RU2065875C1 - Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing - Google Patents
Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2065875C1 RU2065875C1 RU9393019959A RU93019959A RU2065875C1 RU 2065875 C1 RU2065875 C1 RU 2065875C1 RU 9393019959 A RU9393019959 A RU 9393019959A RU 93019959 A RU93019959 A RU 93019959A RU 2065875 C1 RU2065875 C1 RU 2065875C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- colibacterin
- escherichia coli
- enhanced
- лэгм
- Prior art date
Links
- 108010038854 colibacterin Proteins 0.000 title claims abstract description 17
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 title claims abstract description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010073254 Colicins Proteins 0.000 abstract description 6
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 6
- 241000607768 Shigella Species 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 abstract description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 abstract description 2
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 abstract description 2
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 abstract description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 206010040550 Shigella infections Diseases 0.000 abstract 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 abstract 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 abstract 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 abstract 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 abstract 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 abstract 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000617624 Escherichia coli M17 Species 0.000 description 1
- 102000013382 Gelatinases Human genes 0.000 description 1
- 108010026132 Gelatinases Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 231100000249 enterotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002242 enterotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002932 luster Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002135 phase contrast microscopy Methods 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L sodium malonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC([O-])=O PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к производству антагонистических биологических препаратов и, в частности, колибактерина. Колибактерин применяют при хронических колитах, дисбактериозе кишечника различной этиологии, долечивании реконвалесцентов после дизентерии, профилактики дизентерии и других кишечных заболеваний (1). Действующим началом колибактерина являются живые бактерии штамма E.coli и, в первую очередь, их метаболиты, антагонистически активные в отношении шигелл Флекснера и Зонне. The invention relates to medical microbiology, namely to the production of antagonistic biological preparations and, in particular, colibacterin. Colibacterin is used for chronic colitis, intestinal dysbiosis of various etiologies, aftercare of convalescents after dysentery, prevention of dysentery and other intestinal diseases (1). The active principle of colibacterin is the living bacteria of the E. coli strain and, first of all, their metabolites that are antagonistically active against Shigella Flexner and Sonne.
Известен штамм Escherichia coli M-17, который в течение 50-ти лет используется для производства калибактерина (2). Есть все основания считать, что он не только исторически устарел, не адаптирован к изменившимся за это время условиям окружающей среды, но и по своим действующим характеристикам значительно уступает предлагаемому штамму. А именно следует отметить его сравнительно невысокую антагонистическую активность в отношении патогенных шигелл; выраженную чувствительность к основным антибиотикам и, особенно, к колицинам; низкую устойчивость к действию физико-химических факторов. A known strain of Escherichia coli M-17, which for 50 years has been used for the production of calibacterin (2). There is every reason to believe that it is not only historically outdated, not adapted to environmental conditions that have changed during this time, but is significantly inferior to the proposed strain in its current characteristics. Namely, it should be noted its relatively low antagonistic activity against pathogenic shigella; pronounced sensitivity to basic antibiotics and, especially, to colicins; low resistance to physical and chemical factors.
Для усовершенствования биологических препаратов типа колибактерина весьма ценными и необходимыми должны быть следующие характеристики (3):
высокие репродуктивные свойства, что обусловливает их экономическую рентабельность;
повышенная резистентность к наиболее часто применяемым антибиотикам;
выраженная степень устойчивости к известным колицинам;
достаточная резистентность к действию физико-химических факторов;
безвредность, т. е. отсутствие токсичности и иммунных генетических показателей, свойственных условно патогенным микроорганизмам.For the improvement of biological preparations such as colibacterin, the following characteristics should be very valuable and necessary (3):
high reproductive properties, which determines their economic profitability;
increased resistance to the most commonly used antibiotics;
pronounced resistance to known colicins;
sufficient resistance to the action of physico-chemical factors;
harmlessness, i.e. the absence of toxicity and immune genetic indicators characteristic of conditionally pathogenic microorganisms.
Задачей изобретения является получение штамма с более высокими качественными и количественными действующими характеристиками по сравнению со штаммом М-17. The objective of the invention is to obtain a strain with higher qualitative and quantitative effective characteristics in comparison with strain M-17.
Заявляемый штамм бактерии Escherichia coli ЛЭГМ N 18 депонирован во Всесоюзный коллекции промышленных микроорганизмов института "ВНИИ генетика" под N В-6240 8 июня 1992 года. The inventive strain of the bacterium Escherichia coli LEGM
Штамм E. coli ЛЭГМ N 18 обладает всеми свойствами, характерными для семейства Enterobacteriaceae, рода Escherichia и является типичным представителем вида Escherichia coli commune. Штамм ЛЭГМ N 18 был выделен при плановом углубленном медосвидетельствовании здорового человека в баклаборатории СЭС г. Перми. Это обусловливает присущую ему природную приживляемость в организме человека. Видовая идентификация штамма проведена по системе ТИМАЦ'а. В результате всесторонних проверок он отобран как лучший среди более 800 штаммов, исследованных в процессе 7-летних работ по изучению природных популяций микроорганизмов в организации-заявителе. The strain E. coli LEGM
Заявляемый штамм характеризуется следующими признаками. The inventive strain is characterized by the following features.
Культурально-морфологические признаки. Cultural and morphological characters.
Бактерии представляют собой короткие с округлыми концами подвижные палочки с размерами 0,5 на 1,5μ, расположенными в мазке в виде отдельных клеток или небольших скоплений. Грамотрицательны, спор не образуют, капсулы не имеют. На полноценной агаровой среде через 18-20 часов роста при температуре +37oC образуют гладкие, круглые с ровными краями колонии диаметром 2,0-2,5 мм. В жидкой полной среде (мясо-пептонный бульон, казеиновый гидролизат) вызывают равномерное помутнение.Bacteria are short, with rounded ends, mobile sticks with sizes 0.5 to 1.5 μ, located in the smear in the form of individual cells or small clusters. Gram-negative, do not form spores, capsules do not. On a full-fledged agar medium, after 18-20 hours of growth at a temperature of +37 o C form colonies with a diameter of 2.0-2.5 mm, smooth, round with smooth edges. In a liquid complete medium (meat-peptone broth, casein hydrolyzate) cause uniform turbidity.
Биологические признаки. Biological signs.
Штамм не утилизирует цитрат и малонат натрия, не образует ацетоин на среде Кларка, разлагает лактозу при +42oC, не продуцирует оксидазу. В органической среде продуцирует индол, не образует сероводород, не разлагает мочевину, не продуцирует фенилаланиндезаминазу. Штамм не обладает желатиназной активностью, не ферментирует лизин; расщепляет глюкозу, лактозу, маннит, сахарозу до кислоты и газа. Таким образом, штамм ЛЭГМ N 18 видотипичен по своим биохимическим свойствам.The strain does not utilize citrate and sodium malonate, does not form acetoin on Clark's medium, decomposes lactose at +42 o C, does not produce oxidase. It produces indole in the organic medium, does not form hydrogen sulfide, does not decompose urea, and does not produce phenylalanine deaminase. The strain does not have gelatinase activity, does not ferment lysine; breaks down glucose, lactose, mannitol, sucrose to acid and gas. Thus, the
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Выделение штамма бактерий Escherichia coli ЛЭГМ N 18. Example 1. The selection of the bacterial strain Escherichia coli LEGM
Исходный материал (испражнения человека) разводили в пробирке физиологическим раствором приблизительно в 10 раз. После отстаивания берут бактериологической петлей с поверхности каплю жидкости и делают посев штрихом на 2 чашки Петри с дифференциально-диагностической средой Эндо для получения изолированных колоний. После суток роста при +37oC выбирают характерную по внешнему виду (темно-красную с металлическим блеском) колонию и используют ее для получения чистой культуры высевом на скошенный мясо-пептонный агар. Затем следует определение видовой принадлежности выделенного штамма по системе ТИМАЦ'а. Последняя состоит в изучении типичности культуральных, биохимических (ферментативных, сахаро- и протеолитических) и тинкториальных свойств, морфологии выделенных бактерий. Полное соответствие этих признаков требуемым для кишечной палочки дает основание для развернутой проверки выделенного штамма по всем характеристикам, необходимым качественному производственному (для колибактерина) штамму. Сюда относятся: изучение динамики развития на жидких и плотных питательных средах; антагонистической активности в отношении сопутствующей условно патогенной микрофлоры; наличия и уровня устойчивости к основным антибиотикам; чувствительности к колицинам; устойчивости к действию физико-химических факторов (КФ облучение, активный хлор); безвредности, т. е. отсутствию токсичности и антигенных показателей, свойственных условно патогенным микроорганизмам. Все эти исследования проводили параллельно с существующим штаммом М-17 и сравнивали с ним. В таблице приведены сравнительные характеристики свойств и показателей заявляемого штамма ЛЭГМ N 18 с прототипом (штамм М-17).The source material (human feces) was diluted in vitro with saline approximately 10 times. After sedimentation, a drop of liquid is taken from the surface with a bacteriological loop and inoculated with a stroke on 2 Petri dishes with Endo differential diagnostic medium to obtain isolated colonies. After a day of growth at +37 o C, a colony that is characteristic in appearance (dark red with a metallic luster) is selected and used to obtain a pure culture by plating on mowed meat-peptone agar. Then follows the determination of the species affiliation of the selected strain according to the TIMAC system. The latter consists in studying the typicality of cultural, biochemical (enzymatic, sugar, and proteolytic) and tinctorial properties, and the morphology of isolated bacteria. Full compliance of these signs with those required for Escherichia coli provides the basis for a detailed check of the isolated strain for all the characteristics necessary for a high-quality production (for colibacterin) strain. These include: the study of the dynamics of development in liquid and solid nutrient media; antagonistic activity against concomitant opportunistic microflora; the presence and level of resistance to major antibiotics; sensitivity to colicins; resistance to physical and chemical factors (CF irradiation, active chlorine); harmlessness, i.e., the absence of toxicity and antigenic indicators characteristic of conditionally pathogenic microorganisms. All these studies were carried out in parallel with the existing strain M-17 and compared with it. The table shows the comparative characteristics of the properties and indicators of the claimed strain LEGM
Из приведенных в таблице данных следует, что заявляемый штамм E.coli ЛЭГМ N 18 по своим показателям значительно превосходит существующий аналог (штамм М-17). From the data in the table it follows that the claimed strain of E.coli LEGM
Таким образом, штамм Escherichia coli ЛЭГМ-18 отличается более высокими репродуктивными свойствами, высокой антагонистической активностью в отношении болезнетворных шигелл Флекснера и Зонне, повышенной устойчивостью к 9 типам колицинов, абсолютной нечувствительностью к 5-ти и повышенной резистентностью к другим антибиотикам, повышенной устойчивостью к действию активного хлора и УФ облучения. Эти характеристики, как и отсутствие у штамма ЛЭГМ-18 гемолитических и энтеротоксических признаков, а также типичных для условно патогенных микробов антигенов позволяет не только рекомендовать, но и предпочесть его в качестве претендента на роль производственного штамма при изготовлении колибактерина взамен используемого сейчас М-17. Thus, the Escherichia coli strain LEGM-18 is characterized by higher reproductive properties, high antagonistic activity against pathogenic Shigella Flexner and Sonne, increased resistance to 9 types of colicins, absolute insensitivity to 5 and increased resistance to other antibiotics, increased resistance to action active chlorine and UV radiation. These characteristics, as well as the absence of hemolytic and enterotoxic characters in the LEGM-18 strain, as well as antigens typical for opportunistic microbes, not only recommend, but also prefer it as a candidate for the role of the production strain in the manufacture of colibacterin instead of the currently used M-17.
Пример 2. Использование штамма бактерий Escherichia coli ЛЭГМ-18 для получения колибактерина. Example 2. The use of the bacterial strain Escherichia coli LEGM-18 to obtain colibacterin.
Технология производства колибактерина сводится к следующему. The production technology of colibacterin is as follows.
Восстанавливают лиофилизированный и отконтролированный штамм E.coli N 18, для чего содержимое каждой из вскрытых ампул разводят в 5 мл мясо-пептонного бульона и выращивают в пробирках при температуре +37oC в течение 18-20 часов. После этого микробную культуру из каждой пробирки пересевают на бактериологические матрицы с казеиновым агаром и выращивают при тех же параметрах. Затем делают смывы (по 50 мл физиологического раствора на матрац) и переносят их в реактор с казеиновым гидролизатом, где выращивают в течение 5-6 часов при температуре +37oC при постоянном перемешивании, продувке стерильным воздухом, периодических добавках глюкозы до плотности 50-60 млрд микробных клеток в 1 мл культуры (по стандарту мутности). При этом количество живых микроорганизмов должно составлять не менее 20 млрд/мл (по данным микроскопии с фазовым контрастом). Полученную микробную взвесь разливают в стеклянные ампулы по 3 мл и в течение 36-42 часов при остаточном давлении 70 Па проводят ее лиофилизацию с последующим запаиванием ампул под вакуумом (или в атмосфере инертного газа). Сухой препарат имеет вид крупно- или мелкопористой массы желтоватого цвета. Все операции приготовления колибактерина проводят с соблюдением стерильности. Контроль готового колибактерина проводят, согласно Регламенту производства (5): на растворимость, стерильность, антагонистическую активность против шигелл и общую безвредность (на белых мышах). При контроле штамма ЛЭГМ-18 (1 раз в квартал), помимо перечисленных, следует проверять его чувствительность к наборам антибиотиков и колицинов стандартными методами.The lyophilized and controlled E.
Литература
1. Справочник по применению бактериальных и вирусных препаратов. Изд. Медицина. М. 1980.Literature
1. A guide to the use of bacterial and viral drugs. Ed. Medicine. M. 1980.
2. Наставление по применению сухого колибактерина. Пермское НПО "Биомед". Пермь, 1969. прототип. 2. Guidance on the use of dry colibacterin. Perm NGO "Biomed". Perm, 1969. prototype.
3. Пшеничнов Р.А. Колотвинов С.В. Основы построения системы генетического мониторинга природных популяций микроорганизмов. Изд. УНЦ АН СССР, Свердловск, 1986, 118 стр. 3. Pshenichnov R.A. Kolotvinov S.V. Fundamentals of building a system for genetic monitoring of natural populations of microorganisms. Ed. SSC AN USSR, Sverdlovsk, 1986, 118 pp.
4. Справка института "ВНИИ генетика". Москва, 8 июня 1992 г. 4. Information from the Institute "Research Institute of Genetics." Moscow, June 8, 1992
5. Регламент производства колибактерина сухого N 153-80. Утв. Главным управлением по производству бактерийных и вирусных препаратов МЗ СССР. М. 26 июня 1980. ТТТ1 ТТТ2 5. The regulations for the production of dry colibacterin N 153-80. Approved The main department for the production of bacterial and viral preparations of the Ministry of Health of the USSR. M. June 26, 1980. TTT1 TTT2
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9393019959A RU2065875C1 (en) | 1993-04-19 | 1993-04-19 | Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU9393019959A RU2065875C1 (en) | 1993-04-19 | 1993-04-19 | Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU93019959A RU93019959A (en) | 1996-08-20 |
| RU2065875C1 true RU2065875C1 (en) | 1996-08-27 |
Family
ID=20140484
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU9393019959A RU2065875C1 (en) | 1993-04-19 | 1993-04-19 | Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2065875C1 (en) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2144953C1 (en) * | 1998-04-15 | 2000-01-27 | Лившиц Виталий Аркадьевич | Strain of bacterium escherichia coli m17 fim::kan/p colap used for probiotic preparation producing |
| RU2144954C1 (en) * | 1998-04-15 | 2000-01-27 | Лившиц Виталий Аркадьевич | Strain of bacterium escherichia coli m17/p colap used for probiotic preparation producing |
| RU2174842C1 (en) * | 2000-03-02 | 2001-10-20 | Ивановская государственная медицинская академия | Method of preparing eubiotic preparation colibacterin |
| RU2259213C2 (en) * | 2003-10-09 | 2005-08-27 | ГНУ Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева | Strain of bacterium escherichia coli phmb designated for protection of fur animals from toxicosis caused by intestinal microorganism enterotoxins and curative-prophylactic preparation based on thereof |
| RU2281326C2 (en) * | 2000-11-30 | 2006-08-10 | Дзе Байо Бэлэнс Корп. | BACTERIUM STRAIN Escherichia coli USEFUL IN NORMALIZATION OF GASTROINTESTINAL TRACT PHYSIOLOGICAL ACTIVITY, PROBIOTIC COMPOSITION FOR NORMALIZATION OF GASTROINTESTINAL TRACT PHYSIOLOGICAL ACTIVITY (VARIANTS), METHOD FOR PRODUCTION THEREOF AND METHOD FOR CULTURING OF BACTERIUM STRAIN Escherichia coli |
| RU2806907C1 (en) * | 2023-07-07 | 2023-11-08 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) | Escherichia coli q5 bacterial strain, promising for obtaining probiotic preparation for prevention of colibacillosis in poultry |
-
1993
- 1993-04-19 RU RU9393019959A patent/RU2065875C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов.- М.: Медицина, 1980. 2. Наставление по применению сухого колибактерина. Пермское НПО "Биомед". Пермь, 1969. 3. Пшеничнов Р.А., Колотвинов С.В. Основы построения системы генетического мониторинга природных популяций микроорганизмов. - УНЦ АН СССР, Свердловск, 1986, с.118. 4. Регламент производства колибактерина сухого N 153 - 80. Утвержден Главным управлением по производству бактерийных и вирусных препаратов МЗ СССР.- М.: 26 июня 1980. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2144953C1 (en) * | 1998-04-15 | 2000-01-27 | Лившиц Виталий Аркадьевич | Strain of bacterium escherichia coli m17 fim::kan/p colap used for probiotic preparation producing |
| RU2144954C1 (en) * | 1998-04-15 | 2000-01-27 | Лившиц Виталий Аркадьевич | Strain of bacterium escherichia coli m17/p colap used for probiotic preparation producing |
| RU2174842C1 (en) * | 2000-03-02 | 2001-10-20 | Ивановская государственная медицинская академия | Method of preparing eubiotic preparation colibacterin |
| RU2281326C2 (en) * | 2000-11-30 | 2006-08-10 | Дзе Байо Бэлэнс Корп. | BACTERIUM STRAIN Escherichia coli USEFUL IN NORMALIZATION OF GASTROINTESTINAL TRACT PHYSIOLOGICAL ACTIVITY, PROBIOTIC COMPOSITION FOR NORMALIZATION OF GASTROINTESTINAL TRACT PHYSIOLOGICAL ACTIVITY (VARIANTS), METHOD FOR PRODUCTION THEREOF AND METHOD FOR CULTURING OF BACTERIUM STRAIN Escherichia coli |
| RU2259213C2 (en) * | 2003-10-09 | 2005-08-27 | ГНУ Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева | Strain of bacterium escherichia coli phmb designated for protection of fur animals from toxicosis caused by intestinal microorganism enterotoxins and curative-prophylactic preparation based on thereof |
| RU2806907C1 (en) * | 2023-07-07 | 2023-11-08 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) | Escherichia coli q5 bacterial strain, promising for obtaining probiotic preparation for prevention of colibacillosis in poultry |
| RU2807738C1 (en) * | 2023-07-07 | 2023-11-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) | Escherichia coli с41 bacterial strain for obtaining a probiotic preparation for the prevention of colibacillosis in farm animals |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McCarthy et al. | Bacteremia and endocarditis caused by satelliting streptococci | |
| CN113249255B (en) | Bacillus subtilis for preventing and controlling enteritis of poultry and application thereof | |
| CN114134083A (en) | Bacillus belgii and application thereof | |
| CN110004072A (en) | One plant of probiotic enterococcus faecalis separation strains A3-1 and its application | |
| RU2065875C1 (en) | Strain of bacterium escherichia coli used for colibacterin preparing | |
| RU2627164C1 (en) | Bacterium strains lactobacillus rhamnosus, with a wide spectrum of antagonistic activity relating to pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms | |
| RU2298032C2 (en) | Bacillus subtilis 1719 BACTERIUM STRAIN AS PRODUCER OF ANTAGONISTICALLY ACTIVE BIOMASS IN RELATES TO PATHOGENIC MICROORGANISMS, AS WELL AS PROTEOLYTIC, AMYLOLYTIC, AND LIPOLYTIC ENZYMES | |
| RU2210592C1 (en) | Strain of bacterium bifidobacterium longum 58b for preparing biologically active supplements regulating intestine microflora in children of early age | |
| Van der Waaij et al. | Biotyping of Enterobacteriaceae as a test for the evaluation of isolation systems | |
| RU2184774C1 (en) | Strain of bacterium bacillus subtilis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and piscine | |
| RU2203947C1 (en) | Strain of bacterium bacillus licheniformis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and fishes | |
| RU2391395C1 (en) | Lactobacillus fermentum TS3-06 STRAIN USED FOR MAKING BACTERIAL PREPARATIONS AND PRODUCTION OF LIQUID SOUR MILK BROTH AS FOOD PRODUCT FOR MEDICAL AND PREVENTIVE PURPOSES | |
| Fitzsimons et al. | The isolation and growth of axenic cultures of planktonic blue—green algae | |
| RU2085584C1 (en) | Method of preparing recombinant tularemia microorganisms - producers of virulence factors, recombinant strain of francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - producer of virulence factor francisella tularensis nearctica shu, recombinant strain of francisella tularensis holarctica rn4 - a producer of virulence factor pseudomonas tularensis subspecies holarctica r1a - a producer of virulence factor francisella tularensis nearctica b 399 a cole | |
| RU2215027C2 (en) | Strain of bacterium lactobacillus rhamnosus 12l for preparing biologically active supplement regulating intestine microflora in children of early age | |
| Phillips | A sporulation medium for Clostridium perfringens | |
| RU2181596C1 (en) | Curative preparation of bacillusstrain bacteria | |
| RU2103353C1 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus used for correction of disbacteriosis at gastroenteric diseases and in patient with large intestine cancer | |
| CN108441533A (en) | The method that bacteriocin is extracted from lactic acid bacteria | |
| Shapiro et al. | Lactobacilli in the intestinal tract of the chicken | |
| RU2823029C1 (en) | Method for increasing antimicrobial activity of cell-free supernatant bifidobacterium bifidum 791 with respect to klebsiella pneumoniae and escherichia coli | |
| RU2218394C2 (en) | Strain of bacterium lactobacillus acidophilus 27l for preparing biologically active supplements regulating intestine microflora in children of early age | |
| Alexander et al. | Mechanism of emergence of resistance to streptomycin of H. pertussis and H. parapertussis during treatment with this antibiotic | |
| Kumar et al. | Isolation and characterization of endemic strains of Lactobacillus sp. and evaluation of their probiotic activity | |
| Bhaskar et al. | Evaluation of In-vitro Antimicrobial and Anticancer activity of some fresh water Cyanobacteria from Bilaspur (Chhattisgarh), India |