[go: up one dir, main page]

RU2065875C1 - Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина - Google Patents

Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина Download PDF

Info

Publication number
RU2065875C1
RU2065875C1 RU9393019959A RU93019959A RU2065875C1 RU 2065875 C1 RU2065875 C1 RU 2065875C1 RU 9393019959 A RU9393019959 A RU 9393019959A RU 93019959 A RU93019959 A RU 93019959A RU 2065875 C1 RU2065875 C1 RU 2065875C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
colibacterin
escherichia coli
enhanced
лэгм
Prior art date
Application number
RU9393019959A
Other languages
English (en)
Other versions
RU93019959A (ru
Inventor
Р.А. Пшеничнов
В.Н. Вотяков
В.М. Колотов
Original Assignee
Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН filed Critical Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН
Priority to RU9393019959A priority Critical patent/RU2065875C1/ru
Publication of RU93019959A publication Critical patent/RU93019959A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2065875C1 publication Critical patent/RU2065875C1/ru

Links

Images

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Использование: медицинская микробиология - производство антагонистических биологических препаратов. Сущность изобретения: предложен новый природный штамм Escherichia coli /ЛЭГМ N 18/ ВКПМ В-6240 для производства колибактерина - высокоэффективного биологического средства, способствующего восстановлению нормального биоценоза кишечника. По морфологическим, культуральным и физиологическим свойствам относится к семейству Enterobacteriaceae роду Escherichia и является типичным представителем вида Escherichia coli commune. По сравнению со штаммом М-17 предлагаемый штамм ЛЭГМ-18 отличается более высокими репродуктивными свойствами, высокой антагонистической активностью в отношении болезнетворных шигелл Флекснера и Зонне, повышенной резистентностью к большинству колицинов и антибиотиков, апатогенен, нетоксичен, обладает повышенной устойчивостью к действию активного хлора и УФ облучения. Полученный из штамма ВKПМ В-6240 колибактерин более перспективен при санации хронических колитов, дисбактериозе кишечника различной этиологии, долечивании реконвалесцентов после дизентерии, профилактики дизентерии и других кишечных заболеваний. 1 табл.

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к производству антагонистических биологических препаратов и, в частности, колибактерина. Колибактерин применяют при хронических колитах, дисбактериозе кишечника различной этиологии, долечивании реконвалесцентов после дизентерии, профилактики дизентерии и других кишечных заболеваний (1). Действующим началом колибактерина являются живые бактерии штамма E.coli и, в первую очередь, их метаболиты, антагонистически активные в отношении шигелл Флекснера и Зонне.
Известен штамм Escherichia coli M-17, который в течение 50-ти лет используется для производства калибактерина (2). Есть все основания считать, что он не только исторически устарел, не адаптирован к изменившимся за это время условиям окружающей среды, но и по своим действующим характеристикам значительно уступает предлагаемому штамму. А именно следует отметить его сравнительно невысокую антагонистическую активность в отношении патогенных шигелл; выраженную чувствительность к основным антибиотикам и, особенно, к колицинам; низкую устойчивость к действию физико-химических факторов.
Для усовершенствования биологических препаратов типа колибактерина весьма ценными и необходимыми должны быть следующие характеристики (3):
высокие репродуктивные свойства, что обусловливает их экономическую рентабельность;
повышенная резистентность к наиболее часто применяемым антибиотикам;
выраженная степень устойчивости к известным колицинам;
достаточная резистентность к действию физико-химических факторов;
безвредность, т. е. отсутствие токсичности и иммунных генетических показателей, свойственных условно патогенным микроорганизмам.
Задачей изобретения является получение штамма с более высокими качественными и количественными действующими характеристиками по сравнению со штаммом М-17.
Заявляемый штамм бактерии Escherichia coli ЛЭГМ N 18 депонирован во Всесоюзный коллекции промышленных микроорганизмов института "ВНИИ генетика" под N В-6240 8 июня 1992 года.
Штамм E. coli ЛЭГМ N 18 обладает всеми свойствами, характерными для семейства Enterobacteriaceae, рода Escherichia и является типичным представителем вида Escherichia coli commune. Штамм ЛЭГМ N 18 был выделен при плановом углубленном медосвидетельствовании здорового человека в баклаборатории СЭС г. Перми. Это обусловливает присущую ему природную приживляемость в организме человека. Видовая идентификация штамма проведена по системе ТИМАЦ'а. В результате всесторонних проверок он отобран как лучший среди более 800 штаммов, исследованных в процессе 7-летних работ по изучению природных популяций микроорганизмов в организации-заявителе.
Заявляемый штамм характеризуется следующими признаками.
Культурально-морфологические признаки.
Бактерии представляют собой короткие с округлыми концами подвижные палочки с размерами 0,5 на 1,5μ, расположенными в мазке в виде отдельных клеток или небольших скоплений. Грамотрицательны, спор не образуют, капсулы не имеют. На полноценной агаровой среде через 18-20 часов роста при температуре +37oC образуют гладкие, круглые с ровными краями колонии диаметром 2,0-2,5 мм. В жидкой полной среде (мясо-пептонный бульон, казеиновый гидролизат) вызывают равномерное помутнение.
Биологические признаки.
Штамм не утилизирует цитрат и малонат натрия, не образует ацетоин на среде Кларка, разлагает лактозу при +42oC, не продуцирует оксидазу. В органической среде продуцирует индол, не образует сероводород, не разлагает мочевину, не продуцирует фенилаланиндезаминазу. Штамм не обладает желатиназной активностью, не ферментирует лизин; расщепляет глюкозу, лактозу, маннит, сахарозу до кислоты и газа. Таким образом, штамм ЛЭГМ N 18 видотипичен по своим биохимическим свойствам.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Выделение штамма бактерий Escherichia coli ЛЭГМ N 18.
Исходный материал (испражнения человека) разводили в пробирке физиологическим раствором приблизительно в 10 раз. После отстаивания берут бактериологической петлей с поверхности каплю жидкости и делают посев штрихом на 2 чашки Петри с дифференциально-диагностической средой Эндо для получения изолированных колоний. После суток роста при +37oC выбирают характерную по внешнему виду (темно-красную с металлическим блеском) колонию и используют ее для получения чистой культуры высевом на скошенный мясо-пептонный агар. Затем следует определение видовой принадлежности выделенного штамма по системе ТИМАЦ'а. Последняя состоит в изучении типичности культуральных, биохимических (ферментативных, сахаро- и протеолитических) и тинкториальных свойств, морфологии выделенных бактерий. Полное соответствие этих признаков требуемым для кишечной палочки дает основание для развернутой проверки выделенного штамма по всем характеристикам, необходимым качественному производственному (для колибактерина) штамму. Сюда относятся: изучение динамики развития на жидких и плотных питательных средах; антагонистической активности в отношении сопутствующей условно патогенной микрофлоры; наличия и уровня устойчивости к основным антибиотикам; чувствительности к колицинам; устойчивости к действию физико-химических факторов (КФ облучение, активный хлор); безвредности, т. е. отсутствию токсичности и антигенных показателей, свойственных условно патогенным микроорганизмам. Все эти исследования проводили параллельно с существующим штаммом М-17 и сравнивали с ним. В таблице приведены сравнительные характеристики свойств и показателей заявляемого штамма ЛЭГМ N 18 с прототипом (штамм М-17).
Из приведенных в таблице данных следует, что заявляемый штамм E.coli ЛЭГМ N 18 по своим показателям значительно превосходит существующий аналог (штамм М-17).
Таким образом, штамм Escherichia coli ЛЭГМ-18 отличается более высокими репродуктивными свойствами, высокой антагонистической активностью в отношении болезнетворных шигелл Флекснера и Зонне, повышенной устойчивостью к 9 типам колицинов, абсолютной нечувствительностью к 5-ти и повышенной резистентностью к другим антибиотикам, повышенной устойчивостью к действию активного хлора и УФ облучения. Эти характеристики, как и отсутствие у штамма ЛЭГМ-18 гемолитических и энтеротоксических признаков, а также типичных для условно патогенных микробов антигенов позволяет не только рекомендовать, но и предпочесть его в качестве претендента на роль производственного штамма при изготовлении колибактерина взамен используемого сейчас М-17.
Пример 2. Использование штамма бактерий Escherichia coli ЛЭГМ-18 для получения колибактерина.
Технология производства колибактерина сводится к следующему.
Восстанавливают лиофилизированный и отконтролированный штамм E.coli N 18, для чего содержимое каждой из вскрытых ампул разводят в 5 мл мясо-пептонного бульона и выращивают в пробирках при температуре +37oC в течение 18-20 часов. После этого микробную культуру из каждой пробирки пересевают на бактериологические матрицы с казеиновым агаром и выращивают при тех же параметрах. Затем делают смывы (по 50 мл физиологического раствора на матрац) и переносят их в реактор с казеиновым гидролизатом, где выращивают в течение 5-6 часов при температуре +37oC при постоянном перемешивании, продувке стерильным воздухом, периодических добавках глюкозы до плотности 50-60 млрд микробных клеток в 1 мл культуры (по стандарту мутности). При этом количество живых микроорганизмов должно составлять не менее 20 млрд/мл (по данным микроскопии с фазовым контрастом). Полученную микробную взвесь разливают в стеклянные ампулы по 3 мл и в течение 36-42 часов при остаточном давлении 70 Па проводят ее лиофилизацию с последующим запаиванием ампул под вакуумом (или в атмосфере инертного газа). Сухой препарат имеет вид крупно- или мелкопористой массы желтоватого цвета. Все операции приготовления колибактерина проводят с соблюдением стерильности. Контроль готового колибактерина проводят, согласно Регламенту производства (5): на растворимость, стерильность, антагонистическую активность против шигелл и общую безвредность (на белых мышах). При контроле штамма ЛЭГМ-18 (1 раз в квартал), помимо перечисленных, следует проверять его чувствительность к наборам антибиотиков и колицинов стандартными методами.
Литература
1. Справочник по применению бактериальных и вирусных препаратов. Изд. Медицина. М. 1980.
2. Наставление по применению сухого колибактерина. Пермское НПО "Биомед". Пермь, 1969. прототип.
3. Пшеничнов Р.А. Колотвинов С.В. Основы построения системы генетического мониторинга природных популяций микроорганизмов. Изд. УНЦ АН СССР, Свердловск, 1986, 118 стр.
4. Справка института "ВНИИ генетика". Москва, 8 июня 1992 г.
5. Регламент производства колибактерина сухого N 153-80. Утв. Главным управлением по производству бактерийных и вирусных препаратов МЗ СССР. М. 26 июня 1980. ТТТ1 ТТТ2

Claims (1)

  1. Штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В 6240, используемый для получения колибактерина.
RU9393019959A 1993-04-19 1993-04-19 Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина RU2065875C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU9393019959A RU2065875C1 (ru) 1993-04-19 1993-04-19 Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU9393019959A RU2065875C1 (ru) 1993-04-19 1993-04-19 Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU93019959A RU93019959A (ru) 1996-08-20
RU2065875C1 true RU2065875C1 (ru) 1996-08-27

Family

ID=20140484

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU9393019959A RU2065875C1 (ru) 1993-04-19 1993-04-19 Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2065875C1 (ru)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2144954C1 (ru) * 1998-04-15 2000-01-27 Лившиц Виталий Аркадьевич ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli M 17/p Colap, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
RU2144953C1 (ru) * 1998-04-15 2000-01-27 Лившиц Виталий Аркадьевич ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli M 17 fimH::kan/p Colap, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
RU2174842C1 (ru) * 2000-03-02 2001-10-20 Ивановская государственная медицинская академия Способ получения препарата эубиотика колибактерин
RU2259213C2 (ru) * 2003-10-09 2005-08-27 ГНУ Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева Штамм бактерий escherichia coli рнмв, предназначенный для защиты пушных зверей от токсикозов, вызванных энтеротоксинами кишечных бактерий, и лечебно-профилактический препарат на его основе
RU2281326C2 (ru) * 2000-11-30 2006-08-10 Дзе Байо Бэлэнс Корп. ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА, ПРОБИОТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ПРЕДНАЗНАЧЕННАЯ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА (ВАРИАНТЫ), И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ ШТАММА БАКТЕРИЙ Escherichia coli И ПИЩЕВОЙ ПРОДУКТ
RU2806907C1 (ru) * 2023-07-07 2023-11-08 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) Штамм бактерий Escherichia coli Q5, перспективный для получения пробиотического препарата для профилактики колибактериоза сельскохозяйственной птицы

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов.- М.: Медицина, 1980. 2. Наставление по применению сухого колибактерина. Пермское НПО "Биомед". Пермь, 1969. 3. Пшеничнов Р.А., Колотвинов С.В. Основы построения системы генетического мониторинга природных популяций микроорганизмов. - УНЦ АН СССР, Свердловск, 1986, с.118. 4. Регламент производства колибактерина сухого N 153 - 80. Утвержден Главным управлением по производству бактерийных и вирусных препаратов МЗ СССР.- М.: 26 июня 1980. *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2144954C1 (ru) * 1998-04-15 2000-01-27 Лившиц Виталий Аркадьевич ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli M 17/p Colap, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
RU2144953C1 (ru) * 1998-04-15 2000-01-27 Лившиц Виталий Аркадьевич ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli M 17 fimH::kan/p Colap, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА
RU2174842C1 (ru) * 2000-03-02 2001-10-20 Ивановская государственная медицинская академия Способ получения препарата эубиотика колибактерин
RU2281326C2 (ru) * 2000-11-30 2006-08-10 Дзе Байо Бэлэнс Корп. ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА, ПРОБИОТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ПРЕДНАЗНАЧЕННАЯ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА (ВАРИАНТЫ), И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ ШТАММА БАКТЕРИЙ Escherichia coli И ПИЩЕВОЙ ПРОДУКТ
RU2259213C2 (ru) * 2003-10-09 2005-08-27 ГНУ Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева Штамм бактерий escherichia coli рнмв, предназначенный для защиты пушных зверей от токсикозов, вызванных энтеротоксинами кишечных бактерий, и лечебно-профилактический препарат на его основе
RU2806907C1 (ru) * 2023-07-07 2023-11-08 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) Штамм бактерий Escherichia coli Q5, перспективный для получения пробиотического препарата для профилактики колибактериоза сельскохозяйственной птицы
RU2807738C1 (ru) * 2023-07-07 2023-11-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ПФИЦ УрО РАН) Штамм бактерий Escherichia coli С41для получения пробиотического препарата для профилактики колибактериоза сельскохозяйственных животных

Similar Documents

Publication Publication Date Title
McCarthy et al. Bacteremia and endocarditis caused by satelliting streptococci
CN113249255B (zh) 一种防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用
CN114134083A (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌及应用
CN110004072A (zh) 一株益生性粪肠球菌分离株a3-1及其应用
RU2065875C1 (ru) Штамм бактерий escherichia coli, используемый для получения колибактерина
RU2627164C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Lactobacillus fermentum, ОБЛАДАЮЩИЙ ШИРОКИМ СПЕКТРОМ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПО ОТНОШЕНИЮ К ПАТОГЕННЫМ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫМ МИКРООРГАНИЗМАМ
RU2210592C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bifidobacterium longum 58B ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, РЕГУЛИРУЮЩИХ МИКРОФЛОРУ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА
Van der Waaij et al. Biotyping of Enterobacteriaceae as a test for the evaluation of isolation systems
RU2184774C1 (ru) Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы
RU2203947C1 (ru) Штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы
RU2391395C1 (ru) ШТАММ Lactobacillus fermentum TS3-06, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ И ПРОИЗВОДСТВА ЖИДКОЙ МОЛОЧНОКИСЛОЙ ЗАКВАСКИ В КАЧЕСТВЕ ПРОДУКТА ПИТАНИЯ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ
Fitzsimons et al. The isolation and growth of axenic cultures of planktonic blue—green algae
RU2085584C1 (ru) Способ получения рекомбинантных туляремийных микроорганизмов - продуцентов факторов вирулентности, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica shu, рекомбинантный штамм francisella tularensis holarctica rn4 - продуцент фактора вирулентности pseudomonas pseudomallei c 141, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies holarctica r1a - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica b 399 a cole
RU2215027C2 (ru) Штамм бактерий lactobacillus rhamnosus 12l для приготовления биологически активных добавок, регулирующих микрофлору кишечника у детей раннего возраста
Phillips A sporulation medium for Clostridium perfringens
RU2181596C1 (ru) Лекарственный препарат из бактерий рода bacillus
RU2103353C1 (ru) Штамм бактерий lactobacillus acidophilus, используемый для коррекции дисбактериоза при желудочно-кишечных заболеваниях и у больных раком толстой кишки
CN108441533A (zh) 从乳酸菌中提取细菌素的方法
Shapiro et al. Lactobacilli in the intestinal tract of the chicken
RU2823029C1 (ru) Способ повышения антимикробной активности бесклеточного супернатанта bifidobacterium bifidum 791 в отношении klebsiella pneumoniae и escherichia coli
RU2218394C2 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Lactobacillus acidophilus 27L ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, РЕГУЛИРУЮЩИХ МИКРОФЛОРУ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА
Alexander et al. Mechanism of emergence of resistance to streptomycin of H. pertussis and H. parapertussis during treatment with this antibiotic
Kumar et al. Isolation and characterization of endemic strains of Lactobacillus sp. and evaluation of their probiotic activity
Bhaskar et al. Evaluation of In-vitro Antimicrobial and Anticancer activity of some fresh water Cyanobacteria from Bilaspur (Chhattisgarh), India
Raju et al. Isolation, Characterization and Sequencing of Lactobacillus from the Oral and Fecal Samples of Healthy Dogs