[go: up one dir, main page]

RS61956B1 - Metode i sastavi za potrošne materijale - Google Patents

Metode i sastavi za potrošne materijale

Info

Publication number
RS61956B1
RS61956B1 RS20210724A RSP20210724A RS61956B1 RS 61956 B1 RS61956 B1 RS 61956B1 RS 20210724 A RS20210724 A RS 20210724A RS P20210724 A RSP20210724 A RS P20210724A RS 61956 B1 RS61956 B1 RS 61956B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
hemoglobin
heme
meat
leghemoglobin
protein
Prior art date
Application number
RS20210724A
Other languages
English (en)
Inventor
Marija Vrljic
Sergey Solomatin
Rachel Fraser
Patrick O'reilly Brown
Jessica Karr
Celeste Holz-Schietinger
Michael Eisen
Ranjani Varadan
Original Assignee
Impossible Foods Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=53675762&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS61956(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US13/941,211 external-priority patent/US20140220217A1/en
Application filed by Impossible Foods Inc filed Critical Impossible Foods Inc
Publication of RS61956B1 publication Critical patent/RS61956B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L13/00—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof
    • A23L13/40—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof containing additives
    • A23L13/42—Additives other than enzymes or microorganisms in meat products or meat meals
    • A23L13/426—Addition of proteins, carbohydrates or fibrous material from vegetable origin other than sugars or sugar alcohols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/185—Vegetable proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
    • A23B2/40—Preservation of foods or foodstuffs, in general by heating loose unpacked materials
    • A23B2/42—Preservation of foods or foodstuffs, in general by heating loose unpacked materials while they are progressively transported through the apparatus
    • A23B2/46—Preservation of foods or foodstuffs, in general by heating loose unpacked materials while they are progressively transported through the apparatus with transport through tubes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS OR COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/005—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A23D7/0053—Compositions other than spreads
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS OR COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/005—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A23D7/0056—Spread compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/14—Vegetable proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/22—Working-up of proteins for foodstuffs by texturising
    • A23J3/225—Texturised simulated foods with high protein content
    • A23J3/227—Meat-like textured foods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L13/00—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L13/00—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof
    • A23L13/40—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof containing additives
    • A23L13/42—Additives other than enzymes or microorganisms in meat products or meat meals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L13/00—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof
    • A23L13/40—Meat products; Meat meal; Preparation or treatment thereof containing additives
    • A23L13/42—Additives other than enzymes or microorganisms in meat products or meat meals
    • A23L13/424—Addition of non-meat animal protein material, e.g. blood, egg, dairy products, fish; Proteins from microorganisms, yeasts or fungi
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/66—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/10—Natural spices, flavouring agents or condiments; Extracts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
    • A23L27/26—Meat flavours
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/20—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents
    • A23L29/206—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents of vegetable origin
    • A23L29/238—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing gelling or thickening agents of vegetable origin from seeds, e.g. locust bean gum or guar gum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/40—Colouring or decolouring of foods
    • A23L5/41—Retaining or modifying natural colour by use of additives, e.g. optical brighteners
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/10—Cereal-derived products
    • A23L7/109—Types of pasta, e.g. macaroni or noodles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
    • C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
    • C12C5/02—Additives for beer
    • C12C5/026—Beer flavouring preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
    • C12G3/00—Preparation of other alcoholic beverages
    • C12G3/04—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs
    • C12G3/06—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs with flavouring ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
    • C12G2200/00—Special features
    • C12G2200/21—Wine additives, e.g. flavouring or colouring agents

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Seasonings (AREA)
  • Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Alcoholic Beverages (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Edible Oils And Fats (AREA)
  • Non-Alcoholic Beverages (AREA)
  • Distillation Of Fermentation Liquor, Processing Of Alcohols, Vinegar And Beer (AREA)
  • Seeds, Soups, And Other Foods (AREA)
  • Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
  • Sanitary Thin Papers (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Tehnička oblast
Ovo otkriće odnosi se na potrošne proizvode.
Pozadina pronalaska
Uzgoj životinja ima dubok negativan uticaj na životnu sredinu. U ovom trenutku se procenjuje da se 30% kopnene površine Zemlje koristi za uzgoj životinja i da stočarstvo čini 20% ukupne biomase kopnenih životinja. Zahvaljujući njegovim masivnim razmerama, uzgoj životinja odgovoran je za više od 18% neto emisija gasova sa efektom staklene bašte. Uzgoj životinja je možda najveći izvor zagađenja vode koji potiče od čoveka i predstavlja daleko najveću pretnju po bioraznovrsnost na svetu. Procenjuje se da, kada bi čovečanstvo prešlo sa ishrane koja sadrži meso na ishranu bez proizvoda životinjskog porekla, 26% kopnene površine Zemlje bilo bi oslobođeno za druge namene. Osim toga, prelazak na vegetarijansku ishranu bi u ogromnoj meri smanjio potrošnju vode i energije.
Potrošnja mesa ima dubok negativan uticaj na ljudsko zdravlje. Zdravstvene prednosti vegetarijanske ishrane su dobro poznate. Kada bi čovečanstvo prešlo na vegetarijansku ishranu, došlo bi do smanjenja troškova zdravstvene nege.
Glad je globalni problem, a ipak 4 glavna useva na svetu (soja, kukuruz, pšenica i pirinač) već zadovoljavaju 100% potreba ljudske populacije za kalorijama i proteinima, uključujući i sve esencijalne aminokiseline.
Zamene za meso na bazi biljaka nisu uspele da dovedu do prelaska na vegetarijansku ishranu. Trenutna najnovija tehnologija za sastave zamena za meso uključuje ekstrudiranje mešavine soje/žitarica, čime se dobijaju proizvodi koji ne uspevaju da ponove doživljaj pripreme i jedenja mesa. Česta ograničenja kod ovih proizvoda jesu tekstura i osećaj u ustima koji je homogeniji nego kod ekvivalentnih proizvoda od mesa. Osim toga, imajući u vidu da se proizvodi većinom prodaju prethodno pripremljeni, sa dodatim veštačkim ukusima i aromama, oni ne uspevaju da ponove arome, ukuse i druge ključne karakteristike koje se povezuju sa pripremom mesa. Iz ovog razloga, ovi proizvodi su privlačni pre svega ograničenom broju potrošača koji su se već posvetili vegetarijanskoj/veganskoj ishrani, ali nisu privukli veći segment potrošača koji je naviknut na jedenje mesa.
Hrana je svaka supstanca koju životinje, uključujući ljude, piju ili jedu za potrebe ishrane ili zadovoljstva. Ona je obično biljnog ili životinjskog porekla i sadrži osnovne nutrijente, kao što su ugljeni hidrati, masti, proteini, vitamini ili minerali. Organizam unosi supstancu i ćelije organizma je apsorbuju u pokušaju da se proizvede energija, održi život ili podstakne rast.
Hrana obično potiče od organizma koji vrši fotosintezu, obično od biljaka. Neka hrana se dobija direktno od biljaka; ali čak i životinje koje se koriste kao izvori hrane uzgajaju se tako što se hrane hranom dobijenom od biljaka. Jestive gljive i bakterije koriste se za transformisanje materijala biljnog ili životinjskog porekla u druge prehrambene proizvode, pečurke, hleb, jogurt i slično.
U većini slučajeva, biljka ili životinja deli se na niz različitih delova, u zavisnosti od svrhe hrane. Često su određeni delovi biljke, kao što su semena ili plodovi, više cenjeni od strane ljudi od ostalih delova i biraju se za ljudsku potrošnju, dok se drugi manje poželjni delovi, kao što su stabljike trava, najčešće koriste za ishranu životinja.
Životinje se pre potrošnje obično tranžiraju na manje komade mesa određenog ukusa i karakteristika.
Dok se mnoge vrste hrane jedu u sirovom stanju, druge prolaze kroz proces pripreme iz razloga bezbednosti, atraktivnosti, teksture ili ukusa. Na najjednostavnijem nivou, to može da uključuje pranje, sečenje, obrezivanje ili dodavanje drugih vrsta hrane ili sastojaka. Takođe može da uključuje mešanje, zagrevanje ili hlađenje ili fermentaciju a pojedine vrste namirnica mogu se kombinovati sa drugim prehrambenim proizvodima kako bi se postigla poželjna mešavina karakteristika.
Tokom poslednjih godina bilo je pokušaja da se naučna strogost uvede u proces pripreme hrane u oblastima nauke o hrani i molekularne gastronomije. Nauka o hrani uopšteno izučava bezbednost, mikrobiologiju, konzervisanje, hemiju, inženjering i fiziku pripreme hrane, dok se molekularna gastronomija fokusira na korišćenje naučnih alata, kao što su tečni azot, emulgatori poput sojinog lecitina i sredstva za želiranje poput kalcijum alginata za transformisanje prehrambenih proizvoda u neočekivane forme.
Međutim, sirovine su tipično čitavi organizmi (biljke ili životinje) ili izolovana tkiva, kao što su komadi mesa, plodonosna tela gljiva ili semena biljaka. U nekim slučajevima, izolovano tkivo se modifikuje pre pripreme hrane, kao što je proizvodnja brašna ili izolovanje ulja i proteina iz semena.
Uprkos činjenici da svi ovi proizvodi sadrže mešavinu proiteina, ugljenih hidrata, masti, vitamina i minerala, fizički raspored ovih materijala u prvobitnoj biljci ili životinji određuje upotrebu biljnog ili životinjskog tkiva. Ovde su otkrivene unapređene metode za proizvodnju potrošnih materijala.
US 2009/010042 A1 otkriva načine poboljšanja punoće ukusa, ukusa i arome hrane, koja se sastoji od veoma nezasićenih masnih kiselina dugog lanca i/ili njihovih estara kao glavne komponente.
Kalkins i Hodgen (Meat Science, vol.77 (2007), strane 63–80) opisuju pregled ukusa mesa i brojne faktore koji im doprinose.
Sažetak
Aspekti ovog pronalaska navedeni su u priloženim zahtevima. Ovde je pružen metod za dodavanje ukusa junetine u potrošački proizvod, koji se sastoji od ubrizgavanja proteina koji sadrži hem u sastav potrošnog materijala, čime se nakon pripreme dodaje ukus junetine u sastav potrošnog materijala.
Takođe je pružen metod kojim se omogućava da sastav živine ima aromu junetine, metod koji uključuje dodavanje hemoproteina u sastav živinskog mesa.
U nekim verzijama izvedbe, hemoprotein ima sekvencu aminokiseline sa najmanje 70% sličnosti sa bilo kojom od sekvenci aminokiselina iz SEK. ID BR.: 1-27.
Ukoliko nije definisano drugačije, svi tehnički i naučni termini koji su ovde korišćeni imaju značenje koje najčešće razume lice koje poseduje prosečno poznavanje tehnike na koju se ovo otkriće odnosi. Iako se za praktično izvođenje ovog otkrića mogu koristiti metode i materijali slični ili ekvivalentni onima koji su opisani ovde, u nastavku su opisane odgovarajuće metode i materijali. U slučaju sukoba, prednost ima ovde navedena specifikacija, uključujući i definicije. Pored toga, materijali, metode i primeri su ilustrativne prirode i nisu predviđeni da budu ograničavajući.
Detalji jedne ili više verzija izvedbe otkrića opisani su u priloženim crtežima i opisima u nastavku. Druge karakteristike, predmeti i prednosti otkrića biće očigledni iz opisa i crteža, kao i iz zahteva. Reč „sadrži“ u zahtevima može se zameniti frazama „suštinski se sastoji od“ ili „sastoji se“, prema standardnim praksama patentnog prava.
Opis crteža
SL.1 sadrži sekvence aminokiselina hemoproteina korišćenog kao primer.
Detaljan opis
Od grupe ljudi je zatraženo da oceni određeni prehrambeni proizvod, na primer mlevenu junetinu, prema karakteristikama koje opisuju dati prehrambeni proizvod. Potrošni materijal koji je ovde opisan može biti ocenjen od strane istih ljudi kako bi se utvrdila ekvivalencija.
Ukus prehrambenog proizvoda takođe može da se oceni. Ukusi se mogu oceniti prema sličnosti sa prehrambenim proizvodima, npr. podseća na „jaja“, „ribu“, „puter“, „čokoladu“, „voće“, „biber“, „slaninu“, „krem“, „mleko“ ili „junetinu“. Ukusi se mogu oceniti prema sedam osnovnih ukusa, tj. slatko, kiselo, gorko, slano, ukusno, ljuto (ili pikantno) i metalno. Ukusi se mogu opisati prema sličnosti sa doživljajem koji izaziva hemikalija, npr. diacetil (poput putera), 3-hidroksi-2 butanon (poput putera), nona-2E-enal (poput masti), 1-okten-3-ol (pečurka), heksanska kiselina (poput znoja), 4-hidroksi-5-metil furanon (HMF, poput mesa), pirazini (poput orašastih plodova), bis(2-metil-3-furil) disulfid (pečeno meso), dekanon (plesnivi/voćni), izoamil acetat (banana), benzaldehid (gorki badem), cinamaldehid (cimet), etil propionat (voćni), metil antranilat (grožđe), limonen (narandža), etil dekadienoat (kruška), alil heksanoat (ananas), etil maltol (šećer, šećerna vuna), etilvanilin (vanilija), buterna kiselina (užeglost), 12-metiltridekanal (poput junetine) ili metil salicilat (zimovka). Ove ocene se mogu koristiti kao indikacije karakteristika prehrambenog proizvoda. Potrošni materijali iz ovog pronalaska mogu se potom uporediti sa prehrambenim proizvodima kako bi se utvrdilo koliko su potrošni materijali slični prehrambenom proizvodu. U nekim primerima, karakteristike potrošnih materijala se potom menjaju kako bi potrošni materijal bio sličniji prehrambenom proizvodu. Shodno tome, u nekim verzijama izvedbe, potrošni materijal se karakteriše kao sličan prehrambenom proizvodu na osnovu ocene ljudi.
U nekim sastavima, od ispitanika je traženo da identifikuju potrošni materijal kao oblik prehrambenog proizvoda ili kao određeni prehrambeni proizvod, npr. ispitanik identifikuje potrošni materijal kao meso. Na primer, u nekim sastavima ljudi navode da potrošni materijal ima karakteristike ekvivalentne mesu. U nekim slučajevima, jedna ili više karakteristika potrošnog materijala ekvivalentna je odgovarajućim karakteristikama mesa prema mišljenju ljudi. Takve karakteristike uključuju karakteristike koje se mogu testirati.
Eksperimenti mogu da pokažu da potrošači smatraju da je potrošni materijal prihvatljiv. Panel može da se koristi za analizu različitih potrošnih materijala koji su ovde opisani. Određeni broj ljudi koji su članovi veća može da testira različite uzorke potrošnih materijala, prvenstveno prirodna mesa u odnosu na sastave potrošnih materijala koji su ovde opisani, ili zamene za meso u odnosu na sastave potrošnih materijala koji su ovde opisani. Varijable kao što su sadržaj masti mogu se standardizovati, na primer, na 20% masti korišćenjem mešavina krtih i masnih mesa. Sadržaj masti može se odrediti primenom metode Babkok za meso (S. S.
Nielson, Introduction to the Chemical Analysis of Foods (Jones & Bartlett Publishers, Boston, 1994)). Može se formulisati mešavina mlevene junetine i otkrivenih potrošnih materijala pripremljena u skladu sa ovde opisanom procedurom.
Članovima veća mogu se poslužiti uzorci (npr. u zasebnim odeljcima), pod crvenim ili belim svetlom, i u formi otvorenog veća potrošača. Uzorcima se mogu dodeliti nasumični trocifreni brojevi i mogu im se promeniti mesta na listiću za glasanje kako bi se sprečila pristrasnost. Od članova veća se može tražiti da ocene uzorke u pogledu mekoće, sočnosti, teksture, ukusa i opšte prihvatljivosti pomoću hedonističke skale od 1 = nimalo mi se ne sviđa do 9 = veoma mi se sviđa, sa srednjom vrednošću 5 = niti mi se sviđa niti mi se ne sviđa. Članovima veća se može preporučiti da isperu usta vodom između uzoraka, te im se može dati prilika da daju komentar na svaki uzorak.
Rezultati ovog eksperimenta mogu da pokažu značajne razlike ili sličnosti između tradicionalnih mesa i sastava iz ovog otkrića.
Ovi rezultati mogu da pokažu da su ovde opisani sastavi ocenjeni kao prihvatljivo ekvivalentni pravim proizvodima od mesa. Pored toga, ovi rezultati mogu da pokažu da su ovde opisani sastavi poželjniji među članovima veća od ostalih komercijalno dostupnih zamena za meso. Stoga, u nekim slučajevima, ovo otkriće opisuje potrošne materijale koji su slični tradicionalnim mesima i sličniji mesu od prethodno poznatih alternativa za meso.
Gasna hromatografija – masena spektrometrija (GCMS) je metoda koja kombinuje osobine gasno-tečne hromatografije i masene spektrometrije kako bi razdvojila i identifikovala različite supstance u nekom uzorku. GCMS se može, u nekim slučajevima, koristiti za evaluaciju karakteristika potrošnih materijala. Na primer, isparljive hemikalije se mogu izolovati iz praznog prostora oko mesa. Ove hemikalije se mogu identifikovati pomoću GCMS. Tako se izrađuje profil isparljivih hemikalija u praznom prostoru oko mesa. U nekim slučajevima, svaka najviša tačka koju pokaže GCMS može se dalje evaluirati. Na primer, ljudi mogu da ocene doživljaj mirisa hemikalije odgovorne za određenu najvišu tačku. Ova informacija se može koristiti za dalje usavršavanje profila. GCMS se potom može koristiti za evaluaciju karakteristika potrošnog materijala. GCMS profil se može koristiti za usavršavanje potrošnog materijala.
Karakteristične komponente ukusa i mirisa najčešće se razvijaju tokom pripreme hrane zahvaljujući hemijskim reakcijama molekula, uključujući aminokiseline, masti i šećere koji se nalaze u biljkama i mesu. Stoga, u nekim slučajevima, potrošni materijal se ispituje kako bi se utvrdila sličnost sa mesom tokom ili nakon pripreme. U nekim slučajevima, ocene ljudi, ljudske evaluacije, očitavanja olfaktometra ili GCMS merenja, ili kombinacije navedenih, koriste se kako bi se izradila olfaktorna mapa kuvanog mesa. Slično tome, može se izraditi olfaktorna mapa potrošnog materijala, na primer replike mesa. Ove mape se potom porede kako bi se procenilo koliko je kuvani potrošni materijal sličan mesu. U nekim slučajevima, olfaktorna mapa potrošnog materijala tokom ili nakon pripreme slična je ili identična olfaktornoj mapi pripremljenog mesa ili mesa u procesu pripreme. U nekim slučajevima, dovoljno je da sličnost bude preko praga detekcije ljudske percepcije. Potrošni materijal se može kreirati tako da njegove karakteristike budu slične prehrambenom proizvodu nakon pripreme, ali nepripremljeni potrošni materijal može da ima karakteristike koje se razlikuju od predikatnog prehrambenog proizvoda pre pripreme.
Glavni faktor koji određuje boju mesa jeste koncentracija proteina koji nose gvožđe u mesu. U skeletno-mišićnoj komponenti proizvoda od mesa, jedan od glavnih proteina koji nose gvožđe jeste mioglobin. Procenjuje se da belo meso živine sadrži manje od 0,05% mioglobina; svinjetina i teletina sadrže 0,1–0,3% mioglobina; junetina sadrži 0,4–1,0% mioglobina; govedina sadrži 1,5–2,0% mioglobina. Mioglobin u mesu se obično javlja u tri stanja: Oksimioglobin (Fe<2+>) (oksigenisani = svetlocrvena); mioglobin (Fe<2+>) (neoksigenisani = ljubičasta/magenta); i metmioglobin (Fe<3+>) (oksidisani = braon). Veruje se da prelazak oksimioglobina u metmioglobin u prisustvu kiseonika dovodi do promene boje mlevenog mesa iz crvene u braon. Sredstva za produžavanje roka upotrebe mesa razvijena su radi produženja trajanja crvene boje proizvoda od mesa, uključujući, bez ograničenja, ugljenmonoksid, nitrite, natrijum metabisulfit, Bombal, vitamin E, ekstrakt ruzmarina, ekstrakt zelenog čaja, katehine i druge antioksidante.
Međutim, bitno stabilniji hemoprotein, kao što je hemoglobin izolovan iz Aquifex aeolicus (SEK. ID BR.:3) ili Methylacidiphilum infernorum (SEK. ID BR.: 2) sporije oksidiše od mezofilnog hemoglobina, kao što je mioglobin. Ovde opisani hemoproteini (vidite, npr., SL.
1) takođe mogu da imaju trajanje smanjenog hem-Fe<2+>stanja produženo primenom sredstava za produženje roka upotrebe mesa, kao što su ugljen-monoksid i natrijum nitrit. Hemoproteini se mogu izabrati zbog njihove karakteristike očuvanja željene boje. Na primer, kod sous-vide pripreme na niskoj temperaturi, relativno nestabilan hemoprotein kao što je onaj iz Hordeum vulgare može da da proizvod braon boje koji deluje pripremljeno u uslovima u kojima bi mioglobin zadržao svoju crvenu boju i nepripremljen izgled. U nekim slučajevima, hemoprotein se može izabrati tako da ima povećanu stabilnost gde, na primer, replika mesa može da sačuva atraktivan izgled srednje pečenog mesa uprkos tome što je dovoljno kuvano za potrebe bezbednosti.
Kada se ovde koristi, termin „protein koji sadrži hem“ može se koristiti ravnopravno sa „polipeptid koji sadrži hem“ ili „hemoprotein“ ili „hem polipeptid“ i uključuje bilo koji polipeptid koji može kovalentnom ili nekovalentnom vezom da veže hem grupu. U nekim izvedbama, polipeptid koji sadrži hem je globin i može sa sadrži globinski sklop, koji se sastoji od niza sedam do devet alfa heliksa. Proteini globinskog tipa mogu da potiču iz bilo koje klase (npr. klasa I, klasa II ili klasa III) i u nekim izvedbama mogu da transportuju ili skladište kiseonik. Na primer, protein koji sadrži hem može da bude hemoglobin ili leghemoglobin nesimbiotskog tipa. Polipeptid koji sadrži hem može da bude monomer, tj. jednostruki lanac polipeptida, ili može da bude dimer, trimer, tetramer odnosno oligomer višeg reda. Trajanje oksigenisanog Fe<2+>stanja proteina koji sadrži hem može biti slično trajanju mioglobina ili duže za 10%, 20%, 30% 50%, 100% ili više u uslovima u kojima se proizvodi, čuva, rukuje i priprema za upotrebu protein koji sadrži hem. Trajanje neoksigenisanog Fe<2+>stanja proteina koji sadrži hem može biti slično trajanju mioglobina ili duže za 10%, 20%, 30% 50%, 100% ili više u uslovima u kojima se proizvodi, čuva, rukuje i priprema za upotrebu protein koji sadrži hem.
Neograničavajući primeri polipeptida koji sadrže hem mogu da uključuju androglobin, citoglobin, globin E, globin X, globin Y, hemoglobin, leghemoglobin, flavohemoglobin, vrata pakla globin I, mioglobin, eritrokruorin, beta hemoglobin, alfa hemoglobin, protoglobin, cijanoglobin, citoglobin, histoglobin, neuroglobin, hlorokruorin, krnji hemoglobin (npr. HbN ili HbO), krnji 2/2 globin, hemoglobin 3 (npr. Glb3), citohrom, il i peroksidaza.
Proteini koji sadrže hem, koji se mogu koristiti kao ovde opisani potrošni materijali, mogu da potiču od sisara (npr. od domaćih životinja, kao što su krave, koze, ovce, konji, svinje, bikovi ili zečevi), ptica, biljaka, algi, gljiva (npr. kvasaca ili filamentozne gljive), trepljara ili bakterija. Na primer, protein koji sadrži hem može da potiče od sisara koji je korisna domaća životinja (npr. krava, koza, ovca, svinja, bik ili zec) ili od ptice, kao što su ćurke ili kokoške. Proteini koji sadrže hem mogu da potiču od biljaka kao što su Nicotiana tabacum ili Nicotiana sylvestris (duvan); Zea mays (kukuruz), Arabidopsis thaliana, mahunarki kao što su Glycine max (soja), Cicer arietinum (garbanzo ili leblebija), sorte Pisum sativum (grašak) kao što su baštenski grašak ili šećerni grašak, sorti Phaseolus vulgaris običnog pasulja, kao što su boranija, crni pasulj, beli pasulj, biserni pasulj ili pinto, sorti Vigna unguiculata (kravlji grašak), Vigna radiata (mungo pasulj), Lupinus albus (lupin) ili Medicago sativa (lucerka); Brassica napus (kanola); Triticum sps. (pšenica, uključujući zrna pšenice, i spelta); Gossypium hirsutum (pamuk); Oryza sativa (pirinač); Zizania sps. (divlji pirinač); Helianthus annuus (suncokret); Beta vulgaris (šećerna repa); Pennisetum glaucum (biserno proso); Chenopodium sp. (kinoa); Sesamum sp. (susam); Linum usitatissimum (lan); ili Hordeum vulgare (ječam). Proteini koji sadrže hem mogu se izolovati iz gljiva kao što su Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris, Magnaporthe oryzae, Fusarium graminearum ili Fusarium oxysporum. Proteini koji sadrže hem mogu se izolovati iz bakterija kao što su Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Synechocistis sp., Aquifex aeolicus, Methylacidiphilum infernorum, ili iz termofilnih bakterija (npr. koje rastu na temperaturama preko 45 °C) kao što je Thermophilus. Proteini koji sadrže hem mogu se izolovati iz algi kao što je Chlamydomonas eugametos. Proteini koji sadrže hem mogu se izolovati iz protozoa kao što su Paramecium caudatum ili Tetrahymena pyriformis. U nekim izvedbama, bakterijski hemoglobini izabrani su iz grupe koja uključuje Aquifex aeolicus, Thermobifida fusca, Methylacidiphilum infernorum (vrata pakla), Synechocystis SP, ili Bacillus subtilis. Poznate su sekvence i strukture brojnih proteina koji sadrže hem. Videti, na primer, Reedy, et al., Nucleic Acids Research, 2008, Vol. 36, Database issue D307-D313 i bazu podataka o hemoproteinima dostupnu na internetu, na http://hemeprotein.info/heme.php.
Na primer, nesimbiotski hemoglobin može da potiče iz biljke odabrane iz grupe koju čine soja, proklijala soja, lucerka, zlatni lan, crni pasulj, crni okasti grašak, biserni pasulj, garbanzo, mungo pasulj, kravlji grašak, pinto pasulj, mahune graška, sušeni grašak, kinoa, susam, suncokret, zrna pšenice, spelta, ječam, divlji pirinač ili pirinač.
Bilo koji od ovde opisanih proteina koji sadrže hem mogu se koristiti za proizvodnju potrošnih materijala koji mogu da imaju najmanje 70% (npr. najmanje 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% ili 100%) identičnu sekvencu sa sekvencom aminokiselina odgovarajućeg proteina koji sadrži hem divljeg tipa ili njegovih fragmenata koji sadrže motiv koji vezuje hem. Na primer, protein koji sadrži hem može da ima najmanje 70% identičnu sekvencu sa sekvencom aminokiseline navedene na SL. 1, uključujući i nesimbiotički hemoglobin, kao što je onaj iz Vigna radiata (SEK. ID BR:1), Hordeum vulgare (SEK. ID BR.:5), Zea mays (SEK. ID BR.: 13), Oryza sativa subsp. japonica (pirinač) (SEK. ID BR.:14), ili Arabidopsis thaliana (SEK. ID BR.:15), globin vrata pakla I kao što je onaj iz Methylacidiphilum infernorum (SEK. ID BR.:2), flavohemoprotein kao što je onaj iz Aquifex aeolicus (SEK. ID BR.:3), leghemoglobin kao što je onaj iz Glycine max (SEK. ID BR.:4), Pisum sativum (SEK. ID BR.: 16), ili Vigna unguiculata (SEK. ID BR.:17), hem-zavisna peroksidaza kao što je ona iz Magnaporthe oryzae, (SEK. ID BR.:6) ili Fusarium oxysporum (SEK. ID BR.:7), citohrom-c peroksidaza iz Fusarium graminearum (SEK. ID BR.:8), krnji hemoglobin iz Chlamydomonas moewusii (SEK. ID BR.:9), Tetrahymena pyriformis (SEK. ID BR.:10, grupa I krnji), Paramecium caudatum (SEK. ID BR.: 11, grupa I krnji), hemoglobin iz Aspergillus niger (SEK. ID BR.: 12), ili mioglobin protein iz sisara kao što je Bos taurus (SEK. ID BR.:18) mioglobin, Sus scrofa (SEK. ID BR.:19) mioglobin, ili Equus caballus (SEK. ID BR.:20) mioglobin, hemoprotein iz Nicotiana benthamiana (SEK. ID BR.:21), Bacillus subtilis (SEK. ID BR.:22), Corynebacterium glutamicum (SEK. ID BR.:23), Synechocystis PCC6803 (SEK. ID BR.:24), Synechococcus sp. PCC 7335 (SEK. ID BR.:25), Nostoc commune (SEK. ID BR.:26), ili Bacillus megaterium (SEK. ID BR.:27). Videti SL.1.
Procenat identičnosti dve aminokiseline može se odrediti kao što sledi. Prvo, sekvence aminokiseline se poravnavaju pomoću programa BLAST 2 za sekvenciranje (Bl2seq) iz samostalne verzije BLASTZ koja sadrži BLASTP verziju 2.0.14. Ova samostalna verzija BLASTZ može se pribaviti na internet stranici Fish & Richardson (npr. www.fr.com/blast/) ili na internet stranici Nacionalnog centra za biotehnološke informacije američke Vlade (www.ncbi.nlm.nih.gov). Instrukcije za korišćenje Bl2seq programa mogu se pronaći u „readme“ datoteci koja prati BLASTZ. Bl2seq vrši poređenje sekvenci dve aminokiseline pomoću BLASTP algoritma. Kako bi se uporedile sekvence dve aminokiseline, opcije za Bl2seq se podešavaju kao što sledi: -i se podešava na datoteku koja sadrži sekvencu prve aminokiseline koja se poredi (npr. C:\seq1.txt); -j se podešava na datoteku koja sadrži sekvencu druge aminokiseline koja se poredi (npr. C:\seq2.txt); -p se podešava na blastp; -o se podešava na bilo koji željeni naziv datoteke (npr. C:\output.txt); a sve ostale opcije se ostavljaju na podrazumevanim podešavanjima. Na primer, sledeća komanda se može koristiti kako bi se izradila izlazna datoteka koja sadrži poređenje sekvenci dve aminokiseline: C:\Bl2seq-i c:\seq1.txt -j c:\seq2.txt -p blastp -o c:\output.txt. Ako dve upoređene sekvence dele homologiju, onda će naznačena izlazna datoteka prikazivati one regione homologije kao poravnate sekvence. Ako dve upoređene sekvence ne dele homologiju, onda naznačena izlazna datoteka neće prikazivati poravnate sekvence. Slične procedure mogu se primenjivati za sekvence nukleinskih kiselina, osim što se koristi blastn.
Nakon poravnavanja, broj poklapanja se određuje brojanjem pozicija u kojima je identični trag aminokiseline prisutan u obe sekvence. Procenat identičnosti određuje se deljenjem broja poklapanja sa dužinom sekvence aminokiseline polipeptida u punoj dužini, pa množenjem dobijene vrednosti sa 100. Napominjemo da se vrednost procenta identičnosti zaokružuje na najbližu deseticu. Na primer, 78,11; 78,12; 78,13 i 78,14 zaokružuju se na 78,1; dok se 78,15; 78,16; 78,17; 78,18 i 78,19 zaokružuju na 78,2. Takođe se napominje da vrednost dužine uvek mora da bude ceo broj.
Smatra se da određeni broj nukleinskih kiselina može da kodira polipeptid sa određenom sekvencom aminokiseline. Degeneracija genetskog koda dobro je poznata u stanju tehnike; tj. za mnoge aminokiseline postoji više od jednog tripleta nukleotida koji služe kao kodon za aminokiselinu. Na primer, kodoni u sekvenci kodiranja za dati enzim mogu se modifikovati tako da se dobije optimalna ekspresija kod određene vrste (npr. bakterije ili gljive), uz korišćenje odgovarajućih tabela preferencija kodona za datu vrstu.
Proteini koji sadrže hem mogu se ekstrahovati iz izvornog materijala (npr. ekstrahovati iz tkiva životinjskog porekla, ili iz biomase biljaka, algi ili bakterija, ili iz supernatanta kulture za sekrecijske proteine) ili iz kombinacije izvornih materijala (npr. različite biljne vrste).
1
Leghemoglobin je dostupan kao neiskorišćeni nusproizvod useva mahunarki (npr. soja, lucerka ili grašak). Količina leghemoglobina u korenu ovih useva u Sjedinjenim Državama premašuje sadržaj mioglobina u celokupnom crvenom mesu koje se potroši u Sjedinjenim Državama.
U nekim izvedbama, ekstrakti proteina koji sadrže hem uključuju jedan ili više proteina koji ne sadrže hem iz izvornog materijala (npr. drugi proteini iz životinja, biljaka, gljiva, algi ili bakterija) ili iz kombinacije izvornih materijala (npr. različite životinje, biljke, gljive, alge ili bakterije).
U nekim izvedbama, proteini koji sadrže hem su izolovani i prečišćeni iz drugih komponenti izvornog materijala (npr. drugih proteina iz životinja, biljaka, gljiva, algi ili bakterija) primenom gore opisanih tehnika. Kako se koristi ovde, termin „izolovan i prečišćen“ označava da je preparat proteina koji sadrži hem čistoće od najmanje 60%, npr. čistoće preko 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, ili 99%.
Proteini koji sadrže hem takođe se mogu proizvesti rekombinovanjem uz korišćenje tehnika ekspresije polipeptida (npr. tehnika heterologne ekspresije uz korišćenje ćelija bakterija, ćelija insekata, ćelija algi, ćelija gljiva kao što su ćelije kvasca, ćelije biljaka ili ćelije sisara). Na primer, moguće se izvršiti ekspresiju proteina koji sadrži hem u ćelijama E. coli. Proteini koji sadrže hem mogu se označiti heterolognom sekvencom aminokiseline kao što su FLAG, polihistidin (npr. heksahistidin, HIS oznaka), hemaglutinin (HA), glutation-S-transferaza (GST) ili protein koji veže maltozu (MBP) kao pomoć u prečišćavanju proteina. U nekim izvedbama, moguće je izvršiti ekspresiju rekombinantnog proteina koji sadrži hem, uključujući lokaciju HIS-oznake i proteaze (npr. TEV) kako bi se omogućilo razdvajanje HIS-oznake, u E.coli i prečišćavanje pomoću afinitetne hromatografije His-oznake (Talon smola, CloneTech). U nekim slučajevima, standardne tehnike sinteze polipeptida (npr. tehnika sinteze polipeptida tečne faze ili tehnika sinteze polipeptida čvrste faze) mogu se koristiti za sintetičku proizvodnju proteina koji sadrže hem.- U nekim slučajevima, tehnike prevođenja bez ćelija mogu se koristiti za sintetičku proizvodnju proteina koji sadrže hem.
U nekim izvedbama, izolovani i prečišćeni protein je suštinski u svom nativnom sklopu i rastvorljiv u vodi. U nekim izvedbama, izolovani i prečišćeni protein je više od 50, 60, 70, 80 ili 90% u svom nativnom sklopu. U nekim izvedbama, izolovani i prečišćeni protein je više od 50, 60, 70, 80 ili 90% rastvorljiv u vodi.
Proteini korišćeni u potrošnom materijalu mogu se izmeniti (npr. hidrolizovati, razdvojiti, unakrsno vezati, denaturizovati, polimerizovati, ekstrudirati, elektrospinovati, sušiti raspršivanjem ili liofilizovati, ili derivatizovati ili hemijski modifikovati). Na primer, proteini se mogu modifikovati kovalentnim vezivanjem šećera, lipida, kofaktora ili drugih hemijskih grupa, uključujući fosfatne, acetatne, metilne i druge prirodne ili neprirodne molekule. Na primer, peptidna osnova proteina može se razdvojiti izlaganjem kiselinama ili proteazama ili na druge načine. Na primer, proteini mogu biti denaturisani, tj. njihova sekundarna, tercijarna ili kvaternarna struktura može biti izmenjena izlaganjem toploti ili hladnoći, promenama pH vrednosti, izlaganjem sredstvima za denaturaciju kao što su deterdženti, urea ili drugim haotropnim agensima, ili mehaničkim uticajima, uključujući smicanje. Poravnanje proteina u rastvoru, koloidu ili čvrstom stanju može se kontrolisati tako da utiče na mehanička svojstva, uključujući čvrstoću na istezanje, elastičnost, deformabilnost, tvrdoću ili hidrofobičnost.
Potrošni materijal može da sadrži sastave koji mogu da ukazuju da je potrošni materijal za pripremu ili pripremljen. Oslobađanje mirisa nakon pripreme je važan aspekt potrošnje mesa. Neke reakcije u kojima se razvijaju mirisi tokom pripreme mesa mogu se katalizovati pomoću gvožđa, naročito hem gvožđa mioglobina. Stoga, neke karakteristične komponente ukusa i mirisa razvijaju se tokom procesa pripreme zahvaljujući hemijskim reakcijama koje katalizuje gvožđe. U nekim slučajevima, neke karakteristične komponente ukusa i mirisa razvijaju se tokom procesa pripreme zahvaljujući hemijskim reakcijama koje katalizuje hem. U nekim slučajevima, neke karakteristične komponente ukusa i mirisa razvijaju se tokom procesa pripreme zahvaljujući hemijskim reakcijama koje katalizuje hem gvožđa u leghemoglobinu. U nekim slučajevima, neke karakteristične komponente ukusa i mirisa razvijaju se tokom procesa pripreme zahvaljujući hemijskim reakcijama koje katalizuje hem gvožđa u hemoproteinu. Na primer, hemoproteini (npr. iz Aquifex aeolicusm, Methylacidiphilum infernorum, Glycine max, Hordeum vulgare ili Vigna radiate) daju znatno drugačiji profil isparljivih mirisa kada se zagrevaju u prisustvu cisteina i glukoze u poređenju sa bilo kojim podskupom tri komponente kada se analiza vrši pomoću GC-MS. Isparljive komponente ukusa koje se povećavaju pod ovim uslovima uključuju, bez ograničenja, furan, aceton, tiazol, furfural, benzaldehid, 2-piridinkarboksaldehid, 5-metil-2-tiofenkarboksaldehid, 3-metil-2-tiofenkarboksaldehid, 3-tiofenmetanol i dekanol. U ovim uslovima, cistein i glukoza samostalno ili u prisustvu soli gvožđa kao što su gvožđe glukanat daju sumporast miris, ali dodavanjem hemoproteina smanjuje se sumporast miris i zamenjuje se ukusima, uključujući, bez ograničenja ukus pileće supe, zagorelih pečurki, melase i hleba.
Pored toga, hemoprotein (npr. iz Aquifex aeolicus, Methylacidiphilum infernorum, Glycine max, Hordeum vulgare ili Vigna radiata) kada se zagreva u prisustvu mlevene piletine povećava specifične isparljive mirise koji su izraženiji kod junetine u poređenju sa piletinom kada se analiza vrši pomoću GC-MS. Isparljive komponente ukusa koje se povećavaju pod ovim uslovima uključuju, bez ograničenja, propanal, butanal, 2-etil-furan, heptanal, oktanal, trans-2-(2-pentenil)furan, (Z)-2-heptenal (E)-2-oktenal pirol, 2,4-dodekadienal, 1-oktanal, ili (Z)-2-dekenal 2-undekenal.
Boja mesa je važan deo doživljaja pripreme i konzumiranja mesa. Na primer, komadi junetine imaju karakterističnu crvenu boju u sirovom stanju i boja se postepeno menja u braon tokom pripreme. U drugom primeru, belo meso, kao što je piletina ili svinjetina, ima karakterističnu ružičastu boju u sirovom stanju i postepeno se boja menja u belu ili braonkastu tokom pripreme. Jačina promene boje koristi se kao indikator napretka procesa pripreme kod junetine i određuje trajanje pripreme i temperaturu kako bi se dobilo željeno stanje pripremljenosti. Glavni faktor nutritivne definicije koji određuje boju mesa jeste koncentracija proteina koji nose gvožđe u mesu. U skeletno-mišićnoj komponenti proizvoda od mesa, jedan od glavnih proteina koji nose gvožđe jeste mioglobin. Kako je opisano iznad, sadržaj mioglobina varira od 0,05% kod belog pilećeg mesa do 1,5–2,0% kod govedine. Leghemoglobin, koji ima sličnu strukturu i fizička svojstva kao mioglobin, dostupan je kao neiskorišćeni nusproizvod useva mehunarki (npr. soja ili grašak). Leghemoglobin u korenu ovih useva u SAD premašuje sadržaj mioglobina u celokupnom crvenom mesu koje se potroši u SAD.
Ovde opisani hemoproteini mogu se dodati u meso kako bi se poboljšale karakteristike mesa. Rastvor koji sadrži hemoprotein može se ubrizgati u sirovo (npr. sirovo belo meso) ili pripremljeno meso kako bi se poboljšala organoleptična svojstva mesa tokom pripreme dodavanjem ukusa „junetine“ (npr. u bela mesa kao što je pileće belo meso).
Leghemoglobin može se dobiti iz različitih biljaka. Različite vrste mahunarki i njihove sorte (npr. soja, bob, lima pasulj, kravlji grašak, baštenski grašak, žuti grašak, lupin, pasulj, garbanzo, kikiriki, lucerka, grahorica, detelina, lespedeza ili pinto pasulj) sadrže čvoriće u korenu koji vezuju azot, a u kojima leghemoglobin igra ključnu ulogu u kontroli koncentracije kiseonika (na primer čvorići u korenu biljke graška). U jednom slučaju, protein leghemoglobin prečišćen je iz čvorića u korenu mahunarki (npr. soje, boba ili graška) pomoću hromatografije jonske razmene. U jednom slučaju, leghemoglobin je prečišćen iz čvorića u korenu soje, boba ili slatkog graška.
Biljke se mogu uzgajati primenom standardnih poljoprivrednih metoda, s izuzetkom što se, u nekim slučajevima, ne koristi đubrivo i zemljište se obogaćuje prirodnim bakterijama iz roda Rhizobium koje vezuju azot. Mogu se ubirati i lizirati ili čitavi koreni ili čvorići na korenima, na primer u 20 mM kalijum fosfata pH vrednosti 7,4, 100 mM kalijum hlorida i
1
5 mM EDTA pomoću mlina-blendera. Tokom ovog procesa leghemoglobin se ispušta u pufer. Lizat čvorića korena koji sadrži leghemoglobim može se pročistiti od ostataka ćelija filtracijom kroz filter od 5 µm. U nekim slučajevima, nakon filtracije sledi centrifugiranje (7000 g, 20 minuta). Pročišćen lizat koji sadrži leghemoglobin potom se filtrira kroz filter od 200 nm i nanosi na kolonu hromatografije anjonske razmene (high prep Q; High Prep DEAE, GE Healthtcare) na brzoj mašini za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Leghemoglobin se prikuplja u protočnoj frakciji i koncentriše kroz membranu za filtraciju od 3 kDa do željene koncentracije. Čistoća (delimična abundantnost) prečišćenog leghemoglobina analizira se pomoću SDS-PAGE gela: leghemoglobin je prisutan u lizatu leghemoglobina sa 20–40%, dok je nakon prečišćavanja anjonskom razmenom prisutan sa 70–80%. U drugom slučaju, protok leghemoglobin iz soje iz hromatografije anjonskom razmenom primenjuje se na hromatografiju na hromatografskim sitima (Sephacryl S-100 HR, GE Healthcare). Leghemoglobin iz soje se ispira u dve frakcije koje odgovaraju vrstama dimera i monomera. Čistoća (delimična abundantnost) leghemoglobina analizirana je pomoću SDS-PAGE i utvrđeno je da iznosi ~ 90–100%.
Proteini iz lizata čvorić iz korena mahunarki mogu se preneti u natrijum karbonat od 10 mM sa pH vrednošću 9,5, pufer natrijum hlorida od 50 mM, filtriran kroz filter od 200 nm i nanet na kolonu hromatografije anjonske razmene na brzom instrumentu za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Leghemoglobin se može vezati za matricu hromatografije anjonske razmene i ispirati pomoću gradijenta natrijum hlorida. Čistoća (delimična abundantnost) leghemoglobina može se analizirati pomoću SDS-PAGE i može se utvrditi da iznosi ~ 60–80%.
Neželjeni sitni molekuli iz korena mahunarki mogu se ukloniti iz prečišćenog leghemoglobina propuštanjem leghemoglobina u rastvoru kroz anjonskoizmenjivačku smolu. Ovi sitni molekuli boje lizate čvorića na korenu u različite nijanse braon boje, čime se smanjuje kvalitet boje rastvora leghemoglobina. U jednom slučaju, anjonskoizmenjivačka smola je FFQ, DEAE, Amberlite IRA900, Dowex 22 ili Dowex 1x4. Leghemoglobin prečišćen bilo frakcinacijom amonijum sulfata (60 mas% i 90 mas% amonijum sulfata) ili hromatografijom anjonske razmene puferski je izmenjen u 20 mM kalijum fosfata pH vrednosti 7,4, 100 mM natrijum hlorida i rastvor je propušten preko jedne od gore navedenih anjonskoizmenjivačkih smola. Protok se može prikupiti i njegova boja se može uporediti sa bojom rastvora pre prolaska preko anjonskoizmenjivačkih smola. Može se primetiti poboljšanje boje rastvora prečišćenog leghemoglobina utvrđeno vizuelnim pregledom (od žuto/braon u jasnije crvenu), međutim, variraju razmere uklanjanja žuto-braon nijanse.
Alternativno, protein koji sadrži hem može se rekombinantno proizvesti kako je opisano u odeljku III B. Na primer, nesimbiotički hemoglobin iz mungo pasulja može se rekombinantno ekspresovati u E.coli i prečistiti pomoću hromatografije anjonske razmene ili hromatografije katjonske razmene. Ćelijski lizat propušten je preko FF-Q smole na brzom instrumentu za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Nesimbiotički hemoglobin mungo pasulja ispran je u protočnim frakcijama. Čistoća (delimična abundantnost) nesimbiotičkog hemoglobina mungo pasulja analizirana je pomoću SDS-PAGE i utvrđeno je da čini deo ukupnog proteina: 12% u lizatu E.coli, i 31% nakon prečišćavanja na FFQ. UV-Vis analiza prečišćenog proteina pokazala je spektralne karakteristike proteina vezanog hemom.
Alternativno, ćelijski lizat propušten je preko FF-S smole na brzom instrumentu za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Nesimbiotički hemoglobin mungo pasulja može se vezati za FF-S kolonu i ispirati pomoću gradijenta natrijum hlorida (50–1000 mM). Čistoća (delimična abundantnost) nesimbiotičkog hemoglobina mungo pasulja može se analizirati pomoću SDS-PAGE i može se utvrditi da iznosi: 13% u lizatu E.coli, i 35% nakon prečišćavanja na FFQ. UV-Vis analiza prečišćenog proteina može da pokaže spektralne karakteristike proteina vezanog hemom.
Imajući u vidu koliko se hemoproteini koriste za bojenje potrošnih materijala, korisno je detektovati da li proizvod sadrži određeni hemoprotein. Na primer, mogu se izvršiti testovi ELISA, PLA esej (proximity-ligation assay), luminex esej ili western blot analiza kako bi se utvrdilo da li je leghemoglobin ili drugi protein koji sadrži hem prisutan u prehrambenom proizvodu kao što je meso ili zamena za meso. U jednom slučaju, primenjene su metode detekcije kako bi se utvrdilo da li je meso izmenjeno leghemoglobinom ili drugim proteinom koji sadrži hem.
Primeri
Referentni primer 1: Izolacija proteina.
Svi koraci su izvršeni na temperaturi od 4 °C ili na sobnoj temperaturi. Koraci centrifugiranja izvršeni su na 8000 g tokom 20 minuta, na 4 °C ili na sobnoj temperaturi. Brašno se rastvara u specifičnom puferu, suspenzija se centrifugira i supernatant se mikrofiltrira kroz PES membranu od 0,2 mikrona i koncentriše ultrafiltracijom na PES membrani sa granicom separacije od 3 kDa, 5 kDa ili 10 kDa molekulske mase na Spectrum Labs KrosFlo sistemu za filtraciju tangencijalnog protoka sa šupljim vlaknima.
Nakon razdvajanja, sve frakcije precipitata amonijum sulfata od interesa čuvaju se na -20 °C do dalje upotrebe. Pre korišćenja u eksperimentima, precipitati se ponovo rastvaraju
1
u 10 zapremina od 50 mM K fosfatnog pufera, pH 7,4, 0,5 M NaCl. Suspenzije se centrifugiraju i supernatanti se mikrofiltriraju kroz PES membranu od 0,2 mikrona i koncentrišu ultrafiltracijom na PES membrani sa granicom separacije od 3 kDa, 5 kDa ili 10 kDa molekulske mase na Spectrum Labs KrosFlo sistemu za filtraciju tangencijalnog protoka sa šupljim vlaknima. Sastav proteina u pojedinačnim koracima frakcioniranja prati se pomoću SDS-PAGE a koncentracije proteina se mere pomoću standardnih UV-Vis metoda.
(i) Albumini iz graška: Brašno od suvog zelenog ili žutog graška korišćeno je kao izvor albumina iz graška. Brašno je rastvoreno u 10 zapremina pufera natrijum acetata od 50 mM, pH 5 i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena graška centrifugiranjem (8000 g, 20 minuta) ili filtracijom kroz filter od 5 mikrona. Potom je prikupljen supernatant ili filtrat, zavisno od slučaja. U ovaj sirovi ekstrakt proteina dodat je amonijum sulfat u čvrstom stanju, zasićenosti od 50% zapreminske težine. Rastvor je mešan 1 sat i potom centrifugiran. U supernatant iz ovog koraka dodat je amonijum sulfat kako bi se dobila zasićenost od 90% zapreminske težine. Rastvor je mešan 1 sat i potom centrifugiran kako bi se prikupili proteini albumina iz graška u formi pločice. Pločica je čuvana na -20 °C do dalje upotrebe. Protein je povraćen iz pločice i pripremljen za upotrebu kako je opisano iznad, s izuzetkom konačnog pufera koji može da sadrži od 0 do 500 mM natrijum hlorida.
U nekim slučajevima, brašno je rastvoreno u 10 zapremina od 50 mM NaCl, pH 3,8 i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena graška (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 Kda.
(ii) Globulini iz graška: Brašno od suvog zelenog graška koristi se za ekstrahovanje proteina globulina iz graška. Brašno je rastvoreno u 10 zapremina pufera kalijum fosfata od 50 mM, pH 8 i natrijum hlorida od 0,4 mM i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od ostatka semena graška. Supernatant je izložen frakcioniranju amonijum sulfatom u dva koraka pri zasićenosti od 50% i 80%. Pločica od 80% koja sadrži globuline od interesa čuvana je na -20 °C za dalju upotrebu. Protein je povraćen iz pločice i pripremljen za upotrebu kako je opisano iznad.
iii) Globulini 7S i 11S iz soje: Globulini iz sojinog brašna izolovani su tako što je prvo rastvoreno sojino brašno sa malim sadržajem masti/odmašćeno u 4–15
1
zapremina kalijum fosfata od 10 (ili 20) mM, pH 7,4. Emulzija je centrifugirana na 8000 rcf tokom 20 minuta ili razbistrena filtracijom na 5 mikrona, nakon čega je prikupljen supernatant. Sirovi ekstrakt proteina predstavljao je mešavinu 7S i 11S globulina. Rastvor je potom filtriran na 0,2 mikrona i centrifugiran na PES membrani sa granicom separacije od 10 kDa molekulske mase na Spectrum Labs KrosFlo sistemu za filtraciju tangencijalnog protoka sa šupljim vlaknima ili propuštanjem preko anjonskoizmenjivačke smole pre korišćenja u eksperimentima. 11S globulini razdvojeni smo od 7S proteina izoelektričnom precipitacijom. pH vrednost sirovog ekstrakta proteina podešena je na 6,4 pomoću razblažene HCl, mešana tokom 30 minuta do jednog sata i potom centrifugirana kako bi se prikupili 11S precipitat i 7S proteini u supernatantu. Frakcija 11S je potom ponovo rastvorena pomoću kalijum fosfata od 10 mM, pH 7,4, a frakcije proteina su mikrofiltrirane i koncentrisane pre upotrebe.
Proteini iz soje takođe se mogu ekstrahovati rastvaranjem odmašćenog sojinog brašna u 4– 15 zapremina (npr. 5 zapremina) natrijum karbonata od 20 mM, pH 9 (ili u vodi, sa pH vrednošću podešenom na 9 nakon dodavanja brašna) ili pufera kalijum fosfata od 20 mM, pH 7,4 i natrijum hlorida od 100 mM kako bi se smanjili čudni ukusi u prečišćenom proteini. Emulzija se meša jedan sat i centrifugira na 8000 xg tokom 20 minuta. Ekstrahovani proteini su ultrafiltrirani i potom obrađeni kako je opisano iznad ili alternativno, supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 Kda.
(iv) 8S globulini iz mungo pasulja: Brašno mungo pasulja korišćeno je za ekstrahovanje 8S globulina prvo rastvaranjem brašna u 4 zapremine pufera kalijum fosfata od 50 mM, pH 7 (+0,5 M NaCl za prečišćavanje laboratorijskih razmera). Nakon centrifugiranja, proteini u supernatantu su izloženi frakcionisanju dodavanjem amonijum sulfata u 2 koraka pri zasićenosti od 50% i 90%. Talog iz frakcije 90% sadržao je 8S globuline i sačuvan je na -20 °C do dalje upotrebe. Protein je povraćen iz pločice i pripremljen za upotrebu kako je opisano iznad.
Proteini iz mungo pasulja takođe se mogu ekstrahovati rastvaranjem brašna u 4 zapremine pufera natrijum karbonata od 20 mM, pH 9 (ili u vodi, sa pH vrednošću podešenom na 9 nakon dodavanja mungo brašna) kako bi se smanjili čudni ukusi u prečišćenim frakcijama proteina. Emulzija je centrifugirana (ili filtrirana) kako bi se uklonile čvrste materije, ultrafiltrirana i potom obrađena kako je opisano iznad.
(v) Proteini zastupljeni u kasnoj embriogenezi: Brašno (uključujući, bez ograničenja, brašno mungo pasulja i soje) rastvoreno je u 20 mM Tris-HCl, pH 8,0, 10 mM
1
NaCl, i mešano na sobnoj temperaturi 1 sat, i potom centrifugirano. Kiselina (HCl ili sirćetna kiselina) dodata je u supernatant do koncentracije od 5% (v/v), mešana na sobnoj temperaturi i potom centrifugirana. Supernatant je zagrejan na 95 °C tokom 15 minuta, i potom centrifugiran. Supernatant je taložen dodavanjem trihlorosirćetne kiseline do 25%, centrifugiran i potom opran acetonom. Koraci zagrevanja i pranja kiselinom mogu se takođe izvršiti obrnutim redosledom.
(vi) Prolamini iz graška: Brašno od suvog zelenog graška rastvoreno je u 5x (w/v) 60% etanola, mešano na sobnoj temperaturi jedan sat, potom centrifugirano (7000 g, 20 min) nakon čega je prikupljen supernatant. Etanol iz supernatanta je ispario usled zagrevanja rastvora na 85 °C, nakon čega je sledilo hlađenje na sobnoj temperaturi. Dodat je ledeni aceton (1: 4 v/v) radi taloženja proteina. Rastvor je potom centrifugiran (4000 g, 20 min), i proteini su povraćeni u formi svetlobež pločice.
(vii) Prolamini iz kukuruza: Koncentrat proteina kukuruza ili brašno rastvoreno je u 5x (w/v) 60% etanola, mešano na sobnoj temperaturi jedan sat i potom centrifugirano. Etanol u supernatantu je ispario delovanjem toplote, nakon čega je rastvor centrifugiran i protein je povraćen u formi pločice.
(viii) RuBisCO je frakcionisan iz zelenih delova lucerke prvo mlevenjem listova sa 4 zapremine hladnog pufera kalijum fosfata od 50 mM, pH 7,4 (0,5 M NaCl 2 mM DTT 1 mM EDTA) u blenderu. Dobijena emulzija je centrifugirana kako bi se uklonili ostaci i supernatant (sirovi lizat) korišćen je u daljim koracima prečišćavanja. Proteini u sirovom lizatu frakcionisani su dodavanjem amonijum sulfata do zasićenosti od 30% (zapreminske težine). Rastvor je mešan 1 sat i potom centrifugiran. Pločica iz ovog koraka je odbačena i dodata je dodatna količina amonijum sulfata u supernatant kako bi se dobila zasićenost amonijum sulfata od 50% (zapreminske težine). Rastvor je ponovo centrifugiran nakon mešanja tokom 1 sata. Pločica iz ovog koraka sadrži RuBisCO, i sačuvana je na -20 °C do daljeg korišćenja. Protein je povraćen iz pločice i pripremljen za upotrebu kako je opisano iznad.
RuBisCO se takođe može prečistiti usklađivanjem sirovog lizata na 0,1 M NaCl i primenom na anjonskoizmenjivačku smolu. Slabo vezana kontaminacija u proteinu se ispira sa puferom kalijum fosfata od 50 mM, pH 7,4 pufer 0,1 M NaCl. RuBisCO se potom ispira puferom velike jonske jačine (0,5 M NaCl).
Rastvor RuBisCO je izbeljen (pH 7–9) propuštanjem kroz kolone sa aktivnim ugljem. Boje su se vezale u koloni dok je Rubisco izolovan u filtratu.
1
Rastvori RuBisCO su takođe alternativno izbeljeni inkubacijom rastvora sa smolom FPX66 (Dow Chemicals) upakovanom u kolonu (ili u šaržama). Emulzija je inkubirana tokom 30 minuta i potom je tečnost odvojena od smole. Boje su se vezale za smolu i RuBisCO je prikupljen u protočnoj koloni.
U nekim slučajevima, RuBisCO je izolovan iz listova spanaća prvo mlevenjem listova sa 4 zapremine pufera kalijum fosfata od 20 mM, pH 7,4 pufer 150 mM NaCl 0,5 mM EDTA) u blenderu. Dobijena emulzija je centrifugirana kako bi se uklonili ostaci, supernatant (sirovi lizat) je filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
U nekim slučajevima, RuBisCO je ekstrahovan iz praha soka lucerke ili pirevine mešanjem praha sa 4 zapremine pufera kalijum fosfata od 20 mM, pH 7,4 pufer 150 mM NaCl 0,5 mM EDTA) u blenderu. Dobijena emulzija je centrifugirana kako bi se uklonili ostaci, supernatant (sirovi lizat) je filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(ix) Leghemoglobin. Čvorići na korenu soje rastvoreni su i lizirani u 20 mM kalijum fosfata pH vrednosti 7,4, 100 mM kalijum hlorida i 5 mM EDTA pomoću mlinablendera. Tokom ovog procesa leghemoglobin se ispušta u pufer. Lizat čvorića korena koji sadrži leghemoglobin prečišćen je od ostataka ćelija filtracijom kroz filter od 5 mikrona. U nekim slučajevima, nakon filtracije sledilo je centrifugiranje (7000 g, 20 minuta). Prečišćen lizat koji sadrži leghemoglobin je potom filtriran kroz filter od 0,2 mikrona i nanet na kolonu hromatografije anjonske razmene (High Prep Q; High Prep DEAE, GE Healthtcare) na brzom instrumentu za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Leghemoglobin je prikupljen u protočnoj frakciji i koncentrisan na PES membrani sa granicom separacije od 3 kDa molekulske mase na Spectrum Labs KrosFlo sistemu za filtraciju tangencijalnog protoka sa šupljim vlaknima do željene koncentracije. Čistoća (delimična abundantnost) prečišćenog leghemoglobina analizirana je pomoću SDS-PAGE gela: leghemoglobin je prisutan u lizatu leghemoglobina sa 20–40%, dok je nakon prečišćavanja anjonskom razmenom prisutan sa 70–80%. U drugom slučaju, protok leghemoglobina iz soje iz hromatografije anjonskom razmenom primenjen je na hromatografiju na hromatografskim sitima (Sephacryl S-100 HR, GE Healthcare). Leghemoglobin iz soje se ispira u dve frakcije koje odgovaraju vrstama dimera i monomera. Čistoća (delimična abundantnost) leghemoglobina analizirana je pomoću SDS-PAGE i utvrđeno je da iznosi ~ 90–100%. Analiza UV-VIS spektra (250–700 nm) otkrila je spektralni potpis dosledan leghemoglobinu koji sadrži hem.
1
(x) Nesimbiotski hemoglobin iz mungo pasulja kloniran je u pJexpress401 vektor (DNA2.0) i transformisan u E. coli BL21. Ćelije su rasle na LB medijumu koji sadrži soytone umesto triptona, kanamicin, 0,1 mM gvožđe(III) hlorida i 10 µg/ml 5-aminolevulinske kiseline. Ekspresija je indukovana 0,2 mM IPTG-om i ćelije su rasle na 30 °C tokom 20 časova. Ćelije E.coli koje vrše ekspresiju nesimbiotičkog hemoglobina iz mungo pasulja prikupljene su i ponovo rastvorene u 20 mM MES puferu pH 6,5, 50 mM NaCL, 1 mmM MgCl2, 1 mM CaCl2. Dodati su inhibitori proteaze i malo DNAaseI. Ćelije su lizirane ultrazvučnom obradom. Lizat je prečišćen od ostataka ćelija centrifugiranjem na 16.000 g tokom 20 minuta, nakon čega je sledila filtracija kroz filter od 200 nm. Ćelijski lizat propušten je preko FF-S smole na brzom instrumentu za tečnu hromatografiju proteina (GE Healthcare). Nesimbiotički hemoglobin mungo pasulja vezao se za FF-S kolonu i ispran je pomoću gradijenta natrijum hlorida (50– 1000 mM). Čistoća (delimična abundantnost) nesimbiotičkog hemoglobina mungo pasulja analizirana je pomoću SDS-PAGE i utvrđeno je da iznosi: 13% u lizatu E.coli, i 35% nakon prečišćavanja na FFQ. UV-Vis analiza prečišćenog proteina pokazala je spektralne karakteristike proteina vezanog hemom.
(xi) Hemoproteini sintetisani su sa N-terminalnom His6 epitop oznakom i TEV lokacijom razdvajanja, klonirani u pJexpress401 vektoru (DNA2.0), i transformisani u E. coli BL21. Transformisane ćelije su rasle na LB medijumu koji sadrži soytone umesto triptona, kanamicin, 0,1 mM gvožđe(III) hlorida i 10 µg/ml 5-aminolevulinske kiseline. Ekspresija je indukovana 0,2 mM IPTG-om i ćelije su rasle na 30 °C tokom 20 časova. Ćelije E.coli koje vrše ekspresiju hemoproteina prikupljene su i ponovo rastvorene u 50 mM kalijum fosfata, pH 8, 150 mM NaCl, 10 mM imidazola, 1 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, DNAaseI i inhibitorima proteaze. Ćelije su lizirane ultrazvučnom obradom i prečišćene centrifugiranjem na 9000 x g. Lizat je inkubiran sa NiNTA smolom (MCLAB), opran sa 5 zapremina kolone (CV) od 50 mM kalijum fosfata pH 8, 150 mM NaCl, 10 mM imidazola, i ispran sa 50 mM kalijum fosfata pH 8, 150 mM NaCl, 500 mM imidazola. SDS-PAGE i UV-vis spektar potvrdio je očekivane molekulske mase i potpuno opterećenje hema, respektivno.
U nekim slučajevima, transformisane ćelije su uzgajane u medijumu za seme koji se sastojao od 10 g/l glukoza monohidrata, 8 g/l monokalijum fosfata, 2,5 g/l Sensient Amberferm 6400, 2,5 g/l Sensient Tastone 154, 2 g/l diamonijum fosfata, 1 ml/l mešavine metala u tragovima (Teknova 1000x mešavina metala u tragovima Kat. Br. T1001), 1 g/l magnezijum sulfata, 0,25 ml 0,1 M rastvora gvožđe(III) hlorida, 0,5 ml/l Sigma protiv pene 204, 1 ml/l rastvora kanamicin sulfata 1000x. U (4)-1L laboratorijskim bocama za mešanje upotrebljeno je 250 ml, inokulisano sa 0,25 ml svaka iz jedne bočice kulture glicerola. Laboratorijske boce su rasle 5,5 sati, uz agitaciju od 250 o/min na 37 °C. U bioreaktoru od
2
100 l parom je sterilisano 40 l medijuma za seme, ohlađeno na 37 °C, pH vrednost je podešena na 7,0 i inokulisano je sa 800 ml kulture iz laboratorijske boce nakon što je postignut OD laboratorijske boce od 2,5. Aeracija u bioreaktoru obezbeđena je sa 40l/m a agitacija je vršena sa 250 o/min. Nakon 2,2 sata rasta, dostignut je OD od 2,20 i 22 l kulture je preneto u završni bioreaktor od 4 m<3>. Starter medijum za završni bioreaktor sastojao se od sledećih na mestu parenih komponenti: 1775 l dejonizovane vode, 21,75 kg monokalijum fosfata, 2,175 kg diamonijum fosfata, 4,35 kg amonijum feri citrata, 8,7 kg amonijum sulfata, 10,875 kg Sensient Amberferm 6400, 10,875 kg Sensient Tastone 154. Nakon 30 minuta parenja, komponente medijuma su ohlađene na 37 °C i izvršena su dodavanja nakon sterilizacije: 2,145 l rastvora 0,1 M gvožđe(III) hlorida, 59,32 kg 55%w/w glukoza monohidrata, 3,9 l mešavine metala u tragovima (Teknova 1000x mešavina metala u tragovima Kat. Br. T1001), 10,88 l od 200 g/l diamnijum fosfata, 36,14 l 1 M magnezijum sulfata, 2,175 L Sigma protiv pene 204, 2,175 l rastvora kanamicin sulfata 1000x. pH vrednost je kontrolisana na 7,0 dodavanjem 30% amonijum hidroksida. Aeracija je obezbeđena sa 2,175 m<3>/min, rastvoreni kiseonik je kontrolisan na 25% varijacijama agitacije između 60 i 150 o/min. U dve vremenske tačke (EFT=4 i EFT8), obezbeđen je bolus dodatak dodatnih nutrijenata. U svakom dodavanju dodato je 5,5 kg Sensient Amberferm 6400, 5,5 kg Sensient Tastone 154 i 4,4 kg diamonijum fosfata, u autoklaviranim rastvorima (rastvor 100 g/l za Amberferm i Tastetone, 200 g/l za diamonijum fosfat). Sterilni rastvor glukoze od 55%w/w glukoza monohidrata uveden je u bioreaktor kako bi se održao nivo rezidualne glukoze od 2 do 5 g/l. Nakon što je postignut OD od 25, temperatura je smanjena na 25 °C i kultura je indukovana sa 0,648 L 1 M izopropil β-D-1-tiogalaktopiranozida. Kultura je ostavljena da raste ukupno 25 sati, kada je kultura razblažena 1:1 sa dejonizovanom vodom, potom centrifugirana, uz koncentrisanje koncentrata do 50%v/v sadržaja čvrstih materija. Koncentrat ćelija je potom zamrznut na -20 °C. Koncentrat je otkravljen na 4 °C i razređen u 20 mM kalijum fosfata pH 7,8, 100 mM NaCl, 10 mM imidazola, i homogenizovan pri 15.000 PSI. Homogenizovane ćelije su filtrirane sa 0,2 um filtracijom tangencijalnog protoka (TFF) i filtrirani lizat je uveden direktno u cinkom-napunjenu IMAC kolonu (GE). Vezani proteini su oprani sa 10 zapremina kolona (CV) 20 mM kalijum fosfata pH 7,4, 100 mM NaCl, 5 mM histidina i ispran sa 10 CV 500 mM monokalijum fosfata, 100 mM NaCl. Isprani leghemoglobin je koncentrisan i diafiltriran na PES membrani sa granicom separacije od 3 kDa molekulske mase i TFF-u. Koncentrisani uzorak je redukovan pomoću 20 mM natrijum ditionita i desalinizovan pomoću G-20 smole (GE). Desalinizovani uzorci leghemoglobina su zamrznuti u tečnom azotu i uskladišteni na -20 °C. Koncentracija i čistoća leghemoglobina utvrđene su SDS-PAGE i UV-vis analizom.
(xi) Oleozin. Uljna tela suncokreta odvojena su od semena suncokreta. Semena suncokreta pomešana su sa 100 mM puferom natrijum fosfata pH 7,4, 50 mM natrijum hloridom, 1 mMEDTA na 1:3 wt/v. Uljna tela su prikupljena centrifugiranjem (5000 g, 20 min), i ponovo rastvorena u odnosu 1:5 (wt/v) u 50 mM natrijum hlorida, 2 M uree i mešana tokom 30 minuta na 4 °C. Koraci pranja 2 M ureom i centrifugiranje su ponovljeni. Uljna tela prikupljena centrifugiranjem ponovo su rastvorena u 100 mM pufera natrijum fosfata pH 7,4, 50 mM natrijum hlorida. Još jednom su ponovljeni koraci centrifugiranja i pranja, i u poslednjem koraku centrifugiranja dobijena je završna frakcija opranih uljnih tela. Uljna tela su ponovo rastvorena sa 10% wt/w u 100 mM pufera natrijum fosfata pH 7,4, 50 mM natrijum hlorida, 2% wt/v soli masnih kiselina biljnog ulja, homogenizovana na 5000 psi i inkubirana na 4 °C tokom 12 sati. Rastvor je centrifugiran (8000 g, 30 min), uklonjen je gornji sloj i prikupljena je rastvorljiva frakcija. SDS-PAGE analiza pokazala je da oleozini predstavljaju glavni protein prisutan u rastvorljivoj frakciji. Koncentracija oleozina je bila 2,8 mg/ml.
(xii) Ukupni proteini iz graška: Brašno od suvog zelenog ili žutog graška korišćeno je za ekstrakciju ukupnih proteina graška. Brašno je rastvoreno u 10 zapremina pufera kalijum fosfata od 20 mM, pH 8 i 100 mM natrijum hlorida i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od ostatka semena graška. Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 Kda.
(xiii) Vicilin iz graška i legumin iz graška: Brašno od suvog zelenog ili žutog graška korišćeno je za ekstrakciju ukupnih proteina graška kako je opisano iznad. Tako dobijena mešavina sirovog graška frakcionisana je u vicilin iz graška i legumin iz graška pomoću hromatografije jonske razmene. Materijal je stavljen na Q Sepharose FastFlow smolu i prikupljene su frakcije dok je koncentracija soli menjana od 100 mM do 500 mM NaCl. Vicilin iz graška prikupljen je na 350 mM natrijum hlorida, dok je legumin iz graška prikupljen na 460 mM natrijum hlorida. Prikupljene frakcije su koncentrisane pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(xv) Ukupni proteini iz sočiva: Vazdušno klasifikovano brašno od sočiva korišćeno je za ekstrakciju sirove mešavine proteina iz sočiva. Brašno je rastvoreno u 5 zapremina 20 mM pufera kalijum fosfata, pH 7,4 i 0,5 M natrijum hlorida i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena sočiva (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(xvi) Albumini iz sočiva: Vazdušno klasifikovano brašno od sočiva je rastvoreno u 5 zapremina 50 mM natrijum hlorida, pH 3,8 i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena sočiva (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(xvii) Ukupni proteini iz leblebija/garbanzo pasulja: Brašno od garbanzo pasulja je rastvoreno u 5 zapremina 20 mM pufera kalijum fosfata, pH 7,4 i 0,5 M natrijum hlorida i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena leblebija (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(xviii) Albumini iz leblebija/garbanzo pasulja: Brašno od garbanzo pasulja je rastvoreno u 5 zapremina 50 mM natrijum hlorida, pH 3,8 i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena sočiva (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 10 KDa.
(xix) Dehidrini iz brašna amaranta: Brašno od amaranta je rastvoreno u 5 zapremina 0,5 mM natrijum hlorida, pH 4,0 i mešano 1 sat. Rastvorljivi protein je centrifugiranjem razdvojen od neekstrahovanog proteina i ostatka semena sočiva (8000 g, 20 minuta). Supernatant je prikupljen i filtriran kroz membranu od 0,2 mikrona i koncentrisan pomoću PES membrane sa granicom separacije od 3 KDa. Dalje obogaćivanje dehidrina iz ove frakcije dobijeno je kuvanjem koncentrovanog proteinskog materijala, centrifugiranjem na 8000 g tokom 10 minuta i prikupljanjem supernatanta.
Referentni primer 2: Razvoj analognog mišićnog tkiva
Kako bi se pripremila replika mišićnog tkiva, 8 ml rastvora proteina mungo pasulja (114 mg/ml u 20 mM pufera fosfata (pH 7,4) i 400 mM natrijum hlorida) pomešano je sa 16 ml rastvora leghemoglobina (6 mg/ml leghemoglobina u 20 mM kalijum fosfata, 400 mM NaCl, pH 7,3). Dobijena mešavina je koncentrisana pomoću Amicon centrifugalnog koncentratora (granica separacije od 10 kDa) do konačne koncentracije 8S globulina iz mungo pasulja od 61 mg/ml, i koncentracije leghemoglobina od 6,5 mg/ml. Oko 400 mg praha transglutaminaze dodato je u rastvor, koji je dobro promešan, i podeljen u dve Falcon tube od 50 ml i inkubiran tokom noći na sobnoj temperaturi. Završna koncentracija ukupnog proteina bila je 67,5 mg/ml ukupnih proteina. Replika
2
mišićnog tkiva formirala je neprovidan gel crvenkasto-smeđe boje, sa manjim količinama (<1 ml) inkluzija tečnosti tamnocrvene boje poput venske krvi.
Referentni primer 3: Adipozna replika juneće masti
Replika adipoznog tkiva proizvedena je želiranjem rastvora prečišćenog 8S proteina mungo pasulja emulzifikovanog jednakim količinama kakao putera, kokos putera, maslinovog ulja i palminog ulja.8S protein mungo pasulja prečišćen je kako je opisano u Referentnom primeru 1, i imao je koncentraciju od 140 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata pH 7,4, 400 mM NaCl. Mešavina masti pripremljena je topljenjem pojedinačnih masti iz čvrstog u tečno stanje na 45 °C tokom 30 minuta. Pojedinačne masti (kakao puter, kokos puter, maslinovo ulje i palmino ulje) u tečnim stanjima pomešane su u odnosu 1:1:1:1 (v/v). Emulzija od proteina i masti formirana je mešanjem 70% v/v mešavine tečne masti sa 4,2% wt/v 8S proteina mungo pasulja, 0,4% wt/v sojinog lecitina i emulzifikovana vorteksiranjem tokom 30 sekundi, nakon čega je urađena ultrazvučna obrada tokom 1 minuta. Nakon homogenizacije, emulzija od masti i proteina bila je u jedinstvenoj tečnoj fazi kako je uočeno vizuelnim pregledom.
Jedna emulzija replike adipoznog tkiva stabilizovana je uzajamnim vezivanjem sa 0,2% wt/v enzima transglutaminaze na 37 °C tokom 12 sati. Druga replika masnog tkiva stabilizovana je želiranjem proteina zagrevanjem na 100 °C u vodenoj kupci, nakon čega je sledilo hlađenje na sobnoj temperaturi. Dobijene replike adipoznog tkiva bile su u jednoj fazi. Matrica replike adipoznog tkiva koju je formirala transglutaminaza bila je manje čvrstine nego matrica replike adipoznog tkiva koju je formiralo želiranje indukovano toplotom/hlađenjem.
Referentni primer 4: Analogno vezivno tkivo
Replike vlakana vezivnog tkiva proizvedene su elektrocentrifugiranjem rastvora globulina mungo pasulja (22,5 mg/ml) koji sadrži 400 mM natrijum hlorida, 6,75% w/v poli(vinil alkohola) i natrijum azida u tragovima (0,007% w/v). Dobijeni rastvor je upumpan brzinom 3 µl/min pomoću špric-pumpe, iz šprica od 5 ml kroz Teflon cev i tupu iglu veličine 21. Igla je povezana na pozitivni terminal Spellman CZE 30 kV visokonaponskog napojnog kompleta pri 17 kV i pričvršćena na 12 cm od aluminijumskog bubnja (približne dužine 12 cm, 5 cm u prečniku) koja je obmotana aluminijumskom folijom. Bubanj je spojen na osovinu koju okreće motor IKA RW20 brzinom od oko 220 o/min. Osovina je spojena na terminal uzemljenja visokonaponskog napajanja. Vlakna proteina/polimera koja su se nakupila na foliji su sastrugana i korišćena kao replika vezivnog tkiva.
Referentni primer 5: Produženje roka upotrebe redukovanog (hem-Fe2+) leghemoglobina
Konjski mioglobin kupljen je od kompanije Sigma. Mioglobin je ponovo rastvoren sa 10 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl. SDS-PAGE analiza je pokazala da je čistoća proteina ~ 90%.
Leghemoglobin iz soje je prečišćen iz Glycine max čvorića na korenu pomoću precipitacije amonijum sulfata (frakcinacija 60%/90%) kako je detaljno opisano u Referentnom primeru 1. Ponovo rastvoreni leghemoglobin 90% amonijum sulfata je dalje prečišćen hromatografijom anjonske razmene (HiTrap Q FF 5 ml FPLC kolona) u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl. Leghemoglobin je ispran u protočnim frakcijama. SDS-PAGE analiza je pokazala da je čistoća proteina ~ 70%. Leghemoglobin je pufer razmenjen u 20 mM kalijum fosfata, pH 7,4, 100 mM NaCl i koncentrovan do 10 mg/ml na 3,5 kDa membranskim koncentratorima.
Tretiranje ugljen-monoksidom: Mioglobin na 10 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl i leghemoglobin na 10 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata, pH 7,4, 100 mM NaCl su prvo degasifikovani u vakuumu tokom 1 sata na 4 °C a potom prelivani ugljen-monoksidom tokom 2 minuta. Globini su potom redukovani iz hem-Fe<3+>u hem-Fe<2+>stanje dodavanjem 10 mM natrijum ditionita, 0,1 mM natrijum hidroksida tokom 2 minuta. Natrijum ditionit i natrijum hidroksid su uklonjeni iz rastvora proteina koristeći hromatografiju na hromatografskim sitima (PD-10 kolona za desalinizaciju) u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl i 20 mM kalijum fosfata, pH 7,4, 100 mM NaCl respektivno. Frakcije globina su prikupljene kao vršne crveno obojene frakcije kako je utvrđeno vizuelnim pregledom. UV-VIS spektar je potvrdio prisustvo hem-Fe<2+>stanja za oba proteina. Nakon desalinacije, rastvor je ponovo preliven gasom tokom još 2 minuta. Boja rastvora ocenjena je merenjem UV-Vis spektra (250–700 nm) svakih 20 minuta pomoću nanodrop spektrofotometra. Kontrolni uzorci nisu tretirani ugljen-monoksidom.
Tretiranje natrijum nitritom: Mioglobin na 10 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl i leghemoglobin na 10 mg/ml u 20 mM kalijum fosfata, pH 7,4, 100 mM NaCl su redukovani iz hem-Fe<3+>u hem -Fe<2+>dodavanjem 10 mM natrijum ditionita, 0,1 mM natrijum hidroksida tokom 2 minuta. Natrijum ditionit i natrijum hidroksid su uklonjeni iz rastvora proteina koristeći hromatografiju na hromatografskim sitima (PD-10 kolona za desalinizaciju) u 20 mM kalijum fosfata, pH 8,0, 100 mM NaCl i 20 mM kalijum fosfata, pH 7,4, 100 mM NaCl respektivno. Frakcije globina su prikupljene kao vršne crveno obojene frakcije kako je utvrđeno vizuelnim pregledom. UV-VIS spektar je potvrdio prisustvo hem-Fe<2+>stanja za oba proteina. Natrijum nitrit je potom dodat u konačnoj koncentraciji od 1 mM iz 100 mM nitrita u pufer fosfata pH 7,4. Trajanje hem-Fe<2+>stanja praćeno je beleženjem
2
UV-VIS spektra (250–700 nm) pomoću spektrofotometra kao funkcije vremena. Kontrolni uzorci nisu tretirani natrijum nitritom.
Analiza podataka za trajanje hem-Fe<2+>za uzorke mioglobina i leghemoglobina tretirane ugljen-monoksidom i natrijum nitritom vršena je u programu Microsoft Excel plotiranjem amplitude vršne apsorbancije na talasnoj dužini od 540 nm. Osnovna vrednost apsorbancije na 540 nm utvrđena je stanjem UV-vis spektra rastvora globina pre dodavanja bilo kakvih aditiva, redukcije ditionita ili desalinizacije. Ugrađena funkcija prilagođavanja krive korišćena je kako bi se dobila eksponencijalna linija najboljeg prilagođavanja, čiji eksponent se direktno odnosi na vreme poluraspada vršne amplitude.
Trajanje hem-Fe<2+>stanja i prateće crvene boje rastvora mioglobina i leghemoglobina u odsustvu ugljen-monoksida i natrijum nitrita iznosilo je ~ 6 sati i ~ 4 sata, respektivno. Dodavanje natrijum nitrita produžilo je trajanje hem-Fe<2+>stanja i prateće crvene boje za više od sedam dana. Dodavanje ugljen-monoksida produžilo je trajanje hem-Fe<2+>stanja i prateće crvene boje za više od dve nedelje.
Referentni primer 6: Priprema replika mesa u kojima se veličina čestica pojedinačnih jedinica replika tkiva menja kako bi se kontrolisao razvoj arome tokom pripreme.
Replika mišićnog tkiva i replika adipoznog tkiva pripremljene su zasebno i potom spojene u repliku mesa tako da veličine pojedinačnih jedinica replika tkiva može da se menja kako bi se kontrolisao razvoj arome tokom pripreme. Pojedinačne replike masti, mišića i vezivnog tkiva proizvedene su na sledeći način.
Replika mišićnog tkiva pripremljena je kao u Referentnom primeru 2. Replika mišićnog tkiva formirala je neprovidan gel crvenkasto-smeđe boje, sa manjim količinama (<1 ml) inkluzija tečnosti tamnocrvene boje poput venske krvi. Replika vezivnog tkiva pripremljena je kao u Referentnom primeru 4. Replika adipoznog tkiva pripremljena je kao u Referentnom primeru 3.
Replike mesa sa odnosom mišića i masti od 85/15 pripremljene su kombinovanjem pojedinačnih mišićnih, vezivnih i adipoznih tkiva, tako da veličine čestica pojedinačnih replika mesa mogu da variraju. (a) 2,1 g replike mišića sa 0,9 g komadića replike masti veličine 5– 10 mm („grubo usitnjena mešavina“); (b) 2,1 g replike mišića sa 0,9 g replike masti u komadićima veličine 2–3 mm („fino usitnjena mešavina“); i (c) 2,1 g replike mišića sa 0,9 g replike masti dobro usitnjene u komadiće veličine <1 mm („mešavina“). „Samo mišići“ kontrolni uzorak sadržao je samo 3 g replike mišića. „Samo mast“ kontrolni uzorak sadržao je samo 3 g replike masti u formi čestica veličine 5–10 mm. Uzorci mesa, mišićnog i
2
masnog tkiva kuvani su u zatvorenim staklenim bočicama na 150 °C tokom 10 minuta. Profili arome za uzorke analizirani su od strane panela testera, i pomoću GC-MS.
Senzorna olfaktorna analiza uzoraka replika mesa, koju je sproveo panel testera, ukazuje da veličina pojedinačnih jedinica tkiva i razmere njihovog mešanja u replikama tkiva mesa stoje u direktnoj vezi sa razvojem različitih aroma. Replika mišićnog tkiva kuvana zasebno razvila je aromu koja se povezuje sa kupovnim sosom, uz blagi ukus citrusa i zvezdastog anisa. Replika adipoznog tkiva kuvana zasebno razvila je arome koje podsećaju na plesnjive, užegle i slatke arome. Replika kuvanog tkiva mesa (grubo usitnjena mešavina) razvila je arome kupovnog sosa, slatko, blago plesnjivo i aromu zvezdastog anisa. Replika kuvanog tkiva mesa (fino usitnjena mešavina) razvila je arome koje se dovode u vezu sa soja sosom, plesnjivo, blago užeglo i aromom juneće supe. Replika kuvanog tkiva mesa (veoma fino usitnjena mešavina) razvila je arome koje su slatke, plesnjive i arome koja podseća na soja sos. Svi uzorci, s izuzetkom replike adipoznog tkiva, razvile su arome koje se dovode u vezu sa mirisom zagorelog mesa, samo u različitim intenzitetima.
Analiza GCMS podataka pokazala je da veličina pojedinačnih jedinica tkiva i razmere njihovog mešanja u replikama tkiva mesa ima dubinski uticaj na razvoj aromatičnih jedinjenja nakon pripreme. Naročito su to različita aromatična jedinjenja povezana sa aromama voćna/boranija/metalna (2-pentil-furan); orašasti/zeleni (4-metiltiazol); puter od kikirikija/plesnjiv (pirazin, etil); sirovi krompir/pečeno/zemljasto (Pirazin, 2,3-dimetil); sirćetast (sirćetna kiselina); začinjeno/karamel/badem (5-metil-2-furankarboksaldehid); kremast (butirolakton); slatko (2,5-dimetil-3-(3-metil butil) pirazin); voćni/ustajalo pivo (2-ciklopenten-1-one, 2-hidroksi-3-metil); plesnjiv/orašast/kumarin/sladić/orah/hleb (3-acetil-1H-pirolin); kokos/drvenast/sladak (pantolakton); penetrirajući (1-H-pirol-2-2karboksaldehid, 1-metil); ukus peperminta (kaprolaktam); arome prijatna karamela (4H-piran-4-one, 2,3-dihidro-3,5-dihidroksi-6-metil) pojavile su se samo kod mešanih replika mesa, ali ne kod replika pojedinačnih tkiva. Neka druga aromatična jedinjenja, na primer ona koja podsećaju na benzin (nonan, 2,6-dimetil), petrolej (3-heksen, 3-metil); kiselo/trulo/podseća na ribu (piridin); bezukusno/drvenasto/jogurt (acetoin); masno/med/citrus (oktanal); arome ljuto/slatko/karamelasto (2-propanon, 1-hidroksi) i orašasto/izgorelo zeleno (etenil pirazin) su se pojavljivale samo kod pojedinačnih replika tkiva, ali nisu se akumulirale kod mešanih replika mesa. Osim toga, nivoi u kojima su se sva gore navedena jedinjenja nakupljala tokom procesa pripreme zavisili su od veličine jedinica tkiva i kako su pomešane (grubo usitnjeno, fino usitnjeno ili veoma fino usitnjeno (mešavina)).
2
Slično replici tkiva mesa, utvrđeno je da strukturna organizacija i veličina čestica junećih tkiva modifikuju odgovor junećeg tkiva na proces pripreme. Na primer, ukus mesa je izmenjen veličinom čestica. Uzorci junetine pripremljeni su kao što sledi: uzorci junećeg mišića i juneće masti su zasebno isečeni nožem i: (a) „samleveni“, gde su nožem isečene kockice propuštene kroz standardnu mašinu za mlevenje mesa. Uzorak mlevene junetine sa odnosom mišića i masti od 80/20 (wt/wt) pripremljen je mešanjem kockica mišićnog i masnog tkiva u odgovarajućem odnosu pre mlevenja. Ovaj preparat uzorka označen je kao „mešavina sitnih čestica“, (b) veličina čestica mlevenog tkiva dodatno je smanjena zamrzavanjem mlevenog tkiva u tečnom azotu i drobljenjem pomoću avana i tučka do veoma sitnog praha (veličina čestica <1 mm). Ovaj preparat uzorka označen je kao „mešavina veoma sitnih čestica“. Svi uzorci su kuvani u zatvorenim staklenim bočicama na 150 °C tokom 10 minuta. Profili arome za uzorke analizirani su od strane panela testera, i pomoću GC-MS, kako je opisano u Referentnom primeru 1. „Samo mišići“ kontrolni uzorak sadržao je samo 3 g mišićnog tkiva. „Samo mast“ kontrolni uzorak sadržao je samo 3 g masnog tkiva. Uzorak mlevene junetine sadržao je 3 g mešavine mišića i masti u odnosu 80/20 (wt/wt).
Senzorna olfaktorna analiza uzoraka junetine, koju je sproveo panel testera, ukazuje da veličina pojedinačnih jedinica tkiva i razmere njihovog mešanja u uzorcima stoje u direktnoj vezi sa razvojem različitih aroma. Juneći mišić koji se priprema sam razvio je tipične arome koje se povezuju sa pripremom mlevene junetine. Replika masnog tkiva kuvana zasebno razvila je slatkaste arome i arome koje podsećaju na zagorele pečurke. Kuvana mlevena junetina sa „mešavinom sitnih čestica“ razvila je tipične arome koje podsećaju na kuvanu mlevenu junetinu, uz prisustvo blago slatkih aroma karakterističnih za kuvanu mast. Kuvana mlevena junetina sa „mešavinom veoma sitnih čestica“ razvila je arome koje podsećaju na kuvanu mlevenu junetinu, ali bez prisustva blago slatkih aroma karakterističnih za kuvanu mast.
Analiza GCMS podataka pokazuje da veličina čestica pojedinačnih jedinica tkiva utiče na razvoj aromatičnih jedinjenja nakon pripreme. Naročito, razvoj i/ili količina različitih aromatičnih jedinjenja kod pojedinačnih uzoraka tkiva ili kod uzorka mlevene junetine varirao je u odnosu na veličinu čestica. Neka od aromatičnih jedinjenja koja su se razlikovala između fino i veoma fino usitnjenih čestica u mišićnom tkivu: 4H-Piran-4-one, 2,3-dihidro-3,5-dihidroksi-6-metil, 3-Acetil-1H-pirolin, 1-(6-metil-2-pirazinil)-1-etanon, 2,5-dimetil-3-(3-metil butil) pirazin, 2-furankarboksialdehid, 5-metil, sirćetna kiselina, Etenil pirazin, Pirazin, 2,3-dimetil, 2-Propanon, 1-hidroksi, Oktanal, Acetoin, 4-Metiltiazol, Pseudo-2-pentil-furan, 2-pentil-furan. Neka od aromatičnih jedinjenja koja su se
2
razlikovala između fino i veoma fino usitnjenih čestica u masnom tkivu: trietilen glikol: 4H-piran-4-one, 2,3-dihidro-3,5-dihidroksi-6-metil, Kaprolaktam, 1-(6-metil-2-pirazinil)-1-etanon, 2-Ciklopenten-1-one, 2-hidroksi-3-metil, Butirolakton, 2-furankarboksialdehid, 5-metil, Etanon, 1(2 furanil), sirćetna kiselina, 2-etil-5-metil pirazin, Pirazin, 2,3-dimetil, Pirazin, etil, Oktanal, Acetoin, 4-Metiltiazol, Pseudo-2-pentil-furan, Piridin, Nonan, 2,6-dimetil. Neka od aromatičnih jedinjenja koja su se razlikovala između fino i veoma fino usitnjenih čestica u uzorku mišići/masti u odnosu 80/20: 4H-Piran-4-one, 2,3-dihidro-3,5-dihidroksi-6-metil, kaprolaktam, 1H-1Piridin, 3-karbonitril, 4-etil-2-okso-2,5, 1-H-Pirol-2-2karboksaldehid, 1-metil, 2-Ciklopenten-1-one, 2-hidroksi-3-metil, 2,5-dimetil-3-(3-metil butil) pirazin, Butirolakton, 2-furankarboksialdehid, 5-metil, Etanon, 1(2 furanil), sirćetna kiselina, Etenil pirazin, 2-etil-5-metil pirazin, Pirazin, 2,3-dimetil; 2-Propanon, 1-hidroksi, Oktanal, Acetoin, 2-pentil-furan.
Primer 7: Doprinos leghemoglobina ukusu
Ukusi i arome junetine mogu se dodavanjem hemoproteina stvoriti u potrošnim materijalima koji nisu junećeg porekla. Mlevena piletina (90% mišić, 10% mast) proceđena je kroz gazu i pomešana sa rekombinantnim leghemoglobinom iz soje ili rekombinantnim goveđim mioglobinom do konačne koncentracije od 0,5 do 1,0% wt/wt. Rekombinantni hemoproteini ekspresovani su u E. coli i prečišćeni Ni-afinitetnim prečišćavanjem kako je opisano u Referentnom primeru 1. Pre nego što su pomešani sa piletinom, hemoproteini su redukovani sa 20 mM Na ditionitom. Na ditionit je uklonjen iz uzorka pomoću Zeba kolone za desalinizaciju (Thermo Scientific). Leghemoglobin je desalinizovan u 20 mM kalijum fosfata pH 7,4, 100 mM NaCl. Mioglobin je desalinizovan u ili 20 mM kalijum fosfata pH 7,4, 100 mM NaCl ili u 20 mM Na citrata pH 6,0, 100 mM NaCl. Redukovani uzorci hemoproteina su podeljeni na dva, i polovini uzorka su dodati mehurići pomoću ugljen-monoksida (CO) tokom 2 minuta. Nakon mešanja uzoraka hemoproteina sa mlevenom piletinom, mešavina je usuta u kalupe u obliku medaljona i inkubirana tokom noći na 4 °C. Medaljoni su pečeni u rerni ili prženi u tiganju na 165 °C dok svaki od medaljona nije dostigao unutrašnju temperaturu od 165 °C. Panel sudija je degustirao medaljone koji sadrže samo piletinu, piletinu pomešanu sa puferom, piletinu pomešanu sa leghemoglobinom ili mioglobinom /-CO ili junetinu (90% mišići, 10% masti). Sudije su popunile anketu kako bi ocenile aromu i ukus svakog medaljona. Sudije su ocenile aromu i ukus svakog medaljona kao što sledi: 1 = piletina, 2 = piletina blaga junetina, 3 = 50/50 piletina junetina, 4 = junetina blaga piletina, 5 = junetina. U Tabeli 2 su prikazani prosečni rezultati za svaki medaljon. Procenti označavaju konačnu koncentraciju hemoproteina wt/wt (skraćenice: KP = 20 mM kalijum fosfat pH 7,4, 100 mM NaCl pufer. NC = 20 mM Na citrat pH 6,0, 100 mM NaCl pufer. n/d = nije utvrđeno). Dodavanje rekombinantnog
2
leghemoglobina ili mioglobina u piletinu dovelo je do pojačanja arome i ukusa junetine. Uočeni nivoi ukusa i arome junetine povećavali su se sa sadržajem bioglobina i leghemoglobina. Leghemoglobin i mioglobin pružaju iste prednosti u pogledu ukusa i arome.
Tabela 2
Referentni primer 8: Dobijanje ukusa junetine u replikama burgera dodavanjem hema i prekurzora ukusa.
Karakteristične komponente ukusa i mirisa u mesu se najčešće razvijaju tokom procesa pripreme zahvaljujući hemijskim reakcijama molekula (prekurzora), uključujući aminokiseline, masti i šećere koji se nalaze u biljkama i mesu. Prekurzori ukusa zajedno sa 1% leghemoglobina dodati su u mišićnu komponentu replike burgera kako je naznačeno u Tabeli 8. Pripremljene su tri replike, jedna bez prekurzora i dve sa različitim mešavinama prekurzora, zajedno sa junetinom 80:20, i poslužene kvalifikovanim degustatorima kako bi opisali atribute ukusa prikazane u Tabeli 9. Dodavanje prekurzora povećalo je ukus junetine, krvave note, opštu količinu ukusa, a smanjilo je neprijatne note u replici. Replike i uzorak junetine su takođe analizirani pomoću GCMS dodavanjem 3 grama nekuvane replike ili junetine u GCMS bočicu. Svi uzorci su kuvani na 150 °C tokom 3 minuta, ohlađeni na 50 °C kako bi se za 12 minuta izvršila ekstrakcija pomoću GCMS (SPME uzorkovanje vlakana u praznom prostoru). Algoritam za pretragu analizirao je vreme zadržavanja i informacije o masenom otisku kako bi se vršnim vrednostima dodelili hemijski nazivi. Kod replike burgera sa 1% leghemoglobina i mešavinom prekurzora 2, stvoreno je 136 junećin jedinjenja. U tabeli 10 identifikovana su sva jedinjenja stvorena u replici burgera koja su takođe identifikovana pomoću GCMS u uzorcima junetine.
Tabela 8
Dodati prekurzori ukusa u repliku junetine pre pripreme.
1
Tabela 9
Senzorni rezultat koji je utvrdio senzorni panel za replike burgera i uzorak junetine u odnosu 80:20.
Tabela 10
Jedinjenja ukusa junetine stvorena u replici burgera sa 1% LegH i mešavinom prekurzora 2 koja su detektovana pomoću GCMS.
2
Ostale izvedbe
Iako su u predmetnom pronalasku prikazane i opisane poželjne izvedbe, stručnjacima u predmetnoj oblasti biće jasno da su takve izvedbe date isključivo kao primeri. Sledeći zahtevi definišu oblast primene pronalaska i metode kojima je obuhvaćena oblast primene ovih zahteva i njihovih ekvivalenata.
4

Claims (13)

PATENTNI ZAHTEVI
1. Metod za dodavanje ukusa junetine u potrošački proizvod, koji se sastoji od ubrizgavanja rastvora proteina koji sadrži hem u potrošački proizvod, tako da se nakon pripreme doda ukus junetine u potrošački proizvod;
gde je potrošački proizvod belo meso.
2. Metod prema patentnom zahtevu 1, gde je potrošački proizvod živina.
3. Metod prema patentnom zahtevu 2, gde je potrošački proizvod piletina.
4. Metod prema patentnom zahtevu 1, gde je potrošački proizvod svinjetina.
5. Metod prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde protein koji sadrži hem potiče od sisara, biljke, gljive, bakterije, alge ili protozoa.
6. Metod prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde je protein koji sadrži hem nesimbiotski tip hemoglobina ili leghemoglobina.
7. Metod prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, gde je protein koji sadrži hem androglobin, citoglobin, globin E, globin X, globin Y, hemoglobin, leghemoglobin, flavohemoglobin, vrata pakla globin I, mioglobin, eritrokruorin, beta hemoglobin, alfa hemoglobin, protoglobin, cijanoglobin, citoglobin, histoglobin, neuroglobin, hlorokruorin, krnji hemoglobin uključujući HbN i HbO, krnji 2/2 globin, hemoglobin 3 uključujući Glb3, citohrom, ili peroksidaza.
8. Metod prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde protein koji sadrži hem ima sekvencu aminokiseline sa najmanje 70% sličnosti sa bilo kojom od sekvenci aminokiselina iz SEK. ID BR.: 1-27.
9. Korišćenje hemoproteina kako bi se učinilo da sastav živinskog mesa ima ukus junetine, gde je hemoprotein dodat u sastav živinskog mesa.
10. Korišćenje prema patentnom zahtevu 9, gde hemoprotein potiče od sisara, biljke, gljive, bakterije, alge ili protozoa.
11. Korišćenje prema patentnim zahtevima 9-10, gde je hemoprotein nesimbiotski tip hemoglobina ili leghemoglobina.
12. Korišćenje prema bilo kom od patentnih zahteva 9-11, gde je hemprotein androglobin, citoglobin, globin E, globin X, globin Y, hemoglobin, leghemoglobin, flavohemoglobin, vrata pakla globin I, mioglobin, eritrokruorin, beta hemoglobin, alfa hemoglobin, protoglobin, cijanoglobin, citoglobin, histoglobin, neuroglobin, hlorokruorin, krnji hemoglobin uključujući HbN i HbO, krnji 2/2 globin, hemoglobin 3 uključujući Glb3, citohrom ili peroksidaza.
13. Korišćenje prema bilo kom od patentnih zahteva 9-12, gde hemoprotein ima sekvencu aminokiseline sa najmanje 70% sličnosti sa bilo kojom od sekvenci aminokiselina iz SEK. ID BR.: 1-27.
RS20210724A 2013-01-11 2014-01-13 Metode i sastavi za potrošne materijale RS61956B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361751816P 2013-01-11 2013-01-11
US13/941,211 US20140220217A1 (en) 2011-07-12 2013-07-12 Method and compositions for consumables
US201361908634P 2013-11-25 2013-11-25
PCT/US2014/011361 WO2014110539A1 (en) 2013-01-11 2014-01-13 Methods and compositions for consumables
EP14737909.3A EP2943078B1 (en) 2013-01-11 2014-01-13 Methods and compositions for consumables

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61956B1 true RS61956B1 (sr) 2021-07-30

Family

ID=53675762

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210724A RS61956B1 (sr) 2013-01-11 2014-01-13 Metode i sastavi za potrošne materijale
RS20180230A RS56993B1 (sr) 2013-01-11 2014-01-13 Postupci i jedinjenja koja utiču na profil ukusa i arome prehrambenih proizvoda

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180230A RS56993B1 (sr) 2013-01-11 2014-01-13 Postupci i jedinjenja koja utiču na profil ukusa i arome prehrambenih proizvoda

Country Status (22)

Country Link
US (11) US9826772B2 (sr)
EP (5) EP3895543A1 (sr)
JP (8) JP6612129B2 (sr)
KR (7) KR102344776B1 (sr)
CN (3) CN114732052A (sr)
AU (11) AU2014205114B2 (sr)
CA (4) CA3152571A1 (sr)
CY (2) CY1119958T1 (sr)
DE (1) DE202014011607U1 (sr)
DK (2) DK2943072T3 (sr)
ES (3) ES2930853T3 (sr)
HR (2) HRP20210918T1 (sr)
HU (2) HUE038215T2 (sr)
LT (2) LT2943078T (sr)
MX (10) MX378704B (sr)
PL (2) PL2943072T3 (sr)
PT (2) PT2943078T (sr)
RS (2) RS61956B1 (sr)
RU (4) RU2019128577A (sr)
SI (2) SI2943078T1 (sr)
SM (1) SMT201800107T1 (sr)
WO (2) WO2014110539A1 (sr)

Families Citing this family (162)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9485917B2 (en) 2006-12-15 2016-11-08 Ecovative Design, LLC Method for producing grown materials and products made thereby
US10039306B2 (en) 2012-03-16 2018-08-07 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
US20140220217A1 (en) 2011-07-12 2014-08-07 Maraxi, Inc. Method and compositions for consumables
US20150305329A1 (en) 2012-06-04 2015-10-29 Michael Fefer Formulations Containing Paraffinic Oil and Anti-Settling Agent
CA2897606C (en) 2013-01-11 2021-05-11 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
LT2943078T (lt) 2013-01-11 2021-06-25 Impossible Foods Inc. Maisto medžiagų gamybos būdas ir sudėtis
EP2967056B1 (en) 2013-03-15 2018-02-21 Suncor Energy Inc. Herbicidal compositions
PL3044320T3 (pl) 2013-09-11 2020-07-13 Impossible Foods Inc. Sekrecja polipeptydów zawierających hem
CN106455626A (zh) * 2014-03-31 2017-02-22 非凡食品有限公司 碎肉仿品
US9526267B2 (en) 2014-04-17 2016-12-27 Savage River, Inc. Nutrient-dense meat structured protein products
GB201501320D0 (en) * 2015-01-27 2015-03-11 Marlow Foods Ltd Edible fungi
WO2016168563A1 (en) 2015-04-15 2016-10-20 Ecovative Design Llc Process for production of mycelial composite surfaces in a roll-to-roll format
US10264805B2 (en) * 2015-04-23 2019-04-23 Nutriati, Inc. Dry fractionation for plant based protein extraction
MX2017014469A (es) * 2015-05-11 2018-04-10 Impossible Foods Inc Constructos de expresion y metodos para diseñar geneticamente levadura metilotrofica.
PL413181A1 (pl) * 2015-07-17 2017-01-30 Kubara Spółka Jawna Baza roślinnego zamiennika mięsa
US11019836B2 (en) 2015-08-03 2021-06-01 Savage River, Inc. Food products comprising cell wall material
US11649449B2 (en) 2015-09-03 2023-05-16 CHO Plus, Inc. Hybrid cell lines for high level production of a target protein
US20190045809A1 (en) * 2015-09-14 2019-02-14 Sunfed Limited Meat substitute
PL3364770T3 (pl) 2015-10-19 2020-01-31 Unilever N.V. Kompozycja zawierająca fazę olejową
US11849741B2 (en) * 2015-10-20 2023-12-26 Savage River, Inc. Meat-like food products
JP6708389B2 (ja) * 2015-10-21 2020-06-10 ミヨシ油脂株式会社 アーモンドミルクを用いた油中水型乳化油脂組成物とその製造方法
SG11201806963PA (en) 2016-02-19 2018-09-27 Just Inc Functional mung bean-derived compositions
CN108697117A (zh) * 2016-02-19 2018-10-23 就是公司 功能性红小豆衍生的组合物
CN109936983A (zh) * 2016-11-16 2019-06-25 国际香料和香精公司 用于增强风味的新型组合物
CN106720924A (zh) * 2016-11-24 2017-05-31 华中农业大学 一种利用高场强超声技术制备大豆蛋白乳液的新方法
AU2018220906B2 (en) * 2017-02-15 2023-10-26 Tidhar Shalon Hybrid meat product and method of production
JP6852455B2 (ja) 2017-02-23 2021-03-31 オムロン株式会社 光学計測装置
CA3058038C (en) 2017-04-07 2021-09-07 Givaudan Sa Flavor modifiers for meat analog products
IL307747B2 (en) * 2017-04-09 2025-05-01 Supermeat The Essence Of Meat Ltd Hybrid food that includes cultured meat
WO2019060759A1 (en) 2017-09-21 2019-03-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. ISOLATION, PRESERVATION, COMPOSITIONS AND USES OF PLANT EXTRACTS JUSTICIA
CA3078516C (en) 2017-10-06 2025-05-13 Cargill, Incorporated METHODS FOR PREPARING A YERBA MATE EXTRACT COMPOSITION
TW201925443A (zh) * 2017-11-20 2019-07-01 日商味之素股份有限公司 風味組成物
CN108094772A (zh) * 2017-12-08 2018-06-01 桂林莱茵生物科技股份有限公司 一种罗汉果果汁及其制备方法
JP7053276B2 (ja) * 2018-01-10 2022-04-12 アサヒビール株式会社 ビール風味飲食品用風味改善剤
WO2019182116A1 (ja) * 2018-03-23 2019-09-26 サントリーホールディングス株式会社 アロマフリー洋ナシ果汁
US11920126B2 (en) 2018-03-28 2024-03-05 Ecovative Design Llc Bio-manufacturing process
US20210352889A1 (en) * 2018-04-30 2021-11-18 Suncor Energy Inc. Macrocyclic tetrapyrrole compounds, compositions and methods for increasing abiotic stress resistance in plants
JP2021530242A (ja) * 2018-07-23 2021-11-11 エコベイティブ デザイン リミテッド ライアビリティ カンパニー 菌類学的製品を生成する方法及びこの方法によって作られた製品
EP3840593A4 (en) 2018-08-21 2022-10-05 V2 Food Pty Ltd Food ingredients
BR112021007048A2 (pt) * 2018-11-01 2021-07-20 Société des Produits Nestlé S.A. composição alimentícia não láctea e processo para preparação da mesma
MX2021005446A (es) * 2018-11-08 2021-09-14 Triton Algae Innovations Inc Composiciones y metodos para incorporar el hemo de algas en productos comestibles.
CN111213579B (zh) * 2018-11-08 2022-11-29 特里同阿盖亚创新公司 在藻类中过量产生血红素的方法及由此而来的组合物
EP3923729B1 (en) 2019-02-15 2025-08-13 Nutrien Ag Solutions (Canada) Inc. The use of protoporphyrin ix derivatives to improve the health of plants
AU2020273144B2 (en) 2019-04-06 2025-07-03 Cargill, Incorporated Methods for making botanical extract composition
WO2020210118A1 (en) 2019-04-06 2020-10-15 Cargill, Incorporated Sensory modifiers
WO2020208104A1 (en) * 2019-04-10 2020-10-15 Société des Produits Nestlé S.A. Meat analogues and meat analogue extrusion devices and methods
KR20210153106A (ko) 2019-04-17 2021-12-16 임파서블 푸즈 인크. 단백질 생산을 위한 물질 및 방법
PH12021552674A1 (en) 2019-04-25 2022-07-04 Impossible Foods Inc Strains and methods for production of heme-containing proteins
JP6589157B1 (ja) * 2019-04-27 2019-10-16 株式会社アクト・フォ 飲料、食品組成物、健康食品組成物、口腔用組成物、及び呈味改善剤
KR102263365B1 (ko) * 2019-06-17 2021-06-10 김성수 식물성 고기
JP2022547770A (ja) 2019-06-21 2022-11-16 テラミノ インク． カビ発酵組成物から、糸状菌および他の成分を分離する方法、および分離された成分の使用法
US20220248712A1 (en) * 2019-07-12 2022-08-11 Societe Des Produits Nestle S.A. Ground meat analogue product
MX2021015666A (es) * 2019-07-12 2022-03-04 Nestle Sa Producto analogo de tocino.
CN114173574A (zh) * 2019-07-31 2022-03-11 雀巢产品有限公司 成形的仿肉产品
MX2021015587A (es) * 2019-07-31 2022-03-02 Nestle Sa Proceso para fabricar un producto analogo de carne formado.
TWI862660B (zh) 2019-08-12 2024-11-21 美商特朗米諾有限公司 用生產菌絲的真菌結合織構化基底的方法以及以其為原料的食品
MX2022003478A (es) * 2019-09-23 2022-04-25 Unilever Ip Holdings B V Emulsion de aceite en agua con proteinas vegetales.
FI130583B (en) * 2019-10-11 2023-11-23 Fazer Ab Oy Karl Non-dairy crumb and method for its manufacture
RU2718551C1 (ru) * 2019-11-15 2020-04-08 Александр Федорович Попов Способ выполнения космического биологического исследования
WO2021099816A1 (en) * 2019-11-19 2021-05-27 Uab Geld Baltic An edible food product of increased biological value prepared from lyophilised powder
WO2021098966A1 (en) 2019-11-21 2021-05-27 Bunge Loders Croklaan B.V. Meat analogue product and method
KR102070385B1 (ko) * 2019-11-22 2020-01-28 노은정 진세노사이드 및 철분이 보강된 식물성 대체육 첨가물
KR20220121815A (ko) 2019-11-27 2022-09-01 에벨로 바이오사이언시즈, 인크. 헤모글로빈-의존성 박테리아를 배양하기 위한 방법 및 조성물
CN114981406A (zh) 2019-12-10 2022-08-30 科·汉森有限公司 制备乳酸菌培养物的方法
CN115135163A (zh) 2019-12-11 2022-09-30 格兰比亚营养物有限公司 用于植物性食物产品的蛋白质组合物和制备方法
CA3164444A1 (en) * 2019-12-12 2021-06-17 Glanbia Nutritionals Limited Textured plant protein product and method
MX2022007066A (es) * 2019-12-12 2022-09-19 Univ Guelph Producto de queso de origen vegetal.
WO2021138482A1 (en) 2019-12-31 2021-07-08 Air Protein, Inc. High protein food compositions
EP4090746A4 (en) * 2020-01-10 2024-01-24 Intron Biotechnology, Inc. A method for preparing soy leghemoglobin using escherichia coli
CN114945591A (zh) * 2020-01-10 2022-08-26 尹特荣生物科技株式会社 一种利用大肠杆菌制备牛肌红蛋白的方法
CN115397255A (zh) 2020-03-02 2022-11-25 空气蛋白公司 结构化高蛋白肉类似物组合物
US20230180812A1 (en) * 2020-03-23 2023-06-15 Alejandro BARBARINI Meat substitutes produced in plant-based systems and method thereof
KR20220159399A (ko) * 2020-03-27 2022-12-02 에어 프로틴 인코포레이티드 미생물 헴 향미제를 갖는 구조화된 고단백 육류 유사체 조성물
MX2022011099A (es) 2020-03-27 2022-10-03 Firmenich & Cie Microcapsulas coacervadas de nucleo-cubierta.
JP7678987B2 (ja) * 2020-05-01 2025-05-19 ヤマモリ株式会社 大豆たん白を含有する容器包装詰加圧加熱殺菌食品、及びその製造方法
DE202021102619U1 (de) * 2020-05-13 2021-08-19 Emsland-Stärke Gesellschaft mit beschränkter Haftung Geschmacksstoffe aus Erbsen
CN115515433A (zh) * 2020-05-13 2022-12-23 联合利华知识产权控股有限公司 豌豆衍生调味剂
CN115867148A (zh) * 2020-06-09 2023-03-28 丝芭博株式会社 仿真肉食品组合物
CN116322366A (zh) * 2020-07-24 2023-06-23 弗门尼舍公司 通过跨膜区结合进行的美味增强
CN116157021A (zh) * 2020-07-28 2023-05-23 耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展有限公司 类肉食物制品的注射模制
KR102546700B1 (ko) * 2020-07-31 2023-06-22 더 에스지파트너스 주식회사 스테이크용 목살갈비 가공방법 및 그 방법으로 가공된 스테이크용 목살갈비
CN116033834A (zh) * 2020-08-18 2023-04-28 西姆莱斯有限公司 改善味觉印象的香料组合物
CN112094859B (zh) * 2020-09-25 2022-01-25 扬州大学 一种凤丹PoFBA基因、表达载体及其制备方法和应用
US10947552B1 (en) 2020-09-30 2021-03-16 Alpine Roads, Inc. Recombinant fusion proteins for producing milk proteins in plants
US10894812B1 (en) 2020-09-30 2021-01-19 Alpine Roads, Inc. Recombinant milk proteins
WO2022072718A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Nobell Foods, Inc. Recombinant milk proteins and food compositions comprising the same
WO2022086978A1 (en) * 2020-10-19 2022-04-28 Cargill, Incorporated Crumble pieces comprising plant-sourced lipid and inulin
WO2022094532A1 (en) * 2020-10-28 2022-05-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Leghemoglobin in soybean
RU2749460C1 (ru) * 2020-11-10 2021-06-11 Елена Викторовна Борисенко Пищевой ароматизатор, придающий вкус и аромат сливок
US11464239B2 (en) 2020-11-25 2022-10-11 Thrilling Foods, Inc. Composition and method of making plant-based food products
JP2023552497A (ja) * 2020-12-05 2023-12-15 デビガー プラバカール，スミサ 食品のためのササゲベースのタンパク質濃縮物およびその製造方法
US20240032564A1 (en) * 2020-12-23 2024-02-01 Valio Oy Method of manufacturing a formed meat-replacement food product and a formed meat-replacement food product comprising a plant based proteinaceous binder ingredient, a plant based proteinaceous binder ingredient and a method for manufacturing a plant-based proteinaceous binder ingredient
RU2752883C1 (ru) * 2020-12-29 2021-08-11 Елена Викторовна Борисенко Пищевой ароматизатор, придающий аромат и вкус топленого молока
KR20230128512A (ko) * 2020-12-31 2023-09-05 팰리오 비.브이. 동물 미오글로빈을 포함하는 육류 대체물
WO2022147357A1 (en) * 2020-12-31 2022-07-07 Motif Foodworks, Inc. Plant-based connective tissue analogs
CA3210153A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Epogee, Llc Plant-based meat replicas with binders for plant-based food products
WO2022177943A1 (en) * 2021-02-16 2022-08-25 Bunge North America, Inc. Plant-based intramuscular fat substitutes
CN117156975A (zh) * 2021-02-16 2023-12-01 邦吉Sa公司 植物基肌内脂肪替代品
AR124921A1 (es) * 2021-02-18 2023-05-17 Novozymes As Polipéptidos inactivos que contienen hemo
CA3210860A1 (en) * 2021-03-03 2022-09-09 Anna EL TAHCHY Production of phospholipids in microbes and uses thereof
CN113016931B (zh) * 2021-03-05 2022-10-25 深圳市星期零食品科技有限公司 一种植物蛋白牛肉饼及其制作方法
CN112889995B (zh) * 2021-03-05 2022-10-25 深圳市星期零食品科技有限公司 一种植物蛋白牛肉浆及其制作方法
CN112889996B (zh) * 2021-03-05 2022-10-25 深圳市星期零食品科技有限公司 用于制作植物蛋白牛肉的风味物质组合物及其使用方法
WO2022197586A1 (en) * 2021-03-15 2022-09-22 Cargill, Incorporated Protein pigments from cnidaria for meat substitute compositions
MX2023010883A (es) 2021-03-15 2023-09-27 Cargill Inc Pigmentos termolábiles para sustitutos de carne derivados por mutación del pigmento de coral equinopora forskaliana.
US11439159B2 (en) 2021-03-22 2022-09-13 Shiru, Inc. System for identifying and developing individual naturally-occurring proteins as food ingredients by machine learning and database mining combined with empirical testing for a target food function
IL307621A (en) * 2021-04-20 2023-12-01 Impossible Foods Inc Whole-whole food products are not based on animals
FI129711B (en) * 2021-04-27 2022-07-29 Solar Foods Oy Method of producing meat analogue food ingredients
FI129706B (en) * 2021-04-27 2022-07-15 Solar Foods Oy Meat analogue food product and method of producing thereof
CN115247137B (zh) * 2021-04-28 2023-05-26 四川大学 一株能提升酱油风味的地衣芽孢杆菌及其在发酵食品中的应用
US12433315B2 (en) 2021-05-04 2025-10-07 Ecovative Llc Aerial mycelia and methods of making same
AU2022270419A1 (en) * 2021-05-04 2023-12-07 Sovida Solutions Ltd. Nicotinamide adenine dinucleotide (nad) compositions, methods of manufacturing thereof, and methods of use thereof
WO2022251166A2 (en) 2021-05-25 2022-12-01 Evelo Biosciences, Inc. Bacterial compositions comprising soy hemoglobin
US11484044B1 (en) 2021-05-28 2022-11-01 Nowadays Inc., Pbc Modification and extrusion of proteins to manufacture moisture texturized protein
US12156530B2 (en) 2021-07-02 2024-12-03 The Livekindly Company Switzerland GmbH Systems and methods for vacuum cooking
US20240373870A1 (en) * 2021-07-08 2024-11-14 Minutri Inc. Gel compositions with high thermal stability and methods of making the same
BE1029592B1 (nl) * 2021-07-16 2023-02-13 Puratos Chocolade zonder of met een laag gehalte aan zuivelbestanddelen
KR20240038049A (ko) * 2021-07-23 2024-03-22 클라라 푸드즈 컴퍼니 정제된 단백질 조성물 및 제조 방법
US20240349755A1 (en) * 2021-08-29 2024-10-24 Meala Foodtech Ltd Edible plant-based protein composition
CN113533587B (zh) * 2021-09-01 2023-06-13 上海来伊份股份有限公司 基于气相离子迁移谱鉴别辣椒粉品种的方法
CN115836726A (zh) * 2021-09-18 2023-03-24 张翠翠 一种纳米乳液、植物肉及其制备方法
RU2769674C1 (ru) * 2021-09-20 2022-04-04 Елена Викторовна Борисенко Пищевой ароматизатор, придающий вкус и аромат концентрированного молока
EP4362689A1 (en) 2021-09-27 2024-05-08 Firmenich SA Flavor compositions containing iron compounds and their use
AU2022369299A1 (en) 2021-10-19 2024-03-14 Eat Scifi Inc. Plant base/animal cell hybrid meat substitute
US20240407418A1 (en) * 2021-10-20 2024-12-12 Nourish Ingredients Pty Ltd Compositions and methods for producing aromas
CN118871560A (zh) * 2021-11-09 2024-10-29 艾娃食品实验室股份有限公司 朗姆酒复制品
EP4179876A1 (en) * 2021-11-15 2023-05-17 Kerry Group Services International Limited A plant-based substitute for animal and/or dairy fat
EP4205552A1 (en) 2021-12-30 2023-07-05 BK Giulini GmbH Meat and seafood analogue products
CA3242345A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Bk Giulini Gmbh Meat and seafood analogue products
US12419326B2 (en) 2022-01-26 2025-09-23 University Of Massachusetts Meat structured protein products and method for the manufacture thereof
SE2250075A1 (en) * 2022-01-28 2023-07-29 Mycorena Ab Fungi-based fat tissue
US12004539B2 (en) 2022-01-31 2024-06-11 The Livekindly Company Switzerland GmbH Methods for creating of high fibrousness, high moisture extrudates
WO2023152344A1 (fr) * 2022-02-10 2023-08-17 Algama Procédé de production de protéines héminiques à base de microalgues pour utilisation en alimentaire
WO2023152617A1 (en) * 2022-02-10 2023-08-17 The Live Green Group, Inc. System and method for identifying natural alternatives to synthetic additives in foods
CN114609317B (zh) * 2022-02-22 2024-07-12 青海大学 黑藏羊特征挥发性风味成分的鉴别方法
US20230284652A1 (en) * 2022-03-08 2023-09-14 Simulate, Inc. Fiber-spun, chicken-like, food products and methods for manufacturing
KR102390387B1 (ko) * 2022-03-24 2022-04-26 최상배 훈제향이 함유된 부탄가스 제조방법 및 이에 의해 제조된 부탄가스
CN119212568A (zh) * 2022-04-15 2024-12-27 株式会社日水 加工肉样食品的制造方法、加工肉样食品的多汁感的提高方法、乳化凝胶的断裂抑制方法和冷冻乳化凝胶
WO2023199758A1 (ja) * 2022-04-15 2023-10-19 株式会社ニッスイ 加工肉様食品の製造方法、加工肉様食品のジューシー感の向上方法、乳化ゲルの破断抑制方法、および凍結乳化ゲル
EP4508985A1 (en) * 2022-04-15 2025-02-19 Nissui Corporation Emulsified gel, production method for emulsified gel, processed meat-like food, and production method for processed meat-like food
JP7743366B2 (ja) * 2022-05-13 2025-09-24 日清食品ホールディングス株式会社 植物タンパク質組成物
US20250380719A1 (en) * 2022-05-25 2025-12-18 Societe Des Produits Nestle S.A. A process for preparing a texturized plant-based food product
KR20250024051A (ko) 2022-06-09 2025-02-18 초 플러스 인크. 유전자 요법 (gene therapy) 벡터들 및 바이러스 백신들의 고 효율 생산을 위한 숙주 세포들로서의 세포 하이브리드들
EP4547850A1 (en) 2022-06-29 2025-05-07 Moolec Science Limited High expression of animal heme protein in plants
CN119451581A (zh) * 2022-06-29 2025-02-14 富士胶片株式会社 脂肪块组合物、脂肪块混合物、替代肉及脂肪块组合物的制造方法
US12458032B2 (en) 2022-08-16 2025-11-04 empirical foods, inc. Comminuted meat products and apparatuses and methods for producing comminuted meat products
WO2024038201A1 (en) * 2022-08-18 2024-02-22 Formo Bio Gmbh Animal-free substitute food products comprising enzymes
EP4594485A1 (en) 2022-09-29 2025-08-06 Shiru, Inc. Naturally occurring decarboxylase proteins with superior gelation properties for preparing foods and cosmetics
CN119968129A (zh) * 2022-09-30 2025-05-09 富士胶片株式会社 脂肪模拟组合物及替代肉
EP4635299A1 (en) * 2022-12-14 2025-10-22 Nissin Foods Holdings Co., Ltd. Plant protein composition
KR102588901B1 (ko) * 2023-02-06 2023-10-16 주식회사 천년식향 마블링이 형성된 대체육 및 이의 제조방법
WO2024167695A1 (en) 2023-02-08 2024-08-15 Danisco Us Inc. Compositions and methods for producing heterologous globins in filamentous fungal cells
IL322852A (en) * 2023-02-28 2025-10-01 Meala Foodtech Ltd Functional plant proteins and methods for their production
US12319933B2 (en) 2023-03-01 2025-06-03 Alcheme Bio Inc. Systems, methods, and compositions for production of cellular agriculture products
GB202303575D0 (en) 2023-03-10 2023-04-26 Bevo Biotehnoloske Resitve D O O Bone analogue
GB202306850D0 (en) 2023-05-09 2023-06-21 Farmless Holding B V Fermentation process
WO2024248985A1 (en) * 2023-05-31 2024-12-05 Cargill, Incorporated Plant based deli meat analogue products
WO2024249727A1 (en) * 2023-05-31 2024-12-05 Cargill, Incorporated Meat analogue composition
WO2025009555A1 (ja) * 2023-07-03 2025-01-09 キッコーマン株式会社 食品組成物、該食品組成物の製造方法、および豆臭のマスキング方法
WO2025051774A1 (en) * 2023-09-05 2025-03-13 Planted Foods Ag Plant-based food product and method for producing the same
WO2025099060A1 (en) * 2023-11-10 2025-05-15 Givaudan Sa Flavor modulating compositions
CN119060170A (zh) * 2024-10-22 2024-12-03 上海交通大学 一种工程化毕赤酵母发酵的血红蛋白及其制备方法

Family Cites Families (274)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB836694A (en) 1955-04-07 1960-06-09 Unilever Ltd Flavouring substances and their preparation
US2934437A (en) * 1955-04-07 1960-04-26 Lever Brothers Ltd Flavoring substances and their preparation
US2934436A (en) 1956-10-05 1960-04-26 Lever Brothers Ltd Process for the preparation of a meat flavor
GB858660A (en) 1956-10-05 1961-01-11 Unilever Ltd Flavouring substances and their preparation
US2934435A (en) 1956-10-05 1960-04-26 Lever Brothers Ltd Process for preparing a flavoring substance
GB858333A (en) 1956-10-05 1961-01-11 Unilever Ltd Flavouring substances and their preparation
US2955041A (en) 1958-12-11 1960-10-04 Lever Brothers Ltd Flavoring agents and process for imparting a meat-like flavor to an edible composition
US3157516A (en) 1962-05-18 1964-11-17 Gen Mills Inc Process of preparing a flavoring substance and the resulting product
US3271167A (en) 1963-06-17 1966-09-06 Pfizer & Co C Beef-type flavoring composition, soup and gravy
US3394015A (en) 1964-01-16 1968-07-23 Int Flavors & Fragrances Inc Product and process of reacting a proteinaceous substance with a sulfurcontaining compound to provide a meat-like flavor
BE658372A (sr) † 1964-01-16 1965-07-15
CH416293A (fr) 1964-02-08 1966-06-30 Maggi Ag Procédé de fabrication d'un produit aromatisant pour les aliments
GB1082504A (en) † 1964-10-09 1967-09-06 Pfizer & Co C Flavouring compositions
JPS4222194Y1 (sr) 1964-10-22 1967-12-19
GB1130631A (en) 1965-03-10 1968-10-16 Unilever Ltd Edible products
US3394017A (en) * 1965-03-22 1968-07-23 Int Flavors & Fragrances Inc Poultry flavor composition and process
IT1035002B (it) 1965-04-05 1979-10-20 Ajinomoto Kk Procedimento per la produzione di composizioni uttii per il condimento e prodotto relativo
US3316099A (en) 1965-04-28 1967-04-25 Swift & Co Preparation of synthetic meat flavor and the reaction product
US3394016A (en) † 1965-07-07 1968-07-23 Int Flavors & Fragrances Inc Roasted meat flavor and process for producing same
DE1300821B (de) 1965-07-22 1969-08-07 Maizena Werke Gmbh Deutsche Verfahren zur Herstellung von Wuerzstoffen mit fleischextrakt-aehnlichem Geschmack
GB1126889A (en) 1965-11-01 1968-09-11 Kyowa Hakko Kogyo Kk Meat flavour
US3365306A (en) † 1966-02-11 1968-01-23 Pfizer & Co C Meat flavoring compositions
US3524747A (en) 1966-03-30 1970-08-18 Ajinomoto Kk Seasoning compositions and related products and methods
GB1115610A (en) 1966-05-30 1968-05-29 Kyowa Hakko Kogyo Kk Flavouring substance and process for producing the same
NL155719B (nl) 1967-01-20 1978-02-15 Unilever Nv Werkwijze ter bereiding van smaakstofmengsels met een vleessmaak.
JPS4939824B1 (sr) * 1967-01-20 1974-10-29
US3519437A (en) 1967-02-06 1970-07-07 Int Flavors & Fragrances Inc Meat flavor compositions
US3660114A (en) 1967-04-12 1972-05-02 Pfizer Poultry flavor comprising amino acids, sugars, vegetable protein hydrolysate and 5{40 -ribonucleotides
NL6707232A (sr) 1967-05-25 1968-11-26
US3532515A (en) 1967-06-02 1970-10-06 Kohnstamm & Co Inc H Flavoring substances and their preparation
US3645754A (en) 1967-08-11 1972-02-29 Polak Frutal Works Meat flavor and its preparation
JPS4910754B1 (sr) † 1967-08-25 1974-03-12
GB1224989A (en) 1967-09-22 1971-03-10 Unilever Ltd Meat flavoured products
JPS4717548B1 (sr) † 1968-03-29 1972-05-22
JPS4939824Y1 (sr) 1968-04-24 1974-11-01
GB1283913A (en) † 1968-07-01 1972-08-02 Unilever Ltd Flavouring substances prepared by reaction of heterocyclic ketones with hydrogen sulphide
GB1283912A (en) 1968-07-01 1972-08-02 Unilever Ltd Mercapto furane and mercapto thiophene derivatives
FR2012745A1 (sr) 1968-07-11 1970-03-20 Ajinomoto Kk
US3870801A (en) * 1968-08-09 1975-03-11 Lever Brothers Ltd Fluid aqueous protein compositions and food products prepared therefrom
IT1043796B (it) 1968-10-15 1980-02-29 Ralston Purina Co Prodotto succedameo di estratto di carne e procedimento per la sua produzione
CA1038877A (en) 1969-02-05 1978-09-19 William J. Evers Sulfur-containing compositions and processes therefor
GB1302525A (sr) 1969-03-25 1973-01-10
US3658550A (en) 1969-10-16 1972-04-25 Ralston Purina Co Method for producing an artificial adipose tissue
BE760075A (fr) 1970-01-13 1971-06-09 Int Flavors & Fragrances Inc Methodes et compositions pour aromatiser les denrees alimentaires
US3804953A (en) 1970-03-05 1974-04-16 Gen Foods Corp Flavoring materials and method of preparing the same
SU301014A1 (ru) * 1970-04-24 1974-01-15 Ордена Ленина Ститут элементоорганнческих соедипеиий СССР Способ приготовления продуктов, имитирующих л1ясопродукты
GB1313830A (en) 1970-05-14 1973-04-18 Int Flavors & Fragrances Inc Sulphur containing flavour compositions
GB1284357A (en) 1970-06-05 1972-08-09 Nestle Sa Flavouring agent
GB1325335A (en) 1970-07-10 1973-08-01 Kohnstamm Co Inc H Flavouring substances and their preparation
US3716380A (en) † 1970-10-06 1973-02-13 Nestle Sa Soc Ass Tech Prod Beef flavor
US3716379A (en) 1970-10-06 1973-02-13 Nestle Sa Soc Ass Tech Prod Preparation of beef and chicken flavoring agents
US3743516A (en) 1970-12-01 1973-07-03 Hong Kong Soya Bean Preparation of cheese from soybean milk
US3741775A (en) 1970-12-07 1973-06-26 Gen Foods Corp Meat-type aromas and their preparation
CH570122A5 (sr) 1970-12-23 1975-12-15 Givaudan & Cie Sa
US3693533A (en) 1970-12-28 1972-09-26 Procter & Gamble Meat analog apparatus
US3719499A (en) 1970-12-29 1973-03-06 Gen Foods Corp Meat analogs
US3689289A (en) 1971-05-24 1972-09-05 Marcel Andre Perret Chicken flavor and process for preparing the same
US3642497A (en) 1971-07-26 1972-02-15 Fritzsche Dodge & Olcott Inc Flavoring compositions produced by reacting hydrogen sulfide with a pentose
BE786929A (fr) 1971-07-28 1973-01-29 Int Flavors & Fragrances Inc Compositions aromatisantes
CH537158A (fr) 1971-09-28 1973-05-31 Maggi Ag Procédé de préparation d'un produit aromatisant
US3840674A (en) 1972-04-05 1974-10-08 Nestle Sa Soc Ass Tech Prod Flavouring agent and process for preparing same
GB1382335A (en) 1972-04-10 1975-01-29 Cpc International Inc Flavouring agents
US3857970A (en) 1973-04-17 1974-12-31 Fuji Oil Co Ltd Preparation of soy cheese
US3879561A (en) 1972-05-30 1975-04-22 Staley Mfg Co A E Vacuum dried condiments
JPS4939824A (sr) 1972-08-24 1974-04-13
US3829582A (en) * 1972-09-21 1974-08-13 Us Agriculture Method of imparting fatty-fried flavor to foods and composition
FR2202421B1 (sr) 1972-10-10 1976-10-29 Thomson Brandt
US4076852A (en) 1973-02-22 1978-02-28 International Flavors & Fragrances Inc. Edible compositions having a meat flavor and processes for making same
NL7403252A (sr) 1973-03-19 1974-09-23
JPS5248186B2 (sr) 1973-08-20 1977-12-08
US3966985A (en) 1974-02-18 1976-06-29 Pfizer Inc. Flavoring agent obtained by reacting a monosaccharide and a supplemented plastein
US4066793A (en) 1974-03-18 1978-01-03 Ajinomoto Co., Inc. Seasoning composition and preparation thereof
US3930046A (en) 1974-12-03 1975-12-30 Procter & Gamble Process for preparing a meat flavoring
CH604561A5 (sr) 1975-07-25 1978-09-15 Maggi Ag
CH604562A5 (sr) 1975-07-25 1978-09-15 Maggi Ag
US3973043A (en) 1975-07-31 1976-08-03 Lynn Howard D Feedlot animal wastes into useful materials
CA1080539A (en) 1975-08-18 1980-07-01 William L. Baugher Gelatinized fat particles
CH594370A5 (sr) † 1975-08-26 1978-01-13 Maggi Ag
JPS52110875A (en) 1976-03-12 1977-09-17 Kikkoman Shoyu Co Ltd Production of beef like flavor substance and said flavor imparting agent
US4197324A (en) 1976-05-14 1980-04-08 General Mills, Inc. Preparation of meat analog
US4165391A (en) † 1976-06-08 1979-08-21 Stauffer Chemical Company Agent for providing meaty flavor in foods
JPS52156962A (en) 1976-06-21 1977-12-27 Hiroatsu Matsuoka Method of producing cheesee like food from soybean melk
US4132809A (en) * 1976-12-07 1979-01-02 Desrosier Norman W Contextured semimoist meat analogs
US4324807A (en) 1976-12-30 1982-04-13 General Foods Corporation Simulated adipose tissue
JPS53115846A (en) * 1977-03-18 1978-10-09 Jiyunsaku Nonaka Color developing agent for protein food
US4218487A (en) 1977-05-31 1980-08-19 Givaudan Corporation Processes for preparing flavoring compositions
JPS5417158A (en) * 1977-07-06 1979-02-08 Niigata Engineering Co Ltd Coloring of ham and sausage
US4161550A (en) 1977-09-21 1979-07-17 The Procter & Gamble Company Meat aroma precursor composition
CA1108003A (en) 1978-03-06 1981-09-01 Radcliffe F. Robinson Process for preparing cheese analogs
SE451539B (sv) * 1979-11-16 1987-10-19 Sik Svenska Livsmedelsinst Hemjernanrikat aminosyrapreparat framstellt av hemproteiner och forfarande for dess framstellning
US4435438A (en) 1980-12-29 1984-03-06 A. E. Staley Manufacturing Company Soy isolate suitable for use in imitation cheese
JPS5959151A (ja) 1982-09-29 1984-04-04 Ajinomoto Co Inc 新規なゲル状食品の製造法
US4604290A (en) 1983-09-01 1986-08-05 Nestec S.A. Meat flavoring agents and process for preparing same
JPH0611216B2 (ja) 1983-10-04 1994-02-16 太陽油脂株式会社 チーズ様乳化食品の製造法
JPS6283842A (ja) 1985-10-08 1987-04-17 Sennosuke Tokumaru 凍結乾燥ヨ−グルトとその製造方法
JPH0761239B2 (ja) 1986-10-22 1995-07-05 旭化成工業株式会社 可食体およびその製造法
JP2536086B2 (ja) 1988-09-02 1996-09-18 味の素株式会社 長期常温保存可能な豆腐の製造法
US5264239A (en) 1989-10-12 1993-11-23 Nestec S.A. Preparation of dried flavored meats
US5230915A (en) 1990-10-24 1993-07-27 Fereidoon Shahidi Process for preparing a powdered cooked cured-meat pigment
US5039543A (en) * 1990-11-16 1991-08-13 Nestec S.A. Preparation of flavors
DE59207023D1 (de) 1991-02-22 1996-10-10 Martin Prof Dr Ing Herrmann Verfahren zur Herstellung eines quarkähnlichen Produktes aus Sojamilch
US5650554A (en) 1991-02-22 1997-07-22 Sembiosys Genetics Inc. Oil-body proteins as carriers of high-value peptides in plants
US6753167B2 (en) 1991-02-22 2004-06-22 Sembiosys Genetics Inc. Preparation of heterologous proteins on oil bodies
WO1993025697A1 (en) 1992-06-15 1993-12-23 California Institute Of Technology Enhancement of cell growth by expression of cloned oxygen-binding proteins
US5366740A (en) 1993-02-04 1994-11-22 Warner-Lambert Company Chewing gum containing wheat gluten
JP3081101B2 (ja) 1994-03-03 2000-08-28 キッコーマン株式会社 チーズ様食品の製造法
US5753295A (en) 1994-04-05 1998-05-19 Goldman; Marc S. Non-dairy composition containing fiber and method for making same
FR2719222B1 (fr) 1994-05-02 1996-06-21 Rocher Yves Biolog Vegetale Vésicules lipidiques, leur procédé de fabrication et leurs applications.
ATE235166T1 (de) 1994-10-07 2003-04-15 Firmenich & Cie Aromazusammensetzungen und aromatisierungsverfahren
JP2883823B2 (ja) * 1994-11-28 1999-04-19 ハウス食品株式会社 ヘム鉄含有食品の製造方法
US5580499A (en) 1994-12-08 1996-12-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Process for producing zein fibers
JPH08173024A (ja) 1994-12-28 1996-07-09 Kakiyasu Honten:Kk 生肉の肉色制御方法
JP3467901B2 (ja) 1995-04-21 2003-11-17 味の素株式会社 こく味付与剤
GB9509015D0 (en) 1995-05-03 1995-06-21 Dalgety Plc Textured proteins
NZ310975A (en) 1995-06-30 1998-12-23 Novo Nordisk As A cheese making process
JPH0970272A (ja) 1995-09-04 1997-03-18 Kao Corp 即席めん類
DE69728878T2 (de) † 1996-06-10 2005-04-07 Novozymes Biotech, Inc., Davis Verfahren zur vermehrung der hemoproteinherstellung in filamentösen fungi
US5766657A (en) 1996-06-21 1998-06-16 California Polytechnic State University Melt-controlled cheese and process of making
US5807601A (en) 1996-09-09 1998-09-15 Schreiber Foods, Inc. Imitation cheese composition and products containing starch
US5959187A (en) 1996-09-26 1999-09-28 Bailey; James E. Expression of oxygen-binding proteins in plants
US5856452A (en) 1996-12-16 1999-01-05 Sembiosys Genetics Inc. Oil bodies and associated proteins as affinity matrices
GB9706235D0 (en) 1997-03-26 1997-05-14 Dalgety Plc Flavouring agents
US6171640B1 (en) 1997-04-04 2001-01-09 Monsanto Company High beta-conglycinin products and their use
US7585645B2 (en) 1997-05-27 2009-09-08 Sembiosys Genetics Inc. Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products
US6599513B2 (en) 1997-05-27 2003-07-29 Sembiosys Genetics Inc. Products for topical applications comprising oil bodies
US6372234B1 (en) 1997-05-27 2002-04-16 Sembiosys Genetics Inc. Products for topical applications comprising oil bodies
US6761914B2 (en) 1997-05-27 2004-07-13 Sembiosys Genetics Inc. Immunogenic formulations comprising oil bodies
US6183762B1 (en) 1997-05-27 2001-02-06 Sembiosys Genetics Inc. Oil body based personal care products
EP0986309B1 (en) 1997-05-27 2008-02-20 SemBioSys Genetics Inc. Uses of oil bodies
JP4137224B2 (ja) 1998-03-31 2008-08-20 天野エンザイム株式会社 酵素による蛋白質の架橋法
US6936749B1 (en) 1998-06-26 2005-08-30 The University Of Manitoba Nonsymbiotic plant hemoglobins to maintain cell energy status
US6372961B1 (en) 1998-08-20 2002-04-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Hemoglobin genes and their use
EP1123305A1 (en) 1998-10-19 2001-08-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Dna-templated combinatorial library chemistry
US6399121B1 (en) 1999-03-16 2002-06-04 Novozymes A/S Process for producing cheese
RU2144293C1 (ru) * 1999-04-05 2000-01-20 Дальневосточный государственный технический рыбохозяйственный университет Способ получения белковой массы "кланви"
US6228418B1 (en) 1999-04-07 2001-05-08 Cyvex Nutrition Vegetarian pet treat
US6093424A (en) 1999-04-27 2000-07-25 Kraft Foods, Inc. Process for making cheese using transglutaminase and a non-rennet protease
JP2001015704A (ja) 1999-06-29 2001-01-19 Hitachi Ltd 半導体集積回路
GB9915787D0 (en) 1999-07-07 1999-09-08 Cerestar Holding Bv The development of vital wheat gluten in non-aqueous media
JP2001037434A (ja) 1999-07-27 2001-02-13 Fuji Shokuhin:Kk 調理冷凍食品及びその製造方法
US6399135B2 (en) 1999-09-29 2002-06-04 Archer-Daniels-Midland Company Use of soy isolated protein for making fresh cheese
US6413569B1 (en) 1999-09-29 2002-07-02 Archer-Daniels-Midland Company Use of isolated soy protein for making fresh, unripened cheese analogs
CN1252231A (zh) 1999-10-14 2000-05-10 余国华 血红蛋白系列食品及其制造方法
US6379738B1 (en) 1999-11-16 2002-04-30 Nestec S.A. Meat emulsion product
CN1301811A (zh) 1999-12-29 2001-07-04 吴光耀 一种可用于人体补铁的转基因铁蛋白酵母及其生产方法
US20010049132A1 (en) 2000-03-21 2001-12-06 Borge Kringelum Method for supply of starter cultures having a consistent quality
JP2001346533A (ja) 2000-06-02 2001-12-18 Nippon Flour Mills Co Ltd パスタ及びその製造方法
DE10028225A1 (de) 2000-06-07 2001-12-20 Haarmann & Reimer Gmbh Käsearoma
JP5155502B2 (ja) 2000-06-20 2013-03-06 雪印メグミルク株式会社 鉄含有タンパク質組成物
US6858422B2 (en) 2000-07-13 2005-02-22 Codexis, Inc. Lipase genes
JP2002101835A (ja) 2000-07-26 2002-04-09 Taiyo Kagaku Co Ltd 麺類の製造法及び麺質改良剤
US7736686B2 (en) 2000-11-08 2010-06-15 Nestec S.A. Meat emulsion products and methods of making same
US20040161513A1 (en) 2000-11-30 2004-08-19 Kraft Foods Holdings, Inc. Method of preparation of high quality soy-containing meat and meat analog products
US6416797B1 (en) 2001-02-14 2002-07-09 Kraft Foods Holdings, Inc. Process for making a wheyless cream cheese using transglutaminase
CN1457357A (zh) * 2001-02-15 2003-11-19 旭电化工业株式会社 包含β－葡聚糖的制品
US6579992B2 (en) 2001-03-23 2003-06-17 Council Of Scientific & Industrial Research Method for producing chiral dihydrotagetone, and its conversion to chiral 5-isobutyl-3-methyl-4,5-dihydro-2(3H)-furanone
US6572901B2 (en) 2001-05-02 2003-06-03 Kraft Foods Holdings, Inc. Process for making a cheese product using transglutaminase
FR2824756B1 (fr) 2001-05-16 2005-07-08 Mainelab Microcapsules a base de proteines vegetales
US7052879B2 (en) 2001-08-31 2006-05-30 Academia Sinica Recombinant Candida rugosa lipases
CN1407108A (zh) 2001-09-06 2003-04-02 胡放 表达乳铁蛋白的基因工程重组菌株及其应用
US6495184B1 (en) 2001-10-12 2002-12-17 Kraft Foods Holdings, Inc. Grilled meat flavoring composition and method of preparation
EP1329163A1 (fr) 2002-01-18 2003-07-23 Societe Des Produits Nestle S.A. Elaboration de produits ayant un aspect roti
US8021695B2 (en) 2002-02-15 2011-09-20 Arch Personal Care Products, L.P. Personal care composition containing leghemoglobin
US20030224476A1 (en) 2002-03-01 2003-12-04 Szu-Yi Chou Method of producing transglutaminase reactive compound
CN1466903A (zh) 2002-07-11 2004-01-14 余国民 花生水晶豆腐
WO2004019695A1 (ja) 2002-08-28 2004-03-11 Fuji Oil Company, Limited 大豆たん白の酸性ゲル状食品及びその製造法
US20060233721A1 (en) 2002-10-25 2006-10-19 Foamix Ltd. Foam containing unique oil globules
JP2006514547A (ja) 2002-12-23 2006-05-11 マックス−プランク−ゲゼルシャフト ツール フォーデルング デル ヴィッセンシャフテン エー．ヴェー． 植物における貯蔵物質含量の改変方法
JP2004242614A (ja) 2003-02-17 2004-09-02 Hoo Seiyaku Kk ダイエット健康飲料
US6908634B2 (en) 2003-03-20 2005-06-21 Solae, Llc Transglutaminase soy fish and meat products and analogs thereof
EP2204384A1 (en) 2003-04-01 2010-07-07 CropDesign N.V. Plant haemoglobin
WO2004113543A1 (en) 2003-06-18 2004-12-29 The University Of York Plant lipase
US7070827B2 (en) 2003-07-03 2006-07-04 Solae, Llc Vegetable protein meat analog
AU2004262481A1 (en) 2003-08-12 2005-02-17 Unilever Plc Ice confection and its manufacturing process
GB0319463D0 (en) 2003-08-20 2003-09-17 Givaudan Sa Compounds
FR2861549B1 (fr) 2003-10-31 2006-07-07 Rhodia Chimie Sa Aromatisation d'un produit laitier a partir d'au moins une bactrerie produisant une bacteriocine et appartenant au genre pediococcus
FR2861955B1 (fr) 2003-11-07 2006-02-10 Protial Sa Produit alimentaire de type fromage, matrice fromagere et caille a base de lait vegetal fermente et procede de fabrication d'un tel caille
TW201119585A (en) * 2003-11-12 2011-06-16 J Oil Mills Inc Body taste improver comprising long-chain highly unsaturated fatty acid and/or its ester
TW200526778A (en) 2003-11-14 2005-08-16 Sembiosys Genetics Inc Methods for the production of apolipoproteins in transgenic plants
US20050112271A1 (en) 2003-11-26 2005-05-26 Ron Pickarski Meat alternative
CN1250109C (zh) 2004-01-20 2006-04-12 浙江省农业科学院 无废水豆腐制品生产方法
GB0405637D0 (en) 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
EP1765279B1 (en) 2004-04-05 2010-11-10 SemBioSys Genetics Inc. Method for the preparation of cosmetic emulsions
CN100563465C (zh) 2004-05-26 2009-12-02 王健柏 一种活性阿胶营养保健口服液浆
MX2007000626A (es) 2004-07-16 2007-03-07 Danisco Enzima lipolitica; usos de la misma en la industria alimenticia.
US7887870B2 (en) 2004-08-16 2011-02-15 Solae, Llc Restructured meat product and process for preparing same
US20060035003A1 (en) 2004-08-16 2006-02-16 Mcmindes Matthew K Soy protein containing food product and process for preparing same
WO2006042608A1 (en) 2004-10-18 2006-04-27 Unilever Plc Ice confection
CN1284571C (zh) 2004-10-31 2006-11-15 青海石油管理局 改善营养性贫血保健食品
US20070269571A1 (en) 2005-07-27 2007-11-22 Stc System Japan Co., Ltd. Composition for Soybean Protein-Processed Food, Paste for Meat-Containing or Meat-Not-Containing Processed Food, Dried Meat-Like Food
FR2889416B1 (fr) 2005-08-05 2007-10-26 Roquette Freres Composition de proteines de pois
EP1759593A1 (en) * 2005-09-06 2007-03-07 Nug Nahrungs-Und Genussmittel Vertriebsgesellschaft Mbh Minced meat analogue and method of preparing such product
FI121525B (fi) 2005-11-22 2010-12-31 Valio Oy Menetelmä maitoperäisen hapatetun tuoretuotteen valmistamiseksi
PL1971219T5 (pl) * 2005-12-28 2020-10-19 Dsm Ip Assets B.V. Aromaty procesowe o niskiej zawartości akryloamidu
WO2007115899A1 (en) 2006-04-07 2007-10-18 Unilever N.V. Satiety enhancing food products
WO2007118751A2 (de) 2006-04-13 2007-10-25 Max Planck Institut Für Molekulare Pflanzenphysiologie Verfahren zur veränderung des atp-adp-verhältnisses in zellen
US8685485B2 (en) 2006-05-19 2014-04-01 Solae, Llc Protein composition and its use in restructured meat and food products
KR101014101B1 (ko) * 2006-05-19 2011-02-14 솔레 엘엘씨 재구성 고기 조성물
ES2385875T3 (es) 2006-05-19 2012-08-02 Mary Kay, Inc. Composiciones que comprenden compuestos de salicilato de glicerilo
KR100762848B1 (ko) 2006-05-25 2007-10-04 씨제이 주식회사 균류 단백질의 제조방법, 이에 의해 제조된 균류 단백질,이 균류 단백질을 포함하는 저칼로리의 인조육 및 천연육고기향 향미제
WO2008017499A1 (en) 2006-08-11 2008-02-14 Technische Universität München Preparation of a food stuff from a protein enriched substrate under the simultaneous use of transglutaminase and protease
CN101138405A (zh) 2006-09-08 2008-03-12 周伯根 懒豆腐营养方便菜及其制做方法
EP2614718B1 (en) 2006-09-08 2018-01-10 CSK Food Enrichment B.V. Use of yeast and bacteria for making dairy products with improved flavour and/or texture quality characteristics
CN101541187A (zh) 2006-11-01 2009-09-23 西格马食品可变资本有限公司 肉类替代食品及其制备方法
US20080268112A1 (en) * 2006-12-28 2008-10-30 Solae, Llc Ground Meat and Meat Analog Compositions Having Improved Nutritional Properties
ES2604081T3 (es) 2007-01-10 2017-03-02 Dsm Nutritional Products Ag Microcápsulas que incluyen proteína de guisante
EP1952695A1 (en) 2007-01-31 2008-08-06 Unilever N.V. Oil bodies and method of producing such oil bodies
US20080254168A1 (en) 2007-04-10 2008-10-16 Solae, Llc Dried Food Compositions
US8293297B2 (en) 2007-04-05 2012-10-23 Solae, Llc Colored structured protein products
KR100888623B1 (ko) 2007-05-29 2009-03-11 주식회사 엔유씨전자 프로바이오틱 유산균을 이용한 기능성 발효두부의 제조방법및 그 두부
ES2543423T3 (es) 2007-06-04 2015-08-19 Carlton And United Beverages Limited Métodos y composiciones para clarificación de bebidas fermentables
US20110008502A1 (en) 2007-07-02 2011-01-13 San-Ei Gen F.F.I., Inc. Processed food composition containing dextrin
EP2011404A1 (en) 2007-07-04 2009-01-07 Nestec S.A. Extruded food products and methods for making extruded food products
PT2164347T (pt) † 2007-07-10 2016-08-29 Dsm Ip Assets Bv Autolisados de levedura
US20090061046A1 (en) 2007-08-02 2009-03-05 Novozymes A/S Method for producing an acidified milk drink
CN101156632B (zh) 2007-10-19 2010-04-21 扬州大学 再制大豆干酪制品的加工方法
CN101909460B (zh) 2007-11-08 2014-07-09 不二制油株式会社 大豆蛋白凝胶及其制造方法
DE102007061256A1 (de) 2007-12-19 2009-06-25 Katrin Von Oppenkowski Verfahren zur Herstellung einer pflanzlichen Substanz sowie derartige Substanz und deren Verwendung
JP2009171877A (ja) 2008-01-23 2009-08-06 Toshio Sasaki 純植物性チーズ様食品の製造法
RU2010137628A (ru) 2008-02-12 2012-03-20 Марс Инкорпорейтед (US) Продукт-аналог мяса
US20110064847A1 (en) 2008-03-14 2011-03-17 Ajinomoto Co., Inc. Method of denaturing protein with enzymes
CA2720756C (en) 2008-04-11 2016-07-19 Sembiosys Genetics, Inc. Stabilized oleosome preparations and methods of making them
KR20100135260A (ko) 2008-04-11 2010-12-24 셈바이오시스 제네틱스 인코포레이티드 올레오좀으로부터 활성 약제의 방출 조절
KR20090110423A (ko) * 2008-04-18 2009-10-22 전북대학교산학협력단 헴철―폴리펩타이드 복합체를 이용한 철 보충용 음료의제조
US20090264520A1 (en) 2008-04-21 2009-10-22 Asha Lipid Sciences, Inc. Lipid-containing compositions and methods of use thereof
US9079797B2 (en) 2008-05-14 2015-07-14 Nippon Shokubai Co., Ltd. Method for producing polycarboxylic acid copolymer and copolymer composition for cement admixture
JP4993216B2 (ja) 2008-05-30 2012-08-08 シマダヤ株式会社 焼成風味を付与する調味液を被覆した蒸煮麺
ES2534888T3 (es) 2008-06-26 2015-04-29 Emsland-Stärke GmbH Imitación de queso
US8188415B2 (en) 2008-10-24 2012-05-29 Emcore Solar Power, Inc. Terrestrial solar tracking photovoltaic array
US20100196575A1 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Solae, Llc Melting Vegetable Protein Based Substitute Cheese
JP5515325B2 (ja) 2009-02-27 2014-06-11 株式会社三洋物産 遊技機
US20110288389A9 (en) 2009-03-02 2011-11-24 Seventh Sense Biosystems, Inc. Oxygen sensor
US20100233347A1 (en) 2009-03-13 2010-09-16 Uhrhan Richard B Food compositions having a realistic meat-like appearance, feel, and texture
TWI524853B (zh) 2009-03-27 2016-03-11 Ajinomoto Kk Give the flavor of the raw material
WO2010129724A2 (en) 2009-05-05 2010-11-11 Anne Schwartz Efficient biomass fractionating system for an energy pulse crop
US20100310738A1 (en) 2009-06-04 2010-12-09 Wti, Inc. Method of processing meat
JP5271827B2 (ja) 2009-06-19 2013-08-21 ハウス食品株式会社 チーズ様食品組成物及びその製造方法
CN101606574B (zh) 2009-07-14 2011-09-07 中国农业大学 天然高铁蛋白粉及其制备方法
US20110064862A1 (en) 2009-09-11 2011-03-17 Dean Intellectual Property Services, Inc. Non-Dairy, Nut-Based Milk and Method of Production
CN101861895B (zh) 2010-04-06 2012-05-30 扬州大学 一种发酵豆乳制品的制备方法
JP2011234682A (ja) * 2010-05-12 2011-11-24 Univ Of Miyazaki 魚血からのヘムタンパク質に由来するペプチドとヘム鉄とを含む複合体の調製方法
US9085766B2 (en) 2010-05-21 2015-07-21 Cornell University Methods of producing recombinant heme-binding proteins and uses thereof
JP2012016336A (ja) * 2010-07-09 2012-01-26 Ekoopasu Laboratories:Kk ヘム鉄含有食品素材およびその製造方法
BR112013000682A2 (pt) * 2010-07-13 2016-05-31 Nestec Sa composições alimentícias tendo aparência e textura similares à carne realísticas
US20120093994A1 (en) 2010-10-13 2012-04-19 The Curators Of The University Of Missouri Meat Analog Compositions and Process
US20130236626A1 (en) † 2010-12-01 2013-09-12 Cargill, Incorporated Meat substitute product
DE202011002097U1 (de) 2011-01-28 2011-03-24 Tofutown.Com Gmbh pflanzliche Frischcreme
CA2826629A1 (en) 2011-02-07 2012-08-16 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Artificial oil bodies
GB201102557D0 (en) 2011-02-14 2011-03-30 Univ Nottingham Oil bodies
WO2012116703A1 (en) 2011-03-01 2012-09-07 Københavns Universitet A process for the manufacture of a product from a plant material
WO2012137211A1 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Process for contact doping
US20140193540A1 (en) 2011-05-12 2014-07-10 University Of Guelph Soy/milk cheese-type and yoghurt-type products and method of making
WO2012157544A1 (ja) 2011-05-13 2012-11-22 日清フーズ株式会社 冷凍パスタ
CN102835460B (zh) 2011-06-21 2014-06-04 光明乳业股份有限公司 一种涂抹干酪模拟物及其制备方法
US20130004617A1 (en) * 2011-07-01 2013-01-03 Pepsico, Inc. Coacervate complexes, methods and food products
US20140220217A1 (en) 2011-07-12 2014-08-07 Maraxi, Inc. Method and compositions for consumables
EP4606221A2 (en) 2011-07-12 2025-08-27 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
US10039306B2 (en) 2012-03-16 2018-08-07 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
CN110742128A (zh) * 2011-07-12 2020-02-04 非凡食品有限公司 用于消费品的方法和组合物
CN102440302B (zh) 2011-11-11 2013-03-20 华东理工大学 一种涂抹型大豆干酪及其制作方法
CN102578544A (zh) * 2012-03-06 2012-07-18 李连成 一种调味品及其制备方法和使用方法
IN2014DN08481A (sr) 2012-03-16 2015-05-08 Impossible Foods Inc
JP5877743B2 (ja) 2012-03-22 2016-03-08 江崎グリコ株式会社 レトルト臭のマスキング方法
JP6211760B2 (ja) 2012-12-11 2017-10-11 八藤　眞 非加熱食肉類の変色防止処理用塩類組成液、及び、当該塩類組成液を用いた変色防止処理方法
LT2943078T (lt) 2013-01-11 2021-06-25 Impossible Foods Inc. Maisto medžiagų gamybos būdas ir sudėtis
CA2897606C (en) 2013-01-11 2021-05-11 Impossible Foods Inc. Methods and compositions for consumables
US20170172169A1 (en) 2014-02-21 2017-06-22 Impossible Food Inc. Soy-based cheese
CN106455626A (zh) 2014-03-31 2017-02-22 非凡食品有限公司 碎肉仿品
US20150296834A1 (en) 2014-04-17 2015-10-22 Savage River, Inc. dba Beyond Meat, Inc. Plant based meat structured protein products
US9526267B2 (en) 2014-04-17 2016-12-27 Savage River, Inc. Nutrient-dense meat structured protein products
LT3201336T (lt) 2014-10-01 2021-11-10 Impossible Foods Inc. Nedenatūruotų baltymų ekstrahavimo ir valymo būdai
JP6079816B2 (ja) 2015-04-14 2017-02-15 トヨタ自動車株式会社 内燃機関の制御装置
US11849741B2 (en) 2015-10-20 2023-12-26 Savage River, Inc. Meat-like food products
WO2019079135A1 (en) * 2017-10-16 2019-04-25 Algenol Biotech LLC PRODUCTION OF PROTEIN CONTAINING HEM IN CYANOBACTERIA

Also Published As

Publication number Publication date
DE202014011607U1 (de) 2023-09-25
JP2023109941A (ja) 2023-08-08
EP2943072B1 (en) 2017-12-27
CN105050426A (zh) 2015-11-11
LT2943072T (lt) 2018-03-26
US20210037851A1 (en) 2021-02-11
HUE055731T2 (hu) 2021-12-28
RU2769287C2 (ru) 2022-03-30
PT2943072T (pt) 2018-03-19
EP3895543A1 (en) 2021-10-20
MX378704B (es) 2025-03-10
LT2943078T (lt) 2021-06-25
AU2018200726B2 (en) 2019-10-24
JP2022062173A (ja) 2022-04-19
US20180168209A1 (en) 2018-06-21
SMT201800107T1 (it) 2018-05-02
US20190116855A1 (en) 2019-04-25
CA2897602A1 (en) 2014-07-17
US20180027851A1 (en) 2018-02-01
CA2897600C (en) 2023-10-17
KR20220044877A (ko) 2022-04-11
RS56993B1 (sr) 2018-05-31
MX2022006606A (es) 2022-07-11
KR20150105441A (ko) 2015-09-16
JP6553516B2 (ja) 2019-07-31
PL2943078T3 (pl) 2021-09-20
KR20220000919A (ko) 2022-01-04
KR102381965B1 (ko) 2022-04-04
WO2014110532A3 (en) 2014-09-04
US11013250B2 (en) 2021-05-25
HRP20180244T1 (hr) 2018-04-06
RU2660933C2 (ru) 2018-07-11
CY1124217T1 (el) 2022-05-27
HRP20210918T1 (hr) 2021-09-03
JP7286821B2 (ja) 2023-06-05
MX2015008987A (es) 2016-04-04
MX2021011567A (es) 2021-10-13
HUE038215T2 (hu) 2018-10-29
RU2018122769A3 (sr) 2021-06-28
US10314325B2 (en) 2019-06-11
EP2943072B2 (en) 2025-04-30
AU2014205121B2 (en) 2017-12-07
US10993462B2 (en) 2021-05-04
JP7286714B2 (ja) 2023-06-05
AU2024205000A1 (en) 2024-08-08
MX2025006532A (es) 2025-07-01
CA2897600A1 (en) 2014-07-17
RU2018122769A (ru) 2019-03-06
US20220061365A1 (en) 2022-03-03
EP2943078A1 (en) 2015-11-18
JP2016502867A (ja) 2016-02-01
JP6612129B2 (ja) 2019-11-27
MX2025006531A (es) 2025-07-01
AU2022202605A1 (en) 2022-05-12
US20180199605A1 (en) 2018-07-19
CA3152571A1 (en) 2014-07-17
CA2897602C (en) 2023-06-13
AU2014205121A1 (en) 2015-08-06
AU2014205114A1 (en) 2015-08-06
MX2021011566A (es) 2021-10-13
US9826772B2 (en) 2017-11-28
US20170295833A1 (en) 2017-10-19
SI2943078T1 (sl) 2021-08-31
US10172381B2 (en) 2019-01-08
WO2014110532A2 (en) 2014-07-17
CN114732052A (zh) 2022-07-12
AU2020200283A1 (en) 2020-02-06
AU2014205114B2 (en) 2017-11-16
MX2025006530A (es) 2025-07-01
HK1217608A1 (zh) 2017-01-20
JP2016508716A (ja) 2016-03-24
KR102862002B1 (ko) 2025-09-19
KR20230079510A (ko) 2023-06-07
PT2943078T (pt) 2021-06-16
AU2018200969A1 (en) 2018-03-01
JP7021149B2 (ja) 2022-02-16
ES2930853T3 (es) 2022-12-22
RU2701852C2 (ru) 2019-10-01
JP6907271B2 (ja) 2021-07-21
US20210051977A1 (en) 2021-02-25
AU2019229324A1 (en) 2019-10-03
MX2015008985A (es) 2016-04-04
KR102344776B1 (ko) 2021-12-28
JP2023109940A (ja) 2023-08-08
KR20250140633A (ko) 2025-09-25
CY1119958T1 (el) 2018-12-12
DK2943072T3 (en) 2018-03-05
MX2021000076A (es) 2021-04-12
CA3212857A1 (en) 2014-07-17
ES2662586T3 (es) 2018-04-09
RU2015133520A (ru) 2017-02-17
AU2017265014A1 (en) 2017-12-07
AU2020200283B2 (en) 2022-01-27
RU2015133529A (ru) 2017-02-16
AU2019229324B2 (en) 2021-10-21
AU2021240241B2 (en) 2023-11-23
KR20240042553A (ko) 2024-04-02
WO2014110539A1 (en) 2014-07-17
SI2943072T1 (en) 2018-07-31
US20180199606A1 (en) 2018-07-19
AU2018200969B2 (en) 2020-01-30
AU2024200978A1 (en) 2024-03-07
EP4104682A2 (en) 2022-12-21
DK2943078T3 (da) 2021-06-14
JP2021153601A (ja) 2021-10-07
PL2943072T3 (pl) 2018-05-30
EP3345484B1 (en) 2022-08-10
AU2017265014B2 (en) 2018-11-08
AU2021240241A1 (en) 2021-10-28
EP2943078B1 (en) 2021-03-10
US11219232B2 (en) 2022-01-11
JP2019165737A (ja) 2019-10-03
US20190200658A1 (en) 2019-07-04
MX2021000032A (es) 2021-03-25
ES2875952T3 (es) 2021-11-11
ES2662586T5 (en) 2025-09-12
HK1217412A1 (en) 2017-01-13
US11224241B2 (en) 2022-01-18
CN105050414A (zh) 2015-11-11
KR20150105650A (ko) 2015-09-17
US20210051976A1 (en) 2021-02-25
RU2019128577A (ru) 2019-10-14
EP2943072A4 (en) 2016-08-24
EP3345484A1 (en) 2018-07-11
EP4104682A3 (en) 2023-02-22
HK1258133A1 (en) 2019-11-08
EP2943072A2 (en) 2015-11-18
AU2022202605B2 (en) 2024-05-02
JP2019205441A (ja) 2019-12-05
AU2018200726A1 (en) 2018-02-22
EP2943078A4 (en) 2016-11-09
KR102539106B1 (ko) 2023-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS61956B1 (sr) Metode i sastavi za potrošne materijale
US10039306B2 (en) Methods and compositions for consumables
US20220095654A1 (en) Ground meat replicas
US20240298680A1 (en) Methods and compositions for consumables
HK1217608B (en) Methods and compositions for consumables
HK40062530A (en) Compositions for consumables