RS50781B - Derivati pirido (2,3-d) pirimidina, njihovo dobijanje, njihova primena u terapiji - Google Patents

Abstract

Jedinjenje koje odgovara formuli : karkterističnoj po tome što Ar2 i R1 su redom :2,6-dihlorofenil i terc-butil ;ili 2-bromo-6-hlorofenil i terc-butil;ili 2,6-dihlorofenil i etil;ili 2,6-dibromofenil i terc-butil ;ili 2,6-dibromofenil i etil;ili 2,6-dihlorofenil i fenil;ili 3,5-dimetoksi-fenil i terc-butil ;ili fenil i terc-butil;ili 2,6-dimetilfenil i terc-butil;ili 2,6-difluorofenil i terc-butil ;ili 2,6-dihlorofenil i izo-propil.Prijava sadrži još 10 patentnih zahteva.

Description

DERIVATI PIRIDO (2,3-D)

PIRIMIDINA, NJIHOVO DOBIJANJE,

NJIHOVA PRIMENA U TERAPIJI

[0001] Predmet ovog pronalaska su derivati pMdo[2,3-d]pmrnidin, njihovo dobijanje i primena kao leka.

Stanje tehnike

[0002] Jedinjenja derivati pindo[2,3-d]pirimidin su opisani u patentnim prijavama WO 01/55147 i WO 03/000011 i upatentnim prijavama EP-B- 790 997 i US 6733913. Ova jedinjenja se potencijalno koriste za lečenje i probleme ćelijske proliferacije.

WO 2004/085436 opisuje jedinjenja formule (A) :

u kojoj R<1>je jedna amidna veza -CO-NH- i nije veza tipa uree -CO-NH-CO-,

[0003] WO 03/000011 opisuje jedinjenja formule (B):

?t?tr??

"

gde RB je jedna heteroaril grupa koja nije benzotiadiazol i najmanje jedna od grupa RA, R<B>ili R<c>sadrži jednu fosforilisanu grupu.

[0004J WO 09/70741 opisuje jedinjenja formule (C):

koji nisu pirido[2,3-d3pirimidin.

(0005] WO 01/55147 opisuje jedinjenja formule (D) :

u kojoj R<*>nije grupa aril i grupa -NR<7>R<8>nije veza tipa uree.

[0006] EP0790997 B1 opisuje jedinjenja formule (E) ili još specifičnije formule (F): u kojima Ar i Ar' su grupe aril ili heteroaril odabrane iz sledeće liste : fenil, imidazolil, piroltl, piridil, pirimidil, benzimidazolil, benzotienil, benzofuranil, indolil, pirazinil, tiazolil, oksazolil, isoksazolil, furanil, tienil, naftil. Grupa benzotiadiazol nije spomenuta niti se sugeriše.

[00071Članak J. Med. Chemistrv 2001, 44(12), 1915-1926 opisuje pirido[23-d]pirimidm.

GRupa benzotiadiazol se ne sponiinje i ne sugeriše. Članak J. Med. Chem. 2005, 48(14),

4628-4653 ne opisuje pmdo[2,3-d]pirimidin.

[Pronalazak)

[0008]Prema svom prvom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koja odgovaraju formuli (I):

Karkterističnoj po tome što Ar2i Risu redom : 2,6-dihlorofenil i terc-butil; ili 2-bromo-6-hlorofenil i terc-butil; ili 2,6-dihlorofenil i etil; ili 2,6-dibromofenil i terc-butil ; ili 2,6-dibromofenil i etil; ili 2,6-dihlorofenil i fenil; ili 3,5-dimetoksi-fenil i terc-butil ; ili fenil i terc-butil; ili 2,8-dimetilfenil i terc-butil; ili 2,8-difluorofenil i terc-butil; ili 2,6-dihlorofenil i izo-propil.

[0009] Jedno jeclinjenje je naročito pogodno

za ovaj pronalazak a to je:

(N-[2-(2,l,3- benzotiadiazol- 5- ilamino)- 6-(2,6- dihlorofenil) pirido [2,3- d) pirimidin- 7-il]-N<*->(l,l- dimetiletil)-urea)

[0010] Jedinjenje koje podržava ovaj pronalazak može biti: (i) u ne hiralnom obliku, ili racemskom, ili obogaćeno sa jednim stereo-izomerom, ili obogaćeno sa jednim enantiomerom ; (ii) eventualno salifikovano, i (iii) eventualno hidratisano ili solvatisano. Jedinjenja formule (I) mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika. Dakle mogu da postoje u obliku enantiomera ili điastereoizomera. Ovi enantiomeri, diastereoizomeri kao i njihove smeše, gde se podrazumevaju i racemske smeše, su takođe deo ovog pronalaska.

[0011] Jedinjenje formule (I) mogu da postoje u obliku baze ili adicione soli kiselina. Pošto jedinjenja formule (I) sadrže slobodne kiselinske funkcije, na primer karboksilnu, sulfonsku, fosfatnu, ove funkcije mogu biti salifikovane uz pomoć baze kako bi se formirale adicione soli. Te adicione soli su takođe deo ovog pronalaska. Adicione soli kiselina ili baza se pre svega dobijaju od kiselina i baza koje su farmaceutski prihvatljive, ali koriste se i druge kiseline i baze, na primer za prečišćavanje ili izolovanje jedinjenja formule (I) i one takođe čine deo ovog pronalaska.

[0012] Jedinjenja formule (I) mogu takođe da postoje u obliku hidrata ili solvata, u obliku asocijacija ili kombinacija sa jednim ili više molekula vode ili solvata. Takvi hidrati ili solvati takođe čine deo ovog pronalaska

[0013J U svetlu ovog pronalaska, podrazumeva se pod:

- atom halogena : fluor, hlor, brom ili jod; - alkil grupa: zasićena alifatična grupa, linearna ili razgranata. Kao primeri mogu se navesti grupe: metil, etil, n-propil, n-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil, 1-metiletil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1, 1-dimetiletiL 1-metilbutil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, 1,1-đimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, 1-metilpentil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 1,1-dimetilbutil, 1,2-dimetilbutil, 1,3-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 2,3-dimetilbutil, 3,3-dimetilbutil, 1,1,2-trimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 1-etil, 1-metilpropil, l-etil,2-metilpropil, l-enlbutil, 2-etilbutil, 1-metilheksil, 2-metilheksil, 3-metilheksil, 4-metilheksil, 5-metilheksil. 1,1-dimetilpentil, 1,2-dimetilpentil, 1,3-dimetilpentil, 1,4-dimetilpentil, 2,2-dimetilpentii, 2,3-dimetilpentil, 2,4-đimetilpentil, 3,3-dimetilpentil, 3,4-dimeulpentil, 4,4-dimetilpentil, 1,1,2-trimetilbutil, 1,1,3-trimetilbutil, 1,2^-trimetilbutil, 1,2,3-trimetilbutil, 1,3,3-trimetilbutil, 2,2,3-trimetilbutil, 2,3,3-trimetilbutil, 1,1,2,2-tetrametilpropil, 1-etilpentil, 2-etilpentil, 3-etilpentil, l-etil,l-metilbutil, l-etil,2-metilbutil, l-etil,3-metilbutil, 2-etil,l-metilbutil, 2-etil,2-metilbutiI,2-etil,3-metilbutil, 1-propilbutil, l-(l-metiletil)butil, 1-( l-metiletil),2-metilpropil.

[0014] Jedinjenja formule (I) su dobijena reakeujom između jedinjenja formule (U) : U kojoj Rj i Ar2su kao što je definisano za formulu (I) i arnina formule (III)

[0015] U skladu sa pronalaskom, možemo dobiti jedinjenja formule (I) prema postupku karakterističnom po tome što se dovedu u reakciju:

(i) jedinjenje formule:

u kojoj Rio je odlazeća grupa kao : (a) halogen, posebno Cl ili Br, ili (b) allđl-S(0)ni- sa m = 0, l.ili 2 ;R„ jeNHC(0)-NH-R,; i

(ii) amin

[0016]Ukoliko Rioje halogen ili allđl-S(0)m- sa m = 2, reakcija se odvija u rastvaraču, poželjno je polarnom: (i) na primer tetraHdrofuranu, dimetilsulfoksidu ili etanolu, eventualno u prisustvu tragova kiseline kao što je hlorovodonična kiselina; ili (ii) u dimetilsulfoksidu u prisustvu jake baze kao što je tBuOK; na temperaturi između sobne i temperature refluksa rastvarača.(0017]Ukoliko Rio je alkil-S(0)m- sa m=0 ili 1, možemo izvesti reakciju sa

U istopljenom stanju, poželjno je na temperaturi od oko 200 °C, bez katalizatora. U pojedinim slučajevima, amino funkcija iz (III) se prethodno salifikuje ili zaštiti.

(0018]jedinjenja formule (II) se dobijaju prema modelu za postupanje opisanom u evropskoj patentnoj prijavi EP 790997 i patentnoj prijavi US 5733913, kao što je opisano u sledećoj šemi:

mCPBA: kiselina meta-hloroperbenzenska

[0019]Jedinjenja prema pronalasku se dobijaju u racemskom obliku, zatim se mogu pripremiti optički izomeri upotrebom metoda za razdvajanje, poznatim ljudima iz struke. Kao što je kristalizacija forairanjem soli sa biralrum agensima. Takođe možemo pripremiti jedinjenja prema pronalasku u optički čistom obliku, koristeći metode asimetrične sinteze ili stereospecifiČne, upotrebom hromatografskih tehnika koje koriste hiralnu fazu. Zatim, proizvodi prema ovom pronalasku mogu se odvojiti formiranjem diastereoizomera, njihovim odvajanjem, zatim razlaganjem farmaceutski prihvatljivog diastereoizomera u aktivni proizvod koji je enentiomerno čist. Mogu se koristiti takođe enzimske tehnike. Dodatne poznate tehnike za razdvajanje se mogu upotrebiti. One uključuju i tehnike opisane u : Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, New York (1981),

[0020] Sledeći primeri opisuju đobijanje određenih intermedijera i jedinjenja koja su deo ovog pronalaska. U ovim primerima, koriste se sledeće skraćenice:

Boe: terc-butoksikarbonil

BOP: benzotriazol-l-iloksitris( almetilamino )fosfonijum heksafluorofosfat.

THF: tetrahidrofuran

TA : temperatura ambijenta tj. sobna temperatura

TFA: kiselina trifluorosirćetna

DCM: dihlorometan

DMSO: dimetilsulfoksiđ

DMF: dimetilformamid

MeOH: metanol.

DCC1: dicMoheksilk^bcKliirniđ

DIPEA :diisopropiletilamin

KHSO4/ K2SO4: rastvor od 5 % KHSO4/ K2S04.

[0021] Spektri magnetne nuklearne rezonance (RMN) protona su registrovani na 200 ili 250 MHz u DMSO-d6, osim ukoliko nije drugačije označeno. Signal DMSO-d6 je na 2,5 ppm i služi kao referenca. Za interpretaciju spektara, koriste se sledeće skraćenice; s : singlet, d : dublet, t: triplet, m : masivan, mt: multiplet, se : uvećani singlet, dd : dublet dubleta, qd : qvadriplet, qt: qvintiplet.

[0022] Tt.: tačka topljenja (u stepenima Celzijusa) kao što je izmereno na aparatu Buchi B545 sa gradijentom temperature od 1 °C u minuti.

[0023} MH+: Maseni spektar, Jedinjenja su ispitivana kuplovanom HPLC - UV - MS (tečna hromatografija - detekcija UV - masena spektrometrija). Upotrebljen je instrument, comercijalizovan od strane Agilent, koji se sastoji od hromatograma HP1100 opiemljenog sa detektorom sa vezanim diodama Agilent i sa masenim kvadripolmm spektrometrom spektrometrom MSD Quad.

[0024] Analitički uslovi su sledeći:

Colona: Simetrija Cl 8 (50 x 2,1 mm; 3,5 um)

Eluent A: H20 + TFA 0,005 % od pH 3,15; eluent B : CH3CN + TFA 0,005 %

Temperatura kolone: 30 °C; Protokt: 0,4 ml / min; Detekcija: A. = 210 nm; tr: retenciono vreme; v: zapremina.

Dobijanje jedinjenja formule (II)

Preparat 1;N-( t-Butil)-N'-f6-(2,6-dmlorofeml)-2-(memsulfo djpirirmdin- 7 -iljurea

[0025]

1.1 Etil 4-anuho-2-(metdtio)pirum^^^

[0026]U suspenziju od 50,7 g etil 4-Moro-2-(meuluo)pirir^ u 400 ml EtOH doda se u toku 20 minuta, i temperatura se održava do 20 °C, 140 ml rastvora NH4OH od 20%. Nakon 20 sati mešanja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se koncentmje pod vakuuumom skoro do suva, zatim se ostatak preuzme sa 350 ml vode, meša 20 minuta, fUtrira, ispere sa 3x60 ml vođe i zatim se suši pod vakuumom u prisustvu P2O5. Dobija se bela čvrsta supstanca, F = 134-135 °C, m = 39,9 g.

1.2 [4-Ammo-2-(memtio)pirimiđin-5-il]metanol

[0027]U 39,68 g estra dobijenog u prethodnoj etapi rastvorenog u 1 litar THF doda se u trajanju od 45 minuta 210 ml rastvora 1 M LLAIH4u THF, uz održavanje temperature na 30 °C. Meša se još 1 sat zatim se temperatura spusti na 5 °C i dodaje se uzastopno kap po kap 9 ml vode, 6,5 ml natrijum hidroksida 5N zatim 32 ml vode. Nakon 10 minuta mešanja, čvrsta supstanca se filtrira i zatim se ispere sa THF. Filtrat se koncentruje pod vakuumom do suva i zatim se ostatak preuzme sa 600 ml ključajućeg toluena, zatim se brzo filtrira na toplo kako bi se otklonih nerastvomi ostatci i filtrat se ostavi da se ohladi preko noći. Dobijeni beli kristali se fUtriraju, isperu sa malo toluena i zatim etra i suše, Tt. =124-127 °C, m = 23,9 g. 1.3 4-Animo-2-(metilrio)pirimiaUn-5-karbaldeW

[0028] U suspenziju od 23,8 g alkohola dobijenog u prethodnoj etapi u 1600 ml hloroforma, doda se u toku 2 minuta 79,5 g MJ1O2 aktivnog i meša se 1 noć na sobnoj temperaturi: Čvrsti ostatak se filtrira , ispere 3x75 mL CHCI3i filtrat se koncentruje pod vakuumom do suva; beli ostatak se preuzme sa etrom, filtrira, suši, Tt. = 184-186 °C, m =21,05 g.

1.4 6-(2,6-DiWorofeml)-2-(metilito)puido[2,3-d]pirirnidin- 7 -amin

[0029] U 21 g aldehida dobijenog u prethodnoj etapi, rastvorenog u 240 ml DMF i ohlađenog na 5 °C doda se u toku 5 minuta 5,47 g NaH 60% zatim u toku 20 minuta, u malim frakcijama, 29,05 g 2,6-dihlorofenilacetonitrila. Nastavi se sa mešanjem u trajanju od 30 minuta na 5 °C zatim jednu noć na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se ohladi na 5 °C i doda se 65 ml zasićenog rastvora NH4CI zatim 500 ml smeše voda/led; kako bi se dobio precipitat crvene boje koji se filtrira, ispere 2 puta sa vodom, ocedi maksimalno, ispere sa etrom, sa 100 ml hloroforma, zatim ponovo sa etrom; nakon sušenja dobija sebež čvrsta supstanca, Tt = 250-253 °C, m=29,92 g. Faze etra i hloroforma od ispiranja se koncentruju do suva, preuzme se sa malom količinom hloroforma u koji je dodato etra: dobija se druga šarža od 3,15 g, m ukupno je = 33,07 g.

45 1.5N-(t-Butil)-NI-[6-(2,6^Morofeml)-2-(memiltio)pMdo[2,3-d]pirirm 7 -iljurea

[0030] U 29,9 g amina dobijenog prethodno u rastvoru od 300 ml DMF, doda se u toku od 10 minuta i uz održavanje temperature na ispod 25 °C, 4,6 g NaH od 60% ; meša se još 20 minuta i zatim se doda u toku 20 minuta 12,2 ml izocijanata terctiobutila i zatim se meša u toku noći. Reakciona smeša se izlije polako na 800 ml smeše voda/led +100 m HC1 6N ;

dobijeni precipitat se filtrira, ispere sa vodom, ocedi i zatim meša 1 sat u 300 ml etra, zatim se filtrira, ispere sa etro i suši. Dobija se bež čvrsta supstanca, Tt. = 195-196 °C (dec.), m =

28.5 g.

1.6N-(t- Butil)-N' -[6-(2,6-dimorofeml)-2-(me^ 7 -il]urea

[0031] U 21,95 g uree dobijene prethodno u rastvoru od 300 ml hloroforma, daoda se u toku 25 minuta, uz održavanje temperature na manje od 25 °C, 27 g kiseline metahloroperbenzenske (77%). Formira se precipitat. Nakon 2 sata reakciona smeša se razblaži sa 1 litar dihlorometana i doda se Na2S04, zatim 14 g Ca(OH)2. Nakon 30 minuta mešanja čvrsti ostatak se filtrira, ispere sa dihlorometanom i filtrat se koncentruje do suva. Ostatak se usitni tretiranjem sa 80 ml etra na toplo: ostavi se da se ohladi, zatim se čvrsti beli ostatak filtrira, ispere sa etrom i suši, Tt. = 138 - 140 °C, m = 20,5 g.

[0032] Na sličan način kao što je opisano za preparat 1, mogu se dobiti sledeća jedinjenja opšte formule (II): [0033]Amin

je komercijalni proizvod.

[0034] Brojevi jedinjenja koji su dati u primerima odgovaraju onima datira u Tabeli 3 napred koja ilustruje hemijske stnikture i fizičke osobine nekih jedinjenja prema pronalasku. Ukoliko sadrže asimetrični ugljenikov atom ova jedinjenja su dobijena u racemskom obliku.

Jedinjenje N°l: N-f2-(2.1,3-benzotiadiazol-5-ilainmo)-6-(2,6-diMoorfenil)pirido[2,^

d]pirirmdin- 7 -ilj-N<1>-( l,l-dimetiletil)-urea.

[0035] U 3,32 g (20 mmola) arnina

u 45 ml DMSO, doda se 3,21 g (28,6 mmola) t-BuOK u toku 15 minuta, zatim se doda u toku 20 minuta 7,71 g (16,5 mmola) uree iz preparata 1 tabele 1. Nakon 2 sata doda se 1 g t-BuOK, zatim se doda 1 g t-BuOK nakon 2 sata. Nakon 6 sati reakcije, reakciona smeša se razblaži sa ledenom vodom. Zatim se ekstrahuje sa AcOEt. Organska faza se ispere 2 puta sa vodom, jedanput sa zasićenim rastvorom NaCl, suši, koncentruje pod smanjenim pritiskom. Sirovina se usitni tretiranjem sa smešom Et20/heptan, precipitat se filtrira i zatim hromatografiše na silika gelu, eluent CHCb/AcOEt 88/12 (v/v). Dobija se 5 g željenog proizvoda. MH<*>= 539.

JedinieniaN012- 21

[0036] Jedinjenja 12-21 se dobijaju na isti način kao jedinjenje 1 počevši od amina

i odgovarajuće uree odabrane od proizvoda formule (II) preparata tabele 1.

Jedinjenje N°12 : N-r2-(2,1,3-berizotiadiazol-5-ilaniino)-6-(2-bromo-6-

hlorofeml)pMdo[2,3-d]pirirm'din-7-il]-N'-( 1, l-dimetiletil}-urea.

Jedinjenje N°13: N-I2-(2.1 ^-benzoitadiazol-S-ilamino )-6-(2,6-dihlorofenil)piirdo[2,3-djpirimidin- 7 -ilj-N'-eitl-urea.

Jedinjenje N°14: N-r2-(2.1.3-<p>enzotiadiazol-5-Hamino )-6-(2.6-dibromofenil)piirdo[2r3-djpirimidin- 7 -il]-N' -(l,l-dimetiletil)-urea.

Jedinjenje N°16: N~r2-(2.1,3-benzotiamazol-5-ilanimo)-6-(2,6-mbromofenU)piirdo[2,3- d]pirirnidin-7-il3-N'-etil-urea.

Jedinjenje N°16 : N-r2-(2.1,3-benzotiadiazol-5-ilarxiino )-6-(2,6-diWorofenil)pirido[2,3-djpirimidin- 7 -il]-N' -fenil-urea

Jedinjenje N°17: N-f2-(2,1,3-benzotiađiazol-5-damino)-6^(3,5-dimetoksifenil)pm

d]pirimidin-7-il]-N'-( 1,1 -đimetiletii)-urea.

Jedinjenje N°18 : N-r2-f2.1.3-benzotiadiazol-5-ilamino )-6-fenilpirido[2,3-đ]piranidin- 7 -

il]-N' -(1, l-dimetileitl)-uree.

Jedinjenje N°19:N-[2-(2,13-benzotiadiazol-54larmno)-6^(2,6-dimemfenit)pmdo[2

d]pirimidin-

7 -il]-N' -(1 J-imetiletil)-urea.

Jedinjenje N°20;N-f2-f2,1,3-benzotiadiazol-5-iIarm'no)-6-(2,6-difluorofenil)piirdo[2,3-

djpirimidin- 7 -il]-N'-(1, l-di-metiletil)-urea.

Jedinjenje N°21:N-r2-f2,1,3 -benzonadiazol-5-iiannno)-6-(2,6-dihlorofenil)piirdo[2,3- d]pirimidin- 7 -il]-N' -(l-metilettf)-urea.

[0037]Tabela 3 koja sledi ilustruje hernijske strukture i fizičke osobine nekih primera prema pronalasku. Jedinjenja prema ovom pronalasku, bila su podvrgnuta farmakološkim ispitivanjima kako bi se odredila njihova antikancerogena aktivnost.

[0038] Jedinjenja formule (I) prema ovom pronalasku testitrana su in vitro na panelu tumorskih linija humanog porekla : - kancera dojke: MDA-MB231 (American Type culture collection, Rockville, Maryland, USA, ATCC-HTB26), MDA-A1 ili MDA-ADR (navedene linije su multi rezistentne na lekove MDR, i opisane su od strane E.Coliomb et al., u Cytometry, 12(1 ): 15-25,1991), i MCF7 (ATCC-HTB22),

- kancer prostate: DU145 (ATCC-HTB81) i PC3 (ATCC-CRL 1435),

- kancer debelog creva: HCT116 (ATCC-CCL247) i HCT15 (ATCC-CCL225),

- kancer pluća: H460 (opisan od strane Carmichael u Cancer Research 47 (4):936-942,1987 i objavljeno od strane National Cancer Institute, Frederick Cancer Research and Development Center, Frederick, Maryland, USA), - glioblastom : SF268 (opisan od strane Westphal u Biochemical & Biophvsical Research Communications 132 (1): 284-289, 1985 i objavljeno od strane National Cancer institute, Frederick Cancer Research and Development Center, Frederick, Marvlanđ, USA), -leukemija: CML TI (opisano od strane Kurivama et al. u Blood, 74: 1989, 1381-1387, od strane Soda et al. u British Journal of Haematologv, 59: 1985,671-679 i od strane Drexler, u Leukemia Research, 18: 1994, 919-927 objavljeno od strane la societe DSMZ (Deutsche Sammlung van Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) Mascheroder Weg 1 b, 38124 Braunschweig, Germany), K-562 (opisano od Lozzio et al., J Natl Cancer Inst 50: 535

(1973), par Lozzio et al., Blood 45: 321 (1975), i objavljeno od strane DSMZ n° ACC 10), KG-1 a (opisano od Koeffler et al., Blood 56: 265 (1980), i objavljeno od strane DSMZ n°ACC421), i Kasumi-1 (opisano od Asou etal., Blood 77: 2031 (1991), i objavljeno od strane DSMZ n° ACC 220).

{00391Proliferacija i živost celulama je određivana testom uz upotrebu 3-(4,5-dimetiltiazol-2-u)-5-(3-eafboksimetoksifeml)-2-(4-sulfofeml)-2H-tetraz (MTS) prema Fujishita T. et al., Oncology 2003, 64 (4), 399-406. U ovom testu, meri se kapacitet mitohondrija živih ćelija da transformišu MTS ujedno obojeno jedinjenje nakon 72 sata inkubacije jedinjenja formule (1) prema ovom pronalasku. Koncentracije jedinjenja prema pronalasku, koje izazivaju do 50% smanjenja proliferacije i živosti ćelijske (CISo) su između 1 nM i 10 uM, u odnosu na tumorsku liniju i na jedinjenje koje se testira.

[00401Na primer, jedinjenje N °1 pokazalo je CI50od 40 nM na liniju K-562, ili CI5o od 50

nM na liniju KG-1 a i liniju Ciso od 40 nM na liniju Kasumi-1. Na liniju K- 562, jedinjenje N °13 pokazuje CI50od 74 nM.

[0041]Takođe, prema ovom pronalasku, pokazalo se da jedinjenja formule (1) izazivaju smanjenje proliferacije i životnosti tumoralnih ćelija. Pokazalo se dakle da jedinjenja prema ovom pronalasku imaju antikancerogenu aktivnost kao i aktivnost u lečenju drugih proliferativnih bolesti kao što je psorijaza, restenoza, arterioskleroza, SIDA na primer kao i kod bolesti izazvanih proliferacijom ćelija mišića vaskularnih veziva i kod reumatoidnog poliartritisa

[0042]Prema još jednom od svojih aspekata, predmet ovog pronalaska su lekovi koji sadrže jedinjenje formule (1), ili njegovu adicionu so sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama ili hidrat ili solvat jedinjenja formule (1). Ovi lekovi nalaze svoju primenu u lečenju, pre svega u lečenju i prevenciji bolesti izazvanih ili pogoršanih proliferacijom ćelija a posebno tumoralnih ćelija. Proizvod koji odgovara ovom pronalasku može se koristiti za proizvodnju leka namenjenog lečenju patoloških stanja, posebno kancera

[0043]Ko inhibitor proliferacije tumorskih ćehja, ova jedinjenja se koriste za prevenciju i lečenje leukemija, čvrstih tumora primarnih ili metastatičnih, karcinoma i kancera, posebno : kancera dojke, kancera pluća, kancera tankog creva, kancera debelog creva i rektuma; kancera disajnog trakta, kancer orofarinksa i hipofarinksa ; kancer jednjaka ; kancera jetre, kancera želuca, kancera žučnih kanala, kancera žučne kese, kancera pankreasa: kancera urinarnog trakta gde se podrazumeva i bubrega, urotheliuma i bešike; kancera ženskog genitalnog trakta gde se podrazumeva kancer materice, žutog tela, jajnika, chloriocarcinome i trofoblastom; kanceri muškog genitalnog trakta gde se podrazumeva kancer prostate, semenovoda, testisa, tumori geiminalnih ćelija; kanceri endokrinih žlezdi gde se podrazumeva kancer tiroidne žlezde, hipofize, nadbubrežne žlede; kanceri kože gde se podrazumeva hemangiomi, melanomi, sarkomi, uključujući sarkom Kaposi; tumori, mozga, nerava, očiju, moždanice , uključujući astrocistome, gliome, glioblastome, retinoblastome, neurinome, neuroblastome, švanome, meningiome; tumori maligni hemato: leukemije (Akutna Limfoliučna Leukemija ALL, Akutna Mieloidna Leukemija (AML), Hronična Mieloidna Leukemija (CML), Hromčna Limfocitna Leukemija (CLL) hloroma, plazmocitoma, leukemije T ćelija ili B, nehodžkins limfomi ili hodžkins, mielomi, različite maligne hemopauje.

[0044]Prema jednom drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske oblike koji kao aktivni princip sadrže, jedno jedinjenje prema pronalasku. Ovi farmaceutski oblici sadrže efikasnu dozu najmanje jednog jedinjenja prema pronalasku, ili jednu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat rečenog jedinjenja, kao i najmanje jedan ekscipijent koji je farmaceutski prihvatljiv. Rečeni ekscipijenti su odabrani u zavisnosti od farmaceutskog oblika i od željenog načina davanja, od uobičajenih eksipijenata koji su poznati ljudima iz struke. U farmaceutskim oblicima prema ovom pronalasku za davanje oralno, subhngvalno, podkožno, intramuskularno, intra venozno, površinsko, lokalno, intratrahealno, intranazalno, transdermičko ih rektalno, aktivni princip opšte formule (1) kao što je prethodno navedeno, ili njegova so, hidrat ili solvat eventualno, mogu se davati u pojedinačnim dozama u smeši sa klasičnim farmaceutskim ekscipijentima, životinjama i ljudima za profilaksu ili tretman problema ili bolesti prethodno opisanih.

[0045]Pojedinačni oblici za davanje podrazumevaju oblike za oralno davanje kao što su

tablete, meke ili tvrde kapsule, prahove, granule i oralne rastvore ili suspenzije, oblike za sublingvalno davanje , bukalno, intratrahealno, intraokuiarno, intranazalno, inhalacijom, oblike za površinsko davanje, transdermalno, podkožno, intramuskularno ili intravenozno, oblike za davanje rektalno i implanti. Za površinsko davanje, mogu se koristiti jedinjenja prema pronalasku u kremama, gelovima, pomađama ili losionima, Kao primer jedna jedinična doza jedinjenja prema pronalasku u obliku tablete može da sadrži sledeća jedinjenja:

[0046] Jedinjenja formule (1) mogu se upotrebljavati u dnevnim dozama od 0,002 a 2000 mg po kilogramu telesne težine sisara koji se tretira, poželjne su dnevne doze od 0,1 do 300 mg/kg. Kod ljudi , doze mogu da varijaju najčešće od 0,02 do 10000 mg na dan, još preciznije od 1 do 3000 mg u zavisnosti od starosti osobe i od tip atretmana: profilaktičkog ili kurativnog. Mogu postojati pojedinačni slučajevi gde su veće ili manje doze od ovih adekvatnije ; takve doze ne izlaze iz okvira ovog pronalaska. Prema uobičajenoj praksi, odgovarajuće doze za svakog pacijenta određuje lekar u zavisnosti od načina davanja, težine i odgovora kod pacijenta.

[0047] Prema ovom pronalasku, jedinjenja formule (1) mogu se davati u asocijaciji sa jednim (ili više) aktivnih principa antikancerogenih, posebno antitumorskih jedinjenja kao što su alkilujući agensi alkilsulfonati (busulfan), dacarbazine, procarbazine, moutarđes (senf) azotovani (chlormethine, melphalan, chlorambucil), ciklofosfamid, ifosfamid; nitrozouree kao što je carmustine, lomustine, semustine, streptozocine; alkaloidi antineoplastični kao što je vincristine, vinblastine; taksani kao što je paclitaxel ili taxotere ; antibiotici antineoplazični kao što je actinomycine; interhelatni agensi, antimetaboliti antineoplazični, antagonisti folata, methotrexate; inhibitori sinteze purina; analozi purina kao što je merkaptopurin, 6-tioguanin; inhibitori sinteze pirimidina, inhibitori aromataze, kapecitabin, analozi pirimidina kao što je fluorouracil, gemcitabin, citarabin i citozin arabinozid; brekinar ; inhibitori topoizomeraze kao što je kamptotecin ili etoposid ; agonisti i antagonisti hormonski antikancerogeni uključujući tamoksifen, inhibitore kinaze, imatnib, inhibitore faktora rasta; antiimflamatore kao što je pentozan polisulfat, kortikosteroide, prednizon, deksametazon; antitopoizomeraze kao što je etopozid, antracikline uključujući doksorubicin, bleomicin, mitomicin i metramicin; metalne antikancerogene komplekse, komplekse platine, cisplatine, karboplatine, oksaliplatine; interferon alfa, trifeniltiofosforamid, altretamin; agensi antiangiogeni; la talidomiđ, dodatci imunoterapiji; vakcine.

[0048] Prema ovom pronalasku jedinjenja formule (I) mogu podjednako da se daju u asocijaciji sa jednim ili više drugih aktivnih principa koji se koriste kod sledećih patoloških stanja, na primer, agens protiv povraćanja, protiv bolova, protiv upala, anti-kahektičan. Takođe je moguće kombinovati jedinjenje formule (1) sa teraqpijom zračenjem. Ovi tretmani mogu biti simultani, odvojeni, sekvencijalni. Tretman se prilagođava pacijentu u zavisnosti od bolesti koja se leči.

Claims (11)

1. Jedinjenje leoje odgovara formuli : karkterističnoj po tome što Ar2i R i su redom : 2,6-dihJorofenil i terc-butil ; ili 2-bromo-6-hlorofenil i terc-butil; ili 2,6-dihlorofenil i etil; ili 2,6-dibromofenil i terc-butil ; ili 2,6-dibromofenil i etil; ili 2,6-dihlorofenil i fenil; ili 3,5-dimetoksi-fenil i terc-butil ; ili fenil i terc-butil ; ili 2,6-dimetilfenil i terc-butil; ili 2,6-difluoroteni 1 i terc-butil ; ili 2,6-diJalorofeniJ i izo-propil.

2. Jedinjenje formule:

3. Jedinjenje prema zahtevima 1 ili 2 karakteristično po tome Sto je: • TJ hiraknom ili racemskom obliku ili obogaćeno jednim stereo-izomerom ili obogaćeno sa jednim enantiomerom • Po tome što je eventualno salifikovano • Po tome što je eventualno bidratisano ili solvatisano

4. Farmaceutski oblik karakterističan po tome što sadrži jedinjenej prema jednom od zahteva ođ 1 đo 3 kao i najmanje jedan ekscipijent farmaceutski prihvatljiv.

5. Farmaceutski oblik prema zahtevu 4 karakterističan po tome Što sadrži drugi najmanje jedan drugi aktivan princip antikancerogenog tipa.

6. Lek karakterističan po tome što sadrži jedinjenje prema jednom od zahteva os 1 do 3 ili adicionu so takvog jedinjenja sa farmaceaitsM<p>rmvatljivomlđselinom ili hidrat ili solvat takvog jedinjenja.

7. Jedinjenje prema j ednom od zahteva od 1 do 3 kao antikancerogeni agens.

8. Upotreba jedinjenja, prema jednom od zahteva od 1 do 3 , za dobijahje leka namenjenog lečenju i prevenciji bolesti u2rokovarhh ili pororŠanih proliferacijom ćelija.

9. Upotreba, prema zahtevu 8, za prevenciju i lečenje leukemije, čvrstih tumora, primarnih čvrstih tumora i metastatičnih, karcinoma i kancera.

10. Postupak za dobijanje jedinjenja prema zahtevu 1 karakterističan po tome što se dovodi u reakciju jedinjenje formule: u kojoj R| i Ara su kao što je defrnisano u zahtevu 1 na amin formule

11. Postupak za dobijanje jedinjenja prema zahtevu 1 karakterističan po tome što se dovede u reakciju: (i) jedinjenje formule: u kojoj -Rio je odlazeća grupa kao : (a) halogen, posebno Cl ili Br, ili (b) alldl-S(0)m- gde m = 0,1, ili 2; -R„ je NHC(0)-NH-R,; i (ii) amin formule u kojoj (a) ukoliko Rioje halogen ili alkil-S(0)m- sa m = 2, reakcija se odvija u rastvaraču, poželjno je polarnom, na temperaturi između sobne temperature i temperature refluksa rastvaraČa; (b) ukoliko Rio je alkil-S(0)m- sa m=0 ili 1, možemo izvesti reakciju sa U istopljenom stanju; u pojedinim slučajevima amino funkcija jedinjenja formule je prethodno salifikovana ili zaštićena.