RS20050944A - Derivati pirazolo- hinazolina,postupci za njihovo dobijanje i njihova upotreba kao inhibitora kinaze - Google Patents

Abstract

Derivati pirazolo-hinazolina formule (la) ili (1b), definisani u opisu i njihove farmaceutski prihvatljive soli, postupci za njihovo dobijanje i farmaceutski preparati koji ih sadrže; jedinjenja formule (la) ili (1b) su upotrebljiva kao terapeutski agensi, naročito za tretman kancera i poremećaja ćelijske proliferacije.

Description

DERIVATI PIRAZOLO-HINAZOLINA, POSTUPCI ZA

NJIHOVO DOBIJANJE I NJIHOVA UPOTREBA KAO

INHIBITORA KINAZE

Ovaj pronalazak se odnosi na derivate pirazolo-hinazolina, na postupke za njihovo dobijanje, na farmaceutske preparate koji ih sadrže i na njihovu upotrebu kao terapeutskih agenasa, naročito za tretman kancera i poremećaja ćelijske proliferacije.

Diskusija osnove nekoliko citotoksičnih lekova, kao što su npr. fluorouracil (5-FU), doxorubicin i camptothecin-i, pokazuje da omi oštećuju DNK ili da utiču na ćelijske metaboličke puteve, pa stoga, u mnogim slučajevima izazivaju indirektnu blokadu ćelijskog ciklusa. Stoga, proizvodeći nepovratno oštećenje i normalnih i tumorskih ćelija, ovi agensi dovode do znatne toksičnosti i sporednih efekata.

U tom pogledu, poželjna su jedinjenja koja su u stanju da funkcionišu kao visoko specifični anti-tumorski agensi, koji selektivno dovode do mirovanja ili apoptoze tumorske ćelije, sa uporednom efikasnošću, ali smanjenom toksičnošću u odnosu na danas dostupne lekove.

Dobro je poznato da napredovanjem ćelijskog ciklusa vlada niz kontrolnih punktova, koji se inače navode kao restrikcioni punktovi, koje reguliše familija enzima, poznata kao kinaze zavisne od ciklina (CDK). Obrnuto, i CDK same su regulisane na mnogim nivoima, kao što je na primer, vezivanje za cikline.

Koordinisana aktivacija i inaktivacija raznih kompleksa ciklin/CDK neophodna je za normalno napredovanje kroz ćelijski ciklus. Obe kritične tranzicije, G1-S i G2-M kontroliše aktivacija različitih aktivnosti ciklin/CDK. Smatra se da u G1 i ciklin D/CDK4 i ciklin E/CDK2 posreduju u začetku S-faze.

Napredovanje kroz S-fazu zahteva aktivnost ciklin A/CDK2, dok su za začetak mitoze potrebne aktivacija ciklin A/CDK2 (CDK1) i ciklin B/CDK2. Kao opšti citat za cikline i kinaze zavisne od ciklina, videti na primer, Kevin R. VVebster et al.,Exp. Opin. Invest. Drugs,1998, 7(6), 865-887. Kontrolni punktovi su deficitarni u ćelijama tumora, delom zbog deregulacije aktivnosti CDK. Na primer, izmena izlučivanja ciklina E i raznih CDK zapažena je u ćelijama tumora, a pokazano je da izbacivanje inhibitora CDK gena p27 KIP kod miševa, dovodi do više slučajeva kancera.

Porast dokaza podupire ideju da su CDK-enzimi ti koji limitiraju brzinu napredovanja ćelijskog ciklusa, i kao takvi oni predstavljaju molekulske mete za terapeutsku intervenciju. Naročito bi direktna inhibicija aktivnosti CDK/ciklin kinaze trebalo da bude od pomoći u ograničavanju neregulisane proliferacije ćelija tumora.

Sledeće protein kinaze, poznate u stanju tehnike, koje su impliciriane u rastu ćelija kancera, su Aurora kinaze, a posebno Aurora-2.

Nađeno je da se Aurora-2 povećano izlučuje u brojnim i različitim vrstama tumora. Njene mape mesta gena u hromozomalnom regionu 20ql3, često su pojačane kod mnogih kancera, uključujući kancer dojke( Cancer Res.,1999, 59(9), 2041-4) i kancer debelog creva.

Pojačavanje 20ql3 je u korelaciji sa lošom prognozom kod pacijenata sa kancerom dojke sa negativnim-čvorovima, a povećano izlučivanje Aurora 2 je indikacija loše prognoze i smanjenog vremena preživljavanja kod pacijenata sa kancerom bešike( J. Natl. Cancer Inst,2002, 94(17), 1320-9). Opšti citat za ulogu Aurora 2 kod abnormalne funkcije centrozoma kod kancera, je takođe iMolecular Cancer Therapeutics,2003, 2, 589-595.

Predmet ovog pronalaska je davanje jedinjenja koja su korisna u tretiranju proliferativnih bolesti izazvanih sa i/ili povezanih sa izmenom u aktivnosti protein kinaze, na primer, inhibitome aktivnosti Aurora 2 i aktivnosti kinaze od koje zavisi ćelijski ciklus. Sledeći predmet ovog pronalaska je davanje jedinjenja koja imaju inhibitornu aktivnost za protein kinazu.

Ovi pronalazači su otkrili da neki pirazolo-hinazolini poseduju inhibitornu aktivnost za protein kinazu, pa su stoga korisni u terapiji kao antitumomi agensi, a nemaju toksičnosti i sporedne efekte i gore pomenute nedostatke koji su povezani sa danas dostupni antitumornim tekovima.

Određenije, pirazolo-hinazolini iz ovog pronalaska su korisni u tretmanu raznih kancera, uključujući, ali bez ograničavanja, karcinome: bešike, dojke, debelog creva, bubrega, jetre, uključujući kancer malih ćelija pluća, jednjaka, žučne kese, jajnika, pankreasa, stomaka, cerviksa, tiroide, prostate i kože, uključujući kancer skvamoznih ćelija; hematopoietičkih tumora limfnog sistema, uključujući leukemiju, akutnu limfocitnu leukemiju, akutnu leukemiju limfoblasta, limfom B-ćelija, limfom T-ćelija, Hodgkin-ov limfom, ne-Hodgkin-ov limfom, limfom kosmatih ćelija i Burkett-ov limfom; hematopoietičke tumore mijeloidnog porekla, uključujući akutnu i hroničnu mijelogenu leukemiju, mijelodisplastični sindrom i promijelocitnu leukemiju; tumore mezenhimalnog porekla, uključujući fibrosarkom i rabdomiosarkom; tumore centralnog i perifernog nervnog sistema, uključujući astrocitoma neuroblastom, gliom i švanome; druge tumore, uključujući melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, kseroderma pigmentozum, keratoksantom, folikularni kancer tiroide i Kaposi-ev sarkom.

Zahvaljujući ključnoj ulozi ćelijskih ciklin kinaza, kao što su Aurora ili CDK, u regulaciji ćelijske proliferacije, ovi derivati pirazolo-hinazolina su takođe korisni u tretmanu raznih ćelijskih proliferativnih poremećaja, kao što su na primer, benigna hiperplazija prostate, porodična adenomatoza, polipoza, neurofibromatoza, psorijaza, vaskulama proliferacija glatkih ćelija povezana sa aterosklerozom, pulmonarna fibroza, artritis, glomerulonefritis i stenoze i restenoze posle hirurškog zahvata.

Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna u tretmanu Alzheimer-ove bolesti, na šta ukazuje činjenica da je CDK5 uključena u fosforilovanje tau proteina{ J. Biochem.1995,117, 741-749).

Jedinjenja iz ovog pronalaska, kao modulatori apoptoze, mogu takođe biti korisna za tretman kancera, virusne infekcije, prevencije od razvoja SIDE kod osoba inficiranih sa HIV, autoimunih bolesti i neurodegenerativnih poremećaja.

Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna kod inhibicije angiogeneze i metastaze tumora, kao i kod tretmana odbacivanja transplantiranog organa i bolesti domaćina protiv grafta.

Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da deluju kao inhibitor drugih protein kinaza, npr. protein kinaze C u njenim raznim izoformima, Met, PAK-4, PAK-5, ZC-1, STLK-2, DDR-2, Bub-1, PLK, Chkl, Chk2, HER2, rafl, MEK1, MAPK, EGF-R, PDGF-R, FGF-R, IGF-r, PI3K, weel kinaza, Src, Abl, Akt, MAPK, ILK, MK-2, IKK-2, Cdc7, Nek, pa stoga mogu biti efikasna u tretmanu bolesti povezanih sa drugim protein kinazama. Jedinjenja iz ovog pronalaska su takođe korisna u tretmanu i prevenciji alopecije izazvane radioterapijom ili hemoterapijom.

U skladu sa tim, u prvoj realizaciji, ovaj pronalazak daje postupak za tretiranje proliferativnih poremećaja izazvanih sa i/ili povezanih sa izmenjenom aktivnošću protein kinaze, kao što je na primer aktivnost Aurore 2, i aktivnošću kinaze koja zavisi od ćelijskog ciklusa, ordiniranjem sisaru, kome je to neophodno, efikasne količine derivata pirazolo-hinazolina, predstavljenog formulom (la) ili (lb)

gde su:

R je vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između amino, ravan ili račvast C1-C6alkil, C3-C10cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil;

X je prosta veza ili dvovalentni radikal koji se bira između -NR'-, -CONR'-,

-NH-CO-NH-, -0-, -S- ili -S02- gde je

R' vodonik ili opciono supstituisana grupa, koja se bira između: ravan ili račvast d-Ce alkil, C3-C6cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R i R' mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono može da sadrži još jedan heteroatom, koji se bira

između N, O ili S;

R1vezan za bilo koji od atoma azota u pirazolskom prstenu, kao u formulama (la) ili (lb), predstavlja atom vodonika ili opciono supstituisanu grupu koja se bira između: ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3.Cecikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili kao u formuli (lb),

R1predstavlja dvovalentnu -(CH2)n-NH- grupu, koja je povezana sa R2lgde je n jednako 2 ili 3;

R2je grupa koja koja se bira između -NR"R"', -N(OH)R", -OR" ili -R", gde su R" i R'" svaki nezavisno, vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između ravan ili račvast Ci-Cealkil, C3-C6cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R" i R'" mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono sadrži još jedan heteroatom, koji se bira

između N, 0 ili S;

A je dvovalentna grupa, koja se bira između -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2-C(CH3)2-, -C(CH3)2-CH2- ili -CH=CH-;

ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.

U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje takođe postupak za tretiranje ćelijskih proliferativnih poremećaja, izazvanih sa i/ii povezanih sa izmenjenom aktivnošću protein kinaze, kao što je aktivnost kinaze zavisna od ćelijskog ciklusa, ordiniranjem, sisaru kome je to neophodno, efikasne količine derivata pirazolo-hinazolina, predstavljenog gornjim formulama (la) ili (lb).

U poželjnoj realizaciji gore opisanih postupaka, ćelijski proliferativni poremećaj se bira iz grupe koju čine kancer, Alzheimer-ova bolest, virusne infekcije, autoimune bolesti i neurodegenerativni poremećaji.

Specifične vrste kancera, koje se mogu tretirati, su karcinom, karcinom skvamoznih ćelija, hematopoietički tumori mijeloidne ili limfoidne loze, tumori mezenhimalnog porekla, tumori centralnog i perifernog nervnog sistema, melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, xeroderma pigmentosum, keratoksantom, folikularni kancer tiroide i Kaposi-ev sarkom.

U sledećoj poželjnoj realizaciji gore opisanog postupka, ćelijski proliferativni poremećaj se bira iz grupe koju čine benigna hiperplazija prostate, porodična adenomatoza, polipoza, neurofibromatoza, psorijaza, vaskulama proliferacija glatkih ćelija povezana sa aterosklerozom, pulmonama fibroza, artritis, glomerulonefritis i stenoze i restenoze posle hirurškog zahvata. Pored toga, pronađeni postupak obezbeđuje inhibiciju angiogeneze i metastaze tumora, kao i tretman odbacivanja transplantiranog organa i bolesti domaćina prema graftu. Pronađene metode takođe obezbeđuju inhibiciju ćelijskog ciklusa ili inhibiciju zavisnu od CDK/ciklina.

Pored ovoga gore, predmet postupaka iz ovog pronalaska je davanje tretmana ili prevencije alopecije izazvane radioterapijom ili hemoterapijom.

Ovaj pronalazak daje takođe, derivate pirazolo-hinazolina, predstavljene formulama (la) ili (lb),

gde su

R je vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između: amino, ravan ili račvast Ci-C6alkil, C5-C10cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil;

X je prosta veza ili dvovalentni radikal koji se bira između -NR'-, -CONR'-,

-NH-CO-NH-, -O-, -S- ili -SO2-, gde je

R' vodonik ili opciono supstituisana grupa, koja se bira između: ravan ili račvast Ci-Cealkil, C3.Cecikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R i R' mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono može da sadrži još jedan heteroatom, koji se bira između N, 0 ili S;

Rivezan za bilo koji od atoma azota u pirazolskom prstenu, kao u formulama (la) ili (lb), predstavlja atom vodonika ili opciono supstituisanu grupu koja se bira između: ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3.Cecikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili kao u formuli (lb),

R1predstavlja dvovalentnu -(CH2)n-NH- grupu, koja je povezana sa R2, gde je n jednako 2 ili 3;

R2je grupa koja koja se bira između -NR"R"', -N(OH)R", -OR" ili -R", gde su R" i R'" svaki nezavisno, vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između ravan ili račvast C1-C6alkil, C3-C6cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R" i R'" mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono sadrži još jedan heteroatom, koji se bira

između N, O ili S;

A je dvovalentna grupa, koja se bira između -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2-C(CH3)2--C(CH3)2-CH2- ili -CH=CH-;

ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.

Ovaj pronalazak obuhvata takođe i postupke za sintetizovanje derivata pirazolo-hinazolina predstavljene formulama (la) ili (lb), koji, ukoliko se drugačije ne kaže, mogu da se grupišu i definišu kao jedinjenja formule (I). U ovom pronalasku sadržani su takođe farmaceutski preparati, koji sadrže derivate pirazolo-hinazoiina formule (I).

Potpunije razumevanje ovog pronalaska i mnogih od njegovih pratećih prednosti lako će se dobiti i postati shvatljivije pozivanjem na detaljan opis koji sledi.

U stanju tehnike nekoliko heterocikličnih jedinjenja je poznato kao inhibitori protein kinaze. Kao primer, kao inhibitori protein kinaze opisani su 2-karboksamido-pirazoli i 2-ureido-pirazoli i njihovi derivati, u međunarodnim patentnim prijavama VVO 01/12189, WO 01/12188, WO 02/48114 i VVO 02/70515, svi na ime ovog podnosioca prijave.

Fuzionisana biciklična jedinjenja koja sadrže pirazolske ostatke, a poseduju inhibitornu aktivnost za kinaze, opisana su takođe u WO 00/69846, VVO 02/12242, kao i u WO 03/028720, i još u nepublikovanoj US Patent Application 60/381092 (podenta 17. maja 2002), svi na ime ovog podnosioca prijave.

Fuzionisani triciklični derivati, koji poseduju inhibitornu aktivnost za kinaze, opisani su takođe u dve priključene prijave PCT/EP03/01594 i PCT/US03/04844 (obe zahtevaju prioritet sa 19. februarom 2002, u U.S. Patent Application No. 60/35791 i No. 60/357960. respektivno), koje su ovde priključene kroz citat; ni jedna od pomenutih prijava ne opisuje specifično sadašnje derivate.

Pored toga, derivati fuzionisanih policikličnih pirimidina kao inhibitori protein kinaze, opisani su takođe u međunarodnim patentnim prijavama VVO 98/58926 i VVO 98/28281, oba na ime Celltech Therapeutics Ltd; mada se sadrže u istoj opštoj formuli u obe ove prijave, tu nisu dati specifični primeri pirazolo-hinazolina iz ovog pronalaska.

Konačno, derivati pirimidina sa fuzionisanim heterocikličnim prstenom, za tretman hiperproliferativnih bolesti, opisani su u VVO 96/40142, na ime Pfizer Inc.

Jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska mogu imati asimetrične atome ugljenika, pa stoga mogu postojati kao pojedinačni optički izomeri, kao racemske smeše ili kao bilo koja druga smeša, koja sadrži glavninu jednog od dva optička izomera, a namera je da svi budu unutar opsega ovog pronalaska.

Slično, upotreba svih mogućih izomera, i njihovih smeša, i oba metabolita, i farmaceutski prihvatljivih bio-prekursora (koji se inače nazivaju prolekovima) jedinjenja formule (I), kao antitumomog agensa, takođe su unutar obima ovog pronalaska.

Prolekovi su kovalentno vezana jedinjenja koja oslobađajuin vivoaktivni lek, roditelj, u skladu sa formulom (I).

U slučajevima kada ova jedinjenja postoje u tautomemim oblicima, na primer kao keto-enolni tautomeri, podrazumeva se da je svaki tautomerni oblik uključen u ovaj pronalazak, bilo da postoji u ravnoteži ili dominantno u jednom obliku.

U ovom opisu, ukoliko se dugačije ne naznači, pod nazivom ravan ili račvast Ct C6alkil, mi podrazumevamo bilo koju od gripa, na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, terc-butil, sek-butil, n-pentil, n-heksil i slično.

Pod nazivima C3-C10cikloalkil, mi nameravamo, ukoliko se dugačine ne naznači, da podrazumevano cikloalifatični prsten, kao što je ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil, kao i bilo koju premošćenu cikloalkil grupu sa do 10 atoma ugljenika.

Naziv aril, obuhvata karbociklične ili heterociklične ugljovodonike sa od 1 do 2 ostatka u prstenu, bilo fuzionisana ili povezana jedan sa drugim prostim vezama, gde je bar jedan od tih prstenova aromatičan; ukoliko je prisutan bilo koji od aromatičnih heterocikličnih ugljovodonika, koji se takođe navode kao heteroaril grupa, on sadrži 5 do 6 članova u prstenu, sa od 1 do 3 heteroatoma, koji se biraju između N, O i S.

Primeri aril grupa, u skladu sa ovim pronalaskom, su na primer, fenil, bifenil i/ili (3-naftil, dihidronaftil, tienil, benzotienil, furil, benzofuranil, pirolil, imidazolil, pirazolil, tiazolil, izotiazolil, oksazolil, izoksazolil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, indolil, izoindolil, purinil, hinolil, izohinolil, dihidrohinolinil, hinoksalinil, benzodioksolil, indanil, indenil, triazolil i slično.

Ukoliko se drugačije ne naznači, naziv heterociklil obuhvata 5- do 6-člane zasićene, delimično nezasićene ili potpuno nezasićene heterocikle, sa od 1 do 3 heteroatoma, koji se biraju između N, O i S. Nezavisno od potpuno nezasićenih heterocikla, koji su ranije nazvani aromatičnim heterociklima i obuhvaćeni nazivom aril, primeri zasićenih ili delimično nezasićenih heterocikla, u skladu sa ovim pronalaskom, su na primer, piran, pirolidin, pirolin, imidazolin, imidazolidin, pirazolidin, pirazolin, tiazolin, tiazolidin, dihidrofuran, tetrahidrofuran, 1,3-dioksolan, piperidin, piperazin, morfolin i slično.

Iz svega gore rečenog je jasno osobi koja je verzirana u stanje tehnike da bilo koje jedinjenje iz ovog pronalaska, gde X predstavlja prosta veza, treba da se smatra kao da ima R grupu direktno povezanu sa pirimidinskim ostatkom.

U skladu sa tim i značenjem supstituenata, ako se drugačije ne naznači, bilo koja od gornjih R, R', R^ R" i R"' grupa može opciono biti supstituisana u bilo kom od njihovih slobodnih položaja sa jednom ili više grupa, na primer 1 do 6 grupa, koje se nezavisno biraju između: halogen, nitro, okso (=0), cijano, azido, alkil, polifluorovani alkil, hidroksialki, aril, arilalkil, heterociklil, heterocikloalkil, cikloalkil, alkilaril, alkilheterociklil, hidroksi, alkoksi, polifluorovani alkoksi, ariloksi, arilalkiloksi, heterocikliloksi, heterociklilalkoksi, metilendioksi, alkilkarboniloksi, alkilkarboniloksialkil, arilkarboniloksi, karboksi, alkoksikarbonil, alkoksikarbonilalkil, ariloksikarbonil, ciktoalkiloksikarbonil, amino, amonoalkil, alkilaminoalkil, alkilaminoalkiloksi, ureido, alkilamino, dialkilamino, arilamino, diarilamino, formilamino, alkilkarbonilamino, arilkarbonilamino, heterociklilkarbonilamino, alkoksikarbonilamino, alkoksiimino, alkilsulfonilamino, arilsulfonilamino, formil, alkoksikarbonil, arilkarbonil, heterociklilkaroonil, cikloalkilkarbonil, heterociklilkarbonil, aminokarbonil, alklaminokarbonil, dialkilaminokarbonil, arilaminokarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heterociklilsurfonil, aminosulfonil, alkilaminosulfonil, dialkilaminosulfonil, ariltio j alkiltio.

U tom pogledu, naziv atom halogena, namenjen je atomu fluora, hlora, broma i joda.

Naziv polifluorovani alkil namenjen je bilo kojoj od gornjih ravnih ili račvastih Ci-Cealkil grupa, koje su supstituisane sa više od jednog atoma fluora, kao što su na primer, trifluorometil, trifluoroetil, 1,1,1,3,3,3-heksafluoropropil i slično.

Nazive alkoksi, ariloksi, heterocikliloksi i njihove derivate, mi smo namenili bilo kojoj od gornjih alkil, aril ili heterociklil grupa povezanih sa ostatkom molekula preko atoma kiseonika (-0-).

Iz svega ovoga je jasno verziranoj osobi da bilo koja grupa, čije je ime složeno ime, kao što je na primer, arilalkil ili heterociklilalkil, mora biti namenjeno, kako to predviđa konvencija, delovima iz kojih je izvedeno, npr. alkil grupa, koja je još supstituisana sa aril ili heterociklil, gde su alkil, aril ili heterociklil definisani gore.

Slično, bilo koji od naziva, kao što su na primer, alkiltio, alkilamino, dialkilamino, alkoksikarbonil, alkoksikarbonilamino, heterociklilkarbonil, heterociklilkarbonilamino, cikloalkiloksikarbonil i slično, obuhvataju grupe u kojima su alkil, alkoksi, aril, cikloalkil i heterociklil ostaci definisani gore.

Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) su kisele adicione soli sa neorganskim ili organskim kiselinama, npr. azotnom, hlorovodoničnom, bromovodoničnom, sumpornom, perhlomom, fosfornom, sirćetnom, trifluorosirćetnom, propionskom, glikolnom, mlečnom, oksalnom, malonskom, jabučnom, maleinskom, vinskom, limunskom, benzoevom, cinaminskom, bademovom, metansulfonskom, izetionskom i salicilnom kiselinom, a isto tako i soli sa neorganskim ili organskim bazama, npr. alkalnim i zemnoalkalnim metalima, naročito sa hidroksidima, karbonatima ili bikarbonatima natrijuma, kalijuma, kalcijuma ili magnezijuma, acikličnim ili cikličnim aminima, poželjno metilaminom, etilaminom, dietilaminom trietilaminom, piperidinom i slično.

U skladu sa prvom realizacijom ovog pronalaska koja se odnosi na jedinjenja formule (la) ili (lb), poželjni su oni derivati u kojima X predstavlja grupa -NH-, a R2je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je grupa R" opciono supstituisana sa grupom koja se bira između C3-C6cikloalkil ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil; a R, Rii A su kao što su definisani gore.

Takođe, poželjno je da se jedinjenja formule (la) ili (lb), u kojima X predstavlja -0- grupa, a R2je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je grupa R" opciono supstituisana sa grupom koja se bira između C3-C6 cikloalkil ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil; a R, R^i A su kao što su definisani gore.

Takođe, poželjno je da se jedinjenja formule (la) ili (lb), u kojima X predstavlja -S-grupa, a R2je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je grupa R" opciono supstituisana sa grupom koja se bira između C3-C6cikloalkil ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil; a R, R1i A su kao što su definisani gore.

Još su poželjnija, unutar gore pomenutih klasa jedinjenja (la) ili (lb), ona istih derivata, gde A predstavlja grupa -(CH2)2-

U skladu sa sledećom realizacijom, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (la) ili (lb), klasu poželjnih jedinjenja predstavljenu onim derivatima gde X predstavlja grupa -NH-, a R2je grupa -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta C1-C4alkil grupa; i gde su A, R i Ridefinisani gore.

Sledeća klasa poželjnih jedinjenja iz ovog pronalaska, formule (la) ili (lb), predstavljena je derivatima u kojima X predstavlja grupa -0-, a R2 je grupa -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta C1-C4alkil grupa; i gde su A, R i R-i definisani gore.

Sledeća klasa poželjnih jedinjenja iz ovog pronalaska, formule (la) ili (lb), predstavljena je derivatima u kojima X predstavlja grupa -S-, a R2je grupa -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta C1-C4alkil grupa; i gde su A, R i Ridefinisani gore.

Sledeću klasu jedinjenja iz ovog pronalaska sa formulom (lb) predstavljaju derivati u kojima su R, X i A definisani gore, a Ri i R2su zajedno povezani preko dvovalentne -(CH2)n-NH- grupe, tako da daju:

Takođe, unutar gornje klase derivata formule (la) ili (lb), poželjna su jedinjenja u kojima se grupa A bira između -CH2C(CH3)2- ili -C(CH3)2-CH2-.

Za navođenje bilo kog specifičnog jedinjenja formule (la) ili (lb) iz ovog pronalaska, opciono u obliku farmaceutski prihvatljive soli, videti eksperimentalni odeljak i patentne zahteve.

Kao što je ranije naznačeno, sledeći predmet ovog pronalaska predstavlja postupak za dobijanje jedinjenja formule (I), formule koja se, ukoliko se drugačije posebno ne ukaže, sastoji od derivata formula (la) i (lb).

Prema tome, jedinjenja formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu se dobiti postupkom koji se sastoji od:

(1) kada A predstavlja -(CH2)2- grupa:

Korak 1. je reagovanje 2-etoksi-2-cikloheksen-1 -ona sa dietiloksalatom, u prisustvu litijum-bis(trimetilsilil)-amida [LiN(TMS)2], tako da se dobije jedinjenje formule (II)

pa tretiranje sa derivatom hidrazina formule (III),

R1-NHNH2(III)

gde Riima gore data značenja, u skladu sa radnim uslovima koji se daju u koracima (2a) i (2b) ili (2c);

Korak 2a. u prisustvu nižeg alkohola, tako da se dobije smeša jedinjenja formule (IVa) i (IVb)

gde jeRidato gore, pa razdvajanjem njihove smeše na pojedinačna jedinjenja (IVa) i (IVb);

Korak 2b. u prisustvu sirćetne kiseline, tako da se dobije jedinjenje (IVa);

Korak 2c. alkilovanjem jedinjenja (IVa) dobijenog u koraku 2a ili 2b, a kada Ri predstavlja vodonik, sa jedinjenjima formule (IVc):

RiY (IVc)

gde je Y pogodna odlazeća grupa, kao što su mezil, tozil, halogen, tako da se dobije smeša jedinjenja formule (IVa) i (IVb), gde je Ridato gore, pa razdvajanjem njihove smeše na jedinjenja (IVa) i (IVb);

Korak 3. reagovanjem jedinjenja formule (IVa), dobijenog u skladu sa bilo kojim od koraka 2a, 2b ili 2c, ili jedinjenja formule (IVb), dobijenog u skladu sa koracima 2a ili 2c, sa dimetilformamid-di-terc-butilacetalom, tako da se dobiju jedinjenja formule (Va) ili (Vb):

gde je Ri dato gore; pa reagovanjem jedinjenja formule (Va) ili (vb) u skladu sa bilo kojim od alternativnih koraka 4a, 4b ili 4c; Korak 4a. sa gvanidinom, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb)

gde R-X pedstavlja amino, R2je etoksi, a Rije defmisano gore; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);

Korak 4b. sa derivatom gvanidina formule (VI)

R-NH-C-NHNH2(VI)

gde je R dato gore, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde su R i Ridati gore, X je -NH-, a R2je etoksi, i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);

Korak 4c. sa alkilizotioureom formule (VII)

R-S-C-(=NH)NH2(VII)

gde je R dato gore, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde su R i Ridati gore, X je -S-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);

Korak 4d. sa metilizoureom, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde je Ridato gore, R je metil, X je -O-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);

(2) kada A predstavlja -C(CH3)2-CH2- grupa:

Korak 5. reagovanjem 2-metoksi-4,4-dimetil-2-cikloheksen-1-ona sa dietiloksalatom, u prisustvu [LiN(TMS)2], tako da se dobije jedinjenje formule

(VIII)

Korak 6. reagovanjem jedinjenja formule (VIII) sa derivatom hidrazina formule (III), u skladu sa bilo kojim od prethodnih koraka 2a ili 2b, tako da se dobije jedinjenje formule (IXa) ili (IXb) gde je R dato gore; Korak 7. Reagovanjem jedinjenja formule (IXa) ili (IXb) sa etilformijatom, pod baznim uslovima, tako da se dobije jedinjenje formule (Xa) ili (Xb)

Korak 8. reagovanjem jedinjenja formule (Xa) ili (Xb) sa gvanidinom ili derivatom gvanidina, formule (VI), tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde su R i Ri dati gore, X je -NH-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);

(3) kada A predstavlja -CH2-C(CH3)2- grupa:

Korak 9. reagovanje 2-metoksi-5,5-dimetil-2-cikloheksen-1-ona sa dietiloksalatom, u prisustvu natrijum-hidrida, tako da se dobije jedinjenje formule (XI); Korak 10. reagovanje jedinjenja formule (XI) sa derivatom hidrazina formule (III), u skladu sa bilo kojim od prethodnih koraka 2a ili 2b, tako da se dobije jedinjenje formule (Xlla) ili (Xllb)

gde je Ri dato gore;

Korak 11. reagovanje jedinjenja formule (Xlla) ili (XIlb) sa dimetilformamid-di-terc-butilacetalom, tako da se dobije jedinjenje formule (XIHa) ili (XIIlb);

Korak 12. reagovanje jedinjenje formule (Xllla) ili (Xlllb) sa gvanidinom ili derivatom gvanidina formule (VI), tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde su R i Ridati gore, X je -NH-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I); 4. Kada A u formuli (b) predstavlja -(CH2)2- grupa, -CH2-C(CH3)2- grupa ili -C(CH3)2CH2- grupa, a Ri je direktno vezan za R2, tako da to daje tetracikličnu prstenastu strukturu: Korak 13. jedinjenje formule (IV), (IX), (XII), gde je Rivodonik, dobijeno u skladu sa korakom 2, korakom 6 i korakom 10 ovog postupka, reaguje sa trifenilmetilhloridom, tako da se dobije jedinjenje formule (XIV) gde Tr označava tritil (trifenilmetil); Korak 14. reagovanje jedinjenja formule (XIV) sa dimetiformamid-di-terc-butilacetalom, kao što je opisano u koraku 3, tako da se dobije jedinjenje formule (XV); Korak 15. reagovanje jedinjenja formule (XV) sa pogodnim derivatom gvanidina formule (VI), kao što je opisano u koraku 4b, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb)

gde je R definisano gore, A je -(CH2)2- grupa, -CH2-C(CH3)2- grupa ili -C-(CH2-CH- grupa, X je -NH-, Ri je tritil, a R2 je etoksi;

Korak 16. reagovanje gornjeg jedinjenja formule (la) ili (lb), pod kiselim uslovima, tako da se dobiju odgovarajuća jedinjenja formule (la) i (lb) u kojima R predstavlja vodonik;

Korak 17. reagovanje gornjeg jedinjenja formule (la) ili (lb) sa pogodnim agensom za alkilovanje formule (XVI), u prisustvu litijum-terc-butilata

Br-(CH2)n-NH-BOC (XVI)

gde je n 2 ili 3, tako da se dobije jedinjenje formule (lb)

gde su A, n i R definisani gore; Korak 18. reagovanje gornjeg jedinjenja formule (lb), pod kiselim uslovima, tako da se terc-butoksikarbonilamino grupa konvertuje u amino (deprotekcija), pa reaguje sa cezijum-karbonatom (CS2CO3) tako da se dobije jedno od dva jedinjenja formule (lb)

gde su A i R definsiani gore, i opciono ona konvertuju u druge derivate formule (i);

5. Kada R2predstavlja krupnu grupu:

Korak 19. reagovanje 2-etoksi-2-cikloheksanona sa dimetilformamid-di-etrc-butilacetalom, kao što je opisano u Koraku 3, tako da se dobije jedinjenje formule (XVII) Korak 20. reagovanje jedinjenja formule (XVII) sa derivatom formule (VII) u skladu sa Korakom 4c, tako da se dobije jedinjenje formule (XVIII) gde je R definisano gore, pa se zatim tretira pod kiselim uslovima tako da se dobije jedinjenje formule (XIX);

Korak 21. reagovanje jedinjenja formule (XIX) sa jedinjenjem formule

(XX)

gde je R2krupna grupa, tako da se dobije jedinjenje formule (XXI)

Korak 22. reagovanje jedinjenja formule (XXI) sa derivatom hidrazina formule (III) kao u Koraku 1. ovog postupka, tako da se dobije jedinjenje formule (I), gde su R i Ridefinisani gore, X je -S-, a R2je krupna grupa; i opciono njegovim konvertovanjem u druge derivate jedinjenja formule (I).

Kao što je gore opisano, jedinjenja formule (I), koja se dobijaju u skladu sa postupkom koji je prdmet ovog pronalaska, na primer kao što je opisano u koracima 4a, 4b, 4c, 8, 12, 13, 18, i 22, mogu se pogodno konvertovati u druga jedinjenja formule (I), u skladu sa dobro poznatim radnim uslovima.

Kao primer, jedinjenja formule (I):

Korak 23. ako je R2etoksi, može se konvertovati u jedinjenja formule (la) ili (lb), u kojima je R2amino, tretmanom sa amonijum-hidroksidom; Korak 24. ako je R2etoksi, može se konvertovati u jedinjenja formule (I), u kojima je R2grupa -NHR", tretmanom sa aminom formule R"-NH2(XXII) Korak 25. ako je R2etoksi, može se konvertovati u jedinjenja formule (I), u kojima je R2grupa -OH, kiselom ili baznom hidrolizom Korak 26. ako je R2-OH, može se konvertovati u jedinjenja formule (I), u kojima je R2grupa -NR"R"' ili -N(OH)R", reakcijom sa derivatom formule (XXIII) ili (XXIV) pod baznim uslovima i u prisustvu podesnog agensa za kondenzovanje Korak 27. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima se R razlikuje od vodonika, kao što je definisano gore, a X je -CONH-, reakcijom sa halidom kiseline, na primer hloridom formule Korak 28. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima se R razlikuje od vodonika, kao što je definisano gore, a X je -NH-CO-NH-, reakcijom sa izocijanatom formule Korak 29. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X je -NH-, prvo konvertovanjem amino grupe u jod, sa izoamilnitritom i dijodometanom ili cezijum-jodidom, u prisustvu joda i Cul, a zatim reakcijom ovog jodo-derivata sa arilaminom formule u prisustvu paladijum-acetata i (2,2'-bis(difenirfosfino))-1,1'binaftalina (BINAP) Korak 29a. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, arilalkil, heterociklil, heterociklilalkil, a X je -NH- prvo konvertovanjem amino grupe u jod, kao što je opisano u prethodnom Koraku 29, pa zatim reagovanjem ovog jodo-derivata sa alkil, cikloalkil, cikloalkil-alkil, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil aminom formule R-NH2(XXVII), kao što je ranije definisano; Korak 30. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X prosta veza, prvo konvertovanjem amino grupe u jod, kao u Koraku 29., a zatim reagovanjem tog jodo-derivata sa arilbomom kiselinom, formule u prisustvu derivata paladijuma Korak 31. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R alkil ili arilmetil, prvo reakcijom sa alkilaldehidom ili arilaldehidom formule u prisustvu natrijum-cijanoborohidrida (NaBHaCN) i sirćetne kiseline

Korak 31a. kada je R vodonik, a X je -NH-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R cikloalkil ili heterocikloalkil, reakcijom sa cikloalkilketonom ili heterocikloalkilketonom, u prisustvu natrijum-triacetoksiborhidrida (NaBH(OAc)3) i trifluorosirćetne kiseline

Korak 32. kada je R, definisano gore, npr. metil, a X je -S-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R opciono supstituisani alkil, cikloalkil, heterociklil, cikloalkil-alkil, arilalkil ili heterociklialkil grupa, prvo konvertovanjem RS-grupe u RSO2- pod oksidacionim uslovima, pa zatim reagovanjem ovog sulfonil derivata sa aminom, formule R-NH2(XXVII), gde je R opciono supstituisan sa alkil, cikloalki, heterociklil, cikloalkil-alkil, arilalkil ili heterociklilalkil grupa Korak 33. kada je R definisano gore, npr. metil, a X je -S-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R definisano u formuli (I), a X je -O-, prvo konverzijom RS- grupe u RSO2, kao u Koraku 32, a zatim reagovanjem ovog sulfonil derivata sa jedinjenjem formule

Korak 33a. kada je R metil, a X je -O-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R definisano u formuli (I), a X je -O-, prvo konvertovanjem MeO- grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa jedinjenjem formule R-OH (XXX) Korak 33b. kada je R metil, a X je -O-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R opciono supstituisani alkil, cikloalkil, heterociklil, cikloalkil-alkil, heterocikloakil grupa, a X je -NH-, prvo konvertovanjem MeO-grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa aminom formule R-NH2(XXVII), gde je R opciono supstituisana alkil, ckloalkil, heterocikil, cikloalkilalkil, arilalkil ili heterociklilalkil grupa

Korak 33c. kada je R metil, a X je -O-, može se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X je -NH-, prvo konvertovanjem MeO- grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa aminom formule RNH2(XXVII), gde je R opciono supstituisan sa aril, u prisustvu paladijum-acetata i BINAP;

Korak 34. kada A predstavlja -(CH2)- grupa, može se konvertovati u jedinjenja formule (I), gde A predstavlja -CH=CH- grupa, pod radnim uslovima za dehidrogenovanje, u prisustvu Pd ili Pt katalizatora.

Gornji postupak u bilo kojoj od pomenutih varijanti je postupak analogije, koji se može obavljati u skladu sa dobro poznatim metodama u stanju tehnike.

U vezi Koraka 1. ovog postupka, 2-etoksi-2-cikloheksen-1-on reaguje sa dietiloksalatom u prisustvu LiN(TMS)2i pogodnog rastvarača, kao što su na primer, dioksan, tetrahidofuran ili dietiletar.

U vezi Koraka 2, jedinjenje formule (II) reaguje sa pogodnim derivatom hidrazina, formule (III), u prisustvu nižeg alkohola, kao što je metanol, etanol ili njihove smeše, Poželjno je da se gornja reakcija vodi u etanolu, na temperaturi refluksa, tako da se dobije smeša oba jedinjenja, formule (IVa) i (IVb), pri čemu je prvo u preovlađujućoj količini. Njihovo razdvajanje u pojedinačna jedinjenja (IVa) i (IVb), obavlja se konvencionalnim metodama, na primer preparativnom HPLC.

Kada se umesto toga radi kao u Koraku 2b. ovog postupka, reaguje jedinjenje formule (II) sa derivatom formule (III), u prisustvu sirćetne kiseline, pa se dobija jedinjenje formule (IVa). Poželjno je da se ova reakcija vodi na sobnoj temperaturi.

U skladu sa Korakom 2c. ovog postupka, jedinjenje (IVa), gde je Ri vodonik, reaguje sa pogodnim jedinjenjem formule (IVc), u prisustvu baze, kao što je natrijum-hidrid, u pogodnom rastvaraču, na primer tetrahidrofuranu, dioksanu ili dimetilformamidu, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do 100°C, tako da se dobije smeša jedinjenja (IVa) i (IVb), gde je prvo jedinjenje prisutno u preovlađujućoj količini, pa se razdvoje konvencionalnim metodama, na primer preparativnom HPLC.

U skladu sa Korakom 3. ovog postupka, jedinjenje formule (IVa) ili (IVb) reaguje sa dimetilformamido-di-ter-butilacetalom, u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je na primer, dimetilformamid, tako da se dobiju jedinjenja formule (Va) i (Vb) respektivno. Poželjno je da se ova reakcija vodi na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do oko 70° C.

U skladu sa bilo kojim od alternativnih Koraka 4a, 4b, 4c ili 4d ovog postupka, jedinjenje formule (Va) ili (Vb) reaguje sa gvanidinom, solima gvanidina ili njegovim derivatima, alkilizotioureom ili metilizoureom, tako da se dobije odgovarajuće jedinjenje formule (la) ili (lb), preko stvaranja pirimidinskog prstena.

Bilo koja od gornjih reakcija se obavlja u skladu sa konvencionalnim metodama. Kao primer, reakcije sa gvanidinom ili njegovim solima, kao što su hidrohlorid, karbonat ili nitrat, ili sa derivatima gvanidina formule (VI), kao što je opisano u koracima 4a ili 4b, vode se u nižem alkoholu kao rastvaraču, pod neutralnim ili baznim uslovima, poželjno u etanolu i natrijum-etilatu, ili u diazabicikloundekanu (DBU), na temperaturi refluksa, ili alternativno u dimetilformamidu, na temperaturi koja se kreće od 80°C do temperature refluksa, u prisustvu kalijum-karbonata. Reakcija sa alkilizotioureom (VII), u Koraku 4c, vodi se u prisustvu kalijum-acetata i u pogodnom rastvaraču, kao što je dimetilformamid, na temperaturi refluksa.

Reakcija sa metilizoureom, u Koraku 4d, se vodi u pogodnom rastvaraču, kao što je acetonitril, u prisustvu baze, kao što je kalijum-karbonat, na temperaturi refluksa.

Reakcije Koraka 5 i 6 se obavljaju pod radnim uslovima koji su opisani za Korake 1, 2a i 2b, i vode željenim jedinjenjima formule (IXa) ili (IXb), respektivno.

Korak 7. ovog postupka, poželjno je da se vodi reagovanjem derivata formule (IXa) ili (IXb) sa etilformijatom, pod baznim uslovima, poželjno u prisustvu natrijum-etilata ili natrijum-hidrida, u pogodnom rastvaraču, na primer, dietiletru, tetrahidrofuranu ili dioksanu, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do temperature refluksa.

Uslovi reakcije Koraka 8. su oni koji su ranije opisani za Korake 4a ili 4b.

U skladu sa Korakom 9, reaguje 2-metoksi-5,5-dimetil-2-cikloheksen-1-on sa dietiloksalatom, u prisustvu natrijum-hidrida i u pogodnom rastvaraču, kao što je dietiletar, tetrahidrofuran ili dioksan, na temperaturi refluksa.

Reakcioni uslovi u sledećem Koraku 10, u suštini su oni koji su ranije opisani u koracima 2a ili 2b, a oni u Koracima 11. i 12. odgovaraju onima iz Koraka 3, 4a i 4b, respektivno.

U skladu sa Korakom 13. ovog postupka, onom koje verziran u stanje tehnike je jasno da su oba jedinjenja formule (IVa) ili (IVb), u kojima R!predstavlja atom vodonika, tautomerni oblici datog jedinjenja, koje se može pogodno identifikovati tako što ima formulu (IV). U tom pogledu, isti derivat reaguje sa trifenilmetilhloridom, tako da se dobije jedinjenje formule (XIV) u kome su ili jedan ili dva atoma azota pirazola alkilovani sa tritil (tj. trifenilmetil) grupom.

Radni uslovi u Koracima 14. i 15. ovog postupka, suštinski odgovaraju onima koji su već opisani u Koracima 3, 4a i 4b. U skladu sa Korakom 16, tritil grupa jedinjenja formule (I) se ukloni pod kiselim uslovima, na primer sa trifluorosirćetnom kiselinom, u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je dihlorometan, tako da se dobije odgovarajuće jedinjenje formule (I) u kome je Ri vodonik, u oba oblika:

Njegovo naknadno alkilovanje sa derivatom formule (XVI), u skladu sa Korakom 17. ovog postupka, dozvoljava selektivno alkilovanje atoma azota u pirazolu, koji je u blizini -COOEt grupe. Ova reakcija se može obavljati sa litijum-terc-butilatom, u pogodnom rastvaraču, kao što je dioksan, dietiletar ili tetrahidrofuran.

U skladu sa Korakom 18, gornje jedinjenje se prvo konvertuje u amino derivat, radeći po konvencionalnim metodama, na primer pod kiselim uslovima, poželjno sa hlorovodoničnom kiselinom, u pogodnom rastvaraču, kao što je dioksan, na temperaturi refluksa, sa naknadnom ciklizacijom u željeni tetraciklični derivat, u prisustvu baze, kao što je cezijum-karbonat (Cs2C03), u pogodnom rastvaraču, kao što je niži alkohol, poželjno metanol, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do refluksa.

Radni uslovi Koraka 19. i 20. ovog postupka, suštinski odgovaraju onima koji su već opisani u Koracima 3 i 4c; naknadni tretman kiselinom jedinjenja formule (XVIII), u jedinjenje formule (XIX) poželjno je da se obavlja u vodenom rastvoru sirćetne kiseline, na temperaturi oko 100°C.

U skladu sa Korakom 21, jedinjenje formule (XIX) reaguje sa pogodnim derivatim formule (XX), u prisustvu natrijum-hidrida, u pogodnom rastvaraču, npr. dietiletru, tetrahidrofuranu ili dioksanu, na temperaturi koja se kreće od oko -50°C do sobne temperature.

Radni uslovi Koraka 22 suštinski odgovaraju onima iz Koraka 1 ovog postupka.

Kao što je prethodno pokazano, ovako dobijena jedinjenja formule (I) mogu se lako konvertovati u nekoliko drugih jedinjenja formule (I) ovog pronalaska.

Kao primer, jedinjenja formule (I), u kojima R2predstavlja etoksi grupa, ili čak alkoksi grupa, mogu da se konvertuju u razne derivate u skladu sa metodama koje su dobro poznate u stanju tehnike za konvertovanje karboksiestarskih grupa (-COOR2) u karboksamide (-CONH2), N-supstituisane karboksamide (-CONHR") i karboksilne kiseline (-COOH), na primer kao što je opisano u Koracima 23, 24 i 25.

Radni uslovi su oni koji su dobro poznati u stanju tehnike, a mogu da ih čine, na primer, za konverziju karboksiestarske grupe u karboksamidnu grupu, reakcija sa amonijakom ili amonijum-hidroksidom, u prisustvu pogodnog rastvarača, kao što je niži alkohol, dimetilformamid ili njihova smeša; poželjno je da se reakcija vodi sa amonijum-hidroksidom u smeši metanol/dimetilformamid, na temperaturi koja se kreće od oko 50°C do oko 100°C.

Analogni radni uslovi se koriste pri dobijanju N-zasićenih karboksamida, gde se umesto amonijaka ili amonijum-hidroksida koristi pogodan primami amin. Slično, karboksiestarske grupe se mogu konvertovati u derivate karboksilne kiseline, pod uslovima bazne ili kisele hidrolize, što je dobro poznato u stanju tehnike.

U skladu sa Korakom 26. ovog postupka, jedinjenja formule (1), u kojima R2predstavlja hidroksi (-COOH), mogu se konvertovati u karboksamido derivate (-CONR'R") ili [-CON(OH)R"], gde su R" i R'" ranije naznačeni, obuhvatajući takođe jedinjeja u kojima R" i R"', zajedno sa atomom azota sa kojim su vezani, formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja sadrži dodatni heteroatom, koji se bira između N, 0 ili S.

Ova reakcija se obavlja u prisustvu amina formule (XXIII) ili jedinjenja formule (XXIV), prema potrebi, pod baznim uslovima, poželjno sa N,N-diizopropil-N-etilaminom ili trietilaminom, u pogodnom rastvaraču, kao što je dihlorometan, dimetilformamid, tetrahidrofuran ili dioksan, i u prisustvu pogodnog agensa za kondenzaciju, kao što je N,N'-dicikloheksilkarbodiimid (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (EDCI) ili O-(benzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilizouronijum tetrafluoroborat (TBTU), a može biti neophodno i u prisustvu katalitičke količine (benzotriazoM-iloksi)tripirolidinfosfonijum heksafluorofosfata (PyBOP).

Pored toga, jedinjenja formule (I), u kojima je R-NH- amino grupa (NH2), mogu se lako konvertovati u odgovarajuće karboksamido (-NHCOR) ili ureido

(-NHCONHR) derivate, kao što je opisano u Koracima 27. ili 28. ovog postupka, respektivno. Tipično, reakcija sa izocijanatom se obavlja u natrijum-hidridu, i u dimetirformamidu, dok se ona sa hloridom kiseline može obavljati u pogodnom rastvaraču, kao što je piridin, tetrahidrofuran, etilacetat ili dioksan, ili njihova smeša, na sobnoj temperaturi.

Jedinjenja formule (I) u kojima R-NH- predstavlja arilamino ili heteroarilamino grupa, mogu se lako dobiti preko odgovarajućeg jodo derivata, koji se za uzvrat može dobiti pomoću odgovarajućih jedinjenja formule (I) u kojima R-NH-predstavlja amino, kao u Koraku 29. ovog postupka.

Dobijanje jodo derivata se može obaviti u pogodnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran, dietiletar ili dimetoksietan, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do oko 70°C, u vremenu od oko 8 h do oko 48 h.

Naknadna konverzija ovog jodo-derivata se može obaviti u pogodnom rastvaraču, kao što je dimetilformamid, dimetoksietan ili acetonitril, u prisustvu katalitičkih količina paladijum-acetata, (2,2'-bis-(difenilfosf!no)-1,1'-binaftalina (BINAP), i baze, kao što je kalijum-karbonat, kalijum-fosfat ili cezijum-karbonat, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do 110° C, u vremenu koje se kreće od oko 2 do oko 24 h.

Jedinjenja formule (I), u kojima je R aril, a X je prosta veza, mogu se dobiti, kao što je opisano u Koraku 30, iz gore pomenutog jodo-derivata, reakcijom sa arilbomom kiselinom formule (XXVIII), u pogodnom rastvaraču, kao što je dimetilformamid, dihlorometan, metanol, dimetoksietan ili acetonitril, u prisustvu tri(dibenzilidenaceton)dipaladijuma(0) ili tetrakistrifenilfosfinopaladijuma [Pd(PPh3)4], opciono u prisustvu cezijum-fluorida, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do 100°C.

Jedinjenja formule (I), u kojima R-NH- predstavlja alkilamino, cikloalkilamino, cikloalkil-alkilamino, heterociklilamino, heterociklilalkilamino, mogu se dobiti iz odgovarajućeg jodo-derivata, kao što je opisano u Koraku 29a. ovog postupka. Reakcija se može voditi u pogodnom rastvaraču, kao što su dimetilformamid, dioksan ili acetonitril, ili bez rastvarača, na temperaturi koja se kreće od 40° do 120°C, u vremenu koje se kreće od 3 do 18 h.

Jedinjenja formule (I), u kojima R-NH- predstavlja amino, mogu se takođe konvertovati u odgovarajuće alkilamino ili arilmetilamino derivate formule (I), kao što je opisano u Koraku 31, radeći u pogodnom rastvaraču ili smeši rastvarača, koja se na primer sastoji od smeše 1:1:1 sirćetne kiseline, metanola i vode.

Jedinjenja formule (1), u kojima R-NH- predstavlja amino, mogu se takođe konvertovati u odgovarajuće cikloalkilamino ili heterocikloalkilamino derivate formule (I), kao što je opisano u Koraku 31 a, radeći u pogodnom rastvaraču, kao što je metilhlorid, acetonitril ili dimetilformamid.

Jedinjenja formule (I), u kojima R-X predstavlja alkiltio grupa (R-S-), mogu se konverotavi u brojna jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -NH-, prvo oksidacijom alkiltio u alkilsulfonil grupu, pa njenom zamenom sa N-NH- grupom, kao što je opisano u Koraku 32. Korak oksidacije se može obaviti sa oksonom, u prisustvu pogodnog rastvarača, poželjno dimetirformamida ili dimetilsulfoksida, na sobnoj temperaturi. Naknadna zamena alkilsulfonil grupe sa pogodnim amino derivatom, poželjno je da se obavlja u prisustvu dimetilsulfoksida, dimetirformamida, dimetoksietana, dioksana, acetonitrila, N-metil-pirolidinona ili diglima, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature pa do oko 100°C.

Interesantno je da kada se ovaj poslednji Korak izvodi u prisustvu dimetilsulfoksida kao pogodnog rastvarača, ovaj rastvarač istovremeno može da posluži kao oksidacioni agens, koji je u stanju da da željena jedinjenja u kojima A predstavlja -CH=CH- grupa. Ovi poslednji derivati se zatim izdvoje iz reakcione smeše u skladu sa konvencionalnim metodama, na primer hromatografijom ili preparativnom HPLC.

U skladu sa Korakom 33 ovog postupka, jedinjenja formule (I) u kojima X predstavlja -0-, mogu se lako dobiti reagovanjem sulfonil derivata sa derivatom alkohola ili fenola, formule (XXX), gde je R isto kao u formuli (I). Ova reakcija se može obaviti u prisustvu baze, kao što je kalijum- ili natrijum-karbonat, butil-litijum, litijum-amid, natrijumJiidrid i slično, u pogodnom rastvaraču, kao što je dimetirformamid ili tetrahidrofuran, radeći na temperaturi koja se kreće između sobne temperature i oko 100°C.

Alternativno, u skladu sa Koracima 4d i 33a, jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -O-, mogu se dobiti reagovanjem jedinjenja formule (Va) i (Vb) sa metilizoureasulfatom, radeći u pogodnom rastvaraču, kao što je dioksan, dimetilformamid ili acetonitril, u prisustvu baze, kao što je natrijum- ili kalijum-karbonat, na temperaturi koja se kreće od 50°C do 100°C. Jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -O-, a R je vodonik, mogu se dobiti reagovanjem jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -O-, a R je metil, sa trimetilsilil-hioridom, u prisustvu natrijum-jodida, u pogodnom rastvaraču, kao što su dioksan, tetrahidrofuran ili acetonitril, na sobnoj temperaturi. Jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -0-, a R je trifluorosulfonil grupa, mogu se dobiti reagovanjem jedinjenja formule (I) u kojima X predstavlja -O-, a R je vodonik, sa agensom za triflatizaciju, kao što je anhidrid trifluorometansulfonske kiseline, trifluorometansulfonilhlorid ili N-fenil-bis(trifluorometansulfonimid), opciono u prisustvu baze, kao što je trietilamin ili N,N-diizopropil-N-etilamin (DIPEA), u pogodnom rastvaraču, kao što je dihlorometan, tetrahidrofuran ili dioksan, na temperaturi koja se kreće od -78°C do sobne temperature.

Jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -O-, a R je opisano gore, mogu se dobiti reagovanjem jedinjenja formule (I), u kome X predstavlja -O-, a R je trifluorometansulfonil grupa, sa alkoholom ili fenolom formule (XXX), gde je R kao u formuli (I), radeći u pogodnom rastvaraču, kao što je dioksan, tetrahidrofuran, dimetoksietan, acetonitril, dimetilformamid ili dimetilsulfoksid, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do oko 90° C, opciono u prisustvu baze, kao što je kalijum-karbonat, kalijum-terc-butoksid ili natrijum-hidrid.

Alternativno, reakcija se može obavljati u pogodnom rastvaraču, kao što je toluen, dimetilformamid, dimetoksietan ili acetonitril, u prisustvu paladijum-acetata, (±)-BINAP i baze, kao što je kalijum-fosfat (K3PO4) ili kalijum- ili cezijum-karbonat (K2CO3ili CS2CO3), na temperaturi koja se kreće od 0°C do 100°C (Korak 33).

Jedinjenja formule (I), u kojima X predstavlja -MH-, a R je opciono supstituisana alkil, cikloalkil, heterociklil, cikloalkil-alkil ili heterociklilalkil grupa, mogu se dobiti reagovanjem jedinjenja formule (I), u kome X predstavlja -O-, a R je trifluorometansulfonil grupa, sa aminom formule R-NH2(XXVII), gde je R isto kao u formuli (I), radeći u pogodnom rastvaraču, kao što je dioksan, tetrahidrofuran, dimetoksietan, acetonitril, dimetilformamid ili dimetilsulfoksid, na temperaturi koja se kreće od sobne temperature do 90°C, opciono u prisustvu baze, kao što je kalijum-karbonat ili trietilamin.

Konačno, bilo koje od gornjih jedinjenja formule (I), gde A predstavlja -CH2-CH2-grupa, može se podvrgnuti dehidrogenaciji, u prisustvu opcione podrške paladijuma ili platine kao katalizatora, tako da se dobije odgovarajući aromatični derivat, u kome A predstavlja -CH=CH-, kao u Koraku 34. ovog postupka.

Za bilo koji specifični primer dobijanja jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska i njihovu konverziju u jedinjenja formule (I), videti eksperimentalni odeljak.

Intermedijama jedinjenja formule (Va) ili (Vb), u skladu sa Korakom 3. ovog postupka a gde Ripredstavlja atom vodonika ili opciono, supstituisanu grupu, koja se bira između ravan ili račvast CrC6alkil, C3-C6cikloalkil, aril, arilalkil, heterocikli ili heterociklalkil, su nova, pa stoga predstavljaju sledeći predmet ovog pronalaska.

U skladu sa bilo kojom varijantom postupka za dobijanje jedinjenja formule (I), polazni materijal i bio koji od reaktanata je poznat, ili se lako dobija u skladu sa poznatim metodama.

Kao primer, 2-etoksi-2-cikloheksen-1-on je poznato jedinjenje, koje se lako može dobiti refluksovanjem cikloheksan-1,2-diona sa etanolom, u toluenu, u prisustvu katalitičke količine p-toluensulfonske kiseline (TsOH).

Slično, 2-metoksi-4,4-dimetil-2-cikloheksen-1-on je poznato jedinjenje, koje se može dobiti oksidacijom komercijalno dostupnog 4,4-dimetil-2-cikloheksen-1-ona, pa naknadnim tretmanom epoksida sa kalijum-hidroksidom u metanolu.

Konačno, 2-metoksi-5,5-dimetil-2-cikloheksen-1-on se može dobiti, u skladu sa sledećom shemom, iz komercjalno dostupnog 5,5-dimetil-cikloheksan-1-ona:

Jedinjenja formule (III), (VI), (VII), (XVI), (XXII), (XXIII), (XXIV), (XV), (XXVI), (XXVII), (XXVIII), (XXIX) i (XXX) su poznata, ili se lako dobijaju u skladu sa poznatim metodama.

Kao primer, kada se dobija gvanidino derivat formule (VI), u kome je R komleksan hemijski ostatak, može se slediti sledeca shema:

Iz svega ovoga jasno je veziranoj osobi da kada se dobijaju jedinjenja formule (I), u skladu sa bilo kojom od gore pomenutih varijanti, opcione funkcionalne grupe u polaznim materijalima ili njihovim intermedijarima, koje bi mogle dovesti do neželjenih sporednih reakcija, treba da su propisno zaštićene, u skladu sa konvencionalnim tehnikama. Slično, konverzija ovih poslednjih u slobodno deprotektovana jedinjenja, može da se obavi poznatim procedurama.

Kao što će se lako razumeti, ako se jedinjenja formule (I), dobijena u skladu sa gore opisanim postupkom, dobijaju kao smeša izomera, njihovo razdvajanje u pojedinačne izomere formule (I), u skladu sa konvencionalnim tehnikama, je unutar obima ovog pronalska.

Konvencionalne tehnike za razdvajanje racemata su na primer, delimična kristalizacija derivata dijastereomemih soli, ili preparativna hiralna HPLC.

Pored toga, jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska se mogu takođe dobiti u skladu sa tehnikama kombinatorijalne hernije, dobro poznatim u stanju tehnike, na primer, obavljanjem gore pomenutih reakcija između nekoliko intermedijara na serijski način i radeći pod uslovima sinteze na čvrstoj fazi (SPS).

Za opšte upoznavanje sa dobijanjem jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska u skladu sa tehnikom kombinatorijalne hernije, videti eksperimentalni odeljak.

Dakle, sledeći predmet ovog pronalaska je biblioteka jednog ili više jedinjenja formule (1a) ili (1b)

gde su

R je vodonik, ili opciono supstituisana grupa, koja se bira između ravnog i račvastog Ci-Cealkil, C3-C10cikloalkil, cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil;

X je prosta veza ili dvovalentni radikal koji se bira između -NR'-, -CONR'-, - NH-CO-NH-, -0-, -S- ili -SO2-, gde je R' vodonik ili opciono supstituisana grupa, koja se bira između: ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3-C6cikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R i R' mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono može da sadrži još jedan heteroatom, koji se bira između N, 0 ili S;

Rivezan za bilo koji od atoma azota u pirazolskom prstenu, kao u formulama (la) ili (lb), predstavlja atom vodonika ili opciono supstituisanu grupu koja se bira između: ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3.Cecikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili kao u formuli (lb), Ripredstavlja dvovalentnu -

(CH2)n-NH- grupu, koja je povezana sa R2, gde je n jednako 2 ili 3;

R2je grupa koja koja se bira između -NR"R"', -N(OH)R", -OR" ili -R", gde su R" i R", svaki nezavisno, vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između ravan ili račvast Ci-Cealkil, C3.Cecikloalkil, cikloalakil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R" i R'" mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono sadrži još jedan heteroatom, koji se bira između N, O ili S;

A je dvovalentna grupa, koja se bira između -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2-C(CH3)2-, -C(CH3)2-CH2- ili -CH=CH-;

ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.

Farmakologija

Jedinjenja formule (I) su aktivna kao inhibitori protein kinaze, pa su stoga korisna, na primer, za ograničavanje neregulisane proliferacije ćelija tumora.

U terapiji, ona se mogu koristiti u tretmanu raznih tumora, kao što su oni ranije pomenuti, a i u tretmanu drugih proliferativnih poremećaja, kao što su psorijaza, proliferacija vaskulamih glatkih ćelija povezana sa aterosklerozom i stenoza i restenoze posle hirurških zahvata, i u tretmanu Alzheimer-ove bolesti.

Inibitoma aktivnost navodnih inhibitora CDK/ciklina i snaga odabranih jedinjenja određuje se metodom testa zasnovanog na upotrebi tehnologije SPAA (Amersham Pharmacia Biotech).

Taj test se sastoji od transfera radioaktivno obeleženog fosfatnog ostatka pomoću kinaze na biotinilovani substrat. Dobijeni biotinilovani proizvod, obeležen sa ^P, ostavi se da se veže za SPA perlice obložene streptavidinom (kapacitet biotina 130 pmol/mg), a emitovana svetlost se meri u scintilacionom brojaču.

Test inhibiciie aktivnosti CDK2/ ciklin A

Reakcija kinaze:4 pM u interno pripremljenom biotinilovanom histonu Hl (Sigma, # H-5505) kao substratu, 10 1M ATP (0,1 uCi 33Py-ATP), 1,1 nM kompleks ciklin A/CDK2, inhibitor u konačnoj zapremini od 30 uL pufera (TRIS HCI 10 mM pH 7,5, MgCfe 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA) se dodaje u svaki bazenčić ploče sa 96 bazeniča, sa dnom oblika U. Posle 60 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavlja dodavanjem 100 uL pufera PBS, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM hladnog ATP, 0,1% Triton X100 i 10 mg/mL SPA perlica obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije, izvuče se 110 uL suspenzije i prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h ploče se očitavaju 2 min u radioaktivnom brojaču Packard TOP-Count.

Određivanje IC50.Inhibitori se testiraju sa raznim koncentracijama, koje se kreću od 0,0015 do 10 uM. Eksperimentalni podaci se analiziraju u kompjuterskom programu GraphPad Prizm, koristeći logističku jednačinu sa četiri parametra:

y = dno + (vrh - dno)/(1+10A)[(loglC5o- x)(nagib)]

gde je x logaritam koncentracije inhibitora, y je odgovor; y počinje sa dna i ide do vrha u sigmoidnom obliku.

Izračunavanje K, :

Eksperimentalna metoda:Reakcija se vodi u puferu (10 mM Tris pH 7,5, 10 mM MgCb, 0,2 mg/mL BSA, 7,5 mM DTT)) koji sadrži 3,7 nM enzim, histon i ATP (konstantan odnos hladnog/obeleženog ATP je 1:3000). Reakcija se zaustavlja sa EDTA, a substrat se hvata na fosfomembrani (Multiscreen, ploče sa 96 bazenčića, iz firme Millipore). Posle obilnog ispiranja, ove Multiscreen ploče se očitavaju na brojaču Top Counter. Kontrola (vreme nula) se meri za svaku koncentraciju ATP i histona.

Plan eksperimenta:Brzine reakcije se određuju pri četiri koncentracije ATP, substrata (histon) i inhibitora. Načini se matrica koncentracije sa 80 tačaka oko respektivnih vrednosti ATP i Kmsubstrata i IC50vrednosti za inhibitor (0,3,1,3, 9-struka Kmili vrednosti IC50). Preliminarni vremenski tok eksperimenta, u odsustvu inhibitora, a pri različitim koncentracijama ATP i substrata, dozvoljava da se izabere jedinstveno završno vreme (10 min) u linearnom opsegu reakcije, eksperimenta za određivanje Kj.

Ocene kinetičkog parametra:Kinetički parametri su ocenjivani simultanom nelinearnom regresijom srednjih kvadrata, koristeći (jedn. 1) (kompetitivni inhibitor u odnosu na ATP, nasumični mehanizam), koristeći kompletan set podataka (80 tačaka):

gde su, A = [ATP], B = [substrat], I = [inhibitor], Vm= maksimalna brzina, Ka, Kb, K konstante disocijacije ATP, substrata i inhibitora, respektivno, a i p su faktori kooperativnosti vezivanja između substrata i ATP, i vezivanja substrata i inhibitora, respektivno.

Pored toga, odabrana jedinjenja su karakterisana na panelu ser/tre kinaza, tesno vezanih za ćelijski ciklus (CDK2/ciklin E, CDK1/ciklin B1, CDK5/p25, CDK4/ciklin D1), a takođe i na specifičnost MAPK, PKA, EGFR, IGF 1-R, Aurora-2 i Cdc 7

Test inhibicije aktivnosti CDK2/ Ciklin E:

Reakcija kinaze:10 uM sveže pripremljeni biotinilovani histon H1 (Sigma, #H-5505) kao substrat, 30 uM ATP (0,3 uCi ^Pr-ATP), 4 ng kompleksa GST-ciklin E/CDK2, i inhibitor u konačnoj zapremini od 30 uL pufera (TRIS HC110 mM pH 7,5, MgCfe10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA) dodaju se u svaki od 96 bazenčića, dna oblika U. Posle 60 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavlja dodavanjem 100 uL PBS pufera, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM hladni ATP, 0,1% Triton X100 i 10 mg/mL perlica SPA obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije, izvuče se 110 pL ove suspenzije i prebaci na OPTIPLATe ploču sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h ploče se 2 min očitavaju na radioaktivnom čitaču Packard TOP-Count.

Određvanje IC50:videti gore.

Test inhibicije aktivnosti CDK1/ Ciklin B1:

Reakcija kinaze:4 pM sveže pripremljeni biotinilovani histon H1 (Sigma, # H-5505) substrat, 20 uM ATP (0,2 uCi ^Pr-ATP), 3 ng kompleksa ciklin B/CDK1, inhibitor u konačnoj zapremini 30 uL pufera (TRIS HC110 mM pH 7,5, MgCI210 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA), dodaju se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 20 min inkubacije na sobnoj temperaturi (ST), reakcija se zaustavi sa 100 uL PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 uM ATP, koji sadrži 1 mg perlica SPA. Tada se zapremina od 110 uL prebaci na Optiplate. Posle 20 min inkubacije radi zahvatanja substrata, 100 uL 5 M CsCI se doda, da se omogući smirivanje perlica na vrhu Optiplate, pa se ostave da stoje 4 h, pre brojanja raadioaktivnosti u instrumentu Top-Count.

Određivanje IC50:videti gore.

Test inhibicije aktivnosti CDK5/ p25:Test inhibicije aktivnosti CDK5/p25 se obavlja u skladu sa sledećim protokolom.

Reakcija kinaze:10 uM biotinilovani histon H1 (Sigma, #H-5505) substrat, 30 uM ATP (0,3 uCi ^Pr-ATP), 15 ng kompleksa CDK5/p25, inhibitor u konačnoj zapemini 30 uL pufera (TRIS HCI 10 mM pH 7,5, MgCI210 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA), dodaju se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 35 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi sa 100 uL PBS pufera koji sadrži 32 mM EDTA + 500 uM "hladnog" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL perlica SPA, obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije izvuče se 110 uL suspenzije, pa se prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h, ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Određivanje IC50.videti gore.

Test inhibicije aktivnosti CDK4/ ciklin D1:

Reakcija kinaze:0,4 uM mišji GST-Rb (769-921) (# sc-4112, iz firme Santa Cruz) substrat, 10 uM ATP (0,5 uCi ^Pr-ATP), 100 ng bakulovirusa izlučenog iz GST-CDK4/GST-ciklin D1, pogodna koncentracija inhibitora u konačnoj zapremini od 50 uL pufera (TRIS HCI 10 mM pH 7,5, MgCfe 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA), doda se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 40 min inkubacije na 37°C, reakcija se zaustavi sa 20 uL 120 mM EDTA.

Zahvatanje:Iz svakog bazenčića se prebaci 60 uL na ploču Multi Scan, da se omogući vezivanje substrata za fosfocelulozni firter. Ploče se zatim 3 puta operu sa 150 uL/bazenčić PBS, oslobode Ca + F/MgX i filtriraju u sistemu MultiScreen filtration.

Detekcija:Filtri se ostave da se osuše na 37°C, zatim se doda 100 uL/bazenčić scintilanta, a fragment Rb obeležen sa ^P se detektuje brojanjem radioaktivnosti u instrumentu Top-Count.

Određivanje IC50:Videti gore.

Test inhibicije aktivnosti MAPK:

Reakcija kinaze:10 uM sveže pripremljeni biotinilovani MBP (Sigma, #M-1891) kao substrat, 15 uM ATP (0,15 uM 33Py-ATP), 30 ng GST-MAPK (Upstate Biotechnologv. #14-173), inhibitor u konačnoj zapremini od 30 uL pufera (TRIS HC110 mM pH 7,5, MgCfe 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA), dodaju se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 35 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi dodavanjem 100 uL PBS pufera, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM "hladnog" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL perlica SPA, obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije izvuče se 110 uL suspenzije, pa se prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h, ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Određivanje IC50:videti gore.

Test inhibicije aktivnosti PKA:

Reakcija kinaze:10 uM sveže pripremljeni biotinilovani histon (Sigma, #H-5505) kao substrat, 10 uM ATP (0,2 uM ^-ATP), 0,45 jed. PKA (Sigma, #2645), inhibitor u konačnoj zapremini od 30 uL pufera (TRIS HCI 10 mM pH 7,5, MgCb 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/mL BSA), dodaju se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 90 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi dodavanjem 100 uL PBS pufera, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM "hladnog" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL perlica SPA, obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije izvuče se 110 uL suspenzije, pa se prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h, ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Određivanje IC50:videti gore.

Tesf inhibicije aktivnosti EGFR:

Reakcija kinaze:10 uM sveže pripremljeni biotinilovani MBP (Sigma, # M-1891) kao substrat, 2 uM ATP (0,04 uCi ^Pr-ATP), 36 ng GST-EGFR izlučenih iz ćelija insekta, inhibitor u konačnoj zapremini od 30 uL pufera (Hepes 50 mM pH 7,5, MgCI23 mM, MnCI23 mM, DTT 1 mM, NaV033 uM + 0,2 mg/mL BSA), dodaju se u svaki od 96 bazenčića, sa dnom oblika U. Posle 20 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi dodavanjem 100 uL PBS pufera, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM "hladni" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL perlica SPA, obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije izvuče se 110 uL suspenzije, pa se prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h, ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Određivanje /C50-videti gore.

Test inhibicije aktivnosti IGF1- R.

Ovaj test inhibicije aktivnosti IGF 1-R se obavlja u skladu sa sledećim protokolom.

Aktiviranje enzima:IGF1-R se mora aktivirati auto-fosfoirlovanjem, pre početka eksperimenta. Neposredno pred test, koncentracija rastvora enzima (694 nM) se inkubira pola sata na 28°C, u prisustvu 100 uM ATP, pa se zatim dovede na radno razblaženje u naznačenom puferu.

Reakcija kinaze:10 pM biotinilovani peptid IRSI (PRIMM) kao substrat, 0-20 uM inhibitor, 6 uM ATP, 1 uCi ^P-ATP i 6 nM GST-IGF1-R (prethodno inkubiran 30 min na sobnoj temperaturi, sa "hladnim" 60 uM ATP) u konačnoj zapremini 30 uL pufera (50 mM HEPES pH 7,9, 3 mM MnCb, 1 mM DTT, 2 uM NaV03), dodaju se u svaki od 96 bazenčića ploče, sa dnom oblika U. Posle 35 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi dodavanjem 100 uL PBS pufera, koji sadrži 32 mM EDTA, 500 uM "hladnog" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL SPA perlica, obloženih streptavidinom. Posle 20 min inkubacije izvuče se 110 uL suspenzije, pa se prebaci na OPTIPLATE sa 96 bazenčića, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h, ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Test inhibicije aktivnosti Aurora- 2:

Reakcija kinaze:8 uM biotinilovani peptid (četiri ponavljanja LRRVVSLG), 10 uM ATP (0,5 uCi ^Pv-ATP), 7,5 ng Aurora-2 inhibitora u konačnoj zapremini 30 uL pufera (HEPES 50 mM pH 7,0, MgCI2 10 mM, 1 mM DTT, 0,2 mg/mL BSA, 3 uM ortovanadat) dodaju se u svaki od 96 bazenčića ploče sa dnom oblika U. Polse 60 min inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se zaustavi, a biotinilovani peptid zahvati dodavanjem 100 uL suspenzije perlica.

Raslojavanje:U svaki bazenić se doda 100 uL 2,5 M CsCI, pa se ostavi da stoji 4 h, pre nego što se radioaktivnost broji sa instrumentom Top-Count.

Određivanje IC50:videti gore.

Test inhibicije aktivnosti Cdc7/ dbf4.Test inhibicije aktivnosti Cdc7/dbf4 obavljen je u skladu sa sledećim protokolom.

Substrat biotin-MCM2 se trans-fosforiluje sa kompleksom Cdc7/Dbf4, u prisustvu ATP obeleženog sa ^Pr-ATP. Fosforilovani substrat biotin-MCM2 se zatim zahvata na perlicama SPS, obloženim streptavidinom, a domašaj fosforilovanja se vrednuje (3-brojanjem.

Test inhibicije aktivnosti Cdc7/dbf4 se obavlja na ploči sa 96 bazenčića, u skladu sa sledećim protokolom.

U svak bazenčić ploče se dodaje:

- 10 pL substrata (biotinilovani MCM2, konačna koncentracija 6 uM),

- 10 uL enzima (Cdc7/Dbf4, konačna koncentracija 17,9 nM),

- 10 uL testiranog jedinjenja (12 rastućih koncentracija u opsegu od nM do uM, kako bi se generisala kriva doza-odgovor), - 10 pL smeše "hladnog" ATP (konačna koncentracija 2 pM) i radioaktivnog ATP (1/5000 molski odnos sa "hladnim" ATP); to se koristi za početak reakcije, koja je ostavljena da se odigrava na 37°C.

Substrat, enzim i ATP se razblažuju u 50 mM HEPES pH 7,9, koji sadrži 15 mM MgCI2, 2 mM DTT, 3 pM NaV03, 2 mM glicerofosfat i 0,2 mg/mL BSA. Rastvarač za testirana jedinjenja je sadržao takođe i 10% DMSO.

Posle 60 min inkubacije, reakcija se zaustavlja dodavanjem u svaki bazenčić 100 pL PBS pH 7,4, koji sadrži 50 mM EDTA, 1 mM "hladni" ATP, 0,1% Triton X-100 i 10 mg/mL perlica SPS, obloženih streptavidinom.

Posle 20 min inkubacije, izvuče se 110 uL ove suspenzije i prebaci u svaki od 96 bazenčića OPTIPLATE, koji sadrže 100 uL 5 M CsCI. Posle 4 h ploče se 2 min očitavaju na čitaču radioaktivnosti Packard Top-Count.

Određivanje IC50. 'videti gore.

Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu ordinirati ili kao samo jedan agens, ili alternativno, u kombinaciji sa poznatim tretmanima protiv kancera, kao što su režimi radijacione terapije ili hemoterapije, u kombinaciji sa citostaticima ili citotoksičnim agensima, agensima tipa antibiotika, agensima za alkilovanje, antimetaboličkim agensima, hormonalnim agensima, imunološkim agensima, agensima tipa interferona, inhibitorima ciklooksigenaze (npr. inhibitori COX-2), inhibitorima matrične metaloproteinaze, inhibitorima telomeraze, inhibitorima tirozin kinaze, agensima za receptore faktora rasta, anti-HER agensima, anti-EGFR agensima, agensima anti-angiogeneze (npr. inhibitori angiogeneze), inhibitorima farnezil transferaze, inhibitorima transdukcionog puta signalizacije ras-raf, inhibitorima ćelijskog ciklusa, inhibitorima drugih CDK, agensima za vezivanje tibulina, inhibitorima topoizomeraze I, inhibitorima topoizomeraze II i slično.

Ako se formulišu kao fiksna doza, ti kombinovani proizvodi koriste jedinjenja iz ovog pronalaska unutar opsega za doziranje koji je opisan niže, a drugi farmaceutski aktivni agens je unutar dozvoljenog opsega doze.

Jedinjenja formule (I) se mogu koristiti sekvencijalno sa poznatim agensima protiv kancera, kada nije dostupna formulacija kombinacije.

Jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska, pogodna za ordiniranje sisarima, npr. humanim bićima, a mogu se ordinirati uobičajenim putevima i sa nivoom doze koji zavisi od starosti, mase, stanja pacijenta i puta ordiniranja.

Na primer, pogodna doza, prilagođena oralnom ordiniranju jedinjenja formule (I), može biti u opsegu od oko 1 do oko 500 mg po dozi, od 1 do 5 puta na dan.

Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu ordinirati u raznovrsnim oblicima za doziranje, npr. oralno, u obliku tableta, kapsula, tableta obloženih šećerom ili filmom, tečnih rastvora ili suspenzija; rektalno u obliku supozitorija; parenteralno, npr. intramuskularnom ili intravenoznom i/ili intratekalnom i/ili intraspinalnom injekcijom, ili infuzijom.

Ovaj pronalazak obuhvata takođe farmaceutske preparate koji sadrže jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim dodatkom, koji može biti nosač ili razblaživač.

Farmaceutski preparati koji sarže jedinjenja iz ovog pronalaska obično se dobijaju tako što se slede konvencionalne metode, a ordiniraju se u prigodnom farmaceutskom obliku.

Na primer, čvrsti oralni oblici mogu da sadrže, zajedno sa aktivnim jedinjenjem razblaživače, npr. laktozu, dekstrozu, saharozu, celulozu, kukuruzni škrob ili krompimi škrob; lubrikante, npr. silicijum-dioksid, talk, stearinsku kiselinu, magnezijum- ili kalcijum-stearat i/ili polietilenglikole; vezujuće agense, npr. škrob, gumiarabiku, želatin, alginate ili natrijum-skrobglikolat; penušave smeše; bojene materije; zaslađivače; agense za vlaženje, kao što su lecitin, polisorbati, laurilsulfati; i obično, netoksične i farmakološki neaktivne supstance, koje se koriste u farmaceutskim formulacijama. Ovi farmaceutski preparati se mogu proizvoditi na poznat način, na primer, mešanjem, granuliranjem, tabletiranjem, oblaganjem šećerom ili oblaganjem filmom.

Tečne disperzije za oralno ordiniranje mogu biti, npr. sirupi, emulzije i suspenzije.

Za primer, sirupi mogu da sadrže kao nosač saharozu ili saharozu sa glicerinom i/ili manitol i sorbitol.

Suspenzije i emulzije mogu da sadrže, na primer, nosače, prirodne gume, agar, natrijum-alginat, pektin, metilcelulozu, karboksimetilcelulozu ili polivinilalkohol.

Suspenzije ili rastvori za intramuskulame injekcije mogu da sadrže, zajedno sa aktivnim jedinjenjem, farmaceutski prihvatljiv nosač, npr. sterilnu vodu, maslinovo ulje, etiloleat, glikole, npr. propilenglikol i, ako se želi, pogodnu količinu lidokain hidrohlorida.

Rastvori za intravenozne injekcije ili infuzije mogu da sadrže kao nosač sterilnu vodu, ili je poželjno da budu u obliku sterilnih, izotoničnih, slanih rastvora u vodi, ili kao nosač mogu da sadrže propilenglikol.

Supozitorije mogu da sadrže, zajedno sa aktivnim jedinjenjem, farmaceutski prihvatljiv nosač, npr. kakaobuter, polietilenglikol, polioksietilensorbitan, estar masne kiseline, surfaktant ili lecitin.

Sa ciljem da se bolje ilustruje ovaj pronalazak, a bez postavljanja bilo kakvog ograničenja na njih, daju se sledeći primeri.

Primeri

Dobijeno je nekoliko jedinjenja formule (I), dakle, koja obuhvataju ona sa formulom (la) i (lb) iz ovog pronalaska. Dok su neka od njih specifično imenovana i navedena u eksperimentalnom odeljku koji sledi, većina je pogodno identifikovana navedenim sistemom kodiranja u tabelama eksperimentalnog odeljka, zajedno sa njihovim analitičkim podacima.

Svaki kod, koji nedvosmisleno identifikuje samo jedno specifično jedinjenje formule (I), sastoji se od pet simbola B-X-M (C)-D.

Kod B predstavlja R supstituent, kao u formuli (I), koji je spojen sa ostatkom molekula preko X veze; svaka B grupa je predstavljena odgovarajućom hemijskom formulom u Tabeli I koja sledi, ukazujući takođe na mesto spajanja sa ostatkom molekula X-M.

Kod X upravo predstavlja X grupa u formuli (I); njegova značenja su predstavljena u Tabeli II, koja sledi i takođe ukazuje na njeno mesto spajanja sa ostatkom molekula M.

Kod C predstavlja Rigrupu, spojenu uz ostatak molekula, preko bilo kog od atoma azota u pirazolu, kao u formuli (I). Svaka C grupa predstavljena je odgovarajućom hemijskom formulom u Tabeli III koja sledi, ukazujući takođe na mesto njenog spajanja sa ostatkom molekula M.

Kod D predstavlja R2grupa, spojena sa ostatkom molekula preko karbonilne grupe, kao u formuli (I). Svaka D grupa je predstavljena odgovarajućom hemijskom formulom u Tabeli IV koja sledi, ukazujući takođe na mesto njenog spajanja sa ostatkom molekula M.

Konačno, kod M se odnosi na centralno jezgro molekula (I), koje nosi karbonilnu grupu u položaju 3. Iz svega iznetog gore, verziranoj osobi je jasno da je M supstituisan sa grupama -X- (kod X), R^(kod C) i R2(kod D), kao što je prikazano u formuli (I); svaka M grupa je predstavljena njenom odgovarajućom hemijskom formulom u Tabeli V, gde se takođe ukazuje na položaje drugih supstituenata.

Dakle, sistem kodiranja koji se ovde koristi za neka jedinjenja formule (I) može se ukratko sažeti kao što sledi:

Za primer, koji nije namenjen ograničavanju obima ovog pronalaska, jedinjenje B66-X0 M00 (C01)-D01 (videti Primer 3) koje predstavlja derivat pirazolo-hinazolina formule (la), u kome centralno jezgro predstavlja ostatak M00 iz Tabele V, R je grupa formule B66 iz Tabele I, X je dvovalentna grupa X00 iz Tabele II, R^je grupa C01 iz Tabele III, a R2je grupa D01 iz Tabele IV, i ima formulu:

Iz svega ovog gore, jasno je verziranoj osobi da kada su Ri i R2spojeni zajedno, kao u formuli (lb), da je ovaj dodatni ciki već uključen u strukturu M ostatka, pa stoga kodovi za C i D nedostaju.

Jedinjenja iz ovog pronalaska, dobijena u skladu sa sledećim primerima, takođe su karakterisana pomoću analitičkih podataka za<1>H NMR i/ili HPLC/MS; HPLC/MS podaci su sakupljeni sledeći bilo koju od metoda 1, 2 ili 3.

HPLC/ MS. Metoda 1.Oprema za HPLC se sastojala od sistema VVaters 2790 HPLC, opremljenog sa detektorom VVaters 996 PDA i varijantom Micromass. Maseni spektrometar za jedinstveni kvadrupol ZQ, je opremljen elektrosprejom kao izvorom jona (ESI). Kontrola instrumenata, akvizicija podataka i obrada podataka je obavljena sa softverom Empower and MassLynx 4.0.

HPLC je obavljana na 25°C, sa protokom 1 mL/min, koristeći kolonu RP18 VVaters X Terra (4,6*50mm, 3,5 pm). Mobina faza A bio je 5 mM amonijum-acetat u puferu (pH 5,5 sa sirćetna kiselina/acetonitrilom 95:5), a mobina faza B bila je smeša voda/acetonitril (5:95); gradijent je bio od 10 do 90% B za 8 min, zatim 2 min držanja 90% B. Injekciona zapremina je bila 10 uL.

Maseni spektrometar je radio u varijanti pozitivnig i negativnog jona, napon na kapilari je podešen na 2,5 K, temperatura izvora bila je 120°C; konus je bio 10 V; pri punom skenovanju opseg mase je bio podešen od 100 do 800 a.j.m.

HPLC, metoda 2.Oprema HPLC se sastojala od sistema VVaters 2790 HPLC, opremljenog sa detektorom 996 VVaters PDA i varijantom Micromass. Maseni spektrometar za samo jedan kvadrupol ZQ, opremljen je sa elektrosprejom (ESI) kao izvorom jona. Kontrolu instrumenta, akviziciju podataka i obradu podataka obezbeđivao je softver Empovver i MassLynx 4.0.

HPLC je obavljana na 25°C, sa protokom 1 mL/min, koristeći kolonu RP18 VVaters X Terra (3,0x30 mm, 3,5 pm). Mobina faza A bio je 5 mM amonijum-acetat u puferu (pH 5,5 sa sirćetna kiselina/acetonitrilom 95:5), a mobina faza B bila je smeša voda/acetonitril (5:95); gradijent je bio od 10 do 90% B za 4 min, zatim 1 min držanja sa 90% B. Injekciona zapremina je bila 10 pL.

Maseni spektrometar je radio u varijanti pozitivnig i negativnog jona, napon na kapilari je podešen na 2,5 K, temperatura izvora bila je 120°C; konus je bio 10 V; pri punom skenovanju opseg mase je bio podešen od 100 do 800 a.j.m.

HPLC/ MS, metoda 3.Maseni spektri su registrovani na masenom spektrometru Finnigan LCQ Ion Trap, koristeći jonizacionu tehniku elektrospreja (ESI), sa detekcijom pozitivnih i negativnih jona. Maseni spektrometar je direktno povezan sa sistemom SSP4000 HPLC (Thermo Separation), opremljenim sa autosamplerom LcPal (CTC Analvtic) i detektorom W 6000LP PDA (Thermo Separation). Kontrola instrumenta, akvizicija i obrada podataka su obavljani korišćenjem softvera Ycalibur 1.2. HPLC je obavljana na sobnoj temperaturi, sa protokom 1 mL/min, koristeći kolonu RP CIS VVaters Zorbax C18 (4,6x50mm; 1,8 pm).

Mobina faza A bio je 5 mM amonijum-acetat u puferu (pH 5,5 sa sirćetna kiselina/acetonitrilom 90:10), a mobina faza B bio je 5 mM amonijum-acetat u puferu (pH 5,5 sa sirćetna kiselina/acetonitrilom 10:90), (5:95); gradijent je bio od 0 do 100% B za 7 min, zatim 2 min držanja 100% B, pre uravnotežavanja. Ukupno LC vreme je 12 min. Injekciona zapremina je bila 10 pL. Detekcija sa UV je obavljana između 215 i 400 nm.

Joni su generisani pod sledećim uslovima: napon ESI raspršivača je 4,0 kV, temperatura zagrejane kapilare 255°C, pokrivni gas je azot, sa pritiskom 5,0 bar. Korišćena je varijanta detekcije sa poptunim skenovanjem (od 50 do 1000 a.m.j.), sa MS/MS analizom većine intenzivnih jona (normalizovana energija sudara: 35%).

UV detekcija: 215-400 nm.

Primer 1

2- etoksicikloheks- 2- en- 1 - on

Rastvori se 50 g (0,45 mol) 1,2-dicikloheksandiona u smeši 1L toluena i 0,5 L etanola. Doda se 10 g p-toluensulfonske kiseline, pa se rastvor 2 dana zagreva pod refluksom (TLC, hloroform/metanol 6/1). Zatim se ispari rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu, pa opere zasićenim rastvorom NaHC03. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i koncentriše. Sirovi ostatak se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom, uz eluiranje sa smešom cikloheksan/etilacetat 98/2 (6% prinos, u obliku ulja).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,20 (t, 3H), 2,33-2,39 (m, 6H), 3,67 (q, 2H), 5,97 (t, 1H).

Primer 2

etil ( 3- etoksi- 2- oksocikloheks- 3- en- 1 - il)( oksotecetat

Rastvori se 41,40 g (0,29 mol) 2-etoksi-cikloheks-2-en-1-ona u 310 mL dietiletra, pa se u kapima dodaje 325 mL 1M LiN(TMS)2u tetrahidrofuranu, na 50°C. Posle 30 min na istoj temperaturi, uz mešanje se dodaje 44,2 mL dietiloksalata. Ovaj rastvor se preko noći drži na sobnoj temperaturi (TLC; hloroform). Zatim se doda 300 mL vode, pH podesi na 4-5, dodavanjem 1M HCI, a dobijeni rastvor se ekstrahuje etilacetatom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Sirovi proizvod se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom, uz eluiranje sa hloroformom (76% prinos u obliku ulja).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,12 (t, 3H), 1,51 (t, 3H), 2,06-2,58 (m, 4H), 3,57 (m, 1H), 3,86 (q, 2H), 4,38 (, 2H), 6,09 (m, 1H).

Primer 3

etil 1- metil- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

Rastvori se 30 g (0,125 mol) etil (3-etoksi-2-oksocikloheks-3-en-1-il)(okso)acetata u 150 mL glacijalne sirćetne kiseline, pa se doda 6,5 mL metilhidrazina. Ova smeša se 6 h meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ispari, a sirovi proizvod ponovo rastvori u vodi, a rastvor učini baznim, sa 30% NH4OH, pa ekstrahuje hloroformom. Zatim se organski sloj osuši iznad Na2S04 i koncnetriše. Ostatak se hromatografira na koloni sa silikagelom (eluent: hloroform), pa kristališe iz smeše n-heksan/dietiletar (TLC, hloroform; 63% prinos u obliku bele čvrste supstance).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,12 (t, J=6,89 Hz, 3H), 1,51 (t, J=6,94 Hz, 3H), 2,06-2,58 (m, 4H), 3,57 (m, 1H), 3,86 (q, J=6,83 Hz, 2H), 4,38 (q, J=6,94 Hz, 2H), 6,09 (m, 1H).

U skladu sa istim postupkom, ali koristeći pogodno supstituisane derivate hidrazina, dobijena su sledeća jedinjenja:

etil 1 - terc- butil- 7- okso- 4, 5. 6, 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5: 1,16 (t, J=6,83 Hz, 3H), 1,58 (s, 9H), 2,30-2,93 (3m, 6H), 4,18 (q, J=6,83 Hz, 2H);

etil 1 -( 2- etoksi- 2- oksoetin- 7- okso- 4. 5, 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5: 1,18 (t, J=7,20 Hz, 3H), 1,29 (t, J=7,20 Hz, 3H), 2,04 (m, 2H), 2,52 (m, 2H), 2,93 (t, J=6,10 Hz, 2H), 4,40 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,37 (q, J=7,20 Hz,2H), 5,26 (s, 1H);

etil 7- oksc~ 1 -{ 2. 2, 2- trifluoroetin- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5: 1,20 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,05 (m, 2H), 2,57 (m, 2H), 2,95 (m, 2H), 4,2 (q, J=7,07 Hz, 2H), 5,3 (2d, 2H);

etil 7- okso- 2-( 2. 2. 2- trifluoroetil)- 4. 5. 67- tetrahidro- 1H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6: 1,29 (t, J=7,08 Hz, 3H), 2,05 (m, 2H), 2,57 (t, J=7,44 Hz, 2H), 2,94 (m, 2H), 4,30 (q, J=7,19 Hz, 2H), 5,46 (2d, 2H);

etil 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5: 1,28 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,04 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 2,87 (t, J=6,10 Hz, 2H), 4,27 (q, J=7,11 Hz, 2H), 14,39 (s, 1H);

etil 1 - f4-( aminosurfonil) fenin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,34 (t, J=7,13 Hz, 3H), 2,10-2,19 (m, 2H), 2,57-2,63 (m, 2H), 3,05 (t, J=6,10 Hz, 2H), 4,37 (q, J=7,07 Hz, 2H), 7,54 (s, 2H), 7,77 (d, J=8,78 Hz, 2H), 7,96 (d, J=8,90 Hz, 2H);

etil 1 -( 4- metoksifenin- 7- okso- 4. 5. 6, 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<f>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6: 1,3 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,05-2,17 (m, 2H), 2,56 (dd, J=7,26i 5,55 Hz, 2H), 3,03 (t, J=6,10 Hz, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,34 (q, J=7,07Hz, 3H), 7,05 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,44 (d, J=9,02 Hz, 2H);

etil 1 -( 4- cijanofenil)- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5: 1,34 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,09-2,19 (m, 2H), 2,60 (dd, J=7,32 i 5,49 Hz, 2H), 3,04 (t, J=6,16 Hz, 2H), 4,36 (q, J=7,11 Hz, 2H), 7,80 (d, J=8,90 Hz, 2H), 8,03 (d, J=8,78 Hz, 2H);

etil 7- okso- 1 - piridin- 2- il~ 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,34 (t, J=7,13 Hz, 2H), 2,10-2,21 (m, 2H), 2,58 (dd, J=7,32 i 5,61 Hz, 2H), 3,05 (t, J=6,16Hz, 2H), 4,36 (q, J=7,07Hz, 2H), 7,61 (ddd, J=4,79, 1,86 i 0,79 Hz, 1H);

etil 7- okso- 1- fenil- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,30 (t, J=7,08 Hz, 3H), 2,08 (m, 2H), 2,54 (m, 2H), 4,30 (q, J=7,08Hz, 2H), 7,49 (m, 5H);

etil 1- benzil- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

etil 1 -( 1 - metilpiperidin- 4- iO- 7- oksoA5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,84-2,11 (m, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,48-2,53 (m, 2H), 2,52-2,60 (m, 2H), 2,91-3,00 (m, 2H), 2,94 (t, J=6,16 Hz, 2H), 4,32 (q, J=7,15 Hz, 2H), 4,93-5,11 (m, 2H). (Derivat hidrazina koji je korišćen nije komercijalno dostupan (CAS No 53242-78-7), pa je stoga sintetizovan kao što je opisano u literaturi: WO 02/085906).

etil 7- okso- 1- pipeirdin^- iM. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

(Derivat hidrazina koji je korišćen nije komercijalno dostupan, pa je stoga sintetizovan kao što je opisano u literaturi: DE 3634942 A1);

etil 1 -( 1 - benzilpiperidin- 4- il)- 7- okso- 4, 5, 6, 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,32 (t, J=7,07Hz, 3H), 3,34 (s, 2H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 5,06 (m, 1H), 7,35 (m, 5H);

etil 1-( 1 - acetilpipeirdin- 4- ih- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

(Derivat hidrazina koji je korišćen nije komercijalno dostupan, pa je sintetizovan kao što je pokazano u Primeru 69).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8: 1,32 (bs, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,30 (m, 2H), 4,48 (m, 1H), 5,29 (m, 1H);

etil l-( 2- dimetilaminoetilV7<>kso- 4. 5. 6. 74etrahidro- 1H- in^

etil 1- r2- dimetilaminopropih- 7- okso- 4. 5. 6J4etrahidro- 1H- indazol- 3- karboksilat.

Primer 4

etil 1 ( 2)-( 3. 3- dimetilbutih- 7- okso^ 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

1 . Korak: etil 7 ^ toksi - 4 . 5 - dihidro - 1H - indazol - 3 - karboksilat

Rastvori se 1,2 g (5 mmol) etil (3-etoksi-2-oksocikloheks-3-en-1-il)(okso)acetata u 20 mL etanola, pa se u kapima dodaje 25 mL (5,2 mmol) 98% hidrazin hidrata. Ovaj rastvor se 5 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim još 5 h zagreva na 60°C. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a ostatak razmuti u dietiletru, pa se dobijeni talog sakupi filtriranjem, dajući 0,8 g naslovljenog jedinjenja, koje se koristi u sledećm Koraku bez daljeg prečišćavanja.

2. Korak: etil 1 ( 2 )-( 3 . 3<limetilbutil )- 7 - okso - 4 . 5 . 6J - tetrahidro - 1M

karboksilat

Rastvori se 0,28 g (1,17 mmol) etil 7-etoksi-4,5-dihidro-1H-indazol-3-karboksilata u 12 mL suvog dimetilformamida, pa se doda 0,25 g (1,40 mmol) 3,3-dimetilbutil metansulfonata. Dobijeni rastvor sa tretira sa 0,06 g (1,40 mml) natrijum-hidrida, 60% u mineralnom ulju, pa se reakciona smeša 4 h meša na 65°C. Reakciji se doda voda, pa se rastvor ekstrahuje etilacetatom. Rastvarač se ispari pod vakuumom, a ostatak raspodeli između vode i etilacetata, dajući sirovi proizvod, koji se posle sušenja iznad Na2S04, prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent heksan/etilacetat 95/5) (75% prinos).

Primer 5

etil 7- okso- 1 ( 2H( 5- fenil- 1 . 3- oksazol- 2- inmetil1A5. 6 J- tetrahidro- 1 H- indazol-3- karboksilat

Rastvori se 90 mg (4,3 mmol) etil 7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 26 mL DMF, pa se doda 712 mg (5,16 mmol) K2C03i 995 mg (5,16 mmol) 2-(hlorometil)-5-fenil-1,3-oksazola. Reakciona smeša se 5 hmeša na sobnoj temperaturi, zatim rastvarač ispari pod vakuumom, a ostatak rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Hromatografijom se regeneriše 405 mg (30% prinos) dva regioizomera: etil 7- okso- 1 - f ( 5- feniM. 3- oksazol- 2- il) metilM. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3-

karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,29 (t, 3H), 2,09 (m, 2H), 2,59 (m, 2H), 2,97 (m, 2H), 4,31 (q, 2H), 6,04 (s, 2H), 7,39 (m, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,63 (s, 1H), 7,66 (m,2H); i

etil 7- okso- 2- f( 5- fenil- 1. 3- oksazol- 2- il) metin- 4. 5. 6, 7- tetrahidro- 1 H- indazo(- 3-

karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, 3H), 2,09 (m, 2H), 2,60 (m, 2H), 2,99 (m, 2H), 4,31 (q, 2H), 5,98 (s, 2H), 7,39 (m, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,62 (s, 1H), 7,66 (m, 2H).

Primer 6

etil 1- f( 5- etil- 1. 3- oksazol- 2- inmetin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3-

karboksilat

1 . Korak: f3 - fetoksikarbonil )- 7 - okso - 4 . 5 . 6 , 7 - tetrahidro - 1H - indazol - 1f2 )- illsirćetna

kiselina

Rastvori se 1 g (4,8 mmol) etil 7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 30 mL suvog DMF, pa se tretira sa 1,59 g (11,52 mmol) K2C03i 800 mg (5,76 mmol) bromosirćetne kiseline, na sobnoj temperaturi. Posle zagrevanja preko noći na 80° C, smeša se ohladi, a rastvarač ukloni pod vakuumom. Sirovi proizvod se rastvori u vodi, pa neutrališe sa 37% HCI. Tri ekstrakcije sa dihlorometanom daju 1,7 g sirovog proizvoda, koji se prečisti fleš hromatografijom (eluent dihlorometan), dajući 783 mg (61%) proizvoda, kao smešu regioizomera.

2 . Korak: etil 7<>kso - 1 ( 2 )-/ 2<>kso - 2 - f ( 2 - oksobumamino1etilh4 . 5MJ - tetmhidm -

1H - indazol - 3 - karboksilat

Rastvori se 743 mg (2,79 mmol) [3-(etoksikarbonil)-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-1 (2)-il]sirćetne kiseline, kao smeše izomera, u 28 mL DMF, pa se doda 2,18 g (4,18 mmol) benzotriazol-1-iloksi-tri(pirolidino)fosfonijum heksafluorofosfata (PyBOP), 690 mg (5,58 mmol) 1-aminobutan-2-on hidrohlorida i 2,4 mL (13,95 mmol) N-etil-N,N-diizopropilamina. Posle 2 h, rastvarači se ispare pod vakuumom, sirovi proizvod rastvori u dihlorometanu i opere sa zasićenim NaHCC>3, rastvorom soli i vodom. Prečišćavanje fleš hromatografijom (eluent heksan/etilacetat 8/2), daje 511 mg etil-7-okso-1-{2-okso-2-[(2-oksobutil)amino] etil}-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata i 20 mg etil 7-okso-2-{2-okso-[(2-oksobutil)amino]etil},4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata (ukupni prinos 57%).

etil- 7- okso- 1- f2- okso- 2- r( 2- oksobutil) amino1etilM. 5. 6. 7- tetrahidro- 1H- indazol- 3-

karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 0,94 (t, 3H), 1,32 (t, 3H), 2,09 (m, 2H), 2,44 (q, 2H), 2,52 (t, 2H), 2,96 (t, 2H), 3,98 (d, 2H), 4,31 (q, 2H), 5,26 (s, 2H), 8,44 (t,1H);

etil- 7- okso- 2- f2- okso- 2- r( 2- oksobutil) amino1etilM. 5, 6. 7- tetrahidro- 1H- indazol- 3-

karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 0,94 (t, 3H), 1,31 (t, 3H), 2,08 (m, 2H), 2,44 (q, 2H), 2,53 (t, 2H), 2,94 (t, 2H), 3,99 (d, 2H), 4,29 (q, 2H), 5,32 (s, 2H), 8,48 (t, 1H).

3 . Korak: etil 1 - f ( 5 - etil - 1 . 3<>ksazol - 2 - il ) metin - 7<>kso - 4 . 5 . 6J - tetrah

indazol - 3 - karboksilat

Rastvor 506 mg (1,51 mmol) etil 7-okso-1-(2-okso-2-[(2oksobutil)amino]etil}-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u toluenu (45 mL) tretira se sa 0,422 mL (4,53 mmol) fosfor-trihlorida, pa se 15 h zagreva na 90°C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, prespe u led i neutrališe sa 5 M NaOH. Vodena faza se ekstrahuje dihlorometanom, a organski sloj daje 425 mg sirovog proizvoda, koji se prečisti na silikagelu (eluent heksan/etilacetat 7/3). Izolovano je 285 mg naslovljenog jedinjenja (60% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,16 (t, 3H), 1,32 (t, 3H), 2,08 (m, 2H), 2,63 (m, 4H), 2,97 (t, 2H), 4,31 (q, 2H), 5,84 (s, 2H), 6,79 (s, 1H).

Primer 7

etil 6- f( dimetilamino) metilen- 1- metin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1H- indazol- 3-

karboksilat

Rastvori se 16 g (0,07 mol) etil 1-metil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 100 mL dimetilformamida, pa se dodaju 32 mL di-terc-butilacetala u dimetilformamidu. Ova smeša se 8 h meša na 60°C. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a proizvod kristališe iz etanola (90% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,72-2,95 (m, 4H), 3,04-3,14 (m, 6H), 4,10 (s, 3H), 4,24 (q, J=7,20 Hz, 2H), 7,46 (m, 1H).

Radeći po istom postupku, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 1 - terc- butil- 6- r( dimetilamino) metilenl- 7- okso- 4. 5, 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3-karboksilat: etil 6- r( dimetilamino) metilen1- 1 -( 2- hidroksietin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H-indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,80 (t, J=6,34 Hz, 2H), 2,88 (t, J=6,21 Hz, 2H), 3,70 (m, 2H), 4,24 (q, J=7,07 Hz, 3H), 4,58 (t, J=5,97 Hz, 2H), 4,79 (bs, OH), 7,47 (bs, 1H);

etil 6-[( dimetilamino) metilenl- 1 -( 2- etoksi- 2- oksoetih- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H-indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,17 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,28 (t, J=7,13 Hz, 3H), 2,86 (m, 4H), 3,10 (s, 6H), 4,10 (q, J=7,11 Hz, 2H), 4,26 (q, J=7,11 Hz, 2H), 5,33 (s, 2H), 7,43 (s,1H);

etil 1- r4( aminosurfonil) fenin- 6- f( dimetilamino) metilenl- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 6-[( dimetilamino) metilen]- 1 -( 4- metoksifenin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H-indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) S ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,87-2,93 (m, 2H), 2,95-3,00 (m, 2H), 3,12 (s, 6H), 3,83 (s, 3H), 4,32 (q, J=7,07 Hz, 2H), 7,00 (d, J=9,02Hz, 2H), 7,39 (d, J=9,02Hz, 2H), 7,42 (s, 1H);

etil 1-( 4- ciianofenin- 6- f( dimetilamino) metilen1- 7- okso- 4. 5, 6. 7- tetrahidro- 1H-

indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,13Hz, 3H), 2,88-2,94 (m, 2H), 2,97-3,03 (m, 2H), 3,14 (s, 6H), 4,34 (q, J=7,15 Hz, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,73 (d, J=8,90 Hz, 2H), 7,96 (d, J=8,78 Hz, 2H);

etil 6- f( dimetilamino) metilen1- 7- okso- 1 - piridin- 2- il- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H-indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) S ppm: 1,33 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,87-2,93 (m, 2H), 3,00 (t, J=6,71Hz, 2H), 3,13 (s, 6H), 4,33 (q, J=7,07 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,54 (ddd, J=7,47, 4,79 i 1,04 Hz, 1H), 7,56 (dt, J=8,02 i 0,93 Hz, 1H), 7,99-8,04 (m, 1H), 8,52 (ddd, J=4,82, 1,89 i 0,85 Hz, 1H);

etil 6-( dimetilamino) metilen- 1-( 3. 3- dimetilaminobutin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil6-( dimetilamino) metilen- 2-( 3. 3- dimetilaminobutin- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 6- f( dimetilamino) metilenp- okso- 1-( 2. 2. 2- trrfluoroetilM. 5. 6J- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,30 (t, J=7,07, 3H), 2,88 (2m, 4H), 3,10 (s, 6H), 4,33 (q, J=7,07 Hz, 2H), 5,45 (q, J=8,90 Hz, 2H), 7,50 (bs, 1H);

etil6- r( dimetilamino) metilen1- 7- okso- 2-( 2. 2. 2- trrfluoroetilM, 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,28 (t, J=7,07, 3H), 2,82 (2m, 4H), 3,12 (s, 3H), 4,29 (q, J=7,07 Hz, 2H), 5,57 (q, J=9,02 Hz, 2H), 7,53 (bs, 1H);

etil 6- f( dimetilamino) metilenl- 7- okso- 1 - fenil- 4. 5, 6, 7- tetrahidro- 1 H- indazol-3- karboksilat: etil 1 - benzil- 64( dimetilamino) metilen1- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol-3- karboksilat;

etil 6- f( dimetilamino) metilenV^^

1 H- indazol- 3- karboksilat;

etil64( dimetilamino) metilen1- 7H3kso- 1- pipeirdin- 4- iM. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 1 -( 1 - benzilpiperidin- 4HlV64( dimetilam

1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,31 (t, J=7,07Hz, 3H), 1,76-2,15 (m, 4H), 2,79-3,01 (m, 4H), 3,13 (s, 6H), 3,24-3,64 (m, 6H), 4,29 (q, J=7,07Hz, 2H), 5,30 (dd, J=17,01 i 7,26 Hz, 1H), 7,14-7,40 (m, 6H);

etil 1 -( 1 - ac^ tilPiperidin- 4- in- 6- f( dimetilamino) metilen1- 7- okso^ 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 6- f( dimetilamino) metilenJ- 1 -( 1 - formilpiperidin^ 4- il)- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 1-( 2- dimetilaminoetil)- 6- dimetilaminometilen- 7- okso- 4, 5, 6, 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat:

etil 1-( 2- dimetilaminopropih- 6- dimetilaminometilen- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat.

Primer 8

etil 1 - metil- 8-( metiltioM. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB67- X04- M00( C01 HDODI

Rastvori se 9 g (69 mmol) etil 6-[(dimetilamino)metilen]-1-metil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 350 mL anhidrovanog dimetirformamida, pa se dodaju 13,4 g anhidrovanog kalijum-acetata (138 mmol) i 19,18 g (69 mmol) metilizotiourea-sulfata. Smeša se 8 h drži na 90"C, uz mešanje. Zatim se ispari rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari. Sirovi proizvod se triturira dietiletromi sakupi filtriranjem dajući 15,5 g (74% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,29 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,84-3,00 (m, 4H), 4,26 (q, J=7,07Hz, 2H), 4,31 (s, 3H), 8,53 (m, 1H).

Kada se sledi isti postupak, ali koriste pogodno supstituisani derivati izotiouree, mogu se dobiti sledeća jedinjenja: etil 8-( benziltio)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB05- X04- MOO ( C01VD011:

etil 1 - metil- 8-( feniltioM. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB04- X04- M00 ( C01H) 011.

Primer 9

etil 8- benzil- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

rB05- X06- M00 ( C01 )- D0 11

U atmosferi azota doda se 0,5 M rastvora benzilcink-bromida u THF (3,11 mL, 1,556 mmol) u smešu etil-1-metil-8-(metiltio)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-hjhinazolin-3-karboksilata (237 mg, 0,778 mmol) i Pd(PPh3)4(9 mg, 0,0078 mmol, 1%). Posle 20 h zagrevanja na 60°C, pod azotom, smeša se ohladi na sobnu temperaturu, mućka sa rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi i etilacetatom, pa zatim filtrira. Zatim se organska faza odvoji, a vodena faza dva puta ekstrahuje etilacetatom. Kombinovane organske faze se osuše iznad Na2S04, ispare, pa sirovi proizvod prečisti na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 97/3). Izolovano je 20 mg naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, 3H), 2,99 (m, 4H), 4,23 (s, 2H), 4,27 (m, 5H), 7,23 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,36 (m, 2H), 8,66 (s, 1H).

Primer 10

etil 1 - metil- 8-( feniltio) 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB04- X04- MOO ( C0D- D01)

U mešanu suspenziju etil 1-metil-8-(metilsulfonil)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (46 mg, 0,137 mmol) i feniltiola (16 pL, 17 mg, 0,15 mmol) u etanolu (1 mL), doda se 1 M natrijum-hidroksid (150 pL, 0,15 mmol), na sobnoj temperaturi, u atmosferi argona. Posle 3 dana mešanja, smeši se doda 1 M hlorovodonična kiselina (150 pL, 0,15 mmol), pa se rastvarač ukloni pod vakuumom. Hrmatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 97/3) izolovano je 13 mg etil 1-metil-8-(feniltioH,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata i 10 mg etil 8-etoksi-1-metiM,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata.

[B04-X04-M00 (C01)-D01]:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,26 (t, 3H), 2,86 (t, 2H), 2,93 (t, 2H), 3,68 (s, 3H), 4,25 (q, 2H), 7,48 (m, 3H), 7,64 (m, 2H), 8,53 (s,1H);

[B03-X03-M00 (C01)-D01]:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, 3H), 1,38 (t, 3H), 2,91 (t, 2H), 3,01 (t, 2H), 4,33 (m, 5H), 4,41 (q, 2H).

Primer 11 1- metil- 8-( metittioV4. 5<lih^

fB67- X04- M00 ( C0D- P031

Suspenduje se 13,00 g (0,043 mol) etil 1-metil-8-(metiltio)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u smeši 200 mL metanola, 200 mL dimetirformamida i 200 mL 30% amonijum-hidrata. Smeša se oko 8 h meša na 65°C u zatvorenom balonu. Rastvarač se zatim ispari do suva, ostatak rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04 i ispari. Sirovi proizvod se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom, uz eluiranje sa smešom cikoheksan/etilacetat, dajući 6,16 g (52% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,54 (s, 3H), 2,75-3,05 (m, 4H), 4,28 (s, 3H), 7,47 (bs, 2H), 8,51 (m, 1H).

Primer 12

1- metil- 8-( metilsulfonilM. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB67- X05- M00 ( C01VP031

Rastvori se 6,00 g (0,022 mol) 1-metil-8-(metiltioH,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 1000 mL dimetilformamida, pa se doda 40,18 g oksona. Smeša se 16 h meša na sobnoj temperaturi. Zatim se dodaju voda i etilacetat, pa se razdvoje slojevi. Organski sloj se konačno osuši iznad Na2S04i ispari. Ostatak se triturira dietiletrom, pa se fitriranjem izoluje 5,40 g (80% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 3,06 (m, 4H), 3,43 (s, 3H), 4,29 (s, 3H), 7,45 (bs, 2H), 8,92 (m, 1H).

Radeći u skladu sa ovom metodologijom dobijeno je sledeće jedinjenje:

etil 1 - metil- 8-( metilsulfonin- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

[ B67- X05- M00 ( COD- DOH

Primer 13

8-( cikloheksilaminoV1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3-

karboksamid

fB27- X00- M00 ( C0D- D031. i

8-( cikloheksilamino)- 1- metil- 1H- pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

[ B27- X00- M01 ( C01VD031

Rastvori se 1,5 g 1-metil-8-(metilsulfonil)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 100 mL suvog dimetilsulfoksida, pa se doda 1,15 mL cikloheksilamina. Posle 16 h na 80°C, u atmosferi azota, rastvarač se ispari pod sniženim pritiskom. Ostatak se zatim ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Hromatografijom na kobni sa silikagelom (eluent dihlorometan/aceton 9/1) dobije se 300 mg 8-(cikloheksilamino)-1-metil-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida i 200 mg 8-(cikloheksilamino)-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (ukupno 43% prinos).

[B27-X00-M00 (C01)-D03]: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,63 (m, 10H), 2,73 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 3,69 (m, 1H), 4,31 (m, 3H), 6,94 (d, J=6,58 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 8,20 (s, 1H);

[B27-X00-M01 (C01)-D03]:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,63 (m, 10H), 3,88 (m, 1H), 4,66 (s, 3H), 7,40 (s, 1H), 7,47 (d, J=8,66 Hz, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,87 (d, J=8,66 Hz, 1H), 9,13 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovom metodologijom, a kada je amin prisutan kao so, uzimajući u obzir odgovarajuće stehiometrijske količine kalijum-karbonata, dobijena su sledeća jedinjenja, kodirana u Tabeli VI.

Primer 14

etil 6- r( dimetilamino) metilen1- 1 . 4. 4- trimetil- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H-indazol- 3- karboksilat

1 . Korak: 3 - metoksi - 5 . 5 - dimetil - cikloheks - 2 - enon

Tretira se rastvor 5,5-dimetil-cikloheksan-1,3-diona (80,0 g, 0,57 mol) u anhidrovanom metanolu (600 mL), sa 1 M rastvorom titanijum-hlorida (TiCU) u dihlorometanu (17,2 mL). Posle 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, smeša se lagano prespe u hladan rastvor 5% NaHC03, pa ekstrahuje dietiletrom (6x450 mL). Sakupe se organski slojevi, operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i ispare do suva, dajući naslovljeno jedinjenje (81,5 g, 92% prinos), u obliku svetložutog ulja.

<1>H NMR (300 MHz, CHCI3-d) 8 ppm: 1,05 (s, 6H), 2,19 (s, 2H), 2,26 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 5,35 (s, 1H).

2. Korak: 5 . 5 - dimetil - cikloheks - 2 - enon

Tretira se u kapima rastvor 3-metoksi-5,5-dimetil-cikloheks-2-enona (80 g, 0,52 mol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (270 mL) sa 1 M rastvorom LiAIH4u tetrahidrofuranu (182 mL), u atmosferi argona, držeći temperaturu reakcione smeše između 0°C i 5°C. Dozvoli se da temperatura poraste do 25°C, pa se smeša 4 h meša. Dobijena gusta suspenzija se ohladi u kupatilu sa ledom, tretira etilacetatom (30 mL) i pažljivo prespe u ohlađeni rastvor 2M H2SO4. Zatim se vodeni rastvor ekstrahuje dietiletrom (3*300 mL), osuši iznad Na2S04i isparava pod sniženim pritiskom, da se ukloni većina rastvarača. Sirovi materijal sadrži naslovljeno jedinjenje kao ulje niske temperature ključanja, koje se koristi u sledećem Koraku bez daljeg prečišćavanja.

<1>H NMR (300 MHz, CHCb-d) 6 ppm: 1,04 (s, 6H), 2,23 (dd, J=4,10 i 2,05 Hz, 2H), 2,27 (s, 2H), 6,02 (dt, J=9,96 i 2,05 Hz, 1H), 6,85 (dt, J=9,96i 4,10 Hz, 1H).

3 . Korak: 4 . 4 - dimetH - 7 - oksa - biciklof4 . 1 . 0JheDtan - 2 - on

Rastvori se 5,5-dimetil-cikk>heks-2-enon, iz prethodnog Koraka, (0,52 mol, teorijski) u metanolu (500 mL), ohladi na 0°C, pa tretira sa 30% vodonik-peroksidom (265 mL, 2,6 mol). Dobijeni rastvor se u kapima tretira sa 2% rastvorom NaOH (142 mL, 0,067 mol), držeći teperaturu reakcije oko 0°C. Smeša se ostavi 24 h na 4°C, zatim se razblaži vodom (900 mL) i ekstrahuje etiletrom (4*450 mL). Sakupe se ekstrakti, operu sa 5% rastvorom Na2S205i rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i koncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti destialcijom pod vakuumom, tako da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje (56,8 g, 78,3 % prinos)<1>H NMR (300 MHz, CHCI3-d) 8 ppm: 0,91 (s, 3H), 1,01 (s, 3H) 1,82 (m, 2H), 2,03 (d, J=15,53Hz, 1H), 2,64 (d, J=13,7 Hz, 1H), 3,20 (dt, J=3,74 i 0,92 Hz, 1H), 3,49 (t, J=4,10Hz, 1H).

4 . Korak: 2 - metoksi - 5 . 5 - dimetil - cikloheks - 2 - enon

Doda se rastvor 4,4-dimetil-7-oksa-biciklo[4.1.0]heptan-2-ona (44,0 g, 0,31 mol) u metanolu (150 mL), 85% rastvoru kalijum-hidroksida (20,7 g, 0,31 mol) u metanolu (450 mL), na sobnoj temperaturi. Smeša se drži 20 h na ovoj temperaturi, a zatim 30 min zagreva pod refluksom. Posle hlađenja, ovaj rastvor se razblaži vodom (1,2 L), i ekstrahuje etiletrom (5*350 mL). Sakupe se organski ekstrakti, operu rastvorom soli, osuše iznad Na2SC>4 i ispare pod vakuumom, da se ukloni većina rastvarača. Sirovi materijal se prečisti destilacijom, tako da se dobije čisto naslovljeno jedinjenje (32,8 g, 68% prinos) u obliku ulja.

<1>H NMR (300 MHz, CHCIs-d) 8 ppm: 1,04 (s, 6H), 2,30 (d, J=4,69Hz, 2H), 2,35 (s, 2H), 3,59 (t, 3H), 5,67 (t, J=4,54Hz, 1H).

5 . Korak: etil ( 3 - metoksi - 63<limetil - 2 - oksocikloheks - 3 - en - 1 - il )( okso ) acetat

Suspenduje se 60% natrijum-hidrid u mineralnom ulju (2,41 g, 60,3 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (60 mL), u atmosferi argona, pa tretira sa rastvorom 2-metoksi-5,5-dimetil-cikloheks-2-enona (8,17 mL, 60,3 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL). Posle 15 min doda se rastvor dietiloksalata (8,17 mL, 60,3 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL), pa se smeša 1 h refluksuje. Gusta suspenzija se razblaži vodom (800 mL), zakiseli sa 1 M HCI (50 mL) i ekstrahuje etilacetatom (2*500mL). Sakupe se organski slojevi, operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i ispare do suva, dajući sirovo naslovljeno jedinjenje (10,60 g) kao oranž ulje, koje se dalje koristi bez dodatnog prečišćavanja.

<1>HNMR (300 MHz, CHCfe-d) 8 ppm: 1,41 (t, 3H), 2,77 (s, 2H), 3,13 (s, 6H), 4,23 (s, 3H), 4,40 (q, J=7,13Hz, 2H), 7,5 (s, 1H).

6 . Korak: etil lAA - trimetil - 7 ^ kso - 4 . 5 . 6JAetrahidro - 1H - indazol - 3 - kamo

U kapima se tretira rastvor etil (3-metoksi-6,6-dimetil-2-oksocikloheks-3-en-1-il)(okso)acetata, iz prethodnog Koraka (40,2 mmol, teprijski) u sirćetnoj kiselini (65 mL) sa rastvorom metilhidrazina (2,14 mL, 40,2 mmol) u sirćetnoj kiselini (20 mL), pa se ostavi da preko noći stoji na sobnoj temperaturi. Smeša se zatim razblaži vodom (800 mL), pa ekstrahuje etilacetatom (2*500 mL). Organski ekstrakti se operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i ispare do suva. Ovaj sirovi materijal se hromatografira na silikagelu i eluira sa dihlorometan/ etilacetatom 100/5, dajući čisto naslovljeno jedinjenje (4,8 g, 47,7% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCb-d) 8 ppm: 1,42 t, J=7,18 Hz, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,98 (t, J=6,45 Hz, 2H), 2,61 (t, J=6,45 Hz, 2H), 4,19 (s, 3H), 4,43 (d, J=7,03 Hz, 2H).

7 . Korak: etil 6 - f ( dimetilamino ) metilen ]- 1A . 4 - trimetil - 7<>kso - 4 . 5 . 6J -

tetrahidno - 1H - indazol - 3 - karboksilat

Rastvor etil 1,4,4-trimetil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-indazol-3-karboksilata (4,8 g, 19,18 mmol) u anhidrovanom dimetilformamidu (30 mL) tretira se 2 h, na 65°C, sa dimetrformamid di-terc-butilacetalom (9,19 mL, 38,35 mmol). Smeša se ispari do suva, a sirovi materijal kristališe iz heksana, dajući naslovljeno jedinjenje (5,1 g, 87% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCfe-d) 5 ppm: 1,21 (m, 9H), 2,76 (s, 2H), 3,15 (s, 6H), 4,22 (s, 3H), 4,41 (q, 2H).

Primer 15

etil 6-( hidroksimetiten) 1. 5. 5- trimetil- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat

1 . Korak: 5 . 5 - dimetil - 7 - oksabiciklof4 . 1 . 0lheDtan - 2 - on

Rastvor 4,4-dimetil-cikloheks-2-enona (32,0 g, 0,26 mmol) i 30% vodonik-peroksida (132 mL, 1,29 mol) u metanolu (250 mL) tretira se u kapima sa 2% rastvorom natrijum-hidroksida (70 mL, 0,035 mol), uz održavanje temperature reakcije oko 0°C. Smeša se ostavi da 20 h stoji na 4°C, pa se zatim razblaži vodom (400 mL) i ekstrahuje dietiletrom (4*250 mL). Sakupe se ekstrakti, operu sa 5% rastvorom Na2S20si rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i koncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti destilacijom pod vakuumom, dajući naslovljeno jedinjenje kao ulje (27,6 g, 76,4% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCb-d) 5 ppm: 1,06 (s, 3H), 1,21 (s, 3H), 1,20-2,50 (m, 5H), 3,20 (m, 1H).

2 . Korak: 2 . 2 - metoksi - 4 . 4 - dimetilcikloheks - 2 - en - 1 - on

Doda se rastvor 5,5-dimetil-7-oksabiciklo[4.1.0]heptan-2-ona (19,4 g, 138,4 mmol) u metanolu (95 mL), 85% rastvoru kalijum-hidroksida (9,1 g, 138,4 mmol) u metanolu (285 mL), na sobnoj temperaturi. Smeša se 20 h drži na ovoj temperaturi, a zatim 30 min zagreva pod refluksom. Posle hlađenja, rastvor se razblaži vodom (750 mL), pa ekstrahuje dietiletrom (4*350 mL). Sakupe se organski ekstrakti, operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i ispare do suva. Sirovi materijal se razmuti u heksanu (380 mL), snažno meša 30 min i filtrira, da se ukloni čvrst materijal. Filtrat se ispari pod vakuumom, tako da se dobije čisto naslovljeno jedinjenje kao svetložuto ulje (9,8 g, 45,9% prinos).

<1>HNMR (300 MHz, CHCI3-d) 5 ppm: 1,23 (S, 6H), 1,87 (t, 2H), 2,61 (t, 2H), 3,60 (s, 3H), 5,57 (s, 1H).

3 . Korak: etil ( 3 - metoksi - 5 . 5 - dimetil - 2 - oksocikloheks - 3 - en - 1 - il ( okso ) acetat

Tretira se rastvor 2-metoksi-4,4-dimetil-cikloheks-2-enona (12,5 g, 81,1 mmol) i dietiloksalata (12,1 mL, 89,2 mmol) u etiletru, sa 1 M rastvorom litijum-bis(trimetilsilil)amida u tetrahidrofuranu, u atmosferi argona. Reakcija se 2 h meša na sobnoj temperaturi, pa prespe u 10% rastvor NaHPCu(500 mL) i ekstrahuje dietiletrom (2*300mL). Organski ekstrakti se operu rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i ispare do suva. Ovaj sirovi materijal se razmuti u heksanu, meša i filtrira, dajući naslovljeno jedinjenje kao žutu kristalnu supstancu (16,8 g, 81,5% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCb-d) 5 ppm: 1,15 (s, 6H), 1,38 (t, 3H), 2,77 (s, 2H), 3,63 (s, 3H),4,35 (q, 2H), 5,62 (s,1H).

4 . Korak: etil 1 . 5 . 5 - trimetil - 7<>kso - 4 . 5 . 6J - tetrahidm - 1H - indazol - 3 - kafo

Rastvor etil (3-metoksi,5,5-dimetil-2-oksocikloheks-3-en-1-il(okso)acetata (15,50 g, 0,061 mmol) u sirćetnoj kiselini (100 mL), tretira se u kapima sa rastvorom metilhidrazina (3,49 mL, 0,066 mmol) rastvorenog u sirćetnoj kiselini (50 mL). Posle 24 h stajanja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se razblaži vodom (2 L), uz snažno mešanje. Dobijeni talog se filtrira i opere vodom, dajući naslovljeno jedinjenje kao žutu čvrstu supstancu (10,30 g, 67,6% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCI3-d) 8 ppm: 1,20 (s, 6H), 1,42 (t, 3H), 2,43 (s, 2H), 2,93 (s, 2H), 4,21 (s, 3H), 4,41 (q, 2H).

5 . Korak: etil 6 -( hidmksimetilen )- 1 . 5 . 5Jrimetil - 7 - oksoA . 5MJ - tetrah

indazol - 3 - karboksilat

Rastvor etil 1,5,5-trimetil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-indazol-3-karboksilata (1,00 g, 4 mmol) u anhidrovanom etirformijatu (10 mL) tretira se sa natrijum-etoksidom (0,54 g, 8 mmol), pa se refluksuje 3 h. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i prespe u hladnu vodu (40 mL). Vodeni sloj se opere dietiletrom (40 mL) da se ukloni neizreagovali početni materijal, zakiseli sa 20% rastvorom NaH2P04i ekstrahuje etilacetatom (2*50 mL). Sakupe se organski ekstrakti, osuše iznad Na2S04i ispare do suva, dajući naslovljeno jedinjenje kao mrku čvrstu supstancu (9,88 g, 78,8% prinos).

<1>H NMR (300 MHz, CHCfe-d) 8 ppm: 1,21 (S, 6H), 1,32 (t, 3H), 2,87 (s, 2H), 4,19 (s, 3H), 4,30 (q, 2H), 7,74 (s, 1H), 14,00 (brs, 1H).

Primer 16

etil 8- amino- 1- metil- 1 H- pirazolf4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB00- X00- M00 ( C0D- D0H

Rastvori se 16,00 g (0,06 mol) etil-6-[(dimetilamino)metilen]-1-metil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 600 mL etanola, a redom se dodaju 3,90 g natrijum-etilata, pa 5,44 g gvanidin hidrohlorida. Ovaj rastvor se 12 h meša pod refluksom. Zatim se rastvarač ispari, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Zatim se organski sloj osuši iznad anhidrovanog Na2S04 i koncenriše. Ostatak se triturira dietiletrom, a proizvod sakupi filtriranjem (85% prinos, u obliku bele supstance).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,28 (t, J=7,07Hz, 3H), 2,68-2,93 (m, 4H), 4,25 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,30 (s, 3H), 6,54 (bs, 2H), 8,15 (m, 1H).

U skladu sa ovom metodologijom, ali koristeći pogodno supstituisane derivate gvanidina, dobijena su sledeća jedinjenja, prikazana u Tabeli VII.

Primer 17

8 . Korak: etil 8 - n3 - hloro - 4 -( 4 - metilDiDerazin - 1 - il ) fenitlam

4 . 5<lihidro - 1H - Dirazolof4 . 3 - hJhinazolin - 3 - kartoksilat

fB13 - X00 - M03 ( C0D - D011

Rastvor etil 6-[(dimetilamino)metilen]-1,4,4-trimetil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-indazolin-3-karboksilata (0,50 g, 1,6 mmol) i N-[3-hloro~4-(4-metil-piperazin-1-il)-feniljgvanidina (0,48 g, 1,8 mol) u anhidrovanom dimetilformamidu zagreva se 37 h na 100°C. Posle hlađenja smeša se razblaži vodom (50 mL), a nastali talog se sakupi filtriranjem i osuši, dajući naslovljeno jedinjenje u obliku žute čvrste supstance (0,72 g, 85% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 1,33 (m, 9H), 2,75 (S, 2H), 2,84 (s, 3H), 3,33 (m, 8H), 4,32 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,20 (d, J=8,78Hz, 1H), 7,57 (dd, J=8,84 i 2,50 Hz, 1H), 8,01 (d, J=2,44 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 9,68 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovom metodologijom, a kada je derivat gvanidina dostupan kao so, a uzimajući u obzir stehiometrijske količine potrebnog kalijum-karbonata, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 1, 4, 4- trimetil- 8-( f4-( 4- metilpiperazin- 1 - il)- 3- <trifluorometil) fenil] aminoV4, 5-

dihidro- 1H- pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB12- X00- M03 ( COD- DOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,34 (s, 6H), 2,24 (s, 3H), 2,46 (s, 4H), 2,75 (s, 2H), 2,84 (t, J=4,63Hz, 4H), 4,32 (d, J=7,11Hz, 2H), 4,34 (s, 3H), 7,54 (d, J=8,78 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=8,84i 2,50 Hz, 1H), 8,06 (d, J=2,44 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 9,78 (s, 1H);

etil 8- anilino- 1. 4. 4- trimetil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h) hinazolin- 3- karboksilat

rB04- X00- M03 ( C01)- D0n

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (m, 9H), 2,74 (s, 2H), 4,32 (q, J=7,15Hz, 2H), 4,36 (s, 3H), 6,98 (tt, J=7,36 i 1,07 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=7,38 i 1,04 Hz, 2H), 7,71 (dd, J=8,60i 0,91 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H), 9,54 (s, 1H);

etil 8- r4-( 4- metil- piperazin- 1 - ih- fenilaminol- 1. 4. 4- trimetil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB10- X00- MQ3( C01)- D0n

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,33 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,33 (s, 6H) 2,27 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 2,71 (s, 2H), 3,03-3,15 (m, 4H), 4,32 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,33 (s, 3H), 6,91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,53 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,35 (s, 1H), 9,28 (s, 1H);

etil 8- amino- 1, 4. 4- trimetil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB00- X00- M03 ( C0D- D011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,31 (s, 6H), 2,64 (s, 2H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,33 (s, 3H), 6,61 (s, 2H), 8,18 (s, 1H).

Primer 18

etil 8-{[ 3- hloro-( 4- metilpiperazin- 1 - iltfenillaminoVI . 5. 5- tirmetil- 4, 5- dihidro-1H- pirazolof4, 3,- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB13- X00- M02 ( C01)- D0n

Rastvor etil 6-(hidroksimetilen)-1,5,5-trimetil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-indazol-3-karboksilata (400 mg, 1,44 mmol) i N-[3-hloro-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]gvanidina (424 mg, 1,58 mmol) u anhidrovanom dimetirformamidu (5 mL) zagreva se 3 h na 100°C. Posle hlađenja, reakciona smeša se prespe u rastvor soli (50 mL), pa ekstrahuje etilacetatom (2*50 mL). Sakupe se ekstrakti, osuše iznad Na2SC>4 i ispare do suva. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu, uz eluiranje sa dihlorometan/metanolom 9/1, dajući čisto naslovljeno jedinjenje (240 mg, 33% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (m, 9H), 2,27 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 2,92 (s, 2H), 2,95 (t, J=4,63Hz, 4H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,39 (s, 3H), 7,14 (d, J=8,78Hz, 1H), 7,52 (dd, J=8,78i 2,44 Hz, 1H), 7,98 (d, J=2,4Hz, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,63 (s,1H).

Radeći u skladu sa ovom metodologijom, ali kada je derivat gvanidina dostupan kao so, uzimajući u obzir stehiometrijske količine kalijum-karbonata, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 1, 5, 5- trimetil- 8-( 4- f4- metilDiperazin- 1 - in- 3- tfrrfluorometin- fenillamino}-4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB12- X00- M02( C01)- D0n

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (m, 9H), 2,27 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 2,86 (t, J=4,51Hz, 4H), 2,83 (s, 2H), 4,32 (q, J=7,15 Hz, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,54 (d, J=8,66Hz, 1H), 7,93 (dd, J=8,78i 2,56 Hz, 1H), 8,09 (d, J=2,44 Hz, 1H), 8,56 (s, 1H), 9,81 (s, 1H);

etil 8- anilino- 1, 5. 5- trimetil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h) hinazolin- 3- kart>oksilat

[ B04- X00- M02 ( COD- DOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (m, 9H), 2,93 (s, 2H), 4,31 (q, J=7,15 Hz, 2H), 4,38 (s, 3H), 6,98 (tt, J=7,36i 1,04 Hz, 1H), 7,32 (dd, J=8,47i 7,50 Hz, 2H), 7,72 (dd, J=8,60 i 1,04 Hz, 2H), 8,53 (s, 1H), 9,57 (s, 1H);

etil 1, 5. 5- trimetil- 8- ff4-( 4- meilpiperazin- 1- il>feninamino>- 4. 5- dihidro-1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

[ B10- X00- M02 ( COD- DOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,30 (s, 6H), 1,34 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,48 (m, 4H), 2,91 (s, 2H), 3,09 (m, 4H), 4,31 (q, J=7,19 Hz, 2H), 4,35 (s, 3H), 6,92 (d, J=9,29 Hz, 2H), 7,52 (d, J=9,29 Hz, 2H), 8,46 (s, 1H), 9,30 (s, 1H);

etil 1. 5. 5- trimetil- 8- amino- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

rB00- X00- M02 ( COD- DOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,25 (s, 6H), 1,32 (t, J=7,13 Hz, 3H)), 2,86 (s, 2H), 4,30 (q, J=7,07Hz, 2H), 4,35 (s, 3H), 6,61 (s, 2H), 8,29 (s, 1H).

Primer 19

etil 8-( 1 - acetil- piperidin- 4- il) amino- 1- metil- 4. 5- dihidro-

1H- pirazolo[ 4. 3,- h1hinazolin- 3- kart>oksilat

rB91- X00- M00( C01VD0n

U suspenziju 5,187 g (19 mmol) etil 8-amino-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u suvom dimetilformamidu (120 mL) doda se 1-acetil-4-piperidin (4,7 mL, 38 mmol), CF3COOH (10 mL, 128 mmol) i NaBH(OAc)3(8,862 g, 42 mmol). Posle 18 h, ovoj smeši se u kapima dodaje 0,33 M NaOH (800 mL, 264 mmol). Talog se filtrira, opere vodom i suši u sušnici do suva, dajući naslovljeno jedinjenje 5,3 g (70% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,34 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,47 (m, 2H), 1,95 (m, 2H), 2,02 (s, 3H), 2,73 (m, 1H), 2,77 (m, 2H), 3,17 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,95 (m, 1H) 4,30 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,31 (m, 1H), 4,33 (s, 3H), 7,14 (m, 1H), 8,24 (s,1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 20

etil 8- metoksi- 1 - meti! 4, 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB67- X03- M00 ( C01H3011

Rastvori se 2,0 g (7,2 mmol) etil 6-[(dimetilamino)metlen]-1-metil-7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 200 mL acetonitrila, pa se dodaju 17,4 g (70,6 mmol) metilizourea-sulfata i 10,0 g (72,4 mmol) kaiijum-karbonata. Reakciona smeša se 16 h meša pod refluksom. Zatim se ispari rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad anhidrovanog Na2S04i koncentriše. Posle hromatografije na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan) dobije se 1,7 g proizvoda (86% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,98 (m, 4H), 3,97 (S, 3H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,34 (S, 3H), 8,54 (s, 1H).

Primer 21

etil 8- hidroksi- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

rBOo- xo3- Moo ( coiv- pon

Rastvori se 1,5 (5,2 mmol) etil 8-metoksi-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 90 mL acetonitrila, pa se doda 1,6 g (10,6 mmol) natrijum-jodida i 1,5 mL trimetilsililhlorida. Posle 1 dan mešanja u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi, ispari se rastvarač, a ostatak se ponovo rastvori u smeši dihlorometan/metanol 4/1 i opere sa zasićenim rastvorom Na2S203u vodi. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Ostatak se kristališe iz metanola, dajući 1,1 g naslovljenog jedinjenja (78% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,84 (m, 4H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,29 (s, 3H), 7,87 (s, 1H), 11,70 (s, 1H).

Primer 22

etil 1 - metil- 8- fr ( trifluorometil) sulfoninoksiV4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4, 3- h1hinazolin-3- karboksilat

rB66- X03- M00 ( COIVPOU

Rastvore se 0,60 g (2,19 mmol) etil 8-hidroksi-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata i 0,31 mL (2,19 mmol) trietilamina u 60 mL dihlorometana, pa se 5 h mešaju na -78°C. Zatim se doda 0,72 mL (2,19 mmol) anhidrida p-toluensulfonske kiseline. Reakcija se preko noći meša, pa se ostavi da dostigne sobnu temperaturu, opere sa NaHC03u vodi, osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Ostatak se triturira dietiletar/acetonom, a proizvod sakupi filtriranjem, dajući 0,60 g (67% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMS0-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,13 Hz, 3H), 3,09 (s, 4H), 4,28 (s, 3H), 4,31 (q, J=7,11 Hz, 2H), 8,86 (s, 1H).

Primer 23

etil 84T1 -( terc- butoksikarboninpirolidin- 3- inamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo| 4, 3- hjhinazolin- 3- karboksilat

fB97- X00- M00 ( C0D- D011

Rastvori se 1,5 g (5,2 mmol) etil 8-metoksi-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 90 mL acetonitrila, pa se doda 1,6 g (10,6 mmol) natrijum-jodiđa i 1,5 mL trimetilsililhlorida. Posle 1 dan mešanja u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi, ispari se rastvarač, a ostatak rastvori u smeši dihlorometan/metanol 4/1, pa opere zasićenim rastvorom Na2S203u vodi. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Ostatak kristališe iz metanola, dajući 1,1 g naslovljenog jedinjenje (78% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,84 (m, 4H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,29 (s, 3H), 7,8 (s, 1H), 11,70 (s, 1H).

Primer 22

etil 1 - metil- 8- ff ( trifluorometiDsulfoninoksiM. 5- dihidro-1H- pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB66- X03- M00 ( C01VD011

Rastvore se 0,60 g (2,19 mmol) etil 8-hidroksi-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3h]hinazolin-3-karboksilata i 0,31 g (2,19 mmol) trietilamina u 60 mL dihlorometana, pa se 5 h mešaju na -78°C. Zatim se doda 0,72 mL (2,19 mmol) anhidrida p-toluensulfonske kiseline. Reakcija se preko noći meša, pa ostavi da dostigne sobu temperaturu, zatim opere rastvorom NaHC03u vodi, osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Ostatak se triturira dietiletar/acetonom, a proizvod se sakupi filriranjem, što daje 0,60 g (67% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,13 Hz, 3H), 3,09 (s, 4H), 4,28 (s, 3H), 4,32 (q, J=7,11 Hz, 2H), 8,86 (s, 1H).

Primer 23

etil 84f( terc- butoksikarbonil) pirolidin- 3- inamino)- 1- metil- 4, 5- dihidro-1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB97- X00- M00 ( COD- DOn

U rastvor 1,5 g (3,7 mmol) etil 1-metil-8-{[(trifluorometil)surfonil]oksi}-4,3-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 150 mL anhidrovanog dioksana doda se 756 mg (4,1 mmol) ter-butil-3-aminopirolidin-1-karboksilata. Reakciona smeša se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu, pa opere vodom. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata i ispari. Posle trituriranja dietiletrom i filtriranja sakupi se 1,2 g (88% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,38-1,44 (m, 9H), 1,81-1,99 (m, 1H), 2,09-2,23 (m, 1H), 2,79 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,95 (t, J=7,80 Hz, 2H), 3,13-3,66 (m, 4H), 4,30 (q, J=7,07Hz, 2H), 4,32-4,41 (m, 1H), 4,34 (s, 3H), 7,40 (s, 1H), 8,27 (s, 1H).

Analogno, ali koristeći pogodne amino derivate, dobijeno je sledeće jedinjenje: etil 8- fn- benzilpirolidin- 3- il) amino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksilat

fB98- X00- M00 ( COD- DOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,21 i 1,79 (2m, 2H), 2,51 i 2,69 (2m, 4H), 2,93 i 2,74 (2t, J=7,68 Hz, 3H), 4,30 (m, 5H), 7,33 (m, 6H), 8,3 (s, 1H).

Primer 24

8- amino- 1 - metil- 1 H- oirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksi) at

rB00- X00- M00 ( C0D- D031

Rastvori se 2,5 g (9,16 mmol) etil 8-amino-1 -metil-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 40 mL metanola i 4 mL dimetilformamida sa 50 mL 30% NH40H. Ova smeša se 1 dan drži na 65°C, uz mešanje. Zatim se rastvarač ispari do suva, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari. Sirovi proizvod se triturira dietiletrom, a proizvod sakupi filtriranjem (50% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,68 i 2,90 (2m, 4H), 4,28 (s, 3H), 6,50 (bs, 2H), 7,13-7,42 (bs, 2H), 8,15 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 25 1- metil- 6- r( fenilacetil) amino1- 1H- pirazolo[ 4. 3- h1hinozalin- 3- karfa fB05- X01- M00 ( C01HD031

Suspenduje se 0,40 g (1,47 mmol) 8-amino-1 -metil-1 H-pirazoio[4,3-h]hinozalin-3-karboksamida u 20 mL tetrahidrofurana i 5 mL piridina, pa se doda 0,42 mL (3,22 mmol) fenilacetilhlorida. Reakciona smeša se 16 h meša na sobnoj temperaturi. Ispari se rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu, opere rastvorom NaHC03u vodi i zatim vodom. Posle sušenja iznad Na2S04rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, a sirovi materijal prečisti hromatografijm na koloni sa silikagelom (eluent cikioheksan/aceton) dajući 0,35 mg naslovljenog jedinjenja (60% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,62-3,02 (2m, 4H), 3,76 (m, 2H), 4,3 (s, 3H), 7,00-7,50 (m, 7H), 8,50 (s, 1H), 10,80 (bs, 1H).

Radeći analogno ovom postupku, dobije se sledeće jedinjenje: 8-( benzoilaminoH- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h^^

rB04- X01M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,87-3,04 (2m, 4H), 4,33 (s, 3H), 7,20-7,46 (bs, 2H), 7,47-7,53 (m, 3H), 7,90-8,00 (m, 2H), 8,60 (s, 1H), 10,97 (m, 1H).

Primer 26

etil 8- r( aminokarbonil) aminol- 1 - metil- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB00- X02- M00 ( COD- DOH

Rastvori se 1,00 g (3,7 mmol) etil 8-amino-1-metii-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 50 mL piridina, pa se doda 1 mL (8,0 mmol) trihloroacetilizocijanata. Smeša se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ispari pod sniženim pritiskom, a ostatak tretira sa 50 mL metanola. Posle 2 h mešanja ukloni se rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere razblaženim rastvorom amonijum-hidrata. Posle sušenja iznad anhidrovanog Na2SC*4 ispari se organski sloj do suva, a ostatak prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent: dihlorometan/aceton 4/1), dajući 0,40 g (34% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,28 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,8-3,0 (2m, 4H), 4,19-4,34 (1s i 1q, J=7,07 Hz, 3H), 7,04 (bs, 2H), 8,44 (bs, 1H), 9,91 (bs, 1H).

Primer 27

etil 8- ff( etilamino) karrfonil1aminoH- metil- 1 H-pirazolo[ 4. 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB03- X02- M00 ( C01)- D0n

U suspenziju 18 mg (0,44 mmol) natrijum-hidrida (80% u minearinom ulju) (0,37 mmol) u suvom dimetilfonmamidu, u kapima se dodaje rastvor 100 mg etil 8-amino-1-metil-1 H-pirazolo[4.3-h]hinazolin-3-karboksilata (0,37 mmoi) u 5 mL istog rastvarača, na 0°C, uz mešanje. Posle 5 min, smeši se doda 0,070 mL (0,88 mmol) etilizocijanata, pa se reakcija ostavi da dostigne sobnu emperaturu. Posle 8 h rastvarač se ispari pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Posle sušenja iznad Na2SC>4rastvarač se ukloni, a proizvod prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/ aceton) dajući 64 mg, (50% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,10 (t, J=7,20 Hz, 3H), 1,29 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,76-3,04 (2m, 4H), 3,12 (m, H), 4,21 (q, J=7,07Hz, 2H), 4,32 (s, 3H), 8,45 (m, 1H), 8,71 (t, 1H), 9,70 (bs, 1H).

Primer 28

8- r( aminokarbonil) aminol- 1 - metil- 1 H- prazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

[ B00- X02- M00 ( C01VD031

Suspenzija 0,20 g (0,63 mmol) etil 8-[(aminokarbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 15 mL smeše metanol/formamid/30% amonijum-hidroksid, 1/1/1, meša se 48 h u zatvorenom balonu, na 65°C. Zatim se rastvarač ispari pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvori u smeši dihlorometan/metanol 9/1, pa opere vodom. Organski sloj se osuši iznad anhidrovanog Na2S04i ispari do suva. Ovaj proizvod se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/aceton/metanol) dajući 0,06 g (50% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,91-3,09 (m, 4H), 3,81 (s, 3H), 6,47 (m, 3H), 7,83 (bs, 2H), 8,58 (m, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom, dobijeno je sledeće jedinjenje: 8-( r( etilamino) kart) oninamino) 1- metil- 4. 5- dihidro-1H- pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB03- X02- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,10 (t, J=7,19 Hz, 3H), 2,82 (t, J=7,62 Hz, 2H), 2,97 (t, J=7,74 Hz, 2H), 3,23 (m, 2H), 4,28 (s, 3H), 7,24 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,75 (t, J=5,61 Hz, 1H), 9,67 (s, 1H).

Primer 29

etil 8- jodo- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

U snažno mešanu, toplu suspenziju etil 8-amino-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (8,8 g, 0,032 mol) i dimetoksietana (1,2 L), koja se održava u inertnoj atmosferi argona, dodaju se redom cezijum-jodid (9,13 g, 0,035 mol), bisublimat joda (4,45 g, 0,018 mol), bakar-jodid (2,01 g, 0,01 mol) i izopentilnitrit (7,00ml_, 6,14 g, 0,052 mol). Ova reakciona smeša se snažno meša 18 h na 65-70°C. Posle hlađenja u kupatilu led-voda, čvrsta faza se odvoji filtriranjem, a filtrat razblaži dihlorometanom (2,0 L), opere 30% amonijum-hidroksidom (150 mL), natrijum-tiosulfatom (300 mL), rastvorom soli i osuši iznad Na2S04- Posle koncentrisanja do oko 100 mL dimetoksietana, istaloži se sirovi etil 8-jodo-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat, pa se filtrira i opere dimetoksietanom. Fleš hromatografija na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 98/2) daje 5,69 g naslovljenog jedinjenja (46% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,28 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,81-3,07 (2t, J=8,90 Hz, 4H), 4,24 (s, 3H), 4,27 (q, J=7,07 Hz, 2H), 8,5 (bs, 1H).

Radeći analogno ovom postupku, dobijena su sledeća jedinjenja:

etil 8- iodo- 1. 4. 4- trimetil- 4, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,3 (s, 6H), 2,8 (s, 2H), 4,3 (s, 3H), 4,3 (q, J=7,1Hz, 2H), 8,5 (s, 1H);

etil 8- iodo- 1 . S. S- trimetM. S- dihidro- l H- pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,32 (t, J=7,19 Hz, 3H), 1,32 (s, 6H), 2,96 (s, 2H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,28 (s, 3H), 8,58 (s, 1H);

etil 1 -( 3, 3- dimetilbutil)- 8- iodo- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4, 3- h1hinazolin-3- karboksilat: etil 2-( 3, 3- dimetilbutin- 8- iodo- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolof4, 3- h1hinazolin-3- karboksilat.

Primer 30

etil 8-( ciklopentilamino)- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4, 3- h1hinazolin-3- karboksilat

fB73- XQ0- M00 ( COD- DOn

Zagrevaju se 3 h na 100°C, pod azotom, etil 8-jođo-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat (0,5 g, 1,3 mmol) i ciklopentilamin (0,65 mL, 6,5 mmol). Smeša se koncentriše pod sniženim pritiskom, a ostatak prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent etilacetat/cikloheksan 70/30), dajući 0,24 8-(ciklopentilamino)-1 -metil-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (54% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,54 (m, 4H), 1,70 (m, 2H), 1,94 (m, 2H), 2,77 (m, 2H), 2,94 (t, J=7,74 Hz, 2H), 4,17 (m, 1H), 4,30 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,35 (s, 3H), 7,11 (d, J=6,34 Hz, 1H), 8,2 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja: 8-( f1-( etoksikarbonil) Diperidin- 1- inamino)- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4. 3h1hinazolin- 3- karboksilat

rB89- X00- M00 ( COD- DOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm: 1, 20 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,32 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,92 (dd, J=12,62 i 2,99 Hz, 2H), 2,89 (m, 6H), 3,94 (m, 3H), 4,05 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,30 (q, J=7,19 Hz, 2H), 4,33 (s, 3H), 7,13 (d, J=5,85 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H);

fB27- X00- M00 ( C03VD0n: fB27- X00- M04 ( C03)- D011.

Primer 31

kaliium 8-( ciklopentilamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4, 3- hlhinazolin-3- karboksilat

[ B73- X00- M00 ( C0D- D021

Suspenduje se etil 8-(ciklopentilamino)-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat (230 mg, 0,67 mmol) u anhidrovanom etanolu (5 mL), pa se 1,5 h tretira, na temperaturi refluksa, sa 1,5 M rastvorom kalijum-hidroksida u etanolu (1,33 mL, 3 ekviv.). Posle hlađenja u kupatilu sa ledom, nastali talog se sakupi filtriranjem, dajući naslovljeno jedinjenje (193 mg, 82% prinos) kao kristalnu supstancu.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,61 (m, 6H), 1,94 (m, 2H), 2,67 (m, 2H), 2,90 (m, 2H), 4,16 (m, 1H), 4,21 (s, 1H), 6,90 (d, J=6,83 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 32 8-( cikloDentilaminoV1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- hlhinazolin-3- karboksamid fB73- X00- MQ0 ( C0D- D031

Suspenzija kalijum 8-(cik!opentilamino)-1-meiil-4,5-dihidro-1 H-pirazoio[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (180 mg, 0,51 mmol) u anhidrovanom dimetirformamidu (3,0 mL) i anhidrovanom tetrahidrofuranu (3,0 mL), tretira se sa N-etil-N,N-diizopropilaminom (0,175 mL, 2 ekviv.) i N-etil-N',N'-diizopropilkarbo-diimid hidrohloridom (EDCI) (195 mg, 2 ekviv.). Smeša se zatim ohladi na 0°C, pa tretira sa amonijum 1H-1,2,3-benzotriazol-1-atom (137 mg, 2 ekviv.). Posle 5 min reakcija se zagreje na sobnu temperaturu, pa se preko noći drži na toj temperaturi. Reakcija se razblaži vodom, a nastali talog se sakupi filtriranjem, dajući naslovljeno jedinjenje (143 mg, 9 % prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,65 (m, 6H), 1,94 m, 2H), 2,73 (m, 2H), 2,95 (t, J=7,62 Hz, 2H), 4,17 (m, 1H), 4,32 (s, 3H), 7,08 (d, J=6,83 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 8,20 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja:

U Tabeli XII, u nastavku, dati su podaci o HPLC/masi za neka reprezentativna jedinjenja iz ovog pronalaska.

Primer 33

etil 1 - metil- 8-( pirolidin- 3- ilaminoV4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB99- X00- M00 ( C01VD031

Rastvor 110 mg (0,27 mmol) etil 8-{[1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il[1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-il]am

zolin-3-karboksilata u smeši dihlorometan/trifluorosirćetna kiselina 9/1 meša se 6 h na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ukloni pod vakuumom, a dobijeno ulje razmuti sa dihlorometanom i opere rastvorom NaHC03u vodi. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari, a ostatak triturira dietiletrom, dajući 83 mg (60% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,98-2,11 (m, 1H), 2,22 (s, 1H), 2,77 (t, J=7,62 Hz, 2H), 2,92-3,02 (m, 2H), 3,14-3,55 (m, 4H), 4,31 (s, 3H), 4,44-4,57 (m, 1H), 7,27 (s, 2H), 8,29 (s, 1H), 8,76 (s, 1H).

Analogno, dobijeno je sledeće jedinjenje: N. 1 - dimetil- 8-( piperidin- 4- ilaminoH, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3-

karboksamid

fB79- X00- M00 ( C01VD031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,65-1,82 (m, 2H), 2,05-2,16 (m, 2H), 2,75 (d, J=4,76Hz, 3H), 2,75-2,80 (m, 2H), 2,97 (t, J=7,68 Hz, 2H), 3,01-3,09 (m, 2H), 3,27-3,49 (m, 2H), 3,93-4,10 (m, 1H), 4,31 (s, 3H), 7,59 (s, 1H), 8,07 (q, J=4,47Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,44-8,63 (m, 1H), 8,69-8,90 (m, 1H).

Primer 34

1- metil- 8-( piDeridin- 4- ilamino)- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksamid

fB79- X00- M00 ( C01VD031

U rastvor 1 g (2,4 mmol) 8-[(1-benzilpiperidin^-il)amino]-1-metil-4,5dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 90 mL apsolutnog etanola dodaju se 1 g 10 mas% paladijuma na aktivnom uglju i 30 mL 9 % mravlje kiseline. Dobijena smeša se 12 h meša na 60°C. Zatim se katalizator odvoji na Celite-u, a filtrat ispari. Sirovi proizvod se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom i eluira sa smešom CH2Cl2-MeOH-Et3N, dajući 350 mg (45% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,65-1,77 (m, 2H), 2,04-2,17 (m, 2H), 2,75 (t, J=7,56 Hz, 2H), 2,96 (t, J=7,56 Hz, 2H), 2,99-3,09 (m, 2H), 3,28-3,44 (m, 2H), 3,93-4,08 (m, 1H), 4,31 (s, 3H), 7,25 (s, 1H), 7,31 (d, J=7,56 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 8,25 (s, 1H).

Primer 35

8-[( 1- formilpiridin- 4- inamino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3- hlhinazolin-3- karboksamid

fB169- X00- M00 ( C0D- P031

Rastvori se 500 mg (1,53 mmol) 1-metil-8-(piperidin-4-ilamino)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 10 mL dimetilformamida, koji sadrži 253 mg (1,68 mmol) terc-butildimetilsilil hlorida, 0,26 mL trietilamina i 7 mg 4-dimetilaminopiridina (0,06 mmol), pa se ova smeša 25 h meša na 35-40°C, pod azotom. Smeša se zatim raspodeli između dihlorometana i vode, odvoji organski sloj, opere rastvorom soli i osuši iznad natrijum-sulfata. Isparavanje isparljivih sastojaka daje 435 mg (80% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,25-1,48 (m, 2H), 1,88-2,03 (m, 2H), 2,74 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,77-2,87 (m, 2H), 2,95 (t, J=7,62 Hz, 2H), 3,10-3,20 (m, 1H), 3,66-3,79 (m, 1H), 3,93-4,05 (m, 1H), 4,09-4,17 (m, 1H), 4,31 (s, 3H), 7,13 (d, J=6,83 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,23 (s, 1H).

Primer 36

8-( ciklopentilamino)- 1- piperidin- 5- il- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin-3- karboksamid

rB73- X00- M00 ( C18VD031

Rastvori se 500 mg (1,1 mmol) 1-(1-benzilpiperidin-4-il)-8-(ciklopentilamino)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 50 mL sirćetne kiseline, pa se doda 50 mg PtC"2. Ova smeša se podvrgne hidrogenovanju na 4,1 bar, na sobnoj temperaturi. Posle 12 h katalizator se profiltrira kroz Celite, a filtrat se ispari. Ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu i opere rastvorom NaHC03u vodi. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata, a rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom. Naslovljeno jedinjenje (80% prinos) se sakupi filtriranjem, posle trituriranja dietiletrom.

Primer 37

8-( ciklopentilaminoVN- hidroksi- N. 1- dimetil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

fB73- X00- M00 ( C0P- D1421

U suspenziju 400 mg (1,14 mmol) kalijum 8-(ciklopentilamino)-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 80 mL dihlorometana i nekoliko kapi dimetilformamida, na 0°C, doda se 0,11 mL (0,13 mmol) oksalilhlorida. Smeša se 6 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim ispari, ponovo rastvori u anhidrovanom dihlorometanu i prebaci u rastvor 344 mg (2,28 mmol) N-metilhidroksilamin hidrohlorida i 0,33 mL trietilamina u 20 mL istog rastvarača, ohlađenog na 0°C. Posle 4 h smeša se opere zasićenim rastvorom natrijum-hidrogenkarbonata u vodi, osuši iznad natrijum-sulfata i ispari do suva. Ostatak se triturira dietiletrom i filtrira, dajući 780 mg (60% prinos) naslovljenog jedinjenja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,46-1,61 (m, 4H), 1,64-1,78 (m, 2H), 1,87-2,01 (m, 2H), 2,67-2,89 (m, 4H), 3,35 (s, 3H), 4,11-4,23 (m, 1H), 4,31 (s, 3H), 7,06 (d, J=6,58 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,88 (s, 1H).

Analogno, ali koristeći pogodne derivate hidroksilamina, dobijena su sledeća jedinjenja: N- cikloheksil- 8-( cikloDentilaminoVN- hidroksi- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolof4, 3- hl- hinazolin- 3- karboksamid

rB73- X00- M00 ( C0D- D291

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 0,96-2,04 (m, 18H), 2,67-2,81 (m, 4H), 4,04-4,45 (m, 2H), 4,30 (s, 3H), 6,97-7,10 (m, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,45 (s, 1H);

N- benzil- 8- f ciklopentilamino)- N- hidroksi- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1- hinazolin- 3- karboksamid

fB73- X00- MQ0 ( C0D- D281

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,51-1,61 (m, 4H), 1,64-1,79 (m, 2H), 1,87-2,00 (m, 2H), 2,70-2,88 (m, 4H), 4,08-4,22 (m, 1H), 4,31 (s, 3H), 5,01 (s, 2H), 7,06 (d, J=6,58Hz, 1H), 7,22-7,43 (m, 5H), 8,21 (s, 1H), 9,89 (s, 1H).

Primer 38

8- anilino- N- hidroksi- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin-3- karboksamid

rB04- X00- M00 ( C0D- D051

U rastvor 260 mg (0,81 mmol) 8-anilino-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilne kiseline u 50 mL anhidrovanog dimetilformamida dodaju se redom, 111 mg (0,81 mmol) N-hidroksibenzotriazola, 0,16 mL N-metilmorfolina, 205 mg (1,07 mmol) N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorida i 58 mg (2,13 mmol) trifenilmetilhidroksilamina. Posle 48 h na sobnoj temperaturi rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, a ostatak razmuti u dihlorometanu i opere vodom. Zatim se organski sloj osuši iznad natrijum-sulfata i ispari. Ovaj sirovi materijal se tretira sa 10 mL smeše dihlorometan-trifluorosirćetna kiselina, pa se posle 4 h isparijivi sastojci uklone pod vakuumom. Ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu i opere rastvorom NaHC03u vodi, a proizvod prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom i eluira sa CH2CI2-CH3COCH34/1, dajući 180 mg (66% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,80-2,91 (m, 2H), 2,93-3,06 (m, 2H), 4,33 (s, 3H), 6,97 (tt, J=7,35 i 1,07 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=8,47 i 7,38 Hz, 2H), 7,72 (dd, J=8,66i 1,10 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 9,52 (s, 1H), 10,93 (s, 1H).

Primer 39

8- iodo- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h] hinazolin- 3- karboksamid

fB73- X00- M00 ( C01VD031

Rastvori se 1,0 g (2,6 mmol) etil 8-jodo-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u smeši 100 mL metanola i 100 mL 33% amonijum-hidroksida. Ovaj rastvor se 4 h meša na 60°C, u zatvorenom balonu. Nastali talog se sakupi, dajući 0,5 g (54% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,99 (m, 4H), 4,25 (s, 3H), 7,31 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 8,47 (s, 1H).

Primer 40

1- metil- 8-[ n- metilpiperidin^- il) amino|- 415- dihidro- 1H- pirazolof4, 3- h1hinazolin-3- karboksamid

[ B90- X00- M00 ( C0D- D031

Zagrevaju se 3 h, na 80°C, pod azotom, 8-jodo-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamid (0,10 g, 0,28 mmol) i 1-metilpiperidin-4-amin (0,19 g, 1,7 mmol). Smeša se koncentriše pod sniženim pritiskom, a ostatak prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/etanol/amonijum-hidroksid 90/10/1), dajući 0,047 mg 1-metil-8-[(1-metilpipeirdin-4-il)amino]-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida

(50% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,54 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 2,06 (m, 2H), 2,4 (s, 3H), 2,73 (m, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 4,30 (s, 3H), 7,01 (m, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 8,29 (s, 1H).

Primer 41

[ 8-( cikloheksilamino)- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3-

il]( fenil) metanon

fB27- X00- M01 ( C01VD071 i

f8-( cikloheksilamino)- 1- metil- 1 H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- in( fenil) metanon

rB27- X00- M01 ( C01VD071

1 . Korak: 6 -[( dimetilamino ) metilenl - 2 - etoksicikloheks - 2 - en - 1 - on

Rastvori se 3,4 g (0,02 mmol) 2-etoksicikloheks-2-en-1 -ona u 30 mL suvog dimetilformamida, pa se doda 30 mL (0,05 mmol) dimetilformamid-dimetilacetala. Ovaj rastvor se 2 h meša na 60°C. Zatim se rastvarač ispari pod vakuumom, a ostatak triturira dietiletrom i sakupi filtriranjem, dajući 6,6 g naslovljenog jedinjenja (80% prinos).

2. Korak: 2 -( benziltio )- 8 - etoksi - 5 , 6 - dihidrohinazolin

U rastvor 2,0 g (0,01 mmol) 6-[(dimetilamino)metilen]-2-etoksicikloheks-2-en-1-ona u 20 mL dimetilformamida doda se 2,6 g S-benzitizotiouree (2 ekviv ). Reakciona smeša se 4 h meša na 95°C. Zatim se rastvarač ispari pod sniženim pritiskom, a sirovi ostatak prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/metanol 9/1), dajući 1,5 g (50% prinos) naslovljenog jedinjenja.

3 . Korak: 2 -( benziltio )- 6 . 7 - dihidrohinazo1in - 8 ( 5H )- on

Rastvori se 1,5 g (5 mmol) 2-(benziltio)-8-etoksi-5,6-dihidrohinazolina u 50 mL sirćetne kiseline i 3 mL vode. Ovaj rastvor se 4 h meša na temperaturi refluksa. Zatim se rastvarač ukloni pod vakuumom, a ostatak raspodeli između dihlorometana i zasićenog rastvora NaHC03. Organski sloj se osuši iznad anhidrovanog Na2S04i koncentriše, dajući 1,0 g (74% prinos) naslovljenog jedinjenja.4 . Korak: 1 - f2 -( benziltio )- 8 - okso - 5 . 6 . 7 . 8 - tetrahidruhinazolin - 7 - ill -

2 - feniletan - 1 , 2 - dion

U rastvor 0,22 g (0,81 mmol) 2-(benziltio)-6,7-dihidrohinazolin-8(5H)-ona u 5 mL tetrahidrofurana, ohlađen na -50°C, doda se 0,10 g natrijum-hidrida, 60% u mineralnom ulju. Dobijena suspenzija se drži 30 min na istoj temperaturi, a zatim se doda 0,59 mL etil-oksobenzenacetata (PhCOCOOEt), pa se reakciona smeša ostavi da se vrati na sobnu temperaturu. Posle 16 h smeša se raspodeli između vode i etilacetata, a organski sloj osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent heksan/etilacetat 7/3), dajući 0,22 g (68% prinos) naslovljenog jedinjenja.

5 . Korak: [ 8 -( benziltio )- 1 - metil - 4 . 5 - dihidro - 1H - pirazolo [ 4 . 3 - hlhin ^

( fenil ) metanon [ B05 - X04 - M00 ( C0D - D071

Rastvori se 0,22 g (0,55 mmol) 1-[2-(benziltio)-8-okso-5,6,7,8-tetrahidrohinazolin-7-il]-2-feniletan-1,2-diona u 6 mL etanola, pa se doda 0,03 g (0,66 mmol) metilhidrazina. Reakcija se drži još 5 h na temperaturi refluksa, uz mešanje. Posle ovog vremena rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i koncentriše, dajući 0,16 g naslovljenog jedinjenja (79% prinos).

6 . Korak: f8 -( benzilsulfonil )- 1 - metil - 4 . 5 - dihidro - 1H -

Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - ill ( fenil ) metanon fB05 - X05 - M00 ( COD - DO71

U rastvor 70 mg (0,17 mmol) [8-(benziltio)-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-il](fenil)metanona u 3 mL dihlorometana, doda se 115 mg (0,34 mmol) m-hloroperbenzoeve kiseline. Reakciona smeša se 1 h drži na sobnoj temperaturi. Rastvor se zatim opere rastvorom NaHC03u vodi, a organski sloj osuši iznad Na2S04i ispari pod vakuumom, dajući 70 mg (93% prinos) naslovljenog jedinjenja.

7 . Korak: f8 -( cikloheksilamino )- 1 - metil - 4 , 5 - dihidro - 1H -

pirazolo [ 4 . 3 - hJhinazolin - 3 - ilJ ( fenil ) metanon ( B27 - X00 - M00 ( C0D - D071 i

[ 8 -( cikloheksilamin )- 1 - metil - 1H - Dimzolo [ 4 , 3 - h1hinazolin - 3 - ilUfenil ) metanon

[ B27 - X00 - M01 ( C0D - D071

Zagreva se 16 h, na 100°C, uz mešanje, rastvor 83 mg (0,19 mmol) [8-(benzilsulfonil)-1-metil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-il](fenil)metanona u 3 mL dimetilsulfoksida i cikloheksilaminu (0,033 mL, 0,2 mmol). Zatim se ukloni rastvarač pod sniženim pritiskom, a sirovi ostatak prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/aceton), dajući 31 mg [8-

(cikloheksilamino)-l -metil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-il](fenil)-metanona i 15 mg [8-(cikloheksilamino)-1-metil-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-il](fenil)metanona (80% prinos, ukupno).

[B27-X00-M00 (C01)-D07]: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,00-2,00 (5m, 11H), 2,61 (m, 2H), 2,66 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 7,17 (bs, 1H), 7,34-7,37 (m, 3H), 7,41-7,51 (m, 3H), 8,27 (s, 1H),

[B27-X00-M01 (C01)-D07]:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,20-2,20 (5m, 11H), 2,61 (m, 2H), 4,02 (bs, 3H), 6,69 (m, 1H), 7,37-7,58 (2m, 6H), 7,93 (bs, 1H), 8,83 (bs, 1H).

Primer 42

etil 1- metil- 8-( piridin- 2- ilaminoV4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3.- h] hinazolin-3- karboksilat

fB15- X00- MQ0 ( C01)- D01l

U balon okruglog dna, produvan argonom, šaržira se paladijum-acetat [Pd(OAc)2](15,3 g, 0,07 mmol, 10%), (-)BINAP (42,6 mg 0,07 mmol, 10%) i dimetilformamid (12 mL). Smeša se pod argonom meša 30 min, a zatim se dodaju 2-aminopiridin (70,4 mg, 0,75 mmol), etil 8-jodo1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat (250 mg, 0,65 mmol), kalijum-karbonat (1,89 g, 13,67 mmol) i dimetilformamid (5 mL). Dobijena smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim 18 h zagreva na 120°C, u uljanom kupatilu, pod argonom i uz dobro mešanje. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša se prespe u vodu, pa ekstrahuje dihlorometanom. Organski ekstrakti se operu rastvorom soli i osuše iznad Na2S04. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a sirovi proizvod se razmuti u dietiletru, filtrira, opere dietiletrom i pečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol, 97/5 : 2/5), dajući 145 mg (63,8% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 3,0 (m, 4H), 3,2 (q, J=7,2Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,0 (ddd, J=2,4, 9,1 i 0 Hz, 1H), 7,8 (ddd, 1H), 8,2 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,3 (ddd, J=4,8, 2,0 i 0,9 Hz, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 8-[( 3, 5- dihlorofenil) aminol- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo [ 4. 3- hlhinazolin-3- karboksilat

rB14- X00- M00 ( C0PD011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (m, 1H), 7,4 (m, 2H), 8,5 (s, 1H), 10 (s, 1H);

etil 8-{ f3- metoksi- 5-( trifluorometi0fenil] amino)- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

fB16- X00- MQ0 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 3,8 (s, 3H), 4,3 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 6,8 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

etil 8-[( 4- hidroksifenihamino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h] hinazolin-3- karboksilat

rBi8- xoo- Moo ( coppon

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1.3 (t, J=7,1Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (m, 5H), 6,7 (d, J=8,8Hz, 2H), 7,4 (d, J=8,9 Hz, 2H), 8,3 (S, 1H), 9,1 (s, 1H), 9,2 (s, 1H);

etil 8-( 1 H- imidazol- 1 - ilamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksilat

fB21- X00- M00 ( C0DD011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,3 (m, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (d, J=7,1 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (s, 1H), 7,6 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,7 (s, 1H), 7,9 (d, J=8,9Hz, 2H), 8,2 (s,1H), 8,5 (s, 1H), 9,7 (3, 1H);

etil 1- metil- 8-( 1. 3- tiazol- 2- ilamino)- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksilat

fB86- X00- M00 ( CODDOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,3 (m, 3H), 3,0 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (d, J=3,5Hz, 1H), 7,5 (d, J=3,7 Hz, 1H), 8,6 (s, 1H), 11,6 (s, 1H);

etil 1- metil- 8-( 1 H- pirazol- 3- ilaminoM - metili. 5- dihidro- 1 H-pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB77- X00- M00 ( C0DDO11

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 6,5 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 9,6 (s, 1H), 12,2 (s, 1H);

etil 1- metil- 8- r( 4- morfolin^- ifenil) amino1- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB19- X00- M00 ( COPDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 3,1 (m, 4H), 3,8 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,3 (s, 3H), 6,9 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,6 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,4 (s, 1H), 9,3 (s, 1H);

etil 84f4-( etoksikartooniOfenillamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB87- X00- M00 ( COPDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 6H), 3,0 (m, 4H), 4,3 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,9 (m, 4H), 8,5 (s, 1H), 10,0 (s, 1H);

etil 8- ff4-( N. N- dietilamino) feninaminoM- metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

fB17- XQ0- M00 ( COD- DOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,1 (t, J=7,0 Hz, 6H), 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 3,3 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,3 (s, 3H), 6,7 (d, J=9,1Hz, 2H), 7,4 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,3 (s, 1H), 9,1 (s, 1H);

etil 8-( f4-( acetilamino) feninamino>- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB22- X00- M00 ( COPDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1Hz, 3H), 2,0 (s, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,5 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,6 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,4 (s, 1H), 9,4 (s, 1H), 9,8 (s, 1H);

etil 8-{ f3-( hidroksimetil) fenil] amino}- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

fB11- X00- M00 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 4,5 (s, 2H), 6,9 (m, 1H), 7,3 (t, J=7,8Hz, 1H), 7,5 (m, 1H), 7,8(s,1H), 8,4 (s, 1H), 9,5 (s, 1H);

etil 8- r4-( metoksifenil) amino1- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

[ B68- X00- M00 ( C0DD01)

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 4,3 (q, J=7,1Hz, 2H), 4,3 (s, 3H), 6,9 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,6 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,4 (s, 1H), 9,3 (s, 1H);

etil 8- ff( 4- bromo- 3- hloro) feninamino)- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolor4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB88- X00- M00 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,3 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,4 (s, 3H), 7,6 (dd, J=8,8 i 2,4 Hz, 1H), 7,7 (d, J=8,8Hz, 1H), 8,2 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

etil 8- fr3- bromo- 5-( trifluorometil) feninaminoV1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB115- X00- M00 ( COPDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,1 Hz, 3H), 2,95 (m, 4H), 4,31 (q, 7,2 Hz, 2H), 4,39 (s, 3H), 7,49 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 10,11 (s, 1H);

etil 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- in- 3-( hidroksimetihfenilaminol- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

rB116- X00- M00 ( CODDOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,07 Hz, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,42-2,61 (m, 4H), 2,79-2,88 (m, 6H), 2,98 (t, J=7,80Hz, 2H), 4,31 (q, J=7,15Hz, 2H), 4,36 (s, 3H), 4,56 (d, J=5,24 Hz, 2H), 5,06 (t, J=5,30 Hz, 1H), 7,03 (d, J=8,66 Hz, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,81 (d, J=2,68 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 9,42 (s, 1H);

etil 1 - metil- 84f4-( moffolin- 4- ilmetinfeninamino)- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

fB102- X00- M00 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, J=7,13 Hz, 3H), 2,35 (s, 4H), 2,86 (t, J=7,62 Hz, 2H), 2,99 (t, J=7,80 Hz, 2H), 3,42 (s, 2H), 3,55-3,61 (m, 4H), 4,31 (q, J=7,07 Hz, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,24 (d, J=8,41 Hz, 2H), 7,66 (d, J=8,41 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H), 8,52 (s, 1H);

etil 1- metil- 8-( l4- r( 1- metilpiperidin- 4- inoksi1fenil) amino)- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB103- X00- M00 ( C01D011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,32 (t, 3H), 2,09 (m, 4H), 2,86 (m, 5H), 2,98 (t, 2H), 3,37 (m, 5H), 4,30 (q, 2H), 4,34 (s, 3H), 7,03 (m, 2H), 7,61 (m, 2H), 8,39 (s, 1H), 9,40 (s, 1H);

etil 1 - metil- 8-(( 3- f( 4- metilpiperazin- 1 - il) metillfeniltemino^, 5- dihidro- 1 H-

pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

[ B104- X00- M00 ( C0PD011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, 3H), 2,21 (m, 3H), 2,40 (m, 8H), 2,86 (t, 2H), 2,99 (t, 2H), 3,44 (s, 2H), 4,30 (q, 2H), 4,39 (s, 3H), 6,91 (m, 1H), 7,24 (m, 1H), 7,56 (m, 1H), 7,75 (dd, 1H), 8,43 (m, 1H), 9,5 (s, 1H);

etil 8-{ f3- fluoro- 4-( 4- metilpiperazin- 1- il) fenillamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksilat

fB109- X00- M00 ( COPDOP

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,85 (t, 2H), 2,99 (m, 6H), 4,30 (q, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,01 (t, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,64 (dd, 1H), 8,42 (m, 1H), 9,56 (s, 1H);

etil 8- f( 4- hlorofenil) aminoyi - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

[ B112- X00- M00 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, 3H), 2,86 (t, 2H), 2,99 (t, 2H), 4,30 (q, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,38 (d, 2H), 7,74 (d, 2H), 8,45 (s, 1H), 9,70 (s, 1H);

etil 8- ff4-( hidroksimetil) fenil1amino!- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolof4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat

fB114- X00- M00 ( CODDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, 3H), 2,86 (t, 2H), 2,99 (t, 2H), 4,30 (q, 2H), 4,37 (s, 3H), 4,45 (s, 2H), 7,27 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 8,42 (S, 1H), 9,60 (s, 1H).

Primer 43

1- metil- 8-( piridin- 2- ilamino)- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin-3- karboksamid

rB15- X00- M00 ( C0DD031

U rastvor etil 1-metil-8-(piridin-2-ilamino)-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (220 mg, 0,63 mmol) u metanolu (250 mL), doda se 33% amonijum-hidroksid (100 mL), pa se rastvor 8 h meša na 65°C. Koncentrisanjem rastvora istaloži se konačno jedinjenje, pa se sakupi vakuum filtriranjem, opere vodom i dva puta kristališe iz metanola, koji sadrži natrijum-hidroksid, pa se suši na 40°C, pod vakuumom. Na taj način se dobije 60 mg naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,0 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,0 (ddd,J=7,2, 4,9 i 1,0 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,8 (ddd, 1H), 8,2 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,3 (ddd, J=4,8, 2,0 i 0,9 Hz, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H).

Radeći u skladu sa istom procedurom, dobijena su sledeća jedinjenja: 8- f( 3. 4- dihlorofeni0amino1- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

fB14- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,0 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (t, J=1,8 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,9 (d, J=1,8 Hz, 2H), 8,5 (s, 1H), 10,0 (s, 1H);

8- lf3- metoksi- 5- tfrifluorometil) feninamino)- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB16- X00- M00 ( C0P- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,9 (m, 4H), 3,8 (s, 3H), 4,3 (s, 3H), 6,8 (s, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

8- f( 4- hidroksifenil) amino1- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB18- X00- M00 ( C01V- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,9 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 6,7 (d, J=8,8 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (d, J=8,9Hz, 2H), 7,5 (s, 1H), 8,3 (s, 1H), 9,1 (s, 1H), 9,2 (s, 1H);

8- fr4-( 1H- imidazol- 1- il) feninaminoV1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB21- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,9 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (s, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,7 (t, J=1,2 Hz, 1H), 7,9 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,2 (s,1 H), 8,4 (s, 1H), 9,7 (s, 1H);

1 - metil- 8-( tiazol- 2- ilamino) amino]- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB86- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,0 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (d, J=3,7 Hz, H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (d, J=3,7Hz, 1H), 7,5 (s, 1H), 8,6 (s, 1H), 11,8 (s, 1H);

1 - metil- 8-( 1 H- pirazol- 3- ilamino)- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3-

karboksamid

rB77- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,9 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 6,5 (bs, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,6 (bs, 1H), 8,4 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

8-([ 4-( N- morfolino) fenillaminol- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB19- X00- M00 ( C0P- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,9 (m 4H), 3,1 (m, 4H), 3,8 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 6,9 (d, J=9,1Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,6 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,4 (s, 1H), 9,3 (s, 1H);

S^- Cdietilamino^ feninaminoM- metil- 4. 5- dihidro- 1H-

pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB17- X00- M00 ( C0P- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,1 (t, J=7,0 Hz, 6H), 2,9 (m, 4H), 3,3 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 6,7 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (m, 1H), 7,4 (d, J=9,0Hz, 2H), 8,3 (s, 1H), 9,1 (s, 1H);

8-( f4-( acetilamino) fenillamino)- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB2- X0Q- M00 ( C01VD031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,0 (s, 3H), 2,9 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,5 (d, J=8,9Hz, 2H), 7,6 (d, J=9,0 Hz, 2H), 8,4 (s, 1H), 9,4 (s, 1H), 9,8 (s, 1H);

8- ff3-( hidroksimetinfenil1aminoV1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB11- X0Q- M00 ( C0P- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,9 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 4,5 (s, 2H), 5,2 (s, 1H), 6,9 (d, J=8,0Hz, 1H), 7,2 (m, 2H), 7,5 (s, 1H), 7,5 (dd, J=8,1i 1,4 Hz, 1H), 7,8 (t, J=1,8Hz, 1H), 9,5 (s, 1H);

8-[( 4- metoksifenil) amino]- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB68- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,9 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 4,3 (s, 3H), 6,9 (d, J=9,1Hz, 2H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (d, J=9,0Hz, 2H), 8,4 (s, 1H), 9,3 (s, 1H);

8- ff( 4- bromo- 3- hloro) feninamino>- 1 - metiM. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

fB88- X00- M00 ( C01VD031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,9 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (dd, J=8,8 i 2,4 Hz, 1H), 8,2 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,5 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- 3-( hidroksimetinfenilamino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H

pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

TB116- X00- M00 ( C01 )- D03l

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,29 (s, 3H), 2,45-2,61 (m, 4H), 2,73-2,87 (m, 6H), 2,99 (t, J=7,56 Hz, 2H), 4,34 (s, 3H), 4,56 (d, J=5,24 Hz, 2H), 5,06 (t, J=5,37Hz, 1H), 7,03 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,50 (dd, J=8,23i 2,99 Hz, 1H), 7,83 (d, J=2,68Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,40 (s, 1H);

8- r4-( 4- metil- piperazin- 1- il- 3-( hidroksimetil) fenilamino1- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4, 3- hIhinazolin- 3- karboksilna kiselina metilamid

fB116- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,28 (s, 3H), 2,45-2,55 (m, 4H), 2,75 (d, J=4,63Hz, 3H), 2,81 (t, J=7,19 Hz, 2H), 2,83 (t, J=4,63 Hz, 4H), 2,99 (t, J=7,5 Hz, 2H), 4,34 (s, 3H), 4,56 (d, J=5,24Hz, 2H), 5,05 (t, J=5,37 Hz, 1H), 7,03 (d, J=8,54Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,41Hz, 1H), 7,83 (d, J=2,68Hz, 1H), 8,07 (q, J=4,63Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,40 (s, 1H);

8-[ 4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- 3-( bromo) fenilamino|- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksamid trihidrohlorid

fB117- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMS0-d6) 5 ppm: 2,83 (m, 2H), 2,88 (d, J=4,68Hz, 3H), 3,01 (m, 4H), 3,19 (m, 2H), 3,53 (m, 2H), 4,37 (s, 3H), 7,23 (m, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,63 (m, 1H), 8,21 (m, 1H), 8,44 (s, 1H), 9,67 (s, 1H), 10,13 (s, 1H);

8- r3( 4- metil- pjperazin- 1 - ilmetiOfenilaminol- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

fB104- X00- M00 ( C01VD031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,27 (s, 3H), 2,44 (s, 4H), 2,78-3,03 (m, 4H), 3,04-3,40 (m, 4H), 3,45 (s, 2H), 4,37 (s, 3H), 6,90 (d, J=7,32 Hz, 1H), 7,25 (t, J=7,68Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,57 (dd, J=7,68i 1,59 Hz, 1H), 7,76 (t, J=1,77 Hz, 1H), 8,42 (s, 1H), 9,52 (s, 1H);

8-( f( 3- riidroksi) 5- trifluorometillfenilaminoV1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB118- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,77-3,07 (m, 4H), 3,84 (s, 3H), 4,35 (s, 3H), 6,84 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 9,86 (s, 1H);

8- r4( 4- metil- piperazin- 1 - il) fenilamino1- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilna kiselina metilamid

rB10- X00- M0Q ( C0P- D041

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,75 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,81 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,85 (d, J=4,39Hz, 3H), 2,94-3,07 (m, 4H), 3,11-3,25 (m, 2H), 3,51 (d, J=11,83Hz, 2H), 3,73 (d, J=13,66 Hz, 2H), 4,33 (s, 3H), 6,99 (d, J=9,15Hz, 2H), 7,60 (d, J=9,02Hz, 2H), 8,08 (q, J=4,67Hz, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 10,36 (s, 1H);

8- anilino- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin-

3- karboksilna kiselina metilamid

rB04- X0Q- M00 ( C0P- D041

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,72 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,79 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,97 (t, J=7,68Hz, 2H), 4,31 (s, 3H), 6,94 (t, J=7,38Hz, 1H), 7,21-7,32 (m, 2H), 7,68 (d, J=7,56 Hz, 2H), 8,06 (q, J=4,35 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,48 (s, 1H).

Primer 44

1- metil- 8-( piridin- 2- ilaminoM. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4. 3- hlhinazolin-

3- karboksamid hidrohlorid

U rastvor 1-metil-8-(piridin-2-ilamino)-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u smeši 1:1 metanola i dihlorometana, doda se 4M HCI u dioksanu (1 mL). Posle 1 h na sobnoj temperaturi rastvarač se ukloni pod vakuumom, a čvrst ostatak trituria dietiletrom, dajući naslovljeno jedinjenje.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,0 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,3 (m, 2H), 7,5 (s, 1H), 7,8 (d, J=8,8Hz, 1H), 8,2 (t, J=7,7 Hz, 1H), 8,4 (dd, J=5,9 i 1,0 Hz, 2H), 8,6 (s, 1H), 11,6 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja: 1 - metil- 8-( tiazon- 2- ilamino)- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid hidrohohlorid

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 3,0 (m, 4H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (d, J=3,7 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (d, J=3,7Hz, 1H), 7,5 (s, 1H), 8,6 (s, 1H), 11,8 (s, 1H);

8- f4-( N- metilpiperazino) 3- hlorofenilamino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolof4. 3- h] hinazolin- 3- karboksamid trihlorohidrat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 3,1 (m, 15H), 4,4 (s, 3H), 7,2 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (dd, J=8,8 i 2,4 Hz, 1H), 8,0 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,4 (s, 1H), 9,7 (s, 1H), 10,5 (s, 1H);

8-[ 4-( N- metilpiperazino)- 3- bromofenilamino]- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid trihlorohidrat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 3,1 (m, 15H), 4,4 (s, 3H), 7,2 (d, J=8,8Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,6 (dd, J=8,6 i 2,4 Hz, 1H), 8,0 (d, J=2,6Hz, 1H), 8,2 (s, 1H), 9,7 (s, 1H), 10,5 (s, 1H);

N- benzil- 1- metil- 8- fl4-( 4-^

pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksamid ( LHartarat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,40 (s, 3H), 2,70 (m, 4H), 2,80 (t, J=7,52 Hz, 2H), 3,00 (t, J=7,62 Hz, 2H), 3,14 (m, 4H), 4,20 (s, 2H), 4,34 (s, 3H), 4,43 (d, J=6,34 Hz, 2H), 6,93 (d, J=9,15 Hz, 2H), 7,27 (m, 5H), 7,55 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,35 (s, 1H), 8,69 (t, J=6,34 Hz, 1H), 9,28 (s, 1H);

1- metil- 84( 4- morfolin- 4- i^

pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid hidrohohlorid

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,51 (m, 3H), 2,97 (m, 4H), 3,21 (m, 4H); 3,84 (m, 4H), 4,37 (m, 3H), 5,15 (m, 1H), 7,28 (m, 7H), 7,63 (m, 2H), 8,40 (m, 1H), 8,44 (m, 1H), 9,50 (m, 1H);

N-( 3- fluorobenzil)- 1- metil- 8-[( 4- morfolin- 4- irFenil) amino1- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4, 3- h] hinazolin- 3- karboksamid hidrohlorid

<1>H NMR (400 MHz, DMS0-d6) 8 ppm: 2,91 (m, J=73,53Hz, 4H), 3,16 (m, 4H), 3,81 (m, 4H), 4,35 (s, 3H), 4,43 (m, 2H), 7,07 (m, 6H), 7,61 (m, 2H), 8,37 (m, 1H), 8,80 (m, 1H), 9,44 (m, 1H);

N-( 3- fluorobenzin- 1- metil- 8- f( 4- morfolin- 4- ilfenil) amino1- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid metansulfonat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,33 (s, 3H), 3,00 (s, 4H), 3,17 (s, 4H), 3,80 (s, 4H), 4,35 (s, 3H), 4,43 (m, 2H), 7,07 (m, 6H), 7,61 (m, 2H), 8,37 (m, 1H), 8,80 (m, 1H), 9,46 (m, 1H).

Primer 45

8- anilino- N-( 2- hidroksietil)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB04- X00- M00 ( C01VD061

U suspenziju 0,30 g (0,86 mmol) etil 8-anilino-1-metiM,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u smeši 10 mL metanola i 10 mL dimetilformamida, doda se 5 mL etanolamina. Smeša se uz mešanje zagreva na 65°C, u zatvorenom sudu. Posle 5 h rastvarač se ukloni, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari. Ostatak se triturira dietiletrom, a proizvod sakupi filtriranjem (60% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,7-3,0 (2m, 4H), 3,47 (m, 4H), 4,32 (s, 3H), 4,71 (t, 1H), 6,94-7,67 (3m, 5H), 7,91 (t, J=5,73Hz, 1H), 8,38 (bs, 1H), 9,48 (bs, 1H).

Radeći analogno, dobijeno je sledeće jedinjenje: 8- anilino- N. 1- dimetil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB04- XQ0- M00 ( C0D- D041

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,72 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,79 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,97 (t, J=7,68 Hz, 2H), 4,31 (s, 3H), 6,94 (t, J=7,38 Hz, 1H), 7,28 (m, 2H), 7,68 (d, J=7,56 Hz, 2H), 8,06 (q, J=4,35 Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,48 (s, 1H).

Primer 46

8- f ( 4- metoksi- 3- hlorofenil) aminoM - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB20- X00- M00 ( C0D- D03]

U balon okruglog dna, pod atmosferom argona, šaržira se Pd(OAc)2(20 mg, 0,09 mmol, 10%), (±)-BINAP (55 mg, 0,09 mmol, 10%) i dimetilformamid (15 mL). smeša se 30 min meša pod argonom. Zatim se dodaju 3-hloro-p-anizidin (153 mg, 0,97 mmol), 8-jodo-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamid (300 mg, 0,84 mmol), K2CO3(2,45 g, 17,8 mmol) i dimetilformamid (6 mL). Nastala smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim 18 h zagreva na 120°C, u uljanom kupatilu, pod argonom i uz dobro mešanje. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša se prespe u vodu (300 mL), pa ekstrahuje dihlorometanom (5*60mL). Organski ekstrakti se operu vodom (2*20mL) i osuše iznad anhidrovanog Na2S04. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a sirovi proizvod se razmuti u dietiletru, filtrira i opere dietiletrom, pa prečisti fleš hromatografijm na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 97,5/2,5), dajući 95 mg čistog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6)6ppm: 2,9 (m, 4H), 3,8 (s, 3H), 4,3 (s, 3H), 7,1 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,5 (dd, J=9,0 i 2,6 Hz, 1H), 7,9 (d, J=2,6 Hz, 1H), 8,4 (s, 1H), 9,5 (s, 1H).

Radeći u skladu sa istom procedurom dobijeno je sledeće jedinjenje: 8- f4-( N- metil- N- piDerazinil- 3- hlorofenilaminoj- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4, 3- hjhinazolin- 3- karboksamid

fB13- X0O- M0O ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,3 (s, 3H), 2,5 (m, 4H), 2,9 (m, 8H), 4,4 (s, 3H), 7,1 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (s, 1H), 7,5 (dd, J=8,8i 2, Hz, 1H), 8,0 (d, J=2,6Hz, 1H), 8,4 (s, 1H), 9,6 (s, 1H).

Primer 47

8- r( 4- metoksibenzinamino1- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolor4, 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

rB60- X00- M00 ( C0D- D031

U rastvor 8-amino-1 -metil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (244 mg, 1,0 mmol) u smeši glacijalna sirćetna kiselina/metanol/ voda (1:1:1) (30 mL), u balonu okruglog dna, doda se p-metoksibenzaldehid (0,44 mL, 3,0 mmol), a zatim 85% natrijum-cijanoborohidrid (210 mg, 2,0 mmol). Ovaj rastvor se 7 h meša na sobnoj temperaturi. Posle toga doda se još aldehida (0,44 mL) i natrijum-cijanoborohidrida (210 mg), a sa mešanjem se nastavi preko noći. Reakciona smeša se prespe u smešu leda i vode (200 mL), pH podesi na 10 dodavanjem zasićenog natrijum-karbonata, pa se rastvor ekstrahuje etilacetatom (4*20mL). Sakupljeni organski ekstrakti se peru rastvorom soli dok ne postanu neutralni, pa vodom i osuše iznad Na2S04. Isparavanje rastvarača pod vakuumom daje kao ostatak žutu čvrstu supstancu, koja se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 95/5), dajući 250 mg čistog žutog jedinjenja. Kristalizacija iz metanola daje 225 mg kristalnog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,8 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 4,2 (s, 3H), 4,2 (s, 3H), 4,5 (d, J=6,1 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 6,8 (d, J=8,8 Hz, 2H), 7,4 (s, 1H), 7,3 (d, J=8,8 Hz, 2H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja: 1- metil- 8- r( tien- 3- ilmetilaminon. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksamid

rB43- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,8 (m, 4H), 4,2 (s, 3H),4,5 (d, J=6,1Hz, 2H), 7,1 (m, 1H), 7,2 (s, 1H), 7,3 (m, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,5 (m, 1H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H);

8- r( 3. 5- dihidroksibenzihamino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin-

3- karboksamid

rB62- X00- M00 ( C0D- P031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,8 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 4,4 (d, J=6,2 Hz, 2H), 6,0 (m, H), 6,2 (m, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H);

8-({ 4- r3-( dimetilamino) propoksi1benzil) amino)- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB61- X00- M0Q ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,8 (m, 2H), 2,2 (s, 6H), 2,4 (t, 2H), 4,0 (t, 2H), 4,3 (s, 3H), 4,5 (d, J=6,5 Hz, 2H), 6,9 (m, J=9,0 Hz, 2H), 7,2 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H);

r5-({ f( 3-( aminokarftoniO- 1- metiM^

8- il] amino) metil)- 2- furil1metilacetat

fB65- X00- M00 ( C0D- D03]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,0 (s, 3H), 2,8 (m, 4H), 4,3 (s, 3H), 4,5 (d, J=6,1Hz, 2H), 5,0 (s, 2H), 6,2 (d, J=3,2Hz, 1H), 6,4 (d, J=3,2 Hz, 1H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,6 (t, J=6,0 Hz, 1H), 8,2 (s, 1H);

8- r( 3- ciianobenzil) amino1- 1- metil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin-3- karboksamid

fB63- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,8 (m, 4H), 4,1 (s, 3H), 4,6 (d, J=6,1 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,5 (t, J=7,7 Hz, 1H), 7,7 (m, 4H), 8,2 (s, 1H);

8- r( 4- bromobenzil) amino1- 1- metil- 4. 5<iihidro- 1H- pirazolof4, 3- h1hinazolin-3- karboksamid

rB64- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,8 (m, 4H), 4,2 (s, 3H), 4,5 (d, J=6,3 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,3 (d, J=8,5Hz, 2H), 7,4 (s, 1H), 7,5 (d, J=7,5Hz, 2H), 7,7 (m, 1H),8,2 (s, 1H);

8-( r4-( acetilamino) benzinaminoM - metil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin-3- karboksamid

fB80- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,0 (s, 3H), 2,7 (m, 2H), 2,9 (t, J=7,7 Hz, 2H), 4,2 (s, 3H), 4,5 (d, J=6,2Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,3 (d, J=8,5Hz, 2H), 7,4 (s, 1H), 7,5 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,6 (t, J=7,4 Hz, 1H), 8,2 (s, 1H), 9,9 (s, 1H);

rB81- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,7 (m, 2H), 2,9 (t, J=7,6 Hz, 2H), 4,3 (s, 3H), 4,3 (s, 2H), 4,5 (d, J=6,0 Hz, 2H), 5,1 (s, 1H), 6,2 (m, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,6 (t, J=5,9Hz, 1H), 8,2 (s, 1H);

8- f( 1 - metilimidazol- 2- il) metilamino1- 1 - metil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksamid

fB82- X00- M00 ( C0D- DO3T

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,8 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 4,3 (s, 3H), 4,6 (m, 2H), 6,9 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,5 (m, 1H), 8,3 (s, 1H);

8- r( 4- aminobenzil) amino1- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolof4, 3- hlhinazolin-3- karboksamid

fB83- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,7 (m, 2H), 2,9 (t, J=7,7 Hz, 2H), 4,3 (s, 3H), 4,4 (d, J=6,1 Hz, 2H), 5,1 (s, 2H), 6,5 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,0 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,4 (m, 2H), 8,2 (s, 1H);

8- f( 4- fluorobenzinaminol- 1- metil- 4, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin-3- karboksamid

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,73 (t, J=7,74Hz, 2H), 2,94 (t, J=7,56 Hz, 2H), 4,18 (s, 3H), 4,52 (d, J=6,22Hz, 2H), 7,13 (t, J=8,90Hz, 2H), 7,23 (s,

1H), 7,38 (d, J=8,66 i 5,61 Hz, 2H), 7,42 (t, H), 7,71 (t, J=5,97 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H).

Primer 48

8-( r4-( 2- morfolinoetoksi) benzinamino)- 1 - metil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB84- X00- M00 ( C0D- D031

1 . Korak: 8 - f ( 4 - hidroksibenzil ) aminol - 1 - metil - 4 . 5 - dihidm - 1H -

pirazolo [ 4 . 3 - h ] hinazolin - 3 - karboksamid

fB85 - X00 - M00 ( C0D - D031

Dobro mešanom rastvoru 8-[(4-metoksibenzil)amino]-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (242 mg, 0,7 mmol) u hloroformu (30 mL), dodaje se, tokom 5 min, u kapima, na sobnoj temperaturi, bor-tribromid (1M u dicikloheksanu, 5,1 mL, 5,1 mmol). Ova smeša se 8 h zagreva pod refluksom. Dodaje se u kapima, na 0°C, tokom 10 min, rastvor 10% amonijum-hidroksida u vodi (30 mL). Stvori se talog, a posle 2 h se filtrira i opere vodom, pa suši na 40°C pod vakuumom. Dobije se 130 mg naslovljenog proizvoda.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,8 (m, 4H), 4,5 (m, 2H), 6,7 (d, J=8,65 Hz, 2H), 7,2 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,25 (s, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,8 (m, 1H), 8,2 (s, 1H).

2.Korak: 8 -/ f4 -( 2 - morfolinoetoksi ) benzilfamino )- 1 - metil - 4 , 5 - dihidro - 1H -

Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - karboksamid

\ B84 - X00 - M00 ( C0D - D031

U rastvor 8-[(4-hidroksibenzil)amino]-1-metil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (70 mg, 0,2 mmol) u anhidrovanom dimetilformamidu (3 mL), doda se N-morfolinoetilhlorid hidrohlorid (47 mg, 0,3 mmol) i sprašeni kalijum-karbonat (45 mg, 3,3 mmol). Smeša se 1 h zagreva pod refluksom. Reakciona smeša se prespe u smešu led-voda (70 mL), pa ekstrahuje dihlorometanom; organski ekstrakti se peru rastvorom soli dok im pH ne postane neutralno, i osuše iznad Na2S04. Sirovi proizvod se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 96/4), dajući belu čvrstu supstancu, koja se kristališe iz metanola, dajući konačno 47,0 mg naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,5 (m, 4H), 2,7 (t, 2H), 2,8 (m, 4H), 3,6 (m, 4H), 4,0 (t, 2H), 4,2 (s, 3H), 4,5 (m, 2H), 6,9 (d, J=8,42 Hz, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,25 (d, J=8,54 Hz, 2H), 7,4 (s, 1H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H).

Analogno, dobijeno je sledeće jedinjenje: 8-{[ 3-( 2- morolinoetoksi)- 5- trifluorometil1fenilamino}- 1- metil-4. 5- dihidro- 1 H- pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB119- X00- M00 ( C0D- D031

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,47-2,56 (m, 4H), 2,73 (t, J=7,26 Hz, 2H), 2,85 (t, J=7,80 Hz, 2H), 3,01 (t, J=7,80 Hz, 2H), 3,57-3,64 (m, 4H), 4,17 (t, J=5,49Hz, 2H), 4,35 (s, 3H), 6,86 (t, J=1,83 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,61 (t, J=2,32 Hz, 1H), 7,60 (t, J=1,46 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 9,85 (s, 1H).

Primer 49

2- anilino- 5. 6. 8. 9. 10. 11 - heksahidro- 7H-f 1. 41diazepinoM '. 2' : 1. 5lDirazolof4. 3.- h1hinazolin- 7- on

rB04- XOO- M061

1 . Korak: etil 7 - okso - 4 . 5 . 6 . 7 - tetrahidro - 1H - indazol - 3 - karboksilat

Rastvori se 1 g (4,2 mmol) etil (3-etoksi-2-oksocikloheks-3-en-1-il)(okso)acetata u 10 mL etanola, doda 0,21 mL hidrazin hidrata, pa se rastvor 1 dan meša pod refluksom. Zatim se ispari rastvarač, a ostatak ponovo rastvori u dihlorometanu. Organski sloj se opere vodom, osuši iznad Na2S04i koncentriše. Sirovi proizvod se triturira dietiletrom i filtrira, dajući (70% prinos) naslovljeno jedinjenje.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,16 (t, J=6,83 Hz, 3H), 2,25-3,27 (3m, 6H), 4,18 (q, J=6,83 Hz, 2H), 8,45 (bs, 1H).

Analogno je dobijeno sledeće jedinjenje:

etil 4. 4- dimetil- 7- okso- 4. 5. 6. 7- tetrahidro- 1H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,33 (t, J=6,95 Hz, 3H), 1,42 (s, 6H), 1,90-2,02 (m, 2H), 2,55-2,6 (m, 2H), 4,33 (d, J=6,95 Hz, 2H), 14,34 (s, 1H).

2.Korak: etil - 7 - okso - 1 ( i 2 )- tritil - 4 . 5 . 6J - 1H - indazol - 3 - kamoksilat

Rastvori se 1,20 g (4,8 mmol) etil 7-okso-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 40 mL dihlorometana, pa se doda 0,76 mL trietilamina i 1,47 g (5,3 mmol) trifenilmetilhlorida. Rastvor se 6 h meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvor razblaži sa još dihlorometana i opere vodom. Organski sloj se tretira anhidrovanim Na2S04i ispari do suva. Proizvod, kao smeša regionalnih izomera, konačno se dobija kristalizacijom iz dietiletra (80% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,25 (t, 3H), 1,94-2,98 (3m, 6H), 4,25 (q, 2H), 6,85-7,36 (2m, 15H).

Analogno se dobijaju sledeća jedinjenja:

etil 1 - tritil- 4, 4- dimetil- 7- okso- 4, 5. 6. 7- tetrahidro- 1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,26 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,45 (s, 6H), 1,79-1,88 (m, 2H), 2,18-2,26 (m, 2H), 4,27 (q, J=7,15 Hz, 2H), 6,84-7,01 (m, 6H), 7,14-7,33 (m, 9H);

etil 2- tritil- 4. 4- dimetil- 7- okso- 4, 5, 6. 7- tetrahidro- 1H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 0,88 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,27 (s, 6H), 1,92-1,99 (m, 2H), 1,56-2,63 (m, 2H), 3,44 (q, J=7,15 Hz, 2H), 6,99-7,05 (m, 6H), 7,31-7,37 (m, 9H).

3 . Korak: etil - 6 - f ( dimetilamino ) metilenl - 7 - okso - 1 ( 2 )- thtil -^ 7 - tetrahidro -

1H - indazol - 3 - karboksilat

Rastvori se 3,0 g (6,6 mmol) etil 7-okso-1(2)-tritil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata u 20 mL dimetilformamida, pa se doda 3,2 mL (13,2 mmol) dimetiffoimamid-di-terc-butilacetata. Ovaj rastvor se 1 dan zagreva na 65°C, uz mešanje, a zatim se ispari do suva. Proizvod se dobija kristalizacijom iz smeše dietiletar/etilacetat (90% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,24 i 0,79 (2t, J=7,07 Hz, 3H), 2,70-2,90 (2t, J=6,71 Hz, 6H), 2,94 i 2,9 (2m, 6H), 4,21 (q, J=7,07 Hz, 2H), 6,90-7,30 (m, 15H).

Analogno se dobijaju sledeća jedinjenja:

etil 6- r( dimetilamino) metilenM- tritil- 4. 4- dimetil- 7- okso- 4, 5. 6. 7- tetrahidro-

1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,26 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,36 (s, 6H), 2,66 (s, 2H), 2,98 (s, 6H), 4,25 (q, J=7,15 Hz, 2H), 6,96 (t, 7H), 7,15-7,29 (m, 9H);

etil 6- f( dimetilamino) metilenl- 2- tritil- 4. 4- dimetil- 7- okso- 4,^

1 H- indazol- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 0,90 (t, J=7,19 Hz, 3H), 1,19 (s, 6H), 2,78 (s, 2H), 3,11 (s, 6H), 3,42 (q, J=7,23 Hz, 2H), 6,97-7,09 (m, 6H), 7,30-7,37 (m, 9H), 7,48 (s, 1H).

4 . Korak: etil 8 - anilino - 1 ( i 2 )- tirtil - 4 . 5 - dihidno - 1H -

pirazolo [ 4 , 3 - hlhinazolin - 3 - karboksilat

U rastvor 636 mg etil 6-[(dimetilamino)metilen]-7-okso-1(i 2)-tritil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol-3-karboksilata (1,18 mmoL) i 440 mg (1,18 mmol) fenilgvanidin karbonata u 100 mL apsolutnog etanola, doda se 0,5 mL diazabicikloundecena. Smeša se 48 h meša pod refluksom, a zatim se rastvarač ispari pod sniženim pritiskom. Ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu i opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent ckloheksan/etilacetat 8/2), dajući 240 mg naslovljenog jedinjenja (35% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 0,81 (t, J=7,20Hz, 3H), 2,80-2,95 (m, 4H), 3,58 (q, J=7,20 Hz, 2H), 6,85-7,80 (5m, 20H), 8,38 (bs, 1H), 9,49 (bs, 1H).

U skladu sa istim postupkom, ali koristeći pogodne derivate gvanidina, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 8-( f4-( 4- metilpiperazin- 1- in- 3-( trifluorometil) fenillamino)- 1 ( i 2)- tritil-4. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- ff3- hloro- 4-( 4- metilpiperazin- 1 - iOfenillaminol- l ( i 2)- tritil-4, 5- dihidro- 2H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- fl4-( 4- metilpiperazin- 1- il) fenil1amino)- 1 ( i 2)- tritil-4. 5- dihidro- 2H- pirazolof4. 3- hlhinazolin- 3- karboksilat; etil 8- amino- 1 ( i 2)- tritil- 4, 5- dihidro- 2H- pirazolor4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat; etil 8-[ 4-( 4- metilpiperazin- 1 - il) fenilamino1- 1 - tritil- 4. 4- dimetil-4. 5- dihidro- 1H- pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 34^ arbQksilat:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,24 (t, J=7,20 Hz, 3H), 1,31 (s, 6H), 2,20 (s, 3H), 2,43 (m, 4H), 2,56 (m, 2H), 2,99 (m, 4H), 4,24 (q, J=7,20 Hz, 2H), 6,61 (d, J=8,79Hz, 2H), 6,92-7,37 (m, 17H), 8,07 (bs, 1H); etil 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- infenilaminoy2- tritil- 4. 4- dimetil-4, 5- dihidro- 1H- pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 0,89 (t, J=7,20 Hz, 3H), 1,17 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 2,46 (m, 4H), 2,71 (m, 2H), 3,04 (m, 4H), 3,40 (q, J=7,20Hz, 2H), 6,80 (d, J=8,79Hz, 2H), 6,96-7,43 (m, 15H), 7,60 (d, J=8,79Hz, 2H), 8,31 (bs, 1H), 9,31 (bs, 1H); etil 8- anilino- 1( i 2)- tritil- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1H-pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- amino- 1- tritil- 4, 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,27 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,31 (s, 6H), 2,52 (s, 2H), 4,27 (q, J=7,07Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,03-7,09 (m, 6H), 7,16-7,34 (m, 9H), 7,93 (s, 1H); etil 8- amino- 2- tritil- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 0,95 (t, J=7,13 Hz, 3H), 1,16 (s, 6H), 2,63 (s, 2H), 3,46 (q, J=7,07Hz, 2H), 6,47 (s, 2H), 7,09-7,16 (m, 6H), 7,24-7,41 (m, 9H), 8,14(s, 1H). 5.Korak: etil 8 - anilino - 4 . 5<iihidm - 1H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - karbo fB04 - X00 - M00 ( C00 )- D01l

Rastvori se 1.50 g (2,5 mmol) etil 8-anilino-1 (2(-tritil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 50 mL dihlorometana, pa se doda 5 mL trifluorosirćetne kiseline. Rastvor se meša preko noći, a rastvarač se ukloni pod vakuumom. Ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu i opere zasićenim rastvorom NaHC03. Zatim se organski sloj osuši iznad Na2S04, a rastvarač ispari do suva. Kristalizacija iz diizopropiletra daje 70 mg naslovljenog jedinjenja (80% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,17 (t, J=7,07 Hz, 3H), 3,05-3,28 (2m 4H), 4,18 (q, J=7,07 Hz, 2H), 6,83-7,6 (3m, 5H), 8,31 (bs, 1H), 9,10 (m, 2H).

U skladu sa istim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 8- fl4-( 4- metilpiperazin- 1 - il)- 3-( trifluorometil) feninaminoV- 4. 5- dihidro- 2H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat; fB12- X0O- M0O ( COOVDOIl: etil 8-{ r3- hloro- 4-( 4- metilpiperazin- 1- il) feninaminoV4. 5- dihidro- 2H-pirazolo[ 4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat: rB13- X00- M00 ( C00VP011: etil 8-( r4-( 4- metilpiperazin- 1 - i0fenillamino)- 4. 5- dihidro- 2H-

pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat;

rB10- X00- M00 ( COOVDOH

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,35 (t, J=7,20 Hz, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,50-2,60 (m, 4H), 2,86 (m, 2H), 2,99 (m, 2H), 3,10 (m, 4H), 4,33 (q, J=7,20 Hz, 2H), 6.90 (d, J=8,90 Hz, 2H), 7,71 (d, J=8,90 Hz, 2H), 8,34 (s, 1H), 9,27 (bs, 1H), 14,22 (bs, 1H);

etil 8- amino- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolof4, 3- ri1hinazolin- 3- karboksilat:

fBO0- X00- M00 ( COOVDOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7, Hz, 3H), 2,78 (m, 2H), 2,96 (m, 2H), 4,31 (q, J=7,2 Hz, 2H), 6,64 (m, 2H), 8,19 (bs, 1H);

etil 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1 - il) fenilamino1- 4, 4- dimetil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolor4, 3- h] hinazolin- 3- karboksilat:

fB10- X00- M03 ( COO)- DOn

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,31 (t, J=7,20 Hz, 3H), 1,33 (s, 6H), 2,22 (s, 3H), 2,40-2,50 (m, 4H), 2,73 (m, 2H), 3,07 (m, 4H), 4,35 (q, J=7,20Hz, 2H); 6.91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,70 (d, J=9,02Hz, 2H), 8,33 (bs, 1H), 9,30 (bs, 1H), 14,13 (bs, 1H);

etil 8- amino- 4. 4- dimetil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: rB00- X00- M03 ( C00VD011

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,32 (m, 9H), 2,66 (s, 2H), 4,22-4,42 (m, 2H), 6,36 (d, J=14,11, 2H), 8,19 (d, 1H), 14,11 (s, 1H);

etil 8- anilino- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat:

rB04- X00- M03 ( COO)- DOli-

ftKorak: etil 8 - anilino - 2 -{ 3 -[( terc - butoksikamonil ) amino ^

2H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - karboksilat

Rastvori se 500 mg (1,5 mmol) etil 8-anilino^,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 10 mL suvog dimetilformamida, pa se ohlađenom rastvoru doda 1,63 mL 1M litijum-terc-butoksida u tetrahidrofuranu. Posle 30 min mešanja na 0°C, u kapima se dodaje rastvor 432 mg terc-butoksikarbonil-aminopropilbromida u 8 mL suvog tetrahidrofurana. Posle stajanja preko noći na sobnoj temperaturi, smeša se prespe u rastvor NaH2P04, pa ekstrahuje dihlorometanom. Zatim se organski sloj osuši iznad Na2S04, a rastvarač ispari, dajući ulje, koje se tretira u skladu sa 7. Korakom koji sledi, bez daljeg prečišćavanja.

Analogno, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 2-{ 3- f( terc- butoksikarbonil) aminolpropil)- 8- ff4-( 4- metilpiperazin-1- ihfeninamino>- 4. 5- dihidro- 2H- pirazolor4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 2- f3- r( terc- butoksikarbonil) aminolpropil)- 8- ff4-( 4- metilpiperazin- 1- il)- 3-( trifluorometil) fenil1aminoV4. 5- dihidro- 2H- pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat: etil 243- f( terc- butoksikarboninaminolpropil)- 8- lf3- hloro- 4-( 4- metilpiperazin- 1-il) fenillamino)- 4. 5- dihidro- 2H- pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 2-( 3- r( terc- butoksikarbonil) aminolpropil)- 8- ff4-( 4- metilpiperazin- 1-il) fenil1aminoV4, 5- dihidro- 2H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- amino- 2-( 3- f( terc- butoksikarboninaminolpropilM. 5- dihidro- 2H-pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat; etil 8- amino- 2-( 3- r( terc- butoksikarbonil) aminolpropilM. 4- dimetil- 4. 5- dihidro-1H- pirazolof4. 3- hlhinazolin- 34<arboksilat: etil 8- r4-( 4- metil- piperazin- 1 infenilamino1- 2-( 3- f( terc-

butoksikarboninaminolpropilV4, 4- dimetil- 4. 5- dihidro-

1 H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- anilino- 2-( 34( terc- butoksikarboninaminolpropilM, 4- dimetil- 4, 5- dihidro-1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat.

Kada se sledi gornji postupak, ali koristi terc-butoksikarbonil-aminoetilbromid, dobijena su sledeća jedinjenja: etil 8- anilino- 2-( 2- f( terc- butoksikarboninamino] etilM. 5- dihidro- 2H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 2-( 24( terc- butoksikarbonil) amino1etilV8- fr4-( 4- metilpiperazin- 1- il) feninamino}-4. 5- dihidro- 2H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 34<arboksilat: etil 2-( 2- f( terc- butoksikarboninamino1etilV- 8- ir4-( 4- metilpiperazin- 1- il)- 3-( trifluorometinfenil1amino>- 4. 5- dihidro- 2H- pirazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat: etil 2- f2- f( terc- butoksikarbonil) amino1etil)- 8-{ f3- hloro- 4-( 4- metilpiperazin- 1-infenillamino)- 4. 5- dihidro- 2H- pirazolo[ 4. 3- h] hinazolin- 3- karboksilat: etil 8- amino- 2- l2- r( terc- butoksikarboninamino1etilM. 5- dihidro- 2H-pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,31 (s, 9H), 1,36 (t, J=7,2 Hz, 3H), 2,74 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 3,34 (m, 2H), 4,33 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,57 (t, 2H), 6,50 (m, 2H), 6,87 (t, 1H), 8,15 (bs, 1H);

etil 8- amino- 2-{ 2- r( terc- butoksikarbonil) amino1etil)- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro-

2H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat;

etil 8-[ 4-( 4- metilPiperazin- 1- infenilamino1- 242-[( terc- butoksikarbonil) amino1etil>

4, 4- dimetil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilat;

etil 8- anilino- 242- f( terc- butoksikarbonil) amino1etilM. 4- dimetil- 4, 5- dihidro-2H- pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat.7 . Korak: etil - 2 -( 3 - aminoDnoDil )- 8 - anilino - 4 . 5 - dihidro - 2H - Dim ^

3 - karboksilat hidrohlorid

[ B04 - X00 - M04 ( C0D - D011

Rastvori se sirovi proizvod iz prethodnog 6. Koraka, u 2 mL dioksana, pa se doda 8 mL 37% HCI. Posle 6 h mešanja na sobnoj temperaturi rastvarač se ukloni pod vakuumom, a ostatak triturira etanolom i proizvod sakupi filtriranjem (80% prinos).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja: fB04- XOO- M04 ( C12)- D011: fB00- X00- M04 ( C12)- D011:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,37 (t, J=7,2 Hz, 3H), 2,85 (m, 2H), 3,02 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 4,37 (q, J=7,2Hz, 2H), 4,84 (t, 2H), 7,47 (m, 1H), 8,08 (m, 3H), 8,29 (s, 1H); fB12- X00- M04 ( C12VD011: rB13- XOO- M04( C12VD011; rB10- XOO- M04 ( C12H) 011: fB12- X00- M04( C13)- D0n: fB13- X00- M04( C13)- D01l: fB10- XOO- M04 ( C13)- D011: etil 8- amino- 2-( 3- aminopropiM. 5<lihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1riinazolin- 3-

karboksilat hidrohlorid

fB00- X00- M04 ( C13VD011:

etil 8- amino- 2-( 3- aminopropil)- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat hidrohlorid fB00- XQ0- M09 ( C13)- D011: etil 2-( 3- aminopropin- 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- fenilamino1- 4. 4- dimetil- 4. 5-dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 34xarboksilat hidrohlorid fB10- X0O- lv] O9 ( C13)- D011; etil 8- anilino- 2-( 3- aminopropin- 4. 4- dimetil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat hidrohlorid fB04- XOO- M09 ( C13)- D011; etil 8- amino- 2-( 3- aminoetin- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- h1hinazolin-3- karboksilat hidrohlorid fB00- X00- M04 ( C12)- D0H: etil 2-( 3- aminoetil)- 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- fenilarninol- 4, 4- dimetil-

4, 5- dihidro- 1 H- pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat hidrohlorid

fB10- X0O- MO9 ( C12VD011;

etil 8- anilino- 2-( 3- aminoetil)- 4. 4- dimetil- 4. 5- dihidro- 1 H- pirazolor4. 3- hlhinazolin-3- karboksilat hidrohlorid

[ B04- X00- M09 ( C12)- D011.

8 . Korak: 2 - anilino - 5 . 6 . 8 . 9 . 10 . 11 - heksahidto - 7H -

n . 4ldiazeDinof1 '. 2 ' : 1 . 5lDirazolo [ 4 . 3 - hlhinazolin - 7 - on

fB04 - X00 - M061

Rastvori se 185 mg (0,43 mmol) etil 2-(3-aminopropil)-8-anilino-4,5-dihidro-2H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat hidrohlorida u 10 mL metanola, pa se doda 400 mg cezijurrvkarbonata. Posle 1 h mešanja na sobnoj temperaturi, rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom. Zatim se ostatku doda voda, a čvrsta faza sakupi filtriranjem i opere vodom i acetonom, dajući 100 mg (70% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,18 (ddd, J=13,02, 6,65, 6,55 Hz, 2H), 2,88 (m, 4H), 3,21 (q, J=5,89 Hz, 2H), 4,50 (t, J=6,77 Hz, 2H), 6,93 (t, J=7,32 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=8,29 i 7,56 Hz, 2H), 7,85 (d, J=7,68 Hz, 2H), 8,27 (t, J=5,18Hz, 1H), 8,38 (s, 1H), 9,62 (s, 1H).

Radeći u skladu sa ovim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja: 2- anilino- 5. 6. 9. 10- tetrahidropirazinof1'. 2' :1. 5lpirazolof4. 3- hlhinazolin- 7( 8H)- on

fB04- X00- M051

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,92 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 4,41 (m, 2H), 6,93 (m, 1H), 7,28 (m, 2H), 7,85 (m, 2H), 8,26 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 9,61 (s, 1H);

2-( r4-( 4- metilpiperazin- 1- ih- 3-( trifluorometil) feninaminoV5. 6, 9. 10-tetrahidropirazinof1', 2' :1. 5lpirazolor4, 3- h1hinazolin- 7( 8H)- on

[ B12- X00- M05l;

24f3- hloro- 4-( 4- metilpiperazino- 1- infeninamino)- 5. 6, 9. 10-tetrahidropirazinof1'. 2' :1. 5lPirazolof4. 3- h1hinazolin- 7( 8H)- on

rB13- X00- M051: 2- fl4-( 4- metilpiperazin- 1 - infenillaminol- 5. 6. 9, 10-tetrahidropirazinof1'. 2' :1. 5lpirazolof4. 3- hlhinazolin- 7( 8HVon

fB10- X00- M05l;

2- amino- 5. 6. 9. 10- tetrahidropirazinof1\ 2' :1. 5lpirazolor4. 3- h1hinazolin- 7( 8H)- on

rB00- X00- M051

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,74 (t, J=7,56Hz, 2H), 2,88-2,98 (m, 2H), 3,60-2,38 (m, 2H), 4,29^,42 (m, 2H), 6,48 (s, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,21-8,32 (m, 1H);

2- amino- 5. 6. 8. 9. 10. 11- heksahidro- 7H- f1. 41diazepinori'. 2' :1. 51

pirazolor4, 3- h1hinazolin- 7- on

fB00- X00- M061

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,18 (ddd, J=13,02, 6,65 i 6,55 Hz, 2H), 2,74 (m, 2H), 2,92 (m, 2H), 3,21 (q, J=5,89 Hz 2H), 4,50 (t, J=6,77Hz, 2H), 6,48 (m,2H), 8,17 (s,1H), 8,23 (s, 1H);

2-( r4-( 4- metilpiperazin- 1- il)- 3-( trifluorometilWenillamino)- 5. 6. 8. 9. 10. 11-

heksahidro- 7H- f 1, 41- diazepinof 1 ', 2' : 1, 5lpirazolor4. 3- h1hinazolin- 7- on

[ B12- X00- M061:

2- fr3- hloro- 4-( 4- metitpiperazin- 1 - il) fenil1amino)- 5. 6. 8. 9. 10. 11 - heksahidro- 7H-f 1. 41diazepinof 1 ', 2' : 1, 5lpirazolor4. 3- h1hinazolin- 7- on fB13- X00- M06l: 2-( f4-( 4- rnetilpiperazin- 1- infenil1amino)- 5. 6, 8. 9, 10, 11-heksahidro- 7H-[ 1, 4]- diazepino[ 1\ 2' :1, 5lpirazolof4, 3- h1hinazolin- 7- on fB10- X00- M06l: 2- amino- 6. 6- dimetil- 5, 9, 10- tirhidropirazinf1\ 2' :1, 5lpirazolor4, 3- h1hinazolin^

7( 8H)- on

fBO0- X0O- MO71;

2- anilino- 6. 6<limetil- 5. 9. 1Q-^

7( 8H)- on

rB04- X00- M071: 2- r4- M- metilpiperazin- 1- infenilamino1- 6. 6- dimetil- 5. 9. 10-

trihidropirazinof1\ 2' :1. 5lpirazolof4, 3- hlhinazolin- 7( 8H)- on

fB10- X00- M071

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (s, 6H), 2,23 (s, 3H), 2,47 (m, 4H), 2,92 (m, 2H), 3,07 (m, 4H), 3,65 (m, 2H), 4,41 (m, 2H), 6,91 (d, J=9,02Hz, 2H), 7,53 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,23 (m, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,12 (s, 1H);

2- amino- 6, 6- dimetil- 5. 8. 9. 10. 11- pentahidro- 7H-f 1, 41diazepinoM '. 2' : 1. 5lpirazo! of4, 3- hlhinazolin- 7- on

[ B00- X00- M081:

2- anilino- 6. 6- dimetil- 5, 8, 9, 10, 11 - pentahidro- 7H-f 1. 41diazepinoM '. 2' : 1. 5lpirazolor4. 3- h1hinazolin- 7- on fB04- X00- M08] : 2- r4-( 4- metilpiperazin- 1 - il) feni) amino1- 6, 6- dimetil- 5. 8. 9. 10, 11-pentahidro- 7H- ri. 4ldiazepinof1', 2' :1. 5lpirazolof4. 3- h1hinazolin- 7- on

[ B10- X00- M081

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,33 (s, 6H), 2,18 (ddd, J=13,02, 6,65 i 6,55 Hz, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,47 (m, 4H), 2,92 (m, 2H), 3,07 (m, 4H), 3,21 (q, J=5,89 Hz, 2H), 4,50 (t, J=6,77 Hz, 2H), 6,91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,53 (d, J=9,02Hz, 2H), 8,27 (m, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,12 (s, 1H).

Primer 50

8- anilino- 1 - metiM. 5- dihidro- 1 H- pirazolof4. 3- h1hinazolin- 3- karboksilna kiselina

[ B04- X00- M00 ( C0D- D02]

Rastvori se 0,63 g (1,80 mmol) etil 8-anilino-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata u 100 mL smeše tetrahidrofuran/metanol/voda 8/1/1, pa se doda 0,19 g (4,53 mmoL) litijum-hidroksid hidrata. Rastvor se 1,5 h meša na 60°C. Smeša se zatim ohladi na sobnu temperaturu, pa dodaje 1 M HCI dok pH ne bude neutralno. Doda se voda, a nastali talog sakupi filtriranjem (87% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,85 (t, J=7,74Hz, 2H), 2,99 (m, 2H), 4,36 (s, 3H), 6,98 (tt, J=7,35i 1,07 Hz, 1H), 7,31 (dd, J=8,47 i 7,50 Hz, 2H), 7,72 (dd, J=8,60 i 0,91 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H), 9,52 (s, 1H), 12,68 (s, 1H).

Radeći u skladu sa istom procedurom, dobijena su sledeća jedinjenja:

[B00-X00-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,48 i 3,64 (2t, J=7,25 Hz, 4H), 3,84 (s, 3H), 8,04 (bs, 2H), 8,46 (bs, 1H);

[B09-X00-M00 (C03)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 6,49 (m, 1H), 7,07 (m, 2H), 7,94 (bs, 1H), 8,30 (s, 1H), 9,35 (bs, 1H);

[B09-X00-M04 (C03)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 0,80 (s, 9H), 1,62 (m, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,52 (m, 4H),3,13 (m, 4H), 4,86 (m, 2H), 6,58 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 8,41 (s, 1H), 9,20 (bs, 1H);

[B10-X00-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,89 (s, 3H), 2,74 (m, 2H), 2,95 (m, 2H), 4,30 (s, 3H), 6,93 (m, 2H), 7,52 (m, 2H), 8,33 (s, 1H), 9,28 (bs, 1H);

[B103-X00-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,09 (m, 4H), 2,83 (m, 5H), 2,97 (t, 2H), 4,33 (s, 3H), 7,02 (m, 2H), 7,61 (m, 2H), 8,38 (s, 1H), 9,39 (s, 1H);

[B09-X00-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,81 (m, 5H), 2,93 (t, 2H), 3,09 (m, 4H), 3,71 (m, 4H), 4,32 (s, 3H), 6,64 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,29 (m, 2H), 8,38 (s, 1H), 9,42 (s,1H), 10(33 (s, 1H);

[B04-X04-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,89 (t, 2H), 2,97 (t, 2H), 3,70 (s, 3H), 7,51 (m, 3H), 7,67 (m, 2H), 8,56 (s, 1H), 12,81 (bs, 1H);

[B05-X06-M00 (C01)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,92 (t, 2H), 2,97 (t, 2H), 4,23 (s, 2H), 4,26 (s, 3H), 7,23 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,36 (m, 2H), 8,65 (s, 1H), 12,82 (bs, 1H);

[B10-X00-M04 (C15)-D02]

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,60 (m, 5H), 2,89 (m, 2H), 3,04 (m, 4H), 3,33 (m, 4H), 6,31 (s, 2H), 6,78 (d, 2H), 7,39 (m, 3H), 7,47 (m, 2H), 7,63 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 9,33 (s, 1H), 13,55 (s, 1H).

Primer 51

8- anilino- 1- metil- N- fenil- 4. 5- dihidro- 1H- pirazolor4. 3- hlhinazolin- 34xaroksamid

rB04- X00- M00 ( C0D- D201

Rastvori se 45 mg (0,14 mmol) 8-anilino-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilne kiseline u 7 mL dimetilformamida, pa se doda 145,6 mg (0,28 mmol) (benzotriazol-l-iloksi)tripirolidinofosfonil heksafluorofosfata (PyBOP), 0,12 mL (0,70 mmol) N,N-diizopropil-N-etilamina i 0,08 mL (0,70 mmol) anilina. Posle 6 h rastvarač se ukloni, a ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu, pa opere vodom. Organski sloj se osuši iznad Na2S04i ispari do suva. Proizvod kristališe iz metanola (60% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,88 (m, 2H), 3,07 (m, 2H), 4,43 (s, 3H), 6,97-7,85 (6m, 10H), 8,45 (s, 1H), 9,55 (s, 1H), 10,09 (s, 1H).

Radeći analogno, dobijena su sledeća jedinjenja, prikazana u Tabeli XIII.

Primer 52

8- iodo- 1 - metil- N- fd S)- 2- morfolin- 4- il- 1 - feniletil1- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

U dobro mešanu i toplu suspenziju 8-amino-1 -metil-N-[(1 S)-2-morfolin-4-il-1 - feniletil]-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida (3 g, 6,92 mmol) u dimetoksietanu (240 mL), uz održavanje inertne atmosfere argona, dodaju se redom, cezijum-jodid (2,16 g, 8,3 mmol), bi-sublimisani jod (870 mg, 3,46 mmol), bakarjodid (460 mg, 2,42 mmol) i izoprenilnitrit (1,71 mL, 1,5 g, 12,46 mmol). Reakcina smeša se 18 h snažno meša na 65-70°C. Posle hlađenja u kupatilu led-voda, čvrsta supstanca se odvoji filtriranjem, a filtrat razblaži dihlorometanom (100 mL), opere sa 30% amonijum-hidroksidom (50 mL), natrijum-tiosurfatom

(100 mL), rastvorom soli, i osuši iznad anhidrovanog Na2S04. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 95/5) , pa se izoluje 1,48 g naslovljenog jedinjenja (40% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,52 (m, 6H), 2,89 (t, 2H), 2,99 (t, 2H), 4,30 (s, 3H), 5,17 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,41 (m, 2H), 8,47 (s, 1H).

Primer 53

1 - metil- 8-( r3-( 4- metilpiperazin- 1 - iOfenillaminoVN- rd S)- morfolin- 4- il- 1 - feniletill-4. 5- dihidro- 1 H- prazolo[ 4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

rB09- XQ0- M00 ( C01VD31

Balon okruglog dna, produvan argonom, šaržira se sa paladijum-acetatom [Pd(OAc)2](10 mg, 0,022 mmol, 10%), (±)-BINAP (14 mg, 0,022 mmol, 10%) i dimetilformamidom (4 mL). Smeša se 30 min meša pod argonom. Zatim se dodaju 3-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamin (84 mg, 0,44 mmol), 8-jodo-1-metil-N-[(1 S)-2-morfolin-4-il-1 -fenileti]-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamid (120 mg, 0,22 mmol), kalijum-karbonat (670 mg, 4,85 mmol) i dimetilformamid (1,5 mL). Dobijena smeša se 1,5 h zagreva na 80°C u uljanom kupatilu, pod argonom, uz dobro mešanje. Posle hlađenja na sobnu temperaturu reakciona smeša se prespe u vodu i ekstrahuje dihlorometanom. Organski ekstrakti se operu rastvorom soli i osuše iznad Na2S04. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a sirovi materijal prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 95/5), dajući 40 mg (30% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,27 (s, 3H), 2,52 (m, 8H), 2,80 (t, 2H), 2,94 (m, 4H), 3,13 (m, 4H), 3,56 (m, 4), 4,39 (s, 3H), 5,16 (m, 1H), 6,59 (m, 1H), 7,14 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,33 (m, 2H), 7,42 (m, 2H), 8,39 (m, 2H), 9,33 (s, 1H).

Radeći analogno, dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 54 1 . Korak: N -[( 1S )- 2 - amino - 1 - feniletill - 1 - metil - 8 - M -( metW

4 , 5 - dihidro - 1 H - pirazolof4 . 3 - h lhinazolin - 3 - karboksilat

[ B10 - X00 - M00 ( C0D - D711

U rastvor 129 mg (0,228 mmol) N-[(1S)-azido-1-feniletil]-1-metil-8-{[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u 16 mL metanola, doda se 65 mg (1,2 mmol) NH4CI, rastvorenog u 3,2 mL vode i 39 mg gvožđa (0,7 mmol), pa se smeša refluksuje preko noći. Ova suspenzija se ohladi na sobnu temperaturu, pa filtrira. Posle uklanjanja metanola, u vodenu fazu se dodaje u porcijama čvrst Na2C03, sve do pH 10, pa se zatim proizvod ekstrahuje dihlorometanom. Fleš hromatografija ovog sirovog materijala (eluent dihlorometan/metanol 95/5) daje 94 mg naslovljenog jedinjenja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,24 (s, 3H), 2,47 (m, 4H), 2,78 (t, J=7,68 Hz, 2H), 2,96 (m, 3H), 3,08 (m, 5H), 4,37 (s, 3H), 5,01 (m, 1H), 6,91 (d, J=8,15Hz, 2H), 7,31 (m, 5H), 7,54 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,34 (s, 1H), 8,54 (d, J=8,17Hz, 1H), 9,26 (s, 1H).

Radeći analogno gornjem postupku, dobijeno je sledeće jedinjenje: rB10- X00- M03 ( C01)- D711<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,21 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,45-2,49 (m, 4H), 2,62-272 (m, 2H), 2,90-3,0 (m, 2H), 3,06-3,10 (m, 4H), 4,35 (s, 3H), 5,01 (td, J=8,20i 5,67 Hz, 1H), 6,91 (d, J=9,15Hz, 2H), 7,24-7,29 (m, 1H), 7,33-7,38 (m, 2H), 7,38-7,41 (m, 2H), 7,53 (d, J=9,15 Hz, 2H), 8,34 (s, 1H), 8,65 (d, J=8,29 Hz, 1H), 9,26 (s, 1H).2 . Korak: N - r ( 1S )- 2 -( dimetilamino )- 1 - feniletill - 1 - metW 1 - il ) fenillamino }- 4 . 5 - dihidro - 1H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 karboksamid

fB10 - X00 - M00 ( C0D - D721

U rastvor 50 mg (0,091 mmol) N-[(1S)-amino-1-feniletil]-1-metil-8-{[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil]amino}-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida u metanolu (5 mL) dodaju se 0,027 mL formaldehida (40% rastvor u vodi, 0,364 mmol) i sirćetna kiselina (0,02 mL). Posle 30 min doda se 77 mg (0,364 mmol) natrijum-triacetoksiborohidrida, pa se smeša još 5 h meša. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a sirovi materijal se rastvori u vodi, i u porcijama dodaje Na2C03dok pH ne bude bazno. Proizvod se ekstahuje dihlorometanom, kao jedino jedinjenje (34 mg, 68% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,26 (s, 9H), 2,52 (m, 4H), 2,78 (t, 2H), 2,95 (t, 2H), 3,09 (m, 4H), 4,37 (S, 3H), 5,11 (m, 1H), 6,93 (d, 2H), 7,24 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7,41 (m, 2H), 7,53 (d, 2H), 8,34 (m, 2H), 9,26 (s, 1H).

Radeći analogno, dobijena su sledeća jedinjenja: 1- metil- 8- fr4-( 4- metilpiperazin- 1- il) feninamino)- N-(( 1S)- 2- f( 1- metilpiperidin- 4-

il) amino1- 1- feniletil)- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

fB10- X00- M00 ) C01VD1451

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,76 (m, 4H), 2,73 (m, 4H), 4,39 (s, 3H), 5.34 (m, 1H), 6,98 (d, 2H), 7,30 (m, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,57 (d, 2H), 8,36 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 9,33 (bs, 1H);

rB10- X00- M03 ( C0D- P721

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,21 (s, 3H), 1,32 (s, 3H), 2,24 (s, 6H), 2.25 (s, 3H), 2,49 (m, 4H), 2,67 (m, 2H), 2,80 (m, 2H), 3,08 (m, 4H), 4,34 (s, 3H), 5,12 (td, J=8,20 i 5,67 Hz, 1H), 6,91 (d, J=9,15Hz, 2H), 7,25 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,42 (m, 2H), 7,53 (d, J=9,15Hz, 2H), 8,33 (s, 1H), 8,45 (d, J=8,29Hz, 1H), 9.26 (s, 1H).

Primer 55

N- benzil- 1- metil- 8- f4-( 4- metil- 4- oksidopiperazin- 1- il) fenillaminoV

4. 5- dihidro- 1H- pirazo[ or4. 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

U rastvor 39,4 mg (0,0774 mmol) N-benzil-1-metil-8-{[4-(4-metilpiperazin-1 - il)fenil]amino}-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksamida, doda se 17,4 mg (0,0774 mmol) 3-hlorobenzenkarboperoksi kiseline, pa se smeša meša na sobnoj temperaturi. Posle 45 min doda se rastvor NaHC03u vodi, a rastvarač ukloni. Tretman metanolom i filtriranje daju 26,6 mg naslovljenog jedinjenja (66% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,81 (t, J=7,74 Hz, 2H), 3,00 (t, J=7,62 Hz, 2H), 3,37 (m, 8H), 3,15 (s, 3H), 4,34 (s, 3H), 4,43 (d, J=6,34 Hz, 2H), 6,98 (d, J=9,15 Hz, 2H), 7,24 (m, 1H), 7,33 (m, 4H), 7,57 (d, J=9,15 Hz, 2H), 8,36 (s, 1H), 8,70 (t, J=6,34 Hz, 1H), 9,30 (s, 1H).

Primer 56

etil 8- r4-( 4- metil- piperazin- 1 - il)- fenilamino1- 1. 4. 4- trimetil- 4, 5- dihidro-1H- pirazolor4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilat

fB10- X00- M03 ( C0P- D011

Balon okruglog dna, produvan argonom, šaržira se sa Pd(OAc)2(762,34 mg, 3,395 mmol), (±)-BINAP (2,145 g, 3,39 mmol) i dimetilformamidom (250 mL). Smeša se meša pod argonom 30 min. Zatim se doda 4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamin (19,493 g, 101,908 mmol), etil 8-jodo-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilat (14,00 g, 33,961 mmol), K2C03(60,00 g, 434,112 mmol) i dimetilformamid (250 mL). Dobijena smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim se 3 h zagreva u uljanom kupatilu, na 80°C, pod argonom i uz dobro mešanje. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša se filtrira pod sniženim pritiskom, opere dihlorometanom, a filtrat ispari do suva. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 94/6), dajući 11,60 g (72% prinos) čistog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (t, J=7,07 Hz, 3H), 1,33 (s, 6H), 2,27 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 2,71 (s, 2H), 3,03-3,15 (m, 4H), 4,32 (q, J=8,07 Hz, 2H), 4,33 (s, 3H), 6,91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,53 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,35 (s, 1H), 9,28 (s, 1H).

Radeći analogno gornjem postupku, dobije se sledeće jedinjenje:

Primer 57 8- f4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- fenilamino]- 1, 4, 4- trimetil- 4, 5- dihidro-1H- pirazolo[ 4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilna kiselina kalijumova so rB10- X00- M03- D021

U suspenziju etil 8-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (11,60 g, 24,390 mmol) u anhidrovanom etanolu (450 mL), dodaje se uz dobro mešanje 1,5 M kalijum-hidroksid u 85% etanolu (63 mL), pa se smeša 3 h zagreva pod refluksom. Posle hlađenja u kupatilu sa ledom formira se čvrsta supstanca, koja se filtrira i opere etanolom, pa suši na 40°C pod vakuumom, dajući 11,8 g (kvantitativan prinos) naslovljenog jedinjenja u obliku bele čvrste supstance.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,31 (s, 6H), 2,23 (s, 3H), 2,47 (m, 4H), 2,58 (s, 2H), 3,03-3,15 (m, 4H), 4,17 (s, 3H), 6,91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,54 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,24 (s, 1H), 9,12 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 58 8- r4-( 4- metil- piperazin- 1- il)- fenilaminol- 1, 4, 4- trimetil- 4, 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- hlhinazolin- 3- karboksilna kiselina metilamid fB10- X00- M03 ( C01VD041

U suspenziju 8-[4-(4-metil-piperazin-1 -il)fenilamino]-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilna kiselina kalijumove soli (9,5 g, 19,561 mmol) u smeši 1:1 anhidrovanih tetrahidrofurana i dimetilformamida (50 mL), dodaju se sledećim redom: 2M metilamin u tetrahidrofuranu (21,12 mL, 42,24 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (5,332 g, 39,458 mmol) i 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid (EDC) (7,567 g, 39,473 mmol), pa se reakciona smeša 18 h meša na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se prespe u vodu (2,5 L), pa ekstrahuje dihlorometanom (4*250 mL). Sjedinjeni organski ekstrakti se operu vodom, osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom. Ovaj sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent metilenhloird/metanol 94/6), dajući 8,20 g (92% prinos) čistog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,33 (s, 6H), 2,26 (s, 3H), 2,44-2,54 (m, 4H), 2,68 (s, 2H), 2,76 (d, J=4,76 Hz, 3H), 3,04-3,13 (m, 4H), 4,31 (s, 3H), 6,91 (d, J=9,02 Hz, 2H), 7,53 (d, J=9,02 Hz, 2H), 8,15 (q, J=4,84 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,25 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom dobijena su sledeća jedinjenja:

U nastavku se daju analitički podaci HPLC/MS za neka reprezentativna jedinjenja ovog pronalaska.

Primer 59 8-[ 4-( 4- metil- piperazin- 1- ilHenilaminol- 1 A4- trimetii- 4, 5- dihidro- 1H-pirazolo[ 4, 3- h1hinazolin- 3- karboksilna kiselina metilamid trihidrohloridna so fB10- X00- M03 ( C01VD04]

Rastvori se 8-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-]hinazolin-3-karboksilna kiselina metilamid (7,00 g, 15,192 mmol) u smeši 1:1 metanola i dihlorometana (149 mL), pa se doda 4M hlorovodonična kiselina u dioksanu (12,12 mL, 48,48 mmol), a nastali rastvor se 2 h meša na sobnoj temperaturi. Posle uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, crvenkasti ostatak se suši 10 h na 43°C, pod vakuumom. Dobije se 8,11 g naslovljenog jedinjenja kao crvena čvrsta supstanca.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,34 (s, 6H), 2,69 (s, 2H), 2,76 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,85 (d, J=3,54Hz, 3H), 2,95-3,08 (m, 2H), 3,10-3,26 (m, 2H), 3,39-3,55 (m, 2H), 3,74 (d, J=13,41Hz, 2H), 4,30 (s, 3H), 7,00 (d, J=9,02Hz, 2H), 7,59 (d, J=8,90 Hz, 2H), 8,16 (q, J=4,51 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 9,44 (s, 1H), 10,37 (s, 1H).

Pimer 60

8- r4-( 4- metil- piperazin- 1 - ilVfenilamino- 1. 4. 4- trimetil- 4. 5- dihidro- 1 H-pirazolof4, 3- h1hinazolin- 3- karboksamid

[ B10- X00- M03 ( C01VD031

U suspenziju 8-[4-(4-metil-piperazin-1 -il)-fenilamino]-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilna kiselina kalijumove soli (185,5 mg, 0,382 mmol) u smeši 1:1 anhidrovanih tetrahidrofurana i dimetilformamida (4,8 mL), dodaju se sledećim redom: N-etildiizopropilamin (0,13 mL, 0,760 mmol), pa 1-hidroksibenzotriazol amonijumova so (102 mg, 0,769 mmol). Reakciona smeša se ohladi na 0°C, pa tretira sa 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimidom (EDC) (146 mg, 0,760mmol), a zatim se 18 h meša na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se prespe u vodu (10 mL), talog odvoji filtriranjem, opere vodom i 4 h suši na 40°C, pod vakuumom. Dobije se 130 mg (76% prinos) čistog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,34 (s, 6H), 2,26 (s, 3H), 2,46-2,56 (m 4H), 2,68 (s, 2H), 3,04-3,14 (m, 4H), 4,31 (s, 3H), 6,91 (d, J=9,15 Hz, 2H), 7,29 (s, 1H), 7,53 (d, J=9,15 Hz, 2H), 7,55 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,25 (s, 1H).

Radeći u skladu sa gornjim postupkom, dobijena su sledeća jedinjenja:

Primer 61 1 . Korak: 8 - amino - 1 . 4 . 4 - thmetil - 4 . 5 - dihidro - 1H - pirazolof4 . 3 - hIhinazolin -

3 - karboksilna kiselina kaliiumova so

! B01 - X00 - M03 ( C0D - D021

U suspenziju etil 8-amino-1,4,4-trimetiM,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilata (20,00 g, 66,368 mmol) u anhidrovanom etanolu (250 mL) doda se, uz dobro mešanje, 1,5 M kalijum-hidroksid u etanolu (150 mL), pa se smeša zagreva pod refluksom 1,5 h. Posle hlađenja u kupatilu sa ledom formira se čvsrta faza, koja se filtrira, opere etanolom i suši na 40°C pod vakuumom, dajući 17,34 g (84% prinos) belog čvrstog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,28 (s, 6H), 2,51 (s, 2H), 4,16 (s, 3H), 6,37 (s, 2H), 8,07 (s, 1H).2 . Korak: 8 - amino - 1AA - thmetil - 4 . 5 - dihidro - 1H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin -

3 - karboksilna kiselina metilamid

( B00 - X00 - M03 ( C0D - D041

U suspenziju 8-amino-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1 H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilna kiselina kalijumove soli (17,00 g, 54,594 mmol) u smeši 1:1 anhidrovanog tetrahidrofurana i dimetilformamida (340 mL), dodaju se sledećim redom: 2M metilamin u tetrahidrofuranu (40,80 mL, 81,60 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (8,840 g, 65,418 mmol) i 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimd (EDC) (12,540 g, 65,418 mmol), pa se nastala gusta suspenzija meša 20 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se prespe u vodu (2,5 L), pa ekstrahuje dihlorometanom (4*250 mL). Sjedinjeni organski ekstrakti se operu vodom (50 mL), osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata, pa rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom. Dobije se 17,0 g žućkaste čvrste supstance, koja se triturira dietiletrom, dajući 13,05 g (87% prinos) željenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,31 (s, 6H), 2,60 (s, 2H), 2,75 (d, J=4,76 Hz, 3H), 4,30 (s, 3H), 6,55 (s, 2H), 8,12 (q, J=4,39 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H).

Radeći na analogan način, dobijena su sledeća jedinjenja:

8- amino- 4. 5- dihidro- 1 H- Dirazolof4. 3- h| hinazolin- 3- karboksilna kiselina metilamid rB00- X00- M00 ( C0D- D041 <1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,69-2,74 (m, 2H), 2,74 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,94 (t, J=7,56 Hz, 2H), 4,31 (s, 3H), 6,54 (s, 2H), 7,99-8,08 (m, 1H), 8,18 (s, 1H); 8- amino- 1, 4, 4- trimetil- 4, 5- dihidro- 1H- pirazolor4, 3- h] hinazolin- 3- karboksamid [ B00- X00- M03 ( C01VD031 <1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,32 (s, 6H), 2,61 (s, 2H), 4,30 (s, 3H), 6,57 (s, 2H), 7,27 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 8,17 (s, 1H);3 . Korak: 8 - iodo - 1AA - trimetilA . 5 - dihidro - 1H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin -

3 - karboksilna kiselina metilamid

U okruglom balonu, u atmosferi argona, rastvori se etil 8-amino-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilna kiselina metilamid (13,00 g, 45,400 mmol) u anhidrovanom dimetoksietanu (800 mL), pa se dodaju sledećim redom: cezijum-jodid (11,795 g, 45,400 mmol), bi-sublimisani jod (5,761 g, 22,698 mmol), bakar(l)jodid (2,594 g, 13,621 mmol) i izo-amilnitrit (9,107 mL, 68,100 mmol), a smeša 22 h zagreva na 70°C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu čvrst materijal se odvoji filtriranjem pod sniženim pritiskom i opere dihlorometanom. Filtrat se koncentriše na 400 mL, razblaži dihlorometanom (1000 mL), opere sa 30 % amonijum-hidroksidom (100 mL), 5% natrijum-tiosulfatom (50 mL), vodom (4*100 mL) i osuši iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, dajući 11,00 g tamnog ulja, koje se triturira dietiletrom, dajući 4,300 g naslovljenog jedinjenja u obliku žute čvrste supstance. Prečišćavanje matičnog luga fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 97/3) daje još 2,04 g žućkastog čvrstog jedinjenja (ukupan prinos 35%).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,34 (s, 6H), 2,76 (d, J=4,76 Hz, 3H), 2,80 (s, 2H), 4,24 (s, 3H), 8,16-8,25 (m, 1H), 8,48 (s, 1H).

4. Korak: 8 - r3 -( 4 - metil - Dipemzin - 1 - il )- fenilaminol - 1AA - tnm

1H - pirazolo [ 4 . 3 - h ] hiazolin - 3 - karboksilna kiselina metilamid

B104 - X00 - M03 ( C01 )- D041

Balon okruglog dna, produvan argonom, šaržira se sa Pd(OAc)2(16,34 mg, 0,0728 mmol), (±)-BINAP (45,33 mg, 9,9728 mmol) i dimetilformamidom (12 mL). Ova smeša se meša 30 min pod argonom. Zatim se dodaju 3-(4-metil-piperazin-1-il-metil)-fenilamin (448,4 mg, 2,184 mmol), etil 8-jodo-1,4,4-trimetil-4,5-dihidro-1H-pirazolo[4,3-h]hinazolin-3-karboksilna kiselina metilamid (300 mg, 0,728 mmol), K2C03(1,508 g, 10,910 mmol) i dimetilformamid (10 mL). Ova smeša se zagreva 3 h u uljanom kupatilu, na 80°C, pod argonom i uz dobro mešanje. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša se filtrira pod sniženim pritiskom i opere dihlorometanom, a filtrat ispari do suva. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 95/5), dajući 215 mg (62% prinos) čistog naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1, 35 (s, 6H), 2,25 (s, 3H), 2,42 (m, 4H), 2,71 (s, 2H), 2,77 (d, J=4,76 Hz, 3H), 3,44 (m, 4H), 3,48 (s, 2H), 4,35 (s, 3H), 6,91 (d, J=7,31 Hz, 1H), 7,26 (t, J=7,68Hz, 1H), 7,56 (d, J=8,78 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 8,15 (s,1H), 8,41 (s, 1H), 9,5 (s, 1H).

Radeći analogno gornjem postupku, dobijena su sledeća jedinjenja:

Za neka reprezentativna jedinjenja iz ovog pronalaska, u Tabeli XXI se daju analitički podaci za HPLC/masu.

Primer 62 1 . Korak: Šaržiranie primarnih amina na čvrst nosač ( smola )Slučaj A: " Smola" je 4-( 4- formil- 3- metoksifenoksi) butil- polietilenglikol graftovana

sa aminometilpolistiren- 1% DVB:

Za svaku varijantu R2primarnog amina, šaržira se 1 g gore pomenute smole u reakcioni sud od 10 mL Argonaut Quest 210. U ovaj sud se doda trimetil-orto-formijat (7 mL), zajedno sa 5 ekvivalenata (1,95 mmol) svakog od primarnih amina (označenih sa R2u shemi). Reakcija se 16 h meša na aparatu Quest, na 25°C, a zatim se 2 h zagreva na 70°C. Posle hlađenja i uklanjanja rastvora reakcije, smola se opere 1* sa trimetil-orto-formijatom (7 mL) i 3* sa anhidrovanim metanolom (7 mL svaki put). Zatim se smoli doda anhidrovani metanol (5 mL), pa sledi dodavanje 148 mg (3,9 mmol, 10 ekviv.) natrijum-borohidrida. Posle prestanka snažnog izdvajanja gasa, sud se zatvori i 8 h meša na sobnoj temperaturi. Smola se opere metanolom (3*5 mL), smešom metanol/voda (1:1,5 mL) (3*) i sa DMF (3x5 mL). Smola se zatim 1 h tretira sa piperidinom u DMF, na sobnoj temperaturi. Ponovo se smola opere sa DMF (3*5 mL), metanolom (3*5 mL) i dihlorometanom (3*5mL). Uzorak smole se testira na kvantitatvno prisustvo amina, koristeći Fmoc VV-spektrometrijsku metodu, opisanu u nastavku. Kvalitativno, smola se analizira korišćenjem metode hloranilnog testa, opisanog u nastavku.

Slučaj B: " Smola" je Rink amid, 4-( 2', 4'- dimetoksifenil- fmoc- aminometil) fenoksi

( kopolistiren- 1 % D VB) :

Šaržira se 1 g (0,39 mmol) gore pomenute smole u reakcioni sud Argonaut Quest 210, od 10 mL. Smola se 5 min tretira sa 20% piperidinom u DMF, a zatim u drugom tretmanu 30 min, na sobnoj temperaturi. Smola se opere sa DMF (3x5 mL), metanolom (3x5 mL) i dihlorometanom (3*5 mL).

Kvantitativno šaržiranje amina, korišćenjem Fmoc LTV- spektrvmetnjske metode:Preciznim tariranjem odmerena masa (25 mg 5 mg) suve, šaržirane smole se ubaci u polipropilenski špric od 3 mL, opremljen diskom za filtriranje. U ovaj špric se šaržiraju 3 ekvivalenta 9-fluorenilmetil hloroformijata, rastvorenog u 1 mL dihlorometana, i zatim 1,5 ekvivalent N,N-diizopropiletilamina. Smola se 1 h mućka u orbitalnoj mućkalici. Smola se opere sa DMF (3*2 mL, 5 min), metanolom (3x2 mL, 5 min) i sa DCM (3x2 mL, 5 min). Iz šprica se izvuće 1 mL 20% piperidinskog rastvora, pa se 5 min meša na sobnoj temperaturi. Ovaj rastvor se prebaci u volumetrijski balon od 10 mL. Izvuče se drugi alikvot 20% piperidinskog rastvora i meša 30 min na sobnoj temperaturi. Ponovo, ovaj rastvor se prebaci u isti volumetrijski balon od 10 mL (polazni rastvor). U volumetrijski balon se dodaje DMF dok se ne dostigne ukupna zapremina od 10 mL. Ovaj volumetrijski balon sadrži polazni rastvor koji se dobro promućka, pa se tačno 0,5 mL prebaci u drugi volumetrijski balon od 10 mL (rastvor za testiranje). Ponovo se dodaje DMF u ovaj volumetrijski balon dok se ne dostigne ukupna zapremina od 10 mL. Meri se absorbancija ovog rastvora za testiranje na isntrumentu Amerasham Pharmacia Biotech Ultrospec 3000 Pro, UV-Vis spectrometer, pri X = 302 amj, u odnosu na DMF kao šlepu pobu. Supstitucija na smoli posle reakcije se izračunava korišćenjem sledeće formule:

šarža (mmol/g) = (A302 * 20 xio mL) / 8100 x m,

gde je UV absorbancija na X=302 nm, s = 8100 je koeficijent ekstinkcije adukta piperidin-fluorenon, amje tara smole u miligramima.

Kvalitativni hlonanil ( 3, 4, 5, 6- tetrahloro- 1, 2- benzohinon) test za sekundarne amine

vezane na smolu:

Mali alikvot prethodno oprane smole, koja sadrži vezani amin, stavi se u mikro-epruvetu za testiranje. Perlice se još jedanput operu acetonom, a rastvarač ukloni dekantiranjem. U epruvetu se doda jedna kap hloranilnog test rastvora, pa se ostavi da stoji 5 min na sobnoj temperauri. Tamno zelena do mrka boja je pozitina indikacija na sekundarni amin. Intenzitet boje nije kvantitativna indikacija koncentracije sekundarnog amina.

Rastvor za testiranje:zasićeni rastvor 3,4,5,6-tetrahloro-1,2-benzohinona u toluenu, na sobnoj temperaturi.

2. Korak: Acilovanie amina na čvrstom nosaču sa 8 - iodo - 4 . 5 - dihidro -

1H - Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - karbonilfluoridom

Za svaku od varijanti R2primarnog amina, šaržiranog na 1 g (0,39 mmol) smole u gornjem 1. Koraku, doda se sledeći, prethodno-aktivirani reagens fluorida karboksilne kiseline. U 5 mL dihlorometana se rastvore 166 mg (0,585 mmol, 1,5 ekvivalent) tetrametilfluoroformamidinijum heksafluorofosfata i 0,102 mL (0,585 mmol, 1,5 ekvivalent) N,N-diizopropiletilamina. Ovom rastvoru se, uz sonikaciju, dodaje N,N-dimetilacetamid, sve dok svi reagensi ne pređu u rastvor. Reakcioni sistem se 30 min meša na sobnoj temperaturi. Ovom rastvoru se tokom 30 min dodaje još 0,102 mg (0,585 mmol), 1,5 ekvivalent) N,N-diizopropiletilamina, pa se ceo ovaj sadržaj šaržira na smolu u aparatu Quest 210 svnthesizer. Smola se 18 h meša na sobnoj temperaturi. Smola se ocedi od koktela za acilovanje, pa opere sa DMF (3*5 mL, 5 min), metanolom (3*5 mL, 5 min) i sa DCM (3x5 mL, 5 min). Smola se osuši od DCM pod vakuumom. Smola se kvalitativno testira da li je reakcija acilovanja bila kompletna, koristeći metodu hloranilnog testa. Uzorak svake osušene smole se podvrgne kvantitativnoj Fmoc W-spektrometrijskoj analizi da se odredi domašaj acilovanja smole.

3 . Korak: Katalitičko aminovanie 8 - iodo - 1 - metil - 4 . 5 - dihidro - 1H

Dirazolof4 . 3 - hlhinazolin - 3 - karboksamida nanetoa na čvrst nosač

Koristeći kasete od 4 mL instrumenta Argonaut Trident Svnthesizer, 200 mg (0,078 mmol) svakog od tipova smole iz gornjeg 2. Koraka, se šaržira u odvojenu fiolu. U svaku od reaktorski fiola, produvanih argonom, dodaju se kalijum-karbonat (0,158 g, 1,56 mmol), paladijum-acetat [Pd(OAc)2](1,8 mg, 0,008 mmol, 10%], (±)-BINAP (6,0 mg, 0,008 mmol, 10%) i odgovarajući Rtamin (0,156 mmol, 2 ekvivalenta) u dimetilacetamidu (2 mL). Ova smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi, a zatim 16 h zagreva na 60°C u sistemu Argonaut Trident External Agitation Thermal Unit (EATU) Svhthesis Station. Smola se ocedi od koktela za sintezu i opere, koristeći sistem Argonaut Trident EATU Svnthesis Station, sa DMF (1x2 mL, 5 min), vodom(1x2 mL, 5 min), smešom 1:1 DMF/voda (3x2 mL, 5 min), sa DMF (3x2 mL, 5 min), metanolom (3x2 mL, 5 min), i sa DCM (3x2 mL, 5 min).

4 . Korak: Odvajanje diferencijalno suostituisanoo 8 - amino - 1 - metil - 4 , 5 - dihidro -

1H - pirazolof4 . 3 ,- hlhinazolin - 3 - karboksamida od čvrstog nosača

U svaku fiolu Argonaut Trident reaktora doda se 2 mL sledećeg koktela za odvajanje od smole: dihlorometan (50 mL), trifluorosirćetna kiselina (49 mL) i voda (1 mL). Smola, suspendovana u koktelu za odvajanje, mućka se 1 h na sobnoj temperaturi u sistemu Argonaut Trident EATU Svnthesis Station. Rastvori koji sadrže sirove proizvode se zatvore u posebne fiole, gde su zatvorena još i tri ispiranja smole sa dihlorometanom (2 mL svaki put), sve zajedno u istim odgovarajućim fiolama.

4-(4-formil-3-metoksifenoksi)butiril 4-(2',4'-dimetoksifenil-fmoc-polietilenglikol graftovan sa aminometil)fenoksi aminometilpolistiren-1 %DVB (kopolistriren-1 %DVB) Primer 63 N- f3- hloro- 4-( 4- metilpiperazin- 1- infeninavanidin1 . Korak: 1 , 3 - bis -( terc - butoksikarbonil ) ovanidin

Suspenduje se 15 g 1,3-bis(terc-butoksikarbonil)-2-metil-2-tiopseudouree (0,052 mol) u 150 mL gasovitog amonijaka u metanolu, pa se smeša meša u zatvorenom sudu, na sobnoj temperaturi. Nastali rastvor se koncentriše pod vakuumom, sve dok se ne istaloži 10 g (prinos 0,74%) naslovljenog jedinjenja, prethodno istaloženog i sakupljenog filtriranjem.

2. Korak: 1 . 3 - bis ( terc - butoksikamonil )- 2 - tn ' fluorometansulfonilavanidin

Rastvor 5,2 g (20 mmol) 1,3-bis-(terc-butoksikarbonil)gvanidina u 100 mL dihlorometana ohladi se uz mešanje na -78°C, pa se u kapima dodaje 5,6 g (20 mmol) anhidrida trifluorometansulfonske kiseline. Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, pa se zatim 5 h meša. Doda se rastvor NaHSCUu vodi, a organski sloj osuši iznad Na2SC>4 i ispari do suva. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent petroletar/etilacetat 7/3), dajući 4,0 g (51% prinos) naslovljenog jedinjenja.

3 . Korak: N -[ 3 - hloro - 4 -( 4 - metilDiDerazin - 1 - il ) fenillavanidin

U rastvor 3,0 g (13,3 mmol) 4-(3-hloro-4-metilpiperazin-1-il)anilina i 2,22 mL (16,0 mmol) trietilamina u 36 mL dihlorometana, doda se 6,0 g (15,3 mmol) 1,3-bis(terc-butoksikarbonil)-2-trifluorometansulfonilgvanidina. Reakciona smeša se 72 h meša na sobnoj temperaturi. Rastvor se razblaži sa još dihlorometana, opere vodom, a rastvarač osuši iznad Na2S04i ispari pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni sa silikagelom (eluent dihlorometan/metanol 92/6), dajući 5,4 g (86,2% prinos) zaštićenog intermedijara, koji se tretira sa 60 mL 4 M HCI u dioksanu. Smeša se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvori u vodi, dobijeni rastvor neutrališe, a proizvod ekstrahuje etilacetatom. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, dajući 2,4 g (78,7% prinos)naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,23 (s, 3H), 2,48 (m, 4H), 2,90 (m, 4H), 5,38 (bs, 1H), 6,72 (dd, J=2,44i 8,42 Hz, 1H), 6,82 (d, J=2,44Hz, 1H), 7,01 (d, J=8,42 Hz, 1H).

Radeći analogno, ali koristeći pogodno supstituisane derivate anilina, dobijena su sledeća jedinenja:

N- r3-( 4- metilpiperazin- 1- ihfenilqvanidin:

N- f4-( 4- metilpiperazin- 1- ihfenillavanidin

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,80 (s, 3H), 7,09 (m, 4H), 7,41 (s, 2H), 9,85 (s, 1H), 11,39 (s, 1H) (kao dihidrohlorid);

N- f4-( 4- metilpiperazin- 1- il)- 3-( trifluorometil) feninqvanidin

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,22 (s, 3H), 2,43 (m, 4H), 2,80 (m, 4H), 5,46 (bs, 4H), 7,02 (m, 2H), 7,37 (d, J=8,42 Hz, 1H);

N-( 3- hlorofenil) qvanidin.

Primer 64

1 . Korak: terc - butil ( 1S )- 2 - hidroksi - 1 - feniletilkarbamat

Rastvor 40 g (0,291 mmol) (2S)-2-amino-2-feniletanola u 1250 mL etilacetata i 99,83 mL (0,583 mol) N-etil-N,N-diizopropilamina, ohladi se na 0°C, pa se u porcijama dodaje 76,21 g (0,349 mmol) di-terc-butildikarbonata. Smeša se 3 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim opere sa 400 mL 1M KHSO4. Organski sloj se osuši iznad Na2S04, dajući 69,88 g naslovljenog proizvoda.

2. Korak: ( 2S )- 2 - r ( teiv - butoksikamonil ) amiol - 2 - feniletil metansulfonat

Rastvor 68,9 g (0,29 mol) terc-butil (1S)-2-hidroksi-1-feniletilkarbamata i trietilamina (40,36 mL, 0,29 mol) u 700 mL suvog dihlorometana, u inertnoj atmosferi, ohladi se na -10°C, pa se u kapima dodaje 24,79 mL (0,319 mol) mezilhlorida. Posle 2 h na 0°C smeša se prespe u led i vodu, pa ekstrahuje dihlorometanom. Organska faza se opere rablaženom HCI, sa NaHC03, rastvorom soli i osuši iznad Na2S04, dajući 89,8 g naslovljenog jedinjenja (98% prinos).

3 . Korak: terc - butil ( 1S )- 2 - mofrolin - 4 - il - 1 - feniletilkarbamat

Smeša 25 g (0,0792 mol) (2s)-2-[(terc-butoksikarbonil)amino]-2-feniletil metansulfonata i morfolina (69,37 mL, 0,792 mol) u 250 mL suvog THF, u inertnoj atmosferi, refluksuje se 8 h. Reakcija se zatim ohladi na sobnu temperaturu, tretira dietiletrom i čvrsta supstanca filtrira. Rastvor se ispari, dajući sirov materijal kao žuto ulje, koje se prečisti hromatografijom na silikagelu (eluent heksan/etilacetat 6/4). Izolovano je 11,59 g naslovljenog proizvoda (48% prinos).

4 . Korak: ( 1S )- 2 - morfolin - 4 - il - 1 - feniletilamin dihidrohlorid

Rastvor 11,58 g (0,0378 mol) terc-butil (1S)-2-morfolin-4-il-1-feniletilkarbamata u 100 mL dihlorometana se tretira sa 120 mL 4 M HCI u dioksanu, pa meša 18 h. Smeša se razblaži dietiletrom, a proizvod filtrira (9,48 g, 90% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,37 (m, 6H), 3,83 (m, 4H), 4,90 (m, 1H), 7,51 (m, 5H), 8,84 (bs, 3H).

Radeći analogno, dobijeno je sledeće jedinjenje:

( 1 SV2-( 4- metilpiperazin- 1 - ih- 1 - feniletilamin hidrohlorid

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,78 (m, 13H), 4,47 (m, 1H), 7,46 (m, 5H), 8,45 (bs, 3H), 10,40 (bs, 1H).

Primer 65

1 . Korak: 1 - terc - butil - 4 -( 4 - nitrofenil ) Diperazin

Rastvor 800 mg (5,67 mmol) 1-fluoro-4-nitrobenzena, 2,07 g (1,2 mmol) 1-terc-butilpiperazin dihidrobromida i 3,2 mL (20,41 mmol) trietilamina u 22 mL acetonitrila, refluksuje se 10 h. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži vodom i ekstrahuje dihlorometanom. Organski sloj se opere vodom i rastvorom soli, osuši iznad Na2S04i ispari. Prečišćavanje fleš hromatografijom (eluent dihlorometan/metanol 7/3) daje 860 mg naslovljenog jedinjenja kao žutu čvrstu supstancu.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,05 (s, 9H), 2,63 (m, 4H), 3,43 (m, 4H), 7,03 (d, 2H), 8,05 (d, 2H).

2 . Korak: 4 -( 4 - terc - butilDiDemzin - 1 - il ) fenilamin

U rastvor 840 mg (3,189 mmol) 1-terc-butil-4-(4nitrofenil)piperazina u 24 mL metanola, doda se 904 mg (16,9 mmol) amonijum-hlorida rastvorenog u 6 mL vode i 552 mg (9,886 mmol) gvožđa. Posle 7 h suspenzija se ohladi i filtrira. Dodavanjem Na2C03u porcijama vodenoj fazi, podesi se pH na 10. Ekstrakcija dihlorometanom daje 667 mg naslovljenog amina.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,05 (s, 9H), 2,62 (m, 4H), 2,89 (m, 4H), 4,52 (s, 2H), 6,50 (d, J=8,78 Hz, 2H), 6,67 (d, J=8,78Hz, 2H).

Primer 66

N- f3-( 1- metil- piperidin- 4- iloksi)- fenil1- acetamid

Suspenzija N-(3-hidroksi-fenil)-acetamida (30,2 g) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (600 mL) tretira se sa 4-hidroksi-N-metilpiperidinom (3,54 mL) i trifenilfosfinom (68,18 g). U kapima se dodaje rastvor dietilazadikarboksilata u anhidrovanom tetrahidrofuranu (THF) (40,94 mL u 60 mL THF), pa se smeša 2 h meša na sobnoj temperaturi, a zatim preko noći na 50°C. Doda se još trifenilfosfina (28,00 g) i dietiliazadikarboksilata (14 mL), a sa zagrevanjem se nastavi još 24 h. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a ostatak se razmuti u etilacetatu (600 mL), pa ekstrahuje 2M hlorovodoničnom kiselinom (3*200 mL). Vodeni sloj se opere etilacetatom, a dodavanjem 20% natrijum-hidroksida pH se dovede na 10. Obavi se ekstrakcija etilacetatom (4*100 mL), a sjedinjeni organski ekstrakti se operu rastvorom soli i osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata, rastvarač se ukloni pod vakuumom, a sirovi proizvod prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 85/15, a zatim +0,1% trietilamina), dajući 21 g željenog proizvoda.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,52-1,68 (m, 2H), 1,83-1,96 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,46-2,52 (m, 2H), 2,52-2,63 (m, 2H), 4,18-4,20 (m, 1H), 6,59 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 7,14 (t, 1H), 7,26 (s, 1H), 9,83 (s, 1H).

3- metil- piperidin- 4- iloksi- fenilamin

Rastvor N-[3-(1-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-acetamida (2,604 g u apsolutnom etanolu (40 mL) se tretira sa 37% hlorovodoničnom kiselinom, pa se rastvor 3 h zagreva pod refluksom. Posle uklanjanja rastvarača pod vakuumom ostatak se rastvori u vodi i opere etilacetatom (30 mL). Vodeni rastvor se učini baznim sa 20% natrijum-hidroksidom, pa ekstrahuje etilacetatom (40*50 mL). Sjedinjeni organski ekstrakti se operu rastvorom soli (4*20 mL), vodom (2*10mL) i osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Posle uklanjanja rastvarača, sirovi materijal (20,0 g) se kristališe iz n-heksana i etilacetata, dajući 1,00 g čistog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,54-1,68 (m, 2H), 1,82-1,94 (m, 2H), 2,12-2,27 (m, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,58-2,71 (m,2H), 4,14-4,29 (m, 1H), 4,98 (s, 2H), 6,09 (ddd, J=8,11, 2,32 i 0,79 Hz, 1H), 6,14 (ddd, J=7,83, 2,04 i 0,98 Hz, 1H), 6,16 (t, J=2,19 Hz, 1H), 6,88 (t, J=7,99 Hz, 1H).

Primer 67

5- amino- 2-( 4- metil- piperazin- 1- ilVfenil1- metanol

metil 2- fluoro- 5- nitro- benzoat

Tretira se rastvor 2-fluoro-5-nitro-benzoeve kiseline (3,702 g, 20 mmol) u anhidrovanom metanolu (10,00 mL), sa 98% sumpornom kiselinom, pa se rastvor 4 h zagreva pod refluksom. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a ostatak rastvori u etilacetatu (50 mL). Ovaj rastvor se opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata u vodi (3*10 mL), rastvorom soli dok ne bude neutralan, a zatim vodom, pa osuši iznad anhidovanog natrijum-sulfata. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, dajući gusto ulje, koje počne da kristališe. Posle dodavanja n-heksana (3 mL) sirovi materijal se drži 2 dana u frižideru. Kristalno jedinjenje se odvoji filtriranjem i opere sa n-heksanom, dajući 3,147 g čistog jedinjenja. Koncentrisanjem matičnog luga, dobije se druga žetva (390 mg) (prinos 89%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,94 (s, 3H), 7,69 (m, 1H), 8,55 (m, 1H), 8,65 (m, 1H).

Metil 2- f4- metil- piperazin- 1 - ih- 5- nitro- benzoat

Rastvor metil 2-fluoro-5-nitrobenzoata (3,487 g, 17,511 mmol) i N-metilpiperazina (3,855 mL, 3,508 g, 35,022 mmol) u 30 mL anhidrovanog metanola zagreva se 5 h pod refluksom. Posle uklanjanja isparljivih sastojaka pod sniženim pritiskom, sirovo oranž ulje se lagano tretira vodom (oko 20 mL), pa 1 h meša u kupatilu sa ledom. Nastalo kristalno jedinjenje se filtrira pod sniženim pritiskom, opere vodom i suši 24 h na 40°C, pod vakuumom. Dobije se 4,627 g žutog jedinjenja (96% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,25 (s, 3H), 2,46 (m, 4H), 3,27 (m, 4H), 3,87 (s, 3H), 7,22 (d, J=9,27Hz, 1H), 8,08 (dd, J=9,27 i 2,80 Hz, 1H), 8,33 (d, J=2,80 Hz, 1H)

2-( 4- metil- piperazin- 1- il)- 5- nitro- fenill- metanol

Tretira se suspenzija metil 2-(4-metil-piperazin-1-il)-5-nitro-benzoata (1,40 g, 5,00 mmol) u anhidrovanom dietiletru (60 mL), sa litijum-bor-hidridom (190,5 mg, 8,75 mmol), pa se opazi stvaranje taloga. Doda se anhidrovani metanol (0,350 mL, 280,3 mg, 8,75 mmol), pa se rastvor 2 h zagreva pod refluksom. Po završetku reakcije, nakon 4 sata, doda se još dva puta litijum-bor-hidrid (190,5 mg) i metanol (0,350 mL). Posle hlađenja u kupatilu sa ledom, reakciona smeša se tretira vodom i 1 M HCI (6 mL), pa 15 min meša na sobnoj temperaturi. Rastvor se zatim učini baznim na pH 11 sa 1 M natrijum-hidroksidom, pa se ekstrahuje dihlorometanom. Organski ekstrakti se operu rastvorom soli, pa vodom i osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Rastvarač se isparava do suva, dajući 1,35 g mrke čvrste supstance, koja se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol 95/5), dajući 1,10 g željenog jedinjenja (87% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 2,28 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 3,03 (m, 4H), 4,54 (m, 2H), 5,53 (t, 1H), 7,17 (d, J=8,90 Hz, 1H), 8,08 (dd, J=8,90 i 2,92 Hz, 1H), 8,33 (d, J=2,92 Hz, 1H).

5- amino- 2-( 4- metil- piperazin- 1- il)- fenil1- metanol

U rastvor sirovog [2-(4-metil-piperazin1-il)-5-nitrofenil-metanola (437 mg, 1,74 mmol) u metanolu (1,5 mL), dodaju se amonijum-hlorid (NH4CI) (465 mg), voda (4,9 mL) i prah gvožđa (290 mg), pa se smeša 3 h zagreva na 100°C. Reakciona smeša se filtrira, a crni talog opere sa MeOH/vodom 1:1 (10 mL). Metanol se ukloni pod vakuumom, a zaostala voda se učini baznom sa natrijum-karbonatom (Na2C03) i ekstrahuje etilacetatom (5*20 mL). Organski ekstrakti se operu rastvorom soli (2*10 mL) i vodom (2x5mL), pa osuše iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Posle isparavanja, sirova oranž supstanca se prečisti fleš hromatografijom na silikagelu (eluent dihlorometan/metanol/trietilamin 90/10/0,1), dajući 357 mg čistog naslovljenog jedinjenja (92% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 2,26 (s, 3H), 2,52 (m, 4H), 2,73 (m, 4H), 4,48 (m, 2H), 4,75 (bs, 2H), 4,96 (t, 1H), 6,43 (dd, J=8,42i 2,68 Hz, 1H), 6,67 (d, J=2,68 Hz, 1H), 6,80 (d, J=8,42 Hz, 1H).

Primer 68

1 -( 4- metil- piperazin- 1- kart>oni0- 2- piperidin- 4- on hidrohlorid

U suspenziju 4-metilpiperazin-1-karbonilhlorid hidrohlorida (19,9 g, 0,1 mol) i piperidin monohidrat hidrohlorida (15,3 g, 0,1 mol) u 200 mL dihlorometana, u kapima se dodaje suv trietilamin (45 mL, 0,33 mmol). Ova smeša se 2 h meša. Organska faza se opere rastvorom soli (2*20 mL) i osuši iznad natrijum-sulfata. Posle filtriranja ispari se rastvarač pod vakuumom, a sirovi proizvod rastvori u EtOH (50 mL) i dietiletru (100 mL), pa tretira sa 4 M HCI u dioksanu (25 mL). Posle 1 h talog se filtrira i suši u sušnici, dajući 13 g (50% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,40 (t, J=6,16Hz, 4H), 2,81 (s, 3H), 3,00-3,11 (m, 2H), 3,12-3,23 (m, 2H), 3,28-3,42 (m, 2 H), 3,51 (t, J=6,16 Hz, 4H), 3,73 (d, J=14,27Hz, 2H), 10,12 (s, 1H).

Primer 69

1 - acetil- 4- hidrazinopiperidin hidrohlorid

1 . Korak: N '-( 1 - acetilpipehdin - 4 - iliden ) benzohidrazid

Rastvori se 20 g (0,142 mol) 1-acetil-4-piperidona u 400 mL apsolutnog etanola, pa se doda 21,2 g (0,156 mol) benzohidrazina. Ovaj rastvor se refluksuje 6 h, uz mešanje. Zatim se ukloni rastvarač, a ostatak raspodeli između dihlorometana i vode. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata i ispari do suva. Ostatak se triturira dietiletrom, pa se filtriranjem sakupi 30 g (83% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,07 (s, 3H), 2,43-2,62 (m, 4H), 3,45-3,74 (m, 4H), 7,51 (m 3H), 7,84 (m, 2H), 10,7 (bs, 1H).

2.Korak: N '.( 1 - acetilDiDeridin - 4 - il ) benzohidrazid

Rastvori se 30 g (0,12 mol) N'-(1-acetilpiperidin-4-iliden)benzohidrazida u 500 mL glacijalne sirćetne kiseline, pa se doda 1 g PtC>2. Smeša se hidrogenuje 12 h pod pritiskom 4,2 bar, na sobnoj temperaturi. Zatim se katalizator odvoji filtriranjem, a filtrat ispari pod vakuumom. Ostatak se ponovo rastvori u dihlorometanu, pa opere rastvorom NaHC03u vodi. Rastvarač se osuši iznad natrijum-sulfata, pa ukloni pod sniženim pritiskom, dajući, posle trituriranja dietiletrom, 28,6 g (92% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,25 (m, 2H), 1,81 (m, 2H), 2,00 (s, 3H), 3,75 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 4,19 (1, 1H), 7,49-7,51 (m, 3H), 7,84 (m, 2H), 10,01 (s, 1H).

3 . Korak: di - terc - butil 1 -( 1 - acetilDiDehdin - 4 - il )- 2 - benzohidmzin - 12<likarboksilat

U rastvor 28,6 g (0,11 mol) N'-(1-acetilpiperidin-4-il)benzohidrazida u 700 mL acetonitrila doda se 52,19 g (0,44 mol) 4-dimetilaminopiridina (DMAP) i 77,2 g (0,35 mol) di-terc-butildikarbonata. Ova smeša se meša preko noći, rastvarač odstrani, a ostatak razmuti u dihlorometanu, pa opere rastvorom KHSO4u vodi, da se ukloni DMAP. Organski sloj se osuši iznad natrijum-sulfata i ispari, dajući 45 g naslovljenog jedinjenja kao ulje.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,18 i 1,40 (2s, 18H), 1,97 (s, 3H), 4,28 (m, 1H), 7,51-7,53 (m, 4H).

4 . Korak: di - terc - butil 1 -( 1 - acetilDiDeridin - 4 - il ) hidrzain - 1 . 2 - dikarboksilat

Rastvori se 45 g (0,1 mol) di-etil-butil 1-(1-acetilpiperidin-4-il)-2-benzohidrazin-1,2-dikarboksilata u 1 L tetrahidrofurana, pa se doda rastvor 5,8 g (0,14 mol) litijum-hidroksid monohidrata u 1 L vode. Ova smeša se 16 h meša na sobnoj temperaturi, pa tetrahidrofuran ukloni pod vakuumom, a vodeni sloj nekoliko puta ekstrahuje dihlorometanom. Organska faza se osuši iznad natrijum-sulfata i ispari do suva, dajući 32 g (84% prinos) naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 1,41 i 1,42 (2s, 18H), 1,99 (s, 3H), 4,09 (m, 1H), 2,52 i 3,05 (2m, 4H), 3,9 i 4,41 (2m, 4H), 8,81 (bs, 1H).

5 . Korak: 1 - acetil - 4 - hidrazinopiperidin hidrohlorid

Rastvori se 32 g (0,09 mol) di-terc-butil 1-(1-acetilpiperidin-4-il)hidrazin-1,2-dikarboksilata u 300 mL metanola, pa se doda 30 mL 4 M HCI u dioksanu. Ova smeša se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ispari, a ostatak kristališe iz etanola, dajući 14 g (77% prinos) naslovljenog jedinjenja.

Primer 70

( 1 S)- 1 - metil- 2- morfolin- 4- il- 1 - feniletilamin dihidrohlorid

1 . Korak: N -( terc - butoksikarbonil )- 2 - fenil - D - alanin

U suspenziju 500 mg 2-fenil-D-alanina (3,02 mmol) i trimetilamonijum-hidroksida (10% rastvor u vodi, 2,8 mL, 3,02 mmol) u 15 mL acetonitrila, doda se di-terc-butildikarbonat (1,047 g, 4,8 mmol), pa se smeša 2 dana meša na sobnoj temperaturi. Zatim se rastvarač ukloni pod vakuumom, a ostatak rastvori u vodi i opere dietiletrom. Vodeni sloj se zakiseli na pH 3-4 sa limunskom kiselinom, a proizvod ekstrahuje etilacetatom (3*20 mL). Sjedinjena organska faza se opere vodom, osuši iznad Na2S04i ispari. Naslovljeni proizvod se izdvaja kao bela čvrsta supstanca (630 mg, 78% prinos).2. Korak: N -( terc - butoksikarbonil )-( 1S )- 1 - metil - 2 - morfolin - 4 - il -

2 - okso - 1 - feniletilamin

Rastvori se 630 mg (2,374 mmol) N-(terc-butoksikarbonil)-2-fenil-D-alanina u 20 mL suvog DMF, pa se doda 0-(benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TBTU, 1,37 g, 4,27 mmol), morfolin (9,412 mL, 4,73 mmol) i diizopropiletilamin (1,63 mL, 9,5 mmol). Ova smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, zatim se rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom, a ostatak se rastvori u dihlorometanu. Ovaj rastvor se opere zasićenim NaHC03, rastvorom soli i vodom, pa osuši iznad Na2S04. Izoluje se 700 mg naslovljenog jedinjenja (8% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,40 (s, 9H), 1,65 (s, 3H), 3,33 (m, 8H), 7,35 (m, 6H),

3 . Korak: ( 1S )- 1 - metil - 2 - moriolin - 4 - ii - 2 - okso - 1 - feniletilamin hidrohlorid

Rastvor 630 mg (1,884 mmol) N-(terc-butoksikarbonil)-(1 S)-1-metil-2-morfolin-4-il-2-okso-1-feniletilamina u 20 mL dioksana tretira se preko noći sa 2,5 mL 4M HCI u dioksanu. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a čvrsta faza triturira dietiletrom, dajući 560 mg naslovljenog jedinjenja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 1,94 (s, 3H), 3,35 (m, 8H), 7,51 (m, 5H), 8,52 (bs, 3H).

4 . Korak: ( 1S )- 1 - metil - 2 - morfolin - 4 - il - 1 - feniletilamin dihidrohlorid

U atmosferi argona se rastvori 412 mg (1S)-1-metil-2-morfolin-4-il-2-okso-1-feniletilamin hidrohlorida (1,522 mol) u 30 mL suvog THF. Na 0°C, u kapima se dodaje 2M rastvor boran-dimetilsulfida (4,4 mL, 5,78 mmol), pa se smeša 10 min meša na 0°C, a zatim ostavi da dostigne sobnu temperaturu (izdvajanje gasa). Posle 4 h reakcija se tretira metanolom (vrlo pažljivo se dodaje), pa kada prestane penušanje, razblaži metanolom. Ukloni se THF pod vakuumom, a metanolski rastvor se 20 mi zagreva na 60°C. Na kraju se rastvarač potpuno ukloni, pa regeneriše 330 mg amina, koji se zatim rastvori u 15 mL dioksana, i tretira sa 1,35 mL 14 M HCI u dioksanu. Posle 1 h rastvarač se ispari, a proizvod triturira dietiletrom, dajući 350 mg očekivane soli.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 1,66 (s, 3H), 2,52 (m, 6H), 3,57 (m, 4H), 7,51 (m, 5H), 8,53 (s, 3H).

Primer 71

( 1 S)- 2- morfolin- 4- il- 2- okso- 1 - feniletilamin hidrohlorid

1 . Korak: N -( terc - butoksikarbonil )-( 1 S )- 2 - morfolin - 4 - il - 2 - okso - 1 - feniletilamin

Rastvori se 1 g (3,98 mmol) Boc-L-fenilglicina u 18 mL suvog DMF, pa se dodaju 0-(benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TBTU, 1,92 g, 5,97 mmol), morfolin (0,555 mL, 6,37 mmol) i diizopropiletilamin (2,72 mL, 15,92 mmol). Ova smeša se 1 h meša na sobnoj temperaturi, zatim se rastvarač ukloni, a ostatak rastvori u dihlorometanu. Rastvor se opere zasićenim NaHC03, rastvorom soli i vodom, pa suši iznad Na2S04. Izoluje se 1,327 g naslovljenog jedinjenja.

2. Korak: ( 1 S )- 2 - morfolin - 4 - il - 2 - okso - 1 - feniletilamin hidrohlorid

Rastvori se 1,327 g N-(terc-butoksikarboil)-(1S)-2-morfolin-4-il-2-okso-1-feniletilamina u 15 mL dioksana, pa se preko noći tretira sa 3,5 mL 4 M HCI u dioksanu. Ukloni se rastvarač, a ostatak triturira dietiletrom, dajući 920 mg naslovljenog proizvoda (90% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 3,13 (m, 4H), 3,54 (m, 4H), 5,58 (m, 1H), 7,50 (s, 5H), 8,58 (s, 3H).

Claims (27)

1. Derivat pirazolo-hinazolina predstavljen formulom (la) ili (lb), naznačen time, što su R je vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između amino, ravan ili račvast Ci-C6 alkil, C3-C10cikloalkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil; X je prosta veza ili dvovalentni radikal koji se bira između -NR'-, -CONR'-, -NH-CO-NH-, -0-, -S- ili -S02- gde je R' vodonik ili opciono supstituisana grupa, koja se bira između: ravan ili račvast C1-C6alkil, C3-C6cikloalkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R i R' mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono može da sadrži još jedan heteroatom, koji se bira između N, 0 ili S; Rivezan za bilo koji od atoma azota u pirazolskom prstenu, kao u formulama (la) ili (lb), predstavlja atom vodonika ili opciono supstituisanu grupu koja se bira između: ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3-C6cikloalkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili kao u formuli (lb), Ripredstavlja dvovalentnu -(CH2)n-NH- grupu, povezanu sa R2, gde je n jednako 2 ili 3; R2je grupa koja se bira između -NR"R"', -N(OH)R", -OR" ili -R", gde su R" i R'" svaki nezavisno, vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između ravan ili račvast Ci-Cealkil, C3-C6cikloalkil, cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, ili zajedno sa atomom azota za koji su vezani, R" i R'" mogu da formiraju 5- do 6-članu heteroaril ili heterociklil grupu, koja opciono sadrži još jedan heteroatom, koji se bira između N, 0 ili S; A je dvovalentna grupa, koja se bira između -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2-C(CH3)2-, -C(CH3)2-CH2- ili -CH=CH-; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

2. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -NH- grupa, R2je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je R" opciono supstituisana grupa koja se bira između C3.C6cikloalkil, ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, a R, Rii A su definisani gore.

3. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -0- grupa, R2je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je R" opciono supstituisana grupa koja se bira između Cs-Cscikloalkil, ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, a R, Rii A su definisani gore.

4. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -S- grupa, R2 je grupa koja se bira između -NHR", -N(OH)R", -OR" ili -R", gde je R" opciono supstituisana grupa koja se bira između C3-C6cikloalkil, ili cikloalkil-alkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil, a R, Rii A su definisani gore.

5. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -NH- grupa, R2je grupa koja se bira između -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta CrC4 alkil grupa, a R, Rii A su definisani gore.

6. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -0- grupa, R2je grupa koja se bira između -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta C1-C4alkil grupa, a R, Rii A su definisani gore.

7. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što X predstavlja -S- grupa, R2 je grupa koja se bira između -NHR" ili -N(OH)R", gde je R" atom vodonika ili ravna ili račvasta C1-C4alkil grupa, a R, Rii A su definisani gore.

8. Jedinjenje formule (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što su R, X i A definisani gore, a Rii R2su zajedno povezani preko dvovalentne -(CH2)n-NH-grupe, gde je n definisano gore.

9. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što A predstavlja grupa koja se bira između -(CH2)2-, -CH2-C(CH3)2- ili -C(CH3)2-CH2-.

10. Jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, naznačeno time, što bilo koja od gornjih grupa R, R', Ri, R" i R'", može opciono biti supstituisana u bilo kome od njenih slobodnih položaja, sa jednom ili više grupa koje se nezavisno biraju između: halogen, nitro, okso grupe (=0), cijano, azido, alkil, polifluorovani alkil, hidroksialki, aril, arilalkil, heterociklil, heterociklilalkil, cikloalkil, alkilaril, alkilheterociklil, hidroksi, alkoksi, polifluorovani alkoksi, ariloksi, arilalkiloksi, heterocikliloksi, heterociklilalkiloksi, metilendioksi, alkilkarboniloksi, alkilkarboniloksialkil, arilkarboniloksi, karboksi, alkoksikarbonil, alkoksikarbonilalkil, ariloksikarbonil, cikloalkiloksikarbonil, amino, aminoalkil, alkilaminoalkil, alkilaminoalkiloksi, ureido, alkilamino, dialkilamino, arilamino, diarilamino, formilamino, alkilkarbonilamino, arilkarbonilamino, heterociklilkarbonilamino, alkoksikarbonilamino, alkoksiimino, alkilsulfonilamino, arilsulfonilamino, formil, alkilkarbonil, arilkarbonil, heterociklilkarbonil, cikloalkilkarbonil, heterociklilkarbonil, aminokarbonil, alkilaminokarbonil, dialkilaminokarbonil, arilaminokarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heterociklilsulfonil, aminosulfonil, alkilaminosulfonil, dialkilaminosulfonil, ariltio i alkiltio.

11. Bilo koje specifično jedinjenje formule (la) ili (lb), prema Zahtevu 1, između onih koja su definisana u Tabelama od VI do XXI, naznačeno time, što opciono može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli.

12. Postupak za tretiranje ćelijskih proliferativnih poremećaja izazvanih sa, i/ili povezanih sa izmenjenom aktivnošću protein kinaze, naznačen time, što se sisaru kome je to neophodno ordinira efikasna količina derivata pirazolo-hinazolina, predstavljenog formulama (la) ili (lb), opisanim u Zahtevu 1.

13. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što aktivnost protein kinaze predstavlja aktivnost enzima Aurora 2.

14. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što aktivnost protein kinaze predstavlja aktivnost kinaze zavisne od ćelijskog ciklusa.

15. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što se ćelijski proliferativni poremećaj bira iz grupe koju čine kancer, Alzheimer-ova bolest, virusne infekcije, autoimune bolesti i neurodegenerativni poremećaji.

16. Postupak prema Zahtevu 15, naznačen time, što se kancer bira iz grupe koju čine karcinom, karcinom skvamoznih ćelija, hematopoietički tumori mijeloidne i limfoidne loze, tumori mezenhimalnog porekla, tumori centralnog i perifernog nervnog sistema, melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, xeroderma pigmentosum, keratoksantom, tiroidni folikularni kancer i Kaposi-ev sarkom.

17. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što se ćelijski proliferativni poremećaj bira iz grupe koju čine benigna hiperplazija prostate, porodična adenomatozna polipoza, neuro-fibromatoza, psorijaza, proliferacija vaskularnih glatkih ćelija povezana sa aterosklerozom, pulmonama fibroza, artritis, glomerulonefritis i stenoza i restenoza nakon hirurškog zahvata.

18. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što pruža inhibiciju angiogeneze i metastaze tumora, kao i za tretman oko odbacivanja transplantiranog organa i bolesti domaćina protiv grafta.

19. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što pruža tretman ili prevenciju alopecije izazvane radioterapijom ili hemoterapijom.

20. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što se još sastoji od podvrgavanja sisara, kome je to potrebno, režimima radioterapije ili hemoterapije, u kombinaciji sa najmanje jednim citostatičnim ili citotoksičnim agensom.

21. Postupak prema Zahtevu 12, naznačen time, što sisara kome je to potrebno predstavlja humano biće.

22. Postupak za inhibiciju aktivnosti kinaze Aurora 2, naznačen time, što se dovodi u kontakt pomenuta kinaza sa efikasnom količinom nekog od jedinjenja definisanih u Zahtevu 1.

23. Postupak za inhibiciju aktivnosti kinaze zavisne od ciklina, naznačen time, što se sastoji od dovođenja u kontakt pomenute kinaze sa efikasnom količinom nekog od jedinjenja definisanih u Zahtevu 1.

24. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I), ovde obuhvaćenih jedinjenjima formule (la) ili (lb), kako su definisana u Zahtevu 1, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, naznačen time, što ga čini: (1) kada A predstavlja -(CH2)2- grupa:Korak 1.reagovanje 2-etoksi-2-cikloheksen-1-ona sa dietiloksalatom, u prisustvu litijum-bis(trimetilsilil)-amida [LiN(TMS)2], tako da se dobije jedinjenje formule (II) pa tretiranje ovoga sa derivatom hidrazina formule R1-NHNH2(III) gde je Ridefinisano gore, u skladu sa radnim uslovima opisanim u Koracima (2a) i (2b) ili (2c);Korak 2a.,u prisustvu nižeg alkohola, tako da se dobije smeša jedinjenja formule (IVa) i (IVb) gde je Ridefinisano gore, pa razdvajanja njihove smeše na pojedinačna jedinjenja (IVa) i (IVb);Korak 2b.,u prisustvu sirćetne kiseline, tako da se dobije jedinjenje (IVa);Korak 2c,alkilovanjem jedinjenja (IVa), dobijenog u Koraku 2a ili 2b, a kada Ripredstavlja vodonik, sa jedinjenjima formule (IVc): RiY (IVc) gde su, Rije definisano gore, a Y je pogodna odlazeća grupa, koja se bira između mezil, tozil ili halogen, tako da se dobije smeša jedinjenja formule (IVa) i (IVb), gde jeR- idefinisano gore, pa razdvajanjem njihove smeše na jedinjenja (IVa) i (IVb);Korak 3.reagovanja jedinjenja formule (IVa), dobijenog u skladu sa bilo kojim od Koraka 2a, 2b ili 2c, ili jedinjenja formule (IVb), dobijenog u skladu sa Koracima 2a ili 2c, sa dimetilformamid-di-terc-butilacetalom, tako da se dobiju jedinjenja formule (Va) ili (Vb): gde je Ridefinisano gore; pa reagovanja jedinjenja formule (Va) ili (Vb) u skladu sa bilo kojim od alternativnih Koraka 4a, 4b ili 4c;Korak 4a.,sa gvanidinom, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde R-X predstavlja amino, R2je etoksi, a Rije definisano gore; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);Korak 4b.,sa derivatom gvanidina formule (VI) gde je R definisano gore, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde su R i Ridefinisani gore, X je -NH-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);Korak 4c,sa alkilizotioureom formule (VII) gde je R definisano gore, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde su R i Ri definisani gore, X je -S-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I);Korak 4d.,sa metilizoureom, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb), gde je Ridefinisano gore, R je metil, Xje -0-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I); (2) kada A predstavlja -C(CH3)2-CH2- grupa:Korak 5.reagovanja 2-metoksi-4,4-dimetil-2-cikloheksen-1-ona sa dietiloksalatom, u prisustvu [LiN(TMS)2], tako da se dobije jedinjenje formule (VIII) Korak 6.reagovanja jedinjenja formule (VIII) sa derivatom hidrazina formule (III), u skladu sa bilo kojim od prethodnih Koraka 2a ili 2b, tako da se dobije jedinjenje formule (IXa) ili (IXb) gde je Ridefinisano gore;Korak 7.reagovanja jedinjenja formule (IXa) ili (IXb) sa etilformijatom, pod baznim uslovima, tako da se dobije jedinjenje formule (Xa) ili (Xb) Korak 8.reagovanja jedinjenja formule (Xa) ili (Xb) sa derivatom gvanidina, formule (VI), tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde su R i Ridefinisani gore, Xje -NH-, a R2 je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I); (3) kada A predstavlja -CH2-C(CH3)2- grupa:Korak 9.reagovanja 2-metoksi-5,5-dimetil-2-cikloheksen-1-ona sa dietiloksalatom, u prisustvu natrijum-hidrida, tako da se dobije jedinjenje formule (XI) Korak 10.reagovanja jedinjenja formule (XI) sa derivatom hidrazina formule (III), u skladu sa bilo kojim od prethodnih Koraka 2a ili 2b, tako da se dobije jedinjenje formule (Xlla) ili (Xllb) gde je Ri definisano gore;Korak 11.reagovanja jedinjenja formule (Xlla) ili (Xllb) sa dimetilformamid-di-terc-butilacetalom, tako da se dobije jedinjenje formule (XI Na) ili (XIIlb) Korak 12.reagovanja jedinjenja formule (XIIla) ili (Xlllb) sa derivatom gvanidina formule (VI), tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde su R i Ridefinisani gore, X je -NH-, a R2je etoksi; i opciono, njihovim konvertovanjem u druge derivate formule (I); 4. Kada je Rii formuli (lb) direktno vezan za R2, tako da se dobije tetraciklična prstenasta struktura:Korak 13.reagovanja jedinjenja formule (IV), gde je Rivodonik, dobijenog u skladu sa Korakom 2. ovog postupka, sa trifenilmetilhloridom, tako da se dobije jedinjenje formule (XIV) gde Tr označava tritil (trifenilmetil);Korak 14.reagovanja jedinjenja formule (XIV) sa dimetiformamid-di-terc-butilacetalom, kao što je opisano u Koraku 3, tako da se dobije jedinjenje formule (XV) Korak 15.reagovanja jedinjenja formule (XV) sa pogodnim derivatom gvanidina formule (VI), kao što je opisano u Koraku 4b, tako da se dobije jedinjenje formule (la) ili (lb) gde je R definisano gore, X je -NH-, Rije tritil, a R2je etoksi;Korak 16.reagovanja gornjeg jedinjenja formule (la) ili (lb) pod kiselim uslovima, tako da se dobiju odgovarajuća jedinjenja formule (la) i (lb) u kojima Ri predstavlja vodonik;Korak 17.reagovanja gornjeg jedinjenja formule (la) ili (lb) sa pogodnim agensom za alkilovanje formule (XVI), u prisustvu litijum-terc-butilata gde je n 2 ili 3, tako da se dobije jedinjenje formule (lb) gde su n i R definisani gore;Kora/c 18.reagovanja gornjeg jedinjenja formule (lb) pod kiselim uslovima, tako da se terc-butoksikarbonilamino grupa konvertuje u amino (deprotekcija), pa reagovanja sa cezijum-karbonatom (Cs2C03), tako da se dobije jedno od dva jedinjenja formule (lb) gde je R definsiano gore, i opciono, ona se konvertuju u druge derivate formule (I); 5. Kada R2predstavlja krupnu grupu:Korak 19.reagovanja 2-etoksi-2-cikloheksenona sa dimetilformamid-di-terc-butilacetalom, kao što je opisano u Koraku 3, tako da se dobije jedinjenje formule (XVII) Korak 20.reagovanja jedinjenja formule (XVII) sa derivatom formule (VII), u skladu sa Korakom 4c, tako da se dobije jedinjenje formule (XVIII) gde je R definisano gore, pa se zatim tretira pod kiselim uslovima tako da se dobije jedinjenje formule (XIX) Korak 21.reagovanja jedinjenja formule (XIX) sa jedinjenjem formule (XX) gde je R2krupna grupa, tako da se dobije jedinjenje formule (XXI) Kora/c 22.reagovanja jedinjenja formule (XXI) sa derivatom hidrazina formule (III), kao u Koraku 1. ovog postupka, tako da se dobije jedinjenje formule (I), gde su R i R-i definisani gore, X je -S-, a R2je krupna grupa; i opciono, njegovim konvertovanjem u druge derivate jedinjenja formule (I).

25. Postupak prema Zahtevu 24, naznačen time, što se sastoji od konvertvanja jedinjenja formule (I) dobijenih u bio kom od Koraka 4a.,4b., 4c, 8., 12., 13., 18. i 22., u druga jedinjenja formule (I), postupak koji se sastoji od konvertovanja tih jedinjenja formule (I):Korak 23.,ako je R2etoksi, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (la) ili (lb), u kojima je R2amino, tretmanom sa amonijum-hidroksidom Korak 24.ako je R2etoksi, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I), u kojima R2grupu predstavlja -NHR", gde je R" definisano gore, tretmanom sa aminom formule Korak 25.ako je R2etoksi, mogu se konvertovati kiselom ili baznom hidrolizom u jedinjenja formule (I) u kojima R2predstavlja -OH grupa Korak 26.ako je R2-OH, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R2grupa -NR"R"' ili -N(OH)R", gde su R" i R'" definisani gore, reakcijom sa derivatom formule (XXIII) ili (XXIV) pod baznim uslovima i u prisustvu podesnog agensa za kondenzovanje Korak 27.ako je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R različito od vodonika, kao što je definisano gore, a X je -CONH-, reakcijom sa jedinjenjem formule Korak 28.ako je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R različit od vodonika, kao što je definisano gore, a X je -NH-CO-NH-, reakcijom sa izocijanatom formule Korak 29.kada je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X je -NH-, prvo konvertovanjem amino grupe u jod, sa izoamilnitritom i dijodometanom ili cezijum-jodidom, u prisustvu joda i Cul, a zatim reakcijom ovog jodo-derivata sa arilaminom formule u prisustvu paladijum-acetata i (2,2'-bis(difenilfosfino))-1,1'binaftalina (BINAP) Korak 29a. kada je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) gde je R alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, arilalkil, heterociklil, heterociklilalkil, a X je -NH-, prvo konvertovanjem amino grupe u jod, kao što je opisano u prethodnom Koraku 29, pa zatim reagovanjem ovog jodo-derivata sa alkil, cikloalkil, cikloalkil-alkil, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil aminom formule R-NH2(XXVII), gde je R ranije definisano;Korak 30.kada je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X je prosta veza, prvo konvertovanjem amino grupe u jod, kao u gornjem Koraku 29., a zatim reagovanjem tog jodo-derivata sa arilbornom kiselinom, formule u prisustvu derivata paladijuma Korak 31.kada je R vodonik, a X je -NH-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R arilmetil, a X je prosta veza, reakcijom sa arilaldehidom formule u prisustvu natrijum-cijanoborohidrida (NaBHaCN) Korak 32.kada je R metil, a X je -S-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R opciono supstituisani alkil, cikloalkil, heterociklil, cikloalkil-alkil, arilalkil ili heterociklialkil grupa, prvo konvertovanjem RS-grupe u RSO2-, pod oksidacionim uslovima, pa zatim reagovanjem ovog sulfonil derivata sa aminom, formule R-NH2(XXVII), gde je R opciono supstituisan sa alkil, cikloalki, heterociklil, cikloalkil-alkil, arilalkil ili heterociklilalkil grupom Korak 33.kada je R metil, a X je -S-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R različito od metil, a X je -0-, prvo konverzijom RS- grupe u RSO2, kao u Koraku 32, a zatim reagovanjem ovog sulfonil derivata sa jedinjenjem formule Korak 33a.kada je R metil, a X je -0-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R različito od metil, a X je -0-, prvo konvertovanjem MeO-grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa jedinjenjem formule R-OH (XXX) Korak 33b.kada je R metil, a X je -0-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R opciono supstituisani alkil, cikloalkil, heterociklil, cikloalkil-alkil, heterocikloakil grupa, a X je -NH-, prvo konvertovanjem MeO-grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa aminom formule R-NH2(XXVII), gde je R opciono supstituisana alkil, ckloalkil, heterocikil, cikloalkilalkil, arilalkil ili heterociklilalkil grupa Korak 33c.kada je R metil, a X je -0-, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I) u kojima je R aril, a X je -NH-, prvo konvertovanjem MeO- grupe u HO-, a zatim reagovanjem sa agensom za triflatizovanje, tako da se dobije odgovarajući trifluorometansulfonat, i konačno njegovim reagovanjem sa aminom formule RNH2(XXVII), gde je R opciono supstituisan sa aril, u prisustvu paladijum-acetata i BINAP;Korak 34.kada A predstavlja -(CH2)2- grupa, mogu se konvertovati u jedinjenja formule (I), gde A predstavlja -CH=CH- grupa, pod radnim uslovima za dehidrogenovanje, u prisustvu Pd ili Pt katalizatora.

26. Jedinjenje formule (Va) ili (Vb), definisano u Koraku 3. Zahteva 24.: naznačeno time, što R predstavlja atom vodonika ili opciono supstituisanu grupu koja se bira između ravan ili račvast Ci-Cealkil, C3-C6cikloalkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil.

27. Biblioteka od dva ili više jedinjenja formule (la) ili (lb) naznačena time, što su: R je vodonik ili opciono supstituisana grupa koja se bira između amino, ravan ili račvast Ci-C6alkil, C3-C10cikloalkil, aril, arilalkil, heterociklil ili heterociklilalkil; X je prosta veza ili dvovalentni radikal koji se bira između -NR'-, -CONR'-, 30. Proizvod ili komplet, naznačen time, što sadrži jedinjenje formule (la) ili (lb), definisano u Zahtevu 1, ili njegov farmaceutski preparat, definisan u Zahtevu 28, i jedan ili više hemoterapeutskih agenasa, kao kombinovani preparat za simultanu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu u terapiji protiv kancera. 31. Upotreba jedinjenja formule (la) ili (lb), definisanog u Zahtevu 1, kao medikamenta. 32. Upotreba jedinjenja formule (la) ili (lb), definisanog u Zahtevu 1, za proizvodnju medikamenta sa aktivnošću protiv kancera.