PT99661B

PT99661B - Processo para a preparacao de esteroides 2beta,19-etilenicos ligados em ponte

Info

Publication number: PT99661B
Application number: PT99661A
Authority: PT
Inventors: Norton Paul Peet; John O'neal Johnston; Joseph Paul Burkhart
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1990-11-30
Filing date: 1991-11-29
Publication date: 1999-05-31
Also published as: KR920009842A; FI915623L; ZA919296B; FI102073B1; DK0488383T3; NZ240738A; NO180304B; HUT59937A; PT99661A; EP0488383B1; US5166201A; ATE142639T1; ES2094183T3; NO914710L; GR3021981T3; HU210830B; DE69122048T2; AU635444B2; IL100196A; CN1033975C

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ESTERÓIDES 2 β,19-ETILÉNICOS

LIGADOS EM PONTE”

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

As hormonas estrogénicas, estrona e estra diol, estão envolvidas em muitos processos fisiologicos. A formação destes esteróides é regulada por um conjunto de enzimas. 0 enzima aromatase é o enzima limitante da taxa de conversão não reversível das hormonas androgénicas, testoste. rona e androstenediona, nas hormonas estrogénicas, estradiol e estrona. Compostos que sejam inibidores de aromatase, podem assim regular ou inibir a conversão de androgénios em estrogénios e tér uma utilidade terapêutica no tratamento de patolo gias potenciadas pela presença de estrogénios.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA

INVENÇÃO

A presente invenção refere-se aos compostos esteróides 2,19-etilénicos ligados em ponte, os quais são inibidores do enzima aromatase, aos compostos intermédios com eles relacionados, ao seu uso como inibidores de aromatase e ao processo para a sua preparação. Mais concretamente, os compostos que constam da presente invenção representam-se

pela seguinte fórmula geral

na qual

------ representa uma ligação simples ou dupla

R representa um átomo de hidrogénio ou de oxigénio ou um grupo -OH ou = CH₂ representa um átomo de oxigénio ou um grupo -OH ou -0- (alcanoílo )

R₂, e R^ representam, cada um, independentemente , um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^e

X representa um átomo de oxigénio ou um grupo =CH₂-OH ou -0- (alcanoilo C₁

Os grupos alquilo acima referidos podem ser exemplificados pelos grupos metilo, etilo e propilo. Os grupos alcanoílo antes referidos podem ser

- 3 * exemplificados pelos grupos formilo, acetilo, propionilo e butirilo. Nos casos em que os símbolos X, R e R^ representam grupos monovalentes, estes têm uma configuração p em relação à molécula esteroide e o átomo de hidrogénio que está também na mesma posição tem uma configuraçãoc<em rela ção à molécula esteroide.

As linhas sinuosas que ligam R^ , R^ ^eR^ à molécula esteroide, indicam que estes grupos podem ter qualquer uma das configurações esterioquimicas possíveis quando o outro substituinte, na mesma posição do qual é um átomo de hidrogénio. As ligações duplas, representadas pelas linhas ponteadas, são limitadas, considerando que não é possível ter duas ligações duplas partindo do mesmo átomo de carbono e uma ligação dupla na posição 6 é possível apenas quando há também uma ligação dupla na posição 4. Adicionalmente , o composto deve conter pelo menos uma ligação dupla quer na posição 4 quer na posição 5.

Ao descrever os compostos de acordo com a presente invenção, eles foram referidos genericamente como esteróides 2 fô, 19-etilénicos ligados em ponte. Usa-se uma terminologia semelhante ao enumerar compostos específicos englobados pela presente invenção. Esta terminologia indica que existe uma cadeia de dois átomos de carbono que tem duas valências livres em átomos de carbono diferentes, a qual liga as posições 2 e 19, numa molécula esteroide. A designa

ção β é usada ligada à posição 2 para explicitar que a ligação em ponte se faz na fase β .

Seguem-se alguns exemplos específicos de compostos de acordo com a presente invenção.

/5,19-(Etileno)androst-4-ene-3,17-diona.

/3,19^(Etileno)androsta-4,6-dieno-3,17-diona.

β,19-(Etileno)andros-5-ene-3β,17 /3-diol.

β, 19-(Etileno)-androst-5-ene-3/3,17 β-diol diacetato.

2/3,19-Etileno-6-metilenoandrost-4-eno-3,17-diona.

β,Ί9-(Etileno)androst-4-eno-3,6,17-triona.

2/3,19-Etileno-6β -hidroxiandrost-4-eno-3,17-diona. 2'β ,19-Etileno-19-metilandrost-4-eno-3,17-diona.

Os compostos descritos na presente invenção podem ser obtidos pela ciclização mistura de um esteróide substituído na posição 19, tendo um grupo eliminável posicionado adequadamente, nesse substituinte da posição 19. Mais concretamente, os compostos aos quais se refere a presente invenção são preparados através da reacção de um esteróide de fórmula geral,

*

na qual

R₂, e R^ têm os significados definidos antes e

Z é um grupo eliminável com uma base forte, em um dissolvente inerte, submetidos a arrefeci mento. A hexametildissilazida de l€io e o<tetra-hidrofurano são, respectivamente, a base e o dissolvente preferidos. Z_ pode ser qualquer grupo facilmente eliminável sendo, no entanto, preferíveis os ésteres de sulfonatos e o éster de 4-toluenossulfonato é particularmente preferido .

processo indicado origina 0 produto correspondente 0 qual tem 0 mesmo núcleo esteróide mas com uma ponte 2β , 19-etilénica. Este composto pode ser usado para preparar outros compostos da presente invenção. Estas trans_ formações posteriores serão discutidas ao serem aplicadas ao

composto 2 β,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona, podendo no entanto, ser também aplicados a outros compostos semelhan tes.

Assim, o tratamento da 2/3,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona com cloranilo em t-butanol, produz o 4,6- dieno correspondente, enquanto que a reacção da 2/3,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona com acetal-formaldeído produz o 6-metileno correspondente. Reagentes como o ácido p-toluenossúlfónico, ácidos inorgânicos fortes, resinas permutadoras de iões acídicos ou, preferencialmente, cloreto de fosforilo com dimetil-formaldeído ou dietil-acetal, são os mais adequados para a última conversão.

Se se reduzir a 2 β,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17 -diona com boro-hidreto de sódio em etanol, obtém-se o Δ *-3/0,17/ -diol correspondente. Para obter o Δ5-3/3,17/3 -diol, converte-se primeiramente a 2 /3,19 (etileno) androst-4-eno-3,17-diona no 3-acetoxi-3,5-dieno correspondente. Consegue-se esta conversão tratando a diona com anidrido acético, em presença de uma quantidade catalítica de um ácido, com o ácido g-toluenossulfónico, seguido da adição de piridina ou através da reacção da diona com um excesso de anidrido acético e uma quantidade catalítica de solução aquosa de ácido perclórico a 70 #, em acetato de etilo como dissolvente, seguida de neutralização com carbonato de sódio .Ibatanse então.O,3-ade.toxi- 3,5-dieno com boro-hidreto de cálcio em etanol, a uma temperatura de -15°C, para se obter ο Δ 5-diol desejado. 0 tratamento subsequente do diol com um anidrido, como o anidrido acético, origina o diacetato correspondente.

Quando a 2 /3,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona reage com um excesso de etileno-glicol, em presença de uma quantidade catalítica de um ácido como o ácido metanossulfónico, obtém-se o 3,17-bis-etileno-cetal correspondente com a ligação dupla deslocada para a posição 5. A oxidação do 5-eno com o ácido m-cloroperbenzóico em diclorometano a uma temperatura de 0°C, origina o 5,6-epoxido correspondente. A reacção deste epoxido com ácido perclórico em solução aquosa de tetrahidrofurano, produz o 5,6diol e, simultaneamente, eliminam-se os grupos cetal para deixar a 3,17-dicetona livre. A oxidação do diol com reagente de Jones origina a 5-hidroxi-6^ -cetona (aliás, 5-hidroxi-3,6,17-triona) correspondente, cuja posterior desidratação com ácido p-toluenossulfónico produz a £ 4-3,6,17-triona.

Pode usar-se também o bis-cetal obtido no início, no parágrafo anterior, em uma síntese diferente. Assim, hidroliza-se selectivamente este composto usando uma solução aquosa de ácido perclórido a 0,15 % em t-butanol e diclorometano, para se obter a 17-cetona corres pondente. Reduz-se então a 17-cetona com um excesso de iboro-hidreto de sódio em etanol a uma temperatura de 0°C

para se obter o composto 17/3-hidroxilado correspondente.

tratamento deste álcool com uma solução aquosa de ácido clorídrico elimina o grupo protector 3-cetal, para deixar livre o grupo 3-cctona. Alternativamente, pode obter-se o composto 3-ceto-17/^-hidroxi pela reacção selectiva da 3,17-dicetona usando hidreto de tri-(t-butoxi) de alumínio e lítio. Faz-se reagir esta 3-cetona com metilenotrifenilfosforano para se obter o composto 3-metileno-17-hidroxilado correspondente. Oxida-se este composto com reagente de Jones para se obter a 3-metileno-17-cetona desejada.

Pode obter-se o material inicial referido anteriormente, específico para a preparação da 2/3,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona , pela seguinte série de nsacçSes, partindo do 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-androst-5-eno-19-ol. Submete-se este composto a uma reacção de Witting para adicionar uma cadeia de dois oarbonos.- na posição 19· Trata-se, este composto especificamente com fosfonio acetato de trietilo e com uma base forte como a hexametilsalazida de potássio em um dissolvente inerte tal como o tetra-hidrofurano. A reacção prossegue na presença de um poliéter cíclico como o éter l8'-coroa-6 em atmosfera inerte. Usa-se um refluxo com calor prolongado para assegurar que a reacção seja completa. Adicionalmente, podem usar-se tratamentos repetidos com fosfonoacetato e uma base, para assegurar que a reacção seja completa. 0 produto específico

que se obtém através desta .· .. reacção é o composto no qual se substituiu o grupo 19-óxo por um grupo 19-[(etoxicarbonil)-metileno].

Reduz-se selectivamente a ligação dupla da cadeia lateral pelo tratamento do composto com magésio em metanol. Ocorre também uma trans-esterificação e o produto reduzido é o 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19-E(metoxicarbonil)-metil]-androst-5-eno. A redução da função éster com um hidreto redutor, tal como o hidreto de alumínio lítio em um dissolvente inerte, tal como o éter dietílico origina o composto 19(2-hidroxietil) correspondente, o qual reage depois com um reagente apropriado, tal como o cloreto de p-toluenossulfonilo em piridina, para se obter o éster correspondente. Podem introduzir-se outros grupos elimináveis, através dos procedimentos habituais. Removem-se depois os grupos etileno-cetal pelos procedimentos habituais tais como o tratamento com ácido p-toluenossulfónico em acetona. Isto origina a 3,17-diona intermédia desejada.

Podem obter-se produtos intermédios para os compostos nos quais o símbolo R^ é um grupo alquilo jj, utilizando alguns dos compostos intermédios a que se refere o parágrafo anterior. Assim, pode reduzir-se o composto 19-[(metoxicarbonil)-metilo] usando hidreto de di-isobutil-alumínio em tolueno, para se obter o 3,3,17, 17,-bis-(etilenodióxi)-19-(2-oxoetil)-androst-5-eno. Alternativamente , pode obter-se o composto 19-(2-oxoetilo) pela

- 10 * oxidação do composto 19-(2-hidroxietilo)correspondente usan do cloreto de oxalilo e dimetilssulfóxido, seguido de trietilamina. 0 composto oxo reage depois com o alquil-lítio correspondente, ou alquilo de Grignard em tetra-hidrofurano para dar o composto 19-(2-alquil-2-hidroxietilo)correspondente. Converte-se este álcool no éster p-toluenossulfonato correspondente e eliminam-se os grupos protectores etileno-cetal, como foi descrito no parágrafo anterior.

Os compostos a que se refere a presente invenção são inibidores de aromatase . Como inibidores de aromatase,eles são úteis no tratamento da hiperestrogenemia. Estes compostos são úteis no controlo dos níveis anormalmente altos de estrogénios , tanto quando os níveis elevados observados são relativamente estáveis, como quando surgem episódios breves de níveis elevados, fazendo parte das funções cíclicas neuroendóorinaso Tanto as fêmeas como os machos podem ser tratados, tendo em consideração, obviamente, que o nível de estrogénios que seria de considerar elevado nos machos será muito mais baixo que aquele considerado elevado para as fêmeas.

Estes compostos são também úteis como agentes anti-ferticida para evitar a ovulação ou a implantação nas fêmeas ou para reduzir o comportamento de acasalamento dos machos, nos quais é necessária a aromatização a nível cerebral para tal comportamento. Estes compos- 11

tos têm ainda /valor no tratamento da ginecomastia, infertilidade masculina, resultante de níveis elevados de estrogéneos e a hiperestrogenemia, a qual pode preceder o enfarte do miocárdio. Estes compostos podem usar-se tam bém no tratamento do cancro da mama e de outros tumores, induzidos ou estimulados pelos estrogénios e em doenças f-ecidulares hiperplásicas.

Para se conseguir o efeito desejado podem administrar-se os compostos ao paciente oralmente, parentericamente, p.e., ,. por via intravenosa, intraperitoneal, intramuscular ou sub-cutânea, incluindo a injecção do ingrediente activo, directamente no tecido ou tumor. 0 termo doente aplica-se aqui para animal de sangue quente, p.e., mamíferos como os seres humanos, primatas, gado, cães, gatos, cavalos, -ovelhas, ratinhos ratos e porcos. Podem também administrar-se estes compostos sob a forma de uma preparação farmacêutica, e podem ainda incorporar-se em dispositivos de libertação prolongada. A quantidade de composto a administrar variará dentro de um vasto leque assim como a quantidade eficaz.

A quantidade eficaz de composto a administrar varia de 0,01 a 150 mg/kg de peso corporal, por dia e, preferencialmente, de 0,1 a 50 mg/kg de peso corporal, podia, dependendo do doente a tratar, da patologia e do modo de administração.

X

Para administração oral podem formar-se estes compostos em preparações sólidas ou líquidas, tais como cápsulas, comprimidos, pílulas, pós, trociscos, solu ções, suspensões ou emulsões. As formas de dosagem das uni_ dades sólidas podem ser uma eápsula, a qual é feita de gelatina comum, contendo o composto activo e um veículo, p.e., lubrificantes e um excipiente inerte tal como a lactose, sacarose ou amido de milho. Numa outra composição, pode comprimir-se um composto activo descrito na presente invenção com as bases convencionais para comprimidos, tais como a lactose , a sacarose ou o amido de milho, em combinação com ligantes tais como acácia, amido de milho, ácidos algínicos e um lubrificante como um ácido esteárico ou o estearato de magnésio.

Para administração parentérica, podem administrar-se os compostos na forma de dosagens injectáveis de uma solução ou suspensão do composto em um dissolvente fisiologicamente aceitável com um veículo farmacêutico, o qual pode ser um líquido esterilizado, tal como uma emulsão de água em óleo, com ou sem a adição de um tensioactivo e de outros adjuvantes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Óleos de origem animal, vegetal sintático ou obtidos a partir do petróleo, tais como o óleo de amendoim, óleo de soja e óleo mineral, podem usar-se nestas composições. De um modo geral, preferem-se soluções salinas, soluções aquosas de dextrose ou açúcares relacionados, água, eta-

nóis e glicóis como o propilenoglicol ou polietilenoglicol, como veículos líquidos, particularmente para soluções in jec táveis.

Podem administrar-se estes compostos sob a forma de um disco cutâneo, de uma injecção depósito ou de um implante, o qual pode formular-se de modo a permitir a libertação prolongada do composto activo. Pode comprimir-se o ingrediente activo em aglomerados ou em pequenos cilindros e implantar os mesmos subcutaneamente ou intramuscularmente sob a forma de injecções depósito ou implantes. Podem usar-se na fabricação dos implantes, materiais inertes, tais como polímeros biodegradáveis e silicones sintáticos, por exemplo, SILASTIC^ ou borracha de silicone fabricada pela Dow Corning Corporation. Encontra-se mais informações sobre veículos farmacêuticos adequados e técnicas de formulação em publicações como o Remington’s Pharmaceutical Aciences; Mack Publishing Company; Easton; Pennsylvania.

As seguintes formulações farmacêuticas, adequadas para administração oral, podem usar-se ao pôr em prática a presente invenção.

COMPRIMIDO

(a)	2 β, 19-(Etileno)androst-4-eno-3,17-diona	75 g
(b)	Lactose	1 ,216 kg
(e)	Amido de milho	0,3 kg

%

Mistura-se o ingrediente activo, a lactose e o amido de milho, uniformemente. Granula-se com pasta de amido a 10 $ seca-se até atingir um conteúdo de humidade de cerca de 2,5 Peneira-se por um peneiro número 12. Adiciona-se e misturam-se as seguintes substâncias:

(a) Estearato de magnésio 0,015 Kg (b) Amido de milho q.b.p. 1,725 kg

Comprime-se em máquina apropriada para produzir comprimidos com 0,115 g por comprimido.

CÁPSULA DE GELATINA MOLE

(a)	2 /3,19-(Etileno)androst-4-eno-3,17-diona	0,25 kg
(b)	Polisorbato 80	0,25	kg
(c)	Óleo de milho q.b.p.	25,0	kg

e Burkhart et al

Mistura-se e enchem-se 50.000 cápsulas de gelatina mole.

Demonstra-se a actividade inibidora de aromatase dos presentes compostos, através de métodos laboratoriais semelhantes aos procedimentos descritos na patente de invenção Norte-Americana N® 4.322.416 e tal como publicaram Johnston et al.,; ^t,Endocrinology^,l; 115,1984 , p. 776 • »

Steroids; 45; 1985 p. 357.

' .¼

Neste ensaio, pré-incuba-se o inibidor com o enzima, antes de ensaiar a sua actividade em presença de elevados níveis de substrato. Uma diminuição da actividade enzimática,.relacionada com o tempo pode indicar uma ligação reversível através de um modo de invenção preferencial.

No ensaio dependente do tempo, coloca-se em tubos de centrífuga de 35 ml, que já contêm 600 jul de um sistema gerado de NAOPH, uma quantidade do inibidor enzimático, que irá fornecer concentrações de ensaio que se situam normalmente entre 1 nm e 10 /im, em 100 ^1 do tampão de ensaio descrito anteriormente. Inicia-se a pré-incubação pela adição de 700 pl da preparação de aromatase normalmente 300-S00 pg de proteína microssónica por ml de tampão de ensaio. Agitam-se estas preparações com um vortex e incubam-se durante 0, 5, 10 ou 20 minutos a uma temperatura de 25°C. Adicionam-se então 100 pl de androso tenediona (~6,8 juM), contendo 1/3- H androstenediona ,em tampão de ensaio para fornecer uma concentração de substrato (0,55 juM) que seja pelo menos 10 vezes o valor de Km da androstenediona (0,04 juM). Após a agitação com vortex, a incubação do enzima continua durante 10 minutos após o que se interrompe pela adição de clorofórmio. Determina-se a quantidade de radioactividade na fracção aquosa, por proces_ sos de cintilação. Calcula-se a actividade enzimática para cada concentração de inibidor e para cada período de tempo de pré-incubação, como uma percentagem do veículo

de controlo do minuto 0” a que se atribuiu arbitrariamente o valor de 100 Assim, expressa-se a inibição do enzima presente como uma percentagem: (100 $ menos a percentagem de actividade enzimática em presença do inibidor).

Na analise de cinética enzimática, obti^ veram-se os gráficos de Kitz-Wilson para ensaios dependentes do tempo. Estas análises fornecem estimativas do Kl aparente de inactivação o qual representa a concentração de inibidor necessária para produzir metade da taxa máxima de inactivação enzimática. Determina-se a constante de pseudo-primeira ordem para a inactivação enzimática (k e o semi-tempo de inactivação (Ι^θ) de concentrações infinitas de inibidor. Da razão K ,K. (inactivação) resulta um íncat ϊ dice que aumenta com o aumento da eficiência da inactivação enzimática e com o aumento da afinidade do inibidor para o sítio activo do enzima. Usando este ensaio, observaram-se os seguintes resultados para o composto 2β,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona:

K. (nM) = 23,9 t_5Q (min) = 0,87 k ./K. = 557,710 cat ϊ ’

Apresentam-se os seguintes exemplos para ilustrar a presente invenção, mas os mesmos não devem ser construídos de forma a limitar a própria invenção em algum

sentido.

EXEMPLO 1

Em atmosfera de árgon, adicionou-se hexametilsalazido de potássio (30,88 ml de uma solução tolu énica 0,5 M, 15,44 mmole) a uma solução homogeneizada de fosfonoacetato de trietilo (3,06 ml, 15,44 mmole) e éter l8-coroa-6 (1,4,7,10,13,16-hexa-oxa-ciclo-octadecano em tetra-hidrofurano (100 ml). Após 5 minutos, adicionou-se 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-androst-5-en-19-al (2,00 g,

5,15 mmole), agitou-se a mistura reaccional durante 30 minutos e aqueceu-se a mesma à temperatura de refluxo. Após 89 horas à temperatura de refluxo, deixou-se a mistura arrefecer até à temperatura ambiente. Em um recipiente separado e em atmosfera de árgon, adicionou-se hexametilsalarida de potássio (5,14 ml de uma solução toluénica 0,5 M, 2,57 mmole) a uma mistura homogeneizada de fosfonoí?.acetato de trietilo (0,51 ml, 2,57 mmole) e éter 18-coroa-6 (0,68 g, 2,57 mmole) em tetra-hidrofurano (20 ml). Após 5 minutos adicionou-se esta solução à mistura reaccional anterior, atra vés de uma agulha de transferência e tornou a aquecer-se a mistura à temperatura de refluxo durante 46 horas. Concentrou-se a mistura reaccional reduzindo-a a 1/3 do seu volume inicial em um evaporador rotativo e verteu-se este volume reduzido em uma mistura de etiléter (250 ml)/solução aquosa saturada de cloreto de potássio (250 ml). Separaram-se as fases e

-/8 e extraiu-se a fase aquosa com mais 50 ml de éter etílico. Lavaram-se as fases orgânicas, que se juntaram, com uma solução saturada de carbonato de potássio (2 x 250 ml), secaram-se (Na^SO^) e concentraram-se. Uma cromatografia rápida (com uma coluna de gel de sílica de 6x15 cm) usando como eluente uma mistura de acetato de etilo/hexano (40:60) fornecem 2,10 g (rendimento 89 de 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19-[(etoxicarbonil)-metileno]androst-5-eno, sob a forma de uma espuma branca.

RMN H (CDC1 ) 6,93 (d, 1H, J = 15,9 Hz, , /3 invinilo insaturado), 5,78 (d, 1H, J = 15,9

Hz , vinilo	insaturado) ,	5,62-5,68
(m, 1H, vinilo),	4,16-4,27 (m,	2H, OCH₂),
3,79-4,02 (m, 8H,	2 x 0CH₂CH₂0)	, 1,31
(t, J = 7,2 Hz, CH	í₃), 0,72 (s,	3H, 18-CH ).
(KBr) 3434, 2976,	2944, 2876,	1718,
1642, 1306,	1288, 1180,	1104,
_1 1042 cm

EM (Cl, CH^) m/z (intensidade relativa) 459 (MH⁺, 100), 413 (20), 397 (14), 99 (14)

EXEMPLO 2

Tratou-se limalha de magnésio (4,77 g,

0,20 mole) em metanol (100 _; ml ): , ’ ' com um pequeno cristal

de iodo. Após o desaparecinento da coloração e quando se evidenciou a formação de gás, adicionou-se uma solução de 3,3, 17,17-bis-(etilenodioxl)-19-[(etoxicarbonil)-metileno]-androst -5-eno (180 g, 3,92 mmole) em tetra-hidrofurano (10 ml). Usou-se um banho de água e depois um banho de gelo, para moderar a reaeção. Após o desaparecimento de toda a limalha de magnésio, concentrou-se a mistura reaccional até cerca de 1/4 do seu volume original em um evaporador rotativo e adicionou-se-lhe uma mistura de éter etílico (250 ml)/]^^ (300 ml). Adicionou-se lentamente cerca de 300 ml de ácido clorídrico 1N, agitando sempre, até o pH da fase aquosa ter um valor entre 4 e 5. Separaram-se as fases e adicionou-se novamente 200 ml de éter etílico à fase aquosa, acidificando-se a mesma, em seguida, pela adição de ácido clorídrico 1N (cerca de 100 ml), até se atingir um pH entre 2 e 3Separaram-se novamente as fases orgânicas combinadas com ácido clorídrico 0,5 N (2 x 100 ml) seguido de 100 ml de uma solução aquosa de cloreto de sódio. Após selagem, com sulfato de sódio e concentração da solução obteve-se 1

1,63 g de uma espuma esbranquiçada, cujo espectro RMN H mostrou tratar-se de uma mistura de 3,3,17,17-bis-(etileno dioxi)-19-[(metoxicarbonil)-metil]-androst-5-eno e do éster metílico do composto inicial na proporção de 40:60. Três repetições consecutivas dos procedimentos anteriores forneceram produto impuro contendo menos de 5 % do éster meti lico do composto inicial. Uma cromatografia rápida usando uma coluna de gel de sílica 5 x 12 cm e como eluente,

uma mistura de acetato de etilo/hexano (40:60) forneceu 1,10 g (rendimento de 63 de 3>3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19[(metoxicarbonil)-metil]androst-5-eno, sob a forma de espuma esbranquiçada.

RMN¹íÍCDC1₃) é 5,53-5,61 (m, 1H, vinilo), 3,81-4,04 (m, 8H, 2 x OCH₂CH₂O), 3,67 (s,

3H, OCH₃), 0,89 (s, 3H, 18-CH^.

IV (KBr)	3438, 1436,	2948, 2876, 1738, 1634,
1380, 1308, 1104, 1044	-1 cm
EM (CI,	ch₄)	m/z (intensidade relativa)	447
	(MH⁺,	100) , 415 (12) , 385 (20)	99
	(12).	EM (EI) m/z (intensidade	rela-
	tiva)	446 (M⁺, 28), 99 (100).

EXEMPLO 3

Adicionou-se 0,13 g (3,49 mmole) de hidreto de alumínio e lítio a uma solução homogeneizada e agitada de 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19-[(metoxicarbonil)-metil_;]-androst-5-eno (1,04 g, 2,33 mmole) em éter etílico anidro (30 ml), em atmosfera de árgon, arrefecida em banho de gelo. Após 1 hora, tratou-se a mistura reaccional com água (0,1 ml) seguida de hidróxido de sódio 1N (0,1 ml) e, novamente água (0,3 ml). Retirou-se o sobrenadante por decantação e concentrou-se o mesmo para se

obter o produto impuro. Uma cromatografía rápida usando uma coluna de gel de sílica 5 x 10 cm e, como eluente, uma mistura de acetato de etilo/hexano (60:40) forneceu 0,90 g (rendimento 93 D de 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19-(2-hidroxietil)-androst-5-eno, sob a forma de uma espuma branca

HRES Calculado para ^C25^H39°5 ) - 419,2797 ;

Encontrado MH⁺ = 419,2775; erro = -5,2 ppm.

RMN¹H (CDClg) /5,51-5,57 (m, 1H, vinilo), 3,82-4,03 (m,

8H, 2 x OCH₂CH₂O) 3,53-3,64 (m, 2H, CH₂0),

0,90 (s, 3H, 18-CHg).

IV (KBr) 3440, 2944, 2874, 1632, 1378, 1308, 1104,

1048 cm 1.

EM (Cl, CH^) m/z (intensidade relativa) 420 (27), 419 (MH⁺, 100), 418 (12), 417 (22), 357 (30), (12).

EXEMPLO 4

Adicionou-se 0,29 (1,50 mrnole) de cloreto de p-toluenossulfónilo a uma solução homogeneizada e agitada de 3,3,17,17-bio-(etilenodioxi)-19-(2-hidroxietil)-androst-5-eno (0,42 g, 1,00 mrnole) em piridina (10 ml), em atmosfera de árgon. Após 3,5 horas, concentrou-se a mistura reaccional em um evaporador rotativo e solubilizou-se o resi

duo com uma mistura de éter etílico (60 ml) / água (60 ml). Separaram-se as fases e extraiu-se a fase aquosa com mais éter etílico (30 ml). Combinaram-se as fases orgânicas, que se lavaram com 30 ml de ácido clorídrico 1N, uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (30 ml) seguida de uma solução aquosa eoncentnada ide cloreto de sódio (30 ml), secaram-se (Na^SO^) e concentraram-se para darem origem ao produto impuro. Uma cromatografia rápida usando uma coluna de gel de sílica com 5 x 12 cm e como eluente, uma mistura de acetato de etilo/hexano (35:65) forneceu 0,34 g de 3,3,17,17-bis-(etilenodioxi)-19— E 2—(4-toluenosulfoniloxi)-etilandrost-5-eno (rendimento de 60 %), sob a forma de uma espuma branca.

RMN¹H (CDC1₃) £ 7,80 e 7,36 (pr d, 4H, arilo), 5,49-5,53 (m, 1H, vinilo), 3,81-4,03 (m, 10H, 2 x OCH₂CH₂O e CH₂0), 2,46 (s, 3H, arilo C^), 0,83 (s, 3H, 18-CH ).

EM (CI, CH^) m/z (intensidade relativa) 574 (22),

573 (MH⁺, 60), 419 (21), 402 (26), 401 (100), 400 (16), 399 (28) , 357 (21 ) ,

339 (21), 217 (23), 173 (43), 93 (17).

EXEMPLO 5

Adicionou-se 44 mg (0,23 mmole) de ácido p-toluenossulfónico mono-hidratado a uma solução homogeneizada de 3,3,17,17-bis(etilenodioxi)-19-[2-(4-toluenos sulfoniloxi)-etil]-androst-5-eno (0,67 g, 1,17 mmole) em acetona (25 ml). Após 24 horas, concentrou-se a mistura rea£ cional em um evaporador rotativo, dissolveu-se o resíduo em cloreto de metileno (3 ml) e injectou-se esta solução em uma coluna. Uma cromatografia rápida usando uma coluna de gel de sílica 4 x 12 cm e como eluente, uma mistura de acetato de etilo/hexano (65.35)forneceu 0,46 g (rendimento de 81%) de 19-[2-(4-toluenossulfoniloxi)-etil]-androst-4-eno-3,17-diona, sob a forma de uma espuma branca.

RMN¹H (CDC1₃) £7,79 e 7,35 (pr d, 4H, J s 8,1 Hz, arilo), 5,87 (s, 1H, vinilo), 4,03 (t, 2H, J = 5,5 Hz, CH₂0), 2,46 (s, 3H, arilo-CH^), 0,92 (s, 3H, 18-CH ).

IV (KBr) 3444, 2946, 2858, 1738, 1670, 1618,

1358, 1188, 1176 cm¹.

EM (CI, CH^) m/z (intensidade relativa) 485 (MH⁺, 100), 331 (17), 313 (17).

EXEMPLO 6

Adicionou-se, gota a gota, uma solução arrefecida -78°C de 19-[2-(4-toluenossulfoniloxi)-etil]-androst-4-eno-3,17-diona (242 mg, 0,50 mmole) em tetra-hidrofurano (10 ml) a uma solução homogeneizada de hexame24

tildissilazida de lítio (1,50 ml de uma solução em tetra-hidrofurano 1,0 M, 1,50mmole) em tetra-hidrofurano (15 ml), em atmosfera de árgon e a uma temêpratura de -78°C. Após 40 minutos a uma temperatura de -78°C, deixou-se arrefecer a mistura reaccional lentamente (cerca de 2 horas) até à temperatura ambiente. Após 1 hora à temperatura ambiente, verteu-se a mistura reaccional sobre 60 ml de ácido clorídrico 0,5 N e extraiu-se eom cloreto de metileno (60 ml seguidos de 30 ml). Combinaram-se as fases orgânicas e lavaram-se com ácido clorídrico 0,5 N (60 ml), uma solução aquosa semi-saturada de bicarbonato de sódio (60 ml) e uma solução saturada de cloreto de sódio (50 ml). A secagem (Na₂S0₄) e a concentração forneceram o produto impuro. Uma cromatografia rápida usando uma coluna de gel de sílica 2 x 15 cm e, como eluente, uma mistura de acetato de etilo /hexano (45:

:55) forneceu 96 mg (rendimento de 62 de 2 ^jig-íetileno)-androst-4-eno-3,17-diona, sob a forma de um sólido branco; p.f. = 18O°-183°C.

RMN¹H (CDClg) J6,02 (s, 1H, vinilo), 0,91 (s, 3H, 18-CHg).

RMN ¹³C	(CDClg)	çf 220,4, 202,6,	167,1,	128,1,
	52,1,	51,1, 47,4, 43,1	, 40,3	, 38,8,
	35,7,	34,6, 32,2, 31,4,	29,9,	27,3,
	25,3,	21,7, 20,1, 18,8,	13,6.
IV (KBr)	3454,	2922, 2858, 1740,	1658,	1610,
	1450,	1220 cm^-1.

- 25 EM (Cl, CHjj) m/z (intensidade relativa) 313 (MH⁺,

100), 295 (18).

Este composto tem a seguinte estrutura:

EXEMPLO 7

Faz-se reagir 1 mmole de 2 y#,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona com 1,3 mmole de hidreto de tri-(t-butoxi) de alumínio e lítio (usado sob a forma de uma solução 1M em tetra-hidrofurano) em 8 ml de tetra-hidrofurano a uma temepratura de 0°C, durante 45 min. Interrompeu-se a reaeção com água e acidifica-se com ácido clorídrico a 10%. Extraiu-se a mistura resultante com acetato de etilo e lava-se o extracto orgânico com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio e com uma solução de cloreto de sódio. Seca-se sobre sulfato de sódio. A evaporação do dissolvente seguida de cromatografia fornece 2 j®, 19-(etileno)-17 /?-hidroxiandrost-4-en-3-ona pura.

EXEMPLO 8

Adiciona-se 1,2 equivalentes de cloranilo a uma solução de 2 /3_J19-(etileno)-androst-4-eno-3,17diona em álcool t-butílico. Submete-se a mistura a refluxo durante 3 horas, arrefece-se e concentra-se. Dissolve-se o resíduo em clorofórmio e lava-se com água, NaOH em solução aquosa e com uma solução aquosa de cloreto de sódio. A seca gem e concentração, seguidas de cromatografia, fornecem 2 yS, 19-(etileno)-androst-4,6-dieno-3,17-diona.

EXEMPLO 9

Submete-se a refluxo durante 1 hora,uma suspensão de acetato de sódio em clorofórmio absoluto contendo dimetil-acetal-formaldeido e cloreto de fosforilo.

Após a adição de 2 /3,19-(etileno)androst-4-eno-3,17-diona, trata-se a mistura com cloreto de fosforilo, gota a gota,durante um período de 2,5 horas. Submete-se novamente a mistura reaccional a refluxo, durante:o tempo aproximado. Dei_ xa-se arrefecer a suspensão e, agitando vigorosamente, adiciona-se gota a gota, uma solução aquosa saturada de carbonato de sódio até o pH da fase aquosa se tornar alcalino. Separa-se a fase aquosa, lava-se com uma solução de cloreto de sódio e seca-se com sulfato de sódio. Após concentração e purificação obtém-se a 6-metileno-219-(etileno)-androst -4-eno-3,17-diona.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

------- representa uma ligação simples ou dupla;

R representa um átomo de hidrogénio ou de oxigénio ou um grupo -OH ou =CH₂;

R^ representa um átomo de oxigénio ou um grupo hidroxi ou —0-(alcanollo ^),R₂, e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl_4^{; e}.

X representa um átomo de oxigénio ou um grupo =CH₂, -OH ou -0-(alcanollo C^_₄);

caracterizado pelo facto de se fazer reagir um composto de fór mula geral na qual

R₂, R^ e R^ tem os significados definidos antes; e

Z representa um grupo eliminável; com uma base forte no seio de um dissolvente inerte com arrefecimento para se obter ura composto de fórmula geral

R3 e têm os significados definidos antes; e de se submeter, eventualmente, o composto resultante a uma das reacções seguintes:

(a) reacção com cloranilo no seio de t-butanol para se obter o 4,6-dieno correspondente;

(b) reacção com formaldeído-acetal para se obter o composto 6-metilénico correspondente;

(c) redução com boro-hidreto de sódio para se obter o

6diol correspondente;

(d) reacção com anidrido acético para.se obter o 3-acetoxi-3,5-dieno correspondente e subsequente tratamento com boro-hidreto de cálcio, em etanol e â temperatura de -15°C para se obter o -3 p,· 17p-diol correspondente;

(e) reacção do diol obtido em (d) com um anidrido apropriado para se obter o diéster correspondente;

(f) reacção com etilenoglicol em excesso na presença de uma quantidade catalítica de um ácido para se obter o 5

Ζ-Λ-3,5-bis-etileno-cetal correspondente e subsequente reacção com o ácido m-cloroperbenzóico em diclorometano ã temperatura de 0°C para se obter o 5,6-epóxido correspondente seguindo-se ainda uma outra reacção com ácido perclórico em solução aquosa de tetrahidrofurano para se obter a 5,6-di-hidroxi-3,17-dicetona e subsequente oxidação com reagente de Jones seguida por uma desidratação com ãcido jo-toluenossulfóA⁴ nico para se obter a Z—1 -3,6,17-triona;

(g) reacção com etilenoglicol em excesso na presença de uma quantidade catalítica de ácido para, se obter o

Δ-3 ,5-bis-etilenocetal, correspondente, seguida por uma hidrólise selectiva para se obter a 17-cetona correspondente uti lizando uma solução aquosa a 0,15% de ãcido perclórico em t-butanol e diclorometano, seguindo-se ainda a redução da 17„o

-cetona até â obtenção do composto 17p-hidroxilato utilizando um excesso de boro-hidreto de sódio em etanol e subsequente tratamento com uma solução aquosa de ácido clorídrico para remover o grupo protector 3-cetal deixando livre o grupo 3-cetona;

(h) redução com hidreto de tri-(t-butoxi) -alumínio para se obter o composto 3-ceto-170-hidroxi;

* (i) reacção da 3-cetona obtida em (g) ou (h) com metilenotrifenilfosforano para se obter o composto 3-metileno-17-hidroxi correspondente seguindo-se a reacção com o reagente de Jones para se obter a 3-metileno-17-cetona.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

R₂, R₃ e R₄. representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo 0_τ_₄;

caracterizado pelo facto de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual

Rg, Rg e R^ têm os significados definidos antes; e

Z representa um grupo eliminável;

com uma base forte no seio de um dissolvente inerte com arrefecimento .
3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

R representa um átomo de hidrogénio ou de oxigé nio ou um grupo =CH₂ ou -OH;

representa um átomo de oxigénio ou um grupo -OH ou -0-(alcanoílo C₁_₄); e X representa um átomo de oxigénio ou um grupo =CH₂, -OH ou -0-(alcanoílo caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na gual

-------- representa uma ligação simples ou dupla; e

R-j. representa um -átomo de oxigénio ou um grupo -OH ou -0-(alcanoílo C^_₄);

caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 219-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona, ca racterizado pelo facto de se fazer reagir a 19-(2-(4-toluenossulfoniloxi)-etil]-androst-4-eho-3,17-diona com hexametil-disilazida de lítio.
6.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para

ÇJ *

a preparação de 2 , 19-(etileno)-17 -hidroxiandrost-4-en-3-ona, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos ini ciais correspondentemente substituídos.
7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação áe 2 ,19-(etileno)-androst-4,6-die’no-3,17-diona, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 6-metileno-2 p,19-(etileno)-androst-4-eno-3,17-diona, caracterizado pelo facto de se utilizarem compo_s tos iniciais correspondentemente substituídos.
9. - Processo para a preparação de. composições farma cêuticas apropriadas para o tratamento de hiperestrogenemia ou de perturbações induzidas ou estimuladas pela presença de estrogénio, caracterizado pelo facto de se converter em uma forma de dosagem galénica uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula geral I preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1 e que apresenta acção inibidora da aromatase, em associação com um veículo aceitável em farmácia.
10.- Método para o tratamento de hiperestrogenemia ou de perturbações induzidas ou estimuladas pelos estrogénios, caracterizado pelo facto de se administrar a um doente uma quantidade terapeuticamente eficaz, compreendida entre 0,01 e 150 mg/Kg de peso do corpo, de preferência entre 0,1 e 50 mg, de um composto de fórmula geral I preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1 e com acção inibidora da aromatase.