PT88520B

PT88520B - Processo de preparacao de dietil-ditio-carbamato de colina

Info

Publication number: PT88520B
Application number: PT88520A
Authority: PT
Inventors: Dat Xuong Nguyen; Jean Rapin; Thadee Staron
Original assignee: Lafon Pharma
Priority date: 1987-09-18
Filing date: 1988-09-16
Publication date: 1992-11-30
Also published as: JPH01156955A; EP0308349B1; NO884116D0; DK519288A; CA1301776C; HU198682B; DE3866839D1; CS619588A2; ZA886916B; FI884272A7; FR2620701B1; PL153706B1; YU175188A; AU2240188A; FR2620701A1; NO884116L; PL274705A1; IL87784A0; ATE70263T1; PT88520A

Description

Este novo sal ds colina apresenta-se na forma de finos cristais incolores ou ligeiramente amarelados, com um ponto de 1 Líoctu de 86*™ ? í Χ-ϊΊ.., 5 ac .'ί. 1 men *-’£? So 1 UVeX *S e*t5í e.^^Ua, ϊΞ?Γϊϊ a 1 COOX Ξ? íS g 1 i c o x s, e muito menos so1úveis em solventes orgânicos.

Os cristais de dieti1—ditio—carbamato de colina são muito higroseópicos e por isso devem ser conservados num reci™ piente fechado herméticamente e a baixa temperatura.

análise centesimal do produto origina o u1tados untes

	Ca1c u1ado	Encontrado	Média
oã r oama c-o	.4 O 0 X {·«.* · Λ..··» Λ'	48,18-48,47	48,33%
H i d r ogéni 0	3 - è4%	8,37'— 8,64	8,46%
.· t -·*·.···. V '--U	11,12%	11,58—11,61	11,66%
Enxofre	26,6-5%	24 s 94~2*4}	24, 8*5%
Oxigénio	£.36%

I

Os espectros de ΐ.ν., U.V., R.n.N. e de massa mostram ί-.’ν,7jji <S*. m?

xnvenw.

aractsrísticas da molécula do novo produto oo

A reaccão é a seguinte!

C2«5 'N-C-S-Na / S

C₂ ^H5 + ^CH₃-n-^ch2^CH2^OH] ^C1ch₃

C₂ ^h5

N-C-S ^c2^H5 ch₃

I

CH₃-N-CH2-CH2^OH ch₃ + NaCl

S ί ΓΪΤ.

ser realizada pelo modo operatório

£.?fí dOÍS fôP 1 S?nrâfôX©nS OU dOÍS COpOS d© DOCet 1<&P£|S d «3 idade apropriada, dissolve-se separadamente;

.56 g (0;40 mole) de cloreto de colina em 100 ml de etanol m J UO-& Cfe Uflftcã p a ·£?, C S. £? 1 è C t Ρ X C cíi ,-L· sosoiuio aquecidos xevemeru-e com a ou de um banho mar ia e agitando a soiucao Oe modo a favorecer « Ο X ίδ'ίδΟ X UÇ *stO .

- go 9 (o. 40 to# 2 e) d$ d ? et i j -d i t i o·-·carb&ma to cfe sód i o d® t Ρ ί Π 1 d P &. to atiii λ 00 Γη X d& β ί-Ο.ΠΟ X Sb‘5O X U to .

Quando as duas soluções estão límpidas., introduz-se lentamente em fio fino a solução alcoólica de colina na. de sal de sodio, esta sob forte agitação e arrefecida, exteriormente por um banho oe água fria, devido â reacção ser muito exotérmica.

Quando aproximadamente uma terceira parte da solução e adicionada, forma-se um precipitado abundante. Continua-se a adicionar toda a solução mantendo uma agitação muito vigorosa.

A adição da solução alcoólica de colina na do sal de sódio dura cerca de ÍS minutos. Continua-se a agitação ainda durante 30 minutos. Em seguida, deixa-se arrefecer durante toda um-a. noite. 0 recipiente qus contem a massa reaccional permanece fechado.

hío dia seguinte, elimina-se o cloreto de sódio por centrifugação e lava—se o filtro duas vezes com SO ml de etanol absoluto.

Recupera-se cerca de 23 g de cloreto de sódio.

Concentra-se as duas águas-mães alcoólicas (contendo o dxeti1-ditio-carfcamato de colina no etanol) em banho-maria, sob vacuo oe trompa-de-aqua, para apanhar todo o excesso de etanol.

Em seguida, vaza-se rapidamente o resíduo muito viscoso num copo de boca larga ou num almofariz de vidro ou de porcelana. 3ecs-se num excícador de fósforo como agente excicante.

produto obtido apresenta-se em bloco que se reduz em finos cristais ou num pó fino micro-crisyalino, que é incolor ou muito ligeíramente amarelado.

rendimento quantitativo, ssi dieti 1-ditio-carbamato de colina, obtido é aproximadamente de 100 g.

dieti l--ditio-carbamato d© colina assim obtido deve ser conservado num recipiente fechado hermeticamente, devido á sua higroscopis.

Segundo o presentr invrnto, põe-se em evidência as propriedades terapêuticas do novo sal de colina e faz-se um estudo muito completo da sua toxidade.

estudo toxicológico foi efectuado em ratos brancos

SwlSS.

Com este animal pode-se estudar para a dieti1-ditio-carbamato de colina, a toxidade aguda, a toxidade crónica, a influencia na proliferaçâo, a terarogenése, a fertilidade no tempo e a longevidade, a influência na eficiência da resposta imuni tãria.

Para tooas estas experiências, os animais foram misturados aleac-órlamente, separaoos pelos sexos, divididos em lotes cie 30, as fêmeas grávidas foram isoladas em caixas individuais. Estes animais foram alimentados com um alimento completo adequado que eies poderam consumir ad libitum, para evitar toda a carência no curso da experiência. A sua bebida foi áqua normal adicionada ou nao de produto atestado, o dietii-ditio-carbamato de colina.

o alimento completo utilizado, contém vantajosamente cereais, proteínas vegetais, proteína animais, sais minerais e vitaminas.

A medida da toxi dade aguda do novo co3mposto do invento, adminis;trado por via intraperiteonal e sub-cuiánea, mostra que esta toxidade aguda é muito fraca;

Abaixo de 1 g/kg, não existe mortalidade.

A DL SO (dose letal em S0%) está compreendida entre 1,4 e 17 g/kg.

ΰ gráfico seguinte ilustra estes resultados.

SMiDAD^mâ_ai JSA£OS_em_szkq (vxa intraperiteonal e sub-cutanea)

Claims

Para a medição da toxidade crónica do novo composto do invento, administrou-se por via bocal na água de beber, uma dose de 20 mg/kg por dia do novo composto, a 4 lotes de 30 ratos, durante 100 dias. Nenhum efeito nefasto na saúde dos animais Pdde ssr revelado.

Examinou-se qual o estado do efeito do novo cornosto do invento sobre a políferaçêo e a teratogenése dos ratos brancos SWI3S. As experiência foram continuadas ao longo de quatro gerações de animais e mostraram que os lotes que receberam o novo composto do invento tiveram globalmente 15% a mais de descendentes que os lotes testemunha, estes com uma taxa de ratinhos mo r tos-nas c i dos i r. feri o r a me tade.

Os resuItados f i guram no quad ro aba ixo S

EXt£fiIÊ£OAS.D£FOO£ÊRA^

ÊÊ££MfíA8-jsiL^ym^^

EÉÊO^iss^Ê^yâlSfiJagSEâ <Lotes T - testemunhas; lotes 6 - dieti I-di tio-carbamato

de colina a 1%. na âqua de beber) i ¹ i 1 Número de | Número de í I Número de i Número de fetos j âe- ratos grá-| ratinhos í ratinhos j reabsorvidos rs- vidos con-( nascidos 1 nascidos í | çâes i í trolados j em cada geração i v i vos í i 1 mortos í í

i ! 1 ! í..............................·.... Ϊ ------y- g s .......í 7' 1 G J Ϊ G i I G | μ í 3u ..................................í...... 30 { 253 ..............r 243 í 7 - 1 i ¹⁶ í μι i 30 30 | 242 315 { 5 2 | 9 ² 1 μπ { 30 30 i 258 324 j 8 - í ⁸ í μν | L...........................·..... 30 30 i ..................................!... 253 308 ! ................. ! í ¹² f _ I i í j Totali L . L 120 Ϊ 120 1 ........í„„ 1018 í 1137 i L 23 2 i | 43 í ⁴ 1 J

Do mesmo modo s medida de fertilidade dos ratinhos fêmea em função da sua. idade mostrou que a administração do novo composto do invento aumenta substancialmente o período de fertilidade dos ratos fémea, como indicado no quadro abaixo;

Lotes T - testemunhas; Lotes S ~ díetí1-ditio-carbamato de colina a it. na água de beber)

! 1 í 1 í 1 ί í í 1 í l s í % de ratos fémea fértil número médio de ratinhos por rato fértil T G ^T ^G i i ratos de 4 1 meses j '37 37 8,5 3,8 j ratos de 8 meses ί 52 32 S,3 8,0 ί ratos í________ ds 15 mese ί 1 23 SO 5,2 7,5 _

Enfim, no que respeitai ao crescimento e à longevidade dos animais, pode-se verificar que o novo composto do invento não tem influência negativa sobre o crescimento, embora se verificasse uma redução de cerca ds 25% de água bebida e de csrcade 5% dos alimentos tomados. Ao contrário, constatou-se que a administração do novo composto do invento retardou consideravelmente o envelhecimento. Esta última actividade é particularmente espectacuiar nos ratos machos s parece ser devido a uma modificação de caracteristicas e de comportamentos que origina uma diminuição da vuíneraoi1 idade que resulta habitualmente numa agressividade.muito forte. Os machos testemunhei lutam muito ssis, esgotam-se, ferem-se e matam-se.

O£^XÍNClAS„„j^„iaMSevlDAaE CUgVAS.....0£.......hORIALIQãyE DOS.....BâTQ-5 SUISS... MACHOS E.....FÉMEAS

Impregnados com água normal para as testemunhas e de água normal adicionada de 1%. de dietí2-ditio-carbamato ds colina para os lotes experimentais.

(cada curva ê a media ds 10 lotes de 30 ratos) (2) ratos machos receberam o dieti1-ditio-carbamato de i colina (3) ratos fêmea testemunhas (4) ratos fêmea receberam o dieti1-ditio-carbamato de c ο Ϊ i ria

Assasse²³

Η

Igualmente estudou-se a influência do novo composto do invento sobre a eficácia ds resposta imunitária nos ratos brancos swxss.

A proteeção idos animais superiores contra as agressSes é assegurada pelo sistema imunitário em relação com os antigénes do complexo maior de histocompatibi1 idade. A eficiência da reacção imunitária depende dos mecanismos e dos equilíbrios conjugados que determinam os principais parâmetros da competência (sensibilidade, precisão, intensidade e duração). Assim, as múltiplas e diversas agressões são hafoitualmente rápidamente dominadas sem serem cientemente perseguidas pelo hospede agredido. Mas evidentemente, as respostas inapropriadas e erróneas são frequentes, elas são a origem de numerosas doenças inflamatórias difiesis ds dominar e que geralmente amplificam-se, com o envelhecimento. Nesse caso uma estratégia higiénica e de intervenções terapêuticas são impostas para corrigir os erros imunitários, dominar a inflamação e para restabelecer a funeionalidade dos tecidos e das regiões lesadas.

0 quadro seguinte indica a potência da competência imunitária do dieti1-ditio-carbamato de colina.

0 quadro mostra realmente, que para obter a mesma proteeção imunitária, é necessário 100 meg de vacina específica nas testemunhas e Unicamente 20 meg para os ratos tratados com o composto do invento.

ο ιΛ

tn tn 0 rO Ο β (0 •Η 0 ε X! Φ 73 -μ ο * 0 β rO ο W <(ϋ Η ε (0 ο μι <Ν ίΟ φ tn Ρ Λ β ο υ φ β <(0 Η * +j ι 73 rO μι (0 Λ υ Ρ β Ρ W 1 υ ο W •Η Ο ι υ ο ε Ο ·Η XI ·η ο φ ο α -μ Ρ β !(ΰ Φ ι W 'Φ (0 ο 73 -Η tn Η + β ο 73 (0 ο •Η φ W 1 •Η -Ρ Γ—) 'ΓΊ Ο ι—1 > (0 0 β 73 -Η 04 U υ Η ro -μ β β φ ο ο ο φ (0 tn ι 04 -Η (Π 73 Φ ·Η Φ ε β 73 rfl tn Γ* 0 ο (X 73 β 4-J ο ε φ ro φ Φ •Η 73 +J ε ffl Ο Φ ο Φ Ή W ο Φ 73 ο Λ Ρ •Η φ ’ΓΊ η Μ '(0 «Η -μ χ β tn ίϋ -μ ο Ο Η •Η -Η υ •Η U Η 0 4· | Π ο rfl Ο4 0 Ρ to II 73 β Φ •Η ε •Η β •Η 73 0 -μ •Η Λ Ο φ υ η 4J ro tn ο 73 (0 •Η ·' β > ίθ mH 1 -μ β rfl ο Ή C* ι—i W φ χ: υ Φ 73 ο £! β 73 -μ α U Ρ β CO φ W tn ε φ Φ Ο * <ν W Φ rQ Τ3 “ η 75 β μ φ (0 φ « XI 73 tr Η 4» 0 (0 β φ -Η 73 73 φ +J φ μ ιό tr 73 — β CN □ (0 (0 ο W fO t0 ♦ Ή •Η Ρ Φ (0 β Ρ Φ ο υ U ίΰ -μ ρ -η σ 73 C 'Γ0 α ο tnn. Η '‘Φ Ο Η + Ρ •Η ε U Η Μ Ρ ιι ε μ Φ Ο Φ β φ Ο 73 Η ro 73

ο ο

Ο <*» α

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Γ* >4 α

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epeq.osÇuT

ΒΙίτΟΕΑ ap asop ρ opunbas ' οοτιΐθβ

-oqed oqnoou-ç ap '' γ_ο (Ή(Ι) asoq

Resulta de todas as experiências relatadas abaixo que a toxidade do novo composto do invento é praticamente nula. Parece ígualmente que a administração deste novo sal de colina aos ratos brancos SWíSS origina os ©feitos muito favoráveis sobre a proliferado.» a longividade, os comportamentos e a eficácia da resposta imunitária.

Os estudos farmacoiôgicos do novo composto do invento mostraram que ele possuía um efeito quelante dos metais pesados e dé transição, um efeito imuno-estimuisníe, um efeito anti-degenerativo e um efi to sobre as transferências nervosas, e por consequência, apresenta uma actividade terapêutica muito interessante no domínio das doenças degenerativas cerebrais, como as demências senis, a doença de Alzheimer e as demências do tipo Hlzheimer.

Diz—se que nestas doenças, os neurónios centrais coiinérgicos são os primeiros a serem atingidos pela degeneração, que se dá ao nível da síntese do nsuro-mediador : o aceti-colina, ou ao nivel da membrana que necessita da colina para a sua biosíntese. Ou do ponto de vista terapêutico, não se pode aomínxstrar directamente o aceti1-colina porque não atravessa as memoranas, e os resultados obtidos pela administração da colina sozmna na forma de cloreto, são por consequinte insuficientes.

0 novo composto do invento tem sido objectivo de um certo número de experiências conduzidas sob dois modelos animais ds degeneração nervosa, provocada seja por uma destruição dos centros coligêrnicos da base, seja pela administração repetida de hidróxido de alumínio. Observou-se nestes dois casos, que as capacidades de aprendizagem dos animais, deteriorados em ligação com a degeneração voltam ao normal pela administração por via orai do dxetíX-dítio-earbamato de colina, do invento. Depois de um tratamento de três semanas, observou-se um efeito da dose e as medidas da eficiência da dose revelaram que a DE_C.·^ estão compreendidas entre 0,10 g e 0,30 g/kg do peso do animal.

0 estudo clínico do dieti1-ditio-carbamato de colina foi realizado procedendo a experiências em pacientes, que sofrem cjuma doença degenerativa cerebral , perfeitamente definido segundo os critérios de DSM ί Π do MiiS, de um balanço psicomêtrico aprofundado e de uma radiografia SCANER.

A experiência foi feita duma maneira duplamente cega em emio hospitaleiro com os tratamentos seguintes, de duração de seis a doze semanas;

placebo cloreto de colina dietil-ditio-carbamato de colina.

As doses de substancia activa utilizadas foram de Í2S mg por via oral, três vezes por dia, o que totaliza uma dose diária de 37S mg.

Os resultados mostram que em 70% dos casos tratados pelo produto do invento, observa-se uma supressão ou uma redução significativa dos problemas de comportamento e de humor dos pacientes, estes resultados foram objectivados pelos testes psicomêtricos.

mos casos dos pacientes tratados com o placebo ou o cloreto ds colina, observa-se únicamente em 30% dos casos melhoramentos ligeiros, pouco claros e menos duráveis que aqueles ootidos nos casos dos pacientes tratados com o novo composto do invento.

As composições terapêuticas contendo o dietil-ditio-carbamato de colina, como título de princípio activo, podem ser administradas por via orai, rectal, ou injectável dependendo do estado fisiopatolósico do tubo digestivo das doenças consideradas .

Nos casos de administração oral, as composições farmacêuticas do invento apresentam-se na forma de géles ou comprimidos nos quais o composto activo esta associado a um excipiente conveniente, contendo vantejosamente um gel de sílica para ter em conta do caracter fortemente higroscópico da dieti1-ditio-carbamato de colina. Por outro lado para evitar a hidrólise prematura deste último ao nível do estomago, é necessário que o envelope gaienieo destas preparações, para administração orai, seja de natureza entérica (por exemplo micro-encapsulação).

No caso de administração por via rectal, pode-se preparar a partir do composto do invento supositórios de composição clássica.

No caso da via injectável, é necessário prever as condições em separado do dieti1-ditio-carbamato de colina e da solução fisiológica que deve ser adicionada2 no momento da administração.

A posologia retida para as novas composições farmacêuticas situa-se entre uma administração diária de 250 mg a 2,5 g de composto activo, sendo entendido que para a administração oral, or geles ou comprimidos são de preferência dosados em 125 mg de composto activo s podem ser administrados á razão de 2 a 20 geles ou comprimidos por dia, e para a administração rectal os supositórios são dosados em 250 ou 500 mg de composto activo para i κ* hs composiçoes í ar maceu’c-xc as oescrxx-as aoaxxo a ti fulo ds exemplo ilustrativo © não limitativo do invento.

são dadaí presente

S&IVIWDÍÇA^Êâ

11. “ Processo para a preparação do dieti1-ditio™ -carbamato ds colina ds fórmula c₂h₅ . \

N-C-S / ^c2^h5 S

CH:

ch₃-n-ch₂-ch₂oh

CH:

caracterizado por se fazer reagir cloreto ds colina com dieti!· -dítio-carbamato ds sódio tri-hidratado.

21. - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica útil no tratamento ds doenças degenerativas cerebrais, caracterizado por se converter o dietii~ditio-carbamato de colina numa forma farmaceuticamente aceitavel.

31. - Método para o tratamento de doenças degenerativas cersorais, caracterizado por se administrar a um paciente, como ingrediente activo, dietii-ditio-carbamato de colina, sendo a gama de dosagem diária de 2S0 mg a 2,S g de composto activo.