[go: up one dir, main page]

PL200932B1 - Nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków - Google Patents

Nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków

Info

Publication number
PL200932B1
PL200932B1 PL354360A PL35436000A PL200932B1 PL 200932 B1 PL200932 B1 PL 200932B1 PL 354360 A PL354360 A PL 354360A PL 35436000 A PL35436000 A PL 35436000A PL 200932 B1 PL200932 B1 PL 200932B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
tert
acid
mmol
solution
added
Prior art date
Application number
PL354360A
Other languages
English (en)
Other versions
PL354360A1 (pl
Inventor
Marcel Linschoten
Magnus Polla
Peder Svensson
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of PL354360A1 publication Critical patent/PL354360A1/pl
Publication of PL200932B1 publication Critical patent/PL200932B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/34—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/30—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Use Of Switch Circuits For Exchanges And Methods Of Control Of Multiplex Exchanges (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

Wynalazek dotyczy zwi azków o wzorze (I), w którym R 1 -R 4 , X i Y maj a znaczenie podane w opisie, i ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli i solwatów oraz solwatów takich soli, hamu- jacych karboksypeptydaz e U, a zatem u zytecz- nych w profilaktyce i leczeniu chorób zwi aza- nych z karboksypeptydaz a U. Ponadto wynala- zek dotyczy zwi azków wed lug wynalazku do zastosowania jako leki, srodka farmaceutycz- nego zawieraj acego zwiazek wed lug wynalazku lub jego farmakologicznie dopuszczaln a sól lub solwat albo solwat takiej soli jako substancj e czynn a oraz zastosowania zwi azków wed lug wynalazku do wytwarzania leków do leczenia lub profilaktyki zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwo sci. PL PL PL PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków. Nowe związki i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole hamują karboksypeptydazy zasadowe, a w szczególności karboksypeptydazę U, a zatem są użyteczne w profilaktyce i leczeniu chorób, w których korzystne jest hamowanie aktywności karboksypeptydazy U.
Fibrynoliza jest wynikiem szeregu reakcji enzymatycznych powodujących rozkład fibryny przez plazminę. Główny proces fibrynolizy stanowi aktywacja plazminogenu. Rozszczepienie plazminogenu z wytworzeniem plazminy zapewniają aktywatory plazminogenu, aktywator plazminogenu typu tkankowego (t-PA) lub aktywator plazminogenu typu urokinazy (u-PA). Początkowy rozkład fibryny przez plazminę prowadzi do powstania karboksy-końcowych ugrupowań lizynowych, służących jako miejsca o wysokim powinowactwie wiązania do plazminogenu. Ponieważ plazminogen związany z fibryną jest łatwiej aktywowany do plazminy niż plazminogen wolny, mechanizm ten stanowi element dodatniego sprzężenia zwrotnego w regulacji fibrynolizy.
Jednym z endogennych inhibitorów fibrynolizy jest karboksypeptydaza U (CPU). CPU znana jest również jako osoczowa karboksypeptydaza B, aktywny aktywowany trombiną inhibitor fibrynolizy (TAFIa), karboksypeptydaza R i indukowalna aktywność karboksypeptydazy. CPU powstaje w przebiegu krzepnięcia i fibrynolizy z jej prekursora, pro-CPU, na skutek działania enzymów proteolitycznych, np. trombiny, kompleksu trombinatrombomodulina lub plazminy. CPU rozszczepia zasadowe aminokwasy na końcu karboksylowym fragmentów fibryny. Utrata karboksy-końcowych reszt lizynowych, a zatem lizynowych miejsc wiążących dla plazminogenu, hamuje fibrynolizę.
Oczekuje się, że skuteczne inhibitory karboksypeptydazy U ułatwią fibrynolizę poprzez hamowanie utraty lizynowych miejsc wiążących dla plazminogenu, a tym samym zwiększanie szybkości tworzenia plazminy.
Podano, że kwas 2-merkaptometylo-3-guanidynoetylotiopropanowy jest inhibitorem karboksypeptydazy N. Niedawno wykazano, że związek ten hamuje CPU (Hendriks D. i wsp., Biochimica et Biophysica Acta. 1034 (1990): 86-92).
Podano, że kwas guanidynoetylomerkaptobursztynowy jest inhibitorem karboksypeptydazy N. Niedawno wykazano, że związek ten hamuje CPU (Eaton D. L. i wsp., The Journal of Biolo-gical Chemistry, 266 (1991) 21833-21838).
Nieoczekiwanie odkryto, że związki o wzorze I są szczególnie użyteczne jako inhibitory karboksypeptydazy U, a zatem użyteczne jako leki do stosowania w leczeniu i profilaktyce stanów, w których hamowanie karboksypeptydazy U jest korzystne.
Zatem wynalazek dotyczy nowych związków o ogólnym wzorze (I)
w którym
R1 oznacza cyklopentyl, cyklopentenyl, pirydyl, pirymidynyl, piperydynyl lub tiazolil,
R2 oznacza atom wodoru, atom fluoru lub C1-alkil,
R3 oznacza COOH,
R4 oznacza SH,
X oznacza CHZ,
Y oznacza CHZ,
Z niezależnie oznacza atom wodoru lub C1-C6-alkil; przy czym C1-C6-alkil, cyklopentyl, cyklopentenyl lub tiazolil jest ewentualnie niezależnie podstawiony jednym lub wiekszą liczbą niepodstawionych podstawników wybranych z grupy obejmującej C1-C6-alkil, C1-C6-alkilo-CO-, grupę aminową, ugrupowanie C6-C14-aromatycznego węglowodoru i atom chlorowca;
oraz ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli lub solwatów albo solwatów takich soli.
Korzystnymi związkami o ogólnym wzorze (I) według wynalazku są związki wybrane z grupy obejmującej kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylopropionowy,
PL 200 932 B1 kwas 3-merkapto-5-metylo-2-piperydyn-4-ylometyloheksanowy, kwas 3-merkapto-4-fenylo-2-piperydyn-4-ylometylomasłowy, kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowy, kwas 3-(cis-4-aminocyklopent-2-enylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(2-aminotiazol-5-ilo)-2-merkaptometylopropionowy, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole lub solwaty albo solwaty tych soli.
Ponadto wynalazek dotyczy związków wybranych z grupy obejmującej kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy, kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy, kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli lub solwatów albo solwatów tych soli.
W opisie i zastrzeż eniach patentowych uż yto następujących definicji:
Określenie „C1-C6-alkil oznacza prostołańcuchową lub rozgałęzioną, nasyconą lub nienasyconą, ewentualnie podstawioną grupę alkilową o 1 - 6 atomach węgla w łańcuchu, przy czym ta grupa może być poprzedzielana jednym lub większą liczbą heteroatomów wybranych spośród O, N i S. Nieograniczającymi przykładami alkili są metyl, etyl, etenyl, etynyl, n-propyl, izopropyl, propenyl, izopropenyl, propynyl, n-butyl, izobutyl, sec-butyl, t-butyl, butenyl, izobutenyl, butynyl oraz prostołańcuchowe lub rozgałęzione pentyle i heksyle.
Określenie „C1-C3-alkil oznacza prostołańcuchową lub rozgałęzioną, nasyconą lub nienasyconą, ewentualnie podstawioną grupę alkilową o 1 - 3 atomach węgla w łańcuchu, przy czym ta grupa może być poprzedzielana jednym lub większą liczbą heteroatomów wybranych spośród O, N i S. Nieograniczającymi przykładami takich alkili są metyl, etyl, etenyl, etynyl, n-propyl, izopropyl, propenyl, izopropenyl, propynyl.
Określenie „C1-alkil oznacza ewentualnie podstawiony alkil o 1 atomie węgla. Nieograniczającym przykładem takiego alkilu jest metyl.
Określenia „pirydyl, „pirymidynyl, „piperydynyl oraz „tiazolil obejmują także wszelkie izomery powyższych grup. Przykładowo określenie „pirydyl i „piperydynyl należy rozumieć jako obejmujące 2-, 3- i 4-izomery.
Określenie „atom chlorowca obejmuje atomy fluoru, chloru, bromu i jodu.
Określenie „ugrupowanie C6-C14-aromatycznego węglowodoru oznacza ewentualnie podstawiony C6-C14-aromatyczny węglowodór i obejmuje, lecz nie wyłącznie, fenyl, naftyl, indenyl, antracenyl, fenantreny i fluorenyl.
Ponadto związki, w których R4 oznacza grupę merkapto, mogą występować w postaci dimeru przyłączonego poprzez wiązanie -S-S-, co jest objęte zakresem wynalazku.
Zakresem wynalazku są objęte enenancjomery, mieszaniny racemiczne i nierówne mieszaniny dwóch enancjomerów. Należy rozumieć, że zakresem wynalazku są objęte wszelkie możliwe postacie diastereoizomeryczne. Zakresem wynalazku są także objęte pochodne związków o wzorze I wykazujące funkcję biologiczną taką jak związki o wzorze I, takie jak proleki.
Ponadto wynalazek dotyczy środka farmaceutycznego zawierającego substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalną substancję pomocniczą, rozcieńczalnik lub nośnik, którego cechą jest to, że jako substancję czynną zawiera powyżej zdefiniowany związek o ogólnym wzorze (I), ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli.
PL 200 932 B1
Ponadto wynalazek dotyczy środka farmaceutycznego zawierającego substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalną substancję pomocniczą, rozcieńczalnik lub nośnik, którego cechą jest to, że jako substancję czynną zawiera związek wybrany z grupy obejmującej kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy, kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy, kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy i kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli.
Ponadto wynalazek dotyczy powyżej zdefiniowanego związku o ogólnym wzorze (I), ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli do zastosowania jako lek.
Ponadto wynalazek dotyczy związku wybranego z grupy obejmującej kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy, kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy, kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy i kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli do zastosowania jako lek.
Ponadto wynalazek dotyczy zastosowania powyżej zdefiniowanego związku o ogólnym wzorze (I), ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli, do wytwarzania leku do leczenia lub profilaktyki zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwości.
Ponadto wynalazek dotyczy zastosowania związku wybranego z grupy obejmującej kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy,;
kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy, kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy,
PL 200 932 B1 kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy, kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy i kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli lub solwatu albo solwatu takiej soli do wytwarzania leku do leczenia lub profilaktyki zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwości.
W zależnoś ci od warunków procesu syntezy związki o wzorze I otrzymuje się w postaci naturalnej lub jako sole, lub jako solwaty, i wszystkie one są objęte zakresem wynalazku.
Wytwarzanie
Związki o ogólnym wzorze I można wytworzyć zgodnie z poniższymi sposobami A i B.
Sposób A
Sposób A wytwarzania związków o ogólnym wzorze I, w którym R1, R3, R4 i Y mają wyżej podane znaczenie, R2 oznacza atom wodoru, a X oznacza CHZ, obejmuje następujące etapy:
a) Związki o ogólnym wzorze II
R1-X-OH (II) w którym R1 ma znaczenie podane dla wzoru I, a X oznacza CHZ, dostę pne w handlu lub dają ce się wytworzyć znanymi sposobami, można przeprowadzić w związek o ogólnym wzorze III
R1-X-L (III) w którym L oznacza odpowiednią grupę odszczepiającą się, taką jak atom chloru, atom bromu, atom jodu, trifluorometanosulfonyl lub tosyl, w standardowych warunkach, z użyciem odpowiedniego reagenta, takiego jak PPh3/CBr4, TosCl/pirydyna lub (CF3SO2)2O/TEA).
b) Związki o ogólnym wzorze III można następnie poddać reakcji ze związkami o ogólnym wzorze IV
w którym R2 i R3 mają znaczenie podane dla wzoru I, dostępnymi w handlu lub dającymi się wytworzyć znanymi sposobami, w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak K2CO3 lub NaH, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związków o ogólnym wzorze V.
c) Związki o ogólnym wzorze V, w którym R1 i R3 mają znaczenie jak we wzorze I, X oznacza CHZ, a R2 oznacza atom wodoru, można następnie przeprowadzić w związki o ogólnym wzorze VI
(VI) działaniem formaldehydu w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak Et2NH, w standardowych warunkach.
d) Związki o ogólnym wzorze VI można także wytworzyć działaniem na związki o ogólnym wzorze VII
PL 200 932 B1 w którym R3 ma znaczenie jak we wzorze I, ś rodkiem alkilują cym o ogólnym wzorze III, w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak LDA lub NaH, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związków o ogólnym wzorze VIII.
e) Związki o ogólnym wzorze VIII można następnie poddać reakcji z odpowiednim aldehydem lub ketonem OC(HZ), w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak KOtBu, LDA lub NaH, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związku o ogólnym wzorze VI.
(VI)
f) Związki o ogólnym wzorze VI można następnie poddać reakcji ze związkami o ogólnym wzorze IX
R5-SH (IX) (IX) w którym R5 oznacza odpowiednią grupę zabezpieczającą, taką jak Ac, Bz, PMB lub Bn, same lub w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak NaOMe, NaH lub trietyloamina, lub alternatywnie w obecnoś ci inicjatora wolnorodnikowego, takiego jak AIBN, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związków o ogólnym wzorze I, w którym R1, R3, R4 i Y mają znaczenie jak we wzorze I, R2 oznacza atom wodoru, a X oznacza CHZ.
Sposób B
Sposób B wytwarzania związków o ogólnym wzorze I, w którym R1, R2, R3 i R4 mają znaczenie jak we wzorze I, Y oznacza CH2, a X oznacza CHZ, obejmuje następujące etapy:
a) Związek o ogólnym wzorze X
R1-X-H (X) w którym R1 ma znaczenie podane dla wzoru I, X oznacza CHZ, poddaje się reakcji ze ś rodkiem alkilującym o ogólnym wzorze XI
w którym R2 i R3 mają znaczenie jak we wzorze I, a L oznacza odpowiednią grupę odszczepiającą się, taką jak atom chloru, atom bromu, atom jodu, trifluorometanosulfonyl lub tosyl, w standardowych warunkach, z użyciem odpowiednich reagentów, takich jak NaH, Ag2CO3 lub Bu4NHSO4/NaOH, z wytworzeniem zwią zków o ogólnym wzorze XII.
b) Związki o ogólnym wzorze XII można następnie poddać reakcji z ditlenkiem węgla w obecności odpowiedniej zasady, takiej jak LDA lub KHMDS, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związku o ogólnym wzorze XIII.
PL 200 932 B1 (c) Związki o ogólnym wzorze XIII można następnie poddać reakcji z chloromrówczanem alkilu, takim jak CICOOMe, w obecności zasady, takiej jak trietyloamina, a następnie przeprowadzić readukcję powstałego mieszanego bezwodnika z użyciem odpowiedniego środka redukującego, takiego jak
NaBH4, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związku o ogólnym wzorze XIV.
(d) Związki o ogólnym wzorze XIV można następnie poddać reakcji ze związkiem o ogólnym wzorze IX
R5-SH (IX) w którym R5 oznacza odpowiednią grupę zabezpieczającą , taką jak Ac lub Bz, w obecności odpowiedniego reagenta, takiego jak PPh3/DIAD, w standardowych warunkach, z wytworzeniem związków o ogólnym wzorze I, w którym R1, R2, R3 i R4 mają wyżej podane znaczenie, Y oznacza CH2, a X oznacza CHZ.
Dla fachowców będzie oczywiste, że w wyżej opisanym procesie grupy funkcyjne w związkach wyjściowych i pośrednich mogą wymagać zabezpieczenia grupami zabezpieczającymi.
Do grup funkcyjnych, których zabezpieczenie jest pożądane należą hydroksyl, grupa aminowa, grupa merkapto i karboksyl. Do odpowiednich grup zabezpieczających hydroksyl należą trialkilosilil lub diaryloalkilosilil (np. t-butylodimetylosilil, t-butylodifenylosilil lub trimetylosilil), tetrahydropiranyl i benzyl. Odpowiednimi grupami zabezpieczającymi dla grupy aminowej, amidynowej i guanidynowej są np. t-butoksykarbonyl i benzyloksykarbonyl. Odpowiednimi grupami zabezpieczającymi dla grupy merkapto są np. CO-C1-C6-alkil, p-metoksybenzyl i trityl. Odpowiednimi grupami zabezpieczającymi dla karboksylu są np. C1-C6-alkil i ugrupowanie estru benzylowego.
Grupy zabezpieczające można usuwać sposobami znanymi fachowcom i opisanymi w dalszej części.
Pewne zabezpieczone pochodne związków o wzorze I, które mogą powstawać przed końcowym etapem odbezpieczenia z wytworzeniem związków o wzorze I, są nowe.
Stosowanie grup zabezpieczających opisano w Protective Groups in Organic Synthesis, wyd. 2., T.W. Greene & P.G.M. Wutz. Wiley-Interscience (1991). Grupą zabezpieczającą może być także żywica polimeryczna, taka jak żywica Wanga lub żywica na bazie chlorku 2-chlorotritylu.
Dla fachowca będzie zrozumiałe, że jakkolowiek takie zabezpieczone pochodne związków o wzorze I mogą jako takie nie mieć dział ania farmakologicznego, to jednak po ich podaniu pozajelitowym lub doustnym mogą one matabolizować w organizmie z wytworzeniem związków według wynalazku, które są farmakologicznie czynne. Takie pochodne można zatem opisać jako „proleki. Wszystkie proleki związków o wzorze I są objęte zakresem wynalazku.
Należy rozumieć, iż wszystkie polimorfy, postacie amorficzne, anhydraty, hydraty i solwaty związków według wynalazku są objęte zakresem wynalazku.
Środki farmaceutyczne
Dla ich użycia w praktyce klinicznej związki według wynalazku formułuje się w środki farmaceutyczne przeznaczone do podawania doustnego, dożylnego, podskórnego, dotchawiczego, dooskrzelowego, donosowego, dopłucnego, przezskórnego, podpoliczkowego, doodbytniczego, pozajelitowego lub inną drogą. Środek farmaceutyczny zawiera związek według wynalazku w połączeniu z jednym lub większą liczbą farmaceutycznie dopuszczalnych składników. Nośnik może mieć postać stałą, półstałą lub płynną, albo postać kapsułki. Zawartość substancji czynnej wynosi zazwyczaj 0,1-95% w przeliczeniu na masę środka.
Dla wytworzenia środków farmaceutycznych zawierających związek według wynalazku wybrany związek można zmieszać ze stałymi sproszkowanymi składnikami, takimi jak laktoza, sacharoza, sorbitol, mannitol, skrobia, amylopektyna, pochodne celulozy lub żelatyna, albo z innym odpowiednim składnikiem, jak również ze środkami ułatwiającymi rozpad i poślizgowymi, takimi jak stearynian magnezu, stearynian wapnia, stearylofumaran sodu i woski na bazie glikolu polietylenowego. Mieszaninie można następnie nadać postać granulek lub sprasować ją w tabletki.
PL 200 932 B1
Miękkie kapsułki żelatynowe można wytworzyć umieszczając w kapsułkach mieszaninę substancji czynnej lub substancji czynnych według wynalazku, oleju roślinnego, tłuszczu lub innego nośnika odpowiedniego dla miękkich kapsułek żelatynowych. Twarde kapsułki żelatynowe mogą zawierać granulki substancji czynnej. Twarde kapsułki żelatynowe mogą także zawierać substancję czynną w połączeniu ze stałymi sproszkowanymi składnikami, takimi jak laktoza, sacharoza, sorbitol, mannitol, skrobia ziemniaczana, skrobia kukurydziana, amylopektyna, pochodne celulozy lub żelatyna.
Postacie dawkowane do stosowania doodbytniczego można wytworzyć (i) w postaci czopków zwierających substancję czynną zmieszaną z podłożem w postaci obojętnego tłuszczu, (ii) w postaci doodbytniczej kapsułki żelatynowej zawierającej substancję czynną zmieszaną z olejem roślinnym, olejem parafinowym lub innym nośnikiem odpowiednim w przypadku doodbytniczych kapsułek żelatynowych, (iii) w postaci łatwego do przygotowania mikro-wlewu lub (iv) w postaci suchego preparatu przeznaczonego do roztworzenia do postaci wlewu w odpowiednim rozcieńczalniku bezpośrednio przed podaniem.
Preparaty ciekłe można wytworzyć w postaci syropów lub zawiesin, np. roztworów lub zawiesin zawierających substancję czynną a jako resztę, np. cukier lub alkohole cukrowe i mieszaninę etanolu, wody, glicerolu, glikolu propylenowego i glikolu polietylenowego. Gdy jest to pożądane, takie preparaty ciekłe mogą zawierać środki koloryzujące, środki zapachowe, konserwanty, sacharynę i karboksymetylocelulozę lub inne środki zagęszczające. Preparaty ciekłe można wytworzyć również w postaci suchego proszku, przeznaczonego do roztworzenia w odpowiednim rozcieńczalniku bezpośrednio przed użyciem.
Roztwory przeznaczone do podawania pozajelitowego można wytworzyć jako roztwór związku według wynalazku w farmaceutycznie dopuszczalnym rozpuszczalniku. Roztwory te mogą również zawierać środki stabilizujące, konserwujące i/lub środki buforujące. Roztwory przeznaczone do podawania pozajelitowego można również wytworzyć w postaci suchego preparatu przeznaczonego do roztworzenia w odpowiednim rozcieńczalniku przed użyciem.
Typowa dawka dzienna substancji czynnej zmienia się w szerokim zakresie i zależy od różnych czynników, takich jak np. indywidualne zapotrzebowanie danego pacjenta, droga podawania oraz leczone schorzenie. Ogólnie dawki doustna i pozajelitowa wynoszą 0,1-1000 mg substancji czynnej dziennie.
Zastosowanie medyczne i farmaceutyczne
Związki według wynalazku są inhibitorami karboksypeptydazy U, jako takie lub, w przypadku proleków, po podaniu. Oczekuje się zatem, że związki według wynalazku będą użyteczne w tych stanach, w których korzystne jest hamowanie karboksypeptydazy U, np. w leczeniu lub profilaktyce zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwości we krwi i tkankach ssaków, w tym człowieka.
Wiadomo, że nadmierna krzepliwość może prowadzić do rozwoju chorób zakrzepowo-zatorowych. Do stanów związanych z nadmierną krzepliwością oraz chorób zakrzepowo-zatorowych należą oporność na białko C oraz wrodzony lub nabyty niedobór antytrombiny III, białka C, białka S i kofaktora heparyny II. Do innych stanów, o których wiadomo, że wiążą się z nadmierną krzepliwością oraz do innych chorób zakrzepowo-zatorowych należą wstrząs krążeniowy i septyczny, krążące przeciwciała antyfosfolipidowe, homocysteinemia, trombocytopenia wywołana heparyną oraz nieprawidłowości w przebiegu fibrynolizy. Zatem związki według wynalazku są wskazane zarówno w profilaktyce, jak i w leczeniu tych stanów. Związki według wynalazku są ponadto wskazane w leczeniu stanów, w przypadku których wystę puje niepożądany nadmiar proCPU/CPU.
Do konkretnych chorób, o leczeniu i/lub profilaktyce których można tu wspomnieć, należą zakrzepica żylna, zatorowość płucna, zakrzepica tętnicza (np. w zawale serca, niestabilnej dusznicy, udarze związanym z zakrzepem i zakrzepica tętnic obwodowych), jak również zator układowy, zwykle biorący się z przedsionka w przebiegu migotania przedsionków lub z lewej komory po przebyciu pełnościennego zawału serca.
Oczekuje się ponadto, że związki według wynalazku będą użyteczne w zapobieganiu ponownemu zamknięciu naczynia i restenozie (tzn. zakrzepicy) po trombolizie, przezskórnej plastyce naczyniowej (PTA) i pomostowaniu tętnic wieńcowych, oraz w zapobieganiu ponownej zakrzepicy po zabiegach mikro-chirurgicznych i ogólnie po zabiegach chirurgii naczyniowej.
Do dalszych wskazań należą leczenie i/lub profilaktyka rozsianego wykrzepiania wewnątrznaczyniowego wywołanego przez bakterie, wielomiejscowy uraz, intoksykację lub o jakimkolwiek innym mechanizmie, leczenie fibrynolityczne w przypadkach, gdy krew kontaktuje się z obcymi powierzchniami w organizmie, np. w przypadku przeszczepów naczyniowych, stentów naczyniowych, cewników
PL 200 932 B1 naczyniowych, mechanicznych lub biologicznych protez zastawkowych lub jakichkolwiek innych urządzeń medycznych, oraz leczenie fibrynolityczne w przypadkach, gdy krew styka się z urządzeniami medycznymi znajdującymi się poza organizmem, jak w przebiegu zabiegów chirurgicznych sercowo-naczyniowych oraz podczas stosowania maszyny sercowo-płucnej lub hemodializy.
Związki według wynalazku można również łączyć i/lub podawać równocześnie z dowolnym środkiem o działaniu przeciwzakrzepowym o innym mechanizmie działania, np. ze środkami przeciwpłytkowymi, kwasem acetylosalicylowym, tiklopidyną, klopidogrelem, inhibitorem syntetazy i/lub receptora dla tromboksanu, antagonistami receptorów dla fibrynogenu, mimetykami prostacyklin, inhibitorami fosfodiesterazy, antagonistami receptora ADP (P2T) i inhibitorami trombiny.
Związki według wynalazku można ponadto łączyć i/lub podawać równocześnie ze środkami o dział aniu trombolitycznym, takimi jak tkankowy aktywator plazminogenu (naturalny, rekombinowany lub modyfikowany), streptokinaza, urokinaza, prourokinaza, anizoilowany kompleks streptokinazy z aktywatorem plazminogenu (APSAC), aktywatory plazminogenu z gruczoł ów ś linowych ssaków itp., w leczeniu chorób zakrzepowych, a w szczególności zawału serca i udaru.
Doświadczenia in vitro
Hamujące działanie związków według wynalazku oceniono z użyciem testu opisanego w pracy: Dirk Hendriks, Simon Scharpe i Marc van Sande, Clinical Chemistry, 31, 1936-1939 (1985) oraz Wei Wang, Dirk F. Hendriks, Simon S. Scharpe, The Journal of Biological Chemistry, 269, 15937-15944 (1994).
P r z y k ł a d y
Ogólne procedury doświadczalne
Widma masowe rejestrowano z użyciem spektrometru masowego potrójnie kwadrupolowego Finnigan MAT TSQ 700 wyposażonego w interfejs ze strumieniem elektronów (FAB-MS) oraz spektrometru masowego VG Platform II wyposażonego w interfejs ze strumieniem elektronów (LC-MS). Widma 1H NMR i 13C NMR rejestrowano z użyciem spektrometrów Varian UNITY plus 400, 500 i 600, przy częstotliwości 1H odpowiednio 400, 500 i 600 MHz. Przesunięcia chemiczne podano w ppm, w odniesieniu do rozpuszczalnika jako wzorca wewnę trznego. Ekstrakty organiczne suszono z uż yciem MgSO4 i Na2SO4 jako środka suszącego. Rozdzielanie chromatograficzne prowadzono z użyciem żelu krzemionkowego Merck Siliva gel 60 (0,063 - 0,200 mm). Rozdzielanie metodą HPLC prowadzono w kolumnie HIGHCROM KR100-10CS.
P r z y k ł a d 1
Kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylopropionowy (a) Kwas 3-piperydyn-4-ylopropionowy
Roztwór kwasu 3-pirydyn-4-yloakrylowego (4,20 g, 28,0 mmoli) w wodzie (50 ml) i amoniaku (wodny roztwór, 25%, 4 ml) poddano uwodornieniu pod ciśnieniem 6 MPa w wysokociśnieniowym stalowym autoklawie w obecności rutenu (5% na glinie, 439 mg). Gdy ciśnienie wodoru ustaliło się (3 dni) katalizator usunięte z mieszaniny reakcyjnej drogą odsączenia. Katalizator przemyto etanolem i wodą, a następnie etanol usunięto z roztworu w wyparce obrotowej i ten roztwór wodny poddano liofilizacji, w wyniku czego otrzymano kwas 3-piperydyn-4-ylopropionowy (4,30 g, 100%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-karboksyetylo)piperydyno-1-karboksylowego
Roztwór kwasu 3-piperydyn-4-ylopropionowego (4,79 g, 30,5 mmola), diwęglanu di-tert-butylu (6,98 g, 32,0 mmole) i NaHCO3 (2,69 g, 32,0 mmole) w THF/wodzie (1:1, 50 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 22 godziny. Dodano jeszcze porcję diwęglanu di-tert-butylu (2,00 g, 9,10 mmola) razem z katalityczną ilością DMAP i otrzymaną mieszaninę mieszano dodatkowo i przez cztery dni. THF usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i fazę wodną wyekstrahowano CH2Cl2. Następnie fazę wodną zakwaszono do pH 2 z użyciem 1M roztworu HCl i ten kwas wyekstrahowano CH2Cl2. Połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką, wysuszono, zatężono pod próżnią i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(2-karboksyetylo)piperydyno-1-karboksylowego w postaci białej substancji stałej (6,36 g, 81%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu 4-(3-benzylosulfanylo-2-karboksypropylo)piperydyno-1-karboksylowego
BuLi (1,6M, 15,3 ml, 24,4 mmola) dodano do roztworu diizopropyloaminy (3,43 ml, 24,4 mmola) w THF (3 ml) w -78°C i w atmosferze argonu. Po kilku minutach roztwór pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej w ciągu 15 minut. Otrzymany roztwór LDA powoli dodano do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-(2-karboksyetylo) piperydyno-1-karboksylowego (3,07 g, 11,9 mmola) w THF (7 ml) w -78°C. Otrzymany roztwór mieszano w -78°C przez 10 minut i w trakcie tego czasu dodawano THF (20 ml) w celu rozpuszczenia anionu, który się zestalił. Ten dianion ochłodzono do -78°C i dodano
PL 200 932 B1 eteru bromometylowotiobenzylowego (2,72 g, 12,5 mmola) w postaci roztworu w THF (3 ml), roztwór mieszano w -78°C przez 30 minut, a potem w 0°C przez 30 minut, a następnie pozostawiono go do ogrzania się do temperatury pokojowej i mieszano przez noc. Mieszaninę reakcyjną zakwaszono z użyciem 1M roztworu HCl, rozcieńczono EtOAc, a następnie fazę organiczną przemyto wodą i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (MeOH/CHCl3, 1:9) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(3-benzylosulfanylo-2-karboksypropylo)piperydyno-1-karboksylowego w postaci bladożółtego oleju (3,12 g, 66%).
(d) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-karboksy-3-merkaptopropylo)piperydyno-1-karboksylowego
W -60°C i w atmosferze argonu do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-(3-benzylosulfanylo-2-karboksypropylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,9 g, 2,29 mmola) w THF (45 ml) i ciekłego amoniaku (50 ml) dodano w jednej porcji w ciągu 5 minut sodu metalicznego (513 mg, 22,5 mmola). Po mieszaniu przez 15 minut dodano w porcjach chlorku amonu (1,7 g, 31,5 mmola). Łaźnię chłodzącą usunięto i amoniak odparowano strumieniem argonu. Dodano 0,5M roztworu NaOH i mieszaninę przemyto heptanem. Fazę wodną zakwaszono z użyciem 2M roztworu HCl i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Fazę organiczną przemyto solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(2-karboksy-3-merkaptopropylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,7 g, 100 %).
(e) Kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylopropionowy
W atmosferze argonu do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-(2-karboksy-3-merkaptopropylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,7 g, 2,29 mmola) w chlorku metylenu (8 ml) dodano trietylosilanu (731 μ|, 4,58 mmola), a następnie TFA (4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 60 minut, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu drogą HPLC (10 —> 30% acetonitryl, 0,1% TFA w wodzie) otrzymano związek tytułowy w postaci soli TFA (447 mg, 61%).
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 1,34-1,50 (m, 2H), 1,54-1,76 (m, 3H), 1,90-1,99 (m, 1H), 2,0-2,1 (m, 1H), 2,9-3,05 (m, 5H), 3,38-3,48 (m, 2H).
MS (+) 204 (M+1).
P r z y k ł a d 2
Kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
W atmosferze argonu roztwór soli kwasu 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylopropionowego i TFA (0,1 g, 0,32 mmola) w bezwodniku octowym (2 ml) mieszano przez noc, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu drogą HPLC (10 50% acetonitryl, 0,1% TFA w wodzie) otrzymano związek tytułowy (63 mg, 80%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,0-1,22 (m, 2H), 1,46-1,55 (m, 1H), 1,55-1,66 (m, 2H), 1,67-1,79 (m, 1H), 1,81-1,92 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,55-2,73 (m, 4H), 3,03-3,12 (m, 1H), 3,85-3,94 (m, 1H), 4,45-4,53 (m, 1H).
MS (+) 246 (M+1).
P r z y k ł a d 3
Kwas 3-merkapto-5-metylo-2-piperydyn-4-ylometyloheksanowy (a) Ester tert-butylowy kwasu 4-hydroksymetylopiperydyno-1-karboksylowego
Do roztworu 4-(hydroksymetylo)piperydyny (5,00 g, 43,41 mmola THF/H2O (1:1, 120 ml)) dodano diwęglanu di-tert-butylu (9,47 g, 43,41 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną wlano do H2O (500 ml) i wyekstrahowano octanem etylu (3 x 250 ml). Warstwy organiczne połączono i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono nad siarczanem sodu, przesączono, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-hydroksymetylopiperydyno-1-karboksylowego (9,01 g, 96%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu 4-bromometylopiperydyno-1-karboksylowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-hydroksymetylopiperydyno-1-karboksylowego (8,75 g, 40,64 mmola) w eterze dietylowym (200 ml) w 0°C i w atmosferze azotu dodano trifenylofosfiny (21,32 g, 81,28 mmola) i tetrabromku węgla (26,96 g, 81,28 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej i mieszano w atmosferze azotu przez 48 godzin. Mieszaninę reakcyjną przesączono przez warstwę celitu i przesącz organiczny przemyto 5% NaS2O3, wodą, solanką i wysuszono. Mieszaninę przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatgrafii kolumnowej (octan etylu/heksan 1:9), w wyniku czego otrzymano ester tertbutylowy kwasu 4-bromometylopiperydyno-1-karboksylowego (8,26 g, 73%).
PL 200 932 B1 (c) Ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-2-(dietoksyfosforylo)etylo]piperydyno1-karboksylowego
W atmosferze azotu i w 0°C do suspensji wodorku sodu (8,03 g, 334,58 mmola) w DMF (450 ml) wkroplono dietylofosfonooctan tert-butylu (75,0 g, 297,32 mmola). Mieszaninę mieszano w 0°C przez 0,5 godziny, a następnie w temperaturze pokojowej przez 0,5 godziny. Do tej mieszaniny reakcyjnej wkroplono ester tert-butylowy kwasu 4-bromometylopiperydyno-1-karboksylowego (20,68 g, 74,34 mmola) w DMF (50 ml), a potem mieszaninę reakcyjną ogrzano do 60°C i mieszano przez 16 godzin. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, wlano do H2O i wyekstrahowano octanem etylu. Warstwy organiczne połączono i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (octan etylu/heksan, 3:7) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-2-(dietoksyfosforylo)etylo]piperydyno-1-karboksylowego i nieprzereagowany dietylofosfonooctan tert-butylu. Czystość produktu wynosiła 47% według HPLC. Produkt dodatkowo oczyszczono drogą destylacji próżniowej, w wyniku czego otrzymano produkt o czystości 77%. Tę mieszaninę wzięto do następnej rekacji.
(d) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-tert-butoksykarbonylo-5-metyloheks-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego
W atmosferze azotu i w 0°C do suspensji wodorku sodu (1,04 g, 43,13 ramola) w DME (20 ml) wkroplono ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-2-(dietoksyfosforylo)etylo]piperydyno-1-karboksylowego (8,1 g) w 20 ml DME. Mieszaninę mieszano przez 0,75 godziny i wkroplono izopentanal (7,76 g, 90,1 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej, a następnie mieszano ją przez 48 godzin. Mieszaninę rozcieńczono eterem i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 9,4 g żółtego oleju. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (octan etylu/heksan, 1:50) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(2-tert-butoksykarbonylo-5-metyloheks-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego (1,53 g, 24%) z dwu reakcji.
(e) Ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-3-(4-metoksybenzylosulfanylo]-5-metyloheksylo]piperydyno-1-karboksylowego
Roztwór estru tert-butylowego kwasu 4-(2-tert-butoksy-karbonylo-5-metyloheks-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego (2,0 g, 5,24 mmola) w DMF (5 ml) dodano w atmosferze azotu do mieszaniny węglanu potasu (0,54 g, 3,93 mmola) i 4-metoksy-a-toluenotiolu (1,17 g, 10,48 mmola) w DMF (50 ml). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 5 godzin, a następnie pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną wlano do H2O i wyekstrahowano octanem etylu. Warstwy organiczne połączono i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 3,76 g surowego produktu. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (octan etylu/heksan. 1:10) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo3-(4-metoksybenzylosulfanylo)-5-metyloheksylo]piperydyno-1-karboksylowego (1,77 g, 63%).
(f) Kwas 3-merkapto-5-metylo-2-piperydyn-4-ylometylo-heksanowy
Mieszaninę H2O (2,6 ml) i TFA (26 ml) zamrożono, a następnie pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej w atmosferze azotu. Dodano estru tert-butylowego kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-3-(4-metoksybenzylosulfanylo)-5-metyloheksylo]piperydyno-1-karboksylowego (2,62 g, 4,89 mmola) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 16 godzin. Mieszaninę pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej z odwróconymi fazami (MeOH/H2O, 3:2), w wyniku czego otrzymano związek tytułowy w postaci soli TFA (0,40 g, 22%).
1H NMR (300 MHz) (CD3OD) δ 0,88 (d,), 0,94 (d), 1,43 (m), 1,70 (br), 1,94 (m), 2,48 (m), 2,90 (m), 2,99 (br), 3,34 (m).
MS (+) 260,2 (M-TFA).
P r z y k ł a d 4
Kwas 3-merkapto-4-fenylo-2-piperydyn-4-ylometylomasłowy (a) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-tert-butoksykarbonylo-4-fenylobut-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego
W atmosferze azotu w 0°C do suspensji wodorku sodu (0,26 g, 10,51 mmola) w DME (8 ml) wkroplono roztwór estru tert-butylowego kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-2-(dietoksyfosforylo)-etylo]piperydyno]karboksylowego (3,0 g) w DME (8 ml).
PL 200 932 B1
Mieszaninę mieszano przez 0,75 godziny. Do tej mieszaniny w 0°C wkroplono fenyloacetaldehyd (5,26 g, 43,81 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej, a potem mieszano przez 16 godzin. Mieszaninę rozcieńczono eterem i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 8,6 g żółtego oleju. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (octan etylu/heksan, 1:50 1:10) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(2-tert-butoksykarbonylo-4-fenylobut-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego (1,32 g, wydajność 62%) z dwu reakcji.
(b) Ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-3-(4-metoksybenzylosulfanylo)-4-fenylobutylo]piperydyno-1-karboksylowego.
W atmosferze azotu ester tert-butylowy kwasu 4-(2-tert-butoksykarbonylo-4-fenylobut-2-enylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,8 g, 1,93 mmola) w DMF (10 ml) dodano do suspensji węglanu potasu (0,20 g, 1,44 mmola)) i 4-metoksy-a-toluenotiolu (0,54 ml, 3,85 mmola) w DMF (10 ml). Mieszaninę ogrzewano do 75°C przez 24 godziny, a potem pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną wlano do H2O i wyekstrahowano octanem etylu. Warstwy organiczne połączono i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 1,8 g surowego produktu. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (octan etylu/heksan, 1:10) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-3-(4-metoksybenzylosulfanylo)-4-fenylobutylo]piperydyno-1-karboksylowego (0,55 g, 50%).
(c) Kwas 3-merkapto-4-fenylo-2-piperydyn-4-ylometylomasłowy
Mieszaninę H2O (0,65 ml) i TFA (6,5 ml) zamrożono, a następnie pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej w atmosferze azotu. Dodano estru tert-butylowego kwasu 4-[2-tert-butoksykarbonylo-3-(4-metoksybenzylosulfanylo)-4-fenylo-butylo]piperydyno-1-karboksylowego (0,65 g, 1,14 mmola) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 16 godzin. Mieszaninę pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej z odwróconymi fazami (MeOH/H2O, 1:1) i otrzymano związek tytułowy w postaci soli TFA (0,27 g, 58%).
1H NMR (300 MHz) (DMSO) δ 1,22 (m), 1,49 (m), 1,67 (br), 2,21 (d), 2,98 (m), 7,25 (m, 5H), 8,27 (br), 8,57 (br), 12,59 (br).
MS (+) 294,3 (M-TFA).
P r z y k ł a d 5
Kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy (a) N-(4-Metylopirydyn-2-ylo)acetamid
2-Amino-4-metylopirydynę (99,0 g, 91,5 mmola) w bezwodniku octowym (250 ml) ogrzano do 70°C przez 2 godziny. Mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano eteru dietylowego (100 ml). Ten produkt wykrystalizował w postaci białych igieł. Po odsączeniu i wysuszeniu pod próżnią otrzymano N-(4-metylopirydyn-2-ylo)acetamid (130 g, 95%).
(b) Kwas 2-acetyloaminoizonikotynowy
Mieszaninę N-(4-metylopirydyn-2-ylo)acetamidu (40,0 g, 0,26 mola) i wody (400 ml) ogrzewano w 90°C aż do osiągnięcia roztworu homogenicznego. W trakcie intensywnego mechanicznego mieszania dodano ostrożnie małymi porcjami w ciągu 2 godzin KMnCO4 (100 g, 0,62 mol). Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w 90-95°C przez 3 godziny, a następnie gorącą mieszaninę przesączono przez celit. Przesącz zatężono do około 100 ml i dodano stężonego HCl w celu doprowadzenia odczynu roztworu do pH około 4. Kolbę reakcyjną ochłodzono na łaźni lodowej i białą substancję stałą odsączono. Kryształy przemyto zimną wodą i chloroformem, wysuszono pod próżnią i otrzymano kwas 2-acetyloaminoizonikotyny (12,0 g, 25%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-aminoizonikotynowego
Kwas 2-acetyloaminoizonikotyny (10,8 g, 60,0 mmoli) przeprowadzono w stan suspensji w etanolu (150 ml) i dodano BF3OEt2 (22 ml, 138 mmoli). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez noc i po ochłodzeniu do temperatury pokojowej dodano 10% roztworu NaHCO3 (250 ml). Produkt wyekstrahowano chloroformem i połączone ekstrakty organiczne przemyto wodą i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu otrzymano ester etylowy kwasu 2-aminoizonikotynowego (7,46 g, 79%) w postaci bladożółtych kryształów.
(d) Ester etylowy kwasu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]izonikotynowego
Do roztworu estru etylowego kwasu 2-aminoizonikotynowego (5,00 g, 30 mmoli) w t-BuOH (45 ml) i acetonie (15 ml) dodano DMAP (50 mg, 0,41 mmola) i diwęglanu di-tert-butylu (16,4 g, 75,0 mmoli).
PL 200 932 B1
Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i dodano heksanu (60 ml). Mieszaninę reakcyjną ochłodzono w lodówce w ciągu 3 godzin i przesączono, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]izonikotynowego (8,71 g, 79%).
(e) Ester tert-butylowy kwasu (4-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
Roztwór estru etylowego kwasu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]izonikotynowego (35,0 g, 95,5 mmola) w THF (350 ml) poddano działaniu LiAlH4 (7,25 g, 191 mmoli) i całość w atmosferze azotu ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną wylano ostrożnie na pokruszony lód, a następnie produkt wyekstrahowano kilkakrotnie CHCl3 i CHCl3:MeOH (9:1). Połączone ekstrakty organiczne wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu (4-hydroksymetylopirydyn-2-ylo) karbaminowego (18,5 g, 86%) w postaci bladożółtej substancji stałej.
(f) Ester tert-butylowy kwasu (4-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
Ester tert-butylowy kwasu (4-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (8,00 g, 35,6 mmola) rozpuszczono w CH2Cl2 (150 ml) i w atmosferze azotu poddano działaniu PPh3 (11,2 g, 42,8 mmola). Kolbę reakcyjną ochłodzono na łaźni lodowej i dodano małymi porcjami CBr4 (14,2 g, 42,8 mmola). Po 30 minutach łaźnię lodową usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano acetonitrylu (50 ml). Kolbę reakcyjną umieszczono w lodówce na 3 godziny i wytrącony osad odsączono i przemyto zimnym acetonitrylem. Tę białą substancję stałą wysuszono pod próżnią i otrzymano ester tert-butylowy kwasu (4-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (8,38 g, 82%).
(g) Ester dietylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloami-nopirydyn-4-ylometylo)malonowego
Do roztworu NaH (80%, 0,17 g, 4,00 mmole) w THF (5 ml) w 0°C i w atmosferze argonu dodano malonianu dietylu (0,64 g, 4,00 mmole). Mieszaninę mieszano przez 15 minut, a potem tę mieszaninę dodano do mieszaniny, w trakcie ogrzewania w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin, estru tert-butylowego kwasu (4-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (1,00 g, 3,48 mmola) w THF (10 ml) i cał ość ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Mieszanin ę zatężono pod zmniejszonym ciś nieniem i pozostał o ść rozdzielono mię dzy wodę i chloroform. Warstwę organiczną przemyto wodą i solanką, a potem wysuszono. Po przesączeniu i odporowaniu rozpuszczalnika surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 1:100), w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo) malonowego (0,80 g, 55%).
(h) Ester monoetylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (0,19 g, 3,43 mmola) w etanolu (5 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(2-tert-butoksy-karbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)malonowego (1,20 g, 3,27 mmola) w etanolu (5 ml) i chlorku metylenu (5 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i do pozostałości dodano wody. Warstwę wodną przemyto eterem dietylowym, zakwaszono do pH 4 z użyciem 1M roztworu HCl i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH3OH/CH2Cl2, 1:20), w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)malonowego (0,90 g, 81%).
(i) Ester etylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)akrylowego
Roztwór dietyloaminy (0,26 g, 2,67 mmola) w chlorku metylenu (4 ml) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)malonowego (0,90 g, 2,66 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmole). Mieszaninę mieszano przez 5 godzin w temperaturze pokojowej, a potem mieszaninę wylano na lód-wodę i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto 5% NaHCO3 i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (1% metanol w CH2Cl2) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)akrylowego (0,58 g, 71%).
(j) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylo)propionowego
W atmosferze azotu i w 0°C do kwasu tiooctowego (3 ml) dodano roztworu estru etylowego kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylometylo)akrylowego (0,48 g, 1,57 mmola) i trietyloaminy (0,17 g, 1,64 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Mieszaninę wylano na lód-wodę i wyekstrahowano CH2Cl2. Fazę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej
PL 200 932 B1 (2,5% MeOH w CH2CH2), w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylo-sulfanylometylo-3-(2-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylo)propionowego (0,60 g, 100%).
(k) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-aminopirydyn-4-ylo)propionowego
W atmosferze argonu do roztworu estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-4-ylo)propionowego (50 mg, 0,13 mmola) w chlorku metylenu dodano TFA (0,5 ml). Roztwór mieszano przez 60 minut i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-aminopirydyn-4-ylo)propionowego (52 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD3): δ 1,15 (t, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,73-2,83 (m, 2H), 2,86-2,93 (m, 1H), 3,01-3,07 (dd, 1H), 3,12-3,18 (dd, 1H), 4,03-4,12 (m, 2H), 6,39 (s, 1H), 6,43 (d, 1H), 7,77 (d, 1H).
(l) Kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-acetylo-sulfanylometylo-3-(2-aminopirydyn-4-ylo)propionowego (52 mg, 0,13 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (2 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (32 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,70 (bs, 2H), 2,85-3,0 (m, 3H), 6,76 (bs, 1H), 6,81 (bs, 1H), 7,67 (bs, 1H).
MS (+) 213 (M+1).
P r z y k ł a d 6
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester etylowy kwasu 6-aminonikotynowego
Kwas 2-amino-5-pirydynokarboksylowy (25,0 g, 181 mmoli) przeprowadzono w stan suspensji w etanolu (190 ml) i dodano SOCl2 (15 ml, 206 mmoli). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 10 godzin i dodano więcej SOCl2 (16 ml). Po 3 dniach ogrzewania w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin (każdego dnia dodawano po 10 ml SOCl2) mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano eteru dietylowego. Po 24 godzinach w -20°C mieszaninę przesączono. Surową sól rozpuszczono w metanolu (214 ml) i dodano roztworu NaOH (40,0 g, 23,5 mmola) w metanolu (90 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę i dodano THF (270 ml). Mieszaninę reakcyjną przesą czono przez warstwę krzemionki (THF/MeOH) i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 6-aminonikotynowego (36,2 g, 97%).
(b) Ester etylowy kwasu 6-tert-butoksykarbonyloaminonikotynowego
Do roztworu estru etylowego kwasu 6-aminonikotynowego (36,0 g, 217,0 mmoli) w t-BuOH (308 ml) i acetonie (103 ml) dodano DMAP (0,53 g, 4,34 mmola) i diwęglanu di-tert-butylu (72,0 g, 330 mmoli). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 10 godzin, a następnie dodano więcej diwęglanu di-tert-butylu (2,60 g). Po 10 godzinach mieszania w temperaturze pokojowej dodano heksanu (470 ml). Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do -20°C w ciągu 2 godzin i przesączono. Przesącz przemyto heksanem/dichlorometanem (3:1) i wysuszono pod próżnią, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 6-tert-butoksykarbonyloaminonikotynowego (40,5 g, 70%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
W trakcie mieszania i w atmosferze azotu do roztworu estru etylowego kwasu 6-tert-butoksykarbonyloaminonikotynowego (3,50 g, 13,1 mmola) w THF (20 ml) dodano w ciągu 2 godzin LiAlH4 (0,91 g, 24,0 mmole) w THF (20 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 6 godzin, a następnie dodawano (ostrożnie) NH4Cl (nasycony roztwór) aż do zobojętnienia roztworu. Mieszaninę przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (2,00 g, 68%).
(d) Ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
Do suspensji estru tert-butylowego kwasu (5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (7,00 g, 31,2 mmola) w CH2Cl2 (200 ml) dodano w temperaturze pokojowej trifenylofosfiny (8,70 g, 33,1 mmola) i tetrabromku węgla (17,0 g, 51,2 mmola). Mieszanie kontynuowano przez 5 godzin, a następnie odparowano rozpuszczalnik. Dodano acetonitrylu (200 ml) i mieszaninę ochłodzono do -20°C w ciągu 2 godzin. Nastę pnie mieszaninę przesączono i pozostałość w postaci krystalicznej przemyto zimnym acetonitrylem (2x10 ml), w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (5,96 g, 67%).
(e) Ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)malonowego
PL 200 932 B1
Do suspensji NaH (0,49 g, 16,3 mmola, 80%) w THF (15 ml) w 0°C dodano malonianu dietylu (2,61 g, 16,3 mmola). Mieszaninę mieszano przez 15 minut po czym wkroplono ją do mieszaniny (w trakcie ogrzewania w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin) estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (3,90 g, 13,6 mmola) w THF (25 ml) i otrzymany roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 15 minut. Po odparowaniu rozpuszczalnika surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (metanol/CH2CH2, 1:100 2,5:100) i otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)malonowego (2,18 g, 44%).
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (0,37 g, 6,54 mmola) w etanolu (5 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)malonowego (2,18 g, 5,95 mmola) w etanolu (25 ml) i chlorku metylenu (10 ml). Mieszaninę mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Warstwę wodną przemyto eterem, zakwaszono do pH 4 z użyciem 1M roztworu HCl i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (metanol/CH2Cl2, 1:20) i otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonylo-aminopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,00 g, 50%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)akrylowego
Dietyloaminę (0,29 g, 3,00 mmole), wodę (2 ml) i chlorek metylenu (2 ml) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,00 g, 2,96 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,25 g, 3,05 mmola). Mieszaninę mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej, a następnie wylano na lód-wodę i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto 5% NaHCO3 i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,75 g, 83%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propionowego
Do kwasu tiooctowego (3 ml) dodano w 0°C estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,49 g, 1,60 mmola) i trietyloaminy (0,17 g, 1,64 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 6 godzin. Mieszaninę wylano na lód-wodę i wyekstrahowano CH2Cl2. Fazę organiczną przemyto nasyconym roztworem NaHCO3 i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 2,5:100) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propionowego (0,36 g, 61%).
(i) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometyło-3-(6-aminopirydyn-3-ylo)propionowego
W atmosferze argonu do roztworu estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propionowego (100 mg, 0,26 mmola) w chlorku metylenu (2 ml) dodano TFA (0,5 ml). Roztwór mieszano przez 60 minut i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-aminopirydyn-3-ylo)propionowego (104 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,21 (t, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,78-2,97 (m, 3H), 3,05-3,13 (m, 1H), 3,14-3,21 (m, 1H), 4,08-4,15 (m, 2H), 6,99 (d, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,85 (d, 1H).
(j) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propionowego (38 mg, 0,096 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (2,0 ml). Roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, a następnie ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy (25,7 mg, 100%) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,74-2,78 (m, 2H), 2,84-2,94 (m, 3H), 7,02 (d, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,89 (d, 1H).
MS (+) 213 (M+1).
P r z y k ł a d 7
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy (a) Ester tert-butylowo-etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego
PL 200 932 B1
Roztwór metylomalonianu tert-butylowo-etylowego (457 mg, 2,26 mmola) w DMF (4 ml) wkroplono do suspensji NaH (90 mg, 2,26 mmola, 60% w oleju) w DMF (4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut. Dodano roztworu estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (500 mg, 1,74 mmola) w DMF (2,5 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 70 minut. Dodano EtOAc i mieszaninę przemyto wodą i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii (heptan/EtOAc, 3: 1 1:3) otrzymano ester tert-butylowo-etylowy kwasu
2-(6-tert-butoksykarbonyloairunopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (437 mg, wydajność 61%).
(b) Ester mono-tert-butylowy kwasu 2-(6-tert-butoksy-karbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego
Do roztworu estru tert-butylowo-etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (0,42 g, 1,03 mmola) w THF/EtOH (4 ml, 1:1) dodano 1M roztworu NaOH (2 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 50°C przez 16 godzin. Następnie dodano CH2Cl2 i mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl, solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano ester mono-tert-butylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (348 mg, 89%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego
Chloromrówczan metylu (75 μ( 0,92 mmola) wkroplono do roztworu estru mono-tert-butylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (348 mg, 0,915 mmola) i Et3N (123 μ( 0,92 mmola) w THF (6 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut, przesączono i wkroplono w 0°C do suspensji NaBH4: (39 mg, 1,04 mmola) w THF (6 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Dodano 0,2M roztworu HCl, a następnie EtOAc. Fazę organiczną przemyto solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie po chromatografii (toluen/EtOAc, 3:1 1:3) otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego (190 mg, 57%).
(d) Ester tert-butylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego
Azodikarboksylan dietylu (160 μ( 1,01 mmola) wkroplono do roztworu estru tert-butylowego kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego (180 mg, 0,49 mmola) i trifenylofosfiny (266 mg, 1,01 mmola) w THF (6 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 5 minut. Dodano kwasu tiolooctowego (96 μ( 1,34 mmola) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 16 godzin. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie po chromatografii (toluen/EtOAc, 10:1 1:1) otrzymano ester tert-butylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (137 mg, 65%).
(e) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy
W atmosferze argonu ester tert-butylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (4 mg, 9,4 μmola) rozpuszczono w stężonym HCl. Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (2,5 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,20 (s, 3H), 2,62 (d, 1H), 2,76-2,83 (m, 2H), 2,95 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,80 (dd, 1H).
MS (+) 227 (M+1).
P r z y k ł a d 8
Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-2-merkaptometylomasłowy (a) Ester tert-butylowy kwasu [5-(5-etylo-2,2-dimetylo-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydyn-2-ylo]karbaminowego
W atmosferze azotu ester tert-butylowy kwasu (5-bromo-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (1,0 g, 3,48 mmola) dodano do roztworu 2,2-dimetylo-5-etylo-1,3-dioksano-4,6-dionu (600 mg, 3,48 mmola) i trietyloaminy (0,51 ml, 3,66 mmola) w dimetylosulfotlenku (40 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc i dodano wody (100 ml). Po odsączeniu wytrąconego osadu otrzymano ester tert-butylowy kwasu [5-(5-etylo-2,2-dimetylo-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydyn-2-ylo]karbaminowego (1,15 g, 87%).
(b) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-etylomalonowego
PL 200 932 B1
Roztwór sodu metalicznego (140 mg, 6,08 mmola) w etanolu (20 ml) dodano do roztworu estru tert-butylowego kwasu [5-(5-etylo-2,2-dimetylo-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydyn-2-ylo]karbaminowego (1,15 g, 3,04 mmola) w etanolu (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 90 minut, a nastę pnie dodano chlorku metylenu. Mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu (6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-etylomalonowego (1,05 g, 95%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonylo-aminopirydyn-3-ylometylo)-2-hydroksymetylomasłowego
W atmosferze azotu i w -20°C do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-etylomalonowego (700 mg, 1,91 mmola) i Et3N (275 μ|, 1,97 mmola) w THF (15 ml) wkroplono chloromrówczan metylu (150 μ|, 1,95 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 50 minut, przesączono i wkrop|ono w -20°C do suspensji NaBH4 (80 mg, 2,1 mmo|a) w THF (15 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Dodano 0,2M roztworu HCl, a następnie chlorku metylenu. Fazę organiczną przemyto solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii (toluen/EtOAc, 3:1 1:3) otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-hydroksymetylomasłowego (300 mg, 45%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego
W atmosferze argonu w 0°C do roztworu trifenylofosfiny (402 mg, 1,53 mmola) w THF (4 ml) wkroplono azodikarboksylan diizopropylu (296 gl, 1,53 mmola) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Następnie w ciągu 10 minut wkroplono roztwór kwasu tiolooctowego (109 gl, 1,53 mmola) i estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-2-hydroksymetylomasłowego (0,27 g, 0,77 mmola) w THF (2 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 60 minut w 0°C, a następnie przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie po chromatografii (heptan/EtOAc, 10:1 1:1) otrzymano ester etylowy kwasu
2-acetylosulfanylometylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego (193 mg, 61%).
(e) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-2-merkaptometylomasłowy
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)-masłowego (12,3 mg, 30 gmoli) rozpuszczono w stężonym HCl (2 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 24 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieiem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (8,3 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 0,91 (t, 3H), 1,71 (m, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,92 (m, 2H), 6,96 (d, 1H), 7,65 (bs, 1H), 7,82 (dd, 1H).
MS (-) 239 (M-1).
P r z y k ł a d 9
Kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy (a) 2-[N,N-bis (tert-Butoksykarbonylo)amino]-3-metylo-5-(2,2,5-trimetylo-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydyna
Do roztworu 2,2,5-trimetylo-1,3-dioksano-4,6-dionu (630 mg, 4,0 mmole) i trietyloaminy (0,58 ml, 4,2 mmola) w dimetylosulfotlenku (40 ml) dodano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-bromometylo-3-metylopirydyny (1,6 g, 4,0 mmole). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc i dodano wody (100 ml). Mieszaninę wyekstrahowano EtOAc, po czym połączone organiczne fazy przemyto wodą i solanką, a potem wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano surową 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylo-5-(2,2,5-trimetylo-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydynę (2,06 g) (b) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego
W atmosferze argonu roztwór sodu metalicznego (184 mg, 8,0 mmoli) w etanolu (20 ml) dodano do roztworu surowej 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylo-5-(2,2,5-trimetylo-4,6-diokso[1,3]dioksan-5-ylometylo)pirydyny (2,06 g, około 4,0 mmole) w etanolu (20 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 60 minut i dodano chlorku metylenu. Mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (1,9 g).
PL 200 932 B1 (c) Ester etylowy kwasu 3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego
Do roztworu surowego estru monoetylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)-2-metylomalonowego (1,9 g) i Et3N (641 μ|, 4,6 mmola) w THF (30 ml) wkroplono w -20°C chloromrówczanu metylu (338 μ|, 4,4 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 50 minut, przesączono i wkroplono w -20°C do suspensji NaBH4 (182 mg, 4,8 mmola) w THF (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Dodano 0,5M roztworu HCl, a następnie chlorku metylenu. Fazę organiczną przemyto solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii (toluen/EtOAc, 10:1 1:3) otrzymano ester etylowy kwasu 3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego (885 mg, 49%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowy
Azodikarboksylan diizopropylu (755 3,91 mmola) wkroplono w 0°C do roztworu trifenylofosfiny (1,026 g, 3,91 mmola) w THF (10 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Następnie wkroplono w ciągu 10 minut roztwór kwasu tiolooctowego (279 3,91 mmola) i estru etylowego kwasu 3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-hydroksymetylo-2-metylopropionowego (885 mg, 1,96 mmola) w THF (5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 60 minut w 0°C, a następnie przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii (heptan/EtOAc, 10:1 1:3) otrzymano zanieczyszczony ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (1,46 g).
(e) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego
Surowy ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (1,46 g) rozpuszczono w TFA (5 ml) i całość mieszano przez 60 minut. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie po chromatografii (toluen/EtOAc, 1:1 1:10 0:1) otrzymano nieznacznie zanieczyszczony ester etylowy kwasu
2-acetylosulfanylometylo-3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (696 mg, 84%).
(f) Kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropionowego (17 mg, 40 μmoli) rozpuszczono w stężonym HCl (2 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 150 minut. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (10,7 mg, 96%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,20 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,61 (d, 1H), 2,79 (2d, 2H), 2,94 (d, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,69 (m, 1H).
MS (+) 241 (M+1).
P r z y k ł a d 10
Kwas 3-merkapto-2-[(piperydyno-4-karbonylo)amino]propionowy
W atmosferze argonu do chlorku 4-metoksytritylu (żywica) (7 g, L=0,91 mmola/g, 6,37 mmola) dodano CH2Cl2 (70 ml) i żywice pozostawiono do spęcznienia w ciągu 10 minut, a potem dodano chlorowodorku estru etylowego kwasu 2-amino-3-merkaptopropionowego (5,9 g, 32 mmole). Następnie przez 10 minut dodawano małymi porcjami TFA (70 ml). Zawiesinę wytrząsano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Do prawie suchej zawiesiny dodano toluenu (150 ml) i mieszaninę ponownie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Tę procedurę powtórzono dwukrotnie. Otrzymaną żółtą żywicę przemyto DMF (3 x 60 ml), CH2Cl2 (2 x 60 ml), TEA:CH2Cl2 (1:1, 2 x 60 ml), CH2Cl2 (2 x 60 ml), MeOH (2 x 60 ml) i wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem w ciągu nocy.
W celu obliczenia obciążenia żywicy estrem etylowym kwasu 2-amino-3-merkaptopropionowego 50 mg tego produktu poddano działaniu 10% TFA w CH2Cl2 przez 1 minutę i tę procedurę powtórzono czterokrotnie. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano ester etylowy kwasu 2-amino-3-merkaptopropionowy (9,8 mg), co oznacza, że obciążenie wynosiło około 0,6 mmola/g.
Roztwór estru mono-tert-butylowego kwasu piperydyno-1,4-dikarboksylowego (28 mg, 0,12 mmola) w DMF (1 ml) dodano do tej żywicy (100 mg, L=0,6 mmol/g, 0,06 mmola) w plastykowej strzykawce, a następnie dodano PyBOP (62 mg, 0,12 mmola) w DMF (0,5 ml) i DIPEA (41 μ^ 0,24 mmola). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze pokojowej na 2 godziny z mieszaniem od czasu
PL 200 932 B1 do czasu i tę procedurę powtórzono jeszcze raz. Następnie tę żywicę przemyto DMF (2 x 2 ml),
CH2Cl2 (2 x 2 ml), MeOH (2 x 2 ml), CH2Cl2 (2 x 2 ml) i THF (2 x 2 ml). Do strzykawki dodano THF (800 μΐ) i żywicę pozostawiono do spęczania przez 10 minut. Dodano wody (250 μΐ) i 10M roztworu NaOH (50 μ^. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze pokojowej przez 16 godzin z mieszaniem od czasu do czasu. Następnie tę żywicę przemyto THF:wodą (1:1,2 x 2 ml), THF (2 x 2 ml), CH2Cl2 (2 x 2 ml), MeOH (2 x 2 ml) i CH2Cl2 (2 x 2 ml).
Do strzykawki dodano 10% TFA w CH2Cl2 (1 ml) i po 5 minutach roztwór zebrano w wytarowanej fiolce. Tę procedurę powtórzono jeszcze raz i połączone fazy organiczne zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy w postaci soli TFA (15,3 mg, 74%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,85-2,10 (m, 4H), 2,65-2,72 (m, 1H), 2,85-2,92 (m, 1H), 2,95-3,08 (m, 3H), 3,40-3,47 (m, 2H), 4,55-4,60 (m, 1H).
P r z y k ł a d 11
Kwas 2-[(azetydyno-2-karbonylo)amino]-3-merkaptopropionowy
Związek tytułowy wytworzono z estru 1-tert-butylowego kwasu azetydyno-1,2-dikarboksylowego sposobem opisanym w przykładzie 14.
Wydajność: 13,8 mg (72%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,54-2,63 (m, 1H), 2,82-3,05 (m, 3H), 3,93-4,15 (m, 2H), 4,66-4,71 (m, 1H), 5,05-5,10 (m, 1H).
P r z y k ł a d 12
Kwas 3-merkapto-2-[(piperydyno-3-karbonylo)amino]propionowy
Związek tytułowy wytworzono z estru 1-tert-butylowego kwasu piperydyno-1,3-karboksylowego sposobem opisanym w przykładzie 14.
Wydajność: 15,1 mg (73%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,73-2,10 (m, 4H), 2,84-2,92 (m, 2H), 2,95-3,14 (m, 2H), 3,15-3,29 (m, 3H), 4,56-4,62 (m, 1H).
P r z y k ł a d 13
Kwas 2-[(azetydyno-3-karbonyloamino]-3-merkaptopropionowy
Związek tytułowy wytworzono z estru mono-tert-butylowego kwasu azetydyno-1,3-dikarboksylowego sposobem opisanym w przykładzie 14.
Wydajność: 13,5 mg (71%).
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,86-3,02 (m, 2H), 3,72-3,80 (m, 1H), 4,20-4,24 (d, 4H), 4,62-4,67 (m, 1H).
P r z y k ł a d 14
Kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) 5-Bromo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylopirydyna
2-Amino-5-bromo-3-metylopirydynę (15,0 g, 80,2 mmola) w tert-butanolu poddano działaniu diwęglanu di-tert-butylu (43,6 g, 200 mmoli) i DMAP (0,60 g, 4,91 mmola). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze otoczenia przez noc, a następnie zatężono zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano heksanu i produkt wytrącił się w postaci substancji stałej. Po odsączeniu otrzymano 5-bromo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonyloamino]-3-metylopirydynę (22,0 g, 71%).
(b) 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-3-metylopirydyna
Roztwór 5-bromo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylopirydyny (26,0 g, 67,1 mmola), tert-butylodimetylotributylostannanylometoksysilanu (47,6 g, 109 mmoli) i dichlorku bis(trifenylofosfina) palladu (II) (0,90 g, 1,42 mmola) w 1,2-dichloroetanie (80 ml) mieszano w 90°C przez dwa dni. Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano eteru dietylowego (200 ml), a następnie nasyconego wodnego roztworu fluorku potasu (40 ml). Mieszaninę mieszano intensywnie przez 30 minut i przesączono. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 100:0 95:5) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-3-metylopirydynę (18,0 g, 59%).
(c) 2-[N,N-bis[(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylo-3-metylopirydyna
Do roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-3-metylopirydyny (18,0 g, 39,8 mmola) w THF (150 ml) dodano fluorku tetrabutyloamoniowego (25,1 g, 79,6 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 50:50) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)-amino]-5-hydroksymetylo-3-metylopirydynę (8,0 g, 59%).
PL 200 932 B1 (d) 5-Bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylopirydyna
Do roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylo-3-metylopirydyny (8,00 g, 23,6 mmola) w dichlorometanie (220 ml) dodano w 0°C trifenylofosfiny (7,43 g, 28,3 mmola) i CBr4 (9,49 g, 28,6 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 80:20) otrzymano 5-bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-metylopirydynę (8,0 g, 77%).
(e) Ester dietylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)-malonowego
Do suspensji NaH (0,24 g, 6,0 mmoli, 60%) w DMF (5 ml) dodano malonianu dietylu (0,91 ml, 6,0 mmoli) i mieszaninę mieszano przez 15 minut. Dodano roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo) amino]-5-bromometylo-3-metylopirydyny (2,0 g, 5,0 mmoli) w DMF (5 ml) i otrzymany roztwór mieszano przez 120 minut w 60°C. Dodano octanu etylu, po czym mieszaninę przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po odparowaniu rozpuszczalnika, surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH3OH/CH2Cl2, 1:100 1:20), w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometyło)malonowego (1,2 g, 50%).
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (154 mg, 2,75 mmola) w etanolu (2 ml) dodano do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,2 g, 2,50 mmola) w etanolu (10 ml) i chlorku metylenu (4 ml) w 0°C. Mieszaninę mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Dodano octanu etylu i warstwę organiczną przemyto 0,5M roztworem HCl, wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,0 g, 88%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego
Dietyloaminę (0,26 g, 2,67 mmola) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,0 g, 2,2 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmole) w chlorku metylenu (2 ml). Mieszaninę mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej i dodano octanu etylu. Warstwę organiczną przemyto wodą, 5% NaHCO3 i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii rzutowej (toluen/octan etylu, 3:1 1:2) otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,68 g, 73%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo]amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)propionowego
Trietyloaminę (0,234 ml, 1,68 mmola) dodano w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,68 g, 1,61 mmola) w kwasie tiooctowym (3 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Dodano octanu etylu i fazę organiczną przemyto wodą, nasyconym roztworem NaHCO3, solanką i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (toluen/octan etylu, 3:1 1:2), w wyniku czego otrzymano czysty ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (489 mg, 61%) i nieznacznie zanieczyszczony ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (0,34 g, 43%).
(i) Kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (17 mg, 0,034 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (3,0 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy (8,9 mg, 100%) w postaci chlorowodorku.
3H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,26 (s, 3H), 2,72-2,75 (m, 2H), 2,83-2,91 (m, 3H), 7,60 (s, 1H), 7,77 (s, 1H).
MS (+) 227 (M+1).
P r z y k ł a d 15
Kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) 2-Amino-5-bromo-4-metylopirydyna
PL 200 932 B1
2-Amino-4-metylopirydynę (110 g, 1,02 mola) w kwasie bromowodorowym (1 litr, 48%) mieszano w 70°C i wkraplano w ciągu 1 godziny roztwór nadtlenku wodoru (300 ml, 15%) z taką szybkością, żeby temperatura mieszaniny reakcyjnej pozostawała w przedziale 70 - 80°C. Mieszaninę mieszano przez 90 minut w 70°C i wylano ją na pokruszony lód. Odczyn mieszaniny doprowadzono do pH 4-5 z użyciem węglanu sodu i wytrąconą substancję stałą (zawierającą głównie produkty dibromowane) odsączono i odrzucono. Wartość pH zwiększono do 9 i wytrącony produkt odsączono. Po rekrystalizacji z toluenu otrzymano 2-amino-5-bromo-4-metylopirydynę (76,3 g, 40%).
(b) 2-[N,N-bis(tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-bromo-4-metylopirydyna
2-Amino-5-bromo-4-metylopirydynę (5,70 g, 30,5 mmola) w chloroformie poddano działaniu diwęglanu di-tert-butylu (20,0 g, 91,60 mmola) i DMAP (0,60 g, 4,91 mmola). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze otoczenia na noc, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 95:5) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo) amino]-5-bromo-4-metylopirydynę (8,02 g, 68%).
(c) 2-[N,N-bis(tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-4-metylopirydyna
Roztwór 2-[N,N-bis (tert-butoksykarbonylo)amino]-5-bromo-4-metylopirydyny (15,0 g, 38,70 mmola), tert-butylodimetylotributylostannanylometoksysilanu (25,4 g, 58,3 mmola) i dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu(II) (0,90 g, 1,42 mmola) w 1,2-dichloroetanie (50 ml) mieszano w 90°C przez dwa dni. Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano eteru dietylowego (200 ml), a następnie nasyconego wodnego roztworu fluorku potasu (40 ml). Mieszaninę mieszano intensywnie przez 30 minut i przesączono. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 95:5) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-4-metylopirydynę (10,0 g, 57%).
(d) 2-[N,N-bis (tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylo-4-metylopirydyna
Do roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-4-metylopirydyny (10,0 g, 24,3 mmola) w THF (100 ml) dodano fluorku tetrabutyloamoniowego (13,9 g, 44,1 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny w temperaturze pokojowej. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 50:50) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylo-4-metylopirydynę (5,0 g, 67%).
(e) 5-Bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyna
Trifenylofosfinę (4,69 g, 17,9 mmola) i CBr4 (4,89 g, 14,8 mmola) dodano w 0°C do roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylo-4-metylopirydyny (5,00 g, 22,0 mmole) w dichlorometanie (130 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny, a nastę pnie rozcień czono dichlorometanem. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 80:20) otrzymano 5-bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydynę (5,35 g, 90%).
(f) Ester dietylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Do suspensji NaH (0,24 g, 6,0 mmoli, 60%) w DMF (5 ml) dodano malonianu dietylu (0,91 ml, 6,0 mmoli) i mieszaninę mieszano przez 15 minut. Dodano roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo) amino]-5-bromometylo-4-metylopirydyny (2,0 g, 5,0 mmoli) w DMF (5 ml) i otrzymany roztwór mieszano przez 120 minut w 60°C. Dodano octanu etylu i mieszaninę przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po odparowaniu rozpuszczalnika surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH3OH/CH2Cl2,
1:100 1:20), w wyniku czego otrzymano czystą frakcję estru dietylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tertbutoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,15 g, 48%) i zanieczyszczoną frakcję estru dietylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,1 g).
(g) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (141 mg, 2,52 mmola) w etanolu (2 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,1 g, 2,29 mmola) w etanolu (10 ml) i chlorku metylenu (4 ml). Mieszaninę mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Dodano octanu etylu i warstwę organiczną przemyto 0,5M roztworem HCl, wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano suro22
PL 200 932 B1 wy ester monoetylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,0 g, 97%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego
Dietyloaminę (0,26 g, 2,67 mmola) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,0 g, 2,2 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,24 g, 3,00 mmole) w chlorku metylenu (2 ml). Mieszaninę mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej i dodano octanu etylu. Warstwę organiczną przemyto wodą, 5% NaHCO3 i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii rzutowej (toluen/octan etylu, 3:1 1:1) otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-[N,N-bis (tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,81 g, 88%).
(i) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylo)propionowego.
Trietyloaminę (0,279 ml, 2,0 mmole) dodano do roztworu estru etylowego kwasu 2-(6-[N,N-bis-(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,8 g, 1,9 mmola) w kwasie tiooctowym (3 ml) w 0°C. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Dodano octanu etylu i fazę organiczną przemyto wodą, nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (toluen/octan etylu, 3:1 1:2) i otrzymano czysty ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis-(tert-butoksykarbonylo)amino]5-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (200 mg, 21%) i nieznacznie zanieczyszczony ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)-amino]-4-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (0,68 g).
(j) Kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-4-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (36 mg, 0,072 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (3,0 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 1 godzinę. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy (18,7 mg, 98%) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 2,42 (s, 3H), 2,72-2,95 (m, 5H), 6,81 (s, 1H), 7,58 (s, 1H).
MS (+) 227 (M+1).
P r z y k ł a d 16
Kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowy (a) Ester tert-butylowy kwasu 4-formylopiperydyno-1-karboksylowego
Nadjodynian (26,9 g, 63,5 mmola) dodano do roztworu 1-tert-butoksykarbonylopiperydyno-4-metanolu (10,5 g, 48,8 mmola) w chlorku metylenu (200 ml) i mieszaninę mieszano przez 90 minut. Dodano eteru dietylowego i wytrącony osad wyekstrahowano 10% roztworem Na2S2O3/nasyconym roztworem NaHCO3 (1:1, 300 ml). Warstwę organiczną przemyto 0,5M roztworem NaOH i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heksan/EtOAc, 8:2) otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-formylopiperydyno-1-karboksylowego (8,5 g, 81%).
(b) Ester dietylowy kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylometyleno)malonowego
Do roztworu malonianu dietylu (710 gl, 4,7 mmola), estru tert-butylowego kwasu 4-formylopiperydyno-1-karboksylowego (1,0 g, 4,7 mmola) w chlorku metylenu (5 ml) dodano piperydyny (46 gl, 0,47 mmola) i kwasu octowego (27 gl, 0,47 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 72 godziny w temperaturze pokojowej, a następnie przez 16 godzin w 45°C. Dodano EtOAc i mieszaninę przemyto wodą i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc, 3:1 1:3) i otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylometyleno)malonowego (0,69 g, 40%).
(c) Ester dietylowy kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego
W atmosferze argonu i w -78°C do zawiesiny Cul (0,74 g, 3,88 mmola) w THF (5 ml) wkroplono MeLi (5,34 ml, 8,54 mmola, 1,6M roztwór w eterze dietylowym) i mieszaninę mieszano przez 30 minut. Wkroplono roztwór estru dietylowego kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylometyleno)malonowego (0,69 g, 1,94 mmola) w THF (5 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 120 minut w -78°C, a następnie pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej w ciągu 60 minut. Dodano stężonego wodnego roztworu NH4OH i mieszaninę wyekstrahowano EtOAc, przemyto stężonym wodnym roztworem NH4OH i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc, 3:1 1:6) i otrzymano ester dietylowy kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego (0,39 g, 54%).
PL 200 932 B1 (d) Ester monoetylowy kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego
Roztwór KOH (84 mg, 1,16 mmola) w EtOH (2 ml) wkroplono w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego (0,39 g, 1,01 mmola) w chlorku metylenu (4 ml) i EtOH (10 ml). Otrzymaną mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano EtOAc i mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 416 mg surowego estru monoetylowego kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego.
(e) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-etoksykarbonylo-1-metyloallilo)piperydyno-1-karboksylowego
Formaldehyd (132 mg, 1,65 mmola, 37% w wodzie) dodano w 0°C do roztworu surowego estru monoetylowego kwasu 2-[1-(1-tert-butoksykarbonylopiperydyn-4-ylo)etylo]malonowego (416 mg) w chlorku metylenu (2 ml). Wkroplono dietyloaminę (153 μ!, 1,47 mmola) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano EtOAc, a następnie mieszaninę przemyto wodą i nasyconym roztworem NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 3:1) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(2-etoksykarbonylo-1-metyloallilo)piperydyno-1-karboksylowego (0,18 g, 49% z dwu etapów).
(f) Ester tert-butylowy kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylo-1-metylopropylo)-piperydyno-1-karboksylowego
TFA (86 gl, 0,617 mmola) dodano w 0°C do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-(2-etoksykarbonylo-1-metyloallilo)piperydyno-1-karboksylowego (0,18 g, 0,59 mmola) w kwasie tiooctowym (2 ml). Po mieszaniu przez 6 godzin dodano więcej kwasu tiooctowego (2 ml) i mieszaninę mieszano w 45°C przez noc. Dodano EtOAc i mieszaninę przemyto wodą, nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 5:1 1:1) i otrzymano nieznacznie zanieczyszczony ester tert-butylowy kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylo-1-metylopropylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,17 g, 75%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowego
TFA (2 ml) dodano do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylo-1-metylopropylo)piperydyno-1-karboksylowego (0,17 g, 0,439 mmola) w chlorku metylenu (10 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 90 minut i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą HPLC (10 50% acetonitryl w wodzie, 0,1% TFA) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowego (101 mg, 54%) w postaci soli TFA.
(h) Kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowy W atmosferze argonu do soli estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowego i TFA (0,101 g, 0,252 mmola) dodano stężonego kwasu chlorowodorowego (4 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 5 godzin, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano mieszaninę diastereoizomeryczną związku tytułowego (73,7 mg) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, CD3OD) dla głównego diastereoizomeru: δ 1,10 (d, 3H), 1,36-1,58 (m, 2H), 1,71-1,78 (m, 2H), 1,93-1,99 (m, 1H), 2,05-2,11 (m, 1H), 2,60-2,66 (m, 2H), 2,80-2,86 (m, 1H), 2,94-3,02 (m, 2H), 3,38-3,45 (M, 2H).
MS (+) 218 (M+1).
P r z y k ł a d 17
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy (a) Ester tert-butylowy kwasu (5-formylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
Ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (7,00 g, 31,2 mmola) rozpuszczono w bezwodnym DMSO (50 ml) i kolbę reakcyjną zanurzono w łaźni wodnej w 15°C. Dodano TEA (13,1 ml, 94,0 mmole), a następnie w porcjach kompleksu trójtlenek siarki-pirydyna (15,0 g, 94,0 mmole). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez jeszcze 45 minut, a potem wylano ją na pokruszony lód. Produkt wyekstrahowano eterem dietylowym i połączone ekstrakty organiczne przemyto solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po rekrystalizacji z heksanu/CH2Cl2 otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-formylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (5,40 g, 78%) w postaci białych kryształów.
(b) Ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonylo-aminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego
Do roztworu malonianu dietylu (710 4,7 mmola) i estru tert-butylowego kwasu (5-formylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (1,04 g, 4,7 mmola) w chlorku metylenu/DMF (1:1,5 ml) dodano piperydyny
PL 200 932 B1 (46 gl, 0,47 mmola) i kwasu octowego (27 gl, 0,47 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 72 godziny w temperaturze pokojowej, a następnie przez 16 godzin w 45°C. Dodano powoli heptanu i otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (0,69 g, 40%) w postaci szarych kryształów.
(c) Ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego
W atmosferze argonu w -78°C do zawiesiny Cul (0,9 g, 4,73 mmola) w THF (28 ml) wkroplono
MeLi (6,5 ml, 10,4 mmola, 1,6M roztwór w eterze dietylowym). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Następnie wkroplono roztwór estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (0,84 g, 2,3 mmola) w THF (7 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 180 minut w -78°C. Wkroplono nasycony wodny roztwór NH4OH i mieszaninę wyekstrahowano EtOAc. Fazę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem NH4OH i NaCl, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 3:1 1:6) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego (0,723 g, 82,4%) w postaci białej substancji stałej.
(d) Ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego
Roztwór KOH (113,6 mg, 2,04 mmola) w EtOH (2 ml) wkroplono w atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego (0,7 g, 1,84 mmola) w chlorku metylenu (4 ml) i EtOH (10 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Dodano 1M roztworu KOH (100 ml) i mieszaninę przemyto chlorkiem metylenu. Fazę wodną zakwaszono do pH 2 z użyciem 2M roztworu HCl i wyekstrahowano EtOAc. Fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego (423 mg, 65%).
(e) Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]akrylowego
W atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]malonowego (423 mg, 1,2 mmola) i formaldehydu (132 mg, 1,626 mmola, 36% w wodzie) w chlorku metylenu (2 ml) dodano dietyloaminę (0,153 ml, 1,473 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano EtOAc i roztwór przemyto wodą, NaHCO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 3:1) otrzymano ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksy-karbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]akrylowego (158 mg, 41%).
(f) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)masłowego
W atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)etylo]akrylowego (158 mg, 0,493 mmola) w kwasie tiooctowym (2 ml) dodano TEA (0,076 ml, 0,542 mmola). Mieszaninę mieszano w 45°C przez noc. Dodano EtOAc i roztwór przemyto NaHCO3, solanką, a potem wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 5:1 1:1) otrzymano nieznacznie zanieczyszczony ester etylowy kwasu
2- acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)masłowego (178 mg, 91%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-aminopirydyn-3-ylo)masłowego
TFA (2 ml) dodano do roztworu estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)masłowego (178 mg, 0,449 mmola) w chlorku metylenu (2 ml). Mieszaninę mieszano przez 60 minut i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 1:6) otrzymano zanieczyszczony ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylomety-lo3- (6-aminopirydyn-3-ylo)masłowego (176 mg, 95%). Po dalszym oczyszczeniu drogą HPLC (10-70% acetonitryl w wodzie, 0,1% TFA) otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-aminopirydyn-3-ylo)masłowego (104 mg, 56%) w postaci soli TFA.
(h) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy
W atmosferze argonu do estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-aminopirydyn-3-ylo)masłowego (104 mg, 0,253 mmola) dodano stężonego kwasu chlorowodorowego (4 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 5 godzin, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano mieszaninę diastereoizomeryczną związku tytułowego (61 mg, 92%) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O) dla głównego diastereoizomeru: δ 1,26 (d, 3H), 2,49-2,53 (m, 2H), 2,64-2,77 (m, 1H), 2,95-3,02 (m, 1H), 7,02 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,88 (m, 1H).
MS (+) 227 (M+1).
PL 200 932 B1
P r z y k ł a d 18
Kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester tert-butylowy kwasu (5-bromo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
5-Bromo-6-metylopirydyn-2-yloaminę (25,0 g, 133,7 mmola) w THF/tert-butanolu (1:10, 550 ml) poddano działaniu diwęglanu di-tert-butylu (39,3 g, 180,0 mmoli) i DMAP (2,40 g, 19,6 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 4 godziny w 40°C i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (chlorek metylenu) otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-bromo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (17,0 g, 44%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu [5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-6-metylopirydyn-2-ylo]karbaminowego
Roztwór estru tert-butylowego kwasu (5-bromo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (27,5 g, 95,8 mmola), tert-butylodimetylotributylostannanylometoksysilanu (43,5 g, 100,2 mmola) i dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu(II) (1,00 g, 1,40 mmola) w 1,2-dichloroetanie (350 ml) mieszano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 48 godzin. Co 12 godzin dodawano dodatkowo ilość dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu(II) (1,00 g, 1,40 mmola). Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano eteru dietylowego (300 ml), a następnie nasyconego wodnego roztworu fluorku potasu (100 ml). Mieszaninę mieszano intensywnie przez 60 minut i przesączono. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 1:99) otrzymano ester tert-butylowy kwasu [5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-6-metylopirydyn-2-ylo]karbaminowego (15 g, 47%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu [5-(tert-butylo-dimetylosilanyloksymetylo)-6-metylopirydyn-2-ylo]karbaminowego (10,5 g, 31,23 mmola) w THF (100 ml) dodano fluorku tetra-butyloamoniowego (19,6 g, 62,4 mmola) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano wody i produkt wyekstrahowano chloroformem. Fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 2,5:77,5) otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (6,0 g, 81%).
(d) 5-Bromometylo-2-[N,N-bis (tert-butoksykarbonylo)amino]-pirymidyna
Trifenylofosfinę (9,83 g, 37,5 mmola) i CBr4 (17,7 g, 53,5 mmola) dodano w 0°C do roztworu estru tert-butylowego kwasu (5-hydroksymetylo-6-metylopirydyn-2-ylo)karbamidowego (8,50 g, 35,7 mmola) w dichlorometanie (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny w temperaturze pokojowej, a następnie rozcieńczono dichlorometanem. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (CH2Cl2) otrzymano 5-bromometylo-2-[N,N-bis-(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidynę (4,05 g, 38%).
(e) Ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonylo-amino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
W atmosferze argonu i w 0°C roztwór malonianu dietylu (1,21 ml, 7,97 mmola) w DMF (2 ml) wkroplono do suspensji NaH (348 mg, 7,97 mmola, 55% w oleju mineralnym) w DMF (5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 45 minut, po czym wkroplono roztwór estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylo-6-metylopirydyn-2-ylo) karbaminowego (2,0 g, 6,64 mmola) w DMF (5 ml). Mieszaninę mieszano przez noc (0°C 20°C). Dodano EtOAc i roztwór przemyto wodą i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc, 4:1) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,87 g, 74%).
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (300 mg, 5,35 mmola) w EtOH (4 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,85 g, 4,86 mmola) w EtOH/chlorku metylenu (2:1, 21 ml). Mieszaninę mieszano przez 40 godzin w temperaturze pokojowej i dodano EtOAc. Mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-(6tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo) malonowego (1,45 g).
(g) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)-akrylowego
W atmosferze argonu i w 0°C dietyloaminę (359 mg, 4,90 mmola) wkroplono do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
PL 200 932 B1 (1,44 g, 4,09 mmola) i formaldehydu (464 mg, 5,72 mmola, 37% roztworu w wodzie) w chlorku metylenu (35 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano chlorku metylenu, a następnie roztwór przemyto Na2CO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (1,03 g, 79%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylo)propionowego
W atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (1,23 g, 3,84 mmola) w kwasie tiooctowym (10 ml) dodano TEA (0,556 ml, 3,99 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 64 godziny. Dodano EtOAc i roztwór przemyto Na2CO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc, 5:1 >1:1) otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (1,33 g, 87%).
(i) Kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
W atmosferze argonu do estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-2-metylopirydyn-3-ylo)propionowego (77 mg, 0,19 mmola) dodano stężonego kwasu chlorowodorowego (2 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 110 minut, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy (39 mg, 76%) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 2,49 (s, 3H), 2,73-2,92 (m, 5H), 6,81 (d, 1H), 7,77 (d, 1H).
MS (+) 227 (M+1).
P r z y k ł a d 19
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-amino-pirymidyn-5-ylo)propionowego (a) 2-[N,N-bis(tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-bromopirymidyna
2-Amino-5-bromopirymidynę (9,00 g, 51,7 mmola) w THF/tert-butanolu (1:1, 100 ml) poddano działaniu diwęglanu di-tert-butylu (34,0 g, 156,0 mmoli) i DMAP (3,00 g, 24,5 mmola). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze otoczenia na noc i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozdzielono między dichlorometan i wodę, a następnie pH doprowadzono do wartości 4 z użyciem 1M roztworu HCl. Roztwór wyekstrahowano dichlorometanem, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt przeprowadzono w stan suspensji w heksanie i przesączono, w wyniku czego otrzymano 2-[N,N-bis-(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-bromopirymidynę (15,0 g, 77%).
(b) 2-[N,N-bis(tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)pirymidyna Roztwór 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-bromopirymidyny (16,0 g, 45,0 mmoli), tertbutylodimetylotributylostannanylometoksysilanu (20,5 g, 47,1 mmola) i dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu(II) (1,00 g, 1,40 mmola) w 1,2-dichloroetanie (50 ml) mieszano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez noc. Dodano jeszcze dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu(II) (1,00 g, 1,40 mmola) i roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 8 godzin. Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano eteru dietylowego (200 ml), a następnie nasyconego wodnego roztworu fluorku potasu (50 ml). Mieszaninę mieszano intensywnie przez 60 minut i przesączono. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 1:99) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)-pirymidynę (10,2 g, 55%).
(c) 2-[N,N-bis(tert-Butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylopirymidyna
Do roztworu 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-(tert-butylodimetylosilanyloksymetylo)pirymidyny (10,0 g, 24,3 mmola) w THF (100 ml) dodano fluorku tetrabutyloamoniowego (15,3 g, 48,6 mmola) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano wody i produkt wyekstrahowano chloroformem. Fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (MeOH/CH2Cl2, 2,5:77,5) otrzymano 2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylopirymidynę (4,20 g, 53%).
(d) 5-Bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyna
Trifenylofosfinę (2,71 g, 10,73 mmola) i CBr4 (4,89 g, 14,8 mmola) dodano w 0°C do roztworu 2-[N,N-bis (tert-butoksykarbonylo)amino]-5-hydroksymetylopirymidyny (3,20 g, 9,83 mmola) w dichlorometanie (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę, a następnie rozcieńczono dichlorometanem. Fazę organiczną przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (CH2Cl2) otrzymano 5-bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidynę (2,55 g, 67%).
PL 200 932 B1 (e) Ester dietylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego
W atmosferze argonu i w 0°C roztwór malonianu dietylu (0,704 ml, 4,64 mmola) w DMF (2 ml) wkroplono do suspensji NaH (200 mg, 4,64 mmola, 55% w oleju mineralnym) w DMF (4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut, a następnie wkroplono roztwór 5-bromometylo-2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyny (1,5 g, 3,86 mmola) w DMF (4 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Dodano EtOAc i roztwór przemyto wodą i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc, 3:2) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego (0,87 g, 40%).
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis-tert-butoksykarbonyloamino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (106 mg, 1,88 mmola) w EtOH (2 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo) amino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego (0,80 g, 1,71 mmola) w EtOH/chlorku metylenu (2:1, 12 ml). Mieszaninę mieszano przez 16 godzin w temperaturze pokojowej i dodano EtOAc. Mieszaninę przemyto 0,5M roztworem HCl i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego (0,67 g, 89%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)akrylowego
W atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-(2-[N,N-bis(tertbutoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)malonowego (0,62 g, 1,41 mmola) i formaldehydu (160 mg, 2,0 mmole, 37% roztworu w wodzie) w chlorku metylenu (15 ml) wkroplono dietyloaminę (0,124 ml, 1,69 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano EtOAc i roztwór przemyto wodą, NaHCO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester etylowy kwasu 2-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo) amino]pirymidyn-5-ylometylo)akrylowego (0,54 g, 94%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylo)propionowego
W atmosferze argonu i w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu 2-(2-[[N,N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylometylo)akrylowego (0,53 g, 1,30 mmola) w kwasie tiooctowym (13 ml) dodano TEA (0,189 ml, 1,35 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 40 godzin. Dodano EtOAc, a następnie roztwór przemyto Na2CO3 i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc, 5:1 1:1) otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-[N, N-bis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylo)propionowego (0,56 g, 89%).
(i) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-aminopirymidyn-5-ylo)propionowego
TFA (1,5 ml) dodano do roztworu estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-[N,Nbis(tert-butoksykarbonylo)amino]pirymidyn-5-ylo)propionowego (225 mg, 0,46 mmola) w chlorku metylenu (1,5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 120 minut i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy (172 mg, 94%) w postaci soli TFA.
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,22 (t, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,80-3,00 (m, 3H), 3,00-3,22 (m, 2H), 4,13 (q, 2H), 8,43 (s, 2H).
MS(+) 284 (M+1).
P r z y k ł a d 20
Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy (a) Ester etylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-(dietoksyfosforylo)propionowego
Do suspensji NaH (1,17 g, 60% w oleju mineralnym, 29,3 mmola) w DMF (70 ml) dodano w 0°C fosfonooctanu trietylu (6,01 g, 26,82 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 0,5 godziny. Do mieszaniny reakcyjnej dodano w 0°C estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (7,0 g, 24,38 mmola) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Mieszaninę reakcyjną powoli zadano nasyconym wodnym roztworem chlorku amonu (70 ml). Mieszaninę wyekstrahowano EtOAc, przemyto solanką i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (CH2Cl2/EtOAc, 1:0 1:1 0:1) i otrzymano ester etylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-(dietoksyfosforylo)propionowego (5,1 g, 50%).
PL 200 932 B1 (b) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)but-2-enowego
Do suspensji NaH (278,8 mg, 60% w oleju mineralnym, 6,97 mmola) w THF (25 ml) dodano w 0°C roztworu estru etylowego kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-(dietoksyfosforylo)propionowego (2,5 g, 5,81 mmola) w THF (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 1 godzinę. Do mieszaniny reakcyjnej wkroplono w 0°C acetaldehyd (512 mg, 11,6 mmola). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej, a następnie mieszano przez 16 godzin. Do kolby reakcyjnej dodano acetaldehydu (2,0 g) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej jeszcze przez 16 godzin. Mieszaninę reakcyjną powoli zadano nasyconym wodnym roztworem chlorku amonu (30 ml). Mieszaninę wyekstrahowano EtOAc, przemyto solanką i wysuszono, w wyniku czego otrzymano surowy produkt. Ten surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (EtOAc/heksan, 1:8) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)but-2-enowego jako mieszaninę izomerów (1,1 g, 60%).
(c) Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego
Do kwasu tiolooctowego (15 ml) dodano w temperaturze pokojowej Et3N (1,5 g, 14,8 mmola) i estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)but-2-enowego (920 mg, 2,9 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 40-45°C przez 7 dni (co dwa dni do mieszaniny reakcyjnej dodawano dodatkowo kwasu tiolooctowego (1,5 ml)). Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, a następnie rozcieńczono EtOAc (50 ml). Warstwę organiczną oddzielono, przemyto nasyconym roztworem NaHCO3, solanką i wysuszono. Połączone warstwy organiczne zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono z użyciem kolejno trzech kolumn chromatograficznych (CH2Cl2, EtOAc/heksan, 1:5 i aceton/heksan, 1:8) i otrzymano ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego jako mieszaninę diastereoizomeryczną (780 mg, 68%). Tę mieszaninę diastereoizomeryczną rozdzielono drogą preparatywnej chiralnej chromatografii według procedury opisanej poniżej, w wyniku czego otrzymano cztery izomery estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/A, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/D.
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo]masłowego/D
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/D wyodrębniono z mieszaniny estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/A, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo) masłowego/C i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/D w kolumnie Chiralcel OJ z elucją izoheksanem:acetonitrylem:alkoholem izopropylowym:dimetyloaminą (99:0,5:0,5:0,1). Nadmiar enancjomeryczny wynosił > 99% według metody HPLC z użyciem kolumny Chiralpak OJ z elucją izoheksanem: etanolem:dietyloamią (99:1:0,5).
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-buto-ksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/A
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/A wyodrębniono z mieszaniny estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/A, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tertbutoksy-karbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo2-(6-tert-butoksykarbonyloami-nopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C w kolumnie Chiralcel OJ z elucją izoheksanem:1-propanolem:dietyloaminą (98:2:0,1). Nadmiar enancjomeryczny wynosił > 99% według metody HPLC z użyciem kolumny Chiralpak OJ z elucją izoheksanem:etanolem: dietyloaminą (99:1:0,5).
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B wyodrębniono z mieszaniny estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C w kolumnie Chiralcel AS z elucją heksaPL 200 932 B1 nem:etanolem:dietyloaminą (99:1:0,5). Nadmiar enancjomeryczny wynosił > 99% według metody HPLC z użyciem kolumny Chiralpak AS z elucją izoheksanem: etanolem: dietyloaminą (99:1:0,5).
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksy-karbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C wyodrębniono z mieszaniny estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tertbutoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C w kolumnie Chiralcel AS z elucją heksanem:etanolem:dietyloaminą (99:1:0,5). Nadmiar enancjomeryczny wynosił 87% według metody HPLC z użyciem kolumny Chiralpak AS z elucją izoheksanem:etanolem:dietyloaminą (99:1:0,5).
(d) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy/A
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3ylometylo)masłowego/A (45 mg; 0,11 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 28,4 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 7,89 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,03 (d, 1H), 3,23-3,33 (m, 1H), 3,1-3,2 (m, 1H), 2,75-2,9 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS (+) 227 (M+1).
(e) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy/B
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/B (55 mg; 0,14 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 39,4 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 7,89 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,03 (d, 1H), 3,23-3,33 (m, 1H), 3,1-3,2 (m, 1H), 2,75-2,9 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS (+) 227 (M+1).
(f) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy/C
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C (9 mg; 0,02 mmola) w stężonym HCl (0,5 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 6,4 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 7,82-7,9 (m, 1H), 7,67 (br s. 1H), 7,0 (d, 1H), 3,16-3,28 (m, 1H), 2,96-3,04 (m, 1H), 2,76-2,86 (m, 2H), 1,47 (d, 3H).
MS (+) 227 (M+1).
(g) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy/D
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)masłowego/C (9 mg; 0,02 mmola) w stężonym HCl (0,5 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 6,8 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 7,82-7,9 (m, 1H), 7,67 (br s, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,16-3,28 (m, 1H), 2,96-3,04 (m, 1H), 2,76-2,86 (m,2H), 1,47 (d,3H).
MS (+) 227 (M+1).
P r z y k ł a d 21
Kwas 6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy (a) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pent-2-enowego
Do roztworu NaH (290,5 mg, 60% w oleju mineralnym, 7,5 mmola) w THF (25 ml) w 0°C dodano roztworu estru etylowego kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-(dietoksyfosforylo)propionowego (2,5 g, 5,81 mmola) w THF (30 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 1 godzinę. Do mieszaniny reakcyjnej wkroplono w 0°C propionoaldehyd (725 mg, 12,5 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Dodano propionaldehydu (2,5 g) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej jeszcze przez 16 godzin. Mieszaninę reakcyjną powoli zadano nasyconym wodnym roztworem NH4Cl (30 ml). Mieszaninę wyekstrahowano
PL 200 932 B1
EtOAc, przemyto solanką i wysuszono. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (EtOAc/heksan, 1:8) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pent-2-enowego w postaci mieszaniny izomerów (1,2 g, 60%).
(b) Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo]pentanowego
Do kwasu tiolooctowego (15 ml) dodano w temperaturze pokojowej Et3N (1,8 g, 17 mmola) i estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pent-2-enowego (1,1 g, 3,3 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w 65°C przez 8 dni (co dwa dni do mieszaniny reakcyjnej dodawano dodatkowo kwasu tiooctowego (1,5 ml)). Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej, a następnie rozcieńczono EtOAc. Warstwę organiczną oddzielono, przemyto nasyconym roztworem NaHCO3, solanką i wysuszono. Połączone warstwy organiczne zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono kolejno w dwóch kolumnach chromatograficznych (CH2Cl2 i EtOAc/heksan, 1:5), w wyniku czego otrzymano 350 mg mieszaniny żądanych produktów i nieprzereagowanego związku wyjściowego. Surowy produkt oczyszczono drogą HPLC (EtOH/heksan, 1:9), a następnie w kolumnie chromatograficznej (aceton/heksan, 1:8:), w wyniku czego otrzymano związek tytułowy w postaci mieszaniny diastereoizomerycznej (180 mg, 18%). Tę mieszaninę diastereoizomeryczną estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego rozddzielono drogą preparatywnej chiralnej chromatografii według procedury opisanej poniżej, w wyniku czego otrzymano cztery izomery estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/A, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/B, estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/C i estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/D. Tę mieszaninę diastereoizomeryczną rozdzielono w dwóch kolumnach Chiralcel OJ połączonych ze sobą, z elucją izoheksanem:alkoholem izopropylowym:metanolem (97:1:2). Nadmiar enancjomeryczny mierzono drogą analitycznej HPLC z użyciem dwóch kolumn Chiralcel OJ połączonych ze sobą, z elucją izoheksanem:alkoholem izopropylowym:metanolem (97:1:2). Stwierdzono, że nadmiar enancjomeryczny dla estrów etylowych kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/A do C wynosił > 99%, natomiast dla estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/D wynosił 97%.
(c) Kwas 6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy/A
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/A (50,4 mg, 0,12 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 33,9 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 7,87 (dd, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,02-3,16 (m, 2H), 2,79-2,87 (m, 2H), 1,79-1,88 (m, 1H), 1,53-1,64 (m, 1H), 1,07 (t, 3H).
MS (+) 241 (M+1).
(d) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy/B
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/B (51,6 mg; 0,13 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 34,7 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 7,87 (dd, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,02-3,16 (m, 2H), 2,79-2,87 (m, 2H), 1,79-1,88 (m, 1H), 1,53-1,64 (m, 1H), 1,07 (t, 3H).
MS (+) 241 (M+1).
(e) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy/C
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/C (4,3 mg; 0,01 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 2,9 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 7,86 (dd, 1H), 7,66 (br s, 1H), 7,0 (d, 1H), 2,94-3,04 (m, 2H), 2,74-2,9 (m, 2H), 1,88-1,97 (m, 1H), 1,55-1,66 (m, 1H), 1,05 (t, 3H).
PL 200 932 B1
MS (+) 241 (M+1).
(f) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy/D
Roztwór estru etylowego kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)pentanowego/D (19,2 mg; 0,05 mmola) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin w atmosferze argonu przez 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 12,9 mg związku tytułowego w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 7,86 (dd, 1H), 7,66 (br s, 1H), 7,0 (d, 1H), 2,94-3,04 (m, 2H), 2,74-2,9 (m, 2H) , 1,88-1,97 (m, 1H), 1,55-1,66 (m, 1H), 1,05 (t, 3H).
MS (+) 241 (M+1).
P r z y k ł a d 22
Kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester etylowy kwasu 6-amino-5-chloronikotynowego
Do suspensji estru etylowego kwasu 6-aminonikotynowego (18,0 g, 0,108 mola) w acetonitrylu (270 ml) dodano N-chlorosukcynoimidu (21,7 g, 0,162 mola) i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w dichlorometanie, przemyto wodą i wysuszono. Po chromatografii rzutowej (2,5% MeOH w CH2CH2) otrzymano czysty ester etylowy kwasu 6-amino-5-chloronikotynowego (17,23 g, 79%).
(b) Ester etylowy kwasu 6-bis(tert-butoksykarbonylo)amino-5-chloronikotynowego
DMAP (0,11 g, 0,9 mmola) i (Boc)2O (21,54 g, 99 mmoli) dodano do roztworu estru etylowego kwasu 6-amino-5-chloronikotynowego (9,0 g, 45 mmoli) w dichlorometanie (250 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 24 godziny. W trakcie trwania reakcji dodano DMAP (0,02 równoważnika) i (Boc)2O (3 x 0,5 równoważnika). Mieszaninę reakcyjną przemyto wodą i wysuszono. Surowy produkt przemyto heksanem i otrzymano czysty ester etylowy kwasu 6-bis (tert-butoksykarbonylo)amino-5-chloronikotynowego (11,87 g, 66%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu (3-chloro-5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
LiAlH4 (2,4 g, 63,2 mmola) w 0°C dodano porcjami w ciągu 3,5 godziny do roztworu estru etylowego kwasu 6-bis(tert-butoksykarbonylo)amino-5-chloronikotynowego (11,5 g, 28,6 mmola) w THF (70 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, a następnie dodano ostrożnie NH4Cl (nasycony), a potem wody. Roztwór przesączono, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester tert-butylowy kwasu (3-chloro-5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (5,86 g, 79%).
(d) Ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylo-3-chloropirydyn-2-ylo)karbaminowego
Do suspensji estru tert-butylowego kwasu (3-chloro-5-hydroksymetylopirydyn-2-ylo)-karbaminowego (2,38 g, 9,2 mmola) w CH2Cl2 (60 ml) dodano w 0°C trifenylofosfiny (2,61 g, 9,7 mmola), a następnie tetrabromku węgla (4,58 g, 13,8 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 5 godzin i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano acetonitrylu (40 ml) i mieszaninę trzymano w temperaturze do -20°C przez noc. Następnie mieszaninę przesączono i pozostałość w postaci krystalicznej przemyto zimnym acetonitrylem. Przesącz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i drugi rzut bromku otrzymano sposobem opisanym powyżej. Otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylo-3-chloropirydyn-2-ylo)karbaminowego (1,86 g, 63%) w postaci białych kryształów.
(e) Ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)malonowego
Malonian dietylu (1,87 ml, 12,31 mmola) dodano do suspensji NaH (0,54 g, 12,31 mmola, 55%) w bezwodnym DMF (15 ml) w -8°C. Tę mieszaninę mieszano przez 15 minut, po czym w 0°C wkroplono ją do roztworu estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylo-3-chloropirydyn-2-ylo)karbaminowego (3,30 g, 10,26 mmola) w bezwodnym DMF (50 ml). Otrzymany roztwór mieszano przez 40 minut w 0°C, a następnie ostrożnie dodano NH4Cl (5 ml, nasycony roztwór). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez noc i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano pozostałość, którą rozpuszczono w wodzie/CH2CH2. Warstwę wodną wyekstrahowano CH2CH2 i połączone ekstrakty organiczne wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (1% MeOH w CH2Cl2) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo) malonowego (2,45, 60%) w postaci lepkiego przejrzystego oleju.
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)malonowego
PL 200 932 B1
Roztwór KOH (0,44 g, 6,72 mmola, 85%) w etanolu (5 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)malonowego (2,45 g, 6,11 mmola) w etanolu (25 ml) i chlorku metylenu (10 ml). Mieszaninę mieszano przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano pod próżnią i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Warstwę wodną przemyto eterem, zakwaszono do pH 4 z użyciem 1M roztworu HCl i wyekstrahowano chlorkiem metylenu i octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem surowy produkt, który oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (10% MeOH w CH2Cl2) i otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,41 g, 62%) w postaci żółto-białej szklistej piany.
(g) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)akrylowego
Do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)malonowego (1,40 g, 3,64 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,29 ml, 3,75 mmola) w CH2Cl2 (2 ml) wkroplono w 0°C dietyloaminę (3,67 ml, 3,67 mmola), a następnie wodę (2,5 ml) i CH2Cl2 (2,5 ml). Mieszaninę mieszano przez 20 godzin w temperaturze pokojowej, a następnie wylano na lód-wodę i wyekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto 5% roztworem NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (1-2,5% metanol w CH2Cl2) otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)akrylowego 0,81 g (65%).
(h) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)propionowego
Kwas tiooctowy (4 ml) dodano w 0°C do suspensji estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,732 g, 2,16 mmola) i trietyloaminy (0,31 ml, 2,23 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej i w atmosferze argonu przez noc, a potem wylano ją na lód-wodę i wyekstrahowano CH2CH2. Fazę organiczną przemywano nasyconym roztworem NaHCO3, aż do ustania wydzielania się gazu, a następnie wysuszono. Surowy produkt oczyszczono dwukrotnie drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2, 1-2,5% MeOH w CH2Cl2 i heksan/EtOAc, 5:2 1:1), w wyniku czego otrzymano czysty ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)propionowego (0,79 g, 87%).
(i) Kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
Roztwór estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylo)propionowego (55 mg, 0,132 mmola) w stężonym HCl (4 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 90 minut. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (36 mg, 96,4%) 1H NMR (400 MHz, D2O): δ 2,70-2,97 (m, 5H), 7,73 (s, 1H), 8,09 (s, 1H).
MS (+) 248 (M+1).
P r z y k ł a d 23
Kwas 3-(6-amino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester etylowy kwasu 6-bis(tert-butoksykarbonylo)amino-5-winylonikotynowego
Mieszaninę estru etylowego kwasu 5-bromo-6-bis(tert-butoksykarbonylo)aminonikotynowego (4,50 g, 10,1 mmola), winylotributylocyny (3,52 g, 11,1 mmola) i tetrakispalladotrifenylofosfina (0,50 g, 0,40 mmola) w THF (15 ml) mieszano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 24 godziny. Dodano tetrakispalladotrifenylofosfiny (0,50 g) i po 24 godzinach w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin mieszaninę reakcyjną ochłodzono i rozcieńczono dichlorometanem (100 ml). Dodano nasyconego wodnego roztworu KF (25 ml) i roztwór mieszano przez 1 godzinę. Dodano wody i produkt wyekstrahowano dichlorometanem, fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (1% MeOH w dichlorometanie) otrzymano ester etylowy kwasu 6-bis(tert-butoksykarbonylo)amino-5-winylonikotynowego 3,20 g, (81%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu (5-hydroksymetylo-3-winylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
DEBAL (25 ml, 1M roztwór w heksanie) wkroplono w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu
6-bis(tert-butoksykarbonylo)amino-5-winylonikotynowego (2,00 g, 5,1 mmola) w THF (40 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Dodano ostrożnie NH4Cl (nasycony), a następnie wody i mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość przeprowadzono w stan suspensji w 5% MeOH w dichlorometanie i przesączono przez warstwę żelu krzemionkowego.
PL 200 932 B1
Przesącz wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tertbutylowy kwasu (5-hydroksymetylo-3-winylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (1,00 g, 78%).
(c) Ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylo-3-winylopirydyn-2-ylo)karbaminowego
W trakcie mieszania do suspensji estru tert-butylowego kwasu (5-hydroksymetylo-3-winylopirydyn-2-ylo)karbaminowego (10,0 g, 40,0 mmoli) w CH2Cl2 (150 ml) i THF (60 ml) dodano w 0°C trifenylofosfiny (11,5 g, 44,0 mmole), a następnie tetrabromku węgla (19,9 g, 60,0 mmoli). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano acetonitrylu (100 ml) i mieszaninę trzymano w -20°C przez noc. Następnie mieszaninę przesączono i pozostałość w postaci krystalicznej przemyto zimnym acetonitrylem. Produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (1% MeOH w dichlorometanie) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu (5-bromometylo-3-chloropirydyn-2-ylo)karbaminowego (4,5 g, 36%).
(d) Ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Malonian dietylu (2,30 g, 14,3 mmola) dodano w 0°C do suspensji NaH (0,61 g, 14,3 mmola, 55%) w bezwodnym DMF (75 ml). Mieszaninę mieszano przez 15 minut, a następnie w 0°C wkroplono ją do roztworu estru tert-butylowego kwasu (5-bromometylo-3-chloropirydyn-2-ylo)karbaminowego (4,50 g, 14,3 mmola) w bezwodnym DMF (100 ml). Otrzymany roztwór mieszano przez 40 minut w 0°C, a potem ostrożnie dodano NH4Cl (30 ml, nasycony). Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano pozostałość, którą rozpuszczono w wodzie/CH2Cl2. Warstwę wodną wyekstrahowano CH2Cl2 i połączone ekstrakty wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (1% MeOH w CH2Cl2) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (4,30 g, 77%).
(e) Ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (0,71 g, 12,6 mmola, 85%) w etanolu (10 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2- (6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo) malonowego (4,30 g, 11,0 mmoli) w etanolu (25 ml) i dichlorometanu (10 ml). Mieszaninę mieszano przez 6 godzin w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano pod próżnią i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Warstwę wodną przemyto eterem, zakwaszono do pH 4 z użyciem 1M roztworu HCl i wyekstrahowano dichlorometanem. Warstwę organiczną przemyto wodą, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie po chromatografii rzutowej (10% MeOH w CH2Cl2) otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo) malonowego (3,05 g, 76%).
(f) Ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)-akrylowego
Do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)malonowego (3,05 g, 8,37 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,71 g, 8,80 mmola) w CH2Cl2 (2 ml) wkroplono w 0°C dimetyloaminę (0,85 ml, 8,80 mmola). Mieszaninę mieszano przez 3 godziny w temperaturze pokojowej, a następnie wylano na lód-wodę i wyekstrahowano dichlorometanem. Warstwę organiczną przemyto 5% roztworem NaHCO3 i wysuszono. Po chromatografii rzutowej (1% metanol w CH2Cl2) otrzymano ester etylowy kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (1,70 g, 61%).
(g) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylo)propionowego
Kwas tiooctowy (4 ml) dodano w 0°C do suspensji estru etylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylometylo)akrylowego (0,73 g, 2,16 mmola) w trietyloaminie (0,31 ml, 2,23 mmola). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej i w atmosferze argonu przez noc, a potem wylano na lód-wodę i wyekstrahowano CH2Cl2. Fazę organiczną przemywano nasyconym roztworem NaHCO3, aż do ustania wydzielania się gazu, a następnie wysuszono. Po chromatografii rzutowej (1% MeOH w CH2Cl2) otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-chloropirydyn-3-ylometylo)propionowego (0,51 g, 70%).
(h) Ester etylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)merkaptometylopropionowego
W -78°C przez roztwór estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-winylopirydyn-3-ylo)propionowego (0,65 g, 1,60 rnmola) w etanolu (25 ml) przepuszczano pęcherzykami ozon. Następnie przez mieszaninę przepuszczano pęcherzykami O2 w ciągu 5 mi34
PL 200 932 B1 nut, a potem N2 przez 15 minut. Do mieszaniny dodano w -78°C ostrożnie NaBH4 (0,30 g, 8,00 mmoli) w wodzie i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do osiągnięcia temperatury 0°C. Mieszanie kontynuowano przez 3 godziny. Dodano acetonu (10 ml) i mieszaninę reakcyjną odparowano do 1/3 początkowej objętości. Następnie dodano 50% NaCl (wodny roztwór) i mieszaninę wyekstrahowano dichlorometanem, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano surowy ester etylowy kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo) merkaptometylopropionowego (0,38 g, 63%).
(i) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)propionowego
Mieszaninę surowego estru etylowego kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)merkaptometylopropionowego (0,38 g, 1,0 mmol) i KHCO3 (0,11 g, 1,1 mmola) w bezwodniku octowym (1 ml) mieszano w temperaturze pokojowej przez 5 godzin. Następnie dodano NH4Cl (nasycony) i wody. Mieszaninę wyekstrahowano dichlorometanem, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii rzutowej (CH2Cl2, 2,5% MeOH w CH2Cl2) otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)propionowego (0,23 g, 60%).
(j) Kwas 3-(6-amino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy
Roztwór estru etylowego kwasu 3-(6-tert-butoksykarbonyloamino-5-hydroksymetylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowego (50 mg, 135 mmoli) w stężonym HCl (2 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 60 minut. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (37 mg, 98,3%).
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 2,70-2,95 (m, 5H), 4,65 (s, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,88 (s, 1H).
MS (+) 244 (M+1).
P r z y k ł a d 24
Kwas 2-merkaptometylo-3-pirolidyn-3-ylopropionowy (a) (1-Benzylopirolidyn-3-ylo)metanol
W atmosferze argonu Red-Al (160 ml 3,5M roztworu w toluenie, 560 mmoli) dodano do roztworu kwasu 1-benzyl-5-oksopirolidyno-3-karboksylowego (20 g, 91 mmoli) w bezwodnym THF (650 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2,5 godziny, a następnie wylano do mieszaniny pokruszonego lodu i NaOH (20%). Fazy rozdzielono, fazę wodną wyekstrahowano toluenem i połączone organiczne fazy wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 17,9 g surowego produktu w postaci żółtego oleju.
(b) Ester tert-butylowy kwasu 3-hydroksymetylopirolidyno-1-karboksylowego
W atmosferze argonu do roztworu (1-benzylopirolidyn-3-ylo)metanolu (6,1 g, 32 mmole) w metanolu (220 ml) dodano 10% Pd-C (6,1 g) i mrówczanu amonu (10 g, 158 mmoli). Po ogrzewaniu w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 15 minut ciepłą mieszaninę reakcyjną przesączono przez warstwę celitu, po czym celit przemyto metanolem i połączone fazy organiczne zatężono. Pozostałość rozpuszczono w THF (35 ml) i wodzie (35 ml), roztwór ochłodzono do 0°C i dodano K2CO3 (22 g, 159 mmoli) i diwęglanu di-tert-butylu (6,95 g, 32 mmole). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. THF usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, dodano wody i fazę wodną wyekstrahowano EtOAc. Połączone fazy organiczne wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 4,64 g surowego produktu. Po chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc: 1/0 68/32) surowego produktu otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-hydroksymetylopirolidyno-1-karboksylowego (3,82 g, 60%) w postaci bezbawnego oleju.
(c) Ester tert-butylowy kwasu 3-trifluorometanosulfonyloksymetylopirolidyno-1-karboksylowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu 3-hydroksymetylopirolidyno-1-karboksylowego (1 g,
4,97 mmola) i trietyloaminy (1,04 ml, 7,46 mmola) w CH2Cl2 (15 ml) wkroplono w 0°C chlorek metanosulfonylu (0,4 ml, 5,17 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Po przesączeniu dodano CH2CH2 i fazę organiczną przemyto 1M roztworem HCl, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-trifluorometanosulfonyloksymetylopirolidyno-1-karboksylowego (1,4 g, 97%).
PL 200 932 B1 (d) Ester tert-butylowy kwasu 3-bromometylopirolidyno-1-karboksylowego
Mieszaninę estru tert-butylowego kwasu 3-trifluorometanosulfonyloksymetylopirolidyno-1-karboksylowego (3,85 g, 13,8 mmola) i LiBr (3,61 g, 42 mmole) w bezwodnym acetonie (30 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez noc. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej, przesączono i zatężono. Pozostałość rozpuszczono w CH2CH2 i przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 6 g surowego produktu. Po oczyszczeniu drogą chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc: 1/0 68/32) otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-bromometylopirolidyno-1-karboksylowego (2,84 g,
78%) w postaci bezbarwnego oleju.
(e) Ester dietylowy kwasu 2-[1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego
Malonian dietylu (1,93 ml, 12,7 mmola) wkroplono w 0°C do roztworu NaH (60%; 0,51 g, 12,8 mmola) w bezwodnym THF (15 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, po czym dodano do mieszaniny (w trakcie ogrzewania w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin) estru tert-butylowego kwasu 3 -bromometylopirolidyno-1-karboksylowego (2,8 g, 10,6 mmola) w bezwodnym THF (30 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 19 godzin, a następnie zatężono prawie do sucha. Dodano wody (1 litr) i produkt wyekstrahowano CH2Cl2. Połączone fazy organiczne wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 3,3 g surowego produktu. Po oczyszczeniu drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/EtOAc: 1/0 68/32) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego (1,64 g, 45%).
(f) Ester monoetylowy kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego
Roztwór KOH (0,26 g; 4,6 mmola) w etanolu (7 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego (1,52 g, 4,4 mmola) w etanolu (7 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w wodzie (500 ml). Warstwę wodną przemyto eterem dietylowym, zakwaszono do pH 3 z użyciem 0,5M roztworu HCl i wyekstrahowano eterem dietylowym. Fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego (1,13 g, 81%).
(g) Ester tert-butylowy kwasu 3-(2-etoksykarbonyloallilo)pirolidyno-1-karboksylowego
Dietyloaminę (0,34 ml, 3,3 mmola) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu
2- (1-tert-butoksykarbonylopirolidyn-3-ylometylo)malonowego (0,69 g, 2,19 mmola) w 36% wodnym roztworze formaldehydu (0,27 ml, 3,5 mmola), CH2Cl2 (1,6 ml) i wody (1,6 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, wylano na lód-wodę (500 ml) i wyekstrahowano CH2Cl2. Połączone fazy organiczne przemyto 5% NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-(2-etoksykarbonyloallilo)pirolidyno1-karboksylowego (0,55 g, 87%) w postaci bezbarwnego oleju.
(h) Ester tert-butylowy kwasu 3-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)pirolidyno-1-karboksylowego
Kwas tiooctowy (5 ml) ochłodzony do 0°C dodano do mieszaniny estru tert-butylowego kwasu
3- (2-etoksykarbonyloallilo)pirolidyno-1-karboksylowego (0,72 g, 2,54 mmola) i trietyloaminy (0,37 ml; 2,67 mmola) w 0°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 30 minut, a potem w temperaturze pokojowej przez 23 godziny, a następnie wylano na lód-wodę (400 ml). Warstwę wodną wyekstrahowano CH2Cl2. Połączone fazy organiczne przemyto nasyconym roztworem NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/EtOAc: 1/0 68/32) i otrzymano ester tert-butylowy kwasu 3-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)pirolidyno-1-karboksylowego (0,72 g, 79%) w postaci oleju.
(i) Kwas 2-merkaptometylo-3-pirolidyn-3-ylopropionowy
Roztwór estru tert-butylowego kwasu 3-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)pirolidyno-1-karboksylowego (0,52 g; 1,45 mmola) w stężonym HCl (15 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano mieszaninę diastereoizomeryczną związku tytułowego w postaci chlorowodorku (0,33 g; 100%).
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 1,60-1,92 (m, 3H), 2,19-2,32 (m, 1H), 2,32-2,42 (m, 1H), 2,66-2,83 (m, 3H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,23-3,32 (m, 1H), 3,40-3,58 (m, 2H).
MS (+) 190 (M+1).
PL 200 932 B1
P r z y k ł a d 25
Kwas 3-(cis-4-aminocyklopent-2-enylo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester 4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylowy kwasu cis-metanosulfonowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu cis-(4-hydroksymetylocyklopent-2-enylo)karbaminowego (2 g, 9,4 mmola) i trietyloaminy (1,96 ml, 14,1 mmola) w CH2CH2 (30 ml) dodano w 0°C chlorku metanosulfonylu (0,76 ml, 9,8 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Po przesączeniu dodano CH2Cl2 i fazę organiczną przemyto 1M roztworem HCl, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester 4-tert-butoksy-karbonyloatninocyklopent-2-enylometylowy kwasu cis-metanosulfonowego (2,64 g, 96%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu cis-(4-bromometylocyklo-pent-2-enylo)karbaminowego
Mieszaninę estru 4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylowego kwasu cis-metanosulfonowego (2,51 g, 8,6 mmola) i LiBr (2,24 g, 25,8 mmola) w bezwodnym acetonie (20 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez noc. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej, przesączono i zatężono. Pozostałość rozpuszczono w CH2Cl2 i przemyto wodą, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu cis-(4-bromometylocyklopent-2-enylo)karbaminowego (2,23 g, 94%).
(c) Ester dietylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego
Malonian dietylu (1,29 ml, 8,5 mmola) dodano do mieszaniny NaH (60%, 0,34 g; 8,5 mmola) w DMF (10 ml). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 15 minut dodano roztworu estru tert-butylowego kwasu cis-(4-bromometylocyklopent-2-enylo)karbaminowego (1,95 g, 7,1 mmola) w DMF (12 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano w 60°C przez 19 godzin. Dodano EtOAc, a następnie fazę organiczną wyekstrahowano wodą i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 2,44 g surowego produktu. Po oczyszczeniu drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/EtOAc: 1/0 68/32) otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego (1,47 g, 58%).
(d) Ester monoetylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego
Roztwór KOH (0,19 g; 3,4 mmola) w etanolu (6 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego (1,15 g; 3,2 mmola) w etanolu (6 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, zatężono i dodano lodu-wody (400 ml). Fazę wodną przemyto eterem dietylowym (emulsję wytworzono podczas ekstrakcji poddano działaniu solanki w celu dobrego oddzielenia fazy), zakwaszono do pH 3 z użyciem 0,5M roztworu HCl i wyekstrahowano eterem dietylowym. Fazę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego (0,86 g, 81%) w postaci białych kryształów.
(e) Ester etylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)akrylowego
Do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)malonowego (0,66 g, 2,0 mmole) w 36% wodnym roztworze formaldehydu (0,25 ml, 3,2 mmola), CH2Cl2 (1,6 ml) i wody (1,6 ml) dodano w 0°C dietyloaminy (0,31 ml; 3,0 mmole). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, wylano na lód-wodę (400 ml) i wyekstrahowano CH2Cl2. W trakcie ekstrakcji oddzielenie tej fazy ułatwiono przez dodanie solanki. Połączone fazy organiczne przemyto 5% NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)akrylowego (0,56 g, 94%) w postaci oleju.
(f) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent2-enylo)propionowego
Kwas tiooctowy (4 ml) ochłodzony do 0°C dodano do mieszaniny estru etylowego kwasu 2-(cis4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylometylo)akrylowego (0,56 g, 1,9 mmola) i trietyloaminy (0,28 ml, 2,0 mmole) w 0°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 30 minut, a potem w temperaturze pokojowej przez 19 godzin, a następnie wylano ją na lód-wodę (400 ml). Warstwę wodną wyekstrahowano CH2Cl2. Fazę organiczną przemyto nasyconym roztworem NaHCO3, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 1,7 g surowego produktu. Po oczyszczeniu drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/EtOAc: 1/0 68/32) otrzymano ester etylowy
PL 200 932 B1 kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylo)propionowego (0,46 g, 65%).
(g) Kwas 3-(cis-4-aminocyklopent-2-enylo)-2-merkaptometylopropionowy
Roztwór estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(cis-4-tert-butoksykarbonyloaminocyklopent-2-enylo)propionowego (86 mg, 0,23 mmola) w stężonym HCl (5 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano mieszaninę diastereoizomeryczą związku tytułowego w postaci chlorowodorku (65 mg).
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 1,35-1,47 (m, 2H), 1,60-1,72 (m, 1H), 1,74-1,92 (m, 2H), 1,92-2,04 (m, 1H), 2,67-2,92 (m, 10H), 4,34-4,43 (m, 2H), 5,79-5,85 (br s, 2H), 6,12 (d, 1H), 6,18 (d, 1H).
P r z y k ł a d 26
Kwas 2-merkaptometylo-3-piperazyn-1-ylopropionowy (a) Ester tert-butylowy kwasu 4-(2-etoksykarbonyloallilo)piperazyno-1-karboksylowego
Do roztworu estru etylowego kwasu 2-bromometyloakrylowego (1,93 g, 10 mmoli) w N,N-dimetyloformamidzie (25 ml) dodano estru tert-butylowego kwasu piperazyno-1-karboksylowego (1,86 g, 10 mmoli), a następnie wkroplono etylodiizopropyloaminę (1,71 ml, 10 mmoli). Po mieszaniu przez 16 godzin w temperaturze pokojowej rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano wody (50 ml) i dichlorometanu (50 ml). Po mieszaniu przez 2 minuty warstwy rozdzielono a warstwę organiczną przemyto wodą, solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano surowy ester tert-butylowy kwasu 4-(2-etoksykarbonyloallilo)piperazyno-1-karboksylowego (2,456 g, 82%).
(b) Ester tert-butylowy kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)piperazyno-1-karboksylowego
Do surowego estru tert-butylowego kwasu 4-(2-etoksykarbonyloallilo)piperazyno-1-karboksylowego (2,45 g, 8,2 mmola) w atmosferze argonu dodano kwasu tiolooctowego (7,5 ml). Mieszaninę ochłodzono do 0°C i wkroplono trietyloaminę (1,14 ml, 8,2 mmola). Następnie mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 dni i dodano kwasu tiolooctowego (2,5 ml). Mieszanie kontynuowano przez 1 dzień, a następnie ostrożnie dodawano nasyconego wodnego roztworu wodorowęglanu sodu, aż do zobojętnienia mieszaniny reakcyjnej i mieszaninę wyekstrahowano trzykrotnie dichlorometanem. Połączone warstwy organiczne przemyto dwukrotnie nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i jednokrotnie solanką. Po wysuszeniu nad siarczanem magnezu rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (żel krzemionkowy, 1,7% metanol w dichlorometanie), w wyniku czego otrzymano ester tert-butylowy kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)piperazyno-1-karboksylowego (0,29 g, 9,4%).
(c) Kwas 2-merkaptometylo-3-piperazyn-1-ylopropionowy
Do estru tert-butylowego kwasu 4-(3-acetylosulfanylo-2-etoksykarbonylopropylo)piperazyno-1-karboksylowego (0,095 g, 0,25 mmola) dodano kwasu chlorowodorowego nasyconego argonem (3 ml, 37%) i mieszaninę w atmosferze argonu ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2,5 godziny. Roztwór zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano związek tytułowy w postaci dichlorowodorku (0,071 g, ilościowo).
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 3,86 - 3,49 (m, 10H), 3,36 - 3,28 (m, 1H), 3,01 - 2,88 (m, 2H).
MS 205 (M+H).
P r z y k ł a d 27
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy (a) Ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylo]malonowego
W trakcie mieszania i w atmosferze argonu do suspensji jodku miedzi (5,71 g, 30 mmoli) w eterze dietylowym (120 ml) dodano w ciągu 10 minut i w 0°C bromku etylomagnezu (3M roztworu w eterze dietylowym, 20 ml, 20 mmoli). Po 5 minutach mieszania mieszaninę ochłodzono do -78°C i wkroplono w ciągu 0,5 godziny roztwór estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (5,47 g, 15,0 mmoli) w tetrahydrofuranie (60 ml). W trakcie tego czasu dodano tetrahydrofuranu (40 ml). Mieszaninę mieszano w -40°C przez 2,5 godziny. Następnie w trakcie intensywnego mieszania z zasysaniem powietrza dodano roztworu chlorku amonu (5%) w wodnym roztworze amoniaku (5%) i mieszaninę ogrzano do temperatury pokojowej. Mieszaninę wyekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto kolejno wodnym roztworem amoniaku (5%), solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniej38
PL 200 932 B1 szonym ciśnieniem i pozostałość poddano rekrystalizacji z mieszaniny eteru diizopropylowego i tetrahydrofuranu (5:1, obj./obj.), w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylo]malonowego (3,23 g, 55%).
b) Ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylomalonowego
Ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylo]malonowego (3,23 g, 8,19 mmola) rozpuszczono w mieszaninie dichlorometanu (12 ml) i etanolu (24 ml, 99,5%). Do tego roztworu wkroplono w ciągu 0,5 godziny i w 0°C roztwór wodorotlenku potasu (0,528 g, 87%, 8,20 mmola) w etanolu (16 ml, 99,5%). Mieszanie kontynuowano przez 16 godzin i pozwolono by mieszanina w tym czasie ogrzała się do temperatury pokojowej. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem do objętości 5-10 ml dodano wody (50 ml) i otrzymaną emulsję mieszano przez 0,5 godziny, a następnie przesączono. Przesącz przemyto dwukrotnie mieszaniną octanu etylu i eteru dietylowego (2:1, obj./obj.). Warstwę wodną zakwaszono z użyciem roztworu kwasu cytrynowego w wodzie (10%) do uzyskania pH 4 do 5 i wyekstrahowano trzykrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, a potem rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylo]malonowego (2,47 g, 82%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonylopirydyn-3-ylo)propyloakrylowego
Do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)propylo]malonowego (2,45 g, 6,69 mmola) w dichlorometanie (11 ml) dodano w 0°C wodnego roztworu formaldehydu (0,49 ml, 37%) i dietyloaminy (0,62 ml, 6,4 mmola). Po intensywnym mieszaniu przez 16 godzin dodano wody (40 ml) i octanu etylu (40 ml). Po dodatkowym mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 2 minuty warstwy rozdzielono i warstwę wodną wyekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i solanką. Po wysuszeniu nad siarczanem sodu rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-buto-ksykarbonylopirydyn-3-ylo)propylo]akrylowego (1,21 g, 54%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego
Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonylopirydyn-3-ylo)propylo]akrylowego (1,20 g, 3,59 mmola) rozpuszczono w kwasie tiolooctowym (4 ml) i w atmosferze argonu dodano trietyloaminy (0,56 ml, 4,0 mmole). Mieszaninę ogrzewano do 60°C. Po 22 godzinach dodano kwasu tiolooctowego (2 ml). Po dodatkowych 14 godzinach mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano powoli nasyconego roztworu wodorowęglanu sodu w celu otrzymania obojętnego roztworu. Ten roztwór wyekstrahowano trzykrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (żel krzemionkowy, 1,7% metanol w dichlorometanie) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego (1,22 g, 83%).
Tę mieszaninę diastereoizomerów rozdzielono w skali preparatywnej drogą chiralnej chromatograf! z użyciem kolumny Chiralpak AD (250 x 4,6 mm) jako fazy stacjonarnej i mieszaniny heksanu (mieszanina izomerów)/etanolu (85:15) zawierającej dietyloaminę (0,05%) przy prędkości przepływu 1 ml/min z natężeniem próbki 5 mg/ml.
Nadmiar enancjomeryczny określano analitycznie drogą chiralnej HPLC w tej samej kolumnie z użyciem mieszaniny heksanu/etanolu (85:15) jako eluenta.
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego/A:
Czas zatrzymania 10,72 minuty, nadmiar enancjomeryczny = 99%.
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-pentanowego/B;
Czas zatrzymania 14,41 minuty, nadmiar enancjomeryczny = 98%
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-pentanowego/C:
Czas zatrzymania 23,01 minuty, nadmiar enancjomeryczny = 98%
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego/D:
PL 200 932 B1
Czas zatrzymania 29,83 minuty, nadmiar enancjomeryczny = 97% (e) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy.
W atmosferze argonu do estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego (0,041 g, 0,1 mmola) dodano kwasu chlorowodorowego (38%, 4 ml) i mieszaninę ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 4 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem i wysuszeniu (45°C, 30 Pa) otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (0,027 mg, 97%).
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy/A
Ten związek otrzymano z estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego/A sposobem opisanym powyżej.
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,79 (dd, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 2,81 (m, 2 H), 2,51 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 0,72 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy/B
Ten związek otrzymano z estru etylowego kwasu 2-acetylosul-fanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)pentanowego/B sposobem opisanym powyżej.
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,85 (dd, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 2,98 - 2,64 (m, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 0,74 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy/C
Ten związek otrzymano z estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-pentanowego/C sposobem opisanym powyżej.
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,85 (dd, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 2,98 - 2,64 (m, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 0,74 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy/D
Ten związek otrzymano z estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-pentanowego/D sposobem opisanym powyżej.
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,79 (dd, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 0,72 (t, 3H).
MS+ 241 (M+H).
P r z y k ł a d 28
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy (a) Ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego
W trakcie mieszania i w atmosferze argonu do roztworu cyjanku miedzi (3,58 g, 40 mmoli) w tetrahydrofuranie (50 ml) dodano w -15°C w ciągu 15 minut roztworu bromku izopropylomagnezu (40 ml, 2M, 80 mmoli) w tetrahydrofuranie. Po mieszaniu przez 15 minut wkroplono w ciągu 15 minut roztwór esteu dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (3,78 g, 10,4 mmola) w tetrahydrofuranie (50 ml). Po mieszaniu przez 16 godzin mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej. Następnie w trakcie intensywnego mieszania z zasysaniem powietrza dodano roztworu chlorku amonu (5%) w wodnym roztworze amoniaku (5%). Mieszaninę wyekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto kolejno wodnym roztworem amoniaku (5%) i solanką, a potem wysuszono nad siarczanem magnezu. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (żel krzemionkowy, 1,7% metanol w dichlorometanie), w wyniku czego otrzymano surowy ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego (2,85 g, 25%).
(b) Ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego
Do roztworu estru dietylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego (1,569 g, 3,84 mmola) w mieszaninie dichlorometanu (6 ml) i etanolu (12 ml, 95%) wkroplono w ciągu 40 minut i w 0°C roztwór wodorotlenku potasu (0,272 g, 85%, 4,2 mmola) w etanolu (6 ml, 95%). Po mieszaniu jeszcze przez 1 godzinę mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej i mieszanie kontynuowano przez 18 godzin. Następnie dodano wody (30 ml) i dichlorometanu (30 ml) i po mieszaniu przez 3 minuty warstwy rozdzielono. Warstwę organiczną wyekstrahowano jednokrotnie wodą i połączone warstwy wodne jednokrotnie przemyto eterem.
PL 200 932 B1
Następnie dodano wodnego roztworu kwasu cytrynowego (10%) w celu doprowadzenia pH do 4 i roztwór wyekstrahowano trzykrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką wysuszono nad siarczanem magnezu. Po odparowaniu rozpuszczalnika otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego (0,94 g, 64%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]akrylowego
Do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]malonowego (0,94 g, 2,47 mmola) w dichlorometanie (4 ml) dodano w 0°C wodnego roztworu formaldehydu (0,18 ml, 37%) i dimetyloaminy (0,23 ml, 2,32 mmola). Po intensywnym mieszaniu mieszaniny przez 16 godzin dodano wody (30 ml) i octanu etylu (30 ml). Po mieszaniu przez minuty w temperaturze pokojowej warstwy rozdzielono i warstwę wodną wyekstrahowano dwukrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i solanką. Po wysuszeniu nad siarczanem sodu rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (żel krzemionkowy, 1,7% metanol w dichlorometanie), w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]akrylowego (0,24 g, 28%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)4-metylopentanowego
Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonylopirydyn-3-ylo)-2-metylopropylo]akrylowego (0,431 g, 1,24 mmola) rozpuszczono w kwasie tiolooctowym (4 ml) i w atmosferze argonu dodano trietyloaminy (0,21 ml, 1,5 mmola). Mieszaninę ogrzewano do 60°C. Po 24 godzinach dodano kwasu tiolooctowego (2 ml). Po dodatkowych 20 godzinach mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej i powoli dodano nasyconego roztworu wodorowęglanu sodu w celu otrzymania obojętnego roztworu. Ten roztwór wyekstrahowano trzykrotnie octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość oczyszczono drogą chromatografii kolumnowej (żel krzemionkowy, 1,7% metanol w dichlorometanie) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-4-metylopentanowego (0,284 g, 54%) w postaci mieszaniny diastereoizomerów (6:1).
(e) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy
Ester etylowy kwasu acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-4-metylopentanowego (0,085 g, 0,20 mmola) rozpuszczono w kwasu chlorowodorowym nasyconym argonem (5 ml, 37%) i w atmosferze argonu całość ogrzewano do temperatury wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 5,5 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem i wysuszeniu w 45°C/30 Pa otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (0,058 g, 99%) jako mieszaninę diastereoizomerów (6:1).
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,81 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 6,98 (m, 1H), 3,18 - 3,06 (m, 1H), 2,93 - 2,40 (m, 3H), 2,23 -1,93 (m, 1H), 0,93 - 0,74 (m, 6H).
MS 255 (M+H).
P r z y k ł a d 29
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-3-fenylopropionowy (a) Ester dietylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego
W trakcie intensywnego mieszania do suspensji cyjanku miedzi(I) (1,71 g, 19,06 mmola) w bezwodnym THF (18 ml) w 0°C i w atmosferze argonu dodano roztworu bromku fenylomagnezu (12,7 ml 3M roztworu w eterze, 38,11 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej i otrzymano ciemnobrązowy roztwór. Po 150 minutach dodano w 0°C roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (1,74 g, 4,76 mmola) w bezwodnym THF (19 ml). Mieszaninę mieszano przez 3 dni, a następnie dodano wodnego roztworu chlorku amonu. Warstwę wodną oddzielono i wyekstrahowano octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką i wysuszono. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią i otrzymaną pozostałość przeprowadzono w stan suspensji w heksanie. Po odsączeniu kryształów otrzymano ester dietylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego (1,85 g, 88%).
(b) Ester monoetylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego
PL 200 932 B1
Roztwór KOH (0,266 g, 4,11 mmola) w etanolu (14 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego (1,82 g, 4,11 mmola) w etanolu (12 ml) i chlorku metylenu (13 ml). Mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Dodano w 0°C więcej KOH (80 mg rozpuszczono w 3 ml etanolu). Mieszaninę reakcyjną mieszano jeszcze przez 18 godzin. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i do pozostałości dodano octanu etylu i 0,5M roztworu HCl. Warstwę organiczną przemyto solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią, pozostałość przeprowadzono w stan suspensji w heksanie. Po odsączeniu kryształów otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego (1,7 g, 98%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]akrylowego
Dietyloaminę (0,52 ml, 5,04 mmola) dodano w 0°C do mieszaniny estru monoetylowego kwasu
2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]malonowego (1,7 g, 4,1 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,42 ml, 5,6 mmola) w chlorku metylenu (6,5 ml). Mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, a następnie rozcieńczono octanem etylu. Warstwę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]-akrylowego (0,36 g, 23%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-3-fenylopropionowego
W 0°C i w atmosferze argonu trietyloaminę (0,105 g, 1,04 mmola) dodano do roztworu estru etylowego kwasu 2-[(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)fenylometylo]akrylowego (0,36 g, 0,94 mmola) w kwasie tiooctowym (4 ml). Mieszaninę ogrzewano w 45°C przez 24 godziny. Dodano octanu etylu i fazę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (toluen/octan etylu, 1:0 5:1), w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-3-fenylopropionowego (0,314 g, 73%).
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-3-fenylopropionowy
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-3-fenylopropionowego (58 mg, 0,125 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (3,0 ml). W atmosferze argonu roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 130 minut. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (41 mg, 100%).
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 8,03-7,83 (m, 2H), 7,5-7,3 (m, 5H), 7,05-6,95 (m, 1H), 4,27-4,15 (m, 1H), 3,6-3,45 (m, 1H), 2,84-2,58 (m, 2H).
MS (+) 289 (M+1).
P r z y k ł a d 30
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy (a) Ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego
W trakcie intensywnego mieszania do suspensji cyjanku miedzi(I) (0,66 g, 7,32 mmola) w bezwodnym THF (5 ml) w 0°C i w atmosferze argonu dodano roztworu bromku benzylomagnezu (5 ml 2,93M roztworu w eterze, 14,64 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej i otrzymano ciemnobrązowy roztwór. Po 60 minutach dodano w 0°C roztworu estru dietylowego kwasu 2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometyleno)malonowego (0,67 g, 1,83 mmola) w bezwodnym THF (4 ml). Mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej, a następnie dodano wodnego roztworu chlorku amonu. Warstwę wodną oddzielono i wyekstrahowano octanem etylu. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką i wysuszono. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią i otrzymaną pozostałość oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/octan etylu, 1:0 100:15), w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego (0,44 g, 53%).
(b) Ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego
Roztwór KOH (0,067 g, 1,03 mmola) w etanolu (3 ml) dodano w 0°C do roztworu estru dietylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego (0,44 g,
PL 200 932 B1
0,96 mmola) w etanolu (3 ml) i chlorku metylenu (2 ml). Mieszaninę mieszano przez 48 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i do pozostałości dodano octanu etylu i 0,5M roztworu HCl. Warstwę organiczną przemyto solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego (0,37, 90%).
(c) Ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]akrylowego
Do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]malonowego (0,37 g, 0,86 mmola) i 37% wodnego roztworu formaldehydu (0,22 ml, 2,9 mmola) w chlorku metylenu (3,5 ml) dodano w 0°C dietyloaminy (0,27 ml, 2,59 mmola). Mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Dodano więcej formaldehydu (0,24 ml) i dietyloaminy (0,24 ml). Mieszanie kontynuowano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, a następnie dodano octanu etylu i wody. Warstwę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]akrylowego (0,34 g, 99%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-4-fenylomasłowego
W 0°C i w atmosferze argonu do roztworu estru etylowego kwasu 2-[1-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-fenyloetylo]akrylowego (0,34 g, 0,86 mmola) w kwasie tiooctowym (3,5 ml) dodano trietyloaminy (0,096 g, 0,95 mmola). Mieszaninę ogrzewano w 45°C przez 24 godziny. Dodano octanu etylu i fazę organiczną przemyto nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, solanką i wysuszono. Po przesączeniu i odparowaniu pod próżnią surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/octan etylu, 1:0 100:5), w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-4-fenylomasłowego (0,264 g, 65%).
(e) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy
Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-4-fenylomasłowego (0,14 g, 0,3 mmola) rozpuszczono w stężonym HCl (5,0 ml). W atmosferze argonu roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 4,5 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (100 mg, 98%).
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 7,90-7,83 (m, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,34-7,18 (m, 3H), 7,17-7,06 (m, 2H), 7,01-6,9 (m, 1H) , 3,4-2,5 (m, 6H).
MS (+) 303(M+1)
P r z y k ł a d 31
Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy (a) (E,Z)-2-({6-[(tert-Butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}metylo)-5-fenylo-2-pentenian etylu
Do suspensji NaH (310 mg, 7,12 mmola, 55% w oleju mineralnym) w THF (25 ml) w 0°C i w atmosferze argonu dodano roztworu (3-{6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}-2-(dietoksyfosforylo)propanianu etylu (2,55 g, 5,95 mmola) w THF (25 ml). Po 1 godzinie wkroplono roztwór 3-fenylopropanalu (1,59 g, 11,9 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 17 godzin w temperaturze pokojowej, a następnie zadano NH4Cl (50 ml, nasyconym wodnym roztworem). Mieszaninę wyekstrahowano octanem etylu, warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono (Na2SO4), przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii kolumnowej (CH2Cl2/EtOAc 20:1 10,1) otrzymano (E,Z)-2-({6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}metylo)-5-fenylo-2-pentenian etylu (2,49 g, 100%).
(b) 3-(Acetylosulfanylo)-2-({6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}metylo)-5-fenylopentanian etylu
Trietyloaminę (1,22 ml, 0,617 mmola) dodano w 40° do roztworu (E,Z)-2-({6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}-metylo)-5-fenylo-2-pentenianu etylu (400 mg, 0,597 mmola) w kwasie tiooctowym (10 ml). Po mieszaniu przez 90 godzin mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po chromatografii kolumnowej (CH2Cl2/EtOAc 20:1 10,1), a następnie (toluen/EtOAc, 10:1), a potem (heptan/EtOAc 2:1) otrzymano 3-(acetylosulfanylo)-2-({6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3pirydynylo}metylo)-5-fenylopentanian etylu (126 mg, 27%) w postaci mieszaniny diastereoizomerycznej (1:1).
PL 200 932 B1 (c) Kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkapto-5-fenylopentanowy
W atmosferze argonu 3-(acetylosulfanylo)-2-({6-[(tert-butoksykarbonylo)amino]-3-pirydynylo}-metylo)-5-fenylopentanian etylu (9 mg, 18,5 μ^Ό^) rozpuszczono w stężonym HCl (1 ml). Roztwór ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 4,5 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (6,4 mg, 98%) jako mieszaninę diastereoizomeryczną (1:1).
1H NMR (400 MHz, D2O): δ 1,78-2,20 (m, 2H), 2,70-3,04 (m, 6H), 6,88, 6,92 (2d, 1H), 7,22-7,39 (m, 5H), 7,52, 7,54 (2d, 1H), 7,69, 7,75 (2d, 1H).
MS (+) 317 (M+1).
P r z y k ł a d 32
Ester etylowy kwasu 3-[3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-etoksykarbonylopropylodisulfanylo]-2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)propionowego (a) Ester etylowy kwasu 3-[3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-etoksykarbonylopropylodisulfanylo]-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)propionowego
Ester etylowy kwasu 3-acetylosulfanylo-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)propionowego (150 mg, 0,392 mmola) rozpuszczono w etanolu (15 ml) nasyconym NH3 (gaz). Po mieszaniu przez 160 minut mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w EtOH (10 ml), po czym dodano roztworu I2 w EtOH (0,5M, 0,784 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut w temperaturze pokojowej, a następnie rozcieńczono CH2Cl2, przemyto nasyconym wodnym roztworem Na2S2O5 i przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCO3, wysuszono, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 3-[3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-etoksykarbonylopropylodisulfanylo]-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)propionowego (130 mg, 98%).
(b) Ester etylowy kwasu 3-[3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-etoksykarbonylopropylodisulfanylo]-2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)propionowego
Do roztworu estru etylowego kwasu 3-[3-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylo)-2-etoksykarbonylopropylodisulfanylo]-2-(6-tert-butoksykarbonyloaminopirydyn-3-ylometylo)propionowego (130 mg, 0,191 mmola) w octanie etylu (7 ml) dodano w 0°C octanu etylu nasyconego HCl (gaz) (15 ml). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania się do temperatury pokojowej i mieszano ją przez 19 godzin, a potem odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w wodzie, dodano nasyconego wodnego roztworu Na2CO3 i fazę wodną wyekstrahowano CH2Cl2. Warstwę organiczną wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano związek tytułowy (90 mg, 98%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1,19 (t, 3H), 1,20 (t, 3H), 2,68-2,86 (m, 6H), 2,90-3,01 (m, 4H), 4,07-4,14 (m, 4H), 6,45 (d, 2H), 7,28 (m, 2H), 7,87 (s, 2H).
MS (+) 479 (M+1).
P r z y k ł a d 33
Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy (a) N-(5-Butyrylopirydyn-2-ylo)-2,2-dimetylopropionoamid
Roztwór N-(5-bromopirydyn-2-ylo)-2,2-dimetylopropionoamidu (3,582 g, 13,9 mmola) w eterze dietylowym (36 ml) ochłodzono do -78°C i w atmosferze argonu wkroplono n-butylolit (1,6M, 19 ml, 30,4 mmola) w ciągu 20 minut. Po 5 minutach od zakończenia dodawania mieszaninę pozostawiono do ogrzania się do 0°C. Następnie dodano w czasie mniejszym niż 5 minut N-metoksy-N-metylobutyroamidu (3,65 g, 27,8 mmola) i mieszanie kontynuowano przez 45 minut. Przejrzysty roztwór zakwaszono z użyciem 2N roztworu kwasu chlorowodorowego do pH 2. Po intensywnym mieszaniu przez 15 minut mieszaninę zobojętniono z użyciem wodorowęglanu sodu i warstwy rozdzielono. Warstwę wodną wyekstrahowano trzykrotnie eterem dietylowym. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką, wysuszono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymany olej wysuszono w próżniowej pompie olejowej w celu usunięcia nadmiaru reagenta. Po chromatografii rzutowej (dichlorometan/metanol 60:1) otrzymano surowy N-(5-butyrylopirydyn-2-ylo)-2,2-dimetylopropionoamid (2,47 g, 71%) w postaci jasnopomarańczowego oleju, który nie był dalej oczyszczany.
(b) N-[5-(1-Hydroksybutylo)pirydyn-2-ylo]-2,2-dimetylopropionoamid
Do roztworu N-(5-butyrylopirydyn-2-ylo)-2,2-dimetylopropionoamidu (2,47 g, 9,95 mmola) w etanolu (20 ml) dodano borowodorku sodu (185 mg, 5,0 mmoli). Po mieszaniu przez 40 minut w temperaturze pokojowej mieszaninę zakwaszono z użyciem 1N roztworu kwasu chlorowodorowego do pH 2 i całość mieszano przez 10 minut. Po zobojętnieniu z użyciem wodorowęglanu sodu mieszaninę
PL 200 932 B1 wyekstrahowano trzykrotnie dichlorometanem. Połączone ekstrakty organiczne przemyto dwukrotnie wodorowęglanem sodu i jednokrotnie solanką. Po wysuszeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (dichlorometan/metanol 30:1), w wyniku czego otrzymano N-[5-(1-hydroksybutylo)pirydyn-2-ylo]-2,2-dimetylopropionoamid (1,025 g, 41%).
(c) Ester monoetylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo]malonowego
Do roztworu N-[5-(1-hydroksybutylo)pirydyn-2-ylo]-2,2-dimetylopropionoamidu (1,025 g, 4,09 mmola) w trichlorometanie (12 ml) dodano chlorku tionylu (6 ml) i mieszaninę ogrzewano do 55°C przez 1 godzinę. Ten roztwór zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano surowy chlorowodorek N-[5-(1-chlorobutylo)pirydyn-2-ylo]-2,2-dimetylopropionoamidu w postaci bezbarwnej substancji stałej.
Do roztworu malonianu dietylu (1,31 g, 8,2 mmola) w dimetyloformamidzie (20 ml) dodano wodorku sodu (60% dispersja w oleju mineralnym, 350 mg, 8,7 mmola) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Po ochłodzeniu do 0°C dodano roztworu pośredniego chlorowodorku N-[5-(1-chlorobutylo)pirydyn-2-ylo]-2,2-dimetylopropionoamidu w dimetyloformamidzie (5 ml). Po mieszaniu przez 1 godzinę rozpuszczalnik zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano octanu etylu (25 ml), a następnie roztworu chlorku amonu (półnasycony) w celu zobojętnienia. Warstwy rozdzielono, warstwę wodną wyekstrahowano octanem etylu i połączone warstwy organiczne przemyto trzykrotnie wodą, solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość przesączono przez warstwę żelu krzemionkowego z użyciem mieszaniny dichlorometanu/metanolu (30:1) jako rozpuszczalnika.
Ten surowy ester dietylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo}malonowego rozpuszczono w mieszaninie dichlorometanu (2,5 ml) i etanolu (5 ml) w 0°C, a następnie dodano roztworu wodorotlenku potasu (87%, 111 mg, 5,4 mmola) w etanolu (4 ml). Mieszaninę pozostawiono do powolnego ogrzania się do temperatury pokojowej i mieszanie kontynuowano przez 24 godziny. Następnie dodano dichlorometanu (20 ml), wody (20 ml) i solanki (3 ml). Mieszaninę mieszano intensywnie przez 2 minuty. Warstwy rozdzielono i warstwę wodną przemyto dichlorometanem. Połączone warstwy wodne zakwaszono (pH 5) z użyciem kwasu cytrynowego i wyekstrahowano trzykrotnie dichlorometanem. Połączone warstwy organiczne przemyto solanką i wysuszono. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano surowy ester monoetylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo)malonowego (258 mg, 41%).
(d) Ester etylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo}akrylowego
Do roztworu estru monoetylowego kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo}malonowego (712 mg, 1,95 mmola) w THF (6,5 ml) w 0°C dodano w ciągu 5 minut formaldehydu (37% w wodzie, 0,3 ml). Mieszanie kontynuowano przez 10 minut, a następnie wkroplono w ciągu 10 minut piperydynę (0,26 ml, 2,63 mmola). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania się w ciągu nocy do temperatury pokojowej. Po 14 godzinach mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do jednej trzeciej początkowej objętości, a potem dodano eteru i wody (15 ml w każdym przypadku). Po 2 minutach intensywnego mieszania warstwy rozdzielono i warstwę wodną wyekstrahowano eterem, a następnie połączone warstwy organiczne przemyto wodą, 4% kwasem cytrynowym, wodą i solanką. Po wysuszeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymano ester etylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo}akrylowego (550 mg, 85%) w postaci bezbarwnej substancji stałej.
(e) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3ylo]heksanowego
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-{1-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]butylo}akrylowego (550 mg, 1,65 mmola) rozpuszczono w kwasie tiolooctowym (4 ml) i wkroplono trietyloaminę (0,24 ml, 1,7 mmola). Po mieszaniu przez 16 godzin w 50°C dodano kwasu tiolooctowego (2 ml) i mieszanie kontynuowano przez 14 godzin. Roztwór ochłodzono do temperatury pokojowej i zobojętniono z użyciem roztworu wodorowęglanu sodu. Mieszaninę wyekstrahowano trzykrotnie octanem etylu, połączone ekstrakty przemyto roztworem wodorowęglanu sodu i solanką. Po wysuszeniu i zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (dichlorometan/metanol, 60:1), w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]heksanowego (619 mg, 92%) w postaci lepkiego oleju.
PL 200 932 B1 (f) Kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy
W atmosferze argonu ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-[6-(2,2-dimetylopropionyloamino)pirydyn-3-ylo]heksanowego (40,4 mg, 99 μmoli) rozpuszczono w wodnym roztworze kwasu chlorowodorowego (37%, 4,2 ml) i całość ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 2 godziny. Po zatężeniu pod zmniejszonym ciśnieniem (39,9 Pa, 40°C) otrzymano związek tytułowy w postaci chlorowodorku (28 mg, 97%).
1H NMR (300 MHz, D2O): δ 7,86 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,02 (t, 1H), 2,98-2,42 (m, 4H) 1,85-1,54 (m, 2H), 1,19-1,00 (m, 2H), 0,87-0,77 (m, 3H).
MS (+) 255 (M+1).
P r z y k ł a d 34
Kwas 3-(2-aminotiazol-5-ilo)-2-merkaptometylopropionowy (a) Ester dietylowy kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometyleno)malonowego
Do roztworu 2-aminotiazolo-5-karbaldehydu (47%; 6 g; 23 mmola) w CH2Cl2 (30 ml) i DMF (30 ml) dodano sit molekularnych 4A, malonianu dietylu (3,5 ml; 23 mmole), piperydyny (1,1 ml; 11,5 mmola) i kwasu octowego (0,7 ml; 11,5 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 96 godzin. Następnie dodano EtOAc i mieszaninę reakcyjną przesączono przez celit, aby usunąć wytrącony osad. Do przesączu dodano EtOAc (500 ml), a potem fazę organiczną przemyto NHCO3 i solanką. Fazę organiczną wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano 4,9 g surowego produktu. Do roztworu surowego produktu w etanolu dodano eteru naftowego, a następnie przesączono i otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometyleno)malonowego (1,13 g, 18%).
(b) Ester dietylowy kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometylo)-malonowego
W trakcie mieszania do roztworu estru dietylowego kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometyleno)malonowego (1,13 g; 4,2 mmola) w etanolu w 0°C dodano NaCNBH3 (1,88 g; 29,9 mmola). Wartość pH roztworu monitorowano przez dodawanie małej ilości zieleni bromokrezolowej. Wkraplano stężony kwas chlorowodorowy aż do uzyskania przez roztwór koloru żółtego. Łaźnię lodową usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 5 godzin. Dodano wody i produkt wyekstrahowano CH2Cl2. Połączone fazy organiczne wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometylo)malonowego (1 g, 87,8%).
(c) Ester dietylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego
BOC2O (0,6 g; 27,5 mmola) dodano w 0°C do roztworu trietyloaminy (0,4 ml; 30,1 mmola),
4-(dimetyloamino)pirydyny (0,34 g; 27,8 mmola) i estru dietylowego kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometylo)malonowego (0,75 g, 27,5 mmola) w CH2Cl2 (5 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano w 0°C dodatkowo BOC2O (0,15 g; 0,7 mmola) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Następnie dodano CH2Cl2 i fazę organiczną wyekstrahowano 0,3M roztworem KHSO4 i solanką. Fazę organiczną wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano 0,78 g surowego produktu. Analiza metodą NMR wykazała, że pozostało około 40% estru dietylowego kwasu 2-(2-aminotiazol-5-ilometylo)malonowego. Do roztworu tego surowego produktu (0,78 g), trietyloaminy (0,4 ml; 30,1 mmola), 4-(dimetyloamino)pirydyny (0,34 g; 27,8 mmola) w CH2Cl2 (5 ml) dodano w 0°C BOC2O (0,6 g; 27,5 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i procedurę obróbki powtórzono. Surowy produkt (1 g) oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc; 1:1) i HPLC, w wyniku czego otrzymano ester dietylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego (184 mg, 17,9%).
(d) Ester monoetylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego
Ester dietylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego (158 mg;
0,43 mmola) rozpuszczono w etanolu (1 ml) i THF (0,5 ml), a następnie dodano w 0°C roztworu KOH (24 mg; 0,43 mmola) w etanolu (0,14 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 96 godzin, a następnie wylano na lód-wodę. Fazę wodną wyekstrahowano eterem dietylowym, zakwaszono do pH 3 z użyciem 0,5M roztworu HCl i wyekstrahowano eterem dietylowym. Połączone fazy organiczne wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano ester monoetylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego (97 mg, 66,4%).
(e) Ester etylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)akrylowego
Do mieszaniny estru monoetylowego kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)malonowego (94 mg; 0,27 mmola), 36% wodnego roztworu formaldehydu (36 gl; 1,2 mmola), CH2Cl2 (0,2 ml) i wody (0,2 ml) dodano w 0°C dietyloaminy (30 gl; 0,40 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, a potem wylano na lód-wodę i wyekstrahowano CH2CH2.
PL 200 932 B1
Połączone fazy organiczne przemyto 5% NaHCO3, wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano ester etylowy kwasu 2-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)akrylowego (69 mg, 80,9%).
(f) Ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilo)propionowego
Trietyloaminę (32 gl; 0,23 mmola) dodano w 0°C do roztworu estru etylowego kwasu 2-(2-tertbutoksykarbonyloaminotiazol-5-ilometylo)akrylowego (67 mg; 0,21 mmola) w kwasie tiooctowym (0,4 ml). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 48 godzin, a następnie wylano na lód-wodę. Warstwę wodną wyekstrahowano CH2CH2. Połączone fazy organiczne przemyto nasyconym roztworem NaHCO3, wysuszono i zatężono, w wyniku czego otrzymano 190 mg surowego produktu. Surowy produkt oczyszczono drogą chromatografii rzutowej (heptan/EtOAc: 1:0 68:32) i otrzymano ester etylowy kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilo)propionowego (43 mg, 51,6%).
(g) Kwas 3-(2-aminotiazol-5-ilo)-2-merkaptometylopropionowy
Roztwór estru etylowego kwasu 2-acetylosulfanylometylo-3-(2-tert-butoksykarbonyloaminotiazol-5-ilo)propionowego (43 mg; 0,11 mmola) w stężonym HCl (1,5 ml) ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i w atmosferze argonu przez 1,5 godziny. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ochłodzenia się do temperatury pokojowej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 30 mg surowego produktu. Surowy produkt oczyszczono drogą preparatywnej HPLC i otrzymano związek tytułowy (8 mg: 21%) w postaci chlorowodorku.
1H NMR (500 MHz, D2O): δ 2,75-3,1 (m, 5H), 7,0 (br s, 1H).
MS (+) 219 (M+1).
Skróty
Ac = octan
AIBN = α,α'-azoizobutyronitryl
Bn = benzyl
Bu = butyl
Bz = benzoil
DCC = dicykloheksylokarbodiimid
DIAD = azodikarboksylan diizopropylu
DIPEA = diizopropyloetyloamina
DMAP = N,N-dimetyloaminopirydyna
DME = 1,2-dimetoksyetan
DMF = dimetyloformamid
DMSO = dimetylosulfotlenek
EDC = 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimid
Et = etyl
EtOAc = octan etylu
EtOH = etanol
HOAc = kwas octowy
HOBt = 1-hydroksybenzotriazol
HPLC = wysokosprawana chromatografia cieczowa
KHMDS = bis(trimetylosililo)amidek potasu
LDA = diizopropyloamidek litu
MCPBA = kwas 3-chloronadbenzoesowy
Me = metyl
MeOH = metanol
PMB = 4-metoksybenzyl
Ph = fenyl
Pr = propyl
PyBOP = heksafluorofosforan (benzotriazol-1-iloksy)tri pirolidynofosfoniowy
TEA = trietyloamina
TFA = kwas trifluorooctowy
THF = tetrahydrofuran
TOS = tolueno-4-sulfonyl

Claims (9)

1. Nowe związki o ogólnym wzorze (I) w którym
R1 oznacza cyklopentyl, cyklopentenyl, pirydyl, pirymidynyl, piperydynyl lub tiazolil,
R2 oznacza atom wodoru, atom fluoru lub C1-alkil,
R3 oznacza COOH,
R4 oznacza SH,
X oznacza CHZ,
Y oznacza CHZ,
Z niezależnie oznacza atom wodoru lub C1-C6-alkil; przy czym C1-C6-alkil, cyklopentyl, cyklopentenyl lub tiazolil jest ewentualnie niezależnie podstawiony jednym lub wiekszą liczbą niepodstawionych podstawników wybranych z grupy obejmującej C1-C6-alkil, C1-C6-alkilo-CO-, grupę aminową, ugrupowanie C6-C14-aromatycznego węglowodoru i atom chlorowca;
oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole lub solwaty albo solwaty takich soli.
2. Związek według zastrz. 1, wybrany z grupy obejmującej kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylopropionowy, kwas 3-merkapto-5-metylo-2-piperydyn-4-ylometyloheksanowy, kwas 3-merkapto-4-fenylo-2-piperydyn-4-ylometylomasłowy, kwas 2-merkaptometylo-3-piperydyn-4-ylomasłowy, kwas 3-(cis-4-aminocyklopent-2-enylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(2-aminotiazol-5-ilo)-2-merkaptometylopropionowy, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole lub solwaty albo solwaty tych soli.
3. Związek wybrany z grupy obejmującej kwas 3-(1-acetylopiperydyn-4-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(2-aminopirydyn-4-ylometylo)-3-merkaptopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-2-metylopropionowy, kwas 3-(6-amino-5-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-amino-4-metylopirydyny-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylomasłowy, kwas 3-(6-amino-2-metylopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo)-3-merkaptopentanowy, kwas 3-(6-amino-5-chloropirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopropionowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-metylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometylo-4-fenylomasłowy, kwas 2-(6-aminopirydyn-3-ylometylo) -3-merkapto-5-fenylopentanowy, kwas 3-(6-aminopirydyn-3-ylo)-2-merkaptometyloheksanowy, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole lub solwaty albo solwaty tych soli.
4. Środek farmaceutyczny zawierający substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalną substancję pomocniczą, rozcieńczalnik lub nośnik, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek zdefiniowany w zastrz. 1.
5. Środek farmaceutyczny zawierający substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalną substancję pomocniczą, rozcieńczalnik lub nośnik, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek zdefiniowany w zastrz. 3.
PL 200 932 B1
6. Związek zdefiniowany w zastrz. 1 do zastosowania jako lek.
7. Związek zdefiniowany w zastrz. 3 do zastosowania jako lek.
8. Zastosowanie związku zdefiniowanego w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia lub profilaktyki zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwości.
9. Zastosowanie związku zdefiniowanewgo w zastrz. 3 do wytwarzania leku do leczenia lub profilaktyki zakrzepicy i stanów nadmiernej krzepliwości.
PL354360A 1999-05-03 2000-05-03 Nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków PL200932B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9901573A SE9901573D0 (sv) 1999-05-03 1999-05-03 New compounds
PCT/SE2000/000834 WO2000066557A1 (en) 1999-05-03 2000-05-03 New compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL354360A1 PL354360A1 (pl) 2004-01-12
PL200932B1 true PL200932B1 (pl) 2009-02-27

Family

ID=20415426

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL354360A PL200932B1 (pl) 1999-05-03 2000-05-03 Nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków

Country Status (27)

Country Link
US (1) US7071175B1 (pl)
EP (1) EP1180098A1 (pl)
JP (1) JP2002543184A (pl)
KR (1) KR100755152B1 (pl)
CN (1) CN1263739C (pl)
AR (1) AR034241A1 (pl)
AU (1) AU771760B2 (pl)
BR (1) BR0010257A (pl)
CA (1) CA2371213C (pl)
CZ (1) CZ20013930A3 (pl)
EE (1) EE04490B1 (pl)
HK (1) HK1042303A1 (pl)
HU (1) HUP0202876A3 (pl)
IL (1) IL145954A0 (pl)
IS (1) IS6139A (pl)
MX (1) MXPA01011055A (pl)
MY (1) MY128014A (pl)
NO (1) NO321377B1 (pl)
NZ (1) NZ515062A (pl)
PL (1) PL200932B1 (pl)
RU (1) RU2244708C2 (pl)
SE (1) SE9901573D0 (pl)
SK (1) SK15462001A3 (pl)
TR (1) TR200103153T2 (pl)
TW (1) TWI232105B (pl)
WO (1) WO2000066557A1 (pl)
ZA (1) ZA200108968B (pl)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6828566B2 (en) * 1997-07-22 2004-12-07 Hitachi Ltd Method and apparatus for specimen fabrication
SE9901572D0 (sv) * 1999-05-03 1999-05-03 Astra Ab New compounds
ATE239741T1 (de) 1999-09-14 2003-05-15 Meiji Seika Kaisha Derivate der phosphonsäure zur inhibierung von carboxypeptidase b
SE0103272D0 (sv) 2001-09-28 2001-09-28 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US6713496B2 (en) 2002-01-22 2004-03-30 Pfizer Inc 3-(imidazolyl)-2-alkoxypropanoic acids
WO2003061653A1 (en) 2002-01-22 2003-07-31 Pfizer Limited 3-(imidazolyl)-2-aminopropanoic acids for use as tafi-a inhibitors for the treatment of thrombotic diseases
EP1497300A2 (en) * 2002-03-21 2005-01-19 Schering Aktiengesellschaft Plasma carboxypeptidase b inhibitors
EP1511729A4 (en) 2002-05-22 2006-09-06 Errant Gene Therapeutics Llc HISTONDEACETYLASEINHIBITORS BASED ON ALPHACHALCOGEN METHYL CARBONYL COMPOUNDS
SE0201837D0 (sv) * 2002-06-14 2002-06-14 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7576206B2 (en) 2003-08-14 2009-08-18 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7223745B2 (en) 2003-08-14 2007-05-29 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7468383B2 (en) 2005-02-11 2008-12-23 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
EA201100311A1 (ru) 2008-09-11 2011-10-31 Пфайзер Инк. Амидные производные гетероарилов и их применение в качестве активаторов глюкокиназы
CA2741783A1 (en) 2008-10-29 2010-05-06 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Compounds having tafia inhibitory activity
CA2748587A1 (en) 2009-01-20 2010-07-29 Pfizer Inc. Substituted pyrazinone amides
AU2010222589B2 (en) 2009-03-11 2012-08-16 Pfizer Inc. Benzofuranyl derivatives used as glucokinase inhibitors
CN102725300B (zh) 2009-12-22 2015-03-11 赛福伦公司 蛋白酶体抑制剂及其制备、纯化、和应用的方法
CN102249992A (zh) * 2011-07-05 2011-11-23 广东工业大学 一种制备2-氨基异烟酸的方法
CN103987664B (zh) 2011-12-06 2017-03-08 德尔塔阀门公司 龙头中的臭氧分配
CN105263928A (zh) 2013-06-10 2016-01-20 赛诺菲 作为TAFIa的抑制剂的大环脲衍生物、其制备及其作为药物的用途
AR099134A1 (es) * 2014-01-24 2016-06-29 Hoffmann La Roche Procedimiento para la preparación de n-[(3-aminooxetán-3-il)metil]-2-(1,1-dioxo-3,5-dihidro-1,4-benzotiazepín-4-il)-6-metil-quinazolín-4-amina
CN115093008B (zh) 2015-12-21 2024-05-14 德尔塔阀门公司 包括消毒装置的流体输送系统
USD879309S1 (en) 2018-08-09 2020-03-24 Scott Specialties, Inc. Maternity support

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3091569A (en) 1960-08-26 1963-05-28 Mead Johnson & Co Mucolytic-nu-acylated sulfhydryl compositions and process for treating animal mucus
FR1393338A (fr) 1964-01-08 1965-03-26 Rech S Pharma Et Scient Nouveau dérivé de la cystéine et sa préparation
US3766206A (en) 1971-11-03 1973-10-16 Pfizer 18beta-glycyrrheting acid amides useful as antiulcer agents
FR2266502A1 (en) 1974-04-08 1975-10-31 Synpharm Sa N-(2-thenoyl)-cysteine and esters - with mucolytic activity, prepd. from cysteine (esters) and thenoyl chloride
US4113715A (en) 1977-01-17 1978-09-12 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid derivatives
US4177277A (en) 1977-01-17 1979-12-04 E. R. Squibb & Sons, Inc. Method for alleviating hypertension
JPS545949A (en) 1977-06-16 1979-01-17 Hisamitsu Pharmaceut Co Inc Novel cyclohexanecarboxylic acid and its derivatives
FR2430945A2 (fr) 1978-07-12 1980-02-08 Chauvin Blache Lab Nouveaux derives de la cysteine, leur procede de fabrication et leur application en therapeutique
US4537727A (en) 1982-11-12 1985-08-27 Eli Lilly And Company Process for recovering 2-acetylthiomethyl-5-aminopentanoic acid
EP0136883B1 (en) * 1983-10-03 1987-11-25 E.R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
WO1986004580A1 (fr) * 1985-02-08 1986-08-14 Takeda Chemical Industries, Ltd. Derives de piperidine
US4708965A (en) 1985-09-16 1987-11-24 Morgan Lee R Method of treating herpes virus infections with N,N'-diacetylcystine and derivatives
JPS62270555A (ja) * 1986-05-19 1987-11-24 Dainippon Pharmaceut Co Ltd スルホン酸誘導体およびその塩
EP0318859A3 (en) 1987-12-03 1990-08-16 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. N-substituted mercaptopropanamide derivatives
JPH01254654A (ja) * 1988-04-01 1989-10-11 Dainippon Pharmaceut Co Ltd スルホン酸の誘導体及びその塩
EP0361365A1 (en) 1988-09-30 1990-04-04 E.R. SQUIBB & SONS, INC. Aminobenzoic and aminocyclohexane-carboylic acid compounds, compositions, and their method of use
DE3838467C2 (de) 1988-11-12 1998-12-10 Agfa Gevaert Ag Fotografisches Aufzeichnungsmaterial
TW230771B (pl) 1990-08-09 1994-09-21 Sankyo Co
IT1249650B (it) 1991-05-29 1995-03-09 Poli Ind Chimica Spa N-(5-tioxo-l-prolil)-l-cisteina e suoi derivati, loro preparazione ed impiego terapeutico
GB9122016D0 (en) 1991-10-16 1991-11-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
IT1266571B1 (it) * 1993-07-30 1997-01-09 Zambon Spa Derivati della beta-mercapto-propanammide utili nel trattamento delle malattie cardiovascolari
US5470834A (en) * 1993-10-06 1995-11-28 Florida State University Sulfoximine and suldodiimine matrix metalloproteinase inhibitors
DE4441873A1 (de) * 1994-11-24 1996-05-30 Wella Ag Mittel zur dauerhaften Haarverformung
JP3874455B2 (ja) * 1996-06-27 2007-01-31 新日本製鐵株式会社 フィブリノーゲン受容体拮抗物質およびそれを有効成分とする医薬製剤

Also Published As

Publication number Publication date
HK1042303A1 (zh) 2002-08-09
IL145954A0 (en) 2002-11-10
CN1358174A (zh) 2002-07-10
EE04490B1 (et) 2005-06-15
AU4790200A (en) 2000-11-17
NO20015383D0 (no) 2001-11-02
TR200103153T2 (tr) 2002-04-22
SE9901573D0 (sv) 1999-05-03
NO20015383L (no) 2001-12-21
IS6139A (is) 2001-11-01
KR100755152B1 (ko) 2007-09-04
CZ20013930A3 (cs) 2002-10-16
AR034241A1 (es) 2004-02-18
CA2371213C (en) 2009-11-10
ZA200108968B (en) 2003-09-05
SK15462001A3 (sk) 2002-11-06
EP1180098A1 (en) 2002-02-20
CN1263739C (zh) 2006-07-12
EE200100574A (et) 2003-02-17
AU771760B2 (en) 2004-04-01
BR0010257A (pt) 2002-02-13
MXPA01011055A (es) 2002-06-04
KR20020010630A (ko) 2002-02-04
HUP0202876A2 (hu) 2003-01-28
MY128014A (en) 2007-01-31
JP2002543184A (ja) 2002-12-17
PL354360A1 (pl) 2004-01-12
US7071175B1 (en) 2006-07-04
TWI232105B (en) 2005-05-11
CA2371213A1 (en) 2000-11-09
WO2000066557A1 (en) 2000-11-09
RU2244708C2 (ru) 2005-01-20
NZ515062A (en) 2004-04-30
NO321377B1 (no) 2006-05-02
HUP0202876A3 (en) 2005-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL200932B1 (pl) Nowe związki, środek farmaceutyczny i zastosowanie nowych związków
US8008325B2 (en) Plasma carboxypeptidase B inhibitors
KR20010024676A (ko) 신규 화합물
AU776797B2 (en) N-guanidinoalkylamides, their preparation, their use, and pharmaceutical preparations comprising them
US6737416B2 (en) Phosphonic acid derivative having inhibitory activity against carboxypeptidase B
CZ300365B6 (cs) Inhibitory faktoru VIIa, zpusob jejich prípravy a jejich použití
JP2005533064A (ja) ２，５−ジ置換３−メルカプトペンタン酸
SK15662001A3 (sk) Nové zlúčeniny
JP2003500389A (ja) α−アミノ−β−スルホニルヒドロキサム酸化合物
EP1526131A1 (en) Aminoalkyl-pyrazinones and -pyridones as thrombin inhibitors
EP3027611B1 (en) Macrocyclic urea derivatives as inhibitors of tafi a, their preparation and their use as pharmaceuticals
KR100377557B1 (ko) 아실 구아니딘 작용기를 갖는 선택적 트롬빈 억제제
AU726236B2 (en) New amidino derivatives and their use as thrombin inhibitors
EP1655296A1 (en) Thrombin inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20110503