[go: up one dir, main page]

KR102616819B1 - 폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents

폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102616819B1
KR102616819B1 KR1020197030848A KR20197030848A KR102616819B1 KR 102616819 B1 KR102616819 B1 KR 102616819B1 KR 1020197030848 A KR1020197030848 A KR 1020197030848A KR 20197030848 A KR20197030848 A KR 20197030848A KR 102616819 B1 KR102616819 B1 KR 102616819B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
gly
antibody
thr
leu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
KR1020197030848A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190133197A (ko
Inventor
알렉산더 프뢰르
Original Assignee
프로가스트린 에 캔서스 에스.에이 알.엘.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 프로가스트린 에 캔서스 에스.에이 알.엘. filed Critical 프로가스트린 에 캔서스 에스.에이 알.엘.
Publication of KR20190133197A publication Critical patent/KR20190133197A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102616819B1 publication Critical patent/KR102616819B1/ko
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57423—Specifically defined cancers of lung
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/26—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against hormones ; against hormone releasing or inhibiting factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3023—Lung
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/575—Hormones
    • G01N2333/595—Gastrins; Cholecystokinins [CCK]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 폐암의 예방 및 치료를 위한 조성물 및 방법에 관한 것이고, 여기서 상기 조성물은 프로가스트린에 결합하는 항체를 포함하고, 상기 방법은 프로가스트린에 결합하는 항체의 사용을 포함한다.

Description

폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법
본 발명은 암의 예방 및 치료에 관한 것이고, 보다 구체적으로 본 발명은 폐암의 예방 또는 치료를 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 조성물은 프로가스트린-결합 분자, 특히 항-hPG 항체를 포함하고, 본 발명에 따르는 방법은 프로가스트린-결합 분자, 및 특히 항-hPG 항체의 사용을 포함한다.
폐암은 세계에서 가장 치명적인 악성종양으로 남아 있다. 외과적 치료, 전신 치료, 및 방사선 치료에서의 개선에도 불구하고, 폐암으로 진단된 모든 환자의 5년 생존율은 15 내지 20%의 사이에 남아 있다.
폐암은, 2개의 주요 타입, 즉 소세포 폐암(SCLC) 및 비소세포 폐암(NSCLC)을 포함한다. SCLC는 모든 폐암의 15 내지 18%를 나타내고, NSCLC는 폐암의 약 80% 내지 85%를 점유한다. 아데노이드 낭포성 암종, 림프종 및 육종 등의 폐암의 다른 타입, 뿐만 아니라 과오종 등의 양성 폐 종양은 희귀하다.
소세포 및 비소세포 폐암은 상이하게 치료된다. 특히, SCLC는 폐암의 다른 세포형보다 화학요법 및 방사선 요법에 더욱 반응성이다. 그러나, SCLC는 진단시에 광범위하게 보급되는 경향이 크기 때문에, 치유를 달성하는 것은 곤란하다. 현재까지, 폐암의 광범위한 임상 실시로 해석되고 있는 분자 바이오마커는 없다. 치료는 암의 발생에 의존하고, 가능하게는 방사선 요법과 조합하여, 작은-국재화 종양을 위한 수술 또는 화학요법을 통상 포함한다.
따라서, 폐암을 예방 또는 치료하기 위한 신규한 조성물 및 방법이 여전히 필요하다.
이것이 본 발명의 목적이다.
본 발명은 이제 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 프로가스트린에 특이적으로 결합하는 항체를 제공한다. 본 발명은 또한 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물(여기서, 상기 조성물은 프로가스트린에 결합하는 항체를 포함한다), 및 단독으로 또는 폐암에 대한 임의의 기타 공지된 예방 또는 치료 방법과 조합하여, 프로가스트린에 결합하는 항체를 포함하는 조성물의 사용을 포함하는 폐암의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본원에 기재된 항-hPG 항체, 특히 중화 항-hPG 항체는 폐 종양 세포의 PG-의존성 증식을 억제하여, 이들을 폐암의 치료에 유용한 치료제로 되게 한다. 따라서, 폐암을 치료하기 위해 항-hPG 항체를 포함하는 약제학적 조성물, 및 항-hPG 항체 및/또는 약제학적 조성물을 사용하는 방법이 또한 제공된다. 약제학적 조성물은, 예를 들면, 비경구, 피하 또는 정맥내 주사를 포함하는 임의의 편리한 투여 경로를 위해 제형화될 수 있고, 전형적으로 항-hPG 항체, 및 목적하는 투여 방식에 적합한 하나 이상의 허용되는 담체, 부형제 및/또는 희석제를 포함하고, 하기 추가로 기재되는 바와 같이 기타 임의의 성분을 포함할 수 있다. 치료 용도의 경우, 조성물은 사용을 용이하게 하기 위해 단위 용량 형태로 포장될 수 있다.
치료 방법은 일반적으로 치료를 필요로 하는 대상체, 예를 들면, 폐암으로 진단된 대상체에게 치료 효과를 제공하기에 효과적인 항-PG 항체 및/또는 이의 약제학적 조성물의 양을 투여하는 것을 포함한다. 하기에 보다 상세하게 기재되는 치료 효과는 폐암의 임의의 개선, 예를 들면, 폐암의 진행의 지연 또는 정지, 폐암의 중증도의 저하, 폐 종양의 성장 또는 폐암 세포의 증식의 억제, 폐 종양의 크기 감소 및/또는 폐암 환자에서 PG 혈청 수준의 저하를 포함한다. 대상체는 인간 또는 비-인간일 수 있고, 가축 동물(예: 고양이, 개, 소, 돼지, 말) 또는 비-가축 동물을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 치료되는 대상체는 인간이다. 항-hPG 항체 요법이 유용한 대상체는: 질환 진행의 임의 단계의 환자(예: 폐암 스테이지 O, I, II, III 또는 IV), 폐암의 치료를 받은 환자(예: 화학요법, 방사선 요법, 외과적 절개) 또는 폐암의 다른 치료를 받고 있는 환자일 수 있다.
또한, 폐암 줄기 세포의 성장 억제를 필요로 하는 환자에게 항-PG 항체 및/또는 이의 약제학적 조성물을 상기 폐암 줄기 세포의 억제에 유효한 양으로 투여함으로써 환자에서 폐암 줄기 세포의 성장을 억제하는 방법이 제공된다.
다수의 실시형태에서, 항-PG 항체는 증식을 감소시키거나, 폐암 줄기 세포의 분화 또는 세포 사멸 속도를 증가시키거나, 치료된 환자에서 프로가스트린의 혈중 농도를 감소시키는데 효과적이다. 다른 실시형태에서, 항-PG 항체 및/또는 이의 약제학적 조성물은, 결직장암 줄기 세포의 성장을 억제하는데 효과적인 제2 치료제, 예를 들면, 프로가스트린 이외의 특이성을 갖는 항체와 동시에 또는 후에 투여할 수 있다.
본원에 기재되는 항-hPG 항체에 의한 치료는 다른 치료와 조합할 수 있거나 보조할 수 있다. 폐암의 다른 치료의 비제한적 예는 본원에 기재되어 있는 화학요법 치료, 방사선 치료, 외과적 절개 및 항체 치료를 포함한다. 특정 예에서, 항-hPG 항체는 화학요법제와 조합하여 투여된다. 또 다른 특정 예에서, 항-hPG 항체는 외과적 절개의 보조로서 투여된다.
본 발명은 또한, 바람직하게는 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제와 함께 항-PG 항체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 제2 치료제를 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 제2 치료제는 생물학적 약제 또는 화학요법제이다. 생물학적 약제의 예는 항-EGFR 모노클로날 항체 또는 항-VEGF 모노클로날 항체이고, 화학요법제는, 예를 들면, 알킬화제, 항-대사물질, 항-종양 항생물질, 유사분열 억제제, 크로마틴 기능 억제제, 항-혈관형성제, 항-에스트로겐, 항-안드로겐 및 면역조절제 등의 화합물을 포함한다.
인간 프리-프로가스트린, 101 아미노산 펩티드(아미노산 서열 참조: AAB19304.1)는 가스트린 유전자의 일차 번역 산물이다. 프로가스트린은, 프리가스트린으로부터 최초 21 아미노산(신호 펩티드)의 절단에 의해 형성된다. 프로가스트린의 80 아미노산 쇄는 절단에 의해, 및 몇몇 생물학적 활성 가스트린 호르몬 형태: 프로가스트린의 아미노산 38-71을 포함하는 가스트린 34(G34) 및 글리신-신장 가스트린 34(G34-Gly), 및 프로가스트린의 아미노산 55 내지 71을 포함하는 가스트린 17(G17) 및 글리신-신장 가스트린 17(G17-Gly)로 효소를 변형시킴으로써 추가로 처리된다.
항-인간 프로가스트린(항-hPG) 모노클로날 항체, 및 진단 및 치료를 위한 이의 사용은 하기 문헌에 기재되어 있다: 결직장암에 대해서는 WO 2011/083 088, 유방암에 대해서는 WO 2011/083 090, 췌장암에 대해서는 WO 2011/083 091, 결직장암 및 위장암에 대해서는 WO 2011/116 954, 및 간장 병리에 대해서는 WO 2012/013 609 및 WO 2011/083089.
본 발명은 본원에 제공된 상세한 설명 및 첨부의 도면으로부터 보다 완전하게 이해될 것이고, 이들 도면은 예시로서만 제공되며, 본 발명의 의도된 범위를 한정하지 않는다.
제1 양태에서, 본 발명은 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 프로가스트린-결합 분자에 관한 것이다. 본 발명은 또한 전립선암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물을 제공하고, 상기 조성물은 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함한다.
"프로가스트린-결합 분자"란, 본원에서는, 프로가스트린에 결합하지만, 가스트린-17(G17), 가스트린-34(G34), 글리신-신장 가스트린-17(G17-Gly), 또는 글리신-신장 가스트린-34(G34-Gly)에 결합하지 않는 임의의 분자를 지칭한다. 본 발명의 프로가스트린-결합 분자는, 예를 들면, 항체 분자 또는 수용체 분자 등의 임의의 프로가스트린-결합 분자일 수 있다. 바람직하게는, 프로가스트린-결합 분자는 항-프로가스트린 항체 또는 이의 항원-결합 단편이다.
용어 "프로가스트린"은 포유동물 프로가스트린 펩티드, 및 특히 인간 프로가스트린을 지칭한다. 오해를 피하기 위해, 어떠한 명세 없이, 표현 "인간 프로가스트린" 또는 "hPG"는 서열 서열번호 1의 인간 PG를 지칭한다. 인간 프로가스트린은 특히 상기 언급된 생물학적 활성 가스트린 호르몬 형태로 존재하지 않는 N-말단 및 C-말단 도메인을 포함한다. 바람직하게는, 상기 N-말단 도메인의 서열은 서열번호 2에 의해 제시되어 있다. 또 다른 바람직한 실시형태에서, 상기 C-말단 도메인의 서열은 서열번호 3에 의해 제시되어 있다.
따라서, 제1 실시형태에서, 본 발명은, 폐암의 치료에 사용하기 위한, 프로가스트린에 결합하지만 임의의 다른 가스트린-유전자 유래된 생성물에 결합하지 않는 항체에 관한 것이다.
"결합", "결합하다" 등이란, 항체 또는 이의 항원 결합 단편이, 생리학적 조건하에서 비교적 안정한 항원과 복합체를 형성하는 것으로 의도된다. 2개 분자가 결합하는지를 측정하는 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 특정 실시형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원-결합 단편은, BSA 또는 카세인 등의 비-특이적 분자에 결합하는 이의 친화성보다 적어도 2배 큰 친화성으로 프로가스트린에 결합한다. 보다 특정 실시형태에서, 상기 항체, 또는 이의 항원-결합 단편은 프로가스트린에만 결합한다.
표현 "폐암"은, 통상 공기 통로의 내측을 덮는 세포에서, 폐의 조직에서 유래하는 암을 지칭한다. 본원에서 사용되는 "폐암"은 특히 소세포 암종 및 조합된 소세포 암종을 포함하는 소세포 폐암(SCLC), 및 편평 세포 암종, 대세포 암종 및 선암을 포함하는 비소세포 폐암(NSCLC)을 포함한다. 과오종 등의 양성 폐 종양 뿐만 아니라, 아데노이드 낭포성 암종, 림프종 및 육종 등의 다른 타입의 폐암도 본원에서 사용되는 폐암에 또한 포함된다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 항-PG 항체를 제공하고, 상기 항체는 프로가스트린의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하는 에피토프를 인식한다.
보다 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기 항-PG 항체는 프로가스트린의 에피토프를 인식하고, 상기 에피토프는 프로가스트린의 N-말단 부분의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 hPG의 잔기 10 내지 14, hPG의 잔기 9 내지 14, hPG의 잔기 4 내지 10, hPG의 잔기 2 내지 10 또는 hPG의 잔기 2 내지 14를 포함할 수 있고, hPG의 상기 아미노산 서열은 서열번호 1이다.
보다 구체적 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 항-PG 항체는 프로가스트린의 에피토프를 인식하고, 상기 에피토프는 프로가스트린의 C-말단 부분의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 hPG의 잔기 71 내지 74, hPG의 잔기 69 내지 73, hPG의 잔기 71 내지 80(서열번호 40), hPG의 잔기 76 내지 80, 또는 hPG의 잔기 67 내지 74를 포함할 수 있고, hPG의 상기 아미노산 서열은 서열번호 1이다.
보다 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 항-PG 항체는, 상기 기재된 바와 같은 방법에 의해 측정할 때, 적어도 5000nM, 적어도 500nM, 100nM, 80nM, 60nM, 50nM, 40nM, 30nM, 20nM, 10nM, 7nM, 5nM, 4nM, 3nM, 2nM, 1nM, 0.5nM, 0.1nM, 50pM, 10pM, 5pM, 1pM 또는 적어도 0.1pM의 프로가스트린에 대한 친화성을 갖는다.
바람직하게는, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 항-PG 항체는 중화 항-PG 항체이다.
표현 "중화 항-PG 항체"는, PG에 결합하고 PG-의존성 신호전달을 차단하여, 종양 세포 및 특히 폐 종양 세포에서 PG-유도된 반응의 억제를 야기하는 항체를 지칭한다. 폐암 세포의 PG-유도된 반응의 억제는 세포 분화의 억제, 세포 사멸의 억제 및/또는 세포 증식의 자극에 의해 매개될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "항체"는 폴리클로날 및 모노클로날 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 항체(또는 "면역글로불린")는, 디설파이드 결합에 의해 상호 접속된 적어도 2개의 중(H)쇄 및 2개의 경(L)쇄를 포함하는 당단백질로 이루어진다. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역(또는 도메인)(본원에서 HCVR 또는 VH로서 약칭함) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 3개 도메인, CH1, CH2 및 CH3을 포함한다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서 LCVR 또는 VL로서 약칭함) 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인, CL을 포함한다. VH 및 VL 영역은, "상보성 결정 영역"(CDR) 또는 "초가변 영역"으로 불리우는 초가변성의 영역으로 추가로 세분될 수 있고, 이는 항원의 에피토프의 결합에 주로 관여하고, 프레임워크 영역(FR)으로 불리우는 보다 많이 보존되어 있는 영역이 산재되어 있다. 항체의 경쇄 및 중쇄 내의 CDR을 동정하고 이들의 서열을 결정하는 방법은 당업자에게 공지되어 있다. 오해를 피하기 위해, 본문에서 반대의 지시가 없는 경우, 표현 CDR은 IMGT에 의해 정의된 항체의 중쇄 및 경쇄의 초가변 영역을 의미하고, 여기서 IMGT 고유 번호는 프레임워크 영역 및 상보성 결정 영역의 표준화 구분, CDR1-IMGT: 27~38, CDR2를 제공한다.
IMGT 고유 번호는 항원 수용체, 쇄 유형 또는 종류와 관계 없이 가변 도메인을 비교하기 위해 정의되어 있다[참조: Lefranc M.-P., Immunology Today 18, 509 (1997)/Lefranc M.-P., The Immunologist, 7, 132-136 (1999)/Lefranc, M.-P., Pommie, C., Ruiz, M., Giudicelli, V., Foulquier, E., Truong, L., Thouvenin-Contet, V. and Lefranc, Dev. Comp. Immunol., 27, 55-77 (2003)]. IMGT 고유 번호에서, 보존된 아미노산은 항상 동일한 위치, 예를 들면, 시스테인 23(1st-CYS), 트립토판 41(CONSERVED-TRP), 소수성 아미노산 89, 시스테인 104(2nd-CYS), 페닐알라닌 또는 트립토판 118(J-PHE 또는 J-TRP)을 갖는다. IMGT 고유 번호는 프레임워크 영역(FR1-IMGT: 위치 1 내지 26, FR2-IMGT: 39 내지 55, FR3-IMGT: 66 내지 104 및 FR4-IMGT: 118 내지 128) 및 상보성 결정 영역: CDR1-IMGT: 27 내지 38, CDR2-IMGT: 56 내지 65 및 CDR3-IMGT: 105 내지 117의 표준화 구분을 제공한다. 갭은 빈 위치를 나타내기 때문에, CDR-IMGT 길이(괄호로 제시되고 점선으로 분리됨, 예를 들면, [8.8.13])는 중요한 정보로 된다. IMGT 고유 번호는, IMGT Colliers de Perles로서 지정된 2D 그래픽 표시[참조: Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., Immunogenetics, 53, 857-883 (2002)/Kaas, Q. and Lefranc, M.-P., Current Bioinformatics, 2, 21-30 (2007)], 및 IMGT/3Dstructure-DB의 3D 구조[참조: Kaas, Q., Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., T cell receptor and MHC structural data. Nucl. Acids. Res., 32, D208-D210 (2004)]에서 사용된다.
각각의 VH 및 VL은 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되고, 아미노-말단으로부터 카복실-말단까지 하기 순서로 배치되어 있다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 항원과 상호작용하는 결합 도메인을 함유한다. 항체의 불변 영역은 면역계의 다양한 세포(예: 이펙터 세포) 및 고전적 상보 시스템의 최초 성분(Clq)을 포함하는 숙주 조직 또는 인자에 대한 면역글로불린의 결합을 매개할 수 있다. 항체는 상이한 이소형(즉, IgA, IgD, IgE, IgG 또는 IgM)의 것일 수 있다.
특정 실시형태에서, 상기 프로가스트린-결합 항체, 또는 이의 항원-결합 단편은: 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체, 키메라 항체, 단일 쇄 항체, 낙타화 항체(camelized antibody), IgA1 항체, IgA2 항체, IgD 항체, IgE 항체, IgG1 항체, IgG2 항체, IgG3 항체, IgG4 항체 및 IgM 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
"폴리클로날 항체"는, 하나 이상의 다른 비-동일한 항체 중에서 또는 이의 존재하에 생성될 수 있는 항체이다. 일반적으로, 폴리클로날 항체는 비-동일한 항체를 생성하는 몇몇 다른 B-림프구의 존재하에 B-림프구로부터 생성된다. 통상적으로, 폴리클로날 항체는 면역화 동물로부터 직접 수득된다.
용어 "모노클로날 항체"는 거의 균일한 항체 모집단으로부터 생성되는 항체를 지칭하고, 여기서 모집단은, 최소한의 비율로 발견될 수 있는 소수의 가능한 자연-발생 돌연변이를 제외한 동일한 항체를 포함한다. 모노클로날 항체는 하이브리도마 등의 단일 세포 클론의 성장으로부터 생성되고, 하나의 클라스 및 서브클라스의 중쇄 및 한 유형의 경쇄를 특징으로 한다.
표현 항체의 "항원-결합 단편"은, 상기 항체의 표적(또한 일반적으로 항원으로 지칭됨), 일반적으로 동일한 에피토프에 결합하는 능력을 보유하고, 상기 항체의 아미노산 서열의 적어도 5개 연속 아미노산 잔기, 적어도 10개 연속 아미노산 잔기, 적어도 15개 연속 아미노산 잔기, 적어도 20개 연속 아미노산 잔기, 적어도 25개 연속 아미노산 잔기, 적어도 40개 연속 아미노산 잔기, 적어도 50개 연속 아미노산 잔기, 적어도 60개 연속 아미노산 잔기, 적어도 70개 연속 아미노산 잔기, 적어도 80개 연속 아미노산 잔기, 적어도 90개 연속 아미노산 잔기, 적어도 100개 연속 아미노산 잔기, 적어도 125개 연속 아미노산 잔기, 적어도 150개 연속 아미노산 잔기, 적어도 175개 연속 아미노산 잔기, 또는 적어도 200개 연속 아미노산 잔기를 포함하는 임의의 펩티드, 폴리펩티드 또는 단백질을 나타내는 것으로 의도된다.
특정 실시형태에서, 상기 항원-결합 단편은 이것이 유래하는 항체의 적어도 하나의 CDR을 포함한다. 여전히 바람직한 실시형태에서, 상기 항원 결합 단편은 이것이 유래하는 항체의 2, 3, 4 또는 5개 CDR, 보다 바람직하게는 6개 CDR을 포함한다.
"항원-결합 단편"은, 제한 없이, Fv, scFv(단일 쇄의 sc), Fab, F(ab')2, Fab', scFv-Fc 단편 또는 디아바디, 또는 XTEN(신장된 재조합 폴리펩티드) 또는 PAS 모티브 등의 무질서 펩티드, 또는 폴리(에틸렌) 글리콜 등의 폴리(알킬렌) 글리콜의 부가("PEGylation") 등의 화학적 변형(Fv-PEG, scFv-PEG, Fab-PEG, F(ab')2-PEG 또는 Fab'-PEG으로 불리우는 페길화된 단편)(폴리(에틸렌) 글리콜의 "PEG") 또는 리포좀 중의 도입에 의해 반감기가 증가될 수 있는 임의의 단편과의 융합 단백질로 이루어진 그룹에서 선택될 수 있고, 상기 단편은 본 발명에 따르는 항체의 특징적 CDR의 적어도 하나를 갖는다. 바람직하게는, 상기 "항원-결합 단편"은 이들이 유래하는 항체의 가변 중쇄 또는 경쇄의 부분 서열을 구성하거나 이들을 포함할 수 있고, 상기 부분 서열은 이것이 하강하는 항체와 동일한 결합 특이성, 및 표적에 대하여, 이것이 하강하는 항체의 충분한 친화성, 바람직하게는 항체 친화성의 적어도 1/100, 바람직한 방식에서 적어도 1/10까지 친화성을 보유하기에 충분하다.
또 다른 특정 실시형태에서, 본 발명에 따르는 폐암의 진단 방법에서, 대상체로부터의 생물학적 샘플은 프로가스트린에 결합하는 항체와 접촉되고, 상기 항체는 당업자에게 공지된 면역화 방법에 의해 수득되고, 면역원으로서, 아미노산 서열이 프로가스트린의 아미노산 서열의 전체 또는 일부를 포함하는 펩티드를 사용한다. 보다 상세하게는, 상기 면역원은 하기 중에서 선택된 펩티드를 포함한다:
· 아미노산 서열이 전장 프로가스트린, 및 특히 서열번호 1의 전장 인간 프로가스트린의 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어지는 펩티드,
· 아미노산 서열이 프로가스트린, 및 특히 서열번호 1의 전장 인간 프로가스트린의 아미노산 서열의 일부에 상응하는 펩티드,
· 아미노산 서열이 프로가스트린의 N-말단 부분의 일부 또는 전체 아미노산 서열에 상응하는 펩티드, 및 특히 아미노산 서열: SWKPRSQQPDAPLG(서열번호 2)을 포함하거나 이들로 이루어지는 펩티드, 및
· 아미노산 서열이 프로가스트린의 C-말단 부분의 일부 또는 전체 아미노산 서열에 상응하는 펩티드, 및 특히 아미노산 서열: QGPWLEEEEEAYGWMDFGRRSAEDEN(서열번호 3)을 포함하거나 이들로 이루어지는 펩티드,
· 아미노산 서열이 프로가스트린의 C-말단 부분의 아미노산 서열의 일부에 상응하는 펩티드, 및 특히 프로가스트린의 아미노산 71-80에 상응하는 아미노산 서열 FGRRSAEDEN(서열번호 40)을 포함하는 펩티드.
당업자는, 이러한 면역화를 사용하여, 필요에 따라 폴리클로날 또는 모노클로날 항체를 생성할 수 있음을 이해한다. 이들 유형의 항체를 각각 수득하는 방법은 당해 기술분야에 공지되어 있다. 따라서, 당업자는 임의의 소정 항원에 대한 폴리클로날 및/또는 모노클로날 항체를 생성하는 방법을 용이하게 선택 및 실시할 수 있다.
인간 프로가스트린의 아미노산 서열 1-14에 상응하는 아미노산 서열 "SWKPRSQQPDAPLG"을 포함하는 면역원을 사용하여 생성된 모노클로날 항체의 예(N-말단)는 하기 표 1 내지 표 4에 기재된 바와 같이: mAb3, mAb4, mAb16, 및 mAb19 및 mAb20로서 지정된 모노클로날 항체를 포함하지만, 이들로 한정되지 않는다. 다른 모노클로날 항체는, 이들 항체가 실제로 프로가스트린에 결합하는지는 명백하지 않지만, 기재되어 있다(WO 2006/032980). 에피토프 맵핑의 실험 결과는 mAb3, mAb4, mAb16, 및 mAb19 및 mAb20가 상기 hPG N-말단 아미노산 서열 내의 에피토프에 특이적으로 결합하는 것을 나타낸다. 서열번호 2에 의해 제시된 프로가스트린의 N-말단 내의 에피토프를 특이적으로 인식하는 폴리클로날 항체는 당해 기술분야에 기재되어 있다(WO　2011/083088 참조).
인간 프로가스트린의 아미노산 서열 55-80에 상응하는 아미노산 서열 "QGPWLEEEEEAYGWMDFGRRSAEDEN"(프로가스트린의 C-말단 부분)을 포함하는 면역원을 사용하여 생성될 수 있는 모노클로날 항체의 예는: 하기 표 5 및 6에서 mAb8 및 mAb13으로 지정된 항체를 포함하지만, 이들로 한정되지 않는다. 에피토프 맵핑의 실험 결과는 mAb13이 상기 hPG C-말단 아미노산 서열 내의 에피토프에 특이적으로 결합하는 것을 나타낸다.
다른 예는 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 면역원을 사용하여 생성된 항-hPG 모노클로날 및/또는 폴리클로날 항체를 포함한다.
용어 "N-말단 항-hPG 항체" 및 "C-말단 항-hPG 항체"는, hPG의 N-말단 부분에 위치하는 아미노산을 포함하는 에피토프, 또는 hPG의 C-말단 부분에 위치하는 아미노산을 포함하는 에피토프에 각각 결합하는 항체를 나타낸다. 바람직하게는, 용어 "N-말단 항-hPG 항체"는 프로가스트린의 도메인에 위치하는 에피토프에 결합하는 항체를 지칭하고, 이의 서열은 서열번호 2에 제시되어 있다. 또 다른 바람직한 실시형태에서, 용어 "C-말단 항-hPG 항체"는 프로가스트린의 도메인에 위치하는 에피토프에 결합하는 항체를 지칭하고, 이의 서열은 서열번호 3에 제시되어 있다.
용어 "에피토프"는 항체에 의해 결합되는 항원의 영역을 지칭한다. 에피토프는 구조적 또는 기능적으로 정의될 수 있다. 기능적 에피토프는 일반적으로 구조 에피토프의 서브세트이고, 상호작용의 친화성에 직접 기여하는 아미노산을 갖는다. 에피토프는 또한 입체구조적일 수 있다. 특정 실시형태에서, 에피토프는, 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 그룹 또는 설포닐 그룹 등의 분자의 화학적 활성 표면 그룹인 결정기를 포함할 수 있고, 특정 실시형태에서, 특정 3차원 구조 특성 및/또는 특정 전하 특징을 가질 수 있다. 항체에 의해 결합된 에피토프의 결정은 당업자에게 공지된 임의의 에피토프 맵핑 기술에 의해 실시할 수 있다. 에피토프는 단백질의 아미노산 서열 내에 연속하여 위치하는 상이한 아미노산을 포함할 수 있다. 에피토프는 단백질의 아미노산 서열 내에 연속하여 위치하지 않는 아미노산을 또한 포함할 수 있다.
특정 실시형태에서, 상기 항체는 하기로 이루어진 그룹에서 선택된 모노클로날 항체이다:
· 아미노산 서열 서열번호 4, 5 및 6의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 4, 5 및 6의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 7, 8 및 9의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 7, 8 및 9의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 10, 11 및 12의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 10, 11 및 12의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 13, 14 및 15의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 13, 14 및 15의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 16, 17 및 18의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 16, 17 및 18의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 19, 20 및 21의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 19, 20 및 21의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 22, 23 및 24의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 22, 23 및 24의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 25, 26 및 27의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 25, 26 및 27의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 28, 29 및 30의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 28, 29 및 30의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 31, 32 및 33의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 31, 32 및 33의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체, 및
· 아미노산 서열 서열번호 34, 35 및 36의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 34, 35 및 36의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 37, 38 및 39의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 37, 38 및 39의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체.
본 발명의 의미에서, 핵산 또는 아미노산의 2개 서열 사이의 "퍼센트 동일성" 또는 "% 동일성"은, 최적 정렬 후에 수득되는, 비교되는 2개 서열 사이의 동일한 뉴클레오티드 또는 아미노산 잔기의 비율을 의미하고, 이 비율은 순수하게 통계학적이고 2개 서열 사이의 차이는 이들의 길이를 따라 랜덤하게 분산된다. 2개 핵산 또는 아미노산의 비교는 이들을 최적으로 정렬시킨 후에 서열을 비교함으로써 전통적으로 수행되고, 상기 비교는 세그먼트에 의해, 또는 "정렬 윈도우"를 사용함으로써 실시할 수 있다. 비교를 위한 서열의 최적 정렬은, 손에 의한 비교에 추가하여, 당업자에게 공지되어 있는 방법에 의해 실행할 수 있다.
참조 아미노산 서열과 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 나타내는 아미노산 서열에 대해, 바람직한 예는 참조 서열, 특정 변형, 특히 적어도 하나의 아미노산의 결실, 부가 또는 치환, 절단 또는 신장을 포함한다. 하나 이상의 연속적 또는 비-연속적 아미노산의 치환의 경우, 치환된 아미노산이 "동등한" 아미노산으로 치환되는 치환이 바람직하다. 여기서, 표현 "동등한 아미노산"은, 대응하는 항체 및 하기 정의된 특정 예의 생물학적 활성을 변경시키지 않고서, 구조 아미노산 중의 하나로 치환될 가능성이 있는 임의의 아미노산을 나타내는 것을 의미한다.
동등한 아미노산은, 치환되는 아미노산과의 구조적 상동성, 또는 생성될 가능성이 있는 다양한 항체 사이의 생물학적 활성의 비교 시험의 결과에 따라 결정될 수 있다.
보다 특정 실시형태에서, 상기 항체는 하기로 이루어진 그룹에서 선택된 모노클로날 항체이다:
· 아미노산 서열 서열번호 41의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 42의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체;
· 아미노산 서열 서열번호 43의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 44의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체;
· 아미노산 서열 서열번호 45의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 46의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체;
· 아미노산 서열 서열번호 47의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 48의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체;
· 아미노산 서열 서열번호 49의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 50의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체; 및
· 아미노산 서열 서열번호 51의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 52의 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체.
또 다른 특정 실시형태에서, 본 발명의 방법에 사용된 항체는 인간화 항체이다.
본원에 사용된 바와 같이, 표현 "인간화 항체(humanized antibody)"는 비인간 기원의 항체로부터 유래하는 CDR 영역을 함유하는 항체를 의미하고, 항체 분자의 다른 부분은 하나 또는 수개의 인간 항체로부터 유래한다. 또한, 당업자에게 공지된 기술에 따라, 골격 세그먼트 잔기의 일부(프레임워크에서는 FR로서 불리움)를 변형시켜 결합 친화성을 유지할 수 있다[참조: Jones et al., Nature, 321:522-525, 1986]. 인간화의 목표는, 항체의 완전한 항원 결합 친화성 및 특이성을 유지하면서, 인간으로의 도입을 위한 뮤린 항체 등의 이종 항체의 면역원성의 저하이다.
본 발명의 인간화 항체 또는 이의 단편은, 당업자에게 공지된 기술(예를 들면, 문헌[참조: Singer et al., J. Immun., 150:2844-2857, 1992]에 기재된 것들)에 의해 제조할 수 있다. 이러한 인간화 항체는, 시험관내 진단 또는 생체내 예방적 및/또는 치료적 처치를 수반하는 방법에서의 사용에 바람직하다. 기타 인간화 기술은 또한 당업자에게 공지되어 있다. 실제로, CDR-그래프트(EP 0　451　261; EP 0　682　040; EP 0　939　127; EP 0　566　647; US 5,530,101; US 6,180,370; US 5,585,089; US 5,693,761; US 5,639,641; US 6,054,297; US 5,886,152; 및 US 5,877,293), 베니어링 또는 재표면화(EP 0 592 106; EP 0 519 596; Padlan E. A., 1991, Molecular Immunology 28(4/5): 489-498; Studnicka G. M. et al., 1994, Protein Engineering 7(6): 805-814; Roguska M.A. et al., 1994, Proc. Natl. Acad. ScL U.S.A., 91:969-973), 및 쇄 셔플링(U.S. Pat. No. 5,565,332)를 포함하는 다양한 기술을 사용하여 항체를 인간화시킬 수 있다. 인간 항체는 파지 디스플레이 방법을 포함하는 당해 기술분야에 공지된 다양한 방법에 의해 제조할 수 있다. 미국 특허 4,444,887, 4,716,111, 5,545,806 및 5,814,318; 및 국제 특허 출원 공개 번호 WO 98/46645, WO 98/50433, WO 98/24893, WO 98/16654, WO 96/34096, WO 96/33735, 및 WO 91/10741 참조.
보다 특정 실시형태에서, 상기 항체는 하기로 이루어진 그룹에서 선택된 인간화 항체이다:
· 아미노산 서열 서열번호 4, 5 및 6의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 4, 5 및 6의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 7, 8 및 9의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 7, 8 및 9의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 10, 11 및 12의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 10, 11 및 12의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 13, 14 및 15의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 13, 14 및 15의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 16, 17 및 18의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 16, 17 및 18의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 19, 20 및 21의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 19, 20 및 21의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 22, 23 및 24의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 22, 23 및 24의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 25, 26 및 27의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 25, 26 및 27의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체,
· 아미노산 서열 서열번호 28, 29 및 30의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 28, 29 및 30의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 31, 32 및 33의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 31, 32 및 33의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체, 및
· 아미노산 서열 서열번호 34, 35 및 36의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 34, 35 및 36의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 37, 38 및 39의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 적어도 하나, 우선적으로 적어도 2개, 우선적으로 3개 포함하거나, 서열번호 37, 38 및 39의 서열과 최적 정렬후 적어도 80%, 바람직하게는 85%, 90%, 95% 및 98% 동일성을 갖는 서열을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 인간화 항체,
여기서, 상기 항체는 또한 인간 항체로부터 유래하는 경쇄 및 중쇄의 불변 영역을 포함한다.
또 다른 보다 특정 실시형태에서, 상기 항체는 하기로 이루어진 그룹에서 선택된 인간화 항체이다:
· 아미노산 서열 서열번호 53의 중쇄 가변 영역 및 아미노산 서열 서열번호 54의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체;
· 아미노산 서열 서열번호 55의 중쇄 가변 영역 및 아미노산 서열 서열번호 56의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체;
· 서열번호 57, 58 및 59 사이에서 선택된 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 60, 61 및 62 사이에서 선택된 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체;
· 서열번호 63, 64 및 65 사이에서 선택된 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 66, 67 및 68 사이에서 선택된 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체;
· 서열번호 69 및 71 사이에서 선택된 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 70 및 72 사이에서 선택된 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체; 및
· 서열번호 75 및 76 사이에서 선택된 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 77 및 78 사이에서 선택된 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체;
여기서, 상기 항체는 인간 항체로부터 유래하는 경쇄 및 중쇄의 불변 영역을 또한 포함한다.
보다 바람직하게는, 상기 항체는 아미노산 서열 서열번호 71의 중쇄 가변 영역 및 아미노산 서열 서열번호 72의 경쇄 가변 영역을 포함하고, 상기 항체는 또한 인간 항체로부터 유래하는 경쇄 및 중쇄의 불변 영역을 포함한다.
보다 더 바람직하게는, 상기 항체는 아미노산 서열 서열번호 73의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 74의 경쇄를 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 또한 본원에 기재된 프로가스트린-결합 항체를 포함하는 면역접합체(호환적으로 "항체-약물 접합체" 또는 "ADC"로서 지칭됨)을 제공하고, 상기 항체는 하나 이상의 세포독성제, 예를 들면, 화학요법제, 약물, 성장 억제제, 독소(예: 단백질 독소, 세균, 진균, 식물 또는 동물 기원의 효소적 활성 독소, 또는 이의 단편) 또는 방사성 동위체(즉, 방사성접합체)와 접합된다.
면역접합체는, 세포독성제, 즉 암의 치료에서 세포의 성장 또는 증식을 사멸시키거나 억제하는 약물의 국소 전달을 위해 사용되어 왔다[참조: Lambert, J. (2005) Curr. Opinion in Pharmacology 5:543-549; Wu et al (2005) Nature Biotechnology 23(9): 1137-1146; Payne, G. (2003) 13:207-212; Syrigos and Epenetos (1999) Anticancer Research 19:605-614; Niculescu-Duvaz and Springer (1997) Adv. Drug Deliv. Rev. 26:151-172; U.S. Pat. No. 4,975,278]. 면역접합체는 종양에 대한 약물 모이어티의 표적화 전달 및 그 중의 세포내 축적을 가능하게 하고, 비접합된 약물의 전신 투여는 제거하고자 하는 종양 세포 뿐만 아니라 정상 세포에 대한 허용되지 않는 수준의 독성을 가져올 수 있다[참조: Baldwin et al, Lancet (Mar. 15, 1986) pp. 603-05; Thorpe (1985) "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review," in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications (A. Pinchera et al., eds) pp. 475-506]. 폴리클로날 항체 및 모노클로날 항체 둘 다는 이들 전략에서 유용한 것으로 보고되어 있다[참조: Rowland et al., (1986) Cancer Immunol. Immunother. 21 :183-87]. 이들 방법에 사용된 약물은 다우노마이신, 독소루비신, 메토트렉세이트 및 빈데신을 포함한다[참조: 상기 Rowland et al., (1986)]. 항체-독소 접합체에 사용된 독소는 디프테리아 독소 등의 세균 독소, 리신 등의 식물 독소, 겔다나마이신[참조: Mandler et al (2000) J. Nat. Cancer Inst. 92(19): 1573-1581; Mandler et al (2000) Bioorganic & Med. Chem. Letters 10:1025-1028; Mandler et al (2002) Bioconjugate Chem. 13:786-791], 마이탄시노이드[참조: EP 1391213; Liu et al., (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:8618-8623] 및 칼리케아미신[참조: Lode et al (1998) Cancer Res. 58:2928; Hinman et al (1993) Cancer Res. 53:3336-3342] 등의 소분자 독소를 포함한다. 독소는 튜불린 결합, DNA 결합 또는 토포이소머라제 억제를 포함하는 메카니즘에 의해 이들의 세포 독성을 발휘할 수 있다. 일부 세포독성 약물은, 거대 항체 또는 단백질 수용체 리간드와 접합되는 경우, 불활성화 또는 활성이 저하되는 경향이 있다.
특정 실시형태에서, 면역복합체는 항체 및 화학요법제 또는 기타 독소를 포함한다. 면역복합체의 생성에 유용한 화학요법제는 본원에 기재되어 있다(예: 상기). 사용될 수 있는 효소적 활성 독소 및 이의 단편은 디프테리아 A 쇄, 디프테리아 독소의 비결합 활성 단편, 외독소 A 쇄(슈도모나스 에루기노사로부터), 리신 A 쇄, 아브린 A 쇄, 모데신 A 쇄, 알파-사르신, 알레우라이트 포르디(Aleurites fordii) 단백질, 디안틴 단백질, 피토라카 아메리카나 단백질(PAPI, PAPII 및 PAP-S), 모모르디카 카란티아 억제제, 쿠르신, 크로틴, 사파오나리아 오피시날리스 억제제, 겔로닌, 미토겔린, 레스트릭토신, 페노마이신, 에노마이신, 및 트리코테센을 포함한다. 예를 들면, 1993년 10월 28일자로 공개된 WO 93/21232 참조. 다양한 방사성핵종은 방사성접합된 항체의 생성을 위해 이용가능하다. 예는 212Bi,　131I,　131In,　90Y 및 186Re를 포함한다. 항체 및 세포독성제의 접합체는 다양한 이관능성 단백질-커플링제, 예를 들면, N-석신이미딜-3-(2-피리디닐디티올) 프로피오네이트(SPDP), 이미노티올란(IT), 이미도에스테르의 이관능성 유도체(예: 디메틸 아디프이미데이트 HCl), 활성 에스테르(예: 디석신이미딜 수베레이트), 알데히드(예: 글루타르알데히드), 비스-아지도 화합물(예: 비스(p-아지도벤조일) 헥산디아민), 비스-디아조늄 유도체(예: 비스-(p-디아조늄벤조일)-에틸렌디아민), 디이소시아네이트(예: 톨루엔 2,6-디이소시아네이트) 및 비스-활성 플루오린 화합물(예: 1,5-디플루오로-2,4-디니트로벤젠)을 사용하여 제조된다. 예를 들면, 리신 면역독소는 문헌[참조: Vitetta et ah, Science, 238: 1098 (1987)]에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다. 탄소-14-표지된 1-이소티오시아네이토벤질-3-메틸디에틸렌 트리아민펜타아세트산(MX-DTPA)는 항체에 대한 방사성뉴클레오티드의 접합을 위한 예시적 킬레이트제이다. WO 94/11026 참조.
항체 및 하나 이상의 소분자 독소, 예를 들면, 칼리케아미신, 마이탄시노이드, 돌라스타틴, 오로스타틴, 트리코테센 및 CC 1065, 및 독소 활성을 갖는 이들 독소의 유도체의 접합체가 또한 본원에서 의도된다.
본 발명의 면역접합체는 링커(linker)를 추가로 포함할 수 있다.
"링커", "링커 유닛" 또는 "링크"는 결합 단백질을 적어도 하나의 세포독성제에 공유 결합시키는 공유 결합 또는 원자 쇄를 포함하는 화학 모이어티를 의미한다.
링커는 다양한 이관능성 단백질 커플링제, 예를 들면, N-석신이미딜-3-(2-피리딜디티오) 프로피오네이트(SPDP), 석신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)사이클로헥산-1-카복실레이트(SMCC), 이미노티올란(IT), 이미도에스테르의 이관능성 유도체(예를 들면, 디메틸 아디프이미데이트 HCl), 활성 에스테르(예를 들면, 디석신이미딜 수베레이트), 알데히드(예를 들면, 글루타르알데히드), 비스-아지도 화합물(예를 들면, 비스(p-아지도벤조일) 헥산디아민), 비스-디아조늄 유도체(예를 들면, 비스-(p-디아조늄벤조일)-에틸렌디아민), 디이소시아네이트(예를 들면, 톨루엔 2,6-디이소시아네이트), 및 비스-활성 플루오린 화합물(예: 1,5-디플루오로-2,4-디니트로벤젠)을 사용하여 제조할 수 있다. 탄소-14-표지된 1-이소티오시아네이트벤질-3-메틸디에틸렌 트리아민펜타아세트산(MX-DTPA)는 어드레싱 시스템에 대한 세포독성제의 접합을 위한 예시적 킬레이트제이다. 기타 가교-링커 시약은 BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, 설포-EMCS, 설포-GMBS, 설포-KMUS, 설포-MBS, 설포-SIAB, 설포-SMCC, 및 설포-SMPB, 및 (예를 들면, 피어스 바이오테클놀로지 인코포레이티드(Pierce Biotechnology, Inc.), Rockford, Ill., U.S.A로부터) 상업적으로 이용가능한 SVSB(석신이미딜-(4-비닐설폰)벤조에이트)일 수 있다.
링커는 "비-절단가능한" 또는 "절단가능한" 것일 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물을 제공하고, 상기 조성물은 프로가스트린의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하는 에피토프를 인식하는 항체를 포함한다.
보다 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기 조성물은 프로가스트린의 에피토프를 인식하는 항체를 포함하고, 상기 에피토프는 프로가스트린의 N-말단 부분의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 hPG의 잔기 10 내지 14, hPG의 잔기 9 내지 14, hPG의 잔기 4 내지 10, hPG의 잔기 2 내지 10 또는 hPG의 잔기 2 내지 14를 포함할 수 있고, hPG의 상기 아미노산 서열은 서열번호 1이다.
보다 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 프로가스트린의 에피토프를 인식하는 항체를 포함하고, 상기 에피토프는 프로가스트린의 C-말단 부분의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 hPG의 잔기 71 내지 74, hPG의 잔기 69 내지 73, hPG의 잔기 71 내지 80(서열번호 40), hPG의 잔기 76 내지 80 또는 hPG의 잔기 67 내지 74를 포함할 수 있고, hPG의 상기 아미노산 서열은 서열번호 1이다.
보다 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은, 상기 기재된 바와 같은 방법에 의해 측정할 때, 적어도 5000nM, 적어도 500nM, 100nM, 80nM, 60nM, 50nM, 40nM, 30nM, 20nM, 10nM, 7nM, 5nM, 4nM, 3nM, 2nM, 1nM, 0.5nM, 0.1nM, 50pM, 10pM, 5pM, 1pM 또는 적어도 0.1pM의 프로가스트린에 대한 친화성을 갖는 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함한다.
보다 더 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 프로가스트린-결합 항체를 포함하고, 상기 프로가스트린-결합 분자, 또는 이의 항원-결합 단편은 중화 항체이다.
또 다른 특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 프로가스트린-결합 항체를 포함하고, 상기 프로가스트린-결합 분자, 또는 이의 항원-결합 단편은 인간화 항체이다.
특정 실시형태에서, 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 프로가스트린-결합 항체를 포함하고, 상기 프로가스트린-결합 분자 또는 이의 항원-결합 단편은 하나 이상의 세포독성제, 예를 들면, 상기 기재된 바와 같은, 화학요법제, 약물, 성장 억제제, 독소(예를 들면, 단백질 독소, 세균, 진균, 식물 또는 동물 기원의 효소적 활성 독소, 또는 이의 단편) 또는 방사성 동위체(즉, 방사성접합체)를 포함한다.
또 다른 특정 실시형태에서, 환자의 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 프로가스트린-결합 항체를 포함하고, 상기 환자는 폐암으로 진단되었고, 프로가스트린의 농도는 참조 샘플보다 상기 환자의 생물학적 샘플에서 보다 높다. 바람직하게는, 상기 환자는 항-PG 항체를 상기 환자의 생물학적 샘플과 접촉시킴으로써 폐암으로 진단되어 있다.
본원에서 사용되는 "생물학적 샘플"은, 예를 들면, 폐암 단백질, 폴리뉴클레오티드 또는 전사물의 핵산 또는 폴리펩티드를 포함하는 생물학적 조직 또는 체액의 샘플이다. 이러한 샘플은 프로가스트린의 발현 수준의 측정을 가능하게 해야 한다. 프로가스트린은 분비 단백질인 것으로 공지되어 있다. 따라서, 프로가스트린 단백질의 수준을 측정하기 위한 바람직한 생물학적 샘플은 생물학적 체액을 포함한다. 본원에서 사용되는 "생물학적 체액"은 생물학적 기원의 재료를 포함하는 임의의 체액을 의미한다. 본 발명에서 사용하기 위한 바람직한 생물학적 체액은 동물, 예를 들면, 포유동물, 바람직하게는 인간 대상체의 체액을 포함한다. 체액은, 혈액, 혈장, 혈청, 림프액, 뇌척수액(CSF), 타액, 땀 및 뇨를 포함하지만, 이들로 한정되지 않는 임의의 체액일 수 있다. 바람직하게는, 상기 바람직한 액체 생물학적 샘플은 혈액 샘플, 혈장 샘플, 또는 혈청 샘플 등의 샘플을 포함한다. 보다 바람직하게는, 생물학적 샘플은 혈액 샘플이다. 실제로, 이러한 혈액 샘플은 환자로부터 완전히 무해한 채혈에 의해 수득될 수 있고, 따라서 대상체가 종양을 발증하는 위험의 비-침습적 평가를 가능하게 한다.
본원에서 사용되는 "생물학적 샘플"은, 암이 고형 종양인 경우, 시험되는 환자의 고형암 샘플을 또한 포함한다. 이러한 고형암 샘플에 의해, 당업자는, 본 발명의 바이오마커 수준의 임의 유형의 측정을 실시할 수 있다. 일부 경우에, 본 발명에 따르는 방법은, 환자로부터 고형암 샘플을 채취하는 예비 단계를 추가로 포함할 수 있다. "고형암 샘플"이란, 종양 조직 샘플을 지칭한다. 암 환자에서도, 종양 부위인 조직은 여전히 비-종양 건강한 조직을 포함한다. 따라서, "암 샘플"은 환자로부터 채취한 종양 조직으로 한정될 필요가 있다. 상기 "암 샘플"은 생검 샘플 또는 외과적 절제 요법으로부터 채취한 샘플일 수 있다.
생물학적 샘플은 전형적으로 진핵생물 생물, 가장 바람직하게는 포유동물, 또는 조류, 파충류 또는 어류로부터 수득된다. 실제로, 본원에 기재된 방법에 제공될 수 있는 "대상체"는 인간, 개, 고양이, 소, 염소, 돼지(pig), 돼지(swine), 양 및 원숭이를 포함하는 임의의 포유동물; 또는 조류; 파충류; 또는 어류일 수 있다. 바람직하게는, 대상체는 인간이고; 인간 대상체는 "환자"로서 공지될 수 있다.
"생물학적 샘플을 수득한다"란, 본원에서, 본 발명에 기재된 방법에 사용하는 생물학적 샘플을 수득하는 것을 의미한다. 종종, 이는 동물로부터 세포의 샘플을 제거함으로써 수행될 수 있지만, 사전 단리된 세포(예: 또 다른 인간, 또 다른 시간 및/또는 또 다른 목적을 위해 단리된)를 사용하거나 본 발명의 방법을 생체내에서 실시함으로써 또한 달성할 수 있다. 치료 또는 치료 이력을 갖는 아카이브 조직이 특히 유용하다.
이러한 샘플은, 당업자에게 공지된 방법에 따라 수득하고 필요에 따라 제조할 수 있다. 특히, 샘플은 공복 대상체로부터 채취되어야 하는 것이 당해 기술분야에 공지되어 있다.
보다 특정 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따르는 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물에 관한 것이고, 상기 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 N-말단 항-프로가스트린 항체 및 C-말단 항-프로가스트린 항체 중에서 선택된다.
본 발명의 방법에 사용하기 위한 항체 조성물은 상이한 제형으로 제조될 수 있고, 비경구, 척수강내, 피하, 정맥내, 근육내, 복강내, 주입 또는 볼러스 투여를 포함하지만 이로써 한정되지 않는 다양한 경로에 의해 투여하기 위한 수성 현탁액을 포함하지만, 이들로 한정되지 않는다. 일부 실시형태에서, 조성물은 비경구 투여용으로 제형화되고, 일부 특정 실시형태에서, 주입에 의한 정맥내 주사용으로 제형화된다.
특정 실시형태에서, 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은 본 발명의 항-프로가스트린 항체를 0.001mg/kg 내지 약 250mg/kg 범위의 유효량으로 포함하고, 이는 1회의 투여 또는 복수회의 간격을 둔 투여로 제공될 수 있다.
특정 실시형태에서, 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물은, 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체, 키메라 항체, 단일 쇄 항체, 낙타화 항체, IgA1 항체, IgA2 항체, IgD 항체, IgE 항체, IgG1 항체, IgG2 항체, IgG3 항체, IgG4 항체 및 IgM 항체 중에서 선택된 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함한다. 바람직하게는, 상기 항체는 상기 기재된 것들이다. 보다 바람직하게는, 상기 항체는 인간화 항체이다.
바람직하게는, 본 발명은 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물은 상기 기재된 항체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.
보다 특정 양태에서, 본 발명은, 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이고, 상기 항-프로가스트린 항체는 0.001mg/kg 내지 250mg/kg의 용량, 및 바람직하게는 적어도 0.005mg/kg, 적어도 0.01mg/kg, 적어도 0.05mg/kg, 적어도 0.1mg/kg, 적어도 0.5mg/kg, 적어도 1mg/kg, 적어도 5mg/kg, 적어도 10mg/kg, 적어도 50mg/kg 또는 적어도 100mg/kg의 용량으로 투여된다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물 및 항암 치료 분자를 포함하는 키트의 부품에 관한 것이다.
실제로, 본원에 기재된 항-PG 모노클로날 항체에 의한 치료는 다른 요법과 조합되거나 보조적일 수 있다. 다른 요법의 비제한적 예는 화학요법 치료, 방사선 요법, 외과적 절개 및 항체 요법을 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명에 따라 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 조성물, 및 화학요법 분자, 표적화 요법 분자 중에서 선택된 항암 치료 분자를 포함하는 키트의 부품에 관한 것이다.
특정 실시형태에서, 본 발명은, 동시, 순차 또는 개별 투여를 위해, 본 발명에 따르는 폐암 치료용 조성물 및 화학요법 분자를 포함하는 키트의 부품에 관한 것이다. 이러한 목적에 유용한 화학요법 분자는 엽산 길항제, 퓨린 길항제, 피리미딘 길항제, DNA 알킬화 분자, DNA 가교-결합 약물, 항생물질, 백금 착물, 프로테아좀 억제제, 유사물열 스핀들 독, 토포이소머라제 억제제, 티로신 키나제 억제제 등을 포함하지만, 이들로 한정되지 않는다.
또 다른 특정 실시형태에서, 본 발명은, 동시, 순차 또는 개별 투여를 위해, 본 발명에 따르는 조성물 및 또 다른 표적화 요법 분자를 포함하는 조성물을 포함하는 키트의 부품에 관한 것이다. 이러한 표적화 요법 분자는 EGFR을 표적화하는 항체, 예를 들면, 세툭시맵 또는 파니누무맵, VEGF를 표적화하는 항체, 예를 들면, 베바시주맵, HER2를 표적화하는 항체, 예를 들면, 트라스투주맵 또는 퍼투주맵, PD-1 및 PDL-1을 표적화하는 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맵, CTLA-4를 표적화하는 항체, 예를 들면, 이필리무맵, EGFR을 표적화하는 소분자 약물, 예를 들면, 에를로티닙, BRAF를 표적화하는 소분자 약물, 예를 들면, 베무라페닙 또는 다브라페닙, VEGF를 표적화하는 재조합 융합 단백질, 예를 들면, 아플리베르셉트를 포함하지만, 이들로 한정되지 않는다.
또 다른 특정 양태에서, 본 발명은, 페암의 진단을 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도에 관한 것이다.
또 다른 특정 양태에서, 본 발명은, 폐암의 예방 또는 치료를 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도에 관한 것이다.
보다 특정 양태에서, 본 발명은, 환자에 대하여 폐암의 예방 또는 치료를 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도에 관한 것이고, 상기 환자의 생물학적 샘플 중의 프로가스트린의 농도가 측정되고 이는 참조 생물학적 샘플의 프로가스트린 농도보다 더욱 높다.
또 다른 특정 양태에서, 본 발명은 폐암의 재발을 예방하기 위한 본 발명의 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 따라서, 본 발명은, 인간을 포함하는 동물에서 폐암을 치료하고 폐암의 재발을 예방하는데 유용한 방법 및 조성물을 제공한다. 치료 방법은 치료 효과를 제공하기 위해 프로가스트린에 특이적으로 결합하는 유효량의 항체를 폐암으로 진단된 대상체에게 투여하는 것을 수반한다. 항-PG 항체는 단독으로, 단일요법으로서, 또는 종양 절개, 방사선 요법, 화학요법, 다른 항체를 사용한 요법 등의 기타 치료 방식과 조합하여 또는 보조적으로 투여할 수 있다.
고형 종양은 반드시 균질한 조직인 것은 아니다. 오히려, 일부 종양은 명확한 표현형 및 기능 특성을 갖는 복수의 이상 세포 타입을 포함한다. 이와 관련하여, 이러한 종양은 이상 기관과 유사하다. 고형 종양을 포함하는 세포는, 동일한 새로운 부위 또는 동일하거나 상이한 종의 새로운 숙주에 이식되는 경우, 새로운 종양의 형성을 개시할 수 있는 정도와 관련하여 상이하다. 이러한 특성을 갖는 세포는 종양 또는 암 개시 세포, 또는 대안적으로 종양 또는 암 줄기 세포로서 공지되어 있다[참조: Hardavella et al., 2016, "Lung cancer stem cells―characteristics, phenotype," Transl Lung Cancer Res. 2016, 5(3): 272-279]. 이러한 세포는 고도로 종양원성이다.
일반적으로, 암 줄기 세포는 2개 특성: 자가-재생 능력 및 비-줄기 세포로 분화하는 딸 세포를 생성하는 능력에 의해 정의된다. 자가-재생은 세포 분열을 받는 능력이고, 이에 의해 하나 또는 둘 다의 딸 세포는 미분화 상태로 존재하고, 부모 세포와 동일한 증식 능력을 갖는 또 다른 암 줄기 세포를 생성하는 능력을 보유한다. 이러한 특성은 성장하는 종양을 포함하는 다수의 세포를 최종적으로 생성시키는 것을 가능하게 한다. 암 줄기 세포는 또한 분화하는 딸 세포를 생성하는 능력을 갖고, 다수의 고형 종양에서 발견되는 보다 분화된 비-줄기 또는 벌크 종양 세포의 스펙트럼을 생성시킨다. 따라서, 이식하는 경우, 암 줄기 세포는, 복수회의 연속 이식 후에도, 이들이 기원하는 종양의 타입을 재구성할 수 있다. 추가로, 암 줄기 세포는 유전자 돌연변이 및/또는 에피겐성 변화를 함유하고, 그 결과 증식 패턴의 변화 및/또는 아폽토시스의 낮은 속도를 야기하는 것으로 생각된다.
암 줄기 세포는 벌크 종양 세포로부터 이들을 구별하는 다수의 표현형 특징에 따라 동정할 수 있다. 종양 또는 세포주가 암 줄기 세포를 함유하는지의 여부를 평가하는데 유용한 방법은 당업자에게 친숙하다. 이러한 방법은, 예를 들면, 문헌[참조: Hardavella et al., 2016, "Lung cancer stem cells―characteristics, phenotype," Transl Lung Cancer Res. 2016, 5(3): 272-279] 및 WO 2012/013609에 기재되어 있다. 이들 방법의 특정 예는 본 출원의 실시예에 또한 기재되어 있다.
보다 특정 양태에서, 본 발명은, 환자에 대해 폐암의 예방 또는 치료를 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도에 관한 것이고, 상기 환자는 전이를 나타낸다.
보다 특정 양태에서, 본 발명은, 환자에 대해 폐암의 예방 또는 치료를 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 용도에 관한 것이고, 상기 환자는 전이를 나타내고, 상기 환자의 생물학적 샘플 중의 프로가스트린 농도가 측정되고 이는 참조 생물학적 샘플의 프로가스트린 농도보다 더욱 높다.
조합이 구성되는 구성요소는 조합의 최대 효력을 수득하도록 동시에, 별개로 또는 순차로 투여될 수 있고; 각각의 투여는 신속한 투여로부터 연속 관류까지 이의 지속시간이 상이할 수 있다.
본원에 사용되는 바와 같이, "동시 투여"는 단일 및 고유한 약제학적 형태로 조성물의 2개 화합물의 투여를 지칭한다. 본원에 사용되는 바와 같이, "별개 투여"는 상이한 약제학적 형태로 본 발명에 따르는 조성물의 2개 화합물의 동시 투여를 지칭한다. 본원에 사용되는 바와 같이, "순차 투여"는 각각 상이한 약제학적 형태로 본 발명에 따르는 조성물의 2개 화합물의 연속 투여를 지칭한다.
본원에서 사용되는 "치료학적 유효량"은, 질환의 증상을 예방, 완화, 경감 또는 개선시키거나 치료되는 환자의 생존을 연장시키는데 효과적인 화합물(또는 화합물들)의 최소 농도 또는 양을 지칭한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은, 예방을 필요로 하는 대상체에게 항-PG 항체의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 전립선암 재발을 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명에 따르는 간암 재발을 예방하는 방법은 상기 기재된 PG를 중화시킬 수 있는 하나 이상의 항-PG 항체를 폐암 재발 위험이 있는 개체에게 투여함으로써 달성된다.
전립선암 재발의 예방을 필요로 하는 대상체는, 이전에 폐암의 치료를 받았고, 폐암으로 다시 진단될 위험이 있지만 다시 진단되지는 않은 개체이다. 적합한 대상체는 외과적 절개, 화학요법 또는 임의의 기타 치료를 포함하는 임의의 수단에 의해 폐암의 사전 치료를 받은 개체를 포함한다.
폐암 재발의 효과적 예방은 폐암 재발의 완전한 및 계속적 부재를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 일부 실시형태에서, 효과적 예방은 폐암 재발의 위험이 있는 대상체로부터 수득된 폐암 종양 또는 폐암 줄기 세포의 부재에 의해 측정된다. 일부 실시형태에서, 효과적 예방은 폐암 재발의 위험이 있는 대상체에서 PG의 혈중 농도의 증가의 결여에 의해 측정된다.
항-PG 치료는 단독으로, 단일요법으로서, 또는 하나 이상의 다른 치료와 조합하여 또는 보조적으로 투여될 수 있다. 다른 치료는 외과적 절개, 및 상기 기재된 바와 같은 화학요법제 또는 항체 등의 제2 치료제에 의한 치료를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 본원에 제공되는 병용 치료는 환자에게 적어도 2개 치료제의 투여를 수반하고, 이중 하나는 적어도 하나의 항-PG 항체에 의한 항-PG 치료이고, 다른 하나는 치료약 또는 처치에 의한 치료이다.
항-PG 항체 및 제2 약제는 동시에, 연속하여 또는 별도로 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 항-PG 항체 및 제2 약제는, 이들이 동일한 날자에, 예를 들면, 동일한 환자 방문 동안 환자에게 투여되는 경우, 연속하여 투여되는 것으로 언급된다. 연속 투여는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8시간 간격으로 수행될 수 있다. 대조적으로, 항-PG 항체 및 제2 약제는, 이들이 상이한 날자에 투여되는 경우, 별도로 투여되는 것으로 언급되며, 예를 들면, 항-PG 항체 및 제2 치료제는 1일, 2일 또는 3일, 1주, 2주 또는 매월 간격으로 투여될 수 있다. 본 발명의 방법에서, 본 발명의 항-PG 항체의 투여는 제2 약제 투여의 전 또는 후에 수행할 수 있다. 비제한적 예로서, 항-PG 항체 및 제2 약제는 일정 기간 동안 동시에 투여하고, 그 후 항-PG 항체 및 제2 약제의 투여를 교대로 반복하는 제2 기간 동안 투여할 수 있다.
본 발명의 실시형태의 특징은 하기 실시예의 하기 상세한 설명으로부터 추가로 명백해질 것이다.
도 1:
세포 증식 검정: NCI-H358 세포를 대조군 항체 또는 항-hPG hz 8CV2(PG Hz), C-말단 항-hPG 인간화 항체로 처리했다.
실시예
실시예 1: 암 세포주에 대한 항-hPG 항체의 중화 활성
1.1. 항-hPG 모노클로날 항체의 중화 활성
PG에 대한 모노클로날 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주의 증식을 억제하는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 세포의 생존은 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 50,000 세포를 태소 혈청 함유 배지에서 6-웰 플레이트에 파종하고, 8시간 동안 인큐베이팅한다. 세포를 밤새 혈청-고갈시키고, 파종후 24시간에서 개시하여(시간 "T0"), 세포를, 태소 혈청의 부재하에, 1 내지 20㎍/ml의 모노클로날 대조군 항체(모노클로날 항체 항-퓨로마이신)(CT mAb) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG mAb로 48시간 동안 12시간마다 6개 1조로 처리하고, 여기서 상기 mAb는 C-말단 항-hPG 모노클로날 항체 또는 N-말단 항-hPG 모노클로날 항체이다.
상기 mAb는
- 아미노산 서열 서열번호 28, 29 및 30의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 31, 32 및 33의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체,
- 아미노산 서열 서열번호 34, 35 및 36의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 37, 38 및 39의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 중에서 선택된 C-말단 항-hPG 항체이거나,
- 아미노산 서열 서열번호 4, 5 및 6의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 7, 8 및 9의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄를 포함하는 모노클로날 항체,
- 아미노산 서열 서열번호 10, 11 및 12의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 13, 14 및 15의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 항체,
- 아미노산 서열 서열번호 16, 17 및 18의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 19, 20 및 21의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 항체,
- 아미노산 서열 서열번호 22, 23 및 24의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 각각 포함하는 중쇄, 및 아미노산 서열 서열번호 25, 26 및 27의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 각각 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 중에서 선택된 N-말단 항-hPG 항체이다.
T0에서 세포의 수는 각 실험을 위해 대조군 웰에서 계수한다.
구체적으로, 대조군 및 항-hPG mAb 처리된 웰 둘 다에서 생존 세포의 수는 48시간에서 계수한 다음, 각 세포 수와 T0에서 측정한 세포 수 사이의 차이를 계산한다. 이어서, 수득된 항-hPG mAb-처리된 세포의 수를 대조군 mAb-처리된 세포 수의 퍼센트로서 표시한다.
항-hPG 모노클로날 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 세포 수를 감소시킨다. 통계학적 유의성은 터키 사후 검정(Tukey post-hoc test)으로 일방향 ANOVA를 사용하여 측정한다: * = p<0.05, ** = p<0.01, 및 *** = p<0.001. 각 세포주에서, 항-hPG 항체는 세포 생존을 감소시킨다.
1.2. 세포 생존에 대한 항-hPG 인간화 항체의 중화 활성
PG에 대한 인간화 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주의 증식을 억제하는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 세포의 생존은 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 50,000 세포를 태소 혈청 함유 배지에서 6-웰 플레이트에 파종하고, 8시간 동안 인큐베이팅한다. 세포를 밤새 혈청-고갈시키고, 파종후 24시간에서 개시하여(시간 "T0"), 세포를, 태소 혈청의 부재하에, 1 내지 20㎍/ml의 인간화 대조군 항체(항-인간 FcG1, BioXCell로부터)(CT Hz) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG Hz로 48시간 동안 12시간마다 6개 1조로 처리하고, 여기서 상기 Hz는 C-말단 항-hPG 인간화 항체 또는 N-말단 항-hPG 인간화 항체이다. T0에서 세포의 수는 각 실험을 위해 대조군 웰에서 계수한다.
구체적으로, 대조군 및 항-hPG Hz 처리된 웰 둘 다에서 생존 세포의 수를 48시간에서 계수한 다음, 각 세포 수와 T0에서 측정한 세포 수 사이의 차이를 계산한다. 이어서, 수득된 항-hPG Hz-처리된 세포의 수를 대조군 mAb-처리된 세포 수의 퍼센트로서 표시한다.
항-hPG Hz 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 세포 수를 감소시킨다. 통계학적 유의성은 터키 사후 검정으로 일방향 ANOVA를 사용하여 측정한다: * = p<0.05, ** = p<0.01, 및 *** = p<0.001. 각 세포주에서, 항-hPG 항체는 세포 생존을 감소시킨다.
1.3. 암 줄기 세포 빈도에 대한 항-hPG 모노클로날 항체의 중화 활성
PG에 대한 모노클로날 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주에서, 극단 제한 희석 검정(ELDA)를 사용하여 암 줄기 세포(CSC) 빈도를 감소시키는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 CSC 빈도는 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 세포는 FACS 아리아 유세포 분석기를 사용하여 웰당 고정 세포 농도로 초저 부착(ULA) P96(96-웰 플레이트)에 파종하고, 농도 범위를 웰당 1 내지 500 세포로 사용한다. 세포를 M11 배지(Macari et al, Oncogene, 2015)로 ULA 플레이트에서 최대 11일 동안 배양하고, 3 또는 4일마다 1 내지 20㎍/ml의 모노클로날 대조군 항체(모노클로날 항체 항-퓨로마이신)(CT mAb) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG mAb로 처리하고, 여기서 상기 mAb는 C-말단 항-hPG 모노클로날 항체 또는 N-말단 항-hPG 모노클로날 항체이다.
구체적으로, 배양 단계의 말기에, 플레이트를 위상차 현미경으로 관찰하고, 세포 농도에 대한 양성 웰의 수를 평가한다. 최종적으로, ELDA 웹툴(http://www.bioinf.wehi.edu.au/software/elda/)을 사용하여 그룹 사이의 임의의 통계학적 차이에 대해 각 처리 그룹 및 시험의 CSC 빈도를 계산한다(변형된 Chi-제곱 시험).
항-hPG 모노클로날 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 CSC 빈도를 감소시킨다.
1.4. 암 줄기 세포 빈도에 대한 항-hPG 인간화 항체의 중화 활성
· 구체 형성 검정
PG에 대한 인간화 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주에서 구체 형성 검정을 사용하여 암 줄기 세포(CSC) 빈도를 감소시키는 이들의 능력에 대해 시험한다.
각 실험에서, 700 세포를 24-웰 초저 부착(ULA)에 파종한다. 세포를 M11 배지(Macari et al, Oncogene, 2015)로 ULA 플레이트에서 최대 7일 동안 배양하고, 3 또는 4일마다 20㎍/ml의 인간화 대조군 항체(항-인간 FcG1, BioXCell로부터)(CT Hz) 또는 20㎍/ml 항-hPG Hz(PG Hz)으로 처리하고, 여기서 상기 Hz는 C-말단 항-hPG 인간화 항체 또는 N-말단 항-hPG 인간화 항체이다.
구체적으로, 배양 단계의 말기에, 웰을 명시야 현미경을 통해 촬영하고, 화상을 분석하고, 25㎛ 초과의 평균 직경을 갖는 구체를 계수한다.
항-hPG 인간화 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 CSC 빈도를 감소시킨다.
· 극단 제한 희석 검정
PG에 대한 인간화 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주에서, 극단 제한 희석 검정(ELDA)를 사용하여 암 줄기 세포(CSC) 빈도를 감소시키는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 CSC 빈도는 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 세포는 FACS 아리아 유세포 분석기를 사용하여 웰당 고정 세포 농도로 초저 부착(ULA) P96(96-웰 플레이트)에 파종하고, 농도 범위를 웰당 1 내지 500 세포로 사용한다. 세포를 M11 배지(Macari et al, Oncogene, 2015)로 ULA 플레이트에서 최대 11일 동안 배양하고, 3 또는 4일마다 1 내지 20㎍/ml의 인간화 대조군 항체(항-인간 FcG1, BioXCell로부터)(CT Hz) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG Hz으로 처리하고, 여기서 상기 Hz는 C-말단 항-hPG 인간화 항체 또는 N-말단 항-hPG 인간화 항체이다.
구체적으로, 배양 단계의 말기에, 플레이트를 위상차 현미경으로 관찰하고, 세포 농도에 대한 양성 웰의 수를 평가한다. 최종적으로, ELDA 웹툴(http://www.bioinf.wehi.edu.au/software/elda/)을 사용하여 그룹 사이의 임의의 통계학적 차이에 대해 각 처리 그룹 및 시험의 CSC 빈도를 계산한다(변형된 Chi-제곱 시험).
항-hPG 인간화 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 CSC 빈도를 감소시킨다.
1.5. WNT/β-카테닌 경로에 대한 항-hPG 모노클로날 항체의 중화 활성
PG에 대한 모노클로날 항체는, 단백질 서바이빈, 공지된 WNT/β-카테닌 경로 표적화 유전자의 발현을 판독치로서 사용하여, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주에서 WNT/β-카테닌 경로를 억제하는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 서바이빈 발현은 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 50,000 세포를 태소 혈청 함유 배지에서 6-웰 플레이트에 파종하고, 8시간 동안 인큐베이팅한다. 세포를 밤새 혈청-고갈시키고, 파종후 24시간에서 개시하여, 세포를, 태소 혈청의 부재하에, 1 내지 20㎍/ml의 모노클로날 대조군 항체(모노클로날 항체 항-퓨로마이신)(CT mAb) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG mAb로 72시간 동안 12시간마다 4개 1조로 처리하고, 여기서 상기 mAb는 C-말단 항-hPG 모노클로날 항체 또는 N-말단 항-hPG 모노클로날 항체이다.
구체적으로, 처리 72시간 후, 세포를 채취하고, 전체 단백질은 RIPA 완충제를 사용하여 추출한다. 이어서, CT mAb 또는 항-hPG mAb 처리된 세포로부터 동등한 양의 단백질을 항-서바이빈 항체(모노클로날 항체, 셀 시그날링(Cell Signaling)으로부터 #2802) 및 로딩 대조군으로서 항-액틴 항체(모노클로날 항체, SIGMA로부터 #A4700)를 사용하여 웨스턴 블롯에 제공한다. 정량화는 신젠(Syngene)으로부터의 GBOX 케미 시스템을 사용하여 수행한다.
항-hPG 모노클로날 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 서바이빈 발현을 감소시킨다. 통계학적 유의성은 대응하지 않는 스튜던트 T 검정을 사용하여 측정한다: * = p<0.05, ** = p<0.01, and *** = p<0.001.
1.6. WNT/β-카테닌 경로에 대한 항-hPG 인간화 항체의 중화 활성
PG에 대한 인간화 항체는, 단백질 서바이빈, 공지된 WNT/β-카테닌 경로 표적화 유전자의 발현을 판독치로서 사용하여, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주에서 WNT/β-카테닌 경로를 억제하는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 서바이빈 발현은 상이한 항-hPG 인간화 항체를 사용하여 시험한다.
각 실험에서, 50,000 세포를 태소 혈청 함유 배지에서 6-웰 플레이트에 파종하고, 8시간 동안 인큐베이팅한다. 세포를 밤새 혈청-고갈시키고, 파종후 24시간에서 개시하여, 세포를, 태소 혈청의 부재하에, 1 내지 20㎍/ml의 인간화 대조군 항체(항-인간 FcG1, BioXCell로부터)(CT Hz) 또는 1 내지 20㎍/ml 항-hPG Hz로 72시간 동안 12시간마다 4개 1조로 처리하고, 여기서 상기 Hz는 C-말단 항-hPG 인간화 항체 또는 N-말단 항-hPG 인간화 항체이다.
구체적으로, 처리 72시간 후, 세포를 채취하고, 전체 단백질은 RIPA 완충제를 사용하여 추출한다. 이어서, CT Hz 또는 항-hPG Hz 처리된 세포로부터 동등한 양의 단백질을 항-서바이빈 항체(모노클로날 항체, 셀 시그날링으로부터 #2802) 및 로딩 대조군으로서 항-액틴 항체(모노클로날 항체, SIGMA로부터 #A4700)를 사용하여 웨스턴 블롯에 제공한다. 정량화는 신젠(Syngene)으로부터의 GBOX 케미 시스템을 사용하여 수행한다.
항-hPG 인간화 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 서바이빈 발현을 감소시킨다. 통계학적 유의성은 대응하지 않는 스튜던트 T 검정을 사용하여 측정한다: * = p<0.05, ** = p<0.01, and *** = p<0.001.
실시예 2: 암 세포주에 대한 항-hPG 항체의 중화 활성
세포 생존에 대한 항-hPG 인간화 항체의 중화 활성
PG에 대한 인간화 항체는, 프로가스트린을 생성하고 분비하는, 폐암의 연구에 통상 사용되는 몇몇 세포주(즉, NCI-H358, A549 또는 NCI-H460)의 증식을 억제하는 이들의 능력에 대해 시험한다. 이들 세포주 각각으로부터 세포의 생존은 상이한 항-hPG 모노클로날 항체를 사용하여 검정한다.
200,000 NCI-H358 세포를 태소 혈청 함유 배지에서 6-웰 플레이트에 파종하고, 8시간 동안 인큐베이팅한다. 세포를 밤새 혈청-고갈시킨다. 파종(시간 "T0")후 24시간부터, 세포를, 태소 혈청의 부재하에, 20㎍/ml의 인간화 대조군 항체(항-인간 FcG1, BioXCell로부터)(CT Hz) 또는 20㎍/ml 항-hPG Hz 8CV2(PG Hz)로 48시간 동안 12시간마다 처리하고, 여기서 상기 Hz는 C-말단 항-hPG 인간화 항체이다. T0에서의 세포 수는 각 실험에 대해 대조군 웰에서 계수한다.
구체적으로, 대조군 및 항-hPG Hz 처리된 웰 둘 다에서 생존 세포의 수를 48시간에서 계수한다. 이어서, 각 세포 수 및 T0에서 측정한 세포 수 사이의 차이를 계산한다.
항-hPG Hz 항체에 의한 처리는 대조군 항체에 의한 처리와 비교하여 세포 수를 감소시켰다. 통계학적 유의성은 T 검정을 사용하여 측정했다: ** = p<0.01, 각 세포주에서, 항-hPG 항체는 세포 생존을 감소시켰다(도 1 참조).
참조 문헌
SEQUENCE LISTING <110> PROGASTRINE ET CANCERS S.A R.L. <120> COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING LUNG CANCER <130> IPA191261-FR <150> EP 17305382.8 <151> 2017-03-30 <160> 78 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 80 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Ser Trp Lys Pro Arg Ser Gln Gln Pro Asp Ala Pro Leu Gly Thr Gly 1 5 10 15 Ala Asn Arg Asp Leu Glu Leu Pro Trp Leu Glu Gln Gln Gly Pro Ala 20 25 30 Ser His His Arg Arg Gln Leu Gly Pro Gln Gly Pro Pro His Leu Val 35 40 45 Ala Asp Pro Ser Lys Lys Gln Gly Pro Trp Leu Glu Glu Glu Glu Glu 50 55 60 Ala Tyr Gly Trp Met Asp Phe Gly Arg Arg Ser Ala Glu Asp Glu Asn 65 70 75 80 <210> 2 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Amino acids 1-14 N-terminal extremity of human progastrin <400> 2 Ser Trp Lys Pro Arg Ser Gln Gln Pro Asp Ala Pro Leu Gly 1 5 10 <210> 3 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Amino acids 55-80 C-terminal extremity of human progastrin <400> 3 Gln Gly Pro Trp Leu Glu Glu Glu Glu Glu Ala Tyr Gly Trp Met Asp 1 5 10 15 Phe Gly Arg Arg Ser Ala Glu Asp Glu Asn 20 25 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 4 Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr Trp 1 5 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 5 Phe Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Ser 1 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 6 Thr Arg Arg Asp Ser Pro Gln Tyr 1 5 <210> 7 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 7 Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr 1 5 10 <210> 8 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 8 Lys Val Ser 1 <210> 9 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 9 Phe Gln Gly Ser His Val Pro Phe Thr 1 5 <210> 10 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 10 Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Trp 1 5 <210> 11 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 11 Phe Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr 1 5 <210> 12 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 12 Ala Thr Asp Gly Asn Tyr Asp Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 13 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 13 Gln Ser Leu Val His Ser Ser Gly Val Thr Tyr 1 5 10 <210> 14 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 14 Lys Val Ser 1 <210> 15 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 15 Ser Gln Ser Thr His Val Pro Pro Thr 1 5 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 16 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 17 Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr 1 5 <210> 18 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 18 Thr Arg Gly Gly Tyr Tyr Pro Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 19 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 19 Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr 1 5 10 <210> 20 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 20 Leu Val Ser 1 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 21 Trp Gln Gly Thr His Ser Pro Tyr Thr 1 5 <210> 22 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 22 Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp Tyr Ala 1 5 <210> 23 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 23 Ile Ser Phe Ser Gly Tyr Thr 1 5 <210> 24 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 24 Ala Arg Glu Val Asn Tyr Gly Asp Ser Tyr His Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 25 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 25 Ser Gln His Arg Thr Tyr Thr 1 5 <210> 26 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 26 Val Lys Lys Asp Gly Ser His 1 5 <210> 27 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 27 Gly Val Gly Asp Ala Ile Lys Gly Gln Ser Val Phe Val 1 5 10 <210> 28 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 28 Gly Phe Thr Phe Thr Thr Tyr Ala 1 5 <210> 29 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 29 Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr 1 5 <210> 30 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 30 Ala Thr Gln Gly Asn Tyr Ser Leu Asp Phe 1 5 10 <210> 31 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 31 Lys Ser Leu Arg His Thr Lys Gly Ile Thr Phe 1 5 10 <210> 32 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 32 Gln Met Ser 1 <210> 33 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 33 Ala Gln Asn Leu Glu Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 34 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 34 Gly Phe Ile Phe Ser Ser Tyr Gly 1 5 <210> 35 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 35 Ile Asn Thr Phe Gly Asp Arg Thr 1 5 <210> 36 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 36 Ala Arg Gly Thr Gly Thr Tyr 1 5 <210> 37 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 37 Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr 1 5 10 <210> 38 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 38 Leu Val Ser 1 <210> 39 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 39 Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Gln Thr 1 5 <210> 40 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Amino acids 71-80 C-terminal extremity of human progastrin <400> 40 Phe Gly Arg Arg Ser Ala Glu Asp Glu Asn 1 5 10 <210> 41 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 41 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Val His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Gly Phe Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Asp Leu Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Arg Asp Ser Pro Gln Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 42 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 42 Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Leu Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 43 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 43 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Ile Glu Trp Leu Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Phe Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asp Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Leu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Asp Gly Asn Tyr Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 44 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 44 Asp Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Ser Gly Val Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 45 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 45 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Tyr Tyr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 46 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 46 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Arg Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Glu Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Ile Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 47 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 47 Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp 35 40 45 Met Gly Tyr Ile Ser Phe Ser Gly Tyr Thr Ser Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Ile Ser Val Thr Arg Asp Thr Ser Arg Asn Gln Phe Phe 65 70 75 80 Leu Gln Leu Thr Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Val Asn Tyr Gly Asp Ser Tyr His Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ile Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 48 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 48 Gln Leu Ala Leu Thr Gln Ser Ser Ser Ala Ser Phe Ser Leu Gly Ala 1 5 10 15 Ser Ala Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gln His Arg Thr Tyr Thr 20 25 30 Ile Glu Trp Tyr Gln Gln Gln Ser Leu Lys Pro Pro Lys Tyr Val Met 35 40 45 Glu Val Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly His Gly Ile Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Ser Ile Ser 65 70 75 80 Asn Ile Gln Pro Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Ile Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Gln Ser Val Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 100 105 110 Thr Val Leu 115 <210> 49 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 49 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gln Gly Asn Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 50 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 50 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Arg His Thr 20 25 30 Lys Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 51 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 51 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ser Pro Asp Arg Arg Leu Glu Leu Val 35 40 45 Ala Ser Ile Asn Thr Phe Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Thr Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Thr Gly Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 52 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 52 Asp Val Val Leu Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Gln Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 53 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 53 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Gly Phe Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Ser Arg Tyr Ser Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Arg Asp Ser Pro Gln Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 54 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 54 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 55 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 55 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Phe Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Asp Gly Asn Tyr Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 56 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 56 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Ser Gly Val Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 57 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 57 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Tyr Tyr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 58 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 58 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Ile Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Tyr Tyr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 59 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 59 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Gly Tyr Tyr Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 60 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 60 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 61 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 61 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 62 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 62 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Glu Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Ser Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 63 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 63 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile Ser Phe Ser Gly Tyr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Val Asn Tyr Gly Asp Ser Tyr His Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 64 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 64 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile Ser Phe Ser Gly Tyr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Val Asn Tyr Gly Asp Ser Tyr His Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 65 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 65 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile Ser Phe Ser Gly Tyr Thr Ser Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Val Asn Tyr Gly Asp Ser Tyr His Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 66 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 66 Gln Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gln His Arg Thr Tyr Thr 20 25 30 Ile Glu Trp His Gln Gln Gln Pro Glu Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met 35 40 45 Lys Val Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Glu Arg Tyr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Gln Ser Val Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 100 105 110 Glu Ile Lys 115 <210> 67 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 67 Gln Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gln His Arg Thr Tyr Thr 20 25 30 Ile Ala Trp His Gln Gln Gln Pro Glu Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met 35 40 45 Lys Val Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Glu Arg Tyr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Gln Ser Val Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 100 105 110 Glu Ile Lys 115 <210> 68 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 68 Gln Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gln His Arg Thr Tyr Thr 20 25 30 Ile Glu Trp His Gln Gln Gln Pro Glu Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met 35 40 45 Glu Val Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Glu Arg Tyr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Gln Ser Val Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 100 105 110 Glu Ile Lys 115 <210> 69 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 69 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gln Gly Asn Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 70 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 70 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Arg His Thr 20 25 30 Lys Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 71 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 71 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gln Gly Asn Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 72 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 72 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Arg His Thr 20 25 30 Lys Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 73 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 73 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Gln Gly Asn Tyr Ser Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 74 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 74 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Arg His Thr 20 25 30 Lys Gly Ile Thr Phe Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gln Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Ser Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Gln Asn 85 90 95 Leu Glu Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 75 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 75 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Asn Ile Asn Thr Phe Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Thr Gly Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 76 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 76 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Asn Thr Phe Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Val Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Thr Gly Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 77 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 77 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Gln Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 78 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 78 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Gln Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110

Claims (15)

  1. 폐암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 항체가 각각 아미노산 서열 서열번호 28, 29 및 30의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3을 포함하는 중쇄, 및 각각 아미노산 서열 서열번호 31, 32 및 33의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 경쇄를 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 단일 쇄 항체, 낙타화 항체(camelized antibody), IgA1 항체, IgA2 항체, IgD 항체, IgE 항체, IgG1 항체, IgG2 항체, IgG3 항체, IgG4 항체 및 IgM 항체 중에서 선택되는, 약제학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 프로가스트린-결합 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 중화 항체인, 약제학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 항체가 아미노산 서열 서열번호 49의 중쇄 가변 영역 및 아미노산 서열 서열번호 50의 경쇄 가변 영역을 포함하는 모노클로날 항체인, 약제학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 항체가 인간화 항체(humanized antibody)인, 약제학적 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 69 및 71 사이에서 선택된 아미노산 서열의 중쇄 가변 영역 및 서열번호 70 및 72 사이에서 선택된 아미노산 서열의 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화 항체이고, 상기 항체가 또한 인간 항체로부터 유래하는 경쇄 및 중쇄의 불변 영역을 포함하는, 약제학적 조성물.
  7. 제5항에 있어서, 상기 항체가 아미노산 서열 서열번호 71의 중쇄 가변 영역 및 아미노산 서열 서열번호 72의 경쇄 가변 영역을 포함하고, 상기 항체가 또한 인간 항체로부터 유래하는 경쇄 및 중쇄의 불변 영역을 포함하는, 약제학적 조성물.
  8. 제5항에 있어서, 상기 항체가 아미노산 서열 서열번호 73의 중쇄 및 아미노산 서열 서열번호 74의 경쇄를 포함하는, 약제학적 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 추가로 포함하는, 약제학적 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 제2 치료제를 추가로 포함하는, 약제학적 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 상기 치료제가 생물학적 약제 또는 화학요법제인, 약제학적 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 생물학적 약제가 항-EGFR 모노클로날 항체 또는 항-VEGF 모노클로날 항체인, 약제학적 조성물.
  13. 제11항에 있어서, 상기 화학요법제가 알킬화제, 항-대사물질, 항-종양 항생물질, 유사분열 억제제, 크로마틴 기능 억제제, 항-혈관형성제, 항-에스트로겐, 항-안드로겐 및 면역조절제의 그룹에서 선택되는, 약제학적 조성물.
  14. 삭제
  15. 삭제
KR1020197030848A 2017-03-30 2018-03-30 폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법 Active KR102616819B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17305382.8 2017-03-30
EP17305382 2017-03-30
PCT/EP2018/058346 WO2018178364A1 (en) 2017-03-30 2018-03-30 Compositions and methods for treating lung cancer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190133197A KR20190133197A (ko) 2019-12-02
KR102616819B1 true KR102616819B1 (ko) 2023-12-21

Family

ID=58578916

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197030848A Active KR102616819B1 (ko) 2017-03-30 2018-03-30 폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법
KR1020197030347A Active KR102600130B1 (ko) 2017-03-30 2018-03-30 폐암을 검출하기 위한 조성물 및 방법

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197030347A Active KR102600130B1 (ko) 2017-03-30 2018-03-30 폐암을 검출하기 위한 조성물 및 방법

Country Status (12)

Country Link
US (2) US11913958B2 (ko)
EP (2) EP3602060B1 (ko)
JP (2) JP7144063B2 (ko)
KR (2) KR102616819B1 (ko)
CN (2) CN110678753B (ko)
AU (2) AU2018246368B2 (ko)
BR (2) BR112019020224A2 (ko)
CA (2) CA3058265C (ko)
EA (2) EA201992315A1 (ko)
ES (2) ES2926532T3 (ko)
SG (2) SG11201908888VA (ko)
WO (2) WO2018178354A1 (ko)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20240018264A1 (en) * 2015-12-31 2024-01-18 Progastrine Et Cancers S.À R.L. Compositions and methods for detecting and treating ovarian cancer
JP7104153B2 (ja) * 2017-12-05 2022-07-20 プロガストリン、エ、カンセル、エス、アー エル、エル 癌を治療するための抗プロガストリン抗体と免疫療法の併用療法
WO2019110845A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Ecs-Biotracker Sàrl Radiolabeled progastrin in cancer diagnosis
TW201940881A (zh) 2018-01-26 2019-10-16 瑞士商Ｅｃｓ前胃泌激素公司 在癌症診斷中結合前胃泌激素檢測與其他癌症生物標記的技術
US20200400675A1 (en) 2018-02-27 2020-12-24 Ecs-Progastrin Sa Progastrin as a biomarker for immunotherapy
TW202521577A (zh) * 2023-08-04 2025-06-01 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 抗ｏｘ４０ｌ抗體以及其用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008076454A1 (en) * 2006-12-19 2008-06-26 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Immunogenic compositions comprising progastrin and uses thereof
JP2013516438A (ja) * 2010-01-08 2013-05-13 ビオレアリテ 乳癌を処置するための方法

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
US4975278A (en) 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
GB8924581D0 (en) 1989-11-01 1989-12-20 Pa Consulting Services Bleaching of hair
ATE139258T1 (de) 1990-01-12 1996-06-15 Cell Genesys Inc Erzeugung xenogener antikörper
GB9014932D0 (en) 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5565332A (en) 1991-09-23 1996-10-15 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
JPH05244982A (ja) 1991-12-06 1993-09-24 Sumitomo Chem Co Ltd 擬人化ｂ−ｂ１０
ZA932522B (en) 1992-04-10 1993-12-20 Res Dev Foundation Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
DE69303494T2 (de) 1992-11-13 1997-01-16 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
EP0822830B1 (en) 1995-04-27 2008-04-02 Amgen Fremont Inc. Human anti-IL-8 antibodies, derived from immunized xenomice
EP0823941A4 (en) 1995-04-28 2001-09-19 Abgenix Inc HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
EP1500329B1 (en) 1996-12-03 2012-03-21 Amgen Fremont Inc. Human antibodies that specifically bind human TNF alpha
DE69800716T2 (de) 1997-04-14 2001-09-20 Micromet Gesellschaft Fuer Biomedizinische Forschung Mbh Neues verfahren zur herstellung von anti-humanen antigenrezeptoren und deren verwendungen
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
WO2000076454A2 (en) 1999-06-14 2000-12-21 Advanced Medicine Research Institute Therapeutic compositions for ophthalmic use and therapeutic compositions for brain central lesions
US20030232399A1 (en) * 2000-06-14 2003-12-18 Robertson John Forsyth Russell Cancer detection methods and reagents
KR20040049830A (ko) * 2001-07-09 2004-06-12 애프톤 코포레이션 간, 폐 및 식도의 암 및 전암 상태의 치료 및 예방
EP1391213A1 (en) 2002-08-21 2004-02-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Compositions and methods for treating cancer using maytansinoid CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents
WO2006032980A1 (en) * 2004-09-22 2006-03-30 Receptor Biologix, Inc. Monoclonal antibolies to progastrin
US8136651B2 (en) * 2007-12-14 2012-03-20 The Procter & Gamble Company Method and apparatus for orienting articles
CN102791735B (zh) * 2009-10-16 2016-05-18 瑟维尔实验室 抗前胃泌素的单克隆抗体及其用途
US8900817B2 (en) 2010-01-08 2014-12-02 Les Laboratories Servier Progastrin and liver pathologies
US9217032B2 (en) 2010-01-08 2015-12-22 Les Laboratoires Servier Methods for treating colorectal cancer
WO2011116954A2 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Bioréalités S.A.S. Prophylaxis of colorectal and gastrointestinal cancer
AU2011284908B2 (en) 2010-07-26 2015-05-21 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Methods and compositions for liver cancer therapy
US9753043B2 (en) * 2011-12-18 2017-09-05 20/20 Genesystems, Inc. Methods and algorithms for aiding in the detection of cancer
US20140271453A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-18 Abbott Laboratories Methods for the early detection of lung cancer
CN103439511B (zh) * 2013-07-10 2015-11-04 浙江省医学科学院 一种检测肺癌的液相芯片试剂盒
WO2016066671A1 (en) * 2014-10-29 2016-05-06 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for treating resistant cancers using progastrin inhibitors
ES2987412T3 (es) 2015-12-31 2024-11-14 Ecs Progastrin Sa Composiciones y procedimientos para evaluar el riesgo de ocurrencia de cáncer
CN105727320B (zh) * 2016-01-30 2018-10-19 山西大学 检测小细胞肺癌的靶向纳米微泡及其制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008076454A1 (en) * 2006-12-19 2008-06-26 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Immunogenic compositions comprising progastrin and uses thereof
JP2013516438A (ja) * 2010-01-08 2013-05-13 ビオレアリテ 乳癌を処置するための方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110678753B (zh) 2023-10-24
BR112019020224A2 (pt) 2020-05-12
JP7144063B2 (ja) 2022-09-29
WO2018178364A1 (en) 2018-10-04
SG11201908888VA (en) 2019-10-30
JP2020515876A (ja) 2020-05-28
US11561225B2 (en) 2023-01-24
SG11201908996YA (en) 2019-10-30
CA3058265C (en) 2023-03-14
AU2018246368A1 (en) 2019-10-17
BR112019020412A2 (pt) 2020-06-09
CN110662967A (zh) 2020-01-07
KR20190132419A (ko) 2019-11-27
KR20190133197A (ko) 2019-12-02
WO2018178354A1 (en) 2018-10-04
KR102600130B1 (ko) 2023-11-08
EP3602060A1 (en) 2020-02-05
CN110678753A (zh) 2020-01-10
EA201992317A1 (ru) 2020-03-05
AU2018246368B2 (en) 2023-02-09
CA3058270A1 (en) 2018-10-04
JP2020512366A (ja) 2020-04-23
ES2926532T3 (es) 2022-10-26
EP3602061A1 (en) 2020-02-05
US11913958B2 (en) 2024-02-27
JP7251541B2 (ja) 2023-04-04
EP3602060B1 (en) 2022-07-20
ES2925227T3 (es) 2022-10-14
EP3602061B1 (en) 2022-07-20
CA3058265A1 (en) 2018-10-04
US20200103410A1 (en) 2020-04-02
CA3058270C (en) 2023-07-18
AU2018242157A1 (en) 2019-10-24
EA201992315A1 (ru) 2020-03-04
US20210085784A1 (en) 2021-03-25
AU2018242157B2 (en) 2023-02-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114502592B (zh) 靶向cldn18.2的抗体及其制备方法和应用
KR102616819B1 (ko) 폐암을 치료하기 위한 조성물 및 방법
US9238690B2 (en) Non-antagonistic EGFR-binding molecules and immunoconjugates thereof
KR102351556B1 (ko) 프로가스트린 결합 분자를 사용하는 전립선암의 검출 및 치료를 위한 조성물 및 방법
US20160060345A1 (en) Novel EGFR-Binding Molecules and Immunoconjugates Thereof
JP6113933B1 (ja) 繊維芽細胞増殖因子受容体３（ｆｇｆｒ３）に対する化合物および治療的使用
EA045260B1 (ru) Композиции и способы для лечения рака легкого
EA042429B1 (ru) Композиции и способы для диагностики и лечения рака предстательной железы с использованием молекулы, связывающей прогастрин

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

St.27 status event code: A-0-1-A10-A15-nap-PA0105

PG1501 Laying open of application

St.27 status event code: A-1-1-Q10-Q12-nap-PG1501

R17-X000 Change to representative recorded

St.27 status event code: A-3-3-R10-R17-oth-X000

A201 Request for examination
AMND Amendment
P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PA0201 Request for examination

St.27 status event code: A-1-2-D10-D11-exm-PA0201

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

St.27 status event code: A-1-2-D10-D21-exm-PE0902

T11-X000 Administrative time limit extension requested

St.27 status event code: U-3-3-T10-T11-oth-X000

AMND Amendment
E13-X000 Pre-grant limitation requested

St.27 status event code: A-2-3-E10-E13-lim-X000

P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

St.27 status event code: N-2-6-B10-B15-exm-PE0601

AMND Amendment
E13-X000 Pre-grant limitation requested

St.27 status event code: A-2-3-E10-E13-lim-X000

P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PX0901 Re-examination

St.27 status event code: A-2-3-E10-E12-rex-PX0901

PX0701 Decision of registration after re-examination

St.27 status event code: A-3-4-F10-F13-rex-PX0701

X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant
PR0701 Registration of establishment

St.27 status event code: A-2-4-F10-F11-exm-PR0701

PR1002 Payment of registration fee

St.27 status event code: A-2-2-U10-U12-oth-PR1002

Fee payment year number: 1

PG1601 Publication of registration

St.27 status event code: A-4-4-Q10-Q13-nap-PG1601