JP2019053067A

JP2019053067A - 急性腎臓損傷

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Publication number: JP2019053067A
Application number: JP2018189053A
Authority: JP
Inventors: ディターレ，フランク; Dieterle Frank; ホーフリング，ホルガー; Hoefling Holger
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2012-12-20
Filing date: 2018-10-04
Publication date: 2019-04-04
Also published as: CN104871004A; CA2895096A1; JP6416778B2; AU2013360685A1; PH12015501399A1; WO2014096110A1; US20150309052A1; TW201430347A; MX2015008108A; JP2016503162A; BR112015014232A2; MA38171A1; SG11201504329RA; AU2017232081A1; KR20150096728A; HK1209838A1; EP2936160A1; MA38171B1; CL2015001768A1; RU2015129496A

Abstract

【課題】心臓手術の後に急性腎臓損傷の重症度を予測する方法を提供する。【解決手段】心臓手術後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１および／または表２の１つ以上のマーカーを測定するステップと、表１のバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されるステップと、任意選択で、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されない場合は、表２から選択されるバイオマーカーの１つ以上の測定されたレベルに基づいて危険スコアをさらに生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬＥＲを起こす危険があると判定され、または危険スコアが所定のカットオフより低い場合、対象はＡＫＩを起こす危険がないと判定されるステップと、を含む方法。【選択図】なし

Description

発明の分野
本発明は、急性腎臓損傷を予測し、処置する方法に関する。

発明の背景
急性腎臓損傷（ＡＫＩ）は、心肺バイパス（ＣＰＢ）の頻度が高く、重篤な合併症であ
る。ＡＫＩは、尿排出量の低減がしばしば付随する、糸球体濾過速度（ＧＦＲ）の比較的
急な低下を特徴とする、新規のまたは悪化した腎機能不全である（Mehta et al 2007, J
Vasc Surg. 46(5):1085；著者返信1085）。ＡＫＩは任意の原因の一過性血圧低下の発症
の後に最も一般的に起こるが、腎毒素またはレントゲン写真の造影剤に反応して起こるこ
ともある。ＡＫＩの臨床像は、全ての入院患者の５〜７％で見出すことができ、複合外科
手術との関連でより一般的であるかもしれない。定義次第では、ＡＫＩは心肺バイパス（
ＣＰＢ）の後に成人の最大３〜４０％で起こる。心臓手術の合併症としてＡＫＩを経験し
た患者の中で、死亡の確率は軽度の場合の４倍から腎不全の場合の１５倍を超える確率に
増加する。１〜５％の症例での腎臓置換療法を必要とする重度のＡＫＩは、最大７０％の
死亡率と関連している。

ＣＰＢ関連のＡＫＩの病因は、複雑であり且つ多因子性のものであり、以下のいくつか
の損傷経路を含む：腎血流減少、拍動流の減損、低体温、粥状塞栓形成および全身性炎症
応答。損傷のこれらの機構は、異なる時間に異なる強度で活動的であるようであり、おそ
らく相乗的に作用する。現行の臨床診療では、急性腎臓損傷（ＡＫＩ）は、ＲＩＦＬＥ（
危険、損傷、不全、喪失、末期（risk, injury, failure, loss, end stage））またはＡ
ＫＩＮ（急性腎臓損傷ネットワーク）などの様々なＡＫＩ定義システムを使用して、血清
クレアチニンの増加を検出することによって典型的に診断される（Bellomo 2005 Intensi
ve Care Med. 33(3):409-13。Epub 2006 Dec 13.、Bagshaw et al 2008 23(5):1569-74。
Epub 2008 Feb 15）。しかしながら、血清クレアチニンは、いくつかの理由のために腎臓
機能の急変中の信頼できない指標物質である。第１に、血清クレアチニン濃度は腎臓機能
の約５０％が失われてしまうまで変化しないかもしれない。第２には、数日かかる可能性
がある定常状態に到達するまで、血清クレアチニンは腎臓機能を正確に反映しない。最後
に、クレアチニンの血清中レベルは、いくつかの腎臓以外の因子、例えば年齢、性別、人
種、血管内容量、筋肉代謝、薬物および栄養により影響される。これらの理由の全てによ
りＡＫＩの診断がかなりの遅れることが助長され、その時点ではかなりの腎損傷が起こっ
てしまっており、この損傷は部分的または完全に不可逆的なものである可能性がある（Ba
gshaw et al 2007, Curr Opin Crit Care. 13(6):638-44）。術前危険因子に基づき、腎
臓置換術理論（ＲＲＴ）につながる重度のＡＫＩの予測のために様々な臨床アルゴリズム
が提案されてきたが、より程度の低い腎損傷の早期診断のための客観的検査は広く利用可
能なものではない。

血清クレアチニンが上昇する前に、ＣＰＢ中およびその後にＡＫＩの信頼できる早期予
測を可能にすることができるバイオマーカーの臨床有用性を評価する必要性がある。その
ようなバイオマーカーを同定する能力は、非常に初期の時点でのＡＫＩ患者において急性
腎不全のリスク層別化および期間予測を助け、したがって有効な予防または治療戦略をも
たらす。

発明の要旨
現在、心肺バイパス手術（ＣＰＢ）などの心臓手術の後の術後期に、急性腎臓損傷（Ａ
ＫＩ）を速やかに（０〜４８時間）診断する方法がない。本発明は、ＣＰＢなどの心臓手
術の後にＡＫＩの早期予測を可能にするだけでなく、本発明のバイオマーカーは、初めて
、ＡＫＩの重症度のグレードを分類するためにさらに使用することもでき、ＡＫＩを起こ
す危険があると予測される患者のために適当な治療的介入を施与することを可能にする。

一態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を
評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１および／または表２の１つま
たは複数のマーカーを測定するステップと、
表１のバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生
成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬ
ＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されるステップと、
任意選択で、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されない場合は、表
２から選択されるバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険ス
コアをさらに生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、
対象はＲＩＦＬＥＲを起こす危険があると判定され、または危険スコアが所定のカット
オフより低い場合、対象はＡＫＩを起こす危険がないと判定されるステップと、
を含む方法を含む。

一例において、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために
、表１の２つ、３つ、４つまたはそれ以上のバイオマーカーが測定される。別の例におい
て、対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表２の２つまた
は３つのバイオマーカーが測定される。別の例において、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆもし
くはＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡＫＩを起こす危険がないか判定するた
めに、表１および表２の２つまたはそれ以上のバイオマーカーが測定される。

対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために使用することが
できる単一のマーカーおよび組合せの例を、表１４に示す。対象がＲＩＦＬＥＲを起こ
す危険があるかどうか判定するために使用することができる組合せの例を、表１５に示す
。他の組合せの例は、表３に示す。

別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度
を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料でＴＦＦ３を測定するステップと、
バイオマーカーの測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって
、所定のカットオフと比較したときの危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす
危険があるかどうかの指標となるステップと、
を含む方法を含む。

別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度
を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料でＡ１−ミクログロブリンを測定す
るステップと、
バイオマーカーの測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって
、所定のカットオフと比較したときの危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす
危険があるかどうかの指標となるステップと、
を含む方法を含む。

別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度
を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、Ｎ
ＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリ
ンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、所定のカットオフと比較したときの危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥ
Ｉ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるか、またはＡＫＩの危険がないかの指標と
なるステップと、
を含む方法を含む。

さらに別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の
重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、Ｎ
ＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択され
るバイオマーカーの少なくとも１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどう
かの指標となるステップと、
を含む方法を含む。

さらに別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の
重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＴＦＦ３、Ｂ２−ミクログロブ
リンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくと
も１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡ
ＫＩを起こす危険がないかの指標となるステップと、
を含む方法を含む。

別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断
または予測する方法であって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、Ｉ
Ｌ−１８、シスタチンＣ、ＮＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリン
およびＡ１−ミクログロブリンから選択されるバイオマーカーの少なくとも４つを測定す
るステップであって、そのレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆と
なる（predictive）ステップを含む方法を含む。

別の態様では、本発明は、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断
または予測する方法であって、以下のいずれかを測定するステップを含む方法を含む：
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料中の、そのレベルはＡＫＩの指標と
なるか、ＡＫＩの発症の前兆となる、ＴＦＦ３、ならびにＩＬ１８、シスタチンＣ、ＮＧ
ＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリンから選択さ
れるバイオマーカーの少なくとも１つ、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料中の、そのレベルはＡＫＩの指標と
なるか、ＡＫＩの発症の前兆となる、Ａ１−ミクログロブリン、ならびにＩＬ１８、シス
タチンＣ、ＮＧＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＴＦＦ−３から選択
されるバイオマーカーの少なくとも１つ、または
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料中の、そのレベルはＡＫＩの指標と
なるか、ＡＫＩの発症の前兆となる、クラステリン、ならびにＩＬ１８、シスタチンＣ、
ＮＧＡＬ、Ａ１−ミクログロブリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＴＦＦ−３から選択
されるバイオマーカーの少なくとも１つ。

上記の方法では、ＣＰＢ手術などの心臓手術の後に対象で尿クレアチニン（ｕＣｒ）を
、および対象での急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症の予測因子としてマーカーの各々とｕＣ
ｒとの比を測定することもできる。一例において、対象でＡＫＩの発症および重症度を予
測するために、少なくとも１つのバイオマーカー／ｕＣｒの加重線形組合せ（weighted l
inear combination）がレシーバー動作特性（ＲＯＣ）曲線下面積分析（Receiver-Operat
ing Characteristic area under the curve analysis）と共に使用される。

さらに別の態様では、本発明は、心臓手術の後２４時間以内に採取された患者の試料中
の、表１および表２に示す１つまたは複数のバイオマーカーの定量的測定のための診断キ
ットであって、バイオマーカーのレベルは、対象がＡＫＩを起こすかどうかおよびＡＫＩ
の重症度に関する指標となるキットを含む。

本発明のバイオマーカーは、当技術分野で公知である任意のデバイスまたは方法を使用
して測定することができる。一例では、心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の
発症を診断または予測するための看護現場デバイス（a point of care device）が使用さ
れる。一例では、デバイスは、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１
からの少なくとも１つのマーカーおよび表２からの１つのマーカーを測定するために使用
され、そのレベルはＡＫＩおよびＡＫＩの重症度の指標となる。心臓手術の例にはＣＰＢ
が含まれる。

図１は、手術前後の異なる時点での尿クレアチニン標準化の後のＩＬ−１８値の箱ひげ図（ボックスプロット）である。図２は、手術前後の異なる時点での尿クレアチニン標準化の後のＮＧＡＬ値の箱ひげ図である。図３は、手術前後の異なる時点での尿クレアチニン標準化の後のＴＦＦ３値の箱ひげ図である。

発明の詳細な説明
患者の遺伝子およびプロテオーム（protenomic）プロファイルは、疾患の診断のために
使用することができること、または治療処置への患者の応答を決定することができること
を示唆する証拠が増加している。様々な疾患を処置するために利用できる多数の療法があ
るならば、遺伝子およびタンパク質因子の判定は、例えば特定の手術または薬物への患者
の応答を予測するかまたは変化させるために使用することができる。これらの因子の判定
は、より優れた処置および早期の介入を提供するために使用することができた。

心肺バイパス手術（ＣＰＢ）の重篤な合併症は急性腎臓損傷（ＡＫＩ）であり、それは
腎臓機能の急激な喪失を指す。ＣＰＢ後のＡＫＩは、その診断が遅れる（一般的に事象か
ら１〜５日後）ことによる重篤な合併症であり、３〜４０％の発生率を有し、死亡率の増
加および慢性腎臓疾患の危険にしばしばつながることがある。急性腎臓損傷の統一された
定義を確立するために、ＡｃｕｔｅＤｉａｌｙｓｉｓＱｕａｌｉｔｙＩｎｉｔｉａ
ｔｉｖｅは、危険、損傷、不全、喪失および末期腎臓（ＲＩＦＬＥ）分類を策定した。

ＲＩＦＬＥは急性腎臓損傷の重症度の増加の３つのグレードである危険（risk）（クラ
スＲ）、損傷（injury）（クラスＩ）および不全（failure）（クラスＦ）を規定する。
ＲＩＦＬＥ分類は、ベースライン状態からの血清クレアチニンまたは尿排出量のいずれか
の変化に基づいて、急性腎臓損傷の重症度の３つのグレードを提供する。例えば、ベース
ラインと比較した以下の血清クレアチニン（ＳＣｒ）レベルを、患者の病期診断のために
使用することができる：

血清クレアチニン（ＳＣｒ）だけに基づくＡＫＩの診断は、ＳＣｒ測定の変動性を含む
限界を有し、患者の水分補給状態または体液管理によって影響を受ける可能性がある。さ
らに、ＳＣｒはあまり感受性ではなく、しばしば損傷が起こってから１〜５日後にのみ起
こる。優れたベースライン腎機能を有する一部の患者は、「腎予備力（renal reserve）
」によるＳＣｒの増加なしに腎臓損傷が起こる可能性がある。ＡＫＩのためのＲＩＦＬＥ
の別の要素である尿排出量は、特にＣＰＢの後のＡＫＩに関してはＳＣｒと同様に遅く、
感受性でない。したがってＡＫＩの診断およびグレーディングのために現在実施されてい
る方法は、不十分である。本発明は、ＣＰＢ手術などの心臓手術の後のＡＫＩの早期予測
を可能にし、ＡＫＩを起こすＣＰＢ患者への治療的有益性を最大にする可能性を提供する
。

本明細書に記載される方法は、心臓手術の後に患者がＡＫＩを起こすかどうか早期に（
例えば、２４時間以内に）予測するために、特にＡＫＩの重症度を予測するために使用す
ることができる尿中のタンパク質バイオマーカーの１つまたは複数の同定に一部基づく。
本発明により、ＲＩＦＬＥを使用するＡＫＩのグレーディングのための現在認識されるシ
ステムに適合させようと試みるとき、本発明を使用して患者を３つのグレードに分類する
ことができる。具体的には、本発明のバイオマーカーは、個体が手術後にＲＩＦＬＥ危険
クラスＩまたはＦ（本明細書においてＲＩＦＬＥＩ／Ｆと呼ぶ）を起こしそうかどうか
予測することができる。個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを有していないと判定される場合は、
その個体がＲＩＦＬＥＲを起こす可能性について個体をさらに評価することができる。
個体がＲＩＦＬＥＲカテゴリーに分類されないと評価される場合は、その個体はＡＫＩ
を起こす可能性が低い個体であると評価される。

したがって、本方法は、個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲを起こす可能性が
あるか、ＡＫＩを起こす可能性がないかを予測する手段を提供する。

本発明の方法はＣＰＢまたはＣＡＢＧなどの心臓手術に適用できるだけでなく、ＡＫＩ
をもたらし、ＡＫＩの重症度レベルの判定が有益であろういかなる手術（身体的外傷）ま
たは事象にも適用できる。企図される手術には、心臓手術および移植手術ほかを含めるこ
とができる。

バイオマーカー
本発明は、ＣＰＢなどの心臓手術の後４８時間（例えば０．５、１、２、３、４、５、
６、７、８、９、１０、１１、１２、２０、２４、２８、３０、３４、３８、４０、４２
、４４、４６または４８時間）以内にＡＫＩを指示し、グレード分けするために、特定の
タンパク質バイオマーカーを使用することができるとの知見に基づく。特に、上に説明さ
れるようにＡＫＩの重症度の３つの群を予測することができるように、腎臓バイオマーカ
ーを２つの群に分けることができることが判明した。バイオマーカーの第１の群は、重度
のＡＫＩ（ＲＩＦＬＥモデルによって解釈される「損傷」および「不全」と同等；ＲＩＦ
ＬＥＩ／Ｆ）の指標となり、表１に示され、マーカーの第２の群は、より穏やかなＡＫ
Ｉ（ＲＩＦＬＥによって解釈される「危険」と同等、ＲＩＦＬＥＲ）の指標となり、表
２に示される。

一例では、危険スコアを生成して、その危険スコアを所定のカットオフと比較すること
によって個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、ＴＦＦ
３またはＡ１−ミクログロブリンなどの単一のバイオマーカーを使用することができる。

別の例では、危険スコアを生成して、その危険スコアを所定のカットオフと比較するこ
とによって個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか最初に判定するために
、ＴＦＦ３またはＡ１−ミクログロブリンなどの単一のバイオマーカーを使用することが
でき、個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを有しないと判定される場合は、危険スコアを生成して
、その危険スコアを所定のカットオフと比較することによってその個体がＲＩＦＬＥＲ
を起こす危険があるかどうか判定するためにその単一のマーカーを任意選択で使用するこ
ともできる。個体がＲＩＦＬＥＩ／ＦまたはＲＩＦＬＥＲを有しないと判定される場
合は、その個体はＡＫＩを起こすいかなる危険も有しないと評価される。

別の例では、ＣＰＢから４８時間以内、例えば１２、８、４時間以下以内にＡＫＩの重
症度を予測し、グレード分けするために、ＲＩＦＬＥＩ／Ｆバイオマーカー（表１）お
よび／またはＲＩＦＬＥＲバイオマーカー（表２）の組合せを使用することができるこ
とが判明した。

別の例では、本発明のバイオマーカーには、表１に列挙される少なくとも１つのバイオ
マーカータンパク質および表２に列挙される少なくとも１つのバイオマーカータンパク質
が含まれる。バイオマーカーの任意の組合せを選択することができる。組合せの例を、下
の表３に示す。

バイオマーカータンパク質の検出
ＣＰＢなどの心臓手術の後に対象が特定のグレードのＡＫＩを起こす可能性の増加を有
するかどうか判定するために、表１および表２に開示されるバイオマーカータンパク質が
測定される。一般的に、本発明の方法は、尿、血液、血清または血漿などの対象の生体流
体試料で対象のバイオマーカータンパク質を検出するために使用される。一例では、表１
で特定されるＲＩＦＬＥＩ／Ｆマーカーまたは表２で特定されるＲＩＦＬＥＲマーカ
ーが心臓手術後の患者の血清または血漿試料から測定され、血清中レベルは、上述のＲＩ
ＦＬＥ基準によって判定されるＡＫＩの発症および重症度を予測するために使用される。
別の例では、表１で特定されるＲＩＦＬＥＩ／Ｆバイオマーカーまたは表２で特定され
るＲＩＦＬＥＲバイオマーカーが心臓手術後の患者の尿試料から測定され、尿中レベル
はＡＫＩの発症および重症度を予測するために使用される。任意選択で、事象後の患者で
の血清クレアチニン（ｓＣｒ）および／または尿クレアチニン（ｕＣｒ）を標準化のため
に測定し、使用することもできる。

本発明の方法の実施で使用される生体試料は、対象から収集される新鮮試料もしくは冷
凍試料であるか、または既知の診断、処置および／もしくは転帰履歴を有する保管試料で
あってもよい。特定の実施形態では、本発明の方法は、試料を処理せずにまたは限定的処
理により尿試料自体で実施される。

一部の例では、対象のバイオマーカータンパク質は、手術前に、例えば手術の０〜２４
時間前、および／または手術（例えば、ＣＰＢ）から４８時間以内、例えば手術直後、０
時、それ以後の任意の時間、例えば０〜０．５、約０〜１、約０〜２、約０〜３、約０〜
４、約０〜５、約０〜６、約０〜７、約０〜８、約０〜９、約０〜１０、もしくは約０．
５〜４時間、もしくは約０．５〜８時間、もしくは約０．５〜１２時間、もしくは約０．
５〜２４時間、もしくは約０．５〜４８時間以内の任意の時間；または約０．５時間、も
しくは約１時間、もしくは約２時間、もしくは約３時間、もしくは約４時間、もしくは約
５時間、もしくは約６時間、もしくは約７時間、もしくは約８時間、もしくは約９時間、
もしくは約１０時間、もしくは約１１時間、もしくは約１２時間、もしくは約２４時間以
内に測定することができる。別の例では、対象のバイオマーカータンパク質は、ＩＣＵへ
の入院の後に測定することができる。この明細書では、「約」はプラスマイナス１０パー
セントの範囲を表すために定量的用語で用いられる。さらに、「約」が定量的用語と併用
される場合、値プラスマイナス１０パーセントに加えて、定量的用語の正確な値も企図さ
れ、記載されるものと理解される。例えば、用語「約３パーセント」は正確に３パーセン
トを明示的に企図し、記載し、含む。

本明細書に記載されるバイオマーカーレベルは直接に計算することができる、あるいは
クレアチニン（または任意の他の適当なマーカー）などの標準化バイオマーカーとの比と
して計算および／または表現することができる。例えば、ＴＦＦ３レベルは、同じ試料タ
イプでのクレアチニンレベルの比として計算および／または表現することができる（例え
ば、そのレベルは、尿１ミリリットルあたりのＴＦＦ３のｎｇ数をｍｇ／ｍｌ尿で表す尿
クレアチニンで割り算したものとして表すことができる）。

本発明の方法は、事象後にバイオマーカーの存在下で表１または表２の尿バイオマーカ
ーを測定し、変化の動態を使用して患者でのＡＫＩの発症および重症度を予測することを
含むこともできる。実際、バイオマーカーはそれらのダイナミックレンジに基づいて特異
的に選択される、すなわち損傷前のベースラインレベルと比較して、または非ＡＫＩ対象
のレベル（正常範囲）と比較してそれらのレベルが損傷の結果強くモジュレートされるバ
イオマーカーが好ましい。実施例７も参照。

一実施形態では、変化の動態を測定する場合、陽性のパーセント変化はＲＩＦＬＥＲ
のＡＫＩと関連し、より陽性のパーセント変化はＲＩＦＬＥＩ／Ｆの前兆となる。

尿バイオマーカータンパク質レベルは、限定されずに免疫沈降アッセイ、質量分析、ウ
エスタンブロット法を含む当業者に公知である任意のアッセイを使用して、およびディッ
プスティックにより従来の技術を使用して測定することができる。一実施形態では、尿中
のバイオマーカータンパク質のレベルは、イムノアッセイによって検出される。イムノア
ッセイには、限定されずに、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）とも呼ばれる酵素免
疫検定法（ＥＩＡ）、放射線免疫検定法（ＲＩＡ）、拡散イムノアッセイ（ＤＩＡ）、蛍
光免疫検定法（ＦＩＡ）、化学発光イムノアッセイ（ＣＬＩＡ）、計数イムノアッセイ（
ＣＩＡ）、ラテラルフロー免疫クロマトグラフィーアッセイとしても知られるラテラルフ
ロー試験またはイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）、および磁気イムノアッセイ（ＭＩＡ）が含
まれる。

比較のために、患者からの尿試料中のバイオマーカータンパク質のレベルは、標準化値
として使用される測定された尿Ｃｒレベルに対して測定することができる。

個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆの危険を起こす可能性があるかどうか予測するために使用さ
れる、尿などの試料中の表１のバイオマーカーのレベル、または、個体がＲＩＦＬＥＲ
を起こす可能性があるかどうかを測定するために使用される表２のバイオマーカーのレベ
ルは、任意のタンパク質結合剤を使用して判定することができる。一部の実施形態では、
タンパク質結合剤はバイオマーカータンパク質に特異的に結合するリガンドであり、例え
ば、合成ペプチド、化学物質、小分子、または抗体もしくは抗体断片もしくはその変異形
であってもよい。一部の実施形態では、タンパク質結合剤はリガンドまたは抗体または抗
体断片であり、一部の実施形態では、タンパク質結合剤は好ましくは検出可能に標識され
る。

本発明の一実施形態では、抗体を使用するイムノアッセイは、表１および／または表２
のバイオマーカータンパク質の尿中レベルを測定するために使用される。本明細書で用い
るように、用語「抗体」には、抗体のポリクローナル、モノクローナルまたは他の精製さ
れた調製物が含まれ、組換え抗体には、ヒト化抗体、二重特異的抗体、および抗体分子に
由来する少なくとも１つの抗原結合決定因子を有するキメラ分子が含まれる。使用される
抗体は、例えば任意のアイソタイプ（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥなど）の完全抗体
を含むものとし、測定されるバイオマーカータンパク質と特異的に同じく反応性であるそ
の断片を含む。抗体の断片の非限定例には、タンパク分解および／または組換え断片、例
えばペプチドリンカーによって連結されるＶＬおよびＶＨドメインを含有する、Ｆａｂ、
Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆｖ、ｄＡｂおよび単鎖抗体（ｓｃＦｖ）が含まれる。ｓｃ
Ｆｖは、共有結合または非共有結合で連結して、２つ以上の結合部位を有する抗体を形成
することができる。

本発明の方法で有益なバイオマーカータンパク質は、当技術分野で公知である。

バイオマーカータンパク質に対する抗体は、当業者に公知である方法を使用して生成す
ることができる。あるいは、市販抗体を使用することができる。一実施形態では、対象の
バイオマーカーを分析するための市販のキット、例えばＲＢＭが入手できる。

一実施形態では、抗体は検出可能に標識される。

本明細書で用いるように「検出可能に標識される」には、測定可能な手段によって標識
される抗体が含まれ、限定されずに酵素、放射能、蛍光および化学発光で標識される抗体
が含まれる。抗体は、検出可能なタグ、例えばｃ−Ｍｙｃ、ＨＡ、ＶＳＶ−Ｇ、ＨＳＶ、
ＦＬＡＧ、Ｖ５、ＨＩＳまたはビオチンで標識されてもよい。

一実施形態では、抗体は、抗体を酵素に連結することによって検出可能に標識される。
酵素は、その基質に曝露させたとき、次に、例えば分光光度的、蛍光定量的または視覚的
手段によって検出することができる化学部分を生成するような方法で基質と反応する。本
発明の抗体を検出可能に標識するために用いることができる酵素には、リンゴ酸脱水素酵
素、ブドウ球菌ヌクレアーゼ、デルタ−Ｖ−ステロイドイソメラーゼ、酵母アルコール脱
水素酵素、アルファ−グリセロリン酸脱水素酵素、トリオースリン酸イソメラーゼ、西洋
ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコースオキ
シダーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、グ
ルコース−ＶＩ−リン酸脱水素酵素、グルコアミラーゼおよびアセチルコリンエステラー
ゼが含まれるが、これらに限定されない。

抗体を蛍光化合物で標識することも可能である。蛍光標識抗体を適切な波長の光に曝露
させると、蛍光によりその存在を次に検出することができる。最も一般的に使用される蛍
光標識化合物には、ＣＹＥ色素、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、フィ
コエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒドおよびフル
オレスカミンがある。ランタニド系の標識などの蛍光放射金属を使用して、抗体を検出可
能に標識することもできる。これらの金属は、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰ
Ａ）またはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）のような金属キレート化基を使用して抗
体に付着させることができる。

抗体は、それを化学発光化合物に結合することによって検出可能に標識することもでき
る。化学反応の過程中に発生する発光の存在を検出することによって、化学発光−抗体の
存在が次に判定される。特に有益な化学発光標識化合物の例は、ルミノール、ルシフェリ
ン、イソルミノール、セロマティックアクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジ
ニウム塩およびシュウ酸エステルである。

一例では、ＲＩＦＬＥＩ／ＦおよびＲＩＦＬＥＲのレベルを判定するために使用さ
れるアッセイは、競合的イムノアッセイなどのイムノアッセイである。別の実施形態では
、イムノアッセイは非競合的イムノアッセイである。

別の実施形態では、尿中のバイオマーカータンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡアッセイ
によって検出される。当業者に周知であるＥＬＩＳＡの異なる形、例えば標準ＥＬＩＳＡ
、競合的ＥＬＩＳＡおよびサンドイッチＥＬＩＳＡがある。ＥＬＩＳＡの標準技術は、"M
ethods in Immunodiagnosis", 2nd Edition, Rose and Bigazzi, eds. John Wiley & Son
s, 1980；Campbell et al., "Methods and Immunology", W. A. Benjamin, Inc., 1964；
およびOellerich, M. 1984, J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 22:895-904に記載される
。

本明細書に記載されるＥＬＩＳＡ法については、抗バイオマーカー抗体の既知量を固体
表面に固定し、次に、抗原バイオマーカーが固定化抗体（第１の抗体）に結合することが
できるように対象のバイオマーカーを含有する尿試料を表面に洗い流す。あらゆる未結合
のバイオマーカーおよび尿試料中に存在するいかなるバイオマーカー以外のタンパク質も
除去するために、表面を洗浄する。検出抗体（第２の抗体）を表面に加える。検出抗体は
、対象中のバイオマーカーに特異的である。ＥＬＩＳＡの実施は、抗バイオマーカー抗体
の既知量を、固体支持体（通常、ポリスチレンマイクロタイタープレート）の上に非特異
的に（表面への吸着を通して）、または特異的に（「サンドイッチ」ＥＬＩＳＡでの、抗
バイオマーカー抗体に特異的な別の抗体による捕捉を通して）固定化することを含む。試
料のバイオマーカータンパク質の固定化の後、検出抗体を加え、抗原との複合体を形成す
る。

一実施形態では、測定する各バイオマーカータンパク質に特異的な少なくとも２つの抗
体を使用して、表１からの少なくとも１つのバイオマーカーおよび表２からの少なくとも
１つのバイオマーカーのレベルを選択して、測定する。別の実施形態では、測定する各バ
イオマーカータンパク質に特異的な少なくとも３つの抗体を使用して、第１のバイオマー
カータンパク質、第２のバイオマーカータンパク質および第３のバイオマーカータンパク
質を規定する３つのバイオマーカータンパク質（少なくとも１つは表１から、１つは表２
から選択される）のレベルを測定し、各抗体は、測定する第１のバイオマーカータンパク
質、第２のバイオマーカータンパク質または第３のバイオマーカータンパク質と特異的に
反応する。一実施形態では、測定する各バイオマーカータンパク質に特異的な少なくとも
４つの抗体を使用して、第１、第２、第３および第４のバイオマーカータンパク質を規定
する４つのバイオマーカータンパク質（少なくとも１つは表１から、１つは表２から選択
される）のレベルを測定する。

別の実施形態では、試料中の表１および／または表２のバイオマーカーのレベルは、看
護現場検査（ＰＯＣ）としても知られるオンザスポットアッセイによって検出される。Ｐ
ＯＣは、患者看護の現場またはその近くでの診断検査と規定され、例えばこの場合にはＰ
ＯＣはＩＣＵ内であってもよい。提供される例によって明白になるように、本発明は、心
臓手術の後最初の１〜２４時間以内のＲＩＦＬＥＩ／ＦもしくはＲＩＦＬＥＲの発症
、またはＡＫＩの無発症およびそのグレード分けに関して、患者の状態に関する正確な読
取りを提供することができる。ＰＯＣは、患者に便利で迅速な検査をもたらす。これは、
患者がタイムリーに結果を受け取る可能性を増加させる。ＰＯＣは、移動可能で、持ち運
びができる携帯機器（例えば、血糖メーター、神経伝導研究デバイス）および検査キット
（例えば、ＣＲＰ、ＨＢＡ１Ｃ、ホモシステイン、ＨＩＶ唾液アッセイなど）の使用を通
して達成される。ＰＯＣ検査は、当技術分野、特にイムノアッセイで周知である。例えば
、ＰＯＣ診断キットにＬＦＩＡ検査ストリップまたはディップスティックを容易に組み込
むことができる。当業者は、異なるフォーマットを使用してＰＯＣのためにイムノアッセ
イを改変することができ、例は微流動デバイスフォーマットまたは検査ストリップフォー
マットでのＥＬＩＳＡである。

一実施形態では、尿中のバイオマーカータンパク質のレベルは、免疫クロマトグラフィ
ーアッセイとしても知られるラテラルフローイムノアッセイ検査（ＬＦＩＡ）、またはス
トリップ検査によって検出される。ＬＦＩＡは、流体試料中の標的バイオマーカー抗原の
存在（または不在）を検出するために、表１および／または表２のタンパク質を検出する
ことができる単純なデバイスである。自宅検査、看護現場検査または検査室用途のための
医学診断のために使用される、多くのＬＦＩＡ検査が現在ある。ＬＦＩＡ検査は、検査試
料が毛管作用を通して固体基質に沿って流れる形のイムノアッセイである。試料が検査に
加えられた後、それは、試料と混ざり、抗体または抗原で前処理された系またはゾーンに
遭遇する基質を移動させる着色試薬に遭遇する。

別の実施形態では、尿中のバイオマーカータンパク質のレベルは、拡散イムノアッセイ
（ＤＩＡ）によって検出される。このアッセイでは、マイクロチャネル、例えば微流動チ
ップ内の流れと垂直である分子の輸送は、抗原と抗体の間の結合によって影響を受ける。
流体試料中の分析物またはバイオマーカーの検出のための微流動拡散イムノアッセイは、
当技術分野で、例えば米国特許第６，５４１，２１３号；第６，９４９，３７７号；第７
，２７１，００７号；米国特許出願第２００９０１９４７０７号；第２００９０１８１４
１１号；Hatch et al., 2001, Nature Biotechnology 19(5): 461-465; Kに記載されてい
る。

別の例では、ＰＯＣ検査デバイスは、参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ２００
６０２６３８９４に開示されるピエゾ（またはピロ）フィルムに基づく。このＰＯＣ検査
を使用する一実施形態では、ピエゾフィルムは、本発明の表１および／または表２に開示
される１つまたは複数のバイオマーカーに対する抗体でコーティングされる。一例では、
ＰＯＣデバイスは、ピエゾフィルムが存在するチャンバーにつながる毛細管を有するカー
トリッジである。毛細管の内部表面は、ピエゾフィルムに結合する抗体と異なる分子部位
であるが、表１および／または表２に開示されるバイオマーカーに同様に特異的に結合す
ることができる、本発明の表１および／または表２に開示される１つまたは複数のバイオ
マーカーに対する第２の抗体の乾燥層でコーティングされる（今回は炭素粒子に連結され
る）。体液試料は、カートリッジ内のピエゾフィルム検査領域まで、炭素−抗体コンジュ
ゲートを溶解しつつ毛細管に沿って移動する。炭素コンジュゲートと混合された試料がピ
エゾフィルムに到達すると、本発明の表１および／または表２に開示される１つまたは複
数のタンパク質バイオマーカーが検査試料中に存在する場合は、両方の抗体に同時に結合
する。この反応は、本発明の表１および／または表２に開示される１つまたは複数のバイ
オマーカーが２セットの抗体の間に詰められている、「サンドイッチ」をもたらす。サン
ドイッチ反応は、炭素粒子をピエゾフィルムに連結させる。反応中、デスクトップ読取装
置は、フラッシング発光ダイオード（ＬＥＤ）を使用して試料を数ミリ秒おきに照らす。
フィルムに連結された炭素粒子は光を吸収してそれを熱に変換し、熱はフィルムを変形さ
せて電荷を生成する。より多くの炭素粒子がフィルムに連結されるに従って、光の各パル
スはより大きな熱伝達を、したがってより大きな電荷をもたらす。電荷の変化速度は、試
料中の本発明の表１および／または表２に開示される１つまたは複数のバイオマーカーの
濃度に比例する。ピエゾフィルム越えの電荷の経時的測定は、試料中のタンパク質バイオ
マーカー濃度の尺度となる。

上記のシステムを使用する別の実施形態では、競合アッセイフォーマットを用いること
ができる。この例では、表１および／または表２に列挙されるバイオマーカーの１つまた
は複数に対する抗体がピエゾフィルムにコーティングされ、毛細管の内部は炭素標識にコ
ンジュゲートされるバイオマーカータンパク質誘導体の乾燥層でコーティングされる。体
液試料が毛細管に沿って移動すると、それは炭素−タンパク質コンジュゲートを溶解する
。炭素コンジュゲートと混合させた試料がピエゾフィルムに到達すると、試料中のバイオ
マーカータンパク質はコーティングされたバイオマーカー抗体に関してタンパク質コンジ
ュゲートと競合し、タンパク質バイオマーカーの濃度はピエゾフィルム越しの経時的変化
を測定することによって判定することができる。あるいは、試料タンパク質および抗体が
結合することができる表１および／または表２に示すバイオマーカーの１つまたは複数の
バイオマーカー誘導体は、ピエゾフィルムに結合する。この例では、毛細管の内面は、炭
素で標識したバイオマーカー抗体の乾燥層でコーティングされる。試料が抗体−炭素コン
ジュゲートを溶解すると、試料中のバイオマーカータンパク質は抗体への結合に関してバ
イオマーカー誘導体と競合する。タンパク質バイオマーカーの濃度は、ピエゾフィルム越
しの経時的変化を測定することによって判定することができる。これらのアッセイで使用
される競合者は、バイオマーカー抗体結合部位に関してバイオマーカータンパク質と競合
することができる任意の分子、ペプチドまたはその誘導体であってもよい。バイオマーカ
ー誘導体は、任意の公知の標識、例えばビオチン化標識または炭素にコンジュゲートさせ
ることができる。

キット
本発明の実施形態は、診断キットおよび診断キットを含む製造品をさらに提供する。キ
ットは、ヒトでＡＫＩを予測するための手段を含むことができる。

一実施形態では、キットは尿試料中のバイオマーカータンパク質のレベルに応答性であ
る指示薬を含み、バイオマーカータンパク質は表１からの少なくとも１つのバイオマーカ
ーおよび表２からの少なくとも１つのバイオマーカーから選択される。例については表３
を参照する。キットは、尿試料収集のためのカップまたは管、または任意の他の収集デバ
イスをさらに含むことができる。別の実施形態では、キットは、検査結果の解釈を記載す
る少なくとも１つの図および／または説明書を任意選択でさらに含むことができる。

データ分析
本発明の方法では、測定される各バイオマーカーのレベルは、ｕＣＲ、または１つもし
くはいくつかの対照タンパク質もしくは内因性代謝産物の平均、または尿比重による標準
化の後の値に一般的に変換される。生成される値は、次にＡＫＩソフトウェアアルゴリズ
ムに提供されてスコアを生成するために使用され、スコアは、ＡＫＩを起こす可能性のあ
る対象を選択し、ＡＫＩの重症度を予測するために、次に所定のカットオフと比較される
。

一例において、対象でＡＫＩの発症を予測するために、表１の少なくとも１つのバイオ
マーカー／ｕＣｒおよび表２の１つのバイオマーカー／ｕＣｒの加重線形組合せがレシー
バー動作特性（ＲＯＣ）曲線下面積分析と共に使用される。

試料分析操作を促進するために、読取装置によってデバイスから得られるデータは、デ
ジタル式コンピュータを使用して分析してもよい。一般的に、コンピュータはデバイスか
らデータの受け取りおよび保存、ならびに集めたデータの分析および報告、例えばバック
グラウンドの減算、対照が適切に性能を発揮したことの検証、シグナルの標準化、ハイブ
リダイズした標的の量を判定するための蛍光データの解釈、バックグラウンドの標準化等
のために適切にプログラムされる。

一例では、本発明の方法では、ＣＰＢ手術などの心臓手術を受ける患者からの尿試料は
手術後に収集され、任意選択で、ベースラインとして手術前にも収集される。術後試料、
および任意選択でベースライン試料のために、尿試料は表１および／または２に示すバイ
オマーカーのいずれかについて測定される。本発明のバイオマーカーのレベルを標準化す
るために、尿クレアチニンを測定することもできる。下に示す方法を含めて、当技術分野
の任意の方法によってデータを分析することができる。

方法１：前処理のみ
ステップ１：手術の前と後に表１および表２のバイオマーカーの１つまたは複数を測定す
る。
ステップ２：表１のバイオマーカーの処理した測定値の各々を、マーカー特異的カットオ
フと比較する。マーカー特異的カットオフを超えるマーカーの数を、判定する。前で特定
された数のマーカーがカットオフを超える場合は、患者はＲＩＦＬＥＩ／Ｆカテゴリー
に属すると分類される。全てのマーカーがカットオフを超えること、または１つ以外の全
てのマーカー、または２つ以外の全てのマーカーなど、または単一のマーカーだけがカッ
トオフを超えることが必要かもしれない。患者がＲＩＦＬＥＩ／Ｆとして分類される場
合は、評価はここで終わり、そうでなければ評価は次のステップに進行することができる
。
ステップ３：表２のバイオマーカーの全ての処理したマーカー測定値の加重平均をとり、
結果を前に特定したカットオフと比較する。使用される加重は全てのバイオマーカーにつ
いて同じであってもよいが、それらは各マーカーに特異的であってもよい。加重平均がカ
ットオフを上回る場合は、結果をＲＩＦＬＥＲとして分類する。患者がＲＩＦＬＥＲ
として分類されない場合は、次のステップに進む。
ステップ４：患者を「ＡＫＩなし（No AKI）」として分類する。

方法２：前処理および尿クレアチニン標準化。
ステップ１：手術の前と後に表１および表２のバイオマーカーの１つまたは複数ならびに
尿クレアチニンを測定する。
ステップ２：尿クレアチニン以外の全ての測定されたバイオマーカーについて、マーカー
の値を尿クレアチニンの値で割り算する。
ステップ３：表１のマーカーの処理したマーカー測定値の各々を、マーカー特異的カット
オフと比較する。マーカー特異的カットオフを超えるマーカーの数を、判定する。前で特
定された数のマーカーがカットオフを超える場合は、患者はＲＩＦＬＥＩ／Ｆカテゴリ
ーに属すると分類される。全てのマーカーがカットオフを超えること、または１つ以外の
全てのマーカー、または２つ以外の全てのマーカーなど、または単一のマーカーだけがカ
ットオフを超えることが必要かもしれない。患者がＲＩＦＬＥＩ／Ｆとして分類される
場合は、評価はここで終わり、そうでなければ評価は次のステップに進行することができ
る。
ステップ４：表２の単一のマーカーの測定値または表２のマーカーの全ての処理したマー
カー測定値の加重平均をとり、結果を前に特定したカットオフと比較する。使用される加
重は全てのマーカーについて同じであってもよいが、それらは各マーカーに特異的であっ
てもよい。加重平均がカットオフを上回る場合は、結果をＲＩＦＬＥＲとして分類する
。患者がＲＩＦＬＥＲとして分類されない場合は、次のステップに進む。
ステップ５：患者を「ＡＫＩなし」として分類する。

方法３：前処理およびベースライン標準化
ステップ１：手術の前と後に表１および表２のバイオマーカーの１つまたは複数ならびに
尿クレアチニンを測定する。
ステップ２：各バイオマーカーについて、術後試料の値をベースライン試料の値で割り算
する。各々の引き続くステップのために、これらの生じた値を使用する。
ステップ３：表１のマーカーの処理したマーカー測定値の各々を、マーカー特異的カット
オフと比較する。マーカー特異的カットオフを超えるマーカーの数を、判定する。前で特
定された数のマーカーがカットオフを超える場合は、患者はＲＩＦＬＥＩ／Ｆカテゴリ
ーに属すると分類される。全てのマーカーがカットオフを超えること、または１つ以外の
全てのマーカー、または２つ以外の全てのマーカーなど、または単一のマーカーだけがカ
ットオフを超えることが必要かもしれない。患者がＲＩＦＬＥＩ／Ｆとして分類される
場合は、評価はここで終わり、そうでなければ評価は次のステップに進行することができ
る。
ステップ４：表２の単一のマーカーの測定値または表２のマーカーの全ての処理したマー
カー測定値の加重平均をとり、結果を前に特定したカットオフと比較する。使用される加
重は全てのマーカーについて同じであってもよいが、それらは各マーカーに特異的であっ
てもよい。加重平均がカットオフを上回る場合は、結果をＲＩＦＬＥＲとして分類する
。患者がＲＩＦＬＥＲとして分類されない場合は、次のステップに進む。
ステップ５：患者を「ＡＫＩなし」として分類する。

方法４：前処理、尿クレアチニンおよびベースライン標準化
ステップ１：手術の前と後に、尿クレアチニンを含む表１および／または表２のバイオマ
ーカーのいずれかを測定する。
ステップ２：各バイオマーカーおよびベースラインならびに術後試料について、マーカー
の値を同じ試料の尿クレアチニンの値で割り算する。生じた値を次のステップのために使
用する。
ステップ３：各バイオマーカーについて、術後試料の値をベースライン試料の値で割り算
する。各々の引き続くステップのために、これらの生じた値を使用する。
ステップ４：表１のマーカーの処理したマーカー測定値の各々を、マーカー特異的カット
オフと比較する。マーカー特異的カットオフを超えるマーカーの数を、判定する。前で特
定された数のマーカーがカットオフを超える場合は、患者はＲＩＦＬＥＩ／Ｆカテゴリ
ーに属すると分類される。全てのマーカーがカットオフを超えること、または１つ以外の
全てのマーカー、または２つ以外の全てのマーカーなど、または単一のマーカーだけがカ
ットオフを超えることが必要かもしれない。患者がＲＩＦＬＥＩ／Ｆとして分類される
場合は、評価はここで終わり、そうでなければ評価は次のステップに進行する。
ステップ５：表２のマーカーの全ての処理したマーカー測定値の加重平均をとり、結果を
前に特定したカットオフと比較する。使用される加重は全てのマーカーについて同じであ
ってもよいが、それらは各マーカーに特異的であってもよい。加重平均がカットオフを上
回る場合は、結果をＲＩＦＬＥＲとして分類する。患者がＲＩＦＬＥＲとして分類さ
れない場合は、次のステップに進む。
ステップ６：患者を「ＡＫＩなし」として分類する。

追加の分類法：
患者をＲＩＦＬＥＩ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲまたはＡＫＩなしと分類するための上記の
分類法の代わりに、いくつかの他の標準の分類ツールを同様に使用することができた。可
能な方法は、限定されずに以下のものであってもよい：
・線形回帰、ロジスティック回帰、多項回帰
・ペナルティー線形またはロジスティックまたは多項回帰
・サポートベクターマシン（Support Vector Machines）
・線形判別分析
・二次判別分析
・分類および回帰ツリー
・ランダムフォレスト（Random Forests）

当技術分野で訓練された人々にとって、これらおよび他の類似の方法は全て標準とみな
され、上記の分類ステップのいずれかに容易に適用できる。これらおよび他の方法のより
詳細な参考文献については、Hastie, Tibshirani and Friedmanによる"Elements of Stat
istical Learning"を参照する。

試料分析操作を促進するために、得られるデータは、デジタル式コンピュータを使用し
て分析してもよい。一般的に、コンピュータは、デバイスからのデータの受け取りおよび
保存、ならびに集めたデータの分析および報告、例えばバックグラウンドの減算、対照が
適切に性能を発揮したことの検証、シグナルの標準化、ハイブリダイズした標的の量を判
定するための蛍光データの解釈、バックグラウンドの標準化等のために適切にプログラム
される。

急性の腎臓処置
ＡＫＩの処置のために、抗アポトーシス／抗壊死薬剤、抗炎症剤、抗敗血剤、様々な増
殖因子および血管拡張薬などの新規治療薬剤の臨床検査を使用することができるが、結果
は満足できるものでない。ＡＫＩのための満足できる治療薬剤の欠如は、特にＡＫＩの診
断のために適する早期バイオマーカーの欠如のためであり、したがって、早期介入の実行
をほとんど不可能にしている。

当技術分野に、ＡＫＩを処置する多くの方法があり、例えば、処置戦略には以下のもの
がある：
・流体管理の変更
・処置レジメンの変更（腎毒性薬物を腎毒性の低い他の薬物に交換する、腎毒性薬物に
よる処置を中止する、薬物製剤を腎毒性の低い製剤に変更する）
・腎臓を害するか、既存の腎臓損傷を悪化させる可能性のある処置／臨床ルーチンを避
ける（例えば血管造影、造影色素の投与）
・腎臓置換処置または支持療法を開始する

ＡＫＩの処置で使用される、入手可能な薬物：
− 腎臓灌流を増加させる薬物、例えばフェノールドーパム
− 炎症および酸化的ストレスを阻害する薬物、例えばＮ−アセチル−システイン
− 利尿剤、例えばフロセミド
− ドーパミン
− 心房性ナトリウム利尿ペプチド
− 組換えヒト（ｒｈ）ＩＧＦ−１
− テオフィリン

ＡＫＩを処置する薬物候補または提案された処置戦略：
− Ｐ３８阻害剤、例えばＮｏｖａｒｔｉｓＢＣＴ１９７
− Ｐ５３阻害剤、例えばＱｕａｒｋＩ５ＮＰ／ＱｕａｒｋＱＰＩ−１００２
− 鉄キレーター、例えばデフェリプロン
− 中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）阻害剤および／またはエンドセリン変換酵素（
ＥＣＥ）阻害剤または骨形成タンパク質（ＢＭＰ）ファミリーの鍵となる受容体の二重阻
害剤活性化因子、例えばＴＨＲ−１８４
− メラノコルチン（アルファ−ＭＳＨ）ペプチド類似体、例えばＺＰ１４８０（ＡＢ
Ｔ−７１９）またはＡＰ２１４
− 炎症経路の阻害剤
− 幹細胞療法

本発明の方法は、表１および／または表２に存在する１つまたは複数のマーカーの濃度
の判定に基づく、ＡＫＩの重症度の予測を可能にする。したがって、本発明の方法を使用
して得られる結果に基づいて、医師は治療的介入の最良形態を判定することができるよう
になる。本発明は、個体がＲＩＦＬＥＩ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲを起こす可能性があるか
またはＡＫＩを起こす可能性はないかを判定することができ、そのことは各患者個々のた
めに適当な治療戦略を選択するのに重要である。例えば、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起
こすと予測される場合は、医師はおそらく透析などの支持腎機能療法で処置するであろう
が、個体がＲＩＦＬＥＲを起こすと予測される場合は、対象は透析を提供されないだろ
う。本発明は、心臓手術の後に個体がＡＫＩのどのグレードの重症度を有するかについて
の予測を初めて可能にする。したがって、この技術革新は、ＡＫＩを処置または予防する
ためのパーソナライズされた療法の基礎であり、したがって患者の転帰を向上させるのを
助ける。

実施例１：臨床データの概要
この分析のためのデータは、心肺バイパス手術を受ける患者における観察的前向き調査
研究で収集された。選択的手術を受けた１８歳またはいかなる性別の、書面で同意した患
者を試験に含めることができた。試験に登録された患者のうち、我々の分析で評価が可能
であるために、患者は以下の基準を満たさなければならなかった：
− 患者は、研究を完了した
− 患者は、ベースライン／スクリーニング血清クレアチニン値ならびに２４〜７２時
間のウィンドウ中に少なくとも２つの血清クレアチニン測定値を有する。血清クレアチニ
ンは一般的に２４時間おきに１回採取されるだけなので、実際上は、血清クレアチニンが
１２時間〜８４時間のウィンドウ中にある場合は、この基準は満たされたとみなした。
− 患者は、１、２、４または８時間の時点で、少なくとも２つの収集された尿試料を
有する
− 患者は、１２、２４または４８時間の時点で収集される少なくとも１つの尿試料を
有する。
研究では、合計２２０人の患者が登録され、そのうち２００人が上の基準により評価が
可能だった。

評価が可能な患者について、彼らのＡＫＩ状態も評価した。レベル「危険」、「損傷」
または「不全」の１つのＡＫＩを有すると評価されるために、患者の血清クレアチニンの
ベースラインからの変化は、少なくとも３６時間の間閾値を上回らなければならない（腎
前性高窒素血症による血清クレアチニンの一過性の上昇を排除するために）。さらに、手
術から最初の７日以内に基準が満たされる場合にだけ、患者がＡＫＩを有するとして数え
る（その頃までにＣＰＢ手術によって引き起こされるＡＫＩが提示されているべきである
）。血清クレアチニンの非常に短時間の増加を有するだけの患者がＡＫＩ症例と数えられ
ないように、我々は３６時間の時間ウィンドウを導入した。血清クレアチニンのそのよう
な持続的増加が、腎臓への永続的損傷の非常により優れた評価を与えると我々は考える。
詳細には、分類は以下の規則に従った：
− 患者が少なくとも３６時間の間、ベースライン血清クレアチニンレベルから２００
％を超える増加を有する場合は、患者は「不全」として分類される。
− 患者が「不全」として分類されずに、少なくとも３６時間ベースラインを少なくと
も１００％上回る血清クレアチニンの増加を有する場合は、患者は「損傷」として分類さ
れる。
− 患者が「損傷」または「不全」として分類されずに、少なくとも３６時間の間、ベ
ースラインを少なくとも５０％上回る血清クレアチニンの増加を有する場合は、患者は「
危険」として分類される。
− 患者が「危険」、「損傷」または「不全」として分類されない場合は、患者は「Ａ
ＫＩなし」として分類される。

これらの基準は、ＣＰＢ手術から７日以内に満たされなければならない。血清クレアチ
ニンのベースライン値として、両方とも入手できる場合は我々はスクリーニングおよび手
術前の値の平均を使用し、手術前の値が欠落している場合はスクリーニング値を、スクリ
ーニング値が欠落している場合は手術前の値を使用する。スクリーニングおよび手術前の
血清クレアチニン値の両方が欠落している患者は、評価不能であるとみなされる。バイオ
マーカーレベルを判定するためのキットは、ＫｉｄｎｅｙＭＡＰ（登録商標）キットを使
用するＲｕｌｅｓＢａｓｅｄＭｅｄｉｃｉｎｅ（ＲＢＭ）から得られた。

２００人の患者のうち、これらの基準により１８７人の患者を「ＡＫＩなし」、８人を
「危険」、３人を「損傷」および２人を「不全」として分類した。鍵となる臨床変数の要
約統計値の表を、下の表に提供する。

実施例２：考慮中のバイオマーカーおよび前処理
各バイオマーカーについて、分析でそれらを使用する前に特定の前処理ステップを実施
した。使用するアッセイの感度のために、尿中のマーカーが検出限界を下回り、したがっ
て値が報告されないか、または定量限界を下回る（値は報告されえる）ことが起こる可能
性がある。これらの両方の場合に、測定値はこのバイオマーカーおよび試料ロットの定量
限界の半分に等しい値で置き換えられる。測定結果は、以後前処理測定値と呼ぶ。

我々の以下の分析では、この前処理測定値ならびに尿クレアチニン（ＵＣＲＥＡ）で標
準化された測定値を使用する。この標準化のために、同じ尿試料からの尿クレアチニンの
前処理測定値が使用される。標準化は、尿での前処理バイオマーカー測定値を、同じ尿試
料からの前処理尿クレアチニン測定値によって割り算することによって実施する。これを
、以下ＵＣＲＥＡ標準化バイオマーカー測定値と呼ぶ。

前処理およびＵＣＲＥＡ標準化測定値に加えて、前処理およびＵＣＲＥＡ標準化測定値
のベースラインからの変化も評価する。これのために、患者の手術前の尿試料が入手でき
なければならない。手術前の尿試料が欠落している場合は、この患者のベースライン測定
値からの変化は欠落しているとみなす。患者の前処理バイオマーカーについては、ベース
ラインからの変化倍率を得るために、前処理バイオマーカー測定値を、同じ患者の前処理
ベースライン測定値によって割り算する。患者のＵＣＲＥＡ標準化バイオマーカーについ
ては、ベースラインからの変化倍率を得るために、ＵＣＲＥＡ標準化バイオマーカー測定
値を、同じ患者の標準化ベースライン測定値によって割り算する。

全般的に、我々の分析では、前処理、標準化、ベースラインからの前処理変化倍率、お
よびベースライン測定値からのＵＣＲＥＡ標準化変化倍率を全てのバイオマーカーについ
て考慮する。使用時に、これらの４つの導き出された変数の各々に底１０への対数変換を
適用する。

実施例３：モデルの一変量評価
考慮中の各バイオマーカーについて、２つの二成分エンドポイントに関してレシーバー
動作曲線下面積（ＡＵＣ）を計算する。第１の評価では、「損傷」または「不全」として
分類される患者を「ＡＫＩなし」または「危険」として分類される患者と比較する。第２
の評価では、「損傷」または「不全」のいずれかとして分類される患者を排除し、「危険
」として分類される患者を「ＡＫＩなし」として分類される患者と比較するだけである。

実施例４：「損傷」または「不全」を「危険」または「ＡＫＩなし」に対して分類する
患者を「危険」または「ＡＫＩなし」に対して「損傷」または「不全」として分類する
ときには、前処理、ＵＣＲＥＡ標準化、ベースラインからの前処理変化倍率、およびベー
スライン測定値からのＵＣＲＥＡ標準化変化倍率を使用すると、バイオマーカーアルファ
−１−ミクログロブリン（Ａ１Ｍｉｃｒｏ）、クラステリン（ＣＬＵ）、シスタチン−Ｃ
（ＣＹＳＣ）、インターロイキン−１８（ＩＬ−１８）、好中球ゼラチナーゼ関連リポカ
リン（ＮＧＡＬ）およびトレフォイル因子３（ＴＦＦ３）は、０〜４８時間の範囲で性能
を示す。

以下の表では、これらのバイオマーカーの各々について、４つの変換の各々について、
ならびにＩＣＵへの到着から０、１、２、４、８、１２、２４および４８時間後の各時点
についてのデータを提示する。

前処理変換を使用するバイオマーカーA1Micro、CLU、CYSC、IL-18、NGALおよびTFF3につ
いては、表から、時点0、1、2、4、8、12、24および48時間について、「危険」または「A
KIなし」と分類される者から「損傷」または「不全」と分類されるAKI患者を識別するた
めにこれらのマーカーを使用することができることがわかる。全てのこれらのマーカーに
ついて、1時間、2時間、4時間、8時間および48時間の時点は特に優れた性能を示す。さら
に、この例ではAKIの重度の症例を分類するために、マーカーA1Micro、CYSC、IL-18、NGA
LおよびTFF3が特に優れている。

UCREA標準化変換を使用するバイオマーカーA1Micro、CLU、CYSC、IL-18、NGALおよびTFF3
については、表から、0、1、2、4、8、12、24および48時間の時点について、「危険」ま
たは「AKIなし」と分類される者から「損傷」または「不全」と分類されるAKI患者を識別
するためにこれらのマーカーを使用することができることがわかる。全てのこれらのマー
カーについて、1時間、2時間、4時間、8時間および48時間の時点は特に優れた性能を示す
。さらに、この例ではAKIの重度の症例を分類するために、マーカーA1Micro、CYSC、IL-1
8、NGALおよびTFF3が特に優れている。

ベースライン変換からの前処理変化倍率（pre-processed fold-change）を使用するバイ
オマーカーA1Micro、CLU、CYSC、IL-18、NGALおよびTFF3については、表から、0、1、2、
4、8、12、24および48時間の時点について、「危険」または「AKIなし」と分類される者
から「損傷」または「不全」と分類されるAKI患者を識別するためにこれらのマーカーを
使用することができることがわかる。全てのこれらのマーカーについて、1時間、2時間、
4時間および48時間の時点は特に優れた性能を示す。さらに、この例ではAKIの重度の症例
を分類するために、マーカーCLU、CYSC、IL-18およびNGALが特に優れている。

ベースライン変換からのUCREA標準化変化倍率を使用するバイオマーカーA1Micro、CLU、C
YSC、IL-18、NGALおよびTFF3については、表から、0、1、2、4、8、12、24および48時間
の時点について、「危険」または「AKIなし」と分類される者から「損傷」または「不全
」と分類されるAKI患者を識別するためにこれらのマーカーを使用することができること
がわかる。全てのこれらのマーカーについて、1時間、2時間、4時間および48時間の時点
は特に優れた性能を示す。さらに、この例ではAKIの重度の症例を分類するために、マー
カーCLU、CYSC、IL-18およびNGALが特に優れている。

実施例５：「ＡＫＩなし」に対して「危険」に分類する
「ＡＫＩなし」と分類される患者に対して「危険」と分類されるＡＫＩ患者を比較する
場合、バイオマーカーＡ１Ｍｉｃｒｏ、Ｂ２ＭｉｃｒｏおよびＴＦＦ３は、前処理、ＵＣ
ＲＥＡ標準化、ベースラインからの前処理変化倍率、ベースラインからのＵＣＲＥＡ標準
化変化倍率の変換を使用すると、０〜４８時間の範囲で性能を示す。

以下の表では、これらのバイオマーカー、変換、ならびに０、１、２、４、８、１２、
２４および４８時間の時点の各々についてのデータを提示する。

前処理変換を使用するバイオマーカーA1Micro、B2MicroおよびTFF3は、「AKIなし」患者
に対して「危険」を分類する性能を示す。

UCREA標準化変換を使用するバイオマーカーA1Micro、B2MicroおよびTFF3は、「AKIなし」
に対して「危険」を分類する性能を示す。マーカーの性能は、1、2および4時間の時点で
特に優れている。

ベースラインからのUCREA標準化変化倍率を使用するバイオマーカーA1Micro、B2Microお
よびTFF3は、「危険」と分類される患者を「AKIなし」と分類される患者から識別する性
能を示す。

実施例６：モデルの多変量評価
モデルの多変量評価のために、我々が使用する分類問題に従い、一変量マーカーを多変
量モデルに合わせるための異なる方法を使用する。

「危険」および「ＡＫＩなし」に対する「損傷」および「不全」患者の分類のために、
観察が「正常な」患者とどのように異なるかについて評価するアプローチを使用する。第
１のステップでは、モデル中のマーカーごとに、対数凹密度関数に適合するアプローチを
使用して「ＡＫＩなし」と分類される患者のマーカーの分布を推定する。新たな観察を評
価するとき、バイオマーカーごとに、「ＡＫＩなし」患者の推定される分布に関するｐ値
が評価される。次に、それらを平均することによってｐ値を合体させる。ｐ値を合体させ
るための我々が考慮した他の選択肢は、ｐ値の対数の最小値、最大値または平均をとる。
これらの方法の各々は、得られたモデルの感度／特異性曲線に関して特定のトレードオフ
を有する。ここでは、危険スコアのより小さい値は、「損傷」または「不全」と分類され
るＡＫＩを有するより高い危険に対応する。

「危険」または「ＡＫＩなし」に対して「損傷」または「不全」に分類するために、マ
ーカーＡ１Ｍｉｃｒｏ、ＣＬＵ、ＣＹＳＣ、ＩＬ−１８、ＮＧＡＬおよびＴＦＦ３が考慮
されている。我々はこれらのマーカーの全ての可能な組合せを考慮するが、同時の場合に
は多くても３つのマーカーに制限する。これらのモデルの各々について、モデルが達成す
るＡＵＣに関して１時間、２時間および４時間の時点で分類性能を計算する。その後、３
つのＡＵＣを平均することによってモデルにランクをつける。表１に、１時間、２時間お
よび４時間の時点でのＡＵＣの平均によってソートされた、全てのこれらのモデルのリス
トが見出される。これらの３つの時点でのＡＵＣも、同様に列挙される。この表で使用さ
れるバイオマーカーデータは、尿クレアチニンによる標準化を使用して変換されている。

「ＡＫＩなし」カテゴリーの患者に対する「危険」カテゴリーの患者の分類のために、
２つの異なるモデルを考慮する。第１のバージョンでは、変換後のままのバイオマーカー
をとり、それらを平均する。得られたマーカーの平均は危険スコアであり、より高い値は
ＡＫＩを有するより高い危険に対応する。第２のバージョンでは、「ＡＫＩなし」患者の
群で平均値０および標準偏差１を有するように、バイオマーカーの各々を先ず標準化する
。この標準化の後、モデル中のマーカーを平均し、この平均は危険スコアとして使用され
、前と同じようにより高い値はＡＫＩのより高い危険に対応する。表１に、１時間、２時
間および４時間の時点でのＡＵＣの平均によってソートされた、全てのこれらのモデルの
リストが見出される。これらの３つの時点でのＡＵＣも、同様に列挙される。この表で使
用されるバイオマーカーデータは、尿クレアチニンによる標準化を使用して変換されてい
る。

実施例７：時間別のアッセイの範囲およびＡＫＩの重症度
マーカーのダイナミックレンジに基づくマーカーの選択も実施した。この例では、ＩＬ
−１８、ＮＧＡＬおよびＴＦＦ３のためのアッセイの変動性の範囲を、異なる時点での異
なるＡＫＩ群について示す。これらのグラフのために、尿クレアチニン標準化値を使用し
た。

図１は、手術の前と後の異なる時点での尿クレアチニン標準化の後のＩＬ−１８値の箱
ひげ図を示す。示すデータは、プロッティングの前に対数を底１０にとることによって先
ず変換される。グラフは、「損傷／不全」患者を「ＡＫＩなし」または「危険」患者と比
較するときの、１００以上の係数のＩＬ−１８の変化倍率を図示する。

図１は、手術の前と後の異なる時点の尿クレアチニン標準化の後のＮＧＡＬ値の箱ひげ
図を示す。示すデータは、プロッティングの前に対数を底１０にとることによって先ず変
換される。グラフは、「損傷／不全」患者を「ＡＫＩなし」または「危険」患者と比較す
るときの、１０以上の係数のＮＧＡＬの変化倍率を図示する。

図３は、手術の前と後の異なる時点の尿クレアチニン標準化の後のＴＦＦ３値の箱ひげ
図を示す。示すデータは、プロッティングの前に対数を底１０にとることによって先ず変
換される。グラフは、「損傷／不全」患者を「ＡＫＩなし」または「危険」患者と比較す
るときの、３以上の係数のＴＦＦの変化倍率を図示する。さらにグラフは、手術後のＴＦ
Ｆ３レベルが、他のバイオマーカーよりもよく、例えばＩＬ−１８よりもよく、「危険」
患者を「ＡＫＩなし」患者と区別することができることを示す。

図３は、手術の前と後の異なる時点の尿クレアチニン標準化の後のＴＦＦ３値の箱ひげ図を示す。示すデータは、プロッティングの前に対数を底１０にとることによって先ず変換される。グラフは、「損傷／不全」患者を「ＡＫＩなし」または「危険」患者と比較するときの、３以上の係数のＴＦＦの変化倍率を図示する。さらにグラフは、手術後のＴＦＦ３レベルが、他のバイオマーカーよりもよく、例えばＩＬ−１８よりもよく、「危険」患者を「ＡＫＩなし」患者と区別することができることを示す。

本発明は、以下の態様を包含し得る。
［１］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１および／または表２の１つまたは複数のマーカーを測定するステップと、
表１のバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されるステップと、
任意選択で、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されない場合は、表２から選択されるバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアをさらに生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬＥＲを起こす危険があると判定され、または危険スコアが所定のカットオフより低い場合、対象はＡＫＩを起こす危険がないと判定されるステップと、
を含む方法。
［２］
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１の２つ以上のバイオマーカーが測定される、上記［１］に記載の方法。
［３］
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１の３つ以上のバイオマーカーが測定される、上記［１］に記載の方法。
［４］
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表２の２つ以上のバイオマーカーが測定される、上記［１］に記載の方法。
［５］
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表２の３つのバイオマーカーが測定される、上記［１］に記載の方法。
［６］
対象がＲＩＦＬＥＩ／ＦもしくはＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡＫＩを起こす危険がないか判定するために、表１および表２の２つ以上のバイオマーカーが測定される、上記［１］に記載の方法。
［７］
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１４に示すバイオマーカー組合せのいずれかが測定される、上記［１］に記載の方法。
［８］
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表１５に示すバイオマーカー組合せのいずれかが測定される、上記［１］に記載の方法。
［９］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、ＮＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって、所定のカットオフと比較したときの危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥ
Ｉ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるか、またはＡＫＩの危険がないかの指標となるステップと、
を含む方法。
［１０］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、ＮＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくとも２つを測定するステップと、
少なくとも２つのバイオマーカーの測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうかの指標となるステップと、
を含む方法。
［１１］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＴＦＦ３、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成するステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡＫＩを起こす危険がないかの指標となるステップと、
を含む方法。
［１２］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、ＮＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリンから選択されるバイオマーカーの少なくとも４つを測定するステップであって、そのレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方法。
［１３］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＴＦＦ３と、ＩＬ１８、シスタチンＣ、ＮＧＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリンから選択されるバイオマーカーの少なくとも１つとを測定するステップであって、そのレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方法。
［１４］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、Ａ１−ミクログロブリンと、ＩＬ１８、シスタチン、ＮＧＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＴＦＦ−３から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つとを測定するステップであって、そのレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方法。
［１５］
ＣＰＢ手術の後に患者で尿クレアチニン（ｕＣｒ）を測定するステップ、および前記患者で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症の予測因子としてマーカーの各々とｕＣｒとの比を判定するステップをさらに含む、上記項目のいずれかに記載の方法。
［１６］
バイオマーカーが、心臓手術の後０時間〜１２時間の間に測定される、上記項目のいずれかに記載の方法。
［１７］
対象でＡＫＩの発症を予測するために、少なくとも１つのバイオマーカー／ｕＣｒの加重線形組合せがレシーバー動作特性（ＲＯＣ）曲線下面積分析と共に使用される、上記項目のいずれかに記載の方法。
［１８］
心臓手術の後２４時間以内に採取された患者の試料中の、表１および表２に列挙されるバイオマーカーのいずれか１つの定量的測定のための診断キットであって、バイオマーカーのレベルは、対象がＡＫＩを起こすかどうかおよびＡＫＩの重症度に関する指標となる、診断キット。
［１９］
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測するための看護現場デバイスであって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１からの少なくとも１つのマーカーおよび表２からの１つのマーカーを測定するステップを含み、そのレベルはＡＫＩおよびＡＫＩの重症度の指標となる、看護現場デバイス。

Claims

心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１および／または表２の１つま
たは複数のマーカーを測定するステップと、
表１のバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生
成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、対象はＲＩＦＬ
ＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されるステップと、
任意選択で、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があると判定されない場合は、表
２から選択されるバイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険ス
コアをさらに生成するステップであって、危険スコアが所定のカットオフを超える場合、
対象はＲＩＦＬＥＲを起こす危険があると判定され、または危険スコアが所定のカット
オフより低い場合、対象はＡＫＩを起こす危険がないと判定されるステップと、
を含む方法。
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１の２つ以
上のバイオマーカーが測定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１の３つ以
上のバイオマーカーが測定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表２の２つ以上の
バイオマーカーが測定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表２の３つのバイ
オマーカーが測定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＩ／ＦもしくはＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡＫＩ
を起こす危険がないか判定するために、表１および表２の２つ以上のバイオマーカーが測
定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどうか判定するために、表１４に示す
バイオマーカー組合せのいずれかが測定される、請求項１に記載の方法。
対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかどうか判定するために、表１５に示すバイ
オマーカー組合せのいずれかが測定される、請求項１に記載の方法。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、Ｎ
ＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブリ
ンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、所定のカットオフと比較したときの危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥ
Ｉ／Ｆ、ＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるか、またはＡＫＩの危険がないかの指標と
なるステップと、
を含む方法。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、Ｎ
ＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択され
るバイオマーカーの少なくとも２つを測定するステップと、
少なくとも２つのバイオマーカーの測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＩ／Ｆを起こす危険があるかどう
かの指標となるステップと、
を含む方法。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）損傷の重症度を評価する方法であって、
心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＴＦＦ３、Ｂ２−ミクログロブ
リンおよびＡ１−ミクログロブリンからなる群から選択されるバイオマーカーの少なくと
も１つを測定するステップと、
バイオマーカーの１つまたは複数の測定されたレベルに基づいて危険スコアを生成する
ステップであって、危険スコアが、対象がＲＩＦＬＥＲを起こす危険があるかまたはＡ
ＫＩを起こす危険がないかの指標となるステップと、
を含む方法。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であっ
て、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＩＬ−１８、シスタチンＣ、
ＮＧＡＬ、ＴＦＦ３、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブ
リンから選択されるバイオマーカーの少なくとも４つを測定するステップであって、その
レベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方法
。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であっ
て、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、ＴＦＦ３と、ＩＬ１８、シス
タチンＣ、ＮＧＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＡ１−ミクログロブ
リンから選択されるバイオマーカーの少なくとも１つとを測定するステップであって、そ
のレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方
法。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測する方法であっ
て、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で、Ａ１−ミクログロブリンと、
ＩＬ１８、シスタチン、ＮＧＡＬ、クラステリン、Ｂ２−ミクログロブリンおよびＴＦＦ
−３から選択されるバイオマーカーの少なくとも１つとを測定するステップであって、そ
のレベルはＡＫＩの指標となるか、またはＡＫＩの発症の前兆となるステップを含む、方
法。
ＣＰＢ手術の後に患者で尿クレアチニン（ｕＣｒ）を測定するステップ、および前記患
者で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症の予測因子としてマーカーの各々とｕＣｒとの比を判
定するステップをさらに含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
バイオマーカーが、心臓手術の後０時間〜１２時間の間に測定される、前記請求項のい
ずれかに記載の方法。
対象でＡＫＩの発症を予測するために、少なくとも１つのバイオマーカー／ｕＣｒの加
重線形組合せがレシーバー動作特性（ＲＯＣ）曲線下面積分析と共に使用される、前記請
求項のいずれかに記載の方法。
心臓手術の後２４時間以内に採取された患者の試料中の、表１および表２に列挙される
バイオマーカーのいずれか１つの定量的測定のための診断キットであって、バイオマーカ
ーのレベルは、対象がＡＫＩを起こすかどうかおよびＡＫＩの重症度に関する指標となる
、診断キット。
心臓手術の後に対象で急性腎臓損傷（ＡＫＩ）の発症を診断または予測するための看護
現場デバイスであって、心臓手術の後２４時間以内に対象から得た生体試料で表１からの
少なくとも１つのマーカーおよび表２からの１つのマーカーを測定するステップを含み、
そのレベルはＡＫＩおよびＡＫＩの重症度の指標となる、看護現場デバイス。