FR3004193A1

FR3004193A1 - Procede de fabrication de cellules meristematiques de plantago lanceolata, composition comprenant lesdites cellules ou leur extrait cellulaire, et utilisations cosmetiques, nutraceutiques et dermatologiques

Info

Publication number: FR3004193A1
Application number: FR1353103A
Authority: FR
Inventors: Giovanna Pressi; Toso Roberto Dal; Philippe Mondon; Emmanuel Doridot; Caroline Ringenbach
Original assignee: Sederma SA; I R B ISTITUTO DI RECERCHE BIOTECNOLOGICHE
Current assignee: Sederma SA; I R B ISTITUTO DI RECERCHE BIOTECNOLOGICHE
Priority date: 2013-04-08
Filing date: 2013-04-08
Publication date: 2014-10-10
Anticipated expiration: 2033-04-08
Also published as: FR3004193B1

Abstract

Selon l'invention, des cellules méristématiques sont obtenues grâce à une lignée cellulaire sélectionnée et comprennent majoritairement du plantamajoside. Elles peuvent être avantageusement utilisées dans les domaines cosmétique, notamment pour des applications anti-âge, nutraceutiques ou dermatologiques.

Description

La présente invention se rapporte à la préparation de cellules méristématiques à partir d'une nouvelle lignée cellulaire de Plantago lanceolata, de cellules ainsi obtenues, d'un extrait desdites cellules, de compositions les comprenant et leurs utilisations dans les domaines cosmétique, nutraceutique et dermatologique. La présente invention concerne plus spécifiquement l'industrie des cosmétiques et des produits d'hygiène et de soin personnels, s'appliquant à la peau et ses phanères (tels que poils, cils, sourcils, ongles, cheveux) de mammifères, animaux ou humains. Le Plantago lanceolata est une plante herbacée vivace de la famille des Plantaginacées qui pousse sous tous les climats tempérés d'Europe, d'Asie du nord et centrale. Elle est appelée également plantain lancéolé, plantain étroit ou « Herbe à cinq coutures ou à cinq côtes ». Elle est connue depuis toujours pour ses propriétés médicinales, antitussive, anti-inflammatoire, anti-irritante, béchique, expectorante, cicatrisante, antiseptique externe et antibiotique. Ces propriétés peuvent être attribuées aux différents composés synthétisés par la plante et pouvant être extraits des différentes parties de la plante, et en fonction du mode d'extraction et du solvant utilisés. Il a été répertorié que dans Plantago lanceolata on pouvait trouver notamment des hétérosides iridoïdiques, des phénylpropanoïdes glycosides, des mucilages, des flavonoïdes, des acides phénoliques, des tanins, des saponosides et des huiles essentielles. Les extraits peuvent être obtenus par des méthodes d'extraction classiques directement à partir de parties de la plante ou bien par des méthodes de culture in vitro de cellules méristématiques (ou cellules dédifférenciées). Les méthodes in vitro ont pour avantages notamment de pouvoir s'affranchir des fluctuations liées aux conditions de culture et de pouvoir stimuler de manière reproductible la production par les cellules végétales de métabolites secondaires d'intérêts particuliers, qui sinon avaient des rendements faibles, comme dans le cas présent les phénylpropanoïdes glycosides. Le profil et les quantités de composés bioactifs présents dans les cellules obtenues par ces méthodes in vitro seront différents de ceux obtenus par les autres techniques d'extraction, les cellules dédifférenciées n'étant pas capables de produire tous les métabolites secondaires et les cultures pouvant être avantageusement orientées vers la production de métabolites secondaires choisis. Un extrait cellulaire ou une culture de cellules méristématiques n'aura donc pas au final forcément les mêmes activités qu'un autre type d'extrait, notamment un extrait de plante non réalisé par culture cellulaire. Ces méthodes in vitro consistent schématiquement : - le cas échéant dans un premier temps, l'établissement de lignées cellulaire à partir de cals (amas de cellules indifférenciées) obtenus sur des coupures de parties de plantes (feuille, racine, tige ....) ; - sélection d'une lignée cellulaire capable de produire à grande échelle une biomasse de cellules méristématiques selon des critères pré-établis (phénotype constant et production optimale et constante de métabolites choisis, capacité à proliférer) ; - puis à partir de cette lignée sélectionnée : génération de ladite biomasse cellulaire, éventuellement avec une étape d'élicitation ; et enfin - dans un troisième temps, traitement de la biomasse cellulaire obtenue pour récupérer les cellules méristématiques entières et le cas échéant extraire ensuite le contenu des cellules. Ce sont ces extraits et/ou cellules entières ou partiellement broyées qui sont ensuite utilisés notamment dans des compositions cosmétiques, dermatologiques et/ou nutraceutiques. La demande de brevet EP2319914 décrit cette technique pour obtenir des cellules méristématiques avec un rendement élevé en dérivés d'acide caféique pour une liste théorique de 33 espèces de plantes dont Plantago lanceolata. Les dérivés d'acide caféique concernés comprennent les phénylpropanoïdes glycosides ainsi que des acides caffeoyilquiniques. Des résultats de tests ne sont donnés que pour 5 espèces et chacune pour une activité différente : les espèces Buddleja davidii (activité anti-oxydante), Leontopodium alpinum (activité inhibitrice de la hyaluronidase), Lippia citriodora (activité anti-inflammatoire), Gardenia jasminoides (activité inhibitrice de la collagénase) et Echinacea angustifolia (activité sur la stimulation de collagène). Les propriétés des phénylpropanoïdes glycosides ont été largement décrites, principalement des propriétés anti-oxydantes et anti-inflammatoires pouvant être valorisées dans les domaines de la cosmétique, de la dermatologie et de la nutraceutique. La présente invention a pour but de proposer un matériel biologique végétal à partir d'une plante du genre Plantago lanceolata permettant d'obtenir industriellement, c'est-à-dire de manière reproductible, par culture cellulaire in vitro une composition présentant des activités remarquables, notamment liées à la présence de phénylpropanoïdes glycosides. À cet effet, elle propose un procédé de fabrication in vitro de cellules méristématiques de Plantago lanceolata contenant des phénylpropanoïdes glycosides à partir d'une lignée cellulaire stabilisée, caractérisé en ce que la lignée cellulaire est la lignée sélectionnée IRB PL3. Cette lignée a fait l'objet d'un dépôt auprès de DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Inhoffenstral3e 7B, 38124 Braunschweig, Allemagne) par la société IRB Demanderesse sous cette référence provisoire : Plantago lanceolata IRB PL3. Les cellules méristématiques ainsi obtenues sont riches en phénylpropanoïdes glycosides, majoritairement en plantamajoside. La proportion en poids de phénylpropanoïdes glycosides totaux dans la biomasse lyophilisée, évaluée par spectrométrie UV à 330nm, exprimée en équivalent plantamajoside, est d'environ 10%. Des protéines, des acides aminés, des lipides et des polysaccharides ont également été identifiés comme catégories de composés dans les cellules selon l'invention. La sélection et l'utilisation de la lignée cellulaire Plantago lanceolata IRB PL3 permet d'obtenir des cellules méristématiques conduisant avantageusement à des résultats inattendus et remarquables à tous les niveaux de la peau : derme, jonction derme/épiderme (JDE) et épiderme, ainsi que des résultats remarquables en anti-inflammatoire, anti-oxydant et anti-glycation, permettant d'envisager des applications dans les domaines visés selon l'invention. Il a été également mis en évidence que les produits obtenus avec des cellules selon l'invention agissaient avantageusement sur un certain nombre de micro-RNA. Les micro-RNA sont produits par la cellule à partir de l'ADN, comme l'ARNm, et jouent un rôle crucial dans le contrôle de nombreux processus physiologiques en inhibant la synthèse de protéines spécifiques. Les résultats sur les micro-RNA viennent conforter les applications envisagées et ouvrir d'autres perspectives. In vivo, l'application du produit selon l'invention a permis une amélioration de la qualité du derme, qui apparait à la fois plus ferme plus élastique (cutométrie), plus épais (échographie), un effet bénéfique sur les taches de sénescence (analyse par photos de la clarté de la peau, avec le logiciel ColorskinTM), un épaississement de l'épiderme (microscopie confocale laser / VivascopeTM), une peau plus dense (ReviscometerTM), un lissage du relief cutané (numérisation d'empreintes et analyse d'images). Les effets observés avec le produit selon l'invention, tant in vitro qu'in vivo conduisent à le positionner avantageusement comme un anti-âge global. La présente invention propose également de manière plus large l'utilisation de cellules de Plantago lanceolata pour densifier le derme, renforcer la jonction dermoépidermique, épaissir l'épiderme et/ou apporter à la peau des moyens de défense anti- anti-glycation. Les résultats sont présentés ci-après dans la description. Le procédé selon l'invention peut être réalisé selon les étapes suivantes : - à partir de la lignée Plantago lanceolata IRB PL3, produire une pré-biomasse critique par des pré-cultures successives et de tailles croissantes ; - produire une biomasse desdites cellules méristématiques dans un bioréacteur à partir de ladite pré-biomasse et un milieu de culture adapté ; et - séparer ladite biomasse enrichie en phénylpropanoïdes glycosides dudit milieu de culture et récupérer ainsi lesdites cellules méristématiques. Selon d'autres caractéristiques : - l'étape de production en bioréacteur comprend une étape d'élicitation, cela permettant avantageusement d'augmenter le contenu en plantamajoside et plus généralement en phénylpropanoïdes glycosides (PPG) ; et/ou - on récolte la biomasse issue du réacteur par filtration après un temps de culture entre 7 et 21 jours ; de préférence entre 10 et 14 jours cela permettant avantageusement de produire la plus forte quantité de biomasse, avec une grande viabilité ; et/ou - une étape supplémentaire de séchage de la biomasse de cellules méristématiques séparée du milieu de culture, cela permettant avantageusement de tester leur activité biologique et leur stockage à long terme, sans avoir à ajouter de conservateurs. D'une manière générale, l'élicitation des composés d'intérêt peut se faire par l'addition à la culture de fractions microbiennes (notamment des levures sacchoromyces) : l'addition à la culture de molécules d'origine biologique comme par exemple le chitosan, le methyljasmonate, l'acide jasmonique, l'acide salicylique ; l'addition à la culture de molécules d'origine non biologique comme par exemple le paclobutrazol ; l'application à la culture d'une variation de température, de pH ou d'un stress osmotique induit par un sucre non métabolisable, comme par exemple le mannitol ; le recours à un appauvrissement encore plus drastique du milieu en macroéléments et sucre ; l'addition à la culture de résines adsorbantes qui en plus d'éliciter la production des composés d'intérêt pourront les piéger. De préférence selon l'invention, l'élicitation est réalisée en modifiant le milieu de culture, notamment les taux de nutriments. La présente invention vise également la lignée sélectionnée Plantago lanceolata IRB PL3 et les cellules méristématiques de Plantago lanceolata obtenues grâce à cette lignée et le procédé de l'invention décrit ci-dessus et un extrait cellulaire obtenu à partir desdites cellules, extrait réalisé par exemple par une lyse des cellules, puis une étape de centrifugation suivie d'une filtration, de manière à récupérer l'intérieur des cellules et éliminer les parois cellulaires. La présente invention propose également une composition comprenant des cellules méristématiques de Plantago lanceolata ou un extrait cellulaire selon l'invention dans un milieu physiologiquement acceptable et des utilisations cosmétiques, nutraceutiques ou dermatologiques de cette composition, desdites cellules ou dudit extrait cellulaire. Utilisations cosmétiques selon l'invention Les micro-ARN (ou miRNA) ont été découverts en 1993, et ont depuis vu leur rôle se préciser et grandir en quelques années. Les miRNA sont numérotés dans l'ordre de leur découverte, ils forment une classe très à part de tout petits ARN (20-25 nucléotides) non codants. Les miRNA sont produits par la cellule à partir de l'ADN, comme l'ARNm, et jouent un rôle crucial dans le contrôle de nombreux processus physiologiques en inhibant de façon spécifique la synthèse de certaines protéines. Une fois produit, le miRNA vient se coller sur le début d'un ARNm qui lui est dédié, l'information portée par l'ARNm devient alors illisible pour le ribosome ou devient la cible de protéines broyeuses. Ces phénomènes de contrôle post-génétique constituent de véritables interrupteurs naturels. Ils pourraient concerner au moins 30% de la production des gènes. Certains miRNA, répresseurs des synthèses de collagène I, d'élastine et de TIMP ou activateurs de l'activités des MMPs ont été identifiés. Certains autres miRNA déterminent l'apparition de phénotypes sénescents, chez des fibroblastes notamment. La modulation de l'expression de ces interrupteurs constitue donc une voie avantageuse dans une stratégie anti-âge afin de relancer certaines synthèses protéiques et de ralentir la senescence cellulaire. Avec l'âge la peau se modifie, s'affine, devient moins dense, moins ferme et se relâche. Elle se tâche aussi, des zones plus pigmentées apparaissent puis s'agrandissent. La façon de vivre aggrave plus ou moins grandement les dégâts que la peau subit : les expositions solaires, le tabagisme, la pollution urbaine et une alimentation inappropriée vont conduire à accélérer le vieillissement chronologique des organes et de la peau. À la base de ces modifications macroscopiques existe une désorganisation au niveau tissulaire et cellulaire. Le vieillissement se caractérise par une succession de « dérives » par rapport à un état antérieur qui permettait d'avoir une peau jeune (homéostasie). Ainsi, la perte de densité et l'affinement du derme sont liés à une réduction des synthèses des macromolécules (notamment collagène I, collagène IV, élastine, acide hyaluronique) par les fibroblastes dermiques, cellules en charge de leur fabrication. En parallèle, une augmentation de la production de métalloprotéinases matricielles (MMP) concomitante avec la baisse de production de leurs inhibiteurs naturels, les TIMP (Tissue Inhibitor of Metalloproteinase), conduisent à une fragmentation et une dégradation accrue de ces mêmes macromolécules. L'augmentation de l'activité de dégradation des MMP et la réduction des synthèses protéiques se fait aussi sentir au niveau de la jonction entre le derme et l'épiderme (JDE) où se trouvent des protéines importantes pour la peau. Le collagène IV est l'une de ces protéines. Il est organisé en un fin feutrage où s'accrochent d'autres éléments essentiels à l'homéostasie cutanée comme les laminines. Avec l'âge il est plus fragmenté et en même temps moins produit, tout comme les laminines, ce qui entraine dans certaines zones une moins bonne communication entre mélanocytes, kératinocytes et JDE, avec comme conséquence une pigmentation accrue de la peau et notamment l'apparition de tâches de vieillesse ou lentigo séniles dans ces zones. L'épiderme subit lui aussi les effets du vieillissement. Le renouvellement cellulaire est moins important et donc l'épiderme devient plus mince. Par ailleurs, les liaisons entre les cellules sont moins fortes. La filaggrine, l'acide hyaluronique, sont moins synthétisés, provoquant une moindre cohésion intercellulaire et une perte en eau plus importante dans la couche cornée. On note enfin l'augmentation du niveau des médiateurs pré-inflammatoires (type prostaglandines et interleukines) dont la présence est souvent reliée au vieillissement, et du niveau de nombreux composés pro-oxydants, qui vont accroître tous les effets délétères déjà décrits, en oxydant et donc en dégradant/inactivant les molécules qui concourent à l'homéostasie cellulaire (lipides, protéines, sucres, acides nucléiques). Un phénomène particulier, la glycation des protéines, accentue le vieillissement en modifiant toutes les protéines de la peau (de structure ou fonctionnelles) et en particulier les protéines du derme comme par exemple le collagène, désorganisant la matrice extracellulaire et lui faisant perdre sa tonicité, sa souplesse. Cette glycation va générer un accroissement des produits radicalaires qui à leur tour vont perturber les métabolismes et dégrader les structures des cellules de la peau. Les cellules méristématiques, l'extrait cellulaire ou une composition les contenant selon l'invention agissent avantageusement dans cinq directions différentes et complémentaires du vieillissement cutané tel qu'expliqué ci-dessus. 1) Densification du derme - baisse du niveau d'expression de 3 miRNA connus pour freiner les synthèses de collagène I (famille des miRNA-29 et miRNA-196a), d'élastine (famille des miRNA-29), de TIMP-1 (miRNA-21), - stimulation des synthèses des macromolécules dermiques (collagène I, élastine et acide hyaluronique notamment), des TIMP, qui inhibent les MMP. Grâce à l'invention, le derme garde sa densité, son hydratation, va retrouver élasticité et fermeté, le visage va profiter d'un lissage du relief (réduction de la profondeur des rides). 2) Maintien de l'intégrité de la JDE et par là de l'ancrage des kératinocytes et du contrôle des mélanocytes - baisse du niveau d'expression des miRNA-29 connus pour freiner les synthèses de collagène IV et du miRNA-21, qui freinent les synthèses de TIMP-1. Ainsi les synthèses de collagènes IV et des laminines sont accrues, ce qui renforce la JDE, les relations de ces composantes avec la couche basale de kératinocytes et permet d'observer un éclaircissement des tâches de vieillesse. 3) Relance des métabolismes épidermiques pour épaissir l'épiderme - accentue la différenciation des kératinocytes, - stimule la production de deux protéines (Claudine-1 et Zo-1) présentes au niveau des jonctions serrées, qui assurent la cohésion entre les cornéocytes. - stimule les synthèses d'acide hyaluronique et de filaggrine, qui vont favoriser une bonne hydratation de la peau. Ces effets in vitro se traduisent in vivo par un épaississement du derme. 4) Diminution des messagers pré-inflammatoires - baisse de trois messagers pré-inflammatoires (PGE2, IL6 et IL8) sur des kératinocytes humains. La présence de ces messagers influence le vieillissement des cellules, notamment, les PGE2 qui interviennent sur les mélanocytes en augmentant leur activité tyrosinase, leur dendricité et donc le transfert de la mélanine vers les kératinocytes, ce qui produit des hyperpigmentations. 5) Signaux anti-sénescence génériques ; action antioxydante et miRNA intervenant dans le vieillissement. - pouvoir antiradicalaire, - activité protectrice contre la lipopéroxydation induite par les UVA, - diminution du taux basal des espèces réactives de l'oxygène chez des fibroblastes humains dermiques, - induction sur ce même type cellulaire d'une surproduction de superoxyde dismutase, enzyme déterminante dans la lutte contre l'oxydation, - protection contre la glycation des protéines, - réduction de l'expression des miRNA-30a, -34a, -152 et 181a sur des fibroblastes. Cet effet est relié à un prolongement de la survie des cellules et à une réduction de l'apparition de phénotypes sénescents (sur des fibroblastes). Les activités anti-âges sur les matrices extra-cellulaires du derme et de l'épiderme ne sont pas décrites pour les extraits de Plantago de l'art antérieur. Les résultats prouvant l'activité du produit selon l'invention sont décrits plus loin en détails. En outre, des essais comparatifs avec le verbascoside seul ont été menés et ont montré que les cellules méristématiques selon l'invention conduisent à des effets supérieurs sur la synthèse de macromolécules dermiques (collagène I et acide hyaluronique), sur la synthèse de molécules responsables du renforcement de la JDE (laminines) et sur le renforcement de la barrière épidermique (acide hyaluronique). En outre, les cellules méristématiques selon l'invention ont montré un effet protecteur des cellules vis-à-vis d'un effet cytotoxique démontré en revanche pour le verbascoside. On a donc des effets supérieurs avec les cellules selon l'invention par comparaison avec le verbascoside pur qui est le représentant le plus notoire de cette catégorie de molécules phénylpropanoïdes glycosides. Applications dermatologiques selon l'invention Application topique des cellules méristématiques, de l'extrait cellulaire ou d'une composition les contenant, selon l'invention (ou d'une composition contenant les cellules méristématiques ou d'un de leur extrait, selon l'invention), pour le traitement de pathologies de la peau parmi : - Les troubles de la pigmentation ; - Les troubles de nature inflammatoire (comme la dermatite atopique, le psoriasis, l'acné) ; - Les dermatoses bulleuses ; - Les affections mettant en cause des désordres dans les synthèses du collagène, de l'élastine de l'acide hyaluronique ; et/ou - Les peaux sèches, la couperose, l'ichtyose. Applications nutraceutiques selon l'invention Par voie orale (ingestion) pour obtenir un effet bénéfique pour renforcer la paroi intestinale. À titre d'exemple absorption possible de 10 à 50mg de cellules lyophilisées par jour et par personne. Préparation des compositions La présente invention propose donc une composition, notamment topique, comprenant des cellules méristématiques ou un extrait desdites cellules selon l'invention dans un milieu physiologiquement acceptable. Selon l'excipient et le dosage en cellules ou extrait cellulaire, cette composition constituera par exemple un ingrédient actif concentré ou une composition finale moins concentrée directement destinée à l'utilisateur final.

Par « milieu physiologiquement acceptable » on entend selon la présente invention, sans être limitatif, une solution aqueuse ou hydro alcoolique, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion huile-dans-eau, une microémulsion, un gel aqueux, un gel anhydre, un sérum, une dispersion de vésicules, une poudre. « Physiologiquement acceptable » signifie que les compositions conviennent à une utilisation topique ou par voie orale , en contact avec les muqueuses, les ongles, le cuir chevelu, les cheveux, les poils et la peau de mammifère et plus particulièrement humaine, des compositions pouvant être ingérées ou injectées dans la peau, sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, de réponse allergique, et autres. Ce « milieu physiologiquement acceptable » forme ce que l'on appelle classiquement l'excipient de la composition. Les cellules méristématiques ou l'extrait de ces cellules peut être associé à d'autres ingrédients actifs à des concentrations efficaces pouvant agir de façon synergique ou en renfort pour atteindre les effets souhaités décrits pour l'invention, tels que les agents suivants : filtrant les radiations, notamment UVA et/ou UVB, hydratant, calmant, myorelaxant, amincissant, restructurant, raffermissant, repulpant, tenseur, agissant sur la microcirculation, agissant sur l'inflammation, sur les radicaux libres, vitamines, anti-rides, éclaircissants, etc. La composition selon l'invention peut être appliquée sur le visage, le corps, le décolleté, le cuir chevelu, les cheveux, les cils, les poils, sous n'importe quelle forme ou véhicule connus de l'homme de l'art, notamment sous forme de solution, de dispersion, d'émulsion, de pâte ou de poudre, individuellement ou en pré-mélange ou être véhiculée individuellement ou en pré-mélange par des vecteurs comme les macrocapsules, les microcapsules ou les nanocapsules, les macrosphères, les microsphères, ou les nanosphères, les liposomes, les oléosomes ou les chylomicrons, les macroparticules, les microparticules ou les nanoparticules, macroéponges, les microéponges ou les nanoéponges, les microémulsions ou les nanoémulsions, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites, spores ou exines et autres supports minéraux ou organiques. En cosmétique notamment, des applications peuvent être proposées notamment dans les gammes de soins de la peau du visage, du corps, des cheveux et des poils et des gammes de maquillages-soins, notamment les cils et sourcils. D'une manière générale, les cellules ou l'extrait cellulaire selon la présente invention peuvent être utilisés sous n'importe quelle forme, dans une forme liée, incorporée ou adsorbée sur des macro micro -, et nanoparticules, ou sur macro-, micro- et nanocapsules, pour le traitement des textiles, des fibres naturelles ou synthétiques, des laines, et tous matériaux destinés à entrer en contact avec la peau et qui peuvent être employés dans l'habillement, les sous-vêtements de jour ou de nuit, les mouchoirs, ou les tissus, afin d'exercer son effet cosmétique ou thérapeutique par l'intermédiaire de ce contact peau/textile et permettre une délivrance topique continue. Le CTFA (« International cosmetic ingredient dictionary & handbook » (13ème Ed. 2010) publié par « the Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc. », Washington, D.C.) décrit une grande variété, sans limitation, d'ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques habituellement utilisés dans l'industrie du soin de la peau, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans les compositions selon la présente invention. D'autres actifs de soin de la peau additionnels qui sont particulièrement utiles peuvent être trouvés dans la documentation commerciale de Sederma et sur le site www.sederma.fr. On peut aussi citer à titre d'exemples les actifs commerciaux suivants : la bétaïne, le glycérol, l'Actimoist Bio 2TM (Active organics), AquaCacteenTM (Mibelle AG Cosmetics), AquaphylineTM (Silab), AquaregulKTM (Solabia), CarcilineTM (Greentech), CodiavelaneTM (Biotech Marine), DermafluxTM (Arch Chemicals, Inc), Hydra'FlowTM (Sochibo), Hydromoist LTM (Symrise), RenovHyalTM (Soliance), SeamossTM (Biotech Marine), ArgirelineTM (nom commercial de l'acétyl hexapeptide-3 de Lipotec), le spilanthol ou un extrait d' Acmella oleracea connu sous le nom Gatuline ExpressionTM, un extrait de Boswellia serrata connu sous le nom BoswellinTM, Deepaline PVBTM (Seppic), Syn-AKETM (Pentapharm), AmelioxTM, BioxiliftTM (Silab), PhytoCellTecTMArgan (Mibelle), Papilactyl DTM (Silab), PreventheliaTM (Lipotec), SubliskinTM (Sederma), VenuceaneTM (Sederma), Moist 24TM (Sederma), Vegesome Moist 24TM (Sederma), EssenskinTM (Sedenna), JuvinityTM (Sederma), RevidratTM (Sederma), ResistemTM (Sederma), ChronodynTM (Sederma), KombuchkaTM (Sederma), ChromocareTM (Sederma), CalmosensineTM (Sederma), Glycokin factor STM (Sederma), BiobustylTM (Sederma), IdealiftTM (Sederma), Ceramide 2TM, Ceramide A2TM et Ceramide HO3TM (Sederma), LeganceTM (Sederma), IntenslimTM (Sederma), ProdiziaTM (Sederma), Beautifeye TM (Sederma), ou des mélanges de ceux-ci. Parmi les extraits de plante pouvant être combinés avec un peptide selon l'invention, on peut mentionner en outre en particulier les extraits de lierre, par exemple de lierre grimpant (Hedera Helix), de Bupleurum chinensis, de Bupleurum Falcatum, d'arnica (Arnica Montana L), de romarin (Rosmarinus officinalis /V), de souci (Calendula officinalis), de sauge (Salvia officinalis L), de ginseng (Panax ginseng), de ginko biloba, de millepertuis (Hyperycum Perforatum), de fragon (Ruscus aculeatus L), d'ulmaire (Filipendula ulmaria L), d'orthosiphon (Orthosiphon Stamincus Benth), d'algues (Fucus Vesiculosus), de bouleau (Betula alba), de thé vert, de noix de cola (Cola Nipida), de marronniers d'Inde, de bambou, Centella asiatica, de bruyère, fucus, saule, piloselle, les extraits d'escine, les extraits de cangzhu, les extraits de chrysanthellum indicum, de plantes du genre Armeniacea, Atractylodis Platicodon, Sinnomenum, Pharbitidis, Flemingia, de Coleus comme C. Forskohlii, C. blumei, C. esquirolii, C. scutellaroides, C. xanthantus et C. Barbatus, comme un extrait de raciness de Coleus barbatus, des extraits de Ballote, Guioa, Davallia, Terminalia, Barringtonia, Trema, antirobia, cecropia, argania, dioscoreae comme Dioscorea opposita ou mexicain, des extraits de Ammi visnaga, de Siegesbeckia, en particulier Siegesbeckia orientalis, des extraits végétaux de la familles des Ericaceae, en particulier des extraits de myrtilles (Vaccinium angustifollium) de Arctostaphylos uva ursi, alpe vexa, de plantes contenant des stérols (notamment des phytostérols), de Manjistha (extrait de plantes du genre Rubia, en particulier Rubia Cordifolia), de Guggal (extrait de plantes du genre Commiphora, en particulier Commiphora Mukul), un extrait de kola, camomille, treffle violet, de Piper methysticum (Kava Kava de Sederma), de Bacopa monieri (BacocalmineTM Sederma) et de fouet de mer, de Glycyrrhiza glatira, de mûrier, de melaleuca (arbre à thé), de Larrea divaricata, de Rabdosia rubescens, de Euglena gracilis, de Fibraurea recisa Hirudinea, de Chaparral Sorghum, de fleur de tournesol, d'Enantia chlorantha, de Mitracarpe du genre Spermacocea, de Buchu barosma, de Lawsonia inermis L., d' Adiantium Capillus-Veneris L., de Chelidonium malus, de Luffa cylindrical, de « Japanese Mandarin » (Citrus reticulata Blanco var. unshiu), de Camelia sinensis, de Imperata cylindrical, de Glaucium Flavum, de Cupressus Sempervirens, de Polygonatum multiflorum, de loveyly hemsleya, de Sambucus Nigra, de Phaseolus lunatus, de Centaurium, de Macrocystis Pyrifera, de Turnera Diffusa, de Anemarrhena asphodeloides, de Portulaca pilosa, d'Humulus lupulus, de café Arabica, d'Ilex Paraguariensis, de Globularia Cordifolia, d' Oxydendron arboreum et de Zingiber zerumbet smith. Les compositions selon la présente invention peuvent comprendre un ou plusieurs peptides, incluant, sans se limiter, les, di-, tri-, tetra-, penta- et hexapeptides et leurs dérivés. Selon un mode de réalisation particulier, la concentration du peptide additionnel, dans la composition, varie entre lx10-7% et 20%, de préférence entre lx10-6% et 10%, préférentiellement entre lx10-5% et 5%, en poids. Le terme «peptide» désigne ici les peptides contenant 10 acides aminés ou moins, leurs dérivés, isomères et complexes avec d'autres espèces telles qu'un ion métal (e.g. cuivre, zinc, manganèse, magnésium, et autres). Le terme "peptides" se réfère à la fois à des peptides naturels et à des peptides de synthèse. Il se réfère également à des compositions qui contiennent des peptides et qui se rencontrent dans la nature, et/ou qui sont commercialement disponibles. Des exemples non limitatifs de dipeptides utilisables dans le cadre de la présente invention, comprennent la Carnosine (beta-AH), YR, VW, NF, DF, KT, KC, CK, KP, KK ou TT. Des exemples non limitatifs de tripeptides comprennent RKR, HGG, GKH, GGH, GHG, KFK, KPK, KMOK, KMO2K ou KAvaK. Des exemples non limitatifs de tétrapeptides sont RSRK (SEQ ID NO:1), GQPR (SEQ ID NO:2) ou KTFK (SEQ ID NO:3). Un exemple non limitatif de pentapeptide est le KTTKS (SEQ ID NO:4) et d'hexapeptides les GKTTKS (SEQ ID NO:5) et VGVAPG (SEQ ID NO:6). D'autres peptides utilisables dans le cadre de la présente invention peuvent être choisis parmi, sans que cette liste soit limitative : les dérivés lipophiles de peptides, de préférence les dérivés palmitoyl, et les complexes avec les ions métal mentionnés plus haut (e.g. complexe cuivre du tripeptide HGG). Les dipeptides préférés comprennent par exemple le N-Palmitoyl-beta-Ala-His, N-Acetyl-Tyr-Arghexadecylester (CalmosensineTM, IdealiftTM, Sederma), le Pal-KT, le Pal-RT (Sederma). Les tripeptides préférés comprennent notamment le N-Pal-Gly-Lys-His, (Pal-GKH, Sederma), le dérivé cuivre de HGG (LaminTM, Sigma), la lipospondin (N-Elaidoyl-KFK) et ses analogues de substitution conservative, N-Acetyl-RKR-NH2 (Peptide CK+), le N-Biot-GHK (Sederma), le Pal-KMO2K (Sederma) et leurs dérivés. Des dérivés tétrapeptides utilisables dans le cadre de la présente invention comprennent, sans y être limités, le N-Pal-GQPR (Sederma) (SEQ ID NO:7), le Ela-KTFK (SEQ ID NO:8). Des dérivés pentapeptides utilisables sont, sans y être limités, le N-Pal-KTTKS (SEQ ID NO:9) (MATRIXYLTM, Sederma), le N-Pal-Tyr-Gly-Gly-Phe-X (SEQ ID NO:10) avec X étant Met ou Leu ou leur mélange. Des dérivés hexapeptides utilisables, comprennent sans y être limités : N-PalVGVAPG (SEQ ID NO:11), Pal-GKTTKS (SEQ ID NO:12) et dérivés. On peut citer aussi le mélange Pal-GHK et Pal-GQPR (SEQ ID NO:7) (MatrixylTM 3000, Sederma). Les compositions préférées disponibles dans le commerce contenant un tripeptide ou dérivé comprennent le Biopeptide-CLTM, MaxilipTM ou BiobustylTM de Sederma. Les compositions préférées, disponibles dans le commerce, sources de tetrapeptides comprennent : RIGINTM, EyelissTM MatrixylTM Reloaded et Matrixyl 3000TM, qui contiennent entre 50 et 500 ppm de palmitoyl-GQPR (SEQ ID NO:7) et un excipient, proposé par Sederma. Les peptides commerciaux suivants peuvent également être mentionnés comme ingrédients actifs additionnels : VialoxTM, Syn-akeTM or Syn-Co11TM (Pentapharm), Hydroxyprolisilane CNTM (Exsymol), ArgirelineTM, LeuphasylTM, AldenineTM, TrylgenTM, EyeserylTM, SerilesineTM or DecorinylTM (Lipotec), CollaxylTM or QuintescineTM (Vincience), BONT-L-PeptideTM (lnfinitec Activos), CytokinolTMLS (Laboratoires Serobiologiques/Cognis), Kollaren TM, IP2000TM or MelipreneTM (Institut Européen de Biologie Cellulaire), NeutrazenTM (Innovations), ECM-ProtectTm (Atrium Innovations), Timp-Peptide TM, ECM Moduline TM (lnfinitec Activos). La présente invention propose également encore une méthode de traitement topique cosmétique, ou dermopharmaceutique pour l'amélioration de l'apparence et de l'état général de la peau et de ses phanères, comprenant l'application topique sur la peau d'un sujet qui en a besoin d'une quantité efficace de cellules méristématiques ou d'un extrait cellulaire selon l'invention ou d'une composition selon l'invention comprenant lesdites cellules méristématiques ou ledit extrait cellulaire tels que définis ci-dessus. Par « traitement topique » ou « utilisation topique » on entend une application qui est destinée à agir à l'endroit où elle est appliquée : peau, muqueuse, phanères. Les cellules méristématiques, l'extrait cellulaire ou la composition selon l'invention peuvent être appliqués localement sur les zones ciblées. La quantité « efficace » dépend de divers facteurs, comme l'âge, l'état du patient, la gravité du désordre ou de la pathologie et du mode d'administration. Une quantité efficace signifie une quantité non toxique suffisante pour obtenir l'effet désiré. Dans une composition cosmétique selon l'invention, les cellules méristématiques ou l'extrait cellulaire, pour être présents en quantité efficace, se trouvent en général dans des proportions comprises entre 0,000001% et 15% par rapport au poids total de la composition, de préférence encore entre 0,0001% et 10%, en fonction de la destination de la composition et de l'effet recherché plus ou moins prononcé. Selon des caractéristiques préférentielles de l'invention : - le milieu physiologiquement acceptable est une matrice hydrophile dans laquelle lesdites cellules sont mises en suspension ; et/ou - la composition comprend un épaississant et/ou subit une homogénéisation sous haute pression ; et/ou - la composition, formant un ingrédient cosmétique, comprendra au moins 0,1% de phénylpropanoïdes glycosides, en pratique environ 0,1%. Cet ingrédient est ensuite utilisable par exemple à une teneur de quelques % à 20% pour préparer des formulations cosmétiques. Tous les pourcentages et ratios utilisés dans la présente demande sont par poids de la composition totale et toutes les mesures sont faites à 25°C à moins que cela ne soit précisé autrement. À titre d'exemple, pour un traitement cosmétique du visage, la Directive Européenne sur les Cosmétiques a fixé une quantité standard d'application d'une crème de 2,72 mg/cm2/jour/personne et pour une lotion pour le corps de 0,5 mg/cm2/jour/personne. Selon d'autres particularités, le procédé de traitement cosmétique selon l'invention peut être associé avec un ou plusieurs autres procédés de traitement visant la peau, comme par exemple les traitements par luminothérapie, par la chaleur ou par aromathérapie. Selon l'invention, il est possible de proposer des dispositifs à plusieurs compartiments ou kits destinés à la mise en oeuvre du procédé décrit ci-dessus, et qui pourrait comprendre, à titre d'exemple, et sans que ce soit limitatif, dans un premier compartiment une composition contenant des cellules actives selon l'invention et dans un second compartiment un excipient et/ou actif additionnel, les compositions contenues dans lesdits premier et second compartiments étant ici considérées comme composition de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps notamment dans l'un des traitements définis ci-dessus. Le procédé de traitement selon l'invention est plus particulièrement adapté à un traitement : - anti-âge via une action sur les molécules de la MEC dermique et épidermique ; et/ou - pour densifier le derme via la stimulation de collagène I et d'élastine, et/ou - pour ralentir les dégradations des molécules de la matrice extracellulaire dermique, et/ou - pour agir sur la JDE via la stimulation de collagène IV et/ou de laminines, et/ou - pour épaissir l'épiderme, et/ou - pour traiter les taches de senescence, et/ou - anti-rides, et/ou - volumateur. D'autres applications cosmétiques sont également envisageables par exemple amincissante, traitement de la perte d'élasticité, détoxification, anti-glycation, tenseurs, anti-fatigue, anti-poches et/ou cernes, calmant, raffermissant, action sur les poils et les cheveux, action sur l'éclat du teint etc. à titre préventif ou curatif. La présente invention sera mieux comprise et d'autres avantages apparaîtront à la lumière de la description détaillée qui va suivre, description faite en référence à la planche de dessin annexée sur laquelle la figure 1 représente un graphe de déformation de la peau à l'aide d'un Cutomètre illustrant les différents paramètres mesurés.

A) Création de la lignée IRB PL3 Des morceaux choisis de feuilles du genre Plantago lanceolata sont prélevés, lavés et coupés en petits morceaux de quelques cm, de façon à réaliser de 2000 à 5000 explants. Après une série de traitements de décontamination puis de stérilisation, les morceaux sont placés sur un milieu de culture gélosé en présence d'un milieu nutritif contenant des hormones de croissance végétales afin d'induire la callogenèse (formation d'un cal). Après une période de temps appropriée, un amas de cellules dédifférenciées ou cal se forme, lequel est transféré sur une plus grande surface et dans un milieu frais de culture afin de pouvoir se multiplier. Un certain nombre de sous-cultures (transferts sur un milieu frais de culture) est réalisé pour stabiliser la lignée cellulaire, c'est-à-dire jusqu'à que celle-ci présente une vitesse de prolifération élevée et constante, une conservation du phénotype, une teneur constante en composés bioactifs d'intérêt (métabolites primaires et secondaires). La lignée cellulaire est ensuite soumise à une étape de sélection qui consiste à cultiver les cellules pendant une durée appropriée, à prélever les agrégats de cellules formés et à les inoculer sur un milieu de culture liquide pour une durée permettant d'obtenir la multiplication de l'agrégat cellulaire. La meilleure lignée cellulaire sera celle permettant d'obtenir le plus rapidement possible et de manière reproductible une biomasse importante ayant une teneur optimale en métabolites choisis, la meilleure activité biologique et un phénotype homogène. Les inventeurs ont ainsi sélectionné la lignée Plantago lanceolata IRB PL3. Celle-ci a été choisie également pour sa capacité à produire des phénylpropanoïdes glycosides en une quantité d'environ 10% mesurée en poids de phénylpropanoïdes glycosides totaux exprimés en plantamajoside par rapport au poids sec des cellules. B) Procédé industriel d'obtention d'une biomasse de cellules méristématiques de Plantago lanceolata obtenues à partir de la lignée cellulaire Plantago lanceolata IRB PL3 ou d'un extrait desdites cellules La lignée Plantago lanceolata IRB PL3 est dans un premier temps multipliée pour obtenir une quantité suffisante de biomasse de cellules méristématiques afin d'effectuer l'étape de production à grande échelle. Les étapes suivantes sont mises en oeuvre : a) Inoculation de la lignée sélectionnée dans un milieu liquide et culture un temps suffisant pour obtenir une augmentation de la biomasse d'au moins 300% ; b) De façon optionnelle, transfert de la suspension obtenue en a) dans un milieu liquide frais et à nouveau culture un temps suffisant pour obtenir une augmentation de la biomasse d'au moins 300%; c) De façon optionnelle, répétition de l'étape b) ; d) Transfert des suspensions cellulaires obtenues aux stades a) à c) dans un bioréacteur avec du milieu liquide frais, et conduite de la culture dans des conditions telles et pendant un temps suffisant pour obtenir une biomasse cellulaire contenant le métabolite d'intérêt c'est-à-dire les PPG en quantité suffisante, cette étape de production en bioréacteur comprenant une étape d'élicitation réalisée en modifiant les taux de nutriments du milieu de culture. Le bioréacteur : Volume : de 5 à 50 fois plus grand que le volume de biomasse utilisée comme inoculum ; surface interne du bioréacteur lisse et uniforme (pas d'arêtes ou d'angles pouvant provoquer la rupture des parois des cellules). Conditions de culture : Milieu de culture : milieu comprenant des sels minéraux (solution de macroéléments et de microéléments), des vitamines, des hormones végétales ainsi que du sucrose. De l'agar végétal est ajouté dans les milieux solides. Température : entre 15°C et 35°C, de préférence entre 20°C et 30°C et de façon encore plus préférée à 25°C. Durée : entre 7 et 21 jours, de préférence entre 10 et 14 jours. Agitation de la biomasse : il est important que la biomasse soit aérée de façon optimale, et que dans le même temps, elle soit gardée agitée soit par un moyen interne, soit par un moyen externe. Il est nécessaire que l'agitation, bien que faible, soit efficace, surtout dans les étapes finales, quand la biomasse est en quantité importante. Pour les besoins de la présente invention, des moyens appropriés d'agitation par voie interne sont des hélices tournant entre 20 et 120 tours/min, de préférence à 60 tours/min, ou par voie externe des moyens d'agitation orbitale tournant de préférence entre 40 et 200 tours/min et de préférence à environ 120 tours/min. Oxygénation : normalement réalisée en utilisant de l'air stérile, à un débit de 0,5 à 4 litres par minute, de façon préférentielle entre 2 et 2,5 litre par minute, pour un volume de 10 litres de biomasse. De façon alternative, des mélanges de gaz contenant de 10% à 100% v/v d'oxygène peuvent être utilisés. Il sera préférable d'utiliser des moyens de diffusion de l'air ou de l'oxygène avec une buse ayant un débit compris entre 10m1/mn et 600m1/mn et de façon préférentielle entre 50m1/mn et 350m1/mn. Traitement du milieu cellulaire obtenu Filtration pour éliminer le milieu de culture et récupérer la biomasse de cellules. Cette biomasse peut être caractérisée par son taux équivalent de cellules lyophilisées. Caractérisation des composés actifs contenus dans les cellules par détermination analytique de métabolites primaires et secondaires produits par la culture incluant la teneur en protéines et PPG. Facultativement : séchage des cellules notamment par lyophilisation ou atomisation pour permettre une plus grande stabilité des composés d'intérêt, améliorer le stockage à long terme sans avoir à ajouter des conservateurs. - homogénéisation sous haute pression du milieu de culture cellulaire : permet une réduction de la taille des agrégats cellulaires ; certaines cellules peuvent être éclatées et on peut être alors en présence d'un mélange de cellules entières et de cellules broyées ; - extraction du contenu des cellules par broyage/lyse/éclatement des cellules dans un solvant approprié et séparation des phases liquide et solide (par centrifugation ou filtration ou autre), afin d'obtenir un extrait cellulaire. C) Obtention d'une composition selon l'invention La biomasse de cellules, soit telle qu'obtenue au point B) après filtration, soit sous forme séchée, ou encore l'extrait cellulaire, peuvent être mélangés à un milieu physiologiquement acceptable formant l'excipient. À titre d'exemple préférentiel, ce milieu physiologiquement acceptable est une matrice hydrophile dans laquelle les cellules sont mises en suspension, par exemple dans le cas d'une composition cosmétique du glycérol et/ou du butylène glycol. Des additifs peuvent être aussi ajoutés le cas échéant, comme des agents antimicrobiens, des anti-oxydants, des agents stabilisants, des agents agissant sur le pH, des agents émulsifiants ou des agents épaississants, notamment un épaississant comme la gomme xanthane qui va favoriser le maintien en suspension des cellules. On peut en outre prévoir une étape d'homogénéisation sous haute pression pour obtenir une suspension de plus fines particules. Un ingrédient à usage cosmétique, concentré en composés actifs peut ainsi être formé comprenant par exemple 20% en poids de biomasse fraiche de cellules méristématiques entières (correspondant environ à 1% de cellules sèches) par rapport au poids total de la composition, ayant un taux au final d'environ 0,1% de phénylpropanoïdes glycosides totaux, dans un mélange excipient physiologiquement acceptable constitué de glycérol (environ 80%) et de gomme xanthane (0,3% en poids). Cet ingrédient est ensuite utilisable à une teneur de quelques % à 20% pour préparer des formulations cosmétiques comme exposé ci-dessous au point Galénique F). D) Résultats de tests in vitro Les tests in vitro ont été réalisés à partir d'un extrait éthanolique concentré 17 fois par rapport à l'ingrédient selon l'invention défini ci-dessus au point C) à 1% de cellules lyophilisées (soit 17% de cellules lyophylisées). Cet extrait est titré à 1,45% en phénylpropanoïdes glycosides totaux. Cet extrait (appelé produit selon l'invention dans les tests in vitro) est testé ci-après à 0,06%, correspondant à une concentration en Phenylpropanoides glycosides (PPG) de 8,8ppm. Lorsque ce % est différent, cela est précisé. 1) Densification du derme a) Synthèse de collagène I sur des fibroblastes humains dermiques Le collagène I constitue la protéine la plus abondante du derme, elle est essentielle pour avoir une peau ferme et élastique et tend à être moins produite avec l'âge.

Des fibroblastes humains normaux (FHN) en culture ont reçu le produit selon l'invention pendant 6jours. La synthèse de collagène I a été quantifiée sur photos après immuno-marquage. Un comptage des noyaux des cellules a été réalisé à l'aide du colorant de l'ADN (Hoescht 33258). Tableau 1 : Variation de la synthèse du collagène I par des FHN (n=3). Collagène I (UFA*/106 cell.) Variation (%) Contrôle négatif 41,4 ± 14,5 Référence Produit selon l'invention 200,6 ± 20,1 +385% ; p<0,01 * UFA : unité fluorescence arbitraire ; Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle b) Synthèse d'élastine sur des fibroblastes humains dermiques L'élastine est synthétisée et sécrétée dans l'espace extracellulaire dermique par les fibroblastes d'abord en proélastine, puis en tropoélastine. L'élastine est la composante majeure jusqu'à 90 % des fibres élastiques. L'élastine et la fibrilline qui forment les fibres élastiques ainsi que le collagène sont donc les principaux constituants de la matrice extracellulaire. Il importe de stimuler leurs synthèses qui décroissent avec l'âge. Des Fibroblastes humains normaux (FHN) sont cultivés au contact ou non des produits à tester à différentes concentrations. La synthèse d'élastine produite par les cellules est ensuite quantifiée par immuno-marquage et analyse d'images sur les tapis fixés. Une contre coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et permet de pondérer les résultats. Tableau 2 : Variation de la synthèse d'élastine par des FHN (n=3). Elastine (UFA*/106 cell.) Variation (%) Contrôle négatif 3,22 +/- 0,89 Référence Produit selon l'invention 8,46 +/- 3,61 +163% ;p<0,01 * UFA : unité fluorescence arbitraire ; Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle c) Synthèse d'élastine sur explants de peaux après vieillissement accéléré Des explants de peau (femme de 53ans) ont été vieillis de façon accélérée, l'élastine ayant un taux de renouvellement faible, il est difficile de visualiser les néosynthèses sans cette opération. Pour cela les explants ont reçu temporairement un corticoïde, puis une crème selon l'invention (exemple galénique n°1 défini au point E) ci-dessous), ou une crème placebo ont été appliquée pendant 9j. Des coupes de peau ont ensuite été analysées au microscope après immunomarquage de l'élastine. 30 photos (n= 10/réplicate x 3/cas) ont permis de quantifier et comparer les quantités respectives d'élastine. Tableau 3 : Variation de la synthèse d'élastine sur des explants de peaux traités (n=3) PLACEBO PLACEBO « vieilli » Produit selon l'invention« vieilli » Non stressé stress corticoïde stress corticoïde Référence -25% ; p<0.01 +76% ; p<0.01 L'application du corticoïde fait baisser le niveau d'élastine de 25% avec le placebo et le produit selon l'invention permet de le faire remonter à un niveau supérieur à celui des peaux placebo non stressées. d) Synthèse d'acide hyaluronique sur des fibroblastes humains. L'Acide hyaluronique est un composant essentiel du derme. L'intérêt de l'acide hyaluronique tient à ses propriétés viscoélastiques et à sa capacité à capter l'eau. Ainsi elle remplit les espaces entre les fibres de collagène et d'élastine, dans le derme. Cela contribue à la souplesse de la peau et à prévenir la formation des rides. Cette substance diminuant avec l'âge, la peau se dessèche et se ride. Des Fibroblastes humains normaux (FHN) sont mis au contact ou non du produit selon l'invention. La synthèse d'acide hyaluronique produite par les cellules est ensuite quantifiée par immuno fluorescence et analyse d'images sur les tapis fixés. Une contre coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et permet de pondérer les résultats. Tableau 4 : Variation de la synthèse d'acide hyaluronique par des FHN (n=3) IMF Ac hyaluronique FHN Variation Nb cell (HXT) Ac % de Variation Hyaluronique (UFA/106ce11) Contrôle Réf 17,07 +/- 12,40 Référence Produit selon l'invention -3 52,92 +/- 15,90 +210% ; p<0,01 Le produit selon l'invention stimule la synthèse d'acide hyaluronique par des fibroblastes humains normaux. e) Collagènes, élastine et miRNA Des FHD (fibroblastes humains dermiques) ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 3 et 24h. A chaque temps les miRNA ont été extraits et ont été étudiés par analyse transcriptionnelle après vérification de la qualité des ARN par électrophorèse capillaire et détermination du pourcentage de miRNA. Les valeurs obtenues à chaque temps ont été comparées au contrôle sans produit. Tableau 5 : Variation des ratios de miR-29 et -196a sur des FHD Type de miRNA Contrôle négatif (UFA*) Variation* à 3h Variation* à 24h miRNA-29 4886 0,766 0,647 miRNA-196a 168 0,746 0,660 UFA : unité fluorescence arbitraire ; Variation UFA cas considéré / UFA contrôles ; aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Cette étude montre que le produit selon l'invention réduit les niveaux d'expression des miRNA-29 connus pour freiner la synthèse des collagènes et de l'élastine ainsi que ceux des miRNA-196a, qui répriment la synthèse du collagène I. Ces observations ont été renforcées par la baisse d'expression de miRNA-25 et -150 également répresseurs de ces synthèses. Ces résultats, permettent d'expliquer que le produit selon l'invention favorise les synthèses de macromolécules dermiques : collagène I et IV et élastine, et favorise ainsi la densification du derme. f) Ralentissement des dégradations des molécules de la matrice extracellulaire. Les protéases du derme sont induites par différents stress et lors du vieillissement. Elles contribuent à la fragmentation et une dégradation accrue des macromolécules du derme (collagène I notamment), rendant la peau moins ferme, moins dense et moins souple. Les MMP sont contrôlées par différents mécanismes dont les TIMP produites par les cellules. Ces TIMP sont des glycoprotéines chargées d'inhiber l'activité des MMP par complexation. Elles sont elles aussi sous le contrôle de miRNA. Sur des FHD ayant subi un stress oxydatif (H202) mimant un vieillissement accéléré (SIPS =Stress Induced Premature Senescence), ont été mesuré, d'une part la production des MMP-1 et -2 (par ELISA) et d'autre part la production des TIMP-1 et -2 (par ELISA) en présence ou en l'absence du produit selon l'invention. Le stress oxydatif provoque sur le contrôle, une augmentation des MMP-1 et -2 (+21%; +21%) et une baisse des TIMP-1 et -2 (-30% et -41%). Tableau 6 : Variation de la quantité de MMP-1, -2 et de TIMP-1 et -2 produites par des FHD (n=4* ou 3**) suite à un stress oxydatif. Contrôle Produit selon l'invention Variation (%) MMP-1 (ng/106 cell.)* 5049 ± 862 3426 ± 318 -32% ; p<0,05 MMP-2 (ng/106 cell.)* 952 ± 81 734 ± 61 -23% ; p<0,01 TIMP-1 (ng/106 cell.)** 8665 ± 664 11006 ± 1870 +27% ; p<0,05 TIMP-2 (ng/106 cell.)** 129 ± 12 156 ± 10 +21% ; p<0,05 Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Ces résultats montrent que le produit selon l'invention permet de contrôler la production de MMP-1 et -2 en réduisant leur production respectivement de -32% et-23% (p<0,05 ou 0,01), et en parallèle de stimuler la production de l'inhibiteur naturel des TIMP-1 et -2 de +27 et +21% (p<0,05). g) MMP, TIMP et miRNA Le microRNA-21 est connu pour réprimer la production de TIMP-1 et ainsi faciliter l'action des MMP. Des FHD ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 3 et 24h. À chaque temps les miRNA ont été extraits et quantifiés comme mentionné ci-dessus. Tableau 7 : Variation des ratios de miR-21 dans des FHD Type de miRNA Contrôle négatif (UFA*) Variation* à 3h Variation* à 24h miR-21 3609 0,757 0,657 * UFA : unité fluorescence arbitraire ; Variation UFA cas considéré / UFA contrôles ; aucune toxicité n'a été notée par rapport aux contrôles La baisse du niveau d'expression du miR-21 va augmenter la production de TIMP-1 et donc réduire l'activité des MMP. Le produit selon l'invention protège donc avantageusement les macromolécules dermiques contre la dégradation par les protéases.

Par conséquent, en parallèle de son effet stimulateur des synthèses de macromolécules matricielles vu plus haut, le produit selon l'invention protège la matrice extracellulaire dermique de la dégradation par les protéases. Ceci est particulièrement recherché pour une action anti-âge. 2) Maintien de l'intégrité de la JDE et ainsi de l'ancrage des kératinocytes humains (et du contrôle des mélanocytes). La JDE ou jonction dermo-épidermique est une membrane épaisse qui assure la cohésion entre le derme et l'épiderme. a) Stimulation de la synthèse du collagène IV sur explants de peau Le collagène IV est un type de collagène situé principalement au niveau de la membrane basale ou jonction dermo-épidermique (JDE). C'est un des éléments essentiel de la peau, non par sa quantité mais par son rôle au niveau de la JDE. Avec l'âge, il est plus fragmenté car attaqué par les MMP et en même temps moins synthétisé, tout comme les laminines, ce qui entraine dans certaines zones une altération de la JDE, des relations perturbées entre mélanocytes, kératinocytes et JDE avec comme conséquence une pigmentation accrue de la peau. Des explants de peau d'une femme (abdomen, 53ans) mis en survie dans un milieu adapté ont reçu chaque jour pendant 9j une crème contenant selon l'invention (formule galénique n°1 au point F) ci-dessous) ou la crème placebo. À l'issue de ce contact, des coupes de peau ont été faites et le collagène IV a été marqué à l'aide d'un anticorps fluorescent. 30 photos (n= 10/réplicate x 3 / cas) ont permis de quantifier et comparer les quantités respectives de collagène IV. Tableau 8 : Variation de la production de Collagène IV sur explants de peaux (n=3) Collagène IV Explants Intensité de fluorescence moyenne* % Variation / placebo Placebo 11,0 +/- 2,5 Référence Produit selon l'invention 16,8 +/- 2,9 +53,2%; p<0,01 * UFA : unité fluorescence arbitraire Le produit selon l'invention stimule donc avantageusement la synthèse de collagène IV sur explants de peaux. b) Synthèse de laminines par des kératinocytes humains Les kératinocytes basaux sont accrochés les uns aux autres en formant une couche fine reliée au derme via la JDE et son complexe réseau de protéines et de fibres. Parmi elles, on trouve les laminines, des protéines en forme d'ancre à bateaux, dont les branches lient ensembles le collagène IV, les protéoglycanes dermiques et les kératinocytes. Les laminines diminuent en quantité avec l'âge et au niveau des lentigo séniles, d'où l'intérêt à stimuler leur synthèse. Des kératinocytes humains ont été mis en contact pendant 3j avec le produit selon l'invention, un dosage des laminines a été réalisé sur les surnageants de culture à l'aide d'une méthode ELISA. Une estimation de la quantité de cellules par dosage Hoechst permet de pondérer ce dosage.

Tableau 9 : Variation de la synthèse des laminines (n=5). Laminines (ng/106 cell.) Variation (%) Contrôle négatif 246 ± 23 Référence Produit selon l'invention 360 ± 13 +46% ; p<0,01 Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Les résultats montrent que les laminines sont plus produites (+46%, p<0,01) en présence du produit selon l'invention que dans le contrôle. Ils complètent ceux obtenus avec le collagène IV. Ensemble, ces deux composants essentiels de la JDE assurent au kératinocyte de la lame basale un meilleur ancrage et contribuent à maintenir la souplesse de l'épiderme et le contrôle des activités des mélanocytes. 3) Relance des métabolismes épidermiques pour épaissir l'épiderme L'amincissement de l'épiderme est un des aspects du vieillissement, d'où la nécessité d'agir aussi dans le sens du renfort de l'épiderme et donc de la différenciation des kératinocytes. a) Marquage des lipides neutres à l'huile rouge Dans l'épiderme normal, un mélange de lipides neutres et polaires prédomine dans les couches profondes et est progressivement remplacé par un contenu lipidique plus apolaire, incluant des céramides, des stérols libres et des acides gras libres, ainsi que des quantités variables de triglycérides, esters de stérol et autres composants non polaires. Ces lipides neutres (céramides surtout) vont former un ciment intercellulaire au niveau de la couche cornée, assurant son imperméabilité à l'eau. La montée en puissance des lipides neutres est ainsi bien corrélée avec la phase finale de différenciation du kératinocyte (formation du cornéocyte). Des kératinocytes humains à confluence ont été mis au contact du produit selon l'invention à 0,12%, dans un milieu contenant du calcium, et la différenciation a été suivie. La synthèse de lipides neutres est alors évaluée par une coloration à l'Huile Rouge. La quantité de cellules est mesurée par la méthode Hoechst. Tableau 10 : Marquage des kératinocytes à l'huile rouge (n=3 et 15 photos par cas) Marquage huile rouge Nbr. cellules % Variation Lipides % de Variation (UA / 106 cells) * Contrôle Référence 0,75 +/- 0,30 Reference Produit selon l'invention -34% 1,22 +/- 0,31 +63% ;p<0,01 *Unités arbitraires La baisse de la quantité cellulaire est classique après contact avec un produit prodifférenciateur et ne traduit pas une cytotoxicité de ce produit, mais plutôt une moindre adhésion des cellules différenciées au support.

En parallèle de son effet prodifférenciateur (observable sur les tapis cellulaires), le produit selon l'invention stimule la synthèse de lipides épidermiques. Ce dernier résultat est cohérent, la différenciation s'accompagnant d'une accumulation de céramides, qui sont des lipides neutres. b) Renforcement des jonctions serrées : ZO-1 (TJP-1) et Claudine-1 Les Tight Junctions (jonctions serrées) forment un système de protection qui lie fortement les cellules entre elles via le réseau d'actine dans la partie haute de l'épiderme. Elles ont un rôle de gardien de l'homéostasie hydrique, empêchant l'évaporation de l'eau. ZO (zona occludens)-1 et Claudine-1 participent à ce réseau. Des kératinocytes humains ont été mis au contact du produit selon l'invention à 0,12% pendant 2j et un marquage immunofluorescent de ZO-1 et Claudine-1 a été réalisé. Une contre coloration des noyaux au colorant hoechst associée à un comptage permet de pondérer ces données. Tableaux 11 et 12 : Variation des quantités de Claudine-1 et de ZO-1 sur des kératinocytes (n=3 et 18 photos par cas) IMF Claudine-1 HPEK Variation Nb cell (HXT) Claudine-1 (UFA/500cell) * % de Variation Contrôle Réf 18459 +/- 8354 Reference Produit selon l'invention -1 41611 +/- 13459 +125% ; p<0,01 IMF ZO-1 (TJP-1) HPEK Variation Nb cell (HXT) ZO-1 (UFA/500cell)* % de Variation Contrôle Réf 36085 +/- 8653 Reference Produit selon l'invention +2 51227 +/- 13210 +42% ; p<0,01 *Unité de fluorescence arbitraire Le composé selon l'invention induit une augmentation significative de deux protéines des jonctions serrées : ZO-1 et la Claudine-1 au niveau des cornéocytes et participe ainsi au renforcement de la barrière cutanée et à la cohésion des cellules épidermiques. c) Synthèse de loricrine et filaggrine La loricrine et la filaggrine sont deux protéines spécifiques de la différenciation des kératinocytes. L'effet du produit selon l'invention sur leur synthèse a été évalué. Des kératinocytes humains à confluence ont été mis au contact du produit selon l'invention à 0.12% dans un milieu contenant du calcium, et la différenciation a été suivie. Après culture, les tapis sont rincés, fixés et les synthèses de Loricrine et Filaggrine sont mises en évidence par immunofluorescence et quantifiées par analyse d'image. Une contre-coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et pondérer ces résultats.

Tableau 13 : Effet du produit selon l'invention sur la synthèse de loricrine, chez des kératinocytes humains (n=3 et 15 photos par cas). IMF Loricrine Variation Nb cell Loricirne % de Variation (HXT) (UFA/106 cell) Contrôle Référence 0,20 +/- 0,29 Référence Produit selon l'invention -37 1,54 +/- 1,57 +670% ; p<0,01 Tableau 14 : Effet du produit selon l'invention sur la synthèse de filaggrine, chez des kératinocytes humains (n=3 et 15 photos par cas). IMF Filaggrine Variation Nb cell Filaggrine % de Variation (HXT) (UFA/106 cell) Contrôle Référence 0 04 +/- 0 04 Référence Produit selon l'invention -37 0,34 +/- 0,24 +674% ; p<O, 01 La baisse de la quantité cellulaire est classique après contact avec un produit prodifférenciateur et ne traduit pas une cytotoxicité de ce produit, mais plutôt une moindre adhésion des cellules différenciées au support. Le produit selon l'invention stimule fortement la synthèse de loricrine et de filaggrine, et donc la différenciation des kératinocytes. d) Synthèse d'acide hyaluronique (AH) chez des kératinocytes Un déficit en AH conduit à un amincissement et une déshydratation de l'épiderme. C'est ce que l'on constate lors du vieillissement. Des kératinocytes humains sont cultivés pendant 24h. Les cellules sont mises au contact ou non du produit selon l'invention à 0,12% pendant 3 jours. Les surnageants de culture sont prélevés et un dosage d'acide hyaluronique est réalisé par la méthode ELISA ; une estimation de la quantité de cellules par un dosage BCA (mesure de la quantité de protéines) permet de pondérer les résultats. Tableau 15 : Effet du produit selon l'invention sur la synthèse d'acide hyaluronique, chez des kératinocytes humains (n=5). AH Kératinocytes Variation Nb Acide Hyaluronique (ng/106 cell) % de Variation cell (BCA) Contrôle Réf 4728,7 +/- 537 Référence Produit selon l'invention -5 6373,1 +/- 689,6 +35% ; p<0,01 Le produit selon l'invention stimule de façon significative la synthèse d'AH chez les kératinocytes. e) Stimulation de la synthèse du CD44 Le CD44 est un récepteur de surface de l'AH impliqué dans les interactions entre cellules et l'adhésion cellulaire. La baisse de l'AH et du CD44, lors du vieillissement s'accompagne d'une diminution de la prolifération des kératinocytes. Des kératinocytes sont ensemencés. Après une phase de de croissance d'une semaine, les cellules à confluence sont mises au contact du produit selon l'invention à 0.12% durant 48h. A l'issue du contact, les tapis sont rincés, fixés et le CD44 est révélé par immuno fluorescence. Les tapis marqués sont alors photographiés et le marquage spécifique de chaque protéine d'intérêt est quantifié par analyse d'image à l'aide d'image J. Une contre coloration des noyaux au colorant hoechst associée à un comptage permet de pondérer ces données. Tableau 16 : Effet du produit selon l'invention sur la quantité de CD44, chez des kératinocytes humains (n=3 et 18 photos par cas) IMF CD44 kératinocytes Variation CD44 % de Variation Nb cell (UFA/SOOcell) (HXT) l) Contrôle Réf 10788 +/- 9059 Reference Produit selon l'invention -5 61146 +/- 16000 +467% ; p<0,01 Le produit selon l'invention augmente la synthèse de CD44. Cet effet associé à son effet stimulateur de la synthèse d'acide hyaluronique participe à améliorer l'hydratation de l'épiderme, et augmenter son épaisseur. 4) Diminution des messagers pré-inflammatoires, connus pour accélérer le vieillissement Les cellules produisent des médiateurs pré-inflammatoires de façon plus importante avec l'âge. L'IL-6 par exemple, est une cytokine dont les taux sériques sont augmentés chez les personnes âgées, l'IL-6 par ailleurs induit une sénescence prématurée chez le fibroblaste humain. Les PGE2 constituent quant à elles un composé critique pour l'induction de la sénescence et entretenir un état inflammatoire, elles interviennent par ailleurs sur le mélanocyte en augmentant leur activité tyrosinase et leur dendricité ce qui produit des hyperpigmentations. Par ailleurs des cellules cutanées âgées produisent plus d'IL-6 et d'IL-8 en réponse à un stress que des cellules jeunes. Ainsi, une baisse de la production de ces médiateurs de l'inflammation à l'état basal, en l'absence de stress, est avantageuse dans une perspective anti-âge. Des kératinocytes humains normaux sont cultivés jusqu'à l'obtention d'un tapis confluent. A ce stade, ils sont mis au contact des produits à tester pendant 48h. Les quantités de PGE2 d'IL-6 et d'IL-8 synthétisées sont mesurées dans les surnageants de culture par dosage ELISA. Le nombre de cellules est évalué par un test de vitalité métabolique de réduction du MTT (delta Do à 570nm).

Tableau 17 : Variation de la quantité de PGE2, IL-6 et IL-8 produite par des kératinocytes (n=3). Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Ainsi, avantageusement le produit selon l'invention réduit fortement et de façon significative les messagers pré-inflammatoires qui favorisent le vieillissement. 5) Signaux anti-sénescence génériques a) Axe antioxydant Le DPPH (1,1-diphény1-2-picryl hydrazyl) est un radical libre stable qui est très utilisé pour la détection des piégeurs de radicaux libres. Cette molécule en perdant son caractère radicalaire est convertie en DPPH2 (1,1-diphény1-2-picryl hydrazine). Cette conversion s'accompagne d'une décoloration (du violet au jaune) qui peut être suivie dans le temps en spectrophotométrie à 517nm. Le contrôle ne présentant pas d'activité antiradicalaire garde une densité optique constante. Les membranes cellulaires sont formées de phospholipides oxydables. En utilisant un modèle acellulaire (liposomes à base de phospholipides insaturés) et un stress oxydant reproductible et physiologique (irradiation UVA), il est possible de suivre par spectrophotométrie (à 233nm) la formation des sous-produits précoces de la lipoperoxydation que sont les diènes conjugués. Un agent anti-lipoperoxydant permet de réduire voire d'annuler ce phénomène. Tableau 18 : Mesure du pouvoir antioxydant du produit selon l'invention (n=6) DPPH* Variation (%) Lipoperoxydation* Variation (%) Contrôle négatif 0,488 ± 0,004 Référence 2,006 ± 0,015 Référence Produit selon l'invention 0,337 ± 0,006 -31% ;p<0.01 0,712 ± 0,040 -65% ; p<0,01 * UA : unité arbitraire. Le produit selon l'invention possède avantageusement un bon effet anti-radicalaire, et inhibe la peroxydation lipidique induite par les UVA. b) Action contre les espèces réactives de l'oxygène (ERO) L'excès d'ERO dans la cellule conduit à accentuer les dommages et à long terme au vieillissement cellulaire. Contrôle Produit selon l'invention : 0,15% PGE2 (pg/106 cell.) 266 ± 50 148 ± 4 Variation (%) Référence -44%; p<0,01 IL-6 (pg/106 cell.) 111 ± 10 10± 0,5 Variation (%) Référence -91%; p<0,01 Contrôle Produit selon l'invention : 0,15% IL-8 (pg/106 cell.) 1588 ± 250 561 ± 42 Variation (%) Référence -65%; p<0,01 Contrôle Produit selon l'invention : 0,15% L'évaluation des ERO a été effectuée sur des fibroblastes humains dermiques (FHD) à l'aide de la sonde DCFH-DA qui, une fois dans la cellule, devient fluorescente au contact des ERO (niveau de fluorescence directement proportionnel à la quantité d'ERO). La fluorescence obtenue dans les cellules en contact du produit selon l'invention a été quantifiée et comparée à celle du contrôle sans produit. Les résultats bruts ont été ramenés au nombre de cellules. Tableau 19 : Variation de la production d'ERO intracellulaire (n=3). Fluorescence (UFA*/104 cell.) Variation (%) Contrôle négatif 3527 ± 25 Référence Produit selon l'invention 804 ± 33 -77°A; p<0,01 * UFA : unité fluorescence arbitraire ; Aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Le produit selon l'invention protège donc avantageusement le fibroblaste contre les ERO qui pourraient endommager ses structures lipidiques, protéiques ou nucléiques. c) Induction de la superoxyde dismutase (SOD) La SOD est une métalloenzyme qui fait partie du système de défense de la cellule contre les radicaux libres en procédant à la dismutation de l'anion superoxyde en oxygène et peroxyde d'hydrogène. La mitochondrie contient une superoxyde dismutase à manganèse (SOD2) qui représente la première ligne de défense anti-ERO. La peau des souris déficientes en cette enzyme est très altérée et vieillie précocement, entre autre l'épiderme est plus fin. La quantité de SOD2 a été évaluée par ELISA dans les tapis cellulaires des FHD après contact avec le produit selon l'invention et comparée au contrôle sans produit. Les résultats bruts ont été ramenés au nombre de cellules. Tableau 19 : Variation de la quantité de SOD2 intracellulaire (n=3). SOD2 (U*/106 cell.) Variation (%) Contrôle négatif 21,8 ± 2,1 Référence Produit selon l'invention 28,9 ± 0,5 +33%; p<0, 01 * Unité d'activité; aucune toxicité n'a été notée par rapport au contrôle Le produit selon l'invention augmente basalement l'activité SOD des cellules et renforce ainsi avantageusement leur potentiel de défense contre l'oxydation. d) Protection vis-à-vis de la glycation des protéines La glycation des protéines augmente avec l'âge ; elle touche toutes les protéines de la peau (de structure ou fonctionnelles) et en particulier les protéines du derme comme par exemple le collagène, désorganisant la matrice extracellulaire, et faisant perdre à la peau sa tonicité, sa souplesse. Cette glycation va générer un accroissement des produits radicalaires qui à leur tour vont perturber les métabolismes et dégrader les structures des cellules de la peau. Une protéine modèle la BSA (bovine serum albumine), est mise en présence d'un sucre réducteur, en présence ou non du produit selon l'invention durant une semaine à 50°C afin de former des AGE (advanced glycation end products). Les produits finaux de glycation, présentent une fluorescence naturelle que l'on quantifie (ex = 360nm et em = 460nm). Les résultats sont donnés après ultracentrifugation de façon à s'affranchir d'un éventuel artefact lié à la fluorescence naturelle du produit. Tableau 20 : Effet sur la glycation de la BSA (n=4). Glycation Glycation (UFA) % de Variation Contrôle 10910 +/- 125 Référence Produit selon l'invention 2488 +/- 270 -77% ; p<0,05 Le produit selon l'invention baisse, dès la dose de 0.06%, la glycation d'une protéine modèle la BSA. Ainsi, en plus de son effet anti-radicalaire, le produit selon l'invention a une action protectrice vis à vis de la glycation des protéines. e) miRNA et senescence Il a été montré que le trio miR-30e, miR-34a et miR-181a d'une part et que le duo miR-152 et miR181a d'autre part participaient clairement à l'augmentation de phénotypes sénescents chez les neurones ou les fibroblastes. La diminution de ces miRNA a permis de prolonger la survie des cellules et de réduire l'apparition des phénotypes sénescents. Tout comme pour les synthèses de collagène, ces études montrent l'importance de la voie de régulation par les miRNA. Des FHD ont été mis au contact du produit selon l'invention pendant 3 et 24h. À chaque temps les miRNA ont été extraits et ont été étudiés par analyse transcriptionnelle après vérification de la qualité des ARN par électrophorèse capillaire et détermination du pourcentage de miRNA. Les valeurs obtenues à chaque temps ont été comparées au contrôle sans produit. Tableau 21 : Variation des quantités de miR-30a et -181a dans des FHD Type de miRNA Contrôle négatif (UFA**) Variation* à 3h Variation* à 24h miR-30a 28 0,412 0,457 miR 181a 168 0,752 0,637 ** UFA : unité fluorescence arbitraire ; *Variation UFA cas considéré / UFA contrôles Aucune toxicité n'a été notée par rapport aux contrôles Des résultats voisins ont été obtenus pour les miR -34a et -152. Le produit selon l'invention réduit l'expression des miR-30a, -34a, -152 et 181a décrits dans la littérature scientifique comme accélérateurs de la sénescence. Il présente donc un profil d'activité anti-âge global très intéressant notamment pour la cosmétique. E) Résultats comparatifs de tests in vitro Les tests suivants ont fait l'objet d'une comparaison entre le produit selon l'invention et du verbascoside pur à une concentration équivalente à la concentration en phenylpropanoides glycosides (PPG) du produit selon l'invention. 1) Sur la synthèse de macromolécules dermiques (collagène I et acide hyaluronique) a) Synthèse de Collagène I Des Fibroblastes humains normaux (FHN) sont cultivés pendant 24h. Les cellules sont mises au contact ou non du produit à tester (produit selon l'invention ou verbascoside) pendant 6 jours. La synthèse de collagène I produite par les cellules est ensuite quantifiée par immuno-marquage et analyse d'images sur les tapis fixés. Une contre coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et permet de pondérer les résultats. Tableau 22 : Effet comparé du verbascoside et du produit selon l'invention sur la synthèse de collagène, chez des fibroblastes humains. IMF Collagène I Concentration Variation Collagène I % de Variation en PPG Nb cell (UFA/106 cell) Contrôle - Référence 41,36 +/- 14,47 Référence Produit selon 17 6ppm +1 8 84,84 +1- 7,38 +105% ; p<0,01 l'invention Verbascoside 17,6ppm -16,2 50,32 +/- 15,24 +21,7%; dns A la dose considérée, le produit selon l'invention stimule fortement la synthese de collagène I, alors que le verbascoside est inactif b) Synthèse d'acide hyaluronique Des Fibroblastes humains normaux (FHN) sont cultivés pendant 24h. Les cellules sont mises au contact ou non du produit à tester (produit selon l'invention ou verbascoside). La synthèse d'Acide hyaluronique produite par les cellules est ensuite quantifiée par immuno-marquage et analyse d'images sur les tapis fixés. Une contre coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et permet de pondérer les résultats. Tableau 23 : Effet comparé du verbascoside et du produit selon l'invention sur la synthèse d'acide hyaluronique, chez des fibroblastes humains. IMF Acide Concentration Variation Acide % de Variation hyaluronique en PPG Nb cell Hyaluronique (UFA/106 cell) Contrôle - Référence 17,07 +/- 12,40 Référence Produit selon 8,8ppm -3 52,92 +/- 15,90 +210% ; p<0,01 l'invention Verbascoside 8,8ppm +2 28,20 +/- 4,85 +65% ; p<O, OS À la dose considérée, le produit selon l'invention stimule fortement la synthèse d'acide hyaluronique. Le verbascoside présente aussi un effet stimulateur mais nettement moins fort. En parallèle de ces essais, il a été constaté, à des doses plus élevées de verbascoside, que cette molécule avait un effet cytotoxique sur les fibroblastes, alors qu'à une concentration équivalente en PPG, le produit selon l'invention ne présentait pas cette cytotoxicité. L'évaluation du nombre de cellules a été faite en marquant les noyaux avec le colorant Hoescht, et en les comptant sur un grand nombre de champs. Cytotoxicité Concentration en PPG Variation Nb cell Contrôle - Réf Produit selon l'invention 17,6ppm -7 29ppm -16 Verbascoside 17,6ppm -31 29ppm -44 2) Sur la synthèse de molécules responsables du renforcement de la JDE et de l'épiderme (laminines et acide hyaluronique) Des kératinocytes humains sont cultivés pendant 24h. Les cellules sont mises au contact ou non du produit à tester (produit selon l'invention ou verbascoside) pendant 3 jours. Les surnageants de culture sont prélevés et un dosage de la quantité de laminine et d'acide hyaluronique est réalisé par la méthode ELISA ; une estimation de la quantité de cellules par dosage Hoechst (mesure de la quantité d'ADN) ou BCA (mesure de la quantité de protéines) permet de pondérer les résultats. a) Laminines Tableau 24 : Effet comparé du verbascoside et du produit selon l'invention sur la synthèse de laminine, chez des kératinocytes humains. Laminine Concentration Variation Nb Laminine % de Variation kératinocytes en PPG cell (ng/106 cell) Contrôle - Référence 246,4 +/- 23,0 Référence Produit selon 8,8ppm +1 360,0 +/- 13,4 +46% ; p<0,01 l'invention 17,6ppm -9 602,9 +/- 24,7 +145% ; p<0,01 Verbascoside 8,8ppm -18 193,2 +/- 22,3 -22% ; p<0,01 17,6ppm -25 202,1 +/- 10,4 -18% ; p<0,01 Aux doses considérées, le produit selon l'invention stimule fortement et de façon dose-dépendante la synthèse de laminine, alors que le verbascoside est inactif. Comme pour les fibroblastes, on constate chez les kératinocytes un début de toxicité à 8.8ppm de verbascoside, qui n'apparait pas avec le produit selon l'invention. b) Acide Hyaluronique Tableau 25 : Effet comparé du verbascoside et du produit selon l'invention sur la synthèse d'acide hyaluronique, chez des kératinocytes humains.

AH Kératinocytes Concentration Variation Nb Laminines % de Variation en PPG cell (ng/106 cell) (BCA) Contrôle - Réf 4728,7 +/- 537 Référence Produit selon 8,8ppm -11 5562,8 +/- 203,8 +18% ; p<0,05 l'invention 17,6ppm -5 6373,1 +/- 689,6 +35% ; p<0,01 Verbascoside 8,8ppm -25 4907,5 +/- 602,8 +4% ; dns 17,6ppm -27 5477,9 +/- 480 +16% ;dns Aux doses considérees (8,8 et 17,6ppm), le produit selon l'invention stimule de façon dose-dépendante la synthèse de laminine. Le verbascoside évalué en parallèle n'a pas d'effet significatif. Le début de toxicité à 8.8ppm de verbascoside est confirmé par une autre méthode (BCA) c) Sur le renforcement de la barrière épidermique - Synthèse de loricrine Des kératinocytes humains à confluence ont été mis au contact du produit à tester (produit selon l'invention ou verbascoside) dans un milieu contenant du calcium, et la différenciation a été suivie. Après 7 jours de culture, les tapis sont rincés, fixés et la synthèse de Loricrine est mise en évidence par immunofluorescence et quantifié par analyse d'image. Une contre-coloration des noyaux au Hoechst vient compléter l'étude et pondérer ces résultats. Tableau 26 : Effet comparé du verbascoside et du produit selon l'invention sur la synthèse de loricrine, chez des kératinocytes humains. IMF Loricrine Concentration en Variation Nb cell % de Variation PPG (HXT) (UFA/106 cell) Contrôle - Référence Référence Produit selon l'invention 17,6ppm -37 +670% ; p<0,01 Verbascoside 17,6ppm -23 -56,4% ; dns La baisse de la quantité cellulaire est classique après contact avec un produit prodifférenciateur et ne traduit pas une cytotoxicité de ce produit, mais plutôt une moindre adhésion des cellules différenciées au support. A la dose considérée, le produit selon l'invention stimule fortement la synthèse de loricrine, et donc la différenciation des kératinocytes, alors que le verbascoside est inactif. F) Galénique Différentes formulations cosmétiques sont décrites ci-après. Des ingrédients actifs additionnels, venant le cas échéant en soutien et/ou en complément de l'activité de l'ingrédient actif selon l'invention, peuvent être ajoutés dans la phase appropriée selon leur nature hydrophobe ou hydrophile. Ces ingrédients peuvent être de toute catégorie selon leur(s) fonction(s), le lieu d'application (corps, visage, cou, buste, mains, cheveux, cils, sourcils, poils, etc.), l'effet final recherché et le consommateur ciblé, par exemple anti-âge, anti-rides, hydratant, anti-cernes, raffermissant, anti-glycation, amincissant, apaisant, myorelaxant, anti-rougeurs, anti-vergétures, etc. Ingrédient actif selon l'invention utilisé dans les formulations galéniques données ci-après : 20% en poids par rapport au poids total de la composition de cellules méristématiques entières fraiches selon l'invention (correspondant à 1% de cellules sèches), l'ingrédient ayant un taux au final de 0,1% de phénylpropanoïdes glycosides totaux (exprimés en plantamajoside) dans un mélange excipient physiologiquement acceptable constitué de glycérol, d'épaississant gomme xanthane et d'acide citrique pour régler le pH le cas échéant. 1) Forme crème Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Optasense G83 0,30 Carbomer Phase B Brij S2-SS-(RB) 0,40 Steareth-2 Brij S10-SO-(RB) 1,20 Steareth-10 Crodafos CES-PA-(RB) 4,00 Cetearyl Alcohol & Dicetyl Phosphate & Ceteth10 Phosphate Crodacol CS90-PA 1,50 Cetearyl Alcohol Laurocapram 2,50 Laurocapram BRB CM 56 2,00 Cyclopentasiloxane & Cyclohexasiloxane Crodamol OSU-LQ-(RB) 7,00 Diethylhexyl Succinate Phase C Glycérine 4,00 Glycerin Octanediol 0,50 Caprylyl Glycol Phase D Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol Phase E Sorbate de potassium qs Potassium Sorbate Phase F H20 4,00 Water NaOH 30 % 0,40 Sodium Hydroxide Phase G Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase H Parfum 0,10 Fragrance Protocole : peser la phase A et laisser gonfler sans agitation pendant 30 min. Mettre la phase A à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser la phase B et mettre à chauffer à 75°C au bain-marie. Bien mélanger. Peser et Fondre la phase C à 45°C. Rajouter la phase D dans la phase C, préalablement refroidie. Verser la phase C+D dans la phase A, sous agitation staro v= 500 tlmn. Bien homogénéiser. Verser la phase B dans la phase précédente, sous agitation staro v= 1000 t/mn. Bien homogénéiser.

Extemporanément, rajouter la phase E, bien homogénéiser. Rajouter la phase F, bien homogénéiser. Rajouter la phase G, en dessous de 45°C, bien homogénéiser, 1 heure. Rajouter la phase H, bien homogénéiser. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - MATRIXYL synthe'6TM : ingrédient actif anti-rides à base de peptides commercialisé par Sederma (W02010/082175) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. 3% en masse de cet ingrédient peuvent par exemple être rajoutés à la fin de la formulation. - MATRIXYL 3000TM : ingrédient actif anti-rides à base de peptides commercialisé par Sederma (W02005/048968) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. 3% en masse de cet ingrédient peuvent par exemple être rajoutés en fin de formulation. 2) Forme sérum (émulsion fluide) Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Glycérine 5,00 Glycerin Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol N-Hance HP40 0,10 Hydroxypropyl Guar Vivapur CS 032 1,00 Microcrystalline Cellulose & Xanthan Gum Keltrol CG-SFT 0,10 Xanthan Gum Phase C Cithrol PG3PR-LQ-(RB) 1,00 Polyglyceryl-3 Polyricinoleate Cithrol GMIS 40-LQ-(MV) 3,00 Glyceryl Isostearate Keteol V 5 1,50 Squalane Vegetal Crodamol GTCC-LQ-(MV) 2,00 Caprylic/Capric Triglyceride Crodamol ISIS-LQ-(MV) 2,00 Isostearyl Isostearate Parfum Nova 0,10 Fragrance Phase D Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Protocole : Peser la phase A et homogénéiser sous agitation hélice v=300 tr/min. Peser et homogénéiser la phase B. Ajouter la phase B dans la phase A sous agitation hélice v= 300 tr/min. Laisser homogénéiser pendant 1 heure. Peser et homogénéiser la phase C. Ajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation forte hélice v= 1500 tr/min. Ajouter la phase D sous agitation hélice v=300 tr/min. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - RESISTEMTm : ingrédient anti-âge commercialisé par Sederma (W02012/104774), aidant la peau à construire son propre système de défense anti-âge, à base d'un extrait obtenu par culture cellulaire de la plante Globularia cordifolia. 2% peuvent être ajoutés en fin de formulation dans une phase E. - RIGINTM : actif commercialisé par Sederma (W02000/433417) améliorant l'élasticité et la fermeté de la peau, renforçant l'hydratation et lissant la peau. 3% en masse de cet ingrédient peuvent être par exemple rajoutés en fin de formulation. 3) Forme crème de nuit Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de Potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Keltrol CG-SFT 0,30 Xanthan Gum Supercol GF 0,15 Guar Gum Glycérine 4,00 Glycerin Phénoxyéthanol 0,80 Phenoxyethanol Phase C Crodacol C90-PA-(RB) 1,50 Cetyl Alcohol Crodamol SS-PA-(RB) 2,00 Cetyl Esters Syncrowax HRC (R)(PAST) 1,50 Tribehenin Span 60-PW-(MV) 1,00 Sorbitan Stearate Span 40-PW-(MV) 1,50 Sorbitan Palmitate Cithrol GMIS 40-LQ-(MV) 2,50 Glyceryl Isostearate Crodamol ISIS-LQ-(MV) 8,00 Isostearyl Isostearate Seaton Almond Oil organic-NA07413 2,00 Prunus Amygdalus Dulcis Oil Crodamol GTCC-LQ-(MV) 8,00 Caprylic/Capric Triglyceride Crodamol GTIS-LQ-(MV) 2,00 Triisostearin Coviox T 90 0,10 Dl alpha Tocopherol Phase D Ingrédient actif selon l'invention 2,00 / Phase E Parfum 0,10 Fragrance Phase F H20 1,00 Water Acide Lactique 0,03 Lactic Acid Protocole : Peser la phase A. Peser et mélanger la phase B, bien homogénéiser. Ajouter la phase B dans la phase A, sous agitation staro v=500 tr/min, pendant 30 min. Mettre la phase A+B à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser et mélanger la phase C. Mettre la phase C à chauffer à 75°C au bain-marie. Verser la phase C dans la phase A+B, sous agitation staro très forte v=1500 tr/min, puis v=1000 tr/min. Ajouter la phase D à la phase précédente, sous agitation staro v=900 tr/min, en dessous de 45°C. Ajouter la phase E à la phase précédente, sous agitation staro. Ajuster le pH à 5,80 +/-0,10 avec la phase F. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - PRODIZIATM : ingrédient actif commercialisé par Sederma qui combat les signes cutanés de la fatigue causés par le glycation et la glycoxydation. 2% peuvent être ajoutés entre la phase D et la phase E, sous agitation staro v=900 tr/min, en dessous de 35°C. - RESISTEMTm : ingrédient anti-âge commercialisé par Sederma (W02012/104774), aidant la peau à construire son propre système de défense anti-âge, à base d'un extrait obtenu par culture cellulaire de la plante Globularia cordifolia. - MEIRITAGETm : ingrédient actif anti-age à base de trois extraits de plantes (Astragalus membranaceus (Huang Qi), Bupleurum falcatum (Chai Hu) et Atractylodes macrocephala (Bai Zhu), qui améliore l'uniformité et l'éclat du teint. 4) Forme gel contour des yeux Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de Potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Glycérine 3,00 Glycerin Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol Keltrol CG-SFT 0,15 Xanthan Gum Supercol GF 0,15 Cyamopsis Tetragonoloba (Guar) Gum Crodesta F-50-PW-(RB) 0,90 Sucrose Distearate Crodesta F-160-PW-(RB) 0,30 Sucrose Stearate Phase C Keteol V 5 3,00 Squalane Crodamol IPIS-LQ-(MV) 2,00 Isopropyl Isostearate Crodamol GTCC-LQ-(MV) 1,00 Caprylic/Capric Triglyceride Phase D Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase F Parfum 0,10 Fragrance Protocole : Peser la phase A et mettre à chauffer à 75°C au bain marie sous agitation Staro, v=700tImin. Peser et mélanger la phase B. Ajouter la phase B à la phase A lentement sous agitation, à 75°C au bain marie. Bien homogénéiser pendant 30 minutes v=700t/min. Peser et mettre la phase C à chauffer à 75°C au bain marie. Verser la phase C dans la phase A+B sous agitation Staro v=4000t/min. Laisser refroidir sous agitation Staro v=750t/min (hors bain marie). Ajouter la phase D, bien homogénéiser v=2000t/min en dessous de 45°C. Ajouter la phase E, bien homogénéiser. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - BEAUTIFEYETm : ingrédient actif commercialisé par Sederma qui est une association d'un extrait d'Albizia julibrissin et de darutoside extrait de Siegesbeckia orientalis, lifte la paupière supérieure, réduit les rides de la patte d'oie, atténue les cernes et diminue les poches sous les yeux. 3% peuvent être ajoutés en fin de formulation avant la phase E. - MATRIXYL synthe'6TM : ingrédient actif anti-rides à base de peptides commercialisé par Sederma (W02010/082175) qui aide à réparer les dommages cutanés causés par le vieillissement. 3% en masse de cet ingrédient peuvent par exemple être rajoutés à la fin de la formulation. - HALOXYLTM : actif commercialisé par Sederma (W02005/102266), qui améliore le contour des yeux en résorbant les cernes. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés en fin de formulation. - EYELISSTM : est un actif commercialisé par Sederma (W02003/068141), qui aide à prévenir et lutter contre l'apparition des poches sous les yeux. 3% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés en fin de formulation. 5) Forme crème « tenseur » Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de Potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Glycerin 5,00 Glycerin Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol N-Hance HP40 0,40 Hydroxypropyl Guar Keltrol CG-SFT 0,50 Xanthan Gum Phase C Span 40-PW-(MV) 1,50 Sorbitan Stearate Span 60-PW-(MV) 1,00 Sorbitan Palmitate Crodamol IPIS-LQ-(MV) 3,00 Isopropyl Isostearate Phase D Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase E Skin Tightener 10,00 Phase F Parfum 0,10 Fragrance Protocole : Peser la phase A et mettre sous agitation hélice v=300t/mn. Peser et homogénéiser la phase B. Ajouter la phase B dans la phase A sous agitation hélice v=800t/mn, bien homogénéiser. Mettre à chauffer la phase A+B à 75°C au bain-marie. Peser et homogénéiser la phase C, mettre à chauffer à 75°C au bain-marie. Ajouter la phase C dans la phase A+B, sous agitation Forte hélice v=1000dmn bien homogénéiser. Ajouter la phase D en dessous de 45°C à la phase précédente. Ajouter la phase E dans la phase précédente, bien homogénéiser. Ajouter la phase F, en dessous de 35°C bien homogénéiser. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - CALMOSENSINETm : ingrédient actif calmant commercialisé par Sederma (W01998/07744) contenant le lipo-dipeptide Tyr-Arg. Il diminue les sensations d'inconfort. - PHYTOTONINETm : actif commercialisé par Sederma comprenant une association synergique de trois actifs végétaux, les flavonoïdes de fleurs d'Arnica montana, les saponosides de rhyzomes de Polygonatum multiflorum (Sceau de Salomon) et les proanthocyanidols de cônes de Cupressus sempervirens (Cyprès) ; améliore nettement l'apparence de la peau « couperosée ». - CHROMOCARETm : actif anti-âge associant un extrait de Rabdosia rubescens riche en oridonine et d'un extrait de Siegesbeckia orientalis riche en darutoside, commercialisé par Sederma (W02010/119423) qui unifie et rajeunit le teint. 6) Forme gel alcoolisé Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Phase B Keltrol CG-SFT 0,30 Xanthan Gum Supercol GF 0,30 Guar Gum Butylene Glycol 3,00 Butylene Glycol Phenoxyethanol qs Phenoxyethanol Phase C Sorbate de potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase D Alcool 96% 10,00 Ethanol Phase E Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Protocole : Préparer la phase A. Peser et mélanger la phase B. Peser la phase C. Ajouter la phase B dans la phase A, sous agitation hélice, v= 125 tr/min. Verser la phase C dans la phase A+B, sous agitation hélice, v=125 tr/min. Ajouter la phase D, homogénéiser sous agitation hélice v= 500 tr/min. Ajouter la phase E, homogénéiser. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - AQUALANCETM : ingrédient actif hydratant osmoprotecteur commercialisé par Sederma (W02009/104118) composé d'homarine et d' élythritol. - NG Sève de BouleauTM : actif tonifiant et hydratant commercialisé par Sederma, à base de sève brute de l'aubier de bouleau. 7) Forme crème avec protection UV Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de Potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Veegum Ultra 0,80 Magnesium Aluminum Silicate Keltrol CG-SFT 0,50 Xanthan Gum Phase C Crodesta F160-PW-(RB) 1,00 Sucrose Stearate Arlacel 2121-FL-(MV) 3,50 Sucrose Cocoate & Sorbitan Stearate Phase D Crodamol IPIS-LQ-(MV) 5,00 Isopropyl Isostearate Crodamol GTCC-LQ-(MV) 5,00 Caprylic/Capric Triglyceride Prisorine 3505-LQ-(GD) 5,00 Isostearic Acid Phase E Solaveil CT-300-LQ-(WD) 8,00 Titanium Dioxide & Caprylic/Capric Triglyceride && Polyhydroxystearic Acid & Stearic acid & Alumina Solaveil CZ-300-LQ-(WD) 2,00 Zinc Oxide & Caprylic/Capric Triglyceride & Polyhydroxystearic Acid & Isostearic Acid Phase F Butylène glycol 4,00 Butylene glycol Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol Phase G Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase H Parfum 0,10 Fragrance Phase I H20 8,00 Water Acide L-Lactique 0,80 Lactic acid Protocole : Peser la phase A. Peser la phase B et la saupoudrer dans la phase A, sous agitation staro v= 300 tr/min jusqu'à dispersion totale. Mettre la phase A+B à 80°C. Chauffer au bain marie, sous agitation staro v= 300 tr/min. Ajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation staro v= 600 tr/min à 80°C au bain marie. Peser et mettre à chauffer la phase D à 80°C au bain marie. Verser la phase D dans la phase précédente sous agitation staro v=3500 tr/min. Peser la phase E et chauffer au bain marie à 80°C. Verser la phase E dans la phase précédente sous agitation staro v=2000 tr/min, à l'extérieur du bain marie. Extemporanément, ajouter la phase F dans la phase précédente sous agitation staro v=2000 tr/min. Ajouter la phase G en dessous de 45°C, bien homogénéiser. Ajouter la phase H, bien homogénéiser. Ajuster le pH à 5,60 +/- 0,1 avec la phase I, en dessous de 35°C sous agitation staro v = 1000 tr/min, laisser homogénéiser 1 heure. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - VENUCEANETM : ingrédient actif commercialisé par Sederma (W02002/066668) qui prévient des signes visibles du photovieillissement (taches, rides, sécheresse...), protège les structures cellulaires des dommages engendrés par les UV et renforce l'intégrité de la peau. 5% peuvent par exemple être ajoutés après la phase G. - MELASLOWTm : actif commercialisé par Sederma qui favorise l'éclaircissement du teint et la dépigmentation des taches (extrait de Mandarine du Japon Citrus reticulata Blanco var. unshiu). 8) Forme baume de nuit (émulsion fluide) Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Sorbate de Potassium 0,10 Potassium Sorbate Phase B Glycérine 10,00 Glycerin Phénoxyéthanol qs Phenoxyethanol Keltrol CG-SFT 0,20 Xanthan Gum Phase C Syncrowax HRC-PA-(RB) 3,00 Tribehenin Acide Stéarique 1,50 Stearic Acid Span 20-LQ-(SG) 1,80 Sorbitan Laurate Span 80-LQ-(RB) 1,00 Sorbitan Oleate Crodamol GTCC-LQ-(MV) 4,00 Caprylic/Capric Triglyceride Keteol V 5 2,00 Squalane Phase D Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase E Parfum 0,10 Fragrance Protocole: Peser la phase A. Peser et homogéneiser la phase B. Ajouter la phase B dans la phase A sous agitation hélice v= 400tr/min, 30 minutes. Mettre la phase A+B et à chauffer à 75°C au bain marie. Peser la phase C et mettre à chauffer à 75°C au bain marie. Ajouter la phase C dans la phase A+B sous agitation Staro v= 2000 tr/min. Laisser refroidir sous agitation Staro v= 600tr/min. Ajouter la phase D vers 45°C. Ajouter la phase E en dessous de 35°C. Exemple d'ingrédient pouvant être ajouté à cette formulation : - REVIDRATTm : actif commercialisé par Sederma, qui notamment améliore la cohésion de l'épiderme et son hydratation. 2% de cet ingrédient peuvent par exemple être ajoutés à la phase C de la formulation. 9) Forme crème main et corps Produit % Nom INCI Phase A H20 Qsp100 Water Benzoate de Sodium qs Sodium Benzoate Sorbate de Potassium qs Potassium Sorbate Phase B Glycérine 4,00 Glycerin Keltrol CG-SFT 0,30 Xanthan Gum Supercol GF 0,15 Guar Gum Phase C Cithrol GMS 40 SE-PA-(SG) 3,50 Glyceryl Stearate Crodacol CS90-PA-(RB) 0,50 Cetearyl Alcohol Crodamol SS-PA-(RB) 1,00 Cetyl Ester Cithrol GMIS 40-LQ-(MV) 1,00 Glyceryl Isostearate Crodamol GTIS-LQ-(MV) 2,00 Triisostearin Crodamol GTCC-LQ-(MV) 2,00 Caprylic/Capric Triglyceride Crodamol ISIS-LQ-(MV) 4,00 Isostearyl Isostearate Phase D Insaponifiable de Beurre de Karité 1,50 Insaponifiable de Beurre de Karité Phase E Ingrédient actif selon l'invention 2,00 Phase F Parfum 0,10 Fragrance Phase G H20 1,00 Water Acide lactique 0,07 Lactic Acid Protocole : Peser et mélanger la phase A, sous agitation hélice v=300 tr/min. Peser et mélanger la phase B. Ajouter lentement la phase B dans la phase A, sous agitation hélice, v=300 tr/min, bien homogénéiser pendant 30min. Mettre la phase A+B à chauffer à 75°C au bain-marie. Peser et mélanger la phase C. Mettre la phase C à chauffer à 75°C au bain-marie Peser la phase D. Ajouter la phase D à la phase C. Ajouter la phase C+D à la phase A+B, sous agitation staro v=2500 tr/min, hors bain-marie. Ajouter la phase E à la phase précédente, bien homogénéiser. Ajouter la phase F à la phase précédente, bien homogénéiser. Ajuster le pH à pH=5,50 +/- 0,10 avec la phase G. Le beurre de karité est un ingrédient possédant des propriétés nourrissantes et protectrices pour le traitement de la peau agressée par l'environnement. Exemples d'ingrédients pouvant être ajoutés à cette formulation : - INTENSLIMTm : ingrédient actif amincissant commercialisé par Sederma. C'est une association synergique d'extraits de Globularia cordifolia obtenu par culture cellulaire végétale, de Zingiber zerumbet Smith titré en zerumbone et de caféine végétale obtenus par extraction au CO2 supercritique. - JUVINITYTm : actif commercialisé par Sederma (WO 2011/125039) qui réduit les signes de l'âge sur le visage et le décolleté, lisse les rides, restructure et densifie le derme. - RENOVAGETM : ingrédient actif anti-âge global commercialisé par Sederma (W02006/020646). Eventuellement à la place du Beurre de Karité. - BIOBUSTYLTm : ingrédient actif commercialisé par Sederma qui restructure et dynamise la peau en profondeur, pour un buste plus ferme et plus tonique. C'est une association d'un filtrat bactérien, riche en facteur de croissance et de deux biopeptides amphiphiles (Pal^GHK, fragment de collagène et Pal-VGVAPG, fragment "ressort" de l'élastine). G) Tests in vivo Une crème préparée selon l'exemple galénique 1 (voir ci-dessus paragraphe F) a été utilisée pour ces tests. Principe L'évaluation de l'efficacité de la crème selon l'invention a été menée au total sur un panel de 56 femmes matures d'âge moyen 62,5ans (52 - 75 ans) chez lesquelles le dos de la main, un site altéré visiblement par le vieillissement, a été suivi grâce à diverses méthodes complémentaires : - Une mesure des paramètres d'élasticité et de fermeté par Cutometrie - Une mesure de l'intégrité dermique par Reviscometer - Une mesure de l'épaisseur du derme par échographie ultrasons - Une mesure du relief de la patte d'oie par analyse d'empreintes. - Une mesure innovante de l'épaisseur de l'épiderme par microscopie confocale laser In vivo (Vivascope) - Une mesure de la pigmentation des mains par analyse d'images sur photographies standardisées et sur adhésifs. Protocole Critères d'inclusion particuliers Les volontaires devaient présenter des signes visibles de vieillissement sur les parties testées, tels des taches de senescence, une peau relâchée sur les mains et/ou un relief accentué sur la zone de la patte d'oie. Tous les volontaires n'ayant pas les trois paramètres d'une façon optimale, (avec parfois hétérogénéité entre les deux côtés), tous les tests n'ont pas été faits sur chaque volontaire, et des sous-populations ont été faites pour avoir des panels cohérents pour chaque test. Les volontaires devaient respecter une période de wash-out de 15 jours sans utiliser un produit cosmétique traitant et avoir une constance hormonale durant les 3 mois précédant le test et pendant le test (pas de changement de traitement contraceptif, substitutif ou curatif). L'usage exclusif des produits cosmétiques fournis pendant la durée de l'étude était exigé. Type d'études et durée L'étude a été menée en simple aveugle sur le dos de la main et le visage. La crème selon l'invention et la crème placebo, utilisée en contra-latéral, ont été appliquées en massage bi-quotidien pendant 2 mois. Le synopsis de l'étude peut se résumer selon le schéma ci-dessous. TO T 1 mois T2mois Elasticité-Fermeté (Cutometer) Elasticité-Fermeté (Cutometer) Densité cutanée (Reviscometer) Densité cutanée (Reviscometer) Epaisseur derme (Echographie) Epaisseur derme (Echographie) Epaisseur épiderme (Vivascope) Epaisseur épiderme (Vivascope) Relief visage (empreintes) Relief visage (empreintes) Pigmentation (photos + Pigmentation (photos + adhésifs) adhésifs) Des tests statistiques sur séries appariées ont été réalisés à l'aide du test t de Student ou si besoin avec un test non paramétrique de Wilcoxon. 1) Amélioration de la qualité du derme : - Amélioration de l'élasticité et de la fermeté de la peau de la main Le Cutometer MPA580 (Courage & Khazaka, Allemagne) a été utilisé pour mesurer les propriétés d'élasticité et de fermeté de la main. Cet appareil, très largement utilisé pour objectiver les effets des produits cosmétiques mesure la déformation d'une zone cutanée soumise à une contrainte mécanique de succion et son pouvoir de récupération. La sonde de 2mm a été utilisée avec une dépression de 500mbar. La figure 1 en annexe montre un exemple de graphe de déformation de la peau ainsi obtenu.

Parmi les paramètres disponibles, ont été choisis ceux pour lesquels une variation avec l'âge sur le dos de la main avait été clairement démontrée dans la littérature cosmétique : Fermeté (Ua/Ue), Elasticité (Ur/Uf) et Récupération (Ua/Uf). Ces paramètres étant des ratios, ils ont l'avantage d'être indépendants des variations d'épaisseur de la peau. Tableau 27 : Variation de l'élasticité et de la fermeté après application de la crème selon l'invention ou de son Placebo (26 volontaires, n= 3 mesures) Produit selon l'invention Taux de récupération Ua/Uf Fermeté Ur/Ue Elasticité Ur/Uf TO T1 TO T1 TO T1 Moyenne 0,517 0,584 0,272 0,356 0,190 0,233 +1- E-type 0,075 0,080 0,061 0,098 0,043 0,059 % variation vs.TO 12,9% 30,8% 22,4% Significativité p<0,01 p<0,01 p<0,01 Significativité vs placebo p<0, 05 p<0,05 p<0,05 Placebo Taux de récupération Ua/Uf Fermeté Ur/Ue Elasticité Ur/Uf TO T1 TO T1 TO T1 Moyenne 0,536 0,536 0,293 0,321 0,205 0,210 +1- E-type 0,074 0,075 0,065 0,099 0,043 0,059 % variation vs.TO 0% 9.5% 2.4% Significativité dns dns dns Dns : différence non significative Une amélioration significative des 3 paramètres importants que sont la récupération, la fermeté et l'élasticité est observée par rapport au placebo (p<0,05). L'augmentation sur 1 mois est significative (p<0,01) du côté ayant reçu le produit selon l'invention ; elle atteint respectivement +12,9%, +30,8% et +22,4%, l'effet du placebo étant négligeable et non significatif - Mesure de la densité cutanée par le Reviscometer® Le Reviscometer® RV 600 (Courage & Khazaka, Allemagne) mesure le temps de propagation d'une onde acoustique dans le derme et l'épiderme une fois émise à sa surface. Ce paramètre est nommé Resonance Running Time (ou RRT). La sonde cutanée de l'appareil comprend un émetteur acoustique séparé par une distance de 2 mm du receveur. L'onde ne pénétrant pas à plus de 0,5mm, il est possible d'étudier les qualités du derme. La vitesse de propagation du son, dans un matériau, dépend de sa densité et de sa tension. L'appareil mesure les RTT sous différents angles par rotation de la sonde à la surface de la peau. On obtient ainsi une moyenne du temps de propagation (RTT moyen) qui est décrite pour diminuer avec l'âge sur la main, sur d'autres sites ou lorsqu'il existe des dégradations tissulaires. Le RTT moyen traduit donc la qualité de l'ensemble des fibres ; il diminue en parallèle de la densité du tissu au contraire du RTT max. Ce dernier augmente à la suite de cette dégradation, les ondes qui empruntent les fibres les plus importantes, celles qui sont moins rapidement dégradées, étant plus mises en avant. Les essais ont montré que le RTT moyen diminue avec l'âge sur la main. La crème selon l'invention, ou son placebo en controlatéral, ont été appliquées sur la main par les volontaires. Un RTT moyen a été calculé par 19 rotations successives de la sonde sur la peau à TO et après 1 mois d'application, Trois mesures ont été effectuées à chaque fois sur chaque site. Tableau 28 : Variation du RTT moyen après application de la crème selon l'invention ou son Placebo (26 volontaires, n=19 mesures x 3) RRT en ms Crème selon l'invention Placebo TO T 1 mois TO T 1 mois Moyenne 84,4 113,9 82,8 90,9 +1- E-type 41,3 58,1 34,4 36,9 % variation vs.TO 35% 9.8% Significativité p<0,01 dns Significativité vs placebo p<0,05 Les résultats montrent une augmentation significative de 25,2% (p<0, 05) du RTT moyen suite au traitement avec la crème selon l'invention par rapport au côté placebo. Ceci traduit une meilleure densité de la peau. - Mesure de l'épaisseur du derme par échographie L'échographie ultrasonore est une technique très éprouvée pour mesurer l'épaisseur de la peau. Lorsque les ultrasons rencontrent une couche tissulaire dans le corps humain, ils sont réfléchis et renvoient un signal, ou « écho ». L'intensité des échos, une fois traduite par l'échographe en niveaux de gris, permet de reconstruire une image anatomique fidèle de la zone explorée. L'appareil utilisé est un Dermascan C (Cortex Technology, Danemark), muni d'une sonde de fréquence 20 Mhz permettant d'obtenir des images de 12 mm de large sur 15 mm d'épaisseur. Une séquence d'images successives a été réalisée dont 5 images représentatives ont été extraites et analysées. Tableau 29 : Variation de l'épaisseur du derme après application du produit selon l'invention ou son Placebo (29 volontaires, n=5 mesures). Epaisseur (lm) Crème selon l'invention Placebo TO T 1 mois T2mois TO T 1 mois T2mois Moyenne 925 958 973 926 923 940 +1- E-type 86 80 97 105 87 106 Variation vs TO +33ium +491m -3ium +141m % variation vs.TO 3,6% 5,2% -0,3% 1.5% Significativité p<0,01 p<0,01 dns dns Significativité vs placebo p<0, 05 p<0,05 Ces résultats montrent que l'application de la crème selon l'invention produit en moyenne un accroissement significatif de l'épaisseur du derme de 34tm (+3,6%; p<0,01). En parallèle, le site ayant reçu le placebo ne varie pas. La comparaison entre les deux sites est en faveur de la crème selon l'invention (p<0,05). De façon avantageuse l'effet s'amplifie à T2mois pour atteindre +5,3% (p<0,05 vs placebo). Ainsi l'amélioration de l'élasticité et de la fermeté sont corrélés avec l'augmentation de l'épaisseur du derme observée ici et l'augmentation de la densité mesurée au Reviscometer. Tout ceci traduit une amélioration qualitative de la peau et des fibres dermiques en particulier. - Effet lissant sur les pattes d'oie Une analyse de l'effet lissant global du relief a été réalisée sur les pattes d'oie de chaque côté du visage au début et à la fin des applications (2mois). Des empreintes négatives ont été numérisées par la technique des ombres portées grâce à une station Visioline VL650 (Monaderm, Monaco). L'image obtenue est ensuite analysée par le logiciel spécifique Mountains Map (Digital Surf, France) afin de quantifier le paramètre déterminant au mieux l'effet lissant global : la complexité. La complexité d'une surface, est le ratio entre l'aire développée (aire occupée si on étire le relief d'une surface pour la rendre plate) sur l'aire non développée. On obtient un pourcentage qui s'il diminue indique un lissage du relief. Tableau 30 : Variation de la complexité après application de la crème selon l'invention ou de son Placebo (29 volontaires, n=1 mesure) Crème selon l'invention Placebo Complexité (%) Complexité (%) TO T2mois TO T2mois Moyenne 28,86 25,42 28,24 27,44 E-type 9,84 8,53 9,69 8,02 % variation vs.TO -11,9% -2,8% Significativité p<0,01 dns Significativité vs placebo p<0,01 On constate après 2 mois d'application de la crème selon l'invention un lissage du relief hautement significatif (p<0,01) de près de -12%. Du côté placebo la diminution est négligeable et non significative (-3%). La comparaison des deux côtés est très en faveur de la crème selon l'invention (p>0,01). 2) Augmentation de l'épaisseur de l'épiderme : - Mesure de l'épaisseur de l'épiderme par Microscopie confocale laser L'épiderme est connu pour s'amincir avec l'âge notamment sur la main. Pour évaluer ce paramètre, l'épiderme a été analysé à l'aide de la technique de microscopie confocale laser avec le Vivascope 3000 (Mavig, Allemagne) qui possède une sonde portative maniable. La lumière émise par l'appareil (longueur d'onde 830nm) est reflétée dans la peau différemment selon l'indice de réfraction des structures rencontrées ; kératine, mélanine, structures microcellulaires ainsi que les collagènes apparaîtront en blanc sur une image en niveau de gris. Le Vivascope permet d'une part « d'éclairer » un point précis dans la peau (focalisation de l'illumination) et en parallèle de détecter précisément la lumière en revenant (focalisation de la détection). Ce dispositif est nommé «confocal» pour «conjugate focal planes». Ceci permet de réaliser une véritable biopsie en temps réel de la peau d'une façon totalement non-invasive pour l'étude de la peau saine, de sa ,r)igmentation, du vieillissement, du photo-vieillissement ou de l'épaisseur des couches de la peau. Lus de l'étude, des acquisitions verticales espacées de 2,4tm ont été réalisées pour imager l'épiderme au complet. La mesure de l'épaisseur de l'épiderme vivant situé entre la fin du stratum corneum et le début des papilles a ensuite été réalisée manuellement sur plusieurs sites d'une même acquisition afin de rendre compte d'éventuelles variations locales. Les épaisseurs ainsi calculées sont en accord avec celles de la littérature sur le site particulier des mains. Tableau 31 : Variation de l'épaisseur de l'épiderme après application de la crème selon l'invention ou son Placebo (22 volontaires, n=2 mesures) Crème selon l'invention Placebo TO T lmois TO T lmois Moyenne 31,00 35,75 31,18 32,95 E-type 7,98 8,04 7,23 6,81 Variation en ium vs TO 4,751m 1,77ffl % variation vs.TO 15,3% 5,7% Significativité p<0,01 dns Significativité vs placebo p=0,06 L'analyse des résultats montre une augmentation de l'épiderme vivant après application de la crème selon l'invention. De façon remarquable, cet accroissement significatif (p<0,01) atteint +4,751.tm (+15%) par rapport à TO. Le site traité avec le placebo ne montre qu'une augmentation non significative de +1,77wn (+5,7%), et la comparaison avec la crème selon l'invention montre une différence de 31.tm (environ 10%) en sa faveur (p=0.05). Par ailleurs en ne considérant que les 72% de répondeurs au traitement, les résultats montrent une augmentation bien plus importante du coté traité avec la crème selon l'invention (+8,21µm) comparé au côté traité avec le placebo (+3,04tm), entrainant une différence significative (p<0,05) de 51.tm (environ 17%). Cette régénération du nombre de couches cellulaire de l'épiderme vient s'ajouter à l'effet vitalisant déjà observé sur le derme. - Réduction de la pigmentation, analyse par photos À TO et après 2mois d'applications, des photos ont été réalisées par un banc photographique utilisant un appareil numérique à haute définition, un éclairage spécifique ainsi qu'un système de positionnement de la main des volontaires. La position de la main, les paramètres photos et d'éclairage étaient standardisés et contrôlés afin d'être reproduits au cours du temps. Une zone hyper-pigmentée avec tache ou pigmentée sans tache ont été sélectionnées, le paramètre L* ou clarté a été analysé dans chaque photos à l'aide du logiciel ColorskinTM, une augmentation du L* étant recherchée. La clarté de la peau humaine n'évoluant cependant pas dans la totalité de l'échelle de l'appareil, une valeur constante de L*=30 a été retranchée permettant de disposer d'une échelle plus « physiologique ». Tableau 32 : Variation de la clarté de la peau L* après application du produit selon l'invention ou de son Placebo (26 volontaires, n= 1 mesures) Clarté L* Crème selon l'invention Placebo Zone avec tache de senescence Zone sans tache de senescence Zone avec tache de senescence Zone sans tache de senescence TO T2 TO T2 TO T2 TO T2 Moyenne 14,5 19,1 27,1 30,4 16,1 19,6 27,4 29,2 E-type 5,7 5,4 3,3 3,6 5,6 5,5 3,8 3,7 Variation vs TO 4,6 3,3 3,5 1,8 0/0 variation vs.TO 31,7% 12,2% 21,7% 6,6% Significativité p<0,01 p<0,01 p<0,01 p<0,01 Significativité vs placebo p<0,05 p<0,05 Ces résultats montrent que l'application de la crème selon l'invention entraîne un éclaircissement significatif des zones pigmentées. Ainsi, la variation de L* observée pour les zones avec taches ou sans taches est de respectivement 31,7% et 12,2% par rapport à TO, ce qui constitue un éclaircissement supérieur (p<0,05) à celui observé sur le site traité par le placebo qui est de respectivement 21,7% et 6,6%. Il faut remarquer que l'effet dépigmentant est observable aussi bien pour les zones avec tâches que pour leur environnement ce qui contribue à en faire un effet global. - Baisse des taches, analyse sur adhésifs Des prélèvements de stratum corneum ont été effectués à l'aide d'adhésifs (Dsquam ; Cuderm) et ont été colorés avec la méthode de Fontana Masson pour mettre en évidence la mélanine persistante dans le stratum corneum. Des photos standardisées ont été effectuées et analysées pour quantifier cette pigmentation résiduelle exprimée en pourcentage de mélanine par rapport au reste non pigmenté. Compte tenu de la lourdeur de la méthode, seuls 14 volontaires ont été prélevés. Tableau 33 : Variation de quantité de mélanine retrouvée dans le stratum corneum 2mois après application du produit selon l'invention ou de son Placebo (14 volontaires, n= 1 mesure) Crème selon l'invention Placébo Mélanine (%) Mélanine (%) TO T2mois TO T2mois Moyenne 6,337 4,703 5,818 4,951 E-type 1,5 1,4 1,1 1,1 % variation vs.TO -26% -15% Significativité p<0,01 p<0,01 Significativité vs placebo p<0,01 On note donc une baisse de la quantité de mélanine des deux côtés mais supérieure du côté ayant reçu la crème à 2% du produit selon l'invention. La différence entre les deux est nettement en faveur de ce dernier et très significative (-11% ; p<0,01). Ces résultats confirment donc ceux obtenus par la méthode photographique sur les mains.

Claims

REVENDICATIONS1. Procédé de fabrication in vitro de cellules méristématiques de Plantago lanceolata contenant des phénylpropanoïdes glycosides à partir d'une lignée cellulaire stabilisée, caractérisé en ce que la lignée cellulaire est la lignée IRB PL3.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par les étapes suivantes : - à partir de la lignée IRB PL3, produire une pré-biomasse critique par des pré-cultures successives et de tailles croissantes ; - produire une biomasse desdites cellules méristématiques dans un bioréacteur à partir de ladite pré-biomasse et un milieu de culture adapté ; et - séparer ladite biomasse enrichie en phénylpropanoïdes glycosides dudit milieu de culture et récupérer ainsi lesdites cellules méristématiques.
3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'étape de production en bioréacteur comprend une étape d' élicitation réalisée en modifiant le milieu de culture, notamment les taux de nutriments.
4. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'on récolte la biomasse issue du réacteur entre 7 à 21 jours de culture, préférentiellement entre 10 et 14 jours.
5. Lignée cellulaire de Plantago lanceolata de référence IRB PL3.
6. Cellules méristématiques de Plantago lanceolata obtenues avec la lignée IRB PL3 ou selon le procédé de l'une des revendications 1 à 4.
7. Cellules selon la revendication 6, comprenant le plantamajoside comme composant majoritaire phénylpropanoïde glycoside.
8. Extrait cellulaire obtenu à partir des cellules selon la revendication 6 ou 7.
9. Extrait selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il est réalisé par une lyse des cellules, puis une étape de centrifugation suivie d'une filtration, de manière à récupérer l'intérieur des cellules et éliminer les parois cellulaires.
10. Composition comprenant des cellules méristématiques de Plantago lanceolata selon la revendication 6 ou 7, ou un extrait selon la revendication 8 ou 9, dans un milieu physiologiquement acceptable.
11. Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que le milieu physiologiquement acceptable est une matrice hydrophile dans laquelle lesdites cellules sont mises en suspension.
12. Composition selon la revendication 10 ou 11, comprenant un épaississant et/ou ayant subi une homogénéisation sous haute pression.
13. Composition cosmétique selon l'une des revendications 10 à 12, comprenant au moins 0,1% de phénylpropanoïdes glycosides.
14. Utilisation cosmétique non thérapeutique des cellules selon la revendication 6 ou 7, de l'extrait selon la revendication 8 ou 9, ou de la composition selon l'une des revendications 10 à 13.
15. Utilisation selon la revendication 14, pour combattre le vieillissement de la peau et des phanères.
16. Utilisation cosmétique non thérapeutique de cellules méristématiques de Plantago lanceolata ou d'extrait cellulaire desdites cellules, ou utilisation selon la revendication 14 ou 15, pour densifier le derme, renforcer la jonction dermoépidermique, épaissir l'épiderme et/ou apporter à la peau des moyens de défense anti- anti-glycation.
17. Utilisation selon l'une des revendications 14 à 16 pour diminuer l'expression d'un ou plusieurs miRNA parmi 29, 21, 196a, 30a, 34a, 152, et 181a.
18. Utilisation nutraceutique non' thérapeutique de cellules méristématiques de Plantago lanceolata ou d'extrait cellulaire desdites cellules, ou des cellules selon la revendication 6 ou 7, de l'extrait selon la revendication 8 ou 9, ou de la composition selon l'une des revendications 10 à 13.
19. Utilisation selon la revendication 18, destinée à renforcer la paroi intestinale.
20. Cellules méristématiques de Plantago lanceolata ou extrait cellulaire desdites cellules, ou cellules selon la revendication 6 ou 7, extrait selon la revendication 8 ou 9, ou composition selon l'une des revendications 10 à 13, pour un traitement médical dermatologique.
21. Cellules, extrait ou composition selon la revendication 20, pour traiter les troubles de la pigmentation, les troubles de nature inflammatoire comme la dermatite atopique, le psoriasis, l'acné), les dermatoses bulleuses, les affections mettant en câuse des désordres dans les synthèses du collagène, de l'élastine de l'acide hyaluronique, et/ou les peaux sèches, la couperose et/ou l'ichtyose.