FI87469B - Foerfarande foer framstaellning av antibiotikum a 42867 och dess additionssalter. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av antibiotikum a 42867 och dess additionssalter. Download PDFInfo
- Publication number
- FI87469B FI87469B FI872860A FI872860A FI87469B FI 87469 B FI87469 B FI 87469B FI 872860 A FI872860 A FI 872860A FI 872860 A FI872860 A FI 872860A FI 87469 B FI87469 B FI 87469B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- antibiotic
- hcl
- eluent
- following
- water
- Prior art date
Links
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 42
- YRMCBQLZVBXOSJ-PCFSSPOYSA-N (e)-3-[(6r,6as)-4-hydroxy-6-methoxy-3-methyl-11-oxo-5,6,6a,7-tetrahydropyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-yl]prop-2-enamide Chemical compound CO[C@H]1NC2=C(O)C(C)=CC=C2C(=O)N2C=C(\C=C\C(N)=O)C[C@@H]12 YRMCBQLZVBXOSJ-PCFSSPOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 24
- 241000187681 Nocardia sp. Species 0.000 claims abstract description 16
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 6
- DEFJQIDDEAULHB-QWWZWVQMSA-N D-alanyl-D-alanine Chemical compound C[C@@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C)C([O-])=O DEFJQIDDEAULHB-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DEFJQIDDEAULHB-UHFFFAOYSA-N N-D-alanyl-D-alanine Natural products CC(N)C(=O)NC(C)C(O)=O DEFJQIDDEAULHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 claims description 6
- 108010056243 alanylalanine Proteins 0.000 claims description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 6
- MYPYJXKWCTUITO-KIIOPKALSA-N chembl3301825 Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)C(O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-KIIOPKALSA-N 0.000 claims description 6
- 229940072335 vancocin Drugs 0.000 claims description 6
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims description 5
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 5
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 claims description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 claims description 4
- LXMSZDCAJNLERA-ZHYRCANASA-N spironolactone Chemical compound C([C@@H]1[C@]2(C)CC[C@@H]3[C@@]4(C)CCC(=O)C=C4C[C@H]([C@@H]13)SC(=O)C)C[C@@]21CCC(=O)O1 LXMSZDCAJNLERA-ZHYRCANASA-N 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000002143 fast-atom bombardment mass spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 2
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 claims description 2
- HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzenesulfonic acid Chemical compound NC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 claims 1
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 claims 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 229950000244 sulfanilic acid Drugs 0.000 claims 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 35
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 25
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 24
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 22
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 239000002585 base Substances 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 12
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 12
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 7
- -1 nitrate ions Chemical class 0.000 description 7
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000191984 Staphylococcus haemolyticus Species 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 1-butoxybutane Chemical compound CCCCOCCCC DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethylfuran Chemical compound CC1=CC=C(C)O1 GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWTBRYBHCBCJEQ-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-phenyldiazenylnaphthalen-1-yl)diazenyl]phenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1N=NC(C1=CC=CC=C11)=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 FWTBRYBHCBCJEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000606124 Bacteroides fragilis Species 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 2
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 2
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNLXNOZHXNSSPN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO)C=C1 HNLXNOZHXNSSPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 101150010353 Ascl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- 102100024484 Codanin-1 Human genes 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710137965 Cysteine dioxygenase type 1 Proteins 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N Glycerol trihexadecanoate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241001185311 Lyticum Species 0.000 description 1
- 108010057081 Merozoite Surface Protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 description 1
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000534944 Thia Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000202921 Ureaplasma urealyticum Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019728 animal nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007613 bennett's agar Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000012474 bioautography Methods 0.000 description 1
- 238000002815 broth microdilution Methods 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- POLCUAVZOMRGSN-UHFFFAOYSA-N dipropyl ether Chemical compound CCCOCCC POLCUAVZOMRGSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- WVULZDFWPQCPPJ-UHFFFAOYSA-N potassium;hydrochloride Chemical class Cl.[K] WVULZDFWPQCPPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000012487 rinsing solution Substances 0.000 description 1
- 239000012449 sabouraud dextrose agar Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogenphosphate monohydrate Chemical compound O.[Na+].OP(O)([O-])=O BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N sorbic acid group Chemical group C(\C=C\C=C\C)(=O)O WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000012609 strong anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000012610 weak anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/365—Nocardia
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/872—Nocardia
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Paper (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
87469
Menetelmä antibiootin A 42867 ja sen additiosuolojen valmis-tami seksi Tämä keksintö koskee menetelmää uuden antibiootin, jota merkitään antibiootti A 42867 ja sen additiosuolojen valmistamiseksi. Uutta antibioottia ja sen farmaseuttisia koostumuk-5 siä voidaan käyttää lääkkeinä, erityisesti niille herkkien mi kro-organismien aiheuttamien infektiosairauksien hoidossa.
Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat myös aktiivisia kasvua edistävinä aineina eläimillä, kuten siipikarjalla, sioilla, märehtijöillä, jne.
10 Erityisesti keksinnön kohteena on menetelmä antibiootti A 42867:n valmistamiseksi, jossa menetelmässä viljellään uutta kantaa Nocardia sp. ATCC 53492 tai sen antibioottia A 42867 tuottavaa muunnosta tai mutanttia.
Nocardia sp. ATCC 53492 on eristetty maanäytteestä ja tal-15 lennettu 23. toukokuuta 1986 kokoelmaan American Type Culture Collection (ATCC), 12301 Parklawn Drive, Rockville, 20852 Maryland, USA, Budapestin sopimuksen sopimusehtojen mukaisesti. Kannalle on annettu 1 i i ttymi s numero ATCC 53492.
Koska antibiootti A 42867:n ja vastaavien farmaseuttisesti .1 ‘ 20 hyväksyttävien suolojen antimikrobiset aktiivisuudet ovat hyvin samankaltaiset, tässä keksinnössä käsiteltäessä • * « *·**' antibiootti A 42867:n biologisia ominaisuuksia tarkoitetaan myös vastaavia suoloja, ja päinvastoin, käsiteltäessä anti-·: biootti A 42867:n farmaseuttisesti hyväksyttävän additio- : 25 suolan biologia ominaisuuksia tarkoitetaan myös vastaavaa "ei-additiosuola "-muotoa.
*-;· Antibiootti A 42867:n tuotanto aikaansaadaan viljelemällä ·:· kantaa Nocardia sp., joka pystyy tuottamaan sitä, t.s. kan taa Nocardia sp. ATCC 53492 tai sen antibioottia A 42867 30 tuottavaa muunnosta tai mutanttia, aerobisissa olosuhteissa, vesipitoisessa ravintoalustassa, joka sisältää assi- 2 87469 mi 1 oi tuvat hiili-, typpilähteet ja epäorgaanisia suoloja. Monia ravintoalustoja, joita tavallisesti käytetään fer-mentoitaessa, voidaan käyttää, kuitenkin tietyt kasvualustat ovat edullisia. Edullisia hi ililähteitä ovat glukoosi, 5 mannoosi, galaktoosi, tärkkelys, maissijauho ja vastaavat. Edullisia typpi lähteitä ovat ammoniakki, nitraatit, soija-papujauho, peptoni, lihauute, hiivauute, tryptoni , aminohapot ja vastaavat. Epäorgaanisia suoloja, joita voidaan lisätä kasvualustoihin, ovat tavanomaiset liukoiset suo-10 lat, jotka pystyvät muodostamaan natrium-, kalium-, rauta-, sinkki-, koboltti-, magnesium-, kalsium-, ammonium-, kloridi-, karbonaatti-, sulfaatti-, fosfaatti-, nitraatti-ioneja ja vastaavia.
Tavallisesti antibioottia tuottavaa kantaa esivi1jel1 ään 15 ravistuspullossa, sen jälkeen viljelmää käytetään ympättäessä käymisfermentorit oleellisten määrien antibioottia tuottamiseksi. Esikasvatukseen käytetty kasvualusta voi olla sama kuin mitä käytetään suuremmissa fermentoreissa, mutta myös muita kasvualustoja voidaan käyttää. Antibioot-20 tia A 42867 tuottava kanta voi kasvaa lämpötiloissa, jot-;; ka ovat 20°C - 40°C, mieluimmin 24-35°C.
Fermentoi nni n kuluessa antibioottituotantoa voidaan seura-ta testaamalla kasvuliemen ja myseelin uutenäyttei stä an-bioottinen aktiivisuus esimerkiksi kasvukokei 11 a tai TLC-25 tai HPLC-menetelmi 11ä.
Antibiootti A 42867:1 le herkkiä organismeja, kuten kanto-ja Bacillus subtilis ja S.aureus, voidaan käyttää testi-organismeina. Kasvukoe suoritetaan edullisesti agar-dif-fuusiomenetelmäl lä agarlevyi 11 ä. Antibioottisen aktiivi-- 30 suuden maksimi tuotanto tapahtuu tavallisesti fermentoin-nin toisen ja viidennen päivän välisenä aikana.
Antibiootti A 4 2867:ää tuotetaan viljelemällä kantaa No-cardia sp. ATCC 53492 tai sen antibioottia A 42867 3 87469 tuottavaa mutanttia tai muunnosta, ja antibiootti on pääasiassa löydettävissä ka svatus 1iera istä.
Kannan Nocardia sp. ATCC 53492 morfologiset ominaisuudet Tämän kannan morfologia kasvatettuna maa-agarkasvua1 usta! -5 la on samanlainen kuin aktinomykeetei11ä osoittaen runsas ta ilmamyseelin kehittymistä, jossa pitkät hyyfit kohtalaisen haarautuneina. Tämän kannan pääasiallinen morfologinen tunnusmerkki on substraatti- ja ilmamyseelin pilkkoutuminen tankomaisiksi kappaleiksi. Substraattimyseelin 10 pilkkoutuminen havaittiin kaikilla agarkasvualustoilla, joita käytettiin viljelytunnusmerkkien määrittämiseksi, paitsi kasvualustalla No 5, kasvualustalla No 7, Hickey-Tresner- ja munavalkuaisagareilla todettiin täydellinen pi 1kkoutumi nen.
15 Kannan Nocardia sp. ATCC 53492 substraattihyyfit kehittyivät täysin, haarautuminen ja pilkkoutuminen tankomaisiksi kappaleiksi riippuen viljelmän iästä.
. Ilmamyseeli kehittyi hyvin maa-agarilla ja ves iagari 11 a .
Ilmahyyfit olivat pitkiä suoria maa-agarilla, muodostaen i . 20 joskus solmuja tai pesämäisiä tiheikköjä. Tämän kannan morfologia muistuttaa Nocardia-suvun morfologiaa.
'/·/ Tämän kannan morfologinen karakteri soi nti suoritettiin sa moilla levyillä, joita käytettiin viljelyominaisuuksien tutkimiseen. Sen seikan varmentamiseksi, oliko agarlevyil-25 lä tapahtunut pilkkoutumista, kasvualustan pintaa leikattiin muovi veitsellä ja näyte tutkittiin lasilevyllä optisella mikroskoopilla. Ne stemäi sessä viljelmässä tällä kannalla havaittiin laaja pilkkoutuminen sauvamaisiksi kappaleiksi .
4 87469
Kannan Nocardia sp. ATCC 53492 vi1je1ytunnusmerkit
Viljelytunnusmerkkien tutkimiseksi kantaa Nocardia sp.
ATCC 53492 viljeltiin erilaisilla standardikasvua1ustoi1 -la, joita Shirling ja Gottlieb ovat esittäneet (Shirling 5 E.B. and Gottlieb D., 1966 - Method for characterization of Streptomyces species - Int. J. Syst. Bacteriol, 16, 313-340), sekä lisäksi useilla kasvualustoilla, joita Waksman suosittelee (Waksman, S.A. 1961 - The Actino-mycetes - The Williams and Wilkins Co. Baltimore; Voi. 2, 10 328-334).
Värin määrittäminen suoritettiin tarvittaessa menetelmällä, jonka ovat esittäneet Maerz ja Paul (Maerz A. and M. Rea Paul, 1950 - A Dictionary of Color -2nd Edition McGraw -Hill Book Company Inc., New York) 15 Organismin kykyä käyttää hyväkseen erilaisia hii1i1ähteitä tutkittiin menetelmällä, jonka ovat kuvanneet Shirling ja Gottlieb.
. Viljely- ja fysiologiset tunnusmerkit ja hi i 1 i 1 ähtei den hyväksikäyttö on esitetty Taulukoissa I, II, III, IV ja ,·. :20 V.
Taulukossa I esitetyt lukemat on saatu kahden viikon inku-boinnin jälkeen 28°C:ssa.
TAULUKKO I
,·:- KANNAN NOCARDIA sp. ATCC 53492 VILJELYTUNNUSMERKIT
: --25 Vil jelyalusta Tunnusmerkit
Kasvualusta No 2 runsasta kasvua, rypistynyt pin- (hiivauute-mal1asagar) ta, väri ruskea 15/H/11, liuke- neva pigmentti keltainen
Kasvualusta No 3 kohtuullista kasvua, pehmeä pin- 30 (kaurajauhoagar) ta, väri oranssi 12/L/12, jälkiä i1mamyseelistä valkoinen 5 87469 TAULUKKO I (jatk.)
Vi 1jelyalusta Tunnusmerkit
Kasvualusta No 4 runsasta kasvua, rypistynyt pin- (epäorgaanisia suoloja- ta, väri tummaoranssi 13/L/12, 5 tärkkelysagar) jälkiä i1mamyseelistä valkoinen, jälkiä liukenevasta pigmentistä, väri roosa
Kasvualusta No 5 runsasta kasvua, rypistynyt pin- (glyseroli-asparagiini- ta, väri tummaoranssi 13/L/12, 10 agar) jälkiä i1mamyseelistä valkoinen
Kasvualusta No 6 kohtuullista kasvua, pinta hiu- (peptoni-hiivauute- kan rypistynyt, väri aprikoosi rauta-agar) 10/F/7
Kasvualusta No 7 runsasta kasvua, pinta rypisty- 15 (tyrosiiniagar) nyt, väri ruskea 15/H/11, jälkiä i1mamyseelistä valkoinen
Czapek-sakkaroosiagar runsasta kasvua, pinta pehmeä, värikeltainen-oranssi9/G/8, jälkiä i1mamyseelistä 20 Kaurajauhoagar runsasta kasvua, pinta hiukan rypistynyt, väri oranssi 12/F/10, jälkiä i1mamyseelistä valkoinen, jälkiä liukenevasta pigmentistä roosa 25 Hickey'n ja Tresner'n agar runsasta kasvua, pinta rypistynyt, väri kultainen 9/1/6
Kai sium-malaatti agar runsasta kasvua, pinta pehmeä, värivaaleankeltainen10/C/4, jälkiä i1mamyseelistä valkoinen 30 Bennett'n agar runsasta kasvua, pinta rypisty- : nyt, väri ruskea 15/H/11
Czapek-glukoosiagar runsasta kasvua, pinta rypisty nyt, väri ruskea, 7/E/12, jälkiä i1 mamyseelistä valkoinen, liuke- 35 neva pigmentti tummankeltainen
Glukoosi-asparagiini- kohtuullista kasvua, pinta hiu- agar kan kova, väri keltainen 10/L/5
Ravintoagar runsasta kasvua, pinta pehmeä, väri keltainenoranssi 9/G/6 6 87469 TAULUKKO I (jatk.)
Vi1jelyalusta Tunnusmerkit
Kuorittumaitoagar runsasta kasvua, pinta pehmeä, persikan värinen 9/1/5, jälkiä 5 i1mamyseelistä valkoinen
Munanvalkuaisagar kohtuullista kasvua, pinta peh meä, väritön, jälkiä ilmamysee-1 i stä
Sabouraud-agar runsasta kasvua, pinta rypistyit) nyt, väri ruskea 10/L/10
Peruna-agar runsasta kasvua, pinta rypisty nyt, väri keltainen 10/L/7, jälkiä i1mamyseelistä valkoinen, liukeneva pigmentti roosa 15 Vesiagar hyvin niukkaa kasvua, pinta peh meä, väritön, hyvin muodostuvaa ilmamyseeliä valkoinen
Maa-agar kohtuullista kasvua, pinta peh meä, väritön, runsasta ilmamysee-20 Iin muodostumista . *·. Dekstroosi-tryptoniagar runsasta kasvua, pinta rypisty- ·; nyt, väri keltainen 10/L/7 V: Kirjaimet ja numerot viittaavat värin määrittämiseen
Maerzin ja Paulin (2) mukaan.
7 8 7 4 6 9
TAULUKKO II
KANNAN NOCARDIA sp. ATCC 53492 FYSIOLOGISET TUNNUSMERKIT
Kokeet Tulokset 5 Tärkkelyshydrolyysi positiivinen
Tyrosiinireaktio positiivinen
Kaseiinihydrolyysi positiivinen
Kai sium-malaatin liukoiseksi tekeminen negatiivinen 10 Nitriitti nitraatista negatiivinen
Selluloosan hajottaminen negatiivinen
Rikkivedyn muodostus positiivinen 1yijyasetaatti- 1iuskoi11 a (peptonisaati o positiivinen 15 Lakmusmai to-\ ^oagulaatio negatiivinen 8 87469
TAULUKKO III LÄMPÖTILA-TOLERANSSI
15° C = - 22° C = + 5 28° C = ++ 37° C = ++ 42° C = + 50° C = -
Kaikkein sopivin lämpötila pesäkkeiden kehittymiselle ha-10 valttiin olevan alue noin 22°C:sta noin 42°C:seen.
Optimi 1ämpöti1 a on 28°C:sta 37°C:seen.
TAULUKKO IV pH-TOLERANSSI
pH 3 = - 15 pH 4 = - ... pH 5 = ++ pH 6 = ++ pH 7 = ++ pH 8 = ++ 20 pH 9 + + pH 10 = - pH 11 = - = ei kasvua + = kohtuullista kasvua 25 ++ = runsasta kasvua
Fysiologisten tunnusmerkkien, pH- ja 1ämpöti1atoleranssi-kokeiden suorittamiseksi käytettiin Hickey'n ja Tresner'in agarkasvualustaa.
9 87469
TAULUKKO V
HIILEN HYVÄKSIKÄYTTÖ
Hiili lähde Kasvu
Laktoosi ++ 5 Arabinoosi ++
Ksyloosi ++
Mannoosi ++
Fruktoosi ++
Sei 1obi oos i + + 10 Galaktoosi ++
Inositoli ++
Glukoosi ++
Raffinoosi
Riboosi ++ 15 Sakkaroosi
Sa1i s i i n i +
Sei 1 uioosa Ramnoosi = ei kasvua 10 + kohtuullista kasvua ++ - runsasta kasvua Tähän kokeeseen käytettiin kasvualustaa No 8 ja tulokset luettiin sen jälkeen kun oli inkuboitu 10 päivää 28°C -- 30°C:ssa .
87469 1 o
KEMOTAKSONOMISET TUTKIMUKSET
Kantaa viljeltiin V-6 kasvualustassa (lihauutetta 0,5 %, autolysoitua hiivaa 0,5 %, peptonia 0,5 %, hydrolysoitua kaseiinia 0,3 %, glukoosia 2 %, N a C1 : ä ä 0,15 %) inkuboi-5 den kiertoravis telijassa 200 kierr./min. 30°C:ssa 72 tuntia. V-6 kasvualustassa kasvanut myseeli otettiin talteen sentrifugoimal1 a (3000 kierr./min. x 10 minuuttia) ja pestiin kaksi kertaa tislatulla vedellä. Myseeli pestiin edelleen etanolilla, jonka jälkeen kuivattiin huoneen lämpöti-10 lassa 1aminaarisessa virtauksessa.
Kuivattua myseeliä käytettiin kokosoluvalmisteena. AMINOHAPPOJEN ANALYYSI:
Aminohappojen analysointi, joka suoritettiin menetelmällä, jonka ovat esittäneet Becker et ai., ("Rapid differentia-15 tion between Nocardia and Streptomyces by paper chromatography of whole cell hydrolysates", Appi. Microbiol.
1 2 , 421-423 (1964)), osoitti, että läsnä oli meso-diamino-pimeliinihappoja.
SOKERI ANALYYSI: 20 Sokeripitoisuuden analyysi, joka suoritettiin menetelmällä, jonka ovat esittäneet M.P. Lechevalier ("Identification of aerobic actinomycetes of clinical importance", J. Lab. Clin. Med. _71_, 934-944 ( 1968)), käyttäen ohutkerroskroma-tografiassa kalvoja, kuten ovat esittäneet J.L. Staneck 25 ja G.D. Roberts ("Simplified approach to identification of aerobic actinomycetes by thin-layer chomatography", 28, 226-231 1971)), osoitti, että läsnä oli arabinoosia ja galaktoosia.
11 87469
KANNAN NOCARDIA sp. ATCC 53492 IDENTIFIOINTI
Meso-diaminopimeliinihappojen esiintyminen yhdessä tun-nussokereiden, kuten ga Vakioosi n ja arabinoosin kanssa, osoittaa, että tämä kanta on aktinomycetes, jonka solu-5 seinätyyppi on IV, luokituksen mukaan, jonka ovat esittäneet Lechevalier M.P. ja H. Lechevalier ("Chemical composition as a criterion in the classification of aerobic actinomycetes", Int. Journ. Syst. Bacterial. 20, 435-443 (1970)).
10 Kuten on laita muilla mikro-organismeilla, antibioottia A 42867 tuottavan kannan tunnusmerkit ovat alttiina muutokselle. Esimerkiksi kannan keinotekoiset muunnokset ja mutantit voidaan saada käsittelemällä erilaisilla, tunnetuilla mutageenei11a , kuten UV-säteillä, röntgensäteillä, 15 suurtaajuusaal1 oi 11 a , radioaktiivisilla säteillä ja kemi kaaleilla, kuten typpihapolla, N-metyyli-N'-nitro-N-nit-rosoguanidiinilla ja monilla muilla. Kaikkia luonnollisia ja keinotekoisia muunnoksia ja mutantteja, jotka kuuluvat ; Nocardia-suvun lajeihin ja tuottavat A 42867 antibiootte- ; ;20 ja, pidetään ekvivalentteina kannan Nocardia sp. ATCC 53492 ; ’ suhteen ja katsotaan kuuluvaksi tämän keksinnön piiriin.
: ·.. Antibioottien A 42867 talteenotto tuottavan mikro-organis- min käymisliemistä tapahtuu sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti, jolloin suoritetaan uutto liuottimilla, .-.:25 saostaminen lisäämällä ei-liuottimia tai muuttamalla liuok-sen pH-arvoa, jakaantumi skromatograf ia , käänteis-faasinen-jakaantumi skromatografi a, ion i nvaihtokromatografi a , affi-: '·· niteettikromatografia ja vastaavat toimenpiteet.
Edullisessa menetelmässä käytetään affiniteettikromatogra --30 fiaa immobi1isoidul1 a D-alanyyl i-D-alaniini 11 a, jonka jälkeen seuraa käänteisfaasinen pyiväskromatografia .
12 87 469
Immobilisoituja D-alanyyli-D-alaniini-matriiseja, jotka ovat sopivia tähän talteenottomenetelmäan, on esitetty eurooppalaisessa patenttihakemuksessa No 83112555. Edullinen matriisi tässä menetelmässä on D-al anyyl i-D-a 1 ani i n i 5 kytkettynä tasahuokoiseen risti inkytkettyyn polydekstraa- ni in.
Sen jälkeen suodatetuille käymisliemi 11 e suoritetaan affiniteetti kromatograf ia immobi1isoidul1 a D-a1anyyli-D--alaniinilla joko pylväässä tai panoksittain.
10 Antibiootti A 42867:n sitoutuminen affiniteettimatriisiin tapahtuu mieluimmin pH:ssa noin 7,0 - 8,0 ja sen eluointi suoritetaan emäksisemmillä pH-arvoilla (mieluimmin välillä 9,0 - 11,5) vesipitoisella emäksellä. Tämä vesipitoinen emäs voi olla ammoniakki, haihtuva amiini, alkali- tai 15 ai kai imetal lihydroksidi tai emäksinen, puskuroitu liuos mahdollisesti polaarisen orgaanisen liuottimen, kuten polaarisen veteensekoittuvan liuottimen, joita jäljempänä määritellään, läsnäollessa.
Sen jälkeen, kun epäpuhtaudet on poistettu huuhtomalla ;';':20 pylväs vesipitoisella puskurilla, jonka pH on 4-8 ja joka : mahdollisesti sisältää suoloja, karbamidia ja/tai veteen :\ sekoittuvia liuottimia, antibiootti A 42867 eluoidaan edel- * lä esitetyllä eluointiseoksella. Sen jälkeen raaka anti biootti otetaan talteen mieluimmin poistamalla vesi täy-. .25 sin yhdistetyistä antibioottia sisältävistä fraktioista tislaamalla atseotrooppisesti yhdessä orgaanisen liuotti-| men kanssa, joka pystyy muodostamaan veden kanssa atseo- ·.. trooppisia mi nimi seoksia, jonka jälkeen, lisäämällä ei- liuotinta, saostetaan toivottu tuote.
30 Tyypillisiä esimerkkejä orgaanisista liuottimista, jotka - pystyvät muodostamaan atseotrooppisia mi nimi seoksia veden kanssa, ovat n-butanoli, bentseeni, tolueeni, butyylieet-teri , hii1itetraklori di , kloroformi, sykloheksaani , 13 87469 2 ,5-dimetyylifuraani, heksaani ja m-ksyleeni; edullinen liuotin on n-butanoli.
Esimerkkejä ei-1iuottimista ovat petrolieetteri, alempi-alkyylieetterit, kuten etyylieetteri, propyyl ieetteri ja 5 butyylieetteri ja ai empi a 1 kyy1iketonit, kuten asetoni.
Vaihtoehtoisesti yhdistetyt antibioottia sisältävät fraktiot konsentroidaan pieneen tilavuuteen, mieluimmin tislaamalla atseotrooppisesti edellä määritellyn orgaanisen liuottimen kanssa ja muodostunut vesipitoinen liuos lyo-10 fi1i so i daan.
Jos eluointiin käytetty vesipitoinen emäs on haihtumaton, voi olla tarpeen suorittaa neutralointi ja suolan poistaminen konsentraatista ennen seostamista tai pakastus-kuivausta.
15 Sopiva suolanpoistomenetelmä käsittää antibioottia sisältävän vesipitoisen liuoksen valuttamisen läpi silanoidus-ta piihappogeelipyiväästä, joka pestään tislatulla vedellä ja eluoidaan polaarisen veteen sekoittuvan liuottimen ja veden seoksella.
20 Tyypillisiä esimerkkejä polaarisista, veteen sekoittuvista liuottimista ovat vesiliukoiset alkoholit (kuten meta-noli, etanoli, isopropanoli, n-butanoli), asetoni, aseto-nitriili, alempialkyylialkanoaatit (kuten etyyliasetaatti), tetrahydrofuraani, dioksaani ja dimetyyliformamidi ja näi-25 den seokset; edullinen polaarinen, veteen sekoittuva liuotin on asetoni tri i1i .
Vaihtoehtoisesti suolan poistaminen voidaan suorittaa käyttäen antibioottia sisältävälle liuokselle edellä kuvattua affiniteettipylvästä, joka pestään tislatulla vedellä ja 30 eluoidaan haihtuvalla, vesipitoisella emäksellä, kuten edellä esitettiin affiniteettikromatografiän eluoinnin yhteydessä .
14 87 469 Näin saatu tuote on antibiootti A 42867. Sopiva menetelmä puhtaan antibiootti A 42867:n saamiseksi on sellainen, jossa edellä saatu antibiootti puhdistetaan edelleen affiniteetti kromatograf iapyl väässä . Tavallisesti käytetään 5 samaa s tationäärifaasia (immobi1isoitu D-a1 anyy1i-D-ala -niini) ja toivottu antibiootti eluoidaan edellä kuvatun affiniteettikromatografia-menetelmän mukaisesti immobili-s o idulla D-alanyyli-D-alaniinilla.
Edullinen immobi1isoitu D-alanyyli-D-alaniini on Sepha-10 rose--aminokaproyyli-D-alanyyli-D-alaniini , edullinen tasapainoitusseos on 0,16 %:inen (paino/til.) ammoniakki, joka sisältää 2 M NaClrää, pH säädettynä arvoon 7-8, edullinen huuhdeliuos on 0,16 %:inen (paino/til.) ammoniakki, joka sisältää 2M natriumkloridia, pH säädettynä 15 arvoon 7-8, edullinen eluointiseos on 16 %:inen (paino/ til.) ammoniakki .
Vaihtoehtoisesti keksinnön mukainen antibiootti voidaan ·-. eristää käymis 1 iemestä tai se voidaan edelleen puhdistaa vahvojen tai heikkojen anionihartsien avulla, mukaanluettu-. ;20 na funktionalisoidut polystyreeni-, akryyli- tai polydeks-;· traanimatriisit. Esimerkkejä heikoista anioninvaihtohart- seista ovat sellaiset, joita myydään seuraavilla kauppani-• ‘ millä: Dowex MWA-1 tai WGR (Dow Chemical), Amberlite I RA - 7 3 (Rohm and Haas), DEAE-Sephadex (Pharmacia). Esimerkkejä 25 vahvoista anioninvaihtohartseista, joita voidaan käyttää keksinnön mukaisesti, ovat sellaiset, joita myydään seuraavilla kauppanimillä: Dowex MSA -1, SBR, SBR-P (Dow Chemical), Amberlite IR-904 (Rohm and Haas) ja QAE-Sephadex (Pharmacia).
Antibiootti A 42867:n eluointi näistä hartseista suorite-30 taan elektrolyyttien, kuten natrium- tai ka 1iumhydroklori-dien vesipitoisen liuoksen lineaaristen g radienttiseoksien avulla vedessä tai veden ja orgaanisen veteensekoittuvan liuottimen, kuten alempialkoholin (esim. (C^-C^)alkanolin) tai alempi-alkyyliketonien (esim. asetonin, metyylietyyliketoni n jne) seoksissa.
ις 87469 I b
ANTIBIOOTTI A 4 286 7 : n FYSIKO-KEMIALL I SET TUNNUSMERKIT
A) ultraviolettiabsorptiospektri, joka on esitetty liitteenä olevien piirustusten Kuviossa 1 ja jossa on seuraavat absorptiomaksimit:
Amaks (nm) 5 a) 0,1 N HC1 282 b) vesi 282 c) fosfaattipuskuri pH 7,4 282 d) fosfaattipuskuri pH 9 282 305 (olka) 10 e) 0,1 N N.) Oli 301.
265 (olka) B) infrapuna-absorptiospektri, joka on esitetty liitteenä olevien piirustusten Kuviossa 2 ja jossa on seuraavat absorptiomaksimit (cm-*): 15 3700-3100, 3000-2800 (nujoli); 1650; 1580; 1460 (nujoli) 1375 (nujoli); 1300; 1235; 1210; 1160; 1130; 1060; 1025; 1000; 970; 840; 790-700; 720 (nujoli) C) 1H-NMR-spektri, joka on esitetty Kuviossa 3 ja jos- : sa on seuraavat signaaliryhmä (ppm:ssä) 270 MHz, rekiste- Y 20 röity DMSO d^:ssa (heksadeuterodimetyy1isu 1 foksidi) sisäisenä standardina käytettiin TMS:ää (0,00 ppm), (b= ppm): " 0,90, d [(CH3)2-(CH)] ; 1,02, d \ C H 3 - (C H )3 ; 1,23, d \CH3-(CH5 ; 1,52, s I,77, m \CH(CH3)^]; 2,38, s (N-CH3); 3,0-6,35, s ja m (aromaattiset sokeri- ja Y: 2 5 peptidiset C H : t); 6,27-9,29 (aromaattiset CH:t, peptidi- set N H:t ja fenoliset 0H:t) - d = dupletti s = sing letti m=multipletti ie 87469 D) retentioaika (Rt) = 0,537 suhteessa vankomysiini.
HC1:ään (Vancocin, Eli Lilly, Rt = 16,36 min) analysoitaessa käänteisfaasi-HPLC:1 la seuraavissa olosuhteissa: kolonni: Ultrasphere ODS (5 μπι) Altex (Beckman) 5 4,6 mm ( sisähalkaisija) x 250 mm esikolonni: Brownlee Labs RP 18 (5 jjm) eluentti: vesi:asetonitriili:2-etanoliamiini: tri fluori etikkahappo 9: 1:0,01:0,01 (til./til .) 10 virtausnopeus: 1,6 ml/min UV-detektori : 254 nm sisäinen standardi: vankomysiini.HC1 (R^ = 16,36 min) (Vancocin, Eli Lilly) E) retentioaika (Rj.) = 0,665 suhteessa vankomys i i n i .
15 HCl:ään (Vancocin, Eli Lilly, R^ = 9,96 min) analysoitaessa käänteisfaasi-HPLC:11ä seuraavissa olosuhteissa: ; -- kolonni: Ultrasphere ODS (5 ym) Altex (Beckman) 4,6 mm (sisähalkaisija) x 250 mm esikolonni Brownlee Labs RP 18 (5 ym) 20 eluentti A: CHgCN 2%^} säädetty pH- (2,5 g/1) NaH^PO^.H^O 98%j arvoon 6,0 eluentti B: CH3CN 70%^ säädetty pH- (2,5 g/1)NaH2P04.H20 30%J arvoon 6,0 eluointi: lineaarinen gradientti 5 %:sta 25 60X:iineluenttiaBeluenttissaA, 40 minuutissa virtausnopeus: 1,6 ml/min 17 87469 UV-detektori: 254 nm sisäinen standardi: vankomysiini-HC1 (R^ - 9,96) (Vancocin, Eli Lilly) F) alkuaineanalyysi, sen jälkeen kun näytettä on 5 ensin kuivattu 140°C:ssa inerttikaasuatmosfäärissä, antaa tulokseksi seuraavan likimääräisen prosentuaalisen koostumuksen (keskiarvo): hiiltä 53,3 %\ vetyä 5,9 %; typpeä 7,85 %; klooria (kokonais) 4,41 %; klooria (ioneja) 2,22 %; epäorgaaninen jäännös 900°C:ssa ilmassa: 0,875 % 10 G) happo-emästitrauskäyrällä vedessä, tiirattaessa 0,05 N vesipitoisella KQH:lla näyte, johon on etukäteen lisäily ylimäärin ν<·\i p i I n ι ·. I ,i llf. I:ää, o.iinlyy pKu-arvot 3,2, /,1 ja 8,3 H) R^-arvo 0,56 seuraavassa kroma tog ra fiasysteemissä: 15 (vesipitoinen natriumkloridi 87,5 g/1:
NaH9P0. 0,5 g/1) 70 pH säädetty \ CHgCN 30 % J arvoon 6 käytetään käänteisfaasisia silanoituja piihappogeeli-levyjä (RA-18 F254) 20 näkyväksi tekeminen: - UV-valo 254 nm - keltainen väri Pauly-reagenssi11 a, t.s. diatsotoidul1 a sul fani 1 i ini hapol 1 a (J. Chromatog. 2_0 , 1 7 1 ( 1 965 ), Z. Physiol. Chem. 292., 99 , ( 1953)) 25 - bioautografiässä käytetään B.subtilis ATCC 6633:a
Davisin mi nimi aiustal1 a I) molekyylipaino noin 1559 arvioituna FAB-massaspekt-ristä, jossa M+H ® -piikki 1560.
ie 87469
Antibiootti A 42867 sisältää happamia ja emäksisiä funktioita ja lisäksi muodostaa sisäisiä suoloja, sopivissa pH-oloissa se voi muodostaa suoloja orgaanisten ja epäorgaanisten vastaionien kanssa tavanomaisten menetelmien 5 mukaisesti.
Tyypillisiä ja sopivia keksinnön mukaisten yhdisteiden hap-poadditiosuoloja ovat sellaiset suolat, jotka muodostetaan standardireaktiolla sekä orgaanisten että epäorgaanisten happojen, kuten esimerkiksi kloorivety-, bromivety-, rik-10 ki-, fosfori-, etikka-, trif1uorietikka-, trikloorietikka-, meripihka-, sitruuna-, askorbiini-, maito-, omena-, fumaa-ri-, palmitiini-, kooli-, pamoe-, lima-, glutamiini-, kamferi-, glutaari-, glykoli-, ftaali-, viini-, lauriini-, steariini-, salisyyli-, metaanisulfoni-, bentseenisulfoni-, 15 sorbiini-, pikriini-, bentsoe-, kanelihapon ja vastaavien kanssa.
Tyypillisiä esimerkkejä emäksistä ovat: alkali metalli- tai -- maa-aikai imetä! 1 ihydroksidi, kuten natrium-, kalium-, kalsium-, magnesium-, ba r i umhydroksidi; ammon i akk i ja ai i faatti set, a 1 i -; 20 sykliset tai aromaattiset, orgaaniset amiinit, kuten metyy- liamiini, dimetyyliamiini, trimetyyliamiini ja pikoliini.
Keksinnön mukaisten "ei-suola" yhdisteiden muuttaminen vas-taavi ks i additiosuoloiksi ja päinvastoin, t.s. keksinnön mukaisen yhdisteen additiosuolan muuttaminen ei-suolamuo-..:25 toon, ovat alan ammattimiehen suoritettavissa ja kuuluvat tämän keksinnön piiriin.
'· Esimerkiksi antibiootti A 42867 voidaan muuttaa vastaavak- .*··. si happoadditiosuolaksi liuottamalla ei-suo!amuoto vesipi toiseen liuottimeen ja lisäämällä pieni ylimäärä valittua 30 happoa tai emästä. Sen jälkeen muodostunut liuos tai suspensio lyofilisoidaan toivotun suolan taiteenottamiseksi.
,9 87469
Siinä tapauksessa, että lopullinen suola on liukenematon liuottimeen, johon ei-suolamuoto liukenee, se saadaan talteen suodattamalla ei-suolamuodon orgaanisesta liuoksesta, sen jälkeen kun stökiometrinen määrä tai pieni ylimäärä 5 valittua happoa tai emästä on lisätty.
Ei-suolamuoto voidaan valmistaa vastaavasta happo- tai emässuolasta liuottamalla vesipitoiseen liuottimeen, joka sen jälkeen neutraloidaan vapaaksi ei-suolamuodoksi.
Kun neutralointia seuraava ylimääräisen hapon tai emäksen 10 poistaminen on tarpeen, voidaan käyttää tavallista suolan-poi stomenetelmää.
Esimerkiksi pyiväs kromatogra fiaa silanoidulla piihappogee-Iillä, ei-funktionalisoidulla polystyreeni -, akryyli- ja tasahuokoisi11 a polydekstraanihartsei11 a (kuten Sephadex 15 LH 20) tai voidaan edullisesti käyttää aktivoitua hiiltä. Sen jälkeen kun ei-toivotut suolat on eluoitu vesipitoisella liuoksella, toivottu tuote eluoidaan lineaarisella '···' gradientilla tai veden ja polaarisen tai apolaarisen liuot- timen seoksen vaihegradientil la , kuten asetoni tri i 1 i/vesi .-\:20 50 :50 - noin 100 %:iin asetoni tri i 1 i ä .
Kuten on tunnettua suolan muodostusta joko farmaseutti-• - sesti hyväksyttävien happojen (tai emästen) tai ei-farma- seuttisesti hyväksyttävien happojen (tai emästen) kanssa . . voidaan käyttää sopivana puhdistusmenetelmänä. Muodosta- ’25 misen ja eristämisen jälkeen antibiootti A 42867:n suola-muoto voidaan muuttaa vastaavaksi ei-suolamuodoksi tai farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
Eräissä tapauksissa antibiootti A 42867:n emäsadditio-suola on liukenevampi veteen ja hydrofiilisiin liuotti-3 0 m i i n .
2 0 8 7 469
Keksinnön mukaisten yhdisteiden antibakteerinen aktiivisuus voidaan todeta in vitro standardi 1aimennustestien avulla erilaisilla mikro-organismeilla.
Viljelyolot ja kasvuolot MIC-arvojen (minimaalinen inhi-5 biitio-konsentraatio) määrityksille olivat seuraavat: Isosensitest-kasvuliemi (Oxoid), 24 h, stafylokokit,
Strep.faecalis ja gram-negatiiviset bakteerit (Escherichia coli); Todd-Hewitt-kasvuliemi (Difco), 24 h, muut streptokokki1 ajit; GC-peruskasvuliemi (Difco) + 10 1 % Isovitalex (BBL), 48 h, Cl^-rikastettu atmosfääri
Neisseria gonorrhoeae; Brain-Heart-kasvuliemi (Difco) + 1 % Supplement C (Difco), 48 h, Haemophilus influenzae; AC-kasvuliemi (Difco), 24 h, anaerobinen atmosfääri, Clostridium perfringens; Wi1 kins-Cha1gren-agar (viit. T.D.
15 Wilkins & S. Chalgren, 1976, Antimicrob. Ag. Chemother.
1 0 , 926), 48 h, anaerobinen atmosfääri anaerobeille (C.di ffici 1 e , Propionibacterium acnes, Bacteroides fragi-lis); PPLO-kasvuliemi (Difco) + 10 % hevosen seerumia + 1 % glukoosia, 48 h, Mycoplasma gal 1isepticum; PPLO-kasvu-20 liemi yhdessä lisäysten kanssa, kuten R.T. Evans ja D.
Taylor-Robinson ovat esittäneet (J. Antimicrob. Chemother. 4, 57), 24 h, U.urealyticum.
Inkubointi suoritettiin 37°C:ssa. Ymppäykset olivat seuraavat: M.gal 1isepticum 1 % (til./til.) 48 tunnin kasvulie- 4 25 miviljelmää; noin 10 väriä-vaihtavaa yksikköä/ml U.urea- 4 5 lyticum; noin 10 -10 pesäkettä muodostavaa yksikköä/ml : muissa kasvuliemi1aimennoksissa MIC-kokeissa ; 4 5 noin 10 -10 bakteeria/täplä (ymppäys monipiste ymppäys-laitteella) agar-laimennus-MIC-kokeissa (C.di ffici1 e , 30 P.acnes, B.fragilis).
Pienimmät estävät konsentraatiot (MIC, jjg/1 ) eräille mikroorganismei11 e on esitetty seuraavassa Taulukossa VI.
21 87469 <x> oo c\j ^ <C lo co co in co
P— Csl T— «<— CvJ T— LO
g f-' r\ «IM A A 01
\ 4-> Ot— cdcd··— OOCMCDCOOOOOOOCOCOOO
CJ) -M C\J CM CVI C\J (\J (\J C\j -3“ o /\ /\ /\ /\ S\ /\ S\ •i— o xi I—I *1— 2: *-> c (Ö c <u c •r— >
(O
1—1 CJ)
> CD
c o ·!-
^ +J
ZJ C 00 _I ·!— =0 o =* <C r— cd I— d T- ω
CD >> CD
(Ο -M <_> Ό O +-> CD CJ T- CD »—I— 5-
—·· +-1 CO CD CD «C XI
CO «3- CO CO CO >>
00 -r- LT) CD C\J CD CD
CM C_ CJ CD CJ *— 3
CM CD CO CJ \ CD
CM O I— 00 CO
t— -r- 00 CJ <t CO I LDC/) i— 0-MC/)(— s: cd o «a- E cj oo i/)i—i«a;<ci-oox)r-^d- —-
CJ OCD T— I—I T— CO
3 I— Γ-^ CO CJ CO CJ CD 1 CM 1*3-
4_ =£ r— -I— OJ CO '— Γ"— Q_ —- I —I
CJ «J- CJ X CM OO I ΟΊ >> «— CD
PO CJ CJ -r- _] *— CD +J 00 Ll LO N E
«a- «i- cj zj >— ·- _i co _i co iC cm j
CJ *— CM «tl— jp CD CD C/J *— CM O
1— 0«J- φ CD X CD 03 O CD -1-
—-- I -ct" CD "— CD1— C> rti N CJ I-'- '— L_-*J
CD _l «f C -i- (O CD £0 I— <t iC a
en co «1- i-cot-cj o cu < j u on CD
CO -1— I CD —I CD S--1- Ex: D CJ CO
1— "Ό to Nt-VjCi-Kl-rl-Vl-r _I -r- co -r-t/l S- 4- -r- S- <4_ .1— ,— «tCi— £ CD E -i— ΙΦ-Ι— i-OCi-O (Oi—
coC-COr— CLTJCDC-i-tOOtOOfO
D CD CD E (O CO +-> O CD co-1-CD
CD "U ODD CJ -I— E E O CD co i— fO OXi S--i-0(DCD-t->DD<0 DDS-I-Cf— to
D CL >, C (0-1--1--1- XI (Or— > X -I- (O E
(O CD Q. Q. 4- E Ό "O -I--I-··- CJCD CO
-I- -i- e i- x co -- d to to ......i- S- O CD Q- D S- C- “O I— (O XXO.a.Q-a.+J-M-r-coOCDCDCD-1-Q.
+-> Q.CLCDCDaJCDi0i0CLC0E+->X(0'aO
C (OtOS-S-ES-OOO-r-CDOCJ CO
(O -(-I+J+J+J+J+J,— I— C. CD (Ο O CO · (O >1 ^ oococooococ/icjcjQ-zrjco-ujo-cjS: 22 8 7 469
Antibiootti A 42867 on todettu aktiiviseksi koagulaasi-negatiivisia stafylokokkeja vastaan. MIC-arvot (yjg/ml) suhteessa S.epidermidis- ja S.haemolyticus-kantojen kliinisesti eristettyyn sarjaan on esitetty seuraavassa:
5 TAULUKKO VII
Kanta Antibiootti A 42867 MIC (jjg/ml) S. epidermidis L 393 1 S. epidermidis L 408 1 10 S.epidermidisL410 0,5 S. haemolyticus L 381 4 S. haemolyticus L 382 8 S. haemolyticus L 383 1
Keksinnön mukaisten yhdisteiden antimikrobinen aktiivi-15 suus vahvistettiin myös hiiren kokeellisessa verenmyrkytyksessä (experimental septicemia).
Kontrolli- ja käsittelyryhmissä oli 10 CD-1-hiirtä (Charles River) paino 18-22 g. Ne infektoitiin intraperitoneaa-lisesti 0,5 ml :11a bakteerisuspensiota, joka oli valmis-20 tettu laimentamalla yön yli viljeltyä S.pyogenes C 203 (L49)-viljelmää steriilillä peptonoidul1 a suolaliuoksella. Ymppäykset laskettiin siten, että käsittelemättömät eläimet kuolivat verenmyrkytykseen 48 tunnin sisällä.
Testattavat yhdisteet annostettiin subkutaanisesti välit-25 tömästi infektion jälkeen. Seitsemäntenä päivänä ED^g-arvo laskettiin mg/kg:ssa menetelmällä, jonka ovat esittäneet 23 87469
Spearman ja Kärber (D.J. Finney "Statistical Methods in Biological Assay", Griffin, sivu 524, 1952) elossa olevien eläinten prosentuaalisesta määrästä jokaisella annoksella.
5 Näissä olosuhteissa antibiootti A 42867:n ED^g-arvo oli 1 ,54 mg/kg.
Yleensä antibakteerisessa hoidossa antibiootti A 42867:ää sekä sen myrkyttömiä, farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja tai näiden seoksia voidaan annostaa eri tavoin, ku -10 ten topikaalisesti tai parenteraalisesti. Parenteraali-nen annostus on yleensä edullinen annostamistapa.
Injektoitavat koostumukset voivat olla suspensioita, liuoksia tai emulsioita öljymäisissä tai vesipitoisissa kanto-aineissa ja ne voivat sisältää apuaineita, kuten suspen-15 doivia, stabiloivia ja/tai dispergoivia aineita.
Vaihtoehtoisesti aktiiviaine voi olla jauhemuodossa, josta se valmistetaan annostushetkel1ä lisäämällä sopivaa kanto-ainetta, kuten steriiliä vettä.
Riippuen annostamistavasta, nämä yhdisteet voidaan valmis-‘20 taa erilaisina annosmuotoina.
Eräissä tapauksissa voi olla mahdollista valmistaa keksinnön mukaiset yhdisteet enteropää11ys teisinä annosmuotoina oraaliseen annostukseen, mikä voidaan tehdä alalla tunnetulla tavalla (kts. esimerkiksi "Remington's Pharmaceuti-- 25 cal Sciences", 151h edition, Mack Publishing Company,
Easton, Pennsylvania, USA, sivu 1614).
Näin voi olla erityisesti silloin, kun antimikrobisen aineen absorption halutaan tapahtuvan suolistossa (enteric tract) samalla kun niiden toivotaan ohittavan maha-alueen 30 (gastric tract) muuttumattomina.
24 87469
Annostettavan aktiiviaineen määrä riippuu erilaisista tekijöistä, kuten hoidettavan koosta ja kunnosta, annosta-mistavasta ja -tiheydestä ja taudin aiheuttajasta.
Tämän keksinnön mukaiset antibiootit ja niiden fysiolo-5 gisesti hyväksyttävät suolat ovat yleensä tehokkaita päivittäisen annoksen ollessa 0,5 - 50 mg aktiiviainetta per potilaan painokilo, mahdollisesti jaettuna 1-4 annokseen per päivä.
Erityisen toivottuja koostumuksia ovat sellaiset, jotka 10 valmistetaan annosyksikköinä ja jotka sisältävät noin 100 - noin 5000 mg per yksikkö.
Tyypillisiä esimerkkejä injektioon sopivista kantoaineis-ta ovat steriili vesi injektioon, Ringerin liuos, 0,9 %: i nen suolaliuos ja 5 %:inen dekstroosi.
15 Antibiootin sopiva konsentraatio kantoaineessa suonensi-‘ säiseen (i.v.) infuusioon on noin 5 % - 10 %. Muita sopi via valmisteita annosyksiköiksi ovat hermeettisesti sulje-; tut ampullit, muovipussit, steriilit, kumikorkilliset pienpullot ja vastaavat.
20 Lisäksi keksinnön mukainen antibiootti voidaan valmistaa topikaalisena valmisteena kuten liuoksena, voiteena tai lotionina. Nämä valmisteet sisältävät tavallisesti 0,1 -15 % (paino/til.) aktiiviainetta.
Lisäksi keksinnön mukaiset antibiootit ovat käyttökel-25 poisia ehkäisten Clostridium diffici1e-kannan kasvun, joka aiheuttaa kalvoisen paksunsuolentulehduksen suolistossa. Näitä antibiootteja voitaisiin käyttää hoidettaessa kalvoista paksunsuolentulehdusta annostamalla tehokas määrä antibioottia tai sen farmaseuttisesti hyväksyttä-30 vää suolaa valmistettuna farmaseuttisesti hyväksyttävään annosmuotoon. Tällaisessa käytössä antibiootteja voidaan annostaa gel ati i ni kapse! ei ssa tai nestemäisessä suspensiossa.
25 87 469
Paitsi, että antibiootti A 42867 tai sen hyväksyttävä suola ovat aktiivisia lääkkeinä, niitä voidaan käyttää eläinten kasvua edistävinä aineina.
Tätä tarkoitusta varten keksinnön mukaista yhdistettä 5 annostetaan oraalisesti sopivassa ravintoaineessa. Tarkka käyttökonsentraatio on sellainen, joka on tarpeen kasvun edistämiseksi tehokkaasti käytettäessä normaaleja määriä ravintoa.
Keksinnön mukaisen aktiiviaineen lisääminen eläinten ra-10 vintoon suoritetaan mieluimmin valmistamalla sopiva en nalta sekoitettu ravinto, joka sisältää aktiivisen yhdisteen tehokkaassa määrässä, ja tämä ennalta valmistettu ravinto yhdistetään valmiiseen päivän ravintoannokseen.
Vaihtoehtoisesti välituote konsentraatti tai ravintolisä-15 aine, joka sisältää aktiivisen aineosan, voidaan sekoittaa ravintoon.
Tapa, jolla tällaiset ravintoseokset ja valmiit päivän ravintoannokset voidaan valmistaa ja annostaa, on kuvattu viitekirjoissa (kuten "Applied Animal Nutrition", W.H.
20 Freedman and Co., S. Francisco, USA, 1969 tai "Livestock Feeds and Feeding" 0 and B Books, Corvallis, Oregon, USA 1977) ja liitetään tähän selitykseen viitteinä.
Seuraavat esimerkit kuvaavat edelleen keksintöä eikä niiden tarkoitus ole rajoittaa keksinnön piiriä.
26 87469 ESIMERKKI 1
ANTIBIOOTTI A 42867:n TUOTTAMINEN
Tuottavan organismin (Nocardia sp. ATCC 53492) varastovil-jelmää sivellään kaurajauhoagarvinopinnoi11 e ja inkuboi-5 daan 28°C:ssa 2 viikkoa.
Yksi si1 mu ka 11inen kasvatettua kantaa ympätään 500 ml :n erienmeyerpul1oon , jossa on 100 ml ymppialustaa , muodostuen dekstroosista 2,0 %, soijapapujauhosta 0,8 %, hiivauuttees-ta 0,2 %, NaClrstä 0,1 % ja CaCO^sta 0,4 % ja jonka pH on 10 säädetty arvoon 7,3 ennen sterilointia. Pulloa inkuboidaan kiertoravistelijassa 28°C:ssa 72 tuntia. Sen jälkeen 100 ml:n erä viljelmää ympätään käymisastiaan, jossa on 4 litraa samaa ymppialustaa ja viljelmää inkuboidaan 28°C:ssa 48 tuntia ravistellen noin 900 kierr./min ja ilmastaen yk-15 si litra ilmaa per tilavuus per minuutti. Ympätään neljällä litralla ymppivi1j e1 mää käymisastiat, jotka sisältävät 200 1 käymisalustaa, jonka koostumus on sama kuin ymppi-viljelmän, käyminen suoritetaan 96 tunnin ajan samalla sekoittaen noin 250 kierr./min ja ilmastaen yksi litra ilmaa .'20 per tilavuus per minuutti.
Antibiootin aktiivisuutta seurattiin mikrobiologisella kokeella käyttäen B.subtilis-viljelmää Davisin minimi-alustalla.
·· : ESIMERKKI 2
25 ANTIBIOOTTI A 42867:n TALTEENOTTO
Koko käymisliemi (400 1), joka saadaan esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, suodatetaan käyttäen suodatusapuainetta ( Hyf 1 o-Fl oMa ® ) k i ertosuoda 11. i tnell a (a rotary filter). Suodatetun liemen pH säädetään arvoon 7,5 2 N kloorivety-30 hapolla ja lisätään 1000 ml:aan etukäteen turvotettua 27 87469 D-Ala-D-Ala-aminokaproyyli-Sepharose-4B-modifioitua matriisia (valmistetaan kuten eurooppalaisessa patenttihakemuksessa No 83112555.4 esitetään) ja annetaan seistä yön yli samalla varovasti sekoittaen.
5 Hartsi otetaan talteen suodattamalla ja pestään noin 10 litralla 0,5 %:ista (paino/til.) HCl-tris-puskuria pH 7,5, joka sisältää 5 % (paino/til.) NaCl:ää, jonka jälkeen vedellä (4 x 5 1), liemi hylätään.
Tuote, joka on selektiivisesti sitoutunut hartsiin, eluoi-10 daan 1,5 % : i s e 1 la (paino/til.) ammoniumhydroksidil1 a (4 x 5 1) ja konsentroidaan pieneen tilavuuteen (noin 1800 ml) tislaamalla atseotrooppisesti yhdessä n-butanolin kanssa alennetussa paineessa.
Konsentroitu, vesipitoinen liuos lyofilisoidaan, saadaan 15 raaka antibiootti A 42867 (75,6 g).
ESIMERKKI 3
RAA'AN ANTIBIOOTTI A 42867:n PUHDISTAMINEN
Raaka antibiootti A 42867 (75 g), joka saadaan esimerkin 2 menetelmän mukaisesti, liuotetaan 2 litraan vettä, joka 20 sisältää 2 M natriumkloridia, pH säädetään arvoon 7,5 0,1 N natriumhydroksidiliuoksella, jonka jälkeen suodatetaan.
Suodosta siirretään 500 ml/tunti 1000 ml:n pylvääseen (0,1 x 0,1 m), jossa etukäteen turvotettua D-Ala-D-Ala-6--aminokaproyyli-Sepharose-4B-modifioitua matriisia (val-25 mistettu eurooppalaisessa patenttihakemuksessa No 83112555.4 kuvatulla tavalla) ja joka pylväs on etukäteen tasapainotettu 0,04 M boraattipuskuri 11 a, pH 7,5 sisältäen 2 M natriumkloridia ja 0,6 ml Triton x 100 (Baker grade).
Pylväs pestään 8 litralla 8 M karbamidia (pH 7,5), virtaus-30 nopeuden ollessa 500 ml/h, jonka jälkeen 70 litralla vesi- 28 87469 pitoista NaOH:ta, pH-arvossa 10, kerätään fraktiot, joista jokainen 1 000 ml .
Nämä fraktiot testataan B.subtilis-viljelmillä agar-kiek-ko-kokeessa ja ne fraktiot, jotka ovat inaktiivisia, hy-5 lätään, kun taas aktiiviset (kuten fraktiot 63-70 tässä tapauksessa) yhdistetään, konsentroidaan pieneen tilavuuteen (500 ml) alennetussa paineessa tislaamalla atseo-trooppisesti n-butanolin kanssa ja 1yofi1isoidaan jolloin saadaan antibiootti A 42867 (4 g).
10 ESIMERKKI 4
ANTIBIOOTTI A 42867:n PUHDISTAMINEN JA SUOLAN POISTAMINEN
3,5 g antibiootti A 42867:ää, joka saadaan esimerkin 3 menetelmän mukaisesti, liuotetaan 70 ml:aan liuosta, jossa on natriumdivetyfosfaattimonohydraattia (2,5 g/1) ja aseto-15 nitri iliä (91:1), ja suodatetaan.
10 ml tätä suodosta laitetaan ruostumattomaan teräspylvää-seen (2 x 50 cm), joka on pakattu 40 g: 11 a 10 μτη RP 18 Lichrosorb-käänteis-faasi-piihappogeeliä (Merck).
Pylväs on osa Chromatospac Modulprep-yksikköä (Jobin Yvon, 20 16-18 Rue de Canal 91169 Longjumeau, Ranska).
Pylväs eluoidaan nopeudella 8 ml/min samalla liuoksella, jota käytettiin näytteen liuottamiseksi, ja kerätään fraktiot, joista jokainen on 50 ml.
' Jokainen fraktio tarkastetaan HPLC:llä ja paperi-kiekko- 25 kasvukokeel1 a käyttäen herkkiä mikro-organismeja, kuten B.subti 1i s ta .
Fraktiot, jotka ovat aktiivisia seitsemän sarjan B.subti-lista vastaan, yhdistetään, asetonitrii1i poistetaan tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännös laimennetaan 30 vesimäärällä, joka on suurin piirtein sama kuin alkupe- 29 87469 räinen tilavuus.
Liuoksen pH säädetään arvoon 7,5, jonka jälkeen siirretään nopeudella 100 ml/h pylvääseen (5 x 15 cm), joka on täytetty etukäteen turvotetulla D-A1a-D-Ala-6-aminokapro-5 yyli-Sepharose-4B-modifioidulla matriisilla (valmistetaan kuten eurooppalaisessa patenttihakemuksessa No 83112555.4 on esitetty), ja joka pylväs etukäteen tasapainoitetaan 0,04 M boraattipuskuria pH 7,5.
Pylväs pestään 8 litralla vettä (hapotettu 0,5 ml/1 1 N 10 kloorivetyhappoa).
Sen jälkeen pylväs eluoidaan 1,5 %:isella (paino/til.) am-moniumhydroksidi 11 a , kerätään fraktiot, joista jokainen 100 ml .
Ne fraktiot, jotka ovat aktiivisia B.subtilista vastaan, 15 yhdistetään, konsentroidaan alennetussa paineessa ja lyo- filisoidaan, saadaan 1,2 g antibiootti A 42867:n tuotetta ei-suolamuodossa , jonka fysiko-kemia 11iset tunnusmerkit on edellä esitetty.
Claims (5)
1. Menetelmä antibiootin A 42867 tai sen suolan valmistamiseksi, jolla on ei-suolamuodossa seuraavat tunnusmerkit: antibiootti A 42867:n fysiko-kemia 11iset tunnusmerkit
5 A) u11ravio 1 e11iabsorptiospektri , joka on esitetty liitteenä olevien piirustusten kuviossa 1 ja jossa on seuraavat absorpti oma k s imit: X ma k s (nm) a) 0,1 N HC1 282 10 b) vesi 282 c) fosfaattipuskuri pH 7,4 282 d) fosfaattipuskuri pH 9 282 3 05 (olka) e) 0,1 N NaOH 305 15 265 (olka) B) infrapuna-absorptiospektri , joka on esitetty liitteenä olevien piirustusten kuviossa 2 ja jossa on seuraavat absorptiomaks imi t (cm"M: 3700-3100, 3000-2800 (nujoli); 1650; 1580; 1460 (nujoli) .20 1375 (nujoli); 1300; 1235; 1210; 1160; 1130; 1060; 1025; :.:V 1 000; 970 ; 840; 790-700 ; 720 (nujoli) : C) ^H-NMR-spektri, joka on esitetty kuviossa 3 ja jos- ' sa on seuraavat s ignaal i ryhmät (ppm:ssä) 2 70 MHz, rekiste röity DMSO dgtssa (heksadeuterodimetyylisulfoksidi) sisäi-25 senä standardina käytettiin TMS:ää (0,00 ppm), ( §= ppm): 0,90, d [_(CH3)2-(CH)] ; 1,02, d \CH3-(CH)]; 1,23, d •v: \CH3 - (CH )3 ; 1,52, s 1,77, m \CH (CH3) 2~\ ; 2,38, s (N-CHj); 3,0-6,35, s ja m (aromaattiset sokeri- ja peptidiset CH:t); 6,27-9,29 (aromaattiset CH:t, peptidikö set NH : t ja f e noli set 0 H : t) ,.r d = dupletti s = singletti m = multipletti 3, 87469 D) retentioaika (R^.) = 0,537 suhteessa vankomysiini. HCIrään (Vancocin, Eli Lilly, Rt = 16,36 min) analysoitaessa käänteisfaasi-HPLC:llä seuraavissa olosuhteissa: kolonni: Ultrasphere ODS (5 pm) Altex (Beckman) 5 4,6mm(sisähalkaisija)x250mm esikolonni: Brownlee Labs RP 18 (5 pm) eluentti: vesi:asetonitriili:2-etanoliamiini: trifluorietikkahappo 9:1:0,01:0,01 (til ./til .) 10 virtausnopeus: 1,6 ml/min UV-detektori: 254 nm sisäinen standardi: vankomysiini .HC1 (R^ = 16,36 min) (Vancoci n , Eli Lilly) E) retentioaika (R^.) = 0,665 suhteessa vankomys i i ni .
15 HClrään (Vancocin, Eli Lilly, R^ = 9,96 min) analysoitaessa käänteisfaasi-HPLC:llä seuraavissa olosuhteissa: kolooni: Ultrasphere ODS (5 pm) Altex (Beckman) 4,6 mm ( sisaha 1 kaisija ) x 250 mm esikolonni Brownlee Labs RP 18 (5 pm) 20 eluentti A: CH^CN 2%^ säädetty pH- (2,5 g/1) Naf^PO^.H^O 98%J arvoon 6,0 eluentti B: CH-jCN 70%Ί säädetty pH- (2,5 g/1)NaH2P0^.H20 30%J arvoon 6,0 eluointi: lineaarinen gradientti 5 %:sta 25 60 ¾:iin eluentti a β eluenttissa A, 40 minuutissa virtausnopeus: 1,6 ml/min 32 87469 UV-detektori: 254 nm sisäinen standardi: vankomysiini-HC1 (R^. - 9,96) (Vancoc i n , Eli Lilly) F) alkuaineanalyysi, sen jälkeen kun näytettä on 5 ensin kuivattu 140°C:ssa inerttikaasuatmosfäärissä, antaa tulokseksi seuraavan likimääräisen prosentuaalisen koostumuksen (keskiarvo): hiiltä 53,3 %; vetyä 5,9 %; typpeä 7,85 %\ klooria (kokonais) 4,41 %; klooria (ioneja) 2,22 %\ epäorgaaninen jäännös 900°C:ssa ilmassa: 0,875 %
10 G) happo-emäs ti trauskäyrällä vedessä, tiirattaessa 0,05 N vesipitoisella KOH:11a näyte, johon on etukäteen lisätty ylimäärin vesipitoista HCl:ää, esiintyy pKa-arvot 3,2, 7,1 ja 8,3 H) R^-arvo 0,56 seuraavassa kromatografiasysteemissä: 15 (vesipitoinen natriumkloridi 87,5 g/1: ΝβΗ,,ΡΟ^ 0,5 g/1 ) 70 nfj pH säädetty CHjCN 30 arvoon 6 käytetään käänteisfaasisia silanoituja piihappogeeli-- levyjä (RA-18 F254) 20 näkyväksi tekeminen: -UV-valo254nm - keltainen väri Pau1y-reagenssi11 a , t.s. diatsotoidulla sul f ani 1 i i ni hapol 1 a (J. Chromatog. 2Q_, 1 71 ( 1 965), Z. Physiol. Chem. 2J92, 99, (1953)) 25. bioautografiässä käytetään B.subtilis ATCC 6633:a Davisin minimialustal1 a I) molekyylipaino noin 1559 arvioituna FAB-massaspekt-ristä, jossa M+H® -piikki 1560, 33 87469 tunnettu siitä, että viljellään kantaa Nocardia sp. ATCC 53492 tai sen antibioottia A 42867:ää tuottavaa mutanttia tai muunnosta submerssisissa, aerobisissa oloissa assimiloituvien hiili-, typpilähteiden ja epäor-5 gaanisten suolojen läsnäollessa, mainittu antibiootti otetaan talteen ja eristetään käymisliemistä ja haluttaessa se muutetaan halutuksi suolaksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -10 n e t t u siitä, että kantaa viljellään lämpötilassa, joka on 20°C - 40°C.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lämpötila on 24°C - 35°C. 15
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että antibiootin talteenottaminen ja eristäminen tehdään suorittamalla suodatetulle käymis-liemelle affiniteettikromatografia immobilisoidulla D-
20 Alanyyli-D-Alaniinilla, jonka jälkeen käytetään jakaantu-mis-, käänteisfaasi- tai ioninvaihtokromatografiaa.
5. Nocardia sp. ATCC 53492. 34 87 469
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8618445 | 1986-07-29 | ||
| GB868618445A GB8618445D0 (en) | 1986-07-29 | 1986-07-29 | Antibiotic a 42867 |
| AT257187 | 1987-10-08 | ||
| AT0257187A AT388566B (de) | 1986-07-29 | 1987-10-08 | Neues antibiotikum a 42867 und dessen additionssalze |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI872860A0 FI872860A0 (fi) | 1987-06-29 |
| FI872860L FI872860L (fi) | 1988-01-30 |
| FI87469B true FI87469B (fi) | 1992-09-30 |
| FI87469C FI87469C (fi) | 1993-01-11 |
Family
ID=25598710
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI872860A FI87469C (fi) | 1986-07-29 | 1987-06-29 | Foerfarande foer framstaellning av antibiotikum a 42867 och dess additionssalter |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4804534A (fi) |
| EP (1) | EP0254999B1 (fi) |
| JP (1) | JPH07114704B2 (fi) |
| CN (1) | CN87105285A (fi) |
| AT (2) | ATE80914T1 (fi) |
| AU (1) | AU602700B2 (fi) |
| CA (1) | CA1337978C (fi) |
| DE (1) | DE3781846T2 (fi) |
| DK (1) | DK392087A (fi) |
| ES (1) | ES2046184T3 (fi) |
| FI (1) | FI87469C (fi) |
| GB (1) | GB8618445D0 (fi) |
| GR (1) | GR3006514T3 (fi) |
| HU (1) | HU197769B (fi) |
| IL (1) | IL83225A (fi) |
| NO (1) | NO168185C (fi) |
| NZ (1) | NZ221239A (fi) |
| PH (1) | PH24280A (fi) |
| PT (1) | PT85408B (fi) |
| ZA (1) | ZA874164B (fi) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4946941A (en) * | 1986-01-24 | 1990-08-07 | Shionogi & Co., Ltd. | Novel glycopeptide antibiotics |
| EG18377A (en) * | 1986-09-19 | 1993-04-30 | Lilly Co Eli | Process for preparing glycopeptide antibiotics |
| GB8801899D0 (en) * | 1988-01-28 | 1988-02-24 | Lepetit Spa | Antibiotic a42867 derivative |
| WO1993012318A1 (en) * | 1991-12-09 | 1993-06-24 | Patton Bob J | System for controlled drilling of boreholes along planned profile |
| JP4051421B2 (ja) * | 1995-07-05 | 2008-02-27 | サノフイ−アベンテイス・エツセ・ピー・アー | 等電点電気泳動によるダルバヘプチド抗生物質の精製 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3067099A (en) * | 1955-09-16 | 1962-12-04 | Lilly Co Eli | Vancomycin and method for its preparation |
| US2990329A (en) * | 1957-02-11 | 1961-06-27 | Abbott Lab | Preparation of ristocetin a salts |
| US4558009A (en) * | 1982-12-20 | 1985-12-10 | Eli Lilly And Company | Process for producing antibiotic A-51568 by fermentation and microorganism |
| US4764510A (en) * | 1986-04-11 | 1988-08-16 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A42125 and process for its production |
-
1986
- 1986-07-29 GB GB868618445A patent/GB8618445D0/en active Pending
-
1987
- 1987-06-10 ZA ZA874164A patent/ZA874164B/xx unknown
- 1987-06-18 AU AU74451/87A patent/AU602700B2/en not_active Ceased
- 1987-06-29 FI FI872860A patent/FI87469C/fi not_active IP Right Cessation
- 1987-06-30 PH PH35476A patent/PH24280A/en unknown
- 1987-07-06 NO NO872811A patent/NO168185C/no unknown
- 1987-07-16 CA CA000542264A patent/CA1337978C/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-07-17 DE DE8787110373T patent/DE3781846T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1987-07-17 EP EP87110373A patent/EP0254999B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-07-17 AT AT87110373T patent/ATE80914T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-07-17 IL IL83225A patent/IL83225A/xx unknown
- 1987-07-17 ES ES198787110373T patent/ES2046184T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-07-22 HU HU873383A patent/HU197769B/hu not_active IP Right Cessation
- 1987-07-27 PT PT85408A patent/PT85408B/pt not_active IP Right Cessation
- 1987-07-28 US US07/078,501 patent/US4804534A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-07-28 NZ NZ221239A patent/NZ221239A/en unknown
- 1987-07-28 DK DK392087A patent/DK392087A/da not_active Application Discontinuation
- 1987-07-29 CN CN87105285A patent/CN87105285A/zh active Pending
- 1987-07-29 JP JP62187855A patent/JPH07114704B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-10-08 AT AT0257187A patent/AT388566B/de not_active IP Right Cessation
-
1988
- 1988-11-14 US US07/270,884 patent/US4956293A/en not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-12-11 GR GR920402882T patent/GR3006514T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI81117C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antibiotikum a 40926 komplex och dess rena faktorer pa, pb, a, b och bo. | |
| FI90993B (fi) | Menetelmä glykopeptidiantibioottien valmistamiseksi ja niitä tuottavia mikro-organismiviljelmiä | |
| EP0627009B1 (en) | Macrocyclic lactones and a productive strain thereof | |
| EP1751272B1 (en) | Production of tacrolimus (fk-506) using new streptomyces species | |
| PL180230B1 (pl) | Lipopeptydy z Actinoplanes sp. o dzialaniu farmakologicznym, sposób ich wytwarzania, kompozycja farmaceutyczna oraz substancja farmakologicznie czynna PL PL PL PL PL PL PL PL | |
| FI86307B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antibiotiska a 40926 n-acylaminoglukuronyl -aglykoner och antibiotisk a 40926 aglykon. | |
| CA1291054C (en) | Antitumor antibiotics (ll-e33288 complex) | |
| FI77690C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en antibiot, aad 216-komplex med mikroben kibdelosporangium aridum shearer gen. nov., sp. nov. atcc 39323. | |
| FI87469B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antibiotikum a 42867 och dess additionssalter. | |
| RU2228337C2 (ru) | Ванкорезмицин (варианты), его использование, штамм amycolatopsis вида hil-006734 для его получения | |
| JPS6069085A (ja) | デイフイシジンおよび誘導体抗菌物質 | |
| KR860001497B1 (ko) | 항생제 a51568 인자 a 및 b의 제조방법 | |
| JP3830964B2 (ja) | 海洋放線菌から単離した新規なチオデプシペプチド | |
| FI95930C (fi) | Menetelmä antibiootin GE 2270 tekijä A:n valmistamiseksi | |
| EP0211490B1 (en) | Antibiotics of the vancomycin-class | |
| JP4452505B2 (ja) | 抗生物質ｇｅ８１１１２ファクターａ、ｂ、ｂ１、その製薬学的に許容され得る塩および組成物および使用 | |
| EP0545955B1 (en) | Antibiotic ge1655 complex and its factors a, b and c | |
| CA1046965A (en) | Naphthyridinomycin antibiotics from streptomyces | |
| KR100199650B1 (ko) | 신규 만노실 테이코플라닌 아글리콘 및 만노실 테이코플라닌유도체의 제조방법 | |
| IE913058A1 (en) | Antibiotic ge1655 complex and its factors a, b, and c | |
| Bombay et al. | EUROPEAN PATENT APPLICATION |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: GRUPPO LEPETIT S.P.A. |