ES2848050T3

ES2848050T3 - Tratamiento de la mielosupresión

Info

Publication number: ES2848050T3
Application number: ES13787651T
Authority: ES
Inventors: Stephen Marcus
Original assignee: Cantex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Cantex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2012-05-09
Filing date: 2013-03-13
Publication date: 2021-08-05
Anticipated expiration: 2033-03-13
Also published as: US20130323230A1; MX2019009437A; KR20150023361A; SG11201407340YA; IL235593B; CN108498532B; MX2014013633A; SG10201914117QA; CN113521093A; JP2017105850A; DK2846809T3; KR20200118510A; JP2019026647A; US20220354882A1; US9271999B2; PT2846809T; US20130303481A1; KR102165348B1; AU2013260101A1; EP3785720A1

Abstract

Un heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso en un método de atenuación de un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento mielosupresor, comprendiendo dicho método: administrar de forma complementaria dicho heparinoide que interactúa con PF-4 a un paciente que recibe un régimen de tratamiento mielosupresor, en donde el heparinoide PF-4 está sustancialmente desulfatado en la posición 2-O y en la posición 3-O, y donde el paciente es un ser humano.

Description

DESCRIPCIÓN

Tratamiento de la mielosupresión

La presente invención está definida por las reivindicaciones adjuntas.

2. Antecedentes

Las plaquetas juegan un papel fundamental en el mecanismo de coagulación de la sangre. El agotamiento de las plaquetas por debajo de un cierto nivel produce trombocitopenia, que puede desencadenarse por una serie de afecciones y trastornos clínicos y puede variar de leve a potencialmente mortal.

La trombocitopenia puede ser provocada por enfermedades y afecciones que afectan a la médula ósea, en donde surgen los precursores de plaquetas antes de ingresar al torrente sanguíneo; por enfermedades y afecciones que afectan al hígado, que produce trombopoyetina, la hormona que estimula la producción de plaquetas; por secuestro de plaquetas; por una mayor destrucción de plaquetas; y por una variedad de otras causas. En particular, la trombocitopenia es un efecto secundario común de ciertos regímenes de tratamiento, tales como los regímenes de tratamiento del cáncer con agentes antineoplásicos. La trombocitopenia inducida por quimioterapia o por radiación puede provocar retrasos en el tratamiento y/u obligar a reducir la dosis del tratamiento, lo que a su vez puede dar como resultado una reducción de la eficacia del tratamiento.

Dado que la trombocitopenia grave pone al paciente en riesgo de hemorragia incontrolada, es muy deseable el desarrollo de tratamientos seguros y eficaces para la trombocitopenia. A pesar de la clara necesidad de tales tratamientos, sin embargo, existen muy pocos de estos tratamientos. Los intentos de desarrollar una forma recombinante de trombopoyetina humana no han tenido éxito. Si bien una trombopoyetina humana recombinante mostró una promesa inicial, mostró una tendencia a inducir el desarrollo de autoanticuerpos cuando se probó en pacientes. En la actualidad, la terapia estándar de trombocitopenia, tal como trombocitopenia inmunomediada, puede incluir tratamiento con corticosteroides, rituximab y/o agonistas del receptor de trombopoyetina, esplenectomía y transfusiones de plaquetas. Sin embargo, cada una tiene inconvenientes, incluyendo la respuesta incompleta, el desarrollo de efectos secundarios al tratamiento y riesgos asociados a cualquier forma de cirugía. Para la trombocitopenia inducida por quimioterapia, solo un agente terapéutico, interleuquina-11, ha demostrado ser suficientemente eficaz para merecer la aprobación regulatoria, pero los médicos rara vez lo prescriben debido a la gravedad de sus efectos secundarios. Para la trombocitopenia inducida por radiación, no existe ningún agente terapéutico aprobado que atenúe la trombocitopenia. Por tanto, sigue existiendo una necesidad significativa de agentes que atenúen las trombocitopenias de etiología variable, incluyendo trombocitopenias inmunomediadas, trombocitopenias inducidas por fármacos, especialmente trombocitopenia inducida por quimioterapia y trombocitopenia inducida por radiación.

Los neutrófilos, también llamados leucocitos polimorfonucleares, son las más numerosas de las células sanguíneas conocidas como granulocitos. Los neutrófilos, como otras células sanguíneas, son producidos por la médula ósea. Los neutrófilos son un componente importante de la inmunidad natural. Cuando los niveles de neutrófilos caen por debajo de lo normal, se da una afección llamada neutropenia, que aumenta el riesgo de infección. La neutropenia puede deberse a varias causas diferentes, que van desde defectos congénitos hasta infecciones víricas, pero un contexto en el que la neutropenia ocurre con frecuencia es un efecto secundario de un régimen de tratamiento. La neutropenia es un efecto secundario común en pacientes que reciben tratamiento contra el cáncer con agentes antineoplásicos, que pone a los pacientes en riesgo de desarrollar infecciones graves e incluso potencialmente mortales, y que fuerza a retrasos en el tratamiento y/o a una reducción forzosa de la dosis de tratamiento, lo que da como resultado una eficacia reducida.

Se han probado una variedad de agentes y terapias para combatir la neutropenia, con diversos grados de éxito. La administración de glucocorticoides, los esteroides androgénicos y las vitaminas para estimular la médula ósea para producir más neutrófilos no han tenido éxito. En la actualidad, solo dos agentes, el factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) y el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), se usan ampliamente para tratar a pacientes con neutropenia grave, con mayor frecuencia después de quimioterapia intensiva contra el cáncer y/o trasplante de médula ósea. Estos agentes presentan efectos adversos tales como dolor de huesos, anomalías de disfunciones hepáticas y derrames pleurales y pericárdicos. Por tanto, existe la necesidad de compuestos que sean seguros y eficaces para tratar la neutropenia y promover la producción de neutrófilos.

3. Sumario

En un primer aspecto, se proporcionan métodos para atenuar un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento de un paciente. Los métodos comprenden administrar de forma complementaria al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con el factor 4 de plaquetas (en adelante, "heparinoide que interactúa con PF4"). Tal como se proporciona en el presente documento, un efecto secundario mielosupresor es la aparición de trombocitopenia y/o neutropenia, y un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor es un régimen de tratamiento que induce, como efecto secundario, uno o ambos de trombocitopenia y neutropenia. En diversas realizaciones, este aspecto proporciona usos de un heparinoide que interactúa con PF4, por ejemplo, ODSH, en la atenuación de un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento de un paciente.

Numerosos regímenes de tratamiento de pacientes tienen efectos secundarios mielosupresores, incluidos los regímenes de tratamiento antineoplásico, tales como quimioterapia y radioterapia, terapia con anticuerpos, incluidos los regímenes de tratamiento utilizados para tratar el cáncer y/o enfermedades autoinmunes y procedimientos de trasplante, tales como el trasplante de médula ósea o de células madre. En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente comprende quimioterapia y/o radioterapia y/o terapia con anticuerpos. En una realización ilustrativa, el régimen de tratamiento del paciente es un régimen quimioterapéutico que comprende gemcitabina y nabpaclitaxel. En una realización ilustrativa, el régimen de tratamiento del paciente es un régimen quimioterapéutico que comprende ifosfamida, carboplatino y etopósido, opcionalmente incluyendo rituximab. En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente comprende uno o más regímenes adecuados para el tratamiento de sujetos diagnosticados con leucemia mielógena o mieloide aguda ("AML"). En una realización ilustrativa, un régimen adecuado para el tratamiento de sujetos diagnosticados con AML comprende un régimen de quimioterapia adecuado para inducir la remisión de AML (conocido en la técnica como quimioterapia de inducción), un régimen de quimioterapia para prevenir la remisión de AML (conocido en la técnica como quimioterapia de consolidación), o quimioterapia tanto de inducción como de consolidación. Opcionalmente, un régimen adecuado para el tratamiento de sujetos diagnosticados con AML también puede comprender uno o más regímenes no basados en quimioterapia para prevenir la remisión de AML, que se puede usar en lugar de o en combinación con la quimioterapia de consolidación. Estos regímenes no basados en quimioterapia incluyen el trasplante de células madre, tal como el trasplante alogénico de células madre y la inmunoterapia. En la Sección 5.1.1 se describen otros regímenes de tratamiento del paciente.

En diversas realizaciones, los métodos son útiles para tratar sujetos diagnosticados con cáncer, por ejemplo cáncer de páncreas, tumores sólidos, incluido el osteosarcoma, neuroblastoma o AML. El sujeto a tratar puede ser un paciente adulto o pediátrico. En algunas realizaciones, al sujeto se le diagnostica un cáncer en el que los niveles de PF4 están elevados en las plaquetas o en la sangre (denominado en lo sucesivo "cáncer positivo para PF4"). Los ejemplos de cánceres positivos para PF4 incluyen cáncer de páncreas y cáncer colorrectal. En la sección 5.1.2 se describen otros sujetos adecuados.

En algunas realizaciones, los métodos pueden comprender además la administración complementaria de uno o más agentes o terapias adicionales que sean protrombopoyéticas, antitrombocitopénicas, antineutropénicas, progranulopoyéticas y/o anticoagulantes. Los agentes y terapias adecuados para una administración complementaria adicional se describen en el presente documento en la Sección 5.1.3. En algunas realizaciones, se administran dos o más agentes y/o terapias. Los dos o más agentes pueden tener la misma actividad (por ejemplo, antitrombocitopénico), actividad diferente (por ejemplo, un primer agente es protrombopoyético y un segundo agente es antineutropénico), o actividad solapante (por ejemplo, un primer agente es progranulopoyético y anticoagulante y un segundo agente es anticoagulante).

El heparinoide que interactúa con PF4 y cualquier agente o terapia adicional administrada de forma complementaria, se puede administrar al mismo tiempo, de manera secuencial o por separado de la administración del régimen de tratamiento del paciente. Las vías y modos de administración adecuados se proporcionan a continuación en la Sección 5.8.

En un segundo aspecto, se proporcionan métodos para promover la trombopoyesis en un sujeto. Los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 al sujeto. El sujeto puede ser trombocitopénico o no trombocitopénico, tal como se describe a continuación en la Sección 5.2. En diversas realizaciones, los métodos comprenden tratar la mielosupresión causada por una enfermedad o afección que reduce el recuento de plaquetas en un sujeto. En una realización ilustrativa, el sujeto es diagnosticado con síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SRIS), síndrome séptico o septicemia. Opcionalmente, el sujeto tiene niveles elevados de PF4 en suero o plasma. En algunas realizaciones, los métodos comprenden además la administración complementaria de uno o más agentes o terapias adicionales que son protrombopoyéticos, antitrombocitopénicas, antineutropénicas, progranulopoyéticas y/o anticoagulantes. Los agentes y terapias adecuados para una administración complementaria adicional se describen en el presente documento en la Sección 5.2.1.

En un tercer aspecto, se proporcionan métodos para promover la producción de neutrófilos en un sujeto. Los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 al sujeto. El sujeto puede ser neutropénico o no neutropénico, tal como se describe a continuación en la Sección 5.3. En diversas realizaciones, los métodos comprenden tratar la mielosupresión causada por una enfermedad o afección que reduce el recuento de neutrófilos en un sujeto. Opcionalmente, el sujeto tiene niveles elevados de PF4 en suero o plasma. En algunas realizaciones, los métodos comprenden además la administración complementaria de uno o más agentes o terapias adicionales que son protrombopoyéticos, antitrombocitopénicas, antineutropénicas, progranulopoyéticas y/o anticoagulantes. Los agentes y terapias adecuados para una administración complementaria adicional se describen en el presente documento en la Sección 5.3.1.

En un cuarto aspecto, se proporcionan métodos para aumentar la eficacia de un régimen de tratamiento de un paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor. Los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 al paciente sujeto como complemento del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor, sin reducir la dosis y/o la frecuencia de dosificación del régimen de tratamiento del paciente después de una administración de tratamiento o ciclo de tratamiento de referencia.

En algunas realizaciones, el método comprende además administrar una dosis más alta que la que se usa típicamente para tal administración o ciclo en ausencia de administración complementaria de un heparinoide que interactúa con PF4.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden además determinar un recuento de plaquetas inicial en una muestra de sangre de un paciente y administrar una cantidad de un heparinoide que interactúa con PF4 eficaz para elevar el recuento de plaquetas del paciente por encima de un nivel umbral por debajo del cual la terapia con régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor es contraindicativo. En diversas realizaciones, se administra una cantidad suficiente de un heparinoide que interactúa con PF4 para mantener los niveles de plaquetas por encima de los niveles que indican trombocitopenia de grado 3 (grave) o grado 4 (potencialmente mortal). Opcionalmente, los métodos pueden comprender además administrar de forma complementaria al heparinoide que interactúa con PF4 uno o más agentes o terapias que son antitrombocitopénicas, antineutropénicas, anticoagulante, o tiene alguna otra actividad terapéutica. En algunas realizaciones, los métodos comprenden una etapa adicional de administrar un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor al paciente cuyo recuento de plaquetas está por encima de un nivel umbral que contraindica tal terapia. Opcionalmente, se puede aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del régimen de tratamiento del paciente.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden determinar un recuento de neutrófilos inicial en una muestra de sangre de un paciente y administrar una cantidad de un heparinoide que interactúa con PF4 eficaz para elevar el recuento de neutrófilos del paciente por encima de un nivel umbral por debajo del cual la terapia con régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor es contraindicativo. En diversas realizaciones, se administra una cantidad suficiente de un heparinoide que interactúa con PF4 para mantener los niveles de neutrófilos por encima de los niveles que indican neutropenia de grado 3 o grado 4, es decir, por encima de aproximadamente 1000 neutrófilos/pl de sangre y por encima de aproximadamente 500 neutrófilos/pl de sangre, respectivamente. Opcionalmente, los métodos pueden comprender además administrar de forma complementaria al heparinoide que interactúa con PF4 uno o más agentes o terapias que son antineutropénicas, antitrombocitopénicas, anticoagulante, o tiene alguna otra actividad terapéutica. En algunas realizaciones, los métodos comprenden una etapa adicional de administrar un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor al paciente cuyo recuento de neutrófilos está por encima de un nivel que contraindica tal terapia. Opcionalmente, se puede aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del régimen de tratamiento del paciente.

Los heparinoides que interactúan con PF4 de la presente divulgación son heparinoides que son capaces de interactuar con PF4 y contrarrestar la capacidad de PF4 para suprimir la producción de plaquetas y neutrófilos. Los heparinoides que interactúan con PF4 se unen a PF4 y/o compiten con PF4 por unirse a las células progenitoras en el linaje de células mieloides, por ejemplo, megacariocitos. Preferentemente, los heparinoides que interactúan con PF4 tienen un peso molecular promedio superior a aproximadamente 8 kDa, tal como un peso molecular promedio entre aproximadamente 8 kDa y aproximadamente 15 kDa, más preferentemente entre aproximadamente 11 kDa y 13 kDa. El heparinoide que interactúa con PF4 preferentemente está parcialmente desulfatado. En algunas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 está sustancialmente sulfatado en la posición 6-O y/o N. Un heparinoide ilustrativo que interactúa con PF4, que es adecuado para su uso en los métodos descritos en el presente documento, es sustancialmente 2-O, 3-O desulfatado, citado en el presente documento como ODSH. Véase también la Sección 5.6.

La presente divulgación proporciona además composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitaria que comprenden heparinoides que interactúan con PF4, adecuadas para su uso en los métodos descritos en el presente documento, ya sean solas o como complemento de un régimen de tratamiento del paciente y/o uno o más agentes o terapias adicionales. Las composiciones farmacéuticas se pueden preparar para administración parenteral, tal como administración intravenosa o subcutánea. Para la administración intravenosa, las composiciones farmacéuticas se pueden formular para su administración como un bolo o como una infusión continua.

Las composiciones farmacéuticas para su uso en los métodos descritos en el presente documento comprenden una cantidad de un heparinoide que interactúa con PF4, tal como se describe a continuación en la Sección 5.9, suficiente para permitir la administración de dosis eficaces.

En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas de heparinoide que interactúa con PF4 son adecuadas para administración intravenosa a dosis que varían de aproximadamente 0,1 mg/kg/h a aproximadamente 2,5 mg/kg/h para infusiones y de aproximadamente 1 mg/kg a aproximadamente 25 mg/kg para dosis en bolo. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas de heparinoide que interactúa con PF4 son adecuadas para la administración subcutánea y se formulan para la administración en dosis que oscilan entre aproximadamente 25 mg y aproximadamente 400 mg, en volúmenes de 2,0 ml o menos por sitio de inyección.

4. Breve descripción de las figuras

La FIG. 1 proporciona un gráfico que ilustra el efecto de 8 regímenes de tratamiento diferentes sobre el peso del tumor en un modelo in vivo de xenoinjerto murino de cáncer de páncreas humano, tal como se describe en el Ejemplo 1 y en la Tabla 1: control de vehículo (Grupo 1, •); ODSH solo (Grupo 2, o); oxaliplatino/gemcitabina/nabpaclitaxel (Grupo 3, ■); gemcitabina sola (Grupo 4, □); oxaliplatino/gemcitabina/nab-paclitaxel con ODSH (Grupo 5, A); gemcitabina con ODSH (Grupo 6, A); oxaliplatino/gemcitabina (Grupo 7, x); y oxaliplatino/gemcitabina con ODSH (Grupo 8, ☆ ).

La FIG. 2 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso tumoral de un subconjunto de los regímenes de tratamiento usados en el Ejemplo 1 y mostrados en la FIG. 1: control de vehículo (Grupo 1, •); ODSH solo (Grupo 2, o); gemcitabina sola (Grupo 4, □); y gemcitabina con ODSH (Grupo 6, A).

La FIG. 3 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso corporal de los 8 regímenes diferentes utilizados en el Ejemplo 1: control de vehículo (Grupo 1, •); ODSH solo (Grupo 2, o); oxaliplatino/gemcitabina/nab-paclitaxel (Grupo 3, ■); gemcitabina sola (Grupo 4, □); oxaliplatino/gemcitabina/nab-paclitaxel con ODSH (Grupo 5, A); gemcitabina con ODSH (Grupo 6, A); oxaliplatino/gemcitabina (Grupo 7, x); y oxaliplatino/gemcitabina con ODSH (Grupo 8, ☆ ).

La FIG. 4 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso tumoral de 4 regímenes de tratamiento diferentes en un modelo in vivo de xenoinjerto murino de cáncer de ovario humano, tal como se describe adicionalmente en el Ejemplo 2: control de vehículo (Grupo 1, •); ODSH solo (Grupo 2, ♦); carboplatino (Grupo 3, ■); y carboplatino con ODSH (Grupo 4, A).

La FIG. 5 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso tumoral de los regímenes de tratamiento mostrados en la FIG. 4, durante los días 1-21 del estudio.

La FIG. 6 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso corporal del ratón de los 4 regímenes diferentes utilizados en el Ejemplo 2: control de vehículo (Grupo 1, •); ODSH solo (Grupo 2, ♦); carboplatino (Grupo 3, ■); y carboplatino con ODSh (Grupo 4, A), tal como se describe adicionalmente en el Ejemplo 2.

La FIG. 7 proporciona un gráfico que ilustra el efecto sobre el peso corporal del ratón de los regímenes de tratamiento mostrados en la FIG. 6 para los días 1-21.

La FIG. 8 proporciona un gráfico del recuento de plaquetas (en X 103 plaquetas/pl) de pacientes con cáncer de páncreas metastásico que participaron en el ensayo clínico descrito en el Ejemplo 3, medido en muestras tomadas el día 1, el día 8 y el día 15 de cada ciclo de quimioterapia tal como se indica (C1D1 = ciclo 1, día 1; C2D8 = ciclo 2, día 8, etc.). Las líneas horizontales marcan el límite inferior del recuento plaquetario normal (LIN) y el límite inferior (LI) de los grados indicados de trombocitopenia.

La FIG. 9 proporciona un gráfico del recuento de neutrófilos (en X 103 neutrófilos/pl) medidos en muestras tomadas de los mismos individuos descritos en la FIG. 8, el día 1, el día 8 y el día 15 de cada ciclo de quimioterapia tal como se indica (C1D1 = ciclo 1, día 1; C2D8 = ciclo 2, día 8, etc.). Las líneas horizontales marcan el límite inferior del recuento plaquetario normal (LIN) y el límite inferior (LI) de los grados indicados de neutropenia.

Las FIG. 10A-10B proporcionan la media y la mediana de los recuentos de plaquetas (Figura 10A) y la media y la mediana de los recuentos absolutos de neutrófilos (Figura 10B) para todas las muestras en los días indicados en cada uno de los ciclos indicados.

Las FIG. 11A-F proporcionan gráficos del tamaño de las lesiones pancreáticas y metastásicas en pacientes específicos inscritos en el ensayo clínico descrito en el Ejemplo 3 que tienen enfermedad estable y que reciben administración complementaria de ODSH y agentes quimioterapéuticos. La FIG. 11A muestra el tamaño de dos metástasis pulmonares en el paciente 2001 al inicio y al final del ciclo 4. Las FIG. 11B-C muestran el tamaño del tumor de las lesiones metastásicas en el hígado y los ganglios linfáticos al final del ciclo de tratamiento 2 (FIG.

11B) y las lesiones en el páncreas, hígado y ganglios linfáticos al final del ciclo 5 (Figura 11C) con respecto al inicio del tratamiento (inicial) para el paciente 6002. La FIG. 11D muestra el tamaño de dos metástasis pulmonares en el paciente 6003 al inicio y al final del ciclo 6. La FIG. 11E muestra el tamaño de los tumores pancreáticos y un tumor hepático metastásico en el paciente 6006 al inicio del estudio y al final del ciclo 4. La FIG. 11F muestra el tamaño de un tumor pancreático en el paciente 8001 al inicio y al final del ciclo 2.

Las FIG. 12A-F proporcionan gráficos que muestran la respuesta tumoral de pacientes que reciben administración complementaria de ODSH y quimioterapia. La FIG. 12a proporciona un cuadro que resume los sitios de enfermedad metastásica antes del inicio de la quimioterapia, los niveles de CA19-9 al inicio y después de varios ciclos de quimioterapia, y la respuesta tumoral para cada paciente indicado. Las FIG. 12B-12F proporcionan gráficos del tamaño de los tumores para los pacientes 6004, 6007, 7001, 7002 y 9001, que muestran una respuesta parcial al final del ciclo de tratamiento 4 o 5, en relación con los valores iniciales.

Las FIG. 13A-B proporcionan gráficos que muestran el recuento de plaquetas en los días 1 y 15 de los ciclos indicados para pacientes tratados con gemcitabina, nab-paclitaxel y ODSH ("pacientes de la sección de ODSH") y pacientes tratados con gemcitabina y nabpaclitaxel ("pacientes de la sección de control"). La FIG. 13A proporciona una tabla que muestra los recuentos de plaquetas, en el día 1 del ciclo 1 (antes de cualquier quimioterapia) y en el día 15 del ciclo 1 (después de dos dosis de quimioterapia) en 5 pacientes de la sección de ODSH y 5 pacientes de la sección de control. También se muestran la media y la mediana de los recuentos de plaquetas para la sección de control y la sección de ODSH en los días 1 y 15. La FIG. 13B proporciona un gráfico que muestra la mediana de los recuentos de plaquetas en los días 1 y 15 de los ciclos 1 a 6 para pacientes de la sección de control y pacientes de la sección de ODSH.

5. Descripción detallada

Se ha descubierto que los heparinoides que son capaces de interactuar con el factor plaquetario 4 (en adelante, "heparinoides que interactúan con PF4") pueden atenuar la trombocitopenia y neutropenia de diversas etiologías. Además, se ha descubierto que los heparinoides que interactúan con PF4 inducen o desinhiben la trombopoyesis y la granulopoyesis. Sin pretender quedar ligados a teoría alguna, se cree que estos efectos están mediados por la capacidad de tales heparinoides para reducir los niveles de PF4 y/o contrarrestar un efecto supresor de PF4 sobre la megacariopoyesis y la granulopoyesis.

5.1. Métodos para atenuar los efectos secundarios mielosupresores de los regímenes de tratamiento

Tal como se describe en el Ejemplo 3 a continuación, los pacientes diagnosticados con cáncer de páncreas metastásico que fueron tratados de forma complementaria con un heparinoide ilustrativo que interactúa con PF4, denominado en el presente documento ODSH (un heparinoide que está sustancialmente desulfatado en las posiciones 2-O y 3-O, descrito con más detalle en la Sección 5.6), habían aumentado el recuento de plaquetas al final de un primer ciclo de 4 semanas de un régimen de quimioterapia que se sabe que tiene un efecto secundario mielosupresor sustancial. Estos efectos continuaron en ciclos sucesivos de tratamiento y los resultados demostraron que el ODSH administrado de forma complementaria atenúa la trombocitopenia y la neutropenia en pacientes que reciben un régimen de tratamiento de quimioterapia que tiene efectos secundarios mielosupresores.

Por tanto, en un primer aspecto, se proporcionan métodos para atenuar un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento de un paciente. Los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interacciona con PF4 al paciente sujeto como complemento del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor. Por tanto, en el presente documento se proporcionan usos de un heparinoide que interactúa con PF4, opcionalmente ODSH, en la atenuación de un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento de un paciente, como se trata adicionalmente en el presente documento. Las expresiones "administración complementaria", "administración complementaria" o "administración complementaria de" se usan indistintamente en el presente documento para referirse a la administración de un heparinoide que interactúa con PF4 en una proximidad temporal terapéuticamente eficaz al régimen de tratamiento que tiene un efecto secundario mielosupresor. Al administrar de forma complementaria un heparinoide que interactúa con PF4 a pacientes que reciben regímenes de tratamiento que tienen un efecto secundario mielosupresor, ya sea solo o en combinación con otros agentes coadyuvantes o terapia, el solicitante ha descubierto que es posible atenuar los efectos secundarios mielosupresores de tales regímenes de tratamiento.

Los heparinoides que interactúan con PF4 adecuados para su uso en los métodos se describen a continuación en la Sección 5.6. En una realización ilustrativa, el heparinoide que interactúa con PF4 es ODSH. Los modos de administración y los regímenes de dosificación adecuados se describen más adelante, en la Sección 5.8. Las dosis eficaces y las cantidades terapéuticamente eficaces, de heparinoide que interactúa con PF4 se describen a continuación, en la Sección 5.9.

5.1.1. Regímenes de tratamiento con efectos secundarios mielosupresores

Tal como se usa en el presente documento, un efecto secundario mielosupresor es la aparición de trombocitopenia y/o neutropenia. Por tanto, en diversas realizaciones, el régimen de tratamiento, como efecto secundario, hace que los pacientes desarrollen trombocitopenia (recuento bajo de plaquetas), neutropenia (recuento bajo de neutrófilos) o una combinación de trombocitopenia y neutropenia. Dichos regímenes de tratamiento de pacientes también se denominan en el presente documento regímenes de tratamiento mielosupresores.

En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento causa trombocitopenia. En diversas realizaciones, el régimen de tratamiento hace que los recuentos de plaquetas en sangre sean inferiores a aproximadamente 150.000 plaquetas por pl de sangre. En realizaciones particulares, el régimen de tratamiento hace que el paciente tenga recuentos de plaquetas que oscilan entre aproximadamente 150.000 y aproximadamente 75.000 plaquetas por pl de sangre, que se corresponde con trombocitopenia leve o grado 1; los recuentos de plaquetas que van desde menos de aproximadamente 75.000 a aproximadamente 50.000 plaquetas por pl de sangre, que se corresponde con trombocitopenia moderada o de grado 2; los recuentos de plaquetas que van desde menos de aproximadamente 50.000 a aproximadamente 25.000 plaquetas por pl de sangre, que se corresponde con trombocitopenia grave o grado 3; y los recuentos de plaquetas de menos de aproximadamente 25.000 plaquetas por |jl de sangre, que se corresponde con trombocitopenia potencialmente mortal o de grado 4. Por tanto, en una variedad de realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente induce, como efecto secundario, trombocitopenia leve, moderada, grave o potencialmente mortal,

En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento causa neutropenia. En diversas realizaciones, el régimen de tratamiento hace que los pacientes tengan recuentos absolutos de neutrófilos en sangre de menos de aproximadamente 2000 neutrófilos por j l de sangre. En realizaciones particulares, el régimen de tratamiento hace que el paciente tenga recuentos de neutrófilos que oscilan entre aproximadamente 2000 y aproximadamente 1500 neutrófilos por j l de sangre, que se corresponde con neutropenia leve o grado 1; los recuentos absolutos de neutrófilos que van desde menos de aproximadamente 1500 a aproximadamente 1000 neutrófilos por j l de sangre, que se corresponde con neutropenia moderada o de grado 2; los recuentos absolutos de neutrófilos que van desde menos de aproximadamente 1000 a aproximadamente 500 neutrófilos por j l de sangre, que se corresponde con neutropenia grave o grado 3; y los recuentos absolutos de neutrófilos de menos de aproximadamente 500 neutrófilos por j l de sangre, que se corresponde con neutropenia potencialmente mortal o de grado 4. Por tanto, en una variedad de realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente induce, como efecto secundario, neutropenia moderada, grave o potencialmente mortal.

En una variedad de realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente es un régimen de tratamiento antineoplásico. En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento antineoplásico es la quimioterapia. En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento antineoplásico es la radioterapia.

En realizaciones de quimioterapia, el régimen de tratamiento del paciente incluye la administración de uno o más agentes quimioterapéuticos.

En realizaciones ilustrativas, al menos uno de los uno o más agentes quimioterapéuticos se selecciona del grupo que consiste en: antagonistas del folato, incluyendo metotrexato y pemetrexed; antagonistas de purinas, incluyendo cladribina, clofarabina, fludarabina, 6-mercaptopurina, nelarabina, pentostatina; antagonistas de pirimidina, incluyendo capecitabina, citarabina, 5-fluorouracilo, gemcitabina, hidroxiurea; modificadores de la respuesta biológica, incluido el interferón alfa; bleomicina; agentes alquilantes de ADN, incluidas las nitrosureas, carmustina, lomustina; fármacos de reticulación del ADN y agentes alquilantes, incluyendo bendamustina, clorambucilo, ciclofosfamida, ifosfamida, mecloretamina (mostaza de nitrógeno), melfalán, dacarbazina, temozolomida, procarbazina; asparaginasa; antibióticos, incluyendo mitomicina; complejos de platino, incluyendo carboplatino, cisplatino, oxaliplatino; inhibidores del proteosoma, incluyendo bortezomib; venenos del uso mitótico, tales como los taxanos (incluido docetaxel, paclitaxel, nab-paclitaxel (Abraxane®)) y las vincas (incluida la vinblastina, vincristina, vinorelbina); inhibidores de la topoisomerasa, tales como las antraciclinas (incluida la daunorrubicina, daunomicina, doxorrubicina, epirrubicina), los camptotecinas, (incluyendo irinotecan, topotecan), las podofilotoxinas (que incluyen etopósido, tenipósido y mitoxantrona); inhibidores de tirosina cinasa, (incluyendo erlotinib (Tarceva), gefitinib, imatinib, lapatinib, pazopanib, sorafenib, sunitinib); e ifosfamida.

En diversas realizaciones, se utilizan uno o más de otros agentes quimioterapéuticos.

En determinadas realizaciones ilustrativas, el régimen de tratamiento quimioterápico mielosupresor incluye la administración de un taxano, tal como docetaxel o un taxol, tal como paclitaxel (por ejemplo, nab-paclitaxel, Abraxane®) en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales, incluyendo, pero sin limitación, cualquiera de los agentes descritos anteriormente. En algunas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente incluye la administración de un taxano, tal como docetaxel o un taxol, tal como paclitaxel (por ejemplo, nab-paclitaxel, Abraxane®) en combinación con uno o más de un folato, antagonista de purina o pirimidina, un agente alquilante de ADN, un complejo de platino, una vinca, una antraciclina, una camptotecina, una podofilotoxina y/o un inhibidor de la tirosina quinasa. En realizaciones específicas, el régimen de tratamiento del paciente incluye la administración de un taxano, tal como docetaxel, paclitaxel (por ejemplo, nab-paclitaxel, Abraxane®) en combinación con uno o más agentes seleccionados de: gemcitabina, vinorelbina, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, temozolomida y mifepristona. En realizaciones ilustrativas, se administran dos o más agentes quimioterapéuticos, los dos o más agentes quimioterapéuticos seleccionados de: cisplatino y etopósido; carboplatino y etopósido; cisplatino e irinotecán; carboplatino e irinotecán; ciclofosfamida, doxorrubicina (Adriamicina) y vincristina; ciclofosfamida/doxorrubicina/vincristina (conocida como el régimen CAV); gemcitabina con vinorelbina o paclitaxel o nab-paclitaxel (Abraxane®); gemcitabina o capecitabina con oxaliplatino; cisplatino o carboplatino más otro agente quimioterapéutico; 5-fluorouracilo con uno o más de leuvocorin, oxaliplatino, irinotecán.

El régimen de tratamiento del paciente mielosupresor, en diversas realizaciones, comprende la administración de agentes quimioterapéuticos de acuerdo con regímenes específicos nombrados. En realizaciones ilustrativas, el régimen de tratamiento de quimioterapia del paciente incluye uno o más de los siguientes regímenes específicos: 5FU Mayo, 5FU Roswell Park, LVFU2, FOLFOX4, FOLFOX6, bFOL, FUFOX, IFL, XELOX, XELIRI y CAPIRI, que se describen con más detalle en Chau et al., 2009, Br. J. Cancer 100:1704-19; y Field et al., 2007, World J. Gastroenterol.

13:3806-15. Otro régimen con nombre específico es CHOP, que combina ciclofosfamida, hidroxidaunorrubicina (o doxorrubicina o adriamicina), vincristina (u oncovina) y prednisona o prednisolona, generalmente se usa para tratar a pacientes con linfoma no de Hodgkin. En algunas realizaciones, por ejemplo, cuando el paciente en tratamiento tiene antecedentes de enfermedad cardiovascular, la doxorrubicina se omite del régimen, que luego se conoce como COP o CVP. Opcionalmente, el régimen CHOP se puede combinar además con rituximab (Rituxan) y luego se denomina R-CHOP o CHOP-R. También son posibles otras combinaciones. Otro régimen con nombre específico es ICE, que combina los agentes quimioterapéuticos ifosfamida, carboplatino y etopósido. Véase Habermann, 2012, Hematology 17 Supl 1:S93-7.

También se ha demostrado que los regímenes de tratamiento antineoplásico de pacientes que incluyen radioterapia tienen efectos secundarios mielosupresores, a veces se denomina trombocitopenia inducida por radiación y neutropenia inducida por radiación. En varias realizaciones de radiación, el régimen de tratamiento del paciente incluye radioterapia seleccionada de radioterapia con rayos X, rayos gamma, neutrones, protones y otras fuentes, radioterapia de haz externo y radioterapia interna, tal como la braquiterapia.

Los regímenes de tratamiento de pacientes en los que se administran uno o más anticuerpos que tienen un efecto citotóxico, denominados en el presente documento terapia de anticuerpos, también pueden tener efectos secundarios mielosupresores que se tratan de manera útil mediante la administración complementaria de un heparinoide que interactúa con PF4 de acuerdo con los métodos descritos en el presente documento. Por tanto, en determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento que tiene efectos secundarios mielosupresores comprende la terapia con anticuerpos. En algunas realizaciones, la terapia con anticuerpos incluye uno o más anticuerpos conjugados con una toxina, en donde el anticuerpo se une y/o se internaliza por una célula tumoral diana y la toxina destruye la célula. En realizaciones ilustrativas, el régimen de tratamiento del paciente incluye la administración de uno o más anticuerpos que tienen un efecto secundario mielosupresor, tal como abciximab (ReoPro), rituximab (Rituxan), trastuzumab (Herceptin) conjugado con mertansina (T-DM1) e infliximab (Remicade). En algunas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente incluye la administración de uno o más de los siguientes: trastuzumab (Herceptin), cetuximab, bevacizumab (Avastin), tigatuzumab.

En diversas realizaciones, los regímenes de tratamiento de pacientes que tienen efectos secundarios mielosupresores y que se tratan de manera útil mediante la administración complementaria de un heparinoide que interactúa con PF4 de acuerdo con los métodos descritos en el presente documento, incluyen combinaciones de quimioterapia, radioterapia y/o terapia con anticuerpos. En algunas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente comprende quimioterapia, por ejemplo, con uno o más de los agentes descritos en el presente documento y radioterapia; o quimioterapia, por ejemplo, con uno o más de los agentes descritos en el presente documento y terapia con anticuerpos, por ejemplo, con uno o más de los anticuerpos descritos en el presente documento; radioterapia y terapia con anticuerpos, por ejemplo, con uno o más de los anticuerpos descritos en el presente documento; o cualesquiera dos, tres, cuatro, cinco o más agentes o terapias descritas en el presente documento. En realizaciones ilustrativas, tales como cuando el paciente tiene linfoma no de Hodgkin, el régimen de tratamiento del paciente comprende terapia de anticuerpos con rituxan y quimioterapia con régimen CHOP (también conocido como R-CHOP), COP, CVP o ICE (también conocido como R-ICE). Véase Habermann, 2012, Hematology 17 Supl 1:S93-97.

Los regímenes de tratamiento de pacientes que involucran trasplantes, tales como el trasplante de médula ósea o el trasplante de células madre, también pueden tener efectos secundarios mielosupresores. Por tanto, en algunas realizaciones, el régimen de tratamiento del paciente comprende un trasplante de médula ósea o de células madre autólogo o alogénico.

En una variedad de realizaciones, los regímenes de tratamiento del paciente incluyen regímenes en los que se administran uno o más agentes con efectos secundarios trombocitopénicos. En realizaciones ilustrativas, los uno o más agentes con un efecto secundario trombocitopénico se seleccionan de: ácido valproico, inhibidores de la bomba de protones, interferón (por ejemplo, interferón alfa), isotretinoína, panobinostat, diuréticos tiazídicos, montelukast sódico (Singulair), quinidina, quinina, oro, sulfonamidas, cefalotina, fenilbutazona, difenilhidantoína, tranquilizantes de digitoxina y fenotiazina, y heparina.

En diversas realizaciones, los regímenes de tratamiento del paciente incluyen regímenes en los que se administran uno o más agentes con efectos secundarios neutropénicos. En realizaciones ilustrativas, los uno o más agentes con un efecto secundario neutropénico se seleccionan de: ciclofosfamida, psicotrópicos y anticonvulsivos tales como clozapina y olanzapina, tionamidas, ticlopidina, carbimazol, dapsona, dipirona, metimazol, penicilina G, procainamida, propiltiouracilo, trimetoprim, cloranfenicol, penicilinas, cefalosporinas, aminoglucósidos, tetraciclinas, nitroimidazoles, nitrofurantoína, flucitosina, rifampina, isoniazid, etambutol, dapsona, antibióticos de sulfonamida, clomiprimina, tiacetazona, dipirona, sulfasalazina, mesalazina, ciprofloxacino, cloroquina, mebendazol, terbendafina, pirimetamina, levamisol, ristocetina, griseofulvina, fenotiazinas, benzodiazepinas, amoxapina, meprobamato, barbitúricos, risperidona, imipramina, desipramina, tiotixeno, haloperidol, ácido valproico, hidantoínas, succinimidas, trimetadiona, carbamazepina, procainamida, quinidina, propafenona, captoprilo, propranolol, hidralazina, metildopa, ibuprofeno, indometacina, sulindaco, tolmetina, aspirina, aminopirina, fenilbutazona, diflunisal, benoxaprofeno, alopurinol, colchicina, propiltiouracilo, tiouracilo, metimazol, carbimazol, tiocianato, perclorato de potasio, cimetidina, ranatadina, tripelenamina, metafenileno, tenalidina, mianserina, bromofenaramina, quinina, hidroxicloroquina, quinacrina, diazóxido, dihidropiridinas, vesnarinona, aprindina, imipenem/cilastatina, zidovudina, fludarabina, aciclovir, turbinafina, aminoglutetimida, famotidina, bezafibrato, flutamida, tamoxafen, penicilamina, ácido retinoico, metoclopramida, fenindona, dinitrofenol, ácido etacrínico, rauwolfia, etanol, clorpropamida, tolbutamida, las tiazidas, espironolactona, metazolamida, acetazolamida, levodopa y combinaciones de los mismos. Véase, Oyesanme et al., 1999, Psychosomatics, 40:5 en p.414-421.

En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento mielosupresor del paciente comprende uno o más regímenes adecuados para el tratamiento de sujetos diagnosticados con leucemia mielógena o mieloide aguda ("AML"). Los regímenes de tratamiento para la AML generalmente constan de dos fases, una fase inicial destinada a inducir la remisión, denominada fase de inducción, y una segunda fase destinada a prevenir la recurrencia o recaída, conocida como la fase de consolidación. Los tratamientos administrados durante la fase de inducción se denominan regímenes de tratamiento de inducción y los tratamientos administrados durante la fase de consolidación se denominan regímenes de tratamiento de consolidación. Los regímenes de tratamiento de inducción convencionales incluyen quimioterapia, denominada quimioterapia de inducción, y se conocen en la técnica. En una realización ilustrativa de la quimioterapia de inducción, el régimen de quimioterapia consiste en el tratamiento con citarabina (araC) administrada por vía intravenosa durante 7 días consecutivos y un agente de antraciclina (por ejemplo, daunorrubicina o idarrubicina) administrados en 3 días consecutivos. Véase Tallman, 2005, Hematology 2005:143-150; Robak et al., 2009, Clin. Therap. 31:2349-70. Los regímenes de tratamiento de consolidación pueden comprender quimioterapia, inmunoterapia, trasplante de médula ósea o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, la quimioterapia de consolidación consiste en uno o más ciclos del mismo régimen de quimioterapia utilizado durante la fase de inducción. En otras realizaciones, la quimioterapia de consolidación consta de uno o más ciclos de quimioterapia de dosis alta. Las realizaciones ilustrativas de la quimioterapia de consolidación incluyen dos, tres, cuatro, cinco o más ciclos de tratamiento con citarabina y un régimen de antraciclina tal como se describió anteriormente. En algunas realizaciones, el régimen quimioterapéutico de consolidación comprende una dosis más alta del agente o agentes quimioterapéuticos administrados durante la fase de inducción. La fase de consolidación también puede comprender inmunoterapia con uno o más agentes tales como, pero sin limitación, dihidrocloruro de histamina e interleucina-2. En determinadas realizaciones, el régimen de tratamiento de consolidación comprende un alotrasplante de células madre. En diversas realizaciones, se administra un heparinoide que interactúa con PF4 como complemento a un régimen de tratamiento de inducción y/o consolidación. En una realización ilustrativa, ODSH se administra de forma complementaria a un régimen de tratamiento de inducción y/o consolidación.

5.1.2. Sujetos de tratamiento

El sujeto que se va a tratar (usado indistintamente en el presente documento con "paciente") puede ser cualquier animal, por ejemplo un mamífero, preferentemente un ser humano. En determinadas realizaciones, el sujeto es un adulto. En determinadas realizaciones, el sujeto es un niño, por ejemplo, un niño diagnosticado con un cáncer pediátrico.

En algunas realizaciones, los sujetos adecuados son pacientes diagnosticados de cáncer y que necesitan un régimen de tratamiento antineoplásico o citotóxico. El cáncer puede ser un cáncer de tumor sólido en cualquier órgano o tejido, incluido el cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de útero, cáncer de mama, incluido el cáncer de mama metastásico y el cáncer de mama resistente a la quimioterapia (por ejemplo, cáncer de mama que recurre como una recaída dentro de los 6 meses de quimioterapia adyuvante con o sin antraciclina), cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer de pulmón (que incluye cáncer de pulmón no microcítico), cáncer colorrectal, cáncer de estómago, cáncer de esófago, neuroblastoma, cáncer de hígado, melanoma, cáncer de próstata, osteosarcoma, y puede ser un cáncer hematológico, tal como linfoma (incluidos linfomas recurrentes, de Hodgkin y no de Hodgkin) y leucemia (incluida la leucemia mielógena aguda o AML y la leucemia linfoblástica aguda pediátrica).

Los métodos descritos en el presente documento son particularmente útiles para cánceres en los que los niveles de PF4 están elevados en las plaquetas o en la sangre. Por tanto, en algunas realizaciones, al sujeto se le ha diagnosticado un cáncer en el que los niveles de PF4 están elevados en las plaquetas o en la sangre. En determinadas realizaciones, el cáncer es cáncer de páncreas, cáncer colorrectal, osteosarcoma o leucemia (incluyendo leucemia mielógena aguda y leucemia linfoblástica aguda pediátrica).

Los sujetos adecuados para el tratamiento también incluyen sujetos que padecen una enfermedad o afección para la cual el régimen de tratamiento recomendado tiene un efecto secundario mielosupresor, que incluye cualquiera de los regímenes de tratamiento descritos anteriormente en la Sección 5.1.1.

En diversas realizaciones, el sujeto adecuado es un sujeto que tiene un nivel elevado de PF4 en sangre o en plaquetas, incluidos diversos cánceres descritos anteriormente y afecciones no cancerosas con niveles elevados de PF4 en sangre o plaquetas, un sujeto con una enfermedad autoinmune que se puede tratar con un régimen de tratamiento que incluye uno o más agentes que tienen un efecto secundario mielosupresor, tales como la artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, enfermedad inflamatoria intestinal, o un sujeto que tiene niveles reducidos de trombopoyetina, tales como pacientes con cáncer de hígado, hepatitis vírica, cirrosis o función hepática alterada.

En diversas realizaciones, el sujeto adecuado es un sujeto que no tiene trombocitopenia inmunomediada, trombocitopenia debido a una enfermedad autoinmune, trombocitopenia causada por una mayor destrucción de plaquetas o trombocitopenia inducida por heparina.

En realizaciones en las que la heparina que interactúa con PF4 está parcialmente desulfatada, tal como heparina 2-O, 3-O desulfatada, existe un riesgo reducido de trombocitopenia inducida por heparina, incluso cuando se administra en combinación con heparina (heparina no fraccionada o heparina de bajo peso molecular) como agente anticoagulante. Véase la Patente de EE.UU. N.° 7.468.358. En consecuencia, en algunas realizaciones, el paciente puede ser un sujeto que tiene anticuerpos contra el complejo heparina-PF4 y tiene riesgo de trombocitopenia inducida por heparina.

5.1.3. Otros agentes coadyuvantes y terapia

El heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar como un único agente adyuvante a un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor o en combinación con uno o más agentes o terapias adicionales.

Por tanto, en diversas realizaciones, los métodos comprenden además la administración complementaria de uno o más agentes o terapias adicionales que también son capaces de atenuar la trombocitopenia y/o promover la trombopoyesis, atenuar la neutropenia y/o promover la granulopoyesis. En determinadas realizaciones, los métodos comprenden además la administración complementaria de un heparinoide anticoagulante. En algunas realizaciones, se administran dos o más de tales agentes y/o terapias. Los dos o más de tales agentes pueden tener la misma actividad (por ejemplo, antitrombocitopénico), actividad diferente (por ejemplo, un primer agente es protrombopoyético y un segundo agente es antineutropénico), o actividad superpuesta (por ejemplo, un primer agente es progranulopoyético y anticoagulante y un segundo agente es anticoagulante).

Las terapias o agentes adicionales adecuados para atenuar la trombocitopenia y/o promover la trombopoyesis incluyen agentes o terapias que actúan para aumentar el recuento de plaquetas. Por tanto, en algunas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adicionales se seleccionan de transfusión de plaquetas, esplenectomía, corticosteroides (por ejemplo, prednisona y dexametasona), inhibidores de la eliminación plaquetaria (por ejemplo, danazol), trombopoyetina, miméticos de trombopoyetina (por ejemplo, Nplate®, eltrombopag (Promacta®)), agonistas del receptor de trombopoyetina (por ejemplo, romiplostim y eltrombopag), interleucinas, por ejemplo, interleucinas humanas recombinantes (incluida la interleucina-1, interleuquina-3, interleuquina-6, interleucina-11 (por ejemplo, Numega®)), carbonato de litio y folato.

Las terapias o agentes adicionales adecuados para atenuar la neutropenia y/o promover la granulopoyesis incluyen agentes que actúan para aumentar el recuento de neutrófilos. Por tanto, en algunas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adicionales se seleccionan de factor estimulante de colonias de granulocitos humanos recombinantes ("G-CSF") (filgrastim (Neupogen), pegfilgrastim (Neulasta)) y factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos humanos recombinantes ("GM-CSF") (sargramostim (Leukine)).

En algunas presentaciones clínicas, el paciente se puede beneficiar de la terapia anticoagulante. Por tanto, en algunas realizaciones, los métodos comprenden administrar heparinoide que interactúa con PF4 en combinación con uno o más agentes anticoagulantes, tal como uno o más heparinoides anticoagulantes, preferentemente en tales cantidades, o en tales proporciones, para proporcionar anticoagulación sin riesgo de inducir o desencadenar trombocitopenia inducida por heparina. En realizaciones ilustrativas, los agentes anticoagulantes se seleccionan de heparinas, tales como heparina no fraccionada y heparinas de bajo peso molecular, tales como la dalteparina, enoxaparina, fondaparinux, reviparina y tinzaperina. Generalmente, el heparinoide que interactúa con PF4 y el anticoagulante se administran en proporciones en las que la cantidad molar o en peso del heparinoide que interactúa con PF4 excede la cantidad molar o en peso de anticoagulante. En algunas realizaciones, las proporciones molares de heparinoide que interactúa con PF4 a heparina anticoagulante varían de aproximadamente 1:2 a aproximadamente 10:1. También se contemplan proporciones en peso equivalentes. En algunas realizaciones, las proporciones en peso de heparinoide que interactúa con PF4 y heparina anticoagulante varían entre 1:1 y 4:1.

En diversas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adyuvantes adicionales se administran al mismo tiempo, de manera secuencial o por separado con heparinoide que interactúa con PF4. En algunas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adicionales se administran de forma simultánea y secuencial con el heparinoide que interactúa con PF4.

5.2. Método de promover la trombopoyesis

Ahora se ha descubierto que los heparinoides que interactúan con PF4 pueden aumentar el recuento de plaquetas en pacientes humanos. Tal como se describe en el Ejemplo 3 a continuación, los pacientes tratados con ODSH tuvieron un aumento en el recuento de plaquetas al final de un primer ciclo de 4 semanas de un régimen de quimioterapia para el cáncer de páncreas que tiene un efecto secundario mielosupresor sustancial. Este efecto continuó a través de ciclos sucesivos, con pacientes que muestran recuentos de plaquetas por encima de los niveles observados en la detección (es decir, antes del tratamiento con ODSH), después de dos, tres o incluso cuatro ciclos de administración complementaria de ODSH y el régimen de tratamiento de quimioterapia. Por tanto, en otro aspecto, se proporcionan métodos para promover la trombopoyesis en un sujeto. Los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 al sujeto. Los heparinoides que interactúan con PF4 para su uso en los métodos se describen a continuación en la Sección 5.6. En una realización ilustrativa, el heparinoide que interactúa con PF4 es ODSH. Los modos de administración y los regímenes de dosificación adecuados se describen más adelante, en la Sección 5.8. Las dosis eficaces y las cantidades terapéuticamente eficaces, de heparinoide que interactúa con PF4 se describen a continuación, en la Sección 5.9.

El método se puede llevar a cabo en un sujeto trombocitopénico o en un sujeto no trombocitopénico.

En realizaciones en las que el sujeto es trombocitopénico, la trombocitopenia puede ser de etiología variable. Por tanto, en diversas realizaciones, la trombocitopenia es (1) trombocitopenia causada por un régimen de tratamiento con un efecto secundario mielosupresor, tal como se describe anteriormente en la Sección 5.1.1, y los sujetos pueden incluir los descritos anteriormente en la Sección 5.1.2, (2) trombocitopenia causada por una producción alterada de plaquetas por la médula ósea, (3) trombocitopenia causada por el secuestro de plaquetas en el bazo (esplenomegalia), o (4) trombocitopenia causada por una mayor destrucción de plaquetas en la circulación periférica, opcionalmente debido a una enfermedad autoinmune.

En diversas realizaciones, el recuento de plaquetas del sujeto se reduce como resultado de y, opcionalmente, trombocitopenia causada por una enfermedad o afección. Por consiguiente, en determinadas realizaciones, el sujeto padece una infección. En algunas realizaciones, la infección da como resultado síndrome séptico, con o sin coagulación intravascular diseminada. En algunas realizaciones, los sujetos tienen niveles plasmáticos elevados de PF4, por ejemplo, más de aproximadamente 5 ng/ml, más de aproximadamente 6 ng/ml, más de aproximadamente 7 ng/ml, más de aproximadamente 8 ng/ml, más de aproximadamente 9 ng/ml, más de aproximadamente 10 ng/ml, más de aproximadamente 11 ng/ml, más de aproximadamente 12 ng/ml, más de aproximadamente 15 ng/ml, más de aproximadamente 17 ng/ml, más de aproximadamente 20 ng/ml, más de aproximadamente 22 ng/ml, más de aproximadamente 25 ng/ml, más de aproximadamente 27 ng/ml, más de aproximadamente 30 ng/ml, más de aproximadamente 40 ng/ml, hasta aproximadamente 45 ng/ml, hasta aproximadamente 50 ng/ml o más. Lorenz et al., 1988, Infection 16(5):273-6 y ensayo de PF4 en ese documento. En algunas realizaciones, los sujetos tienen trombocitopenia que no es trombocitopenia inducida por heparina.

En realizaciones ilustrativas, la trombocitopenia se selecciona de trombocitopenia inducida por radiación; trombocitopenia inducida por fármacos; trombocitopenia por consumo; trombocitopenia inmunomediada, que incluye trombocitopenia aloinmune y trombocitopenia autoinmune, que incluye púrpura trombocitopénica inmune (PTI); trombocitopenia cíclica infecciosa; trombocitopenia mieloptísica causada por invasión neoplásica de la médula ósea; trombocitopenia inducida por la superficie; trombocitopenia inducida por vacunas; trombocitopenia inducida por trasplante de hígado, médula ósea o células madre; y trombocitopenia asociada a enfermedades autoinmunes (por ejemplo, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico) o trastorno linfoproliferativo (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica). En algunas realizaciones, la trombocitopenia no es o es distinta de: trombocitopenia inmunomediada, trombocitopenia debido a una enfermedad autoinmune o trombocitopenia causada por una mayor destrucción de plaquetas. En algunas realizaciones, la trombocitopenia es distinta de la trombocitopenia inducida por heparina. En diversas realizaciones, los métodos para promover la trombopoyesis son útiles para tratar a un sujeto que tiene trombocitopenia inducida por radiación causada por radioterapia o por exposición no terapéutica a radiación ionizante, por ejemplo, un sujeto que sufre envenenamiento por radiación o enfermedad por radiación como resultado de un accidente o ataque radiológico o nuclear.

En diversas realizaciones, los sujetos adecuados incluyen pacientes que se beneficiarían de un aumento del recuento de plaquetas, como antes de la cirugía, transfusión, terapia con un régimen de tratamiento que tiene un efecto secundario mielosupresor, u otro procedimiento o tratamiento que podría disminuir el recuento de plaquetas o aumentar la necesidad de coagulación. En realizaciones ilustrativas, el sujeto es diagnosticado con cáncer y/o necesita cirugía, transfusión o terapia con un régimen de tratamiento que tenga un efecto secundario mielosupresor. En algunas realizaciones, el sujeto está en riesgo de trombocitopenia inducida por radiación debido a la radioterapia o exposición no terapéutica a radiación ionizante, por ejemplo, como resultado de un accidente o ataque radiológico o nuclear. 5.2.1. Agentes y terapia adicionales

En los métodos para promover la trombopoyesis, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar como agente único o en combinación con uno o más agentes o terapias adicionales. En algunas realizaciones, los uno o más agentes o terapia adicionales son capaces de promover la trombopoyesis. En diversas realizaciones, los uno o más agentes o terapia adicionales es anticoagulante.

Las terapias o agentes adicionales adecuados para promover la trombopoyesis incluyen agentes o terapias que actúan para aumentar el recuento de plaquetas. En realizaciones ilustrativas, los uno o más agentes o terapia adicionales se seleccionan de transfusión de plaquetas, esplenectomía, corticosteroides (por ejemplo, prednisona y dexametasona), inhibidores de la eliminación plaquetaria (por ejemplo, danazol), trombopoyetina, miméticos de trombopoyetina, agonistas del receptor de trombopoyetina (por ejemplo, romiplostim y eltrombopag), interleucinas, por ejemplo, interleucinas humanas recombinantes (incluida la interleucina-1, interleuquina-3, interleuquina-6, interleucina-11), carbonato de litio y folato. Otros agentes y terapias adicionales se describen en la Sección 5.1.3.

En algunas presentaciones clínicas, el paciente puede necesitar terapia anticoagulante, a pesar de requerir trombopoyesis. Por tanto, en algunas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra junto con uno o más agentes anticoagulantes, preferentemente sin riesgo de inducir o desencadenar trombocitopenia inducida por heparina. Los agentes anticoagulantes incluyen heparinas, tales como heparina no fraccionada y heparinas de bajo peso molecular, tales como la dalteparina, enoxaparina, fondaparinux, reviparina, tinzaperina. Generalmente, el heparinoide que interactúa con PF4 y el anticoagulante se pueden administrar en proporciones en las que la cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 excede la cantidad de anticoagulante. Las proporciones molares de heparinoide que interactúa con PF4 a heparina anticoagulante varían de aproximadamente 1:2 a aproximadamente 10:1. También se contemplan proporciones en peso equivalentes.

5.3. Método para promover la producción de neutrófilos

Ahora se ha descubierto que los heparinoides que interactúan con PF4 pueden aumentar el recuento de neutrófilos en pacientes humanos. Tal como se describe con más detalle en el Ejemplo 3 a continuación, los pacientes tratados con ODSH tenían un aumento en el recuento de neutrófilos al final de un primer ciclo de quimioterapia de 4 semanas, a pesar de recibir tratamiento concomitante con un régimen quimioterapéutico que tiene efectos secundarios mielosupresores, y mostraron consistentemente un aumento en el recuento de neutrófilos al final de los ciclos sucesivos de 4 semanas en relación con el recuento de neutrófilos a mitad del ciclo. En algunos casos, los pacientes mostraron recuentos de neutrófilos por encima de los niveles observados en la selección (es decir, antes del tratamiento con ODSH), después de dos, tres o incluso cuatro ciclos de administración complementaria de ODSH y el régimen de tratamiento de quimioterapia. Por tanto, en otro aspecto, se presentan métodos para promover la producción de neutrófilos en un sujeto. Los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4, tal como se describe más adelante en la Sección 5.6 a continuación, al sujeto. En una realización ilustrativa, el heparinoide que interactúa con PF4 es ODSH. Los modos de administración y los regímenes de dosificación adecuados se describen más adelante, en la Sección 5.8. Las dosis eficaces y las cantidades terapéuticamente eficaces, de heparinoide que interactúa con PF4 se describen a continuación, en la Sección 5.9.

El método se puede llevar a cabo en un sujeto neutropénico o en un sujeto no neutropénico. El sujeto puede ser un adulto o un niño. En diversas realizaciones, los sujetos incluyen los descritos anteriormente en la Sección 5.1.2.

En realizaciones en las que el sujeto que se va a tratar es neutropénico, la neutropenia puede ser crónica o aguda. En diversas realizaciones, la neutropenia es congénita (por ejemplo, causada por el síndrome de Kostmann), cíclica o idiopática. En algunas realizaciones, la neutropenia es secundaria a otra afección, tal como cáncer, infección vírica (por ejemplo, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA)). En algunas realizaciones, la neutropenia es autoinmune. En algunas realizaciones, la neutropenia es causada por la infiltración y destrucción de la médula ósea debido a la leucemia, mieloma, linfoma o un tumor sólido metastásico tal como, por ejemplo, cáncer de mama o de próstata. En algunas realizaciones, la neutropenia es neutropenia inducida por radiación, que es resultado de la exposición intencional o no terapéutica a la radiación ionizante, por ejemplo, como resultado de un accidente o ataque radiológico o nuclear.

La neutropenia puede ser un efecto secundario de agentes o procedimientos. Por tanto, en algunas realizaciones, la neutropenia es causada por un régimen de tratamiento que tiene un efecto secundario mielosupresor, por ejemplo, quimioterapia, radioterapia para el cáncer, trasplante de médula ósea asociado con la terapia del cáncer y tal como se describe anteriormente en la Sección 5.1.1.

En algunas realizaciones, la neutropenia es inmunomediada, incluyendo autoinmune o aloinmune (por ejemplo, causada por un antígeno no propio que estimula la formación de anticuerpos y causa una reacción de hipersensibilidad).

En diversas realizaciones, los métodos para promover la producción de neutrófilos son útiles para tratar a un sujeto diagnosticado con neutropenia inducida por radiación causada por radioterapia o por exposición no terapéutica a radiación ionizante, por ejemplo, como resultado de un accidente o ataque radiológico o nuclear.

Los métodos para promover la producción de neutrófilos también son útiles para tratar sujetos no neutropénicos. Los sujetos adecuados incluyen los descritos anteriormente en la Sección 5.1.2. Tales métodos son particularmente útiles cuando el sujeto se beneficiaría de un mayor recuento de neutrófilos. En realizaciones ilustrativas, el sujeto ha sido diagnosticado con cáncer y/o necesita cirugía o terapia con un régimen de tratamiento que tiene un efecto secundario mielosupresor. En algunas realizaciones, el sujeto está en riesgo de neutropenia inducida por radiación debido a la radioterapia o exposición no terapéutica a radiación ionizante, por ejemplo, como resultado de un accidente o ataque radiológico o nuclear. En algunas realizaciones, el sujeto tiene un mayor riesgo de contraer una infección.

5.3.1. Agentes y terapia adicionales

En los métodos para promover la producción de neutrófilos, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar como agente único o en combinación con uno o más agentes o terapias adicionales. En algunas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adicionales son capaces de promover la producción de neutrófilos. En diversas realizaciones, los uno o más agentes o terapias adicionales son anticoagulantes.

Las terapias o agentes adecuados para promover la producción de neutrófilos incluyen agentes que actúan para aumentar el recuento absoluto de neutrófilos. En realizaciones ilustrativas, los uno o más agentes adicionales se seleccionan de factor estimulante de colonias de granulocitos humanos recombinantes ("G-CSF") (filgrastim (Neupogen), pegfilgrastim (Neulasta)) y factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos humanos recombinantes ("GM-CSF") (sargramostim (Leukine)).

En algunas situaciones clínicas, el paciente puede necesitar terapia anticoagulante. Por tanto, en algunas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra junto con uno o más agentes anticoagulantes, preferentemente sin inducir o desencadenar trombocitopenia inducida por heparina. Los agentes anticoagulantes para su uso en tales realizaciones incluyen, por ejemplo, heparinas, tales como heparina no fraccionada y heparina de bajo peso molecular, tales como la dalteparina, enoxaparina, fondaparinux, reviparina, tinzaperina. En diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 y el anticoagulante se administra en proporciones en las que la cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 excede la cantidad de anticoagulante. Las proporciones molares de heparinoide que interactúa con PF4 a heparina anticoagulante varían de aproximadamente 1:2 a aproximadamente 10:1. También se contemplan proporciones en peso equivalentes.

Otros agentes y terapias adicionales adecuadas se describen en la Sección 5.1.3 anterior.

5.4. Método para aumentar la eficacia de los regímenes de tratamiento con efectos secundarios mielosupresores

Los efectos secundarios mielosupresores tales como la trombocitopenia y la neutropenia que son causados por los regímenes de tratamiento del paciente pueden limitar la dosis, limitando la cantidad de dosis, la frecuencia de administración, o ambas, disminuyendo así la eficacia del régimen de tratamiento del paciente. La atenuación de dichos efectos secundarios mielosupresores permitiría mantener o aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del tratamiento, lo que a su vez debería llevar a una mayor eficacia del régimen de tratamiento del paciente. Tal como se muestra en el Ejemplo 3 más adelante, ODSH, un heparinoide que interactúa con PF4, atenuó los efectos secundarios mielosupresores causados por un régimen de tratamiento antineoplásico para el cáncer de páncreas; en particular, la administración de ODSH junto con el tratamiento de quimioterapia aumentó los recuentos de plaquetas y neutrófilos por encima de los anteriores al tratamiento. Por tanto, la administración de un heparinoide que interactúa con PF4 junto con dicho régimen de tratamiento debe permitir mantener o aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del tratamiento, aumentando así la eficacia del régimen de tratamiento del paciente.

En consecuencia, en otro aspecto, se proporcionan métodos para aumentar la eficacia de un régimen de tratamiento con efecto mielosupresor. Los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interacciona con PF4 al paciente sujeto como complemento del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor, tal como el régimen ICE, sin reducir la dosis y/o frecuencia de dosificación del tratamiento mielosupresor del paciente después de una administración de tratamiento de referencia o ciclo de tratamiento. En algunas realizaciones, la administración o ciclo de tratamiento de referencia es la primera administración o ciclo de tratamiento. En diversas realizaciones, la administración del tratamiento de referencia o el ciclo de tratamiento del régimen de tratamiento del paciente es posterior a la primera administración o ciclo de tratamiento.

En algunas realizaciones, los métodos comprenden además determinar un recuento inicial de plaquetas y/o neutrófilos en una muestra de sangre de un paciente.

En diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra en una cantidad que sea eficaz para elevar el recuento de plaquetas y/o neutrófilos del paciente por encima de un nivel umbral determinado previamente. En determinadas realizaciones, el nivel umbral determinado previamente es el nivel por debajo del cual está contraindicada la administración del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor. Los modos de administración y los regímenes de dosificación adecuados se describen más adelante, en la Sección 5.8. Las dosis eficaces y las cantidades terapéuticamente eficaces, de heparinoide que interactúa con PF4 se describen a continuación, en la Sección 5.9.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden determinar un recuento de plaquetas inicial en una muestra de un paciente y luego administrar una cantidad de un heparinoide que interactúa con PF4 eficaz para elevar el recuento de plaquetas del paciente por encima de un nivel umbral por debajo del cual la terapia con un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor está contraindicado. En diversas realizaciones, se administra una cantidad suficiente de un heparinoide que interactúa con PF4 para mantener los niveles de plaquetas por encima de los niveles que indican trombocitopenia de grado 4 o grado 3. En diversas realizaciones, se administra una cantidad suficiente de un heparinoide que interactúa con PF4 para mantener los niveles de plaquetas por encima de los niveles que indican trombocitopenia de grado 2 o grado 1. Opcionalmente, los métodos pueden comprender además administrar de forma complementaria al heparinoide que interactúa con PF4 uno o más agentes o terapias que son antitrombocitopénicas, antineutropénicas, anticoagulante, o tiene alguna otra actividad terapéutica. En algunas realizaciones, los métodos comprenden una etapa adicional de administrar un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor al paciente cuyo recuento de plaquetas está por encima de un nivel que contraindica tal terapia. Opcionalmente, se puede aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del régimen de tratamiento del paciente.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden determinar un recuento de neutrófilos inicial en una muestra de sangre de un paciente y administrar una cantidad de un heparinoide que interactúa con PF4 eficaz para elevar el recuento de neutrófilos del paciente por encima de un nivel umbral por debajo del cual la terapia con régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor es contraindicativo. En diversas realizaciones, se administra una cantidad suficiente de un heparinoide que interactúa con PF4 para mantener los niveles de neutrófilos por encima de los niveles que indican neutropenia de grado 4 o de grado 3, es decir, por encima de aproximadamente 1000 neutrófilos/pl de sangre y por encima de aproximadamente 500 neutrófilos/pl de sangre. En diversas realizaciones, se administra una cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 suficiente para mantener los niveles de neutrófilos por encima de los niveles que indican neutropenia de grado 2 o de grado 1. Opcionalmente, los métodos pueden comprender además administrar de forma complementaria al heparinoide que interactúa con PF4 uno o más agentes o terapias que son antineutropénicas, antitrombocitopénicas, anticoagulante, o tiene alguna otra actividad terapéutica. En algunas realizaciones, los métodos comprenden una etapa adicional de administrar un régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor al paciente cuyo recuento de neutrófilos está por encima de un nivel que contraindica tal terapia. Opcionalmente, se puede aumentar la cantidad de dosis y/o la frecuencia del régimen de tratamiento del paciente.

5.5. Método para mejorar la eficacia de los regímenes de tratamiento antineoplásico de pacientes

Se ha descubierto que la administración complementaria de ODSH, un heparinoide que interactúa con PF4, mejora la capacidad de los regímenes de tratamiento antineoplásico para inhibir el crecimiento tumoral. Tal como se muestra en los Ejemplos 1 y 2 a continuación, la administración complementaria de ODSH da como resultado una mayor inhibición del crecimiento tumoral en modelos de xenoinjerto murino de cáncer de páncreas y ovario, que la administración de ODSH o un régimen de tratamiento quimioterápico solo. Por tanto, en otro aspecto, en el presente documento se proporcionan métodos para mejorar la eficacia de un régimen de tratamiento antineoplásico. Los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 a un paciente sujeto como complemento de un régimen de tratamiento antineoplásico.

Los regímenes de tratamiento antineoplásico son regímenes de tratamiento de pacientes útiles para tratar el cáncer. Los regímenes de tratamiento antineoplásico adecuados incluyen regímenes de tratamiento quimioterapéutico (incluida la quimioterapia de inducción y la quimioterapia de consolidación), regímenes de tratamiento con anticuerpos y combinaciones de los mismos, tal como se describe en detalle en la Sección 5.1.1 anterior.

El sujeto a tratar puede ser cualquier animal, por ejemplo un mamífero, preferentemente un ser humano. En determinadas realizaciones, el sujeto es un adulto. En determinadas realizaciones, el sujeto es un niño. Los sujetos a tratar son pacientes que necesitan tratamiento antineoplásico, en particular pacientes que padecen o están diagnosticados con cáncer. El cáncer puede estar en cualquier órgano o tejido, incluido el cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de útero, cáncer de mama, incluido el cáncer de mama metastásico y el cáncer de mama resistente a la quimioterapia (por ejemplo, cáncer de mama que reaparece como una recaída dentro de los 6 meses posteriores a la quimioterapia adyuvante con o sin una antraciclina), cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer de pulmón (que incluye cáncer de pulmón no microcítico), cáncer colorrectal, cáncer de estómago, cáncer de esófago, linfoma (incluidos linfomas recurrentes, de Hodgkin y no de Hodgkin), cáncer de hígado, melanoma, cáncer de próstata, osteosarcoma y leucemia (incluyendo leucemia mielógena aguda y leucemia linfoblástica aguda pediátrica).

Los heparinoides que interactúan con PF4 adecuados para su uso en los métodos se describen a continuación en la Sección 5.6. En una realización ilustrativa, el heparinoide que interactúa con PF4 es ODSH. Los modos de administración y los regímenes de dosificación adecuados se describen más adelante, en la Sección 5.8. Las dosis eficaces y las cantidades terapéuticamente eficaces de heparinoide que interactúa con PF4 se describen en detalle a continuación, en la Sección 5.9.

5.6. Heparinoides que interactúan con PF4

Los heparinoides para su uso en los métodos descritos en el presente documento son heparinoides que son capaces de interactuar con PF4 y contrarrestar la capacidad de PF4 para suprimir la producción de plaquetas y neutrófilos. Tal como se usa en el presente documento, los heparinoides que interactúan con PF4 incluyen heparinoides que se unen a PF4 y heparinoides que compiten con PF4 por la unión a las células progenitoras en el linaje celular mieloide, por ejemplo, megacariocitos. Un ensayo específico para la unión de un heparinoide a PF4 se proporciona en Joglekar et al., 2012, Thromb Haemost 107(4):717-725. En algunas realizaciones, un heparinoide que interactúa con PF4 es un heparinoide que compite por la unión a PF4 con heparina no fraccionada, según lo determinado por un ensayo de competición, véase, por ejemplo, Stringer et al., 1997, J. Biol. Chem. 272(33) 20508-20514.

Los heparinoides que interactúan con PF4 son polímeros de glicosaminoglicano lineales compuestos de unidades de ácido idurónico y glucosamina que se repiten o alternan que contienen sustituciones de O-sulfato, N-sulfato y N-acetil. Preferentemente, los heparinoides que interactúan con PF4 para su uso en los métodos descritos en el presente documento son polímeros que tienen un peso molecular promedio de al menos aproximadamente 8 kDa, por ejemplo, que tienen un peso molecular medio que varía de aproximadamente 8 kDa a aproximadamente 15 kDa. En determinadas realizaciones, los heparinoides que interactúan con PF4 tienen un peso molecular medio superior a aproximadamente 8 kDa. Más preferentemente, los heparinoides que interactúan con PF4 para su uso en los métodos descritos en el presente documento tienen un peso molecular medio que varía en tamaño desde aproximadamente 11 kDa hasta aproximadamente 13 kDa. El peso molecular de los heparinoides se puede determinar mediante cromatografía de exclusión por tamaño de alto rendimiento como se conoce en la técnica. Véase, por ejemplo, Lapierre et al., 1996, Glycobiology 6(3):355-366, en la página 363; Fryer et al., 1997, J. Pharmacol. Exp. Ther. 282: 208-219, en la página 209.

Opcionalmente, el heparinoide que interactúa con PF4 no causa activación plaquetaria ni trombocitopenia inducida por heparina (TIH) y, por lo tanto, es útil para tratar sujetos con riesgo de trombocitopenia inducida por heparina, incluidos los sujetos con anticuerpos contra un complejo PF4/heparina. Por tanto, en diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 no desencadena la activación plaquetaria que lleva a la trombocitopenia inducida por heparina; la activación plaquetaria se puede determinar mediante un ensayo de liberación de serotonina, tal como se describe en la patente de EE.UU. N.° 7.468.358 y en Sheridan et al., 1986, Blood 67:27-30. En algunas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se une a PF4 pero no es reconocido por los anticuerpos anti complejo heparina-PF4, incluso cuando forma un complejo con PF4.

En diversas realizaciones preferidas, el heparinoide que interactúa con PF4 es sustancialmente no anticoagulante. La actividad anticoagulante se puede determinar usando ensayos conocidos en la técnica, por ejemplo, tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT), tiempo de protrombina, ensayos anti-coagulación de Xa y amidolíticos. Véase, por ejemplo, la Patente de EE.Uu N.° 5.668.118, Ejemplo IV; Fryer et al., 1997, J. Pharmacol. Exp. Ther. 282: 208 219, en la página 209; Rao et al., 2010, Am. J. Physiol. 299:C97-C110, en la página C98; Convención de la Farmacopea de los Estados Unidos de 1995 (para ensayo anticoagulante y el ensayo amidolítico de la USP).

En realizaciones típicas, los heparinoides que interactúan con PF4 están parcialmente desulfatados. Según la invención, los heparinoides que interactúan con PF4 están sustancialmente desulfatados en la posición 2-O del ácido a-L-idurónico (denominada en el presente documento como la "posición 2-O") y desulfatados en la posición 3-O de D-glucosamina-N-sulfato (6-sulfato) (denominada en el presente documento como la "posición 3-O"). En algunas realizaciones, los heparinoides que interactúan con PF4 son al menos el 85 %, al menos el 90 %, al menos el 95 %, o al menos el 99 % desulfatada en la posición 2-O. En algunas realizaciones preferidas, los heparinoides que interactúan con PF4 están desulfatados al menos en un 99 % en la posición 2-O. En algunas realizaciones, los heparinoides que interactúan con PF4 son al menos el 85 %, al menos el 90 %, al menos el 95 %, o al menos el 99 % desulfatada en la posición 3-O. En algunas realizaciones preferidas, los heparinoides que interactúan con PF4 están desulfatados al menos en un 99 % en la posición 3-O. En algunas realizaciones, los heparinoides que interactúan con PF4 son al menos el 85 %, al menos el 90 %, al menos el 95 %, al menos el 99 % desulfatados en la posición 2-O y en la posición 3-O. En algunas realizaciones preferidas, los heparinoides que interactúan con PF4 están desulfatados al menos en un 99 % en la posición 2-O y en la posición 3-O.

En realizaciones típicas, el heparinoide que interactúa con PF4 comprende D-glucosamina sustancialmente N-sulfatada y 6-O sulfatada. En algunas realizaciones, los carboxilatos de los azúcares del ácido a-L-idurónico del heparinoide que interactúa con PF4 están sustancialmente intactos.

Un heparinoide ilustrativo que interactúa con PF4 es sustancialmente heparina 2-O, 3-O desulfatada, citado en el presente documento como ODSH. La ODSH para su uso en los métodos descritos anteriormente se puede preparar a partir de heparina bovina o porcina. En un método ilustrativo para preparar ODSH a partir de heparina porcina, la ODSH se sintetiza por hidrólisis alcalina fría de heparina intestinal porcina USP, que elimina los sulfatos 2-O y 3-O, dejando los N- y 6-O sulfatos en azúcares de D-glucosamina y los carboxilatos en azúcares de ácido a-L-idurónico sustancialmente intactos. Fryer, A. et al., 1997, J. Pharmacol. Exp. Ther. 282: 208-219. Usando este método, se puede producir ODSH con un peso molecular medio de aproximadamente 11,7 ± 0,3 kDa.

A diferencia de la heparina no fraccionada, la ODSH es sustancialmente no anticoagulante: administrada a un sujeto a una dosis equivalente a una dosis anticoagulante completa de heparina no fraccionada, el tiempo de coagulación medido en un ensayo de aPTT no es mayor de 45 segundos, y típicamente en el rango superior de normal, en donde el tiempo normal de coagulación varía entre 27 y 35 segundos. En comparación, la heparina no fraccionada administrada a un sujeto en una dosis de anticoagulante completo hace que el tiempo de coagulación varíe de aproximadamente 60 a aproximadamente 85 segundos en un ensayo de aPTT. Otra medida de la actividad anticoagulante de ODSH es su actividad anti-Xa que se puede determinar en un ensayo realizado usando plasma tratado con veneno de víbora Russell. En ejemplos específicos, la ODSH mostró menos de 9 U de actividad anticoagulante/mg en el ensayo anticoagulante de la USP (por ejemplo, 7 ± 0,3 U), menos de 5 U de actividad anti-Xa/mg (por ejemplo, 1,9 ± 0,1 U/mg) y menos de 2 U de actividad anti-IIa/mg (por ejemplo, 1,2 ± 0,1 U/mg) (comparar con la heparina no fraccionada que tiene una actividad de 165-190 U/mg en los tres ensayos). Véase Rao et al., 2010, Am. J. Physiol. 299:C97-C110, página C101. Se puede determinar si un heparinoide es sustancialmente no anticoagulante o no usando cualquiera de los ensayos anteriores. Asimismo, la ODSH tiene una baja afinidad por la antitrombina III (Kd ~ 339 pM o 4 mg/ml frente a 1,56 pM o 22 pg/ml para la heparina no fraccionada), coherente con el bajo nivel observado de actividad anticoagulante, medido tal como se describe en Rao et al., citado anteriormente, en la página C98.

Los métodos para la preparación de heparina 2-O, 3-O desulfatada también se pueden encontrar, por ejemplo, en las patentes de EE.UU. N.° 5.668.118, 5.912.237 y 6.489.311, y en el documento WO 2009/015183, y en las patentes de EE.UU. 5.296.471, 5.969.100 y 5.808.021.

5.7. Composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitarias

En realizaciones típicas, el heparinoide que interactúa con PF4 se administrará en forma de una formulación o composición farmacéutica. Las composiciones farmacéuticas, adecuadas para la administración a sujetos, pueden incluir opcionalmente agentes activos y/o terapéuticos adicionales, como se sabe en la técnica. Véase Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed. (2005), Lippincott Williams y Wilkins. Las formulaciones incluirán típicamente uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Los vehículos, excipientes y/o diluyentes específicos usados dependerán del modo de administración deseado.

En diversas realizaciones, las composiciones farmacéuticas están en forma de una composición fluida estéril, apirógena.

Las composiciones farmacéuticas se pueden formular para su administración a sujetos mediante una variedad de vías, incluyendo intranasal, por inhalación, intramuscular, intraperitoneal y parenteral, incluyendo por vía intravenosa o subcutánea. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular en volúmenes y concentraciones adecuados para la administración en bolo, para infusión continua o para administración subcutánea.

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar convenientemente en formas de dosificación unitaria que contienen una cantidad predeterminada de heparinoide que interactúa con PF4. En diversas realizaciones, las formas de dosificación unitaria de heparinoide que interactúa con PF4 contienen de 1 mg a 1 g o de 5 mg a 500 mg de heparinoide que interactúa con PF4.

5.8. Modos de administración

Los heparinoides que interactúan con PF4 se pueden administrar en los métodos descritos en el presente documento mediante una variedad de vías, tal como se ha indicado anteriormente. En realizaciones actualmente preferidas, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra por vía intravenosa, ya sea como uno o más bolos, como infusión continua, o como uno o más bolos seguidos de infusión continua.

En una variedad de realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra durante un período de 1 día a indefinidamente, un período de 1 semana a 6 meses, un período de 3 meses a 5 años, un período de 6 meses a 1 o 2 años, o similar. Opcionalmente, se repite la administración de heparinoides que interactúan con PF4; por ejemplo, en determinadas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra una vez al día, dos veces al día, tres veces al día, cuatro veces al día, cinco veces al día, cada dos días, cada tres días, cada cinco días, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez al mes, cada dos meses, de manera semestral o anual. En determinadas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra a intervalos regulares durante un período de varias semanas, seguido de un período de descanso, durante el cual no se administra ningún heparinoide que interaccione con PF4. Por ejemplo, en determinadas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra durante una, dos, tres o más semanas, seguido de una, dos, tres o más semanas sin la administración de heparinoides que interaccionan con PF4. La administración repetida puede ser a la misma dosis o a una dosis diferente. El heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar en una o más inyecciones en bolo, una o más infusiones, o una o más inyecciones en bolo seguidas o precedidas por infusión.

En realizaciones en las que el heparinoide que interactúa con PF4 se administra de forma complementaria a un régimen de tratamiento de un paciente que tiene un régimen mielosupresor, y/o de forma complementaria a la administración de uno o más agentes o terapias adicionales que tienen actividad antitrombocitopénica, protrombopoyética, antineutropénica y/o progranulopoyética, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra en una proximidad temporal terapéuticamente eficaz al régimen de tratamiento que tiene un efecto secundario mielosupresor y/o un agente o terapia adicional. La administración de un heparinoide que interactúa con PF4 puede ser concurrente con (al mismo tiempo), secuencial a (en un momento diferente pero el mismo día, por ejemplo, durante la misma visita del paciente), o por separado (en un día diferente) de la administración del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor u otro agente o terapia. En diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 administrado de forma complementaria se administra al mismo tiempo, secuencialmente y/o por separado del régimen de tratamiento del paciente que tiene un efecto secundario mielosupresor u otro agente o terapia que se está administrando. Cuando se administra secuencialmente o por separado, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar antes, después o antes y después del otro tratamiento.

En las realizaciones en las que se administra de forma complementaria heparinoide que interactúa con PF4, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar a través de la misma o diferente vía que el otro tratamiento administrado en proximidad temporal. En diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra de forma simultánea o secuencial por la misma vía. Por ejemplo, en determinadas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 y otros tratamientos se administran por vía intravenosa, ya sea de forma simultánea o secuencial. Opcionalmente, como parte de un régimen de tratamiento, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar además por separado (en un día diferente) del otro tratamiento por una vía diferente, por ejemplo, subcutánea. En realizaciones específicas, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra por vía intravenosa el mismo día, ya sea al mismo tiempo (concurrentemente), en un momento diferente (secuencialmente), o simultáneamente y secuencialmente con otro tratamiento, y también se administra por vía subcutánea en uno o más días cuando el paciente no está recibiendo otro tratamiento. En diversas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra de forma simultánea o secuencial por una vía diferente. Opcionalmente, como parte de un régimen de tratamiento, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar además por separado (en un día diferente) del otro tratamiento por la misma o diferente vía que aquella por la que se administra el otro tratamiento.

En una realización, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra los días 1, 8 y 15 de un ciclo de quimioterapia de 28 días como un bolo inicial seguido de una infusión continua de 48 horas. El trascurso del tratamiento puede incluir además la administración de uno o más agentes quimioterapéuticos secuencialmente antes o después del heparinoide que interactúa con PF4. Opcionalmente, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra por vía subcutánea el día 21 y/o uno, varios o todos los días 2, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 y 27.

5.9. Dosificaciones eficaces

El heparinoide que interactúa con PF4 se administra al sujeto en una cantidad suficiente o eficaz para proporcionar un beneficio terapéutico, es decir, una cantidad terapéuticamente eficaz. La cantidad terapéuticamente eficaz depende del beneficio terapéutico que se busca, por ejemplo, la atenuación de los efectos secundarios mielosupresores tales como trombocitopenia y neutropenia, y/o la promoción de la trombopoyesis, y/o la promoción de la granulopoyesis, y/o la mejora del efecto antineoplásico.

En los métodos en los que se administra heparinoide que interactúa con PF4 para atenuar un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento de un paciente, se administra una cantidad mieloprotectora de heparinoide que interactúa con PF4, es decir, una cantidad suficiente, en realizaciones típicas, para lograr uno o más de los siguientes, en comparación con los datos históricos sobre el mismo régimen de tratamiento del paciente sin la administración complementaria de heparinoide que interactúa con PF4:

(a) la trombocitopenia mejora en al menos un grado (por ejemplo, del grado 4 al grado 3, 2, 1 o 0; del grado 3 al grado 2, 1 o 0; del grado 2 al grado 1 o 0; o del grado 1 al grado 0);

(b) el recuento de plaquetas aumenta en al menos el 10 %, al menos el 20 %, al menos el 30 %, al menos el 40 %, al menos el 50 %, al menos el 100 %, al menos el 200 %;

(c) el recuento de plaquetas aumenta en al menos 5000, al menos 10.000, al menos 15.000, al menos 20.000, al menos 25.000, al menos 30.000 plaquetas por pl de sangre;

(d) la neutropenia mejora en al menos un grado (por ejemplo, de grado 4 a grado 3, 2, 1 o 0; del grado 3 al grado 2, 1 o 0; del grado 2 al grado 1 o 0; o del grado 1 al grado 0);

(f) el recuento absoluto de neutrófilos aumenta en al menos el 10 %, al menos el 20 %, al menos el 30 %, al menos el 40 %, al menos el 50 %, al menos el 100 %, al menos el 200 %;

(d) el recuento absoluto de neutrófilos ha aumentado en al menos 500, al menos 1000, al menos 1500, al menos 2000, al menos 2500, al menos 3000 neutrófilos por |jl de sangre.

En realizaciones particulares, se administra una cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 suficiente para lograr uno o más de los efectos descritos anteriormente en comparación con los niveles previos al tratamiento.

En los métodos en los que se administra heparinoide que interactúa con PF4 para promover la trombopoyesis, una cantidad trombopoyéticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 es, en realizaciones típicas, una cantidad eficaz para provocar un aumento medible del recuento de plaquetas de un sujeto en comparación con los niveles previos al tratamiento.

En los métodos en los que se administra heparinoide que interactúa con PF4 para promover la producción de neutrófilos, una cantidad granulopoyéticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 es, en realizaciones típicas, una cantidad eficaz para provocar un aumento medible del recuento absoluto de neutrófilos de un sujeto en comparación con los niveles previos al tratamiento.

En los métodos en los que se administra heparinoide que interactúa con PF4 para mejorar la eficacia de un régimen de tratamiento antineoplásico, una cantidad terapéuticamente eficaz de un heparinoide que interactúa con PF4 es una cantidad eficaz o suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico. En el contexto de mejorar la eficacia de un régimen de tratamiento antineoplásico, en diversas realizaciones, un beneficio terapéutico es el logro de uno o más de los siguientes: detener o ralentizar el crecimiento de los tumores, reducir el tamaño y/o el número de tumores dentro de un paciente, aumentar la esperanza de vida, reducción de los efectos secundarios constitucionales del tratamiento antineoplásico (por ejemplo, pérdida de peso, inapetencia, náuseas, vómitos, fatiga), permitir la reducción de la dosificación o frecuencia de dosificación del régimen de tratamiento antineoplásico sin reducir la eficacia y/o mejorar la calidad de vida del paciente. Una cura completa, aunque deseable, no es necesaria para que exista un beneficio terapéutico. En algunos contextos, un beneficio terapéutico se puede correlacionar con uno o más criterios indirectos de valoración, de acuerdo con el conocimiento del experto en la materia. A modo de ejemplo y no de limitación, se puede medir in vivo la mejora de la eficacia de un régimen de tratamiento antineoplásico. Los ensayos ilustrativos in vivo para medir la inhibición del crecimiento tumoral se describen a continuación para dos cánceres diferentes y dos regímenes de tratamiento antineoplásico diferentes en los Ejemplos 1 y 2 a continuación.

La cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 administrada dependerá de varios factores, incluyendo de si el sujeto es trombocitopénico y/o neutropénico, de la gravedad de dicha trombocitopenia y/o neutropenia, de si el heparinoide que interactúa con PF4 se está administrando de forma complementaria a un régimen de tratamiento del paciente, y de la edad y condición del sujeto que está siendo tratado, entre otros. La dosificación apropiada se puede determinar fácilmente por un experto en la materia. En la práctica, un médico determinará las dosificaciones apropiadas que se utilizarán. Esta dosificación se puede repetir con la frecuencia que sea apropiada. La cantidad y/o la frecuencia de la dosificación se puede modificar, aumentar o reducir, dependiendo de la respuesta del sujeto y de acuerdo con la práctica clínica convencional. La dosis y el régimen de tratamiento adecuados se pueden establecer controlando el progreso de la terapia usando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia. En algunas realizaciones, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra en una dosis o cantidad por kilogramo de peso corporal del paciente que varía de aproximadamente 1 mg/kg a aproximadamente 25 mg/kg para dosis de bolo intravenoso, y de aproximadamente 0,1 mg/kg/h a aproximadamente 2,5 mg/kg/h para infusiones intravenosas. En una realización específica, el heparinoide que interactúa con PF4 se administra como un bolo intravenoso a una dosis de aproximadamente 4 mg/kg, opcionalmente seguido de una infusión intravenosa de heparinoide que interactúa con PF4 a una dosis de aproximadamente 0,375 mg/kg/h durante 48 horas. En realizaciones típicas, se administra una dosis en bolo en menos de un minuto, aproximadamente un minuto, aproximadamente 2 minutos, aproximadamente 3 minutos, aproximadamente 4 minutos o aproximadamente 5 minutos. Para la administración subcutánea, el heparinoide que interactúa con PF4 se puede administrar en dosis que varían de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 400 mg, en volúmenes de 2,0 ml o menos por sitio de inyección.

Las composiciones farmacéuticas de heparinoide que interactúa con PF4 se pueden formular en una cantidad que permita la administración intravenosa en bolo y/o la infusión intravenosa continua a tales dosis. En una realización, la composición farmacéutica comprende heparinoide que interactúa con PF4 en un vial estéril a una concentración de 50 mg/ml. Cuando se formula para administración subcutánea, las composiciones farmacéuticas pueden contener heparinoide que interactúa con PF4 a una concentración que varía de 50 mg/ml a 350 mg/ml adecuada para la administración a dosis que varían de aproximadamente 25 a aproximadamente 400 mg, en volúmenes de 2,0 ml o menos por sitio de inyección.

6. Ejemplos

6.1. Ejemplo 1: ODSH, un heparinoide que interactúa con PF4, mejora la eficacia de la gemcitabina en un modelo in vivo de xenoinjerto murino de cáncer de páncreas humano y demuestra un efecto antineoplásico cuando se administra solo

Este experimento demuestra que la administración complementaria de ODSH mejora la eficacia de gemcitabina contra tumores pancreáticos humanos que crecen como xenoinjertos en ratones desnudos atímicos, y demuestra que la ODSH inhibe el crecimiento tumoral cuando se administra sola.

Materiales y métodos. Los compuestos probados en el experimento fueron los siguientes. La ODSH fue elaborada por Pyramid Laboratories, Inc. (Costa Mesa, CA). Se proporcionó ODSH a una concentración de solución madre de 50 mg/ml y se almacenó a temperatura ambiente hasta su uso. La ODSH se diluyó en una solución de NaCl al 0,9% (B. Braun Medical Inc., Irvine, CA) a una concentración de 2,4 mg/ml para administrar 24 mg/kg, en un volumen de dosis de 10 ml/kg cuando se administra por vía intravenosa. Se formuló una concentración de 4,8 mg/ml para administrar una dosis de 24 mg/kg a un volumen de dosis de 5 ml/kg cuando se administra por vía subcutánea. La ODSH se formuló fresca antes de cada dosis.

Los agentes quimioterapéuticos oxaliplatino, gemcitabina y nab-paclitaxel también se probaron. El oxaliplatino fue fabricado por Sanofi-Aventis (Bridgewater, NJ) y diluido en una solución de NaCl al 0,9 % a una concentración de 1 mg/ml para administrar 10 mg/kg, en un volumen de dosis de 10 ml/kg. La gemcitabina fue fabricada por Eli Lilly and Co. (Indianapolis, IN) y diluida en una solución de NaCl al 0,9 % a una concentración de 8 mg/ml para proporcionar 80 mg/kg, en un volumen de dosis de 10 ml/kg. El nabpaclitaxel fue fabricado por Abraxis BioScience LLC (Bridgewater, NJ) y se diluyó en una solución de NaCl al 0,9 % a una concentración de 1,5 mg/ml para proporcionar 15 mg/kg, en un volumen de dosis de 10 ml/kg. Todas las preparaciones de agentes convencionales se hicieron recientes antes de su administración.

Se obtuvieron y prepararon células BxPC-3 como sigue. La línea celular de tumor de páncreas BxPC-3 se recibió de American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Los cultivos se mantuvieron en medio RPMI 1640 (Hyclone, Logan, UT) suplementado con suero bovino fetal al 5 %. Las células se alojaron en una atmósfera de CO2 al 5 %. Los cultivos se expandieron en matraces de cultivo de tejidos en una proporción de división de 1:3 hasta que se recogió una cantidad suficiente de células.

Todos los experimentos se realizaron en ratones desnudos atímicos hembra (Hsd:Athymic Nude-Foxnlnu) suministrados por Harlan (Indianapolis, IN). Los ratones se recibieron con cuatro semanas de vida, 12-15 gramos de peso, y se aclimataron durante siete días antes de su manipulación. Los ratones se alojaron en jaulas con microaisladores (Lab Products, Seaford, DE) y se mantuvieron en condiciones específicas libres de patógenos. Todos los procedimientos se llevaron a cabo bajo las pautas institucionales apropiadas para el cuidado de los animales.

Modelo de xenoinjerto de tumor de páncreas humano BxPC-3: Se inocularon ratones desnudos atímicos hembra por condición de tratamiento por vía subcutánea en el flanco derecho con 0,1 ml de una mezcla de RPMI 1640 al 50 %/Matrigel™ al 50 % (BD Biosciences, Bedford, MA) que contenía una suspensión de células tumorales BxPC-3 (aproximadamente 5 x 106 células/ratón).

Siete días después de la inoculación, los tumores se midieron con calibres y el peso del tumor se calculó con el programa informático de gestión de estudios en animales, Study Director V.1.7.54k (Study Log). Véase Britten CD, et al., ''Enhanced antitumor activity of 6-hydroxymethylacylfulvene in combination with irinotecan and 5-fluorouracil in the HT29 human colon tumor xenograft model", Cancer Res 59:1049-1053, 1999. Se colocaron ochenta ratones con tamaños de tumor de 93-172 mg en ocho grupos de diez ratones por equilibrio aleatorio (Día 1). Los pesos corporales se registraron cuando los ratones se asignaron al azar y se tomaron dos veces por semana a partir de entonces junto con las mediciones del tumor, en cada uno de los días 1, 4, 8, 11, 15, 18, 22, 26, 30, 33 y 36.

La ODSH, el control de vehículo (solución de NaCl al 0,9%, denominada solución salina), el oxaliplatino, la gemcitabina y el nab-paclitaxel se administraron de acuerdo con el régimen de dosificación descrito en la Tabla 1. El estudio finalizó cuando el control del vehículo alcanzó un criterio de valoración de 1500 mg, el día 36. La Tabla 1, a continuación, proporciona más detalles sobre los ocho grupos de tratamiento.

continuación

El tratamiento para los Grupos 7 y 8 se interrumpió el Día 8 debido a los efectos adversos resultantes del tratamiento. La vía de dosificación de ODSH se modificó de intravenosa a subcutánea el día 12, como resultado de la hinchazón y los hematomas de la cola. Se introdujeron gemcitabina y nab-paclitaxel en el régimen de dosificación de los grupos 3 y 5 el día 26.

Los datos y análisis estadísticos se realizaron como sigue. La inhibición del crecimiento tumoral (ICT) media se calculó utilizando la Fórmula A siguiente (las muertes no se incluyeron en los cálculos de la ICT). Los cálculos de la ICT se realizaron comparando los pesos de los tumores del día 26 al día 1, que captura datos antes de la adición de gemcitabina y nab-paclitaxel a varios grupos, y del día 36 (último día del estudio) al día 1.

Fórmula A:

G ^ T ra ta d o (Final) ^ T r a t a d o (D[íaa t 1)) X

ICT = [1 x 100%

( ^ C o n tr o l( Final) ^ C o n tr o l(Díaía F 1)) )

Todos los análisis estadísticos en el estudio de xenoinjerto se realizaron con el programa informático GraphPad Prism® v4. Las diferencias en los pesos de los tumores del día 26 y 36 se confirmaron mediante el análisis de varianza (ANOVA) con la prueba de comparación múltiple de Tukey.

Resultados. Se evaluaron los efectos antitumorales de la ODSH administrada como agente único o en varias combinaciones con uno o más de oxaliplatino, gemcitabina y nab-paclitaxel.

Los pesos de los tumores registrados para los grupos de tratamiento experimental 1 a 8 se proporcionan a continuación en las Tablas 2 a 9. Véase también la FIG. 1.

continuación

continuación

continuación

Las tablas 10 a 13 a continuación muestran los pesos corporales registrados para los grupos de tratamiento 1 a 8 durante el transcurso del experimento. Véase también la FIG. 3.

La eficacia se evaluó mediante la comparación de los pesos tumorales en el día 26 y 36 frente al día 1. Se eligió el día 26 para evaluar los datos antes de la adición de gemcitabina y nab-paclitaxel a los grupos 3 y 5. El día 36 se evaluó como el último día del estudio.

Las Tablas 14 y 15, a continuación, muestran el peso tumoral y el porcentaje de inhibición del crecimiento del tumor (% de ICT) para todos los grupos de tratamiento en relación con el Grupo 1 (el grupo de control del vehículo) en el Día 26 y el Día 36. Véase también la FIG. 1 y la FIG. 2.

El peso medio del tumor en el grupo de control de vehículo (Grupo 1) alcanzó 679,8 mg el día 26 y 1524,2 mg el día 36. Seis de diez tumores demostraron algún nivel de necrosis; sin embargo, esto se atribuye a la progresión normal de este modelo de xenoinjerto tumoral. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 30. Se observó una pérdida de peso máxima del 3,6 % el día 15. Los ratones recuperaron su peso el día 26. Dos de diez ratones demostraron colas con ligeros hematomas, observado por primera vez el día 11.

El peso medio del tumor en el grupo que recibió ODSH a 24 mg/kg (Grupo 2) alcanzó 616,2 mg el día 26 y 1270,1 mg el día 36. Este tratamiento dio como resultado un ICT del 11,5 % el día 26 y del 18,2 % el día 36, en relación con el Día 1. No se observó una diferencia significativa en el peso del tumor el día 26 en comparación con el control del vehículo, sin embargo, el día 36 se observó una diferencia significativa en el peso tumoral, en el Grupo 2 en relación con el grupo de control del vehículo. Tres de diez tumores demostraron algún nivel de necrosis; sin embargo, esto se atribuye a la progresión normal de este modelo de xenoinjerto tumoral. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 30. Se alcanzó una pérdida de peso máxima del 2,7 % el día 11. Los ratones recuperaron su peso el día 22. Los diez ratones de este grupo mostraron hematomas en la cola o el abdomen, en el lugar de la inyección. Esto se observó por primera vez el día 8 para las colas y el día 15 para el abdomen. Uno de los diez ratones también demostró hinchazón de la cola, observado por primera vez el día 11.

Oxaliplatino 10 mg/kg o gemcitabina 80 mg/kg y nab-paclitaxel 15 mg/kg (Grupo 3): El régimen inicial de oxaliplatino solo alcanzó un peso tumoral medio de 635,0 mg el día 26, antes de la adición de gemcitabina y nabpaclitaxel al régimen de dosificación. Este grupo produjo un ICT del 8.0% el día 26, en comparación con el control del vehículo. No se observó ninguna diferencia significativa en el peso tumoral el día 26 en comparación con el control del vehículo. Un ratón exhibió una cola con hematoma, observado por primera vez el día 11. Tres de diez tumores demostraron algún nivel de necrosis; sin embargo, esto se atribuye a la progresión normal de este modelo de xenoinjerto tumoral. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 26.

Tras la recopilación de datos el día 26, se inició el régimen de tratamiento combinado de gemcitabina y nab-paclitaxel. Este régimen resultó ser tóxico después del tratamiento inicial con oxaliplatino solo. No se pudieron documentar datos de eficacia para la combinación triple.

La gemcitabina 80 mg/kg (Grupo 4) alcanzó un peso tumoral medio de 594,7 mg el día 26 y 1288,8 mg el día 36. Este tratamiento dio como resultado un ICT del 15,3 % el día 26 y del 16,8 % el día 36, en comparación con el control del vehículo. No se observó ninguna diferencia significativa en el peso tumoral el día 26 o el día 36 en comparación con el control del vehículo. Cuatro de los diez tumores demostraron algún nivel de necrosis; sin embargo, esto se atribuye a la progresión normal de este modelo de xenoinjerto tumoral. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 26. Se alcanzó una pérdida de peso máxima del 8,7 % el día 11. Los ratones recuperaron su peso el día 18.

ODSH 24 mg/kg y oxaliplatino 10 mg/kg u ODSH 24 mg/kg, gemcitabina 80 mg/kg y nab-paclitaxel 15 mg/kg (Grupo 5): La combinación de tratamiento inicial de ODSH y oxaliplatino alcanzó un peso tumoral medio de 586,6 mg el día 26. Este tratamiento dio como resultado un ICT del 16,7 % el día 26 en comparación con el control del vehículo. No se observó una diferencia significativa en el peso del tumor el día 26 en comparación con el control del vehículo, ODSH (Grupo 2) u oxaliplatino (Grupo 3). Los diez ratones de este grupo demostraron un aumento de hematomas en la cola o el abdomen, en el lugar de la inyección. Esto se observó por primera vez el día 4 para las colas y el día 15 para el abdomen. Dos de los diez ratones también demostraron hematoma en la cola, observado por primera vez el día 4. Tres de los diez ratones demostraron alguna decoloración de la piel, observado por primera vez el día 11.

La triple combinación de ODSH, gemcitabina y nab-paclitaxel, iniciada el día 26, dio como resultado un aumento de la toxicidad después del régimen de tratamiento inicial de ODSH y oxaliplatino. No se pudo realizar ningún análisis estadístico el día 36 porque solo un ratón permaneció en este grupo hasta el día 36 con un tamaño de tumor de 827,5 mg (ICT = 51,4%).

ODSH 24 mg/kg y gemcitabina 80 mg / kg (Grupo 6) alcanzaron un peso tumoral medio de 508,9 mg el día 26 y 993,9 mg el día 36. Este tratamiento dio como resultado un ICT del 30,7 % el día 26 y del 37,9 % el día 36 en comparación con el control del vehículo. No se observó una diferencia significativa en el peso del tumor el día 26 en comparación con el control del vehículo, ODSH (Grupo 2) o gemcitabina (Grupo 4). Se observó una disminución significativa en el peso tumoral el día 36 (P <0,05) en comparación con el control del vehículo; sin embargo, no se produjeron diferencias significativas en los pesos tumorales en comparación con ODSH (Grupo 2) o gemcitabina (Grupo 4). Uno de diez tumores demostró algún nivel de necrosis; sin embargo, esto se atribuye a la progresión normal de este modelo de xenoinjerto tumoral. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 30. Se alcanzó una pérdida de peso máxima del 13,4 % el día 11. Los ratones recuperaron su peso el día 22. Los diez ratones de este grupo mostraron hematomas en la cola o el abdomen, en el lugar de la inyección. Esto se observó por primera vez el día 4 para las colas y el día 15 para el abdomen. Dos de los diez ratones también demostraron hematoma en la cola, observado por primera vez el día 4. Uno de diez ratones demostró decoloración de la piel, observado por primera vez el día 9. Dos de diez ratones demostraron piel seca, observado por primera vez el día 9.

Oxaliplatino 10 mg/kg y gemcitabina 80 mg/kg (Grupo 7) alcanzaron un peso tumoral medio de 612,4 mg el día 26 y 1227,7 mg el día 36. Este grupo produjo un ICT del 15,5 % el día 26 (n = 3) y del 22,5 % el día 36 (n = 3), en comparación con el vehículo de control. No se observaron diferencias significativas en el peso tumoral el día 26, en comparación con el control del vehículo, oxaliplatino (Grupo 3) o gemcitabina (Grupo 4). No se observó una diferencia significativa en el peso tumoral el día 36 en comparación con el control del vehículo o la gemcitabina (Grupo 4). Uno de diez tumores demostró algún nivel de necrosis; esto se atribuye a la progresión natural del modelo de xenoinjerto. La necrosis tumoral se observó por primera vez el día 30. Se alcanzó una pérdida de peso máxima del 16,6 % el día 8. Los ratones recuperaron su peso el día 15 tras el cese del tratamiento con gemcitabina. Este régimen de tratamiento resultó ser tóxico. Los ratones fueron encontrados muertos los días 10, 11 y 14, y se sacrificó a los moribundos los días 11 y 12. Dos de los diez ratones de este grupo demostraron hematomas en la cola. Esto se observó por primera vez el día 4.

ODSH 24 mg/kg, oxaliplatino 10 mg/kg y gemcitabina 80 mg/kg (Grupo 8) no se puedo evaluar en cuanto a la eficacia debido a la toxicidad del régimen promovida por las dosis de oxaliplatino y gemcitabina.

El tratamiento con ODSH solo fue bien tolerado, aunque se produjeron algunos hematomas e hinchazón en el lugar de las inyecciones. Por lo tanto, la vía de dosificación se cambió a inyección subcutánea el día 12. Se toleraron los tratamientos combinados de ODSH y gemcitabina y ODSH y oxaliplatino. En cambio, los regímenes de combinación de tratamiento que incluían gemcitabina con oxaliplatino o gemcitabina y nab-paclitaxel produjeron toxicidad.

La combinación de ODSH y gemcitabina dio como resultado la mejor eficacia el día 26 y el día 36. En ambos días de comparación, la combinación de ODSH y gemcitabina dio como resultado pesos tumorales notablemente más bajos que la gemcitabina sola. Los pesos tumorales de los ratones tratados con ODSH y gemcitabina fueron estadísticamente significativamente más bajos que los pesos de los tumores en el grupo de control (solución salina sola) el día 36. Véase la FIG. 2.

La adición, el día 26 del estudio, de gemcitabina y nab-paclitaxel al régimen de oxaliplatino en los Grupos 3 y 5 demostró una toxicidad grave que llevó a la muerte de muchos animales. No está claro si estas toxicidades se debieron al tratamiento combinado con oxaliplatino, gemcitabina y nab-paclitaxel, o a la toxicidad residual relacionada con la administración de oxaliplatino.

6.2. Ejemplo 2: La ODSH, un heparinoide que interactúa con PF4, mejora la eficacia del carboplatino en un modelo in vivo de xenoinjerto murino de cáncer de ovario humano

Este ejemplo demuestra que la administración complementaria de ODSH mejora la eficacia del carboplatino contra los tumores de ovario humanos que crecen como xenoinjertos en ratones desnudos atímicos.

Materiales y métodos. La ODSH (50 mg/ml de concentración de solución madre) fue preparada por Pyramid Laboratories, Inc. y se almacenó a temperatura ambiente hasta su uso. Tal como se describe adicionalmente a continuación, la ODSH se administró por vía intravenosa (IV), a una dosis de 48 mg/kg y un volumen de 10 ml/kg, o por vía subcutánea (SC) a una dosis de 24 mg/kg y un volumen de 5 ml/kg. El carboplatino obtenido de un proveedor clínico se almacenó a 4 °C hasta su uso. El carboplatino se administró mediante inyección intraperitoneal (IP) a una dosis de 80 mg/kg y un volumen de 10 ml/kg. Se usó solución salina (NaCl al 0,9 %) como control de vehículo para ODSH y se administró por las mismas vías y en los mismos volúmenes que la ODSH.

La línea celular de cáncer de ovario humano A2780 se usó en los experimentos de xenoinjerto murino como sigue. Se utilizaron aproximadamente 5 X 106 células A2780 por ratón, se inyectaron por vía subcutánea en el flanco derecho en 0,1 ml de Matrigel al 50 % / medio al 50 %. El estudio se inició cuando los tumores alcanzaron un tamaño de 90 130 mg. Se utilizaron 40 ratones, 10 por régimen de tratamiento. Los ratones eran hembras atímicas normales, de 6 7 semanas de vida, alojadas en jaulas de microaislador y mantenidas en condiciones libres de patógenos. Se midieron los pesos corporales y de los tumores tres veces por semana.

La ODSH, el oxaliplatino y el vehículo de control (NaCl al 0,9%) se administraron de acuerdo con la pauta de dosificación descrita en la tabla siguiente. Se estudiaron cuatro grupos de tratamiento.

continuación

Resultados. Tal como se muestra en la FIG. 4, la ODSH no reduce ni contrarresta el efecto antineoplásico del carboplatino. Por el contrario, la administración complementaria de ODSH con carboplatino (FIG. 4, triángulos) provocó una reducción significativa en el peso tumoral de las células de cáncer de ovario humano, en comparación con la reducción en los pesos tumorales observada en ratones que recibieron solo carboplatino (FIG. 4, cuadrados). Asimismo, los ratones tratados con ODSH complementaria a carboplatino tuvieron un aumento de peso corporal en comparación con los ratones que recibieron solo carboplatino. Véase la FIG. 6, triángulos frente a cuadrados. Por tanto, la ODSH no solo aumentó la eficacia del carboplatino, sino que también contribuyó a mejorar el peso corporal, lo que es indicativo de un efecto positivo sobre los efectos secundarios constitucionales (por ejemplo, pérdida de apetito, pérdida de peso) que a menudo se observan con los regímenes de tratamiento quimioterapéutico.

Los pesos tumorales registrados (en mg) para ratones en los grupos de tratamiento experimental 1 a 4 se proporcionan en las tablas siguientes. Se midieron los pesos tumorales los días 1, 4, 6, 8, 11, 14, 18, 21,25 y 28 tal como se indica.

continuación

EM = encontrado muerto

ST = sacrificio terminal

Los pesos corporales individuales registrados (en gramos) para ratones en los grupos de tratamiento experimental 1 a 4 se proporcionan en las tablas siguientes. Los pesos corporales se midieron los días 1, 4, 6, 8, 11, 14, 18, 21, 25 y 28 tal como se indica.

6.3. Ejemplo 3: La ODSH, un heparinoide que interactúa con PF4, atenúa la trombocitopenia y la neutropenia, induce trombopoyesis y producción de neutrófilos, y reduce los síntomas constitucionales en pacientes que reciben un régimen de tratamiento de quimioterapia que tienen efectos secundarios mielosupresores

Los pacientes diagnosticados con cáncer de páncreas metastásico fueron tratados con ODSH como complemento del tratamiento con gemcitabina y nab-paclitaxel (Abraxane®, paclitaxel unido a albúmina) en un ensayo clínico sin enmascaramiento.

Criterios de inclusión. Los pacientes masculinos y femeninos, sin embarazo ni lactancia, de 18 a 75 años, con adenocarcinoma metastásico de páncreas confirmado histológicamente se inscribieron en el ensayo. Otros criterios de inclusión fueron: presencia de al menos un tumor metastásico (medible mediante técnicas convencionales o tomografía computarizada), medición de CA 19-9 en suero superior a 2 veces el límite superior de lo normal, sin radioterapia o quimioterapia para la enfermedad localmente avanzada dentro de los seis meses posteriores a la inscripción en el ensayo, recuento absoluto de neutrófilos de al menos 1,5 X 109/l, recuento de plaquetas de al menos 100.000/mm3 (o 100 X 109/l), nivel de hemoglobina de al menos 9 g/dl, tiempos de protrombina y tromboplastina parcial dentro de los límites normales (+/- 15 %) en el momento del cribado, estado funcional del Eastern Cooperative Oncology Group de 1 o más. Adicionalmente, los pacientes fueron examinados para determinar los niveles de compuestos químicos en sangre, incluyendo niveles de creatinina sérica dentro de los límites normales, niveles de transaminasas séricas de 2,5 o mayores que el límite superior de lo normal y niveles de bilirrubina 1,5 veces el límite superior de lo normal o más.

Régimen de dosificación. El tratamiento consistió en una serie de ciclos de 28 días, en donde el último día de un ciclo (por ejemplo, día 28, ciclo 1) fue seguido inmediatamente por el primer día del siguiente ciclo (por ejemplo, día 1, ciclo 2). En cada ciclo de tratamiento de 28 días, los pacientes recibieron las dosis los días 1, 8 y 15 (tres semanas de medicación seguidas de una semana de descanso) de la siguiente manera. Primero, se administró nab-paclitaxel a 125 mg/m2 como perfusión intravenosa durante 30 minutos. A continuación, se administró gemcitabina a 1000 mg/m2 en perfusión intravenosa durante 30 minutos. La terapia con nab-paclitaxel y gemcitabina se administró tal como se describe en la información de prescripción de Abraxane® y Gemzar®. Véase también, Von Hoff et al., 2011, J. Clinical Oncology 29:1-7).

La ODSH se administró inmediatamente después de la administración de gemcitabina, de la siguiente manera: se administró una dosis de carga inicial en forma de bolo de 4 mg/kg durante 5 minutos seguida de una infusión intravenosa continua durante 48 horas, a una dosis de 0,375 mg/kg/h. Estas dosis son, respectivamente, 9 veces más altas y 3,75 veces más altas que las dosis de bolo y mantenimiento de heparina no fraccionada que se usan de forma rutinaria para conferir anticoagulación completa en un entorno clínico (0,44 mg/kg para inyección en bolo y 0,1 mg/kg/h para mantenimiento). Como heparinoide sustancialmente no anticoagulante, la ODSH se puede administrar a una dosis mayor que la dosis de anticoagulante total de heparina no fraccionada, sin preocuparse por el efecto anticoagulante, tal como se muestra en los resultados a continuación.

Se realizó un período de preinclusión en el que diez pacientes fueron tratados con el régimen de gemcitabina, nabpaclitaxel y ODSH descrito anteriormente. Después de que los diez pacientes hubieran completado al menos un ciclo de 28 días, se revisaron los datos y se inició un estudio aleatorizado sin enmascaramiento, con dos secciones (sección de ODSH y sección de control). En la sección de ODSH, el régimen de dosificación fue el mismo que en el período de preinclusión (gemcitabina, nab-paclitaxel y ODSH). En la sección de control, los pacientes recibieron el mismo régimen de gemcitabina y nab-paclitaxel que en el período de preinclusión, pero sin ODSH.

Prueba. Se extrajo sangre antes de la administración del tratamiento los días 1, 8 y 15 de cada ciclo de 28 días. Se realizaron recuentos de plaquetas, recuentos totales de glóbulos blancos y recuentos absolutos de neutrófilos. La clasificación de trombocitopenia y/o neutropenia se realizó de acuerdo con los siguientes estándares:

Trombocitopenia Grado ^{Recuento de plaquetas (X 103/|jl}

_{de sangre)}

0* >150

1 <150-75

2 <75-50

3 <50-25

4 <25

*(no trombocitopénico)

Neutropenia Grado ^{Recuento de plaquetas (X 103/ j l}

_{de sanqre)}

0* §s 2

1 <2-1,5

2 <1,5-1

3 <1,0-0,5

4 <0,5

*(no neutropénico)

También se analizaron muestras de sangre en el día 1 de cada ciclo de tratamiento para determinar el nivel sérico de CA19-9 (antígeno de carbohidrato 19-9), un marcador utilizado para evaluar la eficacia de los agentes de quimioterapia en el tratamiento del cáncer de páncreas. Véase, por ejemplo, Maeda, 2011, Int. J. Clin. Oncol. 16(5):539-45. La reducción del nivel sérico de CA19-9 es indicativa de la eficacia quimioterapéutica contra el cáncer de páncreas. La respuesta tumoral y el estado de la enfermedad se midieron de acuerdo con los Criterios de evaluación de la respuesta en las guías de tumores sólidos (RECIST) Versión 1.1. Eur. J. Cancer, 2009, 45:228-247. Una reducción de al menos el 30 % en la suma de los diámetros de las lesiones diana (lesiones medibles presentes en el cribado, hasta 2 lesiones por órgano afectado) se puntuó como respuesta parcial. Los pacientes se puntuaron como con enfermedad estable en la que la suma más pequeña de los diámetros de la lesión diana no disminuyó ni aumentó lo suficiente como para calificar como una respuesta parcial o enfermedad progresiva.

La falta de anticoagulación por ODSH se confirmó mediante la monitorización del tiempo de tromboplastina parcial (aPTT) durante la infusión de ODSH, en los días 1, 3, 10 y 17 del ciclo de tratamiento 1. El intervalo normal de aPTT es de aproximadamente 27 a 35 segundos /- 15 %.

Los pacientes también fueron evaluados por otros efectos secundarios de la quimioterapia, incluyendo fatiga, neuropatía sensorial, náuseas y vómitos, cada uno de los cuales se clasificó según la gravedad. Los grados fueron: 0 (normal), 1 (leve), 2 (moderado), 3 (grave) y 4 (potencialmente mortal).

Resultados. Los recuentos de plaquetas se muestran en la Tabla 16 a continuación. Los recuentos que se muestran en la columna "Cribado" son recuentos antes de ingresar al protocolo del ensayo clínico.

Diez de cada 10 pacientes que completaron el primer ciclo de quimioterapia y a quienes también se les extrajo sangre al comienzo del segundo ciclo tenían recuentos de plaquetas al comienzo del segundo ciclo que eran mayores que sus recuentos de plaquetas al comienzo del primer ciclo, antes de que se le administrara quimioterapia. Ocho de cada 9 pacientes que completaron el segundo ciclo de quimioterapia y a quienes también se les extrajo sangre al comienzo del tercer ciclo tenían recuentos de plaquetas al comienzo del tercer ciclo que eran mayores que sus recuentos de plaquetas al comienzo del primer ciclo, antes de que se le administrara quimioterapia. Esta tendencia fue sólida y continuó en los ciclos posteriores de quimioterapia. Por ejemplo, 9 de cada 10 pacientes que completaron el tercer ciclo de quimioterapia y a quienes también se les extrajo sangre al comienzo del cuarto ciclo tenían recuentos de plaquetas al comienzo del cuarto ciclo que eran mayores que sus recuentos de plaquetas al comienzo del primer ciclo, antes de que se le administrara quimioterapia.

La FIG. 8 muestra un gráfico de los recuentos de plaquetas para pacientes individuales medidos en muestras tomadas antes del tratamiento en los días indicados (D1 = día 1, D8 = día 8 y D15 = día 15) de los ciclos indicados (C1 = ciclo 1; C2 = ciclo 2, etc.). Existe una clara tendencia a aumentar el recuento de plaquetas al inicio de cada ciclo sucesivo de tratamiento, en relación no solo con el recuento de plaquetas después de dos semanas de tratamiento en un ciclo anterior, sino también en relación con el recuento de plaquetas al inicio del ciclo inicial de tratamiento, es decir, antes de administrar cualquier tratamiento. Ninguno de los pacientes presentó trombocitopenia al comienzo del segundo ciclo y solo uno de los 8 pacientes presentó trombocitopenia al comienzo del tercer ciclo.

La Tabla 17 muestra el porcentaje de pacientes con trombocitopenia después de dos dosis (día 15, primer ciclo) o después de cinco o más dosis (día 15, segundo ciclo o día 1, tercer ciclo) de tratamiento con ODSH complementario a gemcitabina y nab-paclitaxel. También se muestran en la Tabla 17, en la fila 3, los datos de antecedentes, que muestran los porcentajes de pacientes con diferentes grados de trombocitopenia que habían sido tratados con gemcitabina y nab-paclitaxel en las mismas cantidades y con la misma pauta de dosificación que se describe en el presente documento, pero sin administración complementaria de ODSH. Los datos presentados en la fila 3 se reproducen de la Tabla 3 de Von Hoff et al., 2011, J. Clinical Oncology 29:1-7, que proporciona el número total y el porcentaje de pacientes que presentaron eventos adversos seleccionados a lo largo del ensayo. El número total de pacientes en cada categoría se muestra entre paréntesis.

Como se ha mostrado anteriormente, después de dos dosis de tratamiento, el 40 % de los pacientes tratados de forma complementaria con ODSH no mostraron trombocitopenia y el 90 % de los pacientes no presentaron más que una trombocitopenia leve. Después de cinco dosis de tratamiento (día 15 del ciclo 2), 7 de cada 10 pacientes no tenían trombocitopenia.

La Tabla 18 muestra los recuentos de plaquetas de cada paciente en el día 1 de los ciclos de tratamiento sucesivos (por ejemplo, ciclo de tratamiento 1, 2, 3, etc.). Como se puede ver en los recuentos de plaquetas al comienzo de los ciclos 2 y 3, incluso después de recibir uno o dos ciclos completos (iguales a tres o seis dosis) de gemcitabina y nabpaclitaxel, solo uno de los pacientes era trombocitopénico, presentando trombocitopenia leve (Grado 1). Todos los demás pacientes mostraron recuentos de plaquetas muy por encima del límite inferior de lo normal. Esta tendencia continuó en el ciclo 4 para los pacientes 2001, 6002, 6003, 6004, 6006, 6007, 7001, 8001 y 9001. De forma general, los recuentos de plaquetas en 10/10 pacientes fueron más altos al comienzo del ciclo 2 que al comienzo del ciclo 1, y los recuentos de plaquetas en 6/9 pacientes fueron más altos al comienzo del ciclo 3 que al comienzo del ciclo 2.

Como se muestra además en la FIG. 10A, el recuento medio y mediano de plaquetas en todas las muestras estuvo constantemente por encima de 150.000 en el primer día de los ciclos de tratamiento 2 y 3, incluso cuando los números estaban por debajo de 150.000 el día 15 del primer ciclo de tratamiento. De hecho, en los ciclos de tratamiento 2 y 3, el recuento medio y mediano de plaquetas en el día 15 (cuando se espera que el recuento de plaquetas sea el más bajo) permaneció en el intervalo normal. Asimismo, los recuentos medios y medianos de plaquetas al comienzo del tercer ciclo fueron mayores que al comienzo del segundo ciclo y fueron mayores al comienzo del segundo ciclo que en la medición de cribado y al comienzo del primer ciclo (antes de que se administrara cualquier quimioterapia).

En la etapa aleatorizada del ensayo, se detectó una diferencia estadísticamente significativa en los recuentos de plaquetas entre la sección de ODSH y la sección de control del estudio, como se muestra en la Tabla 19, a continuación, lo que demuestra que ODSH atenúa la trombocitopenia asociada con los regímenes de tratamiento mielosupresores.

La Tabla 20 a continuación proporciona recuentos absolutos de neutrófilos para los pacientes tratados de forma complementaria con ODSH. Ocho de cada 10 pacientes que completaron el primer ciclo de tratamiento mostraron recuentos normales de neutrófilos en el primer día del segundo ciclo de tratamiento. Cinco de cada 10 pacientes que completaron el primer ciclo también tenían recuentos de neutrófilos aumentados o sin cambios en el primer día del segundo ciclo de tratamiento en comparación con el primer día del primer ciclo (antes de la quimioterapia). Asimismo, 8 de cada 9 pacientes mostraron recuentos de neutrófilos normales al comienzo del tercer ciclo de tratamiento y 10 de cada 10 pacientes mostraron recuentos de neutrófilos normales al comienzo del cuarto ciclo de tratamiento.

La FIG. 9 muestra un gráfico de los recuentos de neutrófilos para pacientes individuales medidos en muestras tomadas antes del tratamiento en los días indicados (D1 = día 1, D8 = día 8 y D15 = día 15) de los ciclos indicados (C1 = ciclo 1; C2 = ciclo 2, etc.). Existe una clara tendencia a aumentar el recuento de neutrófilos al inicio del segundo ciclo de tratamiento, en relación con el recuento de neutrófilos al inicio del ciclo inicial de tratamiento, es decir, antes de administrar cualquier tratamiento.

La Tabla 21 muestra el porcentaje de pacientes con neutropenia después de dos dosis (día 15, primer ciclo) o después de cinco o más dosis (día 15, segundo ciclo o día 15, tercer ciclo) de tratamiento con ODSH complementario a gemcitabina y nabpaclitaxel. También se muestran en la Tabla 21, en la fila 3, los datos de antecedentes, que muestran los porcentajes de pacientes con diferentes grados de neutropenia que habían sido tratados con gemcitabina y nabpaclitaxel en las mismas cantidades y con la misma pauta de dosificación que se describe en el presente documento, sin ODSH. Los datos presentados en la fila 3 se reproducen de la Tabla 3 de Von Hoff et al., 2011, J. Clinical Oncology 29:1-7, que proporciona el número total y el porcentaje de pacientes que presentaron eventos adversos seleccionados a lo largo del ensayo. El número total de pacientes en cada categoría se muestra entre paréntesis.

Como se ha mostrado anteriormente, después de dos dosis de tratamiento, El 44 % de los pacientes tratados de forma complementaria con ODSH no mostraron más que neutropenia leve. Después de cinco dosis de tratamiento (día 15 del ciclo 2) u ocho dosis de tratamiento (día 15 del ciclo 3), 7 de cada 10 pacientes no tenían más que neutropenia leve. Tal como se muestra además en la FIG. 10B, la media y la mediana de los recuentos absolutos de neutrófilos en todas las muestras, estuvieron constantemente por encima de 2000 el primer día de los ciclos de tratamiento 2 y 3, incluso cuando los números estaban por debajo de 2000 el día 15 del ciclo anterior. Con ciclos sucesivos y sin reducción de dosis, los pacientes con neutropenia de grado 3 en el nadir del primer ciclo, no tuvieron más que neutropenia de grado 1 o 2 en los ciclos 2 o 3 (véase los pacientes 6004, 6004 y 7001). Solo un paciente (7001) de cada 10 fue tratado con G-CSF, recibiendo una dosis única en el ciclo 1.

En la etapa aleatorizada del ensayo, se detectó una diferencia estadísticamente significativa en los recuentos de neutrófilos entre la sección de ODSH y la sección de control del estudio, como se muestra en la Tabla 22, a continuación, lo que demuestra que ODSH atenúa la neutropenia asociada con los regímenes de tratamiento mielosupresores.

continuación

Los recuentos totales de glóbulos blancos fueron consistentes con los recuentos de neutrófilos, tal como se muestra a continuación en la Tabla 23.

La evaluación de la fatiga, neuropatía sensorial, náuseas y vómitos, todos los cuales son efectos secundarios comunes de la quimioterapia, y especialmente en el régimen de gemcitabina-abraxane descrito en Von Hoff et al., reveló que los pacientes tratados de forma complementaria con ODSH experimentaron síntomas leves a moderados, con más del 50 % de los pacientes que experimentan efectos secundarios de grado 1 como máximo. La Tabla 24 a continuación proporciona el porcentaje de pacientes que experimentan diferentes grados de cada efecto secundario, en comparación con los porcentajes documentados en Von Hoff et al., 2011, J. Clinical Oncology 29:1-7.

El nivel de CA19-9 en suero, un marcador correlacionado con la extensión del tumor y, por tanto, correlacionado con la eficacia del tratamiento quimioterapéutico, disminuyó en 8 de cada 10 pacientes, lo que muestra que la capacidad de ODSH para atenuar la trombocitopenia y neutropenia e inducir la trombopoyesis y la producción de neutrófilos no interfirió con la eficacia de la quimioterapia (indicado por la disminución de los niveles séricos de CA19-9), coherente con los resultados obtenidos en el modelo animal de xenoinjerto pancreático descrito en el Ejemplo 1. Véase la Tabla 25, a continuación.

Los diez pacientes mostraron una respuesta al tratamiento a pesar de la enfermedad metastásica extensa al comienzo del ensayo clínico: 5 pacientes mostraron una respuesta parcial y 5 pacientes mostraron enfermedad estable, medido utilizando los criterios RECIST. Véase la FIG. 12A. Después de tres o cuatro ciclos completos de tratamiento, ningún paciente mostró evidencia clínica o radiográfica de enfermedad progresiva. Los pacientes 2001 y 6002 también mostraron una reducción en el tamaño del hígado y pulmón o metástasis ganglionares en el cuarto ciclo de tratamiento. Tal como se muestra en la FIG. 11A, las metástasis hepáticas en el paciente 2001 han desaparecido y las lesiones pulmonares han disminuido de tamaño, con síntomas clínicos mínimos de enfermedad metastásica, a pesar del aumento de los niveles de CA19-9. El paciente 6002 mostró enfermedad estable y una reducción del tamaño de las lesiones metastásicas en el hígado y los ganglios linfáticos. Véase las FIG. 11B-C. El paciente 6003, que se presentó con metástasis pulmonares, también mostró enfermedad estable, tal como se muestra en la FIG. 11d . El paciente 6006 mostró enfermedad estable y cierta reducción en el tamaño de las lesiones pancreáticas y metastásicas en el hígado. Véase la FIG. 11E. El paciente 8001 mostró enfermedad estable con una reducción en el tamaño del tumor pancreático al final del ciclo 2. Véase la FIG. 11F. Las FIG. 12B-F muestran que los pacientes 6004, 6007, 7001, 7002 y 9001 tuvieron una respuesta parcial. El estado funcional del Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) en 7 pacientes evaluables fue estable o mejoró después de 8 semanas en el ensayo (en el día 1 del ciclo de tratamiento 3).

El régimen de tratamiento también parece tener efectos adversos mínimos sobre el peso, ya que la mayoría de los pacientes han experimentado una pérdida de peso mínima o incluso un aumento de peso. Véase la Tabla 26, a continuación.

Tal como se muestra en la Tabla 27 siguiente, la infusión de ODSH no produjo anticoagulación, según lo determinado por el tiempo de tromboplastina parcial (aPTT) en los pacientes.

En el ensayo aleatorizado de sin enmascaramiento iniciado después del período de preinclusión, se observó una diferencia significativa en el recuento de plaquetas entre la sección de ODSH y la sección de control (sin ODSH), como se muestra en las Figuras 13A y 13B. La media y la mediana del recuento de plaquetas en el día 15 del primer ciclo de quimioterapia (después de tres dosis de quimioterapia) fue significativamente mayor en los pacientes que recibieron ODSH además de gemcitabina y nab-paclitaxel que en los pacientes que no recibieron ODSh (p = 0,013 usando la prueba de la t para datos independientes, 5 pacientes en cada sección de tratamiento). Véase la FIG. 13A. Este efecto se mantuvo cierto en los ciclos posteriores 2 a 6 (p = 0,0003 después de 6 ciclos en la prueba de la t para datos independientes). Véase la FIG. 13B y Tabla 28 a continuación. Asimismo, la administración complementaria de ODSH mejoró la recuperación de plaquetas el día 1 de un ciclo posterior. La FIG. 13B y la Tabla 28 a continuación (compare el día 1 de los ciclos en pacientes del grupo de control con los pacientes del grupo de ODSH, p = 0,0004 después de 6 ciclos, prueba de la t para datos independientes).

En conclusión, ODSH atenuó los efectos secundarios mielosupresores del régimen de gemcitabina/Abraxane (en comparación con los pacientes documentados en Von Hoff et al., 2011, J. Clinical Oncology 29:1-7 y en comparación con los pacientes aleatorizados para recibir gemcitabina/Abraxane solo, en la parte aleatorizada de este ensayo), y aumento de los recuentos de plaquetas y neutrófilos en los pacientes por encima de los niveles observados antes del tratamiento, conservando la eficacia del régimen de quimioterapia. Asimismo, también se observó una reducción de los efectos secundarios que se manifiestan como síntomas constitucionales, tales como fatiga, náuseas y vómitos. La ODSH y otros heparinoides que interactúan con PF4 atenúan los síntomas constitucionales asociados con la quimioterapia.

De forma general, los efectos observados pueden permitir la intensificación del régimen quimioterapéutico con una eficacia antineoplásica mejorada.

6.4. Ejemplo 4: La ODSH atenúa la trombocitopenia asociada con el tratamiento de la leucemia mielógena aguda (AML)

Se lleva a cabo un ensayo clínico para confirmar la ventaja terapéutica de la ODSH administrada de forma complementaria a la terapia de inducción y consolidación y al posterior trasplante alogénico o autólogo de médula ósea en el tratamiento de la leucemia mielógena aguda (LMA). Los sujetos incluidos en el ensayo son sujetos diagnosticados con AML que se someten a terapia de inducción y consolidación. Los sujetos se asignan aleatoriamente a un grupo de control (que recibe solo terapia de inducción y consolidación) o un grupo de tratamiento (que recibe administración complementaria de ODSH). La ODSH se administra como una infusión continua (0,375 mg/kg/h). Los sujetos de cada sección del ensayo se evalúan para determinar el recuento de plaquetas y la necesidad de transfusión de plaquetas. Otras métricas evaluadas incluyen la medición de los niveles de PF4 en circulación y la tasa de recuperación de granulocitos.

Se obtienen resultados que demuestran que la adición de ODSH a la terapia estándar de inducción y consolidación atenúa la trombocitopenia.

Se lleva a cabo un segundo ensayo clínico para confirmar la ventaja de la ODSH administrada como complemento a la quimioterapia de inducción y consolidación en el tratamiento de la AML. El ensayo es un estudio piloto sin enmascaramiento de diez pacientes recién diagnosticados con AML y no tratados previamente por AML. Los regímenes de tratamiento del paciente son los siguientes. Durante una fase de inducción, se administran 100 mg/m2/día de citarabina de forma continua mediante perfusión intravenosa durante 7 días (día 1-día 7) y se administran 12 mg/m2/día de idarubicina mediante inyección intravenosa en cada uno del día 1, día 2 y día 3. Se administran cuatro mg/kg de ODSH por vía intravenosa en forma de bolo el día 1 inmediatamente después de la idarrubicina, y luego se administran a una dosis de 0,25 mg/kg/h de forma continua por infusión intravenosa del día 1 al día 7. Para pacientes menores de 60 años, la fase de inducción va seguida de hasta cuatro ciclos de quimioterapia de consolidación, cada ciclo consta de 3 g/m2 de citarabina administrada durante un período de 3 horas, cada 12 horas los días 1, 3 y 5 o un ciclo de 5 días. Durante la fase de consolidación, se administran 4 mg/kg de ODSH por vía intravenosa en forma de bolo el día 1 inmediatamente después de la citarabina, y luego se administran a una dosis de 0,25 mg/kg/h de forma continua por infusión intravenosa del día 1 al día 5. La quimioterapia de consolidación se inicia no antes de los 28 días desde el inicio de la quimioterapia de inducción. Se evalúa a los sujetos para determinar el grado y la duración de la trombocitopenia, según el recuento de plaquetas y la necesidad de transfusión.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso en un método de atenuación de un efecto secundario mielosupresor de un régimen de tratamiento mielosupresor, comprendiendo dicho método:

administrar de forma complementaria dicho heparinoide que interactúa con PF-4 a un paciente que recibe un régimen de tratamiento mielosupresor, en donde el heparinoide p F-4 está sustancialmente desulfatado en la posición 2-O y en la posición 3-O, y donde el paciente es un ser humano.

2. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el heparinoide está desulfatado al menos en un 90 % en cada una de las posiciones 2-O y 3-O.

3. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el heparinoide está desulfatado al menos en un 95 % en cada una de las posiciones 2-O y 3-O.

4. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 2 o 3, en donde el heparinoide tiene un peso molecular promedio de aproximadamente 8 kDa a aproximadamente 15 kDa.

5. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el heparinoide tiene un peso molecular promedio de aproximadamente 11 kDa a aproximadamente 13 kDa.

6. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el heparinoide es ODSH.

7. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el heparinoide se administra por vía intravenosa.

8. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el efecto secundario mielosupresor es la trombocitopenia.

9. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el efecto secundario mielosupresor es neutropenia.

10. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el régimen de tratamiento mielosupresor es un régimen de tratamiento antineoplásico.

11. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 10, en donde el régimen de tratamiento antineoplásico comprende la administración de uno o más agentes quimioterapéuticos.

12. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con la reivindicación 10, en donde el régimen de tratamiento antineoplásico comprende radioterapia.

13. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el paciente tiene un cáncer seleccionado del grupo que consiste en: cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de útero, cáncer de mama, cáncer de mama metastásico, cáncer de mama recurrente, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer de pulmón, cáncer colorrectal, cáncer de estómago, cáncer de esófago, linfoma, cáncer de hígado, melanoma, cáncer de próstata, osteosarcoma, leucemia, leucemia mielógena aguda (AML) y leucemia linfoblástica aguda pediátrica.

14. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso según cualquier reivindicación anterior, en donde el paciente tiene leucemia mielógena aguda (AML).

15. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el heparinoide se produce mediante hidrólisis alcalina fría de heparina bovina o porcina no fraccionada.

16. Un heparinoide que interactúa con PF4 para su uso en un método de tratamiento de la trombocitopenia, comprendiendo dicho método:

administrar dicho heparinoide que interactúa con PF4 a un sujeto humano con trombocitopenia, en donde el heparinoide de PF-4 está sustancialmente desulfatado en la posición 2-O y en la posición 3-O, y en donde la trombocitopenia se selecciona de trombocitopenia de consumo, trombocitopenia inmunomediada (que incluye trombocitopenia aloinmune y trombocitopenia autoinmune, que incluye púrpura trombocitopénica inmune (PTI)), trombocitopenia cíclica infecciosa; trombocitopenia mieloptísica causada por invasión neoplásica de la médula ósea; trombocitopenia inducida por la superficie; trombocitopenia inducida por vacunas; trombocitopenia inducida por trasplante de hígado, médula ósea o células madre; y trombocitopenia asociada a enfermedades autoinmunes (por ejemplo, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico) o trastorno linfoproliferativo (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica).

17. El heparinoide que interactúa con PF4 para su uso según la reivindicación 16, en donde la cantidad de heparinoide que interactúa con PF4 es suficiente para mantener los niveles de plaquetas por encima de los niveles que indican trombocitopenia de grado 3.

18. Un heparinoide que interactúa con PF4 para su uso en un método de tratamiento de la neutropenia, comprendiendo dicho método: administrar dicho heparinoide que interactúa con PF4 a un sujeto humano con neutropenia, en donde el heparinoide PF-4 está sustancialmente desulfatado en la posición 2-O y en la posición 3-O.

19. El heparinoide que interactúa con PF4 para su uso según la reivindicación 18, en donde la cantidad de heparinoide es suficiente para mantener los niveles de neutrófilos por encima de los niveles que indican neutropenia de grado 3.

20. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 19, en donde el heparinoide es ODSH.

21. El heparinoide que interactúa con PF4 para su uso según la reivindicación 20, en el que el heparinoide que interactúa con PF4 se administra por vía intravenosa.

22. Un heparinoide que interactúa con PF4 para su uso en un método de tratamiento o prevención de la trombocitopenia inducida por radiación, comprendiendo dicho método:

administrar dicho heparinoide que interactúa con PF4 a un sujeto expuesto a radiación ionizante, en donde el heparinoide de PF-4 está sustancialmente desulfatado en la posición 2-O y en la posición 3-O, y donde el paciente es un ser humano

23. El heparinoide que interactúa con PF4 para su uso según la reivindicación 22, en donde la radiación es parte de un régimen de tratamiento.

24. El heparinoide que interactúa con PF-4 para su uso de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde dicho heparinoide que interactúa con PF-4 es ODSH.