ES2730810T3

ES2730810T3 - Formulación para inhalación líquida que comprende RPL554

Info

Publication number: ES2730810T3
Application number: ES17207623T
Authority: ES
Inventors: Peter Lionel Spargo; Edward James French; Philip A Haywood
Original assignee: Verona Pharma Ltd
Current assignee: Verona Pharma Ltd
Priority date: 2014-09-15
Filing date: 2015-09-15
Publication date: 2019-11-12
Anticipated expiration: 2035-09-15
Also published as: MY196072A; EP3494962A1; HRP20180833T1; AU2020203081B2; AU2015316592A1; NO3193835T3; JP2017528479A; RU2017108432A3; SMT201900340T1; EP3332767B1; NZ767296A; CN111249260A; LT3193835T; CA2959943C; JP6860477B2; AU2018286571A1; RS57227B1; PL3332767T3; EP3332767A1; US9956171B2

Abstract

Una composición farmacéutica líquida adecuada para administración por inhalación que comprende un diluyente y una suspensión de partículas de 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7- tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (RPL554) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 (mediana del tamaño de partícula en volumen) de 0,2 μm a 5 μm y en la que (a) el diluyente es agua y/o (b) la composición farmacéutica líquida comprende adicionalmente uno o más tampones.

Description

DESCRIPCIÓN

Formulación para inhalación líquida que comprende RPL554

Campo de la invención

La presente invención se refiere a una composición farmacéutica líquida que comprende un fármaco respiratorio. Antecedentes de la invención

Las propiedades toxicocinéticas de las composiciones farmacéuticas líquidas son impredecibles. Es importante que un principio activo (PA) sea correctamente formulado de manera que se proporcione una dosificación segura, eficaz y controlada cuando la composición se administra a un paciente. Esto es particularmente el caso para composiciones inhaladas. Además, las composiciones farmacéuticas líquidas deben tener estabilidad fiable a largo plazo para garantizar que el perfil de dosificación de la composición se mantenga después del almacenamiento. Esto evita la administración de dosificaciones incorrectas. Las composiciones farmacéuticas también deben formularse de tal forma que la administración no sea desagradable para un paciente, por ejemplo en lo que respecta al sabor y acidez.

RPL554 (9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona) es un inhibidor dual PDE3/PDE4 y se describe en el documento WO 00/58308 (y también se denomina algunas veces RPL554). Como inhibidor PDE3/PDE4 combinado, RPL554 tiene tanto actividad antiinflamatoria y broncodilatadora y es útil en el tratamiento de trastornos respiratorios tales como asma y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). La estructura de RPL554 se muestra a continuación.

Es frecuentemente preferible administrar RPL554 por inhalación debido a su eficacia en el tratamiento de trastornos respiratorios. Un método de administración eficaz es la nebulización. Franciosi et al. desvelan una solución de RPL554 en un tampón citrato-fosfato (Efficacy and safety of RPL554, a dual PDE3 and PDE4 inhibitor, in healthy volunteers and in patients with asthma or chronic obstructive pulmonary disease: findings from four clinical trials, The Lancet: Respiratory Medicine 11/2013; 1(9):714-27. DOI: 10.1016/S2213-2600(13)70187-5).

El efecto de RPL554 en el tono de músculo liso bronquial humano aislado se describe en Calzetta et al., (Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 346 (2013) 3, 414-423). Compton et al., Pulmonary Pharmacology and Therapeutics 26 (2013) 562-573) describe los tratamientos para EpOc .

Sumario de la invención

Es un hallazgo sorprendente de la presente invención que la composición óptima para inhalación que comprende RPL554 es una composición farmacéutica líquida que comprende una suspensión de partículas de RPL554. Se ha encontrado que las suspensiones de RPL554 tienen propiedades altamente deseables para un ámbito clínico. Se han encontrado varios beneficios que se asocian a una composición farmacéutica líquida que comprende un diluyente y una suspensión de partículas de RPL554 o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

La composición farmacéutica líquida de la invención tiene propiedades enormemente mejoradas con respecto a las formulaciones previas, por ejemplo, cuando se compara con una formulación en solución de RPL554. Con respecto a las propiedades toxicocinéticas, se ha encontrado que la formulación en suspensión tiene características de liberación retardada en comparación con las de una solución. Esto puede reducir el número de tratamientos que deben administrarse a un paciente. También se ha encontrado que la suspensión permite administrar una dosificación mucho mayor de RPL554, como puede apreciarse de los valores de Cmáx y ABC en plasma. Esto también puede reducir la frecuencia de administraciones requerida.

La composición farmacéutica líquida de la invención también muestra excelente estabilidad, no mostrando las composiciones degradación después de 12 meses a condiciones ambientales (25 °C), no después de 6 meses en condiciones aceleradas (40 °C). Se observa degradación en una composición en solución comparable en las mismas condiciones. Las composiciones pueden no mostrar degradación después de 12 meses en condiciones ambientales (25 °C/60 % de HR), ni después de 6 meses en condiciones aceleradas (40 °C/75 % de HR).

Por consiguiente, la presente invención proporciona una composición farmacéutica líquida que comprende un diluyente y una suspensión de partículas de 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (RPL554) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 (mediana del tamaño de partícula en volumen) de 0,2 pm a 5 pm, y en la que (a) el diluyente es agua y/o (b) la composición farmacéutica líquida comprende adicionalmente uno o más tampones.

La invención también proporciona una composición farmacéutica líquida según la invención para su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal. Una composición farmacéutica líquida según la invención puede usarse en el tratamiento o la prevención de una enfermedad o afección seleccionada de asma, asma alérgica, fiebre del heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfisema, bronquiectasia, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), síndrome disneico del adulto (SDA), asma resistente a esteroides, asma grave, asma pediátrico, fibrosis quística, fibrosis de pulmón, fibrosis pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias.

Normalmente, dicha enfermedad o afección es asma o EPOC, más normalmente EPOC.

La invención también se refiere a un método de tratamiento o prevención de una enfermedad o afección tal como se define en el presente documento en un sujeto, cuyo método comprende administrar a dicho sujeto una cantidad eficaz de una composición farmacéutica líquida de acuerdo con la invención.

Breve descripción de las figuras

Figura 1 - La concentración de provocación (PC) de acetilcolina que produjo de forma acumulada un aumento del 50 % en la resistencia total de las vías respiratorias (Acetilcolina ^rL PC50) en animales tratados con solución salina o formulación en solución de RPL554: momento de tiempo de 2 y 5 h: La acetilcolina RL PC50 se transformó logarítmicamente para los fines del análisis estadístico. La prueba de la t a posteriori de los datos sin transformar mostró diferencias entre grupos frente a solución salina. *El análisis no paramétrico mostró una diferencia significativa entre 2 h (1 mg/ml de solución de RPL554, P = 0,0190 sin ajustar) y 5 h (2,5 mg/ml de solución, P = 0,0095 sin ajustar) frente al grupo de solución salina. Valores de N = 6, 4, 4; 4, 4 izquierda a derecha. (Nota control de 5 h no representado).

Figura 2 - Acetilcolina RL PC50 en animales tratados con vehículo o la formulación en suspensión de RPL554: momento de tiempo de 2 y 5 h: La acetilcolina RL PC50 se transformó logarítmicamente para los fines del análisis estadístico (panel superior). El análisis no paramétrico mostró una diferencia significativa entre 2 h (10 mg/ml de suspensión de RPL554, P = 0,0268 sin ajustar) frente al grupo de control de vehículo. El reanálisis de los datos combinando los datos del vehículo (2 5 h) reveló una broncoprotección significativa global (P=0,0016) que se reflejó por un grado significativo de broncoprotección con 2,5 mg/ml de suspensión de RPL554 (2,52 veces (1-5,72), P < 0,05 y 10 mg/ml de suspensión de RPL554 (4,67 veces (2-11), *P < 0,05) frente al vehículo. En el momento de tiempo de 5 h, RPL554 a 10 mg/ml de suspensión causó un grado significativo de broncoprotección (2,77 veces (1,3-6,0), *P < 0,05). (N=8,4,4,3, 6, izquierda a derecha) (panel inferior).

La Figura 3 muestra las concentraciones medias de RPL554 en plasma de voluntarios humanos sanos tras la administración de o bien (i) la formulación en suspensión o (ii) la formulación en solución por nebulizador a un nivel de dosis nominal de aproximadamente 1,5 mg.

Descripción detallada de la invención

Normalmente, las partículas de RPL554 son partículas micronizadas.

Las partículas tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 (tamaño de partícula medio por volumen) de aproximadamente 0,2 pm a aproximadamente 5 pm. Más normalmente, las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 de aproximadamente 0,7 pm a aproximadamente 3,0 pm. Por ejemplo, las partículas de RPL554 pueden tener una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 de 0,9 pm a 1,7 pm, o alternativamente de 1,7 pm a 2,7 pm. Frecuentemente, las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 de aproximadamente 1,1 pm a aproximadamente 2,6 pm.

El valor de Dv50 es la mediana del tamaño de partícula para una distribución de volumen. Así, la mitad del volumen de las partículas está comprendido en partículas que tienen diámetros inferiores al valor de Dv50 y la mitad del volumen de las partículas está comprendido en partículas que tienen diámetros superiores al valor de Dv50. Esto es un modo muy conocido en el que describir distribuciones del tamaño de partícula.

Las partículas normalmente tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv10 de aproximadamente 0,4 |jm a aproximadamente 1,0 |jm. Las partículas normalmente tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv90 de aproximadamente 2,0 jm a aproximadamente 4,0 jim. El valor de Dv10 refleja el diámetro de partícula donde el 10 % del volumen de la muestra está en partículas que tienen un diámetro de partícula inferior al valor de Dv10. El valor de Dv90 refleja el diámetro de partícula donde el 90 % del volumen de la muestra está en partículas que tienen un diámetro de partícula inferior al valor de Dv90.

La técnica usada para medir el valor de Dv50 normalmente es la difracción láser. Por ejemplo, las partículas de RPL554 normalmente tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 de aproximadamente 0,2 jm a aproximadamente 5 jm como se mide por difracción láser. El análisis de la distribución del tamaño de partícula puede realizarse por difracción láser usando Malvern Spraytec conjuntamente con una celda de dispersión en húmedo. Normalmente, los parámetros del instrumento para Malvern Spraytec son del siguiente modo:

partícula - partícula opaca estándar;

Partícula de índice de refracción - 1,50;

índice de refracción (imaginario) - 0,50;

densidad de partícula - 1,00;

índice de refracción del dispersante - 1,33;

unida de control - 1000 rpm;

tipo de medición - cronometrada;

tiempo de muestreo inicial - 30 s;

ocultamiento - 20 % - 30 %;

dispersante - 1 % de polisorbato 20 en agua desionizada.

Las partículas de RPL554 pueden producirse por cualquier proceso de reducción de tamaño farmacéuticamente aceptable o proceso de producción controlada del tamaño de partícula. Por ejemplo, las partículas pueden producirse por secado por pulverización de una solución de RPL554, o por cristalización controlada, o por reducción de tamaño de una forma sólida de RPL554, por ejemplo por molienda con chorro de aire, micronización mecánica o molienda con materiales.

La concentración de partículas de RPL554 en la composición farmacéutica líquida normalmente es de aproximadamente 0,01 mg/ml a aproximadamente 40 mg/ml. Más normalmente, la concentración de partículas de RPL554 en la composición farmacéutica líquida es de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 20 mg/ml. Por ejemplo, la concentración de partículas de RPL554 en la composición farmacéutica líquida puede ser de aproximadamente 0,01 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml, o de 0,11 mg/ml a 5 mg/ml. La concentración de partículas de RPL554 en la composición farmacéutica líquida puede ser, por ejemplo, de 0,1 mg/ml a 6 mg/ml. Preferentemente, el pH de la suspensión es de aproximadamente 6 a aproximadamente 8, más preferentemente de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 7.

La composición farmacéutica líquida puede comprender además uno o más tensioactivos. Los tensioactivos son tensioactivos farmacéuticamente aceptables. Los tensioactivos pueden ser tensioactivos no iónicos, tensioactivos aniónicos, tensioactivos catiónicos o tensioactivos de ión bipolar. Preferentemente, el uno o más tensioactivos están seleccionados de uno o más tensioactivos no iónicos.

El uno o más tensioactivos normalmente están seleccionados de alquil éteres de polioxietilenglicol, alquil éteres de polioxipropilenglicol, alquil éteres de glucósido, octilfenol éteres de polioxietilenglicol, alquilfenol éteres de polioxietilenglicol, ésteres alquílicos de glicerol, ésteres alquílicos de sorbitano de polioxietilenglicol (polisorbatos), ésteres alquílicos de sorbitano, cocamida MEA, cocamida DEA, óxido de dodecildimetilamina, copolímeros de bloque de polietilenglicol y polipropilenglicol (poloxámeros) y amina de sebo polietoxilada (POEA).

Preferentemente, el uno o más tensioactivos están seleccionados de ésteres alquílicos de sorbitano de polioxietilenglicol, por ejemplo polisorbato 20 (monolaurato de sorbitano de polioxietileno (20)), polisorbato 40 (monopalmitato de sorbitano de polioxietileno (20)), polisorbato 60 (monoestearato de sorbitano de polioxietileno (20)) y polisorbato 80 (monooleato de sorbitano de polioxietileno (20)) y ésteres alquílicos de sorbitano, por ejemplo, monolaurato de sorbitano, monopalmitato de sorbitano, monoestearato de sorbitano, triestearato de sorbitano y monooleato de sorbitano.

La concentración total del uno o más tensioactivos normalmente es de aproximadamente 0,01 mg/ml a aproximadamente 2 mg/ml. La composición frecuentemente comprende dos o más tensioactivos, por ejemplo un polisorbato y un tensioactivo Span.

Normalmente, la composición farmacéutica líquida comprende además uno o más tampones. Los tampones son tampones farmacéuticamente aceptables. Los tampones pueden ser cualquier tampón adecuado para su uso en una composición farmacéutica líquida adecuada para inhalación. El uno o más tampones normalmente están seleccionados de tampones citrato o fosfato. Los tampones citrato incluyen ácido cítrico, citrato de sodio y mezclas de los mismos. Los tampones fosfato incluyen ácido fosfórico, monofosfato de sodio, fosfato de sodio dibásico y mezclas de los mismos.

La concentración total del uno o más tampones normalmente es de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 40 mg/ml. La composición frecuentemente comprende dos o más componentes de tampón, por ejemplo dos sales de fosfato, por ejemplo sales de fosfato de sodio.

Una composición farmacéutica líquida según la invención puede comprender: (a) las partículas de RLP554 a una concentración de aproximadamente 0,01 mg/ml a aproximadamente 40 mg/ml; (b) uno o más tensioactivos a una concentración de aproximadamente 0,01 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml; y (c) un tampón a una concentración de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 25 mg/ml.

La composición farmacéutica líquida normalmente comprende además un agente de ajuste de la tonicidad. El agente de ajuste de la tonicidad puede ser cualquier agente de ajuste de la tonicidad farmacéuticamente aceptable. Ejemplos de agentes de ajuste de la tonicidad incluyen sales non tóxicas simples tales como haluros de metal alcalino, por ejemplo cloruro sódico y yoduro de potasio. Normalmente, el agente de ajuste de la tonicidad es cloruro sódico. La concentración del agente de ajuste de la tonicidad dependerá de la cantidad requerida para alcanzar la tonicidad deseada, por ejemplo isotonicidad con el cuerpo o los pulmones. La concentración del agente de ajuste de la tonicidad normalmente es de aproximadamente 2 mg/ml a aproximadamente 8 mg/ml, y más normalmente de aproximadamente 3,5 mg/ml a 6 mg/ml.

La composición farmacéutica líquida puede comprender otros componentes. Alternativamente, pueden excluirse otros componentes. En algunos casos, la composición farmacéutica líquida no comprende un agonista de receptor p²-adrenérgico o un antagonista de receptor muscarínico (o no comprende más del 0,1 % en peso del total de un agonista de receptor p²-adrenérgico y un antagonista de receptor muscarínico).

El diluyente puede ser cualquier diluyente farmacéuticamente aceptable. El diluyente es adecuado para administración por inhalación. Ejemplos de diluyentes adecuados incluyen agua, etanol y glicerol. El diluyente es preferentemente agua. El diluyente es preferentemente estéril.

Una composición farmacéutica líquida según la invención normalmente comprende:

(a) las partículas de RLP554 a una concentración de 0,01 mg/ml a 40 mg/ml;

(b) un éster alquílico de sorbitano de polioxietilenglicol a una concentración de 0,1 mg/ml a 2 mg/ml;

(c) un éster alquílico de sorbitano a una concentración de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml;

(d) un primer componente de tampón fosfato a una concentración de 5 mg/ml a 10 mg/ml;

(e) un segundo componente de tampón fosfato a una concentración de 5 mg/ml a 10 mg/ml; y

(f) un agente de ajuste de la tonicidad a una concentración de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

Por ejemplo, la composición farmacéutica líquida puede comprender:

(a) las partículas de RLP554 a una concentración de 0,05 mg/ml a 25 mg/ml;

(b) monolaurato de sorbitano de polioxietileno (20) (polisorbato 20, Tween 20) a una concentración de 0,1 mg/ml a 2 mg/ml;

(c) monolaurato de sorbitano (Span 20) a una concentración de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml;

(d) monofosfato de sodio monohidratado a una concentración de 5 mg/ml a 10 mg/ml;

(e) fosfato de sodio dibásico anhidro a una concentración de 5 mg/ml a 10 mg/ml; y

(f) cloruro sódico a una concentración de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

Normalmente, la composición farmacéutica líquida es adecuada para administración por nebulizador.

La invención también proporciona un nebulizador que comprende una composición farmacéutica líquida según la invención. El nebulizador normalmente se carga con la composición farmacéutica líquida. El nebulizador normalmente comprende de aproximadamente 1 ml a aproximadamente 200 ml, más normalmente de 1 ml a 20 ml de la composición farmacéutica líquida.

Los nebulizadores usan aire comprimido para aerosolizar una composición farmacéutica líquida en un aerosol que es inhalada en las vías respiratorias de un sujeto. Ejemplos de nebulizadores incluyen un nebulizador de niebla suave, un nebulizador de malla vibrante, un nebulizador de chorro y un nebulizador de ondas ultrasónicas. Dispositivos nebulizadores adecuados incluyen Philips I-neb™ (Philips), Pari LC Sprint (Pari GmbH), AERx^RTMPulmonary Delivery System (Aradigm Corp.) y Pari LC Plus Reusable Nebulizer (Pari GmbH).

La invención también proporciona una composición farmacéutica líquida para su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal. La composición es como se define en el presente documento. La composición farmacéutica líquida normalmente es para su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal, en el que el tratamiento comprende administración por inhalación.

Las composiciones de la invención permiten la liberación retardada de RPL554 en la circulación sanguínea. La concentración plasmática de RPL554 después de un cierto tiempo es, por tanto, elevada con respecto al uso de composiciones de RPL554 conocidas. Normalmente, la concentración en plasma sanguíneo de RPL554 es mayor o igual a 1 ng/ml en un tiempo superior o igual a cuatro horas después de administrar una dosis nebulizada de la composición. La dosis nebulizada normalmente es de 0,02 mg/kg a 0,6 mg/kg. Por ejemplo, la dosis nebulizada puede ser de 0,2 mg/kg a 0,6 mg/kg. Por ejemplo, la invención proporciona una composición farmacéutica líquida como se define en el presente documento para su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal, en la que la concentración en plasma sanguíneo de RPL554 es mayor o igual a 1 ng/ml en un tiempo superior o igual a cuatro horas después de administrar una dosis nebulizada de 0,2 mg/kg a 0,6 mg/kg mediante inhalación de la composición nebulizada de la invención. La concentración en plasma sanguíneo de RPL554 normalmente es mayor o igual a 1 ng/ml en un tiempo superior o igual a tres, cuatro o cinco horas después de administrar una dosis nebulizada de la composición.

La invención también se refiere a un método de tratamiento o prevención de una enfermedad o afección como se define en el presente documento en un sujeto, método que comprende administrar a dicho sujeto una cantidad eficaz de una composición farmacéutica líquida como se define en el presente documento. Normalmente, el método es para tratar una enfermedad o afección. La enfermedad o afección normalmente está seleccionada de asma, asma alérgica, fiebre del heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfisema, bronquiectasia, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), síndrome disneico del adulto (SDA), asma resistente a esteroides, asma grave, asma pediátrico, fibrosis quística, fibrosis de pulmón, fibrosis pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral y enfermedades autoinmunitarias. Preferentemente, el método comprende el tratamiento de asma o enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), más preferentemente EPOC.

Una cantidad eficaz de RPL554 normalmente es de aproximadamente 0,01 mg/kg a 50 mg/kg para una dosis única. Una cantidad eficaz de RPL554 es frecuentemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a 1 mg/kg para una dosis única. Por ejemplo, una cantidad eficaz puede ser una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg, o de aproximadamente 0,1 mg a 100 mg, preferentemente de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 6 mg. Una cantidad eficaz puede ser de 0,1 mg a 12 mg. Una dosis única de RPL554 puede ser de 0,5 mg a 3 mg, por ejemplo aproximadamente 1,5 mg. La dosis puede administrarse diariamente. Por ejemplo, la dosis de RPL554 puede ser de 0,01 mg/kg/día a 50 mg/kg/día, normalmente de 0,01 mg/kg/día a 10 mg/kg/día o de 0,01 mg/kg/día a 1 mg/kg/día. Estas dosis normalmente son la dosis nominal emitida del inhalador. La composición farmacéutica líquida puede administrarse una vez, dos veces o tres veces al día, o puede administrarse dos veces, tres veces, cuatro veces o cinco veces a la semana. La composición puede administrarse tan frecuentemente como sea requerido por el paciente.

Una cantidad eficaz puede ser una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg, o de aproximadamente 0,1 mg a 100 mg, preferentemente de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 6 mg. Una cantidad eficaz puede ser de 0,1 mg a 12 mg. Una dosis única de RPL554 puede ser de 0,5 mg a 24 mg, que puede administrarse por nebulizador. Una dosis única de RPL554 puede ser de 0,5 mg a 6 mg, por ejemplo aproximadamente 1,5 mg. La dosis puede administrarse una vez, dos veces o tres veces al día. Por ejemplo, la dosis de RPL554 puede ser de 0,1 mg/día a 50 mg/día, normalmente de 1,5 mg/día a 18 mg/día. Estas dosis normalmente son la dosis nominal emitida del inhalador. La composición farmacéutica líquida puede administrarse una vez, dos veces o tres veces al día, o puede administrarse dos veces, tres veces, cuatro veces o cinco veces a la semana. La composición puede administrarse tan frecuentemente como sea requerido por el paciente.

Es un hallazgo sorprendente de la presente invención que una formulación en suspensión de RPL554 permita administrar altas dosis de RPL554 a un paciente sin un aumento simultáneo en la sensibilidad cardiovascular. La composición farmacéutica líquida es, por tanto, adecuada para su uso en el tratamiento de pacientes que padecen trastornos cardiovasculares o en riesgo de sufrir trastornos cardiovasculares.

Por ejemplo, la composición puede usarse para tratar una enfermedad o afección como se ha definido anteriormente en un paciente que padece vulnerabilidad cardiovascular. Los pacientes que padecen vulnerabilidad cardiovascular normalmente son aquellos en riesgo elevado de acontecimientos adversos que surgen de taquicardia o hipertensión. Más normalmente, los pacientes que padecen vulnerabilidad cardiovascular son aquellos que padecen una afección cardíaca preexistente, o una afección que sería agravada por taquicardia o hipertensión. Tales pacientes incluyen aquellos que padecen enfermedad de las arterias coronarias, cardiomiopatía, hipertensión, enfermedad cardíaca hipertensiva, insuficiencia cardíaca, arritmia, disritmias cardíacas, endocarditis, miocarditis, enfermedad cardíaca valvular y accidente cerebrovascular. También están incluidos pacientes que han sufrido un infarto de miocardio.

La invención se describe en más detalle por los siguientes ejemplos.

Ejemplos

Ejemplo 1 - formulación y estabilidad de la formulación en suspensión de RPL554

Se produjeron composiciones farmacéuticas líquidas según la invención con las formulaciones expuestas en las Tablas 1 y 2 a continuación.

T l 1 - f rm l i n ri n 1 4 m ml

T l 2 - f rm l i n ri n 1 2 m ml

La prueba del ensayo se realizó por duplicado. Los parámetros del método clave son del siguiente modo:

fase móvil: acetonitrilo:agua:TFA (45:55:0,1);

columna: Waters X-Bridge phenyl, 3,5 pm, 150 x 4,6 mm;

caudal: 1,5 ml/min;

volumen de inyección: 10 pl;

detección: UV a 254 nm;

tiempo de ejecución: 6 minutos; y

muestra y concentración de patrón: 0,1 mg/ml.

La variante 1a se almacenó en condiciones de o bien (i) una temperatura de 25 °C y una humedad relativa (HR) del 60 % o bien (ii) una temperatura de 40 °C y una HR del 75 %. El aspecto, pH, ensayo, impurezas y distribución del tamaño de partícula (PSD) se midieron inicialmente, a 1 mes, a 2 meses y a 6 meses (6 meses solo para las condiciones de 25 °C y HR del 60 %). La cantidad de impurezas se midió por HPLC con el tiempo de retención relativo (TRR) de la impureza indicada.

Los resultados se muestran en las Tablas 3 y 4 a continuación.

Tabla 3 - Estabilidad de la variante 1a en condiciones: 25 °C/60 % de HR

Tabla 4 - Estabilidad de la variante 1a en condiciones: 40 °C/75 % de HR

La variante 1b se almacenó en condiciones de o bien (i) una temperatura de 25 °C y una humedad relativa (HR) del 60 % o bien (ii) una temperatura de 40 °C y una HR del 75 %. El aspecto, pH, impurezas y distribución del tamaño de partícula (PSD) se midieron inicialmente, a 1 mes, y a 2 meses. La cantidad de impurezas se midió por HPLC con el tiempo de retención relativo (TRR) de la impureza indicada.

Los resultados se muestran en las Tablas 5 y 6 a continuación.

Tabla 5 - Estabilidad de la variante 1b en condiciones: 25 °C/60 % de HR

Tabla 6 - Estabilidad de la variante 1b en condiciones: 40 °C/75 % de HR

Como puede apreciarse de las Tablas 3 a 6, la composición farmacéutica líquida según la invención muestra excelente estabilidad a largo plazo sin variación significativa en el pH o la cantidad de impurezas presentes. Esta estabilidad se observa incluso después de 2 meses a 40 °C.

Ejemplo comparativo 1 - formulación y estabilidad de formulación en solución de RPL554

Se realizó una prueba de estabilidad similar para la formulación en solución de RPL554. Se mantuvo una solución de 1,0 mg/ml de RPL554 en una solución acuosa de tampón citrato/fosfato a un pH de aproximadamente 3,2 en condiciones de una temperatura de 25 °C y una humedad relativa (HR) del 60 % durante seis meses. Se midieron el aspecto, pH, ensayo e impurezas presentes inicialmente y a los 6 meses. Los resultados se muestran en la Tabla 7 a continuación.

Tabla 7 - Estabilidad de la solución de RPL554 en condiciones: 25 °C/60 % de HR

continuación

Aunque no hay cambio en el aspecto de la solución, hay un aumento significativo en la cantidad de la impureza con el valor de TRR de 0,87. Esta impureza se ha identificado como un producto de hidrólisis de RPL554. La solución de RPL554 es menos estable que la formulación en suspensión según la invención.

Ejemplo 2 - distribución del tamaño de partícula

Se evaluó la distribución del tamaño de partícula de una muestra de RPL554 micronizada adecuada para su uso en formulaciones nebulizadas usando difracción láser. El análisis de la distribución del tamaño de partícula se realizó por difracción láser usando Malvern Spraytec conjuntamente con una celda de dispersión en húmedo.

Los resultados son del siguiente modo: Dv10 = 0,69 pm; Dv50 = 1,35 pm; Dv90 = 2,5 pm.

Ejemplo 3 - formulaciones

Se prepararon formulaciones en suspensión y en solución de RPL554 del siguiente modo. Estas formulaciones se usaron en los Ejemplos 4 a 6.

Constituyentes de 20 mg/ml de suspensión de RPL554

formulación (suspensión) Constituyente Cantidad Concentración (mg/ml)

RPL554 - Micronizada 2,12 ga 20 mg/ml Solución de humectación 10,0 ml N/A

Solución de tampón Hasta 100 ml N/A

a Incluye un 6 % superior para pérdidas de fabricación esperadas

Vehículo = como antes, omitiendo RPL554

Solución de tampón de RPL554

Constituyente Cantidad (g) Concentración (mg/ml) Monofosfato de sodio monohidratado 32,9 6,58

Fosfato de sodio dibásico anhidro 34,0 6,80

Cloruro sódico 24,0 4,80

Agua para inyección Hasta 5000 ml N/A

Solución de humectación de RPL554

Constituyente Cantidad (g) Concentración (mg/ml) Polisorbato 20 (Tween 20) 10,0 5,00

Monolaurato de sorbitano (Span 20) 1,0 0,50

RPL554 Disolución de tampón Hasta 2000 ml N/A

Método de preparación Solución de humectación de RPL554: Se pesó la cantidad requerida de polisorbato 20 (suspensión) en un recipiente adecuado y se añadió la cantidad requerida de monolaurato de sorbitano. La solución de humectación se agitó magnéticamente durante 10 minutos, luego se transfirió a un recipiente más grande con solución de tampón y se enrasó al volumen final con la solución de tampón. La solución se agitó magnéticamente durante 10 minutos y se filtró a través de un filtro de 0,22 pm.

Vehículo: Se midió el volumen requerido de Solución de humectación de RPL554 en un recipiente adecuado y se enrasó al volumen final con Solución de tampón de RPL554, se mezcló con un agitador magnético durante 10 minutos. Se midió el pH, se registró y se ajustó, si fuera necesario, a pH 7,0 ± 0,3 usando HCl/NaOH.

20 mg/ml de suspensión de RPL554: Se pesó la cantidad requerida de RPL554 en un vaso de precipitados pequeño y se añadió la cantidad requerida de Solución de humectación. La suspensión se mezcló usando una mezcladora Silverson provista de un tamiz de cizallamiento de 5/8" durante aproximadamente 1 minuto a 8000 rpm. La mezcla se transfirió a un nuevo vaso de precipitados seco limpio enjuagando con Solución de tampón. Se enrasó el peso requerido con Solución de tampón y se mezcló usando una mezcladora Silverson provista de un tamiz de cizallamiento de 1" de altura aproximadamente 1 minuto a 8000 rpm. Se midió el pH, se registró y se ajustó, si fuera necesario, a pH 7,0 ± 0,3 usando HCl/NaOH. La solución se transfirió al recipiente final. Para las concentraciones más bajas de suspensiones de RPL554, se pesó la cantidad requerida de 20 mg/ml de formulación y se diluyó al volumen requerido con vehículo usando una jeringa provista de un filtro de 0,22 pm. La formulación se mezcló suavemente en un agitador magnético durante 5 minutos.

Constituyentes de 1 mg/ml (pH 3,5) de solución de RPL554

formulación (solución) Constituyente Cantidad

RPL554 100 mg

Solución 0,1 M de ácido cítrico 22,5 ml

Solución 0,2 M de fosfato de sodio 9,7 ml

dibásico dodecahidratado

0,9 % (p/p) de solución salina 67,8 ml

1,5 mg/ml (pH 2,5) de solución de RPL554

Constituyente Cantidad

RPL554 150 mg

Solución 0,1 M de ácido cítrico 45 ml

Solución 0,2 M de fosfato de sodio 5 ml

dibásico dodecahidratado

0,9 % (p/p) de solución salina 50 ml

Vehículo: Como antes, omitiendo RPL554

Método de preparación Solución de RPL554 ácido cítrico 0,1 M: Se pesó la cantidad requerida de ácido cítrico (solución) en un recipiente adecuado, se enrasó al volumen requerido con 0,9 % de solución salina y se agitó magnéticamente hasta que se disolvió completamente.

Solución de RPL554 fosfato de sodio dibásico 0,2 M: Se pesó la cantidad requerida de fosfato de sodio dibásico anhidro en un recipiente adecuado, se enrasó al volumen requerido con 0,9 % de solución salina y se agitó magnéticamente hasta que se disolvió completamente.

Vehículo: Se midieron el volumen requerido de solución de ácido cítrico, solución de fosfato de sodio dibásico y 0,9 % de solución salina en un recipiente adecuado y se mezclaron minuciosamente. Se midió el pH y se ajustó si fuera necesario (pH 3,5 (±0,3) o pH 2,5 (±0,2)) por la adición gota a gota de solución de ácido cítrico o fosfato de sodio adicional según se requiriera.

Solución de RPL554: Se pesó la cantidad requerida del material de prueba en un recipiente adecuado, se enrasó al volumen final con vehículo y se agitó magnéticamente hasta que se disolvió completamente. Se midió el pH y se ajustó si fuera necesario. Ejemplo 4 - perfil toxicocinético en ratas

Resumen

Se administraron ratas Han Wistar (5/sexo/grupo) por inhalación solo nasal de una vez al día a la dosis objetivo de 2,4, 8,4 o 21,6 mg/kg/día de una suspensión de RPL554 según la invención durante 7 días consecutivos (grupos 2, 3 y 4). 5 ratas/sexo/grupo adicionales recibieron la suspensión de vehículo y actuaron de controles (grupo 1). La duración de la administración de dosis fue 240 minutos cada día. Al final del periodo de tratamiento, todos los animales supervivientes se sacrificaron y se les practicó la autopsia. Se administraron similarmente animales satélite (3/sexo/grupo) y se sangraron en el día 7 para el análisis toxicocinético. Se administró un grupo adicional de animales satélite (3/sexo) por inhalación solo nasal una vez al día a la dosis objetivo de 2,4 mg/kg/día de solución de RPL554 para comparación con la suspensión de RPL554 y se sangraron en el día 7 para el análisis toxicocinético (grupo 5). Las concentraciones de aerosol medias y dosis logradas se presentan en la Tabla 8 continuación.

T l - n nr i n r l m i i l r

Resultados toxicocinéticos

Se midió el perfil toxicocinético de la suspensión de RPL554 a diferentes dosis (grupos 2, 3 y 4). Éste se comparó con el perfil toxicocinético de la solución de RPL554 conocida (grupo 5). Las dosificaciones administradas al grupo 2 y grupo 5 son similares. El grupo 1 es el grupo de control.

Se evaluaron los parámetros toxicocinéticos de RPL554 en forma de suspensión (invención) o solución (comparativa) en el día 7 de 1 semana de exposición a inhalación diaria de las composiciones de RPL554 a ratas. Los resultados se muestran en las Tablas 10 y 11 a continuación. Los parámetros medidos son concentración máxima de RPL554 en el plasma sanguíneo de las ratas (C^máx), el tiempo necesario para alcanzar la C^máx(T^máx) y el área bajo la curva de dosis después de 8 horas (ABC^sh).

T l 1 - r l xi in i r r m h

Estos resultados demuestran que es posible alcanzar valores de C^máxsustancialmente más altos usando la composición farmacéutica líquida de la invención (por ejemplo, los grupos 3 y 4) en comparación con una composición en solución (grupo 5). La dosis limitada por la solubilidad factible de una solución de RPL554 previene que tales valores de C^máxsean alcanzados con una composición en solución. También se muestra que las composiciones en suspensión tienen una liberación retardada, con valores de T^máxmayores observados para los grupos 2 a 4.

Ejemplo 5 - perfil toxicocinético en perros

Se evaluó el perfil toxicocinético de suspensiones de RPL554 según la invención para perros beagle. El diseño del estudio fue como se expone en la Tabla 12 a continuación.

T l 12 - i ñ l i i n nr i n n min l

continuación

Los animales recibieron la sustancia de prueba, RPL554, por administración por inhalación durante 3 días a cada dosis en la fase de dosis variable (Fase 1), con al menos 2 días de periodo de lavado entre dosis. En la fase de dosis constante (Fase 2), los animales recibieron la sustancia de prueba durante 7 días consecutivos. En la fase de grupos cruzados (Fase 3), los animales recibieron la sustancia de prueba como una única exposición a la formulación en suspensión, seguido de 2 días sin dosis, seguido de una única exposición a la formulación en solución comparativa.

Resultados toxicocinéticos

Tras 7 días de dosis a 9,82 mg/kg/día con la suspensión de RPL554 (grupo 2), los valores de Cmáx para machos y hembras fueron 116 ng/ml y 95,9 ng/ml, respectivamente, y los valores de ABC6h para los machos y hembras fueron 389 ng.h/ml y 289 ng.h/ml, respectivamente.

Después de una única exposición de suspensión de RPL554 a 0,395 mg/kg, los valores de Cmáx para el macho y las hembras fueron 13,4 ng/ml y 12,7 ng/ml, respectivamente, y los valores de ABC6h para el macho y las hembras fueron 33,9 ng.h/ml y 31,5 ng.h/ml, respectivamente.

Después de una única exposición de solución de RPL554 a 0,543 mg/kg, los valores de Cmáx para el macho y las hembras fueron 40,9 ng/ml y 34,2 ng/ml, respectivamente, y los valores de ABC6h para el macho y las hembras fueron 74,6 ng.h/ml y 62,8 ng.h/ml, respectivamente.

Aquí se observa que es posible lograr altos valores de Cmáx y ABC usando la suspensión de RPL554 según la invención (por ejemplo 116 ng/ml y 95,9 ng/ml).

Los resultados toxicocinéticos también confirman que la formulación en suspensión da una liberación retardada en comparación con la formulación en solución. Esto puede observarse de los datos del experimento de fase 3 (dosis únicas separadas de la formulación en suspensión). Estos datos se presentan en la Tabla 13 a continuación, donde la formulación en solución (dosis objetivo 0,5 mg/kg/día, real 0,543 mg/kg/día) se compara con la formulación en suspensión (dosis objetivo 0,5 mg/kg/día, real 0,395 mg/mg/día). La Tabla 13 muestra concentraciones plasmáticas (ng/ml) con el tiempo tras el tratamiento con una dosis única de la suspensión o una dosis única de la solución. Los dos tratamientos se realizaron separados dos días. Se presentan datos para los tres perros: un perro macho (61) y dos perros hembra (62 y 64). BLQ se refiere a concentraciones plasmáticas inferiores a 1,00 ng/ml.

Tabla 13 - Valores de concentración plasmática de RPL554 (ng/ml) para 3 perros tras una dosis con una suspensión RPL 4 n l i n RPL 4

Los datos en la Tabla 13 demuestran que la formulación en suspensión de RPL554 conduce a un perfil de liberación más retardada que la formulación en solución de RPL554. Por ejemplo, la concentración plasmática de RPL554 está por debajo del límite detectable 4 horas después de la inhalación de la formulación en solución para todos los perros, mientras ue al menos 1,4 ng/ml de RPL554 están presentes después de 4 horas en el plasma sanguíneo para todos los perros tras la inhalación de la suspensión.

Ejemplo 6 - función pulmonar en cobayas

Introducción

RPL554 produce broncoprotección contra agentes espasmogénicos administrados por vía intravenosa cuando se administran como polvo seco o cuando se preparan como una solución en solución salina acidificada (pH 2,5). Este antagonismo funcional (dilución de duplicación de 1,5, es decir, 2,8 veces) contra metacolina también ha sido verificado en sujetos asmáticos humanos (Franciosi et al., 2013). Este ejemplo evaluó la broncoprotección proporcionada por RPL554 cuando se presenta como la nueva formulación en suspensión para nebulización.

Metodología

Exposición a fármaco

Se dispusieron cobayas Dunkin Hartley macho (300-400 g) en un cámara de aerosol construida de forma personalizada y se expusieron a o bien vehículo (0,9 % de solución salina a pH 2,5), RPL554 (2,5 mg/ml de solución) o RPL554 (1 mg/ml de solución) durante un periodo de 15 min. Se generaron aerosoles usando un nebulizador ultrasónico (Ultraneb 99) y se usó un caudal de 1 l/min para dirigir la solución nebulizada a una cámara de aerosol que contenía 4 brazos que permitía que los animales estuvieran inmovilizados con sus vías respiratorias superiores (es decir, la nariz) sobresaliendo en la cámara del aerosol.

Después de este periodo de exposición de 15 min, se dejó que los animales se recuperaran y luego antes de la exposición de 2 h y 5 h después del fármaco, los animales se anestesiaron con uretano (1,5 g/kg) y se hizo una incisión en la línea media para exponer la tráquea. Se realizó una traqueotomía, y se colocó en su lugar una cánula traqueal y se unió a un neumotacógrafo que a su vez se conectó a un transductor de presión Validyne (+ 2 cmH²O) para la detección de flujo. Se midieron los cambios respiración a respiración en el flujo de aire usando un sistema de registro de la función pulmonar (LFR, Versión 9, Mumed UK) y se presentó en tiempo real en un PC. La señal de flujo se integró para dar una medida del volumen corriente.

Se insertó una cánula en la cavidad torácica entre el 3° y 5° espacio intercostal y se conectó al lado negativo de un transductor de presión Validyne (+ 20 cmH²O). El lado positivo del transductor de presión se conectó al lado del neumotacógrafo proximal al animal, con el fin de obtener una medida de la presión transpulmonar (TPP: diferencia entre la presión de la boca y torácica). Se derivaron los parámetros de la función pulmonar, resistencia total de las vías respiratorias (RL; cmH²O.s/l) y la distensibilidad pulmonar dinámica (ml/cmH²O) de cada medida de flujo, volumen corriente y TPP por el método de integración. Se canuló la arteria carótida para la medición de la tensión arterial, respectivamente. Se establecieron curvas de concentración acumulada-efecto y la concentración de provocación (PC) de acetilcolina que produjo de forma acumulada un aumento del 50 % en RL (PC50).

Exposición a acetilcolina

Se monitorizó la broncoconstricción a acetilcolina (0,25 a 16 mg/ml, exposición de 4 s) 2 h y 5 después de la administración de una solución de RPL554 (1 y 2,5 mg/ml) o vehículo (solución salina acidificada a pH 3,5 o pH 2,5). Se generaron aerosoles de acetilcolina con un nebulizador Aeroneb® Lab (Aerogen Inc). El flujo de entrada se dirigió o bien a través del neumotacógrafo para la medición de la mecánica respiratoria del pulmón, o se derivó a través del nebulizador para los fines de administración de fármaco directamente al pulmón (mecánica respiratoria no medida durante el periodo de exposición de 4 s).

En una serie separada de experimentos, se realizó la función pulmonar 2 y 5 h después de la inhalación de la nueva formulación en suspensión de RPL554 (2,5 mg/ml y 10 mg/ml) y el vehículo.

Resultados

Parámetros iniciales

Se midieron la resistencia pulmonar total inicial (RL), distensibilidad pulmonar dinámica (Cdyn), tensión arterial media (BP) y salida de nebulizador en animales previamente expuestos al control de vehículo (solución salina a pH 2,5), y formulaciones en solución de RPL554 (1 mg/ml o 2,5 mg/ml, Figura 1) y a nuevas formulaciones en suspensión de RPL554 (2,5 mg/ml y 10 mg/ml, Figura 2). Se tomaron los parámetros respiratorios y cardiovasculares iniciales antes de la exposición a acetilcolina y se monitorizaron 2 y 5 h después de la exposición a solución salina o RPL554 en cobayas anestesiadas.

Parámetros de la función pulmonar

En general, RL representa los cambios en el diámetro de las vías respiratorias en las vías respiratorias centrales tras la activación de receptores muscarínicos en los músculos lisos de las vías respiratorias en esta región del pulmón. Se eligió la acetilcolina por su corta duración de acción.

1. Formulación en solución de RPL554

La acetilcolina administrada a cobayas anestesiadas por vía inhalada causó una respuesta broncoconstrictora dependiente de la dosis como se ha determinado por cambios en RL medidos 2 h y 5 h después de la exposición a solución salina y RPL554 (1 mg/ml, 2,5 mg/ml de solución).

1.1 - Análisis de acetilcolina RL PC50

Análisis a posteriori de la media aritmética demostraron una broncoprotección significativa en el momento de 2 h para RPL554 a 1 mg/ml de solución (dif media = 3,5 (0,11 - 8,83) mg/ml, P = 0,0445) y 2,5 mg/ml a las 2 h (4,7 (0,4 -9) mg/ml, P = 0,0357) y el momento de tiempo de 5 h (3,4 (0,9 - 6) mg/ml, P = 0,0133). El grado de broncoprotección fue menos evidente a las 5 h para 1 mg/ml de solución de RPL554 (2,5 (-0,17-5,2) mg/ml, P = 0,0628).

Se observó una diferencia significativa entre 2 h (1 mg/ml de RPL554, P = 0,0190 sin ajustar) y 5 h (2,5 mg/ml, P = 0,0095 sin ajustar) de solución de RPL554 frente al grupo de solución salina (Figura 1).

2. Nueva formulación en suspensión de RPL554

La acetilcolina administrada a cobayas anestesiadas por vía inhalada causó una broncoconstricción dependiente de la dosis como se ha determinado por cambios en RL medidos 2 h y 5 h después de la exposición a solución salina y suspensión de RPL554 (2,5 mg/ml y 10 mg/ml). La reducción dependiente de la dosis en la distensibilidad pulmonar inicial (Cdyn) también se registró simultáneamente tras las concentraciones crecientes de acetilcolina 2 h y 5 h después de la exposición a solución salina o suspensión de RPL554 (2,5 mg/ml y 10 mg/ml).

2.1 - Análisis de acetilcolina RL PC50

El análisis de la varianza de los datos transformados por log2 para acetilcolina RL PC50 revelaron un efecto de fármaco global a las 2 h (P = 0,0238). Para el grupo de tiempo de 2 h, esto se reflejó por una diferencia significativa entre los 10 mg/ml de suspensión de RPL554 y el grupo de vehículo (veces de diferencia media = 2,67 (1,12 - 6,36), P < 0,05). A pesar de la mayor diferencia media, entre RPL554 (10 mg/ml de suspensión) frente al vehículo en el momento de tiempo de 5 h desplazamiento de 14 veces (0,5-400), el amplio intervalo de confianza es el motivo por el que no se logró diferencia estadística (Figura 2, panel superior).

Se combinaron los datos de vehículo para los momentos de tiempo de 2 y 5 h y se re-analizaron (Figura 2, panel inferior). Hubo un efecto del tratamiento significativo global (P=0,0016) que estuvo afectado por un grado significativo de broncoprotección con 2,5 mg/ml de suspensión de RPL554 (2,52 veces (1-5,72), P < 0,05) y 10 mg/ml de RPL554 (4,67 veces (2-11), P < 0,05). En el momento de tiempo de 5 h, RPL554 a 10 mg/ml de suspensión causó un grado significativo de broncoprotección (2,77 veces (1,3-6,0) (Figura 2, panel inferior).

Resumen

RPL554 inhibió la broncoconstricción inducida por la acetilcolina administrada aerosolizada cuando se midió 2 y 5 h después de la exposición al fármaco. Tanto las formulaciones en solución de RPL554 (1 mg/ml, 2,5 mg/ml) como las nuevas formulaciones en suspensión de RPL554 (2,5 mg/ml, 10 mg/ml) produjeron una broncoprotección estadísticamente significativa.

Ejemplo 7 - estudio farmacocinético en seres humanos

Se realizó un estudio de fase I, aleatorizado, de doble ciego, controlado por placebo, para evaluar la seguridad, tolerabilidad y farmacocinética de dosis inhaladas únicas de la formulación en suspensión de RPL554 según la invención, administrada por nebulizador a sujetos macho sanos de edades de 18 a 5, ambos incluidos.

La dosis nominal de la formulación en suspensión fue aproximadamente 1,5 mg, que es esencialmente equivalente a la dosis de 0,018 mg/kg previamente mostrada que fue bien tolerada en estudios clínicos con la formulación en solución.

La formulación en suspensión usada fue una suspensión estéril para nebulización que contenía 1,5 mg de principio activo RPL554 micronizado en 5 ml de solución salina tamponada con solución de fosfato a pH 7, con tensioactivos (Tween 20 y Span 20) (como se describe en el Ejemplo 1 anteriormente, pero con una concentración diferente de RPL554). La dosificación de la suspensión se realizó usando un nebulizador de chorro estándar (PARI LC Sprint). Se recogieron muestras de sangre (4 ml en cada momento de tiempo) a intervalos de tiempo apropiados después de la administración. Las muestras se recogieron por venopunción o mediante cánula permanente en el antebrazo en tubos de heparina de litio y se enfriaron inmediatamente (baño de hielo). La sangre se centrifugó en el plazo de 15 minutos desde la recogida. El plasma se separó en una centrifugadora refrigerada (aproximadamente 4 °C) a 1100 g durante 15 minutos y se transfirió a tubos de polipropileno. Entonces se midió la concentración del activo.

Los resultados medios se presentan en la Figura 3, que muestra las curvas de concentración media para los sujetos después de la administración de las formulaciones en solución o en suspensión. Los resultados para la formulación en solución derivaron de un estudio clínico previo (The Lancet Respiratory Medicine Volumen 1, No. 9, p. 714-727, Noviembre de 2013) que usó una solución estéril para nebulización que contenía RPL554 disuelta en solución salina tamponada con citrato-fosfato a pH 3,2. La cantidad administrada mediante el nebulizador fue tal que la dosis nominal de RPL554 fue 0,018 mg/kg (-1,26 mg para una persona de 70 kg).

Los parámetros farmacocinéticos medios durante el estudio se presentan en la Tabla 14 a continuación.

Tabla 14

Los valores en la Tabla 14 demuestran que la formulación en suspensión según la invención tiene un perfil farmacocinético sustancialmente mejorado en comparación con la formulación en solución comparativa. En particular, el área bajo la curva (ABC) y la semivida son ambos significativamente elevados. Esto demuestra que la formulación en suspensión proporciona una forma inesperadamente mejorada por la que puede administrarse RPL554 por inhalación.

Ejemplo 8 - estudio de estabilidad de doce meses

Se prepararon tres lotes de la formulación en suspensión de la invención con las composiciones expuestas en la Tabla 15 a continuación.

Tabla 15

Pruebas analíticas

Se realizaron pruebas analíticas después de 1, 3, 6 y 12 meses de almacenamiento de las formulaciones a 25 °C y 60 % de HR. Los resultados de 12 meses se describen a continuación.

Aspecto

Se realizó la prueba de aspecto visualmente en una única muestra. Se encontró que la muestra de placebo era una solución incolora clara. Las muestras de 0,5 mg/ml de concentración fueron una suspensión amarilla clara libre de aglomerados visibles mientras que las muestras de 2,5 mg/ml y 10 mg/ml de concentración parecieron ser suspensiones amarillas libres de aglomerados visibles.

pH

La determinación del pH se realizó en una única muestra. Los resultados se muestran en la Tabla 16.

Tabla 16

Se encontró que las tres formulaciones activas y el placebo tenían un pH de 6,7 en el momento de tiempo de doce meses. No se observó cambio desde el momento de tiempo inicial.

Ensayo

La prueba del ensayo se realizó por duplicado. Los parámetros del método clave se resumen del siguiente modo:

Los resultados del ensayo se muestran en la Tabla 17.

Los resultados del ensayo para las suspensiones activas de cada concentración en el momento de tiempo de doce meses no mostraron ningún cambio desde el momento de tiempo inicial.

Sustancias relacionadas

La determinación de sustancias relacionadas se realizó por duplicado. Los parámetros del método clave se resumen del siguiente modo.

Los resultados de la determinación de sustancias relacionadas de las suspensiones se presentan en la Tabla 18.

Tabla 18 - Resultados del análisis de sustancias relacionadas de suspensiones de RPL554 (como % de LC) Lote BN011/14 - 05 m /ml - 25 °C/60 % de HR

continuación

Los resultados de sustancias relacionadas para las suspensiones activas de cada concentración en el momento de tiempo de doce meses fueron similares al momento de tiempo inicial.

Distribución del tamaño de partícula (PSD)

Se realizó el método de distribución del tamaño de partícula usando un Spraytec con los parámetros detallados a continuación.

Propiedades ópticas: Partícula: RI (real): 1,50 (partícula opaca estándar); RI (imaginaria): 0,50; Densidad: 1,00; Dispersante (agua); Dispersante RI: 1,33

Dispersante usados para el análisis de muestras: 1 % de polisorbato 20 en agua desionizada

Parámetros de la unidad de control: Velocidad del agitador 1000 rpm

Tiempo de medición: Tiempo de muestreo: 30 s; tiempo de fondo: 10 s

Los resultados se muestran en la Tabla 19.

Tabla 19 - Resultados de la determinación del tamaño de partícula por difracción láser de suspensiones de RPL554 en m

Los perfiles de distribución del tamaño de partícula fueron similares para las 3 concentraciones en el momento de tiempo de doce meses y no mostraron ningún cambio en comparación con el momento de tiempo inicial.

Evaluación microscópica

Se realizó evaluación microscópica evaluando visualmente las formulaciones usando un microscopio G3. No se observaron agregados en ninguno de los lotes probados, aunque se observaron ocasionalmente algunos aglomerados sueltos grandes para las suspensiones de 2,5 mg/ml y 10 mg/ml. La evaluación determinó que no hubo cambio en comparación con el momento de tiempo inicial.

Tasa de administración y dosis administrada total

Se realizó la tasa de administración y dosis administrada total en 3 viales por lote. Se dispensaron las suspensiones y se administraron usando una combinación de nebulizador PARI LC PLUS® / compresor cPARI T urboBOY S®. Los resultados de la tasa de administración y la dosis administrada total se presentan en la Tabla 20.

Tabla 20 - Resultados de la determinación de la tasa de administración y dosis total administrada usando el nebulizador PARI LC PLUS

La dosis administrada total y la tasa de administración para todas las concentraciones fueron similares al momento de tiempo inicial. La eficiencia de administración de todas las suspensiones estuvo de acuerdo con momentos de tiempo previos.

Distribución del tamaño de partícula aerodinámica (APSD)

Se realizó la determinación de la distribución del tamaño de partícula aerodinámica (APSD) en 3 viales por lote por condición usando Next Generation Impactor (NGI). Las suspensiones se dispensaron y administraron usando una combinación de nebulizador PARI LC PLUS® / compresor PARI TurboBOY S®. Los resultados de la determinación de APSD se presentan en la Tabla 21. Los resultados se entraron en el programa CITDAS (versión 3.10) para calcular la dosis de partícula finas usando un valor de corte de 5 pm y los resultados obtenidos de los cálculos también se presentan en la Tabla 21.

Tabla 21 - Resultados de la distribución del tamaño de partícula aerodinámica por NGI (como mg de RPL554) usando el nebulizador PARI LC PLUS

continuación

Estabilidad a los 12 meses

Las Tablas 22 (para 0,5 mg/ml), 23 (para 2,5 mg/ml) y 24 (para 10 mg/ml) a continuación combinan los datos de 12 meses descritos anteriormente con los datos correspondientes para los momentos de tiempo de 1, 3 y 6 meses para las formulaciones en suspensión de RPL554 de la invención.

(Nota: Picos de impureza marcados con * en las Tablas 22, 23 y 24 se observaron como un doblete, pero habían sido observados como un pico único en el momento de tiempo inicial. Esto es probablemente debido a que se usó una nueva columna que dio mejor separación y no se cree que sea un signo de degradación.)

Resumen

Se fabricaron suspensiones de RPL554 para nebulización a 0,5 mg/ml (BN011/14), 2,5 mg/ml (BN010/14) y 10 mg/ml (BN009/14) y placebo asociado (BN008/14) y se pusieron en estabilidad a 25 °C/60 % de HR y se probaron en el momento de tiempo de 12 meses.

Los resultados mostraron que esencialmente no hubo cambio en ninguno de los lotes probados en el momento de tiempo de 12 meses y confirmaron que las suspensiones de RPL554 para nebulización fueron estables durante 12 meses a 25 °C/60 % de HR.

continuación

Ejemplo 9 - análisis a los seis meses en condiciones aceleradas (40 °C/75 % de HR)

Los estudios de estabilidad acelerada a 40 °C/75 % de HR también continuaron hasta el sexto mes. Los resultados de éstos se muestran en la Tabla 25 (para 0,5 mg/ml), Tabla 26 (para 2,5 mg/ml) y Tabla 27 (para 10 mg/ml).

(Como se indicó en el Ejemplo 8, los picos de impureza marcados con * se observaron como un doblete, pero habían sido observados como un pico único en el momento de tiempo inicial. Esto es probablemente debido a que se usó una nueva columna que dio mejor separación y no se cree que sea un signo de degradación.)

Los resultados mostraron que esencialmente no hubo cambio en ninguno de los lotes probados en el momento de tiempo de 6 meses y confirmaron que las suspensiones de RPL554 para nebulización tienen excelente estabilidad, siendo estables durante 6 meses a 40 °C/75 % de HR.

________________

continuación

________________

continuación

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica líquida adecuada para administración por inhalación que comprende un diluyente y una suspensión de partículas de 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (RPL554) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la que las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 (mediana del tamaño de partícula en volumen) de 0,2 pm a 5 pm y en la que (a) el diluyente es agua y/o (b) la composición farmacéutica líquida comprende adicionalmente uno o más tampones.

2. Una composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que las partículas de RPL554 tienen una distribución del tamaño de partícula con un valor de Dv50 de 0,7 pm a 2,5 pm.

3. Una composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que la concentración de partículas de RPL554 en la composición farmacéutica líquida es de 0,01 mg/ml a 40 mg/ml.

4. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la composición tiene un pH de 6 a 8.

5. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende además uno o más tensioactivos, preferentemente en la que el uno o más tensioactivos están seleccionados de uno o más tensioactivos no iónicos, más preferentemente en la que el uno o más tensioactivos están seleccionados de ésteres alquílicos de sorbitano de polioxietilenglicol y ésteres alquílicos de sorbitano.

6. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende además uno o más tampones, preferentemente en la que el uno o más tampones están seleccionados de tampones citrato o fosfato.

7. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, composición que comprende:

(a) las partículas de RLP554 a una concentración de 0,01 mg/ml a 40 mg/ml;

(b) uno o más tensioactivos a una concentración de 0,01 mg/ml a 5 mg/ml; y

(c) un tampón a una concentración de 5 mg/ml a 20 mg/ml.

8. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la composición comprende además un agente de ajuste de la tonicidad, opcionalmente en la que el agente de ajuste de la tonicidad es cloruro sódico.

9. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el diluyente es agua.

10. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, composición que comprende:

(a) las partículas de RLP554 a una concentración de 0,01 mg/ml a 30 mg/ml;

(f) un agente de ajuste de la tonicidad a una concentración de 2 mg/ml a 8 mg/ml, preferentemente en la que la composición comprende:

(a) las partículas de RLP554 a una concentración de 0,05 mg/ml a 25 mg/ml;

(f) cloruro sódico a una concentración de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

11. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes que es adecuada para administración por nebulizador.

12. Un nebulizador que comprende una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

13. Una composición farmacéutica líquida de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal.

14. Una composición farmacéutica líquida según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad o afección seleccionada de asma, asma alérgica, fiebre del heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfisema, bronquiectasia, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), síndrome disneico del adulto (SDA), asma resistente a esteroides, asma grave, asma pediátrico, fibrosis quística, fibrosis de pulmón, fibrosis pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias.

15. Una composición farmacéutica líquida para su uso de acuerdo con la reivindicación 14 en la que la enfermedad o afección es enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC).