[go: up one dir, main page]

ES2534757T3 - Extractos de semillas de uva obtenibles mediante fraccionamiento en una resina - Google Patents

Extractos de semillas de uva obtenibles mediante fraccionamiento en una resina Download PDF

Info

Publication number
ES2534757T3
ES2534757T3 ES06776215.3T ES06776215T ES2534757T3 ES 2534757 T3 ES2534757 T3 ES 2534757T3 ES 06776215 T ES06776215 T ES 06776215T ES 2534757 T3 ES2534757 T3 ES 2534757T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
content
hplc
product
water
epicatechin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES06776215.3T
Other languages
English (en)
Inventor
Andrea Giori
Alessandro Anelli
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Indena SpA
Original Assignee
Indena SpA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Indena SpA filed Critical Indena SpA
Application granted granted Critical
Publication of ES2534757T3 publication Critical patent/ES2534757T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/87—Vitaceae or Ampelidaceae (Vine or Grape family), e.g. wine grapes, muscadine or peppervine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

Un procedimiento de extracción de semillas de Vitis vinifera que comprende: a) la extracción de semillas de uva con un disolvente que es un alcohol C1-C3; o mezclas o soluciones acuosas del mismo con un contenido en agua no superior al 90 % (en v/v). b) la eliminación de los taninos insolubles en agua enfriando el extracto de la etapa a) y filtrando o centrifugando los materiales insolubles; c) la eliminación de taninos solubles en agua; d) la separación de productos con distintos pesos moleculares, a través de purificación cromatográfica en una columna; caracterizado porque la etapa c) se lleva a cabo añadiendo polivinilpirrolidona (PPVP) al extracto de la etapa b).

Description

10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
DESCRIPCIÓN
Extractos de semillas de uva obtenibles mediante fraccionamiento en una resina
La presente invención se refiere a un extracto de semillas de uva obtenible mediante fraccionamiento en una resina y al procedimiento para su preparación.
El procedimiento de la invención proporciona un extracto partiendo de semillas de uva con un contenido variable en catequinas y epicatequinas (monómeros). Los productos obtenibles de acuerdo con la invención tienen acción antioxidante y se usan principalmente como cosméticos, complementos alimenticios (en particular como complementos cardioprotectores) y nutracéuticos.
Antecedentes tecnológicos
El extracto total obtenido de la preparación de semillas de uva contiene una serie de metabolitos, en particular monómeros de catequina y epicatequina, oligómeros y polímeros de proantocianidol relacionados (procianidinas), así como polímeros y taninos de alto peso molecular.
El documento EP 275224 desvela un procedimiento de preparación de complejos fosfolipídicos de flavonoides de Vitis vinifera.
El documento WO 2005/36988 desvela un procedimiento de extracción de semillas de Vitis vinifera que consiste en la separación de la piel de las semillas inmediatamente después de preparar el extracto. Los extractos resultantes se caracterizan por un bajo contenido en polifenoles monoméricos.
El documento EP 348781, que es el estado más próximo de la técnica de la presente invención, desvela fracciones enriquecidas en oligómeros de procianidol obtenidos mediante la extracción de semillas de Vitis vinifera con éteres o mezclas de ésteres con hidrocarburos aromáticos y/o mediante filtración.
El documento EP 1035859 desvela el uso de complejos fosfolipídicos de extractos de Vitis vinifera para el tratamiento
o la prevención de la ateroesclerosis.
Los procedimientos conocidos tienen algunas desventajas, tales como el uso de disolventes tóxicos o la necesidad de plantas específicas o procedimientos complejos.
Existe, por lo tanto, la necesidad de un procedimiento conveniente, que se lleve a cabo industrialmente de un modo sencillo y proporcione extractos cuyos contenidos en componentes activos puedan ajustarse a voluntad.
Divulgación de la Invención
El proceso de la invención es flexible en tanto que permite separar una serie de fracciones que difieren en los pesos moleculares (PM) de los derivados de catequina y epicatequina contenidos en su interior. Este procedimiento, permite de este modo preparar extractos ricos tanto en catequina como en epicatequina, con un contenido reducido en oligómeros y polímeros de proantocianidol (procianidinas), y extractos con características diametralmente opuestas, es decir, que tienen alto contenido en oligómeros y procianidinas y contenido reducido en monómeros (catequina y epicatequina), así como extractos que tienen cualquier contenido deseado en monómeros y procianidinas.
Dicha flexibilidad también concierne a la posibilidad de mezclar estas distintas fracciones para obtener productos finales con un contenido en monómeros predeterminado.
Los polímeros y taninos de alto peso molecular que contiene el extracto total se eliminan de las fracciones deseadas en las primeras etapas de la preparación mediante purificación parcial en agua, que se optimiza mediante el tratamiento posterior con polivinilpirrolidona (PVPP).
La purificación parcial en agua elimina solamente parte de los taninos (más del 50 % en p/p), pero solamente la purificación con PVPP reduce el contenido en taninos a menos del 5 % del peso del extracto final.
La presente invención difiere de los procedimientos de la técnica anterior para la preparación de productos derivados de semillas de uva en las siguientes características fundamentales:
i. La extracción de las semillas de uva se lleva a cabo sin la necesidad de controlar el pH, ya que no se usan productos químicos ácidos o básicos.
ii. La extracción y procedimiento de producción completo pueden llevarse a cabo usando solamente agua y etanol como disolventes.
iii. El proceso es flexible ya que permite ajustar a voluntad el contenido en el extracto final en monómeros y oligómeros.
iv. Se eliminan los polímeros y taninos de alto peso molecular.
10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
En su conjunto, el procedimiento de la invención implica cuatro etapas principales:
a) Extracción de semillas de uva con un disolvente (extracto total);
b) Eliminación de taninos insolubles en agua;
c) Eliminación de taninos solubles en agua;
d) Separación de productos con distinto PM, a través de purificación cromatográfica en una columna.
La etapa (a) se efectúa mediante la extracción de semillas de uva con acetona o un alcohol C1-C3, o mezclas o soluciones acuosas de los mismos disolventes siempre que el contenido en agua no exceda el 90 % (v/v). Se prefiere una solución de agua-etanol del 40 % en v/v.
La temperatura de extracción puede variar de 0 ºC a la temperatura de ebullición del disolvente, y preferentemente es de 70 ºC.
La etapa (b), que permite eliminar del extracto los taninos insolubles en agua, en particular los de alto peso molecular, se efectúa enfriando el extracto de la etapa (a) y filtrando o centrifugando los materiales insolubles.
La etapa (c) puede llevarse a cabo para eliminar cualquier tanino que esté aún presente del extracto de la etapa (b). Estos metabolitos se eliminan usando polivinilpirrolidona (PVPP).
La etapa (d) permite fraccionar el extracto eliminando la mayor parte de los metabolitos secundarios no útiles (azúcares y similares), mientras que conserva las procianidinas. Esta etapa consiste en una separación cromatográfica a través de adsorción a una resina polimérica. Son ejemplos de resinas para este fin las resinas de estireno-DVB tales como AmberliteHP20® o Rohm y Haas XAD1180®, o resinas acrílicas tales como Rohm y Haas XAD7HP®.
El extracto total obtenido de las semillas de uva se concentra hasta un residuo seco que varía del 5 % al 50 % en p/p, preferentemente el 10 % (p/p), y se deja reposar a una temperatura que varía de 1 ºC a 25 ºC, preferentemente a 4 ºC, sin agitar, durante un tiempo que varía de 1 hora a 24 horas, preferentemente 16 horas.
La suspensión resultante se centrifuga a 4 ºC hasta eliminar el precipitado residual de la solución acuosa. La solución acuosa transparente se concentra en un evaporador rotatorio y se añade agua para obtener un residuo seco que varía del 5 % al 50 % en p/p, preferentemente el 10 % (p/p). En algunos casos, la solución puede ser bien de agua-alcohol o agua-acetona, en lugar de solamente acuosa. Esto depende del producto acabado deseado: por ejemplo, cuando se desea un producto con un alto contenido en monómeros y oligómeros de catequina, se usa preferentemente una solución acuosa, de otro modo se usan bien las soluciones de agua-alcohol o de agua-acetona.
Por lo tanto, cuando se van a eliminar fracciones de bajo peso molecular del producto final, la solución a cargar en la columna debe tener un residuo seco que varíe del 5 % al 50 % en p/p, así como un contenido en alcohol (alcoholes C1-C3) o acetona que varíe del 5 % al 30 % en v/v, preferentemente un 10 % en v/v. La solución preparada de este modo se adsorbe en la resina, mientras que la solución no retenida se elimina.
Después de eso, la resina se lava con agua-alcohol (alcoholes C1-C3, preferentemente etanol) o con solución de agua-acetona para eliminar los metabolitos secundarios no deseados. El disolvente debe tener un contenido en agua que varíe del 100 % al 70 % en v/v, preferentemente un 90 % en v/v. La solución de lavado que sale de las columnas se deshecha.
El producto se eluye con una solución de agua-alcohol (alcoholes C1-C3), preferentemente con etanol, con un contenido en agua que varía del 50 % al 5 % en v/v, preferentemente un 30 % en v/v. La solución de alcohol puede reemplazarse opcionalmente con una solución de agua-acetona con un contenido en agua que varía del 50 % al 0 % en v/v, preferentemente un 30 % en v/v,
La invención se describe con mayor detalle en los siguientes ejemplos.
Ejemplo 1
Extracción de semillas de uva con una solución de agua-alcohol (etapa a)
En esta etapa, se prepara el extracto total que se usa como material de partida para la separación en cromatografía de columna posterior.
Se cubren 1000 g de semillas de uva con 1,5 litros de etanol (40 % en v/v) a 70 °C durante 4 horas en un percolador estático recubierto. Después de 4 horas se recupera el percolado y se extrae 7 veces más en las mismas condiciones, pero usando 1 litro de disolvente para cada extracción, para obtener aproximadamente 8 litros de percolado total. Los percolados combinados se filtran en caliente con succión y se concentran mediante un evaporador rotatorio a 60 ºC a presión reducida. Este extracto tiene un residuo seco total de 228 g, siendo el rendimiento del material de partida del 22,8 % en p/p. El percolado se concentra para obtener 2,28 kg de una suspensión totalmente acuosa con el 10 % de residuo seco en p/p.
10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
Ejemplo 2
Extracción de semillas de uva con una solución de agua-acetona (etapa a)
En esta etapa, se prepara el extracto total que puede usarse como material de partida para la separación cromatografía de columna posterior.
Se cubren 1000 g de semillas de uva con 1,5 litros de acetona al 40 % en v/v a 70 °C durante 4 horas en un percolador estático recubierto o en un reactor recubierto equipado con un agitador. Después de 4 horas se recupera el percolado y se extrae 7 veces más en las mismas condiciones, pero usando 1 litro de disolvente para cada extracción, para obtener aproximadamente 8 litros de percolado total. Los percolados combinados se filtran en caliente con succión y se concentran mediante un evaporador rotatorio a 60 ºC a presión reducida. Este extracto tiene un residuo seco total de 235,6 g, siendo el rendimiento del material de partida del 23,56 % en p/p.
El percolado se concentra para obtener 2,35 kg de una suspensión totalmente acuosa con un residuo seco del 10 % en p/p.
Ejemplo 3
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva (etapa b): eliminación de los materiales insolubles en agua
La suspensión acuosa resultante de la extracción en agua-alcohol de la etapa (a) (Ejemplo 1) se enfría a 4 ºC y se deja reposar durante 16 horas, después, la suspensión acuosa aún fría se centrifuga a 3000 g durante 20 minutos para separar el residuo precipitado de la solución acuosa transparente. El residuo, rico en productos de alto peso molecular, se desecha.
La solución transparente resultante tiene un residuo seco equivalente a 168 g de extracto parcialmente purificado que tiene un contenido en catequinas por HPLC del 3,74 %, y un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,87 %, y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) del 6,62 % en p/p. El rendimiento en peso del material de partida es del 16,8 % en p/p.
Todos los procedimientos de purificación en columnas cromatográficas que se describen en lo sucesivo en el presente documento (4 procedimientos distintos) pueden aplicarse a esta solución. Para abreviar, solamente el Ejemplo 5 (haciendo uso del procedimiento 2), que no es parte de la invención, se notificará a modo de ejemplo de purificación directa de esta solución. Todos los demás procedimientos que se describen posteriormente se aplicarán a la solución tratada con PVPP.
Ejemplo 4
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva (etapa b): eliminación de los materiales insolubles en agua
La suspensión acuosa resultante de la extracción con agua-acetona de la etapa (a) (Ejemplo 2) se enfría 4 ºC y se deja reposar durante 16 horas, después, la suspensión acuosa aún fría se centrifuga a 3000 g durante 20 minutos para separar el residuo precipitado de la solución acuosa transparente. El residuo, rico en productos de alto peso molecular, se desecha.
La solución transparente resultante tiene un residuo seco de 173 g de extracto parcialmente purificado que tiene un contenido en catequinas por HPLC del 4,21 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,70 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 6,91 % en p/p. El rendimiento en peso del material de partida de este extracto es del 17,3 % en p/p.
Todos los procedimientos de purificación cromatográfica que se describen en lo sucesivo en el presente documento (4 procedimientos distintos) se pueden aplicar a esta solución. Para abreviar, solamente el Ejemplo 6 (haciendo uso del procedimiento 3), que no es parte de la invención, se notificará a modo de ejemplo de purificación directa de esta solución. Todos los demás procedimientos que se describen posteriormente se aplicarán a la solución tratada con PVPP.
Ejemplo 5 (no forma parte de la invención)
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 1 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 168 g, obtenida al final del procedimiento de purificación parcial que se describe en la etapa (b) (Ejemplo 3), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p. Esta solución transparente de extracto parcialmente purificado tiene un residuo seco que tiene un contenido en catequinas por HPLC del 3,75 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,87 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 6,62 % en p/p.
Esta solución acuosa se calienta a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 3300 ml de resina Rohm y Haas XAD7HP® acondicionada con agua. La solución de agua se adsorbe a la
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
resina, mientras que la solución no retenida que sale de la columna se deshecha. La resina se lava después con 6,6 litros de agua, eliminando también esta solución ya que su contenido en monómeros es despreciable y el contenido en procianidinas es bajo. Estas soluciones acuosas descartadas (producto 1) tienen un residuo seco total de 69 g (rendimiento en peso del material de partida: 6,9 % en p/p.), un contenido en catequinas por HPLC del 0,09 %, y un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,10 %, siendo el contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) del 0,19 % en p/p.
La columna se eluye con 9 litros de etanol acuoso al 90 % en v/v. El eluato resultante se recupera y se seca a 60 ºC a presión reducida, para rendir 98 gramos de producto seco (producto 2), que corresponden a un rendimiento sobre el material de partida del 9,80 % en p/p. Este producto tiene un contenido en catequinas por HPLC del 6,25 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 4,77 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 11,02 % en p/p.
Ejemplo 6 (no forma parte de la invención)
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 2 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 173 g, obtenida mediante una extracción en agua-acetona (etapa a; Ejemplo 2) seguida de la purificación parcial tal como se describe en la etapa (b) (Ejemplo 4), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p.
Después de eso, esta solución acuosa se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 3300 ml de resina Rohm y Haas XAD1180®; la solución no retenida se elimina. La resina se lava con 6 litros de agua, y la solución de lavado se combina con la no retenida. La solución acuosa resultante se seca para obtener el producto 3, que tiene un residuo seco de 99,4 g, un contenido en catequinas por HPLC del 1,29 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,46 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 10 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 4). Dicho producto tiene un residuo seco de 23,9 g, un contenido en catequinas por HPLC del 13,5 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 8,41 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 20 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 5). Dicho producto tiene un residuo seco de 15,3 g, un contenido en catequinas por HPLC del 14,3 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 10,9 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 30 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 6). Dicho producto tiene un residuo seco de 14,95 g, un contenido en catequinas por HPLC del 2,21 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 2,04 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 40 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 7). Dicho producto tiene un residuo seco de 14,2 g, un contenido en catequinas por HPLC del 1,06 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 0,66 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 50 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 8). Dicho producto tiene un residuo seco de 3,51 g, un contenido en catequinas por HPLC del 0,67 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 0,46 % en p/p.
Los productos resultantes pueden mezclarse a voluntad para obtener un producto con el contenido deseado en monómeros. Por ejemplo, puede obtenerse un producto con un contenido en monómeros reducido mezclando 3,51 g del producto 8 con 14,2 g del producto 7 para obtener 17,71 g de un producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 0,98 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 0,62 % en p/p, un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) del 1,60 % en p/p. Como alternativa, 3,51 g del producto 8 pueden mezclarse con 14,2 g del producto 7 y con 15,0 g del producto 4 para obtener 32,71 g de un producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 1,12 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,55 % en p/p y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 1,67 % en p/p.
Por otro lado, puede obtenerse un producto con un alto contenido mezclando 23,9 g del producto 4 con 15,3 g del producto 5, para obtener 39,2 g de un producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 13,81 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 9,38 % en p/p, y contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 23,19 % en p/p.
Ejemplo 7
Eliminación de los taninos solubles en agua del extracto obtenido de semillas de uva (etapa c)
La solución acuosa transparente obtenida de la purificación parcial de la etapa b (Ejemplo 3), que tiene un residuo seco de 168 g, se trata para eliminar los taninos solubles en agua. A la solución se le añaden 34 g de PVPP, que corresponden a aproximadamente el 20 % en p/p del peso del residuo seco del extracto a tratar.
10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
Después de agitar durante 1 h a temperatura ambiente, la PVPP se filtra a través de un filtro plisado. La solución resultante tiene un residuo seco de 160 g de extracto parcialmente purificado que tiene un contenido en taninos del 2,7 % en p/p.
El rendimiento en peso del material de partida es del 16,0 % en p/p.
Ejemplo 8
Eliminación de los taninos solubles en agua del extracto obtenido de semillas de uva (etapa c)
La solución acuosa transparente obtenida de la purificación parcial de la etapa b (Ejemplo 4) y que tiene un residuo seco de 168 g, se trata para eliminar los taninos solubles en agua. A la solución se le añaden 52 g de PVPP, que corresponden a aproximadamente el 30 % en p/p del peso del residuo seco del extracto a tratar.
Después de agitar durante 1 h a temperatura ambiente, la PVPP se filtra a través de un filtro plisado.
La solución resultante tiene un residuo seco de 163 g de extracto parcialmente purificado que tiene un contenido en taninos del 1,5 %,
El rendimiento en peso del material de partida es del 16,3 % en p/p.
Ejemplo 9
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 1 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 160 g, obtenida de la purificación parcial de la etapa (c) (Ejemplo 7), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p. Esta solución transparente de extracto parcialmente purificado tiene un residuo seco con un contenido en catequinas por HPLC del 3,87 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,96 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 6,83 % en p/p.
Esta solución acuosa se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 3200 ml de resina Rohm y Haas XAD7HP® acondicionada con agua. La solución acuosa se adsorbe a la resina, mientras que la solución no retenida que sale de la columna se deshecha. La resina se lava después con 6,4 litros de agua, eliminando también esta solución ya que su contenido en monómeros es despreciable y el de procianidinas es bajo. Estas soluciones acuosas desechadas (producto 9) tienen un residuo seco total de 65 g (rendimiento en peso del material de partida: 6,5 % en p/p.), un contenido en catequinas por HPLC del 0,09 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,10 %, siendo el contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) del 0,19 % en p/p.
La columna se eluye con 9 litros de etanol acuoso al 90 % en v/v. El eluato resultante se recupera y se seca a 60 ºC a presión reducida, para rendir 95 gramos de producto seco (producto 10), que corresponde a un rendimiento del 9,50 % en p/p del material de partida. Este producto tiene un contenido en catequinas por HPLC del 6,34 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 4,85 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 11,19 % en p/p.
Ejemplo 10
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 3 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 160 g, obtenida de la purificación parcial de la etapa (c) (Ejemplo 7), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p.
Esta solución acuosa transparente se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 1600 ml de resina Rohm y Haas XAD1180®. La solución acuosa se adsorbe a la resina, mientras que la solución no retenida que sale de la columna se elimina. La resina se lava después con 3 litros de agua, y se recoge la solución de lavado que se combina con la no retenida. La solución acuosa resultante se seca para obtener el (producto 11). Dicho producto tiene un residuo seco de 106,2 g, un contenido en catequinas por HPLC del 1,39 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,95 % en p/p.
La resina se lava después con 3 litros de etanol (10 % en v/v), después, la solución resultante se recoge y se seca (producto 12). Dicho producto tiene un residuo seco de 12,0 g, un contenido en catequinas por HPLC del 12,0 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 7,80 % en p/p.
La resina se lava después con 3 litros de etanol (20 % en v/v), la solución resultante se recoge y se seca (producto 13). Dicho producto tiene un residuo seco de 14,7 g, un contenido en catequinas por HPLC del 11,5 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 9,23 % en p/p.
La resina se lava después con 3 litros de etanol (30 % en v/v), la solución resultante se recoge y se seca (producto 14). Dicho producto tiene un residuo seco de 20,0 g, un contenido en catequinas por HPLC del 6,49 % en p/p, un contenido
10
15
20
25
30
35
40
45
50
E06776215
10-04-2015
en epicatequinas por HPLC del 5,76 % en p/p.
La resina se lava después con 3 litros de etanol (40 % en v/v), la solución resultante se recoge y se seca (producto 15). Dicho producto tiene un residuo seco de 5,08 g, un contenido en catequinas por HPLC del 2,84 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,59 % en p/p.
La resina se lava después con 3 litros de etanol (50 % en v/v), la solución resultante se recoge y se seca (producto 16). Dicho producto tiene un residuo seco de 1,55 g, un contenido en catequinas por HPLC del 0,51 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,35 % en p/p.
Los productos resultantes pueden mezclarse a voluntad para obtener un producto con el contenido deseado en monómeros. Por ejemplo, puede obtenerse un producto con un contenido en monómeros reducido mezclando 1,55 g del producto 16 con 5,08 g del producto 15 para obtener 6,63 g de un producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 2,26 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,11 % en p/p y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC de 4,37 % en p/p o pueden mezclarse 1,55 g del producto 16 con 7,00 g del producto 11 para obtener 8,55 g de un producto que tiene un contenido en catequinas por HPLC del 1,19 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,89 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 2,08 % en p/p.
Por otro lado, puede obtenerse un producto con un alto contenido en monómeros mezclando 12,0 g del producto 12 con 12,0 g del producto 13 y con 15,0 g del producto 14, para obtener 39,0 g de un producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 9,73 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 7,46 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 17,19 % en p/p, o pueden mezclarse 12,0 g del producto 12 con 12,0 g del producto 13 para obtener 24,0 g de producto que tienen un contenido en catequinas por HPLC del 11,75 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 8,52 % en p/p, y un contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 20,27 % en p/p.
Ejemplo 11
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 4 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 160 g, obtenida de la purificación parcial de la etapa (c) (Ejemplo 7), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p.
Esta solución acuosa transparente se concentra a un residuo seco (12 % en p/p), después se le añaden 320 ml de etanol (95 % en v/v), para obtener un residuo seco de aproximadamente el 10 % en p/p y un contenido en etanol de aproximadamente (20 % en p/p). Esta solución de agua-alcohol se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 1600 ml de resina Rohm y Haas XAD1180®. La solución no retenida que sale de la columna se elimina. La resina se lava después con 9,60 litros de etanol al 20 % en v/v, eliminando también la solución de lavado, que tiene un residuo seco de 135,6 g, un contenido en catequinas por HPLC del 4,37 % en p/p, un contenido en catequinas por HPLC del 3,35 % en p/p, y contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 7,72 % en p/p.
La columna se eluye con 6,60 litros de etanol acuoso al 70 % en v/v y el eluato que sale de la columna se recoge y se seca a 60 ºC a presión reducida, para rendir un producto (producto 17) con un residuo seco de 24,3 g, un contenido en catequinas por HPLC del 0,79 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,62 % en p/p, y contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 1,41 % en p/p.
Ejemplo 12
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 2 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 163 g, obtenida de la extracción en agua-acetona de la etapa (a) (Ejemplo 2) seguida de purificación parcial de la etapa (b) (Ejemplo 4) y eliminación de taninos de la etapa (c) (Ejemplo 8), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p.
Esta solución acuosa transparente se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 3200 ml de resina Rohm y Haas XAD7HP® condicionada con agua. La solución de agua-alcohol se adsorbe a la resina, mientras que la solución no retenida que sale de la columna se elimina. La resina se lava después con 6,4 litros de agua, eliminando también esta solución ya que su contenido en monómeros es despreciable y el contenido en procianidinas es bajo. Estas soluciones acuosas descartadas (producto 18) tienen un residuo seco total de 62,5 g (rendimiento en peso frente al material de partida: 6,3 % en p/p.), un contenido en catequinas por HPLC del 0,11 %, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,14 %, y un contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 0,25 % en p/p.
La columna se eluye con 9 litros de acetona acuosa al 90 % en v/v y el eluato que sale de la columna se recoge y se seca a 60 ºC a presión reducida, para rendir 99,8 g de un producto seco (producto 19) (el rendimiento frente al material de partida: 10 % en p/p.) Este producto tiene un contenido en catequinas por HPLC del 7,11 %, un contenido en
10
15
20
25
30
35
E06776215
10-04-2015
epicatequinas por HPLC del 4,52 %, y un contenido total de monómeros por HPLC (catequina + epicatequina) del 11,63 % en p/p.
Ejemplo 13
Purificación del extracto obtenido de semillas de uva: procedimiento 3 (etapa d)
La solución acuosa transparente que tiene un residuo seco de 163 g, obtenida de la extracción en agua-acetona de la etapa a (Ejemplo 2) seguida de la purificación parcial de la etapa (b) (Ejemplo 4) y eliminación de taninos de la etapa c (Ejemplo 8), se concentra hasta un residuo seco del 10 % en p/p.
Esta solución acuosa se lleva a temperatura ambiente, después, se carga en una columna cromatográfica que contiene 3200 ml de resina Rohm y Haas XAD1180® acondicionada con agua.
La solución de acuosa se adsorbe a la resina, mientras que la solución no retenida que sale de la columna se elimina. La resina se lava después con 6 litros de agua, eliminando también esta solución que se combina con la no retenida. La solución acuosa resultante se seca para obtener un producto (producto 20). Dicho producto tiene un residuo seco de 106,4 g, un contenido en catequinas por HPLC del 1,58 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,47 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 20 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 22). Dicho producto tiene un residuo seco de 11,7 g, un contenido en catequinas por HPLC del 16,8 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 15,2 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 30 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 23). Dicho producto tiene un residuo seco de 11,8 g, un contenido en catequinas por HPLC del 2,20 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 2,20 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 40 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 24). Dicho producto tiene un residuo seco de 10,2 g, un contenido en catequinas por HPLC del 1,15 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,75 % en p/p.
La resina se lava después con 6 litros de acetona al 50 % en v/v, la solución resultante se recoge y se seca (producto 25). Dicho producto tiene un residuo seco de 3,04 g, un contenido en catequinas por HPLC del 0,71 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,43 % en p/p.
Los productos resultantes pueden mezclarse a voluntad para obtener un producto con el contenido deseado en monómeros. Por ejemplo, puede obtenerse un producto con un contenido en monómeros reducido mezclando 3,04 g del producto 25 con 10,2 g del producto 24 para obtener 13,24 g de producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 1,05 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,68 % en p/p, y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 1,73 % en p/p, o pueden mezclarse 3,04 g del producto 25 con 10,2 g del producto 24 y con 15,0 g del producto 20 para obtener 28,24 g de un producto que tiene un contenido en monómeros por HPLC del 1,33 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 0,57 % y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 1,90 % en p/p.
Por otro lado, puede obtenerse un producto con un alto contenido en monómeros mezclando 19,6 g del producto 21 con 11,7 g del producto 22 para obtener 31,3 g de producto que tenga un contenido en catequinas por HPLC del 15,80 % en p/p, un contenido en epicatequinas por HPLC del 11,88 % en p/p, y un contenido total de monómeros (catequina + epicatequina) por HPLC del 27,76 % en p/p.

Claims (4)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un procedimiento de extracción de semillas de Vitis vinifera que comprende:
    a) la extracción de semillas de uva con un disolvente que es un alcohol C1-C3; o mezclas o soluciones acuosas del mismo con un contenido en agua no superior al 90 % (en v/v).
    5 b) la eliminación de los taninos insolubles en agua enfriando el extracto de la etapa a) y filtrando o centrifugando los materiales insolubles; c) la eliminación de taninos solubles en agua; d) la separación de productos con distintos pesos moleculares, a través de purificación cromatográfica en una columna;
    10 caracterizado porque la etapa c) se lleva a cabo añadiendo polivinilpirrolidona (PPVP) al extracto de la etapa b).
  2. 2.
    Un procedimiento según la reivindicación 1 en el que el disolvente de extracción es una solución de agua-etanol al 40% en v/v.
  3. 3.
    Un procedimiento según las reivindicaciones 1 o 2 en el que la extracción se lleva a cabo a 70 ºC.
  4. 4. Un procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la separación cromatográfica se 15 lleva a cabo en resinas de estireno-divinilbenceno o acrílicas.
    9
ES06776215.3T 2005-07-29 2006-07-13 Extractos de semillas de uva obtenibles mediante fraccionamiento en una resina Active ES2534757T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ITMI20051485 2005-07-29
IT001485A ITMI20051485A1 (it) 2005-07-29 2005-07-29 Estratto da semi d'uva ottenibile per frazionamento su resina
PCT/EP2006/006852 WO2007017037A1 (en) 2005-07-29 2006-07-13 Grape seeds extracts obtainable by fractioning on a resin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2534757T3 true ES2534757T3 (es) 2015-04-28

Family

ID=37056744

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES06776215.3T Active ES2534757T3 (es) 2005-07-29 2006-07-13 Extractos de semillas de uva obtenibles mediante fraccionamiento en una resina

Country Status (16)

Country Link
US (1) US8372445B2 (es)
EP (1) EP1909750B1 (es)
JP (1) JP5593031B2 (es)
KR (1) KR101393359B1 (es)
CN (1) CN101232865B (es)
AU (1) AU2006278912B2 (es)
CA (1) CA2620689C (es)
DK (1) DK1909750T3 (es)
ES (1) ES2534757T3 (es)
IL (1) IL189074A (es)
IT (1) ITMI20051485A1 (es)
PL (1) PL1909750T3 (es)
PT (1) PT1909750E (es)
RU (1) RU2400246C2 (es)
SI (1) SI1909750T1 (es)
WO (1) WO2007017037A1 (es)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2189062E (pt) 2008-11-25 2013-10-22 Indena Spa Extratos de planta para utilização como fitoquímicos
EP2263481A1 (en) 2009-05-29 2010-12-22 Nestec S.A. Green tea extracts of improved bioavailability
WO2011147989A1 (de) 2010-05-28 2011-12-01 Finzelberg Gmbh & Co. Kg Verfahren zur herstellung eines angereicherten extraktes aus blättern von weinrebengewächsen
EP2575843B1 (de) 2010-05-28 2017-03-01 Boehringer Ingelheim International GmbH Verfahren zur herstellung eines angereicherten extraktes aus blättern von vitis vinifera l
FR2998296B1 (fr) 2012-11-16 2015-03-06 Valagro Carbone Renouvelable Poitou Charentes Procede d'obtention de polyphenols a partir d'une matiere premiere vegetale en contenant
AU2014303393B2 (en) 2013-08-09 2019-11-28 Suntory Holdings Limited Agent for promoting in vivo absorption of hydroxytyrosol and derivatives thereof and use of same
JP6033382B1 (ja) * 2015-10-01 2016-11-30 小豆島ヘルシーランド株式会社 オリーヴ葉エキス及びその製造方法
ITUA20164757A1 (it) 2016-06-29 2017-12-29 Indena Spa Composizioni utili nella prevenzione e/o nel trattamento dell’infiammazione e del dolore osteoarticolare e del danno cartilagineo
RU2664709C2 (ru) * 2016-12-01 2018-08-21 Михаил Юрьевич Ахлебинин Способ выделения биологически активных проантоцианидинов
CN111787909B (zh) 2018-02-02 2023-04-28 因德纳有限公司 包含小檗碱的组合物
EP3755435A1 (en) 2018-02-23 2020-12-30 Givaudan Italia S.p.A. Cosmetic compositions for protection against light-induced damages
AU2020244715A1 (en) * 2019-03-25 2021-10-14 E & J Gallo Winery Methods for continuous extraction and purification of a unique flavan-3-ol extract from immature whole grape clusters and compositions thereof
IT202000015493A1 (it) 2020-06-26 2021-12-26 Fondazione St Italiano Tecnologia Estratto di vinacce di uva bianca di vitis vinifera, relative composizioni e usi

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2092743A1 (en) 1970-06-15 1972-01-28 Aquitaine Invest Pharma Complete extraction of total flavanol gomers from plats -peripheral - venous activity
GB1541469A (en) 1976-12-01 1979-02-28 Inverni Della Beffa Spa Method of obtaining flavonolic oligomers
JPH01218550A (ja) * 1988-02-25 1989-08-31 Itouen:Kk 除タンニン茶液及び茶飲料の製造方法
IT1219732B (it) * 1988-06-28 1990-05-24 Tecnofarmaci Spa Frazioni oligomeriche procianidoliche,loro procedimento di preparazione e composizioni farmaceutiche che le contengono
JP3623247B2 (ja) * 1993-06-16 2005-02-23 株式会社 伊藤園 茶葉サポニン類を含む薬剤
FR2722498B1 (fr) * 1994-07-12 1996-10-11 Berkem Sa Procede de preparation d'extraits contenant des composes polyphenoliques oligomeres de type catechique a partir de xources vegetales et extraits obtenus
JPH08283257A (ja) * 1995-02-15 1996-10-29 Kikkoman Corp プロアントシアニジンの品質改良法及び品質の改良されたプロアントシアニジンの製造法
FR2740684B1 (fr) * 1995-10-13 1998-01-02 Dietetique Comp Gen De Composition prophylactique absorbable ayant un effet protecteur contre les ondes electromagnetiques a effet ionisant ou non ionisant
JPH09220055A (ja) * 1996-02-15 1997-08-26 Calpis Food Ind Co Ltd:The 茶類飲料の製造方法
ATE413873T1 (de) * 1997-09-09 2008-11-15 Univ Rutgers Proanthocyanidinhaltiges pflanzenextrakt für die hemmung von p-type fimbriae-bakterieller adhäsion an oberflächen
US6562803B2 (en) * 2001-02-16 2003-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Hair-growing agent
US6706756B1 (en) * 2001-11-16 2004-03-16 University Of South Florida Vasodilating compound and method of use
JP2004238289A (ja) * 2003-02-03 2004-08-26 Kikkoman Corp 血栓形成抑制剤及び機能性食品
US20080249163A1 (en) * 2003-10-01 2008-10-09 Kinya Takagaki Process For Producing Product Containing Proanthocyanidin in High Proportion
JP2005314316A (ja) * 2004-04-30 2005-11-10 Kikkoman Corp 抗ｓａｒｓコロナウイルス剤

Also Published As

Publication number Publication date
US8372445B2 (en) 2013-02-12
SI1909750T1 (sl) 2015-05-29
JP5593031B2 (ja) 2014-09-17
AU2006278912B2 (en) 2012-07-19
KR20080034135A (ko) 2008-04-18
ITMI20051485A1 (it) 2007-01-30
DK1909750T3 (en) 2015-02-16
JP2009502825A (ja) 2009-01-29
RU2400246C2 (ru) 2010-09-27
WO2007017037A1 (en) 2007-02-15
US20090202667A1 (en) 2009-08-13
IL189074A0 (en) 2011-08-01
PT1909750E (pt) 2015-04-30
IL189074A (en) 2012-12-31
RU2008103196A (ru) 2009-08-10
CN101232865A (zh) 2008-07-30
PL1909750T3 (pl) 2015-07-31
CA2620689C (en) 2015-11-24
EP1909750B1 (en) 2015-01-14
CN101232865B (zh) 2013-09-11
AU2006278912A1 (en) 2007-02-15
KR101393359B1 (ko) 2014-05-14
HK1122992A1 (en) 2009-06-05
EP1909750A1 (en) 2008-04-16
CA2620689A1 (en) 2007-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
IL189074A (en) Grape seed extracts obtainable by fractionating on a resin
ES2315351T3 (es) Metodo para obtener hidroxitirosol purificado a partir de productos y subproductos derivados del olivo.
KR0169957B1 (ko) 신규한 은행나무의 추출물 및 이것의 제조방법
JP3115691B2 (ja) 低カフェイン含量茶ポリフェノールの製造法
CN101336987A (zh) 一种枳椇总黄酮的制备方法
JP3808494B2 (ja) プロアントシアニジン高含有物の製造方法
RU2392954C2 (ru) Обогащенная полифенолами композиция, экстрагированная из шелухи какао-бобов
AU2002342778A1 (en) Solvent extraction process
WO2003029269A1 (en) Solvent extraction process
JP5437537B1 (ja) 低重合度プロアントシアニジンの製法
JPWO2003091237A1 (ja) プロアントシアニジン高含有物の製造方法
JPH07238078A (ja) ポリフェノール化合物の精製法
KR20080031273A (ko) 버드나무 추출물, 그 용도, 및 그것을 함유하는 제제
JPH08169838A (ja) 植物供給源からカテキン型のオリゴマー性ポリフェノール化合物を含有する抽出物を調製する方法、および得られた抽出物
US7863466B2 (en) Method of producing proanthocyanidin-containing material
JPH0631208B2 (ja) プロアントシアニジンの製造法
JP4977024B2 (ja) プロアントシアニジン含有物の製造方法
KR20040067605A (ko) 과실추출물로부터 프로안토시아니딘 올리고머의 분리방법
WO2005033053A1 (ja) プロアントシアニジン高含有物の製造方法
KR20060069885A (ko) 프로안토시아니딘 고함유물의 제조방법
HK1122992B (en) Grape seeds extracts obtainable by fractioning on a resin
RO125704A2 (ro) Procedeu de obţinere a polifenolilor din tescovina de struguri
HK1122491B (en) Salix extract, its use and formulations containing it
HK1133183A (en) Extracts and methods comprisinig green tea species