ES2569110T3

ES2569110T3 - Composición farmacéutica que contiene un derivado de 1,2-ditioltiona para prevenir o tratar una enfermedad causada por la expresión en exceso de LXR-alfa

Info

Publication number: ES2569110T3
Application number: ES09805142.8T
Authority: ES
Inventors: Sang Geon Kim; Sung Hwan Ki; Seong Hwan Hwang
Original assignee: SNU R&DB Foundation
Current assignee: SNU R&DB Foundation
Priority date: 2008-08-04
Filing date: 2009-07-30
Publication date: 2016-05-06
Anticipated expiration: 2029-07-30
Also published as: JP2011529047A; KR101057485B1; JP5300979B2; EP2307006B1; CN102112128A; US20110152524A1; US9370504B2; WO2010016681A2; EP2307006A2; EP2307006A4; WO2010016681A3; KR20100015085A; RU2011108359A; CN102112128B; RU2491065C2

Abstract

Una composición farmacéutica para uso en la prevención y el tratamiento de la hipertensión causada por renina, aldosteronismo, adrenoleucodistrofia, glomeruloesclerosis, proteinuria, nefropatía, esteatosis hepática, hipertrigliceridemia, o hiperreninemia, causadas por la expresión en exceso o la actividad excesiva de un receptor alfa X del hígado (LXR), en donde la composición farmacéutica contiene como componente eficaz un compuesto representado por la siguiente Fórmula 1, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un solvato del mismo, o un hidrato del mismo:**Fórmula** en donde X es carbono o nitrógeno, Q es azufre, oxígeno, o -S>=O, y R1 y R2 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en un átomo de hidrógeno, alquilo C1-C7, cicloalquilo C3-C7, haloalquilo C1-C7, alcoxi C1-C7, cicloalcoxi C3-C7, alquil(C1-C7)tio, cicloalquil(C3-C7)tio, alquenilo C1-C7, alquinilo C1-C7, sulfonilo C1-C7, alquil(C1-C7)aminocarbonilo, HO-alquilo C1-C7, HS-alquilo C1-C7, hidroxi, tiol, halógeno, carboxilo, nitro, ciano, carbonilo C1-C7), alcoxi(C1-C7)carbonilo, alquil(C1-C7)carboniloxi, alquil(C1-C4)carbonilalquilo C1-C4, alcoxi(C1- C4)alquilo C1-C4, alquil(C1-C4)tioalquilo C1-C4, amino, alquil(C1-C7)amino, alquil(C1-C7)carbonilamino,, alcoxi(C1- C4)alquil(C1-C4)amino, alquil(C1-C4)tioalquil(C1-C4)amino, alquil(C1-C4)sulfonilamino, fenilo, heteroarilo, fenilalquilo C1-C4, heteroarilalquilo C1-C4, fenilalcoxi(C1-C4)alquilo C1-C4, fenilalquil(C1-C4)tioalquilo C1-C4, fenoxialquilo C1-C4, feniltioalquilo C1-C4, fenilcarbonilamino, fenoxialquil(C1-C4)carbonilamino, fenilalcoxi(C1-C4)alquil(C1- C4)carbonilamino, heteroariloxialquilo C1-C4, heteroariltioalquilo C1-C4, y heteroarilalquil(C1-C4)tioalquilo C1-C4, en donde el heteroarilo se refiere a un compuesto cíclico de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en nitrógeno, azufre y oxígeno; el fenilo y heteroarilo está sustituido o no sustituido y un sustituyente disponible se selecciona entre el grupo que consiste en halógeno, alquilo C1-C7, alcoxi C1-C7, haloalquilo C1-C7, alquil(C1-C7)tio, alquenil(C1-C7)oxi, carbonilo C1-C4, alquil(C1-C4)amino, nitro, amino, ciano, HOalquilo C1-C4, HS-alquilo C1-C4, HO-alcoxi C1-C7, HO-alquil(C1-C7)tio, HS-alquil(C1-C7)tio, HS-alcoxi C1-C7, tiol, hidroxi y carboxilo, y cuando está sustituido, el fenilo y heteroarilo está monosustituido o multisustituido; el fenilo y heteroarilo está fusionado cada uno independientemente con al menos un benceno o el heteroarilo descrito anteriormente; y el fenilo fusionado y heteroarilo está sustituido o no sustituido y un sustituyente disponible se selecciona entre el grupo que consiste en halógeno, alquilo C1-C7, alcoxi C1-C7, haloalquilo C1-C7, alquil(C1-C7)tio, alquenil(C1-C7)oxi, carbonilo C1-C4, alquil(C1-C4)amino, nitro, amino, ciano, HO-alquilo C1-C4, HS-alquilo C1-C4, HO30 alcoxi C1-C7, HO-alquil(C1-C7)tio, HS-alquil(C1-C7)tio, HS-alcoxi C1-C7, tiol, hidroxi y carboxilo, y cuando está sustituido, el fenilo y heteroarilo están mono-sustituidos o multi-sustituidos.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

alcoxi C1-C7, haloalquilo C1-C7, alquil(C1-C7)tio, alquenil(C1-C7)oxi, carbonilo C1-C4, alquil(C1-C4)amino, nitro, amino, ciano, HO-alquilo C1-C4, HS-alquilo C1-C4, HO-alcoxi C1-C7, HO-alquil(C1-C7)tio, HS-alquil(C1-C7)tio, HS-alcoxi C1-C7, tiol, hidroxi y carboxilo, y cuando está sustituido, el fenilo y heteroarilo puede estar monosustituido o multi-sustituido; el fenilo y heteroarilo pueden ser cada uno independientemente fusionados con al menos un benceno o el heteroarilo descrito anteriormente; y el fenilo fusionado y heteroarilo pueden estar sustituidos o no sustituidos y un sustituyente disponible se puede seleccionar del grupo que consiste en halógeno, alquilo C1-C7, alcoxi C1-C7, haloalquilo C1-C7, alquil(C1-C7)tio, alquenil(C1-C7)oxi, carbonilo C1-C4, alquil(C1-C4)amino, nitro, amino, ciano, HOalquilo C1-C4, HS-alquilo C1-C4, HO-alcoxi C1-C7, HO-alquil(C1-C7)tio, HS-alquil(C1-C7)tio, HS-alcoxi C1-C7, tiol, hidroxi y carboxilo, y cuando está sustituido, el fenilo y heteroarilo pueden estar mono-sustituidos o multi-sustituidos.

En algunas realizaciones de los métodos de tratamiento o prevención de una enfermedad o afección mediada por un LXRα o SREBP-1, la enfermedad o afección es, por ejemplo, esteatosis hepática, hipertrigliceridemia, hiperreninemia, hipertensión causada por renina, aldosteronismo, adrenoleucodistrofia, glomeruloesclerosis, proteinuria o nefropatía. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en la presente memoria se utilizan para mejorar y/o retrasar la progresión de una o más de estas enfermedades o afecciones. El derivado de 1,2-ditioltiona contenido en la composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención puede incluir un compuesto orgánico que incluye 1,2-ditiol-3-tiona y una molécula bicíclica y un compuesto orgánico derivado del compuesto orgánico. La molécula bicíclica puede ser pirazina, piridazina, pirimidina, tiazol, o tiofeno (Tabla 1).

Tabla 1

Ejemplo de compuestos que contienen 1,2-ditiol-3-tionas para inhibir la expresión de SREBP-1

imagen7: imagen8

R1-H. -Alquilo (C1-Cx) R2-H. -Halógeno, -alcoxi R3-H. -Alquilo (C1-Cx)R4-OR5-H. -Alquilo (C1-Cx) (Uno entre R2 a R5 está sustituido): R1-H. -Alquilo (C1-Cx) Uno entre X, Y y Z es -N y los otros son C. R1-H, -Alquilo(C1-Cx) R2-H, -Alquilo(C1-Cx) R1-H, -Alquilo(C1-Cx) R2-H, -Alquilo(C1-Cx), Halógeno R1-H, -Alquilo(C1-Cx) R2-H, -Alquilo(C1-Cx) R3-H, -Alquilo(C1-Cx) R1-H, -Alquilo(C1-Cx) R1-H, -Alquilo(C1-Cx) R2-H, -Alquilo(C1-Cx) R3-H, -Alquilo(C1-Cx) R4-H, -Alquilo(C1-Cx)

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención pueden incluir sales farmacéuticamente aceptables que se forman utilizando los compuestos descritos anteriormente, un solvato de los mismos, un hidrato de los mismos o un profármaco de los mismos. Una sal de adición farmacéuticamente aceptable puede ser una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable o una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable. El término "sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable" utilizado en la presente memoria puede incluir una sal de adición de ácido no tóxico que se forma utilizando el compuesto representado por la Fórmula 1 y es terapéuticamente activo. El compuesto representado por la Fórmula 1 tiene originalmente una característica alcalina y cuando se trata con un ácido adecuado, el compuesto representado por la Fórmula 1 se puede convertir en una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del compuesto representado por la Fórmula 1. El ácido adecuado puede ser un ácido inorgánico o un ácido orgánico. Los ejemplos del ácido inorgánico del ácido adecuado incluyen un ácido de hidrógeno halogenado tal como ácido clorhídrico o ácido brómico; un ácido sulfúrico; un ácido nítrico; y un ácido fosfórico. Los ejemplos del ácido orgánico del ácido adecuado incluyen un ácido acético, un ácido trifluoroacético, un ácido propanoico, un ácido hidroxiacético, un ácido láctico, un ácido pirúvico, un ácido oxálico, un ácido malónico, un ácido succínico (es decir, ácido butanodioico), un ácido maleico, un ácido fumárico, un ácido málico, un ácido tartárico, un ácido cítrico, un ácido metanosulfónico, un ácido etanosulfónico, un ácido bencenosulfónico, un ácido p-toluenosulfónico, un ácido ciclámico, un ácido salicílico, un ácido p-amino-salicílico, y un ácido pamoico. El compuesto convertido que tiene una característica ácida también se puede convertir en una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable del mismo cuando se trata con una base orgánica o inorgánica adecuada. Una sal de adición de base adecuada puede ser, por ejemplo, una sal de amonio; sales basadas en metales alcalinos y alcalinotérreos tales como una sal de litio, una sal de sodio, una sal de potasio, una sal de magnesio, o una sal de calcio; una sal con una base orgánica tal como una sal de benzatina, una sal de N-metil-Dglucamina, o una sal hidrabamina; o una sal con un aminoácido tal como arginina o lisina.

La composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención se puede formular en una preparación de tipo de administración unitaria que es adecuada para la administración oral o una preparación inyectable utilizando un

8 5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

método convencional en la técnica farmacéutica y luego se puede administrar. La preparación de tipo administración unitaria que es adecuada para la administración oral puede ser una cápsula dura o blanda, un comprimido, un polvo, una suspensión, o jarabe. La preparación de tipo administración unitaria que es adecuada para la administración oral puede incluir, además de al menos un componente farmacéuticamente activo, al menos un portador convencional farmacéuticamente inactivo ineficaz. El al menos un portador convencional farmacéuticamente inactivo ineficaz puede incluir, por ejemplo, un excipiente, un aglutinante, un disgregante y un lubricante. Los ejemplos del excipiente incluyen polvo, lactosa, carboximetilcelulosa, y caolín. Los ejemplos del aglutinante incluyen agua, gelatina, alcohol, glucosa, goma Arábiga, y goma de tragacanto. Los ejemplos del disgregante incluyen polvo, dextrina, y alginato de sodio. Los ejemplos del lubricante incluyen talco, ácido esteárico, estearato de magnesio y parafina fluida. La composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención puede incluir adicionalmente un coadyuvante de disolución para la disolución.

Una dosis diaria de la composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención puede variar de acuerdo con la gravedad de la enfermedad, el tiempo de desarrollo de la enfermedad, y la edad, el estado de salud, y las complicaciones del paciente. Por ejemplo, la composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención se puede administrar a una dosis de 1 a 500 mg, específicamente de 30 a 200 mg para un adulto, en un día. La dosis se puede administrar en forma de bolo o dividida en varias porciones.

La presente invención se describirá con más detalle con referencia a los siguientes ejemplos experimentales. Estos ejemplos experimentales tienen fines ilustrativos solamente y no se pretende que limiten el alcance de la presente invención.

Ejemplo de Referencia 1: Animal de ensayo y dieta

Se adquirieron ratones macho C57BL/6 (peso medio de 25 a 30 g) como animales de ensayo de Charles River Orient (Seúl, Corea). Durante al menos una semana antes de ser evaluados, los ratones fueron aclimatados al medio ambiente circundante en el centro de investigaciones sobre animales del College of Pharmacy, Seoul National University, es decir, humedad de 55 ± 5%, temperatura de 22 ± 2°C y ventilación controlada. Los ratones fueron expuestos repetidamente y alternativamente a la luz y luego se colocaron en la oscuridad durante un intervalo de tiempo de 12 horas (de 7 a.m. a 7 p.m). Durante el ensayo, las cantidades de comida y agua que consumieron los ratones no cambiaron significativamente. El peso y el estado de los ratones se midieron una vez a la semana. Se criaron dos grupos de ratones respectivamente con una dieta con alto contenido de lípidos (Dyets Inc., Bethlehem) y una dieta normal durante 10 semanas. Durante las últimas cuatro semanas en cada caso, se administró oltipraz (10

o 30 mg/kg, 3 veces/semana) a los ratones (FIG. 1). Cada grupo constaba de un total de 10 ratones.

Ejemplo de Referencia 2: Preparación de la muestra

El oltipraz y el derivado de 1,2-ditioltiona fueron proporcionados por CJ Co., Ltd. El derivado de 1,2-ditioltiona utilizado en la presente invención se puede elaborar utilizando un método descrito en el documento KR Núm. 100604261. Se adquirió una dieta con alto contenido de lípidos para inducir un hígado graso de Dyet Co., una compañía de los Estados Unidos. El oltipraz se diluyó con PEG200 al 40% para obtener una concentración diana.

Ejemplo de Referencia 3: RT-PCR en tiempo real

El ARN total (2 µg) y el cebador d(T)16 que se extrajeron del hígado de los ratones y una transcriptasa inversa AMV se utilizaron para obtener ADNc. Las cantidades relativas de los genes se cuantificaron por medio de RT-PCR en tiempo real utilizando un colorante verde CyBr. La RT-PCR en tiempo real fue Light-cycler2.0 producido por Roche (Mannheim, Alemania). Se realizó una PCR utilizando el método del fabricante y soporte lógico Light-cycler 4.0 para analizar la cantidad relativa de los respectivos genes.

Ejemplo de Referencia 4: Transferencia Western

La electroforesis en gel de poliacrilamida-dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) se realizó utilizando un aparato Mighty Small II SE 250 de acuerdo con un método de Laemmli UK (1970). Una parte alícuota de la disolución de una muestra de hígado se diluyó con una solución de tampón de dilución de la muestra [Tris 63 mM (pH 6,8), glicerol al 10%, SDS al 2%, azul de bromofenol al 0,0013%, β-mercaptoetanol al 5%] y, a continuación, se llevó a cabo la electroforesis utilizando gel al 7,5% y 9% en una solución de tampón de electrodos (15 g de Tris, 72 g de glicina, y 5 g de SDS contenidos en 1 litro de solución). Después se llevó a cabo la electroforesis, las proteínas del gel se transfirieron a una lámina de nitrocelulosa en una solución tampón [Tris 25 mM, glicina 192 mM, metanol del 20% v/v (pH 8,3)] en un sistema de electroforesis a 190 mAmps durante una hora. Se hizo reaccionar anti-SREBP-1 como anticuerpo primario y, a continuación, se hizo reaccionar anti-IgG de conejo de cabra conjugado con peroxidasa de rábano picante como anticuerpo secundario durante una hora. A continuación, se utilizó un sistema de quimioluminiscencia ECL (Amersham, Gaithesberg, MA) para visualizar la proteína inmunorreactiva. La igualdad de carga de la cantidad de proteína en las muestras respectivas se identificó utilizando un anticuerpo anti-β-actina

9

imagen9

imagen10

imagen11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Estos componentes se mezclaron y a continuación se llenó una cápsula de gelatina blanda de acuerdo con un método de formulación de cápsulas convencional con el fin de preparar una preparación de cápsula.

Ejemplo de Preparación 7

Oltipraz 100 mg Azúcar isomerizado 10 g Azúcar 30 mg Sodio CMC 100 mg Aroma de limón Cantidad apropiada Agua purificada Hasta completar (La cantidad total de todos los componentes fue de 100 ml) Se preparó una suspensión utilizando estos componentes de acuerdo con un método de preparación de suspensión convencional, y a continuación se llenó con ella una botella marrón de 100 ml y se esterilizó, obteniendo de este modo una preparación de suspensión.

Ejemplo de Preparación 8

3-metil-1,2-ditiol-3-tiona 250 mg Lactosa 30 mg Almidón 20 mg Sal de magnesio de ácido esteárico Cantidad apropiada Estos componentes se mezclaron homogéneamente y se llenó con los mismos una bolsa de recubierta de polietileno y a continuación se selló, preparando de este modo una preparación en polvo.

Ejemplo de Preparación 9

Una cápsula blanda contenía: Oltipraz 100 mg Polietilenglicol 400 mg Producto concentrado de Glicerina 55 mg Agua purificada 35 mg Se mezclaron el polietilenglicol y el producto concentrado de glicerina y después se añadió agua purificada. Mientras la temperatura de la mezcla resultante se mantenía a aproximadamente 60°C, se añadió a la mezcla resultante derivado de 1,2-ditioltiona y luego se mezcló uniformemente por agitación a una velocidad de aproximadamente

1.500 rpm. Después, mientras se mezclaba lentamente, la temperatura se enfrió a la temperatura ambiente y a continuación se eliminaron las burbujas usando una bomba de vacío, preparando de este modo el contenido de una cápsula blanda. Se formó una película superficial de la cápsula blanda por tratamiento suave con una gelatina o plastificante conocidos convencionalmente. Se preparó una cápsula utilizando 132 mg de gelatina, 52 mg de producto concentrado de glicerina, 6 mg de la solución de disorbitol del 70%, vainillina de etilo como un agente de adición de fragancia, y cera de carnauba como agente de revestimiento, de acuerdo con un método de formulación de cápsulas convencional.

Aplicabilidad Industrial

Una composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención es eficaz para prevenir y tratar una enfermedad causada por la expresión en exceso o la actividad excesiva de LXR α, o una enfermedad causada por la expresión en exceso o la actividad excesiva de SREBP-1. Cuando se administra la composición farmacéutica, la expresión y la actividad de SREBP-1 se inhiben, donde SREBP-1 es un factor de transcripción clave que controla la expresión de genes de enzimas lipogénicas mediante el ajuste de la actividad de LXR α, y además la expresión de genes lipogénicos se inhibe y por lo tanto, la acumulación de triglicéridos en el tejido hepático, que se produce debido a la esteatosis hepática causada por el trastorno de metabolismo, se inhibe. Por consiguiente, las composiciones farmacéuticas que contienen los derivados de 1,2-ditioltiona como componente eficaz, de acuerdo con la presente invención, son eficaces para prevenir y tratar la esteatosis hepática. Además, las composiciones farmacéuticas son eficaces para prevenir y tratar la hipertrigliceridemia, la hiperreninemia, la hipertensión debida a renina, el aldosteronismo, la adrenoleucodistrofia, la glomeruloesclerosis, la proteinuria, y la nefropatía.

13

Claims

imagen1