EA020815B1

EA020815B1 - Ингибиторы вируса гепатита с

Info

Publication number: EA020815B1
Application number: EA201270656A
Authority: EA
Inventors: Маконен Белема; Джефри Ли Ромине; Ван Н. Нгуен; Гань Ван; Омар Д. Лопез; Денис Р. Сейнт Лорен; Ци Чэнь; Джон А. Бендер; Чжун Ян; Пиясена Хевавасам; Ниннин Сюй; Николас А. Минвелл; Джон А. Истер; Бао-Нин Су; Майкл Дж. Смит
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date: 2009-12-16
Filing date: 2010-12-13
Publication date: 2015-01-30
Also published as: PE20121479A1; CO6561788A2; JP2013514359A; JP5785189B2; TN2012000264A1; CN102741242B; MX2012006635A; CN102741242A; WO2011075439A1; SG181700A1; EA201270656A1; MA33806B1; BR112012014677A2; CA2784662A1; TW201130825A; KR20120107991A; AR079634A1; NZ601220A; AU2010332034B2; CL2012001637A1

Abstract

Изобретение относится к соединениям, имеющим общую формулу (I), композициям и способам лечения инфекции вируса гепатита С (HCV). Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и способам применения этих соединений при лечении HCV инфекции.

Description

Раскрытие в целом относится к противовирусным соединениям и более конкретно оно относится к соединениям, которые могут ингибировать функцию белка Ν85Α, кодируемого вирусом гепатита С (НСУ), содержащим такие соединения композициям и способам ингибирования функции белка Ν85Α.

НСУ представляет собой один из основных человеческих патогенов, которым инфицировано приблизительно 170 миллионов человек в мире - примерно в пять раз больше, чем инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1. У существенной части этих инфицированных НСУ людей развивается серьезное прогрессирующее заболевание печени, включая цирроз и гепатоцеллюлярную карциному.

Современный стандарт лечения НСУ, при котором используют комбинацию пэгилированного интерферона и рибавирина, не характеризуется оптимальным процентом успешных попыток при достижении замедленного вирусного ответа и вызывает множество побочных эффектов. Таким образом, для решения этой актуальной медицинской проблемы существует четкая и давно назревшая потребность в разработке эффективных методов лечения.

НСУ представляет собой вирус, содержащий плюс-цепь РНК. На основе сравнения предсказанной аминокислотной последовательности и большого сходства в 5'-нетранслируемой области НСУ классифицировали как отдельный род семейства Иаущтбае. Все члены семейства Р1ау1ушбае характеризуются заключенными в оболочку вирионы, которые содержат геном в виде плюс-цепи РНК, кодирующий все известные вирусоспецифические белки посредством трансляции одной непрерывной открытой рамки считывания.

Обнаружена значительная гетерогенность в пределах нуклеотидной и кодируемой аминокислотной последовательности по всему геному НСУ из-за высокого коэффициента ошибок кодируемой не способной к коррекции РНК-зависимой РНК-полимеразы. По меньшей мере были охарактеризованы шесть основных генотипов и описано более 50 подтипов, распространенных в мире. Клиническая значимость геннной гетерогенности НСУ показала склонность к появлению мутаций при монотерапевтическом лечении, следовательно, желаемыми являются дополнительные возможности выбора лечения. Возможный модулирующий эффект генотипов на патогенез и терапию остается невыясненным.

Размер одноцепочечной РНК генома НСУ приблизительно составляет 9500 нуклеотидов и содержит одну открытую рамку считывания (ОКБ), кодирующую один крупный полипротеин приблизительно из 3000 аминокислот. В инфицированных клетках этот полипротеин расщепляется по многим сайтам клеточными и вирусными протеазами с образованием структурных и неструктурных (Ν8) белков. В случае НСУ образование зрелых неструктурных белков (N82, N83, Ν84Α, Ν84Β, Ν85Α и Ν85Β) осуществляется двумя вирусными протеазами. Полагают, что первая представляет собой металлопротеазу и расщепляет соединение Ν82-Ν83; вторая представляет собой сериновую протеазу, которая содержится в Ν-концевой области Ν83 (в настоящем документе также называемой №3-протеазой) и опосредует все последующие расщепления ниже Ν83, как в цис-положении в сайте расщепления Ν83-Ν84Α и в трансположении в остальных сайтах Ν84Α-Ν84Β, Ν84Β-Ν85Α, Ν85Α-Ν85Β. Оказывается, что белок Ν84Α выполняет множество функций и действует как кофактор протеазы Ν83, а также способствует размещению в мембране Ν83 и других вирусных репликазных компонентов. Образование комплекса Ν83-Ν84Α необходимо для правильного функционирования протеазы, приводя к повышенной протеолитической эффективности процессов расщепления. Белок Ν83 также проявляет нуклеозидтрифосфатазную и РНК-геликазную активности. Ν85Β (в настоящем документе также называемая полимераза НСУ) представляет собой РНКзависимую РНК-полимеразу, которая участвует в репликации НСУ наряду с другими белками НСУ, включая Ν85Α, в составе репликазного комплекса.

Желаемыми являются применимые для лечения инфицированных НСУ пациентов соединения, которые селективно ингибируют вирусную репликацию НСУ. В частности, желаемыми являются соединения, эффективно ингибирующие функцию белка Ν85Α. Белок Ν85Α НСУ описан, например, в следующих ссылках: Таи, 8.Ь. е! а1., Уио1оду, 284:1-12 (2001); Рагк, К.-к е! а1., 1. Βίά. СЬет., 30711-30718 (2003); ТеШидЬшкеп, Т.Ь. е! а1., №Ниге. 435:374 (2005); Ьоуе, Κ.Α. е! а1., 1. Уио1., 83:4395 (2009); Αρρе1, Ν. е! а1., 1. Βΐοΐ. СЬет., 281:9833 (2006); Ниаид, Ь., 1. Βΐο1. СЬет., 280:36417 (2005); Шее, С. е! а1., АО 2006/093867.

Согласно одному аспекту настоящее раскрытие относится к соединению формулы (I)

или его фармацевтически приемлемой соли, где и равно 0, 1 или 2;

X выбирают из водорода, циано, галогена циклопропила, циклопропилметила, 1-метилциклопропила, аллила, 1-метилпиразол-5-ила, 1-метилимидазол-5-ила и изоксазол-4-ила;

- 1 020815

К¹ представляет собой водород;

К² выбирают из водорода, циклопропила и галогена; или

К¹ и К² вместе образуют -СН=СН- или -СН=СС1-;

при условии, что по меньшей мере один из X и К² не обозначает водород;

каждый К³ представляет собой метил, или два К³ в положениях 3 и 4 пиролидинового кольца вместе с атомами углерода пиролидинового кольца образуют циклопропановое кольцо;

каждый К⁴ независимо выбирают из третбутоксикарбонила, ацетила и Ы-(С₁-С₂)алкоксикарбониламино(С₂-С₅)алканоил, где (С₂-С₅)алканоильный фрагмент может быть замещен 1-2 группами метокси или радикалом, выбранным из группы, включающей гидрокси, циклопропил, циклобутил, 4,4дифторциклогексил, тетрагидропиран-4-ил, 2,6-диметилтетрагидропиран-4-ил.

Согласно второму варианту осуществления первого аспекта настоящее раскрытие относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где X представляет собой галоген.

Согласно третьему варианту осуществления первого аспекта К² представляет собой галоген.

Согласно четвертому варианту осуществления первого аспекта настоящее раскрытие относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где X представляет собой водород.

Согласно второму аспекту настоящее раскрытие относится к композиции, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. Согласно первому варианту осуществления второго аспекта композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное соединение, характеризующееся анти-НСУ активностью. Согласно второму варианту осуществления второго аспекта по меньшей мере одно из дополнительных соединений представляет собой интерферон или рибавирин.

Согласно третьему варианту осуществления второго аспекта интерферон выбирают из интерферона альфа 2В, пэгилированного интерферона альфа, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластоидного интерферона тау.

Согласно четвертому варианту осуществления второго аспекта настоящее раскрытие относится к композиции, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно дополнительное соединение, характеризующееся анти-НСУ активностью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений выбрано из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое усиливает развитие ответа Тхелперной клетки 1 типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквимода, рибавирина, ингибитора инозин-5'-монофосфатдегидрогеназы, амантадина и римантадина.

Согласно пятому варианту осуществления второго аспекта настоящее раскрытие относится к композиции, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно дополнительное соединение, характеризующееся анти-НСУ активностью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений эффективно ингибирует функции мишени, выбранной из металлопротеазы НСУ, сериновой протеазы НСУ, полимеразы НСУ, геликазы НСУ, белка Ν84Β НСУ, входа НСУ, сборки НСУ, выхода НСУ, белка Ν85Α НСУ и ПИРОН для лечения инфекции НСУ.

Согласно третьему аспекту настоящее раскрытие относится к способу лечения инфекции НСУ у пациента, предусматривающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно первому варианту осуществления третьего аспекта способ дополнительно предусматривает введение по меньшей мере одного дополнительного соединения, характеризующегося анти-НСУ активностью перед введением, после введения или одновременно с введением соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью. Согласно второму варианту осуществления третьего аспекта по меньшей мере одно из дополнительных соединений представляет собой интерферон или рибавирин. Согласно третьему варианту осуществления третьего аспекта интерферон выбирают из интерферона альфа 2В, пэгилированного интерферона альфа, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластоидного интерферона тау.

Согласно четвертому варианту осуществления третьего аспекта настоящее раскрытие относится к способу лечением инфекции НСУ у пациента, предусматривающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере одного дополнительного соединения, характеризующегося анти-НСУ активностью перед введением, после введения или одновременно с введением соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений выбрано из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое усиливает развитие ответа Тхелперной клетки 1 типа, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквимода, рибавирина, ингибитора инозин-5'-монофосфатдегидрогеназы, амантадина и римантадина.

Согласно пятому варианту осуществления третьего аспекта настоящее раскрытие относится к способу лечения инфекции НСУ у пациента, предусматривающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере одного дополнительного соединения, характеризующегося анти-НСУ активностью перед введением, после введения или одновременно с введением соединения формулы (I) или его фармацевтиче- 2 020815 ски приемлемой солью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений эффективно ингибирует функции мишени, выбранной из металлопротеазы НСУ, сериновой протеазы НСУ, полимеразы НСУ, геликазы НСУ, белка Ν84Β НСУ, входа НСУ, сборки НСУ, выхода НСУ, белка Ν85Ά нСу и 1МРИН для лечения инфекции НСУ.

Согласно другим аспектам настоящее описание может включать подходящие комбинации раскрытых здесь вариантов осуществления.

Другие аспекты и варианты осуществления могут быть обнаружены в приведенном в настоящем документе описании.

Здесь описание настоящего описания следует толковать в соответствии с правилами и принципами химического связывания. В некоторых случаях может быть необходимым удаление атома водорода для расположения заместителя в любом представленном положении.

Следует понимать, что охватываемые настоящим раскрытием соединения являются подходяще стабильными для применения в качестве фармацевтического средства.

Подразумевается, что определение любого заместителя или переменной в конкретном положении в молекуле будет зависеть от его определений в другом месте этой молекулы. Например, если оба К¹ и К²содержат К⁴ группу, две группы К⁴ могут быть одинаковыми или различными.

Все патенты, заявки на выдачу патента и ссылки на литературу, цитируемые в описании, включены в настоящий документ посредством ссылки во всей полноте. В случае противоречий настоящее раскрытие, включая определения, будет иметь преимущество.

Следующие используемые в настоящем описании термины характеризуются указанными значениями.

Используемые в настоящем документе формы единственного числа подразумевают множественное, если в контексте четко не указано иное.

Как описано в каждом из их соответствующего определения, если не указано иное, все арильные, циклоалкильные и гетероциклильные группы согласно настоящему описанию могут быть замещены. Например, описанная в определении термина арил арильная часть арилалкильной группы может быть замещена.

Используемый в настоящем документе термин алкенил относится к группе из двух-шести атомов углерода с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей по меньшей мере одну углеродуглеродную двойную связь.

Используемый в настоящем документе термин алкенилокси относится к алкенильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин алкенилоксикарбонил относится к алкенилоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин алкокси относится к алкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин алкоксиалкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя алкоксигруппами.

Используемый в настоящем документе термин алкоксиалкилкарбонил относится к алкоксиалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин алкоксикарбонил относится к алкоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин алкил относится к группе, полученной из насыщенного углеводорода с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от одного до шести атомов углерода. В соединениях согласно настоящему описанию, если К³ представляет собой алкил, алкил необязательно может образовывать конденсированное трех- или четырехчленное кольцо со смежным атомом углерода с получением показанной ниже структуры:

ι р⁴ , где т выбирают из 1 и 2, где ζ равно 0, 1 или 2 и где К⁸ представляет собой алкил; или где алкил может необязательно образовывать спироциклическое трех- или четырехчленное кольцо с атомом углерода, к которому оно присоединено, с получением показанной ниже структуры:

где т выбирают из 1 и 2; где ζ равно 0, 1 или 2 и где К⁸ представляет собой алкил.

Используемый в настоящем документе термин алкилкарбонил относится к алкильной группе,

- 3 020815 присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин алкилкарбонилокси относится к алкилкарбонильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин алкилсульфанил относится к алкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом серы. Используемый в настоящем документе термин алкилсульфонил относится к алкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин арил относится к фенильной группе или бициклической конденсированной кольцевой системе, в которой одно или оба кольца представляют собой фенильную группу. Бициклические конденсированные кольцевые системы состоят из фенильной группы, конденсированной с четырех-шестичленным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом. Арильные группы согласно настоящему описанию могут быть присоединены к исходному молекулярному фрагменту через любой взаимозаменяемый атом углерода в группе. Типичные примеры арильных групп содержат без ограничения инданил, инденил, нафтил, фенил и тетрагидронафтил. Арильные группы согласно настоящему описанию необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкенила, алкокси, алкоксиалкила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, второй арильной группы, арилалкокси, арилалкила, арилкарбонила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, гетероциклилкарбонила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро, -ΝΚ/'Κ.-'. (ЮК^хК^у)алкила, оксо и -Р(О)ОК₂, где каждый К независимо выбирают из водорода и алкила; и где алкильная часть арилалкила и гетероциклилалкила является незамещенной и где вторая арильная группа, арильная часть арилалкила, арильная часть арилкарбонила, гетероциклил и гетероциклильная часть гетероциклилалкила и гетероциклилкарбонила дополнительно необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила и нитро.

Используемый в настоящем документе термин арилалкокси относится к арильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через алкоксигруппу.

Используемый в настоящем документе термин арилалкоксикарбонил относится к арилалкоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин арилалкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя арильными группами. Кроме того, алкильная часть арилалкила необязательно замещена одной или двумя дополнительными группами, независимо выбранными из алкокси, алкилкарбонилокси, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гетероциклила, гидрокси и -ΝΚ°Κ^ά, где гетероциклил дополнительно необязательно замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкокси, незамещенного арилалкоксикарбонила, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гидрокси, -ΝΚ.''Κ.^;/ и оксо.

Используемый в настоящем документе термин арилалкилкарбонил относится к арилалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин арилкарбонил относится к арильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин арилокси относится к арильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин арилоксикарбонил относится к арилоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин арилсульфонил относится к арильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин карбонил относится к -С(О)-. Используемый в настоящем документе термин карбокси относится к -СО₂Н. Используемый в настоящем документе термин циано относится к -СЮ Используемый в настоящем документе термин циклоалкил относится к насыщенной моноциклической, углеводородной кольцевой системе, содержащей от трех до семи атомов углерода, и которая не содержит гетероатомы. Типичные примеры циклоалкильных групп включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Циклоалкильные группы согласно настоящему описанию необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, арил, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гетероциклила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро и -ЮК^хК^у, где арил и гетероциклил дополнительно необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гидрокси и нитро.

Используемый в настоящем документе термин (циклоалкил)алкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя циклоалкильными группами. Используемый в настоящем документе термин циклоалкилокси относится к циклоалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин циклоалкилоксикарбонил относится к циклоалкилоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

- 4 020815

Используемый в настоящем документе термин циклоалкилсульфонил относится к циклоалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин формил относится к -СНО. Используемый в настоящем документе термин галоген относится к С1, Вг, Р или I. Используемый в настоящем документе термин галогеналкокси относится к галогеналкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин галогеналкоксикарбонил относится к галогеналкоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин галогеналкил относится к алкильной группе, замещенной одним, двумя, тремя или четырьмя атомами галогена. Используемый в настоящем документе термин гетероциклил относится к четырех-, пяти-, шести- или семичленному кольцу, содержащему один, два, три или четыре гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Четырехчленное кольцо не содержит двойные связи, пятичленное кольцо не содержит или содержит до двух двойных связей и шести- или семичленные кольца не содержат или содержат до трех двойных связей. Термин гетероциклил также подразумевает бициклические группы, в которых гетероциклильное кольцо конденсировано с другой моноциклической гетероциклильной группой, или четырех-шестичленное ароматическое или неароматическое карбоциклическое кольцо; а также такие разветвленные бициклические группы, как 7-азабицикло[2.2.1]гепт-7-ил, 2-азабицикло[2.2.2]окт-2-ил, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил и 2-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил. Гетероциклильные группы согласно настоящему описанию могут быть присоединены к исходному молекулярному фрагменту через любой атом углерода или азот атом в группе. Примеры гетероциклильных групп включают без ограничения бензотиенил, фурил, имидазолил, индолинил, индолил, изохинолинил, изотиазолил, изоксазолил, морфолинил, оксазолил, оксэтанил, пиперазинил, пиперидинил, пиразолил, пиридинил, пирролидинил, пирролопиридинил, пирролил, хинолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тиазолил, тиенил и тиоморфолинил. Гетероциклильные группы согласно настоящему описанию необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкенила, алкокси, алкоксиалкила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, арила, арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилкарбонила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, второй гетероциклильной группы, гетероциклилалкила, гетероциклилкарбонила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро, -ΝΚ^ΧΚ^Υ, (ИК^хК^у)алкила и оксо, где алкильная часть арилалкила и гетероциклилалкила являются незамещенными и где арил, арильная часть арилалкила, арильная часть арилкарбонила, вторая гетероциклильная группа и гетероциклильная часть гетероциклилалкила и гетероциклилкарбонила дополнительно необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила и нитро.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилалкокси относится к гетероциклильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через алкоксигруппу.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилалкоксикарбонил относится к гетероциклилалкоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилалкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя гетероциклильными группами.

Алкильная часть гетероциклилалкила дополнительно необязательно замещена одной или двумя дополнительными группами, независимо выбранными из алкокси, алкилкарбонилокси, арила, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гидрокси и -ΝΚ°Κ^ά, где арил дополнительно необязательно замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкокси, незамещенного арилалкоксикарбонила, галогена, галогеналкокси, галогеналкила, гидрокси и -ΝΚ^ΧΚΤ

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилалкилкарбонил относится к гетероциклилалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилкарбонил относится к гетероциклильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилокси относится к гетероциклильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Используемый в настоящем документе термин гетероциклилоксикарбонил относится к гетероциклилоксигруппе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин гидрокси относится к -ОН.

Используемый в настоящем документе термин гидроксиалкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя гидроксигруппами.

Используемый в настоящем документе термин гидроксиалкилкарбонил относится к гидроксиалкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин нитро относится к -ΝΟ₂. Используемый в настоя- 5 020815 щем документе термин -ИК^сК⁴ относится к двум группам, К^с и К⁴, которые присоединены к исходному молекулярному фрагменту через атом азота. К^с и К⁴ независимо выбирают из водорода, алкенилоксикарбонила, алкоксиалкилкарбонила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, алкилсульфонила, арила, арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилалкилкарбонила, арилкарбонила, арилоксикарбонила, арилсульфонила, циклоалкила, циклоалкилокси, циклоалкилоксикарбонила, циклоалкилсульфонила, формила, галогеналкоксикарбонила, гетероциклила, гетероциклилалкоксикарбонила, гетероциклилалкила, гетероциклилалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, гетероциклилоксикарбонила, гидроксиалкилкарбонила, (ИК.^еК^г)алкила, (ЫК.^еК^г)алкилкарбонила, (ИК.^еК^г)карбонила, (ИК^еК^г)сульфонила, -Ο(ΝΟΝ)ΘΚ' и -ί'.'(Νί'.'Ν)ΝΚ.Ά'. где К' выбирают из алкила и незамещенного фенила и где алкильная часть арилалкила, арилалкилкарбонила, гетероциклилалкила и гетероциклилалкилкарбонила дополнительно необязательно замещены одной -МК^еК^г группой; и где арил, арильная часть арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилалкилкарбонила, арилкарбонила, арилоксикарбонила и арилсульфонила, гетероциклила и гетероциклильная часть гетероциклилалкоксикарбонила, гетероциклилалкила, гетероциклилалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила и гетероциклилоксикарбонила дополнительно необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила и нитро. Используемый в настоящем документе термин (ИК.^сК⁴)алкенил относится к

где К^с и К⁴ определены в настоящем описании, и каждый К⁴ независимо представляет собой водород или С_1-3 алкил.

Используемый в настоящем документе термин (ИК.^сК⁴)алкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -ИК^сК⁴ группами. Алкильная часть (ИК^сК⁴)алкила дополнительно необязательно замещена одной или двумя дополнительными группами, выбранными из алкокси, алкоксиалкилкарбонила, алкоксикарбонила, алкилсульфанила, арилалкоксикарбонила, карбокси, циклоалкила, гетероциклила, гетероциклилкарбонила, гидрокси и (ИК^еК^г)карбонила; где гетероциклил дополнительно необязательно замещен одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, галогена, галогеналкокси, галогеналкила и нитро.

Используемый в настоящем документе термин -ИК.^еК^г относится к двум группам, К^е и К^г, которые присоединены к исходному молекулярному фрагменту через атом азота. К^е и К^г независимо выбирают из водорода, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкила, незамещенного циклоалкила, незамещенного (циклоалкил)алкила, незамещенного гетероциклила, незамещенного гетероциклилалкила, (ИК^хК^у)алкила и (ИК^хК^у)карбонила.

Используемый в настоящем документе термин (ИК^еК^г)алкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -ИК^еК^г группами.

Используемый в настоящем документе термин (ИК^еК^г)алкилкарбонил относится к (ИК^еК^г)алкильной группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин (ИК.^еК^г)карбонил относится к -№К.^еК^г группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин (ИК.^еК^г)сульфонил относится к -№К.^еК^г группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через сульфонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин -ИК^хК^у относится к двум группам, К^х и К^у, которые присоединены к исходному молекулярному фрагменту через атом азота. К^х и К^у независимо выбирают из водорода, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, незамещенного арила, незамещенного арилалкоксикарбонила, незамещенного арилалкила, незамещенного циклоалкила, незамещенного гетероциклила и (ИК^хК^у)карбонила, где К^х и К^у независимо выбирают из водорода и алкила.

Используемый в настоящем документе термин (ИК^хК^у)алкил относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -ИК^хК^у группами.

Используемый в настоящем документе термин (ИК^хК^у)карбонил относится к -ИК^хК^у группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин -ИК^хК^у, относится к двум группам, К^х и К^у, которые присоединены к исходному молекулярному фрагменту через атом азота. К^х и К^у независимо выбирают из водорода и алкила.

Используемый в настоящем документе термин (ИК^хК^у)карбонил относится к -№К^хК^у группе, присоединенной к исходному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Используемый в настоящем документе термин оксо относится к =О.

Используемый в настоящем документе термин сульфонил относится к -§О₂-.

В соединениях согласно настоящему изобретению существуют центры асимметрии. Эти центры обозначены символами К или § в зависимости от конфигурации заместителей вокруг хирального атома углерода. Следует понимать, что раскрытие охватывает все стереохимические изомерные формы

- 6 020815 или их смеси, которые обладают способностью ингибировать Ν85Α. Отдельные стереоизомеры соединений могут быть получены искусственно из коммерчески доступных исходных материалов, которые содержат хиральные центры, или получением смесей энантиомерных продуктов, с последующим разделением, таким как превращение в смесь диастереомеров, с последующим разделением или перекристаллизацией, хроматографическими методиками или посредством прямого разделения энантиомеров на хиральных хроматографических колонках. Исходные соединения конкретной стереохимии являются или коммерчески доступными, или могут быть получены и повторно растворены посредством известных из предшествующего уровня техники методик.

Определенные соединения согласно настоящему описанию также могут существовать в различных стабильных конформационных формах, которые могут быть отделимыми. Асимметрия крутильных колебаний из-за ограниченного вращения вокруг асимметричной одинарной связи, например, из-за стерического затруднения или деформации кольца, может обеспечить возможность разделения различных конформационных изомеров. Настоящее раскрытие охватывает каждый конформационный изомер этих соединений и их смеси.

Соединения согласно настоящему описанию также существуют в виде таутомеров; следовательно, настоящее раскрытие также охватывает все таутомерные формы. Подразумевается, что термин соединения согласно настоящему описанию и эквивалентные выражения охватывают соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые энантиомеры, диастереомеры и соли. Подобным образом, если позволяет контекст, подразумевается, что ссылки на промежуточные соединения охватывают их соли.

Подразумевается, что настоящее изобретение охватывает все изотопы атомов, которые встречаются в настоящих соединениях. Изотопы включают такие атомы, которые характеризуются одинаковым атомным числом, но разными массовыми числами. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают дейтерий и тритий. Изотопы углерода включают ¹³С и ¹⁴С. Как правило, с применением соответствующего меченного изотопом реагента вместо использованного в ином случае немеченого реагента известными специалистам в данной области техники традиционными методиками или способами, аналогичными описанным в настоящем документе, могут быть получены меченные изотопами соединения согласно настоящему изобретению. Такие соединения могут характеризоваться разнообразными возможными использованиями, например, в качестве стандартов и реагентов при определении биологической активности. В случае стабильных изотопов такие соединения также могут характеризоваться возможностью благоприятно модифицировать биологические, фармакологические или фармакокинетические свойства.

Соединения согласно настоящему описанию могут существовать в виде фармацевтически приемлемых солей. Используемый в настоящем документе термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям или цвиттерионным формам соединений согласно настоящему описанию, которые растворимы в воде или в масле или являются диспергируемыми, которые в пределах результатов объема тщательной медицинской оценки подходят для применения при контакте с тканями пациентов без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или усложнения в соответствии с допустимым соотношением польза/риск, и они являются эффективными для их предполагаемого применения. Соли могут быть получены во время заключительного выделения и очистки соединений или отдельно путем осуществления взаимодействия подходящего атома азота с подходящей кислотой. Типичные кислотно-аддитивные соли включают ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфоросульфонат; диглюконат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, формиат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, мезитиленсульфонат, метансульфонат, нафтиленсульфонат, никотинат, 2-нафталенсульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, трихлорацетат, трифторацетат, фосфат, глутамат, бикарбонат, птолуолсульфонат и ундеканоат. Примеры кислот, которые могут быть использованы с образованием фармацевтически приемлемых аддитивных солей, включают неорганические кислоты, такие как хлористо-водородная, бромисто-водородная, серная и фосфорная, и органические кислоты, такие как щавелевая, малеиновая, янтарная и лимонная.

Основно-аддитивные соли могут быть получены во время заключительного выделения и очистки соединений путем осуществления взаимодействия карбоксигруппы с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат катиона металла или с аммиаком или с органическим первичным, вторичным или третичным амином. Катионы фармацевтически приемлемых солей включают литий, натрий, калий, кальций, магний и алюминий, а также нетоксичные катионы аминов, таких как аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, диэтиламин, этиламин, трибутиламин, пиридин, НК-диметиланилин, Ν-метилпиперидин, Ν-метилморфолин, дициклогексиламин, прокаин, дибензиламин, Ν,Ν-дибензилфенэтиламин и Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин. Другие типичные применимые для образования основно-аддитивных солей органические амины включают этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперидин и пиперазин. При возможности для применения в терапии терапевтически эффективные количества соединения формулы (I), а также его фармацевтически приемлемые соли, могут быть введены в качестве неочищенных химических веществ, актив- 7 020815 ный ингредиент может быть представлен в качестве фармацевтической композиции. Соответственно, раскрытие дополнительно относится к фармацевтическим композициям, которые содержат терапевтически эффективные количества соединений формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или наполнителей. Используемый в настоящем документе термин терапевтически эффективное количество относится к общему количеству каждого активного компонента, которого достаточно, чтобы принести пациенту значительную пользу, например, долговременное снижение вирусной нагрузки. При применении к отдельному и введенному отдельно активному ингредиенту термин относится к одному ингредиенту. При применении к комбинации термин относится к комбинированным количествам активных ингредиентов, что приводит к терапевтическому эффекту независимо от того, будут ли они введены в комбинации, периодически или одновременно. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли таковы, как описано выше. Носитель(и), разбавитель(и) или наполнитель(и) должны быть приемлемыми в смысле соответствия с другими ингредиентами состава и не должны быть вредными для пациента. В соответствии с другим аспектом настоящее описание также относится к способу получения фармацевтического состава, предусматривающему смешивание соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или наполнителями. Используемый в настоящем документе термин фармацевтически приемлемый относится к соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые по результатам тщательного медицинского обследования подходят для применения во взаимодействии с тканями пациентов без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения в соответствии с разумным соотношением польза/риск, и они являются эффективными для их предполагаемого применения.

Фармацевтические составы могут присутствовать в стандартных формах дозировки, содержащих предопределенное количество активного ингредиента на стандартную дозу. Уровни дозировки от приблизительно 0,01 до приблизительно 250 мг/кг массы тела в сутки, предпочтительно от приблизительно 0,05 до приблизительно 100 мг/кг массы тела в сутки соединений согласно настоящему описанию являются типичными в монотерапии для профилактики и лечения опосредованного НСУ заболевания. Типично, фармацевтические композиции согласно настоящему раскрытию будут введены от приблизительно 1 до приблизительно 5 раз в сутки или альтернативно способом непрерывного вливания. Такое введение может быть использовано в качестве хронической или острой терапии. Количество активного ингредиента, который может быть объединен с материалами носителя с получением разовой лекарственной формы, будет изменяться в зависимости от состояния, по поводу которого проводят лечение, тяжести состояния, времени введения, пути введения, скорости выведения используемого соединения, длительности лечения и возраста, пола, массы тела и состояния пациента. Как изложено в настоящем документе, предпочтительный стандартный лекарственный состав содержит ежедневную дозу или поддозу активного ингредиента или ее надлежащую часть. Как правило, лечение начинали небольшими дозами, значительно меньшими, чем оптимальная доза соединения. Далее, дозу увеличивали небольшими добавлениями до достижения при таких обстоятельствах оптимального эффекта. В основном, соединение наиболее желательно вводить до уровня концентрации, который, как правило, будет обеспечивать эффективные противовирусные результаты, не вызывая при этом каких-либо вредных или губительных побочных эффектов.

Если композиции согласно настоящему раскрытию содержат комбинацию соединения согласно настоящему описанию и одно или несколько дополнительных терапевтических или профилактических средств, то и соединение, и дополнительное средство обычно присутствуют в дозировке от приблизительно 10 до 150% и более предпочтительно от приблизительно 10 до 80% дозы, которую обычно вводят при режиме монотерапии. Фармацевтические составы могут быть приспособлены для введения любым подходящим путем, например пероральным (включая буккальный или сублингвальный), ректальным, назальным, местным (включая буккальный, сублингвальный или трансдермальный), вагинальным или парентеральным (включая подкожный, внутрикожный, внутримышечный, внутриартикулярный, внутрисуставной, надчревный, подоболочечный, вводимый внутрь пораженных тканей, внутривенный или подкожной инъекцией или вливаниями) путем. Такие составы могут быть получены любым известным из уровня техники фармации способом, например, посредством связывания активного ингредиента с носителем(ями) или наполнителем(ями). Предпочтительным является пероральное введение или введение в виде инъекции.

Приспособленные для перорального введения фармацевтические составы могут быть представлены в виде отдельных единиц, таких как капсулы или таблетки, порошки или гранулы, растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях, пищевые пены или крем, или жидкие эмульсии масло-в-воде или эмульсии вода-в-масле.

Например, для перорального введения в форме таблетки или капсулы компонент активного лекарственного средства может быть объединен с таким пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, как этанол, глицерин, вода и т.п. Порошки готовят посредством измельчения соединения до подходящего мелкого размера и посредством смешивания с аналогично измельчен- 8 020815 ным фармацевтическим носителем, таким как пищевой углевод, например крахмал или маннит. Также могут присутствовать ароматизаторы, консерванты, диспергаторы и красители.

Капсулы готовят получением смеси порошка, как описано выше, и заполнением образованных желатиновых оболочек. Перед заполнением скользящие вещества и смазывающие вещества, такие как коллоидная окись кремния, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или твердый полиэтиленгликоль, могут быть добавлены к смеси порошка. Для улучшения использования лекарственного препарата при проглатывании капсулы также могут быть добавлены разрыхлители или солюбилизаторы, такие как агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия.

Более того, при желании или необходимости в смесь также могут быть включены подходящие связующие вещества, смазывающие вещества, разрыхлители и красители. Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические камеди, такие как гуммиарабик, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль и т.п. Используемые в этих лекарственных формах смазывающие вещества включают олеат натрия, хлорид натрия и т.п. Разрыхлители включают без ограничения крахмал, метилцеллюлозу, агар, бетонит, ксантановую камедь и т.п. Таблетки составляют, например, получением смеси порошка, гранулирования или комкования, добавлением смазывающего средства и разрыхлителя и прессованием в таблетки. Смесь порошка получали смешиванием подходяще измельченного соединения с разбавителем или основой, как описано выше, и необязательно со связующим веществом, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желирующее средство или поливинилпирролидон, ингибитором растворения, таким как парафин, усилителем всасывания, таким как четвертичная соль, и/или поглощающим веществом, таким как бентонит, каолин или двузамещенный фосфат кальция. Смесь порошка может быть гранулирована смачиванием связующим веществом, таким как сироп, паста крахмала, гуммиарабик, или растворами целлюлозных или полимерных материалов, и выдавливанием через сито. В качестве альтернативы гранулированию смесь порошка может быть пропущена через таблетировочную машину и результатом является неполностью сформированные массы, разделенные на гранулы. Гранулы могут быть смазаны для предупреждения прилипания к формам для формования таблеток посредством добавления стеариновой кислоты, стеарата соли, талька или минерального масла. Смазанную смесь затем спрессовывают в таблетки. Соединения согласно настоящему описанию также могут быть объединены с легкосыпучим инертным носителем и сжаты в таблетки сразу без стадий гранулирования или комкования. Может быть обеспечено прозрачное или матовое защитное покрытие, состоящее из герметизирующего покрытия из шеллака, покрытия из сахара или полимерного материала, и глянцевое покрытие из воска. К этим покрытиям могут быть добавлены красители для различения разных единиц дозировки.

Пероральные жидкости, такие как раствор, сиропы и эликсиры, могут быть получены в разовой лекарственной форме, таким образом, данное количество содержит заданное количество соединения. Сиропы могут быть получены путем растворения соединения в подходяще ароматизированном водном растворе, тогда как эликсиры получают путем применения нетоксичных носителей. Также могут быть добавлены солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленсорбитановые эфиры, консерванты, ароматизаторы, такие как масло мяты перечной, или природные подсластители или сахарин или другие искусственные подсластители и т.п.

По необходимости составы разовой формы для перорального введения могут быть микроинкапсулированными. Состав также может быть получен для пролонгирования или способствования высвобождению, например, посредством покрытия или заключения материала частиц в полимеры, воск или подобное.

Соединения формулы (I) их и фармацевтически приемлемые соли также могут быть введены в форме системы доставки липосомы, такой как небольшие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и многоламеллярные везикулы. Липосомы могут быть образованы из разнообразных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть доставлены путем применения моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которыми соединены молекулы соединения. Соединения также могут быть соединены с растворимыми полимерами в качестве нацеливаемых носителей лекарственного средства. Такие полимеры могут содержать поливинилпирролидон, пирановый сополимер, полигидроксипропилметакриламидофенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный остатками палитоила. Кроме того, соединения могут быть объединены в класс биоразлагаемых полимеров, применимый при достижении регулируемого высвобождения лекарственного средства, например, полимолочной кислоты, полиэпсилонкапролактона, полигидроксимасляной кислоты, сложных полиортоэфиров, полиацеталей, полидигидропиранов, полицианоакрилатов и сшитых или амфипатических блок-сополимеров гидрогелей.

Приспособленные для трансдермального введения фармацевтические составы могут находиться в виде отдельных пластырей, которые предназначены оставаться в непосредственном контакте с эпидермисом пациента длительный период времени.

Например, активный ингредиент может быть доставлен из пластыря посредством ионофореза, как в

- 9 020815 общем описано в РЬагтасеибса1 Кевеагей, 3(6):318 (1986).

Приспособленные для местного нанесения фармацевтические составы могут быть составлены в качестве мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.

Для лечения глаз или другой наружной ткани, например ротовой полости и кожи, составы предпочтительно наносят в качестве местно наносимой мази или крема. При составлении в виде мази активный ингредиент может быть использован или с парафиновой, или со смешиваемой с водой мазевой основой. Альтернативно, активный ингредиент может быть составлен в виде крема с кремовой основой масло-вводе или основанием вода-в-масле.

Приспособленные для местных нанесений на глаз фармацевтические составы включают в себя глазные капли, где активный ингредиент растворяют или суспендируют в подходящем носителе, особенно в водном растворителе.

Приспособленные для местного введения в ротовую полость фармацевтические составы включают в себя лепешки, пастилки и жидкости для полоскания рта.

Приспособленные для ректального введения фармацевтические составы могут находиться в виде суппозиториев или в виде клизм.

Приспособленные для назального введения фармацевтические составы, в которых твердый носитель, включают крупный порошок с размером частиц, например, в диапазоне от 20 до 500 мкм, которые вводят втягивания носом, т.е. путем быстрого вдыхания порошка через носовой ход из контейнера, который держат близко к носу.

Подходящие составы для введения в виде назального спрея или капель для носа, в которых носитель жидкий, включают водные или масляные растворы активного ингредиента.

Приспособленные для введения путем ингаляции фармацевтические составы включают пудру или аэрозоли, которые могут быть образованы при помощи различных типов измеренных, дозирующих ингаляторов под давлением, распылителей или инсуффляторов.

Приспособленные для вагинального введения фармацевтические составы могут находиться в качестве составов для пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спрея.

Приспособленные для парентерального введения фармацевтические составы включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические факторы и растворенные вещества, придающие составу изотоничность относительно крови предполагаемого пациента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие средства и загустители. Составы могут быть представлены в контейнерах для одноразовой дозы или для многократных доз, например, в герметизированных ампулах и флаконах, и могут сохраняться при условиях сушки сублимацией (лиофилизированных), при которых требуется только добавление стерильного жидкого носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением. Приготовленные для немедленного приема растворы для инъекций и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Следует понимать, что при добавлении к упомянутым выше конкретным ингредиентам составы могут включать другие средства, общепринятые в настоящем уровне техники, которые имеют отношение к типу рассматриваемого состава, например, подходящие для перорального введения могут включать ароматизаторы.

Термин пациент относится как к человеку, так и к другим млекопитающим.

Термин лечение относится к (ί) профилактике заболевания, нарушения или состояния, возникающего у пациента, когда он может быть предрасположен к заболеванию, нарушению и/или состоянию, но его наличие еще не диагностировано; (ίί) ингибированию заболевания, нарушения или состояния, т.е. подавлению его развития; и (ίίί) ослаблению заболевания, нарушения или состояния, т.е. вызыванию регрессии заболевания, нарушения или состояния.

Соединения согласно настоящему описанию также могут быть введены с циклоспорином, например циклоспорином А. При клинических испытаниях была показана активность циклоспорина А относительно НСУ (Нера1о1оду, 38:1282 (2003); Вюейет. Вюрйув. Кее. Соттип., 313:42 (2004); 1. Сав1гоеп1его1.. 38:567 (2003)).

В табл. 1 ниже представлены некоторые типичные примеры соединений, которые могут быть введены с соединениями согласно настоящему раскрытию. Соединения согласно настоящему раскрытию могут быть введены с другими соединениями с анти-НСУ активностью при комбинированной терапии или совместно, или отдельно, или посредством объединения соединений в композицию.

- 10 020815

Таблица 1

Товарный знак	Физиологический класс	Тип ингибитора или мишень	Компания источника
ΝΙΜ811 ОеЫо-025		Циклофилиновые ингибиторы	КоуагШ ОеЫорЬагт
2адах1П		Иммуномодулятор	8с1С1опе
διινυδ		Метиленовый голубой	Βίοβηνίδϊοη
АсЫоп (СРС10101)		Агонист ТЬК9	Со1еу
ВагаЬиНп (Т67)	Противораковый	Ингибитор βтубулина	Ти1апк 1пс., 5ои1Ь 8ап Ргапс1зсо, СА
1518 14803	Противовирусный	Антисмысловой	1818 РЬагтасеийсак 1пс, СайзЪад, СА / Е1ап РЬагтасеиРсаП 1пс., Νβνν Уогк, ΝΎ
8шпте1ге1	Противовирусный	Противовирусный	Εηάο РЬагтасеийсаЬ Ηο1άίη§81пс., СЬасМз Рогб, РА
08-9132 (АСН-806)	Противовирусный	Ингибитор НСУ	АсЬПНоп/ОПеад
Пиразолпиримидинов ые соединения и соли согласно \νθ 2005/047288 от 26 мая 2005	Противовирусный	Ингибиторы НСУ	Αττονν ТЬегареипсз па.
Ιχνονίήη	Противовирусный	Ингибитор ΙΜΡΏΗ	ЮЪарЬагт 1пс., Соз1а Меза, СА
МептеросИЪ (УХ-497)	Противовирусный	Ингибитор ΙΜΡΌΗ	УеПех РЬагтасеибсаЬ 1пс., СатЬпаае, МА
ХТЬ-6865 (ХТЬ-002)	Противовирусный	Моноклональное антитело	ХТЪ ВюрЪагтасеипса1з Πά., КеЬоуог, 1згае1
Те1арге\тг (УХ-950, ЬУ-570310)	Противовирусный	Ингибитор N83 сериновой протеазы	УеПех РЬагтасеиЬса1з 1пс., СатЬпа§е, МА / ЕИ ПНу апа Со. 1пс., ЬкНапароПз, ΙΝ
НСУ-796	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	\Ууе1Ъ / УиорЬагта
НМ-283	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Μβηΐχ /ИоуагИз

ОЬ-59728	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Сепе ЬаЪз / ΝονΒΠίδ
ОЬ-60667	Противовирусный	Ингибитор Ν55Β репликазы	Сепе ЬаЪз / ΝονβΠϊδ
2'С МеА	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	ОПеаа
Ρ8Ι6130	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	КосЬе
К1626	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	КосЬе
2'С Метиладенозин	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Мегск
ТГК-ООЗ	Противовирусный	Ингибитор ΚάΚρ	Дарап ТоЬассо 1пс., Токуо, 1арап
Εενονίηη	Противовирусный	Рибавирин	ΙΟΝ РЬагтасеиПса1з, Соз1а Меза, СА
ШЬаушп	Противовирусный	Рибавирин	8сЬепп§-Р1ои§Ь Согрогайоп, КетЫопЬ, N1
УиатМше	Противовирусный	Пролекарство рибавирина	ШЬарЬагт 1пс., Сози Меза, СА
Нер1агуте	Противовирусный	Рибозим	ЮЬогуте РЬагтасеиЬса1з 1пс., ВоиИег, СО
ΒΙΕΝ-2061	Противовиру сный	Ингибитор сериновой протеазы	ВоеЬпп§ег 1п§е1Ье1т РЬагта КО, 1п§е1Ье1т, Оегтапу
8СН 503034	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	8сЬепп§-Р1ои§Ь
ΖΆάζζΐπι	Имму номодулятор	Иммуномодулятор	8аС1опе РЬагтасеиНса1з 1пс., 8ап Ма!ео, СА
Сер1епе	Иммуномодулятор	Иммуномодулятор	Мах1т РЬагтасеийса1з 1пс., 5ап Οίε.εο, СА
СЕЬЬСЕРТ®	Иммуносупрессант	Имму носу прессант НСУ 1§О	Р. НоГГтапп-Ьа КосЬе 1ЛТ), Вазе1, 8\укгег1апс1
С1Уас1Г	Иммуносупрессант	Иммуносупрессант НСУ 1§О	ИаЫ ВюрЬагтасеиЬсаЬ 1пс., Воса Каюп, ГЬ
А1ЬиГегоп - а	Интерферон	Альбумин ΙΡΝ-α2Β	Нитап Оепоте 8с1епсез 1пс., КоскуШе, МО
1п£ег§еп А	Интерферон	ΙΡΝ альфакон-1	1тегМипе РЬагтасеиПса1з 1пс., ВпзЬапе, СА

- 11 020815

Отпета ΙΓΝ	Интерферон	ΙΡΝ-ω	1п1агаа ТЬегареийсз
ΙΡΝ-ΡηΕΜΖ701	Интерферон	ΙΡΝ-βΗΕΜΖ701	ТгапзШоп Ткегареийсз 1пс., Оп(апо, Сапайа
ΚΕΒΙΡ®	Интерферон	ΙΡΝ-β1₃	Зегопо, Оепеуа, 8лу11гег1ап<1
КоГегоп А	Интерферон	ПТЧ-о2а	Р. НоЙтапп-Ьа КосЬе Πά., Вазе!, .5»т(гег1ап(1
ίηίΓοη А	Интерферон	ΙΡΝ-υ.2ό	8скейпд-Р1оизк Согрогайоп, КегйКуогД, N1
ΙηίΓοη А и 2ас1ахт	Интерферон	ΙΡΝ-α2Β/α 1 -тимозин	Ке§епеКх ВюрНагта 1пс,, ВеЙгезда, МО / 5с1С1опе РЬагтасеийса1$ 1пс, Зап Ма1ео, СА
КеЬе1гоп	Интерферон	ΙΡΝ-α2Β 1 рибавирин	5скепп§-Р1ои§Ь Согрогайоп, ΚβηϋλνοιΐΗ, N1
Ас1]ттипе	Интерферон	ΓΝΡ-γ	ЫегМипе 1пс., ВпзЬапе, СА
1п(ег1егоп-р	Интерферон	Иитсрферон-β-1 а	Зегопо
Ми1йГегоп	Интерферон	Длительный ΙΡΝ	Уиаяеп. / Уа1епйз
\УеИ£егоп	Интерферон	Лимфобластоидный ΙΡΝ-αηΙ	(ПахоЗтИкКйпе р!с, ихЪгМце, ик
ОтшГегоп	Интерферон	Природный ΙΡΝ-α	Уна§еп 1пс Иатайоп, РЬ
Ревазу 5	Интерферон	ПЭГилированный ГЕТЧ-о2а	Г. НоГГтапп-Ьа КосЬе ЬТО, Вазе1, ЗрлиегЬпй
Ре^азуз и Сер1епе	Интерферон	ПЭГилированный ΙΡΝ-α2α / имму номоду лятор	Мах1т Ркагтасеийсак 1пс., Зап ϋΐββο, СА
Ре^азуз и ВлЪахтп	Интерферон	ПЭГ илированн ый 1ПЧ-а2а / рибавирин	Г. Но£Гтапп-Ьа КосЬе ЬТО, Вазе1, 8%а1гег1апд
РЕС-1п\|гоп	Интерферон	ПЭГилированный ΙΡΝ-α2ϋ	5сЬепп§-Р1ои§Ь Согрогайоп, КепЛжоПЬ, N1
РЕО-1п1гоп / ШЪаутп	Интерферон	ПЭГилированный ΕΓΝ-α2β / рибавирин	ЗсЬепп§-Р1ои£Ь Согрогайоп, Кепй\уопк, N1
ΙΡ-501	Защита печени	Противофиброзное средство	Ιηάβνιΐδ Ркагтасеийсак 1пс., ЬехтдЮп, МА
ΙΟΝ-6556	Защита печени	Ингибитор каспазы	Мип Ркагтасеийсак 1пс., Зап ϋίββο, СА

ΙΤΜΝ-191 (К-7227)	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	1п<егМипе Ркагтасеийсак 1пс., ВпзЬапе, СА
ОЬ-59728	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Оепе1аЬз
ΑΝΑ-97Ι	Противовирусный	ТЬК-7 агонист	Апайуз
Восергечпг	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	Зскепп§-Р1ои§к
ТМ8-435	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	Τίόοΐβο ВУВА, МесЬе1еп, Ве1щит
ΒΙ-2Ο1335	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	ВоеЬппдег 1пде1Ьепп РЬагта КО, 1пде1Ьет1, Оегтапу
МК-7009	Противовирусный	Ингибитор сериновой протеазы	Мегск
РР-00868554	Противовирусный	Ингибитор репликазы	Рйгег
ΑΝΑ593	Противовирусный	Ненуклеозидный ингибитор Ν35Β полимеразы	Апайуз Ркагтасеийсак, 1пс., Зап Ώίββο, СА, иЗА
10X375	Противовирусный	Ненуклеозидный ингибитор репликазы	1беп1х Ркагтасеийсак, СатЬгкЩе, МА, ЫЗА
ВП_В 1941	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β полимеразы	ВоеЬпп§ет Тп^еНют Сапада Ш Κ&Ώ, Ьауа1, ОС, Сапада
Ρ5Ι-7851	Противовирусный	Нуклеозидный ингибитор полимеразы	Ркагтаззей РппсеЮп, N1, иЗА
УСН-759	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β полимеразы	νΐτ °Скет РЬагта
УСН-916	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	νΐτ °Скет Ркагта
03-9190	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	Ойеай
Рес,-1п1ег£егоп 1ат<1а	Противовирусный	Интерферон	гутоСепейсз / ВпзюкМуегз ЗдшЬЬ

- 12 020815

Соединения согласно настоящему описанию также могут быть использованы в качестве лабораторных реагентов. Соединения могут способствовать обеспечению инструментов для исследования для планирования анализа вирусной репликации, проверки систем для анализа животных и структурных биологических исследований для дополнительного увеличения информации о механизмах заболевания НСУ. Кроме того, соединения согласно настоящему описанию применимы в установлении или определении участка связывания других противовирусных соединений, например, посредством конкурентного ингибирования.

Соединения согласно настоящему раскрытию также могут быть использованы для лечения или предупреждения вирусного инфицирования веществ и, следовательно, они снижают риск вирусной инфекции в лаборатории или у медперсонала, или у пациентов, у которых возникает контакт с таким веществами, например кровь, ткань, хирургические инструменты и одежда, лабораторные приборы и одежда, и аппараты и материалы для взятия или переливания крови.

Предусматривается, что настоящее раскрытие охватывает соединения формулы (I), если они получены путем синтеза или метаболическим процессом, включая процессы, проходящие в человеческом или животном организме (ίη νίνο) или процессы, проходящие ίη νίίτο.

Используемые в настоящей заявке аббревиатуры, особенно те, которые включены в следующие типичные примеры, хорошо известны специалистам в данной области техники. Кроме того, используют следующие аббревиатуры: прибл. - приблизительно; мин - минуты; ч - часы; к.т. - комнатная температура, КТ - время удержания; К, - время удержания; ТТЛ - трифторуксусная кислота; ΌΜδΟ - диметилсульфоксид; Ме - метил; ТНР - тетрагидрофуран; ί-Ви - трет-бутил; ЕИС1 - 1-(3-диметиламинопропил)-3этилкарбодиимида гидрохлорид; ΌΜΛΡ - 4-диметиламинопиридин; ИВИ - 1,8-диазабициклоундек-7-ен; РИ - фенил; ΌΕΑ - диэтиламин; Εί - этил; ΌΜΡ - Ν,Ν-диметилформамид; ОАс - ацетат; ΗΜΌδ - гексаметилдисилан; ρΤδΟΗ - п-толуолсульфоновая кислота; ίΡΓ₂ΕίΝ, ΌΙΕΑ или ΌΙΡΕΑ - диизопропилэтиламин; ЕЮЛе или ΕίΘΑο или ЕА - этилацетат; Εί₃δίΗ - триэтилсилан; ΜеΟΗ - метанол; ΤΜδί'.ΉΝ₂ - триметилсилилдиазометан; Н-Э-5ег-ОВ/1.НС1 - гидрохлорид Ό-серинового бензилового сложного эфира; ΕίΟΗ этанол; Μе₂δ - диметилсульфид; ΤΕΑ или Εί₃Ν - триэтиламин; ΕίΗΜΌδ - гексаметилдисилазидлитий; ΌΙΒΑΕ - гидрид диизобутилалюминия; ΤΒΌΜδ-0 - трет-бутилдиметилсилилхлорид; ί-ΡτΟΗ - изопропанол; Вое, Ьос или ВОС - трет-бутоксикарбонил; СЬ/-С1 - бензилхлорформиат; Βη - бензил; ΌΕΑΌ диэтилазодикарбоксилат; тСΡΒΑ - м-хлорпероксибензойная кислота; ЭСМ -дихлорметан; ΤΜδΤ’Ν - триметилсилилцианид; ΑСN или ΜΕСN - ацетонитрил; бррре -1,5-бис(дифенилфосфино)пентан; ΤΜΕΌΑ тетраметилэтилендиамин; ΌΜΑ - Ν,Ν-диметилацетамид; ΜеΟ^ - ΕΌ₃ΟΌ; - гексаны; ΝαΟΕί - этоксид натрия; МТВЕ - метиловый третбутиловый эфир; NСδ - Ν-хлорсукцинимид; Εί₂Ο - диэтиловый эфир; ΌΜΕ - 1,2-диметоксиэтан; и ΕΕΌφ - ^этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин. Настоящее раскрытие будет описано в связи с определенными вариантами осуществления, которые не предназначены ограничивать его объем. Напротив, настоящее раскрытие охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем формулы изобретения. Таким образом, в следующих примерах, которые включают конкретные варианты осуществления, будет показано одно осуществление на практике настоящего описания; было понятно, что примеры представлены с целью иллюстрации определенных вариантов осуществления и представлены для обеспечения предполагаемого наиболее применимого и легкопонятного описания их методик и принципиальных аспектов.

Исходные материалы могут быть получены из коммерческих источников или получены традиционными способами из литературы, известными специалистам в данной области техники.

Синтез общих Сар Условия анализа соединений

Оценку чистоты и массовый анализ с низким разрешением проводили на системе δΐιίιηαάζιι ЬС вместе с системой Аа1ег5 ΜΙ^ΟΜΑδδ® Ζβ Μδ. Следует отметить, что время удерживания между приборами может слегка изменяться. Если не отмечено иное, к текущему разделу применимы дополнительные условия ЬС.

Усл.-М8-А1

Колонка = ХТЕККА® 3,0 X 50 мм 87

В начале программы %В = 0

В конце программы %В = ] 00

Время градиента = 2 мин

Время остановки = 3 мин

Скорость потока = 5 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0,1 % ТР А в 10% метанола/90%НгО

Растворитель В =0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О

- 13 020815

Усл.-М3-\У2

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В Усл.-МЗАУ5 Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Усл.-ϋΐ

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В Усл.-О2

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В = ХТЕЕКА® 3,0 X 50 мм 37 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н₂О = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О = ХТЕККА® 3,0 X 50 мм 87 = 0 = 30 = 2 мин = 3 мин = 5 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н₂О = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н?О = ХТЕККА® С18 3,0 X 50 мм 87 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н₂О = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 4,6 X 50 мм 810 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н₂О = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О

- 14 020815

Усл.-МЗ

Колонка = ХТЕККА® С18 3,0 X 50 мм 87

В начале программы %В = 0

В конце программы %В = 40

Время градиента = 2 мин

Время остановки = 3 мин

Скорость потока = 5 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0,1 % ТРА в 10% метанола/90%Н2О

Растворитель В = 0,1 % ТР А в 90% метанола/10% Н₂О

Условие I

Колонка = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® 1дтаЗ,0 X 50 мм 810

В начале программы %В = 0

В конце программы %В =100

Время градиента = 2 мин

Время остановки = 3 мин

Скорость потока = 4 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А =0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н₂О

Растворитель В = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н>О

Условие Н

Колонка = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 4,6 X 50 мм 810

В начале программы %В = 0

В конце программы %В = 100

Время градиента = 2 мин

Время остановки = 3 мин

Скорость потока = 5 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н2О

Растворитель В = 0,1 % ТРА в 90% метанола/10% Н₂О

Условие III

Колонка = ХТЕККА® С18 3,0 X 50 мм 87

В начале программы %В = 0

В конце программы %В = 100

Время градиента = 3 мин

Время остановки = 4 мин

Скорость потока = 4 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А =0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н2О

Растворитель В =0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О

- 15 020815

(К)-2-(Диметиламино)-2-фенилуксусная кислота

Суспензию 10% Рб/С (2,0 г) в метаноле (10 мл) добавляли в смесь (К)-2-фенилглицина (10 г, 66,2 ммоль), формальдегида (33 мл, 37 мас.%, в воде), 1н. НС1 (30 мл) и метанола (30 мл) и подвергали действию Н₂ (60 фунт/кв.дюйм) в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СБЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество перекристаллизовывали из изопропанола с получением соли НС1 Сар-1 в виде белых игл (4,0 г). Оптическое вращение: -117,1° [с = 9,95 мг/мл в Н₂О; X = 589 нм]. 'Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 7,43-7,34 (т, 5Н),

4,14 (8, 1Н), 2,43 (8, 6Н); ЬС (условие I): КТ = 0,25; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₂ 180.10; обнаружено 180,17; НКМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₂ 180,1025; обнаружено 180,1017.

Сар-2

(К)-2-(Диэтиламино)-2-фенилуксусная кислота

NаВНзСN (6,22 г, 94 ммоль) добавляли порционно в течение нескольких минут в охлажденную (лед/вода) смесь (К)-2-фенилглицина (6,02 г, 39,8 ммоль) и метанола (100 мл), и перемешивали в течение 5 мин. В течение 10 мин по каплям добавляли ацетальдегид (10 мл) и перемешивание продолжали при той же температуре охлаждения в течение 45 мин и при температуре окружающей среды в течение ~6,5 ч. Реакционную смесь снова охлаждали на бане с водой и льдом, обрабатывали водой (3 мл) и затем гасили добавлением по каплям концентрированной НС1 в течение ~ 45 мин до получения рН смеси ~ 1,52,0. Охлаждающую баню удаляли и перемешивание продолжали при добавлении концентрированной НС1 с поддержанием рН смеси приблизительно 1,5-2,0. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, фильтровали с удалением белой суспензии и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество перекристаллизовывали из этанола с получением соли НС1 Сар-2 в виде двух партий блестящего белого твердого вещества (партия-1: 4,16 г; партия-2: 2,19 г). 'Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 10,44 (1,00, Ьт 8, 1Н), 7,66 (т, 2Н), 7,51 (т, 3Н), 5,30 (8, 1Н), 3,15 (Ьг т, 2Н), 2,98 (Ьг т, 2Н), 1,20 (арр Ьг 8, 6Н). Партия-1: [α]²⁵ -102,21° (с = 0,357, Н2О); партия-2: [α]²⁵ -99,7° (с = 0,357, Н2О). ЬС (условие I): КТ = 0,43 мин; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₂Н^О₂: 208,13; обнаружено 208,26.

Сар-3

Ацетальдегид (5,0 мл, 89,1 ммоль) и суспензию 10% Рб/С (720 мг) в метаноле/Н₂О (4 мл/1 мл) последовательно добавляли в охлажденную (~ 15°С) смесь (К)-2-фенилглицина (3,096 г, 20,48 ммоль), 1н. НС1 (30 мл) и метанола (40 мл). Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали с Н₂из баллона в течение 17 ч. Добавляли дополнительное количество ацетальдегида (10 мл, 178,2 ммоль) и перемешивание продолжали в атмосфере Н₂ в течение 24 ч [Примечание: подачу Н₂ дополняли при потребности путем реакции]. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество перекристаллизовывали из изопропанола с получением соли НС1 (К)-2-(этиламино)-2-фенилуксусной кислоты в виде блестящего белого твердого вещества (2,846 г). 'Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 14,15 (Ьг 8, 1Н), 9,55 (Ьг 8, 2Н), 7,55-7,48 (т, 5Н), 2,88 (Ьг т, 1Н), 2,73 (Ьг т, 1Н), 1,20 (арр ΐ, 1 = 7,2, 3Н). ЬС (условие I): КТ = 0,39 мин; индекс гомогенности >95 %; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₂: 180,10; обнаружено 180,18.

Суспензию 10% Рб/С (536 мг) в метаноле/Н₂О (3 мл/1 мл) добавляли в смесь (К)-2-(этиламино)-2фенилуксусной кислоты/НС1 (1,492 г, 6,918 ммоль), формальдегида (20 мл 37 мас.%, в воде), 1н. НС1 (20 мл) и метанола (23 мл). Реакционную смесь перемешивали с Н₂ из баллона в течение ~72 ч, причем подачу Н₂ дополняли при потребности. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество перекристаллизовывали из изопропанола (50 мл) с получением соли НС1 Сар-3 в виде белого твердого вещества (985 мг). 'Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 10,48 (Ьг 8, 1Н), 7,59-7,51 (т, 5Н), 5,26 (8, 1Н), 3,08 (арр Ьг 8, 2Н), 2,65 (Ьг 8, 3Н), 1,24 (Ьг т, 3Н). ЬС (условие I): КТ = 0,39 мин; индекс гомогенности >95 %; ЬСМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^О₂: 194,12; обнаружено 194,18; НКМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцН1^О₂: 194,1180; обнаружено 194,1181.

- 16 020815

(К)-2-(Метоксикарбониламино)-2-фенилуксусная кислота

С1СО₂Ме (3,2 мл, 41,4 ммоль) добавляли по каплям в охлажденный (лед/вода) полураствор ТНР (410 мл) (К)-трет-бутил-2-амино-2-фенилацетата/НС1 (9,877 г, 40,52 ммоль) и диизопропилэтиламина (14,2 мл, 81,52 ммоль) в течение 6 мин, и перемешивали в течение подобной температуре в течение 5,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток разделяли между водой (100 мл) и этилацетатом (200 мл). Органический слой промывали 1н. НС1 (25 мл) и насыщенным раствором №-1НСО₃ (30 мл), сушили (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное бесцветное масло перетирали с гексанами, фильтровали и промывали гексанами (100 мл) с получением (К)-трет-бутил-2-(метоксикарбониламино)-2-фенилацетата в виде белого твердого вещества (7,7 г). ’Н ЯМР (ЭМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 7,98 (ά, 1 = 8,0, 1Н), 7,37-7,29 (т, 5Н), 5,09 (к, 1 = 8, 1Н), 3,56 (5, 3Н), 1,33 (5, 9Н). ЬС (условие I): КТ = 1,53 мин; индекс гомогенности ~90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для |Μ+Να|' ^^^N№0+ 288,12; обнаружено 288,15.

ТРА (16 мл) добавляли по каплям в охлажденный (лед/вода) СН₂С1₂ (160 мл) раствор вышеуказанного продукта в течение 7 мин, охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч. Поскольку снятие защиты не было завершено, добавляли дополнительное количество ТРА (1,0 мл) и продолжали перемешивать дополнительно 2 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме, и полученный масляный остаток обрабатывали диэтиловым эфиром (15 мл) и гексанами (12 мл) с получением осадка. Осадок фильтровали и промывали диэтиловым эфиром/гексанами (соотношение ~1:3; 30 мл) и сушили в вакууме с получением Сар-4 в виде рыхлого белого твердого вещества (5,57 г). Оптическое вращение: -176,9° [с = 3,7 мг/мл в Н₂О; λ = 589 нм]. ’Н ЯМР (ΌΜ8Ο-ά₆, δ= 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,84 (Ьг 5, 1Н), 7,96 (к, 1 = 8,3, 1Н), 7,41-7,29 (т, 5Н), 5,14 (к, 1 = 8,3, 1Н), 3,55 (5, 3Н). ЬС (условие I): КТ = 1,01 мин; индекс гомогенности >95 %; ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₄ 210,08; обнаружено 210,17; НКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+СюН1^О₄ 210,0766; обнаружено 210,0756.

Сар-5

Смесь (К)-2-фенилглицина (1,0 г, 6,62 ммоль), 1,4-дибромбутана (1,57 г, 7,27 ммоль) и №-ьСО₃, (2,10 г, 19,8 ммоль) в этаноле (40 мл) нагревали при 100°С в течение 21 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этаноле и подкисляли 1н. НС1 до рН 3-4, и летучий компонент удаляли в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (вода/метанол/ТРА) с получением соли ТРА Сар-5 в виде полувязкой белой пены (1,0 г). ’Н ЯМР (ЭМ8О-к₆, δ = 2,5, 500 МГц) δ 10,68 (Ьг 5, 1Н), 7,51 (т, 5Н), 5,23 (5, 1Н), 3,34 (арр Ьг 5, 2Н), 3,05 (арр Ьг 5, 2Н), 1,95 (арр Ьг 5, 4Н); КТ = 0,30 мин (условие I); индекс гомогенности >98%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С^Н^Оу 206,12; обнаружено 206,25.

Сар-6

О

Соли ТРА Сар-6 синтезировали из (К)-2-фенилглицина и 1-бром-2-(2-бромэтокси)этана с применением способа получения Сар-5. ’Н ЯМР (1)\18О-к.. δ = 2,5, 500 МГц) δ 12,20 (Ьг 5, 1Н), 7,50 (т, 5Н), 4,92 (5, 1Н), 3,78 (арр Ьг 5, 4Н), 3,08 (арр Ьг 5, 2Н), 2,81 (арр Ьг 5, 2Н); КТ = 0,32 мин (условие I); >98%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С^Н^О’ 222,11; обнаружено 222,20; НКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СУН^ЦО.’,: 222,1130; обнаружено 222,1121.

Сар-7

- 17 020815

Раствор СН₂С1₂ (200 мл) п-толуолсульфонилхлорида (8,65 г, 45,4 ммоль) добавляли по каплям в охлажденный (-5°С) СН₂С1₂ (200 мл) раствор (8)-бензил-2-гидрокси-2-фенилацетата (10,0 г, 41,3 ммоль), триэтиламина (5,75 мл, 41,3 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,504 г, 4,13 ммоль), при этом поддерживали температуру от -5°С до 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 9 ч и затем хранили в морозильной камере (-25°С) в течение 14 ч. Смесь оставляли оттаивать до температуры окружающей среды и промывали водой (200 мл), 1н. НС1 (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением бензил-2-фенил-2(тозилокси)ацетата в виде вязкого масла, которое отвердевало в результате отстаивания (16,5 г). Хиральную чистоту продукта не проверяли и этот продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ^!Н ЯМР (ПМ80-с1₆. δ = 2,5, 500 МГц) δ 7,78 (ά, 1= 8,6, 2Н), 7,43-7,29 (т, 10Н), 7,20 (т, 2Н), 6,12 (5, 1Н), 5,16 (ά, 1 = 12,5, 1Н), 5,10 (ά, 1 = 12,5, 1Н), 2,39 (5, 3Н). КТ = 3,00 (условие 1Н); индекс гомогенности >90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₂Н₂₀ЫаО₅8: 419,09; обнаружено 419,04.

Раствор ТНР (75 мл) бензил-2-фенил-2-(тозилокси)ацетата (6,0 г, 15,1 ммоль), 1-метилпиперазина (3,36 мл, 30,3 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (13,2 мл, 75,8 ммоль) нагревали при 65°С в течение 7 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды и летучий компонент удаляли в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом и водой и органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, этилацетат) с получением бензил-2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-фенилацетата в виде оранжевато-коричневого вязкого масла (4,56 г). Анализом при помощи хиральной ВЭЖХ (СШКАЬСЕЬ® ОЭ-Н) было обнаружено, что образец представляет собой смесь стереоизомеров в соотношении от 38,2 до 58,7. Разделение стереоизомеров выполняли следующим образом: продукт растворяли в 120 мл этанола/гептана (1:1) и вводили (5 мл/введение) в колонку для хиральной ВЭЖХ (СЫгасе1 01. 5 см ГОх50 см Ь, 20 мкм) с элюированием 85:15 гептаном/этанолом при 75 мл/мин и наблюдали при 220 нм. Стереоизомер-1 (1,474 г) и стереоизомер-2 (2,2149 г) восстанавливали в виде вязкого масла. 'Н ЯМР (СЭС1₃, δ = 7,26, 500 МГц) 7,44-7,40 (т, 2Н), 7,33-7,24 (т, 6Н), 7,21-7,16 (т, 2Н), 5,13 (ά, 1 = 12,5, 1Н), 5,08 (ά, 1 = 12,5, 1Н), 4,02 (5, 1Н), 2,65-2,38 (арр Ьг 5, 8Н), 2,25 (5, 3Н). КТ = 2,10 (условие 1Н); индекс гомогенности >98%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₀Н₂₅^0₂: 325,19; обнаружено 325,20.

Раствор метанола (10 мл) любого стереоизомера бензил-2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-фенилацетата (1,0 г, 3,1 ммоль) добавляли в суспензию 10% Ρά/С (120 мг) в метаноле (5,0 мл). Реакционную смесь подвергали воздействию водорода в баллоне при тщательном наблюдении в течение <50 мин. Сразу после завершения взаимодействия катализатор отфильтровывали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме с получением Сар-7, загрязненного фенилуксусной кислотой в виде желтовато-коричневой пены (867,6 мг; масса выше теоретического выхода). Продукт использовали для следующей стадии без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (ЭМ80Ц₆, δ = 2,5, 500 МГц) δ 7,44-7,37 (т, 2Н), 7,37-7,24 (т, 3Н), 3,92 (5, 1Н), 2,63-2,48 (арр. Ьг 5, 2Н), 2,48-2,32 (т, 6Н), 2,19 (5, 3Н); КТ = 0,31 (условие II); индекс гомогенности >90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н₁₉^0₂: 235,14; обнаружено 235,15; НКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н₁₉^0₂: 235,1447; обнаружено 235,1440.

Синтез Сар-8 и Сар-9 проводили согласно синтезу Сар-7 с применением соответствующих аминов для стадии замещения 8Ν₂ (т.е., 4-гидроксипиперидин для Сар-8 и (8)-3-фторпирролидин для Сар-9) и модифицированных условий разделения соответствующих промежуточных стереоизомерных соединений, как описано ниже.

Стереоизомерное разделение промежуточного соединения бензил-2-(4-гидроксипиперидин-1-ил)-2фенилацетата выполняли с применением следующих условий: соединение (500 мг) растворяли в этаноле/гептане (5 мл/45 мл). Полученный раствор вводили (5 мл/введение) в колонку для хиральной ВЭЖХ (СЫгасе1 01, 2 см ГОх 25 см Ь, 10 мкм) с элюированием 80:20 гептаном/этанолом при 10 мл/мин, наблюдали при 220 нм с получением 186,3 мг стереоизомера-1 и 209,1 мг стереоизомера-2 в виде светложелтого вязкого масла. Этот бензиловый сложный эфир гидрогенолизировали согласно методике получения Сар-7 с получением Сар-8: ^!Н ЯМР (ОМ80^₆, δ = 2,5, 500 МГц) 7,40 (ά, 1 = 7, 2Н), 7,28-7,20 (т, 3Н), 3,78 (5, 1Н), 3,46 (т, 1Н), 2,93 (т, 1Н), 2,62 (т, 1Н), 2,20 (т, 2Н), 1,70 (т, 2Н), 1,42 (т, 2Н). КТ = 0,28 (условие II); индекс гомогенности >98%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^0₂: 236,13; обнаружено 236,07; НКМ8: Рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н_£^0₃: 236,1287; обнаружено 236,1283.

- 18 020815

Сар-9

Диастереомерное разделение промежуточного соединения бензил-2-((3)-3-фторпирролидин-1-ил)2-фенилацетата выполняли с применением следующих условий: сложный эфир (220 мг) отделяли в колонку для хиральной ВЭЖХ (СЫгасе1 О1-Н, 0,46 см ГОх25 см Ь, 5 мкм) с элюированием 95% СО₂/5% метанолом с 0,1% ТРА, при давлении 10 бар, скорости потока 70 мл/мин и температуре 35°С. Элюат ВЭЖХ для соответствующих стереоизомеров концентрировали и остаток растворяли в СН₂С1₂ (20 мл) и промывали водной средой (10 мл воды + 1 мл насыщенного раствора ЫаНСО₃). Органическую фазу сушили (М§ЗО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 92,5 мг фракции-1 и 59,6 мг фракции-2. Эти бензиловые сложные эфиры гидрогенолизировали согласно методике получения Сар-7 с получением Сар-9а и Сар-9Ь. Сар-9а (диастереомер-1; образец представляет собой соль ΤΡΆ в результате очистки обращенно-фазовой ВЭЖХ с применением Н₂О/метанола/ТРЛ растворителя). ¹Н ЯМР (ЭМЗОб₆, δ = 2,5, 400 МГц) 7,55-7,48 (т, 5Н), 5,38 (б т, I = 53,7, 1Н), 5,09 (Ьг 5, 1Н), 3,84-2,82 (Ьг т, 4Н), 2,312,09 (т, 2Н). КТ = 0,42 (Условие I); индекс гомогенности >95%; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н₁₅РЫО₂: 224,11; обнаружено 224,14; Сар-9Ь (диастереомер-2): Ή ЯМР (ЭМ8О-б₆, δ = 2,5, 400 МГц) 7,43-7,21 (т, 5Н), 5,19 (б т, I = 55,9, 1Н), 3,97 (5, 1Н), 2,95-2,43 (т, 4Н), 2,19-1,78 (т, 2Н). КТ = 0,44 (условие I); ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С^Н^ЕМО^ 224,11; обнаружено 224,14.

Сар-10 о /

А5

В раствор Ό-пролина (2,0 г, 17 ммоль) и формальдегида (2,0 мл 37 мас.%, в Н₂О) в метаноле (15 мл) добавляли суспензию 10% Рб/С (500 мг) в метаноле (5 мл). Смесь перемешивали с водородом из баллона в течение 23 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и концентрировали в вакууме с получением Сар-10 в виде грязно-белого твердого вещества (2,15 г). ¹Н ЯМР (ЭМ8О-б₆, δ = 2,5, 500 МГц) 3,42 (т, 1Н), 3,37 (бб, I = 9,4, 6,1, 1Н), 2,85-2,78 (т, 1Н), 2,66 (5, 3Н), 2,21-2,13 (т, 1Н), 1,93-1,84 (т, 2Н), 1,75-1,66 (т, 1Н). КТ = 0,28 (условие II); индекс гомогенности >98%; ЬС-М8. Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₆Н₁₂ЫО₂: 130,09; обнаружено 129,96.

Сар-11

НО

Смесь (28,4К)-4-фторпирролидин-2-карбоновой кислоты (0,50 г, 3,8 ммоль), формальдегида (0,5 мл 37 мас.%, в Н₂О), 12н. НС1 (0,25 мл) и 10% Рб/С (50 мг) в метаноле (20 мл) перемешивали с водородом из баллона в течение 19 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из изопропанола с получением соли НС1 Сар-11 в виде белого твердого вещества (337,7 мг). ¹Н ЯМР (ЛМ8О-б₆. δ = 2,5, 500 МГц) 5,39 (б т, I = 53,7, 1Н), 4,30 (т, 1Н), 3,90 (ббб, I = 31,5, 13,5, 4,5, 1Н), 3,33 (бб, I = 25,6, 13,4, 1Н), 2,85 (5, 3Н), 2,602,51 (т, 1Н), 2,39-2,26 (т, 1Н). КТ = 0,28 (условие II); индекс гомогенности >98%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н] С₆НцРМО₂

148,08; обнаружено 148,06. Сар-12 (так же, как и Сар-52)

(8)-2-(Метоксикарбониламино)пропановая кислота Ь-Алании (2,0 г, 22,5 ммоль) растворяли в 10% водном растворе карбоната натрия (50 мл) и к этому добавляли раствор ТНР (50 мл) метилхлорформиата (4,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды в течение 4,5 ч и концентрировали в вакууме. Полученное белое твердое вещество растворяли в воде и подкисляли 1н. НС1 до рН ~ 2-3. Полученные растворы экстрагировали этилацетатом (3x100 мл) и объединенную органическую фазу сушили (Ыа₂ЗО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла (2,58 г). 500 мг этого вещества очищали обращеннофазовой ВЭЖХ (Н₂О/метанол/ТРА) с получением 150 мг Сар-12 в виде бесцветного масла. ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5, 500 МГц) 7,44 (б, I = 7,3, 0,8Н), 7,10 (Ьг 5, 0,2Н), 3,97 (т, 1Н), 3,53 (5, 3Н), 1,25 (б, I = 7,3, 3Н).

- 19 020815

Смесь Ь-аланина (2,5 г, 28 ммоль), формальдегида (8,4 г, 37 мас.%), 1н. НС1 (30 мл) и 10% Ρά/С (500 мг) в метаноле (30 мл) перемешивали в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм) в течение 5 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (СБЫТЕ®) и фильтрат концентрировали в вакууме с получением соли НС1 Сар-13 в виде масла, которое отвердевало в результате отстаивания в вакууме (4,4 г; масса выше теоретического выхода). Продукт использовали без дополнительной очистки. 'Н ЯМР (1)\18О-с1... δ = 2,5, 500 МГц) δ 12,1 (Ьг 5, 1Н), 4,06 (д, I = 7,4, 1Н), 2,76 (в, 6Н), 1,46 (ά, I = 7,3,3Н).

(К)-2-Фенил-2-(пиперидин-1 -ил)уксусная кислота

Стадия 1. Смесь (К)-(-)-Э-фенилглицин-трет-бутилового сложного эфира (3,00 г, 12,3 ммоль), №1ВН₃СХ (0,773 г, 12,3 ммоль), КОН (0,690 г, 12,3 ммоль) и уксусной кислоты (0,352 мл, 6,15 ммоль) перемешивали в метаноле при 0°С. К этой смеси в течение 5 мин добавляли по каплям глутаровый альдегид (2,23 мл, 12,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали и оставили нагреваться до температуры окружающей среды и продолжали перемешивать при той же температуре в течение 16 ч. Растворитель впоследствии удаляли и остаток разделяли 10% водным ЫаОН и этилацетатом. Органическую фазу отделяли, сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали досуха с получением прозрачного масла. Это вещество очищали обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (Рптеврйеге С-18, 30x100 мм; СН₃СЫН₂О-0,1% ТЕЛ) с получением промежуточного сложного эфира (2,70 г, 56%) в виде прозрачного масла.

¹Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ 7,53-7,44 (т, 3Н), 7,40-7,37 (т, 2Н), 3,87 (ά, I = 10,9 Гц, 1Н), 3,59 (ά, I = 10,9 Гц, 1Н), 2,99 (ΐ, I = 11,2 Гц, 1Н), 2,59 (ΐ, I = 11,4 Гц, 1Н), 2,07-2,02 (т, 2Н), 1,82 (ά, I = 1,82 Гц, 3Н), 1,40 (5, 9Н). БС-М8: аналитически рассчитано для С1₇Н₂₅ЫО₂: 275; обнаружено: 276 (М+Н)+.

Стадия 2. К перемешанному раствору промежуточного соединения сложного эфира (1,12 г, 2,88 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли ТЕА (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 4 ч и затем ее концентрировали досуха с получением светло-желтого масла. Масло очищали с применением обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (Рптеврйеге С-18, 30x100 мм; СН₃СЫ-Н₂О-0,1% ТЕА). Соответствующие фракции объединяли и концентрировали досуха в вакууме. Затем остаток растворяли в минимальном количестве метанола и использовали относительно экстракционных картриджей МСХ ЬР (2x6 г). Картриджи промывали метанолом (40 мл) и затем необходимое соединение элюировали с применением 2М аммиака в метаноле (50 мл). Содержащие продукт фракции объединяли и концентрировали и остаток поглощали водой. Посредством лиофилизации этого раствора получали указанное соединение (0,492 г, 78%) в виде светло-желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (ЭМ8ОШ₆) δ 7,50 (5, 5Н), 5,13 (5, 1Н), 3,09 (Ьг 5, 2Н), 2,92-2,89 (т, 2Н), 1,74 (т, 4Н), 1,48 (Ьг 5, 2Н). БС-М8: аналитически рассчитано для СиНпЫОу 219; обнаружено: 220 (М+Н)+.

Стадия 1. (8)-1-Фенилэтил-2-бром-2-фенилацетат. К смеси α-бромфенилуксусной кислоты (10,75 г, 0,050 моль), (8)-(-)-1-фенилэтанола (7,94 г, 0,065 моль) и ЭМАР (0,61 г, 5,0 ммоль) в сухом дихлорметане (100 мл) добавляли весь сразу твердый ЕЭС1 (12,46 г, 0,065 моль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 18 ч и затем ее разбавляли этилацетатом, промывали (Н₂Ох2, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа₂8О₄), фильтровали и концентрировали с получением бледно-желтого масла. При помощи флеш-хроматографии (8Ю₂/ гексан-этилацетат, 4:1) этого масла получали указанное соединение (11,64 г, 73%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1_;) δ 7,53-7,17 (т, 10Н), 5,95 (φ I = 6,6 Гц, 0,5Н), 5,94 (φ I = 6,6 Гц, 0,5Н), 5,41 (5, 0,5Н), 5,39 (5, 0,5Н), 1,58 (ά, I = 6,6 Гц, 1,5Н), 1,51 (ά, I = 6,6 Гц, 1,5Н).

Стадия 2. (8)-1-Фенилэтил (К)-2-(4-гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетат. В раствор (8)-1-фенилэтил-2-бром-2-фенилацетата (0,464 г, 1,45 ммоль) в ТНЕ (8 мл) добавляли триэтиламин (0,61 мл, 4,35 ммоль) с последующим добавлением йодида тетрабутиламмония (0,215 г, 0,58 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и затем добавляли раствор 4метил-4-гидроксипиперидина (0,251 г, 2,18 ммоль) в ТНЕ (2 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч при

- 20 020815 комнатной температуре и затем ее нагревали при 55-60°С (температура масляной бани) в течение 4 ч. Затем охлажденную реакционную смесь разбавляли этилацетатом (30 мл), промывали (Н₂Ох2, насыщенным солевым раствором), сушили (М§§О₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (0-60% этилацетат-гексан) с получением сначала (8,К)-изомера указанного соединения (0,306 г, 60%) в виде белого твердого вещества, а затем соответствующего (8,8)-изомера (0,120 г, 23%), все в виде белого твердого вещества. (8,К)-изомер: ¹Н ЯМР (СО₃,ОЭ) δ 7,51-7,45 (т, 2Н), 7,41-7,25 (т, 8Н), 5,85 (ц, 1 = 6,6 Гц, 1Н), 4,05 (5, 1Н), 2,56-2,45 (т, 2Н), 2,41-2,29 (т, 2Н), 1,71-1,49 (т, 4Н), 1,38 (ά 1 = 6,6 Гц, 3Н), 1,18 (5, 3Н). ЬС-М§: аналитически рассчитано для С₂₂Н₂7NО₃: 353; обнаружено: 354 (М+Н)+. (8,8)-изомер: Ή ЯМР (С1ГО1)) δ 7,41-7,30 (т, 5Н), 7,20-7,14 (т, 3Н), 7,06-7,00 (т, 2Н), 5,85 (ц, 1 = 6,6 Гц, 1Н), 4,06 (5, 1Н), 2,70-2,60 (т, 1Н), 2,51 (άΐ, 1 = 6,6, 3,3 Гц, 1Н), 2,44-2,31 (т, 2Н), 1,75-1,65 (т, 1Н), 1,65-1,54 (т, 3Н), 1,50 (ά, 1 = 6,8 Гц, 3Н), 1,20 (5, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₂₂Н₂7NО₃: 353; обнаружено: 354 (М+Н)+.

Стадия 3. (К)-2-(4-Гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилуксусная кислота. В раствор (8)-1фенилэтил-(К)-2-(4-гидрокси-4-метилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетата (0,185 г, 0,52 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (1 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие вещества впоследствии удаляли в вакууме и остаток очищали обращеннофазовой препаративной ВЭЖХ (Рптс5рЬсгс С-18, 20x100 мм; СН₃СЮН₂О-0,1% ΤΡΆ) с получением указанного соединения (в виде соли ΤΡΆ) в виде бледно-голубого твердого вещества (0,128 г, 98%). ЬС-М8: аналитически рассчитано для СмН^О₃: 249; обнаружено: 250 (М+Н)+.

Стадия 1. (8)-1-Фенилэтил-2-(2-фторфенил)ацетат. Смесь 2-фторфенилуксусной кислоты (5,45 г, 35,4 ммоль), (8)-1-фенилэтанола (5,62 г, 46,0 ммоль), ЕЭС1 (8,82 г, 46,0 ммоль) и ЭМАР (0,561 г, 4,60 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель затем концентрировали и остаток разделяли посредством Н2О-этилацетата. Фазы разделяли и водный слой обратно экстрагировали этилацетатом (2х). Объединенные органические фазы промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (В1ОТАОЕ®/ 0-20% этилацетат-гексан) с получением указанного соединения в виде бесцветного масла (8,38 г, 92%). ΊI ЯМР (400 МГц, С1ГО1)) δ 7,32-7,23 (т, 7Н), 7,10-7,04 (т, 2), 5,85 (ц, 1 = 6,5 Гц, 1Н), 3,71 (5, 2Н), 1,48 (ά, 1 = 6,5 Гц, 3Н).

Стадия 2. (К)-((8)-1-Фенилэтил)-2-(2-фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)ацетат. В раствор (8)-1фенилэтил-2-(2-фторфенил)ацетата (5,00 г, 19,4 ммоль) в ТНР (1200 мл) при 0°С добавляли ЭВИ (6,19 г, 40,7 ммоль) и раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры при перемешивании в течение 30 мин. Раствор затем охлаждали до -78°С добавляли в раствор СВг₄ (13,5 г, 40,7 ммоль) в ТНР (100 мл), и смесь оставляли нагреваться до -10°С и перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водн. ЮН₄С1 и слои разделяли. Водный слой обратно экстрагировали этилацетатом (2х) и объединенные органические фазы промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (№₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. К остатку добавляли пиперидин (5,73 мл, 58,1 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Летучие вещества затем концентрировали в вакууме и остаток очищали хроматографией на силикагеле (ВЮТАОЕ®/ 0-30% диэтиловый эфир-гексан) с получением чистой смеси диастереомеров (соотношение 2:1 посредством 'Н ЯМР) в виде желтого масла (2,07 г, 31%) вместе с непрореагировавшим исходным веществом (2,53 г, 51%). Посредством дополнительной хроматографии диастереомерной смеси (ВЮТАОЕ®/ 0-10% диэтиловый эфир-толуол) получали указанное соединение в виде бесцветного масла (0,737 г, 11%). ¹Н ЯМР (400 МГц, С1ГО1)) δ 7,52 (άάά, 1 = 9,4, 7,6, 1,8 Гц, 1Н), 7,33-7,40 (т, 1), 7,23-7,23 (т, 4Н), 7,02-7,23 (т, 4Н), 5,86 (ч, 1 = 6,6 Гц, 1Н), 4,45 (5, 1Н), 2,39 -2,45 (т, 4Н), 1,52-1,58 (т, 4Н), 1,40-1,42 (т, 1Н), 1,38 (ά, 1 = 6,6 Гц, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₂1Н₂₄РNО₂: 341; обнаружено: 342 (М+Н)+.

Стадия 3. (К)-2-(2-Фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)уксусная кислота. Смесь (К)-((8)-1-фенилэтил)2-(2-фторфенил)-2-(пиперидин-1-ил)ацетата (0,737 г, 2,16 ммоль) и 20% Рά(ОН)₂/С (0,070 г) в этаноле (30 мл) гидрировали при комнатной температуре и атмосферном давлении (Н₂ в баллоне) в течение 2 ч. Раствор затем продували Аг, фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и концентрировали в вакууме. Посредством этого получали указанное соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,503 г, 98%). Ή ЯМР (400 МГц, С1ГО1)) δ 7,65 (άάά, 1 = 9,1, 7,6, 1,5 Гц, 1Н), 7,47-7,53 (т, 1Н), 7,21-7,30 (т, 2Н), 3,07-3,13 (т, 4Н), 1,84 (Ьг 5, 4Н), 1,62 (Ьг 5, 2Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С1₃Н₁₆РNО₂: 237; обнаружено: 238 (М+Н)+.

- 21 020815

Стадия 1. (§)-1-Фенилэтил-(К)-2-(4-гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетат. В раствор (8)-1-фенилэтил-2-бром-2-фенилацетата (1,50 г, 4,70 ммоль) в ТНР (25 мл) добавляли триэтиламин (1,31 мл, 9,42 ммоль), с последующим добавлением йодида тетрабутиламмония (0,347 г, 0,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и затем добавляли раствор 4фенил-4-гидроксипиперидина (1,00 г, 5,64 ммоль) в ТНР (5 мл). Смесь перемешивали в течение 16 ч и затем ее разбавляли этилацетатом (100 мл), промывали (Н₂Ох2, насыщенным солевым раствором), сушили (М§§0₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на колонке с силикагелем (0-60% этилацетат-гексан) с получением приблизительно 2:1 смеси диастереомеров исходя из 'Н ЯМР. Разделение этих изомеров выполняли с применением сверхкритической жидкостной хроматографии (СНГКАЬСЕЬ® 0ТН, 30x250 мм; 20% этанол в СО₂ при 35°С) с получением первого (К)-изомера указанного соединения (0,534 г, 27%) в виде желтого масла и затем соответствующего (8)-изомера (0,271 г, 14%) в виде желтого масла. (8,К)-изомер: ^!Н ЯМР (400 МГц, СН30Н) δ 7,55-7,47 (т, 4Н), 7,44-7,25 (т, 10Н), 7,257,17 (т, 1Н), 5,88 (ц, 1 = 6,6 Гц, 1Н), 4,12 (5, 1Н), 2,82-2,72 (т, 1Н), 2,64 (άί, 1 = 11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,58-2,52 (т, 1Н), 2,40 (άί, 1 = 11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,20 (άί, 1 = 12,1, 4,6 Гц, 1Н), 2,10 (άί, 1 = 12,1, 4,6 Гц, 1Н), 1,72-1,57 (т, 2Н), 1,53 (ά, 1 = 6,5 Гц, 3Н). ЬС-М§: аналитически рассчитано для С27Н29Ы03: 415; обнаружено: 416 (М+Н)+; (8,8)-изомер: ^!Н ЯМР (400 МГц, СН30Н) δ 7,55-7,48 (т, 2Н), 7,45-7,39 (т, 2Н), 7,38-7,30 (т, 5Н), 7,25-7,13 (т, 4Н), 7,08-7,00 (т, 2Н), 5,88 (ц, I = 6,6 Гц, 1Н), 4,12 (5, 1Н), 2,95-2,85 (т, 1Н), 2,68 (άί, I =

11.1, 2,5 Гц, 1Н), 2,57-2,52 (т, 1Н), 2,42 (άί, I = 11,1, 2,5 Гц, 1Н), 2,25 (άί, I = 12,1, 4,6 Гц, 1Н), 2,12 (άί, I =

12.1, 4,6 Гц, 1Н), 1,73 (άά, I = 13,6, 3,0 Гц, 1Н), 1,64 (άά, I = 13,6, 3,0 Гц, 1Н), 1,40 (ά, I = 6,6 Гц, 3Н). ЬСМ§: аналитически рассчитано для С₂₇Н₂₉Ы0₃: 415; обнаружено: 416 (М+Н)+.

Следующие сложные эфиры получали подобным образом.

Промежуточное	°γ°Χθ ό Ν I	Диастереомер 1: ΐ ЯМР (500 МГц,
соединение-17а	ΟΜ5Ο-4₆) δ м.д. 1,36 (ά, I = 6,41 Гц, ЗН) 2,23-2,51 (т, 4Н) 3,35 (8, 4Н) 4,25 (в, 1Н) 5,05 (8, 2Н) 5,82 (4, 1 = 6,71 Гц, 1Н) 7,157,52 (т, 15Н). ЬС-МЗ Аналитически рассчитано для: СгЛо^СЬ 458,22;
	Υ*	обнаружено: 459,44 (М+Н)⁺
	υ «χ	Диастереомер 2: ’Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-4₆) δ м.д. 1,45 (4, 1 = 6,71 Гц, ЗН) 2.27- 2,44 (т, 4Н) 3,39 (δ, 4Н) 4,23 (в, 1Н) 5,06 (8, 2Н) 5,83 (6, 1 = 6,71 Гц, 1Н) 7,12 (44,1 = 6,41, 3,05 Гц, 2Н) 7,19-7,27 (т, ЗН) 7.27- 7,44 (т, ЮН). ЬС-М8: Аналитически рассчитано для: СгяНтТ^Оз 458,22; обнаружено: 459,44 (М+Н/.
Промежуточное соединение -17Ь	Α	Диастереомер 1: КТ . 11,76 минут (Условие П); ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для: СмНззНгОз 338,16; обнаружено: 339,39 (М+Н)⁺.
		Диастереомер 2: КТ = 10,05 минут
	Μ 0^	(Условие П). ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для: СгоНгзГЬОз 338,16; обнаружено: 339,39 (М+Н)⁺.
Промежуточное соединение-17с	ύ Ν	Диастереомер 1: Т_Е = 4,55 минут (Условие I); ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для: СлНгбИгОг 338,20; обнаружено: 339,45 (М+Н)⁺.
		Диастереомер 2: Тд = 6,00 минут (Условие
	υ	I). ЬС-М8: Аналитически рассчитано для: СэрНгб^Ог 338,20; обнаружено: 339,45 (М+Н)⁺
Промежуточное	ίίΆ	Диастереомер 1; КТ = 7,19 минут (Условие
соединение-170	τ	I); ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для: 02₇Η29ΝΟ2 399,22; обнаружено: 400,48 (М+Н)⁺ Диаегереомер 2: КТ = 9,76 минут (Условие I), ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для:
		€;₇Ηι<,Νθ2 399,22; обнаружено: 400,48
	^υ Ό	(М+Н)⁺.

- 22 020815

Условия хиральной 8РС для определения времени удержания:

Условие I

Колонка: СНПЕАЬРАК® ЛО-Н Колонка, 4,62x50 мм, 5мкм

Растворители: 90% СО₂-Ю% метанола с 0,1%ОЕА

Темпер.: 35°С

Давление: 150 бар

Скорость потока: 2,0 мл/мин.

УФ-мониторинг при 220 нм

Введение: 1,0 мг/Змл метанола

Условие II

Колонка: СН1К АРСЕЬ® Οϋ-Η Колонка, 4,62x50 мм, 5 мкм

Растворители: 90% СОг-10% метанола с 0,Ι%ϋΕΑ

Темпер.: 35°С Давление: 150 бар Скорость потока: 2,0 мл/мин.

УФ-мониторинг при 220 нм Введение: 1,0 мг/мл метанола

Сар-17, стадия 2. (К)-2-(4-Гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилуксусная кислота. В раствор (8)-1-фенилэтил-(К)-2-(4-гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-2-фенилацетата (0,350 г, 0,84 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (1 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие вещества впоследствии удаляли в вакууме и остаток очищали обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (РптекрЬете С-18, 20x100 мм; СН₃С^Н₂О-0,1% ΤΡΑ) с получением указанного соединения (в виде соли ΤΡΑ) в виде белого твердого вещества (0,230 г, 88%). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₁₉Н₂ЩО₃: 311,15; обнаружено: 312 (М+Н)+.

Следующие карбоновые кислоты готовили в оптически чистой форме подобным образом.

Сар-17а	ύ	КТ.2,21 (Условие II), *Н ЯМР (500 МГц, ОМЗО-с1₆) 6 м.д. 2,20-2,35 (т, 2Н) 2,34-2,47 (т, 2Н) 3,37 (з, 4Н) 3,71 (5, 1Н) 5,06 (з, 2Н) 7,06-7,53 (т, ЮН). ЕС-МЗ: Аналитически рассчитано для: СмЕЕзУгСЦ 354,16; обнаружено: 355,38 (М+Н)⁺
	Г⁴	' * ТГ
	и	о
Сар-17Ь		с“т° N	КТ = 0,27 (Условие Ш); БС-М8: Аналитически рассчитано для: С₁₂Н₁₄Н₃0з 234,10; обнаружено: 235,22 (М+Н)⁺
		Х.ОН
	и	О
Сар-17с		ό	КТ = 0,48 (Условие II); ЕС-МЗ: Аналитически рассчитано для: СвНщ^СЬ 234,14; обнаружено: 235,31 (М+Н)⁺.
	г*	Лг^он
	и	о
Сар-174		9	КТ . 2,21 (Условие I); ЕС-МЗ: Аналитически рассчитано для: С^НлЫОг 295,16; обнаружено: 296,33 (М+Н)⁺.

	и	О

- 23 020815

Условия ЬС-Μδ для определения времени удержания: Условие I

Колонка: ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 4,6 X 50 мм 810

В начале программы % В = 0

В конце программы % В = 100

Время градиента = 4 мин

Скорость потока = 4 мл/мин

Длина волны = 220

Растворитель А = 10% метанола - 90% Н2О - 0,1% ТРА Растворитель В = 90% метанола -10% НгО - 0,1% ТРА Условие II

Колонка: №а1ега ЗипРпе 4,6 X 50 мм 85 В начале программы % В = 0 В конце программы % В = 100 Время градиента — 2 мин Скорость потока = 4 мл/мин Длина волны = 220

Растворитель А = 10% метанола - 90% НгО - 0,1% ТРА Растворитель В = 90% метанола - 10% НгО - 0,1% ТРА Условие Ш

Колонка: ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® 10 мкм 3,0 X 50 мм

В начале программы % В = 0

В конце программы % В = 100

Время градиента = 2 мин

Скорость потока - 4 мл/мин

Длина волны = 220

Растворитель А = 10% метанола - 90% Н₂О - 0,1% ТРА Растворитель В = 90% метанола - 10% НгО - 0,1% ТРА

Стадия 1. (К,8)-Этил-2-(4-пиридил)-2-бромацетат. В раствор этил-4-пиридилацетата (1,00 г, 6,05 ммоль) в сухом ТНР (150 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляли ΌΒυ (0,99 мл, 6,66 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры более 30 мин и затем ее охлаждали до 78°С. К этой смеси добавляли СВг₄ (2,21 г, 6,66 ммоль) и продолжали перемешивать при -78°С в течение 2 ч. Реакционную смесь затем гасили насыщ. водн. МН₄С1 и фазы разделяли. Органическую фазу промывали (насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное желтое масло сразу же очищали посредством флеш-хроматографии (8Ю₂/ гексан-этилацетат, 1:1) с получением указанного соединения (1,40 г, 95%) в виде несколько нестабильного желтого масла. 'Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ 8,62 (66, I = 4,6, 1,8 Гц, 2Н), 7,45 (66, I = 4,6, 1,8 Гц, 2Н), 5,24 (5, 1Н), 4,214,29 (т, 2Н), 1,28 (ΐ, I = 7,1 Гц, 3Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для СдНюВгЫО/ 242, 244; обнаружено: 243, 245 (М+Н)+.

Стадия 2. (КД)-Этил-2-(4-пиридил)-2-(Ы,М-диметиламино)ацетат. В раствор (КД)-этил-2-(4пиридил)-2-бромацетата (1,40 г, 8,48 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) при комнатной температуре добавляли диметиламин (2М в ТНР, 8,5 мл, 17,0 ммоль). После завершения реакции (исходя из тонкослойной хроматографии) летучие вещества удаляли в вакууме и остаток очищали посредством флеш-хроматографии (ΒΙОТЛОЕ®, 40+Μ δίθ₂ колонка; 50-100% этилацетат-гексан) с получением указанного соединения (0,539 г, 31%) в виде светло-желтого масла. 'Н ЯМР (400 МГц, ί'.’ΌΟ₃) δ 8,58 (6, I = 6,0 Гц, 2Н), 7,36 (6, I = 6,0

- 24 020815

Гц, 2Н), 4,17 (т, 2Н), 3,92 (8, 1Н), 2,27 (8, 6Н), 1,22 (ΐ, 1 = 7,0 Гц). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С_ПН₁₆^О₂: 208; обнаружено: 209 (М+Н)+.

Стадия 3. (К,8)-2-(4-Пиридил)-2-(Ю^диметиламино)уксусная кислота. В раствор (К,8)-этил-2-(4пиридил)-2-(Ю^диметиламино)ацетата (0,200 г, 0,960 ммоль) в смеси ТНР-метанол-Н₂О (1:1:1, 6 мл) при комнатной температуре добавляли порошкообразный ЫОН (0,120 г, 4,99 ммоль). Раствор перемешивали в течение 3 ч и затем его подкисляли до рН 6 с применением 1 н НС1. Водную фазу промывали этилацетатом и затем ее лиофилизировали с получением дигидрохлорида указанного соединения в виде желтого твердого вещества (содержащего ЫС1). Продукт использовали как таковой в последующих стадиях. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 8,49 (ά, 1 = 5,7 Гц, 2Н), 7,34 (ά 1 = 5,7 Гц, 2Н), 3,56 (8, 1Н), 2,21 (8, 6Н).

Следующие примеры получали подобным образом с применением способ описанный выше.

ЬС-М8: Аналитически рассчитано для (λίΗΙπΝιΟι 180, обнаружено: 181 (М+Н)⁺.

Сар-20	НМе₂	ЬС-МЗ: без ионизации. ‘Н ЯМР (400 МГц, СЮДО) δ 8,55 <4.1 = 4,3 Гц, 1Н), 7,84 (арр 1, 3 = 5,3 Гц, 1Н), 7,61 (ά, ί = 7,8 Гц, 1Н), 7,37 (арр 1, .1 = 5,3 Гц, 1Н), 4,35 (а, 1Н), 2,60 (а, 6Н).
О	ΧΟ₂Η
Сар-21	сД	ЫМе₂ ''’^Р'СОгН	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для 0,Ηιι€1Ν₂0₂ 214, 216; обнаружено: 215, 217 (М+Н)⁺.
Сар-22		ЫМе₂	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНцИгОд: 224; обнаружено: 225 (М+Н)⁺.
	ο₂ν	и
Сар-23	О	ΝΜε₂ 'ХОгН )	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для Γι+ΙΙΐίΝΟι: 229; обнаружено: 230 (М+Н)⁺.
Сар-24		ЫМе₂ '^РсОгН	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СцНкРзИО.: 247; обнаружено: 248 (М+Н)⁺.
Сар-25		ΝΜβ₂	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ΟιιΗπΓίΝΟί: 247; обнаружено: 248 (М+Н)⁺.
	и	СР₃
Сар-26	Рт	ΝΜε₂ ''ХОгН	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНцРМСЬ: 197; обнаружено: 198 (М+Н)⁺
	и	Р
Сар-27	ч	ΝΜε₂ %]Ρχο₂Η	ЬС-М8: Аналитически рассчитано для €κιΤ1ι?ΓΝΟι: 247; обнаружено: 248 (М+Н)⁺
Сар-28	^сд	ЫМе₂ ^[Рсо₂н	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для С1оН₁₂СШ0₂: 213, обнаружено: 214 (М+Н)⁺.
Сар-29	Рт	ΝΜβ₂ Рсо₂н	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СцНюСМОг: 213; обнаружено: 214 (М+Н)⁺.
		'Х!
Сар-30	сД	ΝΜβ₂	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СщНиСПЧОг: 213; обнаружено: 214 (М+Н)⁺.
Сар-31	ЫМе₂	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СзНиК.СЬЗ: 200; обнаружено: 201 (М+Н)⁺.

- 25 020815

Сар-32	ЫМе₂ /=>ССО₂Н VI	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для 0βΗιιΝΟ₂8: 185; обнаружено: 186 (М+Н)*.
Сар-33	Ше₂ ₃^у^со₂н	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для 0₈ΗιιΝ0₂8: 185; обнаружено: 186 (М+Н)*.
Сар-34	ΝΜβ₂ Ο-Ν	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СиПиМзСС 220; обнаружено: 221 (М+Н)*,
Сар-35	ΝΜβ₂ К^Л'СОгН	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для С\|₂Нц!\Ю₂3 235; обнаружено: 236 (М+Н)*.
Сар-36	ΝΜβ₂	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ΰι₂Ηΐ4Ν₂Ο₂3: 250; обнаружено: 251 (М+Н)*.

Сар-37

о . НС1 ° в

сар-37

Стадия 1. (К,§)-Этил-2-(хинолин-3-ил)-2-(Ы,М-диметиламино)ацетат.

Смесь этил-^Ы-диметиламиноацетата (0,462 г, 3,54 ммоль), К₃РО₄ (1,90 г, 8,95 ммоль), Рй((-Ви₃Р)₂(0,090 г, 0,176 ммоль), 3-бромхинолина и толуола (10 мл) дегазировали барботированием Аг в течение 15 мин. Реакционную смесь затем нагревали при 100°С в течение 12 ч, после чего ее охлаждали до комнатной температуры и выливали в Н₂О. Смесь экстрагировали этилацетатом (2х) и объединенные органические фазы промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали первый обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (РптезрЬеге С-18, 30x100 мм; СН₃СЫ-Н₂О-5 мм ЫН₄ОАс) и затем посредством флеш-хроматографии (§Ю₂/гексанэтилацетат, 1:1) с получением указанного соединения (0,128 г, 17%) в виде оранжевого масла. 'Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ 8,90 (ά, 1 = 2,0 Гц, 1Н), 8,32 (ά, 1 = 2,0 Гц, 1Н), 8,03-8,01 (т, 2Н), 7,77 (άάά, 1 = 8,3, 6,8, 1,5 Гц, 1Н), 7,62 (άάά, 1 = 8,3, 6,8, 1,5 Гц, 1Н), 4,35 (5, 1Н), 4,13 (т, 2Н), 2,22 (5, 6Н), 1,15 (ΐ, 1 = 7,0 Гц, 3Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С^Н^^Ос 258; обнаружено: 259 (М+Н)+.

Стадия 2. (К,§)-2-(Хинолин-3-ил)-2-(Х,Ы-диметиламино)уксусная кислота.

Смесь (К,§)-этил-2-(хинолин-3-ил)-2-(Х,Ы-диметиламино)ацетата (0,122 г, 0,472 ммоль) и 6М НС1 (3 мл) нагревали при 100°С в течение 12 ч. Растворитель удаляли в вакууме с получением дигидрохлорида указанного соединения (0,169 г, >100%) в виде светло-желтой пены. Неочищенное вещество использовали в последующих стадиях без дополнительной очистки. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С1₃Н₁₄Ы₂О₂: 230; обнаружено: 231 (М+Н)+.

Стадия 1. (К)-(^)-1-Фенилэтил)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат и (Я)-((Я)-1-фенилэтил)2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетат. К смеси (КЯ)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)уксусной кислоты (2,60 г, 13,19 ммоль), ΌΜΑΡ (0,209 г, 1,71 ммоль) и ^)-1-фенилэтанола (2,09 г, 17,15 ммоль) в СН₂С1₂ (40 мл) добавляли ЕЭС1 (3,29 г, 17,15 ммоль) и смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель затем удаляли в вакууме и остаток разделяли этилацетатомН₂О. Слои разделяли, водный слой обратно экстрагировали этилацетатом (2х) и объединенные органические фазы промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (ВЮТАОЕ®/ 0-50% диэтиловый эфир-гексан). Полученную чистую смесь диастереомеров затем разделяли обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (РптсхрНсгс С-18, 30x100 мм; СН₃СЫ-Н₂О-0,1% ТРА) с получением сначала (δ)-1фенэтил-(К)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетата (0,501 г, 13%), а затем ^)-1-фенэтил-^)-2- 26 020815 (диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетата (0,727 г, 18%), оба в виде их солей ТРЛ. (8,К)-изомер: ¹Н ЯМР (400 МГц, СО3ОЭ) δ 7,65-7,70 (т, 1Н), 7,55-7,60 (444, 1 = 9,4, 8,1, 1,5 Гц, 1Н), 7,36-7,41 (т, 2Н), 7,28-7,34 (т, 5Н), 6,04 (ф 1 = 6,5 Гц, 1Н), 5,60 (5, 1Н), 2,84 (5, 6Н), 1,43 (4, 1 = 6,5 Гц, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С18Н2оРХО2: 301; обнаружено: 302 (М+Н)'; (8,8)-изомер: ¹Н ЯМР (400 МГц, ί'.Ό3ΟΌ) δ 7,58-7,63 (т, 1Н), 7,18-7,31 (т, 6Н), 7,00 (44, 1 = 8,5, 1,5 Гц, 2Н), 6,02 (ф 1 = 6,5 Гц, 1Н), 5,60 (5, 1Н), 2,88 (5, 6Н), 1,54 (4, 1 = 6,5 Гц, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₁₈Н₂₀РИО₂: 301; обнаружено: 302 (М+Н)+.

Стадия 2. (К)-2-(Диметиламино)-2-(2-фторфенил)уксусная кислота.

Смесь соли ТРА (К)-((8)-1-фенилэтил)-2-(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетата (1,25 г, 3,01 ммоль) и 20% Р4(ОН)₂/С (0,125 г) в этаноле (30 мл) гидрировали при комнатной температуре и атмосферном давлении (баллон Н₂) в течение 4 ч. Раствор затем продували Аг, фильтровали через диатомитовую землю (СБЫТЕ®) и концентрировали в вакууме. Посредством этого получали указанное соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,503 г, 98%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ί'.Ό₃ΟΌ) δ 7,53-7,63 (т, 2Н), 7,33-7,38 (т, 2Н), 5,36 (5, 1Н), 2,86 (5, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₁₀Н₁₂РХО₂: 197; обнаружено: 198 (М+Н)+.

δ-изомер может быть получен подобным образом из соли ТРА (8)-((8)-1-фенилэтил)-2(диметиламино)-2-(2-фторфенил)ацетата.

Сар-39

сар-39

Смесь (К)-(2-хлорфенил)глицина (0,300 г, 1,62 ммоль), формальдегида (35% водный раствор, 0,80 мл, 3,23 ммоль) и 20% Р4(ОН)₂/С (0,050 г) гидрировали при комнатной температуре и атмосферном давлении (баллон Н₂) в течение 4 ч. Раствор затем продували Аг, фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и концентрировали в вакууме. Остаток очищали обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (Рптс5рНсгс С-18, 30x100 мм; СН₃С№Н₂О-0,1 % ТРА) с получением соли ТРА указанного соединения (К)-2-(диметиламино)-2-(2-хлорфенил)уксусной кислоты в виде бесцветного масла (0,290 г, 55%). ¹Н ЯМР (400 МГц, Π)_:()Ι)ί δ 7,59-7,65 (т, 2Н), 7,45-7,53 (т, 2Н), 5,40 (5, 1Н), 2,87 (5, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для СюН₁₂СШО₂: 213; обнаружено: 214 (М+Н)+.

В очень холодный раствор (К)-(2-хлорфенил)глицина (1,00 г, 5,38 ммоль) и №ЮН (0,862 г, 21,6 ммоль) в Н₂О (5,5 мл) добавляли по каплям метилхлорформиат (1,00 мл, 13,5 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 1 ч и затем ее подкисляли добавлением конц. НС1 (2,5 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2х) и объединенную органическую фазу промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (Яа₂8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением указанного соединения (К)-2-(метоксикарбониламино)-2-(2-хлорфенил)уксусной кислоты в виде желто-оранжевой пены (1,31 г, 96%). Ή ЯМР (400 МГц, С1ЫОЫ) δ 7,39-7,43 (т, 2Н), 7,29-7,31 (т, 2Н), 5,69 (5, 1Н), 3,65 (5, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С1оНюСШО₄: 243; обнаружено: 244 (М+Н)+.

Сар-41

сар-41

К суспензии 2-(2-(хлорметил)фенил)уксусной кислоты (2,00 г, 10,8 ммоль) в ТНР (20 мл) добавляли морфолин (1,89 г, 21,7 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и экстрагировали Н₂О (2х). Водную фазу лиофилизировали и остаток очищали хроматографией на силикагеле (ВЮТАОЕ®/ 0-10% метанола-СН₂С1₂) с получением указанного соединения 2-(2-(морфолинометил)фенил)уксусной кислотой в виде бесцветного твердого вещества (2,22 г, 87%). ^!Н ЯМР (400 МГц, Π)_:()Ι)ί δ 7,37-7,44 (т, 3Н), 7,29-7,33 (т, 1Н), 4,24 (5, 2Н), 3,83 (Ьг 5, 4Н), 3,68 (5, 2Н), 3,14 (Ьг 5, 4Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для С₁₃Н₁₇КО₃: 235; обнаружено: 236 (М+Н)+.

- 27 020815

Следующие примеры получали подобным образом с применением описанного для Сар-41 способа.

Сар-42	О	ЬС-МУ: Аналитически рассчитано для СцН^ГУСЬ: 233; обнаружено: 234 (М+Н)⁺.
Сар-43	о	ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для СиНпЫОг: 219; обнаружено: 220 (М+Н)⁺.
Сар-44	Ме \	ЬС-МУ: Аналитически рассчитано для СпН^ИО;: 193; обнаружено: 194(М+Н)⁺.
Сар-45	\ )	ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для СнНгоКгОг: 248; обнаружено: 249 (М+Н)⁺.

Сар-45а

О.л —- Οχ •сольрТ&ОН

Сар-45 а

НМЭ8 (1,85 мл, 8,77 ммоль) добавляли в суспензию р-толуолсульфоната (К)-2-амино-2фенилуксусной кислоты (2,83 г, 8,77 ммоль) в СН₂С1₂ (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли 1 порцию метилизоцианата (0,5 г, 8,77 ммоль), перемешивание продолжали 30 мин. Реакцию гасили добавление Н₂О (5 мл) и полученный осадок фильтровали, промывали Н₂О и н-гексанами, и сушили в вакууме. (К)-2-(3-метилуреидо)-2-фенилуксусную кислоту (1,5 г; 82%) восстанавливали в виде белого твердого вещества и использовали ее без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-к₆) δ м.д. 2,54 (к, I = 4,88 Гц, 3Н) 5,17 (к, I = 7,93 Гц, 1Н) 5,95 Щ, I = 4,48 Гц, 1Н) 6,66 (к, I = 7,93 Гц, 1Н) 7,26-7,38 (т, 5Н) 12,67 (5, 1Н). БС-М8: аналитически рассчитано для С’₀Н₁₂^О₃ 208,08 обнаружено 209,121 (М+Н)+; ВЭЖХ РНЕ^МЕ№Х® С-18 3,0x46 мм, 0 - 100% В в пределах 2 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТРА, В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ТРА, КТ =1,38 мин, индекс гомогенности 90%.

Сар-46

Необходимый продукт получали согласно способу, описанному для Сар-45а. ’Н ЯМР (500 МГц, ОМ8О-к₆) δ м.д. 0,96 (ί, I = 7,17 Гц, 3Н) 2,94-3,05 (т, 2Н) 5,17 (к, I = 7,93 Гц, 1Н) 6,05 (ί, I = 5,19 Гц, 1Н) 6,60 (к, I = 7,63 Гц, 1Н) 7,26-7,38 (т, 5Н) 12,68 (5, 1Н). БС-М8: аналитически рассчитано для С_ПН’^₂О₃222,10 обнаружено 223,15 (М+Н)+. ВЭЖХ ХТЕККА® С-18 3,0x506 мм, 0 -100% В в пределах 2 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,2% Н₃РО₄, В = 10% воды, 90% метанола, 0,2% Н3РО4, КТ = 0,87 мин, индекс гомогенности 90%.

Сар-47

В Сар-47

Стадия 1. (К)-трет-Бутил-2-(3,3-диметилуреидо)-2-фенилацетат.

К перемешанному раствору (К)-трет-бутил-2-амино-2-фенилацетата (1,0 г, 4,10 ммоль) и основания Хунига (1,79 мл, 10,25 ммоль) в ЭМР (40 мл) по каплям в течение 10 мин добавляли диметилкарбамоил- 28 020815 хлорид (0,38 мл, 4,18 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток растворяли в этилацетате. Органический слой промывали Н₂О, 1н. водн. НС1 и насыщенным солевым раствором, сушили (М§ЗО₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. (К)-трет-бутил-2-(3,3-диметилуреидо)-2фенилацетат получали в виде белого твердого вещества (0,86 г; 75%) и использовали без дополнительной очистки. 'Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 1,33 (8, 9Н) 2,82 (8, 6Н) 5,17 (б, 1 = 7,63 Гц, 1Н) 6,55 (б, 1 = 7,32 Гц, 1Н) 7,24-7,41 (т, 5Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С1₅Н₂₂^О₃ 278,16, обнаружено 279,23 (М+Н)+; ВЭЖХ РНЕNΟМЕNЕX® Ьииа С-18 4,6x50 мм, 0-100% В в пределах 4 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТРА, В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ТРА, КТ = 2,26 мин, индекс гомогенности 97%.

Стадия 2. (К)-2-(3,3-Диметилуреидо)-2-фенилуксусная кислота.

К перемешанному раствору ((К)-трет-бутил-2-(3,3-диметилурейдо)-2-фенилацетата (0,86 г, 3,10 ммоль) в СН2С12 (250 мл) добавляли по каплям ТРА (15 мл) и полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Необходимое соединение затем отделяли осаждением из раствора смесью ЕЮАс:гексаны (5:20), фильтровали и сушили при пониженном давлении. (К)-2-(3,3-Диметилуреидо)-2фенилуксусную кислоту выделяли в виде белого твердого вещества (0,59 г, 86%) и использовали без дополнительной очистки. 'Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 2,82 (8, 6Н) 5,22 (б, 1 = 7,32 Гц, 1Н) 6,58 (б, 1 = 7,32 Гц, 1Н) 7,28 (ΐ, 1 = 7,17 Гц, 1Н) 7,33 (ΐ, 1 = 7,32 Гц, 2Н) 7,38-7,43 (т, 2Н) 12,65 (8, 1Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для СпН^^Оу 222,24; обнаружено: 223,21 (М+Н)+ ВЭЖХ ХТЕККА® С-18 3,0x50 мм, 0 - 100% В в пределах 2 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,2% Н₃РО₄, В = 10% воды, 90% метанола, 0,2% Н₃РО₄, КТ = 0,75 мин, индекс гомогенности 93%.

Сар-48

Стадия 1. (К)-трет-Бутил-2-(3-циклопентилуреидо)-2-фенилацетат.

К перемешанному раствору гидрохлорида (К)-2-амино-2-фенилуксусной кислоты (1,0 г, 4,10 ммоль) и основания Хунига (1,0 мл, 6,15 ммоль) в ЭМР (15 мл) добавляли по каплям циклопентилизоцианат (0,46 мл, 4,10 ммоль) и в течение 10 мин. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток поглощали этилацетатом. Органический слой промывали Н₂О и насыщенным солевым раствором, сушили (М§ЗО₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. (К)-трет-Бутил-2-(3циклопентилуреидо)-2-фенилацетат получали в виде мутного масла (1,32 г; 100 %) и использовали без дополнительной очистки. 'ΐ I ЯМР (500 МГц, СЭ₃С1-Э) δ м.д. 1,50-1,57 (т, 2Н) 1,58-1,66 (т, 2Н) 1,87-1,97 (т, 2Н) 3,89-3,98 (т, 1Н) 5,37 (8, 1Н) 7,26-7,38 (т, 5Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С1₈Н₂₆^О₃318,19, обнаружено 319,21 (М+Н)+; ВЭЖХ ХТЕККА® С-18 3,0x50 мм, 0 - 100% В в пределах 4 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,1% ТРА, В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ТРА, КТ = 2,82 мин, индекс гомогенности 96%.

Стадия 2. (К)-2-(3-Циклопентилуреидо)-2-фенилуксусная кислота. К перемешанному раствору (К)трет-бутил-2-(3-циклопентилуреидо)-2-фенилацетата (1,31 г, 4,10 ммоль) в СН₂С1₂ (25 мл) добавляли по каплям ТРА (4 мл) и триэтилсилан (1,64 мл; 10,3 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Летучие компоненты удаляли при пониженном давлении и неочищенный продукт перекристаллизовывали в этилацетате/пентанах с получением (К)-2-(3-циклопентилуреидо)-2-фенилуксусной кислоты в виде белого твердого вещества (0,69 г, 64%). ¹Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 1,17-1,35 (т, 2Н) 1,42-1,52 (т, 2Н) 1,53-1,64 (т, 2Н) 1,67-1,80 (т, 2Н) 3,75-3,89 (т, 1Н) 5,17 (б, 1 = 7,93 Гц, 1Н) 6,12 (б, 1 = 7,32 Гц, 1Н) 6,48 (б, 1 = 7,93 Гц, 1Н) 7,24-7,40 (т, 5Н) 12,73 (8, 1Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С1₄Н₁₈^О₃: 262,31; обнаружено: 263,15 (М+Н)+. ВЭЖХ ХТЕККА® С-18 3,0x50 мм, 0 - 100% В в пределах 2 мин, время удержания 1 мин, А = 90% воды, 10% метанола, 0,2% Н₃РО₄, В = 10% воды, 90% метанола, 0,2% Н₃РО₄, КТ = 1,24 мин, индекс гомогенности 100%.

Сар-49

сар-49

К перемешанному раствору 2-(бензиламино)уксусной кислоты (2,0 г, 12,1 ммоль) в муравьиной кислоте (91 мл) добавляли формальдегид (6,94 мл, 93,2 ммоль). Через пять часов при 70°С, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении до 20 мл и осаждали белое твердое вещество. После- 29 020815 дующей фильтрацией собирали маточные растворы и дополнительно концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Очисткой обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (ΧΤΕΚΚΑ® 30x100 мм, определяли при 220 нм, скорость потока 35 мл/мин, 0 - 35% В в пределах 8 мин; А = 90% воды, 10% метанола, 0,1% ΤΡΑ, В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ΤΡΑ) получали указанное соединение 2-(бензил(метил)амино)уксусную кислоту в форме ее соли ΤΡΑ (723 мг, 33%) в виде бесцветного воска. Ή ЯМР (300 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ м.д. 2,75 (5, 3Η) 4,04 (δ, 2Η) 4,34 (δ, 2Η) 7,29-7,68 (т, 5Η). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для: 0₀Η₁₃ΝΟ₂ 179,09; обнаружено: 180,20 (Μ+Η)+.

Сар-50

К перемешанному раствору 3-метил-2-(метиламино)бутановой кислоты (0,50 г, 3,81 ммоль) в воде (30 мл) добавляли Ι<Χ.Ό₃ (2,63 г, 19,1 ммоль) и бензилхлорид (1,32 г, 11,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 18 ч. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (30 млх2), и водный слой концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (ΧΤΕΚΚΑ® 30x100 мм, определяли при 220 нм, скорость потока 40 мл/мин, 20-80% В в пределах 6 мин; А = 90% воды, 10% метанола, 0,1% ΤΡΑ, В = 10% воды, 90% метанола, 0,1% ΤΡΑ) с получением соли ΤΡΑ 2(бензил(метил)амино)-3-метилбутановой кислоты, (126 мг, 19%) в виде бесцветного воска. ¹Η ЯМР (500 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ м.д. 0,98 (ά, 3Η) 1,07 (б, 3Η) 2,33-2,48 (т, 1Η) 2,54-2,78 (т, 3Η) 3,69 (5, 1Η) 4,24 (5, 2Η) 7,29-7,65 (т, 5Η). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для: 0₃Η₁₉ΝΟ₂ 221,14; обнаружено: 222,28 (М+Ηβ.

^)-2-(Метоксикарбониламино)-3 -метилбутановая кислота Ν;·^.Ό₃ (1,83 г, 17,2 ммоль) добавляли в ΝαΟΗ (33 мл 1Μ/Η₂Ο, 33 ммоль) раствор Ь-валина (3,9 г,

33,29 ммоль) и полученный раствор охлаждали на бане с водой и льдом. Метилхлорформиат (2,8 мл, 36,1 ммоль) добавляли по каплям в течение 15 мин, охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 3,25 ч. Реакционную смесь промывали эфиром (50 мл, 3х) и водную фазу охлаждали на бане с водой и льдом и подкисляли концентрированной Η0 до области ρΗ 1-2 и экстрагировали ΟΗ₂0₂ (50 мл, 3х). Органическую фазу сушили (Μ§δΟ₄) и выпаривали в вакууме с получением Сар-51 в виде белого твердого вещества (6 г). 'Η ЯМР для доминантного ротамера (Ι)ΜδΟ-ίΙ... δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 12,54 (δ, 1Η), 7,33 (б, ί = 8,6, 1Η), 3,84 (бб, ί = 8,4, 6,0, 1Η), 3,54 (δ, 3Η), 2,03 (т, 1Η), 0,87 (т, 6Η). ΗΚΜδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ С7Η1₄NΟ₄: 176,0923; обнаружено 176,0922.

Сар-51 (альтернативный путь)

^)-2-(Метоксикарбониламино)-3 -метилбутановая кислота

ΌΙΕΑ (137,5 мл, 0,766 моль) добавляли в суспензию гидрохлорида (Я)-трет-бутил-2-амино-3метилбутаноата (75,0 г, 0,357 моль) в ΤΗΡ (900 мл) и смесь охлаждали до 0°С (баня лед/вода). Метилхлорформиат (29,0 мл, 0,375 моль) добавляли по каплям в течение 45 мин, охлаждающую баню удаляли и гетерогенную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 3 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток разделяли между ΕίΟΑс и водой (каждого по 1 л). Органический слой промывали Η₂Ο (1 л) и насыщенным солевым раствором (1 л), сушили (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество пропускали через слой силикагеля (1 кг) с элюированием гексанами (4 л) и 15:85 ΕίΟΑс/гексанов (4 л) с получением (Я)-трет-бутил2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутаноата в виде прозрачного масла (82,0 г, выход 99%). 'Η ЯМР (500 МГц, ΟΜδΟ-б... δ = 2,5 м.д.) 7,34 (б, ί = 8,6, 1 Η), 3,77 (бб, ί = 8,6, 6,1, 1 Η), 3,53 (δ, 3 Η), 1,94 -2,05 (т, 1 Η), 1,39 (δ, 9 Η), 0,83-0,92 (т, 6 Η). ¹³С-ЯМР (126 МГц, ΌΜδΟ-б^ δ = 39,2 м.д.) 170,92, 156,84, 80,38, 60,00, 51,34, 29,76, 27,62, 18,92, 17,95. ЬС-Μδ: | Μ>Ν;ι|' 254,17.

Трифторуксусную кислоту (343 мл, 4,62 моль) и Εί₃δίΗ (142 мл, 0,887 моль) последовательно добавляли в раствор ^)-трет-бутил-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутаноата (82,0 г, 0,355 моль) в ΟΗ₂0₂ (675 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 4 ч. Летучий компонент удаляли при пониженном давлении и полученное масло перетирали с петролейным эфиром (600

- 30 020815 мл) с получением белого твердого вещества, которое фильтровали и промывали гексанами (500 мл) и петролейным эфиром (500 мл). Посредством перекристаллизации из ЕЮАс/петролейный эфир получали Сар-51 в виде белых хлопьевидных кристаллов (54,8 г, выход 88%). МР = 108,5-109,5°С. ¹Н ЯМР (500 МГц, ИМ80^6, δ = 2,5 м.д.) 12,52 (5, 1 Н), 7,31 (ά, 1 = 8,6, 1 Н), 3,83 (άά, 1 = 8,6, 6,1, 1 Н), 3,53 (5, 3 Н), 1,94 - 2,07 (т, 1 Н), 0,86 (άά, 1 = 8,9, 7,0, 6 Н). ¹³С ЯМР (126 МГц, ОМ80Ц6, δ = 39,2 м.д.) 173,30, 156,94, 59,48, 51,37, 29,52, 19,15, 17,98. ЬС-М8: [М+Н]+ = 176,11. Аналитически рассчитано для С₇Н_1;Ц0₄: С, 47,99; Н, 7,48; Ν, 7,99. Обнаружено: С, 48,17; Н, 7,55; Ν, 7,99. Оптическое вращение: [а]_с = -4,16 (12,02 мг/мл; Ме0Н). Оптическая чистота: >99,5% э.и. Примечание: оценку оптической чистоты проводили на производном метилового сложного эфира Сар-51, который получали при стандартном протоколе эстерификации ТМ8СН^ (бензол/Ме0Н). Аналитические условия: колонка, СШКАЬРАК® АЭ-Н (4,6 х250 мм, 5 мкм); растворитель, 95% гептан / 5% ГРА (изократичный); скорость потока, 1 мл/мин; температура, 35°С; УФ-мониторинг при 205 нм. [Примечание: Сар-51 также может быть закуплен у Р1атт.]

Сар-52 (так же, как и Сар-12)

(8)-2-(Метоксикарбониламино)пропановая кислота Сар-52 синтезировали из Ь-аланина согласно методике, описанной для синтеза Сар-51. С целью характеристики порцию неочищенного вещества очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н₂0/метанол/ТРА) с получением Сар-52 в виде бесцветного вязкого масла. ¹Н ЯМР (ИМ80Ц₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 12,49 (Ьг 5, 1Н), 7,43 (ά, 1 = 7,3, 0,88Н), 7,09 (арр Ьг 5, 0,12Н), 3,97 (т, 1Н), 3,53 (5, 3Н), 1,25 (ά, 1 = 7,3, 3Н).

Сар-53 - Сар-64

Сар-53 - Сар-64 получали из соответствующих исходных веществ согласно методике, описанной для синтеза Сар-51 с отмеченными модификациями при их наличии.

Сар	Структура	Данные
Сар-53а: (К) Сар-53Ь: (5) «5)-2- (метоксикарбониламино)бутановая кислота)	Н ? /°γ^Ν-Λοκ	Н ЯМР (ОМЗО-дб, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 6 12,51 (Ьг 5, 1Н), 7,4 «1, ί - 7,9, 0,9Н), 7,06 (арр 8, 0,1Н), 3,86-3,82 (ш, 1Н), 3,53 (а, ЗН), 1,75-1,67 (га, 1Н), 1,62-1,54 (ш, 1Н), 0,88 (ά, I = 7,3, ЗН). КТ = 0,77 минут (Усл. 2); ЬС-М8: Аналитически рассчитано для [М+йаГ Ο,ΗϋΝΝβΟ* : 184,06; обнаружено 184,07. НКМ8 Рассчитано для [М+йаГ СбНпШаОс 184,0586; обнаружено 184,0592.
Сар-54а: (К) Сар-54Ь: (3) ((3)-2-циклопропил-2- (метоксикарбониламино)уксусная кислота)	Н 9 Ύ'υ^^οη	‘Н ЯМР (ОМЗО-(1б, δ = 2,5 м.д., 500 МГц); 3 12,48 (а, 1Н), 7,58 (4, 1 = 7,6, 0,9Н), 7,25 (арр 5, 0,1Н), 3,52 (8, ЗН), 3,36-3,33 (т, 1Н), 1,10-1,01 (т, 1Н), 0,54-0,49 (т, 1Н), 0,46-0,40 (т, 1Н), 0,39-0,35 (т, 1Н), 0,31-0,21 (т, 1Н). НКМ8 Рассчитано для [М+Н]⁺ СХНцКО, 174,0766; обнаружено 174,0771

- 31 020815

Сар-55	Н ? ° Ί	Ή ЯМР (ϋΜδΟ-φ, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,62 (в, 1Н), 7,42 (ά, I = 8,2, 0,9Н), 7,07 (арр 5, 0,1Н), 5,80-5,72 (т, 1Н), 5,10 (ф 1 = 17,1, 1Н), 5,04 (ά, I = 10,4, 1Н), 4,01-3,96 (т, 1Н), 3,53 (в, ЗН), 2,47-2,42 (т, 1Н), 2,35-2,29 (т. 1Н).
Сар-56 (8)-3-метокси-2- (метоксикарбониламино)пропанова я кислота	Η ϋ -°γ^ΝΆοκ ⁰ ч 1	Н ЯМР (РМЗО-а₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,75 (δ, ΙΗ), 7,38 (а, 1 = 8,3, 0,9Н), 6,96 (арр 5, 0,1Н), 4,20-4,16 (т, 1Н), 3,60-3,55 (т, 2Н), 3,54 (5, ЗН), 3,24 (з, ЗН).
Сар-57	н ? /°Υ^νΆοη °	Ή ЯМР (ОМ8О-а«, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,50 (з, 1Н), 8,02 (а, I = 7,7, 0,08Н), 7,40 (а, 1 = 7,9, 0,76Н), 7,19 (ά, 1 = 8,2, 0,07Н), 7,07 (а, 1 = 6,7, 0,09Н), 4,21-4,12 (т, 0,08Н), 4,06-3,97 (т, 0,07Н), 3,96-3,80 (т, О,85Н), 3,53 (з, ЗН), 1,691,51 (т, 2Н), 1,39-1,26 (т, 2Н), 0,85 (1, I = 7,4, ЗН). ЬС (Усл. 2): КТ = 1,39 ЬС-М5: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СтНмЮц : 176,09; обнаружено 176,06.
Сар-58	-°Υ^Κ'··Αοη о ^γ^ΝΗ2 О	’Н ЯМР (ОМЗО-а₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,63 (Ьг 5, 1Н), 7,35 (з,1Н), 7,31 (ф 1 = 8,2, 1Н), 6,92 (з, 1Н), 4,33-4,29 (ш, 1Н), 3,54 (з, ЗН), 2,54(04, I = 15,5,5,4, ιη), 2,43 (аа, 1 = 15,6, 8,0, 1Н). КТ = 0,16 мин (Усл. 2); ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ ^ηΝ₂Ο₅ : 191,07; обнаружено 191,14.
Сар-59а: (К) Сар-59Ь: (5)	н ? ^χ-°Υ^ΝΎ^Λοη о '	Ή ЯМР (ОМЗО-ф, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,49 (Ьг з, 1Н), 7,40 (δ, I = 7,3, 0,89Н), 7,04 (Ьг з, 0,11Н), 4,00-3,95 (т, ЗН), 1,24 (а, ί = 7,3, ЗН), 1,15 (ΐ, 1 = 7,2, ЗН). НКМ8: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СбНиИОц: 162,0766; обнаружено 162,0771.

Сар-60	^н Ц	Неочищенное вещество очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н₂О/МеОН/ТРА) с получением бесцветного вязкого масла, которое кристаллизовали до белого твердого вещества под воздействием высокого вакуума. 'Н ЯМР (РМЗО-сЦ, δ = 2,5 м.д.,400 МГц): δ 12,38 (Ьг з, 1Н), 7,74 (8, 0,82Н), 7,48 (з, 0,18Н), 3,54/3,51 (Ι\νο 8, ЗН), 1,30 (т, 2Н), 0,98 (т, 2Н). НКМ8: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ϋ^ΗιοΝΟα: 160,0610; обнаружено 160,0604.
Сар-61	Н ? о ' ⁴	Ή ямр (омзо-ф, δ = 2,5 м.д„ 400 МГц): δ 12,27 (Ьг 5, 1Н), 7,40 (Ьг з, 1Н), 3,50 (з, ЗН), 1,32 (5, 6Н). НКМЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СбНиИОц: 162,0766; обнаружено 162,0765.
Сар-62	-νΆ,Η О	*Н ЯМР (ΏΜδΟ-φ, 6 = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,74 (Ьг з, 1Н), 4,21 (4, 1 = 10,3, 0,6Н), 4,05 (ά, ] = 10,0, 0,4Н), 3,62/3,60 (два синглета, ЗН), 3,0 (8, ЗН), 2,14-2,05 (т, 1Н), 0,95 (ά, I = 6,3, ЗН), 0,81 (ά, I = 6,6, ЗН). ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М-Н]' СвНиМЭд: 188,09; обнаружено 188,05.
Сар-63	Н н Ύ4	[Примечание: реакцию оставляли проходить более длительное время, чем было отмечено для общей методики] Ή ЯМР (ОМ8Оёб, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,21 (Ьг 8, 1Н), 7,42 (Ьг 8, 1Н), 3,50 (5, ЗН), 2,02-1,85 (т, 4Н), 1,66-1,58 (т, 4Н). ЬСМЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺С₈Н1₄Ж>₄: 188,09; обнаружено 188,19.

- 32 020815

Сар-64

н ί

[Примечание: реакцию оставляли проходить более длительное время, чем было отмечено для общей методики] ^!Н ЯМР (ΌΜ5006, б = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,35 (Ьг 8, 1Н), 7,77 (8, 0,82Н), 7,56/7,52 (перекрытый Ьг 8, 0,18Н), 3,50 (8, ЗН), 2,472,40 (т, 2Н), 2,14-2,07 (т, 2Н), 1,93-1,82 (т,2Н).

^°_Τ ^ν·Αη ° Α,η

Сар-65

Метилхлорформиат (0,65 мл, 8,39 ммоль) добавляли по каплям в течение 5 мин в охлажденную (лед-вода) смесь Ыа₂СО₃ (0,449 г, 4,23 ммоль), ЫаОН (8,2 мл 1М/Н₂О, 8,2 ммоль) и (З)-2-амино-3гидрокси-3-метилбутановой кислоты (1,04 г, 7,81 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин, затем охлаждающую баню удаляли и продолжали перемешивать дополнительно 3,75 ч. Реакционную смесь промывали СН₂С1₂, водную фазу охлаждали на бане с водой и льдом и подкисляли концентрированной НС1 до области рН 1-2. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток поглощали смесью 2:1 МеОН/СН₂С1₂ (15 мл) и фильтровали и фильтрат упаривали на ротационном вакуумном испарителе с получением Сар-65 в виде белой, полувязкой пены (1,236 г). ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆. δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 6,94 (б, Σ = 8,5, 0,9 Н), 6,53 (Ьг 5, 0,1Н), 3,89 (б, Σ = 8,8, 1Н), 2,94 (5, 3Н), 1,15 (5, 3Н), 1,13 (5, 3Н).

Сар-66 и Сар-67 получали из соответствующих коммерчески доступных исходных веществ с использованием описанной для синтеза Сар-65 методикой.

Сар-66

Ή ЯМР ЩМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 12,58 (Ьг 5, 1Н), 7,07 (б, Σ = 8,3, 0,13Н), 6,81 (б, Σ = 8,8, 0,67Н), 4,10-4,02 (т, 1,15Н), 3,91 (бб, Σ = 9,1, 3,5, 0,85Н), 3,56 (5, 3Н), 1,09 (б, Σ = 6,2, 3Н). [Примечание: были отмечены только доминантные сигналы ΝΉ].

Ή ЯМР ЩМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,51 (Ьг 5, 1Н), 7,25 (б, Σ = 8,4, 0,75Н), 7,12 (Ьг б, Σ = 0,4, 0,05Н), 6,86 (Ьг 5, 0,08Н), 3,95-3,85 (т, 2Н), 3,54 (5, 3Н), 1,08 (б, Σ = 6,3, 3Н). [Примечание: были отмечены только доминантные сигналы ΝΉ].

Сар-68

Метилхлорформиат (0,38 мл, 4,9 ммоль) добавляли по каплям к смеси 1 н №ГОН (вод.) (9,0 мл, 9,0 ммоль), 1М NаНСО₃ (вод.) (9,0 мл, 9,0 моль), β-бензилового сложного эфира Ь-аспарагиновой кислоты (1,0 г, 4,5 ммоль) и диоксана (9 мл). Реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды в течение 3 ч и затем промывали этилацетатом (50 мл, 3х). Водный слой подкисляли 12 н НС1 до рН ~ 1-2 и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (№₂ЗО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Сар-68 в виде светло-желтого масла (1,37 г; масса выше теоретического выхода, и продукт использовали без дополнительной очистки). ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆. δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 12,88 (Ьг 5, 1Н), 7,55 (б, ί = 8,5, 1Н), 7,40-7,32 (т, 5Н), 5,13 (б, Σ = 12,8, 1Н), 5,10 (б, Σ = 12,9, 1Н), 4,42-4,38 (т, 1Н), 3,55 (5, 3Н), 2,87 (бб, Σ = 16,2, 5,5, 1Н), 2,71 (бб, ί = 16,2, 8,3, 1Н). ЬС (усл. 2): КТ = 1,90 мин; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СвН^О^ 282,10; обнаружено 282,12.

Сар-69а и Сар-69Ь

С<Сар-69а: (Р?)-энантиомер С,-Сар-69Ь: (8)-энантиомер

- 33 020815

ЫаСМВНз (2,416 г, 36,5 ммоль) добавляли отдельными порциями в охлажденную (~15°С) воду (17 мл)^еОН (10 мл) раствор аланина (1,338 г, 15,0 ммоль). Через несколько минут по каплям добавляли ацетальдегид (4,0 мл, 71,3 ммоль) в течение 4 мин, охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 6 ч. Добавляли дополнительное количество ацетальдегида (4,0 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. В реакционную смесь медленно добавляли концентрированную НС1, пока рН не достигло ~1,5, и полученную смесь нагревали в течение 1 ч при 40°С. Большее количество летучего компонента удаляли в вакууме и остаток очищали ионообменной смолой ЭОХУЕХ®® 50\νΧ8-100 (колонку промывали водой и соединение элюировали разбавленным ХН₄ОН, полученным смешиванием 18 мл ХН₄ОН и 282 мл воды) с получением Сар-69 (2,0 г) в виде грязно-белого мягкого гигроскопичного твердого вещества. ¹Н ЯМР (^ΜδО-6₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 3,44 (φ I = 7,1, 1Н), 2,99-2,90 (т, 2Н), 2,89-2,80 (т, 2Н), 1,23 (6, I = 7,1, 3Н), 1,13 (ΐ, I = 7,3, 6Н).

Сар-70 - Сар-74х

Сар-70 - Сар-74х получали согласно описанным для синтеза Сар-69 методикам с применением соответствующих исходных веществ.

Сар-70а: (К) Сар-70Ь: (8)	о	Ή ЯМР (ϋΜδΟ-ύβ, 5 = 2,5 м.д, 400 МГц): δ 3,42 (η, I = 7,1, 1Н), 2,68-2,60 (т, 4Н), 1,53-1,44 (т, 4Н), 1,19 (ά, 1 = 7,3, ЗН), 0,85 (1, ί = 7,5, 6Н). ЬСМ8: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺С/НгоМСТ: 174,15; обнаружено 174,13.
Сар-71а: (К) Сар-71Ь: (8)	~-ι о	'Н ЯМР (ОМ80-06, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 3,183,14 (т, 1Н), 2,84-2,77 (т, 2Н), 2,76-2,68 (т, 2Н), 1,69-1,54 (т, 2Н), 1,05 (ζ 1 = 7,2, 6Н), 0,91 (1, 1 = 7,3, ЗН). ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ГМ+Н1⁺ ΟβΗ^ΝΟί : 160,13; обнаружено 160,06.
Сар-72	-η ° <\л_он	Ή ЯМР (ОМЗО-06, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 2,772,66 (т, ЗН), 2,39-2,31 (т, 2Н), 1,94-1,85 (т, 1Н), 0,98 (ΐ, ί - 7,1, 6Н), 0,91 (ά, I = 6,5, ЗН), 0,85 (ά, 1 = 6,5, ЗН). ЬС-М5: Аналитически рассчитано для [М+НГ С₉Н₂₀МО,: 174,15; обнаружено 174,15.

Сар-73	V О ^ν_ΟΗ ^чо 1	‘Н ЯМР (ОМ80-а₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 9,5 (Ьг а, 1Н), 3,77 (аа, 1 = 10,8, 4,1,1Н), 3,69-3,61 (га, 2Н), 3,26 (а, ЗН), 2,99-2,88 (т, 4Н), 1,13 (1,1 = 7,2, 6Н).
Сар-74	νη₂	’Н ЯМР (ОМ8О-4₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 6 7,54 (а, 1Н), 6,89 (а, 1Н), 3,81 (ί, 1 = 6,6, к,1Н), 2,822,71 (т, 4Н), 2,63 (аа, ь = 15,6,7,0,1Н), 2,36 (аа, 1 = 15,4, 6,3, 1Н), 1,09 (1, 1 = 7,2, 6Н). КТ = 0,125 минут (Усл. 2); ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СвНп^Оз : 189,12; обнаружено 189,13.
Сар-74х	Ά ° ήΑ»	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺СюНггЫОг: 188,17; обнаружено 188,21

Сар-75

Сар-75, стадия а

№1ВН₃СХ (1,6 г, 25,5 ммоль) добавляли в охлажденную (баня лед/вода) воду (25 мл)/метанольный (15 мл) раствор Н-Э^ег-ОВ/1 НС1 (2,0 г, 8,6 ммоль). Ацетальдегид добавляли по каплям в течение 5 мин (1,5 мл, 12,5 ммоль), охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 2 ч. Реакцию осторожно гасили 12н. НС1 и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в воде и очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ ^еОН^^/ТРА) с получением соли ТРА (К)бензил-2-(диэтиламино)-3-гидроксипропаноата в виде бесцветного вязкого масла (1,9 г). ¹Н ЯМР (^ΜδО-6₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): δ 9,73 (Ьг 5, 1Н), 7,52-7,36 (т, 5Н), 5,32 (6, I = 12,2, 1Н), 5,27 (6, I =

- 34 020815

12,5, 1Н), 4,54-4,32 (т, 1Н), 4,05-3,97 (т, 2Н), 3,43-3,21 (т, 4Н), 1,23 (ΐ, 1 = 7,2, 6Н). ЬС-М8 (Усл. 2): КТ = 1,38 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+С1₄Н₂₂NО₂: 252,16; обнаружено 252,19.

Сар-75 №Н (0,0727 г, 1,82 ммоль, 60%) добавляли в охлажденный (лед-вода) ТНР (3,0 мл) раствор соли ТРА (К)-бензил-2-(диэтиламино)-3-гидроксипропаноат (0,3019 г, 0,8264 ммоль), полученный выше, и смесь перемешивали в течение 15 мин. Добавляли метилйодид (56 мкл, 0,90 ммоль) и продолжали перемешивать в течение 18 ч, при этом оставляли баню оттаивать до условий окружающей среды. Реакцию гасили водой и загружали в предварительно обусловленный картридж МСХ (6 г) с МеОН, и промывали метанолом, затем соединением при элюировании 2н ЮН₃/метанолом. Путем удаления летучего компонента в вакууме получали Сар-75, загрязненный (К)-2-(диэтиламино)-3-гидроксипропановой кислотой, в виде желтого полутвердого вещества (100 мг). Продукт использовали без дополнительной очистки.

Сар-76 н ?

Ύ-Λοη

X №СЮВН₃ (1,60 г, 24,2 ммоль) добавляли отдельными порциями в охлажденную (~15°С) воду/МеОН (каждого 12 мл) раствор (8)-4-амино-2-(трет-бутоксикарбониламино) бутановой кислоты (2,17 г, 9,94 ммоль). Через несколько минут по каплям добавляли ацетальдегид (2,7 мл, 48,1 ммоль) в течение 2 мин, охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 3,5 ч. Добавляли дополнительное количество ацетальдегида (2,7 мл, 48,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 20,5 ч. Большую часть МеОН компонента удаляли в вакууме и оставшуюся смесь обрабатывали концентрированной НС1, пока ее рН не достигло ~ 1,0, и затем нагревали в течение 2 ч при 40°С. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток обрабатывали 4 М НС1/диоксаном (20 мл) и перемешивали при условиях окружающей среды при 7,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали ионообменной смолой ЭОАЕХ® 50АХ8-100 (колонку промывали водой и соединение элюировали разбавленным ЮН₄ОН, полученным из 18 мл ЮН₄ОН и 282 мл воды) с получением промежуточного соединения (8)-2-амино-4-(диэтиламино)бутановой кислоты в виде грязнобелого твердого вещества (1,73 г). Метилхлорформиат (0,36 мл, 4,65 ммоль) добавляли по каплям в течение 11 мин в охлажденную (лед-вода) смесь №-ьСО₃ (0,243 г, 2,29 ммоль), №ЮН (4,6 мл 1М/Н₂О, 4,6 ммоль) и вышеуказанного продукта (802,4 мг). Реакционную смесь перемешивали в течение 55 мин и затем охлаждающую баню удаляли и продолжали перемешивать дополнительных 5,25 ч. Реакционную смесь разбавляли равным объемом воды и промывали СН₂С1₂ (30 мл, 2х), и водную фазу охлаждали на бане с водой и льдом и подкисляли концентрированной НС1 до области рН 2. Летучий компонент затем удаляли в вакууме и неочищенное вещество высвободили смолой МСХ (6,0 г; колонку промывали водой и образец элюировали 2,0 М ЮН₃/МеОН) с получением неочищенного Сар-76 в виде грязно-белого твердого вещества (704 мг). ^!Н ЯМР (МеОН<, δ = 3,29 м.д., 400 МГц): δ 3,99 (άά, 1 = 7,5, 4,7, 1Н), 3,62 (5, 3Н), 3,25-3,06 (т, 6Н), 2,18-2,09 (т, 1Н), 2,04-1,96 (т, 1Н), 1,28 (ΐ, 1 = 7,3, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СюН₂₁^О₄: 233,15; обнаружено 233,24.

Сар-77а и Сар-77Ь Ιί^ι о

С Сар-77а: энантиомер-1 С Сар-77Ь: энантиомер-2

Синтез Сар-77 проводили описанной для Сар-7 методикой с применением 7-азабицикло[2,2,1] гептана для стадии замещения 8Ν₂, и с выполнением стереоизомерного разделения промежуточного соединения бензил-2-(7-азабицикло[2,2,1]гептан-7-ил)-2-фенилацетата с применением следующего условия: промежуточное соединение (303,7 мг) растворяли в этаноле, и полученный раствор вводили в колонку для хиральной ВЭЖХ (СЫгаее1 ΛΌ-Н колонка, 30x250 мм, 5 мкм) с элюированием 90% СО₂-10% ЕЮН при 70 мл/мин и температуре 35°С с получением 124,5 мг стереоизомера-1 и 133,8 мг стереоизомера-2. Эти бензиловые сложные эфиры гидрогенолизировали согласно методике получения Сар-7 с получением Сар-77: ^!Н ЯМР (ПМ8О^₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 7,55 (т, 2Н), 7,38-7,30 (т, 3Н), 4,16 (5, 1Н), 3,54 (арр Ьг 5, 2Н), 2,08-1,88 (т, 4 Н), 1,57-1,46 (т, 4Н). ЬС (Усл. 1): КТ = 0,67 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₄Н₁₈КО₂: 232,13; обнаружено 232,18. НКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СПАСЕ: 232,1338; обнаружено 232,1340.

- 35 020815

УОВН₃ (0,5828 г, 9,27 ммоль) добавляли в смесь соли НС1 (К)-2-(этиламино)-2-фенилуксусной кислоты (промежуточное соединение в синтезе Сар-3; 0,9923 мг, 4,60 ммоль) и (1-этоксициклопропокси) триметилсилана (1,640 г, 9,40 ммоль) в МеОН (10 мл) и полугетерогенную смесь нагревали при 50°С на масляной бане в течение 20 ч. Добавляли большее количество (1-этоксициклопропокси)триметилсилана (150 мг, 0,86 ммоль) и NаСNВНз (52 мг, 0,827 ммоль) и реакционную смесь нагревали в течение дополнительных 3,5 ч. Затем ее оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды и подкисляли до области рН ~2 концентрированной НС1, смесь фильтровали и фильтрат упаривали на ротационном вакуумном испарителе. Полученное неочищенное вещество поглощали и-РгОН (6 мл) и нагревали до выполненного растворения и нерастворенную часть отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме. Приблизительно 1/3 полученного неочищенного вещества очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н₂О/МеОН/ТРА) с получением соли ТРА Сар-78 в виде бесцветного вязкого масла (353 мг). ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц; после Э₂О обмена): δ 7,56-7,49 (т, 5Н), 5,35 (З, 1Н), 3,35 (т, 1Н), 3,06 (арр Ьг 8, 1Н), 2,66 (т, 1Н), 1,26 (ΐ, I = 7,3, 3Н), 0,92 (т, 1Н), 0,83-0,44 (т, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 0,64 мин; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₃Н^О₂: 220,13; обнаружено 220,21. НКМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₃Н^О₂: 220,1338; обнаружено 220,1343.

Сар-79 н 9

-°Υ^ν·Λοη

Озон барботировали через охлажденный (-78°С) СН2С12 (5,0 мл) раствор Сар-55 (369 мг, 2,13 ммоль) приблизительно 50 мин, пока реакционная смесь не стала слегка голубого цвета. Добавляли Ме₂З (10 капель пипеткой) и реакционную смесь перемешивали в течение 35 мин. Баню с -78°С заменили баней с -10°С и продолжали перемешивать дополнительно 30 мин и затем летучий компонент удаляли в вакууме с получением бесцветного вязкого масла.

NаВНзСN (149 мг, 2,25 ммоль) добавляли в раствор МеОН (5,0 мл) вышеуказанного неочищенного вещества и морфолина (500 мкл, 5,72 ммоль) и смесь перемешивали при условиях окружающей среды в течение 4 ч. Ее охлаждали до температуры ледяной воды, и обрабатывали концентрированной НС1 до доведения его рН до -2,0 и затем перемешивали в течение 2,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали комбинацией смолы МСХ (промывочный МеОН; элюирование 2,0н. NНз/МеΟН) и обращенно-фазовой ВЭЖХ (Н2О/МеОН/ТРА) с получением Сар-79, содержащего неизвестное количество морфолина.

Для потребления морфолинового загрязнителя вышеуказанное вещество растворяли в СН₂С1₂ (1,5 мл) и обрабатывали ЕΐзN (0,27 мл, 1,94 ммоль) с последующим добавлением уксусного ангидрида (0,10 мл, 1,06 ммоль) и перемешивали при условиях окружающей среды в течение 18 ч. Добавляли ТНР (1,0 мл) и Н₂О (0,5 мл) и перемешивали в течение 1,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме, и полученный остаток пропускали через смолу МСХ (промывочный МеОН; элюирование 2,0 н NНз/МеΟН) с получением неочищенного Сар-79 в виде коричневого вязкого масла, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

Сар-80а и Сар-80Ь о

Сар-бОа: 3/3-диастереомер Сар-бОЬ: 8/К-диастереомер

ЗОС1₂ (6,60 мл, 90,5 ммоль) добавляли по каплям в течение 15 мин в охлажденную (лед-вода) смесь (З)-3-амино-4-(бензилокси)-4-оксобутановой кислоты (10,04 г, 44,98 ммоль) и МеОН (300 мл), охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 29 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток осторожно разделяли между ЕЮАс (150 мл) и насыщенным раствором №-1НСО₃,. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (150 мл, 2х) и объединенную органическую фазу сушили (М§ЗО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением (З)-1-бензил 4-метил-2-аминосукцината в виде бесцветного масла (9,706 г). ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 7,40-7,32 (т, 5Н), 5,11 (8, 2Н), 3,72 (арр ΐ, I = 6,6, 1Н), 3,55 (8, 3Н), 2,68 (бб, I = 15,9, 6,3, 1Н), 2,58 (бб, I = 15,9, 6,8, 1Н), 1,96 (8, 2Н). ЬС (усл. 1): КТ = 0,90 мин; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н^О₄: 238,11; обнаружено 238,22.

РЬ^О₃)₂ (6,06 г, 18,3 ммоль) добавляли в течение 1 мин в СН₂С1₂ (80 мл) раствор (З)-1-бензил 4метил-2-аминосукцината (4,50 г, 19,0 ммоль), 9-бром-9-фенил-9Н-флуорена (6,44 г, 20,0 ммоль) и ЕΐзN (3,0 мл, 21,5 ммоль) и гетерогенную смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 48 ч. Смесь фильтровали и фильтрат обрабатывали М§ЗО₄ и фильтровали снова и готовый фильтрат концентрировали. Полученное неочищенное вещество подвергали ВЮТАОЕ® очистке (350 г силикагеля, элю- 36 020815 ирование СН2С12) с получением (8)-1-бензил 4-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)сукцината в виде высоковязкого бесцветного масла (7,93 г). ¹Н ЯМР (ЭМ8О-4₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): δ 7,82 (т, 2Н), 7,39-7,13 (т, 16Н), 4,71 (4, 1 = 12,4, 1Н), 4,51 (4, 1 = 12,6, 1Н), 3,78 (4, 1 = 9,1, ΝΉ), 3,50 (5, 3Н), 2,99 (т, 1Н), 2,50-2,41 (т, 2Н, частично перекрыто растворителем). ЬС (усл. 1): КТ = 2,16 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С_3!Н₂^О₄: 478,20; обнаружено 478,19.

ЫНМ08 (9,2 мл 1,0 М/ТНР, 9,2 ммоль) добавляли по каплям в течение 10 мин в охлажденный (78°С) ТНР (50 мл) раствор (8)-1-бензил 4-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)сукцината (3,907 г,

8,18 ммоль) и перемешивали в течение ~1 ч. Ме1 (0,57 мл, 9,2 ммоль) добавляли по каплям в течение 8 мин к смеси, и продолжали перемешивать в течение 16,5 ч, при этом охлаждающую баню оставляли оттаивать до комнатной температуры. После гашения насыщенным раствором МН₄С1 (5 мл) большую часть органического компонента удаляли в вакууме и остаток разделяли между СН2С12 (100 мл) и водой (40 мл). Органический слой сушили (Мд8О₄) фильтровали и концентрировали в вакууме и полученное неочищенное вещество очищали ВЮТАОЕ® (350 г силикагеля; 25% ЕЮАс/гексаны) с получением 3,65 г 28/38 и 28/3К диастереомерных смесей 1-бензил-4-метил-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9иламино)сукцината в соотношении 1,0:0,65 (¹Н ЯМР). В данных обстоятельствах стереохимию доминантного изомера не определяли и смесь переносили на следующую стадию без разделения. Неполные данные ¹Н ЯМР (ЭМ8О-4₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): главный диастереомер, δ 4,39 (4, 1 = 12,3, 1Н СН₂), 3,33 (5, 3Н, перекрытие сигналом Н₂О), 3,50 (4, 1 = 10,9, ΝΉ), 1,13 (4, 1 = 7,1, 3Н); второстепенный диастереомер, δ 4,27 (4, 1 = 12,3, 1Н СН₂), 3,76 (4, 1 = 10,9, ΝΉ), 3,64 (5, 3Н), 0,77 (4, 1 = 7,0, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 2,19 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₂Н₃₀ЫО₄: 492,22; обнаружено 492,15.

Диизобутилалюминийгидрид (20,57 мл 1,0 М в гексанах, 20,57 ммоль) добавляли по каплям в течение 10 мин в охлажденный (-78°С) ТНР (120 мл) раствор (28)-1-бензил 4-метил-3-метил-2-(9-фенил-9Нфлуорен-9-иламино)сукцината (3,37 г, 6,86 ммоль), полученный выше, и перемешивали при -78°С в течение 20 ч. Реакционную смесь удаляли из охлаждающей бани, и быстро выливали в ~1М Н₃РО₄/Н₂О (250 мл) с перемешиванием, и смесь экстрагировали эфиром (100 мл, 2х). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Мд8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Получали осажденное на силикагеле неочищенное вещество и подвергали хроматографии (25% ЕЮАс/гексаны; гравитационное элюирование) с получением 1,1 г (28,38)-бензил-4-гидрокси-3-метил-2(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата, загрязненного бензиловым спиртом, в виде бесцветного вязкого масла и (28,3К)-бензил-4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата, содержащего (28,3К) стереоизомер в качестве примеси. Последний образец повторно подвергали тем же условиям очистки колоночной хроматографией с получением 750 мг очищенного вещества в виде белой пены. [Примечание: (28,38) изомер элюируют перед (28,3К) изомером при вышеуказанном условии]. (28,38) изомер: ^!Н ЯМР (ПМ8О-46, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 7,81 (т, 2Н), 7,39-7,08 (т, 16Н), 4,67 (4, 1 = 12,3, 1Н), 4,43 (4, 1 = 12,4, 1Н), 4,21 (арр ΐ, 1 = 5,2, ОН), 3,22 (4, 1 = 10,1, ΝΉ), 3,17 (т, 1Н), 3,08 (т, 1Н), ~2,5 (т, 1Н, перекрытие сигналом растворителя), 1,58 (т, 1Н), 0,88 (4, 1 = 6,8, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 2,00 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С31Н30ЫО3: 464,45; обнаружено 464,22. (28, 3К) изомер: ^!Н ЯМР (ЭМ8О-46, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 7,81 (4, 1 = 7,5, 2Н), 7,39-7,10 (т, 16Н), 4,63 (4, 1 = 12,1, 1Н), 4,50 (арр ΐ, 1 = 4,9, 1Н), 4,32 (4, 1 = 12,1, 1Н), 3,59-3,53 (т, 2Н), 3,23 (т, 1Н), 2,44 (44, 1 = 9,0, 8,3, 1Н), 1,70 (т, 1Н), 0,57 (4, 1 = 6,8, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 1,92 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃1Н₃₀ЫО₃: 464,45; обнаружено 464,52. Относительные стереохимические назначения продуктов восстановления ΌΙΒΆΡ были сделаны на основе изучений ЫОЕ, проводимых на лактоновых производных, полученных их каждого изомера с использованием следующего протокола: ЫНМЭ8 (50 мкл 1,0 М/ТНР, 0,05 ммоль) добавляли в охлажденный (лед-вода) ТНР (2,0 мл) раствор (28,38)-бензил-4гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата (62,7 мг, 0,135 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при подобной температуре в течение ~2 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток разделяли между СН₂С1₂ (30 мл), водой (20 мл) и насыщенным водным раствором МН₄С1 (1 мл). Органический слой сушили (Мд8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме, и полученное неочищенное вещество подвергали очистке В1ОТАОЕ® (40 г силикагеля; 10-15% ЕЮАс/гексаны) с получением (38,48)-4-метил-3-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)дигидрофуран-2(3Н)-она в виде бесцветной пленки твердого вещества (28,1 мг). (28,3К)-бензил 4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9иламино)бутаноат обрабатывали подобно (38,4К)-4-метил-3-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино) дигидрофуран-2(3Н)-ону. (38,48)-лактоновый изомер: ¹Н ЯМР (ЭМ8О-46, δ = 2,5 м.д., 400 МГц), 7,83 (4, 1 = 7,5, 2Н), 7,46-7,17 (т, 11Н), 4,14 (арр!, 1 = 8,3, 1Н), 3,60 (4, 1 = 5,8, ΝΉ), 3,45 (арр ΐ, 1 = 9,2, 1Н), ~2,47 (т, 1Н, частично перекрыто сигналом растворителя), 2,16 (т, 1Н), 0,27 (4, 1 = 6,6, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 1,98 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ С24Н21М№О2: 378,15; обнаружено 378,42. (38,4К)лактоновый изомер: ^!Н ЯМР ЮМ8О-46, δ = 2,5 м.д., 400 МГц), 7,89 (4, 1 = 7,6, 1Н), 7,85 (4, 1 = 7,3, 1Н), 7,46-7,20 (т, 11Н), 3,95 (44, 1 = 9,1, 4,8, 1Н), 3,76 (4, 1 = 8,8, 1Н), 2,96 (4, 1 = 3,0, ΝΉ), 2,92 (44, 1 = 6,8, 3, ЫСН), 1,55 (т, 1Н), 0,97 (4, 1 = 7,0, 3Н). ЬС (усл. 1): КТ = 2,03 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ С₂₄Н₂₁ЫМаО₂: 378,15; обнаружено 378,49.

К СН₂С1₂ (3 мл) раствору (28,38)-бензил-4-гидрокси-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)

- 37 020815 бутаноата (119,5 мг, 0,258 ммоль) добавляли ТВИМ8-С1 (48 мг, 0,312 ммоль) с последующим добавлением имидазола (28,8 мг, 0,423 ммоль) и смесь перемешивали при условиях окружающей среды при 14,25 ч. Реакционную смесь затем разбавляли СН₂С1₂ (30 мл), и промывали водой (15 мл), и органический слой сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали ВЮТАОЕ® (40 г силикагель; 5% ЕЮАс/гексаны) с получением (28,38)-бензил-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата, загрязненного примесями на основе ТВЭМ8. в виде бесцветного вязкого масла (124,4 мг). (28,3К)-бензил-4-гидрокси-3-метил-2-(9фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноат обрабатывали подобно (28,3К)-бензил-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноату. Изомер (28,38)-силилового эфира: ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц), 7,82 (к, I = 4,1, 1Н), 7,80 (к, I = 4,0, 1Н), 7,38-7,07 (т, 16 Н), 4,70 (к, I = 12,4, 1Н), 4,42 (к, I = 12,3, 1Н), 3,28-3,19 (т, 3Н), 2,56 (кк, I = 10,1, 5,5, 1Н), 1,61 (т, 1Н), 0,90 (к, I = 6,8, 3Н), 0,70 (5, 9Н), -0,13 (5, 3Н), -0,16 (5, 3Н). ЬС (Усл. 1, где время обработки было увеличено до 4 мин): КТ = 3,26 мин; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₇Н₄^О₃8г 578,31; обнаружено 578,40. Изомер (28,3К)-силилового эфира: ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц), 7,82 (к, I = 3,0, 1Н), 7,80 (к, I = 3,1, 1Н), 7,39-7,10 (т, 16Н), 4,66 (к, I = 12,4, 1Н), 4,39 (к, I = 12,4, 1Н), 3,61 (кк, I = 9,9, 5,6, 1Н), 3,45 (к, I = 9,5, 1Н), 3,41 (кк, I = 10, 6,2, 1Н), 2,55 (кк, I = 9,5, 7,3, 1Н), 1,74 (т, 1Н), 0,77 (5, 9Н), 0,61 (к, I = 7,1, 3Н), -0,06 (5, 3Н), -0,08 (5, 3Н).

Баллон с водородом присоединяли к смеси (28,38)-бензил-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноата (836 мг, 1,447 ммоль) и 10% Рк/С (213 мг) в ЕЮАс (16 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ~ 21 ч, причем баллон при необходимости подзаряжали Н₂. Реакционную смесь разбавляли СН₂С1₂ и фильтровали через слой диатомитовой земли (СЕЫТЕ®-545), и слой промывали ЕЮАс (200 мл), ЕЮАс/МеОН (1:1 смесь, 200 мл) и МеОН (750 мл). Объединенную органическую фазу концентрировали и осажденное на силикагеле неочищенное вещество получали из полученного неочищенного вещества и подвергали флеш-хроматографии (8:2:1 смесь ЕЮАс/1-РЮН/Н₂О) с получением (28,38)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановой кислоты в виде белого рыхлого твердого вещества (325 мг). (28,3К)-бензил 4-(третбутилдиметилсилилокси)-3-метил-2-(9-фенил-9Н-флуорен-9-иламино)бутаноат разрабатывали подобно (28,3К)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановой кислоте. Изомер (28,38)-аминокислоты: ’Н ЯМР (метанол-к₄, δ = 3,29 м.д., 400 МГц), 3,76 (кк, I = 10,5, 5,2, 1Н), 3,73 (к, I = 3,0, 1Н), 3,67 (кк, I = 10,5, 7,0, 1Н), 2,37 (т, 1Н), 0,97 (к, I = 7,0, 3Н), 0,92 (5, 9Н), 0,10 (5, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С”Н₂^О₃8г 248,17; обнаружено 248,44. Изомер (28,3К)-аминокислоты: ’Н ЯМР (метанол-к₄, δ = 3,29 м.д., 400 МГц), 3,76-3,75 (т, 2Н), 3,60 (к, I = 4,1, 1Н), 2,16 (т, 1Н), 1,06 (к, I = 7,3, 3Н), 0,91 (5, 9Н), 0,09 (5, 6Н). Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С”Н₂^О₃8г 248,17; обнаружено

248,44.

Воду (1 мл) и №ЮН (0,18 мл 1,0 М/Н₂О, 0,18 ммоль) добавляли к смеси (28,38)-2-амино-4-(третбутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановой кислоты (41,9 мг, 0,169 ммоль) и №-ьСО₃ (11,9 мг, 0,112 ммоль) и обрабатывали ультразвуком приблизительно 1 мин до осуществления растворения реагентов. Смесь затем охлаждали на бане со смесью воды и льда, в течение 30 с добавляли метилхлорформиат (0,02 мл, 0,259 ммоль) и продолжали интенсивно перемешивать при подобной температуре в течение 40 мин и затем при температуре окружающей среде в течение 2,7 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (5 мл), охлаждали на бане с водой и льдом и обрабатывали по каплям водным раствором 1,0 н НС1 (-0,23 мл). Смесь дополнительно разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали СН₂С1₂ (15 мл, 2х). Объединенную органическую фазу сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Сар-80а в виде грязно-белого твердого вещества. (28,3К)-2-амино-4-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилбутановую кислоту разрабатывали подобно Сар-80Ь. Сар-80а: ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц), 12,57 (Ьг 5, 1Н), 7,64 (к, I = 8,3, 0,3Н), 7,19 (к, I = 8,8, 0,7Н), 4,44 (кк, I = 8,1, 4,6, 0,3Н), 4,23 (кк, I = 8,7, 4,4, 0,7Н), 3,56/3,53 (два синглета, 3Н), 3,48-3,40 (т, 2Н), 2,22-2,10 (т, 1Н), 0,85 (5, 9Н), ~0,84 (к, 0,9Н, перекрытие сигналом трет-Ви), 0,79 (к, I = 7, 2,1Н), 0,02/0,01/0,00 (три перекрывающих синглета, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]+ СиЩ^ШОЯП 328,16; обнаружено 328,46. Сар-80Ь: ’Н ЯМР (СИС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц), 6,00 (Ьг к, I = 6,8, 1Н), 4,36 (кк, I = 7,1, 3,1, 1Н), 3,87 (кк, I = 10,5, 3,0, 1Н), 3,67 (5, 3Н), 3,58 (кк, I = 10,6, 4,8, 1Н), 2,35 (т, 1Н), 1,03 (к, I = 7,1, 3Н), 0,90 (5, 9Н), 0,08 (5, 6Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]+ СвН^ШО^г 328,16; обнаружено 328,53. Неочищенные продукты использовали без дополнительной очистки.

Сар-81

-аАн о=/ ₃ ^оно—'

Получен согласно описанному у Ра1Ь е1 а1., 8уи1кекс Соттишса1юп5. 23:2839 (1993) протоколу. Сар-82 - Сар-85

Сар-82 - Сар-85 синтезировали из соответствующих исходных веществ описанной для Сар-51 или Сар-13 методикой. Образцы проявляли подобные их стереоизомерам спектральные профили (т.е., Сар-4,

- 38 020815

Сар-13, Сар-51 и Сар-52, соответственно).

Сар-86

ΜβΟ₂0ΗΝ

.....с-у

Ьм_е ^ОН (2δ,3К)-3-Μетокси-2-(метоксикарбониламино)бутановая кислота.

К смеси О-метил-Ь-треонина (3,0 г, 22,55 ммоль), ΝαΟΗ (0,902 г, 22,55 ммоль) в Н₂О (15 мл) добавляли по каплям С1СΟ₂Μе (1,74 мл, 22,55 ммоль) при 0°С. Смесь оставляли перемешиваться в течение 12 ч и подкисляли до ρΗ 1 с применением 1 н ΗΟ. Водную фазу экстрагировали ΕίΟΑс и (2x250 мл) и 10% ΜеΟΗ в ΟΗ₂0₂ (250 мл) и объединенные органические фазы концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла (4,18 г, 97%), которое было достаточной чистоты для применения в последующих стадиях. Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ 4,19 (δ, 1Η), 3,92-3,97 (т, 1Η), 3,66 (δ, 3Η), 1,17 (б, ί = 7,7 Гц, 3Η). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С7Η₁₃NΟ5: 191; обнаружено: 190 (М-Η)^-.

Сар-87

МеО₂СНЬ1

НО он

К смеси Ь-гомосерина (2,0 г, 9,79 ммоль), Ν;·^.Ό₃ (2,08 г, 19,59 ммоль) и Н₂О (15 мл) добавляли по каплям С1СΟ₂Μе (0,76 мл, 9,79 ммоль) при 0°С. Смесь оставляли перемешиваться в течение 48 ч и подкисляли до ρΗ 1 с применением 1 н ΗΟ. Водную фазу экстрагировали ΕίΟΑс и (2x250 мл) и объединенные органические фазы концентрировали в вакууме с получением бесцветного твердого вещества (0,719 г, 28%), которое было достаточной чистоты для применения в последующих стадиях. 'Η ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ 4,23 (бб, ί = 4,5, 9,1 Гц, 1Η), 3,66 (δ, 3Η), 3,43-3,49 (т, 2Η), 2,08-2,14 (т, 1Η), 1,82-1,89 (т, 1Η). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С7Η1₃NΟ5: 191; обнаружено: 192 (Μ+Η)+.

Смесь Ь-валина (1,0 г, 8,54 ммоль), 3-бромпиридина (1,8 мл, 18,7 ммоль), Κ^Ο₃ (2,45 г, 17,7 ммоль) и ΟιΙ (169 мг, 0,887 ммоль) в ΌΜδΟ (10 мл) нагревали при 100°С в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., выливали в Н₂О (прибл. 150 мл) и промывали ΕίΟΑс (х2). Органические слои экстрагировали небольшим количеством Н₂О и объединенные водные фазы подкисляли до прибл. ρΗ 2 посредством 6н. ΗΟ. Объем уменьшали приблизительно до одной третьей и добавляли 20 г катионобменной смолы (δίΓαΙα). Взвесь оставляли отстаиваться в течение 20 мин и загружали на слой катионообменной смолы (δίΓαία) (прибл. 25 к). Слой промывали Η₂Ο (200 мл), ΜеΟΗ (200 мл), а затем ΝΗ₃ (3Μ в ΜеΟΗ, 2x200 мл). Соответствующие фракции концентрировали в вакууме и остаток (прибл. 1,1 г) растворяли в Н₂О, замораживали и лиофилизировали. Указанное соединение получали в виде пены (1,02 г, 62%). 'Η ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-бб) δ 8,00 (δ, Ьг, 1Η), 7,68-7,71 (т, 1Η), 7,01 (δ, Ьг, 1Η), 6,88 (б, ί = 7,5 Гц, 1Η), 5,75 (δ, Ьг, 1Η), 3,54 (δ, 1Η), 2,04 - 2,06 (т, 1Η), 0,95 (б, ί = 6,0 Гц, 3Η), 0,91 (б, ί = 6,6 Гц, 3Η). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для Ο₀Η₁₄Ν₂Ο₂: 194; обнаружено: 195 (М+Щ+.

Смесь Ь-валина (1,0 г, 8,54 ммоль), 5-бромпиримидина (4,03 г, 17,0 ммоль), К₂ТО₃ (2,40 г, 17,4 ммоль) и ΟιΙ (179 мг, 0,94 ммоль) в ΌΜδΟ (10 мл) нагревали при 100°С в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., выливали в Н₂О (прибл. 150 мл) и промывали ΕίΟΑс ^2). Органические слои экстрагировали небольшим количеством Н₂О и объединенные фазы подкисляли до прибл. ρΗ 2 посредством 6н. ΗΟ. Объем уменьшали приблизительно до одной третьей и добавляли 20 г катионообменной смолы (δίΓαία). Взвесь оставляли отстаиваться в течение 20 мин и загружали на слой катионообменной смолы (δίΓαία) (прибл. 25 г). Слой промывали Η₂Ο (200 мл), ΜеΟΗ (200 мл), а затем ΝΗ₃ (3Μ в ΜеΟΗ, 2x200 мл). Соответствующие фракции концентрировали в вакууме и остаток (прибл. 1,1 г) растворяли в Η2Ο, замораживали и лиофилизировали. Указанное соединение получали в виде пены (1,02 г, 62%). При помощи 'Η ЯМР (400 МГц, СОЮО) была показана смесь, содержащая валин, и в которой не были установлены примеси. Вещество использовали так таковое в последующих реакциях. ЬС-Μδ: аналитически

- 39 020815 рассчитано для С₉Н1₃ЩО₂: 195; обнаружено: 196 (М+Н)+.

Сар-90

Сар-90 получали согласно описанному для получения Сар-1 способу. Неочищенное вещество использовали так таковое в последующих стадиях. ЬС-М8: аналитически рассчитано для ^^^ΝΟ^ 193; обнаружено: 192 (М-Н)^-.

Сар-91 - Сар-116

Следующие Сар получали согласно используемому для получения Сар-51 способу, если не указано иное

Сар	Структура	ЬС-М8
Сар-91	ΝΗ0Ο₂Μβ	ЬС-МЗ; Аналитически рассчитано для СцНвИОф: 223; обнаружено: 222 (ΜΗ)’
Сар-92	ИНСО₂Ме	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СцН^ИО^ 223; обнаружено: 222 (Мну.
Сар-93	о ² о- 2=0 о X	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюН^гОф: 224; обнаружено: 225 (М+Н)⁺
Сар-94	о V ΗΝ 0^ Н Т о	ЬС-МЗ; Аналитически рассчитано для СвНпМзО*: 213; обнаружено: 214 (М+Н)⁺.
Сар-95	о А 0 ΝΗ О	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для С1₃Н₁₇ЬЮ+: 251; обнаружено: 250 (Мну.
Сар-96	О '^Ο'^'ΝΗ 0	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для С12Н15ИО«: 237, обнаружено: 236 (ΜΗ)'.
Сар-97	0 >ΑνΗ о ό^Λ“	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СцНезМО-г 201; обнаружено; 200 (Мну.
Сар-98	о /	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СзНиЫОд: 201; обнаружено: 202 (М+Н)⁺.
Сар-99	о Ά« СО₂Н	‘н ЯМР (400 МГц, СИзОИ) δ 3,88 3,94 (т, 1Н), 3,60, 3,61 (5, ЗН), 2,80 (т, 1Н), 2,20 (т 1Н), 1,82 - 1,94 (т, ЗН), 1,45 -1,71 (т, 2Н).
Сар-99а	о '•сАнн ό СО₂Н	¹Н ЯМР (400 МГц, СИзОО) 5 3,88 3,94 (т, 1Н), 3,60, 3,61 (₈, ЗН), 2,80 (т, 1Н), 2,20 (т 1Н), 1,82 - 1,94 (т, ЗН), 1,45- 1,71 (т,2Н).
Сар-100	о 'сАмн о	ЬС-МЗ; Аналитически рассчитано для СиН^О^: 255; обнаружено: 256 (М+Н)⁺.

- 40 020815

Сар-101	О 'сАмн \|А^СО₂Н ό	ЬС-М8: Аналитически рассчитано для СпИпИО#: 223; обнаружено: 222 (ΜΗ)'.
Сар-102	о ^ХОЧн А^созН ό	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СпНнИО*: 223; обнаружено: 222 (ΜΗ)'
Сар-103	о ^ΧΟ^ΝΗ А^СОгН и	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНиИгОг 224; обнаружено: 225 (М+Н)⁺.
Сар-104	ΗΝ—( >—СО₂Н ₀Ц νν ²/°	^ГН ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) б 3,60 (з, ЗН), 3,50 - 3,53 (ш, 1Н), 2,66 - 2,69 и 2,44 - 2,49 (т, 1Н), 1,91 - 2,01 (т, 2Н), 1,62 - 1,74 (т, 4Н), 1,51 - 1,62 (т, 2Н).
Сар-105	ΗΝ·'·^ ^*СО₂Н ° /°	Ή ЯМР (400 МГц, СИзОЬ) δ 3,60 (δ, ЗН), 3,33 - 3,35 (т, 1Н, частично перекрыто растворителем), 2,37 - 2,41 и 2,16 - 2,23 (т, 1Н), 1,94 - 2,01 (т, 4Н), 1,43 - 1,53 (т, 2Н), 1,17 - 1,29 (т, 2Н).
Сар-106	\\|—СО₂Н Получали из цис-4- аминоциклогексанкарбоновой кислоты и ацетальдегида с использованием подобной методикой, описанной для синтеза Сар-2 . Неочищенную соль НС1 пропускали через МСХ (промывочный раствор МеОН/Н₂О/СН₂С1₂; 2 н ЫНз/МеОН элюирование) с получением масла, которое растворяли в СНзС№Н₂О и лиофилизировали с получением коричневого твердого вещества.	^ХН ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 3,16 (ц, I = 7,3 Гц, 4Н), 2,38 - 2,41 (т, 1Н), 2,28 2,31 (т, 2Н), 1,79 - 1,89 (т, 2Н), 1,74 (арр, άάά ί = 3,5, 12,5, 15,9 Гц, 2Н), 1,46 (арр άί I = 4,0, 12,9 Гц, 2Н), 1,26 (ί, 1 = 7,3 Гц, 6Н)
Сар-107	V ΗΝ^Ο^ О	ЬС-М5: Аналитически рассчитано для СзНюЫгОдЗ: 230; обнаружено: 231 (М+Н)⁺.
Сар-108	о о / I	ЬС-М5: Аналитически рассчитано для СиНрИзОд: 303; обнаружено: 304 (М+Н)⁺
Сар-109	о ^Ο^ΝΗ А'ЧОгН	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ϋιοΗπΝίΟδ: 224; обнаружено: 225 (М+Н)⁺.
Сар-110	О ^Ο^ΝΗ <^СО₂Н ά	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНпИгОд: 224; обнаружено: 225 (М+Н)⁺.
Сар-111	О <^СО₂Н ф V⁰ Ме°' х_он	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ϋηΗΐδΝΟβΡ: 333; обнаружено: 334 (М+Н)⁺.
Сар-112	О г^СОгН С-/ ^ΝΗ	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СцНздЫгО*: 262; обнаружено: 263 (М+Н)⁺.
Сар-113	О цАмн А^СОгН ф ОВп	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ^βΗ^ΝΟ?: 329; обнаружено: 330 (М+Н)⁺.

- 41 020815

Сар-114	СО₂Ме Су со₂н	‘Н ЯМР (400 МГц, СПСЬ) δ 4,82 - 4,84 (т, 1Н), 4,00 - 4,05 (т, 2Н), 3,77 (5, ЗН), 2,56 (а, Ьг, 2Н)
Сар-115	ЫНСО^Ме	'Н ЯМР (400 МГц, СОС1з) δ 5,13 (8, Ьг, 1Н), 4,13 (5, Ьг, 1Н), 3,69 (з, ЗН), 2,61 (<3,1 = 5,0 Гц, 2Н), 1,28 (ά, 1 = 9,1 Гц, ЗН).
Сар-116	1ЧНСО_гМе	^ГН ЯМР (400 МГц, С ОСЬ) 6 5,10 (6, 1 = 8,6 Гц, 1Н), 3,74 - 3,83 (т, 1Н), 3,69 (я, ЗН), 2,54 - 2,61 (т, 2Н), 1,88 (яер1,) = 7,0 Гц, 1Н), 0,95 (4,1 = 7,0 Гц, 6Н).

Сар-117-Сар-123

Для получения Сар-117 - Сар-123 из коммерческих ресурсов получали Вос-аминокислоты и снимали защитные группы посредством обработки 25% ТРА в СН₂С1₂. Исходя из ЬС-МЗ, после завершения реакция растворители удаляли в вакууме и соответствующею соль ТРА аминокислоты карбамилировали метилхлорформиатом описанной для Сар-51 методикой.

Сар	Структура	ЬС-МЗ
Сар-117	/	ЬС-М$: Аналитически рассчитано для СпНиИОб: 237; обнаружено: 238 (М+Н)\
Сар-118	/	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНхзйКЦЗ: 243; обнаружено: 244 (М+Н)*
Сар-119	о ^Ο^ΝΗ О \ ³	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СюНвМОбЗ: 243; обнаружено: 244 (М+Н)*.

Сар-120	О >Ανη о γ	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для ΟιοΗηΝΟψδ: 243; обнаружено: 244 (М+Н)⁺.
Сар-121	О Ά4η ^2у^СО₂Н	Ή ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ 4,06 - 4,16 (т, 1Н), 3,63 (5, ЗН), 3,43 (з, 1Н), 2,82 и 2,66 (&, Ьг, 1Н), 1,86 - 2,10 (т, ЗН), 1,64 - 1,76 (т, 2Н), 1,44 - 1,53 (т, 1Н).
Сар-122	О άΑνη Уу.,.СО₂Н	*Н ЯМР профиль подобный профилю его стереоизомера, Сар-121.
Сар-123	О. / У-ΝΗ л-тх О '“Ол >° ⁴⁼⁷ )·ΝΗ ЧАХ X та он	ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для СгН?б^Об: 474; обнаружено: 475 (М+Н)*.

Сар-124

Гидрохлорид Ь-треонин-трет-бутилового сложного эфира карбамилировали согласно методике для Сар-51. Неочищенную реакционную смесь подкисляли 1н. НС1 до рН~1 и смесь экстрагировали ЕЮАс (2x50 мл). Объединенные органические фазы концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла, которое отвердевало при отстаивании. Водный слой концентрировали в вакууме и полученную смесь продукта и неорганических солей перетирали с ЕЮАс-СН₂С1₂-МеОН (1:1:0,1) и затем органическую фазу концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла, которое являлось необходимым продуктом, как показано при помощи ЬС-МЗ. Обе порции объединяли с получением 0,52 г твердого вещества. ^!Н ЯМР (400 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 4,60 (т, 1Н), 4,04 (б, 1 = 5,0 Гц, 1Н), 1,49 (б, 1 = 6,3 Гц, 3Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С5Н7NΟ₄: 145; обнаружено: 146 (М+Н)+.

- 42 020815

К суспензии Рб(ОН)₂, (20%, 100 мг), водного формальдегида (37% масс, 4 мл), уксусной кислоты (0,5 мл) в метаноле (15 мл) добавляли (З)-4-амино-2-(трет-бутоксикарбониламино)бутановую кислоту (1 г, 4,48 ммоль). Реакционную смесь несколько раз продували водородом и перемешивали в течение ночи с водородом из баллона при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через слой диатомитовой земли (СЕЫТЕ®) и летучий компонент удаляли в вакууме. Полученное неочищенное вещество использовали как таковое на следующей стадии. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для СцН₂₂^О₄: 246; обнаружено: 247 (М+Н)+.

МеО₂СНГч СО₂Н сар-126

Сар-126 /х-ЫМе

N Л. С1СО₂Ме, МаНСОз

Эта методика представляет собой модификацию используемой методики с получением Сар-51. К суспензии 3-метил-Ь-гистидина (0,80 г, 4,70 ммоль) в ТНР (10мл) и Н₂О (10 мл) при 0°С добавляли Ν;-ιНСО₃ (0,88 г, 10,5 ммоль). Полученную смесь обрабатывали С1СО₂Ме (0,40 мл, 5,20 ммоль) и смесь оставляли перемешиваться при 0°С. После перемешивания прибл. 2 ч при помощи ЬС-МЗ было показано отсутствие исходных веществ. Реакционную смесь подкисляли до рН 2 при помощи 6 н НС1. Растворители удаляли в вакууме и остаток суспендировали в 20 мл 20% МеОН в СН2С12. Смесь фильтровали и концентрировали с получением светло-желтой пены (1,21 г). При помощи ЬС-МЗ и ¹Н ЯМР показывали, что вещество представляет собой смесь 9:1 метилового сложного эфира и необходимого продукта. Это вещество поглощали ТНР (10 мл) и Н2О (10мл), охлаждали до 0°С и добавляли ЫОН (249,1 мг, 10,4 ммоль). После перемешивания прибл. 1 ч при помощи ЬС-МЗ показали, что сложного эфира не осталось. Следовательно, смесь подкисляли 6 н НС1 и растворители удаляли в вакууме. При помощи ЬС-МЗ и ¹Н ЯМР подтверждали отсутствие сложного эфира. Указанное соединение получали в виде его соли НС1, загрязненной неорганическими солями (1,91 г, >100%). Соединение использовали как таковое в последующих стадиях без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (400 МГц, СО3ОЭ) δ 8,84, (5, 1Н), 7,35 (5, 1Н), 4,52 (бб, ί = 5,0, 9,1 Гц, 1Н), 3,89 (5, 3Н), 3,62 (5, 3Н), 3,35 (бб, ί = 4,5, 15,6 Гц, 1Н, частично перекрыто растворителем), 3,12 (бб, ί = 9,0, 15,6 Гц, 1Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С₉Н1^₃О₄: 227,09; обнаружено: 228,09 (М+Н)+.

Сар-127

Сар-127 получали согласно вышеуказанного способа для Сар-126, начиная с (З)-2-амино-3-(1метил-1Н-имидазол-4-ил)пропановой кислоты (1,11 г, 6,56 ммоль), NаНСО₃ (1,21 г, 14,4 ммоль) и С1СО₂Ме (0,56 мл, 7,28 ммоль). Указанное соединение получали в виде его соли НС1 (1,79 г, >100%), загрязненной неорганическими солями. При помощи ЬС-МЗ и ¹Н ЯМР показывали присутствие прибл. 5% метилового сложного эфира. Неочищенную смесь использовали как таковую без дополнительной очистки. Ή ЯМР (400 МГц, С1ЫОЫ) δ 8,90 (5, 1Н), 7,35 (5, 1Н), 4,48 (бб, Σ = 5,0, 8,6 Гц, 1Н), 3,89 (5, 3Н), 3,62 (5, 3Н), 3,35 (т, 1Н), 3,08 (т, 1Н); ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для СдН₁₃^О₄: 227,09; обнаружено: 228 (М+Н)+.

Получение Сар-128

- 43 020815

Стадия 1. Получение ^)-бензил-2-(трет-бутоксикарбониламино)пент-4-иноата (с_|-27Ь).

В раствор соединения д-27а (1,01 г, 4,74 ммоль), ОМАР (58 мг, 0,475 ммоль) и ίΡτ₂ΝΕί (1,7 мл, 9,8 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл) при 0°С добавляли СЬ/-С1 (0,68 мл, 4,83 ммоль). Раствор оставляли перемешиваться в течение 4 ч при 0°С, промывали (1н. КНЯО₄, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флешхроматографией (ТЬС 6:1 гекс:ЕЮАс) с получением указанного соединения (1,30 г, 91%) в виде бесцветного масла. Ή ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ 7,35 (5, 5Н), 5,35 (ά, Ьг, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 5,23 (ά, 1 = 12,2 Гц, 1Н), 5,17 (ά, 1 = 12,2 Гц, 1Н), 4,48 - 4,53 (т, 1Н), 2,68 - 2,81 (т, 2Н), 2,00 (ΐ, 1 = 2,5 Гц, 1Н), 1,44 (5, 9Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С^Н^ЫОс 303; обнаружено: 304 (М+Н)+.

Стадия 2. Получение ^)-бензил-3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино) пропаноата (с_)-28).

К смеси ^)-бензил-2-(трет-бутоксикарбониламино)пент-4-иноата (0,50 г, 1,65 ммоль), аскорбата натрия (0,036 г, 0,18 ммоль), С^О₄-5Н₂О (0,022 г, 0,09 ммоль) и ЫаЫ₃ (0,13 г, 2,1 ммоль) в ΌΜΡ-НЮ (5 мл, 4:1) при к.т. добавляли ВпВг (0,24 мл, 2,02 ммоль) и смесь нагревали до 65°С. Через 5 ч при помощи ЬС-Μδ показывали слабое превращение. Добавляли дополнительную порцию Ν;·ιΝ₃ (100 мг) и нагревание продолжали в течение 12 ч. Реакционную смесь выливали в ЕЮАс и Н₂О и встряхивали. Слои разделяли и водный слой экстрагировали 3х ЕЮАс и объединенные органические фазы промывали (Н₂Ох3, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа^О₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флеш (ВЮТАОЕ®, 40+М 0-5% ΜеОН в СН₂С1₂; ТЬС 3% ΜеОН в СН₂С1₂) с получением светло-желтого масла, которое отвердевало при отстаивании (748,3 мг, 104%). ЯМР соответствовал необходимому продукту, но предполагал присутствие ΌΜΕ. Вещество использовали как таковое без дополнительной очистки. Ή ЯМР (400 МГц, ΙΑΙδΟίΕ) δ 7,84 (5, 1Н), 7,27 - 7,32 (т, 10Н), 5,54 (5, 2Н), 5,07 (5, 2Н), 4,25 (т, 1Н), 3,16 (άά, 1 = 1,0, 5,3 Гц, 1Н), 3,06 (άά, 1 = 5,3, 14,7 Гц), 2,96 (άά, 1 = 9,1, 14,7 Гц, 1Н), 1,31 (5, 9Н). ЬСΜδ: аналитически рассчитано для С₂₄Н₂₈Ы₄О₄: 436; обнаружено: 437 (М+Н)+.

Стадия 3. Получение ^)-бензил-3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(метоксикарбониламино) пропаноата (с_)-29).

Раствор ^)-бензил-3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропаноата (0,52 г, 1,15 ммоль) в СН2С12 добавляли ТРА (4 мл). Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла, которое отвердевало при отстаивании. Это вещество растворяли в ТНР-Н2О и охлаждали до 0°С. Добавляли твердый ЫаНСО₃ (0,25 г, 3,00 ммоль) с последующим добавлением СЮО^е (0,25 мл, 3,25 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 ч смесь подкисляли до рН~2 6 н НС1 и затем выливали в Н₂О-ЕЮАс. Слои разделяли и вод. фазу экстрагировали 2х ЕЮАс. Объединенные орг. слои промывали (Н₂О, насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа^О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением бесцветного масла (505,8 мг, 111%, ЯМР предполагал присутствие неопределенной примеси), которое отвердевало при отстаивании при откачивании. Вещество использовали как таковое без дополнительной очистки. Ή ЯМР (400 МГц, ^ΜδО-ά₆) δ 7,87 (5, 1Н), 7,70 (ά, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 7,27-7,32 (т, 10Н), 5,54 (5, 2Н), 5,10 (ά, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 5,06 (ά, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 4,32 - 4,37 (т, 1Н), 3,49 (5, 3Н), 3,09 (άά, 1 = 5,6, 14,7 Гц, 1Н), 2,98 (άά, 1 = 9,6, 14,7 Гц, 1Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для С_2!Н₂₂Ы₄О₄: 394; обнаружено: 395 (М+Н)+.

Стадия 4. Получение ^)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пропановой кислоты (Сар-128).

- 44 020815 (З)-Бензил-3-(1-бензил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-2-(метоксикарбониламино)пропаноат (502 мг, 1,11 ммоль) гидрировали в присутствии Ρά-С (82 мг) в МеОН (5 мл) при атмосферном давлении в течение 12 ч. Смесь фильтровали через диатомитовую землю (СБЫТЕ®) и концентрировали в вакууме. (З)-2(метоксикарбониламино)-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пропановую кислоту получали в виде бесцветной камеди (266 мг, 111%), которая была загрязнена прибл. 10% метилового сложного эфира. Вещество использовали как таковое без дополнительной очистки. 'Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 12,78 (к, Ьг, 1Н), 7,59 (к, 1Н), 7,50 (ά, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 4,19 - 4,24 (т, 1Н), 3,49 (к, 3Н), 3,12 (άά, 1 = 4,8 Гц, 14,9 Гц, 1Н), 2,96 (άά, 1 = 9,9, 15,0 Гц, 1Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С₇Н₁₀Ы₄О₄: 214; обнаружено: 215 (М+Н)+.

Получение Сар-129

Стадия 1. Получение (З)-2-(бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановой кислоты (сл-31).

Ν=\ .О

СЬгШМ'^СОгН

0,-37

Суспензию (З)-бензил-2-оксооксетан-3-илкарбамата (0,67 г, 3,03 ммоль) и пиразола (0,22 г, 3,29 ммоль) в СН₃СЫ (12 мл) нагревали при 50°С в течение 24 ч. Смесь охлаждали до к.т. в течение ночи и твердое вещество отфильтровывали с получением (З)-2-(бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1ил)пропановой кислоты (330,1 мг). Фильтрат концентрировали в вакууме и затем перетирали с небольшим количеством СН₃СЫ (прибл. 4 мл) с получением второй порции (43,5 мг). Общий выход равен 370,4 мг (44%). т.пл. 165,5-168°С. т.пл. в литературе 168,5-169,5 [Vеάе^ак е! а1, 1. Ат. СЬет. Зос, 107:7105 (1985)]. Ή ЯМР (400 МГц, СБ₃ОБ) δ 7,51 (ά, 1 = 2,0, 1Н), 7,48 (к, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 7,24-7,34 (т, 5Н), 6,23 т, 1Н), 5,05 (ά, 12,7 Н, 1Н), 5,03 (ά, 1 = 12,7 Гц, 1Н), 4,59-4,66 (т, 2Н), 4,42-4,49 (т, 1Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С1₄Н1₅Ы₃О₄: 289; обнаружено: 290 (М+Н)+.

Стадия 2. Получение (З)-2-(метоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановой кислоты (Сар129).

(З)-2-(Бензилоксикарбониламино)-3-(1Н-пиразол-1-ил)пропановую кислоту (0,20 г, 0,70 ммоль) гидрировали в присутствии Ρά-С (45 мг) в МеОН (5 мл) при атмосферном давлении в течение 2 ч. Продукт казался растворимым в МеОН, следовательно, реакционную смесь разбавляли 5 мл Н₂О и несколькими каплями 6н. НС1. Гомогенный раствор фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и МеОН удаляли в вакууме. Оставшийся раствор замораживали и лиофилизировали с получением желтой пены (188,9 мг). Это вещество суспендировали в ТНР-Н₂О (1:1, 10 мл) и затем охлаждали до 0°С. В холодную смесь осторожно добавляли ЫаНСО₃ (146,0 мг, 1,74 ммоль) (выделение СО₂). После прекращения выделения газа (прибл. 15 мин) по каплям добавляли С1СО₂Ме (0,06 мл, 0,78 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться в течение 2 ч и подкисляли до рН~2 при помощи 6н. НС1 и выливали в Е!ОАс. Слои разделяли и водную фазу экстрагировали ЕЮАС (х5). Объединенные органические слои промывали (насыщенным солевым раствором), сушили (Ыа₂ЗО₄), фильтровали и концентрировали с получением указанного соединения в виде бесцветного твердого вещества (117,8 мг, 79%). ¹Н ЯМР (400 МГц, БМЗО-ά,·,) δ 13,04 (к, 1Н), 7,63 (ά, 1 = 2,6 Гц, 1Н), 7,48 (ά, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 7,44 (ά, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 6,19 (арр !, 1 = 2,0 Гц, 1Н), 4,47 (άά, 1 = 3,0, 12,9 Гц, 1Н), 4,29-4,41 (т, 2Н), 3,48 (к, 3Н). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для С₈Н_ПЫ₃О₄: 213; обнаружено: 214 (М+Н)+.

Сар-130

ΑοΗΝ СО₂Н

Сар-130 получали путем ацилирования коммерчески доступного (К)-фенилглицина аналогичной методикой, представленной в: Са1тек, М. е! а1., Теί^аЬеά^оη, 43(10):2285 (1987).

Сар-131

- 45 020815

Стадия а: диметилкарбамоилхлорид (0,92 мл, 10 ммоль) медленно добавляли в раствор гидрохлорида (8)-бензил-2-амино-3-метилбутаноата (2,44 г; 10 ммоль) и основания Хунига (3,67 мл, 21 ммоль) в ТНР (50 мл). Полученную белую суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (16 ч) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученное желтое масло очищали посредством флешхроматографии с элюированием этилацетатами:гексанами (1:1). Собранные фракции концентрировали в вакууме с получением 2,35 г (85%) прозрачного масла. ¹Н ЯМР (300 МГц, ЭМ80Ы6) δ м.д. 0,84 (ά, 1 = 6,95 Гц, 3Н), 0,89 (ά, 1 = 6,59 Гц, 3Н), 1,98-2,15 (т, 1Н), 2,80 (5, 6Н), 5,01-5,09 (т, 1 = 12,44 Гц, 1Н), 5,13 (ά, 1 = 12,44 Гц, 1Н), 6,22 (ά, 1 = 8,05 Гц, 1Н), 7,26-7,42 (т, 5Н). ЬС (усл. 1): КТ = 1,76 мин; М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ Ск5Н2^203: 279,17; обнаружено 279,03. Стадия Ь: в полученный выше раствор Ме0Н (50 мл) промежуточного соединения (2,35 г; 8,45 ммоль) добавляли Ρά/С (10%; 200 мг) и полученную черную суспензию промывали Ν2 (3х) и помещали под 1 атм. Н2. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали через микроволокнистый фильтр с удалением катализатора. Полученный прозрачный раствор затем концентрировали при пониженном давлении с получением 1,43 г (89%) Сар-131 в виде белой пены, которую использовали без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (500 МГц, ЭМ80Ы6) δ м.д. 0,87 (ά, 1 = 4,27 Гц, 3Н), 0,88 (ά, 1 = 3,97 Гц, 3Н), 1,93-2,11 (т, 1Н), 2,80 (5, 6Н), 3,90 (άά, 1 = 8,39, 6,87 Гц, 1Н), 5,93 (ά, 1 = 8,54 Гц, 1Н), 12,36 (5, 1Н). ЬС (усл. 1): КТ = 0,33 мин; М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₈Н₁₇^0₃: 189,12; обнаружено 189,04.

Сар-132

НС1

Сар-132 получали из гидрохлорида (8)-бензил-2-аминопропаноата согласно способу, описанному для Сар-131. Ίί ЯМР (500 МГц, ПМ80Ц₆) δ м.д. 1,27 (ά, 1 = 7,32 Гц, 3Н), 2,80 (5, 6Н), 4,06 (ςί, 1Н), 6,36 (ά, 1 = 7,32 Гц, 1Н), 12,27 (5, 1Н). ЬС (Усл. 1): КТ = 0,15 мин; М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₆Н₁₃Ы₂0₃: 161,09; обнаружено 161,00.

Сар-133 получали из гидрохлорида (8)-трет-бутил-2-амино-3-метилбутаноата и 2фторэтилхлорформиата согласно способу, описанному для Сар-47. ¹Н ЯМР (500 МГц, ИМ80Ц₆) δ м.д. 0,87 (ΐ, 1 = 6,71 Гц, 6Н), 1,97-2,10 (т, 1Н), 3,83 (άά, 1 = 8,39, 5,95 Гц, 1Н), 4,14-4,18 (т, 1Н), 4,20-4,25 (т, 1Н), 4,50-4,54 (т, 1Н), 4,59-4,65 (т, 1Н), 7,51 (ά, 1 = 8,54 Гц, 1Н), 12,54 (5, 1Н).

Сар-134 получали из (8)-диэтилаланина и метилхлорформиата согласно способу, описанному для Сар-51. Ίί ЯМР (500 МГц, ПМ80Ц₆) δ м.д. 0,72-0,89 (т, 6Н), 1,15-1,38 (т, 4Н), 1,54-1,66 (т, 1Н), 3,463,63 (т, 3Н), 4,09 (άά, 1 = 8,85, 5,19 Гц, 1Н), 7,24 (ά, 1 = 8,85 Гц, 1Н), 12,55 (5, 1Н). ЬС (усл. 2): КТ = 0,66 мин; ЬС-М8. Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₉Н_£^0₄: 204,12; обнаружено 204,02.

Сар-135

Раствор И-2-амино-(4-фторфенил)уксусной кислоты (338 мг, 2,00 ммоль), 1 н НС1 в диэтиловом эфире (2,0 мл, 2,0 ммоль) и формалине (37%, 1 мл) в метаноле (5 мл) подвергали баллоновой гидрогенизации над 10% палладием на угле (60 мг) в течение 16 ч при 25°С. Смесь затем фильтровали через СЕЫТЕ® с получением соли НС1 Сар-135 в виде белой пены (316 мг, 80%). ¹Н ЯМР (300 МГц, Ме0Н^₄) δ 7,59 (άά, 1 = 8,80, 5,10 Гц, 2Н), 7,29 (ΐ, 1 = 8,6 Гц, 2Н), 5,17 (5, 1Н), 3,05 (ν Ьг 5, 3Н), 2,63 (ν Ьг 5, 3Н); К = 0,19 мин (усл.-М8-^5); индекс гомогенности 95%; ЬКМ8. Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₀Н₁₃РNО₂. 198,09; обнаружено: 198,10.

- 46 020815

В охлажденную (-50°С) суспензию 1-бензил-1Н-имидазола (1,58 г, 10,0 ммоль) в безводном диэтиловом эфире (50 мл) в азоте добавляли по каплям н-бутиллитий (2,5 М в гексанах, 4,0 мл, 10,0 ммоль). После перемешивания в течение 20 мин при -50°С, сухой диоксид углерода (пропускали через Эпеп1е) барботировали в реакционную смесь в течение 10 мин перед тем, как ее оставляли нагреваться до 25°С. Тяжелый осадок, который был образован при добавлении диоксида углерода в реакционную смесь, фильтровали с получением гигроскопического, белого твердого вещества, которое поглощали водой (7 мл), подкисляли до рН 3, охлаждали и вызывали кристаллизацию царапаньем. Путем фильтрации этого осадка получали белое твердое вещество, которое суспендировали в метаноле, обрабатывали 1н. НС1/диэтиловым эфиром (4 мл) и концентрировали в вакууме. Путем лиофилизации остатка из воды (5 мл) получали соль НС1 Сар-136 в виде белого твердого вещества (817 мг, 40%). ¹Н ЯМР (300 МГц, ОМ8ОЦ₆) δ 7,94 (ά, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 7,71 (ά, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 7,50-7,31 (т, 5Н), 5,77 (5, 2Н); К₃ = 0,51 мин (усл.-М8-А5); индекс гомогенности 95%; ЬКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцН₁₂^О₂: 203,08; обнаружено: 203,11.

Сар-137

Суспензию 1-хлор-3-цианоизохинолина (188 мг, 1,00 ммоль; полученную согласно методике в АО 2003/099274) (188 мг, 1,00 ммоль), фторида цезия (303,8 мг, 2,00 ммоль), дихлорида бис(три-третбутилфосфин)палладия (10 мг, 0,02 ммоль) и 2-(трибутилстаннил)фурана (378 мкл, 1,20 ммоль) в безводном диоксане (10 мл) в азоте нагревали при 80°С в течение 16 ч перед тем, как ее охлаждали до 25°С, и обрабатывали насыщенным, водным раствором фторида калия с интенсивным перемешиванием в течение 1 ч. Смесь разделяли между этилацетатом и водой и органическую фазу отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали. Путем очистки остатка на силикагеле (элюировали 0-30% этилацетатом/гексанами) с получением Сар-137, стадия а, в виде белого твердого вещества, которое использовали как таковое (230 мг, 105%). Κ_ΐ= 1,95 мин (усл.-М8-А2); индекс гомогенности 90%; ЬКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₄Н₈К₂О: 221,07; обнаружено: 221,12.

Сар-137

К суспензии Сар-137, стадия а (110 мг, 0,50 ммоль) и перийодата натрия (438 мг, 2,05 ммоль) в тетрахлориде углерода (1 мл), ацетонитрила (1 мл) и воде (1,5 мл) добавляли трихлоридгидрат рутения (2 мг, 0,011 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и затем разделяли между дихлорметаном и водой. Водный слой отделяли, экстрагировали еще два раза дихлорметаном и объединенные экстракты дихлорметана сушили над №ь8О₄. фильтровали и концентрировали. Путем перетирания остатка с гексанами получали Сар-137 (55 мг, 55%) в виде твердого вещества сероватого цвета. К, = 1,10 мин (усл.-М§А2); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцН^₂О₂: 200,08; обнаружено: 200,08.

Сар-138-Сар-158 Стратегии синтеза. Способ А

- 47 020815

Сар-138, стадия а

В перемешанную суспензию 5-гидроксиизохинолина (полученную согласно методике в ЮО 2003/ 099274) (2,0 г, 13,8 ммоль) и трифенилфосфина (4,3 г, 16,5 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (20 мл) порциями добавляли сухой метанол (0,8 мл) и диэтилазодикарбоксилат (3,0 мл, 16,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч перед тем, как ее разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №-ь8О₄. фильтровали и концентрировали. Остаток предварительно абсорбировали на силикагеле и очищали (элюировали 40% этилацетатом/гексанами) с получением Сар-138, стадия а, в виде светло-желтого твердого вещества (1,00 г, 45%). 'Н ЯМР (СЭС1₃, 500 МГц) δ 9,19 (8, 1Н), 8,51 (ά, 1 = 6,0 Гц, 1Н), 7,99 (ά, 1 = 6,0 Гц, 1Н), 7,52-7,50 (т, 2Н), 7,00-6,99 (т, 1Н), 4,01 (8, 3Н); К = 0,66 мин (усл. Ό2); индекс гомогенности 95%; ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н₁₍^О: 160,08; обнаружено 160,10.

Сар-138, стадия Ь

К перемешанному раствору Сар-138, стадия а (2,34 г, 14,7 ммоль), в безводном дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре добавляли одну порцию мета-хлорпербензойной кислоты (77%, 3,42 г, 19,8 ммоль). После перемешивания в течение 20 ч добавляли порошкообразный карбонат калия (2,0 г) и смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре перед тем, как ее фильтровали и концентрировали с получением Сар-138, стадия Ь, в виде бледного желтого твердого вещества, которое было достаточно чистым для перенесения на другую стадию (2,15 г, 83,3%). ¹Н ЯМР (СЭС1₃, 400 МГц) δ 8,73 (ά, 1 = 1,5 Гц, 1Н), 8,11 (άά, 1 = 7,3, 1,7 Гц, 1Н), 8,04 (ά, 1 = 7,1 Гц, 1Н), 7,52 (ΐ, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 7,28 (ά, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 6,91 (ά, 1 = 7,8 Гц, 1Н), 4,00 (8, 3Н); К, = 0,92 мин, (усл.-Э1); индекс гомогенности 90%; ЬСМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₂: 176,07; обнаружено: 176,0.

Сар-138, стадия с

К перемешанному раствору Сар-138, стадия Ь (0,70 г, 4,00 ммоль) и триэтиламина (1,1 мл, 8,00 ммоль) в сухом ацетонитриле (20 мл) при комнатной температуре в азоте добавляли триметилсилилцианид (1,60 мл, 12,00 ммоль). Смесь нагревали при 75°С в течение 20 ч перед тем, как ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором перед сушкой над №ь8О₃ и концентрированием растворителя. Остаток обрабатывали флеш-хроматографией на силикагеле (элюировали 5% этилацетатом/гексанами) 25% этилацетатом/гексанами с получением Сар-138, стадия с (498,7 мг), в виде белого, кристаллического твердого вещества вместе с 223 мг дополнительного количества Сар-138, стадия с, восстановленного из фильтрата. ^!Н ЯМР (СОС1₃, 500 МГц) δ 8,63 (ά, 1 = 5,5 Гц, 1Н), 8,26 (ά, 1 = 5,5 Гц, 1Н), 7,88 (ά, 1 = 8,5 Гц, 1Н), 7,69 (ΐ, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 7,08 (ά, 1 = 7,5 Гц, 1Н), 4,04 (8, 3Н); К = 1,75 мин, (усл.-П1); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃Н%О: 185,07; обнаружено: 185,10.

Сар-138, стадия с (0,45 г, 2,44 ммоль), обрабатывали 5н. раствором гидроксида натрия (10 мл) и полученную суспензию нагревали при 85°С в течение 4 ч, охлаждали до 25°С, разбавляли дихлорметаном и подкисляли 1н. гидрохлоридной кислотой. Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №₂8О₄, концентрировали до ¹/4 объема и фильтровали с получением Сар-138 в виде желтого твердого вещества (0,44 г, 88,9%). ¹Н ЯМР (ОМ5>ОЫ6, 400 МГц) δ 13,6 (Ьг 8, 1Н), 8,56 (ά, 1 = 6,0 Гц, 1Н), 8,16 (ά, 1 = 6,0 Гц, 1Н), 8,06 (ά, 1 = 8,8 Гц, 1Н), 7,71-7,67 (т, 1Н), 7,30 (ά, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 4,02 (8, 3Н); К, = 0,70 мин (усл.-Э1); индекс гомогенности 95%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцНк^О₃: 204,07; обнаружено: 204,05.

- 48 020815

Стратегия синтеза Способ В (полученный из Τеί^аЬеб^οη Ьейеге, 42:6707 (2001))

Сар-139

В сосуд с толстыми стенками и завинчивающимся колпачком, содержащий дегазированную аргоном суспензию 1-хлор-6-метоксиизохинолина (1,2 г, 6,2 ммоль, полученную согласно методике в νΟ 2003/099274), цианид калия (0,40 г, 6,2 ммоль), 1,5-бис(дифенилфосфино)пентан (0,27 г, 0,62 ммоль) и палладия (ΙΙ) ацетат (70 мг, 0,31 ммоль) в безводном толуоле (6 мл) добавляли Ν,Ν,Ν',Ν'тетраметилэтилендиамин (0,29 мл, 2,48 ммоль). Сосуд герметизировали, нагревали при 150°С в течение 22 ч и затем оставляли охлаждаться до 25°С. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над Να₂δΟ.·|. фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на силикагеле с элюированием 5% этилацетатом/гексанами - 25% этилацетатом/гексанами с получением Сар-139, стадия а, в виде белого твердого вещества (669,7 мг). 'Η ЯМР (СЭСк 500 МГц) δ 8,54 (б, ί = 6,0 Гц, 1Η), 8,22 (б, ί = 9,0 Гц, 1Η), 7,76 (б, ί = 5,5 Гц, 1Η), 7,41-7,39 (т, 1Η), 7,13 (б, ί = 2,0 Гц, 1Η), 3,98 (δ, 3Η); Κ_ί = 1,66 мин (усл.-Э1); индекс гомогенности 90%; ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ΟιΗ₉Ν₂Ο: 185,07; обнаружено: 185,20.

Сар-139

Сар-139 получали из основного гидролиза Сар-139, стадия а, 5н. ΝαΟΗ согласно методике, описанной для Сар-138. ' Н ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-бб) δ 13,63 (ν Ьг δ, 1Η), 8,60 (б, ί = 9,3 Гц, 1Η), 8,45 (б, ί = 5,6 Гц, 1Η), 7,95 (б, ί = 5,9 Гц, 1Η), 7,49 (б, ί = 2,2 Гц, 1Η), 7,44 (бб, ί = 9,3, 2,5 Гц, 1Η), 3,95 (δ, 3Η); Κ_ί = 0,64 мин (усл.-Э1); индекс гомогенности 90%; ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ Ο₁Η₁₀ΝΟ₃: 204,07; обнаружено: 204,05.

Сар-140

Сар-140, стадия а

К интенсивно перемешиваемой смеси 1,3-дихлор-5-этоксиизохинолина (482 мг, 2,00 ммоль; полученной согласно методике в νΟ 2005/051410), палладия (ΙΙ) ацетата (9 мг, 0,04 ммоль), карбоната натрия (223 мг, 2,10 ммоль) и 1,5-бис(дифенилфосфино)пентана (35 мг, 0,08 ммоль) в сухом диметилацетамиде (2 мл) при 25°С в азоте добавляли Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилэтилендиамин (60 мл, 0,40 ммоль). Через 10 мин смесь нагревали до 150°С и затем добавляли порциями по 1 мл маточный раствор цианогидрина ацетона (получали из 457 мкл цианогидрина ацетона в 4,34 мл ΌΜΑ) в течение 18 ч с применением шприцевого насоса. Смесь затем разделяли между этилацетатом и водой и органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Να₂δΟ.₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на силикагеле с элюированием 10% этилацетатами/гексанами - 40% этилацетатом/гексанами с получением Сар-140, стадия а, в виде желтого твердого вещества (160 мг, 34%). Κ_ί = 2,46 мин (γοπ.-Μδ-ν2); индекс гомогенности 90%; ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ Ο₂Η₉£’1Ν₂Ο: 233,05; обнаружено: 233,08.

- 49 020815

Сар-140

Сар-140 получали посредством кислотного гидролиза Сар-140, стадия а, при помощи 12н. НС1, как описано ниже, методикой для получения Сар-141. К» = 2,24 мин (усл.-МЗ-У2); индекс гомогенности 90%; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₂НцСШО₃: 252,04; обнаружено: 252,02.

Сар-141

Са я а

Сар-141, стадия а, получали из 1-бром-3-фторизохинолина (получали из 3-амино-1бромизохинолина с применением изложенной в Ь Меб. СНет., 13:613 (1970)), как описано в методике для получения Сар-140, стадия а (см. выше). ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 8,35 (б, ί = 8,5 Гц, 1Н), 7,93 (б, ί = 8,5 Гц, 1Н), 7,83 (ί, Σ = 7,63 Гц, 1Н), 7,77-7,73 (т, 1Н), 7,55 (5, 1Н); К» = 1,60 мин (усл.Ю1); индекс гомогенности 90%; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СюН₆Р^: 173,05; обнаружено: 172,99.

Сар-141

Сар-141, стадия а (83 мг, 0,48 ммоль), обрабатывали 12н. НС1 (3 мл) и полученную взвесь нагревали при 80°С в течение 16 ч перед тем, как ее охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (3 мл). Смесь перемешивали в течение 10 мин и затем фильтровали с получением Сар-141 в виде грязнобелого твердого вещества (44,1 мг, 47,8%). Фильтрат разбавляли дихлорметаном и промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №₂ЗО₄ и концентрировали с получением дополнительное количество Сар-141, который был достаточной чистоты для переноса на следующую стадию (29,30 мг, 31,8%). ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, 500 МГц) δ 14,0 (Ьг 5, 1Н), 8,59-8,57 (т, 1Н), 8,10 (б, Σ = 8,5 Гц, 1Н), 7,88-7,85 (т, 2Н), 7,74-7,71 (т, 1Н); К, = 1,33 мин (усл.-Э1); индекс гомогенности 90%; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С11 ΡΝΟ192,05; обнаружено: 191,97.

Сар-142

Са [ а

Сар-142, стадия а, получали из Ν-оксида 4-бромизохинолина, как описано в двухстадийной методикой для получения Сар-138, стадии Ь и с. К, = 1,45 мин (Усл.-МЗ-У1); индекс гомогенности 90%; ЬСМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СнНеВгА: 232,97; обнаружено: 233,00.

Сар-142,стадия Ь

В дегазированную аргоном суспензию Сар-142, стадия а (116 мг, 0,50 ммоль), трехосновного фосфата калия (170 мг, 0,80 ммоль), палладия (II) ацетата (3,4 мг, 0,015 ммоль) и 2-(дициклогексилфосфино) бифенила (11 мг, 0,03 ммоль) в безводном толуоле (1 мл) добавляли морфолин (61 мкл, 0,70 ммоль). Смесь нагревали при 100°С в течение 16 ч, охлаждали до 25°С и фильтровали через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®). Путем очистки остатка на силикагеле с элюированием 10-70% этилацетатом/гексанами

- 50 020815 получали Сар-142, стадия Ь (38 мг, 32%), в виде желтого твердого вещества, которое переносили на следующую стадию. К, = 1,26 мин (Усл.-М8-А1); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₄Н₁₄^О: 240,11; обнаружено: 240,13.

Сар-142 получали из Сар-142, стадия Ь, при помощи 5н. гидроксида натрия, как описано в методике для Сар-138. К₁ = 0,72 мин (усл.-М8-А1); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₄Н₁₅К₂Оз: 259,11; обнаружено: 259,08.

Сар-143, стадия а

К перемешанному раствору 3-амино-1-бромизохинолина (444 мг, 2,00 ммоль) в безводном диметилформамиде (10 мл) добавляли одну порцию гидрида натрия (60%, непромытый, 96 мг, 2,4 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 5 мин перед добавлением 2-бромэтилового эфира (90%, 250 мкл, 2,00 ммоль). Смесь перемешивали дополнительно при 25°С в течение 5 ч и при 75°С в течение 72 ч перед тем, как ее охлаждали до 25°С, гасили насыщенным раствором хлорида аммония и разбавляли этилацетатом. Органический слой отделяли, промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали Путем очистки остатка на силикагеле с элюированием 0% 70% этилацетатом/гексанами получали Сар-143, стадия а, в виде желтого твердого вещества (180 мг, 31%). К = 1,75 мин (усл.-М8-А1); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₃Н₁₄Вг^О: 293,03; обнаружено: 293,04.

В холодный (-60°С) раствор Сар-143, стадия а (154 мг, 0,527 ммоль), в безводном тетрагидрофуране (5 мл) добавляли раствор н-бутиллития в гексанах (2,5 М, 0,25 мл, 0,633 ммоль). Через 10 мин сухой диоксид углерода барботировали в реакционную смесь в течение 10 мин перед тем, как ее гасили 1н. НС1 и оставляли нагреваться до 25°С. Смесь затем экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл) и объединенные органические экстракты концентрировали в вакууме. Путем очистки остатка обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/вода/ТРА) получали Сар-143 (16 мг, 12%). К₁ = 1,10 мин (усл.-М8-А1); индекс гомогенности 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₄Н₁₅^О₃: 259,11; обнаружено: 259,08.

Сар-144

1,3-Дихлоризохинолин (2,75 г, 13,89 ммоль) добавляли небольшими порциями в холодный (0°С) раствор дымящей азотной кислоты (10 мл) и концентрировали серной кислотой (10 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч перед тем, как ее постепенно нагревали до 25°С, при этом ее перемешивали в течение 16 ч. Смесь затем выливали в стакан, содержащий изрубленный лед и воду, и полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч при 0°С перед тем, как ее фильтровали с получением Сар-144, стадия а (2,73 г, 81%), в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно. К, =

- 51 020815

2,01 мин. (усл.-Э1); индекс гомогенности 95%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₉Н₅СЖ0₂: 242,97; обнаружено: 242,92.

Сар-144, стадия Ь

Сар-144, стадия а (0,30 г, 1,23 ммоль), поглощали в метаноле (60 мл) и обрабатывали оксидом платины (30 мг) и суспензию подвергали гидрогенизации Парра при 7 фунт/кв.дюйм Н₂ в течение 1,5 ч. Затем добавляли формалин (5 мл) и дополнительное количество оксида платины (30 мг) и суспензию подвергали гидрогенизации Парра при 45 фунт/кв.дюйм Н2 в течение 13 ч. Затем ее фильтровали отсасыванием через диатомитовую землю (СЕЫТЕ®) и концентрировали до А объема. Путем фильтрации отсасыванием полученного осадка получали указанное соединение в виде желтого твердого вещества, которое подвергали флеш-хроматографии на силикагеле с элюированием 5% этилацетатом в гексанах - 25% этилацетатом в гексанах с получением Сар-144, стадия Ь (231 мг, 78%), в виде бледно-желтого твердого вещества. К, = 2,36 мин (усл.-И1); индекс гомогенности 95%; ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃) δ 8,02 (5, 1Н), 7,95 (ά, 1 = 8,6 Гц, 1Н), 7,57-7,53 (т, 1Н), 7,30 (ά, 1 = 7,3 Гц, 1Н), 2,88 (5, 6Н); ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпНцС^у 241,03; обнаружено: 241,02. НКМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С_ПН„С№ 241,0299; обнаружено: 241,0296.

Сар-144, стадия с

ΟΝ

Сар-144, стадия с, получали из Сар-144, стадия Ь, согласно методике, описанной для получения Сар-139, стадия а. К, = 2,19 мин (усл.-Э1); индекс гомогенности 95%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н_ПСШ₃: 232,06; обнаружено: 232,03. НКМ8: аналитически рассчитано для [М+НЦСпНцСШу 232,0642; обнаружено: 232,0631.

Сар-144 получали согласно методике, описанной для Сар-141. К, = 2,36 мин (усл.-И1); 90%; ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₂Н1₂СШ₂0₂: 238,01; обнаружено: 238,09.

Сар-145 - Сар-162

Сар-145 - Сар-162 получали из соответствующих 1-хлоризохинолинов согласно методике, описанной для получения Сар-138 (способ А) или Сар-139 (способ В), если не отмечено иное, как изложено ниже.

Сар-#	Сар	Способ	Гидролиз	К, (ЬС-Усл ); % индекс гомогенности; М3 данные
Сар-145	ПП со_гн Получали из коммерчески доступного 1,3- д их лориаохинол ина	в	12нНС1	1,14 мин (Усл.- МЗ-Ш1); 90%; ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ €ιοΗ₇01Ν0₂; 208,02, обнаружено: 208,00.
Сар-146	Получали из коммерчески доступного 3- гидроксиизохинолина	А	5 н ИаОН	1,40 мин (Усл.Ш), 95%; ЬСМЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СпНюЫОз: 204,07, обнаружено: 204,06.

- 52 020815

Сар-147	''о	в	5 н.ЧЮН	0,87 мин (Усл.-
				О1); 95%; ЬС-
				М8;
	со₂н			Аналитически
	Получали из			рассчитано для
	коммерчески			[М+Н]
	доступного 1-хлор-4-			СцНюМОз:
	гидроксиизохинолина			204,07; обнаружено: 204,05.
Сар-148		А	5 нЦаОН	0,70 мин (Усл.-
				О1). 95%; ЬС-
	СО₂Н			М5:
	Получали из			Аналитически
	коммерчески			рассчитано для
	доступного 7-			[М+Н]⁺
	гидроксиизохинолина			СпНюЫОз: 204,07; обнаружено: 204,05.
Сар-149		А	5 и.НаОН	0,70 мин (Усл.ϋΐ); 95%; ЬС-
				М8:
	СОгН			Аналитически
	Получали из			рассчитано для
	коммерчески			[М-Н]*
	доступного 5-			СцНю1чО₃:
	гидроксиизохинолина			обнаружено: 204,05.
Сар-150		А	12нНС1	0,26 мин (Усл -
				Ш), 95%, ЬС-
	СО₂Н			М3:
	Получали из 8-			Аналитически
	метокси-1-			рассчитано для
	хлоризохинолина,			[М+Н]*
	который может быть			СпНщЫиз:
	синтезирован			204,07; '
	следующей			обнаружено:
	методикой из \νθ 2003/099274			204,04. '

Сар-151		В	12 н НС1	1,78 мин (Усл,-
З-хлор-5-	пгг^С\|			Ш); 90%; ЬС-
метоксиизох и нолин-1 -				М5:
карбоновая кислота	со_гн			Аналитически
	Получали из 5- метокси-1,3дихлоризохинолина, который может быть синтезирован следующей методикой из \УО 2005/051410			рассчитано для [М+Н]⁺ СпНрС^Оз: 238,03, обнаружено: 238,09.


Сар-152		В	12 н НС1	1,65 мин (Усл.-
	ΥΑγ			ϋΐ), 95%; ЬС-
	СОгН			М8?
	Получали из			Аналитичес ки
	коммерчески			рассчитано для
	доступного б-			[М+Н]*
	метокси-1,3-			СнЩСПЧОз:
	дихлоризохинолина			238,00; обнаружено: 238,09.
Сар-153		А	6нНС1	1,18 мин (Усл.М8ЛУ1); 95%;
				ЬС-М8:
	СО₂Н			Аналитически
	Получали из 4-			рассчитано для
	бромизохинолина,			[М+Н]⁺
	который может быть			СюНтВгЫОз;
	синтезирован			251,97;
	следующей			обнаружено:
	методикой из АУО 2003/062241			251,95.
Сар-154		В	5 н ИаОН	0,28 мин (Усл -
	ρ-ΆΑγΝ			М8-1¥1); 90%;
	СО₂Н			ЬС-М8:
	Получали из 7-фтор-			Аналитически
	1 -хлоризохинолина,			рассчитано для
	который может быть			[М+Н]*
	синтезирован			ΰ,οΗ,ΡΝΟ».
	следующей			192,05;
	методикой из А¥О			обнаружено:
	2003/099274			192,03.

- 53 020815

Сар-155		В	5нИаОН	0,59 мин (Усл.-
				М8-1У1); 90%;
				Г.С-М5:
	со₂н			Аналитически
	Получали из 1,7дихлоризохинолина, который может быть			рассчитано для [М+Н]⁺ СмНтСМОг:
	синтезирован следующей методикой из \УО 2003/099274			208,02; обнаружено: 208,00.
Сар-156		в	5нИаОН	0,60 мин (Усл.-
				МЗ-Ч/1); 90%;
	т со₂н			ЬС-М8:
	Получали из 1,6-			Аналитически
	дихлоризохинолина,			рассчитано для
	который может быть			[М+Н]
	синтезирован			СюНтСШОг:
	следующей			208,02;
	методикой из \¥О			обнаружено:
	2003/099274			208,03.
Сар-157		в	12нНС1	1,49 мин (Усл.- О1); 95%, ЬС-
				М8:
	СОгН			Аналитически
	Получали из 1,4-			рассчитано для
	дихлоризохинолина,			[М+Н]⁺
	который может быть			С1оН,₇С1№>:
	синтезирован			208,02,
	следующей			обнаружено:
	методикой из \\Ό 2003/062241			208,00.
Сар-158	С1	в	5 н КаОН	0,69 мин (Усл.-
				Μ8-\νΐ); 90%;
				ЬС-М8.
	со_гн			Аналитически
	Получали из 1,5-			рассчитано для
	дихлоризохинолина,			[М+Н]*
	который может быть			СюНтСВДОг:
	синтезирован			208,02;
	следующей			обнаружено:
	методикой из \УО 2003/099274			208,01.

Сар-159	Р	в	5н№ОН	0,41 мин (Усл -
	γϊΠ			М8-№1); 90%;
				ЬС-МЗ:
	СО₂Н			Аналитически
	Получали из 5-фтор-			рассчитано для
	1 -хлор изохинолина,			[М+Н]*
	который может быть			С+ДЬРКО,:
	синтезирован			192,05;
	следующей			обнаружено:
	методикой из ΑΛΌ 2003/099274			192,03.
Сар-160		в	5ηΝ8ΟΗ	0,30 мин (Усл.-
				М8-ХУ1); 90%;
	т СОгН			ЬС-М8:
	Получали из 6-фтор-			Аналитически
	1-хлоризохинолина,			рассчитано для
	который может быть			[М+Н]*
	синтезирован			СюНтРИСЬ:
	следующей			192,05;
	методикой из ΑΥΟ			обнаружено:
	2003/099274			192,03.
Сар-161		-	-	0,70 мин (Усл.
				Ш); 95%; ЬС-
	Γ^ί^ΊΓΊ			М5:
	⁴''·''^ν^χ’χο₂η			Аналитически
	Получали из 4-			рассчитано для
	бр омх инол ин-2-			[М+Н]*
	карбоновой кислоты и			СпНгзКгОг:
	диметиламина			217,10,
	(ΌΜ3Ο, 100°С)			обнаружено: 217,06,
Сар-162	-ХСи		—	0,65 мин (Усл.- М3); 95%; ЬС-
	Получали из м-			М5:
	анизидина следующей
	методикой, описанной в I. Нечего. СНеш., 17 (1993) и Не1егосус1е8, 60:953 (2003).			рассчитано для М+Н]⁺ СцЩЯОз: 204,07; обнаружено: 203,94.

- 54 020815

В раствор 2-кетомасляной кислоты (1,0 г, 9,8 ммоль) в диэтиловом эфире (25 мл) добавляли по каплям бромид фенилмагния (22 мл, 1М в ТНР). Реакционную смесь перемешивали при ~25°С в атмосфере азота в течение 17,5 ч. Реакционную смесь подкисляли 1 н НС1 и продукт экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенный органический слой промывали водой с последующим добавлением насыщенного солевого раствора и сушили над М§8О₄ После концентрирования в вакууме получали белое твердое вещество. Твердое вещество перекристаллизовывали из гексанов/этилацетатв с получением Сар-163 в виде белых иголок (883,5 мг). ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 12,71 (Ьг 5, 1 Н), 7,54-7,52 (т, 2Н), 7,34-7,31 (т, 2Н), 7,26-7,23 (т, 1Н), 5,52-5,39 (Ьг 5, 1Н), 2,11 (т, 1Н), 1,88 (т, 1Н), 0,79 (арр ί, I = 7,4 Гц, 3Н).

Сар-164

Смесь 2-амино-2-фенилмасляной кислоты (1,5 г, 8,4 ммоль), формальдегида (14 мл, 37% в воде), 1н. НС1 (10 мл) и 10% Рк/С (0,5 мг) в МеОН (40 мл) подвергали действию Н₂ при 50 фунт/кв.дюйм в колбе Парра в течение 42 ч. Реакционную смесь фильтровали через СБЫТЕ® и концентрировали в вакууме, остаток поглощали МеОН (36 мл) и продукт очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/Н₂О/ТРА) с получением соли ТРА Сар-164 в виде белого твердого вещества (1,7 г). ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц) 7,54-7,47 (т, 5Н), 2,63 (т, 1Н), 2,55 (5, 6Н), 2,31 (т, 1Н), 0,95 (арр ί, I = 7,3 Гц, 3Н).

Сар-165

К смеси 2-амино-2-инданкарбоновой кислоты (258,6 мг, 1,46 ммоль) и муравьиной кислоты (0,6 мл, 15,9 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (7 мл) добавляли формальдегид (0,6 мл, 37% в воде). Смесь перемешивали при ~25°С в течение 15 мин, затем нагревали при 70°С в течение 8 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток растворяли в ИМР (14 мл) и очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/Н₂О/ТРА) с получением соли ТРА Сар-165 в виде вязкого масла (120,2 мг). ’Н ЯМР (ИМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 7,29-7,21 (т, 4 Н), 3,61 (к, I = 17,4 Гц, 2Н), 3,50 (к, I = 17,4 Гц, 2Н), 2,75 (5, 6Н). БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н’^О₂: 206,12; обнаружено: 206,07.

Сар-166а и Сар-166Ь

Сар-166а и Сар-166Ь получали из (18,48)-(+)-2-метил-2,5-диазабицикло[2,2,1]гептана (2НВг) согласно способу, описанному для синтеза Сар-7а и Сар-7Ь, за исключением того, что промежуточное соединение бензилового сложного эфира отделяли с применением полупреп. колонки СЬпа1се1 ОР 20x250 мм, 10 мкм с элюированием смесью 85:15 гептана/этанола при скорости элюирования10 мл/мин в течение 25 мин. Сар-166Ь: ’Н ЯМР (ОМ8О-к₆, δ = 2,5 м.д., 500 МГц): 7,45 (к, I = 7,3 Гц, 2Н), 7,27-7,19 (т, 3Н), 4,09 (5, 1Н), 3,34 (арр Ьг 5, 1Н), 3,16 (арр Ьг 5, 1Н), 2,83 (к, I = 10,1 Гц, 1Н), 2,71 (т, 2Н), 2,46 (т, 1Н), 2,27 (5, 3Н), 1,77 (к, I = 9,8 Гц, 1Н), 1,63 (к, I = 9,8 Гц, 1Н). БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С’₄Н’₉^О₂: 247,14; обнаружено: 247,11.

Сар-167

Раствор рацемической Вос-1,3-дигидро-2Н-изоиндолкарбоновой кислоты (1,0 г, 3,8 ммоль) в 20% ТРА/СН₂С1₂ перемешивали при ~25°С в течение 4 ч. Весь летучий компонент удаляли в вакууме. Смесь полученного неочищенного вещества, формальдегид (15 мл, 37% в воде), 1н. НС1 (10 мл) и 10% Рк/С (10 мг) в МеОН подвергали действию Н2 (40 фунт/кв.дюйм) в колбе Парра в течение 23 ч. Реакционную смесь фильтровали через СЕЫТЕ® и концентрировали в вакууме с получением Сар-167 в виде желтой

- 55 020815 пены (873,5 мг). ^!Н ЯМР (^ΜδО-ά₆, δ = 2,5 м.д, 500 МГц) 7,59-7,38 (т, 4Н), 5,59 (5, 1Н), 4,84 (ά, 1 = 14 Гц, 1Н), 4,50 (ά, 1 = 14,1 Гц, 1Н), 3,07 (5, 3Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]+С1οН1₂NО₂: 178,09; обнаружено: 178,65.

Сар-168

Рацемический Сар-168 получали из рацемической Вос-аминоиндан-1-карбоновой кислоты согласно методике, описанной для получения Сар-167. Неочищенное вещество использовали как таковое.

Сар-169

Смесь гидрохлорида 2-амино-2-фенилпропановой кислоты (5,0 г, 2,5 ммоль), формальдегида (15 мл, 37% в воде), 1н. НС1 (15 мл) и 10% Рά/С (1,32 г) в ΜеОН (60 мл) помещали в колбу Парра и встряхивали в атмосфере водорода (55 фунт/кв.дюйм) в течение 4 дней. Реакционную смесь фильтровали через СЕЫТЕ® и концентрировали в вакууме. Остаток поглощали ΜеОН и очищали обращенно-фазовой преп. ВЭЖХ (ΜеОН/вода/ТРА) с получением соли ТРА Сар-169 в виде вязкого полутвердого вещества (2,1 г). ¹Н ЯМР (СПС1₃, δ = 7,26 м.д., 500 МГц): 7,58-7,52 (т, 2 Н), 7,39-7,33 (т, 3Н), 2,86 (Ьг 5, 3Н), 2,47 (Ьг 5, 3Н), 1,93 (5, 3Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]+С11Н1₆NО₂: 194,12; обнаружено: 194,12.

^)-2-(Метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусная кислота.

К ^)-2-амино-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоте (505 мг; 3,18 ммоль; полученной у

Л51а1есН) в воде (15мл) добавляли карбонат натрия (673 мг; 6,35 ммоль), оставшуюся смесь охлаждали до 0°С и затем по каплям в течение 5 мин добавляли метилхлорформиат (0,26 мл; 3,33 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 18 ч, при этом оставляли баню оттаивать до температуры окружающей среды. Реакционную смесь затем разделяли между 1н. НС1 и этилацетатом. Органический слой удаляли и водный слой дополнительно экстрагировали 2 дополнительными порциями этилацетата. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Сар-170 в виде бесцветного остатка. ¹Н ЯМР (500 МГц, 1)\ЫО-с1₆) δ м.д. 12,65 (1 Н, Ьг 5), 7,44 (1 Н, ά, 1 = 8,24 Гц), 3,77-3,95 (3 Н, т), 3,54 (3 Н, 5), 3,11-3,26 (2 Н, т), 1,82-1,95 (1 Н, т), 1,41-1,55 (2 Н, т), 1,21-1,39 (2 Н, т); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Π|+ С₉Н_ИЫО₅: 218,1; обнаружено 218,1.

Сар-171

ΗΝ^Ο /О

Раствор метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(оксетан-3-илиден)ацетата (200 мг, 0,721 ммоль; 11 Рагтасо, 56:609-613 (2001)) в этилацетате (7 мл) и СН₂С1₂ (4,00 мл) дегазировали барботированием азота в течение 10 мин. Затем добавляли диметилдикарбонат (0,116 мл, 1,082 ммоль) и Рά/С (20 мг, 0,019 ммоль), реакционную смесь обеспечивали баллоном водорода и оставляли перемешиваться при температуре окружающей среды в течение ночи, при этом при помощи ТЬС отмечали полное преобразование (95:5 СН₂С1₂ / ΜеОН: визуализировали путем окрашивания, полученного из 1 г Се(ЫН₄)^О₄, 6 г молибдата аммония, 6 мл серной кислоты и 100 мл воды). Реакционную смесь фильтровали через СЕЫТЕ® и концентрировали. Остаток очищали через В1ОТАОЕ® (загрузка дихлорметана на 25 δатр1еΐ; элюирование на 25δ колонке дихлорметаном за 3СУ, затем 0-5% ΜеОН / дихлорметаном с 250 мл, затем удерживали при 5% ΜеОН / дихлорметана с 250 мл; 9 мл фракций). Собирали фракции, содержащие необходимые вещества, и концентрировали до 120 мг (81%) метил-2-(метоксикарбониламино)-2-(оксетан-3ил)ацетата в виде бесцветного масла. ¹Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 3,29 - 3,40 (т, I = 6,71 Гц, 1 Н) 3,70 (5, 3 Н) 3,74 (5, 3 Н) 4,55 (ΐ, I = 6,41 Гц, 1 Н) 4,58-4,68 (т, 2 Н) 4,67-4,78 (т, 2 Н) 5,31 (Ьг 5, 1 Н). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₈Н_ПЫО₂: 204,2; обнаружено 204,0. В метил-2(метоксикарбониламино)-2-(оксетан-3-ил)ацетат (50 мг, 0,246 ммоль) в ТНР (2 мл) и вода (0,5 мл) добавляли моногидрат гидроксида лития (10,33 мг, 0,246 ммоль). Полученный раствор оставляли перемешиваться в течение ночи при температуре окружающей среды. При помощи ТЬС показывали (1:1 ЕА / Гекс;

- 56 020815 окрашивание Напе551ап [1 г Се(ЫН₄)^О₄, 6 г молибдата аммония, 6 мл серной кислоты и 100мл воды]) ~10% остатка исходных веществ. Добавляли дополнительное количество 3 мг ЫОН и оставляли перемешиваться в течение ночи, при этом ТЬС не показала остатка исходного вещества. Концентрировали в вакууме и помещали под высокий вакуум в течение ночи с получением 55 мг лития-2(метоксикарбониламино)-2-(оксетан-3-ил)ацетата в виде бесцветного твердого вещества. ¹Н ЯМР (500 МГц, \1еО1)) δ м.д. 3,39-3,47 (т, 1Н) 3,67 (5, 3 Н) 4,28 (6, 1 = 7,93 Гц, 1 Н) 4,64 (ΐ, 1 = 6,26 Гц, 1 Н) 4,68 (ΐ, 1 = 7,02 Гц, 1 Н) 4,73 (6, 1 = 7,63 Гц, 2 Н).

Сар-172, стадия а

Следующую стадию диазотирования использовали из ВаПоп. А. еΐ а1., Ιί',’.δ. Регкш Тгап5 I, 159-164 (1982): Раствор ЫаМО₂ (166 мг, 2,4 ммоль) в воде (0,6 мл) медленно добавляли к перемешанному, холодному (0°С) раствору метил-2-амино-5-этил-1,3-тиазол-4-карбоксилата (186 мг, 1,0 ммоль), С^О₄-5Н₂О (330 мг, 1,32 ммоль), ЫаС1 (260 мг, 4,45 ммоль) и Н^О₄ (5,5 мл) в воде (7,5 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин и оставляли нагреваться до комнатной температуры, причем ее перемешивали дополнительно в течение 1 ч перед добавлением СиС1 (118 мг). Эту смесь перемешивали дополнительно при комнатной температуре в течение 16 ч перед тем, как ее разбавляли насыщенным солевым раствором и экстрагировали дважды эфиром. Органические слои объединяли, сушили над Μ§δО₄ и концентрировали с получением метил-2-хлор-5-этилтиазол-4-карбоксилата (т.е., Сар-172, стадия а) (175 мг, 85%) в виде оранжевого масла (80% чистоты), которое использовали сразу в следующей реакции. Κ_ΐ = 1,99 мин (усл.ΜΌ1); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Нф С₇Н₉СШО^: 206,01; обнаружено: 206,05.

Сар-172

В раствор метил-2-хлор-5-этилтиазол-4-карбоксилата (175 мг) в ТНР/Н₂О/ΜеОН (20 мл/ 3 мл/12 мл) добавляли ЫОН (305 мг, 12,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи перед тем, как ее концентрировали и нейтрализовали 1н. НС1 в эфире (25 мл). Остаток экстрагировали дважды этилацетатом и органические слои объединяли, сушили над Μ§δО₄ и выпаривали с получением Сар-172 (60 мг, 74%) в виде красного твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (300 МГц, ^ΜδО-6₆) δ м.д. 13,03-13,42 (1 Н, т), 3,16 (2 Н, ф 1 = 7,4 Гц), 1,23 (3 Н, ΐ, 1 = 7,5 Гц). Κ_ΐ = 1,78 мин (усл.-ΜΌ’); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Нф С₆Н₇СШО^: 191,99; обнаружено: 191,99.

Сар-173, стадия а

Следующую стадию диазотирования использовали из ВаПоп, А. еΐ а1., Ιί,’.δ. Регкш Тгап5 I, 159-164 (1982): Раствор ЫаМО₂ (150 мг, 2,17 ммоль) в воде (1,0 мл) добавляли по каплям к перемешанному, холодному (0°С) раствору метил-2-амино-5-этил-1,3-тиазол-4-карбоксилата (186 мг, 1,0 ммоль) в 50% Н3РО2 (3,2 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и оставляли нагреваться до комнатной температуры, причем ее перемешивали дополнительно в течение 2 ч. После охлаждения до 0°С смесь медленно обрабатывали раствором ЫаОН (85 мг) в воде (10 мл). Смесь затем разбавляли насыщенным раствором ЫаНСО₃ и дважды экстрагировали эфиром. Органические слои объединяли, сушили над Μ§δО₄ и концентрировали с получением метил 5-этилтиазол-4-карбоксилата (т.е., Сар-173, стадия а) (134 мг, 78%) в виде оранжевого масла (85% чистоты), которое использовали сразу в следующей реакции. К = 1,58 мин (Усл.-ΜΌ’); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Нф С₇Н₁₀ЫО^: 172,05; обнаружено: 172,05.

Сар-173

В раствор метил 5-этилтиазол-4-карбоксилата (134 мг) в ТНР/Н₂О/ΜеОН (18 мл/ 2,7 мл/ 11 мл) добавляли ЫОН (281 мг, 11,74 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи перед тем, как ее концентрировали и нейтрализовали 1н. НС1 в эфире (25 мл). Остаток экстрагировали дважды этилацетатом и органические слои объединяли, сушили над Μ§δО₄ и выпаривали с получением

- 57 020815

Сар-173 (90 мг, 73%) в виде оранжевого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. Ή ЯМР (300 МГц, БМЗОД₆) δ м.д. 12,74-13,04 (1 Н, т), 3,20 (2 Н, ф 1 = 7,3 Гц), 1,25 (3 Н, ί, 1 =

7,5 Гц). Р, = 1,27 мин (усл.-МБ1); ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₆Н₈ЫО₂З: 158,03; обнаружено: 158,04.

Сар-174

Сар-174, стадия а

о

Трифторметансульфоновый ангидрид (5,0 г, 18,0 ммоль) добавляли по каплям в холодный (0°С) раствор метил-3-гидроксипиколината (2,5 г, 16,3 ммоль) и ТЕА (2,5 мл, 18,0 ммоль) в СН₂С1₂ (80 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч перед тем, как ее оставляли нагреваться до комнатной температуры, причем ее перемешивали дополнительно в течение 1 ч. Смесь затем гасили насыщенным раствором ЫаНСО₃ (40 мл) и органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над М§ЗО₄ и концентрировали с получением метил-3-(трифторметилсульфонилокси)пиколината (т.е., Сар-174, стадия а) (3,38 г, 73%) в виде темно-коричневого масла (>95% чистоты), которое использовали сразу без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (300 МГц, СБС1₃) δ м.д. 8,72-8,79 (1 Н, т), 7,71 (1 Н, ά, 1 =

1,5 Гц), 7,58-7,65 (1 Н, т), 4,04 (3 Н, к). Р = 1,93 мин (усл.-МБ1); ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₈Н₇Р₃ЫО₅З: 286,00; обнаружено: 286,08.

Сар-174

В раствор метил-3-(трифторметилсульфонилокси)пиколината (570 мг, 2,0 ммоль) в БМР (20 мл) добавляли ЫС1 (254 мг, 6,0 ммоль), трибутил(винил)станнан (761 мг, 2,4 ммоль) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия (42 мг, 0,06 ммоль). Смесь нагревали при 100°С в течение ночи перед тем, как насыщенный раствор КР (20 мл) добавляли в реакционную смесь при комнатной температуре. Эту смесь перемешивали в течение 4 ч перед тем, как ее фильтровали через СЕЫТЕ®, и слой СЕЫТЕ® промывали этилацетатом. Водную фазу фильтрата затем разделяли и концентрировали в вакууме. Остаток обрабатывали 4н. НС1 в диоксанах (5 мл) и полученную смесь экстрагировали метанолом, фильтровали и выпаривали с получением Сар-174 (260 мг) в виде зеленого твердого вещества, которое было незначительно загрязнено неорганическими солями, но использовали его без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (300 МГц, БМЗОД₆) δ м.д. 8,21 (1 Н, ά, 1 = 3,7 Гц), 7,81-7,90 (1 Н, т), 7,09 (1 Н, άά, 1 = 7,7, 4,8 Гц), 6,98 (1 Н, άά, 1 = 17,9, 11,3 Гц), 5,74 (1 Н, άά, 1 = 17,9, 1,5 Гц), 5,20 (1 Н, ά, 1 = 11,0 Гц). Р = 0,39 мин (усл.МБ1); ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₈Н₈ЫО₂: 150,06; обнаружено: 150,07.

Сар-175

Са ι а

В раствор метил-3-(трифторметилсульфонилокси)пиколината (т.е., Сар-174, стадия а) (570 мг, 2,0 ммоль), промежуточное соединение при получении Сар-174 в БМР (20 мл), добавляли ЫС1 (254 мг, 6,0 ммоль), трибутил(винил)станнан (761 мг, 2,4 ммоль) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия (42 мг, 0,06 ммоль). Смесь нагревали при 100°С в течение 4 ч перед тем, как растворитель удаляли в вакууме. Остаток поглощали ацетонитрилом (50 мл) и гексанами (50 мл) и полученную смесь промывали дважды гексанами. Слой ацетонитрила затем разделяли, фильтровали через СЕЫТЕ® и выпаривали. Путем очистки остатка посредством флеш-хроматографии на аппарате Ноп/оп (градиентное элюирование 25% этилацетата в гексанах - 65% этилацетата в гексанах) получали метил-3-винилпиколинат (т.е., Сар-175, стадия а) (130 мг, 40%) в виде желтого масла. ¹Н ЯМР (300 МГц, СБС1₃) δ м.д. 8,60 (1 Н, άά, 1 = 4,6, 1,7 Гц), 7,94 (1 Н, ά, 1 = 7,7 Гц), 7,33-7,51 (2 Н, т), 5,72 (1 Н, ά, 1 = 17,2 Гц), 5,47 (1 Н, ά, 1 = 11,0 Гц), 3,99 (3 Н, к). Р = 1,29 мин (усл.-МБ1); ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СэН^ЫОу 164,07; обнаружено: 164,06.

- 58 020815

Сар-175, стадия Ь

Палладий на угле (10%, 25 мг) добавляли в раствор метил-3-винилпиколината (120 мг, 0,74 ммоль) в этаноле (10 мл). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 1 ч перед тем, как ее фильтровали через СΕ^IΤΕ®, и слой СΕ^IΤΕ® промывали метанолом. Фильтрат концентрировали досуха с получением метил-3-этилпиколината (т.е., Сар-175, стадия Ь), который сразу перенесли в следующую реакцию. Κ_ί = 1,15 мин (\Ό.τ-Μϋ1); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ ΟΗ₁₂ΝΟ₂: 166,09; обнаружено: 166,09.

Сар-175

В раствор метил-3-этилпиколината в ΤΗР/Η₂Ο/ΜеΟΗ (5 мл/ 0,75 мл/ 3 мл) добавляли ΗΟΗ (35 мг, 1,47 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток перед добавлением дополнительного количества ΗΟΗ (80 мг). После дополнительных 24 ч при комнатной температуре смесь фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Остаток затем обрабатывали 4н. ΗΟ в диоксанах (5 мл) и полученную суспензию концентрировали досуха с получением Сар-175 в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. ¹Η ЯМР (300 МГц, ΌΜδΟ^) δ м.д. 8,47 (1 Н, бб, ί = 4,8, 1,5 Гц), 7,82-7,89 (1 Н, т), 7,53 (1 Н, бб, ί = 7,7, 4,8 Гц), 2,82 (2 Н, ц, ί = 7,3 Гц), 1,17 (3 Н, ί, ί =

7,5 Гц). Κ_ί = 0,36 мин (\Ό3.-Μϋ1); ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ ΟΗ₁₀ΝΟ₂: 152,07; обнаружено: 152,10.

^)-2-(4,4-Дифторциклогексил)-2-(метоксикарбониламино)уксусная кислота Сар-176, стадия а

Раствор 1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-она (15 г, 96 ммоль) в ΕίΟΑс (150 мл) добавляли в раствор метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (21,21 г, 64,0 ммоль) в 1,1,3,3тетраметилгуанидина (10,45 мл, 83 ммоль) и ΕίΟΑс (150 мл). Полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 72 ч и затем ее разбавляли ΕίΟΑс (25 мл). Органический слой промывали 1 н ΗΟ (75 мл), Н₂О (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали на ΒΙΟΤΑΟΕ® (5-25% ΕίΟΑс/Гексаны; колонка 300 д). Содержащие продукт объединенные фракции затем концентрировали в вакууме и остаток перекристаллизовывали из гексанов/ΕίΟΑс с получением белых кристаллов, которые представляли собой метил2-(бензилоксикарбониламино)-2-(1,4-диоксаспиро[4,5]декан-8-илиден)ацетат (6,2 г) ¹Η ЯМР (400 МГц, СОСЮ) δ м.д. 7,30 - 7,44 (5 Н, т), 6,02 (1 Н, Ьг. δ.), 5,15 (2 Н, δ), 3,97 (4 Н, δ), 3,76 (3 Н, Ьг. δ.), 2,84-2,92 (2 Н, т), 2,47 (2 Н, ί, ί = 6,40 Гц), 1,74-1,83 (4 Н, т). ЬС (усл. согласно примеру ΟΜ): Κ_ί = 2,89 мин. ЬСΜδ: аналитически рассчитано для |Μ+Να|' Ο₉Η₂₃ΝΝ;·ιΟ₆: 745,21; обнаружено: 745,47.

Сар-176, стадия Ь

Сложный эфир Сар-176, стадия Ь, получали из алкена Сар-176, стадия а, согласно способу Вигк, Μ. ί. еί а1. (ί. Αт. СЬет. δο^ 117:9375-9376 (1995)) и ссылка в настоящем описании): 500 мл резервуар высокого давления загружали алкеном Сар-176, стадия а (3,5 г, 9,68 ммоль), в дегазированном ΜеΟΗ (200 мл) в слое Ν₂. Раствор затем загружали тетрафторборатом (-)-1,2-бис(^^)-2,5-диметилфосфолано) этанЩиклооктадиенфодияД) (0,108 г, 0,194 ммоль) и полученную смесь промывали Ν₂ (3x1 и загружали Н₂ ^). Раствор интенсивно встряхивали при 70 фунт/кв.дюйм Н₂ при температуре окружающей среде в течение 72 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и оставшийся остаток поглощали ΕίΟΑπ Светло-бурый раствор затем фильтровали через слой силикагеля и элюировали ΕίΟΑπ Растворитель концентрировали в вакууме с получением прозрачного масла, представляющего собой сложный эфир Сар-176, стадия Ь (3,4 β.Ή ЯМР (500 МГц, С0С1_;-б) δ м.д. 7,28-7,43 (5 Н, т), 5,32 (1 Н, б, ί = 9,16 Гц), 5,06-5,16 (2 Н, т), 4,37 (1 Н, бб, ί = 9,00, 5,04 Гц), 3,92 (4 Н, ί, ί = 3,05 Гц), 3,75 (3 Н, δ), 1,64-1,92 (4 Н, т), 1,37-1,60 (5 Н, т). ЬС (усл. согласно примеру ΟΜ): Κ_ί = 1,95 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+Ο₉Η₂₆ΝΟ₂: 364,18; обнаружено: 364,27.

- 59 020815

Сар-176, стадия с

Сложный эфир Сар-176, стадия Ь (4,78 г, 13,15 ммоль), растворяли в ТНР (15 мл) с последующим добавлением воды (10 мл), ледяной уксусной кислоты (26,4 мл, 460 ммоль) и дихлоруксусной кислоты (5,44 мл, 65,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 72 ч при температуре окружающей среды и реакцию гасили медленным добавлением твердого №-ьСО₃ при интенсивном перемешивании, пока не стало видно высвобождаемого газа. Неочищенный продукт экстрагировали в 10% этилацетатдихлорметан и органические слои объединяли, сушили (Мд§О₄) фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали на В1ОТЛОЕ® (0-30% ЕЮЛс/Нех; колонка 25 д) с получением кетона Сар-176, стадия с (3,86 г), в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, ί'.Όί'.’1₃-ά) δ м.д. 7,28-7,41 (5 Н, т), 5,55 (1 Н, ά, 1 = 8,28 Гц), 5,09 (2 Н, 8), 4,46 (1 Н, άά, 1 = 8,16, 5,14 Гц), 3,74 (3 Н, 8), 2,18-2,46 (5 Н, т), 1,96 - 2,06 (1 Н, т), 1,90 (1 Н, άάά, 1 = 12,99, 5,96, 2,89 Гц), 1,44-1,68 (2 Н, т, 1 = 12,36, 12,36, 12,36, 12,36, 4,77 Гц). ЬС (усл. согласно примеру ОЬ1): К, = 1,66 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' С11Н₂₁NNаΟ5: 342,13; обнаружено: 342,10.

Сар-176, стадия ά

1)ЕОХО-ЕЕЕО1К® (3,13 мл, 16,97 ммоль) добавляли в раствор кетон Сар-176, стадия с (2,71 г, 8,49 ммоль), в СН₂С1₂ (50 мл) с последующим добавлением каталитического количества Е,ОН (0,149 мл, 2,55 ммоль). Полученный желтоватый раствор перемешивали при к.т. в течение ночи. Реакцию гасили добавлением насыщ. водн. NаНСΟ₃ (25 мл) и смесь экстрагировали ЕЮЛс (3x75 мл)). Объединенные органические слои сушили (Мд§О₄), фильтровали и сушили с получением желтоватого масла. Остаток очищали хроматографией на ВЮТЛОЕ® (2-15% ЕЮЛс/Нех; колонка 90 д) и восстанавливали белое твердое вещество, представляющее собой дифторид дифтораминокислоты Сар-176, стадия ά (1,5 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, СБС13-ф δ м.д. 7,29 -7,46 (5 Н, т), 5,34 (1 Н, ά, 1 = 8,28 Гц), 5,12 (2 Н, 8), 4,41 (1 Н, άά, 1 = 8,66, 4,89 Гц), 3,77 (3 Н, 8), 2,06-2,20 (2 Н, т), 1,83-1,98 (1 Н, т), 1,60-1,81 (4 Н, т), 1,38 - 1,55 (2 Н, т). ¹⁹Р ЯМР (376 МГц, СОСМ) δ м.д. -92,15 (1 Р, ά, 1 = 237,55 Гц), -102,44 (1 Р, ά, 1 = 235,82 Гц). ЬС (усл. согласно примеру ОЬ1): К, = 1,66 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [2М+№]+С34Н₄₂Р₄^№О₈: 705,28; обнаружено: 705,18.

Сар-176, стадия е

Дифторид Сар-176, стадия ά (4 г, 11,72 ммоль), растворяли в МеОН (120 мл) и загружали Ρά/С (1,247 г, 1,172 ммоль). Суспензию промывали Ν₂ (3х) и реакционную смесь помещали в атмосферу Н₂ 1 атм (баллон). Смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 48 ч. Суспензию затем фильтровали через слой СБЫТЕ® и концентрировали в вакууме с получением масла, которое представляло собой аминокислоту Сар-176, стадия е (2,04 г) и которое использовали без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8ОЫ6) δ м.д. 3,62 (3 Н, 8), 3,20 (1 Н, ά, 1 = 5,77 Гц), 1,91 -2,09 (2 Н, т), 1,50-1,88 (7 Н, т), 1,20-1,45 (2 Н, т). ¹⁹Р ЯМР (376 МГц, ВМЗО-ф) δ м.д. -89,39 (1 Р, ά, 1 = 232,35 Гц), 100,07 (1 Р, ά, 1 = 232,35 Гц). ¹³С ЯМР (101 МГц, ПМ8О^6) δ м.д. 175,51 (1 С, 8), 124,10 (1 С, ΐ, 1 = 241,21, 238,90 Гц), 57,74 (1 С, 8), 51,39 (1 С, 8), 39,23 (1 С, Ьг. 8.), 32,02-33,83 (2 С, т), 25,36 (1 С, ά, 1 = 10,02 Гц), 23,74 (1 С, ά, 1 = 9,25 Гц). ЬС (усл. согласно примеру ОЬ2): К, = 0,95 мин. БС-М8: аналитически рассчитано для [2М+Н]+С₁₈Н₃₁Р₄Ы₂О₂: 415,22; обнаружено: 415,40.

Сар-176, стадия ί

Метилхлорформиат (1,495 мл, 19,30 ммоль) добавляли в раствор аминокислоты Сар-176, стадия е (2 г, 9,65 ммоль) и Э1ЕА (6,74 мл, 38,6 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл). Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 3 ч и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали на В1ОТЛОЕ® (0-20% ЕЮЛс/Нех; колонка 90 д). Прозрачное масло восстанавливали, которое отвердевало в результате отстаивания в вакууме и представляло собой карбамат Сар-176, стадия ί (2,22 г). ¹Н ЯМР (500 МГц, СБС13-ф δ м.д. 5,27 (1 Н, ά, 1 = 8,55 Гц), 4,39 (1 Н, άά, 1 = 8,85, 4,88 Гц), 3,77 (3 Н, 8), 3,70 (3 Н, 8), 2,07-2,20 (2 Н, т), 1,84-1,96 (1 Н, т), 1,64-1,82 (4 Н, т), 1,39-1,51 (2 Н, т). ¹⁹Р ЯМР (471 МГц, СОС13-ф δ

- 60 020815

м.д. -92,55 (1 Р, б, Σ = 237,13 Гц), -102,93 (1 Р, б, Σ = 237,12 Гц). ¹³С ЯМР (126 МГц, СОСЕ-б) δ м.д. 171,97 (1 С, 5), 156,69 (1 С, 5), 119,77-125,59 (1 С, т), 57,24 (1 С, Ьг. 5.), 52,48 (1 С, Ьг. 5.), 52,43 (1 С, 5), 39,15 (1 С, 5), 32,50-33,48 (2 С, т), 25,30 (1 С, б, Σ = 9,60 Гц), 24,03 (1 С, б, Σ = 9,60 Гц). ЬС (усл. согласно примеру ОЬ1): К, = 1,49 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для |М+№|' СцН1₇Р₂М№О₄: 288,10; обнаружено: 288,03.

(З)-2-(4,4-Дифторциклогексил)-2-(метоксикарбониламино)уксусная кислота. Раствор ЫОН (0,379 г, 15,83 ммоль) в воде (25 мл) добавляли в раствор карбамата Сар-176, стадия ί (2,1 г, 7,92 ммоль), в ТНР (75 мл) и полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 4 ч. ТНР удаляли в вакууме и оставшуюся водную фазу подкисляли раствором 1н. НС1 (2 мл) и затем экстрагировали ЕЮАс (2x50 мл). Объединенные органические слои сушили (МдЗО₄), фильтровали и концентрировали с получением белой пены, которая представляет собой Сар-176 (1,92 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМЗО-б6) δ м.д. 12,73 (1 Н, 5), 7,50 (1 Н, б, Σ = 8,78 Гц), 3,97 (1 Н, бб, Σ = 8,53, 6,02 Гц), 3,54 (3 Н, 5), 1,92-2,08 (2 Н, т), 1,57 - 1,90 (5 Н, т), 1,34 - 1,48 (1 Н, т), 1,27 (1 Н, дб, Σ = 12,72, 3,26 Гц). ¹⁹Р ЯМР (376 МГц, ЭМЗО-б6) δ м.д. -89,62 (1 Р, б, Σ = 232,35 Гц), -99,93 (1 Р, б, Σ = 232,35 Гц). ЬС (Усл. согласно примеру ОЬ2): К, = 0,76 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М-Н]+ С₁₀Н₁₄Р^О₄: 250,09; обнаружено: 250,10.

1,1,3,3-Тетраметилгуанидин (0,985 мл, 7,85 ммоль) добавляли в перемешиваемый раствор метил-2(бензилоксикарбониламино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (2,0 г, 6,0 ммоль) в ЕЮАс (40 мл) и смесь перемешивали при к.т. в атмосфере Ν₂ в течение 10 мин. Затем добавляли дигидро-2Н-пиран-3(4Н)-он [23462-75-1] (0,604 г, 6,04 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч. Реакционную смесь затем охлаждали в морозильной камере в течение 10 мин и нейтрализовали вод. лимонной кислотой (1,5 г в 20 мл воды). Две фазы разделяли и органический слой промывали вод. 0,25н. НС1 и насыщенным солевым раствором и затем сушили (МдЗО₄) и концентрировали до получения бесцветного масла. Неочищенное вещество очищали флеш-хроматографией на силикагеле (загрузка растворителя: ЭСМ. элюированный ЕЮАс/гексанами, градиент от 20% до 30% ЕЮАс) с получением двух изомерных продуктов: Первый элюированный продукт представлял собой (2)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(2Нпиран-3(4Н,5Н,6Н)-илиден)ацетат (490 мг) (белое твердое вещество), а второй представлял собой (Е)метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(2Н-пиран-3(4Н,5Н,6Н)-илиден)ацетат (433 мг) (белое твердое вещество). Время удержания ЬС-МЗ 1,398 мин (для Ζ-изомера) и 1,378 мин (для Е-изомера); т/ζ 304,08 (для Ζ-изомера) и 304,16 (для Е-изомера) (МН-). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе ЗЫтабζи ЬС-10АЗ, оборудованном РНЕNОМЕNЕX® Ьииа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора ЗРЭ-10АУ ИУ-У15 при длине волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% Растворителя А / 0% Растворителя В - 0% Растворителя А / 100% Растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представлял собой 5% МеОН / 95% Н₂О /10 мм ацетата аммония, а растворитель В представлял собой 5% Н₂О / 95% МеОН /10 мм ацетата аммония. Значения МЗ определяли с применением платформы МЮКОМАЗЗ® для ЬС при способе электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) (для Ζ-изомера) δ м.д. 7,30-7,44 (т, 5 Н), 6,18 (Ьг. 5., 1Н), 5,10-5,17 (т, 2 Н), 4,22 (5, 2 Н), 3,78 (Ьг. 5., 3 Н), 2,93 - 3,02 (т, 2 Н), 1,80 (б1, ί = 11,7, 5,8 Гц, 2 Н), 1,62 (5, 2 Н). ^!Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) (для Еизомера) δ м.д. 7,31-7,44 (т, 5 Н), 6,12 (Ьг. 5., 1 Н), 5,13 - 5,17 (т, 2 Н), 4,64 (Ьг. 5., 2 Н), 3,70-3,82 (т, 5 Н), 2,49 (ί, ί = 6,5 Гц, 2 Н), 1,80 (Ьг. 5., 2 Н). (Примечание: абсолютную региохимию определяли сдвигами ¹Н ЯМР и константами взаимодействия).

- 61 020815 (-)-1,2-Бис((23,58)-2,5-диметилфосфолано)этаи(циклооктадиен)родия(1)тетрафторборат (28,2 мг, 0,051 ммоль) добавляли в перемешиваемый раствор (2)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(2Нпиран-3(4Н,5Н,6Н)-илиден)ацетата (310 мг, 1,015 ммоль) в МеОН (10 мл) и смесь промывали Ν₂ в вакууме с последующим добавлением Н₂ и затем реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н₂ (60 фунт/ кв.дюйм) при к.т. в течение 2 суток. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали флешхроматоргафией на силикагеле (загрузка растворителя: ЭСМ, элюировали 20% ЕЮАс в гексанах) с получением (8)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата (204 мг) в виде прозрачного бесцветного масла. Время удержания ЬС-М8 1,437 мин; т/ζ 307,89 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαάζιι ЬС-10А8, оборудованном РНЕNОМЕNЕX® Ьииа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора 8РП-10АУ ИУ-при длине волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В-0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Н2О /10 мм ацетата аммония и растворитель В представляет собой 5% Н2О / 95% МеОН / 10 мм ацетата аммония. Значения М8 определяли с применением платформы М1СКОМА88® для ЬС способом электрораспыления. Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 7,30-7,46 (т, 5 Н), 5,32 (ά, 1 = 8,8 Гц, 1 Н), 5,12 (5, 2 Н), 4,36 (άά, 1 = 8,9, 5,6 Гц, 1 Н), 3,84-3,98 (т, 2 Н), 3,77 (5, 3 Н), 3,28-3,37 (т, 1 Н), 3,23 (άά, 1 = 11,3, 10,5 Гц, 1 Н), 2,04-2,16 (т, 1 Н), 1,61-1,75 (т, 3 Н), 1,31-1,43(т, 1Н).

Другой стереоизомер ((Е)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(2Н-пиран-3(4Н,5Н,6Н)-илиден) ацетат) (360 мг, 1,18 ммоль) восстанавливали подобным способом с получением (8)-метил-2(бензилоксикарбониламино)-2-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата (214 мг) в виде прозрачного бесцветного масла. Время удержания ЬС-М8 1,437 мин; т/ζ 308,03 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαάζιι ЬС-10А8, оборудованном РНЕNОМЕNЕX® Ьипа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора 8РИ-10АУ ИУ-У15 с длиной волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В - 0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Н₂О / 10 мм ацетата аммония, а растворитель В представляет собой 5% Н₂О / 95% МеОН / 10 мм ацетата аммония. Значения М8 регистрировали с применением платформы М1СКОМА88® для ЬС способом электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 7,30 - 7,44 (т, 5 Н), 5,31 (ά, 1 = 9,0 Гц, 1 Н), 5,12 (5, 2 Н), 4,31 (άά, 1 = 8,7, 6,9 Гц, 1 Н), 3,80 - 3,90 (т, 2 Н), 3,77 (5, 3 Н), 3,37 (ΐά, 1 = 10,8, 3,5 Гц, 1 Н), 3,28 (άά, 1 = 11,3, 9,8 Гц, 1 Н), 1,97 - 2,10 (т, 1 Н), 1,81 (ά, 1 = 11,5 Гц, 1 Н), 1,61 - 1,72 (т, 2 Н), 1,33 - 1,46 (т, 1 Н).

Отдельные энантиомеры Сар-177а, стадия Ь (Сар-177с, стадия Ь) и Сар-177Ь, стадия Ь (Οηρ-ΠΤά, стадия Ь), получали таким же способом и с подобными выходами с использованием тетрафторбората (-)1,2-бис((2К,5К)-2,5-диметилфосфолано)этан-(циклооктадиен)-родия(1) в качестве катализатора гидрогенизации для восстановления олефинов отдельного стереоизомера исходных веществ.

Сар-177а и Сар-177Ь, стадия с

10% Ρά/С (69,3 мг, 0,065 ммоль) добавляли в раствор (8)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата (200 мг, 0,651 ммоль) и диметилдикарбоната [4525-33-1] (0,104 мл, 0,976 ммоль) в МеОН (10 мл). Реакционную смесь промывали в вакууме Ν₂ с последующим добавлением Н₂ и затем реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н₂ (55 фунт/кв.дюйм) при к.т. в течение 5 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой СЕЫТЕ®/диоксида кремния и фильтрат концентрировали до бесцветного масла. Неочищенное масло очищали флеш-хроматоргафией на силикагеле (загрузка растворителя: ЭСМ, элюировали 30% ЕЮАс в гексанах) с получением продукта (8)-метил-2(метоксикарбониламино)-2-((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата (132 мг) в виде бесцветного масла. Время удержания ЬС-М8 0,92 мин; т/ζ 231,97 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαάζιι ЬС-10А8, оборудованном ΡНЕNОМЕNЕX® Ьипа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора 8РИ-10АУ ИУ-У15 с длиной волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В - 0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Н₂О /10 мм ацетата аммония, а растворитель В представляет собой 5% Н₂О / 95% МеОН / 10 мм ацетата аммония. Значения М8 регистрировали с применением платформы М1СКОМА88® для ЬС способом электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 5,24 (ά, 1 = 8,5 Гц, 1 Н), 4,34 (άά, 1 = 8,9, 5,6 Гц, 1 Н), 3,84-3,97 (т, 2 Н), 3,77 (5, 3 Н), 3,70 (5, 3 Н), 3,29-3,38 (т, 1 Н), 3,23 (άά, 1 = 11,2, 10,4 Гц, 1 Н), 2,03 - 2,14 (т, 1 Н), 1,56-1,75 (т, 3 Н), 1,32-1,43 (т, 1 Н).

Другой диастереомер ((8)-метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)

- 62 020815 ацетат) превращали подобным образом с получением (§)-метил-2-(метоксикарбониламино)-2-((К)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата в виде прозрачного бесцветного масла. Время удержания ЬС-М§ 0,99 мин; т/ζ 231,90 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαύζιι ЬС-10А§, оборудованном ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Еипа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора δΡΌ10АУ υν-νίδ с длиной волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В - 0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Η₂Ο / 10 мм ацетата аммония, а растворитель В представляет собой 5% Η₂Ο / 95% МеОН /10 мм ацетата аммония. Значения М§ регистрировали с применением платформы М1СКОМА§§® для ЬС способом электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 5,25 (ά, 1 = 8,0 Гц, 1 Н), 4,29 (άά, I = 8,4, 7,2 Гц, 1 Н), 3,82-3,90 (т, 2 Н), 3,77 (5, 3 Н), 3,70 (5, 3 Н), 3,37 (ίά, I = 10,8, 3,3 Гц, 1 Н), 3,28 (ί, I = 10,5 Гц, 1 Н), 1,96-2,08 (т, 1 Н), 1,81 (άά, I = 12,9, 1,6 Гц, 1 Н), 1,56-1,72 (т, 2 Н), 1,33-1,46 (т, 1 Н). Отдельные энантиомеры Сар-177а, стадия с (Сар-177с, стадия с) и Сар-177Ь, стадия с (Сар-177П„ стадия с), получали подобным способом и с подобными выходами с применением соответствующих исходных веществ из Сар-177а^, стадия Ь.

Сар-177а и Сар-177Ь, стадия ά

Раствор (8)-метил-2-(метоксикарбониламино)-2-((§)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)ацетата (126 мг, 0,545 ммоль) в ТНР (4 мл) перемешивали при к.т., добавляли раствор 1М ПОН (1,090 мл, 1,090 ммоль) в воде. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч, нейтрализовали 1М НС1 (1,1 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x10 мл). Органически вещества сушили, фильтровали и концентрировали с получением (§)-2-(метоксикарбониламино)-2-((§)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (Сар-177а) (125 мг) в виде прозрачного бесцветного масла. Время удержания ЬС-М§ 0,44 мин; т/ζ 218,00 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαάζιι ЬС-10А§, оборудованном ΡΗΕNΟΜΕΝΕΧ® Ьииа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора δΡΩ-ΌΛν υν-νίδ с длиной волн детектора 220 нм При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В - 0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Н₂О /10 мм ацетата аммония, а растворитель В представляет собой 5% Н₂О / 95% МеОН / 10 мм ацетата аммония. Значения М§ регистрировали с применением платформы М1СКОМА§§® для ЬС способом электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 5,28 (ά, I = 8,8 Гц, 1 Н), 4,38 (άά, I = 8,7, 5,6 Гц, 1 Н), 3,96-4,04 (т, 1 Н), 3,91 (ά, I = 11,0 Гц, 1 Н), 3,71 (δ, 3 Н), 3,33-3,41 (т, 1 Н), 3,24 - 3,32 (т, 1 Н), 2,10 - 2,24 (т, 1 Н), 1,74-1,83 (т, 1 Н), 1,63-1,71 (т, 2 Н), 1,35-1,49 (т, 1 Н).

Другой диастереомер ((§)-метил-2-(метоксикарбонил амино)-2-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3ил)ацетата) превращали подобным образом с получением (§)-2-(метоксикарбониламино)-2-((К)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (Сар-177Ь) в виде прозрачного бесцветного масла. Время удержания ЬС-М§ 0,41 мин; т/ζ 217,93 (МН+). Значения ЬС регистрировали на жидкостном хроматографе δΐιίιηαάζιι ЬС-10А§, оборудованного ΡΗΕNΟΜΕNΕX® Ьипа 10и С18 3,0x50 мм колонкой с применением детектора δΡΩ-ΠΗν υν-νίδ с длиной волн детектора 220 нм. При условиях элюирования использовали скорость потока 4 мл/мин, градиент 100% растворителя А / 0% растворителя В-0% растворителя А / 100% растворителя В, время градиента 3 мин, время удержания 1 мин и время анализа 4 мин, где растворитель А представляет собой 5% МеОН / 95% Н₂О /10 мм ацетата аммония, а растворитель В представляет собой 5% Н₂О / 95% МеОН/ 10 мм ацетата аммония. Значения Μδ регистрировали с применением платформы ΜIСΚΌΜАδδ® для ЬС способом электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 6,18 (Ьг. 5., 1 Н), 5,39 (ά, I = 8,5 Гц, 1 Н), 4,27 - 4,37 (т, 1Н), 3,82 -3,96 (т, 2 Н), 3,72 (δ, 3 Н), 3,42 (ίά, I = 10,8, 3,3 Гц, 1 Н), 3,35 (ί, I = 10,4 Гц, 1 Н), 2,01 -2,18 (т, 1 Н), 1,90 (ά, I = 11,8 Гц, 1 Н), 1,59 - 1,76 (т, 2 Н), 1,40 - 1,54 (т, 1 Н). Отдельные энантиомеры Сар-177а (Сар-177с) и Сар-177Ь (Сар177ά) получали подобным способом и с подобными выходами с применением соответствующих исходных веществ из Сар-177аП, стадия с.

Сар-178, стадия а

ОАс

ЪГ

- 63 020815

В раствор (28,38,48)-2-метил-3,4-дигидро-2Н-пиран-3,4-диилдиацетата (5 г, 23,34 ммоль) в 20 мл МеОН в емкость для гидрирования добавляли Рк/С (150 мг, 0,141 ммоль). Полученную смесь гидрировали при 40 фунт/кв.дюйм на шейкере Парра в течение 1 ч. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали с получением Сар-178, стадия а (5,0 г), в виде прозрачного масла, которое отвердевало при отстаивании. ’Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ м.д. 4,85 - 4,94 (1 Н, т), 4,69 (1 Н, ί, I = 9,46 Гц), 3,88-3,94 (1 Н, т), 3,44 (1 Н, I = 12,21, 1,83 Гц), 3,36 (1 Н, кц, I = 9,42, 6,12 Гц), 2,03 - 2,08 (1 Н, т), 2,02 (3 Н, 5), 2,00 (3 Н, 5), 1,70-1,80 (1 Н, т), 1,16 (3 Н, к, I = 6,10 Гц).

Сар-178, стадия Ь

В раствор Сар-178, стадия а (5,0 г, 23 ммоль), в 50 мл МеОН добавляли несколько капель метоксида натрия. После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин добавляли метоксид натрия (0,1 мл, 23,12 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель затем удаляли в вакууме. Остаток разбавляли бензолом и концентрировали с получением соответствующего диола в виде желтого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в 50 мл пиридина и в этот раствор при -35°С добавляли по каплям бензоилхлорид (2,95 мл, 25,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -35°С в течение 1 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли ЕьО и промывали водой. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х). Объединенные органические слои сушили М§8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 5-15% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-178, стадия Ь (4,5 г) в виде прозрачного масла, которое медленно кристаллизовалось при длительном отстаивании. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]⁺ С’₃Н’₆№О₄ 259,09; обнаружено 259,0; ’Н ЯМР (500 МГц, С1ХТ) δ м.д. 8,02-8,07 (2 Н, т), 7,55-7,61 (1 Н, т), 7,45 (2 Н, ί, I = 7,78 Гц), 5,01 (1 Н, ккк, I = 11,44, 8,70, 5,49 Гц), 3,98 (1 Н, ккк, I = 11,90, 4,88, 1,53 Гц), 3,54 (1 Н, ίφ I = 12,36, 2,14 Гц), 3,41 (1 Н, ί, I = 9,00 Гц), 3,313,38 (1 Н, т), 2,13-2,19 (1 Н, т), 1,83-1,94 (1 Н, т), 1,36 (3 Н, к, I = 5,80 Гц).

Сар-178, стадия с

К смеси NаН (1,143 г, 28,6 ммоль) (60% в минеральном масле) в 6 мл С5₂ добавляли по каплям Сар-178, стадия Ь (4,5 г, 19 ммоль), в 40 мл С5₂ в течение 15 мин. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь становилась светло-оранжевой с некоторым количеством твердых веществ. Затем по каплям добавляли ΜеI (14,29 мл, 229 ммоль) в течение 20 мин. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакцию осторожно гасили насыщенным раствором N^01. Смесь экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои сушили М§8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 6% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-178, стадия с (3,13 г), в виде прозрачного масла. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]⁺С₁₅Н’₈№О₄8₂ 349,05; обнаружено 349,11; ’Н ЯМР (500 МГц, С1Х'1₃) δ м.д. 7,94-8,00 (2 Н, т), 7,50-7,58 (1 Н, т), 7,41 (2 Н, ί, I = 7,78 Гц), 5,96 (1 Н, ί, I = 9,46 Гц), 5,28 (1 Н, ккк, I = 11,37, 9,38, 5,49 Гц), 4,02 (1 Н, ккк, I = 11,98, 4,96, 1,68 Гц), 3,54 - 3,68 (2 Н, т), 2,48 (3 Н, 5), 2,31 (1 Н, кк), 1,88-1,99 (1 Н, т), 1,28 (3 Н, к).

Сар-178, стадия к ΟΒζ

ό.

О

К смеси Сар-178, стадия с (3,13 г, 9,59 ммоль) и ΛΣΒΝ (120 мг, 0,731 ммоль) в 40 мл бензола при 80°С добавляли гидрид три-н-бутилолова (10,24 мл, 38,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре флегмы в течение 20 мин, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли диэтиловым эфиром и добавляли 100 мл водного раствора КР (10 г) и смесь интенсивно перемешивали в течение 30 мин. Затем два слоя отделяли и водную фазу экстрагировали ЕЮАс (2х). Органический слой сушили М§8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, который деактивировали 3% Еί₃N в гексанах и промывали 3% Еί₃N в гексанах с удалением производного трибутилолова и затем элюировали 15% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-178, стадия к (1,9 г), в виде прозрачного масла. ’Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 7,98-8,07 (2 Н, т), 7,52-7,58 (1 Н, т), 7,43 (2 Н, ί, I = 7,63 Гц), 5,08-5,17 (1 Н, т), 4,06 (1 Н, ккк, I = 11,90, 4,88, 1,53 Гц), 3,50-3,59 (2 Н, т), 2,08-2,14 (1 Н, т), 1,99-2,06 (1 Н, т), 1,69-1,80 (1 Н, т), 1,41-1,49 (1 Н, т), 1,24 (3 Н, к, I = 6,10 Гц).

Сар-178, стадия е ОН

о..

- 64 020815

К смеси Сар-178, стадия ά (1,9 г, 8,63 ммоль), в 10 мл МеОН добавляли метоксид натрия (2 мл, 4,00 ммоль) (2 М В метаноле). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворитель удаляли в вакууме. Смесь нейтрализовали насыщенным раствором МН₄С1 и экстрагировали ЕЮАс (3х). Органические слои сушили МдЗО₄ и концентрировали с получением Сар-178, стадия е (0,8 г), в виде прозрачного масла. Продукт использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ^!Н ЯМР (400 МГц, СБСЕ) δ м.д. 4,01 (1 Н, άάά, 1 = 11,80, 5,02, 1,76 Гц), 3,73 -3,83 (1 Н, т), 3,36 - 3,46 (2

H, т), 1,92 - 2,00 (1 Н, т), 1,88 (1 Н, т), 1,43 - 1,56 (1 Н, т), 1,23 (3НД), 1,15 -1,29(1 Н, т).

Сар-178, стадия £

ОТз

О,

Тозил-С1 (2,63 г, 13,77 ммоль) добавляли в раствор Сар-178, стадия е (0,8 г, 6,89 ммоль) и пиридина (2,23 мл, 27,5 ммоль) в 100 мл СН2С12. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. В реакционную смесь затем добавляли 10 мл воды и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение часа. Два слоя разделяли и органическую фазу промывали водой и 1н. НС1 вод. раствором. Органическую фазу сушили МдЗО₄ и концентрировали с получением Сар-178, стадия £ (1,75 г), в виде светло-желтого твердого вещества. Продукт использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н₁₉О₄З 271,10; обнаружено 270,90; ¹Н ЯМР (500 МГц, СБС1₃) δ м.д. 7,79 (2 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,34 (2 Н, ά, I = 7,93 Гц), 4,53 - 4,62 (1 Н, т), 3,94 (1 Н, άάά, I = 12,13, 4,96, 1,83 Гц), 3,29 -3,41 (2 Н, т), 2,45 (3 Н, к), 1,90 - 1,97 (1 Н, т), 1,79 - 1,85 (1 Н, т),

I, 64 - 1,75 (1 Н, т), 1,38 -1,48 (1 Н, т), 1,17 (3 Н, ά, I = 6,10 Гц).

Сар-178, стадия д

В пробирку для облучения микроволнами помещали этил-2-(дифенилметиленамино)ацетат (1,6 г, 5,92 ммоль) и Сар-178, стадия £ (1,6 г, 5,92 ммоль). Добавляли 10 мл толуола. Пробирку запаивали и по каплям добавляли ЬЕНМБЗ (7,1 мл, 7,10 ммоль) (1 н в толуол) в атмосфере Ν₂. Полученный темнокоричневый раствор нагревали при 100°С при облучении микроволнами в течение 6 ч. К смеси затем добавляли воду и смесь экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили МдЗО₄ и концентрировали с получением смеси диастереомеров Сар-3, стадия д (3,1 г), в виде оранжевого масла. Неочищенную смесь переносили на следующую стадию без разделения. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₃Н₂^О₃ 366,21; обнаружено 366,3.

Сар-178, стадия Ь

В раствор смеси диастереомеров этила Сар-178, стадия д, в 20 мл ТНР добавляли НС1 (30 мл, 60,0 ммоль) (водный 2н.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь экстрагировали ЕЮАс и водный слой концентрировали с получением соли НС1 Сар-178, стадия Ь (1,9 г), в виде оранжевого масла. Соль использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н₂₍^О₃ 202,14; обнаружено 202,1.

Сар-178, стадия ί

Раствор 1,9 г Сар-178, стадия Ь (соль НС1), Б1РЕА (4,19 мл, 24,0 ммоль) и метилхлорформиата (1,24 мл, 16,0 ммоль) в 20 мл СН₂С1₂ перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разбавляли СН₂С1₂ и промывали водой. Органический слой сушили №₂ЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-20% ЕЮАс/Нех) с получением Сар178, стадия ί (1,1 г), в виде желтого масла. Аналитически рассчитано для [М+№]+ С1₂Н₂1NNаΟ5 282,13; обнаружено 282,14; Ή ЯМР (400 МГц, СБС1₃) δ м.д. 5,16 (1 Н, Ьг. к.), 4,43-4,58 (1 Н, т), 4,17-4,28 (2 Н, т), 3,89-4,03 (1 Н, т), 3,72-3,78 (2 Н, т), 3,67-3,72 (3 Н, т), 2,07 - 2,19 (1 Н, т), 1,35-1,77 (4 Н, т), 1,30 (3

- 65 020815

Н, !ά, 1 = 7,09, 2,89 Гц), 1,19 (3 Н, ά, 1 = 6,53 Гц).

Сар-178, стадия _)

О '''

К смеси Сар-178, стадия ί (1,1 г, 4,2 ммоль), В 5 мл ТНР и 2 мл воды добавляли ЫОН (6,36 мл, 12,7 ммоль) (водн. 2 н.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем нейтрализовали водн. 1 н НС1 и экстрагировали ΕίΟΛα (3х). Объединенные органические слои сушили Мд8О₄ и концентрировали с получением Сар-178, стадия _) (0,8 г), в виде прозрачного масла. БСМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₅ 232,12; обнаружено 232,1; ¹Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) 5 м.д. 5,20 (1 Н, ά, 1 = 8,28 Гц), 4,54 (1 Н, !, 1 = 8,16 Гц), 3,95-4,10 (1 Н, т), 3,66 - 3,85 (5 Н, т), 2,15 - 2,29 (1 Н, т), 1,41-1,85 (4 Н, т), 1,23 (3 Н, άά, 1 = 6,53, 1,76 Гц).

Стереоизомер 1, стадия к

В раствор Сар-178, стадия _) (240 мг, 1,04 ммоль), (8)-1-фенилэтанола (0,141 мл, 1,142 ммоль) и БОС (219 мг, 1,14 ммоль) в 10 мл СН₂С1₂ добавляли ΌΙ^ΑΡ (13,95 мг, 0,114 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и растворитель удаляли в вакууме. Остаток поглощали Ε!θΑο, промывали водой, сушили Мд8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией (силикагель, 0-15% Ε!ΟΑс/Гексаны) с получением Сар-178, стадия к, в виде смеси двух диастереомеров. Смесь отделяли хиральной ВЭЖХ (^ΙΚΑΡΡΑΚ® Α8 колонка, 21x250 мм, 10 мкм) с элюированием 90% 0,1%диэтиламина/гептана-10% Е!ОН при 15 мл/мин с получением стереоизомера 1 Сар-178, стадия к (элюирован первым) и стереоизомера 2 Сар-178, стадия к (элюирован вторым) в виде белых твердых веществ. Стереохимия изомеров не была установлена.

Стереоизомер 1. Сар-178, стадия к (130 мг): БС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' С1₈Н₂₅МНаО₅ 358,16; обнаружено 358,16; Ή ЯМР (500 МГц, СПСБ) δ м.д. 7,28-7,38 (5 Н, т), 5,94 (1 Н, д, 1 = 6,71 Гц), 5,12 (1 Н, ά, 1 = 9,16 Гц), 4,55 (1 Н, !, 1 = 9,00 Гц), 3,72-3,81 (1 Н, т), 3,67 (3 Н, 5), 3,60-3,70 (2 Н, т), 1,98-2,08 (1 Н, т), 1,59 (3 Н, ά, 1 = 6,71 Гц), 1,38-1,47 (2 Н, т), 1,30 (2 Н, !, 1 = 5,34 Гц), 0,93 (3 Н, ά, 1 = 6,41 Гц).

Стереоизомер 1. Сар-178.

В раствор стереоизомера 1 Сар-178, стадия к, ((8)-2-(метоксикарбониламино)-2-((28,4Н)-2-метилтетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусная кислота), (150 мг, 0,447 ммоль) в 10 мл Е!ОН добавляли Ρά/С (20 мг, 0,188 ммоль) и смесь гидрировали в шейкере Парра при 40 фунт/кв.дюйм в течение ночи. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали с получением стереоизомера 1 Сар-178, (100 мг) в виде липкого белого твердого вещества. БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^О₅ 232,12; обнаружено 232,1; ΊI ЯМР (500 МГц, С1)С1_;) δ м.д. 5,14-5,27 (1 Н, т), 4,51 (1 Н, !, 1 = 8,39 Гц), 3,90-4,07 (1 Н, т), 3,60-3,83 (5 Н, т), 2,06-2,27 (1 Н, т), 1,45-1,77 (4 Н, т), 1,21 (3 Н, ά, 1 = 6,41 Гц).

Сар-179 (энантиомер-1 и энантиомер-2)

Добавляли 2,6-диметил-4Н-пиран-4-он (10 г, 81 ммоль) растворяли в этаноле (125 мл) и Ρά/С (1 г, 0,94 ммоль). Смесь гидрировали в шейкере Парра в атмосфере Н₂ (0,325 г, 161 ммоль) (70 фунт/кв.дюйм) при комнатной температуре в течение 12 ч. Катализатор отфильтровывали через слой СЕБ1ТЕ® и промывали этанолом. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали в ΒЮΤΑСΕ® (2-25% Ε!θΑο/№χ; колонка 160 д). Выделяли две фракции прозрачных масел. При первом элюировании получали (2К,68)-2,6-диметилдигидро-2Н-пиран-4(3Н)-он (1,8 г), а при втором получали Сар-179, стадия а (1,8 г)

Данные (2К,68)-2,6-диметилдигидро-2Н-пиран-4(3Н)-она: ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 3,69 (2 Н, άάά, 1 = 11,29, 5,95, 2,29 Гц), 2,24-2,36 (2 Н, т), 2,08-2,23 (2 Н, т), 1,18-1,34 (6 Н, т); ¹³С ЯМР (126 МГц, СПСБ) δ м.д. 206,96 (1 С, Ьг. 5.), 72,69 (2 С, 5), 48,70 (2 С, 5), 21,72 (2 С, 5).

- 66 020815

Данные Сар-179, стадия а: ^!Н ЯМР (500 МГц, СНС13) δ м.д. 3,69 - 3,78 (1 Н, т), 3,36 -3,47 (2 Н, т), 2,10 (1 Н, Ьг. 5.), 1,88 (2 Н, άά, 1 = 12,05, 4,73 Гц), 1,19 (6 Н, ά, 1 = 6,10 Гц), 1,10 (2 Н, ц, 1 = 10,70 Гц); ¹³С ЯМР (126 МГц, СНС13) δ м.д. 71,44 (2 С, 5), 67,92 (1 С, 5), 42,59 (2 С, 5), 21,71 (2 С, 5).

Сар-179, стадия Ь

ΝΟ₂

ПЕАО (2,311 мл, 14,59 ммоль) добавляли по каплям в раствор Сар-179, стадия а (0,38 г, 2,92 ммоль), 4-нитробензойной кислоты (2,195 г, 13,14 ммоль) и РЬ₃Р (3,83 г, 14,59 ммоль) в бензоле (25 мл). Обнаружили выделение теплоты и полученный янтарный раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 6 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали в В1ОТАОЕ® (0-15% ЕЮАс/Нех; колонка 80д). Выделяли белое твердое вещество, которое представляет собой Сар-179, стадия Ь (0,77 г). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [М]+ С_МН_ГЫО₅ : 279,11; обнаружено 279,12. Ή ЯМР (500 МГц, СНС1₃) δ м.д. 8,27-8,32 (2 Н, т), 8,20-8,24 (2 Н, т), 5,45 (1 Н, цшп, 1 = 2,82 Гц), 3,92 (2 Н, άςά, 1 = 11,90, 6,10, 6,10, 6,10, 1,53 Гц), 1,91 (2 Н, άά, 1 = 14,80, 2,29 Гц), 1,57 (3 Н, άΐ, 1 = 14,65, 3,05 Гц), 1,22 (6 Н, ά, 1 = 6,10 Гц).

Сар-179, стадия с

V он

Раствор ЬЮН (0,330 г, 13,8 ммоль) в воде (8 мл) добавляли в раствор Сар-179, стадия Ь (0,77 г, 2,76 ммоль), в ТНР (30 мл) и полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 16 ч. ТНР удаляли при пониженном давлении и водный слой разбавляли большим количеством воды (20 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3х 15 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Восстанавливали масляный остаток с белым твердым веществом. Смесь перетирали с гексанами и твердое вещество отфильтровывали с получением прозрачного масла, которое представляет собой Сар-179, стадия с (0,34 г). ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭСЕ) δ м.д. 4,21 (1 Н, сции 1 = 2,82 Гц), 3,87 - 3,95 (2 Н, т), 1,72 (1 Н, Ьг. 5.), 1,63 (2 Н, άά, 1 = 14,34, 2,14 Гц), 1,39 - 1,47 (2 Н, т), 1,17 (6 Н, ά, 1 = 6,41 Гц).

Сар-179, стадия ά

V ότε р-Тозилхлорид (3,98 г, 20,89 ммоль) добавляли в раствор Сар-179, стадия с (1,36 г, 10,5 ммоль) и пиридина (3,38 мл, 41,8 ммоль) в СН₂С1₂ (150 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 24 ч и затем концентрировали до желтого масла. Оставшийся остаток добавляли в пиридин (20 мл) и воду (30 мл) и полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среде в течение 1 1/2 ч. Смесь экстрагировали ЕьО (75 мл) и отделенный органический слой тщательно промывали 1н. вод. НС1 (4х50 мл). Органический слой затем сушили ^^О₄), фильтровали и концентрировали. Выделяли белое твердое вещество, представляющее собой Сар-179, стадия ά (2,2 г). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [2М+Н]+ С₂₈Н₄₁О^₂ : 569,22; обнаружено 569,3. Ή ЯМР (400 МГц, СНС1₃) δ м.д. 7,80 (2 Н, ά, 1 = 8,28 Гц), 7,35 (2 Н, ά, 1 = 8,03 Гц), 4,89 (1 Н, диш, 1 = 2,82 Гц), 3,77-3,88 (2 Н, т), 2,46 (3 Н, 5), 1,77 (2 Н, άά, 1 = 14,93, 2,89 Гц), 1,36 (2 Н, άάά, 1 = 14,31, 11,54, 2,76 Гц), 1,13 (6 Н, ά, 1 = 6,27 Гц).

Сар-179, стадия е

РН

ΕίΜΜΟδ (4,30 мл, 4,30 ммоль) добавляли в раствор Сар-179, стадия ά (1,02 г, 3,59 ммоль) и бензил2-(дифенилметиленамино)ацетата (1,181 г, 3,59 ммоль) в толуоле (25 мл) при комнатной температуре в запаянном сосуде для микроволнового облучения и полученную смесь затем перемешивали в течение 5 ч при 100°С при облучении микроволнами. Реакцию гасили водой (10 мл), экстрагировали ЕЮАс, промывали водой, сушили над Μ§δО₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали в В1ОТАОЕ® (0-6% ЕЮАс/Нех; колонка 80д) и выделяли желтое масло, которое представляет собой Сар-179, стадия е (1,2 г). Аналитически рассчитано для |2Μ+Νη|' С₅₈Н₆₂Ы₂ЫаО₆ : 905,45; обнаружено 905,42. ¹Н ЯМР (400 МГц, СНС1₃) δ м.д. 7,64-7,70 (4 Н, т), 7,29-7,44 (29 Н, т), 7,06 (4 Н, άά, 1 = 7,65, 1,63 Гц), 5,18 (2

- 67 020815

Н, 6, 1 = 2,01 Гц), 3,89 (2 Н, 6, 1 = 6,53 Гц), 3,79-3,87 (1 Н, т), 3,46 (5 Н, скрний 1 = 11,26, 5,87, 5,87, 5,87, 5,87, 1.88 Гц), 2,47 (2 Н, 5), 2,35-2,46 (2 Н, т), 1,78 (1 Н, 66, 1 = 14,81, 3,01 Гц), 1,62-1,65 (1 Н, т), 1,61 (2 Н, 5), 1,36-1,43 (3 Н, т), 1,19 (7 Н, 6, 1 = 6,27 Гц), 1,14 (11 Н, 66, 1 = 6,15, 2.89 Гц), 0,86-0,96 (3 Н, т).

Сар-179, стадия £ (энантиомер-1 и энантиомер-2) \

о

Сар-179, стадия е (2,08 г, 4,71 ммоль), растворяли в ТНР (100 мл) и обрабатывали 2н. НС1 (9,42 мл, 18,84 ммоль). Полученный прозрачный раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 4 ч и затем ТНР удаляли при пониженном давлении. Оставшийся водный слой экстрагировали гексанами (3x20 мл) и после разбавления Н₂О (20 мл) водную фазу превращали в основание при помощи 1н. ЫаОН до рН 10 и экстрагировали ЕЮАс (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили (Μ§δО₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученный остаток поглощали СН₂С1₂ (100 мл) и загружали ОЕЕА (2,468 мл, 14,13 ммоль) и метилхлорформиат (0,401 мл, 5,18 ммоль). Полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и органический слой удаляли при пониженном давлении. Водный слой затем экстрагировали ЕЮАс (3x10 мл) и объединенные органические слои сушили ^^ОД фильтровали и концентрировали. Остаток очищали в ВЮТАОЕ® (10% ЕЮАс/Нех; колонка 25 §). Восстанавливали прозрачное бесцветное масло, которое представляет собой Сар-179, стадия £ (1,05 г). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Нф С₁₈Н₂₆ЫО₅ : 336,18; обнаружено 336,3. ’Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ м.д. 7,32-7,40 (5 Н, т), 5,26 (1 Н, 6, I = 8,24 Гц), 5,13-5,24 (2 Н, т), 4,36 (1 Н, 66, I = 8,85, 4,88 Гц), 3,68 (3 Н, 5), 3,32-3,46 (2 Н, т), 2,022,14 (1 Н, т), 1,52 (1 Н, 6, I = 12,82 Гц), 1,32 (1 Н, 6, I = 12,51 Гц), 1,11-1,18 (6 Н, т), 0,89-1,07 (2 Н, т).

Способ хиральной δРС разрабатывали для разделения рацемической смеси с применением 12% метанола в качестве модификатора на колонке СШКАЬРАК® ΛΌ-Н (30x250 мм, 5мкм) (темп. = 35°С, давление = 150 бар, длина волны = 210 нм, скорость потока = 70 мл/мин в течение 8 мин, растворитель А = СО₂, растворитель В = ΜеОН). Два отдельных изомера, Сар-179, стадия £ (энантиомер-1) (первое элюирование) и Сар-179, стадия £ (энантиомер-2) (второе элюирование), проявляли те же аналитические значения, что и соответствующая смесь (см. выше).

Сар-179 (энантиомер-1 и энантиомер-2)

Сар-179, стадия £ (энантиомер-1) (0,35 г, 1,044 ммоль), растворяли в ΜеОН (50 мл) в сосуде Парра и загружали Р6/С (0,111 г, 1,044 ммоль). Суспензию затем помещали в шейкер Парра и смесь промывали Ν₂ (3х), помещали в атмосферу Н₂ при 40 фунт/кв.дюйм (2,104 мг, 1,044 ммоль) и встряхивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Катализатор отфильтровывали через слой СЕЫТЕ® и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением янтарного твердого вещества, которое представляет собой энантиомер-1 Сар-179 (0,25 г). ’Н ЯМР (500 МГц, ^ΜδО-6₆) δ м.д. 12,74 (4 Н, Ьг. 5.), 7,35 (4 Н, 6, I = 6,10 Гц), 3,85 (4 Н, Ьг. 5.), 3,53 (3 Н, 5), 3,35 (2 Н, 666, I = 15,95, 9,99, 6,10 Гц), 1,97 (1 Н, Ьг. 5.), 1,48 (2 Н, ΐ, I = 13,28 Гц), 1,06 (6 Н, 6, I = 6,10 Гц), 0,82 -1,00 (2 Н, т). Энантиомер-2 Сар-179 получали подобным образом: ’Н ЯМР (500 МГц, ^ΜδО-6₆) δ м.д. 12,50 (1 Н, Ьг. 5.), 7,31 (1 Н, Ьг. 5.), 3,84 (1 Н, ΐ, I = 7,32 Гц), 3,53 (3 Н, 5), 3,29 - 3,41 (2 Н, т), 1,99 (1 Н, 5), 1,48 (2 Н, ΐ, I = 14,34 Гц), 1,06 (6 Н, 6, I = 6,10 Гц), 0,95 (1 Н, ер 1 = 12,21 Гц), 0,87 (1 Н, ср 1 = 11,80 Гц). [Примечание: незначительное изменение профиля ’Н ЯМР энантиомеров, вероятно, является результатом различия концентрации образцов].

Сар-180 (рацемическая смесь)

Сар-180, стадия а ν. X

ОТз р-Тозил-С1 (4,39 г, 23,0 ммоль) добавляли в раствор Сар-179, стадия а (1,50 г, 11,5 ммоль) и пиридина (3,73 мл, 46,1 ммоль) в СН₂С1₂ (50 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 2 суток. Реакционную смесь разбавляли СН₂С1₂, промывали водой, затем ’н. НС1. Органический слой сушили (Μ§δϋ₄) и концентрировали до желтого масла, которое очищали в ВЮТАОЕ® (5% - 20% ЕЮАс/Нех; колонка 40д). Выделяли прозрачное масло, которое отвердевало в вакууме и представляет собой Сар-180, стадия а (2,89 г). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для |2Μ+Νη|' С₂₈Н₄₀№О^₂ : 591,21; обнаружено 591,3. ’Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ м.д. 7,80 (2 Н, 6, I = 8,24 Гц), 7,35 (2 Н, 6, I = 7,93 Гц), 4,59 (1 Н, й, I = 11,37, 4,96 Гц), 3,36-3,46 (2 Н, т), 2,46 (3 Н, 5), 1,91 (2 Н, 66, I = 12,05, 5,04 Гц), 1,37 (2 Н, 6ΐ, I = 12,67,

- 68 020815

11,52 Гц), 1,19 (6 Н, ά, 1 = 6,10 Гц).

Сар-180, стадия Ь

ЫНМЭ8 1н. (7,09 мл, 7,09 ммоль) добавляли в раствор Сар-180, стадия а (1,68 г, 5,91 ммоль) и этил2-(дифенилметиленамино)ацетата (1,579 г, 5,91 ммоль) в толуоле (30 мл) при комнатной температуре и полученную смесь затем перемешивали в течение 16 ч при 85°С. Реакцию гасили водой (50 мл), экстрагировали ЕЮАс. промывали водой, сушили над М§80₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали в ВЮТАСЕ® (0-15% ЕЮАс/Нех; колонка 40д). Выделяли прозрачное желтоватое масло, которое представляет собой Сар-180, стадия Ь (рацемическая смесь; 0,64 г). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₄Н₃^0₃ : 380,22; обнаружено 380,03. ^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 7,64-7,70 (2 Н, т), 7,45-7,51 (3 Н, т), 7,38-7,44 (1 Н, т), 7,31-7,37 (2 Н, т), 7,13-7,19 (2 Н, т), 4,39 (1 Н, ά, 1 = 10,54 Гц), 4,16-4,26 (2 Н, т), 3,29-3,39 (1 Н, т), 2,93-3,03 (1 Н, т), 2,70 (1 Н, т, 1 = 9,41, 4,14 Гц), 1,42-1,49 (2 Н, т), 1,31-1,37 (1 Н, т), 1,29 (4 Н, ΐ, 1 = 7,15 Гц), 1,04 (6 Н, άά, 1 = 7,78, 6,27 Гц).

Сар-180, стадия с

Сар-180, стадия Ь (0,36 г, 0,949 ммоль), растворяли в ТНР (10 мл) и обрабатывали 2н. НС1 (1,897 мл, 3,79 ммоль). Полученный прозрачный раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 20 ч и ТНР удаляли при пониженном давлении. Оставшийся водный слой экстрагировали гексанами (3х20 мл) и после разбавления Н₂0 (20 мл) водную фазу превращали в основание при помощи 1н. №ЮН до рН 10 и экстрагировали ЕЮАс (3х 10 мл). Объединенные органические слои сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученный остаток поглощали СН₂С1₂ (10,00 мл) и загружали ЭША (0,497 мл, 2,85 ммоль) и метилхлорформиат (0,081 мл, 1,044 ммоль). Полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 2 ч, реакционную смесь гасили водой (10 мл) и органический слой удаляли при пониженном давлении. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (3х 10 мл) и объединенные органические слои сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали. Все янтарное масло, которое представляет собой Сар-180, стадия с (0,21 г), восстанавливали и использовали его без дополнительной очистки. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н₂₄Ы05 : 273,17; обнаружено 274,06. ^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 5,20 (1 Н, ά, 1 = 8,03 Гц), 4,59 (1 Н, ΐ, 1 = 10,16 Гц), 4,11-4,27 (3 Н, т), 3,69-3,82 (2 Н, т), 3,64 (3 Н, 5), 1,95-2,07 (1 Н, т), 1,63 (1 Н, ά, 1 = 13,80 Гц), 1,41 (2 Н, άά, 1 = 8,03, 4,02 Гц), 1,31-1,37 (1 Н, т), 1,26 (3 Н, ΐ, 1 = 7,15 Гц), 1,16 (1 Н, ά, 1 = 6,27 Гц), 1,12 (6 Н, άά, 1 = 6,15, 3,89 Гц).

Сар-180 (рацемическая смесь)

Сар-180, стадия с (0,32 г, 1,2 ммоль), растворяли в ТНР (10 мл) и загружали ЬЮН (0,056 г, 2,342 ммоль) в воде (3,33 мл) при 0°С. Полученный раствор перемешивали при к.т. в течение 2 ч. ТНР удаляли при пониженном давлении и оставшийся остаток разбавляли водой (15 мл) и промывали Е,₂0 (2х 10 мл). Водный слой затем подкисляли 1н. НС1 до рН ~ 2 и экстрагировали ЕЮАс (3х 15 мл). Объединенные органические слои сушили (М§80₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Сар-180 (рацемическая смесь) (0,2 г) в виде белой пены. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцН_2СЦ05 : 246,13; обнаружено 246,00. ^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ м.д. 5,14 (1 Н, ά, 1 = 9,03 Гц), 4,65 (1 Н, ΐ, 1 = 9,91 Гц), 3,63-3,89 (5 Н, т), 1,99-2,13 (1 Н, т), 1,56-1,73 (2 Н, т), 1,48 - 1,55 (1 Н, т), 1,35 - 1,48 (1 Н, т), 1,27 (1 Н, Ьг. 5.), 1,17 (6 Н, ά, 1 = 6,02 Гц).

Сар-185 (энантиомер-1 и энантиомер-2)

Сар-185, стадия а

К смеси фурана (1,075 мл, 14,69 ммоль) и цинка (1,585 г, 24,24 ммоль) в 1 мл ТНР добавляли по каплям 1,1,3,3-тетрабромпропан-2-он (8,23 г, 22,03 ммоль) и триэтилборат (5,25 мл, 30,8 ммоль) в 4 мл ТНР в течение 1 ч в темноте. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в темноте в течение 17 ч. Полученную темно-коричневую смесь охлаждали до -15°С и добавляли 6 мл воды. Смесь на- 69 020815 гревали до 0°С и перемешивали при этой температуре в течение 30 мин. Смесь затем фильтровали и промывали эфиром. Фильтрат разбавляли водой и экстрагировали эфиром (3Ж). Объединенные органические слои сушили М§ЗО₄ и концентрировали с получением темно-коричневого цвета. Темно-коричневое масло растворяли в 6 мл МеОН и раствор добавляли по каплям к смеси цинка (4,99 г, 76 ммоль), хлорида меди (I) (0,756 г, 7,64 ммоль) и хлорида аммония (5,4 г, 101 ммоль) в 20 мл МеОН. Во время добавления температуру реакции поддерживали ниже 15°С. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч, фильтровали и фильтрат разбавляли водой и экстрагировали СН₂С1₂ (3Ж). Объединенные органические слои сушили М§ЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-14% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-185, стадия а, в виде белого твердого вещества (1,0 г) в виде белого твердого вещества, которое вскоре превращалось в желтое. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 6,24 (2 Н, 8), 5,01 (2 Н, б, I = 4,88 Гц), 2,73 (2 Н, бб, I = 16,94, 5,04 Гц), 2,31 (2 Н, б, I = 16,79 Гц).

Сар-185, стадия Ь

В раствор Сар-185, стадия а (240 мг, 1,933 ммоль), в 2 мл ТНР при -78°С добавляли по каплям Ьселектрид (3,87 мл, 3,87 ммоль) (1 М в ТНР) в течение 100 мин. Полученную смесь перемешивали при 78°С в течение 1 ч и затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем охлаждали до 0°С, добавляли 4 мл 20% водного раствора №ЮН, с последующим добавлением по каплям 2 мл Н₂О₂ (30% воды раствор). Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч и затем нейтрализовали 6н. НС1 (~5 мл). Водный слой насыщали ΝαΟ и экстрагировали СН₂С1₂ (3Ж). Объединенные органические слои сушили М§ЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-40% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-185, стадия Ь (180 мг), в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 6,49 (2 Н, 8), 4,76 (2 Н, б, I = 4,27 Гц), 3,99 (1 Н, ΐ, I = 5,77 Гц), 2,29 (2 Н, ббб, I = 15,18, 5,65, 4,02 Гц), 1,70-1,78 (2 Н,т).

Сар-185, стадия с °я

ОТ5 р-Тозил-С1 (544 мг, 2,85 ммоль) добавляли в раствор Сар-185, стадия Ь (180 мг, 1,427 ммоль) и пиридина (0,462 мл, 5,71 ммоль) в 5 мл СН₂С1₂ (5 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток. Реакционную смесь разбавляли СН₂С1₂ и промывали 1н. вод. НС1. Водный слой экстрагировали СН₂С1₂ (2Ж). Объединенные органические слои сушили М§ЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-185, стадия с (210 мг), в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 7,73 (2 Н, б, I = 8,24 Гц), 7,32 (2 Н, б, I = 8,24 Гц), 6,25 (2 Н, 8), 4,76 (1 Н, ΐ, I = 5,65 Гц), 4,64 (2 Н, б, I = 3,66 Гц), 2,44 (3 Н, 8), 2,18 (2 Н, 16, I = 10,07, 5,49 Гц), 1,71 (2 Н, б, I = 15,56 Гц).

Сар-185, стадия б

Пробирку для облучения микроволнами загружали бензил-2-(дифенилметиленамино)ацетатом (1,5 г, 4,57 ммоль) и Сар-185, стадия с (1,28 г, 4,57 ммоль), в 5 мл толуола. Пробирку запаивали и ЫНМЭЗ (5,5 мл, 5,5 ммоль) (1н. в толуоле) добавляли по каплям в атмосфере Ν₂. Полученный темно-коричневый раствор нагревали при 10°С в микроволнах в течение 5 ч. К смеси затем добавляли воду и ЕЮАс. Слои разделяли и водную фазу экстрагировали ЕЮАс (2Ж). Объединенные органические слои концентрировали с получением Сар-185, стадия б, в виде рацемической смеси. Неочищенную смесь переносили на следующую стадию без очистки или разделения. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₉Н₂^О₃438,21; обнаружено 438,4.

Сар-185, стадия е ΝΗ, /=\

В раствор рацемической смеси Сар-185, стадия б, в 30 мл ТНР добавляли НС1 (20 мл) (2н. вод.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции, исходя из ТЬС, два слоя разделяли. Водный слой промывали ЕЮАс, нейтрализовали нас. водн. раствором NаНСΟ₃ и затем экстрагировали ЕЮАс (3Ж). Объединенные органические слои сушили М§ЗО₄ и концентрировали с получением Сар-185, стадия е. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+

- 70 020815

С₁₆Н₂₍^О₃ 274,14; обнаружено 274,12.

Сар-185, стадия ί

Раствор неочищенного Сар-185, стадия е, ΌίΡΒΆ (1,24 мл, 7,1 ммоль) и метилхлорформиата (0,55 мл, 7,1 ммоль) в 5 мл СН₂С1₂ перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь затем разбавляли СН₂С1₂ и промывали водой. Органический слой сушили №₂8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-40% ЕЮЛс/Нех) с получением 700 мг рацемической смеси. Смесь затем разделяли хиральной ВЭЖХ (СНГКЛЬРЛК® ЛЭ-Н колонка, 30x250 мм, 5 мкм) с элюированием 88% СО2-12% ЕЮН при 70 мл/мин с получением 240 мг энантиомера-1 и 310 мг энантиомера-2 Сар-1, стадия ί, в виде белых твердых веществ. Энантиомер-1: ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₈Н₂₂НО₅ 332,15; обнаружено 332,3. ^!Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 7,30-7,40 (5 Н, т), 6,03-6,16 (2 Н, т), 5,09-5,26 (3 Н, т), 4,65-4,74 (2 Н, т), 4,33 (1 Н, άά, 1 = 9,16, 4,88 Гц), 3,67 (3 Н, 8), 2,27-2,38 (1 Н, т), 1,61-1,69 (1 Н, т), 1,45-1,56 (1 Н, т), 1,34 (1 Н, άά, 1 = 13,43, 5,19 Гц), 1,07 (1 Н, άά, 1 = 13,12, 5,19 Гц). Энантиомер-2: ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₈Н₂₂НО₅332,15; обнаружено 332,06.

Сар-185 (энантиомер-1 и энантиомер-2)

В сосуд для гидрирования, который содержит раствор Сар-185, стадия ί, (энантиомер-2) (300 мг, 0,905 ммоль) в 10 мл МеОН добавляли Ρά/С (15 мг, 0,141 ммоль) в атмосфере азота. Смесь гидрировали в шейкере Парра при 40 фунт/кв.дюйм в течение 3 ч. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали с получением Сар-185 (энантиомер-2) (200 мг) в виде белого твердого вещества. ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^О₅ 244,12; обнаружено 244,2. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 5,33 (1 Н, Ьг. 8.), 4,46 (2 Н, ά), 4,28 (1 Н, Ьг. 8.), 3,68 (3 Н, 8), 2,35 (1 Н, Ьг. 8.), 1,91 -2,03 (2 Н, т), 1,56 - 1,80 (4 Н, т), 1,36 - 1,55 (2 Н, т). [Примечание: Сар-185 (энантиомер-1) может быть получен подобным образом].

Сар-186

В раствор сложного эфира Сар-185, стадия ί (энантиомер-2) (150 мг, 0,453 ммоль), в 4 мл МеОН добавляли №ЮН (4 мл 1н. в воде, 4,00 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Метанол затем удаляли в вакууме и остаток нейтрализовали 1н. раствором НС1 и экстрагировали ЕЮЛс (3х). Объединенные органические слои сушили Мд§О₄ и концентрировали с получением Сар-186, который был загрязнен некоторым количеством бензилового спирта (густое белое твердое вещество; 115 мг). ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^Оз 242,10; обнаружено 242,1. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 6,10 - 6,19 (2 Н, т), 5,36 (1 Н, ά, 1 = 8,85 Гц), 4,75 - 4,84 (2 Н, т), 4,28 (1 Н, άά, 1 = 8,55, 4,58 Гц), 3,68 (3 Н, 8), 2,33 - 2,45 (1 Н, т), 1,60 -1,72 (2 Н, т), 1,30 - 1,48 (2 Н, т).

Сар-187, стадия а

В раствор Сар-178, стадия е (2,2 г, 18,94 ммоль), РРЬ₃ (24,84 г, 95 ммоль) и 4-натробензойной кислоты (14,24 г, 85 ммоль) в 30 мл бензола добавляли по каплям ПЕЛО (42,9 мл, 95 ммоль). Полученный светло-оранжевый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель затем удаляли в вакууме и остаток очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮЛс/Нех) с получением Сар-187, стадия а (2,3 г), в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 8,27-8,34 (2 Н, т), 8,20-8,26 (2 Н, т), 5,45 (1 Н, ΐ, 1 = 2,90 Гц), 3,83 -3,96 (3 Н, т), 1,90-2,03 (2 Н, т), 1,80-1,88 (1 Н, т), 1,61-1,70 (1 Н, т), 1,21 (3 Н, ά, 1 = 6,10 Гц).

Сар-187, стадия Ь

- 71 020815 он α

В раствор Сар-187, стадия а (2,3 г, 8,67 ммоль), в 10 мл Ме0Н добавляли метоксид натрия (2,372 мл, 8,67 ммоль) (25% в метаноле). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли воду и смесь экстрагировали ЕЮАс (5х). Объединенные органические слои сушили М§§0₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮАс/Нех, затем 15-50% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-187, стадия Ь (0,85 г), в виде прозрачного масла. ^!Н ЯМР (500 МГц, СОС1₃) δ м.д. 4,19-4,23 (1 Н, т), 3,82-3,91 (2 Н, т), 3,73-3,79 (1 Н, т), 1,79-1,88 (1 Н, т), 1,62-1,68 (1 Н, т), 1,46-1,58 (2 Н, т), 1,14 (3НД I = 6,10 Гц).

Сар-187

Отдельные энантиомеры Сар-187 синтезировали из Сар-187, стадия Ь, описанной для Сар-178 методикой. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н^0₅ 232,12; обнаружено 232,1. ¹Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ м.д. 5,26 (1 Н, ά, ί = 7,78 Гц), 4,32-4,43 (1 Н, т), 4,07 (1 Н, άά, ί = 11,54, 3,51 Гц), 3,72 (3 Н, 5), 3,39-3,50 (2 Н, т), 2,08-2,23 (1 Н, т), 1,54-1,68 (1 Н, т), 1,38-1,52 (1 Н, т), 1,11-1,32 (5 Н, т).

Сар-188 (четыре стереоизомера)

Сар-188, стадия а

В раствор 2,2-диметилдигидро-2Н-пиран-4(3Н)-она (2 г, 15,60 ммоль) в 50 мл Ме0Н медленно добавляли боргидрид натрия (0,649 г, 17,16 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. К смеси затем добавляли водный раствор 1н. НС1, пока она не стала с кислым диапазоном рН и затем экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои сушили М§§0₄ и концентрировали с получением Сар-188, стадия а (1,9 г), в виде прозрачного масла.

Продукт использовали в следующей стадии без очистки. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) δ м.д. 3,91-4,02 (1 Н, т), 3,79-3,86 (1 Н, т), 3,63 (1 Н, ίά, I = 12,05, 2,51 Гц), 1,82-1,93 (2 Н, т), 1,40-1,53 (1 Н, т), 1,291,38 (1 Н, т), 1,27 (3 Н, 5), 1,20 (3 Н, 5).

Сар-188,1 и Сар-188,2, стадия Ь

р-Тозил-С1 (5,56 г, 29,2 ммоль) добавляли в раствор Сар-188, стадия а (1,9 г, 14,59 ммоль) и пиридина (4,72 мл, 58,4 ммоль) в 100 мл СН2С12. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. В реакционную смесь добавляли 10 мл воды и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительного часа. Два слоя разделяли и органическую фазу промывали водой и водным раствором 1н. НС1. Органическую фазу сушили М§§0₄ и концентрировали с получением смесь двух энантиомеров в виде светло-желтого твердого вещества. Смесь затем разделяли хиральной ВЭЖХ (СНГОАЬРАК® АО колонка, 21x250 мм, 10 мкм) с элюированием 92% 0,1%диэтиламина/гептана-8% ЕЮН при 15 мл/мин с получением Сар-188,1, стадия Ь (1,0 г) и Сар-188,2, стадия Ь (1,0 г). Абсолютная стереохимия двух энантиомеров не была определена. Сар-188,1, стадия Ь: ЬС-М8: аналитически рассчитано для [2М+№]+ С₂₈Н₄₀№0₈8₂ 591,21; обнаружено 591,3. ^!Н ЯМР (500 МГц, СОС1₃) δ м.д. 7,79 (2 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,34 (2 Н, ά, I = 8,24 Гц), 4,72-4,81 (1 Н, т), 3,78 (1 Н, άί, I = 12,44, 4,16 Гц), 3,53-3,61 (1 Н, т), 2,45 (3 Н, 5), 1,75-1,86 (2 Н, т), 1,61-1,71 (1 Н, т), 1,52-1,60 (1 Н, т), 1,22 (3 Н, 5), 1,14 (3 Н, 5). Сар188,2, стадия Ь: ЬС-М8: аналитически рассчитано для [2М+№]+С₂₈Н₄₀№0₈8₂ 591,21; обнаружено 591,3;

Сар-188

Четыре стереоизомера Сар-188 могут быть синтезированы из Сар-188,1, стадия Ь и Сар-188,2, стадия Ь, описанной для получения Сар-178 методикой. Сар-188 (стереоизомер-1): ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' СцН₁₈МНа0₅ 268,12; обнаружено 268,23. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС13) δ м.д. 5,32 (1 Н, ά, I = 8,55 Гц), 4,26-4,35 (1 Н, т), 3,57-3,82 (5 Н, т), 2,11-2,34 (1 Н, т), 1,25-1,58 (4 Н, т), 1,21 (6 Н, ά, I = 6,10 Гц). Сар-188 (стереоизомер-2): ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СцН2(^05 246,13; обнаружено 246,1. ^!Н ЯМР (500 МГц, СОС13) δ м.д. 5,25 (1 Н, ά, I = 8,55 Гц), 4,33 (1 Н, άά, I = 8,39, 5,04 Гц), 3,80 (1 Н, άά, I = 11,90, 3,97 Гц), 3,62 - 3,76 (4 Н, т), 2,20 - 2,32 (1 Н, т), 1,52 - 1,63 (1 Н, т), 1,27 - 1,49 (3 Н, т), 1,22 (6 Н, ά, I = 14,04 Гц).

Сар-189

- 72 020815

Саρ-189, стадия а

В раствор фенилмагнийбромида (113 мл, 340 ммоль) (3 М в эфире) в 100 мл эфира добавляли по каплям экзо-2,3-эпоксинорборнан (25 г, 227 ммоль) в 50 мл эфира. После начального выделения тепла смесь нагревали до температуры флегмы в течение ночи. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и осторожно гасили водой (~ 10 мл). Смесь разбавляли эфиром и промывали водным раствором 3н. ΗΟ (~ 160 мл). Водный слой экстрагировали эфиром и объединенные органические слои сушили Μ§δΟ₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флешхроматографии (силикагель, 0-18% ΕίΟΑс/Нех) с получением Сар-189, стадия а (11 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, СОС1_;) δ м.д. 6,03-6,11 (2 Н, т), 3,76 (1 Н, б, ί = 11,29 Гц), 2,72-2,81 (2 Н, т), 1,98 (1 Н, б, ί = 11,29 Гц), 1,67 - 1,76 (2 Н, т), 0,90-0,97 (2 Н, т).

Сар-189, стадия Ь

В раствор оксалилхлорида (59,9 мл, 120 ммоль) в 200 мл 0Η₂Ο₂ при -78°С добавляли ΌΜδΟ (17,01 мл, 240 ммоль) в 100 мл ΟΗ₂0₂. Смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли Сар-189, стадия а (11 г, 100 ммоль), в 150 мл СЩС1₂ с последующим добавлением Εί₃Ν (72,4 мл, 519 ммоль) в 30 мл ΟΗ₂0₂. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем нагревали до комнатной температуры. Добавляли воду (150 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Два слоя затем разделяли и водный слой экстрагировали 0Η₂Ο₂ ^). Органические слои объединяли, сушили Μ§δΟ₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-5% ΕίΟΑс/Ηеx) с получением Сар-189, стадия Ь (5,3 г), в виде светло-желтого масла. ¹Η ЯМР (500 МГц, СОС1_;) δ м.д. 6,50-6,55 (2 Н, т), 2,78 -2,84 (2 Н, т), 1,92-1,99 (2 Н, т), 1,17-1,23 (2 Н, т).

Сар-189, стадия с

Смесь Сар-189, стадия Ь (5,3 г, 49,0 ммоль), моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (1,492 г, 7,84 ммоль) и этиленгликоля (4,10 мл, 73,5 ммоль) в 100 мл бензола нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разделяли между Εί₂Ο и водным нас. раствором Ν;·ι^'.Ό₃, и два слоя разделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили Μ§δΟ₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-6% ΕίΟΑс/Ηеx) с получением Сар-189, стадия с (5,2 г), в виде прозрачного масла. ¹Η ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 6,20 (2 Н, ί, ί = 2,13 Гц), 3,903,97 (2 Н, т), 3,81-3,89 (2 Н, т), 2,54 (2 Н, т), 1,89-1,99 (2 Н, т), 0,95-1,03 (2 Н, т).

Сар-189, стадия б

Раствор Сар-189, стадия с (5,2 г, 34,2 ммоль), в 60 мл ΜеΟΗ и 50 мл 0Η₂Ο₂ охлаждали до -78°С и обрабатывали газообразным озоном, пока не появился светло-голубой цвет. Затем реакционную смесь барботировали Ν2 с удалением избытка газообразного озона (голубой цвет исчез) и в реакционную смесь добавляли боргидрид натрия (1,939 г, 51,3 ммоль). Реакционную смесь затем нагревали до 0°С. В смесь добавляли ацетон, чтобы погасить избыток боргидрида натрия. Смесь концентрировали и остаток очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 100% ΕίΟΑ^ с получением Сар-189, стадия б (5,0 г), в виде прозрачного масла. ¹Η ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 3,99-4,09 (4 Η, т), 3,68 (4 Н, т), 2,17-2,29 (2 Н, т), 1,92-2,10 (2 Н, т), 1,77-1,88 (2 Н, т), 1,57-1,70 (2 Η, т).

Саρ-189, стадия е

- 73 020815

В раствор Сар-189, стадия б (1 г, 5,31 ммоль), в 20 мл СН2С12 добавляли оксид серебра (3,8 г), р-Т5С1 (1,215 г, 6,38 ммоль) и Кб (0,176 г, 1,063 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 60% ЕЮАс/Нех) с получением Сар189, стадия е (0,79 г), в виде прозрачного масла. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+№]+ С1 ЕЛаО-.З 365,10; обнаружено 365,22. ^!Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 7,80 (2 Н, б, б = 8,28 Гц), 7,36 (2 Н, б, б = 8,03 Гц), 4,11-4,17 (1 Н, т), 3,85-4,06 (5 Н, т), 3,64-3,71 (1 Н, т), 3,55-3,63 (1 Н, т), 2,47 (3 Н, 5), 2,32-2,43 (1 Н, т), 2,15-2,27 (1 Н, т), 1,70-1,89 (2 Н, т), 1,52-1,66 (1 Н, т), 1,35-1,47 (1 Н, т).

Сар-189, стадия ί

В раствор Сар-189, стадия е (2,2 г, 6,43 ммоль), в 40 мл МеОН добавляли карбонат калия (1,776 г, 12,85 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем разбавляли водой и ЕЮАс. Два слоя разделяли. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили МдЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-189, стадия ί (0,89 г, 5,23 ммоль, 81%), в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 3,89 - 4,02 (6 Н, т), 3,58 (2 Н, бб, б = 10,79, 2,51 Гц), 1,69 - 1,89 (6 Н, т).

Сар-189, стадия д

К раствору Сар-189, стадия ί (890 мг, 5,23 ммоль), в 15 мл ТНР добавляли НС1 (15 мл, 45,0 ммоль) (3 М водный). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем разбавляли эфиром и разделяли два слоя. Водную фазу экстрагировали эфиром (2х) и объединенные органические слои сушили МдЗО₄ и концентрировали с получением Сар-189, стадия д (0,95 г, содержащего некоторое количество оставшихся растворителей). Продукт использовали в следующей стадии без очистки. Ή ЯМР (500 МГц, СОСЕ) δ м.д. 3,95-4,00 (2 Н, т), 3,85 (2 Н, б, б = 10,68 Гц), 2,21-2,28 (2 Н, т), 1,99 - 2,04 (2 Н, т), 1,90-1,96 (2 Н, т).

Сар-189, стадия Н (энантиомер-1 и энантиомер-2)

В раствор сложного эфира (+/-)-бензилоксикарбонил-а-фосфоноглицинтриметила (1733 мг, 5,23 ммоль) в 6 мл ТНР при -20°С добавляли 1,1,3,3-тетраметилгуанидин (0,723 мл, 5,75 ммоль). Полученную светло-желтую смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч и добавляли Сар-189, стадия д (660 мг, 5,23 ммоль), в 3 мл ТНР и смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток. Реакционную смесь затем разбавляли ЕЮАс. промывали 0,1н. НС1 вод. раствором. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х) и объединенные органические слои сушили МдЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-4% ЕЮАс/СН₂С1₂) с получением 960 мг рацемической смеси. Смесь отделяли хиральной ВЭЖХ (СШКАЬРАК® АО колонка, 21x250 мм, 10 мкм) с элюированием 90% 0,1% диэтиламина/гептанов-10% ЕЮН при 15 мл/мин с получением Сар-189, стадия Н (энантиомер-1; 300 мг) и Сар-189, стадия Н (энантиомер-2; 310 мг), в виде белых твердых веществ. Сар-189, стадия Н (энантиомер-1): ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₈Н₂^О₅332,15; обнаружено 332,2. Ή ЯМР (500 МГц, СОСЕ) δ м.д. 7,29 - 7,41 (5 Н, т), 6,00 (1 Н, Ьг. 5.), 5,13 (2 Н, 5), 3,63 - 3,87 (8 Н, т), 2,84 (1 Н, Ьг. 5.), 1,84 - 2,02 (2 Н, т), 1,63 - 1,84 (2 Н, т). Сар-189, стадия Н (энантиомер-2): ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ Ц₈Н₂^О₅ 332,15; обнаружено 332,2.

Сар-189, стадия ί

Ν₂ барботировали через раствор Сар-189, стадия Н (энантиомер-2; 290 мг, 0,875 ммоль) в 10 мл МеОН в 500 мл сосуде для гидрирования в течение 30 мин. В раствор добавляли тетрафторборат 1,2бис((1З,5З)-2,5-диметилфосфолано)этан(циклооктадиен) родия (I) ((З,З)-Ме-ВРЕ-КН) (9,74 мг, 0,018 ммоль) и смесь затем гидрировали при 60 фунт/кв.дюйм в течение 6 суток. Смесь концентрировали и при помощи хиральной аналитической ВЭЖХ (колонка СШКАЬРАК® Об) показывали, что в ней оставалось небольшое количество оставшегося исходного вещества и один основной продукт. Остаток затем разде- 74 020815 ляли хиральной ВЭЖХ (колонка СШКАЬРАК® ОТ 21x250 мм, 10 мкм) с элюированием 70% 0,1%диэтиламина/ гептана-30% ЕЮН при 15 мл/мин с получением Сар-189, стадия ί, (150 мг), в виде прозрачного масла. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ Ц₈Н₂^О₅ 334,17; обнаружено 334,39. ^!Н ЯМР (500 МГц, СБС1₃) δ м.д. 7,28-7,41 (5 Н, т), 5,12-5,18 (1 Н, т), 5,09 (2 Н, к), 4,05 (1 Н, ί, I = 10,07 Гц), 3,75 (3 Н, к), 3,60 - 3,72 (2 Н, т), 3,41-3,50 (2 Н, т), 2,10 (1 Н, Ьг. к.), 1,72-1,99 (6 Н, т).

Сар-189, стадия _)

В раствор Сар-189, стадия ί (150 мг, 0,450 ммоль), в 10 мл МеОН в сосуде для гидрирования добавляли диметилдикарбонат (0,072 мл, 0,675 ммоль) и 10% Ρά/С (23,94 мг, 0,022 ммоль) в атмосфере азота. Смесь затем гидрировали в шейкере Парра при 45 фунт/кв.дюйм в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением Сар-189, стадия _) (110 мг), в виде прозрачного масла. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С'УШ^Оя 258,13; обнаружено 258,19. ¹Н ЯМР (500 МГц, СБС1₃) δ м.д. 5,08 (1 Н, ά, I = 9,16 Гц), 4,03 (1 Н, ί, I = 10,07 Гц), 3,75 (3 Н, к), 3,60-3,72 (5 Н, т), 3,46 (2 Н, ί, I = 10,38 Гц), 2,11 (1 Н, Ьг. к.), 1,72-1,99 (6 Н, т).

Сар-189

К смеси Сар-189, стадия _) (110 мг, 0,428 ммоль), в 2 мл ТНР и 1 мл воды добавляли ЬЮН (0,641 мл, 1,283 ммоль) (2н. вод.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь нейтрализовали 1н. НС1 вод. раствором и экстрагировали Е!ОАс (3х). Объединенные органические слои сушили МдЗО4 и концентрировали с получением Сар-189 (100 мг) в виде белого твердого вещества. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+№]+ С11Н17NNаΟ5 266,10; обнаружено 266,21. ¹Н ЯМР (500 МГц, СБС1₃) δ м.д. 5,10 (1 Н, ά, I = 9,16 Гц), 4,02 (1 Н, ί, I = 10,07 Гц), 3,62-3,78 (5 Н, т), 3,49 (2 Н, ά, I = 10,68 Гц), 2,07-2,22 (2 Н, т), 1,72-1,98 (6 Н, т).

Сар-190 (смесь диастереомеров)

Сар-190, стадия а отвз

К смеси циклопент-3-енола (2,93 г, 34,8 ммоль) и имидазола (5,22 г, 77 ммоль) в 30 мл БМР при 0°С добавляли т-бутилдиметилхлорсилан (6,30 г, 41,8 ммоль). Полученную бесцветную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем к смеси добавляли гексаны и воду и два слоя разделяли. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили МдЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 2% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-190, стадия а (6,3 г), в виде прозрачного масла. ^!Н ЯМР (500 МГц, СБС1₃) δ м.д. 5,65 (2 Н, к), 4,49-4,56 (1 Н, т), 2,56 (2 Н, άά, I = 15,26, 7,02 Гц), 2,27 (2 Н, άά, I = 15,26, 3,36 Гц), 0,88 (9Н,к), 0,06 (6Н,к).

Сар-190, стадия Ь ОТВ5 сг

В раствор Сар-190, стадия а (2,3 г, 11,59 ммоль), в 40 мл СН₂С1₂ при 0°С добавляли 5 порций мСРВА (5,60 г, 16,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем к смеси добавляли гексаны и воду и два слоя разделяли. Органический слой промывали 50 мл вод. 10% NаНЗΟ₃ и насыщенным солевым раствором, сушили МдЗО₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 3%-6% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-190, стадия Ь (1,42 г) и его транс-диастереомера (0,53 г) в виде прозрачных масел. Сар-190, стадия Ь (цис): ^!Н ЯМР (400 МГц, СБС1₃) δ м.д. 4,39-4,47 (1 Н, т), 3,47 (2 Н, к), 2,01-2,10 (2 Н, т), 1,93-2,00 (2 Н, т), 0,88 (9 Н, к), 0,04 (6 Н, к). Сар-190, стадия Ь (транс): Ή ЯМР (400 МГц, СБС1₃) δ м.д. 4,04-4,14 (1 Н, т), 3,47 (2 Н, к), 2,41 (2 Н, άά, I = 14,05, 7,28 Гц), 1,61 (2 Н, άά, I = 14,18, 6,90 Гц), 0,87 (9 Н, к), 0,03 (6 Н, к).

Сар-190, стадия с

- 75 020815

В раствор (8)-1,2'-метилендипирролидина (0,831 г, 5,39 ммоль) в 15 мл бензола при 0°С добавляли по каплям н-бутиллитий (4,90 мл, 4,90 ммоль) (1 М в гексане). Раствор становился коричнево-желтым. Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Затем добавляли Сар-190, стадия Ь (цис-изомер; 0,7 г, 3,27 ммоль), в 10 мл бензола и полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч. ЕЮАс и нас. ΝΉ₄Ο вод. раствор добавляли к смеси и два слоя разделяли. Органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили М§8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 15% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-190, стадия с (400 мг), в виде светло-желтого масла. ’Н ЯМР (500 МГц, СЭСТ) δ м.д. 5,84-5,98 (2 Н, т), 4,53-4,69 (2 Н, т), 2,63 2,73 (1 Н, т), 1,51 (1 Н, к!, I = 13,73, 4,43 Гц), 0,89 (9 Н, 5), 0,08 (6 Н, 5).

Сар-190, стадия к

В раствор Сар-190, стадия с (400 мг, 1,866 ммоль), ΜеI (1,866 мл, 3,73 ммоль) (2 М в тбутилметиловом эфире) в 5 мл ТНР при 0°С добавляли NаН (112 мг, 2,80 ммоль) (60% в минеральном масле). Полученную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь затем гасили водой и экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили М§8О₄ и концентрировали. Неочищенный продукт очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 5% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-190, стадия к (370 мг), в виде светло-желтого масла. ’Н ЯМР (500 МГц, СНСТ) δ м.д. 5,92-5,96 (1 Н, т), 5,87-5,91 (1 Н, т), 4,64-4,69 (1 Н, т), 4,23-4,28 (1 Н, т), 3,32 (3 Н, 5), 2,62-2,69 (1 Н, т), 1,54 (1 Н, к, I = 13,12, 5,49 Гц), 0,89 (9 Н, 5), 0,07 (5 Н, к, I = 1,83 Гц).

Сар-190, стадия е

В раствор Сар-190, стадия к (400 мг, 1,751 ммоль), в 10 мл ЕЮАс в сосуде для гидрирования добавляли оксид платиныДУ) (50 мг, 0,220 ммоль). Полученную смесь гидрировали при 50 фунт/кв.дюйм в шейкере Парра в течение 2 ч. Смесь затем фильтровали через СЕЫТЕ® и фильтрат концентрировали с получением Сар-190, стадия е (400 мг), в виде прозрачного масла. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С’₂Н₂₇О₂81 231,18; обнаружено 231,3. ’Н ЯМР (500 МГц, СНСТ) δ м.д. 4,10-4,17 (1 Н, т), 3,653,74 (1 Н, т), 3,27 (3 Н, 5), 1,43-1,80 (6 Н, т), 0,90 (9 Н, 5), 0,09 (6 Н, 5).

Сар-190, стадия £

В раствор Сар-190, стадия е (400 мг, 1,736 ммоль), в 5 мл ТНР добавляли ТВАР (3,65 мл, 3,65 ммоль) (1н. в ТНР). Окрашенная смесь через несколько минут становилась коричневой, и ее перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель, 0-25% ЕЮАс/Нех) с получением Сар-190, стадия £ (105 мг), в виде светло-желтого масла. ’Н ЯМР (500 МГц, СЭСТ) δ м.д. 4,25 (1 Н, Ьг. 5.), 3,84 - 3,92 (1 Н, т), 3,29 (3Н,5), 1,67-2,02 (6 Н, т).

Сар-190

Сар-190 затем синтезировали из Сар-190, стадия £, описанной для Сар-182 методикой. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]⁺ С’₀Н’’NNаΟ5 254,10; обнаружено 254,3. ’Н ЯМР (500 МГц, СЭСТ) δ м.д. 5,25 (1 Н, к, I = 8,55 Гц), 4,27-4,41 (1 Н, т), 3,81-3,90 (1 Н, т), 3,69 (3 Н, 5), 3,26 (3 Н, 5), 2,46-2,58 (1 Н, т), 1,76-1,99 (3 Н, т), 1,64-1,73 (1 Н, т), 1,40-1,58 (1 Н, т), 1,22 -1,38 (1 Н, т).

Сар-191 (энантиомер-1)

Сар-191, стадия а

- 76 020815

В раствор диизопропиламина (3 мл, 21,05 ммоль) в ТНР (3 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М в гексанах; 8,5 мл, 21,25 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 10 мин, затем доводили до 0°С в течение 25 мин. Реакционную смесь охлаждали снова до -78°С, добавляли метилтетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксилат (3 г, 20,81 ммоль) в ТНР (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 15 мин, затем доводили до 0°С в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждали до -78°С, добавляли метилйодид (1,301 мл, 20,81 ммоль). После добавления холодную баню удаляли и реакционную смесь медленно оставляли нагреваться до ~25°С и перемешивали в течение 22 ч. Добавляли этилацетат и водный НС1 (0,1н.) и органический слой отделяли и промывали насыщенным солевым раствором и сушили (М§§О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток загружали в картридж Томпсона с силкагелем с элюированием 10% этилацетатом/гексанами с получением светло-желтого масла (2,83 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8ОЛ₆) δ м.д. 3,73-3,66 (т, 2Н), 3,66 (5, 3Н), 3,40-3,30 (т, 2Н), 1,95-1,93 (4т, 1Н), 1,92-1,90 (4т, 1Н), 1,43 (άάά, 1 = 13,74, 9,72, 3,89, 2Н), 1,18 (5, 3Н).

Сар-191, стадия Ь

О

В раствор Сар-191, стадия а (3 г, 18,96 ммоль), в толуоле (190 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляли по каплям гидрид диизобутилалюминия (1,5М в толуоле; 26,5 мл, 39,8 ммоль). Реакционную смесь продолжали перемешивать при -78°С в течение 1,5 ч и баню удаляли и перемешивали в течение 18 ч. Реакцию гасили МеОН (20 мл). Добавляли НС1 (1М, 150 мл) и смесь экстрагировали ЕЮАс (4x40 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили (М§§О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали флеш-хроматографией (силикагель; 40% этилацетат/гексаны) с получением бесцветного масла (1,36 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 3,77 (άΐ, 1 = 11,73, 4,55, 2Н), 3,69-3,60 (т, 2Н), 3,42 (5, 2Н), 1,71-1,40 (Ь5, 1Н)1,59 (άάά, 1 = 13,74, 9,72, 4,39, 2Н), 1,351,31 (т, 1Н), 1,31-1,27 (т, 1Н), 1,06 (5, 3Н).

Сар-191, стадия с

В раствор ЭМ8О (5,9 мл, 83 ммоль) в СН₂С1₂ (85 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляли оксалилхлорид (3,8 мл, 43,4 ммоль) и перемешивали в течение 40 мин. Затем добавляли раствор Сар-191, стадия Ь (4,25 г, 32,6 ммоль), в СН₂С1₂ (42,5 мл). Реакционную смесь продолжали перемешивать при 78°С в атмосфере азота в течение 2 ч. Реакцию гасили холодным 20% К₂НРО₄ (вод.) (10 мл) и водой. Смесь перемешивали при ~25°С в течение 15 мин, разбавляли диэтиловым эфиром (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали диэтиловым эфиром (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (М§§О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток поглощали СН2С12 (4 мл) и очищали флеш-хроматографией (силикагель, с элюированием СН₂С1₂) с получением бесцветного масла (2,1 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ м.д. 9,49 (5. 1Н), 3,80 (άΐ, 1 = 11,98, 4,67, 2Н), 3,53 (άάά, 1 = 12,05, 9,41, 2,89, 2Н), 1,98 (άάά, 1 = 4,71, 3,20, 1,38, 1Н), 1,94 (άάά, 1 = 4,71, 3,20, 1,38, 1Н), 1,53 (άάά, 1 = 13,87, 9,60, 4,14, 2Н), 1,12 (5, 3Н).

Сар-191, стадия ά

В раствор Сар-191с (2,5 г, 19,51 ммоль) в СНС1₃ (20 мл) в атмосфере азота при ~25°С добавляли (К)2-амино-2-фенилэтанол (2,94 г, 21,46 ммоль) и перемешивали в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, по каплям добавляли триметилсилилцианид (3,8 мл, 30,4 ммоль). Холодную баню удаляли и реакционную смесь оставляли перемешиваться при ~25°С в атмосфере азота в течение 15,5 ч. Реакционную смесь обрабатывали 3н. НС1 (20 мл) и водой (20 мл) и продукт экстрагировали СНС1₃ (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили (№8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали флеш-хроматографией (силикагель; 40% этилацетат/гексаны) с получением двух диастереомеров: Сар-191, стадия ά1 (диастереомер 1), в виде бесцветного масла, которое отвердевало в белое твердое вещество в результате отстаивания (3 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8ОЛ6) δ м.д. 7,42-7,26 (т, 5Н), 5,21 (ΐ, 1 = 5,77, 1Н), 3,87 (άά, 1 = 8,53, 4,52, 1Н), 3,61-3,53 (т, 1Н), 3,53-3,37 (т, 5Н), 3,10 (ά, 1 = 13,05, 1Н), 2,65 (ά, 1 = 13,05, 1Н), 1,64-1,55 (т, 1Н), 1,55-1,46 (т,1Н), 1,46-1,39 (т, 1Н), 1,31-1,23 (т, 1Н), 1,11 (5, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Щ+С^^Юе 275,18; обнаружено 275,20. Сар-191, стадия ά2 (диастереомер 2), в виде светло-желтого масла (0,5 г). ¹Н ЯМР (400 МГц, ОМ8ОЛ6) δ м.д. 7,44-7,21 (т, 5Н), 4,82 (ΐ, 1 = 5,40, 1Н), 3,82-3,73 (т, 1Н), 3,73-3,61 (т, 3Н), 3,61-3,37 (т, 5Н), 2,71 (άά, 1 = 9,29, 4,77, 1Н), 1,721,55 (т, 2Н), 1,48-1,37 (т, 1Н), 1,35-1,25 (т, 1Н), 1,10 (5, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для

- 77 020815 |М-11|'С1 Н\О< 275,18; обнаружено 275,20.

Сар-191, стадия е

В раствор Сар-191, стадия ά2 (диастереомер 2) (0,4472 г, 1,630 ммоль), в СН₂С1₂ (11 мл) и МеОН (5,50 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли тетраэтилсвинец (1,445 г, 3,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч, холодную баню удаляли и продолжали перемешивать в течение 20 ч. Реакционную смесь обрабатывали фосфатным буфером (рН 7; 6 мл) и перемешивали в течение 45 мин. Реакционную смесь фильтровали через СЕПТЕ®, промывали СН₂С1₂ и слои разделяли. Водный слой экстрагировали СН₂С1₂ (3x25 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали флешхроматографией (силикагель; 15% этилацетат/гексаны) с получением иминового промежуточного соединения в виде бесцветного масла (181,2 мг). ^!Н ЯМР (400 МГц, ИМ8О-й₆) δ м.д. 8,55 (ά, I = 1,00, 1Н), 7,897,81 (т, 2Н), 7,61-7,46 (т, 3Н), 4,80 (ά, I = 1,00, 1Н), 3,74 («, I = 11,80, 4,02, 2Н), 3,62-3,46 (т, 2Н), 1,791,62 (т, 2Н), 1,46-1,30 (т, 2Н), 1,15 (δ, 3Н).

Иминовое промежуточное соединение поглощали 6 н НС1 (10 мл) и нагревали при 90°С в течение 10 дней. Реакционную смесь забирали с теплоты, оставляли охлаждаться до комнатной температуры и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Водный слой концентрировали в вакууме с получением беловатого твердого вещества. Твердое вещество поглощали МеОН и загружали в предварительно обусловленный картридж МСХ (6 г), промывали МеОН с последующим добавлением элюированного раствора 2н. NΗз/ΜеΟΗ и концентрировали в вакууме с получением беловатого твердого вещества (79,8 мг). ^!Н ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а₆) δ м.д. 14,33-13,51 (Ь5, 1Н), 8,30 (Ьз, 3Н), 3,82-3,75 (т, 1Н), 3,70 (άί, I = 11,80, 4,02, 2Н), 3,58-3,43 (т, 2Н), 1,76-1,60 (т, 2Н), 1,47-1,36 (т, 1Н), 1,36-1,27 (т, 1Н), 1,08 (δ, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₈Н1^О₃: 174,11; обнаружено 174,19.

Сар-191 (энантиомер-1)

В раствор Сар-191, стадия е (0,0669 г, 0,386 ммоль) и карбоната натрия (0,020 г, 0,193 ммоль) в гидроксиде натрия (1М вод.; 0,4 мл, 0,40 ммоль) при 0°С добавляли по каплям метилхлорформиат (0,035 мл, 0,453 ммоль). Реакционную смесь удаляли из холодной бани и оставляли перемешиваться при ~25°С в течение 3 ч. Реакционную смесь промывали диэтиловым эфиром (3x20 мл). Водный слой подкисляли 12 н НС1 (рН ~1-2) и экстрагировали этилацетатом (2 х 20 мл). Объединенные органические слои сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Сар-191 в виде бесцветной пленки (66,8 мг). ^!Н ЯМР (400 МГц, ПМ8О-й₆) δ м.д. 13,10-12,37 (Ь₈, 1Н), 7,37 (ά, I = 9,04, 1Н), 4,02 (ά, I = 9,29, 1Н), 3,72-3,57 (т, 2Н), 3,56 (δ, 3Н), 3,54-3,44 (т, 2Н), 1,65 (άάά, I = 13,61, 9,72, 4,27, 1Н), 1,53 (άάά, I = 13,68, 9,66, 4,27, 1Н), 1,41-1,31 (т, 1Н), 1,31-1,22 (т, 1Н), 1,00 (δ, 3Н). ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' СыН^ОзШ: 254,10; обнаружено 254,11.

Сар-192 (энантиомер-2)

Сар-192 (энантиомер-2) получали из Сар-191, стадия ά1, описанной для получения его энантиомера Сар-191 методикой.

Сар-193

В раствор метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (1,45 г, 4,2 ммоль) в ИСМ добавляли ΌΒυ (0,70 мл, 4,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин с последующим добавлением раствора 1,3-диметоксипропан-2-она (0,5 г, 4,2 ммоль) в ИСМ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь загружали в силикагелевый картридж 80 д который элюировали с градиентом 18 мин 0-70% ЕЮАс в гексане с получением Сар193, стадия а (0,8 г), в виде густого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОИ) м.д. 7,23-7,43 (5 Н, т), 4,99-5,18 (2 Н, т), 4,16 (2 Н, δ), 4,06 (2 Н, δ), 3,66-3,78 (3 Н, δ), 3,26 (3 Н, δ), 3,23 (3 Н, δ). ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+№]+ С’кНз^ШО,·,: 346,14; обнаружено: 346,12.

Сар-193, стадия Ь

- 78 020815

Реакционную смесь сложного эфира Сар-193, стадия а (0,5 г) и тетрафторбората (+)-1,2-бис((28,58)2,5-диэтилфосфолано)бензол(циклооктадиен)родия (I) (0,1 г) в МеОН перемешивали при 55 фунт/ кв.дюйм Н₂ в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток загружали в силикагелевый картридж 25 д и элюировали с градиентом 18 мин 0-80% Ε!θΑο в гексане с получением Сар-193, стадия Ь (0,49 г), в виде прозрачного масла. БС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' С₁₆Н₂₃Х№О₆: 348,15; обнаружено: 348,19.

Сар-193, стадия с

Реакционную смесь Сар-193, стадия Ь (0,16 г), диметилдикарбоната (0,13 г) и 10% Ρά/С (0,026 г) в ΕΐΟΑο перемешивали в атмосфере Н₂ при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали с получением метилкарбамата Сар-193, стадия с. БС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' С₁₀Н₁₉№№О₆: 272,12; обнаружено: 272,07.

Сар-193

В раствор сложного эфира Сар-193, стадия с, в ТНР (1 мл) и МеОН (0,25 мл) добавляли 1н. №ЮН (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли ΕΐΟΑο и 1н. НС1. Водную фазу экстрагировали ΕΐΟΑο и объединенную органическую фазу промывали нас. №С1, сушили над безводным №₂8О₄, фильтровали и концентрировали с получением Сар-193 (0,082 г). ^!Н ЯМР (400 МГц, СПСР) 5,99 (1 Н, ά, 1 = 8,56 Гц), 4,57 (1 Н, άά, 1 = 8,56, 3,27 Гц), 3,67 (3 Н, 5), 3,49 (2 Н, ά, 1 = 4,28 Гц), 3,45 - 3,44 (2 Н, т), 3,26-3,35 (6 Н, т). БС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' СдНпМЫаО^ 258,11; обнаружено: 258,13.

Пиперидин (1,0 мл, 10 ммоль) добавляли в раствор (8)-2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси) карбониламино)-4-метоксибутановой кислоты (0,355 г, 1 ммоль) в ОМР (3 мл) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Летучие вещества удаляли и остаток разделяли между нас. №-1НСО₃ (вод.) (5 мл) и ΕΐΟΑο (5 мл). Водный слой дополнительно промывали ΕΐΟΑο и Ε!₂Ο. В водный раствор добавляли №-ьСО₃ (212 мг, 2,0 ммоль) с последующим добавлением метилхлорформиата (0,16 мл, 2,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч. Реакционную смесь подкисляли 1н. НС1 (вод.) до рН <7 и затем экстрагировали ΕΐΟΑο (2x10 мл). Объединенные органические слои сушили (№₂8О₄ фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флеш-хроматоргафией на силикагеле (Ε!ΟΑс/гексаны, градиент от 20% до 70%) с получением (8)-4-метокси-2-(метоксикарбониламино)бутановой кислоты (Сар-194) (91,5 мг) в виде вязкого бесцветного масла. Время удержания БС-М8 = 0,61 мин; т/ζ 214 |М+№|'. (Колонка: Ρ4ΕNΟМΕNΕX® Ьииа 3,0x50 мм 810. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ΤРΑ. Растворитель В = 10% воды: 90% метанола: 0,1% ΤРΑ. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ά) δ м.д. 7,41 (Ьг. 5., 1 Н), 5,74-6,02 (т, 1 Н), 4,32-4,56 (т, 1 Н), 3,70 (5, 3 Н), 3,54 (!, 1 = 5,0 Гц, 2 Н), 3,34 (5,3Н), 1,99 - 2,23 (т, 2 Н).

Раздел примеров

Массовый анализ с низким разрешением проводили на системе 8Ь^таάζи ЬС вместе с системой Аа!ег5 МIСΚΟМΑ88® ΖΡ М8 (Усл. согласно прим. 1) или Аа!ег5 Αс^и^!у ВЭЖХ с определением Аа!ег5 ΡΌΑ ИУ-У15 и Аа!ег5 ΖΡ М8 (Усл. согласно прим. 2). С применением следующих условий получали время удержания (Η_!) и следует отметить, что время удержания между приборами может незначительно изменяться:

- 79 020815

Условие 1а Колонка

Условие 1Ь

Колонка (при 35С)

Удержание 10%В 10-50%В 50-98%В Удержание 98%В 98-10%В Удержание 10%В Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Условие 1с

Колонка (пр_И35°С)

Удержание 10%В

10-60%В

60-98%В

Удержание 98%В 98-10%В Удержание 10%В Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Условие 2а

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 4,6Х 30 мм 810 = 0

-100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%НгО

- 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О = А¥а1ег$ Асцш1у ВЕН С18; 1,7 мкм; 150 X 2,1 мм Ш;

= 0-1 мин = 0-25 мин = 25-33 мин = 32-35 мин = 35,0-35,5 мин = 35,5-40 мин = 0,35 мл/мин

- 254 нм = 0,05% ТРА в воде = 0,05% ТРА в СНзСК = \Уа1ег5 Αοςυίίγ ВЕН С18; 1,7 мкм; 150 X 2,1 мм Ю;

= 0-1 мин = 1-4 мин = 4-21 мин = 21-21,5 мин = 21,5-22 мин = 22-25 мин = 0,35 мл/мин = 315 нм = 0,05% ТРА в воде = 0,05% ТРА в СНзСИ = \Уа1егв δυηΡΪΓ© С18,4,6X150 мм, 3,5 мкм = 10 = 50 = 20 мин = изменяется от 25 до 40 мин = 1 мл/мин = 220 и 254 нм = 0,1% ТРА в 5% СН₃С№95%Н₂О = 0,1% ТРА в 95% СНзС№5% Н₂О

- 80 020815

Условие 2Ь

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Длина волны Растворитель А

Растворитель В

Условие 3

Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента: Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Условие ОЫ Колонка

Условие ОЬ2 Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки Скорость потока Темп печи Длина волны Растворитель А

Растворитель В = \Уа1ег5 ХЬпд^е рЬепу1,4,6X150 мм, 3 мкм = 10 = 50 = 20 мин = изменяется от 25 до 40 мин = 1 мл/мин = 220 и 254 нм = 0,1% ТРА в 5% СН₃С№95%Н₂О = 0,1% ТРА в 95% СН₃С№5% Н₂О = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа С18 (2), 3 ц, 150x4,6 мм = 0 = 100 = 10 мин = 1 мд/мин = 220 и 256 нм = Н₂О/СН₃СМ (95:5) + 0,05% ТРА = Η₂0/ΟΗ₃ΟΝ (5:95) + 0,05% ТРА = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 3,0 X 50 мм 510 = 0 = 100 = 4 мни = 5 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н20 = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% Н₂О = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 50Х 2 мм 3 и = 0 = 100 = 4 мин = 5 мин = 0,8 мл/мин = 40°С = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% ацетонигрила/90%Н2О = 0,1% ТРА в 90% ацетонитрила/10% Н₂О

- 81 020815

Условие ОЬЗ Колонка (при 35’С)

Удержание 10%В 10-60%В 60-98%В Удержание 98%В 98-10%В Удержание 10%В Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Условие 01.4а Колонка

Условие 0Ь4Ъ Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки

Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В

Условие ОЬ4с Колонка (при 35°С) Удержание 2%В 2-98%В 98%В

Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В = 1Уа(ег5 АсцшТу ВЕН С18, 1,7 мкм, 150 X 2,1 мм Ю, = 0-1 мин = 1-4 мин = 4-21 мин

- 21-21,5 мин = 21,5-22 мин

- 22-25 мин = 0,35 мл/мин = 315 нм = 0,05% ТРА в воде = 0,05% ТРА в СН,СМ = \Уа1егв ЗипКге С18,4,6X150 мм, 3,5 мкм = 10 = 100 = 15 мин = 18 мин = 1 мл/мин = 220 и 254 нм = 0,1% ТРА в 5% СН₃С№95%Н_гО = 0,1% ТРА в 95% СНзСМ/5% Н,0

- ТУа1ег5 ХЬпОуе рЬепу1, 4,6X150 мм, 3 мкм -10 = 50 = 15 мин = 18 мин = 1 мл/мин = 220 и 254 нм = 0,1% ТРА в 5% СН₃С№95%Н₂О = 0,1% ТРА в 95% СНзС№5% Н₂О = 1Уа1ег8 Ас$ш1у ВЕН С18; 1,7 мкм; 50 X 2,1 мм ГО;

= 0-1 мин = 1-1,5 мин = 1,5-2,2 мин = 0,8 мл/мин = 2 нм = 0,05% ТРА в воде = 0,05% ТРА в СН₃СХ

- 82 020815

Условие ОЬ5а

Колонка

Условие О1_5Ь Колонка

Условие-04

Колонка

Условие Ί4 Колонка

Условие ΡΥ1 Колонка

В начале программы %В В конце программы %В Время градиента Время остановки = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 3,0 X 50 мм 810 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%НгО = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% РЬО = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 3,0 X 50 мм 810 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 10 мм ТТЩОАс в 5% метанола/95%НзО = 10 мм ΝΗ,ΟΑο в 95% метанола/5% ЩО = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа, 3,0 X 50 мм 810 = 0 = 100 = 3 мин = 4 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н;О = 0,1% ТГА в 90% метанола/10% НгО = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьипа 4,6Х 50 мм 810 = 0 = 100 = 4 мин = 5 мин = 4 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90%Н?О = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% ЩО = ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ®, 2,0 X 50 мм, 3 мкм = 0 = 100 = 4 мин = 5 мин

- 83 020815

Скорость потока Длина волны Растворитель А Растворитель В Темп, печи.

= 0,8 мл/мин = 220 нм = 0,1% ТРА в 10% метанола/90% воды = 0,1% ТРА в 90% метанола/10% воды = 40°С

Амид согласно примеру 1а (СН₃ЗО₃Н) получали согласно описанной для синтеза его энантиомера в патентной публикации АО 2004/052850 методикой.

Пример 1, стадия Ь о °гУ

Ль

В 1 л круглодонную колбу, оборудованную входом для азота, мешалкой сверху, термопарой и нагревателем колб, загружали 50 г (225 ммоль) амида согласно примеру 1а (СН₃ЗО₃Н) и 250 мл изопропанола. Полученную взвесь затем загружали 252 мл 23 вес.% NаΟЕΐ в ЕЮН (2,68 М, 675 ммоль, 3,0 эквив.) и перемешивали при 50°С прибл. 1 ч. Смесь загружали 12,2 мл (675 ммоль, 3 эквив.) воды и нагревали до 60°С. Полученную взвесь оставляли перемешиваться при 60°С прибл. 18 ч. Взвесь охлаждали до к.т. и загружали 250 мл воды и 98,2 г (450 ммоль, 2,0 эквив.) ди-трет-бутилдикарбоната. Этанол и изопропанол удаляли посредством вакуумной дистилляции и водную смесь охлаждали до 0°С. Смесь нейтрализовали 76 мл (456 ммоль) 6М водным НС1, при этом поддерживали внутреннюю температуру < 5°С. Продукт экстрагировали 500 мл МТВЕ и обогащенный органический слой промывали 100 мл воды. Прозрачный раствор концентрировали до 150 мл посредством вакуумной дистилляции и полученную взвесь загружали 600 мл гептана, при этом поддерживали внутреннюю температуру > 45°С. Взвесь охлаждали до к.т. в течение прибл. 30 мин и оставляли перемешиваться при к.т. в течение прибл. 2 ч. Продукт фильтровали, промывали 250 мл 4:1 гептана:МТВЕ и сушили в вакууме при 70°С с получением 40,5 г (178 ммоль, выход 79%, 99,8 АР при 205 нм) кислоты 1Ь: ^!Н ЯМР (400 МГц, ЭМЗО-б6) δ 12,48 (8, 1Н), 4,02-3,80 (т, 1Н), 3,45-3,15 (т, 1Н), 2,40-2,19 (т, 1Н), 2,19-2,0 (т, 1Н), 1,70-1,50 (т, 1Н), 1,50-1,20 (т, 9Н), 0,83-0,60 (т, 1Н), 0,33-0,55 (т, 1Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, ЭМЗО-б6) δ 173,7, 173,2, 155,0, 154,3, 79,4, 60,5, 60,2, 37,6, 32,6, 31,8, 28,4, 28,2, 15,6, 15,2, 14,4; НКМЗ рассчитано для С^^^Од (М + Н; ЕЗЖ: 228,1236. Обнаружено: 228,1234.

Альтернативный синтез кислоты 1Ь

В 500 мл реакторе в ТНР (87,5 мл) растворяли сложный эфир соединения согласно примеру 1Ь. 1 (коммерчески доступный, 17,5 г, 1,00 эквив.). Полученный раствор охлаждали до -75°С и загружали 1,5М ЭГВАЬ-Н в толуоле (61,3 мл, 1,5 эквив.), при этом поддерживали температуру ниже -70°С. Полу- 84 020815 ченный раствор перемешивали при -70°С в течение 1 ч. В течение 10 мин загружали трифторуксусную кислоту (2,3 мл, 0,5 эквив.), при этом поддерживали внутреннюю температуру ниже -70°С. Триэтиламин (51,3 мл, 6 эквив.) затем загружали в течение 15 мин, при этом поддерживали внутреннюю температуру ниже -70°С. Трифторуксусный ангидрид (11,2 мл, 1,3 эквив.) загружали в течение 10 мин, при этом поддерживали внутреннюю температуру ниже -70°С. Реакционную смесь затем оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 90 мин и гасили посредством обратного добавления в раствор 20 вес. % моногидрата водной лимонной кислоты (96,6 г, 1,5 эквив.), при этом поддерживали температуру ниже 15°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем нижний водный слой исключали. Обогащенный продуктом органический слой промывали дважды 70 мл насыщенным водным бикарбонатом натрия. Загружали твердый бикарбонат натрия (1,7 г, 0,1 г/г, пример 146) и в растворе заменяли растворитель на чистый толуол в вакууме с получением соединения 1Ь.2 в виде раствора в 2 л/кг толуоле.

Раствор соединения согласно примеру 1Ь.2 (16,5г теоретически из примера 151) в 33 мл толуола фильтровали через тонкопористый фильтр в 250 мл реактор. Затем загружали трифтортолуол (50 мл) и хлорйодметан (43,2 г, 4,0 эквив.) и полученный раствор охлаждали до -20°С. Загружали 1,1 М диэтилцинк в толуоле (111 мл, 2,0 эквив.), при этом поддерживали внутреннюю температуру < -8°С. Полученный раствор перемешивали при от -15 до -20°С в течение 14 ч. Реакционную смесь нагревали до 0°С, затем гасили обратным добавлением в раствор 20 вес.% водной лимонной кислоты (135,7 г, 2,3 эквив.). Реактор промывали толуолом (82 мл) и промывочное средство добавляли для гашения раствора. Полученную двухфазную смесь перемешивали в течение 20 мин, затем нижний водный слой разделяли и исключали. Обогащенные органические вещества дважды промывали 60 мл 13 вес. % водным №С1 с последующим добавлением 60 мл насыщенного №НС0₃,. В полученном растворе заменяли растворитель на чистый ГРА в вакууме с получением соединения 1Ь.3 в виде раствора в 10 л/кг 1РА.

В 250 мл реактор загружали раствор соединения 1Ь.3 (147 мл, 14,7 г теоретически от сложного эфира соединения согласно примеру 1Ь.1) в 1РА. Раствор нагревали до 35°С и добавляли твердый гидроксид натрия (6,2 г, 3,0 эквив.). Полученную смесь перемешивали при 35°С в течение ночи. Добавляли воду (44 мл) и органические растворители удаляли в вакууме. Добавляли МТВЕ (145 мл) и рН доводили до 3,0 при помощи 6н. водной НС1. Водный слой разделяли и исключали. Обогащенный органическими веществами продукт промывали 60 мл водой, затем азеотропно сушили в вакууме посредством постоянного добавления объема МТВЕ. Раствор концентрировали до 55 мл и перемешивали при 50°С в течение 30 мин. Раствор охлаждали до комнатной температуры в течение 1 ч, во время чего была образована взвесь. Гептан (90 мл) загружали в течение 90 мин и полученную взвесь выдерживали в течение 1 ч. Твердые вещества собирали на стеклообразную фритту среднего размера и промывали 22,5 мл 3:1 гептана:МТВЕ с последующим добавлением 22,5 мл гептана. Коричневое твердое вещество сушили в 50°С вакуумной печи с получением 5,48 г (46%) кислоты согласно примеру 1Ь с чистотой 94,9 при очистке ВЭЖХ. Неочищенную кислоту согласно примеру 1Ь растворяли в 55 мл МТВЕ при 50°С. Полученный раствор концентрировали до 20 мл и охлаждали до комнатной температуры в течение 1 ч. Затем в течение 90 мин добавляли гептан (33 мл). Полученные твердые вещества собирали на стеклообразную фритту среднего размера, промывали гептаном (15мл) и сушили в 50°С вакуумной печи с получением 4,45 г кислоты согласно примеру 1Ь в виде коричневого порошка (98,8 активный фармацевтический ингридиент, 98,8% хиральной чистоты, 37% из сложного эфира соединения согласно примеру 1Ь.1).

Пример 1, стадия с

Вое

250 мл круглодонную колбу, оборудованную входом для азота, мешалкой сверху и термопарой, загружали 20,0 г (88,0 ммоль, 2,11 эквив.) кислоты согласно примеру 1Ь, 16,5 г (41,7 ммоль, 1 эквив.) 1,1'(бифенил-4,4'-диил)бис(2-бромэтанона), 110 мл ацетонитрила и 55 мл тетрагидрофурана. Затем загружали диизопропилэтиламин (15,1 мл, 86,6 ммоль, 2,08 эквив.), при этом поддерживали внутреннюю температуру < 25°С. Смесь оставляли перемешиваться при 20-25°С в течение прибл. 5 ч и загружали 83 мл этилацетата и 90 мл 13 вес.% водного №С1. Полученную двухфазную смесь отделяли и обогащенный органический слой промывали дополнительным количеством 90 мл 13 вес.% водного №С1. Обогащенный органический слой разбавляли 20 мл тетрагидрофураном и промывали водной смесью №НС0₃, и ΝαΟ (45 мл 1М водного №НС0₃, и 45 мл 26% водного №С1). В обогащенном органическом слое растворитель заменяли на толуол посредством вакуумной дистилляции до заданного объема прибл. 160 мл. Полученный толуоловый раствор сложного кетоэфира согласно примеру 1с использовали как таковой в следующей стадии.

[Примечание: для получения 1,1'-(бифенил-4,4'-диил)бис(2-бромэтанона) см. способ в заявке на патент \Υ0 2009/020825].

Пример 1, стадия ά

- 85 020815

В вышеуказанный толуоловый раствор сложного кетоэфира согласно примеру 1с загружали 64,2 г (832,9 ммоль, 20,0 эквив.) NН₄ОАс и оставляли перемешиваться при 90-100°С в течение прибл. 18 ч. Охлаждали до 60°С и загружали 255 мл 2:1 АсОН:воды. Полученную двухфазную смесь отделяли и слой толуола промывали 58 мл 1:1 АсОН:воды. Обогащенные водные слои объединяли и остаточный толуол удаляли посредством вакуумной дистилляции. Водный раствор разбавляли 60 мл метанола и нагревали до 50-60°С. Загружали 106 мл (1060 ммоль, 25,4 эквив.) 10н. №ЮН, при этом поддерживали внутреннюю температуру <60°С. Полученную взвесь затем охлаждали до к.т. Взвесь фильтровали и промывали 100 мл воды с последующим добавлением 400 мл метанола с получением 26,1 г неочищенного имидазола согласно примеру 16. Влажный, неочищенный имидазол согласно примеру 16 затем загружали в 500 мл круглодонную колбу, оборудованную входом для азота, мешалкой сверху и термопарой. Загружали 165 мл ^метил-2-пирролидинон и нагревали до 50°С. Полученный прозрачный раствор загружали в 30 мл метанола и оставляли перемешиваться при 50°С в течение прибл. 18 ч. Полученную взвесь загружали дополнительно 130 мл метанола, при этом поддерживали внутреннюю температуру >45°С. Взвесь оставляли перемешиваться при 50°С в течение прибл. 30 мин и охлаждали до к.т. Взвесь фильтровали и твердые вещества промывали 90 мл 1:1 метанола№метил-2-пирролидинона с последующим добавлением 200 мл метанола. Твердые вещества сушили в вакууме при 70°С с получением 22,7 г (31,5 ммоль, 76% выход, 95 АР при 254 нм) имидазола согласно примеру 16: ’Н ЯМР (400 МГц, ^ΜδО-6₆) δ 11,95 (5, 2Н), 7,89-7,76 (6, 4Н), 7,74-7,60 (6, 4Н), 7,50 (5, 2Н) 4,62 (5, 2Н), 3,55-3,30 (т, 2Н), 2,45-2,20 (т, 4Н), 1,70-1,59 (т, 2Н), 1,59-0,90 (5, 18Н), 0,83-0,69 (т, 2Н), 0,65-0,49 (т, 2Н); НИ^З рассчитано для С₃₈Н₄₅^О₄ (Μ + Н; ЕЗГ¹): 649,3502. Обнаружено: 649,3524.

Пример 1, стадия е

250 мл круглодонную колбу, оборудованную входом для азота и мешалкой сверху, загружали 7,0 г (10,8 ммоль) имидазола согласно примеру 16, 105 мл метанола и 3,7 мл (20,8 ммоль, 1,93 эквив.) 5,6 М НС1 в изопропаноле. Полученный раствор обрабатывали активированным углем и фильтровали. Активированный уголь промывали 140 мл метанолом и объединяли с фильтратом. Обогащенный органический поток концентрировали до прибл. 70 мл и загружали в круглодонную колбу, оборудованную входом для азота, мешалкой сверху и термопарой. Раствор затем загружали 14,75 мл (88,5 ммоль, 8,2 эквив.) 6М НС1 и оставляли перемешиваться при 50°С. Через прибл. 12 ч при 50°С смесь загружали 50 мл изопропанолом и полученную взвесь оставляли перемешиваться при 50°С в течение 1 ч. Взвесь охлаждали до к.т. и выдерживали в течение прибл. 15 ч. Продукт фильтровали и промывали 35 мл 4:1 изопропанола:метанола с последующим добавлением 70 мл изопропанола. Твердые вещества сушили при 55°С в вакууме с получением 5,3 г (8,9 ммоль, 83%, 99,8 АР при 254 нм) пирролидина согласно примеру 1е/4НС1: ’Н ЯМР (400 МГц, ^ΜδО-6₆) δ 14,00-9,38 (Ь5, 8Н), 8,31 (5, 2Н), 8,06-7,96 (6, 4Н), 7,94-7,84 (6, 4Н), 5,05-4,89 (66, 2Н), 3,55-3,42 (т, 2Н), 2,87-2,69 (6ΐ, 2Н), 2,64-2,53 (66, 2Н), 2,05-1,89 (т, 2Н), 1,17-0,98 (т, 2Н), 0,96-0,82 (66, 2Н); ’³С ЯМР (100 МГц, ^ΜδО-6₆) δ 140,0, 139,3, 133,6, 127,2, 126,6, 125,8, 116,6, 49,8, 34,3, 29,9, 15,2, 5,3; I ΙΚΜδ рассчитано для С₂₈Н₂<М (М + Н; ЕЗД): 449,2454. Обнаружено: 449,2470.

250 мл обшитый реактор, оборудованный входом для азота, мешалкой сверху и термопарой, загружали 4,24 г (24,2 ммоль, 2,4 эквив.) (δ)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты, 3,86 г (25,21 ммоль, 2,5 эквив.) 1-гидроксибензотриазолмоногидрата, 4,55 г (23,73 ммоль, 2,35 эквив.) гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида и 60 мл ацетонитрила. Смесь перемешивали в течение прибл. 1 ч и загружали 6 г (10,1 ммоль) пирролидина согласно примеру 1е/4НС1. Полученную взвесь охлаждали до 10°С и загружали 7,92 мл (45,41 ммоль, 4,5 эквив.) диизопропилэтиламина. Смесь оставляли нагреваться до к.т. и перемешивали в течение прибл. 19 ч. Полученный органический раствор промывали 36 мл 13 вес. % водным №С1. Обогащенные органические вещества загружали 12 мл ацетонитрилом и промывали 36 мл водного раствора, содержащего 13 вес. % водного №-1С1 и 1 М №ЮН. Обогащенные органические вещества затем загружали 12 мл метанола и нагревали до 50°С. Вода (60 мл)

- 86 020815 добавляли в течение 2 ч и полученную взвесь охлаждали до к.т. и выдерживали в течение прибл. 2 ч. Твердые вещества фильтровали, промывали 36 мл 1:1 ацетонитрила:воды и сушили в вакууме. 250 мл обшитый реактор, оборудованный входом для азота, мешалкой сверху и термопарой, загружали вышеуказанными твердыми веществами и растворяли в 240 мл этанола марки ЗБА3А. Раствор концентрировали до прибл. 50 мл посредством вакуумной дистилляции и загружали 4,24 мл (23,19 ммоль, 2,30 эквив.) 5,47 М НС1 в изопропанол и дополнительно в 30 мл ЗБА3А этанола. Смесь концентрировали до прибл. 50 мл, разбавляли 40 мл этанола ЗБА3А и обрабатывали активированным углем. Активированный уголь фильтровали и промывали 90 мл этанола ЗБА3А. Обогащенный фильтрат и промывочную жидкость объединяли и концентрировали до 40 мл. Загружали 16 мл этилацетата и нагревали до 40°С. Загружали 60 мг затравки кристаллов амида согласно примеру 1£/2НС1 и перемешивали при 40°С в течение 1 ч. Загружали дополнительно 68 мл этилацетата в течение 1,5 ч, при этом поддерживали внутреннюю температуру 40°С. Перемешивали полученную взвесь при 40°С в течение прибл. 18 ч и охлаждали до к.т. Взвесь фильтровали и промывали 24 мл 3:1 этилацетата: ЗБА3А этанола и 30 мл этилацетата. Твердые вещества сушили в вакууме при 50°С с получением 6,83 г (8,17 ммоль, 81%, 99,5 АР при 300 нм) амида 1£/2НС1: ^!Н ЯМР (600 МГц, БМЗОД6) δ 15,51 (к, 2Н), 14,95 (к, 2Н) 8,19 (к, 2Н), 8,05 (ά, 4Н), 7,91 (ά, 4Н), 7,25 (ά, 2Н), 5,18 (ί, 2Н), 4,44 (ί, 2Н), 3,77 (к, 2Н), 3,55 (к, 6Н), 2,50 (т, 2Н), 2,39 (т, 2Н), 2,24 (т, 2Н), 1,91 (т, 2Н), 0,95 (т, 2Н), 0,92 (ά, 6Н), 0,81 (ά, 6Н), 0,75 (к, 2Н); ¹³С ЯМР (125 МГц, БМЗОД6) δ 172,7, 156,9, 148,5, 139,1, 131,7, 127,1, 126,5, 125,9, 115,1, 57,8, 54,5, 51,5, 37,3, 32,9, 29,2, 19,7, 17,5, 17,5, 15,7; Рассчитанный элементный анализ (с поправкой на 0,81% воды): С = 59,86%, Н = 6,30%, N = 13,29%, С1 = 8,41%; Обнаружено: С = 59,99%, Н = 6,27%, N = 13,12%, С1 = 8,42%. Получение затравки для амида согласно примеру 1£/2НС1: Амид согласно примеру 1£ получали согласно изложенной выше основной методикой с применением 504 мг (0,8 ммоль) пирролидина согласно примеру 1е. 4НС1. После завершения реакции обогащенный ацетонитрильный раствор промывали 3 мл 13% водным №С1, 2х3 мл водным раствором, содержащим 13% №-1С1 и 1М №ЮН и 3 мл 13% водным №С1. Обогащенные органические вещества концентрировали до остатка и разбавляли 10 мл ацетонитрила. Мутную смесь фильтровали и прозрачный фильтрат концентрировали до остатка. Остаток разбавляли 10 мл этанола ЗБА3А и загружали 2,1 мл (1,9 ммоль, 2,4 эквив.) 0,88 М НС1 в этаноле. Смесь концентрировали до остатка и разбавляли 1,8 мл изопропанола. Полученный раствор нагревали до 50°С и оставляли перемешиваться в течение прибл. 18 ч. Полученную взвесь охлаждали до к.т., фильтровали и промывали 2:1 ацетоном:этанолом с получением 476 мг (0,57 ммоль, 78%) амида 1£/2НС1. [Примечание: (З)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановую кислоту закупали у Р1атта].

Примеры 1 и 2.

Образец амида согласно примеру 1£/2НС1 (106,9 мг) освобождали от основания (МСХ колонка 2 д; промывочная жидкость МеОН; элюирование 2 н Ν^/МеОН) и сушили в вакууме. NСЗ (0,0195 г, 0,146 ммоль) добавляли в раствор БМР (2,5 мл) полученного вещества и нагревали на масляной бане при 50°С в течение 16,5 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток растворяли в МеОН и подвергали очистке обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/вода/ТРА; колонка: ΡНЕNΟΜЕNЕX® Ьипа, 30х100 мм З10 Ах1а) с восстановлением солей ТРА согласно примеру 1 (белая пена; 56,1 мг) и согласно примеру 2 (белая пена; 22,3 мг). Соединение согласно примеру 1: ¹Н ЯМР (БМЗОД6, δ = 2,50 м.д., 400 МГц): 12,61 (Ьг к, 1Н), 8,13 (к, 1Н), 7,93 (ά, I = 8,5, 2Н), 7,90-7,86 (т, 4Н), 7,82 (ά, I = 8,5, 2Н), 7,27 (ά, I = 8,3, 1Н), 7,17 (ά, I = 8,5, 1Н), 5,02-4,94 (т, 2Н), 4,44-4,38 (т, 1,80Н), 4,31 (арр Ьг к, 0,2Н), 3,75 (т, 1Н), 3,62 (т, 1Н), 3,55 (к, 3Н), 3,54 (к, 3Н), 2,56-2,50 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 1Н), 2,41-2,23 (т, 3Н), 2,17-2,09 (т, 1Н), 2,07-2,00 (т, 1Н), 1,97-1,91 (т, 1Н), 1,88-1,81 (т, 1Н), 1,01-0,81 (т, 15Н), 0,71 (т, 1Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-МЗ (усл. согласно прим. 1а): Р = 1,80 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С42Н50СШ8О6: 797,35; обнаружено 797,33. Соединение согласно примеру 2: ¹Н ЯМР (БМЗОД6, δ = 2,50 м.д., 400 МГц): 7,86 (ά, I = 8,6, 4Н), 7,80 (ά, I = 8,5, 4Н), 7,17 (ά, I = 8,5, 2Н), 4,96 (άά, I = 7,5, 6,0, 2Н), 4,40 (арр ί, I = 7,8, 2Н), 3,61 (т, 2Н), 3,54 (к, 6Н), 2,33-2,23 (т, 4Н), 2,09-1,98 (т, 2Н), 1,90-1,82 (т, 2Н), 1,01-0,82 (перекрыто т и два ά при 0,96 м.д. и 0,87 м.д. I = 6,8 и I = 6,5, соответственно; 14Н); 0,71 (т, 1,7Н), 0,62 (т, 0,3Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-МЗ (усл. согласно прим. 1а): Κ_ί = 2,79 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₄₉С1₂^О₆: 831,32; обнаружено 831,26.

- 87 020815

Для синтеза амида согласно примеру согласно примеру 3а/2НС1 см. способ в заявке на патент УО 2009/020825.

Пример 3.

В раствор амида согласно примеру 3а (32 мг, 0,043 ммоль) в уксусной кислоте (2 мл) добавляли 2 экв. 1М брома в уксусной кислоте и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли дополнительный 1 экв. брома (образованные твердые вещества) и реакционную смесь нейтрализовали 5% NаНСОз и экстрагировали ЕЮАс (2x10 мл). Объединенные экстракты промывали нас. раствором №₂З₂О₃ и насыщенным солевым раствором и концентрировали. Остаток сушили под высоким вакуумом с получением соединения согласно примеру 3 (41 мг). ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ=3,54 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₄₉Вг^₈О₆: 897,22; обнаружено 897,28.

Примеры 4 и 5

Диизопропилэтиламин (100 мкл, 74,2 мг, 0,574 ммоль) добавляли в смесь амида согласно примеру 3а (197 мг, 0,243 ммоль) и Ν-хлорсукцинамида (39 мг, 0,292 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) и перемешивали в течение в течение ночи. Затем в реакционную смесь добавляли дополнительную порцию Νхлорсукцинамида (66 мг, 0,494 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока посредством анализа ВЭЖХ не подтвердили поглощение исходных веществ. Неочищенную реакционную смесь затем очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ (растворитель А = Н₂О/СН₃СN (95:5) + 0,05% ТРА; растворитель В = Н₂О/СН₃СN (5:95) + 0,05% ТРА; колонка: Ьииа С18, 5и, 100x21,5 мм; скорость потока: 20 мл/мин) с получением солей ТРА согласно примеру 4 (желтоватый аморфный порошок, 60 мг) и согласно примеру 3 (желтоватый аморфный порошок, 115 мг). Соединение согласно примеру 5: ЬС-МЗ (усл. согласно прим. 3): К, = 6,13 мин. ^!Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, ТМЗ, 600 МГц): 8,16 (5, 1Н), 7,95-7,91 (т, 7Н), 7,85 (б, б = 8,8, 2Н), 7,35 (б, б =

8,4, 1Н), 7,32 (б, б = 8,4, 1Н), 5,19 (ΐ, б = 7,3, 1Н), 5,05 (т, 1Н), 4,15 (ΐ, б = 7,7, 1Н). 4,08 (ΐ, б = 8,1, 1Н), 3,883,81 (т, 4Н), 3,56 (5, 6Н), 2,43 (т, 1Н), 2,21-2,11 (т, 4Н), 2,08-2,05 (т, 2Н), 1,97 (т, 3Н), 0,91 (б, б = 6,5, 3Н), 0,87 (б, б = 7,0, 3Н), 0,85 (б, б = 7,0, 3Н), 0,80 (б, б = 6,6, 3Н). НКМЗ: Рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₅₀С1^О₆: 773,3542; обнаружено 773,3530. Соединение согласно примеру 4: ЬС-МЗ (Усл. согласно прим. 3): К = 8,61 мин. ^!Н ЯМР (ЭМЗО-б₆, ТМЗ, 600 МГц): 7,89 (б, б = 8,3, 4Н), 7,83 (б, б = 8,3, 4Н), 7,33 (б, б = 8,4, 2Н), 5,05 (т, 2Н), 4,09 (ΐ, б = 8,3, 2Н), 3,84-3,81 (т, 4Н), 3,56 (5, 6Н), 2,24-2,15 (т, 4Н), 2,00-1,95 (т, 6Н), 0,91 (б, б = 6,7, 6Н), 0,87 (б, б = 6,6, 6Н). НКМЗ: Рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₄₉СВДЮ₆: 807,3152; обнаружено 807,3138.

К смеси пирролидина согласно примеру 1е/4НС1 (0,104 г, 0,174 ммоль), НАТИ (0,133 г, 0,349 ммоль) и Сар-193 (0,082 г, 0,349 ммоль) в ЭМР добавляли ОША (0,183 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ (РНЕЖМЕИЕХ® Ама 5 и колонка, 35 мин градиент 0-90%В. А = Н₂О/СН₃СЖ0 мм ΝΒ,ΘΆς, 95:5. В = СН₃СМН₂О/10 мм ЯН₄ОАс 95:5) с получением соединения согласно примеру 6, стадия а (0,064 г). ЬСМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С._и,Н_;уА₈О₁₀: 883,43; обнаружено: 883,26. ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) м.д. 7,90 (2 Н, 5), 7,78-7,86 (8 Н, т), 5,13 (2 Н, бб, б = 9,2, 6,9 Гц), 4,96 (2 Н, б, б = 5,0 Гц), 3,73-3,79 (2 Н, т), 3,63 (6 Н, 5), 3,39-3,49 (6 Н, т), 3,35 (1 Н, б, б =4,8 Гц), 3,32-3,34 (1 Н, т), 3,30 (6 Н, 5), 3,15 (6 Н, 5), 2,66 (2 Н, бб, б = 13,5, 9,4 Гц), 2,37-2,51 (4 Н, т), 2,02 - 2,09 (2 Н, т), 1,03 - 1,14 (2 Н, т), 0,81-0,93 (2 Н, т).

Примеры 6 и 7.

В раствор соединения согласно примеру 6, стадия а (0,057 г), в ЭМЕ добавляли NСЗ (10,34 мг, 0,077 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ (РНЕNОМЕNЕX® Ахба 5 и 30x100 мм колонка, 20 мин градиент 0-100%В. А = Н₂О/СН₃ОН/

- 88 020815

ТРА 90:10:0,1. В = СН₃ОН/Н₂О/ТРА 90:10:0,1) с получением соединения согласно примеру 6 (0,022 г) и согласно примеру 7 (0,017 г). Соединение согласно примеру 6: ЬС (Усл.-15): К, = 3,46 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₈СШ₈О’₀: 917,39; обнаружено: 917,12. ’Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) м.д. 7,87-7,91 (1 Н, т), 7,77-7,86 (8 Н, т), 5,14 (1 Н, кк, 1 = 9,2, 6,9 Гц), 5,05 (1 Н, кк, 1 = 8,1, 6,3 Гц), 4,96 (2 Н, ί, 1 = 5,7 Гц), 3,73-3,79 (1 Н, т), 3,67-3,72 (1 Н, т), 3,57-3,66 (6 Н, т), 3,32-3,51 (8 Н, т), 3,29 (6 Н, к, 1 = 1,8 Гц), 3,19 (3 Н, 5), 3,12-3,16 (3 Н, т), 2,60-2,72 (1 Н, т), 2,32 - 2,54 (5 Н, т), 2,02 (2 Н, к, 1 = 6,3 Гц), 1,00-1,19 (2 Н, т), 0,88 (1 Н, Ьг. 5.), 0,82 (1 Н, Ьг. 5.). Соединение согласно примеру 7: ЬС (Усл. согласно прим. РУ1): к, = 4,083 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₆С1₂ХО’₀: 951,35; обнаружено: 951,09. ’Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) м.д. 7,74-7,84 (8 Н, т), 5,05 (2 Н, ί, 1 = 7,2 Гц), 4,95 (2 Н, к, 1 = 5,5 Гц), 3,66-3,72 (2 Н, т), 3,63 (6 Н, 5), 3,37-3,53 (8 Н, т), 3,30 (6 Н, 5), 3,19 (6 Н, 5), 2,32 - 2,51 (6 Н, т), 1,92-2,06 (2 Н, т), 1,08 (2 Н, к,, 1 = 8,6, 5,8 Гц), 0,81 (2 Н, к, 1 = 1,8 Гц).

Раствор карбамата согласно примеру 1к (0,80 г, 1,23 ммоль) и NС8 (0,214 г, 1,603 ммоль) в ЭМР (12 мл) нагревали при 50°С в течение 17 ч. После этого его оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды, летучие компоненты удаляли в вакууме. Остаток растворяли в МеОН (36 мл) и два продукта разделяли преп. ВЭЖХ (Колонка: ХТЕККА®, 30х100 мм, 85; в начале программы %В = 50, в конце программы %В = 100; время градиента =10 мин; время остановки = 12 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% МеОН - 90% Н₂О - 0,1% ТРА; растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О - 0,1% ТРА). Каждую из двух фракций нейтрализовали избытком раствора 2н. ИН₃/МеОН и концентрировали в вакууме с удалением большей части метанола и остаток разделяли между 20% МеОН/СНС1₃ и водой. Органический слой сушили (М§8О₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением хлорида согласно примеру У1а-1 (светло-желтая пена; 288,4 мг) и дихлорида согласно примеру У1а-2 (светло-желтое твердое вещество; 400,4 мг). Хлорид согласно примеру У1а-1: ’Н ЯМР (ЭМ8О-к₆. δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,62-12,60 (т, 1Н), 12,23 (5, 0,2Н), 11,92 (5, 0,8Н), 7,85-7,32 (т, 9Н), 4,68-4,42 (т, 2Н), 3,47-3,38 (т, 2Н), 2,40-2,35 (т, 2Н), 2,26-2,20 (т, 2Н), 1,71-1,58 (т, 2Н), 1,55-0,96 (арр Ьг 5, 18Н), 0,82-0,69 (т, 2Н), 0,64-0,51 (т, 2Н). ЬС (У-усл. 1): К, = 2,44 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₄СШ₆О₄: 683,31; обнаружено: 683,31. Дихлорид согласно примеру У1а-2: ’Н ЯМР (ЭМ8О-к₆. δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,62 (5, 2Н), 7,85 (к, 1 = 8,8, 4Н), 7,82 (к, 1 = 8,9, 4Н), 4,61-4,42 (т, 2Н), 3,53-3,38 (т, 2Н), 2,41-2,35 (т, 2Н), 2,27-2,20 (т, 2Н), 1,70-1,59 (т, 2Н), 1,53-0,94 (арр Ьг 5, 18Н), 0,80-0,70 (т, 2Н), 0,64-0,53 (т, 2Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): К, = 2,89 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₃С1₂^О₄: 717,27; обнаружено: 717,31.

К суспензии хлорида согласно примеру У1а-1 (0,2741 г, 0,401 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли 4М НС1 в диоксане (4 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7ч и затем летучий компонент удаляли в вакууме с получением соли НС1 соединения согласно примеру У1Ь в виде коричневого твердого вещества (231,7 мг). Продукт использовали без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (ЭМ8Ок₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 13,51 (Ьг 5, 1Н), 10,53-10,30 (т, 2Н), 9,87-9,72 (т, 1Н), 8,02-7,85 (т, 9Н), 4,724,68 (т, 1Н), 4,65-4,53 (т, 1Н), 3,42-3,30 (т, 2Н), 2,68-2,37 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 4Н), 1,97-1,87 (т, 2Н), 1,16-1,07 (т, 2Н), 0,89- 0,80 (т, 2Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): К, = 1,66 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₈СШ₆: 483,21; обнаружено: 483,20. [Примечание: точное содержание НС1 в продукте не было определено].

Пример У1.

В раствор хлорида согласно примеру У1Ь/4НС1 (0,045 г, 0,072 ммоль), (8)-2(метоксикарбониламино)бутановой кислоты (0,025 г, 0,157 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0,075 мл, 0,429 ммоль) в ЭМР (1,5 мл) добавляли НАТИ (0,057 г, 0,150 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при ~25°С в течение 1 ч. Ее разбавляли МеОН (2,5 мл) и продукт очищали преп. ВЭЖХ (Колонка:

- 89 020815

ХТЕККА®, 30 X 100 мм, 85; в начале программы %В = 30, в конце программы %В = 90; время градиента = 10 мин; время остановки =12 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% МеОН - 90% Н₂О - 0,1% ТЕА; растворитель В = 90% МеОН -10% Н₂О - 0,1% ТЕА) с получением солей ТЕА согласно примеру У1 в виде светло-желтого твердого вещества (39,4 мг). ¹Н ЯМР (ЭМ8О-й₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 14,80-14,36 (Ьг т, 1,4Н), 12,58 (арр Ьг 5, 0,6Н), 8,14 (5, 1Н), 7,94 (ά, I = 8,5, 2Н), 7,89 (ά, I = 8,3, 2Н), 7,87 (ά, I = 8,4, 2Н), 7,82 (ά, I = 8,6, 2Н), 7,38 (ά, I = 7,8, 0,9Н), 7,28 (ά, I = 7,8, 0,9Н), 7,07 (арр Ьг 5, 0,1Н), 6,96 (арр Ьг 5, 0,1Н), 5,02 (άά, I = 8,8, 6,8, 1Н), 4,96 (άά, I = 7,0, 6,0, 1Н), 4,50-4,39 (т, 2Н), 3,74-3,67 (т, 1Н), 3,59-3,48 (т, 7Н), 2,60-2,47 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 1Н), 2,422,22 (т, 3Н), 2,01-1,65 (т, 4Н), 1,65-1,52 (т, 2Н), 1,06-0,84 (т, 8Н), 0,83-0,77, (т, 1Н), 0,74-0,66 (т, 1Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): К₍ = 1,66 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₄₆СШ₈О₆: 769,32; обнаружено: 769,35.

Пример У2.

Соединение согласно примеру У2 (соль ТЕА) получали из пирролидина согласно примеру У1Ь/4НС1 и (8)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты описанной для синтеза соединения согласно примеру У1 методикой.

Пример	О А,	К, (ЬС-Усл.); ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): % индекс гомогенности; данные М$
У2	-γ’-Λ ’ό	2,06 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С^ЛяСНШ: 881,38; обнаружено: 881,36.

Пример У3

Пример У3, стадия а

Промежуточное соединение согласно примеру У3а получали в виде соли НС1 из карбамата согласно примеру У1а-2 описанной для получения пирролидина У1Ь методикой. ¹Н ЯМР (ВМ8О^₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 10,62-10,48 (т, 2Н), 9,92-9,75 (т, 2Н), 7,92 (ά, I = 8,8, 4Н), 7,89 (ά, I = 9,1, 4Н), 4,68-4,57 (т, 2Н), 3,40-3,31 (т, 2Н), 2,54-2,50 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 2Н), 2,46-2,39 (т, 2Н), 1,91-1,85 (т, 2Н), 1,16-1,07 (т, 2Н), 0,85-080 (т, 2Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): Κ_ΐ = 2,01 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₇С1₂Х₆: 517,17; обнаружено: 517,06. [Примечание: точное содержание соли НС1 продукта не было определено].

Пример У3.

Соединение согласно примеру У3 (ТЕА соль) получали из соли НС1 пирролидина согласно примеру У3а описанной для соединения согласно примеру У1 методикой. ¹Н ЯМР (ЭМ8О^₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,59 (очень Ьг 5, ~2Н), 7,86 (ά, I = 8,5, 4Н), 7,80 (ά, I = 8,3, 4Н), 7,46 (арр Ьг 5, 0,13Н), 7,37 (ά, I = 7,6, 1,73Н), 6,97 (арр Ьг 5, 0,14Н), 4,97-4,94 (т, 2Н), 4,52-4,35 (т, 2Н), 3,63-3,45 (т, 8Н), 2,36-2,23 (т, 4Н), 1,96-1,83 (т, 2Н), 1,82-1,67 (т, 2Н), 1,64-1,49 (т, 2Н), 1,13-0,82 (т, 8Н), 0,78-0,61 (т, 2Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): К₍ = 2,66 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₄₅С1₂Х₈О₆: 803,28; обнаружено: 803,28.

Примеры У4-У6.

Соединения согласно примеру У4-У6 (соль ТЕА) получали из соли НС1 пирролидина согласно примеру У3а и соответствующих кислот описанной для синтеза согласно примеру У1 методикой.

- 90 020815

Пример	о А,	Κι (ЬС-Усл.); ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): % индекс гомогенности; данные Μδ
У4	-γΑ ’О	2,64 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдбНззСБНяОз: 915,34, обнаружено: 915,70. *Н ЯМР (ϋΜδΟ-06, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,63 (очень Ьг δ, -2Н), 7,87 (ά, 1 = 8,6, 4Н), 7,78 (ά, Д = 8,5, 4Н), 7,42 (арр Ьг 8, 0,1Н), 7,26 (ά, I = 8,6, 1,75Н), 6,97 (арр Ьг з, 0,14Н), 4,95 (άά, 1 = 8,4, 5,1, 2Н), 4,48 (арр 1,1 = 8,1, 2Н), 3,85 (т, 4Н), 3,73-3,64 (т, 2Н), 3,54 (δ, 6Н), 3,32-3,18 (т, 4Н), 2,37-2,19 (т, 4Н), 2,05-1,91 (т, 2Н), 1,91-1,78 (т, 2Н), 1,711,58 (т, 2Н), 1,56-1,39 (т, 4Н), 1,39-1,25, (т, 2Н), 1,05-0,93 (т, 2Н), 0,77-0,66 (т, 2Н)
У5	..... ΖΖ о \	2,59 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-М8: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СзвЯцСЬЫзОб: 775,25; обнаружено: 775,29. ¹Н ЯМР (ϋΜδΟ-дб, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,56 (очень Ьг з, ~2Н), 7,86 (ά, 1 = 8,5, 4Н), 7,80 (ά, I = 8,5, 4Н), 7,37 (ά, 1 = 7,6, 1,70Н), 7,02 (арр Ьг 5, 0,ЗН), 4,95 (арр 1, I = 6,8, 2Н), 4,63-4,54 (т, 2Н), 3,62-3,34 (перекрыто ‘т’ и ‘з’; 8 представляет собой приблизительно 3,52; 8Н), 2,31-2,28 (ш, 4Н), 1,91-1,84 (ш, 2Н), 1,28 (δ, ЗН), 1,27 (ά, 1 = 7, 6Н), 1,02-0,97 (т, 2Н), 0,76-0,61 (т, 2Н).
У5,1	-уА	2,65 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СзаНиСЬКвОб: 775,25; обнаружено: 775,35.
У5,2	О о -	2,72 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-,Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдоНдзСЬНвОб: 803,28; обнаружено: 803,38.
У5,3	γΑ о =	2,50 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СзвНиСЪКвОи 743,26; обнаружено: 743,36.
У6	γΛ ⁰ Δ	2,75 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-Μδ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдгН^СЬТчОб: 827,28; обнаружено: 827,33.

Примеры У7 и У8

\п (В, = н, к₂ = С1) νβ (В, = С1, в₂ = Н)

Пример У7, стадия а

В раствор пирролидина согласно примеру 1е/4НС1 (0,350 г, 0,589 ммоль), (§)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (0,103 г, 0,589 ммоль), (§)-2-(метоксикарбониламино)-2(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты (0,128 г, 0,589 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0,720 мл, 4,12 ммоль) в ЭМР (3 мл) добавляли НАТИ (0,493 г, 1,295 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при ~25°С в течение 4 ч и затем разбавляли МеОН и очищали преп. ВЭЖХ (Колонка: ХТЕККА®, 30x100 мм, §5; в начале программы %В = 30, в конце программы %В = 75; время градиента =15 мин; время остановки =15 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% МеОН - 90% Н₂О - 0,1% ТРА; растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О - 0,1% ТРА) с выделением продукта согласно примеру У7а трех возможных продуктов. Продукт согласно примеру У7а растворяли в МеОН и приводили в свободное основание (картридж МСХ 6д; промывочная жидкость МеОН; элюирование 2 н NНз/МеОН) и концентрировали в вакууме с получением коричневого твердого вещества (103,2 мг). ЬС (усл. согласно прим. 1а): К= 1,63 мин. ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₃Ю О₇: 805,40; обнаружено: 805,49.

Примеры У7 и У8.

Раствор продукта согласно примеру У7а (0,103 г, 0,128 ммоль) и NС§ (0,022 г, 0,167 ммоль) в ЭМЕ (1,5 мл) нагревали при 50°С в течение 24 ч. После этого его оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды, реакционную смесь разбавляли МеОН и очищали преп. ВЭЖХ (Колонка ХТЕККА®, 30x100 мм, §5; в начале программы %В = 40, в конце программы %В = 100; время градиента =15 мин; время остановки =17 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% МеОН -90% Н₂О - 0,1% ТРА; растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О - 0,1% ТРА) с выделением смеси региоизомеров согласно примерам У7 и У8. Смесь растворяли в МеОН и подвергали различным условиям очистки преп. ВЭЖХ (Колонка: Аа1ег5 §ипР1ге, 30x100 мм, §5; в начале программы %В = 10, в конце

- 91 020815 программы %В = 50; время градиента = 20 мин; время остановки = 20 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% ацетонитрила - 90% Н2О - 0,1% ТРА; растворитель В = 90% ацетонитрила - 10% Н₂О - 0,1% ТРА) с разделением двух региоизомеров в виде солей ТРА. Соединение согласно примеру У7 (беловатое твердое вещество, 17,3 мг): ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б6, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 14,52 (арр Ьг 8, слишком уширенный для объединения), 12,64 (арр Ьг 8, слишком уширенный для объединения), 8,14 (8, 1Н), 7,95-7,79 (т, 8Н), 7,26 (два перекрыто б, 1 =~8,6, 1,70Н), 7,10 (арр Ьг 8, 0,08Н), 6,98 (арр Ьг 8, 0,22Н), 5,01-4,97 (т, 1Н), 4,96-4,92 (т, 1Н), 4,50-4,46 (т, 1Н), 4,43-4,40 (т, 1Н), 3,90-3,81 (т, 2Н), 3,79-3,72 (т, 1Н), 3,71-3,64 (т, 1Н), 3,54 (арр 8, 6Н), 3,31-3,18 (т, 2Н), 2,65-2,50 (т частично перекрыто растворителем, 1Н), 2,45-2,19 (т, 3Н), 2,18-2,08 (т, 1Н), 2,04-1,89 (т, 2Н), 1,89-1,79 (т, 1Н), 1,691,59 (т, 1Н), 1,55-1,41 (т, 2Н), 1,38-1,23 (т,1Н), 1,04-0,77 (т, 9Н), 0,74-0,67 (т, 1Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): К = 2,15 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С44Н51С1^8 О7: 839,36; обнаружено: 839,35. Соединение согласно примеру У8 (беловатое твердое вещество, 16,8 мг): ¹Н ЯМР (ЭМЗО-б6, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 14,53 (Ьг 8, слишком уширенный для объединения), 12,61 (Ьг 8, слишком уширенный для объединения), 8,13 (8, 1Н), 7,94 (б, 1 = 8,3, 2Н), 7,90 (б, 1 = 8,6, 2Н), 7,85 (б, 1 = 8,5, 2Н), 7,82 (б, 1 = 8,6, 2Н), 7,36 (б, 1 = 8,8, ~1Н), 7,17 (б, 1 = 8,5, ~1Н), 5,00-4,94 (т, 2Н), 4,49 (арр ΐ, 1 = 7,7, 1Н), 4,40 (арр ΐ, 1 = 7,9, 1Н), 3,90-3,78 (т, 3Н), 3,65-3,59 (т, 1Н), 3,55 (8, 3Н), 3,54 (8, 3Н), 3,35-3,19 (т, 2Н), 2,64-2,50 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 1Н), 2,41-2,34 (т, 1Н), 2,33-2,22 (т, 2Н), 2,12-1,99 (т, 2Н), 1,99-1,90 (т, 1Н), 1,89-1,81 (т, 1Н), 1,52-1,27 (т, 4Н), 1,07-0,84 (т, 8Н), 0,84-0,77 (т, 1Н), 0,75-0,65 (т, 1Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): К = 2,15 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₁С1^₈ О₇: 839,36; обнаружено: 839,38.

- 92 020815

Вос₂О (0,734 г, 3,36 ммоль) с последующим добавлением ОМАР (0,021 г, 0,168 ммоль) добавляли к смеси пирролидина согласно примеру 1е/4НС1 (2,00 г, 3,36 ммоль) и ΒΐзN (2,3 мл, 16,82 ммоль) в ЭМР (60 мл) и перемешивали при условиях окружающей среды в течение 4,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток разделяли между 1,0 н №ЮН (20 мл) и 20% МеОН/СНС1₃ (50 мл). Водную фазу промывали 20% МеОН/СНС1₃ (50 мл, 2х). Объединенную органическую фазу сушили (МдЗО₄) и концентрировали в вакууме. Осажденное на силикагеле неочищенное вещество получали из полученного неочищенного вещества и подвергали очистке ВЮТАОЕ® (силикагель 160 д), причем колонку сначала элюировали ЕЮАс, пока не проявились все самые высокие пятна К_£ (т.е., бис-Вос производное 1ά; 0,28 г) и затем колонку элюировали 5-10% МеОН/СН₂С1₂ избытком 2,5 л с элюированием остаточного бис-Вос х (с последующим добавлением моно-Вос согласно примеру У9а (0,81 г; —содержащий 1,1 моль эквив. Е,₃№). ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₃Н₃-Н-,О₂: 549,30; обнаружено 549,45.

В раствор карбамата согласно примеру У9а (1 г, 1,823 ммоль), (З)-2-(метоксикарбониламино)-2(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты (0,400 г, 1,841 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0,65 мл, 3,72 ммоль) в ЭМЕ (8 мл) добавляли НАТИ (0,770 г, 2,026 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при —25°С в течение 3 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток поглощали 20% МеОН/СНС1₃ (250 мл), промывали водой (3x40 мл), сушили над МдЗО₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток поглощали СНС1₃ (4 мл) и загружали в картридж Томпсона с силикагелем и элюировали 10% МеОН/ЕЮАс с получением продукта согласно примеру У9Ь в виде желтовато-коричневой пены (1,15 г). ЬС (усл. согласно прим. 1а): К, = 1,70 мин; ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₂Н₃₀НЮ₆: 748,38; обнаружено: 748,40.

Раствор согласно примеру У9Ь (0,9387 г, 1,255 ммоль) и NСЗ (0,335 г, 2,51 ммоль) в ЭМР (13 мл) нагревали при 50°С в течение 24,5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток поглощали СН2С12 (200 мл), промывали водой (3x50 мл), с последующим добавлением насыщенного солевого расотвора (50 мл), сушили над МдЗО₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток поглощали СН₂С1₂ (6 мл) и подвергали очистке на силикагеле (100% этилацетат) с получением соединения согласно примеру У9с в виде желтого твердого вещества (720,7 мг). ЬС (усл. согласно прим. 1а): К, = 3,19 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₄₈С1₂^О₆: 816,30; обнаружено: 816,35.

Пирролидин согласно примеру ν9ά получали в виде соли НС1 из карбамата согласно примеру У9с описанной для синтеза согласно примеру У1Ь методикой. ¹Н ЯМР (ЭМЗОЛ₆. δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 10,49-10,38 (т, 1Н), 9,84-9,72 (т, 1Н), 7,90-7,81 (т, 8Н), 7,27 (ά, 1 = 8,6, 0,89Н), 6,99 (арр Ьг 8, 0,11Н), 4,98-4,95 (т, 1Н), 4,65-4,55 (т, 1Н), 4,50-4,46 (т, 1Н), 3,90-3,80 (т, 2Н), 3,76-3,64 (т, 1Н), 3,54 (8, 3Н), 3,41-3,32 (т, 1Н), 3,32-3,19 (т, 2Н), 2,54-2,40 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 2Н), 2,362,24 (т, 2Н), 2,06-1,95 (т, 1Н), 1,94-1,78 (т, 2Н), 1,69-1,57 (т, 1Н), 1,55-1,40 (т, 2Н), 1,39-1,27 (т,1Н),

- 93 020815

1,17-1,07 (т, 1Н), 1,04-0,92 (т, 1Н), 0,88-0,78 (т, 1Н), 0,76-0,66 (т,1Н). ЬС (Усл. согласно прим. 1а): Κ_ί = 2,66 мин; индекс гомогенности >95%. ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₇Н₄₀С1_2¥О₄: 716,25; обнаружено: 716,28.

Пример ν9.

Соединение согласно примеру ν9 (ТРА соль) получали из соли НС1 промежуточного соединения согласно примеру ν9ά и (§)-2-(метоксикарбониламино)бутановой кислоты описанной для синтеза соединения согласно примеру ν1 методикой. ¹Н ЯМР (ЭМ§О_¥, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,59 (Ьг δ, ~2Н), 7,87-7,77 (т, 8Н), 7,29/7,26 (два частично перекрытых ά, 1 = 8,6/7,8, 1,82Н), 6,97 (арр Ьг δ, 0,18Н), 4,974,93 (т, 2Н), 4,50-4,42 (т, 2Н), 3,90-3,81 (т, 2Н), 3,72-3,65 (т, 1Н), 3,60-3,46 (перекрытый т и два δ, δ представляют собой приблизительно 3,54 и 3,53, 7Н), 3,32-3,18 (т, 2Н), 2,38-2,18 (т, 4Н), 2,05-1,23 (система 'т', 9Н), 1,09-0,85 (т, 5Н), 0,76-0,59 (т, 2Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): Κ_ί = 2,66 мин. ЬС-М§: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₃Н₄₉С1₂^О₇: 859,31; обнаружено: 859,43.

Примеры ν10-ν16.

Соединения согласно примерам ν10-ν16 (ТРА соль) получали из соли НС1 пирролидина согласно примеру ν9ά и соответствующих кислот описанной для получения соединения согласно примеру ν1 методикой. Соединениям согласно примерам У13-У16 будет необходима дополнительная очистка обращено-фазовой ВЭЖХ, при которой использовали следующее условие: Колонка: ^аίе^δ §цпР1ге, 30x100 мм, δ5; в начале программы %В = 10, в конце программы %В = 50; время градиента = 20 мин; время остановки = 20 мин; скорость потока = 30 мл/мин; длина волны = 220; растворитель А = 10% ацетонитрила - 90% Н2О - 0,1% ТРА; растворитель В = 90% ацетонитрила - 10% Н₂О-0,1% ТРА.

Пример	Ο	Κ< (ЬС-Усл.); ЬС (Усл, согласно прим. 2а и 2Ь): % индекс гомогенности; данные М3
νιο	0	2,59 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%, ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄1Н45С1₂М₈О₇: 831,28; обнаружено: 831,31.
VII	\ ο ^θ4 ζζ .....ь %	2,54 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-М5: Аналитически рассчитано для [М+Н]* СцгНсСЬУвО? 845,29; обнаружено: 845,17.
У12	э'А ⁰	2,69 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]* 873,33; обнаружено: 873,27.
νΐ3	° Δ	2,73 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%, ЬС-МЗ: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С-иНчзСЬНвО?: 871,31; обнаружено: 871,41
νΐ4	-γΑ ° ζ>	2.83 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-М8: Аналитически рассчитано для [М+Н]* 885,33; обнаружено 885,45.
У15	-°γΆ ⁰ он	2,70 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЦС-М5: Аналитически рассчитано для [М+Н]* СлНлСЬКвОв 889,32; обнаружено 889,44.
Υ16		2,52 мин (Усл. согласно прим. 1а); >95%; ЬС-М5: Аналитически рассчитано для [М+Н]* С-иНи.СЬМтОб 814,29; обнаружено 814,18.

Примеры 0^1-1- 0^1-3

- 94 020815

Пример С\Ы, стадия а

Для получения карбамата согласно примеру С\1а см. заявку на патент США № 2009/0068140.

В раствор карбамата согласно примеру СЦ1а (0,830 г, 1,271 ммоль) в ЭМР (9 мл) добавляли NС8 (0,221 г, 1,653 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч. Добавляли большее количество NС8 (0,1 г, 0,75 ммоль) и нагревание продолжали еще 4 ч. Ее оставляли охлаждаться до температуры окружающей среды и разделяли между ЭСМ и вода (каждого 20 мл). Водный слой экстрагировали ЭСМ (20 мл) и объединенную органическую фазу сушили (№₂80₄) и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество растворяли в Ме0Н и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (Ме0Н/вода/ТРА; колонка: ΡНЕNОΜЕNЕX® Ьипа, 30х100 мм 810 Ах1а) с восстановлением солей ТРА согласно примеру С\1Ь в виде светло-желтой пены (0,25 г). ¹Н ЯМР (Ме0Э, δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,82 (арр 5, 8Н), 4,95-4,85 (т частично перекрытый сигнал Н0Э, 2Н), 4,04 (т, 2Н), 2,36-2,14 (т, 6Н), 1,77 (т, 2Н), 1,50-1,20 (перекрытие Ьг 5 и ά, 24Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): КТ = 3,0 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₇С1₂^0₄: 721,30; обнаружено 721,32.

4н. НС1 в диоксане (10 мл) добавляли в карбамат согласно примеру С\1Ь (0,29 г, 0,306 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч.

Растворитель удаляли и сушили в вакууме в течение ночи с получением соли НС1 продукта согласно примеру С\1с в виде коричневого твердого вещества (0,21 г). ¹Н ЯМР (Ме0Э, δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,85 (ά, 1 = 8,6, 4Н), 7,80 (ά, 1 = 8,8, 4Н), 4,95-4,85 (т, 2Н), 3,89-3,80 (т, 2Н), 2,58-2,31 (т, 6Н), 2,01-1,91 (т, 2Н), 1,50 (ά, 6,5 Гц, 6Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): КТ = 3,0 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₃₁С1₂^: 521,20; обнаружено 521,20.

Примеры С\1-1- С\1-3.

В раствор соли НС1 согласно примеру С\1с (150 мг, 0,225 ммоль), (8)-2-(метоксикарбониламино)2- (тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты (57,6 мг, 0,265 ммоль) и (8)-2-(метоксикарбониламино)3- метилбутановой кислоты (48,0 мг, 0,274 ммоль) в ЭМР (10 мл) добавляли ОЬЕА (0,236 мл, 1,349 ммоль) и НАТИ (176 мг, 0,463 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме, остаток растворяли в Ме0Н и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (Ме0Н/вода/ТРА; колонка: ΡНЕNОΜЕNЕX® Ьипа, 30х100 мм 810 Ах1а) с выделением трех продуктов в виде солей ТРА. Соединение согласно примеру С\1-1 (светло-желтая пена, 25 мг) было загрязнено неопределенной примесью. ¹Н ЯМР (Ме0Э, δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 8,057,93 (т, 1,54Н), 7,87-7,56 (т, 6,46Н), 5,42 (Ьг ά, 1 = 6,6, 0,68Н), 4,97 (т, 1,32Н), 4,76-4,69 (т, 1,2Н), 4,314,14 (т, 2,8Н), 3,98-3,84 (т, 4Н), 3,68/3,67/3,63 (три 5, 6Н), 3,40-3,21 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 4Н), 2,72 (т, 0,7Н), 2,45-1,14 (перекрыто много т и два ά, ά при 1,51 и 1,18 1 = 6,5 и 6,3, соответственно; 23,3Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): >91,8% индекс гомогенности. ЬС (Усл. согласно прим. 1с): КТ = 6,22 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₇С1₂^0₈: 919,37; обнаружено 919,9. Соединение согласно примеру С\1-2 (светло-желтая пена, 39 мг); ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,97 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₅С1₂^0₇: 877,36; обнаружено 877,35. Соединение согласно примеру С\1-3 (светло-желтая пена, 22 мг), ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. 1а): КТ = 3,07 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₃С1₂^0₆: 835,35; обнаружено 835,34.

- 95 020815

Пример СА2, стадия а

В раствор карбамата согласно примеру СА1а (0,830 г, 1,271 ммоль) в ОМР (9 мл) добавляли NС8 (0,221 г, 1,653 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч. Добавляли дополнительное количество NС8 (0,1 г, 0,75 ммоль) и нагревание продолжали при 50°С дополнительные 4 ч. Смесь разделяли между ЭСМ и водой (каждого 20 мл). Водную фазу экстрагировали ЭСМ (20 мл) и объединенную фазу сушили №₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Полученный неочищенный продукт растворяли в МеОН и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (МеΟН/вода/ΤРΑ; колонка: ΡНΕNΟМΕΝΕΧ® Ьииа, 30x100 мм 810 Αχίη) с восстановлением карбамата согласно примеру СА2а в виде светложелтой пены (0,03 г). Ή ЯМР (МеОЭ. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,76-7,64 (т, 8Н), 7,34 (5, 1Н), 5,10-4,65 перекрывание сигналом НОЭ. т, 2Н), 3,99 (т, 2Н), 2,31-2,01 (т, 6Н), 1,78-1,76 (т, 2Н), 1,55-1,15 (арр Ьг т, 24Н). ЬС (усл. согласно прим. 1а): НТ = 2,55 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С₃₈Н₄₈СШ₆О₄: 687,34; обнаружено 687,39.

Пример СА2, стадия Ь

4н. НС1 в диоксане (10 мл) добавляли в карбамат согласно примеру СА2а (0,19 г, 0,208 ммоль) и это перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляли и это сушили в вакууме в течение ночи с получением соли НС1 пирролидина согласно примеру СА2Ь в виде коричневого твердого вещества (0,16 г). Ή ЯМР (МеОЭ. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 8,11 (5, 1Н), 7,95 (ά, 1 = 8,5, 2Н), 7,87 (проявление 'ά', 4Н), 7,82 (ά, 1 = 8,8, 2Н), 5,22 (т, 1Н), 4,92 - 4,83 (перекрывание сигналом НОЭ. т, 1Н), 3,99 (т, 1Н), 3,84 (т, 1Н), 2,78-2,62 (т, 2Н), 2,57-2,31 (т, 4Н), 2,12-1,91 (т, 2Н), 1,55 (ά, 1 = 6,8, 3Н), 1,50 (ά, 1 = 6,8, 3Н). ЬС (Усл. согласно прим. 1а): НТ = 1,74 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С₂₈Н₃₂СШ₆: 487,24; обнаружено 487,21.

Пример СА2.

В раствор соли НС1 пирролидина согласно примеру СА2Ь (80 мг, 0,126 ммоль) и (8)-2(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (48,7 мг, 0,278 ммоль) в ОМР (3 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,132 мл, 0,758 ммоль) и НΑΤυ (99 мг, 0,260 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток растворяли в МеОН и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (МеΟН/вода/ΤРΑ; колонка: ΡНΕNΟМΕNΕX® Ьииа, 30x100 мм 810 Αχίπ) с восстановлением солей ΤРΑ согласно примеру СА2 (светло-желтая пена; 50 мг). Ή ЯМР (МеОЭ. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 8,00-7,75 (т, 9Н), 5,71 (арр Ьг т, 0,2Н), 5,40 (ά, 1 = 6,3, 0,45

Н), 5,15-5,11 (т, 0,87Н), 5,00-4,96 (т, 0,92Н), 4,81-4,68 (т, 1,56Н), 4,26-4,03 (т, 2Н), 3,71/3,70/3,64/3,63 (четыре 5 6Н), 2,77-1,87 (т, 9,24Н), 1,65-1,48 (перекрыто т и ά, 4,66 Н), 1,28 (ά, I = 0,62Н), 1,17 (ά, I = 6,3Н, 1,23Н), 1,06-0,82 (т, 12,15Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬСМ8 (усл. согласно прим. 1а): НТ = 2,46 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С₄₂Н₅₄СШ₈О₅: 801,39; обнаружено 801,41.

Пример СА2-1.

Соединение согласно примеру СА2-1 ^ΡΑ соль) получали из пирролидина согласно примеру СА2Ь и (8)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты описанной для получения соединения согласно примеру СА2 методикой.

Пример		КТ (ЬС-Усл.); % индекс гомогенности; данные М8
СЛУ2-1	ο^ζ нЛ°	2,23 мин (Усл. согласно прим. 1а); >98%; ЬС-М8: Аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ САЕЫОМяОа: 885,41; обнаружено 885,37

- 96 020815

Вышеуказанные три сложных эфира получали из (8)-1-трет-бутил-2-метил-5-оксопирролидин-1,2дикарбоксилата согласно описанной в Теί^аЬеά^οη Ьейеге, 3203-3205 (2003) методике.

Пример С\У3, стадия Ь

Диметилсульфидборановый комплекс (5,44 мл, 10,88 ммоль) добавляли в раствор сложного эфира согласно примеру С\У3а-2 (1,4 г, 5,44 ммоль) в ТНР (25 мл) и реакционную смесь нагревали при 40°С в течение 7 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток разделяли между ЕЮАс и водой (каждого 50 мл). Водный слой экстрагировали ЕЮАс (30 мл) и объединенную органическую фазу сушили Να₂80.₄и концентрировали в вакууме. Полученное бесцветное масло очищали флеш-хроматографией (0-50% ЕЮАс/Гексан) с получением сложного эфира согласно примеру С\У3Ь в виде бесцветного масла (0,77 г). ^!Н ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц): 4,29-4,18 (т, 1Н), 3,78-3,66 (т, 4Н), 2,99 (арр ί, I = 10,1, 1Н), 2,43-2,97 (т, 1Н), 2,43-2,37 (т, 1Н), 2,30-2,18 (т, 1Н), 1,60-1,52 (т, 1Н), 1,47/1,42 (два 5 9Н), 1,08-1,05 (т, 3Н).

Пример С\У3, стадия с

В раствор сложного эфира согласно примеру С\У3Ь (1,69 г, 6,95 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляли раствор ЬЮН (0,250 г, 10,42 ммоль) в воде (5,00 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Органический растворитель выпаривали в вакууме и остаток разбавляли водой (10 мл) и промывали эфиром (10 мл). Это охлаждали на бане со льдом и водой и подкисляли до диапазона рН ~2 при помощи 1н. НС1. Это затем экстрагировали ЕЮАс (20 мл, 3х). Органический слой сушили Ν;·ι₂80₂ и концентрировали в вакууме с получением кислоты согласно примеру С\У3с в виде бесцветного масла, которое становилось белым твердым веществом после пролонгированного воздействия под высоким вакуумом (1,38 г). ¹Н ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц): 4,39-4,22 (т, 1Н), 3,80-3,69 (т, 0,91Н), 3,59-3,35 (т, 0,18Н), 3,03-2,89 (т, 0,91Н), 2,51-2,22 (т, 2Н), 1,98-1,91 (т, 0,71Н), 1,68-1,60 (0,29Н), 1,50/1,44 (два '5', 9Н), 1,09 (арр т, 3Н).

Пример С\У3, стадия ά

К суспензии согласно примеру С\У3с (1,83 г, 7,98 ммоль) и 1,1'-(бифенил-4,4'-диил)бис(2бромэтанона) (1,581 г, 3,99 ммоль) в СН₃СК (30 мл) добавляли Э1ЕА (1,436 мл, 8,22 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток разделяли между ЕЮАс и водой (каждого 50 мл). Органический слой промывали нас. №НС0₃ (20 мл), сушили Ν;·ι₂80₂ и концентрировали в вакууме с получением сложного диэфира согласно примеру Ον3ά в виде светло-желтого твердого вещества (2,67 г), который использовали как таковой в следующей стадии.

Пример Ον3, стадия е

- 97 020815

В раствор сложного дикетоэфира согласно примеру О\34 (2,67 г, 3,85 ммоль) в ксиленах (30 мл) добавляли ацетат аммония (2,97 г, 38,5 ммоль) и смесь нагревали в течение 6 ч в герметизированной пробирке при 140°С. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток разделяли между ОСМ (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой промывали нас. ЫаНСО₃ (20 мл), сушили Ыа₂8О₄ и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали флеш-хроматографией (50-100% ЕЮАс/гексана, 100% ЕЮАс-10% МеОН/ЕЮАс)) с получением имидазола согласно примеру О\3е в виде оранжевого твердого вещества (1,3 г). ¹Н ЯМР (ЭМ8О-4₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 12,21-11,87 (три Ьг 5, 2Н), 7,82-7,51 (т, 9,2Н), 7,30 (т, 0,6Н), 6,88-6,81 (т, 0,2Н), 4,9-4,67 (т, 1,81Н), 3,98-3,93 (т, 0,19Н), 3,77-3,54 (т, 2Н), 3,07-2,76 (т, 2Н), 2,43-2,04 (т, 4Н), 1,80-1,56 (т, 2Н), 1,41-1,33 (т, 8Н), 1,10-1,04 (т, 16Н). 1.С-М8 (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,09 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₉Ы₆О₄: 653,38; обнаружено 653,51.

Пример О\3, стадия £

4н. НС1 в диоксане (12,10 мл, 48,4 ммоль) добавляли в карбамат согласно примеру О\3е (1,3 г, 1,99 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и продукт сушили в вакууме в течение ночи с получением соли НС1 пирролидина согласно примеру О\3Г в виде желтого твердого вещества (1,14 г). ¹Н ЯМР (ЭМ8О-4₆, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 10,32 (арр Ьг 5, 2Н), 9,79 (арр Ьг 5, 2Н), 8,13 (5, 2Н), 8,02 (4, I = 8,3, 4Н), 7,99 (4, I = 8,3, 4Н), 5,01 (Ьг т, 2Н), 3,47 (Ьг т, 2Н), 3,05 (Ьг т, 2Н), 2,62 (т, 2Н), 2,45 (т, 2Н), 2,21 (т, 2Н), 1,13 (4, I = 6,3, 6Н). ЬС-М8 (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,09 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₃₃Ы₆: 453,28; обнаружено 453,17.

Пример О\3, стадия д

К суспензии соли

НС1 пирролидина согласно примеру

О\\'3Г (1,14 г

1,905 ммоль), (8)-2(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты (0,488 г, 2,248 ммоль) и (8)-2(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (0,407 г, 2,324 ммоль) в ЭМР (15 мл) добавляли О1ЕА (1,996 мл, 11,43 ммоль). При помощи разрушения ультразвуком получали общее растворение, затем добавляли НАТи (1,478 г, 3,89 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток растворяли в МеОН и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (МеОН/вода/ТРА; колонка: РНЕЫОМЕХЕХ® Ьипа, 30x100 мм 810 Ах1а) с получением солей ТРА трех продуктов: соединение согласно примеру О\3д-1 (0,28 г), соединение согласно примеру О\3д-2 (0,64 г) и соединение согласно примеру О\3д-3 (0,36 г) в виде светло-желтой пены. Продукт согласно примеру О\3д-3: ¹Н ЯМР (ЭМ8О, δ = 2,5 м.д., 400 МГц): 14,74 (арр Ьг 5, не совместный), 8,16 (5, 2Н), 7,97 (4, I = 8,6, 4Н), 7,88 (4, I = 8,3, 4Н), 7,29 (4, I = 8,0, < 2Н), 5,23 (Ьг т, 0,1Н), 5,07 (44, I = 10,6, 7, 1,9Н), 4,18 (т, 2Н), 4,09 (т, 2Н), 3,53 (5, 6Н), 3,39 (т, 2Н), 2,56-2,35 (т частично перекрыто сигналом растворителя, 2Н), 1,95 (т, 2Н), 1,82 (т, 2Н), 1,13 (4, 1 = 6,3, 6Н), 0,79 (4, I = 6,5, 6Н), 0,76 (4, 1 = 6,5, 6Н). [Примечание: три последние интеграции включают незначительное количество ротамеров с сигналами в области 1,1-0,85 м.д., у которых не были выбраны пики]. БС-М8 (усл. согласно прим. 1а): КТ = 1,79 мин. БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₅Х₈О₆: 767,42; обнаружено 767,30. Продукт согласно примеру О\3д-1, БС-М8 (усл. согласно прим. 1а): КТ = 1,62 мин. БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₉Х₈О₈: 851,45; обнаружено 851,33. Продукт согласно примеру О\3д-2, БС-М8 (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 1,70 мин. БС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₇Ы₈О₇: 809,44; обнаружено 809,30.

Пример О\3.

В раствор соединения согласно примеру О\3д-3/2ТРА (160 мг, 0,174 ммоль) в ЭМР (2 мл) добавляли ЫС8 (30,6 мг, 0,229 ммоль). Смесь нагревали до 50°С в течение 5,5 ч. Остаток растворяли в МеОН и подвергали очистке обращено-фазовой ВЭЖХ (МеОН/вода/ТРА; колонка: РНЕЫОМЕХЕХ® Ьипа,

- 98 020815

30x100 мм δ10 Ах1а) с восстановлением солей ТРА согласно примеру Ον3 в виде светло-желтой пены (40 мг). [Примечание: при аналогичных случаях проводили хлорирование исходного вещества, которое было в форме свободного основания.] ’Н ЯМР ([ЛеОО. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,88 (5, 1Н), 7,84-7,76 (т, 8Н), 5,19 (66, 1 = 11,1, 7,1, 1Н), 4,98 (66, 1 = 10,4, 7,3, 1Н), 4,32 (т, 1Н), 4,24-4,17 (т, 3Н), 3,63 (5, 3Н), 3,62 (5, 3Н), 3,40-3,33 (т, 2Н), 2,65 (т, 1Н), 2,50 (т, 2Н), 2,37 (т, 1Н), 1,99 (т, 2Н), 1,82 (т, 2Н), 1,22 (6, 1 = 6,3, 2,85Н), 1,18 (6, 1 = 6,3, 2,85Н), 1,09 (т, 0,3Н), 0,92-0,85 (т, 12Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,32 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С₄₂Н₅₄СШ₈О₆: 801,39; обнаружено 801,25.

Соединение согласно примеру Ον4 (соль ТРА) получали из соединения согласно примеру 0ν3§-1 описанной для получения соединения согласно примеру Ον3 методикой. ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,17 мин (Усл. согласно прим. 1а). ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С₄₆Н₅₈СШ₈О₈: 885,41; обнаружено 885,26.

В раствор соединения согласно примеру 0ν3§-2 (565 мг, 0,588 ммоль) в ΌΜΕ (2 мл) добавляли NСδ (0,021 г, 0,161 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 17 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток растворяли в ΜеОН и подвергали очистке обращенофазовой ВЭЖХ (ΜеОН/вода/ТРА; колонка: РНЕNОΜЕNЕX® Ьипа, 30x100 мм δ10 Ах1а) с получением двух фракций (одна представляет собой соединение согласно примеру Ον5, а вторая представляет собой смесь соединений согласно примерам Ον6 и Ον7). Фракции сушили в вакууме и восстанавливали в виде светло-желтого твердого вещества. Обе фракции отдельно растворяли в метаноле и подвергали очистке обращенно-фазовой ВЭЖХ (АС^ГРА/вода, Vаΐе^-δиηР^^е 30x100 мм δ5) с восстановлением солей ТРА соединений согласно примерам Ον5, Ον6 и Ον7. Соединение согласно примеру Ον5: ’Н ЯМР (ЫеОО. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,74 (т, 8Н), 5,02 (т, 2Н), 4,29-4,18 (т, 4Н), 3,90 (т, 2Н), 3,63 (5, 6Н), 3,41-3,33 (т, 4Н), 2,52 (т, 2Н), 2,39 (Ьг т, 2Н), 2,01-1,79 (т, 4Н), 1,58-1,27 (т, 4Н), 1,18 (6, 1 = 6,5, 5,63Н), 1,09 (т, 0,37Н), 0,93 (6, 1 = 6,8, 3Н), 0,88 (6, 1 = 6,5, 3Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,81 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С-мНяяСЬ^О-: 877,36; обнаружено 877,30. Соединение согласно примеру Ον6: ’Н ЯМР ([ЛеОО. δ= 3,30 м.д., 400 МГц): 7,86 (5, 1Н), 7,82-7,73 (т, 8Н), 5,19 (66, 1 = 11, 7, 1Н), 4,98 (66, 1 = 10,4, 7,3, 1Н), 4,33-4,19 (т, 4Н), 3,90 (т, 2Н), 3,67 (т, 0,35Н), 3,63/3,62 (два перекрытых δ, 5,65Н), 3,41-3,31 (т, 4Н), 2,65 (т, 1Н), 2,49 (т, 2Н), 2,38 (т, 1Н), 2,00-1,79 (т, 4Н), 1,57-1,27 (т, 4Н), 1,22/1,18 (два перекрытых 6, 1 = 6,5/6,3, соответственно, 5,69Н), 1,09 (т, 0,31Н), 0,90/0,86 (два перекрытых '6', 1 = 6,8/6,8, 6Н). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,25 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С^ЩЮШЮ/ 843,40; обнаружено 843,24. Соединение согласно примеру Ον7: ’Н ЯМР (ΜοΘϋ, δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,87-7,75 (т, 9Н), 5,19 (66, 1 = 11. 7,0, 1Н), 4,99 (66, 1 = 10,3, 7,3, 1Н), 4,38-4,17 (т, 4Н), 3,90 (т, 2Н), 3,64/3,62 (два 5, 6Н), 3,41-3,26 ('т' частично перекрыто сигналом растворителя, 4Н), 2,64 (т, 1Н), 2,50 (т, 2Н), 2,37 (т, 1Н), 2,03-1,79 (т, 4Н), 1,60-1,08 (т, 10Н), 0,92 (6, 1 = 6,8, 3Н), 0,86 (6, 1 = 6,8, 3Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,24 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С₄₄Н₅₆СШ₈О₇: 843,40; обнаружено 843,24.

- 99 020815

В раствор соединения согласно примеру С^3е (0,360 г, 0,551 ммоль) в ΌΜΡ (9 мл) добавляли NСδ (0,096 г, 0,717 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 15 ч. Остаток разбавляли ΜеОН и подвергали очистке обращенно-фазовой ВЭЖХ (ΜеОН/вода/ТРЛ; колонка: РНЕNОΜЕNЕX® Ьипа, 30х100 мм δ10 Ах1а) с восстановлением соли ТРА карбамата согласно примеру С\У8а в виде светло-желтой пены (20 мг). Также выделяли соли ТРА согласно примеру С\У3е (60 мг) и монохлорированный аналог (70 мг). Карбамат согласно примеру С\У8а: ¹Н ЯМР (ЫеОЭ. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,83 (арр 5, 8Н), 4,95-4,79 (т частичное перекрытый сигнал НОЭ. 2Н), 3,85-3,75 (т, 2Н), 3,14 (т, 2Н), 2,58-2,48 (т, 2Н), 2,44-2,30 (т, 2Н), 1,80-1,71 (т, 2Н), 1,43 (5, 6Н), 1,23 (5, 12Н), 1,14/1,12 (два перекрытых 5, 6Н). ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,98 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₃₈Н₄₇С1Ы₆О₄: 721,30; обнаружено 721,39.

н НС1 в диоксане (3 мл) добавляли в соли ТРА согласно примеру С\У8а (55 мг, 0,063 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток сушили в вакууме в течение ночи с получением соли НС1 пирролидина согласно примеру С\У8Ь в виде коричневого твердого вещества (50 мг). ЬС-Μδ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,20 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₂₈Н₃₁С1₂Ы₆: 521,20; обнаружено 521,20.

Пример С\У8.

К суспензии соли НС1 согласно примеру С\У8Ь (50 мг, 0,075 ммоль) в ΩΜΕ (3 мл) добавляли (δ)-2(метоксикарбониламино)-3-метилбутановую кислоту (28,9 мг, 0,165 ммоль), Э1ЕА (0,079 мл, 0,450 ммоль) и НАТИ (58,7 мг, 0,154 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме и остаток растворяли в ΜеОН и подвергали очистке обращенно-фазовой ВЭЖХ (ΜеОН/вода/ТРА; колонка: РНЕNОΜЕNЕX® Ьипа, 30х100 мм δ10 Ах1а) с восстановлением солей ТРА согласно примеру С\У8 (светло-желтая пена; 40 мг). ¹Н ЯМР (ЫеОЭ. δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,80-7,75 (т, 8Н), 5,01 (άά, I = 10,4, 7,4, 2Н), 4,26-4,17 (т, 4Н), 3,63 (5, 6Н), 3,383,33 (т, 2Н), 2,52-2,49 (т, 2Н), 2,45-2,33 (т, 2Н), 2,03-1,95 (т, 2Н), 1,87-1,79 (т, 2Н), 1,19 (ά, I = 6,3, 6Н), 0,92 (ά, I = 6,8, 6Н), 0,87 (ά, I = 6,8, 6Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-Μδ (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,89 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₄₂Н₅₃С1₂Ы₈О₆: 835,35; обнаружено 835,41.

В раствор соединения согласно примеру С^3а-2 (1,31 г, 5,09 ммоль) в ТНР (25 мл) добавляли по каплям бромид метилмагния (2,037 мл, 6,11 ммоль) при -40°С (баня сухой лед/ацетон). Это перемешива- 100 020815 ли при той же температуре в течение 2 ч и затем баню удаляли и продолжали перемешивать дополнительно в течение 1 ч. Добавляли уксусную кислоту (1 мл), воду (10 мл) и эфир (50 мл), смесь встряхивали и органический слой отделяли. Органический слой промывали водой, сушили Να₂δΟ.₄ и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали флеш-хроматографией (5-95% ΕίΟΑс/Гексан) с получением сложного эфира согласно примеру Ο\ν9;·ι в виде бесцветного масла (0,6 г). ¹Η ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц): 4,97 (Ьг б, 1 = 8,3, 1Η), 4,29 (т, 1Η), 3,74/3,73 (перекрытый δ 3Η), 2,66 (т, 1Η), 2,27-2,22 (т, 0,21Η), 2,17 (δ, 2,58Η), 2,10-2,02 (т, 1,22Η), 1,80-1,1,74 (т, 1Η), 1,43/1,40 (перекрытый V, 9Η), 1,16 (б, 1 = 7,1,2,6Η), 1,05(б, 1 = 6,8,0,4Η).

Пример Ον9, стадия Ь

О\Л/-9Ь-1 Ονν-9ί>2

В раствор кетона согласно примеру Ο\ν9;·ι (0,6 г, 2,195 ммоль) в ^СΜ (15 мл) добавляли ΤΡΑ (0,846 мл, 10,98 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и сушили в вакууме в течение ночи с получением светло-желтого масла (0,63 г).

Раствор вышеуказанного неочищенного продукта (0,5 г, 1,8 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли в 500 мл сосуд шейкера Пара, содержащий Рб/С (0,025 г, 0,234 ммоль). После проведения откачки и повторного заполнения азотом ^) смесь встряхивали при 60 фунт/кв.дюйм в течение 24 ч. Реакционную смесь фильтровали через фильтрованную бумагу и летучий компонент удаляли в вакууме с получением светло-желтого масла (0,41 г).

В раствор вышеуказанного неочищенного продукта (0,48 г, 1,77 ммоль) в 0Η₂Ο₂ (7 мл) добавляли ΌΜΑΡ (10,81 мг, 0,088 ммоль), триэтиламин (0,740 мл, 5,31 ммоль). В течение 15 мин порционно добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (0,386 г, 1,77 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем летучий компонент удаляли в вакууме, неочищенное вещество очищали флешхроматографией (0-22% ΕίΟΑс/Гексан) с получением двух основных продуктов. Первый элюат представлял собой соединение согласно примеру 0\ν9ό-1 (0,54д). ¹Η ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц) 4,41/4,30 (Ьг т, 1Η), 3,74 (δ, 3Η), 3,48/3,33 (Ьг т, 1Η), 2,37-2,22 (т, 0,2Η), 2,10-2,04 (т, 0,9Η), 1,98-1,19 (т, 0,9Η), 1,79 (т, 1Η), 1,46-1,32 (т, 12Η), 1,05/1,01/0,97 (три перекрытых б, I = 6,8/6,6/6,3, соответственно, 3Η). Второй элюат представлял собой соединение согласно примеру Ο\ν9ό-2. загрязненный неопределенной примесью (0,48 г). Чистые фракции соединения согласно примеру Ο\ν9ό-2 использовали для получения следующих спектральных значений: 'Η ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц) 4,23-4,12 (два перекрытых бб, 1Η), 4,00-3,85 (два перекрытых т, 1Η), 3,72/3,71 (перекрытый δ, 3Η), 2,34-2,20 (т, 2Η), 1,69-1,55 (1Η), 1,45/1,39 (перекрытый 'δ', 9Η), 1,13-1,01 (т, 3,13Η), 0,97 (б, I = 6,3, 2,87Η).

Пример Ον9, стадия с

В раствор соединения согласно примеру 0\ν9ό-1 (3,73 г, 14,50 ммоль) в этаноле (40 мл) добавляли раствор ΕίΟΗ (0,417 г, 17,39 ммоль) в воде (20,00 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Добавляли большее количество ΕίΟΗ (0,1 г, 4,3 ммоль) и продолжали перемешивать дополнительно в течение 2 ч. Большую часть органического компонента выпаривали и оставшуюся порцию промывали эфиром (20 мл). Водный слой охлаждали на бане с водой и льдом, подкисляли 1н. ΗΟ до ρΗ 2-3, экстрагировали ΕίΟΑο (50 мл, 4x), сушили Να₂δΟ.₄ и концентрировали с получением бесцветного масла, которое становилось белым твердым веществом под воздействием высокого вакуума (3,43 г). Твердое вещество растворяли в минимальном количестве ΕίΟΑο при помощи струйной воздушной сушилки, что привело к условию флегмирования. После охлаждения до комнатной температуры добавляли 5 капель гексана и оставляли отстаиваться до температуры флегмы в течение ночи с получением кислоты согласно примеру Ο\ν9α в виде белых иголок, которые фильтровали и промывали гексаном, сушили в вакууме (2,02 г). ' Η ЯМР (СОС1₃, δ = 7,24 м.д., 400 МГц) 4,40 (арр бб, ί = 8,3, 2,8, 1Η), 3,30 (Ьг т, 1Η), 2,50 (Ьг т, 1Η), 2,01-1,93 (т, 1Η), 1,68-1,59 (т, 1Η), 1,52 (δ, 9Η), 1,29 (б, ί = 6,0, 3Η), 1,07 (б, ί = 6,8, 3Η).

Пример Ον9, стадия б

Соединение согласно примеру СV9б (соль ΤΡΑ; светло-желтая пена) получали из кислоты согласно примеру Ο\ν9α описанной для получения предшествующих продуктов согласно примеру Ον3§ методи- 101 020815 кой из кислоты согласно примеру СУ3с за исключением того, что (З)-2-(метоксикарбониламино)-3метилбутановую кислоту использовали в заключительной стадии. ¹Н ЯМР (МеОЭ, δ = 3,30 м.д., 400 МГц): 7,97-7,96 (т, 2Н), 7,88-7,82 (т, 8Н), 5,70 (Ьг б, б = 6,7, 0,6Н), 5,29 (бб, б = 10,3, 1,2Н), 5,19-5,14 (т, 0,2Н), ~4,90 (перекрытый сигнал НОЭ, 1Н), 4,38 (т, 1Н), 4,12-4,06 (т, 2Н), 3,71/3,67/3,64 (перекрытый 5, 6Н), 2,73-2,68 (т, 0,6Н), 2,53-2,45 (т, 1,4Н), 2,35-2,18 (т, 2,5Н), 2,07-1,82 (т, 3,5Н), 1,53 (б, б = 6,8, 3,6Н), 1,40 (б, б = 7,1, 0,5Н), 1,30 (б, б = 7,1, 1,9Н), 1,17-0,83 (система перекрытый б, 18Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-МЗ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,07 мин. ЬСМЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₉^О₆: 795,46; обнаружено 795,44.

Примеры СУ9 и СУ10.

В раствор соединения согласно примеру СУ9б (ТРА соль; 310 мг, 0,328 ммоль) в ЭМР (6 мл) добавляли NСЗ (62,5 мг, 0,468 ммоль) и смесь нагревали при 50°С в течение 9 ч. Большую часть летучего компонента удаляли в вакууме, остаток растворяли в МеОН и подвергали очистке обращенно-фазовой ВЭЖХ (МеОН/вода/ТРА; колонка: РНЕNОМЕNЕX® Ьииа, 30x100 мм З10 Ах1а) с разделением моно- и дихлорированных продуктов. Монохлорированный продукт дополнительно очищали при различных условиях обращено-фазовой ВЭЖХ (ΆСN/ΤРΆ/Вода, Уаΐе^-ЗиηЕ^^е 30x100 мм З5). Соединение согласно примеру СУ9 (светло-желтая пена; 36 мг) и согласно примеру СУ10 (светло-желтая пена; 60 мг) восстанавливали в виде солей ТРА. Соединение согласно примеру СУ9: ¹Н ЯМР (ЭМЗО, δ = 2,50 м.д., 400 МГц): 12,71-12,64 (Ьг т, 1Н), 8,10 (Ьг 5, 1Н), 7,95-7,83 (т, 8Н), 7,64-7,58 (т, 1,4Н), 7,51 (б, б = 8,6, 0,6Н), 5,56 (т, 0,22Н), 5,33 (т, 0,33Н), 5,16 (т, 0,78Н), 5,04 (т, 0,67Н), 4,27-4,11 (т, 2Н), 3,93-3,86 (т перекрытие сигнала Н2О, 2Н), 3,56-3,53 (т, 6Н), 2,62-1,64 (система т, 8Н), 1,50-0,75 (система б, 24Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС-МЗ (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,66 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С44Н58С1^О6: 829,42; обнаружено 829,44. Соединение согласно примеру ОУ10: ^!Н ЯМР (ЭМЗО, δ = 2,50 м.д., 400 МГц): 12,7 (Ьг т, 2Н), 8,00-7,80 (т, 8Н), 7,63 (т, 0,76Н), 7,51 (б, б = 8,6, 1,09Н), 7,08 (т, 0,09Н), 6,57 (т, 0,05Н), 5,33 (б, б = 6,3, 0,74 Н), 5,05 (арр ΐ, 1,26Н), 4,25-4,12 (т, 2Н), 3,90-3,85 (т перекрытие сигнала Н2О, 2Н), 3,58-3,49 (т, 6Н), 2,59-2,55 (т, 0,5Н), 2,33-2,13 (т, 2,7Н), 1,98-1,88 (т, 4,05Н), 1,71-1,63 (т, 0,75Н), 1,43 (б, б = 6,6, 3,7Н), 1,18 (б, б = 6,3, 2,05Н), 1,05-0,76 (система б, 18,25Н). ЬС (усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬСМЗ (усл. согласно прим. 1а): КТ = 3,29 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₇С1₂^О₆: 863,38; обнаружено 863,38.

Соединения согласно примерам СУ11 и СУ12 получали описанной для получения соединений согласно примерам СУ9 и СУ10 методикой, за исключением того, что (З)-2-(метоксикарбониламино) бутановую кислоту использовали вместо (З)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты. Соединение согласно примеру СУ11 (ТРА соль): ЬС-МЗ (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 2,57 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₄СЮ₈О₆: 801,39; обнаружено 801,38. Соединение согласно примеру СУ12 (ТРА соль): ЬС-МЗ (Усл. согласно прим. 1а): КТ = 3,24 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₃С1₂^О₆: 835,35; обнаружено 835,31.

Пирролидин согласно примеру 1е/4НС1 (455 мг, 0,766 ммоль), (З)-2-(4,4-дифторциклогексил)-2(метоксикарбониламино)уксусную кислоту (385 мг, 1,532 ммоль), НАТИ (612 мг, 1,609 ммоль) и ОбЕА (0,803 мл, 4,60 ммоль) объединяли в ЭМР (30 мл) и полученный желтый раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 3 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток повторно растворяли в метаноле и очищали препаративной ВЭЖХ (растворитель А: 10% ацетонитрила /

- 102 020815

90% воды / 10 мм ΝΉ^Άο; растворитель В: 90% ацетонитрила / 10% воды / 10 мм ΝΉ^Άο; колонка: ЗипИге Ргер МЗ С18 30х150 мм З10; длина волны: 220 нм; скорость потока: 40 мл/мин; градиент: 10% В - 75% В в течение 30 мин со временем удержания 30 мин). Восстанавливали беловатое твердое вещество, которое соответствует продукту согласно примеру ОЬ1а (0,37 г, 0,396 ммоль). ¹Н ЯМР (500 МГц, БМЗОά₆) δ м.д. 11,67-12,26 (2 Н, т), 7,80 (4 Н, ά, I = 7,93 Гц), 7,67-7,76 (1 Н, т), 7,65 (4 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,54 (2 Н, к), 7,23-7,35 (2 Н, т), 5,07 (2 Н, άά, I = 8,24, 3,66 Гц), 4,54 (2 Н, ί, I = 7,93 Гц), 3,62 (2 Н, ά, I = 4,27 Гц), 3,55 (6 Н, к), 2,36 (2 Н, ί, I = 10,99 Гц), 2,20-2,30 (2 Н, т), 2,01 (4 Н, Ьг. к.), 1,57-1,85 (9 Н, т), 1,19-1,53 (6

H, т), 0,92-1,08 (2 Н, т), 0,71 (2 Н, Ьг. к.). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ3): Р = 0,79 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₅Р₄^О₆: 915,42; обнаружено: 915,8. Оценка чистоты при помощи ВЭЖХ (Усл. согласно прим. ОЬ4а): Р = 23,12 мин, индекс гомогенности = 98,4%.

Примеры ОЬ1 и ОЬ2.

NСЗ (6,83 мг, 0,051 ммоль) добавляли в раствор амида согласно примеру ОЬ1а (39 мг, 0,043 ммоль) в БМР (2 мл) и полученную смесь нагревали до 50°С в течение 5 ч. Реакционную смесь затем очищали препаративной ВЭЖХ. Растворитель А: 10%МеОН / 90% воды / 0,1% ТРА; растворитель В: 90% МеОН / 10% воды / 0,1% ТРА; колонка: ЗипРпе Ргер МЗ С18 30х100 мм 5и; длина волны: 220 нм; скорость потока: 40 мл/мин; градиент: 0% В - 75% В в течение 30 мин со временем удержания 2 мин. После концентрирования фракций выделяли соли ТРА согласно примеру ОЬ1 (15 мг) и согласно примеру ОЬ2 (16 мг). Соединение согласно примеру ОЬ1: ¹Н ЯМР (500 МГц, БМЗОД6) δ м.д. 8,11 (1 Н, к), 7,74-8,00 (8 Н, т), 7,40 (1 Н, ά, I = 8,55 Гц), 7,28 (1 Н, ά, I = 8,24 Гц), 4,91 - 5,05 (2 Н, т), 4,48-4,59 (2 Н, т), 3,74-3,87 (2 Н, т), 3,62-3,71 (1 Н, т), 3,55 (3 Н, к), 3,54 (3 Н, к), 2,19-2,43 (6 Н, т), 1,66-2,07 (19 Н, т), 1,56 (1 Н, ά, I = 10,38 Гц), 1,26-1,48 (5 Н, т), 0,89-1,02 (2 Н, т), 0,81 (1 Н, к), 0,70 (1 Н, Ьг. к.). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ3): ρ, = 0,87 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С48Н54С1Р/Ц8О6: 949,38; обнаружено: 949,6. Оценка чистоты при помощи ВЭЖХ (усл. согласно прим. ОЬ4а): ρ, = 9,16 мин, индекс гомогенности = 94,7%. Соединение согласно примеру ОЬ2: ¹Н ЯМР (500 МГц, БМЗОД6) δ м.д. 7,86 (4 Н, ά, I = 8,55 Гц), 7,79 (4 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,29 (2 Н, ά, I = 8,55 Гц), 4,95 (2 Н, άά, I = 8,55, 4,88 Гц), 4,52 (2 Н, ί, I = 7,63 Гц), 3,67 (2 Н, ί, I = 4,58 Гц), 3,54 (6 Н, к), 2,21-2,40 (4 Н, т), 2,01 (4 Н, Ьг. к.), 1,67-1,95 (13 Н, т), 1,27 I, 46 (4 Н, т), 0,94-1,02 (2 Н, т), 0,70 (2 Н, ά). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ3): Р = 1,01 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₃С1₂ЬУ₈О₆: 983,34; обнаружено: 983,7. Оценка чистоты при помощи ВЭЖХ (усл. согласно прим. ОЬ4а): ρ, = 12,25 мин, индекс гомогенности = 94,7%.

Пирролидин согласно примеру У9а (207 мг, 0,377 ммоль), (З)-2-(метоксикарбониламино)-2(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусную кислоту (82 мг, 0,377 ммоль), НАГИ (158 мг, 0,415 ммоль) и Б1ЕА (0,132 мл, 0,755 ммоль) объединяли в БМР (5 мл) и полученный желтый раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 3 ч. Смесь очищали препаративной ВЭЖХ. Растворитель А: 10%МеОН / 90% воды / 0,1% ТРА; растворитель В: 90% МеОН / 10% воды / 0,1% ТРА; колонка: ЗипРпе Ргер МЗ С18 30х 100 мм 5и; длина волны: 220 нм; скорость потока: 40 мил/мин; градиент: 20% В - 80% В в течение 30 мин с временем удержания 2 мин. Восстанавливали белое твердое вещество, которое соответствовало соли ТРА карбамата согласно примеру ОЬ3а (0,19 г). [Примечание: карбамат согласно примеру ОЬ3а и согласно примеру У9Ь представлял собой одно и то же вещество состояния формы]. ¹Н ЯМР (500МГц, БМЗОД₆) δ м.д. 8,18 (1 Н, Ьг. к), 8,12 (1 Н, к), 7,80-8,00 (8 Н, т), 7,34 (1 Н, ά, I = 8,55 Гц), 5,01 (1 Н, ί, I = 8,09 Гц), 4,79-4,90 (1 Н, т), 4,49 (1 Н, ί, I = 7,48 Гц), 3,74 - 3,87 (3 Н, т), 3,55 (4 Н, к), 3,18 3,32 (2 Н, т), 2,52-2,59 (2 Н, т), 2,37 (2 Н, άάά, I = 19,99, 13,43, 6,26 Гц), 2,07 (1 Н, Ьг. к.), 1,92 (1 Н, άί, I = 13,20, 6,68 Гц), 1,73 (1 Н, άάά, I = 13,20, 6,49, 6,26 Гц), 1,06-1,52 (17 Н, т), 0,80 (2 Н, Ьг. к.), 0,74 (1 Н, Ьг. к.). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ1): ρ, = 1,98 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₀^О₆: 748,38; обнаружено: 748,52.

- 103 020815

Пример ОЬ3, стадия Ь

Карбамат согласно примеру ОЬ3а (0,19 г, 0,195 ммоль) растворяли в СН₂С1₂ (15 мл) и загружали 4н. НС1 в диоксанах (3 мл, 12,00 ммоль). Полученную суспензию перемешивали при температуре окружающей среде в течение 2 ч и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Восстанавливали желтоватое твердое вещество, которое соответствовало соли НС1 (3ж) пирролидина согласно примеру ОЬ3Ь (0,12 г) и использовали без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 8,14 (1 Н, 8), 7,83-8,01 (10 Н, т), 7,34 (1 Н, б, I = 8,55 Гц), 5,06 (1 Н, ΐ, I = 7,93 Гц), 4,73 (1 Н, ΐ, I = 8,24 Гц), 4,50 (1 Н, ΐ, I = 7,48 Гц), 3,78-3,87 (3 Н, т), 3,64-3,74 (2 Н, т), 3,56 (3 Н, 8), 3,44-3,51 (1 Н, т), 3,39-3,44 (1 Н, т), 3,203,35 (2 Н, т), 2,55-2,64 (2 Н, т), 2,34 - 2,43 (1 Н, т), 2,06 - 2,16 (1 Н, т), 1,87 - 1,97 (2 Н, т), 1,27-1,51 (4 Н, т), 1,12 (1 Н, б, I = 4,58 Гц), 0,90 - 0,98 (1 Н, т), 0,82 - 0,89 (1 Н, т), 0,78 (1 Н, Ьг. 8.). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ2): К = 2,51 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₇Н₄₂^О₄: 648,33; обнаружено: 648,4.

(З)-2-(4,4-Дифторциклогексил)-2-(метоксикарбониламино)уксусную кислоту (87 мг, 0,345 ммоль), соль НС1 (3ж) пирролидина согласно примеру ОЬ3Ь (261 мг, 0,345 ммоль), НАТИ (144 мг, 0,379 ммоль) и ЭГЕА (0,301 мл, 1,724 ммоль) объединяли в ЭМР (10 мл) и полученный коричневатый раствор перемешивали при температуре окружающей среде в течение 2 ч. Образец сразу очищали препаративной ВЭЖХ. Растворитель А: 10% МеОН / 90% воды / 0,1% ТРА; растворитель В: 90% МеОН / 10% воды / 0,1% ТРА; колонка: ЗииРие Ргер МЗ С18 30x100 мм 5и; длина волны: 220 нм; скорость потока: 40 мил/мин; градиент: 30% В - 70% В в течение 30 мин со временем удержания 2 мин. Восстанавливали белое твердое вещество, которое соответствовало соли ТРА (2ж) амида согласно примеру ОЬ3с (132 мг, 0,117 ммоль, 33,8% выход). ^!Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 11,68-12,18 (2 Н, т), 7,78 (3 Н, ΐ, I = 8,39 Гц), 7,73 (1 Н, б, I = 9,46 Гц), 7,66 (4 Н, б, I = 8,55 Гц), 7,54 (2 Н, бб, I = 4,12, 1,68 Гц), 7,28 (2 Н, бб, I = 19,68, 8,39 Гц), 5,08 (2 Н, ббб, I = 8,39, 4,12, 3,97 Гц), 4,46-4,58 (2 Н, т), 3,82-3,94 (2 Н, т), 3,61-3,67 (2 Н, т), 3,54 (6 Н, б, I = 1,53 Гц), 3,24 (2 Н, ΐ, I = 11,29 Гц), 2,33-2,41 (2 Н, т), 2,21-2,31 (2 Н, т), 1,91-2,08 (4 Н, т), 1,75-1,89 (6 Н, т), 1,58 (1 Н, б, I = 13,43 Гц), 1,40-1,52 (2 Н, т), 1,26-1,40 (3 Н, т), 0,97-1,07 (2 Н, т), 0,67-0,79 (2 Н, т). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ1): К = 1,94 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₇Н₅₅^О₇: 881,42; обнаружено: 881,58.

Примеры ОЬ3-ОЬ5.

NСЗ (22,66 мг, 0,170 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА согласно примеру ОЬ3с (115 мг, 0,131 ммоль) в ЭМР (3 мл) и полученную смесь нагревали до 50°С в течение 5 ч. Смесь очищали препаративной ВЭЖХ. Растворитель А: 05% МеСN / 95% воды / 10 мм ЯН₄Ас; растворитель В: 95% МеСN / 5% воды / 10 мм ЯН₄АС; колонка: ЗииИге Ргер МЗ С18 30x100 мм З10; длина волны: 220 нм; скорость потока: 35 мл/мин; градиент: 10% В - 100% В в течение 30 мин с временем удержания 2 мин. Две фракции выделяли, причем первый элюат соответствовал смеси монохлорированных аналогов (соединения согласно примерам ОЬ4 и ОЬ5), а второй соответствовал бисхлорированному аналогу (соединение согласно примеру ОЬ3). После концентрирования соответствующих фракций смесь повторно растворяли в метаноле и монохлорированные региоизомеры разделяли препаративной ВЭЖХ. Растворитель А: 10% ацетонитрила/ 90% воды /0,1% ТРА; растворитель В: 90% ацетонитрила / 10% воды / 0,1% ТРА; колонка: РНЕNΟМЕNЕX® Ьииа 21x100 мм З10; длина волны: 220 нм; скорость потока: 25 мл/мин; градиент: 10% В - 50% В в течение 60 мин со временем удержания 2 мин. Две фракции, которые соответствовали соединениям согласно примеру ОЬ4 и примеру ОЬ5, выделяли в виде ТРА и их относительную региохимию не определяли. Соединение согласно примеру ОЬ3 (36 мг) восстанавливали в виде белого твердого вещества. ^!Н ЯМР (500 МГц, ЭМЗО-б₆) δ м.д. 12,55 (2 Н, б, I = 1,22 Гц), 7,87 (4 Н, б, I = 8,24 Гц), 7,78 (4 Н, б, I = 7,02 Гц), 7,27 (2 Н, бб, I = 18,62, 8,55 Гц), 5,76 (1 Н, 8), 4,91 -5,01 (2 Н, т), 4,45 - 4,58 (2 Н, т), 3,85 (2 Н, б, I = 9,77 Гц), 3,64 - 3,71 (2 Н, т), 3,54 (6 Н, 8), 3,20 - 3,31 (2 Н, т), 2,21 - 2,35 (4 Н, т), 2,02 (3 Н, б, I = 3,97 Гц), 1,59 - 1,93 (9 Н, т), 1,21 - 1,55 (7 Н, т), 0,93 - 1,02 (2 Н, т), 0,71 (2 Н, т). ЬС (усл. согласно прим. ОЬ3): К = 0,95 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₇Н₅₃С1₂Р₂^О₇: 949,34; обнаружено: 949,8. Оценка чистоты ВЭЖХ (усл. согласно прим. ОЬ4Ь): К = 11,10 мин, индекс гомогенности = 100%.

- 104 020815

Соединение согласно примеру ОЬ4 (10 мг) восстанавливали в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (500 МГц, 1)\18Оч% δ м.д. 14,62 (1 Η, Ьг. 5.), 12,59 (1 Η, Ьг. 5.), 8,12 (1 Η, Ьг. 5.), 7,87 (8 Η, άά, I = 19,38, 8,09 Гц), 7,80 (2 Η, ά, I = 7,63 Гц), 7,40 (1 Η, ά, I = 8,85 Гц), 7,26 (1 Η, ά, I = 8,24 Гц), 5,00 (1 Η, ΐ, I = 7,93 Гц), 4,95 (1 Η, άά, I = 8,39, 5,04 Гц), 4,54 (1 Η, ΐ, I = 7,48 Гц), 4,49 (1 Η, ΐ, I = 7,93 Гц), 3,86 (3 Η, άά, I = 11,44, 2,59 Гц), 3,79 (1 Η, Ьг. 5.), 3,65 - 3,72 (2 Η, т), 3,55 (6 Η, ά, I = 5,19 Гц), 3,19-3,28 (2 Η, т), 2,20 2,43 (4 Η, т), 1,89-2,07 (5 Η, т), 1,30-1,89 (10 Η, т), 0,92-1,03 (2 Η, т), 0,80 (1 Η, Ьг. 5.), 0,72 (1 Η, Ьг. 5.) ЬС (усл. согласно прим. ОЬ3): Κ_ΐ = 0,85 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₇Н₅₄С1Р₂М₈О₇: 915,38; обнаружено: 915,9. Оценка чистоты ВЭЖХ (усл. согласно прим. ОЬ4а): К = 9,03 мин, индекс гомогенности = 100%.

Соединение согласно примеру ОЬ5 (12 мг, выход 7,96%) восстанавливали в виде белого твердого вещества. Ή ЯМР (500 МГц, ПМ8ОЦ₆) δ м.д. 14,62 (1 Η, Ьг. 5.), 12,59 (1 Η, Ьг. 5.), 8,09 (1 Η, Ьг. 5.), 7,87 7,98 (4 Н, т), 7,84 (2 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,80 (2 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,35 (1 Н, ά, I = 8,24 Гц), 7,29 (1 Н, ά, I = 8,55 Гц), 4,91 - 5,03 (2 Н, т), 4,51 (2 Н, άάά, I =15,64, 7,71, 7,48 Гц), 3,78 - 3,90 (4 Η, т), 3,64 - 3,71 (1 Η, т), 3,54 (6 Η, 5), 3,16 - 3,31 (2 Η, т), 2,19 - 2,44 (3 Η, т), 2,02 (3 Η, Ьг. 5.), 1,64 - 1,95 (7 Η, т), 1,27-1,54 (6 Η, т), 0,96 (2 Η, άά, I = 12,21, 7,32 Гц), 0,81 (1 Н, Ьг. 5.), 0,70 (1 Н, Ьг. 5.). ЬС (Усл. согласно прим. ОЬ3): К = 0,86 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₇Н₅₄С1Р₂М₈О₇: 915,38; обнаружено: 915,9. Оценка чистоты ВЭЖХ (усл. согласно прим. ОЬ4а): Κ_ΐ = 8,11 мин, индекс гомогенности = 100%.

Соединение согласно примеру ОЬ6 (ТЕА соль) может быть получено из пирролидина согласно примеру У1Ь/4НС1 и Сар-179 (энантиомер-1) по описанной для синтеза согласно примеру У1 методикой. ^!Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О^₆) δ м.д. 8,11 (1 Η, Ьг. 5.), 7,74-8,01 (8 Η, т), 7,22-7,35 (1 Η, т), 7,14 (1 Η, ά, I = 7,53 Гц), 4,87-5,15 (2 Η, т), 4,47 (2 Η, ά, I = 7,03 Гц), 3,80 (1 Η, Ьг. 5.), 3,65 (1 Η, Ьг. 5.), 3,55 (6 Н, Ьг. 5.), 3,36 (4 Н, Ьг. 5.), 2,20-2,37 (3 Н, т), 2,13 (1 Н, Ьг. 5.), 1,90-2,05 (2 Н, т), 1,85 (1 Н, Ьг. 5.), 1,63-1,80 (1 Н, т), 1,38-1,61 (2 Н, т), 0,62-1,14 (25 Н, т). ЬС (Усл. согласно прим. 2а и 2Ь): индекс гомогенности >95%. ЬС (усл. согласно прим. ОЬ4с): Κ_ΐ = 0,85 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄,Н₆₂С1Н₈О₈: 937,44; обнаружено: 937,5.

В раствор (28,2'8)-трет-бутил-2,2'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))дипирролидин-1-карбоксилата (500 мг, 0,800 ммоль) в АсОН (30 мл) добавляли по каплям бром (0,041 мл, 0,800 ммоль) в АсОН (0,8 мл) в течение 10 мин. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали нас. №НСО₃. затем экстрагировали СН₂С1₂. Органические слои сушили Мд8О₄ и концентрировали в вакууме. Полученное неочищенное вещество очищали посредством флеш-хроматографии (силикагель; 1:1 ЕЮАс/Нех, затем 2:1 ЕЮАс/Нех) с получением бромида согласно примеру ОЬ7а. 1 (200 мг) и дибромида согласно примеру ОЬ7а.2 (140 мг) в виде белых твердых веществ (примечание: дибромид сначала элюировали из колонки).

Смесь циклопропилбороновой кислоты (13,49 мг, 0,157 ммоль), трехосновного фосфата калия (90 мг, 0,423 ммоль) в воде (0,03 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем добавляли бромид согласно примеру ОЬ7а. 1 (85 мг, 0,121 ммоль), Ρά(II)ацетат (2,71 мг, 0,012 ммоль), трициклогексилфосфин (6,8 мг, 0,024 ммоль) и толуол (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 110°С

- 105 020815 в течение ночи. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с применением следующего условия. Колонка: \Уа1ег5 8ипИге ОВЭ 19х100 мм 85; растворитель А = 10%АС^ 90%Н₂О-0,1%ТРА; растворитель В = 90%АС^10%Н₂О-0,1%ТРА; в начале программы %В = 10; В конце программы %В = 75; скорость потока = 20 мл/мин; время градиента = 20 мин. Соль ТРА объединенного продукта согласно примеру ОЬ7Ь.1 восстанавливали в виде светло-желтого твердого вещества (79 мг).

Смесь дибромида согласно примеру ОЬ7а.2 (140 мг, 0,179 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (40,0 мг, 0,465 ммоль), Рк(11)ацетата (8,03 мг, 0,036 ммоль), трехосновного фосфата калия (266 мг, 1,252 ммоль), трициклогексилфосфина (20,07 мг, 0,072 ммоль) в толуоле (1,5 мл) и Вода (0,05 мл) нагревали в микроволновом облучении при 110°С в течение 1,5 ч. При помощи ЬСМ8 было показано отсутствие взаимодействия. Смесь фильтровали, фильтрат концентрировали в вакууме и полученный неочищенный продукт очищали преп. ВЭЖХ: Колонка = \Уа1ег5 8ипР1ге ОВЭ 19х100 мм 85; растворитель А = 10%АС^90%Н₂О-0,1%ТРА; растворитель В = 90%АС^10%Н₂О-0,1%ТРА; в начале программы %В = 10. В конце программы %В = 70; скорость потока = 20 мл/мин; время градиента = 20 мин. Соль ТРА объединенного продукта согласно примеру ОЬ7Ь.2 получали в виде светло-желтого твердого вещества.

В полученный выше раствор карбамата согласно примеру ОЬ7Ь (79 мг) в СН₂С1₂ (2 мл) добавляли НС1 (2 мл, 8,00 ммоль) (4 н в диоксан) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Летучий компонент удаляли в вакууме с получением соли НС1 согласно примеру ОЬ7с (69 мг), который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.

Пример ОЬ7.

К смеси (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (20,09 мг, 0,115 ммоль), пирролидина согласно примеру ОЬ7/4 НС1 (35 мг, 0,057 ммоль) в ЭМР (1 мл) добавляли П1РЕА (0,06 мл, 0,34 ммоль) и НАТИ (43,6 мг, 0,115 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем добавляли аммиак (2 мл, 2 М в метаноле) и продолжали перемешивать дополнительно в течение 1 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ: Колонка = \Уа1ег5 8ипИге С18 19х100 мм 5и; растворитель А = 10% МеОН-90%Н₂О-О,1%ТРА; растворитель В = 90%МеОН-10%Н₂О-0,1%ТРА; в начале программы %В = 10; В конце программы %В = 75; скорость потока = 25 мл/мин; время градиента =18 мин. Соль ТРА согласно примеру ОЬ7 получали в виде грязно-белого твердого вещества (24 мг). К, = 1,68 мин (усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)' 779,47. ’Н ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-к₆) δ м.д. 8,12 (1 Н, Ьг. 5.), 7,97 (4 Н, кк, I = 12,97, 8,39 Гц), 7,86-7,92 (2 Н, т), 7,80 (2 Н, к, I = 8,24 Гц), 7,32 (2 Н, ί, I = 8,70 Гц), 5,14 (1 Н, ί, I = 7,02 Гц), 5,05 (1 Н, ί, I = 7,48 Гц), 4,12 (2 Н, ί, I = 6,71 Гц), 3,76 - 3,92 (4 Н, т), 3,54 (6 Н, 5), 2,39 (2 Н, к, I = 6,10 Гц), 1,95 -2,21 (9 Н, т), 1,08 (2 Н, к, I = 8,24 Гц), 0,84 (7 Н, ί, I = 7,17 Гц), 0,79 (6 Н, к, I = 6,41 Гц), 0,67 - 0,74 (1 Н, т).

Примеры ОЬ8-ОЬ14.

Соединения согласно примерам ОЬ8 - ОЬ14 получали в виде солей ТРА с использованием соответствующих предшествующих продуктов и описанной для получения соединения согласно примеру ОЬ7 методикой.

- 106 020815

ОЬ9		^1НСО₂Ме		К1 = 1,77 мин (Усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)⁺ 819,55
ОЫО	Л νει₂		Κι - 1,54 мин (Усл. согласно прим. О1..5а). (М+Н)⁺ 883,51
ОЕ11		ЫНСО₂Ме д	н	Κι = 1,74 мин (Усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)⁺ 803,41
ОЬ12		ЫНСО₂Ме ь	н	К1 = 2,40 мин (Усл. согласно прим. ОЬ5Ь). (М+Н)⁺ 887,60
ОЬ13		1МНСО₂Ме д		Κι = 1,87 мин (Усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)⁺ 843,39
ОЫ4		Г4НСО₂Ме ь	1—<1	Κι = 2,55 мин (Усл. согласно прим. 0Ь5Ь). [(М+Н)/2] ⁺ = 464,36

Пример ОЬ15

Пример ОЬ15, стадия а

Смесь бромида согласно примеру ОЬ7а.1 (200 мг, 0,284 ммоль), С8Р (0,021 мл, 0,568 ммоль), Ρά(ΡЬ₃Ρ)₄ (19,71 мг, 0,017 ммоль) и 2-аллил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (0,107 мл, 0,568 ммоль) в ТНР (3 мл) нагревали при 140°С в микроволновом облучении в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ. Колонка, ΡНΒNΟΜΒNΒX® Ьипа 10и (30x100 мм); растворитель А = 5%СН₃С^95%Н₂О-10 мм ΝΗ₄ Оас; растворитель В = 95%СН₃С^5%Н₂О-10 мм ΝΗ.-ОАс; в начале программы %В = 30; В конце программы %В = 100; скорость потока = 25 мл/мин; время градиента = 48 мин. Продукт согласно примеру ОЬ15а получали в виде белого твердого вещества (90 мг).

Пример ОЬ15.

Карбамат согласно примеру ОЬ15а дополняли солью ТРА согласно примеру ОЬ15 описанной для синтеза соединения согласно примеру ОЬ7 методикой. К, = 1,73 мин (усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)+ 779,53.

Соединение согласно примеру ОЬ16 (соль ТРА) получали из соответствующих предшествующих продуктов описанной для синтеза соединения согласно примеру ОЬ15 методикой. К, = 1,73 мин (Усл. согласно прим. ОЬ5а). (М+Н)+ 863,11.

В раствор соединения согласно примеру ОЬ15а (70 мг, 0,105 ммоль), дийодметана (0,102 мл, 1,263 ммоль) в толуоле (0,5 мл) при 0°С быстро добавляли диэтилцинк (1,263 мл, 1,263 ммоль) (1 М в гептане).

- 107 020815

Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем при комнатной температуре в течение 4 ч. К смеси добавляли насыщенный водный раствор №НС0₃, и смесь экстрагировали СН₂С1₂. Объединенные органические слои сушили под М§§0₄ и концентрировали. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ: Колонка ΡНЕN0МЕNЕX® Ьииа 10и (30x100 мм); растворитель А - 5%СН₃С^95%Н₂0-10 мм ЯН₄0ас; растворитель В = 95%СН₃С^5%Н₂0-10 мм ЯН₄0АС; в начале программы %В = 30; В конце программы %В = 100; скорость потока = 25 мл/мин. Время градиента = 25 мин. Полученное вещество (белое твердое вещество, 40 мг) растворяли в СН₂С1₂ (1 мл) и обрабатывали НС1 (1 мл, 4,00 ммоль) (4 н в диоксане). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме с получением продукта (35 мг), который объединяли с (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислотой описанной для синтеза соединения согласно примеру 0Ь7 методикой. Полученный неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ: Колонка = ^а1ег5 8ипИге С18 19x100 мм 5и; растворитель А = 10%Ме0Н-90%Н₂0-0,1%ТРА; растворитель В = 90%Ме0Н-10%Н₂0-0,1%ТРА; в начале программы %В = 20; В конце программы %В = 85; скорость потока = 25 мл/мин; время градиента = 27 мин. Две фракции выделяли, причем первую элюировали до соответствующей соли ТРА согласно примеру 0Ь18 (Κί = 1,74 мин (Усл. согласно прим. 0Ь5а). (М+Н)+ 793,54), а вторую элюировали до соответствующей соли ТРА согласно примеру 0Ь17 (Κ_ί = 1,77 мин (усл. согласно прим. 0Ь5а). (М+Н)+ 793,53).

Смесь 1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (59,1 мг, 0,284 ммоль), трехосновного фосфата калия (121 мг, 0,568 ммоль) в воде (0,2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем добавляли бромид согласно примеру 0Ь7а.1 (100 мг, 0,142 ммоль), Ρά(ΡΡ₃Ρ)₄ (9,85 мг, 0,008 ммоль и ЭМР (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при 130°С при облучении микроволнами. Летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с применением следующего условия. Колонка: ΡНЕN0МЕNЕX® Ьииа 10и (30x100 мм); растворитель А = 10%АС^90%Н₂0-10 мм №₄0Ас; растворитель В = 90%АС^10%Н₂0-10 тт ЯН₄0Ас; в начале программы %В = 10; В конце программы %В = 80; скорость потока = 25 мл/мин; время градиента =15 мин. Объединенный продукт согласно примеру 0Ь19а восстанавливали в виде светложелтого твердого вещества (120 мг).

Пример 0Ь19, стадия Ь.

В полученный выше раствор карбамата согласно примеру 0Ь19а (120 мг) в СН₂С1₂ (1 мл) добавляли НС1 (1 мл, 4,00 ммоль) (4 н в диоксане) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Летучий компонент удаляли в вакууме с получением соли НС1 согласно примеру 0Ь19Ь (87 мг), который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.

Пример 0Ь19.

К смеси (8)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (15,30 мг, 0,087 ммоль), пирролидина согласно примеру 0Ь19Ь/4 НС1 (30 мг, 0,044 ммоль) в ЭМР (1 мл) добавляли О1РЕА (0,053 мл, 0,306 ммоль) и НАТИ (33,2 мг, 0,087 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, летучий компонент удаляли в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ: Колонка = ^а1ег5 А11апЙ5 0ΒΌ 30x100 мм 5и; растворитель А = 10%Ме0Н-90%Н₂0-0,1%ТРА; растворитель В = 90%Ме0Н-10%Н₂0-0,1%ТРА; в начале программы %В = 20; В конце программы %В = 75; скорость потока = 25 мл/мин; время градиента = 25 мин. Соль ТРА согласно примеру 0Ь19 получали в виде белого твердого вещества (33 мг). Κί = 1,63 мин (усл. согласно прим. 0Ь5а). (М+Н)+ 819,40. ¹Н ЯМР (500 МГц, 1)\180-сР) δ м.д. 8,13 (1 Н, 5), 7,88-7,96 (2 Н, т), 7,78-7,88 (4 Н, т), 7,57 (1 Н, Ьг. 5.), 7,43-7,51 (2 Н, т), 7,33 (2 Н, άά, I = 8,39, 3,51 Гц), 6,42 (1 Н, Ьг. 5.), 5,10-5,18 (2 Н, т), 4,11 (2 Н, ίά, I = 7,93, 2,75 Гц), 3,78-3,91 (4 Н, т), 3,59-3,66 (3 Н, т), 3,54 (6 Н, ά, I = 1,53 Гц), 2,35-2,45 (1 Н, т), 2,30 (1 Н, ά, I = 7,32 Гц), 2,13-2,22 (2 Н, т), 1,93-2,13 (6 Н, т), 0,89 (5 Н, ά, I = 6,71 Гц), 0,83 (6 Н, ί, I = 6,87 Гц), 0,78 (3 Н, ά, I = 6,71 Гц).

- 108 020815

Примеры ОЬ20-ОЬ25.

Примеры ОЬ20-ОЬ25 получали в виде солей ТРА с использованием соответствующих предшествующих веществ и описанной для получения соединения согласно примеру ОЬ19 методикой.

Пример ^δТ^-1, стадия а

Дифенилфосфорилазид (17,09 мл, 79 ммоль) добавляли в раствор 6-бром-2-нафтойной кислоты (16,5 г, 65,7 ммоль), триэтиламина (18,32 мл, 131 ммоль) и трет-бутилового спирта (7,54 мл, 79 ммоль) в толуоле (225 мл) и перемешивали в течение 4 ч при 100°С. Летучие вещества удаляли посредством ротационного выпаривания, остаток поглощали ЕЮАс (500 мл) и промывали водой и насыщенным солевым раствором. При концентрировании был образован осадок, который выделяли посредством фильтрации и промывали 1:1 ЕьО/Нех с получением соединения согласно примеру ΌδΈ^Ε стадия а (10,5 г). Второй выход менее чистого продукта выделяли при концентрировании маточной жидкости (9,8 г); выход объединяли (93%). ЬС-Μδ (усл.-И): КТ = 3,44 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+№]+ С1₅Н1₆ВгЫО₂: 345,02; обнаружено 345,03.

Пример ΩδΊΈ-1, стадия Ь

Соединение согласно примеру ΌδΈ^Ε стадия а (5 г, 15,52 ммоль), разбавляли в уксусной кислоте (50 мл) и по каплям добавляли дымящуюся азотную кислоту (2,3 мл) в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч и выделенный фильтрацией продукт разделяли между Ωί'Μ и нас. раствором ЫаНСО₃. Органический слой концентрировали и получали 5,7 г (колич.) соединения согласно примеру Όδ^-Γ стадия Ь. ЬС-Μδ (усл.-И): КТ = 3,52 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+№]+ С1₅Н₁₅ВгЫ₂О₄: 390,02.; обнаружено 390,99.

- 109 020815

Пример О8ТЬ-1, стадия с

Обезвоженный хлорид олова (II) (3 г, 16,34 ммоль) добавляли в раствор согласно примеру О8ТЬ-1, стадия Ь (2 г, 5,47 ммоль), в Ме0Н (100 мл) и раствор перемешивали в течение 18 ч при 70°С. Растворитель удаляли ротационным выпариванием и соединение согласно примеру О8ТЬ-1, стадия с (предполагаемый теоретический выход 1,25 г), сушили под высоким вакуумом. ЬС-М8 (усл.-И): КТ = 1,49 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ ί.’Ή,ΒΓΝ^: 237,00; обнаружено 236,96.

Пример О8ТЬ-1, стадия ά

Вое

НАТИ (2,085 г, 5,48 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия с (1,25 г, 5,48 ммоль), согласно примеру 1, стадия Ь (1,246 г, 5,48 ммоль) и основания Хунига (7,09 г, 54,8 ммоль) в ЭМР (70 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч перед разделением между ЕЮАс (500 мл) и нас. NаНСО₃ (150 мл). Осажденные соли олова удаляли посредством фильтрации через СЕЫТЕ® и органическую фазу концентрировали с получением остатка, который поглощали Ас0Н (100 мл) и нагревали при 60°С в течение 18 ч. Растворитель удаляли ротационным выпариванием под высоким вакуумом и остаток поглощали в СН₂С1₂ и промывали нас. раствором NаНСО₃. После концентрирования неочищенный продукт загружали (ЭСМ) в картридж Томпсона на силикагеле (110 г) и подвергали градиентному элюированию; 15-100% В над 1 л с получением соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия ά (420 мг, 44 %). ЬС-М8 (усл.-И): КТ = 2,51 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂1Н₂₂В^₃0₂: 430,10; обнаружено 430,06.

Пример П8ТЬ-1, стадия ά. 1

Соединение согласно примеру П8ТЬ-1, стадия ά.1, получали из соединения согласно примеру 1, стадия Ь, описанной для синтеза его метилзамещенного аналога в заявке на патент \0 2008/021927 методикой.

Пример П8ТЬ-1, стадия е

В раствор соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия ά.1 (560 мг, 1,39 ммоль), в ЭМР (15 мл) добавляли NС8 (203 мг, 1,52 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч. Раствор продували азотом с выпариванием ЭМР и неочищенный остаток загружали (ЭСМ) в колонку Томпсона с 8Ю₂ (80 г) и выполняли градиентное элюирование (ВЮТАСЕ®). Сегмент 1: 10 - 100% В над 1,5 л. Сегмент 2: удержание 100% В, 300 мл. (А/В Гексаны/ЕЮАс). Выделяли соединение согласно примеру П8ТЬ-1, стадия е (589,1 мг, выход 92%). ЬС-М8 (усл.Ю4): КТ = 2,61 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+№|' С19Н₂₂СШ₃0₂: 462,04; обнаружено 462,07.

Пример П8ТЬ-1, стадия ί

С1

Одну порцию тетракис(трифенилфосфин) палладия (76 мг, 0,066 ммоль) добавляли в перемешиваемую суспензию соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия е (580 мг, 1,32 ммоль), бис(паниколато) диборона (671 мг, 2,64 ммоль) и ацетата калия (324 мг, 3,30 ммоль) в растворе диоксана (12 мл) в сосуде под высоким давлением с завинчивающимся колпачком. Реакционную смесь выкачивали, промывали аргоном (3х) и помещали в предварительно нагретую масляную баню (80°С) и перемешивали в течение 16 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, промывали нас. раствором NаНСО₃, насыщенным солевым раствором и сушили над №₂80₄. Неочищенный остаток загружали (ЭСМ) в колонку Томпсона с 8Ю₂ (80 г) и выполняли градиентное элюирование (ВЮТАСЕ®). Сегмент 1:5- 100% В над 1,5 л. Сегмент 2: удержание 100% В, 300 мл. (А/В СН₂С1₂/ЕЮАс). Выделяли соединение согласно примеру ПТ8Ь-1, стадия ί (714,7 мг, 95%) в виде желтой пены. ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 2,69 мин. ЬС-М8: анали- 110 020815 тически рассчитано для |М+Н|' С^Нз^СШзОу 486,24; обнаружено 486,26.

Пример О8ТЬ-1, стадия д

Одну порцию тетракис(трифенилфосфин) палладия (27,0 мг, 0,023 ммоль) добавляли в перемешиваемую суспензию соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия ά (200 мг, 0,467 ммоль), соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия £ (250 мг, 0,514 ммоль) и NаНСΟ₃ (196 мг, 2,335 ммоль) в дегазированном растворе ОМЬ (4 мл) и воде (1 мл) в атмосфере аргона в сосуде под высоким давлением с завинчивающимся колпачком. Раствор выкачивали, загружали аргон и помещали в предварительно нагретую масляную баню (80°С) и перемешивали в течение 14 ч. Смесь разбавляли ΕΏΑο (10 мл), ТНР (2 мл) и МеОН (1 мл), промывали насыщенным солевым раствором и сушили над №₂8О₄. После концентрирования с удалением растворителя остаток загружали в колонку Томпсона с 8Ю₂ (80 г) и элюировали (ΒΙΟΤΑСΕ®) градиентом. Сегмент 1:20-100% В над 1,5 л, сегмент 2: удержание 100% В для 300 мл; А/В гексаны/Ε!ΟΑс. Выделяли соединение согласно примеру О8ТЬ-1, стадия д (195,0 мг, 52,6%), в виде коричневого твердого вещества. ЬС-М8 (усл.-Э4): НТ = 2,40 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|+ С₄₀Н₄₄СШ₆О₄: 707,31; обнаружено 707,43.

Холодную (0°С) 4н. НС1 в диоксане (4 мл) добавляли в перемешиваемый раствор соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия д (65 мг, 0,092 ммоль), в МеОН (1 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч, концентрировали и помещали под высокий вакуум с получением соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия Ь, в виде оранжево-коричневого твердого вещества и в виде тетра-соли НС1. ЬС-М8 (Усл.-Э4): НТ = 1,63 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С₃₀Н₂₈СШ₆: 507,21; обнаружено

507,26.

Пример О8ТЬ-1.

Соединение согласно соединение согласно примеру Ό8ΊΈ-1 получали из соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру СА2 методикой. Очистку завершали при помощи препаративной ВЭЖХ (0 -50% В) в течение градиента 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки Аа!ег5 81111^112 (30x100 мм, 85), где растворитель В = 90% Ο^ΟΝ - 10% Н₂О 0,1% ΤΡΑ и А = 5% ^^Ν - 95% Н₂О-0,1% ΤΡΑ. %). Выделяли соединение согласно примера О8ТЬ-1 (70,4 мг, 67,7%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (МеОЭ. 500 МГц, δ): 8,47 (ά, I = 8,6 Гц, 1Н), 8,44 (5, 1Н), 8,15 (5, 1Н), 8,13 (5, 1Н), 7,91 (ά, I = 8,6 Гц, 2Н), 7,85 (ά, I = 8,6 Гц, 2Н), 7,80 (ά, I = 8,6 Гц, 1Н), 5,34-5,31 (т, 1Н), 5,07 (!, I = 7,32 Гц, 1Н), 4,61-4,58 (т, 2Н), 3,39-3,31 (т, 1Н), 3,75-3,72 (т, 1Н), 3,69 (5, 3Н), 3,68 (5, 3Н), 2,83-2,81 (т, 1Н), 2,64-2,59 (т, 1Н), 2,49-2,48 (т, 2Н), 2,23-2,14 (т, 3Н), 2,05-2,03 (т, 1Н), 1,18-1,12 (т, 2Н), 1,05-0,92 (т, 13Н), 0,83-0,81 (т, 1Н). ЬС-М8 (усл.Ю4): НТ = 2,24 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С.₁.₁Н₅₀С1Н₈О₆: 821,36; обнаружено 821,54.

Соединение согласно примеру О8ТЬ-2 получали из соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру СА2 методикой, за исключением применения (8)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51. Очистку завершали при помощи препаративной ВЭЖХ (0-50% В) в течение градиента 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки Аа!ег5 81111^112 (30x100 мм, 85), где растворитель В = 90% Ρ^ΌΝ - 10% Н₂О 0,1% ΤΡΑ и А = 5% ίΉ^Ν - 95% Н₂О - 0,1% ΤΡΑ. Выделяли соединение согласно примеру О8ТЬ-2 (18,0 мг) в виде белого твердого вещества. ЬС-М8 (усл.-Э4): НТ = 2,04 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для |М+Н|' С₄₈Н₅₄С1Й₈О₆: 905,38; обнаружено 905,60.

- 111 020815

Примеры О8ТЬ-3 и О8ТБ-4

Примеры О8ТЬ-3, стадия а и О8ТЬ-4, стадия а

Порционно добавляли раствор брома (0,079 мл, 1,54 ммоль) в АсОН (1 мл) к перемешанному раствору соединения согласно примеру 1, стадия ά (1,0 г, 1,541 ммоль) в АсОН (40 мл) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток поглощали ЭСМ и промывали нас. раствором ЫаНСО₃. Водный слой экстрагировали дважды большим количеством ОСМ и объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором и сушили (Ыа₂8О₄). Остаток загружали (ЭСМ) в картридж Томпсона с силикагелем (160 г) и элюировали 30-100% В над 2 л. Сегмент 2: удержание 100% В для 800 мл. А/В гексаны/ЕЮАс. Выделяли 3 компонента: исходное вещество (303,6 мг); соединение согласно примеру П8ТЬ-3, стадия а (Х= Η; 382,1 мг); желтое твердое вещество. ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 2,21 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₄ВгЫ₆О₄. 729,26; обнаружено 729,28; пример ОТ8Ь-4, стадия а (Х= Вг; 287,2 мг); светлое, желтое твердое вещество. ЬС-М8 (усл.Ό4): КТ = 2,62 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₃Вг₂Ы₆О₄ 807,17; обнаружено: 807,33.

Примеры О8ТЬ-3, стадия Ь и О8ТЬ-4, стадия Ь

Продукты согласно примеру П8ТЬ-3, стадия Ь и согласно примеру П8ТЬ-4, стадия Ь, переносили на следующую стадию отдельно. Удаление защитных групп выполняли, как описано в методике для соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия й. Х= Η; соединение согласно примеру ОТ8Ь-3, стадия Ь: желтое твердое вещество, 33,1 мг (97% чистоты); ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 1,49 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₈ВгЫ₆: 529,16; обнаружено 529,24. Х= Вг; соединение согласно примеру ОТ8Ь-4, стадия Ь: желтое твердое вещество, 33 мг (96% чистоты); ЬС-М8 (Усл.-Э4): КТ = 1,82 мин. ЬСМ8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₇Вг₂Ы₆: 607,07; обнаружено 607,16.

Пример О8ТЬ-3.

Соединение согласно примеру О8ТЬ-3 получали из соединения согласно примеру О8ТЬ- 3, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ; 0% - 50%В за градиент 30 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки \Уа1ег5 8ипЕ1ге (30x100 мм, 85) В = 90% СН_;С\ - 10% Н₂О - 0,1% ТЕА и А = 5% СН_;С\ - 95% Н₂О - 0,1%ТРА. Выделяли соединение согласно примеру О8ТЬ-3 (29,0 мг) в виде белого твердого вещества. ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 2,07 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₅₀ВгЫ₈О₆: 843,30; обнаружено 843,39.

Пример О8ТЬ-4.

Соединение согласно примеру О8ТЬ-4 получали из соединения согласно примеру П8ТЬ-4, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ; 0% - 50%В за градиент 30 мин при 40 мл/мин с применением колонки \Уа1ег5 8ипЕ1ге (30x100 мм, 85) В = 90% СН₃СЫ - 10% Н₂О -0,1% ТЕА и А = 5% СН₃СЫ - 95% Н₂О - 0,1%ТЕА. Выделяли соединение согласно примеру О8ТЬ-4 (30,2 мг) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 7,82 (5, 8Н), 5,08-5,05 (т, 2Н), 4,58 (арр ά, I = 6,7 Гц, 2Н), 3,76-3,74 (т. 2Н), 3,67 (5, 6Н), 2,57-2,52 (т, 2Н), 2,50-2,44 (т, 2 Н), 2,22-2,17 (т, 2Н), 2,06-2,01 (т, 2Н), 1,12-1,08 (т, 2Н), 1,04 (ά, I = 6,7 Гц, 6Н), 0,95 (ά, I = 6,7 Гц, 6Н), 0,84-0,82 (т, 2Н). ЬС-М8 (усл.Ю4): КТ = 2,56 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₂Н₄₉ВгЫ₈О₆: 921,31; обнаружено 921,30.

- 112 020815

Добавляли одну порцию Ассийиог (45-50% на оксиде алюминия) (345 мг, 1,2 ммоль) в перемешиваемую суспензию согласно примеру 1, стадия к, (1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-трет-бутил 3,3'-(5,5'-(бифенил4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилата) (500 мг, 0,77 ммоль) в сухом ЭМР (5 мл) при к.т. Смесь помещали в предварительно нагретую масляную баню при 60°С и перемешивали 4 ч перед удалением растворителя ротационным выпариванием под высоким вакуумом. Неочищенный продукт загружали в картридж Томпсона 90 д с силикагелем и элюировали 10100% В над 2 л и удерживали 100% В для 1 л (растворитель В = Е,ОАс; растворитель А = гексаны). Использовали второй градиент с элюированием 0-100% В над 2 л (растворитель В = метанол; растворитель А = Е,ОАс). Собирали три фракции соединение согласно примеру О8ТЬ-5, стадия а (Х= Р), (1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-трет-бутил-3,3'-(5,5'-(бифенил-4,4'-диил)бис(4-фтор-1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилат) (45,0 мг, 7%) в виде желтого твердого вещества, соединение согласно примеру О8ТЬ-5, стадия а (X = Н) ((1К,38,5К)-трет-бутил-3-(5-(4'-(2-((1К,38,5К)-2-(третбутоксикарбонил)-2-азабицикло [3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-4-фтор-1Нимидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилат (193 мг, 32%) в виде желтого твердого вещества и восстановленное исходное вещество (153 мг, 24%).

Соединение согласно примеру О8ТЬ-5, стадия а, X = Р: образец (~10 мг) первого элюированного соединения дополнительно очищали препаративной ВЭЖХ (0-100% В) за градиент 30 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки РНЕNΟΜЕNЕX® Ьипа (30х 100 мм, 10 и), где растворитель В = 90% ^ΧΝ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% СН^ -95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли (4,6 мг) в виде светложелтого твердого вещества. ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 4,43 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₃Р₂Н5О₄: 685,33; обнаружено 685,38.

Соединение согласно примеру О8ТЬ-5, стадия а, X= Н: образец (~15 мг) второго элюированного соединения дополнительно очищали препаративной ВЭЖХ (0-100% В) за градиент 30 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки РНЕNΟΜЕNЕX® Ьипа (30х 100 мм, 10и), где растворитель В = 90% ^ΧΝ - 10% Н₂О-0,1% ТРА и А = 5% СН^ -95% Н₂О-0,1% ТРА. Выделяли (11,2 мг) в виде грязнобелого твердого вещества. ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 4,43 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₈Н₄₄РН5О₄: 667,34; обнаружено 667,40.

дующую стадию отдельно. Удаление защитных групп выполняли как описано в методике для соединения согласно примеру О8ТЬ-1, стадия И.

Соединение согласно примеру ОТ8Ь-5, стадия Ь Р): желтое твердое вещество, 23,4 мг; ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 2,89 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₇Р₂Н5: 485,22; обнаружено 485,25.

Соединение согласно примеру ОТ8Ь-5, стадия Ь Н): 18 мг (95% чистоты); ЬС-М8 (усл.-Э4): КТ = 2,55 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₂₈РН5: 467,25; обнаружено 467,27.

Пример О8ТЙ-5

Соединение согласно примеру О8ТЙ-5 получали из соединения согласно примеру О8ТЬ-5, стадия Ь

Н), описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ; 0-50%В за градиент 30 мин при 40 мл/мин с применением колонки \Уа1ег5 8ипР1ге (30х 100 мм, 85) В = 90% СН^ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% СН^ - 95% Н₂О - 0,1%ТРА. Выделя- 113 020815 ли соединение согласно примеру ОЗТЬ-5 (37,3 мг, 39%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ’Н ЯМР ([НеОО, 500 МГц, δ): 7,88 (5, 1 Н), 7,84 (6, 1 = 8,5 Гц, 2Н), 7,80 (6, 1 = 8,5 Гц, 2Н), 7,77 (6, 1 = 8,5 Гц, 2Н), 7,68 (6, 1 = 8,5, 2Н), 5,13 (ΐ, 1 = 7,0 Гц, 1Н), 5,04 (ΐ, 1 = 6,1Гц, 1Н), 4,56 (6, 1 = 6,7 Гц, 2Н) 3,82 (Ьг. 5, 1Н), 3,68-3,67 (т, 7Н), 2,72-2,68 (т, 1Н), 2,51-2,43 (т, 3Н), 2,21-2,14 (т, 2Н), 2,09 (Ьг. 5, 1Н), 2,03 (Ьг. 5, 1Н), 1,15-1,09 (т, 2Н), 1,02 (6, 1 = 6,7 Гц, 6Н), 0,94 (ΐ, 1 = 7,0 Гц, 6Н), 0,90 (Ьг. 5, 1Н), 0,81 (Ьг. 5, 1Н). ЬСΜδ (усл.-Э4): КТ = 3,45 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С₄₂Н₅₀Р^О₆: 781,39; обнаружено 781,54.

Соединение согласно примеру ОЗТЬ-6 получали из соединения согласно примеру ОЗТЬ-5, стадия Ь (Х= Н), описанной для получения соединения согласно примеру Ον2 методикой, за исключением применения (δ)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ (0-50% В) за градиент 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки \νη^Γ5 δικιΕίΐΌ (30x100 мм, δ5), где растворитель В = 90% СН₃С№ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% Ο4^Ν - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ОЗТЬ-6 (37,1 мг, 36%) в виде белого твердого вещества. ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 3,17 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С₄₈Н₅₄РНЮ₆: 865,41; обнаружено 865,55.

Соединение согласно примеру ОЗТЬ-7 получали из соединения согласно примеру ОЗТЬ-5, стадия Ь (Х= Р), описанной для получения соединения согласно примеру Ο\ν2 методикой, за исключением применения (δ)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ (0 - 50% В) за градиент 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки ^а1ег5 ЗипИге (30x100 мм, δ5), где растворитель В = 90% Ο4^Ν - 10% Н₂О-0,1% ТРА и А = 5% Ο4^Ν - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ОЗТЬ-7 (14 мг, 25%) в виде белого твердого вещества. ’Н ЯМР ([ЛеОО. 500 МГц, δ) 7,72 (6, 1 = 8,5 Гц, 4Н), 7,64 (6, 1 = 8,5 Гц, 4Н), 5,03 (ΐ, 1 = 6,7 Гц, 2Н), 4,63 (6, 1 = 7,6 Гц, 2Н), 3,97-3,93 (т, 4Н), 3,72 (Ьг. 5, 2Н). 3,67 (5, 6Н), 3,42-3,37 (т, 4Н), 2,44-2,42 (т, 4Н), 2,02 (Ьг. 5, 4Н),1,63-1,57 (т, 6Н), 1,46-1,43 (т, 2Н), 1,14-1,19 (т, 2Н), 0,80 (Ьг. 5, 2Н): ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 3,17 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]⁴ С^^Р^О^ 883,40; обнаружено 883,57.

Добавляли одну порцию АссиДиот (45-50% на оксиде алюминия) (274 мг, 0,92 ммоль) в перемешиваемую суспензию согласно примеру Ο\ν1, стадия а, (2δ,2'δ,5δ,5'δ)-трет-бутил-5,5'-(5,5'-(бифенил-4,4'диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпирролидин-1-карбоксилата) (400 мг, 0,6 ммоль) в сухом

- 114 020815

ΩΜΕ (4 мл) при к.т. Смесь помещали в предварительно нагретую масляную баню при 60°С, перемешивали 4 ч перед добавлением дополнительных 135 мг Ассийиог и продолжали перемешивать при 60°С в течение 16 ч. Растворитель удаляли ротационным выпариванием под высоким вакуумом и неочищенный продукт загружали в картридж Томпсона 90 д с силикагелем и элюировали 10-100% В над 2 л и удерживали 100% В для 1 л (растворитель В = ЕЮАс; растворитель А = гексаны). Использовали второй градиент с элюированием 0-100% В над 2 л (растворитель В = метанол; растворитель А = ЕЮАс). Собирали три фракции: соединение согласно примеру П8ТЬ-8, стадия а (Х= Р), ^,2^^,5^)-трет-бутил-5,5'-(5,5'(бифенил-4,4'-диил)бис(4-фтор-1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-метилпирролидин-1-карбоксилат) (33 мг, 5,1%) в виде желто-оранжевого твердого вещества ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 4,64 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₃₈Н₄₇Р₂Ы₆С₄: 689,36; обнаружено 689,50, соединение согласно примеру ЭВТЕ-Б, стадия а (Х=Н), ^^)-трет-бутил-2-(5-(4'-(2-(^^)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-4-фтор-1Н-имидазол-2-ил)-5-метилпирролидин-1карбоксилат (108,6 мг, 17%) в виде желто-оранжевого твердого вещества. ЬС-Μδ (усл. - Ω4): КТ = 3,83 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₃₈Н₄₈РЫ₆О₄: 671,37; обнаружено 671,48 и восстановленное исходное вещество (321,2 мг, 80%) в виде красновато-оранжевого твердого вещества.

Продукты соединения согласно примеру ОВТЬ-8, стадия а (Х= Р) и (Х= Н), переносили на следующую стадию отдельно. Удаление защитных групп выполняли как описано в методике из соединение согласно примеру ОВТЬ-1, стадия И.

Соединение согласно примеру ОТВЬ-8, стадия Ь (Х= Р): Желтое твердое вещество, 22,7 мг; ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 3,03 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₂₈Н₃₀Р₂Ы₆: 489,26; обнаружено 489,35.

Соединение согласно примеру ОТВЬ-8, стадия Ь (Х= Н): 35 мг (95% чистоты); ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 2,63 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Π^ С₂₈Н_3!РЫ₆: 471,27; обнаружено 471,33.

Пример ОВТЬ-8.

Соединение согласно примеру ΩδΈΕ-5 получали из соединения согласно примеру ΩδΈΕ-8, стадия Ь (Х= Н), описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ; 0-50%В за градиент 30 мин при 40 мл/мин с применением колонки \Уа1ег5 δиηР^^е (30х 100 мм, δ5) В = 90% СН₃СЫ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% СН₃СЫ - 95% Н₂О - 0,1%ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ΩδΈΕ-8 (31,9 мг, 41%) в виде твердого вещества светло-персикового цвета. ЬС-Μδ (усл.Ю4): КТ = 3,66 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н^ С₄₂Н₅₄РЫ₈О₆: 785,42; обнаружено 785,48.

Соединение согласно примеру ΩδΈΕ-9 получали из соединения согласно примеру ΩδΈΕ-8, стадия Ь (Х= Н), описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой, за исключением применения (Ъ)-2-(\1етоксикарбонила\1ино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ (0 - 50% В) за градиент 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки \Уа1ег5 διπιΕίΐΌ (30х 100 мм, δ5), где растворитель В = 90% СН₃СЫ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% СН₃СЫ - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ОВТЬ-9 (27,2 мг, 32%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ЬС-Μδ (усл.-Э4): КТ = 3,37 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Н]* С₄₆Н₅₈РЫ₈О₈: 869,44; обнаружено 869,54.

- 115 020815

Соединение согласно примеру БЗТЬ-10 получали из соединения согласно примеру БЗТЬ-8, стадия Ь (Х= Р), описанной для получения соединения согласно примеру С\У2 методикой, за исключением применения (З)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ (0-50% В) за градиент 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки \Уа1егк ЗипРпе (30х 100 мм, З5), где растворитель В = 90% СН₃С№ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% ^^Ν - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли соединение согласно примеру БЗТЬ-10 (13,8 мг, 25%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ЬС-МЗ (усл.-Э4): РТ = 4,28 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₆Н₃-Ру₈О₈: 887,43; обнаружено 887,50.

Пример БЗТЬ-11, стадия а

Получение соединения согласно примеру БЗТЬ-11, стадия а, проводили аналогичным образом, что и получение соединения 15 в заявке на патент № 20080213 ИЗ 10889А ИЗС1Р. ЬС-МЗ (усл.-Э4): РТ = 2,22 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С’₂₂Н₂-ВгУО₄: 476,12; обнаружено 478,17.

Пример БЗТЬ-11, стадия Ь

5н. гидроксид натрия (1,469 мл, 7,4 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру БЗТЬ-11, стадия а и (1Р,3З,5Р)-трет-бутил 3-(4-(4-бромфенил)-5-(этоксикарбонил)-1Н-имидазол-2-ил)-2азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилата (1,75 г, 3,7 ммоль) в этаноле (40 мл). Смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч и добавляли дополнительное количество 5 н №ЮН (1,5 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение 6 ч, добавляли дополнительное количество 5 н №ЮН (0,75 мл) и продолжали перемешивать при 60°С в течение 16 ч. Этанол удаляли ротационным выпариванием и остаток поглощали этилацетатом и нейтрализовали до рН 5 (1н. НС1 прибл. 20 мл с приближением до рН 7, затем до рН 5 фосфатным буфером). Органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали. Выделяли соединение согласно примеру БЗТЬ-11, стадия Ь (1,6 г, 92 %) в виде белого твердого вещества. ЬС-МЗ (усл.-Э4): РТ = 1,78 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂ IΕΊ’ιΝΈΕ: 448,09; обнаружено 447,97.

Пример БЗТЬ-11, стадия с

Добавляли одну порцию СБ1 (0,58 г, 3,57 ммоль) в перемешиваемый раствор БЗТЬ-11, стадия Ь, 4(4-бромфенил)-2-((1Р,3З,5Р)-2-(трет-бутоксикарбонил)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-5карбоновой кислоты (1,6 г, 3,57 ммоль) в сухом ТНР (30 мл). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч перед охлаждением до к.т и добавляли NН₄ΟН (конц.) (4,96 мл, 35,7 ммоль). Смесь перед этим перемешивали в течение 16 ч, разбавляли ЕЮАс. промывали нас. раствором НСО₃, насыщенным солевым раствором и сушили. Неочищенный продукт загружали в картридж Томпсона 160 д с силикагелем и элюировали 40-100% В над 3 л, с последующим удержанием при 100% В для 1 л. (растворитель В = ЕЮАс; растворитель А = гексаны). Выделяли соединение согласно примеру БЗТЬ-11, стадия с, (1,76 г 99%). ЬС-МЗ (усл.-Э4): РТ = 1,75 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₀Н₂₄В^₄О₃449,10; обнаружено: 449,06.

Пример БЗТЬ-11, стадия ά

- 116 020815

Добавляли одну порцию 2,4,6-трихлор-1,3,5-триазина (циануровый хлорид) (168 мг, 0,91 ммоль) к перемешанному раствору соединения согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия с, (1К,3З,5К)-трет-бутил-3-(4(4-бромфенил)-5-карбамоил-1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилата (903 мг, 1,82 ммоль) в сухом ЭМР (4 мл). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем нагревали до 50°С в течение 16 ч. Добавляли дополнительное количество цианурового хлорида (20 мг) и смесь перемешивали дополнительно при 50°С в течение 24 ч, разбавляли ЕЮАс и водой и органический слой промывали нас. раствором NаНСΟ₃, насыщенным солевым раствором и сушили (№₂ЗО₄). Неочищенный продукт загружали картридж Томпсона 90 д с силикагелем и элюировали 25-100% В над 1,5 л, с последующим удержанием при 100% В 500 мл. (растворитель В = ЕЮАс; растворитель А = гексаны). Выделяли соединение согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия б, (346 г, 60%) в виде желтовато-коричневой пены. ЬС-МЗ (усл.-Э4): КТ = 3,93 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₀Н₂₂В^₄О₂ 431,09; обнаружено: 431,01.

Пример ЭЗТЬ-11, стадия е

Тетракис(трифенил)палладия (45,8 мг, 0,04 ммоль) добавляли в продуваемую аргоном суспензию соединение согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия б и (1К,3З,5К)-трет-бутил-3-(5-(4-бромфенил)-4-циано1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксилата (340 мг, 0,79 ммоль). (1К,3З,5К)-Третбутил-3-(4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло [3.1.0]гексан-2-карбоксилат (393 мг, 0,871 ммоль) и NаНСΟ₃ (333 мг, 3,96 ммоль) в ЭМЕ (6 мл) и воде (1,5 мл) в завинченной сверху пробирке с толстыми стенками. Реакционную смесь промывали аргоном, запаивали и погружали в предварительно нагретую масляную баню (80°С) и перемешивали 14 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс, промывали нас. раствором NаНСΟ₃, насыщенным солевым раствором, сушили над №-1₂ЗО.-|. Неочищенный продукт загружали картридж Томпсона 90 д с силикагелем и элюировали 35 100% В над 1,5 л, с последующим удержанием при 100% В для 0,5 л. (растворитель В = ЕЮАс; растворитель А = гексаны). Выделяли соединение согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия е, (200 мг, 36%) в виде светло-желтой пены.

Небольшой образец (~20 мг) подвергали дополнительной очистке преп. ВЭЖХ (0%В -100%В за градиент 25 мин при 40 мл/мин) с применением колонки РНЕNΟМЕNЕX® Оет1ш (30x100 мм, 10и), где растворитель В = 95% ΟΚ,ϋΝ - 5% Н₂О- 10 мМ N1 ЮАс и А = 5% ΟΚ,ϋΝ - 95% Н₂О - 10 мМ N1 ЮАс. (12,9 мг) ЬС-МЗ (Усл.-Э4): КТ = 3,51 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₉Н₄₄^О₄674,35; обнаружено: 674,29.

Пример ЭЗТЬ-11, стадия £

Продукт соединения согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия £, получали после удаления защитных групп, как описано в методике для соединения согласно примеру ЭЗТЬ-1, стадия И. ЬС-МЗ (усл.-Э4): КТ = 2,36 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₉Н₂₈^: 474,24; обнаружено 474,13.

Пример ЭЗТЬ-11.

Соединение согласно примеру ЭЗТЬ-11 получали из соединения согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия £, описанной для получения соединения согласно примеру СА2 методикой. Очистку завершали препаративной ВЭЖХ; 0% - 50%В за градиент 30 мин при 40 мл/мин с применением колонки Аа1ег8 ЗииРпе (30x100 мм, З5) В = 90% СН₃С№ - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А=5% СН^ - 95% Н₂О - 0,1%ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ЭЗТЬ-11 (21,5 мг, 31%) в виде грязно-белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 7,93-7,82 (т, 9 Н), 5,15-5,08 (т, 2Н), 4,58-4,56 (т, 2Н), 3,82 (Ьг. 8 1Н), 3,72 (Ьг. 8, 1Н) 3,67 (8, 6Н), 2,73-2,67 (т, 1Н), 2,50-2,46 (т, 3Н), 2,21-2,14 (т, 2Н), 2,09 (Ьг. 8, 1Н), 2,03 (Ьг. 8, 1Н), 1,141,10 (т, 2Н), 1,05-1,02 (т, 6Н), 0,97-0,93 (т, 6Н), 0,90 (Ьг. 8, 1Н), 0,83 (Ьг. 8, 1Н). ЬС-МЗ (усл.-Э4): КТ = 3,25 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₃Н₅₀^О₆: 780,39; обнаружено 788,31.

Соединение согласно примеру ЭЗТЬ-12 получали из соединения согласно примеру ЭЗТЬ-11, стадия £, описанной для получения соединения согласно примеру СА2 методикой, за исключением применения (З)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты вместо Сар-51.

- 117 020815

Очистку завершали препаративной ВЭЖХ (0-50% В) за градиент 25 мин (при 40 мл/мин) с применением колонки ХУаЮге §ипРпе (30x100 мм, δ5), где растворитель В = 90% ^^Ν - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% ^_¥Ν - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. Выделяли соединение согласно примеру ΌδΊΈ-12 (26,7 мг, 35%) в виде грязно-белого твердого вещества. ^^δ (усл.-Э4): КТ = 2,98 мин. Π^^δ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₇Н_54¥О₈: 872,41; обнаружено 872,35.

Для синтеза соединения согласно примеру ДЬК-1, стадия а, см. способ в заявке на патент УО 2009/020825.

Пример ДЬК-1, стадия Ь

Раствор 1 М брома в АсОН (0,4 мл) добавляли в раствор соединения согласно примеру ДЬК-1, стадия а (250 мг, 0,40 ммоль), в уксусной кислоте (15 мл) и перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в ЭСМ (100 мл) и обрабатывали нас. раствором NаΗСΟ₃ и твердым NаΗСΟ₃, пока рН нейтральный. Органическую фазу концентрировали и сушили в вакууме. Путем осуществления взаимодействия получали 1:1:1 смесь исходного вещества : монобромида: дибромида, которую разделяли после использования (ЭСМ) на колонке Томпсона 5Ю₂ (25 г). Элюированием (В1ОТАОЕ®) градиентом 15 100% В над 500 мл получали соединение согласно примеру 1ЬК-1, стадия Ь (180 мг). Π^^δ (усл.-Л4): КТ = 2,75 мин. ^^δ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₆Н.₁.₁ВгН₆О.₄: 705,26; обнаружено 705,22.

Пример 1ЬК-1, стадия с о

+-ΝΗ (Соль НС1 Вг

Раствор 4н. НС1 в диоксане (4 мл) добавляли в соединение согласно примеру 1ЬК-1, стадия Ь (38 мг, 0,054 ммоль), в МеОН (4 мл) и перемешивали в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме и тетрасоль НС1 сушили под высоким вакуумом. ^^δ (Усл.-Э4): КТ = 1,75 мин. ^С-Μδ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₇₆Н₂₈ВгН₆: 503,16; обнаружено 503,26.

Пример 1ЬК-1.

Соединение согласно примеру ДЪК-1 получали из соединения согласно примеру ДЬК-1, стадия с, описанной для получения соединения согласно примеру 0У2 методикой. Очисткой препаративной ВЭЖХ, колонка ΡΗΕNΟΜΕNΕX® Ьипа (30x100 мм δ10), запускали 25 мин градиент от 15-100% В (при 40 мл/мин), где растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% МеОН - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. ^^δ (усл.-Л4): КТ = 2,61 мин. Π^^δ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₅₀Вг_¥О₆: 819,31; обнаружено 819,23.

- 118 020815

Йод (162 мг, 0,640 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру 1ЬК-1, стадия а (400 мг, 0,640 ммоль) и ЫаНСО₃ (161 мг, 1,921 ммоль) в диоксане (15 мл) и воде (15 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч, гасили 10% раствором Ыа₂8₂О₃ (40 мл) и разбавляли ЕЮАс/ТНР (2:1). Органическую фазу концентрировали и неочищенный продукт использовали (ОСМ) на колонке Томпсона на силикагеле (40 г) и элюировали 35-100% В над 1 л (А/В ЭСМ/ЕЮДс) с получением смеси исходного вещества, дийодида (255 мг) и соединения согласно примеру 1ЕК-2, стадия а (46 мг, 9%). ЬС-М8 (усл.14): КТ = 2,45 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₆Н₄₄1Ы₆О₄: 751,24; обнаружено 751,18.

Пример 1ЕК-2, стадия Ь

Раствор 4н. НС1 в диоксане (5 мл) добавляли в соединении согласно примеру 1ЬК-2, стадия а (46 мг, 0,061 ммоль), в МеОН (5 мл) и перемешивали в течение 4 ч. Растворитель удаляли в вакууме и тетрасоль НС1 сушили под высоким вакуумом. ЬС-М8 (усл.-14): КТ = 1,70 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₆Н₂₈1Ы₆: 551,13; обнаружено 551,09.

Пример 1ЬК-2.

Соединение согласно примеру 1ЬК-2 получали из соединения согласно примеру 1ЬК-2, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру О\2 методикой. Очищали полупреп. ВЭЖХ; Эупатах 6А полупреп. колонка С8; 5% - 95% В в течение 30 мин (при 20 мл/мин), где растворитель В = 90% СН₃СЫ - 10% Н₂О - 1% МН₄ОАс и А = 5% СН₃СЫ - 95% Н₂О - 1% МН₄ОАС. ЬС-М8 (усл.-И): КТ = 2,35 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₅₀1Ы₈О₆: 865,29; обнаружено 865,31.

ЫС8 (175 мг, 1,310 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия 4 (510 мг, 1,191 ммоль), в ОМЕ (10 мл) и перемешивали в течение 18 ч при 50°С. Растворитель удаляли ротационным выпариванием под высоким вакуумом и остаток загружали (ОСМ) в картридж Томпсона на силикагеле (80 г). Градиентное элюирование выполняли от 25 до 100% В над 750 мл (А/В Нех/ЕЮАс) с получением соединения согласно примеру 1ЬК-3, стадия а (250 мг, 46%). ¹Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 8,58 (5, 1Н), 8,39 (4, 1 = 8,6 Гц, 1Н), 7,97 (5. 1Н), 7,93 (4, 1 = 7,6 Гц, 1Н), 4,98 (5, 1Н), 3,70 (5, 1Н), 2,76-2,71 (т, 1Н), 2,50-2,45 (т, 1Н), 1,86 (5, 1Н), 1,48/1,12 (5, 9Н), 0,96-0,92 (т, 1Н), 0,79-0,77 (т, 1Н). ЬС-М8 (Усл.-14): КТ = 3,13 мин. ЬС-М8: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂1Н₂₂ВгС1Ы₃О₂: 464,06; обнаружено 464,05.

Пример 1ЬК-3, стадия а.1

Соединение согласно примеру 1ЕК-3, стадия а.1 получали из соединения согласно примеру П8ТЬ-1, стадия 4.1, описанной в заявке на патент \О 2008/021927 методикой для получения его метилзамещенного аналога.

Пример 1ЕК-3, стадия Ь

Соединение согласно примеру 1ЕК-3, стадия Ь, получали из соединения согласно примеру 1ЬК-3, стадия а и соединения согласно примеру 1ЬК-3, стадия а.1 описанной для получения соединения соглас- 119 020815 но примеру ΌδΤΕ-1, стадия д, методикой с получением соединения согласно примеру !ЬК-3, стадия Ь. ЬС-Μδ (усл.-И): ΚΤ = 2,72 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ ^₀Η₄₄ΟΝ₆Ο₄: 707,31; обнаружено 707,44.

Соединение согласно примеру ίΕΚ-3, стадия с, получали из соединения согласно примеру ίΕΚ-3, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру ΌδΤΕ-3, стадия а, методикой с получением соединения согласно примеру !ЬК-3, стадия с. ЬС-Μδ (Усл.-14): ΚΤ = 3,30 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ С^^ВгСШЮу 787,21; обнаружено 787,34.

Пример !ЬК-3, стадия б

Соединение согласно примеру !ЬК-3, стадия б, получали из соединения согласно примеру !ЬК-3, стадия с, описанной для получения соединения согласно примеру !ЬК-1, стадия Ь, методикой. ЬС-Μδ (Усл.-И): ΚΤ = 2,37 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ Сз^^ВтС!^: 587,12; обнаружено 587,14.

Пример 1ЬК-3.

Соединение согласно примеру !ЬК-3 получали из соединения согласно примеру !ЬК-3, стадия б, описанной для получения соединения согласно примеру Ον2 методикой. Очисткой препаративной ВЭЖХ, колонка ΡΗΕΝΟΜΕΝΕΧ® Ьииа (30x100 мм δ10), запускали 18 мин градиент от 15 до 100% В (при 40 мл/мин), где растворитель В = 90% ΜеΟΗ - 10% Н₂О - 0,1% ΤΡΑ и А = 5% ΜеΟΗ - 95% Н₂О 0,1% ΤΡΑ. ¹11 ЯМР (ΜΝΟΙλ 500 МГц, δ): 8,69-8,68 (т, 1Η), 8,52-8,50 (т, 1Η), 8,18-8,16 (т, 1Η), 7,98-7,96 (т. 1Η), 7,91-7,90 (т, 4Η), 5,34-5,34 (т, 1Η), 5,09-5,06 (т, 1 Η), 4,62-4,58 (т, 2Η), 3,91 (Ьг δ, 1Η), 3,76 (Ьг δ, 1Η) 3,69 (δ, 6Η), 2,77-2,73 (т, 1Η), 2,64-2,59 (т, 1Η), 2,51-2,48 (т, 2Η), 2,23-2,16 (т, 3Η), 2,06 (Ьг δ, 1Η), 1,17-1,12 (т, 2Η), 1,06-0,92 (т, 13Η), 0,83 (т, 1Η). ЬС-Μδ (Усл.-И): ΚΤ = 3,14 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ С^ЩгСШЮ^ 901,27; обнаружено 901,45.

Основание Хунига (1,2 г, 9 ммоль) добавляли в раствор 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона (2,5 г, 8,99 ммоль) и (2δ,5δ)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-2-карбоновой кислоты (1,9 г, 8,29 ммоль) в ацетонитриле (75 мл) и перемешивали в течение 6 ч при 24°С. Реакционную смесь концентрировали, остаток поглощали в ΕίΟΑο и промывали водой. Концентрированием получали белое твердое вещество, которое поглощали ксилолом (90 мл). Добавляли ацетат аммония (4,23 г, 70,4 ммоль) и раствор перемешивали в сосуде под давлением с завинчивающейся крышкой при 135°С в течение 3,5 ч. Реакционную смесь разбавляли ΕίΟΑο (400 мл) и промывали нас. раствором NаΗСΟ₃ и концентрировали. Неочищенный продукт загружали (^СΜ) в картридж Томпсона 80д с силикагелем и градиентное элюирование выполняли от 15 до 100% В над 1 л (А/В ^^ΕΟΑ^ с получением соединения согласно примеру 1ЬК-4, стадия а (выход не определен). ЬС-Μδ (усл.-И): ΚΤ = 2,21 мин. ЬС-Μδ: аналитически рассчитано для [Μ+Η]+ ^Η^γ^Ο^ 406,12; обнаружено 406,10. [Примечание: для синтеза исходной карбоновой кислоты, см. заявку на патент США №2009/0068140).

Пример !ЬК-4, стадия Ь ,_чМе

С1

- 120 020815

NСЗ (161 мг, 1,21 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру бЬК-4, стадия а (700 мг, 1,7 ммоль), в ЭМР (10 мл) и перемешивали в течение 18 ч при 50°С. Добавляли дополнительно количество NСЗ (50 мг) и реакцию продолжали в течение 6 ч перед удалением растворителя при помощи продувания азотом. Неочищенный продукт загружали (ЭСМ) в картридж Томпсона 40д на силикагеле и градиентное элюирование выполняли от 15% до 100% В над 750 мл (А/В Нех/ЕЮАс) с получением соединения согласно примера бЬК-4, стадия Ь (580 мг, 70%). ¹Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 7,62 (аррг 5, 4Н), 4,77 (Ьг. 5, 1Н), 4,03 (Ьг. 5, 1Н), 2,24 (Ьг 5, 2Н), 2,16-2,11 (т, 1Н) 1,79 (Ьг. 5, 1Н), 1,47-1,25 (т, 12Н). ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ = 3,33 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₉Н₂₄ВтСЮ₃О₂: 440,08; обнаружено 440,0.

Пример бЬК-4, стадия с

ЕЕЭО (1,67 г, 6,75 ммоль) добавляли в раствор соединения согласно примеру ПЗТЬ-1, стадия с (1,6 г, 6,75 ммоль) и (2З,5З)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-2-карбоновой кислоты (1,55 г, 6,75 ммоль) в ЭСМ (100 мл) и перемешивали в течение 6 ч. (Примечание: дианилин не был полностью растворимым). Реакционную смесь разбавляли ЭСМ (1 объем) и промывали наполовину насыщенным раствором NаНСО₃. Путем концентрирования получали твердое вещество (2,5 г). ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ = 3,07 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂1Н₂₇В^₃О₃ 448,13; обнаружено 448,11.

Неочищенное твердое вещество (2,5 г, 5,58 ммоль) поглощали АсОН (200 мл) и перемешивали в течение 18 ч при 60°С. Путем концентрирования под высоким вакуумом удаляли растворитель. Остаток поглощали ЭСМ, промывали нас. раствором NаНСО₃ и концентрировали. Остаток загружали (ЭСМ) в картридж Томпсона 80 д на силикагеле и градиентное элюирование выполняли от 15% до 100% В над 750 мл. (А/В Нех/ЕЮАс) с получением соединения согласно примеру бЬК-4, стадия с (2,6 г). ¹Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 8,36-8,35 (т, 2Н), 8,0 (б, б = 9Гц, 1Н), 7,91 (бб, б = 9, 2 Гц, 1Н), 7,87 (б, б = 9 Гц, 1Н), 5,31-5,28 (т, 1Н), 4,17 (Ьг. 5, 1Н), 2,59-2,56 (т, 1Н), 2,39-2,31 (т, 2Н) 1,86-1,83 (т, 1Н), 1,52-1,19 (т, 12Н). ЬС-МЗ (Усл.-б4): КТ = 2,57 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂1Н₂₅В^₃О₂: 430,12; обнаружено 430,09.

Пример бЬК-4, стадия б

Соединение согласно примеру бЬК-4, стадия б, получали из соединения согласно примеру бЬК-4, стадия с, описанной для получения соединения согласно примеру ПЗТЬ-1, стадия ί, методикой. ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ = 2,86 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₇Н₃₇В^О₄: 478,29; обнаружено

478,25.

Соединение согласно примеру бЬК-4, стадия е, получали из соединения согласно примеру бЬК-4, стадия б и из соединения согласно примеру бЬК-4, стадия Ь, описанной для получения соединения согласно примеру ПЗТЬ-1, стадия д, методикой с получением соединения согласно примеру бЬК-4, стадия е. ^!Н ЯМР (МеОЭ, 500 МГц, δ): 8,53 (б, б = 8,6 Гц, 1Н), 8,49 (5, 1Н), 8,20 (бб, б = 8,6, 2 Гц, 2Н), 7,97 (б, б = 8,6 Гц, 2Н), 7,92 (б, б = 8,6 Гц, 2Н), 7,88 (б, б = 8,9 Гц, 1Н). 5,32 (ΐ, б = 6,4 Гц, 1Н), 4,85 (Ьг. 5, 1Н), 4,20 (Ьг. 5, 1Н), 4,06 (Ьг. 5, 1Н). 2,59-2,58 (т, 1Н), 2,44-2,28 (т, 4Н), 2,19-2,15 (т, 1Н). 1,89-1,84 (т, 1Н), 1,83-1,79 (т, 1Н), 1,54-1,20 (т, 24Н). ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ = 3,18 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₀Н₄₈С1НЮ₄: 711,34; обнаружено 711,31.

Соединение согласно примеру бЬК-4, стадия ί, получали из соединения согласно примеру бЬК-4, стадия е, описанной для получения соединения согласно примеру бЬК-1, стадия Ь, методикой с получением соединения согласно примеру бЬК-4, стадия ί. ЬС-МЗ (усл.-б4): КТ = 2,19 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₀Н₃₂С1Н5: 511,24; обнаружено 711,23.

- 121 020815

Пример ДЬК-4

Соединение согласно примеру ДЬК-4 получали из соединения согласно примеру ДЬК-4, стадия ί, описанной для получения соединения согласно примеру СЮ2 методикой. Очисткой препаративной ВЭЖХ, колонка Ьипа Ах1а (30x100 мм С18), запускали 25 мин градиент от 15 до 100% В (при 40 мл/мин), где растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О -0,1% ТРА и А = 5% МеОН - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. ЬС-МЗ (усл.-И): КТ = 3,12 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₄Н₅₄СШ₈О₆: 825,39; обнаружено 825,31.

Соединение согласно примеру 1ЬК-5 получали из соединения согласно примеру ДЬК-4, стадия ί, описанной для получения соединения согласно примеру СЮ2 методикой, за исключением применения и (З)-2-(метоксикарбониламино)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)уксусной кислоты. Очисткой препаративной ВЭЖХ, колонка Ьипа Ах1а (30x100 мм С18), запускали градиент 25 мин от 15 до 100% В (при 40 мл/мин), где растворитель В = 90% МеОН - 10% Н₂О - 0,1% ТРА и А = 5% МеОН - 95% Н₂О - 0,1% ТРА. ЬС-МЗ (Усл.-И): КТ = 2,85 мин. ЬС-МЗ: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₈СШ₈О₆: 909,41; обнаружено 909,39.

НАТИ (151 мг, 0,40 ммоль) добавляли в раствор соли НС1 4,4'-бис(2-((1К,3З,5К)-2-азабицикло [3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила (соединение согласно примеру 1е) (107 мг, 0,18 ммоль) и (З)-2-(метоксикарбониламино)-2-((З)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (сар-177а) (86 мг, 0,40 ммоль) в ЭМР (1,5 мл) и ОГРЕА (0,25 мл, 1,4 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли МеОН и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(З,1З,1'З)-2,2'-((1К,1'К,3З,3'З,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Нимидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((З)-тетрагидро-2Н-пиран-3ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (148,5 мг) в виде светло-желтого твердого вещества. Время удержания ЬСМЗ = 1,61 мин; т/ζ = 847 [М+Н]+. (Колонка: ΡНΒNΟΜΒNΒX® Ьипа 3,0x50 мм З10. Растворитель А = 90% воды:10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды :90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). Ή ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ м.д. 7,80-7,91 (т, 10 Н), 5,13 (άά, 1 = 9,3, 7,0 Гц, 2 Н), 4,79 (ά, 1 = 8,3 Гц, 2 Н), 3,84-3,97 (т, 2 Н), 3,70 - 3,80 (т, 4 Н), 3,68 (8, 6 Н), 3,52-3,63 (т, 2 Н), 3,343,42 (т, 2 Н), 2,61 - 2,75 (т, 2 Н), 2,43-2,54 (т, 2 Н), 1,98 - 2,15 (т, 4 Н), 1,67-1,84 (т, 4 Н), 1,48-1,65 (т, 4 Н), 0,98 -1,16 (т, 2 Н), 0,77-0,93 (т, 2 Н).

Пример ΖΥ1.

NСЗ (8,2 мг, 0,061 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(З,1З,1'З)-2,2'((1К,1'К,3З,3'З,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0] гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1 -((З)-тетрагидро-2Н-пиран-3 -ил)этан-2,1 -диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ1, стадия а) (33 мг, 0,031 ммоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(З,1З,1'З)-2,2'-((1К,1'К,3З,3'З,5К,5'К)-3,3'-(4,4'(бифенил-4,4'-диил)бис(5-хлор-1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2оксо-1-((З)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ1) (25 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-МЗ = 1,92 мин; т/ζ = 458 [М/2+Н]+. (Колонка: ΡНΒNΟΜΒNΒX® Ьипа 3,0 x50 мм З10. Растворитель А = 95% воды/ 5% метанола/10 мм ацетата

- 122 020815 аммония. Растворитель В = 5% воды/ 95% метанола/10 мм ацетата аммония. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 2 мин. Длина волны = 220). Ή ЯМР (400 МГц, \1е01)) δ м.д. 7,77 - 7,85 (т, 8 Н), 5,03 (άά, I = 8,8, 6,0 Гц, 2 Н), 4,75 - 4,86 (т, 2 Н), 3,71 - 3,89 (т, 6 Н), 3,67 (5, 6 Н), 3,36 - 3,62 (т, 4 Н), 2,38 - 2,57 (т, 4 Н), 1,94 - 2,12 (т, 4 Н), 1,69 1,87 (т, 4 Н), 1,46 - 1,65 (т, 4 Н), 1,03 -1,17 (т, 2 Н), 0,77 - 0,85 (т, 2 Н).

Пример ΖΥ2, стадия а

НАТИ (140 мг, 0,37 ммоль) добавляли в раствор соли НС1 4,4'-бис(2-((1К,38,5К)-2-азабицикло [3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила (соединение согласно примеру 1е) (100 мг, 0,17 ммоль) и (8)-2-(метоксикарбониламино)-2-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (сар 117Ь) (80 мг, 0,37 ммоль) в ЭМР (1,5 мл) и Э1РЕА (0,23 мл, 1,3 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(К,18,1'8)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-бифенил-4,4'-диил)бис(1Нимидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ2, стадия а) (76,2 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,53 мин; т/ζ = 847 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕN0МЕNЕX® Ьипа 3,0x50 мм 810. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды: 90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). ¹Н ЯМР (400 МГц, Ме0Э) δ м.д. 7,75-7,96 (т, 10 Н), 5,13 (άά, I = 9,3, 7,0 Гц, 2 Н), 4,60 (ά, I = 8,3 Гц, 2 Н), 3,77-3,95 (т, 6 Н), 3,67 (5, 6 Н), 3,24-3,47 (т, 4 Н), 2,62-2,76 (т, 2 Н), 2,40-2,57 (т, 2 Н), 1,97-2,19 (т, 4 Н), 1,54-1,82 (т, 6 Н), 1,36-1,54 (т, 2 Н), 1,001,17 (т, 2 Н), 0,79-0,93 (т, 2 Н).

Пример ΖΥ2.

NС8 (5,2 мг, 0,039 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(К,18,1'8)-2,2'-((1К,1'К,38, 3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2диил))бис(2-оксо-1-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3 -ил)этан-2,1 -диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ2, стадия а) (21 мг, 0,020 ммоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂0-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(К,18,1'8)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил4,4'-диил)бис(5-хлор-1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил)) бис(2-оксо-1-((К)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ2) (10,8 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,92 мин; т/ζ = 458 [М/2 + Н]+. (Колонка: ΡНЕN0МЕNЕX® Ьипа 3,0x50 мм 810. Растворитель А = 95% воды/ 5% метанола/10 мм ацетата аммония. Растворитель В = 5% воды/ 95% метанола/10 мм ацетата аммония. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 2 мин. Длина волны = 220). ^!Н ЯМР (400 МГц, \1е01)) δ м.д. 7,76-7,87 (т, 8 Н), 5,04 (άά, I = 8,8, 6,0 Гц, 2 Н), 4,61 (ά, I = 8,3 Гц, 2 Н), 3,75-3,95 (т, 6 Н), 3,66 (5, 6 Н), 3,35-3,48 (т, 4 Н), 2,39-2,58 (т, 4 Н), 1,97-2,16 (т, 4 Н), 1,73-1,87 (т, 2 Н), 1,40-1,73 (т, 6 Н), 1,01-1,16 (т, 2 Н), 0,81 (ά, I = 1,8 Гц, 2 Н).

Пример ΖΥ3

Пример ΖΥ3, стадия а

НАТИ (82 мг, 0,22 ммоль) добавляли в раствор соли НС1 4,4'-бис(2-((1К,38,5К)-2-азабицикло

- 123 020815 [3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила (соединение согласно примеру 1е) (58,3 мг, 0,098 ммоль) и (К)-2-(метоксикарбониламино)-2-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (сар 117с) (49 мг, 0,23 ммоль) в ЭМР (1 мл) и □(РЕА (0,14 мл, 0,79 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂0-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(К,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((К)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ3, стадия а) (79,8 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,63 мин; т/ζ = 847 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕNОΜЕNРX® Ьипа 3,0х50 мм 810. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды:90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220).

Пример ΖΥ3.

NС8 (6,7 мг, 0,050 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(К,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8, 5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2диил))бис(2-оксо-1-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ3, стадия а) (27 мг, 0,025 ммоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂0-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(К,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'диил)бис(5-хлор-1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((К)тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ3) (15,8 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,93 мин; т/ζ = 458 [М/2 + Н]+. (Колонка: РНЕNОΜЕNРX® Ьипа 3,0х50 мм 810. Растворитель А = 95% воды/ 5% метанола/10 мм ацетата аммония. Растворитель В = 5% воды/ 95% метанола/10 мм ацетата аммония. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 2 мин. Длина волны = 220).

НАТи (75 мг, 0,20 ммоль) добавляли в раствор соли НС1 4,4'-бис(2-((1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0] гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила (соединение согласно примеру 1е) (53,5 мг, 0,090 ммоль) и (К)2-(метоксикарбониламино)-2-((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)уксусной кислоты (сар 117ά) (45 мг, 0,21 ммоль) в ЭМР (1 мл) и □(РЕА (0,13 мл, 0,72 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н, фильтровали и очищали преп ВЭЖХ (Н₂0-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(8,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((8)-тетрагидро2Н-пиран-3 -ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ4, стадия а) (78,5 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,57 мин; т/ζ = 847 [М+Н]+. (Колонка: РНЕNОΜЕNРX® Ьипа 3,0х50 мм 810. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды :90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220).

Пример ΖΥ4.

NС8 (9,2 мг, 0,069 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(8,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо1-((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ4, стадия а) (37 мг, 0,034 ммоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли Ме0Н, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂0-Ме0Н с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(8,1К,1'К)-2,2'-((1К,1'К,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(5-хлор-1Н-имидазол-4,2диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-((8)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил) дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ4) (25 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М8 = 1,93 мин; т/ζ = 458 [М/2+Н]+. (Колонка: ΡНЕNОΜЕNРX® Ьипа 3,0х50 мм 810. Растворитель А = 95% воды/ 5% метанола/10 мм ацетата аммония. Растворитель В = 5% воды/ 95% метанола/10 мм ацетата аммония. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 2 мин. Длина волны = 220).

- 124 020815

NС§ (5,3 мг, 0,039 ммоль) добавляли в раствор соль ТРА диметил-(§,1§,1'§)-2,2'-((1К,1'К,3§,3'§, 5К,5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2диил))бис(2-оксо-1-((§)-тетрагидро-2Н-пиран-3 -ил)этан-2,1 -диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ1, стадия а) (42,4 мг, 0,039 ммоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н2О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соединения согласно примеру ΖΥ5 в виде соли ТРА (11,7 мг, белое твердое вещество). Время удержания ЬС-М§ = 2,04 мин; т/ζ = 881 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕNОМЕNЕX® Ьипа 3,0x50 мм §10. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды:90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны =220). ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ м.д. 7,767,92 (т, 9 Н), 5,13 (άά, I = 9,2, 6,9 Гц, 1 Н), 5,04 (άά, I = 8,0, 6,5 Гц, 1 Н), 4,74-4,80 (т, 2 Н), 3,71-3,94 (т, 6 Н), 3,68 (5, 3 Н), 3,67 (5, 3 Н), 3,36 - 3,63 (т, 4 Н), 2,63-2,75 (т, 1 Н), 2,40-2,55 (т, 3 Н), 1,95-2,15 (т, 4 Н), 1,67-1,86 (т, 4 Н), 1,45-1,65 (т, 4 Н), 1,03-1,18 (т, 2 Н), 0,84 - 0,91 (т, 1 Н), 0,75 - 0,83 (т, 1 Н).

NС§ (1,1 мг, 8,4 мкмоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(К,1§,1'§)-2,2'-((1К,1'К,3§,3'§,5К, 5'К)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил)) бис(2-оксо-1-((К)-тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)этан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ2, стадия а) (8,1 мг, 8,4 мкмоль) в ЭМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА согласно примеру ΖΥ6 (2,2 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М§ = 2,01 мин; т/ζ = 881 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕNОМЕNЕX® Ьипа 3,0x50 мм §10. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды: 90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ м.д. 7,77-7,90 (т, 9 Н), 5,12 (άά, I = 9,2, 6,9 Гц, 1 Н), 5,05 (άά, I = 7,9, 6,1 Гц, 1 Н), 4,58-4,96 (т, 2 Н), 3,71-3,94 (т, 6 Н), 3,68 (5, 3 Н), 3,66 (Ьг. 5., 3 Н), 3,34-3,46 (т, 4 Н), 2,64-2,75 (т, 1 Н), 2,40-2,54 (т, 3 Н), 1,96-2,16 (т, 4 Н), 1,40-1,85 (т, 8 Н), 1,04-1,18 (т, 2 Н), 0,84-0,92 (т, 1 Н), 0,79 (т, 1 Н).

НАТИ (95 мг, 0,25 ммоль) добавляли в раствор соли НС1 4,4'-бис(2-((1К,3§,5К)-2-азабицикло[3.1.0] гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила (соединение согласно примеру 1е) (67,6 мг, 0,114 ммоль) и (§)4-метокси-2-(метоксикарбониламино)бутановой кислоты (пример ΖΥ7, стадия а) (50 мг, 0,26 ммоль) в ЭМР (1 мл) и ОГРЕА (0,16 мл, 0,91 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(2§,2'§)-1,1'-((1К,1'К,3§,3'§,5К,5'К)-3,3'-4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Нимидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло [3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(4-метокси-1 -оксобутан-2,1 -диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ7, стадия а) (96,4 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-М§ = 1,53 мин; т/ζ 795 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕNОМЕNЕX® Ьипа 3,0x50 мм §10. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды:90% метанола: 0,1%

- 125 020815

ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОБ) δ м.д. 7,78-7,97 (т, 10 Н), 5,16 (άά, 1 = 9,2, 6,7 Гц, 2 Н), 4,76-4,83 (т, 2 Н), 3,75-3,84 (т, 2 Н), 3,66 (к, 6 Н), 3,45-3,56 (т, 4 Н), 3,32 (к, 6 Н), 2,68 (άά, 1 = 13,4, 9,4 Гц, 2 Н), 2,42-2,53 (т, 2 Н), 2,01-2,23 (т, 4 Н), 1,80-1,95 (т, 2 Н), 1,05-1,18 (т, 2 Н), 0,78-0,98 (т, 2 Н).

Пример ΖΥ7.

NСЗ (9,7 мг, 0,073 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(2З,2'З)-1,1'((1Р,1'Р,3З,3'З,5Р,5'Р)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0] гексан-3,2-диил))бис(4-метокси-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ7, стадия а) (29 мг, 0,036 ммоль) в БМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% буфером ТРА) с получением соли ТРА диметил-(2З,2'З)-1,1'-(1Р,1'Р,3З,3'З,5Р,5'Р)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(5хлор-1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло [3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(4-метокси-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ7) (7,9 мг) в виде белого твердого вещества. Время удержания ЬС-МЗ = 2,51 мин; т/ζ = 863 [М+Н]+. (Колонка: ΡНЕNΟΜЕNЕX® Ьипа 3,0х50 мм З10. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В = 10% воды: 90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. В начале программы % В = 0. В конце программы % В = 100. Время градиента = 3 мин. Длина волны = 220). ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОБ) δ м.д. 7,82 (к, 8 Н), 5,07 (άά, 1 = 8,5, 5,8 Гц, 2 Н), 4,75-4,83 (т, 2 Н), 3,70-3,76 (т, 2 Н), 3,66 (к, 6 Н), 3,44-3,54 (т, 4 Н), 3,32 (к, 6 Н), 2,39-2,57 (т, 4 Н), 1,98-2,21 (т, 4 Н), 1,82-1,94 (т, 2 Н), 1,05-1,19 (т, 2 Н), 0,78-0,92 (т, 2 Н).

NСЗ (5,6 мг, 0,042 ммоль) добавляли в раствор соли ТРА диметил-(2З,2'З)-1,1'((1Р,1'Р,3З,3'З,5Р,5'Р)-3,3'-(4,4'-(бифенил-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0] гексан-3,2-диил))бис(4-метокси-1-оксобутан-2,1 -диил)дикарбамата (соединение согласно примеру ΖΥ7, стадия Ь) (33,3 мг, 0,042 ммоль) в БМР (1 мл) и смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли МеОН, фильтровали и очищали преп. ВЭЖХ (Н₂О-МеОН с 0,1% ТРА буфером) с получением соли ТРА согласно примеру ΖΥ8 (9,4 мг) в виде белого твердого вещества. Время удерживания ЬС-МЗ = 1,99 мин; т/ζ = 829 [М+Н]+ (Колонка: ΡНЕNΟΜЕNЕX® Ьипа 3,0х50 мм З10. Растворитель А = 90% воды: 10% метанола: 0,1% ТРА. Растворитель В =10% воды:90% метанола: 0,1% ТРА. Скорость потока = 4 мл/мин. Начало % В = 0. Конец % В = 100. Время градиентного элюирования = 3 мин. Длина волны = 220). ^!Н ЯМР (400 МГц, МеОБ) δ м.д. 7,77-7,91 (т, 9 Н), 5,15 (άά, 1 = 9,2, 6,7 Гц, 1 Н), 5,07 (ί, 1 = 7,0 Гц, 1 Н), 4,77-4,83 (т, 2 Н), 3,76-3,83 (т, 1 Н), 3,68-3,75 (т, 1 Н), 3,66 (к, 6 Н), 3,44-3,56 (т, 4 Н), 3,33 (к, 6 Н), 2,63-2,75 (т, 1 Н), 2,41-2,56 (т, 3 Н), 1,97-2,23 (т, 4 Н), 1,80-1,95 (т, 2 Н), 1,06-1,19 (т, 2 Н), 0,87-0,96 (т, 1 Н), 0,84 (т, 1 Н).

Биологическая активность

В настоящем раскрытии использовали анализ репликона и получали, проводили и рассматривали, как описано в одновременно находящейся на рассмотрении заявке РСТ/иЗ 2006/022197 и у О'Воу1е еί а1., АпЦписгоЬ. Адепк СЬетоШет., 49(4): 1346-1353 (Арг. 2005). Как было описано, также использовали способы анализа, включающие репортеры люциферазы (АраОтсот).

Для определения описанной в настоящий момент группы соединений использовали клетки с репликоном НСУ-пео и клетки с репликоном, содержащим определяющие резистентность замены в области №5А. Было определено, что соединения характеризуются различными степенями понижения ингибирующей активности на клетки, содержащие мутации, относительно соответствующей ингибирующей силы против клеток дикого типа. Таким образом, соединения по настоящему описанию могут эффективно ингибировать функцию белка №5А НСУ, и их признавали столь же эффективными в комбинациях, как ранее было описано в заявке РСТ/иЗ 2006/022197 и в \УО 04/014852 того же заявителя. Следует понимать, что соединения по настоящему описанию могут ингибировать множество генотипов НСУ. В табл. 2 представлены значения ЕС₅₀ (эффективная 50% ингибирующая концентрация) характерных соединений по настоящему описанию относительно НСУ 1Ь генотипа. Согласно одному варианту осуществления соединения по настоящему описанию являются ингибирующими относительно генотипов 1а, 1Ь, 2а, 2Ь, 3а, 4а и 5а. Значения ЕС₅₀ относительно НСУ 1Ь следующие. Значения ЕС₅₀ относительно НСУ 1Ь представляют собой: А = 0,2 пМ - <1 пМ; В = 1 пМ - <10 пМ; и С = 10 пМ -< 100 пМ; и Б = 100 пМ0,15 мкМ.

Соединения по настоящему описанию могут ингибировать НСУ посредством дополнительных механизмов, помимо ингибирования №5А, или отличных от них. Согласно одному варианту осуществления соединения по настоящему описанию ингибируют репликон НСУ, а согласно другому варианту осуществления соединения по настоящему описанию ингибируют Ν85Ά.

- 126 020815

Таблица 2

Пример	ЕС50 (мкМ)	ЕСзо-диапазон
М1		В
М2		В
М4		В
М5		В
Мб	4.08Е-06	В
М7	2ДЗЕ-06	В
VI		В
У2	8.88Е-05	С
УЗ		В
У4	3.22Е-05	С
У5	6,58Е-07	А
У5,1	3,90Е-06	В
У5,2	3,0бЕ-05	С
У5,3	1,ЗЗЕ-04	э
У6		А
У7		В
ν$		В
У9	2,70Е-06	В
νιο		В
VII		В
νΐ2		В
νη		в
У14		в
νΐ5		с
νΐό	9.66Е-07	А
Θ\νΐ-1		В
ΟΛνΐ-2		В
ΟΑΥ1-3		В
θ\Υ2		в
Θ\ν2-1	1,27Е-05	с
<ЖЗ		в
Ο\Υ4		с
Ο\Υ5		в
Ο\Υό		в
СЛУ7		в
ο\νδ		в
0ΛΥ9		А
ο\νιο		В
Ολνΐΐ		А
Ο\νΐ2		А
ОЫ	3,0бЕ-06	В
ОЬ2		в

ОЬЗ		В
ОЬ4		в
ОЬ5		в
ОЬб		в
ОЬ7		в
ОЬ8	2.09Е-04	ϋ
ОЬ9	6,08Е-06	в
ОЫО		ϋ
ОЫ1		в
ОЬ12		с
ОЬ13		в
ОЫ4		с
ОЫ5		в
ОЫ6		с
ОЬ17		в
ОЬ18		в
ОЬ19		с
ОЬ20		ϋ
ОЬ21		с
ОЬ22	4,08Е-04	ϋ
ОЬ23		э
ОЬ24		в
ОЬ25		ϋ
ϋδΐΈ-ι		А
ΏδΊΈ-2		с
Р8ТЬ-3	1,25Е-06	в
О8ТЬ-4		А
Ώ8ΊΈ-5	5,59Е-07	А
ΏδΙΓ-6		в
Р8ТЬ-7		в
ΏδΊΈ-8		А
ΏδΊΈ-9		в
П5ТЬ-10		В
ΏδΊΈ-Π		А
Р8ТЬ-12		С
ЯК-1		В
ЯК-2		В
ЯК-3		А
ЯК-4	7,69Е-07	А
ЯК-5		В
ΖΥ1		В
ΖΥ2		В
ΖΥ3		В
ΖΥ4		в
ΖΥ5		в
ΖΥ6	1,08Е-05	с
ΖΥ7		в
ΖΥ8		в

- 127 020815

Специалисту в настоящей области техники будет понятно, что настоящее раскрытие не ограничено вышеупомянутыми иллюстративными примерами, и что оно может включать в себя другие конкретные формы без отклонения от его обязательных признаков. Следовательно, необходимо, чтобы примеры во всех отношениях рассматривали в качестве иллюстративных и неограничивающих, со ссылкой на приложенную формулу изобретения, а не на вышеупомянутые примеры, и подразумевается, что здесь охвачены все изменения, которые пребывают в пределах значения и диапазона эквивалентности формулы изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, где п равно 0,1 или 2;

Х выбирают из водорода, циано, галогена циклопропила, циклопропилметила, 1-метилциклопропила, аллила, 1-метилпиразол-5-ила, 1-метилимидазол-5-ила и изоксазол-4-ила;

К¹ представляет собой водород;

К² выбирают из водорода, циклопропила и галогена; или

К¹ и К² вместе образуют -СН=СН- или -СН=СС1-;

при условии, что по меньшей мере один из Х и К² не обозначает водород;

каждый К³ представляет собой метил или два К³ в положениях 3 и 4 пиролидинового кольца вместе с атомами углерода пиролидинового кольца образуют циклопропановое кольцо;

каждый К⁴ независимо выбирают из третбутоксикарбонила, ацетила и ^(С’-С₂)алкоксикарбониламино(С2-С5)алканоила, где (С2-С5)алканоильный фрагмент может быть замещен 1-2 группами метокси или радикалом, выбранным из группы, включающей гидрокси, циклопропан, циклобутил, 4,4дифторциклогексил, тетрагидропиран-4-ил, 2,6-диметилтетрагидропиран-4-ил.
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где Х представляет собой галоген.
3. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где К² представляет собой галоген.
4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К’ и К² вместе образуют -СН=СС1-.
5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где Х представляет собой водород.