BG100699A - Карбоциклични съединения - Google Patents

Abstract

Съединения с формула, в която z означава тетрахидро-пираногрупа, избрана между които имат противогъбична активност, методи за тяхното получаване и използване в медицината.

Description

Изобретението се отнася до нови производни на сордарина, които притежават противогъбична активност,до методи за тяхното получаването фармацевтични състави,които ги съдържат и до тяхното използване в медицината,по-специално за профилактика или лечение на заболявания на животни,включително хора,причинени от гъбични инфекции .

Британски патент № 1,162,027 описва получаването на антибиотик, SL 2266,посредством култивирането на вида NRRL 3196 от рода гъбички Sordaria araneosa . SL 2266,наречен по-късно сордарин,притежава фунгистатична активност.Същата изследователска група описва също в Helvetica Chimica Acta (1971),51 , 119-120 разграждането на сордарина до сордарицин.Публикуваното описание на Японски патент № J 6 2040292А разкрива получаването на антибиотик,зофимарин, за който се съобщава,че притежава противогъбична активност.

Сордаринът,сордарицинът ^зофимаринът могат да бъдат представени с формула (А),по-долу:

описва сордарин;

(А)

когато OR означава ОН описва сордарицин; и когато OR означава
	OCOCH=ZCH-CH = ьснсн3
	Ύ	9 ''S	,0СН3 Ί
	Λ	ох	\ сн3	описва зофимарина.

Макар,че сордаринът и зофимаринът проявяват противогъбна активност,двете съединения са умерено активни и притежават ограничен спектър на действие при тест със серия от фунги.Тук е описана нова група фунгицидни производни на сордарина,която притежава атлична противогъбна активност и широк спектър на действие. Така, съгласно първия аспект на изобретението,са осигурени съединения с формула (I):

(I) в която Z означава тетрахидро-пирано група,избрана от следните:

3

R R

/б) и техните фармацевтично приемливи соли и солвати(напр,хидрати) или техните метаболитно-неустойчиви производни, в която к означава водорд,халоген,хидроксил, алкокси или ацилокси;

R и R могат независимо един от друг да означават водород, алкил или алкокси,алкил или R и R могат заедно да означават с въглеродния атом,към който са прикрепени,С=0, C=S или С_{7 0} циклоалкил;

, з “ о уу

R означава водород или CH_?R (където R означава водород,хидрок^z 8 8 сил,С^_^ алкокси или група като OCOR , в която R означава алкил или арил);

r5 и r6 могат независимо един от друг да означават водород, алкил или алкокси,алкил или R⁵ и R& заедно с въглеродния атом,към който са прикрепени,могат да означават C=O,C=S , или Cj_g циклоалкил;

п означава нула или 1;

X и У могат независимо един от друг да означават кислород,сяра,

10 9 10 или CR R (където R и R могат независимо един от друг да означават водород,С, , алкил,С, . алкокси или С_п_.алкоксиС, .

10 ^1-0 алкил или R и R могат заедно с въглеродния атом,към който са прикрепени,да означават С=О,С= ,С_{Х я} циклоалкил или OCHR^ , ^ύ ° където R означава водород или алкил); или когато X и У означават кислород и п означава нула,тогава съответно групите -y-CR^R³ или -X- Cr2r³- могат също да означават -N=CR³- или -Nr12-Cr2r3_ (_{където и 03начават} с=о и R^^ означава

13

С_халкил ,ацилна група COR ,където R означава алкил) или когато У означава кислород и п означава нула X може да означава групата CrU (където R^ има посочените по-горе значения), • · · · · • · · · ♦ • · · · · · · • · · · • · ·

-4която е прикрепена към пирановия пръстен с двойна връзка; R¹⁵ означава водород,халоген,азидо група,алкил,хидрокси, (по желание заместена с 1 или2 хидрокси или кеталС, с. алкокси 1-о с 1 или 2 алкокси групи),арилС^_^алкокси,

18 алкенилокси,група OCOR (където R означава арилС^^алкокси или _ιθ алкилна група,по желание съдържаща една или две двойни връзки) или алкоксикарбонил алкокси, и R^ означава водород или r!5 и R^ могат заедно с въглеродния атом,към който ни групи или

са прикрепени да означават С=0 или ОС^;

19 19

R означава C^R , където R означава водород,хидроксил,С^

20 алкокси или група OCOR ,в която R означава алкил);и

W означава кислород или сяра или групата ;

и пунктираната линия в групата с формула (а) означава присъствието , по желание, на допълнителна връзка;

Подходящите фармацевтично-приемливи соли на съединенията с формула (I) включват соли с неорганични основи,такива като соли на алкални метали(например натриева и калиева сол) и амониевата сол и соли с органични бази.Подходящите соли с органични бази включват соли с амини,такива като триалкиламин(напр.триетилами),диалкиламин(напр. дициклохексиламин),по желание бензиламин (напр.фенилбензиламин или р-бромобензиламин),прокаин,етаноламин, диетаноламин,II-метилглюкозамин и три(хидроксиметил)метиламин и соли с амино киселини (напр. лизин-и аргининови соли).

Понататък означението съединение с формула(1) включва съединението и неговите фармацевтично приемливи соли.

Други соли,които не са фармацевтично-приемливи, могат да бъдат полезни при получаването на съединенията с формула (I) и тези форми представляват допълнителен аспект на изобретението .

Метаболитно неустойчивите производни на съедине-

-5ния,от формула (I) са съединения,които в човешкото тяло се превръщат в съединения от формула (I).Примери за такива производни включват обичайните метаболитно неустойчиви естери,образувани от свободната карбоксилова киселина в молекулата.

Трябва да се разбира,че изобретението включва в обхвата си всички изомери,включително оптическите изомери,на съединенията с формула (I),посочена по-горе,като и техните смеси, включително пълните или частични техни рацемични смеси.

Както е използван,тук терминъталкил означава група или част от алкокси група и може да бъде с права или разклонена верига.Подходящите примери включват метил,етил,н-пропил,изо-пропил,н-бутил,сек.-бутил и трет.-бутил,н-хексил и н октил.

Както е използван тук,терминът арил като група или част от група означава фенил или хетероарил,всеки от които може по желание да е заместен с един или повече атоми (напр.1,

илиЗ) или групи,избрани от халоген,хидроксил,С^_^ алкил,С^ алкокси илиС^ ^алкокси карбонил.Хетероарилната група може да представлява 5- или 6-членен хетероатомен пръстен,съдържащ един или повече хетероатома,избрани от азот,кислород и сяра.Подходящи те примери за хетероарилни групи включват пиридил,фурил,тиенил, или пиролил.

Терминът халоген означава флуор,хлор,бром или йод.

Когато r! означава ацилокси група,може да представ13 13 лява например група OCOR ,в която R има посочените по-горе значения .

Примерите за C^g циклоалкилни групи включват циклопентил и циклохексилни групи.

Примерите за X групи включват кислород, CR^R^O

10 където R и R означават поотделно водорд,С^ алкокси или д алкил или Cr9r10 означава групата С=О или C=CHR·'’^ ,напр. С= СН£,или X означава CR^^.

Примерите за подходящи У групи включват кислород

10 9 или CR R ,където R означава водород,С^_далкокси или С^^алкил и r10 означава водород или С^^алкил.

Когато R означава ненаситена алкилна група, по-специално може да означава C^g алкилна група с права или раз7 Е клонена верига,съдържаща две двойни връзки,например -СН- СН-СН=

снсн₃.

Когато r!5 означава ^алкокси група,заместена с хидрокси или алкокси,може да представлява примерно 2,3-дихидрок си пропокси и произхождащата от него ацетон кетална форма или

2,3-диметокси-пропокси група.

за предпочитане означава водроден атом,когато R^e в <Х-конфигурация.

r! може да означава,например,водороден атом или хид-

роксилна група.

R може да означава,например,водрод или алкил (напр.метил), и R може да означава,напр.,водород,алкил(напр. метил,етил или н-пропил) или _^алкоксиС₁_^алкил(напр.,метокси2 3 етил) или CR R може да означава C=O,C=S , или С^_дциклоалкил (напр. циклопентил).

R може да означава,например метил или ^алкоксиметил(напр. метоксиметил).

r5 и r6 могат независимо един от друг да означават, например водород или С-^ ^алкил (напр. метил).

Примери за пръстенни системи представени с формулата:

Примерите за специфични групи включват халоген, (напр. флуор), азидо хидроксил, ^алкокси,бензилокси,бензилоксикарбонилокси,^алкоксикарбонилокси и _^алкоксиС^_^алкокси (например , мето ксието кси) ,С^^алкоксикарбонил-С^_^алкокси,С^_^алкилкарбонилокси,2,3-дихидрокси пропокси,и техните ацетон кетални фор ми , 2 , 3-диметокси пропокси,С2_^алкенилокси,напр.алилокси или З-метил

-1 Г -I /Г алилокси или R¹ и R¹ заедно с въглеродния атом,към който са при

крепени означават С=0 или С=СН£.

R може да означава,например метил или алкоксиметил(напр. метоксиметил) или хидроксиметил.

rIS за предпочитане означава ^алкокс,С^_далке4 4 нилокси,бензилокси или OCOR (където R означава алкилна група) ,по-специално разположена в «/.-конфигурация.

«17

R за предпачитане означава метил.

VV за предпочитане означава кислород.

Специфична група съединения,съгласно изобретението, са съединенията с формула (I) ,в която Z означава групата:

или

където един от двата заместителяХ или У означава кислород или групата CR^R^? В тези групи по-специално R^ означава хидроксил

109 или водород;Х означава кислород,или CR R ,където R означава водород,j алкокси,^алкил и R^® означава водород или CR^R^

119 означава групата С=0, или C=CHR ; У означава кислород или CHR ,

23 където R означава водород или С^ ^алкил^ и R независимо един от друг означават водород,С^^алкил,напр. метил,пропил или алкокси алкил,напр. метоксиметил или R и R заедно с въглерод ния атом,към който са прикрепени,означават циклопентилна група или групата С=0 или С=S ;R^ и R^ поотделно за предпочитане озна

чават водород.

Когато r! означава хидроксил или алкокси,R^ частта за предпочитане е разположена в аксиална конфигурация.Обаче r! за предпочитане означава водород.

3

Всеки един от R и R може поотделно да означава водород или С^_^алкил.

R за предпочитане означава метил.

r5 и r6 за предпочитане означават водород.

п за предпочитане означава нула.

Специфичната пръстенна система,представена с формулата:

·· ···· • · ·· ···· • ·

3 където R и R имат посочените по-горе значения и X и У независи9 10 9 10 мо един от друг означават кислород или CR R (където R и R вече посочените значения),при условие,чепоне един от X и У озна-

чава кислород или пръстена: СН_О

СН0

I!i

При пръстенната система:

предпочитаните пръстени са онези,в които единият от X и У озна9 10 910 чава кислород а другият означава CR R (където R и R незави

симо един от друг означават водород или С^^алкил(напр. метил)

10 или CR R означава групата С=0 или С=СН₂) или X и У едновремен2 3 но означават кислород^ и R означават водород,алкил или групата С=0.

Трябвя дя се разбира,че изобретението обхваща всички комбинации на специфичните и предпочитани групи,описани по-го ре.

Друга специфична група от съединенията,съгласно изобретението ,са съединенията с формула (1),в която / означава група (а) и където R^03Ha4aBa водород , R^ означава метил_£ п означава нула и R и R означават водород или С^_₄алкил,Хи У означават кислород или У означава кислород и X означава групата

CHR ,където R означава водород или С₁₄алкил,С=О,С=СН₂ или X означава СН,У означава кислород,п означава нула и R и R озна• · • · · · • · • ·

чават водород.

Друга специфична група съединения,съгласно изобретението,са съединенията с формула (I),в която X означава групата (б)

итехните фармацевтично-приемливи соли и солвати(напр.хидрати), където VV означава кислород или сяра и означава група,изб4 4 рана от С^_далкокси,бензилокси или OCOR (където R означава ^1-4^{алкилна г}РУ^па>^напР· изопропил),или алкенилокси,С^ алкоксикарбонилокси група.

Специфичните съединения,съгласно изобретението, включват:

/lR-(lc<, За β , 4 В ,4а ίζ 7В ,7аВ ,8аВ )/ 8а-/( 1 S ,7R,9R)-2,8-Диокса9-метил-4-метилен-цис-бицикло (3.4.0)-нон-7-ил-окси-метил/-4-

формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина.

/1R-(1</ ,3а В ,4 β ,4а β ,7 β ,7ао< ,8а β )/ 8а-/(2,6-дидеокси-З , 4 -0-изопропилиден- β - D-алопиразонилокси)метил/-4-формил-4,4а,5, 6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3(1-метилетил)-1,4-метано- s -инда цен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/1R-(1 с/, За β , 4 β , 4а β , 7 β , 7а<Х, 8а β ) / 8a-/( 1 S , 4R, 7R, 9R) - 2,8

-диокса-4,9-диметил-цис-бицикло(3.4.0)-нон-7-ил-окси-метил/-4формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4 -метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/1 R -(1</ ,3а В ,4 6 ,4а β ,7 β , 7а е/, 8а β )/ 8а/(IS ,4 S ,6R,8R)-2,7диокса-4,6-диметил-цис-бицикло(3.4.0)-нон-8-ил-окси-метил/-4-

-11формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4 -метано-5-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/1 R-(lo(,3a В,46 ,4а6 ,76 ,7а<£,8а6 )/ 8а-/(2,3-анхидро-6-деок си-4-0-пропил- 6- 0-манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6, 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/1R (lot ,3а6 ,4 6,4а6 ,76 ,7a<Z,8a6 )/ 8а-/( 2,3-анхидро-6деок^метил си-4-О-0-Б-манопиранозилоксиметил)-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-

октахидро-7-метил-3(1-метилетил)-1,4-метано- з-индацен-За(1Н)карбоксилова киселина;

и техните фармацевтично-приемливи соли и солвати(напр. хидрати) или неустойчивите им метаболитни производни.

Съединенията с формула (1) са много активни фунги-

циди,полезни в борбата с гъбични инфекции при животни,включително хора.Например,те могат да се използват при лечение на гъбични инфекции,причинени от организми,такива като видовете _ Candida /е.g.Candida albicans, Candida glabrata, (Torulopsis glabrata),Candida tropicalis6 Candida parapsilosis , Candida pseudotropicalis,Cryptococcusneoformans,Pmeumocystis carinii,Aspergillus Sp. (e.g. Aspergillus fumigatus and Aspergillus flavus),Coccidioides immitis)6Paracoccidioides brasiliensis),Histoplasma (e.g. Histoplasma capsulatum) ,Blastomices (e.g. Blastomices dermatitidis)'.Те могат също да бъдат използвани за лечение на гъбични инфекции,причинени от други видове на Candida,Trichophyton,

Microsporum,Epidermophyton (e.g.Trichophyton mentographytes, Trichophyton rubrum,Microsporum canis,Epidermophyton flfccosum или мукозни инфекции,причинени от Candida albicans .

Съединениета с формула (I) могат също да се използват за лечение на инфекции,причинени от видовете на нишковидни фунги,такива като

Geotrichum ( e.g. Geotrichum clavatum),Trichosporum (e.g.Trichosporum beigelii), Blastoschizomyces (e. g.Blastoschizomyces capitalis), Sporothrix(e.g. Sporothrix schenckii), Scedosporium (e.g. Scedosporium apioaperum),Cladosporium ,(e.g.Cladosporium carrionii), Pityrosporum ovale .

Съединенията c формула (I) могат също да се използват за лечение на инфекции,причинени от протозои,такива като

Toxoplasma, Cryptosporidium,Leishmania,Tripanosoma,Giardia,

Trichomonas .

Оценяванетотп vitro на противогъбичната активност на съединенията ,съгласно изобретението,се осъществява в течна или твърда среда посредством методиката на противо-гъбично двукратно серийно разреждане,до определянето на минималната инхибираща концентрация (MIC) на противо-гъбичните средства,които инхибират развитието нарастежа след 24 до 48 часа инкубиране при37°С.На практика, серия от блюда с агар или плочи за многократно разреждане на хранителната среда,съдържащи двукратни разреждания на изследваното противогъбично средство,се заразяват със стандартна култура на клинично откривани патогени,например,кандида албиканс. След това блюдата с агара или плочите за многократно разреждане се изследват за отсъствие или наличие на растеж на фунги и съответните стойности за MIC се записват.

MFC стойностите (определени като най-ниската противогъбична концентрация,която унищожава най-малко 99.9% от първоначалния инокулум в течна среда) също могат да бъдат определени посредством субкултивиране 0.01 и 0.1 микролитра хранителна средаот свободна от лекарство,контролна ямка,първата ямка,при която има растеж и всяка прозрачна ямка върху блюдата с агара.

Оценяването In VIVO на съединенията с формула (I) може да се осъществи посредством серийно въвеждане на различни дози(напр.,подкожно,орално, интраперитонеално или интравенозно) на мишки или плъхове,заразени с вида Кандида албиканс.

Животните,които не са лекувани умират в разстояние на 3 до 9 дни,а дозите в които изследваните съединения осигуряват 50%-тна защита от леталния изход на инфекцията,се записват.

От гледна точка на противо-гъбичната им активност, съединенията с формула (I) се препоръчват за лечение на различни гъбични инфекции при хора и животни.Такива инфекции включват по-

върхностни, кожни, подкожни и системни микотичнш инфекции,такива като инфекции на дихателните пътища,инфекции на стомашно-чрев ния тракт,кардиоваскуларни инфекции,инфекции на пикочната система, инфекции на централната нервна система,кандидиази и хронични мукокандидиази (напр. млечница и вагинална кандидиаза) и кожни инфекции,причинени от гъбички,кутанни и мукокутанни кандидиази, дерматофитози,включително трихофития и кел,атлетични крака,паронихия, питириазис версиколор,е ритразма,интертиго,кандида вулвитис,кандида балантис и външни отити.Те могат също да бъдат използвани като профилактични средства за предпазване от систем-

ни и локални гъбични инфекции.Използването им като профилактични средства може да е подходящо например,като част от подбран обеззаразителен режим за предпазване от инфекции на пациенти с разстроена имунна система (напр. пациенти със СПИН,пациенти,които са подложени на противораково лечение или пациенти с трансплантации).Предпазването от свръх растеж на гъбичките по време на лечение с антибиотици може също да се окаже желателно при някои болестни синдроми или иатрогенни състояния.

Доколкото е възможно това,за използване при терапията , съединенията , съгласно изобретението,могат да се въвеждат като чисто съединение,но за предпочитане е да присъстват като ·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · · · · • ···· · · · · ···· • ♦ ··· ·· · ···· · • · · · · · · · · ····· ·· · ·· · ·

активен инградиент във фармацевтичен препарат.Изобретението понататък осигурява също фармацевтичен състав,съдържащ съединения с формула(I) и техните физиологично-поносими соли заедно с един или повече фармацевтично-приемливи носители и по желание други терапевтични и/или профилактични инградиенти.Носителят/ите/ може да бъде приемлив” в смисъл,че е съвместим с другите инградиенти на състава и не влияе лошо на ресипиента.

Съставите,съгласно изобретението,включват онези, които са специално пригодени за орална,парентерална,имплатна,ректална,локална,офталмична или генито-уринарна употреба,или са подхо дящи за въвеждане по пътя на инхалиране или инсуфлиране.

Таблетките и капсулите за орална употреба могат да съдържат обичайните ексципиенти,такива като свързващи средства например,сироп от акация,желатен,сорбитол,трагакант,растителен клей от нишесте или поливинилпиролидон;пълнители,например лактоза, захар,микрокристална целулоза,царевично нишесте,калциев фосфат, или сорбитол;омасляващи средства,например магнезиев стеарат,сте-

аринова киселина,талк,полиетилен гликол или силициевдиоксид; средства,предотвратяващи слепването,например картофено нишесте или натриев нишестен гликолат или натриева кроскармелоза;умокрящи средства,такива като натриев лаурил сулфат.Таблетките,които включват таблетки за дъвчене,диспергиращи се таблетки и ефервесцен тни таблетки,могат да бъдат обвити по методите,известни в тази област на техниката.Течните орални препарати за орална употреба могат да бъдат под формата,например на водни или маслени суспензии,разтвори,емулсии,сиропи или елексири,или могат да представляват сух продукт,пригоден за използване с вода или друг подходящ носител,преди употреба.Такива течни препарати могат да съдър жат обичайните добавки,такива като суспендиращи средства.например сорбитол,сироп,метил целулоза,глюкоза/захарен сироп,желатин, • · · · · · • ·

-15хидроксиетил целулоза,карбоксиметил целулоза,алуминиев стеарат, под формата на гел или хидрирани едивни мазнини;емулгиращи средства,например лецитин,сорбитан моно-олеат или акация; неводни носители(които могат да включват едивни масла),например бадемово масло,фракционирано кокосово масло,мастни естери,пропилен гликол

или етилов алкохол; и консерванти,например метил или р-хидрокси бензоат или сорбинова киселина.

За въвеждане в устната кухина,съставът може да бъде под формата на таблетки или бонбончета,приготвени по обичайния начин.

Съставът,съгласно изобретението,може да бъде получен във вид удобен за парентерална употреба чрез инжекции или инфузии.Инжекционните форми могат да бъдат като дозажни едини ци във вид,на ампули,или в много-дозажни контейнери с прибавен консервант.Съставите могат да бъдат под формата на суспензии, разтвори или емулсии в маслени или водни носители и могат да съдържат и помощни средства,такива като суспендиращи средства, стабилизиращи и/или диспергиращи средства.Съответно активният

инградиент може да бъде под формата на прах,пригоден за смесване с подходящ носител,напр. стерилна,свободна от пирогени,вода, преди употреба.

За въвеждане посредством инхалации,съставите съгласно изобретението,обикновено се доставят под формата на аеро золен спрей в нагнетени опаковки с използването на подходящ про пелент,напр.дихлородифлуорометан,трихлорофлуорометан,дихлоротетрафлуороетан,въглероден диоксид или други подходящи газове или в подхадящи апаратчета за получаване на мъгла.В случая на нагне тен аерозол,дозажната единица може да се определи чрез осигуряването на клапан за доставяне на отмерено количество.

Съответно за въвеждане чрез инхалации,съставите съг-16-

ласна изобретението,могат под формата на сух прахообразен състав, например прахообразна смес от съединението и подходящ прахообразен носител,такъв като лактоза,нишесте или като модифицирана физическа форма на лекарството,самостоятелно.Прахообразният състав може да бъде под формата на дозажни единици,например капсули или патрончета от например желатин или в пликчета,от които прахът се използва за въвеждане в организма с помощта на инхалатор или инсуфлатор.

Съставите могат да бъдат под формата на супозитории например съдържащи обичайната супозиториална база или песарий,напр.

съдържащ обичайната база за песарий.

Съставите могат също да бъдат приготвени за локална употреба под формата на мази,кремове,гелове,лосиони,шампоани, пудри /включителни и пудри за разпръскване/,песарий,тампони, спрейове,аерозоли,капки (например за очи,уши или за нос) и пре парати за обливане.Мазите и кремовете могат,например да бъдат на водна или маслена основа с добавяне на подходящи сгъстители и/ или желиращи средства.Мазите,предназначени за очна употреба мо гат да бъдат приготвени по стерилен начин при използване на сте рилни компоненти.Препаратите за обливане,например могат да бъдат предназначени за ветеринарни цели и да бъдат на основата на мас ла, съдържащи органични разтворители,и по желание с помощни средства ,например стабилизиращи средства или средства,подпомагащи солюбилизацията.Песариите и тампоните за вагинална употреба могат да бъдат получени по обичайните методики и където е подходящо да включват ефервесцентен носител.Такива състави могат също да съдържат други активни инградиенти,такива като кортикостероиди, антибиотици или антипаразитни средства,когато е подходящо.

Течните препарати за интраназална употреба могат да бъдат под формата на разтвори или суспензии и могат да съдър·· ··· ·· · ··

-17жат обичайните ексципиенти,такива като средства за нагласяне на тоничността,такива като натриев хлорид ,декстроза или манитол; консерванти,такива като напр, бензалкониев хлорид,тиомерсал,фе нилетил алкохол;и други помощни средства,такива като суспендиращи, буфериращи, стабилизиращи, диспергиращи средства и/или средства, придаващи вкус и аромат.

Препаратите за трансдермална употреба могат да бъ-

дат повлияни от вида на подходящата система,която може да подпомогне абсорбцията на активното вещество през кожата и обикновено представляват основа,обвита с адхезивен филм,мембрани и освобождаваща обвивка.Такива системи могат да включват вещества,повишаващи абсорбцията , такива като алкохоли или да действат като подпомагат йонофорезата.

, Съставите ,съгласно изобретението,могат да бъдат приготвени и под формата на депо-препарати.Такива препарати с удължено действие могат да се въвеждат посредством имплантация /например подкожна/ или чрез интрамускулни инжекции.Така,например, съединение,съгласно изобретението,може да се смеси с подходящи полимерни или хидрофобни материали (напр, като емулсия в приемливо масло) или с йоно-обменни смоли, или да бъде под формата на умерено разтворими производни,например,под формата на умерено разтворима сол.

всяка единица

Когато съставите са под формата на дозажни единици, за предпочитане съдържа от 0.001 мг до 1000 мг,поспециално от 0.01мг до 400 мг,активно вещество,когато съединение, съгласно изобретението,трябва да се прилага орално.Дневната доза, приема,например в зависимост от начина на приемане и от състояникоято се използва за лечение на възрастен човек за предпочитане е в границите от 0.001мг до 5000 мг активно вещество,по-специално от 0.01 мг до 2000 мг,и може да бъде приета на една до 4 дневни • ·

-18ето на пациента и заболяването,което трябва да се лекува.

Съединението може да бъде въведено посредством интравенозна инфузия при използване,например до 50 мг/кг/ден от активното вещество.Продължителността на лечението ще зависи от реак циите на организма повече отколкото от определен брой дни.

Съединенията,съгласно изобретението,могат да се прилагат също в комбинация с други терапевтични средства и в понататъшен аспект изобретението осигурява комбинация,съдържаща съединение , съгласно изобретението,заедно с друго терапевтично-актив-

но средство.

Така например съединенията,съгласно изобретението, могат да се използват в комбинация с едно или повече други противогъбични средства,такива като полиенови производни,напр.(Амфоте рицин В,Нистатин, липидна форма на Амфотерицин В),азолно производно ,напр.(Флуконазол,Интраконазол,Кетоконазол,Миконазол,Клотримазол, ZO-08070, t/K-109496) , 5-Флуороцитозин,Пнеумокандин или Ехино кандинво производно,такова като Цилофунгин, LY-303366, L-733560, и/или едно или повече имуномодулиращи ферон,напр.(IEN- /,интерлевкин,напр.

стимулиращи колония,фактори,/(G)-CSI, средства,такива като интер/IL-l,IL-2,IL-3 и IL-8) и (М)-СБГ / и защитни средства.Особено предпочитани съединения за използване в комбинация със съединенията,съгласно изобретението, са Интраконазол,Флуцито; зин,Флуконазол!<или Амфотерицин В.

Когато съединенията,съгласно изобретението,се използват в комбинация с друго противогъбично средство,съединенията, съгласно изобретението и другото противогъбично средство могат да се дават в препоръчаните максимални клинични дози или в пони жени дози.

Комбинациите,описани по-горе могат обикновено да бъдат предложени за употреба под формата на фармацевтични препара·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · ·« · ··· • ···· · · · · · · · · • · ··· «· · · · · · · ·· · · · · ··· ····· ·· · ·· ··

ти и тези фармацевтични препарати съдържат описаната по-горе комбинация заедно с фармацевтично приемлив носител и съставляват понататъшен аспект на изобретението.Отделните компоненти на такива комбинации могат да се дават или посредователно или едновременно в самостоятелни или комбинирани фармацевтични препарати.

Когато съединение,съгласно изобретението, се използва в комбинация с второ терапевтично средство срещу същото състояние (болестно) , дозата на всяко съединение може да се различава от тази,когато съединението се използва самостоятелно.Подходящите дози могат лесно да се изчислят от специалист в дадената тясна област.

Съгласно друг аспект на изобретението се осигурява съединение с формула (I) или негова физиологично приемлива сол или фармацевтичен състав,съдържащ съединение с формула (I) или негова физиологично приемлива сол,както е описано по-горе,за използване в медицината,по-специално за лечение на гъбични инфекции при животни (особено при хора).

Съгласно друг аспект на изобретението се осигурява използването на съединение с формула (I) или негова физиологично приемлива сол за производството на препарати за лечението на гъбичтни инфекции при хора и животни.

Съгласно понататъшен аспект на изобретението се осигурява метод за лечение на хора и животни от гъбични заболявания, който метод се състои от въвеждане на ефективно количество от съединение с формула (I) или на негова физиологично поносима сол в тялото на пациента.

От специалиста в дадената област се разбира,че споменатото тук за лечение се разпростира върху профилактиката, както и върху лечението на установени състояния или инфекции.

Съединенията,съгласно изобретението,могат да се по·· · ·♦ · ·· ····

лучат по описаните по-долу методи.

Така,общ метод (А) за получаване на съединение с формула (1),в която / означава групата (а) , включва взаимодействие на съединение с формула (II)

(в която и R^ имат посочените при формула (I) значения по-го ре,RPo3Ha4aBa защитена карбоксилна група и X и У имат посочените при формула (I) по-горе,значения,с изключение на това,че X и/или У са различни от CR R ) до образуване на желаната циклична система , последвано от отстраняване на защитната група при карбоксил-

ната група.

Съгласно първи начин за осъществяване на метода (А) съединение с формула (1а),в която R^ до R^ имат посочените по-го ре при формула (I),значения,п означава нула и X и У означават едновременно кислород, може да се получи чрез взаимодействие на диол с формула (III) • · • · · · • · • · · · • « * · · · · · ·

и R₽ е защитна група на карбоксилната група) със съединение

3 (Li)_?CR R (в която 1_ означава подходяща отцепваща се група).

3 последвано от отцепване на защитната група.Когато R и R означа ват едновременно водород,реакцията за образуване на пръстена може удобно да се осъществи посредством обработване на съединение с фор мула (III) с дихалометан(напр.,дибромометан) в присъствието на силна основа,такава като хидроксид на алкален метал (напр. натриев хидроксид),за предпочитане при условия на фазов преход,при използване например на тетраалкиламониева сол (напр. тетрабутиламониев бромид) при температура около стайната.Когато поне един от за

3 местителите R и R означава С^^алкилна група или С^_₄ алксокси

3 С^_₄алкилна група или CR R означава С^_gHHKnoanKHnHa група,реакцията за образуване на пръстена може удобно да се проведе чрез

3 обработка на съединението с формула (III) с кетал (RO)₂CR R (където R означава ^алкилна група,напр. метил),за предпочитане в присъствието на подходяща киселина,такава като р-толуенсулфоновата киселина или пиридиниев р-толуенсулфонат, и в подходящ разтво рител,такъв като кетон(напр. ацетон),нитрил (напр. ацетонитрил) или халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) при температура около стайната.Съединенията с формула (1а),в която X и/или У означават сярамогат да бъдат получени по подобен начин от междин-22-

• · · ·

ни съединения,съответстващи на онези от формула (III) в която една или две от диолните хидроксилни групи е заместена с тиолна.

3

Когато CR R означава С=0 или С= реакцията за образуване на пръстена може удобно да се осъществи чрез взаимодействие на съедине ние с формула (III) с карбонилдиимидазол или с тиокарбонилдиими дазол в подходящ разтворител,такъв като въглеводород (напр,толуен) или етер (напр. тетрахидрофуран) под обратен хладник.Съответно,ко2 3 гато CR R означава С= реакцията за образуване на пръстена може

да се осъществи посредством взаимодействие на съединение с формула (III) с калаен оксид (напр. с дибутил калаен оксид) във въгле водороден разтворител(напр. в толуен при кипене на обратен хлад ник) , последвано от прибавяне на халотионоформиат (напр. фенил хлоротионоформиат) във въглеводороден разтворител(напр. толуен)

при температура,около стайната.

В съответствие с друг начин на осъществяване на метод (А),съединение с формула(I),в която R^ и R^ имат посочени2 3 те към формула (I),значения,един от заместителита R и R означава С^_^алкил и другият означава водород,С^^алкия или ^алкоксиС^^алкил, (Cr5r6)h означава CR^R^,където R$ и R^HMaT посоченитепо-горе при формула (I),значения и X и У едновременно означават кислород,може да бъде получено чрез взаимодействие на диол с фор мула (III) с калаен оксид (напр. дибутил калаен оксид) във въглеводороден разтворител (напр. в толуен при кипене на обратен хладник) ,последвано от прибавянето на алилхалид HaICR^R^CR^ = CHR·'’^ (където R означава водород или С^^алкил и Hal означава халоген(напр. бром) и флуоридна сол ( напр. тетрабутиламониев флуорид) в подходящ разтворител,такъв като етер (напр. тетрахидрофуран) и нагряване на сместа при температура в границите от около 40° до 80°С до получаването на съединение с формула (IV) • ·

ocr⁵r⁶cr²=chr¹⁴

R⁴ (IV)

което може да бъде превърнато в желаното съединение с формула (1а) посредством циклизация,включваща вътремолекулно електрофилно присъединяване,индуцирано от живачна сол (напр.живачен трифлуороацетат),последвана от редукция с хидрид,например при използване на триалкилкалаен хидрид (напр, трибутил калаен хидрид) и последващо 'отстраняване на защитната група при карбокси групата. Взаимодействието може удобно да се осъществи при температура около стайната в присъствието на подходящ разтворител,такъв като етер (напр.тетрахидрофуран).

При друг начин на реализация на метода (А),съединение с формула (1а),в която R^ до R⁴ имат посочените при формула (I),значения,п означава нула и един от заместителите X и У

10 означава кислород,а другият означава CR R (където единият от

10 заместителите R и R означава С^^алкил и другият означава водо9 10 род,С^ & алкил или С^_^алкоксиС^_далкил или CR R означава С= CHrU) може да се получи посредством обработка на съединение с формула (III) с оксид (напр. дибутилкалаен оксид) във въглеводороден разтворител (напр.,толуен при кипене на обратен хладник) и по желание в присъствието на флуоридна сол (напр,тетрабутиламониев флуорид ), и последващо прибавяне към него или на алилхалид HaICR²R^CR^=CHR·*·⁴ или на алкинилхалид HaICR²R^C=CR^^(къ-

-24дето rH

и Hal имат посочените по-горе значения) или прибавянето на алилхалида или алкинилхалида да стане след защита на една от двете диолни хидроксилни групи,до получаването на съединение с формула (V)

(V) (където χΐ означава ОН и У¹ означава OCR²R³CR⁹=CHR⁴⁴ _Или OCR²R³C=CR¹¹nnH X¹ означава OCR²R³CR⁹=CHR¹⁴ или OCR²R³C=CR^1;Lh У^означава защитена хидроксилна група).Циклизацията може да се осъществи чрез първоначално отстраняване на хидроксилната защит на група,ако има такава,след това активиране на свободната хид-

роксилна група,например чрез образуване на S-алкилдитиокарбонат (напр., S-метилдитиокарбонат) и последващо затваряне на пръсте на в условия на радикалова реакция,например посредством обработване на разтвор на активираното междинно съединение във въглеводороден разтворител(напр. толуен) при кипене на обратен хладник с донор на водород,например редуциращо хидридно средство (напр. триалкилкалаен хидрид,такъв като трибутилкалаен хидрид) в присъствието на активиращо средство(напр.азобис(изобутиронитрил)), и последващо отстраняване на защитната група при карбокси групата. Получаването на - алкилдитиокарбоната може удобно да се осъществи посредством обработка на съединение с формула (V),b която

1 един от заместителите X и У означава ОН и другият означава

• · · · · · · · · · · · · • · ··· ·· · ···· · • · ···· ··· ········ · · · ·

-25OCR^R^CR^=CHR^^ или OCR^R^C^CR^^ със силна основа на алкален метал (напр. натриев хидроксид),в присъствието на имидазол, и в подходящ разтворител,такъв като етер (напр.тетрахидрофуран) при понижена температура (напр. около 0°С) и последващо прибавяне на въглероден дисулфид и алкил халид (напр. метил йодид) при температура около стайната.

При друг начин за осъществяване на метода (А)съединение с формула (I), в която У означава кислород,п означава ну2 3 9 10 na,R и R означават водород и X означава група CR R , може да се получи посредством взаимодействие на съединение с формула (V), в която X¹ означава хидроксил,с трифенилфосфин,йод и имидазол в подходящ разтворител,такъв като тетрахидрофуран до получаването на желаното 4-йодно производно с формула (Уа).След това желано то затваряне на пръстена може да се осъществи в условията на радикалова реакция,такава като взаимодействие с триалкил калаен хидрид във въглеводороден разтворител при нагряване.

(Va)

При друг начин за осъществяване на метода (А),съединения с формула (I),в която У означава кислород,X означава

2 3

NR и групата CR R означава С=О,могат да бъдат получени чрез взаимодействие на йодното производно с формула (Va) с натриев хидрид и изоцианата R в апротен разтворител,такъв като тетра-

-26хидрофуран,последвано от отстраняването на карбокси-защитната група.

При друг начин на осъщесдтвяване на метода (А), съединение с формула (I),в която Е^ и Е^ имат посочените при фор2 3 мула (I),значения,Е и Е независимо един от друг означават во-

3 дород,С^_^алкил или С^_далкоксиС^_^алкил или СЕ Е означава С^_ дЦиклоалкил, п означава нула и един от заместителите X и У озна12 12 чава -ΝΕ (където Е има посочените при формула (I),значения)и другият означава кислород,може да се получи чрез N-ацилиране

на съединение с формула (VI)

(VI) ( в която един от двата tt заместителя X ft и У означава ОН и другият е biHz ) или негово защитено производно,при използване на ацилхалид,такъв като ацил хлорид при обичайните условия,послед2 3 вано от взаимодействие на амида с алдехид или кетон Е Е С=0

3 или с диалкилацетал Е Е С(ОА1Ку1)2 в присъствието на подходяща киселина,такава като р-толуенсулфонова киселина или пиридиниев р-толуенсулфонат и в присъствието на подходящ разтворител,такъв като халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) при темпера тура около стайната,и последващо отстраняване на всички налични защитни групи.

При друг начин на осъществяване на метода (А),

• · • · · · съединение c формула (I), в която R¹ и К⁴имат посочените при

3 2 3 формула (I),значения,п означава нула, X- CR R или'-У-CR R·

3 означава -N=CR - (където R означава С^^алкил или С^^алкоксиС^_^алкил) и останалият заместител X или У означава кисло род,може да се получи посредством обработка на съединение с формула (VI) с имино естер R C( = NH)OR (където R означава С^ ^алкилна група,напр.,метил).

По Друг общ метод за получаване съединения с формула (I), в която Z означава групата (а) и У означава кислород,

3 п означава Hyna,R и R означават водород и X означава СН ,могат да се получат чрез взаимодействие на съединението с формула(VII)

(VII) където R означава групата СНО или нейно защитено производно,

RP означава защитена карбокси група, с диалкил диазометил фосфонат в присъствието на база,такава като калиев трет.-бутоксид в апротен разтворител,такъв като етер(напр, тетрахидрофуран)последвано от отстраняване на карбокси-защитната група RP и ако е необходимо алдехидната защитна група.

4-Кетотетрахидропирановото производно с формула (VII) може да се получи посредством окисляване на съответното 4-хидрокси производно по обичайните начини,например чрез окисляване на Сверн.

• · · ·

Общ метод В за получаване на съединения с формула (I),в която 7. означава групата (б) и W означава кислород,включва циклизиране на съединение с формула (VIII)

(VIII) ( в която R^³ }R^^^a и rI?³ имат посочените за R^, R^ и значения към формула (I),по-горе или означават техните защитени производни,RP означава водород или карбокси-защитна група,I озна чава подходяща отцепваща се група,такава като алкил- или арил22 22 сулфонилокси група и R означава водород или OR означава същата група,както е посочено за L),последвано от,където е необ-

ходимо , отстраняване на всяка налична защитна група.

Методът за циклизация може лесно да се осъществи чрез обработка на съединение с формула (VIII) със силна база, такава като хидрид на алкален метал(напр. натриев хидрид) в подходящ разтворител,такъв като диметилформамид или етер(напр. тетрахидрофуран),обикновено при температура около стайната. Съответно може да се използва натрий в алкохолен разтворител (напр. метанол),по-специално когато OR означава същата група, както е посочено за L.B този случай алкалната система се прибавя към разтвор на съединение с формула (VIII) в подходящ разтворител,такъв като халогениран въглеводород(напр. дихлорометан) и взаимодействието обикновено протича при температури,

-29от стайната до температурата на кипене на обратен хладник.

Друг общ метод (Г) за получаването на съединение с формула (I),в която W означава сяра,включва обработка на съединение с формула (IX)

16 17 ( в която .R¹ , R¹ и R^3- имат посочените при формула (I) по-горе, значения,със серен донор.Така,например взаимодействието протича удобно при обработка на съединение с формула (IX) с 5,5-диметил 2-тиоло-2-тиоксо-1,3,2-диоксафосфоринан в разтворител,такъв като диметилформамид,за предпочитане в присъствието на подходяща база,такава като триалкиламин (напр. триетиламин) при повишена температура (напр, около 80 до 120°С).

Съединение с формула (IX) може удобно да се получи от съединение с формула (VIII), в която L означава хидрок22 си група и OR означава подходяща отцепваща се група,такава като алкил- или арилсулфонилокси група при използване на условията , описани при метод (В), последвано,когато е необходимо, от отстраняване на всички налични защитни групи.

Друг общ метод (Д) включва реакция на вътрешно прегрупиране,при което съединение с формула (I) се получава от различно съединение с формула (I) или от негово защитено произ водно .

·· ····

-30В съответствие с първи начин за осъществяване на метода (Д),защитено при карбоксилната група производно на съеди нение с формула (1),в която Ζ означава групата (а) и в която означава хидроксилна група,може да се превърне в съответното съединение от формула (I),в която Д^означава водород ,по методика, включваща (!) образуването на S-алкилдитиокарбонат,съгласно метода описано по-горе и (!!) отстраняване на тази група посред ством обработване на разтвора на междинното съединение във въгле

водороден разтворител (напр.толуен) при повишена температура (напр. около 80 до 120°С) с хидридно редуциращо средство (напр. триалкил калаев хидрид,такъв като трибутил калаен хидрид) и пос ледващо отстраняване на карбокси-защитната група.

При друго осъществяване на метода (Д),съединение с формула (I), в която Ζ означава група (а), в която R^ означава С^^алкокси и/или R^ означава алкоксиметил, може да се получи чрез алкилиране на защитеното производно на съединение с формула (I), в която r! означава хидрокси група и /или R^ означава хидроксиметил и всяка лабилна група (напр, карбоксилна и хидрок

си групите) са защитени,последвано от отстраняване на наличните защитни групи.Алкилирането може удобно да се проведе чрез първо начално взаимодействие със силна база на алкален метал(напр. нат риев хидрид) и след това с алкил халид ( напр, метил йодид). Взаимодействието може да се проведе в подходящ разтворител,такъв като етер ( напр. тетрахидрофуран) при температура в границата от около 0°С до 30°С.

При друг начин за осъществяване на метода (Д),съе1 динение с формула (I), в която R означава ацилокси група и /или

8

R означава C^OCOR може да се получи посредством ацилиране на защитено производно на съединение с формула (1),в която R^ означава хидроксилна група и/или R означава СН₂ОН _и всички лабилни групи >4 • · • ·

-31(напр. карбоксилна и хидроксилна групи) са защитени,последвано от отстраняване на всички налични защитни групи.Реакцията на ацилиране може да се осъществи при използване на обичайните методики, напр, посредством обработка с карбоксилова киселина в присъствието на активиращо средство,такова катодициклохексилкарбодиимид и подходяща база,такава като диметиламинопиридин, или при използване на киселинен халид (напр, киселинен хлорид),по желание в присъствието на подходяща база,такава като пиридин или 4-диметиламинопиридин.

Съгласно друг начин за осъществяване на метода (Д), съединение с формула (I), в която Е^означава хидроксилна група в екваториална конфигурация може да се получи от защитено про изводно на съединение с формула (1),в която R^ означава хидрок силна група в аксиална конфигурация и всички лабилни групи са защитени(напр. карбоксилна,хидроксилна и СНО групи),последвано от отцепване на всички налични защитни групи.Реакцията на изомеризация може удобно да се осъществи по двуетапна методика,включ ваща (!) окисляване на 2’-аксиалната ОН група до оксо група чрез обработка с подходяща окислителна система(напр. хромен оксид в присъствието на пиридин в разтворител,такъв като халогениран въглеводород (напр . дихлорометан) , съдържащ оцетен анхидрид)и (!!) редуциране на оксо групата до екваториална ОН група при използване на подходящо редуциращо средство,такова като борохидрид (напр. натриев борохидрид).Редукцията може да се проведе в подходящ разтворител,такъв като алкохол (напр. воден метанол) при температура в границите от около 0° до 10°С.

При друг начин за осъществяване на метода (Д), съединение с формула (1),в която Е^означава халогенен атом,мо же да се получи от защитено производно на съединение с формула (I), в която R1 означава хидроксилна група,последвано от отстраΛ • · · ·

-32тича с обръщане на конфигурацията.Така,например,една аксиална хи дрокси група може да се превърне удобно в екваториален йоден атом чрез прибавяне на йод към разтвор на изходния материал в подходящ разтворител,такъв като въглеводород (напр. толуен) в присъствието на трифенил фосфин и йод с последващо нагряване на сместа (напр. при кипене на обратен хладник).

По подобен начин може да бъде въведен флуорен атом чрез обработка с подходящо флуориращо средство,такова като диетил

аминосулфо трифлуорид (ДАСТ) в подходящ разтворител,такъв като халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) или ароматен въглеводород (напр.толуен) при температура ,около стайната.

При друг начин на осъществяване на метода (Д), съединение с формула (I),в която У означава кислород,п означава

2 нулаД и R означават водород и X означава СН,или негово защи тено производно,може да се превърне в съответното съединение, при което X означава чрез редукция с водород и подходящ ката лизатор,напр. паладий/въглен в подходящ разтворител,последвана от отстраняване на карбокси-защитната група.

При друг начин на осъществяване на метода (Д), съединение с формула (I), в която У означава кислород,п означава

3 нулаД и R означават водород и X означава групата С=СН2 може да се превърне в съответното съединение,в което X означава гру пата С=0 чрез окисляване ,напр. с използване на осмиев тетраоксид и натриев перйодат.

Аналогично съединения с формула(I),в която У означа

3 ва кислород,п означава нулаД и R означават водород и X означа ва групата С=С1<2 ,може да се превърне в съответното съединение с

3 формула (I),където R и R заедно с въглеродния атом,към който са прикрепени образуват групата С=0, чрез окисляване напр. с хромен

триоксид в пиридин.

Съгласно друг начин за осъществяване на.метода (Д), карбокси-защитеното производно на съединение с формула (1),в коя то R¹³ означава хидрокси група може да се превърне в съответното съединение от формула (I),в която R^³ означава халоген,посред ством известните реакции на заместване и с последващо отстраня ване на карбокси-защитната група.Така,например заместването на хидрокси групата с флуорен атом може удобно да се осъществи с промяна на конфигурацията чрез прибавяне на диетиламиносулфо трифлуорид(ДЕАСТ) към разтвор на изходния материал в разтворител, такъв като галогениран въглеводород (напр.,дихлирометан).Реакцията може удобно да се проведе при температура,около стайната.

При друг начин за осъществяване на метода (Д), съединение ,от формула (1),в която R⁴³ означава С^_^алкоксиметил може да се получи чрез алкилиране на защитено производно на съе15 17 динение с формула ¢1),в която R и / или R съдържат свободна хидроксилна група и всяка лабилна група (напр.карбокси и хидрок си групи) е защитена по подходящ начин,и последващо отстраняване

на защитните групи.Алкилирането може да се проведе посредством първоначално взаимодействие със силна база на алкален метал (напр.

натриев хидрид) и последващо взаимодействие с алкил халид (напр.

метил бромид).Реакцията може да се осъществи в подходящ разтворител ,такъв като етер (напр, тетрахидрофуран) при температура в границите от около 0°С до около 50°С.Където е необходимо в реакцион ната смес може да присъства също и амониева сол,такава като тетраалкиламонива сол,напр.тетраалкиламониев халид (напр. тетрабутиламониев йодид.

Съответно може лда: бъде въведена алкилна група с пра^.

ва или разклонена верига, удобно на два етапа,като птврвияъретап включва алкенилиране при използване на подходящ алкенил халид в

• ·

присъствието на база,такава като карбонат (напр. цезиев карбонат) в разтворител,такъв като диметилформамид при температура около стайната и вторият етап включва процедура на хидриране в присъствието на паладиев катализатор (напр. 10%-ен паладий/въглен) при температура,около стайната.

При друг начин за осъществяване на метода (Д),

20 1 съединение от формула (1),в която R означава C^OCOR или R означава OCOR ,може да бъде получено чрез ацилиране на защите17 но производно на съединение от формула (I),в която R означава

СН₂ОН или r15 означава хидроксилна група, и всяка лабилна група (напр.карбокси и хидрокси групи) е защитена,с последващо отцеп ване на наличните защитни групи.Реакцията на ацилиране може да се проведе при използване на обичайните методики,напр.чрез обра ботване с карбоксилова киселина в присъствието на активиращо средство,такова като дициклохексилкарбодиимид и подходяща база, такава като диметиламинопиридин,или при използване на киселинен халид (напр, киселинен хлорид),по желание в присъствие на подходяща база,такава като пиридин или диметиламинопиридин.

Съгласно друг начин за осъществяване на метода (Д), съединение с формула (1),в която CR¹⁵R¹⁶ означава

С=0,може да се получи чрез окисляване формула (I) ,в която R^ на защитено производно на означава хидрокси група и съединение от всяка лабилна група (напр, карбокси и хидрокси групи) е защитена,с последващо отстраняване на нали&ните защитни групи.Реакцията на окисление може да се проведе чрез прибавяне на подходящо окисляващо средство, такова катодиметилсулфоксид в присъствието на трифлуорооцетен анхидрид , Окислението обикновено се осъществява удобно в присъствие то на подходящ; разтворител,такъв като халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) при повишена температура (напр. около 40 до 80°С).

k. i • · · ·· • · ·· • ·· • · · · · • ·· • ·· · · • · · ·· • ··

-3515 16

Съединения от формула (I), в която GR R означа

ва групата 0Η=0Η£,могат да се получат чрез взаимодействие на съответното съединение от формула (I), или от негово защитено производно,където CR^J’³R означава С=0, с алкилтрифенил фосфониев халид и алкиллитий в апротен разтворител,такъв като ,напр,тетрахидрофуран.

Съединение с формула (I) ,в която R^ означава азидна група,може да се получи от съответното съединение с формула (I) или от негово защитено производно,където R·^ означава хидрокси група,посредством взаимодействие с толуен сулфонил халид и последваща обработка на полученото толуенсулфонатно производно с азид на алкален метал,напр. литиев азид в апротен разтворител,напр., дихлорометан.

. Много от споменатите по-горе методики,изискват отстра няването на една или повече защитни групи,като краен етап при получа нето на желаното съединение от формула (I).

Така,друг общ метод (Е) включва деблокиране на защитено производно на съединение с формула (I).Карбокси-защитните и

хидрокси-защитните групи,подходящи за използване тук,включват всяка обичайна защитна група,напр.както е описано в Protective Groups in. Organic Chemistry, Ed. J. F. W. McOmie (Plenum Press, 1973) или Protective Groups in Organic Synthesis by Theodora W. Green (John Wiley and Sons, 1991).

Примери за подходящи карбокси-защитни групи са ар^ИЗЯКИлните групи,такива като дифенилметил,р-метоксибензил и силилните групи(например,триметилсилилетил или трет.-бутилдиметилсилил).Примерите за подходящи хидрокси-защитни групи включват арилалкилни групи, такива като р-метоксибензил и естерни групи ,такива като бензилоксикарбонил.Алдехидните групи могат удобно да бъдат защитени под формата на циклични кетали.

-36Защитните групи могат да бъдат отстранени при използване на обичайните методики.Така,дифенилметилна група може удоб но да бъде отстранена при използване на трифлуорооцетна киселина или чрез хидрогенолиза в присъствието на паладиев катализатор (напр. 10%-ен паладий/въглен).Бензилоксикарбонилна група може удобно да бъде отстранена чрез хидрогенолиза в присъствието на паладиев катализатор (напр. 10%-ен паладий/въглен).р-Метоксибензил на група може удобно да бъде отстранена при използване на 2,3-дихлоро-5,6-дициано-1,4-бензохинон.Силилни групи,такива като триметил

силилетил или трет.-бутилметилсилилна група могат удобно да се от странят при използване на флуоридни йони.Циклични кетални групи могат удобно да се превърнат в алдехидна група чрез прибавяне на под ходяща киселина,такава като солна киселина.

Съединенията от формула (II) могат удобно да се получат чрез взаимодействие на съединение с формула (X)

(където R^p означава карбокси-защитна група) със съединение с формула (XI)

ХН

R⁴ (XI)

( в която R¹, R⁴, X и У имат посочените по-горе при формула (I), значения) или негово защитено производно,последвано от,ако е необходимо , отстраняване на наличните защитни групи,Взаимодействието може удобно да се осъществи чрез нагряване на (X) и (XI) при температура в границите от около 40 до 80°С в подходящ разтворител,такъв като въглеводород (напр. толуен),в присъствието на киселина, такава като бромна киселина-трифенилфосфин.

Когато ХН и УН във формулата (XI) означават хидроксилни групи,те могат удобно да бъдат защитени като ацилокси (например ацетокси) групи,като след протичане на взаимодействието със съединение с формула (Х),тези защитни групи се отстраняват.Отстраняването на защитните ацетокси групи може удобно да се осъществи чрез прибавяне на подходяща база,такава като алкоксид (напр. натриев метоксид) в подходящ разтворител,такъв като алкохол (напр. метанол)при температура,около стайната.

Споменатото по-горе взаимодействие е особено подхо4 дящо за получаване на съединения от формула (II),в която R е раз4 личен от метилна група.Когато R означава метил,съединенията от формула (II) могат да се получат по-удобно от 4 -деметилсордарин, съединение с формула (XII)

(XII) • · ···· • · · ·

-38Така,например,съединения с. формула (III),в която

R означава метил,могат лесно да се получат чрез защита на карбоксилната група в съединение с формула (XII) при използване на обичайните методи,последвано,ако е подходящо, от превръщане на 2аксиалната хидрокси група в друга ,различна R^ група,чрез методиките на вътрешно прегрупиране,описани по-горе.Може да е необходимо да се защитят З² и 4 ² хидрокси групи ,когато се обработва 2- аксиалната група.Защитата може удобно да се осъществи чрез образу-

ване на изопропилиденова група при използване на методиката,описана при първия начин за осъществяване на метода /А).Последващото отстраняване на тази група до получаването на диолната функция може да се постигне чрез обработка с киселина,такава като неорганична киселина(напр. солна киселина).

Когато карбокси групата в съединението с формула (XII) е защитена с дифенилметилна група,реакцията на защита може удобно да се осъществи чрез обработка на разтвор на съединението с формула (XII) в алкохолен разтворител (напр. метанол) и /или в халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) с дифенилдиазометан

прибавян обикновено под формата на разтвор в халогениран въглеводороден разтворител (напр. дихлорометан).

Съединенията от формула (II) , в която X и У означават кислород или сяра могат също да се получат чрез декарбонилиране на съответното защитено производно на съединение с формула (I), в коя2 3 то CR R означава С=0 и п означава нула.Декарбонилирането може удобно да се проведе чрез прибавяне на алкокси съединение (напр.

CHjONa) в подходящ разтворител,такъв като алкохол ( напр. метанол).

Съединенията с формула (X) могат удобно да се получат от сордарицин при използване на обичайните средства за защита на карбоксиланата група.Така,напр.когато R₽ в съединение от формула • · · ·· · (X) означава триметилсилилетил,тази група може да се въведе чрез обработка на сордарицина с 0-/2-(триметилсилил)етил-II,11-диизопропилизокарбамид,в подходящ разтворитл,такъв като етер (напр. тетрахидрофуран) при повишена температура (напр. при кипене на обратен хладник).Когато К^ означава дифенилметил,то тази група може удобно да се въведе при използване на методиката,описана по-горе.

Когато хидроксилна група в карбокси-защитено производно на сордарина или на съединение с формула (XII)

е защитена с рг-метоксибензилна група,тази група може да се въведе посредством взаимодействие с калаен оксид (напр.дибутилкалаен оксид) във въглеводороден разтворител (напр. в толуен при кипене на обратен хладник),последвано от прибавяне на р-метоксибензил халид в присъствието на флуоридна сол (напр.тетрабутиламониев флуорид).

Когато е защитена с бензилоксикарбонилна група,тази група може да се въведе чрез взаимодействие с бензилхалоформиат в присъствието на подходящ амин,такъв като 4-диметиламинопиридин и в разтворител, такъв като халогениран въглеводород (напр. дихлорометан) или аце-

тонитрил .

Създаването на група L. във формула (VIII),където

L означава алкил- или арилсулфонилокси група и / или група К?²0, 22 където R 0 означава алкил- или арилсулфонилокси група,може да се осъществи чрез взаимодействие на подходяща защитено производно на сордарина или на съединение с формула (XII) с алкил- или арил сулфонил халид в присъствието на подходящ разтворител,такъв като ра,около стайната.Други групи могат аналогично да бъдат въведени пиридин и по желание също може да присъства амин (напр. 4-диметил аминопиридин) или в халогениран въглеводороден разтворител(напр.

дихлорометан) в присъствието на подходящ амин ( напр. 4-метиламино пиридин).Взаимодействието може удобно да се проведе при температу··· ·· · ♦ · · ····· · · · · · · • · · е ♦ « · · · ♦ · · • · · · · · · ·

-40при използване на обичайните методики.

Трябва да се разбира,че може да е подходящо хидрокгил силна група да се превърне в желаната R¹⁵ група,преди циклизацията, съгласно метод (В).Така,подходящо защитено производно на 4 ² деме15а тилсордарин или на съединение с формула (II),в което R означава хидрокси група може да взаимодейства до превръщане на 4 -хидрокси групата в желаната R^rpyna при използване на обичайните методи-

С^^алкокси група,може да се осъществи чрез обичайните методики на алкилиране,например,в съотвотствие с различните методи,описани тук, по-горе.Отстраняването на хидрокси групата до получаване на съеди нение^ което r!5 означава водород,може да се осъществи удобно в

два етапа,включващи (!) образуването на -алкилдитиокарбонат чрез взаимодействие със силна база на алкален метал (напр. натриев хидрид) в присъствието на имидазол, и в подходящ разтворител,такъв като етер ( напр. тетрахидрофуран) при понижена температура (напр. около 0°С),и следващо прибавяне на въглероден дисулфид и на алкилхалид (напр. метилйодид) при температура,около стайната, и (!!) отстраняване на тази група чрез обработка на разтвор на междинното съединение във въглеводороден разтворител (напр.толуен) при по- вишена температура (напр. около 80 до 120°С) с редуциращо,хидрида средство (напр. триалкил калаен хидрид,такъв като трибутилкалаен хидрид),по желание в присъствието на активиращо средство(напр. азобис(изобутиронитрил)/.Превръщанате в алкилна група може да се осъществи удобно чрез (!) образуване на S-алкилдитиокарбонат,както е описано по-горе,(!!) заместване на тази група с алкенилна група чрез взаимодействие с триалкилалкенил калаено производно при условията, описани по-горе за отстраняване на $-алкилдитиокарбонатна група и (!!!J редуциране на алкенилната група до алкилна група чрез,например хидрогенолизав присъствието на подходящ паладиев катализатор ·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · ·· · · · · • · · ·· · · · · ···· • · · · · · · · ···· · ·· ···· ··· ·· ··· ·· · ·· ··

-41(напр. 10%-ен паладий/въглен).

Алкалните соли на съединенията с формула (I) могат удобно да се получат чрез взаимодействие на съединение с формула (I) с подходяща сол или база.Така,напр.соли могат да се получат удобно чрез взаимодействие на съединение от формула (I) със сол или база,избрана измежду натриев или калиев хидроксид,бикарбонат , карбонат или ацетат (напр.калиев хидроксид,калиев бикарбонат, натриев бикарбонат или калиев ацетат),амониев ацетат,калциев ацетат и I-лизин.Солта може,например да се получи чрез прибавяне на подходящата сол или база (ако е необходимо под формата на воден разтвор) към разтвор или суспензия на съединението от формула (I) в подходящ разтворител,такъв като алкохол(напр. метанол) или диоксан при температури,например от 0° до 80°С и за предпочитане при стайна' температура.

Фармацевтично приемливи соли могат да се получат също от други соли,включително други фармацевтично приемливи соли на съединенията с формула (I) при използване на обичайните методи.

Метаболитно неустойчивите естери на съединенията от формула (I) могат да се получат при налична карбоксилна група също по обичайните методики.Подобно,метаболитно неустойчиви естери могат също да се получат с която и да е налична свободна хидроксил на група в молекулата.

Новите съединения с формула (XII) могат удобно да се получат по ферментационния метод,описан тук,по-долу или от деметилиран сордарин при използване на методика на биотрансфор ната среда.

мация.

Методът на ферментация включва култивиране на микроорганизми , способни да продуцират съединението с формула (XII) , с последващо изолиране на съединението с формула (XII) от културал-

Микроорганизми,способни да продуцират съединението от формула (XII) обикновено са мутантни видове на gordaria_____j .

araneosa ,които могат лесно да бъдат идентифицирани посредством скрининг на преживелите мутагенезата с помощта на анализ на тестова проба,получена от ферментацията на микроорганизмите,при използване на стандартната методология.По-специално ,който обикновено се използва , е мутантен вид на Sordaria araneosa ,регистриран в постоянната културална колекция на CAB International Mycological Institute, Genetic Resource Reference Collection, Bakeham Lane, Egham, Surrey TW20 9TY, England.

Щамът е получен в Института на 10 юни 1994 и впоследствие му е даден номер IMI 362184 иепроверяван за приемливост и потвърждение на жизнеспособността му съответно на 13 и 21 юни,1994.Институтът е International Depository authority утвърден в съответствие с Договора от Будапеща.Характеристиките,които идентифицират IMI 362184 са дадени в Пример 74.

Изобретението в допълнителен аспект осигурява и микроорганизма IMI 362184 per se и неговите мутанти.

Мутантите на IMI 362184 могат да възникнат спонтанно или да бъдат получени по множество методики,включително онези, описани в Techniques for the Development of Microorganisms by Η I Adler in Radiation and Radioisotopes for Industrial Microorganisms, Proceedings of the Symposium, Vienna 1973, p241, International Atomic Energy authority.

Такива методи включват йонизираща радиация,химически методи,на9 пример обработка с М-метил-N -нитро-N-нитрозогуанидин (НТГ), нагряване,генетични техники,такива като рекомбинация и трансфор мация и селективни методики за спонтанно мутиране.

Получаването на съединението с формула (XII) чрез ферментация може да се осъществи с обичайните средства,напр. чрез ? т п- ζ- П-* Г> τι Ω *т* Г\ ТЛ *□

• · · · · · ··· • · ··· · · · · ···· • · · · · · · · ··· · · * · · · · · ··· ·· ··· ·· · ·· ··

-43източници на въглерод,азот и минерални соли,с последващо изолиране на желания продукт.

Асимилируеми източници на въглерод,азот и минерални соли могат да се осигурят или чрез обикновени или чрез комплексни хранителни среди.Източниците на въглерод обикновено включват глюкоза,малтоза,нишесте,глицерол,меласа,декстрин,захар,фруктоза, галактоза,мио-инозитол, £)-манитол,соево масло, карбоксилови киселини, амино киселини,алкохоли,алкани и растителни масла.Източниците на въглерод обикновено съставляват от 0.5 до 10 % спрямо теглото на ферментационната среда,Предпочитаните източници на въглерод са фруктоза,глюкоза и захароза.

Източниците на азот обикновено включват соево брашно,царевични настойки/разтворими барди,дрожден екстракт,брашно от памучно се,ме ,пептони, фъстъчено брашно,малцов екстракт,меласа, казеин,смеси на амино киселини,амоняк (газообразен и течен),амониеви соли или нитрати.Карбамидът и други амиди могат също да се използват.Източниците на азот обикновено съставляват от 0.1 до 10% спрямо теглото на ферментационната среда.

Хранителните минерални сдоли,които са включени в културалната среда,обикновено използват соли,способни да доставят натрий,калий,амоний,желязо,цинк,никелкобалт,манган,ванадий, хром,калций,мед,молибден,бор,фосфат,сулфат,хлорид и карбонат,във вид на йони.

Култивирането на организма обикновено се осъществява при температура от 20 до 40°С,за предпочитане от 20 до 35°С, по-специално около 25°С и за предпочитане се осъществява при аериране и разбъркване,напр. чрез разклащане и ли разбъркване. В началото средата може да бъде инокулирана с малко количество мицел и/или спори.Полученият вегетативен инокулум може да бъде • · ··· · • · · · · ·

-44прехвърлен във ферментационна среда,или към един или повече етапи на посявки,където продължава понататъшния растеж ,преди да се прехвърли в основната ферментационна среда.Ферментацията обикновено се осъществява при pH в границите от 3.5 до 9.5,за предпочитане от 4.5 до 7,5.3а да се поддържа pH в желаните граници към ферментационната среда може да се добавя киселина или основа.Подходящи бази,които могат да се прибавят включват хидроксиди на ал кални метали,такива като воден разтвор на натриев хидроксид или калиев хидроксид.Подходящите киселини включват минерални киселини, такива като солна,сярна,или фосфорна киселина.

Ферментацията може да се осъществи в продължение на период от 4-30 дни,за предпочитане около 5-15 дни.За контролиране на прекомерното пенене може да се прибавят антипенители на интервали от време,когато е необходимо.Източниците на въглерод и на азот могат също да се подават към ферментационната среда,когато е необходимо.

Съединенията с формула (XII) се свързват главно с клетките и могат да се разтворят или посредством добавянето на ки-

селина и смесим с вода,разтворител,или за предпочитане чрез прибавяне на база(напр. натриев хидроксид).Клетките могат да се отделят от тези разтвори посредством центрофугиране,обичайното филтруване или филтруване през мембрана.Маточният разтвор може по желание след това да се обработи с киселина,такава като сярна до постигане на pH,по-ниско от 6 (напр. около pH 4,5).

Съединението с формула (XII) може да се изолира и пречисти по множество методики за фракциониране,например чрез ад-елуиране,утаяване,фракционна кристализация,разтворителна екстракция и разделяне течност-течност,които могат да се комбинират по различни начини.

• · · · · · · ··· * • · ···· · · ·· ··· ·· · ··

-45Адсорбцията върху твърд носител с последващо елуир: ране е особено подходяща за изолирането и пречистването на съединения от формула (IX).Подходящите твърди носители включват сили-

циев диоксид;макромолекулни адсорбционни смоли,например омрежен стирен дивинилбензеновиполимерни смоли,такива като CG 161 и Amberlite XAD-2, XAD-4, XAD-16 или XAD -1180 смоли(ИоЬт & Haas Limited); or Kastell S112 (Montedision); заместен стирен-дивинил бензенов полимер,такъв като Diaion SP207 (Mitsubishi); анйонра обменна смола(напр., IRA-958 или МасгоРгер High Q (BioRad)), омрежен декстран,съвместим с органичен разтворител,такъв като Sephadex LH20 (Pharmacia UK Limited), или носители -обратна фаза,такива като омрежен с въглеводород силициев диоксид,напр. силициев диоксид,омрежен с C^g силициев диоксид.

Съединенията с формула (XII) могат също да се изолират и пречистят с използване на течна йоно-обменна смола,така ва като LA2.

Разтворители,подходящи за изолиране на съединенията от формула (XII),разбирасе,сподбират в зависимост от естеството на адсорбента.Когато се използва^полимерна смрла,такава като

XAD -16 ,могат да бъдат особено подходящи смесими с вода,разтво рители , такива като метанол,ацетон,изопропанол или ацетонитрил,в различни пропорции с вода.

Съдържанието на съединението с формула (XII) по време на методиките за екстракция/изолиране може да се проследява при използване на обичайните начини като високоефективна течна хроматография (ВЕТХ) или УВ спектроскопия или чрез използване на оптическото въртене или други свойства на съединението,

Когато съединението с формула (XII) се получи под формата на разтвор в органичен разтворител,например след пречис-

тването чрез адсорбция /елуиране,разтворителят може да се отстрани по обичайните методики,например чрез изпаряване,до получаване на желаното съединение.По желание,съединението понататък може да се пречисти с различни хроматографски методики,такива като хроматография в противоток при използване на спирален екстрактор ,такъв като многослоен спирален екстрактор или високоефективна течна хроматография върху адсорбенти,такива като въглен,двуалумин : г. ниев триоксид,ванадий,полимерни смоли,илиьсилициев диоксид,със или без свързани фази.Подборът но подходящи разтворители/елуенти за хроматографското пречистване /разделяне на съединението с формула (XII) ще зависи ,разбира се , от природата на адсорбента. Когато се използва С8 свързан силициев диоксид,особено подходящи са смеси от ацетонитрил и вода.Съответно,съединението понататък може да бъде пречистено при използване на екстракция с разтворител, например при използване на подходящ органичен разтворител,такъв като кетон(напр. ацетон),халогениран въглеводород ^алкохол (напр. метанол),диол (напр. пропан-1,2-диол или бутан-1,3-диол) или естер (напр. метилов ацетат или етил ацетат).Като друга възможност, разтворите на съединение с формула (XII) могат да се пречистят допълнително при използване на адсорбенти,които селективно отстраняват онечистванията,когато са прибавени в пходходящи количества (напр. ЕАЕ-целулоза) или чрез кристализация (напр. из смес от ацетонитрил и вода) или при използване на комбинации от спомена тите,по-горе методики.

Биотрансформацията на сордарина до 4- деметидсорда-. рин,съединението с формула (XII), може да се осъществи посредством инкубиране на сордарина в културална среда,съдържаща подходящ ор ганизъм и източници на въглерод и азот,включително онези източници,споменати по-горе,и последващо изолиране на съединението с фор-ммула (XII) от културалната среда.

Микроорганизмите,които могат лесно да деметилират сордарина на 4 -място,могат лесно да се идентифицират при изпол зване на маломащабен тест и анализиране на получената проба от теста при използване на обичайните методики.,напр.при използнане на ВЕТХ.Примери за микроорганизми,които са идентифицирани като деметилатори на сордарина, включват Streptomyces capreolus ATCC 31963, Streptomyces avermitilis ATCC 31272, Streptomyces capreolus NRRL 3176, Streptomyces antibioticus ATCC 31771, Streptomyces rimosus ATCC 23955, Streptomyces platensis ATCC 29778 , Streptomyces mashuensis ATCC 23934, Streptomyces eurythermus ATCC 14975, Nocardia orientalis ATCC 43491 and Cunninghamella echinulata var elegans ATCC 36112.

, Култивирането на микроорганизма обикновено се осъществява при температура от 20 до 40°С,запредпочитане от 20 до 35°С,по-специално около 28°С, и е желателно да протича с аериране и разбъркване,напр. при разклащане и разбъркване.Средата първоначално може да бъде инокулирана с малко количество мицел и/ или спори.Полученият вегетативен инокулум може да се прехвърли във ферментационна среда или към един или повече етапа на посяв ки,където се наблюдава понататъшен растеж /напр. за около 1-3 дни/,преди да се прехвърли към основната ферментационна среда.и Основната ферментационна среда също съдържа сордарин и ферментацията протича при pH,обикновено в границите от 3,5 до 9,5, за предпочитане от 4.5 до 7.5.Може да е необходимо да се прибави към ферментационната среда база или киселина,за да се поддържа pH в желаната граница.Подходящите бази,които могат да бъдат добавени включват хидроксиди на алкални метали,такива като водни разтвори на натриев хидроксид или калиев хидроксид.Подходящите киселини включват минерални киселини ,такива като солна,сярна • · · · • · · · • · ··· · · · · · ··· • · ··· ·· · ···· · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· ··

-48или фосфорна.Ферментацията може да протече за период от 2 до 5 дни,за предпочитане около 3 дни.За контролиране на прекомерното разпенване в средата може да има антипенител,който да се прибавя на интервали,когато е необходимо.Изтичниците на въглерод и /или азот могат също да се захранват към ферментационната среда,когато е необходимо.

Отделянето и изолирането на съединението с формула (XII) от ферментационната среда може да се осъществи по общите

методики,споменати по-горе.Когато е необходимо pH на матерния ликьор да се понижи под 6(напр. до около 2.5),това може удобно да се постигне чрез прибавяне на киселина,такава като ортофосфор ната.

Трябва да се разбира,че биотрансформацията може да се осъществи по множество вариантни методи.Например,клетките могат да нарастват и да се събират преди прибавянето към разтворана сордарина,например,на буфер,отработена ферментационна среда или вода.Също е очевидно,че подходящите ензими могат да се изолират и да се използват ( с подходящи ко-ензими) или клонираните ензими.

Както бе вече споменато по-горе сордаринът и сордарицинът са известни съединения,които се получават при използване на методите,описани в нивото на техниката.Така,например,получаването на сордарин посредством култивиране на Сордариа аранеоза NRRL 3196 ( също депозиран в АТСС като АТСС 36386) е описано в Британски патент № 1,162,027.Специфични примери за получаването на сордарина при използване на подобни методики са описани тук по-долу.

Сордарицинът може удобно да се получи в условията на ферментация,подобни на онези,описани за получаването на сор-

• · · · • · · · • · • · · ·

дарин.при използване на Сордариа аранеоза bIRRL. 3196 или подобен р негов мутант,с изолиране на желаното съединение при използване на подходящи хроматографски средства,Един такъв мутант е депози ран в постоянната колекция на култури на CAB International

Mycologxcax Institute, Genetic Resource Reference Collection,

Bakeham Lane, Egham, Surrey TW209TY, England.

Щамът е получен и приет от Института на 11 август 1994 и след това му е даден номер IMI 362947 и датата на потвърждение на неговата жизнеспособност е 19 август 1994.Институтът е International Depository authority утвърден в съответствие със Спогодбата от Будапеща.Характеристиките за идентифициране на IMI 362947 ,са дадени в Пример 75.

В допълнителен аспект изобретението се отнася и до микроорганизъм IMI 362947 като такъв и до неговите мутанти.

Методите за получаване на мутанти на IMI 362947 и неговия генетичен материал са подобни на онези,описани по-горе, за обработката на IMI 362184.

Сордарицинът може също да се получипри използване на методика на биотрансформация.Биотрансформацията може удобно да се осъществи посредством инкубиране на сордарин в културална среда включваща подходящ организъм и източници на въглерод и азот,включително и онези източници,определени по-горе, с последващо изолира;

не на сордарицина от културалната среда.

Микроорганизмите,способни да превърнат сордарин в сордарицин могат лесно да се идентифицират при използване на маломащабен тест и анализиране на получената проба от теста при използуване на обичайната методология,напр., при използване на ВЕТХ.

Един такъв микроорганизъм е идентифициран и е депозиран в Националната колекция на Industrial and Marine Bacteria Limited (NCIMB),

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· · · · ··· • · · · · · · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · ·· · · · · · · · • · · · · ·· · · · · ·

-5025 St. tlarshur Drive, Aberdeer лЬ2 1AY,

St. Marshal Drive , Aberdeen AB2 1RY ,

Шотландия.Щамът е приет от IICIMB на 4 август 1994 и същият е приет същия ден за депозиране за целите на патентоването и жизнеспособността на микроорганизма е потвърдена.Микроорганизмът,който е от вида CoryneformHMa характеристиките,посочени в Пример 76 и е получил номер в колекцията- MCIMB 40675. NCIMB е International Depository authority утвърден съгласно Спогодбата от Будапеща.

Така изобретението се отнася също и до микроорганизъм NCIMB 40675 като такъв и до неговите мутанти,които участват в биоконверсията на сордарина до сордарицин.

Методите за получаване на мутантите на NCIMB 40675 и на неговия генетичен материал са подобни на онези,описани погоре за обработката на IMI 362184.

Култивирането на NCIMB 40675 се осъществява главно при температура от 20 до 40°Е,за предпочитане от 20 до 35°С, и по-специално около 28°С,и е желателно да протича при аериране и разбъркване,напр., чрез разклащане и разбъркване.Средата може и-.р първоначално да се инокулира с малко количество мицел и/или спорни Полученият вегетативен инокулум може да се прехвърли към фермен тационната среда или към един или повече стадий на посявки,където нараства /напр. за около 1-3 дни) преди прехвърлянето му в основната ферментационна среда,Основната ферментационна среда съдържа сордарин и ферментацията обикновено се провежда при pH в границите от 3,5 до 9.5,за предпочитане около 7,5.3а да се поддържа pH в желаните граници,може да е необходзимо към фермента ционната среда да се прибавя база или киселина.Подходящите бази, които могат да се прибавят включват хидроксиди на алкален метал, такива като воден разтвор на натриев хидроксид или калиев хидроксид .Подходящите киселини включват минерални киселини,такива като ·· ···♦ • « ♦ · • ·

-51солна,сярна или фосфорна киселина.Фермента-цията протича за период от 4 до;‘8 дни,за предпочитане около 6 дни.За да се контролира прекомерното разпенване може да се прибавя антипенител на интервали, когато е необходимо.Източници на въглерод и /или азотгмогат също да се подават към ферментационната среда,когато е необходимо .

Трябва да се разбира,че биотрансформацията може

да се осъществи по редица вариантни начини.Например, клетките могат да се развиват и събират преди добавянето на,например буфер, отработена ферментационна среда или вода,към разтвора на сорда рина.Също така се разбира,че подходящите ензими могат да се изо лират и използват или гл^г гиг. ги-; ? ензимите да се клонират.

Отделянето и изолирането на сордарина от ферментационната среда може да се осъществи по вече описаните общи методики. Когато pH б,това е желателно^да се понижи pH на матерния ликьор до около може удобно да се постигне чрез прибавянето на киселина,такава като ортофосфорна.

Трябва да се разбира ,че ферментацията и биотрансформацията, описани по-горе,за получаването на сордарицин п редставляват допълнителни аспекти на изобретението.

нието и не са

Примерите илюстрират различните аспекти на изобретепредназначени да го ограничават по никакъв начин.

ПОЛУЧАВАНЕ!;г

Получаване на сордарин

Култура на gordaria araneosa NRRL3ig6 /АТСС 36386) се развива върху агар до появата на узряване.Тампони от агар с диа- с метър 6 мм,съдържащи нарастнала култура: се прехвърлят в стерилна вода или в мозък-сърце инфузионен разтвор (Oxoid ) + 10% глицерол и се съхраняват при температура ,стайна или при -140°С,съответно. 1.у?г Суспензия,съдържаща 2 от тези агарови тампона се използва за ·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· · · ···· • · · ·· · · · ····· е···········* ······ · · · • •••е · · · · · · ·

-52инокулиране на Ерленмайерова колба от 250 мл,съдържаща 50 мл среда FS

Среда FS г/л

Пептон(0хо1<1 34)10

Малцов екстракт(Oxoid 39)21

Глицерол(Глицерин СР)40

Junlon 110 (Honeywell & Stein) 1

Дестилирана вода

Културата се държи в инкубатор при 25°С в продъл жение на 5 дни върху клатачен шейкър,работещ при 250 оборота/ минута и има 50 мм в диаметър орбитално движение.Използват се аликвотни проби (2мл) от развития инокулум за инокулиране на допълнителни 250-милилитрови Ерленмайерови колби,съдържащи среда IS (50 мл),които се инкубират по описания по-горе,начин.80 мл

развит инокулум от разклащаната колба се използва за инокулиране на всеки от двата ферментатора (7л),съдържащи 5л среда iS . Ферментациите се контролират да протичат при 25°С.Културите се разбъркват при 400 оборота/мин и се аерират с 2 л/мин.След ферментация в продължение на 2 дни,10 л култура се използва за инокулиране на 780-литров ферментатор,съдържащ 500 л среда .·.

SM55VAR.

SM55VAR . г/л

Glucidex 32D(Roquette Frere)74 llenTOH(0Xoid L37)10

Proflo (Търговски протеин)30

Цвеклова меласа15

MgSO₄.7H₂O (В DH)5

CaCO₃(BDH )5 . FeS О₄,7Н₂О fSigma)

ZnO4.7H2O (BDH)	0.04
L -τpиπτoφaн(Sigma)	2
PPG2000 (К & К Greef)	0.5
Силикон 1520 (Dow Corning)	0.04

Дестилирана вода

Ферментацията се контролира при температура

25°С.

Хранителната среда се разбърква при 300-350 оборота/мин и се аерира при 200 л/мин.Към културата се подава 70%(тегло/обем) Меritose (Tunnel Refineries ) разтвор,за да се поддържа положителна остатъчна концентрация от глюкоза.За да се поддържа обема на културалната среда се подават 500 л дестилирана вода.При необ ходимост за контролиране на разпенването се подава антипенител PPCG2000.Всички екстракти на хранителната среда (във воден ацетонитрил + 1.% трифлуорооцетна киселина) се анализират за наличие на сордарин при използване на ВЕТХ -обратна фаза.Културата се събира след 11 дни,когато титърът на екстракт от хранителната среда показва наличие на сордарин 0.6 г/л.Ферментационната сре-

да се алкализира с 0.1М натриев хидроксид и след съхранение при стайна температура в продължение на една нощ се филтрува през Дикалит във въртящ се вакуумен филтър ( 1% Дикалит се прибавя към хранителната среда като помощно филтруващо средство).pH на филтрата се нагласява на 6τ7 с концентрирана сярна киселина и разтворът се подава към ХА 16 ( 10 обема филтрат на /един обем смола).Адсорбентът се промива с вода и ацетон:вода (1:3), и в двата случая до получаването на бистър елуент,преди сордаринът да се елуира с ацетон:вода(3:1; събират се 2 обема на колоната). Скоростта на потока през колоната по време на процеса е между 1-2 обема на колоната /час.Елуатът се концентрира до малък обем (8.5 л).pH на концентрата се нагласява на 3 с фосфорна ки селина и престоява при стайна температура в продължение на една ·· ···· ·· ····

нощ до поява на утайка от сордарин.Супернатантата се декантира, после се центрофугира и супернатантата се изхвърля.Центрофугираните пелети и утайката се поемат с 75 %-ен воден ацетонитрил до получаването на 3.9 л тъмно кафяв разтвор.Към него се прибавя 1.0 л л 0.2 М-ен NH₄H₂₽O₄ при разбъркване и pH на разтвора се нагласява на 4.0 с фосфорна киселина до получаване на краен обем 5.0 л с приблизителен състав 60¾ ацетонитрил-0.1 Μ ΝΗ₄Η₂Ρ0₄· Суровият разтвор на сордарин,получен по-горе,се подлага на препаративна ВЕТХ в 10 инжекции ( всяка по 450-550 мл) върху колона (15 см х 25 см) от 7 мм Кромазил С8 в мобилна фаза от 50%ен ацетонитрил -0.1М NH₄H₂₽0₄ , с pH 4.0 ( 50л ацетонитрил, доу..;· пълнени до 100л с вода,съдържаща 575 г ΝΗ₄Η2Ρθ4 ^и 40 мл Н^РО₄) при скорост на потока 600 мл/мин.,наблюдавана посредством УВ абсорбция при ( Λ 210 нм).

Фракциите,елуирани между 15.4 и 19.2 минута ,се събират . Събраните фракции от 10 инжекции (23 л) се разреждат с вода до 50 л и този разтвор се напомпва обратно към колоната с Кромазил при скорост 28 л/час.Колоната се промива с вода (25 л) и след това се елуира с 90 %-ен ацетонитрил (10 л).Елуатът се изпарява до остатък 1300 мл,който се подлага на сушене чрез замразяване,до получаването на посоченото в наименованието,съединение,под формата на мек прах ( 105.6 г),МС и ЯМР анализите на продукта показват идентичност с автентична проба сордарин.

ПОЛУЧАВАНЕ 2С

Получаване ца калиева сол на сордарин

Sordaria araneosa NRRL3196 (АТСС36386) се поддържа в мозък-сърце инфузионна среда (Oxoid ) + 10%-ен глицерол при -140°С,както е описано в Получаване 1.Суспензия съдържаща 2 тампона агар се използва за инокулиране на 250-милилит• · • · · · • · · · • · ·· · ·

роваЕрленмайерова колба,съдържаща 50 мл среда FS .Културата се инкубира при 25°С в продължение на 5 дни във въртящ се шейкър, който работи при 250 об./мин. с 50 милимртраввдиаметър на орбитално движение.Аликвотни проби (2 мл) от развития инокулум се използват за заразяване на допълнителни 250 милилитрови Ерленмайерови колби,съдържащи IS среда (50 мл),които се инкубират,както е описано по-горе.80 мл развит инокулум от разбърквания обем се използват за инокулиране на всеки от двата 7-литрови фермента- υ: тора,съдържащи по 50 л среда IS .Температурата на ферментациите се поддържа при 25°С.Културата се разбърква при 400 об./мин.

и се аерира при 2 л/мин.След ферментация 3 дни,10 л от културата се използва за инокулиране на 780-литров ферментатор,съдържащ 500 л среда SD1.

SDli	г/л
Меритоза (Tunnel refineries)	22
Лактоза	20
Glucidex 32D (Roquette Frere)	30
Arkasoy (The British Arkady Co.)	20
CSL	20
FeCI3,6H2O	0
NH.H.PO. 4 2 4	5

(BDH)

ZnSO₄.7H₂O

PPG 2000

0.1

0.5

Дестелерана вода

Ферментацията се поддържа при температура 25°С.

Хранителната среда се разбърква при 350 об./мин. и се аерира при 200 л/мин.За поддържане на обема на културалната среда 500л се подава дестилирана вода.Всички екстракти на хранителната среда се анализират за присъствие на сордарин с помощта на ВЕТХ-обрат на фаза.След 6 дни се събира културата,когато екстрактът на проба

от хранителната среда показва титър на сордарин 1,3 г/л.50-литрова пр

проба от културата се алкализира с 0.1М натриев хидроксид и се съхранява при 4°С в продължение на една нощ.Клетките се отделят посредством вакуумно филтруване през слой от Дикалит,като към хранителната среда е прибавен допълнително 2¾ Дикалит като помощно филтруващо срледство.рН на филтрата се нагласява приблизително на 6 с концентрирана сярна киселина.Екстрактът на културалната среда се нагнетява през слой от смола Амберхром С& 161 при скорост 320 мл/мин (0.64 обема на слоя за минута).Елуентът се проследял; дява с помощта на ВЕТХ.След 45 мин. ( еквивалентно на изпомпан обем 14.4 л) започва да се появява сордарин и помпането се прекъсва .Адсорбентът се промива с вода (2л),след това с 25% (обем/ обем) ацетон във вода (2л).Сордаринът се елуира с 75 % обем/ обем ацетон във вода ( 1.5 л).75 %?тнйят ацетонов елуат се изпарява до около 200 мл посредством изпаряване при въртене при 40θΰ. Прибавят се 200 мл бутан-1-ол и изпаряването продължава до полу чаване на вискозен остатък( съдържащ известно количество бутан1-ол).Маслообразният остатък се екстрахира с горещ метанол ( 2 х

500 мл).Екстрактите се събират,филтруват се( хартия на Ватман № 1) и склед това се изпаряват при 40 до 45°С до получаването на вискозно масло.То се екстрахира с горещ ацетон ( 2 х 500 мл). Ацетоновите екстракти се събират,филтруват се и се изпаряват до вискозно масло.Прибавят се 350 мл пропан-2-ол и маслото се разтваря при 45°С до получаването на бистър кафяв разтвор.В 500 милилитрова конусна колба се претегля разтвор на калиев 2-етилхексаноат ( 39% тегло/тегло разтвор в пропан-2-ол,54 г).Разтворът на сордарин в пропан-2-ол се излива в конусната колба,съдържанието се смесва и се оставя да престои 4 ч при стайна температура.

Разтворът се посява със зародишни кристали от калиева сол на сор • · • · дарина (около 5 мг) и затворената колба се съхранява 3 дни при 4°С.Образуваното белезникаво твърдо вещество се филтрува във вакуум ( синтерована фуния №4) и филтърния кейк се промива с пропан2-ол ( около 20-30 мл).Твърдото вещество се прехвърля в кристализационно блюдо и се суши във вакуум над Р₂0^ в продължение на 16 ч до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 10.5 г ).

ПОЛУЧАВАНЕ 3

Получаване на калиева сол на сордарина

Приготовляватсе 500 мл културална среда,както в

Получаване 1.Средата се алкализира с 0.1М натриев хидроксид и след 4 дни престояване при 0°С се филтрува през слой от Дикалит в ротиращ вакуумен филтър.1¾ Дикалит е прибавен към средата като помощно филтрув.ащо средство.pH на филтрата се нагласява на 7,5 от 9.6 с концентрирана сярна киселина.Филтратът ( 10 л) се подкислява до pH 6 с Н^РО^и се подава към слой от (200 мл) смола XAD -16 напълнена във вода при скорост на потока 1-1.5 слоя/час.Слоят от смолата се промива с вода(обем 1 слой) и след това с 25 % воден изо пропанол (2.5 слоя -обем) предиелуирането с чист изопропанол.След първите 50 мл изопропанол' :елуатът се събира като 100 милилитрови фракции.Богатите на сордарин,фракции от 2-6 вкл. се събират и се изпаряват наполовина.Прибавя се наново изопропанол до въз становяване на обема от 500 мл,след което изпаряването до поло вината от обема се повтаря за отстраняване на остатъка от водата чрез ацеотропна дестилация.След третото изпаряване до половин обем остатъкът се филтрува и филтъра се промива с изопропанол. Към събраните екстракти и промивни води (400 мл) се прибавя разтвор на калиев 2-етилхексаноат (8г) в изопропанол (100 мл).

Сместа се посява със зародишни кристали от калиевата сол на сордарина и се оставя да престои няколко дни при 4°С,докато се поя• · · · · · • · • · · · • · ♦ • · • · · · ·

-58ви бавна кристализация.Кристалите се филтруват през синтер №3,гр промиват се с малко ледено-студен изопропанол и се сушат във ва

куум до получаването на посоченото в наименованието,съединение, под формата на бледо кафяв прах (4.85 г).

ПОЛУЧАВАНЕ 4

Получаване на 4 -деметилсордарин (!) IMI 362184 се поддържа в хранителна среда мозък-сърце (Oxoi-d ) + 10% глицерол при -140°С,както е описано в Получаване 1.Суспензия,съдържаща 2 тампона агар се използва за инокулиране на 250 милилитрова Ерленмайерова колба,съдържаща 50 мл IS среда.Културата се инкубира при 25°С в продължение на 5 дни в ротиращ шейкър,който работи при 250 об./мин. и има 50 мм диаметър на орбиталното движение.Аликвотни проби (2мл) от разви тия инокулум се използват за посявки на допълнителни 250 мл Ерленмайерови колби,съдържащи FS среда (50 мл) :,които се инкубират по описания по-горе,начин.80 мл от развития инокулум от разбър-

квания обем се използват за инокулиране на всеки от двата 7лтрови ферментатора,съдържащи всеки по 5л IS среда.Ферментациите се поддържат при 25°С.Културалната течност се разбърква при 400 об./мин.и се аерира при 2 л/мин.След тридневна ферментация,10л от културата се използва за инокулиране на 780 литров ферментатор,съдържащ 500 л среда SM55VAR (както е описано в Получаване 1).Ферментацията се контролира при 25°С.Хранителната среда се разбърква при 350 об./мин и се аерира при 500 л/мин.70%-тен тегло/обем, разтвор на Меритоза (Tunnel Refineries) се пода ва към културата ,за да се поддържа положителна остатъчна концентрация на глюкоза.За да се поддържа обема на хранитгелната среда 500 л, се добавя дестилирана вода.Всичките екстракти на хра9 нителната среда се анализират за присъствие на 4 -деметилсорда рин с ВЕТХ-обратна фаза.Културата се събира след 10 дни,когато ··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· * · · · · ·· · · · · · · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· ··

-61на още 3 дни.500 микролитрова проба от цялата култура се смесва: в тръба на Епендорф с 500 л 80% ацетонитрил /2% трифлуорооцетна киселина и се оставияда се екстрахира при стайна температура в про дължение на 30 минути.Проба от супернатантата,получена след ценз трофугиране на проби в микрофуга,се анализира с ВЕТХ за наличие > >

на 4- деметил сордарин.4- деметил сордаринът се елуира на 3.35 минути с мобилна фаза 35%-ен ацетонитрил във вода,при скорост на потока 2 мл/мин., и използване на колона Сферисорб ( 5рм, 15 см,х 4.6 мм).По този метод като деметилатори на сордарина се

идентифицират следните микроорганизми:

Streptomyces	capreolus	ATCC	31963
Streptomyces	avermitilis		ATCC	31272
Streptomyces	armentosus		bIRRL 3176
Streptomyc.es	antibioticus		ATCC	31771
Streptomyces	rimosus		ATCC	23955
Streptomyces	platensis		ATCC	29778
Streptomyces	mashuensis		ATCC	23934
Streptomyces	eurythermus		ATCC	14975
Nocardia orientalis		ATCC	43491
Cunninghamell	a echinulata var	elegans	ATCC	36112
c SB1 Среда		г/л
Arkasoy		25
Дрожден екстракт	5
KH2PO4		5
Глюкоза		20

Дестилирана вода pH 7

FBI Среда

Соево масло

Arkasoy г/л

-62Дрожден екстракт к₂нро₄

Глюкоза

Дестилирана вода pH 5.5

ПОЛУЧАВАНЕ

Получаване на рин

АТСС 31963 • · · · · ♦ ·· ·· • · · · · • · · · · · ·

-деметилсордарин чрез биотрансформация на сорда0.3 мл суспензия от спори на Streptomyces capreolus ( в 15% обем/обем глицерин,съхранявана при -20°С) се инокулира в 30 мл SB1 среда в 250-милилитрова Ерленмайерова колба до получаването на култура,която се инкубира при 28°С и при 250 об./мин. в ротиращ шейкър.След 4 дни, 0.5 мл от тази култура се използва за инокулиране на 35 мл ва Ерленмайерова колба,която се култивира 48

SB1 в 250 -милилитрог,

28°С и 250 часа при об./мин,На този етап,културата се разделя на проби по мл в 50милилитрови Ерленмайерови колби,които се допълват с 5 мг сордарин / от 200 мг/мл щоков разтвор в етанол).Инкубирането продължа ва още 3 дни.Към цялата култура ( 14 мл) се прибавя 80% обем/ обем ацетонитрил във вода (14мл) и сместа се държи при стайна тем пература и от време на време се разклаща.След 30 мин.,клетките се отстраняват чрез центрофугиране.Ацетонитрилът се отстранява чрез изпаряване и pH на водния разтвор се нагласява на 2.5 с ортофосфорна киселина.Разтворът се прекарва през колона,съдържаща Амберлит XAD -16 (слой с обем 5 мл).Адсорбентът се промива последователно с вода (10 мл), 10% обем/обем ацетонитрил във вода ,. (20 мл).,30% обем/обем ацетонитрил във вода (10 мл), 50% обем/ обем ацетонитрил във вода ( 20 мл) и 90% обем/обем ацетонитрил във вода(10 мл).Флакциите се следят с помощта на ВЕТХ;4 -деме тилсордаринът се открива в елуата с 50% обем/обем ацетонитрил • · · · · · • · · ·

-63във вода.Фракцията,съдържаща 4 -деметилсордарин се изпарява до сухо във вакуум при стайна температура и остатъкът се разтваря с·.·'.::· отново в 35% V/V ацетонитрил във вода (15 мл).4 -деметилсордаринът се пречиства чрез препаративна ВЕТХ.

Колона

Сферисорб 5 микрон 25 см х 2.5 см

Скорост на потока

25мл/мин.

Откпивяне

УВ при 210 нм

Подвижна фаза

350 мл ацетонитрил,допълнен до 1000 мл с 0.05 М-ен амониев дикисел фос

фат във вода.рН се нагласява на 2.5 с ортофосфорна киселина.

Инжекционен обем

4,5 мл

-деметилсордарин се елуира след 10 мин. при посо-

чените по-горе условия,Събраните фракции от четирикратната ВЕТХ се разреждат 1:1 с вода и след това се подават с помпа обратно силициев диоксид ( след промиването му с ацетонитрил и повторно еквилибриране с вода).Адсорбентът се промива с вода (200 мл) и адсорбираният продукт се елуира с 95% V/V ацетонитрил във вода(200 мл).Елуатът в ацетонитрил/вода се изпарява за отстраняване на органичния разтворител, и водният разтвор се подлага на суше не чрез замразяване д© получаването на 4 -деметилсордарин (1.5 г),и под формата на бял прах.

£ ( ¹Н, CDCI₃); 9.М ( s,lH)&6,08( brd,3,1Н); 4.70( d,l,5,lH);

4.16( d,9.5,lH); 4.08(dd,4.5,3.5,1Н); 3.88(dd,4.5,1.5,1H);

3.75(dq,8.5,6,1H); 3.62(d,9.5,1H); 3.68(dd,8.5,3.5,1H); 2.65(m,lH);

2.34(m,lH); 1.32(d,6,3H); 1.30(d,12.5,1H); 1.23(m,lH); 1.04(d,

7,3H); 0.99(d,7,3H); 0.81(d,7,3H)

ПОЛУЧАВАНЕ 7

Получаване на сордарин ·· ···· • · · ·· • · ··· ·· • · » · ·· • · · ·· ·· ··· ··

-64Следва се методиката,описана в Получаване 1 вклю-

чително до етапа на препаративната ВЕТХ.Фракцията,елуирана между 21.4 и 25.0 минути, се събира.Събраните фракции от 10 инжекции (22л) се разреждат с равен обем вода и този разтвор се подава обратно през колона с Кромазил при скорост 28 л/час.Колоната се промива с вода (20л) и след това се елуира с 90%-ен ацетонитрил (4. 5 л).Елуатът се смесва със съответната фракция елуат (4.5 л) от подобна ферментация,която е проведена по същата методзика.^ Събраните елуати в 90%-ен ацетонитрил се концентрират в ротиращ изпарител докато продуктът започне да кристализира( обем около

1.6 л).Остатъкът се нагрява при 60°С на водна баня с прибавяне на минимален обем ацетонитрил до получаването на бистър разтвор. Разтворът се охлажда и се съхранява при 4°С.Кристалите се филтруват през синтер №3 и се сушат във вакуум до получаването на кафяво твърдо вещество.То се прекристализира из ацетонитрил:вода (40:60) и продуктът се филтрува,промива се с 25% ацетонитрил и се суши във вакуум до получаването на посоченото в наименованието,съединение (10.7 г). МС и ЯМР анализите на продукта сочат,че той е еквивалентен на автентична проба сордарин.

ПОЛУЧАВАНЕ 8

Биотрансформация на сордарин до сордарицин

0.2 мл суспензия от bICIMB 40675 се използва за инокулиране на 250 мл-трова Ерленмайерова колба,съдържаща 50 мл хранителна среда ( Oxoid, ),допълнена с 0.2% дрожден екстракт. Куртурата се инкубира при 28°С в продължение на 29 ч в ротиращ шейкър,който работи при 250 об./мин. с 50 мм орбитално отклонение .Аликвотни проби ( 1 мл) от развития инокулум се използват за инокулиране на още 250 мл-трови Ерленмайерови колби,съдържащи по 50 мл двойно по-концентрирана хранителна среда ( Oxoid)допълнена с 0.1% дрожден екстракт.Тези култури се инкубират по описа-

-65ния по-горе начин в продължение на 24 ч.62 от тези колби се събират до получаването на 2,65 л развита култура,която се прибавя към 30 л сордаринов ферментационен филтрат,pH се нагласено на 7.5,получен,както е описано в Получаване 1.Реакцията протича в в 70 литров ферментатор при 30°С,разбъркване 200 об./мин.,аери ране 0.5 VVM.pH се контролира на 7.5 чрез прибавяне на 1PJ солна киселина.След 6 дни,приблизително 16 г сордарин са превърнати

в сордарицин.Биотрансформационната хранителна среда се филтрува през Дикалит във вакуумен филтър и слоят се промива с вода до получаването на 31.5 л филтрат,pH 8.2.рН се нагласява на 6.0 с HjPO^ и филтратът се подава през слой ( 25 см х 5 см) от Амберхром СС 161 при скорост 290 мл/мин.Амберхроменият слой се промива с 0.1% HjPO₄(2n) и 25% -ен ацетонитрил (4 л),след това се елуира с 60%-ен CHjCKI ( 2л).Елуатът се концентрира чрез ротативно изпакя ряване до започване на кристализацията,след това остатъкът се нагрява до; 60°С на водна баня с добавяне на минимален обем ацетонит- .

рил до получаването на блистър разтвор.Този разтвор се охлажда и замразява при 4°С в продължение на една нощ.Кристалите се филтру-

ват,промиват се с 25%-ен ацетонитрил и се сушат във вакуум до получаването на кафяв прах.Суровият продукт се прекристализира из

1л ацетонитрил :вода (40:60),филтрува се и се суши ,както е опи сано по-горе , до получаването на сордарицин,под формата на бледо кафяви игли ( 6,15 г).

ПОЛУЧАВАНЕ 9

Биотрансформация;. на сордарин до сордарицин

Пълен контур от повърхността на култура в агар на NCIMB 40675 се използва за инокулиране на 250 -милилитржво Ерленмайерова колба,съдържаща 50 мл хранителна среда (Охо),допълнена с 0.2% дрожден: екстракт.Културата се инкубира в продължение на 26 ч при 25°С в ротиращ шейкър,който работи при 250 об./мин. с • · мм отклонение, в диаметър.1мл аликвотни проби от развитата

култура се използват за инокулиране на 250 милилитрови Ерленмайерови колби,както е описано по-горе.Колбите се допълват с чист сордарин в 80%-ен етанол до полячяването на крайна концентрация от 1.25 мг/мл.Колбите се инкубират,както е описано по-горе, в продължение на 8 дни,след което набъбват до получаването на 365 мл куртурална среда,съдържаща сордарин,Биотрансформационната смес се центрофугира до отстраняване на NCJMB 40675 клетките и супернатантата ( 350 мл) се декантира.Към супернатантата се прибавя Whatman Partisil Р40 ODS - 3 (5 мл,предварително умокрен с ацетонитрил) и pH на сместа се нагласява на

4.0 с Н^РОд .Партизилът се филтрува с Бюхнерова фуния и се елуира с ацетонитрил ( 100 мл),последван от 75%-ен ацетонитрил(100 мл).Събраните елуати се изпаряват до получаването на воден остатък от 10-15 мл.Той се нагрява до 60°С на водна баня и се прибаняколко дни.Кристалите се филтруват се с вода и дарицин под се сушат във вакуум над формата на бели иглички вя ацетонитрил до получаването на бистър разтвор,след това при поддържане на нагряването се прибавя вода до помътняване на разтвора, Сместа се охлажда и се съхранява при 4°С в продължение на върху синтер № 3,промиват Р₂О^ до пжлучаването на сор(92 мг).

ПОЛУЧАВАНЕ 10

Получаване на сордарицин

Замразена ампула с IMI 382947 се използва за инокулиране на 50 мл среда I в 25о мл-трова Ерленмайерова колба.Тази колба се инкубира при 25°С за 6 дни в ротиращ шейкър,който работи при 250 об./мин. с 50 мм отклонение в диаметър.Аликвотни прог.

би ( 1 мл) от развития инокулум се използват за инокулиране на

Ерленмайерови колби,съдържащки 50 мл продуктивна среда SM55/A.

• · · ·

-67-.

SM55/A г/л

Малтодекстрин MD30E (Roquette Frere)120

Цвеклова меласа15

Пептон( Oxoid L37)10

Proflo (Търговски протеин)30

L -Триптофан (Sigma)2

ZnSO₄.7H₂O (BDH)0.4

FeSO₄,7H₂O (Sigma)2

CaCO₃ (BDH)5

MgSO₄.7H₂O (BDH)5

Допълнена c дестилирана вода и обработена в автоклав при 121°С в продължение на 120 мин.

Тези култури се инкубират,както е описано по-горе, в продължение на 7 дни.Съдържанието на колбите се събира и 40 мл проба се обработва с 1N натриев хидроксид (4 мл),при стайна температура и разбъркване от време на време, в продължение на 45 мин.С След това клетките се отстраняват чрез центрофугиране при 3000 об./мин. в продължение на 20 мин.супернатантата се отделя и pH се нагласява на 3 с 1 N солна киселина.Разтворът се прекарва през колона Bond Elut /. ( 1г размер; С18) и абсорбентът се промива с вода ( 20 мл),след това се елуира с 90 % V/V ацетонитрил във вода(15 мл).Елуатът се изпарява до сухо при стайна температура и остатъкът се поема с 50% V/V ацетонитрил във вода (9 мл).Сордарицинът се пречиства чрез препаративна ВЕТХ.

Колона Сферисорб 5 микрона ODS -2(25 см х 2.1 см)

Скорост на потока 25 мл/мин.

Подвижна фаза 550 мл ацетонитрил,допълнен с вода, с 1 мл трифлуорооцетна киселина,прибавен на 1 л подвижна фаза

-68Откпиване _ч 210 нм

Инжекционен обем 4,5 мл

Сбдзриуинът се елуира след 6.0 мин. при посочените условия.Фракциите,съдържащи сордарицин се събират,ацетонитрилът се отстранява чрез ротационно изпаряване при стайна температура и водният разтвор се суши чрез замразяване до получаването на посоченото в наименованието,съединение (8.9 мг),под формата на бял

прах.

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 1..

/ 1R - ( lt<,3aB , 4В , 4аВ , 7В , 7а<*,8аВ )/ 8а-/(6-Деокси- В-D алтропиранозилокси)метил-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова : киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на 4- деметилсордарин (Юг) в метанол (200 мл) се прибавя на капки,при стайна температура,0.35М-ен разтвор на дифенилдиазометан (90 мл) в метилен хлорид, и сместа се разбърква в продължение на 6 ч.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография в колона със силикагел, с хексан:етил ацетат (3:1) като елуент,до получаване то на посоченото в наименованието,съединение,под формата на бледо жълта пяна(12.6 г).

£(^ΧΗ, CDCI₃) : 9.73( s ,

1Н,Н-2, J=1.5 и 3.6 Hz (2d ,2Н,8а-СН₂ , J = 9Hz

1Н,СНО),6.98 ( s,lH,CHPh₂ ), 6.05 (dd , ), 4.65 ( d,lH, H-l’ J = l.5 Hz) ,4.09,3.76 9 ),4.01 (M,1H,H-2’),3.84(m,1H,H-3 * ),3,75 (Μ,ΙΗ,Η-δ’),3.69(м,1Η,Η-4’),2.73( t,lH,H-l, J=4.2 Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 2 /1R-(lcX ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7a<X,8aB )/ 8а~/(6-Деокси-3,4-0-изопропилиден- В - D-алтрОпиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а, 8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-(1Н)-1,4-метано- s-индаценЗа(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилметил естер

-69Към разтвор на междинния продукт 1 (650 мг) в 15 мл диметоксипропан: ацетон (1:2) се прибавя р-толуенсулфонова киселина , 1' (10 мг). Разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 1.5ч, след това се прибавя калиев карбонат (1.0 г), разбъркването продължава още 30 мин. и разтворителят се изпарява до сухо. Суровата смес се разпределя между етилацетат (50 мл) и вода (25 мл), водната фаза се екстрахира с етил ацетат (2 х 50 мл), органичната фаза се промива с воден разтвор на натриев хлорид, суши се над магнезиев сулфат и се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат: хексан (1:3) до получаването на посоченото в наименованието, съединение (600 мг), под формата на бяла пяна.

$ (^ХН, CDClj): 9.73 (s, 1Н, СНО), 7.45-7.24 (m, 10Н, 2Ph), 6.98(s,

1H, CHPh₂)‘, 6.06 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and 3.3 Hz), 4.57 (d,lH, H-l’, J=3.0 Hz), 4.30 (dd, 1H, H-3’, J=3.6 and 5.7 Hz), 4.07 (d, 1H, 8aCH_2> J=9.0Hz), 3.95-3.93 (m,lH, H-2’), 3.85(dd, 1H, H-4', J=5.7 and 9.3 Hz), 3.75 (d, 1H, 8aCH₂, J=9.0 Hz), 3.44 (dq, 1H, H-5', J_d=9.3 Hz, J =6.3Hz), 2.73 (t, 1H, H-l, J=3.6 Hz).

МЕЖДИНЕН ПРЕДУКТ 3 /lR-(lo<, ЗаВ, 4B, 4aB, 76, 7aX, 8aB)/ 8a-/(6-Деокси - 3,4-0-(2пентилиден)-B-D-алтропиранозилокси) метил/-4-формил-4, 4а, 5, 6, 7, 7а, 8, 8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1, 4-метано-⁵-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 1 (500 мг) и р-толу енсулфонова киселина (5 мг) в дихлорометан (5 мл) се прибавя 2, 2-диметоксипентан (2 мл). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Прибавя се калиев карбонат (150 мг) и разбъркването продължава 30 мин. Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при • · · · · · ·· ····

чаване на посоченото в наименованието,съединение ( 474 мг).

& (¹Н, CDC13); 9.73 (s, 1Н, СНО), 7.45-7.24 (m, 10Н, 2Ph), 6.98 (s, lH,CHPh2), 6.06 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and 3.3 Hz), 4.57 (d, 1H, r. Hrl’, J=2.1 Hz), 4.30 (dd, 1H, H-3’, J=3.9 and 6.0 Hz), 4.04 (d, 1H 8aCH2, J=9.0 Hz), 3394-3.91 (т/1Н,Нн2 4 5 3 86 (dd^H; H+4 ’ i J*6. Ъ ^:dnd 9t6Hz);3.73(d,IHj8aGH2iJf9.0Hz),3.45(dq^lH,H-5;J , = 9.0Hz,J =6.0Hz)

2772(t,lH,H-l,J=3.6Hz). ⁴

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 4c / 1R -(1о<,3ав ,4β ,4ав ,7β ,7ао(,8ав (/ 8a-/( 6-Деокси-3,4-0(4-метокси-2бутилиден)- β- D- алтропиранозилокси) метил-4-формил-4,4a,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- з-индацен-За(1Н )-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към суспензия на междинния продукт 1 ( 350 мг) и р-толуенсулфонова киселина ( 5 мг) в дихлорометан ( 4 мл) се прибавя 2,2,4-триметоксибутан ( 1 мл).Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час.Прибавя се калиев карбонат и разбъркването продължава още 30 мин.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат : хексан ( 3:7) и ( 4:6 ) до получаването на посоченото в наименованието ,съединение (290 мг) в отношение на епимерите ( 3:1).

S (^H,gpCl₃) signals of the major component; 9.73(s,1H,CHO), 7.45-7.20(m,10H,2Ph), 6,98(s,1H,CHPh^, 6.06(dd,1H,H-2,J=1.5 and 3.6Hz),4.57(d,1H,H-1’,J=2.1Hz),4.31(dd,lH,H-3’,J=3.9 and 6.0Hz), 4.05(d,1H,8aCH_?,J=9.0Hz),3.95-3.90(m,lH,H-2*),3.88(dd,lHH-4 ,J=6.0 and 9.3Hz),3.73(d,lH,8aCH₂,J=9.0Hz),3,51(t,2H,CH₂O,J=7.2Hz), 3.50-3.45(m,1H,H-5’),3.33(s,3H,CHjO),2.72(t,1H,H-1,J=3.6Hz). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 5

I lR-(lot,3a6 ,46 ,4a6 ,76 ,7ao(.,8a6 )/ 8а-/(6-Деокси-3,4-0циклопентилиден- 6- D-алтропиранозилокси) - 4-формил/ - 4,4a,5,6,7,7a,.:

·· ···· • · · · · ·

-718,8а-октахидро-7-метил-3-(l-метилетил )-1,4- 5-индацен-За(1Н )карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер

Към суспензия на междинния продукт 1 ( 160 мг) в дихлорометан: 1,1-диметоксициклопентан ( 3:1, 4 мл ) се прибавя р-толуенсулфонова киселина ( 5 мг) и сместта се разбърква при стайна температура в продължение на 2 ч.Прибавя се калиев карбонат ( 1

г) и разбъркването продължава още 30 мин.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел приелуиране с етил ацетат:хексан (1:4 ) до получаването

на посоченото в наименованието,съединение (142 мг).

$ (¹H,CDC13): 9.73 (s, 1Н, СНО), 7.45-7.25 (m, 10Н, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh2), 6.06 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and 3.6 Hz), 4.55(d, 1H, H-l’, J=1.8 Hz), 4.17(dd, 1H, H-3’, J=3.0 and 5.1Hz), 4.08(d,lH, 8aCH2, J=9.0Hz), •3.95(dt,lH,H-2^,,Jd=1.8Hz,J_t=3.0Hz) , 3.81 (dd, lH,H-4 ’, J= 5.1 and 9.3Hz), 3.76(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz),3,42(dq,lH,H-5’,J_d=9.3Hz, J =6,3Hz), 2.73(t,lH,H-l, J=3.9Hz).

4.

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 6 .

/ 1 R -(1<Х,Зав ,4β ,4ав ,7β ,7а<Х,8ав )/ 8а-/(6-Деокси-3,4-0изопропилиден-2-0-(метилтио)тиокарбонил-β -р -алтропиранозилокси) метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-( 1-метил етил)-1,4-метано- s-индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 2 ( 100 мг) и имидазол ( 1 мг) се разтварят в сух тетрахидрофуран ( 4 мл) в азотна атмосфера.Прибавя се натриев хидрид ( 5 мг) и суспензията се разбърква при стайна температура в пхродължение на половин час.Прибавя се въглероден дисулфид ( 27 микролитра),разбъркването продължава още 20 мин. и се прибавя метил йодид ( 18 |й;л).След 2 ч реакцията се прекъсва чрез прибавянето на 1 N амониев хлорид ( 20 мл).Сместа се екстрахира с етил ацетат ( 3 х 25 мл ),органичната фаза се про-

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· ···· • ···· · · · · ···· • · ··· ·· · ···· · ·· ···· · · · ····· ·· · ·· ··

-72мива с воден разтвор на натриев хлорид,суши се над магнезиев сулфат и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат:хексан ( 1:9 ) до получаването на посоченото в наименованието ,съединение ( 110 мг).

8(¹H,CDC1₃): 9,71(s,lH,CHO),7.44-7.25(m,10H,2Ph),6.96(s,lH,CHPh₂), 6.01(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2 and 3.6Hz),6.90(dd,1H,H-2’,J=2.4 and 5.4Hz), 4,85(d,1H,H-1’,J=2.4Hz),4.53(dd,1Η,Η-3’,J=5.4 and 6.3Hz), 4.00 (dd,lH,H-4’,J=6.3 and 8.7Hz),3.93(d,1H,8aCH₂,J=9.3Hz), §.65(dq, lH,H-5’,J_d=8.7,J =6.3Hz),2.68(t,lH,H-l,J=3.9Hz),2.59(s,3H,CH₃S). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 7 :

/ lR-(lo/,3aB ,4β ,4ав ,7β ,7аХ,8ав )/ 8a-/( 2,6-Деокси-3,4-0изопропилиден- β- р-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6, 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-Б^индаценЗа(1Н )-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер (!) Междинният продукт 6 (95 мг ) се разтваря в сух толуен ( 5 мл) в азотна атмосфера и се нагрява при 110°С.При разбъркване на капки в продължение на час и половина се прибавя разтвор на трибутид калаен хидрид ( 64 |*.л) в сух толуен ( 5 мл) .Нагряването продължава още час и половина,прибавя се метанол ( 2 мл) и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат: хексан ( 1:9) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 42 мг).

δ (¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО),7.44-7.25(m,10Н,2Ph),6.98(1Н,s,CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2;J=1.2 and 3.3Hz), 4.54(dd,1H,H-1’,J=2.7 and 9.3 Hz), 4.39(dt,1H,H_3’,J_d=2.7Hz, J =3.6Hz), 4.04(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz), 3,67 (d,lH,8aCH₂,J=9.0Hz). 3,65(dd,1Η,Η-4’,J=3.6 and 8.7Hz), 3.44(dq,lH, K-5’,J_d=6.3Hz,J_q=8.7Hz), 2.75(t,1H,J=3.9 Hz).

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • · · ·· · · · · ···· • · · · · · · · ···· · • · · · · · ··· ·· ··· ·· * ·· ··

-73(!!) Разтвор на трибутил калаен хидрид ( 5.5 мл) в сух толуен (150 мл) се продухва с поток от азот в продължение на един час и се нагрява при кипене на обратен хладник.Към този разтвор в продължение на два часа се прибавя разтвор на междинния продукт 6 ( б г) в сух толуен ( 50 мл).Нагряването продължава до завършване на реакцията ( час и половина).Разтворителят се отгстранява при понижено налягане до получаване на суров продукт, който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан и хексан: етил ацетат ( 20:1 до 15:1) до получаване на посоченото в наименованието,съединение ( 4 г). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 8 /1К-(1^,ЗаВ ,4β ,4ag , 7β ,7a<Z,6a₈ )/ 8a-(2,6-Дидеокси-3,4 -0-(4-метокси-2-бутилиден)- β- ρ-алопиранозилокси) метил/-4формил - 44 а, 5,6,7,7 а, 8,8 а - о кт ахи дро-7-метил-З- (1-метилетил) 1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 4 ( 600 мг) в сух тетрахидрофуран (Юмл ) при О°С,в азотна атмосфера се прибавя разтвор на натриев хидрид ( 30 мг) и имидазол (5 мг).Разтворът се разбърква 10 мин. и се прибавя въглероден дисулфид / 147 ^л).След 20 мин. се прибавя метил йодид /127 ^ил) и разбъркването продължава още 30 мин.Прибавя се 1 KI-ен амониев хлорид ( 20 мл) и сместа се екстрахира с етил ацетат (3x25 мл), органичната фаза се промива с разтвор на натриев хлорид,суши се над магнезиев сулфат и разтворителят се отстранява до сухо. Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат:хексан ( 15:85) до получаването на бяла пяна.Тази пяна се разтваря в сух толуен ( 10 мл) в азотна атмосфера и се прибавя на капки в продължение на 2ч при температура 115°С,разтвор на трибутил калаен хидрид ( 0.46 мл) в толу• · · · · · • · • ·

-74ен ( 10 мл).Нагряването продължава още 2 ч.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат:хексан ( 15:85) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 260 мг) ,със съотношение на епимерите 4:1.

δ (^ХН, CDClj); 9.63(s,1Н,СНО),7.44-7.20(m,10Н,2Ph),6.99(s,lH, CHPh₂),6.06(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2and 3.3Hz),4.53(dd,lH,h-l’,J=2.7 and 8.7 Hz),4.42(dt,lH,H-3’,J_d=3.0Hz,J_f=4.2Hz),4.03(d,lH,8aCH₂,J=9.0Hz), 3.68(dd,lH,H-4’,J=5.1 and 9.3Hz),3.66(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz),3.52(t, 2H,CHaO,J=7.2Hz),3.40(dq,1H,H-5’,J , = 9.3Hz,J =6.3Hz),3.34(s,3H, CH.O); 2.74(t,lH,H-l,J=4.2Hz). ^{α q}

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 9 / .

/1R -(1<Z ,3a B ,4 8 ,4a β ,7 β , 7a οί , 8a В ) / 8a- / (6-Деокси-3,4-0тиокарбонил- β -D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6. 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -инда^ и цен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Смес на междинния продукт 1 (0.500 г) и тиокарбо- j нилдиимидазолл(0.270 г) в тетрахидрофуран (10 мл) се кипи на об ратен хладник в продължение на 6 ч.Разтворителят се изпарява във

вакуум до получаването на жълт остатък,който се подлага на мигновена iхроматография върху силикагел при елуиране с хексан етил ацетат (3:1) до получаването на посоченото в наименованието съе динение ( 0.263 г).

(¹Н, CDClj):9.71(s,1Н,СНО), 7.44-7.26(m,10Н,2xPh), 6.97(s,lH, CO₂CHPh₂), 6.06(dd,1H,H-2,J=1.5 and3.3Hz), 4.93(dd,ΙΗ,Η-З’,J=3.9 and 7.2Hz), 4.63(d,1H,H-1’,J=2.1Hz), 4.61(dd,lH,H-4',J=7.2and9.3Hz),

4.12(m,lH,H-2’), 4.08(d,1H,8aCH₂,J_AB=9.3Hz), 3.74(d,1H,8aCH₂, J_ab=9.3Hz), 3.64(m,lH,H-5'), 2.69(m,1H,H-1).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 10

I lR-( 1</,Зав ,4 β ,4a β ,7 β ,7 a cZ ,8a β) / 8 а/(2,6-Ди деокси- β D -алопиразонилокси)метил/-4-формил-4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро

-757-метил-З-(1-метилетил)т1,4-метано- s-индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина,диф енилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 7 (1.5 г) в смес от тетрахидрофуран ( 30 мл) и метанол ( 150 мл) се прибавя на кгнки капки,при стайна температура, 1 bl-ен разтвор на солна киселина (15 :

( 15 мл) при енергичйо разбъркване,След завършване на реакцията (ксонтрол с тънкослойна хроматографея (ТХ)),се прибавят наси-

тен разтвор на натриев бикарбонат ( 50 мл) и етил ацетат (200 мл ) и сместа се разпределя.Органичният слой се промива с вода ( 2 х 100 мл) и се суши над магнезиев сулфат,Отстраняването на р з

А разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан :етиллацетат (5:1) и ι ( 2:1) до получаването на посоченото в наименованието,съедине ние (1.1 г),под формата на бяла пяна.

?(¹H,CDC1₃): 9.73 (s , 1Н, СНО) , 7.5-7.2 (m, 10Н, 2Ph) , 6.99 (s , 1Н, CHPhp , 6w65<dd,lH,H-2,J=1.2 and 3.3Hz), 4.64(dd,1H,H-1’,J=2.land9.6Hz),4.11 (m,lH,H-3'), 4.06(d,lH,8aCH₂,J_AB=9.3Hz) , 3.70 (m, 2H,H-5 ' <)nd 8aCH₂) , 3.34(m,lH,H-4’), 2,75(t,lH,Ht1,J=3.6Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 11 a<^ / !R-(loC,3aS ,4β , 4a oL., 7в~<8ав )/ 8a-/(2,6-Дидеокси-3,4-0-тио карбонил-β - Б-алопиранозилокси)метил/-4-фолмиб-4,4а,5,6,7,7а,8, 8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1.4-метано- зИндацен-За(1Н9-т . карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинен продукт 10 ( 160 мг) и дибуги.!

тил калаен оксид ( 124.5 мг) в сух толуен ( 15 мл) се нагрява на обратен хладник 2 ч в колба,снабдена с хладник на Дин-Старк и след това се оставя да пресдтои при стайна температура в азотна атмосфера. Към получения разтвор се прибавя фенил-хлоротионоформиат (69 рл) в сух толуен ( 5 мл).Контролът с тънкослойна хроматография • · · ·

-76показва,че реакцията завършва след 6 часа.Разтворителят се отстра нява при понижено налягане и суровата смес се подлага на мигнове на хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат (20:1) и ( 15:1) до получаването на посоченото в наименованието, съединение (150 мг),под формата на безцветно масло.

S^H^DClj): 9.72(s,1Н,СНО) , 7.5-7.2 (m, 10Н, 2Ph) , 6.97 (s , 1Н, CHPhp , 6.05(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.10(m,lH,H-3’),4,61(dd,1H,H-1’,J= 2.4and8.4Hz), 4.44(dd,lH,H-4’,J=6.6and9.0Hz), 4.04$nd3.67(2d,2H, 8aCH₂,J_AB=9Hz); 3.62(m,lH,H-5'), 2.70(t,1H,H-1,J=2.0Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 12.

I 1R-( lot,3a6 ,4B ,4a6 ,76 ,7ao4 ,8a6 )/8а-/(4-0-Алил-2,6-дидеокси-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-Зь(1-метилетил)-1,4-метано-з-индацен-За(1Н) карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинния продукт 10 (400 мг) и трибутил калаен оксид ( 240 мг) в сух толуен ( 50 мл) се нагрява на обратен хладник в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк и

след това се оставя да престои при стайна температура в азотна атмосфера( отделясе приблизително 10 мл ацеотропна смес ).Последовалтелно се прибавят алил бромид ( 71 ^л) и тетрабутиламониев флуорид ( 1М-ен разтвор в тетрахидрофуран,0.95 мл) и сместа се на>:· грява при 50°С 24 ч.Отстраняването на разтворителя води до полу чаването на остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел:тпри елуиране с ацетон:хексан (1:20) и (1:15) до получаването на посоченото в наименованието,съединение(300 мг) ,под формата на безцветно масло.

£(¹Н,CDC1₃): 9.72(s ,1Н,СНО), 7.52-7.2(m,10Н,2Ph), 6.98(s,Н,CHPh₂), 6.05(dd,lh,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.89(m,1H,CH=CH₂), 5.30-5.20(m,2H, CH=CH₂), 4.64(dd,1H,H-1¹,J=2.land9.6Hz),4.19(m,lH,H-3’), 4.15-3.95

······ *····· ·· ·· • · · ······ ····*··· ····· • · ····· ······ • · · · · · ··· ····· ··· ····

-77(m,3H,CH₂CH=CH₂+8aCH₂), 3.80-3.60(m,2H,H-5'+8aCH₂), 3.06(dd,lH, H-4’,J=3.3and9.3Hz), 2.75 (t, 1H,H-1, J=3.9Hz) , 2.38.(bd, ΙΗ,ΟΗ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 13 /1R-(1 ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a cZ , 8a β ) 8a /(2,6-Дидеокси-4-0-(2

-метил-2-пропенил)- β- D-алопиранозилокси)метил/-4-фолмил64,4а, 5,6,7,7а,8.8а -октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- _s: индацен -За(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междиянния продукт 10 ( 500 мг) и трибутил калаен оксид (300 мг) в сух толуен ( 50 мл) се нагрява на обратен хладник в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк и след това се- оставя да престои при стайна температура в азотна атмосфера(отстраняван се приблизително 10 мл ацеотроп).Последователно се прибавят З-бромо-2-метил-пропен ( 202 рл) и тетрабуг тил амониев флуорид ( 1М-ен разтвор в тетрахидрофуран,0.90 мл) и сместа се нагрява при 50°С 24 ч.Отстраняването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с ацетон:хексан (1:20) и (1:15) до получаване на посоченото в наименованието,съединение( 340 мг),под формата на безцветно масло.

(¹Н, CDClj): 9.73(s,1Н,СНО), 7.50-7.20(m,10Н,2Ph), 6.98(s,lH,CHPh₂), 6.05(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.5and3.6Hz), 4.96 and 4.91(2m,2H,=CH₂), 4.65(dd, 1H,H-1',J=1.8and9.6Hz), 4.20(m,ΙΗ,Η-З'),4.05 and 3.68(2d,2H,8aCH₂, J_ab=9.3Hz), 4.00iand 3.87(2d,2H,OCH₂,J_AB=12Hz), 3.75(m,1H,H-5'), 3.06(dd,lH,H-4’,J=3and9.6Hz), 2.75(t,1H,H-1,J=3.6Hz), 2.37(bd,lH, OH), 1.76(bs,3H,CH₃C=CH₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 14 /1R-(1 ol, За β ,4β ,4ав ,7β ,7ac£,8a_B)/ 8a-/(l ,7R,9R) -2,5,8

-Триокса-3,7-диметил -цис-бицикло/4.4.0/-дeκ-9-ил-oκcи-чeτил-4φopчил-4 ,4а, 5,6,7,7а, 8,8а -октахидро -7-метил>-3-(1-метилетил) • · · ·· ·

-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил ме тилов естер

Към разтвор на междинен продукт 12 (200 мг) в безводен тетрахидрофуран (10 мл.) се прибавя,при стайна температура в азотна атмосфера,твърд живачен трифлуороацетат (213 мг) ,на ¹ малки порции.Реакционната смес се оставя да престои при стайна температура в продължение на 30 мин и след това при енергично разбъркване се прибавя трибутил калаен хидрид.След 30 мин. се

прибавя етил ацетат ( 50 мл)_;и суспензията сефилтрува през зейит дп пплучаването на безцветен разтвор,който се промива с вода ( 3 х 100 мл) и се суши над магнезиев сулфат.Отстраняването на разтворителя дава масло, което се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с ацетон:хексан ( 1:15) до получаването на посочиното в наименованието,съединение (120 мг),под формата на смес 1:1 от епимерите при С-3 .

S^H/ZDClj) includs: 4.73 (dd, 1Н,Н-9' , J=3.0and6.3Hz), 4.62(dd,lH, H-9',J=2.1 and 9.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУФКТ .15 / 1R-(1</. ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7acC,8aB )/ 8a /( 1 S,7R,9S )-2,5,8Триокса-3,3,7-триметил-цис-бицикло/4.4.0/-дек-9-ил-окси-метил)4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилмети лов естер

Към разтвор на междинния продукт 13 ( 325 мг) в безводен тетрахидрофуран /10 мл/ се прибавя при стайна температура, в азотна атмосфера,твърд живачен трифлуороацетат (303 мг), на малки порции.Реакционната смес се оставя да престои при стайна температура в продължение на 30 мин. и след това при енергично разбъркване се прибавя трибутилкалаен хидрид (192 /ш).

·· ···· ·· ···· • ··· ··· · ·

-79След 30 мин. се прибавя етил ацетат (50 мл) и суспензията се филтрува през зелит до получаването на безцветен разтвор,който се промива с вода( 3 х 100 мл) и се суши над магнезиев сулфат ,Отстраняването на разтворителя води до получаването на масло, което се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с ацетон:хексан (1:20) и (1:15) до получаването на посоченото в наименованието,съединение( 210 мг) ,под формата на безцветно масло.

δ (¹H,CDC1₃):9.73(s,1Н,СНО),7.50-7.20(m,10H,2Ph),6.98{s,1H,CHPh₂), 6.03(dd,1H,H-2,J=1.2Hz,J=3.3Hz),4.54(dd,lH,H-9',J=2.land9.6Hz),4.25 (m,2H,H-7’,andH-1'),4.05 and. 3.66(2d,2H,8aCH₂,J_Ab=9Hz), 3.41 and 3.18(2d,2H,OCH₂,J_AB=11.7Hz), 3.25(dd,lH,H-6’,J=3.3 and 10.2 Hz), 2.75(t,lH,H-l,J=3.3Hz), 1,25 and 1.16(2s,2CH₃).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 16 /1Е-(1о(,Зав ,4β ,4аВ , 7β ,7ao<,8aB )/ 8a-/2,6-Дидеокси-4-0-рметоксибензил- β- D-алопиранозилокси)метил -4-формил-4,4а,5,6, 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-/1-метилетил/-1,4-метано- s-индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинния продукт 10 ( 500 мг) и три-

бутил калаен оксид (374 мг) в сух толуен (500 мл) се нагрява на обратен хладник в колба,снабдена с кондензатор на Ден-Старк и след това се оставя да престои при стайна температура , в азотна атмосфера(отстраняват се приблизително 10 мл ацеотропна смес). Последователно се прибавят р-метоксибензил хлорид (135 у л) и тетрабутиламониев флуорид ( 1М-ен разтвор в тетрахидрофуран,1.5 мл) и сместа се нагрява при 60°С в продължение на 24 ч.Отстра^· няването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматогрифия върху силикагел при елуиране с ацетон:хексан (1:20) и (1:15) до получаването на посоченото в наименованието , съединение (ЗООмг),под формата на безцветно масло.

• · ···· ·· ···· · · ·· ··· ·· · ··· • ·*··· · · · · ···· • · · · * ·· · · · · · * • · ···· ··· _₈₀_ ............

(^CDClj): 9.72(s,1H,CHO) , 7.5-7.2 (m, 12H, 2Ph and 2Hortho), 6.97(s, H,CHPh₂), 6.88(m,2H,2Hmeta), 6.04(dd,1H,H-2,J=1.5Hz_iJ=3.6Hz), 4.64 (dd,lH,H-l«,J=2.4 and 9.9Hz), 4.55 and 4.50(2d,2H,CH₂Ph,J_AB=11;2Hz), 4.18(m,lH,H-3’), 4.04,and 3.66(2d,2H,8aCH₂,J_AB=9Hz), 3.80(s,3H,CH₃O), 3.74(m,lH,H-5’), 3.12(dd,lH,H-4',J=3.0and9.3Hz), 2.75(t,1H,H-1;J=3.9Hz

МЕЖДИНЕН ΠΡΟДУKT17 /1R-(1c4 ,3aB ,4B ,4aB ,7β ,7a<X ,8aB )/ 8a-/(З-О-Алил-2,6-дидеокси-4-О-р-метоксибензил-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил4,4a,5,6,7, 7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано - з-индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

При енергично разбъркване към разтвор на междинния продукт 16 (400мг) в безводен тетрахидрофуран (10 мл) се прибавя, в азотна атмосфера,при О°С,разтвор на натриев хидрид (48 мг),на малки порции.След като прибавянето приключи,сместа се оставя да престои при стайна температура 1 час и след това се прибавя алил бромид ( 191 р.л),След 24 ч реакцията се прекъсва чрез прибавянето на амониев хлорид( 1N разтвор във вода,100 мл) и сместа се екстрахира с етил ацетат (200 мл).Органичният слой се промива с вода ( 1 х 100 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо и полученото масло се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат:хексан (1:20) и ( 1:15 ) до получаването на посоченото в наименованието,съединение(400 мг),под формата на безцветно масло.

^(¹Н,СДС1₃): 9.74 (s , 1Н, СНО) , 7.5-7.2 (m, 12Н, 2Ph and 2Hortho) , 6.98 (s,H,CHPh₂), 6.86(m,2H,2Hmeta), 6.04(dd,1H,H2,J=1.2and3.3Hz), 5.95(m,

1H,CH=CH₂), 5.28 and 5.15(2m,2H,CH=CH₂), 4.60(m,2H,H-1’andGH₂Ph),

4.42(d,lH,CH₂Ph,J_AB=11.4Hz), 4.13(m,2H,CH₂-CH=), 4.02 and 3.68 (2d, 2H,8aCH₂,J_AB=9.6Hz), 3.89(m,2H,H-5' and H-3’), 3.80(s,3H,

CH₃O), 3.09(dd,lH,H-4’,J=3.0andp;3Hz), 2.73(t,1H,H-1J=3.9Hz). МЕЖДИНЕН ПР0ДУКТ18 /lR-/lo(,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7a<Z,8aB )/ 8a-/(З-0-Алил-2,6-дидеокси-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8аоктахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1H) -карбоксилова киселина,дифенил метилов естер

Разтвор, на междинния продукт 17 ( 2.3 г) в дихлорометанк(200 мл) се разбърква с вода (200 мл) и се прибавя 2,3дихлоро-5,6-дицианохинон (0.79 г).След разбърква в продължение на една нощ при стайна температура,сместа се филтрува през Зелитов слой с използване на повече дихлорометан.Дихлорометановата фаза след това се промива с воден разтнвор на натриев бикарбонат, последван от разтвор на натриев хлорид,след което се суши над безводен натриев сулфат,филтрува се и се концентрира до сухо .Осдтатъкът се хроматографира върху силикагел при използване на дихлорометан:метанол (49:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (1,95 г),под формата на бяла пяна.

5(^ХН,СОС1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.45-7.24(m,10Н,2Ph₂), 6.99(s,lH, CHPh₂), 6.05(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.5and3.3Hz), 5.95(m,1H,CH=CH₂), 5.26(m, 2H,CH=CH₂), 4.53(dd,1H,H-1’,J=1.8and9.6Hz), 4.19 and 3.96(2m,2H, CH₂CH=CH₂), 4.03 and 3.69(2d,2H,8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.80(q,1H,H-3', J=3.3Hz), 3.60(dq,1H,H-5’,J=9.6and6.3Hz), 3.23(ddd, lH,H-4',J=10.8, 9.6and3.3Hz), 2.74(t,1H,H-1,J=3.6Hz), 2.25(d,ΙΗ,ΟΗ,J=10.8Hz). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 19 /1R- (lcZ,3aB ,4β ,4aB ,7 β ,7a<<,8aB )/ 8a -/( З-0-Алил-2,6дидеокси-4-0-(метилтио)тиокарбонил-β -D -алопиранозил)метил/

-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро -7-метил-3-(1-метилетил)

-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер • » • · · ·

• · · · · · • · · · · · · • · · · • · · · ·

-82Към охладен разтвор на междинния продукт 18 (1.9 г) в безводен тетрахидрофуран ( 50 мл) в азотна атмосфера се прибавя на малки порции натриев хидрид (240 мг) и каталитично количество имидазол.След това ледената баня се отстранява и ' реакционната смес се оставя да престои при стайна температура и разбъркване в продължение на 1ч.Последователно се прибавят въглероден дисулфид (1.5 мл) и метил йодид (1.25 мл).След завършване на реакцията ( контрол с ТХ),суровата смес се излива в етил ацетат (500 мл) и реакцията се прекъсва с 0.1 N-ен разтвор на амониев хлорид (250 мл).След това органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид ( 1 х 500 мл) и вода (1 х 500 мл) суши се над безводен натриев сулфат и се концентрира до сухо. Маслообразният остатък се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан: дихлорометан (3:5) като елуент до получаването на посоченото в наименованието, съединение (1.85 г),под формата на бяла пяна.

§(¹H,GDC1₃): 9.74(s,lH,CHO), 7.45-7.24(m,10H,Ph₂), 6.99(s,lH, CHPh₂), 6.06(dd,lH,H-2,J=l,2and3.3Hz), 5.88(m,lH,CH=CH₂), 5.41(dd,lH, H-4’,J=2.7and9.6Hz), 5.22(m,2H,CH=CH₂), 4.70(dd,1H,H-1',J=2.land9.3 Hz), 4.20-4.02(m,5H,H-5’,CH₂-CH=CH₂,H-3',and8a-CH₂(1H)), 3.71(D,1H, 8a-CH₂,J=9.3Hz), 2.75(t,1H,H-1,J=3.9Hz), 2.58(s,3H,SCHj).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 20 (а) /lR-(l<=C,3aB ,4B ,4aB ,7В ,7ао(,8аВ )/ 8a-/(lS ,4S ,6R,· 8R)-2,7-Диокса-4,6-диметил-цил-бицисло/3.4.0/-нон-8-ил-окси-метил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил)-1,4-метано- 5-индацен-За/1Н/-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер и (б) /lR-(lc/,3aB ,4В ,4аВ ,7В ,7ао(,8аВ )/ 8a-/(lS ,4R,6R,8R)- 2,7 -Диокса-4,6-диметил-цис-бицикло/3.4<. 0/-нон- 8 - ил-окси-метил -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) • · · ·

-1,4-метано- s-индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилме

тилов естер

Разтвор на междинния продукт 19 (1,8 г ) в сух толуен {250 мл) се продухва с поток от аргон в продължение на 1 час и след това се кипи на обратен хладник.Със спринцовка в продължение на около 2 часа,при поддържане на нагряването и потока от аргон, се прибавят каталитично количество азобис (изобутиронитрил) и трибутилкалаен хидрид (0.95 мл),разтворени в сух толуен ( 50 мл).След като приключи прибавянето реакционната смес се кипи допълнително още един час на обратен хладник и след това се охлажда,концентрира се до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан и след това на хекасн:етил ацетат (9:1) като Меудипи^я!· продукт 20(a) се получава под формата на бяла пяна ( 680 мг; Rf=0.31 в хексан: етил ацетат 4:1) и Междинният продукт 20 (б) се изолира като бяла твърдо вещество ( 180 мг; R =0.25 в хексан :етил ацетат 4:1 ).

(а) (¹HjCDCl₃): 9.73 (s , 1Н, СНО), 7.45-7.28 (m, 10Н, Php , 6.99£s,lH, CHPh₂), 6.05(DD, ΙΗ,Η-2,J=1.2and3.6Hz), 4.46(dd,ΙΗ,Η-8’,J=2.4and9.6 Hz), 4.14-4.05(m,3H,8a-CH₂(lH),H-1'andCH₂-3’,(1H)>, 3.67(d,lH,8aCH₂,J=9.3Hz) , 3.36-3.25 (m, 2H,H-6 ’ and СН₂~3 ’ , (1H) ) , 2.77 (t, 1H,H-1, J=3.9Hz), 1.05(d,3H,$'-CH₃,J=6.9Hz).

(б) ’S (¹H,CDC1₃): 9.7 2 (s , 1H, CHO) ; 7.45 - 7.24 (m, 10H, Ph₂) , 6.99(s,lH, CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2,J=1.50and3.6Hz), 4.42(dd,ΙΗ,Η-8',J=2.1and 9.6Hz), 4.20(m,lH,H-l’), 4.07 and 3.67(2d,2H,8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.97(t, lH,CH₂-3*,J=8.4Hz), 3.54(m,lH,H-6’), 3.46(dd,1H,CH₂-3',J=10.5Hz), 2.77(t,lH,H-l,J=3.9Hz), 2.53(m,lH,H-4’), 1.02(d,3H,6-CH₃).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 21 / 1R-( l/,3aB ,4β ,4aB ,7 β ,7а^,8ав)/ 8a-/( 4-О-Алил-2,6дидеокси-3-0-(метилтио)тиокарбонил-β -D - алопиранозилокси)

метил-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил) -1,4-метано- s -индацен-За(1Н) -карбоксилова киселина, дифе.-г нилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 12 /380 мг/ в безводен тетрахидрофуран (.10 мл ) се прибавят твърд натриев хидрид ( 48 мг ) ,на малки порции и каталитично количество имидазол, в азотна атмосфера и при О°С.След като прибавянето приключи ледената баня се отстранява и реакционната смес се оставя да престои при стайна температура в продължение на 1 ч.Последовател но се прибавят въглероден дисулфид ( 300 ^л) и метил йодид (250 ^л).След 4 ч сместа се излива в етил ацетат ( 100 мл ) и реакцията се прекратява чрез прибавяне на воден 1 N-ен разтвор на амониев хлорид ( 50 мл ).Органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид ( 1 х 100 ) и с вода ( 1 х 100 ),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо.Полученото жълто масло се подлага на мигновена хроматография върху силикагел и се елуира с етил ацетат : хексан ( 1: 25) и (1:20) до получаването на посоченото в наименованието съединение (350 мг) под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDC1₃): 9.73 (s , 1Н, СНО) , 7.50-7.20(m,10Н,2Ph), 6.98 (s ,Н, CHPhp , 6.24(m,lH,H-3'), 6.05(dd,1H,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.85(m,1H,CH=CH₂), 5.30-5.20(m,2H,CH=CH₂), 4.56(dd,1H,H-1',J=1.8and9.3Hz), 4.15-3.75 (m,4H,CH₂CH=CH₂+8aCH₂+H-5’), 3.69(d,1H,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.21(dd, lH,H-4',J=3.3and9.3Hz), 2.72(t,ΙΗ,Η-1,J=3.89Hz), 2.59(s,3H,SCiy . МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 22 /1 R-(lol,3aB ,4B ,4aB ,7 B,7ao<,8aB )/ 8a-/(2,6-Дидеокси-З0-(метилтио)тиокарбонил-4-0-(2-метил- 2-пропенил )-В -0 -алопиранозилокси) метил -4- формил- 4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро -7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен -За(1Н)- карбок• · · · · · • · · · · ·

• · · · · · · · · ···· • · ··· ♦ · · · · · ♦ · ·· ···· · · · ····· ·· · ·· ··

-85силова киселина,дифенилметилов естер

Към охладен разтвор на междинния продукт 13 (700 мг ) в безводен тетрахидрофуран ( 30 мл) , в азотна атмосфера се прибавя натриев хидрид ( 85 мл ) ,на малки порции, и каталитично количество имидазол.Ледената баня се отстранява и реакционната смес се оставя да престои при стайна температура и магнитно разбъркване в продължение на 1 ч.Последователно се прибавят въглероден дисулфид ( 0.54 мл ) и метил йодид ( 0.45 мл). След завършване на реакцията( контрол с ТХ),суровата смес се излива в етил ацетат (200 мл ) и реакцията се прекратява с 0.1 N-ен воден разтвор на амониев хлорид (120 мл). Органичният слой след това се промива с разтвор на натриев хлорид ( 1 х 200 мл ) и вода ( 1х 200 мл ),суши се над безводен натриев сулфат и се крнцентрира до сухо.Маслообразният остатък ,получен по този начин, се подлага на хроматография върху силикагел при из^ ползване на хексан: етил ацетат (19:1) като елуент за получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 600 мг ).

(¹Н, CDCI₃): 9-33( s,lH,CHO ),7.45-7.26(m,10Н,Ph₂), 6.98( s, 1H,CHPh₂),6.24(m,lH,H-3’),6.05(dd,lH,h-2,J=1.5 and 3.6 Hz),4.92 and 4.88 (2m,2H,C=CH₂), 4.55(dd,lH,H-l’,J=2,1 and 9.6 Hz),4.03 and 3.96 (2d,2H,8a-CH₂,J=9.3 Hz),3.95 and 3 .82 (2d,2H,CH₂ C=CH₂,J=12.3 Hz),3.86 (m,lH,H-5’),3.19 (dd,lH,H-4’,J=3 and

9.3 Hz),2.72 (t,1H,H-1,J=3.9 Hz), 2.58 ( s,3H,SCHj),1.70(s,3H; МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 23 _{сн с=сн} (а) / 1R-( 101,3а _β,4 В,4а_В ,7,7асС,8а_В )/ 8а-/( l_s ,4R,7R,9R/-

2,8- Диокса-4,9-диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил

-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3 -(1-метил)1,4-метано- s-индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер и ·· ···· ·· ····

-86(б) / 1R- (lot ,3a B ,4 В ,4a B ,7 β ,7a(< ,8a β )/ 8a-/( 1 S ,4 S ,7R,

9R) - 2,8-Диокса-4,9-диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-ме-z тил/-4-формиб-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

МЕТОД А

Разтвор на междинния продукт 21 (1.5 г) в сух толуен ( 150 мл) се продухва с поток от аргон в продължение на 90 мин.

и след това се кипи на обратен хладник.Към този кипящ разтвор

се прибавят трибутил калаен хидрид (847уйл) и азобис(изобутиронитрил) (33 мг ).Нагряването продължава допълнително още 30 мин.

Отстраняването на разтворителя дава сурова смес,която се подлага на мигновена хроматография двукратно върху силикагел при елуира не с хексан:етил ацетат (20:1 ) до получаването на посоченото в наименованието съединение ( а ) ( 150 мг; R =0.6 в хексан:етил ацетат 4:1 ) и посоченото в наименованието съединение ( б ) (260 мг; R =0.4 в хексан: етил ацетат 4:1 ), и двете под фор мата на безцветни масла.

( a )S(¹H,CDCI₃):9.75(s,lH,CHO),7.5-7.2(m,10H,2Ph),6.99(s,lH, CHPh₂),6.06(dd,lh,H-2,J=1.5 and 3.6 Hz),4.46(dd,lH,H-7',J=3 and 7.5Hz),4.06-3.95(m,2H,H-3 and 8aCH₂),3.78-3.60(m,2H,H-1 and 8aCH₂),3.38-3.26(m,2H,H -9’ and H-3’),2.75(t,1H,H-1,J=

3.6 Hz),0.98 ( d,3H,CH₃,CH,J=6.9 Hz).

( 6 ) B (¹H,CDCI₃):9.74(s,1H,CHO),7.5-7.2(m,10H,2Ph),6.99(s, lH,CHPh₂),6,04(dd,lH,H-l,J=1.5 and 3.6 Hz),4.74(t,lH,H-7', J=3Hz),3.94 and 3.61 (2d,2H,8aCH₂,Д_дв=9,3Hz),3.88 and 3.76 (2d,2H,H-3’),3.66(m,lH,h-9’),3.43(t,lH,H-l',J=7.8 Hz),2.72 (t,lH,H-l,J=3.6 Hz),2.46(2m,2H,CHCH₂O and H-5’), 0.97(d,3H, J=6.9 Hz).

• · · · • ·

МЕТОД Б

Разтвор на междинния продукт 98 (685 мг) в оксилен ( 15 мл ) се продухва с поток от аргон в продължение на 1 ч и след това се кипи на обратен хладник.Прибавя се трибутил калаен хидрид (379 ^л) и нагряването продължава още 15 мин.След охлаждане сместа се разпределя между диетилов етер ( 150 мл ) и вода ( 100 мл ).Органичният слой се промива с наситен воден раз?? твор на калиев флуорид докато вече не се забелязва утайка от трибутил калаенияфлуорид,филтрува се и се изпарява до сухо до получаването на остатък ,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел двукратно при елуиране с хексан:етил ацетат ( 20:1 ) до получаването на посоченото в наименованието, съединение (а) ( 103 мг) и до съединението,посочено в наименованието като ( б) ( 235 мг ).

МЕТОД В

Разтвор на трибутил калаен хидрид ( 684 /<л) в сух толуен ( 25 мл ) се продухва с поток от аргон в продължение на 1 ч и се кипи на обратен хладник,след което към него в продължение на 2 ч със спринцовка се прибавя разтвор на междинния продукт 98 ( 610 мг ) в сух толуен ( 30 мл).Нагряването продъл жава три и половина часа.Отстраняването на разтворителя дава суров продукт,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан и хексан:етил ацетат ( 10:1 ) до ( 8:1 ) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( а ) ( 357 мг ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 24 / 1R-(1 X , За β , 4 β ,4а β , 7 β , 7а <4,8а β )/ 8а- /(1 S , 7R,9R)-2,8Диокса-4,4,8-триметил-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s -индацен-За(1н)-карбоксилова киселина,дифенил• · метилов естер

Разтвор на междинния продукт 22 ( 580 мг ) в сух толуен ( 150 мл ) се продухва с поток от аргон в продължение на един час и с лед това се кипи на обратен хладник.Като се поддър жа продухването с аргон и кипенето,в продължение на 2 ч със спринцовка се прибавя каталитично количество азобис(изобутиронитрил) и трибутил калаен хидрид (0.27 мл ),разтворен в сух толуен ( 20 мл ).След приключване на прибавянето,реакционната смес се

кипи на обрпатен хладник още 3 трира се във вакуум и остатъкът при използване на хексан и след като елуенти до получаването на ч и след това се охлажда,конценсе хроматографира върху силикагел това хексан : етил ацетат (4:1) посоченото в наименованието,

съединение (100 мг ),под формата на бяла пяна.

δ (¹Н, CDCI₃):9.74(s,lH,СНО),7.45-7.26(m,10H,Ph₂),6.99(s,lH, CHPh₂),6.04(dd,h-2,J=1.5 and3.6Hz),4.71(t,1Н,Н-7’ J=3.3 Hz),3.93and 3.61/2d,2H,8a-CH₂,J=9.3 Hz),3.85(t,1H,H-1',J=8.7Hz),3.56(m,1H, h-9'),3.55and 3.43(2d,2H,CH₂-3’,J=8.4),2.73()m,1H,H-1),108 and

0.99(2s,6H,4'-CH₃)-.

/1 R-/loi ,3a β,4Β ,4aB ,7 β ,7ac<,8aB )/ 8a-/( б-Деокси-β -D алтропиранозилокси)метил/-4-(1,3-диоксолан-2-ил ) -4,4a,5,6,7,7a,

8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацев - За, (1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

При разбъркване към разтвор на междинния продукт ! ( 2.5 г) в сух ацетонитрил (100 мл ) се прибавя при стайна температура , етилен гликол ( 30 мл ),триметил ортоформиат ( 2 мл) и каталитично количество р-толуенсулфонова киселина.Реакционна та смес се разбърква в продължение на 3 ч,след това се разрежда с етил ацетат ( 300 мл ) и се промива последователно с 5%-ен воден разтвор на натриев бикарбонат и с разтвор на натриев хлорид. Органичният слой се суши над сух натриев сулфат,концентрира се • · · ·

и се пречиства чрез хроматография върху силикагел при използване на хексан:етил ацетат ( 3: 1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (2.6 г ).

£ (¹H,CDCI₃) :7.46-7.24(m,10H,Ph₂)_,6.94(s,lH,CHPh₂) ,5.83(dd,lH, H-2,J=1.2andf 3.6 Hz),5.07(s,1H,CH,CHbeta),4.65(d,1H,H-1',J=1.8 Hz),4.07-4.04(m,2H,8a-CH₂(1H)andH-3’),3.88-3B69(m,8H,OCH₂CH₂O, 8a-CH₂(lH),H-2',H-4* andH-5’),2.51(t,H-1,J=4.5Hz),2.37(d,ΙΗ,ΟΗ,J= 2.7Hz),2.28(d,ΙΗ,ΟΗ,J=3.6Hz),2.04(d,1H,OH,J=5.7Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 26 / 1R- ( 1(/.,За В ,4 В ,4a В,7 B,7a</,8aB )/ 8а- /( 6-Деокси-3,40-изопропилиден - В- D-алтропиранозилокси)метил/-4- (1,3-диокг солан-2-ил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)—1,4-метано- s-индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина, дифенилме-тилов естер₍

Към разтвор на междинния продукт 25 ( 200 мг ) в сух ацетонитрил ( 6 мл ) в азотна атмосфера , се прибавят 2,2-диметоксипропан (0.6 мл ) и каталитично количество пиридиниев р-толуенсулфонат.След 4 ч престояване при стайна температура ,сместа се обработва с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат ( 20 мл ) и се екстрахира двукратно с етил ацетат ( 20 мл ).Събраните органични фази се промиват с вода и наситен воден разтвор на натриев хлорид,сушат се над магнезиев сулфат, филтруват се и се изпаряват.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан : етил ацетат ( 4:1) и подходящите фракции се събират и изпаряват до получаването на посоченото в наименованието,съединение (205 мг ),под формата на бяла пяна.

(¹H,CDCI₃) : 7.47-7.2 (m, 10Н, 2Ph ) , 6.93 (s , 1Н, CHPhp , 5.83 (dd, 1H, H-2,J=1.2 and 3.6 Hz),5.08/s,1H,1,3-dioxolan),4.56(d,1H,H-1’,J= 2.1 Hz) ,4.3(dd,lH,H-3’ ,J=3.6and 5.7Hz) , 4.04 (d, 1H, A part of8aCH₂, • · · · · · ··· • ···· · · · · · ··· • · ··· · · · · · · · · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· · ·

-90J_AB=9Hz) ,3,95-3.75(m,7H,H-2’,H-4';OCH₂CH₂Oand B part of8aCH₂) ,3'. 44(dq,1H,H-5',J=6and9 Hz),2.65(m,1H,CHMe^,2.51(bt,1H,H-1,J=3.6 Hz),2.35(d,lH,OH2’),1.47,1.36(2s,6H,2CH

P изопропилиден кетал ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 27 /1К-(1о(,За S ,4 В,4а β,7 B,7ao/,8as )/ 8а-/( 6-Деокси-3,4-0-изопропилиден-β - D-алопиранозилокси)-4- (1,3-диоксолан-2-ил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- ^s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към смес от хромен оксид (С 0^ ) (412 мг) в дихлорометан ( 25 мл ),при 0°С, се прибавя пиридин ( 0.67 мл ).След 15 минути,се прибавя оцетен анхидрид (0.40 мл ),последван след 10 мин. при същата температура от разтвор на междинния продукт 26 (750 мг ) в дихлорометан ( 25 мл).Сместа се разбърква 2 ч,филтру ва се през колона със силикагел , с горен слой от магнезиев сул-

фат и филтратът се изпарява до сухо при понижено налягане до получаването на сироп.Този сироп се разтваря в метанол: вода (10:1; 11 мл ) и след това се прибавя натриев борохидрид(40 мг ) при 0°С. Сместа се държи при 0°С в продължение на 2 ч,подкислява се до pH 6-7 с разтвор на I N солна кисел ина и след това се изпарява до сухо при понижено налягане до получаването на твърдо бяло вещество, което се пречиства двукратно чрез мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан:етил ацетат (6:1) и после (2:1).Фракциите,които съдържат желания продукт се събират и се изпаряват във вакуум до получаването на посоченото в наименованието, съединение ( 585 мг ).

S(¹H,CDCI₃)7.24-7.40(m,lfH,2Ph)6.92(s,lH,CHPh₂)5.87(dd,lH,H-2,J=

3.9,1.5Hz)5.09(s,lH,CH-dioxolan)4.52(t,lH,H-3’J=4.5Hz)4.45(d,1Н,

H-l'J=7.8Hz)4.07(d,lH,8aCH₂J=9Hz)3.74-3.86(m,6H,2CH₂dioxolan,H-4'

8aCH₂)3.67(m,lH,H-2')2.65(m,lH,H-14)2.58(t,lH,H-ll).

• ·

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 28 /1К-(1о( ,3а β ,4 β ,4а β , 7 β,7а<£ ,8а β )/ 4-Формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-8а-х-идроксиметил-7-метил-3-/1-метилетил/-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,2-(триметилсилил)

етилов естер

Разтвор на сордарицин ( 6.6 г ) и 0-/2-(триметилсилил)етил-N , М -диизопропилизо.карбамид (9.3 г ) в безводен тетрахидрофуран ( 150 мл ) се нагрява на обратен хладник в продължение на 3 ч.След това сместа се охлажда до стайна температура,филтрува се и се концентрира до сухо.фстатъкът се разтваря в етил ацетат ( 750 мл ) и се промива последователно с 1 П -на солна киселина, 5%-ен воден разтвор на натриев бикарбонат и с воден разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се суши над безводен натриев сулфат,концентрира се във вакуум и се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при използване на (10 %-ен)етил ацеттат в хексан като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (6.8 г ),под формата на бяла пяна.

(¹Н,CDCI3)9.67/s,1Н,СНО)6.07(dd,ΙΗ,Η-2J=1.5,3.6Hz)4.27(m,2Η, CH2CH2O)3.93,3.49(2m,2H,8aCH2)2.75(bs,lH,OH), 2.54(t,1H,H-1)1.05(m 2H,CH2CH2Si)0.07(s,9H,(CH3)3Si) (¹³C,CDCI3)204.9(CHO)173.6(COO

TMSE)148.2(C-3),130.6(C-2),66.9(8aCH₂O)64.0(CH₂CH₂O)177.7(CH₂CH Si)1.6 (CH₃)₃Si).

^L.J.Mathias , Synthes is ,(1979),561.

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 29 (1R-(lcZ- , За β ,4 в,4ав ,7β ,7ао<,8ав)/ 8а-/(3,4,6-Три-О-ацетил-2-деокси-β -ρ -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4-4а,5,6 , 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-_s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,триметилсилилетилов естер • · · · · · • ·

Към разтвор на междинния продукт 28 ( 63 мг) и 3,4,6-три-0-ацетил- D-алал¹ ( 20 мг ) в сух толуен ( 1 мл ) се прибавя бромна киселина-трифенилфосфин ( 9 мг ).Реакционната смес се нагрява до 60°С в продължение на 2 ч и се излива в 1 М-ен разтвор на натриев бикарбонат (100 мл).Прибавя се етил ацетат ( 100 мл) и органичният слой се промива с вода,суши се над безводен магнезиев сулфат и се филтрува.Разтворителят се

изпарява до сухо,и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан :етил ацетат (10 :1 ) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (16 мг ),под формата на бяла пяна.

§(!_Η, CDCI₃)9.73(s,lH,CHO)6.03(dd,lH,H-2J=1.5,3,6Hz)f5.48(m,lH, H-3)4.98(dd,lH,H-4’J=3.3,9.6Hz)4.65(dd,lH,h-l'J=2.4 ;8.7Hz)4.23(m, 4H,H-6’ ,COOCH₂CH₂Si) , 4.02 (ddd, 1H,H- 5 ’, J=3,54.3and 9.6Hz),3.92 and 3.69(2d,2H,8aCH₂,J=9.6 Hz), 2.75 (t,1H,H-1),2.28 (m,1H,CH(CH₃)_£)

I’M. D.Wittman, R.L..Halcomb and S.J. Danishefsky, J. Org.

Chem. (1990), 55, 1979-1981.

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 30 / lR-( lc(,3a B,4 B,4a β,7 S,7ao(,8aB )/ 8a-/( 2-Деокси-3,4О-изопропилиден-6-О-метил-β - D-алопиранозилокси) метил/-4формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано- -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина[2-триметилсилил)етилов естер

При разбъркване към разтвор на междинния продукт ( 275 мг) в абсолютен метанол ( 10 мл ) се прибавят2или 3 капки от 1 М-ен разтвор на натриев метоксид в метанол.След разбъркване в продължение на час и половина реакционната смес се концентрира ,разрежда с толуен ( 10 мл) и се концентрира до получаването на жълт сироп.Този сироп се разрежда с ацетон ( 5 мл) ·« ····

• · · · · · · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · ······ · · · • · · ·« ·· · ·· · ·

-93и се прибавят 2,2-диметоксипропан ( 60 ^лл) и р-толуенсулфонова киселина,монохидрат ( 75 мг). Реакционната смес се разбърква в продължение на еДин час при стайна температура,неутрализира се с натриев карбонат,филтрува се и филтратът се концентрира до сухо .Маслообразният остатък се разтваря в етил ацетат ( 20 мл) , промива се с вода и разтвор на натриев хлорид,суши се и се конценг;? трира до получаването на масло.Разтвор на това масло в сух тетрахидрофуран (5 мл )(при 0°С се обработвах натриев хидрид (10 мг) и се разбърква в продължение на 30 мин. преди прибавянето на метил йодид ( 100 ф л) . Реакционната смес се затопля постепенно до стайна температура в продължение на 3 ч.Реакцията се прекъсва с метанол ( 1 мл ) и сместа след това се концентрира,остатъкът се пречиства трикратно чрез мигновена хроматография със силикагел при последователното използване на хексан:етил ацетат ( 10:1), (6:1) и ( 4:1) и подходящите фракции се събират и разтворителят се изпарява до получаването на посоченото в наименованието съединение ( 50 мг ) ,под формата на безцветно масло.

B(¹H,CDCI₃)9.73(s,lH,CHO)6.04(dd,lH,H+2J(1.2B3.6Hz)4.61(dd,lH, H-1’J=2.4 and 8.4 Hz)4.43(m,1Н,Н-3'), 4.34-4.10 ( m,2H,CH₂ SEM защитна група), 3.66 and 3.89 (2d, 2H, 8aCH₂ , J=9,3 Ηζ)·;·3.87 (m,1H,H-4')3.48 - 3.64(m,3H,2H-6’H-5’)324(s,3H,6'OMe)2.73(t,ΙΗ,Η-1 H-4'),3.48-3.64(m,3H,2H-6'Н5йетилна група и изопропилиден). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ31 /1К-/(1рС ,3а В,4 В,4а В,7 В,7а^,8а В)/ 8а-/(4-0-((Е)-2-Бутенил)2,6-дидеокси- В- D-алопиранозилокси)метил)-4-формил-4,4а,5,·,',‘, 6,7,7а,8,8а-октахидро-7-митил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинен продукт 10 ( 1.5 г ) и дибутил калаен оксид (0.9 г) в сух толуен (150 мл) се кипи на об-94·· ···· ·· ····

ратен хладник в продължение на 2 ч в колба,снабдена с кондензатор на Дин -Старк и след това се оставя да престои при стайна температура в азотна атмосфера ( отстраняват се приблизително 10 мл ацеотроп).Последователно се прибавят кротил бромид (като преобладава транс формата, 0.37 мл),тетрабутиламониев флуорид (3,6 мл от 1 М-ен разтвор в тетрахидрофуран) и 4 А молекулни сита (активиран прах) и сместа се нагрява при 60°С в продължение на 24 ч.Молекулните сите се филтруват.Отстраняването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан :ацетон (95:5) до получаването на съединението,посочено в наименованието,(1 г ),под формата на бяла пяна.

B(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.44-7.23(m,10Н,2Ph), 6.98(s,lH, CHPhtp, 6.05 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and 3.6Hz), 5.75-5.52 (m, 2H, CH= CH), 4.64 (dd, 1H, H-l', J=2,l and 9.6 Hz), 4.16 (m, 1H, H-3’), 4.98 (m, 3H, 8a-CH₂, (1H)\andCCH₂CH=CH(2H)), 3.74 (m, 1H, H-5'), 3.67 (d, 1H, 8a-CH₂ (1H), J=9.3 Hz), 3.05 (dd, 1H, H-4’, J=3.0 and

9.6 Hz), 2.75 (t, 1H, H-l, J=3.6 Hz), 2.40 (d, 1H, OH, J=2.1 Hz), 1.72_V(m, 3H, CH₃CH=CH).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 32 / 1R, - (1<jC , ЗаВ ,4B ,4aB ,7B ,7a</,8aB )/ 8a/( 2,6-дидеокси-40-пропаргил- В- П-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4-, 4а, 5,6,7 , .

7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия от междинния продукт 10 ( 2 г ) и дибутил калаен оксид (1.2 г) в сух толуен ( 150 мл) се кипи на обратен хладник в продължение на 2 ч в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк и след това се оставя да престои при стайна температура в азотна атмосфера ( отстраняват се прибли• ·

• · · · • · · ·

зително 20 мл ацеотроп ),Последователно се прибавят пропаргил бромид ( 0.55 мл, 80 %,спрямо теглото,разтвор в толуен),тетрабутиламониев флуорид ( 4.8 М-ен разтвор в тетрахидрофуран и 4А моле кулни сита /активиран прах / и сместа се нагрява при 60θ0 в продължение на 24 ч.Молекулните сите се отфилтруват.Отстраняването на разтворителя дава остатък,който двукратно се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:ацетон (96:4) до получаването на посоченото в наименованието съединение (1.25 г ),под формата на бяла пяна.

£ (¹Н, CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.44-7.26(m,10Н,2Ph), 6.98(s,lH, CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2,J=1.3and3.3Hz), 4.65(dd,1H,H_1’,J=2.1and9.6 Hz), 4.29 (m,lH,H_3’), 4.24 and4.22(2d,2H,CHg=CH,J=2.4Hz), 4.05 and 3.68(2d,2H,8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.75(m,1H,H_5’), 3.25(dd,lH,H-4’,J=3.0 and 9.3Hz), 2.75(t,1H,H-1,Jf3.9Hz), 2.46(t,lH,C?CH,J=2j4Hz). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 33 / lR-( 1(/-,ЗаВ ,4β ,4ав , 7β ,7аоС,8ав )/ 8а/ ( 4-0-(3-метил2-бутенил)-2,6-дидеокси- β- D^-алопиранозилокси)метил-4-формил4,4а,5,6,7,7 а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано - s -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинния продукт 10 (1 г ) и трибутил калаен оксид ( 600 мг ) в 150 мл сух толуен се кипи на обратен хладник в продължение на 2 ч в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк ( отделя се 25 мл ацеотропна смес ) и след това се охлажда до стайна температура.След това се прибавят 2-метил4-бромо-2-бутен ( 276 ^цл) и тетрабутиламониев флуорид ( 1М-ен разтвор в тетрахидрофуран,2.4 мл ) и сместа се нагрява при 50°С в продължение на 24 ч.Отстраняването на разтворителя дава суров продукт,който се подлага на мигновена хроматография (етил ацетат : хексан 1:20,1:15,1:10) до получаването на 770 мг от посоченото в наименованието,съединение,под формата на пяна (69% добив).

• ·

• · · · · ·· · ···· · • · ···· ··· ·· ··· ·· · ·· ··

-96& (^Xh,CDCI₃):9.73(s,1Н,СНО)7.5-7.2(щ,10Н,2Ph)6.98(s,1Н,CHPh₂) 6005(dd,1Н,Н2,J=1.5,3.3Ηζ) /5.33 (m, 1H,OCH₂CH=) , 4.64 (dd, 1H,H1' , J=2.1 ς9.6Ηζ),4.20(m,lH,H3’),4.25-3.95(m,3H,OCH₂C=+8aCH₂),_{3 ?5}_ 3.65(m2H,H5’+8aCH₂)3.03(dd,lH,H4’J=3.3,9.6),2.75(t,lH,Hl,J=3.9Hz) МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 34 2.44 (d, ΙΗ,ΟΗ, J=2.1Hz)

I lR-(loi,3a β,4 B,4a β,7β ,7ao£,8aB )/ 8a-/( 4-0-((Е)-2-Бутенил)22,6-дидеокси-3-0-(метилтио)тиокарбонил- β- D-алопиранозилокси/четил-4-формиб-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-

3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер

Към охладен разтвор на междинния продукт 31 (1г) в безводен тетрахидрофуран (20 мл) , в азотна атмосфера, се прибавя натриев хидрид на малки порции ( 0.256 г) и каталитично : количество имидазол.След това ледената баня се отстранява и ре-

акционната смес се оставя да престои при стайна температура, при разбъркване в продължение на 1 ч.Последователно се прибавят въглероден дисулфид ( 0.58 мл) и метил йодид (0.8 мл).След като реакцията приключи ( контрол с ТХ ),суровият продукт се излива в етил ацетат (400 мл) и взаимодействието се прекратява с 1 N-ен воден разтвор на амониев хлорид (500 мл ).Органичният слой се промива след това последователно с 1 N солна киселина ( 200 мл), 5%-ен воден разтвор на натриев бикарбонат (200 мл) и разтвор на натриев хлорид ( 200мл ).Органичният слой се суши над безводен натриев сулфат ,филтрува се и се концентриравъв вакуум. Така полученият остатък се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан :хексан (6:4) до получаването на съединението,посочено в наименованието, (1.04 г ),под формата на бяла пяна.

• · • · · · • ·

• · ··· · · · · ···· • · · · · · · · ···· · • · · · · · ··· ····· ·· · ·· ··

-97§ (¹H,CDCI₃) : 9.73 (s , 1H,CHO) 7.45-7.26 (m. 10H, 2Ph) 6.98 (s , 1H, CHPhp 6.23(dd,lH,h3’,J=3.0,6.3Hz)6.05(dd,1H,H2,J=1.5,3.3Hz),5.75-5.40 (m,2H,CH=CH),4.55(dd,lH,Hl·,J=1.8,9.3Hz),4.05-3S80(m,4H,8a-CH₂(lH) ,CH₂CH=CH(2H) and H-5'),3.75(d,1H,8a-CH₂(1H),J=9;3Hz)3.20(dd,1H, H-4’,J=3.0,9.3 Hz) , 2.72 (t·, 1H,H-1, J=3.9 Hz),.2.58 (s,3H,CH₃S), 1.68 (m, 3H,CH₃CH=CH).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 35 /IR- (Ιοί ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a<Z ,8a _β )/ 8а-/(2,6-Дидеокси-30-(метилтио)тиокарбонил-4-0-пропаргил-β -D -алопиранозилокси): метил/-4-формил-4-4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1 , 4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

Към охладен разтвор на междинния продукт 32 /1,25 г / ‘в безводен тетрахидрофуран ( 25 мл), в азотна атмосфера се прибавя натриев хидрид на малки порции(0.2 г) и каталитично количество имидазол .След това ледената баня се отстранява и реакционната смес се оставя да престои при стайна темпера-; тура и при разбъркване в продължение на 1 ч.Последователно се прибавят въглероден дисулфид (0.6 мл) и метил йодид (0.75 мл). След като завърши реакцията ( контрол с ТХ),суровата смес се излива в етил ацетат ( 400 мл) и взаимодействието се прекъсва с 1 N -ен воден разтвор на амониев хлорид (500 мл).Органичният слой след това се промива последователно с 1 N-на солна киселина (300 мл),5%-ен воден разтвор на натриев бикарбонат (200 мл) и разтвор на натриев хлорид (200 мл).Органичният слой след това се суши над безводен натриев сулфат,филтрува се и се концентрира . Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат 97:3 и 95:5 до получаването на посоченото в наименованието,съединение (1.2 г ),под фор

мата на бяла пяна.

§ (^-HjCDCIj) . 9.73(s,lH,CHO) ,7.45-7.26(m,10Н,2Ph) ,6.99(s , 1H,CHPhp 6.28(q,lH,h-3',J=3.3Hz),6.06(dd,ΙΗ,Η-2,J=l.5,3.6Hz),4.57(dd,lH, H-l' ,J=1.8,9.3Hz) , 4.19,4.17 (2d, 2H, CH C=CH, J=2.4Hz) £4'. 03,3.70 (2d, 2H,8a-CH₂,J=9.3Hz),3.86(dq,ΙΗ,Η-5’,J=6.3,9.3Hz),3.50 (dd,lH,H4',J=3.0 and 9.3Hz),2.73 (t,1H,H-1,J=3.9 Hz), 2.58 ( s,3H,CH₃S) 2.42 ( t,lH, C=CH ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 36 /1К-(1<Л,За B,4 В,4аВ ,7В ,7аоС,8аВ )/8а -/(4-0-(З-метил-2-бутенил)-2,6-дидеокси-3-0-(метилтио)тиокарбонил-В - D-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3/метилетил/-1,4-метано- s -индацен-За(1Н)^!-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 33 (770 мг) в сух тетрахидрофуран (15 мл) се прибавя при О°С натриев хидрид (105 мг) и имидазол (30 мг), в азотна атмосфера.Сместа се разбърква в продължение на 1 ч при стайна температура ,след това последова? .и телно се прибавят въглероден дисулфид ( 300 ^л) и метил йодид (311 |лл) .След разбъркване в продължение на 1 ч,реакцията се прекъсва чрез прибавяне на O.lN-ен амониев хлорид (50 мл) и се екстрахира двукратно с етил ацетат (2 х :100мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до получаването на масло,което се под лага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат : хексан (1:25 ) и (1:20) до получаването на 780 мг от посоченото в наименованието,съединение (90% добив),под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDCI₃) .9.73(s,1Н,СНО) , 7.5 - 7.2 (m, 10Н, 2Ph) , 6.98 (s , 1H, CHPhp 6',26(m, 1H,H3') , 6.06(dd,lH,H2,J=1.2 dnd 3.3Hz) ,5.26(m, 1H,OCH₂CH=) 4.54(dd,1H,H1',J=1.8 and 9.6 Hz),4.10-3.75(m,4H,8aCH₂+OCH₂C=+H5’) 3.96(d, 1H, 8aCH₂,J=9;6 Hz),3.18( dd, 1H, H4', J= 3 and 9.3 Hz)

• · ·

2.72 Ct, 1H, Hl, J= 3.9 Hz ), 2.58 ( s,3H,SCH₃ ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 38 и 37

а) /1R-(1^ ,3a β,4β ,4aB ,7β ,7а<Х.,8аВ )/ 8a-//lS £>4R,7R,9R/

- 2,8-Диокса-4-етил-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/.нон-7-ил-оксиметил-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1 , 4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов есдтер

б) /lR-(la ,3ab ,4b ,4ab ,7b ,7aa,8ab )/ 8a-/(lS ,4S ,7R,)R)-

2,8-Диокса-4-етил-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-ме-тил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил метилов естер . Разтвор на междинния продукт 34 (1.04 г) в сух толуенС>50 мл ) се продухва с поток от аргон в продължение на 1ч при кипене на обратен хладник.Прибавят се трибутилкалаен хидрид (0.55 мл) и каталитично количество азобис(изобутиронитрил).Реакционната смес продължава да се нагрява на обратен хладник още 20 мин. и след това се охлажда,концентрира се и след това се подлага двукратно на мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан и хексан:етил ацетат (94: 6) като елуенти.Междиннят продукт 37 (220 Mr,Rf =0.32 в хексан: етил ацетат 4:1) се получава под формата на бяла пяна и междинният продукт 38 (444 мг, Rf =0.27 в хексан:етил ацетат 4:1) се изолира под формата на бяло твърдо вещество.

Междинен продукт 37 ^(¹Н,CDCI₃).9,75(s,lH,CHO),7.45-7.26(m,10H,2Ph),6.99( s,lH,

CHPh₂),6.06(dd,lH,H-2,J=1.5 and 3.6 Hz),4.50(dd,lH,H-7’,J=2i7,6.9

Hz),4.06,3.38(2dd,2H,CH₂- 3’,J=8.4,7.5Hz),4.01 and3.65( 2d,2H,8a• ·

-100-

CH₂,J=9.0 Hz),3.71 (dd,lH,H-l’, J=7.5 and 9.0 Hz), 3.34( m,lH, H-9# ),2.75 (t,lH,K-l ),0.93 (t, 3H, CH₃CH₂, J=7.5 Hz) МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ з8 (^{* 1}H,CDCIj).9.74(s,1H,CHO)7.45-7.26(m,10H,2Ph),6.99(s,1H,CHPh₂), 6.04(dd,lH,H-2'J=1.2,3.6Hz),4.73(t,1H,H-7’,J=3.0Hz),3.92(m,2H,8aCH₂(lH)andCH₂-3'(lH))3.75(m,2H,H-9'andH-l'),3.62(d,lH,8a-CH₂,J= 9.3Hz)3.48(m,1H,CH₂-3'(1H))2.71(t,1H,H-1’,J=3.6Hz)2.55,2.23(2m,3H, МЕЖДИННИ ПРОДУКТИ39 и 40 Η-4’, Η-5’,3 - CH)0.96(m3HCH₃CH₂) /lR-(la ,3а b,4 b,4ab ,7b ,7aa,8ab )/ 8a/(1 s,4R,7R,9R)-2,8Диокса-4-(1-метилетил)-9-метил-цис-бицикло/З.4.0/-нон-7-илоксиметил)-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3(1-метилетил)-1,4-метано- s-инда-цен-За(1Н9-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер и /lR-(la,3ab ,4 b,4a b,7b,7aa,8ab )/ 8а-/(1 S,4 S,7R,9R)-2,8Диокса-4-(1-метилетил)-9-метил-цис-бицикло/З.4,0/-нон-7-ил-оксиметил)/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1 ,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 36 (780 мг) в сух толуен (50 мл ) се продухва с поток от аргон в продължение на час при кипене на обратен хладник.Прибавят се трибутил калаен хидрид ( 367 рл) и каталитично количество а,а азоизобутиронитрил (20 мл) и сместа се кипи на обратен хладник в продължение на 2 часа,след това се охлажда до стайна температура.Отстраняването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография ( силикагел, хексан: етил ацетат 25:1,20:1,18:1 и 15:1) до получаването на 280 мг от междинния продукт 39 (добив 41%) и 300 мг от междинния продукт 40 ( добив 44¾),под формата • · · · · ·

-101на масла ( съответно Rf 0.5 и 0.3 в хексан: етил ацетатУ/V 3:1).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 39

S(¹Н, CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.5-7.2(m,10Н,2Ph J, 6.99(s,lH,CHPh₂), 6.05(dd,lH,H2,J=1.2and3.6Hz), 4.57(dd,1H,H7’,J=2.7and5.7Hz), 4.053.90(m,2H,H3't8aCH₂), 3.73(dd,1H,H1’,J=8.land9.3Hz), 3.62(d,lH, 8aCH₂,J=9Hz), 3.50-3.45(m,2H,H3’+H9'), 2.74(t,1H,H1,J=3.9Hz). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 40

S(¹H, CDC1₃): 9.74 (s , 1H, CHO) , 7.5-7.2 (m, 10H, 2Ph) , 6.99 (s , 10H, CHPh^ , 6.03(dd,lH,H2,J=1.5and3.3Hz), 4.74(t,1H,H7’,J=3Hz), 4.0-3.8(m, 8aCH₂+H9'+H3'), 3.73(dd,1H,H1',J=3.3and4.5Hz), 3.63(d,1H,8aCH₂, J=9.6Hz), 3.52(dd,1H,H3’,J=8.landlO.5Hz), 2.70(t,1H,H1,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 41 /lR-(liZ,3aB ,4β ,4аб , 7β ,7ас<,8аб )/ 8а/(IS , 7R, 9R)-2,8-Диокса-4-метилен-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси -метил-/ -4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s-индацен-За/1Н/-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 35 (1.02 г) в сух толуен (50 мл) се продухва с поток от аргон в продължение на 1 час при кипене на обратен хладник.Прибавят се трибутил калаен хидрид (0.55 мл) и каталитично количество азобис(изобутиронитрил).Реакционната смес допълнително се кипи на обратен хладник още 1 ч и след това се охлажда,концентрира и след това двукратно се подла га на мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан : етил ацетат (94:6) като елуенти.Така се получава посоченото в наименованието ,съединение, в чист вид (380 мг), изолира се под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDC1₃): 9.75 (s , 1Н, СНО) , 7.44-7.28 (m, 10Н, 2Ph) , 6.99(s,lH,

CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.07 and 5.02(2dd,1H,CH₂=C,

-102J=2.4and4.8Hz), 4.49-4.31(m,3H,H-7’^ndCH₂-3'), 3.95 and 3.66(2d,2H, 8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.80(dd,1H,H-1’,J=7.5and9.3Hz), 3.26(m,lH,H-9’), 3.02(m,lH,H-5’) , 2.76 (t, 1H,H-1, J=3.9Hz) ; S (Цс, CDClj) : 204.4(CHO), 171.0(COODPM); 148.8 and 148.3(C-3andC-4’), 139.5 and 139.4(2 CIV Ph), 130.7(C-2), 128.6,128.5,128.2,128.0,127.7 and 127.0(2x5CH(Ph)),103.9 (CH₂=C), 98.3(C-7'), 80.4 and 69.5(C-l'andC-9’), 78.5(CHPh₂), 73.9 and

70.6 (C8a-C and C-3’).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 42 /1К-(1о<,ЗаВ ,4β ,4ав ,7β,7η</,83β )/ 8a -/(IS ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-4-метилен-3-оксо-бис-бицикло/3.4.0/-нон-7-илокси-метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил.3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -индацен-За/1Н/-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

При разбъркване към разтвор на храмен (VI) оксид (0.23 г) и сух пиридин (0.37 мл) в сух дихлорометан (20 мл) при O°CGce прибавя междинния продукт:41 (0.15 г) в сух дихлорометан ( 3 мл ).Разбъркването се поддържа при стайна температура в продължение на 6 ч и след това реакционната смес директно се подлага на мигновена хроматография върху силикагел ’.ci дихлорометан като елуент до получаването на посоченото в наименованието, съединение ( 65 мг),под формата на бяла пяна.

й(^ХН, CDC1₃): 9.74 (s , lh,CHO) ; 7.44-7.25 (m, 10Н, 2Ph) , 6.98(s.lH, CHPh₂), 6.37 and 5.64(2d,2H,CH₂=C), 6.04(dd,1H,H-2,J=1.2and3.3Hz), 4.47(dd,1H,H-7',J=3.6and6.0Hz), 4.29(m,1H,H-1'), 4.00 and 3.64(2d,2H, 8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.40(m,1H,H-5'), 3.30(m,lH,H-9'), 2.73(t,1H,H-1, J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 43 /lR-( 1</ ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a ex!,8a β )/ 8a -/(IS ,7R,9R)/- 2,8Диокса-9-метил-4-оксо-бис -бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/

-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)

-1031,4-метано-5 -индацен-За(1H)-карбоксилова киселина,дифенилмети лов естер

МЕТОД А

Към ледено студена смес от междинния продукт 41 (105 мг) и М-метилморфолин-N-оксид ( 43 мг) в ацетон:вода (8:1,9 мл ) се прибавя осмиев тетраоксид (2.5% VV/V разтвор в 2-метил-2-пропанол,0.075 мл).Ледената баня се отстранява и сместа се разбърква .при стайна температура в продължение на 24 часа.Реакцията се прекъсва с натриев бисулфит,сместа се разбър-

ква 1 час и разтворителят се изпарява,Суровият остатък се разрежда с етил ацетат (100 мл ) и се промива последователно с вода ( 30 мл),1 N-на солна киселина ( 30 мл),наситен воден разтвор на натриев бикарбонат ( 30 мл) и вода ( 30 мл ),след което· се изпарява.Суровият продукт се разтваря в диоксан:вода (2:1, 6 мл ) и се охлажда до 0°С.Прибавя се натриев перйодат ( 0.13 г) на малки порции и сместа се разбърква в продължение на 6 ч в интервал от 0°С до стайна температура,концентрира се и суровият про дукт се разпределя между вода ( 60 мл) и етил ацетат ( 60 мл ).

Органичната фаза се суши и концентрира и остатъкът .получен по този начин, се пречиства чрез мигновена хроматография върху сили кагел ( хексан:етил ацетат 85:15) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (0,045 г).

МЕТОД Б

Към разтвор на трифлуорооцетен анхидрид (0.43 мл) в сух дихлорометан (2.5 мл) се прибавя диметилсулфоксид(0.22 мл) при -60°С в азотна атмосфера при енергично разбъркване.След 10 мин. се прибавя разтвор на междинния продукт 79 (470 мг) в сух дихлорометан ( 2.5 мл ) и сместа се разбърква при -60°С в продължение на 2 ч.На капки за период от 10 мин. се прибавя • · · · ·

• · • · · · ·

-104-

триетиламин (1.4 мл) и се оставя температурата на сместа да достигне -20°С.След това се прибавя вода ( 20 мл) и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час.Сместа се разпределя и водният слой се екстрахира с дихлорометан (100 мл). Събраните органични слоеве се промиват с 1 14 -на солна киселина (100 мл),с наситен разтвор на натриев бикарбонат (100 мл) и с разтвор на натриев хлорид (100 мл ),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо.Полученото масло се разтваря в дихлорометан и се обработва с триетиламин ( 1 мл )в продължение на една нощ.Разтворителят се отстранява и полученото в резултат,масло се подлага на мигновена хроматография върху силикагел (етил ацетат:хексан 1:25,1:20 и 1:15 ) до получаването на 400 мг от посоченото в наименованието,съединение(добив 86 %) .

δ (¹H,CDC1₃): 9.71(s,lH,CHO), 7.44-7.26(m,10Н,2Ph), 6.97(s,lH, CHPh₂), 6.06(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 4.18-4.11(m,3H,H-7',H-1'and H-3'(1H)), 4.00 and 3.62(2d,1H,8a-CH₂,J=9.3Hz), 3.91(d,ΙΗ,Η-З',J=18 Hz), 3.30(m,lH,H-9'), 2.85(bt,lH,H-5',J=7.8Hz), 2.75(t,1H,H-1,J=3.9Hz) МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 44 /1К-(1с/,ЗаВ ,4B ,4aB ,7β ,7а^,8аВ )/ 8a-/(4-0-(Транс-2-бутенил)-б-деокси-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил -4,4a, 5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинния продукт 1 (5 г ) и дибутил калаен оксид (2.3 г) в сух толуен (300 мл) се кипи на обратен хладник в продължение на 3 ч в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк,в азотна атмосфера и след това се оставя да се охла ди до 60⁹С.Последователно се прибавят молекулни сита ( 4А,прах) кротил бромид (2.4 мл ) и 1 М-ен разтвор в тетрахидрофуран на тетрабутиламониев флуорид (23 мл) и сместа се нагрява при 60°С в продължение на 1 час и при стайна температура в продължение • · · · · · • · ··· ·

-105на 12 ч.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се хроматографира върху силикагел (мигновена хроматография) приелуиране с хексан до хексан:ацетон (9:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (3.2 г ),под формата на бяла пяна, δ (¹H,CDC1₃) : 9.73(s ,1Н,СНО) , 7.45-7.2 (m, 10Н, 2Ph) , 6.98 (s , 1H, CHPhp , 6.05(dd,1Η,Η-2,J=1.5and3.6Hz), 5.8 - 5.65(m,1H;CH=CH), 5.65-5.5(m, 1H,CH=CH), 4.63(d,1H,H-1#,J=0.9Hz), 4.2-3.8(m,5H,H-2’,H-3',8aCHa and О-СН₂~С=С), 3.8 - 3.65(m,2H,H-5',8aCHb), 3.6(dd,1Η,Η-4',J=3and9.3 Hz), 2.74(t,lH,H-l,J=3.9Hz), 1.71(dd,3H,CH₃-C=C,J=1.2and6.3Hz).

МЕЖДИННИ ПРОДУКТИ 45,46 и 47

a)/lR- (1 ¢0,3aB ,4β ,4ag , 7β ,7a<K,8as )/ 8a-/(2 , З-Анхидро-4-0транс-2-бутенил)-6-деокси- β- р-маннопиранозилокси)метил/-4-фор мил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4 -метано- £ -индацен-За(1Н9-карбоксилова киселина,дифенилмети

лов естер

б) /1Е-(1с0,ЗаВ ,4β ,4ав , 7β ,7аж,8ав ) / 8а-/(1 s , 4S6S, 7R, 9R)

- 2,8-Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон -7-ил-окси-метил/-4-формил-4-4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7 метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

b)/R- (la, За b ,4 b ,4а b ,7 b ,7аа,8а b )/ 8a-/(1S4R,6 S ,7R,9R) -

2,8-Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон

- 7 -ил-окси-метил-4-формил-4-4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7 метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 44 (1.225 г),трифенилфосфин (1,38 г) и имидазол (0.36 г) се кипят на обратен хладник в толуен ( 35 мл) при разбъркване и след това се обработват на капки с разтвор на йод (0.89 г) в толуен (15 мл) в продължение на 2 ч.Прибавя се тетрабутиламониев йодид (0.2 г) и кипе• · · · · • ·

·· ·· • · ♦

06

нето на обратен хладник продължава още 1 час.Реакционната смес се охлажда и се разпределя между етил ацетат (100 мл) и 1 ТЧ-на солна киселина(50 мл).Органичният слой се промива последователно с 1 N-на солна киселина ,вода,воден разтвор на натриев метабисул фит,вода,наситен воден разтвор на натриев хлорид,след това се суши (натриев сулфат),филтрува се и се концентрира във вакуум. Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат (7:1) до получаването на 2:1 смес от 2 съединения с много подобни Rf в хексан:етил ацетат (1,08г) ( Rf=0.4 в хексан:етил ацетат 4:1).Сместа се разтваря в сух толуен (25 мл) и разтворът се продухва с поток от аргон в продължение на 1 ч и след това се кипи на обратен хладник. Прибавя се трибутил калаен хидрид (0.36 мл) и кипенето на обратен хладник продължава още 20 мин.След охлаждане се прибавя въглероден тетрахлорид ( 2 мл) и разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на 1 ч.След това се прибавя разреден разтвор на йод в етер до появата на слабо оцветяване. След това разтворителят се отстранява във вакуум и остатъкът се поема в диетилов етер и се промива няколко пъти с наситен воден разтвор на калиев флуорид докато вече не се наблюдава утайка от трибутил калаен флуорид.Органичният слой се суши и се изпарява до получаването на остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел(два пъти ) при елуиране с дихлорометан:етил ацетат (95:5) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (а) междинен продукт 47 (230 Mr,Rf =0.8, дихлорометан:етил ацетат 9:1),посоченото в наименованието (б) междинно съединение 45 (275 Mr,Rf =0.5 в дихлорометан : етил ацетат 9:1) и посоченото в наименованието (в) междинно съединение 46 (200 мг; Rf =0.4 в дихлорометан: етил ацетат 9:1).

• · · · • · · · · · ··· · · · · · · ····· ··· ····· • · ··· ·· · · · · · · ·· · · · · ··· «···· · · · · · · ·

-107 МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 45;

$ (^ХН, CDClj) : 9.72(s,1Н,СНО) , 7.46-7.23(m,10H,2Ph), 6.98(s,lH,

CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2,J=1.2and3.3Hz), 4.61(d,lH,H-7’,J=3.3Hz), 4.03 (d,1H,8a-CHa,J=9.3Hz), 3.90(dd,lH,Ha-3',J=6.9and8.7Hz), 3.82-3,69(m, 3H,H-6’,H-1’andH-9'), 3.66(d,1H,8a-CHb,J=9.6Hz), 3.61(dd,lH,Hb-3', J=6.6and8.4Hz), 2.69(t,lH,H-l,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 46

5(¹H,CDC1₃): 9.74(s,1Н,СНО), 7.45-7.22(m,10H,2Ph), 6.99(s,lH, CHPh₂), 6.06(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 4.50(d,lH,H-7',J=2.1Hz),

4.1-4.02(m,1H,8aCHa and Ha-3’), 3.84(dd,1H,H-1',J=7.5and8.7Hz),3.763.66(m,2H,8aCHb and H-6’), 3.5-3.38(m,2H,H-9'andHb-3’), 2.72(t,1H,H-1, J=3.9Hz), 0.94(t,3H,CH₂-CH₃, J=7.5Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 47 £(^ΧΗ, CDC.l₃) : 9.75 (s , 1H,СНО) , 7.45-7.2 (m, 10H, 2Ph) , 6.99 (s , 1H,CHPhp ,

6.08(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.85-5.7(m,1H,CH=CH), 5.65-5.5(m, 1H,CH=CH), 4.67(s,lH,H-l'), 4.2-4.05(m,2H,OCHa-C=Cand8aCHa), 4.053.9(m,lH,OCHb-C=C), 3.78(d,1H,8aCHb,J=9Hz), 3.3-3.15(m,3H,H-3',H4*andH5'), 3.12(d,1H,H-2’,J=3.9Hz), 2.86(t,1H,H-1,J=3.9Hz). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 48 /1К-(Ιοζ За β ,4β ,4аВ ,7β ,7ао<,8аВ )/ 8а-/( 6-Деокси-4-0-метил-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8, 8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер

Разтвор на сордарин (10.0 г) в дихлорометан (150 мл) се обработва ,на капки с разтвор на дифенилдиазометан в дихлорометан (0.35М-ен,85 мл).Полученият в резултат разтвор се разбърква при стайна температура в продължение на 24 ч.Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат (4:1) и (2:1).Фракциите се събират и се

• · · ·· · ··· • · · · · · · · · · · ♦ · • · ··· ·· · ···· · • · · ··· ··· ····· ·· · ·· ··

-108изпаряват до получаване на посоченото в наименованието съединение (11.8 г ),под формата на бяла пяна.

S(¹H,CDC1₃): 10.00(s,lh,CHO) , 7.63(m,10Н,2Ph), 7.26 (s , 1H, CHPhp ,

6.30 (dd, 1H;H-2 , J=1.2aiid3.3Hz), 4.92(d,1H,H-1’,J=0.9Hz), 4.84(t,lH, H-3',J=3.3Hz), 4.03 and 4.35(2d,2H,8aCH₂, J=9Hz), 3.88(m,lH,H-2'),

3.70(dq,1H,H-5’,J=6.3and9.3Hz), 3.41(s,3H,4'-OMe), 3.20(dd,1Η,Η-4', J03.3and9Hz), 2.75(t,1H,H-1).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 49 (a) / lc4,Зав ,4β ,4aB ,7β ,7а<^,8ав )/ 8а-/( 6-Деокси

-4-0-метил-2,3-ди-0-тозил- β- D-алтропиранозилокси)метил/-4 -формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил

метилов естер (б) /1R-(lcZ ,3а β ,4 В ,4а β ,7 β ,7a(Z,8a β )/ 8a-/( 6-Деокси-

4-0-метил-2-0-тозил- β - D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 48 ( 2 г) и 4-диметиламинопиридин (500 мг) се разтварят в сух пиридин (30 мл).На капки се прибавя разтвор на тозил хлорид ( 960 мг) в сух пиридин (20 мл).Реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на 4 дни.Разтворителят се идпарява във вакуум до получаването на жълт остатък,който се хроматографира върху колона със силикагел,при елуиране с хексан:етил ацетат (4:1) и (1:1) до получаване на съединението,споменато в наименованието (а),със по-високата стойност за Rf ,под формата на бяла пяна(1.65 г) и съединението споменато в наименованието (б) с по-ниската стойност за Rf ,също под формата на • · · · · • · · · • · · · · • to · · · to • · ·

-109бяла пяна.

(a) §(¹H,CDC1₃): 9.71 (s , 1H, CHO) , 7.8 5 - 7.91 (m, 4H, ortho-Ts) , 7.267.41(m,14H,meta-Ts and2 Ph), 6.95(s,1H;CO₂CHPh₂), 5.87(dd,lH,H-2;

J=1.2 and3.3Hz), 4.92(dd,1H,H-3',J=3.3and4.2Hz), 4.65(dd,lH,H-2',J=

1.2and4.5Hz), 4.61(d,1H,H-1',J=1.2Hz), 3.50and3.94(2d,2H,8aCH₂,J=9Hz),

3.68(dq,1H,H-5',J=6.6and9Hz), 3.16(dd,lH,H-4',J=3and9Hz), 2.78(s,

3H,4'-OMe), 2.45and2.47(2s,1H,2Ts).

(6) (¹H,CDC1₃): 9.71(s,1H,CHO), 7.85(m,2H,ortho-Ts), 7.26-7.41(m,

12H,meta-Ts and 2Ph), 6.95(s,1H,CHPhp, 5.87(dd,1H,H-2,J=1.5and3.3 Hz), 4.61(d,1H,H-1’,J=1.5Hz9, 4.55(dd,1H,H-2',J=1.2and4.2Hz), 4.37(m,

1Н,Н-3’), 3.50and3.95(2d,2H,8aCH₂,J=9Hz), 3.70(dqlH,H-5',J=8.4and6.3Ης

3.23(dd,lH,H-4',J=3.3and8.7Hz), 2.42(s,3H,Ts).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 50 /1К-( lot,.3aB ,4β ,4aB ,7 β ,7ас^,8аВ )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6 деокси-4-0-метил- β- D -маннопиранозилокси)метил/-4-формил

-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4 метано- з-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилмети лов естер

Натрий (0.5 г) се прибавя към безводен метанол (50 мл) с охлаждане до 0°С,последван от междинния продукт ( 670 мт) в сух дихлорометан (20 мл).Сместа се разбърква в продължение на 5 дни при стайна температура и 4 дни при кипене на обратен хладник.Сместа се филтрува и разтворителят се отстра нява,Остатъкът се подлага на мигновена хроматография при елу иране с хексан:етил ацетат (3:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (330 мг).

& (¹H, CDC1₃): 9.75(s,1H,CHO), 7.26-7.44(m,10H,2Ph), 6.998s,lH,

CO₂CHPh₂), 6.08(dd,1H,H-2,J=1.5and3Hz), 4.68(s,1H,H-1'), 3.78 and

4.11(2d,2H,8aCH₂,J=9Hz), 3.49(s,3H,4'-Ome), 3.26(d,1H,H-2’,J=3.9 • · • · · · · ·

	• · · ·· · ··· • · · ·· · · · · ···· • · ··· ·· · ···· · • · · · · · ··· ····· ·· · ·· · · -110-
Hz), 3.18(ш,1Н,Н-5#),	3.12(d,1Н,Н-3',J=3.6Hz), 3.08(ш,1Н,Н-4’),

2.86(m,1Н,Н-1').

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 51 /lR-(lo( ,3а β ,4 β ,4а β ,7 β ,7а <к,8а β )/ 8а/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-метил-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5, 6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Сух натриев хидрид (25,9 мг) се суспендира в сух

диметилформамид (5 мл).На капки се прибавя разтвор на междинния продукт 49(6) (470 мг) в сух диметилформамид и сместа се разбърква в продължение на 40 мин. при стайна температура.Реакционната смес се излива,при разбъркване, в ледено-студена вода (20 мл) и полученият в резултат разтвор се обработва с етил ацетат (3 х 20 мл).Органичните слоеве се събират и се сушат над безводен магнезиев сулфат,Полученият смолообразен остатък след изпа ряването на разтворителите, се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с хексан:етил ацетат (5:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (332 мг),под фор мата на бяла пяна.

δ(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.26-7.44(m,10Н,2Ph), 6.98(s,lH, GO₂CHPh₂), 6.08(dd,1Η,Η-2,J=1.5and3Hz), 4.60(s,1H,H-1’), 3.76 and 4.03(2d,2H,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.51(m,4H,H-4' and 4’-OMe), 3.33(m,3H, H-2',H-3’ andH-5’), 2.80(m,1H,H-1).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 52 /1R-(1 ot, За β , 4β ,4ав ,7β ,7а<Х,8ав )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-40-метил- β- D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7, 7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s индацен-За(1H)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 51 (ЮОмг) в

-111етил ацетат (15 мл ) се прибавя 10%-ен паладий върху въглен /100 г/ в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 15 пси(абсолютно налягане в паунди/инч²) в продължение на 1 ч при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел,при елуиране с хексан: етил ацетат (3:1) и дихлорометан:метанол (15:1).Подходящитефрак ции се събират и разтворителят се отстранява до получаването на посоченото в наименованието ,съединение(70 мг),под формата на

пяна.

(¹H,CDC1₃):9.77(s,1Н,СНО), 6.09(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2and3.6Hz), 4.67(d, 1H,H-1',J=0.9Hz), 3.58 and 4.17(2d,2H,8aCH₂,J=9.6Hz), 3.51(m,4H,H-3' and4'-0Me), 3.38(m,lH,H-5'), 3.34(d,ΙΗ,Η-2’,J=4.2Hz), 3.30(dd,lH, H-4',J=9andl.5Hz), 2.65(t,ΙΗ,Η-1,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ53 /lR-(loZ ,3aB ,4β ,4aB ,7β ,7ak,8aB )/ 8a-/8 4-0-Алил-6деокси-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а 8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индаценЗа(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на междинния продукт 1 (2 г) и дибутилг калаен оксид (870 мг) в сух толуен (25 мл ) се кипи на обратен хладник в продължение на 2 ч в колба,снабдена с кондензатор на Дин-Старк,в азотна атмосфера, и след това се оставя да престои при стайна температура.Прибавят се алил бромид (0.3 мл) и1М-ен разтвор на тетрабутиламониев флуорид (3.5 мл) и сместа се нагрява 24 ч при 40°С в азотна атмосфера.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху колона със силикагел при елуиране с хексанацетон (10:1) и (9:1) до получаване на посоченото в наименование то,съединение (1.7 г),под формата на бяла пяна.

··· • ♦

-112'b (^ΧΗ, CDC1₃): 9.73 (s , 1H, CH09, 6.98 (s , 1H, CHPhp , 6.05(dd,1H,H-2,J=

1.5and3.6Hz), 5.89(m,1H,CH=CH₂), 5.25(m,2H,CH=CH₂), 4.64(d,1H,H-1’, J=1.5Hz), 4.15(t,1Η,Η-3’,J=3.3Hz), 4.09(m,3H,CH₂-CH=CH₂ and 8aCH₂), 3.87(m,lH,H-2’), 3.74(m,2H,H-5' and 8а-СНр, 3.38(dd,1Η,Η-4', J=3.3and9Hz), 2.74(t,1H,H-1,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 54 /1К-(1<Л, ЗаВ, 4В, 4аВ, 7В, 7аЛ,8аВ)/ 8а-/( 4-0-Бензил-6-

деокси-В-П-алтропиранозилокси) метил/-4-формил-4, 4а, 5, 6, 7, 7а, 8, 8а-октахидро-7-метил-3 (1-метилетил)-1,4-метано-з-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

При енергично разбъркване смес от междинния продукт 1 (б.Ог) и дилутилков оксид (3.55 г ) в сух толуен (80 мл) се кипи на обратен хладник в продйлжение на 3 ч. в колба, снабдена с кондензатор на Дин-Старк, в азотна атмосфера. Реакционната смес се охлажда до 0^toC и след това се обработва с бензил бромид (1.2 мл) и тетрабутиламониев флуорид (1М- ен в тетрахидрофуран, 10 мл). След нагряване при 40^уС в продължение на 18 ч. в азотна атмосфера, реакционната смес се концентрира при пониже-

но налягане и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с хексан: етил ацетат (6:1) и (4:1). Подходящите фракциисе събират и разтворителят се изпарява ди получаването на посоченото в наименованието, съединение (3.73 г), под формата на бяла пяна.

(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.24-7.44(m,15Н,3Ph), 6.98(s,lH,

CO₂CHPh₂), 6.05(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 4.65(d,1Η,Η-1',J=1.2Ηζ),

4.57(ΑΒ system,4’0CH₂Ph,J=ll.1Hz), 4.21(m,1H,H-3'), 3.76 and 4.07 (2d,2H,8aCH₂,J=9Hz), 3.87(m,1H,H-2’), 3.76(m,1H,H-5'), 3.49(dd,lH,

H-4',J=3.3and9Hz), 2.74(t,1H,H-1,J=3.6Hz).

• · · · · · · · · ···· • · · · · · · · · · · · · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· ··

-113МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ55 /1R- (1с<,ЗаВ ,4В ,4аВ ,7В ,7ао<,8аВ )/ 8а-/( 2-0-Бензилоксикарбонил-6-деокси-4-0-метил-В -D -алтропиранозилокси)метил/~ оформил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7- метил -3- (1-метилетил)

-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил-

метилов естер

Към разтвор на междинния продукт 48 (3 ммола) в сух дихлорометан (15 мл) при 0°С в азотна атмосфера се прибавя 4-диметиламинопиридин (6.Зммола).След разбъркване в продължение на 15 мин.,сместа се охлажда при -20°С и към нея на капки се прибавя разтвор на бензилхлороформиат (3.6 ммола) в сух дихлорометан (15 мл).След 2 часа,разтворителят се изпарява и остатъкът се пречиства чрез ^мигновена хроматография при използване на хексан : е.тил ацетат (3:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (1.2 г ).

δ С^ХН,С CDC1₃) : 9.70(s,1Н,СНО), 7.35(m,15Н,3xPh), 6.96(s,1H,CHPh₂), 5.99(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.18(AB system,2H,OCH₂Ph,J=12Hz), 5.00(dd,1H,H-2’, J=1.5 and 4.2 Hz )/4.70( d,lH,H-l’, J=1.8 Hz) 4.13 (m, 1H, H-3’), 4.01 and 3.66 (dd, 1H, 1H, 8a -CH₂ , J=9 Hz )3.75(m,lH,H-5’ ),3.40 ( s,3H, OMe ),3.17(dd,lH,H-4',J=3.3 and 8.4 Kz),2.62 (t,lH,H-l, J=3·. 6 Hz),2.43 (d,lH,OH, J=2.4 Hz), 2.21 (m, 1H, CH(CH₃)₂)

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ56 /lR-(loi,3a β,4δ ,4a β ,7 В,7а^<,8аВ )/ 8a-/( 4-0-Алил-2-0бензилоксикарбонил-6-деокси- β-D -алтропиранозилокси)метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил-3-/метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 53 (1.4 г ) в сух метилен хлорид (30 мл) при О°С се прибавя диметиламинопири·. · • « · ·

• · ··· · 9 9 99 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

99 9 9 9 9 9 9 9 9

-114дин(513 мг ) и сместа се разбърква в продължение на 15 мин.

След това на капки в продължение на 15 мин. се прибавя бензил хлороформиат (0.35 мл) в сух метилен хлорид (15 мл) и сместа се разбърква в продължение на 4 ч.След това сместа се разрежда с метанол (1 мл) и метилен хлорид (20 мл) и се промива с вода, 1 М-на солна киселина и разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се суши над безводен магнезиев сулфат ,филтрува се и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез миг новена хроматография върху колона със силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат (7:1) и (5:1) до получаване на посоченото в наименованието,съединение (1.1 г).

B(¹’H,CDC1₃): 9.70(s,1Н,СНО), 6.96(s,1Н,CHPh₂), 5.99(dd,1Н,Н-2,J= 1.5and3.6Hz), 5.88(m,1H,CH=CH₂), 5.20(m,4H,Ph-CH₂-0, CH₂-CH=CH₂), 4.99(dd,ΙΗ,Η-2’,J=1.5and4.2Hz), 4.70(d,1H,H-1',J=1.5Hz), 4.12(m,lH H-3'), 4.03(m,3H,CH₂-CH=CH₂andH-8a-CH₂), 3.76(m,ΙΗ,Η-З'), 3.64(d, 1H,8a-CH₂,8.7Hz), 3.348dd,ΙΗ,Η-4',J=3.3and8.7Hz), 2.61(t,1H,H-1, J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 57 /1R- (1 cL ,3aS ,4B ,4aB ,78 ,7a^,8aB )/ 8a-/( 4-0-Бензил-2-0бензилоксикарбонил-6-деокси-В -D -алтропиранозилоксш)метил/-4 -формил-4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилме тилов естер

Към разтвор на междинния продукт 54 ( 3.7 г) в сух дихлорометан (25 мл) при О°С,в азотна атмосфера, се прибавя 4диметиламинопиридин (1.85 г).След разбъркване 15 мин.,сместа се охлажда до -20°С и се прибавя разтвор на бензилхлороформиат (0.68 мл) в сух дихлорометан (10 мл),на капки докато не се открие наличието на продукт(контролира се с ТХ,хексан:етил ацетат 4:1).След това разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се ·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · ·· · · · · • · · ·· · · · · ···· • · ····· · ··· · · • · ···· · · · ····· · · · · · ··

-115пречиства чрез вигновена хроматография при използване на хексан :етил ацетат (6:1) до получаването на посоченото в наименовани·: ето,съединение (3.6 г),под формата на бяла пяна.

(H^CDCls): 9.70 (s , 1Н, СНО) , 7.26-7.42(m,20Н,4Ph), 6.96(s,lH, C0₂CHPh₂), 5.99(dd,1Н,Н-2,JOI.2and3.3Hz), 5,18(AB system,2’0C0₂CH₂Ph,J=12.3Hz), 5.00(dd,1H,H-2',J=1.5and4.2Hz), 4.71(d,lH, H-l',J=1.5Hz), 4.56(AB system,4-OCH₂Ph,J=ll.1Hz), 4.15(m,lH,H-3'), 3.66 and 4.00(2d,2H,8aCH₂,J=9Hz9, 3.81(dq,1H,H-5’,J=6.6and9Hz), 3.43(dd,lh,H-4',J=3.3and9Hz), 2.60(t,1H,H-l,J=3.6Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 58 /1К- (1 oC, Зав ,4β ,4ав ,7β ,7ao<,8aft }/ 8а-/( 2-0-Бензилоксикарбонил-6-деокси-4-0-метил-3-0-тозил- β- П-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил метилов естер

Разтвор на междинния продукт 55 ( Зммола) и 4диметиламинопиридин (5.1ммола) в сух дихлорометан (60 мл) се обработва с прибавян на капки разтвор на тозил хлорид (4,5 ммола) в сух дихлорометан ( 20 мл).След 24 ч,разтворителят се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат (5:1) като елуент ,до получаването на посоченото в наименованието,съединение (1.( г).

^(¹Н, CDC1₃): 9.70(s,lh,СНО), 7.84 and 7.32(d,m,2Н,17H,Ar), 6.96(s, lh,CHPh₂), 5.94(dd,1H,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.17(AB system,2H, 0CH₂Ph,J=12Hz), 5.10(m,lH,H-3'), 4.88(dd,lH,H-2',J=3and5.4Hz), 4.68(d,1H,H-1’,J=2.1Hz), 3.97 and 3.63(2d,2H,8a-CH₂,J=9Hz), 3.76(dd, lH,H-5',J=6.3and8.1Hz), 3.18(dd,lh,H-4',J=3and8.1Hz), 3.05(s,3H, OMe), 2.51(t,1H,H-1,J=3.6Hz), 2.43(s,3H,CH₃Ar), 2.01(m,lH, CH(CH₃)₂).

• · · · · · · · · · · · · • · · · · · · · ···· · • · · · · · ··· ····· ·· · ·· ··

-116МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 59 /lR-(l(Z,3a В,4 В,4аВ ;7В ,7а</.,8аВ )/ 8а-/( 4-0-Алил-2-0бензилоксикарбонил-6-деокси-3-0-тозил-В -D -алтропиранозилокси) метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-гоктахидро-7-метил-3- (1-метил етил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил

метилов естер

Към разтвор на междинния продукт 56 (1.1 г) и диметиламинопиридин (300 мг) в сух метилен хлорид ( 40 мл) се прибавя на капки разтвор на тозил хлорид (400 мг) в сух метилен хлорид (20 мл) и реакционната смес се разбърква в продължение на 3 дни при стайна температура.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се хроматографира върху колона със силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат(9:1) и (6:1) до получаване на посоченото в наименованието,съедийение (820 мг).

Ь(^ХН,CDCIj):9.70(s,1Н,СНО);6.95(s,1Н,CHPh₂),5.94(dd,1H,H-2,J= 1.5 and 3.9 Hz),5.61(m,1H,CH=CH₂),5.12(m,4H,Ph-CH₂-0,CH₂ CH= CH₂),4.84(dd,lH,H-2',J=3 and 5.1Hz),4.69(d,1H,H-1’,J=1.8Hz),3.96, 3.63 (2d,2H,8a-CH₂J=9.0 Hz)3.76(m,4H,H-3Ή-5’ CH₂-CH=CH₂)3.38(dd, lH,H-4’J=3,8.1 Hz),2.50(t,1H,H-1J=3.9Hz),242(s,3H,CH₂-Ph) МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 60 / 1 R-(loC,3aB ,4B ,4aB ,7 B ,7ao<,8aB )/ 8a-/( 4-0-Бензил-2-0бензилоксикарбонил-6-деокси-3-0-тозил-B -D -алтропиранозилокси) метил/-4-формил-4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифе нилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 57 (3.5 г) и диметиламинопиридин (1.3 г) в сух метилен хлорид (80 мл) се прибавя на капки разтвор на тозил хлорид (2 г) в сух метилен хлорид (50 мл) и сместа се разбърква 3 дни при стайна температура.Раз творителят се изпарява и остатъкът се пречиства с мигновена ·· ···· ·· ···· • · · · ·· • ·«·· · ·· • · · · · ·· • · · · ·· ·· ··· ·· · -117 хроматография върху силикагел при използване на хексан :етил ацетат (9:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието , съединение ( 3.14 г).

^(¹H,CDCI₃):9.70(s,1Н,СНО)6.95(s,1Н,CHPh₂)5.95(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2 , and 3.3 Hz), 5.16 (m,3H, Ph-CH₂~O, H-2'), 4.93 (dd, lH,H-3',

J=3 and 4,8 Kz ),4.71 (d,lH,H-l’, J=1.8 Ηζ)β 4.25 (AB system,

2H, O-CH₂Ph, J₌11.5Hz),3.96,3.63(2d,2H,8a-CH₂J=9.0gz)3.83(m,ΙΗ,Η-5')

3.45(dd;1Η,Η-4’J=3j8.4Hz),2;51{t,1H,H-1,J=3.9Hz)2.35(s,3H,CH,-Ph) МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 61 /1К -(1 (Z,За β,4 В,4а β,7 В,7а^,8аВ )/ 8а-/( 6-Деокси-4-0метил-3-0-тозил- β- П-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер . Към разтвор на междинния продукт 58(1.9 ммола) ветил ацетат (60 мл ) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (100 мг), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при 15 пси (абсолютно налягане в паунди/инч²) налягане на водорода в продължение на 1 час,при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворът се обработва с 0.35М-ен разтвор на дифенилдиазометан (20 мл).След 2 ч разтворителят се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат (3:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (1.3 г).

$(¹H,CDCI₃)9.72(s,1Н,СНО),7.85,7.32(d,2Н,12Н,Аг)698 (s,lH,CHPh₂)

6.06(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2,3.3Hz),4.84(dd,1Н,Н-3’,J=3,4.2Hz),4.64 (d,lH,H-l'J=1.5Hz),4.06,3.75 (2d,2H,8a-CH₂,J=9.3Hz),4.02(m_TlH, H-2 '),3.70(m,ΙΗ,Η-5'),3.16(dd,1Η,Η-4',J=3,9Hz),2.93(s,3H,0Me), 2.69(t,1H,H-1',J=3.9Hz),2.45(s,3H,CH₃Ar),2.30(d,ΙΗ,ΟΗ,J=3Hz),

2.23(m,lH,CH(CH₃)₂) *4-

···· ·· ·· • · · · • · · · · · • ······ • · · · • · · · ·

-118 МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 62 /1R-.(1 << ,3а В,4 β ,4а β , 7 В,7а^,8а β )/ 8а-/ ( 6-Деокси-4-0пропил-3-0-тозил- β- D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4, 4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано - s-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 59 (800 мг) в етил ацетат (200 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий/въглен (300 мг),в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 20 пси (абе,налягане в паунди/инч²) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се разтваря в метилен хлорид (50 мл) и на капки към него се прибавя 0.35М-ен разтвор на дифенилдиазометан ( 6 мл).Сместа се разбърква в продължение на 3 ч при стайна температура.Разтворителят се изпарява и остатъкът се хроматографира върху силикагел(мигновена хроматография ) при елуиране с хексан:етил ацетат (8:1) и (3:1) до получаването на посоченото в наименованието съединение (630 мг).

§'(¹H,CDCI₃)9.7 2(s,lH,CHO)6.98(s,lH,CHPh₂)6.06(dd,lH,H-2,J=1.2, 3.3Hz)4.84(dd,1Н,Н-2',J=3,4.2Hz)4.64(d,lH,H-l',J=1.5Hz)4.05(m,2H, H-3',H-8a-CH₂)3.73(m,2H,H-5’,H-8a-CH₂)3.29(dd,lH,H-4',J=2.7,9Hz) 3.01(t,2H,OCH₂CH₂CH₃,J=7Hz),2.68(t,1H,H-1,J=3.9Hz),2.44(s,3H,p-Ts)

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ63 /lR-(loC,3a β ,4 8,4a β,7 B,7ao(,8a β)/ 8а-/( 4-0-Бензил-6деокси-3-0-тозил- β- D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4, 4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано

- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 60 (1.0 г) в етил ацетат (70 мл) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (600 мг),

...... .··.···: ··· :: · .···· : ·: : : · ··:: : .......... ·· ··

- 119в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 15 пси (абе.налягане,паунди/инч²),в продължение на 4 ч при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигно вена хроматография върху силикагел,при елуиране с хексан:етил ацетат (3:1) и (1:1).Подходящите фракции се събират и разтворителят се изпарява до получаването на посоченото в наименованието, съединение (530 мг ).

b(¹H,CDCl₃); 9.70(s,lH,CH(D) , 7.81 and 7.10-7.30(2m,9H,Ts and Ph), 6.08(dd,1Η,Η-2,J=1.5and3.3Hz), 4.91(dd,1Η,Η-3’,J=3.3and4.5Hz), 4.68 (d,lH,H-l*,J=1.5Hz), 4.12(m,3H,CHgBhandH-2’), 4.06iand 3.64(2d,2H, 8aCH₂,J=9.3Hz), 3.46(m,lH,H-4'), 2.65(m,1H,H-1), 2.36(s,3H,Ts). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 64 /1К-(1с/,ЗаВ ,4β ,‘4аВ ,7β ,7а</.,8аВ )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-6деокси-4-0-метил-β -D -маннопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Суспензия на натриев хидрид (3.2 ммола) в сух диметилформамид (6 мл),в азотна атмосфера,се обработва с разтвор на междинния продукт 61 (1,6 ммола) в сух диметилформамид ( 6 мл). След 40 мин. се прибавят вода:етил ацетат (1:1,60 мл).Органичната фаза се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при езползване на хексан:етил ацетат (4:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (960 мг),което има идентичен протонен ЯМР спектър с този на междинното съединение 50.

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 65 /lR-(li/,3aB ,4β ,4аВ ,7В ,7аХ,8аВ )/ 8а-/( 2,3-Анхидро-6деокси-4-0-пропил- β -fiD -маннопиранозилокси)метил/-4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-мета····

.,...... ·· ··

-120но- s-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към суспензия на натриев хидрид ( 35 мг) в сух диметилформамид (10 мл) се прибавя на капки разтвор на междинния продукт 62 (600 мг) в сух диметилформамид ( 15мл ).Сместа се разбърква при стайна температура и азотна атмосфера в продължение на 1ч и след това се обработва с ΙΝ-ен амониев хлорид (50 мл) и с етил ацетат (70 мл).Органичният слой се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид , суши се над безводен магнезиев сулфат и се изпарява до сухо.Остатъкът се хроматографира върху силикагел прни елуиране с хексан:етил ацетат (8:1) и (6:1) до получаване на посоченото в наименованието,съединение /450 мг/ под формата на бяла пяна.

^(^CDCls): 9.75 (s , 1Н, СНО) , 6.99(s,1Н,CHPh₂), 6.08 (dd, 1Н-Н-2 , J=1.5and4.8Hz), 4.68(s,1H,H-1'), 4.11 and3.79(2d,2H,8a-CH₂,J=9.0Hz), 3.68(m,lh,H-5’), 3.45(m,1Н,Н-4'), 3.24 and 3.12(2d,2H,H-2’,H-3’,J= 3.9Hz)), 3.19 (t, 2H,0CH₂CH₂CH₃ , J=7Hz) , 2,86 (t, lh,H-l; J=3.9Hz) . МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 66 /lR-(lo/,3aB ,4β ,4aB ,7β ^7а</,8ав )/ 8a-/( 6-Деокси-3-0тозил- β- D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а, 8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил).1,4-метано- _s-индацен -За(1H)-карбоксилова киселина

Към суспензия на 10%-ен паладий/въглен (800 мг) в етил ацетат (60 мл) в бутилка за хидрогениране, в азотна атмосфера,се прибавя разтвор на междинния продукт 60 ( 1.0 г) в етил ацетат (30 мл) и смес от метанол : 1 N-на солна киселина (3:1;4 мл ).Бутилката се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 30 пси (абе.налягане в паунди /инч²) в продължение на 18 часа.Реакционната смес се филтрува и филтратът се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел,при елуиране с дихлорометан:метанол (20:1).Под: : : . . .

·· ··· ·· · ·· ··

-121ходящите фракциисе събират и разтворителят се изпарява до получаването на посоченото в наименованието,съединение(380 мг).

£ (¹H,CDC1₃): 9.70(s,1Н,СНО), 7.84 and 7.38(2d,4H,Ts), 6.06(dd,lH, Н-2; J=1.5and3.6Hz), 4.75(dd,lH,H-3’,J=3.3and4.5Hz), 4.61(d,1H,H-1’, J=1.2Hz), 4.05(d,1Н,Н-8аСН₂а,J=9.3Hz), 3.92(dd,1H,H-2’,J=1.2and4.5Hz), 3.65(m,3H,H-5’,H-4’ and H-8aCH₂b), 2.63(m,1H,H-1), 2.46(в,3H,Ts).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 67

/1К-(1оС,ЗаВ ,4β ,4ав ,7β ,7ао/,8ав )/ 8a-/(2,З-Анхидро-6деокси- β- В-маннопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7, 7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- §-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 55 (585 мг) в сух дихлорометан (20 мл) се обработва на капки с пурпурен разтвор на дифенилдиазометан в дихлорометан (0.35М-ен, 8 мл).Получе ният в резултат разтвор се разбърква при стайна температура в продължение на 14 ч.Разтворителят се отстранява при понижено

налягане и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан: етил ацетат (6:1) и (4:1) Подходящите фракции се събират и се изпаряват до получаването на посоченото в наименованието,съединение (764 мг),под формата на бяла пяна.

δ(^ΧΗ, CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.26-7,44(m,10Н,2Ph), 7.00(s,lH, C0₂CHPh₂), 6.09(dd,lH,H-2,J?1.2and3.6Hz), 4.71(s,1H,H-1'), 3.79 and 4.12(2d,2H,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.63(dd,1Η,Η-4’,J=5.7and8.7Hz), 3.21(m, lH,H-5'), 3.15 and 3.24(2d,2H,H-2’ and H-3’,J=3.6Hz), 2.86(t,1H,H-1, J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 68 /1R-(1<X ,3a 8 ,4 β ,4a β ,78 ,7а</,8ав)/ 8a-/( 2,3-Анхидро-4,6 деокси-4-флуоро- β - D-талопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, • ·

-1225,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1Н)-капбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 67 (300 мг) в дихлорометан (25 мл) се обработва с диетиламиносулфу трифлуорид (0.16 мл) и получената в резултат смес се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура.Сместа се охлажда до 0°С,реакцията се прекъсва чрез прибавянето на метанол ( 15 мл) и след това се концентрира при понижено налягане.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан :етил ацетат (6:1) и (4:1) до получаване на посоченото в наименованието,съединение (160 мг).

§(¹H,CDC1₃): 9.73(s,lH,CHO)), 7.45-7.26 (m, 10Н, 2Ph) , 6.98(s,lH, CHPh₂), 6.09(dd,lH,H-2,J=1.5and3.9Hz), 5.09(d,ΙΗ,Η-1',J=1.5Hz), 4.75 and 4.58(2dq,1H,H-5’, J₅, _p=48.6Hz,J=6.6Hz,J=3.9Hz), 4.18 and 4.11(2d,lH,H-4’,J₄,_F=23.1Hz,J=3.9Hz), 3.97.and 3.81(2d,2H,8aCH₂, J=9.3Hz), 3.75 and 3.70(2m,2H,H-2’ and H-3'), 2.84(t,1H,H-1). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 69 /1К- (Ιοί , ЗаВ ,4В ,4аВ ,7В ,7а</,8аВ )/ 8а-/( 2,3-Анхидро-6деокси-4-0-(2-метоксиетил)- В -D -манопиранозилокси)метил-4формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилме тилов естер

Към суспензия на натриев хидрид (24 мг) в сух тетрахидрофуран (20 мл) при 0°С в азотна атмосфера се прибавя междинния продукт 67 ( 300 мг) и сместа се разбърква в продължение на 30 мин.Прибавят се 2-бромоетил метилов етер (300 мт) и 1 Νен тетрабутиламониев йодид (2 мл) и сместа се нагрява при 40° С в продължение на 2 дни.Реакцията се прекъсва чрез прибавяне на 1 N -ен амониев хлорид (10 мл) и сместа се разрежда с етил ацетат ( 30 мл).Органичният слой се промива с вода и воден раз·· ····

-123твор на натриев хлорид,суши се над безводен магнезиев сулфат и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигно вена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил аце тат (5:1) до получаването на посоченото в наименованието съедине

ние,под формата на безцветно масло.

^(¹H,CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 6.98(s,1Н,CHPh₂), 6.08(dd,1Н,Н-2,

J=1.2and3.3Hz), 4.67(s,1Н,Н-1’), 4.10 and 3.78(2d,2Н,8а-СН₂,J=9.0Hz) 4.09-4.00(m,2Н,Н-4’,Η-5’), 3.90-3.53(m,4H,OCH₂CH₂OCH₃), 3.40(s,3H; CH₃0CH₂CH₂), 3.29 and 3.11(2d,2H,H-3’ and Η-2 * ,J=3.9and3.9Hz), 2.86 (t,1H,H-1,J=3.7Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 70 /1К- (1 oC ,3aB ,4B ,4аВ ,7β ,7а^,8а8 )/ 8a/( 2,3, Анхидро-6-деокси-4-0-(2-метилпроп-2-енил)- β- П-маннопиранозилокси)метил/-4 -формил-(1,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3- (1-метилетил) -

1,4-метано- Б-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилме

тилов естер

Смес от междинния продукт 67 ( 0.Зммола),цезиев карбонат (0.3 ммола) и З-бромо-2-метил-пропен (0.5 ммола) в сух диметилформамид (1,5 мл)се разбърква в продължение на 3 дни при стайна температура.След разреждане с диетилов етер (30 мл) сместа се промива с вода.Разтворителят се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан: етил ацетат (4:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение(62 мг).

& (¹H,CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.35(m,10Н,2xPh), 6.99(s,lH,CHPh₂), 6.08(dd,lH,H-2,J=1.5and3.6Hz), 5.00 and4.93(m,m,1H,1H,CH₂=C), 4.70(s,1H,H-1'), 4.12 and 3.79(2d,2H,8a-CH₂,J=9.3Hz), 4.12 and3.96 (d,d,1H,1H,CH₂0,J=12Hz), 3.26(m,3H,H-3’,H-4' and H-5‘), 3;13(d,lH,H2’,J=3.9Hz), 2.86(t,1H,H-1,J=3.9Hz), 2.23(m,lH,CH(CH₃)₂).

·· ···· • · • ··· ·· ····

• ··· • · · • · · ·· ·· • · ·· ···

-124МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 71 /1R- (1 σό ,3а β ,4 β ,4а β ,7 β ,7а<х: ,8а β )/ 8а-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-(1-метилетил)карбонил- β - D-манопиранозилокси)метил/

-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилмети- лов естер

Към разтвор на междинния продукт 67 (160 мг) в сух дихлорометан (5 мл) се прибавя 4-диметиламинопиридин(70 мг) и изобутирил хлорид (60 л).Сместа се разбърква в продължение на

една нощ при стайна температура и след това се концентрира до получаването на жълто масло,което се подлага на мигновена хроматография в колона със силикагел при използване на хексан:етил ацетат ( 5:1) като елуент до получаване на посоченото в наименованието , съединение (162 мг),под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.26-7.44(m,10Н,2Ph), 6.99(s,lH,

CHPh₂), 6.08(dd,1Н,Н-2), 5.75(s,1H,H-1*), 4.68(d,1Н,Н-4',J=9Hz),

4.12 and 3.80(2d,2Η,8aCH₂,J=9Hz), 3.43(dq,1Η,Η-5',J=6.6and9Hz), 3.15 (s,2H,H-2* andH-3’), 2.86(m,1H,H-11), 2.59(m,1Η,4’-0C0CHMe₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 72 /1R-(1 ¢(. , ЗаВ ,4В ,4а8 ,7β ,7ас<,8ав )/ 8а -/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-(2,2-диметилпропионил)-β -D -манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил метилов естер

Смес от междинния продукт 67 (0.3 ммола) и 4-диметиламинопиридин (0.6 ммола) в сух дихлорометан (15 мл) се обработва с пивалоил хлорид ( 0.45 ммола).След 25 ч, сместа се промива с вода.Органичният слой се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат (5:1) като елуент до получаване на посоченото в наименова• ·

-125нието,съединение (190 мг).

^(¹H,CDC1₃): 9.76(s,1Н,СНО), 7.83(m,10Н,2xPh), 7.00(s,1H,CHPh₂) , 6.08(dd,lH,H-2,J=1.5and3.3Hz), 4.77(s,1H,H-1’), 4.67(d,lH,H-4',J=9 Hz), 4.13 and 3.81(d,d,1H,1H,8a-CH₂,J=9Hz), 3.43(m,1H,H-5'), 3.13(m, 2H,H-2' and H-3’), 2.86(t,1H,H-1,J=3.9Hz), 2.24(m,1H,CH(CH₃)₂). МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 73 /lR-Clo/^aB ,4β ,4aB ,7β ,7а<Х,8аВ )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-4-0бензилоксикарбонил-6-деокси-β -D -манопиранозилокси)метил/-4формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4 -метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 67 (0.3 ммола) и 4-диметиламинопиридин (0.8ммола) в сух дихлорометан (15 мл) се обработва на капки с бензилоксикарбонил хлорид (0.7 ммола) и се разбърква в продължение на 3 ч.След промиване с вода и разтвор на натриев хлорид,разтворителят се изпарява и остатъкът се пречист ва чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат ( 5:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието , съединение (180 мг).

&(¹Н,CDC1з): 9.75(s,1Н,СНО), 7.32(m,15Н,3xPh), 6.99(s,lH,CHPh₂),

6.08(dd,1Н,Н-2,J=1.2and3.3Hz), 5.20(m,2H,OCH₂Ph), 4.72(s,1H,H-1’), 4.57(d,1Η,Η-4’,J=8.4Hz), 4.11 and 3.79(2d,2H,8a-CH₂,J=9Hz), 3.43(m, lH,H-5’), 3.27 and 3.15(2d,2H,H-2' and H-3’,J=3.6Hz), 2.85(t,1H,H-1, J=3.9Hz), 2.24(m,1H,CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 74 /lR-(l</,3aB ,4β ,4a β,7β ,7ac<,8aB )/ 8a -/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-оксо- β- D-манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5, 6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4тметано-5 индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер····· ·· ⁹

-126Разтвор на трифлуорооцетен анхидрид (0.1 мл) в сух дихлорометан (5 мл) при -60°С се обработва на капки с диметилсулфоксид (0.06 мл) и с разтвор на междинния продукт 67 (0.39 ммола) в сух дихлорометан ( 5 мл).След 60 мин.се прибавя триетиламин (0.24 мл) и сместа се разбърква при -20°С в продължение на 2 ч. Сместа се разрежда с дихлорометан (20 мл) и се промива с вода. След отстраняване на разтворителя,остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат (4:

1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието, съединение (171 мг).

S(¹H,CDC1₃): 9.76(s,1Н,CHO) , 7.36(m,10Н,2xPh), 6.59(s,1H,CHPh₂),

6.09(dd,1H,H-2,J=1.5and3.6Hz), 4.84(s,1H,H-1'), 4.11 and 3.84(2d,2H 8a-CH₂,J=9Hz), 3.92(q,lH,H-5’,J=6.9Hz), 3.59 and 3.37(2d,H-2' and H-3’,J=4.2Hz), 2.86(t,1H,H-1,J=3.9Hz), 2.26(m,1H,CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ75 /lR-(l<Z,3aB ,4β ,4aB ,7β ,7a<<,8aB )/ 8a -/( 2-0-Бензоил-6 деокси-4-О-метил-В -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,

4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-

s-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 48 (15.88 г) и диметиламинопиридин(8,83 г) в сух дихлорометан ( 200 мл) се прибавя на капки при -25°С, в азотна атмосфера,бензоил хлорид (2 мл) в сух дихлорометан (10 мл).След разбъркване в продължение на 45 мин. ледената баня се отстранява и се прибавя 1 JN-на солна киселина (10 мл) внимателно.Двете фази се разделят и органичният слой се разрежда с дихлорометан ( 600 мл) и се промива с ΙΝ-на солна киселина (500 мл),10%-ен разтвор на натриев бикарбонат ( 500 мл) и разтвор на натриев хлорид ( 500 мл).Разтворителят се отстранява до сухо и полученото масло се подлага на мигновена хроматография (силикагел, етил ацетат :хексан V/V 1:20 и 1:7) до

-12 7 получаването на посоченото в наименованието,съединение (8.75 г ) (48%-ен добив ),под формата на пяна.

& (¹H,CDC1₃): 9.66(s,1Н,СНО), 8.15-8.05,7.60-7.2(2m,15H,3Ph), 6.95(s, lH,CHPh₂), 5.93(bd,1H,H2,J=2.1Hz), 5.35(dd,1H,H2’,J=1.5and4.8Hz), 4.82(d,1H,H1',J=1.8Hz), 4.25(m,1H,H3'), 3.99(d,1H,8aCH₂,J=9Hz),

3.86(dq,1H,H5’,J=6.3and 8.1Hz), 3.68(d,1H,8aCH₂,J=9Hz), 3.43(s,3H, 0CH₃), 3.22(dd,1H,H4',J=3and8.1Hz), 2.62(t,ΙΗ,ΗΙ,J=3.9Hz), 2.45(d, ΙΗ,ΟΗ,J=2.4Hz), 2.19(m,lH,CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 76 /lR-(lc<,3aE ,4 β ,4a β ,7 β ,7a e< ,8a β )/ 8a/( 2-0-Бензоил-З , 6дидеокси-4-О-метил-З-оксо- β- D-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- ^s -индацен-За(1Н)-карбоксилаво киселина,дифенилметилов

естер

Към разтвор на трифлуорооцетен анхидрид (1.29 мл) в сух дихлорометан ( 15 мл ) се прибавят ДМСО (диметилсулфок сид) (0.66 мл) в продължение на 10 мин. при -60°С в азотна атмосфера. Към така получената суспензия се прибавя разтвор на междинния продукт 75 (3.45 г) в сух дихлорометан ( 30 мл) и сместа се разбърква при -60°С в продължение на 1 час.На капки се прибавя триетиламин (5.76 мл ) и се оставя температурата да се повиши до -20°С, след това се прибавя вода ( 6 мл) към така получения жълт разтвор и сместа се разбърква в продължение на 1 час при стайна температура.Прибавят се дихлорометан ( 200 мл) и вода (200 мл ) и двете фази се разделят.Органичният слой се суши над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо.Полученият суров продукт се разтваря в дихлорометан ( 10 мл ) и се обработва с триетиламин (2 мл ) през цялата нощ.Отстраняването на разтворителя дава масло,което се подлага на мигновена хроматография • е · · · · • · ··· · ♦ · · · · • · ··· · ......_ж • · ··· ·♦ · ···· · ······ ··· • · · · · ·· · ·· ··

-128/силикагел,етил ацетат :хексан V/V 1:15 и 1:10 / до получаване то на 2,6 г от посоченото в наименованието,съединение (76%ен добив ) ,под формата на пяна.

δ(¹H,CDC1₃) : 9.68(s,1Н,СНО), 8.2-8.0,7.6-7.2(2m,15H,3Ph), 6.96 (s,lH,CHPh₂), 5.76(dd,lH,H2,J=1.2and3.3Hz), 5.77(dd,1H,H2,J=1.2and3.3 Hz), 5.39(dd,1H,H2',J=1.2and8.1Hz), 4.53(d,1H,H1',J=8.1Hz), 4.09(d, 1H,8aCH₂,J=9Hz), 3.75(d,1H,8aCH₂,J=9Hz), 3.7-3.4(m,5H,H4'+0CH₃+H5'), 2.63(t,ΙΗ,ΗΙ,J=4.2Hz).

МЕЖСИНЕН ПРОДУКТ 77 /1Й-/1 o( ,3ав ,4β ,4ав ,7β ,7acZ,8a8 )/ 8a-/(2,3,6-Тридеокси4-0-метил-3-оксо-в -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs-индацен - За(1Η)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов

естер

Към добре обезвъдушен разтвор (аргон, 15 мин.) на трибутил калаен хидрид (5.96 мл) в сух толуен (120 мл) се прибавя със спринцовка разтвор на междинния продукт 76 (5.7 г ) и а,а - азоизобутиронитрил (420 мг ) в сух толуен ( 50 мл) при 90°С в продължение на 1 час.Нагряването продължава до пълното давършване на реакцията и след това реакционната смес се охлажда до стайна температура.Прибавят се вода (40 мл) и калиев флуорид ( 1.5 г) и сместа се разбърква в продължение на една нощ.Суровият продукт,получен след отстраняване на разтворителите се разбърква с диетилов етер в продължение на 1 час и твърдото вещество се отстранява чрез филтруване.Етерният разтвор се концентрира до сухо и полученото в резултат масло се подлага на мигновена хроматография ( силикагел,етил ацетат : хексан (1:15 и 1:10)) до получаването на 2.22г от посоченото в наименованието,съединение ( 61%-ен добив),под формата на пяна,след изсушаване във вакуум.

• · ·· ···· • · · • · ·

-129^(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1H,CHO), 7.5-7.2(m,10H,2Ph), 6.98(s,1H,CHPh₂),

6.04(dd,1H,H2,J=1.5and3.6Hz), 4.45(dd,ΙΗ,ΗΙ',J=2.7and8.7Hz), 4.06 (d,1H,8aCH₂,J=9Hz), 3.70(d,1H,8aCH₂,J=9Hz), 3.52(s,3H,OCH₃), 3.5

3.3(m,2H,H4’+H5’), 2.7-2.5(m,3H,H1’+H2' ) , 2.24(m,1H,CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 78 /1К-(1о(,Зав ,4β ,43β ,7β )/ 8a-/( IS ,7R,9R)-2,8Диокса -9-метил-бицикло-/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/-4-формил -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

При енергично разбъркване към разтвор на междинния

продукт 77 (260 мг ) и диетил диазометил фосфонат (110 мг) в сух тетрахидрофуран се прибавя бавно при температура 0°С ,в азотна атмосфера,суспензия на калиев трет.-бутоксид ( 112 мг) в сух тетрахидрофуран (1 мл ) ( веднага се наблюдава отделянето на газ ).След 10 мин. сместа се разрежда с дихлорометан ( 100 мл) и се промива с 1 N-на солна киселина ( 2 х 100 мл),с наситен разтвор на натриев бикарбонат ( 2 х 100 мл) ,с наситен разтвор на натриев хлорид ( 2 х 100 мл) и се суши над магнезиев сулфат. Отстраняването на разтворителя дава масло,което се подлага на миг новена хроматография ( силикагел, етил ацетат : хексан V/V 1:15 и 1:12 ) до получаването на 200 мг от посоченото в наименованието, съединение ( добиви 77 %) ,под формата на пяна.

⁽¹Н,CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 7.5- 7.2(m,10Н,2Ph), 6.99(s,1Н,CHPh₂),

6.05(dd,1H,H2,J=1.2and3.3Hz), 5.45(m,1H,H4'), 4.65(m,2H,H3'), 4.254.15(m,2Η,Η7’+Η1’), 4.07(d,1Н,8аСН₂,J=9Hz), 3.71(d,1H,8aCH₂,J=9 Hz), 3.19(dq,1H,H9',J=6and8.4Hz), 2.77(t,ΙΗ,ΗΙ,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 79 /1R-(1 , За β ,4β ,4ав ,7β ,7Βοί,8Ββ )/ 8a-/(lS ,4R,7R,9R)-2,8Диокса-4-хидрокси-9-метил-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-окси·· ···· • · • ··· ·· ····

-130·-·

метил-4-хидроксиметил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина , дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 78 (620 мг ) в безводен тетрахидрофуран ( 5 мл) се прибавя 9-борабицикло /3.3. 1/ нонан (0.5 М-ен разтвор в тетрахидрофуран,6 мл),в азотна атмосфера. След това сместа се нагрява до 50°С в продължение на 1 час.При температура 50°С в продължение на 3 часа се прибавя допълнително количество 9-борабицикло/З.3.1/ нонанов разтвор за завършване на реакцията и сместа се оставя да се разбърква в продължение на 1 ч при стайна температура.Прибавя се етилов алкохол ( 2 мл) внимателно ( отделяне на газ)и разтворът се разбърква в продължение на 1 ч.След това последователно се прибавят 314-ен натриев хидроксид ( 5 мл) и водороден пероксид ( 35%-ен V/V, 5 мл) при 0°С и после сместа се разбърква при стайна температура, при 0°С и при 70°С в продължение на една нощПолученият в резултат разтвор се охлажда до стайна температура и се концентрира до половината обем,след това се разрежда clN-на солна киселина ( 100 мл) и се екстрахира с етил ацетат двукратно ( 2 х 100 мл).Органичният слой се промива с ΙΝ-на солна киселина ( 100 мл) , с натриев бикарбонат ( 2 х 100 мл) и с разтвор на натриев хлорид(100 мл),суши се над натриев сулфат и се кон центрира до сухо като полученият сироп се подлага на мигновена хроматография ( ацетон: хексан 1:10 и 1:5) до получаването на 475 мг от посоченото в наименованието,съединение /74 %-ен добив) под формата на пяна.

B/¹H,CDC1₃) : 7 . 5-7.2 (ιπ,ΙΟΗ, 2Ph) , 7.04 (s , 1Н,CHPh₂) , 5.90 (dd, 1H,H2 ,

J=1.5and3.6Hz), 4.75(d,1H,HOCH₂,J=10.5Hz), 4.62(dd,1H,H7',J=2.7 and 5.1Hz), 4.27(m,1H,H4'), 4.16(d,1H,8aCH₂J=9Hz), 4.09(dd,1H,H3',

J=6and9.6Hz), 3.91(t,1H,H3’,J=6.9Hz), 3.7-3.5(m,ЗН,8aCH₂+Hl’+H9'),

3.35(d,1H,HOCH₂,J=ll.5Hz), 3.22(dd,1H,HOCH₂,J=ll.landl2Hz),

2.57(t,ΙΗ,ΗΙ,J=4.5Hz), 2.48(m,1H,H5’), 2.30(m,1H,CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕНПРОДУКТ 80 /1R- (1</ , 3a β ,4β ,4ав ,7β ,7ао6,8ав )/ 8a-/( IS ,7R,9R)-2,8Диокса-9-бицикло/З,4,0/-нон-7-ил-оксиметил/-4- (трет.бутилдиметилсилил-оксиметил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил3-(1-метилетил)-1,4-метано- з-индацен-За/1Н/-карбоксилова кисе лина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 78 (200 мг) в тетрахидрофуран (5 мл) се прибавя твърд натриев борохидрид (18,9 мг) и вода (1 мл) и сместа се разбърква при 0°С в продъл жение на 30 мин. и след това 1ч при стайна температура.Реакцията се спира внимателно чрез прибавянето на вода ( 2 мл) при 0°С и сместа се разпределя между етил ацетат (100 мл) и вода ( 100 мл).Органичният слой се суши над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като дава сироп,който се разтваря в сух диметилформамид ( 5 мл) и се обработва при стайна температура ,в азотна атмосфера, с имидазол ( 204 мг) и трет.бутил-диметил-силил хлорид( 316 мг) в продължение на една нощ,Разтворът се излива в 100 мл смес от 1М-ен амониев хлорид и етил ацетат (V/V 1:1) и се разбърква в продължение на 1 час.Органичният слой се промива с ΙΝ-ен амониев хлорид ( 100 мл) и с воден разтвор на натриев хлорид ( 100 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентри ра до сухо като получената пяна се подлага на мигновена хроматография ( силикагел, етил ацетат : хексан V/V 1:20) до получаването на 215 мг от посоченото в наименованието,съединение (общо 92 % -ен добив ).

S(¹H, CDC1₃): 7.5 - 7.2(m,10Н,2Ph), 6.94(s,1Н,CHPh₂), 5.96(dd,1H,H2, • · • · · ·· · ···

..... ........_л

Л * ··· · · · ···· · ·· · · · · ··· ··«·· ·· · ·* *·

-132J=1.2and3.6Hz), 5.54(ш,1Н,Н4’), 4.65(ш,2Н,НЗ’), 4.25-4.15(m,ЗН,

SiOCH₂+H7'+Н1'), 4.1(d,lH,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.69(d,1Н,SiOCH₂,J=9

Hz), 3.30(d,1H,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.19(dq,1H;H9',J=6and9Hz), 2.68(dd, 1H,H6',J=2andl3.2Hz), 2.57(t,ΙΗ,ΗΙ,J=4.2Hz), 2.3(т,2H,CH(CH₃)₂+H6'), -0.017 and -0.031(2s,6H,(CH₃)₂Si).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ81 /1К-(1ж,ЗаВ ,4B ,4aB ,7В ,7а<Х,8аВ )/ 8a-/(lS , 4R. 7R, 9R) - 2,8

-Диокса-4-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/- 4-(трет.-бутил-диметилсилис-оксиметил)-4,4а,5,6,7,7а

8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен

-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 80 ( 700 мг) в сух тетрахидрофуран ( 5 мл)се прибавя 9-борабицикло/З.3.1/нонан (0.5 М-ен разтвор в тетрахидрофуран,6 мл), в азотна атмосфера. Сместа се нагрява до 50°С в продължение на 1 ч.При температура 50°С в продължение на 3 ч за завършване на реакцията се прибавя допълнително количество разтвор на 9-борабицикло/З.3.1/ нонан,след това сместа се охлажда до стайна температура и внимателно се прибавя етилов алкохол ( 2 мл).След 1ч последова-

телно се прибавят ЗЬ1-ен натриев хидроксид ( 5 мл) и водороден пероксид ( 35%-ен,У/У,5 мл),при температура О°С и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 ч и след това при 70°С в продължение на една нощ.Разтворът се охлажда до стайна температура и се концентрира до половината обем,след това се разрежда с ΙΝ-на солна киселина /100 мл/ и се екстрахира двукратно с етил ацетат ( 2 х 100 мл).Органичният слой се промива с 1ГЧ-на солна киселина (100 мл), с наситен разтвор на натриев бикарбонат ( 100 мл) и с разтвор на натриев хлорид (100 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като се получава сироп,който се подлага на мигновена хрломатография ( ацетон:хексан 1:20 и 1:15 ) до получаването на 550 мг • ·

-133(77%-ен добив ) от посоченото в наименованието,съединение.

5(¹H,CDC1₃): 7.5-7.2(m,10H,2Ph), 6.94(s,1Н,CHPh₂), 5.95(m,1H,H2, 4.57(dd,1H,H7’,J=3and5.1Hz), 4.30-4.15(m,2H,H4’+CH₂0Si), 4.10-3.95 (m,2H,H3'+8aCH₂), 3.87(t,1H,H3',J=6.9Hz), 3.7-3.5(m,3H,H1’+8aCH₂ + +H9’), 3.30(d,1H,CH₂0Si,J=9.3Hz), 2.53(t,1H,H1,J=3.9Hz), 2.46 (m,lH,H5'), 2.32(m,1H,CH(CH₃)₂), -0.016 and -0.029(2s,6H,(CH₃)₂Si).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 82 /1R- (1(/,ЗаВ ,4В ,4аВ ,7β ,7а</,8аВ )( 8а -/( IS ,4R,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-метокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- з-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 81 (537 мг) в безводен тетрахидрофуран ( 5 мл ) се прибавя натриев хидрид ( 75 мг ), на малки порции,при температура О°С,в азотна атмосфера. След разбъркване в продължение на 10 мин. се прибавя метил йодид (374 уйл) и сместа се държи при стайна температура до завършване на реакцията.Взаимодействието се прекратява чрез прибавяне на вода ( 100 мл) и след това сместа се екстрахира с етил ацетат (100 мл).Органичният слой се промива с разтвор на натриев хлорид (100 мл) и се концентрира до сухо,като получената пяна се разтваря в безводен тетрахидрофуран ( 5 мл ) и се обработва с тетрабутиламониев флуорид (1.1 М-ен разтвор в тетрахидрофуран, 2 мл)при 0°С в продължение на 24 ч.Полученият в резултат разтвор се концентрира до сухо и остатъкът се разтваря в етил ацетат и се промива с вода ( 2 х 100 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до получаването на сироп,който се разтваря в сух дихлорометан (85 мл).Прибавя се пиридиниев хлорохромат ( 215 мг) и сместа се разбърква при стайна температура до завършване на реакцията.Суспензията се излива върху добре разбърквана смес от дихлорометан и натриев метабисулфит ( 10% ен воден разтвор),Органичният слой се промива с ΙΝ-на солна киселина (200 мл ) и ΙΝ-ен натриев хидроксид (200 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като полученото масло се подлага на мигновена хроматография върху силикагел ( етил ацетат: хексан 1:15,1:10 и 1:8) до получаването на посоченото в наименованието , съединение , под формата на масло ( 57%-ен добив ).

^(¹H,CDC1₃): 9.74(s,1Н,СНО), 7.5-7.2 (m, 10Н, 2Ph), 6.99(s,lH,CHPh₂),

6.04(dd,1H,H2,J01.2and3.6Hz), 4.60(m,1H,H7’), 4.10-3.95(m,2H, H4'+8aCH₂), 3.90-3.65(m,3H,H3’+H1¹), 3.65-3.55(m,2H,8aCH₂+H9’), 3.35 (s,3H,OCH₃), 2.73 (t, ΙΗ,ΗΙ, J==3.6 Hz) , 2.54(m,1H,H5'), 22.4(m,lH, CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 83 / 1К-(1</ ,3aB ,4β ,4ав ,7β ,7aoC,8aB )/ 8а-/( 6 -Деокси-4-0метил-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-(1,3-диоксолан-2-ил) -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1.4-метано-s -индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор намеждинния продукт 48 (9.7 ммола) в сух метанол ( 40 мл) се обработва с етилен гликол ( 110 мл),с триметилортоформиат (3.25 мл) и с каталитично количество р-толуенсулфонова киселина.Сместа се нагрява при 40θ0 в продължение на 3 часа.След охлаждане,сместа се излива върху етил ацетат :воден разтвор на натриев бикарбонат (1:1;500 мл) и водният слой се екстрахира внимателно с етил ацетат.Събраните органичнти слоеве се промиват с вода,и с воден разтвор на натриев хлорид и се сушат.След отстраняване на разтворителя,остатъкът се подлага на мигновена хроматография при използвнане на хексан: етил ацетат (6:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието , съединение (6.1 г) .

• · · · · · • ·

Ο^Η,ΟϋΟΙ·;): 7.43 and 7.30(m,m,4H,6H,2xPh), 6.94(s,lH,CHPh₂), 5.83(dd,lH,H-2,J=1.2and3.6Hz), 5.07(s,1H,4-CH), 4.63(d,1H,H-1', J=1.5Hz), 4.20(t,lH,H-3', J03.3Hz), 4.07(d,lH,8a-CHa,J=9.3Hz), 3.84 (m,6H,H-2',8a-CHb and 0CH₂CH₂0), 3.71(m,lH,H-5'), 3.42(s,3H,0CH₃), 3.21(dd,lH,H-4’,J=3and9Hz), 2.63(m,1H,CH(CH₃)₂), 2.54(t,1H,H-1, J=3.9 Hz).

МЕЖДИНЕНПРОДУКТ 84 /1К-(1а ,3ab ,4b ,4ab ,7b ,7aa 8ab )/ 8a- /2-0-Бензоил-6-деокси-О-метил-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-(1,3-диоксолан-2ил)-4-4a-5-6-7- 7a-8-8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилмети лов естер

Към разтвор на междинния продукт 83 ( 12,12 г) и диметиламинопиридин (6,3 г ) в сух дихлорометан (155 мл) се прибавя на капки при -20°С,бензоил хлорид (1.40 мл) в 50 мл сух дихлорометан в азотна атмосфера.След разбъркване в продъл-

жение на 2 часа сместа се оставя да повиши температурата си до стайната и разтворът се промива с 0.1 Ь1-на солна киселина (500 мл ), с наситен разтвор на натриев бикарбонат (500 мл). Отстраняването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография (силикагел, етил ацетат : хексан V/V 1:4) до получаването на 5.89 г от посоченото в наименованието , съединение (42 %),под формата на бяла пяна.

§(¹H,CDC1₃): 8.14-8.05,7.6-7.2(2m,15Н,3Ph), 6.91(s,1Н,CHPh₂), 5.70 bd,1H,H2,J=2.1Hz), 5.34(dd,1H,H2',J=2.land5.1Hz), 5.01(s,lH,

ОСНО), 4.82(d,ΙΗ,ΗΙ',J=1.8Hz), 4.26(m,lH,H3’), 3.98(d,1H,8aCH₂,

J=9.3Hz), 3.92-3.74(m,5H,H5'+0CH₂CH₂0), 3.72(d,1H,8aCH₂,J=9.3Hz),

3.42(s,3H,0CH₃), 3.23(dd,1H,H4',J03.3and8.1Hz9, 2.57(m,lH,

CH(CH₃)₂), 2.44-2.38(m,2H,OH+H1).

·· ·«·· ·· ···· • ·

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 85 /lR-(lc(,3aB ,46 , 4а β , 7.β , 7а<Х , 8а β )/ 8а-/ ( 2-0-Бензоил-3,6дидеокси-0-метил-3-оксо-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-/1,3 диоксолан-2 -ил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, дифенилметилов естер

Към разтвор на трифлуорооцетен анхидрид(О.45 мл) в сух дихлорометан ( 5 мл) се прибавя диметилсулфоксид (0.23 мл) в продължение на 10 мин. при -60°С, в азотна атмоссфера.Към така получената суспензия се прибавя разтвор на междинния продукт 84 (1.2 г ) в сух дихлорометан ( 5 мл ) и сместа се разбърква при 60°С в продължение на 1 час.На капки се прибавя триетиламин (1,24 мл) и температурата на сместа се оставя да достигне -20°

С,след това се прибавя вода ( 2 мл) къмполучения жълт разтвор и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 ч.Прибавят се дихлорометан ( 200 мл) и вода ( 250 мл ) и двете фази се разделят.Органичният слой се суши над маг незиев сулфат и се концентрира до сухо,като получения суров продукт се разтваря в дихлорометан ( 10 мл) и се обработва с

триетиламин ( 2 мл) в продължение на една нощ.Отстраняването на разтворителя дава масло,което се подлага на мигновена хро матография( силикагел, етил аДетат : хексан V/V,l:15 и 1:10) до получаването на 1.1 г от посоченото в наименованието,съединение (92 %-ен добив ) ,под формата на пяна,когато се суши във вакуум.

^tlH^DCl₃): 8.2-8.0,7.6-7.2(2m,15Н,3Ph), 6.90(s,1H,CHPh₂), 5.57 (dd,1H,H2,J=1.2and3.6Hz), 5.37(dd,1H,H2',J01.5and8.1Hz), 5.05(s,lH,

ОСНО), 4.52(d,ΙΗ,ΗΙ',J=8.1Hz), 4.08(d,1H,8aCH₂,J=8.7Hz), 3.9-3.7(m, • · • · · ·

5H,0CH₂CH₂0+8aCH₂), 3.6-3.4(m,5H,H4'+0CH₃+Н5'), 2.62(m,lH,

CH(CH₃)₂), 2.43(t,ΙΗ,ΗΙ,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 86 / 1R- (Ιο/ , За В ,4 β , 4а β , 7 β , 7а ο< , 8а β ) / 8а/ (-2,3,6-Тридеокси-4О-метил-3-оксо- β -D -алопиранозилокси)метил/-4/1,3-диоксолан2-ил/-4,4a,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано-s -индацен- За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил-

метилов естер

Към добре обезвъдушен разтвор ( с поток от аргон, мин.) на трибутилкалаен хидрид ( 263 л) в сух толуен(10 мл) се прибавя с помощта на спринцовка разтвор на междинния продукт ( 25о мл) и а,а’-азоизобутиронитрил (16 мг) в сух толуен (5 мл) при 90°С в продлъжение на 1 час.Нагряването продължава до завършване на реакцията.след което сместа се охлажда до стайна температура.Прибавят се вода ( 5 мл) и калиев флуорид (100 мг) и сместа се разбърква цяла нощ.Полученият суров продукт,след отстраняването на разтворителите, се разбърква с диетилов етер

в продължение на 1 час и твърдото вещество се отстранява чрез филтруване.Етерният разтвор се концентрира до сухо и полученото масло се подлага на мигновена хроматография ( силикагел, етил ацетат:хексан 1:15 и 1:19) до получаването на 168 мг от посоченото в наименованието,съединение ( 80 %-ен добив),под формата на пяна,когато се суши във вакуум.

$ (¹H,CDC1₃) : 7.6-7.1(m,10Н,2Ph), 6.92(s,1Н,CHPh₂), 5.80(dd,lH,

H2,J= and 3.6Hz), 5.08(s,1H,ОСНО); 4.44(dd,ΙΗ,ΗΙ’,J=2.7 and 8.7 Hz),

4.05(d,1H,8aCH₂,J=9.3Hz), 3.9-3.7(m,5H,0CH₂CH₂0+8aCH₂), 3.50-3.30 (m,2H,H5'+H4'), 2.5-2.1(m,3H,H2'+CH(CH₃)₂), 2.50(t,ΙΗ,ΗΙ,H=4.5Hz).

-13*8-

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 87 /lR-(la,3ab ,4b ,4ab ,7b ,7aa,8ab )/ 8a -/(IS ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-бицикло-/3.4.0/-нон-4-ен-7-ил-оксиметил/-4-(

1,З-диоксолан-2-ил)-4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова кисе лина , дифенилметилов естер

При енергично разбъркване ,към разтвор на междинния продукт 86 (160 мг ) и диетилдиазометил-фосфонат (63 мг ) в сух тетрахидрофуран се прибавя бавно при температура 0°С в азотна атмосфера,суспензия на калиев трет.бутоксид ( 100 мг) в сух тетрахидрофуран (2.3 мл ) ( веднага се наблюдава отделяне на газ ).След 10 минути сместа се разрежда с дихлорометан (100 мл) и се промива с ΙΝ-на солна киселина (2 х 100 мл) и след това с наситен разтвор на натриев бикарбонат ( 2 х 100 мл ), с разтвор на натриев хлорид (2 х 100 мл) и след това се суши над магнезиев сулфат.Отстраняването на разтворителя дава мас-ло което се подлага на мигновена хроматография ( силикагел,етил ацетат: хексан V/V 1:15 и 1:12) до получаването на 110 мг от посоче ното в наименованието,съединение( 70 %-ен добив ),под формата на пяна.

^(¹H,CDC1₃): 7.5-7.2(m,10Н,2Ph), 6.94(s,lH,CHPh₂), 5.83(dd,1H,H2, J=1.2and3.3Hz), 5.53(m,1H,H4’), 5.06(s,ΙΗ,ΟΟΗΟ), 4.65(m,2H,H3'), 4.25-4.10(m,2H,H7'+H1’), 4.05(d,1Н8аСН₂,J=9.3Hz), 3.90-3.70(m,5H, 0CH₂CH₂0+8aCH₂), 3.18(dq,1H,H9'.J=6 and 8.7H?), 2.75 - 2.50(m,3H, H6'+CH(CH₃)₂+H1).

• ·

-139МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 88 /1Е-(1^,За6 ,46 ,4аВ ,76 ,7aaf,8a6 )/ 8а- (-4-0-Алил-3,6-дидеокси-3-йодо- В- 0-манопиранозилокси)метил -4-фолмил-4,4а,5,6,7 7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 53 ( GM2008) (103 мг ),трифенилфосфин (197 мг) и имидазол ( 51 мг ) в сух тетрахидрофуран ( 5 мл ) се обработва с йод ( 95 мг),прибавен на

порции.След разбъркване в продължение на 1 час при стайна температура ,разтворът се кипи на обратен хладник до пълното изразходване на изходния продукт ( контрол с ТХ,хексан:етил ацетат 4:1)

Реакционната смес се охлажда и се разпределя между етил ацетат ( 50 мл ) и 1 N-ен воден разтвор на солна киселина ( 30 мл).

Органичният слой се промива последователно с ΙΝ-ен воден раз-

твор на солна киселина ,вода , воден разтвор на натриев метабисулфит,вода и воден разтвор на натриев хлорид,след което се суши над натриев сулфат,филтрува се и се концентрира,Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуира не с хексан:етил ацетат (9:1) до получаване на посоченото в наименованието ,съединение (70 мг).

§(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СН0), 7.46-7.22(m,10Н,2Ph), 6.98(s,lH,

CHPh₂), 6.03(dd,1Н,Н-2,J=1.5and 3.6Hz),'6.0 2-5.9(m,1H,O-C-CH=C),

5.35-5.15(m,2H,O-C-C=CH₂), 4.4-4.32(m,1H,O-CHa-C=C), 4.35(d,lH,H1' ,J=0.6Hz), 4.18-3.96(m,4H,0-CHb-C=C,H-2’,H-3’,8aCHa), 3.75(d,lH;

8a-CHb,J=9Hz), 3.45(dd,lH,H-4',J=9 and 10.2Hz), 3.34(dq,1H,H-5’,J=

5.7 and 8.7Hz), 2.72(t,1H,H-1,J=3.9Hz).

-140-

• ·

МЕЖДИННИ ПРОДУКТИ 89а и 896

a)/lR -(1^ ,3а В ,4 β ,4а β ,7 β ,7а<< ,8а β )/ 8а-/(1 S ,4 S ,6 S ,7R, 9R)-2,8тДиокса-4,9,диметил-6-хидрокси-цис-бицикло/З.4.0/-нон7-ил-окси-метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил -3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова кисе лина,дифенилметилов естер

б) / lR-(la,3ab ,4аb ,7b ,7аа,8аb)/ 8а-/(1 S ,4R,6 S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4,9-диметил-6-хидрокси-цис-бицикло/3.4.0./-нон-7-

ил-окси-метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил -3-(1-метилетил)-1,4.-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 88 (80 мг) в сух толуен (2 мл) се продухва с поток от аргон в продължение на 60 минути и след това се кипи на обратен хладник.Прибавя се трибутилкалаен хидрид (41 л) и кипенето на обратен хладник продължава още 15 мин.Разтворителят се отстранява във вакуум и остатъкът се поема с диетилов етер ( 50 мл ) и се промива няколко пъти с наситен воден разтвор на калиев флуорид докато повече не се наблюдава образуването на утайка от трибутилкалаен флуорид.Органичният слой се суши и се изпарява до получаването на остатък,който се пречиства чрез препаративна ТСХ/силикагел, дихлорометан :етил ацетат 95:5) до получаването на посоченото в наименованието а),съединение,междинен продукт 89а ( 35 мг,

Rf=0.4, дихлорометан:етил ацетат 9:1) и посоченото в наименова нието б) междинно съединение 89 б (24 мг, Rf=0.3, дихлорометан :етил ацетат 9:1).

междинен продукт 89 а ^(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.46 - 7.22 (m,10Н,2Ph), 6.99(s,lH,

CHPh₂), 6.05(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2 and 3.3Hz), 4.63(d,1H,H-7',J=3.3Hz), • · • · · ·· · • ···· · · · · ···· • · ··· · · · ···· · • · · · · · ··· ····· ·· · ·· ··

-1414.02(d,1Н,8aCHa,J=9Hz), 3.86(dd,1Н,На-3’, J=6.6 and 8.7Hz), 3.83-3.6 (m,4H,H-6',H-1’,H-9 ’ and 8a-CHb), 3.52(dd,lH,Hb-3’,J=5.7and8.7Hz),

2.69)t,1H,H-1,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ896

S(¹H,CDC1₃): 9.74(s,1H,CHO), 7.45-7.22(m,10H,2Ph), 6.99(s,lH, CHPhJ, 6.06( dd,lH,H-2,JOI.2and3.6Hz), 4.48(d,1H,H-7’,J=2.1Hz), 4.14.0 (m, 2H, 8a-CHa and Ha-3’), 3.85 (dd, 1H,H-1 ’ , J07.8 and 9Hz) , 3.76-3.68 (m,2H,8a-CHb and H-6’), 3.46-3.3(m,2H,H-9'andHb-3'), 2.73(t,1H,H-1, J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 90 /1R- (1<У ,3aB ,4β ,4afi ,7β ,7ao<,8ag )/ 8a-/( 6-Деокси- - алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- _s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на 4 -деметилсордарин (10 г ) в метанол (20 мл ) се прибавя на капки при стайна температура разтвор на дифенилдиазометан (90 мл) в метилен хлорид и сместа се разбърква в продължение на 6 часа.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се хроматографира върху силикагел(мигновена хроматография) с хексан:етил ацетат (3:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (12.6 г),под формата на бледо жълта пяна.

S^HCDCls): 9.73 (s , 1Н, СНО) , 6.98 (s , 1Н, CHPh₂) , 6.05 (dd, ΙΗ,Η-2 , J= 1.5and3.6Hz), 4.65(d,1H,H-1',J=1.5Hz), 4.09,3.76(2d,2H,8a-CH₂,J= 9Hz), 4.01(m,lH,H-2’), 3.84(m,ΙΗ,Η-З’), 3.75(m,1H,H-5'), 3.69(m,lH, H-4'), 2.73(t,1H,H-1,J=4.2Hz).

• · ···· • · «·· ·

-142МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 91 /1К-(1о6,ЗаВ ,4В ,4а& ,7β , 7ао( ,8ав )/ 8а-/( 6-Деокси-3,4 изопропилиден - β- D-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,

4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-(1Н)-1,4метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов

естер

Към разтвор на междинния продукт 90 (650 мг) в 15 мл 2,2-диметоксипропан:ацетон ( 1:2) се прибавя р-толуенсулфонова киселина (10 мг).Разтворът се разбърква при стайна температура в продължение на час и половина ,след това се прибавя калиев карбонат ( 1,0 г ),разбъркването продължава още 30 мин.

и разтворителят се изпарява до сух,Суровата смес се разпределя между етил ацетат ( 50 мл ) и вода ( 25 мл ), водната фаза се екстрахира с етил ацетат (2x50 мл) , органичната фаза се промива с наситен разтвор на натриев хлорид,суши се над магнезиев сулфат и се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат :хексан (1:3) до получаването на посоченото в наименованието,съе динение (600 мг),под формата на бяла пяна.

§(¹H,CDC1₃): 9.73(s,1Н,СНО) , 7.45 - 7.24 (m, 10Н, 2Ph) , 6.98(s,lH, CHPh₂), 6.06(dd,1H,H-2,J=1.5and3.3Hz), 4.57(d,1H,H-1’,J=3.0Hz), 4.30 (dd,lH,H-3',J=3.6and5.7Hz), 4.07(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz), 3.95-3.93(m, 1Η,Η-2'), 3.85(dd,1H,H-4',J=5.7and9.3Hz), 3.75(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz), 3.44(dq,lH,H-5',J_d=9.3,J_q=6.3Hz), 2.73(t,1H,H-1,J=3.6Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 92 /1К-(1 , ЗаВ ,4B ,4aB ,7β ,7a<Z,8aB )/ 8а-/( 6-Деокси-3,4-0изопропилиден-2-0-(метилтио)тиокарбонил- β- D-алтропиранозилокси/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-/1-143-

метилетил)-1,4-метано-з-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина дифенилметилов естер

Междинният продукт 91 (100 мг) и имидазол (1 мг) се разтварят в сух тетрахидрофуран ( 4 мл ) в азотна атмосфера.

Прибавя се натриев хидрид ( 5 мг) и суспензията се разбърква при стайна температура в продължение на половин час.Прибавя се въглероден дисулфид (2,7 мл ),разбъркването продължава още 20 мин. и се прибавя метил йодид (18 мл),След 2 ч реакцията се прекъсва

чрез прибавянето на 1Ь1-ен амониев хлорид ( 20 мл).Сместа се екстрахира с етил ацетат (3x25 мл),органичната фаза се проми ва с воден разтвор на натриев хлорид,суши се над магнезиев сулфат и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат:хексан (1:9) до получаването на посоченото в наименованието съединение(110 мг).

^(¹H,CDCI₃).9.71(s,lH,СНО),7.44-7.25(m,10Н,2Ph),6.96(s,1Н, CHPh₂),6.01(dd,1Η,Η-2,J=1.2and3.6Hz),6.90(dd,lH,H-2’,J=2.4,5.4 Hz),4.85(d,lH,H-l*,J=2.4Hz),4.53(dd,lH,H-3*J=5.4,6.3Hz),4.00(dd, ΙΗ,Η-4’,J=6.3,8.7Hz),3.93(d,lH,8aCH₂,J=9.3Hz),3.65(dq,lH,H-5' Jj=8,7,Jq=6.3Hz)B2.68(t,1H,H-1,J=3.9Hz),2.59(s,3H,CHjS)'

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ93 /1К-(1о<,За β,4 B,4aB ,7B ,7at/,8aB )/ 8a-/( 2,6-Дидеокси-3,40,-изопропилиден-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,

5,6,7а,7,8,8а-октахидро-7-метил-3-/1-метилетил)-1,4-метаноs-индацен-За(1Η)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 92(95 мг) се разтваря в сух толуен (5 мл ) в азотна атмосфера и се нагрява при 110°С.При разбъркване в продължение на час и половина на капки се прибавя разтвор на трибутилкалаен хидрид ( 64 мл) в сух толуен • · · · • · • · · · · ·· · · · · · · • · ···· ··· ····· ·· · ·· · ·

-144( 5 мл ).Нагряването продължава още час и половина ,прибавя се метанол (2 мл ) и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с етил ацетат : хексан (1:9),при което се получава посоченото в наименованието,съединение (42 мг).

о(¹H,CDCI₃): 9.73 (s , 1Н, СНО) 7.44 -7.25 (m, 10Н, 2Ph) 6.98 (1Н, s ,CHPhp,

6.05 (dd,ΙΗ,Η-2, J=1.2,3.3Ηζ) , 4.54 (dd, 1Н,Н-1' , J=2.7,9.3Ηζ),4. 39 (dt,lH,H-3*,J_d=2.7Hz,J_t=3.6Hz),4.04(d,1H,8aCH₂,J=9.0Hz),3.67(d, 1H,8dCH₂,J=9.0Hz), 3,65(dd,lH,H-4*,J=3.6,8.7Hz),3.44(dq,1H,H-5', C J_d=6.3 Hz,j_q=8.7 Hz),2.75 (t,1H,J=3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 94 /1К, - (1</, ЗаВ ,4 В,4аВ ,7В ,7ас^,8аВ )/ 8а-/( 2,6-ДидеоксиВ -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8аоктахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано-з -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 93(1,5 г ) в смес от тетрахидрофуран ( 30 мл) и метанол ( 15 мл ) се прибавя на капки при стайна температура 1 Ь1-ен разтвор на солна киселина ( 15 мл ) при енергично разбъркване.След като реакцията приключи (ТСХ) се прибавя наситен разтвор на натриев бикарбонат ( 50 мл ) и етил ацетат ( 200 мл ) и сместа се разделя.Органичният слой се промчива с вода ( 2 х 100 мл ) и се суши над магнезиев сулфат.Отстраняването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хекксан : етил ацетат ( 5:1) и ( 2:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 1,1 г),под формата на бяла пяна.

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · ··· ·· · ···· · ·· ···· ··· ····· · · · ·· ··

-145н, CDCI₃ ): 9.73 ( s, 1Η, CHO), 7,5-7.2 ( m, 10H, 2Ph) , 6'. 99 ( s,lH, CHPh₂ ), 6.05 ( dd,lH, H-2,J=1.2 and 3.3 Hz ),4.64 ( dd, 1H, J=2.1 and 9.6 Hz ), 4.11 ( m, 1H, H-3* ), 4.06 ( d, 1H, ^8aCH ₂, J_AB =9.3 Hz ), 3.70 ( m,2H, H-5’ and 8aCH₂ ),3.34 ( m, 1H, H-4’.), 2.75 (t, 1H, H-l, J=3.6 Hz )'

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ95 /1К-/1(/,За β,4 В,4а β,7 в,7а</,8а_в )/ 8a-/( 2,3,6.-Тридеокси-3-йодо- β- D-глюкопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6, 7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 94 ( 2.0 г),трифенилфосфин (3.4 г) и имидазол (186 мг) се кипят на обратен хладник в толуен ( 50 мл) при разбъркване и след това се обработва сйод (610 мг),прибавнен на малки порции.Реакционната смес се охлажда ,декантира се в делителна фуния в излишък от воден разтвор на натриев бикарбонат и на натриев тиосулфат.Сместа се разклаща до пълното изразходване на йода.Толуеновата фаза се промива с вода,суши се над магнезиев сулфат и се концентрира.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с хексан:етил ацетат (15:1) и (5:1) до получаватнето на посоченото в наименованието,съединение (1.65 г).

S (¹Н, CDCI₃ ): 9.73 ( s, 1Н, CHO ), 7.26-7.44 ( m,10 H,2Ph ), 6.98 ( s, 1H , CHPh₂ ), 6.04 ( dd, 1H, J= 1.2 and 3.3 Hz ),4.25 ( dd, 1H, H-l' , J= 1.8 and 9.3 Hz ), 4.08 ( m,lH, H-4' ),3.67 and 4.01 ( 2d, 2H, 8aCH₂ , J=9 Hz), 3.40 ( m, lH,H-3' ), 3.32 ( m,lH, H-5' ), 2.74 ( t,lH, H-l, J= 4.2 Η z), 2.32 and 2.53 МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 96 (2m, 2H, 2H-2’ ).

/1К-(1_а ,3a b,4 b,4ab ,7b ,7aa,8ab )/ 8a/(/2,3,6-Тридеокси3-етиламино-3-bl,4-0-карбонил-β -D -алопиранозил/окси)метил/• · * · · ·

-1464-формил-4,4a,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)

-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенил метилов естер

Разтвор на междинния продукт 95 (200 мг) в сух тетрахидрофуран (15 мл ) се обработва с натриев хидрид (24 мг, 1.0 ммола).След 15 минути,се прибавя етил изоцианат(0.04 мл ) и реакционната смес се разбърква при кипене на обратен

хладник в продължение на 6 ч.След като се прекъсне реакцията чрез прибавянето на вода ( 3 мл ),сместа се екстрахира с етил ацетат ( 3 х 5 мл ) и се суши над магнезиев сулфат,филтрува се и се концентрира във вакуум до получаването на сироп.Този сироп се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат 3:1 до получаването на посоченото в наименованието съединение в чист вид ( 75 мг ).

S(¹H,CDCI₃):9.74 (s, 1Н,СНО), 7.44-7.26 (m, 10H,2Ph),6.98 (s,lH, CHPh₂), 6.03 (dd, lH,H-2, J=3.3 and 1.2 Hz),4.60 (dd, 1H,H-1’, J=5.1 and 3.9 Hz),4.12 (m,2H,H-3’,4’),4.01 (d,lH,H-8a, J=9.3 Hz),3.64(d,lH,H-8a, J=9.3 Hz),3.61(dq,1Η,Η-5',J=8.7 and

6.3 Hz),3.49(m,lH ,CH₂-CH₃ ),3.13(m,1H,CH ₂-CH₃),2.70(t,1H, H-l, J=3.9Hz),2.24(m,lH,CH(CH₃)₂ ),1.14(t,3H,CH₃, J=7.2 Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 97 /1R-(1г/, За β ,4β ,4аВ,7В,7ао^8аВ/ 8a-/(lS ,4R,6S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4,9-диметил-6-(метилтио)-тиокарбонилокси-цис-бицикло/3.4.0/-НОН-7-ил-окси-метил-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацин-За(1Н) -карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Междинният продукт 896 (250 мг) и имидазол (каталитично количество ) се разтварят в сух тетрахидрофуран ( 10 • · · · · · · · · · · · · • · .···· ··· ····· ·· · ·· ··

-147мл) в аргонова атмосфера.Прибавя се натриев хидрид ( 45 мг ) и суспензията се разбърква при стайна температура в продължение на 20 мин.Прибавя се въглероден дисулфид (140^л) и разбъркването продължава още 20 минути и се прибавя метил йодид ( 150 ^nj.Cnen 2 часа реакцията се прекратява посредством прибавянето на етил ацетат ( 10 мл) и след това на вода ,на капки ( 5 мл ).Сместа се разпределя между етил ацетат ( 50 мл ) и вода ( 50 мл ),органичният слой се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид,след това се суши и се изпарява.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат (10:1) до (8:1), до получаването на посоченото в наименованието,съединение (211 мг ).

δ(¹Η, CDCI₃ ): 9.72 ( s, 1Н, CHO ), 7.46-7.22 ( m, 10H,2Ph ) 6.97 ( s, 1H, CHPh₂ ), 6.02 ( dd, 1H, H-2, J=1.2 and 3.3 Hz ), 5.80 ( dd,lH, H-6', J=2.1 and 6.3 Hz ), 4.72( d,lH, H-7’, J= 2.1 Hz ), 4.05 ( dd, 1H, Ha-3’, J= 7.2 and 8.4 Hz ), 3.98 -

3.86 ( m, 2H, 8aCHa and Hl' ), 3.66-3.55 ( m, 2H, 8aCHb and H-9' ), 3.34 (t, lH,H--3’, J=8.4Hz),2.73(t,ΙΗ,ΗΙ,J=3.9Hz),2.59 МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 98 ( s, 3H, SCHj)'.

/ 1 R- (l^Z , 3a β ,4B , 4a β ,7 β , 7a ,8a β )/ 8a-/( 4-0-Алил-3-йодо2,3,6-тридеокси-b -D -глюкопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер НРазтвор на междинния продукт 12 ( 67 мг) ,трифенилфосфин (105 мг ) и имидазол ( 28 мг ) в сух тетрахидрофуран ( 5 мл ) се обработва с йод ( 51 мг ),на порции.Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на час и половина и се разпределя между етил ацетат ( 30 мл) и 1N воден разтвор на солна киселина ( 30 мл9.Органичният слой се промива последова• · · « · · ····

-148телно clN-ен воден разтвор на солна киселина,вода, воден раз твор на натриев метабисулфитн,вода и с воден разтвор на натриев хлорид,след товна се суши,филтрува се и се концентрира.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография при елуиране с хексан: етил ацетат (9:1),върху силикагел, до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 68 мг ).

3(^ХН, CDCI₃): 9.73(s,1Н,СНО), 7.45-7.22 (m,10Н,2Ph),6.97 ( s,lH,CHPh₂),6.07-5.9 (m,2H,H-2 and OC-CH=I),5.37-5.14(m,2H, O-C-C=CH₂),4.45-4.35(m, lH,O-CHa-C=C),4.25-4.1(m,2H,H-1' and O-CHb-C=C),4.1-3.95 (m,2H,H-3* and 8a-CHa),3.66(d,1H,8a-CHb,J=

Hz),3.29(dq,lH,H-5’,J=6 and 8.7Hz),3.15(dd,lH,H-4',J=8.7and

9.9Hz), 2.73(t,1H,H-1,J=3.9 Hz )'.

МЕЖДИНЕН ПРОДЕКТ 99 /1К-(1о( ,3a β,4 B,4a β,7 B,7ac< ,8aB )/ 8a-( 2,3-Анхидро-6-деокси- β- D-манопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил)-4,4a,5, 6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер Разтвор на междинния продукт 67 ( 3.2 ммола ) в сух ацетонитрил ( 40 мл ) се обработва с етилен гликол (39 мл ) ,триметилортоформиат ( 1.1 мл) и р-толуенсулфонова киселина ( 30 мг ).След 5 часа сместа внимателно се екстрахира с етил ацетат. След отстраняването на разтворителя,остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан: етил ацетат 3:1 ,като елуент до получаването на посоченото в наименованието ,съединение ( 2.08 г ).

£(¹H,CDCI₃):7.43 and 7.29(m,m,4Н,6Н,2xPh),6.95( s,lH,CHPh₂),

5.86 (d,lH,H-2,J=3.3Hz),5.08( s,1H,4-CH),4.69( s,1H,H-1'),4.11 (d,1H,8a-CHa,J=9.3Hz),3.81(m,5H,8a-CHb and 0-CH₂CH₂-0 ),3.63 • · · · · · • · • · • · · ·

-149( m, 1H, H-5’ ),3.23 and 3.15 ( d,d, 1H,1H, H-2' and H-3' ,J=3.6

Hz ),3.20 (m, 1H, H-4' ), 2.63 ( m, 2H,H-1 and CH(CH₃)₂ ).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 100 /1К-(1о( ,3aB ,4β ,4аВ,7В ,7ао(,8аВ )/ 8а- (2,З-Анхидро-4-оксо-

6-деокси-β -D -манопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил)-

4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на трифлуорооцетен анхидрид (230 μл) в сух дихлорометан ( 10 мл ) при температура -60°С се обработва на капки с дим етилсулфоксид (138 р.л) и с разтвор на междинния продукт 99 (0.9 ммола) в сух дихлорометан ( 10 мл).След 60 мин.се прибавя триетиламин ( 554 μ л) и сместа се разбърква при -20θ0 в продължение на 2 часа.След това време,сместа се разрежда с дихлорометан и се промива с вода.След отстраняване на разтворителя,остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат 4:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (214 мг ).

§ (¹Н, CDCI₃):7.44 and 7.30(m,m,4Н,6Н,2xPh),6.94'Ч(s,1Η,CHPhp

5.87 (dd,1Η,Η-2,J=1.5 and 3,6 Hz) , 5.10 (s , 1H, 4-CH) J>4.81 ( s, 1H,H-1’),4.09 ( d,lH,8d-CKd,J=8.7Hz),3.88(m.5H,8d-CHb,OCH₂CH₂-

F),3.58,3.36(d,d,lH,lH,H-2' and H-3', J=3.9 Hz), 2.65 (m,2H, H-l and CH(CH₃ )₂ )'

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 101 /lR-(la,3ab,4b,4ab ,7b,7aa,8ab )/-8a -( 2,З-Анхидро-4,6дидеокси-4-метилен- β-D -манопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил) -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил

-150етил)-1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на метилтрифенилфосфониев бромид (0.3 ммола) в сух тетрахидрофуран ( 10 мл ) в азотна атмосфера при -78°С се обработва с н-Бутиллитий 2.44М (0.15 мл ).След 15 минути банно се прибавя разтвор на междинния продукт 100 (0.

ммола) в сух тетрахидрофуран ( 5 мл ) и сместа се затопля бавно до стайна температура.Сместа се разрежда с етил ацетат и се промива с амониев хлорид ( llM-ен) и с воден разтвор на нат

риев хлорид.След отстраняване на разтворителя,остатъкът се пречиства с мигновена хроматография при използване на хексан:

етил ацетат 4:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието ,съединение ( 91 мг ).

δ (^ХН, CDCI₃): 7.45 and 7.29 (m,m, 4Н,6Н, 2х Ph), 6.95 ( S,1H, CHPh₂) , 5.87 (m,lH,H-2),5.35 and 5.22 (d, d,lH,lH, CH₂=C, J= 2.4 Hz),5.08 ( S,1H, 4-CH ), 4,68 ( s,lH,H-l' ),4.10 (m, 2H,8a-CHa and H-5’), 3,82 ( m,5H,8a7CHb and O-CO₂-CH₂-O j _{3 57} and 3.35 (d,d,1H,lH,H-2' and H-3’,J=3.9 H z),2.63 (m,2H,H-l and CH(CH₃)₂) .

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 102 /1К-(1с<,За β,4 β,4ηβ ,7 B,7ao<,8aB )/ 8a( 2,3-Анхидро-6-деокси- β- D-талопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил)-4,4а, 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-^s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 100 (1,13 ммола ) в сух тетрахидрофуран (45 мл ),в азотна атмосфера,при -78°С,бавно се прибавя L- селектрид 1 N (2 мл ).След един час сместа се разреж да с етил ацетат ( 100 мл ),затопля се до стайна температура и -151се промива с воден разтвор на амониев хлорид ( 11М-ен)с вода и разтвор на натриев хлорид .След отстраняването на разтворителя остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан : етил ацетат 3:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (431 мг).

i(¹H,CDCl₃): 7.44-7.31(m,m,4Н,6Н,2xPh), 6.95(s,1Н,CHPh₂), 5.85 (dd,1Н,Н-2,J=1.2and3.6Hz), 5.08(s,1H,4-CH), 4.92(s,1H,H-1'), 4.11 (d,1H,8a-CHa,J=9.3Hz), 3.83(m,5H,8a-CHb and 0CH₂CH₂0), 3.62(m,lH,H4'); 3.54(dd,ΙΗ,Η-З’,J=3.6and5.1Hz), 3.40(m,lH,H-5'), 3.24(d,lH,H2',J*3.9Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 103 /lR-(la,3ab ,4b ,4ab ,7b ,7aa,8% )/ 8a- (2,З-Анхидро-4-О-трет.

бутилкарбойил-6-деокси-β -β -талопиранозилокси)метил-4-(1,3диоксолан-2-ил) -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Смес от междинния продукт 102 ( 0.2 ммола ) и 4-ди-

метиламино пиридин (0.4 ммола ) в сух дихлорометан ( 15 мл ) се обработва с пивалоил хлорид ( 0.3 ммола ).След 30 мин. сместа се промива с вода и се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан:етил ацетат 5:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение (95 мг ).

S(¹H,CDC1₃): 7.44 and7.30(m,m,4H,6H,2xPh), 6.95(s,1Н,CHPh₂), 5.85 (dd,lH,H-2,J=1.2and3.6Hz), 5.08(s,1H,4-CH), 4.82(t,ΙΗ,Η-4',J=3.9Hz),

4.60(s,1H,H-1') , 4.12(d,1H,8a-CHa,J=9.6Hz), 3.83(m,5H,8a-CHb and 0CH₂CH₂-0), 3.65(m,ΙΗ,Η-5’), 3.53(t,ΙΗ,Η-З',J=4.2Hz), 3.17(d,lH,H-2',

J=4.2Hz), 2.63(m,2H, H-l and CH(CH₃)₂).

• · • ···· · · · · · · · · • · ··· ·· · ···· · • · ···· ··· ·· ··· ·· · t» ··

-152МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 104 /1R- Cl cZ ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7ad ,8a β )/ 8a- (4-0-Алил-2,3анхидро-6-деокси- β -D -талопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1 , 4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,дифе нилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 102 (0.3 ммола) в сух тетрахидрофуран (10 мл ) в азотна атмосфера,се прибавят

натриев хидрид ( 0.6 ммола) и каталитично количество тетрабутиламониев йодид.След 30 мин. се прибавя алил бромид (0.9 ммола ) и сместа се разбърква цяла нощ при стайна температура.След това се разрежда с етил ацетат ( 10 мл ) и се промива с амониев хлорид (1 N-ен ) и с воден разтвор на натриев хлорид.След отстраняването на разтворителя остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан: етил ацетат 4:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието, съединение (163 мг ).

δ( Н,СДС1₃): 7.44 and 7.29(m,m,4H,6H,2xPh), 6.95(s,1Η,CHPh₂), 5.96 (m,lH,H-2 ), 5.85(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.2and3.6Hz), 5.30 and 5.12(m,m,1H, lH,CH₂-3), 5.06(s,lH,4-CH), 4.58(s,1H,H-1'), 4.31(m,lH,H-4'), 4.10 (m,2H,H-5· and 8a-CHa), 3.83(m,5H,8a-CHb and 0-CH₂CH₂-0), 3.53(m,2H, CH₂O), 4.23(t,1Η,Η-3’,J=4.2Hz), 3.19(d,1Η,Η-2',J=4.2Hz), 2.65(t,lH, H-l,J=4.2Hz), 2.61(m,lH,CH(CH₃)₂).

междинен продукт 105 /1К-(1«к,Зав ,4β ,4Ββ ,7 β ,7 a οί ,8a β ) / 8a-/ 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-тозил-β -D -талопиранозилокси/метил-4-(1,3-диоксолан-2-ил)-4,4a,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) - 1 , 4 . -метано - s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина • *

-153дифенилметилов естер

Разтвор на междинния продукт 102 (0.45 ммола ) в сух дихлорометан ( 7 мл ) се обработва с 4-диметиламинопиридин (1,35 ммола ) и с тозил хлорид ( 0.9 ммола ) и се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура.След това се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид.След отстраняването на разтворителя остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на хексан : етил ацетат 3:1 като елуент. Подходящите фракции се събират и изпаряват до получаването на посоченото в наименованието,съединение(277 мг ).

δ (¹Н, CDC1₃): 7.86,7.42 and 7.29(m,m,10H,Dr), 6.93(s,1H,CHPh₂), 5.82 (m,lH,H-2), 5.06(s,1H,4-CH), 4.68(t,lH,H-3',J=4.2Hz), 4.55(s,1H,H-1’) 4.07(d,1H,8a-CHa,J=8.7Hz), 3.81(m,5H,8a-CHb and 0-CH₂CH₂-0), 3.62(m, lH,H-5’), .3.30 (t, 1H,H-2 ' , J=4.2Hz) , 3.15(d,lH,H-4',J=3.9Hz), 2.61(m, 2H,H-1 and CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 106 /1Κ-(1ί2 ,3a В ,4 β ,4a β ,7 β ,7ac<,8aB )/ 8a-8 2 , З-Анхидро-4-азидо€4,6-дидеокси- β- D-манопиранозилокси)метил-4-(1,3-диоксолан-2ил)-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- s -индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина,дифенилметиловестер

Разтвор на междинния продукт 105 ( 0.15 ммола ) и литиев азид (0.45 ммола) в сух диметилформамид ( 3 мл ) се нагрява цяла нощ при 100°С.Реакционната смес се разрежда с етил ацетат ( 20 мл ) и се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид.След отстраняване на разтворителя, остатъкът се пречидтва чрез мигновена хроматография при използване на хексан: етил ацетат 4:1 като елуент.Подходящите фракции се изпаряват до получава-154нето на посоченото в наименованието,съединение ( 53 г ).

^(¹H,CDC1₃): 7.46 - 7.23(m,10Н,Ph₂) , 6.94 (s , lH,CHPh₂) , 5.86 (dd, ΙΗ,Η

2,J=1.2and3.6Ηζ), 5.08(s,1Η,4-CH), 4.67(s,1Η,Η-1’), 4.10(d,lH,8aCHa,J=8.7Ηζ), 3.83(m,4Η,8a-CHb and 0-CH₂CH₂-0), 3.40(d,1Η,Η-4', J=9.3Hz), 3.31 and 3.15(d,d,H-2' and H-3',J=3.6Hz), 3.23(m,lH,H-5'), 2.65(m,2H,H-1 and CH(CH₃)₂).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 107 /1К-(1£/,ЗаВ ,4B ,4аВ ,7В ,7а<й,8аВ ) / 8а/(-4-0-Алил-2,3-анхидро-6-деокси- В- Д-манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6, 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)т1,4-метано-s индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,дифенилметилов естер МЕТОДИКА А

Към разтвор на междинния продукт 21 ( 650 мг ) в сух тетрахидрофуран при 0°С се прибавят 90 мг натриев хидрид. Сместа се разбърква в азотна атмосфера при О°С в продължение на 30 мин.След това се прибавят 875 мг алил бромид и каталитично количество тетрабутиламониев йодид ( 50 мл).Реакцията завършва след 5 часа разбъркване при стайна температура.Суровият продукт се обработва с 1 Ь1-ен амониев хлорид и с етил ацетат. Органичният слой се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид,суши се над безводен магнезиев сулфат и се изпарява до сухо. Остатъкът се хроматографира върху колона със силикагел с хексан :етил ацетат 7:1 до получаването на 590 мг от посоченото в наименованието , съединение , под формата на бяла пяна.

МЕТОДИКА Б

Към разтвмор на междинния продукт 53 ( 3 г ) в сух метиленхлорид (200 мл ) при стайна температура се прибавят 2.35 грама диметиламинопиридин.След това при разбъркване бавно се прибавя разтвор на 3.66 г тозил хлорид в 100 мл метилен хлорид.

·· ···· ·· ····

·· ·· • · · · ·· · ··· · · · ·· ··· • · · · · · ··· ♦· • · · · · ·· ··· ·· · ·· ··

Сместа се разбърква в продължение на три дни при стайна температура до завършване на реакцията.Суровият продукт се промива с 1 N-ен разтвор на солна киселина ,с наситен разтвор на натриев бикарбонат и с разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се суши над безводен магнезиев сулфат ,филтрува се и се обработва с 20 мл разтвор на натриев метоксид в метанол (25 тегл.%).

Тази смес се разбърква в продължение на един ден при стайна температура . Суровият продукт се обработва с IN-на солна киселина и се промива с вода и разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се суши над безводен магнезиев сулфат и се изпарява.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография с н-хексан:етил ацетат 8:1 до получаването на посоченото в наименованието,съединение,под формата на бяла пяна ( 45% -ен общ добив).

^(¹H,CDC1₃): 9.75(s,1Н,СНО), 6.99(s,1Н,CHPh₂), 6.08(dd,1Н,Н-12, J=1.2and3.3Hz), 5.90(m,1H;CH=CH₂), 5.28(m,2H,CH=CH₂), 4.69(d,lH, H-l,J=1.2Hz), 4.23(m,lH,H-5’), 4.11(d,1Н,Н-19а,J=9Hz), 4.06(m,lH, Η-4'), 3.79(d,1H,H-I9b,J09Hz), 3.26(d,1Η,Η-2',J=3.9Ηζ), 3.21(m,2Η.СН₂ СН=СН₂), 3.13(d,1Н,Н-3’,J=3.9Hz), 2.86(t,ΙΗ,Η-11,J=3.6Hz).

МЕЖИДИНЕН ПРОДУКТ 108 /1К-(1о4,ЗаВ ,4β ,4aB , 7Β ,7ao<,8aB )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-(2,3-дихидроксипропил)-В -D -манопиранозилокси )метил /-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,дифенил метилов естер

Към разтвор на междинния продукт 107 (2 г ) в 50 мл ацетон и 5 мл вода се при бавя 1 грам ΓΊ-оксид на Ь1-метил морфолин,при температура О°С.Към тази смес бавно се прибавя 0.2 мл разтвор на осмиев тетраоксид (2.% тегл,% в изобутанол. Хидроксилирането на GM 218045 X завършва след разбъркване в про• ·

-156-

дължение на 3 дни при стайна температура.Суровият продукт се обработва с натриев хидросулфит,филтрува се над целит и се изпарява до сухо.Остатъкът се разтваря в етил ацетат и се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се суши над безводен магнезиев сулфат,изпарява се до сухо и се хроматографира върху колона със силикагел с н-хексан : етил ацетат 1:1 и с метилен хлорид :метанол,50:1.Посоченото в наименованието съединение ( смес от енантиомери 50:50) се получава под формата на бяла пяна(1.75 г).

(¹Н, CDCI₃):9.75( s,lH,CHO), 6.99 (s,lH, CHPh₂),6.08 (dd,

1H,H-12, J=1.5 and 3.6 Hz), 4.69 ( s,1H,H-1J ),4.10 (d,lH,H19a, J=9.3 Hz), 3,90-3.58 (m,5H,CH₂OH,OCH₂-CHOH in 4'), 3.79 ( d,lH,H-19b, J=9.3 Hz),3.27,3.13 (d,lH,H-2' and H-3', J=3.9 Hz ),3.28-3.22 (m,2H,H-4' and H-5' ), 2.85 ( t,lH,H-ll, J=

3.6 Hz).

МЕЖДИНЕН ПРОДУКТ 109 /1Й-(la ,3a b,4 b,4a b,7 b,7aa, 8ab)/-8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-/( 2,3-0-изопропилиден)-2,3-дихидроксипропил)-b D-манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- ^s-индацен-За(1Н)карбоксилова киселина,дифенилметилов естер

Към разтвор на междинния продукт 108 (350 мг) в сух ацетон (20 мл ), се прибавят 250 μπ 2, 2-диметоксипропан и каталитично количество р-толуенсулфонова киселина ( 30 мг ). Сместа се разбърква при стайна температура в продьшжение на 2 часа в азотна атмосфера.Суровата смес се изпарява до сухо и остатъкът се разтваря отново в етил ацетат (70 мл ) и се промива с вода и с воден разтвор на натриев хлорид.Органичният слой се концентрира и се пречиства през колона със силикагел с нхексан:етил ацетат 6:1 до получаване на посоченото в наименова• ·

• · · ·· · · · · • ···· · · · · ···· • · ··· ·· · ···· · ·· ···· · · · ····· ·· · ·· ··

-157 нието,съединение ( смес от изомери 50:50),под формата на бяла пяна ( 290 мг )(80%-ен добив).

^(¹Н, CDCI₃):9.74 (s , 1Н, СНО) , 6.99 (s , 1Н,CHPhp , 6.08 (dd, 1Н,Н-12, J=0.9 and 3.3 Hz),4.67 (d,1H,H-1#,J=2.1 Hz),4.32-4.22(m,1H, CHOH in 4' ),4.12-4.03 (m,2H,H-19a and ОСН_£ in 4'),3.82-3.51 (m,4H,H-19b, OCH₂-CHOH-CH₂O ) 3-29 and 3.12 (d,d,1H,1Η,Η-2',H-3', J=3.9 Hz),3.26-3.20 (m,2H,H-4· and H-5'), 285 (t,1H,H-11,J=3.9 Hz), 1.42 and 4.36 (d,d,3H,3H, (СН₃)₂~

C на изопропилиден).

Пример 1 /1К-(Id ,3a B ,4 β ,4a β ,7 β ,7a A,8a β)/ 8a-/( 6-Деокси-3,4,-0изопропилиден- β - D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4a,5, 6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s индацен-За-(1Н) -карбоксилова киселина

Към суспензия на 10%-ен паладий /въглен ( 80 мг) в етил ацетат (10 мл ) в азотна атмосфера се прибавя разтвор на междинния продукт 2 (180 мг ) в етил ацетат (10 мл) и сместа се хидрогенира при стайна температура при налягане на водорода 30 пси (абе.налягане в паунди/инч²) в продължение на 1 час. Катализаторът се отфилтрува и филтратът се изпарява до сухо. Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хлорометан:метанол (20:1) до получаване на посоченото в наименованието,съединение (128 мг).

3(¹Н, CDCI₃):9.73(s,1Н,СНО), 6.08 (dd,1Н,Н-2,J=1.5 and 3.3 Hz), 4.61 (d,1Н,К-1’,J=2.1 Hz),4,30 (dd,1Η,Η-3’,J=3,6 and 5.4 Hz),4.04 (d,lH, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3.95 (dd,lH,H-2', J=2.1 and

3.6 Hz),3.85 (dd,lH,H-4', J=5.4 and 9.0 Hz),3.66 ( d,lk, J=

9.3 Hz), 3.49 (dq, lH,H-5', J_d=9.0 Hz, J_q= 6.3 Hz), 2.69 (t,lH, J=3.6 Hz), & (¹³I,CDCI₃): 204.8 (CHO), 175.4 (CO₂H ), 148.3 (C

·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · ··· ·· · · · · · · ·· ···· ··· ····· ·· · · · · ·

-1583),130.7(С-2),109.3(Cq. isop),(98.9(C-1'),76.9 (C-4’),75.9(C2’),74.2 (8aCH₂), 71.7 (C-3 ' ) , 68.6 (C-5 ' ) , 65.6 (C-8a) , 58.9 (C-4) . ПРИМЕР 2 /1R-(1cZ, 3aB, 4 β, 4a β 7 β, 7a<X,8aB)/ 8a-/( 6-Деокси-3,4-0-изо пропилиден-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил--4,4a,5, 6,7,7a,8,8 а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1H)-карбоксилова киселина,натриева сол

Продуктът от пример 1 /246 г) се разтваря в диоксан ( 2 мл ) и се прибавя 0.5М-ен разтвор на натриев бикарбонат. (0.99 мл=.Разтворът се разбърква в продължение на 15 мин. и се суши чрез замразяване до получаване на посоченото в наименованието , съединение (256 мг).

δ (¹Н, 9.88(s,1Н,СНО), 5.95 (dd,lH,H-2, J=1.5 and 3.3 Hz),

4.51 (d, ΙΗ,Η-l', J=1.8 Hz),4.26 (dd,lH,H-3', J=4.8 and 6.0

Hz),4.01 (d,lH,8aCH₂, J=9.6 Hz), 3.87-3.80 (m,2H,H-2' and

H-4'),3.74(d,lH,8aCH₂,J=9.6 Hz),3.50-3.42 (m,1H,H-5¹), 2.66 (t,lH,H-l, J=3.9 Hz).

ПРИМЕР 3 /1R-(1<Z ,3a β,4β ,4aB ,7 B,7ao/,8aB )/ 8a-/( 6-Деокси-3,4-0(2-пентилиден)-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил4,4a,5,6,7,7a,8,8a- октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4 -метано-s -индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина

Към суспензия на 10%-ен паладий/въглен ( 30 мг) в етил ацетат (10 мл) , в азотна атмосфера, се прибавя разтвор на междинния продукт 3 (140 мг ) в етил ацетат и сместа се хидрира с водород с налягане 30 пси(абс,налягане в паунди/инч²) в продължение на 45 мин.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкътсе подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на дихлорометан:метанол (30:1) като елуент до получаването на посоченото в наиме··· ·· · · · · • ···· · · · · ···· • · ··· · · · · · · · · ······ ··· ····· ·· · · · ··

-159нованието,съединение (75 мг) в епимерно съотношение 26:74.

§(^ΧΗ, CDC13): 9.82(s,1Н,СНО), 6.08(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.5and3.3Hz), 4.6( (d,lH,H-l*,J=1.8Hz), 4.30(dd,ΙΗ,Η-З’,J=4.2and6.0Hz), 3.98(d,lH, 8aCH2,J=9.3Hz), 3.94(dd,1Η,Η-2',J=1.8and4.2Hz), 3.87(dd,ΙΗ,Η-4',J= 6.0and9.3Hz), 3.65(d,1H,8aCH2,J=9.3Hz), 3.47(dq,ΙΗ,Η-5',Jd=9.3Hz, Jq=6.3Hz), 2.70(t,ΙΗ,Η-1,J=3.9Hz); (¹³C,CDC13): 204.5(CHO), 176.5 (C0₂H), 148.2(0-3), 130.6(0-2), 110.8(Cq acetal),98.8(C-1'),76.6(C4') , 75.6(0-2'),73.9(8aCH₂),71.3(0-3') ,68.9(0-5') , 65.5(C8a) , 58.8

(C-4).

ПРИМЕР 4 /1К-(1 (K , За В ,4B ,4aB ,7 β ,7ас<,8аВ ,)/ 8а-/( 6-Деокси-З , 4-0(4-метокси-2-бутилиден)-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- 5-индацен-За(1Н) -карбоксилова киселина

Към суспензия на 10%-ен паладий/въглен ( 100 мг) в етил ацетат ( 15 мл ) се прибавя разтвор на междинния продукт (260 мг ) в етил ацетат (10 мл ) и сместа се хидрира при стайна температура с водород при налягане 30 пси (абе.налягане в па унди/инч²) в продължение на 45 мин.Катализаторът се отфилтрува, разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан : метанол (30:1) до получаване на посоченото в наименованието , съединение (172 мг).

^(¹H,CDC13): 9.71(s,1Н,СНО), 6.08(dd,ΙΗ,Η-2,J=1.5and3.6Ηζ), 4.60 (d,lH,H-l',J=2.4Hz), 4.31(dd,1Η,Η-3',J=4.2and6.0Hz), 3.98(d,lH, 8aCH2,J=9.3Hz), 3.94(dd,ΙΗ,Η-2’,J=2.4and4.2Ηζ), 3.88(dd,1Η,Η-4’,J= 6.0and9.3Hz), 3.65(d,1Η,8aCH2,J=9.3Ηζ), 3.50(t,1H,CH2O,J=7.2Ηζ), 3.50-3.40(m,1Η,Η-5'), 2.69(t,1Η,Η-1,J=3.9Ηζ); S(¹³C,CDC13): 204.5(CHO

176.2 (CO₂H), 148.2 ¢0-3), 130.6 (C-2), 109.8 (C-2), 98.8 (C-l'),

76.7 (C-2'), 73.8 (8aCH₂), 71.2 (C-2'), 68.8 (C-5'), 68.4 (CH₂0),

65.6 (C8a), 58.9 (C-4), 58.5 (CH₃0).

ПРИМЕР 5 /lR-(l</,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7а<Х,8аВ )/ 8a-/( 6-Деокси-3,4-0циклопентилиден-β -D -алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -индацен-За(1H)-карбоксилова киселина

Към суспензия на 10 %-ен паладий/въглен ( 50 мг) в етил ацетат (10 мл ) се прибавя разтвор на междинния продукт 5 ( 232 мг ) в етил ацетат и сместа се хидрира с водород при стайна температура и налягане 35 пси (абе,налягане в паунди/инч²) в продължение на час и половина.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан: метанол (30:1) до получаване на посоченото в наименованието, съединение (67 мг).

ft ό	(XH, CDC13): 9	.71 (s	, 1H, CHO),	6.07	(dd, 1H,	H-2,	, J=1.5 and 3.3
Hz)	, 4.59 (d, 1H,	н-r,	J=2.1 Hz),	4.17	(dd, 1Н,	H-3'	' , J=3.6 and 5.4
Hz)	, 4.54 (d,lH,	8aCH2,	J=9.3 Hz),	3.97	(dd, 1H,	H-2 ’	' , J = 2.1 and 3.6
Hz)	, 3.81 (dd, 1H	, H-4'	, J=5.4 and	9.0	Hz), 3.70	(d,	1H, 8aCH2, J=
9.3	Hz), 3.44 (dq	, 1H,	H-5', Jd=9.	0 Hz	, Jq=6.3	Hz) ,	2.69 (t, 1H,
H-l	, J=3.3 Hz).

ПРИМЕР 6 /1R-(1cZ ,ЗаВ ,4β ,4аВ ,7В ,7ack,8aB )/ 8а-/( 2,6 - Дидеокси-3,4 0-изопропилиден- β- D-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,

6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил-3 -(1-метилетил)-1,4-метано-з • · · · • · tt ··· ·

161 индацен- За(1H9-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 7 (1,2 г ) в етил ацетат ( 60, мл) се прибавя 10 %-ен паладий/въглен( 600 мг ),на порции,в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 40 пси (абе,налягане в паунди /инч²) в продължение на 1 ч при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и се промива с допълнително количество етил ацетат.Разтво рителят се изпарява до сухо и остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан:метанол (25:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (0.79 г ) .

S(¹H, CDC1₃): 9.81 (s, 1Η, СНО), 6.05 (dd, 1Н, H-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.63 (dd,lH, H-l', J=2.4 and 8.4 Hz), 4.38 (dt, 1H, H-3', J_d= 3.0 Hz, J =5.1 Hz), 4.29 (d, 1H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3.64 (dd,lH, H4', J=5.1 and 9.3 Hz), 4.43 (dq, 1H, H-5', J_d=9.3 Hz, J_q=6.0 Hz), 3.40 (d, 1H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 2.53 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz); $( C, CDC1₃): 204.7 (CHO), 174.6 (C0₂H), 148.2 (C-3), 130.6 (C-2), 108.9 (C(CH₃)₂), 98.3 (C-l'), 76.6 (C-4'), 73.7 (8aCH₂), 72.5 (C-3'), 71.7 (C-5'), 67.0 (C8a), 65.2, 59.0 (C-4).

ПРИМЕР 7 /1R- (loZ ,3afi ,4β ,4ай ,7β ,7av<,8aB )/ 8a-/( 2,6-Дидеокси-3,40-/4-метокси-2-бутилиден)- β- Д-алопиранозилокси)метил/-4-φορмил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към суспензия на 10%-ен паладий/ въглен ( 300 мг ) в етил ацетат (10 мл ) се прибавя разтвор на междинния продукт 8 (246 мг ) в етил ацетат ( 10 мл ) и сместа се хидрира при стайна температура в продължение на 1. час при налягане на водорода 45 пси(абе.налягане в паунди/инч²).Катализаторът се отфил• · · · · · • · · · · · • · · ·· • · · · · ·· • · · · ·· • · · ·· • · · · · · · -16 2трува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан и дихлорометан:метанол (30:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (182 мг ),под формата на бяла пяна, в епимерно съотношение 4:1.

δ(^ΧΗ, CDC1₃) сигнали на главния компонент: 9.81 (s, 1Н, СНО),

6.06 (dd, 1Н, Н-2, J=1.5 and 3.6 Hz), 4.62 (dd, 1H, H-l', J=2.7 and

8.1 Hz), 4.41 (dt, 1H, H-3', J_d=3.3 Hz, J_t=2.5 Hz), 4.24 (d, 1H, 8aCH₂ J=9.0 Hz), 3.68 (dd, 1H, H-4’, J-5.7 and 9.0 Hz), 3.50 (t, 2H, CH₂, J=7.5 Hz), 3.46-3.38 (m, 1H, H-5'), 3.33 (s, 3H, CH₃0), 2.54 (t, 1H, H-l, J=4.2 Hz); S (¹³C, CDC1₃): 204.5 (CHO), 175.1 (CO₂H), 148.2 (C-3),

130.7 (C-2), 109.4 (C-2), 98.3 (C-l'), 76.4 (C-4'), 73.6 (8aCH₂),

71.9 (C-3'), 71.4 (C-5'), 68.6 (CH₂0), 65.2 (C8a), 58.9 (C-4),

58.6 (CH₃0).

ПРИМЕР 8 /1R-(1cZ ,3aB ,4B ,4aB , 7B ,7а<т<,8аВ )/ 8a-/( 2,6-Дидеокси-3,40-изопропилиден - B- D-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4a, 5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs-индацен-За(1H)-карбоксилова киселина.натриева сол

Съединението от

Пример 6 (376 мг) се разтваря в диоксан ( з мл) и се прибавя

0.5 II-ен натриев бикарбонат(1.50 мл ).Полученият в резултат разтвор се разбърква на 30 минути при стайна температура и след това в продължение се суши чрез замразяване до получаването на посоченото в наименованието,съединение (392 мг ).

8(¹H,CDC1₃): 9.84 (s,lH,CHO), 5.94 (dd,lH, Н-2, J=1.5 and 3.6

Hz), 4.52 (dd, 1H, H-l', J=2.4 and 9.0 Hz), 4.41-4.37 (m, 1H, H-3'),

4.02 (d, 1H, 8aCH₂, J=9.6 Hz), 3.74 (d, 1H, 8aCH₂, J=9.6 Hz), • · · · · ·

ПРИМЕР 9

/1R-(1 с/, ЗаВ ,4В ,4аВ ,7В ,7ао<,8аВ )/- 8а-/( 6-Деокси-З,4-0тионокарбонил- В- Д-алтропиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 9 (0.220 г) в дихлорметан ( 5 мл ) при температура О°С се прибавя 2%-ен разтвор на трифлуорооцетна киселина в дихлорометан ( 20 мл).Реакционната смес се разбърква при 0°С в продължение на 1 час и след това се промива с вода ( 2 х 20 мл) и се суши (магнезиев сулфат) . Разтворителят се изпарява до получаването на остатък, който се хроматографира върху колона със силикагел и се елуира с дихлорометан :метанол (40:1 до 20:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (0.1 г).

^(¹Н, CDClj): 9.68 (s, 1Н, СНО), 6.09 (s, 1Н, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.94 (dd, 1H, H-3', J=3.9 and 7.2 Hz), 4.62 (m, 2H, H-l' and H-4’), 4.14 (dd, 1H, H-2', J=1.2 and 3.9 Hz), 4.00 (d, 1H, 8aCH₂, J_ab=9.3 Hz), 3.72 (d,lH, 8aCH₂, J_AB=9.3 Hz), 3.68 (m, 1H, H-5'), 2.71 (m, 1H, H-l); ^(¹³C, CDC1₃): 204.4 (CHO), 190.2 (CS), 176.4 (C0₂H), 148.4 (C-3), 130.6 (C-2), 98.2 (C-l'), 82.3 and 80.1 (C-3' and C-4'), 74.5 (8aCH₂), 71.7 (C-3a), 69.2 and 66.4 (C-2' and C-5'), 65.5 (C-8a), 58.8 (C-4), 46.0 (C-l).

ПРИМЕР 10 /!R-(lcZ,3aB ,4B ,4aB , 7B ,7a<*,8aB )/ 8a-/8 2,6-Дидеокси-3,4

0-карбонил- B- D-алопиранозилокси)метил /-4-формил-4,4а,5,6,

7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-ин

дацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 10 (125 мг ) при кипене на обратен хладник в сух толуен (15 мл) се прибавя, в азотна атмосфера,излишък от карбонилдиимидазол на малки порции.След като реакцията завърши ( контролира се с ТСХ)разтворителят се изпарява при понижено налягане и суровата смес се разтваря в дихлорометан ( 200 мл),промива се с ΙΝ-на солна киселина ( 3 х 100 мл ), с воден разтвор на натриев хлорид (1 х 100 мл ) и с вода ( 1 х 100 мл ),след това се суши над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като полученото масло се изполва понататък без допълнително пречистване.Маслото се разтваря в

етил ацетат (15 мл ) и се разклаща в апарат на Пар при налягане пси (абе.налягане на водорода в паунди / инч²) на водорода в присъствието на 10 %-ен паладий/въглен 850 мг ) в продължение на 1 час при стайна температура.Филтруването на катализатора и отстраняването на разтворителя дава сироп,който се пречиства чрез препаративна ТСХ ( силикагел,метанол:дихлорометан 1:15) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 50 мг)получено от фракцията с Rf =0.5.

8(¹H,CDC1₃): 9.70 (s, 1Н, CHO), 6.07 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.93 (го, 1H, H-3’), 4.63 (dd, 1H, H-l’, J=2.4 and 7.8 Hz), 4.24 (dd, 1H, H-4', J=6.6 and 9.3 Hz), 4.05 and 3.57 (2d, 2H,

8aCH₂, J_ab=9 Hz), 3.63 (m, 1H, H-5’), 2.66 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), (¹³C, CDC1₃): 204.6 (COH), 176.0 (COOH), 154.0 (OCO), 148.2 (C3) , 130.7 (C-2), 97.5 (C-l’), 76.6 (C-4’), 74.7 (C-3’) . 69.9 (C5'), 31.7 (C-2').

ПРИМЕР 11 /1К-(1с4,ЗаВ ,4B ,4aB ,7 β ,Tact,Zak ) / 8а/(- 2,6-Дидеокси-3,40-тиокарбонил- β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6, 7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано-s -инда·· ···· • · · · · ·

-165цен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 11 (130 мг) в сух дихлорометан ( 5 мл ) се прибавя трифлуорооцетна кисе лина /250 /л) при 0°С,След 2 часа разтворът се разрежда с дихлорометан ( 50 мл),промива се с вода (2 х 100 мл),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като полученото масло се пречиства чрез препаративна ТСХ (силикагел,метанол:дихлорометан!:15) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (68 мг), получено от фракцията с Rf =0.6.

o(¹H,CDCl₃): 9.70 (s, 1Н, CHO), 6.07 (dd, 1Η, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 5.08 (m, 1H, H-3'), 4.63 (dd, 1H, H-l', J=2.7 and 8.4 Hz), 4.45 (dd, lH,H-4', J=6.6 and 9.0 Hz), 4.03 and 3.59 (2d, 1H, 8aCH₂, J_ab=9.3 Hz), 3.64 (m, 1H, H-5'), 2.67 (t, 1H, H-l, J=3.0 Hz);

$(¹³C, CDC1₃): 204.5 (COH), 190.9 (CS), 176.3 (COOH), 148.2 (C-3),

130.7 (C-2), 97.5 (C-l), 80.3 (C-4'), 79.6 (C-3’), 69.5 (C-5’),

31.3 (C-2').

ПРИМЕР 12

/1К-(1о4,ЗаВ ,4 δ ,4a B ,7 В ,7a</,8a 8 )/ 8a-/( 2,6-Дидеокси-3,40-метилен- β - D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4a,5,6,7,7a

8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- ^s -индацен

-За(1H)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 10 ( 450 мг ) в дихлорометан (10 мл ) се прибавя при енергично разбъркване,тетрабутиламониев бромид ( 40 мг ) и 50%-ен воден разтвор на натриев хидроксид (100 мл ).След 12 часа, реакцията се прекъсва чрез прибавянето на 1 N-на солна киселина (100 мл ) и сместа се екстрахира с дихлорометан ( 100 мл ).Органичният слой се промива clNна солна киселина ( 1х 100 мл ),суши се над магнезиев сулфат и се концентрира до сухо като полученото твърдо вещество се използва • ·· ·

-166понататък без допълнително пречистване.Това твърдо вещество се разтваря в етил ацетат ( 15 мл) и се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 20 пси(абе.налягане в паунди/инч²) в присъствието на 10%-ен паладий /активиран въглен ( 50 мг) в

продължение на 1 час при стайна температура.След филтруване на катализатора и отстраняване на разтворителя,маслообразният остатък се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с ацетон :хексан (1:10) и (1:5) до получаване на посоченото в наименованието,съединение(130 мг ),под формата на масло.

§(¹H,CDC1₃): 9.80 (s,

Hz) , 5.12 and 4.86 (2m,

8.7 Hz), 4.20 and 3.44

3'), 3.67 (dd, 1Н, (t, 1H, H-l, J=3.9

148.3 (C-3), 130.6

Hz);

1Н,

2H, (2d,

СНО), 6.05 (dd, 1Н, H-2, J=1.2 and 3.3

0СН₂0), 4.60 (dd, 1Н, H-l', J=2.4 and

2Н, 8аСН₂, , J=5.1 and 8.7

S(¹³C, CDC1₃):

(C-2) , 98.1 (C-l’),

73.9(C-3'), 70.3 (C-5·), 32.3 (C-2').

ПРИМЕР 13 /1К-(1</,ЗаВ ,4B ,4aB ,7В ,7ао<,8аВ )/

J_AB=9.3 Hz), 4.13 (т,1Н, НHz), 3.38 (т,1Н, H-5'), 2.58

204.6 (COH), 174.8 (COOH),

8а-/( 2,6-Дидеокси-3,40-метилен-β -D -алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4a,5,6,7,7a 8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индаценЗа(1Н)-карбоксилова киселина,натриева сол

Към разтвор на Пример 12 (200 мг) в метанол(5 мл ) се прибавя на капки О.ЮбГЧ-ен разтвор на натриев хидроксид във вода ( 3.98 мл).След 30 мин.разтворителят се отстраня ва при понижено налягане и остатъкът се разтваря в диоксан ( 5 мл) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието , съединение (209 мг ).

^(¹H,CDC1₃): 9.87 (s, 1Н, СНО), 6.54 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 and 3.6

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • · · · · · · · · ···· • * ··· · · · ···· · ······ ··· ····· · · · ·· · ·

-167Ηζ) , 5.10 and 4.82 (2m, 2H, 0CH₂0), 4.51 (dd, 1H, H-l', J=2.4 and

8.7 Hz), 4.12 (m, 1H, H-3'), 4.03 and 3.73 (2d, 2H, 8aCH₂, J_AB=

9.9 Hz), 3.61 (m, 1H, H-4'), 3.35 (m, 1H, H-5'), 2.56 (t, 1H,H-1);

S(¹³C, CDC1₃): 200.2 (COH), 169.0 (COOH), 142.9(C-2), 120.6 (C2), 90.3 (C-l’), 86.4 (0CH₂0), 67.5 (C-4'), 66.2 (C-3’), 61.8 (C-5').

ПРИМЕР 14 (а) /1R-(1* ,3ав ,4β ,4aB ,7β ,7аВ ,8ав )/ 8а -/(1 S ,3R,7R,9R)

- 2,5,8-Триокса-З,7-диметил-цис-бицикло/4.4.0/-дец-9-ил-оксиметил-/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1 метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина (б) /lR-(la,3aB ,4β ,4аВ ,7 β ,7а«£ ,8ав )/ 8а-/( Is ,3 ,7R,9R)

-2,5,8-Триокса-З,7-диметил-цис-бицикло-/4.4.0/-дец-9-ил-оксиметил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина

Междинният продукт 14 ( 120 мг) в етил ацетат ( 15 мл) се разклаща в апарат на Пар при налягане 20 пси (абе. налягане в паунди /инч²) на водорода в присъствието на 10%-ен паладий/ въглен ( 50 мг) в продължение на 1 час.,при стайна температура.Филтруването на катализатора и изпаряването на раз творителя при понижено налягане води до получаването на сироп, който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване като елуент на ацетан : хексан (1:10),(1:7) и (1:5) до получаването на посоченото в наименование (а),съединение ( 35 Mr;Rf =0.5 в хексан:ацетон 4:1) и до посоченото в наименованието (б) ,съединение ( 40 мг, Rf =0.4 в хексан: ацетон 4:1) като и двата продукта са под формата на безцветни масла.

(a) ^Н, CDC1₃): 9.80 (s, 1Н, CHO), 6.04 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 4.62 (dd, 1H, H-9', J=2.1 and 9.9 Hz), 4.20 (m, 2H, ·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · · · · ·· · ···· · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· ··

-1688аСН₂+Н-7'), (3.97 (m, 1Н, H-l), 3.73 (m, 1H, 0CHCH₃), 3.40 (m,

2H, 8aCH₂+0CH₂), 3.27 (d, 1H, 0CH₂, J_AB=10.8 Hz), 3.18 (dd, 1H, H-6', J=3.3 and 10.2 Hz); (¹³C,CDC1₃): 204.6 (COH), 174.6 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 97.9 (C-9'), 73.5 (0CH₂), 73.2 (C-6'), 72.1 (C-l'), 71.9 ( 0CHCH₃ ), 65.4 (C-7’), 31.9 (C-10'), 22.7 (0CHCH₃).

(6) δ(¹Η, CDC1₃): 9.79 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.73 (dd, 1H, H-9', J=3.0 and 6.3 Hz), 4.26 (m, 1H, H-l'),

4.15	(ш,2Н,8аСН2+Н-7') ,	3.98	(m, lh, 0CHCH3), 3.79	(dd,	1H,	0CH2,
J=3.1	and 11.4 Hz), 3.41	Cd,	1H, 8aCH2, J=9.6 Hz),	3.35	(m,	1H,
0СН2 ,	J=3.1 and 6.3 Hz),	3.27	(dd, 1H, H-6', J=5.7	and	11.7	Hz),

2.55 (t, 1H, H-l); (¹³C, CDC1₃): 204.6 (COH), 174.6 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 99.2 (C-9'), 74.7 (0CHCH₃), 73.6 (0CH₂), 69.3 (C-6'), 66.3 (C-l'), 65.4 (C-7'), 31.9 (C-10'), 22.6 (0CHCH₃).

ПРИМЕР 15 /!R-(lcX,3aB ,4B ,4aB , 7β ,7ао/,8аВ )/ 8a-/(lS , 7R, 9R)-2,5,8-

Триокса-3,3,7-триметил-цис-бицикло/4.4.0/-дец-9-ил-οкси-метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано - s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 15 (200 мг ) в етил ацетат ( 15 мл ) се прибавя 10%-ен паладий /въглен ( 50 мг), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 20 пси (абе.налягане в паунди /инч²) на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Филтруването на катализатора и изпаряването на разтворителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с ацетон:хексан (1:10) и (1:5) до получаването на по • · • · · ·

• ·

-169соченото в наименованието,съединение (140 мг ),под формата на

бяла пяна.

И¹Н, CDC1₃): 9.81 (s, 1Н, СНО), 6.03 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 Hz),

4.62 (dd, 1H, H-l', J=2.1 Hz, J=9.6 Hz), 4.35-4.15 (m, 3H, 8aCH₂, H-7' and H-l'), 3.40 (m, 2H, 8aCH₂ and 0CH₂), 3.25-3.15 (m, 2H, H-6', and 0CH₂), 2.52 (t, 1H, H-l), 1.33 and 1.13 (2s, 2CH₃); S(¹³C, CDC1₃)

204.7 (COH), 174.1 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 98.0 (C-9'),

73.4 (0CH₂), 73.3(C-6'), 65.1 (C-l’), 64.7 (C-7), 31.9 (C-10’),

21.1 (2CH₃).

ПРИМЕР 16 /lR-( 1* ,3aB ,4B ,4aB , 7B ,7B ,SaB )/ 8a-/( 1S ,4S ,6R,8R)2,7-Диокса-4,6-диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-8-ил-окси-метил4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 20(a) (680 мг) в етил ацетат (100 мл) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (200 мг ), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща на апарат на Пар под 25 пси (абе,налягане в паунди/инч²) налягане на водорода в продължение на 2 часа при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с дихлорометан : метанол ( 49:1) до получаване на посоченото в наименованието , съединение ( 450 мг ),под формата на бяла пяна.

С (¹Н, CDC13): 9.86 (s, 1Н, СНО), 6.04 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 and 3.6 Hz), 4.57 (dd, 1H, H-8', J=2.4 and 9.3 Hz), 4.40 (d, 1H, 8a-CH2, J=9.6 Hz), 4.08(m, 2H, H-l' and CH2-3' (1H)), 3.27 (m, 3H, H-6', CH2-3' (1H), 8a-CH2 (1H)), 2.47 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), 1.02 (d, 3H, 4'-CH3, J=6.6 Hz); J(¹³C,CDC13): 204.7 (CHO), 173.8 (COOH),

148.4 (C-3), 130.5 (C-2), 98.5 (C-8'), 75.2 (C-l'), 74.3 (8a-

• to to to • to to

• · · ·

CH₂), 73.3 (C-3'), 71.9 (C-6*) , 51.2 (C-5'), 36.0 (C-4’), 32.9 (C9'), 19.4 (4'-CH₃).

ПРИМЕР 17

/lR-( 1^ ,3aB ,4β ,4aB ,7β ,7ay ,8afi )/ 8a-/( IS ,4S ,6R,8R)2,7-Диокса-4,6 -диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-8-ил-окси-метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3 -(1-метилетил)-1, 4-метано-Б -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 16 (450 мг) в метанол (100 мл) се прибавя на капки разтвор на натриев хидроксид (0.099 П-ен, 9.5 мл).Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 80 мл) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието, съединение(470 мг ).

? (¹Н, CD₃0D): 9.86 (s, 1Н, CHO), 5.94 (dd, 1H , H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.43 (dd, 1H, H-8’, J=2.1 and 9.3 Hz), 4.13-4.02 (m, 3H,

ПРИМЕР 18 /1R-(1,.> ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a.x ,8aβ )/ 8ац/(IS ,4R,6R,8R)-2,7 Диокса-4,6-диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-8-ил-окси-метил/-4формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина • ·

-171Към разтвор на междинния продукт 20(6) (180 мг) в етил ацетат ( 60 мл) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (100 мг) в азотна атмосфера.Суспензията се разклаща на апарат на Пар при налягане на водорода 25 пси ( абе.,паунди/инч²) в продължение на 2 ч при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага двукратно на мигновена хроматография върху силикагел при използване последователно на дихлорометан:метанол ( 49:1) и хексан :ацетон

(4:1) като елуенти до получаване на посоченото в наименованието, съединение(90 мг),под формата на бяла пяна.

^(¹Н, CDC1H³): 11.5 (bs, 1Н, СИН), 9.87 (s, 1Н, СНО), 6.04 (dd, 1Н, Н-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.53 (dd, 1H, H-8', J=2.4 and 9.9

Hz), 4.45 and 3.26 (Id, 2H, 8a-CH₂, J=9.3 Hz), 4.19 (q, 1H, H-l’,

J=3.3 Hz),‘3.96 (t, 1H, CH₂-3’, J=8.4 Hz), 3.58 (m, 1H, H-6'),

3.43 (dd, 1Н, СН2-3', J=10.2 Hz), 2.55 (m, 1Н, H-4'); S (13С,

CDC13) : 204.6 (СНО), 174.4 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 9

(C-8'), 78.7 (C-l'), 73.3 (C-3’), 72.9 (8a-CH2), 68.7 (C-6’)>

46.1 (C-5'), 36.6 (C-4'), 34.02 (C-9'), 21.8 (6'-CH3), 13.6 (4

CH3) .

ПРИМЕР 19

/1R-(U ,3aB ,4B ,4aB , 7B ,7aa ,8aB )/ 8a-/( IS ,4R,7R,9R)-

2,8 -Диокса-4,9-диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/

-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)

-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 23(a) (150 мг) в етил ацетат (15 мл ) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (50 мг) в азотна атмосфера.Сместа се разклаща на апарат на Пар при 20 пси налягане на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се из • · • · · · · · • · парява до сухо.Остатъкът ,получен по този начин, се пречиства като се подлага на мигновена хроматография при елуиране с ацетон : хексан(1 : 3) до получаване на посоченото в наименованието, съединение (100 мг),под формата на кристално вещество.

ξ(¹Η, CDC1₃): 9.86 (s, 1Н, СНО), 6.05 (dd, 1H, H_2 , J=1.2 and

3.3 Hz), 4.63 (dd, 1H, H-7', J=3.3 and 6.6 Hz), 4.37 (d, 1H, 8aCH₂,

JAb=9-6 Hz 9,	3.98	and 3.67 (2dd, 2H, H-3', J=6.6 and 8.1 Hz),
3.40-3.20 (m,	3H,	8aCH2, H-9' and H-l'), 2.46 (t, 1H, H-l, J=
3.9 Hz), 1.04	(d,	3H, CH3CH).
ПРИМЕР 20
/1R-(U ,3aB	,4B	,4aB ,7B ,7ax ,8aB )/ 8a-/( IS ,4R,7R,9R)-

-2,8-Диокса-4,9-диметил-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 19 ( 100 мг) в метанол ( 5 мл ) се прибавя на капки воден разтвор на натриев хидроксид (0.106 N-ен,1.88 мл).След 30 мин. разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода( 3 мл ) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение (104 мг).

c (гн,	CD3OD)	: 9.88	(s, 1H, CHO)	, 5.93	(dd, 1H, H-2, J=1.2 and
3.3 Hz).	, 4.49	(m, 1H.	, H-7'), 4.02	(m, 2H	, H-3' and 8aCH2), 3.72
(d, 1H,	8aCH2,	JAB=9,	.3 Hz), 2.56	(t, 1H,	H-l, J=3.6 Hz);S(13C,
CD30D) :	209.7	(CHO),	178.4 (COOH)	, 152.4	(C-3), 130.1 (C-2), 99.9
(C-7 ') ,	82.1 (	C-l'),	76.5 (8aCH2)	, 72.2	(C-9'), 37.5 (C-5'), 15.2
(B3-CH)
ПРИМЕР	21

/1К-(1а ,ЗаВ ,4В ,4аВ ,7В ,7ал ,8аВ )/ 8a-/(lS ,4S ,7R,9R)-

-173-

- 2,8-Диокса-4,9?диметил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано-s -индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 23(6) (260 мг) в етил ацетат (15 мл ) се прибавя 10%-ен паладий/въглен (50 мг).Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 20 пси в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо. Остатъкът ,получен по този начин, се пречиства с помощта на препаративна ТСХ / силикагел,метанол:дихлорометан 1:20/ дополучаване на посоченото в наименованието,съединение (185 мг), под формата на масло с Rf =0.6.

^<Ь(¹Н, CDC1₃): 9.85 (s, 1H, СНО), 6.04 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.88 (t, 1H, H-7', 2.7 Hz), 4.27 and 3.28 (2d, 2H, 8aCH₂, J_ab=9.9 Hz), 3.85 and 3.73 (2m, 2H, 0CH₂), 3.60 (m, 1H,

H-9'), 3.37 (dd, 1H, H-l', J=7.2 and 8.4 Hz), 2.47 (m, 3H, H-5'+CHCH₃+H1); ξ (¹³C, CDC1₃): 204.4 (CHO), 173.7 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2), 98.7 (C-7'), 81.2 (C-l'), 72.8 (8aCH₂+0CH₂),

69.9 (C-9’), 25.4 (C-6'), 12.4 (CH₃CH).

ПРИМЕР 22 /1R-(1«* ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7а<ч ,8aB )/ 8a-/(lS ,7R,9R)-2,8Диокса-4,4,9-триметил-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-/1-метилетил)-

1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 24 (100 мг) в етил ацетат ( 40 мл ) се прибавя 10%-ен паладий/въглен ( 50 мг) в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 25 пси в продължение на 2 часа при стайна температура . Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага двукратно на мигновена хроматогра• · · · · · • · · · • · • · · · · · · · · * · · · • · ··· · · · ···· · ·· · · · · ··· ····· · · · ·· ··

-174фия при използване последователно на 1,5%-ен метанол в дихлорометан и 15%-ен ацетон в хексан,като елуенти,до получаването на посоченото в наименованието,съединение (40 мг),под формата на бяла пяна.

(^ХН, CDC1₃): 9.85 (s, 1Н, СНО), 6.05 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and

3.6 Hz), 4.84 8t, 1H , H-7', J=3 Hz), 4.23 and 3.29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9.6 Hz), 3.81 (t, 1H , H-l', J=8.7 Hz), 2.48 (t, 1H, H-l, J=4.2 Hz), 1.09 and 0.98 (2s, 6H, 4'-CH₃); J(¹³C, CDC1₃): 204.5 (CHO), 174.0 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2) , 98.7 (C-7'), 81.01 (C-l'),

78.8 (C-3'), 72.7 (8a-H₂), 70.2 (C-9'), 41.3 (C-4'), 40.4 (C5'), 27.3 (4'-CH₃), 26.5 (C-6'), 22.8 (4'-CH₃).

ПРИМЕР 23 /1R-(K ,3aB ,4β ,4aB ,7B ,7ad ,8aB )/ 8a-/( 6-Деокси-3,4,-O-изопропилиден- β- D-алопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1H)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 27 ( 125 мг) в метанол ( 25 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий/въглен (100 мг) в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 15 пси в продължение на час и половина при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и към филтрата се прибавя 1П-на солна киселина (0.5 мл ) при О°С.След разбъркване в продължение на 1 час,сместа се неутрализира с 1=%-ен разтвор на натриев бикарбонат.Разтворителите се изпаряват до сухо и маслообразният остатък се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с хексан:етил ацетат (4:1) и с дихлорометан : метанол ( 20:1) до получаването на посоченото в наименованието съединение ( 62 мг ).

·· ·*·· ·· ···· ·· ·· • · · · · · ·· · • ···· · · · ····· • · · · · ·· · · · · · · • · · · · ···· ····· · · ··· ··

-175 (^XH, CDC1₃): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.10 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 4.51 (t, 1H, H-2', J=4.5 Hz), 4.48 (d, 1H, H-l', J=7.5 Hz), 3.65 and 4.07 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3.78 (dd, 1H, H-4', J=9 and 5.1 Hz), 3.69 (dd, 1H, H-3', J=7.5 and 5.1 Hz), 3.50 (m, 1H, H-5', J=6 and 9 Hz), 2.59 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), 2.32 (m, 1H, CHMe₂); (¹³C, CDC1₃): 204.6 (CHO), 176.1 (C0₂H), 148.2 (C-3), 130.8 (C-2), 110.4 (quaternary C Isoproilidene), 100.9 (C-l'), 78.34 (C4'), 75.1 (C-2'), 74.7 (8aCH₂), 72.5 (C-4a), 71.7 (C-3'), 69.3 (C-5'), 65.6 (C-8a) , 58.9 (C-4), 46.3 (C-l).

ПРИМЕР 24 /1R-(1 ,3ав ,4β ,43β , 7β ,7a ,8ηβ )/ 8a-/( 2-Деокси-3,4 - 0изопропилиден-6-0-метил- β- D-алопиранозилокси)метил/-4-формил -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 30 (50 мг) в тетрахидрофуран (5 мл ) при стайна температура се обработва с тетрабутиламониев флуорид1.0 М-ен разтвор в тетрахидрофуран,200 л).

След 24 ч,реакционната смес се концентрира до сухо и полученото в резултат,жълто масло се пречиства чрез мигновена хроматография при елуиране с дихлорометан:метанол (15:1) до получаването на посоченото в наименованието,съединение (18 мг ).

(^ХН, CDC1₃): 9.80 (s, 1Н, CHO), 5.98 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 4.64 (dd, 1H, H-l', J=2.7 and 8.1 Hz), 4.42 (m, 1H, H3'), 3.68 and 4.01 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3.90 (m, 1H, H-4'), 3.45-3.65 (m, ЗН, H-5' and 2H-6'), 3.22 (s, 3H, 6'-OCH₃), 2.60 (m, 1H, H-l'), 1.34 and 1.35 (2s, 6H, methyl groups of isopropilidene); (¹³C, CDC1₃): 206.3 (CHO), 175.7 (C0₂H), 149.7 (C-3), 129.7 (C-2), 108.9 (C-quaternary of isopropilidene ), 98.2 (C-l'),

74.8 (C-3a), 74.8 (C-4), 74.4 (8aCH₂), 72.6 (C-3'), 71.3 (C-5'),

65.1 (C-8a), 61.1 (C-6'), 58.4 (C-4), 48.4 (6'-OMe), 46.1 (C-l),

32.8 (С-2'l.

·· · · · · · « • · · · · · ··· • ···· · · · · ···· • · · · · ·· · · · · · · ·· · · · · ··· ···♦· ·· · ·· · · • ·· ·

-176ПРИМЕР 25 /1R- С 1иж ,ЗаВ ,4В ,4ав ,7β ,7а^ ,8ав )/ 8а-/( IS ,4R,7R,9R)-2,8-Диокса-4-етил-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1метилетил)-1,4-метано- 5-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 37 (200 мг) в етил ацетат ( 40 мл ),в азотна атмосфера,се прибавя 10%-ен паладий/въглен(50 мг).Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 30 пси ( абе,налягане в паунди/инч²) в продължение на 2 ч ,при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът ,получен по този начин,се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на дихлорометан: метанол (98:2) като елуент до получаването на посоченото в наименованието, съединение (125 мг).

$( ¹Н, CDCly): 9.86 (s, 1Н, СНО), 6.05 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 and

3.3 Hz), 4.66 (dd, 1H, H-7', J=3.0 and 6.0 Hz), 4.32 and 3.29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9.6 Hz), 4.02 (dd, 1H, CH₂-3', (1H), J=7.2 and 8.4 Hz), 3.67 (dd, 1H, H_l’, J=7.8 and 9.3 Hz), 3.41-3.22 (m, 2H, H-9' and CH₂-3' (1H)), 2.48 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), 0.92 (t, 3H, CH₃CH₂, J=7.5 Hz); S(¹³C, CDC1₃): 204.5 (CHO), 174.2 (COOH), 148.3 (C-3), 130.5 (C2), 98.5 (C-7'), 80.3 (C-l'), 73.0 and 73.0 (8a-C and C-3’), 70.9 (C-9').

ПРИМЕР 26 /1R-C1(X ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7a<X ,8aB )/ 8a-/( IS ,4R,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-етил-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-oксиметил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1- ·· ···· ··· ·· · · · · • · ··· · · ♦ · * ··· • · ··· · · · ···« · • · ···· · · · ····· ·· · ·· ··

-177 метилетил )-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, натриева сол

Към разтвор на съединение от Пример 25 (88 мг) в метанол(10 мл ),на капки се прибавя 0.099 Ь1-ен разтвор на натриев хидроксид (1,8 мл ).Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 50 мл ) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 92 мг).

S>(¹H, DMSO-d₆): 9.77 (s, 1Н, СНО), 5.78 (m, 1H, H-2), 4.40 (brdd, 1H, H-7'), 3.92 (m, 1H, H-3’), 3.87 (d, 1H, 8a-CH₂ (1H), J=9.6 Hz), 3.50 (m, 2H, 8a-CH₂ (1H) andH-1’), 3.38-3.21 (m, 2H, H-3' and H-9'). ПРИМЕР 27 /1R-(L* ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7ay ,8aR )/ 8a-/( IS ,4S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-етил-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро -7-метил-3-Clметилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 38(420 мг ) в етил ацетат ( 80 мл),в азотна атмосфера, се прибавя 10 %-ен паладий/въглен (100 мг).Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 30 пси,при стайна температура,в продължение на час и половина.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Така полученият остатък се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при използване на дихлорометан:метанол (98:2) като еруент ,до получаването на посоченото в наименованието,съединение (280 мг).

С(¹Н, CDC1₃): 9.86 (s, 1Н, СНО), 6.05 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.89 (m, 1H, H-7'), 4.29 and 3.29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=

9.9 Hz), 3.90 (dd, 1H, H-3', J=7.5 and 8.7 Hz), 3.75 (fil,. 1Ну H1'), 3.64 (m, 1H, H-9'), 3.43 (t, 1H, H-3', J=8.7 Hz), 2.46 (t, 1H, H-l, J=3.6 Hz), 0.93 (t, 3H, CH₃-CH₂, J = 7.2 Hz); c,(¹³c,

-178 CDC1₃): 204.4 (СНО), 173.7 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2), 98.8 (C-7'), 81.3 (C-l), 72.8 and 70.9 (8a-C and C-3’), 69.8 (C-9’).

ПРИМЕР 28 /IR-(Ιοί , Заб ,46 ,4a6 ,76 ,7a<X,8a6 )/ 8a-/( IS ,4S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-етил-9 -метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил /-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,

натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 27 (262 мг) в метанол ( 20 мл ) на капки се прибавя 0.099 N-ен воден разтвор на натриев хидроксид (5.3 мл ).Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 100 мл ) и се лиофилизира до получаване на посоченото в наименованието , съединение (272 мг ).

δ(¹Η, DMSO-d₆): 9.77 (s, 1Η, СНО),5.79 (dd,lH, Н-2, J=1.2 and 3.6 Hz), 4.57 (m, 1H, H-7’ ), 3.83 and 3.45 (2d, 2H,8a CH₂, J=9.6 Hz ), 3.76 and 3.33 (2m, 2H, CH₂-3’ ), 3,52(m,2H,H-1’, ПРИМЕР 29 and H-9’).

/lR-(l</,3a 6,4 6,4a 6,76 ,7a<*,8a6 )/ 8a-/( 1 S,4R,7R,9R)-

2,8 -Диокса-4-(1-метилетил)- 9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-илоксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3 /1-метилетил /-1,4-метано-е -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 39 ( 280 мг ) в етил ацетат (15 мл ) ,в азотна атмосфера, се прибавя паладий (10%-ен) /въглен ( 50 мг ).Сместа се разклаща в апарат на Пар (РН₂=20 пси) в продължение на 1 час при стайна температура.Филтруването на катализатора и изпаряването на разтворителя дава остатък,който се пречиства чрез мигновена хроматография (силикагел, хексани:ацетонУ/V 10:1 и 5:1 ) до получаване на 180 мг от посоченото в наименованието,съединение,под формата на масло (добив 84¾-ен ) .

δ(¹Η, CDCIj): 12-11 (Ь,1Н, COOH ), 9.88 (s, 1H, CHO ),6.053 ( dd, 1H, H2, J=1.5 and 3.6 Hz),4.77 (m,1H,8a-CH2, J=9.3 Hz ), 3.95 ( dd,lH,H3’, J=7.2 and 8.7 Hz ), 3.67 ( dd,lH,Hl' , J=8.7 and 9 Hz ),3.5-3.36 (m, 2H, H3'+H9’ ), 3.23 ( d,lH, 8aCH₂, J=

9.3 Hz ), 2.43 (t, 1H,H1, J= 3.9 Hz )'

ПРИМЕР 30 /lR-(loi,3aB ,4β ,4aB, 78 ,7a_t<,8aB )/ 8a-/( 1 S,4S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-(1-метилетил)-9-метил-цис-бицикло/З.4.0/-нон-7ил -оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 29 ( 170 мг) в метанол ( 15 мл ) се прибавя 0.0956 N-ен воден разтвор на натриев хидроксид ( 3.45 мл ).След разбъркване 1 час,разтво рителят се отстранява до сухо като полученото твърдо вещество се разтваря в 3 мл вода и се суши чрез замразяване.

b(¹H,DMSO-d₆ ): 9.78 ( s, 1Н,СНО ), 5.80 ( dd,lH,H2, J=1.2 and 3.6 Hz),4.46 ( dd,lH,H7', J=2.7 and 5.1 Hz ), 3.9-3.8 ( m, 2H, H3’ + 8aCH₂ ), 3.54 ( dd, 1H,H1', J=8.1 and 9 Hz ), 3.47 (d,lH, 8aCH₂ , J= 9.3 Hz ), 3 (¹³C, DMSO-d₆ ): 206.4 ( CHO)

174.3 ( COO), 151.3 ( C3 ), 127.6 ( C7' ),80.7 (Cl’ ).

ПРИМЕР 31 / 1R-(1// ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a<Z,8a β)/ 8a-/(1 S ,4 S ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-(1-метилетил)-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил оксиметил/- 4 -формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 40 (280 мг ) в • · · ·

-180-

етил ацетат ( 15 мл ) в азотна атмосфера се прибавя паладий (10%-ен ) върху въглен ( 50 мг).Сместа се разклаща в апарат на Пар (налягане на водорода 20 пси) в продължение на 1 час при стайна температура.Филтруването на катализатора и изпаряването на раз творителя дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография(силикагел,хексани:яцетон V/V 10:1 и 5:1) до получаването на 190 мг от посоченото в наименованието съединение под формата на твърдо кристално вещество (89 %-ен добив).

$( ¹H,CDCI₃) :9.88 ( S,1H,H2, J=1.5 and 3.3 Hz ), 4.92 ( t,lH,

H7 ' , J=2.7 Hz),4.33 ( d,lH, 8aCH_2> J=10.2 Hz ), 3.94 ( t, 1H,

H3', J= 8.1 Hz ),3.8-3.7 ( m,2H,Kl’ + H9' ),3.47 ( dd,lH,H3’ , J=8.4and 10.8 Hz), 3.29 ( d,lH, 8aCH₂, J= 10.5 Hz )'

ПРИМЕР 32 / 1R- (1о4,3а B,4 B,4aB ,7 B,7ao(,8aB J/ 8a -/( 1 S,4 S,7R,9R)

- 2,8-Диокса-4-(1-метилетил)-9-метил-цис-бицикло-/3.4.0/-нон-

7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 31 (165 мг) в метанол ( 15 мл ) се прибавя 0.0956 Ь1-ен разтвор на натриев хидроксид ( 3.35 мл ).След разбъркване в продължение на 1 час разтворителят се отстранява до сухо и полученото твърдо вещество се разтваря във вода ( 3 мл ) и се суши чрез замразяване.

&(¹H,CDCI₃); 9.77 ( S,1H, СНО ),5.79 ( dd,lH, Н2, J=0.9 and

3.3 Hz), 4.58 ( bs, 1H, 1H, H7'), 3.85-3.72 ( m, 2H,H3' + 8aCH₂),3.71-3.56 ( m, 2H, H9' + Hl' ), 3.45 ( d,lH, 8aCH₂, J=

9.9 Hz ); £ (¹³C, CDCI₃): 206.3 ( CHO ), 174.3 ( COO^-), 151.4 ( C3 ),127.5 (C2 ), 96.7 (C7’ ), 80.8 (Cl’ ).

• · • · · Λ

Λ ·

-181-

ПРИМЕР 33 /lR-(l^,3a В,4 В,4а В,7 B,7a<Z,8aB )/ 8а-/(1 S, 7R, 9R) - 2,8Диокса-9-метил-4-метилен-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1метилетил)-1,4-метано-Б -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към охладен с лед,разтвор на междинния продукт ( 330 мг) в дихлорометан (4 мл) се прибавя трифлуорооцетна киселина (0.2 мл ).Сместа се разбърква в продължение на 20 мин. при 0°С и след това послбедователно се разрежда сдихлорометан (150 мл ) и се промива три пъти с вода ( 100 мл ).Органичният слой се суши над безводен натриев сулфат и се концентрира до сухо.,като полученото масло се подлага на мигновена хрома тография върху силикагел при използване на дихлорометан : метанол (98:2) като елуент.След това подходящите фракции се събират и след това се подлагат на RP -18 хроматография при налягане на средата (около 10 бара) при използване на линеен градиент на ацетонитрил (60 до 75%9 във вода до получаване на посоченото в наименованието,съединение.

8(^ХН ,CDCI₃):9,87 ( S,1H, СНО), 6.04 ( d,lH,H-2, J= 3.3 Hz ), 5.08 and 5.02 (2m, 2H, H₂C= ), 4.50 (dd, lH,H-7', J=2.7 and

8.4 Hz ), 4.48-4.29 ( m,3H,CH₂-3' and 8a-CH₂ (1H)), 3.76 (dd, 1H, H-l', J=7.2 and 9.3 Hz ), 3.27 ( m,lH, H-9' ), 3,02 (m,lH, H-5' ), 2.45 ( m, 1H, H-l ); § (¹³C,CDCI₃): 205.1 ( CHO ),176.0 ( COOH ),148.6 ( C-3 ), 130.4 ( C-2 ), 104.2 ( CH₂= ), 98.2 CC-7’ ), 80.1 ( C-l'),73.4 and 70.6 ( 8a-CH₂ and C-3' ), 69.8 ( C-9' ).

ПРИМЕР 34 /lR-(loi,3a B,4 B,4a B ,7 B,7aiX,8aB )/ 8a-/(l S , 7R, 9R) - 2,8Диокса-9-метил-4-метилен-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/ - 4 -формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1• · · ·· · ··· • · · ·· · · · · ···· • · · · · ·· · ···· · • · · ··· ··· ····· ·· · ·· ··

-182метилетил)-1,4-метано- -индацен-За(1Η)-карбоксилова киселина, натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 33 (140мг) в метанол (1S мл ),на капки се прибавя 0.945Ь1-ен воден разтвор на натриев хидроксид.Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 60 мл) и се лиофи

лизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение(145 мг).

δ (¹H,DIiSO-d₆) : 9.76 ( s, 1Н,СНО ), 5.76 ( d, 1Н, H-2, J=

3.3 Hz ), 5.04 ( m, 2H, Н_£С= ), 4.34-4.20 ( m,3H, H-7' and CH₂-3' ), 3.84 and 3.50 ( 2d, 2H, 8a-CH₂, J=9.9 Hz ), 3.62 (dd,lH,H-l', J=7,5 and 9.3 Hz), 3.μ5 (m, 1H, H-9' ),2.89 (m, lH,H-5').

ПРИМЕР 35 /1К-(1/ ,3a β,4 B,4a β,7 в,7а</,8ав ,)/ 8a-/(l s,7R,9R)-2,8 Диокса-9-метил-4-метилен-3-оксо-цис-бицикло/3,4.0/-нон-7ил-оксо-метил / -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-/1-метилетил/-1,4-метано- _s-индацен -За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 43 (62 мг ) в сух дихлорометан ( 1.1 мл) се прибавя трифлуорооцетна киселина ( 0.05 мл ).Сместа се разбърква при 0°С в продължение на мин.,след това се разрежда с дихлорометан (50 мл ) и се промива с вода ( 3 х 25 мл ).Органичният слой се суши над безводен натриев сулфат и се концентрира до получаването на масло,което двукратно се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на дихлорометан:метанол (98:2) като елуент.Посоченото в наименованието съединение се получава по този начин ( 25 мг ),под формата на бледо жълта пяна.

δ(^ΧΗ, CDCI₃): 9.75 ( s,lH,CHO), 6.35 and 5.63 (2d,2H, H₂C=C,

-183J= 3.3 Hz ),6.04 ( dd, 1H, H-2, J= 1.2 and 3.3 Hz ), 4.52 ( t, 1H, H-7', J= 4.8 Hz ),4.24 ( t,lH, H-4', J=8.7 Hz), 4.09

and 3.46	( 2d,2H,	8a-	CH2,J=9.3 Hz )B3	.38 ( m,lH, H-5	' ),3.30
( т,1Н,	H-9' ), 2.	59	(	t,lH,H-l, J=3.	9 Hz ), (13C,	CDCI3):
204.5 (	CHO ) , 175	.3	(	VOOH ), 269.7	( C-3’ ),136.8 1	( C-4'),
130.6 (	C-2 ), 122	.4	(	C=CH2 ), 97.7	( C-7’ ),77.8 (	C-l· ),
and 71.2	( C- 9' )

ПРИМЕР 36 /lR-(lo(,3a β,4β ,4ав ,7 в,7а*,8а_в )/ 8a-/(ls ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-4-метилен-З-оксо-цис-бицикло/3,4.0/-нон-7-илоксиметил /-4-фолмиб-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3 (1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина ,натриева сол

Към разтвор на сйединението от Пример 35 ( 25 мг) в метанол (10 мл ) се прибавя на капки 0.0945N воден разтвор на натриев хидроксид( 0.53 мл ).Разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 25 мл ) и се лиофилизира до получаване на посоченото в наименованието, съединение ( 26 мг ).

^(¹Н, DMSO-d₆ ): 9.75 (s, 1Н,СНО ), 6.15 and 5.82 ( 2d, 2Н, Н₂С=С, J=3.3 Hz ), 5.76 ( brd, 1Н,Н-2 ), 4.31 ( dd,1Н,Η-7',J=

2.4 and 7.8 Hz ), 4.24 (t, 1H, H-1',J=8.7 Hz ) , 3.84 and 3.52 ( 2d, 2H, 8a-CH₂, J=9.9 Hz ), 3,38 ( m, 1H, H-5' ), 3.21 ( m, 1H, H-9’ ).

ПРИМЕР 37 /1К-/1У ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β , 7aoc ,8a β)/ 8a-/(1 s ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-4-оксо-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-окси-метил /4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

-184Към разтвор на междинния продукт 43 ( 45 мг ) в етил ацетат (15 мл ) се прибавя 10%-ен паладий /въглен (25 мг ) , в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 25 пси ( абсолютно налягане в паунди/инч²) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при използване на хексан:етил ацетат ( 65:35) като елуент до получаване на посоченото в наименованието,съединение(25 мг).

ф (¹H,CDCI₃) : 9.77 (s,lH, СНО ), 6.05 ( dd , 1Н, H-2, J= 1.5 and 3.6 Hz ),4.17 ( m,4H, H-3' (1H),8a-CH₂(1H), H-7' and H-l'), 3.90 ( d, 1H, H-3’(1H), J= 17.7 Hz ), 3.42 ( d,1H,8a-CH₂(1H), J=9 Hz ), 3.31 (m, 1H, H-9'), 2.85 (m, 1H, H-5' ),2.58 ( t,lH, H-3, J=3.9 Hz ); £ (¹³C, CDCI₃): 214.4 ( C-4),204.8 ( CHO ),

148.3 ( C-3 ),130.6 ( C-2 ), 98.9 ( C-7'), 78.6 and 70.3 ( Ο-

Ι' and C-9' ), 73.6 and 69.1 ( C8a-C and C-3 ' ).

ПРИМЕР 38 /1R- (1* ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7a^ ,8aB )/ 8a- (/ 1 S ,4 S ,6 S ,7R,

C9R)- 2,8 -Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/нон-7-ил-окси-метил-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро7-метил-3-(1-метилетил)-1, 4-метано-s -индацен-За(1Н)-карбок силова киселина

Към разтвор на междинния продукт 45 (123 мг) в етил ацетат ( 50 мл ) ,в азотна атмосфера се прибавя 10%-ен паладий/въглен (65 мг) и сместа се хидрогенира при налягане на водорода 15 пси (абе.налягане в паунди/инч²) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан : метанол ( 1 9 : 1 ) до (18:2) до получаване на посоченото • ♦ • ·· ·

-185в наименованието,съединение ( 90 мг ).

^(¹H,CDCI₃): 9.67 ( s,lH, CHO ), 6.07 d, 1H, H-2, J=3.3 Hz ),

4,64 ( d, lH,H-7', J= 3.6 Hz), 4.02 ( d, 1H, 8aCHd, J=9.9 Hz ),

3,89 ( dd, 1H, Ha-3', J= 6.9 and 9 Hz ),3.85-3.7 ( m,3H,H-6', H-l' and H+9' ), 3.68-3.5 ( m, 2H, Hb-3' and 8a-CHb ), 2.65 Ct, 1H,H-1; J=3.6 Hz ); ^(¹³C, CDCI₃): 204.9 ( CHO ), 176.3 / CO₂H ), 148.9 ( C-3 ),130.1 ( C-2 ), 99.2 ( C-7'),80.5, 70.1 and 65.5 ( C-6', C-l' and C-9' ), 73.7 and 71.0 ( 8a-CH₂and C-3') , 13.4 ( CH₂-CH₃ )'

ПРИМЕР 39 /lR-(l^,3a β, 4β , 4aB, 7В , Ί ά^, 8a8 )/ 8a- /( IS, 4R,6S,7R,9R )-2,8Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-HOH-7- илoкси-метил /-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил3-(1-метилетил)-1,4-метано- з -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 46 ( 102 мг ) в етил ацетат ( 25 мл ), в азотна атмосфера, се прибавя 10 %-ен паладий /въглен ( 60 мг ) и сместа се хидрогенира при налягане на водорода 15 пси (абсолютно налягане в паунди /инч²) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при използване на дихлорометан :метанол ( 25:1) като елуент до получаване на посоченото в наименованието,съединение ( 75 мг ).

& (^!H,CDCI₃): 9.73 ( s, 1Н, CHO ), 6.08 ( dd,lH,H-2, J=1.2 and 3.6 Hz ), 4.53 ( d,lH, H-7', J=1.8 Hz ), 4.05 ( dd, 1H, Ha3', J= 7.2 and 8.4 Hz ), 4.02 ( d,lH,8a-CHa, J=9.3 Hz ), 3.83 ( dd, 1H,H-1', J=7.2 and 8.7 Hz ), 3.72 ( dd,lH,H-6’, J=2.1 ···· • · · ·

-186-

and 4.8 Hz )B 3.64 ( d,lH,8a-CHb, J=9.3 Hz ), 3.54-3.36 (m, 2H, H-9' and Hb-3'),2.68 (t,lH,H-l, J=3.9 Hz ), 0.96 (t, 3H, CH₃-CH₂ , J=7.5 Hz ); (¹³C,CDCI₃): 2047 (CHO ), 176.1 (CO₂H ),

148.5 ( C-3 ), 130.5 ( C-2 ), 98.8 ( C-7' ), 79.2,70.7 ,and

69.1 ( C-6', C-l', and C-9' ), 73.7 and 72.7 ( 8a-CH₂,C-3’)12.7 ПРИМЕР 40 (CH₂-CH₃ ).

/lR-(lo< ,3a β ,4 В ,4a B ,7 β ,7ao< ,8a β )/ 8a-/( 1 S , 4R, 6 S , 7R, 9R) -

2,8-Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7ил-окси-метил/- 4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-

3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина , натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 39 (490 мг ) в метанол ( 50 мл) се прибавя на капки 0.095 II-ен воден разтвор на натриев хидроксид (10 мл ).След 30 мин. разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода (10 мл ) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение (475 мг).

S (¹Н, (CD₃)₂SO ): 9.77 ( s, 1Н, СНО ), 5.8 ( d,lH, H-2, J= 2B4 Hz ), 4.41 (bs,lH,-OH), 4.31 (d, 1H, H-7', J=2.1 Hz),3.94 -3.82 ( m, 2H,8aCHa and Ha -3' ), 3.66 ( t, 1H, H-l', J= 8.1 Hz ),3.54-3.34 (m, 3H,8aCHb,H-6' and H-9' ), 3.24 (t, lH,Hb3', J= 8.1 Hz ), 2.55 ( t, 1H, H-l, J= 3.6 Hz ).

ПРИМЕР 40 /lR-(lo( ,3a β,4 в,4а β,7 в,7ас<,8ав )/ 8a-/( 1 ,4R,6 ,7R,9R)-

2,8-Диокса-4-етил-6-хидрокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-

-ил-окси-метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7 метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 39 /490 мг/ в метанол ( 50 мл) се прибавя на капки 0.095 II-ен воден разтвор • · • ·

• · · ·· · ··· • · ··· · · · · · ··· • · ··· ·· · ···» · ·· · · · · ··· ····· ·· · ·· ··

-187 на натриев хидроксид (10 мл ).След 30 мин. разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода (10 мл ) и се лиофилизира до получаване на посоченото в наименованието , съединение (475 мг ).

^(¹Н, (CD₃)₂SO ): 9.77 ( S,1H, CHO ), 5,8 ( d,lH,H-2, J= 2.4 Hz ), 4.41 ( bs, 1H,-OH), 4.31 ( d, 1H, H-7’, J=2.1 Hz), 3.94 -3.82 ( m, 2H, 8aCHa and Ha-3' ), 3.66 ( t,lH, H-l', J=8.1Hz ), 3.54-3.34( m, 3H,8aCHb,H-6' amd H-9' ), 3.24 ( t, 1H, Hb-3',J= 8.1 Hz ), 2,55 ( t, 1H, H-l, J= 3.6 Hz ).

ПРИМЕР 41 /1К-(1о< ,3a β ,4 β ,4a β ,7 β ,7ao< ,8ε β )/ 8a-/( IS ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-4-оксо-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/ - 4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил)-1,4-метано- s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина натриева сол

Към разтвор на междинния продукт 43 ( 350 мг) в етил ацетат ( 15 мл ),в азотна атмосфера, се прибавя паладий (10 %-ен ) /въглен ( 50 мг ).Сместа се разклаща в апарат на Пар (налягане на водорода 25 пси ) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до получаването на остатък,който се подлага на мигновена хроматография ( силикагел,дихлорометан:метанол V/V 100:1, 70:1 и 50:1) до получаването на 200 мг пяна,която се разтваря в метанол (10 мл ) и се обработва с 0.0947 М-ен разтвор на натриев хидроксид ( 4.54 мл ).Разтворителят се отстранява във вакуум и полученото в резултат,твърдо вещество се разтваря във вода ( 15 мл ) и се суши чрез замразяване.

(¹Н, DMSO- d₆): 9.76 ( s, 1Н, CHO ), 5.80 ( dd, 1H, H-2, J=

-1880.9 and 3.3 Hz ), 4.20-3.95 ( m, 4H, H7'+ Hl'+H3' ), 3.89( d,

1H, 8aCH₂, J= 9.6 Hz ), 3.47 ( d, 1H, 8aCH₂ , J= 96 Hz ), 292 ( m, 1H, H5 ' ).

ПРИМЕР 42

MR- (1(/ ,3a 6,4 6 ,4a 6,7 6 ,7a <Z,8a6 )/ 8a-/(-1 S ,4R,7R,9R )-

2,8-Диокса-4-метокси-9-метил-цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метилетил)-1,4метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,натриева сол

Към разтвор на междинния продукт 82 (250 мг) в етил ацетат (15 мл ) в азотна атмосфера се прибавя паладий (10%-ен ) /въглен ( 50 мг ).Сместа се разклаща в апарат на Пар (налягане на водорода 25 пси) в продължение на 1 час при стайна температура.Филтруването на катализатора и изпаряването на разтвортеля дава остатък,който се подлага на мигновена хроматография (силикагел,дихлорометан:метанол 100:1,70:1,50:

и 40:1) до получаването на 120 мг сироп,който се разтваря в метанол ( 15 мл ) и се обработва с 0.0947 М -ен натриев хидроксид (2,51 мл ).Отстраняването на разтворителя дава полутвърдо вещество,което се разтваря във вода (15 мл ) и се замразява до изсушаване,

S (^{* 1 * * * S}H,DMSO-d6 ):9.77 ( S,1H,CHO ), 5.80 ( dd, 1Н, H2, J= 1.2 and 3,3 Hz ),4.47 ( t, 1H, H7’, J= 39 Hz ),3.96-3.84 ( m, 2H, H3' + 8a CH2 ), 3.80 ( m, 1H, H4' ),3.65-3.40( m,4H, H9’+8aCH2+ H3'+H1' ), 3.23 (s, 3H,OCH3) , 2.46-2.2 ( m, 4H,K1+K6'+H5'+ CH(CH3)2 ); (¹³C, DOSO-d6 ): 206,4 ( CHO ), 174.4 ( COO)

1513 ( C3 ), 127.6 ( C2 ), 96.9 ( C7'), 84.1( C4’), 56.6 ( осн₃ )'

ПРИМЕР 4 3 • · · · • · • · • · · ·

-189/1R-(1с/,3а β ,4В ,4аВ ,7В ,7a«f,8aB )/ 8а-/( 1S ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-бицикло/3.4.0/-нон-4-ен-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано- 5-индацен-За/1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 87 (120 мг) в сух

дихлорометан (20 мл ) се прибавя при 0°С, в азотна атмосфера, трифлуороцетна киселина ( 100 /лл).След 5 минути сместа се разрежда с дихлорометан ( 100 мл ) и се промива с вода ( 100 мл) и разтвор на натриев хлорид ( 100 мл ),след което се суши над магнезиев сулфат и се концентрира до получаването на суров продукт,който се разтваря в смес от тетрахидрофуран : метанол /V/V 2:1,15 мл ) и се обработва с 1Н-на солна киселина / 100 мл / и се екстрахира двукратно с дихлорометан.Органичният слой се суши над магнезиев сулфат до получаването на масло,което се пречиства чрез препаративна ТСХ ( силикагел,ацетон:хексани 1:3) до получаването на 62 мг от посоченото в наименованието, съединение ( 73 %-ен добив ),под формата на бяла пяна.

5(¹Н, CDC1₃): 9.79 (s, 1Н, СНО), 6.06 (dd, 1Н, H2 , J=1.2 and

3.3 Hz), 5.56 (m, 1H, H4' ), 4.65-4.65 (m, 2H, H3’), 4.3-4.0 (m, 3H, H7'+8aCH₂+Hl'), 3.50 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3.18 (dq, 1H, H9' , J=6.3 and 9 Hz), 2.72 (m, 1H, H6'), 2.62 (t, 1H, Hl, J=3 Hz), S(¹³C, CDC1₃): 204.6 (CHO), 175.2 (COOH), 148.3 (C3), 136.3 (C5'),

130.6 (C2), 119.15 (C4'), 101.5 (C7'), 86.5 (Cl').

ПРИМЕР 44 /lR-(lo(,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7аж,8аВ )/-8a-/( IS ,7R,9R)-2,8Диокса-9-метил-бицикло/3.4.0/-нон-4-ен-7-ил-оксимитшл/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина, натриева сол • ···· · · · · · · · · • · ··· · · · ···· · ·· ···· ··· ····· ·· · ·· · ·

-190Към разтвор на съединението от Пример 43 ( 50 мг) в метанол ( 5 мл ) се прибавя 0.0966 N-ен разтвор на натриев хидроксид(1.09 мл ). Сместа се разбърква в продължение на 15 минути и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се разтваря във вода ( 1 мл ) и се изсушава чрез замразяване.

В(¹Н, DMSO-d₆): 9.78 (s, 1Н, СНО), 5.80 (bd, 1Н, H2, J=3.6 Hz), 5.64 (bs, 1H, H4') , 4.6-4.4 (m,2H, H3’), 4.1 (dd, 1H, H7', J=2.7 and 9.3 Hz), 4.05-3.90 (m, 2H, Hl'+8aCH₂), 3.56 (d, 1H, 8aCH₂, J=

9.6 Hz), 3.06 (dq, 1H, H9', J=6.3 and 8.7 Hz); $(¹³C, DMSO-d₆): O 215.9 (CHO), 183.9 (COO^_), 160.9 (C3), 146.1 (C5’), 137.2 (C2) ,

128.3 (C4'), 110.9 (C7'), 95.7 (Cl').

ПРИМЕР 45 /1R, - (Ιοί , ЗаВ ,4B ,4aB ,7В ,7а^,8аВ )/ 8а-/( I^s ,7R,9R)-Диокса-9-метил-цис-бицикло/З.4.0/-нон-7-ил-оксиметил/-4-формил-4,4а, 5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-⁵ -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 87 ( 100 мг ) в етил ацетат 8 15 мл ),се прибавя паладий ( 10 %-ен )/въглен,в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар ( налягане на водорода 20 пси ) в продължение на 1 час при стайна температура . Филтруването на катализатора и изпаряването на разтворителя дава остатък,който се разтваря в смес от тетрахидрофуран : метанол ( V/V 2:1, 15 мл ) и се обработва с 1 bl-на солна киселина ( 5 мл ). След завършване на реакцията се прибавят дихлорометан (100 мл ) и вода ( 100 мл ) и двата слоя се разделят.Органичният слой се суши над магнезиев сулфат и се концентрира до получаването на масло,което се пречиства чрез препаративна

ТСХ ( хексани: ацетон V/V 3:1) до получаването на 20 мг от посо • · · ченото в наименованието,съединение,под формата на прозрачно масло ( 30%-ен общ добив ).

^(¹Н, CDC1₃): 9.86 (s, 1Н, СНО), 6.05 (dd, 1H, H2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.07 (dd, 1H, H7', J=3 and 5.4 Hz), 4.33 (d, 1H, 8aCH₂,

J=9.6 Hz), 3.90 (m, 1H, H3'), 3.69 (m, 1H, H3’), 3.61 (dd, 1H, Hl',

J=8.1 and 9 Hz), 3.39 (dq, 1H, H9', J=6 and 9 Hz), 3.28 (d, 1H,

8aCH₂, J=9.6 Hz), 2.6-2.4 (m, 2H, H5’+H1), 2.32 (m, 1H, CH(CH₃)₂).

ПРИМЕР 46 /1 R-(lo(,3aS ,46 ,4a6 ,76 ,7a^,8a6 -)/ 8a-/( IS ,4R,6S ,7R, 9R )-2,8-Диокса-4,9-диметил-6-хидрокси-цис-бицикло/3.4.0/-нон7-илоксиметил/- 4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил

-3-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 896 (90 мг ) в етил ацетат ( 25 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий /въглен ( 50 мг ),в азотна атмосфера и сместа се хидрогенира при 40 пси ( абсолютно налягане в паунди /инч²) на водорода в продължение на 45 мин., при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се подлага на мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с дихлорометан : етил ацетат ( 10:1 ) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 60 мг ).

§(¹Н, CDC1₃): 9.74 (s, 1Н, СНО), 6.08 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.53 (d,lH, H-7’, J= 2.1 Hz ),4.09 ( d,lH,8a-CHa, J=

9.6 Hz J, 4.03 ( dd,lH,Ha-3', J=7.5 and 8.4 Hz ), 3.84 ( dd, ΙΗ,Η-l',J=7.8 and 9 Hz ), 3.74 ( dd, 1Η,Η-6',J=2.1 and 5.1 Hz ), 3.60 ( d, 1H, 8a-CHb, J=9.3 Hz ),3.42 (dq, lH,J-9’, J=6 and 9

Hz ),3.34 ( t, 1H, Hb-3', J= 8.7 Hz ), 2.66 ( t, 1H, H-l, J=

3.9 Hz )'.

• ·

ПРИМЕР 47 / 1R- ( lot ,3а В ,4 В ,4а β ,7 В ,7а <χ ,8а β )/- 8а/( IS ,4R,6S ,7R, 9R }- 2,8 -Диокса-4,9 -демител-6-хидрокси-цис-бицикло/3.4.0/-нон7-ил-окси-метил / -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-ме тил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен- За(1Н)-карбоксилова

киселина, натриева сол

Към разтвор на съединение от Пример 46 ( 258 мг ) в метанол ( 20 мл ) се прибавя на капки 0.103N-eH воден разтвор на натриев хидроксид ( 4,98 мл ).След 15 мин.разтворителят се отстранява при понижено налягане и остатъкът се разтваря във вода ( 10 мл ) и се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 250 мл ).

О^НДСД )₂SO ):9.77 ( s,lH, СНО ), 5.79 ( d,lH, H-2, J=3.6

Hz ), 5,79 ( d, lH,H-2, J=3.6 Hz ), 4.29 ( d, 1H, H-7', J=1.8

Hz ), 3.94-3.8 ( m, 2H, 8a-CHa and Ha -3' ), 3.67 ( t, 1H,H-1', J= 8.4 Hz ), 3.55-3.25 ( m, 3H, 8a-CHb, H-6', H-9' ), 3.14 ( t, 1H, Hb-3', J= 8.4 Hz ), 2.54 ( t, 1H, H-l, J= 3.6 Hz ).

ПРИМЕР 48 / lR-( 1^,3a β,4 B,4aB ,7B ,7aot,8aB )/- 8a-/( 2,3,6-Тридеокси-З-етиламино-З-ΓΊ,4-0-карбонил-β -D -алопиранозилокси)метил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил -3-(1-метилетил) -1,4-метано-s -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 96 ( 180 мг ) в етил ацетат ( 15 мл ) в азотна атмосфера се прибавя паладий / 10 %-ен / върху въглен ( 30 мг ).Сместа се разклаща в апарат на Пар ( налягяне на водорода 20 пси ) в продължение на 2 часа при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпорява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиране с хексан:етил ацетат 1:1 до получаване на чист GM 233039Х ( 70 мг ).

·· ····

-193o(¹H, CDClj): 9.76 (s, 1H, СНО), 6.05 (dd, 1H, H-2, J=3.0 and

1.2 Hz), 4.64 (dd, 1H, H-l', J=5.7 and 3.3 Hz), 4.11 (m, 2H, H-3', H-4'), 4.04 (d,lH, H-8a, J=9.3 Hz), 3.62 (dq, 1H, H-5', J=8.4 and

6.0 Hz), 3.51 (d, 1H, H-8a, J=9.3 Hz), 3.49 (m, 1H, CH₂-CH₃), 3.13 (m, 1H, CH₂-CH₃), 2.62 (t,lH, H-l, J=3.6 Hz), 2.32 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 1.15 (t, 3H, CH₃, J=7.2 Hz); (¹³C, CDC1₃): 204.4 (CHO), 175.7 (COOH), 157.6 (N-COO), 148.3 (C-3), 130.5 (C-2), 97.2 (C-l'),

74.2 (C-4'), 73.4 (8a-CH₂), 69.4 (C-5'), 51.2 (C-N).

ПРИМЕР 49

/ lR-(l^,3aB ,4 B,4aB ,7β , 7a<*,8aB )/ 8a-/(2,3 -Анхидро-6деокси-4-0-метил-В - П-манопиранозилокси)метил /-4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилети л)-1,4метано- s-‘индацен-3а (1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 50 ( 140 мг ) в етил ацетат / 20 мл / се прибавя 10 %-ен паладий /въглен ( 100 мг ), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при 15 пси (абе.налягане в паунди / инч²) на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел,при елуиране с хексан: етил ацетат ( 5:1 ) и дихлорометан : метанол ( 20:1 ).Подходящите фракции се събират и разтворителят се отстранява до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 85 мг ),под формата на пяна.

δ (¹Н, CDC1₃): 9.76 (s, 1Н, СНО), 6.08 (dd, 1Н, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 4.74 (s, 1H, H-l'), 3.63 and 4.13 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3.48 (m, 4H, H-4' and 4'-0Me), 2.26 (d, 1H, H-2; J=3.9 Hz), 3.19 (m, 1H, H-5'), 3.13 (d, 1H, H-3', J=3.9 Hz), 3.06 (d, 1H, H4', J=8.7 Hz), 2.74(t, 1H, H-l, J=3.6 Hz); (¹³ _C, CDC1₃): 204.8 • ·

-194-

ССНО)’, 175.6 (C0₂H), 148.2 (C-3); Ц₀.8 (C-2) , 98.0 (C-l') ,

76.5 (С-4'), 74.3 (8aCH₂), 74.4 (C-За), 72.5 (С-5’) , 65.6 (С8а), 59.0 (С-4), 58.2 (4'-0Ме), 53.6 (С-2'), 50.3 (С-3'),

46.4 (С-1).

пример 50 /1R- (1ί< ,ЗаВ ,4β ,4аВ ,7β ,7аа<,8ав )/ 8а-/( 2,3- Анхидро-6деокси-4-0-метил- β-D -манопиранозилокси)метил /-4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метил етил )-1,4метано- s-индацен - За(1Н)-карбоксилова киселина, натриева сол

Съединението от Пример 49 ( 310 мг ) се разтваря в метанол ( 10 мл ) и се прибавя воден разтвор нанатриев хидроксид ( 0.0867 N-ен, 6.69 мл ).Сместа се разбърква в продължение на 2 часа при стайна температура.Разтворителят се отстранява и остатъкът се разтваря във вода ( 2 мл ) и се суши чрез замразяване до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 324 мг ),под формата на бяло твърдо вещество.

Зс¹н, CDC1₃): 9.87 (s, 1Н,СНО), 5.98 (dd, 1Н, Н-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.69 (s, 1H, H-l'), 3.85 and 4.07 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9.6 Hz), 3.47 (s, 3H, 4’-OMe), 3.26 (d, 1H, H-2, J=3.9 Hz), 3.19 (dq, 1H, H-5', J=5.7 and9 Hz), 3.12 (d, 1H, H-3',J=3.9 Hz), 2.97 (dd, 1H, H-4’, J=0.6 and 8.7 Hz), 2.66 (t, 1H, H-l, J=3.6 Hz);

S C¹³C, CDC1₃): 209.6 (CHO), 178.6 (C0₂H), 152.4 (C-3), 130.2 (C-

2), 100.1 (С-1'), 78.2	(С-4'), 77.9 (8аСН2), 73.8 (C-За), 73.9 (С-
5'), 65.6 (С-8а), 59.2	(С-4), 58.2	(4'-ОМе),	54.6	(С-2’), 51.9
(С-3'), 46.4 (С-1).
ПРИМЕР 51
/1R- (1=< , За β , 4 β , 4а β	,7 β ,7а d ,8¾	)/ 8а-(/	2,3-	Епитио-4-0-

-метил-2,3,6-тридеокси- β-D -манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4• · · ·

-195 -

метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Смес от междинния продукт 52 (0.67 ммола),5,5диметил-2-тиоло-2-тиоксо-1,3,2-диоксафосфоринан ^(3.37 ммола ) и триетиламин ( 4.02 ммола ) в сух диметилформамид ( 5 мл ) се нагрява в продължение на 48 ч при 100°С.След охлаждане сместа се излива във воден разтвор на етер.Органичната фаза се изпарява и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на дихлорометан : метанол ( 30:1 ) като елуент до получаване на посоченото в наименованието,съединение (180 мг ) .

(^ХН, CDC13): 9.77 (s, 1Н, CHO), 6.08 (dd, 1Н,Н-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.95 (d, 1H, H-l', J=1.8 Hz), 4.15 and 3.65 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH2 , J=9.3 Hz), 3.33 (d, 1H, H-4’, J=8.7 Hz), 3.18 (m, 1H, H-5'), 3.14 (m, 2Ή, H-2’ and H-3’), 2.70 (m, 1H, H-l), 2.30 (m, 1H, CH(CH3)2); (¹³C, CDC13): 204.7 (CHO), 175.6 (C0₂H), 148.3 (C3) , 130.7 (C-2), 98.5 (C-l’), 79.1 (C-4’), 74.1 (8a-CH₂), 73.5 (C5'), 46.6 (C-l), 35.6 (C-2’), 35.2 (C-3'), 27.5 (CH(CH₃)₂), ¹ R. S. Edmundson; Tetrahedron, 21, 2379 (1965).

ПРИМЕР 52

I 1R-(1</ ,3aB ,4B ,4aB , 7β ,7a/,8aB )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-пропил- β - D-манопиранозилокси)метил /-4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро- 7-метил-3 -(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 65 ( 400 мг ) в етил ацетат ( 100 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий/въглен (200 мг ),в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 20 пси на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства върху силикагел • · • · · · • · · · • · • · · · · ·· · · · · · · ·· · · · · ··· ····· ·· · · · · ·

-196(мигновена хроматография ) при елуиране с метилен хлорид и метилен хлорид.'метанол (25:1) до получаването на посоченото в наименованието, съединение ( 300 мг ),под формата на бяла пяна.

Λ(¹Н, CDC1₃): 9.76 (s, 1Н, СНО), 6.08 (dd, 1Н, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.72 (s, 1H, H-l'), 4.13 and 3.65 (2d,2H, 8a-CH₂, J=

Hz), 3.67 (m, 1H, H-5'), 3.44 (m, 1H, H-4'), 3.25 and 3.12 (2d, 2H, H-2', H-3', J=4.2 Hz), 3.20 (m, 2H, 0CH₂CH₂CH₃), 2.74 t, 1H, H-l, J=3.9 Hz); ^(¹³С, CDC1₃): 204.8 (CHO), 175.8 (C0₂H),

130.8 (C-2), 148.2 (C-3), 98.0 (C-l'), 74.9 (C-4'), 74.3 (C-8aCH₂), 72.6 (C-5’), 72.4 (0CH₂CH₂CH₃ en C-4'), 65.6 ()C-8a), 59.0 (C-3), 54.2 (C-2'), 50.3 (C-3'), 18.6 (C-6').

ПРИМЕР 53

/1R-(1<X ,3as ,4β ,4aB ,7B ,7ao< ,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-6деокси-4-О-пропил-β -D -манопиранозилокси) метил/-4-формил4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро- 7-метил-3-(1-метилетил)-1,4метано-s -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина,натриева сол

Към разтвор на съединението от Пример 52 ( 400 мг ) в сух метанол ( 30 мл ) се прибавя на капки разтвор на натриев хидроксид ( 0.0976 14-ен, 8,15 мл ) ,при стайна температура . Сместа се разбърква 1 час.Разтворителят се изпарява до сухо и остатъкът се разтваря в минимален обем вода ( 1015 мл ).Този разтвор се лиофилизира до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 417 мг ),под формата на бяло твърдо вещество.

^(ХН, CDC13): 9.89	(s, 1H, CHO), 5.97 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and
3.6 Hz),	4.70	(s ,	1H,	H-l')	, 4.09	and 3.86 (2d, 2H, 8a-CH2, J=
9.7 Hz),	3.70	(m,	1H,	H-5')	, 3.44	(m, 1H, H-4'), 3.24 and 3.12
(2d, 2Н,	H-2 '	and	H-3	', J = 4	Hz),	3.20 (m, 2H, 0CH2CH2CH3), 2.65

Ct, 1H, H-l, J=3.9 Hz); ^(¹³C, CDC1₃): 209.6 (CHO), 178.38 (C0₂Na), 152.4 (C-3), 130.1 (C-2), 100.1 (C-l'), 77.9 (0CH₂CH₂CH₃ en C-4'), 76.6 (C-4'), 73.5 (C-5'), 73.1 (C-8a-CH₂),

66.6 (C-3'), 18.9 (C-6').

ПРИМЕР 54 ^{* 5} /1К-(1о/ ,3aB ,46 ,4a6 ,76 ,7a</,8a6 )/ 8a-/( - 2,З-Анхидро-4О-бензил-б-деокси-β -D -манопиранозилокси)метил /-4-формил4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4метано-s- индацен -За (1Н)-карбоксилова киселина

Към суспензия на натриев хидрид ( 22 мг ) в сух диметилформамид ( 5 мл ) се прибавя на капки , разтвор на междинния продукт 63 ( 200 мгж ) в сух метилформамид ( 7 мл ) и сместа се разбъркщва в продължение на 1 час при стайна температура . Реакционната смес се неутрализира с ΙΝ-на солна киселина и се прибавя етил ацетат ( 30 мл ).Органичният слой се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид,суши се над

безводен магнезиев сулфат,филтрува се и се изпарява до сухо. Остатъкът се хроматографира върху колона със силикагел ( мигновена хроматография ) при използване на метилен хлорид : метанол ( 50:1 ) и (35 :1 ) като елуенти до получаването на посоче ното в наименованието,съединение (150 мг ) под формата на бяла пяна.

(¹Н, CDC13): 9.86 (s, 1Н, СНО), 7.31 (m, 5Н, PhCH20), 6.08 (dd, 1Η, H-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.75 (d, 1H, 0CH2Ph, J=11.4 Hz), 4.73 (s, 1H, H-l'), 4.56 (d, 1H, 0CH2Ph, J=11.4 Hz), 4.17 and 3.62 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9.0 Hz), 3.32 and 3.14 (2d, 2H, H-3' and H-2', J=3.7 Hz), 3.30 (m, 2H, H-4', H-5'), 2.71 (t, 1H,H-1); £(¹³C, CDC13): 104.9 (CHO), 175.8 (COOH), 137.2, 128.14, 128.11 (6C-Ph),

148.3 (C-3), 130.8 (C-2), 98.0 (C-l’), 74.4 (C8a-CH₂), 74.3 (C- *·' ηι.-, in r rr ГИ AC C iC-Q-j'l ξΛ 0 ίΟ.-Vk

198

18.6 (С-6').

ПРИМЕР 55 /lR-( 1оС ,ЗаВ ,4β ,4а β,7β ,7ав( ,8аВ )/ 8а-/( 2,З-Анхидро-6-

деокси-β -D -манопиранозилокси) метил /-4-формил-4,4а,5,6,7,

7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -инда цен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Към суспензия на сух натриев хидрид ( 75 мг ) в сух диметилформамид ( 5 мл ),в азотна атмосфера,се прибавя разтвор на междинния продукт 66 / 500 мг / в сух диметилформамид ( 5 мл ).Реакционната смес се разбърква в азотна атмосфера в продължение на 3 часа и след това взаимодействието се прекратява чрез прибавяне на вода и сместа се неутрализира до pH 6.5 -7 с 0.5 М-ен воден разтвор на солна киселина.Сместа се концентрира и остатъкът се разпределя между вода и етил ацетат (1:1, 100 мл ).Воднатагфаза се екстрахира с етил ацетат ( 2 х 20 мл) и органичните фази се събират и обработват с воден разтвор на ¹ натриев хлорид и се сушат над магнезиен сулфат,филтруват се и се концентрират във вакуум до получаването на сироп.Този сироп се пречиства чрез мигновена хроматография върху силикагел при елуиъ ране с дихлорометан :метанол ( 40:1) до получаване на посочено то в наименованието,съединение (172 мг ),под формата на бяла пяна.

ξ(¹Η, CDC1₃): 9.76 (s, 1Н, СНО), 6.09 (dd, 1Н, H-12, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.77 (s, 1H, H-l'), 3.61 and 4.21 (2d, 2H, 8aCH₂, J= ··· ·· · ··· • · ··· · · · · ···· ·· ····· · ··· · · ·· · ··· ··· ····· ·· · ·· ··

-1998.7 Hz), 3.21 (dq, 1H, Н-S', J69 and 6Hz) , 3.16 and 3.27 (2d, 2H,

H-2' and H-3', J=3.6 Hz), 2.70 (t, 1H, H-l); $(¹³C, CDC1₃): 205.5 (CHO), 174.6 (C0₂H), 148.4 (C-3), 130.8 (C-2), 97.8 (C-l'), 74.1 (8aCH₂), 73.9 (C-4'), 73,7 (C-За), 67.2 (C-5'), 65.5 (C-8a),

59.0 (C-4), 56.51(6-2'), 50.4 (C-3'), 46.5 (C-l).

ПРИМЕР 56 /lR-(loi ,3aB ,4 B,4aB ,7β ,7a«f,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-4,6дидеокси-4-флуоро-β -D -талопиранозилокси)метил/4-формил-4,4a 5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За(1H)-карбоксилова киселина . Към разтвор на междинния продукт 68 (100 мг ) в етил ацетат ( 30 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий /въглен (100 мг ), в,азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 15 пси на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се хроматографира върху силикагел (мигновена хроматография) при използване на хексан:етил ацетат (4:1) и дихлорометан : метанол ( 20:1) като елуенти до получаването на посоченото в наименованието,съединение,под формата на бяла пяна ( 82 мг ).

S'(¹H, CDC1₃): 9.79 (s, 1Н, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and

3.6 Hz), 5.13 (s, 1H, H-l'), 4.75 and 4.58 (2dq, 1H, H-5', J₅,_p=

48.3 Hz; J=6.6 Hz, J=3.9 Hz), 4.18 and 4.11 (2d, 1H, H-4', J=3.9 Hz and J_4#f=23.1 Hz), 4.07 and 3.61 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3.77 (m,2H, H-2' and H-3'), 2.67 (t, 1H, H-l); ^(¹³C, CDC1₃):

·· ···· • · · · · · • · ··· ·· · ··♦ • ···· · · · · ···· • · ··· ·· · ···· · ·· ···· ··· ····· ·· ♦ ·· ··

-200-

204.6 (СНО ), 175.3 (СО₂К ), 148.2 ( С-3 1,130.7 ( С-2 ),

101.7 ( C-l') ,90.2 (d,C-4', J_C4,__p=157 Hz ),80.3 (d,C-5*, J_C5,__F =21.4 Hz ), 74.3 ( C-8aCH₂ ),73.4 ( C-За ), 65.4 ( C8a ),58.9 ( C-4 ), 55.9 (C-2' ), 55.1 (d, C-3’, J_C3,__p =6.3 Hz ),16.4 ( d, C-6', J_C6I__F= 21 Hz ).

ПРИМЕР 57

/1R- (1 </· , 3a 6 , 4 B,4a 6, 7:6 , 7aoC , 8a β ) / 8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-(2-метоксиетил)- 6 -D -манопиранозилокси ) метил /-4формил -4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано-2 -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 69 ( 140 мг ) в етил ацетат ( 50 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий /въглен ( 70 мг ),в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 20 пси на водорода ,в продължение на 1 час при стайна

температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства през колона със силикагел (мигновена хроматография ) при елуиране с дихлорометан й дихлорометан : метанол ( 40:1) до получаването на посоченото в наименованието ,съединение мг ) ,под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDCI₃):

9.78 (s, 1Н, СНО )5,6.08 ( dd,lH, J=1.2 and 3.3

Hz ), 4.74 (s, 1H, H-l'

4.23 and 3.60 (2d,2H, 8a-CH₂, J=9

Hz ),3.86-3.50 (m,4H,OCH₂CH₂OCH₃ ),3.38 (s,3H,CH₃OCH₂CH₂O )_y

3.30 and 3.13 (2d,2H,H-2', and H-3', J= 3.9 Hz ), 3.26-3.22 ( m,2H,H-4' and H-5' ), 2.68 (t, 1H, H-l, J=3.7 Hz ), £ (¹³C,

CDCI₃):204.8 (CHO), 175.2 ( COOH ), 148.3 (C-3 ), 130.8 (C-2),

97.9 (C-l'), 74.2 ( C-8aCH₂), 72.4 (C-5'), 71.7 and 69.9 (OCH₂ CH₂OCH₃), 54.1 ( C-2'), 50.3 ( C-3'), 46.5 ( CH₃ OCH₂CH₂) , 18'. 5 ( C-6' ).

• · · · ·

-201-

ПРИМЕР 58 /1R -( 1^ ,3а В ,4β ,4а β ,7 β ,7а<< ,8а β

-6-деокси/ 8a-/( 2,3 -Анхидр<^4- 0(2-метилпропил)- β -D -манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,

6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- _s -ин дацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 70 ( 0.14 ммола) в етил ацетат се прибавя 10 %-ен паладий/въглен ( 50 мг ),в азотна атмосфера(използваният етил ацетат е 30 мл ).Сместа се разкла

ща на апарат на Пар при налягане 25 пси на водорода в продължение на 30минути,при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на дихлорометан:метанол ( 40:1 ) като елуент за получаването на посоченото в наименованието , съединение ( 49 мг ).

O(¹H,CDCI₃): 9.76 ( s,lH, СНО ), 6.09 (dd, 1Н,Н-2, J= 1.2 and

3.3 Hz),4.73 ( s, 1H, H-l' ), 4.12 and 3.65 ( 2d,2H,8a-CH₂, J=

9.3 Hz ), 3.49 ( m,lH, H-5' ),3.22 ( m,3H, H-2' and CH₂-0 ), 3.13 (m, 2H, H-3' and H-4' ),2.75 ( t, 1H, H-l, J= 3.9 Hz ), 2.33 (m, 1H, CH(CH₃)₂); J (¹³C,CDCI₃): 204.8 (CHO), 176.0 (CO₂H )6148.2 ( C-3 ), 130.8 ( C-2 ), 98.0 (C-l* ), 77.6 (ΟΙ ), 75.2 ( C-4' ),74.3 (8a-CH₂),729 ( C-За ),72.6(C-5' ),65.6 ( C-8a ), 59.0 ( C-4 ), 54.1 ( C-2' ), 50.4 ( C-3' ), 46.4 (ΟΙ ), 41.7 ( C-4a ), 41.3 ( C-7a ).

ПРИМЕР 59 /1R- (U ,3a B,4 B,4a β,7 В,7а^С,8а β)/ 8a-/( 2,3-Анхидро-6деокси-4-0-(1-метилетил)карбонил- β- D-манопиранозилокси)метил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s -индацен-За-(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 71 (140 мг ) в етил ацетат ( 20 мл ) се. прибавя 10 %-ен паладий/въглен (120

··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · · · · ·· · · · · · · ·· ···· · · · ····· ·· · · · · ·

- 202 мг), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане 20 пси (абсолютно налягане в паунди/инч²) на водорода в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства през колона със силикагел (мигновена хроматография ) при елуиране с хексан:етил ацетат / 4:1/ и с дихлорометан : метанол ( 20:1 ) до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 103 мг ),под формата на бяла пяна.

^(¹H,CDC1₃): 9.74 (s, 1Н, CHO), 6.09 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.78 (s, lh, H-l'), 4.66 (d, 1H, H-4', J=9 Hz), 4.10 and 3.60 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9Hz), 3.42 (dq, 1H, H-5', J= 9 and

Hz), 3.15 (s, 2H, H-2' and H-3'), 2.78 (m, 1H, H-l), 2.58 (m, 1H, 4'-0C0CHMe₂); ^(¹³C,CDC1₃): 204.9 (CHO), 176.1, 175.9 (C0₂H and 4'OCOR), 148.2 (C-3), 130.9 (C-2), 97.9 (C-l'), 74.5 (C-8aCH₂),

72.6 (C-3a), 71.4 (C-4'), 67.8(C-5'), 66.0 (C-8a), 59.0 (C-4),

18.5 and 18.8 (2CH₃ of 4'-0C0CHMe₂).

ПРИМЕР 60 /1R-(1* ,3aB ,4β ,4aB ,7β ,7ax ,8afi )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6-деокси-4-О- (2,2-диметилпропионил)- β- D-манопиранозилокси)метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано- s-индацен-За(1Н )-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 72 ( 0.21 ммола) в етил ацетат ( 60 мл ) се прибавя 10 %-ен паладий/въглен ( 50 мг ), в азотна атмосфера.Сместа се разклаща на апарат на Пар при 20 пси налягане на водорода в продължение на 30 минути, при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на дихлорометан :метанол (40:1 ) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съе• · · · · · • · ··· · · ···· • · · ·· · · · · ···· • · · · · · · · ···· · • · ···· ··· • · · · · ·· · ·· · ·

-203динение ( 101 мг ).

£ С^ХН, CDC1₃): 9.75 (s, 1Н, СНО), 6.10 (dd, 1Н, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 4.80 (s, 1H, H-l'), 4.64 (d, 1H, h-4', J=9 Hz), 4.11 and 3.70 (2d, 2H; 8a-CH₂, J=9.3 Hz), 3.43 (m, 1H, H-5'), 3.13 (m, 2H, H-2' and H-3'), 2.78 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), 2.34 (m, 1H, CH(CH₃)₂);

(¹³C, CDC1₃): 204.9 (CHO), 177.3 and 176.5 (2xCO₂), 148.2 (C3), 130.9 (C-2), 98.0 (C-l'), 74.5 (8a-CH₂), 72.6 (C-2), 71.3 (C5'), 67.9 (C-8a), 59.0 (C-4), 54.3 (C-2'), 50.1 (C-3'), 46.3 (C-l),

41.8 (C-4a), 41.3 (C-8), 38.8 (C-^tBu), 32.0 (C-5), 30.9 (C-

C 7), 18.5 (^ХВи).

Пример 61 /1 R- ( 1о/,3ав ,48 ,4a8 ,78 ,7a.x^z,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-4,-бензилоксикарбонилтб-деокси-β -D -манопиранозилокси )метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- s-индацен-За (1Н9-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 73 ( 0.22 ммола) в дихлорометан ( 10 мл ) при О°С се обработва с трифлуорооцетна киселина ( 0.1 мл ).След 2 часа,сместа се промива с вода и органичната фаза се изпарява.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на дихлорометан:метанол ( 40:1) като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 60 мг ) .

£	(ХН, CDC13)	: 9.74 (s,	1H,	CHO), 7.37 (m,5H, Ph),	6.09	(dd,
1Н,	Н-2, J=1.5	and 3.6 Hz)	, 5.	20 (m, 2H, CH2Ph), 4.75	(s,	1H,
Н-1 ’	'), 4.55 (d,	1H, H-4',	J = 9	Hz), 4.08 and 3.70 (2d,	2H,	8a-
сн2;	, J=9Hz), 3.	47 (m, 1H,	H-5'	), 3.28 and 3.16 (d, d,	1H,	1H,
Н-2 '	' and Η-3',	J=3.6 Hz),	2.79	(t, 1H, H-l, J=3.9 Hz)	, 2.	33 (m,

1Н, СН(СН₃)₂); 5(¹³С, CDC1₃): 204.8 (СНО), 176.4 (С0₂Н), 154.1

-204(С0₃), 148.1 (C-3), 134.6 (Cipso), 130.9 (C-2), 128.8, 128.7, μ28,5, 128.4 (Ph), 97.8 (C-l’), 74.5 (8a-CH₂), 72.5 (C-За), 71.6 (C-5'), 71.1 (C-4'), 70.3 (CH₂Ph), 65.7 (C-8a), 58.9 (C-4), 53.9 (C-2’), 50.0 (C-3'), 46.2 (C-l), 41.7 (C-4a) , 41.3 (C-7a).

ПРИМЕР 62 /lR-(l-/,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7a<X,8a& )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-оксо-B -D -манопиранозилокси)четил/-4-формил-4,4а,5, 6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен- За(1H)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 74 (0.26 ммола ) в етил ацетат ( 30 мл) се прибавя 10 %-ен паладий /въглен ( 50 мг ) ,в азотна атмосфера.Сместа се разклаща в апарат на Пар при налягане на водорода 25 пси,в продължение на час и половина , при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография при използване на дихлорометан: метанол (40:1 ) като елуент и подходящите фракции се събират и изпаряват до получаването на посоченото в наименованието,съединение (38 мг ).

О^Н, CDC1₃): 9.72 (s, 1Н, CHO), 6.12 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 4.87 (s, 1H, H-l’), 4.10 and 3.76 (2d, 2H, 8aCH₂), J=9Hz), 3.83 (q, 1H, H-5', J=6.6 Hz), 3.60 and 3.38 (d, d, lh, 1H, 3’ and 2’, J=3.9 Hz),2.82 (t, 1H, H-l', J=3.6 Hz), 2.36 (m, 1H, CH(CH₃)₂); (¹³C,CDC1₃): 204.9 (CHO), 202.9 (CO-4'), 176.2 (C0₂H),

148.2 (C-3), 130.9 (C-2), 96.1 (C-l’), 76.6 (C-5'), 74.7 (8aCH₂),

72.1 (C-3a), 65.7 (C-8a), 58.9 (C-4), 54.2 and 53.5 (C-2' and C-3’),

46.1 (C-l), 41.8 (C-4a), 41.3 (C-7a).

·· ····

-205ПРИМЕР 63 /1К-(lcZ ,3aE ,4β ,4а8 , 7β ,7ac<,8aB )/ 8a- /(-2,3-Анхидро-4,6 дидеокси-4-метилен- β- D-манопиранозилокси)метил /-4-формил-4,

4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил )-1,4-мета

но- s-индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 101 ( 0.17 ммола ) в дихлорометан (15 мл )при 0°С се обработва с трифлуорооцетна киселина ( 0.15 мл ).След 2 часасместа се обработва с вода.Органичната фаза се изпарява и остатъкът серазтваря в етанол ( 15 мл ) и ΙΝ-на солна киселина ( 1.5 мл ) и се разбърква при О°С

в продължение на още 2 часа.Разтворителят се отстранява и остатъкът се пречиства при използване на дихлорометан:метанол 20:1 като елуент.Подходящите фракции се изпаряват до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 24 мг ), δ(^ΧΗ, CDC1₃): 9.75 (s, 1Н, СНО), 6.08 (dd, 1H, H-2, J=1.2 and

3.3 Hz), 5.20 and 5.10 (s, s, 1H, 1H, CH₂=C), 4.82 (d, 1H, H-l, Ji=2.1 Hz), 4.42 (m, 2H, H-5' and H-3’), 4.19 and 3.56 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH₂, J=9.6 Hz), 3.65 (m, 1H, H-2'), 2.63 (t, 1H, H-l, J=

3.9 Hz), 2.36 (m 1H, CH(CH₃)₂); §(¹³C, CDC1₃): 204.7 (CHO), 175.0 (C0₂H), 148.5 (C-3), 145.6 (C-4'), 130.5 (C-2), 112.1 (CH₂=C),

99.5 (C-l'), 74.0 (8a-CH₂), 73.0 (C-5'), 72.8 (C-За), 72.2 and

71.6 (C-2' and C-3').

ПРИМЕР 64 /1R- (lc/ ,3aB ,4β ,4aB ,7β ,7a<X,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-4-Отрет.бутилкарбонил-б-деокси-β -D - талопиранозилокси ) метил /

-4-формил -4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил )-1,4-метанот s-индацен -За (1Н)-карбоксилова киселина

Смес от междинния продукт 103 ( 0.1 ммола ) и во• · * ·

-206да ( 2 мл ) при О°С се обработва с трифлуорооцетна киселина ( 3 мл ).След 90 мин.сместа се излива в етилов етер: вода 1:1 ( 30 мл ).Органичната фаза се изпарява и остатъкът се пречиства чги-у чрез хроматография при използване на дихлорометан : метанол 40:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието съединение ( 32 мл ).

3(¹Н, CDC1₃): 9.77 (s, 1Н, СНО), 6.08 (dd , 1H, H-2, J=1.S and

3,6 Hz), 4.75 (dd, 1H, H-4', J=3.6 and 4.8 Hz), 4.68 (s, 1H, H-l'), 4.17 (d, 1H, 8a-CHa, J=9.3 Hz), 3.66 (m, 2H, 8a-CHb and H-5'), 3.57 Ct, 1H, H-3', J=4.2Hz), 3.17 (d, 1H, H-2’, J=3.6 Hz), 2.73 (t, 1H, H-l, J=3.9 Hz), 2.33 (m, 1H, CH(CH₃)₂); $(¹³C, CDC1₃):

204.8 (CHO), 178.5 and 175.7 (2xCO₂), 148.3 (C-3), 130.8 (C-2),

97.9 CC-1'), 74.1 (8a-CH₂), 73.0 (C-За), 71.5 (C-5'), 66.0 (C4'), 65.6 (C-8a), 59.0 (C-4) , 51.3 (C-2'), 50.7 (C-3').

ПРИМЕР 65 /1 R-(lcZ,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7ao(,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-4-О(транс-2-бутенил )-6-деокси-В -D -манопиранозилокси)метил/-4формил-4,4a,5,6,7,7a,8;8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-

1,4-метано- 5-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 47 ( 103 мг ) в сух дихлорометан ( 5 мл ) при О°С се обработва с трифлуорооцетна киселина ( 100 μη ).След 1 часа,сместа се разпределя между етил ацетат ( 50 мл ) и наситен воден разтвор на натриев сулфат ( 50 мл ).Органичният слой се промива с наситен воден разтвор на натриев сулфат , с вода и с наситен воден разтвор на натриев хлорид след което се суши и се изпарява.Остатъкът се хроматографира двукратно върху силикагел при елуиране с хексан: етил ацетат (2: 1 ) до ( 1:1) до получаването на посоченото в наименованието съединение ( 50 мг ).

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · · · · ·· · ···· · ·· · · · ♦ ··· ····· ·· · ·· ··

-207 δ (¹Η, CDC1₃): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J=1.5 and

3.6 Hz), 5.82-5.68 (m, 1H, CH=CH), 5.62-5.48 (m, 1H, CH=CH), 4.72 (s, 1H, H-l'), 4.2-4.1 (m, 2H, O-CHa-C=C and 8a-CHa), 4.02- 3.92 (m, 1H, OCHb-C=C), 3.63 (d, 1H, 8a-CHb, J=9.3 Hz), 3.3-3.15 (m, 3H, H-3', H-4' and H-5'), 3.12 (d, lH,H-2^f, J=3.9Hz), 2.73 (t, 1H, H-l, J)3.9 Hz), 1.72 (dd, 3H, H3C-C=C, J=1.2 and 6.6 Hz); S (¹³C, CDC13): 204.8 (CHO), 175.6 (C0₂H), 148.2 (C-3) , 130.8 (C-2),

131.1 and 126.6 (0-CH₂-C=C-CH₃), 97.9 (C-l'), 74.2 (8a-CH₂), 71.2 (0-CH₂-C=C-CH₃), 73.5 and 72.5 (C-4' and C-5').

ПРИМЕР 66

/1R-(lot , За β , 4 β , 4a β , 7 β , 7a<Z , 8a β ) / 8a-/( 2 , З-Анхидро-6деокси-4-0;пропил- β- D-талопиранозилокси ) метил/-4-формил4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3 - (1-метилетил)-1,4-метано- s- индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 104 ( 150 мг,

0.21 ммола ) в етанол ( 50 мл ),етил ацетат ( 10 мл ) и 1 М-на солна киселина ( 1 мл,се прибавя в азотна атмосфера паладий ( 10 %-ен ) /въглен ( 30 мг ).Сместа се разклаща на апарата на Пар ( налягане на водорода 35 пси ) в продължение на три и половина часа при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез хроматография при използване на дихлорометан :метанол 30:1 като елуент

до получаването на

посоченото в наименованието,съединение (60

мг ) .

S С1Н, CDCI3): 9.83	( S,1H, CHO ), 6.06 ( dd, 1H, H-2, J= 1.2
and 3.6 Hz ), 4.75	( s, 1H, H-l' ),4.44 ^nd 3.42 ( dd, 2H, 8a-

СН_? ,

J= 9.3 Hz ),4.37 ( t, 1Н,Н-3', J= 2.7 Hz ), 4,10 ( m,lH, • · ··· · · · ··· • · · · · · · · · ···· • · ··· t · · · · · · · • · ···· ··· ····· ·· · · · · ·

-208H-4' ), 3.74-3.65 ( m, 1H, H-5' ), 3.19 ( m,lH, H-2' ), 2.51 Ct, 1H,H-1, J= 3.6 Hz ); δ (¹³C, CDCI₃ ): 204.7 ( CHO ),174.9 ( CO₂H ), 148.6 ( C- 3 ), 130.4( C-2 ), 97.9 ( C-l' ), 78.7 ( C4' ), 73.9( 8a-CH₂), 73.3 (CH₂O ), 69.8 ( C- 5'),69.3 ( C-3'),

65.3 ( C-8a ), 59.0(C-4),47.0 ( C-l ).

ПРИМЕР 67 /1 R-(l<<,3a β,4β ,4aB ,7 B,7ac<,8aB )/ 8a- (2,З-Анхидро-4-азидо-4,6-дидеокси-β -D -манопиранозилокси) метил-4-формил-4,4a,5,

6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 106 ( 0.06 ммола) в сух дихлорометан ( 5 мл ) при О°С се обработва с трифлуорооцетна киселина ( 70 |ал) . След 2 часа,сместа се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид.Разтворителят се изпарява и остатъкът се пречиства чрез хроматография при използване на дихлорометан : метанол 30:1 като елуент до получаването на посоченото в наименованието,съединение ( 12 мг ).

(^{1 * * * * * * 8 9}Н, CDCI₃) : 9.73 ( s, 1Н,СНО ), 6109 (d, 1Н,Н-2, J= 3'.6 Hz ),4.73 ( s, 1Н,Н-1'), 4.12 and 3.67 ( d,d, ΙΗ,ΙΗ, 8а-СН₂, J=

Hz ), 3.39 ( d, 1Н,Н-4' Jy 9Hz ), 333 and 3.17 ( d,d, ΙΗ,ΙΗ, H-2’, J=3.6 Hz ), 3.22(m,lH,H-5'), 2.76 ( t, 1H,H-1, J= 3.6 Hz ),2.34 ( m, 1H,CH(CH₃)₂); (¹³C,CDCI₃): 205.1 ( CHO ),175.3 ( CO₂H ), 148.4 ( C-3 ), 130,8 ( C-2 ), 97.8 ( C-l' ), 74.6 (8aCH₂) , 72.7 ( C-5' ),68.0 (C-За ), 65.7 (C -8a ),59.0 (C-4 ),

58.7 ( C-4' ), 54.4 ( C-2 ' ), 50.1 ( C-3'), 46.3 ( C-l ).

ПРИМЕР 68 /1R- (1 c< , 3a β ,4β ,4a β, 7 β ,7ao(,8aB )/ 8а-/(4-0-Алил, 2,3-анхидро,6-деокси-β - 0-манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,

-209

5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метаноs -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Разтвор на междинния продукт 107 ( 250 мг ) в смес от 10 мл метилен хлорид ш 0.2 мл трифлуорооцетна киселина при 0° С се разбърква в продължение на 4 часа.Суровата смес се изпарява до сухо и остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография с метилен хлорид гметанол 50:1, до получаването на посоченото в наименованието , съединение ,под формата на бяла пяна.

δ(¹Η, CDCI₃): 9.77( s,lH, СНО ), 6.08 (dd,lH,H-p2, J= 1.2 and

3,3 Hz),5.90( m, 1H, CH=CH₂ ), 5.28 ( m, 2H,CH=CH₂ ), 4.75 ( s, 1H, H-l' ), 4.28 ( m, 1H, H-5' ),4.21 ( d, 1H, H-19a, J= 9.6 Hz ), 4.05 ( m, 1H, H-4' ), 3.60 ( d,lH, H-19b ,J= 96 Hz ), 3.27 (d,d, 1H,1H, H-2', H-3', J= 3.9 Hz ), 3.25 ( m, 2H, CH₂-CH=CH₂), 2.68 ( t, 1H, H-ll, J= 4.2 Hz ), 3 (¹³C, CDCI₃): 205.07 ( CHO ),

174.6 ( CO₂H ), 148.4 ( C-13 ), 133.7( CH=CH₂ ), 129.7 (C-12 ), 118.0 ( CH₂=CH ), 97.8 ( C-l' ), 74.17 ( C- 19 ), 74.04 (C-4'), 72.5 ( C-5’ ), 71.0 ( O-CH ₂-CH=CH₂), 54.1 ( C-2' ), 50.2 ( C-3'),

27.5 ( C-14 ), 22.7 ( C-20 ), 21.2( C-15 ), 18.6 ( C-6’ ), 17.4 ( C-17 ).

ПРИМЕР 69 /1R-(1<X ,3a B,4 8,4a β,7 B,7aoC,8a β)/ 8a-/( 2,3-Анхидро-6-деокси,4-0-трет.бутоксикарбонилметил - s-D -манопиранозил) оксиметил/ -4 -формил-4,4a,5,6,7,7a,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано- _s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 21 (200 мг ) в мл сух тетрахидрофуран при 0°С се прибавят 30 мг натриев хидрид. Сместа се разбърква при 0°С в азотна атмосфера в продължение на мин. След това към сместа се прибавят 260 ьлл трет. бутил-бромо-

-210-

ацетати сместа след това се разбърква при стайна температура в азотна атмосфера в продължение на 3 дни.Суровият продукт се обработва с амониев хлорид 1 Ь1-ен и с етил ацетат.Органичният слой се промива с вода и с воден разтвор на натриев хлорид и се изпарява до сухо.Остатъкът се хидрогенира съгласно стандартна методика и суровият продукт се пречиства чрез мигновена хроматография с метилен хлорид : метанол , 50:1, до получаването на 140 мг от посоченото в наименованието,съединение,под формата на бяла пяна.

(¹Н, CDCI₃): 9.74 ( s, 1Н, СНО ), 6.08 ( dd,lH,H-12, J=1.5 and 3.9 Hz ),4.74 ( S,1H, H-l'), 4.21 ( dd, lH,H-4’ ,J=3.6 and 6.0 Hz ), 4.16 ( d,lH,H-19a, J= 9 Hz )4-12( s, 2H, CH₂-CO₂C(CHj)₃)

3.63 ( d, 1H, H-19b, J= 9 Hz ), 3.36, 3.14 ( d, d, 1H,1H, H-2', H-3', J= 3.9 Hz ), 3.30 ( m, 1H, H-5' ), 2.71 ( t, 1H, H-ll, J=3.9 Hz ), (¹³C, CDCI₃ ): 205.7 ( CHO ), 174.9 ( CO₂C-

(СН3)з)	1 , 168.8 (	CO	2Н ), 148	•4 (	С-	13 )	, 130.8 ( С-12	),	97.8
( С-1’	), 82.2 (	С	(сн3)3),	75.6	(	С-4'	), 72.4	( С-5'	)	, 68.2
( ОСН2	-CO ), 59.	.0	( с-з ),	53.9	(	С-2 '	), 50.3	( С-З'	)	, 27.5

( C-14 ), 22.7 ( C -20 ), 21.2 (C-15),18.6(C-6')17.4(C-17 ).

ПРИМЕР 70 /lR-(lo< ,3a β , 4β ,4a β , 7β ,7ac< ,8aB )/ 8а-/( 2,3-Анхидро - 6деокси-4-0-етил- β- D-манопиранозилокси )метил /-4,4а,5,6,7,

7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 21 ( 290 мг ) в сух диметилформамид при О°С,в азотна атмосфера, се прибавят 25 мг натриев хидрид.Сместа се разбърква в продължение на 30 мин. при 0°С и след това се прибамя 1 ммол етил йодид.След 16 часово разбъркване при стайна температура реакцията е приключила . Суровият продукт се обработва с 1 N-ен амониев хлорид • · • · · · • ·

-211и с етил ацетат.Органичният слой се промива с вода и воден разтвор на натриев хлорид ,суши се над безводен магнезиев сулфат и се изпарява до сухо.Остатъкът се хидрогенира следвайки стан дартна методика и суровият продукт се пречиства чрез мигновена хроматография с метилен хлорид : метанол ,50:1, до получаването на 180 мг от посоченото в наименованието,съединение,под формата на бяла пяна.

δ (¹Н, CDC1₃): 9.73 (s, 1Н, СНО) , 6.08 (d, 1Н, H-12,J=3.3 Hz),

4.73 (s , 1Н, H-l'), 4.16 (d, 1H, H-19a, J=9.3 Hz), 3.78, 3.54 (m, m, 1H, 1H, 0-CH₂-CH₃), 3.63 (s, 1H, H-19b, J=9.3 Hz), 3.25, 3.13 (d, d, 1H, 1H, H-2', H-3', J = 3.9 Hz), 3.19 (m, 2H, H-4', H-5'), 2.71 Ct, 1H, H-ll, J=3.3 Hz), ί(¹³C, CDC1₃) : 201.8 (CHO), 175.0 (C0₂H), 148.2 (C-13), 130.7 (C-12), 97.9 (C-l'), 74.6 (C-4'),

74.3 (C-19 ), 72.5 (C-5'), 54.3 (C-2'), 50.3 (C-3'), 27.5 (C-14 ),

22.7 (C-20), 21.2 (C-15), 18,6 (C-6‘), 17.4 (C-17).

ПРИМЕР 71 /1R- (lc< ,3a β ,4B ,4aB ,7β ,7a ,8aβ )/ 8a-/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0-( 2,3-дихидроксипропил )-β -D -манопиранозил)оксиметил /-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-Б -индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 108 ( 700 мг ) в етанол ( 100 мл ) се прибавя паладий ( 10 %-ен )/въглен (350 мг ) в азотна атмосфера.Сместа се разклаща на апарат на Пар (налягане на водорода 20 пси ) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се филтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства върху колона със силика гел при елиране с метилен хлорид и метилен хлорид :метанол 25:

-2121 до получаването на 425 мг от посоченото в наименованието съединение (смес от изомери 50:50 ) ,под формата на бял прах.

i (¹Н, CDC1₃): 9.75 (s, 1Н, СНО), 6.08 (d, 1Н, H-12, J=3.3 Hz),

4.73 (d, 1H, H-l', J=1.5 Hz), 4.18 (d, 1H, H-19b, J=9 Hz), 3.62 (d, 1H, H-19b, J-9 Hz), 3.48 and 3.47 (s, s, ЗН, 3H, CH₂0Me, CHOMe), 3.36- 3.20 (m, 4H, H-2', H-3', H-4', H-5'), 2.70 (t,

1H, H-ll, J=3.6 Hz); £(¹³C, CDC1₃): 205.2 (CHO), 174.7 (C0₂H), 148.4 (C-ll), 130.7 (C-12), 97.9 (C-l'), 79.0 (CHOMe in C-4'), 75.6 and

75.7 (C-4#), 72.4 (C-5') , 71.6 and 71.5 (0CH₂-CH0Me in C-4'),

70.1 and 69.8 (-CH₂0Me in C-4'), 59.2, 57.9 and 57.8 (-CHOMe and -CH₂0Me in C-4'), 53.9 and 50.2 (C-2' and C-3'), 22.7 (C-20 ),

21.2 (C-15), 18.6 (C-6'), 17.4 (C-17).

ПРИМЕР 72 /1R- ( lp€,3aB ,4B ,4aB ,7B ,7 a<d ,8aB )/ 8a-/( 2,3-Анхидро-, 6деокси-4-0-( 2,3-диметоксипропил)-B -D -манопиранозил)оксиметил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил) -1,4-метано-s -индацен- За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор на междинния продукт 108 ( 350 мг ) в сух тетрахидрофуран ( 20 мл ) при О°С,в азотна атмосфера, се прибавя натриев хидрид ( 40 мг ) и сместа се разбърква в продължение на 30 мин.,след което се прибамя метил йодед (0.5 мл ) и реакционната смес се разбърква при стайна температура в продължение на два дни ,над азот.Суровият продукт се обработва с 1 Νен амониев хлорид и с етил ацетат.Органичният слой се промива свода и с воден разтвор на натриев хлорид и се изпарява до сухо.

Остатъкът се хидрогенира по стандартна методика без предварител но пречистване до получаването на посоченото в наименованието, съединение ( смес от изомери 50:50 ),под формата на бяла пяна (225 мг ).

♦ · · ·· · • ··· • · ···· ··· ·· ♦·· ·· · ·· ··

-213S(¹H, CDC1₃): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.08 (d, 1H, H-12, J/)3.3 Hz),

4.73 (d, 1H,H-1', J=1.5 Hz), 4.18 (d, 1H , H-19b, J=9 Hz), 3.62 (d,

1H, H-19b, J=9 Hz), 3.48 and 3.47 (s, s, ЗН, 3H, CH₂0Me, CHOMe),

3.36-3.20(m, 4H, H-2’, Η-З',: H-4', H-5' ),2.70 ( t, 1H, H-ll, J= 3,6 Hz ), (¹³C,CDCI₃); 205,2 ( CHO ), 174.7 ( CO₂H ),

148,4 ( C-ll ), 130.7 / C-12 ), 97.9 ( C-l’ ), 79.0 ( CHOMe in

C-4' ), 75.6 and 75.7 ( C-4' ), 72,4 ( C-5' ), 71.6 and 71.5 ( OCH₂-CHOMe in C-4' ),70.1 and 69.8 ( CH₂OMe in C-4' ), 59.2, '

57.9 and 57.8 ( -CHOMe and -CH₂OMe in C-4'), 53.9 and 50.2 ( C-2' and C+3' ), 22,7 ( C-20 ), 21.2 ( C-15 ), 18.6 ( C-6' ) ,17.4 ( C-17 ).

ПРИМЕР 73 /1R-(1i/ ,3a β,4 B,4a β ,7 в,7а<Х,8ав )/- 8a -/( 2,З-Анхидро-6деокси-4-0‘-/( 2, 3 - 0-изопропилиден)-2, 3-дихидроксипропил/-β - ρманопиранозил)оксиметил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро7-метил-3-(1-метилетил)-1,4τ s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина

Към разтвор в етил ацетат ( 50 мл ) в ( 10 %-ен ) /въглен ( 100 на междинния продукт 109 ( 250 мг) азотна атмосфера се прибавя паладий мг ).Сместа се разклаща в апарата на

Пар (налягане на водорода пси ) в продължение на 1 час при стайна температура.Катализаторът се отфилтрува и разтворителят се изпарява до сухо.Остатъкът се пречиства чрез мигновена хроматография с н-хексан:етил ацетат 1:1 и с метилен хлорид : метанол 50:1 до получаване на посоченото в наименованието,съединение ( смес от изомери 50:50 ),под формата на бяла пяна ( 150 мг ).

(¹Н, CDCI₃): 9.75 ( s,lH, CHO ), 6.08 ( dd,lH,H-12, J=1.5 and 3.6 Hz ), 4.71( d, 1H, H-l', J= 0.9 Hz ), 4.29 -4.24 ( m, • ·

1Н, CHOH in 4’ ), 4.15-4.01 ( m,3H, H-19a and -OCH₂ ), 3.823.49 ( m,4H, H-19b, OCH₂-CHOH-CH₂O ), 3.29 and 3.13 ( d,d,lH

H-2' and H-3' Hz ), 3.27-3.18 ( m,2H, H-4' and H-5' ), 2.74 (t,

1H, H-ll, J=3.6 Hz ), 1.41 and 1,35 ( d, d, 3H,3H, (CH₃)₂C of isopropilyden ): (¹³C, CDCIj); 204.8 ( CHO ), 165.7 (

CO₂H ), 148.2 ( C-ll ), 130.8 ( C-12 ), 97,9 ( C-l' ), 75.7 and

75.6 ( -CHO-CH₂O in C-4' ), 74.4 ( C-4'), 72.8 and 72.4 ( C-5' ), 72.0 and 71.6 ( 0-CH₂-0 in C-4' ), 54.0 and 53.8 ( C-3' ),

50.3 ( C-2' ), 22.6 ( C-20 ), 21.1 ( C-15 ), 18.6 ( C-6' ),

17.4 ( C-17 ) .

ПРИМЕР 74

Характеристики на IMI 362184

IMI 362184 е мутант на Sordaria araneosa (ATCC 36386, NRRL 3196),изолиран при следване на JN-метилN -нитро-N-нитрозогуанидиновата мутагенеза на аскоспори от този вид.Характеристиките на IMI 362184 са по същество подобни

на онези,описано в ВРА № 1,162,027 за NRRL 3196,с изключение на това ,че IMI 362184 продуцира 4 -деметилсордарин като основен продукт при същите условия,използвани за продуцирането на сордарина от NRRL 3196.

ПРИМЕР 75

Характеристики на IMI 362947

IMI 362947 е мутант на Sordaria araneosa (ATCC 36386, NRRL 3196) ,изолиран като се следва N-метил-И нитро-N-нитрозогуанидиновата мутагенеза на аскоспори от този вид.Характеристиките на IMI 362947 са по същество подобни на онези,описани в ВРА № 1,162,027 за NRRL 3196, с изключение на това,че IMI 362947 не продуцира аскоспори лесно върху агар.

Видът също се отличава от IMI 362947 в това,че продуцира сорда• ·

• ·

-215-

рицин като основен продукт при същите условия,използвани за продукцията на сордарин от NRRL 3196.

ПРИМЕР 76

Характеристики на NCIMB 40675

NCIMB 40675 е аеробна,Грам-позитивнанеподвижна неправилна пръчица,която продуцира лимонено жълти,полупрозрачни,кръгли,изпъкнали колонии с диаметър между 0.5-1 мм,когато расте върху триптик соя агар,допълнен с 2¾ (VV/V) дрожден екстракт в продължение на 48 часа при 28°С.Организмът расте добри при температури до 37°С,но не и при 45°С.Метахроматични гранули не се забелязват и видът е каталаза позитивен,оксидаза негативен и не метаболизира глюкозата ферментативно.Видът може да използва следните източници на въглерод: - D-глюкоза, р-фруктоза, р-хидроксифенил-оцетна киселина, D-манитол,метилпируват,лактамид, -трехалоза и захароза.Организмът може само слабо да използва

-глюконовата киселина,пирогроздената киселина и салицин,като самостоятелни източници на въглерод.Колонийната и микроскопска морфология наподобява тези на коринеформ бактериите.Родът

Corynebacterium е изключен на основа на факта,че пептидогликанът на NCIMB 40675 съдържа по-скоро омитин,отколкото мезоизомерът на 2,6-диаминопимелиновата киселина или диаминомаслената киселина.Също,организмът съдържа комплексна смес от мастни киселини със странични вериги,които са нетипични за Согупе bacterium видовете, по-точно 12-метилтетрадекановата,14-метилхексадекановата и 14-метилпентадекановата киселини.Наличието на /.-разклонени- β -хидроксилирани мастни киселини наподобява един от следните актинобактериални родове: Aureobacterium, Curtobacterium or Cellulomonas.

За да се изясни таксономичната позиция на I-ICIMB 40675 , частична последователност с 1100 базови двойки на 16 S rRNA гена се • · • · срещу 24 други вида,представители на актинобактериите и свързаните с тях видове.Резултатите от този анализ показват тясна връзка между NCIMB 40675 и родовете Aureobacterium and

Curtobacterium но не и с Cellulomonas or Corynebacterium'no-точна индикация за вида може да се получи чрез осъществяване на филогенетичен анализ,сравняващ различни области на

S rRNA гена за областта на видовете Aureobacterium and

Curtobacterium в допълнение на понататъшните хемотаксономични и физиологични тестове.

ФАРМАЦЕВТИЧНИ ПРИМЕРИ

1. Обичайна таблетка за прием през устата

Лекарствено вещество 100 мг Микрокристална целулоза 160 мг Натриева кроскармелоза 20 мг Магнезиев стеарат 5 мг

Лекарственото вещество се смесва с микрокристалната целулоза, натриевата кроскармелоза и магнезиевия стеарат и след това се компримира в таблетки.

2. Таблетка за дъвчене

Лекарствено вещество	100	мг
Ксилитол	865	мг
Ментова есенция	5	мг
Аспартам	10	мг
Поливинилпиролидон	15	мг
Магнезиев стеарат	5	мг

Лекарственото вещество,ксилитола,аспартама и поливинилпиролидо на се смесват заедно и се гранулират с вода,след което се сушат.

Тези гранули се смесват с ароматизиращата есенция и магнезиевия стеарат и след това се компримират в таблетки.

·· ···· ·· ···· ·· ·· ··· ·· · ··· • ···· · · · · ···· • · ♦ · · ·· · ···· ·· · · · · · · ····· · · · ·· ··

-217-

3. Воден разтвор за приемане през устата

Лекарствено вещество	100	мг
Хидроксипропилметил целулоза	150	мг
Натриев пропилхидроксибензоат	1	мг
Натриев метилхидроксибензоат	2	мг
Портокалова есенция	10	мг
Захарин натрий	5	мг
Захар	800	мг
Подходящи буфери
Пречистена вода до	5	мл

Лекарственото вещество и останалите ексципиенти се разтварят в по-голямата част от пречистената вода и се смесват. Допълва се вода до определения обем и се смесва.За контролиране на pH на разтвора в областта на най-голямата устойчивост, може да се прибавят подходящи буфери.

4. Неводна суспензия за приемане през устата

Лекарствено вещество	100	мг
Аспартам	50	мг
Грейпфрутова есенция	25	мг
Манитол	800	мг
Колоидален силициев диоксид	10	мг
Фракционирано кокосово масло	5	мл

В по-голямата част от фракционираното кокосово мас.ло се диспергират лекарственото вещество и манитола при смесване с висока скорост.Прибавят се останалите инградиенти и се смесват.Обемът се допълва до определеното количество с фракционирано кокосово масло и се размесва.

5. Мехлем

200 мг

Лекарствено вещество

Мек бял парафин

9800 мг

Мекият бял парафин се стопява,прибавя се лекарственото вещество и се смесва.Смесването продължава докато мех лема почне да се втвърдява.

Инжекция
Лекарствено вещество	40 мг
Подходящи	буфери	qs
Подходящи	антиокислители	qs
Подходящи	желиращи средства	qs
Вода за инжекции до	2 мл

В по-голямата част от водата за инжекции се разтваря лекарственото вещество.За контролиране на pH в областта на най-голямата устойчивост,може да се прибавят подходящи буфериращи средства.За подобряване на стабилността на инжекцията може да се добавят подходящи антиокисляващи и хелатиращи средства.Обемът се допълва до марката с вода за инжекции.Пълни се в ампули или стъкла,след това се стерилизира чрез обработка в автоклав.Съответно,може да се стерилизира посредством фил

труване и асептично пълнене.

ПРОТИВОГЪБИЧНА АКТИВНОСТ

Съединението с формула (I) се изследват за противогъбична активност по стандартната in vitro методика и за всяко съединение се определя минималната инхибираща концентрация ( MICP μ г/мл ) срещу различни,клинично установени патогени

Съединенията,съгласно изобретението,са по същество нетоксични в използваните терапевтични дози.Например съединението от пример 8,когато се дава през устата в доза 50 мг/кг на мъжки мишки,инфектирани с С. albicans 4711Е,проявява активна защита. LD на съединението от пример 8,при мъжки мишки е по-голяма от 1000 мг/кг,през устата.

МИНИМАЛНИ ИНХИБИРАЩИ КОНЦЕНТРАЦИИ/MIC/ в нг/мл.ПРИМЕР

	o	o	CM	o	·· · co	• ·	• · Ο	• o	•' co
co	o	40	o	Ki	Ln	Ln	ο	o	o
40	o	o	o	CO	CM	r-4	•	•	•
	•	•	•	•	•	O	ι—Ι	1—1	1—4
	o	o	o	o	o	•	Ю
						co
	Ln	i—l	00	CM	Ln		ο	o	CO
Οϊ	t—<	o	o	o	r-4	m	ο	o	o
LQ	o	o	o	o	CO	1—4	•	•	•
	•	•	•	•	•	O	ο	40	1—4
	o	o	O	co	o		1—4	ί-1
	ί—1	ί—1	τ—4	r-4	1—1		co	CO	O
	CO	o	co	o	co	1—1	ο	O	o
LO	Q	o	co	o	co	o	•	•	•
	•	•	•	•	•	•	οο	OO	CM
	o	co	o	o	co	o
		ι-Ч	00	’'d-	o	ί—4	ο	o	o
CM	o	O	o	o	tn	O	ο	o	co
LO	o	O	o	o	co	O	•	•	•
	•	•	•	•	•	•	00	oo	ί—4
	o	o	o	co	o	o
r—|	o	o	o	o	o	oo	ο	co	Ln
LD	CM	tn	CM	CM	o	o	co	co	CM
	rH	co	τΉ	i—l	Ln	o	•	•	1—4
	•	•	•	•	•	•	Ο
	o	o	o	o	o	o	ι—Ι	rH
	1—1	1—1	1—(	i—l	o	r-1	co	o	o
Ш	o	o	o	O	o	O	ο	o	o
	o	o	o	O	Ln	O	•	•	•
	•	•	•	•	•	•			CM
	o	o	o	o	co	o
	o	1—1	o	o	o	o	ο	o	o
	Ю	o	o	tn	co	Ю	ο	o	Ln
to	o	o	o	o	un	co	•	•	CM
	•	•	•	•	•	•		40	•
	o	o	o	o	o	o			o
	1—1	i—4	i—l	r—1	o	ί—1	ο	co	o
	o	co	o	CO	Ln	o	ο	co	Ln
	o	o	co	o	r-4	o	co	o	CM
Ю	•	•	•	•	•	•	•	•	•
	o	o	o	o	o	o	ι—Ι	r*“4	o
	Г—(	1—1	i—l	i—l	oo		ο	O	o
	co	o	o	O	o	co	ο	CO	Ln
o	o	o	o	O	o	o	Ln	Ln	CM
CM	«	•	•	•	•	•	•	•	•
	o	o	o	o	co	o	ο	o	o
	ί—1	rH	t—1	ί—1	00	i—l	ο	co	o
	O	O	o	o	o	o	ο	o	o
Ю	CO	O	o	co	co	o	•	♦	•
гЧ	•	•	•	•	•	•	00	00	ί—1
	o	co	o	o	co	o
	.-5 « o	Ln	co	o	co	co	ο	o	CO
	tn	ι-Ч		m	co	Ό	ο	o	CO
	o	o	o	o	•	o	•	•	•
τ—1	•	•	•	«	O	•	οο	40	i—l
	o	o	co	o	rH	co		i—l	tn
	LQ	oo	Ln	Ln	CO	00	ο	o	co
tn	i—l	co	ί—1	r-4	04	o	ο	o	co
i—l	CO	o	o	CO	ί—1	o	•	•	Ln
	•	•	•	•	•	•	00	00	•
	o	o	co	o	CO	o			o
	00	1—1	00	*=d-	o	’d-	ο	o	o
	o	o	o	co	CM	o	co	o	co
	o	o	co	o	1—1	o	•	•	•
	•	•	•	•	•	•	ί—1	ί—1	oo
	o	o	co	co	o	o	tn	tn
	o	o	o	co	o	o	ο	o	LQ
i—4	o	CM	o	Ln	o	40	ο	co	CM
	LO	i—l	Ln	CM	o	o	•	•	r—4
	•	•	•	«	•	•	ί—1	i—l
	o	o	o	o	ί—1	o	tn	tn
	Й				OO	1
	00	w	w		O JX	cd	W	Щ
		Ln	CM	1—1	00	υ	Ln	40
		o	o	i—l	CM	r-l
	i—l	o		Γ-.	(Л	Λ	ю	tn	V)
*>*	(Л	CM	CM		•H	ο	CM	CM	pi w
jjQ	£	V)	ω	ω	i—4	н	cd	cd
co	cd	Pi	Pi	Pl	cd	Ρ Щ	4->	+->	g 40
X		cd	cd	cd	υ	Ο I	cd	cd	μ oo
X		υ	υ	υ	•H	0 t'*	P	P	O гм
<	r-Q	•H	•H	•H	Pu	0) tn	3P	x>	4-1
		x>	x>		o	3 СЧ	cd	cd	o
Ph		f—4	r—4	r—4	μ	ω	r—4	i—4
o		cd	cd	cd	4->	•Ρ is	bo	bO
		u	CJ	o	u	—) j—4	u	U	u

Claims (16)

1. Съединение със следната формула:

(I) в която 7. означава тетрахидропирано група,избрана измежду

Л<¹⁷ (б) и техните фармацевтично -приемливи соли и солвати ( напр. хидрати) или метаболитно неустойчивите им производни, където К^Х означава водород,халоген,хидроксил, С^ ₄ алкокси или ацилокси група;

• · * · · · • · •· · •· · ··· ·

-223

R и R могат независимо един от друг да означават водород, алкил или С^_₄ алкокси С^^алкил или R и R могат заедно с въглеродния атом,към който се прикрепени да образуват С=О,С =S , или C₃_g циклоалкилна група;

4 77

R означава водород или CH₂R ( където R означава водород,хид-

8 8 роксил, С^_₄алкокси или група с формулата : OCOR , в която R означава С^_₄алкил или арил );

R³ и R^ могат независимо един от друг да означават водород, алкил или С^_₄ алкоксиС^_₄алкил или R³ и R^ заедно с въглеродния атом,към който се прикрепени, могат да образуват С=0, С=5 или Cj_g циклоалкилна група п означава нула или 1;

X и У могат независимо един от друг да означават кислород, сяра

910 9 10 или групата CR R (където R и R могат независимо един от друг да означават водород,С^^алкил, С^_₄алкокси или С₁_₄алкок9 10 сиС^_₄алкил или R и R могат заедно с въглеродния атом,към който са прикрепени да образуват ОО, С=$ , C₃_g циклоалкил или групата C=CHrH , в която R¹¹ означава водород или С^_₄ алкил); или когато X или У означават кислород и п означава нула,тогава 2 3 2 3 съответно -У-CR R или -X-CR R могат също да означават -N =

CR³- или -Nr12_cr2r³~ ( където CR^ и R³ означават С=0 и R¹^

13 13 означава С^^алкил , ацилна група COR ,където R означава

С алкил ) или когато У означава кислород и п означава нула

X може да бъде представен с групата CR , която е прикрепена към пирановия пръстен с двойна връзка;

R означава водород, халоген,азидо група, С^^алкил, хидрокси,

Οχ ^алкокси ( по желание заместена с 1 или 2 хидроксилни или техни кетални групи или с 1 или 2 С|_₃алкокси групи ), арилС^^

18 18 алкокси, _^алкенилокси, група с формула OCOR ( където R ·· ···· ·· ···· • · • · • · ··

-3• ·· ··· •· •· •· •· ·· .· • · • · • · • · · ·· ·· • · · • · • · ·· означава арил С^^алкокси или С^ ^алкилна група,съдържаща по желание една или две двойни връзки ) или С^ θ 16 15 означава водород или R¹ и алкокси, и R алкокси карбонил-С^_₄

R^X^3aeflHo с въглеродния атом,към който са прикрепени могат да образуват С=0 или

С=СН₂ ;

„17

R означава

С^ _ .^алкокси група или група с формулата водород, хидроксил,

2Ω 2 0

OCOR , в която R означава С^_₄ алкил ); и

VV означава кислороден или серен атом или

СН^ група;

и пунктираната линия във формулата на грапа (а) означава наличие по желание, на допълнителна връзка.

2.Съединение,съгласно претенция 1, в което

Z означава формула:

група със следната където един от заместителите X или У означава кислород и другият означава кислород или групата

CR⁹R¹⁰

3.Съединение ,съгласно претенции 1 или 2, в което п означава нула.

4. Съединение,съгласно която и да е претенция от 1 до 3,където и двата заместителя X и У означават кислород

2 3 и R и R независимо един от друг означават водород или С^_₄ алкил.

5. Съединение,съгласно която и да е от претенции от 1 до 3, където един от двата заместителя X и У означава

9 10 кислород и другият означава групата CR R • ·

-4или

6.Съединение,съгласно претенция 5, където

9 10

R означава водород или С_р_₄алкил и R означава водород групата CR^R^ означава групата С=0 или C=CHrH.

дето X ции от начава

7.Съединение,съгласно означава кислород.

8.Съединение,съгласно

1 до 7,където К^Р означава водород метил.

9 . Съединение,съгласно претенция 5 или която и да е от или хидроксил и претенция 1,при

6, къпретенR⁴ озкоето в групата :

VV означава кислород.

10. /1R- (W , ЗаВ ,4 В ,4а В ,7 В ,7ас/ ,8а β )/ 8а-/( 1 s,7R ,9R )-2,8-Диокса-9-метил-4-метилен- цис-бицикло/3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)-1,4-метано- s-индацен-За (1Н)карбоксилова киселина и нейните фармацевтично-приемливи соли.

11. /1R-(1Λ. ,3а β ,4 β ,4ав , 7β ,7а</,8аВ )/-

8а-/( 2,6-дидеокси-З,4-О-изопропилиден- β- D-алопиранозилокси)метил /-4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано- _s-индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина;

/1R- (Ш,3а β ,4 В,4а β ,7 В,7а<Х,8аВ ) 8а-/( 1 S,4R,7R,9R)-

2,8-диокса-4,9-диметил-цис-бицикло /3.4.0/-нон-7-ил-окси-метил/4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-З-(1-метилетил)1,4-метано- s-индацен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/lR-(l.-/,3a β,4 В,4а β,7 В,7а^,8а β)/ 8а-/( 1 S,4 S,6R,8R)• · · ·

-5- 2,7-диокса-4,6-диметил-цис-бицикло/З.4.0/-нон-8-ил-οкси-метил/ -4-формил-4,4а,5,6,7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)1,4-метано-s -индацен-За (1Н)-карбоксилова киселина;

/ 1R- (1 d ,3а β ,4 β ,4а β ,7 β ,7 а У- ,8a β ) / 8a- / ( 2,3-анхидро-6-деокси-4-0-пропил- β -D -манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,

7,7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -инда цен-За(1Н)-карбоксилова киселина;

/ 1R- (1 d. ,3а β ,4 β ,4а β, 7 β , 7а оС , 8а β,)/ 8а-/( 2,3-анхидро - 6-деок- си-4-0-метил- β -D -манопиранозилокси)метил/-4-формил-4,4а,5,6,7,

7а,8,8а-октахидро-7-метил-3-(1-метилетил)-1,4-метано-s -индацен

-За (1Н)-карбоксилова киселина ;

и техните фармацевтично-приемливи соли.

12.Метод за получаване на съединения с форму- ла /I/,характеризиращ се с това,че включва :

(а) взаимодействие на съединение с формула(П):

СНО (II) ( в която R·*· и R^ имат посочените по-горе към формула (I),зна чения , R^p означава карбокси-затитна група и X и У имат посочените към формула (I) по-горе,значения, с изключение на това,че 9 10

X и /или У не могат да означават CR R ) до образуване на желаната циклична система,последвано от отстраняване на карбоксизащитната група.

(б)взаимодействие на съединението с формула (VII):

в която R означава групата СНО или нейно защитено производно,

R^p означава карбокси-защитна група, с диалкил диазометил фосфо- нат до получаване на съединения от формулата (I),в която 2- означава групата с формула (а) и У означава кислород,п означава

2 3 нула,R и R означават водород и X означава СН;

(в)циклизиране на съединение с формула (VIII):

(VIII) (в която R^X3a, R^X^^a и R^X?^a имат посочените за R^X3 , R^X^ и

R значения,към формула (I) по-горе, или означават техни защитени производни, RP означава водород или карбокси-защитна група, L означава подходяща отцепваща се група,такава като алкил2 2 2 2 или арилсулфонилокси група и R означава водород или OR означава същата група,както е посочено за L ),последвано ,ако е необходимо от отстраняването на наличните защитни групи,за получаване на,съединение от формулата (I), в която

7. означава група с формулата (б) и VV означава кислород;

(г)обработване на съединение с формула(IX):

(IX)

15 16 17 ( в която R¹ , R¹ и R¹ имат посочените по-горе към формула (I), значения със съединение,отдаващо сяра за получаване на съедине-

-8ние от формула (I), в която VV означава сяра;

последвани ,когато е необходимо или желателно от един или повече от следните етапи:

(!) отстраняване на каквато и да е защитна група;

(!!)превръщане на съединение от формула (I) или негово защитено производно в друго съединение от формула (I);

(!!!) изолиране на съединение с формула (I) под формата на негова фармацевтично-приемлива сол.

13.Използване на съединения,съгласно която и да е претенция от 1 до 11, за лечение.

14.Използване на съединение,съгласно която и да е от претенции от 1 до 11 за получаване на препарат за лечение на‘гъбични инфекции.

15.Фармацевтичен състав,характеризиращ се с това,че включва съединение,съгласно която и да е от претенции от 1 до 11, в смес с един или повече физиологично приемливи но сители или ексципиенти.

16. Метод за лечение на гъбични инфекции,ха- рактеризиращ се с това,че включва въвеждане на ефективно количество от съединение,съгласно която и да е от претенции от 1 до 11, на пациента.