MX2013000804A - Una composicion de combinacion farmaceutica y metodos para tratar la diabetes y los trastornos metabolicos. - Google Patents

Abstract

La presente solicitud proporciona una composición farmacéutica para la administración a un paciente que sufre de diabetes y otros trastornos metabólicos, la composición comprende a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo al receptor de la insulina humana, y b) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo para la sintasa de (NO) endotelial.

Description

UNA COMPOSICIÓN DE COMBINACIÓN FARMACÉUTICA Y MÉTODOS PARA TRATAR LA DIABETES Y LOS TRASTORNOS METABÓLICOS.

CAMPO La presente invención está relacionada al campo de la medicina y puede ser usada para el tratamiento y prevención de enfermedades de la diabetes y otros desórdenes metabólicos.

ANTECEDENTES La Diabetes Mellitus es una condición crónica caracterizada por hiperglucemia (altos niveles de azúcar en la sangre). El continuo incremento de niveles de glucosa en la sangre aumenta el riesgo de complicaciones relacionadas a la diabetes tales como daños al riñon, pérdida de la visión, enfermedades cardíacas y úlceras en los pies.

Hay dos grandes tipos de diabetes: Diabetes de Tipo 1 y Diabetes de Tipo 2. Con la Diabetes de Tipo 1 , la hiperglucemia se desarrolla porque los páncreas no pueden producir insulina. Este tipo de diabetes usualmente aparece en la infancia o adolescencia. En la diabetes de tipo 2, los páncreas son capaces de producir insulina, pero no puede cumplir adecuadamente con los requerimientos del cuerpo. El problema es que el cuerpo humano no responde a la insulina de manera apropiada, lo que se traduce en menos glucosa siendo absorbida por las células y resulta en elevados índices de niveles de glucosa en la sangre. Después de sobrecargar el páncreas por varios años, éste eventualmente falla y agota su habilidad para producir insulina, con lo que, a este punto, una persona con Diabetes de tipo 2 puede requerir terapia de insulina.

La insulina, una hormona natural producida por el páncreas, transporta glucosa desde el torrente sanguíneo hasta el interior de las células. De esta forma, el trabajo principal de la insulina es regularizar el transporte de glucosa hacia las células gracias a que disminuye el nivel de glucosa en la sangre.

El efecto de la insulina es controlada a través de la activación de un receptor heterotetramérico el cual es encontrado en la membrana del plasma. El receptor de insulina es una glicoproteína compuesta de dos subunidades-alfa extracelulares y dos i subunidades-beta de transmembranas unidas por puentes de disulfuro. (Ullrich et al., Nature, 313:756-61, 1985). Las subunidades-alfa contienen el dominio de unión de la insulina, y la porción intracelular de las subunidades-beta contiene la proteína tirosina quinasa regulada por la insulina (la enzima que cataliza la transferencia de un grupo de alta energía a partir de un donante (usualmente ATP) hacia un receptor).

Cuando una molécula de insulina es liberada por las células beta del páncreas y llega a una célula, la misma se une junto al receptor de insulina en la superficie de la mayoría de las células. Una vez la insulina se une, la función intrínseca fosfotransferasa de la insulina de las subunidades-beta del receptor es activada, dando como resultado un número de proteínas intracelulares en la fosforilación de la tirosina. Una vez el receptor de insulina ha sido activado, el evento de fosforilación conduce a incrementar el almacenamiento de glucosa y como consecuencia un descenso en los niveles de glucosa en la sangre.

Un control efectivo de niveles de glucosa es difícil de alcanzar por un período prolongado de tiempo incluso con el método más meticuloso de terapia de insulina en los pacientes con más motivación. Debido a esto hay una necesidad continua por nuevas drogas con deseos de eficacia terapéutica para el tratamiento de enfermedades y desórdenes metabólicos.

El Óxido Nítrico (NO) es una molécula gaseosa que ha sido demostrado actúa en la señalización de diferentes procesos biológicos. El derivado del endotelio de (NO) es una molécula clave en la regularización del tono vascular y su asociación con enfermedades vasculares ha sido reconocida desde hace mucho tiempo atrás. (NO) inhibe muchos procesos conocidos por estar envueltos en la formación de la placa aterosclerótica, incluyendo adhesión de monocitos, agregación de plaqueta y proliferación de células en el músculo liso. Otro rol importante del endotelio de (NO) es la protección de la pared vascular del estrés oxidativo inducido por sus propios productos metabólicos y por la oxidación de productos de lípidos y lipoproteínas. La disfunción endotelial ocurre en etapas muy tempranas de la aterosclerosis. De esta forma es posible que la deficiencia en la disponibilidad de (NO) a nivel local pueda ser comúnmente la vía final que acelera la aterogénesis en humanos. Además de su papel en el endotelio vascular, se ha sido demostrado que la disponibilidad de (NO) modula el metabolismo de las lipoproteínas. Una correlación negativa ha sido reportada entre las concentraciones de plasma de productos no metabólicos de (NO) y la plasma total, y el nivel de colesterol de Lipoproteínas de Baja Densidad (LBD) mientras las Lipoproteínas de Alta Densidad (LAD) incrementan la función vascular en pacientes hipercolesterolémicos. La pérdida de (NO) tiene efectos considerables en el desarrollo de la enfermedad. Diabetes Mellitus está asociada a altas tasas de mortalidad y mortalidad causada por un desarrollo acelerado de enfermedades ateroscleróticas. Además, reportes afirman que la diabetes disminuye las funciones pulmonares. Ha sido propuesto que la resistencia a la insulina conduce a una inflamación de las vías respiratorias. (Habib et al., Nitríc Oxide Measurement From Blood To Lungs, Is There A Link? Pak J Physiol 2007;3(1).) El Óxido Nítrico es sintetizado por el endotelio desde L-arginina por la Óxido Nítrico sintasa. Una sintasa de (NO) ocurre en diferentes isoformas, incluyendo una forma constitutiva (cNOS) y una forma inducible (¡NOS). La forma constitutiva está presente en las células endoteliales normales, neuronas y otras formas de tejido.

El efecto terapéutico de una forma extremadamente diluida (o ultra baja) de anticuerpos potenciados por tecnología homeopática ha sido descubierto por el inventor de la presente solicitud, Dr. Oleg I. Epshtein. La patente de EE.UU. de número 7.582.294 revela un medicamento para el tratamiento de Hiperplasia próstática benigna o la prostatitis por administración de una forma homeopáticamente activada de anticuerpos contra el antígeno 'prostético específico (APE). La patente de EE.UU. No. 7.700.096 describe una forma homeopática potenciada de anticuerpos frente a sintasa de (NO) endotelial. La forma homeopática potenciada de anticuerpos frente a sintasa de (NO) endotelial se comercializa en la Federación de Rusia y otros países bajo el nombre Impaza®.

SUMARIO Por un lado, éste invento provee una composición farmacéutica para la administración de un paciente que sufre de enfermedades de diabetes y otros desórdenes metabólicos. La composición comprende: a) una forma activa potenciada de un anticuerpo frente a sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención provee üna composición farmacéutica para la administración de un paciente que sufre de enfermedades de diabetes y otros desórdenes metabólicos. La composición comprende: a) una forma activa potenciada de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la composición farmacéutica de este aspecto de la invención comprende: a) una forma activa potenciada de un anticuerpo hacia el receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a sintasa de (NO) endotelial, donde el receptor de la molécula de insulina comprende al menos una subunidad alfa y al menos una subunidad beta.

En una variante, la composición farmacéutica de este aspecto de la invención incluye una forma activa potenciada de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina o la forma activa potenciada de un anticuerpo hacia el receptor humano de insulina en la forma de una mezcla de diluciones homeopáticas de C12, C30, y C200, impregnadas sobre un soporte sólido. La forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial en la forma de mezcla de diluciones homeopáticas de C12, C30, y C200, puede ser subsecuentemente impregnada sobre un portador sólido.

En otra variante, la composición farmacéutica de este aspecto de la invención incluye una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial en la forma de mezcla de diluciones homeopáticas de C12, C30, y C200 impregnadas sobre un portador sólido. La forma activa potenciada de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de una subunidad beta de un receptor humano de insulina o la forma activa potenciada de un anticuerpo al receptor humano de insulina en la forma de diluciones homeopáticas de C12, C30, y C200 subsecuentemente impregnadas sobre un portador sólido.

Preferiblemente, la forma activa potenciada de anticuerpos a un fragmento de C-terminal de la subunidad beta de un receptor de insulina humano o la forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un receptor humano de insulina es un anticuerpo monoclonal, policlonal o natural, pero sobre todo, un anticuerpo policlonal. En otra variante de este aspecto de la invención, la forma activa potenciada de un fragmento de C-terminal de la subunidad beta del receptor humano de insulina o la forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un receptor humano de insulina es preparada por sucesivas diluciones centesimales acopladas a través de una sacudida por cada dilución.

Preferiblemente, la forma activa potenciada de un anticuerpo a sintasa de (NO) endotelial es un anticuerpo monoclonal, policlonal o natural; mayormente, un anticuerpo policlonal. En una variante de este aspecto del invento, la forma activa de un anticuerpo a sintasa de (NO) endotelial es preparada por sucesivas diluciones centesimales acopladas a través de una sacudida por cada dilución.

En otro aspecto, la invención ofrece un método para el tratamiento de un paciente que sufre de Diabetes de Tipo 1. El método se basa en administrar al paciente una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención ofrece un método para tratar a un paciente que sufre de Diabetes de Tipo 2. El método se basa en administrar al paciente una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo a un receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención ofrece un método para tratar a un paciente que sufre de Diabetes de Tipo 2. El método se basa en administrar al paciente una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención provee un método para reducir los niveles de glucosa en un mamífero. El método consiste en administrar al mamífero una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo a un receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención provee un método para reducir los niveles de glucosa en un mamífero. El método consiste en administrar al mamífero una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención provee un método para tratar la resistencia a la insulina de un mamífero. El método consiste en administrar al mamífero una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo a un receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

Por otro lado, la invención provee un método para tratar la resistencia a la insulina de un mamífero. El método consiste en administrar al mamífero una combinación de a) una forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina, y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial.

En otra variante de este aspecto de la invención, se proporciona la administración de una o dos formas de dosis unitaria de la forma activa potenciada de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de una subunidad beta del receptor humano de insulina, y de una o dos formas de dosis de la forma activada potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endotelial; cada forma de dosis siendo administrada una vez al día a cuatro veces por día. Preferiblemente, la administración de una o dos formas de dosis de cada forma activa potenciada de anticuerpos debe ser administrada dos veces al día.

DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Figura 1 - Ilustra el efecto de preparaciones probadas en niveles de glucosa del plasma sanguíneo de ratas con estreptozotocina inducida de Diabetes Mellitus.

Figura 2 - Ilustra el efecto de preparaciones probadas en el día 14 de inyecciones en indicadores de área bajo la curva de tiempo-concentración (AUC) en la prueba de tolerancia a la glucosa en las ratas con estreptozotocina inducida de Diabetes Mellitus. 6 i Figura 3 - Ilustra el efecto de preparaciones probadas en niveles de glucosa del plasma sanguíneo de ratas con Diabetes Mellitus espontánea no dependiente a la insulina.

Figura 4 - Ilustra el efecto de preparaciones probadas en el día 28 de inyecciones en indicadores de área sobre la curva de concentración (AUC) en niveles de glucosa del plasma sanguíneo de ratas con Diabetes Mellitus espontánea.

Figura 5 - Ilustra las dinámicas de glucosa y los niveles de hemoglobina glicolada en pacientes con Diabetes Mellitus Tipo 1 contra el antecedente de tomar preparaciones de IR Ab + NOS Ab.

Figura 6 - Ilustra las dinámicas de glucosa y los niveles de hemoglobina glicolada en pacientes con Diabetes Mellitus Tipo 2 contra el antecedente de tomar preparaciones de IR Ab + NOS Ab.

DESCRIPCIÓN DETALLADA La invención se define con referencia a las afirmaciones. En relación a las quejas, el glosario que sigue provee las definiciones relevantes.

El término "anticuerpo" tal y como es usado acá se define como una inmunoglobulina que específicamente se une a, y por consiguiente es definido como complementario con, una particular organización espacial y polar de otra molécula. Los anticuerpos como reza en las afirmaciones pueden incluir una inmunoglobulina completa o fragmento de la misma, puede ser natural, policlonal o moniclonal, y puede incluir varios tipos e isotipos, tales como as IgA, IgD, IgE, lgG1 , lgG2a, lgG2b y lgG3, IgM, etc. Fragmentos de la misma puede incluir Fab, Fv y F(ab')2, Fab', y similares. El singular "anticuerpo" incluye el plural "anticuerpos".

El término "forma activa potenciada" o "forma potenciada" respectivamente, en relación a anticuerpos mencionados aquí se utiliza para designar un producto de la potenciación homeopática de cualquier solución inicial de anticuerpos. "Potenciación Homeopática" denota el uso de métodos de homeopatía para impartir potencia homeopática de una solución inicial de la sustancia en cuestión. Aunque no es tan limitado, "la potenciación homeopática" puede implicar, por ejemplo, repetidas diluciones consecutivas en combinación con un tratamiento externo, en particular (mecánico) agitación. En otras palabras, una solución inicial de los anticuerpos se somete a la dilución consecutivas repetidas y múltiples sacudidas verticales de cada solución obtenida de acuerdo a técnicas homeopáticas. La concentración preferida de la solución inicial de anticuerpos en el disolvente, preferiblemente agua o una mezcla de agua y alcohol etílico, oscila entre 0,5 a 5,0 mg / mi. El procedimiento preferido para la preparación de cada componente, por ejemplo una solución de anticuerpos, es el uso de la mezcla de tres diluciones acuosas o acuosas de alcohol de la solución de la matriz primaria (tintura madre) de anticuerpos diluidos 10.012, 10.030 y 100.200 veces, respectivamente, lo que equivale centesimal de las diluciones homeopáticas (C12, C30 y C200) o el uso de la mezcla de tres diluciones acuosas o acuosas de alcohol de la solución de la matriz primaria de anticuerpos diluidos 10012, 10030 y 10050 veces, respectivamente, lo que equivale a centesimal diluciones homeopáticas (C12, C30 y C50).Ejemplos de la potenciación homeopática se describen en la patente de EE.UU. Número 7.572.441 y 7.582.294, que se incorporan por referencia en su totalidad y para el propósito indicado Mientras que el término "forma activa potenciada" se utiliza en las afirmaciones, el término "dosis ultra-bajas" se usa en los ejemplos. El término "dosis ultra-bajas" se convirtió en un término técnico en el campo del arte creado por el estudio y uso de la forma homeopáticamente diluida y forma potenciada de la sustancia. El término "dosis ultra-baja" o "dosis ultra-bajas"" se entiende como un sinónimo del término "forma activa potenciada" utilizada en las afirmaciones.

En otras palabras, un anticuerpo es en la "activa potenciada" cuando tres factores están presentes. Primero, la forma "activa potenciada" del anticuerpo es un producto del proceso de preparado bien aceptado en el arte homeopática. Segundo, la forma "activa potenciada" de un anticuerpo debe tener una actividad biológica determinada por métodos bien aceptados en la farmacología moderna. Y tercero, la actividad biológica exhibida por el la forma "activa potenciada" del anticuerpo no puede ser explicada por la presencia de la forma molecular del anticuerpo en el producto final del proceso homeopático.

Por ejemplo, la forma activa potenciada de anticuerpos puede ser preparada tras someter una primera y aislada forma de molécula anticuerpo a consecutivas y múltiples diluciones acopladas con un impacto externo, por ejemplo una agitación mecánica El tratamiento externo en el curso de la reducción de concentración puede también ser logrado, por ejemplo, a través de la exposición a factores ultrasónicos, electromagnéticos, y otros factores físicos. V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967,patente de EE.UU. Número 7.229.648 y 4.311.897, las cuales están incorporadas por referencia en su totalidad y por el propósito establecido, describen dichos procesos que son métodos de potenciación homeopáticos bien aceptados en el arte de la homeopatía. Este procedimiento da lugar a una disminución de concentración molecular de la forma de molécula inicial del anticuerpo. Este procedimiento es repetido hasta que la potencio homeopática, es lograda. Para el anticuerpo individual, la potencia homeopática requerida puede ser determinada sometiendo la dilución intermedia a exámenes biológicos en el modelo farmacológico deseado. Aunque no es tan limitada, la "potenciación homeopática" puede incluir, por ejemplo, repetidas y consecutivas diluciones combinadas con tratamientos externos, particularmente (mecánica) agitación vertical. En otras palabras, una solución inicial de anticuerpos está sujeta a repetidas y consecutivas diluciones y múltiples agitaciones verticales de cada solución obtenida de acuerdo a la tecnología homeopática. La concentración ideal de la solución inicial de anticuerpo en el solvente, preferiblemente, agua o agua con una mezcla de alcohol etílico, va desde los 0.5 a los 5.0 mg/ml. El procedimiento ideal para preparar cada componente, por ejemplo una solución de anticuerpo, es el uso de mezclas de tres diluciones acuosas o diluciones acuosas del alcohol de la solución de la matriz primaria (tintura madre) de anticuerpos diluidos 10012, 10030 and 100200veces respectivamente, lo que equivale a una dilución homeopática centésima C12, C30 y C200 de la mezcla de tres diluciones acuosas o diluciones acuosas del alcohol de la solución de la matriz primaria (tintura madre) de anticuerpos diluidos 10012, 10030 and 10050veces respectivamente, lo que equivale a una dilución homeopática centésima C12, C30 y C50. Ejemplos de cómo obtener la potencia deseada son también ofrecidos, por ejemplo, en la patente de EE.UU. número 7.229.648 y 4.3 1.897, las cuales están incorporadas por referencia con el propósito declarado. El procedimiento aplicable a la forma "activada potenciada" de los anticuerpos descritos se describen con más detalles a continuación.

Hay existido una cantidad considerable de controversia en relación al tratamiento homeopático en seres humanos. Mientras la presente invención se basa en procesos homeopáticos aceptados para obtener la forma "activa potenciada" de anticuerpos, la misma no se basa solamente en homeopatía en seres humanos para evidencia de la actividad. Se ha descubierto sorpresivamente por el inventor de la presente solicitud y demostrado ampliamente demostrado en los modelos farmacológicos aceptados que el solvente en última instancia obtenido por múltiples diluciones de una forma de molécula inicial de un anticuerpo tiene actividad definitiva no relacionada con la presencia de rastros de formas moleculares de anticuerpos en la dilución destino. La forma "activa potenciada" del anticuerpo que acá se provee se pone a prueba para actividad biológica en modelos de actividad farmacológico aceptados, bien sea en experimentos in vitro apropiados, o en vivo en modelos de animales adecuados. Los experimentos que se proveen a continuación proveen evidencia de actividad biológica en dichos modelos. Los estudios clínicos humanos, también ofrecidos acá, son evidencia, entre otros, de que la actividad observada en los modelos animales se puede traducir perfectamente a la terapia humana. El estudio humano también provee evidencia de disponibilidad de la forma "activa potenciada" descrita en este documento para tratar enfermedades en humanos especificadas o desórdenes aceptados como condiciones patológicas en la ciencia médica.

También, la aclamada forma "activa potenciada" de anticuerpos abarca solo soluciones o preparaciones sólidas de actividad biológica de las que no pueden ser explicadas por la presencia de forma molecular del anticuerpo que aún persiste de la muestra inicial. En otras palabras, mientras se contempla que la forma "activa potenciada" del anticuerpo puede contener rastros de la forma inicial de molécula del anticuerpo, algún experto en la materia no podría atribuir la actividad biológica observada en los modelos farmacológicos aceptados a la forma molecular restante del anticuerpo con cualquier grado de plausibilidad debido a los extremamente bajas concentraciones de forma molecular del anticuerpo restante después de diluciones consecutivas. Mientras la invención no está limitada por ninguna teoría en específico, la actividad biológica de la forma "activa potenciada" de los anticuerpos de la invención presente no es atribuible a la forma inicial molecular del anticuerpo. Ideal es la forma "activa potenciada" de anticuerpo en forma líquida o sólida en la cual la concentración de la forma inicial molecular del anticuerpo está por debajo del límite de detección de las técnicas analíticas aceptadas, tales como electroforesis capilar y Cromatografía Líquida de Alto Desempeño. Particularmente ideal es la forma "activa concentrada" del anticuerpo en forma líquida o sólida en la cual la concentración de la forma inicial molecular está por debajo del número Avogrado. En farmacología de formas moleculares y sustancias terapéuticas, es práctica común crear una "curva de dosis de respuesta" en la cual el nivel de respuesta farmacológica es trazado en contra de la concentración de la droga activa administrada al sujeto o probada in-vitro. El nivel mínimo de la droga la cual produce una respuesta detectable es conocido como un umbral de dosis. Es especialmente contemplada e ideal que la forma "activa potenciada" de los anticuerpos contenga anticuerpo molecular, si existe alguno, en una concentración menor a la dosis umbral para la forma molecular del anticuerpo en el proceso biológico ofrecido.

La presente invención provee una composición farmacéutica para administración a un paciente que sufre de enfermedades de Diabetes y otro desorden metabólico, que comprende a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo hacia un fragmento de C-terminal de la subunidad beta del receptor humano de insulina, o una forma activa potenciada de un anticuerpo al receptor humano de insulina; y b) una forma activa potenciada de un anticuerpo a una sintasa de (NO) endoteliaí. Como se indica anteriormente en el presente documento, cada uno de los componentes individuales de la combinación es generalmente conocido por sus propios e individuales usos médicos. Sin embargo, los inventores de la presente solicitud de patente sorpresivamente descubrieron que la administración de la combinación es de significante ayuda en el tratamiento de pacientes con Diabetes y resistencia a la insulina, reduciendo aún más los niveles de glucosa en la sangre. Mientras el solicitante no está obligado por ésta teoría, la hipótesis "acelerador" asume que Diabetes Mellitus (DM) de Tipo 1 y Diabetes Mellitus (DM) de Tipo 2 son las mismas enfermedades caracterizadas por resistencia a la insulina, cuyos desarrollos dentro del Tipo 1 de DM y Tipo 2 de DM está determinado por el genotipo del paciente. Ésta hipótesis no niega el rol de procesos autoinmunes, sin embargo, pone en duda su rol principal. La hipótesis "acelerador" divide Tipo 1 y Tipo 2 DM de acuerdo a la velocidad de progreso: En la DM Tipo 1 , un desarrollo rápido de cambios patológicos determina la aparición más temprana de las manifestaciones de síntomas de enfermedades clínicas. La hipótesis fue propuesta por primera vez en el año 2001 y actualmente está confirmada por el resultado de 6 estudios clínicos independientes (referirse a Wilkin, T.J. The accelerator hypothesis: a review of the evidence for insulin resistance as the basis for type [I] as well as type II diabetes. // International Journal for Obesity. 2009: Vol. 33 - p. 716-726.). Un aspecto importante en la patogenesia de ambos tipos de diabetes es interpretado por la resistencia a la insulina, que lleva la reducción de la evolución clínica en ambos tipos de Diabetes (Tipo 1 y 2) (referirse a Cellular mechanisms of insulin resistance. World Congress on Insulin Resistance Syndrome, 2009, Diabetes Care. 2010: Vol. 33, N8, pp. 103-108.). El rol del receptor de insulina de la subunidad beta en la señal de insulina es conocido. Después de la unión de la insulina con el receptor y la activación de la subunidad beta, la trayectoria puede ir hacia dos direcciones diferentes: fosfatidilinositol 3-quinasa (Pl 3- K) o MAP quinasa (MAP - K). La primera trayectoria parece ser necesaria para la realización de la mayoría de los efectos de la insulina metabólicos y antiapoptótico, y la trayectoria alterna está conectada con su efecto no-metabólico, proliferativo y mitogénico. En la resistencia a la insulina, ha sido demostrado que solo la resistencia a la insulina metabólica, conectada con la activación de la subunidad beta a lo largo de la trayectoria P13 - K, juega un papel importante a la hora de determinar el desarrollo de Diabetes Mellitus. (Referirse a Muntoni, S, Muntoni, S. Insulin Resistance: Pathophysiology and Rationale for Treatment,Ar\n. Nutr. Metab. 2011 : Vol. 58, N1 , pp. 25-36). La aclamada composición farmacéutica asegura un efecto en la resistencia metabólica a la insulina.

La composición farmacéutica de acuerdo con este aspecto de la invención puede ser en forma líquida o en forma sólida. Cada una de las formas activas potenciadas de los anticuerpos incluidos en la composición farmacéutica es preparada desde una forma de molécula inicial del anticuerpo vía un proceso aceptado por el arte homeopática. Los anticuerpos iniciales pueden ser monocloriales, o anticuerpos policlonales preparados de acuerdo a conocidos procesos, por ejemplo, como se describe en Immunotechniques, G. Frímel, M., "Meditsyna", 1987, p. 9-33; "Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after" by Laffly E., Sodoyer R. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2. P.33-55, ambas incorporadas en el presente documento como referencias.

Los anticuerpos monoclonales pueden ser obtenidos, por ejemplo, gracias a tecnología hibridoma. La fase inicial del proceso incluye imunización basada en los principios ya desarrollados en el curso de la preparación del antisuero policlonal. Las siguientes etapas de trabajo incluyen producción de células híbridas generando clones de anticuerpos con especificaciones idénticas. Su aislamiento separado se realiza usando los mismos métodos como en el caso de la preparación de antisuero policlonal.

Anticuerpos policlonales pueden ser obtenido vía inmunización activa de animales. Para esto, por ejemplo, animales adecuados (por ejemplo: conejos), reciben una serie de inyecciones de un antígeno apropiado, bien sea sintasa de (NO) endotelial y fragmentos de C-terminal de la subunidad beta del receptor humano de insulina; o la sintasa de (NO) endotelial y el receptor humano de insulina. El sistema inmune de los animales genera anticuerpos correspondientes, los cuales son colectados del animal de una manera conocida. Este procedimiento habilita la preparación de un suero monoespecífico rico en anticuerpos. Si se desea, el suero que contiene anticuerpos puede ser purificado, por ejemplo usando cromatografía afín, el fraccionamiento por precipitación de sales, o cromatografía, de intercambio iónico. El resultante suero purificado y enriquecido con anticuerpos puede ser usado como un material de inicio para la preparación de la forma activa potenciada de los anticuerpos. La concentración ideal del resultado final de la solución inicial de anticuerpo en el solvente, preferiblemente, agua o mezcla de agua con alcohol etílico, va desde los 0.5 a los 5.0 mg/ml.

El procedimiento ideal para preparar cada componente es el uso de mezclas de de tres diluciones acuosas o diluciones acuosas del alcohol de la solución de la matriz primaria (tintura madre) de anticuerpos diluidos 10012, 10030 and 100200veces respectivamente, lo que equivale a una dilución homeopática centésima C12, C30 y C200. Para preparar una dosis en forma sólida, un soporte sólido es tratado con la dilución deseada y obtenida a través del proceso homeopático. Para obtener una forma de dosificación sólida de la combinación de la invención, la masa conductora debe estar impregnada con cada una de las diluciones. Ambas órdenes de impregnación son adecuadas a preparar la forma de dosificación.

En el personificación ideal, el material inicial para la preparación de la forma activa potenciada que consiste en una combinación de la invención de anticuerpo policlonal de animales al correspondiente antígeno, llamado, fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano, o, la sintasa de (NO) endotelial y el receptor humano de insulina. Para obtener la forma activa potenciada de anticuerpos policlonales alfragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano, el antígeno deseado puede ser inyectado como inmunogeno dentro de un animal de laboratorio, preferiblemente conejos. Péptidos de interés particular puede incluir al menos tres aminoácidos, generalmente por lo menos unos 10 a cada lado de la secuencia, preferiblemente con un mínimo de 3 aminoácidos en la parte C-terminal. Las siguientes secuencias de los receptores de la insulina humana se contemplan específicamente como antígenos apropiados: Toda la subunidad alfa del receptor de la insulina humana.

SEQ ID NO: 1 His Leu Tyr 28 30 Pro Gly Glu Val Cys Pro Gly Met Asp lie Arg Asn Asn Leu Thr 35 40 45 Leu His Glu Leu Glu Asn Cys Ser Val lie Glu Gly His Leu 46 50 55 60 Gln He Leu Leu Met Phe Lys Thr Arg Pro Glu Asp Phe Arg Asp 61 65 70 75 Leu Ser Phe Pro Lys Leu lie Met He Thr Asp yr Leu Leu Leu 76 80 85 90 Phe Arg Val Tyr Gly Leu Glu Ser Leu Lys Asp Leu Phe Pro Asn 91 95 100 105 Leu Thr Val lie Arg Gly Ser Arg Leu Phe Phe Asn Tyr Ala Leu 106 110 115 120 Val lie Phe Glu Met Val His Leu Lys Glu Leu Gly Leu Tyr Asn 121 125 130 135 Leu Met Asn lie Thr Arg Gly Ser Val Arg lie Glu Lys Asn Asn 136 140 145 150 Glu Leu Cys Tyr Leu Ala Thr He Asp Trp Ser Arg lie Leu Asp 151 155 160 165 Ser Val Glu Asp Asn Tyr He Val Leu Asn Lys Asp Asp Asn Glu 166 170 175 . 180 Glu Cys Gly Asp lie Cys Pro Gly Thr Ala Lys Gly Lys Thr Asn 181 185 190 195 Cys Pro Ala Thr Val lie Asn Gly Gln Phe Val Glu Arg Cys Trp 196 200 205 210 Thr His Ser His Cys Gln Lys Val Cys Pro Thr lie Cys Lys Ser 211 215 220 225 His Gly Cys Thr Ala Glu Gly Leu Cys Cys His Ser Glu Cys Leu 226 230 235 240 Gly Asn Cys Ser Gln Pro Asp Asp Pro Thr Lys Cys Val Ala Cys 241 245 250 255 Arg Asn Phe Tyr Leu Asp Gly Arg Cys Val Glu Thr Cys Pro Pro 256 260 265 270 Pro Tyr Tyr His Phe Gln Asp Trp Arg Cys Val Asn Phe Ser Phe 271 275 280 285 Cys Gln Asp Leu His His Lys Cys Lys Asn Ser Arg Arg Gln Gly 286 290 295 300 Cys His Gln Tyr Val lie His Asn Asn Lys Cys lie Pro Glu Cys 301 305 310 315 Pro Ser Gly Tyr Thr Met Asn Ser Ser Asn Leu Leu Cys Thr Pro 316 320 325 330 Cys Leu Gly Pro Cys Pro Lys Val Cys His Leu Leu Glu Gly G'lu 331 335 340 345 Lys Thr He Asp Ser Val Thr Ser Ala Gln Glu Leu Arg Gly Cys 346 350 355 360 Thr Val lie Asn Gly Ser Leu lie He Asn lie Arg Gly Gly Asn 361 365 370 375 Asn Leu Ala Ala Glu Leu Glu Ala Asn Leu Gly Leu lie Glu Glu 376 380 385 390 lie Ser Gly Tyr Leu Lys He Arg Arg Ser Tyr Ala Leu Val Ser 391 395 400 405 Leu Ser Phe Phe Arg Lys Leu Arg Leu lie Arg Gly Glu Thr Leu 406 410 415 420 Glu He Gly Asn Tyr Ser Phe Tyr Ala Leu Asp Asn GIn Asn Leu 421 425 430 435 Arg GIn Leu Trp Asp Trp Ser Lys His Asn Leu Thr He Thr GIn 436 440 445 450 Gly Lys Leu Phe Phe His Tyr Asn Pro Lys Leu Gys Leu Ser Glu 451 455 460 465 He His Lys Met Glu Glu Val Ser Gly Thr Lys Gly Arg GIn Glu 466 470 475 480 Arg Asn Asp lie Ala Leu Lys Thr Asn Gly Asp GIn Ala Ser Cys 481 485 490 495 Glu Asn Glu Leu Leu Lys Phe Ser Tyr lie Arg Thr Ser Phe Asp 496 500 505 510 Lys lie Leu Leu Arg Trp Glu Pro Tyr Trp Pro Pro Asp Phe Arg 51 1 515 510 525 Asp Leu Leu Gly Phe Met Leu Phe Tyr Lys Glu Ala Pro Tyr GIn 526 530 535 540 Asn Val Thr Glu Phe Asp Gly GIn Asp Ala Cys Gly Ser Asn Ser 541 545 550 555 Trp Thr Val Val Asp lie Asp Pro Pro Leu Arg Ser Asn Asp Pro 556 560 565 570 Lys Ser GIn Asn His Pro Gly Trp Leu Met Arg Gly Leu Lys Pro 571 575 580 585 Trp Thr GIn Tyr Ala lie Phe Val Lys Thr Leu Val Thr Phe Ser 586 590 595 600 Asp Glu Arg Arg Thr Tyr Gly Ala Lys Ser Asp lie lie Tyr Val 601 605 610 615 GIn Thr Asp Ala Thr Asn Pro Ser Val Pro Leu Asp Pro lie Ser 616 620 625 630 Val Ser Asn Ser Ser Ser GIn He lie Leu Lys Trp Lys Pro Pro 631 635 640 645 Ser Asp Pro Asn Gly Asn lie Thr His Tyr Leu Val Phe Trp Glu 646 650 655 660 Arg GIn Ala Glu Asp Ser Glu Leu Phe Glu Leu Asp Tyr Cys Leu 661 665 670 675 Lys Gly Leu Lys Leu Pro Ser Arg Thr Trp Ser Pro Pro Phe Glu 676 680 685 690 Ser Glu Asp Ser GIn Lys His Asn GIn Ser Glu Tyr Glu Asp Ser 691 695 700 705 Ala Gly Glu Cys Cys Ser Cys Pro Lys Thr Asp Ser GIn lie Leu 706 710 715 720 Lys Glu Leu Glu Glu Ser Ser Phe Arg Lys Thr Phe Glu Asp Tyr 721 725 730 735 Leu His Asn Val Val Phe Val Pro Arg Lys Thr Ser Ser Gly Thr 736 740 745 750 Gly Ala Glu Asp Pro Arg Pro Ser Arg Lys Arg Arg 751 755 760 762 Fragmentos de la subunidad alfa del receptor de la insulina humana.

SEQ ID NO: 2 Leu Gly Leu Tyr Asn 131 135 Leu Met Asn lie Thr Arg Gly Ser Val 136 140 144 SEQ ID NO: 3 Lys Gly Lys Thr Asn 191 195 Cys Pro Ala Thr Val He Asn Gly 196 200 203 SEQ ID N0: 4 Trp Ser Lys His Asn Leu Thr lie Thr Gln 441 445 450 Gly Lys Leu 451 453 SEQ ID NO: 5 Asn Val Thr Glu Phe Asp Gly Gln Asp Ala Cys Gly Ser Asn Ser 541 545 550 555 Trp Thr Val Val Asp 556 560 SEQ ID NO: 6 Asp lie He Tyr Val 611 615 Gln Thr Asp Ala Thr 616 620 SEQ ID NO: 7 Tyr Glu Asp Ser 702 705 Ala Gly Glu Cys Cys Ser Cys Pro Lys Thr Asp Ser Gln lie 706 710 715 719 Subunidad beta completa de receptores de insulina humana.

SEQ ID NO: 8 Ser Leu Gly 763 765 Asp Val Gly Asn Val Thr Val Ala Val Pro Thr Val Ala Ala Phe 766 770 775 780 Pro Asn Thr Ser Ser Thr Ser Val Pro Thr Ser Pro Glu Glu His 781 785 790 795 Arg Pro Phe Glu Lys Val Val Asn Lys Glu Ser Leu Val He Ser 796 800 805 810 Gly Leu Arg His Phe Thr Gly Tyr Arg lie Glu Leu Gln Ala Cys 811 815 820 825 Asn Gln Asp Thr Pro Glu Glu Arg Cys Ser Val Ala Ala Tyr Val 826 830 . 835 840 Ser Ala Arg Thr Met Pro Glu Ala Lys Ala Asp Asp lie Val Gly 841 845 850 855 Pro Val Thr His Glu lie Phe Glu Asn Asn Val Val His Leu Met 856 860 865 870 Trp Gln Glu Pro Lys Glu Pro Asn Gly Leu lie Val Leu Tyr Glu 871 875 880 885 Val Ser Tyr Arg Arg Tyr Gly Asp Glu Glu Leu His Leu Cys Val 886 890 895 900 Ser Arg Lys His Phe Ala Leu Glu Arg Gly Cys Arg Leu Arg Gly 901 905 910 915 Leu Ser Pro Gly Asn Tyr Ser Val Arg lie Arg Ala Thr Ser Leu 916 920 925 930 Ala Gly Asn Gly Ser Trp Thr Glu Pro Thr Tyr Phe Tyr Val Thr 931 935 940 945 Asp Tyr Leu Asp Val Pro Ser Asn He Ala Lys He He lie Gly 946 950 955 960 Pro Leu lie Phe Val Phe Leu Phe Ser Val Val lie Gly Ser lie 961 965 970 975 Tyr Leu Phe Leu Arg Lys Arg Gln Pro Asp Gly Pro Leu Gly Pro 976 . 980 985 990 Leu Tyr Ala Ser Ser Asn Pro Glu Tyr Leu Ser Ala Ser Asp Val 991 995 1000 1005 Phe Pro Cys Ser Val Tyr Val Pro Asp Glu Trp Glu Val Ser Arg 1006 1010 1015 1020 Glu Lys lie Thr Leu Leu Arg Glu Leu Gly GIn Gly Ser Phe Gly 1021 1025 1030 1035 Met Val Tyr Glu Gly Asn Ala Arg Asp lie He Lys Gly Glu Ala 1036 1140 1145 1050 Glu Thr Arg Val Ala Val Lys Thr Val Asn Glu Ser Ala Ser Leu 1051 1155 1 160 1065 Arg Glu Arg Me Glu Phe Leu Asn Glu Ala Ser Val Met Lys Gly 1066 1 170 .1 175 1080 Phe Thr Cys His His Val Val Arg Leu Leu Gly Val Val Ser Lys 1081 1185 1 190 1095 Gly GIn Pro Thr Leu Val Val Met Glu Leu Met Ala His Gly Asp 1096 1 100 1105 1 1 10 Leu Lys Ser Tyr Leu Arg Ser Leu Arg Pro Glu Ala Glu Asn Asn 1111 11 15 1120 1125 Pro Gly Arg Pro Pro Pro Thr Leu GIn Glu Met lie GIn Met Ala 1126 1130 1 135 1 140 Ala Glu lie Ala Asp Gly Met Ala Tyr Leu Asn Ala Lys Lys Phe 1141 1 145 1150 1155 Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Cys Met Val Ala His Asp 1 156 1160 1 165 1 170 Phe Thr Val Lys He Gly Asp Phe Gly Met Thr Arg Asp He Tyr 1 17V 1 175 1180 1185 Glu Thr Asp Tyr Tyr Arg Lys Gly Gly Lys Gly Leu Leu Pro Val 1186 1190 1 195 1200 Arg Trp Met Ala Pro Glu Ser Leu Lys Asp Gly Val Phe Thr Thr 1201 1205 1210 1215 Ser Ser Asp Met Trp Ser Phe Gly Val Val Leu Trp Glu He Thr 1216 1220 1225 1230 Ser Leu Ala Glu GIn Pro Tyr GIn Gly Leu Ser Asn Glu GIn Val 1231 1235 1240 1245 Leu Lys Phe Val Met Asp Gly Gly Tyr Leu Asp GIn Pro Asp Asn 1246 1250 1255 1260 Cys Pro Glu Arg Val Thr Asp Leu Met Arg Met Cys Trp GIn Phe 1261 1265 1270 1275 Asn Pro Lys Met Arg Pro Thr Phe Leu Glu lie Val Asn Leu Leu 1276 1280 1285 1290 Lys Asp Asp Leu His Pro Ser Phe Pro Glu Val Ser Phe Phe His 1291 1295 1300 1305 Ser Glu Glu Asn Lys Ala Pro Glu Ser Glu Glu Leu Glu Met Glu 1306 1310 1315 1320 Phe Glu Asp Met Glu Asn Val Pro Leu Asp Arg Ser Ser His Cys 1321 1325 1330 1335 GIn Arg Glu Glu Ala Gly Gly Arg Asp Gly Gly Ser Ser Leu Gly 1336 1340 1345 1350 Phe Lys Arg Ser Tyr Glu Glu His lie Pro Tyr Thr His Met Asn 1351 1355 1360 1365 Gly Gly Lys Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn 1366 1370 1375 1380 Pro Ser 13811382 Fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano.

SEQ ID NO: 9 Lys Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr Leu Pro 1368 1370 1375 1377 SEQ ID NO: 10 Arg lie Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn 1372 1375 1380 Pro Ser 13811382 SEQ ID NO: 11 Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr 13691370 1375 SEQ ID NO: 12 Gly Gly Lys Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn 1366 1370 · 1375 1380 Pro Ser 13811382 SEQ ID NO: 13 Asn 1365 Gly Gly Lys Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn 1366 1370 1375 1380 Pro Ser 13811382 El uso de los receptores de la insulina humana como antígeno tamb contempla La secuencia adecuada para dicho antígeno es el siguiente: SEQ ID NO: 14 etAla Thr Gly Gly Arg Arg Gly Ala Ala Ala Ala Pro Leu Leu 1 5 10 15 Val Ala Val Ala Ala Leu Leu Leu Gly Ala Ala Gly His Leu Tyr 16 20 25 30 Pro Gly Glu Val Cys Pro Gly Met Asp lie Arg Asn Asn Leu Thr 31 35 40 45 Arg Leu His Glu Leu Glu Asn Cys Ser Val lie Glu Gly His Leu 46 50 55 60 GIn He Leu Leu Met Phe Lys Thr Arg Pro Glu Asp Phe Arg Asp 61 65 70 75 Leu Ser Phe Pro Lys Leu He Met lie Thr Asp Tyr Leu Leu Leu 76 80 85 90 Phe Arg Val Tyr Gly Leu Glu Ser Leu Lys Asp Leu Phe Pro Asn 91 95 100 105 Leu Thr Val lie Arg Gly Ser Arg Leu Phe Phe Asn Tyr Ala Leu 106 110 115 120 Val He Phe Glu Met Val His Leu Lys Glu Leu Gly Leu Tyr Asn 121 125 130 135 Leu Met Asn He Thr Arg Gly Ser Val Arg He Glu Lys Asn Asn 136 140 145 150 Glu Leu Cys Tyr Leu Ala Thr lie Asp Trp Ser Arg lie Leu Asp 151 155 160 165 Ser Val Glu Asp Asn Tyr lie Val Leu Asn Lys Asp Asp Asn Glu 166 170 175 180 Glu Cys Gly Asp lie Cys Pro Gly Thr Ala Lys Gly Lys Thr Asn 181 185 190 195 Cys Pro Ala Thr Val lie Asn Gly GIn Phe Val Glu Arg Cys Trp 196 200 205 210 Thr His Ser His Cys GIn Lys Val Cys Pro Thr lie Cys Lys Ser 21 1 215 220 225 His Gly Cys Thr Ala Glu Gly Leu Cys Cys His Ser Glu Cys Leu 226 230 235 240 Gly Asn Cys Ser GIn Pro Asp Asp Pro Thr Lys Cys Val Ala Cys 241 245 250 255 Arg Asn Phe Tyr Leu Asp Gly Arg Cys Val Glu Thr Cys Pro Pro 256 260 265 270 Pro Tyr Tyr His Phe GIn Asp Trp Arg Cys Val Asn Phe Ser Phe 271 275 280 285 Cys GIn Asp Leu His His Lys Cys Lys Asn Ser Arg Arg GIn Gly 286 290 295 300 Cys His GIn Tyr Val lie His Asn Asn Lys Cys lie Pro Glu Cys 301 305 310 315 Pro Ser Gly Tyr Thr Met Asn Ser Ser Asn Leu Leu Cys Thr Pro 316 320 325 330 Cys Leu Gly Pro Cys Pro Lys Val Cys His Leu Leu Glu Gly Glu 331 335 340 345 Lys Thr He Asp Ser Val Thr Ser Ala GIn Glu Leu Arg Gly Cys 346 350 355 360 Thr Val He Asn Gly Ser Leu lie He Asn He Arg Gly Gly Asn 361 365 370 375 Asn Leu Ala Ala Glu Leu Glu Ala Asn Leu Gly Leu He Glu Glu 376 380 385 390 He Ser Gly Tyr Leu Lys lie Arg Arg Ser Tyr Ala Leu Val Ser 391 395 400 405 Leu Ser Phe Phe Arg Lys Leu Arg Leu lie Arg Gly Glu Thr Leu 406 410 415 420 Glu He Gly Asn Tyr Ser Phe Tyr Ala Leu Asp Asn GIn Asn Leu 421 425 430 435 Arg GIn Leu Trp Asp Trp Ser Lys His Asn Leu Thr lie Thr GIn 436 440 445 450 Gly Lys Leu Phe Phe His Tyr Asn Pro Lys Leu Cys Leu Ser Glu 451 455 460 465 He His Lys Met Glu Glu Val Ser Gly Thr Lys Gly Arg GIn Glu 466 470 475 480 Arg Asn Asp lie Ala Leu Lys Thr Asn Gly Asp GIn Ala Ser Cys 481 485 490 495 Glu Asn Glu Leu Leu Lys Phe Ser Tyr He Arg Thr Ser Phe Asp 496 500 505 510 Lys lie Leu Leu Arg Trp Glu Pro Tyr Trp Pro Pro Asp Phe Arg 51 1 515 510 525 Asp Leu Leu Gly Phe Met Leu Phe Tyr Lys Glu Ala Pro Tyr Gln 526 530 535 540 Asn Val Thr Glu Phe Asp Gly Gln Asp Ala Cys Gly Ser Asn Ser 541 545 550 555 Trp Thr Val Val Asp He Asp Pro Pro Leu Arg Ser Asn Asp Pro 556 560 565 570 Lys Ser Gln Asn His Pro Gly Trp Leu Met Arg Gly Leu Lys Pro 571 575 580 585 Trp Thr Gln Tyr Ala lie Phe Val Lys Thr Leu Val Thr Phe Ser 586 .590 595 600 Asp Glu Arg Arg Thr Tyr Gly Ala Lys Ser Asp lie He Tyr Val 601 605 610 615 Gln Thr Asp Ala Thr Asn Pro Sér Val Pro Leu Asp Pro lie Ser 616 620 625 630 Val Ser Asn Ser Ser Ser Gln lie He Leu Lys Trp Lys Pro Pro 631 635 640 645 Ser Asp Pro Asn Gly Asn lie Thr His Tyr Leu Val Phe Trp Glu 646 650 655 660 Arg Gln Ala Glu Asp Ser Glu Leu Phe Glu Leu Asp Tyr Cys Leu 661 665 670 675 Lys Gly Leu Lys Leu Pro Ser Arg Thr Trp Ser Pro Pro Phe Glu 676 680 685 690 Ser Glu Asp Ser Gln Lys His Asn Gln Ser Glu Tyr Glu Asp Ser 691 695 700 705 Ala Gly Glu Cys Cys Ser Cys Pro Lys Thr Asp Ser Gln lie Leu 706 710 715 720 Lys Glu Leu Glu Glu Ser Ser Phe Arg Lys Thr Phe Glu Asp Tyr 721 725 730 735 Leu His Asn Val Val Phe Val Pro Arg Lys Thr Ser Ser Gly Thr 736 740 745 750 Gly Ala Glu Asp Pro Arg Pro Ser Arg Lys Arg Arg Ser Leu Gly 751 755 760 765 Asp Val Gly Asn Val Thr Val Ala Val Pro Thr Val Ala Ala Phe 766 770 775 780 Pro Asn Thr Ser Ser Thr Ser Val Pro Thr Ser Pro Glu Glu His 781 785 790 795 Arg Pro Phe Glu Lys Val Val Asn Lys Glu Ser Leu Val lie Ser 796 800 805 810 Gly Leu Arg His Phe Thr Gly Tyr Arg Me Glu Leu Gln Ala Cys 811 815 820 825 Asn Gln Asp Thr Pro Glu Glu Arg Cys Ser Val Ala Ala Tyr Val 826 830 835 840 Ser Ala Arg Thr Met Pro Glu Ala Lys Ala Asp Asp lie Val Gly 841 845 850 855 Pro Val Thr His Glu lie Phe Glu Asn Asn Val Val His Leu Met 856 860 865 870 Trp Gln Glu Pro Lys Glu Pro Asn Gly Leu lie Val Leu Tyr Glu 871 875 880 885 Val Ser Tyr Arg Arg Tyr Gly Asp Glu Glu Leu His Leu Cys Val 886 890 895 900 Ser Arg Lys His Phe Ala Leu Glu Arg Gly Cys Arg Leu Arg Gly 901 905 910 915 Leu Ser Pro Gly Asn Tyr Ser Val Arg He Arg Ala Thr Ser Leu 916 920 925 930 Ala Gly Asn Gly Ser Trp Thr Glu Pro Thr Tyr Phe Tyr Val Thr 931 935 940 945 Asp Tyr Leu Asp Val Pro Ser Asn lie Ala Lys lie lie lie Gly 946 950 955 960 Pro Leu He Phe Val Phe Leu Phe Ser Val Val lie Gly Ser He 961 965 970 975 Tyr Leu Phe Leu Arg Lys Arg Gln Pro Asp Gly Pro Leu Gly Pro 976 980 985 990 Leu Tyr Ala Ser Ser Asn Pro Glu Tyr Leu Ser Ala Ser Asp Val 991 995 1000 1005 Phe Pro Cys Ser Val Tyr Val Pro Asp Glu Trp Glu Val Ser Arg 1006 1010 1015 1020 Glu Lys lie Thr Leu Leu Arg Glu Leu Gly GIn Gly Ser Phe Gly 1021 1025 1030 1035 Met Val Tyr Glu Gly Asn Ala Arg Asp lie lie Lys Gly Glu Ala 1036 1140 1145 1050 Glu Thr Arg Val Ala Val Lys Thr Val Asn Glu Ser Ala Ser Leu 1051 1155 1160 1065 Arg Glu Arg lie Glu Phe Leu Asn Glu Ala Ser Val Met Lys Gly 1066 1170 1175 1080 Phe Thr Cys His His Val Val Arg Leu Leu Gly Val Val Ser Lys 1081 1185 1190 1095 Gly GIn Pro Thr Leu Val Val Met Glu Leu Met Ala His Gly Asp 1096 1100 1105 1110 Leu Lys Ser Tyr Leu Arg Ser Leu Arg Pro Glu Ala Glu Asn Asn 1111 1115 1120 1125 Pro Gly Arg Pro Pro Pro Thr Leu GIn Glu Met lie GIn Met Ala 1126 1130 1135 1140 Ala Glu lie Ala Asp Gly Met Ala Tyr Leu Asn Ala Lys Lys Phe 1141 1145 1150 1155 Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Cys Met Val Ala His Asp 1156 1160 1165 1170 Phe Thr Val Lys lie Gly Asp Phe Gly Met Thr Arg Asp lie Tyr 1171 1175 1180 1185 Glu Thr Ásp Tyr Tyr Arg Lys Gly Gly Lys Gly Leu Leu Pro Val 1186 1190 1195 1200 Arg Trp Met Ala Pro Glu Ser Leu Lys Asp Gly Val Phe Thr Thr 1201 1205 1210 1215 Ser Ser Asp Met Trp Ser Phe Gly Val Val Leu Trp Glu lie Thr 1216 1220 1225 1230 Ser Leu Ala Glu GIn Pro Tyr GIn Gly Leu Ser Asn Glu GIn Val 1231 1235 1240 1245 Leu Lys Phe Val Met Asp Gly Gly Tyr Leu Asp GIn Pro Asp Asn 1246 1250 1255 1260 Cys Pro Glu Arg Val Thr Asp Leu Met Arg Met Cys Trp GIn Phe 1261 1265 1270 1275 Asn Pro Lys Met Arg Pro Thr Phe Leu Glu He Val Asn Leu Leu 1276 1280 1285 1290 Lys Asp Asp Leu His Pro Ser Phe Pro Glu Val Ser Phe Phe His 1291 1295 1300 1305 Ser Glu Glu Asn Lys Ala Pro Glu Ser Glu Glu Leu Glu Met Glu 1306 1310 1315 1320 Phe Glu Asp Met Glu Asn Val Pro Leu Asp Arg Ser Ser His Cys 1321 1325 1330 1335 Gln Arg Glu Glu Ala Gly Gly Arg Asp Gly Gly Ser Ser Leu Gly 1336 1340 1345 1350 Phe Lys Arg Ser Tyr Glu Glu His lie Pro Tyr Thr His Met Asn 1351 1355 1360 1365 Gly Gly Lys Lys Asn Gly Arg lie Leu Thr Leu Pro Arg Ser Asn 1366 1370 1375 1380 Pro Ser 13811382 El procedimiento ejemplar para la preparación de los anticuerpos iniciales policlonales del fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano pueden ser descritos a continuación. En los 7-9 días antes de la extracción de la sangre, 1-3 inyecciones intravenosas del antígeno deseado son hechas en los conejos para incrementar el nivel de anticuerpos policlonales en el torrente sanguíneo de los conejos. Tras la vacunación, se toman muestras sanguíneas para poner a prueba el nivel de anticuerpos. Normalmente, el nivel máximo de reacción inmune del antígeno soluble es alcanzado dentro de los 40 a 60 días después de la primera inyección del antígeno. Tras la finalización del primer ciclo de inmunización, los conejos tienen un período de 30 días de rehabilitación, después de lo cual re-vacunación se lleva a cabo con otras 1-3 inyecciones intravenosas.

Para obtener un antisuero que contiene los anticuerpos deseados, la sangre de los conejos inmunizados se recoge y se coloca en el tubo de centrífuga de 50 mi. Coágulos de producto formado a los lados del tubo se retira con una espátula de madera, y una barra se coloca en el coágulo en el centro del tubo. La sangre se coloca en el refrigerador por una noche en la temperatura de 40 ° C. Al día siguiente, el coágulo en la espátula se retira, y el resto del líquido se centrifuga durante 10 minutos a 13.000 rotaciones.Sobrenadante es el antisuero deseado. El antisuero se obtiene generalmente de color amarillo. 20% de NaN3 (concentración de peso) es agregado en el antisuero de la concentración final de 0,02% y se almacenan antes de su uso en estado de congelación a una temperatura de -20 0 C (o sin NaN3 a una temperatura de -70 ° C). Para separar el anticuerpo deseado del fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano, la siguiente fase sólida de absorción es recomendable: 10 mi de antisuero de conejo se diluye doble con NaCI 0,15 M, después de lo cual se añade 6.26g Na2S04, mezclado e incubado durante 12-16 horas a 4 ° C. El sedimento se separa por centrifugación, se diluye en 10 mi de solución amortiguadora de fosfato y se dializa contra el mismo durante una noche a temperatura ambiente. Después de que el sedimento se elimina, la solución se aplica a la columna de DEAE-celulosa equilibrada con solución amortiguadora de fosfato. La fracción de anticuerpo se determina midiendo la densidad óptica del efluente a 280 Nm.

Los anticuerpos aislados crudos se purifican usando el método de cromatografía, uniendo los anticuerpos obtenidos a un fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano que se encuentra en la matriz insoluble de los medios de cromatografía, con posterior elución por soluciones concentradas de sal acuosa.

La solución amortiguadora de fosfato resultante se utiliza como solución inicial para el proceso de dilución homeopática utilizado para preparar la forma activada potenciada de los anticuerpos. La concentración ideal de la solución de la matriz inicial de los anticuerpos de conejo purificada de antígeno policlonal fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano es de 0,5 a 5,0 mg / mi, preferiblemente, 2,0 a 3,0 mg / mi Los anticuerpos de la sintasa de (NO) endotelial se obtienen mediante una metodología similar con el adyuvante. Con el fin de obtener anticuerpos policlonales de la sintasa de (NO) endotelial, es posible el uso de la molécula completa de la especie bovina para la sintasa de (NO) endotelial de la siguiente secuencia descrita como inmunógeno (antígeno): SEQ ID NO: 15 Met Gly Asn Leu Lys Ser Val Gly GIn Glu Pro Gly Pro Pro Cys 1 5 10 15 Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Cys Gly Lys GIn Gly 16 20 25 30 Pro Ala Ser Pro Ala Pro Glu Pro Ser Arg Ala Pro Ala Pro Ala 31 35 40 45 Thr Pro His Ala Pro Asp His Ser Pro Ala Pro Asn Ser Pro Thr 46 50 55 60 Leu Thr Arg Pro Pro Glu Gly Pro Lys Phe Pro Arg Val Lys Asn 61 65 70 75 Trp Glu Leu GLys er He Thr Tyr Asp Thr Leu Cys Ala GIn Ser 76 80 . 85 90 GIn GIn Asp Gly Pro Cys Thr Pro Arg Cys Cys Leu GLys er Leu 91 95 100 105 Val Leu Pro Arg Lys Leu GIn Thr Arg Pro Ser Pro Gly Pro Pro 106 110 115 120 Pro Ala Glu GIn Leu Leu Ser GIn Ala Arg Asp Phe lie Asn GIn 121 125 130 135 Tyr Tyr Ser Ser Me Lys Arg Ser GLys er GIn Ala His Glu Glu 136 140 145 150 Arg Leu GIn Glu Val Glu Ala Glu Val Ala Ser Thr Gly Thr Tyr 151 155 160 165 His Leu Arg Glu Ser Glu Leu Val Phe Gly Ala Lys GIn Ala Trp 166 170 175 180 Arg Asn Ala Pro Arg Cys Val Gly Arg lie GIn Trp Gly Lys Leu 181 185 190 195 GIn Val Phe Asp Ala Arg Asp Cys Ser Ser Ala GIn Glu Met Phe 196 200 205 210 Thr Tyr lie Cys Asn His lie Lys Tyr Ala Thr Asn Arg Gly Asn 211 215 220 225 Leu Arg Ser Ala lie Thr Val Phe Pro GIn Arg Ala Pro Gly Arg 226 230 235 240 Gly Asp Phe Arg lie Trp Asn Ser GIn Leu Val Arg Tyr Ala Gly 241 245 250 255 Tyr Arg GIn GIn Asp GLys er Val Arg Gly Asp Pro Ala Asn Val 256 260 265 270 Glu lie Thr Glu Leu Cys He GIn His Gly Trp Thr Pro Gly Asn 271 275 280 285 Gly Arg Phe Asp Val Leu Pro Leu Leu Leu GIn Ala Pro Asp Glu 286 290 295 300 Ala Pro Glu Leu Phe Val Leu Pro Pro Glu Leu Val Leu Glu Val 301 305 310 315 Pro Leu Glu His Pro Thr Leu Glu Trp Phe Ala Ala Leu Gly Leu 316 320 325 330 Arg Trp Tyr Ala Leu Pro Ala Val Ser Asn Met Leu Leu Glu lie 331 335 340 345 Gly Gly Leu Glu Phe Ser Ala Ala Pro Phe Ser Gly Trp Tyr Met 346 350 355 360 Ser Thr Glu lie Gly Thr Arg Asn Leu Cys Asp Pro His Arg Tyr 361 365 370 375 Asn He Leu Glu Asp Val Ala Val Cys Met Asp Leu Asp Thr Arg 376 . 380 385 390 Thr Thr Ser Ser Leu Trp Lys Asp Lys Ala Ala Val Glu lie Asn 391 395 400 405 Leu Ala Val Leu His Ser Phe Gln Leu Ala Lys Val Thr lie Val 406 410 415 420 Asp His His Ala Ala Thr Val Ser Phe Met Lys His Leu Asp Asn 421 425 430 435 Glu Gln Lys Ala Arg Gly Gly Cys Pro Ala Asp Trp Ala Trp lie 436 440 445 450 Val Pro Pro Me Ser GLys er Leu Thr Pro Val Phe His Gln Glu 451 455 460 465 Met Val Asn Tyr He Leu Ser Pro Ala Phe Arg Tyr Gln Pro Asp 466 470 475 480 Pro Trp Lys GLy Ser Ala Thr Lys Gly Ala Gly lie Thr Arg Lys 481 485 ' 490 495 Lys Thr Phe Lys Glu Val Ala Asn Ala Val Lys lie Ser Ala Ser 496 500 505 510 Leu Met Gly Thr Leu Met Ala Lys Arg Val Lys Ala Thr lie Leu 51 1 515 510 525 Tyr Ala Ser Glu Thr Gly Arg Ala Gln Ser Tyr Ala Gln Gln Leu 526 530 535 540 Gly Arg Leu Phe Arg Lys Ala Phe Asp Pro Arg Val Leu Cys Met 541 545 550 555 Asp Glu Tyr Asp Val Val Ser Leu Glu His Glu Ala Leu Val Leu 556 560 565 570 Val Val Thr Ser Thr Phe Gly Asn Gly Asp Pro Pro Glu Asn Gly 571 575 580 585 Glu Ser Phe Ala Ala Ala Leu Met Glu Met Ser Gly Pro Tyr Asn 586 590 595 600 Ser Ser Pro Arg Pro Glu Gln His Lys Ser Tyr Lys He Arg Phe 601 605 610 615 Asn Ser Val Ser Cys Ser Asp Pro Leu Val Ser Ser Trp Arg Arg 616 620 625 630 Lys Arg Lys Glu Ser Ser Asn Thr Asp Ser Ala Gly Ala Leu Gly 631 635 640 645 Thr Leu Arg Phe Cys Val Phe Gly Leu GLy Ser Arg Ala Tyr Pro 646 650 655 660 His Phe Cys Ala Phe Ala Arg Ala Val Asp Thr Arg Leu Glu Glu 661 665 670 675 Leu Gly Gly Glu Arg Leu Leu GIn Leu Gly GIn Gly Asp Glu Leu 676 680 685 690 Cys Gly GIn Glu Glu Ala Phe Arg Gly Trp Ala Lys Ala Ala Phe 691 695 700 705 GIn Ala Ser Cys Glu Thr Phe Cys Val Gly Glu Glu Ala Lys Ala 706 710 715 720 Ala Ala GIn Asp lie Phe Ser Pro Lys Arg Ser Trp Lys Arg GIn 721 725 730 735 Arg Tyr Arg Leu Ser Thr GIn Ala Glu Gly Leu GIn Leu Leu Pro 736 740 745 750 Gly Leu lie His Val His Arg Arg Lys Met Phe GIn Ala Thr Val 751 755 760 765 Leu Ser Val Glu Asn Leu GIn Ser Ser Lys Ser Thr Arg Ala Thr 766 770 775 780 lie Leu Val Arg Leu Asp Thr Ala Gly GIn Glu Gly Leu GIn Tyr 781 785 790 795 GIn Pro Gly Asp His He Gly lie Cys Pro Pro Asn Arg Pro Gly 796 800 805 810 Leu Val Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Glu Asp Pro Pro Pro Pro 811 815 820 825 Thr Glu Ser Val Ala Val Glu GIn Leu Glu Lys GLys er Pro Gly 826 830 835 840 Gly Pro Pro Pro Ser Trp Val Arg Asp Pro Arg Leu Pro Pro Cys 841 845 , 850 855 Thr Leu Arg GIn Ala Leu Thr Phe Phe Leu Asp lie Thr Ser Pro 856 860 865 870 Pro Ser Pro Arg Leu Leu Arg Leu Leu Ser Thr Leu Ala Glu Glu 871 875 880 885 Pro Ser Glu GIn GIn Glu Leu Glu Thr Leu Ser GIn Asp Pro Arg 886 890 895 900 Arg Tyr Glu Glu Trp Lys Trp Phe Arg Cys Pro Thr Leu Leu Glu 901 905 910 915 Val Leu Glu GIn Phe Pro Ser Val Ala Leu Pro Ala Pro Leu Leu 916 920 925 930 Leu Thr GIn Leu Pro Leu Leu GIn Pro Arg Tyr Tyr Ser Val Ser 931 935 940 945 Ser Ala Pro Asn Ala His Pro Gly Glu Val His Leu Thr Val Ala 946 950 955 960 Val Leu Ala Tyr Arg Thr GIn Asp Gly Leu Gly Pro Leu His Tyr 961 965 970 975 Gly Val Cys Ser Thr Trp Leu Ser GIn Leu Lys Thr Gly Asp Pro 976 980 985 990 Val Pro Cys Phe lie Arg Gly Ala Pro Ser Phe Arg Leu Pro Pro 991 995 1000 1005 Asp Pro Tyr Val Pro Cys lie Leu Val Gly Pro Gly Thr Gly He 1006 1010 1015 1020 Ala Pro Phe Arg Gly Phe Trp GIn Glu Arg Leu His Asp lie Glu 1021 1025 1030 J035 Ser Lys Gly Leu GIn Pro Ala Pro Met Thr Leu Val Phe Gly Cys 1036 1040 1045 1050 Arg Cys Ser GIn Leu Asp His Leu Tyr Arg Asp Glu Val GIn Asp 1051 1055 1060 1065 Ala GIn Glu Arg Gly Val Phe Gly Arg Val Leu Thr Ala Phe Ser 1066 1070 1075 1080 Arg Glu Pro Asp Ser Pro Lys Thr Tyr Val GIn Asp Me Leu Arg 1081 1085 1090 1095 Thr Glu Leu Ala Ala Glu Val His Arg Val Leu Cys Leu Glu Arg 1096 1100 1105 1110 Gly His Met Phe Val Cys Gly Asp Val Thr Met Ala Thr Ser Val 1111 1115 1120 1125 Leu GIn Thr Val GIn Arg lie Leu Ala Thr Glu Gly Asp Met Glu 1126 1130 1135 1140 Leu Asp Glu Ala Gly Asp Val lie Gly Val Leu Arg Asp GIn GIn 1141 1145 1150 1155 Arg Tyr His Glu Asp lie Phe Gly Leu Thr Leu Arg Thr GIn Glu 1156 1160 1165 1170 Val Thr Ser Arg He Arg Thr GIn Ser Phe Ser Leu GIn Glu Arg 1171 1175 1180 1185 His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro 1186 1190 1195 1200 Asp Thr Pro Gly Pro 1201 1205 Los anticuerpos policlonales de la (NO) sintasa se pueden obtener con toda la molécula de (NO) sintasa humana de la siguiente secuencia: SEQ ID NO:16 Met Gly Asn Leu Lys Ser Val Ala GIn Glu Pro Gly Pro Pro Cys 1 5 10 15 Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Gly Leu Cys Gly Lys GIn Gly 16 20 25 30 Pro Ala Thr-Pro Ala Pro Glu Pro Ser Arg Ala Pro Ala Ser Leu 31 35 40 45 Leu Pro Pro Ala Pro Glu His Ser Pro Pro Ser Ser Pro Leu Thr 46 50 55 60 GIn Pro Pro Glu Gly Pro Lys Phe Pro Arg Val Lys Asn Trp Glu 61 65 70 75 Val GLys er lie Thr Tyr Asp Thr Leu Ser Ala GIn Ala GIn GIn 76 80 85 90 Asp Gly Pro Cys Thr Pro Arg Arg Cys Leu GLys er Leu Val Phe 91 95 100 105 Pro Arg Lys Leu GIn Gly Arg Pro Ser Pro Gly Pro Pro Ala Pro 106 110 1 15 . 120 Glu GIn Leu Leu Ser GIn Ala Arg Asp Phe lie Asn GIn Tyr Tyr 121 125 130 135 Ser Ser lie Lys Arg Ser GLys er GIn Ala His Glu GIn Arg Leu 136 140 145 150 GIn Glu Val Glu Ala Glu Val Ala Ala Thr Gly Thr Tyr GIn Leu 151 155 160 165 Arg Glu Ser Glu Leu Val Phe Gly Ala Lys GIn Ala Trp Arg Asn 166 170 · 175 180 Ala Pro Arg Cys Val Gly Arg He GIn Trp Gly Lys Leu GIn Val 181 185 190 195 Phe Asp Ala Arg Asp Cys Arg Ser Ala GIn Glu Met Phe Thr Tyr 196 200 205 210 lie Cys Asn His lie Lys Tyr Ala Thr Asn Arg Gly Asn Leu Arg 211 215 220 225 Ser Ala lie Thr Val Phe Pro GIn Arg Cys Pro Gly Arg Gly Asp 226 230 235 240 Phe Arg lie Trp Asn Ser GIn Leu Val Arg Tyr Ala Gly Tyr Arg 241 245 250 255 GIn GIn Asp GLy Ser Val Arg Gly Asp Pro Ala Asn Val Glu He 256 260 265 270 Thr Glu Leu Cys lie GIn His Gly Trp Thr Pro Gly Asn Gly Arg 271 275 , 280 285 Phe Asp Val Leu Pro Leu Leu Leu GIn Ala Pro Asp Glu Pro Pro 286 290 295 300 Glu Leu Phe Leu Leu Pro Pro Glu Leu Val Leu Glu Val Pro Leu 301 305 310 315 Glu His Pro Thr Leu Glu Trp Phe Ala Ala Leu Gly Leu Arg Trp 316 320 325 330 Tyr Ala Leu Pro Ala Val Ser Asn Met Leu Leu Glu lie Gly Gly 331 335 340 345 Leu Glu Phe Pro Ala Ala Pro Phe Ser Gly Trp Tyr Met Ser Thr 346 350 355 360 Glu lie Gly Thr Arg Asn Leu Cys Asp Pro His Arg Tyr Asn Me 361 365 370 375 Leu Glu Asp Val Ala Val Cys Met Asp Leu Asp Thr Arg Thr Thr 376 380 385 390 Ser Ser Leu Trp Lys Asp Lys Ala Ala Val Glu lie Asn Val Ala 391 395 400 405 Val Leu His Ser Tyr GIn Leu Ala Lys Val Thr He Val Asp His 406 410 415 420 His Ala Ala Thr Ala Ser Phe Met Lys His Leu Glu Asn Glu GIn 421 425 430 435 Lys Ala Arg Gly Gly Cys Pro Ala Asp Trp Ala Trp lie Val Pro 436 440 445 450 Pro lie Ser GLys er Leu Thr Pro Val Phe His GIn Glu Met Val 451 455 460 465 Asn Tyr Phe Leu Ser Pro Ala Phe Arg Tyr GIn Pro Asp Pro Trp 466 470 475 480 Lys Gly Ser Ala Ala Lys Gly Thr Gly He Thr Arg Lys Lys Thr 481 485 490 495 Phe Lys Glu Val Ala Asn Ala Val Lys lie Ser Ala Ser Leu Met 496 500 505 510 Gly Thr Val Met Ala Lys Arg Val Lys Ala Thr lie Leu Tyr Gly 51 1 515 510 525 Ser Glu Thr Gly Arg Ala GIn Ser Tyr Ala GIn GIn Leu Gly Arg 526 530 535 540 Leu Phe Arg Lys Ala Phe Asp Pro Arg Val Leu Cys Met Asp Glu 541 545 550 555 Tyr Asp Val Val Ser Leu Glu His Glu Thr Leu Val Leu Val Val 556 560 565 570 Thr Ser Thr Phe Gly Asn Gly Asp Pro Pro Glu Asn Gly Glu Ser 571 575 580 585 Phe Ala Ala Ala Leu Met Glu Met Ser Gly Pro Tyr Asn Ser Ser 586 590 595 600 Pro Arg Pro Glu GIn His Lys Ser Tyr Lys lie Arg Phe Asn Ser 601 605 610 615 lie Ser Cys Ser Asp Pro Leu Val Ser Ser Trp Arg Arg Lys Arg 616 620 625 630 Lys Glu Ser Ser Asn Thr Asp Ser Ala Gly Ala Leu Gly Thr Leu 631 635 640 645 Arg Phe Cys Val Phe Gly Leu GLys er Arg Ala Tyr Pro His Phe 646 650 655 660 Cys Ala Phe Ala Arg Ala Val Asp Thr Arg Leu Glu Glu Leu Gly 661 665 670 675 Gly Glu Arg Leu Leu Gln Leu Gly Gln Gly Asp Glu Leu Cys Gly 676 680 685 690 Gln Glu Glu Ala Phe Arg Gly Trp Ala Gln Ala Ala Phe Gln Ala 691 695 700 705 Ala Cys Glu Thr Phe Cys Val Gly Glu Asp Ala Lys Ala Ala Ala 706 710 715 720 Arg Asp lie Phe Ser Pro Lys Arg Ser Trp Lys Arg Gln Arg Tyr 721 725 730 735 Arg Leu Ser Ala Gln Ala Glu Gly Leu Gln Leu Leu Pro Gly Leu 736 740 745 750 lie His Val His Arg Arg Lys Met Phe Gln Ala Thr lie Arg Ser 751 755 760 765 Val Glu Asn Leu Gln Ser Ser Lys Ser Thr Arg Ala Thr lie Leu 766 770 775 780 Val Arg Leu Asp Thr Gly Gly Gln Glu Gly Leu Gln Tyr Gln Pro 781 785 790 795 Gly Asp His lie Gly Val Cys Pro Pro Asn Arg Pro Gly Leu Val 796 800 805 810 Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Glu Asp Pro Pro Ala Pro Thr Glu 811 815 820 825 Pro Val Ala Val Glu Gln Leu Glu Lys Gly Ser Pro Gly Gly Pro 826 830 835 840 Pro Pro Gly Trp Val Arg Asp Pro Arg Leu Pro Pro Cys Thr Leu 841 845 850 855 Arg GIn Ala Leu Thr Phe Phe Leu Asp lie Thr Ser Pro Pro Ser 856 860 865 870 Pro GIn Leu Leu Arg Leu Leu Ser Thr Leu Ala Glu Glu Pro Arg 871 875 880 885 Glu GIn GIn Glu Leu Glu Ala Leu Ser GIn Asp Pro Arg Arg Tyr 886 890 895 900 Glu Glu Trp Lys Trp Phe Arg Cys Pro Thr Leu Leu Glu Val Leu 901 905 910 915 Glu GIn Phe Pro Ser Val Ala Leu Pro Ala Pro Leu Leu Leu Thr 916 920 925 930 GIn Leu Pro Leu Leu GIn Pro Arg Tyr Tyr Ser Val Ser Ser Ala 931 935 940 945 Pro Ser Thr His Pro Gly Glu lie His Leu Thr Val Ala Val Leu 946 950 955 960 Ala Tyr Arg Thr GIn Asp Gly Leu Gly Pro Leu His Tyr Gly Val 961 965 970 975 Cys Ser Thr Trp Leu Ser GIn Leu Lys Pro Gly Asp Pro Val Pro 976 980 985 990 Cys Phe Me Arg Gly Ala Pro Ser Phe Arg Leu Pro Pro Asp Pro 991 995 1000 1005 Ser Leu Pro Cys lie Leu Val Gly Pro Gly Thr Gly lie Ala Pro 1006 1010 1015 1020 Phe Arg Gly Phe Trp GIn Glu Arg Leu His Asp lie Glu Ser Lys 1021 1025 1030 1035 Gly Leu Gln Pro Thr Pro Met Thr Leu Val Phe Gly Cys Arg Cys 1036 1040 1045 1050 Ser Gln Leu Asp His Leu Tyr Arg Asp Glu Val Gln Asn Ala Gln 1051 1055 1060 1065 Gln Arg Gly Val Phe Gly Arg Val Leu Thr Ala Phe Ser Arg Glu 1066 1070 1075 1080 Pro Asp Asn Pro Lys Thr Tyr Val Gln Asp He Leu Arg Thr Glu 1081 1085 1090 1095 Leu Ala Ala Glu Val His Arg Val Leu Cys Leu Glu Arg Gly His 1096 1100 1105 1110 Met Phe Val Cys Gly Asp Val Thr Met Ala Thr Asn Val Leu Gln 1111 1115 1120 1125 Thr Val Gln Arg lie Leu Ala Thr Glu Gly Asp Met Glu Leu Asp 1126 1130 1135 1140 Glu Ala Gly Asp Val He Gly Val Leu Arg Asp Gln Gln Arg Tyr 1141 1145 1150 1155 His Glu Asp He Phe Gly Leu Thr Leu Arg Thr Gln Glu Val Thr 1156 1160 1165 1170 Ser Arg lie Arg Thr Gln Ser Phe Ser Leu Gln Glu Arg Gln Leu 1171 1175 1180 1185 Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Ser Asp Thr 1186 1190 1195 1200 Asn Ser Pro 1201 1203 Las siguientes secuencias del fragmento de la (NO) sintasa endotelial están específicamente previstas como antígenos apropiados: SEQ ID NO: 17 Pro Trp Ala Phe 1192 1195 SEQ ID NO: 18 Gly Ala Val Pro 1189 1192 SEQ ID NO: 19 Arg 1185 His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro 1186 1190 1195 1200 Asp Thr Pro Gly Pro 1201 1205 SEQ ID NO: 20 Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro 11941195 1200 Asp Thr Pro Gly Pro 1201 1205 SEQ ID NO: 21 His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp 1186 1190 11951196 SEQ ID NO: 22 His Leu Arg Gly Ala Val Pro Trp Ala Phe Asp Pro Pro Gly Pro 1186 1190 1195 1200 Asp Thr Pro Gly Pro 1201 1205 La forma activa potenciada de cada componente de la combinación puede ser preparado a partir de la solución inicial de dinamización homeopática, utilizando preferentemente el método de disminución de la concentración proporcional de dilución en serie de una parte de cada solución anterior (a partir de la solución inicial) en 9 partes (por dilución decimal), o en 99 partes (para la dilución centesimal), o en 999 partes (para la dilución milésimas) de un disolvente neutro, junto con el impacto externo, Preferiblemente, el impacto externo consiste en sacudir varias veces de forma vertical (dinamización) cada dilución Preferiblemente, los contenedores se utilizan por separado para cada dilución posterior hasta el nivel de potencia requerida, o el factor de dilución Este método es bien aceptado en la técnica homeopática. Referirse a V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967, p. 14-29, incorporado aquí como referencia para el propósito indicado.

Por ejemplo, para preparar una dilución de 12 centésimas (denominado C12), una parte de la solución de la matriz inicial de anticuerpos contra el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humanocon la concentración de 3,0 mg / mi se diluye en 99 partes de solución acuosa neutral muchas o solución acuosa de alcohol disolvente (preferiblemente, el 15%, alcohol etílico) y luego se agitan verticalmente (10 y más veces) para crear la primera dilución centesimal (denotada como C1). La dilución centesimal segunda (C2) se prepara a partir de la dilución C1 primera centesimal. Este procedimiento se repite 11 veces para preparar la 12a dilución centesimal C12. Así, el 12° de dilución centesimal C12 representa una solución obtenida por 12 diluciones seriadas de una parte de la solución de la matriz inicial de anticuerpos contra el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humanocon la concentración de 3,0 mg / mi en 99 partes de un disolvente neutro en diferentes contenedores, lo que equivale a la dilución homeopática centesimal C12. Procedimientos similares con el factor de dilución correspondiente se realizanpara obtener diluciones C30 y C200. Las diluciones intermedias pueden ser probadas en un modelo biológico deseado para comprobar la actividad. El ideal activado de formas potenciadas por los anticuerpos que comprende la combinación de la invención es una mezcla de C12, C30, C200 y diluciones. Cuando se utiliza la mezcla de varias diluciones homeopáticas (principalmente centesimal) de la sustancia activa como componente líquido biológicamente activo, cada componente de la composición (por ejemplo, C12, C30, C200) se prepara por separado de acuerdo con el procedimiento antes descrito hasta que la próxima y última dilución se obtiene (por ejemplo, hasta C11 , C29 y C199, respectivamente), y luego una parte de cada componente se agrega en un contenedor de acuerdo con la composición de la mezcla y se mezcla con la cantidad necesaria de solvente (por ejemplo, con 97 piezas para la dilución centesimal).

Es posible el uso de la sustancia activa como mezcla de varias diluciones homeopáticas, por ejemplo, decimal y / o centesimal (D 20, C 30, C100 o C12, C30, C50, etc.), la eficiencia de las cuales se determina experimentalmente mediante pruebas de la dilución en un modelo biológico adecuado, por ejemplo, en los modelos descritos en los ejemplos en este documento.

En el curso de la disminución de la potenciación y la concentración, la sacudida vertical puede ser sustituida por la exposición externa a los ultrasonidos, campos electromagnéticos o cualquier otro procedimiento similar de impacto externo aceptado en el arte homeopática.

Preferiblemente, la composición farmacéutica de la invención puede estar en forma de un líquido o en la forma de dosificación sólida. La forma ideal de líquido de la composición farmacéutica es una mezcla, preferiblemente, en una proporción de 1 :1 de la forma activa potenciada de anticuerpos del fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humanoy la forma activa potenciada de anticuerpos de la sintasa de (NO) endotelial. El vehículo líquido ideal es el agua o agua con una mezcla de alcohol etílico.

La forma de dosificación sólida de la composición farmacéutica de la invención puede ser preparada mediante el uso de impregnación de un soporte sólido farmacéuticamente aceptable con la mezcla de la solución acuosa de forma activa potenciada o soluciones acuosas de alcohol de los componentes activos, éstos se mezclan, principalmente en una proporción de 1 :1 y se utiliza en forma de dosificación líquida. Por otra parte, el portador puede ser impregnado consecutivamente con cada dilución necesaria. Ambos órdenes de impregnación son aceptables.

Preferiblemente, la dosificación de la composición farmacéutica de forma sólida es preparada a partir de los gránulos del portador farmacéuticamente aceptable, el cual estaba saturado previamente con las diluciones acuosas o acuoso-alcohólicas de forma activa potenciada de anticuerpos frente al fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano y la forma activada potenciada de anticuerpos frente a la sintasa de (NO) endotelial. La forma de dosificación sólida puede ser en cualquier forma conocida en la técnica farmacéutica, incluyendo una tableta, cápsula, pastilla oral, y otros. Como ingredientes farmacéuticos inactivos se puede utilizar la glucosa, sacarosa, maltosa, almidón, isomaltosa, isomalt y otros mono-oligo y polisacáridos utilizados en la fabricación de productos farmacéuticos, al igual que en mezclas tecnológicas de los ingredientes inactivos farmacéuticos mencionados con otros excipientes farmacéuticamente aceptables(por ejemplo, isomalt, crospovidona, ciclamato sódico, sacarina de sodio, ácido cítrico anhidro, etc.), incluidos los lubricantes, disgregantes, aglutinantes y agentes colorantes. Los medios de transporte preferidos son la lactosa e isomalt. La forma farmacéutica puede además incluir excipientes farmacéuticos estándar, por ejemplo, celulosa microcristalina y estearato de magnesio.

Para preparar la forma oral sólida, 100-300 micros gránulos de lactosa son impregnados con soluciones acuosas o acuoso-alcohólicas de forma activa potenciada de anticuerpos a la histamina, forma activa potenciada de anticuerpos hacia el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humanoy la forma activada potenciada de anticuerpos frente a la sintasa de (NO) endotelial en la proporción de 1 kg de solución de anticuerpos de 5 a 10 kg de lactosa (1 :5 a 1 :10). Para que la impregnación pueda ocurrir, los gránulos de lactosa son expuestos al riego de saturación en la cama de fluido en ebullición en una planta de la cama de ebullición (por ejemplo, "Hüttlin Pilotlab" por Hüttlin GmbH) con posterior secado a través de flujo de aire caliente a una temperatura por debajo de 40°C. La cantidad estimada de los gránulos secos (10 a 34 partes de peso) saturada con la forma activa potenciada de anticuerpos se coloca en la mesa de mezclas, y se mezcla con 25 a 45 partes en peso de lactosa pura "no-saturada" (utilizado para los fines de la reducción de costes y la simplificación y aceleración de los procesos tecnológicos sin disminuir la eficiencia del tratamiento), junto con 0,1 a 1 partes en peso de estearato de magnesio, y de 3 a 10 partes en peso de celulosa microcristalina. La masa de tableta obtenida es uniformementemixta, y en tabletas por contacto directo de prensado en seco (por ejemplo, en una Prensa de Tabletas Korsch -XL 400), para formar pastillas redondas de 150 a 500 mg, preferiblemente, de 300 mg. Después del proceso de elaborar tabletas, pastillas de 300 mg se obtienenmediante la saturación con una solución acuosa de alcohol en la solución (desde 3,0 hasta 6,0 mg / pastilla) de la combinación de la forma activa potenciada de anticuerpos del fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano y la forma activa potenciada de anticuerpos a la sintasa de (NO) endotelial. Cada componente de la combinación utilizada para impregnar el soporte está en forma de una mezcla de diluciones homeopáticascentesimales C12, C30, y C50, o una mezcla de diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200.

Mientras que la invención no se limita a ninguna teoría específica, se cree que la forma activa potenciada de los anticuerpos descritos en este documento no contiene la forma molecular de los anticuerpos en la cantidad suficiente para tener actividad biológica atribuida tal forma molecular. La actividad biológica de la combinación de la invención es ampliamente demostrada en los ejemplos adjuntos.

La composición farmacéutica de la invención puede ser utilizada para la administración a pacientes con cualquier tipo de diabetes.

Dicha composición farmacéutica se puede utilizada en el tratamiento de la Diabetes Mellitus como una monoterapia de la hiperglucemia y de la terapia compleja como un complemento a la terapia de reemplazo de insulina; y/o con hipoglucemiantes orales, tales como biguanidas (metformina), sulfonilureas (glibenclamide, glipizida, gliclazida, glicvidone, glimepirida), las tiazolidinedionas (rosiglitazona), inhibidores de alfa glucosidasa (acarbosa), etc., así como complemento para acompañar la terapia de la Diabetes Mellitus para prevenir complicaciones relacionadas a la diabetes.

Como se muestra en los ejemplos adjuntos, la administración de la combinación de la invención de estos pacientes mejora los niveles de glucosa en la sangre.

EJEMPLOS Ejemplo 1.

Los dos estudios experimentales han investigado los efectos de los anticuerpos contra el fragmento C-terminal del receptor de insulina humanop-subunidad de antígeno purificado por afinidad, en la ultra-baja dosis, que se obtiene por la súper dilución de la solución de matriz inicial 10012, 10030, 100200veces (ULD anti-IR), los anticuerpos de la sintasa de (NO) endotelialpurificados por afinidad de antígeno, de ultra baja dosis, que se obtiene por la hiper-dilución de la solución de la matriz inicial de 10012, 10030, 100200(ULD anti-ULD anti-eNOS), así como la combinación de ultra baja dosis de anticuerpos contra el fragmento C-terminal del receptor de la insulina ß-subunidad y de muy baja dosis de anticuerpos contra la sintasa de (NO) endotelial (ULD anti-IR + ULD anti-eNOS).

Según el criterio de la Organización Mundial de la Salud (OMS), la Diabetes Mellitus (Tipo 1 y 2) se caracteriza por un aumento en el nivel de glucosa en la sangre (hiperglucemia) y por las perturbaciones de tolerancia a la glucosa. Ésta última puede ser causada por una secreción anormal de insulina y/o por disminución de sensibilidad a la insulina de los tejidos periféricos. La prueba de tolerancia a la glucosa, sobre la base de la evaluación dinámica de la capacidad de los tejidos del cuerpo para utilizar la glucosa, es un método sensible para evaluar el problema de la perturbación de tolerancia a la glucosa del cuerpo.

Estudio 1.

En el estudio, 150 ratas Wistar machos fueron utilizadas (peso al inicio del estudio de 250 a 300 g, edad 3,5 a 4 meses). 10 ratas estaban intactas. El resto se inyectó por vía intravenosa con estreptozotocina a la dosis de 50 mg / kg (modelo experimental de Diabetes Mellitus). 72 horas después de la inyección de estreptozotocina, ratas con niveles de glucosa en el plasma sanguíneo de menos de 12 mmol/L fueron seleccionados, divididos en 7 grupos (20 ratas en cada uno), en los que en 21 días se les administró agua destilada (5 mi / kg / día, una vez al día intragástrica), la Insulina® (8 unidades / kg / día, subcutánea), Rosiglitazona® (8 mg / kg / día, dos veces al día intragástrica), ULD anti-IR (2,5 mi / kg / día en un volumen de 5 mi / kg / día, una vez al día intragástrica), ULD anti-IR + ULD anti-ENOS (5 mi / kg / día, una vez al día intragástrica), y también la Insulina® y Rosiglitazona® juntos o ULD anti-IR + ULD anti-eNOS y la Insulina®, de acuerdo con los regímenes correspondientes a cada preparación (como se describió anteriormente). Las ratas intactas recibieron agua destilada en el mismo volumen. En los días 7, 14 y 21 de la inyección de preparados en ratas, rápidos niveles de glucosa en la sangre medidos con el método enzimático (método de la glucosa oxidasa) con la utilización de "glucosa FKD kits" (Rusia).

Prueba oral de tolerancia a la glucosa (SOG) se llevó a cabo el día 14 del estudio (día 14 de la administración de la preparación) de acuerdo con el método estándar (Du Vigneaud y Karr, 1925). Las ratas se mueren de hambre con el agua durante 18 horas. 60 minutos antes de la prueba se les dio las últimas sustancias de prueba. Ratas intactas recibieron agua destilada en el mismo volumen. La glucosa se administra por vía oral 50% w/w solución de glucosa al agua (1 g / kg de peso del animal). Glucosa en suero de muestras de sangre de vena de la cola se midió mediante el uso de "glucosa FKD kit" (OOO "Pharamaceutical and clinical diagnostics, Russia, www.fkd.ru") a 0, 30, 60, 90, 120 min. El área media bajo la curva de concentración de glucosa (AUC) en la sangre a través del tiempo se ha calculado.

La inyección de estreptozotocina llevado a un aumento sustancial de la glucosa en el plasma sanguíneo de las ratas en comparación con animales intactos (18 mmol/L frente a 3,5 mmol / 1, p <0,05). En el ULD anti-IR grupo, el día 7, 14 y 21 de la inyección de la preparación, el nivel de glucosa fue menor que en el grupo control por 22 a 28% en promedio, sin embargo, las diferencias no llegaron a un nivel estadísticamente significativo La combinación de ULD anti-IR y anti eNOS fue más eficaz, la disminución del nivel de glucosa en los días 14 y 21 del experimento fueron 47% y 42%, respectivamente (p <0,05 frente a control). La preparación de referencia, la Rosiglitazona, también redujo los niveles de glucosa en el día 14 y 21 del experimento, en el que, el efecto fue estadísticamente significativo en el día 14 del experimento único (36%, p <0,05 frente a control).

Insulina se inyecta en la mitad de la dosis efectiva (seleccionado en el estudio preliminar) con glucosa mejormente disminuida en todos los períodos de observación (hasta el nivel del control intacto). (Figura 1). Hay que tener en cuenta que la insulina de acción corta que se utilizó en el estudio de la glucosa en plasma y la sangre se midió una hora después de su inyección, lo que también influyó el efecto de la media dosis de insulina en el nivel de glucosa en la sangre. En este contexto, no fue posible determinar plenamente lo que el efecto del uso combinado de insulina y rosiglitazona o la insulina y el complejo de ULD anti-IR + anti-eNOS establece.

Perturbación a la tolerancia a la glucosa (disminución de la utilización de glucosa por el cuerpo) es uno de los indicadores más importantes en el diagnóstico y el tratamiento de la Diabetes ellitus. En los animales intactos, en la prueba de tolerancia a la glucosa oral (día 14 de la inyección de preparados), la preparación de complejos ULD anti-IR + ULD anti-eNOS y la insulina más efectivamente aumento la tolerancia de la glucosa cuando se administró sola. Rosiglitazona también redujo el área bajo la curva de concentración en el tiempo (mayor tolerancia a la glucosa), sin embargo, su eficacia no fue estadísticamente significativa frente al grupo control (Figura 2).

Estudio 2.

En el estudio, 36 ratas Goto-Kakizaki machos se utilizaron (peso al inicio del estudio de 250-280 g, la edad de 10-12 semanas). Las ratas de esta línea se caracterizan por el desarrollo espontáneo de la Diabetes no dependiente a la insulina. Los animales fueron divididos en 3 grupos (12 ratas en cada uno) y recibieron agua destilada (5 mi / kg una vez al día intragástrica), o ULD anti-IR (2,5 mi / kg una vez al día intragástrica), o ULD anti-IR + ULD anti-ENOS (5 mi / kg una vez al día intragástrica) durante 28 días. El nivel de glucosa en plasma se midió con la ayuda de un analizador de glucosa (Beckman, Fullerton, California, EE.UU.) antes de iniciar la inyección de las preparaciones y en los días 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28 de inyección de las preparaciones. El día 28, una prueba de tolerancia a la glucosa se llevó a cabo (la glucosa por vía oral, 1 g / kg) La inyección de ULD anti-IR llevó a una disminución significativa (p <0,05) en el nivel de glucosa en el plasma sanguíneo de las ratas, sin embargo, la utilización de complejos ULD anti-IR + ULD anti-eNOS fue más eficaz (p <0,001 frente a control) (Figura 3).

Los resultados fueron confirmados por los datos de la prueba de tolerancia a la glucosa realizada el día 28 de la inyección de preparados (Figura 4). La inyección de ULD anti-IR llevó a un aumento en la tolerancia a la glucosa (disminución estadísticamente significativa en un 44% en la curva de concentraciónversus control).AI mismo tiempo, la reducción de este parámetro (AUC), causada por la inyección de complejo ULD anti-IR + ULD anti-eNOS fue del 62% y fue estadísticamente significativa frente al control (p <0,05).

Ejemplo 2 Un estudio clínico de la combinación de dosis ultra baja de anticuerpos contra el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano (ULD anti-IR) y de muy baja dosis de anticuerpos frente a la sintasa de (NO) endotelial (ULD anti-eNOS), cada uno en forma de mezcla de agua y alcohol de las diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnados en isomalt se realizó en los seres humanos.

Un estudio abierto no comparativo de la eficacia y seguridad de ULD anti-IR + ULD anti-eNOS en los pacientes con Diabetes Mellitus (DM) Tipo 1 , incluyendo pacientes con un diagnóstico de la DM Tipo 1 de intensidad leve a moderada, sin signos de patología graves y micro-vasculares. Después de obtener el consentimiento voluntario del paciente para la participación en el ensayo clínico, un estudio inicial se realizó con el propósito de establecer si el paciente cumplía con el criterio de inclusión / exclusión. Un "período de lavado" de dos semanas fue proporcionado antes del inicio del estudio, durante el cual un examen de los pacientes se llevó a cabo (las quejas, la glucemia en ayunas, hemoglobina glicosilada, perfil glucémico diario y lipoproteinograma así y la eficacia y seguridad de los actuales tratamiento fueron evaluados). En un estudio de 12 semanas, los objetivos clave se midieron en las semanas de "limpieza interna", y luego en las semanas 6 y 12 del tratamiento. En 4 pacientes, durante la "limpieza interna" y al final del estudio, la supervisión continua del nivel de glucemia se había llevado a cabo con la ayuda del sistema CGMS. El sistema de control de la glucosa continua (CGMS) hace que sea posible controlar el nivel de glucosa durante tres días. Los resultados muestran cómo el nivel de glucosa durante 3 días cambia, dependiendo de la terapia con insulina y el estilo de vida. Estos datos ayudan a diferenciar los períodos de nivel de glucosa alta o baja dependiendo de la dieta, la ingesta de medicamentos o de la carga física. El sistema en forma gráfica muestra el nivel de glucosa mínimo de 2,2 mmol / L, los valores máximos de hasta 22,2 mmol / L, y también el nivel medio diario de glucosa en sangre.

Los pacientes con DM de Tipo 1 , de leve a moderada gravedad, en la fase de descompensación, recibieron la terapia de insulina estándar antes de la inclusión y durante el estudio: 1. Insulinas de acción prolongada (Protaphane®, Lantus®) en dosis promedio de 12 a 26 U / día. 2. Las insulinas de acción corta (Apidra®, NovoRapid®, Aktropid®) en las dosis medias: • Mañana 8.10 U / día •Almuerzo 12.08 U / día •Cena 8.13 U / día.

Después de confirmar la capacidad del paciente para participar, el paciente se incluyó en el estudio y, como un complemento a la terapia estándar de la DM de Tipo 1 recibió la preparación ULD anti-IR + ULD anti-eNOS; la pauta de administración depende del grado de la severidad y la compensación de la DM Tipo 1. Los pacientes incluidos en el estudio recibieron terapia por preparación en diferentes dosis de ULD anti-IR + ULD anti-eNOS: 1. Cuatro pacientes— 1 comprimido 4 veces al día a las 8:00 AM, 12:00 PM, 6:00 PM, 10:00 PM. 2. Dos pacientes— 1 comprimido 2 veces al día a las 8:00 AM, 6:00 PM.

En las semanas 3 y 8, el perfil glucémico diario también fue controlado (ocho puntos de medición) y los pacientes fueron contactados por teléfono (teléfono "visitas"). Los exámenes clínicos fueron realizados cada semana. Como un total, los pacientes habían sido observados durante 14 semanas.

Seis pacientes fueron incluidos en el estudio, cinco de los cuales lo completaron de acuerdo con el protocolo del estudio.La evaluación de la glucemia se realizó por ocho puntos de perfil diario de glucosa en una línea de base y después de la semana 3, 6 y 12 del tratamiento El nivel de hemoglobina glicosilada se determinó en un inicio y después de 12 semanas de tratamiento.

Todos los pacientes de DM Tipo 1 incluidos en el estudio mostraron señas de que la glucemia tendía a disminuir todos los días después de un tratamiento de 6 semanas con los fármacos del estudio. De acuerdo con ocho puntos de perfil diario de glucosa, una reducción media de glucemia de 20% se registró en los pacientes con DM de Tipo 1. Después de 12 semanas de tratamiento, la hemoglobina glucosilada fue en promedio 10-15% más bajos en comparación con el valor base.

De acuerdo con los resultados del monitoreo continuo de glucosa con el sistema CGMS en todos los pacientes, la terapia de 3 meses por ULD anti-IR + ULD anti-Enos resultó en una reducción de la glucemia media diaria y la disminución de las oscilaciones de la glucemia mínimo y máximo de 15 a 20 % de la línea de base.

En el paciente N° 103 con DM Tipo 1 en una fase de descompensación, una caída significativa de la glucemia todos los días del 48% se observó inesperadamente (1 semana - 8,0 mmol / L, 12 semanas - 4,8 mmol / L), que requiere una corrección del tratamiento de insulina (reducción de la dosis diaria de insulina de acción corta hasta 8 U / d). La dinámica de la glucemia en la media y la hemoglobina glicosilada se muestra en la Figura 5.

En el curso del estudio, eventos adversos no fueron registrados, incluyendo adversos graves, lo que evidencia la seguridad de la preparación.

Ejemplo 3 Un estudio clínico de la combinación de dosis ultra baja de anticuerpos contra el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano (ULD anti-IR) y de muy baja dosis de anticuerpos frente a la sintasa de (NO) endotelial (ULD anti-eNOS), cada uno en forma de mezcla de agua y alcohol de las diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnado en isomalt se realizó en los seres humanos.

Un estudio abierto no comparativo de la eficacia y segundad de ULD anti-IR + ULD anti-eNOS en los pacientes con Diabetes Mellitus Tipo 2 (DM) incluyó a pacientes con un diagnóstico de la DM Tipo 2 de severidad leve a moderada, sin signos graves y patología micro-vascular, quienes recibieron media dosis terapéuticas de Metformina. Después de obtener el consentimiento informado voluntario del paciente para la participación en el ensayo clínico, un estudio inicial se realizó con el propósito de establecer si el paciente cumplía inclusión / exclusión. Tras la confirmación de la posibilidad de participar en el estudio, el paciente recibió 1 comprimido de Subbetta 4 veces al día, además de la terapia estándar de DM tipo 2. Un tiempo de dos semanas denominado: "período de lavado" fue proporcionado antes del inicio del estudio, durante el cual un examen de los pacientes se llevó a cabo (las quejas, la glucemia en ayunas, hemoglobina glicosilada, perfil glucémico diario y lipoproteinograma, indicadores del índice de resistencia a la insulina (HOMA-IR), también como la eficacia y seguridad del tratamiento actual se evaluaron). En un estudio de 12 semanas, los objetivos clave se midieron en las semanas de "período de lavado", y luego en las semanas 6 y 12 del tratamiento. En 4 pacientes, durante el " período de lavado" y al final del estudio, la supervisión continua del nivel de glucemia se había llevado a cabo con la ayuda del sistema CGMS. En las semanas 3 y . 8, ocho puntos el perfil glucémico fueron adicionalmente controlados y "visitas teléfono" fueron realizadas. La condición clínica fue revisada cada semana. En general, el paciente fue observado durante 14 semanas.

Once pacientes con Diabetes (DM) Tipo 2 en la fase de descompensación se incluyeron en el estudio. Uno de los pacientes voluntarios abandonó el estudio. El resto de los pacientes siguen el tratamiento. En pacientes con DM tipo 2, de acuerdo con ocho puntos de datos de perfiles diarios, uña caída promedio de la glucemia de un 20% se registró en la semana 6. En la semana 12, un descenso medio en la hemoglobina glucosilada de 15 a 19% del valor de referencia se observó.

En todos los pacientes en el curso de 12 semanas, los parámetros de los análisis de sangre (eritrocitos, hemoglobina, leucocitos, plaquetas, fórmula leucocitaria, velocidad de sedimentación globular), lipoproteinograma, electrocardiograma, prueba de función hepática (ALT, AST, bilirrubina y sus fracciones) se mantuvo dentro de límites normales.

Resistencia a la insulina, determinada por la prueba de HOMA-IR, cayó en un promedio de 17-19% del valor base.

En el curso de 12 semanas del estudio, no se registraron eventos adversos, incluyendo un los adversos-graves, lo que evidencia la seguridad de la preparación. No se observaron anormalidades en la actividad funcional del hígado tampoco.

La dinámica de la glucemia en la media y la hemoglobina glicosilada se muestra en la figura 6.

Ejemplo 4 Un paciente X. (varón, 74 años de edad) con diagnóstico de diabetes tipo 2 ha estado recibiendo Maniil® (Glibenclamida, Berlín - Chemie) a una dosis de 5 mg dos veces al día. Una úlcera necrótica profunda en los pies, específicamente en el hueso calcáneo, apareció hace 3 años a pesar del tratamiento que le dieron. El paciente fue hospitalizado dos veces en una sala de cirugía, sin embargo, el tratamiento no resultó en una mejora significativa. Una composición farmacéutica afirmó, una tableta de 250 mg, que comprende la forma activa potenciada (dosis ultra baja) de anticuerpos contra el fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina (Rl Áb) y la sintasa de (NO) endotelial (NOS Ab) impregnada en isomalt como una mezcla de diluciones homeopáticas de agua y etanol C12, C30, C200 (Rl Ab + Ab NOS) se añadió a la terapia Maniil®. Como resultado del tratamiento de un mes la dosis de Maniil® se redujo a 5 mg al día (un comprimido antes de dormir). Los niveles de glucosa en la sangre disminuyeron a valores normales (de 8-10 mmol/L a 5.6 mmol/L). El tratamiento devolvió el desarrollo de la úlcera del pie. La úlcera se limpió de masas necróticas y cuticularizado. En el examen de la úlcera la misma se ha ido, y hay un área blanca (3,5 cm de diámetro) de la descamación de la piel en el hueso calcáneo.

Claims (39)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica que comprende a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo al receptor de la insulina humana, y b) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo de la sintasa de (NO) endotelíal.

2. Una composición farmacéutica que comprende a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano, y b) una forma activa potenciada" de un anticuerpo de la sintasa de (NO) endotelial.

3. Una composición farmacéutica que comprende a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo al receptor de la insulina humana, y b) una forma activa potenciada" de un anticuerpo de la sintasa de (NO) endotelial, en donde la molécula del receptor de la insulina consiste en una subunidad alfa y una subunidad beta

4. Una composición farmacéutica que comprende vehículo sólido farmacéuticamente aceptable, y a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de una subunidad beta del receptor de insulina humano en forma de una mezcla de C12, C30 y C200 de las diluciones homeopáticas impregnados sobre dicho soporte sólido, y b) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo de la sintasa de (NO) endotelial en forma de mezcla de C12, C30 y C200 de las diluciones homeopáticas impregnado en dicho soporte sólido.

5. La composición farmacéutica de las afirmaciones 1 , 2, 3, o 4, en donde dicho anticuerpo al receptor de la insulina humana es de anticuerpos monoclonales, policlonales o natural.

6. La composición farmacéutica de la afirmación 5, en donde dicho anticuerpo al receptor de la insulina humana es un anticuerpo policlonal.

7. La composición farmacéutica de la afirmación 6, la forma "activa potenciada" de un anticuerpo a un receptor de la insulina humana es preparado por sucesivas diluciones centesimales, junto con agitación de cada dilución.

8. La composición farmacéutica de las afirmaciones 1 , 2, 3, o 4, en donde dicho anticuerpo de la sintasa de (NO) endotelialson anticuerpos monoclonales, policlonales o naturales.

9. La composición farmacéutica de la afirmación 8, donde dicho anticuerpo de la sintasa de (NO) endoteliales un anticuerpo policlonal.

10. La composición farmacéutica de la afirmación 9, la forma "activa potenciada" de un anticuerpo de la sintasa de (NO) endoteliales preparado por sucesivas diluciones centesimales, junto con agitación de cada dilución.

11. La composición farmacéutica de la afirmación 1 , donde dicho receptor de la insulina humana se compone de la secuencia seleccionada del grupo que consiste en la, SEC ID No: 1 , SEQ ID No: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID No: 5 , SEC ID No: 6, SEQ ID No: 7, SEQ ID No: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID No: 10, SEQ ID No: 11 , SEQ ID No: 12, SEQ ID No: 13, SEQ No ID: 14

12. La composición farmacéutica de la afirmación 1, caracterizado porque la sintasa de (NO) endotelialconsiste en la secuencia prevista en la SEC ID N 0 15, SEQ ID No: 16, SEQ ID No: 17, SEQ ID No: 18, SEQ ID No: 19, SEQ ID No: 20, SEQ ID No: 21 , SEQ ID NO: 22.

13. Un método para tratar la diabetes tipo I en un paciente humano, cuyo método consiste en administrar la composición farmacéutica de las afirmaciones 1 , 2, 3, o 4, a dicho paciente.

14. El método de la afirmación 13, en donde la composición farmacéutica se administra a un paciente en una forma de dosificación sólida por la administración.

15. El método de la afirmación 13, caracterizado porque la forma de dosificación es un comprimido.

16. El método de la afirmación 15, caracterizado porque la tableta se obtiene por compresión directa.

17. El método de la afirmación 15, caracterizado porque la tableta se administra de una vez al día o cuatro veces al día.

18. El método de la afirmación 15, caracterizado porque la tableta se administra dos veces al día.

19. El método de la afirmación 15, caracterizado porque la pastilla se administra cuatro veces al día.

20. Un método para tratar la diabetes tipo 2 en un paciente humano, cuyo método consiste en administrar la composición farmacéutica de las afirmaciones 1 , 2, 3, o 4 a dicho paciente.

21. El método de la' afirmación 20, en donde la composición farmacéutica se administra a un paciente en una forma de dosificación sólida.

22. El método de la afirmación 21 , que establece que forma de dosificación es un comprimido.

23. El método de la afirmación 22, caracterizado porque la tableta se obtiene por compresión directa.

24. El método de la afirmación 22, caracterizado porque la tableta se administra de una vez al día o cuatro veces al día.

25. El método de la afirmación 15, caracterizado porque la tableta se administra cuatro veces al día.

26. Un método para reducir el nivel de glucosa en sangre en un mamífero, dicho método comprende la administración de la composición farmacéutica de las afirmaciones 1, 2, 3, o 4 a dicho mamífero.

27. Él método de la afirmación 26, en donde dicho mamífero es un ser humano.

28. El método de la afirmación 27, en donde la composición farmacéutica se administra a un paciente como una o dos formas de dosificación unitaria.

29. El método de la afirmación 28, caracterizado porque la(s) forma(s) de dosificación es / son administradas de una vez al día o cuatro veces al día.

30. El método de la afirmación 29, caracterizado porque la(s) forma(s)de dosificación se administra tres veces al día.

31. Un método para tratar la resistencia a la insulina, dicho método comprende la administración de la composición farmacéutica de las afirmaciones 1 , 2, 3, o 4 para dicho mamífero.

32. El método de la afirmación 31 , en donde dicho mamífero es un ser humano.

33. El método de la afirmación 32, en donde la composición farmacéutica se administra a un paciente como una o dos formas de dosificación unitaria.

34. El método de la afirmación 33, caracterizado porque la(s) forma(s) de dosificación es / son administradas de una vez al día o cuatro veces al día.

35. El método de la afirmación 34, caracterizado porque la(s) forma(s)de dosificación se administra tres veces al día.

36. El método de la reivindicación 13, dicho método comprende además la administración de insulina o de otros agentes adicionales farmacéutica adecuada para el tratamiento de la diabetes tipo I

37. El método de la afirmación 20, dicho método comprende además la administración de agentes farmacéuticos adicionales adecuados para el tratamiento de la diabetes tipo 2.

38. Una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un paciente que sufre de diabetes o trastornos metabólicos, la composición que ha sido obtenida proveyendo a) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo al receptor de la insulina humana y b) una forma "activa potenciada" de un anticuerpo para la sintasa de (NO) endotelial, cada uno preparado por dilución consecutiva y repetida, y varias agitaciones de cada solución obtenida de acuerdo a técnicas homeopáticas, y entonces la combinación de las soluciones potenciadas mediante la mezcla de ellos, o, alternativamente, la impregnación de una masa portadora con la solución de dicho combinado o con la soluciones por separado.

39. La composición farmacéutica según la afirmación 38, en el que la forma "activo potenciada" de un anticuerpo al receptor de la insulina humana es una forma "activa potenciada" de un anticuerpo a un fragmento C-terminal de un receptor de insulina humano.