MC2069A1 - Nouveaux composes antibacteriens - Google Patents

Description

RAN 4410/218

NOUVEAUX COMPOSES ANTIBACTERIENS La présente invention concerne les composés de formule générale

R'v dans laquelle R est un hydrogène, un groupe ester facilement hydrolysable ou un groupe protecteur, R^ est un hydrogène et R2 est un hydrogène ou un groupe acyle, ou R1 et R2, pris conjointement, sont le groupe

(CKL) tfv*- dans lequel n est égal à 5, 6 ou 7, 2 n

X est un groupe fluoro, thioacyanato, azido ou le groupe R3aC02",

0

R-.-C—S-

^NR42

-S—. —SR3 . —OR3 NR4 •

-OC—N.

.♦Nj,

.NR4' fNR4 '

.Ra ou

—SC—N.

.NR4' rNR4

—SC—N.

.NR4' rNR4

R^a est un groupe alkyle en C2 à C^g, un groupe aryle, un hétérocycle, un groupe -(CH2)m-aryle, -(CH2)m-hétérocycle, hétérocycle-alcényle inférieur ou aryle-alcényle inférieur, R3 est un groupe alkyle en C1 à C^g, un groupe aryle, un

2

hétérocycle, un groupe -(CH2)m-aryle, -(CH2)m-hétérocycle, hétérocycle-alcényle inférieur ou aryle-alcényle inférieur,

et ' sont chacun indépendamment un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, 5 Ra est un hydrogène, un halogène, un groupe amino, amino-alkyle inférieur, carboxy, carbamoyle, carboxy-alkyle inférieur, carbamoyl-alkyle inférieur ou carbalcoxy inférieur-alkyle inférieur, m vaut de 1 à 4 et p vaut 3, 4 ou 5, à condition que X soit autre qu'un fluoro lorsque R est un 10 groupe protecteur. Sont également inclus, lorsque R est un hydrogène, les hydrates, les sels de ces composés, ainsi que les hydrates des sels.

Ces composés sont utiles comme agents anti-bactériens pour la prévention et le traitement des infections bacté-15 riennes chez les mammifères, y compris les humains.

Dans la description des composés de formule I et des composés tout au long de cette description, un trait effilé épaissi (-^ ) indique un substituant dans l'orientation (3 (c'est-à-dire au-dessus du plan de la molécule ou de la 20 page) et un trait pointillé ( mil)) indique un substituant dans l'orientation a (c'est-à-dire au-dessous du plan de la molécule ou de la page).

Tel qu'on l'utilise dans cette description, le terme "alkyle inférieur" désigne un groupe hydrocarboné saturé à 25 chaîne droite ou ramifiée comportant de 1 à 8, de préférence de 1 à 4, atomes de carbone, par exemple méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, t-butyle et analogues.

Le terme "alcoxy inférieur" désigne un groupe hydrocar-bonoxy à chaîne droite ou ramifiée dans lequel le fragment i

30 "alkyle inférieur" est un groupe alkyle inférieur tel que défini ci-dessus, par exemple méthoxy, éthoxy, propoxy et analogues.

Les termes "halogéno", "halogène" et "Hal" sont utilisés pour représenter les quatre formes chloro, bromo, iodo 35 et fluoro, sauf indication contraire.

3

Le terme "aryle" signifie un groupement aromatique substitué ou non substitué tel que phényle, naphtyle et analogue, qui peut comporter 1 à 3 substituants convenables comme halogéno (fluoro, chloro, bromo, etc.), hydroxy, ami-5 no, nitro, cyano, carboxy, carbamoyle, cabalcoxy inférieur, carboxy-alkyle inférieur, carbamoyl-alkyle inférieur, car-balcoxy inférieur-alkyle inférieur, amino-alkyle inférieur, alcanoyloxy inférieur, etc.

Le terme "phényle substitué" signifie un groupe phényle 10 mono- ou di-substitué par un groupe halogéno ( chloro,

bromo, fluoro, etc.), alkyle inférieur, amino, nitro ou tri-fluorométhyle.

Le terme "alkyle substitué" signifie un groupement alkyle substitué, par exemple, par un groupe halogéno (chloro, 15 fluoro, bromo, etc.), trifluorométhyle, amino, cyano, etc.

Le terme "alcényle inférieur" signifie un groupe hydrocarboné à chaîne droite ou ramifiée qui contient une double liaison oléfinique, comportant 2 à 8 atomes de carbone, par exemple allyle, vinyle, etc.

20 Le terme "cycloalkyle inférieur) signifie un groupement carbocyclique saturé à 3-8 chaînons, par exemple cyclopro-pyle, cyclobutyle, cyclohexyle, etc.

Le terme "hétérocycle" signifie des noyaux contenant plus d'un type d'atome. Les groupes hétérocycliques conve-25 nables sont, par exemple, les hétérocycles insaturés à 5-8 chaînons contenant 1 à 4 atome(s) d'azote dans le noyau (par exemple pyrrole, pyrazole, imidazole, dihydroimidazole, py-ridine et tétrazole), les hétérocycles condensés insaturés contenant 1 à 3 atome(s) d'azote dans le noyau (par exemple 30 indole), les hétérocycles insaturés à 5-8 chaînons contenant un atome de soufre dans le noyau (par exemple thiophène), les hétérocycles condensés insaturés contenant 1 à 3 atomes de soufre dans le noyau (par exemple thianthrène), les hétérocycles insaturés à 5-8 chaînons contenant un atome de 35 soufre et 1 à 2 atomes d'azote dans le noyau (par exemple

4

thiazole, dihydrothiazole, thiadiazole), les hétérocycles condensés insaturés contenant un atome de soufre et 1 à 2 atomes d'azote dans le noyau (par exemple benzothiazole), les hétérocycles insaturés à 5-8 chaînons contenant un atome 5 d'oxygène dans le noyau (par exemple furanne), les hétérocycles condensés insaturés contenant un atome d'oxygène et 1 à 2 atomes d'azote dans le noyau (par exemple benzoxazole), les hétérocycles insaturés à 5-8 chaînons contenant un atome d'oxygène et 1 à 2 atomes d'azote dans le noyau (par exemple 10 oxadiazole), etc.

Ces groupes hétérocycligues peuvent être non substitués ou mono-, di- ou trisubstitués par un groupe alkyle inférieur, carbalcoxy inférieur, alcoxy inférieur, alkylthio inférieur, hydroxy, mercapto et oxo.

15 Le terme "acyle" utilisé pour R2 dans cette description signifie et englobe tous les radicaux organiques dérivés d'un acide carboxylique par élimination du groupe hydroxyle. Bien que le groupe R2 puisse être un radical acyle quelconque parmi de nombreux radicaux acyle, certains groupes 2o acyle sont préférés.

Des exemples sont les groupes acyle qui ont été utilisés dans le passé pour acyler les p-lactamines, y compris l'acide 6-aminopénicillanique et ses dérivés et l'acide 7-aminocéphalosporanique et ses dérivés; voir, par exemple, 25 Cephalosporins and Penicillins, sous la direction de Flynn, Academic Press (1972), le brevet belge 866 038, publié le 17 octobre 1978, le brevet belge 867 994, publié le 11 décembre 1978, le brevet U.S. 4 152 432, délivré le 1er mai 1979, le brevet U.S. 3 971 778, délivré le 27 juillet 1976 et le bre-30 vet U.S. 4 173 199, délivré le 23 octobre 1979. Les références décrivant divers groupes acyle sont citées ici à titre de référence. La liste suivante de groupes acyle est présentée pour illustrer plus en détail le terme "acyle", mais ne doit pas être considérée comme étant limitative. Des 35 exemples de groupes acyle sont :

5

(a) Les groupes acyle aliphatigues de formule

10

dans laquelle R5 est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, cycloalkyle inférieur, alcoxy inférieur, alcényle inférieur, cycloalcényle inférieur, cyclohexadiényle; ou alkyle inférieur ou alcényle inférieur substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino, mercapto, alkylthio ou cyanométhylthio.

(b) Les groupes acyle aromatiques de formule

15

4

y

20

25

30

35

w x: /

R8

-S—-CH.

3~ M+

dans laquelle n est égal à 0, 1, 2 ou 3; Rg, R7 et Rg sont chacun indépendamment un hydrogène, un halogène, un groupe hydroxy, nitro, amino, cyano, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone ou aminométhyle; et Rgg est un groupe amino, acylamino, hydroxy, un sel carboxy ou sulfo, un groupe carboxy protégé tel que benzyloxycarbonyle, formyloxy ou azido.

Les groupes acyle aromatiques préférés englobent ceux de formule 1

❖ * ❖ ❖

H0—•—ai-2

et

❖ ❖

• ÇH—

❖ ❖ ❖ ❖

5

-•~sr^

90

RgO est de préférence un groupe amino, un groupe hy-droxy ou un sel carboxy ou sulfo.

Des exemples d'autres groupes acyle aromatiques conve-

*

nables pour les besoins de la présente invention sont les_ groupes sulfophénylacétyle, hydroxysulfonyloxyphénylacétyle, suifamoylphénylacétyle, (phénoxycarbony1)phénylacétyle, (p-tolyloxycarbonyl)phénylacétyle, formyloxyphénylacétyle, car-boxyphénylacétyle, formylaminophénylacétyle, benzyloxycarbo-nylphénylacétyle, 2-(N,N-diméthylsulfamoyl)-2-phénylacétyle, etc.

(c) Les groupes acyle hétéroaromatiques de formule

"loi-S"

T1

OU

R101~S~CH2"

O O

AUX

dans laquelle n est égal à 0, 1, 2 ou 3; R90 est tel que défini ci-dessus; et R^qi est un noyau hétérocyclique substitué ou non substitué à 5, 6 ou 7 chaînons, contenant 1, 2, 3 ou 4 (de préférence 1 ou 2) hétéroatomes choisis parmi les atomes d'azote, d'oxygène et de soufre. Des exemples de

8

noyaux hétérocycligues sont les noyaux thiényle, furyle, pyrrolyle, pyridinyle, pyrazinyle, thiazolyle, pyrimidinyle et tétrazolyle. Des exemples de substituants sont les groupes halogéno, hydroxy, nitro, amino, cyano, trifluoromé-5 thyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone ou alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone.

Les groupes acyle hétéroaromatiques préférés englobent les groupes de formules ci-dessus dans lesquels R]_qi est un groupe 2-amino-4-thiazolyle, 2-amino-5-halogéno-4-thiazo-10 lyle, 4-aminopyridine-2-yle, 2-amino-l,3,4-thiadiazole-5-yle, 2-thiényle, 2-furannyle, 4-pyridinyle ou 2,6-dichloro-4-pyridinyle.

(d) Les groupes [[(2,3-dioxy-l-pipérazinyl 4-substi-tué)carbonyl]amino]acétyle de formule

15

30

J J

-C——NH—C

N ✓

\

✓N R120

m o o

20 dans laquelle Rm est un groupe alkyle inférieur, hydroxy-alkyle inférieur ou un groupe hétérocyclique aromatique ou carbocyclique, tel que ceux de formule

R„

R,

25

dans laquelle Rg, R7 et Rg sont tels que définis ci-dessus ou sont les groupes hétéroaromatiques inclus dans la définition de Rioi' et r120 est un grouPe alkyle inférieur, alkyle inférieur substitué (dans lequel le groupe alkyle est substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino ou mercapto), par exemple 4-alkyl inférieur (de préférence éthyl ou méthyl)-2,3-dioxo-l-pipérazinecarbonyl-D-phé-35 nylglycyle.

9

(e) Les groupes (oxyimino substitué)arylacétyle de formule

5

101

130

dans laquelle R]_oi est tel <ïue défini ci-dessus et R130 est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur ou cycloalkyle en C3-C7 ou alkyle inférieur substitué [dans lequel le groupe 10 alkyle est substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino, mercapto, alkylthio inférieur, groupes aromatiques (tels que définis pour Rm.)/ carboxy (y compris leurs sels), amido, carbamoyle, alcoxycarbonyle inférieur, phénylméthoxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle, hydroxyal-15 coxyphosphinyle, dihydroxyphosphinyle, hydroxy(phényl-

méthoxyJphosphinyle ou di(alcoxy inférieur)phosphinyle], ou carboxy-(cycloalkyle en C3-C7).

sont les groupes [2—[(chloroacétyl)amino3-4-thiazolyl]-(méthoxyamino)acétyle, (2-amino-4-thiazolyl)(1-méthyléthoxy-25 imino)acétyle, (2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyle, (2-furyl)(méthoxyimino)acétyle, (4-hydroxyphényl)(méthoxyimino )acétyle, (méthoxyimino)(phényl)acétyle, (hydroxyimino )(phényl)acétyle, (hydroxyimino)(2-thiényl)acétyle, [[(dichloroacétyl)oxy]imino](2-thiényl)acétyle, [5-chloro-2-30 [(chloroacétyl)amino]-4-thiazolyl](méthoxyimino)acétyle, (2-amino-5-chloro-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyle, t E[l-d/l-dimé thylé thoxy )carbonyl]-1-méthyléthoxy]imino]-2-suifoamino-4-thiazolyl)acétyle, [[[1—(1,1-diméthyléthoxy)carbonyl]-l-méthyléthoxy]imino]-[[2-(triphénylméthyl)amino]-4-thiazo-35 lyl]acétyle, (méthoxyimino)(2-sulfoamino-4-thiazolyl)-

Des exemples du groupement

20

101

10

25

30

acétyle, [(1-méthyléthoxy)imino]-[2-[(méthylsulfonyl)amino]-4-thiazolyl]acétyle, [(3-méthylsulfonyl)-2[3H]-thiazolimine-4-y1]-[1-(méthyléthoxy)imino]acétyle, [[2-(chloroacétyl)-amino]-4-thiazolyl][[[[(4-nitrophényl)méthoxy]carbonyl]-méthoxy]imino]acétyle, (2-amino-4-thiazolyl)[(carboxy-méthoxy)imino]acétyle, (2-amino-4-thiazolyl)[1-carboxy-(1-méthyléthoxy)imino]acétyle, (2-amino-4-thiazolyl)[[(amino-carbonyl)méthoxy]imino]acétyle.

(f) Les groupes (acylamino)acétyle de formule

10

ÇH—NH—Î-

:—CH-111

140

dans laquelle Rm est tel que défini ci-dessus et R140 est 15 un hétérocycle insaturé, un groupe de formule

ou

20

(dans laquelle Rg, R7, Rg et n sont tels que définis ci-des-sus), un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, alkyle inférieur substitué, amino, alkylamino inférieur, di(alkyl inférieur) amino, (cyanoalkyl inférieur)amino, hydrazino, alkyl inférieur hydrazino, arylhydrazino ou acylhydrazino.

Les groupes (acylamino)acétyle préférés de formule ci-dessus englobent les groupes dans lesquels R140 est un groupe amino ou acylamino. On préfère aussi les groupes dans lesquels Rm est un groupe phényle ou 2-thiényle.

(g) Les groupes oxyiminoacétyle substitués de formule

140

35 dans laquelle Rm et R140 sont tels que définis ci-dessus

11

et R22 et R23 sont indépendamment choisis dans le groupe constitué par un hydrogène et un groupe alkyle inférieur, ou bien R22 et R23f pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont fixés, forment un noyau carbocyclique en C3-C7, par exemple cyclopropyle, cyclobutyle ou cyclopentyle.

Les groupes oxyiminoacétyle substitués préférés de formule ci-dessus englobent ceux dans lesquels R140 est un groupe hydroxy ou amino. On préfère aussi les groupes dans lesquels Rm est un groupe 2-amino-4-thiazolyle.

(h) Les groupes [[[2-oxo-l-imidazolidinyl 3-substi-tué]carbonyl]amino]acétyle de formule dans laquelle Rm est tel que défini ci-dessus et R^5 est un hydrogène, un groupe alkylsulfonyle inférieur, arylméthy-lèneamino (à savoir -N=CHRm, où R]_n est tel que défini ci-dessus), -COR^g (où R^g est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur ou alkyle inférieur halogéno-substitué), un groupe aromatique (tel que défini pour Rm ci-dessus), alkyle inférieur ou alkyle inférieur substitué (dans lequel le groupe alkyle inférieur est substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino ou mercapto).

Les groupes [[[2-oxo-l-imidazolidinyl 3-substi-tué3carbonyl3amino]acétyle préférés répondant à la formule ci-dessus englobent ceux dans lesquels Rm est un groupe phényle ou 2-thiényle. On préfère aussi les groupes dans lesquels R]_5 est un hydrogène, un groupe méthylsulfonyle, phénylméthylèneamino ou 2-furylméthylèneamino.

Les composés préférés de formule I sont ceux dans lesquels X est

O

3 II 2~. R —C—S

-SR3 et -OR3

12

Les composés particulièrement préférés sont ceux dans lesquels R3a et R3 sont indépendamment un groupe aryle ou un hétérocycle.

Comme esters facilement hydrolysables des composés de 5 formule I, il faut entendre les composés de formule I dont le(s) groupe(s) carboxy (à savoir le groupe 2-carboxy) est/sont présent(s) sous forme de groupes esters facilement hydrolysables. Des exemples de ces esters, qui peuvent être du type classique, sont les esters alcanoyloxyalkyliques in-10 férieurs (par exemple l'ester acétoxyméthylique, pivaloyl-oxyméthylique, 1-acétoxyéthylique et 1-pivaloyloxyéthyli-que), les esters alcoxycarbonyloxyalkyliques inférieurs (par exemple l'ester méthoxycarbonyloxyméthylique, l'ester 1-éthoxycarbonyloxyéthylique et l'ester 1-isopropoxycarbony-15 loxyéthylique), les esters lactonyliques (par exemple l'ester phtalidylique et l'ester thiophtalidylique), les esters alcoxyméthyliques inférieurs (par exemple l'ester mé-thoxyméthylique) et les esters alcanoylaminométhyliques inférieurs (par exemple l'ester acétamidométhylique). D'autres 20 esters (par exemple les esters benzyliques et cyanométhyli-ques) peuvent également être utilisés.

Des exemples de sels des composés de formule I sont les sels de métaux alcalins comme le sel de sodium et le sel de potassium, le sel d'ammonium, les sels de métaux alcalino-25 terreux comme le sel de calcium, les sels avec des bases organiques comme les sels avec les aminés (par exemple les sels avec la N-éthyl-pipéridine, la procaïne, la dibenzyl-amine, la N,N'-dibenzyléthylènediamine, les alkylamines ou les dialkylamines), ainsi que les sels avec des aminoacides 30 comme, par exemple, les sels avec l'arginine ou la lysine. Les sels peuvent être des monosels, des disels ou des tri-sels .

Les composés de formule I forment également des sels d'addition avec les acides organiques ou minéraux. Des 35 exemples de ces sels sont les halogénhydrates (par exemple

13

les chlorhydrates, les brorahydrates, les iodhydrates), ainsi que d'autres sels d'acides minéraux comme les sulfates, les nitrates, les phosphates et analogues, les alkylsulfonates et les monoarylsulfonates tels que les éthanesulfonates, les toluènesulfonates, les benzènesulfonates et analogues, et aussi d'autres sels d'acides organiques comme les acétates, les tartrates, les maléates, les citrates, les benzoates, les salicylates, les ascorbates et analogues.

Les composés de formule I, leurs sels et esters et les hydrates de ces composés sont utiles comme agents pour lutter contre les infections bactériennes (notamment les infections des voies urinaires et respiratoires) chez les mammifères, par exemple les chiens, les chats, les chevaux et les hommes. Ces composés présentent une activité contre un grand éventail de bactéries Gram négatives.

L'activité in vitro des composés de la présente invention, mesurée par la concentration inhibitrice minimale (MIC) en microgrammes par millilitre (mg/ml), au moyen de la méthode de diffusion en puits de gélose, contre une variété de microorganismes Gram négatifs, est illustrée dans le tableau suivant, dans lequel les composés étudiés sont les suivants :

Composé A : sel monosodique sesquihydraté de l'acide [2S-[2a,3a,5a, 6(3,(11*) ] ] —6— [ [ [ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazi-ny1)carbony1]amino]phénylacétyl]amino]-3-méthy1-3-[[(1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio3méthyl3-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxylique Composé B : sel monosodique de l'acide [2S-

(2a,3a,5a,63)3-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio 3 méthyl3-7-oxo-6-[(phénylacéty1)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3,2,03 heptane-2-carboxylique

14

Composé C : sel monosodique de l'acide [2S-

[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ] —6— [ [ (2-amino-4-thiazolyl) (méthoxyimino )acétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(1-méthyl-lH-tétra-zole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique Composé D : sel monosodique de l'acide [2S-

( 2a, 3a,5a,6J3) ] —3 — (azidométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6- [ (phé-nylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique Composé E : sel interne d'hydroxyde de [2S-

(2a,3a,5a,6(3) ]-l-[ [2-carboxy-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phényl acétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]mé-thylpyridinium

Composé F : sel disodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-tria-z ine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthy1-7-oxo-6-[(phény1-acétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique Composé G : sel monosodique de l'acide [2S-

( 2a,3a, 5a, 6(3) ] -3-[ (acétylthio)méthyl] - 3-méthyl-7-oxo-6 [(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxylique Composé H : sel monosodique de l'acide [2S-

( 2a, 3a, 5a, 6(3) ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétylamino]-4-thia-1 azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

15

Culture

MIC in vitro (mcr/ml) Composés

Pseudomonas aeruginosa 56 ATCC 8079

15^6 62^5 62;5 >125 125 31^5 125 31^5

Pseudomonas aeruginosa 56M 0^49 0^98 0;98 3^9 3^9 0^49 0^98 1^95

Pseudomonas maltophilia 28978 250 >125 >500 >125 ATCC 17445

>500 31;5

Proteus vulgaris 101N ATCC 6380

0^98 ' 15;6 31^3 15^6 125 7^8 31^3 62^5

Proteus vulgaris 100

7.8 >125 250 >125 >500 250 >500 >500

Escherichia coli 1269B

62,5 >125 >500 >125 500 500

Escherichia coli 2721B

3^9 62^5 31T 3 62^5 31^3 31;3 62,5 500

Escherichia coli 2722B

0^ 12 31^3 1 j 95 15,6 31;3 3;9 7^8 62^5

Escherichia coli 3081B

15,6 >125 >125 125 125 125 500 >500

Escherichia coli 3082B

0^24 31^3 1,95 7;8 31;3 0;98 1;95 15;6

16

Culture

MIC in vitro (mq/ml) (suite) Composés

Streptococcus faecium ATCC 8043

3y 7^8 125 7^8 125 62^5 0;98 7;8

Staphylococcus aureus 82 ATCC 6538P

0;98 0,03 0;49 0^03 0^49 0,24 0;03 0; 12

Staphylococcus aureus 1059B 7^8 3^9 3^9 7^8 15^6 0^24 0^98 7^8 Staphylococcus aureus 3037B 500 125 250 125 62^5 500 250 125 Staphylococcus aureus 3647B 500 125 250 125 500 500 250 500

Micrococcus luteus PCI ATCC 9341

0^49 0^03 0^24 0,03 1^95 0;24 0^06 0^ 12

Bacillus megaterium 164 ATCC 8011

0^ 12 0;015 0; 12 0^ 12 0;49 0^ 12

Bacillus subtil us 558 NRRL 558

0^98 0;03 0^ 49 0^06 0^24 0;12 0^,03 0,12

e

17

Pour lutter contre les infections bactériennes chez les mammifères, on peut administrer un composé de cette invention à un mammifère en une quantité d'environ 5 mg par kg de poids corporel et par jour (mg/kg/jour) à environ 100 mg/kg/jour, et mieux encore d'environ 10 mg/kg/jour à environ 55 mg/kg/jour.

Pratiquement tous les modes d'administration employés couramment par le passé pour délivrer les antibiotiques cé-phalosporines et pénicillines au site d'infection sont également envisagés pour être utilisés avec les composés de cette invention. Ces modes d'administration englobent le mode intraveineux, intramusculaire, sous-cutané et entéral, par exemple par suppositoires.

Il est entendu qu'une composition pharmaceutique contenant un composé de formule I contient un véhicule pharmaceu-tiquement acceptable, comme les véhicules connus dans le domaine . !

Les schémas réactionnels suivants décrivent les procédés et les intermédiaires utiles pour produire les composés de formule I formant les produits finals de cette invention.

Dans ces schémas réactionnels, lorsqu'on a, dans la molécule, un substituant qui peut être attaqué chimiquement au cours de la réaction, il doit être présent sous une forme protégée au moyen d'un groupe protecteur. Les groupes protecteurs convenant dans ce but peuvent être choisis parmi les produits classiques bien connus de l'homme de métier. A titre d'illustration, on peut protéger les groupes amino au moyen de groupes protecteurs facilement éliminables employés en chimie des peptides, comme un groupe alkylcarbonyle, par exemple formyle, acétyle, propionyle, etc., un groupe al-coxycarbonyle, par exemple t-butoxycarbonyle, etc., un groupe alcoxyalkylcarbonyle, par exemple méthoxyacétyle, mé-thoxypropionyle, etc., un groupe alcoxycarbonyle substitué, par exemple trichloroéthoxycarbonyle, etc., un groupe alkylcarbonyle substitué, par exemple monochlorométhylcarbonyle,

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monochloroéthylcarbonyle, dichlorométhylcarbonyle, dichlo-roéthylcarbonyle, trichlorométhylcarbonyle, trichloroéthyl-

i carbonyle, trichloropropylcarbonyle, etc., un groupe arylal-kyloxycarbonyle, par exemple benzyloxycarbonyle, etc., un groupe arylalkyloxycarbonyle substitué, par exemple p-nitro-benzyloxycarbonyle, etc., ou un groupe amino gui est protégé par une protéine.

Les groupes amino-protecteurs préférés convenant à cette invention sont les groupes benzyloxycarbonyle, t-buty-loxycarbonyle ou un groupe protecteur silyle, tel que trimé-thylsilyle.

On effectue l'élimination du groupe amino-protecteur d'une façon classique, par exemple par traitement avec un acide dans le cas d'un groupe t-butoxycarbonyle, par réduction catalytique dans le cas d'un groupe p-nitrobenzyloxy-carbonyle, ou par traitement avec du zinc et un acide dans le cas d'un groupe trichloroéthoxycarbonyle.

Comme groupes protecteurs pour les groupes acides car-boxyliques dans la molécule, on peut utiliser un groupe ester qui est ensuite facilement transformable en un groupe acide carboxylique par traitement ménagé avec un acide ou une base ou par réduction. Des exemples de ces groupes protecteurs d'acides carboxyliques sont les groupes (3-méthyl-sulfonyléthyle, triméthylsilyle, t-butyldiméthylsilyle, benzhydryle, (3,3,3-trichloroéthyle, phénacyle, p-méthoxy-benzyle, p-nitrobenzyle, méthoxyméthyle, etc.

Dans ces schémas réactionnels, R' désigne un groupe protecteur d'acide carboxylique (dont des exemples figurent ci-dessus), Ph signifie un groupe phényle, M désigne un cation métallique (par exemple un ion sodium ou potassium) et Ri, R2, X et Hal sont tels que définis ci-dessus.

19

Schéma 1

O O

AH JCh

PaCH^^X -<S /CH3 PhCH2^NK ^ |CHi

I 1 y *- |~r y-

'N^"CH2Hal 0^~N i 'CH2X

CO2R ' C02R '

IV

10

PhCHr iCH PhCH2

1 5

Schéma 1

III -> IV

On fait réagir le composé de formule III, gui est connu et peut être préparé par des procédés décrits, avec un sel 20 du nucléophile choisi. La réaction est réalisée dans un solvant convenable. Les sels convenables du nucléophile sont, par exemple, les sels de sodium, de potassium, de césium, d'argent ou de tétrabutylammonium. L'halogène préféré est le brome. La réaction est réalisée à une température d'environ 25 -10°C à 80°C, la température ambiante (par ex. 23-25°C)

étant préférée.

XV > y

Le composé de formule IV est ensuite déprotégé pour donner le produit recherché de formule V, au moyen de réac-30 tifs compatibles avec le groupe protecteur ester utilisé. On peut utiliser les réactifs suivants et l'ester compatible correspondant : para-nitrobenzyle éliminé par hydrogénolyse avec du palladium sur charbon ou par hydrolyse en présence

20

de sulfure de sodium, à une température allant d'environ 0°C ou moins à la température ambiante, dans un solvant comme le diméthylformamide (aqueux); ester t-butylique ou diphénylmé-thylique éliminé par réaction avec l'acide trifluoroacé-5 tique, en présence d'anisole, à une température allant d'environ 0°C à la température ambiante, avec ou sans co-solvant tel que le chlorure de méthylène; ou esters ally-liques éliminés par une réaction de trans-allylation catalysée par le palladium, en présence du sel de sodium ou de po-10 tassium de l'acide 2-éthylhexanoïque; voir, par exemple, J. Org. Chem. 4]_, 587 (1982).

y > j

Le composé de formule V est transformé en sel de formule I avec un hydroxyde, un carbonate ou un bicarbonate de 15 métal alcalin. Les réactifs préférés sont le bicarbonate de sodium ou de potassium. On peut réaliser cette transformation dans un solvant tel que l'eau ou un mélange d'eau et d'un solvant organique.

ê

21

O

A"

PhCH2 N

Schéma 2

ch3

<^9— N-w/V

; CH2H3I C02R'

PhCh'o N

IV

H2N4

s lch3

N

CH2X

co2r '

R1%

VN R4

<S ,CH,

CO2R '

VI

vu

R1n r2^NV -*s (CH,

jzx ch2x co2m

VIII ,

Schéma 2

XII ^ iv

On effectue la transformation du composé de formule III en composé de formule IV en utilisant les mêmes conditions 5 que celles décrites pour le schéma réactionnel 1.

XV vi

On transforme le composé de formule IV en VI en le faisant réagir avec PCI5 ou PBrs et de la pyridine ou de la lu-tidine, à une température d'environ -20°C à 40°C, de préfé-10 rence à -10°C. On emploie un solvant chloré, comme CH2CI2,

22

CHCI3 ou CH2CICH2CI. Une autre réaction avec un alcool, de préférence le n-propanol ou 1'isopropanol, et de l'eau donne, après alcalinisation, le composé de formule VI.

V! > VII

On acyle le groupe amino du composé de formule VI par réaction avec un acide carboxylique activé, selon des procédés connus dans l'art, pour introduire R2 (R^ = H) et obtenir le composé de formule VII. Par exemple, en employant un solvant comme le chlorure de méthylène, 1'acétate d'éthyle ou le diméthylformamide, on fait réagir le composé VI avec o

un agent d'acylation de formule R5-C-Z, dans laquelle Z est un groupe acyle activant. Le groupe activant Z préféré est un groupe halogéno,

Les réactions sont effectuées à une température d'environ 0° à environ 30°C, pendant 2 à 24 heures. Si on R2 lui-même est introduit sous une forme qui contient des fonctions protégées, les groupes protecteurs sont ensuite éliminés par des procédés appropriés connus dans 1'art.

Le composé de formule VII, dans laguelle R-*- et R2, pris conjointement, sont

23

s'obtient par réaction avec le composé suivant :

dans un hydrocarbure chloré comme le chlorure de méthylène, à une température d'environ -20° à 40°C.

VII > VIII -> I

10 On effectue la transformation du composé de formule VII

en VIII et la transformation de VIII en composé de formule I en employant les mêmes conditions que celles décrites dans le schéma réactionnel 1 pour la transformation de IV en V et de V en I.

20

!

24

Schéma 3

PhCH

CH2Hal C02R'

K

VIII

Schéma 3

III •» IX

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation de IV en VI.

IX -> VI

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 1 pour la transformation

25

de III en IV.

VI -» VII

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation 5 de VI en VII. ,

VII -> VIII -> I

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation de VII en VIII et la transformation de VIII en I. 10 Schéma 4

PhCH2

h N

0

15

C02R

c02r'

II

20

O

ch?x

C02R '

co2r '

25

vii

X

30

co2w

35

26

Schéma 4

III > IX

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation 5 de IV en VI.

IX X

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation de VI en VII.

10 X -> VII

Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 1 pour la transformation de III en IV.

VII * VIII -» I

15 Les conditions réactionnelles sont les mêmes que celles décrites dans le schéma réactionnel 2 pour la transformation de VII en VIII et la transformation de VIII en I.

Pour préparer les esters facilement hydrolysables des acides carboxyliques du composé de formule I, on préfère 20 faire réagir l'acide carboxylique avec un halogénure approprié contenant le groupe ester, et en particulier avec l'iodure. On peut accélérer la réaction à l'aide d'une base, comme un hydroxyde ou un carbonate de métal alcalin, ou une aminé organique, par exemple la triéthylamine. La réaction 25 d'estérification est habituellement réalisée dans un solvant organique inerte, comme le diméthylacétamide, le bromure d'acide hexaméthylphosphorique, le diméthylsulfoxyde ou le diméthylformamide, de préférence ce dernier. La température est de préférence dans l'intervalle d'environ 0°-40°C. 30 On peut préparer les sels et les hydrates des composés de formule I, ou les hydrates de ces sels, d'une manière connue, telle que par réaction de l'acide carboxylique de formule I avec une quantité équivalente de la base recherchée, avantageusement dans un solvant aqueux ou non aqueux, 35 comme l'eau, l'éthanol, le méthanol ou l'acétone. La tempé

27

rature de la salification est généralement la température ambiante (par exemple environ 23°C), mais peut être aussi supérieure ou inférieure, par exemple dans l'intervalle de 0°C à +50°C.

5 La formation d'hydrates a lieu habituellement automati quement au cours du procédé de préparation ou, dans tous les cas, du fait des propriétés hygroscopigues d'un produit initialement anhydre. Pour la préparation contrôlée d'un hydrate, on peut soumettre un produit entièrement ou partielle» lement anhydre (acide carboxyligue de formule I, ou son ester ou son sel) à une atmosphère humide, à une température d'environ 10°C à +40°C.

Dans les exemples suivants, les configurations stéréo-chimiques sont indiquées par les notations alpha ("a") ou 15 bêta ("(3") dans les noms chimiques des composés.

Exemple 1

Ester (4-nitrophényl)méthylique de l'acide [2S-(2a, 3a, 5a, 6(3)]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)-thio]méthy1]-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thi a-1- az a^

20 bicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxylique

On dissout 201,1 mg (0,367 mmole) d'ester (4-nitrophé-nyl)méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6[3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique et 79,1 mg (0,573 mmole) de 25 sel sodique de 5-mercapto-l-méthyltétrazole dans 2,5 ml d'acétonitrile et on agite à la température ambiante pendant 2,5 heures. On concentre ensuite le mélange et on le purifie par chromatographjie éclair, en éluant avec 40% et 50% d'acétate d'éthyle dans l'hexane, ce qui donne 87,8 mg (0,150 30 mmole, rendement 41,0%) d'un produit solide amorphe.

Exemple 2

Sel monosodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^ 35 ligue

28

On dissout 131,8 mg (0,226 mmole) d'ester (4-nitrophé-nyDméthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,63) ]-3-méthyl-3-[ [ (1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-6-[(phényl-acétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-5 ligue dans 11,1 ml de tétrahydrofuranne contenant 0,25 ml d'éthanol. On ajoute le catalyseur, 268,9 mg de Pd à 10%/C, et on agite le mélange pendant 3 heures à la température ambiante, sous hydrogène. On filtre le mélange réactionnel à travers de la Célite et on concentre le filtrat. On dissout 10 le résidu brut (131,8 mg) dans 0,7 ml de tétrahydrofuranne et 2 ml d'acétate d'éthyle. A cette solution, on ajoute 38,1 mg (0,453 mmole) de bicarbonate de sodium et 4 ml d'eau. On purifie la phase lagueuse par CLHP, en éluant avec de 1'acétonitrile dans l'eau. Après lyophilisation, on obtient un 15 solide blanc amorphe, qui pèse 26,9 mg (0,0572 mmole, rendement 22,7%).

Exemple 3

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) 3- 3-[ (acétyloxy)méthyl3 -3-méthyl-7-oxo-6-20 C(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-

carboxylique

On dissout 337 mg (3,434 mmoles) d'acétate de potassium dans 9,5 ml d'éthanol et on l'ajoute à 500,4 mg (0,912 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthylique d'acide [2S-25 ( 2a, 3a,5a,6(3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxy-lique. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante. Au bout de 2 heures et 25 minutes, on est encore en présence d'une grande guantité de solide jaune orangé. On 30 élimine le surnageant à la pipette, on le dilue avec 90 ml d'acétate d'éthyle et on l'extrait avec 100 ml de solution saturée de bicarbonate de sodium saturé, puis avec 100 ml de saumure. On sèche l'acétate d'éthyle sur Na2S04. On dissout le solide dans 1 ml de chlorure de méthylène et 9,5 ml 35 d'éthanol contenant 337 mg (3,434 mmoles) d'acétate de po

29

tassium. Au bout d'une heure et 15 minutes, on évapore l'éthanol et on dissout le résidu dans 100 ml d'acétate d'éthyle et on le lave avec NaHC03 saturé, puis avec 100 ml de saumure. On sèche l'acétate d'éthyle sur Na2S04- Les deux 5 extraits dans l'acétate d'éthyle sont filtrés et concentrés. Le premier pèse 80 mg et le second pèse 360 mg. On les réunit et on les purifie par chromatographie éclair, poids total de produit 117 mg (0,222 mmole, rendement 24,3%).

Exemple 4

10 Sel monosodique de l'ester (4-nitrophényl)méthylique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[ [ (2,5-dihydro-6-hydroxy-2-mé-thyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxylique

15 A une solution de 0,255 g (0,47 mmole) d'ester (4-ni-

trophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromo-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-1-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue dans 15 ml d'acétone et 3 ml d'eau, on ajoute 0,106 g (0,52 mmole) du sel disodigue 20 de la tétrahydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-3-thioxo-l,2,4-triazine à la température ambiante, pendant une nuit. On élimine 1'acétone sous vide et on lyophilise la phase agueuse. On reprend le résidu avec de 1'eau et on 1'applique sur une colonne Cl8 Sep-Pak à polarité de phases inversée 25 (Waters Assoc.) et on l'élue avec CH3CN/H20 (0 - 40%, le produit est élué avec CH3CN à 10%/H20, Rf (Si02) = 0,3, acétate d'éthyle/acide acétique/eau 60:3:1). On réunit les fraction adéquates, on élimine 1'acétonitrile sous vide et on lyophilise la phase aqueuse pour obtenir 0,065 g (21%) 30 d'une poudre floconneuse jaune clair.

Exemple 5

Sel disodique de l'acide [ 2S- ( 2a, 3a, 5a, 6(3) ]-3-[ [ ( 2, 5-dihy-dro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-35 azabicvclo[ 3,2,0 ]heptane-2-carboxylicrue

30

A une solution de 0,057 g (0,088 mmole) de sel monoso-digue de l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-( 2a, 3a, 5a, 6(3) ] — 3 — [ [ ( 2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-1,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phényl-5 acétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 2 ml d'acétate d'éthyle et une solution agueuse de bicarbonate de sodium (0,1M, 0,88 ml), on ajoute 0,06 g de Pd à 10%/C. On met la suspension hétérogène sous vide et on la charge avec de l'hydrogène cing fois, et on l'agite 10 sous une atmosphère d'hydrogène pendant 4 heures. On filtre le mélange à travers de la Célite et on lave la Célite à l'eau. On élimine les solvants organiques sous vide et on lyophilise la solution aqueuse résultante. On chromatogra-phie le résidu sur une colonne C18 Sep-Pak à polarité de 15 phases inversée (Waters Assoc.) gue l'on élue avec CH3CN/H2O (0 - 40%). On réunit les fractions adéguates, on élimine 1'acétonitrile sous vide et on lyophilise la solution agueuse. On purifie le résidu par chromatographie haute pression à polarité de phases inversée (Whatman M9-Partisil 20 10-ODS-2, gradient linéaire 0-100% CH3CN/H2O), pour obtenir le sel disodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[ [ (2,5-di-hydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique sous forme d'une 25 poudre blanche floconneuse.

Exemple 6

Ester (4-nitrophényl)méthylique de l'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]- 3-(azidométhyl) - 3-méthyl-7-oxo-6 -[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^

30 ligue

A une solution de 2,13 g (3,89 mmoles) d'ester (4-ni-trophényl)méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromo-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 40 ml d'acétone et 35 18 ml d'eau à la température ambiante, on ajoute 0,78 g

31

(11,66 mmoles) d'azoture de sodium. Au bout de 4 heures, on élimine l'acétone sous vide et on partage le mélange résultant avec 100 ml d'acétate d'éthyle. La phase d'acétate d'éthyle est lavée avec 2 x 50 ml d'eau, puis avec 1 x 25 ml de saumure, séchés sur Na2S04, filtrée et concentrée sous vide. Une chromatographie sur du gel de silice (acétate d'éthyle/éther de pétrole 2:3) donne 1,03 g d'ester (4-ni-trophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(azido-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

Exemple 7

Sel monosodigue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(azido-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-1-

azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

A une solution de 0,198 g (0,39 mmole) d'ester (4-ni-trophényl)méthyligue d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-(azido-méthyl ) -3 -méthyl-7 -oxo-1- 6- [ ( phénylacétyl ) amino ] - 4 -thia-1 -azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue dans 4 ml d'acétate d'éthyle, sous argon, on ajoute 0,175 g de Pd à 10%/C. On met sous vide la suspension hétérogène et on la charge avec de l'hydrogène cing fois, et on agite pendant 5 heures sous une atmosphère d'hydrogène (introduite par un ballon). On filtre le mélange réactionnel à travers de la Célite et on lave la Célite avec du tétrahydrofuranne. On ajoute au filtrat 0,049 g (0,58 mmole) de bicarbonate de sodium et 2 ml d'eau, et on élimine les solvants organigues sous vide. On lyophilise la solution agueuse résultante et on la purifie par chromatographie liguide à polarité de phases inversée (Whatman M9-Partisil lO-ODS-2, gradient linéaire CH3CN/H2O), pour obtenir le sel monosodigue de l'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]- 3-(azidométhyl)- 3-méthyl-7-oxo-6 -[ (phénylacétyl) amino] -4-thia-l-azabicyclo[ 3 ,2,0]heptane-2-carboxy-ligue, sous forme d'une poudre blanche floconneuse.

32

Exemple 8

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-( 2a, 3a, 5a, 6(3) ] - 3- [ ( acétylthio)méthyl] -3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

5 carboxylique

A une solution de 0,79 g (1,44 mmoles) d'ester (4-ni-trophényl)méthylique d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromo-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo [3,2,0]heptane-2-carboxylique, de 12 ml d'acétone 10 et de 2 ml d'eau, on ajoute 0,33 g (2,9 mmoles) de thioacé-tate de potassium. Après avoir agité à la température ambiante pendant 2 heures, on élimine l'acétone sous vide et on partage la solution restante entre 1'acétate d'éthyle et l'eau. La phase aqueuse est lavée avec de l'acétate d'éthyle 15 et les phases d'acétate d'éthyle sont réunies, séchées sur du sulfate de sodium, filtrées et concentrées sous vide. Le résidu est chromatographié sur du gel de silice avec un système acétate d'éthyle/éther de pétrole (30-40%) pour donner l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-20 (2a,3a,5a,63)]-3-[(acétylthio)méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-

[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue avec un rendement de 35%.

Exemple 9

Sel monosodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ] —3— [ (acétyl-25 thio)méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo [ 3 ,2,0]heptane-2-carboxylique

A une solution de 0,164 g (0,3 mmole) d'ester (4-nitro-phényl)méthylique d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-(acétylthio-méthy1)-3-méthy1-7-oxo-6-[(phény1acétyl)amino]-4-thia-1-30 azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 1 ml d'acétate d'éthyle, on ajoute 0,154 g de Pd à 10%/C. On met la solution sous vide et on charge avec de l'hydrogène cinq fois et on agite sous uné atmosphère d'hydrogène, introduite par un ballon, pendant 4 heures. On filtre le mélange réactionnel à 35 travers de la Célite et on lave la Célite avec THF. On

1

33

concentre la solution sous vide et on ajoute au résidu 0,025 g (0,3 mmole) de bicarbonate de sodium, 0,5 ml de tétrahydrofuranne et 1 ml d'eau. On élimine le tétrahydrofuranne sous vide et on lyophilise la phase agueuse restante. Une 5 chromatographie sur une colonne Cl8 Sep-Pak à polarité de phases inversée (Waters Assoc.) avec CH3CN/H2O (0-20%) donne 53 mg (41%) de sel monosodigue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[(acétylthio)méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino3 -4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique, sous forme 10 d'une poudre blanche floconneuse.

Exemple 10

Sel monosodigue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)3-3-[[(2,5-dihy-dro-3-mercapto-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-6-yl)oxy3 -méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino3-4-thia-l-

15 azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxylique

On dissout de l'ester (4-nitrophényl)méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromométhy 1 )-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl )amino]J4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-car-boxyligue dans 6,55 ml de DMF, et on ajoute 378,5 mg (1,191 20 mmoles) de tétrahydro-2-méthyl-3-thioxo-l,2,4-triazine-5,6-dione et on agite à la température ambiante pendant 16 heures et 50 minutes. La phase d'acétate d'éthyle est lavée avec 3 x 55 ml d'eau et 55 ml de saumure, puis séchée sur Na2S04, filtrée et concentrée, pour donner un résidu gue 25 l'on purifie par chromatographie éclair en utilisant THF à 7% dans le chlorure de méthylène. On obtient ainsi 301,8 mg (0,482 mmole, rendement 25,1%) du produit recherché, ainsi que du produit moins pur (148,1 mg, 0,236 mmole, rendement 12,3%).

30 On dissout ce produit ester de p-nitrobenzyle (289 mg,

0,461 mmole) dans 9,58 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 4,61 ml (0,461 mmole) de NaHC03 0,1N, puis 292,4 mg de catalyseur Pd à 10%/C. On agite le mélange à la température ambiante sous hydrogène. Au bout de 2 heures et 45 minutes, on 35 filtre le mélange réactionnel à travers de la Célite et on

34

lave la Célite avec de 1'eau et de 1'acétate d'éthyle. Après séparation des phases, on fait passer la phase agueuse à travers un filtré de seringue Millipore de 0,5 ran et on la lyophilise pour obtenir 106,4 mg d'un produit brut. On puri-5 fie ce produit par CLHP en utilisant un système acétoni-

trile/H20. On obtient 53,9 mg d'un produit relativement pur, plus des fractions moins pures (13,2 mg). On poursuit la purification sur une colonne de CLHP, ce gui conduit à 15,7 mg d'un produit plus pur.

10 Exemple 11

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-

(2a,3a,5a,63)]-3-[[(2-furannylcarbonyl)thio]méthyl]-3-mé-

thyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo^

[3,2,0]heptane-2-carboxylique

15 On agite à la température ambiante pendant 1 heure un mélange de 82 mg (0,641 mmole) d'acide 2-thiofuroïque, de 30 ml d'acétone, de 54 mg (0,643 mmole) de bicarbonate de sodium, de 351 mg (0,641 mmole) d'ester (4-nitrophényDméthy-ligue d'acide [ 2S-( 2a, 3a, 5a, 6(3) ]-3-( bromométhyl )-3-méthyl-7-20 oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxylique et de 10 ml d'eau. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite jusqu'à ce qu'il se forme deux phases que 1'on partage entre de 1'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organique est séparée, 25 extraite deux fois avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après avoir filtré l'agent desséchant et évaporé le solvant sous pression réduite, on chromatographie le résidu sur du gel de silice (élution avec hexane/acétate d'éthyle 1:1) pour obtenir 248 mg de produit. 30 Exemple 12

Sel monosodigue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-[[(2-furan-nylcarbony1)thio]méthy1]-3-méthy1-7-oxo-6-[(phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On agite sous une atmosphère d'hydrogène (pression ini-35 tiale 55,5 psi), à la température ambiante, sur un appareil

35

de Parr, pendant 2 heures, un mélange de 250 mg de palladium à 10% sur charbon, de 40 ml d'eau déminéralisée, de 40 mg (0,476 mmole) de bicarbonate de sodium, de 248 mg (0,417 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-5 (2a, 3a, 5a,6(3)]-3-[[( 2-furannylcarbonyl) thio]méthyl] -3-mé-thyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxyligue et de 40 ml d'acétate d'éthyle. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté 10 et on lave le gâteau de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux liqueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. La phase agueuse est séparée, extraite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée. On dissout le résidu dans 45 ml d'eau déminéralisée et 15 on introduit la solution dans trois colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants (eau/acétonitrile : depuis 100% d'eau jusgu'à 33% d'acétonitrile) et lyophilisation, on obtient 36 mg de produit.

20 Exemple 13

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(fluorométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^

ligue

25 On ajoute goutte à goutte, à la température ambiante,

une solution de 46 mg (0,362 mmole) de fluorure d'argent dans 3 ml d'eau déminéralisée à une solution agitée de 200 mg (0,365 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-( 2a,3a,5a, 6(3) ]-3-(bromométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6-30 [(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 30 ml d'acétone (on protège le flacon de la lumière en le recouvrant d'une feuille d'aluminium). On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 5,5 heures et on le filtre. On concentre le filtrat 35 sous pression réduite jusgu'à ce gu'il se forme 2 phases gue

C

36

l'on partage entre de l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organigue est séparée, lavée trois fois avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après voir éliminé l'agent desséchant par filtration et évaporé le 5 solvant sous pression réduite, on chromatographie le résidu sur du gel de silice. L'élution avec un système hexane/ acétate d'éthyle 1:1 donne 47 mg de produit.

Exemple 14

Sel de sodium de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-(fluoro-10 méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-

azabicycloÇ 3,2,0]heptane-2-carboxylique

On agite sous une atmosphère d'hydrogène (pression initiale 55,5 psi, 383 kPa), à la température ambiante, sur un appareil de Parr, pendant 2 heures, un mélange de 120 mg de 15 palladium à 10% sur charbon, de 40 ml d'eau déminéralisée, de 25 mg (0,298 mmole) de bicarbonate de sodium, de 120 mg (0,246 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-(fluorométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl )amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-20 ligue et de 40 ml d'acétate d'éthyle. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté et on lave le gâteau de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux liqueurs de lavage réunis 2,0 g de chlorure de sodium so-25 lide. La phase agueuse est séparée, extraite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée. On dissout le résidu dans 45 ml d'eau déminéralisée et on introduit la solution dans trois colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants (eau/acétonitrile : 30 depuis 100% d'eau jusgu'à 33% d'acétonitrile) et lyophilisation, on obtient 36 mg de produit.

c.

37

Exemple 15

Sel de sodium de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-[ [ [3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phényl-acétylamino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^

5 ligue

On dissout 113,6 mg (0,447 mmole) d'acide 3,4-bis-(acétyloxy)benzènecarbothioïgue dans 4,24 ml (0,424 mmole) de KHCO3 0,1N et 10,6 ml d'acétone. On ajoute 231 mg (0,421 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-10 ( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-ligue et on agite le mélange réactionnel à la température ambiante sous azote. Au bout de 50 minutes, on ajoute 100 ml d'acétate d'éthyle et 100 ml de bicarbonate de sodium. Après 15 avoir séparé la phase d'acétate d'éthyle, on la lave avec 100 ml de saumure, puis on la sèche sur du sulfate de sodium, on la filtre et on la concentre pour obtenir 248 mg de résidu brut. On dissout ce produit (gui éguivaut, pur à 156 mg, 0,216 mmole) dans 10 ml de tétrahydrofuranne contenant 20 0,5 ml d'éthanol. On ajoute 200 mg de catalyseur Pd à 10%/C et on agite le mélange réactionnel à la température ambiante sous hydrogène. Au bout de 2 heures et 25 minutes, on filtre le mélange réactionnel à travers de la Célite et on le concentre pour obtenir un résidu, que l'on redissout immé-25 diatement dans 2-3 ml de tétrahydrofuranne, et on ajoute suffisamment d'eau (2 ml) pour rendre la solution limpide. Ensuite, on ajoute 1,5 ml (0,15 mmole) de NaHCOj 0,1N avec suffisamment de THF pour produire de nouveau une solution limpide (remarque : on ajoute 1-2 ml d'acétonitrile). On 30 élimine ensuite le THF et 1'acétonitrile et on obtient une suspension jaune, que l'on dilue avec 3 ml d'eau et que l'on filtre à travers de la Célite (très lent). On purifie le filtrat par CLHP en utilisant un système acétonitrile/eau. Le produit pèse 22,8 mg (0,0375 mmole, rendement 17,34%).

<

38

Exemple 16

Sel monosodigue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ] —3 — [ [3,4-(dihydrobenzoyl)oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacé^ tylamino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique 5 On agite à la température ambiante pendant 24 heures un mélange de 200 mg (0,365 mmole) d'ester (4-nitrophényl)mé-thyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique, de 60 mg (0,39 mmole) d'acide 10 3,4-dihydroxybenzoïgue, de 42 mg (0,39 mmole) de bicarbonate de sodium, de 40 ml d'acétone et de 10 ml d'eau déminéralisée et on concentre la solution sous pression réduite jusgu'à ce gu'il se forme 2 phases. On partage le mélange entre de l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organigue 15 est séparée, lavée trois fois avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après avoir filtré l'agent desséchant et évaporé le solvant sous pression réduite, on ajoute le résidu à un mélange de 180 mg de palladium à 10% sur charbon, de 40 ml d'eau déminéralisée, de 30 mg (0,357 20 mmole) de bicarbonate de sodium et de 40 ml d'acétate d'éthyle. Le mélange est hydrogéné (57,7 psi, 396 kPa) à la température ambiante pendant 2 heures. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté et on lave le tampon de 25 Célite avec de l'eau. On ajoute au filtrat et aux ligueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. La phase agueuse est séparée, extraite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée pendant une nuit. On dissout le résidu dans 21 ml d'eau déminéralisée et on introduit la 30 solution dans trois colonnes Cl8 Sep-Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants (eau/ acétonitrile : depuis 100% d'eau jusqu'à 33% d'acétonitrile) et lyophilisation, on obtient 21 mg de produit.

39

Exemple 17

Sel de sodium de l'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(5) ]-3-[ [3-(lH-imida-zole-4-yl)-l-oxopropoxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phényl-acétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^

5 ligue

On agite à la température ambiante pendant 20 heures un mélange de 200 mg (0,365 mmole) d'ester (4-nitrophényl)-méthyligue d'acide [ 2S- ( 2a, 3a, 5a, 6(3) ]-3-(bromométhyl)-3-mé-thyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-10 [3,2,0]heptane-2-carboxyligue, de 70 mg (0,5 mmole) d'acide 3-(4-imidazolyl)propanoïgue, de 42 mg (0,5 mmole) de bicarbonate de sodium, de 20 ml d'acétone et de 7 ml d'eau, on le concentre sous pression réduite jusgu'à ce qu'il se forme 2 phases et on le partage entre de l'acétate d'éthyle 15 et de la saumure. La phase organigue est séparée, lavée trois fois avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après avoir éliminé l'agent desséchant par filtration et évaporé le solvant sous pression réduite, on ajoute le résidu à un mélange de 210 mg de palladium à 10% 20 sur charbon, de 50 ml d'eau déminéralisée, de 30 mg (0,45 mmole) de bicarbonate de sodium et de 50 ml d'acétate d'éthyle. Le mélange est hydrogéné (55,0 psi, 379 kPa) à la température ambiante pendant une demi-heure dans un appareil de Parr. On élimine le catalyseur par filtration à travers 25 un tampon de Célite sur un entonnoir à disgue en verre fritté et on lave le tampon de Célite avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux ligueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. La phase agueuse est extraite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée pendant 30 une nuit. On dissout le résidu dans 23 ml d'eau déminéralisée et on introduit la solution dans trois colonnes Cl8 Sep-Pak raccordées eiji série. Après élution avec un gradient de solvants (eau/acétonitrile : depuis 100% d'eau jusgu'à 50% d'acétonitrile) et lyophilisation, on obtient 17 mg de pro-35 duit.

40

Exemple 18

Sel interne d'hydroxyde de [2S-(2a,3a,5a,6|3) 3 —1— [ [2-carboxy-3 -méthyl-7 -oxo-6- [ (phénylacétyl ) amino ] -4-thia-1 -azabicycloj^

[3,2,0] hept- 3 -yl 3 méthylpyr idinium

5 Dans un flacon sec, taré, contenant une atmosphère d'argon, on introduit 0,0453 g (0,234 mmole) d'AgBF^ Dans un autre ballon sec, contenant une armosphère d'argon, on introduit 0,16 g (0,21 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthy-ligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-10 oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2 -carboxylique, 3 ml de CH2CI2 anhydre et 50 mg (0,64 mmole) de pyridine anhydre, ainsi gu'un agitateur magné-tigue. En agitant rapidement la solution à la température ambiante, on ajoute rapidement ,1'AgBF4 par un entonnoir fait 15 de papier cristal. Le mélange réactionnel devient blanc trouble. On enveloppe le ballon dans une feuille d'aluminium. Au bout de '3 heures et demie, on filtre le mélange réactionnel à travers un tampon de Célite et on rince la Célite avec CH2CI2, puis on concentre le mélange sous vide 20 pour obtenir un solide blanc. On rince le mélange avec H2O, puis avec une solution agueuse à 5%, à 10%, à 20% de CH3CN (ce qui conduit à une suspension blanche), en introduisant chaque solution de rinçage (environ 10 ml) sur une colonne C18 Sep-Pak et en éluant avec CH3CH/H2O. Le composé recher-25 ché est élué de la colonne avec 10-40% CH3CN/H2O. On réunit les fractions adéquates, on élimine le solvant organique sous vide et on lyophilise la phase aqueuse pour obtenir le tétraf luoroborate de [2S-( 2a, 3a, 5a, 6(3) ]-1-[ [ 3-méthyl-2-[ [ ( 4-nitrophény1)méthoxy]carbonyl]-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-30 4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]méthyl]pyridinium sous forme d'un solide blanc floconneux; Rf (Si02) = 0,5 [(Et0Ac/Ac0H/H20) 6:2:1)]. Une tache monte à un Rf inférieur = 0,2 sur CCM (SiÛ2) lorsqu'on conserve le produit obtenu ci-dessus dans H2O à la température ambiante pendant 24-48 35 heures. Le produit obtenu est soluble (> lmg/ml) dans EtOAc,

CH2C12, CDCI3, CH3COCH3 et légèrement soluble dans H20.

A 0,200 g (0,32 mmole) de tétrafluoroborate de [2S-(2a,3a,5a,63)]—1—[[3-méthyl-2-[[(4-nitrophényl)méthoxy]carbonyl ]-7-0x0-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]hept-3-yl]méthyl]pyridinium dans 10 ml de THF et 100 ml de H20, on ajoute 0,2 g de Pd à 10%/C et 3,2 ml de NaHC03 0,lmM, ainsi gu'un agitateur magnétigue. On met sous vide et on charge ensuite avec de l'hydrogène gazeux trois fois le ballon contenant la suspension sous agitation rapide. Au bout de 2 heures, on fait le vide dans le ballon et on le charge avec de l'argon, puis on filtre la suspension à travers un tampon de Célite. On élimine le THF dans le filtrat sous vide et on fait passer la phase aqueuse restante à travers trois colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série. On fait passer .des solutions d'acétonitrile dans l'eau (0, 2, 5, 10, 20, 100%, 20 ml chacune) à travers la colonne C18. En recueillant les fractions adéguates (5 - 10% CH3CN/H20), en éliminant le CH3CN sous vide et en lyophilisant la phase agueuse, on obtient 25 mg du produit recherché sous forme d'une poudre blanche.

Exemple 19

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]—3—[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-3-mé thyl- 7 -oxo - 6 - [ ( phény lacé ty lamino ] - 4 - thia-1 - a z abicyc lo_^ [3,2,0]heptane-2-carboxylique

On ajoute goutte à goutte, en 20 minutes, une suspension de 250 mg (0,73 mmole) de diacétyloxybenzoate d'argent dans 20 ml d'acétonitrile anhydre à une solution agitée, à 0°C, de 0,4 g (0,73 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 20 ml d'acétone anhydre, dans un ballon enveloppé d'une feuille d'aluminium et placé dans un bain d'eau glacée. On agite le mélange réactionnel aux environ de 0°C pendant 5 heures et on le filtre à travers une petite

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colonne de gel de silice (mouillée à l'acétone). On lave la colonne avec 100 ml d'acétone et on évapore le solvant sous pression réduite à partir du filtrat et des ligueurs de lavage réunis. On chromatographie le résidu sur du gel de si-5 lice (230 - 400 mesh, élué avec un système hexane/acétate d'éthyle 1:1), pour obtenir 242 mg de produit.

Exemple 20

Sel monosodigue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-[[[3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacé^ 10 tylamino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On agite sous une atmosphère d'hydrogène (pression initiale 55 psi, 379 kPa), à la température ambiante, sur un appareil de Parr, pendant 3 heures, un mélange de 100 mg de palladium à 10% sur charbon, de 50 ml d'eau déminéralisée, 15 de 12 mg (0,143 mmole) de bicarbonate de sodium, de 100 mg

(0,142 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-[[[3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxyligue et de 50 ml d'acétate d'éthy-20 le. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disgue en verre fritté et on lave le gâteau de filtration avec une petite guantité d'eau froide. On place le filtrat et les ligueurs de lavage réunis dans une ampoule à décanter. La phase agueuse est 25 séparée, et lyophilisée. On purifie le résidu dans des colonnes C18 Sep-Pak (eau/acétonitrile : depuis 100% d'eau jusgu'à 40% d'acétonitrile dans l'eau) pour obtenir 38 mg de produit.

Exemple 21

30 Sel monosodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-méthyl-7-

oxo-6-[(phénylacétylamino]-3-[(thiocyanato)méthyl]-4-thia-1-

azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

A une solution contenant 0,541 g (1,06 mmoles) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-(bro-35 mométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-

i

43

azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 10 ml d'acétone et 10 ml d'eau, on ajoute 0,133 g (1,17 mmoles) de KSCN. Après 1'avoir agitée à la température ambiante pendant 7 heures, on élimine l'acétone sous vide et on ajoute 50 ml de 5 EtOAc à la suspension résultante. On lave la phase de EtOAc avec 30 ml d'eau, 30 ml de saumure, on la sèche sur Na2S04, on la filtre et o'n la concentre sous vide. On dissout le résidu dans une quantité minimale de CH2CI2, on l'introduit dans une colonne éclair (40 g de Si02, EtOAc à 40%/éther de 10 pétrole, fractions de 20 ml) et on l'élue, pour obtenir 0,28 g d'ester (4-nitrophénylJméthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6p)]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétylamino]-3-[(thiocyanato)méthyl]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique sous forme d'un solide amorphe blanc cassé. 15 A une solution de 0,167 g (0,32 mmole) d'ester (4-ni trophényl )méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétylamino]-3-[(thiocyanato)méthyl]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue, de 2 ml de EtOAc, de 3 ml d'eau et de 0,04 g de NaHC03, on ajoute 0,17 g de Pd 20 à 10%/C et un agitateur magnétigue. Le ballon contenant la suspension sous agitation rapide est mis sous vide et ensuite rempli d'hydrogène gazeux trois fois. Après avoir agité le mélange réactionnel à la température ambiante sous une atmosphère d'hydrogène (introduite par un ballon) pendant 3 25 heures et demie, on fait le vide dans le ballon et on le remplit d'argon, puis on filtre le mélange à travers un tampon de Célite. On élimine sous vide EtOAc dans le filtrat et on lyophilise la suspension agueuse résultante. On introduit le solide résultant dans une colonne Cl8 constituée de 3 30 Sep-Pak raccordées en série. On élue la colonne avec un gradient de 0 - 100% de CH3CH/H2O, en recueillant les fractions adéquates, que l'on concentre ensuite sous vide pour éliminer CH3CN, et que l'on lyophilise pour obtenir le produit recherché sous forme d'une poudre blanche floconneuse (Rf = 35 0,3 (Si02), EtOAc/AcOH/H20 60:3:1).

K

44

Une seconde purification par CLHP, au moyen d'une colonne C18-Mg Whatman, que l'on élue avec CH3CN/H2O, donne le produit recherché sous forme pure pour analyse.

Exemple 22

5 Sel monosodique de l'acide [2S-(2a,3a(E),5a,6(3) ]-3-[ [ [3-( 1H-imidazole-4-yl)-l-oxo-2-propényl]oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxylique

On agite à la température ambiante pendant 24 heures 10 une solution de 200 mg (0,365 mmole) d'ester (4-nitrophé-

nyl)méthyligue d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique, de 76 mg (0,475 mmole) d'uro-cyanate de sodium, de 20 ml d'acétone et de 7 ml d'eau. On 15 concentre le mélange réactionnel sous pression réduite jusgu'à ce gu'il se forme 2 phases et on le partage entre de l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organigue est extraite deux fois avec de la saumure, séchée sur du sulfate de sodium anhydre, filtrée et le solvant est éliminé sous 20 pression réduite. On agite à la température ambiante pendant 2 heures, dans un appareil de Parr, sous une atmosphère d'hydrogène (42 psi, 290 kPa), le résidu, 200 mg de palladium à 10% sur charbon, 40 ml d'eau déminéralisée, 40 ml d'acétate d'éthyle et 24 mg (0,286 mmole) de bicarbonate de 25 ..sodium. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disgue en verre fritté et on lave le tampon de Célite avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux ligueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. La phase agueuse est séparée, ex-30 traite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée. On dissout le résidu dans 19 ml d'eau déminéralisée et on l'introduit dans trois colonnes Cl8 Sep-Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants (eau/ acétonitrile : depuis 100% d'eau jusqu'à 50% d'acétonitrile) 35 et lyophilisation, on obtient 55 mg de produit.

45

Exemple 23

Sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z)]]-6-[[2 —(2 — amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-

5 azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxylique

A une solution de 0,741 g (1,27 mmoles) d'ester (4-nitrophényl )méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-6-[(phénylacétyl) amino3-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0 ]heptane-2-carboxy-10 ligue, de 0,126 g (1,59 mmoles) de pyridine dans 9 ml de

CHCI3, refroidi dans un bain froid (-15 à -10°C), on ajoute 0,291 g (1,40 mmoles) de pci5 en une fois, sous forme solide. Après avoir agité à une température de -15 à 10°C pendant 1 heure, on ajoute 0,76 g (12,7 mmoles) de n-propanol, 15 puis, 40 minutes plus tard, 5 ml de saumure. On maintient le mélange résultant sous agitation à environ 0°C pendant 15 minutes, après quoi on le transfère dans une ampoule à décanter. On ajoute 50 ml de EtOAc et on lave le mélange avec NaHC03 (saturé), de l'eau et de la saumure, on le sèche sur 20 NaHC03, on le filtre et on le concentre sous vide. On dissout le résidu dans 10 ml de CH2CI2 et on ajoute à la solution résultante du (E)-O-méthyloxime de S-[2-benzothiazo-lyl]-2-amino-4-thiazologlyoxylate. A l'issue de la réaction, déterminée par CCM (Si02, EtOAc), au bout d'environ 3-4 25 heures, on concentre le mélange réactionnel sous vide et on le purifie par chromatographie éclair (SiÛ2, EtOAc), pour obtenir l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-6-[ [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino) acétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(1-méthyl-lH-tétrazole-5-30 yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,03heptane-2-carboxyligue sous forme d'un solide blanc amorphe.

A une solution de 0,058 g (0,09 mmole) d'ester (4-nitrophényl )méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) 3 3-6-[ [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-mé-35 thyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-OXO-4-

1

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thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique, de 2 ml de EtOAc et de 0,89 ml de solution 0,1M de NaHC03, on ajoute 0,06 g de Pd à 10%/C et un agitateur magnétigue. On met sous vide et on remplit d'hydrogène gazeux trois fois le ballon 5 contenant la solution sous agitation rapide, et on maintient le contenu sous agitation à la température ambiante, sous une atmosphère d'hydrogène (introduit par un ballon). Au bout de 2 heures et demie, on filtre le mélange réactionnel à travers un tampon de Célite, on élimine EtOAc sous vide et 10 on élimine l'eau par lyophilisation. On dissout le solide résultant dans de l'eau et on le purifie par chromatographie sur C18 avec 3 Sep-Pak raccordées en série et éluées avec un gradient de ch3cn/h2o. Après avoir réuni les fractions adé-guates, on élimine CH3CN sous vide et on lyophilise la solu-15 tion résultante pour obtenir le sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z)]]-6-[[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(mé-thoxyimino)acétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(1-méthyl-lH-tétrazo-le-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxyligue sous forme d'une poudre blanche 20 floconneuse.

Exemple 24

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-6-[ [ 2-( 2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-(azido-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

25 carboxylique

On dissout 320,4 mg (1,539 mmoles) de pentachlorure de phosphore dans 5,8 ml de chlorure de méthylène et on ajoute 141,8 ml (1,753 mmoles) de pyridine et on agite sous argon. On refroidit cette solution à une température de -10 à 15°C 30 (il se forme un précipité blanc dès que l'on commence à refroidir). Au bout de 5-10 minutes, on ajoute 716 mg (1,402 mmoles) d'ester (4-nitrophényl)méthylique d'acide [2S-( 2a, 3a, 5a, 6(3) ] - 3- ( azidométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6- [ ( phénylacétyl) amino] -4-thia-l-azabicyclo [ 3 ,2,0]heptane-2-carboxy-35 lique avec 4,3 ml de chlorure de méthylène. Au bout d'une

47

heure et demie, on ajoute 1,29 ml (14,02 mmoles) d'isobu-tanol et, 45 minutes plus tard, on ajoute 15 ml de saumure et on agite le mélange pendant 10 minutes. On ajoute à ce mélange 15 ml de solution saturée de bicarbonate de sodium.

5 Après la séparation, on lave la phase organigue avec une autre portion de 15 ml de solution saturée de bicarbonate de sodium, puis avec 15 ml de saumure. On sèche ensuite la phase sur du sulfate de sodium. On transfère la solution dans un ballon contenant 444,5 mg (1,396 mmoles) de (E)-O-mé-10 thyloxime de S-[2-benzothiazolyl]-2-amino-4-thiazologlyoxa-late et on agite sous argon à la température ambiante pendant une heure et demie. On filtre ensuite le mélange à travers de la Célite et on le purifie par chromatogrphie éclair en utilisant de l'acétate d'éthyle et de l'éther de 15 pétrole (3/1) et de l'acétate d'éthyle, du méthanol et du chlorure de méthylène (9/0,25/6 v/v/v). Le produit ester p-nitrophényligue pèse 200 mg (0,348 mmole, rendement 24,9%).

On dissout ce produit (164 mg, 0,285 mmole) dans 10,8 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute 165 mg de Pd à 10%/C. 20 On agite le mélange à la température ambiante sous hydrogène pendant 2 heures. On le filtre ensuite à travers de la Célite et on le lave au THF. On dissout 26,6 mg (0,317 mmole) de bicarbonate de sodium dans de l'eau et on l'ajoute à la solution dans le THF. On ajoute ensuite suffisamment d'eau 25 et de THF pour maintenir la solution limpide. On élimine ensuite le THF sous vide, ce gui produit une suspension jaune que l'on filtre (un peu de moussage). On fait ensuite passer le filtrat à travers un filtre de seringue Millipore de 0,45 mm et on le lyophilise (26,4 mg). On le purifie ensuite par 30 CLHP en utilisant de 1'acétonitrile et de l'eau, pour obtenir 17,6 mg (0,0381 mmole, rendement 13,3%) de produit.

48

Exemple 25

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]mé-thyl]-6-[[2-(2-amino-4-thiazoly1)-2-(méthoxyimino)acétyl]-5 amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxylique

Sous une atmosphère d'argon sec, on refroidit à -12°C, avec un bain de glace salée, un mélange agité de 61,2 mg (0,294 mmole) de pentachlorure de phosphore dans 4 ml de 10 chlorure de méthylène anhydre et on ajoute 0,06 ml (0,75

mmole) de pyridine anhydre. Après avoir ajouté 187 mg (0,265 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-1-azabicyclois [3,2,0]heptane-2-carboxylique et 2 ml de chlorure de méthylène anhydre, on maintient la température du mélange réactionnel agité au voisinage de -12°C avec un bain de glace salée pendant 3 heures et demie. On ajoute goutte à goutte 0,15 ml (1,63 mmole) d'alcool isobutyligue anhydre et on 20 poursuit l'agitation pendant 1 heure et 15 minutes, tout en maintenant la température au voisinage de -11°C (bain de glace salée). Après avoir ajouté goutte à goutte 0,5 ml de saumure saturée, on maintient la température du mélange réactionnel agité au voisinage de -10°C pendant 1/2 heure et 25 on dilue le mélange réactionnel avec 6 ml de chlorure de méthylène, 3 ml supplémentaires de saumure saturée et 0,6 ml de solution saturée de bicarbonate de sodium. On sépare la phase organique, on la lave par extraction avec de la saumure saturée (3x) et on la sèche sur du sulfate de sodium 30 anhydre. Après avoir éliminé l'agent desséchant par filtration, on ajoute goutte à goutte, à la température ambiante, la solution dans le chlorure de méthylène d'ester (4-nitro-phényl)méthylique d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-[ [ [3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-7-oxo-6-amino-4-thia-l-aza-35 bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue à une solution agitée

49

de 70 mg (0,2 mmole) de (E)-O-méthyloxime de S-[2-benzo-thiazolyl]-2-amino-4-thiazologlyoxolate dans 30 ml de chlorure de méthylène anhydre. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 5 heures et demie, on le 5 lave par extraction avec une solution saturée de bicarbonate de sodium (Ix), puis avec de la saumure saturée (3x), et on le sèche sur du sulfate de sodium anhydre. Après avoir éliminé l'agent desséchant par filtration et avoir évaporé le solvant sous pression réduite, on chromatographie le résidu 10 sur du gel de silice élué avec un système hexane/acétate d'éthyle 1:4, pour obtenir 47 mg de produit.

Exemple 26

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-3-[ [ [3,4 — bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[2-(2-amino-4-thiazo-15 ly1)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-

azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue

On agite un mélange de 70 mg de palladium à 10% sur charbon, de 20 ml d'eau déminéralisée, de 10 mg (0,12 mmole) de bicarbonate de1sodium, de 70 mg (0,091 mmole) d'ester (4-20 nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6f3(Z) ] ]-3-

[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue et de 30 ml d'acétate d'éthyle sous une atmosphère d'hydrogène (pression 25 initiale 56 psi, 386 kPa), à la température ambiante, sur un appareil de Parr pendant 2 heures et demie. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir en verre fritté et on lave le gâteau de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux li-30 gueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. On sépare la phase organigue. On extrait 3 fois la phase agueuse avec de l'acétate d'éthyle et on la lyophilise pendant une nuit. On dissout le résidu dans 15 ml d'eau et on l'introduit dans deux colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série. A 35 l'issue de l'élution avec un gradient de solvants constitué

50

d'eau et d'acétonitrile (depuis 100% d'eau jusgu'à 33% d'acétonitrile dans l'eau), on lyophilise le produit pour obtenir 14 mg de produit.

Exemple 27

5 Sel monosodigue d'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z) ] ] —6-[ [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-

oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

10 On dissout 205,6 mg (0,987 mmole) de pentachlorure de phosphore dans 3,93 ml de chloroforme (3,93 ml, fraîchement séché à travers de l'aluminium). On ajoute 90,7 ml (1,121 mmoles) de pyridine (il se forme immédiatement un précipité) et on refroidit la suspension à une température de -10°C à 15 -15°C sous azote (sec). Au bout de 5 à 10 minutes, on ajoute 492,4 mg (0,898 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,6p)]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue. Au bout de 45 minutes, on ajoute 0,67 ml 20 (8,963 mmoles) de n-propanol. Au bout d'une heure, on ajoute 10 ml de saumure et on agite pendant 5 minutes, puis on ajoute 10 ml de solution saturée de bicarbonate de sodium et 2 ml de chloroforme et on agite pendant 5 minutes supplémentaires. On lave la phase de chloroforme avec 10 ml de sau-25 mure et on la sèche sur Na2S04, puis on la filtre à travers de la Célite. On ajoute 285,8 mg (0,898 mmole) de (E)-O-méthyloxime de S-[2-benzothiazolyl]-2-amino-4-thiazole-glyoxylate au filtrat, ainsi gue guelgues millilitres de chloroforme. On agite ensuite le filtrat à la température 30 ambiante sous azote (sec). Au bout de 2 heures, on élimine le solvant et on dissout le résidu (686,4 mg) dans le chlorure de méthylène, et on le purifie par chromatographie éclair, en utilisant un système 1/1 et 2/1 d'acétate d'éthyle dans l'éther de pétrole. Le produit résultant pèse 121 35 mg.

1

51

On dissout le produit ci-dessus (119 mg, 0,194 mmole) dans 2 ml d'acétone et 1,25 ml d'eau. On ajoute 39,4 mg (0,194 mmole) de sel disodigue de tétrahydro-2-méthyl-3-thioxo-l,2,4-triazine-5,6-dione avec 4,27 ml d'acétone et on 5 agite sous azote (sec) pendant 15 heures. On évapore ensuite l'acétone par entraînement (il se produit un moussage). On redissout le résidu dans l'acétate d'éthyle et l'eau et on le filtre à travers de la Célite. On purifie une partie de la phase agueuse sur urle colonne Cl8 Sep-Pak, pour obtenir 10 2,8 mg de produit.

Exemple 18

Sel disodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-6-[ [2-( 2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2, 4-triazine-3-yl)thio]-15 méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxylique

On dissout 20,4 mg (0,0286 mmole) de sel monosodigue d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(Z) ] ]-6-[ [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-(méthoxy-20 imino)acétyl]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-1,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue dans 0,6 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 0,28 ml (0,028 mmole) de NaHC03 0,IN. On agite le mélange à la température ambiante sous hy-25 drogène. Au bout de 2 heures et 45 minutes, on ajoute 1 ml d'acétate d'éthyle et 1 ml de NaHCOj 0,1N et on filtre le mélange réactionnel à travers de la Célite et on sépare les phases. On fait passer la phase agueuse à travers 2 colonnes C18 Sep-Pak et on obtient 13,4 mg de produit après lyophili-30 sation. On poursuit sa purification par CLHP en utilisant un système acétonitrile/eau.

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Exemple 29

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[ 2a, 3a, 5a, 6(3 (R*) ]]-6-[[2-[[( 4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazi-nyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(1-5 méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thiojméthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabi^

cyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On dissout 157,9 mg ((0,495 mmole) d'acide (R)-a-[[(4-éthyl-2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]benzèneacétique et 84,1 mg (0,504 mmole) de 2-mercaptobenzotriazole dans 3,15 10 ml de chloroforme. On dissout 101,6 mg (0,493 mmole) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide dans 1,88 ml de chloroforme et on l'ajoute à la première solution. On l'agite à la température ambiante pendant 1 heure et 45 minutes. On prépare, de la manière suivante, 1'aminé libre de l'ester (4-nitrophé-15 nyl)méthylique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-méthyl-3-

[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-6-amino-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique : on dissout i

90 mg (0,432 mmole) de pentachlorure de phosphore dans 2 ml de chloroforme (passé à travers de l'alumine) et 39,7 ml 20 (0,491 mmole) de pyridine (il se forme immédiatement un précipité). On refroidit le mélange à une température de -15 à -20°C pendant 5 à 10 minutes, puis on ajoute l'ester (4-nitrophényl ) méthyligue de l'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-3-yl)thio]méthyl]-7-oxo-6-[(phé-25 nylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo13,2,0]heptane-2-car-boxylique. Au bout d'une heure et quart, on ajoute 305 ml (4,080 mmoles) de n-propanol. Au bout d'une heure et 40 minutes, on introduit 3 ml de saumure sous agitation pendant 10 minutes, puis on sépare les phases et on ajoute 4 ml de 30 solution saturée de bicarbonate de sodium et 2 ml de chloroforme. On extrait les phases aqueuses avec 2 ml de chloroforme. On réunit toutes les phases de chloroforme et on les sèche sur Na2S04, puis on les filtre et on ajoute le filtrat à la solution préparée dans la première partie. 35 Au bout de 2 heures, on extrait le mélange réactionnel

53

avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et on sèche la phase organique sur Na2SC>4, puis on la filtre et on la purifie par chromatographie éclair en utilisant comme éluant un système acétate d'éthyle/méthanol/chlorure de mé-5 thylène 9/0,25/6. On poursuit la purification du produit partiellement purifié (103 mg) par CLHP, en utilisant un système acétate d'éthyle/chlorure de méthylène, pour obtenir 61,6 mg de produit (0,0803 mmole, rendement 20,3%).

Exemple 30

10 Sel monosodigue sesquihydraté de l'acide [2S-

[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-6-[ [2-[ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazi-ny1)carbony1]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-3-[[(1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabij2

cyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

15 On dissout 38,5 mg (0,0502 mmole) d'ester (4-nitrophé-

nyl)méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,6f3(R*) ] ]-6-[ [2-[ [ ( 4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl] amino] -3 -méthyl-3 - [ [(1-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]-méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-20 lique dans 1,74 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 39,2 mg de Pd à 10%/C. On ajoute ensuite 2,6 ml d'eau, puis 0,6 ml (0,06 mmole) de NaHC03 0,1N. On agite le mélange à la température ambiante sous hydrogène. Au bout d'une heure et 55 minutes, on filtre le mélange à travers de la Célite et on 25 lave la Célite avec de l'acétate d'éthyle et de l'eau. On le filtre ensuite à travers un filtre de seringue Millipore de 0,22 mm et on le laisse se séparer pendant 1 heure. On purifie la phase aqueuse par CLHP en utilisant un système acéto-nitrile/eau et on récupère 15,0 mg (0,0229 mmole, rendement 30 45,7%) de produit par évaporation de 1'acétonitrile et lyophilisation de la phase agueuse.

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Exemple 31

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-5 amino] -2-phénylacétyl] amino] -3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-aza_2

bicycloE3,2,0]heptane-2-carboxylique

On refroidit à -13°C au moyen d'un bain de glace salée un mélange agité de 91,0 mg (0,437 mmole) de pentachlorure de phosphore dans 5 ml de chlorure de méthylène anhydre et 10 on ajoute 0,07 ml (0,87 mmole) de pyridine anhydre. Après avoir ajouté 280 mg (0,4 mmole) d'ester (4-nitrophényl)-méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy )benzoyl]oxy]méthyl]-6-E(phénylacétyl)amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique, on 15 agite le mélange réactionnel au voisinage de -15°C pendant 3 heures, puis on ajoute goutte à goutte 0,2 ml (2,18 mmoles) d'alcool isobutylique anhydre. On agite le mélange réactionnel une heure supplémentaire tout en maintenant la température au voisinage de -12°C et on ajoute 0,6 ml de saumure 20 saturée. On poursuit l'agitation pendant 15 minutes après la dernière addition et on dilue le mélange agité avec 20 ml de chlorure de méthylène. On sépare la phase organigue et on l'extrait une fois avec une solution saturée de bicarbonate de sodium, puis 3 fois avec de la saumure. Après un séchage 25 sur du sulfate de sodium anhydre, on élimine l'agent desséchant par filtration et on ajoute le filtrat à une solution agitée dans le tétrahydrofuranne de 109,5 mg (0,251 mmole) de (R)-N-[2-(lH-benzotriazole-l-yl-oxy)-2-oxo-l-phényl-éthyl]-4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazine-carboxamide préparé au 30 préalable (on agite à la température ambiante pendant 2

heures un mélange de 80 mg (0,251 mmole) d'acide (R)-a-[[(4-éthylL2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétigue, de 34 mg (0,25 mmole) de 1-hydroxybenzotriazole, de 52 mg (0,25 mmole) de N,N-dicyclohexylcarbodiimide et de 10 ml de tétra-35 hydrofuranne anhydre). On agite le mélange réactionnel pen

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dant une nuit à la température ambiante et on le concentre à sec sous pression réduite. On triture le résidu 4 fois avec de l'acétate d'éthyle et on le filtre. On extrait le filtrat 1 fois avec une solution diluée de bicarbonate de sodium, 3 5 fois avec de la saumure, puis on le sèche sur du sulfate de sodium anhydre. Après la filtration de l'agent desséchant et 1'évaporation du solvant, on chromatographie le résidu sur du gel de silice (gue l'on élue avec de l'acétate d'éthyle seul), pour obtenir 41 mg du produit. 10 Exemple 32

Sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4 — bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-di-oxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^

15 ligue

On agite un mélange de 60 mg de palladium à 10% sur charbon, de 30 ml d'eau déminéralisée et de 14 mg (17 mmoles) de bicarbonate de sodium, de 56 mg (0,063 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-20 [2a, 3a, 5a, 60(R*) ] ] — 3 — [ [ [ 3,4-bis ( acétyloxy)benzoyl ] oxy]-

méthyl]-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]-amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthy1-7-oxo-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue et de 30 ml d'acétate d'éthyle sous une atmosphère d'hydrogène (pression initiale 25 53,5 psi, 369 kPa1), à la température ambiante, sur un appareil de Parr, pendant 2 heures. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disgue en verre fritté et on lave le gâteau de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux liqueurs 30 de lavage réunis du chlorure de sodium solide. On extrait 3 fois la phase agueuse avec de l'acétate d'éthyle et on la lyophilise pendant une nuit. On introduit le résidu, dissous dans 35 ml d'eau déminéralisée, sur deux colonne Cl8 Sep-Pak raccordées en série. A l'issue de l'élution avec un gradient 35 de solvants constitué d'eau et d'acétonitrile (depuis 100%

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d'eau jusqu'à 50% d'acétonitrile dans l'eau), on obtient 16 mg de produit.

Exemple 33

Sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*) ] ] —6— [ [2-5 [[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phény-lacétyl]amino]-3-[[(3,4-dihydroxybenzoyl)oxy]méthyl]-3-mé^ thyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique On conserve à la température ambiante pendant 19 heures une solution de 250 mg (0,34 mmole) d'ester (4-nitrophé-10 nyl)méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-amino]-2-phénylacétylamino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique, de 60 mg (0,39 mmole) d'acide 3,4-dihydroxybenzoïque, de 42 mg (0,5 mmole) de bicarbonate 15 de sodium, de 40 ml d'acétone et de 10 ml d'eau déminéralisée. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite jusgu'à ce gu'il se forme deux phases et on le partage entre de l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase orga-nigue est séparée, lavée 3 fois par extraction avec de la 20 saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après l'élimination de l'agent desséchant par filtration et éva-poration du solvant sous pression réduite, on ajoute le résidu à une suspension de 200 mg de palladium à 10% sur charbon, de 40 ml d'eau déminéralisée, de 25 mg (0,298 mmole) de 25 bicarbonate de sodium et de 40 ml d'acétate d'éthyle. On soumet le mélange à une hydrogénation (55,0 psi, 379 kPa) sur un appareil de Parr pendant 2 heures. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté, et on lave le gâteau 30 de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux liqueurs de lavage réunis 2,0 g de chlorure de sodium solide. La phase agueuse est séparée, extraite deux fois avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée pendant une nuit. On introduit le résidu, dissous dans 18 ml d'eau déminéra-35 lisée, dans trois colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série.

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A l'issue de l'élution avec un gradient de solvants constitué par de l'eau et de 1'acétonitrile (depuis 100% d'eau jusgu'à 50% d'acétonitrile dans l'eau), on obtient 21,3 mg de produit.

5 Exemple 34

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ] —6— [ [2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phény-lacétyl ] amino ] -3- [ [ ( 2-f urannylcarbonyl ) thio 3méthyl 3 -3-mé_^ thyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0 3heptane-2-carboxylique 10 On agite à la température ambiante pendant 1 heures une solution de 50 mg (0,39 mmole) d'acide 2-thiofuroïque, de 60 ml d'acétone, de 34 mg (0,41 mmole) de bicarbonate de sodium, de 197 mg (0,27 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthy-ligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) 3 3-3-(bromométhyl)-6-[ [2-15 E[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino3-2-phényl-acétylamino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hep-tane-2-carboxyligue et de 20 ml d'eau déminéralisée. On concentre le mélange réactionnel sous pression réduite jusgu'à ce qu'il se forme deux phases et on le partage entre de 20 l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organique est séparée, lavée 3 fois par extraction avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium anhydre. Après l'élimination de l'agent desséchant par filtration et évaporation du solvant sous pression réduite, on ajoute le résidu à un mélange 25 de 170 mg de palladium à 10% sur charbon, de 21 mg (0,25

mmole) de bicarbonate de sodium, de 50 ml d'eau déminéralisée et de 50 ml d'acétate d'éthyle. On agite le mélange sous une atmosphère d'hydrogène (pression initiale 56 psi, 386 kPa), à la température ambiante, sur un appareil de Parr 30 pendant une heure et demie. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté, et on lave le gâteau de filtration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux liqueurs de lavage réunis du chlorure de sodium solide. La phase 35 aqueuse est séparée, extraite deux fois avec de l'acétate

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d'éthyle et lyophilisée. On dissout le résidu dans 25 ml d'eau déminéralisée et on l'introduit dans trois colonnes C18 Sep-Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants constitué par de l'eau et de l'açétoni-5 trile (depuis 100% d'eau jusgu'à 50% d'acétonitrile dans l'eau) et lyophilisation, on obtient 23 mg de produit.

Exemple 35

Sel monosodigue de l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ] —6— [ [2-[ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-l-10 pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-1,2,4-1riaz ine-3-y1)thio]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxylique

On dissout 263,5 mg (0,826 mmole) d'acide (R)—œ-[[(4-15 éthyl-2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétigue et 138,3 mg (0,827 mmole) de 2-mercaptobenzotriazole dans 11,7 ml de chlorure de méthylène. On dissout 171,3 mg (0,830 mmole) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide dans 2,5 ml de chlorure de méthylène et on l'ajoute à la première solution, gue 20 l'on agite ensuite à la température ambiante sous azote

(sec). On prépare simultanément, selon le mode opératoire suivant, 1'aminé libre de l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-amino-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-25 ligue :

On dissout 192,7 mg (0,925 mmole) de pentachlorure de phosphore dans 2,3 ml de chlorure de méthylène. On ajoute ensuite 83,5 ml (1,032 mmoles) de pyridine (il se forme immédiatement un précipité) et on agite la suspension et on la 30 refroidit -15°C. Au bout de 5 à 10 minutes, on ajoute 452,3 mg (0,825 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [ 2S-( 2a,3a,5a,6(â) ]- 3-(bromométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-car-boxyligue et on agite sous azote (sec). Au bout de 2 heures, 35 on transfère le mélange réactionnel à la pipette dans 12 ml

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de solution saturée de bicarbonate de sodium. On lave ensuite la phase de chlorure de méthylène avec 7 ml supplémentaires de solution saturée de bicarbonate de sodium, puis avec 15 ml de saumure. On la sèche ensuite sur Na2S04 dans 5 un tube à essai.

On transfère ensuite la solution dans l'ester activé préparé dans la première partie. Avant l'addition, on réduit le volume de la solution d'ester activé à 5 - 10 ml. On agite la solution sous azote à la température ambiante. Au 10 bout de 2 heures et 25 minutes, on réduit le volume à 5 - 10 ml et on filtre le mélange à travers de la Célite et on le purifie par chromatographie éclair en utilisant comme éluant de l'acétate d'éthyle dans l'éther de pétrole. On obtient deux fractions (84 mg de produit d'une pureté d'environ 80% 15 et 115 mg de produit d'une pureté d'environ 33% par RMN) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ]']-3-(bromométhyl)-6-[ [2-[ [ (4-éthyl-2,3-di-oxo-1-pipéraz iny1)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-20 ligue.

On dissout ensuite 80 mg (0,109 mmole) de l'intermédiaire ci-dessus dans 1,3 ml d'acétone et on ajoute 0,63 ml d'eau. A cette solution laiteuse, on ajoute du sel disodigue de tétrahydro-2-méthyl-3-thioxo-l,2,4-triazine-5,6-dione, 25 puis 1,74 ml d'acétone. On agite la solution jaune limpide à la température ambiante sous azote. Au bout de 3 heures et 30 minutes, on ajoute 5 ml d'eau et on évapore l'acétone (il se produit un moussage). On purifie en partie le produit sur des colonnes C18 Sep-Pak, puis par CLHP en utilisant un sys-30 tème acétonitrile/eau et une colonne C18. On recueille deux fractions, gui pèsent respectivement 26,9 mg et 3,9 mg.

35

60

Exemple 36

Sel disodique de 'l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-6-[ [2 — [ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl ]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-1,2,4-5 triazine-3-yl)thio]méthyl3-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicy2,

clo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On dissout 40 mg (0,0481 mmole) de sel monosodigue de l'ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) 3 3-6-[ [2— [ [ ( 4-éthyl-2, 3-dioxo-l-pipérazi-10 nyl)carbonyl3amino3-2-phénylacétyl3amino3-3-[[(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl3-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 0,46 ml (0,046 mmole) de NaHC03 0,1N et on ajoute 0,46 ml d'eau, puis 1 ml d'acétate d'éthyle et 40 mg de Pd à 15 10%/C. On agite le mélange sous hydrogène à la température ambiante. Au bout de 2 heures, on ajoute 1 ml d'eau et 1 ml d'acétate d'éthyle et on filtre la suspension à travers de la Célite. On élimine la phase aqueuse et on l'évaporé brièvement, puis on la lyophilise par CLHP en utilisant un sys-20 tème acétonitrile/eau, ce qui donne deux fractions (18,9 mg et 6,5 mg).

Exemple 37

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]- 3-[ (acétyl) thio) méthyl] -3-méthyl-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipé-2 5 razinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-7-oxo-4-thia-

l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

Dans un ballon sec contenant une atmosphère d'argon, on introduit 6,73 g (12,27 mmoles) d'ester (4-nitrophényl)-méthylique d'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-(bromométhyl)-3-30 méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-

[3,2,0]heptane-2-carboxylique, 41 ml de CH2CI2 et on refroidit le mélange jusqu'à une température de -5 à -10°C. A cette solution refroidie, on ajoute 1,21 g (15,35 mmoles, 1,24 ml) de pyridine, puis, 5 minutes plus tard, on ajoute 35 2,808 g (13,5 mmoles) de pci5 solide, en une fois. Après

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avoir agité à cette température pendant 30 minutes, on refroidit le mélange réactionnel jusgu'à une température de -15 à -20°C et on ajoute lentement 5,45 g ( 73,69 mmoles, 6,78 ml) d'isobutanol le long de la paroi interne du ballon, 5 en l'espace de 5 minutes. Après avoir agité pendant 15 minutes supplémentaires, on ajoute une solution saturée de NaBr (20 ml) à 0°C et on place le ballon réactionnel dans un bain de glace à 0°C. Au bout de 5 minutes, on ajoute lentement 41 ml de Et20, ce gui provogue la précipitation du com-10 posé recherché. On maintient le mélange réactionnel sous agitation rapide pendant encore 5 minutes, après guoi on filtre le mélange réactionnel à travers un Buchner et on lave le solide avec Et20 jusqu'à ce gue le produit prenne un aspect granulaire et gue l'on ne puisse plus déceler d'odeur 15 d'halogénures de phosphore. On transfère le solide dans un verre de montre et on le sèche sous vide dans un dessicca-teur contenant CaSO^ Le solide obtenu (4,77 g) contient environ 50% du dérivé bromhydrate de 6-amine recherché, l'impureté majeure étant NaBr.

20 Dans un ballon contenant de l'ester (4-nitrophényl)-

méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,60) ]-6-amino-3-(bromométhyl) -3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[ 3 ,2,0]heptane-2-carboxylique, obtenu à partir du dérivé bromhydrate d'aminé par traitement avec NaHC03, 12 ml d'acétone et 4 ml d'eau, 25 on ajoute 0,34 g (2,98 mmoles) de thioacétate de potassium. On maintient l'agitation du mélange réactionnel pendant 7,5 heures à la température ambiante, après guoi on ajoute 100 ml de EtOAc et on transfère le mélange dans une ampoule à décanter, et on le lave avec 50 ml de H20, 50 ml de NaHCOj, 30 30 ml de H20 et de la saumure, on le sèche avec Na2S04 et on le concentre jusqu'à un volume de 1-2 ml. On ajoute cette solution au mélange réactionnel décrit ci-dessous.

Dans un ballon sec contenant une atmosphère d'argon, on introduit 0,475 g (1,49 mmoles) d'acide (R)-a-[[(4-éthyl-35 2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétique, 5 ml de

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DMF et 0,201 g (1,49 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, et on refroidit la solution dans un bain de glace à 0°C. Au bout de 5 minutes, on ajoute 0,337 g (1,64 mmoles) de dicy-clohexylcarbodiimide et on maintient le mélange réactionnel 5 sous agitation pendant encore 10 minutes. A ce moment, on ajoute la solution décrite dans le paragraphe précédent, ainsi gue 2-3 ml de CH2CI2. On maintient la solution résultante sous agitation pendant une nuit à la température ambiante. On ajoute 100 ml de EtOAc et on-la lave dans une am-10 poule à décanter avec 3 fois 100 ml de H20, 50 ml de NaHC03 et 50 ml de saumure, puis on la sèche sur Na2S04, on la filtre et on la concentre sous vide. On purifie le résidu par chromatographie éclair (51 g de Si02, EtOAc), pour obtenir 0,375 g (35%) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide 15 [2S-[2a,3a,5a,6(à(R*) 3 3 —3 — [ (acétylthio)méthyl]-3-méthyl-6-[E 2-E[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique, sous forme d'un solide amorphe blanc cassé.

A une solution de 0,202 g (0,278 mmoles) d'ester (4-ni-20 trophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*)]]-3-

[(acétylthio)méthyl]-3-méthyl-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl] amino]-2-phénylacétyl]amino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue, de 6 ml de EtOAc et de 5,56' ml de NaHC03 0,1M, on ajoute 0,20 g de Pd à 25 10%/C et un agitateur magnétigue. On met sous vide et on remplit d'hydrogène gazeux trois fois le ballon contenant la suspension sous agitation rapide. Après avoir agité le mélange réactionnel pendant 2 heures à la température ambiante sous une atmosphère d'hydrogène (délivrée par un ballon), on 30 filtre le mélange réactionnel à travers un tampon de Célite, on élimine EtOAc sous vide et on lyophilise la suspension agueuse résultante. On purifie le solide obtenu après lyophilisation par chromatographie sur C18 avec trois colonnes Sep-Pak raccordées en série et on 1'élue avec un gradient de 35 CH3CN/H2O (0 - 100%). On réunit les fractions adéguates (10

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- 20% de ch3cn/h2o), on élimine CH3CN sous vide et on lyophilise la solution agueuse résultante pour obtenir 0,063 g du produit recherché sous forme d'une poudre blanche floconneuse. On purifie ce solide par CLHP avec une colonne 5 Whatman-M9 C18 gue l'on élue avec ch3cn/h2 (gradient de 15% à 50%) et qui donne, après l'élimination de CH3CN et de l'eau, 0,034 g de sel monosodigue d'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*)]]-3-[(acétylthioJméthyl]-3-méthyl-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phényl-10 acétyl]amino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-car-boxylique.

Exemple 38

Sel monosodique d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-(fluoro-méthyl)-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-15 amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-aza^

bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On agite à la température ambiante pendant 5,5 heures un mélange de 137 mg (0,19 mmole) d'ester (4-nitrophényl)-méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-3-(bromométhyl)-6-20 t[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique (ballon réactionnel recouvert d'une feuille d'aluminium), de 30 ml d'acétone et de 24 mg (0,19 mmole) de fluorure d'argent dans 3 ml d'eau déminéra-25 lisée. Après l'avoir filtré à travers un filtre Millipore, on élimine la plupart de l'acétone du filtrat sous pression réduite. On partage le résidu entre de l'acétate d'éthyle et de la saumure. La phase organique est séparée, lavée trois fois avec de la saumure et séchée sur du sulfate de sodium. 30 Après avoir éliminé l'agent desséchant par filtration et évaporé l'acétate d'éthyle sous pression réduite, on ajoute le résidu à un mélange de 40 mg de palladium à 10% sur charbon, de 30 ml d'eau déminéralisée, de 10 mg (0,12 mmole) de bicarbonate de sodium et de 20 ml d'acétate d'éthyle. On 35 agite le mélange sous une atmosphère d'hydrogène (pression

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initiale 56 psi, 386 kPa), à la température ambiante, sur un appareil de Parr, pendant 3 heures. On élimine le catalyseur par filtration à travers un tampon de Célite sur un entonnoir à disque en verre fritté et on lave le gâteau de fil-5 tration avec de l'eau froide. On ajoute au filtrat et aux ligueurs de lavage réunis 521,7 mg de chlorure de sodium solide. La phase agueuse est séparée, extraite avec de l'acétate d'éthyle et lyophilisée. Le résidu est dissous dans 15 ml d'eau déminéralisée et placé sur trois colonnes C18 Sep-10 Pak raccordées en série. Après élution avec un gradient de solvants constitué d'eau et d'acétonitrile (depuis 100%

d'eau jusgu'à 50% d'acétonitrile dans l'eau) et lyophilisation, on obtient 10 mg de produit.

Exemple 39

15 Sel monosodigue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]thio]méthyl]-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl )carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-mé^ thyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On dissout 423,2 mg (2,032 mmoles) de pentachlorure de phosphore dans 5,73 ml de chlorure de méthylène et on ajoute ensuite 187 ml (2,312 mmoles) de pyridine (il se forme un précipité blanc). On refroidit le mélange dans un bain de glace additionné d'acétone (-10°C à -15°C), sous argon,

__ puis, au bout de 5 minutes, on ajoute 1,0156 g (1,852 2 5

mmoles) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a, 3a, 5a, 60)]-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl) amino] -4-thia-l-azabicyclo [3,2,0]heptane-2-carboxylique. Au bout de 45 minutes, on ajoute 1,70 ml (18,42 3Q mmoles) d'isobutanol et on poursuit l'agitation dans le bain d'acétone/glace. Au bout de 40 minutes, on ajoute une solution de bromure de sodium (13 ml d'une solution de 70 g de NaBr dans 100 ml de H2O) et on agite à la température ambiante. Au bout de cing minutes, on ajoute 6 ml d'éther di-

__ éthylique et on agite vigoureusement pendant guelgues mi-35

nutes. On filtre le mélange résultant dans un entonnoir en

65

verre fritté grossier et on le lave avec une solution de bromure de sodium (une partie froide et une partie à la température ambiante). Cette opération est suivie de guatre lavages à l'éther diéthyligue de 12,5 ml chacun. Le solide 5 est séché à l'air sur l'entonnoir et redissous dans 5 ml de chlorure de méthylène et 5 ml de bicarbonate de sodium saturé. La phase de chlorure de méthylène est séchée sur du sulfate de sodium, puis additionnée à l'ester activé gue l'on prépare simultanément de la manière suivante : 10 On dissout 311,5 mg (1,862 mmoles) de 2-mercaptobenzo-

thiazole et 580,4 mg (1,819 mmoles) d'acide (R)-a-[[(4-éthyl-2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétique dans 24 ml de chlorure de méthylène. On dissout 385,6 mg (1,869 mmoles) de 1,3-dicyclohexylcarbodiimide dans 7 ml de 15 chlorure de méthylène et on l'ajoute à la première solution. On agite la solution sous argon à la température ambiante pendant 2 heures 1/3. On réduit le volume au guart du volume initial et on ajoute la solution d'aminé libre préparée comme il est décrit ci-dessus, et on agite à la température 20 ambiante sous argon. Au bout de 2 heures et 10 minutes, on filtre la solution à travers de la Célite et on la purifie par chromatographie éclair en utilisant de l'acétate d'éthyle dans l'éther de pétrole. On obtient deux fractions (72 mg et 11 mg).

25 On dissout la fraction la plus pure (72 mg, 0,098

mmole, rendement 5,3% par rapport à l'ester (4-nitrophé-nyl)méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*)]]-3-(bromo-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipé-razinyl)carbonylj amino]-2-phénylacétyl]amino]-4-thia-1-aza-30 bicyclo[3,2,0]hej)tane-2-carboxylique) et 26,7 mg (0,105 mmole) d'acide 3,4-bis(acétyloxy)benzènecarbothioïgue dans de l'acétone et du bicarbonate de potassium 0,1N (1 ml, 0,1 mmole). On agite le mélange sous argon à la température ambiante. Au bout de 30 minutes, on ajoute 20 ml d'acétate 35 d'éthyle et 20 ml de solution saturée de bicarbonate de so

66

dium. On sèche la phase d'acétate d'éthyle sur du sulfate de sodium (anhydre), puis on la filtre pour obtenir un résidu.

On dissout le résidu dans 5 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute 72,1 mg de Pd à 10%/C. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante et sous la pression ambiante, sous hydrogène. Au bout de deux heures, on le filtre à travers de la Célite et on ajoute 0,93 ml (0,093 mmole) de bicarbonate de sodium 0,1N et 2 ml d'eau, ainsi gue suffisamment de tétrahydrofuranne pour produire une solution limpide. On élimine le tétrahydrofuranne par évaporation et on filtre la partie aqueuse à travers de la Célite. On fait passer le filtrat à travers deux colonnes C18 Sep-Pak (en série) et on l'élue avec de l'eau et des mélanges de 5%, 10%, 20% et 40% d'acétonitrile dans l'eau (chacun de 10 ml, à l'exception du mélange à 20% gui sont des fractions recueillies de 15 ml et de 5 ml). On récupère deux séries de fractions (4,1 mg et 2,2 mg, total 0,0080 mmole, 0,43%, par rapport à l'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-( 2a,3a,5a,6(3) ]- 3-(bromométhyl) -3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl) amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-ligue). Le produit est ensuite purifié davantage par CLHP au moyen d'acétonitrile et d'eau.

Exemple 40

Ester (4-nitrophényl)méthyligue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-(bromométhyl)-6-[ [2— [ [ ( 4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy^ ligue

On agite pendant 2 heures, à la température ambiante, une solution de 158 mg (0,496 mmole) d'acide (R)-a-[[(4-éthyl-2,3-dioxopipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétigue, de 83 mg (0,496 mmole) de 2-mercaptobenzothiazole, de 103 mg (0,5 mmole) de N,N'-dicyclohexylcarbodiimide et de 25 ml de tétrahydrofuranne anhydre. On ajoute goutte à goutte, à la température ambiante, une solution de 175 mg (0,41 mmole)

67

i d'ester (4-nitrophényl)raéthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,60)]-6-amino-3-(bromométhyl)-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique dans 16 ml de chlorure de méthylène anhydre. On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 2 heures supplémentaires, et on le concentre à sec sous pression réduite. On partage le résidu entre de l'acétate d'éthyle et une solution diluée de bicarbonate de sodium. Les phases organiques sont séparées et tour à tour extraites avec de l'eau (2x) et de la saumure (lx), puis séchées sur du sulfate de sodium anhydre. Après élimination de l'agent desséchant par filtration et évaporation du solvant sous pression réduite, on chromatographie le résidu sur du gel de silice (élué avec de l'acétate d'éthyle seul), pour obtenir 250 mg de produit.

Exemple 41

Sel monosodique d'acide [2S-(2a,3a,5a,60)]-6-[[[3,4-bis-(acétyloxy)benzoylamino]phénylacétyl]amino]-3-[[3,4-bi s-( acétyloxy)benzoyloxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-aza_2

bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

On agite pendant 30 minutes un mélange de 0,055 g (0,15 mmole) d'acide (3,4-bisacétoxybenzoylamino)phénylacétigue, de 0,025 g (0,16 mmole) de 1-hydroxybenzotriazole et de 0,034 g (0,16 mmole) de N,N-dicyclohexylcarbodiimide dans 5 ml de chlorure de méthylène anhydre. A la solution ci-des-sus, on ajoute 0,112 g (0,18 mmole) d'ester (4-nitrophényl)-méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,60]]-3-[[[3,4-bis(acétyloxy) benzoyl]oxy]méthyl]-6-amino-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique, préparé comme dans l'exemple 31, et on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 3 heures. Un traitement et une purification analogues à ceux décrits dans l'exemple 31 donnent 33 mg (26,6%) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-(2a,3a,5a,60)]—6—[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoylamino]phénylacétyl ]amino]-3-[[3,4-bi s(acétyloxy)benzoyloxy]méthyl]-3-mé thy1-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-

68

ligue.

On soumet l'ester ci-dessus (33 mg, 0,04 mmole) et 35 mg de Pd à 10%/C dans THF-H2O (1:1, 24 ml) à une hydrogénation avec H2 (45 psi, 310 kPa) à la température ambiante 5 pendant 2 heures. Après la transformation en sel de sodium avec du bicarbonate de sodium, on purifie le produit brut sur une colonne C18 et on lyophilise les fractions adéguates pour obtenir 18,4 mg (5,6%) du composé du titre.

Exemple 42

10 Sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3a,5a,60(R*)]]-4-[[[2-carboxy-6-[[2—[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl- 7 -oxo-4-thia-1-az abi^ cyclo[3,2,0]hept-3-yl]thio]méthyl]-1-éthylpyridinium

A une solution de 0,26 g (0,35 mmole) d'ester (4-nitro-15 phényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-3-(bromo-méthyl)-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-azabi-cyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue (exemple 40) dans 13 ml de DMF, on ajoute 0,064 g (0,46 mmole) de N-éthyl-4-thio-20 pyridine à la température ambiante et on agite le mélange pendant 8 heures à 45°C. On élimine le solvant et on triture le résidu avec de l'acétate d'éthyle. On purifie le précipité sur une colonne de gel de silice éluée avec du chlorure de méthylène, puis un système chlorure de méthylène/méthanol 25 (9:1) contenant 2% d'acide acétigue, pour obtenir 49 mg

(17%) de bromure de [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-4-[ [ [2-carboxy-6-[[2-[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-2-phénylacétyl]amino]-3-méthyl-2-[[(4-nitrophényl)méthoxy]-carbonyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]thio]-30 méthyl]-1-éthylpyridinium.

On soumet l'ester ci-dessus (15 mg, 0,019 mmole) et 15 mg de Pd à 10%/C dans THF-H2O (1:1, 10 ml) à une hydrogénation avec H2 (45 psi, 310 kPa) à la température ambiante pendant 2 heures. La purification du produit sur une colonne 35 C18 et la lyophilisation des fractions adéguates donnent 6,7

!

mg (55,8%) du composé du titre.

Exemple 43

Sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3a,5a,60]]-4-[[[2-car-boxy-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabi_2

cyclo[3,2.0]hept-3-yl]thio]méthyl]-1-éthylpyridinium

A une solution de 0,274 g (0,5 mmole) d'ester (4-nitro-phényl)méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,60]]-3-(bromo-méthyl)-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue dans 4,8 ml de DMF, on ajoute 0,082 g (0,58 mmole) de N-éthyl-4-thiopyridine à la température ambiante et on agite le mélange pendant une nuit. On élimine le solvant sous vide et on purifie le résidu sur des plagues de silice préparatives éluées avec un système chlorure de méthylène/méthanol (92:8), pour obtenir 0,108 g (31%) de bromure de [2S-[2a,3a,5a,60]]—4—[[[2—[[(4-nitrophényl)méthoxy]carbonyl]-6-[(phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]thio]-méthyl]-1-éthylpyridinium.

On soumet l'ester ci-dessus (0,144 g, 0,20 mmole) et 160 mg de Pd à 10%/C dans THF-H2O (1:1, 10 ml) à une hydrogénation avec H2 (45 psi, 310 kPa) à la température ambiante pendant 21 heures. La purification du produit sur une colonne C18 et la lyophilisation des fractions adéguates donnent 36,7 mg (37,5%) du composé du titre.

Exemple 44

Acide [2S-[2a,3a,5a,6(3] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]-oxy]méthyl]-6-[[(hexahydro-lH-azépine-l-yl)méthylène]amino]-

7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique

A un mélange de 48,2 mg (0,25 mmole) d'acide p-toluène-sulfonique et de 0,044 ml (0,25 mmole) de N,N-diisopropylé-thylamine dans 5,7 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 284 mg (0,465 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,60]]—3—[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]-oxy]méthyl]-6-amino-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxyligue, préparé comme dans l'exemple

70

37, et on agite le mélange à la température ambiante sous argon. Ensuite, on ajoute au mélange ci-dessus 0,32 ml (1,83 mmoles) de N-formylhexaméthylèneiminediméthylacétal et on agite le mélange réactionnel à la même température pendant 1 heure. On verse le mélange réactionnel dans de l'acétate d'éthyle et on le lave avec de l'eau, une solution saturée i

de bicarbonate de sodium et de la saumure. On éliminé le solvant et on soumet le résidu, dissous dans THF-H2O (5,7 ml:5,7 ml), à une hydrogénation avec 560 mg de Pd à 10% sur charbon et H2 (1 atm) pendant 2 h. On élimine le catalyseur par filtration et on purifie le produit brut sur une colonne C]_8 pour obtenir 33 mg du composé du titre (13,5%).

Exemple 45

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3] ]-3-[ [ [3,4 — bis(acétyloxy)benzoylJoxy]méthyl]-6-[[(difluorométhyl)-thio]acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicycloj^ [3,2,0]heptane-2-carboxyligue

A une solution de 360 mg (0,59 mmole) d'ester (4-nitro-phényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,60]]-3-[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-amino-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique (préparé comme dans l'exemple 31) et de 0,066 ml (0,823 mmole) de pyridine dans 10 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 117,3 mg (0,73 mmole) de chlorure de difluorométhylthioacétyle et on agite le mélange résultant à la température ambiante pendant 5 h. A l'issue de la réaction, on lave la solution avec HCl dilué, une solution diluée de NaHCÛ3 et de la saumure. On purifie le produit brut sur une colonne de gel de silice éluée avec un système acétate d'éthyle/éther de pétrole (1:1), pour obtenir 103 mg (25,7%) d'ester (4-nitrophényl )méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,60]]-3-[[[3,4-bis-(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[(difluorométhyl)thio]-acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxylique.

On soumet l'ester ci-dessus (87,3 mg, 0,128 mmole) à

71

une hydrogénation avec 92 mg de Pd à 10% sur charbon dans THF:H20 (3,2 ml:2,2 ml) sous une pression d'hydrogène de 1 atm. On purifie le produit sur une colonne C-^g pour obtenir le composé du titre (39 mg, 51%).

5 Exemple 46

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*) ] ]-3 — [ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[amino(phénylacétyl)-amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

carboxyligue

10 On agite pendant 2,5 h à la température ambiante un mé

lange de 147 mg (0,445 mmole) de (R)-N-(4-nitrobenzyloxy)-carbonylphénylglycine, de 60 mg (0,44 mmole) de 1-hydroxy-benzotriazole et de 98,,5 mg (0,478 mmole) de N,N-dicyclo-hexylcarbodiimide dans 5 ml de chlorure de méthylène an-15 hydre. A la solution ci-dessus, on ajoute 262 mg (0,46 mmole) d'ester (4-nitrophényl)méthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3] ] —3 — E [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-amino-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique (préparé comme dans l'exemple 31) et on agite 20 le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 2 h. Un traitement et une purification réalisés comme dans l'exemple 31 donnent 146 mg (37,6%) d'ester (4-nitrophényl ) mé thy ligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[(4-nitrobenzyloxy)-25 carbonyl]amino(phénylacétyl)amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo [3,2,0]heptane-2-carboxyligue.

On soumet l'ester ci-dessus (107,7 mg, 0,122 mmole) et 100 mg de Pd à 10% sur charbon dans THF-H2O (3 ml:3 ml) à une hydrogénation avec une pression d'hydrogène de 1 atm 30 pendant 3 h. Après la transformation en sel de sodium avec NaHC03, on purifie le produit brut sur une colonne C^g et on lyophilise les fractions adéguates pour obtenir 25,6 mg (33,6%) du composé du titre.

35

72

Exemple 47

Sel interne d'hydroxyde de [ 2S- [ 2a, 3a, 5a, 6(3 ( Z ) ] ]—1—[6—[ [ [ (2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyl]amino]-2-carboxy-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]thioj^

5 méthyl]-1-éthylpyridinium

A une solution de 300 mg (0,49 mmole) d'ester (4-nitrophényl Jméthyligue d'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z)]]-6-[[2-(2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyl]amino]-3-bromométhyl-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-10 ligue (préparé comme dans l'exemple 27) et de 0,115 ml (1,42 mmoles) de pyridine, on ajoute 119 mg (0,61 mmole) de AgBF4 et on agite le mélange réactionnel pendant 4 h à la température ambiante. On filtre le mélange réactionnel et, après avoir concentré le filtrat sous vide, on le purifie sur une 15 colonne C^g. On lyophilise les fractions adéguates pour obtenir 87 mg (25,4%) de tétrafluoroborate de [2S-[2a,3a,5a,60(Z)]]—1—[6—[[[(2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino )acétyl]amino]-2-(4-nitrobenzyloxycarbony1)-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-yl]thio]méthyl]-1-20 éthylpyridinium.

On dissout le tétrafluoroborate ci-dessus (87 mg, 0,124 mmole) dans un système acétonitrile/eau (4 ml:5 ml) et on ajoute 2,48 ml (0,248 mmole) de NaHCOj 0,1N. L'hydrogénation du mélange résultant avec 96 mg de Pd à 10% sur charbon sous 25 une pression d'hydrogène de 1 atm, pendant 2 h, donne, après purification sur une colonne C18, 11,2 mg du composé du titre (19,2%).

Exemple 48

Sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3a,5a,6fJ(R*) ] ]-l-[ [2-car-30 boxy-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-phénylacé tyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo^

[3,2,0]hept-3-yl]méthyl]pyridinium

A une solution de 443 mg (0,60 mmole) d'ester (4-nitrophényl )méthylique d'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R*)]]-3-bromomé-35 thyl-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-

73

phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique (exemple 40) et de 0,149 ml (1,84 mmoles) de pyridine dans 8,7 ml de chlorure de méthylène, on ajoute 144 mg (0,74 mmole) de AgBF4 et on agite le mélange réactionnel pendant 3 h. On élimine le solvant et on purifie le résidu sur une colonne C18 éluée avec un gradient de ch3cn-h2o, pour obtenir 113,6 mg (23%) de tétra-f luoroborate de [2S-[2a,3a,5a,6|3(R) ] ]-l-[ [2-(4-nitrobenzyl-oxycarbonyl)-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl ]amino]phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]hept-3-yl]méthyl]pyridinium.

On dissout le tétrafluoroborate ci-dessus (80 mg, 0,098

mmole) dans un système acétonitrile/eau (3 ml:8,7 ml) et on

1

ajoute 0,98 ml (0,098 mmole) de NaHC03 0,1N. L'hydrogénation du mélange résultant avec 80 mg de Pd à 10% sur charbon sous une pression d'hydrogène de 1 atm, pendant 3 h, donne, après purification sur une colonne C^g, 21,3 mg du composé du titre (36,7%).

En employant des modes opératoires analogues à ceux des exemples 31 et 32 ci-dessus, mais en y substituant l'acide phénylacétique approprié, on prépare les composés suivants énumérés dans les exemples 49-53.

Exemple 49

Sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(S*) ] ]- 3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[[(4-hydroxy-6-méthyl-3-pyridinyl)carbonyl]amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-lique

Exemple 50

Sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[[(4-hydroxy-6-méthyl-3-pyridinyl)carbonyl]amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-lique

74

Exemple 51

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ] — 3 — [ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipéraz iny1)carbonyl]amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino] 3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-ligue

Exemple 52

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6(3(S*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl) carbonyl] amino] (4-hydroxyphényl)acétyl]amino] 3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-ligue

Exemple 53

Sel monosodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,60(R,S)]]-3-[[[3,4 bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[[3,4-bis(acétyloxy)-phényl][[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]-acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxyligue

75

EV 4410/218

1.

Claims (54)

1. REVENDICATIONS Procédé de fabrication d'un composé de formule générale R'.

   dans laguelle R est un hydrogène, un groupe ester facilement hydrolysable ou un groupe protecteur, R1 est un hydrogène et R2 est un hydrogène ou un groupe acyle, ou R^ et R2, pris conjointement, sont le groupe

   <CH2)B

   dans lequel n est égal à 5, 6 ou 7,

   X est un groupe fluoro, thioacyanato, azido ou le groupe R3aC02",

   O

   II

   r,—c —s

   O

   II

   —OC—N

   .nr4' rNR4

   —S—C^ O

   II

   —sc—n

   .nr4'; rnr4

   ^NR4' ^NR4

   —sr3 , —or3

   s

   II

   —sc-

   •n

   .nr4' rnr4

   OU

   R3a est un groupe alkyle en C2 à C^g, un groupe aryle, un hétérocycle, un groupe -(CH2)m-aryle, -(ch2)m-hétérocycle, hétérocycle-alcényle inférieur ou aryle-alcényle inférieur, r3 est un groupe alkyle en C^ à C]_g, un groupe aryle, un hétérocycle, un groupe -(CH2)ra-aryle, -(ch2)m-hétérocycle, hétérocycle-alcényle inférieur ou aryle-alcényle inférieur, R4

   76

   et R4 sont chacun indépendamment un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, alcényle inférieur ou alcynyle inférieur, Ra est un hydrogène, un halogène, un groupe amino, amino-al-kyle inférieur, carboxy, carbamoyle, carboxy-alkyle infé-5 rieur, carbamoyl-alkyle inférieur ou carbalcoxy inférieur-alkyle inférieur, m vaut de 1 à 4 et p vaut 3, 4 ou 5, à condition gue X soit autre qu'un fluoro lorsgue R est un groupe protecteur, d'un hydrate, d'un ester facilement hy-drolysable ou d'un sel de ce composé, ou d'un hydrate de 10 l'ester ou du sel, lorsque R est un hydrogène, caractérisé en ce gu'il comprend les étapes qui consistent à :

   a) faire réagir un composé de formule générale dans laquelle Hal est un halogène et R' est un groupe protecteur, et r! et R2 sont tels gue définis dans la revendi-15 cation 1,

   avec un sel d'un composé de formule générale HX, dans laquelle X est tel que défini dans la revendication 1, ou b) faire réagir un composé de formule générale

   O

   ,.j<h .. _

   fîlci— 2 nw s ic~3 (y

   • ch2x dans laguelle R' est tel gue défini ci-dessus et X est tel 20 gue défini dans la revendication 1,

   avec pci5 ou PBrs et de la pyridine ou de la lutidine, ou c) faire réagir un composé de formule générale

   77

   CH3 77

   dans laquelle R' est tel que défini ci-dessus et X est tel que défini dans la revendication 1,

   avec un composé de formule générale

   (CH2)n N ^ ou (C!^)n N==/

   Ci"

   dans laquelle n est tel que défini dans la revendication 1 5 et Rb est un groupe alkyle inférieur, ou d) acyler un composé de formule générale VI ci-dessus avec un acide carboxyligue ou un de ses dérivés réactifs, et, éventuellement,

   e) éliminer le groupe protecteur ester dans un composé ■ob-10 tenu, dans lequel R est un groupe ester protecteur, transformer un composé obtenu, dans leguel R est un hydrogène, en un ester facilement hydrolysable ou un sel et/ou transformer un composé obtenu, dans leguel R est un hydrogène, ou un ester facilement hydrolysable ou un sel de celui-ci, en un hy-

   15 drate.
2. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que R est un groupe protecteur.
3. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue r! et R^ sont des atomes d'hydrogène.
4. 20 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue r! est un hydrogène et R2 est un groupe acyle.
5. 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue R1 et R2, pris conjointement, sont le groupe

   78

   dans lequel n est égal à 5, 6 ou 7.
6. 6. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le groupe acyle R2 est un groupe acyle aliphatique de formule

   O

   II

   Rj— C-f-

   5 dans laguelle R5 est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, cycloalkyle inférieur, alcoxy inférieur, alcényle inférieur, cycloalcényle inférieur, cyclohexadiényle, ou alkyle inférieur ou alcényle inférieur substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino, mercapto, 1 0 alkylthio ou cyanométhylthio.
7. 7. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce gue le groupe acyle R2 est un groupe acyle aromatigue choisi dans le groupe constitué par

   îr s /

   7

   "> ;"v s ✓ 2 /

   \ _ x

   C

   79

   dans lequel n vaut 0, 1, 2 ou 3, Rg, R7 et Rg sont indépendamment des atomes d'hydrogène, d'halogène, des groupes hy-droxy, nitro, amino, cyano, trifluorométhyle, alkyle de 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone ou 5 aminométhyle, et Rgg est un groupe amino, acylamino, hy-droxy, un sel carboxy ou sulfo, un groupe carboxy protégé, formyloxy ou azido.
8. 8. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce gue le groupe acyle R2 est un groupe acyle hétéroaromatigue 10 choisi dans le groupe constitué par

   O

   11

   R10t (CHa) 5 c -r

   0

   (I

   Rt« CH—C-f

   R»

   80

   O

   ii

   R101 O CH2—C-f o

   ii

   R101 s CH2——C-f o o

   :i II

   ^101 ~~C — C

   dans lequel n vaut 0, 1, 2 ou 3, Rgg est tel que défini dans la revendication 7, et Rioi est un noyau hétérocyclique à 5, 6 ou 7 chaînons, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 hétéroatomes choisis dans le groupe constitué par 5 l'azote, l'oxygène et le soufre.
9. 9. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le groupe acyle R2 est un groupe [[(2,3-dioxo-l-pipérazinyl 4-substitué)carbonyl]amino]acétyle de formule dans laguelle Rm est un groupe alkyle inférieur, hydroxy-10 alkyle inférieur, un groupe aromatigue de formule dans laquelle Rg, R7 et Rg sont tels que définis dans la revendication 7, ou un noyau hétérocyclique à 5, 6 ou 7 chaînons, substitué ou non substitué, contenant 1, 2, 3 ou 4 hétéroatomes choisis dans le groupe constitué par l'azote, 15 l'oxygène et le soufre, et R120 est un grouPe alkyle inférieur ou alkyle inférieur substitué (dans lequel le groupe alkyle inférieur est substitué par un ou plusieurs groupes

   O

   II

   O

   11

   l»c CH — NH — C — N N R12q

   81

   halogéno, cyano, nitro, amino ou mercapto).
10. 10. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce gue le groupe acyle R2 est un groupe (acylamino)acétyle de formule

    0 V

    y-C—CH—NH C-R,

    ^111

    140

    dans laguelle Rm est tel gue défini dans la revendication 9, et r]_4o est un hétérocycle insaturé ou un groupe de formule

    >-(CH2\n-<>^

    OU

    10

    15

    (dans laquelle Rg, R7 et Rg sont tels que définis dans la revendication 7 et n vaut 0, 1, 2 ou 3), un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, alkyle inférieur substitué, amino, alkylamino inférieur, di(alkyl inférieur)amino, (cyanoalkyl inférieur)amino, hydrazino, alkyl inférieur-hydrazino, aryl-hydrazino ou acyl-hydrazino.
11. 11. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce gue le groupe acyle R2 est un groupe (oxyimino substitué)acétyle de formule

    JU

    w—0—o

    .

    :—c—R

    140

    111

    23

    82

    dans laquelle Rm est tel que défini dans la revendication 9, R140 est tel Çue défini dans la revendication 10 et R22 et R23 sont indépendamment choisis dans le groupe constitué par un hydrogène et un groupe alkyle inférieur, ou R22 et R23, pris conjointement avec l'atome de carbone auquel ils sont fixés, forment un noyau carbocyclique en c3-c7.
12. 12. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le groupe acyle R2 est un groupe [[[2-oxo-l-imidazolidinyl 3-substitué]carbonyl]amino]acétyle de formule o

    dans laquelle Rm est tel que défini dans la revendication 9 et R]_5 est un hydrogène, un groupe alkylsulfonyle inférieur, arylméthylèneamino (à savoir -N=CHRm, où Rm est tel gue défini dans la revendication 9), -COR^g (où R^q est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur ou alkyle inférieur substitué par un halogène), un groupe aromatigue (tel gue défini pour Rm dans la revendication 9), alkyle inférieur ou alkyle inférieur substitué (dans leguel le groupe alkyle inférieur est substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino ou mercapto).
13. 13. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce gue le groupe acyle R2 est un groupe acyle de formule dans laguelle Rioi est tel gue défini dans la revendication 8 et Ri30 est un hydrogène, un groupe alkyle inférieur, cycloalkyle en c3-c7 ou alkyle inférieur substitué [dans lequel le groupe alkyle inférieur est substitué par un ou plusieurs groupes halogéno, cyano, nitro, amino, mercapto, al-

    83

    kylthio inférieur, des groupes aromatiques (tels gue définis pour Rm dans la revendication 9), carboxy (y compris leurs sels), amido, carbamoyle, alcoxycarbonyle inférieur, phényl-méthoxycarbonyle, diphénylméthoxycarbonyle, hydroxyalcoxy-5 phosphinyle, dihydroxyphosphinyle, hydroxy(phénylméthoxy)-phosphinyle ou di(alcoxy inférieur)phosphinyle] ou carboxy-(cycloalkyle en c3-c7).
14. 14. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1-13, caractérisé en ce que X est R3aCC>2-, R3-COS-, -SR3 ou -OR3

    10 et R3a et R3 sont indépendamment un groupe aryle ou un hétérocycle.
15. 15. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue 1'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de 1'acide [2S-(2a,3a,5a,6p)]-3-méthyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-

    15 y1)thio]méthyl]-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thi a-1-az a-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue.
16. 16. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue 1'on prépare le composé suivant : sel disodigue de 1'acide [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-3-[ [ (2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-

    20 oxo-1,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-

    [(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue.
17. 17. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue l'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de l'acide

    25 [2S-(2a,3a,5a,60)]-3-[(acétylthio)méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue.
18. 18. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue l'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de l'acide

    30 [2S-(2a,3a,5a,6P)]-3-[[(2,5-dihydro-3-mercapto-2-méthyl-5-oxo-1,2,4-triazine-6-yl)oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl) amino] -4-thia-l-azabicyclo[ 3 ,2,0]heptane-2-car-boxyligue.
19. 19. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 35 l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide

    84

    i

    [2S-( 2a, 3a, 5(1,613) ]-3-[ [ (2-furannylcarbonyl)thio]méthyl]-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-heptane-2-carboxylique.
20. 20. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 5 l'on prépare le composé suivant : sel de sodium de l'acide

    [2S-( 2a,3a>5a,6|3) ]- 3-(fluorométhyl) - 3-méthyl-7-oxo-6 -[ (phénylacétyl )amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-car-boxylique.
21. 21. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 10 l'on prépare le composé suivant : sel de sodium de l'acide

    [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]thio]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
22. 22. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 15 l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide

    [2S-(2a,3a,5a,63)]-3-[[3,4-dihydroxybenzoyl)oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
23. 23. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 20 l'on prépare le composé suivant : sel de sodium de l'acide

    [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-[ [3-( lH-imidazole-4-yl)-1-oxopropoxy) ]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
24. 24. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 25 l'on prépare le composé suivant : sel interne d'hydroxyde de

    [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-l-[ [ 2-carboxy-3-méthyl-7-oxo-6-[ ( phénylacétyl) amino] -4-thia-l-azabicyclo [ 3 ,2,0]hept-3-yl]méthylpyr idinium.

    30
25. 25. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-(2a,3a,5a,6|3) ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-aza-bicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    35
26. 26. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 1'on prépare le composé suivant : sel monosodique de 1'acide

    85

    [2S-(2a,3a(E),5a,6g)]-3-[[[3-(lH-imidazole-4-yl)-l-oxo-2-propényl]oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-6-[(phénylacétyl)amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
27. 27. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que

    5 l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z) ] ]-6-[ [ (2-amino-4-thiazolyl) (méthoxyimino) acétyl] amino]-3-méthyl-3-[ [(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    10
28. 28. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z) ] ]-6-[ [ ( 2-amino-4-thiazolyl) (méthoxyimino )acétyl]amino]-3-(az idométhy1)-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    15
29. 29. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(Z) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[(2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino)acétyl]-amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-

    20 carboxylique.
30. 30. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel disodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6p(Z)]]-6-[[(2-amino-4-thiazolyl)(méthoxyimino ) acétyl ] amino] -3- [ [(2,5-dihydro-6-hydroxy-2-méthyl-5-

    25 oxo-1,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
31. 31. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique sesquihy-draté de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-6-[ [ [ [ (4-éthyl-2,3-

    3 0 dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-mé-thyl-3-[[(l-méthyl-lH-tétrazole-5-yl)thio]méthyl]-7-OXO-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
32. 32. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 1'on prépare le composé suivant : sel monosodique de 1'acide

    35 [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-

    86

    méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-amino]phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabi-cyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy1igue.
33. 33. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue 5 1'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de 1'acide [2S-[2a,3a,5a,6£(R*)]]—6—[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazi-nyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino] - 3 - [ [ ( 3,4-dihydroxy-benzoyl)oxy]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo-[3,2,0]heptane-2-carboxyligue.
34. 10 34. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue l'on prépare le composé suivant : sel de sodium de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-6— [ [ [ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazi-nyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-[[(2-furannylcarbo-nyl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]-15 heptane-2-carboxyligue.
35. 35. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue l'on prépare le composé suivant : sel disodigue de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ] —6— [ [ [ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl )carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-[[(2,5-dihydro-6-

    20 hydroxy-2-méthyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl)thio]méthyl]-3-méthyl-7-oxo-l-aza-4-thiabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-ligue. '
36. 36. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue l'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de l'acide

    25 [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ] —3— [ (acétylthio)méthyl]-3-méthyl-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]phényl-acétyl]amino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxyligue.
37. 37. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce gue 30 l'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de l'acide

    [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-3-(fluorométhyl)-6-[ [ [ [ ( 4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7 -oxo-4-thia-l-azabicyclo[ 3 ,2,0]heptane-2-carboxyligue.
38. 38. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 35 l'on prépare le composé suivant : sel monosodigue de l'acide

    87

    [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*)]]—3-[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]thio]-méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-amino]phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-a z abi-cyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    5
39. 39. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le'composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*)]]—3 — [[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[amino(phénylacétyl)amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    10
40. 40. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3a,5a,6|3(R*) ] ]-4-[ [ [ 2-carboxy-6-[ [ [ [ (4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-méthyl-7 -oxo- 4-thia-l-azabicyclo [3,2,0]hept-3-yl]thio]méthyl]-

    15 1-éthylpyridinium.
41. 41. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel interne d'hydroxyde de [2S-(2a,3a,5a,6(3) ]-4-[ [ [2-carboxy-3-méthyl-7-oxo-6-[ (phénylacétyl )amino]-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-y1]méthyl]-

    20 thio]-l-éthylpyridinium.
42. 42. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : acide [ 2S-( 2a,3a,5a,6(3) ] -3-[[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]méthyl]-6-[[(hexahydro-lH-azépine-l-yl)méthylène]amino]-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo-

    25 [3,2,0]heptane-2-carboxylique.
43. 43. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3] ] — 3—[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[[(difluorométhyl)thio]acétyl]amino]-3-méthyl-7-

    30 oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
44. 44. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6f3] ]-6-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoylamino]phénylacétyl ]amino]-3-[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyloxy]méthyl]-3-

    35 méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxy-

    °t)

    88

    lique.
45. 45. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3ct,5a,6fà(Z) ]-l-[6-[ [ [ ( 2-amino-4-thiazolyl) (méthoxy-

    5 imino)acétyl]amino]-2-carboxy-3-méthyl-7-oxo-4-thia-1-azabi-cyclo[3,2,0]hept-3-yl]méthyl]pyridinium.
46. 46. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel interne d'hydroxyde de [2S-[2a,3a,5a,6fâ(R*) ]-l-[ [2-carboxy-6-[ [ [ [ ( 4-éthyl-2, 3-di-

    1 0 oxo-l-pipérazinyl)carbonyl]amino]phénylacétyl]amino]-3-mé-thyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]hept-3-y1]méthyl]-pyridinium.
47. 47. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide

    15 [2S-[2a,3a,5a,6f3(S*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[[[(4-hydroxy-6-méthyl-3-pyridinyl)carbonyl]-amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
48. 48. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 20 l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide

    [2S-[2a,3a,5a,6|â(R*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[[[(4-hydroxy-6-méthyl-3-pyridinyl)carbonyl]-amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo [3,2,0]heptane-2-carboxylique.

    25
49. 49. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6fi(R*)]]—3 — [[[3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipérazinyl)carbonyl]-amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-30 l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
50. 50. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on prépare le composé suivant : sel monosodique de l'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(S*) ] ]-3-[ [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-méthyl]-6-[[[[(4-éthyl-2,3-dioxo-l-pipérazinyl)carbonyl]-35 amino](4-hydroxyphényl)acétyl]amino]-3-méthyl-7-oxo-4-thia-

    89

    l-azabicyclo[3,2,03heptane-2-carboxylique.
51. 51. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que 1'on prépare le composé suivant : sel monosodique de 1'acide [2S-[2a,3a,5a,6|3(R,S) 3 ] —3 — C [ [3,4-bis(acétyloxy)benzoyl]oxy]-

    5 méthyl3-6-[[[3,4-bis(acétyloxy)phényl][[(4-éthyl-2,3-dioxo-1-pipéraz inyl)carbonyl]amino 3 acétyl3 amino 3 -3-méthyl-7-oxo-4-thia-l-azabicyclo[3,2,0]heptane-2-carboxylique.
52. 52. Procédé de fabrication d'une composition pharmaceutique, à utiliser en particulier pour lutter contre les mala-

    10 dies infectieuses ou pour les prévenir, caractérisé en ce qu'il comprend la production d'une forme galénique à partir d'un composé de formule I selon la revendication 1, d'un hydrate, d'un ester facilement hydrolysable ou d'un sel de celui-ci, ou d'un hydrate de l'ester ou du sel, lorsque R est 15 un hydrogène, et d'un véhicule thérapeutiquement inerte.
53. 53. Utilisation d'un composé de formule I selon la revendication 1, d'un hydrate, d'un ester facilement hydrolysable ou d'un sel de celui-ci, ou d'un hydrate de l'ester ou du sel, lorsque R est un hydrogène, pour la fabrication de

    20 compositions pharmaceutiguement actives à activité antibiotique .
54. 54. L'invention telle que décrite ci-dessus.

    original tonseil ^Propriété Industrielle 26 bl«, Boul. Princesse Charlotte

    MONTE-CARLO