[go: up one dir, main page]

WO2024024760A1 - ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤 - Google Patents

ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2024024760A1
WO2024024760A1 PCT/JP2023/027102 JP2023027102W WO2024024760A1 WO 2024024760 A1 WO2024024760 A1 WO 2024024760A1 JP 2023027102 W JP2023027102 W JP 2023027102W WO 2024024760 A1 WO2024024760 A1 WO 2024024760A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
carbon atoms
optionally substituted
compound
pyrazolone
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2023/027102
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
賢二 大隅
浩太朗 後藤
正斗 筒井
真盛 水野
杉　智和
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Noguchi Institute
Original Assignee
Noguchi Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Noguchi Institute filed Critical Noguchi Institute
Priority to US18/834,041 priority Critical patent/US20250129030A1/en
Priority to JP2024537730A priority patent/JP7782046B2/ja
Priority to EP23846490.3A priority patent/EP4563572A1/en
Publication of WO2024024760A1 publication Critical patent/WO2024024760A1/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C07D231/22—One oxygen atom attached in position 3 or 5 with aryl radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C07D231/22—One oxygen atom attached in position 3 or 5 with aryl radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D231/24—One oxygen atom attached in position 3 or 5 with aryl radicals attached to ring nitrogen atoms having sulfone or sulfonic acid radicals in the molecule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
    • C07H7/06—Heterocyclic radicals

Definitions

  • the present invention relates to pyrazolone compounds and pyrazolonating agents.
  • Patent Document 1 A method is known in which the formyl group of a protein such as an antibody is modified with a pyrazolone compound and a fluorescent molecule or the like is introduced (Patent Document 1 and Non-Patent Documents 1 to 3).
  • the present inventors used 3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone as a pyrazolone compound to modify the formyl group of sugar to produce a pyrazolonated compound.
  • 3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone as a pyrazolone compound to modify the formyl group of sugar to produce a pyrazolonated compound.
  • the obtained pyrazolonated compound was easily decomposed and had low stability. Therefore, it is an object of the present invention to provide pyrazolonated compounds with high stability.
  • R 1 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms (one or more halogen atoms are bonded to the carbon atom at the 1st position), or a halogen atom having 2 to 10 carbon atoms.
  • Alkyl group having 1 to 60 carbon atoms optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted carbon Aralkyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aryl group with 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkoxy group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted Alkenyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, and/or case is an aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms , which may be substituted by group, carboxy group, optionally substituted alkyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted carbon number 1 ⁇ 60 alkynyl group, an optionally substituted aral
  • a pyrazolonated compound exhibiting high stability can be obtained.
  • 1 is a graph examining the stability of pyrazolonated compounds (compounds 5 to 10) produced using the pyrazolone compound of the present invention.
  • 1 is a graph examining the stability of pyrazolonated compounds (compounds 5 and 28 to 31) produced using the pyrazolone compound of the present invention.
  • 1 is a graph examining the stability of pyrazolonated compounds (compounds 5 and 32 to 36) produced using the pyrazolone compound of the present invention.
  • 1 is a graph examining the stability of pyrazolonated compounds (compounds 5 and 37 to 41) produced using the pyrazolone compound of the present invention.
  • 1 is a graph examining the stability of pyrazolonated compounds (compounds 5 and 42 to 45) produced using the pyrazolone compound of the present invention.
  • the pyrazolone compound of the present invention has the following formula (1): This is a compound represented by R 1 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms (one or more halogen atoms are bonded to the carbon atom at the 1st position), or a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms.
  • R 3 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms, a carboxy group, or a carbon number that may be optionally substituted.
  • Alkyl group having 1 to 60 carbon atoms optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted carbon Aralkyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aryl group with 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkoxy group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted Alkenyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted R 4 is an aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms, and R 4 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms, or a carboxy group.
  • an optionally substituted alkyl group having 1 to 60 carbon atoms an optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms Alkynyl group, optionally substituted aralkyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aryl group with 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted with 1 to 60 carbon atoms an alkoxy group, an optionally substituted alkenyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, an optionally substituted carbon number Aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted an alkenylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkynylcarbonyl group
  • Oxycarbonyl group optionally substituted alkynyloxycarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxycarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted It is an aryloxycarbonyl group having 6 to 60 carbon atoms, and in the case of formula (4), R 4 is 0 to 4, and in the case of formulas (5) to (7), R 4 is 0 to 3. ) is an electron-withdrawing group selected from the group consisting of.
  • R 2 is a hydrocarbon group having 1 to 1000 carbon atoms that may contain a heteroatom.
  • n is an integer from 0 to 2.
  • the pyrazolone compound of the present invention can be used to convert a formyl group-containing compound into a pyrazolone.
  • the pyrazolone compound of the present invention may be the CH form of formula (1), but may be of the following formula (8): A structural isomer (OH form) represented by or the following formula (9): It may be a structural isomer (NH form) represented by Since R 1 of the present invention is an electron-withdrawing group, the pyrazolonated compound produced using the pyrazolone compound of the present invention is resistant to decomposition and can be a stable pyrazolonated compound.
  • halogen atom examples include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, and an iodine atom.
  • pyrazolone compounds in which R 1 is a halogen atom include, but are not limited to, can be mentioned.
  • a nitro group is a group represented by -NO 2 .
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a nitro group include, but are not limited to, can be mentioned.
  • a cyano group is a group represented by -CN.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a cyano group include, but are not limited to, can be mentioned.
  • a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms is one in which one or more hydrogen atoms of the alkyl group is a fluorine atom, chlorine atom, bromine atom, iodine atom, etc. means an alkyl group having 1 to 10 carbon atoms substituted with one or more halogen atoms, preferably a haloalkyl group having 1 to 8 carbon atoms, more preferably a haloalkyl group having 1 to 6 carbon atoms, More preferred is a haloalkyl group having 1 to 4 carbon atoms.
  • the alkyl group may be a linear alkyl group, a branched alkyl group, or a cyclic alkyl group.
  • the haloalkyl group can function as an electron-withdrawing group.
  • the "1-position carbon atom" of a haloalkyl group means the carbon atom bonded to -(CH 2 )n- of R1.
  • the haloalkyl group having 2 to 10 carbon atoms preferably, one or more (preferably two or more) halogen atoms are bonded to the carbon atom at the 2-position, although this is not limited.
  • the haloalkyl group includes a chloromethyl group, a 2,2,2-trichloroethyl group, or a 2,2,2-trifluoroethyl group.
  • a group in which all hydrogen atoms of an alkyl group are substituted with halogen atoms is referred to as a perhalogenoalkyl group.
  • a perfluoroalkyl group means an alkyl group in which all hydrogen atoms have been replaced with fluorine atoms.
  • the perhalogenoalkyl group includes a trifluoromethyl group, 2,2,2-trifluoro-1,1-dichloroethyl group, perfluoroethyl group, perfluoropropyl group, perfluoroisopropyl group, perfluorobutyl group, Examples include perfluoro sec-butyl group, perfluoro tert-butyl group, perfluoropentyl group, perfluorohexyl group, trichloromethyl group, tribromomethyl group, and triiodomethyl group.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms (one or more halogen atoms are bonded to the carbon atom at the 1st position) include, but are not limited to, for example: can be mentioned.
  • a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms (one or more halogen atoms bonded to the carbon atom at position 1) has a strong electron-withdrawing effect if one or more halogen atoms are bonded to the carbon atom at position 1. , and the effects of the present invention can be obtained.
  • a haloalkyl group in which a total of two or more halogen atoms are bonded to the carbon in the 1st position, or a haloalkyl group in which a total of two or more halogen atoms are bonded to the carbon in the 1st and 2nd positions is extremely strong. It has an electron-withdrawing effect and can obtain the effects of the present invention.
  • a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms is a perfluoroalkyl group containing an ether group (-O-). Specifically, but not limited to, can be mentioned.
  • the carboxy group is a group represented by -COOH.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a carboxy group include, but are not limited to, can be mentioned.
  • Substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms (the benzene ring bonded to the pyrazolone skeleton side has at least one substituent, and the substituent is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a aryl group having 1 to 60 carbon atoms) 10 haloalkyl groups (one or more halogen atoms are bonded to the carbon atom at the 1st position), perfluoropolyether groups having 2 to 10 carbon atoms, carboxy groups, acyl groups having 2 to 61 carbon atoms, 1 to 1 carbon atoms 60 alkoxycarbonyl group, an alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, and an alkyl group having 1 to 60 carbon atoms, provided that the substituent is an alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, or in the case of an alkyl group having 1 to 60 carbon atoms, the substituent position is the meta-position of the benzene
  • a group in which an atom is substituted with a substituent that is an electron-withdrawing group At least one hydrogen atom of the benzene ring bonded to the pyrazolone skeleton side is substituted, and has two substituents, three substituents, four substituents, or five substituents. Good too. In addition, when it has two or more substituents, the substituents may be the same or a combination of two or more of the above substituents. Moreover, the position of the substituent of the electron-withdrawing group is not limited, but is most preferably the para position. Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms include, but are not limited to, for example: can be mentioned.
  • the acyl group having 2 to 61 carbon atoms is a group represented by R 5 -OC-, where R 5 is a hydrocarbon group.
  • R 5 include, but are not limited to, optionally substituted alkyl groups having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkenyl groups having 1 to 60 carbon atoms, and optionally substituted Examples include an alkynyl group having 1 to 60 carbon atoms which may be substituted, an aralkyl group having 1 to 60 carbon atoms which may be optionally substituted, or an aryl group having 6 to 60 carbon atoms which may optionally be substituted. It will be done.
  • R 1 is the following formula (2): It may also be a group represented by R 3 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms, a carboxy group, or a optionally substituted group having 1 to 60 carbon atoms.
  • Alkyl group optionally substituted alkenyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted with 1 to 60 carbon atoms an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, and an optionally substituted aryl group having 1 to 60 carbon atoms; 60 alkenyloxy group, optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, and/or optionally substituted It is an aryloxy group sometimes having 6 to 60 carbon atoms.
  • Examples of the haloalkyl group in which R 3 is a carbon number of 1 to 10 include a trifluoromethanesulfonyl group and a pentafluoroethanesulfonyl group.
  • Examples of the alkyl group having 1 to 60 carbon atoms which may be optionally substituted for R 3 include methylsulfonyl group (mesyl group), ethylsulfonyl group, n-propylsulfonyl group, isopropylsulfonyl group, n-propylsulfonyl group, and n-propylsulfonyl group.
  • aryl group having 6 to 60 carbon atoms which may be optionally substituted by R 3 include phenylsulfonyl group, methylphenylsulfonyl group, methylp-tolylsulfonyl group, methylmethatolylsulfonyl group, and methyl ortho-sulfonyl group.
  • Examples include tolylsulfonyl group, 1-naphthylsulfonyl group, 2-naphthylsulfonyl group, 2-methylphenylsulfonyl group, and the like.
  • the group represented by formula (2) functions as an electron-withdrawing group due to the sulfonyl group moiety close to the pyrazolone skeleton. Therefore, it is considered that R 3 bonded via a sulfonyl group close to the pyrazolone skeleton does not have a significant effect on the function as an electron-withdrawing group.
  • R 3 may be an alkyl group or an aryl group that is not an electron-withdrawing group, or may be a halogen atom or a nitro group that is an electron-withdrawing group.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a group represented by formula (2) include, but are not limited to, can be mentioned.
  • R 1 is the following formula (3): It may also be a group represented by R 4 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms, a carboxy group, or a optionally substituted group having 1 to 60 carbon atoms.
  • Alkyl group optionally substituted alkenyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted with 1 to 60 carbon atoms an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, and an optionally substituted aryl group having 1 to 60 carbon atoms; 60 alkenyloxy group, optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted Aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkenylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted an alkynylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms which may be optionally substituted, an aralkylcarbonyl group
  • R 4 is an optionally substituted alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, in one embodiment it is an alkoxy group having 1 to 30 carbon atoms, and in another embodiment it is an alkoxy group having 1 to 20 carbon atoms. , in one embodiment, is an alkoxy group having 1 to 10 carbon atoms.
  • the group of formula (3) includes a methoxycarbonyl group, an ethoxycarbonyl group, a butoxycarbonyl group, and the like.
  • the alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms functions as an electron-withdrawing group due to the ester moiety (or carbonyl moiety) close to the pyrazolone skeleton.
  • an alkoxy group having 60 carbon atoms can also function as an electron-withdrawing group.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is an optionally substituted alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms include, but are not limited to, for example: can be mentioned.
  • R 4 is an optionally substituted alkyl group having 1 to 60 carbon atoms, in one embodiment it is an alkyl group having 1 to 30 carbon atoms, and in another embodiment it is an alkyl group having 1 to 20 carbon atoms. , in one embodiment, is an alkyl group having 1 to 10 carbon atoms.
  • the group of formula (3) includes an acetyl group, a propionyl group, a butanoyl group, a 2-methylpropionyl group, a heptanoyl group, a 2-methylbutanoyl group, a 3-methylbutanoyl group, an octanoyl group, and a decanoyl group.
  • R 4 is an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms, in one embodiment it is an aryl group having 6 to 30 carbon atoms, and in another embodiment it is an aryl group having 6 to 22 carbon atoms. , in one embodiment is an aryl group having 6 to 10 carbon atoms.
  • examples of the group of formula (3) include benzoyl group, methylbenzoyl group, ethylbenzoyl group, propylbenzoyl group, butylbenzoyl group, dimethylbenzoyl group, 1-phthylcarbonyl group, naphthylcarbonyl group, etc. .
  • the carbonyl group portion close to the pyrazolone skeleton functions as an electron-withdrawing group. Therefore, it is considered that the aryl group bonded to the pyrazolone skeleton via the carbonyl group does not have a large effect on the function as an electron-withdrawing group. Therefore, for example, an aryl group having 60 carbon atoms can also function as an electron-withdrawing group.
  • Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms include, but are not limited to, for example: can be mentioned.
  • R 1 is represented by the following formulas (4) to (7): It may also be a group represented by R 4 is a halogen atom, a nitro group, a cyano group, a haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, a perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms, a carboxy group, or a optionally substituted group having 1 to 60 carbon atoms.
  • Alkyl group optionally substituted alkenyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkynyl group with 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted with 1 to 60 carbon atoms an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkoxy group having 1 to 60 carbon atoms, and an optionally substituted aryl group having 1 to 60 carbon atoms; 60 alkenyloxy group, optionally substituted alkynyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted aralkyloxy group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted Aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted alkenylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms, optionally substituted an alkynylcarbonyl group having 1 to 60 carbon atoms which may be optionally substituted, an aralkylcarbonyl group
  • the group represented by formula (4) is a pyridyl group that may be optionally substituted, and is a residue obtained by removing one hydrogen atom from pyridine (C 5 H 5 N).
  • the position on the pyridine ring excluding one hydrogen atom may be any carbon atom at the ortho, meta or para position relative to the nitrogen atom. That is, the pyridyl group includes a 2-pyridyl group, a 3-pyridyl group, or a 4-pyridyl group.
  • R 4 is a pyridyl group in which one or more hydrogen atoms are substituted, and may have one substituent, two substituents, three substituents, or four substituents.
  • R 4 When R 4 is 0, it means a pyridyl group having no substituent. In addition, when it has two or more substituents, the substituents may be the same or a combination of two or more of the above substituents. Examples of pyrazolone compounds in which R 1 is a group represented by formula (4) include, but are not limited to, can be mentioned.
  • the groups represented by formulas (5) to (7) are optionally substituted diazine groups, and are residues obtained by removing one hydrogen atom from diazine (C 4 H 4 N 2 ).
  • Diazine includes three types of isomers depending on the position of the nitrogen, ie, pyrazine, pyrimidine, or pyridazine, but the position excluding one hydrogen atom may be any carbon atom position.
  • R 4 is a diazine group in which one or more hydrogen atoms are substituted, and may have one substituent, two substituents, or three substituents. When R 4 is 0, it means a pyrazine group, a pyrimidine group, or a pyridazine group having no substituent.
  • substituents when it has two or more substituents, the substituents may be the same or a combination of two or more of the above substituents.
  • pyrazolone compounds in which R 1 is a group represented by formulas (5) to (7) include, but are not limited to, for example: can be mentioned.
  • the halogen atom, nitro group, cyano group, haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, or carboxy group of R 3 and R 4 are the same as those described in R 1 .
  • an optionally substituted alkyl group having 1 to 60 carbon atoms, an optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms, and an optionally substituted alkenyl group having 1 to 60 carbon atoms are optionally substituted alkyl group having 1 to 60 carbon atoms.
  • an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms an optionally substituted aryloxy group having 6 to 60 carbon atoms, or an optionally substituted aryl group having 6 to 60 carbon atoms.
  • the number of carbon atoms in the arylcarbonyl group of 60 is, in some embodiments, 6 to 30 carbon atoms, in some embodiments, 6 to 22 carbon atoms, and in some embodiments, 6 to 10 carbon atoms.
  • the optionally substituted hydrogen atom substituents such as alkyl groups having 1 to 60 carbon atoms are not particularly limited as long as the effects of the present invention can be obtained, but include halogen atoms, nitro groups, cyano groups, Haloalkyl group having 1 to 10 carbon atoms, carboxy group, alkyl group having 1 to 10 carbon atoms, alkenyl group having 1 to 10 carbon atoms, alkynyl group having 1 to 10 carbon atoms, aralkyl group having 1 to 10 carbon atoms, 6 carbon atoms Aryl group with ⁇ 10 carbon atoms, alkoxy group with 1 ⁇ 10 carbon atoms, alkenyloxy group with 1 ⁇ 10 carbon atoms, alkynyloxy group with 1 ⁇ 10 carbon atoms, aralkyloxy group with 1 ⁇ 10 carbon atoms, carbon number 6 ⁇ 10 aryloxy group, alkylcarbonyl group having 1 to 10 carbon atoms, alkenylcarbonyl group having 1 to 10 carbon
  • R 2 in the pyrazolone compound of the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention can be obtained, but it is a hydrocarbon group having 1 to 1000 carbon atoms that may contain a hetero atom, and In one embodiment, it is a hydrocarbon group having 1 to 200 carbon atoms, and in another embodiment, it is a hydrocarbon group having 1 to 100 carbon atoms.
  • heteroatoms include, but are not limited to, nitrogen atom (N), oxygen atom (O), sulfur atom (S), phosphorus atom (P), chlorine atom (Cl), iodine atom (I), A bromine atom (Br), a fluorine atom (F), or a silicon atom (Si) is included.
  • the group R 2 may contain one or more of the above heteroatoms, or may contain two or more different types of heteroatoms.
  • R 2 does not affect the stability of pyrazolonated compounds prepared using the pyrazolone compounds of the present invention, as described below. Therefore, R 2 is not fundamentally limited.
  • the hydrocarbon group include saturated or unsaturated chain hydrocarbon groups, alicyclic hydrocarbon groups, aromatic groups, and polyethylene glycol groups. More specific hydrocarbon groups having 1 to 1000 carbon atoms that may contain heteroatoms include, for example, polymers containing polyethylene glycol, polyols, amino acids and derivatives thereof, peptides, proteins, nucleic acids, sugars and derivatives thereof, etc. can be mentioned.
  • n is an integer from 0 to 2.
  • the group -(CH 2 )n- is a group that connects the pyrazolone skeleton and R 1 . It is considered that the effects of the present invention can be exhibited as long as the distance between R 1 , which is an electron-withdrawing group, and the pyrazolone skeleton is below a certain level. That is, the group -(CH 2 ) n- is preferably shorter, and therefore n is preferably an integer of 0 or 1, more preferably 0.
  • electron-withdrawing groups with a very strong electron-withdrawing effect for example, halogen atoms, nitro groups, cyano groups, haloalkyl groups having 1 to 10 carbon atoms (one or more halogen atoms bonded to the carbon atom at the 1st position) (2) and (perfluoropolyether group having 2 to 10 carbon atoms
  • electron-withdrawing groups with a strong electron-withdrawing effect for example, carboxy groups and substituted aryl groups having 6 to 60 carbon atoms
  • the pyrazolone compound of the present invention may be in the form of a salt acceptable as a pyrazolonating agent as described below. That is, it may form an acid addition salt or a salt with a base.
  • Specific salts with bases include salts with inorganic bases, organic bases, and metal alkoxides. Salts can be formed by mixing the pyrazolone compounds of the invention with inorganic bases, organic bases, or metal alkoxides.
  • Inorganic bases capable of forming salts include hydroxides, carbonates, bicarbonates, acetates, or hydrides of alkali metals (such as lithium, sodium, or potassium); alkaline earth metals (such as magnesium, etc.); , calcium, or barium) or hydrides.
  • Organic bases that can form salts include dimethylamine, triethylamine, piperazine, pyrrolidine, piperidine, 2-phenylethylamine, benzylamine, ethanolamine, diethanolamine, pyridine, or collidine; metal alkoxides include sodium methoxide, potassium Examples include tert-butoxide, magnesium methoxide, and the like.
  • Specific acid addition salts include salts with inorganic acids or organic acids. Acid addition salts can be produced by mixing the compound [1] of the present invention with an inorganic acid or an organic acid. Examples of inorganic acids include hydrochloric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, sulfuric acid, nitric acid, or phosphoric acid.
  • organic acids include formic acid, acetic acid, propionic acid, oxalic acid, malonic acid, succinic acid, fumaric acid, maleic acid, lactic acid, malic acid, mandelic acid, tartaric acid, dibenzoyltartaric acid, ditoluoyltartaric acid, citric acid, methanesulfonic acid, Ethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, aspartic acid, glutamic acid, benzoic acid, camphorsulfonic acid, ethenesulfonic acid, gluconic acid, hydrobromic acid, isethionic acid, mucinic acid, pamonic acid, or pantothenic acid etc.
  • the method for producing the pyrazolone compound of the present invention is not particularly limited, and methods known in the art can be used without restriction.
  • the pyrazolonating agent of the present invention contains the pyrazolone compound of the present invention, and can convert the formyl group of a formyl group-containing compound into pyrazolonate. Specifically, as shown below, a pyrazolone compound of the present invention is reacted with a formyl group-containing compound such as a formyl group-containing protein, peptide, or sugar to form a pyrazolonated compound in which two molecules of the pyrazolone compound are bonded. can be obtained.
  • a formyl group-containing compound such as a formyl group-containing protein, peptide, or sugar
  • the pyrazolonating agent of the present invention does not contain a carrier (for example, water or a buffer), an excipient, a diluent, a preservative, a stabilizer, a preservative, an antioxidant, etc. as components other than the pyrazolone compound. But that's fine.
  • the formyl group-containing compound is not particularly limited as long as it contains a formyl group, but includes, for example, antibodies, drugs, peptides, amino acids and derivatives thereof, peptides, proteins, nucleic acids, sugars, and Examples include derivatives thereof or sugars.
  • the pyrazolone compound of the present invention and a formyl group-containing compound are brought into contact with each other.
  • the reaction is usually carried out in a solvent, and the reaction temperature is usually 0°C to 100°C, preferably 10°C to 50°C from the viewpoint of reaction rate and reaction efficiency.
  • the reaction time depends on the amount and type of substrate and solvent, the reaction temperature, etc., and is usually 5 minutes to 180 hours, and preferably 30 minutes to 48 hours from the viewpoint of reaction rate and reaction efficiency.
  • the theoretical amount of the pyrazolone compound is 2 moles per 1 mole of the formyl group-containing compound, and the amount can be arbitrarily changed depending on the reaction situation.
  • the amount of the pyrazolone compound is 1 to 20 mol, preferably 1 to 10 mol, per 1 mol of the formyl group-containing compound.
  • the reaction pressure is not particularly limited, and may be elevated pressure, normal pressure, or reduced pressure, and is usually 0.01 to 10 MPa (hereinafter, pressure is expressed as absolute pressure), preferably 0.1 to 1 MPa. It is.
  • the pyrazolone compound and a formyl group-containing compound are brought into contact.
  • the reaction conditions for the pyrazolone compound and the formyl group-containing compound may be the same as those for the pyrazolonization method of the formyl group-containing compound.
  • the obtained pyrazolonated compound is difficult to decompose and is stable.
  • a pyrazolone compound and a formyl group-containing compound are brought into contact with each other.
  • the reaction conditions for the pyrazolone compound and the formyl group-containing compound may be the same as those for the pyrazolonization method of the formyl group-containing compound.
  • the pyrazolonated compound of the present invention can be produced by the method for producing a pyrazolonated compound of the present invention.
  • the mechanism by which the obtained pyrazolone compound is difficult to decompose and is stable has not been analyzed in detail, but it can be estimated as follows.
  • the present invention is not limited by the following assumptions.
  • the pyrazolone compound is an isomer mixture of the CH form, the OH form, and the NH form. Therefore, the pyrazolonated compound obtained using a pyrazolone compound is also an isomer mixture of CH form, OH form, and NH form. According to the analysis by the present inventors, it was found that among the isomer mixture of the pyrazolonated compound, the CH form is easily decomposed.
  • R 1 when R 1 is an electron-withdrawing group, it is considered that the pyrazolone ring becomes an OH form having a stable cyclic resonance structure. That is, when R 1 is an electron-withdrawing group, the resulting pyrazolonated compound has a stable OH structure, so it is presumed that the stability of the pyrazolonated compound is high and that it does not decompose.
  • R 2 since R 2 does not participate in the conjugated system, it is considered that if R 1 is an electron-withdrawing group, it will not be affected by R 2 . Therefore, the structure of R 2 is presumed to have no effect on the stability of the pyrazolonated compound, and the structure of R 2 is not limited.
  • Example 1 a pyrazolone derivative was produced.
  • Example 1 Ethyl 4,4,5,5,5-pentafluoro-3-oxovalerate (0.38 mL, 2.2 mmol) was dissolved in acetic acid (5 mL), and phenylhydrazine (0.26 mL, 2.6 mmol) was added. Ta. After stirring at 90°C for 23 hours, the reaction solution was extracted with ethyl acetate. The organic phase was washed successively with water, saturated aqueous sodium bicarbonate solution, and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate.
  • HPLC GL-7400 (GL Sciences Co., Ltd.)
  • Mobile phase A H 2 O solution containing 0.1% TFA (v/v)
  • Mobile phase B MeCN solution containing 0.1% TFA (v/v) Gradient (mobile phase B%): Compound 5, 30% (0 min), 60% (30 min), Compound 6, 45% (0 min), 80% (30 min), Compound 7, 60% (0 min) ), 90% (30 min), Compound 8, 50% (0 min), 80% (30 min), Compound 9, 50% (0 min), 80% (30 min), Compound 10, 30% (0 minutes), 80% (30 minutes).
  • Detection wavelength Compound 5, 240 nm, Compound 6, 240 nm, Compound 7, 240 nm, Compound 8, 252 nm, Compound 9, 250 nm, Compound 10, 235 nm.
  • Example 10 Ethyl (4-fluorobenzoyl)acetate (300 ⁇ L, 1.70 mmol) was dissolved in acetic acid (3.0 mL) under an argon atmosphere and phenylhydrazine (183 ⁇ L, 1.87 mmol) was added. After stirring at 85° C. for 17 hours, ethyl acetate was added to the reaction mixture, and the organic layer was washed successively with water, a saturated aqueous sodium bicarbonate solution, and saturated brine, and dried over anhydrous magnesium sulfate.
  • a pyrazolone compound was introduced into galactopyranoside to synthesize a pyrazolone-galactose complex.
  • an aqueous solution of galactose oxidase (manufactured by Worthington Biochemical Corporation, 90 units/mL, 623 ⁇ L), an aqueous solution of wasabi-derived peroxidase (manufactured by Oriental Yeast Co., Ltd., 3 units/mL, 396 ⁇ L), a DMF solution of a pyrazolone compound (25 mM, 5.76 ⁇ L) Add L) , and shaken for 24 hours at 30°C in a constant temperature shaking bath at a shaking rate of 165 times/min.
  • the reaction solution is transferred to a 1 L eggplant flask, methanol is added, and the solvent is concentrated under reduced pressure. After drying with a vacuum pump, the resulting residue is dissolved in methanol and insoluble matter is filtered off. The obtained filtrate is concentrated under reduced pressure and the obtained residue is purified to obtain a pyrazolone-galactose complex.
  • Detection wavelength Compound 28, 262 nm, Compound 29, 277 nm, Compound 30, 270 nm, Compound 31, 226 nm.
  • the pyrazolone compound of the present invention By using the pyrazolone compound of the present invention, it is possible to introduce a drug into the formyl group on an antibody under mild conditions, and it is also possible to produce a chemically and biochemically stable antibody-drug conjugate. Therefore, it is expected to contribute to drug development.
  • the pyrazolone compound of the present invention can form a stable modified product with the formyl group at the reducing end of a sugar chain, making it possible to quantitatively and qualitatively analyze sugar chains, as well as to conduct detailed analyzes using enzymatic reactions. Since structural analysis is also possible, it is expected to contribute to biology and medicine, especially to diagnosis and pathological analysis.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本発明の目的は、安定性の高いピラゾロン化化合物を提供することである。　前記課題は、本発明の下記式（１）：（式中、Ｒ１は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、置換された炭素数６～６０のアリール基、及び下記式（２）～（７）：で表される基、からなる群から選択される電子求引基であり、Ｒ２は、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基、そしてｎは０～２の整数である） で表されるピラゾロン化合物によって解決することができる。

Description

ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤
　本発明は、ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤に関する。
　抗体などのタンパク質のホルミル基を、ピラゾロン化合物で修飾し、蛍光分子などを導入する方法が知られている（特許文献１及び非特許文献１～３）。
国際公開第２０１４／０７４２１８号公報
「エイシーエス・メディカル・ケミストリー・レターズ（ACS Medicinal Chemistry Letters）」（米国）２０１６年、第７巻、ｐ．９９４－９９８ 「ケムバイオケム（ChemBioChem）」（ドイツ）２０２０年、第２１巻、ｐ．３５８０－３５９３ 「ケムサスケム（ChemSusChem）」（ドイツ）２０２２年、ｅ２０２１０２５９２
　本発明者らは、ピラゾロン化合物として３－メチル－１－フェニル－５－ピラゾロンを用いて、糖のホルミル基を修飾し、ピラゾロン化化合物を生成した。しかしながら、得られたピラゾロン化化合物は、分解しやすく、安定性が低いことが分かった。
　従って、本発明の目的は、安定性の高いピラゾロン化化合物を提供することである。
　本発明者は、安定性の高いピラゾロン化化合物について、鋭意研究した結果、驚くべきことに、特定の位置に電子求引基を導入されたピラゾロンを用いて、ホルミル基を修飾することによって、高い安定性を有するピラゾロン化化合物が得られることを見出した。
　本発明は、こうした知見に基づくものである。
　従って、本発明は、
［１］下記式（１）：
（式中、Ｒ１は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、置換された炭素数６～６０のアリール基（ピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環が少なくとも１つの置換基を有し、そして前記置換基はハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、炭素数２～６１のアシル基、炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、炭素数１～６０のアルコキシ基、及び炭素数１～６０のアルキル基からなる群から選択される１つ以上であり、但し置換基が炭素数１～６０のアルコキシ基、又は炭素数１～６０のアルキル基の場合、置換基の位置はピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環のメタ位である）、及び下記式（２）～（７）：
（式中、Ｒ３は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基であり、Ｒ４は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基であり、式（４）の場合、Ｒ４は０～４個であり、式（５）～（７）の場合、Ｒ４は０～３個である）で表される基、からなる群から選択される電子求引基であり、
Ｒ２は、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基、そして
ｎは０～２の整数である）
で表されるピラゾロン化合物、
［２］［１］に記載のピラゾロン化合物を含む、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化剤、
［３］［１］に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化方法、
［４］［１］に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ピラゾロン化化合物の安定化方法、
［５］［１］に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ピラゾロン化化合物の製造方法、及び
［６］［５］に記載の製造方法によって得られるピラゾロン化化合物、
に関する。
　本発明のピラゾロン化合物又はピラゾロン化剤によれば、高い安定性を示すピラゾロン化化合物を得ることができる。
本発明のピラゾロン化合物を用いて製造したピラゾロン化化合物（化合物５～１０）の安定性を検討したグラフである。 本発明のピラゾロン化合物を用いて製造したピラゾロン化化合物（化合物５、及び２８～３１）の安定性を検討したグラフである。 本発明のピラゾロン化合物を用いて製造したピラゾロン化化合物（化合物５、及び３２～３６）の安定性を検討したグラフである。 本発明のピラゾロン化合物を用いて製造したピラゾロン化化合物（化合物５、及び３７～４１）の安定性を検討したグラフである。 本発明のピラゾロン化合物を用いて製造したピラゾロン化化合物（化合物５、及び４２～４５）の安定性を検討したグラフである。
　本発明のピラゾロン化合物は、下記式（１）：
で表される化合物である。
　Ｒ１は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、置換された炭素数６～６０のアリール基（ピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環が少なくとも１つの置換基を有し、そして前記置換基はハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、炭素数２～６１のアシル基、炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、炭素数１～６０のアルコキシ基、及び炭素数１～６０のアルキル基からなる群から選択される１つ以上であり、但し置換基が炭素数１～６０のアルコキシ基、又は炭素数１～６０のアルキル基の場合、置換基の位置はピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環のメタ位である）、及び下記式（２）～（７）：
（式中、Ｒ３は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基であり、Ｒ４は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基であり、式（４）の場合、Ｒ４は０～４個であり、式（５）～（７）の場合、Ｒ４は０～３個である）で表される基、からなる群から選択される電子求引基である。Ｒ２は、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基である。そしてｎは０～２の整数である。
　本発明のピラゾロン化合物は、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化に用いることができる。
　本発明のピラゾロン化合物は、前記式（１）のＣＨ体でもよいが、下記式（８）：
で表される構造異性体（ＯＨ体）、又は下記式（９）：
で表される構造異性体（ＮＨ体）でもよい。
　本発明の前記Ｒ１が、電子求引基であることにより、本発明のピラゾロン化合物を用いて製造されたピラゾロン化化合物は、分解されにくく、安定なピラゾロン化化合物となることができる。
　ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子が挙げられる。Ｒ１がハロゲン原子であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　ニトロ基は、－ＮＯ２で表される基である。Ｒ１がニトロ基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　シアノ基は、－ＣＮで表される基である。Ｒ１がシアノ基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）は、アルキル基の１個以上の水素原子がフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等の１個以上のハロゲン原子で置換された炭素数１～１０のアルキル基を意味し、好ましくは炭素数１～８のハロアルキル基であり、より好ましくは炭素数１～６のハロアルキル基であり、更に好ましくは炭素数１～４のハロアルキル基である。また、本明細書において、アルキル基は、直鎖状アルキル基、分岐状アルキル基、又は環状アルキル基のいずれでもよい。ハロゲン原子の数は多い方が、電子を吸引する作用が強くなるため、好ましい。しかしながら、１位の炭素原子に１以上（好ましくは２以上）のハロゲン原子が結合していることによって、ハロアルキル基は、電子求引基としての機能を発揮することができる。本明細書において、ハロアルキル基の「１位の炭素原子」とは、前記Ｒ１の－（ＣＨ２）ｎ－に結合している炭素原子を意味する。また、炭素数２～１０のハロアルキル基において、限定されるものではないが、好ましくは２位の炭素原子に１以上（好ましくは２以上）のハロゲン原子が結合している。例えば、ハロアルキル基としては、クロロメチル基、２，２，２－トリクロロエチル基、又は２，２，２－トリフルオロエチル基が挙げられる。
　また、アルキル基の全ての水素原子がハロゲン原子で置換された基を、ペルハロゲノアルキル基と記す。たとえばペルフルオロアルキル基とは、アルキル基の全ての水素原子がフッ素原子に置換された基を意味する。具体的には、ペルハロゲノアルキル基としては、トリフルオロメチル基、２，２，２－トリフルオロ－１，１－ジクロロエチル基、ペルフルオロエチル基、ペルフルオロプロピル基、ペルフルオロイソプロピル基、ペルフルオロブチル基、ペルフルオロｓｅｃ－ブチル基、ペルフルオロｔｅｒｔ－ブチル基、ペルフルオロペンチル基、ペルフルオロヘキシル基、トリクロロメチル基、トリブロモメチル基、又はトリヨードメチル基等が挙げられる。
　Ｒ１が炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）は、１位の炭素に１以上のハロゲン原子が結合していれば、強い電子求引作用を有し、本発明の効果を得ることができる。更に、１位の炭素に合計２個以上のハロゲン原子が結合しているハロアルキル基、又は１位及び２位の炭素に合計２個以上のハロゲン原子が結合しているハロアルキル基は、非常に強い電子求引作用を有し、本発明の効果を得ることができる。
　炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基は、エーテル基（－Ｏ－）を含むペルフルオロアルキル基である。具体的には、限定されるものではないが、
が挙げられる。
　カルボキシ基は、－ＣＯＯＨで表される基である。Ｒ１がカルボキシ基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　置換された炭素数６～６０のアリール基（ピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環が少なくとも１つの置換基を有し、そして前記置換基はハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、炭素数２～６１のアシル基、炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、炭素数１～６０のアルコキシ基、及び炭素数１～６０のアルキル基からなる群から選択される１つ以上であり、但し置換基が炭素数１～６０のアルコキシ基、又は炭素数１～６０のアルキル基の場合、置換基の位置はピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環のメタ位である）は、基本的にピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環の水素原子が電子求引基である置換基によって置換された基である。ピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環の少なくとも１つ以上の水素原子が置換されるものであり、２つの置換基、３つの置換基、４つの置換基、又は５つの置換基を有してもよい。また２つ以上の置換基を有する場合、置換基は同じものでもよく、前記置換基の２つ以上の組み合わせでもよい。また、電子求引基の置換基の位置は限定されないが、最も好ましくはパラ位である。Ｒ１が置換された炭素数６～６０のアリール基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　前記炭素数２～６１のアシル基は、Ｒ５－ＯＣ－で表される基であり、Ｒ５は炭化水素基である。Ｒ５としては、限定されるものではないが、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基が挙げられる。
　Ｒ１は、下記式（２）：
で表される基でもよい。Ｒ３は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基である。
　Ｒ３が、炭素数１～１０のハロアルキル基としては、具体的にはトリフルオロメタンスルホニル基、又はペンタフルオロエタンスルホニル基などが挙げられる。Ｒ３が、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基としては、具体的にはメチルスルホニル基（メシル基）、エチルスルホニル基、ｎ－プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ｎ－ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、ｓｅｃ－ブチルスルホニル基、又はｔｅｒｔ－ブチルスルホニル基等が挙げられる。Ｒ３が、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基としては、具体的にはフェニルスルホニル基、メチルフェニルスルホニル基、メチルパラトリルスルホニル基、メチルメタトリルスルホニル基、メチルオルトトリルスルホニル基、１－ナフチルスルホニル基、２－ナフチルスルホニル基、２－メチルフェニルスルホニル基、等が挙げられる。
　式（２）で表される基は、ピラゾロン骨格に近いスルホニル基部分によって、電子求引基としての機能を発揮する。従って、ピラゾロン骨格に近いスルホニル基を介して結合しているＲ３は、電子求引基としての機能には大きな影響を与えないと考えられる。従って、Ｒ３は、電子求引基ではない、アルキル基又はアリール基でもよく、電子求引基であるハロゲン原子、又はニトロ基などでもよい。
　Ｒ１が式（２）で表される基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　Ｒ１は、下記式（３）：
で表される基でもよい。Ｒ４は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基である。
　Ｒ４が、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基の場合、ある態様では炭素数１～３０のアルコキシ基であり、ある態様では炭素数１～２０のアルコキシ基であり、ある態様では炭素数１～１０のアルコキシ基である。具体的には、式（３）の基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、又はブトキシカルボニル基等が挙げられる。炭素数１～６０のアルコキシ基は、ピラゾロン骨格に近いエステル部分（又はカルボニル部分）によって、電子求引基としての機能を発揮する。従って、ピラゾロン骨格に近いエステル部分を介して結合している基は、電子求引基としての機能には大きな影響を与えないと考えられる。従って、例えば炭素数６０のアルコキシ基も、電子求引基としての機能を発揮することができる。Ｒ１が場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　Ｒ４が、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基の場合、ある態様では炭素数１～３０のアルキル基であり、ある態様では炭素数１～２０のアルキル基であり、ある態様では炭素数１～１０のアルキル基である。具体的には、式（３）の基としては、アセチル基、プロピオニル基、ブタノイル基、２－メチルプロピオニル基、ヘプタノイル基、２－メチルブタノイル基、３－メチルブタノイル基、オクタノイル基、デカノイル基、ドデカノイル基、又はオクタデカノイル基が挙げられる。場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基の場合、ピラゾロン骨格に近いカルボニル基部分によって、電子求引基としての機能を発揮する。従って、ピラゾロン骨格に近いカルボニル基を介して結合している基は、電子求引基としての機能には大きな影響を与えないと考えられる。従って、炭素数６０のアルキル基も、電子求引基としての機能を発揮することができる。Ｒ１が場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　Ｒ４が、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基の場合、ある態様では炭素数６～３０のアリール基であり、ある態様では炭素数６～２２のアリール基であり、ある態様では炭素数６～１０のアリール基である。具体的には、式（３）の基としては、ベンゾイル基、メチルベンゾイル基、エチルベンゾイル基、プロピルベンゾイル基、ブチルベンゾイル基、ジメチルベンゾイル基、１フチルカルボニル基、ナフチルカルボニル基などが挙げられる。場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基の場合、ピラゾロン骨格に近いカルボニル基部分によって、電子求引基としての機能を発揮する。従って、ピラゾロン骨格側にカルボニル基を介して結合しているアリール基は、電子求引基としての機能には大きな影響を与えないと考えられる。従って、例えば炭素数６０のアリール基も、電子求引基としての機能を発揮することができる。Ｒ１が場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　Ｒ１は、下記式（４）～（７）：
で表される基でもよい。Ｒ４は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基であり、式（４）の場合、Ｒ４は０～４個であり、式（５）～（７）の場合、Ｒ４は０～３個である。
　式（４）で表される基は、場合により置換されることのあるピリジル基であり、ピリジン（Ｃ５Ｈ５Ｎ）から水素原子を一つ除いた残基である。ピリジン環上の水素原子を一つ除く位置は窒素原子に対するオルト位、メタ位又はパラ位の何れの炭素原子でもよい。すなわち、ピリジル基は、２－ピリジル基、３－ピリジル基、又は４－ピリジル基を含む。Ｒ４は、ピリジル基の１つ以上の水素原子が置換されるものであり、１つの置換基、２つの置換基、３つの置換基、又は４つの置換基を有してもよい。Ｒ４が０個の場合は、置換基を有さないピリジル基を意味する。また２つ以上の置換基を有する場合、置換基は同じものでもよく、前記置換基の２つ以上の組み合わせでもよい。Ｒ１が式（４）で表される基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　式（５）～（７）で表される基は、場合により置換されることのあるジアジン基であり、ジアジン（Ｃ４Ｈ４Ｎ２）から水素原子を一つ除いた残基である。ジアジンは、窒素の位置により３種類の異性体、すなわちピラジン、ピリミジン、又はピリダジンを含むが、水素原子を一つ除く位置はいずれの炭素原子の位置でもよい。Ｒ４は、ジアジン基の１つ以上の水素原子が置換されるものであり、１つの置換基、２つの置換基、又は３つの置換基を有してもよい。Ｒ４が０個の場合は、置換基を有さないピラジン基、ピリミジン基、又はピリダジン基を意味する。また２つ以上の置換基を有する場合、置換基は同じものでもよく、前記置換基の２つ以上の組み合わせでもよい。Ｒ１が式（５）～（７）で表される基であるピラゾロン化合物として、限定されるものではないが、例えば
が挙げられる。
　前記式（２）～（７）における、Ｒ３及びＲ４のハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、又はカルボキシ基は、Ｒ１に記載のものと同じである。また、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基における炭素数は、ある態様では炭素数１～３０であり、ある態様では炭素数１～２０であり、ある態様では炭素数１～１０である。また、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基における炭素数は、ある態様では炭素数６～３０であり、ある態様では炭素数６～２２であり、ある態様では炭素数６～１０である。
　前記場合により置換される炭素数１～６０のアルキル基等の水素原子の置換基は、本発明の効果が得られる限りにおいて特に限定されるものではないが、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、カルボキシ基、炭素数１～１０アルキル基、炭素数１～１０のアルケニル基、炭素数１～１０のアルキニル基、炭素数１～１０のアラルキル基、炭素数６～１０のアリール基、炭素数１～１０のアルコキシ基、炭素数１～１０のアルケニルオキシ基、炭素数１～１０のアルキニルオキシ基、炭素数１～１０のアラルキルオキシ基、場炭素数６～１０のアリールオキシ基、炭素数１～１０のアルキルカルボニル基、炭素数１～１０のアルケニルカルボニル基、炭素数１～１０のアルキニルカルボニル基、炭素数１～１０のアラルキカルボニル基、炭素数６～１０のアリールカルボニル基、炭素数１～１０のアルコキシカルボニル基、炭素数１～１０のアルケニルオキシカルボニル基、炭素数１～１０のアルキニルオキシカルボニル基、炭素数１～１０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は炭素数６～１０のアリールオキシカルボニル基が挙げられる。炭素数１～１０は、好ましくは炭素数１～６であり、好ましくは炭素数１～４である。また炭素数６～１０は、好ましくは炭素数６である。
　本発明のピラゾロン化合物におけるＲ２は、本発明の効果が得られる限りにおいて、特に限定されるものではないが、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基であり、ある態様では炭素数１～２００の炭化水素基であり、ある態様では炭素数１～１００の炭化水素基である。ヘテロ原子としては、特に限定されるものではないが、窒素原子（Ｎ）、酸素原子（Ｏ）、硫黄原子（Ｓ）、リン原子（Ｐ）、塩素原子（Ｃｌ）、ヨウ素原子（Ｉ）、臭素原子（Ｂｒ）、フッ素原子（Ｆ）、又はケイ素原子（Ｓｉ）が含まれる。Ｒ２の基は、前記ヘテロ原子を１つ以上含んでもよく、２つ以上の種類の異なるヘテロ原子を含んでもよい。Ｒ２は、後述のように、本発明のピラゾロン化合物を用いて製造されたピラゾロン化化合物の安定性に影響を与えない。従って、Ｒ２は基本的に限定されるものではない。炭化水素基としては、例えば飽和又は不飽和の鎖式炭化水素基、脂環式炭化水素基、芳香族基、又はポリエチレングリコール基などが挙げられる。より具体的な、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基としては、例えばポリエチレングリコールを含むポリマー、ポリオール、アミノ酸およびその誘導体、ペプチド、タンパク質、核酸、糖及びその誘導体等が挙げられる。
　ｎは、０～２の整数である。基－（ＣＨ２）ｎ－は、ピラゾロン骨格と、Ｒ１とを結合する基である。電子求引基であるＲ１とピラゾロン骨格との距離が一定以下であれば、本発明の効果を発揮することができると考えられる。すなわち、基－（ＣＨ２）ｎ－は、短い方が好ましく、従ってｎは好ましくは０又は１の整数であり、より好ましくは０である。しかしながら、電子求引作用が非常に強い電子求引基（例えば、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、及び炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基）では、ｎ＝２でも十分に本発明の効果を得ることができる。電子求引作用が強い電子求引基（例えば、カルボキシ基及び置換された炭素数６～６０のアリール基）では、ｎ＝２で本発明の効果を得ることができるが、好ましくはｎ＝１又はｎ＝０である。
　本発明のピラゾロン化合物は、後述のピラゾロン化剤として許容される塩の形態をとってもよい。すなわち酸付加塩又は塩基との塩を形成する場合がある。具体的な塩基との塩としては、無機塩基、有機塩基、又は金属アルコキシドとの塩が挙げられる。塩は、本発明のピラゾロン化合物と、無機塩基、有機塩基、又は金属アルコキシドとの混合により生成しうる。
　塩を形成しうる無機塩基としては、アルカリ金属（例えば、リチウム、ナトリウム、又はカリウム等）の水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩、酢酸塩、又は水素化物；アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム、カルシウム、又はバリウム）の水酸化物、又は水素化物等が挙げられる。
　塩を形成しうる有機塩基としては、ジメチルアミン、トリエチルアミン、ピペラジン、ピロリジン、ピペリジン、２－フェニルエチルアミン、ベンジルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピリジン、又はコリジン等；金属アルコキシドとしては、ナトリウムメトキシド、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はマグネシウムメトキシド等；が挙げられる。
　具体的な酸付加塩としては、無機酸又は有機酸との塩が挙げられる。酸付加塩は、本発明の化合物［１］と、無機酸又は有機酸との混合により生成しうる。
　無機酸としては塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、又はリン酸等が和えられる。有機酸としては、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、エテンスルホン酸、グルコン酸、臭化水素酸、イセチオン酸、粘液酸、パモン酸、又はパントテン酸等が挙げられる。
　本発明のピラゾロン化合物の製造方法は、特に限定されるものではなく、本分野で公知の方法を制限なく使用することができる。
　本発明のピラゾロン化剤は、本発明のピラゾロン化合物を含み、ホルミル基含有化合物のホルミル基をピラゾロン化することができる。具体的には、下記に示したように、ホルミル基を有するタンパク質、ペプチド、又は糖などのホルミル基含有化合物に、本発明のピラゾロン化合物を反応させ、２分子のピラゾロン化合物が結合したピラゾロン化化合物を得ることができる。
　本発明のピラゾロン化剤は、前記ピラゾロン化合物以外の成分として、担体（例えば、水又は緩衝液）、賦形剤、希釈剤、保存剤、安定化剤、防腐剤、又は酸化防止剤等を含んでもよい。
　前記ホルミル基含有化合物としては、ホルミル基を含有する限りにおいて特に限定されるものではないが、例えばホルミル基が導入された抗体、薬物、ペプチド、アミノ酸およびその誘導体、ペプチド、タンパク質、核酸、糖及びその誘導体、又は糖が挙げられる。
　本発明のホルミル基含有化合物のピラゾロン化方法は、本発明のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させる。
　具体的には、反応は、通常溶媒中で行われ、反応温度は、通常０℃～１００℃であり、反応速度と反応効率の観点から、好ましくは１０℃～５０℃である。
　反応時間は、基質や溶媒の量、種類、及び反応温度等に依存し、通常５分～１８０時間であり、反応速度と反応効率の観点から、好ましくは３０分～４８時間である。
　ピラゾロン化合物は、ホルミル基含有化合物１モルに対して、２モルが理論量であり、反応の状況により任意に変化させうる。通常は、ホルミル基含有化合物１モルに対して、ピラゾロン化合物は１～２０モルであり、好ましくは１～１０モルである。
　反応の圧力は、特に限定されず、加圧、常圧、減圧のいずれでもよく、通常０．０１～１０ＭＰａ（以下、圧力は絶対圧で示す。）であり、好まくは０．１～１ＭＰａである。
　本発明のピラゾロン化化合物の安定化方法は、前記ピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させる。前記ピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物との反応条件は、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化方法と同じ条件を用いることができる。前記得られるピラゾロン化化合物は、分解されにくく、安定である。
　本発明のピラゾロン化化合物の製造方法は、ピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させる。前記ピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物との反応条件は、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化方法と同じ条件を用いることができる。
　本発明のピラゾロン化化合物は、本発明のピラゾロン化化合物の製造方法によって製造することができる。
《作用》
　本発明において、得られたピラゾロン化合物が、分解されにくく、安定であるメカニズムは詳細に解析されたわけではないが、以下のように推定することができる。しかしながら、本発明は、以下の推定によって限定されるものではない。
　ピラゾロン化合物は、前記のように、ＣＨ体、ＯＨ体、及びＮＨ体の異性体混合物である。従って、ピラゾロン化合物を用いて得られたピラゾロン化化合物も、ＣＨ体、ＯＨ体、及びＮＨ体の異性体混合物となっている。本発明者らの解析によれば、ピラゾロン化化合物の異性体混合物のうち、ＣＨ体が分解しやすいことが分かった。ここで、Ｒ１が、電子求引基であると、ピラゾロン環が安定な環状共鳴構造であるＯＨ体となると考えられる。すなわち、Ｒ１が、電子求引基の場合、得られたピラゾロン化化合物が、安定なＯＨ体の構造をとるため、ピラゾロン化化合物の安定性が高くなり、分解しないものと推定される。
　一方、前記環状共鳴構造の形成において、Ｒ２は共役系に関与しないため、Ｒ１が電子求引基であれば、Ｒ２の影響を受けないと考えられる。従って、Ｒ２の構造はピラゾロン化化合物の安定性に何ら影響を与えないと推定され、Ｒ２の構造は限定されない。
　以下に、本発明を実施例を用いて更に詳細に説明するが、この実施例は本発明の具体例を示すもので、本発明を何ら限定するものではない。またピラゾロンの構造は明細書中式（１）、（８）、又は（９）で示されるような互変異性体の平衡状態で存在しているが、本実施例では式（１）のＣＨ体のみで記載する。
《実施例１～４》
　本実施例では、ピラゾロン誘導体を作製した。
（化合物１の調製）（実施例１）
　４，４，５，５，５－ペンタフルオロ－３－オキソ吉草酸エチル（０．３８ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を酢酸（５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（０．２６ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）を加えた。９０℃で２３時間攪拌したのち、反応液を酢酸エチルで抽出した。有機相を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。抽出液をろ過、濃縮後、残渣をエタノールでシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１～２：１）で精製することで、化合物１を４２８．３ｍｇ（収率７１％）得た。
化合物１　１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ＝１２．５３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７４－７．６７（ｍ，２Ｈ），７．５６－７．４９（ｍ，２Ｈ），７．４３－７．３６（ｍ，１Ｈ），５．９３（ｓ，１Ｈ）．
（化合物２の調製）（実施例２）
　（２，４，５－トリフルオロベンゾイル）酢酸エチル（５０１．７ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）を酢酸（５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（０．２２ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２４時間攪拌したのち、反応液を酢酸エチルで抽出した。有機相を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。抽出液をろ過、濃縮後、残渣をエタノールでシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１～３．５：１）で精製することで、化合物２を４８２．３ｍｇ（収率８１％）得た。
化合物２　１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ＝１２．０１（ｍ，１Ｈ），８．０２－７．９２（ｍ，１Ｈ），７．８７－７．７８（ｍ，２Ｈ），７．７１－７．６１（ｍ，１Ｈ），７．５４－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．３７－７．２８（ｍ，１Ｈ），６．００－５．９４（ｍ，１Ｈ）．
（化合物３の調製）（実施例３）
　２－（４－ニトロベンゾイル）酢酸エチル（５０１．１ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）をエタノール（５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（２２０μＬ、２．２４ｍｍｏｌ）を加えた。加熱還流下で２２時間攪拌したのち、減圧下に溶媒を除去した。残渣を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。抽出液をろ過、濃縮後、残渣をエタノールで再結晶することで、化合物３を２６９．９ｍｇ（収率４５％）得た。
化合物３　１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ＝１２．１１（ｂｒｓ，１Ｈ），８．３１－８．２５（ｍ，２Ｈ），８．１５－８．０８（ｍ，２Ｈ），７．８５－７．８０（ｍ，２Ｈ），７．５５－７．４７（ｍ，２Ｈ），７．３７－７．３１（ｍ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ）．
（化合物４の調製）（実施例４）
　３－オキソ－３－（４－ピリジル）プロピオン酸エチル（４１４．８ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を酢酸（５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（２４０μＬ、２．４４ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２３時間攪拌したのち、反応液を酢酸エチルで抽出した。有機相を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。抽出液をろ過、濃縮後、残渣をエタノールでシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝３０：１～２０：１）で精製することで、化合物４を１７４．６ｍｇ（収率３４％）得た。
化合物４　１Ｈ－ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ＝１２．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），８．６３－８．５６（ｍ，２Ｈ），７．８５－７．７６（ｍ，４Ｈ），７．５５－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．３６－７．２９（ｍ，１Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ）．
《比較例１及び実施例５～９》
　本実施例では、ピラゾロン誘導体をガラクトピラノシドへ導入した。
（化合物５の調製）（比較例１）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１１．２ｍｇ，３７．４μｍｏｌ）に水（３．７ｍＬ）、３－メチル－１－フェニル－５－ピラゾロン（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．５ｍＬ、１５０μｍｏｌ）の順で加えた。室温で一時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝３０：１～１０：１）で精製し、化合物５を１８．４ｍｇ（収率７８％）を得た。
化合物５　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ（ＡＸＩＭＡ－ＴＯＦ２）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３２Ｈ３２Ｎ５Ｏ９，６３０．２２，ｆｏｕｎｄ　６３０．２５．
（化合物６の調製）（実施例５）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１３．７ｍｇ，４５．７μｍｏｌ）に水（４．６ｍＬ）、３－トリフルオロメチル－１－フェニル－５－ピラゾロン（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．９ｍＬ、１９０μｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）の順で加えた。室温で２２時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣を固相抽出カラム（Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ１８、メタノール：Ｈ２Ｏ＝１：４～４：１、Ｗａｔｅｒｓ）、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳカラム　２５０×１０ｍｍ、５ｕｍ、溶離液Ａ：０．１％　ａｑ．ＴＦＡ、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ　５５％～７０％（３０分）、３０℃、ＵＶ２４０ｎｍ）の順で精製し、化合物６を０．７ｍｇ得た。
化合物６　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ（ＡＸＩＭＡ－ＴＯＦ２）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３２Ｈ２６Ｆ６Ｎ５Ｏ９，７３８．１６，ｆｏｕｎｄ　７３７．９７．
（化合物７の調製）（実施例６）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１２．８ｍｇ，４２．８μｍｏｌ）に水（４．３ｍＬ）、化合物１（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．８ｍＬ、１８０μｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）の順で加えた。室温で２４時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣を固相抽出カラム（Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ１８、メタノール：Ｈ２Ｏ＝１：４～３：２、Ｗａｔｅｒｓ）、高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳカラム　２５０×１０ｍｍ、５ｕｍ、溶離液Ａ：０．１％　ａｑ．ＴＦＡ、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ　５５％～７０％（３０分）、３０℃、ＵＶ　２４０ｎｍ）の順で精製し、化合物７を２．０ｍｇ得た。
化合物７　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦＭＳ（ＡＸＩＭＡ－ＴＯＦ２）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３４Ｈ２５Ｆ１０Ｎ５Ｏ９Ｎａ，８６０．１４，ｆｏｕｎｄ　８６０．２４．
（化合物８の調製）（実施例７）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１３．９ｍｇ，４６．５μｍｏｌ）に水（４．６ｍＬ）、化合物２（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．９ｍＬ、１９０μｍｏｌ）、ＤＭＦ（４．５ｍＬ）の順で加えた。室温で２４時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２５：１～８：１）で精製し、化合物８を３２．６ｍｇ（収率８２％）得た。
化合物８　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ＝７．９１－７．８６（ｍ，２Ｈ），７．８２－７．７７（ｍ，２Ｈ），７．７５－７．６３（ｍ，３Ｈ），７．５９－７．５３（ｍ，２Ｈ），７．５２－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．４４－７．３９（ｍ，１Ｈ），７．３８－７．３３（ｍ，１Ｈ），７．１７－７．０１（ｍ，３Ｈ），７．００－６．９５（ｍ，２Ｈ），５．０６（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．９５－４．８７（ｍ，１Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ　ｗｉｔｈ　ｗａｔｅｒ　ｓｉｇｎａｌ），３．９９（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝３．３，９．６，Ｈｚ，１Ｈ）．
（化合物９の調製）（実施例８）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１３．４ｍｇ，４４．８μｍｏｌ）に水（４．５ｍＬ）、化合物３（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．８ｍＬ、１８０μｍｏｌ）、ＤＭＦ（４．５ｍＬ）の順で加えた。室温で２２時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２５：１～６：１）で精製し、化合物９を３１．９ｍｇ（収率８４％）得た。
化合物９　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ＝８．０３－７．９７（ｍ，２Ｈ），７．８９－７．８２（ｍ，６Ｈ），７．８０－７．７５（ｍ，２Ｈ），７．６５－７．６１（ｍ，２Ｈ），７．５８－７．５１（ｍ，４Ｈ），７．５０－７．４４（ｍ，２Ｈ），７．４２－７．３７（ｍ，１Ｈ），７．３５－７．３０（ｍ，１Ｈ），６．９９－６．９５（ｍ，２Ｈ），５．０９－５．０３（ｍ，２Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９１－３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｄｄ，Ｊ＝３．３，９．６Ｈｚ，１Ｈ）．
（化合物１０の調製）（実施例９）
　４－ニトロフェニル　β－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（１４．６ｍｇ，４８．８μｍｏｌ）に水（４．９ｍＬ）、化合物４（１００ｍＭ　ＤＭＦ溶液、１．９６ｍＬ、１９６μｍｏｌ）、ＤＭＦ（４．５ｍＬ）の順で加えた。室温で２４時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１～４：１～クロロホルム：メタノール：水＝１２：８：１）で精製し、化合物１０を２９．５ｍｇ（収率８０％）得た。
化合物１０　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ＝８．３１（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．９０－７．８４（ｍ，４Ｈ），７．５７－７．５０（ｍ，４Ｈ），７．４７－７．４３（ｍ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８９－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄｄ，Ｊ＝３．３，９．６Ｈｚ，１Ｈ）．
　本実施例では、ピラゾロン誘導体を導入したガラクトピラノシド（化合物５～１０）のリン酸緩衝液中における安定性を調べた。
（ピラゾロン誘導体を導入したガラクトピラノシドの安定性の検討）
　ピラゾロンを導入したガラクトピラノシド（化合物５～１０）をＤＭＳＯに溶解し、５ｍＭの溶液とした。この５ｍＭの化合物５～１０（２５μＬ）に、０．１ＭのｐＨ７．４リン酸緩衝液（１２５μＬ）、水（６２．５μＬ）、ＤＭＳＯ（３７．５μＬ）を加え、３７℃に加熱した。１～３５日後の反応液の一部を逆相ＨＰＬＣで測定し、ピーク面積から化合物５～１０の残存率を算出した（図１）。
　その結果、Ｒ１が電子求引基であるピラゾロン化合物とホルミル基含有化合物から得られたピラゾロン化化合物６～１０は、コントロール化合物である化合物５（Ｒ１＝Ｍｅ）と比較して、安定が向上することが明らかとなった。
［逆相カラムを用いたＨＰＬＣ分析条件］
ＨＰＬＣ：ＧＬ－７４００（ジーエルサイエンス株式会社）
カラム：Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ　ＲＰ－１８　ＧＰ　Ａｑｕａ，５μｍ，Φ２×２５０ｍｍ（関東化学株式会社）
カラム温度：３０℃
移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含むＨ２Ｏ溶液（ｖ／ｖ）
移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡを含むＭｅＣＮ溶液（ｖ／ｖ）
グラジエント（移動相Ｂ％）：化合物５、３０％（０分）、６０％（３０分）、化合物６、４５％（０分）、８０％（３０分）、化合物７、６０％（０分）、９０％（３０分）、化合物８、５０％（０分）、８０％（３０分）、化合物９、５０％（０分）、８０％（３０分）、化合物１０、３０％（０分）、８０％（３０分）。
流速：０．２ｍＬ／分
検出波長：化合物５、２４０ｎｍ、化合物６、２４０ｎｍ、化合物７、２４０ｎｍ、化合物８、２５２ｎｍ、化合物９、２５０ｎｍ、化合物１０、２３５ｎｍ。
　本発明においては以下の表１に記載の化合物が好ましい。なお、下記表１のピラゾロン化合物はｎ＝０である。
《実施例１０～２６》
（化合物１１の調製）（実施例１０）
　（４－フルオロベンゾイル）酢酸エチル（３００μＬ、１．７０ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気中で酢酸（３．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（１８３μＬ、１．８７ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で１７時間攪拌したのち、反応液に酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過、減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製することで、化合物１１を２０６ｍｇ（収率９５％）得た。
化合物１１　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９７（ｄｄ，Ｊ＝１．２，９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８０－７．７７（ｍ，２Ｈ），７．４４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１７－７．１５（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｓ２Ｈ）．
（化合物１２の調製）（実施例１１）
　（４－クロロベンゾイル）酢酸エチル（１５０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（７２μＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌したのち、反応液に酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過、減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製することで、化合物１２を１５４ｍｇ（収率８４％）得た。
化合物１２　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４３－７．４０（ｍ，４Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ）．
（化合物１３の調製）（実施例１２）
　（４－シアノベンゾイル）酢酸エチル（３００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を酢酸（３．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（１５０μＬ、１．５２ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌したのち、反応液に酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過、減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製することで、化合物１３を１９８ｍｇ（収率５５％）得た。
化合物１３　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｓ，２Ｈ）．
（化合物１４の調製）（実施例１３）
　３－オキソ－３－（ピリジン－４－イル）プロパン酸エチル（２１５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気中でテトラヒドロフラン（３．７ｍＬ）に溶解し、メチルヒドラジン（５８．６μＬ、１．１１ｍｍｏｌ）を加えた。６５℃で５時間攪拌した後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝３０：１）で精製することで、化合物１４を１８１ｍｇ（収率９３％）得た。
化合物１４　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）８．６７（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５９（ｓ，２Ｈ），３．４４（ｓ，３Ｈ）．
（化合物１５の調製）（実施例１４）
　３－オキソ－３－（ピリジン－２－イル）プロパン酸エチル（１５５ｍｇ、８０２μｍｏｌ）をアルゴン雰囲気中で酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（８６．８μＬ、８８３μｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌した後、反応液にメタノールを加えて希釈した。トルエン共沸により溶媒を減圧留去した後、真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製することで、化合物１５を１５２ｍｇ（収率８０％）得た。
化合物１５　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）８．６４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄｄ，Ｊ＝１．２，８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３７－７．３３（ｍ，１Ｈ），７．２５－７．２２（ｍ，１Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ）．
（化合物１６の調製）（実施例１５）
　３－（２，６－ジクロロ－５－フルオロピリジン－３－イル）－３－オキソプロパン酸エチルエステル（２０２ｍｇ、７２１μｍｏｌ）を酢酸（２．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（７８．０μＬ、７９３μｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌した後、反応液にメタノールを加えて希釈した。トルエン共沸により溶媒を減圧留去した後、真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製することで、化合物１６を１７６ｍｇ（収率７５％）得た。
化合物１６　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ（ｐｐｍ）１２．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝１．０，７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ）．
　化合物１６はＤＭＳＯ－ｄ６中でエノール体として観測された。
（化合物１７の調製）（実施例１６）
　３－オキソ－３－（ピリジン－３－イル）プロパン酸エチル（１９６ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を酢酸（２．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（１１０μＬ、１．１２ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌した後、反応液にメタノールを加えて希釈した。トルエン共沸により溶媒を減圧留去した後、真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１）で精製することで、化合物１７を１６９ｍｇ（収率７０％）得た。
化合物１７　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）８．９４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．７０（ｄｄ，Ｊ＝１．１，４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１６－８．１４（ｍ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４６－７．４１（ｍ，３Ｈ），７．２５－７．２３（ｍ，１Ｈ），３．８９（ｓ，２Ｈ）．
（化合物１８の調製）（実施例１７）
　［６－（トリフルオロメチル）ニコチニル］酢酸メチルエステル（１４４ｍｇ、５８２μｍｏｌ）を酢酸（１．４ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（６３．０μＬ、６４１μｍｏｌ）を加えた。８５℃で２２時間攪拌した後、反応液にメタノールを加えて希釈した。トルエン共沸により溶媒を減圧留去した後、真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製することで、化合物１８を１６７ｍｇ（収率９４％）得た。
化合物１８　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）９．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），８．３０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），７．２９－７．２７（ｍ，１Ｈ），３．９１（ｓ，２Ｈ）．
（化合物１９の調製）（実施例１８）
　３－オキソ－３－（ピラジン－２－イル）プロピオン酸エチル（４１７ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を酢酸（４．２ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（２３２μＬ、２．３２ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２時間攪拌した後、反応液に酢酸エチルを加えて希釈した。トルエン共沸により溶媒を減圧留去した後、真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：アセトン＝５：１）で精製することで、化合物１９を４３４ｍｇ（収率８５％）得た。
化合物１９　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ（ｐｐｍ）１２．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．６５（ｄｄ，Ｊ＝１．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５３－７．５０（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１７（ｓ，１Ｈ）．
　化合物１９はＤＭＳＯ－ｄ６中でエノール体として観測された。
（化合物２０の調製）（実施例１９）
　（２，３，４，５，６－ペンタフルオロベンゾイル）酢酸エチル（１５０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（５７．０μＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で１時間攪拌した後、トルエン共沸により溶媒を減圧留去した。真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝３０：１）で精製することで、化合物２０を１１０ｍｇ（収率６４％）得た。
化合物２０　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．８９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．２６－７．２３（ｍ，１Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ）．
（化合物２１の調製）（実施例２０）
　（４－クロロ－２，３，５－トリフルオロベンゾイル）酢酸エチル（１５０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（５８．０μＬ、０．５９ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で２３時間攪拌した後、トルエン共沸により溶媒を減圧留去した。真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１）で精製することで、化合物２１を１３６ｍｇ（収率７９％）得た。
化合物２１　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９２－７．９７（ｍ，３Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２６－７．２３（ｍ，１Ｈ），３．９４（ｓ，２Ｈ）．
（化合物２２の調製）（実施例２１）
５－［（４－メチルフェニル）スルホニル］－３－オキソペンタン酸エチル（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（５４．０μＬ、０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で４０分攪拌した後、トルエン共沸により溶媒を減圧留去した。真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）で精製することで、化合物２２を７５ｍｇ（収率４４％）得た。
化合物２２　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．７８－７．７２（ｍ，４Ｈ），７．３４－７．３１（ｍ，４Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３４（ｓ，２Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ）．
（化合物２３の調製）（実施例２２）
　アルゴン雰囲気中で（３－メトキシベンゾイル）酢酸エチル（４３．６μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を酢酸（５６３μＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（２４．３μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を加えた。８５℃で２４時間攪拌した後、反応溶液に酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて塩基性にした。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過、減圧留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１～４：１）で精製することで、化合物２３を４６ｍｇ（収率７６％）得た。
化合物２３　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３６－７．３５（ｍ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝２．６，８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．３８（ｓ，２Ｈ）．
（化合物２４の調製）（実施例２３）
　（２－ニトロベンゾイル）酢酸エチル（６００ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）を酢酸（６．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（２７３μＬ、２．７９ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で２１時間攪拌した後、トルエン共沸により溶媒を減圧留去した。真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製することで、化合物２４を１０４ｍｇ（収率１５％）得た。
化合物２４　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ（ｐｐｍ）１２．０４（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１Ｈ），７．７－７．６９（ｍ，３Ｈ），７．５８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．８６（ｓ，１Ｈ）．
　化合物２４はＤＭＳＯ－ｄ６中でエノール体として観測された。
（化合物２５の調製）（実施例２４）
　（３－ニトロベンゾイル）酢酸エチル（３００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を酢酸（４．０ｍＬ）に溶解し、フェニルヒドラジン（１３７μＬ、１．３９ｍｍｏｌ）を加えた。８０℃で２１時間攪拌した後、トルエン共沸により溶媒を減圧留去した。真空ポンプにより乾燥を行い、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製することで、化合物２５を２４２ｍｇ（収率６８％）得た。
化合物２５　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）７．９４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６９（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４４－７．４１（ｍ，４Ｈ），７．２２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｓ，２Ｈ）．
（化合物２６の調製）（実施例２５）
　アルゴン雰囲気中、ヒドラジノ酢酸エチル塩酸塩（１．０４ｇ，６．７４ｍｍｏｌ）と酢酸ナトリウム（６１５ｍｇ，７．５０ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１０ｍＬ）に溶解し、室温で５分間攪拌した後に、４，４，４－トリフルオロアセト酢酸エチル（１．００ｍＬ，６．８０ｍｍｏｌ）を加えて２４時間加熱還流した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：酢酸＝１９０：１０：２）で精製することで、エチルエステル体Ａの粗生成物を得た。得られた粗生成物を酢酸エチルに加熱溶解させ、ヘキサンで析出させることでエチルエステル体Ａを５１３ｍｇ（収率３２％）得た。エチルエステル体Ａのうち２４２ｍｇ（１．０１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（６．８ｍＬ）とメタノール（１０．２ｍＬ）の混合溶媒に溶解させた後、水酸化ナトリウム水溶液（６０３ｍＭ，３．４ｍＬ）を加え室温で１９時間攪拌した。氷冷下で反応溶液に４Ｍ塩酸を加えて反応溶液をｐＨ６．０にし、溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２：１～１：４）で精製することで、カルボン酸体Ａの粗生成物（２６８ｍｇ）を得た。得られたカルボン酸体Ａの粗生成物をアルゴン雰囲気中でＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解させ、１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ：２０９ｍｇ，１．５３ｍｍｏｌ）、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（２５０μＬ，１．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２６０μＬ，１．５３ｍｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ：３００ｍｇ，１．５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１．５ｍＬ）を加え、室温で２３時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１～３５：１）で精製することで、化合物２６を２８３ｍｇ（収率６７％、２工程）得た。
化合物２６　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－Ｄ６）：δ（ｐｐｍ）１１．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．１６（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），５．７１（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），３．６４－３．５９（ｍ，２Ｈ），３．５８－３．５１（ｍ，８Ｈ），３．４７－３．４３（ｍ，２Ｈ），３．４０－３．３８（ｍ，２Ｈ），３．２８－３．２２（ｍ，２Ｈ）．
（化合物２７の調製）（実施例２６）
　アルゴン雰囲気中、ヒドラジノ酢酸エチル塩酸塩（１．０４ｇ，６．７２ｍｍｏｌ）と酢酸ナトリウム（６０７ｍｇ，７．４０ｍｍｏｌ）を無水エタノール（２０ｍＬ）に溶解し、室温で５分間攪拌した後に、３－オキソ－３－（４－ピリジル）プロピオン酸エチル（１．４３ｇ，７．４１ｍｍｏｌ）を加えて２２時間加熱還流した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１～２５：１）で精製することでエチルエステル体Ｃを５６９ｍｇ（収率３４％）得た。エチルエステル体Ｃのうち３０１ｍｇ（１．２２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８．２ｍＬ）とメタノール（１２．３ｍＬ）の混合溶媒に溶解させた後、水酸化ナトリウム水溶液（６０３ｍＭ，４．１ｍＬ）を加え室温で１９時間攪拌した。氷冷下で反応溶液に４Ｍ塩酸を加えて反応溶液をｐＨ６．０にし、溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝３：１～１；１）で精製することで、カルボン酸体Ｃの粗生成物（３１６ｍｇ）を得た。得られた粗生成物をＤｉａｉｏｎ　ＨＰ－２０により脱塩処理を行い、カルボン酸体Ｃを１９０ｍｇ（収率７１％）得た。得られたカルボン酸体Ｃのうち９８ｍｇ（４６６μｍｏｌ）をアルゴン雰囲気中でＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解させ、１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ：１００ｍｇ，７３５μｍｏｌ）、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（１１０μＬ，５５４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１１５μＬ，６７６μｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ：２１２ｍｇ，６７８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１．５ｍＬ）を加え、室温で１９時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝４０：１～１０：１）で精製し化合物２７の粗生成物を得た。粗生成物を再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：酢酸＝２５０：１０：０．２６～２００：１０：０．２１）で精製し、化合物２７を４３ｍｇ（収率２３％）得た。
化合物２７　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）８．５２（ｂｒｓ，２Ｈ），７．８０－７．７６（ｍ，２Ｈ），４．７２（ｓ，２Ｈ），３．６５－３．５９（ｍ，１２Ｈ），３．５９－３．５５（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３７－３．３４（ｍ，２Ｈ）．
　以下の実施例では、ピラゾロン化合物をガラクトピラノシドへ導入し、ピラゾロン－ガラクトース複合体を合成した。
《実施例２７～４１》（一般的な合成例）
　ピラゾロン－ガラクトース複合体である化合物２８～４２の合成は以下の手順で行った。
　５０ｍＬのポリプロピレン製遠心チューブに４－ニトロフェニルβ－Ｄ－ガラクトピラノシドの水溶液（５０ｍＭ，７２０μＬ）、リン酸バッファー（１．０Ｍ，ｐＨ７．０，１．８ｍＬ）、水（３２．５ｍＬ）、ガラクトースオキシダーゼの水溶液（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ製，９０ｕｎｉｔｓ／ｍＬ，６２３μＬ）、ワサビ由来ペルオキシダーゼの水溶液（オリエンタル酵母社製，３ｕｎｉｔｓ／ｍＬ，３９６μＬ）、ピラゾロン化合物のＤＭＦ溶液（２５ｍＭ，５．７６ｍＬ）を加え、振とう恒温槽中３０℃、振とう速度１６５回／分で２４時間振とうさせる。反応溶液を１Ｌのナスフラスコに移し替え、メタノールを加え、溶媒を減圧下濃縮する。真空ポンプで乾燥後、得られた残渣をメタノールに溶解し不溶物を濾別する。得られた濾液を減圧下濃縮し、得られた残渣を精製することでピラゾロン－ガラクトース複合体が得られる。
（化合物２８の調製）（実施例２７）
原料のピラゾロン化合物：化合物１１
収量２２ｍｇ（収率７９％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）
化合物２８　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．８５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４９－７．４６（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝５．４，８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８８（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８７－３．８４（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｄｄ，Ｊ＝３．３，９．６Ｈｚ，１Ｈ）．
（化合物２９の調製）（実施例２８）
原料のピラゾロン化合物：化合物１３
収量２０ｍｇ（収率７０％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１～７：１）
化合物２９　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．９１－７．８２（ｍ，４Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５８－７．５３（ｍ，４Ｈ），７．５０－７．３０（ｍ，４Ｈ），６．９９－６．９２（ｍ，１Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９０－３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７２（ｄｄ，Ｊ＝９．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ），３．６４－３．５９（ｍ，１Ｈ）．
（化合物３０の調製）（実施例２９）
原料のピラゾロン化合物：化合物１４
収量２１ｍｇ（収率９１％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１～１：１）
化合物３０　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）８．３１（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），８．０３－８．０１（ｍ，２Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．３９（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｄｄ，Ｊ＝３．３，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ）．
（化合物３１の調製）（実施例３０）
収量１１ｍｇ（収率５２％）
原料のピラゾロン化合物：１－メチル－３－トリフルオロメチル－５－ピラゾロン
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５「：１～１：１）後に、再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５：１～２：１）。粗生成物を分取薄層クロマトグラフィー（２０×２０ｃｍ、展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝２：１）
化合物３１　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）８．０２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５２（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６７（ｓ，３Ｈ），３．６３（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．５７（ｄｄ，Ｊ＝３．２，９．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｓ，１Ｈ），３．３５（ｓ，１Ｈ）．
（化合物３２の調製）（実施例３１）
原料のピラゾロン化合物：化合物１５
収量２３ｍｇ（収率８５％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１～８：１）
化合物３２　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ．：Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ４０Ｈ３４Ｎ７Ｏ９ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋：７５６．２４１，Ｆｏｕｎｄ　７５６．１６５．
（化合物３３の調製）（実施例３２）
原料のピラゾロン化合物：化合物１６
収量３０ｍｇ（収率８９％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１～８：１）の後、再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１～５：１）
化合物３３　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）８．１６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５６－７．２９（ｍ，９Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝３．４，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６４－３．５９（ｍ，３Ｈ）．
（化合物３４の調製）（実施例３３）
原料のピラゾロン化合物：化合物１７
収量２７ｍｇ（収率９９％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８０：２５：５）
化合物３４　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．８９－７．８３（ｍ，５Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），５．００－４．９８（ｍ，２Ｈ），４．２８（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８９－３．８３（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｄｄ，Ｊ＝３．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６０（ｓ，１Ｈ）．
（化合物３５の調製）（実施例３４）
原料のピラゾロン化合物：化合物１８
収量１６ｍｇ（収率５１％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８５：２０：１）
化合物３５　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）８．８１（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６２（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９１－７．８１（ｍ，７Ｈ），７．５５－７．５２（ｍ，３Ｈ），７．４７－７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３７－７．３４（ｍ，２Ｈ），７．３１－７．２８（ｍ，１Ｈ），５．０１－４．９９（ｍ，２Ｈ），４．２５（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５８－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝３．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ）．
（化合物３６の調製）（実施例３５）
原料のピラゾロン化合物：化合物１９
収量２２ｍｇ（収率８１％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８０：２５：５）
化合物３６　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）９．１６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，２Ｈ），７．８０－７．７６（ｍ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９３－６．９０（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．９５－４．８８（ｍ，３Ｈ），４．０９（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７１（ｄｄ，Ｊ＝３．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｂｒｓ，１Ｈ）．
（化合物３７の調製）（実施例３６）
原料のピラゾロン化合物：化合物２０
収量３１ｍｇ（収率９２％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８５：２０：１）
化合物３７　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．８３－７．７７（ｍ，３Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４３－７．３５（ｍ，２Ｈ）７．３２－７．２８（ｍ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝７．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６４－３．５６（ｍ，５Ｈ），３．３２（ｓ，１Ｈ）．
（化合物３８の調製）（実施例３７）
原料のピラゾロン化合物：化合物２１
収量２６ｍｇ（収率７８％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８５：１５：１）
化合物３８　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．８９－７．８６（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７４－７．７０（ｍ，３Ｈ），７．５５（ｄｄ，Ｊ＝１．２，７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．２，７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），６．９６－６．９３（ｍ，２Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄｄ，Ｊ＝１．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６７（ｄｄ，Ｊ＝３．０，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｓ，１Ｈ）．
（化合物３９の調製）（実施例３８）
原料のピラゾロン化合物：化合物２２
収量３１ｍｇ（収率８９％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：水＝８５：２０：１）
化合物３９　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．７７（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，２Ｈ），７．５４－７．５０（ｍ，４Ｈ），７．４１－７．３９（ｍ，４Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８７（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６３－３．６１（ｍ，１Ｈ），３．５８－３．５２（ｍ，３Ｈ），３．３９－３．３４（ｍ，１Ｈ），３．０２－２．９１（ｍ，３Ｈ），２．８３－２．７８（ｍ，１Ｈ），２．７４－２．６９（ｍ，１Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ）．
（化合物４０の調製）（実施例３９）
原料のピラゾロン化合物：化合物２３
収量２０ｍｇ（収率７０％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）後に、再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１～３０：１）。粗生成物を分取薄層クロマトグラフィー（２０×２０ｃｍ、展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝７：１）後にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝３０：１～２０：１）
化合物４０　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．９１－７．８８（ｍ，２Ｈ），７．８５－７．８４（ｍ，２Ｈ），７．７７－７．７５（ｍ，２Ｈ），７．５７－７．５４（ｍ，２Ｈ），７．５０－７．４７（ｍ，２Ｈ），７．４０－７．３８（ｍ，１Ｈ），７．５５－７．３２（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．９８－６．９６（ｍ，２Ｈ），６．９１－６．９０（ｍ，１Ｈ），６．８６－６．８１（ｍ，３Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８７－３．８４（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ）．
（化合物４１の調製）（実施例４０）
原料のピラゾロン化合物：化合物２４
収量１５ｍｇ（収率４８％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１～５：１）後に、再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝５０：１～２０：１）
化合物４１　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．９９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，３Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，３Ｈ），７．４５－７．３３（ｍ，５Ｈ），７．０５（ｂｒｓ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．１６（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｄｄ，Ｊ＝７．８，９．６Ｈｚ，１Ｈ）３．７０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，９．６Ｈｚ，１Ｈ）．
（化合物４２の調製）（実施例４１）
原料のピラゾロン化合物：化合物２５
収量２１ｍｇ（収率６８％）
精製条件：シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１～１０：１）
化合物４２　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ．：ｃａｌｃｄ．　ｆｏｒ　Ｃ４２Ｈ３３Ｎ７ＮａＯ１３，８６６．２０３，ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋　ｆｏｕｎｄ　８６６．２０６．
《実施例４２～４４》（その他の製法）
（化合物４３の合成）（実施例４２）
　４－ニトロフェニルβ－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（９．５ｍｇ，２９．９μｍｏｌ）に化合物１２（３２．４ｍｇ，１２０μｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）の順で加えた。室温で一時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１５：１５）で精製し、化合物４３を２３ｍｇ（収率９２％）得た。
化合物４３　１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ（ｐｐｍ）７．８６（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５６－７．４３（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１９－７．１４（ｍ，６Ｈ），６．９６－６．９３（ｍ，２Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８７－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．６２－３．５９（ｍ，１Ｈ）．
（化合物４４の調製）（実施例４３）
　４－ニトロフェニルβ－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（２３．０ｍｇ，７２．５μｍｏｌ）を水（７．１ｍＬ）に溶解させ、化合物２６（１１７．１ｍｇ，２８５μｍｏｌ）のＤＭＦ（４．６ｍＬ）を加えた。３７℃で２５時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１～３：１）で精製し、化合物４４を２１ｍｇ（収率２７％）得た。
化合物４４　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ．：ｃａｌｃｄ．　ｆｏｒ　Ｃ４０Ｈ５３Ｆ６Ｎ１３ＮａＯ１７，１１２４．３４８，ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋　ｆｏｕｎｄ　１１２４．２７２．
（化合物４５の調製）（実施例４４）
　４－ニトロフェニルβ－Ｄ－ガラクト－ヘキソジアルド－１，５－ピラノシド（４．８ｍｇ，１５．０μｍｏｌ）に化合物２７（２５．１ｍｇ，５９．８μｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．０ｍＬ）の順で加えた。室温で２４時間攪拌したのち、反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１～３：２）で精製し、化合物４５を１７ｍｇ（収率９９％）得た。
化合物４５　ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ．：ｃａｌｃｄ．　ｆｏｒ　Ｃ４８Ｈ６１Ｎ１５ＮａＯ１７，１１４２．４２６，ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋　ｆｏｕｎｄ　１１４２．３３７．
《安定性試験》
　実施例２７～４４で得られたピラゾロン誘導体を導入したガラクトピラノシド（化合物２８～４５）のリン酸緩衝液中における安定性を調べた。
（ピラゾロン誘導体を導入したガラクトピラノシドの安定性の検討）
　ピラゾロンを導入したガラクトピラノシド（化合物２８～４５）をＤＭＳＯに溶解し、５ｍＭの溶液とした。この５ｍＭ溶液（７５μＬ）に、０．１ＭのｐＨ７．４リン酸緩衝液（３７５μＬ）、水（１８７．５μＬ）、ＤＭＳＯ（１１２．５μＬ）を加え、３７℃に加熱した。１～１４日後の反応液の一部を逆相ＨＰＬＣで測定し、ピーク面積から化合物２８～４５の残存率を算出した（図２～図５）。その結果、Ｒ１が電子求引基であるピラゾロン化合物とホルミル基含有化合物から得られたピラゾロン化化合物２８～４５は、コントロール化合物である化合物５（Ｒ１＝Ｍｅ）と比較して、安定が向上することが明らかとなった。
［逆相カラムを用いたＨＰＬＣ分析条件］
（化合物２８～４５）
ＨＰＬＣ：ＧＬ－７７００（ジーエルサイエンス株式会社）
カラム：Ｉｎｅｒｔ　ｓｕｓｔａｉｎ　ＡＱ－１８，５μｍ，Φ４．６×２５０ｍｍ（ジーエルサイエンス株式会社）
カラム温度：３０℃
移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含むＨ２Ｏ溶液（ｖ／ｖ）
移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡを含むＭｅＣＮ溶液（ｖ／ｖ）
グラジエント（移動相Ｂ％）：化合物２８、化合物２９、化合物３５、化合物３９、化合物４０、化合物４２、化合物４３、５０％（０分）、８０％（３０分）、化合物３０、１０％（０分）、４０％（３０分）、化合物３１、化合物４５、２０％（０分）、５０％（３０分）化合物３２、化合物３４、化合物４４、３０％（０分）、６０％（３０分）、化合物３３、６０％（０分）、９０％（３０分）、化合物３６、化合物４１、４０％（０分）、７０％（３０分）、化合物３７、化合物３８、６５％（０分）、９５％（３０分）。
流速：１．０ｍＬ／分
検出波長：化合物２８、２６２ｎｍ、化合物２９、２７７ｎｍ、化合物３０、２７０ｎｍ、化合物３１、２２６ｎｍ。化合物３２、２８８ｎｍ、化合物３３、２８３ｎｍ、化合物３４、２７４ｎｍ、化合物３５、２７５ｎｍ、化合物３６、２９０ｎｍ、化合物３７、２４５ｎｍ、化合物３８、２５２ｎｍ、化合物３９、２５０ｎｍ、化合物４０、２６２ｎｍ、化合物４１、２５０ｎｍ、化合物４２、２６０ｎｍ、化合物４３、２６５ｎｍ、化合物４４、３０３ｎｍ、化合物４５、２９５ｎｍ。
　本発明のピラゾロン化合物を利用すれば、温和な条件で抗体上のホルミル基に対して薬物の導入が可能になり、かつ化学的・生化学的に安定な抗体薬物複合体の製造が可能となることから、医薬品開発への貢献が期待される。また本発明のピラゾロン化合物は、糖鎖の還元末端のホルミル基と安定な修飾化体を形成することができるため、糖鎖の定量的、定性的分析が可能であり、さらに酵素反応による詳細な構造解析も可能となることから、生物学や医学への貢献、特に診断や病理学的解析への貢献が期待される。

Claims (6)

  1. 　下記式（１）：
    （式中、Ｒ１は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、置換された炭素数６～６０のアリール基（ピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環が少なくとも１つの置換基を有し、そして前記置換基はハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基（１位の炭素原子に１以上のハロゲン原子が結合している）、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、炭素数２～６１のアシル基、炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、炭素数１～６０のアルコキシ基、及び炭素数１～６０のアルキル基からなる群から選択される１つ以上であり、但し置換基が炭素数１～６０のアルコキシ基、又は炭素数１～６０のアルキル基の場合、置換基の位置はピラゾロン骨格側に結合しているベンゼン環のメタ位である）、及び下記式（２）～（７）：
    （式中、Ｒ３は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基であり、Ｒ４は、ハロゲン原子、ニトロ基、シアノ基、炭素数１～１０のハロアルキル基、炭素数２～１０のペルフルオロポリエーテル基、カルボキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリール基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシ基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシ基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルコキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルケニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアルキニルオキシカルボニル基、場合により置換されることのある炭素数１～６０のアラルキルオキシカルボニル基、及び／又は場合により置換されることのある炭素数６～６０のアリールオキシカルボニル基であり、式（４）の場合、Ｒ４は０～４個であり、式（５）～（７）の場合、Ｒ４は０～３個である）で表される基、からなる群から選択される電子求引基であり、
    Ｒ２は、ヘテロ原子を含有してもよい炭素数１～１０００の炭化水素基、そして
    ｎは０～２の整数である）
    で表されるピラゾロン化合物。
  2. 　請求項１に記載のピラゾロン化合物を含む、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化剤。
  3. 　請求項１に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ホルミル基含有化合物のピラゾロン化方法。
  4. 　請求項１に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ピラゾロン化化合物の安定化方法。
  5. 　請求項１に記載のピラゾロン化合物と、ホルミル基含有化合物を接触させることを特徴とする、ピラゾロン化化合物の製造方法。
  6. 　請求項５に記載の製造方法によって得られるピラゾロン化化合物。
PCT/JP2023/027102 2022-07-25 2023-07-25 ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤 Ceased WO2024024760A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US18/834,041 US20250129030A1 (en) 2022-07-25 2023-07-25 Pyrazolone compound and pyrazolone agent
JP2024537730A JP7782046B2 (ja) 2022-07-25 2023-07-25 ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤
EP23846490.3A EP4563572A1 (en) 2022-07-25 2023-07-25 Pyrazolone compound and pyrazolone agent

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022118259 2022-07-25
JP2022-118259 2022-07-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024024760A1 true WO2024024760A1 (ja) 2024-02-01

Family

ID=89706371

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2023/027102 Ceased WO2024024760A1 (ja) 2022-07-25 2023-07-25 ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20250129030A1 (ja)
EP (1) EP4563572A1 (ja)
JP (1) JP7782046B2 (ja)
WO (1) WO2024024760A1 (ja)

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5980470A (ja) * 1982-10-29 1984-05-09 Konishiroku Photo Ind Co Ltd オキソノ−ル染料の製造方法
JPH03289653A (ja) * 1990-04-06 1991-12-19 Konica Corp ハロゲン化銀カラー写真感光材料
JPH0485538A (ja) * 1990-07-28 1992-03-18 Konica Corp ハロゲン化銀カラー写真感光材料
JPH08229302A (ja) * 1995-02-24 1996-09-10 Konica Corp 固体微粒子の製造方法および製造装置
JP2003059547A (ja) * 2001-08-17 2003-02-28 Nippon Kayaku Co Ltd 色素増感光電変換素子
JP2005015750A (ja) * 2003-06-24 2005-01-20 Yamada Chem Co Ltd ペリミジン化合物
WO2006129587A1 (ja) * 2005-05-30 2006-12-07 Genecare Research Institute Co., Ltd. ピラゾロン誘導体を含有する医薬組成物
WO2006129583A1 (ja) * 2005-05-30 2006-12-07 Genecare Research Institute Co., Ltd. ピラゾロン誘導体
JP2009093909A (ja) * 2007-10-09 2009-04-30 Konica Minolta Business Technologies Inc 色素増感光電変換素子及びその製造方法
CN110128345A (zh) * 2019-05-13 2019-08-16 上海大学 一种吡唑酮衍生物的制备方法

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5980470A (ja) * 1982-10-29 1984-05-09 Konishiroku Photo Ind Co Ltd オキソノ−ル染料の製造方法
JPH03289653A (ja) * 1990-04-06 1991-12-19 Konica Corp ハロゲン化銀カラー写真感光材料
JPH0485538A (ja) * 1990-07-28 1992-03-18 Konica Corp ハロゲン化銀カラー写真感光材料
JPH08229302A (ja) * 1995-02-24 1996-09-10 Konica Corp 固体微粒子の製造方法および製造装置
JP2003059547A (ja) * 2001-08-17 2003-02-28 Nippon Kayaku Co Ltd 色素増感光電変換素子
JP2005015750A (ja) * 2003-06-24 2005-01-20 Yamada Chem Co Ltd ペリミジン化合物
WO2006129587A1 (ja) * 2005-05-30 2006-12-07 Genecare Research Institute Co., Ltd. ピラゾロン誘導体を含有する医薬組成物
WO2006129583A1 (ja) * 2005-05-30 2006-12-07 Genecare Research Institute Co., Ltd. ピラゾロン誘導体
JP2009093909A (ja) * 2007-10-09 2009-04-30 Konica Minolta Business Technologies Inc 色素増感光電変換素子及びその製造方法
CN110128345A (zh) * 2019-05-13 2019-08-16 上海大学 一种吡唑酮衍生物的制备方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ACS MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS (U.S.A., vol. 7, 2016, pages 994 - 998
ANGELASTRO ANTONIO, BARKHANSKIY ALEXEY, MATTEY ASHLEY P., PALLISTER EDWARD G., SPIESS REYNARD, GOUNDRY WILLIAM, BARRAN PERDITA, FL: "Galactose Oxidase Enables Modular Assembly of Conjugates from Native Antibodies with High Drug‐to‐Antibody Ratios**", CHEMSUSCHEM, WILEY-VCH, DE, vol. 15, no. 9, 6 May 2022 (2022-05-06), DE , XP093133611, ISSN: 1864-5631, DOI: 10.1002/cssc.202102592 *
CHEMBIOCHEM (GERMANY, vol. 21, 2020, pages 3580 - 3593
JANSON NILS, KRÜGER TOBIAS, KARSTEN LENNARD, BOSCHANSKI MAREILE, DIERKS THOMAS, MÜLLER KRISTIAN M., SEWALD NORBERT: "Bifunctional Reagents for Formylglycine Conjugation: Pitfalls and Breakthroughs", CHEMBIOCHEM, JOHN WILEY & SONS, INC., HOBOKEN, USA, vol. 21, no. 24, 11 December 2020 (2020-12-11), Hoboken, USA, pages 3580 - 3593, XP093100013, ISSN: 1439-4227, DOI: 10.1002/cbic.202000416 *
KUDIRKA ROMAS A., BARFIELD ROBYN M., MCFARLAND JESSE M., DRAKE PENELOPE M., CARLSON ADAM, BAÑAS STEFANIE, ZMOLEK WES, GAROFALO ALB: "Site-Specific Tandem Knoevenagel Condensation–Michael Addition To Generate Antibody–Drug Conjugates", ACS MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, US, vol. 7, no. 11, 10 November 2016 (2016-11-10), US , pages 994 - 998, XP093133609, ISSN: 1948-5875, DOI: 10.1021/acsmedchemlett.6b00253 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP4563572A1 (en) 2025-06-04
JPWO2024024760A1 (ja) 2024-02-01
US20250129030A1 (en) 2025-04-24
JP7782046B2 (ja) 2025-12-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5122462B2 (ja) ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤
JP6181168B2 (ja) ある種の２−（ピリジン−３−イル）チアゾール類の製造方法
CN102164898A (zh) 用于合成卤化的环状化合物的方法
CN101528700A (zh) 用于制备伊马替尼的方法及其中间体
CN101952252A (zh) 哌啶-3-基氨基甲酸烷基酯的光学拆分方法及其中间体
CN101171237B (zh) 用于制备任选2-取代的1，6-二氢-6-氧代-4-嘧啶羧酸的方法
JP7782046B2 (ja) ピラゾロン化合物及びピラゾロン化剤
US6891041B2 (en) Method for producing 4-(heteroaryl-methyl)-halogen-1(2H)-phthalazinones
CN101977899A (zh) 哌啶-3-基氨基甲酸酯化合物的制造方法及其光学拆分方法
WO1998057923A1 (en) New production process
EP1065202B1 (en) 6-(alpha-fluoroalkyl)-4-pyrimidones and process for producing the same
CN101160288B (zh) 烟酸衍生物或其盐的制造方法
CN1362948A (zh) 3s－3－氨基－3－芳基丙酸及其衍生物的制备方法
CN108864113B (zh) 一种mdm2-hdac双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途
JP3028168B2 (ja) ベンゼンスルホンアミド誘導体の製造方法
CN1376145A (zh) 间硝基苯酚衍生物及其制备方法
JP4110633B2 (ja) ３−アミノ−４−フルオロ−２−不飽和カルボン酸エステル及びその製法
KR101152607B1 (ko) ６-[４-(２-피페리딘-1-일-에톡시)-페닐]-３-피리딘-４-일-피라졸로[１,５-ａ]피리미딘의 제조방법
US20070037854A1 (en) Process for preparing sulfonamide-containing indole compounds
CN110669027A (zh) 化合物和其酯、其制备方法和用途
TW202515868A (zh) 蘭尼菲諾(lanifibranor)中間體之合成
JP4055246B2 (ja) ５−クロロ−６−（α−フルオロアルキル）−４−ピリミドン及びその製法
WO1998017629A1 (en) 1,4-benzoquinone derivatives
WO2006003974A1 (ja) 環状ジアミン誘導体の製造法
JPH09227532A (ja) ２−ニトロイミノヘキサヒドロ−１，３，５−トリアジン類の製造法

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23846490

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2024537730

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 18834041

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2023846490

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2023846490

Country of ref document: EP

Effective date: 20250225

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 18834041

Country of ref document: US

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2023846490

Country of ref document: EP