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WO2021033994A1 - 단삼 또는 작약 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

단삼 또는 작약 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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WO2021033994A1
WO2021033994A1 PCT/KR2020/010684 KR2020010684W WO2021033994A1 WO 2021033994 A1 WO2021033994 A1 WO 2021033994A1 KR 2020010684 W KR2020010684 W KR 2020010684W WO 2021033994 A1 WO2021033994 A1 WO 2021033994A1
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WO
WIPO (PCT)
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extract
peony
lipid metabolism
mixed
pharmaceutical composition
Prior art date
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Application number
PCT/KR2020/010684
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English (en)
French (fr)
Inventor
송석진
오별님
차미란
강선희
손주아
이윤성
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Uscarepharm Co ltd
Original Assignee
Uscarepharm Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by Uscarepharm Co ltd filed Critical Uscarepharm Co ltd
Priority to US17/628,235 priority Critical patent/US20220257688A1/en
Publication of WO2021033994A1 publication Critical patent/WO2021033994A1/ko
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Priority to US19/172,673 priority patent/US20250235497A1/en
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    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Definitions

  • the present invention relates to a composition for preventing or treating lipid metabolism diseases containing an extract of Salvia miltiorrhiza or Paeonia lactiflora as an active ingredient.
  • Triglyceride is a type of lipid. It is a representative storage fat in the form of three molecules of fatty acids bound to one molecule of glycerin, and accounts for 95% of body fat. Recently, the triglyceride problem is serious, as about a third of Koreans have a blood triglyceride concentration of 150 md/dL.
  • abdominal obesity is closely related to triglycerides.
  • Abdominal obesity is caused by an increase in the amount of fat cells in the mesentery, and fat cells in the mesentery are easily decomposed, so that the decomposed fat flows into the nearby liver or is accumulated as fat in the abdomen.
  • Fatty acids introduced into the liver are excreted into the blood and cause hypertriglyceridemia or increase blood sugar. Therefore, abdominal obesity and fatty liver can be said to be closely related to blood triglyceride levels.
  • lipid is a concept that encompasses cholesterol in addition to triglycerides, and general lipid tests include triglycerides, total cholesterol, low density lipoprotein (LDL) cholesterol, and high density lipoprotein (HDL) cholesterol.
  • LDL cholesterol is also known as'bad cholesterol', and high LDL cholesterol levels increase the risk of heart attack or stroke.
  • HDL cholesterol is also known as'good cholesterol', and high HDL cholesterol levels reduce the risk of heart attack or stroke.
  • hyperlipidemia hyperlipidemia
  • hypercholesterolemia hypertriglyceridemia
  • dyslipidemia is a disease name in the concept encompassing the above diseases.
  • Diagnosis of dyslipidemia is diagnosed as dyslipidemia if an abnormality is found in any of the following items when measured two or more times.
  • Reference values of 200 mg/dL or less total cholesterol, 130 mg/dL or less LDL cholesterol, 60 mg/dL or more HDL cholesterol, and less than 150 mg/dL triglycerides mean target values for people without risk factors such as heart disease and stroke. The normal range of people with risk factors may vary.
  • statin In the treatment of dyslipidemia, drugs such as statin, fibrate, nicotinic acid, ezetimibe and omega-3 fatty acids are taken alone or in combination. There are methods and so on.
  • statins cause hepatotoxicity and myopathy, and fibrates can cause gallstones.
  • Nicotinic acid can cause skin flushing, digestive problems, liver toxicity, gout, etc., and ezetimibe can increase intestinal gas and cause constipation.
  • omega-3 fatty acids not only does it reduce the ease of use due to fishy smell and high doses, but also has serious side effects with currently used drugs such as skin rash, so a safe and effective treatment for side effects is required.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating lipid metabolism diseases and a health functional food composition containing an extract derived from a natural product as an active ingredient.
  • the present invention provides a health functional food composition for improving blood lipids containing an extract derived from a natural product as an active ingredient.
  • the pharmaceutical composition for preventing or treating lipid metabolic diseases according to the present invention may contain, as an active ingredient, a Salvia miltiorrhiza extract, a peony extract, a Paeonia lactiflora extract, or a mixed extract of a ginseng and peony.
  • the health functional food composition for preventing or improving lipid metabolic diseases according to the present invention may contain a sweet ginseng extract, a peony extract, or a mixed extract of sweet ginseng and peony as an active ingredient.
  • the health functional food composition for improving blood lipids according to the present invention may contain a sweet ginseng extract, a peony extract, or a mixed extract of sweet ginseng and peony as an active ingredient.
  • Dansam extract, peony extract or mixed extract of sweet ginseng and peony inhibits the differentiation of adipocytes into adipocytes, reduces the content of triglycerides and cholesterol in the blood, and effectively inhibits the production of fatty liver and visceral fat, It can be usefully used as a pharmaceutical and food composition for the prevention, improvement or treatment of lipid metabolism diseases.
  • the extract can safely and effectively prevent, improve or treat lipid metabolism diseases since it does not have side effects.
  • 1 is a graph showing the effect of inhibiting fat accumulation in hepatocytes according to treatment with a Dansam or Peony extract, or a mixed Dansam and Peony extract according to an experimental example of the present invention.
  • Figure 2 is a graph showing the change in triglyceride (TG) content according to the treatment of the extract of sweet ginseng or peony extract, or a mixed extract of sweet ginseng and peony according to an experimental example of the present invention.
  • TG triglyceride
  • Figure 3 is a graph showing the change in cholesterol content according to the treatment of Dansam or Peony extract, or a mixture of Dansam and Peony extract according to an experimental example of the present invention, where A is total cholesterol content, B is LDL cholesterol content, C is HDL cholesterol content Represents.
  • the present inventor has searched for natural product-derived materials that effectively prevent or treat diseases caused by lipid accumulation in blood or diseases caused by adipocyte differentiation by effectively reducing blood lipids without accompanying side effects, and 100 kinds of natural product extracts Five materials were selected from the library. Was selected for which efficacy is the best Salvia miltiorrhiza and peony as the final material, the efficacy test results for the extract of mixed crude drugs of the finally selected for two species, Salvia miltiorrhiza and peony mixed extract in vitro (in vitro) or in vivo (in In vivo ), by inhibiting the differentiation of adipocytes and suppressing the production of triglycerides and cholesterol, the present invention was completed by confirming that it is effective in improving blood lipids.
  • Danshen (Salvia miltiorrhiza) is referred to as a perennial plant belonging to the Lamiaceae, Salvia miltiorrhiza up the color resembling the shape of ginseng red.
  • the dried roots of Danseng have been traditionally used to improve blood circulation and treat congestion, and are also referred to as Geukseoncho, Mokyangyu, Bunmacho, Red Ginseng and Red Ginseng.
  • prevention means any action of inhibiting or delaying the onset of at least one symptom of lipid metabolism disease or lipid metabolism disease by administration of the pharmaceutical composition or health functional food composition according to the present invention do.
  • prevention includes treatment of a subject with remission of the disease to prevent or prevent recurrence.
  • treatment means alleviating, reducing, or eliminating at least one symptom of a lipid metabolism disease or lipid metabolism disease by administration of the pharmaceutical composition according to the present invention, etc. Means action.
  • the term "improvement” refers to ameliorating, reducing, or eliminating at least one symptom of a lipid metabolism disease or a lipid metabolism disease by ingestion of the health functional food composition according to the present invention, etc. It means all the actions you do.
  • triglyceride is a type of lipid, and can be mixed with “triglyceride.” Among the energy in the body that is not used is accumulated in the subcutaneous fat, most of which is accumulated as triglyceride. , It can act as a major cause of arteriosclerosis, diabetes, and obesity along with cholesterol.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of lipid metabolism diseases, comprising a Salvia miltiorrhiza extract, a Paeonia lactiflora extract, or a mixed extract of Salvia miltiorrhiza as an active ingredient.
  • the extract of sweet ginseng, the extract of peony or the mixed extract of the extract of sweet ginseng and peony may be extracted with any one solvent selected from the group consisting of water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, and a mixed solvent thereof. And, preferably, it may be an alcoholic extract extracted with an aqueous ethanol solution of 60 to 80% by weight, more preferably an aqueous ethanol solution of 70% by weight, but is not limited thereto. According to an experimental example of the present invention, the extract yield of the Dansam and peony were the highest in a 70% by weight aqueous ethanol solution, and the triglyceride inhibitory effect and the adipocyte differentiation inhibitory effect were also the most excellent.
  • any one of methods such as hot water extraction, cold precipitation extraction, reflux cooling extraction, solvent extraction, steam distillation method, ultrasonic extraction method, elution method, and compression method may be used.
  • the desired extract may be further subjected to a conventional fractionation process, or may be purified using a conventional purification method.
  • the extract may be prepared in a powder state by additional processes such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying of the primary extract extracted by the hot water extraction or solvent extraction method described above. Further, the primary extract was further purified by using various chromatography such as silica gel column chromatography, thin layer chromatography, high performance liquid chromatography, etc. You can also get Therefore, in the present invention, the mixed extract of sweet ginseng and peony is a concept including all extracts, fractions and purified products obtained in each step of extraction, fractionation, or purification, and their dilutions, concentrates, or dried products.
  • the extract is extracted by a reflux cooling method using alcohol (ethanol) as an extraction solvent, and the extract is obtained by concentrating and drying under reduced pressure, but an extraction solvent for extracting the active ingredients of Dansam and peony And if it is an extraction method, it is not limited thereto.
  • alcohol ethanol
  • an extraction solvent for extracting the active ingredients of Dansam and peony And if it is an extraction method it is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may contain as an active ingredient the single extract of the Dansam extract or the peony extract as an active ingredient, and may contain a mixed extract obtained by mixing the Dansam and Peony extract as an active ingredient.
  • the mixed extract may be a mixture of the Dansam and peony at a weight ratio of (0.1 to 10): 1, preferably (0.2 to 5): 1, more preferably, a mixture at a weight ratio of 1:1 have.
  • a weight ratio of (0.1 to 10): 1, preferably (0.2 to 5): 1, more preferably, a mixture at a weight ratio of 1:1 have. According to an experimental example of the present invention, it was found that the triglyceride inhibitory effect and the adipocyte differentiation inhibitory effect were the most excellent in the mixed extract extracted by mixing Dansam and peony at a weight ratio of 1:1.
  • the mixed extract obtained by mixing the sweet ginseng and peony may be extracted with a 70% by weight aqueous ethanol solution by mixing the sweet ginseng and peony at the same weight ratio.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may inhibit the differentiation of adipocytes into adipocytes, suppress the accumulation of triglycerides in adipocytes or hepatocytes, and reduce blood triglycerides or blood cholesterol. In addition, it can effectively inhibit the production of fatty liver and visceral fat.
  • the extract of sweet ginseng, the extract of peony or the extract of the mixture of sweet ginseng and peony effectively reduces blood triglycerides, total cholesterol and LDL cholesterol content, and increases HDL cholesterol content in animal experiments.
  • the mixed extract of dansam and peony effectively reduced fatty liver and visceral fat in animal experiments. Due to this effect, the composition can be used as a pharmaceutical composition for preventing or treating lipid metabolic diseases.
  • the lipid metabolism disease may be one or more diseases selected from the group consisting of dyslipidemia, fatty liver, and obesity, but is not limited thereto.
  • the dyslipidemia is a condition in which blood lipids are increased or decreased than normal, more specifically, total cholesterol, LDL cholesterol, and triglycerides in the blood are increased or HDL cholesterol is reduced, hypertriglyceridemia, Hypercholesterolemia or hyperlipidemia may be included, but is not limited thereto.
  • Hypertriglyceridemia refers to an increase in triglycerides in the blood
  • hypertriglyceridemia refers to an increase in cholesterol in the blood, resulting in high total cholesterol and LDL cholesterol.
  • hyperlipidemia is a state in which lipids including cholesterol and triglycerides are increased in the blood, thereby increasing the risk of coronary artery disease such as arteriosclerosis or myocardial infarction.
  • the fatty liver is a reversible disease caused by an increase in fat content due to accumulation of excess fat, mainly triglycerides in the liver, and may also appear in conjunction with diseases such as hyperlipidemia.
  • obesity may include abdominal obesity related to the accumulation of visceral fat.
  • the visceral fat is a tissue made of fat cells in the human body and is also called white adipose tissue.
  • White adipose tissue is distributed in the subcutaneous and posterior abdominal cavity, and is a tissue that stores energy in the form of triglyceride, which accounts for more than 80% of fat cells.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may further include an adjuvant in addition to the extract.
  • an adjuvant in addition to the extract. Any of the adjuvants known in the art may be used without limitation, but, for example, Freund's complete adjuvant or incomplete adjuvant may be further included to increase its effect.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be prepared in a form in which an active ingredient is incorporated in a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the pharmaceutically acceptable carrier includes carriers, excipients, and diluents commonly used in the pharmaceutical field.
  • Pharmaceutically acceptable carriers that can be used in the pharmaceutical composition of the present invention are not limited thereto, but lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, gum acacia, alginate, gelatin, Calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, and mineral oils.
  • compositions of the present invention can be formulated and used in the form of oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, etc., external preparations, suppositories, or sterile injectable solutions according to a conventional method. .
  • Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and such solid preparations include at least one excipient, such as starch, calcium carbonate, sucrose, lactose, and the like in the active ingredient. It can be prepared by mixing gelatin or the like. Further, in addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used.
  • Liquid preparations for oral administration include suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, and other excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to water and liquid paraffin, which are commonly used diluents.
  • Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized formulations, and suppositories.
  • the non-aqueous solvent and suspension propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like may be used.
  • As a base for suppositories witepsol, tween 61, cacao butter, laurin paper, glycerogelatin, and the like may be used.
  • composition according to the present invention can be administered to a subject by various routes. All modes of administration can be expected, for example, by oral, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intraperitoneal injection.
  • the dosage of the pharmaceutical composition according to the present invention is selected in consideration of the age, weight, sex, and physical condition of the individual.
  • the concentration of the extract can be selected in various ways depending on the subject, and is preferably included in the pharmaceutical composition at a concentration of 0.01 to 5,000 ⁇ g/ml. When the concentration is less than 0.01 ⁇ g/ml, pharmaceutical activity may not appear, and when the concentration exceeds 5,000 ⁇ g/ml, toxicity to humans may occur.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be used alone for the prevention or treatment of lipid metabolic diseases, or may be used in combination with surgery or other drug treatment.
  • the present invention provides a health functional food composition for preventing or improving lipid metabolism disease, comprising a Salvia miltiorrhiza extract, Paeonia lactiflora extract, or a mixed extract of Salvia miltiorrhiza as an active ingredient.
  • the present invention provides a health functional food composition for improving blood lipids, containing a Dansam extract, a peony extract, or a mixed extract of Dansam and peony as an active ingredient.
  • the sweet ginseng extract, the peony extract, or the mixed extract of sweet ginseng and peony is extracted with any one solvent selected from the group consisting of water, alcohols having 1 to 4 carbon atoms, and a mixed solvent thereof. It may be, preferably 60 to 80% by weight of ethanol aqueous solution, more preferably 70% by weight of the ethanol aqueous solution extracted may be an alcohol extract, but is not limited thereto.
  • the health functional food composition according to the present invention may contain a single extract of the Dansam extract or the peony extract as an active ingredient, and may contain a mixed extract obtained by mixing the Dansam and Peony extract as an active ingredient.
  • the mixed extract may be a mixture of the Dansam and peony at a weight ratio of (0.1 to 10): 1, preferably (0.2 to 5): 1, more preferably, a mixture at a weight ratio of 1:1 have.
  • the mixed extract may be extracted with a 70% by weight aqueous ethanol solution by mixing the Dansam and peony at the same weight ratio.
  • the health functional food composition according to the present invention can inhibit the differentiation of adipocytes into adipocytes, suppress the accumulation of triglycerides in adipocytes or liver cells, and reduce blood triglycerides or blood cholesterol. have. In addition, it can effectively inhibit the production of fatty liver and visceral fat. Due to this effect, the composition may be used as a functional food composition for preventing or improving lipid metabolism diseases, or a functional food composition for improving blood lipids.
  • the lipid metabolism disease may be one or more diseases selected from the group consisting of dyslipidemia, fatty liver, and obesity, but is not limited thereto.
  • the health functional food composition according to the present invention may be manufactured and processed in the form of tablets, capsules, powders, granules, liquids, pills, etc. for the purpose of preventing or improving lipid metabolic diseases and improving blood lipids.
  • the term'health functional food composition' refers to a food manufactured and processed using raw materials or ingredients having useful functions for the human body according to the Health Functional Food Act No.6727, and with respect to the structure and function of the human body It means ingestion for the purpose of obtaining beneficial effects for health purposes such as controlling nutrients or physiological effects.
  • the health functional food composition according to the present invention may contain various flavoring agents or natural carbohydrates, etc. as an additional ingredient, like a conventional food composition.
  • natural carbohydrate include monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, and the like; And polysaccharides, for example, common sugars such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.
  • flavoring agents can be advantageously used as natural flavoring agents (taumatin), stevia extracts (eg, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.).
  • the health functional food composition according to the present invention may be formulated in the same manner as the pharmaceutical composition to be used as a functional food or added to various foods.
  • Foods to which the composition according to the present invention can be added include, for example, beverages, meat, chocolate, foods, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, candies, ice cream, alcoholic beverages, vitamin complexes, and health supplements. Etc.
  • the composition includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic and natural flavoring agents, coloring agents and heavy weight agents (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and salts thereof, in addition to the active ingredient extract, Alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonates used in carbonated beverages, and the like may be contained.
  • the composition may contain natural fruit juice and flesh for the production of fruit juice beverages and vegetable beverages.
  • the health functional food according to the present invention may contain ordinary food additives, and whether or not it is suitable as a food additive is determined according to the general rules of the Food Additive Code approved by the Ministry of Food and Drug Safety and the general test method, etc. It is judged according to the standards and standards for Items listed in the'Food Additives Code' include, for example, chemical compounds such as ketones, glycine, calcium citrate, nicotinic acid, and cinnamic acid; Natural additives such as reduced pigment, licorice extract, crystalline cellulose, high color pigment, and guar gum; Mixed preparations, such as a sodium L-glutamate preparation, an alkali additive for noodles, a preservative preparation, and a tar color preparation, etc. are mentioned.
  • chemical compounds such as ketones, glycine, calcium citrate, nicotinic acid, and cinnamic acid
  • Natural additives such as reduced pigment, licorice extract, crystalline cellulose, high color pigment, and gu
  • the health functional food in the form of a tablet is granulated by a conventional method of a mixture of the active ingredients of the present invention, such as Dansam extract, Peony extract, or mixed extract of Dansam and peony mixed with excipients, binders, disintegrants and other additives. Then, compression molding may be performed by putting a lubricant or the like, or the mixture may be directly compression molded.
  • the health functional food in the form of a tablet may contain a mating agent or the like, if necessary.
  • hard capsules can be prepared by filling a mixture of the extract with additives such as excipients in a conventional hard capsule, and soft capsules include gelatin with a mixture of the extract and additives such as excipients. It can be prepared by filling in a capsule base such as.
  • the soft capsules may contain a plasticizer such as glycerin or sorbitol, a colorant, a preservative, and the like, if necessary.
  • Ring-shaped health functional foods can be prepared by molding a mixture of the extract, excipients, binders, disintegrants, etc.
  • the health functional food in the form of granules can be prepared in granular form by a mixture of the extract, excipients, binders, disintegrants, and the like by a conventionally known method, and may contain flavoring agents, flavoring agents, and the like, if necessary.
  • the composition has the advantage of not having side effects that may occur when taking drugs for a long time, and has excellent portability, and is used as an adjuvant for preventing or improving lipid metabolism diseases and improving blood lipids. Can be consumed.
  • Quantification of intracellular triglycerides was performed by an enzymatic method using a TG determination kit (Asan Pharm Co., Ltd., Korea). After washing the cells 3 times with phosphate-buffered saline (PBS), lysis buffer (1% Triton X-100 in PBS) was added and sonication was performed at 4°C for 30 seconds. ) And centrifuged (10,000 rpm, 20 min, 4°C) to separate the supernatant. 3 mL of the enzyme solution was added to 20 ⁇ L of the supernatant and reacted at 37° C. for 10 minutes, and then absorbance was measured at 550 nm. Protein content was measured according to the Bradford method using bovine serum albumin (BSA) as a standard reagent.
  • BSA bovine serum albumin
  • Table 1 shows the results of checking the intracellular triglyceride inhibitory effect of 70% alcohol extract for 100 kinds of herbal medicines.
  • the 5 kinds of herbal medicines were selected, and the efficacy of the mixed extracts by weight of each herbal medicine was compared.
  • Table 2 below confirms the intracellular triglyceride inhibitory effect of the extract according to the concentration of each alcohol (0, 20, 50, 70 and 100%) in a single ginseng, peony, loquat leaf, white hair root and fat oil selected according to Experimental Example 1. It is the result.
  • the alcohol concentration was set to 70%, and triglyceride inhibition efficacy was compared under the mixed extraction conditions for each medicine.
  • Table 3 below is a result of confirming the triglyceride inhibitory effect according to the mixed extraction of each medicinal material at 70% alcohol concentration.
  • the cells used in the experiment were 3T3-L1 preadipocytes, 5% CO 2 , DMEM (10% FBS, 100 unit/mL of penicillin G sodium, 100 ⁇ g/mL of streptomycin sulfate) in an incubator at 37°C.
  • DMEM 10% FBS, 100 unit/mL of penicillin G sodium, 100 ⁇ g/mL of streptomycin sulfate
  • 0.5 mM IBMX, 1 ⁇ M DEX and DMEM containing 1 ⁇ g/mL insulin differentiation inducer were exchanged for 2 days to induce differentiation, and then 1 ⁇ g every 2 days. /mL was replaced with DMEM containing insulin. After 10 days of differentiation, cells were used for analysis.
  • 3T3-L1 pro-adipocytes were treated with 0.5 mM IBMX, 1 ⁇ M DEX and 1 ⁇ g/mL insulin to induce differentiation as a control group, and each extract treated for 2 days of differentiation induction was used as a test group.
  • Oil red O staining was performed to confirm the generation of adipocytes in differentiated cells.
  • the cultured cells were washed with PBS, fixed with 3.7% formalin for 10 minutes, washed with deionized water, treated with Oil red O, and stained for 30 minutes at room temperature. Thereafter, the staining solution was removed, washed three times with deionized water, stained cells, dimethyl sulfoxide (DMSO) was added to extract fat, and the absorbance was measured at 510 nm using ELISA (Molecular Devices, USA). I did.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • Table 4 below is a result of confirming the inhibitory effect of adipocyte differentiation of the mixed extract by weight of Dansam and Peony according to Experimental Example 2.
  • HepG2 cells were inoculated into a 24-well culture plate at a concentration of 1 ⁇ 10 5 cells/well, cultured until the cell density reached 80%, and then bovine in order to induce fat accumulation while further growth of cells was inhibited. It was replaced with a medium containing no fetal bovine serum-free medium and containing 2% bovine serum albumin (BSA), and cultured overnight. After removing the culture medium, 100 and 200 ⁇ g of a cell culture solution containing palmitate and extracts of Dansam peony to induce fat accumulation, sodium palmitate-fatty acid free BSA conjugation complex Treated at a concentration of /ml.
  • BSA bovine serum albumin
  • 1 is a graph showing the effect of inhibiting fat accumulation in hepatocytes according to treatment with a Dansam or Peony extract, or a mixed Dansam and Peony extract according to an experimental example of the present invention.
  • Omega-3 fatty acids were used as a positive control. Specifically, after 10 weeks of high fat diet using C57BL/6 APOE-/- mice, the extract was administered daily at a concentration of 400 mg/kg for 7 days. On the day of necropsy, about 500 ⁇ L of blood collected from the abdominal vein from all animals is collected, placed in a tube without anticoagulant, left for 90 minutes, and then centrifuged (3,000 rpm, 10 minutes, room temperature) with the obtained serum. (BS220, Mindray) was used to measure triglycerides (TG).
  • BS220 Mindray
  • Figure 2 is a graph showing the change in triglyceride (TG) content according to the treatment of the extract of sweet ginseng or peony extract, or a mixed extract of sweet ginseng and peony according to an experimental example of the present invention.
  • TG triglyceride
  • the blood cholesterol reduction effect was confirmed through animal experiments for the single extract of single ginseng of Comparative Example 16, the single extract of peony of Comparative Example 17, and the mixed extract of each weight ratio of ginseng and peony of Examples 1 to 11.
  • Omega-3 fatty acids were used as a positive control. Specifically, after 10 weeks of high fat diet using C57BL/6 APOE-/- mice, the extract was administered daily at a concentration of 400 mg/kg for 7 days. On the day of necropsy, about 500 ⁇ L of blood collected from the abdominal vein is collected from all animals, placed in an anticoagulant (EDTA-2K) tube, centrifuged (3,000 rpm, 10 minutes, room temperature) to separate plasma, and then total cholesterol Content, LDL cholesterol and HDL cholesterol content were measured.
  • EDTA-2K anticoagulant
  • Figure 3 is a graph showing the change in cholesterol content according to the treatment of Dansam or Peony extract, or a mixture of Dansam and Peony extract according to an experimental example of the present invention, where A is total cholesterol content, B is LDL cholesterol content, C is HDL cholesterol content Represents.
  • Omega-3 fatty acids were used as a positive control. Specifically, after performing a high fat diet for 10 weeks using C57BL/6 APOE-/- mice, Comparative Examples 16, 17 and Example 6 were administered daily for 7 days at a concentration of 400 mg/kg. On the day of necropsy, liver and abdominal fat (white adipo tissue) were removed from all animals, and then fixed with 10% neutral formalin. The fixed organ tissue was subjected to general tissue processing procedures such as dehydration paraffin and paraffin embedding of the tissue to prepare tissue sections. Specimens were prepared through the cutting process and evaluated by performing hematoxylin & eosin staining.
  • Example 6 when comparing the fat lesions and fat accumulation of the liver caused by the high fat diet of Comparative Examples 16 and 17 and Example 6, it was confirmed that the fat accumulation of the liver was suppressed in Example 6. In addition, it was confirmed that the size of adipocytes of white fat in the abdominal fat increased in the high fat diet decreased in Example 6, thereby affecting visceral fat production.

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Abstract

본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 또는 작약(Paeonia lactiflora) 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하고, 혈중 중성지방 및 콜레스테롤의 함량을 감소시키며, 지방간 및 내장지방 생성을 효과적으로 억제하므로, 지질대사질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 및 식품 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.

Description

단삼 또는 작약 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 또는 작약(Paeonia lactiflora) 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
서구 식생활이 도입되면서 동물성 식품 및 가공식품 등을 통하여 열량의 섭취가 증가함에 따라, 성인병 유발률이 증가하고 있다. 특히 동물성 지방의 과다한 섭취로 인한 혈액 내의 고중성지방과 고콜레스테롤이 만성 성인병의 발병에 중요한 원인으로 여겨지고 있고, 중성지방은 심장 질환 및 비만의 원인이 된다고 보고되어 있으며, 여기에 복부비만, 고혈압, 고중성지방, 고혈당 및 고지혈증으로 대변되는 대사증후군(metabolic syndrome)의 하나의 원인이 되기도 한다.
일반적으로 중성지방이라 일컫는 트리글리세라이드(triglyceride)는 지질의 한 종류로, 글리세린 한 분자에 지방산 3분자가 결합한 형태의 대표적인 저장지방이며, 체지방의 95%를 차지한다. 최근 우리나라 국민의 1/3 가량이 혈중 중성지방 농도가 150 md/dL일 정도로 중성지방 문제가 심각하다.
특히, 복부비만은 중성지방과 밀접한 관련이 있다. 복부비만은 장간막의 지방세포의 양이 증가하여 발생하는 것으로, 장간막의 지방세포는 지방분해가 쉽게 이루어져 분해된 지방이 지리적으로 가까운 간으로 유입되거나 복부에 지방으로 축적된다. 간으로 유입된 지방산은 혈액으로 배출되어 고중성지방혈증을 유발하거나 혈당 증가를 초래하게 되므로, 복부비만 및 지방간은 혈중 중성지방 수치와 밀접한 관련이 있다고 할 수 있다.
한편, 지질(lipid)은 중성지방 외에도 콜레스테롤을 포괄하는 개념으로, 보편적인 지질 검사에는 중성지방, 총 콜레스테롤, LDL(low density lipoprotein) 콜레스테롤, 및 HDL(high density lipoprotein) 콜레스테롤이 포함된다. LDL 콜레스테롤은 일명 '나쁜 콜레스테롤'이며, 높은 LDL 콜레스테롤 수치는 심장마비나 뇌졸중 등의 위험을 증가시킨다. HDL 콜레스테롤은 일명 '좋은 콜레스테롤'로, 높은 HDL 콜레스테롤 수치는 심장마비나 뇌졸중의 위험을 감소시킨다. 이러한 중성지방, 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤이 증가하거나 HDL 콜레스테롤이 감소하는 증상의 질환을 고지혈증(hyperlipidemia), 고콜레스테롤혈증(hypercholesterolemia), 고중성지방혈증(hypertriglyceridemia) 등으로 지칭한다. 통상적으로 이상지질혈증은 상기 질환들을 포괄하는 개념의 질환명이다.
이상지질혈증의 진단은 다음 항목을 2회 이상 측정하였을 시 한 항목이라도 이상이 발견되면 이상지질혈증이라고 진단한다. 총 콜레스테롤 200 mg/dL 이하, LDL 콜레스테롤 130 mg/dL 이하, HDL 콜레스테롤 60 mg/dL 이상 및 중성지방 150 mg/dL 이하의 기준 수치는 심장질환, 뇌졸중 등의 위험 요인이 없는 사람들의 목표치를 의미하는 것이며, 위험 요인이 있는 사람들의 정상범위는 달라질 수 있다.
이상지질혈증의 치료에는 스타틴(statin), 피브레이트(fibrate), 니코틴산(nicotinic acid), 에제티미브(Ezetimibe) 및 오메가-3 지방산(Omega-3 fatty acid) 등의 약물을 단독 복용 혹은 병용하는 방법 등이 있다. 그러나 스타틴은 간독성 및 근육병증을 유발하고, 피브레이트는 담석이 발생할 수 있다. 니코틴산은 피부홍조, 소화 장애, 간독성, 통풍 등을 유발할 수 있으며, 에제티미브는 장 내 가스 증가 및 변비가 생길 수 있다. 또한 오메가-3 지방산의 경우, 비린내 및 고용량 복용 등으로 복용 편의성이 떨어질 뿐만 아니라, 피부발진 등 현재 사용되는 약물에 부작용이 심각한 문제점이 있어, 부작용에서 안전하고 보다 효과적인 치료제가 필요한 실정이다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해, 본 발명은 천연물 유래의 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 천연물 유래의 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈중 지질 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 추출물, 작약(Paeonia lactiflora) 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 지질대사질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물은 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 혈중 지질 개선용 건강기능식품 조성물은 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하고, 혈중 중성지방 및 콜레스테롤의 함량을 감소시키며, 지방간 및 내장지방 생성을 효과적으로 억제하므로, 지질대사질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학 및 식품 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
또한, 상기 추출물은 천연물을 이용함으로써, 부작용을 동반하지 않아 안전하고 효과적으로 지질대사질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 간세포에서의 지방축적 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 중성지방(TG) 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 콜레스테롤 함량 변화를 나타낸 그래프로, A는 총 콜레스테롤 함량, B는 LDL 콜레스테롤 함량, C는 HDL 콜레스테롤 함량을 나타낸다.
도 4는 본 발명의 일 실험예에 따른 혼합 추출물의 조직병리학적 검사 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다.
본 발명자는 부작용을 동반하지 않으면서, 혈중 지질을 효과적으로 감소시킴으로서 혈중 지질 축적에 기인하는 질환 또는 지방세포 분화에 기인하는 질환 등을 효과적으로 예방 또는 치료하는 천연물 유래 소재들을 탐색하였고, 100종의 천연물 추출물 라이브러리에서 5종의 소재를 선별하였다. 그중 효능이 가장 우수한 단삼과 작약을 최종 소재로 선정하였고, 최종적으로 선정된 2종의 생약을 혼합한 추출물에 대한 효능시험 결과, 단삼 및 작약 혼합 추출물이 인 비트로(in vitro) 또는 인 비보(in vivo) 상에서, 지방세포 분화를 억제하고 중성지방 및 콜레스테롤의 생성을 억제하여 혈중 지질 개선에 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서, "단삼(Salvia miltiorrhiza)"이란, 꿀풀과에 속하는 다년생 초본식물로, 인삼의 형태를 닮고 빛깔이 붉어서 단삼이라고 한다. 단삼의 건조된 뿌리는 혈액 순환의 개선과 울혈의 치료를 위해 전통적으로 사용되어 왔으며, 극선초, 목양유, 분마초, 적삼, 홍근 등으로 불리기도 한다.
본 발명에서, "작약(Paeonia lactiflora)"이란, 미나리아재비과의 내한성이 강한 여러해살이풀로, 중부이북지방의 낮은 산지에서 자란다. 예로부터 관상용 및 약용으로 재배되어, 뿌리는 한방에서 약재로 사용되는데, 백작약 뿌리는 빈혈 치료와 진통제로, 적작약 뿌리는 혈압 강하제와 해열제로 이용된다.
본 발명에서, "예방"이란, 본 발명에 따른 약학 조성물 또는 건강기능식품 조성물의 투여에 의해 지질대사질환 또는 지질대사질환의 적어도 하나 이상의 증상의 발생을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, 재발을 예방하거나 방지하기 위해 상기 질병에 차도가 있는 대상의 치료를 포함한다.
본 발명에서, "치료"란, 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여에 의해 지질대사질환 또는 지질대사질환의 적어도 하나 이상의 증상을 완화, 감소, 또는 소멸시키는 등 그 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서, "개선"이란, 본 발명에 따른 건강기능식품 조성물의 섭취에 의해 지질대사질환 또는 지질대사질환의 적어도 하나 이상의 증상이 완화, 감소, 또는 소멸시키는 등 그 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 "트리글리세라이드(triglyceride, TG)란, 지질의 한 종류로, "중성지방"과 혼용될 수 있다. 체내의 에너지 중 사용되지 않는 것은 피하지방으로 축적되는데 그 대부분이 중성지방으로 축적되고, 이는 콜레스테롤과 함께 동맥경화, 당뇨, 비만 등의 주요 원인으로 작용할 수 있다.
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 추출물, 작약(Paeonia lactiflora) 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 약학 조성물에 있어서, 상기 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출된 것일 수 있고, 바람직하게는 60 내지 80 중량%의 에탄올 수용액, 보다 바람직하게는 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 주정 추출물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 일 실험예에 따르면, 70 중량% 에탄올 수용액에서 상기 단삼 및 작약의 추출 수율이 가장 높았고, 트리글리세라이드 억제 효능 및 지방세포분화 억제 효능도 가장 우수한 것으로 나타났다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다. 예를 들면, 상기 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한, 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다. 따라서 본 발명에 있어서 단삼 및 작약 혼합 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 일 제조예에 따르면, 상기 추출물은 주정(에탄올)을 추출용매로 하여 환류 냉각 방법으로 추출하고, 이를 감압 농축 건조하여 추출물을 수득하나, 단삼 및 작약의 유효성분을 추출하기 위한 추출 용매 및 추출 방법이라면, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 상기 단삼 추출물 또는 작약 추출물의 단독 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있고, 상기 단삼 및 작약을 혼합한 혼합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다. 상기 혼합 추출물은 상기 단삼 및 작약이 (0.1 내지 10):1의 중량비로 혼합된 것일 수 있고, 바람직하게는 (0.2 내지 5):1, 보다 바람직하게는 1:1의 중량비로 혼합된 것일 수 있다. 본 발명의 일 실험예에 따르면, 단삼 및 작약을 1:1의 중량비로 혼합하여 추출한 혼합 추출물에서 트리글리세라이드 억제 효능 및 지방세포분화 억제 효능이 가장 우수한 것으로 나타났다.
이에, 본 발명에 따른 약학 조성물에 있어서, 상기 단삼 및 작약을 혼합한 혼합 추출물은 상기 단삼 및 작약이 동일 중량비로 혼합되어 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 것일 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제할 수 있고, 지방전구세포 또는 간세포에서의 중성지방 축적을 억제할 수 있으며, 혈중 중성지방 또는 혈중 콜레스테롤을 감소시킬 수 있다. 또한, 지방간 및 내장지방 생성을 효과적으로 억제할 수 있다. 본 발명의 일 실험예에 따르면, 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물이 동물 실험에서 효과적으로 혈중 중성지방, 총 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤 함량을 감소시키고, HDL 콜레스테롤 함량을 증가시킴을 확인할 수 있었다. 또한, 상기 단삼 및 작약 혼합 추출물은 동물 실험에서 지방간 및 내장지방을 효과적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다. 이러한 효과로 인해, 상기 조성물은 지질대사질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물로 사용될 수 있다. 상기 지질대사질환은 이상지질혈증, 지방간 및 비만으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 이상지질혈증(dyslipidemia)은 혈중 지질이 정상보다 증가하거나 감소한 상태, 보다 상세하게는 혈중에 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤, 중성지방이 증가된 상태거나 HDL 콜레스테롤이 감소된 상태로, 고중성지방혈증, 고콜레스테롤혈증 또는 고지혈증을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 고중성지방혈증은 혈중에 중성지방이 증가된 상태를 말하고, 고콜레스테롤혈증은 혈중에 콜레스테롤이 증가된 상태로 총 콜레스테롤과 LDL 콜레스테롤이 높게 나타난다. 또한, 고지혈증란 혈중에 콜레스테롤과 중성지방을 포함한 지질이 증가된 상태로, 이에 의해 동맥경화나 심근경색과 같은 관상동맥질환의 위험을 증가시킬 수가 있다.
상기 지방간은 간 내 과도한 지방, 주로 중성지방이 쌓여 지방함량이 증가하여 나타나는 가역적 질병으로, 고지혈증 등의 질환과 동반하여 나타나기도 한다.
또한, 비만은 내장지방의 축적과 관련된 복부비만을 포함할 수 있다. 상기 내장지방은 인체 내 지방세포로 이루어진 조직으로 백색지방(white adipose tissue)라고도 한다. 백색지방조직은 피하 및 후복강 등에 분포하며, 지방세포의 80% 이상을 차지하는 중성지방의 형태로 에너지를 저장하는 조직이다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 추출물 이외에 보조제(adjuvant)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 보조제는 당해 기술 분야에 알려진 것이라면 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들어 프로인트(Freund)의 완전 보조제 또는 불완전 보조제를 더 포함하여 그 효과를 증가시킬 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 상기 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 성별, 신체 상태 등을 고려하여 선택된다. 본 발명에 따른 약학 조성물에 있어서, 상기 추출물의 농도는 대상에 따라 다양하게 선택할 수 있음은 자명하며, 바람직하게는 약학 조성물에 0.01 ~ 5,000 ㎍/ml의 농도로 포함되는 것이다. 그 농도가 0.01 ㎍/ml 미만일 경우에는 약학 활성이 나타나지 않을 수 있고, 5,000 ㎍/ml를 초과할 경우에는 인체에 독성을 나타낼 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 지질대사질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로 사용될 수 있고, 수술 또는 다른 약물 치료 등과 병용하여 사용될 수 있다.
본 발명은 단삼(Salvia miltiorrhiza) 추출물, 작약(Paeonia lactiflora) 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈중 지질 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출된 것일 수 있고, 바람직하게는 60 내지 80 중량%의 에탄올 수용액, 보다 바람직하게는 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 주정 추출물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 상기 단삼 추출물 또는 작약 추출물의 단독 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있고, 상기 단삼 및 작약을 혼합한 혼합 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다. 상기 혼합 추출물은 상기 단삼 및 작약이 (0.1 내지 10):1의 중량비로 혼합된 것일 수 있고, 바람직하게는 (0.2 내지 5):1, 보다 바람직하게는 1:1의 중량비로 혼합된 것일 수 있다.
즉, 본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 혼합 추출물은 상기 단삼 및 작약이 동일 중량비로 혼합되어 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 것일 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제할 수 있고, 지방전구세포 또는 간 세포에서의 중성지방 축적을 억제할 수 있으며, 혈중 중성지방 또는 혈중 콜레스테롤을 감소시킬 수 있다. 또한, 지방간 및 내장지방 생성을 효과적으로 억제할 수 있다. 이러한 효과로 인해, 상기 조성물은 지질대사질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물, 또는 혈중 지질 개선용 건강기능식품 조성물로 사용될 수 있다. 상기 지질대사질환은 이상지질혈증, 지방간 및 비만으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 지질대사질환 예방 또는 개선, 혈중 지질 개선의 목적으로, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능성식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 유효성분인 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨,소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 상기 약학 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한, 상기 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 상기 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품첨가물공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다.
예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 상기 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 상기 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능식품은 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능식품은 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
상기 조성물은 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 지질대사질환의 예방 또는 개선, 혈중 지질 개선 등을 위한 보조제로 섭취될 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<제조예 1> 원료 추출물 제조
각 약재의 단일 또는 혼합 추출 조건; 주정(에탄올) 농도(0, 20, 50, 70 및 100%)의 조건에 따라, 추출물을 제조하였다. 보다 상세하게는 먼저, 각 생약을 중량 비율별로 각 조건에 따라 혼합한 뒤, 물 또는 20 내지 100%의 주정을 각 조건에 따라 추출 용매로 선택하여 추출하였다. 멀티 히팅맨틀(WiseTherm)을 사용하여 추출액의 온도를 70℃로 유지하고, 환류 냉각장치를 저온 항온수조(A&D)와 연결하여 환류 냉각 추출한 추출액을 진공회전농축기(EYELA)를 활용하여 45℃의 수욕 및 200 mbar 이하의 압력에서 감압 농축하여 최종적으로 각 조건의 추출물을 수득하였다. 그 후, 상기 각 조건에 따른 추출물의 수율(%)을 확인하였다.
<실험예 1> 단일 또는 혼합 추출물에 따른 지방전구세포의 트리글리세라이드(triglycerides, TG) 함량 감소 효과 확인
상기 제조예 1에 따라 수득한 약재별 추출물에 따른 지방전구세포의 트리글리세라이드(TG) 함량의 감소 효과를 확인하기 위한 실험을 수행하였다.
세포 내 트리글리세라이드의 정량은 TG 디터미네이션 키트(TG determination kit, Asan Pharm Co., Ltd., Korea)를 사용하여 효소법으로 실시하였다. 세포는 인산완충용액(Phosphate-buffered saline; 이하, PBS)으로 3번 세척한 후, 라이시스 버퍼(lysis buffer, 1% Triton X-100 in PBS)를 첨가하여 4℃에서 30초간 음파처리(sonication)하고 원심분리(10,000 rpm, 20 min, 4℃)하여 상등액을 분리하였다. 상등액 20μL에 3 mL의 효소 용액을 첨가하여 37℃에서 10분 동안 반응시킨 후, 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 단백질 함량은 소혈청알부민(bovine serum albumin, BSA)을 표준시약으로 사용하여 브래드포드(Bradford) 방법에 따라 측정하였다.
하기 표 1은 100종의 생약에 대한 70% 주정 추출물의 세포 내 트리글리세라이드 억제 효능을 확인한 결과이다.
Figure PCTKR2020010684-appb-T000001
표 1을 참조하면, 100종의 생약 추출물 중에서 단삼(no.8), 작약(no.27), 비파엽(no.50), 백모근(no.52) 및 지유(no.68)에서 세포 내 트리글리세라이드 억제 효능이 30% 이상으로 우수한 효능을 나타내는 것을 확인하였다.
이에 따라, 상기 5종의 생약을 선발하였고 각 생약의 중량별 혼합 추출물에 대한 효능 비교를 실시하였다.
하기 표 2는 상기 실험예 1에 따라 선발된 단삼, 작약, 비파엽, 백모근 및 지유 단일에 각 주정 농도(0, 20, 50, 70 및 100%)에 따른 추출물의 세포 내 트리글리세라이드 억제 효능을 확인한 결과이다.
Figure PCTKR2020010684-appb-T000002
표 2를 참조하면, 단삼, 작약, 비파엽, 백모근 및 지유 단일 추출물의 경우, 주정 70% 농도 조건에서 추출 수율이 가장 높았다. 또한, 지방전구세포에서의 트리글리세라이드 억제 효능 역시 주정 70%의 조건(비교예 16 내지 20)에서 가장 우수함을 확인하였다.
이에 따라, 주정 농도를 70%로 설정하고, 각 약재에 대한 혼합 추출조건에서의 트리글리세라이드 억제 효능 비교를 실시하였다.
하기 표 3은 주정 농도 70%에서 각 약재의 혼합 추출에 따른 트리글리세라이드 억제 효능을 확인한 결과이다.
Figure PCTKR2020010684-appb-T000003
표 3을 참조하면, 5종의 약재에 대한 중량별 혼합 추출물 중에서 1:1 중량비의 단삼과 작약의 혼합 추출물(참고예 1)에서 트리글리세라이드 억제 효능이 가장 우수한 것으로 나타났다. 상기 단삼 및 작약의 혼합 추출물은 다른 중량비, 다른 약재들의 혼합 추출물에 비해 억제 효능이 현저히 우수한 것을 확인할 수 있었다.
이에 따라, 단삼 및 작약의 혼합 추출물의 비율에 따른 효능 비교 시험을 수행하였다.
<실험예 2> 약재 복합 추출물에 따른 지방세포 분화 억제 효과 확인
상기 실험예 1을 통해 선별된 단삼 및 작약의 중량별 혼합 추출물의 지방세포 분화의 억제 효과를 확인하기 위한 실험을 수행하였다.
실험에 사용한 세포는 3T3-L1 지방전구세포(Preadipocytes)는 5% CO2, 37℃ 배양기에서 DMEM(10% FBS, 100 unit/mL of penicillin G sodium, 100 μg/mL of streptomycin sulfate) 배양하였다. 100% 융합(confluent)되었을 때 0.5 mM IBMX, 1 μM DEX와 1 μg/mL 인슐린(insulin)의 분화유도물질이 포함된 DMEM으로 교환하여 2일 동안 분화를 유도하였으며, 그후 매 2일 마다 1 μg/mL 인슐린이 포함된 DMEM으로 교환하였다. 분화 10일 후 세포는 분석을 위해 사용되었다. 3T3-L1 전구지방세포에 0.5 mM IBMX, 1 μM DEX와 1 μg/mL 인슐린을 처리하여 분화를 유도한 것을 대조군으로 하였고, 각 추출물을 분화 유도 2일 동안 처리한 것을 시험군으로 하였다.
분화된 세포 내 지방구 생성을 확인하기 위하여 오일 레드 O(Oil red O) 염색을 실시하였다. 배양된 세포는 PBS로 세척한 후, 3.7% 포르말린(formalin)으로 10분간 고정하고 탈이온수(deionized water)로 세척하여 Oil red O를 처리한 후 실온에서 30분간 염색하였다. 그 후 염색액을 제거하고 탈이온수로 3회 세척하여 염색된 세포 후 다이메틸설폭사이드(dimethyl sulfoxide, DMSO)를 가하여 지방을 추출한 후 ELISA(Molecular Devices, USA)를 사용하여 510 nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 세포 내 트리글리세라이드 억제 효능은 상기 실험예 1과 동일하게 수행하였다.
하기 표 4는 상기 실험예 2에 따른 단삼 및 작약의 중량별 혼합 추출물의 지방세포 분화의 억제 효과를 확인한 결과이다.
Figure PCTKR2020010684-appb-T000004
표 4를 참조하면, 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물에서 트리글리세라이드 억제 및 지방분화 억제 효능이 우수함을 확인할 수 있었다. 특히, 실시예 6의 1:1의 중량비에서 가장 우수한 것으로 나타났다.
<실험예 3> 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물의 간세포에서의 지방축적 억제 효과 확인
상기 표 2의 비교예 16의 단삼 단일 추출물, 비교예 17의 작약 단일 추출물 및 상기 표 4의 실시예 1 내지 11의 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물의 각 추출물에 대한 간세포 HepG2 cell에서의 중성지방 생성량을 확인하기 위하여, 세포질 내 지질(intracytoplasmic lipids)을 측정하는데 적합한 Oil Red O로 염색하여 분석하였다.
HepG2 세포를 24 웰 배양 플레이트에 1×105 cells/well 농도로 접종하고, 세포 밀도가 80%에 도달할 때 까지 배양한 다음, 세포의 추가적인 성장이 억제된 상태에서 지방축적을 유도하기 위하여 소태아혈청 무 배지(fetal bovine serum-free medium)를 미포함하고, 2% 소혈청알부민(bovine serum albumin, BSA)이 함유된 배지로 교체하여 밤새 배양하였다. 배양액을 제거한 후, 지방축척을 유도하기 위하여 소듐 팔미테이트-지방산 프리 BSA 접합 복합체(sodium palmitate-fatty acid free BSA conjugation complex)를 팔미테이트(palmitate) 함유하는 세포 배양액과 단삼 작약 추출물을 100 및 200 μg/ml의 농도로 처리하였다.
24시간 처리 후에 DPBS(Dulbecco's phosphate-buffered saline)로 2회 세척하고, 파라포름알데히드 용액(paraformaldehyde solution)으로 10분간 고정하였고, 60% 이소프로판올(isopropanol)로 세척 후에 Oil Red O dye로 30분간 염색하였다. 증류수를 이용하여 여러 번 세척한 후에 염색 정도를 분석하기 위하여 이소프로판올로 용출하여 500 nm 흡광도를 측정하였다. 양성대조군으로 오메가 3를 200μg/ml 농도로 사용하였다.
도 1은 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 간세포에서의 지방축적 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 1을 참조하면, 단삼 또는 작약의 각 단일 추출물인 비교예 16, 17에 비해 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물인 실시예 1 내지 11을 처리했을 때, 간세포에서 농도 의존적으로 중성지방 생성이 억제되는 것으로 나타났으며, 특히 실시예 6에서 그 효과가 가장 우수함을 확인할 수 있었다.
<실험예 4> 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물의 동물실험에서의 혈중 중성지방 감소 효과 확인
상기 표 2의 비교예 16의 단삼 단일 추출물, 비교예 17의 작약 단일 추출물 및 상기 표 4의 실시예 1 내지 11의 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물의 각 추출물에 대한 동물실험을 통해 혈중 중성지방 감소 효과를 확인하였다.
양성대조군으로는 오메가-3 지방산을 사용하였다. 구체적으로, C57BL/6 APOE-/- mouse를 이용하여 10주간 고지방식이를 진행한 후, 추출물을 400 mg/kg 농도로 7일간 매일 투여하였다. 부검일에 모든 동물을 대상으로 복대정맥에서 채취한 혈액 중 약 500 μL를 채혈하여 항응고제가 없는 튜브에 담고 90분간 방치 후, 원심분리(3,000 rpm, 10분, 상온) 후 얻어진 혈청으로 혈액생화학분석기(BS220, Mindray)를 이용하여 중성지방(트리글리세라이드, TG)을 측정하였다.
도 2는 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 중성지방(TG) 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2를 참조하면, 단삼 또는 작약의 각 단일 추출물인 비교예 16, 17에 비해 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물인 실시예 1 내지 11을 처리했을 때, TG 감소 효능이 더 우수함을 확인하였다. 이는 양성대조군으로 사용한 오메가-3 지방산 보다 우수한 효과를 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명에 따른 혼합 추출물의 약리학적 활성 시너지 효과를 확인할 수 있었다.
<실험예 5> 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물의 동물실험에서의 혈중 콜레스테롤 개선 효과 확인
상기 비교예 16의 단삼 단일 추출물, 비교예 17의 작약 단일 추출물 및 실시예 1 내지 11의 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물에 대한 동물실험을 통한 혈중 콜레스테롤 감소 효과를 확인하였다.
양성대조군으로는 오메가-3 지방산을 사용하였다. 구체적으로, C57BL/6 APOE-/- mouse를 이용하여 10주간 고지방식이를 진행한 후, 추출물을 400 mg/kg 농도로 7일간 매일 투여하였다. 부검일에 모든 동물을 대상으로 복대정맥에서 채취한 혈액 중 약 500 μL를 채혈하여 항응고제(EDTA-2K) 튜브에 담고 원심분리(3,000 rpm, 10분, 상온)하여 혈장을 분리한 뒤, 총 콜레스테롤 함량, LDL 콜레스테롤 및 HDL 콜레스테롤 함량을 측정하였다.
도 3은 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 또는 작약 추출물, 또는 단삼 및 작약 혼합 추출물 처리에 따른 콜레스테롤 함량 변화를 나타낸 그래프로, A는 총 콜레스테롤 함량, B는 LDL 콜레스테롤 함량, C는 HDL 콜레스테롤 함량을 나타낸다.
도 3을 참조하면, 단삼 또는 작약의 각 단일 추출물인 비교예 16, 17 에 비해 단삼 및 작약의 중량 비율별 혼합 추출물인 실시예 1 내지 11을 처리했을 때, 총 콜레스테롤 함량 및 LDL 콜레스테롤 함량이 감소하였고, HDL 콜레스테롤 함량이 증가하는 것을 확인하였다. 이는 양성대조군으로 사용한 오메가-3 지방산 보다 우수한 효과를 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명에 따른 혼합 추출물의 약리학적 활성 시너지 효과를 확인할 수 있었다.
<실험예 6> 혼합 추출물의 동물실험에서의 지방간 및 내장지방 감소 효과 확인
상기 표 2의 비교예 16의 단삼 단일 추출물, 비교예 17의 작약 단일 추출물 및 상기 표 4의 실시예 6의 단삼 및 작약의 혼합 추출물에 대하여 조직병리학적 검사를 수행하였다.
양성대조군으로는 오메가-3 지방산을 사용하였다. 구체적으로, C57BL/6 APOE-/- mouse를 이용하여 10주간 고지방식이를 진행한 후, 비교예 16, 17 및 실시예 6을 400 mg/kg 농도로 7일간 매일 투여하였다. 부검일에 모든 동물을 대상으로 간 및 복부지방(white adipo tissue) 적출 후, 10% 중성 포르말린으로 고정하였다. 고정된 장기 조직에 대하여 탈수 파라핀, 조직의 파라핀 포매 등의 일반적인 조직처리과정을 거쳐 조직 절편을 제작하였다. 박절과정을 거쳐 검체를 제작하여 헤마톡실린&에오신(Hematoxylin & eosin) 염색을 실시하여 평가하였다.
도 4는 본 발명의 일 실험예에 따른 혼합 추출물의 조직병리학적 검사 결과이다.
도 4를 참조하면, 상기 비교예 16, 17 및 실시예 6의 고지방식이에 따라 발생한 간의 지방 병변 및 지방 축적 현상을 비교하였을 때, 실시예 6에서 간의 지방 축적이 억제되는 현상을 확인하였다. 또한, 고지방식이에 증가된 복부지방 내의 백색 지방의 지방세포 크기가 실시예 6에서 감소하여 내장지방 생성에 영향을 미치는 것을 확인할 수 있었다.
상기 일련의 결과를 통하여, 본 발명의 단삼 및 작약 혼합 추출물을 유효성분으로 이용 시, in vitro 상에서는 지방세포 분화 억제, 중성지방 축적 억제 효과 등을 확인할 수 있었다. 또한, in vivo 상에서는 상기 각 추출물에 따른 혈중 중성지방, 총 콜레스테롤 함량, LDL 콜레스테롤 및 HDL 콜레스테롤 함량이 개선됨을 확인하였고, 뿐만 아니라 지방간 및 내장지방 생성을 억제하는 효과를 나타냄을 확인하였다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 즉, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다.

Claims (11)

  1. 단삼(Salvia miltiorrhiza) 추출물, 작약(Paeonia lactiflora) 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 추출물은,
    물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출된 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 추출물은,
    60 내지 80 중량%의 에탄올 수용액으로 추출된 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 혼합 추출물은,
    상기 단삼 및 작약이 (0.1 내지 10):1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    상기 혼합 추출물은,
    상기 단삼 및 작약이 동일 중량비로 혼합되어 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  6. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은,
    지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하는 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제 1 항에 있어서,
    상기 조성물은,
    혈중 중성지방 또는 혈중 콜레스테롤을 감소시키는 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  8. 제 1 항에 있어서,
    상기 지질대사질환은,
    고중성지방혈증, 고콜레스테롤혈증 또는 고지혈증을 포함하는 이상지질혈증, 지방간 및 비만으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  9. 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  10. 제 9 항에 있어서,
    상기 혼합 추출물은,
    상기 단삼 및 작약이 동일 중량비로 혼합되어 70 중량% 에탄올 수용액으로 추출된 것을 특징으로 하는 지질대사질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  11. 단삼 추출물, 작약 추출물 또는 단삼 및 작약의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈중 지질 개선용 건강기능식품 조성물.
PCT/KR2020/010684 2019-08-16 2020-08-12 단삼 또는 작약 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질대사질환 예방 또는 치료용 조성물 Ceased WO2021033994A1 (ko)

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