WO2018052002A1 - Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １結合ペプチド - Google Patents

Abstract

TSP1の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である化合物の提供。式（１）［式中、Ａは、連結基Ａ_１～Ａ_６から選択され、Ｘ_ａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、または^ｍＳであり；Ｘ_ａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；Ｘ_ａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ８は、芳香族アミノ酸残基であり；Ｘ_ａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；Ｘ_ａａ１１は、芳香族アミノ酸残基であり；Ｘ_ａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である］で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩など。

Description

Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ　１結合ペプチド

　本発明は、血管新生抑制物質（thrombospondin 1/TSP1)の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩に関する。

　重症下肢虚血（CLI）は、下肢への血流障害によって安静時疼痛が生じ、下肢末梢に潰瘍や壊死が生じた状態である。Fontaine分類ではIIIおよびIV、Rutherford分類では4-6に分類される（非特許文献１）。

　CLIは予後が不良で、死亡率が高いことが問題となっており、CLI患者に対しては、虚血組織での血管再生などにより血管システムを再構築し、酸素および栄養分を虚血組織に送り届けることによって、下肢の潰瘍・壊死の進展を抑制する治療が検討されている（非特許文献２）。これまでに、血管新生を促進する増殖因子を用いた遺伝子治療も試みられているが、動物実験とは異なり、臨床試験では有効性を示すに到っていない。そのような臨床試験成績から、血管新生抑制因子にも焦点が当てられ、血管新生促進因子と血管新生抑制因子とのバランスが重要であるといった仮説が立てられている（非特許文献３および４）。

　血管新生に対して抑制的に作用することが報告されている糖タンパク質thrombospondin 1 (TSP1)は、活性化血小板から放出され、内皮細胞、平滑筋細胞、腎メサンギウム細胞、尿細管細胞、および有足細胞を含む多くの細胞で合成され、分泌されることが報告されている（非特許文献５～７）。TSP1は末梢血管障害患者の血液およびCLI患者の下肢骨格筋中でその発現が亢進していることから、CLI患者下肢における潰瘍・壊死の進展への関与が示唆されている（非特許文献８および９）。TSP1がラット下肢虚血-再灌流後の血流回復を抑制すること、TSP1欠損マウスにおいて下肢虚血後の血管新生が亢進することから、TSP1は下肢虚血後の血流回復に対して抑制的に働いていると考えられる（非特許文献１０および１１）。また、TSP1欠損マウスでは、創傷部位での血流が増加し、創傷サイズの縮小も亢進したことから、CLI患者で認められる傷に対して、TSP1の機能を阻害することにより創傷治癒効果が期待できる（非特許文献１２）。

　TSP1は血管新生阻害作用以外にも様々な薬理作用を示し、多くの疾患に関与していると考えられる。TSP1は血小板から分泌されて線溶系PAI-1レベルを増加させ、血栓形成を亢進させる（非特許文献１３）。肥満でインスリン抵抗性が生じている患者でTSP1レベルは増加し、TSP1はマクロファージに作用して、肥満により誘発される炎症反応を促進し、インスリン抵抗性を増悪させる（非特許文献１４および１５）。TSP1は腎有足細胞のアポトーシスを促進して、細胞機能の低下を誘発する（非特許文献１６）。TSP1は非食細胞上のsignal-regulatory protein-αに結合してNADPH oxidaseを活性化し、血管弛緩作用を抑制することにより、腎臓での虚血再灌流傷害を誘発する（非特許文献１７）。これらの結果から、TSP1阻害により、心筋梗塞、肥満患者における炎症反応やインスリン抵抗性、さらには虚血再灌流傷害を含む腎障害が改善される可能性がある。また、TSP1によって産生された血小板由来のマイクロパーティクルが、鎌型赤血球患者においてvaso-occlusive crisisを誘発する（非特許文献１８および１９）。さらには、TSP1が単核球の遊走・接着を亢進して、大動脈瘤における炎症反応が増強されることが報告されている（非特許文献２０）。TSP1は、癌細胞の細胞増殖、接着、浸潤への作用を介して、癌の抑制や促進に関与している可能性が報告されている（非特許文献２１）。
　一方、TSP1とCD47受容体との結合を阻害する物質として、抗体（特許文献１）やポリペプチド（特許文献２）が知られている。しかしながら、TSP1に結合する大環状ポリペプチドについてはこれまで知られていなかった。

WO 2008/060785 US 2014/296477

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　本発明は、TSP1の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である化合物を提供することを目的とする。

　本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、特定のアミノ酸配列を有する大環状ポリペプチドがTSP1に結合し、TSP1への細胞の接着を阻害することにより、TSP1の機能を阻害することを見出し、本発明を完成させた。

　すなわち、本発明は、以下の［１］～［３４］を提供するものである。
［１］式（Ｉ）

 

［式中、Ａは、連結基

 

から選択され、
　ここで、

 

は、Ｘ_ａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のα炭素への結合点を示し、
　Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、
　Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシであり、
　ｎは０～３の整数であり、
　ｉおよびｊはそれぞれ独立に１～３の整数であり、
　ｋおよびｌはそれぞれ独立に０～３の整数であり、
　ｍは１～７の整数であり；
　Ｘ_ａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、または^ｍＳであり；
　Ｘ_ａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
　ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）

 

（式中、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニルまたはＣ_３－６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
　芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）

 

（式中、Ｒ^４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ_１－３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ_１－３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０～３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
　塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）

 

［式中、Ｒ^５は、
式－（ＣＨ_２）_ｑａＮＨ_２（式中、ｑａは１～６の整数である）、
式

 

（式中、Ｒ^６は水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、ｑｂは１～６の整数である）、
式－（ＣＨ_２）_ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２（式中、ｑｃは１～６の整数である）、または
式

 

（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
　中性アミノ酸は、式

 

［式中、Ｒ^７は、式－（ＣＨ_２）_ｒａＮＨＣＯＮＨ_２（式中、ｒａは１～６の整数である）または式－（ＣＨ_２）_ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、^ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
　酸性アミノ酸は、式

 

［式中、Ｒ^８は、式－（ＣＨ_２）_ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１～６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２］Ｘ_ａａ４がＳｅｒである、［１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［３］Ｘ_ａａ５がＧｌｙである、［１］または［２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［４］Ｘ_ａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、［１］～［３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［５］Ｘ_ａａ８がＴｒｐである、［４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［６］Ｘ_ａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、［１］～［５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［７］Ｘ_ａａ１１がＴｒｐである、［６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［８］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、［１］～［７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［９］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、［８］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１０］Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、［１］～［９］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１１］Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌである、［１０］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１２］Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、［１］～［１１］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１３］Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである、［１２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１４］Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、［１］～［１３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１５］Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、［１４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１６］Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、［１］～［１５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１７］Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、［１］～［１６］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１８］Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、［１７］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１９］Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐhｇ、またはＶａｌである、［１］～［１８］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２０］Ｘ_ａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐhｇ、またはＶａｌである、［１９］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２１］Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、［１］～［２０］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２２］Ｘ_ａａ１２がＶａｌである、［２１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２３］Ａが、連結基

 

である、［１］～［２２］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２４］Ａが

 

である、［２３］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２５］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐhｇ、またはＶａｌであり；
　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
　Ａが、連結基

 

である、［１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２６］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８がＴｒｐであり；
　Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
　Ｘ_ａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐであり；
　Ｘ_ａａ１２がＶａｌであり；
　Ａが

 

である、［２５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２７］
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

で表される化合物からなる群より選択される、［２６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２８］［１］～［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
［２９］重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防のための、［２８］に記載の医薬組成物。
［３０］［１］～［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む、血管新生促進剤。
［３１］［１］～［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量をヒトに投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法。
［３２］疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、［３１］に記載の方法。
［３３］重症下肢虚血、末梢血管障害、心筋梗塞、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全、腎障害、虚血再灌流障害、狭心症、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がん、鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、または一般的な創傷の治療または予防のための、［２８］に記載の医薬組成物。
［３４］疾患または症状が、重症下肢虚血、末梢血管障害、心筋梗塞、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全、腎障害、虚血再灌流障害、狭心症、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がん、鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、または一般的な創傷である、［３１］に記載の方法。
［３５］疾患または症状の治療または予防における使用のための［１］～［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［３６］疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、［３５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。

　また本発明は、以下の［Ａ１］～［Ａ２６］を提供するものである。
［Ａ１］式（Ｉ）

 

［式中、Ａは、連結基

 

から選択され、
　ここで、

 

は、Ｘ_ａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のα炭素への結合点を示し、
　Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、
　Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシであり、
　ｎは０～３の整数であり、
　ｉおよびｊはそれぞれ独立に１～３の整数であり、
　ｋおよびｌはそれぞれ独立に０～３の整数であり、
　ｍは１～７の整数であり；
　Ｘ_ａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、または^ｍＳであり；
　Ｘ_ａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
　Ｘ_ａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
　ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）

 

（式中、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニルまたはＣ_３－６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
　芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）

 

（式中、Ｒ^４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ_１－３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ_１－３アルコキシから選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０～３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
　塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）

 

［式中、Ｒ^５は、
式－（ＣＨ_２）_ｑａＮＨ_２（式中、ｑａは１～６の整数である）、
式

 

（式中、Ｒ^６は水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、ｑｂは１～６の整数である）、
式－（ＣＨ_２）_ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２（式中、ｑｃは１～６の整数である）、または
式

 

（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
　中性アミノ酸は、式

 

［式中、Ｒ^７は、式－（ＣＨ_２）_ｒａＮＨＣＯＮＨ_２（式中、ｒａは１～６の整数である）または式－（ＣＨ_２）_ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、^ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
　酸性アミノ酸は、式

 

［式中、Ｒ^８は、式－（ＣＨ_２）_ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１～６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２］Ｘ_ａａ４がＳｅｒである、［Ａ１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ３］Ｘ_ａａ５がＧｌｙである、［Ａ１］または［Ａ２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ４］Ｘ_ａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、［Ａ１］～［Ａ３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ５］Ｘ_ａａ８がＴｒｐである、［Ａ４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ６］Ｘ_ａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、［Ａ１］～［Ａ５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ７］Ｘ_ａａ１１がＴｒｐである、［Ａ６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ８］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、［Ａ１］～［Ａ７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ９］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、［Ａ８］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１０］Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、［Ａ１］～［Ａ９］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１１］Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌである、［Ａ１０］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１２］Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、［Ａ１］～［Ａ１１］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１３］Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅである、［Ａ１２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１４］Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、［Ａ１］～［Ａ１３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１５］Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、［Ａ１４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１６］Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、［Ａ１］～［Ａ１５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１７］Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、［Ａ１］～［Ａ１６］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１８］Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、［Ａ１７］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１９］Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、またはＶａｌである、［Ａ１］～［Ａ１８］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２０］Ｘ_ａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、またはＨｉｓである、［Ａ１９］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２１］Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、［Ａ１］～［Ａ２０］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２２］Ｘ_ａａ１２がＶａｌである、［Ａ２１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２３］Ａが、連結基

 

である、［Ａ１］～［Ａ２２］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２４］Ａが

 

である、［Ａ２３］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２５］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、またはＶａｌであり；
　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
　Ａが、連結基

 

である、［Ａ１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２６］Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅであり；
　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８がＴｒｐであり；
　Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
　Ｘ_ａａ１０がＡｒｇまたはＬｙｓであり；
　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐであり；
　Ｘ_ａａ１２がＶａｌであり；
　Ａが

 

である、［Ａ２５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、TSP1に結合し、TSP1への血管内皮細胞などの細胞の接着を阻害することができる。従って本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、TSP1の発現亢進により誘発される疾患または症状の治療または予防に有用である。また本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、血管新生促進剤として有用である。

（定義）
　本明細書中、天然アミノ酸は、天然に存在するタンパク質中に通常見出される未修飾のアミノ酸を意味し、具体的には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンを意味する。なお、本明細書においては、天然アミノ酸の表記には、三文字表記または一文字表記を用いる場合がある（すなわち、アラニン：ＡｌａまたはＡ；アルギニン：ＡｒｇまたはＲ；アスパラギン：ＡｓｎまたはＮ；アスパラギン酸：ＡｓｐまたはＤ；システイン：ＣｙｓまたはＣ；グルタミン酸：ＧｌｕまたはＥ；グルタミン：ＧｌｎまたはＱ；グリシン：ＧｌｙまたはＧ；ヒスチジン：ＨｉｓまたはＨ；イソロイシン：ＩｌｅまたはＩ；ロイシン：ＬｅｕまたはＬ；リジン：ＬｙｓまたはＫ；メチオニン：ＭｅｔまたはＭ；フェニルアラニン：ＰｈｅまたはＦ；プロリン：ＰｒｏまたはＰ；セリン：Ｓｅｒ又はＳ；スレオニン：ＴｈｒまたはＴ；トリプトファン：ＴｒｐまたはＷ；チロシン：ＴｙｒまたはＹ；バリン：ＶａｌまたはＶ）。

　本明細書中、非天然アミノ酸は、天然アミノ酸以外のアミノ酸を意味し、天然アミノ酸の修飾体も含まれる。本明細書中に記載する非天然アミノ酸の略語を以下に示す。

 

　なお、本明細書においてアミノ酸という場合、ポリペプチドの構成アミノ酸についてはアミノ酸残基を意味する。また特に明記しない限り、アミノ酸はＬ－アミノ酸を意味する。

　本明細書中、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）：

 

（式中、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニルまたはＣ_３－６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸である。

　天然の脂肪族アミノ酸としては、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、およびＩｌｅが挙げられる。また非天然の脂肪族アミノ酸としては、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ａｈｐ、Ａｏｃ、Ａｌｇ、Ｂｔｇなどが挙げられるがこれらに限定されない。

　本明細書中、芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）

 

（式中、Ｒ^４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ_１－３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ_１－３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０～３の整数である）で表されるアミノ酸である。

　天然の芳香族アミノ酸としては、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、およびＴｒｐが挙げられる。また非天然の芳香族アミノ酸としては、２Ｎａｌ、４ＣＦ、ＤＣＦ、６ＣＷ、ＨＦ、Ｐｈｇなどが挙げられるがこれらに限定されない。

　本明細書中、塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）

 

［式中、Ｒ^５は、
式－（ＣＨ_２）_ｑａＮＨ_２（式中、ｑａは１～６の整数である）、
式

 

（式中、Ｒ^６は水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、ｑｂは１～６の整数である）、
式－（ＣＨ_２）_ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２（式中、ｑｃは１～６の整数である）、または
式

 

（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である。

　天然の塩基性アミノ酸としては、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、およびＡｒｇが挙げられる。また非天然の塩基性アミノ酸としては、３ＭＨ、ＡＭＦなどが挙げられるがこれらに限定されない。

　本明細書中、中性アミノ酸は、式（ＩＩｄ）

 

［式中、Ｒ^７は、式－（ＣＨ_２）_ｒａＮＨＣＯＮＨ_２（式中、ｒａは１～６の整数（例えば、１、２、３、４、５、または６）である）、または式－（ＣＨ_２）_ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１～３の整数（例えば、１、２、または３）である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、^ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎである。

　天然の中性アミノ酸としては、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、およびＧｌｎが挙げられる。また非天然の中性アミノ酸としては、ＭＯ１、ＭＯ２、３ＨｙＰ、^ｍＳ、ＭＳ、Ａｌｂ、Ｃｉｔ、Ｈｃｔ、Ｈｃｙ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、Ｐｅｎなどが挙げられるがこれらに限定されない。

　本明細書中、酸性アミノ酸は、式（ＩＩｅ）

 

［式中、Ｒ^８は、式－（ＣＨ_２）_ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１～６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である。

　天然の酸性アミノ酸としては、ＡｓｐおよびＧｌｕが挙げられる。

　本明細書中、Ｃ_１－３アルキルは、１～３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであり、例えば、メチル、エチル、１－プロピル、または２－プロピルである。

　本明細書中、Ｃ_１－６アルキルは、１～６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであり、例えば、メチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、１－ブチル、２－ブチル、２－メチル－１－プロピル、２－メチル－２－プロピル、１－ペンチル、２－ペンチル、３－ペンチル、２－メチル－２－ブチル、３－メチル－２－ブチル、１－ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、２－メチル－１－ペンチル、３－メチル－１－ペンチル、２－エチル－１－ブチル、２,２－ジメチル－１－ブチル、または２,３－ジメチル－１－ブチルである。

　本明細書中、Ｃ_２－６アルケニルは、２～６個の炭素原子を有し、１以上の二重結合を含む直鎖または分枝鎖アルケニルであり、例えば、ビニル、１－プロペニル、２－プロペニル（アリル）、１－ブテニル、２－ブテニル、３－ブテニル、１－メチル－２－プロペニル、２－メチル－２－プロペニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、１－メチル－２－ブテニル、２－メチル－２－ブテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、３－メチル－２－ペンテニルなどが挙げられ、好ましくは、ビニル、２－プロペニル（アリル）、３－ブテニル、４－ペンテニル、５－ヘキセニルである。

　本明細書中、Ｃ_３－６シクロアルキルは、３～６個の炭素原子を有する環状アルキル基であり、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、または、シクロヘキシル基である。

　本明細書中、ハロゲン原子は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである。

　本明細書中、Ｃ_１－３アルコキシは、１個の上記Ｃ_１－３アルキル基で置換されたヒドロキシル基であり、例えば、メトキシ、エトキシ、１－プロポキシ、または２－プロポキシである。

　本明細書中、ＴＳＰ１阻害活性とは、ＴＳＰ１の血管新生阻害作用を含む１つ以上の作用を阻害する活性をいう。ＴＳＰ１阻害活性は、本願の実施例に示されるヒトＴＳＰ１および血管内皮細胞を用いた細胞接着阻害アッセイにより測定される。該アッセイにおいて、被験物質の５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）が２００ｎＭ以下である場合、ＴＳＰ１阻害活性を有すると決定される。

（本発明の大環状ポリペプチド）
　本発明は、ＴＳＰ１阻害活性を有する新規大環状ポリペプチドに関する。

　一態様において、本発明に係る化合物は、式（Ｉ）

 

で表される大環状ポリペプチドである（以下、本発明の大環状ポリペプチドという）。本発明の大環状ポリペプチドにおいては、Ｘ_ａａ１～Ｘ_ａａ１２のアミノ酸、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２～Ｘ_ａａ１２のアミノ酸が、アミド結合により連結されてポリペプチド鎖が形成されており、Ｎ末端アミノ酸（Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２）とＣ末端アミノ酸（Ｘ_ａａ１２）とが連結基：Ａを介して連結され大環状構造が形成されている。

　式（Ｉ）において、Ａは、アミノ酸構造を含む下記の連結基Ａ_１～Ａ_６：

 

から選択される。

　Ａにおいて、末端に記載されている

 

は、Ｘ_ａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、

 

は、Ｘ_ａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のα炭素への結合点を示す。上記連結基に含まれるアミノ酸構造の不斉点はＲ体であってもＳ体であってもよい。

　一態様において、Ａは、

 

である（以下、Ａ_１という）。連結基Ａ_１において、ｎは０～３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。Ｃ_１－３アルキルは、好ましくはメチルである。

　Ａ_１の好ましい態様としては、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ^１０がアミノであり、ｎが０である、連結基

 

が挙げられる（以下、Ａ_１ａという）。Ａ_１ａは、例えば、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の－ＳＨを、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基に結合した－ＣＯＣＨ_２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＣｙｓはＬ－アミノ酸またはＤ－アミノ酸であってもよい。特に、Ａ_１ａにおいてＸ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ－アミノ酸である場合の連結基を、Ａ_１ａ１という。

　Ａ１の好ましい別の態様としては、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ^１０がアミノであり、ｎが１である、連結基

 

が挙げられる（以下、Ａ_１ｂという）。Ａ_１ｂは、例えば、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＨｃｙ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の－ＳＨを、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基に結合した－ＣＯＣＨ_２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＨｃｙはＬ－アミノ酸またはＤ－アミノ酸であってもよい。特に、Ａ_１ｂにおいてＸ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＨｃｙ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ－アミノ酸である場合の連結基を、Ａ_１ｂ１という。

　連結基Ａ_１の好ましい別の態様としては、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれメチルであり、Ｒ^１０がアミノであり、ｎが０である、連結基

 

が挙げられる（以下、Ａ_１ｃという）。Ａ_１ｃは、例えば、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＰｅｎ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の－ＳＨを、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基に結合した－ＣＯＣＨ_２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＰｅｎはＬ－アミノ酸またはＤ－アミノ酸であってもよい。特に、Ａ_１ｃにおいてＸ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＰｅｎ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ－アミノ酸である場合の連結基を、Ａ_１ｃ１という。

　別の態様において、連結基Ａは、

 

である（以下、Ａ_２という）。Ａ_２において、ｎは０～３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。

　Ａ_２の好ましい態様としては、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ^１０がアミノであり、ｎが０である連結基が挙げられる（以下、Ａ_２ａという）。Ａ_２ａは、例えば上記Ａ_１ａのスルフィド基を酸化してスルホキシドとすることにより得ることができる。特に、Ａ_１ａ１のスルフィド基を酸化してスルホキシドとした場合の連結基を、Ａ_２ａ１という。

　別の態様において、Ａは、

 

である（以下、Ａ_３という）。Ａ_３において、ｎは０～３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。

　Ａ_３の好ましい態様としては、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ^１０がアミノであり、ｎが０である連結基が挙げられる（以下、Ａ_３ａという）。Ａ_３ａは、例えば上記Ａ_１ａのスルフィド基を酸化してスルホンとすることにより得ることができる。特に、Ａ_１ａ１のスルフィド基を酸化してスルホンとした場合の連結基を、Ａ_３ａ１という。

　別の態様において、Ａは、

 

である（以下、Ａ_４という）。Ａ_４において、ｉおよびｊはそれぞれ独立に１～３の整数（例えば、１、２、または３）であり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。

　ＡがＡ_４である場合、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２は、

 

［式中、Ｒ^９は、式－（ＣＨ_２）_ｔＳＨ（式中、ｔは１～３の整数（例えば、１、２、または３）である）で表される基である］で表されるアミノ酸の残基である。

　Ａ_４の好ましい態様において、ｉおよびｊはそれぞれ１であり、Ｒ^１０はアミノである（以下、Ａ_４ａという）。Ａ_４ａは、例えば、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の－ＳＨを、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２の－ＳＨと反応させることにより得ることができる。この場合、ＣｙｓはＬ－アミノ酸またはＤ－アミノ酸であってもよい。特に、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ－アミノ酸であるＡ_４ａを、Ａ_４ａ１という。

　別の態様において、Ａは、

 

である（以下、Ａ_５という）。Ａ_５において、ｋおよびｌはそれぞれ独立に０～３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。連結基Ａ_５は、例えば、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合した、側鎖に－（ＣＨ_２）_ｌＣＨ＝ＣＨ_２を有するアミノ酸（カルボキシがアミドに変換されていてもよい）と、Ｘ_ａａ１またはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基に結合した―ＣＯ（ＣＨ_２）_ｋＣＨ＝ＣＨ_２とのオレフィンメタセシスにより得ることができる。この場合、Ｘ_ａａ１２のＣ末端側にアミド結合したアミノ酸はＬ－アミノ酸およびＤ－アミノ酸のいずれであってもよい。

　別の態様において、Ａは、

 

である（以下、Ａ_６という）。Ａ_６において、ｍは１～７の整数（例えば、１、２、３、４、５、６、または７）であり、Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシである。Ａ_６は、例えば、Ａ_５におけるＣ－Ｃ二重結合を還元することにより得ることができる。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在しない。好ましい態様において、Ｘ_ａａ１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず、より好ましくは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸の残基であり、より好ましくは、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり、さらに好ましくは、２Ｎａｌである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ３は、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり、より好ましくは、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、または^ｍＳである。好ましい態様において、Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒである。好ましい態様において、Ｘ_ａａ５は、Ｇｌｙである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ６は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｃｉｔ、Ｓｅｒ、またはＭＯ２であり、より好ましくは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ７は、ＡｓｎまたはＡｓｐである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ８は、芳香族アミノ酸残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ８は、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり、より好ましくはＴｒｐである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ９は、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり、より好ましくは、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ１０は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり、より好ましくはＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ１１は、芳香族アミノ酸残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ１１は、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌであり、より好ましくは、Ｔｒｐである。

　式（Ｉ）において、Ｘ_ａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘ_ａａ１２は、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり、より好ましくはＶａｌである。

　本発明の大環状ポリペプチドの好ましい態様としては、式（Ｉ）において、
　Ａが連結基Ａ_１ａ、Ａ_１ｂ、またはＡ_１ｃであり；
　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；かつ
　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである；
大環状ポリペプチドが挙げられる。

　本発明の大環状ポリペプチドのより好ましい態様としては、式（Ｉ）において、
　Ａが連結基Ａ_１ａであり；
　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
　Ｘ_ａａ２が、２Ｎａｌであり；
　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
　Ｘ_ａａ４が、Ｓｅｒであり；
　Ｘ_ａａ５が、Ｇｌｙであり；
　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
　Ｘ_ａａ８が、Ｔｒｐであり；
　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
　Ｘ_ａａ１１が、Ｔｒｐであり；かつ
　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌである；
大環状ポリペプチドが挙げられる。

　本発明の大環状ポリペプチドのさらに好ましい態様としては、
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

で表される化合物からなる群より選択される大環状ポリペプチドが挙げられる。ここに示されたポリペプチドは、後述する実施例２４、４０、４１、４２、４３、４４、４５、５８、６０、７５、７６、９５、９６、および９８～１０１の化合物であり、Ａはいずれも連結基Ａ_１ａ１である。

　本発明の大環状ポリペプチドが塩基性基を有する場合、酸と組み合わされて塩を形成することができ、これらの塩は、本発明に包含される。そのような塩としては、例えば、無機酸塩、有機酸塩、アミノ酸塩、およびスルホン酸塩が挙げられる。無機酸塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などが挙げられる。有機酸塩としては、例えば、酢酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、フタル酸塩、トリフルオロ酢酸塩などが挙げられる。アミノ酸塩としては、例えば、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩などが挙げられる。スルホン酸塩としては、例えば、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、２,４－ジメチルベンゼンスルホン酸塩、２,４,６－トリメチルベンゼンスルホン酸塩、４－エチルベンゼンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩などが挙げられる。本発明の大環状ポリペプチドの薬理上許容される塩の好ましい態様としては、酢酸塩、塩酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩であり、より好ましくは、酢酸塩である。

　本発明の大環状ポリペプチドが酸性基を有する場合、塩基と組合わされて塩を形成することができ、これらの塩は、本発明に包含される。これらの塩としては、例えば、金属塩、無機アミン塩、有機アミン塩、およびアミノ酸塩が挙げられる。金属塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などが挙げられる。無機アミン塩としては、例えば、アンモニウム塩が挙げられる。有機アミン塩としては、例えば、モルホリン塩、グルコサミン塩、エチレンジアミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、ジエタノールアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩などが挙げられる。アミノ酸塩としては、例えば、リジン塩、アルギニン塩などが挙げられる。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、結晶の形態で使用されてもよく、該結晶は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩のみから形成されていても、共結晶や溶媒和物（例えば水和物）を形成していてもよい。本発明の大環状ポリペプチドおよびその薬理上許容される塩は、いずれかを単独でまたは２種以上を適宜組み合わせて用いてもよい。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、それを構成する１個以上の原子が非天然の比率で同位体原子に置換された同位体化合物を形成することができる。同位体原子は、放射性または非放射性であり得、例えば、重水素（^２Ｈ；Ｄ）、トリチウム（^３Ｈ；Ｔ）、炭素－１４（^１４Ｃ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）などである。放射性の同位体原子で標識された化合物は、疾患の治療または予防薬、研究用試薬（例えば、アッセイ用試薬）、診断薬（例えば、画像診断薬）などとして使用され得る。本発明は、放射性または非放射性の同位体化合物を包含する。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、化学合成、無細胞翻訳系などの当該技術分野において知られている方法で製造することができる。例えば、本発明の大環状ポリペプチドの化学合成は、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行うことができる。固相合成には、市販の自動合成機（例えばSyro II（Biotage Japan社）、Liberty Blue（CEM社）など）を用いることができる。

　例えば、連結基としてＡ_１を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば以下の方法に従って得ることができる。

　ペプチド自動合成機を用いて、固相支持体（例えば、Rink Amide Resin AM (Novaviochem社)、2-Chlorotrityl chloride resin(Novaviochem社)など）に、アミノ基の保護基（例えば、Fmoc基など）で保護されたアミノ酸をＣ末端側から順次連結する（Ｃ末端アミノ酸はチオールを有するアミノ酸である）。アミノ基の脱保護は当業者に知られた方法（例えば、Fmoc基の場合は20%ピペリジン／1-メチル-2-ピロリジノンなど）で行う。Ｎ末端のアミノ酸を連結し、アミノ基を脱保護した後、連結基を形成させるための基（例えば、クロロメチルカルボニル基など）を導入し（例えば、クロロ酢酸をＮ末端アミノ基と反応させ）、大環状ペプチドを形成する。その後、得られたペプチドをペプチドレジンから、常法（例えば、Rink Amide Resin AMを使用する場合には、トリフルオロ酢酸－エタンジチオール－トリイソプロピルシラン－水を使用する条件）により切断する。エーテル沈殿により粗ペプチドを回収したのち、常法（例えば、逆相高速液体クロマトグラフィー）により目的物を精製する。得られた目的物は常法により所望の塩に変換することができる。
　連結基としてＡ_４を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば上記方法において最後にＮ末端のアミノ酸として－ＳＨを含むアミノ酸を連結することにより、さらに連結基を形成させるための基を導入することなく大環状ペプチドを形成することができる。

　連結基としてＡ_２またはＡ_３を有する本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、例えば、Ａ_１を有する本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を酸化剤（例えば、m-クロロ過安息香酸、過酸化水素水またはジメチルジオキシラン）により酸化することにより得ることができる。

　例えば、連結基としてＡ_５またはＡ_６を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば以下の方法に従って得ることができる。

 

　末端基Ｂ_１およびＢ_２を有するポリペプチドは、ペプチド自動合成機を用いて、固相支持体に、アミノ基の保護基（例えば、Fmoc基など）で保護されたアミノ酸をＣ末端側から順次連結し（Ｃ末端アミノ酸はオレフィンを有するアミノ酸である）、Ｎ末端のアミノ酸のアミノ基を脱保護した後、連結基を形成させるための基（例えば、２－プロペニル基など）を導入することにより調製することができる。
　末端基Ｂ_１およびＢ_２を有するポリペプチドを調製した後に、適切な触媒（例えば、第２世代グラブス触媒）を使用してオレフィンメタセシス反応を行うことにより連結基としてＡ_５を有する大環状ポリペプチドを調製することができる。該ポリペプチドを適切な条件下（例えば、水素、ウィルキンソン触媒）で還元反応に付すことにより、連結基としてＡ_６を有する大環状ポリペプチドを得ることができる。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１阻害活性を有し、ＴＳＰ１への血管内皮細胞の接着を阻害することができるため、血管新生阻害剤として有用である。

（医薬組成物）
　本発明はさらに、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、優れたＴＳＰ１阻害活性を有しており、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状（例えば、血管新生阻害に起因する疾患、血栓形成亢進に起因する疾患、炎症性疾患、腎臓細胞機能低下に起因する疾患、血管弛緩作用の抑制に起因する疾患、虚血性疾患、癌疾患などの疾患、および鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、一般的な創傷などの症状）の治療または予防に有用である。血管新生阻害に起因する疾患としては、例えば、重症下肢虚血、末梢血管障害などが挙げられる。血栓形成亢進に起因する疾患としては、例えば、心筋梗塞、末梢血管障害（PAD）などが挙げられる。炎症性疾患としては、例えば、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症などが挙げられる。腎臓細胞機能低下に起因する疾患としては、例えば、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全などが挙げられる。血管弛緩作用の抑制に起因する疾患としては、例えば、腎障害、虚血再灌流障害などが挙げられる。虚血性疾患としては、例えば、心筋梗塞、狭心症などが挙げられる。癌疾患としては、例えば、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がんなどが挙げられる。ＴＳＰ１は、扁平上皮がん、乳がん、およびすい臓がんの進行を促進することが報告されている（例えば、前記非特許文献２１、第３９頁左欄、下から１４行～右欄３行、およびTable 4参照）。好ましい態様において、本発明の医薬組成物は、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であり、例えば、重症下肢虚血患者における創傷治癒の促進および重症下肢虚血に対する血管内治療の予後の改善に有用である。

　ＴＳＰ１は、重症下肢虚血患者の下肢骨格筋中でその発現が亢進していることが知られている。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、本発明の医薬組成物は、ＴＳＰ１への血管内皮細胞の接着を阻害することにより、ＴＳＰ１によって阻害されている血管新生を促進することができると考えられる。それにより本発明の医薬組成物は、重症下肢虚血患者における創傷治癒を促進することができ、またカテーテルなどによる血管内治療と組み合わせた場合に当該治療の予後を改善する（例えば、再狭窄を予防する）ことができる。

　本発明において、疾患または症状の治療または予防には、該疾患の発症の予防、増悪または進行の抑制または阻害、該疾患に罹患した個体が呈する一つ以上の症状の軽減または増悪もしくは進行の抑制、二次性疾患の治療または予防などが含まれる。

　本発明の医薬組成物は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩と、適宜の薬理学上許容される添加剤とを混合して製剤化することができる。例えば、本発明の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤などの製剤として経口的に、または、注射剤、経皮吸収剤などの製剤として非経口的に投与することができる。

　これらの製剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、乳化剤、安定剤、希釈剤、注射剤用溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、防腐剤、抗酸化剤などの添加剤を用いて、周知の方法で製造される。

　賦形剤としては、例えば、有機系賦形剤または無機系賦形剤が挙げられる。有機系賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖のような糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプンのようなデンプン誘導体；結晶セルロースのようなセルロース誘導体；アラビアゴムなどが挙げられる。無機系賦形剤としては、例えば、硫酸カルシウムのような硫酸塩が挙げられる。

　結合剤としては、例えば、上記の賦形剤；ゼラチン；ポリビニルピロリドン；ポリエチレングリコールなどが挙げられる。

　崩壊剤としては、例えば、上記の賦形剤；クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウムのような化学修飾された、デンプンまたはセルロース誘導体；架橋ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。

　滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；コロイドシリカ；ビーズワックス、ゲイロウのようなワックス類；硫酸ナトリウムのような硫酸塩；ラウリル硫酸ナトリウムのようなラウリル硫酸塩；上記の賦形剤におけるデンプン誘導体などが挙げられる。

　乳化剤としては、例えば、ベントナイト、ビーガムのようなコロイド性粘土；ラウリル硫酸ナトリウムのような陰イオン界面活性剤；塩化ベンザルコニウムのような陽イオン界面活性剤；ポリオキシエチレンアルキルエーテルのような非イオン界面活性剤などが挙げられる。

　安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラヒドロキシ安息香酸エステル類；クロロブタノールのようなアルコール類；フェノール、クレゾールのようなフェノール類などが挙げられる。

　希釈剤としては、例えば、水、エタノール、プロピレングリコールなどが挙げられる。

　注射剤用溶剤としては、例えば、水、エタノール、グリセリンなどが挙げられる。

　溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、D-マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。

　懸濁化剤としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。

　等張化剤としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、D-マンニトールなどが挙げられる。

　緩衝剤としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。

　無痛化剤としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。

　防腐剤としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。

　抗酸化剤としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。

　本発明の医薬組成物が投与される対象は、例えば、哺乳動物であり、好ましくはヒトである。

　本発明の医薬組成物の投与径路としては、経口投与および非経口投与のいずれでもよく、対象となる疾患に応じて好適な投与経路を選択すればよい。また投与経路は、全身投与および局所投与のいずれであってもよい。非経口投与としては、例えば、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、腹腔内投与、経皮投与、骨内投与、関節内投与などを挙げることができる。本発明の医薬組成物の投与径路の好ましい態様は、静脈内投与、皮下投与、または経皮投与である。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、治療または予防に有効な量で対象に投与される。「治療または予防に有効な量」とは、特定の疾患、投与形態および投与径路につき治療または予防効果を奏する量を意味し、対象の種、疾患の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定される。

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の投与量は、対象の種、疾患の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定され、ヒトの成人に対しては、通常、０．１～１０００ｍｇ／ｋｇ、好適には０．１～１０ｍｇ／ｋｇを、１～７日間に１回、または１日２回もしくは３回以上投与することができる。

　本発明の医薬組成物は、少なくとも１つの既知の治療剤または治療法と併用してもよい。例えば、重症下肢虚血の治療においては、カテーテルなどの血管内治療の前に、後に、または同時に、本発明の医薬組成物を投与することができる。
　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、薬剤溶出性ステント（ＤＥＳ）によって送達することができる。薬剤溶出性ステントとは、ステント表面に薬剤を担持させ、血管内留置後、薬剤が徐々に溶出されるようにしたステントをいう。

　また本発明は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法に関する。

　本発明における「治療または予防有効量」とは、特定の疾患または症状、投与形態および投与径路につき治療または予防効果を奏する量を意味し、対象の種、疾患または症状の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定される。

　本発明における「対象」は、例えば、哺乳動物であり、好ましくはヒトである。

　本発明における「投与すること」には、経口投与および非経口投与が含まれ、全身投与および局所投与のいずれであってもよい。非経口投与としては、例えば、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、腹腔内投与、経皮投与、骨内投与、関節内投与などを挙げることができる。本発明における「投与すること」の好ましい態様は、静脈内投与、皮下投与、または経皮投与である。

　本発明における「疾患または症状」としては、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状が挙げられる。本発明によれば、重症下肢虚血または末梢動脈疾患を治療または予防することができる。

　以下、実施例および試験例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲は、これらに限定されるものではない。

（実施例１～１０４）
　実施例１～１０４の大環状ポリペプチドの構造式を以下に示す。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

　また実施例１～１０４の大環状ポリペプチドを構成する残基を表１～４に示す。表中の１３番目のアミノ酸は、連結基を構成するアミノ酸であり、そのＣ末端はアミド基に変換されている。

 

 

 

 

　表５～７に示す通り、実施例１～１０４の大環状ポリペプチドを下記の合成法１～５により、またその酢酸塩を合成法６により、合成した。なお、化合物ＸＸＸａは、化合物ＸＸＸの酢酸塩を示す。

 

 

 

合成法１
　自動合成機Syro II(Biotage Japan社)を用い、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行った。
　Rink Amide Resin AM (Novaviochem社)の88μmol相当を反応用ベッセルに加え、1-メチル-2-ピロリジノン中で、以下の１）および２）に従って順次アミノ酸を連結した。
　１）CysおよびHis：N, N-ジイソプロピルカルボジイミド、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(HOAt)、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
　２）その他のアミノ酸：O-（7-アザベンゾトリアゾール-1-イル）-N, N, N’, N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート(HATU)、N, N-ジイソプロピルアミン、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
　Fmoc基の脱保護は20%ピペリジン／1-メチル-2-ピロリジノンで行った。
　N末端のアミノ酸を連結し、Fmoc基を脱保護した後、1-メチル-2-ピロリジノン中で、N,N-ジイソプロピルカルボジイミド、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール（HOAt）、クロロ酢酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
　得られたペプチドレジンを1-メチル-2-ピロリジノンで3回、ジクロロメタンで3回洗浄して乾燥し、トリフルオロ酢酸－エタンジチオール－トリイソプロピルシラン－水（体積比で92.5: 2.5: 2.5: 2.5）を2mL加えて室温で3時間攪拌した。
　エーテル沈殿により切断された粗ペプチドを回収し、tert-ブチルメチルエーテルで２回洗浄して乾燥した後、ジメチルスルホキシド（8mL）に溶解し、n-プロピルアミン（80μL）を加えて終夜静置した。酢酸（80μL）を加えた後、V10（Biotage Japan社）で反応液を濃縮し、Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水－アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。

合成法２
　合成法1に従って、目的物のフラクションを凍結乾燥した後、0.1N塩酸－アセトニトリルに溶解し再び凍結乾燥して、塩酸塩として目的物を得た。

合成法３
　自動合成機Liberty Blue（CEM社）を用い、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行った。
　Rink Amide Resin AM (Bovaviochem社)の100μmol相当を反応用ベッセルに加え、N, N-ジメチルホルムアミド中でN, N-ジイソプロピルカルボジイミド、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ5当量加えて反応させ、順次アミノ酸を連結した。
　Fmoc基の脱保護は20%ピペリジン／N, N-ジメチルホルムアミドで行った。
　N末端のアミノ酸を連結し、Fmoc基を脱保護した後、N, N-ジメチルホルムアミド中で、N, N-ジイソプロピルカルボジイミド、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル、クロロ酢酸をそれぞれ5当量加えて反応させた。
　得られたペプチドレジンをN, N-ジメチルホルムアミドで3回、ジクロロメタンで3回洗浄して乾燥し、トリフルオロ酢酸－エタンジチオール－トリイソプロピルシラン－水（体積比で92.5: 2.5: 2.5: 2.5）を2mL加えて室温で3時間攪拌した。
　エーテル沈殿により切断された粗ペプチドを回収し、tert-ブチルメチルエーテルで2回洗浄して乾燥した後、ジメチルスルホキシド（8ml）に溶解し、ｎ－プロピルアミン（80μL）を加えて終夜静置した。酢酸（80μL）を加えた後、V10（Biotage Japan社）で反応液を濃縮し、Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水－アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥した後、0.1N塩酸-アセトニトリルに溶解し再び凍結乾燥して、塩酸塩として目的物を得た。

合成法４
　合成法２で得た大環状ポリペプチド塩酸塩（40.0mg, 24μmol）をアセトニトリル（5mL）、50mM炭酸水素アンモニウム水溶液（5mL）に溶解させた。m-クロロ過安息香酸の100mg/mLアセトニトリル溶液を64μL（24μmol）加えて攪拌し、室温で静置した。2時間後さらに15μL（6μmol）加えて1時間静置した。Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水－アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。

合成法５
　合成法２で得た大環状ポリペプチド塩酸塩（40.0mg, 24μmol）をアセトニトリル（5mL）、50mM炭酸水素アンモニウム水溶液（5mL）に溶解させた。m-クロロ過安息香酸の100mg/mLアセトニトリル溶液を127μL（48μmol）加えて攪拌し、室温で静置した。2時間後さらに64μL（24μmol）加えて1時間静置した。Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水－アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。

合成法６
　合成法１で得た目的物のトリフルオロ酢酸塩、または合成法２で得た目的物の塩酸塩を10%アセトニトリル水溶液に溶解し（5-10mM）、あらかじめ酢酸イオンに置換しておいたダウエックス（登録商標）(1x8 100-200メッシュ、1.2meq/ml、和光純薬工業株式会社)を50当量加えて2時間振とうした。ろ過した後、ろ液を凍結乾燥し、目的物を酢酸塩として得た。

　実施例１～１０４の大環状ポリペプチドの合成に用いた天然アミノ酸試薬を表８および９に示す。また実施例１～１０４の大環状ポリペプチドの合成に用いたか、または用い得る非天然アミノ酸試薬とその調達先を表１０～１２に示す。

 

 

 

 

 

　各大環状ポリペプチドの精製に用いたＨＰＬＣ条件および保持時間を表５～７に示す。ＨＰＬＣ条件１～４は以下の通りである。

ＨＰＬＣ条件１
カラム：Kinetex 1.7u XB-C18(50 x 2.1 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水　B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：0.6 ml/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％）、０．３３分（Ｂ１０％）、０．３４分（Ｂ２０％）、０．６６分（Ｂ２０％）、０．６７分（Ｂ３０％）、０．９９分（Ｂ３０％）、１．００分（Ｂ４０％）、１．３３分（Ｂ４０％）、１．３４分（Ｂ５０％）、１．６６分（Ｂ５０％）、１．６７分（Ｂ８０％）、２．５０分（Ｂ８０％）

ＨＰＬＣ条件２
カラム：Inertsil　ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水　B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.0 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％)、２０．００分（Ｂ７０％)

ＨＰＬＣ条件３
カラム：Inertsil　ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水　B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.5 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ２５％)、８．００分（Ｂ７０％)

ＨＰＬＣ条件４
カラム：Inertsil　ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水　B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.5 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ５％)、８．００分（Ｂ７０％)

　また得られた目的物の質量分析を、以下の条件でＬＣ－ＭＳまたはＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳにより行った。各大環状ポリペプチドのＭＳ実測値を表５～７に示す。

ＬＣ－ＭＳ条件
　Agilent 6530 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS（Agilent Tecnology社）を用いて測定した。
カラム：Kinetex 1.7u XB-C18(50 x 2.1 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水　B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：0.6 ml/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％）、０．３３分（Ｂ１０％）、０．３４分（Ｂ２０％）、０．６６分（Ｂ２０％）、０．６７分（Ｂ３０％）、０．９９分（Ｂ３０％）、１．００分（Ｂ４０％）、１．３３分（Ｂ４０％）、１．３４分（Ｂ５０％）、１．６６分（Ｂ５０％）、１．６７分（Ｂ８０％）、２．５０分（Ｂ８０％）

ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ条件
　4800　MALDI TOF/TOF（ABSCIEX社）を用いて測定した。マトリックスにはα－シアノ－４－ヒドロキシケイ皮酸（CHCA）を用いた。

（試験例１）細胞接着阻害アッセイ
Ｉ．材料・試薬
・96 well Non-treated White with clear bottom (Coster, 3632)
・BrightMax adhesive sealing films (EXCEL Scientific WT50)
・プロテオセーブ（登録商標）SS 15mL (住友ベークライトMS-52150)
・Thrombospondin human platelet (Calbiochem 605225)
・HUVEC (KURABO KE-4109P10)
・EGM-2 MV (Lonza, CC-3202): HUVEC継代用
・Collagen coated dish (IWAKI 4020-010): HUVEC継代用
・Lipidure（登録商標）-BL802 (日油) 5% solution
・DMEM low glucose (GIBCO 11054-020)
・Albumin solution (35%) fraction V from Bovine (Sigma A7979)
・CellTiter-Glo (Promega G7572)

ＩＩ．アッセイ
＜Plate coat＞
　Thrombospondin 1 vial (25 μg)をTBS (+2mM CaCl₂、以下すべて同じ)に溶解し、200μg/ml溶液を調製し、プロテオセーブ（登録商標）15 mLチューブ中で10μg/mLになるようにTBSで希釈した。10μg/mL溶液を50μL/wellで96 well plateに分注し（吸着しやすいのでリザーバーは使用しなかった）、4℃で一晩静置した。
＜Plate blocking＞
　Lipidure（登録商標）をTBSで10倍希釈し0.5% solutionを調製した。上記＜Plate coat＞でコートしておいたプレートのバッファーを捨て、使用するすべてのウェルに0.5% solutionを100μL/wellで分注し、室温で１時間静置した。
＜サンプルの希釈＞
　希釈バッファー（DMEM +0.5% BSA）を用いて、各サンプルについて0.2μM溶液を調製した。0.2μM溶液2μLを希釈バッファー500μLで希釈し、希釈サンプルを調製した。Vehicle controlとしてDMSOを用い、サンプルと同様に希釈した。
＜サンプル分注＞
　上記＜Plate blocking＞のプレートのブロッキング液を捨て、TBS 150μL/wellで3回洗浄した。3回目の洗浄液をアスピレーターで完全に吸い、希釈サンプルを50μL/well分注し、室温で15～30分間静置した。
＜HUVEC播種＞
　HUVECの維持には、EGM2-MV, collagen coated dishを使用した（10～11継代で増殖が落ちるので、そこで使用終了した）。細胞を0.05% Trypsin EDTAで分散させ、DMEM 0.5% BSAで回収し、1000 rpmで3分間遠心した。上清を除いて、細胞をDMEM bufferで1回洗浄した。細胞をDMEM bufferに再懸濁し、細胞数をカウントし、10000 cells/50μLに希釈した。サンプルを分注してあるプレートに、細胞懸濁液を50μL/well分注し、軽く混ぜ、37℃で2.5時間インキュベーションした。
＜洗浄・検出＞
　細胞の接着を確認した後、アスピレーターで培地を完全に除き、100μL/wellのDMEM 0.5% BSAを静かに分注した。アスピレーターでDMEM 0.5% BSAを完全に除き、50μL/wellのDMEM 0.5% BSAを分注した。プレートの底にwhiteシールを貼り、CellTiter-Glo（登録商標）50μL/wellを分注し、2分間撹拌した後、室温で8分間静置した。EnVision Xcite Multilabel Reader（Perkin Elmer社）により発光を検出した。

ＩＩＩ．結果
　発光の測定値から、各大環状ポリペプチドによる細胞接着阻害についてIC50（nM）を算出した。得られた結果を表１～４に示す。上記試験結果により、実施例1～104の化合物はTSP1の血管内皮細胞への接着阻害作用を有し、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であることが示された。

（試験例２）SPRによる相互作用解析
　SPRによる相互作用解析は、Biacore T200（GEヘルスケア）を用いて行った。
Ｉ．Recombinant-hTSP1の固定化
　NTA-Chip(GEヘルスケア：BR100532)に500μM NiCl₂を流速5μL/minで1分間injectすることで、NTAを活性化させた。次いで、EDC/NHS mixtureを流速10μL/minで7分間injectすることで、デキストランのカルボキシル基を活性化させた。NTAおよびカルボキシル基が活性化された基板表面に対し、Recombinant-hTSP1を流速10μL/minで7分間injectすることで固定化した。Ethanolamineを流速10μL/minで7分間injectすることで、未反応の活性化カルボキシル基を不活化させた。
　なお、10xHBS-P+(GEヘルスケア：BR100671)を1xに希釈し、かつ5mM CaCl₂を添加したものを固定化bufferとして用いた。
　EDC/NHS/Ethanolamineとしては、GEヘルスケアから販売されているAmine-coupling kit (BR100050)に含まれる試薬を使用した。

ＩＩ．検体の測定
　測定Bufferは下記に示す組成で調製した。
50mM Tris-HCl pH7.5 / 150mM NaCl / 5mM CaCl₂ / 0.05% Tween20 / 5% DMSO
　測定は以下の順で実施した。
1) Startup
　基板表面の平衡化のため、測定Bufferを下記の条件でinjectした。
　Contact-time:60sec, Dissociate-time:120sec, 流速50ul/min, 温度:25℃
　同条件を5回繰り返し平衡化させた。
2) Solvent Correction
　Biacore T200はDMSO濃度の変化に対し敏感に反応することから、DMSOによる影響を補正するため、4%-4.4%-4.8%-5.2%-5.6%-6%のDMSO溶液をinjectした。
3) Sample測定
　低解離性挙動を有する検体に対し有効なSingle-Cycle kinetics法を採用した。本手法は各濃度域を同一サイクル中でinjectするため、解析において低解離に伴うサイクル間の影響を無視できる点が優れている。
　検体は3倍希釈系列で5濃度（100、33、11、3.7および1.2 nM）調製し、濃度の低い順から流速50μL/minで3分間、連続的にinjectした。また、最も高い濃度の希釈液をinjectした後、解離時間を20～30分設けた。
　なお、検体の測定前に、ベースライン作成のため測定Bufferのみを同条件でinjectした。

ＩＩＩ．解析
　Biacore T100およびT200に付属のEvaluation softwareを用いて解析した。Solvent correction測定によって得られたDMSO補正曲線を適用した。検体測定データからベースラインデータを差し引いたものに対し、kinetics fittingを実施した。
　結合速度定数(ka)および解離速度定数(kd)からKD値を算出した。得られた結果を表１～４に示す。上記試験結果により、実施例1～7、9～13、24、28、40～45、58、75の化合物はTSP1に直接結合することでTSP1の血管内皮細胞への接着阻害活性を示していることが確認された。したがって、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であることが示された。

（試験例３）血流改善測定試験
　7-9週齢の雄性C57BL/6マウスを日本チャールズ・リバー株式会社より購入し、FR-2固形飼料（株式会社フナバシファーム）を供与して1週間以上馴化させた。飼育室は午後7時消灯、午前7時点灯の12時間周期の明暗切り替えを行った。イソフルオレイン吸入麻酔下に、マウスの左大腿部を切開し、浅大腿動脈および静脈（深部大腿動脈のすぐ下から膝窩動脈および静脈まで）を結紮し、切除した。モデル作製後、被験物質（化合物24、28、40～45、58）を20 mM乳酸および5% (w/v)ルトロール溶液に溶解し、１日１回腹腔内投与した。
（血流改善測定試験１）
　ビヒクル投与群
　化合物24（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験２）
　ビヒクル投与群
　化合物28（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験３）
　ビヒクル投与群
　化合物40（10 mg/kg）投与群
　化合物41（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験４）
　ビヒクル投与群
　化合物42（10 mg/kg）投与群
　化合物43（10 mg/kg）投与群
　化合物44（10 mg/kg）投与群
　化合物45（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験５）
　ビヒクル投与群
　化合物58（10 mg/kg）投与群
 
　虚血肢（左）および非虚血肢（右）の血流を、レーザードップラー血流計（LDPI、PIM III、Perimed、Inc.）を用いて測定した。血流の値は、非虚血肢に対する虚血肢の比で評価した。
マウスの血流は、手術直後で最も低値を示し、その後、徐々に回復した。本動物モデルで検討したすべての被験物質は、ビヒクル処置と比較して、手術後の血流回復がより改善された。手術後7日目における被験物質投与群の血流は、ビヒクル処置マウスよりも高かった。結果を表１３に示す。

 

　本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１に結合し、ＴＳＰ１への血管内皮細胞などの細胞の接着を阻害することができる。従って本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状の治療または予防に有用である。また本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、血管新生促進剤として有用である。

配列番号１～１０４：実施例１～１０４の化合物のペプチド領域
配列番号１～１０４：Ｃ末端カルボキシル基のアミド化

Claims (32)

1. 　式（Ｉ）
   

   

    
   ［式中、Ａは、連結基
   

   

    
   から選択され、
   　ここで、
   

   

    
   は、Ｘ_ａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、
   

   

    
   は、Ｘ_ａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、
   

   

    
   は、Ｘ_ａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸ_ａａ１が存在しない場合にはＸ_ａａ２のα炭素への結合点を示し、
   　Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、
   　Ｒ^１０はアミノまたはヒドロキシであり、
   　ｎは０～３の整数であり、
   　ｉおよびｊはそれぞれ独立に１～３の整数であり、
   　ｋおよびｌはそれぞれ独立に０～３の整数であり、
   　ｍは１～７の整数であり；
   　Ｘ_ａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
   　Ｘ_ａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、または^ｍＳであり；
   　Ｘ_ａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
   　Ｘ_ａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
   　Ｘ_ａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
   　ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）
   

   

    
   （式中、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニルまたはＣ_３－６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
   　芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）
   

   

    
   （式中、Ｒ^４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ_１－３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ_１－３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０～３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
   　塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）
   

   

    
   ［式中、Ｒ^５は、
   式－（ＣＨ_２）_ｑａＮＨ_２（式中、ｑａは１～６の整数である）、
   式
   

   

    
   （式中、Ｒ^６は水素原子またはＣ_１－３アルキルであり、ｑｂは１～６の整数である）、
   式－（ＣＨ_２）_ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２（式中、ｑｃは１～６の整数である）、または
   式
   

   

    
   （式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
   　中性アミノ酸は、式（ＩＩｄ）
   

   

    
   ［式中、Ｒ^７は、式－（ＣＨ_２）_ｒａＮＨＣＯＮＨ_２（式中、ｒａは１～６の整数である）または式－（ＣＨ_２）_ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１～３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、^ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
   　酸性アミノ酸は、式（ＩＩｅ）
   

   

    
   ［式中、Ｒ^８は、式－（ＣＨ_２）_ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１～６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
   で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
2. 　Ｘ_ａａ４がＳｅｒである、請求項１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
3. 　Ｘ_ａａ５がＧｌｙである、請求項１または２に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
4. 　Ｘ_ａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、請求項１～３のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
5. 　Ｘ_ａａ８がＴｒｐである、請求項４に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
6. 　Ｘ_ａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、請求項１～５のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
7. 　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐである、請求項６に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
8. 　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、請求項１～７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
9. 　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、請求項８に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
10. 　Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、請求項１～９のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
11. 　Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌである、請求項１０に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
12. 　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、請求項１～１１のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
13. 　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである、請求項１２に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
14. 　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
15. 　Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、請求項１４に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
16. 　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、請求項１～１５のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
17. 　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、請求項１～１６のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
18. 　Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、請求項１７に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
19. 　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
20. 　Ｘ_ａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである、請求項１９に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
21. 　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、請求項１～２０のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
22. 　Ｘ_ａａ１２がＶａｌである、請求項２１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
23. 　Ａが、連結基
    

    

     
    である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
24. 　Ａが
    

    

     
    である、請求項２３に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
25. 　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
    　Ｘ_ａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
    　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
    　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
    　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
    　Ｘ_ａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
    　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
    　Ｘ_ａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
    　Ｘ_ａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
    　Ｘ_ａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
    　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
    　Ｘ_ａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
    　Ａが、連結基
    

    

     
    である、請求項１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
26. 　Ｘ_ａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
    　Ｘ_ａａ２が２Ｎａｌであり；
    　Ｘ_ａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
    　Ｘ_ａａ４がＳｅｒであり；
    　Ｘ_ａａ５がＧｌｙであり；
    　Ｘ_ａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
    　Ｘ_ａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
    　Ｘ_ａａ８がＴｒｐであり；
    　Ｘ_ａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
    　Ｘ_ａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
    　Ｘ_ａａ１１がＴｒｐであり；
    　Ｘ_ａａ１２がＶａｌであり；
    　Ａが
    

    

     
    である、請求項２５に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
27. 

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    

    

     
    で表される化合物からなる群より選択される、請求項２６に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
28. 　請求項１～２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
29. 　重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防のための、請求項２８に記載の医薬組成物。
30. 　請求項１～２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む、血管新生促進剤。
31. 　請求項１～２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量をヒトに投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法。
32. 　疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、請求項３１に記載の方法。