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WO2017209494A1 - 네오페트로사이드 a 및 b, 및 이의 합성방법 - Google Patents

네오페트로사이드 a 및 b, 및 이의 합성방법 Download PDF

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Publication number
WO2017209494A1
WO2017209494A1 PCT/KR2017/005645 KR2017005645W WO2017209494A1 WO 2017209494 A1 WO2017209494 A1 WO 2017209494A1 KR 2017005645 W KR2017005645 W KR 2017005645W WO 2017209494 A1 WO2017209494 A1 WO 2017209494A1
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WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
compound
formula
nps
pyridine
heart disease
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/KR2017/005645
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
한진
정승훈
송인성
김형규
김나리
케이. 수비나라리사
엔. 마카리에브아타티아나
에이. 스토니크발렌틴
브이. 야순스키드미트리
이. 니판티예프니콜라이
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Industry Academic Cooperation Foundation of Inje University
Original Assignee
Industry Academic Cooperation Foundation of Inje University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Industry Academic Cooperation Foundation of Inje University filed Critical Industry Academic Cooperation Foundation of Inje University
Priority to US16/327,330 priority Critical patent/US10927101B2/en
Publication of WO2017209494A1 publication Critical patent/WO2017209494A1/ko
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Ceased legal-status Critical Current

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    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
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    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
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    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
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    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
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    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
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    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
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    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings

Definitions

  • the present invention relates to a novel Pyridine Nucleosides compound extracted from Neopetrosia sp, a marine sponge, and its medical use.
  • Ischemic heart diseases such as myocardial infarction, arrhythmia, and heart failure caused by cardiomyocyte damage and cardiac function during ischemic reperfusion are high in morbidity, mortality, and hard to cure, and intensive basic and clinical studies have been conducted for the past 50 years. .
  • Ischemic reperfusion injury involves various physiological mechanisms such as metabolism, changes in immune response and ion homeostasis, oxygen free radicals, and therefore, studies have been conducted in various fields such as immunomodulators, apoptosis-related substances, and ion channel regulators. In addition to the mechanism research, the development of therapeutic agents and surgical procedures by new action points has been actively conducted, but the technology for protecting cardiomyocytes from ischemic reperfusion has not been clinically commercialized.
  • an object of the present invention is to provide a novel compound having a therapeutic effect on ischemic heart disease.
  • Another object of the present invention is to provide a method for preparing a novel compound having a therapeutic effect on ischemic heart disease.
  • the present invention to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating ischemic heart disease.
  • the present invention has another object to provide a health functional food for preventing or improving ischemic heart disease.
  • the present invention provides a pyridine nucleosides compound represented by the following formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • R 1 is heteroaromatic or phenol.
  • the pyridine nucleoside is characterized in that the compound represented by the formula (2) or formula (3).
  • the present invention also provides a method for synthesizing a pyridine nucleoside compound represented by Formula 2 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating ischemic heart disease comprising a pyridine nucleoside compound represented by Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the present invention provides a health functional food for preventing or improving ischemic heart disease comprising a pyridine nucleoside compound represented by the formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. .
  • the present invention is a novel pyridine nucleoside compound obtained by dividing neopetrosia sp, a marine sponge, neopetrosia sp, extracted with ethanol with n-butanol (n-BuOH).
  • NPS A Petroside A
  • NPS B Neopetroside B
  • oxidative phosphorylation basal and mitochondria when the NPS A is treated in cardiomyocytes
  • Activation of oxygen consumption, respiration associated with ATP, and ATP synthesis stimulating glycolysis and treatment of NPS A in the ischemic reperfusion injury model resulted in recovery of left ventricular pressure damaged by ischemic reperfusion, and myocardial injury site.
  • the size of was significantly reduced.
  • Neopetrosia sp which is a marine sponge
  • Figure 2 is a result confirming the toxicity of neooperoside A (Neoperoside A, NPS A) on the cardiomyocytes,
  • FIG. 3 shows the results of confirming oxygen consumption rate (OCR) and mitochondrial ATP (adenosine triphosphate) levels after treatment with various concentrations of NPS A in cardiomyocytes.
  • OCR oxygen consumption rate
  • mitochondrial ATP adenosine triphosphate
  • Figure 6 confirms the activity of NPS A in the tongue-perfusion heart model
  • Figure 6A is the result of confirming the left ventricular pressure (LV pressure) of the positive control
  • Figure 6B is left ventricular pressure of the experimental group treated with NPS A Is the result of
  • Figure 7 is a result confirming the effect on oxidative phosphorylation in mitochondria extracted from the heart heart treated with NPS A,
  • FIG. 8 shows the results of screening for kinases regulated by NPS A using a set of kinases associated with cardiovascular and diabetes.
  • the inventor of the present invention extracted a novel pyridine nucleosides compound from Neopetrosia sp, a marine sponge of Fig. 1, and confirmed the effect of treating the ischemic heart disease by The present invention has been completed.
  • Neopetrocia species The spongiform (Neopetrosia sp. Sponge) was developed in May 2010 near Con Son Island, Vietnam (08 ° 40,9 N; 106 ° 44,4 E, depth 6-15 m). Collected via scuba during the 38 th systematic cruise of the R / V "Academic Oparin" of the Institute of Bioorganic Chemistry (PIBOC).
  • Neopetroc species The spongy bodies are 1-2 cm thick and have a variety of shapes, the surfaces are generally uniform, smooth or slightly velvety in touch. Oscule is sporadically present at intervals of up to 5 mm in diameter, the outer color is dull blue, the inner color is creamy, hard, brittle and dense choanosomal skeleton Have
  • the present invention provides a Pyridine Nucleosides compound represented by Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • R 1 is heteroaromatic or phenol.
  • the pyridine nucleoside compound is preferably a compound represented by the following Formula 2 or Formula 3, the compound represented by Formula 2 is Neooperoside A (NPS A), the compound represented by Formula 3 is neo Petroside B (NPS B).
  • the pyridine nucleoside compound may be extracted from neo-Petrcia species spongysis, and more specifically, the extract extracted from neo-Petrose species spongysis with a solvent selected from the group consisting of water, C1-C4 alcohol and mixtures thereof. Can be obtained by fractionation with C4 alcohol.
  • NPS A can be obtained through the synthesis as in Scheme 1 below.
  • the present invention provides a step of preparing a riboside compound of Compound 10 by adding p-acetoxybenzoyl chloride to the riboside solution of Compound 9, as in Scheme 1; Preparing ethyl nicotinyl riboside compound of compound 11 by adding ethyl nicotinate to the riboside solution of compound 10; Preparing an nicotinoyl riboside compound of compound 12 by adding an ammonium solution to the nicotinoyl riboside solution of compound 11; And dissolving nicotinyl riboside of Compound 12 in an aqueous trifluoroacetic acid solution, followed by concentration and lyophilization to prepare a neopetroside compound of Compound 8, wherein the pyridine nucleoside compound represented by Formula 2 is prepared. Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the NPS A when the NPS A is treated to cardiomyocytes, oxidative phosphorylation, basal and mitochondrial oxygen consumption rates, ATP-associated respiration and ATP synthesis are activated, and stimulate the glycolysis.
  • the NPS A was treated in the ischemic reperfusion injury model, the left ventricular pressure was restored by ischemic reperfusion, and the size of the myocardial injury site was significantly reduced.
  • the present invention can provide a pharmaceutical composition for preventing or treating ischemic heart disease, which comprises a pyridine nucleosides compound represented by the following formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • R 1 is hetero-aromatic (heteroaromatic) or phenolic (phenol).
  • the pyridine nucleoside compound is preferably a compound represented by the following Formula 2 or Formula 3, the compound represented by Formula 2 is Neooperoside A (NPS A), the compound represented by Formula 3 is neo Petroside B (NPS B).
  • the ischemic heart disease may be selected from the group consisting of myocardial infarction, heart failure and angina pectoris, and more preferably myocardial infarction.
  • the pharmaceutical composition may include 0.01 to 90 parts by weight of the pyridine nucleoside compound, based on 100 parts by weight of the pharmaceutical composition.
  • the pharmaceutical composition for preventing or treating ischemic heart disease according to the present invention is selected from the group consisting of injections, granules, powders, tablets, pills, capsules, suppositories, gels, suspensions, emulsions, drops or solutions according to conventional methods. Either formulation can be used.
  • the carriers, excipients and diluents are lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline Cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil can be used, and solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules.
  • solid preparations may be prepared by mixing at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin, and the like in the composition.
  • excipients such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin, and the like
  • lubricants such as magnesium styrate and talc may also be used.
  • Oral liquid preparations include suspensions, solvents, emulsions, syrups, and the like, and may include various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin.
  • Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories, and the like.
  • non-aqueous solvent and suspending agent propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate and the like can be used.
  • Witsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like may be used as the base material of the suppository.
  • the pharmaceutical composition is intravenous, intraarterial, intraperitoneal, intramuscular, intraarterial, intraperitoneal, intrasternal, transdermal, nasal, inhaled, topical, rectal, oral, intraocular or intradermal Via the route can be administered to the subject in a conventional manner.
  • the preferred dosage of the pyridine nucleoside compound may vary depending on the condition and weight of the subject, the type and severity of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration and may be appropriately selected by those skilled in the art. According to one embodiment of the present invention, but not limited thereto, the daily dosage may be 0.01 to 200 mg / kg, specifically 0.1 to 200 mg / kg, more specifically 0.1 to 100 mg / kg. Administration may be administered once a day or divided into several times, thereby not limiting the scope of the invention.
  • the 'subject' may be a mammal including a human, but is not limited thereto.
  • the present invention may provide a health functional food for preventing or improving ischemic heart disease, which comprises a pyridine nucleosides compound represented by the following Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient:
  • R 1 is heteroaromatic or phenol.
  • the pyridine nucleoside compound is preferably a compound represented by the following Formula 2 or Formula 3, the compound represented by Formula 2 is Neooperoside A (NPS A), the compound represented by Formula 3 is neo Petroside B (NPS B).
  • the ischemic heart disease may be selected from the group consisting of myocardial infarction, heart failure and angina pectoris, and more preferably myocardial infarction.
  • the dietary supplement is used with other food or food additives in addition to the pyridine nucleoside compound, and may be suitably used according to conventional methods.
  • the mixed amount of the active ingredient can be suitably determined depending on the purpose of use thereof, for example, prophylactic, health or therapeutic treatment.
  • the effective dose of the compound contained in the dietary supplement may be used in accordance with the effective dose of the therapeutic agent, but may be less than the above range for long term intake for health and hygiene purposes or for health control purposes. It is evident that the active ingredient can be used in an amount above the above range because there is no problem in terms of safety.
  • dietary supplements for example, meat, sausages, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, dairy products including ice cream, various soups, drinks, tea , Drinks, alcoholic beverages and vitamin complexes.
  • the pyridine nucleoside compound represented by Formula 1 of the present invention may be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt, and the salt may be used in the form of either a pharmaceutically acceptable basic salt or an acid salt.
  • the basic salt may be used in the form of organic salt or inorganic salt, and may be sodium salt, potassium salt, calcium salt, lithium salt, magnesium salt, cesium salt, aluminum salt, ammonium salt or triethyl. It may be selected from the group consisting of aluminum salts and pyridinium salts, but is not limited thereto.
  • acid salts are useful acid addition salts formed by free acid.
  • the inorganic acid and organic acid may be used as the free acid, and hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, sulfurous acid, phosphoric acid, etc. may be used as the inorganic acid, and citric acid, acetic acid, maleic acid, fumaric acid, gluconic acid, and methanesulfonic acid may be used as the organic acid.
  • Benzenesulfonic acid, camphorsulfonic acid, oxalic acid, malonic acid, glutaric acid, acetic acid, glyconic acid, succinic acid, tartaric acid, 4-toluenesulfonic acid, galacturonic acid, embonic acid, glutamic acid, citric acid, aspartic acid Etc. can be used.
  • hydrochloric acid may be used as the inorganic acid
  • methanesulfonic acid may be used as the organic acid.
  • the pyridine nucleoside compound represented by Formula 1 of the present invention includes not only pharmaceutically acceptable salts, but also all salts, hydrates, and solvates that can be prepared by conventional methods.
  • the addition salt according to the present invention can be prepared by a conventional method, for example, the pyridine nucleoside compound represented by the formula (1) is dissolved in a water miscible organic solvent, such as acetone, methanol, ethanol, or acetonitrile and excess It may be prepared by adding an organic base of or adding an aqueous base solution of an inorganic base, followed by precipitation or crystallization. Alternatively, the solvent or excess base may be evaporated and dried in this mixture to obtain an addition salt, or the precipitated salt may be prepared by suction filtration.
  • a water miscible organic solvent such as acetone, methanol, ethanol, or acetonitrile and excess
  • the solvent or excess base may be evaporated and dried in this mixture to obtain an addition salt, or the precipitated salt may be prepared by suction filtration.
  • Neo-Petrocea species a marine sponge, was extracted with ethanol (Ethanol, EtOH), and then partitioned into distilled water (H 2 O) and n-butanol (n-butanol, n-BuOH).
  • n-BuOH layer (n-BuOH-soluble material) was concentrated in vacuo and then partitioned into EtOH and n-hexane.
  • the EtOH layer was chromatographed on a YMC gel column, purified using reversed-phase high performance liquid chromatography, and purified by neopetroside.
  • A Neopetroside A, NPS A
  • Neopetroside B Neopetroside B, NPS B
  • NPS A Bright yellow amorphous solid (amorphous solid); UV (EtOH) ⁇ max (log ⁇ ) 260 (3.54); ECD (EtOH, c 2.66 ⁇ 10 ⁇ 4 M) ⁇ max ( ⁇ ) 275 (+0.21) nm; IR (KBr) ⁇ max 3417, 1708, 1642, 1608, 1385 cm ⁇ 1 ; 1 H, 13 C NMR, Table 1; HRESIMS m / z 376.1033 [M + H] + (calcd for C 18 H 17 NO 8 , 376.1027) and 398.0854 [M + Na] + (calcd for C 18 H 17 NNaO 8 , 398.0846).
  • HMRS-ES positive mode m / z found 375.1059 [M + Na] + ; calcd. for C 17 H 20 Na0 8 375.1056.
  • the mixture was stirred at rt for 4 h, then diluted with water and concentrated to dryness.
  • Nicotinoyl riboside 12 (65 mg, 0.157 mmol) was dissolved in 2 ml of 90% aqueous trifluoroacetic acid (TFA), and then the mixture was left at room temperature for one hour. Concentrated in vacuo, dissolved in water and lyophilized to 74 mg (97%) pure nicotinoyl 8 ribonucleic side (nicotinoyl riboside 8, neopetroside A) to obtain a salt.
  • TFA trifluoroacetic acid
  • 2,3-acetonide of D-ribose is used as a starting material, and conditions change for formation of N-glycoside bond (Ph 3 P in CCl 4) .
  • one step was reduced through the use of Tf 2 O in CH 2 Cl 2 , thereby avoiding the use of intermediate chlorine-containing derivatives.
  • NPS A is a safe compound that is soluble in water, soluble in pyridine and methanol, but poorly soluble in other organic solvents.
  • h9c2 cells which are cardiomyocytes
  • the toxicity of NPS A extracted from Neopetrosia sp of Example 1 was confirmed.
  • the h9c2 cells were dispensed by 2 ⁇ 10 4 cells / well in a 96-well tissue culture plate and incubated for 16 hours. Thereafter, various concentrations of NPS A were treated and further incubated for 24 hours.
  • the degree of reduction of MTT to intracellular formazan was confirmed by measuring the optical density at 570 nm using a microplate reader (Molecular device, Sunnyvale, Calif., USA).
  • NPS A did not show toxicity even to a concentration of 300 ⁇ M to the cardiomyocytes.
  • OCR oxygen consumption rate
  • mitochondrial ATP adenosine triphosphate
  • OCR basal oxygen consumption rate
  • respiratory respiratory
  • proton leak maximum capacity
  • mitochondrial OCR associated with adenosine triphosphate (ATP) Confirmed.
  • h9c2 cells were dispensed in XF24 cell plates (Seahorse Bioscience, Billerica, Mass., USA) by 2 ⁇ 10 4 cells / well and incubated for 16 hours. Thereafter, the cells were dispensed with various concentrations of NPS A and incubated for another hour. After 1 hour, the medium was transferred to 500 ⁇ L of XF assay medium-modified DMEM (XF Assay Medium-modified DMEM, Seahorse Bioscience, Billerica, Mass., USA) and incubated for 1 hour in a 37 ° C. incubator without CO 2 .
  • XF assay medium-modified DMEM XF Assay Medium-modified DMEM, Seahorse Bioscience, Billerica, Mass., USA
  • OCR OCR was measured with an XF24 analyzer (Seahorse Bioscience, Billerica, Mass., USA) and XF24 software. After OCR measurements, XF 24 assay results were normalized to cell number and the number of cells in each well was measured with a Luna TM automated cell counter (Logos, Annandale, VA, USA).
  • mitochondrial ATP levels were measured using the Mitochondrial ToxGlo TM assay (Promega, Madison, Wis., USA) according to the manufacturer's instructions.
  • h9c2 cells were dispensed in 60 mm tissue culture plates by 2 ⁇ 10 6 cells / well and incubated for 16 hours, followed by treatment with 0, 3, or 10 ⁇ M of NPS A for 1 hour. All treated cells were pooled and resuspended by pipetting until the cells were evenly dispersed. Resuspended h9c2 cells were dispensed into 96 well plates by 2 ⁇ 10 4 cells / well per well, and the plate was centrifuged at 200 ⁇ g for 10 minutes to remove the medium. Then 50 ⁇ L of fresh medium (except glucose, including 10 mM galactose) was added.
  • NPS A stimulated ATP synthesis and increased intracellular ATP levels in the same cell.
  • NPS A up-regulates oxidative phosphorylation, respiratory and ATP synthesis associated with OCR and ATP of basal and mitochondria in cardiomyocytes.
  • NPS A increased OCR / ECAR ratio as well as basal extracellular acidification rate (ECAR) and basal OCR.
  • h9c2 cells were treated with 10 mM glucose (G), 1 ⁇ M oligomycin (O) and 10 mM 2 deoxyglucose (2DG) in order, treated with NPS A for 1 hour, and then measured by XF24 analyzer. It was.
  • NPS A may affect energy metabolism, enhance glycolysis and oxidative posphorylation and increase the level of ATP synthesis.
  • NPS Effect of treatment and ventricular pressure recovery
  • the heart of the rat was extracted and the experiment was carried out using an acyclic system.
  • an ischemic reperfusion model I / R; ischemic reperfusion
  • a drug treatment group NPS A treatment; NPS A 10 ⁇ M treatment after ischemic reperfusion
  • hypoxic solution was flowed for 30 minutes.
  • normal thyroid solution and NPS A were treated together to restore the cardiac function and confirm the change of electrocardiogram.
  • the heart was blocked to induce reperfusion (50 minutes) following global ischemia (30 minutes). After global ischemia (starting reperfusion), 10 ⁇ M of NPS A was administered for 30 minutes.
  • NPS A is processed Rat From the mitochondria extracted from the heart Oxidative Identify the effects on phosphorylation
  • OCR was significantly reduced during the three phases of mitochondrial respiration in mitochondria extracted from cardioblasts of the I / R rat group, but the fourth phase of respiration was not altered in any group of mitochondria.
  • NPS A When NPS A was administered, it was determined whether it affected kinases related to cell survival.
  • kinases regulated by NPS A were selected using a set of kinases associated with cardiovascular and diabetes.
  • NPS A did not control most of the candidate kinase of the first type.
  • GSK-3 ⁇ (Glycogen synthase kinase-3 ⁇ ), GSK-3 ⁇ and mTOR (mammalian target of rapamycin) among the kinases associated with diabetes.
  • IC 50 of NPS A was 140 ⁇ M for GSK-3 ⁇ and 124 ⁇ M for GSK-3 ⁇ . In contrast, no change in mTOR activity was observed with different doses of NPS A.

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Abstract

본 발명은 심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)을 에탄올로 추출한 추출물을 n-부탄올(n-butanol, n-BuOH)로 분획하여 수득한 신규한 피리딘 뉴클레오사이드 화합물인 네오페트로사이드 A(Neopetroside A, NPS A)와 네오페트로사이드 B(Neopetroside B, NPS B)에 대한 것으로, 상기 NPS A를 심근세포에 처리하였을 때 산화적 인산화(oxidative phosphorylation), 기저(basal) 및 미토콘드리아의 산소소비율, ATP와 연관된 호흡 및 ATP 합성을 활성화시키며, 해당작용을 자극하는 효과를 보이며, 상기 NPS A를 허혈성 재관류 손상 모델에 처리한 경우, 허혈성 재관류에 의해 손상된 좌심실 압력이 회복되었으며, 심근손상 부위의 크기가 유의하게 감소되는 효과를 보였으므로 허혈성 심장질환 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물이나 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품으로 제공될 수 있다.

Description

네오페트로사이드 A 및 B, 및 이의 합성방법
본 발명은 심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)으로부터 추출한 신규한 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물과 이의 의학적 용도에 대한 것이다.
허혈성 재관류 시의 심근세포 손상과 심장기능 저하에 의해 발생하는 심근경색, 부정맥, 심부전증 등의 허혈성 심장질환은 유병율 및 사망률이 높고 완치가 어려워, 지난 50년 동안 집중적인 기초 및 임상 연구가 진행된 바 있다.
허혈성 재관류 손상은 대사, 면역반응 및 이온 항상성의 변화, 산소유리기 등 다양한 생리학적 기전이 관여되므로 면역조절 물질, 세포사멸 관련물질, 이온통로 조절물질 등 다양한 분야에서 연구가 이루어지고 있다. 기전연구와 함께 새로운 작용점에 의한 치료제의 개발 및 외과적 시술의 개발 등이 활발히 이루어졌으나 허혈성 재관류로부터 심근세포를 보호할 수 있는 기술이 아직 임상적으로 상용화되지못하고 있다.
관동맥우회술, 관동맥경피성형술 등의 외과적 시술 및 혈전용해제 등의 약물요법에 의한 재관류 요법 후에도 심근경색의 재발, 심장기능저하, 부정맥, 신경인지능력 저하 등 재관류 손상이 높은 비율로 나타나는 것으로 알려져있다.
따라서 허혈성 심장질환 치료에 있어서, 심근세포 손상의 진행을 늦추고, 재관류 손상을 완화시킬 수 있는 물질의 개발이 요구된다.
따라서 본 발명은 허혈성 심장질환 치료 효과를 갖는 신규한 화합물을 제공하는데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명은 허혈성 심장질환 치료 효과를 갖는 신규한 화합물의 제조방법을 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
또한, 본 발명은 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
또한, 본 발명은 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000001
상기 화학식 1에 있어서,
R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)이다.
상기 피리딘 뉴클레오사이드는 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 한다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000002
[화학식 3]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000003
또한, 본 발명은 화학식 2로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 합성 방법을 제공한다.
상기 또 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 또 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명은 심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)을 에탄올로 추출한 추출물을 n-부탄올(n-butanol, n-BuOH)로 분획하여 수득한 신규한 피리딘 뉴클레오사이드 화합물인 네오페트로사이드 A(Neopetroside A, NPS A)와 네오페트로사이드 B(Neopetroside B, NPS B)에 대한 것으로, 상기 NPS A를 심근세포에 처리하였을 때 산화적 인산화(oxidative phosphorylation), 기저(basal) 및 미토콘드리아의 산소소비율, ATP와 연관된 호흡 및 ATP 합성을 활성화시키며, 해당작용을 자극하는 효과를 보이고 상기 NPS A를 허혈성 재관류 손상 모델에 처리한 경우, 허혈성 재관류에 의해 손상된 좌심실 압력이 회복되었으며, 심근손상 부위의 크기가 유의하게 감소되는 효과를 보였다.
도 1은 심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)의 이미지이며,
도 2는 심근 세포에 대한 네오페트로사이드 A(Neoperoside A, NPS A)의 독성을 확인한 결과이고,
도 3는 심근 세포에 다양한 농도의 NPS A를 처리한 후, 산소소비율(oxygen consumption rate, OCR) 및 미토콘드리아의(Mitochondrial) ATP(adenosine triphosphate) 레벨을 확인한 결과이며,
도 4는 NPS 농도에 따른 OCR/세포외 ECAR(extracellular acidification rate)의 비율을 확인한 결과이고,
도 5는 다양한 농도의 NPS A를 처리한 후, 해당작용(glycolysis)을 확인한 결과이며,
도 6은 혀혈성 재관류 심장모델에서 NPS A의 활성을 확인한 것으로, 도 6A는 양성 대조군의 좌심실 압력(Left ventricular pressure, LV pressure)을 확인한 결과이고, 도 6B는 NPS A를 처리한 실험군의 좌심실 압력을 확인한 결과이며,
도 7은 NPS A가 처리된 렛트 심장에서 추출된 미토콘드리아에서 산화적 인산화에 대한 효과를 확인한 결과이고,
도 8은 심혈관(cardiovascular) 및 당뇨병(diabetes)과 관련된 키나아제(kinase) 세트를 이용하여 NPS A에 의해 조절되는 키나아제를 선별한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자는 도 1의 심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)으로부터 신규한 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물을 추출하였고, 상기 화합물의 허혈성 심장질환 치료 효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.
상기 네오페트로시아 종. 해면체(Neopetrosia sp. sponge)는 2010년 5월 콘손섬 근처(Con Son Island, 베트남, 08°40,9 N; 106°44,4 E, depth 6-15 m)에서 러시아 태평양생유기화학연구소(Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, PIBOC)의 R/V "아카데믹 오파린(Academic Oparin)"의 38th 체계적인 임지답사(cruise)동안 스쿠버(scuba)를 통해 수집하였다.
네오페트로시아 종. 해면체는 1-2cm 두께이며 다양한 형태를 가지고, 표면은 일반적으로 균일하며 부드럽거나 약간 벨벳의 촉감을 가진다. 오스큘공(oscule)은 지름 내에서 최대 5mm의 간격으로 산발적으로 존재하며, 외부 색상은 흐린 파란색(dull blue)이며, 내부 색상은 크림색으로 단단하고 부서지기 쉽고 조밀한 코아노소말(choanosomal) 골격을 갖는다.
따라서 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000004
상기 화학식 1에 있어서,
R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것이 바람직하며, 화학식 2로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 A(Neoperoside A, NPS A)이고, 화학식 3으로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 B(Neoperoside B, NPS B)이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000005
[화학식 3]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000006
상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 네오페트로시아 종 해면체로부터 추출할 수 있으며, 보다 상세하게는 네오페트로시아 종 해면체를 물, C1-C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출한 추출물을 C1-C4 알콜로 분획하여 수득할 수 있다.
더불어 상기 NPS A는 하기 반응식 1과 같은 합성을 통하여서도 수득할 수 있다.
[반응식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000007
따라서 본 발명은 상기 반응식 1과 같이, 화합물 9의 리보사이드 용액에 p-아세톡시벤조일 클로라이드를 첨가하여 화합물 10의 리보사이드 화합물을 제조하는 단계; 상기 화합물 10의 리보사이드 용액에 에틸 니코티네이트을 첨가하여 화합물 11의 니코티노일 리보사이드 화합물을 제조하는 단계; 상기 화합물 11의 니코티노일 리보사이드 용액에 암모늄 용액을 첨가하여 화합물 12의 니코티노일 리보사이드 화합물을 제조하는 단계; 및 상기 화합물 12의 니코티노일 리보사이드를 트리플루오로아세트산 수용액에 용해시킨 후, 농축 및 동결건조하여 화합물 8의 네오페트로사이드 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 화학식 2로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.
더불어 본 발명에 따르면, 상기 NPS A를 심근세포에 처리하였을 때 산화적 인산화(oxidative phosphorylation), 기저(basal) 및 미토콘드리아의 산소소비율, ATP와 연관된 호흡 및 ATP 합성을 활성화시키며, 해당작용을 자극하는 효과를 보이고 상기 NPS A를 허혈성 재관류 손상 모델에 처리한 경우, 허혈성 재관류에 의해 손상된 좌심실 압력이 회복되었으며, 심근손상 부위의 크기가 유의하게 감소되는 효과를 확인하였다.
그러므로 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공할 수 있다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000008
상기 화학식 1에 있어서,
R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것이 바람직하며, 화학식 2로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 A(Neoperoside A, NPS A)이고, 화학식 3으로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 B(Neoperoside B, NPS B)이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000009
[화학식 3]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000010
상기 허혈성 심장질환은 심근경색, 심부전증 및 협심증으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 보다 바람직하게는 심근경색일 수 있다.
상기 약학 조성물은 약학 조성물 총 100 중량부에 대하여, 피리딘 뉴클레오사이드 화합물을 0.01 내지 90 중량부로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 통상적인 방법에 따라 주사제, 과립제, 산제, 정제, 환제, 캡슐제, 좌제, 겔, 현탁제, 유제, 점적제 또는 액제로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형을 사용할 수 있다.
구체적으로 담체, 부형제 및 희석제는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 사용할 수 있으며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트,수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기재로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면 상기 약학 조성물은 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 복강내, 흉골내, 경피, 비측내, 흡입, 국소, 직장, 경구, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 대상체로 투여할 수 있다.
상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물의 바람직한 투여량은 대상체의 상태 및 체중, 질환의 종류 및 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 달라질 수 있으며 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 본 발명의 일실시예에 따르면 이에 제한되는 것은 아니지만 1일 투여량이 0.01 내지 200 mg/kg, 구체적으로는 0.1 내지 200 mg/kg, 보다 구체적으로는 0.1 내지 100 mg/kg 일 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고 수회로 나누어 투여할 수도 있으며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 '대상체'는 인간을 포함하는 포유동물일 수 있으나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.
더불어 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공할 수 있다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000011
상기 화학식 1에 있어서,
R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것이 바람직하며, 화학식 2로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 A(Neoperoside A, NPS A)이고, 화학식 3으로 표시되는 화합물은 네오페트로사이드 B(Neoperoside B, NPS B)이다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000012
[화학식 3]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000013
상기 허혈성 심장질환은 심근경색, 심부전증 및 협심증으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 보다 바람직하게는 심근경색일 수 있다.
상기 건강기능식품은 상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 이외에 다른 식품 또는 식품 첨가물과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적 예를 들어 예방, 건강 또는 치료적 처치에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 건강기능식품에 함유된 화합물의 유효용량은 상기 치료제의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다.
상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한이 없고, 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제등을 들 수 있다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염은 약학적으로 허용가능한 염기성 염 또는 산성 염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있다. 염기성 염은 유기염기염, 무기염기염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있으며, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 리튬염, 마그네슘염, 세슘염, 아미늄(aminium)염, 암모늄염, 트리에칠아미늄염 및 피리디늄염으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 산성 염은 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 아황산, 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 말레산, 퓨마르산, 글루코산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, 캠퍼설폰산, 옥살산, 말론산, 글루타릭산, 아세트산, 글리콘산, 석신산, 타타르산, 4-톨루엔설폰산, 갈락투론산, 엠본산, 글루탐산, 시트르산, 아스파르탄산 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는 무기산으로는 염산, 유기산으로는 메탄설폰산을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물을 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토니트릴 등에 녹이고 과량의 유기염기를 가하거나 무기염기의 염기 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 또는 이 혼합물에서 용매나 과량의 염기를 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1> 네오페트로사이드 A(Neopetroside A, NPS A) 추출 및 합성
1. 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)으로부터 추출
심해 해면체(Marin sponge)인 네오페트로시아 종을 에탄올(Ethanol, EtOH)로 추출한 후, 증류수(H2O)와 n-부탄올(n-butanol, n-BuOH)로 분배(Partitioned)하였다.
n-BuOH층(n-BuOH-soluble material)을 진공(vacuo)으로 농축한 후, EtOH과 n-헥산(n-hexane)으로 분배하였다.
그 중 EtOH층을 YMC 겔 컬럼(YMC gel column) 상에서 크로마토그래피 분리(chromatographic separation)한 후, 역전상(reversed-phase) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)를 이용해 정제하여 네오페트로사이드 A(Neopetroside A, NPS A) 및 네오페트로사이드 B(Neopetroside B, NPS B)를 수득하였다.
상기 NPS A와 NPS B에 대하여 NMR 분석을 실시하였다. 그 결과는 하기와 하기 표 1과 같다.
* NPS A: 밝은 노란색, 비정질 고체(amorphous solid); UV (EtOH)λmax (log ε) 260 (3.54); ECD (EtOH, c 2.66 × 10-4 M) λmax (Δε) 275(+0.21) nm; IR (KBr) ν max 3417, 1708, 1642, 1608, 1385 cm-1; 1H, 13C NMR, 표 1; HRESIMS m/z 376.1033 [M + H]+ (calcd for C18H17NO8, 376.1027) 및 398.0854 [M + Na]+ (calcd for C18H17NNaO8, 398.0846).
* NPS B: 밝은 노란색, 비정질 고체; UV (EtOH) λmax (log ε) 266 (3.33); ECD (EtOH c 2.04 × 10-4 M) λmax (Δε) 275 (+0.18) nm; 1H, 13C NMR (CD3OD), 표 1; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δH 11.97 (1H, s, H-1), 9.14 (1H, s, H-2), 8.80 (1H, m, H-4), 8.02 (1H, m, H-5), 8.89 (1H, m, H-6), 6.56 (1H, d, J = 5.3 Hz, H-1′), 4.63 (1H, m, H-2′), 4.23 (1H, dd, J = 3.4, 4.5 Hz, H-3′), 4.77 (1H, m, H-4′), 4.38 (1H, dd, J = 4.6, 12.2 Hz, H-5′) 4.49 (1H, dd, J = 3.6, 12.2 Hz, H-5′), 6.89 (1H, dd, J = 1.7, 3.7 Hz, H-3″), 6.21 (1H, dd, J =2.5, 3.7 Hz, H-4″), 7.08 (1H, dd, J = 1.7, 2.5 Hz, H-5″); HRESIMS m/z 347.0887 [M - H]- (calcd for C16H16N2O7, 347.0885); HRESIMS/MS m/z 110.0243 [C5H4NO2]- (calcd for C5H4NO2, 110.0248).
위치 (position) NPS A NPS B
δC,b type δH mult (J inHz) δC,b type δH mult (J inHz)
2 144.3, CH 9.28, s 144.3, CH 9.27, s
3 139.5, C 139.0, C
4 147.9, CH 8.94, dd (8.0, 1.4) 148.0, CH 8.94, m
5 127.8, CH 8.06, dd (8.0, 6.2) 127.8, CH 8.06, m
6 143.7, CH 8.96, dd (6.2, 1.4) 143.7, CH 8.95, m
7 167.2, C 168.0, C
1' 98.6, CH 6.50, d (5.3) 98.7, CH 6.48, d (5.3)
2' 74.4, CH 4.79, m 74.4, CH 4.81, m
3' 73.3, CH 4.33, dd (3.8, 4.5) 73.3, CH 4.33, dd (3.4, 4.5)
4' 88.0, CH 4.96, ddd (3.8, 3.6, 4.6) 88.2, CH 4.93, ddd (3.4, 3.6, 4.6)
5' 65.3, CH2 4.50, dd(4.6,12.2) 64.7, CH2 4.48, dd(4.6,12.2)
4.59, dd (3.6, 12.2) 4.57, dd (3.6, 12.2)
1'' 122.3, C
2'' 133.6, CH 7.93, d (8.8) 123.6, C
3'' 117.0, CH 6.86, d (8.8) 117.7, CH 6.95, dd (1.7, 3.7)
4'' 164.5, C 111.6, CH 6.21, dd (2.5, 3.7)
5'' 117.0, CH 6.86, d (8.8) 125.9, CH 7.01, dd (1.7, 2.5)
6'' 133.6, CH 7.93, d (8.8) 163.4, C
7'' 168.2, C
aSpectra were recorded at 500 MHz for 1H NMR and 125 MHz for 13C NMR. b13C NMR assignments were supported by HSQC and HMBC data.
2. NPS A 합성
또는 NPS A의 경우, 새로운 아세토나이드 디펜스(acetonide defense)를 사용하여 하기 반응식 1과 같이 합성할 수 있다.
[반응식 1]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000014
1. 1 단계
교반된 리보사이드 9(riboside 9, 240 mg, 1.33 mmol)를 포함하는 피리딘 용액(3ml)에 p-아세톡시벤조일 클로라이드(p-acetoxybenzoyl chloride, 313 mg, 1.6 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다.
혼합물을 실온에서 30분간 교반한 후, 디클로로메탄(dichloromethane)으로 희석하고, 1M HCl과 물로 세척하고 동등한 양의 NaHCO3 용액으로 포화시켰다. 그 후, 건조시키고 진공 내에서 농축시켰다.
잔여물은 1:3 부피비율의 에틸아세테이트-톨루엔(ethyl acetate-toluene)에서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography)를 수행하였다. 그 결과 아노머(anomers)의 혼합물로서 리보사이드 10( riboside 10) 화합물을 421mg(90%) 얻었다.
HMRS-ES 양성 모드(positive mode): m/z found 375.1059 [M+Na]+; calcd. for C17H20NaO8 375.1056.
2. 2 단계
0℃ 트리플릭 무수물(triflic anhydride) (0.154 mL, 0.98 mmol, 2.7 eq.)에서 디클로로메탄(1.5ml)에 리보사이드 10(120 mg, 0.34 mmol)과 에틸 니코티네이트 5(154 mg, 1.02 mmol, 3.0 eq.)를 교반한 용액을 첨가하였다.
혼합물을 실온에서 30분간 교반한 후, 메탄올에 담그고(quenched), 농축하였다.
잔여물은 에테르(ether)를 이용하여 분말화하고(triturated) 침전물(precipitate)은 (디클로로메탄 → 95:5 부피비율의 디클로로메탄-메탄올)에서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 니코티노일 리보사이드 11( nicotinoyl riboside 11)을 162 mg(72%) 수득하였다.
Rf 0.52 (15%MeOH-CHCl3); [α]D22 -3° (c 1, MeOH); δH (600 MHz, CD3OD): 0.99 및 1.28 (both s, 6H, Me2C); 1.36 (t, 3H, J = 7.1, COOCH2CH3), 2.33 (s, 3H, Ac); 4.49 (q, 2H, COOCH2CH3), 4.75 (dd, 1H, J = 3.9 및 12.9, H-5’а), 4.87 (br.d, H-5’b), 4.99 (m, 1H, H-4’), 4.70-4.79 (m, 2 H, H-2’및 H-3’), 6.63 (d, 1H, J = 5.2, H-1’), 7.20 및 8.02 (both d, 4H, J = 8.5, H-2’’, H-3’’, H-5’’, H-6’’), 8.25 (m, 1 H, H-5), 9.12 (d, 1 H, J = 8.0, H-4), 9.36 (d, 1H, J = 6.2, H-6), 9.59 (s, 1 H, H-2); HMRS-ES 양성 모드: m/z found 486.1761 [M]+; calcd. for C25H28NO9 486.1759.
3. 3 단계
니코티노일 리보사이드 11(150 mg, 0.236 mmol)를 포함하는, 교반된 2 ml의 아세토니트릴(acetonitrile)에 1.4 N aq. 암모니아 용액(ammonia solution) 2.5ml을 첨가하였다.
혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 물로 희석하고 건조한 상태에서 농축하였다.
잔여물을 [90% MeOH-H2O)=디클로로메탄25→50%]에서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 72mg(74%)의 니코티노일 리보사이드 12( nicotinoyl riboside 12)를 수득하였다.
Rf 0.36 (CHCl3-MeOH-H2O 10:10:1); HMRS-ES 양성 모드: m/z found 416.1341 [M+H]+; calcd. for C21H21NO8 416.1340.
4. 4 단계
니코티노일 리보사이드 12(65 mg, 0.157 mmol)을 2 ml의 90% 수성 트리플루오로아세트산(aqueous trifluoroacetic acid, TFA)에 용해한 후, 혼합물을 한시간 동안 실온에 두었다. 진공에서 농축한 후, 물에 용해하고, 동결건조하여 74 mg(97%)의 순수 니코티노일 리보사이드 8(nicotinoyl riboside 8, neopetroside A)를 염의 형태로 얻었다.
Rf 0.36 (CHCl3/MeOH/H2O, 10:10:1); [α]D 19+20 (c 1, H2O); δH (600 MHz, CD3OD): 4.37 (dd, 1H, J = 3.8 및 4.6, H-3’), 4.51 (dd, 1H, J = 4.5 및 12.3, H-5’a), 4.59 (dd, 1H, J = 3.5 및 12.3, H-5’b), 4.80 (m, 1H, H-2’), 4.98 (m, 1H, H-4’), 6.54 (d, 1H, J = 5.2, H-1’), 6.86 (d, 2H, J = 8.5, H-3”, H-5”), 7.93 (d, 2H, J = 8.5, H-2”, H-6”), 8.17 (dd, 1H, J = 6.8 및 7.9, H-5), 9.02 (dd, 1H, J = 1.3, 8.0, H-4), 9.12 (dd, 1H, J = 1.4 및 6.2, H-6), 9.38 (s, 1H, H-2); HMRS-ES 양성 모드: m/z found 398.0849 [M+Na]+; calcd. for C18H17NNaO8 398.0846.
이를 통해 추출 용매 및 시약에 대한 비용을 감축시킬 수 있으며, 크로마토그래피보다 더 빨리 목표 화합물을 얻을 수 있었다. 또한 총 수율의 손실 없이 소요되는 단계를 감소시킬 수 있었다.
더불어, D-리보오스의 2,3-아세토니드(2,3-acetonide)를 시작 물질로 사용하고, N-글리코사이드 본드(N-glycoside bond)의 형성을 위한 조건 변경(CCl4 내 Ph3P 대신 CH2Cl2 내 Tf2O 사용)을 통해 한 단계를 감소시켜, 중간 염소 함유 유도체(intermediate chlorine-containing derivative)의 사용을 피할 수 있었다.
상기 NPS A는 물에 용해되는 안전한 화합물이며, 피리딘(pyridine) 및 메탄올(methanol)에는 용해되지만, 다른 유기용매(organic solvents)에는 잘 용해되지 않는다.
하기 화학식 4 또는 화학식 5와 같이 두 가지 형태(forms)로 존재할 수 있는데, 이는 산 및 중성 메디아(neutral media)에서 얻을 수 있다: 분자내 염(inner salt(betainic form), 화학식 4) 및 염 형태(화학식 5).
[화학식 4]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000015
[화학식 5]
Figure PCTKR2017005645-appb-I000016
< 실시예 2> 세포에 대한 독성 확인
심근세포인 h9c2 세포에서, 상기 실시예 1의 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)에서 추출한 NPS A의 독성을 확인하였다.
96웰 조직 배양 플레이트(tissue culture plate)에 상기 h9c2 세포를 2×104 cells/well 만큼 분주한 후, 16시간 동안 배양하였다. 그런 후, 다양한 농도의 NPS A를 처리한 후, 24시간 더 배양하였다.
배양이 끝난 후, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)를 이용한 정량적인 비색분석법(colorimetric assay)을 통해 세포의 생존율을 확인하였다.
세포 내 포르마잔(formazan)에 대한 MTT의 환원 정도는 마이크로플레이트 리더기(microplate reader, Molecular device, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 570nm에서 흡광도(optical density)를 측정하여 확인하였다.
그 결과 도 2와 같이, 심근세포에 대해 NPS A는 300μM의 농도까지도 독성을 보이지 않았다.
< 실시예 3> 심근 세포에서 NPS A의 활성 확인
1. 산소소비율(oxygen consumption rate, OCR) 및 미토콘드리아의 ATP(adenosine triphosphate) 레벨 확인
h9c2 세포주에서 NPS A 처리 시 심근 기능과 대사 활성 향상 효과를 확인하였다.
이를 위해 기저(Basal) 산소소비율(oxygen consumption rate, OCR), ATP(adenosine triphosphate)와 관련된 호흡(respiratory), 양성자 누출(proton leak), 최대한의 용량(maximal capacity) 및 미토콘드리아의(Mitochondrial) OCR을 확인하였다.
먼저 OCR을 측정하기 위하여, h9c2 세포를 XF24 세포 플레이트(Seahorse Bioscience, Billerica, MA, USA)에 2×104 cells/well만큼 분주하고 16시간 동안 배양하였다. 그 후, 세포에 다양한 농도의 NPS A를 분주하고 1시간 더 배양하였다. 1시간 후, 배지를 500 μL의 XF 분석 배지-수정된 DMEM(XF Assay Medium-modified DMEM, Seahorse Bioscience, Billerica, MA, USA)으로 갈아주고, CO2 없이 37℃ 배양기에서 1시간 동안 배양시켰다.
OCR은 XF24 분석기(Seahorse Bioscience, Billerica, MA, USA) 및 XF24 소프트웨어로 측정하였다. OCR 측정 후, XF 24 분석 결과는 세포 숫자에 맞춰 표준화 하였고 각 웰의 세포의 수를 루나™ 자동화된 세포 카운터(Luna™ automated cell counter, Logos, Annandale, VA, USA)로 측정하였다.
더불어, 미토콘드리얼 톡스글루™ 분석(Mitochondrial ToxGlo™ assay (Promega, Madison, WI, USA)을 이용하여 제조사의 지침에 따라 미토콘드리아 ATP 레벨을 측정하였다.
간략하게, h9c2 세포를 60 mm 조직 배양 플레이트에 2×106 cells/well만큼 분주하고 16시간 동안 배양한 후, 0, 3, 또는 10 μM의 NPS A를 1시간 동안 처리하였다. 처리된 세포를 모두 모으고, 세포가 균일하게 분산될 때까지 파이펫팅(pipetting)으로 재현탁시켰다. 재현탁된 h9c2 세포들을 96웰 플레이트에 각 웰당 2×104 cells/well만큼 분주하고, 플레이트를 200 ×g에서 10분간 원심분리시켜 배지를 제거하였다. 그런 후, 50 μL의 신선한 배지(글루코스(glucose) 제외, 10mM 갈락토스 포함)를 더해주었다.
이를 CO2가 공급되는 가습의(humidified) 37℃ 배양기(incubator)에서 90분간 배양하였다. 그 후, 분석 용액(100 μL)을 플레이트에 넣어 주고, 실온(room temperature)에서 30분간 반응시켰다. 발광(Luminescence)은 루미노미터(luminometer, Molecular Device, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 측정하였다.
그 결과 도 3과 같이, 동일한 세포에서 NPS A는 ATP 합성을 자극하고 세포내 ATP 수준을 증가시키는 것을 확인하였다.
즉, NPS A는 심근세포에서 산화적 인산화(oxidative phosphorylation), 기저 및 미토콘드리아의 OCR, ATP와 연관된 호흡 및 ATP 합성을 활성화(up-regulate)시켰다.
한편 도 4와 같이, NPS A는 기저 ECAR(extracellular acidification rate) 및 기저 OCR 뿐만 아니라 OCR/ECAR 비율도 증가시켰다.
2. 해당작용( glycolysis )에 대한 효과 확인
h9c2 세포에 NPS A를 처리한 후, 해당작용, 해당 용량(capacity) 및 해당 저장(reserve)을 XF24 분석기를 이용하여 확인하였다.
h9c2 세포에 10 mM 글루코스(G), 1μM 올리고마이신(oligomycin, O) 및 10 mM 2 디옥시글루코스(2Deoxyglucose, 2DG)를 순서대로 처리하고, NPS A를 1시간동안 처리한 후, XF24 분석기로 측정하였다.
그 결과 도 5와 같이, 고농도 처리(20μM 또는 30 μM)에 비해 10μM의 NPS A를 h9c2 세포에 처리하였을 때 가장 큰 해당작용과 해당 용량을 보여주었다.
따라서 이를 통해 NPS A는 에너지 대사(energy metabolism)에 영향을 주어, 해당작용과 산화적인 인산화(oxidative posphorylation)을 강화시키며 ATP 합성의 레벨을 증가시킬 수 있다는 것을 확인하였다.
< 실시예 4> 허혈성 재관류 심장모델에서 네오페트로사이드 에이(NPS A)의 활성확인
1. 허혈성 재관류 손상 모델 제작
8주령 수컷 SD 랫트(200-250 g)에 펜토바비탈나트륨(sodium pentobarbital, 100 mg/kg)을 복강 주입(intraperitoneal)하여 마취시켰다. 흉곽(chest cavity)을 노출시키고, 대동맥(aorta)에 글래스 캐뉼라(glass cannula)를 삽입했다. 심장은 빠르게 개흉술(thoracotomy)로 잘라내어 정상 타이로드 용액(normal Tyrode's solution)으로 비순환 장치(Langendorff system)에서 관류시켰고, 혈액을 모두 제거하기 위해 10분 동안 37℃에서 95% O2와 5% CO2로 평형을 유지하였다.
2. NPS A 처리 및 심실압력 회복 효과 확인
랫트의 심장을 적출하고 비순환 시스템을 이용하여 본 실험을 진행하였다.
먼저, 허혈성 재관류 모델(I/R; ischemic reperfusion)과 약물처리군(NPS A처리; 허혈성 재관류 후 NPS A 10 μM 처리)으로 구성하고 30분간 저산소 용액을 흘려주었다. 30분경과 후 노말 타이로이드 용액과 NPS A를 함께 처리하여 심장기능을 회복시키고 심전도의 변화를 확인하였다.
그 결과, 도 6A 및 도 6B와 같이, 심장은 글로벌 허혈(golbal ischemia, 30분)에 뒤이은 재관류(50분)를 유도하기 위해 차단되었다. 글로벌 허혈(재관류를 시작하는) 이후 10μM의 NPS A를 30분간 투여하였다.
도 6A와 같이 허혈성 재관류 실험군에서는 허혈성 재관류에 따른 좌심실 압력(Left ventricular pressure, LV pressure)은 회복되지 않은 반면, 도 6B와 같이 재관류시 NPS A가 동시에 처리된 약물처리군에서는 좌심실 압력이 효과적으로 회복되는 것을 확인할 수 있었다.
더불어 심장 활성 리듬(rhythm)도 회복되었으며, 심장 경색(infarction)의 크기도 현저히 감소된 것을 확인할 수 있었다.
3. NPS A가 처리된 래트 심장에서 추출된 미토콘드리아에서 산화적 인산화에 대한 효과 확인
I/R 랫트 그룹의 위심세포(cardioblasts)에서 추출된 미토콘드리아에서 미토콘드리아 호흡의 3 단계동안 OCR은 유의하게 감소되었지만, 호흡의 4 단계는 어떤 그룹의 미토콘드리아에서도 변경되지 않았다.
반면, NPS A를 처리한 경우 미토콘드리아에서 3 단계의 호흡 저하가 상당히 보호되었다.
따라서 도 7과 같이, 호흡 조절 비율(respiratory control ratio, RCP)은 NPS A 처리에 의해 회복된 것을 확인할 수 있었다.
< 실시예 5> 허혈성 재관류 심근 세포에서 NPS A의 활성 확인
NPS A 투여시, 세포의 생존과 관련된 키나아제(kinase)에 영향을 미치는지 확인하였다.
먼저, 심혈관(cardiovascular) 및 당뇨병(diabetes)과 관련된 키나아제 세트를 이용하여 NPS A에 의해 조절되는 키나아제를 선별하였다.
그 결과 도 8과 같이, NPS A는 제 1타입의 후보 키나아제의 대부분을 조절하지 않는 것을 알 수 있었다.
반면, 당뇨병과 관련된 키나아제 중 GSK-3α(Glycogen synthase kinase-3α), GSK-3β 및 mTOR(mammalian target of rapamycin)를 억제하는 것을 확인하였다.
절반 최대한의 억제 투여량(half maximal inhibition dosage)을 결정하기 위해, NPS A에 의해 조절된 GSK-3α, GSK-3β 및 mTOR 키나아제의 활성을 측정하였다.
NPS A의 IC50은 GSK-3α에 대해서는 140 μM이었고, GSK-3β에 대하여는 124μM이었다. 반면, 다른 용량의 NPS A에 따른 mTOR 활성의 변화는 관찰할 수 없었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (11)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000017
    상기 화학식 1에 있어서,
    R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 피리딘 뉴클레오사이드는 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000018
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000019
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)으로부터 추출한 것을 특징으로 하는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  4. 제 3항에 있어서,
    상기 피리딘 뉴클레오사이드 화합물은 네오페트로시아 종(Neopetrosia sp)을 물, C1-C4 알콜 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출한 추출물을 C1-C4 알콜로 분획하여 수득하는 것을 특징으로 하는 것을 특징으로 하는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
  5. 하기 반응식 1과 같이, 화합물 9의 리보사이드 용액에 p-아세톡시벤조일 클로라이드를 첨가하여 화합물 10의 리보사이드 화합물을 제조하는 단계;
    상기 화합물 10의 리보사이드 용액에 에틸 니코티네이트을 첨가하여 화합물 11의 니코티노일 리보사이드 화합물을 제조하는 단계;
    상기 화합물 11의 니코티노일 리보사이드 용액에 암모늄 용액을 첨가하여 화합물 12의 니코티노일 리보사이드 화합물을 제조하는 단계; 및
    상기 화합물 12의 니코티노일 리보사이드를 트리플루오로아세트산 수용액에 용해시킨 후, 농축 및 동결건조하여 화합물 8의 네오페트로사이드 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 화학식 2로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
    [반응식 1]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000020
  6. 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000021
    상기 화학식 1에 있어서,
    R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
  7. 제 6항에 있어서,
    상기 피리딘 뉴클레오사이드는 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학 조성물:
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000022
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000023
  8. 제 6항에 있어서,
    상기 허혈성 심장질환은 심근경색, 심부전증 및 협심증으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  9. 하기 화학식 1로 표시되는 피리딘 뉴클레오사이드(Pyridine Nucleosides) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000024
    상기 화학식 1에 있어서,
    R1은 헤테로방향족화합물(heteroaromatic) 또는 페놀(phenol)임.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 피리딘 뉴클레오사이드는 하기 화학식 2 또는 화학식 3으로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품:
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000025
    [화학식 3]
    Figure PCTKR2017005645-appb-I000026
  11. 제 9항에 있어서,
    상기 허혈성 심장질환은 심근경색, 심부전증 및 협심증으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 허혈성 심장질환 예방 또는 개선용 건강기능식품.
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Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DAVIES, L. C. ET AL.: "Simple Synthesis of the 5-O-Benzoylriboside of 1 ,4-Dihydronicotinic Acid; a Cofactor for DT Diaphorase and Nitroreductase Enzymes", NUCLEOSIDES & NUCLEOTIDES, vol. 14, no. 3-5, 1995, pages 311 - 312 *
FRANCHETTI, P. ET AL.: "Stereoselective Synthesis of Nicotinamide beta-Riboside and Nucleoside Analogs", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 14, no. 18, 2004, pages 4655 - 4658, XP027347993 *
FRIEDLOS, F. ET AL.: "Identification of Novel Reduced Pyridinium Derivatives as Synthetic Co-Factors for the Enzyme DT Diaphorase (NAD(P)H Dehydrogenase (quinone), EC 1. 6. 99. 2", BIOCHEMICAL PHARMACOLOGY, vol. 44, no. 1, 1992, pages 25 - 31, XP025567727, DOI: doi:10.1016/0006-2952(92)90033-F *
GRIBBLE, G. W. ET AL.: "Six-Membered Ring Systems: Pyridine and Benzo Derivatives", PROGRESS IN HETEROCYCLIC CHEMISTRY, vol. 28, no. 1, 23 September 2016 (2016-09-23), pages 682 *
SHUBINA, L. K. ET AL.: "Pyridine Nucleosides Neopetrosides A and B from a Marine Neopetrosia sp. Sponge. Synthesis of Neopetroside A and Its β-Riboside Analogue", JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS, vol. 78, no. 6, 2 June 2015 (2015-06-02), pages 1383 - 1389, XP055447327 *

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