WO2010133015A1

WO2010133015A1 - 治疗抑郁症的药物组合物、制备方法及用途

Info

Publication number: WO2010133015A1
Application number: PCT/CN2009/001409
Authority: WO
Inventors: 张作光
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-05-21
Filing date: 2009-12-09
Publication date: 2010-11-25
Anticipated expiration: 2011-11-21
Also published as: CN101890082A; CN102438630A; CN102438630B

Description

治疗抑郁症的药物组合物、制备方法及用途技术领域

本发明属于医药技术领域。本发明涉及用于治疗抑郁症的药物组合物及其制备方法。本发明还涉及所述药物组合物用于制备药物、保健食品和 /或营障碍或者病症的方法。背景技术

抑郁症（ depression )是情感性精神障碍（ mood disorders )的主要类型 , 是一种以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征。抑郁症是危害人类身心健康的常见病、多发病，是一个全球性的主要精神问题。据统计在一般人口中大约有 25%女性在其一生中经历过抑郁症，男性中约有 10%左右经历过抑郁症（张春兴著：《现代心理学》 )。世界卫生组织提供的资料：抑郁症在全世界的发病率约为 11%，目前全球约有 3.4亿精神抑郁患者，而且这个数字仍成上升趋势，调查发现在今后 20年，抑郁症将会上升为全球第二大常见疾病。

目前国内外市场上抗抑郁症药物中基本以百优解、赛洛特、左洛复等 5 羟色胺再摄取抑制剂（SSRIs ) 为主，其作用机理是通过调节人体单胺类神经递质 5羟色胺等成分含量緩解抑郁症状。这类药物都有不同程度的副作用，研究表明 "这些药品中含有的复安栓对平衡人体机能有作用，但更多时候，它们还是无法让患者平静下来。，，近年来，百优解等抑郁症药物是否有害已成为严重的社会问题，其中赛洛特更是早在 1996年就被发现存在有安全隐患，自 2001年开始已陆续从市场上召回。 2004年 6月，美国紐约州总检察长指控英国葛兰素史克公司为了获取利润，欺骗性隐瞒了服用赛洛特与 "增加青少年自杀倾向及行为的风险" 之间有联系的研究报告。在这种背景下，如何研发生产新一代副作用小又能有明显抗郁作用的药物已成为全球医药界所关注的问题。发明内容

为了克服现有抗抑郁药物的不足，发明人结合现代医学和现代药理学对传统中药治疗抑郁症的病机和作用机理进行了研究，并在反复多次药效、药理学实验的基础上，提出本发明。

为有助于理解本发明，下面定义了一些术语。本文定义的术语具有本发明相关领域的普通技术人员通常理解的含义。

除非另外说明，本文所用的术语"药学上可接受的载体和赋形剂，，指的是那些本领域中公知用作丸剂、片剂、胶囊剂等中的填充剂或载体物质的物质。这些物质通常被保健专家认可用于这一目的且作为药剂的非活性成分.有关可药用载体和赋形剂的汇编可以在《药物赋形剂手册》（Handbook of Pharmaceutical excipients , 第 2 版，由 A . Wade和 P . J . Weller编辑； American Pharmaceutical Association 出版 , Washington and The

Pharmaceutical Press , London， 1994 )等工具书中找到。

除非另外说明，本文所用的术语"治疗有效量"，系指需要产生有效作用的药物的用量，其是可以改变的，且最终由医务人员根据给药途径、制剂类型、接受者的年龄和体重，以及所治疗疾病的性质和严重程度等多方面因素所决定。本发明的一个目的在于，提供用于治疗抑郁症的药物组合物。

本发明的另一目的在于，提供制备上述药物组合物的方法。

本发明的再一个目的在于，提供上述药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途。

本发明的又一个目的在于，提供上述药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途，和提供一种用于治疗抑郁症及同时治疗抑郁症与其并发的疾病、障碍或者病症的方法。针对上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一方面，本发明提供一种用于治疗抑郁症的药物组合物，所述药物组合物含有以下活性成分：

1 ) 甘草酸或甘草次酸；

2 ) 芍药甙；和

3 ) 芍药内酯苷。

优选地，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.1-2重量份，所述芍药甙为 0.4-8重量份且所述芍药内酯苷为 0.15-5重量份；

优选地，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.2-0.6重量份，所述芍药甙为 1.2-3.5重量份且所述芍药内酯苷为 0.4-2重量份；最优选地，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.3重量份, 所述芍药甙为 0.6重量份且所述芍药内酯苷为 0.4重量份。

优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂；优选地，所述药物组合物的剂型选自：口服制剂、肠胃外给药制剂、局部和吸入式给药制剂和透皮制剂；

更优选地，所述剂型为选自如下的口服制剂：片剂、胶嚢剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、滴剂，果汁和糖浆剂；

进一步优选地，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自：崩解剂、润滑剂、粘合剂、填充剂、溶剂、香料、甜味剂、抗氧化剂。另一方面，本发明提供一种制备上述药物组合物的方法，所述方法包括下述步驟：

( 1 )将甘草破碎，水提醇沉，过滤，回收乙醇，浓缩干燥，得甘草提取物；

( 2 )将白芍破碎，以 70%乙醇溶液提取 (或是用水渗漉)，通过（ME-1 或是 D-101等）大孔树脂吸附柱纯化，收集洗脱液，浓缩干燥，得白芍提取物；以及

( 3 )将步骤（1 ) 中获得的甘草提取物和步骤（2 ) 中获得的白芍提取物混合粉碎或是与添加的辅料一起混合粉碎制成制剂；

其中，所述甘草为 5~100重量份，所述白芍为 10~600重量份；优选地，所述甘草为 10~60重量份，所述白芍为 40〜200重量份；最优选地，所述甘草为 20重量份，所述白芍为 60重量份。再一方面，本发明提供由甘草和白芍为原料制得的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途。又一方面，本发明提供由甘草和白芍为原料制得的药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 / 或营养剂中的用途；

优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。又一方面，本发明提供以甘草提取物和白芍提取物为活性成分制得的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；优选地，所述药物组合物不含其它活性成分。又一方面，本发明提供以甘草提取物和白芍提取物为活性成分制得的药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；

优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍；和 /或

优选地，所述药物组合物不含其它活性成分。又一方面，本发明提供所述药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途。又一方面 , 本发明提供所述药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。又一方面，本发明提供一种治疗抑郁症的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的甘草提取物和白芍提取物。又一方面，本发明提供一种同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的甘草提取物和白芍提取物；

优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。又一方面，本发明提供一种治疗抑郁症的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的所述药物组合物；

所述药物组合物的治疗有效日服量优选为：甘草酸或甘草次酸

20mg-90mg, 芍药苷 40mg-120mg, 芍药内酯苷 30mg-100mg; 更优选为：甘草酸或甘草次酸 30mg-60mg,芍药苷 60mg-120mg，芍药内酯苷 ⁴0mg-80mg。又一方面，本发明提供一种同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的所述药物组合物；所述药物组合物的治疗有效日服量优选为：甘草酸或甘草次酸

20mg-90mg, 芍药苷 40mg-120mg，芍药内酯苷 30mg-100mg; 更优选为：甘草酸或甘草次酸 30mg-60mg,芍药苷 60mg-120mg，芍药内酯苷 40mg-80mg。优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。为了更加清楚地说明和阐述本发明的技术方案，以下将对本发明作进一步的陈述：

本发明的药物组合物采用甘草、白芍组方，包括至少选自以下重量份配比组方：

甘草 5-100 重量份

白芍 10〜600 重量份

优选为：

甘草 10〜60重量份

白芍 40〜200重量份

更优选为：

甘草 20重量份

白芍 60重量份

根据如前所述的药物组合物，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂；

优选地，所述药物组合物的剂型选自：口服制剂、肠胃外给药制剂、局部和吸入式给药制剂和透皮制剂；

进一步优选地，所述剂型为选自如下的口服制剂：片剂、胶嚢剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、滴剂，果汁和糖浆剂；

更进一步优选地，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自：崩解剂、润滑剂、粘合剂、填充剂、溶剂、香料、甜味剂、抗氧化剂。是以上述组为、原 , 用水提取所获得的提物粉而制得的药物组合 ^；还可以是分别用水提取甘草、白芍所获得的提取物（或是与用乙醇水溶液提取白芍所获得的提取物）混合粉碎而制得的药物组合物，其中优选为水提醇沉所获得的甘草提取物和水渗漉上柱纯化所获得的白芍提取物。

上述甘草提取物含有 0.1-2重量份的甘草酸或甘草次酸，所述白芍提取物含 0.4〜8重量份的芍药甙和 0.15~5重量份的芍药内酯苷；

优选地，所述甘草提取物含有 0.2~0.6重量份的甘草酸或甘草次酸，所述白芍提取物含有 1.2-3.5重量份的芍药甙和 0.⁴~²重量份的芍药内酯苷；进一步优选地，所述甘草提取物含有 0.3重量份的甘草酸或甘草次酸，所述白芍提取物含有 0.6重量份的芍药甙和 0.4重量份的芍药内酯苷。

本发明的药物组合物还可直接采用甘草酸或甘草次酸与芍药甙、芍药内酯苷混合粉碎，所述药物组合物含有 0.1-2重量份的甘草酸或甘草次酸、 0.4-8重量份的芍药甙和 0.15〜5重量份的芍药内酯苷；

优选地，所述甘草酸或甘草次酸与芍药甙的重量份及芍药内酯苷重量份配比为 0.2〜0.6： 1.2-3.5: 0.4-2;

更优选地，所述甘草酸或甘草次酸与芍药甙的重量份、芍药内酯苷重量份配比为 0.3: 0.6: 0.4。

本发明的另一目的在于提供制备上述药物组合物的方法。

方法一，所述方法包括：

将甘草和白芍混合后粉碎（优选超微粉碎）来制备所述药物组合物；所述甘草为 5~100重量份，所述白芍为 10~600重量份；

优选地，所述甘草为 10~60重量份，所述白芍为 40〜200重量份；最优选地，所述甘草为 20重量份，所述白芍为 60重量份。

方法二，所述方法包括：

( 2 )将白芍破碎，以 70%乙醇水溶液提取 (或是用水渗漉)，通过（ME-1 或是 D-101等）大孔树脂吸附柱纯化，收集洗脱液，浓缩干燥，得白芍提取物；以及

其中，所述甘草为 5~100重量份，所述白芍为 10~600重量份；优选地，所述甘草为 10〜60重量份，所述白芍为 40~200重量份；最优选地，所述甘草为 20重量份，所述白芍为 60重量份。

方法三，所述方法包括：

直接将甘草酸（或甘草次酸）和芍药甙、芍药内酯苷一起混合粉碎来制备所述药物组合物；

所述药物组合物有 0.1~2重量份的甘草酸（或甘草次酸），含有 0.4-8 重量份的芍药甙和 0.15〜5重量份的芍药内酯苷；

优选地，含有 0.2-0.6重量份的甘草酸（或甘草次酸）、含有 1.2-3.5重量份的芍药甙和 0.4〜2重量份的芍药内酯苷；进一步优选地，含有 0.3重量份的甘草酸（或甘草次酸）、 0.6重量份的芍药甙和 0.4重量份的芍药内酯苷。

上述的药物组合物是实现本发明目的的核心组方，在本发明公开后，本领域的技术人员可以根据中医理论或是相关现代药理学理论，对上述药物组合物及提取物组合物进行常规的加减化裁。这种常规的加减化裁是本领域技术人员的一般性技术活动 , 只要是在本发明药物组合物及提取物组合物的配方基础上所进行的一般性技术加减，均在本发明的保护范围之内。

以上所述的药物组合物包括含有药学上可接受的载体或赋形剂，可以加工为任何药剂学上所公知的口服剂型（片剂、胶嚢剂或是粉剂等）。

本发明药物组合物的应用范围：可将其制成用于治疗抑郁症的植物药制剂、保健食品和 /或营养剂。本发明的药物组合物可应用于治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症中。优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。与现有技术相比，本发明具有如下的明显优点：

白芍的抗抑郁主要有效成分是芍药内酯苷和芍药甙，其中芍药甙具有抑制 ATP酶、升高 AC活性增强胞浆内 cAMP含量的作用；甘草抗抑郁的主要有效成分是甘草酸、甘草香豆素等是 cAMP磷酸二酯酶抑制剂。白芍与甘草组方，可以多靶点激活脑区 cAMP-PKA通路，促进 CREB的磷酸化，使得抗抑郁功效得以增强。

白芍提取物与甘草提取物虽均有一定程度的抗抑郁功能，但小鼠悬尾正交实验结果证明：本发明的药物组合物在抗抑郁的功效上，要明显优于单一的白芍提取物、甘草提取物。

另外，传统中药方剂芍甘汤也是仅用白芍、甘草两味药材组方，但其适应症并不包括抑郁症，而且芍甘汤的组方配比及其制法也与本发明的药物组合物不同，本发明的药物组合物在组方、制法和适应症上较芍甘汤具有明显的优势。

附图的简要说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施例，其中：

图 1为以甘草和白芍为原料制备本发明药物组合物的方法的工艺流程图；

图 2为直接以甘草酸、芍药甙和芍药内酯苷为原料，制备本发明药物组合物的方法的工艺流程图；

图 3为直接将甘草和白芍混合来制备本发明药物组合物的方法的工艺流程图。实施发明的最佳方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体实险条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照厂商所建议的条件。实施例 1 本发明药物组合物的制备

本实施例提供以甘草和白芍为原料制备本发明药物组合物的优选方法，其操作包括如下步骤：

参见附图 1 , 将 15公斤的甘草（符合 2005年版《中华人民共和国药典》规定）破碎，加水提取 3次，每次分别为 2、 2、 1.5小时，加水量为 12、 10、 10倍提取液，回收提取液，至药材：提取液为 1 : 1.5 , 加乙醇至 75%，冷置，过滤，回收乙醇，至相对密度为 1.20-1.30 ( 70 °C ) , 70°C减压浓缩干燥，得 3公斤甘草提取物（含 10%的甘草酸）；

参见附图 1，将 150公斤的白芍（符合 2005年版《中华人民共和国药典》规定）破碎，用 70%的乙醇水溶液加热回流 3次， 3次的溶剂重量分别为白芍的 5倍、 4倍、 3倍，浓缩回收乙醇，稀释膏至 4倍体积，过滤得澄清液上 ME-1型大孔树脂吸附柱（南开大学生物活性材料教育重点实验室提供），以 1床体积 /小时的流速吸附，先用 4倍床体积的水冲洗，然后用 2倍床体积的 10%乙醇冲洗，再用 30%乙醇冲洗，收集第 2、 3、 4、 5个床体积的洗脱液，浓缩干燥，得 4.5公斤白芍提取物（出膏率为 3%，含 48.13%芍药苷、 31.16%芍药内酯苷）；

将上述步骤所得的两种提取物混合粉碎，即得本发明的药物组合物。实施例 2本发明药物组合物的制备

本实施例提供直接以甘草提取物和白芍提取物为原料制备本发明药物组合物的优选方法，其操作包括如下步骤：

参见附图 2，直接将纯度为 90%的 3克甘草酸（或甘草次酸）与纯度为 90%的 12克芍药甙、纯度为 90%的 6克芍药内酯苷一起混合粉碎，即得本发明的药物组合物。实施例 3本发明药物组合物的制备

本实施例提供直接以甘草和白芍混合来制备本发明药物组合物的优选方法，其操作包括如下步骤：

参见附图 3，直接将 1.5公斤甘草与 14公斤白芍混合后超微粉碎，即得本发明的药物组合物。实验例 4 白芍提取物 ( B )、甘草提取物（G )对小鼠悬尾不动时间的影响

本实施例是根据本发明药物组合物的白芍提取物（B ) 、甘草提取物 ( G )对小鼠悬尾不动时间的影响，选取具有抗抑郁作用的本发明药物组合物的优选组合。

1. 实险目的

通过设计的正交实验，筛选 B (实施例 1中的白芍提取物）和 G (实施例 1中的甘草提取物 G )抗抑郁作用的优选组合。

2. 实验材料

2.1 实验动物： ICR小鼠，雄性，体重 18-22g, 由首都医科大学试验动物部提供，合格证编号 scxk (京) 2005-0006。

2.2 实险药物：

受试药物： B (实施例 1中的白芍提取物）、 G (实施例 1中的甘草提取物）；阳性药物：盐酸氟西汀胶嚢（百优解），购自礼来苏州制药有限公司，批号： A333341-070608 , 国药准字 J20030017, 日服用量， 20mg/日。

2.3 实验器材：

JZ型 300g张力换能器（购自高碑店市新航积淀设备有限公司 )， Medlab 生物信号采集处理系统（购自南京美易科技有限公司）。

3. 实验方法

3.1 B、 G药物组合的正交设计

釆用正交试验的方法，以小鼠悬尾不动时间为指标，对 B药和 G药的剂量和组合进行优选。因素水平表、正交试验表如表 1和表 2。

表 1 因素水平表

2 40 20

3 0 0

1 \乡\乡乡乡乡乡乡 & ^合合 ^合会4.. 1 1 1 1

约约约约约约约 ^约 ^

2 1 2 2 2

3 1 3 3 3

4 2 1 2 3

5 2 2 3 1

6 2 3 1 2

7 3 1 3 2

8 3 2 1 3

9 3 3 2 1 根据因素水平表和正交试验表，给药方案如表 3所示：表 3 给药方案表

药^! B药 /kg/d G药/ kg/d

1组 B药 80mg G药 40mg

2组 B药 80mg G药 20mg

3组 B药 80mg G药 Omg

4组 B药 40mg G药 40mg

5组 B药 40mg G药 20mg

6组 B药 40mg G药 Omg

7组 B药 Omg G药 40mg

8组 B药 Omg G药 20mg

9组 B药 Omg G药 Omg

3.2 分组给药

正常小鼠 150只，按体重随机分成 10个组，每组 I⁵只，即给药 1-9组、阳性药物盐酸氟西汀胶囊（3.5 mg/kg/d ) ，空白对照组（给药 9组相当于空白组）。各组均按 0.2ml/10g体重给药，连续给药 2天。

3.3 测试方法

以上各组均连续给药 2天，分别于第 2天给药后 lh进行实验。将小鼠尾端（在距尾尖 2cm处）用胶布固定在 lOOg张力换能器的连线上，使其呈倒悬状态，头部离实验台约 15cm，每次同时测试 2只动物，相互之间用纸板隔开。换能器连接到 Medlab生物信号采集处理系统，适应 2min后，记录 4min 之内的小悬不时结果，将不动状态换算成时间（s ) 。

且尾动第第第第第第第第鼠间

4. 实验^W245678 (31结果

s：组组组组组组组组第

实验结果参见表 4和表 5。

表 4 小鼠悬尾实验结果

M 剂量 (mg/kg ) 样本数不动时间（x ± s )

- 14 112.21 ± 38.95

3.5mg 15 62.57 ± 19.79**

B药 80mg + G药 40mg 15 70.03 + 24.12**

B药 80mg + G药 20mg 14 79.50 ± 33.02**

B药 80mg + G药 Omg 13 85.46 + 34.98*

B药 40mg + G药 40mg 14 78.75 + 31.92**

B药 40mg + G药 20mg 14 90.21 ± 29.97

B药 40mg + G药 Omg 15 88.87 ± 28.17

B药 Omg + G药 40mg 14 83.82 ± 33.60*

B药 Omg + G药 20mg 15 98.42土 40.72 注：与空白组相比， * P<0.05 , **P<0.01

2 1 2 2 2 79.50

3 1 3 3 3 85.46

4 2 1 2 3 78.75

5 2 2 3 1 90.21

6 2 3 1 2 88.87

7 3 1 3 2 83.82

8 3 2 1 3 98.42

9 3 3 2 1 112.21

234.99 232.6 257.32 272.45

257.83 268.13 270.46 252.19

294.45 286.54 259.49 262.63

59.46 53.94 13.14 20.26 根据实验结果，极差分析最佳条件为 B1G1 , 即 B药 80mg与 G药 40mg 的配伍组合。在正交表中，第 1组为最佳条件，在各给药组中，给药第 1 组悬尾不动时间最短，且与空白对照组相比有显著性差异（PO.01 ) 。

B1G2 ( B药 80mg+G药 20mg )的配伍组合、 B2G1 ( B药 40mg+G药 40mg ) 的配伍组合，亦能缩短小鼠悬尾不动时间，与空白对照组相比有显著性差异（PO.01 ) 。

B1G3 (单独 B药 80m ) 、 B3G1 (单独 G药 40mg)亦能缩短小鼠悬尾不动时间，与空白对照组相比有明显差异（PO.05 ) 。

5. 结论

5.1 灌胃给药 2天，本发明药物组合物 B1G1 (白芍提取物 80mg+甘草提取物 40mg ) 的配伍组合、本发明药物组合物 B1G2 (白苟提取物 80mg+甘草提取物 20mg ) 的配伍组合，或本发明药物组合物 B2G1 (白芍提取物 40mg+甘草提取物 40m ) 的配伍组合，皆可明显缩短小鼠悬尾不动时间 ( P<0.01 , 与空白组比较），具有显著的抗抑郁作用。

5.2 灌胃给药 2天，虽然单独的白芍提取物、甘草提取物亦有疗效 ( P<0.05, 与空白组比较），但是本发明药物组合物（白芍提取物与甘草提取物各优化配比组合 B1G1、 B1G2、 B2G1 )的抗抑郁疗效更明显，也更稳定（PO.01 , 与空白组比较）。实验例 5 芍甘胶嚢对小鼠强迫游泳实验的影响

1 实验材料

1.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0 ± 2g，二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

1.2 实 3全药品

受试药物：按照实施例 1制得的本发明药物组合物芍甘胶囊，阳性药物：帕罗西汀（赛乐特），中美天津史克制药有限公司产品。

1.3 实验仪器

GM222型电子温度计，秒表。

2. 实验方法及结果

2.1 剂量设计

受试药物大剂量为 120mg kg/d，中剂量为 60mg kg/d、小剂量为

2.2 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只：（ 1 ) 受试药物大剂量组（ UOmg*!^-¹ , 灌胃，给药 2d )； ( 2 )受试药物中剂量组 ( 60mg *kg-l，灌胃，给药 2d )； ( 3 ) 受试药物小剂剂量组（SOmg *]^-¹ , 灌胃，给药 2d ) ； ( 4 ) 阳性药帕罗西汀组 Gmg kg-¹ , 灌胃，给药 2d ) 。

2.3 实验方法

将小鼠分别放入水深 10cm，直径 14cm的玻璃缸中，水温 25 °C，观察 5min 记录小鼠在水中的累计不动时间。

2.4 统计学处理

实验数据用 ^ ± 表示，实验结果用 SPSS11.5统计软件进行方差分析。 2.5 实验结果

实验结果参见表 6。

表 6 芍甘胶嚢对小鼠强迫游泳实验结果组另 il 动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 142. 93 ± 21. 94 帕罗西汀组 10 65. 53 ± 17. 27* 芍甘胶嚢大剂量组 10 79. 17 ± 39. 33* 芍甘胶囊中剂量组 10 64. 58 ± 24, 00* 芍甘胶囊小剂量组 10 128. 00 ± 19. 34 与模型组比较， * P<0.05

3 结论

根据以上实验，可以看出本发明药物组合物芍甘胶嚢大、中剂量组和帕罗西汀组均可明显缩短小鼠强迫游泳累计不动时间，中剂量组和大剂量组与生理盐水组（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明药物组合物芍甘胶嚢具有抗实验性抑郁功能。实验例 6 芍甘胶嚢对慢性应激大鼠脑内单胺类神经递盾的影响

1 实验材料

1.1 实验药物

受试药物：本发明的药物组合物芍甘胶嚢；阳性药物：盐酸氟西汀（百忧解），礼来苏州制药有限公司提供（批号：国药准字 J20030017 ) 。

1.2 实3佥动物

Wistar雄性大鼠，体重 220g ~ 240g, 由北京维通利华公司提供。所有动物提前一周购入，常规饲养。

1.3 仪器与试剂去曱肾上腺素 NE ( Serva公司），多巴胺 DA ( Fluka公司），肾上腺素 ( E )、 5-羟色胺（ 5-HT )、 5-羟吲哚乙酸（ 5-HIAA )、高香草酸（ HVA )、 3 , 4-二羟基苯乙酸（DOPAC ) 、 3 , 4-二羟苄胺（DHBA ) (均为 Sigma 公司），二正丁胺（上海化学试剂采购站进口分装）， B-8离子对试剂（天津化学试剂二厂），曱醇（优级纯，北京化工厂），其它试剂均为国产分析纯。

2 实验方法

2.1 分组和给药

正常大鼠 72只， 24h禁水不禁食后，给予 1 %蔗糖水，测定 lh内的消耗量。根据蔗糖水消耗量随机分成 6个组，每组 12只，即正常对照组、模型组、阳性药百忧解组（3.5mg kg/d ) 、芍甘胶嚢高（100mg/kg/d ) 、中 ( 50mg kg/d ) 、低（25mg/kg/d )剂量组。造模同时给药，每日一次，连续给药 21天。各组均按 1.0ml/100g体重给药，每周称一次体重。

2.2 造模

对照组大鼠群养，用药组及模型组大鼠每笼单只饲养。参照文献方法 (许晶，李晓秋，慢性应激抑郁模型的建立及其评价，中国行为医学科学， 2003, 12 ( 1 )： 14-16 ) , 用药组（给药同时）及模型组大鼠接受 21d各种不同的随机应激，包括 4°C冰水游泳（5min ) 、 45°C热烘（5min ) 、夹尾 ( lmin ) 、潮湿饲养（潮湿垫料）、昼夜颠倒（24h ) ，禁食（24h ) ，禁水（24h )等刺激。

2.3 样品制备及检测方法

动物断头处死，迅速在冰上剥离大脑，取前额皮质，称重后置组织冷冻管中用液氮快速冷冻后，放入 -70 °C冰箱保存至测定。

才艮据脑组织的重量，加入预冷的 0.1mol/L过氯酸（内含 0.3mMEDTA二钠和 0.5mM亚硫酸钠）， 2 μ g/mLDHBA,超声匀浆， l lOOOrpm离心 lOmin, 上清夜用于神经递质测定。

采用高效液相色谱 -电化学检测器系统（ HPLC-ECD型，购自美国 ESA Biosciences, Inc. )进行测定，色 i普条件为：色 i普柱为 4 χ 150mm，

Nova-pakC18 , 5 μ m (中国科学院大连化学物理研究所国家色语研究分析中心填装）；流动相为 50mM柠檬酸-乙酸钠緩冲液 PH3.5 (内含 1.0mM B-8 离子对试剂， 1.8mM二正丁胺， 0.3mMEDTA二钠， 4 %甲醇） , 流速 l.OmL/min,玻璃碳工作电极，检测池电压为 +0.75V; 3 , 4 -二羟苄胺 DHBA 为内标物，样品中各主要组分用内标法进行定量。 2.4 统计学处理实验数据以均数土标准差（ ^ ± s )表示，采用 SPSS13.0统计软件，运用单因素方差分析 ( one-way ANOVA )进行各组间比较，显著性水平以 0.05和 0.01为标准。

3 实验结果

结果表明，连续给药 21天后，与空白组比较，模型组大鼠脑内单胺类神经递质去曱肾上腺素、 5-羟色胺含量降低（p<0.05 )，与模型组相比较，芍甘胶嚢中、高剂量组和阳性药盐酸氟西汀组大鼠脑内单胺类神经递质去曱肾上腺素、 5-羟色胺含量升高（PO.05 ) , 结果参见表 7和表 8。表 7 芍甘胶嚢对脑内去甲肾上腺素的影响（士 s )

组别剂量 (； mg/kg ) 样本数 NE

空白组 - 9 398.47 ± 111.11* 模型组 - 11 159.20 ± 49.31 阳性组 3.5mg/kg/d 8 440.88 ± 152.58* 芍甘胶嚢低剂量组 25mg/kg/d 11 174.59 + 70.35 芍甘胶囊中剂量组 50mg/kg/d 11 345.19 ± 133.43* 芍甘胶嚢高剂量组 100mg/kg/d 10 271.48 ± 102.50 与模型组比较， *P<0.05, **P<0.01

表 8芍甘胶嚢对脑内五羟色胺的 ^p向（ x 士 S ) 组别剂量 (mg/kg ) 样本数 5-HT

空白组 ― 8 340.11 ± 75.88* 模型组 - 11 158.27 + 90.34 阳性组 3.5mg/kg/d 10 272.19 ± 93.42* 芍甘胶嚢低剂量组 25mg/kg/d 11 188.43 ± 167.91 芍甘胶嚢中剂量组 50mg/kg/d 8 270.77土 96.43* 芍甘胶嚢高剂量组 lOOmg/kg/d 9 258.86 + 87.55* 与模型组比较， *P<0.05, **P<0.01

4 结论

实验研究结果显示慢性应激大鼠脑内 5-HT、 NE含量明显降低，本发明药物组合物芍甘胶嚢中、高剂量组能明显提高脑内 5-HT、 NE含量，提示本发明药物组合物可能是通过提升脑内单胺类神经递质的表达起到抗抑郁作用。

Claims

权利要求

1、一种用于治疗抑郁症的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有以下活性成分：

4 ) 甘草酸或甘草次酸；

5 ) 芍药甙；和

6 ) 芍药内酯苷。 2、根据权利要求 1所述的药物组合物，其特征在于，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.1-2重量份，所述芍药甙为 0.4-8重量份且所述芍药内酯苷为 0.15-5重量份；

优选地，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.2-0.6重量份，所述芍药甙为 1.

2-3.5重量份且所述芍药内酯苷为 0.4-2重量份；

最优选地，在所述药物组合物中，所述甘草酸或甘草次酸为 0.3重量份，所述芍药甙为 0.6重量份且所述芍药内酯苷为 0.4重量份。

3、根据权利要求 1或 2所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂；

进一步优选地，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自：崩解剂、润滑剂、粘合剂、填充剂、溶剂、香料、甜味剂、抗氧化剂。

4、一种制备权利要求 1-3任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，所述方法包括下述步骤：

( 2 )将白芍破碎，以 70%乙醇溶液提取 (或是用水渗漉)，通过（ME-1 或是 D-101等）大孔树脂吸附柱純化，收集洗脱液，浓缩干燥，得白芍提取物；以及

( 3 )将步骤（1 ) 中获得的甘草提取物和步骤（2 ) 中获得的白芍提取物混合粉碎或是与添加的辅料一起混合粉碎制成制剂；其中，所述甘草为 5~100重量份，所述白芍为 10~600重量份；优选地，所述甘草为 10〜60重量份，所述白芍为 40~200重量份；最优选地，所述甘草为 20重量份，所述白芍为 60重量份。

5、由甘草和白芍为原料制得的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途。

6、由甘草和白芍为原料制得的药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。

7、以甘草提取物和白芍提取物为活性成分制得的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；

优选地，所述药物组合物不含其它活性成分。

8、以甘草提取物和白芍提取物为活性成分制得的药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 / 或营养剂中的用途；

优选地，所述药物组合物不含其它活性成分。

9、权利要求 1-3任一项所述的药物组合物在制备用于治疗抑郁症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途。

10、权利要求 1-3任一项所述的药物组合物在制备用于同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的药物、保健食品和 /或营养剂中的用途；优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。

11、一种治疗抑郁症的方法，其特征在于，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的甘草提取物和白芍提取物。

12、一种同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的方法，其特征在于，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的甘草提取物和白芍提取物；

优选地，所述疾病、障碍或病症选自焦虑、睡眠障碍和创伤后应激性障碍。

13、一种治疗抑郁症的方法，其特征在于，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的权利要求 1-3任一项所述的药物组合物；

20mg-90mg, 芍药苷 40mg-120mg, 芍药内酯苷 30mg-100mg; 更优选为：甘草酸或甘草次酸 30mg-60mg，芍药苷 60mg-120mg,芍药内酯苷 40mg-80mg。

14、一种同时治疗抑郁症及与其并发的疾病、障碍或者病症的方法，其特征在于，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的权利要求 1-3任一项所述的药物组合物；

20mg-90mg, 芍药苷 40mg-120mg, 芍药内酯苷 30mg-100mg; 更优选为：甘草酸或甘草次酸 30mg-60mg,芍药苷 60mg-120mg，芍药内酯苷 40mg-80mg。