WO2009070915A1

WO2009070915A1 - Compositions pharmaceutiques destinées à traiter la dépression et l'anxiété

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Publication number: WO2009070915A1
Application number: PCT/CN2007/003386
Authority: WO
Inventors: Zuoguang Zhang
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2007-11-30
Filing date: 2007-11-30
Publication date: 2009-06-11
Anticipated expiration: 2010-05-30
Also published as: PT2216038T; CA2707114A1; MX2010005837A; CY1118528T1; EP2216038B1; JP2011504884A; AU2007362017B2; ES2601510T3; KR20100106976A; TR201004346T2; ZA201004030B; US20130040903A1; NZ592625A; EP2216038A1; BRPI0722183A2; EP2216038A4; PL2216038T3; SI2216038T1; LT2216038T; DK2216038T3

Description

用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物技术领域

本发明涉及一组以包含人参皂甙（ Rgl+Rbl )、甘草酸及大枣环磷酸腺苷（大枣 cyclic adenosine monophosphate, 大枣 cAMP )的原料，制成的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物或保健食品。尤其涉及一种功效成份明确，疗效明显，副作用低，长期服用安全性高的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物或保健食品。背景技术

精神障碍又称为精神疾病，是指在生物、社会、心理因素的作用下，造成大脑功能失调，而出现感知、思维、情感、行为、意志以及智力等精神运动方面的异常。随着社会的发展，精神障碍越来越受到人们的重视，在 10 种造成社会最沉重负担的疾病中，精神疾病占了 4种。精神医学正在逐步受到医学同行及社会的关注并被赋予新的认识。而焦虑症 (Anxiety Disorder)和忧郁症 (Depression)是精神障碍的最常见类型，应用抗焦虑药和抗忧郁药是治疗焦虑症和忧郁症的主要方法。

焦虑症是一种以焦虑情绪为主的神经病症，主要表现为发作性或持续性的焦虑、緊张、惊恐不安等焦虑情绪，并伴有自主神经紊乱、肌肉紧张与运动不安等症状。自从弗尹德将焦虑症从神经衰弱中分离出来以后，各国学者对焦虑症展开了大规模的研究工作，积累了大量的资料。现代医学研究认为焦虑症的发生发展与神经解剖、神经递质调质一受体、神经内分泌系统等多方面均有关系。

. 现有技术中，抗焦虑药物以苯二氮卓 (Benzodiazepine)类抗焦虑药为主，其作用机制是调整一种抑制性的神经传导物质 GABA的活性以緩解焦虑症状。但却会产生诸如失眠、过敏、肌肉疼痛、虚弱、恶心、运动失调、视力模糊、疲倦、混乱、妄想等副作用。忧郁症是一种常见的疾病，世界卫生组织（WHO )提供的数据：忧郁症在全世界的发病率约为 11%，目前全球约有 3.4亿精神忧郁患者，而且这个数字仍呈上升趋势，调查发现在今后 20年，忧郁症将会上升为全球第二大常见疾病。

现有技术中，抗忧郁药物以百忧解、赛洛特、左洛复等（SSRI、 SN I、 DRI等类的 5-HT、 E、 DA再摄取抑制剂）为主，其作用机制是通过增加人体神经介质内 5羟色胺等成分含量以緩解忧郁症状。但是，已问世的抗忧郁药物都有不同程度的副作用，例如：增加自杀率、头痛、头晕、晕眩、失眠、嗜睡、耳呜、口千、厌食、食欲增加、体重上升、血压上升、肠胃不适、反胃、恶心、呕吐、消化不良、腹泻、便秘、下肢痛、皮肤出疹、颤抖、痉挛、多汗、氷肿、性欲降低、性无能等。

近年来百忧解等抗忧郁药物已成为社会严重关注的问题，美国食品暨药物管理局（ Food and Drug Administration, FDA )更于 2004年要求药厂将市场上主要的 32种抗忧郁药物重新标示其副作用和警告的部分，并对医护人员强调这些药物可能增加孩童及青少年自杀的机率；而许多有治疗条件和治疗意愿的忧郁症病患，因为惧怕或难以忍受现有抗忧郁剂的诸多副作用而中断或拒绝治疗。在这种背景下，如何研发新一代副作用低、长期服用安全性高又能明显有效抗忧郁及抗焦虑的药物，已成为全球医药界所关注的问题。

' 因此，申请人鉴于已知技术中所产生的不足，经悉心研究与探索，并本着锲而不舍的精神，终构思出本发明的 r用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物 J , 以下为本发明的简要说明。发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一组以包含人参皂甙 ( Rgl+Rbl )、甘草酸及大枣 cAMP的原料，制成的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物或保健食品，特别是功效成份明确，疗效明显，副作用低，长期用安全性高的新技术方案。

本发明药物的解决方案是经本人潜心研究探索的结果，依据现代医学治疗忧郁症及焦虑症的病理及药理学理论，特别是结合受体后作用机制的药物靶标研究，经过大量的动物实验证明：人参皂甙含有腺苷酸环化酶（adenylate cyclase, AC )刺激腺苷，并含有 cAMP磷酸二酯酶（CAPD )的抑制成份；甘草酸（甘草次酸）是 cAMP磷酸二酯酶（CAPD )强抑制剂；以包含人参皂甙（Rgl+Rbl )、甘草酸的原料配伍，协同作用，可以进一步提高体内 cAMP 及 PKA的浓度和活性，而 cAMP的浓度和活性增强，则可增加去甲肾上腺素（ norepinephrine, NE )等神经递质的合成与释放，增强脑源性神经营养因子（ brain-derived neurotrophic factor, BDNF )的表达，抑制下丘脑 -垂体 -肾上腺轴（ hypothalamic-pituitar -adrenal axis, HPA轴 )的亢进和糖皮质激素的分泌，从而达到显著的抗忧郁功能，而 PKA 的浓度和活性增强，则可放大 GABA对神经元的抑制作用，从而达到显著的抗焦虑功能；此外，大枣 cAMP 作为外源性非水解类 cAMP能参与机体中 cAMP的代谢过程，可模拟激素作用，提高体内 cAMP及 PKA的表达，从而起到抗忧郁及抗焦虑的作用，因此，还可将包含人参皂甙（Rgl+Rbl )、甘草酸及大枣 cAMP的原料配伍，进一步增强本发明的抗忧郁及抗焦虑的功效。人参、甘草、大枣是几千年以来中医及食补药膳常用的药材和食品，在千百年的食用和临床使用过程中，已充分证明人参、甘草、大枣配伍的安全性。发明人研究及实验的结果证明：这三种药材若仅以一般已知的煎煮方式提取所得的提取物与现有技术中用于治疗忧郁症及焦虑症的主流药物相比较，不具备显著的抗忧郁及抗焦虑疗效；发明人将三种药材的提取物进一步纯化以提高提取物中所含的人参皂甙 ( Rgl+Rbl )、甘草酸及大枣 cAMP等有效成份的浓度后制成的药物组合物，实验的结果证明与现有技术中用于治疗忧郁症及焦虑症的主流药物帕>罗西汀 (Paroxetine)及地西泮 (Diazepam)相比较，具有显著的抗忧郁及抗焦虑疗效；收集三种药材提取及纯化后所得提取物之外剩余的残渣，检测后虽然含微量的人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸和大枣 cAMP, 但是经过动物试验后证明没有显著的抗忧郁及抗焦虑功能。而服用人参、甘草及大枣不会发生前述已知技术中抗忧郁及抗焦虑主流药物服用后的副作用，病患再也不会因为惧怕副作用而中断或拒绝药物治疗。故发明人提出以包含人参皂甙（Rgl+Rbl ) 、甘草酸及大枣 cAMP的原料，制成用于治疗忧郁症及焦虑症的口服药物或保健食品，特别是功效成份明确，疗效明显，副作用低，长期服用安全性高的新技术方案以改进已知技术中所产生的不足。由于甘草酸在体内转化为甘草次酸的转化率几乎达到 100%, 而脂溶性比甘草酸强的甘草次酸能够透过血脑屏障进入脑内，故甘草酸抑制 CAPD 是通过体内转化为甘草次酸来进行的，因此，可以用甘草酸或甘草次酸为原料制成本发明的药物组合物。

本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，它是包括由人参及甘草为原料所制成。优选地，本发明的药物组合物，是包括由 4 - 60重量份的所述人参及 2 ~ 30重量份的所述甘草为原料所制成。

优选地，本发明的药物組合物，是包括由 10 ~ 28重量份的所述人参及 5 ~ 14重量份的所述甘草为原料所制成。

根据本发明的另一方面，本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，它是包括由人参、甘草及大枣为原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，是包括由 4 ~ 60重量份的所述人参、 2 ~ 30重量份的所迷甘草及 2 ~ 40重量份的所述大枣为原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，是包括由 10 ~ 28重量份的所述人参、 5 ~

14重量份的所述甘草及 4 ~ 18重量份的所述大枣为原料所制成。

根据本发明的另一方面，本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物，它是包括由含有人参皂甙 Rgl、 RM及甘草酸或甘草次酸的原料所制成。

优选地，本发明的药物組合物，是包括由含有人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 2~25重量份与甘草酸或甘草次酸 3~46重量份的原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，是包括由含有人参皂甙（Rgl+Rbl )合计 4~12重量份与甘草酸或甘草次酸 5~15重量份的原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，其中包括所迷人参皂甙是含人参皂甙 Rgl及 Rbl的人参提取物，且所述甘草酸类是含甘草酸的甘草提取物。

根据本发明的另一方面，本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，它是包括由含有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP的原料所制成。优选地，本发明的药物組合物，是包括由含有合计 2〜25重量份的人参皂甙（ Rgl+Rbl )与 3~46重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.002-0.4重量份的大枣 cAMP的原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，是包括由含有合计 4~12重量份的人参皂甙（ Rgl+Rbl )与 5~15重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.01-0.08重量份的大枣 cAMP的原料所制成。

优选地，本发明的药物组合物，其中包括所述人参皂甙是含人参皂甙 Rgl + Rbl的人参提取物，所述甘草酸类是含甘草酸的甘草提取物，且所述大枣环磷酸腺苷是含大枣环磷酸腺苷的大枣提取物。

优选地，本发明的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料是下述第二提取物：先提取大枣获得第一提取物，再纯化所述第一提取物得所述第二提取物，其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

优选地，本发明的药物组合物可以含有选自药学上可接受的载体、添加剂及其组合中的一种。

优选地，本发明的药物組合物可以制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型中的任一种。

优选地，所述的药物组合物可用来制成用于治疗抑郁症的药物、保健食品和营养剂。

根据本发明的另一方面，本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料的制备方法包括下列步驟：

(a)提取大枣获得第一提取物；及

(b)纯化所述第一提取物获得第二提取物 ,

其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所迷第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

优选地，所述的制备方法，其中步骤 (b)使用含酸基的大孔树脂上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。优选地，所述的制备方法，其中步骤 (b)选用含醛基的大孔树脂 OU-2上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

优选地，所述的制备方法，其中步骤 (b)再以大孔树脂 ME-2上柱分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

本发明说明书和权利要求中所述的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，是实现本发明目的的核心内容，在本发明公开后，本领域的技术人员可以根据中医理论或是相关现代药理学理论，对上述药物进行常规的加减化裁或是用功效作用相同的其它中药有效成分（如远志甙、柴胡甙、甘草香豆素等）替代。这种常规的加減化裁和用作用机理相似或相同的其它 CAPD 抑制剂、 AC激活剂的中药或是相应的有效成分来替代，均属于本领域技术和研究人员的一般性技术活动，故其都在本发明的保护范围之内。

本发明通过参阅附图及详细说明而获较佳了解。附图概述

图 1为制备本发明实施例 1药物的方法流程示意图。

图 2为制备本发明实施例 2药物的方法流程示意图。

图 3为制备本发明实施例 3药物的方法流程示意图。

图 4为制备本发明实施例 4药物的方法流程示意图。

图 5为制备本发明实施例 5药物的方法流程示意图。

图 6为制备本发明实施例 6药物的方法流程示意图。本发明的较佳实施方式

以下将结合附图和实施例进一步说明本发明。本发明主要是采用本领域技术人员已知的方法结合本发明的特征制备本发明所述的药物。以下实施例仅仅是为了说明，并非限定本发明。

为了完成本发明的目的，本发明特别提出下列技术方案。

本发明揭露了一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物，它是由含人参皂甙（Rgl+Rbl) 、甘草酸及大枣 cAMP的原料所制成。

方案一：

以包括人参及甘草为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案二：

以包括 4 ~ 60重量份的所述人参及 2 ~ 30重量份的所述甘草为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案三：

以包括 10~28重量份的所述人参及 5~14重量份的所述甘草为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案四：

以包括人参、甘草及大枣为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案五：

以包括 4 ~ 60重量份的所述人参、 2 ~ 30重量份的所述甘草及 2 ~ 40重量份的所述大枣为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物。

方菜六：

以包括 10~28重量份的所述人参、 5~14重量份的所述甘草及 4~18 重量份的所述大枣为原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案七：

以包括含有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸的原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案八：

以包括含有合计 2-25重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl )与 3〜46重量份的甘草酸或甘草次酸的原料制成本发明的药物组合物。

方案九：

以包括含有合计 4~12重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl )与 5~15重量份的甘草酸或甘草次酸的原料制成本发明的药物组合物。

方案十：

以包括含有前述重量份人参皂甙（ Rgl+Rbl )的人参提取物与含有前述重量份甘草酸的甘草提取物为原料制成本发明的药物組合物。

方案十一：

以包括含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP的原料制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方案十二：

以包括含有合计 2~25重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl ) 、 3〜46重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.002-0.4重量份的大枣 cAMP的原料制成本发明的药物组合物。

方案十三：

以包括含有合计 4〜12重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl ) 、 5~15重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.01-0.08重量份的大枣 cAMP的原料制成本发明的药物组合物。

方案十四：

. 以包括含有前述重量份人参皂甙（Rgl+Rbl )的人参提取物与含有前述重量份甘草酸的甘草提取物及含有前述重量份大枣 cAMP 的大枣提取物为原料制成本发明的药物組合物。

方案十五：

本发明的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料是以下述第二提取物为原料制成本发明的药物组合物：先提取大枣获得第一提取物，再纯化所述第一提取物得所述第二提取物，其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

方案十六：

· 本发明的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料的制备方法，包括下列步骤：

(a)提取大枣获得第一提取物；及

(b)纯化所述第一提取物获得第二提取物，且所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

方案十七：

前述的制备方法，其中步骤 (b)选用含醛基的大孔树脂上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

方案十八：

前述的制备方法，其中步骤 (b)选用含醛基的大孔树脂 OU-2上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。方案十九：

前述的制备方法，其中步骤 (b)再以大孔树脂 ME-2上柱分离所述笫一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

方案二十：

本发明的药物组合物可以含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。方案二十一：

本发明的药物组合物可以制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型的任一种。

方案二十二：

本发明所述的药物组合物可用来制成用于治疗忧郁症及焦虑症的药物、保健食品和营养剂。

为了完成本发明的目的，特提出以下药物的制作方法。

方法一：

将包括 4 ~ 60重量份的所述人参及 2 ~ 30重量份的所述甘草为原料，提取及纯化后得舍有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸的提取物，将其加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方法"一：

将包括 10 ~ 28重量份的所述人参及 5 - 14重量份的所述甘草为原料，提取及純化后得含有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸的提取物，将其加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。方法三：

将包括 4 ~ 60重量份的所述人参、 2 - 30重量份的所述甘草及 2 ~ 40重量份的所述大枣为原料，提取及纯化后得含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸及大枣 cAMP的提取物，将其加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方法四：

将包括 10 - 28重量份的所述人参、 5 ~ 14重量份的所述甘草及 4 ~ 18 重量份的所述大枣为原料，提取及纯化后得含有人参皂戒 Rgl、 Rbl、甘草酸及大枣 cAMP的提取物，将其加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物。

方法五：

自人参及甘草中提取及纯化的含有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸的提取物为原料，或直接采用已制备成的含有人参皂甙 Rgl、 Rbl及甘草酸或甘草次酸的原料，加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物。

方法六：

将含有合计 2~25重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl )与 3〜46重量份的甘草酸或甘草次酸的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方法七：

将含有合计 4〜12重量份的人参皂甙（ Rgl+Rbl )与 5〜15重量份的甘草酸或甘草次酸的原料，加工制成本发明的药物组合物。方法八：

自人参及甘草及大枣中提取及纯化的含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸及大枣 cAMP的提取物为原料，或直接采用巳制备成的含有人参皂甙 Rgl、 Rbl、甘草酸或甘草次酸及大枣 cAMP的原料，加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物。

方法九：

将含有合计 2~25重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl ) 、 3-46重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.002-0.4重量份的大枣 cAMP的原料 , 加工制成本发明的药物组合物。

方法十：

将含有合计 4〜12重量份的人参皂甙（Rgl+Rbl ) 、 , 5~15重量份的甘草酸或甘草次酸及 0.01-0.08重量份的大枣 cAMP的原料，加工制成本发明的药物组合物。

方法十一：

本发明的药物组合物，其中所述含大枣环磷酸腺苷的原料的制备方法，包括下列步骤：

(a)提取大枣获得第一提取物；及

方法十二：

前迷的制备方法，其中步驟 (b)选用含醛基的大孔树脂上柱吸附分离所迷第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。方法十三：

前述的制备方法，其中步骤 (b)选用含基的大孔树脂 OU-2上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

方法十四：

前迷的制备方法，其中步骤 (b)再以大孔树脂 ME-2上柱分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

方法十五：

本发明的药物组合物可以含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。

• 方法十六

将本发明的药物组合物制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型的任一种。

方法十七：

将本发明所述的原料依 GMP制药标准及保健食品生产制造标准的方法，加工制成本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物、保健食品和营养剂。

具体实施例

以下将结合附图和具体实施案例进一步说明本发明。

实施例 1

请参阅图 1，为制备本发明实施例 1药物的方法流程示意图。在图 1中，先将 20 kg的人参破碎后用 70%乙醇溶液加温提取，经上柱层析分离纯化、干燥，得含 120 g人参皂甙（Rgl+Rbl )的人参提取物 0.8 kg; 接着，再将 10 kg的甘草破碎后常温浸泡 12小时，以水提醇沉法提取、浓缩千燥，得含甘草酸 200 g的甘草提取物 2 kg;之后，将上述方法得到的人参提取物 150 g 及甘草提取物 200 g粉碎混合均匀后，得 350 g (含 22.5 g人参皂甙 Rgl+Rbl 及 20 g甘草酸）本发明药物组合物。

实施例 2

请参阅图 2，为制备本发明实施例 2药物的方法流程示意图。在图 2中，将已制备成纯度为 96%的甘草次酸 3.96 g及实施例 1所得的人参提取物 200 g粉碎混合均匀后，得 203.96 g (含 30 g人参皂甙 Rgl+Rbl及 3.8 g甘草次酸）本发明药物组合物。

实施例 3

请参阅图 3,为制备本发明实施例 3药物的方法流程示意图。在图 3中，将已制备成的 3.4 g纯度为 90%的人参鬼甙 Rgl、 7.8 g纯度为 90%的人参皂甙 Rbl及 36.8 g纯度为 95%的甘草酸粉碎混合均匀后，得 48 g (含 10 g人参皂甙 Rgl+Rbl及 35 g甘草酸）本发明药物組合物。

实施例 4

请参阅图 4,为制备本发明实施例 4药物的方法流程示意图。在图 4中，将 10 kg的大枣破碎后加水常温浸泡，再以水提醇沉法提取获得大枣提取液，再用大孔树脂 OU-2、 ME-2 两柱先后连续上柱吸附分离、干燥，得含大枣 cAMP 0.3 g的大枣提取物 30 g作为原料供制备本发明药物。

接着，将实施例 1得到的人参提取物 150 g、甘草提取物 200 g及前述大枣提取物 3 g粉碎混合均匀后，得 353 g (含 22.5 g人参皂甙 Rgl+Rbl、 20 g甘草酸及 0.03 g大枣 cAMP )本发明药物組合物。

实施例请参阅图 5,为制备本发明实施例 5药物的方法流程示意图。在图 5中，将实施例 1得到的人参提取物 150 g及甘草提取物 200 g及实施例 4得到的大枣提取物 0.5 g粉碎混合均匀后，得 350.5 g(含 22.5 g人参皂甙 Rgl+Rbl、 20 g甘草酸及 0.005 g大枣 cAMP )本发明药物组合物。

实施例 6

请参阅图 6，为制备本发明实施例 6药物的方法流程示意图。在图 6中，将已制备成的 6.8 g纯度为 90%的人参皂甙 Rgl、 15.6 g纯度为 90%的人参皂甙 RM、 26 g纯度为 96%的甘草次酸及实施例 4得到的大枣提取物 10 g 粉碎混合均匀后，得 58.4 g (含 20 g人参皂甙 Rgl+Rbl、 25 g甘草次酸及 0.1 g大枣 cAMP )本发明药物组合物。

实验例一实施例 1对小鼠悬尾实验的影响

1.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g, 二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

1.2 实险药品

实施例 1: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

1.3 实瞼仪器：秒表。

1.4 剂量设计

实施例 1大剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

1.5 实验方法及结果

1.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每組 10只： 1.实施例 1大剂量组（80 mg kg, PO, 给药 7d ) ； 2.实施例 1中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d ) ； 3.实施例 1小剂量组（ 20 mg/kg, PO,给药 7d ) ; 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水組（PO ) 。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

1.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高于台面 5 cm的木条上悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

1.5.3 统计学处理

实验资料用 ± <¾)表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

1.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 1。

表 1、实施例 1对小鼠不动时间的影响组别动物数（ J n 不动时间（秒）

生理盐水组（模型组） 10 113.22±21.18 帕罗西汀组 10 75.33±22.91* 实施例 1大剂量组 10 54.67±26.38** 实施例 1中剂量组 10 72.68±27.06* 实施例 1小剂量组 10 95.26±49.91 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 1大、中剂量組和帕罗西汀组均可减少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水組（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 1具有抗实验性抑郁功能。

实瞼例二实施例 1对小鼠利血平诱导体温下降的影响

2.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g, 二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。 2.2 实验药品

实施例 1: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

2.3 实验仪器

GM222型电子温度计，秒表。

2.4剂量设计

实施例 1大剂量： 80 mg/kg/d、中剂量： 40 mg/kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

2.5 实验方法及结杲

2.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 1大剂量组（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 1中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 1小剂量组（ 20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水組（PO ) 。

2.5.2 实验方法

在第 8天给药后 1小时测定小鼠肛温，然后经腹腔注射利血平 2 mg kg, 于注射利血平后 4小时再测定小鼠肛温。每次测温时温度计插入小鼠肛门的深度及时间均一致。

2.5.3 统计学处理

实验资料用 ^土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

2.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 2。

表 2、实施例 1小鼠利血平诱导体温下降的影响

组別动物数（只）体温下降值 ( °C ) 生理盐水组（模型组） 10 3·65±0·77 帕罗西汀组 10 2.38±0.69** 实施例 1大剂量组 10 1.85±1.01** 实施例 1中剂量组 10 2.05±1.03** 实施例 1小剂量组 10 2.35±0.69** 注：与模型组比较 *Ρ<0.05 ** Ρ<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 1大、中、小三个剂量组和帕罗西汀组均可明显减少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递质含量有关，从而可以推断本发明实施例 1具有抗实验性抑郁功能。

实验例三实施例 1对小鼠明暗穿箱实验的影响

3.1 实验动物

昆明种小鼠，雄性，体重 24-26 g, 二级，由北京大学医学部实验动物科学部提供。

3.2 实验药品

实施例 1: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

地西泮 (Diazepam): 天津金辉氨基酸有限公司产品。

3.3 实验仪器：自制明暗穿箱。

3.4剂量设计

实施例 1大剂量： 80 mg kg/d,中剂量： 40 mg/kg d及小剂量： 20 mg/kg/d„ 3.5 实验方法及结果

3.5.1 分组给药

将小鼠随机分为 5组，每组 10只： 1.实施例 1大剂量组（ 80 mg kg/d )；

2.实施例 1中剂量组（40 mg/kg d )； 3.实施例 1小剂量组（ :20 mg/kg/d )； 4.地西泮組（2.5 mg/kg/d ) ; 5.NS组。每天一次灌胃给药，连续给药 7天，给药期间动物自由进食饮水，于第八天给药后 1小时后进行试验。

3.5.2 实验方法

小鼠明暗箱实险：明暗穿箱（ 44 cm X 21 cm X 21 cm ) 中暗箱占 1/3 , 顶部加盖；明箱占 2/3，光亮照明，两箱间有一门洞供动物穿过。实验时将小鼠置于明箱中央，背朝暗箱，观察并记录 10分钟内小鼠进入暗室后返回明室的次数。并以此作为评价药物抗焦虑作用的指标。

3.5.3 统计学处理

实验资料以 ±Si)表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。

3.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 3。

表 3、实施例 1对小鼠明暗箱实验穿箱次数的影响

组别动物数 (只）由暗室返回明室次数实施例 1大剂量组 10 11.2±3.84 *

实施例 1中剂量组 10 13.1±5.38 **

实施例 1小剂量组 10 13.5±4.65 **

地西泮组 10 11.3±4.54 *

NS组 10 6.2±4.32

*P<0.05, ** P<0.01 , 与 NS组比较

3.6说明

本实验所采用的明暗箱实验是建立在鼠类对强光的先天性厌恶和对新环境的自发性探究行为的基础上的，临床上可用于治疗人类焦虑症的药物和它们在此模型上可以促进小鼠的自发探究行为增加的作用具有 [艮好的相关性。根据以上实验结果显示实施例 1大、中、小剂量组及地西泮组均可显著增加小鼠由暗室返回明室次数，与 NS组比较差异具有统计学意义。实验结果证明实施例 1具有抗焦虑作用。

3.7结论

根据以上实验结果显示本发明实施例 1大、中、小剂量组及地西泮组均可显著增加小鼠由暗室返回明室次数，表明实施例 1具有抗焦虑作用。

实验例四实施例 2对小鼠悬尾实验的影响

4.1 实 ^验动物

4.2 实验药品

实施例 2: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

4.3 实验仪器

秒表。

4.4剂量设计

实施例 2大剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

4.5 实 ^方法及结果

4.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每組 10只： 1.实施例 2大剂量组（80 mg kg, PO，给药 7d )； 2.实施例 2中剂量組（40 mg kg， PO, 给药 7d )； 3.实施例 2小剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO )。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

4.5.2 实验方法

将小鼠尾 (距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高于台面 5 cm的木条上悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

4.5.3 统计学处理实验资料用 ±5©表示，实验结杲用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

4.5.4 实验结杲

实验结果请参阅表 4。

表 4、实施例 2对小鼠不动时间的影响

组另' J 动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 113.22±21.18 帕罗西汀组 10 75.33±22.91* 实施例 2大剂量组 10 93.27±36.42 实施例 2中剂量组 10 76.21±28.36* 实施例 2小剂量组 10 107.79±32.56 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 2中剂量组和帕罗西汀组均可减少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水組（模型組）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 2具有抗实验性抑郁功能。

实验例五实施例 2对小鼠利血平诱导体温下降的影响

5.1 实险动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g, 二级，北京首都医科大学实臉动物科学部提供。

5.2 实验药品

实施例 2: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

5.3 实驗仪器 GM222型电子温度计，秒表。

5.4剂量设计

实施例 2大剂量： 80 mg/kg/d>中剂量： 40 mg/kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

5.5 实除方法及结果

5.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 2大剂量组（80 mg kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 2中剂量组（40 mg/kg， PO, 给药 7d )； 3.实施例 1小剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d ) ; 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg， PO,给药 7d ) ; 5·生理盐水组（PO ) 。

5.5.2 实验方法

5.5.3 统计学处理

实验资料用士 SD表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。

5.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 5。

表 5、实施例 2小鼠利血平诱导体温下降的影响

组别动物数（只）体温下降值 ( °C ) 生理盐水组（模型组） 10 3.65±0.77 帕罗西汀组 10 2.38±0.69** 实施例 2大剂量组 10 2.93±0.74* 实施例 2中剂量组 10 2.31±0.82** 实施例 2小剂量组 10 3.21土 0.71 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：根据以上实验，可以看出本发明实施例 2中剂量组和帕罗西汀組均可明显减少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递质含量有关，从而可以推断本发明实施例 2具有抗实验性抑郁功能。

实验例六实施例 3对小鼠悬尾实验的影响

6.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0士 2 g, 二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

6.2 实验药品

实施例 3: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

6.3 实验仪器：

秒表。

6.4剂量设计

实施例 3大剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg d及小剂量： 20 mg kg/d。

6.5 实验方法及结果

6.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.实施例 3大剂量组（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 3中剂量組（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 3小剂量组（20 mg/kg， PO, 给药 7d )； 4.帕罗西汀组（ 3 mg/kg, PO,给药 7d ) ; 5.生理盐水组（PO ) 。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

• 6.5.2 实验方法

将小鼠尾（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在头高山台面 5 cm的木条上悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的不动时间。

6.5.3 统计学处理

实验资料用土 SD表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 6.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 6。

表 6、实施例 3对小鼠不动时间的影响

动物数（只）不动时间（秒）

生理盐水組（模型组） 10 113.22±21.18 帕罗西汀組 10 75.33±22.91* 实施例 3大剂量組 10 70.37±28.14* 实施例 3中剂量组 10 76.26±23.81* 实施例 3小剂量组 10 90.40±31.32 注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 3大、中剂量组和帕罗西汀组均可减少小鼠悬尾后的不动时间，且与生理盐水組（模型组）相比有显著性差异，从而可以推断本发明实施例 3具有抗实验性抑郁功能。

实验例七实施例 3对小鼠利血平诱导体温下降的影响

7.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2 g，二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

7.2 实验药品

实施例 3: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

利血平：广东邦民制药厂有限公司。

7.3 实验仪器

GM222型电子温度计，秒表。 7.4剂量设计

实施例 3大剂量： 80 mg/kg/d,中剂量： 40 mg/kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

7.5 实验方法及结果

7.5.1 分组给药

. 将小鼠随机分組，每组 10只： 1.实施例 3大剂量组（80 mg/kg, PO, 给药 7d )； 2.实施例 3中剂量组（40 mg/kg, PO, 给药 7d )； 3.实施例 3小剂量组（20 mg/kg, PO,给药 7d )； 4.帕罗西汀組（ 3 mg/kg, PO,给药 7d )； 5.生理盐水组（PO ) 。

7.5.2 实验方法

7.5.3 统计学处理

实验资料用 ±5©表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 7.5.4 实验结果

实验结果请参阅表 7。

表 7、实施例 3小鼠利血平诱导体温下降的影响

动物数（只）体温下降值 ( V ) 生理盐水组（模型组） 10 3.65±0.77 帕罗西汀组 10 2.38±0.69** 实施例 3大剂量组 10 2.18±0.92** 实施例 3中剂量组 10 2.36±0.83** 实施例 3小剂量组 10 2.97±0.67* 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出本发明实施例 3大、中、小剂量组和帕罗西汀组均可明显減少利血平诱导的体温下降，表明其抗实验性抑郁作用可能与影响单胺递质含量有关，从而可以推断本发明实施例 3 具有抗实-验性抑郁功

实验例八实施例 4对大鼠嗅球损毁实验的影响

8.1 实验动物

嗅球毁损模型：健康 Wistar雄性大鼠，二级，体重 330土20 g, 购于北京维通利华实验动物技术有限公司（合格证编号 SCXK (京） 2002-0003 ) 。

8.2 试剂与药品

实施例 4由欧纳尔生物工程技术有限公司提供（批号： 060313 ) , 帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 04050011 ) , 以上药物用 0.5%羧甲基纤维素纳（CMC-Na )配制后供灌胃使用；注射用青霉素钠为华北制药股份有限公司产品（批号： S0511204 )；去曱肾上腺素（ E )及 5- 羟色胺（5-HT )标准品为 Sigma公司产品；其它试剂均为市售。

8.3仪器

自制开野实验箱，避暗实验箱，大鼠脑立体定位仪，高效液相色语仪， DFM-96型 10管放射免疫 γ计数器。

8.4 实-睑方法

8.4.1动物分组与给药方法

大鼠随机分 6组，假手术组、模型对照组、实施例 4 高剂量组（60 mg/kg/d )、实施例 4中剂量组（ 30 mg/kg/d )、实施例 4低剂量组（ 15 mg/kg/d )、帕罗西汀组 ( 2 mg/kg/d )。受试药与阳性药用 0.5%羧曱基纤维素纳（ CMC-Na ) 配制。每天一次灌胃给药。

8.4.2模型制备方法

大鼠用水合氯醛麻醉，麻醉后从大鼠前面门前 1 cm至前自后 1 cm正中线处切开，暴露颅骨。在距离前囱前 8 mm、正中线两侧 2 mm处分別开骨窗，直径约 2 mm。用特制电烙铁垂直插入颅内 2秒，破坏嗅球，用止血海棉填充骨窗，缝合皮肤；术后每 4天以腹腔注射（intraperitoneal, IP )给与青霉素钠 40,000单位/ Kg，并连续给与受试药物 24天。

8.5观测指标

8.5.1开野实验

开野实—瞼箱由浅蓝色胶合板及铝合金框架构成（ 1 m X 1 m X 0.4 m ) , 箱底划分为 25个方格（每个 20 cm X 20 cm ) , 沿四壁为外周格，其余为中央格。将动物放入正中方格中，观察 3分钟内动物的跨格次数（三爪以上跨入邻格）和站立次数（两前肢离地 1 cm以上）。

8.5.2被动回避实险一避暗法

实-验箱内由明、暗两室组成，中间有一个通道供大鼠出入，暗室隔栅与电击仪相联，两室间有一活动隔板。如大鼠进入暗室则遭电击。训练时，将大鼠头背向洞口放入明室中适应 5分钟，然后将隔板抽出观察 5分钟，记录大鼠首次进入暗室时间（触电潜伏期），此为学习成绩。 24 小时后重复测试，抽出隔板并通电 5分钟观察大鼠第一次钻入暗室的时间，此为记忆成绩。

8.6统计学处理

实验资料用 ±5©表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 8.7 实验结杲

8.7.1 开野实验结杲请参阅表 8。

表 8、嗅球毁损模型大鼠开野实验结果

水平运动垂直运动动物数

(跨格次数） (直立次数）实施例 4大剂量组 11只 49.18±27.68 ** 10.91±6.91 ** 实施例 4中剂量组 11只 54.55+23.01 13.45±5.72 * 实施例 4小剂量组 11只 61.82±21.43 15.18±4.47 帕罗西汀组 11只 55.36+25.96 * 14.36+5.55 模型组 11只 79.55±24.33 19.09±8.53 假手术组 45.36±26·84 ** 10.45+6.19 ** 注：与模型组比较 *Ρ<0.05 ** Ρ<0.01

8.7.2避暗实验结果请参阅表 9。

表 9、嗅球毁损模型大鼠避暗实验结果

动物数第一天潜伏期 (S) 第二天潜伏期 (S) 实施例 4大剂量组 11只 187.00+87.59 * 289.82+28.59 * 实施例 4中剂量组 11只 191.71+72.95 * 288.82+37.09 * 实施例 4小剂量组 11只 152.44±76.81 271.18+38.61 帕罗西汀组 11只 181.87+90.54 * 265.00+65.39 模型組 11只 111.21±82.93 236.88+74.17 假手术组 11只 211.46±82.10 ** 292.82±14.37 * 注：与模型组比较 *Ρ<0.05 ** Ρ<0.01

结论：

实验例八结果显示：实施例 4大剂量组可明显改善嗅球毁损所造成的大鼠水平及垂直运动增加，实施例 4中剂量组对嗅球毁损模型大鼠的垂直运动增加也有明显改善作用。另外，实施例 4大、中剂量组对嗅球毁损所造成的大鼠学习及记忆功能減退也有明显改善作用。

实验例九实施例 4对大鼠不可预测长期应激实验的影响

9.1 实验动物

不可预测性长期应激模型：健康 Wistar雄性大鼠，二级，体重 240 - 270 g, 购于北京维通利华实验动物技术有限公司（合格证编号 SCX (京） 2002-0003 ) 。

9.2试剂与药品

实施例 4由欧纳尔生物工程技术有限公司提供（批号： 060313 )，帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 04050011 ) , 以上药物用 0.5%羧甲基纤维素纳（CMC-Na)配制后供灌胃使用 ,· 注射用青霉素钠为华北制药股份有限公司产品（批号： S0511204 ) ；去曱肾上腺素 (NE )及 5- 羟色胺（5-HT )标准品为 Sigma公司产品；其它试剂均为市售。

9.3仪器

自制开野实验箱，避暗实验箱，大鼠脑立体定位仪，高效液相色仪，

DFM-96型 10管放射免疫 γ计数器。

9.4 实验方法

9.4.1 动物分组与给药方法

大鼠随机分 6组，假手术组、模型对照组、实施例 4 高剂量組（60 mg/kg/d )、实施例 4中剂量组（ 30 mg/kg/d )、实施例 4低剂量组（ 15 mg/kg/d )、帕罗西汀组（ 2 mg/kg/d )。受试药与阳性药用 0.5%羧甲基纤维素纳（ CMC-Na ) 配制。每天一次灌胃给药。

9.4.2模型制备方法

不可预测性长期应激模型：空白对照组正常饮食饮水，不给任何刺激。其它五组，每笼饲养 1只，并接受 24天不可预知的应激刺激，包括： 3次 24小时禁食， 3次 24小时断水， 3次 24小时潮湿垫料（鼠盒中加水 200 ml ), 3次通宵照明， 3次 4°C冷水游泳 5分钟， 3次 45°C烤箱热烘 5分钟， 3次 1 分钟夹尾，及 3次 30分钟高速水平振荡。每天随机给予一种刺激，共剌激 24天，每种刺激不得连续给予。每天一次灌胃给药，共 24天。

9.5观测指标

. 9.5.1 开野实验：同上。

9.5.2被动回避实—检：同上。

9.5.3大鼠强迫游泳

末次给药后实验分两天进行。第一天预试 15分钟，玻璃缸内装 25°C温水，水深 25 cm。 24小时后，进行正式实验，给药后 1小时，将大鼠放入缸中，观察并记录 5分钟不动时间。

9.5.4体重测试比较各组动物实验前后体重的增加值。

9.5.5饮蔗糖水量测试：

比较各种动物蔗糖摄入量。让各组大鼠饮用 1%的蔗糖水（定时为 1小时），应激前、应激后 3周各测一次饮水量；大鼠在禁食禁水 14小时后，将 1%的蔗糖水放入笼中代替原来的饮用水。称量记录大鼠饮用蔗糖水 1小时前后的瓶重的差值计算每次的蔗糖水饮用量。比较各组每一次测试中糖水摄入量的差异。

9.5.6高效液相一电化学检测法

测定大鼠大脑皮质中 E及 5-HT含量。

9.6统计学处理

实验资料用土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析。 9.7 实验结果

9.7.1 大鼠饮蔗糖水量结果请参阅表 10。

表 10、不可预测性长期应激模型大鼠饮蔗糖水量

饮蔗糖水量 (g) 实施例 4大剂量组 13只 22.55±5.03

实施例 4中剂量组 13只 26.53±4.99 ** 实施例 4小剂量组 13只 26.97±6.93 ** 帕罗西汀组 13只 26.29+4.87 ** 模型组 13只 19.42±4.25

空白对照组 13只 29.41+3.83 ** 注：与模型組比较 *P<0.05 ** P<0.01

9.7.2 大鼠体重增量结杲请参阅表 11。

表 11、不可预测性长期应激模型大鼠体重增量

动物数体重增量 (g) 实施例 4大剂量组 13只 86.08±10.84 实施例 4中剂量组 13只 96.00+11.05 ** 实施例 4小剂量组 13只 95.15+15.46 ** 帕罗西汀组 13只 96.85±9.30 ** 模型组 13只 84.92±12.61 空白对照組 13只 120.54±10.60 ** 注：与模型組比较 ** P<0.01

9.7.3大鼠强迫游泳实验不动时间结果请参阅表 12。

表 12、不可预测性长期应激模型大鼠强迫游泳实验不动时间

动物数不动时间 (秒）实施例 4大剂量组 13只 23.28+18.05 ** 实施例 4中剂量组 13只 18.95+12.55 ** 实施例 4小剂量组 13只 25.20±13.60 * 帕罗西汀组 13只 31.38±19.59 模型组 13只 39.95±17.46 空白对照组 13只 26.96+12.76 * 注：与模型組比较 *P<0.05, ** P<0.01

9.7.4大鼠开野实验结果请参阅表 13。

表 13、不可预测性长期应激模型大鼠开野实验结杲

动物水平运动（跨格次垂直运动 (直立次数数）数）

实施例 4大剂量组 14 58.31+15.35 * 16.54±4.24 ** 实施例 4中剂量组 14 49.15± 14.26 13.54±4.48 实施例 4小剂量组 14 52.62+21.83 16.15±7.32 * 帕罗西汀组 14 61.85±21.68 ** 14.69+4.2 39.54±16.31 11.46+3.26

64.00±11.97 ** 16.85+3.18 ** 注：与模型组比较 *P<0.05, ** P<0.01

9.7.5大鼠避暗实验结果请参阅表 14。

表 14、不可预测性长期应激模型大鼠避暗实验结果

动物数第一天潜伏期 (S) 第二天潜伏期 (S) 实施例 4 大剂量 13只 65.43+31.44 259.22+56.51 组 13只 58.18±18.0 212.76±77.27 实施例 4 中剂量 13只 75.98±32.22 * 204.85±94.99 組

13只 75.75±46.52 * 257.46+66.92 实施例 4 小剂量

13只 50.01±15.7 189.25+111.99 组

13只 80.00±39.17 * 263.38±59.68 帕罗西汀组

模型组

空白对照组

注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

9.7.6 大鼠大脑皮质中 E及 5-HT含量检测结果请参阅表 15。

表 15、不可预测性长期应激模型大鼠大脑皮质中 NE及 5-HT含量动物

-HT ΝΈ

数

(nmol/L脑组织匀浆） (rnnol L脑组织匀浆）

(只）

实施例 4大剂量组 12 230.4157±47.78554* 269.5409±58.86389** 实施例 4中剂量組 12 303.4418±70.31711** 227.2976±28.95101** 实施例 4小剂量组 12 332.7343±76.25168** 201.8688±29.80775** 帕罗西汀组 12 227.0637±46.53838* 220.5419士 38.31681** 179.3866±20.49374 57.6671±77.66958

228.1478士 28.40397* 132.8598士 20.84756**

注：与模型组比较 *P<0.05 ** P<0.01

' 结论：

实 ^Μ¹列九结果显示：实施例 4中小剂量组可明显改善不可预测性长期应激刺激所造成的饮蔗糖水量减少及体重下降；实施例 4大中小剂量组均可明显增加大鼠强迫游泳实臉不动时间；实施例 4大剂量组可明显改善不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠水平及垂直运动减少，实施例 4小剂量组对不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠垂直运动减少也有明显改善作用；实施例 4 小剂量组对不可预测性长期应激刺激所造成的大鼠学习能力降低有改善作用；实施例 4大中小剂量组均可明显增加大鼠大脑皮质中 ΝΕ及 5-ΗΤ 含量。

实验例十实施例 4对小鼠明暗穿箱实验的影响

10.1 实验动物

10.2 实^:药品

实施例 4: 北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

地西泮 (Diazepam): 天津金辉氨基酸有限公司产品。

10.3 实验仪器：自制明暗穿箱。

10.4 剂量设计

实施例 4大剂量： 80 mg/kg/d^中剂量： 40 mg/kg/d及小剂量： 20 mg/kg/d。

10.5 实验方法及结果

10.5.1 分组给药将小鼠随机分为 5组，每组 10只： 1.实施例 4大剂量组（80mg/kg/d)； 2.实施例 4中剂量组（40mg/kg/d)； 3.实施例 4小剂量组（20mg/kg/d)； 4.地西泮组 (2.5mg/kg/d)； 5.NS组。每天一次灌胃给药，连续给药 7天，给药期间动物自由进食饮水，于第八天给药后 1小时后进行试验。

10.5.2 实-险方法

小鼠明暗箱实验：明暗穿箱（44cm X 21 cm X 21 cm)中暗箱占 1/3, 顶部加盖；明箱占 2/3, 光亮照明，两箱间有一门洞供动物穿过。实验时将小鼠置于明箱中央，背朝暗箱，观察并记录 10分钟内小鼠进入暗室后返回明室的次数。并以此作为评价药物抗焦虑作用的指标。

10.5.3 统计学处理

实验资料以 ±5Ώ表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。

10.5.4 实^ r结果

实验结果请参阅表 16。

表 16、实施例 4对小鼠明暗箱实验穿箱次数的影响

组别动物数 (只）由暗室返回明室次数

实施例 4大剂量组 10 11.6±4.53 *

实施例 4中剂量组 10 13.9±3.76 **

实施例 4小剂量組 10 13.4±4.12 **

地西泮组 10 11.7±4.47*

NS组 10 6.8±3.85

£： *P<0.05, **P<0.01, 与 NS组比较

10. 说明

本实验所采用的明暗箱实验是建立在鼠类对强光的先天性厌恶和对新环境的自发性探究行为的基上的，临床上可用于治疗人类焦虑症的药物和它们在此模型上可以促进小鼠的自发探究行为增加的作用具有很好的相关性。根据以上实验结果显示实施例 4大、中、小剂量组及地西泮组均可显著增加小鼠由暗室返回明室次数，与 NS组比较差异具有统计学意义。实验结果证明实施例 4具有抗焦虑作用。

10.7结论

根据以上实验结果显示本发明实施例 4大、中、小剂量组及地西泮组均可显著增加小鼠由暗室返回明室次数，表明实施例 4具有抗焦虑作用。

实验例十一实施例 5对小鼠悬尾实验的影响

11.1 药品

实施例 5由欧纳尔生物工程技术有限公司提供 (中试放大产品）；帕罗西汀为中美天津史克制药有限公司产品（批号： 05070384 ) , 以上药物用生理盐水配制后供灌胃使用。

11.2动物

. ICR小鼠，雄性，体重 20.0±l g, 二級，由北京大学医学部实验动物科学部提供，动物质量合格证号 SCX (京） 2006-0008。

11.3 仪器

秒表。

11.4 方法

小鼠 70只，随机平均分成 5组， NS组、帕罗西汀组（3 mg/kg/d )、实施例 5大剂量組（ 80 mg/kg/d )、实施例 5中剂量组（ 40 mg kg/d )、实施例 5小剂量組 ( 20 mg/kg/d )。每日灌胃给药一次，于第八天给药后 1小时将小鼠尾端（距尾尖 1 cm处）用胶布粘在置于一敞口箱内的水平支撑物上，使小鼠呈倒悬状态，小鼠头距底面约 10 cm, 悬吊 6分钟，记录后 5分钟内小鼠的累积不动时间。

11.5统计学处理

实验资料以 ±SD表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。 11.6结果

小鼠悬尾实验不动时间结杲请参阅表 17。

表 17、实施例 5对小鼠悬尾实验累积不动时间的影响

动物数 (只）剂量 (mg kg/d) 不动时间 (秒）实施例 5大剂量组 14 80 64.75±42.22** 实施例 5中剂量组 14 40 55.41±33.83** 实施例 5小剂量组 14 20 . 62.75±26.61** 帕罗西汀组 14 3 53.27土 20.02**

NS组 14 113.59±36.11 注：与 NS组比较 *P<0.05 ** P<0.01

结论：

研究结果显示实施例 5大、中、小三个剂量组及临床有效的抗抑郁药帕罗西汀均可明显缩短小鼠悬尾累积不动时间，表明实施例 5具有一定的抗实验性抑郁作用。

实验例十二实施例 5对小鼠强迫游泳实验的影响

12.1 药品

12.2 动物

ICR小鼠， '雄性，体重 20.0±l g，二级，由北京大学医学部实验动物科学部提供，动物质量合格证号 SCXK (京） 2006-0008。

12.3仪器

秒表。

12.4方法小鼠分组及给药如同小鼠悬尾实验。实验各组小鼠于给药 1小时后进行实验，实验前及第八天小鼠训练游泳 15分钟， 24小时后测试，将小鼠分别水深 10 cm、直径 14 cm的玻璃缸中，水温 25 °C , 观察 5分钟记录小鼠在水中的累积不动时间。

12.5统计学处理

实验资料以土表示，实验结果用 SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析。

12.6 结果

小鼠强迫游泳实验结果请参阅表 18。

表 18、实施例 5对小鼠强迫游泳实验的影响动物数剂量 (mg/kg/d) 不动时间 (秒） (只）

实施例 5大剂量组 14 80 88.35±51.64* 实施例 5中剂量组 14 40 65.87±38.96** 实施例 5小剂量组 14 20 88.12±38.57* 帕罗西汀组 14 3 57.80±38.07**

NS组 14 132.47士 40.64 注：与 NS组比较 *Ρ<0·05 ** Ρ<0.01

结论：

研究结果显示实施例 5大、中、小剂量组及临床有效的抗抑郁药帕罗西汀均可明显缩短小鼠强迫游泳累积不动时间，表明实施例 5具有一定的抗实验性抑郁作用 ₀

实-险例十三

将实施例 1及实施例 4提取后收集所剩的人参残渣 9 kg,甘草残渣 7 kg 与大枣残渣 0.9 kg, 将其干燥、粉碎、混合均匀后得含极微量的人参皂甙 Rgl、 Rbl、及甘草酸和大枣 cAMP的残渣混合物，进行对小鼠悬尾实验的影响的对照试验。

13.1 实验动物

ICR小鼠，雄性，体重 22.0±2g, 二级，北京首都医科大学实验动物科学部提供。

13.2 实验药品

残渣混合物：北京欧纳尔生物工程技术有限公司提供。

帕罗西汀（赛乐特）：中美天津史克制药有限公司产品。

13.3 实验仪器

秒表。

13.4剂量设计

残渣混合物大剂量： 160mgkg/d、中剂量： 80mg/kg/d及、小剂量： 40 mg/kg/d₀

13.5 实验方法及结果

13.5.1 分组给药

将小鼠随机分组，每组 10只： 1.残渣混合物大剂量组（160mg/kg， PO, 给药 7d)； 2.残渣混合物中剂量组（80mg/kg， PO, 给药 7d)； 3.残渣混合物小剂量组（40mg/kg, PO, 给药 7d)； 4.帕罗西汀组（3mgkg, PO, 给药 7d)； 5.生理盐水組（PO) 。最后一次给药后 1小时进行悬尾实验。

13.5.2 实验方法

13.5.3 统计学处理

实验结果请参阅表 19。表 19、残渣混合物对小鼠不动时间的影响

组别动物数（只）不动时间（秒）生理盐水组（模型组） 10 82.03±43.01 帕罗西汀组 10 38.37±20.76* 残渣混合物大剂量组 10 76.91±31.09 残渣混合物中剂量组 10 78.89±48.18 残渣混合物小剂量组 10 81.31士 58.68 注：与模型组比较 * P<0.05 **P<0.01

结论：

根据以上实验，可以看出残渣混合物大、中、小三个剂量组虽可缩短小鼠悬尾后的不动时间，但与生理盐水组 (模型组）相比差异无显著性，从而可以推断所述残渣混合物不具有抗实验性抑郁功能。

工业实用性

本发明用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物的应用范围：

1.本发明所述的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物中，可以含有药物学上可接受的添加剂；

2.本发明所述的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物可以将其加工制成散剂、胶嚢剂、片剂等各种已知的剂型；以及

3.本发明所迷的用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物可以制成用于治疗忧郁症及焦虑症的保健食品。

本发明可以由本领域技术人员做出多种改变 ,但都不脱离所附权利要求所要求保护的范围。

Claims

权利要求书

1. 一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，包括由人参及甘草为原料所制成。

2.如权利要求 1所迷的药物组合物，其中所述药物组合物包括由 4 ~ 60 重量份的所述人参及 2 ~ 30重量份的所述甘草为原料所制成。

3. 如权利要求 2所述的药物组合物，其中所述药物组合物还包括由 10 ~ 28重量份的所述人参及 5 ~ 14重量份的所述甘草为原料所制成。

4. 如权利要求 1 所述的药物组合物，其中所述药物组合物含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。

5.如权利要求 1所迷的药物组合物，其中所述药物组合物制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型其中之一。

6.如权利要求 1 所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

7. 一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物組合物，包括由人参、甘草及大枣为原料所制成。

8. 如权利要求 7所迷的药物组合物，其中所述药物组合物包括由 4 ~ 60 重量份的所述人参、 2 ~ 30重量份的所述甘草及 2 ~ 40重量份的所述大枣为原料所制成。

9.如权利要求 8所述的药物組合物，其中所述药物组合物还包括由 10 ~

28重量份的所述人参、 5 ~ 14重量份的所述甘草及 4 ~ 18重量份的所述大枣为原料所制成。

10.如权利要求 7所述的药物组合物，其中所述药物组合物含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。

11. 如权利要求 7所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型中的任一种。

12.如权利要求 7所迷的药物组合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

13.一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，其包括：

人参皂甙，其包含 Rgl及 Rbl; 及

甘草酸类，其由选自甘草酸、甘草次酸及其组合的一种为原料所制成。

14. 如权利要求 13所述的药物組合物，其中所述药物组合物包括 2 ~ 25 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl及 3~46重量份的所述甘草酸类。

15.如权利要求 14所述的药物組合物，其中所述药物组合物还包括 4 ~ 12重量份的所述人参皂甙 Rgl + RM及 5 ~ 15重量份的所述甘草酸类。

16.如权利要求 13 所述的药物組合物，其中其中所述药物组合物包括所述人参皂甙是舍人参皂甙 Rgl及 Rbl的人参提取物，而所述甘草酸类是含甘草酸的甘草提取物。

17.如权利要求 13所述的药物组合物，其中所述药物組合物含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。

18.如权利要求 13所述的药物組合物，其中所述药物組合物制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型的任一种。

19.如权利要求 13所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

20.—种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物，其包括：

人参皂甙，其包含 Rgl及 Rbl;

甘草酸类，其选自甘草酸、甘草次酸及其组合的一种；及

大枣环磷酸腺苷为原料所制成。

21.如权利要求 20所述的药物組合物，其中所述药物组合物包括 2 ~ 25 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl、 3 ~ 46重量份的所述甘草酸类及 0.002 ~

0.4重量份的所述大枣环磷酸腺苷。

22. 如权利要求 21所述的药物组合物，其中所述药物组合物包括 4 ~ 12 重量份的所述人参皂甙 Rgl + Rbl、 5 - 15重量份的所述甘草酸类及 0.01 ~ 0.08重量份的所迷大枣环磷酸腺苷。

23.如权利要求 20所迷的药物组合物，其中所述药物组合物包括所述人参皂甙是含人参皂甙 Rgl及 Rbl的人参提取物，所述甘草酸类是含甘草酸的肯草提取物，而所述大枣环磷酸腺苷是含大枣环磷酸腺苷的大枣提取物。

24. 如权利要求 20所述的药物组合物，其中所述大枣环祷酸腺苷的原料是下述的第二提取物：先提取大枣获得第一提取物，再纯化所述第一提取物得所述第二提取物，其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环璘酸腺苷浓度。

25. 如权利要求 20所述的药物组合物，其中所述药物组合物含有药学上可接受的载体、添加剂或其组合。

26.如权利要求 20所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成一剂型，所述剂型选自锭剂、胶嚢剂、散剂、片剂、粉剂、溶液剂、微嚢剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂及药剂学上的口服药物剂型的任一种。

27.如权利要求 20所述的药物组合物，其中所述药物组合物制成保健食品或营养剂。

28. 一种用于治疗忧郁症及焦虑症的药物组合物的含大枣环磷酸腺苷的原料的制备方法，其包括下列步骤：

(a)提取大枣获得第一提取物；及

(b)纯化所述第一提取物获得第二提取物，

其中所述第二提取物的大枣环磷酸腺苷浓度高于所述第一提取物的大枣环磷酸腺苷浓度。

29.如权利要求 28所述的制备方法，其中步骤 (b)选用含基的大孔树脂上柱吸附分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

30. 如权利要求 29所述的制备方法，其中步骤 (b)选用含醒基的大孔树脂 OU-2上柱吸附分离所述笫一提取物中的大枣环磷酸腺苷。

• 31.如权利要求 30所述的制备方法，其中步骤 (b)再以大孔树脂 ME-2 上柱分离所述第一提取物中的大枣环磷酸腺苷。