WO2008004340A1

WO2008004340A1 - Senescence inhibitor

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Publication number: WO2008004340A1
Application number: PCT/JP2007/000716
Authority: WO
Inventors: Noriyasu Ota; Satoshi Haramizu; Takatoshi Murase
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2006-07-05
Filing date: 2007-06-29
Publication date: 2008-01-10
Anticipated expiration: 2009-01-05
Also published as: EP2036552A4; KR101473017B1; US20090281174A1; KR20090037403A; EP2036552B1; US8962678B2; EP2036552A1

Description

明細書

老化抑制剤

技術分野

[0001 ] 本発明は、老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤、寝たきり予防剤、筋肉老化抑制剤及び運動機能向上剤に関する。

背景技術

[0002] 老化は生理学的老化と病的老化に大別される。生理学的老化は加齢に伴い必然的に起こる老化であり、毛髪、皮膚、眼、骨、脳等の変化、運動能力やエネルギー代謝の低下が生じる。近年、老化によるエネルギー代謝の低下にはミトコンドリア D N Aの変異や損傷といったミトコンドリァ機能の低下が関係していることが言われている（非特許文献 1 ) 。

[0003] —方、老化によって生じる筋力や持久力の低下は日常の生活能力を低下させる。また、エネルギー代謝やミトコンドリア機能の低下はエネルギー摂取とエネルギー消費のアンバランスを引き起こし、肥満や糖尿病等の生活習慣病の原因となり得る。これらを防止することはクオリティォブライフ（Q O L ) の向上といった観点から先進諸国において重要な課題として位置づけられている。したがって、 Q O Lを充実して健康寿命を延伸するためには、加齢に伴い生じる生理機能の低下、いわゆる老化を抑制すること、特に持久力を保つこと、疲労を抑制すること及びエネルギー代謝を高く維持すること、またミトコンドリァ機能を向上することが重要である。

[0004] また、一般に、筋肉の筋質量や筋力が減少する筋萎縮には、廃用性筋萎縮やサルコぺニァ等が挙げられる。筋萎縮が起こると、それに伴って筋機能の低下がみられるようになる。特に高齢者は、加齢による筋萎縮や筋力の低下が認められ、筋肉損傷や骨折しやすくなる。この治療■療養のための安静状態やギプス固定等の活動制限下におかれると、廃用性筋萎縮や筋機能の低下が急速に進行する。高齢者は、斯かる悪循環に陥りやすく、最悪の場合には寝たきりになるため、生活機能を改善し健康寿命を延伸し、クオリティォブライフ（Q O L ) を維持するためには、ある程度の運動を促がすことにより廃用性筋萎縮や筋機能の低下を抑制し、運動能力を保ち、身体機能を全般的に良好に保つことが重要である。

[0005] 老化は遺伝的要因や環境的要因により進行するが、食事■運動といった生活習慣を始めとする環境的要因を改善することで遅らせることは可能であると考えられている。老化に伴う運動能力低下や筋萎縮や筋機能の低下を防ぐ手段としては、健常時に適度な運動の継続或いはリハビリ亍ーションの理学療法等が挙げられ、特に高齢者の場合では適度な運動等を実践する、あるいはリハビリテーションを実践する等が挙げられるが、モチベーションの維持の困難さや怪我の恐れもあることから、安全性が高く、より効果的な方法が望まれていた。

[0006] 身体的変化の老化を抑制しうる成分の探索は行われており、皮膚の老化抑制成分として、生体コラーゲン合成促進剤と異常タンパク質除去剤を含有する抗老化用組成物（特許文献 1 ) 、ニンジン葉部からの抽出物を有効成分とする抗老化剤（特許文献 2 ) 、わさび抽出物とィグサ抽出物を必須成分とする老化防止用組成物（特許文献 3 ) 等が開示されている。

[0007] また、テロメァ短縮抑制成分として、マンネンタケの溶媒抽出物による細胞老化抑制剤（特許文献 4 ) 、また脳の老化抑制剤として、ココア及び又はカカオマス（特許文献 5 ) 、有機ゲルマニウム化合物（特許文献 6 ) 、 L —アルギニン、フォスファチジルセリン、ドコサへキサェン酸、イチヨウ葉又はイチヨウ葉エキス、及びトコフエロール（特許文献 7 ) が開示されている。また、ミトコンドリア機能異常に起因する疾患における臨床症状発現の予防■治療用組成物として L _アルギニン（特許文献 8 ) が開示されている

[0008] また、栄養学的アプローチにより、運動や理学療法のみならず、筋萎縮及びそれに伴う筋機能の低下、ひいては寝たきりを予防しうる成分の探索が行われている。例えば、シスチン及びテアニンによる老化防止（特許文献 9 ) 、果実ポリフエノールによる筋萎縮抑制（特許文献 1 0 ) 、リコピンによる筋蛋白分解抑制（特許文献 1 1 ) 、カルボキシル基を 2つ以上有する有機酸又はその塩類を有効成分とした運動能力低下抑制（特許文献 1 2 ) 、ァスタキサンチン及び又はそのエステルによる疲労予防剤（特許文献 1 3 ) 、プ口アントシァニジンによる筋萎縮抑制剤及び運動能力向上剤（特許文献 1 4 、特許文献 1 5 ) 、スーパーォキシドジスムターゼによる筋の酸化ストレス軽減（特許文献 1 6 ) 等が開示されている。しかしながら、実際の老化に伴う筋力の低下や筋萎縮に対する効果については検討されていないのが現状であ^ ο

[0009] —方、緑茶、紅茶、カカオ豆等に含まれているカ亍キン類には、コレス亍ロール上昇抑制作用（特許文献 1 7 ) 、血糖上昇阻害作用（特許文献 1 8 ) 、動脈硬化防止作用（特許文献 1 9 ) 、持久力向上作用（特許文献 2 0 ) 、筋ジストロフィ抑制作用（非特許文献 2 ) 等、生理的な有益性があると報告されている。

しかしながら、カテキン類が老化やミトコンドリア機能に及ぼす作用、特に加齢に伴う、持久力やエネルギー代謝の低下、疲労、ミトコンドリア機能の低下に及ぼす作用についてはこれまで全く知られていない。

また、カテキン類が廃用性筋萎縮及びそれに伴う筋機能低下に及ぼす作用についても全く報告が無い。

[0010] —方、分岐鎖アミノ酸であるロイシン、パリン及びイソロイシンは耐糖能異常治療薬剤（特許文献 2 1 ) 、瞬発力■持久的筋力維持剤（特許文献 2 2 ) 、筋肉痛■筋肉のこりとはり解消剤（特許文献 2 3 ) として有用であることが知られている。中でもロイシンは、インスリン分泌促進作用（非特許文献 3 ) や筋タンパク質合成作用（非特許文献 4 ) 等の作用が報告されている。しかしながら、カ亍キン類とアミノ酸類、また両者の併用が老化に伴う筋重量や筋力の低下抑制に及ぼす作用についてはこれまで全く知られていない特許文献 1 ：特開 2 0 0 4 _ 1 1 5 4 3 8号公報特許文献 2：：特開 2004 - 51 580号公報

特許文献 3：：特開 200 6 - 6 3 0 38号公報

特許文献 4：：特開 200 3 - 1 2 5 39号公報

特許文献 5：：特開 200 5 - 2 8 1 285号公報

特許文献 6：：特開平 1 1 ― 43 4 3 2号公報

特許文献 7：：特開 200 3 - 2 6 1 456号公報

特許文献 8：：特開 200 4 - 1 8 2 705号公報

特許文献 9：：国際公開第 2 00 5 1 23058号パンフレツト

特許文献 10：：特開 20 0 1 - 8 9 3 87号公報

特許文献 11 ：：特開 20 0 4 - 5 9 5 1 8号公報

特許文献 12：：特開平 1 0 - 1 7 5 8 5号公報

特許文献 13：：特開 20 0 6 - 1 6 4 09号公報

特許文献 14：：特開 20 0 2 - 3 3 8 464号公報

特許文献 15：：特開 20 0 5 - 9 7 2 73号公報

特許文献 16：：特開 20 0 6 - 6 2 9 76号公報

特許文献 17：：特開昭 6 0 - 1 5 6 6 1 4号公報

特許文献 18：：特開平 4 ― 25 3 9 1 8号公報

特許文献 19：：特開平 4 ― 35 2 7 2 6号公報

特許文献 20：：特開 20 0 5 - 8 9 3 84号公報

特許文献 21 ：：特開 20 0 6 - 2 8 1 94号公報

特許文献 22：：特開 20 0 0- 2 6 2 90号公報

特許文献 23：：特開 20 0 0- 2 6 2 89号公報

非特許文献 1 :岩波講座現代医学の基礎， vol.12， No.2, pp55-58, 1999 非特許文献 2： Dorchies OM et al, AJP-Ce 11 Physiol, vol.290, No.2, pp61 6-25， 2006

非特許文献 3 : Brouwer AE et al， Pancreas, vol.6, No.2, pp221- 8， 1991 非特許文献 4 : Grozier SJ et al, J Nutr, vol. 135， No.3, pp376- 82， 2005 発明の開示 [0011] すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。

( 1 ) 力テキン類を有効成分とする老化抑制剤。

(2) 力テキン類を有効成分とするミトコンドリア機能向上剤。

(3) カ亍キン類を含有する老化抑制用飲食品。

[0012] (4) カ亍キン類を有効成分とする筋機能低下抑制剤。

(5) カ亍キン類を有効成分とする筋萎縮抑制剤。

(6) カ亍キン類を有効成分とする寝たきり予防剤。

(7) カ亍キン類を含有する筋機能低下抑制用、筋萎縮抑制用又は寝たきり予防用飲食品。

[0013] (8) (a) カ亍キン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を有効成分とする筋肉老化抑制剤。

(9) (a) カ亍キン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を有効成分とする運動機能向上剤。

( 1 0) (a) カテキン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を有効成分とする寝たきり予防剤。

( 1 1 ) (a) カテキン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を含有する筋肉老化抑制用飲食品、運動機能向上用飲食品又は寝たきり予防用飲食品。

[0014] (1 2) カテキン類の老化抑制剤又はミトコンドリア機能向上剤としての使用。

( 1 3) 老化抑制剤又はミトコンドリア機能向上剤の製造のための力テキン類の使用。

[0015] ( 1 4) カ亍キン類の筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤又は寝たきり予防剤としての使用。

( 1 5) カ亍キン類の筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤又は寝たきり予防剤の製造のためのカ亍キン類の使用。

[0016] ( 1 6) (a) カ亍キン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類の筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤としての使用。

( 1 7) 筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤の製造のための（a) カテキン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類の使用。

[0017] ( 1 8) カ亍キン類を有効量投与することを特徴とする老化抑制方法又はミトコンドリア機能向上方法。

[0018] ( 1 9) カ亍キン類を有効量投与することを特徴とする筋機能低下抑制方法、筋萎縮抑制方法又は寝たきり予防方法。

[0019] (20) (a) カ亍キン類、並びに（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を有効量投与することを特徴とする筋肉老化抑制方法

、運動機能向上方法又は寝たきり予防方法。

図面の簡単な説明

[0020] [図 1]テノトミー処置における対照群及びカテキン群並びに非処置群のひらめ筋質量（mg) 。

[図 2]テノトミー処置における対照群及びカテキン群並びに非処置群の最大筋力（g) 。

[図 3]尾懸垂処置における対照群及びカ亍キン群並びに非処置群のひらめ筋質

M (m g ) 。

[図 4]尾懸垂処置における対照群及びカ亍キン群並びに非処置群の最大筋力（ g) 。

発明の詳細な説明

[0021] 本発明は、老化抑制、ミトコンドリア機能向上、筋機能低下抑制、筋萎縮抑制、寝たきり予防、筋肉老化抑制及び運動機能向上に有効であり、食経験が豊富で安全性の高い医薬品、医薬部外品及び飲食品を提供することに関する。

本発明者らは、種々検討した結果、 1 ) カテキン類が老化に伴って生じる、持久力の低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等の諸機能の低下を抑制する作用を有し、老化抑制及びミトコンドリア機能向上効果を発揮する飲食品又は医薬品等として有用であること、 2 ) カテキン類が行動制限下に生じる筋質量の減少や最大筋力の低下を抑制する作用を有し、筋萎縮抑制及び筋力低下抑制効果を発揮する飲食品又は医薬品等として有用であること、さらに、 3 ) カ亍キン類と分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を併用した場合に、老化に伴い生じる筋力低下、筋萎縮抑制作用、運動機能向上作用及び寝たきり予防効果を有し、筋肉老化抑制効果、運動機能向上効果を発揮する飲食品又は医薬品等として有用であることを見出した。

[0022] 本発明の老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤、寝たきり予防剤は、食経験が豊富で副作用が少なく、長期投与又は摂取しても安全性が高いカ亍キン類を有効成分とするものであり、老化抑制効果、特に老化に伴って生じる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等の諸機能の低下を抑制する効果、筋力等の運動機能を向上する効果、筋機能の低下抑制効果、寝たきり予防効果を発揮する飲食品や医薬品等として有用である。

また、本発明の（a ) カテキン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を有効成分とする筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤は、長期投与又は摂取しても安全性が高いカテキン類及び特定のァミノ酸類を有効成分とするものであり、老化に伴い生じる筋力の低下や筋萎縮を抑制する効果を発揮する飲食品や医薬品等として有用でめる。

[0023] 本発明において、「老化抑制」とは、老化に伴って生じる生理的変化を抑制することをいい、当該生理学的変化には、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等が含まれる。具体的には、加齢、例えば 3 0代以降の中高年においてみられる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等を抑制することが挙げられる。

また、「筋肉老化」とは、老化に伴って生じる筋肉の衰え、例えば筋機能 (筋力、筋持久力、筋瞬発力等）低下や筋萎縮をいう。「運動機能向上」とは、筋機能の低下を抑制させることによって運動能力を維持又は向上することをいう。

また、「筋萎縮」とは、筋細胞の減少や縮小により筋量が低下することをいい、長期間の安静臥床や骨折等によるギプス固定或いは微小重力暴露によるもの（廃用性筋萎縮という。）、加齢に伴って生じるもの（サルコぺニァという。）が挙げられる。したがって「筋萎縮の抑制」とは、不活動や加齢に伴う筋量の低下を抑制することを指す。

また、「筋機能低下」とは、筋が構造的あるいは質的に変化し、筋力、筋持久力、筋瞬発力等が低下することを示す。したがって「筋機能低下の抑制」とは、筋力、筋持久力、筋瞬発力等の低下を抑制することを指す。

また、「寝たきり」とは、特に老化、例えば 3 0代以降の中高年においてみられる廃用性筋萎縮とサルコぺニァと力《複合した症状、例えば、高齢者の脳卒中や骨折等の治療や療養等において運動量が極度に少なくなり、さらに筋機能が低下し、寝かせきり状態からつくられるものをいう。

[0024] 本発明におけるカテキン類とは、カテキン、力テキンガレート、ガロカテキン及びガロカテキンガレート等の（A ) 非ェピ体力テキン類；並びにェピカテキン、ェピガロカテキン、ェピカテキンガレート及びェピガロカテキンガレート等の（B ) ェピ体力テキン類の総称であり、これらの一種以上を含有するのが好ましい。また、カテキン類は、非重合体であるのが好ましい。

[0025] 本発明に使用するカテキン類は、一般的には茶葉から直接抽出すること、又はその茶抽出物を濃縮若しくは精製することにより得ることができるが、他の原料由来のもの、カラム精製品及び化学合成品でもあってもよい。

[0026] 当該茶葉抽出は、 C a m e l I i a属、例えば C . s i n e n s i s , C . a s s a m i c a , またはそれらの雑種から得られる茶葉より製茶された茶葉に、水や熱水、場合によってはこれらに抽出助剤を添加して抽出することにより行うことができる。また、煮沸脱気や窒素ガス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除去しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出する方法を併用してもよい。 [0027] 当該製茶された茶葉には、（1 ) 煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜煎り茶等の緑茶類；（2 ) 総称して烏龍茶と呼ばれる鉄観音、色種、黄金桂、武夷岩茶等の半発酵茶；（3 ) 紅茶と呼ばれるダージリン、ゥバ、キーマン等の発酵茶が含まれる。

抽出助剤としては、ァスコルビン酸ナトリゥム等の有機酸又はこれら有機酸塩類が挙げられる。

[0028] 当該茶抽出物の濃縮は、上記抽出物を濃縮することにより行うことができ、当該茶抽出物の精製は、溶剤やカラムを用いて精製することにより行うことができる。茶抽出物の濃縮物や精製物の形態としては、固体、水溶液、スラリー状等種々のものが挙げられる。

例えば、当該茶抽出物（茶カ亍キンともいう。）は、特開昭 5 9— 2 1 9 3 8 4号、特開平 4— 2 0 5 8 9号、特開平 5 _ 2 6 0 9 0 7号、特開平 5 - 3 0 6 2 7 9号等に詳細に例示されている方法で調製することができる。また、市販品を用いることもでき、斯かる市販品としては、三井農林（株）「ポリフエノン」、（株）伊藤園「テアフラン」、太陽化学（株）「サンフェノン」、 D S M二ユートリショナル■ プロダクツ「テアビゴ」、サントリ一（株）「サンウーロン」等が挙げられる。

[0029] 当該茶抽出物中のカテキン類は、非重合体で存在し、かつ液に溶解しているもの又は茶の微細粉末の懸濁物に吸着若しくは包含された固形状のものとして存在する。

また、当該抽出物中のカテキン類の含有量は、 1 0 ~ 1 0 0質量％、好ましくは 3 0〜9 5質量％、より好ましくは 4 0〜 8 0質量％である。また、当該茶抽出物に含まれる総ポリフエノール中のカ亍キン類の含有率は、製造直後でカ亍キン量が 1 0質量％以上で、好ましくは 2 0質量％以上である。

[0030] また、持久力の低下、疲労、エネルギー代謝の低下、ミトコンドリア機能低下等の老化に伴い生じる諸機能の低下、筋機能低下、筋萎縮又は筋肉老化等をより効率よく抑制するため、ガロカ亍キン、ェピガロカ亍キン、力テキンガレート、ェピカテキンガレート、ガロカテキンガレート及びェピガロカテキンガレー卜から選ばれる単独又は 2種以上のものの含有率は、当該茶抽出物に含まれるカテキン類総量中 4 0 %以上であるのが好ましく、 6 0 %以上であるのがより好ましく、 8 0 0/₀以上であるのが更に好ましい。

[0031 ] また、茶葉中のカ亍キン類の大部分はェピ体力亍キン類として存在しており、このェピ体力亍キン類を用いて熱や酸やアル力リ等の処理により立体異性体である非ェピ体に変化させることができる。従って、非ェピ体力亍キン類を使用する場合には、緑茶類、半発酵茶類又は発酵茶類からの抽出液や茶抽出液の濃縮物を水溶液にして、例えば 4 0〜 1 4 0 °C、 0 . 1分〜 1 2 0 時間加熱処理して得ることができる。また非ェピカ亍キン類含有量の高い茶抽出液の濃縮物を使用してもよい。それらは単独又は併用してもよい。

[0032] また（a ) カ亍キン類と、（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を併用した場合には、老化に伴って生じる筋力低下抑制作用、筋萎縮抑制作用、運動機能向上作用又は寝たきり予防効果を相乗的に高めることができる。

当該分岐鎖アミノ酸とは、構造上に分岐鎖をもつアミノ酸で、このうち、ロイシン、イソロイシン、バリンが好ましい。

本発明においてはバリン、ロイシン、イソロイシン、タウリンのうち少なくとも 1種をカテキン類と共に使用するのが好ましい。

( b ) アミノ酸類の異性体に関しては、 L—体、 D—体、 D L—体のいずれの異性体も使用可能である。しかしながら、天然に存在する観点から L _ 体が好ましい。

( b ) アミノ酸類の入手方法としては、市販品を用いても良く、公知の方法に基づき製造することも可能である。

[0033] 後記実施例に示されるように、茶抽出物を老化促進モデルマウス（S A M - P 1 ) に摂取させると、老化に伴う限界走行時間の低下、平均酸素消費量 (エネルギー消費量）の低下及びミトコンドリア機能低下が抑制される。従つて、カ亍キン類は、老化抑制作用、具体的には老化に伴って生じる持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等を抑制する作用を有する老化抑制剤及びミトコンドリア機能向上剤として使用することができ、またこれら老化抑制剤等を製造するために使用することができる。そして、力テキン類を有効成分とする当該老化抑制剤等は、老化抑制、ミトコンドリア機能向上等の各効果を発揮する、ヒト若しくは動物用の医薬品や飲食品としての使用が可能である。また、飲食品として使用する場合は、老化に伴って生じる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリア機能低下等の諸機能の低下を抑制することをコンセプトとする飲食品、機能性食品、病者用食品及び特定保健用食品として応用することが可能である。当該老化抑制剤等は、特に、老化に伴う、持久力の低下、疲労の蓄積、エネルギ一代謝の低下及びミトコンドリア機能低下が起こるべッドレス卜者、高齢者及び運動不足者に対して有効である。

[0034] また、茶抽出物を亍ノトミーや尾懸垂処理といった行動制限下のマウスに摂取させると、筋質量の減少や最大筋力の低下が抑制される。従って、カテキン類は、行動制限下による筋萎縮又は筋力低下等の筋機能の低下を抑制する作用を有する筋機能低下抑制剤や筋萎縮抑制剤として使用でき、さらに廃用性筋萎縮やサルコぺニァによって引き起こされる寝たきり状態を抑制する寝たきり予防剤として使用することができ、またこれら筋機能低下抑制剤等を製造するために使用することができる。力テキン類を有効成分とする当該筋機能低下抑制剤等は、ベッドレスト、ギプス固定、座業等の活動制限下の生活による運動量の不足や減少、身体への過重負荷の減少や加齢による筋萎縮や筋機能低下の抑制の効果を発揮する、ヒト若しくは動物用の飲食品又は医薬品として有用である。また、飲食品として使用する場合には、筋萎縮抑制、筋力機能低下抑制又は寝たきり予防の生理機能をコンセプトとし、その旨を表示した飲食品、例えば、病者用食品、高齢者用食品、特定保険用食品等の特別用途飲食品や機能性食品に応用できる。

[0035] また、（a ) カ亍キン類と、（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類を組み合せたものを老化促進モデルマウス（S A M—P 1 ) に摂取させると、（a ) カ亍キン類又は（b ) 前記アミノ酸類をそれぞれ単独の場合に比べて運動機能の向上や筋萎縮抑制効果が顕著に優れている。従つて、斯かる組成物は、ベッドレスト者や高齢者、運動不足者における筋力低下抑制、筋萎縮抑制効果又は寝たきり予防効果を発揮する筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤として使用できるのみならず、あらゆる人々の筋肉老化に対処するために用いることができ、また当該筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤を製造するために使用することができる。そして、当該筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤及び寝たきり予防剤は、各効果を発揮する、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品、飲食品として使用可能である。

[0036] 本発明の老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤、寝たきり予防剤、筋肉老化抑制剤及び運動機能向上剤を、医薬品として用いる場合の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の固形剤、シロップ剤、エリキシル剤、経腸或いは経管栄養剤等の液剤による経口投与又は注射剤、座剤、吸入薬、経皮吸収剤、外用剤等による非経口投与が挙げられる。これらの投与形態のうち、経口投与が好ましい

[0037] また、（a ) カテキン類と、（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤には、前記必須成分以外の許容しうるアミノ酸、ビタミン類、カルノシン等のジペプチド類、無機塩類等の成分を医薬品や医薬部外品、飲食品に通常含有せしめる補助的成分を任意に添加することができる。当該ァミノ酸類としては、例えば、必要に応じてアルギニン、グリシン、リジン、ァラニン、シスチン、システィン、チアニン、メチォニン等が挙げられる。

[0038] また、このような種々の剤型の製薬製剤を調製するには、本発明の力テキン類を単独、カ亍キン類と又は前記アミノ酸類を併せて、又は更に薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等の製剤担体を適宜組み合わせて用いることができる。賦形剤としては、固形粉末状の担体、例えばグルコース、ラクトース、サッカロース等の糖、グリシン等のアミノ酸、セルロース等が挙げられる。潤滑剤として二酸化珪素、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール等、結合剤としてデンプン、ゼラチン、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等、崩壊剤としてはデンプン、寒天等が挙げられる。

[0039] また、本発明の老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤、寝たきり予防剤、筋肉老化抑制剤及び運動機能向上剤を飲食品として使用する場合は、例えば、チーズ（ナチュラル、プロセス）、アイスクリーム、ヨーグルト及びその他乳製品、ソース、スープ、ふりかけ、和菓子類（せんべい等）、洋菓子類（ポテトチップス、プリン、ゼリー、グミキャンディー、キャンディー、ドロップ、キャラメル、チョコレート、チューインガム等）、焼き菓子類（カステラ、ケーキ、ドーナッツ、ビスケット、クッキー、クラッカー等）、各種飲料等の形態とすることができる。飲食品を製造する場合には、力テキン類を単独で、又は力テキン類を前記アミノ酸類と併せて、一般飲食品で用いられる種々の原料を配合し、通常の方法により加工製造することができる。

[0040] 飲料として使用する場合には、炭酸系飲料（ソフトドリンク）、非炭酸系飲料（果汁飲料、ネクター飲料、野菜飲料等）、清涼飲料、スポーツ飲料、ニァウォーター、ダイエット飲料、茶、コーヒー、ココア及びアルコール飲料等のいずれでもよく、また、他の飲料成分と組み合わせることで、更に幅広い範囲の飲料を提供することが可能である。

例えば、長時間保存時に安定した色調と外観の透明性を呈する飲料に、消費者の嗜好にあわせて茶葉の微粉末のような不溶性化合物が含まれる粗抽出茶カ亍キンをあえて懸濁させた形態の飲料も可能である。

上記飲料は、容器に充填した容器詰飲料とするのが好ましく、容器詰飲料としては、例えば、特許公報 3 7 4 2 0 9 4号公報記載の非茶系容器詰飲料、特開 2 0 0 2 _ 2 7 2 3 7 3号公報記載の茶系容器詰飲料が例示できる。以下に配合組成の一例を示す。 [0041] 容器詰飲料は、長期摂取できる味および安定性、並びに効果の点から、非重合体であって水に溶解状態にあるカテキン類（（A) 非ェピ体力テキン類及び（B) ェピ体力テキン類）を、飲料 50 OmL当り合計量 50~250 Omg含有する力好ましくは 200〜250 Omg、より好ましくは 30 0〜1 300mg、更に好ましくは 400〜1 0 OOm g含有するのが、味の点から好ましい。

飲料中で総ポリフエノール中のカ亍キン類の含有率としては、製造直後でカ亍キン量が 1 0重量％以上で、好ましくは 20重量％以上である。

[0042] また、筋萎縮抑制剤又は筋機能低下抑制剤を容器詰飲料として使用する場合は、以下に配合組成の一例を示す。

当該容器詰飲料は、非重合体であって水に溶解状態である非重合体成分（ A) 非ェピ体力亍キン類と（B) ェピ体力亍キン類を含有し、それらの含有量が容器詰めされた飲料 500 m L当り、

成分（A) =合計量 5~225 Omg、

成分（A) + (B) =合計量 50~250 Omg、

質量比（A) （B) =0. 1 -9. 0

を含有する。

[0043] ここで、（A) 非ェピ体力テキン類と（B) ェピ体力テキン類は、飲料 5 0 Om L当り合計量 50~ 250 Om g含有する力好ましくは 460~2 500 m g、より好ましくは 500~1 300mg、より好ましくは 600 ~1 300mg、更に 640~80 Omg含有するのが、味の点から好ましい。

また成分（A) は、飲料 500mL当り 5〜2250mg含有する力好ましくは 90〜 225 Omg含有する力より好ましくは 1 40〜2250 mg、更に好ましくは 1 40〜 1 88 Omg含有するのが、安定性の点から好ましい。

[0044] 飲料中で総ポリフエノール中のカ亍キン類の含有率としては、製造直後でカ亍キン量が 1 0質量％以上で、好ましくは 20質量％以上である。更に成分（A) と成分（B) の含有質量比は（A) / (B) =0. 1 ~9 . 0である力《、好ましくは 0. 25~9. 0、より好ましくは 0. 43~5 . 67、更に好ましくは 0. 67~5. 67力《、味及び安定性の点から好ましい。

[0045] また、カ亍キン類の含有量の 30〜 98重量％、好ましくは 40〜 90重量％が、ェピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレート、ェピガロカ亍キン、ガロカ亍キンから選ばれたものであると、飲料としての呈味が更に優れ、後を引くような収斂性も少なく好ましい。ここでェピガロカ亍キンガレート、ガロカテキンガレート、ェピガロカ亍キン、ガロカ亍キンは 1種以上含有するが、通常は全て含有される。

[0046] また、（a) カ亍キン類と、（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤を容器詰飲料として使用する場合は、（a) カテキン類に加え、（b) 前記ァミノ酸類を飲料 500 m L当り合計量 1 00~60000mg含有させることができ、 500~20000mg、更には 500~1 OOOOm g 、更には 1 000~600 Omg含有するのが好ましい。

[0047] 各アミノ酸については、ロイシンは飲料 50 OmL当たり 1 0 Omg~2 000 Omg含有することが好ましく、 500~400 Omg含有するのが更に好ましい。イソロイシンは 1 0 Omg~2000 Omg含有することが好ましく、 500~300 Omg含有するのが更に好ましい。バリンは 1 0 0-2000 Om g含有することが好ましく、 500~300 Om g含有するのが更に好ましい。タウリンは 1 00〜1 000 Omg含有することが好ましく、 500〜 3000 m g含有するのが更に好ましい。

[0048] 飲料の p Hは、 25°Cで 3〜7、好ましくは 4〜7、更に 5〜7とするの力味及びカ亍キン類の化学的安定性の点で好ましい。

[0049] 上記飲料には、カ亍キン類単独、又はカ亍キン類及び前記アミノ酸類の混合物にあわせて、処方上添加して良い任意成分として、酸化防止剤、香料、各種エステル類、有機酸類、有機酸塩類、無機酸類、無機酸塩類、無機塩類、色素類、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、酸味料、果汁エキス類、野菜エキス類、花蜜エキス類、 p H調整剤、品質安定剤等の添加剤を単独、あるいは併用して配合しても良い。

[0050] 使用される容器は、一般の飲料と同様にポリエチレン亍レフタレートを主成分とする成形容器（いわゆる P E Tボトル）、金属缶、金属箔ゃプラスチックフィルムと複合された紙容器、瓶等の通常の形態で提供することができる。ここでいう飲料とは希釈せずに飲用できるものをいう。

[0051 ] 上記容器詰は、例えば、金属缶のように容器に充填後、加熱殺菌できる場合にあっては食品衛生法に定められた殺菌条件で製造される。 P E Tボトル、紙容器のようにレトルト殺菌できないものについては、あらかじめ上記と同等の殺菌条件、例えばプレート式熱交換器等で高温短時間殺菌後、一定の温度まで冷却して容器に充填する等の方法が採用される。また無菌下で、充填された容器に別の成分を配合して充填してもよい。更に、酸性下で加熱殺菌後、無菌下で p Hを中性に戻すことや、中性下で加熱殺菌後、無菌下で p Hを酸性に戻す等の操作も可能である。

[0052] 病者用食品としては、適当量の栄養補給が困難な高齢者やべッドレスト状態の病者に投与される経腸栄養剤や濃厚流動食（食品）等が挙げられる。

[0053] 経腸栄養剤や濃厚流動食は、カテキン類単独、又はカテキン類及び前記ァミノ酸類の混合物に栄養組成物の原料を配合し、通常の方法により製造することができる。具体的には、カテキン類及び種々の原料を適当な溶媒に溶解、混合した後、ホモジナイザー等で均質化し、レトルトやプラスチック等の各種容器に充填したのち公知の殺菌法により、液状、半個体状や固体状の製剤を得ることができる。また、上記のようにホモジナイザー等で均質化した後、公知の噴霧乾燥等により、粉末状の製剤も得ることができる。

栄養組成物の一例として、蛋白質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、乳化剤、香料等が配合された栄養組成物が挙げられる。蛋白質源としては、アミノ酸バランスのとれた栄養価の高い乳蛋白質、大豆蛋白質、卵アルブミン等の蛋白質が挙げられるが、これらの分解物、卵白のオリゴペプチド、大豆加水分解物等の他、ァミノ酸単体の混合物も使用してもよい。本栄養組成物の投与（摂取）量は、栄養剤としてのカロリー換算で成人 1 日当たり 1 0~50 k c a l 体重 k gが好ましい。

[0054] 上記老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤又は寝たきり予防剤の製剤中に含まれるカ亍キン類の配合量は、その使用形態により異なるが、飲食品ゃぺットフード等の場合、通常 0. 0 1〜 5質量％、より 0. 05〜5質量％、更に 0. 1〜 1質量％とするのが好ましい。上記以外の医薬品、例えば錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口用固形製剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤等の場合、通常 0. 0 1〜 9 5質量％、より 5〜 90質量％、 5〜 9 5質量％、更に 1 0〜 80質量％、 1 0〜9 5%質量とするのが好ましい。

[0055] (a) カ亍キン類と、（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤を非飲料として使用する場合は、（a) カテキン類の配合量は、その使用形態により異なるが、食品やペットフード等の場合、通常 0. 0 1 ~5重量％、より 0. 05~5重量⁰ /o、更に 0. 1 ~ 1重量⁰ /oとするのが好ましい。上記以外の医薬品、例えば錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口用固形製剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤等の場合、通常 0. 0 1 ~9 5重量％、より 5~90重量⁰ /o、更に 1 0~80重量⁰ /oとするのが好ましい。

[0056] また、当該非飲料製剤中に配合される（b) 前記アミノ酸類の量は、その使用形態により異なるが、食品やペットフード等の場合、通常 0. 0 1 ~5 重量％、より 0. 1〜5重量％、更に 0. 2〜 2重量％とするのが好ましい。上記以外の医薬品、例えば錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口用固形製剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤等の場合、通常 0. 0 1〜9 5 重量％、より 5〜90重量％、更に 1 0〜 80重量％とするのが好ましい。

[0057] 本発明の老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤、筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤、寝たきり予防剤、筋肉老化抑制剤又は運動機能向上剤の投与量 (有効摂取量）は、投与される患者の性別、年齢、体重、症状の程度等によつて異なる力成人に対して 1 日あたり、カテキン類として、 1 00~30 0 Om g/60 k g体重とするのが好ましく、より 250~2000mgZ 60 k g体重、更に 250~1 000mgZ60 k g体重とするのが好ましい。

[0058] また、（a) カ亍キン類と（b) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤においては、（b) 前記アミノ酸類として、 1 日あたり、 1 00〜600 0 Om g/60 k g体重とするのが好ましく、より 500〜20000mg /60 k g体重、更に 1 000〜6000mgZ60 k g体重とするのが好ましい。これらカ亍キン類と前記アミノ酸類は、相乗効果が得られる範囲内で同時又は別々に投与してもよい。

[0059] 以下、本発明を更に詳しく説明するため、本発明組成物につき行った試験例を挙げ、次いで本発明組成物の調製例を実施例として挙げる。

[0060] 試験例 1 カテキン類の老化抑制効果

本実施例において茶カ亍キンは、総力亍キン量 81 %の緑茶抽出物を用いた。

また、茶カ亍キン中のカ亍キン類の組成は、公知の方法により測定し（例えば、特開 2006— 1 29738号公報）、ガロカ亍キン（7%) 、ガロ力テキンガレート（4%) 、ェピカ亍キン（9%) 、ェピガロカ亍キン（2 3%) 、ェピカテキンガレート（1 2%) 、ェピガロカテキンガレート（4 1 %) 、その他（4%) である。

[0061] (1 ) 各群マウスの調整

1 3週齢の SAM— P 1雄性マウス（老化促進モデルマウス）及び SAM 一 R 1雄性マウス（通常老化マウス）を個別飼育にて 5週間予備飼育した後、トレッドミル走行させ、馴化させた後、限界走行時間を測定した。

具体的には、マウスを停止したトレッドミル内で安静にし、環境に慣れさせた後、トレッドミルを一定速度で回転させ、トレッドミル回転開始時を走行開始の始点とし、ベルト速度（mZm i n) を一定間隔で変化させ、トレッドミル上でマウスが走れなくなった時点を走行終了の終点とした。この時間を限界走行時間とし、持久力を評価した。

マウスの限界走行時間の測定におけるベルト速度及び時間は、 1 OmZm i nから始め、 1 0及び 1 5mZm i nで各 5分間、 20mZm i nで 60 分間、 22mZm i nで 60分間、 24 mZm i nで 60分間、 26 mZm i nで 60分、以降は 28mZm i nで行った。

S AM-R 1 (通常老化マウス）対照群、 SAM—P 1 (老化促進モデルマウス）対照群、 S AM—P 1カ亍キン群に群分けし、各系統の限界走行時間に差がないようにした（各群 8匹）。

(2) 老化促進モデルマウスにおける茶カ亍キンの効果

表 1に示す配合で茶カ亍キンを添加していない対照飼料及び茶カ亍キンを添加したカテキン飼料を調製した。

対照飼料を SAM— R 1対照群及び SAM— P 1対照群に、カテキン飼料を SAM— P 1カテキン群に食餌として用い、各群を 1 0週間飼育した。尚、各マウス群には 1 5mZm i nで 30分間の運動を週に 3回負荷した

ほ 1]

飼料組成（重量％)

[0064] 8週間飼育後に各群の限界走行時間を測定した。この時のマウス限界走打時間を表 2に示す。

[0065] 2]

8週間飼育後のマウス限界走行時間

SAM— P 1対照群に対する統計学的有意差： * <0. 05 また、 9週間飼育後の各群の安静時における酸素消費量（エネルギー消貢量）を呼気分析により測定した。分析には O x y ma Xシステム（コロンバス社）の 8連チャンバ一を用いた。マウスをチャンバ一に入れて 6時間安静にした後、 24時間の平均酸素消費量（¹ m i n当たりのマウス体重¹ k g における酸素消費量 mL (mLZk gZm i n) ) を 1 8分毎に 2分間ずつ連続測定した。 24時間の平均酸素消費量（mLZk gZm i n) を表 3に示す。

[0067] [表 3]

9週間飼育後の 24時間の平均酸素消費量（エネルギ一消費量）

SAM— P 1対照群に対する統計学的有意差：ぐ 0. 05

[0068] 表 2の結果から、老化促進モデルマウスである S A M_P 1対照群の限界走行時間は通常老化マウスである SAM—R 1対照群に対して有意に短く、老化に伴い持久力は低下することがわかる。

[0069] —方、カテキン飼料を摂取した SAM—P 1カテキン群の限界走行時間は

SAM— P 1対照群と比較して有意に長かった。このことから、茶カテキンを摂取すると、老化に伴う持久力低下が抑制されたことがわかる。また疲労しにくいことがわかる。

また、老化促進モデルマウスである SAM— P 1対照群の限界走行時間は試験前に比べ、 8週後には約 20分低下した。

[0070] —方、カ亍キン飼料を摂取した SAM— P 1カ亍キン群の限界走行時間は低下が認められなかった。このことから、茶カ亍キンを摂取すると、老化に伴う持久力の低下が抑制されることがわかる。

[0071] 表 3の結果から、老化促進モデルマウスである S A M_P 1対照群の酸素消費量（エネルギー消費量）は通常老化マウスである SAM— R ¹対照群に対して有意に低値を示した。このことは、老化により、酸素消費量が減少し

、エネルギー代謝が低下することを示している。

[0072] —方、カ亍キン飼料を摂取したマウスの酸素消費量は SAM—P 1対照群に対して有意に高かった。このことから、茶カテキンは、老化に伴うエネルギー代謝の低下を抑制する作用を有することがわかる。

また、上記のように茶カテキン摂取により走行時間が延びることや酸素消費量が高まることは、疲労が抑えられることを意味している。

[0073] 試験例 2 カ亍キン類のミトコンドリア機能低下抑制効果

(1 ) 各群マウスの調整

[0074] マウスの限界走行時間の測定におけるベルト速度及び時間は、 1 OmZm i nから始め、 1 0及び 1 5mZm i nで各 5分間、 20mZm i nで 60 分間、 22mZm i nで 60分間、 24mZm i nで 60分間、 26mZm i nで 60分、以降は 28mZm i nで行った。

S AM-R 1 (通常老化マウス）対照群、 SAM—P 1 (老化促進モデルマウス）対照群、 SAM—P 1カテキン群、 SAM—P 1運動群、 SAM— P 1力テキン運動併用群に群分けし、各系統の限界走行時間に差がないようにした（各群 8匹）。

[0075] (2) 老化促進モデルマウスにおける茶カ亍キンの効果

表 4に示す配合で茶カ亍キンを添加していない対照飼料及び茶カ亍キンを添加したカ亍キン飼料を調製した。

対照飼料を S A M _ R 1対照群、 S A M _ P 1対照群及び S A M _ P 1運動群に、カ亍キン飼料を S AM—P 1カ亍キン群、 SAM—P 1力テキン運動併用群に食餌として用い、各群を 1 0週間飼育した。尚、各マウス群には 1 5m m i nで 30分間の運動を週に 3回負荷した表 4]

飼料組成（重量

1 0週間飼育後に各群のマウスの腓腹筋を採取し、 I SOGEN (二ッホンジーン）を用いて、 RN Aサンプルを得た。各 RN Aサンプルを定量し、 1反応あたりの RN A量を 5 jU gとして S u p e r s c r i p t F i r s t— S t r a n d S y n t h e s i s S y s t em f o r R i_— P CR (インビトロジェン）を用いて、逆転写反応を行い、 c DNAを得た。反応条件は 42。C， 50分間， 70。C， 1 5分間とした。

得られた c DN Aを未知サンプルの場合は 40倍希釈、スタンダード用サンプルの場合には 1 0倍希釈し、 AB I PR I SM 7700 S e q u e n c Θ D e t e c t o r (アプライドバイオシステムズ社）により定量的 PCRを行った。 36 B4mRN Aの発現量を基準として補正し、相対的 mRN A発現量として表した。

プライマーとして、 CO X 1は G e n B a n k ： X57780、 n t 8 7 6― 8 9 7、 n t 9 57一 9 7 6を、 COX 2は A F 3 7 7 80、 n t 4

8 8 ― 5 07 、 n t 5 6 7 - 5 8 8を、 COX 3は N C一 00508 9、 n t 9 1 9 6 - 9 2 1 7 、 n t 9 3 08 — 9 3 27を、 COX 4は NM一 05

3 0 9 1 、 n t 2フ 6 ― 2 9 5 、 n t 396— 4 1 5を、 h e a t h o c k P r o t e i n 7 2 (H s P 7 2) は NM—O 1 047 9、 n t 1 8

1 5 ― 1 8 3 5 、 n t 1 9 1 6一 1 9 3 7を、 P G C_ 1 は NM一 008

9 0 4 、 n t 6 4 2 ― 6 6 1 、 n t 7 5 1 — 7 7 0を、 P G C— 1 /Sは NM

.1 3 3 24 9 、 n t 2 8 65一 28 8 5、 n t 294 5 - 29 65を用いた。

[0078] 結果を表 5に示した。

[0079] [表 5]

1 0週間飼育後のマウス腓腹筋における遺伝子発現

S AM— P 1対照群に対する統計学的有意差： * j9く 0. 05

[0080] 表 5の結果から、老化促進モデルマウスである S AM— P 1対照群の腓腹筋における COX 1 〜4、 H S P 7 2、 P G C— 1 、 P G C— 1 ^の遺伝子発現は、通常老化マウスである S AM— R 1対照群に対して有意に低く、老化に伴い電子伝達系に関与する遺伝子やミトコンドリァの分化■増殖に関与する遺伝子の発現は低下することがわかる。

[0081] —方、カテキン飼料と運動を併用した S AM—P 1カテキン群の COX 2 〜4、 HS P 72遺伝子発現は SAM— P 1対照群と比較して有意に高かつた。このことから、茶カ亍キンを摂取すると、老化に伴う電子伝達系やミトコンドリアの分化■増殖に関与する遺伝子の発現の低下が抑制されたことがわかる。

また、上記のように茶カ亍キン摂取と運動の併用により電子伝達系遺伝子が抑えられることはミトコンドリァ機能の機能が維持されていることを意味している。

[0082] 以上のことから、カ亍キン類は、老化抑制、具体的には老化に伴って生じる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下、ミトコンドリアの機能低下等を抑制する作用を有し、老化抑制剤、ミトコンドリア機能向上剤として有用である。

[0083] 試験例 3 カテキン類の筋萎縮抑制効果■筋機能低下抑制効果

総力テキン量 810/₀の緑茶抽出物を用いた。また、カテキン類の組成は、ガロカテキン（7 o/o) 、ガロカテキンガレート（4 o/o) 、ェピカテキン（9 %) 、ェピガロカテキン（23%) 、ェピカテキンガレート（1 2%) 、ェピガロカテキンガレート（41 %) 、その他（4%) であった。

[0084] (1 ) テノトミー（Tenotomy) 処置マウスにおけるカテキン類の有効性雄性 Balb/Gマウス（9週齢）を 1週間予備飼育し、体重を基準に 3群（非処置群、対照群、カ亍キン群）に群分けした（各群 n=8) 。その後、各群のマウスに、表 6に示す配合で調製した飼料を 2週間給餌した。

[0085] ほ 6] 飼料組成（重量％)

[0086] 上記飼料を 2週間給餌した後、対照群及びカ亍キン群のマウス後肢アキレス腱に亍ノトミー処置を施し、後肢脹脛部位に属する筋群（ひらめ筋等）への張力負荷を排した。張力が減じた筋は廃用性筋萎縮を呈し、筋質量や筋力が低下する。非処置群は、亍ノトミー処理を施さなかった。

摘出筋における筋力測定

テノトミー処置後 2週間、試験飼料での飼育を継続して行い、マウスを解剖に供した。マウスよりひらめ筋を摘出、 3 7 °Cの Krebs溶液中（通気条件： 9 5 %-酸素， 5 %-二酸化炭素）で、トランスデューサー（WP I : F0RT100) に固定した。その後、電気刺激（0 . 2 mseG、 4 O Hz) を施し最大筋力を測定した。ひらめ筋の湿質量を図 1に、筋力の測定結果を図 2に示す。

[0087] ( 2 ) 尾懸垂処置マウスにおける力テキン類の有効性

雄性 Ba l b/Gマウス（9週齢）を 1週間予備飼育し、体重を基準に 3群（非処置群、対照群、カテキン群）に群分けした（各群 n= 8 ) 。その後、各群のマウスに、上記表 6に示す配合で調製した試験飼料を 2週間給餌した。

試験飼料を 2週間給餌した後、対照群及びカ亍キン群のマウスに尾懸垂処置を施し、後肢筋群（ひらめ筋等）への重力荷重を排した。荷重が減じた筋は廃用性筋萎縮を呈し、筋質量や筋力が低下する。非処置群は、尾懸垂処置を施さなかった。

[0088] 摘出筋における筋力測定

尾懸垂処置後 1 0日間、試験飼料での飼育を継続して行い、マウスを解剖に供した。マウスよりひらめ筋を摘出、 37°Cの Krebs溶液中（通気条件： 9 5%-酸素， 5%-二酸化炭素）で、トランスデューサー（WPI : F0RT100) に固定した。その後、電気刺激（0. 2mseG、 4 OHz) を施し最大筋力を測定した。ひらめ筋の湿質量を図 3に、筋力の測定結果を図 4に示す。

[0089] 試験例 3の結果より、力亍キン類を摂取することで筋の萎縮が抑制され、筋力低下も抑制された。また、本試験例 3において、カ亍キン類の処置前投与による筋量及び筋力向上はほとんど認められなかった。これより、力テキン類は、筋活動量低下に伴う筋萎縮及び筋機能低下を抑制する効果を有することが明らかであり、寝たきり抑制剤或いは筋機能低下抑制剤として有用であ^)とョ^_ん。

[0090] 試験例 4 (a) カ亍キン類及び（b) アミノ酸類の混合物の筋肉老化抑制効果

(a) カテキン類として、総力テキン量 81 %の茶抽出物を用いた。また、カテキン類の組成は、ガロカテキン（7%) 、ガロカテキンガレート（4 %) 、ェピカテキン（9%) 、ェピガロカテキン（23%) 、ェピカテキンガレート（1 2%) 、ェピガロカテキンガレート（41 %) 、その他（4% ) であった。また、（b) アミノ酸類として、ロイシンを用いた。

1 0週齢の SAM— P 1雄性マウス（老化促進モデルマウス）及び SAM 一 R 1雄性マウス（通常老化マウス）を個別飼育にて 5週間予備飼育した後、各系統の体重に差がないように S A M _ R 1対照群、 S A M _ P 1対照群、 SAM—P 1カテキン群、 SAM—P 1 ロイシン群、 SAM—P 1力テキンロイシン併用群に群分けした（各群 8匹）。表 7に示す配合で調整した食餌を用いて 9週間飼育した。尚，各マウスには流水プールを用い、 1 Om 分の速度で 3分間の運動を一日に 5回、週に 4日負荷した。

[0091] 飼料組成（重量％)

[0092] 9週間飼育後に、マウスを解剖に供し、単離したヒラメ筋を 37°Cの K r e b s溶液中（通気条件： 95%—酸素， 5%—二酸化炭素）で、トランスデューサー (FORT 1 00 ： Wo r I d P r e c i s i o n I n s t r u m e n t s , I n c. ) に固定した。その後、電気刺激（0. 5m秒、 1 40H z) を施し、最大筋力を測定した。筋力の測定結果を表 8に示す。

[0093] [表 8]

9週間飼育後における電気刺激時のヒラメ筋最大筋力

S AM- P 1対照群に対する統計学的有意差（D U n n e t検定) [0094] 表 8の結果から、老化促進モデルマウスである SAM— P 1対照群のヒラメ筋の最大筋力は通常老化マウスである SAM—R 1対照群に対して有意に減少しており、老化に伴い最大筋力は低下することがわかる。また、力テキン類あるいはロイシンを配合した飼料を摂取したマウスの最大筋力は SAM -P 1対照群に対して有意な差は認められなかったのに対して、カ亍キン類とロイシンの併用は老化による筋力の低下を有意に抑制したことがわかる。

[0095] 以上のことから、本発明のカ亍キン類アミノ酸類の併用は老化に伴う筋力低下抑制剤として有用である。また SAM— P 1対照群と比較し、力テキンロイシン併用群では筋力が向上したことから、カ亍キンロイシンの併用は運動機能の向上に有効である。

[0096] 試験例 5 (a) カ亍キン類及び（b) アミノ酸類の混合物の筋肉萎縮抑制効果

カテキン類として、総力テキン量 81 %の茶抽出物を用いた。また、カテキン類の組成は、ガロカテキン（7%) 、ガロカテキンガレート（4%) 、ェピカテキン（9%) 、ェピガロカテキン（23%) 、ェピカテキンガレート（1 2%) 、ェピガロカテキンガレート（41 %) 、その他（4%) であつた。また、アミノ酸類として、ロイシンを用いた。

1 3週齢の SAM— P 1雄性マウス（老化促進モデルマウス）及び SAM 一 R 1雄性マウス（通常老化マウス）を個別飼育にて 5週間予備飼育した後、各系統の体重に差がないように S A M _ R 1対照群、 S A M _ P 1対照群、 SAM—P 1カテキンロイシン併用群に群分けした（各群 8匹）。表 9 に示す配合で調整した食餌を用いて 9週間飼育した。尚，各マウスには流水プールを用い、 1 OmZ分の速度で 3分間の運動を一日に 5回、週に 4日負荷した。

[0097] ほ 9] 飼料組成（重量％)

[0098] 9週間飼育後に、マウスを解剖に供し、腓腹筋、ヒラメ筋、足底筋、長趾伸筋、大腿四頭筋を摘出した後、重量を測定し、総筋肉重量を求めた。体重当たりの総筋肉重量を表 1 0に示す。

[0099] [表 10]

9週間飼育後の体重当たりの筋肉重量（％)

S AM— P 1対照群に対する統計学的有意差（D u n n e t検定)

[0100] 表 1 0の結果から、老化促進モデルマウスである S A M— P 1対照群の体重に占める筋肉重量は通常老化マウスである S A M—R 1対照群に対して有意に減少しており、老化に伴い筋肉は萎縮することがわかる。また、力テキン類及びロイシンを配合した飼料を摂取したマウスの筋肉重量は S A M—P 1対照群に対して有意に大きいことがわかる。以上のことから、本発明のカテキン類 Zァミノ酸類の併用は老化に伴う筋萎縮抑制剤として有用である。

[0101] 以下に、本発明の老化抑制剤等の製剤例を示す。

[0102] 製剤例 1 老化抑制用容器詰飲料

表 1 1に示した配合および条件で、老化抑制用容器詰飲料を調製した。また、本容器詰飲料における茶抽出物（茶カ亍キン）の組成を表 1 2に示す。本飲料の保存安定性および風味は良好であった。

[0103] [表 11]

茶系飲料の組成 (g/10 OmL)

[0104]

ほ 12] 飲料中のカテキン組成 (mg/50 OmL)

[0105] 製剤例 2 老化抑制用経腸栄養剤（濃厚流動食）

表 1 3に示した配合で、本発明品を常法に従いレトルトに密封後、高圧蒸気滅菌し、調製した。ミネラル類は、 N a、 K、 Ca、 M_g、 P、 C 1、 F e等の有機又は無機塩混合物、ビタミン類は、ビタミン A、 D、 E、ビタミン B 1、 B2、 B6、 B 1 2、 C、ナイァシン、パントテン酸等の混合物を、国民栄養所要量に合致した量用いた。

[0106]

13] 経腸栄養剤組成（g/10 OmL)

製剤例 3 老化抑制用ゼリー食品

カラギーナンとローカストビーンガムの混合ゲル化剤 0. 65<½、グレープフルーツの 50%の濃縮果汁 5. 0%、クェン酸 0. 05%、ビタミン C 0. 05 <½、茶カテキン（テアビゴ（DSM二ユートリショナル ' プロダクッ）） 0. 54%、を混合し、これに水を加えて 1 00%に調整し、 65°G で溶解した。更に少量のグレープフルーツフレーバーを添加して 85°Cで⁵ 分間保持して殺菌処理後、 1 OOmLの容器に分注した。 8時間静置して徐冷しながら 5 °Cに冷却して、力テキンを含有するゼリ一食品を得た。

製剤例 4 老化抑制用ビタミン内服液

タウリン 800mg、ショ糖 2000mg、カラメル 50mg、安息香酸ナトリウム 30mg、ビタミン B 1硝酸塩 5mg、ビタミン B2 2 Omg 、ビタミン B6 20mg、ビタミン C 2000mg、ビタミン E 1 0 Omg、ビタミン D3 2000 I U、ニコチン酸アミド 2 Om g、茶カテキン（ポリフエノン 70S (三井農林）） 1 0 Omgを適量の精製水に加えて溶解し、リン酸水溶液で p H 3に調節した後、更に精製水を加えて全量を 50mLとした。これを 80°Cで 30分滅菌して、カ亍キンを含有するビタミン内服液を得た。

[0108] 製剤例 5 老化抑制用チユアブル錠剤

ァスコルビン酸 1 80mg、クェン酸 50mg、アスパルテーム 1 2mg 、ステアリン酸マグネシウム 24 m g、結晶セルロース 1 20mg、乳糖 2 74mg、茶カ亍キン（テアフラン 9 OS (伊藤園）） 54 Omgを含む処方で、日本薬局方（製剤総則「錠剤」）に準じて錠剤を製造し、カ亍キンを含有するチユアブル錠剤を得た。

[0109] 製剤例 6 老化抑制用錠剤

下記処方に基づいて、常法によリカテキン類を含有する錠剤を調製した。成分配合量（重量⁰ /₀) ：茶カテキン（ポリフヱノン 7 OS (三井農林） ) 2 0、リンゴ酸ナトリウム 20、パラチノース 20、ァスコルビン酸 20、ビタミンミックス（日本香料薬品社製） 5、結晶セルロース 5、ショ糖エステル 4、二酸化ケイ素 1、卵殻カルシウム 5。

[0110] 製剤例 7 筋機能低下抑制筋萎縮抑制寝たきり予防（以下、筋機能低下抑制等とする。）用飲料

表 1 4に示した配合及び条件で、本発明の製剤を茶系飲料として調製した。また、本飲料におけるカ亍キン類の組成を表 1 5に示す。本飲料の保存安定性及び風味は良好であった。

[0111] ほ 14]

[0112] [表 15]

[0113] 製剤例 8 筋機能低下抑制等用経腸栄養剤

表 1 6に示した配合で、本発明の製剤を経腸栄養剤としてレトルト容器に密封し、高圧蒸気滅菌法の常法に従い殺菌し、調製した。ミネラル類は、 N a、 K、 Ca、 Mg、 P、 C l、 F e等の有機又は無機塩混合物、ビタミン類は、ビタミン A、 D、 E、ビタミン B_1¾ B₂、 B₆、 B₁₂、 C、ナイァシン、パントテン酸等の混合物を、国民栄養所要量に合致した量用いた。

[0114] [表 16]

[0115] 製剤例 9 筋機能低下抑制等用ゼリ一食品

本発明の製剤をゼリー食品として調製した。カラギーナンとローカストビーンガムの混合ゲル化剤 0. 65%、グレープフルーツの 50%の濃縮果汁 5. 0%、クェン酸 0. 05%、ビタミン CO. 05%、テアビゴ（DSM 二ユートリショナル■ プロダクツ） 0. 54%を混合し、これに水を加えて 1 00%に調整し、 65°Cで溶解した。更に少量のグレープフルーツフレーバーを添加して 85°Cで 5分間保持して殺菌処理後、 1 0 OmLの容器に分注した。 8時間静置して徐冷しながら 5°Cに冷却して、ゲル化させ、口に含んだ時に口溶け性が良好で、果実風味を有し食感良好なカ亍キン類を含有するゼリー食品を得た。

[0116] 製剤例 1 0 筋機能低下抑制等用ビタミン内服液

本発明の製剤をビタミン内服液として調製した。タウリン 800mg、ショ糖 1 1 000mg、カラメル 50mg、安息香酸ナトリウム 30mg、ビタミン巳硝酸塩 5mg、ビタミン B₂ 20mg、ビタミン B₆ 20mg、ビタミン C 2000mg、ビタミン E 1 00mg、ビタミン D3 20 00 I U、ニコチン酸ァミド 20mg、ポリフエノン 70S (三井農林） 5 4 Omgを適量の精製水に加えて溶解し、リン酸水溶液で p H 3に調節した後、更に精製水を加えて全量を 5 OmLとした。これを 80°Cで 30分滅菌して、力テキン類を含有するビタミン内服液を得た。 [0117] 製剤例 1 1 筋機能低下抑制等用チユアブル錠剤

本発明の製剤をチユアブル錠剤として調製した。ァスコルビン酸 1 80m g、クェン酸 50m g、アスパルテーム 1 2mg、ステアリン酸マグネシゥム 24mg、結晶セルロース 1 20mg、乳糖 274 m g、テアフラン 90 S (伊藤園） 540m gなる処方（1 日量 1 200m_g) で、日本薬局方（製剤総則「錠剤」）に準じて錠剤を製造し、カ亍キン類を含有するチュアブル錠剤を得た。

[0118] 製剤例 1 2 筋機能低下抑制等用錠剤

本発明の製剤を下記処方に基づいて常法により錠剤として調製した。成分配合量（質量⁰ /₀) ：ポリフエノン 70 S (三井農林） 20、リンゴ酸ナトリゥム 20、パラチノース 20、ァスコルビン酸 20、ビタミンミックス（日本香料薬品社製） 5、結晶セルロース 5、ショ糖エステル 4、二酸化ケイ素 1、卵殻カルシウム 5

[0119] 製剤例 1 3 筋肉老化抑制用茶系飲料

表 1 7に示した配合及び条件で、本発明の筋肉老化抑制用アミノ酸配合茶系飲料を調製した。本飲料の保存安定性及び風味は良好であった。

[0120] 17]

ァミノ酸類配合茶系飲料の糸且成 (g/10 OmL) 緑茶飲料烏龍茶飲料緑茶抽出液 (g) 1 7. 5 0 烏龍茶抽出液 (g) 0 8 茶カテキン（ポリフコノン 70 s ) 、g) 0 . 12 0. 16 精製水 kg) バランス《ランスァスコルビン酸 N a 、g) 0 . 05 0. 05 ロイシン g) 0 . 16 0. 16 イソロイシン g) 0 . 08 0. 08 パリン g) 0 . 08 0. 08 タウリン (g) 0 . 05 1. 00 H (殺菌後〉 5 - 98 5. 87 殺菌温度 (°C) ] L 33 134 殺菌加熱時間（秒） 30 30 容器 PET容器 PET容器 [0121] 製剤例 1 4 筋肉老化抑制用非茶系飲料

表 1 8に示した配合及び条件で、本発明の筋肉老化抑制用アミノ酸配合スポーッ飲料を調製した。本飲料の保存安定性及び風味は良好であった。

[0122] 18]

(g/10 OmL)

配合例 1 配合例 2 カテキン類（ポリフコノン 70 s) 0. 11 0. 1 1 4 甘味料（ァスパルテ -ム +グノレコース） (g) 1. 2 1. 2 酸味料 (g) 0. 24 0. 24 精製水 kg) ランスバランス

Na C 1 S 0. 04 0. 04

KC 1 0. 009 0. 009 フ L ^一バー g) 0. 3 0. 3 ビタミン C g) 0. 03 0. 03 ロイシン (g) 0. 12 0 イソロイシン (g) 0. 06 0 リン (g) 0. 06 0 タウリン (g) 0 0. 4 H (殺菌後） 3. 5 3. 5 容器 PET容器 PET容器

[0123] 製剤例 1 5 筋肉老化抑制用経腸栄養剤

乳カゼイン 3. 4 g、分離大豆タンパク質 1. 67 g、デキストリン 1 4 . 86 _§、ショ糖1. 3 _§、大豆油1. 75 _§、シソ油0. 1 8 g、大豆リン脂質 0. 1 4 g、グリセリン脂肪酸エステル 0. 07 g、ミネラル類 0. 60 g、ビタミン類 0. 06 g、テアフラン 90 s (伊藤園） 0. 1 1 g、ロイシン 0. 1 8 _§、ィソロィシン0. 09 _§、バリン0. 09 gに精製水を加え、常法に従い、レトルト殺菌し、カテキン類及びアミノ酸類を含有する筋肉老化抑制用経腸栄養剤（1 00mL) を得た。ミネラル類は、 N a、 K、 Ca、 Mg、 P、 C 1、 F eなどの有機又は無機塩混合物、ビタミン類は、ビタミン A、 D、 E、ビタミン B，、 B₂、 B₆、 B₁₂、 C、ナイァシン、パントテン酸などの混合物を、国民栄養所要量に合致した量を用いた。

[0124] 製剤例 1 6 筋肉老化抑制用ゼリー食品カラギーナンとローカストビーンガムの混合ゲル化剤 0. 65%、グレープフルーツの 50%の濃縮果汁 5. 0%、クェン酸 0. 05%、ビタミン C 0. 05%、テアビゴ（DSM二ユートリショナル■ プロダクツ） 0. 54 %、ロイシン 0. 3%、イソロイシン 0. 1 5%、パ、リン 0. 1 5%、タウリン 0. 5%を混合し、これに水を加えて 1 00%に調整し、 65°Cで溶解した。更に少量のグレープフルーツフレーバーを添加して 85°Cで 5分間保持して殺菌処理後、 1 O OmLの容器に分注した。 8時間静置して徐冷しながら 5°Cに冷却して、ゲル化させ、口に含んだ時に口溶け性が良好で、果実風味を有し食感良好なカ亍キン類及び分岐鎖ァミノ酸を含有する筋肉老化抑制用ゼリー食品を得た。

[0125] 製剤例 1 7 筋肉老化抑制用ビタミン内服液

タウリン 800mg、ショ糖 2000mg、カラメル 50mg、安息香酸ナトリウム 30m g、ビタミン B，硝酸塩 5m g、ビタミン B₂ 20mg、ビタミン巳₆ 20mg、ビタミン C 2000mg、ビタミン E 1 00mg、ビタミン D₃ 2000 I U、ニコチン酸ァミド 20mg、ポリフエノン 70 S ( 三井農林） 50mg、ロイシン 200m g、イソロイシン 1 00m g、バリン 1 00 m gを適量の精製水に加えて溶解し、リン酸水溶液で p H 3に調節した後、更に精製水を加えて全量を 5 OmLとした。これを 80°Cで 30分滅菌して、力テキン類及びァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制用飲料を得た

[0126] 製剤例 1 8 筋肉老化抑制用チユアブル錠剤

ァスコルビン酸 1 80mg、クェン酸 50mg、アスパルテーム 1 2mg 、ステアリン酸マグネシウム 24 m g、結晶セルロース 1 20mg、乳糖 2 74mg、テアフラン 90 S (伊藤園） 300mg、ロイシン 600mg、イソロイシン 300m g、バリン 30 Omgなる処方で、日本薬局方（製剤総則「錠剤」）に準じて錠剤を製造し、カ亍キン類及びアミノ酸類を含有する筋肉老化抑制用チユアブル錠剤を得た。

[0127] 製剤例 1 9 筋肉老化抑制用錠剤下記処方に基づいて、常法によリカテキン類及びァミノ酸類を含有する老化抑制用錠剤を調製した。成分配合量（重量⁰ /₀) ：ポリフエノン 7 O S (三井農林） 5、ロイシン 1 0、タウリン 5、リンゴ酸ナトリウム 2 0、パラチノース 2 0、ァスコルビン酸 2 0、ビタミンミックス 5、結晶セルロース 5 、ショ糖エステル 4、二酸化ケイ素 1、卵殻カルシウム 5。

Claims

請求の範囲

[I ] カ亍キン類を有効成分とする老化抑制剤。

[2] 老化に伴って生じる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下又はミトコンドリァ機能低下を抑制する請求項 1記載の老化抑制剤。

[3] カ亍キン類を有効成分とするミトコンドリア機能向上剤。

[4] カ亍キン類を含有する老化抑制用飲食品。

[5] 老化に伴って生じる、持久力低下、疲労、エネルギー代謝低下又はミトコンドリア機能低下を抑制する請求項 4記載の飲食品。

[6] 力テキン類を有効成分とする筋機能低下抑制剤。

[7] 力テキン類を有効成分とする筋萎縮抑制剤。

[8] 筋萎縮が廃用性筋萎縮又はサルコぺニァである請求項 7記載の抑制剤。

[9] 力テキン類を有効成分とする寝たきり予防剤。

[10] 力テキン類を含有する筋機能低下抑制用飲食品、筋萎縮抑制用飲食品又は寝たきり予防用飲食品。

[I I ] ( a ) カテキン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を有効成分とする筋肉老化抑制剤。

[1 2] 筋肉老化が筋力低下又は筋萎縮である請求項 1 1記載の筋肉老化抑制剤。

[13] ( a ) カ亍キン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を有効成分とする運動機能向上剤。

[14] ( a ) カ亍キン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を有効成分とする寝たきり予防剤。

[15] ( a ) カ亍キン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を含有する筋肉老化抑制用飲食品、運動機能向上用飲食品又は寝たきり予防用飲食品。

[1 6] 筋肉老化が筋力低下又は筋萎縮である請求項 1 5記載の飲食品。

[1 7] カテキン類の老化抑制剤又はミトコンドリア機能向上剤としての使用。

[18] 老化抑制剤又はミトコンドリア機能向上剤の製造のためのカテキン類の使

[1 9] カテキン類の筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤又は寝たきり予防剤としての使用。

[20] 筋機能低下抑制剤、筋萎縮抑制剤又は寝たきり予防剤の製造のためのカテキン類の使用。

[21 ] ( a ) カ亍キン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類の筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤としての使用。

[22] 筋肉老化抑制剤、運動機能向上剤又は寝たきり予防剤の製造のための（a ) カ亍キン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるアミノ酸類の使用。

[23] カ亍キン類を有効量投与することを特徴とする老化抑制方法又はミトコンドリア機能向上方法。

[24] 力テキン類を有効量投与することを特徴とする筋機能低下抑制方法、筋萎縮抑制方法又は寝たきり予防方法。

[25] ( a ) カテキン類、並びに（b ) 分岐鎖アミノ酸及びタウリンから選ばれるァミノ酸類を有効量投与することを特徴とする筋肉老化抑制方法、運動機能向上方法又は寝たきり予防方法。