WO2007078009A1

WO2007078009A1 - 化粧料

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Inventors: Tomohisa Hirobe; Koichi Akatsuka
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Abstract

水溶性二量体鉄塩の水溶液を含有する化粧料であって、前記水溶液はマグネシウムイオン及びカルシウムイオンを含有することを特徴とする。

Description

明細書

化粧料

技術分野

[0001] 本発明は、日焼けやしみ'そばかすに影響するケラチノサイト及びメラノサイトに作用し、優れた美容効果を発揮する化粧料に関する。

背景技術

[0002] 紫外線の照射を受けると、皮膚に紅斑が生じ、次、で黒ィ匕が起こって、、わゆる日焼けとなる。紫外線が過度に照射された場合には、火傷のように水泡を生じることもある。紫外線の照射を受け続けると皮膚の老化が早まるだけでなぐしみやそばかすもできると考えられて、る。しみ及びそばかすの発症メカニズムには未だに不明な点が多いが、表皮基底層に存在するメラノサイトが紫外線によって活性化され、メラニン色素の産生が過剰になることためであると考えられている。

[0003] しみ及びそばかすを除去する!、わゆる「美白効果」を有する化粧料に対して消費者の関心は極めて高ぐ従来力も多くの美白化粧料が市販されている。美白化粧料に従来カゝら用いられている成分として、過酸化水素、過酸化亜鉛、過酸化マグネシウム等の過酸化物、ァスコルビン酸の各種の天然物がある。しかしながら、ァスコルビン酸は安定性及び保持性等に問題があり、かつその効果も十分なものとは言い難い。米国等ではハイドロキノンが皮膚脱色剤として使用されているが、安全性 (刺激性、アレルギー性等）の面力化粧料に配合するには問題がある。そのため、安全性等の問題がなく、かつ皮膚美白効果を有する種々の化粧料が研究されてヽる。

[0004] より安全な化粧料として、コウジ酸及びその誘導体、ハイド口キノン配糖体及びその誘導体を有効成分とするものが提案されている。しかし、これらの成分を含有する化粧料は細胞レベルでは効果が認められるものの、ヒトレベルでは効果が十分発揮されていない。

[0005] 特開平 9-241145号は、極微量の二価鉄及び三価鉄を含む水溶液に銀杏葉エキスを配合してなる化粧料を開示している。特開平 9-241145号は、希釈した二価鉄 Z三価鉄と銀杏葉エキスとが皮膚細胞に浸透して皮膚をみずみずしくするほか、血管内にも浸透して白血球中の好中球の貪食作用を強化して免疫力を高めると記載して、る。しかし、この化粧料は美白効果をほとんど有さない。

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0006] 従って本発明の目的は、健康に全く無害でありながら優れた美白効果を発揮する化粧料を提供することである。

課題を解決するための手段

[0007] 上記目的に鑑み鋭意研究の結果、本発明者等は、水溶性二量体鉄塩の水溶液をベースとし、さらにマグネシウムイオン及びカルシウムイオンを含有する化粧料は、ケラチノサイト及びメラノサイトの増殖及び分化を促進することにより、優れた美容効果を発揮することを発見し、本発明に想到した。

[0008] すなわち本発明の化粧料は、水溶性二量体鉄塩の水溶液をベースとし、さらにマグネシゥムイオン及びカルシウムイオンを含有することを特徴とする。

[0009] 水溶性二量体鉄塩の含有量は 0.01〜10000 μ g/Lであるのが好ましい。マグネシゥムの濃度は 0.01〜5000 mg/Lであるのが好ましい。カルシウムの濃度は 1〜10000 mg

/Lであるのが好ましい。

発明の効果

[0010] 水溶性二量体鉄塩の水溶液にマグネシウムイオン及びカルシウムイオンを含有させた本発明の化粧料は、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖及び分化を促進するので、白くみずみずしい肌の維持、しみ'そばかすの予防及び治療といつた優れた美白効果を得ることができる。

図面の簡単な説明

[0011] [図 1]参考例 1(0の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 2]参考例 1(0の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 3]参考例 1G0の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 4]参考例 1G0の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 5]参考例 i(m)の培養前後の細胞数を示すグラフである。 [図 6]参考例 i(m)の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 7]参考例 l(iv)の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 8]参考例 l(iv)の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 9]参考例 2(0の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 10]参考例 2(0の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 11]参考例 2G0の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 12]参考例 2(ii)の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 13]参考例 2(iii)の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 14]参考例 2(iii)の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 15]参考例 2(iv)におけるメラノサイトの細胞分裂指数を示すグラフである。

[図 16]参考例 2(iv)の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 17]参考例 2(iv)の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 18]参考例 2(iv)におけるメラノブラストの細胞分裂指数を示すグラフである。

[図 19]比較例 1(0の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 20]比較例 1(0の分ィ匕率を示すグラフである。

[図 21]比較例 l(ii)の培養前後の細胞数を示すグラフである。

[図 22]比較例 l(ii)の分ィ匕率を示すグラフである。

発明を実施するための最良の形態

[0012] [1]化粧料

本発明の化粧料は水溶性二量体鉄塩の水溶液に、マグネシウムイオン及びカルシゥムイオンを含有させてなる。本明細書に用いる用語「ィ匕粧料」は、化粧水、乳液、クリーム、美容液、リップクリーム等の基礎ィ匕粧料に限らず、ファンデーション、口紅、ァィシャドー等のメーキャップィ匕粧料も含む。以下、化粧料に含まれる各成分について説明する。

[0013] (1)水溶性二量体鉄塩

水溶性二量体鉄塩（Ferrous Ferric Chloride)は、二価の鉄イオンと三価の鉄イオンを含む複合体であり、典型的には Fe C1により表される組成を有する。水溶性二量体

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鉄塩の水溶液は大きな表面張力及び浸透圧を有し、表皮に存在するケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖及び分ィ匕を促進して美白効果を発揮するとともに、白血球中の好中球の貪食作用を強化して免疫力を高めたり老化を防止したりする効果を発揮する。水溶性二量体鉄塩が溶解してなる二価の鉄イオンと三価の鉄ィォンの比は、水溶性二量体鉄塩の合成条件によって異なり、両者は任意の比率で存在しえる。そこで、両イオンをまとめて二価の鉄イオン Z三価の鉄イオンと呼ぶ。

[0014] 化粧料中の二価の鉄イオン Z三価の鉄イオンの濃度 (水溶性二量体鉄塩の含有量により表す）は 0.01〜10000 μ g/Lであるのが好ましぐ 0.1〜1000 μ g/Lであるのがより好ましぐ 1〜500 g/Lであるのが特に好ましい。二価の鉄イオン Z三価の鉄ィォンの濃度が 0.01 g/L未満であると、塗布しても美白効果が小さい。一方、二価の鉄イオン Z三価の鉄イオンの濃度を 10000 g/L超としても、メラノブラスト等の増殖及び分化を促進する効果は飽和し、さらなる増大は期待できな、。

[0015] カルシウムイオン及びマグネシウムイオンを含有する水溶性二量体鉄塩の水溶液を含む培養液中で幼マウスの皮膚細胞を培養したところ、この水溶液を含まなヽ培養液中で培養した皮膚細胞に比べて、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖力 ¾〜2.5倍も促進されることが分った。これにより、しみ及びそばかすを予防及び Z又は軽減したり、皮膚を白くしたりする効果が得られると推定できる。

[0016] (2)カルシウムイオン

化粧料中のカルシウムイオンの濃度は 0.1〜10000 mg/Lであるのが好ましぐ 1〜50 00 mg/Lであるのがより好ましい。カルシウムイオンの濃度が 1 mg/L未満であると、メラノブラスト及びメラノサイトに有効に作用せず、十分な美白効果を示さない。しかしカルシウムイオンの濃度が 10000 mg/L超となると、メラノブラスト及びメラノサイトの成長はかえつて阻害される。カルシウムイオンの濃度は、皮膚細胞の培地として一般に使用されている Ham's F-10培養液 (ギブコネ土製等）と同程度であるのが特に好ましい。後述するマグネシウムイオンの濃度と、カルシウムイオンの濃度とを Ham's F-10培養液と同程度にすることにより、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖及び分ィ匕を促進し、非常に優れた美白効果を得ることができる。二価の鉄イオン Z三価の鉄イオンとカルシウムイオンとのモル比（水溶性二量体鉄塩 Zカルシウム）は 1〜 10000であるのが好ましぐ 10〜5000であるのがより好ましぐ 100〜1000であるのが特に好ましい。なおカルシウムイオンを生成する無機塩は、皮膚に対して無害である限り限定されない

[0017] (3)マグネシウムイオン

化粧料中のマグネシウムイオンの濃度は 0.01〜5000 mg/Lであるのが好ましぐ 0.0 5〜500 mg/Lであるのがより好ましい。マグネシウムイオンの濃度が 0.01 mg/L未満であると、メラノブラスト及びメラノサイトに有効に作用せず、十分な美白効果を示さない。し力しマグネシウムイオンの濃度が 5000 mg/L超となると、メラノブラスト及びメラノサイトの成長が阻害される。マグネシウムイオンの濃度も、カルシウムイオンの濃度と同様に、 Ham's F-10培養液と同程度であるのが特に好ましい。なおマグネシウムイオンを生成する無機塩は、皮膚に対して無害である限り限定されな、。二価の鉄イオン Z三価の鉄イオンとマグネシウムイオンとのモル比（水溶性二量体鉄塩 Zマグネシウムイオン）は 1〜100000であるのが好ましぐ 10〜10000であるのがより好ましぐ 100〜1000であるのが特に好ましい。カルシウムイオンとマグネシウムイオンとのモル比、及び二価の鉄イオン z三価の鉄イオンとマグネシウムイオンとのモル比力の範囲であると、メラノサイト等の増殖効果が大きいので、非常に大きな美白効果を発揮する。

[0019] (4)任意成分

本発明の化粧料は任意成分として、細胞培養液 (例えば Ham's F-10)に含まれる成分 (無機塩類、アミノ酸等、了ザニン、エタノールァミン、ホスホエタノールァミン、フェノールレッド Na、プトレシン 2HC1、チアミン HC1、チォタト酸、チミジン、グルコース、 H EPES、抗生物質等)、通常の化粧料に配合されている成分 (油分、界面活性剤、保湿剤、低級アルコール、増粘剤、酸化防止剤、キレート剤、 pH調整剤、防腐剤、香料、色素、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、ビタミン等)、生薬、蛋白分解酵素等を含有してもよい。化粧料の組成を Ham's F-10培養液に近づけると、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖及び分ィ匕を一層促進することができる。任意成分の濃度は、 Ham's F- 10中の濃度の 1/100〜100倍程度であるのが好ましぐ 1/10〜10倍であるのがより好ましい。 [0020] 水溶性二量体鉄塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩以外の無機塩類の例として、塩ィ匕ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、セスキ炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ケィ酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、亜セレン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ピルビン酸ナトリウム、塩ィ匕カリウム、硫酸カリウム、リン酸二水素カリウム、ヨウ化カリウム、塩ィ匕アンモ-ゥム、無水ケィ酸、メタケイ酸、硫酸銅 (11)、硫酸鉄 (111)、塩ィ匕マンガン、硫酸ニッケル、塩化スズ、硫酸亜鉛、硫酸アルミニウム、珪酸アルミニウム、ホウ砂、メタバナジン酸アンモ-ゥム、モリブデン酸アンモ-ゥム等が挙げられる。

[0021] アミノ酸の例として、 L-ァラニン、 L-アルギニン、 L-ァスパラギン、 L-ァスパラギン酸、 L-システィン、 L-シスチン、 L-グルタミン酸、グルタミン、グリシン、 L-ヒスチジン、 L- イソロイシン、 L-ロイシン、 L-リシン、 L-メチォニン、 L-フエ二ルァラニン、 L-プロリン、 L-ヒドロキシプロリン、 L-セリン、 L-卜レオ-ン、 L-卜リプ卜ファン、 L-チロシン、 L-ノリン等が挙げられる。

[0022] 油分としては、ハツ力油、ジャスミン油、ショウノウ油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレビン油、ケィヒ油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、べィ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラ-オール、カンファー、チモーノレ、スピラントール、ビネン、リモネン等の精油類、ォリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、カカオ脂、椿油、ヤシ油、木ロウ、グレープシード油、アボカド油、ミンク油、卵黄油、硬化油等の油脂類、鯨ロウ、蜜ロウ、ラノリン、カルナウパロウ、キャンデリラロゥ等のロウ類、流動バラフイン、セレシン、スクヮラン、マイクロクリスタリンワックス、パラフィンワックス、ワセリン等の炭化水素類、ステアリン酸、ォレイン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、イソステアリン酸、パルミチン酸、ベへニン酸等の脂肪酸類、セタノール、ステアリルアルコール、ラノリルアルコール、オタチルドデカノール、へキシルデカノール等の高級アルコール類、ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸プチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オタチルドデシル、コレステロールォレート等のエステル類が挙げられる。

[0023] 界面活性剤としては、（a)ステアリン酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルリン酸、ラウリルリン酸ナトリウム、パルミチン酸トリエタノールァミン、 N-ァシルグルタミン酸ナトリウム等のァ-オン界面活性剤、 (b)塩化ステアリルジメチルベンジルアンモ-ゥム、塩化ステアリルトリメチルアンモ -ゥム等のカチオン界面活性剤、 (c)塩ィ匕アルキルアミノエチレングリシン液、レシチン等の両性界面活性剤、モノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸ソルビタン、ショ糖脂肪酸エステル、モノステアリン酸プロピレングリコール、ポリオキシエチレンォレイルエーテル、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレンヤシ脂肪酸モノエタノールアミド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレンラノリン等の非ィオン界面活性剤が挙げられる。

[0024] 保湿剤としては、グリセリン、 1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール等の多価アルコール、アミノ酸、乳酸ナトリウム、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等の NMF成分、ヒアルロン酸、コラーゲン、ムコ多糖類、コンドロイチン硫酸等の水溶性高分子物質が挙げられる。

[0025] 低級アルコールとしては、エタノール、イソプロピルアルコールが挙げられる。

[0026] 増粘剤としては、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、マルメ口種子抽質物、トラガカントガム、デンプン、カゼイン、水溶性ゼラチン、ぺクチン、カラャゴム、ローカストビーンガム、カラギナン、カーボポーノレ、ァカシャゴム、カンテン、メチノレセノレロース、ヒドロキシェチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カチオン化セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、カルボキシビ二ルポリマー、ポリビニルアルコール等が挙げられる。

[0027] 酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシァ-ソール、没食子酸プロピル、ァスコルビン酸が挙げられる。キレート剤としては、ェデト酸ニナトリゥム、エタンヒドロキシジホスフェート、ピロリン酸塩、へキサメタリン酸塩、クェン酸、酒石酸、グルクロン酸が挙げられる。 pH調整剤としては、水酸化ナトリウム、トリエタノールァミン、クェン酸、クェン酸ナトリウム、ホウ酸、リン酸一水素ナトリウムが挙げられる。防腐剤としては、パラォキシ安息香酸メチル、デヒドロ酢酸、サリチル酸、安息香酸、ソルビン酸、塩ィ匕ベンザルコ-ゥムが挙げられる。紫外線吸収剤としては、 2-ヒドロキシ -4-メトキシベンゾフエノン、ォクチルジメチルパラァミノべンゾエート、ェチルへキシルパラメトキシサイナメートが挙げられる。紫外線散乱剤としては、酸化チタン、カオリン、タルク等を、ビタミンとしては、ビタミン A、ビタミン B、ビタミン C、ビタミン D、ビタミンE、ビタミン!⁷、ビタミンビタミン P、ビタミン U、カルニチン、フェルラ酸、 _Ί -オリザノール、 α -リポ酸、ォロット酸及びこれらの誘導体が挙げられる。

[0028] 生薬としては、ソウジュッ、ビヤクジュッ、力ノコソゥ、ケィガイ、コゥボタ、センキユウ、トウヒ、トウキ、ショウキヨウ、ォゥゴン、サンシン、ガイヨウ、アロエ、ニンジン、ケィヒ、シャクャク、ハツ力葉、ブクリヨウ、ショウブ、マツブサ、ビヤクシ、サフラン、ォゥバタ、ウイキヨウ、チンピ、ガンピ、力ミツレ、ダイコン、ャナギ、タスノキ、ニヮトコ、ソクズ、ナキナタコウジュ、ャッデ、セキショウ、ョモギ、オトギリソゥ、ュズ、ダイダイ、モモ、サイカチ、ビヮ、スイカズラ、ョロイダサ、ボダイジュ、トチノキ、ノコギリソゥ、ホップ、ローズマリー、カバノ、マツ、ャレンズラ、ランタナ、カンゾゥ、キッソゥコン、マロニエ等が挙げらる。

[0029] [2]化粧料の製造方法

水溶性二量体鉄塩は、例えば杉ニ郎、外 1名、「水溶性二量体鉄塩の製造法」、日本海水学会年会研究技術発表会講演要旨集 Vol. 42nd, p. 11 (1991)に記載の以下の合成方法によって作製することができる。

[0030] 2 molのギ酸アンモ-ゥム、 1 molのヒドロキシルァミン及び 1 molのフオルムアミドの混合液に、 lmolの塩ィ匕第二鉄 (FeCl · 6Η Ο)を加える。この調製液を順次蒸留水で

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希釈し、 a液（10— ⁸ mM)、 β液（10— ¹² mM)及び y液（10— ¹⁴ mM)を得る。得られた a、 j8及び 0液にそれぞれ塩ィ匕第二鉄 (FeCl · 6Η Ο)を 1 g/10 mLの割合で溶解し、 100

3 2

°C以下で徐々に蒸発乾固して塩化鉄の結晶 α、 j8及び γを得る。これらの合成法により得られた二価三価鉄塩中の 2価鉄： 3価鉄の比率をメスバウアー法で測定した結果、結晶 aは 4 : 6、結晶 βは 6 : 4、結晶 γは 7 : 3であり、またイオンクロマト法、 X線解析法等により塩化鉄中の 2価鉄と 3価鉄は単なる混合状態ではなぐいずれも二量体の形をとつていることが推測されると上記文献に記載されている。本発明で使用する二価三価鉄塩は、上記合成方法に限定されず、また 2価鉄: 3価鉄の比率も上記値に限定されるものではない。

[0031] また市販の飲料水等のうち水溶性二量体鉄塩を含有するものも、化粧料の材料として使用することができる。例えばパイロゲン (有限会社アトムジャパンの登録商標、販売：株式会社赤塚)の名称で市販されて!、る飲料や、 FFCセラミックス (「FFC」は有限会社アトムジャパンの登録商標、販売:株式会社エフエフシー 'ジャパン)を浸漬した水が挙げられる。 FFCセラミックスを水 1じ当たり 10〜100個程度（25〜250 cm³)になるように水に入れ、室温で 3〜48時間浸漬しておくと、上述の好ましい濃度で水溶性二量体鉄塩の水溶液を得ることができる。パイロゲンや FFCセラミックスを浸漬した水は、水溶性二量体鉄塩の水溶液、カルシウムイオン及びマグネシウムイオンを上述の好ましい濃度で含有する上、塗布することにより皮膚に素早く浸透して、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖を活発にする効果を発揮するため、特に好ましい。

[0032] なお本発明者らによる研究の結果、パイロゲンや FFCセラミックスを浸漬した水を原料に用いたィ匕粧水は、特に優れた美白効果を奏することが明らかになった。パイロゲンゃ FFCセラミックスを浸漬した水には銅、モリブデン、亜鉛、ストロンチウム、バリウム、バナジウム、ホウ素等の様々な元素が含まれ、水溶性二量体鉄塩の水溶液等の必須要素と相乗的に作用しているためこの様な効果が得られると考えられる。従って、ノイロゲンや FFCセラミックスを浸漬した水を含有する化粧料中で、ケラチノサイト、メラノブラスト又はメラノサイトの増殖及び分ィ匕は一層促進されると考えられる。これらの元素の好ましい濃度を質量基準で示すと、銅濃度は 0.001〜100 ppbであり、モリブデン濃度は 0.001〜100 ppbであり、亜鉛濃度は 0.001〜100 ppbであり、ストロンチウム濃度は 0.001〜1 ppmであり、バリウム濃度は 0.0001〜1 ppmであり、バナジウム濃度は 0. 0001〜0.1 ppmであり、ホウ素濃度は 0.001〜100 ppbである。

[0033] 上述のように、パイロゲンや FFCセラミックスを浸漬した水にはカルシウムイオン及びマグネシウムイオンが含まれている力 Ham's F-10培養液と同じ組成又はこれに近い組成にするために、これらの金属を添カ卩しても良い。 Ham's F-10培養液と同じ組成又はこれに近い組成にすることで、化粧料の美白効果を一層高めることができる。パイロゲンや FFCセラミックスを浸漬した水に、カルシウム等を含む塩を添加しても良 V、し、カルシウム等を分散させたクリームに水溶性二量体鉄塩の水溶液を添加しても良い。つまり、作製する化粧料の種類 (化粧水、乳液、クリーム等）に応じて、所望の性状になるようにすればょ、。

[0034] 水溶性二量体鉄塩の水溶液と、カルシウムと、マグネシウムとを含有する化粧料はケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトに働きかけ、これらの増殖及び分化を促進する。本発明者らによる研究の結果、水溶性二量体鉄塩の水溶液を含有し、 Ham' s F-10培養液程度の濃度のカルシウムイオンと、マグネシウムイオンとを含有する溶液中で、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖が 2〜2.5倍に促進されることが分力ゝつている。なお水溶性二量体鉄塩の水溶液、カルシウムイオン及びマグネシゥムイオンの、ずれかを含有してヽな、場合には、このような効果を得ることはできない。例えばカルシウム又はマグネシウムを含有していない溶液中では、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの培養をすることができない。また水溶性二量体鉄塩の水溶液を含有していない溶液中では、培養は可能であるものの、ケラチノサイト、メラノブラスト及びメラノサイトの増殖及び分ィ匕を促進する効果を得ることはできなヽ。従って、水溶性二量体鉄塩の水溶液、カルシウムイオン及びマグネシウムイオンの V、ずれかを含有して、な、化粧料は、十分な美白効果を奏することができな!、。

[0035] 本発明を以下の実施例によってさらに詳細に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。

[0036] 実施例 1

(0 FFC水の組成分析

超純水で 2分間洗浄した 40個の FFCセラミックス（直径約 16 mmの球状）を、 900 mL の超純水に 24時間浸漬させ、グラスファイバー濾紙（1 μ m)でろ過した。得られた水水溶液中の鉄イオン（二価の鉄イオン Z三価の鉄イオン）、カルシウムイオン及びマグネシゥムイオンの濃度を測定した。結果を表 1に示す。

[0037] [表 1]

*注：質量基準 [0038] (ii)臨床実験

脱イオン後に蒸留した 2 Lの水 (DDW)に、 60 gの FFCセラミックス（直径約 16 mmの球状）を 8時間浸漬させ FFC水を調製した。得られた FFC水、又はパイロゲン (水溶性二量体鉄塩、ブドウ糖果糖液糖、大豆オリゴ糖、ハチミツ、リンゴ果汁、米酢、リンゴ酢ゝ柿酢、梅酢、クェン酸、リンゴ酸、梅エキス、ステビア、ビタミン C、ビタミン Bゝビタミン

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B、香料、その他天然ミネラルウォーターからなる飲料水）を FFC水で 10〜100倍程

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度に希釈したものを被験者の顔に 1〜3回日程度かける処置を 3ヶ月間行い、実験前と 3ヶ月経過後の肌の色を比較した。結果を表 2に示す。

[0039] [表 2]

[0040] 表 2から分力るように、被験者 23人中 19人に美白効果が認められ、 82.6%という極めて高、有効率であることが分力つた。

[0041] 参考例 1

本発明者らが開発した表皮細胞（主にケラチノサイトとメラノサイトからなる）の無血清初代培養法を用い、水溶性二量体鉄塩の水溶液を含むパイロゲンが動物の皮膚、特にケラチノサイト、メラノサイトに与える作用を次に示すようにして調べた。

[0042] (0 MDM+パイロゲンメラノサイトのもとになるメラノブラストを純粋に培養するためのメラノブラスト純ィ匕培養液 (MDM)に、パイロゲンを加え、生後 0.5日の黒色純系マウス (未だ皮膚は黒くない）の表皮細胞を初代培養した。メラノブラスト純ィ匕培養液 (MDM)は、 Ham's F-10 ( ギブコネ土製）培養液に、 10 g/mLのインスリン、 0.5 mg/mLの牛血清アルブミン、 1 μ Μのエタノールァミン、 1 μ Μのホスホエタノールァミン及び ΙηΜの亜セレン酸ナトリウムが含有する様に調製した。試料 (MDM及びパイロゲンを含有する培養液)のパイ口ゲン濃度は、パイロゲンの 100倍希釈、 1000倍希釈、 10000倍希釈とした。いずれのパイロゲン濃度の試料においても対照よりケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コ口- 一中のケラチノサイトの数も増えた。各試料のケラチノサイト数は、対照の 2〜2.5倍になった。メラノブラスト数及びメラノサイト数の計測結果及び分ィ匕率を図 1及び 2に示す。ノイロゲンを添加した培養液においては、メラニンを作っているメラノサイトが多く現れた。メラノサイトの成熟を早める効果は、パイロゲンを培養液で 100倍に薄めたものが最も大きぐ 1000倍、 10000倍と薄いものほど小さかった（図 2)。一方、細胞の数につ!ヽてはノイロゲンの添カ卩による効果は認められな力つた（図 1)。

[0043] (ii) MDM+パイロゲン +メラノサイト刺激ホルモン (MSH)

MDMに、パイロゲンとメラノサイト刺激ホルモン (MSH)とをカ卩えた以外、参考例 1(0と同様にして、マウスの表皮細胞を初代培養した。いずれのノイロゲン濃度の試料においても対照よりケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。各試料のケラチノサイト数は、対照の 2〜2.5倍になった。メラノブラスト数及びメラノサイト数の計測結果及び分化率を図 3及び 4に示す。ノイロゲンを添加した培養液においては、添加していないものと比較してメラノサイトの成熟が早ぐメラニンの量が多ぐメラノサイトが樹枝状突起をよく伸ばすことが分力つた。メラノサイトの成熟を早める効果は、パイロゲンを培養液で 100倍に薄めたものが最も大きぐ 1000倍、 10000倍と薄いものほど小さ力つた（図 4)。一方、細胞の数についてはパイロゲンの添加による効果は認められな力つた（図 3)。

[0044] (iii) MDM+パイロゲン +ジブチリル環状アデノシン 1リン酸（DBcAMP)

MDMに、パイロゲンとメラノサイトの増殖に重要なジブチリル環状アデノシン 1リン酸 (DBcAMP)とをカ卩えた以外、参考例 1(0と同様にして、マウスの表皮細胞を初代培養した。いずれのパイロゲン濃度の試料においても対照よりケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。各試料のケラチノサイト数は、対照の 2〜2.5倍になった。またメラノブラスト数及びメラノサイト数を計測し、分化率を求めた。結果を図 5及び 6に示す。パイロゲンを添カ卩したものは、添カ卩していないものと比較してケラチノサイトの増殖が大きぐメラノサイトの成熟が早ぐメラニンの増加量も多ぐ樹枝状突起をよく伸ばし、細胞が大きくなつた。また 3〜4日後から細胞が増え始め、 14日後には添カ卩していないものの約 2倍になった。メラノサイトの成熟を早める効果は、パイロゲンを培養液で 100倍に薄めたものが最も大きぐ 1000倍、 10000倍と薄いものほど小さ力つた（図 6)。一方、メラノサイトを増やす働きは、一番薄い 10000倍のものが最も大きかった（図 5)。

[0045] (iv) MDM +パイロゲン + DBcAMP+塩基性繊維芽細胞増殖因子 (bFGF)

MDMに、パイロゲンとメラノブラストを増やす効果を発揮する DBcAMP及び塩基性繊維芽細胞増殖因子 (bFGF)を加えた以外、参考例 1(0と同様にして、マウスの表皮細胞を初代培養した。 V、ずれのパイロゲン濃度の試料にぉ、ても対照よりケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。各試料のケラチノサイト数は、対照の 2〜2.5倍になった。またメラノブラスト数及びメラノサイト数を計測し、分化率を求めた。結果を図 7及び 8に示す。パイロゲンを添加したものは、添カロして！/、な、ものと比較してケラチノサイトがよく増えた。また 3〜4日後からメラノブラストが増え始め、 14日後には添カ卩していないものの 2倍になった。またパイロゲンの添カロにより、メラノサイトの割合も大きくなつた。メラノサイトの成熟を早める効果は、パイ口ゲンを培養液で 100倍に薄めたものが最も大きぐ 1000倍、 10000倍と薄いものほど小さ力つた（図 8)。一方、メラノサイトを増やす働きは、一番薄い 10000倍のものが最も大きぐ 1000倍、 100倍と濃いものほど小さかった（図 7)。

[0046] 参考例 2

脱イオン後に蒸留した 2 Lの水 (DDW)に、 60 gの FFCセラミックスを 8時間浸漬させた後、グラスファイバー濾紙（1 μ m)でろ過し、 FFC水を調製した。

[0047] 得られた FFC水と未処理の DDWとにそれぞれ培養液用粉末（Ham' s F-10、シグマ社製)を溶かした後、すぐに濾過滅菌し、 FFC処理培養液と FFCを含有しない培養液 (対照)を得た。得られた培養液は冷蔵庫に保存した。

[0048] (0 FFC処理培養液（MDM + FFC処理 DDW)

FFC処理培養液を用いた以外参考例 1(0と同様にして、黒色マウスの表皮細胞を初代培養し、細胞数を計測し、分化率を求めた。結果を図 9及び 10に示す。 FFC処理培養液で初代培養すると、ケラチノサイトがよく増殖し、ケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。 FFC処理培養液においては、対照の 2〜2.5倍のケラチノサイトが生成した。またメラニン作って、るメラノサイトが多く現れ、 14日目には分ィ匕したメラノサイトの割合が 40%を越えた（図 10)。 FFC処理培養液においては、メラノブラスト及びメラノサイトの数は、 FFC処理していない培養液と比較して少し増加した力統計学的に有意な差ではな力つた（図 9)。

[0049] (ii) FFC処理培養液 +メラノサイト刺激ホルモン (MSH)

FFC処理培養液に MSHをカ卩えた培養液を用いた以外参考例 1(0と同様にして、黒色マウスの表皮細胞を初代培養し、細胞数を計測し、分化率を求めた。結果を図 11 及び 12に示す。この FFC処理培養液で初代培養すると、ケラチノサイトがよく増殖し、ケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。この FFC処理培養液のケラチノサイトの数は、対照の 2〜2.5倍になった。またメラノサイトの成熟が早まり、メラノサイトが大きくなり、メラニンの量が増えるほか、樹枝状突起を伸ばすことがわかった。この FFC処理培養液においては、メラノブラスト及びメラノサイトの数は、 FFC処理していない培養液と比較して少し増加した力統計学的に有意な差ではなかった（図 11)。

[0050] (iii) FFC処理培養液 +ジブチリル環状アデノシン 1リン酸（DBcAMP)

FFC処理培養液に DBcAMPをカ卩えた培養液を用いた以外、参考例 1(0と同様にして黒色マウスの表皮細胞を初代培養し、細胞数を計測し、分化率を求めた。結果を図 13及び 14に示す。また細胞分裂指数を図 15に示す。この FFC処理培養液で初代培養すると、ケラチノサイトがよく増殖し、ケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コ口- 一中のケラチノサイトの数も増えた。この FFC処理培養液中のケラチノサイトの数は、対照の 2〜2.5倍になった。またメラノサイトの成熟が早まり、メラノサイトが大きくなり、メラニンの量が増えるほか、樹枝状突起を伸ばすことがわ力つた。し力も 3〜4日後から細胞が増え始め、 14日後には対照の約 2.5倍になった他、分裂頻度も高かった（図 15)。 FFCを含有する培養液は、 DBcAMPと相乗的にメラノサイトを増殖させる働きを示すことが分力つた。

[0051] (iv) FFC処理培養液 + DBcAMP+塩基性繊維芽細胞増殖因子 (bFGF)

FFC処理培養液に DBcAMP及び bFGFをカ卩えた培養液を用いた以外、参考例 1(0と同様にして黒色マウスの表皮細胞を初代培養し、細胞数を計測し、分化率を求めた。結果を図 16及び 17に示す。また細胞分裂指数を図 15及び 18に示す。この FFC処理培養液で初代培養すると、ケラチノサイトがよく増殖し、ケラチノサイトのコロニーが大きくなり、コロニー中のケラチノサイトの数も増えた。この FFC処理培養液においては、対照の 2〜2.5倍のケラチノサイトが生成した。また培養開始の 3〜4日後からメラノブラストが活発に増え始め、 14日後には FFC処理していない培養液の約 2倍になった。また分裂頻度も高ぐメラノサイトの割合も高かった (図 18)。 FFCを含有する培養液は、 DBcAMPや bFGFと相乗的にメラノブラストを増殖させる働きを示すことが分力つた。

[0052] FFC処理培養液で黒色マウスの表皮細胞を初代培養すると、ケラチノサイトの増殖が促進された上、メラノブラストとメラノサイトの増殖'分ィ匕が促進された。このこと力ゝら、 FFC処理水によって、皮膚を構成している細胞の恒常性を保つことができることが分かった。

[0053] 比較例 1

FFCセラミックスの代わりに麦飯石セラミックス (木曽根物産製、約 400 g)を用いた以外参考例 2と同様にして、麦飯石セラミックス力も溶出した金属イオンを含有する培養液を得た。麦飯石セラミックスを浸漬した蒸留水に含まれる主な金属の濃度を表 3に示す。

[0054] [表 3] 元素濃度 (g/L)

カリウム 7.1

ナトリウム 8.9

カノレシゥム 8.8

マグネシウム 5.9

鉄 0.05

マンガン 0.03

スト口ンチウム 0.04

亜鉛 0.02

銅 0.04

クロム 0.02

セレン 0.005

モリブデン 0.0019

[0055] (i)麦飯石処理培養液 +ジブチリル環状アデノシン 1リン酸 (DBcAMP)

麦飯石処理培養液に DBcAMP及び bFGFを加えた培養液を用いた以外、参考例 l(i )と同様にして黒色マウスの表皮細胞を初代培養した。ケラチノサイトのコロニー中のケラチノサイトの数を表 4に示す。またメラノサイトの増殖細胞数及び分化度を図 19及び 20に示す。図 19から分力るように、この麦飯石処理培養液で表皮細胞を初代培養すると、麦飯石処理して！/ヽな！ヽ蒸留水を用いた培養液と比較してメラノサイトの分ィ匕は抑制された。増殖細胞数は対照とほぼ同じであった。

[0056] [表 4]

例 No. 培養液ケラチノサイトの数（個）

未処理培養液 + DBcAMP (対照） 6.86±1.22

参考例 2(iii) FFC処理培養液 + DBcAMP 17.57±2.65 比較例 l(i) 麦飯石処理培養液 + DBcAMP 15.27±2.77

― 未処理培養液 + DBcAMP

7.49±1.16

+ bFGF (対照）

FFC処理培養液 + DBcAMP

参考例 2(iv) 16.63±3.66

+ bFGF

麦飯石処理培養液 + DBcAMP

比較例 l(ii) 15.30±2.64

+ bFGF

[0057] (ii)麦飯石処理培養液 + DBcAMP +塩基性繊維芽細胞増殖因子 (bFGF)

麦飯石処理培養液に DBcAMPをカ卩えた培養液を用いた以外参考例 1(0と同様にして、黒色マウスの表皮細胞を初代培養した。ケラチノサイトのコロニー中のケラチノサイトの数を表 4に併せて示す。またメラノサイトの増殖細胞数及び分ィ匕度を図 21及び 2 2に示す。図 21から分力るように、この麦飯石処理培養液で表皮細胞を初代培養すると、麦飯石処理して、な、蒸留水を用いた培養液と比較してメラノサイトの分ィ匕は抑制された。増殖細胞数は対照とほぼ同じであった。

[0058] 麦飯石処理培養液で黒色マウスの表皮細胞を初代培養すると、ケラチノサイトの増殖が促進されるものの、メラノブラストとメラノサイトの増殖には影響しなカゝつた。麦飯石セラミックスは、ケラチノサイトに対して作用するものの、メラノブラスト及びメラノサイトを活性ィ匕しないため、表皮細胞の恒常性を保つ効果は奏しないことが分力つた。メラノブラストやメラノサイトの増殖について、参考例 2と比較例 1とがこのような相違を示すのは、 FFC処理水に含まれる鉄分は水溶性二量体鉄であるのに対し、麦飯石処理水に含まれる鉄分は水溶性二量体鉄ではないためであると考えられる。

Claims

請求の範囲

[1] 水溶性二量体鉄塩の水溶液を含有する化粧料であって、前記水溶液はマグネシゥムイオン及びカルシウムイオンを含有することを特徴とする化粧料。

[2] 請求項 1に記載の化粧料において、前記水溶性二量体鉄塩としての濃度が 0.01〜

10000 g/Lであることを特徴とする化粧料。

[3] 請求項 1又は 2に記載の化粧料において、前記マグネシウムイオンの濃度が 0.01〜

5000 mg/Lであることを特徴とする化粧料。

[4] 請求項 1〜3のいずれかに記載の化粧料において、前記カルシウムイオンの濃度力 .1〜10000 mg/Lであることを特徴とする化粧料。