[go: up one dir, main page]

WO2003048343A1 - Bifidobacterium longum - Google Patents

Bifidobacterium longum Download PDF

Info

Publication number
WO2003048343A1
WO2003048343A1 PCT/JP2002/012162 JP0212162W WO03048343A1 WO 2003048343 A1 WO2003048343 A1 WO 2003048343A1 JP 0212162 W JP0212162 W JP 0212162W WO 03048343 A1 WO03048343 A1 WO 03048343A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
longum
strain
medium
milk
bacteria
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2002/012162
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Kazuyoshi Sotoyama
Akinori Hiramatsu
Jin-Zhong Xiao
Noritoshi Takahashi
Shizuki Kondo
Tomoko Yaeshima
Sachiko Takahashi
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Morinaga Milk Industry Co Ltd
Original Assignee
Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Morinaga Milk Industry Co Ltd filed Critical Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority to DE60210497T priority Critical patent/DE60210497T2/de
Priority to JP2003549522A priority patent/JP3875237B2/ja
Priority to EP02804353A priority patent/EP1449915B1/en
Publication of WO2003048343A1 publication Critical patent/WO2003048343A1/ja
Priority to US10/709,674 priority patent/US7427499B2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/121—Brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/533—Longum

Definitions

  • Bifidobacterium genus such as Bifidobacterium longum (hereinafter referred to as “Bibidobacterium”) is one of the dominant bacterial species in the intestinal flora formed in the intestinal tract of humans. It is known to have an intestinal regulating effect upon ingestion.
  • Bibidobacterium Bifidobacterium longum
  • demand for foods containing bifidobacteria has increased, and bifidobacteria are widely used in fermented milk and lactic acid bacteria beverages.
  • various reports have been made on the physiological effects of bifidobacteria such as antitumor activity, and attempts have been made to use it in various health foods.
  • the survival rate is 50% or more when it is rapidly cooled to 10 ° C for 2 weeks when it reaches pH 4.4 to 4.6 in milk medium.
  • the present invention provides a food or drink containing such bifidopacteria ⁇ longum.
  • (2) relates to fermentability.
  • Bifidobacteria are generally poorly proliferative in dairy component media and require a long fermentation time to reach a certain pH and number of bacteria. Fermentation can be performed in a short time if it is a bacterium that has a strong fermentative ability that can reduce the pH to 4.6 or less in a milky medium.
  • a certain number of bacteria for example, 10 million per 1 ml of fermented milk product
  • (2) relates to acid resistance that can maintain a certain number of bacteria during storage or distribution of fermented dairy products using bifidobacteria.
  • the pH of acidic dairy products or fruit juice products is 4.0 to 4.8
  • the shelf life is generally about 2 weeks under storage conditions of 10 ° C or less.
  • the present inventors can cultivate using a dairy medium, rapidly cool when it reaches pH 4.4 to 4.6, and have a survival rate of 50% or more when kept at 10 ° C for 2 weeks. In other words, it has been found that a certain number of viable bacteria can be secured in acid dairy products with strong acid resistance and within the shelf life.
  • the dairy medium is a medium containing milk components such as milk, fresh cream, putter and skim milk, and containing 3% or more of milk protein.
  • the Bifidobacterium longum of the present invention can be obtained, for example, by the following method. First, isolate the strain from various samples, and ferment it in the milky medium. Select one that has excellent fermentability, that is, one that has fermentability that makes the milky medium pH 4.6 or lower. Next, fermented dairy products are prepared using the selected bacteria as a starter, cultured in a low-temperature storage strain with excellent survival, i.e., a milky medium, and when pH 4.4 to 4.6 is reached. Select strains with a survival rate of 50% or more when rapidly cooled and kept at 10 ° C for 2 weeks. Furthermore, such a strain can be obtained by incubating at 37 ° C. for 2 hours with an artificial gastric juice having a pH of 3.0, and selecting a strain excellent in gastric acid resistance with a survival rate of 10% or more. The details will be described below.
  • the present inventors prepared an anaerobic diluent (sample published in 1980 by Shubunsha, “The World of Enteric Bacteria”, page 322). (Referred to as Reference 1), and applied to a plate of BL agar medium (Reference 1, page 319) and anaerobically cultured at 37 ° C. Among the colonies obtained, Bifidobacteria-specific morphology was observed. Bacteria that were gram-positive by microscopic observation of the coated specimens and showed rod-like, rod-like, or branched-like fungi were inoculated.
  • Bihuy pacterum longum F ERM BP— 7 7 8 7 is fermented milk fermented to pH 4.6 or less, and more than 50% survive even after 2 weeks storage at 10 ° C.
  • the Bifidobacterium longum FERM BP-7 787 strain of the present invention is highly fermentable and acidic in dairy media.
  • Bifidobacterin has excellent survivability during storage at high temperatures and is highly resistant to artificial gastric juice. It is clear that it has properties not found in the reference strain of Ryum Longham or previously known strains.
  • the ATCC 55817 strain which is known to have gastric acid metabolism, is extremely poor in fermentability in a milky medium and in viability during storage under acidic conditions, and the FERM BP- It was significantly inferior to 7787 shares.
  • the seed culture 50 Om 1 of the Bifidopacteria longum FERM BP-7787 strain of the present invention that had been pre-cultured for 16 hours was inoculated into 10 L of the medium and cultured at 37 for 16 hours. Further, the whole culture solution (10.5 L) was inoculated into a medium 200 having the same composition as the medium sterilized at 90 for 30 minutes, and cultured at 37 ° C. for 16 hours.
  • the viable cell count after culture was 3.0 X 10 Vm 1.
  • the cells are then collected using a sharp press centrifuge (15000 rpm), resuspended in sterile medium at the same volume for 90 minutes at 90 ° C, centrifuged again, and collected again. Fungus. Suspend the resulting cells in 20 L of skim milk powder 10% (W / W), sucrose 1% (W / W), 1% glutamic acid soda (W / W) (sterilized for 30 minutes at 90 ° C), According to a conventional method, it was freeze-dried to obtain about 2.2 kg of a powder containing 1.6 ⁇ 10 1D Zg of this bacterium.
  • the cooled fermented milk was homogenized at a pressure of 15 MPa, filled in a 200 ml capacity glass container and sealed to obtain a drink yogurt.
  • the resulting fermented milk has a lactic acidity of 0.70% and a pH of 4.55.
  • Bifidopacterium 'longum FERM BP—7787 strain 1.5 X 10 8 Zm 1, Streptococcus ⁇ Talemorris 9.8 X 10 8 Zm 1 was contained.
  • this fermented milk was stored at 10 ° C for 14 days, the number of Bifidopacteria longum FERM BP-7787 strain was 8.5 x 10 Vm 1 and the survival rate was 57%.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Description

明 細 書 ビフィ 'ドパクテリ ゥム . 口ンガム 技術分野
本発明は、 発酵性や、 酸性条件下、 流通過程での保存性に優れ、 さらに胃酸耐 性能に優れ、 生理機能を発揮し易い新規なビフィ ドパクテリゥム · ロンガム
(Bindobacterium longum)に する。
また、 本発明は、 かかるビフィドバクテリゥム♦ロンガムを含有する新規なビ フイ ドパクテリゥム♦ロンガムの菌末及び飲食品に関する。 背景技術
ビフィ ドバクテリ ゥム ' ロンガム等のビフィ ドバクテリ ウム属菌 (以下、 「ビブ ィズス菌」 という） は、 ヒ トの腸管内で形成される腸内菌叢の優勢菌種の一つで あって、 その摂取により整腸作用を有することが知られている。 近年、 生活者の 健康志向の高まりと共に、 ビフィズス菌を含む食品への需要も高まっており、 発 酵乳ゃ乳酸菌飲料等に広くビフィズス菌が利用されている。 また、 抗腫瘍活性等、 ビフィズス菌の有する生理作用についても、 種々報告がなされており、 各種健康 食品への利用が試みられている。 このように、 腸内菌叢の維持や改善等、 ビフィ ズス菌の効果が期待されているが、 このような効果をビフィズス菌に発揮させる ためには、 ビフィズス菌を継続的に摂取することが必要とされている。
し力 し、 ビフィズス菌は、 乳性成分培地における増殖性が良くなく、 一定の p H及び菌数に到達するまで長時間の発酵を要する。 また、 ビフィズス菌は、 酸性 条件下での保存が難しく、 死滅し易いため、 ビフィズス菌を用いた発酵乳製品は、 流通過程で菌数の維持が大きな課題である。
一方、 ビフィズス菌の生理作用の発揮には生きている菌がもっとも効果的であ るとされているが、 ヒ ト消化管内には、 乳酸菌やビフィズス菌にとって様々な死 滅要因や生育阻害要因が存在している。 特に、 消化管の最初の関門である胃に到 達した時に、 胃液の低い p H及ぴ消化酵素の洗礼を受けなければならない。 胃 内の内容物などの状況によるが、 一般的に pH 3 . 0で 2時間生きることが胃酸 耐性能の 1つの基準とされている （伊藤ら、 日畜会報、 6 3卷、 1 2号、 1 2 7 6— 1 2 8 9頁、 1 9 9 2年）。
しかし、 ビフィズス菌の殆どは、 低い p Hに弱く、 乳酸桿菌などに較べて胃 液を通過する確率が低いとされている。
したがって、 ビフィズス菌を含有する飲食品を開発するに際しては、 短時間で 一定量以上増殖させることができ （発酵性）、 製造後の流通及び消費の過程で一定 量以上の生菌数を維持でき （耐酸性）、 さらに胃酸耐性能を有し、 生きたまま消化 管 （特に腸管） に到達して生理作用を発揮し得るビフィズス菌の開発が望まれて いる。
このような点から、 ビフィズス菌の発酵性、 耐酸性及び胃酸耐性能の研究がな されている。 例えば、 ビフイ ドバクテリウム · ビフィダム (Bifidobacterium bifidum)について、 耐酸性や乳性培地中での発酵性を有する変異株が存在する ことが知られている （特公昭 5 6— 4 2 2 5 0号公報）。 また、 ビフイ ドパクテリ ゥム · ロンガムについて耐酸性を有する菌株が知られている （特公昭 5 9 - 5 3 8 2 9号公報 （以下引用文献 1と記載する）、 特開平 1 1— 7 5 8 3 0号公報)。 さらに、 ビフイ ドパクテリゥム ·ブレーべ (Bifidobacterium breve)が還元脱脂乳 培地中で増殖し、 さらに耐酸性を有することが知られている （特開平 4— 3 2 0 6 4 2号公報）。
しかし、 前記既報のビフィ ドパクテリゥム · ビフイダム及ぴビフィ ドパクテリ ゥム ·プレーべは、 乳性培地中で所定 p Hまで発酵するには 1 5時間以上の長時 間を要する。 また、 耐酸性菌株の多くも、 酸性乳製品又は果汁製品中 （p H 4 . 0〜4 . 8 ) において冷蔵保管した生残率は、 必ずしも十分満足できるものとは いえない。 即ち、 前記菌株は耐酸性が十分ではなかった。 また、 消化管 （腸管） 内での生残性に関係があるとされている胃酸耐性能の強いビフィ ドパクテリゥム • ロンガムの変異株の報告もあるが （特開平 9一 3 2 2 7 6 2号公報、 以下引用 文献 2と記載する）、 この菌株は後記する試験の結果等からも明らかであるように、 酸性乳製品中での保存性が十分ではなかった。
したがって、 本発明は、 乳性培地中で増殖性がよく、 耐酸性を有し、 発酵乳製 品中で一定数以上の菌数が確保しやすく、 また保存流通中でも菌数の維持ができ、 かつ胃酸耐性能が強く、 生きて消化管 （腸管） まで到達し、 生理機能を発揮しや すいビフィズス菌を提供することを目的とする。
また、 本発明は、 かかるビフィズス菌を含有する菌末及び飲食品を提供するこ とを目的とする。 発明の開示
本発明者らは、 上記目的を達成すべく鋭意研究した結果、 （1) 乳性培地を p H 4. 6以下にする発酵性、 （2) 乳性培地で pH4. 4〜4. 6に達した時に 急冷して 10°C、 2週間保持した時の生残率が 50%以上である、 （3) p H 3. 0の人工胃液で 37°C 2時間保温した時の生残率が 10%以上である胃酸耐性能、 を有するビフィドパクテリゥム ·ロンガムであれば、 短時間で一定量以上増殖さ せることができ、 製造後の流通及び消費の過程で一定量以上の生菌数を維持でき、 さらに胃酸耐性能を有し、 生きたまま消化管 （特に腸管） に到達して生理作用を 発揮し得ることを見出し、 本発明を完成した。
すなわち、 本発明は、 下記の菌学的性質を有するビフィ ドパクテリゥム ·ロン ガムを提供するものである。
(1) 乳性培地を pH'4. 6以下にする発酵性、
(2) 乳性培地で pH4. 4〜4. 6に達した時に急冷して 10°C、 2週間保持 した時の生残率が 50 %以上である、
(3) pH3. 0の人工胃液で 37 で 2時間保温した時の生残率が 10 %以上 である胃酸耐性能。
また、 本発明は、 かかるビフィドパクテリゥム ·ロンガムを含有する菌末を提 供するものである。
また、 本発明は、 かかるビフィドパクテリゥム♦ロンガムを含有する飲食品を 提供するものである。 発明を実施するための最良の形態
本発明のビフイ ドパクテリゥム ' ロンガムは、 上記 （1)、 （2)、 (3) の特性 を有するものである。
(1) は、 発酵性に関するものである。 ビフィズス菌は、 一般に乳性成分培地 における増殖性が弱く、 一定の pH、 菌数に到達するまで長時間の発酵が必要で ある。 乳性培地にて、 pHを 4. 6以下にすることができる強い発酵力を有する 菌であれば、 発酵を短時間で行うことができ、 これを用いた飲食品 （発酵乳製品 等の酸性乳製品、 果汁製品等） 中で一定菌数 （例えば発酵乳製品 lml当たり 1 000万個） を容易に確保することができ、 製造効率が向上する。
(2) は、 ビフィズス菌を用いた発酵乳製品の保存中又は流通中において、 一 定の菌数を維持できる耐酸性に関するものである。 一般に、 酸性乳製品又は果汁 製品の pHは、 4. 0〜4. 8であり、 その品質保持期限は、 10°C以下の保存 条件で、 2週間程度であることが一般的である。 本発明者らは、 乳性培地を用い て培養し、 pH4. 4〜4. 6に達した時に急冷して 10°C、 2週間保持した時 の生残率が 50%以上ある菌であれば、 耐酸性が強く、 品質保持期限内の酸性乳 製品等において、 一定の生菌数を確保することができることを見出した。 これに 対して、 例えば p H 4のタエン酸ゃリンゴ酸緩衝液中で、 10 °C、 4日間保存し たときの残存率が 5 %以上の菌では、 かならずしも十分な耐酸性を有するとはい えない。 なお、 乳性培地とは、 牛乳、 生クリーム、 パター、 脱脂乳等の乳成分を 培地とし、 乳蛋白質を 3%以上含有した培地をいう。
(3) は、 ビフィズス菌が生きて消化管 （腸管） に到達するための胃酸耐性能 に関するものである。 ビフィズス菌は、 経口摂取後、 胃を通過した後、 腸管に達 してその生理機能を発揮する。 しかし、 胃酸は pHが低いため、 胃中で大部分の 菌は死滅してしまい、 腸管に到達できる菌は少ない。 pH3. 0の人工胃液で 3 7°C2時間保温した時の生残率が 10%以上であれば、 胃酸耐性能が高く、 多く の菌が生きて腸管に到達することができると考えられる。
上記 （1) 〜 （3) の菌学的性質を有するビフイ ドパクテリゥム ·ロンガムを 摂取することにより、 多くの菌が生きて腸管に到達することができ、 ビフィズス 菌としての生理機能が発揮され易い。
本発明のビフィドバクテリゥム ·ロンガムは、 例えば以下の方法により得るこ とができる。 まず、 各種の試料から菌株を分離し、 この中から乳性培地での発酵 性が優れたもの、 すなわち乳性培地を pH4. 6以下にする発酵性を有するもの を選択する。 次いで、 選択された菌をスターターとして発酵乳製品を調製し、 低 温保存中で生残性の優れた菌株、 すなわち乳性培地を用いて培養し、 pH4. 4 〜4. 6に達した時に急冷して 10°C、 2週間保持した時の生残率が 50%以上 である菌株を選出する。 さらに、 かかる菌株を pH3. 0の人工胃液で 37°C2 時間保温し、 生残率が 10%以上である胃酸耐性能の優れた菌株を選択すること により得ることができる。 以下、 さらに詳細に説明する。
1. 菌株の取得
本発明者らは、 前記の性質を有する菌株を自然界から取得すべく、 自然界から 採集したサンプルを嫌気性希釈液 （1980年叢文社発行、 光岡知足著 「腸内菌 の世界」 322ページ。 以下、 参考文献 1と記載する。） で希釈し、 BL寒天培地 (前記参考文献 1、 319ページ） の平板に塗布し、 37 °Cで嫌気培養した。 そ して得られたコロニーの中でビフィズス菌特有の形態を示し、 かつ塗布標本の顕 微鏡観察によりグラム陽性であり、 棒状、 棍棒状又は分岐状の菌形を示す菌を釣 菌し BL寒天平板に画線塗布し、 前記と同様の方法で嫌気培養を反復し、 純粋単 離された菌株を得た。 これらの菌株を下記の試験方法を用いて、 まず発酵試験及 ぴ保存中での生残性試験を行ない、 それらに優れた性質をもつ菌株を 20株あま り得た。 続いて、 胃酸耐性試験を行ない、 pH3. 0の人工胃液中で優れた生残 性を示した株を取得した。 そのなかで、 最も優れた菌株を、 独立行政法人産業技 術総合研究所特許生物寄託センターに FERM BP— 7787 (寄託日 ：平成 13年 10月 3 1日） として寄託した。 該菌株の菌学的性質を以下に示す。
2. 菌学的性質
(1) 菌形 （BL寒天培地で 37°C、 72時間嫌気培養したときの光学顕微鏡観 察時）
大きさ ： 0. 3〜0. 8 /^ 111 4〜10 111
形 状：多形性を示す桿菌 （こん棒状、 Y字状等） (2) グラム染色性：陽性
( 3 ) コロニー形態 （ B L寒天培地で 37 °C、 72時間嫌気培養したとき） 形状：円形隆起〜半球状に'隆起
周 縁：円滑
大さ ： 1〜4 mm
色調：周縁暗褐色、 中心濃褐色
表 面：円滑
(4) 芽胞形成：陰性
(5) ガス生成：なし
( 6 ) 運動性： なし
(7) カタラーゼ活性：陰性
(8) 酢酸 ZL ( + ) 乳酸モル比： 1. 5以上
(9) 糖の発酵性 光岡の糖発酵性用培地 （前記参考文献 1、 323ページ） を 用いて AP I 50CHシステム （日本バイオメリュー株式会社） により実施し た。
L—ァラビノース、 D—キシロース、 ガラクトース、 D—グルコース、 D— フラクトース、 D—マンノース、 マノレトース、 ラタ トース、 メリビ才ース、 シュ 一クロース、 メレチトース、 ラフィノース、 D—ッラノースは陽性； α—メチル ダルコシドは遅れて陽性；
グリセロール、 エリスリ トール、 D—ァラビノース、 リボース、 L—キシロ ース、 アドニッ ト、 メチリキシロシド、 L—ソノレポース、 ラムノース、 ダルシッ ト、 イノシッ ト、 マンニット、 ソルビット、 ひーメチルマンノシド、 Ν—ァセチ ルダルコサミン、 ァミグタリン、 アルブチン、 エスクリン、 サリシン、 セロピオ ース、 トレノヽロース、 ィヌリン、 スターチ、 グリコーゲン、 キシリ トーノレ、 ゲン チオビオース、 D—リキソース、 D—タガトース、 D—フコース、 L—フコース、 D—ァラビトール、 L—ァラビトール、 ダルコネート、 2—ケトグルコネート、
5—ケトグルコネートは陰性。
(10) DNAの相同性
ビフィ ドバクテリゥム · ロンガム AT C C 15707 τ及ぴビフィ ドバクテ リウム · アニマリス (Bifidobacterium animaHs) R 101 - 8 τ (理化学研究所微 生物系統保存施設にて J CM 1190 τとして入手可能。） の染色体 DNAをそ れそれ抽出し、 ビフイ ドパクテリゥム ' ロンガム FERM BP— 7787から 抽出した染色体 D N Aとマイクロプレートハブリダイゼション法によりハイブリ ダイゼ一シヨンを行った。 ビフイ ドバクテリウム · ロンガム F ERM BP— 7 787から抽出した染色体 DNAは、 ビフィ ドバクテリゥム · ロンガム AT C C 15707から抽出した染色体 DNAに対して 95%の相同性を示し、 ビフィ ドパクテリゥム ·アニマリス: R 101— 8 τとの相同性は 22%であった。
以上、 本発明のビフィ ドバクテリゥム · ロンガム FERM BP— 7787は、 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology vo l. 2， 丄 986の分類 ¾準 に示されるビフィズス菌と合致しており、 また、 糖発酵性、 性状及び DNAの相 同性の結果によりビフィ ドバクテリゥム ■ ロンガムであると同定された。
3. 乳性培地での発酵性
0. 2%酵母エキス （Difco社製） を配合した 11%還元脱脂粉乳培地を 11 5°C；、 15分で滅菌し、 同培地で 2回継代培養したビフイ ドパクテリゥム . ロン ガム: FERM BP- 7787及び対照株 （表 1に記載されている本発明菌以外 の菌株） のスターターを 5%接種し、 37°Cで 6時間培養した。 培養液の pH及 び菌数を測定した。 菌数測定は R C A (Reinforced Clostridial Agar, Oxoid社 製） 平板で行なった。 本培養条件で、 ビフィ ドバクテリゥム ' ロンガム FERM
BP— 7787は、 対照株に比較して、 短時間で乳性培地を凝固させることが でき、 ビフィズス菌数も最も高かった （表 1)。 [表 1] 各菌株の乳性培地における発酵生
Figure imgf000010_0001
ピフィドハ"クテリウム 'ロン力"厶 FERM P - 6548：引用文献 1記載菌株
ビフィドハ"クテリゥ厶，ロン力"厶 ATCC55817：弓 I用文献 2記載菌株
4. 耐酸性
(1) 単独発酵
前記 0. 2%酵母エキス （Difco社製） を配合した 1 1%還元脱脂粉乳培地を ガラス試験管に入れ、 1 1 5°C、 1 5分滅菌し、 ビフイ ドパクテリゥム .ロンガ ム FERM BP— 7787及ぴ対照株 （表 2において本菌株以外の菌株） のス ターターを 5%接種し、 3 7°Cで pHが 4. 3〜4. 4になるまで発酵させた後、 急冷し、 10°Cで保存試験を行なった。 急冷直後、 保存 1週間後及び 2週間後の 菌数を RC A寒天平板で測定し、 各期間保存後における生残率を算出した。
ビフイ ドパクテリゥム ' ロンガム FERM BP— 7787は、 pH4. 4ま で発酵した培地において、 1 OeCで 2週間保存しても殆ど生き残つており、 非常 に高い生残性を示し、 対照株ビフィ ドパクテリゥム ·ロンガム FERM P- 6 548に比べて優れている （表 2)。 胃酸耐性能を有することが知られているビフ イ ドパクテリゥム · ロンガム ATCC 558 1 7及び他の対照株は 2週間保存後 殆ど生き残っていなかった。 各菌株の乳性培地における生残性
O
Figure imgf000011_0001
ヒ"フイト"八"クテリゥム 'ロン力"厶 FERM P-6548：引用文献 1記載菌株
ビフイド八1'クテリウ厶 ·□リカ1'厶 ATCC5581 7：引用文献 2記載菌株
嫩 2 (2) 混合発酵
後記実施例 1と同様組成の轧脂肪 3. 0% (WZW)、 無脂乳固形分 9% (W/ W) からなる生乳ベースを、 7 0°Cに加温し， 1 5MP aの圧力で均質し， 9 0 °Cで 1 0分間殺菌し， 4 0°Cに冷却した。 この殺菌したベースに、 後記実施例 1 記載の方法で調製したストレプトコッカス ·サーモフィルス （Streptococcus thermophilus) とラクトバチルス *デルプリュッキイ ♦サプスビシーズ ·ブルガ リクス (Lacobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus) の 合力ノレテヤー 0. 6 %を接種した。 さらに、 前記 0. 2%酵母エキス （Difco社製） を配合した 1 1 %還元脱脂粉乳培地で、 3 7 °Cで p Hが 4. 3〜 4. 4になるまで培養したビフ ィ ドパクテリゥム .ロンガム F ERM B P- 7 7 8 7及ぴ対照株 （表 3におい て本発明菌以外の菌株） のスターターをそれぞれ 5%接種し、 試験管に分注し、
3 7 °Cで 5時間培養し、 急冷レ 1 0°Cで保存試験を行なった。 急冷直後、 保存 1 週間後及び 2週間後の菌数を RC A寒天平板で測定し、 保存における生残率を算 出した。 ビフイ ドパクテリゥム ·ロンガム F ERM B P— 7 7 8 7は、 pH4. 6以下まで発酵した発酵乳において、 1 0°Cで 2週間保存しても 5 0%以上が生 き残っており、 胃酸耐性能を有していることが知られているビフィ ドパクテリゥ ム♦ロンガム ATCC 5 5 8 1 7及び他の対照株に比べて耐酸性がすぐれている
(表 3)。
各菌株の乳性培地における生残性
Figure imgf000013_0001
ビフイド八"クテリゥ厶 'ロン力"厶 FERM P-6548：弓 I用文献 1記載菌株 ビフイド八 ' テリウ厶 'ロン力"厶 ATCC55817：弓 I用文献 2記載菌株
5. 胃酸耐性
胃酸耐性試験は以下の通りに実施した。 すなわち、 ろ過滅菌した 1M塩酸で PH3. 0に調製した人工胃液 〔0. 2%NaCl、 0. 35%ペプシン （1 ： 5000 ) を精製水で溶解〕 9. 9 m 1に、 Briggs liver broth (光岡知足；臨床 検査、 18卷、 1163〜 1172ページ、 1974年） で 2回賦活培養 （ 37 °C、 24時間） し、 生理食塩水で 1回洗浄したビフイ ドバクテリウム · ロンガム FERM BP— 7787及び対照株の菌体懸濁液 0. 1mlを添加した。 37 °Cで 2時間接触後、 1mlを pH6. 5のリン酸緩衝液 （ 67 mM) 9 mlに添 加し処理を停止させた。 次に、 初発菌数及び人工胃液に接触後の菌数を： RC A寒 天平板を用いて計測し、 生残率を算出した。 本法により本発明の FERM BP - 7787株は ATCC 55817株と同レベルで高い胃酸耐性能を示し、 他の 菌株は、 比較的耐酸性を有する FERM P— 6548を含めて殆ど耐性を示さ なかった (表 4)。
[表 4] 各菌株の人工胃液耐性
Figure imgf000014_0001
ヒ"フイト"八"クテリウ厶 'ロン力"厶 FERM P-6548：弓 I用文献 1記載菌株
ピフイド八"クテリゥ厶 'ロン力"厶 ATCC55817：弓 I用文献 2記載菌株 以上のように， 本発明のビフィ ドバクテリゥム · ロンガム FERM BP- 7 787菌株は、 乳性培地中で強い発酵性及び酸性下での保存中において優れた生 残性を有し、 さらに人工胃液に対して強い耐性を示すことから、 ビフイ ドバクテ リゥム · ロンガムの基準株又は今まで公知の菌株に見られなかった性質を持って いることが明らかである。 一方、 胃酸而忖生能を有することが知られている AT C C 55817株は、 乳性培地中での発酵性、 酸性下での保存中における生残性は 極めて悪く、 本発明の FERM B P— 7787株に比較して著しく劣っていた。 本発明のビフィ ドパクテリゥム .ロンガムは、 自然界から分離したビフィ ドパ クテリウム ·ロンガムの中から、 発酵性、 耐酸性及び胃酸耐性能を有するものを 選び出し得られたものである。 したがって、 本発明のビフイドバクテリウム ·口 ンガムは、 短時間で迅速に培養することができ、 培養物又はその加工物の保存中 における生菌数の低下が少なく、 広い p H域の飲食物への利用が可能である。 また、 本発明のビブイドパクテリゥム *ロンガムは、 凍結や凍結乾燥したとき の生残率も優れてレ、ることが試験で確認されているので、 菌末の形態で用いるこ ともできる。 さらに、 本発明のビフィドバクテリゥム♦ロンガムは、 胃酸耐性能 を有し、 人又は動物の体内に摂取された場合， 高い確率で生きて消化管 （腸管） に到達し、 生理機能を発揮し得るため、 産業上きわめて有用である。 例えば、 古 くから知られている人や動物の医薬品としての整腸剤に使用することは勿論、 粉 末状の食品， 飼料あるいは液状又は半固形状の飼料， 食品に添加あるいは混在さ せることもできる。 以下に実施例を示し、 本発明をさらに詳細に説明する。
実施例 1
酵母エキス 0. 2% (W/W)、 脱脂粉乳 1 1% (W/W) からなる 90°C、 3 0分殺菌後の培地 1000m 1に、 本発明のビフィ ドバクテリゥム ·ロンガム F ERM B P— 7787菌株を接種し、 37 °C 6時間培養した。 一方、 10%
(W/W) 還元脱脂乳培地 1500mlを 90 °C、 30分間殺菌し， ストレプト コッカス ·サーモフィルス （ハンセン社製） 及ぴラク トバチルス 'デルプリュッ キイ ·サプスビシーズ♦プルガリクス (ハンセン社製) の混合カルチャー 5 Om 1を接種し、 42 °Cで 5時間培養した。
これとは別に乳脂肪 3. 0% (W/W) , 無脂乳固形分 9% (W/W) からなる 生乳 50 Lを 70°Cに加温し， 1 5 MP aの圧力で均質し， 90°Cで 1 0分間殺 菌し， 40°Cに冷却した。 この殺菌したベースに、 前記の通り前培養した本発明 のビフィ ドパクテリゥム♦ ロンガム FERM B P- 7787菌株のカルチャー 750m 1及びストレプトコッカス ·サーモフイノレスとラク トバチルス ·デルプ リュッキイ ·サプスビシーズ ·プルガリタスの混合カルチャー 300m lを接種 し、 50 Om 1容の容器に充填し、 密封し、 37°Cで 5時間培養し、 直ちに冷却 した。 得られた発酵乳は、 乳酸酸度 0. 8 1%、 PH4. 55であり、 ビフイ ド パクテリゥム · ロンガム FERM B P- 778 7菌株 2. 3 X 10 Vm 1、 ス トレプトコッカス .サーモフィルス 6. 8 X 1 0 m 1、 ラク トバチルス ·デル プリュッキイ ·サプスピシース、 ·プルガリクス 3. 4 X 1 0 Vm 1を含有してい た。 この発酵乳を 1 0 °Cで 14日間保存した時のビフィ ドパクテリゥム · 口ンガ ム FERM B P— 7787の菌数は 1. 5 X 1 08/m 1であり、 生残率は 65 %であった。 実施例 2
肉エキス 50 g、 酵母エキス 100 g、 ペプトン 100 g、 乳糖 200 g、 K 2HPO4 50 g、 KH2PO4 1 0 g、 シスチン 4 g及ぴ水 9. 5 Lの組成か らなる培地で、 37°C、 1 6時間、 前培養した本発明のビフィ ドパクテリゥム · ロンガム FERM B P— 7787菌株のシードカルチャー 50 Om 1を、 前記 の培地 10 Lに接種し、 37でで 1 6時間培養した。 更に、 90 で 30分殺菌 した前記培地と同一組成の培地 200 に、 前記培養液全量 （1 0. 5 L) を接 種し、 37 °Cで 1 6時間培養した。 培養後の生菌数は 3. 0 X 1 0 Vm 1であつ た。
次いで、 シャープレス型遠心分離機 （1 5000 r pm) により菌体を集め、 培地に同量の 90°C、 30分間殺菌の生理食塩水に再懸濁し、 前記と同様遠心分 離して再度集菌した。 得られた菌体を脱脂粉乳 10% (W/W) , 蔗糖 1% (W/ W)、 グルタミン酸ソーダ 1% (W/W) からなる溶液 （90°C30分殺菌） 20 Lに懸濁し、 常法に従って凍結乾燥し、 1. 6 X 1 01DZgの本菌を含む粉末約 2. 2 k gを得た。 実施例 3
乾燥殺菌した澱粉 14 k g及ぴ乳糖 6 k gに、 実施例 2で得られた本発明のビ フィドパクテリゥム · ロンガム FERM BP— 7787菌株を含む粉末 20 g を加えて均一に混合し、 1. 0 X 108Zgの本菌を含有する粉末の整腸剤約 20 k gを得た。 実施例 4
酵母エキス 0. 2% (W/W) , 脱脂粉乳 1 1% (W/W) からなる 90°C、 3 0分殺菌後の培地 100 Om 1に、 本発明のビフィ ドパクテリゥム * ロンガム FERM B P— 7787菌株を接種し、 37°C、 6時間培養した。 一方、 酵母 エキス 0. 6 % (W/W) 入り 10 % (W/W) 還元脱脂乳培地 1000 m 1を 90 °C、 30分間殺菌し、 ス トレプトコッカス · クレモリス (Streptococcus c remoris, ハンセン社製） のカルチャー 30m 1を接種し、 30°Cで 16時間培 養した。
これとは別に、 乳脂肪 0. 5% (W/W)、 無脂乳固形分 8. 5% (W/W)、 蔗糖 6. 5%からなる生乳 50 Lを 70°Cに加温し， 15MP aの圧力で均質化 処理し， 90°Cで 10分間殺菌し， 33°Cに冷却した。 この殺菌したベースに、 前記の通り前培養を行った本発明のビフィ ドバクテリゥム ·ロンガム FERM B P- 7787菌株のカルチャー 750m l及び前記の通り前培養を行ったス ト レプトコッカス .クレモリスのカルチャー 500m lを接種し、 30°Cで 16時 間培養し、 直ちに攪拌冷却した。 冷却発酵乳を 15MP aの圧力で均質化処理し、 200ml容量のガラス容器に充填し、 密封し、 ドリンクヨーグルトを得た。 得られた発酵乳は乳酸酸度 0. 70%、 pH4. 55であり、 ビフイ ドパクテ リ ウム ' ロンガム FERM BP— 7787菌株 1. 5 X 108Zm 1、 ス トレプ トコッカス ♦ タレモリス 9. 8 X 108Zm 1を含有していた。 この発酵乳を 10 °Cで 14日間保存した時のビフィドパクテリゥム · ロンガム FERM BP— 7 787菌株の菌数は 8. 5 X 10 Vm 1であり生残率は 57%であった。 産業上の利用の可能性
本発明のビフィドパクテリゥム ·ロンガムは、 乳性成分培地において高い発酵 性及ぴ生残性、 さらに人工胃液に対して強い耐性を有する。 したがって、 本発明 菌の培養物の調製は短時間で迅速にでき， 培養物又はその加工物の保存中におけ る生菌数の低下が少なく， 広い p H域の飲食物への利用が可能である。 さらに本 発明菌は、 胃酸耐性能を有し人又は動物の体内に摂取された場合， 高い確率で生 きて消化管 （腸管） に到達し、 生理機能を発揮することが考えられ， 産業上きわ めて有用である。

Claims

請求の範囲
1. 下記の菌学的性質を有するビフィドパクテリゥム ·ロンガム
(Biiidob acterium longum) 0
( 1 ) 乳性培地を p H 4. 6以下にする発酵性、
( 2 ) 乳性培地で p H 4. 4〜 4. 6に達した時に急冷して 10 ° ( 、 2週間保 持した時の生残率が 50%以上である、
(3) pH3. 0の人工胃液で 37 °C、 2時間保温した時の生残率が 10 %以上 である胃酸耐性能。
2. 菌株が、 ビフイ ドバタテリゥム 'ロンガム FERM BP— 7787である 請求項 1に記載のビフィ ドパクテリゥム♦ロンガム。
3. 請求項 1又は 2に記載のビフィ ドパクテリゥム . ロンガムを含有する菌末。
4. 請求項 1又は 2に記載のビフィ ドバクテリゥム ·ロンガムを含有する飲食品。
PCT/JP2002/012162 2001-12-07 2002-11-21 Bifidobacterium longum Ceased WO2003048343A1 (en)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE60210497T DE60210497T2 (de) 2001-12-07 2002-11-21 Bifidobacterium longum
JP2003549522A JP3875237B2 (ja) 2001-12-07 2002-11-21 ビフィドバクテリウム・ロンガム
EP02804353A EP1449915B1 (en) 2001-12-07 2002-11-21 Bifidobacterium longum
US10/709,674 US7427499B2 (en) 2001-12-07 2004-05-21 Bifidobacterium longum

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2001374327 2001-12-07
JP2001-374327 2001-12-07

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
US10/709,674 Continuation US7427499B2 (en) 2001-12-07 2004-05-21 Bifidobacterium longum

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2003048343A1 true WO2003048343A1 (en) 2003-06-12

Family

ID=19182902

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2002/012162 Ceased WO2003048343A1 (en) 2001-12-07 2002-11-21 Bifidobacterium longum

Country Status (8)

Country Link
US (1) US7427499B2 (ja)
EP (1) EP1449915B1 (ja)
JP (1) JP3875237B2 (ja)
CN (1) CN1274809C (ja)
AT (1) ATE322538T1 (ja)
DE (1) DE60210497T2 (ja)
DK (1) DK1449915T3 (ja)
WO (1) WO2003048343A1 (ja)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007007562A1 (ja) * 2005-07-08 2007-01-18 Morishita Jintan Co., Ltd. ビフィドバクテリウム属の微生物が産生する多糖
CN100413958C (zh) * 2004-12-29 2008-08-27 王敖喜 具有抗肠道致病菌和抗氧化特性的双歧杆菌及其用途
JP4772131B2 (ja) * 2007-02-13 2011-09-14 森永乳業株式会社 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
WO2011118765A1 (ja) * 2010-03-26 2011-09-29 森永乳業株式会社 生菌数の測定方法及び培地
JPWO2021166285A1 (ja) * 2020-02-18 2021-08-26
CN117551589A (zh) * 2024-01-10 2024-02-13 广州集妍化妆品科技有限公司 长双歧杆菌婴儿亚种的溶胞产物的应用
WO2025047884A1 (ja) * 2023-08-31 2025-03-06 森永乳業株式会社 細菌、組成物及び組成物の製造方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102604855B (zh) * 2011-12-15 2013-09-11 上海交通大学 一株长双歧杆菌sqs7-31及其制备方法和应用
CN105112333A (zh) * 2015-08-31 2015-12-02 江南大学 一种具有良好肠道定殖能力的长双歧杆菌及筛选方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58224685A (ja) * 1982-06-22 1983-12-27 Morinaga Milk Ind Co Ltd ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する新規微生物、その菌体の製造法および該微生物を含む組成物
US5711977A (en) * 1996-05-06 1998-01-27 Food Industry Research And Development Institute Bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method
US6306638B1 (en) * 1996-10-22 2001-10-23 Food Industry Research And Development Institute Mutant bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5283974A (en) 1976-01-01 1977-07-13 Yakult Honsha Kk Incubation mixture of milk containing living cell of bifidus strain and method of producing same
JP2922013B2 (ja) 1991-04-17 1999-07-19 雪印ローリー株式会社 耐酸性及び酸素耐性を有する新規ビフィズス菌
JP3749359B2 (ja) 1997-09-16 2006-02-22 雪印乳業株式会社 新規ビフィズス菌及びその利用
ID29150A (id) * 1999-01-15 2001-08-02 Entpr Ireland Cs Penggunaan lactobacillus salivarius

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58224685A (ja) * 1982-06-22 1983-12-27 Morinaga Milk Ind Co Ltd ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する新規微生物、その菌体の製造法および該微生物を含む組成物
US5711977A (en) * 1996-05-06 1998-01-27 Food Industry Research And Development Institute Bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method
US6306638B1 (en) * 1996-10-22 2001-10-23 Food Industry Research And Development Institute Mutant bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NORIO ISHIBASHI: "Biseibutsu to kagaku 2 bifiduskin oyobi sono kogyoteki riyo", CHEMICAL EDUCATION, vol. 48, no. 10, 2000, pages 660 - 663, XP002963494 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100413958C (zh) * 2004-12-29 2008-08-27 王敖喜 具有抗肠道致病菌和抗氧化特性的双歧杆菌及其用途
WO2007007562A1 (ja) * 2005-07-08 2007-01-18 Morishita Jintan Co., Ltd. ビフィドバクテリウム属の微生物が産生する多糖
US8022049B2 (en) 2005-07-08 2011-09-20 Morishita Jintan Co., Ltd. Polysaccharide produced by microorganism belonging to genus Bifidobacterium
JP4772131B2 (ja) * 2007-02-13 2011-09-14 森永乳業株式会社 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
JP5401558B2 (ja) * 2010-03-26 2014-01-29 森永乳業株式会社 生菌数の測定方法及び培地
CN102510901A (zh) * 2010-03-26 2012-06-20 森永乳业株式会社 活菌数的测定方法及培养基
WO2011118765A1 (ja) * 2010-03-26 2011-09-29 森永乳業株式会社 生菌数の測定方法及び培地
US8859226B2 (en) 2010-03-26 2014-10-14 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Measurement method for viable cell count, and culture medium
CN102510901B (zh) * 2010-03-26 2015-01-07 森永乳业株式会社 活菌数的测定方法及培养基
JPWO2021166285A1 (ja) * 2020-02-18 2021-08-26
WO2021166285A1 (ja) * 2020-02-18 2021-08-26 ＡｕＢ株式会社 新規ビフィドバクテリウム属細菌及びそれを含む組成物
JP6995411B2 (ja) 2020-02-18 2022-02-21 ＡｕＢ株式会社 新規ビフィドバクテリウム属細菌及びそれを含む組成物
WO2025047884A1 (ja) * 2023-08-31 2025-03-06 森永乳業株式会社 細菌、組成物及び組成物の製造方法
CN117551589A (zh) * 2024-01-10 2024-02-13 广州集妍化妆品科技有限公司 长双歧杆菌婴儿亚种的溶胞产物的应用
CN117551589B (zh) * 2024-01-10 2024-05-07 广州集妍化妆品科技有限公司 长双歧杆菌婴儿亚种的溶胞产物的应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP1449915A4 (en) 2005-01-19
CN1274809C (zh) 2006-09-13
DE60210497T2 (de) 2006-11-23
JP3875237B2 (ja) 2007-01-31
DK1449915T3 (da) 2006-08-14
DE60210497D1 (en) 2006-05-18
US20040202749A1 (en) 2004-10-14
US7427499B2 (en) 2008-09-23
JPWO2003048343A1 (ja) 2005-04-14
EP1449915B1 (en) 2006-04-05
CN1585820A (zh) 2005-02-23
EP1449915A1 (en) 2004-08-25
ATE322538T1 (de) 2006-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4862053B2 (ja) 新規乳酸菌
JP4772131B2 (ja) 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
JP3017687B2 (ja) ビフィズス菌及びその培養方法
JP6594911B2 (ja) 乳酸菌、該乳酸菌由来の自然免疫活性化剤、感染症予防治療剤及び飲食品
WO2019206754A1 (en) Composition and process for producing a fermented milk product comprising application of a lactose-deficient s. thermophilus strain, a lactose-deficient l. bulgaricus strain and a probioti _/ strain
JP5774517B2 (ja) ビフィドバクテリウム属細菌含有発酵食品の製造方法
JP4456160B2 (ja) 新規乳酸菌株及びその利用
TW200303723A (en) Bifidobacterium microbes and fermented food containing the same
JP3875237B2 (ja) ビフィドバクテリウム・ロンガム
CN102892299A (zh) 含有双歧杆菌属细菌的发酵食品的生产方法
JP4794592B2 (ja) 新規乳酸菌
Kim et al. Characterization of Bacillus polyfermenticus KJS-2 as a probiotic
JP5561642B2 (ja) ヨーグルト
JP4794593B2 (ja) 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
JP5351113B2 (ja) ビフィドバクテリウム属細菌含有発酵食品の製造方法
RU2816652C1 (ru) Штамм бактерий lacticaseibacillus paracasei subsp. paracasei 1338 вкм b-3753d для производства кисломолочных продуктов и в качестве пробиотика
NOIDA Astha Nigam1, Avnish Kumar2, Madhusudan HV1, and Neelam Bhola1
JP2019058139A (ja) 乳酸菌の生残性向上方法
HK1132299A (en) Novel lactic acid bacteria

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): CN JP US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE SK TR

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2003549522

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 20028222253

Country of ref document: CN

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2002804353

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2002804353

Country of ref document: EP

WWG Wipo information: grant in national office

Ref document number: 2002804353

Country of ref document: EP