WO2002085110A1 - Egg freezing preservation tool, and cylindrical member holding tool - Google Patents

Description

明細書 卵凍結保存用具および筒状部材保持器具 技術分野

本発明は、 哺乳動物の卵子、 胚などの卵を凍結保存する際に使用する 卵凍結保存用具に関する。 背景技術

哺乳動物胚の凍結保存は、 特定の系統や品種の遺伝資源の保存を可能 とする。 また、 絶滅の危機に瀕している動物種の維持にも有効である。 さらに、 ヒ 卜の不妊治療においても有用である。

哺乳動物胚の凍結保存方法としては、 特開 2 0 0 0— 1 8 9 1 5 5公 報において、 哺乳動物胚または卵子を滅菌処理した凍結ストロー、 凍結 パイアルまたは凍結チューブ等の凍結保存用容器の内面に、 これらの胚 または卵子を包被するに充分な最少量のガラス化液で貼り付け、 この凍 結保存用容器を密封し、 そしてこの容器を液体窒素に接触させて急速に 冷却することが提案されている。 そして、 融解方法では、 前記の方法で 保存した凍結保存用容器を前記液体窒素から取リ出し、 容器の一端部を 開口し、 この容器内に 3 3〜 3 9 °Cの希釈液を直接注入し、 胚または卵 子の凍結を融解希釈するものである。 この方法によれば、 哺乳動物胚ま たは卵子をウィルスや細菌による感染のおそれがなく高い生存率で保存 および融解希釈することのできるという優れた効果を備えている。

しかし、 凍結ストロー、 凍結バイアルまたは凍結チューブ等の凍結保 存用容器の内面に、 胚または卵子などの卵を包被するに充分な最少量の ガラス化液で貼り付ける作業が必ずしも容易ではなかった。

そこで、 本発明の目的は、 卵の凍結保存作業を確実かつ容易に行うこ とができる卵凍結保存用具を提供するものである。 発明の開示

本発明は、 耐寒性材料により形成された本体部と、 該本体部の一端に 取リ付けられ、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐性材料により形成され た卵付着保持用ストリップと、 該卵付着保持用ストリップを被包可能に 前記本体部に着脱自在に取リ付けられる一端が封鎖され、 かつ耐寒性材 料によリ形成された筒状部材とからなる卵凍結保存用具であ ¾。

また、 本発明は、 先端側に挟持部を備え、 後端側に把持部を備える 2 つの保持部材からなリ、 該 2つの保持部材の前記挟持部と前記把持部間 において回動自在に軸支された鋏鉗子状の筒状部材保持器具であって、 前記 2つの保持部材の向かい合う挟持部には、 上記筒状部材を実質的に 潰すことなく保持するために向かい合う一組の凹部が形成されている筒 状部材保持器具である。 図面の簡単な説明

図 1 は、 本発明の実施例の卵凍結保存用具の正面図である。

図 2は、 図 1 に示した卵凍結用保存用具の筒状部材を本体部材ょリ離 脱させた状態の正面図である。

図 3は、 図 2に示した卵凍結用保存用具の本体部材の側面図である。 図 4は、 図 1 に示した卵凍結保存用具の本体部材の先端部分および筒 状部材の拡大正面図である。

図 5は、 図 1 に示した卵凍結保存用具の本体部材の先端部分および筒 状部材の拡大断面図である。

図 6は、 本発明の筒状部材保持器具の正面図である。

図 7は、 図 6に示した筒状部材保持器具の解放状態の先端部分拡大図 である。

図 8は、 本発明の筒状部材保持器具の保持状態維持機構を説明するた めの説明図である。 発明を実施するための最良の形態

本発明の卵凍結保存用具を図面に示す実施例を用いて説明する。

本発明の卵凍結保存用具 1 は、 耐寒性材料により形成された本体部 2 と、 本体部 2の一端に取り付けられ、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐 性材料により形成された卵付着保持用ス トリップ 3と、 卵付着保持用ス 卜リップ 3を被包可能に本体部 2に着脱自在に取り付けられる一端が封 鎖され、 かつ耐寒性材料によリ形成された筒状部材 4とからなるもので ある。

そして、 前記本体部は、 細長い平板状本体部であることが好ましい。 また、 前記卵付着保持用ストリップは、 細長い平坦フイルム状の卵付着 保持用ストリップであることが好ましい。 また、 前記筒状部材は、 一端 側内部に挿入された綿状体により通気可能に封止されていることが好ま しい。 さらに、 前記本体部は、 前記卵付着保持用ストリップの一端を保 持するとともに前記筒状部材の他端内に侵入し係合する円柱状部を備え ていることが好ましい。 また、 前記筒状部材は、 他端部がテーパー状に 拡径するテーパー部となっていることが好ましい。

本発明の卵凍結保存用具は、 卵ガラス化保存用具、 卵子または胚凍結 保存用具、 卵子または胚ガラス化保存用具と言い換えることができる。 本発明の卵凍結保存用具は、 卵凍結保存用具本体部材 1 0と、 これに 着脱自在に取り付けられる筒状部材 4とからなる。 なお、 筒状部材 4を 設けず、 卵凍結保存用具本体部材 1 0を単独としても卵凍結保存用具と して使用することもできる。

卵凍結保存用具本体部材 1 0は、 耐寒性材料により形成された本体部 2と、 本体部 2の一端に取り付けられ、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素 耐性材料により形成された卵付着保持用ス トリップ 3とからなる。

この実施例の卵凍結保存用具本体部材 1 0では、 本体部 2は、 細長い 平板状本体部となっている。 本体部の長さと しては、 5 0〜 2 0 0 m m 程度が好適である。 また、 平板状本体部の場合の幅としては、 3〜 1 0 m m程度が好適であり、 厚さは、 1 〜 3 m m程度が好適である。 そして、 本体部材 1 0は、 卵付着保持用ス トリ ップ 3の一端を保持するとともに 筒状部材 4の他端内に侵入し係合する円柱状部 5を備えている。 この円 柱状部は、 先端に向かってテーパー状に若干縮径している。 円柱状部の 外径としては、 0 . 5〜 3 m m程度が好適である。 そして、 円柱状部 5 の先端には、 図 5に示すように、 卵付着保持用ス トリップ 3の一端を収 納するための軸方向に延びる凹部が形成されている。

本体部 2は、 ポリエステル （例えば、 ポリエチレンテレフタ レート、 ポリブチレンテレフタレート） 、 ポリオレフイン （例えば、 ポリエチレ ン、 超高分子量ポリエチレン、 ポリプロピレン、 エチレン—プロピレン 共重合体、 エチレン一酢酸ビニル共重合体） 、 スチレン系樹脂 （例えば, ポリスチレン、 メタクリレー卜一スチレン共重合体、 メタクリレートー ブチレン一スチレン共重合体） 、 ポリアミ ド （例えば、 6ナイロン， 6 6ナイロン） 、 ポリサルホン、 フッ素樹脂、 ポリイミ ド等の耐寒性樹脂 が使用され、 特に、 液体窒素の温度に耐え得るものが好ましい。

卵付着保持用ス卜リップ 3は、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐性材 料により形成されており、 この実施例では、 細長い平坦フイルム状のも のとなつている。 ス トリップ 3は、 卵付着作業を容易にするために、 可 撓性かつ無色透明な平坦フイルム状のものが用いられている。 卵付着保 持用ストリップ 3の露出する部分の長さは、 1 0〜 3 0 m m程度、 幅 0 . 5〜 2 . O m m程度、 厚さが 0 . 0 1 ~ 0 . 4 m m程度のものが用いら れる。

そして、 卵付着保持用ス トリップ 3は、 他端部 （基端部） が、 上述し た本体部 2の凹部に収納され、 接着剤により本体部 2に固着されている。 卵付着保持用ストリップ 3の形成材料としては、 例えば、 3—フッ化 ポリエチレン、 低密度ポリエチレン、 中密度ポリエチレン、 高密度ポリ エチレン、 ポリカーボネート、 ナイロン、 ポリスルホン、 ポリエステル、 ポリスチレン、 ポリイミ ド、 超高分子量ポリエチレン、 エチレン一酢酸 ビニル共重合体などの合成樹脂からなるフィルムあるいはそれらの積層 体が挙げられる。 特に、 液体窒素耐性材料、 言い換えれば、 液体窒素に 接触しても脆化しないものが使用される。

筒状部材 4は、 卵付着保持用ス卜リップ 3を被包可能に本体部 2に着 脱自在に取り付けられる一端が封鎖され、 かつ耐寒性材料により形成さ れたものである。 特に、 この実施例の筒状部材 4は、 一端側内部に挿入 された綿状体 1 2により通気可能に封止されており、 他端部がテーパー 状に拡径するテーパー部となっている。 そして、 筒状部材 4内に収納さ れた綿状体 1 2は接着剤 1 3により固定されている。

筒状部材 4は、 卵付着保持用ストリップ 3に接触することなく被包で きる内径および長さを備えている。 そして、 筒状部材 4がテーパー部を 備えることにより、 ストリップ 3の筒状部材内への挿入を容易にしてい るとともに、 本体部 2の円柱状部分の筒状部材内への侵入も容易なもの としている。

筒状部材 4の形成材料としては、 例えば、 3—フッ化ポリエチレン、 低密度ポリエチレン、 中密度ポリエチレン、 高密度ポリエチレン、 ポリ カーボネート、 ナイロン、 ポリスルホン、 ポリエステル、 ポリスチレン、 ポリイミ ド、 超高分子量ポリエチレン、 エチレン一酢酸ビニル共重合体 などの合成樹脂からなるフィルムあるいはそれらの積層体が挙げられる。 特に、 液体窒素耐性材料、 言い換えれば、 液体窒素に接触しても脆化し ないものが好ましい。 .

次に、 本発明の筒状部材保持器具について図面に示した実施例を用い て説明する。

図 6は、 本発明の筒状部材保持器具の正面図である。 図 7は、 図 6に 示した筒状部材保持器具の解放状態の先端部分拡大図である。

本発明の筒状部材保持器具 2 0は、 先端側に挟持部 2 5， 2 6を備え、 後端側に把持部 2 3， 2 4を備える 2つの保持部材 2 1 ， 2 2からなリ、 2つの保持部材 2 1 ， 2 2の挟持部 2 5， 2 6と把持部 2 3， 2 4間に おいて回動自在に軸支された鋏鉗子状の筒状部材保持器具である。 そし て、 2つの保持部材 2 1 , 2 2の向かい合う挟持部 2 5， 2 6には、 細 径の筒状部材を実質的に潰すことなく保持するための向かい合う一組の 凹部 3 1 , 32が形成されている。

そして、 前記筒状部材保持器具は、 上記の卵凍結保存用具の前記筒状 部材を保持するためのものである。 そして、 前記筒状部材保持器具は、 前記筒状部材を保持した状態を維持するための 2つの保持部材に設けら れた保持状態維持機構を備えていることが好ましい。

この筒状部材保持器具は、 上述した卵凍結保存用具の筒状部材 4を保 持するために有効に使用される。

本発明の筒状部材保持器具 20は、 2つの保持部材 2 1， 22からな り、 それらは、 ほぼ左右対称なものとなっている。 保持部材 2 1 は、 先 端側に挟持部 25を後端側に把持部 23を備えている。 同様に、 保持部 材 22は、 先端側に挟持部 26を後端側に把持部 24を備えている。 挟 持部 25， 26には、 向かい合う刃部 27， 28と、 挟持部 25， 26 の先端部に設けられた向かい合う一対の凹部 3 1 , 32を備えている。 また、 2つの保持部材 21， 22は、 挟持部 25， 26と把持部 23， 24間において、 軸 29により回動自在に軸支されている。 そして、 凹 部 3 1， 32は、 筒状部材保持器具 20の上記凹部 3 1， 32部分にお いて、 筒状部材 4を挟持したとき、 細径の筒状部材を実質的に潰すこと なく保持できる大きさに形成されている。 具体的には、 凹部 3 1， 32 により構成される円状開口部の内径が保持する筒状部材の外径よリ若干 小さくなるように形成されている。

さらに、 筒状部材保持器具は、 図 6および図 8に示すように、 筒状部 材を保持した状態を維持するための 2つの保持部材 21， 22に設けら れた保持状態維持機構 35， 36を備えている。 具体的には、 2つの保 持部材 2 1， 22の把持部 23, 24付近より他方の保持部材方向に延 びる平板状突起部 3 5， 3 6を備えており、 この平板状突起部の接触す る内面には、 図 8に示すように、 断面鋸刃状の段階的係合可能部が形成 されている。 このため、 筒状部材保持器具 2 0の凹部部分において筒状 部材を挟持した状態において、 保持部材 2 1， 2 2の把持部 2 3， 2 4 を近接する方向に押すと、 保持状態維持機構 3 5， 3 6の断面鋸刃状部 分が係合し、 その状態を維持するようになっている。 このため、 この筒 状部材保持器具 2 0では、 筒状部材を保持状態の維持に特別な力を加え ている必要がなく、 筒状部材 4をストリップ 3を被包し、 かつ、 本体部 2に取り付ける操作が容易である。 また、 保持状態維持機構 3 5， 3 6 の係合は、 横方向、 言い換えれば、 図 8の上下方向に、 2つの保持部材 2 1， 2 2を広げることにより解除することができる。

筒状部材保持器具は、 ステンレス鋼、 チタン合金などの金属により作 製される。

次に、 本発明の卵凍結保存用具 1 および筒状部材保持器具 2 0の使用 方法について説明する。

この説明では、 卵子を凍結保存する場合を例に取り説明する。

まず、 ピペッ トの先端に卵子を採取し、 卵子の細胞内液を平衡液に置 換する作業を行い、 さらに、 細胞外液をガラス化液に置換する作業を行 う。 そして、 顕微鏡下において、 本発明の卵凍結保存用具 1の卵付着保 持用ストリップ 3の先端部に卵子を少量のガラス化液とともに付着させ、 卵子が付着したストリップ部分をあらかじめ準備しておいた液体窒素に 浸潰し凍結 （ガラス化） させる。 そして、 あらかじめ準備してある筒状 部材 4を保持しその状態が維持されている筒状部材保持器具を用いて、 筒状部材 4を本体部材 1 0に取り付け、 筒状部材保持器具を取り外した 後、 収納容器 （ケーン） 内に、 ガラス化した卵子を付着保持する卵凍結 保存用具を収納した後、 収納容器を液体窒素タンク内に入れ保存する。 産業上の利用可能性

本発明の卵凍結保存用具は、 耐寒性材料によリ形成された本体部と、 該本体部の一端に取リ付けられ、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐性材 料により形成された卵付着保持用ストリップと、 該卵付着保持用ストリ ップを被包可能に前記本体部に着脱自在に取り付けられる一端が封鎖さ れ、 かつ耐寒性材料により形成された筒状部材とからなるものである。 卵付着保持用ストリップを備えることにより、 卵子もしくは胚などの 卵をガラス化液と共に付着保持することが容易であり、 さらに、 卵の液 体窒素への浸漬作業も容易に行うことができる。

Claims

請求の範囲

1 . 耐寒性材料により形成された本体部と、 該本体部の一端に取り付け られ、 可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐性材料により形成された卵付着 保持用ストリップと、 該卵付着保持用ストリップを被包可能に前記本体 部に着脱自在に取リ付けられる一端が封鎖され、 かつ耐寒性材料によリ 形成された筒状部材とからなることを特徴とする卵凍結保存用具。

2 . 前記本体部は、 細長い平板状本体部である請求の範囲第 1項に記載 の卵凍結保存用具。

3 . 前記卵付着保持用ストリップは、 細長い平坦フィルム状の卵付着保 持用ス卜リップである請求の範囲第 1 項または第 2項に記載の卵凍結保 存用具。

4 . 前記筒状部材は、 一端側内部に挿入された綿状体により通気可能に 封止されている請求の範囲第 1項ないし第 3項のいずれかに記載の卵凍 結保存用具。

5 . 前記本体部は、 前記卵付着保持用ストリップの一端を保持するとと もに前記筒状部材の他端内に侵入し係合する円柱状部を備えている請求 の範囲第 1項ないし第 4項のいずれかに記載の卵凍結保存用具。

6 . 前記筒状部材は、 他端部がテーパー状に拡径するテーパー部となつ ている請求の範囲第 1項ないし第 5項のいずれかに記載の卵凍結保存用 具。

7 . 先端側に挟持部を備え、 後端側に把持部を備える 2つの保持部材か らなり、 該 2つの保持部材の前記挟持部と前記把持部間において回動自 在に軸支された鋏鉗子状の筒状部材保持器具であって、 前記 2つの保持 部材の向かい合う挟持部には、 細径の前記請求項 1 ないし 6のいずれか に記載の卵凍結保存用具の前記筒状部材を実質的に潰すことなく保持す るために向かい合う一組の凹部が形成されていることを特徴とする筒状 部材保持器具。

8 . 前記筒状部材保持器具は、 前記請求の範囲第 1項ないし第 6項のい ずれかに記載の卵凍結保存用具の前記筒状部材を保持するためのもので ある請求の範囲第 7項に記載の筒状部材保持器具。

9 . 前記筒状部材保持器具は、 前記筒状部材を保持した状態を維持する ための保持状態維持機構を備えている請求の範囲第 7項または第 8項に 記載の筒状部材保持器具。