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WO2000061574A2 - Verfahren zur herstellung von thiophenyl-amidinen - Google Patents

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WO2000061574A2
WO2000061574A2 PCT/EP2000/003018 EP0003018W WO0061574A2 WO 2000061574 A2 WO2000061574 A2 WO 2000061574A2 EP 0003018 W EP0003018 W EP 0003018W WO 0061574 A2 WO0061574 A2 WO 0061574A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
substituted
amidines
formula
thienylmethylamide
preparation
Prior art date
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Application number
PCT/EP2000/003018
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English (en)
French (fr)
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WO2000061574A3 (de
Inventor
Thomas Zierke
Helmut Mack
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BASF SE
Original Assignee
BASF SE
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Publication date
Application filed by BASF SE filed Critical BASF SE
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Priority to AU35590/00A priority patent/AU3559000A/en
Priority to CA002369267A priority patent/CA2369267A1/en
Priority to JP2000610848A priority patent/JP2002541252A/ja
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Publication of WO2000061574A3 publication Critical patent/WO2000061574A3/de
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Ceased legal-status Critical Current

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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
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    • C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention describes a new process for the preparation of amidines which are not substituted on nitrogen and their salts with inorganic or organic acids, characterized in that corresponding carboxamide amides are reacted with Zn in the presence of carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid.
  • amidines which are important structural elements in a number of biologically active molecules such as fibrinogen antagonists (L. Alig et al., J. Med. Chem. 1992, 32, 4407), thrombin inhibitors (H. Vieweg et al. ' , Pharmazie 1982, 37, 178) or factor Xa inhibitors (T. Nagahara et al., J. Med. Chem. 1993, 36, 1811) already exist, a large number of synthetic methods already exist.
  • Pinner reaction is the conversion of nitriles via thioamides and S-alkylthioimino esters to amidines (H. Bredereck, Chem. Ber. 1957, 90, 1837). This method is widely used when it comes to building up the amidine functionality in complex compounds such as synthetic thrombin inhibitors (B. Voigt, Pharmazie, 1983, 38, 835). However, the method can only be used for the production of small laboratory quantities.
  • amidines consists in the hydrogenolytic cleavage of the NO bond of carboxylic acid amidoximes (H.Jendralla et al., Tetrahedron 1995, 51, 12047; BD Judkins, Synth. Commun. 1996, 26, 4351) with hydrogen and 5 palladium / carbon catalysts. This method cannot be used for the synthesis of amidines, which may contain functionalities which can be hydrogenated, such as CC double bonds, benzyl-substituted 0 or N atoms, etc.
  • integrin receptor antagonists such as fibrinogen receptor antagonists, or serine protease inhibitors, there in particular thrombin inhibitors, factor Xa inhibitors, factor villa inhibitors, factor IXa inhibitors , 5 urokinase inhibitors, tryplase inhibitors, complement inhibitors (for example Ci s and C ⁇ r ), which contain substituted thienylamidines as structural elements:
  • One of the objects of the invention was to find a method which also enables the preparation of substituted amidines in a simple manner, with good yields and on an industrial scale.
  • Aryl and He arylamidine syntheses are of particular interest, in particular those of thienylamidines.
  • the invention relates to a new generally applicable process for the preparation of amidines which are not substituted on nitrogen and their salts with inorganic or organic acids, characterized in that a corresponding carboxamide amide oxime with Zn in the presence of carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid, preferably acetic acid, implements.
  • the new process can also be used to prepare substituted thienylamidines, preferably those in which the amidine function is either in the 2-position or 3-position and another substituent in one of the three other positions with respect to sulfur, the substituent in turn via a C, N or O atom is bonded to the thiophene radical.
  • amidines of the formula I can be prepared by the process according to the invention
  • Ci-C ß- alkyl-CO with alkyl meaning straight-chain or branched alkyl such as methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl or tert-butyl,
  • Aryl such as phenyl, naphthyl, or heteroaryl such as pyridyl, thienyl, furyl, benzothiazolyl, benzimidazolyl, where these aromatics can optionally be substituted one or more times.
  • substituents are Ci-C ⁇ - alkyl, Ci-Cg-alkoxy, halogen, amino, mono- or di-Ci-C ⁇ - alkylamino.
  • an ⁇ -amino acid fragment in the R or S configuration the N atom of which is protected or unprotected in the usual manner as tert-butoxycarbonyl or benzyloxycarbony derivative, preferably the amino acid fragments 3, 4-dehydroproline, 4,5-dehydro - pipecolic acid, azetidine, proline, pipecolic acid, a dipeptide fragment, optionally substituted one or more times at the N-terminus, consisting of the natural amino acids, the corresponding D-amino acids or the very similar amino acids in the L or D form, preferably combinations of the amino acids 3, 4-dehydroproline , 4,5-dehydropipecolic acid, azetidine, proline, pipecolic acid, phenylalanine, phenylglycine, cyclohexylalanine, cyclohexylglycine, alanine, valine, glycine, particularly preferably combinations of the amino acids azetidine, proline, 3,
  • Carboxylic acid amidoximes of the formula II are used for this
  • n and R have the same meaning as in formula I, with Zn in the presence of carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid, preferably acetic acid, to give the corresponding amidines of the formula I.
  • carboxylic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid, preferably acetic acid
  • the carboxylic acid amidoximes required to carry out the process according to the invention are prepared by known methods (F. Eloy et al., Chem. Rev. 1962, 62, 155) by reacting the corresponding nitriles with hydroxylamine or preferably its salts, particularly preferably hydroxylamine. Hydrochloride.
  • the corresponding hydroxylamine derivative is preferably used in a 1 to 3-fold excess.
  • the reaction is carried out in an inert solvent.
  • Preferred solvents are alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, iso-propanol or n-butanol, possibly in a mixture with methylene chloride, toluene or water.
  • salts of hydroxylamine are used, at least one equivalent of a stronger base than hydroxylamine itself must be added to release the hydroxylamine.
  • the base can also be used in excess, based on the hydroxylamine salt.
  • inorganic bases such as sodium carbonate (F. Tiemann, Chem. Ber. 17, 1884, 126), metal alcoholates such as sodium methylate or potassium tert-butoxide (BD Judkins, Synth. Commun. 1996, 26, 4351) are particularly suitable as bases but preferably also tert.
  • Amines such as triethylamine (H. Jendralla et al., Tetrahedron 1995, 51, 12047) or diisopropylethylamine in
  • the reaction takes place at room temperature, but to accelerate it can also be heated to the boiling point of the reaction solution, but usually not higher than 80 ° C.
  • the amidines are preferably synthesized by the process according to the invention by converting the carboxamide oximes into an acetic acid solution, where they are reacted by adding metallic zinc, which is usually used as a fine powder.
  • the reaction is usually carried out in a pure acetic acid solution. However, it is also possible to carry out the reaction in, for example, propionic acid solution or in a solvent mixture.
  • alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol and n-butanol are suitable.
  • the zinc is used in excess of up to 10 equivalents.
  • the reaction can be carried out in a temperature range from -10 ° C to 70 ° C, a temperature range between 20 and 50 ° C is preferred.
  • the conversion can be checked by means of thin layer chromatography. A reaction time of 2 to 5 hours is usual. But it is also possible to stir at 20 ° C for a long time.
  • Refurbishing is easy. Excess zinc and the resulting zinc salts are filtered off and concentrated.
  • the reaction products can either be isolated and characterized at this stage or can be directly implemented further.
  • any protective groups such as tert-butyl ester or N-tert. -Butoxycarbonyl groups can advantageously be carried out after the solid Zn residues have been separated off without intermediate isolation.
  • the CHC1 2 phase was washed with water, which was adjusted to pH 12 with sodium hydroxide solution. After the phase separation, the water phase was re-extracted with CH 2 C1 2 . The combined CH 2 C1 2 phases were washed neutral and concentrated. Weight: 2.4 g solidified foam I3c-NMR (DMSO; ppm): 158.8 (broadened, amidine)

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Abstract

Verfahren zur Herstellung von am Stickstoff nicht substituierten Amidinen und deren Salzen mit anorganischen oder organischen Säuren, wobei entsprechende Carbonsäureamidoxime mit Zn in Gegenwart von Carbonsäuren umgesetzt werden.

Description

Verfahren zur Herstellung von Amidinen
Beschreibung
Die vorliegende Erfindung beschreibt ein neues Verfahren zur Herstellung von am Stickstoff nicht substituierten Amidinen und deren Salzen mit anorganischen oder organischen Säuren, dadurch gekennzeichnet, daß man entsprechende Carbonsäureamidoxime mit Zn in Gegenwart von Carbonsäuren wie Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure umsetzt.
Zur Herstellung von Amidinen, die als bedeutendes Strukturelement in einer Reihe biologisch aktiver Moleküle wie Fibrinogen-Antagonisten (L. Alig et al . , J. Med. Chem.1992, 32, 4407), Thrombin-Inhibitoren (H. Vieweg et al.', Pharmazie 1982, 37, 178) oder auch Faktor Xa-Inhibitoren (T. Nagahara et al., J. Med. Chem. 1993, 36, 1811) vorkommen, existieren bereits eine Vielzahl von Synthesemethoden.
Eine der bewährtesten Methoden ist die zweistufige, als Pinner- Reaktion (A. Pinner, Chem. Ber. 1885, 18, 2845) bekannte, Transformation von Nitrilen über Iminoester in Amidine. In der Regel benutzt man große Überschüsse an Chlorwasserstoff in Alkoholen zur Bildung der Iminoester. Die Reaktionszeiten sind oft sehr lang (J. B. Medwid, J. Med. Chem. 1990, 33, 1237). Durch begleitende Abspaltung säurelabiler Schutzgruppen oder Umesterungs- reaktionen eignet sich die Methode nicht zur Herstellung komplexerer Moleküle. Die alternative basenkatalysierte Herstellung von Iminoestern (F.C. Schaefer et al . , J. Org. Chem., 26, 412, 1961) bleibt beschränkt auf elektronenarme Nitrile.
Eine Variante der Pinner-Reaktion ist die Umsetzung von Nitrilen über Thioamide und S-Alkylthioiminoester zu Amidine (H. Bredereck, Chem. Ber. 1957, 90, 1837). Diese Methode findet breite Anwendung, wenn es darum geht, die Amidinfunktionalität in komplexen Verbindungen wie den synthetischen Thrombin-Inhibitoren aufzubauen (B. Voigt, Pharmazie, 1983, 38, 835). Allerdings kann die Methode nur für die Herstellung kleiner Labormengen Ver- wendung finden. Die eingesetzten Chemikalien, Schwefelwasserstoff (übelriechend und hochtoxisch), Methyljodid oder Dirnethylsulfat (karzinogene Alkylierungsmittel) sowie das als Begleitprodukt gebildete Methylmercaptan (übelriechend und hochtoxisch) erfordern umfangreiche Sicherheitsmaßnahmen und Entsorgungsmöglichkeiten, die nur in Spezialanlagen zu gewährleisten sind. Zudem müssen die Produkte in aller Regel chromatographisch gereinigt werden. Eine weitere Möglichkeit zur Herstellung von Amidinen besteht in der hydrogenolytischen Spaltung der N-O-Bindung von Carbonsäure- amidoximen (H.Jendralla et al . , Tetrahedron 1995, 51, 12047; B.D. Judkins, Synth. Commun. 1996, 26, 4351) mit Wasserstoff und 5 Palladium/Kohle-Katalysatoren. Für die Synthese von Amidinen, die im Molekül hydrierfähige Funktionalitäten wie CC-Doppelbindungen, benzylsubstituierte 0- bzw. N-Atome etc. enthalten können, ist diese Methode nicht einsetzbar.
0 In letzter Zeit wurden eine Reihe von synthetischen Arzneimitteln, wie z.B. Integrin-Rezeptor-Antagonisten, dort insbesondere Fibrinogen-Rezeptor-Antagonisten, oder Serinprotease- inhibitoren, dort insbesondere Thrombininhibitoren, Faktor Xa- Inhibitoren, Faktor Villa-Inhibitoren, Faktor IXa-Inhibitoren, 5 Urokinaseinhibitoren, Tryplaseinhibitoren, Complementinhibitoren (z.B. Cis und Cιr) beschrieben, die als Strukturelement substituierte Thienylamidine beinhalten: Faktor Xa-Inhibitoren: RPR 120844 (Thromb. Haemostasis 81, No 1, 157-160, (1999)); Urokinaseinhibitoren: (Fujisawa, WO 9811089); Thrombininhibitoren: 0 Eli Lilly WO95/23609 (Bsp. 65), BASF, WO 98/06741 (Bsp. 1-9 etc) , Boehringer Ingelheim DE 19754490 (Bsp. 98-103 etc)). Die un- substituierten 2- bzw. 3-Thiophencarboxamidine konnten nach der oben beschriebenen Pinner-Reaktion in guten Ausbeuten hergestellt werden (S. Gronowitz, Acta Chem. Scand B 31, 1977, 771).
25
Die durch die o.g. Patentanmeldungen offenbarten komplex substituierten Thienylamidine wurden im allgemeinen über die oben beschriebene Thioamid-Route in kleinen Mengen zugänglich gemacht. Ein befriedigender Zugang zur Herstellung größerer Mengen
30 dieser Verbindungen ist angesichts der erwähnten Nachteile dieser Methode bislang nicht beschrieben. Auch die katalytische Hydrierung von entsprechenden Carbonsäureamidoximen kommt wegen der allgemein bekannten Eigenschaft von schwefelhaltigen Verbindungen, Hydrierkatalysatoren zu vergiften, nicht in Betracht
35 (s. R. Schröter, Houben-Weyl 11/1, S. 350 u. W.D. Rudolf Houben- Weyl E6a, S.492) .
Die einfache Addition von Ammoniak unter Druck in Gegenwart von Ammoniumsalzen (F.C. Schaefer et al . , J. Org. Chem., 27, 1255, 40 1962) führt bei Thiophencarbonitrilen nur zu schlechten Umsätzen.
Der Erfindung lag unter anderem die Aufgabe zugrunde, eine Methode zu finden, die auch die Herstellung von substituierten Amidinen in einfacher Art und Weise, mit guten Ausbeuten und im 45 technischen Maßstab ermöglicht. Besonders interessieren Aryl- und He arylamidinsynthesen, insbesondere solche von Thienylamidinen. Gegenstand der Erfindung ist ein neues allgemein anwendbares Verfahren zur Herstellung von am Stickstoff nicht substituierten Amidinen und deren Salzen mit anorganischen oder organischen Säuren, dadurch gekennzeichnet, daß man ein entsprechendes Carbonsäureamidoxim mit Zn in Gegenwart von Carbonsäuren wie Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure, bevorzugt Essigsäure, umsetzt.
Nach dem neuen Verfahren lassen sich auch substituierte Thienyl- amidine, bevorzugt solche, in denen die Amidinfunktion entweder in der 2-Position oder 3-Position und ein weiterer Substituent in einer der drei anderen Positionen zum Schwefel steht, herstellen, wobei der Substituent seinerseits über ein C-, N- oder O-Atom an den Thiophenrest gebunden ist.
Insbesondere lassen sich nach dem erfindungsgemäßen Verfahren gemäß Anspruch 1 Amidine der Formel I
Figure imgf000005_0001
worin n = 1-3 sein und R die folgenden Bedeutungen haben kann
Ci-Cß-Alkyl-CO, mit Alkyl in der Bedeutung geradkettig oder verzweigtes Alkyl wie Methyl-, Ethyl, n-Propyl, iso-Propyl, n-Butyl oder tert.-Butyl,
Cι-C6-Alkoxy-CO, mit Alkoxy in der Bedeutung Methoxy-, Ethoxy, n-Propoxy, iso-Propoxy, n-Butoxy, tert.-Butoxy,
Benzyloxy,
Aryl wie Phenyl, Naphthyl, oder Heteroaryl wie Pyridyl, Thienyl, Furyl, Benzothiazolyl, Benzimidazolyl, wobei diese Aromaten gegebenenfalls weiter ein oder mehrfach substituiert sein können. Beispiele für Substituenten sind Ci-Cδ-Alkyl, Ci-Cg-Alkoxy, Halogen, Amino, mono- oder di-Ci-Cδ-Alkylamino.
ein α-Aminosäurefragment in der R- oder S-Konfiguration, deren N-Atom in der üblichen Weise als tert-Butoxycarbonyl oder Benzyl- oxycarbonyderivat geschützt oder ungeschützt vorliegt, vorzugs- weise die Aminosäurefragmente 3 , 4-Dehydroprolin, 4,5-Dehydro- pipecolinsäure, Azetidin, Prolin, Pipecolinsäure, ein, gegebenenfalls am N-Terminus ein oder mehrfach substituiertes Dipeptidfragment, bestehend aus den natürlichen Aminosäuren, den entsprechenden D-Aminosäuren oder den natürlichen Aminosäuren sehr ähnlichen Aminosäuren in der L- oder D-Form, vorzugsweise Kombinationen aus den Aminosäuren 3 , 4-Dehydroprolin, 4,5-Dehydro- pipecolinsäure, Azetidin, Prolin, Pipecolinsäure, Phenylalanin, Phenylglycin, Cyclohexylalanin, Cyclohexylglycin, Alanin, Valin, Glycin, besonders bevorzugt Kombinationen aus den Aminosäuren Azetidin, Prolin, 3 , 4-Dehydroprolin, Cyclohexylalanin, Cylohexyl- glycin, Phenylglycin und Phenylalanin,
weitere Reste für R sind in den publizierten Integrinrezeptor- Antagonisten und Serinproteaseinhibitoren Anmeldungen angegeben, wobei R jeweils dem Molekülfragment entspricht, das an dem heterocyclischen alkylaminosubstituierten Amidinrest hängt,
herstellen.
Dazu setzt man Carbonsäureamidoxime der Formel II
Figure imgf000006_0001
in denen n und R die gleiche Bedeutung haben wie in Formel I, mit Zn in Gegenwart von Carbonsäuren wie Ameisensäure, Essigsäure, Propionsäure, bevorzugt Essigsäure, zu den entsprechenden Amidinen der Formel I um.
Verbindungen der Formel I können ein oder mehrere Asymmetriezentren enthalten. Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren können sowohl reine Enantiomere bzw. Diastereomere als auch Mischung der Enantiomere bzw. Diastereomere hergestellt werden. Die
Konfiguration der Asymetriezentren bleibt bei der Reaktion nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhalten.
Das Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I eröffnet somit einen einfachen Zugang zu Thrombin-Inhibitoren der WO 98/06741, dort repräsentiert durch die allgemeine Formel III
Figure imgf000006_0002
mit D in der Bedeutung
Figure imgf000007_0001
Die Strukturelemente A, B, E in den Bedeutungen der WO 98/06741 entsprechen besonders bevorzugten Verbindungen der Formel I, in der die Einheit A-B-E durch den Rest R repräsentiert wird.
Die Herstellung der zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens benötigten Carbonsäureamidoxime erfolgt nach bekannten Methoden (F. Eloy et al . , Chem. Rev. 1962, 62, 155) durch Umsetzung der entsprechenden Nitrile mit Hydroxylamin oder vorzugs- weise seiner Salze, besonders bevorzugt Hydroxylamin-Hydrochlor- id. Dabei wird das entsprechende Hydroxylaminderivat bevorzugt im 1- bis 3fachen Überschuß eingesetzt. Die Reaktion wird in einem inerten Lösemittel durchgeführt. Bevorzugte Lösemittel sind Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, iso-Propanol oder n-Butanol, ggf im Gemisch mit Methylenchlorid, Toluol oder auch Wasser. Werden Salze des Hydroxylamins eingesetzt, so muß zur Freisetzung des Hydroxylamins mindestens ein Äquivalent einer stärkeren Base als Hydroxylamin selbst zugegeben werden. Die Base kann auch im Überschuß bezogen auf das Hydroxylaminsalz eingesetzt werden. Als Basen kommen sowohl anorganische Basen wie Natriumcarbonat (F. Tiemann, Chem. Ber. 17, 1884, 126), Metallalkoholate wie Natriummethylat oder Kalium-tert .-butylat (B.D. Judkins, Synth. Commun. 1996, 26, 4351), besonders bevorzugt aber auch tert. Amine wie Triethylamin (H. Jendralla et al . , Tetrahedron 1995, 51, 12047) oder Diisopropylethylamin in
Betracht. Die Reaktion erfolgt bereits bei Raumtemperatur, zur Beschleunigung kann aber auch bis zum Siedepunkt der Reaktionslösung erhitzt werden, in der Regel jedoch nicht höher als 80°C.
Die Isolation der Carbonsäureamidoxime ist unterschiedlich. Im Fall der Krictallisation aus der Reaktionslösung werden die Produkte durch Filtration isoliert. In anderen Fällen wird auf- konzentriert, mit einem nicht mit Wasser mischbaren Lösemittel aufgenommen, in dem die Produkte gut löslich sind. Diese Lösung wird mit Wasser, das ggf. mit Mineralsäure auf pH 2 angesäuert wird, gewaschen und aufkonzentriert . Die Rückstände können in einem geeigneten Lösemittel in üblicher Weise zur Kristallisation gebracht werden. Es ist aber in der Regel auch möglich die Produkte ohne weitere Reinigung weiter umzusetzen. Die auf diese Weise hergestellten Verbindungen der Formel II stellen zum Teil neue Verbindungen dar und sind somit ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Besonders bevorzugt sind die folgenden Verbindungen:
2-N-Boc-aminomethyl- (4-amidoximo ) -thiophen 2-N-Cbz-aminomethyl- (4-amidoximo) -thiophen N-Boc-Pro-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N-Cbz-Pro-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N-Boc-Aze-2- (4-amidoximo ) -thienylmethylamid N-Boc-Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N-Boc-Dep-2- (4-amidoximo ) -thienylmethylamid Pro-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid Aze-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid Dep-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid
N- (t-BuOOC-CH ) -N-Boc-D-Chg-Dhp-2- (4-amidoximo) -t ienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2 ) -N-Boc-D-Cha-Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2 ) -N-Boc-D-Phe-Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2 ) -N-Boc-D-Phg-Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2)-NH-D-Chg-Dhp-2-(4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2 ) -NH-D-Cha-Dhp-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH ) -NH-D-Phe-Dhp-2- ( 4-amidoximo) -thienylmethylamid N- (t-BuOOC-CH2)-NH-D-Phg-Dhp-2-(4-amidoximo) -thienylmethylamid
Abkürzungsliste: Aze: Azetidincarbonsäure Boc : tert . -Butoxycarbonyl t-Bu: tert.-Butyl Cbz Benzyloxycarbonyl
Cha Cyclohexylalanin Chg Cyclohexylglycin Dep 4, 5-Dehydropipecolinsäure Dhp 3 , 4 Dehydroprolin Phe Phenylalanin Phg Phenylglycin Pro Prolin
Die Synthese der Amidine nach dem erfindungsgemäßen Verfahren er- folgt vorzugsweise durch Überführung der Carbonsäureamidoxime in eine Essigsäurelösung, wo man sie durch Zugabe von metallischem Zink, das gewöhnlich als feines Pulver eingesetzt wird, zur Reaktion bringt. Die Reaktion wird üblicherweise in einer reinen Essigsäurelösung durchgeführt. Es ist jedoch auch möglich die Reaktion in z.B. Propionsäurelösung oder in einem Lösemittelgemisch durchzuführen. In Frage kommen z.B. Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, iso-Propanol und n-Butanol. Das Zink wird im Überschuß bis zu 10 Äquivalenten eingesetzt. Die Reaktion kann in einem Temperaturbereich von -10°C bis 70°C durchgeführt werden, bevorzugt ist ein Temperaturbereich zwischen 20 und 50°C. Der Umsatz kann mittels Dünnschichtchromatographie kontrolliert werden. Üblich ist eine Reaktionszeit von 2 bis 5 Stunden. Es ist aber auch möglich bei 20°C über längere Zeit nachzurühren.
Die Aufarbeitung ist einfach. Es wird von überschüssigem Zink und den entstandenen Zinksalzen abfiltriert und aufkonzentriert . Die Reaktionsprodukte können entweder auf dieser Stufe isoliert und charakterisiert werden oder unmittelbar weiter umgesetzt werden. Insbesondere die Abspaltung von etwaigen Schutzgruppen wie tert.- Butylester oder N-tert. -Butoxycarbonylgruppen läßt sich vorteilhaft nach Abtrennung der festen Zn-Rückstände ohne Zwischen- isolierung durchführen.
Reduktionen von Carbonsäureamidoximen mit Zn zu Amidinen sind bislang nicht beschrieben. Gegenüber der bekannten Reduktion von Carbaldoximen mit Zn zu Aminomethylenverbindungen (G.D. Pandey et al. Indian J. Chem. Sect. B 1980, 19, 160; E. Testa et al . Chimia 1957, 11, 310; S. Negi et al. Synthesis, 1996, 991) ist es überraschend, daß nach dem erfindungsgemäßen Verfahren die Spaltung einer N,0-Bindung ohne Reduktion einer im selben Strukturelement vorliegenden C,N-Doppelbindung erreicht werden kann.
Die folgenden Beispiele dienen der Illustration des erfindungsgemäßen Verf hrens .
Beispiel 1
Synthese von 2-N-Boc-aminomethyl- (4-amidino) -thiophen
a) 2-N-Boc-aminomethyl- ( 4-amidoximo ) -thiophen
70 g (294 mmol) 2-N-Boc-aminomethyl- (4-cyano) -thiophen wurden zusammen mit 51,1 g ((735 mmol) Hydroxylammoniumchlorid in 700 ml Ethanol vorgelegt. Anschließend wurden man zwischen 20°C und 30°C 113,8 g (882 mmol) Diisopropylethylamin zugegeben und über 12 h bei 20°C bis 30°C nachgerührt. Zur Aufarbeitung wurde das Ethanol im Vakuum abdestilliert. Der Rückstand wurde in 1000 ml Methylenchlorid (CH2C12) aufgenommen. Die organische Phase wurde einmal mit 500 ml und ein zweites Mal mit 250 ml Wasser gewaschen. Nach Auf- konzentrieren der organischen Phase wurde das Produkt durch Zugabe von Methyl-tert . -butylether (MTBE) ausgefällt. Auswaage: 78 g
"C-NMR (DMSO; ppm) : 148,3 (Amidoxim) CnHι7N303S (271,34); berechnet: (M+H)+ = 272; gefunden: (M+H)+ = 272
b) 2-N-Boc-aminomethyl- (4-amidino) -thiophen
5 g (18,4 mmol) des nach a) hergestellten Carbonsäureamido- xims wurden bei 20°C in einem Gemisch aus 25 ml Essigsäure und 25 ml Methanol gelöst. Anschließend wurde unter ansteigen der Innentemperatur auf 30-35°C portionsweise 2,4 g (36,9 mmol) Zinkpulver zugegeben. Nach 12 h Nachrührzeit bei 25 bis 40°C war nach DC (CH2C12 /Methanol 9:1) kein Ausgangs- produkt mehr zu erkennen. Nach Abfiltrieren der Feststoffe wurde der Filterrückstand mit Methanol nachgewaschen Die gesammelten Filtrate wurden bei ca. 50°C im Vakuum auf- konzentriert . Der Rückstand wurde in CH2C1 aufgelöst. Die der CHC12-Phase wurde mit Wasser, das mit Natronlauge auf pH 12 eingestellt wurde, gewaschen. Die Wasserphase wurde nach der Phasentrennung mit CH2C12 nachextrahiert. Die vereinigten CH2C12 -Phasen wurden neutral gewaschen auf- konzentriert . Auswaage: 2,4 g erstarrter Schaum I3c-NMR (DMSO; ppm): 158,8 (verbreitert, Amidin)
CnHιN302S (255,34); berechnet: (M)+ = 255; gefunden: (M)+ = 255 Beispiel 2
Synthese von N-Boc-3 , 4-Dehydroprolyl-2- ( 4-amidino) -thienylmethylamid
a) N-Boc-3, 4-Dehydroprolyl-2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid
50 g (177 mmol) N-Boc-3 , 4-Dehydroprolyl-2- (4-cyano) -thienylmethylamid wurden zusammen mit 30,8 g ((442,5 mmol) Hydroxyl- ammoniumchlorid in 590 ml Ethanol vorgelegt. Anschließend wurden zwischen 20°C und 30°C 113,8 g (882 mmol) Diisopropyl- ethylamin zugegeben und über 12 h bei 20°C bis 30°C nachgerührt. Danach war der Umsatz lt. DC (CH2C1 /Methanol 9:1) vollständig. Zur Aufarbeitung wurde das Ethanol im Vakuum größtenteils abdestilliert. Der Rückstand wurde in 120 ml CH2C12 aufgenommen. Die organische Phase wurde mit 180 ml Wasser gewaschen. Die Wasserphase wurde einmal mit 60 ml CHC12 nachextrahiert. Die vereinigten CH2C1 -Phasen wurden nochmals mit 30 ml Wasser gewaschen, filtriert und eingeengt. Auswaage: 66,3 g erstarrter Schaum. 13C-NMR (DMSO; ppm): 147,9 (Amidoxim)
Cι6H22N404S (366,44); berechnet: (M+H)+ = 367; gefunden: (M+H)+ = 367
b) N-Boc-3, 4-Dehydroprolyl-2- (4-amidino) -thienylmethylamid
41,4 g (113 mmol) des nach a) hergestellten Carbonsäure- amidoxims wurden bei 40°C in 400 ml Essigsäure gelöst. Anschließend wurde bis zu einer Innentemperatur von max. 50°C portionsweise 41,1 g (630 mmol) Zinkpulver zugegeben. Nach 2,5 h Nachrührzeit bei 25 bis 40°C war nach DC
(CHC1 /Methanol 9:1) kein Ausgangsprodukt mehr zu erkennen. Nach Abfiltrieren der Feststoffe wurde der Filterrückstand mit Essigsäure nachgewaschen Die gesammelten Filtrate wurden bei ca. 50°C im Vakuum aufkonzentriert und zwischen 180 ml MTBE und 370 ml Wasser verteilt. Die Wasserphase wurde mit
Natronlauge auf pH 7 gestellt. Nach Abtrennung der MTBE-Phase wurden 180 ml CHC12 zugegeben und die Wasserphase mit Natronlauge auf pH 12 gestellt. Nach Abtrennung der CH2C12-Phase wurde noch zweimal mit 150 ml CHC1 nachextrahiert. Die ver- einigten CH2C1 -Phasen wurden einmal mit Wasser nachgewaschen und aufkonzentriert. Auswaage: 34,6 g erstarrter Schaum. 13C-NMR (DMSO; ppm): 159,9 (Amidin) Cι6H22N4θ3S (350,44); berechnet: (M+H)+ = 351; gefunden: (M+H)+ = 351 Beispiel 3
Synthese von N- (t-Butoxycarbonyl-methylen)-N-Boc-D-Chg-3, 4-
Dehydroprolyl-2- (4-amidino) -thienylmethylamid
a) N- (t-Butoxycarbonyl-methylen) -N-Boc-D-Chg-3 , 4-Dehydroprolyl- 2- (4-amidoximo) -thienylmethylamid
365,8 g (0,623 mol) N- ( t-Butoxycarbonyl-methylen) -N-Boc-D- Chg-3, 4-Dehydroprolyl-2- (4-cyano) -thienylmethylamid wurden zusammen mit 108,3 g ((1,559 mol) Hydroxylammoniumchlorid in 1,83 1 Ethanol vorgelegt. Anschließend wurden zwischen 20°C und 30°C 241,3 g (1,870 mol) Diisopropylethylamin zugegeben und über 12 h bei 20°C bis 30°C nachgerührt. Danach war der Umsatz lt. DC (CH2C12 /Methanol 9:1) vollständig. Zur Aufarbeitung wurde das Ethanol im Vakuum größtenteils abdestilliert. Der Rückstand wurde in 730 ml MTBE aufgenommen. Die MTBE-Phase wurde einmal mit 1,1 1 Wasser gewaschen, die Wasserphase einmal mit 370 ml MTBE reextrahiert. Die vereinigten MTBE-Phasen wurden nochmals mit 180 ml Wasser ge- waschen und danach bei 0,5 bar durch azeotrope Destillation getrocknet und auf 730 ml Restvolumen aufkonzentrier . Das Produkt wird durch Eintropfen der MTBE-Lösung in 2,2 1 Petrolether (60/40) gefällt und im Trockenschrank bei 50°C 12 h getrocknet. Auswaage: 371,5 g leicht gelbes bis farbloses Pulver 13C-NMR (DMSO; ppm): 147,9 (Amidoxim)
C3oH45N507S (619,79); berechnet: (M+H)+ = 620; gefunden: (M+H)+ = 620
b) N- (t-Butoxycarbonyl-methylen)-N-Boc-D-Chg-3 , 4-Dehydroprolyl- 2- (4-amidino) -thienylmethylamid, Essigsäuresalz
5 g (8,1 mmol) des nach a) hergestellten Carbonsäureamidoxims wurden bei 30°C in 50 ml Essigsäure gelöst. Anschließend wurde bei einer Innentemperatur von 50 bis 55°C portionsweise 2,9 g (44,4 mmol) Zinkpulver zugegeben. Nach einer Nachrührzeit von 2 h bei ca. 50°C war nach DC (CH2C12/Methanol 9:1) kein Ausgangsprodukt mehr zu erkennen. Nach Abfiltrieren der Feststoffe wurde der Filterrückstand mit Essigsäure nach- gewaschen. Die gesammelten Filtrate wurden bei ca. 50°C im Vakuum aufkonzentriert .
Auswaage: 4,3 g leicht gelbes bis farbloses Pulver 13C-NMR (DMSO; ppm): 159 (verbreitert, Amidin) , 1H-NMR (DMSO; ppm): 1,87 (CH3C02-) C30H45N5O6S (603,79); berechnet: (M+H)+ = 604; gefunden: (M+H) + = 604 N- ( -Butoxycarbony1-methylen) -N-Boc-D-Chg-3 , 4-Dehydroprolyl- 2- (4-amidino) -thienylmethylamid, Base
62 g (100 mmol) des nach a) hergestellten Carbonsäure- amidoxims wurden bei 35°C in 620 ml Essigsäure gelöst. Anschließend wurde bei einer Innentemperatur von 35 bis 40°C portionsweise 36 g (550 mmol) Zinkpulver zugegeben. Nach einer Nachrührzeit von 4 h bei ca. 40°C war nach DC (CHCl2/Methanol 9:1) kein Ausgangsprodukt mehr zu erkennen. Nach Abfiltrieren der Feststoffe wurde der Filterrückstand mit Essigsäure nachgewaschen. Die gesammelten Filtrate wurden bei ca. 50°C im Vakuum aufkonzentriert und zwischen 200 ml MTBE und 410 ml Wasser verteilt. Die Wasserphase wurde mit Natronlauge auf pH 7 gestellt. Nach Abtrennung der Wasser- phase wurde die MTBE-Phase zweimal mit 200 ml Wasser nachextrahiert und verworfen. Die vereinigten Wasserphasen wurden anschließend mit Natronlauge auf pH 12 gestellt und zweimal mit mit je 330 ml MTBE extrahiert. Die vereinigten MTBE- Phasen wurden bei ca. 0,7 bar durch azeotrope Destillation getrocknet und auf ca. 270 ml Restvolumen aufkonzentriert . Das Produkt wird durch Eintropfen der MTBE-Lösung in 740 ml n-Heptan gefällt und im Trockenschrank bei 50°C 12 h getrocknet . Auswaage: 57,2 g leicht gelbes bis farbloses Pulver C3oH45N506S (603,79); berechnet: (M+H)+ = 604; gefunden: (M+H)+ = 604

Claims

Patentansprüche
1. Verfahren zur Herstellung von am Stickstoff nicht substi- tuierten Amidinen und deren Salzen mit anorganischen oder organischen Säuren, wobei entsprechende Carbonsäureamidoxime mit Zn in Gegenwart von Carbonsäuren umgesetzt werden.
2. Verfahren gemäß Anspruch 1 zur Herstellung von substituierten Aryl- oder Heteroarylamidinen, insbesondere von Thienyl- amidinen.
3. Verfahren gemäß Anspruch 1 zur Herstellung von substituierten Thienylamidinen, wobei die Thienylamidingruppe ein Struktur- fragment eines Arzneimittels ist.
4. Verfahren gemäß Anspruch 1 zur Herstellung von substituierten Thienylamidinen der Formel I
Figure imgf000014_0001
worin n = 1-3 sein und
R die folgenden Bedeutungen haben kann
Cι-C6-Alkyl-CO,
Cι-C6-Alkoxy-CO,
Benzyloxy,
Aryl oder Heteroaryl, wobei diese Aromaten gegebenenfalls weiter ein oder mehrfach substituiert sein können,
ein oc-Aminosäurefragment in der R- oder S-Konfiguration, deren N-Atom in der üblichen Weise geschützt oder ungeschützt vorliegt, ein, gegebenenfalls am N-Terminus ein oder mehrfach substituiertes Dipeptidfragment, bestehend aus den natürlichen Aminosäuren, den entsprechenden D-Aminosäuren oder den natürlichen Aminosäuren sehr ähnlichen Aminosäuren in der L- oder D-Form,
herstellen,
dadurch gekennzeichnet, daß man Carbonsäureamidoxime der Formel II
Figure imgf000015_0001
in denen n und R die gleiche Bedeutung haben wie in Formel I, mit Zn in Gegenwart einer Carbonsäure umsetzt.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Carbonsäure Essigsäure ist.
6. Verbindungen der Formel II gemäß Anspruch 4.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002060861A1 (en) * 2001-01-29 2002-08-08 Teijin Limited Benzamidine derivatives and process for production thereof
WO2006101860A1 (en) * 2005-03-16 2006-09-28 Janssen Pharmaceutica N.V. Novel thiophene sulfoximines for treating complement-mediated diseases and conditions

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2375611A (en) * 1941-08-19 1945-05-08 May & Baker Ltd Production of amidines
US2851490A (en) * 1955-04-20 1958-09-09 Monsanto Chemicals Guanyl aliphatic mono-carboxylic acids
DE19632773A1 (de) * 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002060861A1 (en) * 2001-01-29 2002-08-08 Teijin Limited Benzamidine derivatives and process for production thereof
WO2006101860A1 (en) * 2005-03-16 2006-09-28 Janssen Pharmaceutica N.V. Novel thiophene sulfoximines for treating complement-mediated diseases and conditions
US7385066B2 (en) 2005-03-16 2008-06-10 Janssen Pharmaceutica N.V. Thiophene sulfoximines, compositions thereof, and methods of treating complement-mediated diseases and conditions
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