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WO1999019474A1 - Modified oligodeoxyribonucleotides having tggg sequence - Google Patents

Modified oligodeoxyribonucleotides having tggg sequence Download PDF

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WO1999019474A1
WO1999019474A1 PCT/JP1998/004625 JP9804625W WO9919474A1 WO 1999019474 A1 WO1999019474 A1 WO 1999019474A1 JP 9804625 W JP9804625 W JP 9804625W WO 9919474 A1 WO9919474 A1 WO 9919474A1
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WO
WIPO (PCT)
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group
compound
ch2ch2
meoph
dbp
Prior art date
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Ceased
Application number
PCT/JP1998/004625
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Makoto Koizumi
Masakatsu Kaneko
Toshinori Ohmine
Hidehiko Furukawa
Takashi Nishigaki
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sankyo Co Ltd
Original Assignee
Sankyo Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
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Ceased legal-status Critical Current

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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1131—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses
    • C12N15/1132—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses against retroviridae, e.g. HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
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    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate

Definitions

  • the present invention relates to a novel oligodeoxyribonucleotide having an excellent anti-AIDS virus action.
  • BACKGROUND ART Oligodeoxyribonucleotides having a sequence complementary to a certain gene (hereinafter referred to as antisense oligodeoxyribonucleotide) are known to inhibit the functional expression of the gene. It has also been reported that antisense oligodeoxyribonucleotides of the viral gene or oncogene can inhibit viral replication or cell growth, respectively, by inhibiting the function of that gene. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 75, No. 1, page 280 (1977), and P. Zamecnik, J. Goodchild, Y. Taguchi, Sarin, Proc (PC Zamecnik, ML Stephenson, Proc. Natl. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 83, No. 6, 4143 (1986)).
  • the antisense oligodeoxyribonucleotide In order for the antisense oligodeoxyribonucleotide to exhibit the above-mentioned inhibitory action, it must form a stable hybrid with the target RNA or DNA in vivo. In order to form this hybrid, it is said that the antisense oligodeoxyribonucleotide needs to have a length of at least about 15 nucleotides or more. Had been.
  • the present inventors have proposed various nucleotide sequences and 5′-terminal and 3′-terminal oligo-nucleotide ribonucleotides, which have been considered to have no specific inhibitory activity.
  • modified oligodeoxyribonucleotides having a constant nucleotide sequence have a remarkably high anti-AIDS virus activity, and Found that the compound has low toxicity to normal cells, was relatively easy to synthesize, and was practically useful, and disclosed the compound described in Japanese Patent Laid-Open Publication No. 7-87982.
  • the present invention also includes a pharmacologically acceptable salt thereof.
  • Q represents a RiRsRsZ group (wherein, R, R 2 and R 3 may be the same or different and may have a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, or a substituent.
  • Z represents C or Si; or R 2 , R 3 and Z together form a fluorenyl group or a xanthyl group.
  • R 4 has a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms which may have a substituent, an aryl group or a substituent which may have a substituent.
  • ODN oligodeoxyribonucleotide
  • B the hydroxyl groups at the 5 'end and 3' end of each oligodeoxyribonucleotide are not included. The left end of each sequence is the 5 'end, and the right end is the 3' end.
  • R 2 , R 3 and R 4 are each a hydrogen atom
  • X is an ethylene group.
  • Y or ⁇ 2 , ⁇ 3 and ⁇ 4 are each an oxygen atom, ⁇ is a carbon atom, m is 1 to 3, and n is 1.
  • B is TGGGAG, is a 3,41- (dibenzyloxy) phenyl group
  • R 2 , R 3 and R 4 are each a hydrogen atom
  • X is an ethylene group
  • ⁇ 2 Upsilon 3 and Upsilon 4 are each an oxygen atom
  • m is 2 to 3
  • n is 1.
  • the present invention also relates to a drug, particularly an anti-AIDS agent, comprising the compound (1) or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • examples of the anthraquinonyl group which may have a substituent of R 2 and R 3 in the Q group include, for example, 9,10-anthraquinone-11-yl, 9, Unsubstituted anthraquinonyl groups such as 10-anthraquinone-2-yl; such as 9,10-anthraquinone-1-4-methyl-1-yl, 9,10-anthraquinone-1-6-ethyl-2-yl An alkyl-substituted anthraquinonyl group having 1 to 4 carbon atoms; 1 to 4 carbon atoms such as 9,10-anthraquinone-5-methoxy-11-yl, 9,10-anthraquinone-18-ethoxy-2-yl 9 alkoxy-substituted anthraquinol groups; 9,10-anthraquinone-7-chloro-1-yl, 9,10-anthraquinone-18-flu
  • examples of the alkyl group having 1 to 4 carbon atoms which may have a substituent of R 4 include, for example, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, Unsubstituted alkyl groups such as isobutyl, s-butyl, and t-butyl; amino-substituted alkyl groups such as 2-aminoethyl and 3-aminopropyl; carbons such as 2-methoxyethoxy and 3-methoxypropyl Examples thereof include an alkoxy-substituted alkyl group having 1 to 4 alkoxy groups, preferably, methyl, ethyl, n-propyl, 2-aminoethyl, and 2-methoxethyl groups.
  • examples of the aryl group which may have a substituent of R 4 include, for example, phenyl group; alkyl having 1 to 4 carbon atoms such as 2-methylphenyl and 3-ethylphenyl. Substituted phenyl group; 2-phenylphenol, 2-phenylphenyl, 4-chlorophenyl, 2-bromophenyl, 2-phenylphenyl, etc.
  • Gen-substituted phenyl group A 2-substituted phenyl group such as 2-nitrophenyl, 4-nitrophenol; an alkoxy-substituted phenyl group such as 4-methoxyphenyl or 4-ethoxyphenyl; An alkylthio-substituted phenyl group having 1 to 4 carbon atoms such as 4-methylthiophene and 4-ethylthiophenyl; a naphthyl group; a phenanthrenyl group; an anthracenyl group; and a pyrenyl group. Examples include phenyl, halogen-substituted phenyl, and nitrogen-substituted phenyl groups.
  • examples of the aralkyl group which may have a substituent for R 4 include, for example, a benzyl group; an alkyl-substituted benzyl group having 1 to 4 carbon atoms such as methylbenzyl and ethylbenzyl; Methoxyben Alkoxy-substituted benzinole groups having 1 to 4 carbon atoms, such as ethoxybenzyl; halogen-substituted benzinole groups, such as phenoleno benzone, chlorobenzenole, and bulomobenzinole; chloronaphthylmethyl Halogen-substituted naphthylmethyl group such as phenol; indulmethyl group; phenanthrenylmethyl group; anthracenylmethyl group; diphenylmethyl group; triphenylmethyl group; 1-phenylene, 2-phenethyl, 2,2-diphenylethylenol, Mono-
  • examples of the alkylene having 1 to 4 carbon atoms of Y 2 include methylene, ethylene, propylene, tetramethylene, and pentamethylene. And methylene, preferably methylene.
  • each of Y, Y 3 and Y 4 is preferably an oxygen atom.
  • ⁇ 2 is preferably an oxygen or sulfur atom.
  • ⁇ in the Q group is preferably a carbon atom.
  • examples of the linear or branched alkylene group having 1 to 10 carbon atoms which may be substituted with a hydroxyl group of X include, for example, methylene, methylmethylene, ethylene, Propylene, tetramethylene, methinoleethylene, ⁇ -methinoletrimethylene, 2-methinoletrimethylene, 2-methyltetramethylene, 3-methyltrimethylene, pentamethylene, hexamethylene, heptamethylene, octamethylene, Examples thereof include nonamethylene, decamethylene, 2-hydroxytrimethylene, and 2-hydroxytramethylene, and preferably methylene, methylmethylene, ethylene, propylene, and methylethylene.
  • m is preferably 0 to 6, and more preferably 0 to 4.
  • m is preferably 1 to 3
  • B is TGGGAG
  • m is preferably 2 to 3.
  • n is preferably 0 to 6, and more preferably 1.
  • the sequence of B TG GG GT, TGG GGTT, TG GG GGT, TGG G CG, T GG GT G, T GG GG, TG GG GG or TG GGAG is selected from the group consisting of oligodeoxyribonucleotides. Preferred among them are the sequences TGGGGT, TGGGGGTT, TGGGGGT, TGGGGG, TGGGGG or TGGGGG.
  • A is adenine deoxyribonucleotide
  • G is guanine deoxyribonucleotide
  • C is cytosine deoxyribonucleotide
  • T is thymine deoxyribonucleotide. Shows Reotide.
  • the left end is the 5 'end and the right end is the 3' end. However, the hydroxyl groups at the 5 'end and 3' end of each oligodeoxylyl nucleotide are not included.
  • preferred groups at the 5 ′ end (Ri Rs Rs Z—Yi) obtained by combining R 2 , R 3 , and Z include triphenylmethyloxy, 3, 4- (dibenzinoleoxy) benzoyloxy, 3, 5- (dibenzyloxy) benzyloxy, t-butylinolethiophenolenosilyloxy, phenylenoleoleoni / reoxy, and phenylxanthenyloxy, More preferably, they are triphenylmethinoleoxy, 3,4- (dibenzyloxy) benzyloxy, 3,5- (dibenzyloxy) benzyloxy group or 3,5-bis [3,5- (dibenzyloxy) benzyloxy] benzyloxy group. Is a 3,4- (dibenzyloxy) benzyloxy group.
  • a suitable group at the 3 ′ terminal obtained by a combination of R 4 , X, Y 2 , ⁇ 3 , ⁇ 4 , m and ⁇ ([P (O) (Y 2 R 4 ) I Y 3 — (X- ⁇ 4 ) n ] m ⁇ ) includes hydrogen ( ⁇ ), methyl phosphoryl [P (0) (0CH 3 ) 0 H], 2 — phenylphosphoryl [ P (0) (0-2-C1- Ph) 0H], (O- methyl) Chiohosuhoriru [P (0) (0CH 3 ) SH], Mechiruhosu Honiru [P (0) (CH 3 ) 0H], main switch Luthiophosphonyl [P (0) (CH 3 ) SH], Phenylphosphonyl [P (0) (Ph) OH], 2 — Hydroxicetyl phosphoryl [P (0) (0H) 0CH 2 CH 2 0H] , [O— (2-hydroxy
  • preferred compounds include
  • B is an oligodeoxyribonucleotide selected from the sequence TGGGGT, TGGGGGTT, TGGGGGT, TGGGGG, TGGGGG or TGGGGG;
  • the 5 ′ terminal group (R i Rs Rg Z—Y i) is a triphenylmethyloxy, 3,4- (dibenzyloxy) benzyloxy, 3,5- (dibenzyloxy) benzyloxy group, and R 4 , X, Y 2 3 ′ terminal group ([P (0) (Y 2 R 4 ) — — 3 — (X—Y 4 ) n ] m H) force 'hydrogen obtained by the combination of, Y 3 , Y 4 , m and ⁇ , Methinole phosphoryl, 2-black mouth phenole phosphorinole,
  • B is an oligodoxyribonucleotide selected from the sequence TGGG GT, TG GGGTT or TGG GGGT Compound,
  • B represents oligodeoxyribonucleotide represented by the sequence TGGGG or TGGGGG, and m represents 1, 2 or 3.
  • G is guanine deoxyribonucleotide
  • T represents thymine deoxyribonucleotide.
  • the hydroxyl groups at the 5 'end and 3' end of each oligodeoxyribonucleotide are not included. The left end of each sequence is the 5 'end, and the right end is the 3' end.
  • B represents oligodeoxyribonucleotide represented by the sequence TGGGGAG, and m represents 2 or 3.
  • A indicates adenine deoxyribonucleotide
  • G indicates guaendeoxy ribonucleotide
  • T indicates thymine deoxyribonucleotide.
  • the hydroxyl groups at the 5 'end and the 3' end of the oligodeoxyribonucleotide are not included. The left end of the sequence is the 5 'end and the right end is the 3' end.
  • the compound having the general formula (1) of the present invention can be used in the form of a “pharmaceutically acceptable salt”.
  • a “pharmaceutically acceptable salt” examples include sodium and potassium salts.
  • Inorganic or organic salts such as alkaline metals such as calcium; alkaline earth metals such as calcium; ammonia; basic amino acids such as lysine and arginine; alkylamines such as triethylamine;
  • it is an alkali metal salt such as sodium or potassium.
  • the compound having the general formula (1) and a pharmacologically acceptable salt thereof may form a solvate in the production process or a hydrate during storage.
  • the present invention also includes hydrates and hydrates. 99/19474
  • Me is methyl
  • Et is ethyl
  • Pr is propyl
  • Bu is butyl
  • tBu is t-butyl
  • 3,4-DBP is 3,4-mono (dibenzyloxy) fuel
  • 3, 5-BDBBP is 3,5-bis ⁇ 3,5- (dibenzyloxy) benzyloxy ⁇ phenyl
  • 3,5-DBP is 3,5- (dibenzyloxy) phenyl
  • 1-PYR is pyrene-1-yl
  • 2-NAP is naphthalene-1-yl
  • 4-PhPh is 4- (phenyl) phenyl
  • 2-PhPh is 2- (phenyl) phenyl
  • 9-ANT is anthracene-9-yl
  • 2-ANT is anthracene-1-yl
  • 1-NAP is naphthalene-1-yl
  • 2-ANQ is anthraquinone-12-yl
  • 4-PHE is phenant
  • PhE is 1,4-phenylene
  • 2-NH2Et is 2-aminoethyl
  • 2-MeOEt is 2-methoxethyl
  • 1-Me-PrE is 1-methylpropyl.
  • Pyrene 2-Me-BuE is 2-methylbutylene
  • 2-0H-PrE is 2-hydroxypropylene
  • 1 is TGGGGT
  • 2 is TGGG GTT
  • 4 is TGGGCG
  • 5 is TGGGTG
  • 6 indicates TGGGG
  • 7 indicates TGGGGG
  • 8 indicates TGGG AG.
  • preferred compounds include 1 to 33, 32 27 to 39, 65 3 to 68, 979 to 1011, and 1089 to
  • the compounds of 121, 119, 1205, 121 and 122 to 123 can be cited.
  • preferred compounds include 1 to 11, 1, 327 to 337, 653 to 663, 979 to 989, 1089 to 1099, 1 Compounds of 199, 125, 1221, 122, and 123 to 123 can be mentioned.
  • the compound of the general formula (1) according to the present invention comprises the following compound (2) produced by the following methods A-1 and A_2
  • DMT-o-F-i w 4a (6a) DMT-o-F-w 5b (7b) de-DMT (4,4'-dimethoxytrityl) is used as a raw material, and the following C-1, It can be manufactured by the methods shown in C1-2 and C-3.
  • T r is a trityl group (T r), which is generally used to specifically protect the primary hydroxyl group of a nucleoside, a 4-monomethoxytrityl (MMT) group, and a 4,4′-dimethoxytrityl (DMT) group.
  • MMT 4-monomethoxytrityl
  • DMT 4,4′-dimethoxytrityl
  • a 2 is tert-butyldimethylsilyl (TB DMS) groups and triisopropylate Rushiriru (TIPS) good UNA trisubstituted silyl group group, Application Benefits Kuroroe Toki Shikaruboeru (T roc) Application Benefits Nono Rogenoe Tokishikarubo two Le groups such as An aralkyloxycarbonyl group such as a benzyloxycarbonyl (Z) group;
  • D ' represents a thymine base or a protected thymine base
  • D ′′ represents the base moiety of the nucleotide at the 3′-terminal where the amino group is protected with the acryl group
  • D "" indicates the base of any nucleotides used in DNA synthesis, and indicates a base selected from adene, guanine, cytosine and thymine or a corresponding protected base;
  • F is the oligonucleotide moiety excluding the nucleotide at the 5 'end of the desired nucleotide sequence, which is commonly used in DNA synthesis, and is protected by a protecting group on the phosphoric acid moiety. Indicates the oligonucleotide (including the 5'-terminal hydroxyl group of the 5'-terminal nucleoside and the 3'-position hydroxyl group of the 3'-terminal nucleoside);
  • V is a protecting group for the phosphoric acid moiety (particularly, a lower alkyloxy group such as a methoxy group, a cyanoalkyloxy group such as a cyanoethyloxy group, and in Step 39, particularly, an orthochlorophenoxy group).
  • Group); U is an amino group in the amidite portion (particularly a complex having one or two oxygen atoms and / or nitrogen atoms in the ring, such as a dialkylamino group such as a dimethylamino group or a diisopropylamino group, and a morpholino group).
  • Wi, W 2a , W 2 , W 3 , W, W 4 , W 5 a or W 5 b are obtained by converting the oligonucleotide F from the CPG of the final target compound in the method shown in B-1 to B-5. '3' of the terminal part up to the oxygen atom of the hydroxyl group;
  • E represents a hydrogen atom or an optionally protected hydroxyl or amino group
  • K represents an oxygen or sulfur atom
  • DMT represents 4, 4'-dimethoxytrityl group
  • H a 1 is (preferably, a chlorine or bromine atom) a halogen atom indicates;
  • R 5 is methyl, Echiru, propyl, butyl, phenyl, main butoxy, E butoxy, Purobokishi, butoxy, is Xia Roh ethyl O alkoxy or substituted Phenyloxy group (preferably unsubstituted).
  • Methods A-1 and A-2 are methods for producing compound (2), which is an important intermediate, for producing compound (1).
  • Method B-1 is based on a nucleotide having a protecting group at the 5 'terminal
  • the 3 'terminal nucleoside is linked to a controlled' pore glass' (CPG) via a linker as a starting material, and is a commercially available nucleoside reagent for DNA synthesis on a DNA synthesizer.
  • CPG controlled' pore glass'
  • DMT group a trimethyl group
  • One of the hydroxyl groups is condensed with a dicarboxylic anhydride to give succinic acid half ester (indicated by succinic acid as a representative of dicarboxylic acid in the scheme), and the carboxyl group of the ester and CPG
  • the CPG carrier (416) obtained by binding the amino group and removing the terminal DMT group is used to produce nucleotides on a DNA synthesizer using a nucleotide unit in the usual manner.
  • a nucleotide reagent capable of forming a phosphorothioate bond is reacted, and the nucleotide is then sequentially extended using a nucleotide unit in the usual manner. It is also the desired Origonuku Reochido Yori one less O Li Gonuku Reochido compound bound before (4 one b) Method of manufacturing.
  • a commercially available compound (5-2) is obtained from a CPG carrier (5-1) (that is, (4-1-6)) in which an alkylene diol and CPG are bonded via a dicarboxylic acid as a raw material.
  • a CPG carrier (5-1) that is, (4-1-6)
  • an alkylene diol and CPG are bonded via a dicarboxylic acid as a raw material.
  • one hydroxyl group of the diol compound (6-1) is converted to a compound (6-2) obtained by DMT, and then the other hydroxyl group is mixed with an amidating reagent (6-3 '). Reacting the compound (6-3) to obtain the compound (6-3).
  • the compound (6-2) is bound to CPG via dicarboxylic acid, and the CPG carrier is obtained. (6-6), and using the CPG carrier (6-7) obtained by removing the DMT group as a raw material.
  • the nucleotides are sequentially extended in a usual manner, and the compound is bound to a position before the desired oligonucleotide, which is one less than the desired oligonucleotide ( 6).
  • a ) is produced by reacting the compound (6-3) with the CPG carrier (6-7) once, twice or three times on a DNA synthesizer.
  • the product (6-9), (6-10) or (6-11) is a raw material, the nucleotide is sequentially extended by a usual method using a nucleotide unit to obtain a desired product. This is a method for producing a compound (6b), (6c) or (6d), which is bound to one oligonucleotide less than the oligonucleotide.
  • the B-5 method is based on the removal of the DMT group of a commercially available protected 2'-deoxynucleoside-linked CPG (hereinafter referred to as D '' '-CPG) by the linker (7- (Tetrahedron Letters, 27, 475 (19986))) (2-cyanoethoxy) one [2— (2'—O one) 4,4'-Dimethoxytrityloxetylsulfonyl) ethoxy]-(N, N-diisopropylamino) phosphine (7-1) to produce compound (7-3) Then, a compound obtained by removing the DMT group of the compound (7-3) and a compound separately synthesized by a conventional method
  • the compound (2) is reacted with a phosphating agent to prepare a 3′-phosphorous acid derivative (8), and the compound (3) synthesized by the methods B-1 to B-5 is used. ), (4—a), (4—b), (5), (6a), (6b),
  • the C-12 method is based on the compound (2), which is prepared by reacting a phosphorylating agent with a 3, monophosphate derivative (9), and the compounds (3), (4) synthesized by the methods B-1 to B-5.
  • a), (4-1b), (5), (6a), (6b), (6c), (6d), (7a), or (7b) with the DMT group removed This is a method for producing the compound (1) of the present invention by condensing the compound and on a DNA synthesizer, cleaving the bond with CPG, and finally removing the protecting group.
  • the C-13 method comprises a compound (10) in which a phosphonic acid group is introduced at the 3′-position of the compound (2), and a compound (3), (4—a) synthesized by the methods B-1 to B-5. ), (4-b), (5), (6a), (6b), (6c), (6d), (7a), and the corresponding compound from which the DMT group has been removed.
  • a compound (10) in which a phosphonic acid group is introduced at the 3′-position of the compound (2) and a compound (3), (4—a) synthesized by the methods B-1 to B-5.
  • (4-b), (5), (6a), (6b), (6c), (6d), (7a) are condensed and then oxidized to form a phosphodiester bond, further cleave the bond with CPG, and finally, remove the protecting group to obtain the compound (1) of the present invention. Is the way.
  • This step includes, in an inert solvent, the step of protecting compound (2-1) ⁇ wherein the base moiety is A, G or C in the presence of A, G or C, for protecting an existing amino group from acylation.
  • the protection step can be easily performed by a known method (J. Am. Chetn. Soc., 104, 1316, (1982)).
  • a lower aliphatic acyl or an aromatic acyl is generally used.
  • the lower aliphatic acyl used includes, for example, formyl, acetinole, propiole, butyryl, isobutylinole, pentanoyl, pivaloyl, valeryl, isovaleryl, and the like.
  • the benzyl include benzoyl, 4-acetoxybenzoyl, 4-methoxybenzoyl, 4-methylbenzoyl, and 11-naphthyl.
  • the base moiety is A or C
  • a compound (2-2) in which only the hydroxyl group at the 5′-position is selectively protected is produced by reacting a hydroxyl-protecting reagent. '
  • the solvent used is preferably an aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene or xylene; methylene chloride, chloroform, carbon tetrachloride, dichloroethane, or cyclobenzene. And halogenated hydrocarbons such as dichlorobenzene; esters such as engineered formate, ethyl acetate, propyl acetate, butyl acetate, and getyl carbonate; getyl ether, diisopropyl propylether, tetrahydrofuran, dioxane, and the like.
  • aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene or xylene
  • halogenated hydrocarbons such as dichlorobenzene
  • esters such as engineered formate, ethyl acetate, propyl acetate
  • Ethers such as dimethoxetane and diethylene glycol dimethyl ether; ketones such as acetone, methylethylketone, methylisobutylketone, isofolone and cyclohexanone; nitrotroethane, nitrite Nitro compounds such as benzene; acetonitrile, a Buchiroyu Tritoles such as trinole; amides such as formamide, dimethylformamide (DMF), dimethylacetamide, hexamethylphosphorotriamide; dimethylsulfoxide Sulfolane, sulfolane; aliphatic tertiary amines such as trimethylamine, triethylamine, N-methylmorpholine; aromatic amines, such as pyridine and picolin. More preferred are halogenated hydrocarbons (particularly methylene chloride) and amides (particularly DMF).
  • the protecting reagent used is not particularly limited as long as it can selectively protect only at the 5'-position and can be removed under acidic and neutral conditions.
  • Trimethyl chlorides such as lithichloride, monomethoxytrityl chloride, and dimethoxytrityl chloride.
  • a base is usually used.
  • the base to be used may be a heterocyclic amine such as pyridine, dimethylaminopyridine, pyrrolidinopyridine, or an aliphatic tertiary amine such as trimethylamine or triethylamine.
  • Amines are preferred, and pyridine, dimethylaminopyridine and pyrrolidinopyridine are preferred.
  • the base When a liquid base is used as the solvent, the base itself acts as a deoxidizing agent, so that it is not necessary to add a base again.
  • the reaction temperature is usually from 0 to 150 ° C, preferably from 20 to 100 ° C, depending on the starting materials, reagents, solvents and the like used.
  • the reaction time varies depending on the starting material, solvent, reaction temperature and the like to be used, but is usually 1 to 100 hours, preferably 2 to 24 hours.
  • reaction solution is poured into water, extracted with a water-immiscible solvent, for example, benzene, ether, ethyl acetate, and the like, and the solvent is distilled off from the extract to obtain the desired product (2-2). And usually the next Used in the step. If desired, it can be isolated and purified by various chromatography or recrystallization methods.
  • a water-immiscible solvent for example, benzene, ether, ethyl acetate, and the like
  • compound (2-2) is reacted with a hydroxyl-protecting reagent in an inert solvent to produce compound (2-3).
  • the solvent used is preferably an aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene, or xylene; methylene chloride, chloroform, carbon tetrachloride, dichloroethane, cyclobenzene, or dichloromethane.
  • Halogenated hydrocarbons such as chlorobenzene; esters such as ethyl formate, ethyl acetate, propyl acetate, butyl acetate, and getyl carbonate; getyl ether, diisopropyl ether, tetrahydrofuran, dioxane, and dimethoxetane
  • Ethenes such as diethylene glycol dimethinoleone; ketones such as acetone, methylethylketone, methylisobutylketone, isofolone and cyclohexanone; nitroethane, nitrobenzene
  • Nitro compounds such as: acetonitrile, Butyramides such as soptilonitrile; amides such as formamide, dimethylformamide, dimethylacetamide, hexamethylphosphorotriamide; and sulfoxides such as dimethylsulfoxide and sulfolane. More preferably, ethers (
  • the protecting reagent to be used is not particularly limited as long as it can be deprotected in distinction from the protecting group at the 5'-position.
  • t-butyldimethylsilyl chloride is used.
  • Certain compounds include silyl halides such as triisoprovir silyl chloride, haloalkoxycarbon halides such as triethoxy ethoxycarbonyl chloride, and benzyloxy canoleles. Examples include aralkyloxycarbonyl halides such as bojyl chloride.
  • a base is usually used.
  • the base used is preferably an organic base (particularly, triethylamine, pyridine, N-methylmorpholine, DBU, imidazole, etc.).
  • the reaction temperature is usually from 120 to 150 ° C, preferably from ⁇ 10 to 50 ° C, depending on the reagents, raw materials, solvents and the like used.
  • the reaction time varies depending on the starting material, solvent, reaction temperature and the like to be used, but is usually 1 to 100 hours, preferably 1 to 24 hours.
  • reaction solution is poured into water, extracted with a water-immiscible solvent, for example, benzene, ether, ethyl acetate, or the like. 3) is obtained and usually used as it is in the next step. If desired, it can be isolated and purified by various chromatography or recrystallization methods.
  • a water-immiscible solvent for example, benzene, ether, ethyl acetate, or the like. 3
  • the solvent to be used is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction.
  • aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene and xylene; methylene chloride, chloroform and tetrachloride Halogenated hydrocarbons such as carbon, dichloroethane, cyclobenzene, and dichlorobenzene; ethyl formate, ethyl acetate, propyl acetate, butyl acetate, and ethyl carbonate Esters such as tyl; ethers such as getyl ether, disopropyl ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethoxetane, and methyl dimethyl ether; methanol, ethanol, n -Prono.
  • Alcohols such as ethanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, isoamyl alcohol, diethylene glycol, glycerin, octanol, cyclohexanol, methinolace Ketones such as acetone, methylethylketone, methylisobutylketone, isophorone and cyclohexanone; two-mouth compounds such as nitroethane and nitrobenzene; acetonitrile, isobutyroni Ditolyls, such as tolyl; amides, such as formamide, dimethylformamide, dimethylacetamide, hexamethylphosphotriamide; sulfoxides, such as dimethylsulfoxide and sulfolane; More preferably, alcohols ( Methanol, ethanol) or if you methylene chloride and deprotection reagent using acetic acid is a mixture of acetic acid
  • the deprotecting reagent to be used is not particularly limited as long as it is a commonly used deprotecting reagent. If the protecting group is a triarylmethyl group, for example, acetic acid, dichloroacetic acid, trifluoroacetic acid, hydrochloric acid And Lewis acids such as zinc bromide, preferably acetic acid, dichloroacetic acid and trifluoroacetic acid.
  • the reaction temperature varies depending on the used reagents, raw materials, solvents and the like, but is usually from 10 to 100 ° C, preferably from 0 to 50 ° C.
  • the reaction time varies depending on the starting material, solvent, reaction temperature and the like used, but is usually 1 minute to 50 hours, preferably 1 minute to 24 hours.
  • the reaction solution is neutralized with a base such as pyridine, poured into water, extracted with a water-immiscible solvent such as benzene, ether, ethyl acetate, etc., and the solvent is distilled off from the extract.
  • a base such as pyridine
  • a water-immiscible solvent such as benzene, ether, ethyl acetate, etc.
  • the product (2-4) is obtained and usually used as it is in the next step. If desired, it can be isolated and purified by various chromatography or recrystallization methods.
  • the desired compounds (4_6), (6-7) and (6-9) can be collected by filtration, and an organic solvent such as methylene chloride can be used. After washing with, use it as it is in the next step.
  • compound (2-5) is reacted with compound (2-1) or (2-4) in an inert solvent in the presence of a base to produce compound (2) or (216)
  • the solvent used is preferably an aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene, or xylene; a halogen such as methylene chloride, chloroform, carbon tetrachloride, dichloroethane, cyclobenzene, or dichlorobenzene.
  • aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene, or xylene
  • a halogen such as methylene chloride, chloroform, carbon tetrachloride, dichloroethane, cyclobenzene, or dichlorobenzene.
  • Esters such as ethyl ethyl formate, ethyl acetate, propyl acetate, butyl acetate, and getyl carbonate; dimethyl ether, diisopropyl ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethyl oxetane, diethylene glycol dimethynoate ether Ethers; ketones such as acetone, methylethyl ketone, methyl isobutyl ketone, isophorone, and cyclohexanone; nitro compounds such as nitroethane, nitrobenzene; acetonitrile; Issobutyroni Tril Nitriles; amides such as formamide, dimethylformamide, dimethylacetamide and hexamethylphosphorotriamide; and sulfoxides such as dimethylsulfoxide and sulfolane.
  • Ethers especially tetrahydrofuran
  • ketones especially acetone
  • halogenated hydrocarbons especially methylene chloride
  • amides especially dimethylformamide
  • aromatic amines especially , Pyridine
  • the base used is preferably an organic base (particularly, triethylamine, pyridine, N-methylmorpholine, DBU, etc.), an alkali metal hydride (particularly, sodium hydride), and an alkali metal carbonate. Salts (particularly sodium carbonate and lithium carbonate) are preferred.
  • Z in the compound (2-5) is a silicon atom
  • an organic base such as imidazole is most preferred.
  • reaction temperature is not particularly limited, it is generally 0 to 100 ° C, preferably 20 to 60 ° C.
  • the reaction time is usually from 5 minutes to 30 hours, but when the reaction is carried out at 50 ° C, the reaction is completed in 10 hours.
  • reaction mixture is appropriately neutralized, and if insolubles are present, they are removed by filtration. Then, an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added. The organic layer containing the compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off to obtain the desired product (2) or (2-6).
  • an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added.
  • the organic layer containing the compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off to obtain the desired product (2) or (2-6).
  • the obtained target compound can be further purified, if necessary, by a conventional method, for example, recrystallization, reprecipitation or chromatography.
  • This step is a step of producing compound (2) by reacting compound (2-6) with a deprotecting agent in an inert solvent.
  • the method of this step differs depending on the type of the protecting group of compound (2-6).
  • the solvent used is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction, but ethers such as tetrahydrofuran and dioxane are preferred. Suitable.
  • the reaction temperature is not particularly limited, but is usually from 130 ° C to 100 ° C, and preferably from 0 ° C to 30 ° C.
  • the reaction time is usually 5 minutes to 30 hours, but when the reaction is carried out at 20 ° C., the reaction is completed in 10 hours.
  • the reaction mixture is appropriately neutralized, and if insolubles are present, they are removed by filtration. Then, an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added. After separating the organic layer containing, the organic layer is dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and the solvent is distilled off to obtain the desired product (2).
  • an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate
  • the obtained target compound can be further purified by a conventional method, for example, recrystallization, reprecipitation or chromatography.
  • the solvent used is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction, but acetic acid, alcohol, or a mixed solvent of these and water is preferred.
  • the reaction temperature is not particularly limited, but is usually 0 to 100 ° C., and preferably is carried out at room temperature.
  • the reaction time is usually 5 minutes to 30 hours, but when the reaction is carried out at room temperature, the reaction is completed in 10 hours.
  • the reaction mixture is appropriately neutralized, and if insolubles are present, they are removed by filtration. Then, an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added. The organic layer containing the compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off to obtain the desired product (2).
  • an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added.
  • the organic layer containing the compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off to obtain the desired product (2).
  • the obtained target compound can be further purified, if necessary, by a conventional method, for example, recrystallization, reprecipitation or chromatography. 3) When an aralkyloxycarbonyl group is used as the 3′-position deprotection, the reaction can be carried out by catalytic reduction or oxidation.
  • the reduction catalyst used in the catalytic reduction is not particularly limited as long as it is usually used in the catalytic reduction reaction, but is preferably palladium carbon, Raney nickel, platinum oxide, platinum black. , Rhodium aluminum monoxide, triphenylphosphine-rhodium chloride, and palladium monosulfate.
  • the pressure is not particularly limited, but it is usually 1 to 10 atm.
  • the reaction temperature and reaction time vary depending on the type of the starting material, the solvent and the catalyst, and the like.
  • the solvent used in the removal by oxidation is not particularly limited as long as it does not participate in this reaction, but is preferably a water-containing organic solvent.
  • the organic solvent preferably, ketones such as acetone, halogenated hydrocarbons such as methylene-based lid, chloroform-based form, carbon tetrachloride, and acetonitrile are preferred.
  • Nitriles such as Jethyl ether, tetrahydrofuran, dioxane, amides such as dimethylformamide, dimethylacetamide, hexamethylphosphorotriamide, and dimethylsulfoxide Sulphoxides.
  • the oxidizing agent to be used is not particularly limited as long as it is a compound used for the oxidation, but preferably, potassium persulfate, sodium persulfate, ammonium permite nitrate (CAN), 2, 3-Zikuguchi-5, 6-Diciano-p-Venzoquinone (DDQ) is used.
  • reaction temperature and the reaction time vary depending on the starting material, the solvent, the type of the catalyst, and the like, but are usually carried out at 0 to 150 ° C for 10 minutes to 24 hours.
  • liquid ammonia or in alcohols such as methanol and ethanol, -78 to -20 It can also be removed by the action of alkali metals such as tritium.
  • alkylsilyl halide such as aluminum chloride-sodium iodide or trimethylsilyl iodide in an inert solvent.
  • the solvent to be used is not particularly limited as long as it does not participate in this reaction, but preferably, -tolyls such as acetonitrile, methylene chloride, and chloroform Halogenated hydrocarbons such as form or a mixed solvent thereof are used.
  • reaction temperature and reaction time vary depending on the starting materials, the solvent, and the like, but are usually 0 to 50 ° C. for 5 minutes to 3B.
  • reaction substrate has a sulfur atom
  • sodium aluminum chloride and iodide are preferably used.
  • the reaction mixture is appropriately neutralized, and if insolubles are present, they are removed by filtration, and then an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added.
  • an immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added.
  • the organic layer containing the target compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off to obtain the desired product (2).
  • the obtained target compound can be further purified by a conventional method, for example, recrystallization, reprecipitation or chromatography.
  • CPG (3-1) carrying a nucleoside which is the nucleotide at the 3 'end of the target oligonucleotide, is used as a raw material and is usually used for a DNA chain elongation reaction on a DNA synthesizer.
  • This procedure is repeated to extend the oligonucleotide to the oligonucleotide excluding the nucleotide other than the 5 'end of the desired oligonucleotide, and the oligonucleotide is supported on cPG.
  • This is the step of obtaining oxyribonucleotide (3) and the like.
  • a CPG (3-1) carrying a nucleoside which is a nucleotide on the 3 ′ end side of the target oligonucleotide, which is commercially available or obtained by the method described above or below, is added to D.
  • the phosphite-triester bond formed by condensing the nucleotide unit is converted to phosphoric acid-triester using an oxidizing agent. Oxidize.
  • oligodeoxynucleotide is abbreviated as ODN.
  • a CPG carrying the ODN of the desired nucleotide sequence protected at the 5 ′ end with a DMT group can be synthesized using a DNA synthesizer (for example, Applied Biosystems' phosphoramidite model 380B, The compound can be synthesized by the method in Nucleic Acids Res, 124539 (1994) or a modified method thereof using a cycloamidite method by the phosphoramidite method of Z Biosearch.
  • a DNA synthesizer for example, Applied Biosystems' phosphoramidite model 380B
  • the compound can be synthesized by the method in Nucleic Acids Res, 124539 (1994) or a modified method thereof using a cycloamidite method by the phosphoramidite method of Z Biosearch.
  • nucleotide unit of the nucleotide unit used for the synthesis of an oligonucleotide a nucleotide unit protected with an aliphatic or aromatic acyl group is used.
  • base is A or C
  • a benzoyl group is used
  • base is G
  • an isobutyryl group is suitably used.
  • the solvent used in the condensation reaction in this step is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction. Hydrofuran is preferred, and tetrazole is preferred as the acidic substance used as the catalyst.
  • the reaction temperature may be anywhere from 130 to 50 ° C., but is usually carried out at room temperature.
  • the reaction time varies depending on the reaction temperature from 1 minute to 20 hours. When the reaction is carried out at room temperature, the reaction is completed in 10 minutes.
  • the solvent used in the oxidation reaction of this step is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction and dissolves the starting material to some extent.
  • the heterocyclic amines particularly, pyridine
  • Nitriles especially, acetonitrile
  • ethers especially, tetrahydrofuran
  • nitrogenated hydrocarbons especially, methylene chloride
  • Oxides iodine-pyridine-water.
  • the reaction is carried out at a temperature of from 150 to 100 ° C, and the reaction time is usually from 30 minutes to 15 hours, although it depends mainly on the reaction temperature, the type of the starting compound or the type of the solvent used.
  • the reaction is accelerated by adding an interlayer transfer catalyst such as tributylbenzylammonium mouthride or tributylbenzylammonium bromide.
  • an interlayer transfer catalyst such as tributylbenzylammonium mouthride or tributylbenzylammonium bromide.
  • the desired product (3) is collected by filtration, washed with an organic solvent such as methylene chloride, and used as it is in the next step.
  • the 12th, 14th, 15th, 15th, 17th, 23rd, 26th, 28th, 30th, 33th, and 35th steps can be performed in the same manner as described above.
  • Steps 9 and 20 In this step, the compound (4-2) or (6-2) is reacted with an anhydride of a dicarboxylic acid in the presence of a basic catalyst to form a dicarboxylic acid half ester (4-3) or (6-4). This is the step of obtaining.
  • succinic acid is described as a representative, but the same can be performed for other dicarboxylic acids.
  • the dicarboxylic acid used is not particularly limited, but is preferably one having 2 to 10 carbon atoms, and most preferably succinic acid or glutaric acid.
  • Examples of the basic catalyst used include aminopyridines such as dimethylaminopyridine and pyrrolidinoviridine, tertiary amines such as trimethylaminetriethylamine, and hydrogencarbonate.
  • Alkali metal carbonates such as lithium and lithium carbonate are preferred, but dimethylaminopyridine and pyrrolidinopyridine are most preferred.
  • the solvent used is not particularly limited as long as it does not hinder the reaction and dissolves the starting material to some extent, but is preferably an aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene or xylene; methylene chloride Halogenated hydrocarbons such as lids and chloroform; ethers such as ether, tetrahydrofuran, dioxane, and dimethoxetane; dimethylformamide, dimethylacetamide, hexamethylphosphorotriamide Amides such as amides; sulfoxides such as dimethyl sulfoxide; methanol, ethanol, n-propanol, and isoprono II.
  • aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene or xylene
  • Halogenated hydrocarbons such as lids and chloroform
  • ethers such as ether, tetrahydrofuran, dioxane, and dimethoxetane
  • dimethylformamide dimethyl
  • Alcohols such as ethanol, n-butanol, isobutanol, and isoamino alcohol; dilute acids such as sulfuric acid water; dilute bases such as sodium hydroxide water; water; acetate; methylethylketone; Ketones; heterocyclic amides such as pyridine or nitriles such as acetonitrile
  • they are nitriles (especially acetonitrile), ethers (especially tetrahydrofuran), and halogenated hydrocarbons (especially methylene chloride).
  • the reaction is carried out at a temperature of 150 to 100 ° C., and the reaction time is usually 30 minutes to 15 hours, although it depends mainly on the reaction temperature, the type of the starting compound or the type of the solvent used.
  • the reaction mixture is appropriately neutralized, and if there is any insoluble matter, it is removed by filtration. Then, a water-immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate is added, and the mixture is washed with water. Thereafter, the organic layer containing the target compound is separated, dried over anhydrous magnesium sulfate or the like, and then the solvent is distilled off, whereby the target product (4-1-3) or (6-4) can be obtained.
  • a water-immiscible organic solvent such as water and ethyl acetate
  • the phenol used is not particularly limited as long as it reacts with a carboxylic acid to form an active ester, but pentachlorophenol 412 trophenol is preferred.
  • the base to be used is not particularly limited as long as it is used as a base in a usual reaction, and is preferably triethylamine, tributylamine, or diisopropylamine.
  • the solvent used does not hinder the reaction and dissolves the starting materials to some extent.
  • amides such as dimethylformamide, dimethylacetamide and hexamethylphosphorotriamide
  • sulfoxides such as dimethylsulfoxide
  • acetate Ketones such as luethyl ketone
  • heterocyclic amides such as pyridine or nitriles such as acetonitrile
  • amides such as dimethylformamide. It is a kind.
  • the base to be used is not particularly limited as long as it is used as a base in a usual reaction, but is preferably triethylamine, tributylamine, diisopropylamineethyl. , N-methylmorpholinepyridine, 4- (N, N-dimethylamino) pyridine, N, N-dimethylaniline, N, N-getinoleaniline, 1,5-diazabicyclo [4,3,0] ] Nona 1-5, 1,4 diazabicyclo [2,2,2] octane (DABCO), 1,8 diazabicyclo [5,4,0] Ndeku 7-Den (DBU) Examples thereof include organic bases, preferably, triethylamine, pyridine, N-methylmorpholine, and DBU.
  • the reaction is carried out at a temperature of 150 to 100 ° C, and the reaction time varies depending mainly on the reaction temperature, the type of the starting compound or the solvent used. 30 to 50 hours.
  • the target substance is collected by filtration, washed with an organic solvent such as methylene chloride, and used as it is in the next step.
  • the compound (416) obtained in the 1st step is reacted with a commercially available 5'-O-DMT-nucleoside-13'-phosphoramidite reagent on a DNA synthesizer. Then, the chelating reagent is reacted, This is a step of obtaining the desired product (4.7) which is a CPG carrier having a C bond.
  • the reagent for the formation of a cholate is not particularly limited as long as it can react with trivalent phosphorus to form a cholate. Tetraethylthiuram disulfide (TETD) or Beaucage reagent, which can be obtained from Miragen Z Bioresearch, is suitable.
  • the desired product (4-7) can be obtained by processing according to the method or a modification thereof.
  • the compound (7-3) is reacted with a 5'-O-DMT-nucleotide 3'-phosphoramidite reagent, and a phosphoric acid triester bond is formed by a usual treatment.
  • the desired product (7-7) can be obtained by reacting the thioating reagent with a thioating reagent having a certain force.
  • the desired product is collected by filtration, washed with an organic solvent such as methylene chloride, and used as it is in the next step.
  • the condensing agent to be used is not particularly limited as long as it forms a mixed acid anhydride with the phosphonic acid monoester, but is preferably adamanta.
  • 1-Carbonyl chloride and pivaloyl chloride are used.
  • the deoxidizing agent used is not particularly limited as long as it is a deoxidizing agent used for acylation using a fatty acid halide, but usually pyridin is used.
  • the solvent to be used is not particularly limited as long as it does not inhibit the reaction, but nitriles such as anhydrous acetonitrile are preferably used.
  • the reaction time is 5 to 60 minutes when the reaction is carried out at room temperature.
  • the target substance is collected by filtration, washed with an organic solvent such as methylene chloride, and used as it is in the next step.
  • This step is a step of reacting the compound (5-3) with a desired alkylamine and carbon tetrachloride to form a phosphoramidate bond.
  • reaction temperature is from 150 ° C. to 100 ° C., and is not particularly limited. In the case of room temperature, the reaction time is from 1 hour to 10 hours.

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Description

明細書
T G G G配列を持つ修飾ォリ ゴデォキシリボヌクレオチド 技術分野 本発明は、 優れた抗エイズウィルス作用を有する新規なオリ ゴデォ キシリボヌクレオチドに関する。 背景技術 ある遺伝子に相補的な配列を有するオリ ゴデォキシリボヌク レオチド (以下、 アンチセンスオリ ゴデォキシリボヌク レオチドという） は、 その遺伝子の機能発現を阻害することが知られている。 また、 ウィル ス遺伝子またはオンコジーンのァンチセンスオリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドは、 その遺伝子の機能を阻害することによ り、 それぞれウイ ルスの複製または細胞の増殖を阻害しうることが報告されている（P. C. Zamecnik, M. L. Stephenson, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 75 卷、 1号、 2 8 0頁 （ 1 9 7 8 ) および P. Zamecnik, J. Goodchild, Y. Taguchi, Sarin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83 卷、 6 号、 4143 (1986) ) 。
該アンチセンスオリ ゴデォキシリボヌク レオチドが、 上記阻害作用 を示すためには、 生体内で、 標的となる RN A若しくは DN Aと安定 なハイブリ ッ ドを形成しなくてはならず、 さらに、 このハイブリ ッ ド 形成のためには、 該アンチセンスオリゴデォキシリボヌクレオチドは、 少なく とも 1 5ヌク レオチ ド程度以上の長さを持つことが必要と言わ れていた。
しかしながら、 一般に、 長さが 1 5ヌク レオチド程度以上のものは、 合成コス トの問題により、 その実用化が困難である。 また、 長さが 1
5ヌク レオチ ド程度のアンチセンスオリ ゴデォキシリボヌク レオチド によるウィルスの複製または細胞の増殖阻害活性は、 十分満足するも のとは言えないと考えられる。
本発明者らは， これまで特異的な阻害活性を発揮しえないと考えら れていた鎖長の短いォリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドについて， 種々 の塩基配列並びに 5'末端及び 3'末端側に種々の修飾基を有するオリ ゴ デォキシヌク レオチドを鋭意検討した結果、 一定の塩基配列からなる 修飾ォリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドは， 顕著に高い抗エイズウィル ス作用を有し， 宿主の正常細胞に対する毒性は低く 、 かつ、 合成も比 較的容易で実用性があることを見出し、 公開特許公報 （特開平 7— 8 7 9 8 2号） に記載の化合物を開示した。
さらに、 オリ ゴデォキシリボヌク レオチド誘導体の合成及び活性評 価を継続して行った結果、 公開特許公報 （特開平 7— 8 7 9 8 2号） には具体的に開示されていない一群の化合物が、 該公開特許公報に具 体的に記載された化合物に比べて、 顕著に優れた抗エイズウイルス活 性を示すことを見出し、 本発明を完成するに至った。 本発明の新規なオリゴデォキシリボヌクレオチドは、
一般式
Figure imgf000004_0001
(1) を有し、 また、 本発明は、 その薬理上許容しうる塩も包含する。
上記式 （ 1 ) において、 Qは RiRsRsZ基 （式中、 R 、 R2及び R3 は同一又は異なって水素原子、 炭素数 1乃至 4個のアルキル基、 置 換基を有していてもよいァリール基又は置換基を有していてもよいァ ントラキノ二ル基を示し、 Zは C又は S i を示すか、 あるいは、 R2、 R 3 及び Zが一緒になつてフルォレニル基又はキサンテュル基を示 す。 ) を示し、 R4は水素原子、 置換基を有していてもよい炭素数 1乃 至 4個のアルキル基、 置換基を有していてもよいァリール基又は置換 基を有していてもよいァラルキル基を示し、 丫丄 、 Y3及び Y4 は同一 又は異なって Ο, S又は ΝΗを示し、 Υ2 は 0， S， NH， 炭素数 1乃 至 4個のアルキ レン基又はフエ二レン基を示し、 Xは水酸基で置換さ れていてもよい直鎖又は分枝鎖の炭素数 1乃至 1 0個のアルキ レン基 を示し、 m及び nは同一又は異なって 0乃至 1 0の整数を示し、 Bは、 配列 TGGGGT、 TGGGGTT、 TGGGGGT、 TGGG CG、 TG G G TG、 TG G GG、 TG G G G Gまたは T G G GAG力 ら選 択されるオリ ゴデォキシリボヌク レオチド （以下、 O D Nという） を 示す。 但し、 Bにおいて、 各オリ ゴデォキシリボヌク レオチドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。 なお、 各配列の左末端が 5 ' 末端 であり、 右末端が 3 ' 末端である。 さらに、 Bが、 TGG GG又は T G G G G Gの場合には、 が 3， 4 - (ジベンジルォキシ） フエ二 ル基であり、 R2、 R3 及び R4 がそれぞれ水素原子であり、 Xがェチ レン基であり、 Yい Υ2、 Υ3及び Υ4 がそれぞれ酸素原子であり、 Ζ が炭素原子であり、 mが 1乃至 3であり、 nが 1 である。 また、 Bが TGGGAGの場合には、 が 3， 4一 （ジベンジルォキシ） フエ二 ル基であり、 R2、 R3 及び R4 がそれぞれ水素原子であり、 Xがェチ レン基であり、 Υ2、 Υ3及び Υ4がそれぞれ酸素原子であり、 Ζ が炭素原子であり、 mが 2乃至 3であり、 nが 1である。
また、 本発明は、 上記化合物 （ 1 ) 又はその薬理上許容される塩を 有効成分とする医薬、 特に抗エイズ剤に関する。
さらに、 本発明は、 医薬、 特に抗エイズ剤を製造するための、 上記 化合物 （ 1 ) 又はその薬理上許容される塩の使用に関する。 前記式 （ 1 ) において、 Q基の 、 R 2 及び R 3 の炭素数 1乃至 4個のアルキル基と しては、 例えば、 メチル、 ェチル、 n-プロピル、 イ ソプロピル、 n-ブチル、 イソブチル、 s -プチル、 t-ブチル基があげ られ、 好適には、 t 一ブチル基があげられる。
前記式 （ 1 ) において、 Q基の R i 、 R 2 及び R 3 の置換基を有して いてもよいァリ ール基と しては、 例えば、 フエニル基 ； 4ーメチルフ ェニル、 4一 t 一ブチルフエエルのような炭素数 1 乃至 4 個のアルキ ノレ置換フエ二ノレ基 ； 2 —フエユルフェ二ノレ、 4 一フエ二ノレフエ二ノレの よ うなァリール置換フエニル基 ； 4 一フルオロ フェ -ル、 2 —ク ロ 口 フエ二ノレ、 4 —ク ロ 口 フエ二ノレ、 4 —プ、ロモフエ二ノレ、 4 — ョ一 ドフ ェニル、 2 ， 4ージフルオロフェニルのようなモノ又はジハロゲン置 換のフエニル基 ； 4一二 トロフエエルのよ う な二 トロ置換フエニル 基 ； 4 一 t 一ブトキシフエニル、 4ーメ トキシフエ二ノレ、 4 ーェ トキ シフエニルのような炭素数 1乃至 4 個のアルコキシ置換フエニル基 ； 3—フエノキシフェニ^^、 4—フエノキシフエ二ノレのよ うなァリ一ノレ ォキシ置換フエニル基 ； 2 —べンジルォキシフエニル、 4—ベンジル ォキシフエエル、 3 ， 4 - (ジベンジルォキシ） フエニル、 3 ， 5 - (ジベンジルォキシ） フェニルのよ うなモノ又はジァラルキルォキシ 置換フエエル基、 3 , 5—ビス [ 3 ， 5— (ジベンジルォキシ） ベン ジルォキシ] フエニルのよ うなモノ又はジァラルキルォキシ置換され たァラルキルォキシモノ又はジ置換フエエル基 ； ナフタ レン一 1 ーィ ル、 ナフタレン一 2 —ィ/レのよ うなナフチノレ基 ； フエナンスレン一 4 —ィルのようなフエナンスレ -ル基 ； アン トラセン一 9 _ィル、 アン トラセン一 2—ィルのようなアン トラセエル基及びピレ -ル基があげ られ、 好適には、 無置換のフエニル基、 アルコキシ置換フエニル基
(特に、 4ーメ トキシフエ二ル） 、 ジァラルキルォキシ置換フエニル 基 （特に、 3 ， 4— (ジベンジルォキシ） フエ-ル、 3 ， 5— (ジべ ンジルォキシ） フエニル） 及びモノ又はジァラルキルォキシ置換され たモノ又はジァラルキルォキシ置換フエニル基 （特に、 3 ， 5—ビス
[ 3 , 5— (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ] フエ-ル） であり、 さらに好適には、 3 ， 4 一 （ジベンジルォキシ） フエニル及び 3 ， 5 一 （ジベンジルォキシ） フエ-ル基 （特に 3 ， 4 一 （ジベンジルォキ シ） フエニル基） があげられる。
前記式 （ 1 ) において、 Q基の 、 R 2 及び R 3 の置換基を有し ていてもよいアントラキノニル基と しては、 例えば、 9, 10- アン トラ キノン一 1 一ィル、 9， 10- アントラキノンー 2—ィルのような無置換 アン トラキノニル基 ； 9, 10- アントラキノン一 4 —メチル一 1 一ィル、 9, 10- アン トラキノン一 6 —ェチル一 2 —ィルのような炭素数 1 乃至 4 個のアルキル置換アントラキノニル基 ； 9 , 10- アン トラキノン一 5— メ トキシー 1 一ィル、 9, 10- アントラキノン一 8 —エ トキシー 2 —ィ ルのような炭素数 1 乃至 4 個のアルコキシ置換アントラキノ -ル基 ； 9, 10- アン トラキノンー 7 —クロ口 一 1 —ィル、 9， 10- アン トラキノ ン一 8 —フルオロー 2 —ィルのようなハロゲン置換アン トラキノエル 基 ； 9, 10- アン トラキノン一 6 —ヒ ドロキシ一 1 —ィルのよ うなヒ ド ロキシ置換アン トラキノニル基があげられ、 好適には無置換のものが あげられる。 前記式 （ 1 ) において、 Q基の R 2 、 R 3及び Zが一緒になつて形成 するフルォレニル基又はキサンテュル基と しては、 好適には、 フルォ レン一 9—ィル、 キサンテン一 9ーィル基があげられる。
前記式 （ 1 ) において、 R 4の置換基を有していてもよい炭素数 1乃 至 4個のアルキル基としては、 例えば、 メチル、 ェチル、 n-プロピル、 イ ソプロ ピル、 n-ブチル、 イ ソブチル、 s -ブチル、 t-ブチルのよ うな 無置換アルキル基 ； 2—アミノエチル、 3 —ァミノプロピルのよ うな ァミ ノ置換アルキル基 ； 2—メ トキシェチル、 3 —メ トキシプロピル のよ うな炭素数 1 乃至 4個のアルコキシ置換アルキル基があげられ、 好適には、 メチル、 ェチル、 n -プロ ピル、 2—アミ ノエチル、 2—メ トキシェチル基があげられる。
前記式 （ 1 ) において、 R 4の置換基を有していてもよいァリール基 と しては、 例えば、 フエニル基 ； 2 —メチルフエニル、 3 —ェチルフ ェニルのよ うな炭素数 1乃至 4個のアルキル置換フヱニル基 ； 2—フ ノレオロフェニノレ、 2 _クロ口 フエ二ノレ、 4 一クロ口 フエ二ノレ、 2 —ブ ロモフ エニル、 2 — ョ ー ドフエニルのよ うなノヽ口.ゲン置換フ エエル 基 ； 2 —二 ト ロ フエ二ノレ、 4 —ュ ト ロ フエ -ノレのよ うなニ ト ロ置換フ ェニル基 ； 4ーメ トキシフエ二ル、 4 一エ トキシフエニルのようなァ ルコキシ置換フエ-ル基 ； 4ーメチルチオフエエル、 4ーェチルチオ フエニルのような炭素数 1 乃至 4個のアルキルチオ置換フヱ-ル基 ； ナフチル基 ； フエナンスレニル基 ； アントラセニル基 ； ピレニル基が あげられ、 好適には、 フエニル、 ハロゲン置換フエニル、 ニ ト ロ置換 フェニル基があげられる。
前記式 （ 1 ) において、 R 4の置換基を有していてもよいァラルキル 基と しては、 例えば、 ベンジル基 ； メチルベンジル、 ェチルベンジル のよ うな炭素数 1乃至 4個のアルキル置換ベンジル基 ； メ トキシベン エ トキシベンジルのよ う な炭素数 1 乃至 4個のアルコキシ置換 ベンジノレ基 ； フノレオ口べンジノレ、 ク ロ 口べンジノレ、 ブ'ロモべンジノレの よ う なハロゲン置換べンジノレ基 ； ク ロ ロナフチルメチノレのよ うなハロ ゲン置換ナフチルメチル基 ； イ ンデュルメチル基 ； フエナンスレニル メチル基 ； アン トラセニルメチル基 ； ジフエニルメチル基 ； ト リ フエ エルメチル基 ； 1 -フエネチル、 2 -フエネチル、 2, 2 -ジフエ二ルェチノレ、 2， 2， 2- ト リ フ エ ニルェチル、 3, 3 , 3, - ト リ フ エ ニルプロ ピルのよ う な モノ、 ジ若しく は ト リ フェニル置換ェチル基 ； 卜ナフチルェチル、 2 - ナフチルェチルのよ うなナフチル置換ェチル基 ； 1-フエニルプロ ピル、 2-フエ二ノレプロ ピル、 3-フエ二ノレプロ ピル、 1 -ナフチルプロ ピル、 2- ナフチルプロ ピル、 3-ナフチルプロ ピルのよ う なァ リール置換プロ ピ ノレ基 ； 1 -フエ -ルブチノレ、 2-フエエルブチノレ、 3-フエ -ルブチノレ、 4- フエエルプチノレ、 1 -ナフチノレブチル、 2-ナフチノレプチノレ、 3-ナフチノレ ブチル、 4-ナフチルブチルのよ う なフエニル又はナフチル置換ブチル 基 ； 1 -フエ二ルペンチル、 2-フエ二ルペンチル、 3-フエ二ルペンチノレ、 4_フエ二ルペンチル、 5-フエ二ルペンチル、 1 -ナフチルペンチル、 2 - ナフチルペンチル、 3-ナフチルペンチル、 4-ナフチルペンチル、 5 -ナ フチルペンチルのよ う なフェエル又はナフチル置換ペンチル基 ； 1 -フ ェニノレへキシル、 2-フエ二ノレへキシル、 3-フエエルへキシル、 4-フエ ニルへキシル、 5-フエ 二ノレへキシル、 6-フエ 二ノレへキシノレ、 1 -ナフチ ノレへキシノレ、 2-ナフチノレへキシノレ、 3-ナフチノレへキシノレ、 4 -ナフチノレ へキシノレ、 5-ナフチルへキシノレ、 6-ナフチルへキシルのよ う なフ エ二 ル又はナフチル置換へキシル基があげられ、 好適には、 無置換のベン ジル基又は 2-フエネチル基である。
前記式 （ 1 ) において、 Y 2 の炭素数 1 乃至 4個のアルキレンと して は、 メチレン、 エチレン、 プロ ピレン、 テ トラメチレン、 ペンタメチ レンがあげられ、 好適にはメチレンである。
前記式 （ 1 ) において、 丫 ェ 、 Y3及び Y4 は、 好適には、 酸素原子 である。
前記式 （ 1 ) において、 Υ2 は、 好適には、 酸素又は硫黄原子である。 前記式 （ 1 ) において、 Q基の Ζは、 好適には、 炭素原子である。 前記式 （ 1 ) において、 Xの水酸基で置換されていてもよい直鎖又 は分枝鎖の炭素数 1乃至 1 0個のアルキレン基と しては、 例えば、 メ チレン、 メチルメチレン、 エチレン、 プロ ピレン、 テ トラメチレン、 メチノレエチレン、 丄-メチノレ ト リ メチレン、 2-メチノレ ト リ メチレン、 2- メチルテ トラメチレン、 3-メチル ト リ メチレン、 ペンタメチレン、 へ キサメ チレン、 ヘプタメチレン、 ォク タメチレン、 ノナメチレン、 デ カメチレン、 2-ヒ ドロキシ ト リ メチレン、 2-ヒ ドロキシテ トラメチレ ン基があげられ、 好適にはメチレン、 メチルメチレン、 エチレン、 プ ロ ピレン、 メチルエチレン基である。
前記式 （ 1 ) において、 mは、 好適には 0乃至 6であり、 更に好適 には 0乃至 4である。 但し、 Bが TG G GG又は TGG GG Gの場合 には、 mが 1乃至 3が好適であり、 Bが T G G G A Gの場合には、 m が 2乃至 3が好適である。
前記式 （ 1 ) において、 nは、 好適には 0乃至 6であり、 更に好適に は 1である。
前記式 （ 1 ) において、 Bの配列 TG GG G T、 TGG G G T T、 TG G G GGT、 TGG G CG、 T GG GT G、 T G G GG, T G G G GGまたは TG GGAGから選択されるオリ ゴデォキシリボヌク レ ォチドのうち、 好適なものは、 配列 TGGG GT、 TG GG G T T、 TGG G GGT、 TGGG G、 TG GG GGまたは TG GG AGであ る。 なお、 Bの配列中、 Aはアデニンデォキシリボヌク レオチ ド、 Gは グァニンデォキシリボヌク レオチ ド、 Cはシ トシンデォキシリボヌク レオチ ド、 Tはチミンデォキシリボヌク レオチドを示す。 また、 左端 が 5 ' 末端であり、 右端が 3 ' 末端である。 但し、 各オリ ゴデォキシリ ボヌク レオチ ドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。
前記式 （ 1 ) において、 、 R2 、 R3 、 及び Zの組み合わ せによ り得られる 5 ' 末端の好適な基 （Ri Rs Rs Z— Yi ) と して は、 ト リ フエ-ルメチルォキシ、 3， 4— (ジベンジノレオキシ） ベン ジルォキシ、 3， 5— （ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 t ーブ チノレジフエニノレシリルォキシ、 フエニノレフ レオレニ/レオキシ、 フエ二 ルキサンテニルォキシ基があげられ、 さらに好適には、 トリ フエニル メチノレオキシ、 3， 4一 （ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 3， 5 - (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ基又は 3， 5—ビス [ 3， 5 - (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ] ベンジルォキシ基であり、 最も好適には 3， 4— (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ基である。
前記式 （ 1 ) において、 R4、 X、 Y2 、 Υ3 、 Υ4、 m及び ηの組 み合わせにより得られる 3 ' 末端の好適な基 （ [P (O) (Y2 R4 ) 一 Y3 — (X - Υ4 ) n ] m Η) と しては、 水素（Η) 、 メチルホスホリ ル [P(0) (0CH3)0H]、 2 — ク ロ 口 フエ ニルホス ホ リ ル [P(0) (0-2-C1- Ph)0H] 、 （O—メチル） チォホスホリル [P(0) (0CH3)SH]、 メチルホス ホニル [P(0) (CH3)0H] 、 メ チルチオホスホニル [P(0) (CH3)SH] 、 フエ -ルホスホニル [P (0) (Ph) OH]、 2 — ヒ ドロ キシェチルホスホ リ ノレ [P(0) (0H)0CH2CH20H] 、 [O— ( 2—ヒ ドロキシェチル） ] チォホス ホ リル [P(0) (SH)0CH2CH20H] 、 フエニルホスホ リル [P (0) (OPh) OH] 、 4一ク ロ 口 フエ -ルホスホ リル [P(0) (0-4- CI- Ph)0H] 、 2—二 ト ロ フ ェニルホスホ リル [P (0) (0-2-N02-Ph) OH] N 4一二 トロ フエニルホスホ リ ル [P(0) (0- 2- N02- Ph)0H]、 ェチルホスホ リ ル [P(0) (0CH2CH3)0H] 、 (〇一ェチル） チォホスホ リル [P(0) (0CH2CH3)SH] 、 2 — （ 2 —ヒ ド ロ キ シ ェ チ ノレ ホ ス ホ リ ル ォ キ シ ） ェ チ ノレ ホ ス ホ リ ノレ
{ [P(0) (0H)0CH2CH20]2H }、 2— [ 2 — ( 2 —ヒ ドロキシェチルホス ホ リ ノレオキ シ） ェチノレホ ス ホ リ ノレオキ シ ] ェ チノレホ ス ホ リ ノレ { [P(0) (0H)0CH2CH20]3H }基があげられ、 さらに好適には、 水素、 メ チノレホスホ リノレ、 2 —ク ロ 口フエ二ノレホスホ リノレ、 （O—メチノレ） チ ォホスホリノレ、 メチノレホスホニノレ、 メチノレチォホスホニノレ、 フエ二ノレ ホスホ-ノレ、 2 — ヒ ドロキシェチノレホスホリノレ、 [ O - ( 2 —ヒ ドロ キシェチル） ] チォホスホ リル、 2 — （ 2—ヒ ドロキシェチルホスホ リルォキシ） ェチルホスホ リル、 2 — [ 2 — （ 2 — ヒ ドロキシェチル ホスホ リルォキシ） ェチノレホスホ リノレオキシ] ェチルホスホ リル基で あり、 最も好適には 2 —ヒ ドロキシェチルホスホリル、 2 — ( 2 —ヒ ドロキシェチノレホスホ リノレオキシ） ェチノレホスホ リ ノレ、 2 — [ 2 — ( 2 — ヒ ドロキシェチルホスホ リルォキシ） ェチルホスホ リ ノレオキ シ] ェチルホスホリル基である。
本発明の化合物において、 好適な化合物と しては、
1 ) Bが配列 T GG GG T、 TG G GG TT、 T GG G G G T、 T G G G G、 T G G G GGまたは T GG GA Gから選択されるォ リ ゴデォキシリボヌク レオチドである化合物、
2 ) R 1 ¾ R2 、 R3 、 Y i 及び Zの組み合わせによ り得られる
5 ' 末端の基 （R i Rs Rs Z — 、 ト リ フエニルメチル ォキシ、 3， 4 - (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 3， 5 一 （ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 3， 5 —ビス [ 3， 5 一 （ジベンジルォキシ） ベンジ /レオキシ] ペンジノレオキシ、 t — プチルジフェニルシリ /レオキシ、 フェ-ルフルォレュルォキシ、 フエニルキサンテュルォキシ基であり 、 R4 、 X、 Y2 、 Υ3 、 Υ4 、 m及び ηの組み合わせにより得られる 3 ' 末端の基 （ [Ρ
(O) ( Y 2 R 4 ) 一 Υ3 — (X— Y4 ) n ] m H) 、 水素、 メチルホスホリル、 2—ク ロ口 フエ -ルホスホリノレ、 （O—メチ ノレ） チォホスホリル、 メチルホスホニル、 メチルチオホスホニル、 フエ二ノレホスホニノレ、 2—ヒ ドロキシェチノレホスホリノレ、 [ O -
( 2—ヒ ドロキシェチル） ] チォホスホ リ ル、 フエュルホスホリ ノレ、 4一ク ロ 口 フエ二ノレホスホ リ ノレ、 2—エ ト ロ フエェノレホスホ リ ノレ、 4—ニ ト ロ フエニノレホスホリノレ、 ェチノレホスホ リノレ、 (O —ェチノレ） チォホスホ リノレ、 2— ( 2—ヒ ドロキシェチノレホスホ リルォキシ） ェチルホスホ リル、 2— [ 2 - ( 2—ヒ ドロキシェ チノレホスホリノレ才キシ） ェチノレホスホリ ノレ才キシ] ェチノレホスホ リル基であり、 Bが配列 T G G G G T、 T G G G G T T、 T G G G GGT、 TGGG CGまたは TG GGTGから選択されるオリ ゴデォキシリボヌク レオチドである化合物、
R x , R2 , R3 ^ Y 及び Zの組み合わせによ り得られる
5 ' 末端の基 （R i Rs Rg Z— Y i ) が、 ト リ フエニルメチル ォキシ、 3 , 4— (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 3， 5 一 （ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ基であり、 R4 、 X、 Y 2 、 Y3 、 Y4 、 m及び ηの組み合わせにより得られる 3 ' 末端 の基 （ 〔 P (0) (Y2 R4 ) — Υ3 — (X— Y4 ) n ] m H) 力'水素、 メチノレホスホ リ ル、 2—ク ロ 口 フエエノレホスホ リノレ、
(O—メチル） チォホスホ リル、 メチルホスホニノレ、 メチノレチォ ホスホニノレ、 フエ二ノレホスホニノレ、 2—ヒ ドロキシェチノレホスホ リノレ、 [O— （ 2—ヒ ドロキシェチル） ] チォホスホリル、 2—
( 2—ヒ ドロキシェチルホスホリルォキシ） ェチルホスホリル、 2— [ 2— ( 2—ヒ ドロキシェチルホスホリルォキシ） ェチルホ スホリルォキシ] ェチルホスホリル基であり、 Bが配列 TGGG GT、 TG GGGTTまたは TGG GGGTから選択されるオリ ゴデォキシリボヌク レオチドである化合物、
4 ) R , R2 、 R3 、 Y 及び Zの組み合わせによ り得られる 5 ' 末端の基 （R 1 R2 R3 Z— 力 3， 4— (ジベンジ ルォキシ） ベンジルォキシ基であり、 R4 、 X、 Y2 、 Υ3 、 Υ 4 、 m及び ηの組み合わせによ り得られる 3 ' 末端の基 （ [ Ρ
(O) (Y2 R4 ) - Y3 - (X— Υ4 ) η ] m Η) 、 2—ヒ ドロキシェチノレホスホリノレ、 2— （ 2—ヒ ドロキシェチノレホスホ リルォキシ） ェチルホスホリノレ、 2— [ 2— （2—ヒ ドロキシェ チルホスホリ ノレオキシ） ェチノレホスホリ ノレオキシ] ェチノレホスホ リル基であり、 Βが配列 T G G G G Τ、 T G G G G Τ Τまたは Τ GGGGG Tから選択されるォリゴデォキシリボヌク レオチドで ある化合物。 また、 以下の 5 ) 及び 6) に掲げる本発明の化合物も好適である。
5 ) —般式
Figure imgf000014_0001
[式中、 Bは配列 T GG GGまたは TG GG GGで表わされるォ リ ゴデォキシリボヌク レオチドを示し、 mは 1、 2または 3を示 す。 但し、 Bにおいて、 Gはグァニンデォキシリボヌクレオチド、 Tはチミンデォキシリボヌク レオチ ドを示す。 また各オリ ゴデォ キシリボヌク レオチ ドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。 なお、 各配列の左末端が 5 ' 末端であり、 右末端が 3 ' 末端であ る。 ] で表わされる化合物、
6 ) 一般式
Figure imgf000015_0001
[式中、 Bは配列 T G G G A Gで表わされるオリ ゴデォキシリボ ヌク レオチドを示し、 mは 2または 3を示す。 但し、 Bにおいて、 Aはアデニンデォキシリボヌク レオチド、 Gはグァエンデォキシ リボヌクレオチド、 Tはチミンデォキシリボヌクレオチドを示す。 また該オリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の 水酸基は含まない。 なお、 配列の左末端が 5 ' 末端であり、 右末 端が 3 ' 末端である。 ] で表わされる化合物。
本発明の前記一般式 （ 1 ) を有する化合物は、 「薬理上許容される 塩」 の形で使用することができ、 そのような塩と しては、 例えばナト リ ゥム、 カリ ゥムのよ うなアルカ リ金属 ； カルシウムのようなアル力 リ土類金属 ； アンモニア ； リジン、 アルギニンのよ うな塩基性ァミノ 酸 ； ト リェチルァミンのよ うなアルキルァミ ン類 ； などの無機塩又は 有機塩を挙げることができ、 好適には、 ナト リ ウム、 カ リ ウムのよう なアルカ リ金属塩である。
また、 一般式 （ 1 ) を有する化合物及びその薬理上許容される塩は、 その製造工程で溶媒和物を形成したり、 保存中に水和物を形成するこ とがあるが、 それらの溶媒和物及び水和物も本発明は包含する。 99/19474
14 本発明の代表的化合物と しては、 例えば、 表 1 に記載する化合物を 挙げることができるが、 本発明はこれらの化合物に限定されるもので はない。
表中、 Me はメチルを、 Et はェチルを、 Pr はプロピルを、 Bu はブチ ルを、 tBu は t —ブチルを、 3,4- DBP は 3、 4一 （ジベンジルォキ シ） フエエルを、 3,5- BDBBP は 3、 5—ビス { 3、 5 - (ジベンジル ォキシ） ベンジルォキシ } フエニルを、 3,5-DBP は 3、 5 - (ジベン ジルォキシ） フエエルを、 1- PYR はピレン一 1 —ィルを、 2- NAP はナ フタレン一 2—ィルを、 4- PhPh は 4— (フエニル） フエ-ルを、 2- PhPh は 2— (フエニル） フエニルを、 9- ANT はアントラセン一 9—ィ ルを、 2-ANT はアントラセン一 2—ィルを、 1-NAP はナフタレン一 1 —ィルを、 2- ANQ はアントラキノン一 2—ィルを、 4- PHE はフエナン スレン一 4—イノレを、 PhE は 1 、 4—フエ二レンを、 2— NH2Et は 2— アミノエチルを、 2- MeOEt は 2—メ トキシェチルを、 1 - Me- PrE は 1 一メチルプロピレンを、 2- Me-BuE は 2—メチルブチレンを、 2- 0H- PrE は 2—ヒ ドロキシプロピレンを、 ①は TGGGGT、 ②は TGGG GTT、 （1^¾TGGGGGT、 ④は TGGGCG、 ⑤は TGGGTG、 ⑥は TGGGG、 ⑦は TGGGGG、 ⑧は TGGG AGを示す。
Figure imgf000016_0001
(表 1 )
番号 Rl R2 R3 Z Yl Y2 R4 Y3 X Y4 n m 配歹 IJ
1 3, 4 - DBP H C O O 0 CH2CH2 O i l ① 2 3, 4- DBP H C O S 0 CH2CH2 O i l ① Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ
〇
o 〇 o
o o o o
ΐ。 £ , 5-DBP H H C O CH2 H 0 - - 0 ①, 5 DBP H H C O CH2 H S - - 0 ①, 5-DBP H H C O PhE H 0 - - 0 ①, 5-DBP H H C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①, 5-DBP H H C 0 0 Me NH (CH2)3 一 1 ① - MeOPh 4-MeOPh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ①- MeOPh 4- MeOPh Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 ①- MeOPh 4- MeOPh Ph C O - - - - - 0 ① - MeOPh 4 - MeOPh Ph C O O Me 0 - - 0 ① - MeOPh 4 - MeOPIi Ph C O O Me S - - 0 ① MeOPh 4 - MeOPh Ph C O O 2 ClPh 0 - - 0 ①- MeOPh 4- MeOPh Ph C O CH2 H 0 - - 0 ①- MeOPh 4- MeOPh Ph C O CH2 H S - - 0 ①- MeOPh 4- MeOPh Ph C O PhE H 0 - - 0 ① MeOPh 4- MeOPh Ph C O NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①- MeOPh 4- MeOPh P C O O Me NH (CH2)3 一 1 ① - MeOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ① - MeOPh Ph Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 ① - MeOPh Ph Ph C O - - - - - 0 ①- MeOPh Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 ①- MeOPh Ph Ph C 0 0 Me S - - 0 ① - MeOPh Ph Ph C O O 2 - ClPh 0 - - 0 ①- MeOPh Ph Ph C O CH2 H 0 - - 0 ① - MeOPh Ph Ph C O CH2 H S - - 0 ①-MeOPh Ph Ph C O PhE H 0 - - 0 ① - MeOPh Ph Ph C O NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ① o o
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81 4- BnOPh H H C O O Me 0 - - 0 ①
82 4-BnOPh H H C O O Me S - - 0 ①
83 4-BnOPh H H C O O 2-ClPh 0 - - 0 ①
84 4--BnOPh H II C 0 CH2 H 0 - - 0 ①
85 4 BnOPh H H C 0 CH2 H S - - 0 ①
86 4-BnOPh H H C O PhE H 0 - - 0 ①
87 4- BnOPh H H C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①
88 4 BnOPh H H C 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ①
89 Ph Xan then-9-yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
90 Ph Xanthen-9-yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ① 91 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 ①
92 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 ①
93 Ph Xanthen-9-y l 0 0 Me S - - 0 ①
94 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 ①
95 Ph Xanthen-9-yl 0 CH2 H 0 - - 0 ①
96 Ph Xanthen-9-yl 0 CH2 H S - - 0 ①
97 Ph Xanthen-9-yl 0 PhE H ■ 0 - - 0 ①
98 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①
99 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ① 100 Ph Fluoren 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ① 101 Ph Fluoren - 9 - yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ①
102 Ph Fluoren - 9 - yl 0 - - - - 0 ①
103 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me 0 - 0 ①
104 Ph Fluoren - 9- yl 0 0 Me S - - 0 ①
105 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 ①
106 Ph Fluoren - 9 - yl 0 CH2 H 0 - 一 0 ① 99/19474
19
107 Ph Fluoren - 9 - y 1 0 CH2 II S - ①
108 Ph Fluoren-9-y 1 0 PhE H 0 ①
109 Ph Fluoren - 9 - yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 ①
110 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me NH (CH2)3 ①
111 1-PYR H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ① 112 1-PYR H H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ① 113 1-PYR H H C 0 - - 0 ① 114 1-PYR H H c 0 0 Me 0 - - 0 ① 115 1-PYR H H c 0 0 Me S - - 0 ①
116 2-NAP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
117 2-NAP H H c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ①
118 2-NAP H H c 0 - - 0 ①
119 2-NAP H H c 0 0 Me 0 - - 0 ①
120 2-NAP H H c 0 0 Me S - - 0 ① 121 Ph Ph H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
122 Ph Ph H c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ①
123 Ph Ph H c 0 - - 0 ①
124 Ph Ph H c 0 0 Me 0 - - 0 ①
125 Ph Ph H c 0 0 Me S - - 0 ①
126 4 - PhPh H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
127 4 - PhPh H H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 ①
128 4 - PhPh H H c 0 - - 0 ①
129 4 - PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 ①
130 -PhPh H H c 0 0 Me S - - 0 ① 131 2 - PhPh H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ① 132 2 - PhPh H H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 ① Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ
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o o o o o o o o o o o
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^s 99/19474
21
159 3, 4- DBP H H C O O H 0 CH2CH2 0 6 2 ①
160 3, 4- DBP H H c o o H 0 CH2CH2 0 6 3 ① 161 3, 4- DBP II H c o o H 0 CH2CH2 0 6 4 ①
162 3, 4- DBP H H c o o H 0 2-OH-PrE NH 1 ①
163 Ph Ph Ph C 0 NH Me 0 CH2CH2 0 1 ①
164 Ph Ph Ph C O O Ph 0 - 0 ①
165 Ph Ph Ph C O O 4-ClPh 0 - 0 ①
166 Ph Ph Ph C 0 NH 2-NH2Et 0 CH2CH2 0 1 ①
167 Ph Ph Ph C 0 NH 2-MeOEt 0 CH2CH2 0 1 ①
168 Ph Ph Ph C O S Me 0 - 0 ①
169 Ph Ph Ph C O S H 0 - 0 ①
170 Ph Ph Ph C O O H S CH2CH2 0 1 ① 171 Ph Ph Ph C O O Et 0 - 0 ①
172 Ph Ph Ph C O O Et s - 0 ①
173 Ph Ph Ph c o o Bu 0 - 0 ①
174 Ph Ph Ph c o o Bu s - 0 ①
175 Ph Ph Ph c o o H 0 CH2CH2 0 6 ①
176 Ph Ph Ph c o o H 0 CH2CH2 0 6 2 ①
177 Ph Ph Ph c o o H 0 CH2CH2 0 6 3 ①
178 Ph Ph Ph c o o H 0 CH2CH2 0 6 4 ①
179 Ph Ph Ph c o o H 0 2-OH-PrE NH 1 1 ①
180 3, 5- DBP H H C 0 NH Me 0 CH2CH2 0 1 1 ① 181 3, 5- DBP H H c o o Ph 0 - 0 1 ①
182 3， 5 - DBP H H c o o 4-ClPh 0 - 0 1 ①
183 3, 5- DBP H H C 0 NH 2-NH2Et 0 CH2CH2 0 1 1 ①
184 3, 5 - DBP H H C 0 NH 2-MeOEt 0 CH2CH2 0 1 1 ① idf. ,3d6l〇Λν "
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SZ9tO/86df/X3d f^6l/66 OW /？ 66Ϊ6 OAV
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言)
289 3, 4-DBP H H C S CH2 H 0 - - 0 ①
290 3, 4-DBP H H c s CH2 H S - - 0 ① 291 3, 4 -DBP H H c s Ph E H 0 - - 0 ①
292 3, 4-DBP H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①
293 3 , 4-DBP H H c s 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ①
294 9- ANT H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
295 9- ANT H H c s S H 0 CH2CH2 0 1 ①
296 9- ANT H H c s - 0 ①
297 9- ANT H H c s 0 Me 0 - - 0 ①
298 9- ANT H H c s 0 Me S - - 0 ①
299 9- ANT H H c s 0 2-C l Ph 0 - - 0 ①
300 9- ANT H H c s CH2 H 0 - 0 ① 301 9- ANT H H c s CH2 H S - - 0 ①
302 9- ANT H H c s PhE H 0 - - 0 ①
303 9- ANT I I H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①
304 9 ANT H H c s 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ①
305 2- NAP H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
306 2- NAP H H c s S H 0 CH2CH2 0 1 ①
307 2- NAP H H c s - 0 ①
308 2- NAP H H c s 0 Me 0 - - 0 ①
309 2- NAP H H c s 0 Me S - - 0 ①
310 2- NAP H H c s 0 2-C lPh 0 - - 0 ① 31 1 2 - NAP H H c s CH2 H 0 - - 0 ①
312 2- NAP H H c s CH2 H S - - 0 ①
313 2- NAP H H c s PhE H 0 - - 0 ①
314 2- NAP H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ① 315 2-NAP II H C S 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ①
316 BDBBP H H C S 0 H 0 CH2CH2 0 1 ①
317 BDBBP H H C S S H 0 CH2CH2 0 1 ①
318 BDBBP H H C S - - - - 0 ①
319 BDBBP H H C S O Me 0 - - 0 ①
320 BDBBP H H C S O Me S - - 0 ① 321 BDBBP H H C S 0 2-ClPh 0 - - 0 ①
322 BDBBP H H C S CH2 H 0 - - 0 ①
323 BDBBP H H C S CH2 H S - - 0 ①
324 BDBBP H H C S PhE H 0 - - 0 ①
325 BDBBP H H C S NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ①
326 BDBBP H H C S 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ①
327 3, 4-DBP H H C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
328 3, 4-DBP H H C O S H 0 CH2CH2 0 1 ②
329 3, 4-DBP H H C O - - - - - 0 ②
330 3, 4-DBP H H C O O Me 0 - - 0 ② 331 3, 4-DBP H H C O O Me S - - 0 ②
332 3， 4-DBP H H C O O 2-ClPh 0 - - 0 ②
333 3, 4-DBP H H C 0 CH2 H 0 - - 0 ②
334 3, 4-DBP H H C 0 CH2 H S — - 0 ②
335 3， 4-DBP H H C O PhE H 0 - - 0 ②
336 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ②
337 3, 4-DBP H H C 0 0 Me NH (CH2)3 - 1 ②
338 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
339 Ph Ph Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 ②
340 Ph Ph Ph C 0 - - - 0 0 ② ® Θ ® ® Θ ® (§} @) (§) Θ ί§) {§) @) © (§) ® (§) (§) (§) @) ® (§) (§) (§) © (§)
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367 4- MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 CH2 H S - - 0
368 4 - MeOPh 4-MeOPh Ph C O PhE H 0 - - 0 ②
369 4 MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ②
370 4- MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me NH (CH2)3 - 1 ② 371 4 MeOPh Ph Ph C O 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
372 4 -MeOPh Ph Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1
373 4 MeOPh Ph Ph C 0 - 0
374 4 - MeOPh Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 ②
375 4-MeOPh Ph Ph C O 0 Me S - - 0 ②
376 4 MeOPh Ph Ph C O 0 2-ClPh 0 - - 0 ②
377 4- MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H 0 - - 0 ②
378 4- MeOPh Ph Ph C O CH2 H S - - 0 ②
379 4 - MeOPh Ph Ph C 0 PhE H 0 - - 0 ②
380 4- MeOPh Ph Ph C O H Pr 0 CH2CH2 0 1 381 4 - MeOPh Ph P C 0 0 Me NH (CH2)3 - 1
382 tBu Ph Ph Si 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
383 tBu Ph Ph Si 0 S H 0 CH2CH2 0 1
384 tBu Ph Ph Si 0 - 0 ②
385 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 ②
386 tBu Ph Ph Si 0 0 Me S - - 0 ②
387 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 ②
388 tBu Ph Ph Si 0 CH2 H 0 - - 0 ②
389 tBu Ph Ph Si 0 CH2 H S - - 0 ② 390 -tBu Ph Ph Si 0 PhE H 0 - - 0 391 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 392 tBu Ph Ph Si 0 0 Me NH (CH2)3 一 1 ② ΐ 0 - 0 0 . Md 81 ② 0 0 - 0 - ② ΐ 0 0 H S 0 - Md 9 ⑤ I 0 0 Η 0 0 - .6 - USI^UBX Md 9\f
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② ΐ 0 2HD2H3 0 d HN 0 0 H dO'JO-i' ε ② 0 - - 0 H 3Md 0 0 H Lidoug- zif ② 0 - - S H ZHO 0 3 H qdouo-i? π ② 0 - - 0 H ZHD 0 3 H MdOUO-i' 0 ② 0 - - 0 ^ά\^-Z 0 0 3 H リ doug - e f ⑧ 0 - - S 9W 0 0 3 H Lidoug - sof ⑤ 0 - - 0 9W 0 0 0 H MdO'JO-t' LOf ② 0 - 0 0 H MdOUQ-^ 90
dddddddddHHHHHH HHHHTl
② ΐ 0 ZHDZUD 0 H S 0 3 H MdOU8-i' ， ② ΐ 0 0 H 0 0 3 H MdOuO-t- ② 1 - ε(ΖΗ。） ΗΝ SW 0 S 3 Md Md εο ⑧ ΐ 0 ZHDZH3 0 Jd HN S 3 Md ZO
0 - - 0 H 3Md S 3 ηό Md Ϊ0
② 0 - - S H 2H3 S 3 Md Md 00^ ② 0 - - 0 H ZH3 S D d 66G 0 - - 0 MdID-2 0 S D Md Md 86£ 0 - - S aW 0 S 3 qd Md L6
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0 - S 0 Md リ d 6?
② ΐ 0 ZHDZHD 0 S 3 lld Md {-6C ΐ 0 ZHDZ D 0 H 0 S 3 Md οε
SZ9tO/86df/IDd 419 Ph Xan then - 9- y丄 0 0 Me S - - 0 ②
420 Ph Xanthen - 9- yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 ② 421 Ph Xanthen 9 - yl 0 ひ 12 H 0 - - 0 ②
422 Ph Xant en-9-y 1 0 CH2 H S - - 0 ②
423 Ph Xanthen-9-y 1 0 PhE H 0 - - 0 ②
424 Ph Xanthen - 9- y l 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ②
425 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ②
426 Ph Fluoren- 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
427 Ph Fluoren- 9 - y l 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ②
428 Ph Fluoren- 9 - yl 0 - - 0 ②
429 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me 0 - - 0 ②
430 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me S - - 0 431 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 ②
432 Ph Fluoren - 9 - yl 0 CH2 H 0 - - 0
433 Ph Fluoren - 9 - yl 0 CH2 H S - - 0
434 Ph Fluoren - 9 - y l 0 PhE H 0 - - 0 ②
435 Ph Fluoren - 9 - yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ②
436 Ph Fluoren - 9- yl 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ② 437 1-PYR H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ② 438 1-PYR H C 0 s H 0 CH2CH2 0 1 ② 439 1-PYR H C 0 - - 0 ② 440 1-PYR H c 0 0 Me 0 - - 0 441 1-PYR H c 0 0 Me S - - 0
442 2 - NAP H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
443 2- NAP H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 ②
444 2--NAP H c 0 一 - 0 0 445 2- NAP H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 ②
446 2- NAP H H C 0 0 Me S - - 0 1
447 Ph Ph H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
448 Ph Ph H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1
449 Ph Ph H C 0 - 0 0
450 Ph Ph H C 0 0 Me 0 - - 0 1 451 Ph Ph H C 0 0 Me S - - 0 1
452 4 - PhPh H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
453 4- PhPh H H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
454 4- PhPh H H C 0 - 0 0 ②
455 4 - PhPh H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 ②
456 4 - PhPh H H C 0 0 Me S - - 0 1 ②
457 2- PhPh H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
458 2- Ph Ph H H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
459 2 - Ph Ph H H C 0 - 0 0 ②
460 2- PhPh H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 ② 461 2 - PhPh H H C 0 0 Me S - - 0 1 ②
462 Ph Ph H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
463 Ph Ph H c s S H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
464 Ph Ph H c s - 0 0
465 Ph Ph H c s 0 Me 0 - - 0 1
466 Ph Ph H c s 0 Me S - - 0 1 ②
467 Ph Ph Ph C NH 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
468 Ph Ph Ph C NH S H 0 CH2CH2 0 1 1 ②
469 Ph Ph Ph C NH - 0 0 ②
470 Ph Ph Ph C NH 0 Me 0 0 1 ② Δ 6/66 OAV
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Ζ 9 0 0 H 0 0 3 H daa- ' 6I S ΐ 9 0 ZH3ZHD 0 H 0 0 D H H doa- 'C 8Ϊ 9 ΐ 0 - S ng 0 0 0 H H daa- 'ε ΐ 9
② ΐ 0 - 0 "a 0 0 3 H H daa- 'ε 919 ② Τ 0 - S ^3 0 0 3 H H d9a 'ε s i 9 I 0 - 0 13 0 0 3 H H doa- 'e
② ΐ ΐ 0 Z OZHD S H 0 0 3 H H dea- 'ε ε τ ο ⑤ 1 0 - 0 H S 0 3 H H daa- 'ε ζ ΐ ② ΐ 0 - 0 9W S 0 3 H H doa- 'e ns ② ΐ ΐ 0 2H3ZH3 0 HN 0 D H H doa- 'ε 01 ② ΐ ΐ 0 0 HN 0 3 H H daa- 'ε 609 ② ΐ 0 - 0 MdTD-i' 0 0 3 H H d8a- 'ε 809 ② ΐ 0 - 0 Md 0 0 0 H H daa- 'ε ο ⑧ ΐ ΐ 0 0 aw HN 0 3 H H daa- 'ε 90S ② ΐ ΐ ΗΝ 0 H 0 0 3 Md Hd Md 90S ② f 9 0 0 H 0 0 0 Md Md Md ίΌ9 ε 9 ο 0 H 0 0 3 Md d Md SOS
2 9 0 0 H 0 0 D ^ό Md
② ΐ 9 0 ZtiDZWD 0 H 0 0 3 Md ^ό lld 109 ② I 0 - S no 0 0 3 Md i|d OOS ⑤ ΐ 0 - 0 "9 0 0 3 lId ^d 66f ΐ 0 - S 13 0 0 3 Md Md Md 86^
⑧ I 0 一 0 0 0 3 Md Md
SCTtO/86<U7丄:) d 1^^61/66 O 523 4-MePh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
524 4-MePh 4 - MePh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
525 4-MePh 4 - MePh 4 - MePh C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
526 4-tBuPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
527 4-tBuPh 4- tBuPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
528 4- t'BuPli 4 tBuPh 4-tBuPh C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
529 4-N02P Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
530 4 -匿 Ph 4 - N02Ph Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ② 531 4-FPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
532 4-FPh 4-FPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
533 2, 4-F2Ph Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
534 2-ClPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
535 4- ClPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
536 4-ClPh 4-ClPh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
537 4-BrPh P Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
538 4-BrPh 4-BrPh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
539 4-IPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
540 4-tBuOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ② 541 -EtOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
542 4-EtOPh 4-EtOPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
543 2-BnOPh H H C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
544 4-BnOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
545 4-BnOPh 4-BnOPh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1
546 4-MeOPh 4-MeOPh 4-MeOPh C O O H 0 CH2CH2 0 .1 ②
547 9 - ANT H H C O O H 0 CH2CH2 0 1 ②
548 2— ANT H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ② ② ΐ 0 6(ΖΗつ） 0 Η 0 0 3 H H dea-fr '£ ② t 0 8(ΖΗ0) 0 Η 0 0 3 H H daa-t- 'e ② ΐ 0 Ζ(2Η3) 0 Η 0 0 0 H H daa-fr 'ε gzg ΐ 0 9(ΖΗ0) 0 Η 0 0 0 H H d -f '£ TZQ
⑤ ΐ 0 9(2Η3) 0 Η 0 0 0 H H 綱 - 'ε ο ② ΐ 0 ί-(2Η3) 0 Η 0 0 0 H Η dQQ-f 'ε 69g ② 1 0 0 Η 0 0 3 H Η daa-t- 'ε 89 ⑤ 0 - 0 dOia-fr 0 0 3 H Η dea-t 'ε 9s 0 - 0 0 0 3 H Η doa-fr 'ε 999 0 - 0 Md09W-i- 0 0 3 H Η dM' '£ 99S
③ 0 - 0 I-Z 0 0 0 H Η daa-^ 'ε t-99 0 - o 0 0 3 H Η dOa-i' 'C S99 0 - 0 άά-Ζ 0 0 D H Η 删- 'ε Z9S
⑤ 0 - 0 MdZON-i' 0 0 3 H Η doa-fr 'ε ΐ99 ② 0 - o zon-z 0 0 3 H Η dOa-t' 'C 099 ② Ζ 0 0 H S O D H Η dOa-^ 'C 659 ② Ζ 0 0 H 0 0 3 H Η daa-t' 'ε 8 S ② 9 0 0 ^環 - 2 HN 0 3 H Η dQQ-f 'ε Z.9S
9 0 0 Jd HN 0 0 H Η daa-t- 'ε 939
9 0 ΖΗΟΖΗΟ 0 ¾3 HN 0 3 H Η dea -i' 'ε ggg
② 9 0 0 H S 0 3 H Η dsa-t- 'ε i-gg ② ΐ 0 0 H 0 0 〇 H Η 3Hd-fr £99 ② ΐ 0 2HDZH3 0 H 0 0 3 H Η DNV-Z 299 ΐ 0 0 H 0 0 3 H Η dOMd-i' 199
⑤ ΐ 0 ZViOZWd 0 H 0 0 3 H Η MdOMd-e 0S9 ② ΐ 0 0 H 0 0 3 H Η dVN-I 6 S
9S
SZ9tO/86df/I3d PL 61/66 ΟΛ\
o o
o o
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O o o O O o o o o o o o O O o o o o ο ο
Figure imgf000039_0002
o O o O o o O o o . o o O o o o o o ο ο
® Θ ® ® Θ Θ Θ ® Θ Θ Θ Θ Θ ® ® ® ® ® ® Θ Θ ®
601 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 (CH2)7 0 1 ②
602 3, 4-DBP H H C O Nil Pr 0 (CH2)8 0 1 ②
603 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 (CH2)9 0 1
604 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 (CH2)10 0 1 ②
605 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 CH2CH(CH3) 0 1 ②
606 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 1-Me-PrE 0 1
607 3, 4-DBP H H C 0 NH Pr 0 2-Me-BuE 0 1
608 Ph Ph P C NH 0 H 0 CH2CH2 0 6
609 3, 4-DBP H H C S 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
610 3, 4-DBP H H C S S H 0 CH2CH2 0 1 ② 611 3, 4-DBP H H C S - - - 0
612 3, 4-DBP H H C S 0 Me 0 - - 0 ②
613 3, 4-DBP H H C S 0 Me S - 0
614 3, 4-DBP H H C S 0 2 - ClPh 0 - - 0
615 3, 4-DBP H H C S CH2 H 0 - - 0
616 3, 4-DBP H H C S CH2 H S - - 0 ②
617 3， 4-DBP H H C S P E H 0 - - 0
618 3, 4-DBP H H C S NH Pr 0 CH2CH2 0 1
619 3, 4-DBP H H C S 0 Me NH (CH2)3 - 1 ②
620 9 - ANT H H C S 0 H 0 CH2CH2 0 1 ② 621 9 - ANT H H C S S H 0 CH2CH2 0 1 ②
622 9 - ANT H H C S - - - 0
623 9 - ANT H H C S 0 Me 0 - - 0
624 9 - ANT H H C S 0 Me S - - 0 ②
625 9- ANT H H C S 0 2-ClPh 0 - - 0 ②
626 9一 ANT H H C S CH2 H 0 一 一 0 ② 627 9 - ANT H H C S CH2 H S - - 0
628 9 ANT H H c s PhE H 0 - 0 ②
629 9 - ANT H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ②
630 9 - ANT H H c s 0 Me NH (CH2) 3 ② 631 2 - NAP H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 ②
632 2- NAP H H c s S H 0 CH2CH2 0 1 ②
633 2- NAP H H c s - 0 ②
634 2 - NAP H H c s 0 Me 0 - - 0 ②
635 2- NAP H H c s 0 Me S - - 0 ②
636 2- NAP H H c s 0 2-C l Ph 0 - - 0 ②
637 2- NAP H H c s CH2 H 0 - - 0 ②
638 2 - NAP H H c s CH2 H S - - 0 ②
639 2 - NAP H H c s PhE H 0 - - 0 ②
640 2 - NAP H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ② 641 2 - NAP H H c s 0 Me NH (CH2) 3 1 ②
642 BDBBP H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1
643 BDBBP H H c s S H 0 CH2CH2 0 1
644 BDBBP H H c s - 0
645 BDBBP H H c s 0 Me 0 - - 0
646 BDBBP H H c s 0 Me S - - 0 ②
647 BDBBP H H c s 0 2-Cl Ph 0 - - 0 ②
648 BDBBP H H c s CH2 H 0 - - 0 ②
649 BDBBP H H c s CH2 H S - - 0 ②
650 BDBBP H H c s PhE H 0 - - 0 ② 651 BDBBP H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 652 BDBBP H H c s 0 Me NH (CH2) 3 一 1
Figure imgf000042_0001
o o o o o o o o O o o o o o o o o
Figure imgf000042_0002
o o o o o o o O O o c O C o O o o o c O o o o o ^ c -
0- α- 0- α. α-
H
匪。
i 679 3, 5-DBP H H C O O Me S - - 0
680 3, 5-DBP H H C O O 2- ClPh 0 - - 0 ③ 681 3, 5-DBP H H C 0 CH2 H 0 - - 0 ③
682 3, 5-DBP H H C O CH2 H S - - 0 ③
683 3, 5-DBP H H C O PhE H 0 — - 0 ③
684 3, 5-DBP H H C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ③
685 3, 5-DBP H H C 0 0 Me NH (CH2)3 ― 1 ③
686 4 MeOPh 4 - MeOPh Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 ③
687 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 ③
688 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C O - - - - - 0 ③
689 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 0 Me 0 - - 0 ③
690 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 0 Me S - - 0 ③ 691 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C O O 2- ClPh 0 - - 0 ③
692 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C O CH2 H 0 - - 0 ③
693 4 - MeOPh 4- MeOPh Ph C O CH2 H S - - 0 ③
694 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C O PhE H 0 - - 0 ③
695 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ③
696 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C O O Me NH (CH2) 3 - 1 ③
697 4 - MeOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
698 4- MeOPh Ph Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 ③
699 4 - MeOPh Ph Ph C O - - - - - 0 ③
700 4 - MeOPh Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 ③ 701 4 - MeOPh Ph Ph C 0 0 Me S - - 0 ③
702 4- MeOPh Ph Ph C O O 2 - ClPh 0 - - 0 ③
703 4 - MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H 0 - - 0 ③
704 4— MeOPh Ph Ph C O CH2 H S - 一 0 ③ o o o a-
_c a- a-
O
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謹；：
愚 731 4-BnOPh H H C 0 s H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
732 4-Bn oOPh H H C 0 - - 一 - - 0 0 ③
733 H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 ③
734 4-BnOPh H H c 0 0 Me S - ― 0 1 ③
735 4-BnOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 ③
736 4-BnOPh H H c 0 CH2 H 0 一 ― 0 1 ③
737 4- BnOPh H H c 0 CH2 H s - ― 0 1 ③
738 4-BnOPh H H c 0 PhE H 0 一 - 0 1 ③
739 4-BnOPh H H c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ③
740 4-BnOPh H H c 0 0 Me NH (CH2) 3 ― 1 1 ③
741 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
742 Ph Xanthen - 9一 yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
743 Ph Xanthen - 9 - yl 0 - - ― - - 0 0 ③
744 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 ③
745 Ph Xanthen - 9 - y l 0 0 Me s - - 0 1 ③
746 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 2 - ClPh 0 - - 0 1 ③
747 Ph Xanthen - 9一 yl 0 CH2 H 0 - - 0 1 ③
748 Ph Xanthen - 9 - yl 0 CH2 H s - ― 0 1 ③
749 Ph Xanthen - 9- yl 0 PhE H 0 - - 0 1 ③
750 Ph Xanthen - 9一 yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ③
751 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 Me NH (CH2) 3 ― 1 1 ③
752 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
753 Ph Fluoren - 9 - yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
754 Ph Fluoren- 9 - yl 0 0 0 ③
755 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me 0 0 1 ③
756 Ph Fluoren - 9一 yl 0 0 Me S 0 1 ③ 757 Ph Fluoren - 9- -y l 0 0 2-ClPh 0 0 1 ③ -
758 P F丄 uoren— 9- -yl 0 CH2 H 0 一 0 1 ③
759 Ph Fl uoren - 9- -y l 0 CH2 H S - 0 1 ③
760 Ph Fluoren-9- -y l 0 PhE H 0 一 0 1 ③
761 Ph Fluoren-9- -yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ③
762 Ph Fluoren-9- -y l 0 0 Me NH (CH2) 3 ― 1 1 ③
763 H II c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
764 H H c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
765 H H c 0 - - - ― 0 0 ③
766 H H c 0 0 Me 0 - ― 0 1 ③
767 H H c 0 0 Me s - ― 0 1 ③
768 2-NAP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
769 2-NAP H H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
770 2-NAP H H c 0 - - ― - - 0 0 ③
771 2-NAP H H c 0 0 Me 0 - ― 0 1 ③
772 2-NAP H H c 0 0 Me s - - 0 1 ③
773 Ph Ph H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
774 Ph Ph H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
775 Ph Ph H c 0 - - - - - 0 0 ③
776 Ph Ph H c 0 0 Me 0 ― ― 0 1 ③
777 Ph Ph H c 0 0 Me s ― 0 1 ③
778 4-PhPh H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
779 4-PhPh H H c 0 s H 0 CH2CH2 0 1 1 ③
780 4-PhPh H H c 0 0 0 ③
781 4~PhPh H H c 0 0 Me 0 0 1 ③
782 4-PhPh H H c 0 0 Me s 0 1 ③ 3ϋ ; 3d
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⑥ ΐ 0 0 0 0 0 H H doa- - s 'c s
⑤ ΐ 0 _ 0 Hd 0 0 0 H H doa- -s 'ε
⑧ ΐ ΐ 0 0 sW HN 0 3 H H dea- -g 'ε Z£8
⑧ Τ τ ΗΝ 3 d- HO - Z 0 H 0 0 D d Md IC8
⑥ 9 0 SHOZHD 0 H 0 0 3 Md lid 0C8
⑧ ε 9 0 0 H 0 0 3 Md Md Md 6Z8
⑧ ζ 9 0 0 H 0 0 0 Hd Md SZ8
⑥ ΐ 9 0 0 H 0 0 D Md Md ^d LZS
⑥ τ 0 一 一 S 19 0 0 0 Md Md Md 928
⑧ τ 0 一 一 0 "8 0 0 0 Md ^ά Md ZS
⑧ τ 0 ― _ S 13 0 0 D Md d qd U
⑥ τ 0 ― 0 53 0 0 0 l!d Md Z8
⑧ ΐ ΐ 0 S H 0 0 3 4d Md lid ZZ8
⑧ τ 0 0 H S 0 0 Md Md IZ8
⑧ I 0 0 S 0 D Md Md Md 0Z8
⑥ τ ΐ 0 0 HN 0 D Md Md Md 618
⑥ ΐ ΐ 0 0 HN 0 d Md 4d Md 818
⑧ ι 0 0 0 0 D ild Md Md LIS
⑧ ΐ 0 0 Md 0 0 D Md Md Md 918
⑥ τ I 0 ZHDSHD 0 aW H 0 D Hd 【ld t|d gi8
⑧ ΐ ι ΗΝ 3-id-HO-Z 0 H 0 0 3 H II doa- - i， ' H8
V 9 u (JHJOHJ u H 0 J H H dHQ- -V ί CI8
⑧ ε 9 0 0 H 0 0 3 H H doa- -f 'ε ZIS
⑧ ζ 9 0 0 H 0 0 3 H H daa- - 'ε Π8
⑧ I 9 0 0 H 0 0 3 H H daa- -y 'z 0Ϊ8
⑧ ι 0 s ng 0 0 3 H H daa 'ε 608
9f
SZ9tO/86df/13d f .f6l/66 O 835 3, 5-DBP H H C 0 H 2 - NH2 Et 0 CH2CH2 0 1 1 ③
836 3, 5-DBP H H C 0 NH 2-MeOEt 0 CH2CH2 0 1 1 ③
837 3, 5-DBP H H C 0 S Me 0 - 0 1
838 3, 5-DBP H H C 0 S H 0 - 0 1 ③
839 3, 5-DBP H H C 0 0 H S CH2CH2 0 1 1 ③
840 3, 5-DBP H H C 0 0 Et 0 - 0 1 ③ 841 3, 5-DBP H H C 0 0 Et S - 0 1 ③
842 3, 5-DBP H H C 0 0 Bu 0 - 0 1 ③
843 3, 5-DBP H H C 0 0 Bu S - 0 1 ③
844 3, 5-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 6 1 ③
845 3, 5-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 6 2 ③
846 3, 5-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 6 3 ③
847 3， 5-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 6 4 ③
848 3, 5-DBP H H C 0 0 H 0 2-OH-PrE NH 1 ③
849 4-MePh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
850 4-MePh 4-MePh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③ 85 1 4-MePh 4-MePh 4-MePh C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
852 4- tBuPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
853 4- t Bu Ph 4-tBuPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
854 4- t Bu Ph 4-tBuPh 4 - tBuPh C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
855 4- N02 PH Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
856 4-N02Ph 4- N02Pli Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
857 4-FPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
858 4-FPh 4-FPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
859 2, 4- F2Ph Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1
860 2-ClPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③ O
© © ® ® ® @ ® C 4-
Figure imgf000050_0001
wo ZW z 887 3 , 4-DBP 11 H C O O 4 -隨 Ph 0 - 0 ③
888 3 , 4-DBP H H c o o 2-FP 0 - 0 ③
889 3 , 4-DBP H H c o o 2-BrPh 0 - 0 ③
890 3 , 4-DBP H H c o o 2-IPh 0 - 0 ③ 891 3 , 4-DBP H H c o o 4 MeOPh 0 - 0 ③
892 3 , 4-DBP H H c o o 4- eSPh 0 - 0 ③
893 3 ， 4-DBP H H c o o 4 - EtOPh 0 - 0 ③
894 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)3 0 1 ③
895 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)4 0 1
896 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)5 0 1 ③
897 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)6 0 1 ③
898 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)7 0 1 ③
899 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)8 0 1 ③
900 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)9 0 1 ③ 901 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2)10 0 1 ③
902 3 , 4-DBP H H c o o H 0 CH2CH(CH3) 0 1 ③
903 3 ' 4-DBP H H c o o H 0 -Me-PrE 0 1 ③
904 3 , 4-DBP H H c o o H 0 -Me-BuE 0 1 ③
905 3 , 4-DBP H H C O S H 0 CH2)3 0 1 ③
906 3 , 4-DBP H H C O S H 0 CH2)4 0 1 ③
907 3 ， 4-DBP H H C O S H 0 CH2)5 0 1 ③
908 3 , 4-DBP H H C O S H 0 CH2)6 0 1 ③
909 3 , -DBP H H C O S H 0 CH2)7 0 1 ③
910 3 ' 4-DBP H H C O S H 0 CH2)8 0 1 ③ 911 3 , 4-DBP H H C O S H 0 CH2)9 0 1 ③ 912 3 , 4-DBP H H C O S H 0 C 2) 10 0 1 ③ ⑤ T 0 0 0 S 3 H H dea-f' 'ε 8S6
⑧ 0 0 - - - _ 一 S 3 H H daa-i' 'e ZC6
⑧ ΐ ΐ 0 0 H S S 3 H H d -f 'ε 9S6
⑧ ΐ ΐ 0 ΖΗΟΖΗΟ 0 H 0 S 3 H H daa-i' 'ε 9£6
⑧ ΐ 9 0 0 H 0 HN 3 Md Md Md H6
⑧ I ΐ 0 0 d HN 0 3 H H daa-t' 'c Z6
⑤ I ΐ 0 I 0 HN 0 d H H daa-i' 'G ZZ6
⑧ ΐ ΐ 0 (SHD)HOZHO 0 HN 0 D H H daa-i- 'ε IC6
⑧ ί τ 0 0Τ(2Η3) 0 Jd HN 0 3 H H daa-i' 'z 0C6
⑧ ΐ ΐ 0 6(2Η3) 0 Jd HN 0 3 H H doa-t' 'e 626
⑧ ΐ ΐ 0 8(2Η3) 0 -td HN 0 0 H H daa-^ 'z SZ6
⑧ ΐ ΐ 0 Ζ(ΖΗΟ) 0 •id HN 0 3 H H daa-i' 'G LZ6
⑥ I ΐ 0 9(2Η3) 0 ■id HN 0 D H H 926
⑧ I I 0 5(2Η3) 0 ュ d HN 0 3 H H daa-fr 'ε 9Z6
⑧ I I 0 {ZUD) 0 ■id UN 0 D H H daa ' 'c fZ6
⑧ I ΐ 0 £(ΖΗΟ) 0 HN 0 D H H dm-f '£ G26
⑥ I ΐ 0 ε( Ηつ） 0 Md HN 0 3 H H dga- 'ε ZZ6
⑥ ΐ ΐ 0 ε(2Η3) 0 HN 0 3 H H dm-f ' IZ6
⑧ ΐ ΐ 0 ζ(ζηο) 0 HN 0 0 H H daa-f- 'ε 026
⑧ ΐ ΐ 0 0 d HN 0 3 H II daa-i- 'c 616
⑧ 1 I 0 C(2HO) 0 HN 0 3 H H 816 τ τ o つ ；
⑧ I ΐ 0 0 Md HN 0 D H H daa-i' 'e 9Ϊ6
⑧ ΐ ΐ 0 0 H S 0 D H H daa-i' 'ε 916
⑧ ΐ ΐ 0 0 H S 0 D H H dga-t' 'z H6
⑧ ΐ ΐ 0 (εΗ3)Η02Η3 0 H S 0 D H H daa-i' 'ε £16
OS
SWtO/86df/X3d ^6l/66 O 939 3 4-DBP H H C S 0 Me S - 0 ③
940 3 4-DBP H H c s 0 2 - C l Ph 0 - 0 ③ 941 3 4-DBP H H c s CH2 H 0 - 0 ③
942 3 4-DBP H ト I c s CH2 H S - - 0 ③
943 3 4-DBP H H c s PhE H 0 - - 0 ③
944 3 4-DBP H H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ③
945 3 ; 4-DBP H H c s 0 Me NH (CH2 ) 3 - 1 ③
946 9- ANT H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
947 9 ANT H H c s S H 0 CH2CH2 0 1 ③
948 9- ANT H H c s - 0 ③
949 9 - ANT H H c s 0 Me 0 - 0 ③
950 9- ANT H H c s 0 Me S - 0 ③ 951 9- ANT H H c s 0 2- C l Ph 0 - 0 ③
952 9- ANT H H c s CH2 H 0 - 0 ③
953 9- ANT H H c s CH2 H S - - 0 ③
954 9- ANT H H c s PhE H 0 - - 0 ③
955 9- ANT II H c s NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ③
956 9 - ANT H H c s 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ③
957 2 - NAP H H c s 0 H 0 CH2CH2 0 1 ③
958 2- NAP H H c s S H 0 CH2CH2 0 1 ③
959 2- NAP H H c s - 0 ③
960 2- NAP H H c s 0 Me 0 - - 0 ③ 961 2- NAP H H c s 0 Me S - - 0 ③
962 2- NAP H H c s 0 2- C l Ph 0 - - 0 ③
963 2- NAP H H c s CH2 H 0 - - 0 ③
964 2- NAP H H c s CH2 H S - 一 0 ③ ® ΐ ΐ 0 ZUDZHD 0 H 0 0 0 Md Md Md 066
® ΐ ΐ - £ (ZWO) HN 0 0 3 H H aaa-t' 'ε 686
® ΐ τ 0 ZHdZtiD 0 HN 0 0 H H dSa-t' '£ 886
® ΐ 0 - - 0 H 3Md 0 0 H H daa - ε 86
® ΐ 0 - - S H Z O 0 D H H daa-fr 'e 986
® ΐ 0 ― ― 0 H ZH3 0 3 H H daa-t' 'ε 986
© I 0 - - 0 0 0 3 H H doa-t' 'ε
® I 0 - ― s 0 0 D H H doa-t 'ε S86
® ΐ 0 - ― 0 0 0 0 H H doa-f' 'ε Z86
® 0 0 - - 一 一 - 0 D H H daa-■ ε ΐ 86
® I ΐ 0 0 H S 0 3 H H doa-t' 'ε 086
® ΐ 1 0 Z DZtiD 0 H 0 0 3 H H dQQ-f 'ε 616
⑥ ΐ I - (Z 3) HN a 0 s 0 H H d98a0 8Ζ6
⑧ ΐ ΐ 0 0 HN s D H H da园 ιι<
⑧ ΐ 0 ― 一 0 H 3Md s 0 H H dg漏 9 6
⑧ ΐ 0 - 一 S H ZWd s D H H daaao S 6
⑧ ΐ 0 ― - 0 H Ζ\Ώ s 3 H 11 dtiaaa i- e
⑧ ΐ 0 - - 0 0 s 3 H H d讓 8 CA6
⑧ ΐ 0 ― - S 0 s 0 H H d8画 ZL6
⑥ ΐ 0 - ― 0 0 s 3 H H daaao 6
⑧ 0 0 - - ― ― ― s 3 H H deoao 0A6
I ι 0 ZHDZUD o o u ,ιααπα «α«
⑧ ΐ ΐ 0 SHOZHD 0 H 0 s 3 H H daaao see
⑥ ΐ ΐ C (ZHD) 1 HN 0 s 3 H H dVN-2 Z96
⑧ Τ ΐ 0 ZUDZUD 0 d 1-1 s 3 H H dVN-2 996
⑥ ΐ 0 0 H ：ヨリ d s 0 H H dVN~Z 996
25
SZ9tO/86dT/13 I ^6l/66 O W 991 Ph Ph Ph C 0 s H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
992 Ph Ph Ph c 0 ― - ― ― 一 0 0 ④
993 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 ④
994 Ph Ph Ph c 0 0 Me S 一 ― 0 1 ④
995 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 ④
996 Ph Ph Ph c 0 CH2 H 0 - - 0 1 ④
997 Ph Ph Ph c 0 CH2 H s - ― 0 1 ④
998 Ph Ph Ph c 0 PhE H 0 一 - 0 1 ④
999 Ph Ph P c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1000 Ph Ph Ph c 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
1001 3, 5-DBP H II c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1002 3, 5- DBP H H c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1003 3, 5-DBP H H c 0 - - - - - 0 0 ④
1004 3, 5-DBP H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 ④
1005 3, 5-DBP H H c 0 0 Me s ― - 0 1 ④
1006 3, 5-DBP H H c 0 0 2-ClPh 0 一 - 0 1 ④
1007 3， 5-DBP H H c 0 CH2 H 0 - - 0 1 ④
1008 3, 5-DBP H H c 0 CH2 H s ― 一 0 1 ④
1009 3, 5-DBP H H c 0 PhE H 0 - ― 0 1 ④
1010 3, 5-DBP H H c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
101 1 3, 5-DBP H H c 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
1012 4 - MeOPh 4- MeOPh Ph c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1013 4- MeOPh 4 - MeOPh Ph c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1014 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph c 0 0 0 ④
1015 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph c 0 0 Me 0 0 1 ④
1016 4— MeOPh 4 - MeOPh Ph c 0 0 Me S 0 1 ④ 1017 4- MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 0 2 ClPh 0 - 0 ④
1018 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 CH2 H 0 - 0 ④
1019 4 - MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 CH2 H S - 0 ④
1020 4 MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 PhE H 0 - - 0 ④ 1021 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ④
1022 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 ④
1023 4- MeOPh Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ④
1024 4- MeOPh Ph Ph C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ④
1025 4 - MeOPh Ph Ph C 0 - 0 ④
1026 4- MeOPh Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 ④
1027 4- MeOPh Ph Ph C 0 0 Me S - - 0 ④
1028 4 - MeOPh Ph Ph C 0 0 2 Cl Ph 0 - - 0 ④
1029 4- MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H 0 - - 0 ④
1030 4 - MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H s - - 0 ④ 1031 4- MeOPh Ph Ph C 0 PhE H 0 - - 0 ④
1032 4 - MeOPh Ph Ph C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 ④
1033 4 MeOPh Ph Ph C 0 0 Me NH (CW2) 3 - 1 ④
1034 tBu Ph Ph S i 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 ④
1035 tBu Ph Ph S i 0 S H 0 CH2CH2 0 1 ④
1036 tBu Ph Ph S i 0 - 0 ④
1037 t Bu Ph Ph S i 0 0 Me 0 - - 0 ④
1038 tBu Ph Ph S i 0 0 Me S - - 0 ④
1039 tBu Ph Ph S i 0 0 2 - ClPh 0 - - 0 ④
1040 tBu Ph Ph S i 0 CH2 H 0 - - 0 ④
1041 tBu Ph Ph S i 0 CH2 H S - - 0 ④
1042 tBu Ph Ph S i 0 PhE H 0 一 - 0 ④ O 99/19474
55
1043 tBu Ph S i 0 Nil Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1044 tBu Ph S i 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
HHHHHHHHHHHPPPPPPPPPPPP P
1045 Ph hhhhhhhhhhhh h Ph C S 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1046 Ph Ph C S S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1047 Ph Ph C S - 0 0 ④
1048 Ph Ph C S 0 Me 0 - - 0 1 ④
1049 Ph Ph C S 0 Me S - - 0 1 ④
1050 Ph Ph C S 0 2-CIPh 0 - 0 1 ④
1051 P Ph C S CH2 H 0 - - 0 1 ④
1052 Ph Ph C S CH2 H S - - 0 1 ④
1053 Ph Ph C S PhE H 0 - - 0 1 ④
1054 Ph Ph C S NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1055 Ph Ph C S 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
1056 4-BnOPh H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1057 4-BnOPh H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1058 4-BnOPh H C 0 - 0 0 ④
1059 4-BnOPh H C 0 0 Me 0 - - 0 1 ④
1060 4-BnOPh H C 0 0 Me S - - 0 1 ④
1061 4-BnOPh H C 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 ④
1062 4-BnOPh H C 0 CH2 H 0 - - 0 1 ④
1063 4-BnOPh H C 0 CH2 H S - - 0 1 ④
1064 4-BnOPh H C 0 PhE H 0 - - 0 1 ④
1065 4-BnOPh H C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1066 4-BnOPh H C 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
1067 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1068 Ph Xanthen - 9— yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④ 1069 Ph Xanthen— 9 - yl 0 0 0 ④
1070 Ph Xanthen- 9- yl 0 0 Me 0 - - 0 1 ④
1071 Ph Xanthen - 9 - yl 0 0 Me S - - 0 1 ④
1072 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 ④
1073 Ph Xanthen- 9 - yl 0 CH2 H 0 - - 0 1 ④
1074 Ph Xanthen-9-yl 0 CH2 H S ― ― 0 1 ④
1075 Ph Xanthen - 9 - y丄 0 PhE H 0 ― 一 0 1 ④
1076 Ph Xanthen - 9 - yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1077 Ph Xanthen- 9 - yl 0 0 Me NH (CH2) 3 ― 1 1 ④
1078 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1079 Ph Fluoren - 9 - yl 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1080 Ph Fluoren - 9 - yl 0 ― - - ― ― 0 0 ④
1081 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me 0 - 一 0 1 ④
1082 Ph Fluoren - 9一 yl 0 0 Me s 一 - 0 1 ④
1083 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 2-ClPh 0 ― - 0 1 ④
1084 Ph Fluoren - 9 - yl 0 CH2 H 0 - 一 0 1 ④
1085 Ph Fluoren - 9 - y丄 0 CH2 H s 一 - 0 1 ④
1086 Ph Fluoren - 9 - yl 0 PhE H 0 - ― 0 1 ④
1087 Ph Fluoren - 9 - yl 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ④
1088 Ph Fluoren - 9 - yl 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ④
1089 3, 4-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1090 3, 4-DBP H H C 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1091 3, 4- - DBP H H C 0 0 0 ⑤
1092 3, 4- -DBP H H C 0 0 Me 0 0 1 ⑤
1093 3, 4-DBP H H C 0 0 Me S 0 1 ⑤
1094 3, 4-DBP H H C 0 0 2-ClPh 0 0 1 ⑤ 1095 3, 4-DBP H H C 0 CH2 H 0 0 1 ⑤
1096 3, 4-DBP H H C 0 ひ 12 H S - 0 1 ⑤
1097 3, 4-DBP H H c 0 PhE H 0 0 1 ⑤
1098 3, 4-DBP H H c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1099 3, 4-DBP H H c 0 0 Me NH (CH2) 3 ― 1 1 ⑤
1 100 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1 101 Ph Ph Ph c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1 102 Ph Ph Ph c 0 一 ― 0 0 ⑤
1103 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 ⑤
1 104 Ph Ph Ph c 0 0 Me s 一 0 1 ⑤
1 105 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - ― 0 1 ⑤
1 106 Ph Ph Ph c 0 CH2 H 0 0 1 ⑤
1107 Ph Ph Ph c 0 CH2 H s 一 一 0 1 ⑤
1108 Ph Ph Ph c 0 PhE H 0 一 0 1 ⑤
1109 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1 1 10 Ph Ph Ph c 0 0 Me NH (CH2) 3 1 1 ⑤
11 11 3, 5-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1112 3, 5-DBP H H c 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1113 3, 5-DBP H H c 0 - ― - - - 0 0 ⑤
1114 3, 5-DBP H H c 0 0 Me 0 - ― 0 1 ⑤
1 1 15 3, 5-DBP H H c 0 0 Me s - ― 0 1 ⑤
1116 3, 5-DBP H H c 0 0 2-ClPh 0 0 1 ⑤
1 117 3, 5-DBP H H c 0 CH2 H 0 0 1 ⑤
1118 3, 5-DBP H H c 0 CH2 H s 0 1 ⑤
11 19 3, 5-DBP H H c 0 PhE H 0 0 1 ⑤
1120 3， 5-DBP H H c 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤ 1121 3, 5-DBP H H C O O Me NH (CH2)3 - 1 1 ⑤
1122 4 - MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1123 4 - MeOPh 4- MeOPh Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1124 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C O - 0 0 ⑤
1125 4-MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 ⑤
1126 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 0 Me S - - 0 1
1127 4-MeOPh 4- MeOPh Ph C O O 2-ClPh 0 - - 0 1 ⑤
1128 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 CH2 H 0 - - 0 1 ⑤
1129 4 - MeOPh 4 - MeOPh Ph C 0 CH2 H S - - 0 1 ⑤
1130 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 PhE H 0 - - 0 1 ⑤ 1131 4- MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 NH Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1132 4-MeOPh 4- MeOPh Ph C 0 0 Me NH (CH2) 3 - 1 1 ⑤
1133 4- MeOPh Ph Ph C O O H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1134 4-MeOPh Ph Ph C O S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1135 4- MeOPh Ph Ph C O - - 0 0 ⑤
1136 4- MeOPh Ph Ph C O O Me 0 - - 0 1 ⑤
1137 4- MeOPh Ph Ph C O O Me S - - 0 1 ⑤
1138 4- MeOPh Ph Ph C O O 2-ClPh 0 - - 0 1 ⑤
1139 4- MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H 0 - - 0 1 ⑤
1140 4- MeOPh Ph Ph C 0 CH2 H S - - 0 1 ⑤ 1141 4- MeOPh Ph Ph C 0 PhE H 0 - - 0 1 ⑤
1142 4- MeOPh Ph P C 0 H Pr 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1143 4-MeOPh P Ph C O O Me NH (CH2)3 - 1 1 ⑤
1144 tBu Ph Ph Si 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1145 tBu Ph Ph Si 0 S H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑤
1146 tBu Ph Ph Si 0 一 一 0 0 ⑤ 0 - - 0 H Z D o o H H MdOua-t ZLll
⑤ 0 - - 0 dio-z 0 o o H H dOUO-t' ILU ⑤ 0 - S 0 0 3 H H LldO"8-t' ΟΖΠ ⑤ 0 - - 0 0 0 D H H WOug - 69Π ⑨ 0 - 0 0 H H 4dOug 89ΐΐ ⑨ I 0 0 H S 0 D H H MdO"8-^ Ζ9Π ⑤ ΐ 0 SH3ZH3 0 H 0 0 3 H H MdOua-t' 99Π ⑤ ΐ - S(ZHつ） ΗΝ 0 S 3 Md Md Md 59ΐΐ ⑤ ΐ 0 ZWZHD 0 Jd HN S 0 Md ^d Md t9II ⑤ 0 - - 0 H 3Md S 3 d Md C9U ⑨ 0 - - S H ZWD S D Md Md Md Ζ9Π ⑤ 0 - - 0 H ZUD S 3 Md Md Md Ϊ9Π ⑤ 0 - - 0 ^άlD-z o S D Md Md 09Π ⑤ 0 - - S 0 S 3 t|d 6SU
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⑤ 0 - S 0 Md lld ^d Ζ9Π ⑤ ΐ 0 ZHOZHO 0 H S S 3 Md Md Md 99 Π ⑨ Τ 0 zmztiD 0 H 0 S 3 Md Md dl 99ΐΐ ⑤ ΐ - S(ZHつ） ΗΝ 8HI 0 0 TS Md Md
⑤ 1 0 ztiozm o -td HN 0 TS 4d Md S9IT ⑤ 0 - - 0 H 3Md 0 TS Md Lid ' Ζ9ΐΐ ⑨ 0 - - S H zm 0 TS Md Md '"W Ι9Π ⑤ 0 - - 0 H ZHD 0 TS Md Md nei 0911 ⑤ 0 - - 0 dT3-2 0 0 Md ^d ngi 6ΗΪ ⑤ 0 - - S o 0 TS Hd Lld > 8·Ηΐ ⑤ 0 - - 0 0 TS ngi ΖΙΊΙ
6S
SZ9tO/86df/X3d Κί'όΙ/όό OAV CD
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一 § き 1225 3, 5-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1. 2 ⑤
1226 3, 4-DBP H H C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑤
1227 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑤
1228 3, 5-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑤
1229 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 1 ⑦
1230 3, 4-DBP H H c 0 0 ト 1 0 CH2CH2 0 1 1 ⑥
1231 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 2 ⑥
1232 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑥
1233 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 2 ⑧
1234 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑧
1235 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 2 ⑦
1236 3, 4-DBP H H c 0 0 H 0 CH2CH2 0 1 3 ⑦
上記例示化合物のうち、 好適な化合物と しては、 1乃至 3 3、 3 2 7乃至 3 5 9、 6 5 3乃至 6 8 5、 9 7 9乃至 1 0 1 1、 1 0 8 9乃 至 1 1 2 1、 1 1 9 9、 1 20 5、 1 2 1 1及び 1 2 2 9乃至 1 2 3 4の化合物をあげることができる。
更に、 好適な化合物と しては、 1乃至 1 1、 3 2 7乃至 3 3 7、 6 5 3乃至 6 6 3、 9 7 9乃至 9 8 9、 1 0 8 9乃至 1 0 9 9、 1 1 9 9、 1 2 0 5、 1 2 1 1、 1 2 2 9及び 1 2 3 1乃至 1 2 3 4の化合 物をあげることができる。
最も、 好適な化合物と しては、 1、 3 2 7、 6 5 3、 9 7 9、 1 0 8 9、 1 2 2 9、 1 2 3 1及び 1 2 3 2の化合物をあげることができる。 本発明の一般式 （ 1 ) の化合物は、 下記 A— 1及び A_ 2法により製 造される下記化合物 （2)
Figure imgf000065_0001
及び下記 B— 1、 B _ 2、 B— 3、 B— 4及び B— 5により製造され る下記化合物 （ 3 ) 、 （4- a ) 、 （4- b) 、 （ 5 ) 、 （6 a ) 、 (6 b ) 、 (6 c ) , (6 d ) 、 （ 7 a ) または （ 7 b )
DMT -一 O - - F -w, ( 3 ) DMT - O - F一 w4b (6 b )
DMT - - o一 - F -w2a (4 - a ) DMT - o ― F -w4c (6 c )
DMT - 〇一 F - -w2b (4 - b ) DMT - o一 F一 w4d (6 d)
DMT - o一 F - -w3 ( 5 ) DMT - o一 F -w5a (7 a )
DMT - o一 F -一 w4a ( 6 a ) DMT - o - F -w5b ( 7 b) の脱 DMT (4， 4 ' —ジメ トキシトリチル） 体を原料と して用い、 下記 C— 1、 C一 2及び C— 3法で示す方法によって、 製造すること ができる。
A— 1法
Figure imgf000066_0001
第 2工程
Figure imgf000066_0002
R1
第 4工程
R2-Z-Hal
R 3 (2-5)
Figure imgf000066_0003
第 5工程
Figure imgf000066_0004
(2) A— 2法
Figure imgf000067_0001
第 6工程 R3
(2-5) c CZR--
13一 H
a
Figure imgf000067_0002
B— l法
Figure imgf000067_0003
(3-D
DNA合成機による 第 7工程
DNA合成操作
DMT-0- F -W!
(3) B— 2法
(4-1) 第 9工程 ^ 4 O
(4-2) (4-3) 第 10工程
(4-4)
rr Λ 5' 3'
DMT-O- F -W2
(4-a)
Figure imgf000068_0001
(4-7) ( = DMT-W2b) 第 14工程
DMT-O-コ F J-W2b
(4-b) 19474
67
B— 3法
H CH2( CH\ OCCH2CH2CNH' ^^ΕΧ^
E ノ, O O (5-1)
Figure imgf000069_0001
(5-3)
第 16工程
Figure imgf000069_0002
(5-4) ( = DMT - W3) 第 17工程
DMT-0-5 F -W3
(5)
Figure imgf000070_0001
of
Figure imgf000071_0001
Sェ ιε
Figure imgf000071_0002
(ϊ-ύ
O
69
SZ9tO/86df/13d f6l/66 OAV C— .1法
Figure imgf000072_0001
3J
DMT-O- F (3) 第 37工程
Figure imgf000072_0002
Figure imgf000072_0003
(1)
C一 2法
Figure imgf000073_0001
第 39工程 D T-0-5F (3)
I
W5 (7a-b)
Figure imgf000073_0002
(1)
人
Ul
H 人- Χ)-ε人一^。
II ,ε 日 ,S
Ο
(q - E乙） ¼
I
Figure imgf000074_0001
一 (z)
ZL
Sr9fO/86df/IDd ^61/66 OAV 上記化合物 （ 2 ) 乃至 （ 7 b ) 、 上記工程表の A— 1 、 A— 2、 B — 1 、 B— 2、 B - 3 , B— 4、 B— 5、 C - 1 , C— 2及び C— 3 法中、 R , 、 R 2 、 R 3 、 R 4、 Z、 Yい Y 2、 Y 3、 Y 4、 X、 n、 m 及び Bは、 前述のものと同意義を示し ；
A, は一般にヌク レオシドの一級の水酸基を特異的に保護するために 用いられる ト リチル基 （T r ) 、 4 一モノメ トキシ ト リチル （MM T) 基、 4 , 4 ' —ジメ トキシト リチル （DMT) 基を示し ；
A2は三級ブチルジメチルシリル （T B DMS) 基やトリイソプロピ ルシリル （T I P S ) 基のよ うな 3置換シリル基、 ト リ クロロェ トキ シカルボエル （ T r o c ) 基のような ト リ ノヽロゲノエ トキシカルボ二 ル基、 ベンジルォキシカルボニル （Z) 基のようなァラルキルォキシ カルボ二ル基を示し ；
D' はチミ ン塩基又は保護されたチミ ン塩基を示し、
D''はァミノ基がァシル基で保護された 3 ' 末端側ヌク レオチドの 塩基部分を示し ；
D" ' は D N A合成に用いられる任意のヌク レオチ ドュニッ トの塩 基部分を示し、 アデェン、 グァニン、 シトシンおよびチミンから選択 される塩基又は保護された対応の塩基を示し ；
Fは所望の塩基配列の 5 ' 末端側のーヌク レオチドを除いたオリ ゴ ヌク レオチド部分で、 DN A合成において一般的に用いられる塩基部 分、 あるレ、はリ ン酸部分の保護基によって保護されたオリ ゴヌク レオ チドを示し （但し、 5 ' —末端ヌク レオシドの 5 ' 位水酸基と 3 ' 末端 ヌク レオシドの 3 ' 位水酸基は含まない） ；
Vはリ ン酸部分の保護基 （特に、 メ トキシ基等の低級アルキルォキ シ基、 シァノエチルォキシ基等のシァノアルキルォキシ基、 第 3 9ェ 程においては、 特にオルトクロロフエノキシ基） を示し ； Uはァミダイ ト部分のァミ ノ基 （特に、 ジメチルァミノ基、 ジィ ソ プロピルアミノ基等のジアルキルアミノ基、 モルホリ ノ基等の 1又は 2個の酸素原子及び/又は窒素原子を環内に有する複素環基） を示 し ；
Wi 、 W2a、 W2い W3、 W 、 W4い W 、 W5 a又は W5b は、 B— 1 乃至 B— 5に示した方法において最終目的化合物の C P Gからオリゴ ヌク レオチド Fの 3 ' 末端部分の 3 ' 水酸基の酸素原子までを示し ；
1 (エル） は：！〜.9の整数を示し ；
Eは水素原子又は保護されていてもよい水酸基あるいはァミノ基を示 し ；
Kは酸素又は硫黄原子を示し ；
DMTは 4、 4 ' —ジメ トキシトリチル基を示し ；
H a 1 はハロゲン原子 （好適には、 塩素又は臭素原子） を示し ； R5 はメチル、 ェチル、 プロピル、 ブチル、 フエニル， メ トキシ、 ェ トキシ、 プロボキシ、 ブトキシ、 シァノエチルォキシ又は置換されて いてもよいフエニルォキシ基 （好適には、 無置換のもの） を示す。
A— 1法及び A— 2法は、 化合物 （ 1 ) を製造するための、 重要中 間体である化合物 （ 2) を製造する方法である。
B— 1法は、 5 ' 末端部分に保護基を有するヌク レオシ ド （以下、
3 ' 末端ヌクレオシドという） がリンカ一を介してコントロールド ' ポア · グラス （以下、 C P Gという） と結合したものを、 出発原料と して、 DNA合成機上、 市販の DNA合成用ヌク レオチ ド試薬 （以下、 ヌク レオチドュニッ トという） を用いて、 通常の方法で、 順次ヌクレ ォチドを伸長し、 所望のオリゴヌク レオチドより 1つ少ないオリ ゴヌ ク レオチド前まで結合させた化合物 （3 ) を製造する方法である。
B— 2法は、 アルキレンジオール （4— 1 ) の一方の水酸基を、 4，
4 ' ージメ トシキ トリチル基 （以下、 DMT基という） で保護し、 他の 一方の水酸基にジカルボン酸無水物を縮合し、 コハク酸ハーフエステ ノレ （スキームにおいては、 ジカルボン酸の代表と してのコハク酸で記 載している） と し、 該エステルのカルボキシル基と C P Gのァミノ基 を結合し、 末端の DMT基を除去して、 得られる C P G担体 （4一 6 ) を原料として、 DNA合成機上、 ヌク レオチ ドユニッ トを用いて、 通常の方法で、 順次ヌク レオチドを伸長した、 所望のオリ ゴヌク レオ チドより 1つ少ないオリゴヌク レオチド前まで結合させた化合物 （4 - a ) を製造する方法であり、 また、 DNA合成機上、 同原料である C P G担体 （4一 6 ) に、 まず、 ホスホロチォエート結合を生成でき るヌク レオチド試薬を反応させ、 さらに、 ヌク レオチドユニッ トを用 いて、 通常の方法で、 順次ヌク レオチドを伸長し、 所望のオリゴヌク レオチドょり 1つ少ないォリ ゴヌク レオチド前まで結合した化合物 (4一 b ) を製造する方法でもある。
B— 3法は、 アルキレンジオールと C P Gをジカルボン酸を介して結 合した C P G担体 （ 5— 1 ) (すなわち、 （4一 6) ) を原料と して、 市販の化合物 （ 5— 2) を用いて、 DNA合成機上、 化合物 （5— 3 ) を製造し、 次いで、 置換ア ミン1¾4 NH2と反応して、 化合物 （ 5 - 4 ) を製造し、 さらに、 ヌク レオチドユニッ トを用いて、 通常の方 法で、 順次ヌク レオチドを伸長し、 所望のオリゴヌクレオチドより 1 つ少ないオリゴヌク レオチ ド前まで結合した化合物 （ 5) を製造する 方法である。
B— 4法は、 ジオール化合物 （6— 1 ) の一方の水酸基を DMT化し て得られる化合物 （ 6— 2) と した後、 他の一方の水酸基にアミダイ ト化試薬 （ 6— 3 ' ) を反応させ、 化合物 （6— 3 ) を得る方法であ り、 また、 前述の化合物 （6— 2) を、 B— 3の方法と同様に、 ジカ ルボン酸を介して C P Gと結合し、 C P G担体 （6— 6) を得、 さら に、 DMT基を除去して得られる、 C P G担体 （6— 7) を原料とし て、 D NA合成機上、 ヌク レオチ ドユニッ トを用いて、 通常の方法で、 順次ヌク レオチドを伸長し、 所望のオリ ゴヌク レオチドより 1つ少な いオリ ゴヌク レオチ ド前まで結合させた化合物 （6 a ) を製造する方 法であり、 またさらに、 DNA合成機上、 C P G担体 （ 6— 7) に、 化合物 （ 6— 3 ) を、 1回， 2回又は 3回反応した後、 得られる化合 物 （6— 9 ) 、 （6— 1 0 ) 又は （ 6— 1 1 ) を原料と して、 ヌク レ ォチ ドユニッ トを用いて、 通常の方法で、 順次ヌク レオチドを伸長し、 所望のオリ ゴヌクレオチドより 1つ少ないォリゴヌクレオチド前まで 結合した化合物 （6 b ) 、 （6 c ) 又は （6 d ) を製造する方法であ る。
B— 5法は、 市販の保護された 2 ' —デォキシヌクレオシドをリンカ 一を介して結合した C P G (以下 D''' — C P Gとレ、う） の DMT基 を除去した化合物 （ 7— 2) と、 T h o m a s H o r nらによって 報告されている （T e t r a h e d r o n L e t t e r s , 2 7， 4 7 0 5 ( 1 9 8 6 ) ) ( 2—シァノエ トキシ） 一 [ 2— ( 2 ' — O 一 4， 4 ' ージメ トキシ ト リチルォキシェチルスルホニル） ェ トキ シ] 一 （N， N—ジイ ソプロ ピルァ ミ ノ） ホスフィン （ 7— 1 ) とを 反応して、 化合物 （ 7— 3 ) を製造し、 次いで、 該化合物 （ 7— 3) の DM T基を除去した化合物と、 常法により別途合成される化合物
( 7 - 4) とを、 縮合して得られる化合物 （ 7— 5) を製造し、 さら に、 該化合物 （ 7— 5 ) を原料として、 ヌク レオチドュニッ トを用い て、 通常の方法で、 順次ヌク レオチドを伸長し、 所望のオリ ゴヌクレ ォチドよ り 1つ少ないオリ ゴヌク レオチド前まで結合した化合物 （7 a ) を製造する方法であり、 また、 前述の化合物 （ 7— 3) の DMT 基を除去した化合物と、 常法により別途合成される化合物 （ 7— 6) とを、 縮合して得られる化合物 （ 7— 7) を製造し、 さらに、 該化合 物 （ 7— 7 ) を原料として、 ヌクレオチドュニッ トを用いて、 通常の 方法で、 順次ヌクレオチドを伸長し、 所望のオリゴヌクレオチドより 1つ少ないオリ ゴヌク レオチ ド前まで結合した化合物 （ 7 b ) を製造 する方法である。
C一 1法は、 化合物 （ 2) に、 亜リン酸化剤を反応して、 調製した 3 ' —亜リン酸誘導体 （ 8) と、 B— 1乃至 B— 5法で合成した化合 物 （3 ) ， （4— a ) 、 （4— b ) ， （ 5) ， （6 a ) 、 （ 6 b ) 、
( 6 c ) , ( 6 d ) , ( 7 a ) 又は （ 7 b ) の DMT基を除去した対 応化合物とを、 それぞれ、 DN A合成機上で縮合し、 次いで、 酸化し、 さらに、 C P Gとの結合を切断し、 最後に、 保護基を除去して、 本発 明の化合物 （ 1 ) を製造する方法である。
C一 2法は、 化合物 （2) に、 リン酸化剤を反応して調製した 3， 一 リン酸誘導体 （ 9) と、 B— 1乃至 B— 5法で合成した化合物 （ 3 ) ， (4— a ) 、 （4一 b ) ， （ 5 ) ， （6 a ) 、 （6 b) 、 （ 6 c ) 、 ( 6 d ) ， ( 7 a ) 又は （ 7 b ) の DMT基を除去した対応化合物と を、 それぞれ、 DNA合成機上で縮合し、 C P Gとの結合を切断し、 最後に、 保護基を除去して、 本発明の化合物 （ 1 ) を製造する方法で ある。
C一 3法は、 化合物 （ 2 ) の 3 ' 位にホスホン酸基を導入した化 合物 （ 1 0 ) と、 B— 1乃至 B— 5法で合成した化合物 （ 3 ) ， （4 — a ) 、 （4— b ) ， （5) ， （6 a ) 、 （6 b ) 、 （ 6 c ) 、 ( 6 d ) ， (7 a ) 及び （7 b ) の DMT基を除去した対応化合物とを、 それぞれ、 縮合し、 次いで、 酸化して、 リン酸ジエステル結合を形成 し、 さらに、 C P Gとの結合を切断し、 最後に、 保護基を除去して、 本発明の化合物 （ 1 ) を得る方法である。
以下に A_ 1法乃至 C一 3法における各工程につき詳しく説明す る。 なお、 同様にして行うことができる工程については、 最先の工程 を代表と して説明する。 (第 1 、 8及び 1 8工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 化合物 （ 2— 1 ) <但し、 塩基部分が A、 G 、 Cの場合は、 存在するァミノ基のァシル化保護工程を前段階に含 む。
該保護工程は、 公知の方法 （ J. Am. Chetn. Soc. , 104， 1316， （1982) )に より容易に実施することができる。
ァミノ基の保護基と しては、 一般に、 低級脂肪族ァシル又は芳香族 ァシルが用いられる。
使用される低級脂肪族ァシルと しては、 例えば、 ホルミル、 ァセチ ノレ、 プロ ピオ-ル、 ブチリル、 イ ソブチリノレ、 ペンタノィル、 ピバロ ィル、 バレリル、 イ ソバレリル基などがあげられ、 使用される芳香族 ァシルと しては、 例えば、 ベンゾィル、 4—ァセ トキシべンゾィル、 4—メ トキシベンゾィル、 4—メチルベンゾィル、 1 一ナフ トイルな どがあげられ、 好適には、 塩基部分が A又は Cの場合はベンゾィル基、 Gの場合はイ ソプチリル基である。 >に、 水酸基の保護化試薬を反応 し、 選択的に 5 ' 位の水酸基のみを保護した化合物 （ 2— 2 ) を製造 する工程である。 '
使用される溶剤と しては、 好適には、 ベンゼン、 トルエン、 キシレ ンのよ うな芳香族炭化水素類 ； メチレンク ロ リ ド、 ク ロ口ホルム、 四 塩化炭素、 ジク ロ ロェタン、 ク ロ 口ベンゼン、 ジク ロロベンゼンのよ うなハロゲン化炭化水素類 ； 蟻酸工チル、 酢酸ェチル、 酢酸プロピル、 酢酸プチル、 炭酸ジェチルのよ うなエステル類 ； ジェチルエーテル、 ジィ ソプロ ピルェ一テル、 テ トラヒ ドロ フラン、 ジォキサン、 ジメ ト キシェタン、 ジエチレングリ コールジメチルエーテルのよ う なエ ーテ ル類 ； アセ トン、 メチルェチルケ トン、 メチルイ ソプチルケ トン、 ィ ソホロ ン、 シク ロへキサノ ンのよ う なケ トン類 ； ニ トロェタン、 ニ ト 口ベンゼンのよ うな二 トロ化合物類 ； ァセ トニ ト リル、 イ ソブチロュ ト リ ノレのよ うな二 ト リ ル類 ； ホルムア ミ ド、 ジメチルホルムア ミ ド ( D M F ) 、 ジメチルァセ トアミ ド、 へキサメチルホスホロ ト リ ア ミ ドのよ うなア ミ ド類 ； ジメチルスルホキシ ド、 スルホランのようなス ルホキシ ド類 ； ト リ メチルァ ミ ン、 ト リェチルァミ ン、 N—メチルモ ルホリ ン等の脂肪族三級ァミン類 ； ピリジン、 ピコ リ ンのよ うな芳香 族ァミ ンなどがあげられ、 さ らに好適には、 ハロゲン化炭化水素類 (特にメチレンクロ リ ド） 、 アミ ド類 （特に D M F ) である。
使用される保護化試薬と しては、 5 ' 位のみを選択的に保護でき、 酸 性、 中性の条件下、 除去できるものであれば、 特に制限はないが、 好 適には、 ト リチルク ロ リ ド、 モノ メ トキシ ト リチルク ロ リ ド、 ジメ ト キシ ト リチルク ロ リ ドのよ うな ト リァリ一ルメチルハライ ド類である。 保護化試薬としてトリアリールメチルハライ ド類を用いる場合には、 通常、 塩基を用いる。
その場合において、 使用される塩基と しては、 ピリジン、 ジメチル アミ ノ ビリ ジン、 ピロ リジノ ピリ ジン等の複素環ァミ ン類、 ト リメチ ルァ ミ ン、 ト リェチルァ ミ ン等の脂肪族三級ア ミ ン類があげられ、 好 適には、 ピリジン、 ジメチルァミ ノ ピリ ジン、 ピロ リジノ ピリ ジンで ある。
溶剤と して、 液状の塩基を用いる場合には、 該塩基自体が脱酸剤と して働くので、 改めて塩基を加える必要はない。
反応温度は、 使用される原料、 試薬、 溶剤などにより通常 0乃至 1 5 0 °Cであり、 好適には 2 0乃至 1 0 0 °Cである。 また、 反応時間は使 用される原料、 溶剤、 反応温度などにより異なるが、 通常 1乃至 1 0 0時間であり、 好適には、 2乃至 2 4時間である。
反応終了後、 反応液を水に注ぎ、 水と混和しない溶剤、 たとえば、 ベンゼン、 エーテル、 酢酸ェチルなどで抽出し、 抽出液より溶剤を留 去することによって、 目的物 （ 2— 2 ) は得られ、 通常、 そのまま次 の工程に用いる。 所望により、 各種クロマ トあるいは再結晶法により、 単離精製することもできる。
(第 2工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 化合物 （ 2 — 2 ) に水酸基の保護化試薬 を反応して、 化合物 （2— 3 ) を製造する工程である。
使用される溶剤と しては、 好適には、 ベンゼン、 トルエン、 キシレ ンのよ うな芳香族炭化水素類 ； メチレンクロ リ ド、 クロ口ホルム、 四 塩化炭素、 ジク ロ ロェタン、 ク ロ 口ベンゼン、 ジク ロ ロベンゼンのよ うなハロゲン化炭化水素類 ； 蟻酸ェチル、 酢酸ェチル、 酢酸プロピル、 酢酸ブチル、 炭酸ジェチルのよ うなエステル類 ； ジェチルエーテル、 ジイ ソプロ ピルエーテル、 テ トラ ヒ ドロフラン、 ジォキサン、 ジメ ト キシェタン、 ジエチレングリ コールジメチノレエ一テノレのよ う なエーテ ノレ類 ； アセ トン、 メチルェチルケ トン、 メチルイ ソプチルケ トン、 ィ ソホロ ン、 シク ロへキサノ ンのようなケ トン類 ； ニ トロェタン、 ニ ト 口ベンゼンのよ うなニ トロ化合物類 ； ァセ トニ ト リル、 イ ソプチロニ ト リルのよ うなュ ト リル類 ； ホルムアミ ド、 ジメチルホルムア ミ ド、 ジメチルァセ トア ミ ド、 へキサメチルホスホロ トリア ミ ドのよ うなァ ミ ド類 ； ジメチルスルホキシド、 スルホランのようなスルホキシド類 があげられ、 さらに好適には、 ェ一テル類 （特に、 テ トラヒ ドロフラ ン） 、 ハロゲン化炭化水素類 （特に、 塩化メチレン） 、 芳香族炭化水 素類 （特に、 トルエン） 、 アミ ド類 （特に、 ジメチルホルムアミ ド） があげられる。
使用される保護化試薬と しては、 通常、 5 ' 位の保護基と区別して 脱保護できるものであれば、 特に制限はないが、 好適には、 t —プチ ルジメチルシリルク 口 リ ドあるレ、は ト リイ ソプロ ビルシリルク ロ リ ド のよ う なシリルハラィ ド類、 ト リ ク ロ口エ トキシカルボニルク ロ リ ド のよ う なハロアルコキシカルボ-ルハライ ド類、 ベンジルォキシカノレ ボユルク ロ リ ドのよ う なァラルキルォキシカルボニルハライ ド類があ げられる。
保護化試薬と して、 シリルハラィ ド類、 ハロアルコキシカルボ-ル ハライ ド類ゃァラルキルォキシカルボニルハライ ド類を用いる場合に は、 通常、 塩基を用いる。
その場合において、 '使用される塩基としては、 好適には、 有機塩基類 (特に ト リェチルァミン、 ピリ ジン、 N—メチルモルホリ ン、 D BU 及びイ ミダゾ一ルなど） である。
反応温度は、 使用される試薬、 原料、 溶剤などにより通常一 20乃至 1 5 0 °Cであり、 好適には、 ― 1 0乃至 5 0 °Cである。 また、 反応時間 は使用される原料、 溶剤、 反応温度などにより異なるが、 通常 1乃至 1 0 0時間であり、 好適には、 1乃至 24時間である。
反応終了後、 たとえば、 反応液を水に注ぎ、 水と混和しない溶剤、 た とえばベンゼン、 エーテル、 酢酸ェチルなどで抽出し、 抽出液より溶 剤を留去することによって、 目的物 （ 2— 3 ) は得られ、 通常、 その まま次の工程に用いる。 所望により、 各種クロマ トあるいは再結晶法 により、 単離精製することもできる。
(第 3、 1 1、 2 2及び 2 5工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 化合物 （ 2— 3 ) 、 （4— 5 ) 、 (6 -
6 ) 又は （ 6— 8) に脱保護化試薬を反応させて、 5 ' 位の水酸基の 保護基を選択的に除去して、 化合物 （ 2— 4 ) 、 (4 - 6) 、 (6—
7) 又は （6— 9) を製造する工程である。
使用される溶剤と しては、 反応を阻害しなければ、 特に限定はない 、 好適には、 ベンゼン、 トルエン、 キシレンのような芳香族炭化水 素類 ； メチレンクロ リ ド、 クロ 口ホルム、 四塩化炭素、 ジク ロロエタ ン、 クロ口ベンゼン、 ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素 類 ；蟻酸ェチル、 酢酸ェチル、 酢酸プロピル、 酢酸プチル、 炭酸ジェ チルのよ う なエステル類 ； ジェチルエーテル、 ジィ ソプロピルェ一テ ル、 テ トラヒ ドロフラン、 ジォキサン、 ジメ トキシェタン、 ジェチレ ングリ コ一ルジメチルエーテルのよ うなエーテル類 ； メ タノ一ル、 ェ タノ一ル、 n-プロノ、。ノール、 イ ソプロパノール、 n-ブタノール、 イ ソ ブタノ ール、 t-ブタノール、 イ ソアミルアルコール、 ジエチレングリ コール、 グリセ リ ン、 ォクタノール、 シク ロへキサノ一ノレ、 メチノレセ 口 ソルブ、 のよ うなアルコール類 ； アセ トン、 メチルェチルケ トン、 メチルイ ソブチルケ トン、 イ ソホロン、 シク ロへキサノ ンのよ うなケ トン類 ； 二 トロエタン、 二 トロベンゼンのよ うな二 ト口化合物類 ； ァ セ トニ ト リル、 ィ ソブチロニ ト リルのよ うな二 ト リル類 ； ホルムァミ ド、 ジメチルホルムアミ ド、 ジメチルァセ トアミ ド、 へキサメチルホ スホロ ト リ アミ ドのよ うなアミ ド類 ； ジメチルスルホキシド、 スルホ ランのようなスルホキシド類があげられ、 さらに好適には、 アルコ一 ル類 （特にメタノール、 エタノール） や塩化メチレン及び脱保護化試 薬と して酢酸を用いる場合は酢酸と水の混液があげられる。
使用される脱保護化試薬と しては、 通常用いられるものであれば、 特に制限はないが、 保護基が ト リァリールメチル基の場合には、 例え ば酢酸、 ジクロロ酢酸、 トリフルォロ酢酸、 塩酸、 及び臭化亜鉛のよ うなルイス酸があげられ、 好適には酢酸、 ジクロロ酢酸、 トリフルォ 口酢酸である。
反応温度は、 使用される試薬、 原料、 溶剤などによ り異なるが、 通 常一 1 0乃至 1 0 0 °Cであり、 好適には 0乃至 5 0 °Cである。 反応時問 は使用される原料、 溶剤、 反応温度などによ り異なるが、 通常 1分間 乃至 5 0時間であり、 好適には、 1分間乃至 2 4時間である。
反応終了後、 たとえば、 反応液をピリジン等の塩基を用いて中和し、 水に注ぎ、 水と混和しない溶剤、 たとえばベンゼン、 エーテル、 酢酸 ェチルなどで抽出し、 抽出液よ り溶剤を留去することによって、 目的 物 （ 2— 4 ) は得られ、 通常、 そのまま次の工程に用いる。 所望によ り、 各種クロマ トあるいは再結晶法によ り、 単離精製することもでき る。
なお、 第 1 1 、 2 2及び 2 5工程においては、 目的物 （ 4 _ 6 ) 、 ( 6— 7 ) 及び （ 6— 9 ) は濾取することができ、 メチレンクロ リ ド のような有機溶剤で洗浄後、 そのまま、 次の工程に用いる。
(第 4 、 6工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 塩基の存在下、 化合物 （ 2 — 1 ) 又は ( 2— 4 ) に、 化合物 （ 2— 5 ) を反応させ、 化合物 （ 2 ) 又は （ 2 一 6 ) を製造する工程である。
使用される溶剤としては、 好適には、 ベンゼン、 トルエン、 キシレ ンのような芳香族炭化水素類； メチレンクロ リ ド、 クロ口ホルム、 四 塩化炭素、 ジクロロェタン、 クロ口ベンゼン、 ジクロロベンゼンのよ うなハロゲン化炭化水素類 ； 蟻酸ェチル、 酢酸ェチル、 酢酸プロピル、 酢酸ブチル、 炭酸ジェチルのようなエステル類 ； ジェチルエーテル、 ジィソプロピルエーテル、 テトラヒ ドロフラン、 ジォキサン、 ジメ ト キシェタン、 ジエチレングリコー ジメチノレエーテノレのようなエーテ ル類 ； アセ トン、 メチルェチルケトン、 メチルイソブチルケトン、 ィ ソホロン、 シクロへキサノンのようなケ トン類 ； ニ トロェタン、 ニト 口ベンゼンのようなュ ト口化合物類 ； ァセ トニトリル、 ィソブチロニ トリルのような二トリル類 ； ホルムァミ ド、 ジメチルホルムァミ ド、 ジメチルァセ トアミ ド、 へキサメチルホスホロ トリアミ ドのようなァ ミ ド類 ； ジメチルスルホキシド、 スルホランのようなスルホキシド類 があげられ、 さらに好適には、 エーテル類 （特に、 テトラヒ ドロフラ ン） 、 ケトン類 （特に、 アセ トン） 、 ハロゲン化炭化水素類 （特に、 メチレンクロ リ ド） 、 アミ ド類 （特に、 ジメチルホルムアミ ド） 及び 芳香族ァミン類 （特に、 ピリジン） である。 使用される塩基としては、 好適には、 有機塩基類 （特に トリェチル ァミ ン、 ピリジン、 N—メチルモルホリ ン、 D B Uなど） 、 アルカリ 金属水素化物 （特に、 水素化ナトリ ウム） 及びアルカ リ金屌炭酸塩 (特に、 炭酸ナトリ ウム、 炭酸リチウム） であるが、 化合物 （2— 5 ) の Zが珪素原子の場合は、 イ ミダゾ一ルのよ うな有機塩基が最も 好ましい。
反応温度は、 特に限定はないが、 通常 0 から 100 °Cであり、 好適 に、 2 0乃至 6 0 °Cで実施する。 反応時間は、 通常 5分から 3 0時間 であるが、 反応を 5 0 °Cで実施したときには、 1 0時間で反応は終了 する。
例えば、 反応終了後、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在 する場合には濾過により除去した後、 水と酢酸ェチルのような混和し ない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層を分離し、 無 水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することによって、 目的 物（2 )又は （ 2— 6 ) は得られる。
得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば再結晶、 再沈殿又 はクロマ トグラフィ一等によって更に精製できる。
(第 5工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 化合物 （ 2— 6 ) に脱保護剤を反応させ、 化合物 （ 2 ) を製造する工程である。
本工程は、 化合物 （ 2— 6 ) の保護基の種類により、 その方法が異 なる。
1 ) 3 ' 位の保護基として、 シリル原子を有する基を使用した場合に は、 通常、 弗化テ トラプチルアンモェゥムのような弗化物イオンを生 成する化合物で処理することにより除去される。
使用される溶剤としては、 反応を阻害しないものであれば特に限定 はないが、 テ トラヒ ドロフラン、 ジォキサンのようなエーテル類が好 適である。
反応温度は、 特に限定はないが、 通常一 3 0 °Cから 1 0 0 °Cであり、 好適に、 0 °C乃至 3 0 °Cで実施する。
反応時間は、 通常 5分から 3 0時間であるが、 反応を 2 0 °Cで実施し たときには、 1 0時間で反応は終了する。
例えば、 反応終了後、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在 する場合には濾過により除去した後、 水と酢酸ェチルのような混和し ない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層を分離し、 無 水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することによって、 目的 物 （ 2 ) が得られる。
得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば再結晶、 再沈殿又は クロマ トグラフィ一等によって更に精製できる。
2 ) 3 ' 位の保護基としてハロアルコキシカルボ二ル基を使用した場 合には、 通常、 亜鉛末を用いる。
使用される溶剤と しては、 反応を阻害しないものであれば特に限定 はないが、 酢酸、 アルコール又はこれらと水との混合溶剤が好適であ る。
反応温度は、 特に限定はないが、 通常 0 から 100 °Cであり、 好適 には、 室温で実施する。 反応時間は、 通常 5分から 3 0時間であるが、 反応を室温で実施したときには、 1 0時間で反応は終了する。
例えば、 反応終了後、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在 する場合には濾過により除去した後、 水と酢酸ェチルのような混和し ない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層を分離し、 無 水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することによって、 目的 物 （ 2 ) は得られる。
得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば再結晶、 再沈殿又 はクロマ トグラフィ一等によって更に精製できる。 3 ) 3 ' 位の脱保護と してァラルキルォキシカルボ二ル基類を使用し た場合には、 接触還元又は酸化によって行なうことができる。
接触還元を行なう場合に使用される還元触媒と しては、 通常、 接触 還元反応に使用されるものであれば、 特に限定はないが、 好適には、 パラジウム炭素、 ラネーニッケル、 酸化白金、 白金黒、 ロジウム一酸 化アルミニウム、 トリフエニルホスフィン—塩化ロジウム、 パラジゥ ム一硫酸バリ ゥムが用いられる。
圧力は、 特に限定はないが、 通常 1乃至 1 0気圧で行なわれる。 反応温度及び反応時間は、 出発物質、 溶媒及び触媒の種類等により 異なるが、 通常、 0乃至 1 0 0 °Cで、 5分乃至 2 4時間実施される。 酸化による除去において使用される溶剤と しては、 本反応に関与し ないものであれば特に限定はないが、 好適には、 含水有機溶剤である。 該有機溶剤と しては、 好適には、 アセ トンのようなケ トン類、 メチ レンク口 リ ド、 クロ口ホルム、 四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水 素類、 ァセ トニ トリルのような二トリル類、 ジェチルェ—テル、 テト ラヒ ドロフラン、 ジォキサンのようなエーテル類、 ジメチルホルムァ ミ ド、 ジメチルァセ トアミ ド、 へキサメチルホスホロ ト リアミ ドのよ うなァミ ド類及びジメチルスルホキシドのようなスルホキシド類をあ げることができる。
使用される酸化剤としては、 酸化に使用される化合物であれば、 特 に限定はないが、 好適には、 過硫酸カリ ウム、 過硫酸ナトリ ウム、 ァ ンモェゥムセリ ゥムナイ トレイ ト（CAN) 、 2 , 3-ジク口口 -5 , 6- ジシァノ -p - べンゾキノン（DDQ) が用いられる。
反応温度及ぴ反応時間は、 出発物質、 溶媒及び触媒の種類等により 異なるが、 通常、 0乃至 1 5 0 °Cで、 1 0分乃至 2 4時間実施される。 又、 液体アンモニア中若しくはメタノール、 エタノールのようなァ ルコール中において、 — 7 8乃至ー 2 0 で、 金属リチウム、 金属ナ ト リ ウムのようなアルカリ金属類を作用させることによっても除去で きる。
更に、 不活性溶剤中、 塩化アルミニウム—沃化ナトリ ウム、 又はトリ メチルシリルィォダイ ドのようなアルキルシリルハラィ ド類を用いて も除去することができる。
この場合に、 使用される溶剤と しては、 本反応に関与しないものであ れば特に限定はないが、 好適には、 ァセ トニ トリルのような- トリル 類、 メチレンクロ リ ド、 クロ口ホルムのようなハロゲン化炭化水素類 又はこれらの混合溶剤が使用される。
反応温度及び反応時間は、 出発物質、 溶媒等により異なるが、 通常 は 0乃至 5 0 °Cで、 5分乃至 3 B間実施される。
尚、 反応基質が硫黄原子を有する場合は、 好適には、 塩化アルミ二 ゥム一沃化ナト リ ウムが用いられる。
反応終了後、 例えば、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在す る場合には濾過により除去した後、 水と酢酸ェチルのような混和しな い有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層を分離し、 無水 硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することによって、 目的物 ( 2 ) は得られる。
得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば再結晶、 再沈殿又は クロマ トグラフィ一等によって更に精製できる。
(第 7 , 1 2， 1 4 , 1 7， 2 3， 2 6， 2 8， 3 0， 3 3及び 3 5 工程）
本工程は、 目的のオリ ゴヌク レオチドの 3 ' 末端側のヌク レオチド となる、 ヌク レオシドを担持した C P G ( 3 — 1 ) を原料と して、 D N A合成機上、 通常 D N A鎖の伸長反応に用いられる操作を繰り返し、 目的のオリ ゴヌク レオチドの 5 ' 末端以外のヌク レオチドを除いたォ リ ゴヌク レオチ ドまで伸長し、 c P Gに担持された状態でのオリ ゴデ ォキシリボヌク レオチ ド （ 3 ) 等を得る工程である。
以下、 DN A合成機上での DNA鎖の伸長反応に関し、 ホスホロァ ミダイ ド法について述べるが、 本方法に特に限定されるわけではない。 第 7工程において、 市販又は前述若しくは後述の方法で得られる、 目 的のオリ ゴヌク レオチドの 3 ' 末端側のヌク レオチドとなる、 ヌク レ オシ ドを担持した C P G ( 3— 1 ) 等を、 D NA合成機上、 脱 DMT 化試薬を用いて、 DMTを除去した後、 ヌク レオチ ドユニッ トを縮合 して生成した亜リ ン酸ト リエステル結合を、 酸化剤を用いて、 リ ン酸 ト リエステルに酸化する。
上記の操作を繰り返し、 目的のオリ ゴヌクレオチドの 5 ' 末端以外の ヌク レオチ ドを除いたオリ ゴヌク レオチ ドまで伸長し、 DMT基を 5 ' 末端に有する C P Gに担持されたォリ ゴデォキシヌク レオチ ド ( 3 ) (以下、 オリ ゴデォキシヌク レオチドは O D Nと略記する） を 得ることができる。
5 ' 末端が DMT基で保護された、 所望のヌク レオチド配列の O D Nを担持した C P Gは、 D NA合成機 （たとえば、 アプライ ドバイオ システムズ社のホスホロアミダイ ト法によるモデル 3 8 0 Bや、 ミ リ ジェン Zバイオサーチのホスホロアミダイ ト法によるサイクロンプラ ス） を用レヽて、 N u c l e i c A c i d s R e s , 1 2 4 5 3 9 ( 1 9 8 4 ) における方法又はその変法によって合成できる。
また、 ォリ ゴヌクレオチドの合成に用いるヌクレオチドュニッ トの塩 基部と しては、 脂肪族又は芳香族ァシル基で保護されたものを用いる。 該ァシル基としては、 塩基部が A又は Cの場合にはベンゾィル基が、 Gの場合にはィソブチリル基が、 好適に用いられる。
本工程の縮合反応において、 使用される溶剤と しては、 反応を阻害 しないものであれば特に限定はしないが、 ァセ トニ ト リル及びテ トラ ヒ ドロフランが好適であり、 触媒と して使用される酸性物質としては、 テ トラゾールが、 好適である。
反応温度は、 一 3 0乃至 5 0 °Cまでのいずれでもよいが、 通常は、 室 温で実施する。 反応時間は、 1分乃至 2 0時間まで反応温度によって 異なるが、 室温で反応を実施した場合は、 反応は 1 0分間で終了する。 本工程の酸化反応において、 使用される溶剤と しては、 反応を阻害 せず、 出発物質をある程度溶解するものであれば特に限定はないが、 好適には、 複素環ァミン類 （特に、 ピリジン） 、 二 ト リル類 （特に、 ァセ トニ ト リル） 、 エーテル類 （特に、 テ トラヒ ドロフラン） 、 ノヽロ ゲン化炭化水素類 （特に、 メチレンクロ リ ド） であり、 使用される酸 化剤と しては、 通常、 酸化反応に使用されるものであれば特に限定は ないが、 好適には、 m _クロ口過安息香酸のような過酸類 ； t-ブチル ヒ ドロバーオキシドのよ うなパ一ォキシ ド類 ； よう素一ピリジン—水 である。
反応温度は一 5 0乃至 100 °Cで行なわれ、 反応時間は、 主に反応温 度、 原料化合物又は使用される溶媒の種類によって異なるが、 通常 3 0分乃至 1 5時間である。
尚、 上記酸化反応においては、 ト リェチルベンジルアンモニゥムク 口ライ ド、 ト リブチルベンジルアンモニゥムブロ ミ ドのような層間移 動触媒を加えることによって反応が加速される。
反応終了後、 目的物 （ 3 ) は濾取され、 メチレンクロリ ドのような有 機溶剤で洗浄され、 そのまま次の工程に用いられる。
第 1 2 、 1 4 、 1 5 、 1 7 、 2 3 、 2 6 、 2 8 、 3 0 、 3 3及び 3 5工程においても、 上記に示した方法と同様にして行うことができる。
(第 9及び 2 0工程） 本工程は、 化合物 （4 一 2 ) 又は （ 6— 2 ) に、 塩基性触媒の存在 下、 ジカルボン酸の無水物を反応させ、 ジカルボン酸ハーフエステル ( 4— 3 ) 又は （6— 4 ) を得る工程である。
なお、 工程のスキームでは、 代表と してコハク酸で記載するが、 他 のジカルボン酸についても同様に行うことができる。 使用されるジカルボン酸と しては特に限定はないが、 好適には、 炭素 数 2乃至 1 0のものであり、 最も好適には、 コハク酸又はグルタール 酸である。
使用される塩基性触媒と しては、 ジメチルァミノピリジンやピロ リジ ノ ビリ ジンのよ うなアミノ ビリ ジン類、 ト リ メチルァミ ンゃト リェチ ルァミ ンのよ うな三級ァミ ン、 炭酸水素ナト リ ウム、 炭酸力リ ウムの よ うなアルカリ金属の炭酸塩などが好ましいが、 ジメチルァミノ ピリ ジン、 ピロ リジノピリジンが最も好ましい。
使用される溶剤と しては、 反応を阻害せず、 出発物質をある程度溶解 するものであれば特に限定はないが、 好適には、 ベンゼン、 トルエン、 キシレンのよ うな芳香族炭化水素類 ； メチレンクロ リ ド、 クロ口ホル ムのよ うなハロゲン化炭化水素類 ； エーテル、 テ トラ ヒ ドロフラン、 ジォキサン、 ジメ トキシェタンのよ うなェ一テル類 ； ジメチルホルム アミ ド、 ジメチルァセ トアミ ド、 へキサメチルホスホロ トリアミ ドの ようなアミ ド類 ； ジメチルスルホキシドのよ うなスルホキシド類 ； メ タノール、 エタノール、 n-プロパノール、 イ ソプロノヽ。ノール、 n-ブタ ノール、 イ ソブタノ一ル、 イソアミノレアルコールのよ うなアルコール 類 ； 硫酸水のような希釈酸 ； 水酸化ナト リ ウム水のような希釈塩基 ； 水 ； アセ トン ； メチルェチルケ トンのよ うなケ トン類 ； ピリジンのよ うな複素環ァミ ン類又はァセ トニ ト リルのよ うな二 ト リル類をあげる ことができ、 好適には、 二 トリル類 （特にァセ トニ ト リル） 、 ェ一テ ル類 （特にテ トラヒ ドロフラン） 、 ハロゲン化炭化水素類 （特にメチ レンク ロ リ ド） である。
反応温度は、 一 5 0乃至 1 0 0°Cで行なわれ、 反応時間は、 主に反応 温度、 原料化合物又は使用される溶媒の種類によって異なるが、 通常 3 0分乃至 1 5時間である。
反応終了後、 例えば、 反応混合物を適宜中和し、 また、 不溶物が存 在する場合には濾過によ り除去したのち、 水と酢酸ェチルのような水 と混和しない有機溶剤を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層を分 取し、 無水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することにより、 目的物 （4一 3 ) 又は （6— 4 ) を得ることができる。
(第 1 0及び 2 1工程）
本工程は、 縮合剤の存在下、 第 9又は 2 0工程で得られるジカルボ ン酸のハーフエステル （4— 3 ) 又は （ 6— 4 ) に、 ペンタク ロルフ ヱノールのよ うなフエノール類を反応させ、 活性エステルと し、 次い で、 塩基の存在下、 この活性エステルと、 ァ ミ ノ一 C P G (4— 4 ) 又は （ 6— 5 ) とを反応させ、 目的物 （ 4一 5 ) 又は （ 6— 6 ) を得 る工程で ¾)る。
使用されるフヱノール類と しては、 カルボン酸と反応して活性エステ ルを形成するものであれば特に限定はないが、 ペンタクロロフエノー ルゃ 4一二 トロフエノ一ルが好適である。
使用される塩基と しては、 通常の反応において塩基と して使用され るものであれば、 特に限定はないが、 好適には、 ト リェチルァミン、 ト リブチルァミン、 ジイ ソプロピルァミ ンである。
使用される溶剤と しては、 反応を阻害せず、 出発物質をある程度溶 解するものであれば特に限定はないが、 ジメチルホルムアミ ド、 ジメ チルァセ トアミ ド、 へキサメチルホスホロ ト リアミ ドのようなアミ ド 類 ； ジメチルスルホキシドのよ うなスルホキシド類 ； ァセ トン ； メチ ルェチルケ トンのよ うなケ トン類 ； ピリ ジンのような複素環ァミ ン又 はァセ トニ トリルのような二 ト リル類をあげることができ、 好適には、 ジメチルホルムアミ ドのようなアミ ド類である。
使用される塩基と しては、 通常の反応において塩基と して使用され るものであれば、 特に限定はないが、 好適には、 ト リェチルァ ミ ン、 ト リブチルァミ ン、 ジイ ソプロピルアミンェチルァミン、 N—メチル モルホリンピリジン、 4一 （N、 N—ジメチルァミノ） ピリジン、 N、 N—ジメチルァニ リ ン、 N、 N—ジェチノレア二リ ン、 1 、 5—ジァザ ビシク ロ [ 4， 3， 0 ] ノナ一 5—ェン、 1 、 4ージァザビシク ロ [ 2， 2， 2 ] オク タン （D A B C O) 、 1 ， 8—ジァザビシク ロ [ 5， 4 , 0 ] ゥンデクー 7—ェン （D B U) のよ うな有機塩基類が あげられ、 好適には、 ト リェチルァミン、 ピリジン、 N—メチルモル ホリン、 D B Uである。
反応温度は一 5 0乃至 1 0 0 °Cで行われ、 反応時間は、 主に反応温 度、 原料化合物又は使用される溶媒の種類によって異なるが、 通常、 反応を室温で行う場合には、 3 0乃至 5 0時間である。
反応終了後、 目的物は濾取され、 メチレンクロ リ ドのよ うな有機溶 剤で洗浄された後、 そのまま、 次の工程に用いられる。
(第 1 3、 3 2工程）
第 1 3工程は、 第 1 1工程で得られた化合物 （4一 6) に、 DNA合 成機上、 市販の 5 ' — O— DMT—ヌク レオシド一 3 ' —ホスホロアミ ダイ ト試薬を反応し、 次いで、 チォェ一 ト化試薬を反応し、 チォエー ト結合を有する C P G担体である目的物 （4 一 7 ) を得る工程である。 チォェ一ト化の試薬と しては、 3価のリンに反応してチォェ一トを形 成することができる試薬であれば、 特に限定はされないが、 硫黄のほ 力 、 アプライ ドバイオシステムズ社より入手できるテ トラエチルチウ ラムジスルフィ ド （T E T D) やミ リ ジェン Zバイォリサーチよ り入 手できる B e a u c a g e試薬などが好適であり、 反応終了後、 前者 の場合は、 T e t r a h e d r o n L e t t e r s 3 2. 3 0 0 5 ( 1 9 9 1 ) に示された方法又はその変法に従って処理し、 また、 後者の場合は、 J, Am. Chem. Soc. 1_1 2_ 1 2 5 3 ( 1 9 9 0 ) に示さ れた方法又はその変法に従って、 処理することによ り、 目的物 （ 4 — 7 ) を得ることができる。 第 3 2工程においては、 化合物 （ 7 — 3 ) に、 5 '— O— DMT—ヌ ク レオチ ドー 3 ' —ホスホロアミダイ ト試薬を反応させた後、 通常の 処理により、 リ ン酸ト リエステル結合を有する力 、 又は、 チォエート 化試薬を反応させて、 目的物 （ 7— 7 ) を得ることができる。
反応終了後、 目的物は、 濾取され、 メチレンクロ リ ドのような有機 溶剤で洗浄され、 そのまま次の工程に用いられる。
(第 1 5工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 縮合剤及び脱酸剤の存在下、 化合物 （4 一 6 ) と同様にして得られる化合物 （ 5 — 1 ) と、 市販のホスホン酸モ ノエステル （ 5 — 2 ) (例えば、 ミ リジェン /バイオサーチ社から入 手できる） とを反応して、 目的物 （ 5— 3 ) を得る工程である。
用いられる縮合剤としては、 ホスホン酸モノエステルと混合酸無水物 を形成するものであれば、 特に限定はないが、 好適には、 ァダマンタ ン一 1 —カルボニルクロ リ ドゃピバロイルク ロ リ ドが用レ、られる。 用いられる脱酸剤と しては、 脂肪酸ハライ ドを用いて、 ァシル化する 際に用いられる脱酸剤であれば、 特に限定はないが、 通常は、 ピリジ ンが用いられる。
用いられる溶剤と しては、 特に反応を阻害しなければ限定はないが、 好適には、 無水のァセ トニ ト リルのような二 トリル類が用いられる。 反応時間は、 室温で反応を実施する場合は 5乃至 6 0分である。
反応終了後、 目的物は濾取され、 メチレンク ロ リ ドのよ うな有機溶 剤で洗浄され、 そのまま次の工程に用いられる。
(第 1 6工程）
本工程は、 化合物 （ 5— 3 ) に、 所望のアルキルアミン及び四塩化炭 素を反応させ、 ホスホロアミデート結合を形成する工程である。
使用される溶剤としては、 通常、 試薬である四塩化炭素を用いる。 反応温度は一 5 0 ° 乃至 1 0 0 °Cまで、 特に限定はないが、 室温の場 合は、 反応時間は 1乃至 1 0時間である。
反応終了後、 目的物は、 濾取され、 メチレンクロ リ ドのよ うな有機 溶剤で洗浄され、 そのまま次の工程に用いられる。
(第 1 9、 3 6工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 脱酸剤の存在下、 化合物 （2 ) 又は （6— 2 ) に、 亜リン酸化剤 （ 6— 3 ' ) を反応させて、 3 ' 亜リン酸誘導体 ( 3 ) 又は （6— 3 ) を製造する工程である。
亜リン酸化剤 （ 6— 3 ' ) と しては、 クロ口モルホリ ノメ トキシホス フィ ン、 ク ロ 口モルホ リ ノ シァノエ トキシホスフィ ン、 ク ロ 口ジメチ ルァ ミ ノ メ トキシホスフイ ン、 ク ロ ロジメチルァ ミ ノシァノエ トキシ ホスフィ ン、 ク ロロジイ ソプロ ピルアミ ノ メ トキシホスフィ ン、 ク ロ ロジィ ソプロ ピルァ ミ ノシァノエ トキシホスフィ ンのよ うなホスフィ ン類があげられ、 好適には、 ク ロ 口モルホ リ ノ メ トキシホスフィ ン、 ク ロ 口モルホ リ ノ シァノエ トキシホスフィ ン、 ク ロ ロジイ ソプロ ピノレ ア ミ ノ メ トキシホスフィ ン、 ク ロ ロジイ ソプロ ピルア ミ ノシァノエ ト キシホスフィンである。
使用される溶剤と しては、 反応に影響を与えないものであれば、 特に 限定はないが、 好適には、 テ トラヒ ドロフラン、 ジェチルェ一テル、 ジォキサンのようなエーテル類である。
使用される脱酸剤と しては、 ピリジン、 ジメチルァミノピリジンのよ うな複素環ァミ ン類、 ト リ メチルァ ミ ン、 ト リェチルァ ミ ン、 ジイソ プロピルェチルァ ミ ンのよ うな脂肪族ァミン類があげられるが、 好適 には、 脂肪族ァミン類 （特にジイ ソプロピルェチルァミ ン） である。 反応温度は、 特に限定はないが、 通常一 5 0乃至 5 0 DCであり、 好適 には、 室温である。 反応時間は、 使用する原料、 試薬、 温度等により 異なるが、 通常、 5分から 3 0時間であり、 好適には、 室温で反応し た場合、 3 0分である。
反応終了後、 目的化合物は、 例えば、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在する場合には、 濾過により除去した後、 水と酢酸ェチル のよ うな混和しない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機 層を分離し、 無水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去すること によって得られる。 得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば、 再結晶、 再沈殿又はク口マ トグラフィ一等によって更に精製できる。
(第 2 4工程）
本工程は、 第 7工程において、 D N A合成機上、 ヌク レオチドュニッ トに代えて、 化合物 （ 6— 3 ) を使用する以外は、 同様に行って、 リ ン酸ト リエステル結合を有する C P G担体 （ 6— 8 ) を得る工程であ る。
(第 2 7、 2 9工程）
本工程は、 第 2 5工程で得られた C P G担体 （6— 9) を、 第 2 4及 び 2 5工程と同様にして （第 2 9工程においては、 これらの工程を 2 度繰り返して） 、 リ ン酸ト リエステル結合を 2又は 3個有する、 C P G担体 （ 6— 1 0) 又は （ 6— 1 1 ) を得る工程である。
(第 3 1工程）
本工程は、 市販品から 5 ' 位の DMT基を除去した化合物 （ 7—
2 ) と、 市販の （ 2—シァノエ トキシ） ― [ 2— [ 2， - O - (4， 4 ' ージメ トキシ ト リ チルォキシェチルスルホニル] エ トキシ） 一
(N, N—ジイ ソプロ ピルァミ ノ） ホスフィ ン （ 7— 1 ) [T h o rn a s P o r n ら、 T e t r a h e d r o n L e t t e r s 2 7， 4 7 0 5 ( 1 9 8 6 ) とを、 第 2 4工程と同様にして、 反応し、 4， 4 ' —ジメ トキシ ト リチルォキシェチルスルホ -ルェ トキシ基を有す る C P G担体 （ 7— 3) を得る工程である。
(第 3 4工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 第 3 1 工程で得られる C P G担体 （ 7—
3 ) の DMT基を除去して得られる化合物と、 化合物 （ 7— 4) とを、 縮合剤の存在下、 反応し、 化合物 （ 7— 5) を得る工程である。
用いられる溶剤は、 反応を阻害しないものであれば、 特に限定はない が、 好適には、 ピリジンのような芳香族ァミ ンが用いられる。 用いられる縮合剤と しては、 ジシク ロへキシルカルポジイ ミ ド （D C C) 、 メ シチレンスルホン酸ク ロ リ ド （M s — C 1 ) 、 ト リイ ソプロ ピルベンゼンスノレホニルク ロ リ ド、 メ シチレンスルホン酸ト リアゾリ ド （M S T) 、 メ シチレンスルホン酸一 3—エ トロ ト リアゾリ ド （M S N T ) 、 ト リ イ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸テ トラゾリ ド （T P S— T e ) 、 ト リイ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸- トロイ ミダゾリ ド （T P S— N I ) 、 ト リイソプロピルベンゼンスルホン酸ピリ ジル テ トラゾリ ド等をあげることができるが、 好適には、 M S N T、 T P S— T e、 T P S— N Iがあげられる。
反応温度は、 一 1 0乃至 1 0 0 DCまで、 特に限定はないが、 通常は、 室温で実施する。 反応時間は、 使用する溶剤、 反応温度によって異な るが、 反応溶剤と してピリジンを使用し、 室温で実施した場合には、 3 0分である。
反応終了後、 目的物は、 濾取され、 メチレンクロ リ ドのよ うな有機 溶剤で洗浄され、 そのまま次の工程に用いられる。
(第 3 7工程）
本工程は、 第 3 6工程で得られる化合物 （ 8 ) と、 化合物 （ 3 ) ， 化合物 （ 4 一 a ) 、 化合物 （ 4 一 b ) ， 化合物 （ 5 ) ， 化合物 （ 6 a ) 、 化合物 （ 6 b ) 、 化合物 （ 6 c ) 、 化合物 （ 6 d ) 、 化合物 ( 7 a ) 又は化合物 （ 7 b ) の 5 ' 位末端の DM T基を除去して得ら れる化合物とを、 酸触媒の存在下、 縮合し、 次いで、 酸化し、 さらに、 C P Gを切断し、 最後に、 保護基を除去して、 精製操作を経て、 本発 明の目的化合物 （ 1 ) を得る工程である。
縮合反応において、 使用される酸触媒としては、 好適には、 テ トラゾ ールである。 酸化反応において、 使用される酸化剤としては、 通常、 酸化反応に使 用されるものであれば特に限定はないが、 好適には、 m—クロ口過安 息香酸のよ うな過酸類 ； t-ブチルヒ ドロパーォキシドのようなパーォ キシド類 ； よう素一ピリジン一水である。
使用される溶剤と しては、 反応を阻害せず、 出発物質をある程度溶解 するものであれば特に限定はないが、 好適には、 複素環ァミ ン類 （特 に、 ピリ ジン） 、 二 ト リル類 （特に、 ァセ トニ ト リル） 、 エーテル類
(特に、 テ トラヒ ドロフラン） 、 ハロゲン化炭化水素類 （特に、 メチ レンクロリ ド） である。
反応温度は、 — 5 0乃至 1 0 0 °Cで行なわれ、 反応時間は、 主に、 反応温度、 原料化合物又は使用される溶剤の種類によつて異なるが、 通常 3 0分乃至 1 5時間である。
尚、 上記酸化反応においては、 トリェチルベンジルアンモニゥムクロ リ ド、 ト リブチルベンジルアンモユウムブロ ミ ドのような層間移動触 媒を加えることによって反応が加速される。
C P Gの切断、 及び、 最終段階における保護基の除去は、 公知の方法 (J. Am. Chem. Soc. , 103, 3185, ( 1981 ) )によって行なうことができる。 このよ うにして得られる、 一般式 （ 1 ) の化合物を含む反応混合物を、 逆相およびイオン交換ク口マトグラフィー （高速液体クロマ トグラフ ィ一を含む。 ） 等の各種クロマ トグラフィーを用いて、 通常のオリゴ ヌクレオチド精製で行なわれる操作で精製することにより、 目的化合 物を得ることができる。
(第 3 8工程）
本工程は、 不活性溶剤中で、 化合物 （ 2 ) に、 リ ン酸化試薬 （例え ば、 V置換ホスホロ ピス ト リアゾリ ド （ Vが 2—ク ロ口 フエニル基の 場合、 2—ク ロ 口フ； rニルホスホロ ビス ト リァゾリ ド） ） を反応させ、 中間体であるモノヌク レオチ ド （ 9 ) を得る工程である。
用いられる溶剤と しては、 反応を阻害しないものであれば、 特に限定 はないが、 通常は、 ピリジンのような芳香族ァミンが用いられる。
反応温度は、 一 2 0乃至 1 0 ◦ °Cまで特に限定はないが、 通常は、 室温で実施する。 反応時間は、 溶剤、 反応温度によって異なるが、 反 応溶剤と して、 ピリジンを用い、 室温で実施した場合は 1時間である。 反応終了後、 目的化合物は、 例えば、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在する場合には濾過によ り除去した後、 水と酢酸ェチルの よ うな混和しない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層 を分離し、 無水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することに よって得られる。
得られた目的化合物は、 必要ならば、 常法、 例えば、 再結晶、 再沈 殿又はク口マ トグラフィ一等によって更に精製できる。
(第 3 9工程）
本工程は、 第 3 8工程で得られる化合物 （9 ) と、 化合物 （ 3 ) 、 ィ匕 合物 （ 4— a ) 、 （ 4 一 b ) 、 （ 5 ) 、 （ 6 a ) 、 （ 6 b ) 、 （ 6 c ) 、 （ 6 d ) 、 ( 7 a ) 及び （ 7 b ) の 5 ' 末端の DMT基のみを 除去したものとを縮合し、 次いで、 C P Gを切断し、 最後に、 保護基 を除去して、 本発明の化合物 （ 1 ) を得る工程である。
用いられる溶媒は、 反応を阻害しないものであれば、 特に限定はない が、 好適には、 ピリジンのような芳香族ァミンが用いられる。
縮合に用いられる縮合剤と しては、 ジシク ロカルポジイ ミ ド （D C C) 、 メ シチレンスルホン酸ク ロ リ ド （M s — C l ) 、 ト リ イ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸ク口 リ ド、 メ シチレンスルホン酸ト リ アゾリ ド （M S T) 、 メ シチレンスルホン酸一 3—二 トロ ト リ アゾリ ド （M S NT) 、 ト リイ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸テ トラゾリ ド （T P S— T e ) 、 ト リイ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸ニ ト ロイ ミ ダゾリ ド （T P S— N I ) 、 及び ト リ イ ソプロ ピルベンゼンスルホン酸ピリ ジルテ トラゾリ ドなどをあげることができるが、 好適には、 MS NT や T P S— T e及び T P S—N I が用いられる。
反応温度は、 — 1 0乃至 1 0 0 °Cまで、 特に限定はないが、 通常、 室温で実施する。 反応時間は使用する溶剤、 反応温度によって異なる が、 反応溶剤と してピリジンを使用し、 室温で実施した場合は、 3 0 分である。
C P Gの切断、 及び、 最終段階における保護基の除去は、 公知の方法 (J.Am. Chem.Soc. , 103, 3185, (1981) )によって行なうことができる。 このよ うにして得られる、 一般式 （ 1 ) の化合物を含む反応混合物を、 逆相およびイオン交換ク口マ トグラフィー （高速液体クロマ トグラフ ィ一を含む。 ） 等の各種ク ロマ トグラフィーを用いて、 通常のオリゴ ヌク レオチド精製で行なわれる操作で精製することにより、 目的化合 物を得ることができる。
(第 4 0工程）
本工程は、 不活性溶剤中、 化合物 （ 2) に、 例えば、 文献 （B.C.
Freohler, P. G. Ng and MD. Matteucci, NucleicAcids Res. , 14 5399 (1986)) に従って三塩化リ ン及び 1， 2， 4— ト リァゾールから調製 したトリ ス一 （ 1， 2， 4一 トリァゾリル） ホスファイ トを反応させ、 ヌクレオシド 3 ' H—ホスホネート （ 1 0) を得る工程である。
用いられる溶剤としては、 反応を阻害しないものであれば、 特に限定 はないが、 好適には、 塩化メチレンのようなハロゲン化炭化水素であ る。
反応温度は— 2 0乃至 1 0 0 °Cまで、 特に限定はないが、 通常は、 室 温で実施する。
反応時間は、 溶剤、 反応時間によって異なるが、 塩化メチレン中で、 室温で反応した場合は、 3 0分である。
反応終了後、 目的化合物は、 例えば、 反応混合物を適宜中和し、 又、 不溶物が存在する場合には濾過により除去した後、 水と酢酸ェチルの ような混和しない有機溶媒を加え、 水洗後、 目的化合物を含む有機層 を分離し、 無水硫酸マグネシウム等で乾燥後、 溶剤を留去することに よって得られる。
得られた目的化合物は必要ならば、 常法、 例えば再結晶、 再沈殿又 はクロマ トグラフィ一等によって更に精製できる。
(第 4 1工程）
本工程は、 第 4 0工程で得られる化合物 （ 1 0 ) と、 化合物 （3) 、 化合物 （ 4 一 a ) 、 化合物 （ 4 一 b ) 、 化合物 （ 5 ) 、 化合物 （ 6 a ) 、 化合物 （ 6 b ) 、 化合物 （ 6 c ) 、 化合物 （ 6 d ) 、 化合物 ( 7 a ) 又は化合物 （ 7 b ) の 5 末端の DMT基を除去した化合物 を、 縮合剤と脱酸剤の存在下、 縮合させ、 次いで、 酸化し、 最後に、 塩基性条件下、 C P Gを切断し、 同時に、 保護基を除去して、 本発明 の化合物 （ 1 ) を得る工程である。
用いられる溶剤と しては、 反応を阻害しないものであれば、 特に限 定はないが、 好適には、 無水のァセ トニ トリルが使用される。
用いられる縮合剤と しては、 カルボン酸やリ ン酸の酸塩化物が用い られるが、 好適には、 ピバロイルクロリ ドが用いられる。
用いられる酸化剤と しては、 通常、 酸化反応に使用されるものであれ ば特に限定はないが、 好適には、 m—クロ口過安息香酸のよ うな過酸 類 ； t -プチルヒ ドロパーォキシドのよ うなパ一ォキシド類 ； よ う素一 ピリジン一水である。
使用される脱酸剤と しては、 ピリ ジン、 ジメチルァミノ ピリジンの ような複素環ァミ ン類、 ト リ メチルァ ミ ン、 ト リェチルァミ ン、 ジィ ソプロ ピルェチルァ ミ ンのような脂肪族ァミ ン類があげられるが好適 には脂肪族ァミ ン類 （特にジイ ソプロ ピルェチルァ ミ ン） である。 反応温度は、 特に限定はないが、 通常— 5 0乃至 5 0 であり、 好適 には、 室温である。
反応時間は、 使用する原料、 試薬、 温度等により異なるが、 通常、 5分から 3 0時間であり、 好適には、 室温で反応した場合、 3 0分で ある。
C P Gの切断、 及び、 最終段階における保護基の除去は、 公知の方法 (J. Am. Chem. Soc. , 103, 3185, ( 1981 ) )によって行なうことができる。 このよ うにして得られる、 一般式 （ 1 ) の化合物を含む反応混合物を、 逆相およびィオン交換ク口マ トグラフィー （高速液体ク口マ トダラフ ィーを含む。 ） 等の各種ク ロマ トグラフィーなど、 通常の核酸の精製 に用いる操作で精製することにより、 前記一般式 （ 1 ) を有する化合 物を得ることができる。 本発明の化合物 （ 1 ) およびその薬理上許容 される塩は、 優 れた抗 H I V— 1 活性を示 し、 化合物 （ 1 ) 及びその薬理上許 容される塩を医薬 （特に、 抗エイ ズ剤） と して使用する場合に は、 それ自体あるいは適宜の薬理学的に許容される、 賦形剤、 希釈剤等 と混合し、 錠剤、 カ プセル剤、 顆粒剤、 散剤若しく は シロ ップ剤等によ る経口的又は注射剤等によ る非経口的に投与 する こ と ができ る。 これらの製剤は、 賦形剤 （例えば、 乳糖、 白糖、 ブ ドウ糖、 マンニ ッ ト、 ソルビッ トの よ う な糖誘導体 ； ト ウモロ コ シデン プン、 馬鈴薯デンプン、 ひ一デンプン、 デキス ト リ ン、 カルボ キシメ チルデンプンのよ う なデンプン誘導体 ； 結晶セルロース、 低置換度ヒ ド ロ キ シプロ ピルセルロ ース 、 ヒ ドロ キ シプロ ピル メ チゾレセノレロ ース、 カノレボキシメ チノレセノレ口一ス、 力ノレボキシ メ チルセルロ ースカルシウム、 内部架橋カルボキシメ チルセル ロ ースナ ト リ ゥ ムの よ う なセルロ ース誘導体 ； ア ラ ビア ゴム ； デキス ト ラ ン ； プルラ ン ； 軽質無水珪酸、 合成珪酸アルミ ユ ウ ム、 メ タ珪酸アルミ ン酸マグネシウムのよ う な珪酸塩類 ； リ ン 酸カルシウムのよ う な リ ン酸塩類 ； 炭酸カルシウムの よ う な炭 酸塩類 ； 硫酸カルシウムのよ う な硫酸塩類等） 、 結合剤 （例え ば、 前記の賦形剤 ； ゼラチン ； ポ リ ビュルピロ リ ドン ； マグ口 ゴール等） 、 崩壊剤 （例えば、 前記の賦形剤 ； ク ロ ス カルメ ロ —スナ ト リ ウム、 カルボキシメ チルス タ一チナ ト リ ウム、 架橋 ポリ ビニルピロ リ ドンのよ う な化学修飾された、 デンプン、 セ ルロ ース誘導体等） 、 滑沢剤 （例えば、 タ ルク ； ス テア リ ン 酸 ； ステア リ ン酸カルシウム、 ステア リ ン酸マグネシウムの よ う なステア リ ン酸金属塩 ； コ ロイ ドシ リ カ ； ビーガム、 ゲイ 口 ゥのよ う なワ ッ ク ス類 ； 硼酸 ； グリ コ コール ； フマル酸 ； アジ ピン酸のよ う なカルボン酸類 ： 安息香酸ナ ト リ ゥムのよ う な力 ルボン酸ナ ト リ ゥム塩 ； 硫酸ナ ト リ ゥムのよ う な硫酸類塩 ； 口 イ シン ； ラ ウ リ ル硫酸ナ ト リ ウム、 ラ ウ リ ル硫酸マグネシウム のよ う なラ ウ リ ル硫酸塩 ； 無水珪酸、 珪酸水和物のよ う な珪酸 類 ； 前記の賦形剤におけるデンプン誘導体等） 、 安定剤 （例え ば、 メ チルパラペン、 プロ ピルパラペンのよ う なノ、。ラオキシ安 息香酸エ ステノレ類 ； ク ロ ロ ブタ ノ ール、 ベンジノレアノレコ ール、 フ エ ニルエチルア ルコ ールの よ う なアル コ ール類 ； 塩化ベンザ ルコ ユ ウム ； フ エ ノ ール ； ク レゾールのよ う なフ エ ノ ール類 ； チメ ロ サール ； 無水酢酸 ； ソ ル ビ ン酸等） 、 矯味矯臭剤 （例え ば、 通常使用 される 、 甘味料、 酸味料、 香料等） 、 懸濁化剤 (例えば、 ポ リ ソルベー ト 8 0 、 力ノレボキシメ チルセル ロ ース ナ ト リ ウム等） 、 希釈剤、 製剤用溶剤 （例えば、 水、 エタ ノ ー ル、 グリ セ リ ン等） 等の添加物を用いて周知の方法で製造され る。
その使用量は症状、 年齢等によ り 異なるが、 成人に対 して、 経口投与の場合には、 1 日 当たり 0 . 1 乃至 2 0 0 0 mg (好適 には、 1 乃至 1 0 0 0 mg ) を、 静脈内投与の場合には、 一 日 当 た り 0 . 1 乃至 2 0 0 0 mg (好適には、 1 乃至 1 0 0 0 mg) を、 1 乃至 6 回症状に応じて投与する こ と が望ま しい。 また、 有効 な治療に必要な化合物 （ 1 ) の濃度を維持するために、 連続的 に投与する こ と もでき る。 発明を実施するための最良の形態 以下に、 実施例、 参考例及び製剤例を挙げて、 本発明を更に詳細に 説明する。
尚、 以下に示す化学式中の塩基配列 （例えば、 TGGGGT) は、 特に断 りがない場合は、 それぞれ 5 ' 末端より対応する塩基配列をもつオリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドの ト リェチルアミン塩を表わし、 5 ' 末 端及び 3 ' 末端の水酸基を含まないものとする。
また、 目的化合物を示すのに、 適宜、 化学名又は構造式を用いる。
(実施例 1 )
Figure imgf000107_0001
パーキンエルマ一社製の 3 9 2 DNA/RNA シンセサイザ一に、 付属す る合成用試薬類を接続し、 プログラムと して ΙΟ /z molDNA 合成を使用し た。 但し、 このとき、 #5 のボトルに、 約 0. 1 M に調製した 5 ' — 0—
[ (3, 4- ジベンジルォキシ） ベンジル] チミ ジン一 3 ' — 0 — [ ( 2 —シァノエチル） （N， N—ジイ ソプロ ピル） ホスホロアミ ダイ ト]
(特開平 7 - 8 7 9 8 2の実施例 7 b に記載） のァセ トニ ト リル溶液 を用い、 固相担体と しては、 修飾されたコン トロールドポアグラス (CPG)
DMT-OCH2CH2OCCH2CH2CNHCH2CH2CH2 -<^^>
0 0
(特開平 7 - 8 7 9 8 2の実施例 1 2 b に記載） を 7. 5 μ mol 分量り と り、 10 // mo l 用エンプティーカラムにつめて使用した。 5GGGGTT と いう塩基配列を入力し、 最後の #5 のボトルの試薬を結合させた後には 酸処理を行わない設定のプログラムを作動させることによって、 CPG 上に保護されたオリ ゴヌク レオチドが構築された誘導体を得た。 これ を減圧下乾燥後、 カラムからと り出し、 約 1 0 mL の 2 9 %アンモニア 水に加えて、 密閉し、 室温で約 2 日間反応した。 CPG をろ過して除去 し、 1 O mし の水で 2回洗浄した。 ろ液と洗浄液を合わせて、 減圧下に 水溶液を約 4 mL に濃縮した。 濃縮液を 90°Cで 5分間加熱し、 氷冷した 後、 逆相シリカゲルカラムクロマ トグラフィー （Cosmos il 75C18- 0PN、 ナカライテスク、 1. 5 X 1 5 c m ； A ： 5 0 mM重炭酸ト リエチルァ ミ ン水溶液 （T E A B) 、 p H 7. 5， B : ァセ トェ トリ ノレ ； 1 0— 5 0 %B/ l i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) に供与した。 約 3 0 %ァセ トニ ト リルで溶出する分画を集め、 減圧下、 溶剤を留去し、 約 1 O mL の水に溶解して、 再度、 溶媒の留去 を繰り返し、 アモルファス状の目的化合物を 1 6 6 OD ( 2 6 0 η m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS- DNA、 4.6 x 1 5 0 m m ; A : 5 %ァセ トニ ト リル、 0. 1 M 酢酸ト リェチルァミン水溶 液（ T E AA) 、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0— 6 0 % B/ 2 0分 ； 1 i n e a r g r a d i e n t ; l m l /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 4. 0 6分に溶出された。
UVmax (H20) :256 nm
(実施例 2 )
Figure imgf000108_0001
5GGGGTT に代えて、 5GGGGTTT という塩基配列を入力する以外は、 実 施例 1 と同様にして合成した。 精製においては、 逆相シリカゲルカラ ムク ロマ トグラフィ ー （ Cosmosil 75C18-0PN 、 ナカライテスク、 1 . 5 X 1 5 c m ； A ： 5 0 mM T E A B、 p H 7. 5， B : ァセ トニ ト リル ； 5— 4 0 % B ; 1 i n e a r g r a d i e n t ； 2 5 4 n m) を用いた。 実施例 1 と同様の後処理を行い、 ァモ ルファス状の目的化合物を 2 3 0 OD ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS- DNA、 4.6 x 1 5 0 m m ; A : 5 %ァセ トニ ト リノレ、 0. 1 MT E AA、 p H 7. 0， B ： ァセ トニ ト リル ； 1 0— 6 0 %BZ2 0分 ； 1 i n e a r g r a d i e n t ； 1 m l /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 3. 8 2分に 溶出された。
UVmax(H20) :258nm
(実施例 3 )
Figure imgf000109_0001
5GGGGTT に代えて 5GGGGGTT という塩基配列を入力する以外は、 実施 例 1 と同様にして合成した。 精製においては、 逆相シリカゲルカラム ク ロマ トグラフィー （ Cosmos il 75C18-0PN 、 ナカライテスク、 1. 5 1 5 c m ； A ： 5 0 mM T EA B、 p H 7. 5 , B : ァ セ トニ ト リル ； 5— 4 0 % B ; 1 i n e a r g r a d i e n t ； 2 5 4 n m) を用いた。 実施例 1 と同様の後処理を行い、 ァモルファ ス状の目的化合物を 1 5 1 O D ( 2 6 0 n m) 得た。 本化合物は、 逆 相 H P L C (Wakosil WS- DNA、 4.6 x 1 5 0 mm ； A ： 5 %ァセ ト 二 ト リ ル、 0. 1 MT E A A、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0— 6 0 %BZ 2 0分 ； 1 i n e a r g r a d i e n t ； 1 m l /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 3. 7 6分に溶出された。
UVmax(H20) :256nm (実施例 4 )
Figure imgf000110_0001
5GGGGTT に代えて 5GGGCGT という塩基配列を入力し、 修飾された CPG 10//mol を用いて、 実施例 1 と同様にして合成した。 精製におい ては、 逆相シリカゲルカラムクロマ トグラフィー （ Cosmosil 75C18- 0PN 、 ナカライテスク、 1 . 5 X 1 5 c m ； A ： 5 0 mM T E A B、 p H 7. 5， 8 : ァセ トニ トリル ； 1 0— 4 0 %8 ; 1 1 n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) を用レヽた。 実施例 1 と 同様の後処理を行い、 アモルファス状の目的化合物を 2 7 0 O D ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS- DNA、 4.6 x 1 5 0 m m ； A : 5 %ァセ トニ ト リル、 0. 1 MT EAA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0— 60 %BZ20分 ； l i n e a r g r a d i e n t ； 1 m l ノ分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 5. 3 9分に溶出 された。
UVmax (H20) :256 nm
(実施例 5 )
Figure imgf000110_0002
5GGGGTT に代えて 5GGGTGT という塩基配列を入力し、 修飾された CPG 10μ mol を用いて、 実施例 1 と同様にして合成した。 精製におい wo 99 1
109 ては、 逆相シリ カゲルカラムク ロマ トグラフィー （ Cosmos il 75C18- 0PN 、 ナカライテスク、 1. 5 1 5 c m ； A ： 5 0 mM T E A B、 p H 7. 5， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0— 4 0 % B ; 1 i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) を用いた。 実施例 1 と同 様の後処理を行い、 アモルファス状の目的化合物を 3 1 0 O D ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS-DNA, 4.6x 1 5 0 mm ; A : 5 %ァセ トニ ト リル、 0. 1 MT E AA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リノレ ； 1 0— 6 0 % BZ 2 0分 ； l i n e a r g r a d i e n t ； 1 m l /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 5. 4 2分に溶出 された。
UVmax(H20) :255nm
(実施例 6 ) 表 1において化合物番号 1 2 2 9の化合物
Figure imgf000111_0001
5GGGGTT に代えて 5GGGGGT という塩基配列を入力し、 修飾された CPG 10 μπιοΐ を用いて、 実施例 1 と同様に合成した。 精製においては、 逆相シリカゲルカラムクロマ トグラフィー （Cosmosil 75C18- 0PN 、 ナ 力ライテスク、 1 . 5 X 1 5 c m ； A ： 5 0 mM重炭酸ト リェチルァ ミン水溶液 （T EA B) 、 p H 7. 5， B ： ァセ トニ ト リル ； 1 0— 5 0 %B 1 i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) に供与し た。 約 3 0 «½ァセ トニ ト リルで溶出する分画を集め、 減圧下留去した 後、 約 1 OmL の水に溶解し、 再度、 溶媒留去を繰り返して、 ァモルフ ァス状の目的化合物を 1 6 7 OD ( 2 6 0 n m) 得た。 本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS-DNA, 4, 6 x 150mm ； A ： 5 %ァセ トニ ト リル、 0. 1 M 酢酸ト リエチルァ ミ ン水溶液（T E A A )、 p II 7. 0 , Β ： ァセ トニ ト リル ； 1 0 — 6 0 % Β Ζ 2 0分 ； 1 i n e a r g r a d i e n t ； 1 m l ,分 ； 2 6 0 n m) で分析す ると 1 3. 8 3分に溶出された。
UVmax (H20)： 254 nm
(実施例 7 ) 表 1において化合物番号 1 2 3 0の化合物
Figure imgf000112_0001
5GGGGGT の代わりに 5GGGGT という塩基配列に変更して入力する以外 は、 実施例 6 と同様にして合成した。 精製においては、 逆相シリカゲ ルカラムク ロマ トグラフィ ー （ Cosmosil 75C18— 0PN、 1 . 5 x 1 5 c m ; A : 5 0 m T E A B、 p H 7. 5， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0 — 4 0 % B ; l i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) を用 いた。 実施例 6 と同様の後処理を行い、 アモルファス状の目的化合物 を 2 2 7 OD ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS-DNA, 4.6 x 1 5 0 m m ； A : 5 %ァセ トニ ト リノレ、 0. 1 M T E AA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リル ； 1 0— 6 0 %BZ 2 0分 ； l i n e a r g r a d i e n t ； 1 m 1 分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 5. 2 8分に溶出され た。
UVmax (H20)： 255nmQ (実施例 8 ) 表 1において化合物番号 1 2 3 1の化合物
Figure imgf000113_0001
( 8 a) 0- (4, 4' -ジメ トキシ ト リチル） エチレングリ コール - 0- ( 2-シ ァノエチル N、 N-ジイ ソプロ ピル） ホスホロア ミダイ ト
0 - （4, 4'-ジメ 卜キシトリチル） エチレングリ コール （特開平 7— 8
7 9 8 2の実施例 1 2a 記載） 317mg (0.84m m o 1 ) をピリジンに溶 解し、 留去して、 乾燥した。 そこへ塩化メチレン （3m l ) を加え、 溶 解し、 さ らに、 ジイ ソプロ ピルェチルァ ミ ン 0.61m l (3.48mm o
1 ) を加え、 窒素置換を行った。 そこへ、 2—シァノエチル N， N ージイ ソプロ ピルク ロ 口ホスホロア ミ ダイ ト 0.23 m l ( 1.04 m m o
1 ) を 2分かけて滴下した。 室温で 6 0分攪拌し、 原料が消失したこ とを T L Cで確認後、 酢酸ェチル （ 3 0 m l ) を加え、 有機層を飽和 重曹水、 飽和食塩水で洗浄した。 有機層を I P S濾紙 （商標ワッ トマ ン社製） を用いて濾過後、 溶媒を留去し、 残渣をシリカゲルカラムク 口マ トグラフィ一 （ 7 0— 2 3 0 m e s h、 1 6 g、 溶出液 ： へキサ ン ： 酢酸ヱチル = 3 ： 1 ) を行い、 精製し、 油状物質と して 270mg (55%) の目的化合物を得た。
1 H-NMR (270MHz、 CDC13、 TMS) δ ppm: 7.48-7.19 (9Η, m, Ph) 、 6.84- 6.80(4H, m, Ph) 、 3· 87— 3.58(12H、 m, — 0CH3, P0CH2 and PNCH) 、 3.26- 3.21 (2H, m, DMTr- 0— CH2)、 2.62-2.58 (2H, m, CH2CN) , 1.26-1.17 (12H, m, CH3)。
( 8 b)
#6のボトルに、 およそ 0.1 Mに調製した （ 8 a) のァセ トニ トリル溶 液を用い、 5GGGGGT に代えて 5GGGG6T という塩基配列に変更して入力 し、 修飾された CPG 10 μ mol を用いて、 実施例 1 と同様にして合成 した。 精製においては、 逆相シリカゲルカラムクロマ トグラフィ ー ( Cosmosil 75C18-OPN, 1 . 5 x l 5 c m ; A : 5 0 mM T E A B、 p II 7. 5 , B ： ァセ トニ ト リノレ ； 1 0 — 4 0 % B ; 1 i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) を用いた。 実施例 6 と同様の後処理を 行い、 アモルファス状の目的化合物を 8 9 OD ( 2 6 0 n m) 得た。 本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS-DNA, 4.6 x 150mm ； A ： 5 %ァセ トニ ト リノレ、 0. 1 M T E AA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リ ノレ ； 1 0 — 6 0 % B / 2 0分 ； l i n e a r g r a d i e n t ； 1 m 1 /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 5. 1 9分に溶出された。
UVmax (H20)： 255 nm。
(実施例 9 ) 表 1 において化合物番号 1 2 3 2の化合物
Figure imgf000114_0001
#6 のボ トルに、 およそ 0.1 Mに調製した （8 a) のァセ トェ トリル溶 液を用い、 5GGGGGT に代えて 5GGGG66T という塩基配列に変更して入力 し、 修飾された CPG 10 μ ιηοΐ を用いて、 実施例 1 と同様にして合成 した。 但し、 精製においては、 逆相シリカゲルカラムクロマ トグラフ ィ― ( Cosmosil 75C18- 0PN、 1 . 5 x 1 5 c m ； A ： 5 0 mM T E A B、 p H 7 . 5 , B : ァセ トニ ト リル ； 1 0 — 4 0 % B ; l i n e a r g r a d i e n t ; 2 5 4 n m) を用いた。 実施例 6 と同様 の後処理を行い、 アモルファス状の目的化合物を 1 9 6 O D ( 2 6 0 n m) 得た。 本化合物は、 逆相 H P L C (Wakosil WS- DNA、 4.6 x 150mm ； A ： 5 %ァセ トニ ト リノレ、 0. 1 M T E AA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ ト リ ノレ ； 1 0 — 6 0 % B / 2 0分 ； l i n e a r g r a d i e n t ； 1 m 1 /分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 1 5. 0 4分に溶出された。
UVmax (1120)： 25½m。
(実施例 1 0 ) 表 1において化合物番号 1 2 3 3の化合物
Figure imgf000115_0001
5GGGGGT に代えて 5GGGAG6T という塩基配列に変更して入力し、 実施 例 6 と同様にして合成した。 実施例 1 と同様の後処理を行い、 ァモル ファス状の目的化合物を 1 5 0 OD ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Symmetry, 3.9 x 150 mm ； A ： 5 % ァセ トニ ト リル、 0.05 M T E AA、 p H 7. 0 , B : ァセ トニ ト リ ル ； 1 0— 4 0 % B/4 5分 ； l i n e a r g r a d i e n t ; 1 m 1 Z分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 3 1. 64分に溶出された。
に溶出された。
UVmax (H20)： 254nmG
(宾施例 1 1 ) 表 1において化合物番号 1 2 3 4の化合物
ο ο ο
CH20" -CH2-"0-TGGGAG-0-P.OCH2CH20-P-OCH,CH,0-P-OCH,CH2OH
OH OH OH
5GGGGGT に代えて 5GGGAG66T という塩基配列に変更して入力し、 実 O 99/19474
114 施例 6 と同様にして合成した。 実施例 1 と同様の後処理を行レ、、 ァモ ルフ ァ ス状の目的化合物を 1 6 5 OD ( 2 6 0 n m) 得た。
本化合物は、 逆相 H P L C (Symmetry, 3.9 x 150 m m ； A ： 5 % ァセ トニ ト リノレ、 0.05 M T E AA、 p H 7. 0， B : ァセ トニ 卜 y ノレ ； 1 0— 4 0 % B/4 5分 ； l i n e a r g r a d i e n t m 1 Z分 ； 2 6 0 n m) で分析すると 3 1. 2 0分に溶出された。
に溶出された。
UV max (11,0)： 254nm。
(参考例 1 )
0
CH2-0-TGGGAG-0-P-OCH2CH2OH
OH 特開平 7— 8 7 9 8 2の実施例 9 4に記載された方法に従って、 合成 した。
(製剤例 1 ) 注射剤
1.5 重量％ の実施例 1の化合物を、 10 容量％ のプロ ピレングリ コール 中で搅抨し、 次いで、 注射用水で一定容量にした後、 滅菌して製造す る。
(製剤例 2) 錠剤 1
1 ) 実施例 1の化合物 200
2) ピロ燐酸ナ ト リ ウム 5
3 ) ァエロジル 2 0 0 5 4 ) ステアリン酸マグネシウム 5
Figure imgf000117_0001
9 9 7 m g
上記のうち 5 ) 〜 8 ) を混合し造粒した予製顆粒に、 1 ) 〜 4 ) を 混合し粉砕したものを添加し、 次いで打錠機により打錠して 1錠 1 0 0 m gの錠剤とする。
(製剤例 3 ) カプセル剤
1 ) 実施例 1の化合物 20 0
2 ) リ ン酸水素カルシウム 20 0
3 ) ケィ酸アルミニゥム 3 4 5
4 ) 結晶セルロース 2 5 0
5 ) ステアリン酸マグネシゥム 2
計 9 9 7 m g
上記の 1 ) 〜 5 ) を混合粉砕し， さ らにふるいを通し、 よく混合した のち， 常法に従いカプセル 20 0 m gのカプセル剤とする。
(製剤例 4 ) ハー ドカプセル剤
標準二分式ハー ドゼラチンカプセルの各々に、 100 mg の粉末状の実 施例 1 の化合物、 150 mg のラク トース、 50 mg のセル口ース及び 6 mg のステアリ ン酸マグネシウムを充填することにより、 単位カプセルを 製造し、 洗浄後、 乾燥する。 (製剤例 5 ) ソフ トカプセル剤
消化性油状物、 例えば、 大豆油、 綿実油又はオリ—ブ油中に入れた、 実施例 1 の化合物の混合物を調製し、 正置換ポンプでゼラチン中に注 人して、 100 mg の活性成分を含有するソフ トカプセルを得、 洗浄後、 乾燥する。
(製剤例 6 ) 錠剤 2
常法に従って、 100 mg の実施例 1の化合物、 0.2 mg のコロイ ド性ニ 酸化珪素、 5 mg のステアリン酸マグネシウム、 275 mg の微結晶性セル ロース、 11 mg のデンプン及び 98.8 mg のラク トースを用いて製造す る。 以下に、 試験例をあげて、 本発明による効果を具体的に説明する。 (試験例 1 ) 修飾ォリ ゴデォキシリボヌク レオチドの抗 HIV- 1 活性の 測定
抗 HIV- 1 活性はパゥエルらの方法によって測定した （R. Pauel et al. , J. Virological Methods 20, 309-321 (1988)) 。 すなわち， 対数 増殖期にある MT— 4細胞を 150 X gで 5 分間遠心し， 得られた細胞 沈澱を培地にて懸濁したのち HIV- 1 (IIIB 型） を 10 CCID5。 の濃度で 37°Cで 1 時間感染させた。 その後， 牛胎児血清 10% を含む RPMI- 1640 培地（ 以下 「血清培地」 と称する） で遠心し、 洗浄することによ り HIV-1 感染 MT— 4細胞を得た。
HIV-1 感染 MT-4細胞および HIV- 1 非感染 MT- 4細胞をそれぞれ 4 X 105細胞/ ml になるように血清培地に懸濁した。 96 穴プラスチックマ イクロタイタ一プレー ト中にあらかじめ段階希釈した検体化合物溶液 ( 血清培地に溶解したもの） を各穴に 100 μ 1 づっ入れ， 次いでこの 各穴に上記細胞懸濁液を各々 100 μ 1 づっ添加し， 5%の炭酸ガス存在 下で 6 日間静置培養した。
同様に， 検体化合物添加の HIV- 1 感染 ΜΤ-4 細胞および検体化合物 無添加の HIV- 1 非感染 ΜΤ-4細胞を培養した。
培養終了後、 ΜΤΤ(3- (4, 5-dimethylthiazole-2-yl)-2, 5-dipheny ltet razolium bromide)法に基づき， 生細胞数を測定し（し M. Green et al. , J. Immunol.
Methods, 70, 257-268(1984)), HIV- 1 による細胞障害活性を求めた。 検体化合物無添加の HIV- 1 感染 MT-4 細胞の細胞障害活性を 100%と し、 検体化合物無添加の HIV- 1 (IIIB 型） 非感染 MT— 4細胞の細胞 障害活性を 0 %と して、 HIV - 1 感染 MT— 4細胞の細胞障害活性を 5 0 %抑制しうる検体の濃度 （ I C50) を求めた。 また、 検体化合物の 細胞毒性活性と して、 HIV - 1 非感染 MT— 4細胞の増殖を 5 0 %抑制 する濃度 （C C50) を求めた。 これらの測定結果を表 2に示す。
なお、 本試験では、 I C5。及び C C5。値が細胞の状態により試験ご とに変動することがあるので、 参考例 1の化合物を比較化合物とした。 参考例 1の化合物 I C5。 値を 1. 0と して、 各実施例の化合物の I C 50 値を参考例 1の化合物の I C5。 値で除した値を I C5。 相対値とし た。
参考例 1 の化合物は、 特開平 7— 8 7 9 8 2号において実施例 9 4 に開示された化合物である。 (表 2) 化合物 I c 5 O I Cso相対値 C C5。
( μ g/ml) ( μ g/ml) 実施例 1 0. 2 0. 4 〉 5 0
2 0. 2 0. 4 〉 5 0
3 0. 6 0. 3 2 〉 5 0
6 0. 2 0. 4 〉 50
8 0. 2 0. 4 〉 5 0
9 0. 8 0. 3 6 〉 50
1 0 1. 2 0. 7 5 〉 50
参考例 1 0. 5 1. 0 〉 5 0 その結果、 表 2にあげた修飾オリ ゴデォキシリボヌク レオチドはい ずれも、 優れた抗 HIV - 1 活性を有することが明らかとなった。
ここで、 実施例 1 、 2及び 3の化合物は参考例 1の化合物 [特開平 7 - 8 7 9 8 2号において実施例 9 4に開示された化合物] と比較し て 2. 5倍以上の優れた抗 HIV-1 活性を示した。 産業上の利用可能性 本発明の化合物は、 エイズウイルス （H I V— 1 ) に対して、 特異 的な障害活性を有し、 感染細胞における本ウィルスの増殖を特異的に 抑制しうる。 したがって、 本発明の化合物はエイズ疾患の治療および 予防薬と して有用である。

Claims

請求の範囲
1 . 一般式 （ 1 )
Figure imgf000121_0001
[ Qは R RsRsZ基 （式中、 R i、 R2及び R3 はそれぞれ独立に同 一又は異なって水素原子、 炭素数 1 乃至 4個のアルキル基、 置換基を 有していてもよいァリール基又は置換基を有していてもよいアン トラ キノ二ル基を示し、 Zは C又は S i を示すか、 あるいは、 R2、 R3及 び Zが一緒になつてフルォレニル基又はキサンテュル基を示す。 ） を 示し、 R4は水素原子、 置換基を有していてもよい炭素数 1乃至 4個の アルキル基、 置換基を有していてもよいァリール基又は置換基を有し ていてもよいァラルキル基を示し、 Ύ 1 、 Y3及び Y4は同一又は異な つて 0， S又は ΝΗを示し、 Υ2 は 0， S， ΝΗ, 炭素数 1乃至 4個の アルキレン基又はフ -レン基を示し、 Xは水酸基で置換されていて もよい直鎖又は分枝鎖の炭素数 1乃至 1 0個のアルキレン基を示し、 m及び ηは同一又は異なって 0乃至 1 0の整数を示し、 Βは、 配列 Τ G G G G T、 T G G G G T T、 T G G G G G T、 T G G G C G、 T G G G T G、 T G G G G、 T G G G G Gまたは T G G G A Gから選択さ れるオリゴデォキシリボヌクレオチド （以下、 ODNという） を示す。 但し、 Bにおいて、 各オリ ゴデォキシリボヌク レオチドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。 なお、 各配列の左末端が 5 ' 末端であり， 右末端が 3 ' 末端である。 さらに、 Bが、 T G G G G又は T G G G G Gの場合には、 尺 丄 が 3， 4— (ジベンジルォキシ） フエ ル基であ り、 R2、 R3 及び R4 がそれぞれ水素原子であり、 Xがエチレン基で あり、 Yい Υ2、 Υ3及び Υ4がそれぞれ酸素原子であり、 Ζが炭素原 子であり、 mが 1 乃至 3であり、 nが 1である。 また、 Bが T G G G AGの場合には、 が 3， 4一 （ジベンジルォキシ） フエニル基であ り、 R2、 R3 及び R4 がそれぞれ水素原子であり、 Xがエチレン基で あり、 Υ1λ Υ2、 Υ3及び Υ4がそれぞれ酸素原子であり、 Ζが炭素原 子であり、 mが 2乃至 3であり、 nが 1である。 ] で表される化合物 又はその薬理上許容しうる塩。
2. 請求項 1 において、 Bが配列 TGGGGT、 TGGGGTT、 T GGG GGT、 TGGGG、 TGG GGGまたは TGG GAGから選 択されるオリ ゴデォキシリボヌクレオチドである化合物。
3. 請求項 1 において、 尺 丄 、 R2 、 R3 、 丫ェ 及び Zの組み合わせ により得られる 5 ' 末端の基 （R i Rs Rg Z—丫ェ ） 力 ト リフエ二 ルメチルォキシ、 3， 4 - (ジベンジルォキシ） ベンジノレオキシ、 3，
5— （ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ、 3， 5—ビス [ 3， 5— (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ] ベンジルォキシ、 t 一ブチル ジフエニノレシリ ノレ才キシ、 フエニノレフノレォレニノレ才キシ、 フエニノレキ サンテニルォキシ基であり、 R4 、 χ、 γ2 、 γ3 、 γ4 、 m及び ηの 組み合わせにより得られる 3， 末端の基 （ 〔P (0) (Y2 R4 ) - Υ 3 - (X— Υ4 ) η ] m Η) 力 、 水素、 メチルホスホリル、 2—クロ口 フエエノレホスホリノレ、 （ο—メチノレ） チ才ホスホリノレ、 メチノレホスホ ニル、 メチルチオホスホニル、 フエニルホスホニル、 2—ヒ ドロキシ ェチルホスホリル、 [Ο— ( 2—ヒ ドロキシェチル） ] チォホスホリ ノレ、 フ エ 二ノレホスホ リ ノレ、 4一ク ロ 口 フエ二ノレホスホ リ ノレ、. 2—エ ト 口 フ エ 二ノレホス ホ リ ノレ、 4一二 ト ロ フエ ニノレホスホ リ ノレ、 ェチノレホス ホ リル、 （O—ェチノレ） チォホスホ リノレ、 2— （ 2—ヒ ドロキシェチ ルホスホ リルォキシ） ェチノレホスホ リル、 2 - [ 2— ( 2—ヒ ドロキ シェチノレホスホ リ ノレオキシ） ェチノレホスホ リ ノレ才キシ] ェチノレホスホ リ ル基であり、 Bが配列 T GG G G T、 TG G GG T T、 T G G G G GT、 TG G G C Gまたは TG GG TGから選択されるオリ ゴデォキ シリボヌク レオチドである化合物。
4. 請求項 1 において、 R i 、 R2 、 R3 、 及び Zの組み合わせ により得られる 5 ' 末端の基 （Ri Rs Rg Z—Yi ) 力 ト リフエ二 ルメチルォキシ、 3， 4 - (ジベンジルォキシ） ペンジノレオキシ、 3， 5 - (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ基であり、 R4 、 X、 Y2 、 Υ3 、 Υ4 、 m及び ηの組み合わせにより得られる 3 ' 末端の基 （ [ Ρ (O) (Y2 R4 ) - Y3 - (X - Υ4 ) η ] m Η) が水素、 メチルホ スホ リ ノレ、 2—ク ロ 口 フエ二ノレホスホ リノレ、 （Ο—メチノレ） チォホス ホ リノレ、 メチノレホスホニノレ、 メチノレチ才ホスホニノレ、 フエニノレホスホ エグレ、 2—ヒ ドロキシェチノレホスホ リノレ、 [Ο— ( 2—ヒ ドロキシェ チル） ] チォホスホリル、 2— ( 2—ヒ ドロキシェチルホスホリルォ キシ） ェチルホスホリル、 2— [ 2— ( 2— ヒ ドロキシェチルホスホ リルォキシ） ェチルホスホ リルォキシ] ェチルホスホリル基であり 、 Βが配列 T GG GGT、 TGG GGTTまたは TG GG GG Tから選 択されるオリゴデォキシリボヌクレオチドである化合物。
5. 請求項 1 において、 R 1 R2 、 R3 、 及び Zの組み合わせ により得られる 5 ' 末端の基 （R i Rs R Z— 力 S、 3， 4— (ジベンジルォキシ） ベンジルォキシ基であり、 R4 、 X、 Y2 、 Υ3 、 Υ4 、 m及び ηの組み合わせにより得られる 3 ' 末端の基 （ [Ρ (Ο)
(Y2 R4 ) - Y3 - ( X - Υ 4 ) η ] ιη Η) カ 、 2—ヒ ドロキシェチ ノレホスホ リル、 2— ( 2— ヒ ドロキシェチルホスホ リルォキシ） ェチ ルホスホ リ ル、 2— [ 2 - ( 2 —ヒ ドロ キシェチルホスホ リ ルォキ シ） ェチルホスホリルォキシ] ェチルホスホリル基であり、 Βが配列 TG G G G T、 TG G G G TTまたは TGG G GG Tから選択される ォリ ゴデォキシリボヌク レオチドである化合物。
6 -般式
Figure imgf000124_0001
[ 式中、 Bは配列 TGGGGまたは TGGGGGで表わされるオリ ゴ デォキシリボヌク レオチ ドを示し、 mは 1、 2または 3を示す。 但し、 Bにおいて、 Gはグァニンデォキシリボヌク レオチ ド、 Tはチミンデ ォキシリボヌク レオチドを示す。 また各オリ ゴデォキシリボヌク レオ チドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。 なお、 各配列の左末端 が 5 ' 末端であり、 右末端が 3 ' 末端である。 ] で表わされる化合物。
7. 一般式
Figure imgf000124_0002
O 99/19474
123
[ 式中、 Bは配列 TGGG AGで表わされるオリ ゴデォキシリボヌク レオチ ドを示し、 mは 2または 3を示す。 但し、 Bにおいて、 Aはァ デエンデォキシリボヌク レオチ ド、 Gはグァニンデォキシリボヌク レ ォチ ド、 Tはチミンデォキシリボヌク レオチ ドを示す。 また該オリ ゴ デォキシリボヌク レオチ ドの 5 ' 末端と 3 ' 末端の水酸基は含まない。 なお、 配列の左末端が 5 ' 末端であり、 右末端が 3 ' 末端である。 ] で 表わされる化合物。
8. 記化合物群から選択される化合物又はその薬理上許容しう る 塩；
Figure imgf000125_0001
Figure imgf000125_0002
H02H02HO
Figure imgf000126_0001
Figure imgf000126_0002
Figure imgf000126_0003
Figure imgf000126_0004
Figure imgf000126_0005
Figure imgf000126_0006
9画 6dfAL3<I
9 . 請求項 1 に記載の化合物又はその薬理上許容される塩を有効成分 とする医薬。
1 0 . 請求項 1 に記載の化合物又はその薬理上許容される塩を有効成 分とする抗エイズ剤。
1 1 . 医薬を製造するための、 請求項 1 に記載の化合物又はその薬理 上許容される塩の使用。
1 2 . 抗エイズ剤を製造するための、 請求項 1 に記載の化合物又はそ の薬理上許容される塩の使用。
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