WO1993024477A1

WO1993024477A1 - Derive de chromone et inhibiteur de l'aldose reductase contenant ledit derive comme ingredient actif

Info

Publication number: WO1993024477A1
Application number: PCT/JP1993/000699
Authority: WO
Inventors: Yasushi Igarashi; Takuji Yamaguchi; Kunio Hosaka
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1992-05-27
Filing date: 1993-05-26
Publication date: 1993-12-09
Anticipated expiration: 1994-11-27
Also published as: JPH05331161A; EP0605728A4; EP0605728A1; US5521216A

Description

明細書

クロモン誘導体及び該化合物を有効成分とするアルドースリダクターゼ阻害剤

技術分野

本発明は、糖尿病合併症の治療に有効なアルドースリダクターゼ阻害作用を有するクロモン誘導体、その合成中間体及び該誘導体の用途に関するものである。背景技術

近年、白内障、網膜症、角膜症、腎症、末梢神経障害等の糖尿病における各種合併症の成因として、グルコースの代謝経路の一^ 5であるポリオール経路を介した細胞内ソルビトールの蓄積が注目されている。ポリオール経路は、グルコース、ガラクトース等のアルド一スがソルビトール、ガラクチトール等のポリオールを介してフルク卜ース等のケトースに変換される代謝経路であり、免疫組織化学的手法により全身諸臓器に広く存在することが明らかになつてきた。

この経路の第一段階であるアルドースーポリオール間の変換を触媒する酵素をアルドースリダクターゼといい、この酵素がポリオール経路の律速酵素と考えられている。このアルドースリダクターゼを阻害し、ソルビトールの生産や蓄積を低下させることが、糖尿病患者における各種合併症の予防及び治療に有効であるという報告がなされている（フアルマシア， ϋ， 459 ( 1988) ) 。

そこで、アルドースリダクターゼ阻害作用を有する薬剤の開発が望まれていた。

アルドースリダクターゼ阻害作用を有する薬剤としては、生薬インチンコゥから単離された次式：

で示されるクロモン誘導体であるキヤビラリシン（R=H) 及び 7—メチルキヤビラリシン（R=CH₃) が知られている（特開平 1-228914号公報）。

キヤビラリシンに類似する公知化合物として、次式（A ) ：

において、 R R₂、 R₃、 RH 及び R_S が表 1 に示すものであるクロモン誘導体があるが（例えば特開平 2-169586号公報、特開昭 54- 114768号公報、特開昭 63-322066 号、薬学雑誌、， 841 (1976)、薬学雑誌、 ^， 855 (1976) ) 、これらのクロモン誘導体がアルドースリダクターゼ阻害作用を有するか否かは明らかにされていない。

表 1

発明の開示

本発明は、天然由来のキヤビラリシンを原料とすることなく容易に全合成が可能で、かつキヤビラリシンに比し優れたアルド一スリダクタ一ゼ阻害作用を有するクロモン誘導体を提供することを目的とする。

本発明の第 1は、次式（ 1 ) ：

R , ( 1 )

R,0 0

(式中、及び R₂ は、同一又は異なって、水素原子又は低級アルキル基を表す。）で示されるクロモン誘導体である。

前記式（ 1 ) において、又は R₂ で表される低級アルキル基とは、炭素数 1〜6のアルキル基をいい、例えばメチル基、ェチル基、プ口ピル基、イソプロビル基、ブチル基、イソブチル基、 sec-ブチル基、 tert-ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、 1一ェチルブロビル基、へキシル基が挙げられる。

本発明のクロモン誘導体（ 1 ) としては、前記式（ 1 ) における及び R₂ の少なくとも一方が、次式（ 3 ) ：

R₇.

CH- (3 )

R₈

(式中、 R⁷ 及び R⁸ は、同一又は異なって、メチル基又はェチル基を表す。）で示される分枝状アルキル基、例えばイソプロビル基であるものが好ましい。

本発明のクロモン誘導体（ 1 ) の具体例としては、次の化合物が挙げられる。

5 , 7—ジヒドロキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2— （4 -ヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—メトキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5, 7—ジメトキシクロモン、 5， 7—ジエトキシー 2— （4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—イソプロポキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ） - 7—イソブロポキシー 5—メ卜キシクロモン、 5—エトキシ一 2— (4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—イソブロボキシクロモン、 2— ( 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジイソプロボキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5, 7—ジブ口ポキシクロモン、 5 , 7—ジブトキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5 , 7—ジー s—ブトキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 7— s—ブトキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）一 5—イソプロポキシクロモン、 7— s—ブトキシー 5—エトキシ一 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 7— s—ブトキシー 2 — （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5—メトキシクロモン、 7— ( 1一ェチルプロボキシ）一 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 ーメトキシクロモン。

本発明の化合物（ 1 ) は、例えば、以下のようにして製造することができる。

即ち、市販のフロロァセトフエノンの 2 '位、 4 '位又は 6 '位の水酸基のうち少なくとも一つをハロゲン化アルキルでアルキル化し、これに t一ブトキシカリゥム及び二硫化炭素を反応させて得られるチオン体をメチル化することによってスルフィドを得、これを過酸、ォキソン、過ヨウ素酸ナトリゥム等の酸化剤で酸化することにより得られるスルホキシド (以下、「中間体①」という。）を塩基の存在下、 4ーヒドロキシベンゼンチオールで置換させることにより、本発明の化合物を得ることができる。

ハロゲン化アルキルの具体例としては、ヨウ化メチル、ヨウ化工チル、ヨウ化ブロビル、ヨウ化イソブロビル、ヨウ化ブチル、ヨウ化イソブチル、ヨウ化 s—ブチル等のヨウ化アルキル、臭化メチル、臭化工チル等の臭化ルキル等が挙げられる。

アルキルを行う時は、炭酸カリウム等の塩基を用いることが好ましく、反応温度は室温でよいが、反応効率等を考慮に入れて 50〜6(TC程度に加温してもよく、また必要であれば還流等の操作を行ってもよい。また、 2 '—ヒドロキシー 4 ' , 6 '—ビス（メトキシメトキシ）ァセトフエノンを、 T H F、トルエン、ベンゼン、 1 , 2 —ジメトキシェタン、 N , N—ジメチルホルムアミド（ D M F ) 、ジメチルスルホキシド、ジグリム、へキサメチルホスホルアミド等の溶媒中、 t一ブトキシカリウム、リチウムジイソプロビルアミド、水素化カリウム等の塩基の存在下、二硫化炭素と反応させた後、メチル化させることにより、次式 ( 2 ) ：

で示される 5 , 7—ビス（メトキシメトキシ）一 2—メチルチオクロモンを得、これを塩酸、リン酸、硫酸等の酸で処理することにより脱保護して 5 , 7—ジヒドロキシー 2—メチルチオクロモンを得た後、必要に応じてクロモン骨格の 7位、又は 5位及び 7位の水酸基をアルキル化し、次いで前述と同様に、酸化及び 4ーヒドロキシベンゼンチオールによる置換を行うことによっても本発明の化合物を得ることができる。なお、前記式（ 2 ) で示される合成中間体は新規化合物であり、本発明は、該新規合成中間体を提供することをも目的とする。

また、生成物を精製するには、通常用いられる手法、例えばシリカゲル等を担体として用いたカラムクロマトグラフィーやメタノール、エタノール、クロ口ホルム、ジメチルスルホキシド、水等を用いた再結晶法によればよい。カラムクロマトグラフィーの溶出溶媒としては、クロ口ホルム、アセトン、へキサン、ジクロロメタン、酢酸ェチル等が挙げられる。

本発明のクロモン誘導体（ 1 ) は、優れたアルドースリダクタ一ゼ阻害作用を有し、白内障、網膜症、角膜症、腎症、末梢神経障害等の糖尿病における各種合併症の治療剤として有用である。

即ち、本発明は、前記式（ 1 ) で示されるクロモン誘導体を有効成分とするアルドースリダクターゼ阻害剤を提供することをも目的とする。以下、本発明の化合物がアルドースリダクターゼ阻害作用を有することを実験例を挙げて説明する。

実験例 1

くアルドースリダクターゼ活性の測定（in vitro) >

6週齢のウィスター（Wistar) 系雄性ラットをエーテル麻酔下に致死させ、直ちに水晶体を摘出し、一 20°Cにて保存した。

水晶体は 0·5ιηΜ フエ二ルメチルスルホニルフルオリドを含む 135mM ナトリウム -カリウム一リン酸緩衝液（pH7.0 ) にてホモジナイズし、 30, 000rpm で 30分間遠心した。その上清をアルドースリダクターゼ酵素液とした。また、以上の操作はすべて 4 で行い、酵素液は - 20 で保存した。

アルドースリダクターゼ活性の測定はデュフラン（Dufrane) らの方法 [Biochemical Medicine, 32, 99〜105 (1984) ] により行った。

即ち、 lOOmM 硫酸リチウム、 0.03mM NAD P H (還元型ニコチンァミドアデニンジヌクレオチドリン酸）、及び基質として 20mMグルコースを含むように調製した 135raMナトリウム一カリウムーリン酸緩衝液 (_ΡΗ7.0)800 α 1 に、上記の酵素液 100 1 、後記実施例で得た化合物をそれぞれジメチルスルホキシド（DMS O) に 1.0X 10_^S〜 4.0X 10-⁷ M の終濃度となるように溶解させた検体 lOOt l をそれぞれ加え、 30°C にて 30分間反応させた。次に、 0.5N塩酸 0.3ml を加えて反応を停止させ、 10mMィミダゾールを含む 6 N 水酸化ナトリウム 1 mlを添加することにより、前記の反応によって生じた NAD P (酸化型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸）を蛍光物質に変換して、 30分後にその蛍光強度を測定した。蛍光強度は、室温で蛍光光度計 F - 4000 (日立製作所製）を用いて励起波長 360nm 、蛍光波長 460nm の条件で測定した。また、本発明の化合物を溶解させた検体を加える代わりに DMS Oを加える以外は上記と同様にして反応させて測定した蛍光強度をコントロール値とした。

アルドースリダクターゼは N A D P Hを補酵素として、 D L—グリセルアルデヒドあるいはグルコースをボリオールに変換する酵素であり、この反応に伴って N A D P Hは NA D Pに変化する。従って N A D P力少なければ、アルドースリダクターゼが阻害されていることになる。実験例 2

くアルドースリダクターゼ活性の測定（in vivo) >

6週齢のウィスター（Wistar) 系雄性ラッ卜に 10mMクェン酸緩衝液 (pH4.5) に溶解させたストレブトゾトシン（ S T Z) を 65mg/kg 尾静脈より投与した。 48時間後、頸動脈より採血し、血糖値が 200nig/dl 以上のラッ卜を糖尿病ラットとし、持続性高血糖を示したものを実験に使用した。血糖値は、グルコースォキシダーゼ法により求めた。

S T Z投与 2週間後に、後記実施例で得た化合物をそれぞれ精製水あるいは 0.5%カルボキシナトリウムセルロース溶液に懸濁し、 30mg/kg 2週間経口投与した。

2週間投与後、エーテル麻酔下、坐骨神経を取り出し、坐骨神経の重量を測定した後一 20 で保存した。

坐骨神経内ソルビトール含量の測定は以下に示す方法で行った。

即ち、坐骨神経をァラビ二トール 10" g/mlを含む精製水 1 mlで 100 °C、 20分抽出し、 0.2 M 水酸化バリウム、 0.19M 硫酸亜鉛をそれぞれ 0.2ml 加え、遠心分離（3000rpm、 30分）し、上清を蒸発乾固した後、トリメチルシリル化しガスクロマトグラフィーにより求めた。ソルビトールは、アルド一スリダクターゼがグルコースよりフルク卜ースを生成する際に生じる中間体で、特に高血糖であると水晶体や末梢神経にフルクトースとともに蓄積してくる。従ってソルビトールが少なければ、アルドースリダクターゼを抑制したことになる。

本発明の化合物の lOtill での阻害率（％ ) 、 50%阻害濃度 [IC₅₀ ( ) ], 又は 30mg/kgでの抑制率（％) を表 2に示した。

表 2

次に、本発明の化合物の経口投与での急性毒性試験を I C R系マウスを用いて行ったところ、実施例で得た化合物は 1 g/kgの経口投与で死亡例はなかった。

このように、本発明の化合物は極めて毒性が低く、安全性の髙いものである。更に、本発明の化合物の投与量及び製剤化について説明する。

本発明の化合物はそのまま、あるいは'頃用の製剤担体と共に動物及び人に投与することができる。投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発明の化合物の重量として 30mg 〜2 gを、 1 曰数回に分けての服用が適当である。

経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニ、ソト、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体例は以下に示すごとくである。

[結合剤]

デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、ヒドロキシブ口ビルスターチ、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナ卜リウム、ヒドロキシブ口ビルセルロース、結晶セルロース、ェチルセルロース、ボリビニルビ口リドン、マクロゴール。

[崩壊剤]

デンプン、ヒドロキシブ口ビルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシブ口ビルセルロース。

[界面活性剤]

ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリソルベート 80。 [滑沢剤]

タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミユウム、ポリエチレングリコール。

[流動性促進剤]

軽質無水ケィ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケィ酸アルミ二ゥム、ケィ酸マグネシウム。

また、本発明の化合物は、懸濁液、ェマルジヨン剤、シロップ剤、ェリキシル剤としても投与することができ、これらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発明の化合物の重量として 1 日 0. 1〜& OOmg までの静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当である。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、ラッカセィ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等を用いることができる。更に必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもできる。更に、必要に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を加えてもよい。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟詈等の塗布剤、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って製造される。

発明を実施するための最良の形態以下、合成例及び実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら制限されるものではない。

合成例 1

t一ブトキシカリゥム 336. Ogを卜ルェン 2 Lに懸濁させ、氷冷下ここに、 2 '—ヒドロキシ一4 ' , 6 '—ジメトキシァセトフエノン 196. Ogとニ硫化炭素 72. Omlのトルエン 2 L溶液を滴下した。室温で 20時間攪拌後、水 7 Lを加えトルエン層を抽出した。このトルエン溶液に 10 %硫酸水溶液 800ml を加え pH 4〜5とし、室温で 5時間攪拌した後、一晚放置した。生じた黄色結晶を減圧逋取し、水でよく洗い、 50°Cで 3日間減圧乾燥し、粗 4 ーヒドロキシー 5 , 7—ジメ卜キシクロメンー 2—チオン 160. 0gを得た。

4ーヒドロキシー 5， 7—ジメトキシクロメンー 2—チオン 160. 0g、炭酸カリウム 110. 4gを水 4. 8 Lに懸濁させ、ここに室温でヨウ化メチル 125. 0ml を加え 2. 5時間攪拌した。生じた結晶を減圧瀘取し、水でよく洗い、 60でで減圧乾燥し、粗 5， 7—ジメ卜キシ - 2—メチルチオクロモン 146. 8gを得た。

5 , 7—ジメトキシー 2—メチルチオクロモン 146. 8gをメタノール 3 Lに懸濁させ、ここに氷冷下、ォキソン 252. 2gの水 1. 5 L溶液を加え、室温で 3時間攪拌した。反応液に水 4 Lを加え、ジクロロメタンで 2回 ( 4 L、 2 L ) 抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリゥムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をメタノール 8 Lから再結晶し、 5， 7—ジメトキシー 2—メチルスルフィユルクロモン（中間体 ①） 91. 5g を得た。

実施例 1

フロロァセトフエノン 8. 37g 、ヨウ化イソブロビル 25. 0g 、炭酸力リゥム 20. 62g、アセトン 120mlの混合溶液を、パス温 60 で還流しながら 2日間攪拌した。反応液を希塩酸で中和し、酢酸ェチルで 2回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた粗結晶 12. 46gをフラッシユカラムクロマトグラフィ一（へキサン：酢酸ェチル = 40： 1 ) で精製し、ジイソプロビル体 9. 46 gを得た。

氷冷下、 t一ブトキシカリウム 399mgを T H F 10mlに懸濁させ、ここにジイソプロビル体 225mgの T H F溶液 3 mlと、二硫化炭素 135mgの T H F溶液 3 mlを加えた。室温で一晚攪拌後、反応液にヨウ化メチルを加え 1時間攢拌した。反応液に水を加え、酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られたオイル 345mgをフラッシュカラムクロマトグラフィー

(クロ口ホルム：アセトン = 10： 1 ) で精製し、スルフィドを得た。このスルフィド 136mg、ォキソン 271mg、メタノール 3 ml、水 3 mlの混合溶液を室温で 2時間攪拌した。反応液に水を加え、クロ口ホルムで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた粗結晶 80mgをフラッシュカラムクロマトグラフィー（クロ口ホルム：アセトン = 30 : 1 ) で精製し、スルホキシド 31mgを得た。

このスルホキシド 29mg、 4ーヒドロキシベンゼンチオール 23mg、炭酸カリウム 25rag、アセトン 3 mlの混合溶液を、室温で 20時間攢拌した。反応液に水を加え、希塩酸で弱酸性にし、生じた固体を瀘取した。水洗、乾燥後、得られた粗結晶 29mgをメタノール 2 mlから再結晶し、下記の理化学的性質を有する 2— （4ーヒドロキシフユ二ルチオ）一 5， 7—ジイソブロポキシクロモン 17mgを得た。

融点： 234~ 236 *Ό

赤外線吸収スペクトル（IR) ( _{m a} x cm" , KBr) ： 2980, 1612, 1578, 1498， 1452, 1426， 1380, 1322, 1286, 1112 プロトン核磁気共鳴スペクトル（'H-NMR) ( δ ppm, CDC1₃ 中）：

7.47 (2H， d， J = 8.3Hz) , 6.92 (2H, d, J = 8.3Hz) ,

6.56 (1H, d, J = 2.4Hz) , 6.41 (1H, d, J = 2.4Hz) , 5.32 (1H， s) ,

4.76 (1H, h, J=6.1Hz) , 4.59 (1H， h, J=6.1Hz) ,

1.29 (6H， d, J = 6.1Hz) , 1.25 (3H, d, J = 6.1Hz)

マススペクトル（MS) (EI-MS) m/z (%) ：

386, 371, 344, 328, 302, 286, 150

高分解能マススペクトル（HRMS) : C_{2 l}H₂₂0₅S

計算値； 386.11876

実測値； 386.11596

実施例 2

合成例 1 で得た中間体① 3.89g、 4ーヒドロキシベンゼンチオール 2.43 g及び水酸化ナトリゥム 1.40 _gを入れ窒素置換した後、無水ジメチルスルホキシド 78mlを加え、室温で終夜攪拌した。この反応液を氷 1 N 塩酸にあけ、析出する不溶物を瀘取（水でよく洗う）し、白色固体を得た。これをメタノールークロロホルム一 n—へキサンから再結晶し、下記に示す理化学性質を有する 2 — (4—ヒドロキシフユ二ルチオ）一 5 , 7—ジメトキシクロモン 3.18gを無色撒針状晶として得た。

融点： 272〜275 ^eC

I R ( max cm" ¹ , KBr) ：

3208， 1626, 1578, 1496, 1458, 1330, 1272, 1204, 1164, 1124,

1106, 1060， 920, 834, 692, 670, 598, 528

1 Η - Ν Μ R ( δ ppm, DMS0-d₆中）：

3.79 (3H， s) , 3.86 (3H, s)， 5.36 (1H, s)，

6.49 (1H, d， J=2.4Hz) , 6.61 (1H， d, J=2.4Hz) , 6.93 (2H， d， J = 8.8Hz) , 7.50 (2H， d, J = 8.8Hz) ,

10.22 (1H, s)

M S (EI- S) m/z (%) ：

330 (100, M + ) , 313 (6) , 301 (26)， 284 (36) , 181 (9)， 151 (32) 元素分析： C_{J 7}H, 40₅S

計算値； C ： 61.81 , H ： 4.27

実測値； C ： 61.49， H ： 4.24

実施例 3

実施例 2で得た 2 — （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジメトキシクロモン 2.22gを入れ窒素置換し、無水塩化メチレン 25ralを加え懸濁させた後、 - 40"Όで 0.8M 三臭化ホウ素の塩化メチレン溶液 25mlを加え、 - 40^eCで 10分攪拌し、次いで室温で 1時間攪拌した。この反応液を氷水 300mlにあけ、不溶物を瀘取（水でよく洗う）し黄色固体を得た。これをアセトン一 n—へキサンから再結晶し、下記に示す理化学性質を有する 5—ヒドロキシー 2 — （4 -ヒドロキシフエ二ルチオ）一 7 ーメトキシクロモン 1.57gを無色針状晶として得た。

I R ( V „ax cm"¹, KBr) ：

3164, 1660, 1590, 1494, 1436, 1336, 1286, 1198, 1166, 1130,

1110， 1040, 916, 860, 832, 800, 766, 686, 538, 524

1 Η - N M R ( δ ppm, DMSO-d₆中）：

3.83 (3H, s)， 5.51 (1H， s)， 6.38 (1H, d， J=2.4Hz) ,

6.59 (1H， d, J = 2.4Hz) , 6.96 (2H， d, J = 8.8Hz) ,

7.52 (2H， d， J = 8.8Hz) , 10.29 (.1H， s)， 12.61 (1H, s)

M S (EI-MS) m/z (%) ：

316 (100, M ⁺ )， ²87 (13) , 167 (53) , 150 (30) , 138 (10)，

121 (12)， 95 (10) 元素分析： C_l6Hi ₂0₅S

計算値； C ： 60.75， H ： 3.82

実測値； C ： 60.77, H ： 3.84

実施例 4

( 1 ) 氷冷下、水素化力リゥム（35%ミネラルオイル 0.5 ml) を T H F 2 mlに懸濁させ、ここに 2'— ヒドロキシ一4', 6'— ビス（メトキシメトキシ）ァセトフエノン 126mg (0.492mmol)、 18—クラウン一 6 130mg (0.492mmol) の T H F 2 ml溶液を滴下し、 1時間攪拌した。この溶液に二硫化炭素 0.89ml (14.76ramol) を加え、室温で 20時間攪拌した。その後ヨウ化メチル 0.5 mlを加え、 30分間攪拌した。反応液に水をゆっくり加えエーテルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリゥムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた粗生成物をへキサンで洗い、 5 , 7—ビス（メ卜キシメトキシ）一 2 —メチルチオクロモンを 133.5mg (収率 87%) 得た。

融点： 109〜110 °C

I R ( V m.x cm", KBr) ：

1640, 1620, 1588, 1316, 1152, 1126， 1092, 1074, 1036, 904 1 Η - Ν Μ R (δ pm, CDC1₃中）：

6.73 (d, 2.5Hz, 1H)， 6.71 (d, 2.5Hz, 1H) 6.04 (s， 1H) ,

5.31 (s, 2H) , 5.22 (s， 2H)， 3.55 (s, 3H) 3.50 (s， 3H) ,

2.49 (s, 3H)

M S (FAB)： 313 (MH ⁺ )

H R M S : C₁₄H,r0₆S

計算値； 313.07459

実測値； 313.07433

(2 ) 氷冷下、 5 , 7—ビス（メトキシメトキシ 2—メチルチオクロモン 9.47g (30.30mmol) の T H F 70ml溶液中に塩酸メタノール 70mlを加え、室温で一晚攢拌した。反応液に水を加え酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、 5 , 7—ジヒドロキシー 2—メチルチオクロモンを 6.88 g得た。これは精製せずに次の反応に用いた。

融点： 244〜246 °C

I R ( V max cm- \ KBr) ：

1650, 1610, 1582, 1564, 1498, 1354, 1346, 1164

1 Η - M R (δ ppm, アセトン- d_e 中）：

12.82 (s, 1H)， 9.70 (brs, 1H) , 6.37 (d, 2.0Hz, 1H) ,

6.23 (d, 2.0Hz, 1H)， 2.64 (s, 3H)

M S (FAB) ： 225 (MH ⁺ )

H R M S : C_{l o}H₉0

計算値； 225.02216

実測値； 225.02406

(3 ) 5 , 7 - ジヒドロキシ一 2 —メチルチオクロモン 30mg (0.134 mmol) のメタノール 1 ml溶液中に、室温でォキソン 82mg (0.134mmol)の水溶液 l mlを滴下し、 1時間攪拌した。反応液に水を加え酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、 5， 7—ジヒドロキシー 2—メチルスルフィ二ルクロモン（少量のスルホンを含む）を 32mg得た。これは精製せずに次の反応に用いた。

¹ H - N M R ( δ pm, アセトン- d₆ 中）：

12.4 & (s, 1H) , 6.64 (s， 1H) , 6.49 (d, 2.4Hz, 1H) ,

6.32 (d, 2.4Hz, 1H) , 3.03 (s, 3H)

M S (FAB) ： 241 (MH⁺) H R M S : CoHsOsS

計算値； 241.01856

実測値； 241.01707

(4 ) 5 , 7—ジヒドロキシー 2—メチルスルフィニルクロモン 32mg (0.134nunoi)、 4ーヒドロキシベンゼンチオール 20mg (0.161mmol) , 炭酸カリウム 41mg(0.295mniol) 、アセトン 2 mlの混合溶液を、室温で一晩搰样した。反応液を希塩酸で中和後、酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をアセトン一へキサンから再結晶し、 5 , 7—ジヒドロキシー 2 - (4 - ヒドロキシフエ二ルチオ）クロモンを 14.6mg (1β率 36 %) 得た。

融点： 249〜251 °C

I R ( V _m.x cm"¹, KBr) ：

3400, 1702, 1642, 1604, 1582, 1574, 1500, 1348, 1334, 1164, 830

¹ H - M R (δ ppm, アセトン -d₆ 中）：

12.72 (s, 1H)， 7.56 (d, 8.8Hz, 2H) , 7.05 (d， 8.8Hz, 2H) ,

6.33 (d, 2.0Hz, 1H) , 6.23 (d, 2.0Hz, 1H)， 5.54 (s， 1H)

M S (EI) ： 302 (M⁺)， 153, 150

計算値； 302.02490

実測値； 3Q2.02526

実施例 5

( 1 ) 5 , 7 - ジヒドロキシー 2 —メチルチオクロモン 6.88g (30.35 mmol) 、炭酸カリウム 12.56g (91.05mmol)、ヨウ化イソプロビル 6.07ml (60.70mmol)、 D M F 150ml を 60 で 30分間攪拌した。反応液に水を加え酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナ卜リウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をフラッシュカラムク口マトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル = 4 : 1)で精製し、 5—ヒドロキシ - 7—イソプロボキシー 2—メチルチオクロモンを 6.71g (収率 83%) 得た。

融点： 119〜120 。C

I R ( V _nax cm"¹, KBr) ：

1664, 1592, 1498, 1484, 1430, 1342， 1322, 1164, 1132， 1110 1 Η - Ν Μ R (5 ppm, CDC1₃中）：

12.59 (s， 1H) , 6.31 (s， 2Η) , 6.03 (s, 1Η) , 4.59 (m, 1H) , 2.52 (s, 3H) , 1.37 (d, 5.9Hz, 6H)

M S (FAB) ： 267 (MH⁺) , 225

H R M S ： ₃H_1S0₄S

計算値； 267.06911

実測値； 267.06964

(2 ) 5—ヒドロキシー 7—イソプロポキシ一 2—メチルチオクロモン 6.54 g (24.59mmol) のジクロロメタン 150ml 溶液に氷冷下、メタクロ口過安息香酸 5.11 g (29.51nunol) のジクロロメタン 50ml溶液を滴下し、 1 時間攪拌した。反応液に重曹水を加えクロ口ホルムで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、 5—ヒドロキシー 7—イソプロボキシ - 2—メチルスルフィニルクロモシを 7.01 g得た。これは精製せずに次の反応に用いた。

I R ( V _max cm"¹, KBr) ：

1664, 1608, 1068

1 H - N M R (δ ppra, CDC1₃中）：

12.27 (s， 1H)， 6.81 (s, 1H) , 6.37 (s, 2H) , 4.62 (m, 1H)， 2.96 (s， 3H) , 1.38 (d, 6.4Hz, 6H)

(3 ) 5—ヒドロキシー 7—イソブロボキシー 2—メチルスルフィニルクロモン 7.01g (24.59mmol) 、 4ーヒドロキシベンゼンチオール 3.72g (29.51mraol) 、炭酸カリウム 4.07g (29.51ramol) 、アセトン 170ml の混合溶液を、室温で 1時間攪拌した。反応液を希塩酸で中和後、クロロホルムで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をエタノール一メタノールから再結晶し、 5—ヒドロキシー 2 — （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7 一イソプロポキシクロモンを 6.64g (収率 78%) 得た。

融点： 205〜207 "C

I R ( V _m.x cm-', KBr) ：

3300, 1656, 1594, 1496， 1322

' Η - N M R (δ ppm, CDC1₃中）：

12.26 (s, 1H) , 7.97 (brs, 1H)， 7.41 (d， 8.8Hz, 2H) ,

6.87 (d， 8.8Hz, 2H) , 6.36 (d， 2.4Hz, 1H) , 6.32 (d， 2.4Hz, 1H) ,

5.59 (s， 1H) , 4.61 (m, 1H) , 1.37 (d, 5.9Hz, 6H)

M S (EI) ： 344 (M⁺) , 302

H R M S : C_{i e}H,e0₅S

計算値； 344.07185

実測値； 344.07170

実施例 6

( 1 ) 5 , 7—ジヒドロキシー 2 —メチルチオクロモン 354mg (1.58 mmol) 、炭酸カリウム 1.09g (7.90mmol)、ヨウ化イソプロビル 0.79ml (7.90匪01)、アセトン 20mlを一晚還流した。その後、ヨウ化メチル 2.95 ml (47.4mraol) を加え、更にー晚還流した。反応液に水を加え酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル = 1 : 3 → 1 : 6 ) で精製し、 7—イソプロポキシ - 5—メトキシ - 2—メチルチオクロモンを 228mg (収率 52 %) 得た。

融点： 113〜114 °C

I R ( V _max cm" ¹ , ΚΒΓ) ：

1640, 1586, 1308， 1124

1 Η - Ν Μ R (δ pm, CDC1₃中）：

6.39 (d, 2.2Hz, 1H)， 6.32 (d, 2.2Hz， 1H) , 6.04 (s, 1H)，

4.61 (m, 1H)， 3.92 (s， 3H)， 2.48 (s， 3H) , 1.39 (d， 6.1Hz, 6H) M S (FAB) ： 281 (MH⁺) , 239

H R M S ： C₁₄H₁₇0-S

計算値； 281.08476

実測値； 281.08588

(2 ) 7—イソプロボキシー 5—メトキシー 2 —メチルチオクロモン 158mg (0.564mmol) のメタノール 4 ml溶液中に、室温でォキソン 347mg (0.564難 ol) の水溶液 2 mlを滴下し、 30分間攪拌した。反応液に水を加え酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリゥムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、 7—イソプロポキシ一 5—メトキシー 2—メチルスルフィニルクロモン（少量のスルホンを含む）を 147mg 得た。これは精製せずに次の反応に用いた。

¹ H - N M R ( δ pm, CDC1₃中）：

6.73 (s, 1H) , 6.45 (d， 2.2Hz, 1H) , 6.38 (d, 2.2Hz, 1H)，

4.63 (m, 1H) , 3.94 (s， 3H) , 2.95 (s, 3H) , 1.40 (d， 6.1Hz, 6H)

(3 ) 7—イソプロポキシ一 5—メトキシー 2—メチルスルフィニルクロモン 146mg (0.493mmol) 、 4ーヒドロキシベンゼンチオール 93mg (0· 740mmol) 、炭酸カリウム 102mg (0.740mmol) 、アセトン 6miの混合溶液を、室温で 2時間攪拌した。反応液を希塩酸で中和後、酢酸ェチルで二回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をアセトン一メタノールから再結曰し、 2 — （4 ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—イソブロポキシー 5 — メ卜キシクロモンを 102mg (収率 57%) 得た。

融点： 263〜265 ^eC

I R ( V _m.x cm"¹, KBr) ：

3200, 1626, 1598, 1582, 1320, 1126

1 Η - Ν R (5 pm, DMS0-d₆中）：

7.48 (d, 8.5Hz, 2H)， 6.93 (d， 8.5Hz, 2H) , 6.60 (d, 2. OHz, 1H) ,

6.42 (d, 2.0Hz, 1H) , 5.32 (s， 1H)， 4.78 (m, 1H)， 3.78 (s， 3H) ,

1.30 (d， 6.1Hz, 6H)

M S (FAB)： 359 (MH⁺)， 317

計算値； 359.09532

実測値； 359.09547

実施例 7

実施例 6と同様にして以下の化合物を合成した。

( 1 ) 5—エトキシ一 2 — （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—イソブロポキシクロモン

(2 ) 7 - s—ブトキシー 2 - (4 - ヒドロキシフエ二ルチオ） - 5 — ィソブロポキシクロモン

(3 ) 7— s—ブトキシー 5 -エトキシー 2 — （4 ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン

(4 ) 7— s—ブトキシー 2 — （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 — メトキシクロモン

(5 ) 7— （.1一ェチルプロポキシ）一 2 — （4ーヒドロキシフユニルチォ）一 5 —メトキシクロモン

実施例 8

①コーンスターチ 44 g

②結晶セルロース 40g

③カルボキシメチル

セルロースカルシウム 5g

④軽質無水ケィ酸 0.5g

⑤ステアリン酸マグネシゥム 0.5g

施例 1で ¾た化 _金物 10^

計 100 g

上記の処方に従って①〜⑥を均一に混合し、打錠機にて圧縮成型して —錠 200 mgの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、実施例 1で得た化合物 20mgが含有されており、成人 1 日 10〜25錠を数回にわけて服用する。

実施例 9

①結晶セルロース 84.5 g

②ステアリン酸マグネシウム 0.5g

③カルボキシメチル

セルロースカルシウム 5g

④荬施例 2で得た化合物 lOg

計 100 g

上記の処方に従って①、 ④及び②の一部を均一に混合し、圧縮成型した後、粉砕し、 ③及び②の残量を加えて混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠 200mg の錠剤を得た。この錠剤一錠には、実施例 2で得た化合物 20mgが含有されており、成人 1 日 10〜25錠を数回にわけて服用する。

実施例 10

①結晶セルロース 49. 5 g

② 10 %ヒドロキシプロビル

セルロースエタノール溶液 35 g

ーョ

③カルボキシメチル

セルロースカルシウム 5 g

④ステアリン酸マグネシウム 0. 5 g

⑤実施例 3で得た化合物 10 g_

100 g

上記の処方に従って①、 ②及び⑤を均一に混合し、常法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥 ·解砕した後、 ③及び④を混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠 200mg の錠剤を得た。

この錠剤一錠には、実施例 3で得た化合物 20mgが含有されており、成人 1 日 10~ 25錠を数回にわけて服用する。

実施例 11

①コーンスターチ 34. 5 g

②ステアリン酸マグネシウム 50 g

③カルボキシメチル

セルロースカルシウム 5 g

④軽質無水ケィ酸 Q . 5 g

(¾塞施例 4で^ こ化:^物 10

計 100 ε

上記の処方に従って①〜⑤を均一に混合し、圧縮成型機にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤を得た。この顆粒剤 l g に、実施例 4で得た化合物 lOOmg が含有されており、成人 1 日 2〜5 gを数回にわけて服用する。

実施例 12

①結晶セルロース 55 g

② 10%ヒドロキシブ口ビル

セルロースエタノール溶液 35 g

③実施例 5で得た化合物 10

I† 100g

上記の処方に従って①〜③を均一に混合し、ねつ和した。押し出し造粒機により造粒し、乾燥し、篩別して顆粒剤を得た。

この顆粒剤 l g には、実施例 5で得た化合物 lOOmg が含有されており、成人 1 日 2〜5 gを数回にわけて服用する。

実施例 13

①コーンスターチ 89.5 g

②軽質無水ケィ酸 Q.5g

塞施例 6で置た化合物 10

計 100g

上記の処方に従って①〜③を均一に混合し 200m を 2号カプセルに充填した。

このカブセル剤 1 カブセルには、実施例 6で得た化合物 20mgが含有されており、成人 1 日 10〜 25カプセルを数回にわけて服用する。

実施例 14

①大豆油 5g

②注射用蒸留水 89.5g

③大豆リン脂質 2.5g

④グリセリン 2 g 実施例 1で侵た化合物

計 100 g

上記の処方に従って⑤を①及び③に溶解し、二れに②と④の溶液を加えて乳化し、注射剤を得た。産業上の利用可能性

本発明によれば、天然由来のキヤビラリシンを原料とすることなく容易に全合成が可能で、かつキヤビラリシンに比し優れたアルドースリダクタ一ゼ阻害作用を有するクロモン誘導体を提供することができる。本発明のクロモン誘導体は、白内障、網膜症、角膜症、賢症、末梢神経障害等の糖尿病における各種合併症の治療剤として有用である。

Claims

請求の範囲

1 . 次式（ 1 ) ：

R

( 1 )

(式中、及び R₂ は、同一又は異なって、水素原子又は低級アルキル基を？す。）

で示されるクロモン誘導体。

2 . 前記式（ 1 ) において、 R , 及び R₂ の少なくとも一方が、次式 ( 3 ) ：

CH— ( 3 )

(式中、 R⁷ 及び R⁸ は、同一又は異なって、メチル基又はェチル基を表す。）で示される分枝状アルキル基である請求の範囲第 1項記載の化合物。

3 . 前記式（ 1 ) において、及び R₂ の少なくとも一方がィソブロビル基である請求の範囲第 1項記載の化合物。

4 . 5 , 7—ジヒドロキシ一 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2— （4ーヒドロキシフユ二ルチオ）一 7—メトキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジメトキシクロモン、 5， 7—ジエトキシー 2— （4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2 — （ 4 ーヒドロキシフエニルチォ）一 7—イソブロポキシクロモン、 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）一 7—イソブロポキシー 5—メトキシクロモン、 5—エトキシー 2 一（ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7—イソブロポキシクロモン、 2 一（ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7 -ジイソプロポキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジブロボキシクロモン、 5 , 7—ジブトキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5 , 7—ジー s—ブトキシー 2 — （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 7— s—ブトキシー 2 — （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）一 5—イソプロポキシクロモン、 7— s—ブトキシー 5—エトキシ一 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 7— s—ブトキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5—メ卜キシクロモン又は 7— ( 1一ェチルブロポキシ）一 2— （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 ーメ卜キジクロモンである請求の範囲第 1項記載の化合物。

5 . 次式（ 2 ) ：

CHaOCHj

CH₃0CH₂0 0 で示されるクロモン誘導体。

6 . 次式（ 1 ) ：

R

(式中、及び R₂ は、同一又は異なって、水素原子又は低級アルキル基を表す。）

で示されるクロモン誘導体を有効成分とするアルド一スリダククーゼ阻害剤。

7. 前記式（ 1 ) において、及び R₂ の少なくとも一方が、次式 ( 3 ) ：

R₇-

CH- (3 )

(式中、 R⁷ 及び R^e は、同一又は異なって、メチル基又はェチル基を表す。）で示される分枝状アルキル基である請求の範囲第 6項記載のアルドースリダクタ一ゼ阻害剤。

8. 前記式（ 1 ) において、 R, 及び R₂ の少なくとも一方がィソプロビル基である請求の範囲第 6項記載のアルドースリダクタ一ゼ阻害剤。

9. 5， 7—ジヒドロキシー 2 - (4—ヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 7 -メトキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジメトキシクロモン、 5， 7—ジエトキシ一2— （4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 5—ヒドロキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）一 7—イソブロポキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエニルチォ）一 7—イソプロポキシ一 5—メトキシクロモン、 5—エトキシー 2 一（4ーヒドロキシフユ二ルチオ）一 7—イソプロポキシクロモン、 2 一（ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5， 7—ジイソプロポキシクロモン、 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 , 7—ジブ口ポキシクロモン、 5 , 7—ジブトキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 5， 7—ジー s—ブトキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）クロモン、 7 - s—ブトキシー 2— （ 4ーヒドロキシフエニルチォ）一 5—イソブロポキシクロモン、 7— s—ブトキシー 5—エトキシ一 2— （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）クロモン、 7— s—ブトキシー 2— （4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5—メ卜キシクロモン又は 7 - ( 1 ーェチルブロボキシ）一 2— （ 4ーヒドロキシフエ二ルチオ）一 5 ーメトキシクロモンを有効成分とするアルドースリダク夕ーゼ阻害剤。