[go: up one dir, main page]

UA61054C2 - Cytoctatics modified by carbohydrates - Google Patents

Cytoctatics modified by carbohydrates Download PDF

Info

Publication number
UA61054C2
UA61054C2 UA97115364A UA97115364A UA61054C2 UA 61054 C2 UA61054 C2 UA 61054C2 UA 97115364 A UA97115364 A UA 97115364A UA 97115364 A UA97115364 A UA 97115364A UA 61054 C2 UA61054 C2 UA 61054C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
methanol
dichloromethane
mmol
batracillin
lysyl
Prior art date
Application number
UA97115364A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Bayer Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag filed Critical Bayer Ag
Publication of UA61054C2 publication Critical patent/UA61054C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/02—Halogenated hydrocarbons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Description

Опис винаходу
Винахід стосується цитостатичних засобів, специфічних щодо пухлин, зокрема модифікованих вуглеводами 2 сполук цитостатичної активності.
Хіміотерапія при пухлинних захворюваннях частіше за все супроводжується тяжкими побічними явищами, зумовленими токсичним впливом хіміопрепаратів на проліферувальні клітини інших тканин. Здавна вчені займаються проблемою покращення селективності застосовуваних активних речовин. Часто наслідуваним прийомом є синтез препаратів, що більш або менш селективно вивільняються в цільовій тканині, наприклад, 70 шляхом зміни значення рН (Тітце та інші (Тіеїге еї аІ.), патент ФРН 4 229 903), за допомогою ферментів (наприклад, глюкуронідаз; Джеквезі та інші (дасдцезу еї а!.), європейський патент 511 917; Босслет та інші (Воззієї еї аІ.), європейський патент 595 133) або кон'югатів антитіло-фермент (Багшев та інші (Вадзпеме еї аі!), міжнародна публікація МУО 88/07378; Сентер та інші (Зепіег еї аІ.), патент США 4 975 278; Босслет та інші (Возвієеї еї а), європейський патент 595 133). Проблемною в цих спробах є недостатня стабільність 72 кон'югату в інших тканинах та органах, та зокрема повсюдне розподілення активної речовини, що супроводжує екстра целюлярне вивільнення активної речовини в пухлинній тканині.
Виділений лектиновий рисунок на поверхні пухлинної клітини (Сабріив; ОпкКоЇодіеє 12, (1989), 175) відкриває принципову можливість шляхом зв'язування відповідних вуглеводних модулів до цитостатичних засобів цілеспрямовано адресувати останні на пухлинні клітини. Ця перспектива обмежена тим, що і в інших тканинах, особливо в печінці, лектини зустрічаються зі схожими вуглеводами (галактоза, лактоза, маноза,
М-ацетил-глюкозамін, фукоза і т.п.) (АвПпмжеїй еї аїЇ., Аппи.Кем.Віоспет. 46 (1982), 531; е8ап еї аї.,
Ргос.МакнН.Асайа.Зсі. ОБА 74 (1977), 1521; НІіЇ еї аї., 9.Віої.Спет. 262 (1986), 7433; дапвеп еї аї., 9. Віої.
Спет. 266 (1991), 3343). Тому слід рахуватися з відчутним накопиченням глікокон'югатів, що містять активну речовину, в печінці та інших багатих на лектин органах, якщо використовуються такі немодифіковані цукри. с
Гетероциклічний амін батрацилін (1) проявив в різних моделях раку кишкового тракту добру протипухлинну (9 дію (описання винаходу до патенту США 4 757 072). (о нм т 2
М ю
Іо о
М - (Се) 0)
Пептидні кон'югати батрациліну (1) з доброю дією іп міго та прийнятною розчинністю (патент США 4 180 343) в дослідах на тваринах переносяться гірше, ніж батрацилін. Описані в європейському патенті 501 250 « Кон'югати фукози в значній мірі накопичуються в печінці. 8 с Хінолон-а (2) 7-КЗакз, 45, й тазк)-4-аміно-1,3,За,4,7,7а-гексагідро-ізоіндол-2-іл|-8-хлор-1-циклопропіл-б-фтор-1,4-дигідро-4-оксо-3-хінолін "» карбонова кислота поряд з відмінною антибактеріальною активністю має також добру ефективність проти різних ліній пухлинних клітин (європейський патент 520 240, патент Японії 4-253 973). Однак, йому протистоять значні тоКксикологічні проблеми (наприклад, токсичність відносно генів, кісткового мозку, гостра токсичність іп мімо,
Ге») і т.п.). - о о що соон 1 ї» Нм Н 7 ІМ М
Сі о я А
Нн іме) бо (2) (хінолон-а)
Задача винаходу полягає у одержанні нових модифікованих вуглеводами сполук цитостатичної активності, яким властива стабільність у сироватці, кращою клітинною і тканевою селективністю, зокрема, у випадку пухлини ве печінки, і кращою розчинністю і покращеною переносністю.
Поставлена задача вирішується пропонуємими модифікованими вуглеводами сполук загальної формули (1):
К-5р-І-АА1-АА2-С, (І) в якій
К - незаміщений або регіоселективно модифікований вуглеводний залишок,
Зр - арилен формули - о. 7 70 - ,
Кк то А 5 ММ р АХ рий
І - У або т М й де К - хлор або гідроксиалкіламіно,
АА1 - залишок амінокислоти в О- або І -конфігурації, що при необхідності може мати захисні групи або другу групу К-5р-Ї, в якій К, Зр, Ї незалежно від іншої групи К-5р-Ї може мати вказані вище значення, або прямий с
ЗВ'ЯЗОК, о
АА2? - залишок амінокислоти в О- або І-конфігурації, що при необхідності може мати захисні групи, або прямий зв'язок,
С - цитостатичний залишок, залишок цитостатичного засобу або похідне цитостатичного засобу, та їх ізомери і солі. «І
Структурний елемент -5Р-І -АА1-АА2- являє собою носій, що зв'язує К та С.
Сполуки формули (І) можуть бути одержані в стереоізомерній формі, наприклад, як енантіомери або й діастереомери, або як їх суміші, наприклад, як рацемат. Винахід стосується як чистих стереоізомерів, так і їх (ав) сумішей.
При необхідності суміші стереоізомерів можуть бути розділені на стереоізомерно єдині складові відомими -- способами, наприклад, шляхом хроматографії або кристалізації. (Се)
Сполуки згідно з винаходом можуть бути одержані також в формі їх солей. В загальному випадку тут називаються солі органічних чи неорганічних основ або кислот, а також внутрішні солі.
До кислотно-адитивних солей належать, переважно, галогеноводневі кислоти, такі, наприклад, як « хлороводнева кислота та бромоводнева кислота, особливо хлороводнева кислота, крім того фосфорна кислота, щавелева кислота, сірчана кислота, моно- та біфункціональні карбонові кислоти та гідроксикарбонові кислоти, - с такі як оцтова кислота, малеїнова кислота, малонова кислота, оксапова кислота, глюконова кислота, бурштинова а кислота, фумарова кислота, винна кислота, лимонна кислота, саліцилова кислота, сорбінова кислота та молочна "» кислота, а також сульфонові кислоти, такі як р--олуолсульфонова кислота, 1,5-нафталіндисульфонова кислота або камфоросульфонова кислота.
Фізіологічно безпечними солями сполук згідно з винаходом можуть бути також солі металів та амонію, що (о) мають вільну карбоксильну групу. Особливу перевагу мають, наприклад, натрієві, калієві, магнієві або - кальцієві солі, а також амонієві солі, похідні від аміаку або органічних амінів, як, наприклад, етиламін, ди- та триетиламін, ди- та триетиноламін, дициклогексиламін, диметиламіноетанол, аргінін, лізин, етилендіамін або (ав) фенетиламін. сл 50 В першу групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких
К - вуглеводний радикал загальної формули (ІІ): нн ее;
Ф) в в (ІІ) хо) до де бо А - метил, гідроксиметил, алкоксиметил, карбоксиалкілоксиметил, в, в, В! - окремо або разом означають водень, гідрокси, алкілокси, гідроксиалкокси, карбоксиалкілкарбонілокси, сульфат, галоген, або два з залишків Б, КЗ, 27 разом означають епоксигрупу, і р,
І, ААТ, АА?2 та С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі. 65 В другу групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких
Зр - арилен формули со щч--
Н й з
К, І, АА1, АА2 та С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі. 70 В третю групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких
С - хінолонкарбонова кислота, батрацилін, камптотецин, доксорубіцин, мельфалан,
К, 5р, І, ААТ, АА2 мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі.
В четверту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких /5 АА1 - залишок амінокислоти, похідне гліцину, аланіну, валіну, лізину, аспарагінової кислоти, глутамінової кислоти, орнітину, тирозину або серину, в О- або І -конфігурації, який може бути зв'язаний з іншою додатковою групою К-5р-І -, або прямий зв'язок,
К, 5р, І, АА?2 і С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі.
В п'яту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (ії) входять сполуки, в яких
АА2 - залишок амінокислоти, похідне гліцину, аланіну, лізину, орнітину, діамінопропіонової кислоти або серину, в ЮО- або І -конфігурації, або прямий зв'язок,
К, 5р, І, АА?2 і С мають наведені в п. 1 значення та їх ізомери і солі.
В шосту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких
С означає залишок формули (11): с
Т-О, (1) в якій Ге) о - залишок формули
Х, 0 х, сооН З чЗЩХ їй - о
Мк - і (Се) 1 де У - означає М або С-БЕ5, де 5 означає водень, галоген або метокси, «
Ху - водень, галоген,
Х» - водень, аміногрупа, 8 с або ц о - залишок формули и? 8)
Ж СсоОоНн
Ф зи хх а ит о МО с5 сл 20 ре
Ї» не з де Хз - галоген,
Т - залишок формули (Ф) /Й/ ра
Ге) НМ НИ 60
М- , М- , в в б5 де 25 - водень, алкіл з 1-3 атомами вуглецю, і
К, 5р, І, ААТ, АА2 мають наведені вище значення, та їх ізомери і солі.
Завдяки вищезгаданій активності сполуки формули (І) можуть представляти собою активну речовину / цитостатичного засобу, що є додатковим об'єктом винаходу.
Винахід ілюструється наступними прикладами
Приклади серії А: Біологічне тестування
Приклад А.1
Тестування стримування росту для визначення цитотоксичних властивостей глікокон'югатів батрациліну та 7/о Хінолону-а:
Лінії клітин БУУ 480 та НТ 29 (АТСС-Мг. СС 228 та НВТ-38) товстої кишки людини, а також лінію клітин В 16
Е 10 меланоми миші поміщують в чашки Коих в середовище КРМІ 1640 з додаванням 1095 ЕС. Потім трипсинують і в КРМІ плюс 1095 ЕС доводять концентрацію клітин до 50000 клітин на мілілітр. По 10Омкл клітинної суспензії на лунку поміщують в мікротитрувапьну пластину з 96 лунками і інкубують протягом 1 дня в 15 інкубаційній шафі при температурі 37"С в середовищі СО». Потім додають ще 100мкл середовища КРМІ та мкл
ОМ5О з дослідними речовинами. Ріст контролюють через З дні і через 6 днів. Для цього до кожної лунки додають 40Омкл розчину МТТ (3-(4,5-диметилтіазол-2-іл)-2,5-дифенілтетразолінбромід) з висхідною концентрацією 5мг на мілілітр води. Інкубують протягом 5 годин в інкубаційній шафі при температурі 37"С в середовищі СО». Потім середовище відсмоктують і додають по 100мкл і-пропанолу на лунку. Через 30 хвилин струшують зі 100мкл води 20 1 вимірюють затухання на довжині хвилі 540нм за допомогою Піегпек Мийізсап МСС/340 (Ріому).
Цитотоксична дія описаних глікокон'югатів бартациліну наведена в таблиці Та як значення ІС во для ліній клітин ЗМУ480 та НТ 29.
В таблиці 15 зведені значення ІСво для хінолону-а на лініях клітин ЗМУ 480, НТ 29 та В16 Б. см 25 й зЗууА8о нтго9 з зо ю о - 5 що по. « 4 З - ї» в | вп 4
Ф
Щ зв ю | ю о я. й ї» о е |в 18 59 бо БЗ 20 40 ви ою |в о юю | юю ів юю | по вю юю в 1 ю | в сч 2 о вю тю |в ва 1 | в ч зо вою | яю ю (ав) - і г
УУ480 нтго ВЕ 1о0 « я пф ю 518 з с пе, 81181 5 і г» пе) 00918 з пе 817512
Ф щ повів 18 о во» 5| 77115105 те юю ою 8,811 о в) 408 1 й 80000805 бо ро 5 яв зв в 14.3 8 А А аю о ве | обов 006 ол
Залежність біологічної ефективності від вуглеводів додатково підтверджується неефективністю безвуглеводних порівняльних сполук, покладених в основу серій прикладів 5, 6 та 11:
М-ІМо, Ме-біс-(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл)-лізил|-батрацилін та
М-ІМо, Ме-біс-(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін або 20. М-ІМо,Ме-біс-(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл)-О-лізил-хінолон-а (Значення ІС 5о»250).
Приклад А.2
Іп-міго-дослідження розщеплюваності глікокон'югатів
Кінетика розщеплення крові людини 1,225мл крові людини інкубують разом з 1,25мл РВ5 та 25мкл розчину штаму речовини (Імг/мл в 396 ОМ5Ов С
РВБ5) при 37"С. Через 1 годину та 24 години беруть проби по 1мл, змішують з 1Тмл етанолу та дають постояти 20 о хвилин при 4"С. Після центрифугування (5 хвилин при З500об/хв) відбирають 100мкл залишку для аналізу шляхом рідинної хроматографії.
Кінетика розщеплення клітин 2,25мл РВЗ інкубують разом з 225мкл клітинної суспензії (ЗОмг/мл) та 25мкл розчину штаму речовини (мг/мл в 396 ОМ5О в РВ5) при 37"С. Через 1 годину та 24 години беруть проби по мл, змішують з мл етанолу та ю дають постояти 20 хвилин при 4"С. Після центрифугування (5 хвилин при З3500об/хв) відбирають 100мкл залишку для аналізу шляхом рідинної хроматографії. о
Умови рідинної хроматографії: «-
Прилад: Установка Уотерса (У/аїегв) (се)
Колонка: Вівспоїї Нурегвії ОС КР 18 Бмкм 250х4мм
Елюент: А: 10мМ калійфосфатний буфер рН 4,5
В: 8095 ацетонітрилу/2095 води «
Потік Тмл/хв шщ с Довжина хвилі: 372мм и Градієнт: Охв 105 В "» 1Охв 6095 В 15БхВ 6095 В 18хв 1095 В (22) 20хв 6095 В - Елюент для кон'югатів хінолону-а: ав) А: 10095 метанол
В: тОмм калійфосфатний буфер рН 2,2; і-й 10мм гептансульфонова кислота «з»
Приклад 5в о ПЕ НИМИ ПНЯ ЕЗОПА НЕННЯ юю ля 101010 16101о ва 10111611 101010 во вав 1101019610 вла папя 10161016 т 10111160 10 1 01 0 б5 прилад з розщеплення в крові людини т-розщеплення з 5Мі-480 | розщеплення в тепатомі, па 10116110 101010
МЕТИ ПОГ ИН ПОЕТ У ПНО ТИНН КОН УАНН НО ТИН ПН УА пт 66101610 ово 161610 20196191 9619 19 то лав ооо 10101
Приклад А.З
Дослідження розподілу в органах
Для всіх експериментів використовувались атимічні голі миші (штам ММК! пи/пш), вирощені в "Огид 7/5 БемеІортепі Іарогаюгу, Опсоїеві бтрН", проф. Х.Х. Фібіг (Н.Н. Ріерід), м. Фрайбург. Тварини утримувались в макролонових клітках в умовах І атіпаг Ріом. Як пухлинний матеріал використовувалась тканина серії клітин
ЗМУ480, що в кілька прийомів вводилась в тварин.
Кожній миші віком 6-8 місяців в обидва боки підшкірне імплантувались дві пухлини. До моменту рандомізації тварини витримувались 26-27 днів. Після цього середня маса пухлин становила 5О0Омг, що відповідає діаметрові 2о пухлин близько 1О0мм. Фармакокінетика відбувалася таким чином: мишам вводилась речовина, що підлягає дослідженню, і їх знову до взяття проб на 1/2 год або на 4 год поміщали в клітку. Власне взяття проб починалось із забору крові. Для цього мишей наркозним ефіром присипляли (тривалість 1/2-1хв). Через 1/2 год або 4 год після введення досліджуваної речовини розкривали черевну порожнину, мишей під наркозом через
Мепа сама сацадаїїз протягом 1-2 хвилин знекровлювали, а потім умертвляли шляхом переламування шийного сч ов Відділу хребта. Внаслідок цього розривається центральне коло кровообігу і припиняється перфузія органів.
Потім протягом бхв препарували окремі органи. Зразу ж після цього проби органів, а потім рештки тіла і) зважували і заморожували в рідкому азоті.
Речовина "кон'югат 1" вводилась в кількості ЗООмг на кілограм маси тіла внутрішньочеревно (і.р.), а речовина "кон'югат 2" - в кількості 10Омг/кг внутрішньовенно (і.м.) в хвостову вену. Для кожної речовини та «г зо Відрізку часу використовували 5 тварин.
Результати розподілу кон'югату 1 зведені в таблиці З, а для кон'югату 2 в таблиці 4. о
А. Еталонний ряд: о 5,10, 50, 100 та 200мкг речовини, розчинених в суміші етанол-вода (1:11, за об'ємом (м/у)), додають до 1г телячої печінки. Потім розтирають з 1г морського піску та 2.5мл охолодженої суміші етанол/вода (1:1, мм), -- проби центрифугують протягом 2хв при З500об/хв. Після видалення надосадової рідини залишок знов змішують «о з 2,5мл суміші етанол/вода, центрифугують і надосадові зливки об'єднують. Відбирають 10Омкл і аналізують за допомогою рідинної хроматографії (НРІ С).
Умови рідинної хроматографії: «
Прилад: Установка Уотерса (Ууаїегв) 2
Колонка: Вівссноїї Нурегзії О05 КР18 Бмкм 250хімм с Елюент: А: 8095 ацетонітрил 2095 вода :з» В: 10мм калійфосфатний буфер рн 4,5
Градієнт: Охв 909 В 1Охв 4095 В б 15БхВ 4095 В 18хв 9095 В - 20хв 9095 В
І ав | Потік: Тмл/хв сл 50 Довжина хвилі: 372нм
Їх» В. Підготовка органів
Підготовку органів здійснюють аналогічно А, причому всі органи подрібнюють і екстрагують 2,5 мілілітрами суміші етанол/вода.
С. Підготовка крові
Взяті кількості крові змішують з 2мл суміші етанол/вода (1:1, м/м), центрифугують протягом 2хв. при (Ф; ЗБ5Обоб/хв і зливають надосадову рідину. До залишку знову додають 2мл суміші етанол/вода (1:1, мм), ко центрифугують і надосадові зливки об'єднують. 1О0Омкл об'єднаних зливків аналізують шляхом НРІ С.
Використовують умови НРІ С, наведені для А. во Кон'югаті (ЕР 501 250-А1) б5
РІШ о нм. Ж Мн 1 мар М ваше
Ме М но, А у о і но х зо па я і он о /5 Кон'югат 2 (Приклад 3.9) о о ня. Ж МН : мно М 7 й й ' Іво
Ме . й но, А о МН кн сч - ТТ о о САТ З й насос он З
Іо) о - зв дров о енюатт 00000320 Ф вації 313 ані 0300 « 2 С вані 01110014 2 с . С вані 01116105 г» Ммеюю дет 000 о Батецилін) 11111111 (о) - о я. дров енкюат? 00000650 о аа 11111171 » пули ню? 00000020
С авані 11111126
Печна кю? 00000059 вавацин! 111313 о
Со ан 01111168 т Мехюю сетета і 1 Батацилні////////7 11111111 бо
Приклад А.4
Визначення гострої токсичності глікокон'югатів батрациліну (одноразове застосування)
Гостра токсичність похідних батрациліну визначали на голих мишах пи/пи. Внутрішньовенно вводили речовини у вигляді водного розчину, а внутрічеревно у вигляді розчину ОМ5О в концентрації до 40О0мг речовини 65 на кілограм маси миші. Допустиму разову дозу вираховували, виходячи із ваги тварин до 21-го дня після введення та із кількості тварин, що вижили. Допустимі дози для речовин наведені в таблиці 5.
Для речовин із прикладів 3.16, 3.33; 3.9; 6.12; 6.14; 6.2; 6.81; 8.2 вона становить понад 200Омг на кілограм маси миші. Для речовин 3.33; 6.12; 6.14; 6.2; 6.81 навіть при дозі 40Омг/кг ще не виявлялась гостра токсичність.
На противагу цьому, лізил-О-аланіл-батрацилін (2.13) вже при разових дозах між 25 та 5Омг/кг був явно токсичним. й 07 знурішньотеровногр) | внутшньовенно(х). ів с
Приклад А.5
Визначення гострої токсичності після багаторазового введення о
Речовини вводили частково і.м. та частково і.р.. або щодня в дні 1-4 та 7-10, або в дні 1, 5 та 9. Дози становили 400, 200 та 10Омг/кг/день. Оцінку здійснювали за вагою на 21-й день та за кількістю тварин, що вижили. Для дослідів на кожну дозу та на кожну речовину було використано по 5 тварин. Результати наведенів /-«ф зо таблиці 6. ою о 7 введення дозування в дні Максимальна денна доза. мпчідень - зв Ф пиши ни ПО ПО т по вав яю юю
Цю ч 4 З с Цю 5 вв |в ;
Цю
ІБатрацилін) їро | 7.55 177777777111лою (22)
Приклад А.6 - Гематопатична активність глікокон'югатів хінолону-а порівняно з покладеними в їх основу речовинами о Матеріали та методики іп міго:
Мн Клітини кісткового мозку вимивають із бедра миші. 109 клітин інкубують при температурі 377С та в «з» атмосфері 7956 СО» в середовищі МеСоу 5А (0,395 агар) разом з рекомбінантним ЗМ-СЗЕ (Сепгіте; утворення колонії клітин штаму) та досліджуваною речовиною (1077-10Омкг/мл). Через 7 днів рахують колонії («50 клітин) та кластери (17-50 клітин). іп мімо: о Мишам підшкірно вводять 1, З, 10, ЗОмг/кг сполук. Через різні інтервали часу (3, 24, 48, 72 години після ін'єкції) розкривають бедро і ізолюють клітини кісткового мозку. 2хХ10? клітин описаним вище чином інкубують з о ОМ-С5БЕ і через 7 днів рахують колонії та кластери.
Результати: 6о Як видно із таблиці 7, досліджувані глікокон'югати порівняно з хінолоном-а мають в 105-103 разів менше гальмування проліферації клітин штаму в кістковому мозкові. п мімо також порівняно з хінолоном-а не спостерігалось гальмування проліферації клітин штаму сполукою 12.3 до дози ЗОмг/кг. Вже Змг/кг хінолону-а спричиняє масоване пригнічення проліферації клітин штаму (фіг.1). б5
Індукована СЗЕ проліферація клітин штаму в кістковому мозку миші
0,0002 то
Приклад А.7
Протипухлинна активність кон'югатів хінолону-а т5 Іп-міго-активність глікокон'югатів хінолону-а визначалась на ксенографі для дослідження пухлин людини в двошаровій системі "м'який агар-культура" за Гамбургером та Салмоном (Натбригдег та ЗаІтоп) (Зсіепсе 197: 461-463).
Тверді пухлини спочатку підсаджують голим мишам (ММК! пи/пи), оперативним шляхом добувають і механічно подрібнюють. Потім добувають окремі клітини шляхом інкубування при температурі 37"С протягом 30 хвилин в ферментній суміші коллагенази 0,0595, ДНКзи 0,0795 та хіалуронідази 0,195 в КРМІ. На закінчення клітини двічі промивають і пропускають через сита з розмірами вічок 200мкм та 20мкм.
Використовувався такий метод одержання культури:
Донний шар містить О0,2мл середовища Ізсомев'є Модігіей ЮОцірессовз з 2095 сироватки ембріона теляти та ре 0,795 агару. На цей шар накладають 40000-200000 клітин в О0,2мл такого ж середовища та 0,495 агару в 24 с пластинках з лунками. о
Цитостатичні речовини додають до 0,2мл проб середовища.
Культури інкубують при температурі 37"С в атмосфері 7-95 СО» протягом 6-15 днів.
Потім вирощені колонії обраховуються за допомогою інвертуючого мікроскопа, причому, за 24 години до « обрахування живі колонії фарбують хлоридом тетразолу.
Ефективність активної речовини визначається в процентах кількості колоній, що вижили, відносно кількості ІФ) колоній до обробки (Т/С-Кількість оброблених колоній х 100/Кількість необроблених колоній). о
Речовина вважається активною, якщо значення Т/С«3090.
В таблиці 7 ці дані наведені у вигляді значення ІСво в мкг/мл. ч- щі що пи нят схвово оо то Бозі « й нта вв 5 З ва (|в - їхню 4 09,22 3 ї» 1
Ф ух 023|136| 12 ло | о - Приклад А.8: о Досліди Іп-мімо:
Методика: о В день 10 мишам вводили 5х10У клітин пухлини ВІ16Е10. Тверді черевні пухлини розвивались в тваринах,
Т» яким щодня вводили досліджувані речовини або контрольні речовини-носії. В контрольній групі між 14-м та 20-м днями помирало зазвичай 5095 тварин. Тестовані речовини вводили в буфері або системі органічних розчинників, що складалась із 2095 метанолу та 2095 диметилсульфоксиду в 0,7-95 розчині кухонної солі.
Введення носія не впливає на виживаність тварин. Терапевтичний ефект проявляється в продовженні часу життя тварин, яким ввели досліджувану речовину. Переносність сполук аналізували паралельно, спостерігаючи
Ф) за тваринами, яким не вводили пухлин. Із переносності та продовження часу життя може бути вирахований ка терапевтичний індекс. й 0 деньодень о |день ов день зо день зв пазом 01000800 60 03030 дв пелоомтю 10001000 10050080 хінолон-а (0,1мг/кг)! 100 100 100 60 40
(топозид Бмок) | 100 | во | во | во | то
Таблиця 9 ілюструє терапевтичну ефективність сполуки із прикладу 11.12 на мишах, яким було трансплантовано пухлину В16Е10. 95 Приклад А.9:
Іп-мімо-гальмування росту пухлин з використанням моделі голих мишей
Матеріал:
Для всіх експериментів з дослідження гальмування росту пухлин використовувались голі миші (ММК, штам пи/пи). Вибрана великоклітинна карцинома легень ХР 529 вирощувалась послідовними пробами в голих то мишах. Походження пухлини від людини підтверджувалось ізоензиматичним та імуногістохімічним методами.
Хід експерименту:
Пухлину імплантували підшкірно в обидва боки голих мишей віком 6-8 тижнів. Лікування - в залежності від часу подвоєння - розпочиналось, як тільки пухлини досягали в діаметрі 5-7мм. Миші були розділені на лікувальні та контрольні групи (5 мишей в групі 8-10 пухлинами, що піддаються оцінці) шляхом випадкової то вибірки. Окремі пухлини контрольної групи росли особливо прогресивно. Величина пухлин вимірювалась в двох вимірах за допомогою штангенциркуля. Для всіх оцінок використовувався об'єм пухлин, що добре корелюється з кількістю клітин. Об'єм пухлин вираховувався за формулою "Довжина х Ширина х Ширина/2" (а х 522, де а та
Ь означають два діаметри, розміщені під прямим кутом).
Значення відносного об'єму пухлин вираховувались для кожної окремої клітини шляхом ділення розміру пухлини в день Х на розмір пухлини в день О (в момент розділення на групи). Для подальшої оцінки використовувались середні значення відносного об'єму пухлин.
Кінцевою величиною, що визначалась, було гальмування росту об'єму пухлин (відношення об'єму пухлин тест-групи до об'єму пухлин контрольної групи, Т/С, в процентах). сч
Лікування:
Всі сполуки вводились періодично, в дні 1, 5 та 9 внутрічеревно (і.р.) з використанням води як розчинника. о) їй зо пил п ПЕ РИ ПЕС ТО ПОЛЛНЯ ПОЛОН ПО
Жентельня! 02000001 615а000000000100то6 во шт м о пил п ПЕ ЕС ПОЛЯ ПОЛЯ ПО є 1666 8011111111110300711111111001тея - зв п ПО ПОСТИ НЯ ПОН ПОЛОН ПО Те
ПИЛИ ПИ ПОЕТИ ПОСТИ ПОЛОН ПОН НО ки 81111121 п ПО ПОСТ НЯ ПОН ПОЛОН ПО « 11 лаяв 18111151 но, с ПИ ПИ ПЕС ПОН ПОЛОН ПОН НО 5) вдень 19
Сполуки камптотецину серії прикладів 18 в ході цього тесту показували, як правило, порівнювану або кращу б ефективність. - Приклади серії В: Приклади синтезу
Приклад 1.1 о р-амінофеніл-2-О-метил- Д-І -фукозид с 50
Ме, ,0 2;
ГТ» . а, вв НО Н ? Мн,
Ф) б. Он Ме о 1.1.а) р-нітрофеніл-3,4-О-ізопропіліден-р-І-фукозид:
Розчин р-нітрофеніл-р-І-фукозиду (750мг, 2,63 ммоль) в 40мл суміші ОМЕРЕ/діоксан 1:2 змішують при 07 з 60 бБМг р-толуолсульфонової кислоти та з інтервалами ЗОхв з 5х100мкл 2-метоксипропену. Після перемішування протягом 18 год при 207"С згущують та очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1). Після згущення одержують 710мг (8390) білої твердої речовини. 1.1.5). р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4-О-ізопропіліден-р-І -фукозид: 10Омг (0,307 ммоль) сполуки із прикладу 1.1.4 разом з Убмкл метилиодиду кладуть в 10мл ТНЕ і потім бо порціями змішують з 11мг гідриду натрію (80-95). Після перемішування протягом З год при 207С ще раз додають
9бмкл метилйиодиду та 11мг гідриду натрію. Після подальшого перемішування протягом 16 год при 207С додають трохи води та 100мл дихлорметану. Пробу двічі струшують з водою, органічну фазу згущують, а потім одержаний продукт очищують на хроматографічній колонці (петролейний ефір/ефір оцтової кислоти 8:1). Вихід: 7Вмг (7596). 1.1) р-амінофеніл-2-О-метил-р-І -фукозид: 7вмг (0,23 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4-О-ізопропіліден-дД-І-фукозиду протягом 16 год перемішують при 207"С в Змл 80-95 оцтової кислоти. Потім оцтову кислоту видаляють у вакуумі, пробу змішують з 1Омл метанолу і після додавання діоксиду титану гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском. 70 Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал промивають метанолом. Після хроматографічного очищення (дихлорметан/метанол 97,5:2,5) одержують 77мг (8090) цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол 91 кО,421.
Приклад 1.2 р-амінофеніл-3-О-метил- р-І -фукозид т Ме, 0 о , хх «б й ІФ п ще но : ОН МН,
ЕІ
ОоМе Щи 1.2.а) р-нітрофеніл-3-О-метил-р -І -фукозид: бг (21 ммоль) р-нітрофеніл-Д-І-фукозиду в ЗОО0мл абсолютного метанолу змішують з 7,849 (31,5 ммоль) дибутилоксиду олова та протягом 2 год нагрівають зі зворотним холодильником. Потім згущують, залишок с осушують і розчиняють в ЗОО0мл ОМР. Після додавання 15,7мл метилиодиду пробу перемішують протягом 40год. (9 при 70"С. Розчинник видаляють у вакуумі, а залишок розчиняють в ЗОО0мл дихлорметану. Суспензію фільтрують, залишковий розчин знову згущують і піддають тонкошаровій хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1). Після згущення одержують З3815мг (6195) цільового продукту. 1.2) р-амінофеніл-3-О-метил-р-І -фукозид: З
З,81г (12,73 ммоль) р-нітрофеніл-3-О-метил-рД-І-фукозиду гідрують аналогічно прикладу 1.1. Вихід: Зг М) (8890). (ОС: дихлорметан/метанол 9:1 К.0,531. «в)
Приклад 1.3 р-амінофеніл-3-О-метил- о-І -фукозид -
Ме я ра (Се) но" ОК Мн, ч
Е | ші с ОоМе :з» Одержання аналогічне прикладу 1.2, виходячи із р-нітрофеніл- у-І-фукозиду. Вихід: 6395 в 2 стадії. (ОС дихлорметан/метанол 9:1 К,0,39).
Приклад 1.4
Ф р-амінофеніл-4-О-метил- Д-І -фукозид - Ме т о. мо пд о Не. ги ьо щі Меоб б Тон Мн, ї» Е он 1.4.а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-4-О-ацетил-р-І -фукозид: 1г (3,5 ммоль) р-нітрофеніл-р-І -фукозиду в 100мл абсолютного ТНЕ змішують з Зімг р-толуолсульфонової кислоти та 1134мг (7 ммоль) триетилортоацетату. Після перемішування протягом 15хв при 207С розчинник о відганяють у вакуумі. Залишок розчиняють в 5О0мл ТНЕ та Змл ОМЕ і змішують з 4165мкл бензилброміду, а також ко 21Омг гідриду натрію (60-95). Після перемішування протягом 1 год при 207С додають 1Омл 80-95 оцтової кислоти, згущують і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1). Після згущення 6о та сушіння одержують 123бмг (8595) цільового продукту. 1.4.5) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-ацетил-4-О-метил-р-І -фукозид: 1000Омг (2,39 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил-4-О-ацетил-р-І-фукозиду розчиняють в бОмл бензолу. Після додавання 2988мкл метилиодиду та 1109мг оксиду срібла пробу протягом 8 год нагрівають зі зворотним холодильником. Одержану суміш шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1) 65 відокремлюють на компоненти. Ізолюють 239мМг (2390) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-ацетил-4-О-метил- р-І -фукозиду поряд Кк) б5Змг (6390) ізомерного р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-метил-4-О-ацетил- р-І -фукозиду у вигляді білої твердої речовини. 1.4) р-амінофеніл-4-О-метил-р-І -фукозид: 224мг (0,52 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-ацетил-4-О-метил-р-І-фукозиду розчиняють в 20мл метанолу і змішують з З9О0мкл 1М розчину метилату натрію. Після перемішування протягом 16 год при 207С нейтралізують 80-96 оцтовою кислотою, згущують і розчиняють в дихлорметані. Органічну фазу промивають 1М розчином гідрокарбонату натрію, а також водою, осушують і згущують. Залишок розчиняють в 20мл метанолу та гідрують в присутності паладію на активованому вугіллі аналогічно прикладу 1.1. Після згущення продукт розчиняють у воді і ліофілізують. Одержують 119мг (88905) білої аморфної твердої речовини. (ОС: 70 дихлорметан/метанол 9:11 Ке0,38)
Приклад 1.5 р-амінофеніл-3-О-п-пропіл- р-І -фукозид
Ме /й о. мо
І СХ Фе м но Ї он Мн, в)
І
1.5.а). р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-п-пропіл-4-О-ацетил-р-І -фукозид: с
Аналогічно прикладу 1.4.5 із сполуки 1.4.3 за допомогою пропілийодиду одержують і хроматографічно відокремлюють ізомерні продукти 3- та 4-пропілування. Одержують і9) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-п-пропіл-4-О-ацетил- р-І -фукозид Кк) виходом 4990 поряд Кк) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-ацетил-4-О-п-пропіл- р-І -фукозидом з виходом 2995. 1.5.5) р-амінофеніл-3-О-п-пропіл-р-І -фукозид: «І
Синтез фракції 1 із прикладу 1.5.а) аналогічний прикладу 1.4. Вихід: 78956 (ОС дихлорметан/метанол 9:1 ю
О,42
Приклад 1.6 (ав) р-амінофеніл-З-дезокси- р -І -фукозид «-
Ме т, о Ко о ісе)
СХ ІФ но | он МН, « 1.6.а). р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-4-О-ацетил-р-І -гулозид: З с 1г (3,5 ммоль) р-нітрофеніл-р-І-фукозиду в Т0б0мл ТНЕ змішують з Зімг р-толуолсульфонової кислоти та "» 1134мг (7 ммоль) триетилортоацетату. Після перемішування протягом 15хв при 207"С розчинник відганяють у " вакуумі. Додають 100мл насиченого розчину хлористого водню в дихлорметані. Після 1Охв реакції продукт згущують та очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1). Одержують 79Змг (6590) цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол 97,5:2,5 К;-0,36)
Фо 1.6.5). р-нітрофеніл-3.6-ди-дезокси-З-хлор-р-І -гулозид: - З7омг (1,08 ммоль) р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-4-О-ацетил-р-І-гулозиду розчиняють в 25мМл о метанолу та змішують з 10 краплями 1М розчину метилату натрію. Через 20хв підкислюють оцтовою кислотою, згущують та розподіляють між 400мл дихлорметану та бОмл води. Органічну фазу осушують, згущують і (9) 50 осаджують із суміші дихлорметан/простий ефір. Одержують З15мг (9695) цільового продукту.
І» 1.6) р-амінофеніл-З-дезокси-р-І -фукозид:
З15мг (1,04ммоль) р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-р-І -гулозиду розчиняють в 40мл метанолу, змішують з 200мг паладію на активованому вугіллі та 290мкл триетиламіну і протягом 4 днів гідрують в атмосфері водню св при незначному надлишковому тискові. Суспензію фільтрують, промивають, згущують і продукт очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 97,5:2,5). Одержують 16бОмг (6595) дезокси-сполуки. (Ф) ІОС: дихлорметан/метанол 95:5 К,0,18)
ГІ Приклад 1.7 р-амінофеніл-3,4-ди-дезокси- Д-І -фукозид бо Ме, 9. хо
ОК й "МН, 65 400мг (1,16 ммоль) р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-4-О-ацетил-р-І-гулозиду (приклад 1.6б.а) розчиняють в 55мл метанолу, змішують з 32З3мкл триетиламіну і гідрують в атмосфері водню при незначному надлишковому тискові в присутності паладію на активованому вугіллі (1095). Після перемішування протягом 16 год при 2070 фільтрують через целіт, промивають, згущують та знову розчиняють в 100мл метанолу. Додають 1,5мл 1М розчину метилату натрію і перемішують 16 год при кімнатній температурі. Нейтралізують оцтовою кислотою,
Згущують і відокремлюють одержані продукти шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 97,5:2,5). Після згущення відповідних фракцій та осадження із суміші метанол/простий ефір одержують 120мг (4690) цільової сполуки (ОС: о дихлорметан/іметанол 95:5 КеО,31)| поряд з 77мг (2895) р-амінофеніл-З-дезокси- р-І -фукозиду (ОС: дихлорметан/метанол 95:5 К.0,181.
Приклад 1.8 р-амінофеніл-3,4-епокси- рД-І -фукозид
Ме, 0 Ще) т с щі ах он МН, 8Омг (0,23 ммоль) р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-З3-хлор-4-О-ацетил-р-І -гулозиду (приклад 1.6б.а) розчиняють в 10мл метанолу і змішують з 345мкл 1М розчину метилату натрію. Після оброблення ультразвуком протягом 1 год Підкислюють 80-96 оцтовою кислотою, згущують і хроматографують сумішшю дихлорметан/метанол 99:1. Після згущення суттєвих фракцій розчиняють в метанолі та гідрують на суміші паладій/активоване вугілля аналогічно прикладу 1.1. Одержують 4бмг (75965) цільової сполуки. РАВ-М5: т/е-238-М 1.
Приклад 1.9 р-амінофеніл-4-дезокси- р-І -фукозид с
Ме СС о ї он МН «І
Е Ї он во
Цю сполуку одержують за інструкцією Т. Ліндхорста та Дж. Тіма (Т. І іпарогві та 9.Тпіет), викладеною в
Сагропуаг. Кез. 209 (1991), 119, виходячи із р-нітрофеніл- Д--фукозиду через ж- р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензоїл-4,6-ди-дезокси-4-йодо- р-І -фукозид. (ОС: дихлорметан/метанол 90:10 КО, 3). «со
Приклад 1.10 р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил- р-І -фукозид
Ме п. о м о; «
Й од ІФ й - но7 У Тон мн, и? Е (в;
З
(22) - сон шк У 1.10.а). р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-р-І -фукозид: о 1г (3,5 ммоль) р-нітрофеніл-р-І -фукозиду та 1,Зг (5,2 ммоль) дибутилоксиду олова протягом 2 год нагрівають с 20 в БОмл метанолу зі зворотним холодильником. Розчин згущують, залишок розчиняють в 5Омл діоксану, змішують з 2мл метилового ефіру бромооцтової кислоти та 100мг йодиду тетрабутиламонію і протягом 16 год нагрівають
Т» зі зворотним холодильником. Розчинник випарюють, а продукт очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99:1). Після згущення відповідних фракцій та осадження із суміші метанол/простий ефір одержують 455мг (3795) цільової сполуки. 59 1.10) р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил-р-І -фукозид: (ФІ 282мг (0,79 ммоль) р-нітрофеніл-З-метоксикарбонілметил-р-І-фукозиду розчиняють в 20мл метанолу та змішують з 440мкл 2М розчину гідроксиду літію. Після перемішування 2 год при 207С кислим іонообмінником
ЗС108 встановлюють рН З і фільтрують. До фільтрату додають 250мг паладію на активованому вугіллі. Потім протягом 1,5 год гідрують з воднем при незначному надлишковому тискові, відокремлюють каталізатор і 60 промивають метанолом. Згущення, розчинення у воді та виморожування дає 86-95 вихід цільового продукту (212мг). (ОС: ацето-нітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К..0.24).
Приклад 1.11 р-амінофеніл-3-О-метоксикарбонілметил- р-І -фукозид: б5
Ме п о (о)
СХ но : он МН, й сСоОоМе 250мг (0,7 ммоль) р-нітрофеніл-3-метоксикарбонілметил-р-І-фукозиду (приклад 1.10.а) розчиняють в 20мл метанолу та 1,5 год гідрують з воднем над паладієм на активованому вугіллі при незначному надлишковому тискові. Каталізатор відокремлюють та промивають метанолом. Згущення, розчинення у воді та виморожування 75 дають 195мг (8590) цільового продукту. (ОС дихлорметан/метанол 9:1 К-0,43; ЕАВ-М5: т/е-328-М 11.
Приклад 1.12 р-амінофеніл-3-О-гідроксиетил- р-І -фукозид:
Ме п в) К (в) м" но Н он МН, (о; с ре 1 . о он 1.12.3). р-нітрофеніл-3-О-гідроксиетил-р-І -фукозид: З 1000мг (2,8 ммоль) р-нітрофеніл-3-метоксикарбонілметил-р-І-фукозиду розчиняють в суміші 1бО0мл ТНЕ та юю 4Омл води і змішують з 5Змг борогідриду натрію. Через 10хв розчинник випарюють і очищують залишок шляхом о тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 95:5). Після згущення відповідних фракцій, розчинення у воді та виморожування одержують З6б2мг (40965) цільового продукту. -- 1.12) р-амінофеніл-3-О-гідроксиетил-р-І -фукозид: со
Після гідрування 36б2мг сполуки із прикладу 1.12.а) аналогічно прикладу 1.1 одержують 27Омг (82965) цільового продукту. (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К,0,431.
Приклад 1.13 р-амінофеніл-2-О-карбоксиметил- р-І -фукозид: « зо Ме, 0. 0 8 с й що 2»
М но 7 о МН,
Е б он ссоон - 1.13.а) р-нітрофеніл-2-О-метоксикарбонілметил-р-І -фукозид: (ав) 250мг (0,88 ммоль) р-нітрофеніл-р-І-фукозиду розчиняють в 25мл абсолютного ТНЕ та Змл ОМЕ. Додають сл 50 8Омг (2,64 ммоль) 80-95 гідриду натрію і після 1Охв перемішування при 207С ЗбБмкл - бензилового ефіру бромоцтової кислоти. З 1Охв - інтервалами здійснюють З подальші додавання по ЗбОмкл бензилового ефіру ї» бромоцтової кислоти. Протягом ЗОхв перемішують і охолоджують доливанням метанолу. Через наступні 10хв підкислюють 5 мілілітрами 80-95 оцтової кислоти. Згущують і дистилюють з дихлорметаном. Очищення шляхом тонкошарової хроматографії починають з системою розчинника дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота в пропорції 90:10:11. Потім в такій же системі пропорцію підвищують до 80:20:22. Після згущення відповідних о фракцій залишки дигерують складним ефіром і одержують із ранішого елюату 157мг (4290) цільової сполуки. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 05:1:0,2 МК «:0,65). Із пізнішого елюата одержують ізомерну де 3-О-алкіловану сполуку (33905). (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,0,541). 1.13) р-амінофеніл-2-О-карбоксиметил-р-І -фукозид: бо Омилення та гідрування 150мг р-нітрофеніл-2-О-метоксикарбоніл-метил- р-І-фукозиду згідно з описаною в прикладі 1.10 методикою дає при 83-95 виході 109мг цільового продукту (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К;-0,35І.
Приклад 1.14.а
Синтез регіоїзомерних моносукцинільованих продуктів р-нітрофеніл-р-І-фукозиду: 1100мг (3,86 ммоль) бо р-нітрофеніл- Д-І -фукозиду розчиняють в 50мл піридину та змішують з 58Омг (5,79 ммоль) ангідриду бурштинової кислоти. Після 16 год перемішування при 20"С згущують і двічі дистилюють з дихлорметаном. Осаджують із суміші дихлорметан/простий ефір і одержують 1г невідокремлюваної суміші речовин, її розчиняють в суміші метанол/вода і змішують з 846бмг (2,6 ммоль) карбонату цезію. Випарюють розчинник і дистилюють з ЮОМЕ.
Залишок розчиняють в ОМЕ і змішують з 618мкл бензилброміду. Після оброблення ультразвуком протягом 1 год бромід цезію відфільтровують і фільтрат згущують. Розподіляють між 50О0мл ефіру оцтової кислоти та 5Омл води. Органічну фазу осушують та згущують. Хроматографічне відокремлення складових здійснюють в системі розчинника дихлорметан/метанол 99:1. Одержують:
Фракція 1: 87мг (4,896) р-нітрофеніл-3-О-(3-бензилоксикарбонілпропіоніл)- Д-І-фукозиду ІОС: 7/0 дихлорметан/метанол 95:5 К0,45).
Фракція 2: 2їмг (1,596) р-нітрофеніл-2-О-(3-бензилоксикарбонілпропіоніл)- Д-І-фукозиду ІОС: дихлорметан/метанол 95:5 К,0,341).
Фракція З: 190мг (10,395) р-нітрофеніл-4-О-(3-бензилоксикарбонілпропіоніл)- Д-І-фукозиду ОС: дихлорметан/метанол 95:5 К,0,281І.
Приклад 1.16 р-амінофеніл-4-О-сукциніл- Д-І -фукозид
Ме т о їх о 7 СХ ІФ о Ї он Мн, он о сч - о соон Щ
Фракцію З із прикладу 1.14.а гідрують аналогічно прикладу 1.14. Вихід: 125мг (8890) (|ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,0,631. «
Приклад 1.17 р-амінофеніл-3,4-ди-О-метил- Д-І -фукозид о
Ме, /0. хо о «- щі С ІФ що б оон мн,
Ме (8) "Ме « 70 1.17.а). р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-р-І -фукозид: 8 с 377мг (1,16 ммоль) сполуки із прикладу 1.1.4 розчиняють в ЗОмл абсолютного ТНЕ, послідовно змішують з з бо9Омкл бензилброміду та 52мг гідриду натрію перемішують при 20"С. Через 4 год та б год ще раз додають 6б9Омкл бензилброміду та гідриду натрію. Пробу обробляють аналогічно прикладу 1.1.5. Одержують 245мг (51965) цільової сполуки. б» 75 1.17.5) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-ди-О-метил-р-І -фукозид: 245мг (0,59 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-рД-І -фукозиду протягом 16 год перемішують - при 207С в 80-95 оцтовій кислоті. Згущують та розмішують залишок із сумішшю простий ефір/пентан. Після о відсмоктування та сушіння продукт, що залишився, розчиняють в 20мл абсолютного ТНЕ, додають 45мг 80-95 гідриду натрію і через 15хв вбризкують1бОмкл метилйиодиду. Після 20 год перемішування при 207С охолоджують о вливанням метанолу та льодяної оцтової кислоти, згущують і залишок розподіляють між дихлорметаном та
Т» водою. Органічну фазу осушують, згущують і очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 100:1). Після згущення та сушіння відповідних фракцій одержують 188мг (79905) цільового продукту. 1.17) р-амінофеніл-3,4-ди-О-метил-р-І -фукозид: 18Омг (0,45 ммоль) сполуки із прикладу 1.17.6 гідрують протягом 2 днів при кімнатній температурі в суміші (Ф) 15мл метанолу та Змл дихлорметану після додавання 5О0мг паладію на активованому вугіллі. Каталізатор ко відфільтровують, фільтрат згущують і очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 97,5:2,5). Одержують 8бмг (6890) цільової сполуки. (ОС: дихлорметан/метанол 95:5 К.20,211. во Приклад 1.18 р-амінофеніл-3-О-карбамоїлметил- р-І -фукозид б5
Ме пр В ах І)
СХ но оон Мн, г то сомн, 10Омг (0,305 ммоль) сполуки із прикладу 1.11 розчиняють в 1Омл метанолу і змішують з О,5мл 17-95 розчину гідроксиду амонію. Через 4 год згущують, розчиняють у воді і ліофілізують. Одержують 95мг цільової сполуки.
ІОС: ацетонітрил/вода 10:1 К.0,43І.
Приклад 1.19 р-амінофеніл-2-О-гідроксиетил- р -І -фукозид
Ме 7, щі АЙ о 7 (Х
У" то мн, он с (8) - ОН
Цю сполуку одержують, виходячи із 200мг (0,56 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-метоксикарбонілметил- Д-І-фукозиду (приклад 1.13.а) аналогічно прикладам 1.12.а та 1.12. «К
Вихід: 7бмг (45905 в 2 стадії) (ОС: дихлорметан/метанол 9:1 Ке0,2і. ою
Приклад 1.20 р-амінофеніл-3,6-ди-дезокси-З-хлор- Д-І -гулозид І ав
Ме па в; м о - (Се) м но он Мн, «
СІ - то 5Омг (0,165 ммоль) сполуки із прикладу 1.6.6 протягом 1 год гідрують в 5мл метанолу над паладієм на с активованому вугіллі. Відфільтровують від каталізатора промивають, згущують, розчиняють у воді і :з» ліофілізують. Одержують 45мг (89965) цільової сполуки. (ОС: дихлорметан/метанол 9:1 К,-0,35І.
Приклад 1.21 15 р-амінофеніл-у-І -рамнозид
Ф Ме п о) о о СТ о що ри но Н он МН, (9! ЕІ т, к
І» он
Цю сполуку одержують, виходячи із З0Омг р-нітрофеніл- о-І -рамнозиду (Зідта) аналогічно прикладу 1.1.
Вихід: 9695
Приклад 1.22 р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил- о-І -рамнозид
Ф) іме) 60 б5
Ме, 0 о і Фі "чі но7о тон Мн, й соон 1.22.а) р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-о-І -рамнозид 481мг (1,6З3ммоль) р-нітрофеніл-у-І -рамнозиду розчиняють в ЗОмл метанолу і змішують з 629мг (2,45 ммоль) дибутилоксиду олова. Протягом 2 год нагрівають зі зворотним холодильником, згущують і розчиняють в ЗОмл діоксану. Додають 85мг йодиду тетрабутиламонію та 950О0мкл метилового ефіру бромоцтової кислоти і протягом 16 год нагрівають зі зворотним холодильником. При необхідності ще раз додають їмл метилового ефіру бромоцтової кислоти та подовжують час реакції. Згущують і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії, р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-о-І -рамнозид елююють сумішшю дихлорметан/метанол 99:1 і після сушіння одержують 408мг (7090). (ОС: дихлорметан/метанол 95:5 К.-0,361. 1.223 р-Амінофеніл-3-О-карбоксиметил-о-І -рамнозид:
Синтез повністю аналогічний прикладу 1.10, виходячи із р-нітрофеніл-3-О-метокси-карбонілметил- о-І -рамнозиду. Одержують цільовий продукт з виходом 8095. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,0,261І. с
Приклад 1.23 р-амінофеніл- р-ЮО-галактопіранозид Ге) он о о « і Фе ій пи (ав) но "он мн, «- он (Се) р-нітрофеніл-Д-О-галактопіранозид (З,0г, 10 ммоль) розчиняють в суміші метанол/вода 1:1 (5Омл) і після додавання паладію на активованому вугіллі (1095 Ра, 200мг) протягом З год гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском. Суспензію через целіт фільтрують і фільтрувальний матеріал промивають « гарячою сумішшю метанол/вода 1:1 (10Омл). Згущення фільтрату у вакуумі та перекристалізація із метанолу дає безбарвні кристали (2,11г, 7895); ОС |метанолі: 0,62; (9179--39,52 (с-1,0/Н»О); т. пл.-1662С. З с Приклад 1.24 "» р-амінофеніл-2-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид п он
Фу о в) т но о ти сл 50 І 2 он сн
Т» з 1.24.а) р-нітрофеніл-6- О-трифенілметил-д-О-галактопіранозид:
Розчин р-нітрофеніл-дД-О-галактопіранозиду (9,0г, 30 ммоль), хлортрифенілметану (16,77, 60 ммоль) та
М,М-ди-метиламінопіридину (б09мг, 5 ммоль) в абсолютному піридині (10Омл) витримують 4 год при 60"С. Після о згущення у вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 2:1-53:2, за певних умов з 0,595 триетиламіном). Одержують безбарвні кристали (9,23г, 5790); ОС де Ідихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: К0,55; т. пл.-8276. 1.24.5). р-нітрофеніл-3,4-О-ізопропіліден-6- О-трифенілметил-р-О-галактопіранозид: бо Вказану вище сполуку (8,7г, 16 ммоль) змішують з диметоксипропаном (400мл) та каталітичною кількістю (5)-камфоро-(ІО-сульфонової кислоти (40Омг, 1,7 ммоль). Через 1 годину при кімнатній температурі припиняють реакцію шляхом додавання триетиламіну (24Омл, 1,7 ммоль) та згущують у вакуумі. Шляхом тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 2:1| одержують безбарвну піну (6,2г, 6690); ОС |петролейний ефір/етилацетат 1:11: Б.0,46; (9120--42,12 (с-0,94/СН»оСІ»). бо 1.24.с). р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4-О-ізопропіліден-6-О-трифенілметил-д-О-галактопіранозид:
Розчиняють сполуку 1.24.65 (5,83г, 10 ммоль) в диметилформаміді (10Омл) та змішують з метилйодидом (2,5мл, 40 ммоль) та порціями з 80-96 суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі (450мг, 15 ммоль). Через 2 год при кімнатній температурі припиняють реакцію додаванням краплями метанолу (1Омл) та згущують у вакуумі. Залишок розчиняють в дихлорметан (1000мл) і розчин розмішують з водою (500мл). Органічну фазу осушують сульфатом магнію (50г) згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 12:1-58:1Ї. Одержують безбарвну піну (4,72г, 799); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:11; Ке0,72; (о1790--35,72 (с-1,0/ СНЗОН). 1.24.а4) р-нітрофеніл-2-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Розчин одержаної вище сполуки (4,48г, 7,5 ммоль) в дихлорметані (200мл) змішують з 99-95 трифтороцтовою кислотою (2Омл) і З год перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 5:1-5»52:1). Одержують безбарвні кристали (1,09г, 4695); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: К-0,42; т. пл.-17776. 1.24) р-амінофеніл-2-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.24.а (946бмг, З ммоль) розчиняють в метанолі (5Омл) і після додавання води (0,5мл) та основного нікелю Ренея (близько 200мг) протягом 2 год гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском.
Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (1ООмл).
Згущення фільтрату у вакуумі дає коричнювату піну (579мг, 6890); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: Бе0,28; (с179--39,32 (с-0,15 / СНЗОН).
Приклад 1.25 р-амінофеніл-3-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид он о о то ї Й 15; но он МН, « о не й 1.25.а) р-нітрофеніл-3-О-метил-р-О-галактопіранозид: і
Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (1,5г, 5,0 ммоль) в абсолютному метанолі (40мл) змішують з їж 7
З5 дибутилоксидом олова (1,87г, 7,5 ммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником. Через З год згущують У. «(о вакуумі і залишок протягом 1 год осушують у вакуумі. Потім розчиняють діоксаном (40мл), одержаний розчин змішують з метил йодидом (1,9мл, 30 ммоль) і протягом 16 год перемішують пробу при 100"С у водяній бані.
Потім розчинник відганяють у вакуумі і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 2:1 »етилацетат!| Одержують безбарвні кристали (1,32г, 84960); ОС « |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: К,0,34; т. пл.-196752; Іо129--53,32 (с-1,0/СНЗОН). - с 1.25) р-амінофеніл-3-О-метил-р-О-галактопіранозид: и Вказану вище сполуку (946мг, З ммоль) відновлюють і оброблюють як описано в прикладі 124. Одержують коричнюваті кристали (б5бмг, 77950); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,2)1. 0,21; т. пл.-19670; (9170---25,22 (с-1,0/СНЗОН).
Приклад 1.26 б р-амінофеніл-4-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид, ацетат - он ї-о ще їз» А с ' тя, бо Гон Мн, он 1.26.а) р-нітрофеніл-3-О-бензил-Д-О-галактопіранозид: о Розчин р-нітрофеніл-З-О-галактопіранозиду (1,5г, 5,0 ммоль) в абсолютному діоксані (4О0мл) змішують з їмо) дибутилоксидом олова (1,87г, 7,5 ммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником. Через З год одержаний розчин змішують з бензилбромідом (3З,бмл, ЗО ммоль) і перемішують пробу ще 48 год зі зворотним 60 холодильником. Потім відганяють розчинник у вакуумі і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 2:1.51:11). Одержують безбарвні кристали (1,58г, 8195); ро
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: Ке0,69; т. пл.-12776. 1.26.) р-нітрофеніл-3-О-бензил-4,6-О-ізопропіліден-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.26.а (6,26бг, 16 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 11.24.65. Після хроматографії бо |петролейний ефір/етилацетат 5:1.53:1)|) одержують безбарвну піну (6,54г, 9595); ОС |петролейний ефір/етилацетат 1:11: Б0,34; Іс379--38,92 (с-1,0 / СНЬСІ») 1.26.) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-4,6-О-ізопропіліден-д-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.26.6 (4,31г, 10 ммоль) розчиняють в диметилформаміді (10Омл) і змішують з бензилбромідом (12мл, 100 ммоль) та порціями з 80-95 суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі (45Омг, 15 ммоль). Через 2 год при кімнатній температурі реакцію припиняють додаванням краплями метанолу (1Омл) і згущують у вакуумі. Залишок розчиняють в дихлорметані (100Омл) і розчин розмішують з водою (50О0мл). Органічну фазу осушують сульфатом магнію (5О0г), згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії
І(петролейний ефір/етилацетат 20:1-515:1-510:1). Одержують ще не очищену безбарвну маслянисту рідину 70. (2,72г, 5290); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:1|: К,0,62. 1.26.4) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (2,6г, 5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.а. Після згущення у вакуумі та випарювання залишку діетиловим ефіром одержують безбарвні кристали (805мг, 3390); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:1|: К-О,23; т. пл.-16070. 1.26.е) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-6-О-трифенілметил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.26.а (722мг, 1,5 ммоль) триетилюють як описано в прикладі 1.24.а. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 15:1.510:1.55:1)| одержують безбарвну піну (88О0мг, 8190); ОС (петролейний ефір/етилацетат 2:11: К0,79; (9120--25,32 (с-0,3 / СНоСІ»). 1.26.) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-4-О-метил-6-О-трифенілметил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (724мг, 1 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/(етилацетат 10:1. 55:11 одержують безбарвну піну (6б2мг, 90965); ОС (петролейний ефір/етилацетат 5:11: Б0,66, (012О--38,72 (с-0,2/СНоСі»). 1.26) р-амінофеніл-4-О-метил-р-О-галактопіранозид, ацетат: сч
Вказану вище сполуку (590мг, 0,8 ммоль) розчиняють в 90-95 оцтовій кислоті (5Омл) і після додавання паладію на активованому вугіллі (1095 Ра, 200мг) гідрують протягом 16 год в атмосфері водню під незначним і) надлишковим тиском. Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (100мл). Згущення фільтрату у вакуумі та осадження залишку із суміші діетиловий ефір/петролейний ефір дає безбарвні кристали (253Змг, 9290); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К,-0,12. «г зо Приклад 1.27 р-амінофеніл-6-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид що) о7 з о «- в) о л (Се) но тон мн, « он - с "» 1.27.а) бензиліегипд сполуки 1.24.р: " Сполуку 1.24.5 (5,84г, 10 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1.26.с. Після тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 15:1-512:1-55:1 »етилацетат, при необхідності 0,595 триетиламіні одержують дві фракції: б Фракція 1: р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-6-О-трифенілметил-Д-О-галактопіранозид; -й жовтувата піна (1,71г, 25965); ОС |петролейний ефір/етилацетат 2:11: Б.0,72; (о129--8,12 (с-1,0/СНьСІ»). о Фракція 2: р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-р-О-галактопіранозид; жовтувата масляниста рідина (8Обмг, 1995); ОС |петролейний ефір/етилацетат 2:1): Б 50,45; (ЩО-2,8г о (с-1,2/СНЗОН).
Т» 1.27.5). р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-6-Ю-метил-р-О-галактопіранозид:
Фракцію 2 із прикладу 1.27.а (7/77мг, 1,8 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1,24.с. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 10:1-58:1|) одержують коричнювату маслянисту рідину (73Омг, 91965); ОС (петролейний ефір/етилацетат 2:11: Бу-0,54; |5120--11,62 (с- 1,1/СН»Сі»). о 1.27.с) р-нітрофеніл-2-О-бензил-6-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (668мг, 1,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.а. З ення фільтрат у вищ уку р р р ГУЩ рату У де вакуумі та випарювання залишку з невеликою кількістю діетилового ефіру після охолодження до кімнатної температури дає світлобежеві кристали (388мг, 6490); ОС (|петролейний ефір/етилацетат 1:1); 0,15; т. 60 пл.-14376. 1.27) р-амінофеніл-6-О-метил-р-О-галактопіранозид
Сполуку 1.27.с (324мг, 0,8 ммоль) протягом 16 год відновлюють як описано в прикладі 1.24. Після згущення фільтрату у вакуумі та випарювання залишку з невеликою кількістю діетилового ефіру одержують бежеві кристали (184мг, 8195); ОС (етилацетаті|: К,0,05; т. пл.-11572 (розклад.). 65 Приклад 1.28 р-амінофеніл-2,3-ди-О-метил- В-ЮО-галактопіранозид он (в) о що не но о мн, 7 0 сн, нс. 1.28.а) ізопропіліденігипу моп р-нітрофеніл-З-О-галактопіранозид:
Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (7,5г, 25 ммоль) в абсолютному ацетоні (1000мл) змішують з 75 безводною толуолсульфоновою кислотою (500мг). Протягом ЗОхв при нормальному тискові відганяють ацетон (250мл) і зразу ж нейтралізують додаванням карбонату калію (50Омг). Після згущення у вакуумі залишок розмішують з діетиловим ефіром (100Омл). Відфільтровують, згущують фільтрат і очищають шляхом тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 2:1-51:1-53:2). При цьому в осад випадають дві фракції:
Фракція 1: р-нітрофеніл-3,4-О-ізопропіліден- Д-ЮО-галактопіранозид; безбарвна піна (3,74г, 4490); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: Ке0,59; (0420-5422 (с-0,38/СНЗОН).
Фракція 2: р-нітрофеніл-4,6-О-ізопропіліден- р-О-галактопіранозид; безбарвна піна (4,3г, 5090); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,2|: Ке3,54; сч
Іо179--81,02(с-0,31/СНЗОН). (8) 1.28.5). р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-4,6-О-ізопроптіден-дД-О-галактопіранозид:
Фракцію 2 із прикладу 1.28.а (4,1г, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 5:1-521) одержують безбарвну піну (2,93г, 6696); ОС (петролейний «ж ефір/етилацетат 1:11: Б0,42; (41420--52,62 (с-0,34/СНЗОН). 1.28.с) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид: о
Вказану вище сполуку (2,77г, 7,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.4. Через 1 год згущують (2 при кімнатній температурі у вакуумі і залишок протягом 1 год сушать у вакуумі. Шляхом дигерування із сумішшю - діетиловий ефір/петролейний ефір 1:1 (100мл) одержують безбарвні кристали (1,11г, 4595); ОС (етилацетаті:
КЕО,24; т. пл.-15670. (се) 1.28) р-амінофеніл-2,3-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.38.с (989мг, З ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Одержують безбарвну маслянисту рідину (З9бмг, 4490); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21; 20,50; Іод79--19,42 (с-0,16/СНЗОН). «
Приклад 1.29 р-амінофеніл-2,4-ди-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид о) с он ;» (8) о) (22) ну що - в; о МН, о оно сн, с 50 1.29.а) триетилювання сполуки 1.26.а:
Я» Сполуку 1.26.3 (11,7г, 30 ммоль) триетилюють як описано в прикладі 11.24.43. Після тонкошарової хроматографії |(петролейний ефір/етилацетат 10:1. 57:1. 5521, при необхідності з 0,595 триетиламіном)| одержують два продукти:
Фракція 1: трифенілметил-2-О-(р-нітрофеніл)-3-О-бензил-6-О-трифенілметил-р-О-галактопіранозид,
ГФ) безбарвна піна (8,5г, 3295); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 2:11: Б0,68; (с179--н42,82 (с-1,0/СН»СІ»). юю Фракція 2: р-нітрофеніл-3-О-бензил-6-О-трифенілметил- р-Ю-галактопіранозид; безбарвна піна (9,0г, 4795); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 2:11: Бе0,22; (0170--22,67 (с-1,03/СН»СІ). во 1.29.5). р-нітрофеніл-2,4-ди-О-метил-3-О-бензил-6-О-трифенілметил-р-О-галактопіранозид:
Фракцію 2 із прикладу 1.29.а (7,бг, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії (|петролейний ефір/(етилацетат 15:1-510:1| одержують безбарвну піну (7,07г, 89965); ОС (петролейний ефір/етилацетат 2:11: К0,79; (4120--35,82 (с-1,09/СНЗОН). 1.29.с) р-амінофеніл-2,4-ди-О-метил-3-О-бензил-ВД-О-галактопіранозид: 65 Вказану вище сполуку (6б,0г, У ммоль) протягом 48 год гідрують як описано в прикладі 1.26. Одержують безбарвні кристали (1,39г, 4095); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11: К0,20; т. пл.-14876.
1.29) р-амінофеніл-2,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.29.с (779мг, 2 ммоль) протягом 5 днів гідрують як описано в прикладі 1.24. Після випарювання об'єднаних фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (2х5Омл) одержують зеленуваті
Кристали (391мг, 6595); ОС (етилацетат|: КеО,16; т. пл.-2607С (розклад.).
Приклад 1.30 р-амінофеніл-2,6-ди-О-метил- Д-О-галактопіранозид о7 сн» о) о. 75. НО й МН, оно сн, 1.30.а). р-нітрофеніл-2,6-ди-О-метил-3,4-О-ізопропіліден-р-О-галактопіранозид:
Фракцію 1 із прикладу 1.28.а (4 1г, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 10:1. 58:1.55:1| одержують безбарвну маслянисту рідину (3,25г, 7390), ОС |петролейний ефір/етилацетат 1:1): К-0,65. 1.30.Б) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (2,77г, 7,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 11.24.04. Після тонкошарової Га Хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 2:1) одержують безбарвні кристали (1,63г, 6695); ОС (етилацетаті: о
Ече0,31; т. пл.-22276. 1.30) р-амінофеніл-2,6-ди-О-метил-р-ЮО-галактопіранозид:
Сполуку 1.30.р (989мг, З ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Одержують безбарвну маслянисту рідину (597мг, 66965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Б0,56; (4129--53,127 (с-0,49/СНЗОН). «І
Приклад 1.31 р-амінофеніл-3,4-ди-О-метил- В-ЮО-галактопіранозид, ацетат он о «- в) і) (Се)
НУс., що 1 о он Мн, снсооН « н с7? ші с 3 "» 1.91.а). р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-О-ізопропіліден-д-О-галактопіранозид: " Фракцію 1 із прикладу 1.28.а (41г, 12 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1.26.с. Після тонкошарової хроматографії |(петролейний ефір/етилацетат 6:1|) одержують жовтувату маслянисту рідину (5,3г, 8590); ОС
Іетилацетат/петролейний ефір 2:11: Бе0,76; |(сЩ2О---8,82 (с-1,2/СНЗОН). б 1.31.5) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-р-О-галактопіранозид; - Вказану вище сполуку (4,69г, 9 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.4. Через ЗОхв згущують у о вакуумі при кімнатній температурі і залишок протягом 1 год сушать у вакуумі. Шляхом перекристалізації із етанолу одержують безбарвні кристали (2,89г, 67965); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11). КеО042; т. 1020 оплеі332с; |я2О--64,92 (с-1,0/ СНЗОН).
І» 1.31.с) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-ди-О-метил-ВД-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (2,4г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після перекристалізації із суміші етанол/п-гексан одержують безбарвні кристали (1,74г, 69965); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:11;
ГЕ О,74; т. пл.-14976. 1.31) р-амінофеніл-3,4-ди-О-метил-р-ЮО-галактопіранозид, ацетат: (Ф. Сполуку 1.31.с (1,52г, З ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.26. Одержують безбарвні кристали (6б4мг, ко 6296); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: Ке0,47; т. пл.-1407С (розклад.).
Приклад 1.32 во р-амінофеніл-3,6-ди-О-метил- В-ЮО-галактопіранозид б5 сн ревдк! о о) но он Мн, ро) нс 1.32.а). р-нітрофеніл-3-О-метил-6-О-(трет-бутилдіметилсиліл)-д-О-галактопіранозид:
Розчин сполуки 1.25.а (1,58г, 5 ммоль) в диметилформаміді (15Омл) змішують з імідазолом (1г, 15 ммоль) та 75 хлоридом трет-бутилдіметилсилілу (1,25г, 8 ммоль) і протягом 24 год перемішують при кімнатній температурі.
Потім реакцію припиняють шляхом додавання води (100мл). Розводять дихлорметаном (100Омл), органічну фазу промивають водою (2х1000мл), сушать сульфатом магнію (20г) та згущують у вакуумі. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 15:1-510:1-55:1| одержують неочищену жовтувату піну (826бмг, 3895), ОС (етилацетаті: Б0,59; |4179--56,32 (с-1,0 / СНоСІ»). 1.32.Б) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3-О-метил-6-О-(трет-бутилдіметилсиліл )-Д-Ю-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (77Змг, 1,8 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1.26.с. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/(етилацетат 30:1-55:1| одержують безбарвну піну (810мг, 74965); ОС
Іпетролейний ефір/етилацетат 5:1|: К-0,58. 1.32.с) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3-О-метил-р-О-галактопіранозид: с
Сполуку 1.32.6 (732мг, 1,2 ммоль) розчиняють в тетрагідрофурані (бмл) і при ОС змішують з 1М-розчином.ї (3 фториду тетрабутиламонію в ТНЕ (2,4мл). Протягом 40хв перемішують при кімнатній температурі, а потім згущують у вакуумі. Після тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 5:1. 53:1-52:1| одержують безбарвні кристали (512мг, 8690); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:1): К;-0,36; т. пл.-17776. - 20 1.32.4). р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3,6-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (44бмг, 0,9 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової т) хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 20:1. 510:1. 58:1| одержують безбарвну маслянисту рідину (401мг, о 8790); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:1|: Ке70; Іо129--56,52 (с-0,96 / СНеСІ»). 1.32) р-амінофеніл-3,6-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид: --
Сполуку 1.32.а (357мг, 0,7 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після випарювання об'єднаних (Се) фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (207мг, 9990); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:1); К-0,02, т. пл.-22807С (розклад.).
Приклад 1.33 « р-амінофеніл-4,6-ди-О-метил- В-ЮО-галактопіранозид «т а с (8) ів Б ,» ,0 (0;
Ме, НС. п, фії (8) он А шк 2 о он с 20 1.33.а) р-нітрофеніл-2.3-ди-О-бензил-4,6-ди-О-метил-рД-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.26.а (2,4г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії
Т» І(петролейний ефір/етилацетат 5:1-53:1|) одержують безбарвні кристали (1,89г, 7490); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:1|: К-О,76. т. пл.-10070. 1.33) р-амінофеніл-4,6-ди-О-метил-р-О-галактопіранозид: 59 Сполуку 1.33.а (1,53г, З ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Одержують безбарвні кристали (890мг,
ГФ) 9996); ОС |метанол/етилацетат 1:1|: 520,71; т. пл.-1807С (розклад.). 7 Приклад 1.34 р-амінофеніл-2,3,4-три-О-метил- дД-Ю-галактопіранозид 60 б5 он о іо) не Я о о мн, о сн 70 не з 1.34.а) р-нітрофеніл-2,3,4-три-О-метил-6-О-трифенілметил-д-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.24.а (1,63г, З ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії
І(петролейний ефір/етилацетат 5:1-53:1| одержують безбарвну піну (1,24г, 7195); ОС (|петролейний 75 ефір/етилацетат 1:11: Бе0,54; (9120--53,62 (с-0,3 / СНЗОН). 1.34.5). р-нітрофеніл-2,3,4-три-О-метил-В-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (1,17г, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.а. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 3:1-52:1| одержують безбарвні кристали (468мг, 6895); ОС
Іпетролейний ефір/етилацетат 1:11; 2 веб; т, пле1042С; (од20--68,22 (с-0,47 / СНЗОН). 1.34) р-амінофеніл-2,3,4-три-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.34.6 (34Змг, 1 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24.
Одержують бежеві кристали (224мг, 7195); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21; - -44до с
Ече0,67; т. пл.-13870.
Приклад 1.35 о р-амінофеніл-2,3,6-три-О-метил- Д-ЮО-галактопіранозид сн - З . о « о. 0 во «в) , «- но "о ї МН, (Се) (6; сн й не й « 1.35.а) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-метил-р-О-галактопіранозид: 7 й й .
Сполуку 1.30.6 (2,63г, З ммоль) селективно метилюють як описано в прикладі 1.25.а. Після тонкошарової с хроматографії |(петролейний ефір/етилацетат 5:1.52:1| одержують коричнювату маслянисту рідину (890мг, 3296); :з» ОС (етилацетаті: Б-0,37, (с129--63,32 (с-0,9 / СНоСІ»). 1.35) р-амінофеніл-2,3,6-три-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (858мг, 2,5 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Одержують бежеву піну (є) (519мг, 6696); ОС |(етилацетаті: Б-0,23; (9170--34,52 (с «0,86 / СНЗОН). з Приклад 1.36 р-амінофеніл-2,4,6-три-О-метил- ВД-Ю-галактопіранозид о сн, с о
Т» о ів) зв НС о т не (8; МН
Ф) | 2 тю он сн, во 1.36.а) р-нітрофеніл-2,4,6-три-О-метил-3-О-бензил-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.26.а (1,96г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії
І(петролейний ефір/етилацетат 10:1.58:1|) одержують безбарвні кристали (1,47г, 6895); ОС (петролейний ефір/етилацетат 2:1|: К,О,46; т. пл.-16470. 1.36) р-амінофеніл-2,4,6-три-О-метил-р-О-галактопіранозид: 65 Вказану вище сполуку (1,3г, З ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.26. Одержують безбарвні кристали (642мг, 6890); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11):
Ече0,12; т. пл.-1477С (розклад.).
Приклад 1.37 р-амінофеніл-3,4,6-три-О-метил- д-Ю-галактопіранозид 9 сн - 3 о о о н .
Но що о: он Мн, о ра не 1.37.а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-р-О-галактопіранозид:
Фракцію 1 із прикладу 1.27.а (1,17г, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.24.4. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 3:1-52:1| одержують безбарвні кристали (468мг, 68965); ОС |петролейний ефір/етилацетат 1:11: Б 0,12; т. пл.-1042С; (9420--68,22 (с-0,47 / СНЗОН). 1.37.5) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4,6-три-О-метил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (З391мг, 1 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 10:1-55:1| одержують світложовті кристали (З0Змг, 7090); ОС
Іетилацетаті: К- 0,81; (0479--76,52 (с-1,1 / СНоСІ»). с 1.37) р-амінофеніл-3,4,6-три-О-метил-р-О-галактопіранозид: Ге)
Сполуку 1.37.6 (26Омг, 0,6 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Одержують бежеві кристали (161мг, 8696); ОС (етилацетаті): К,0,20; т. пл.-13276.
Приклад 1.38 « зо р-амінофеніл-2,3,4,6-тетра-О-метил- р-О-галактопіранозид сн, ю о о о о - ! (Се) н С що 7 ", о 9 Мн, 705 сн, нс ші с 1.38.а) р-нітрофеніл-2,3,4,6-тетра-О-метил-р-О-галактопіранозид: :з» р-нітрофеніл-Д-ЮО-галактопіранозид (904мг, З ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії (|петролейний ефір/етилацетат 8:1-56:1.54:1.52:1| одержують безбарвну, Ввоскоподібну тверду речовину (63Змг, 5995); ОС (етилацетаті: К.0,67; І 9--55,72 (с-0,9 / СНІ»).
Ге») 1.38) р-амінофеніл-2,3,4,6-тетра-О-метил-р-ЮО-галактопіранозид: -з Сполуку 1.33.а (53бмг, 1,5 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після випарювання об'єднаних фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (412мг, (ав) 8496); ОС |(етилацетат): К.-0,42, т. пл.-2047С (розклад.).
Приклад 1.39 р-амінофеніл-у-ЮО-маннопіранозид їз он оо м
Ф) й я їх) но : он Мн, во Он р-нітрофеніл-у-ЮО-маннопіранозид (3,0г, 10 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.23. Переосадження із суміші метанол/діетиловий ефір дає безбарвні кристали (2,03г, 7595), ОС |метанол): К.0,69; дЩ2б---102,72 (с-1,0/ Н2О). т. пл.-16176.
Приклад 1.40 бо р-амінофеніл-3-О-метил-у-ЮО-маннопіранозид он о. о и г но он Мн, (о) - сн, 1.40.а) р-нітрофеніл-6-О-трифенілметил-3-ЮО-маннопіранозид: р-нітрофеніл-2-О-маннопіранозид (З,0г, ТОммоль) триетилюють як описано в прикладі 1.24.а. Одержують 75 безбарвні кристали (4,35г, 8095); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2596) 15:3:0,21: В0,52; (щЩО---104,02 (с-1,0 /
СНЗОН); т. пл.-102-10426. 1.40.65). р-нітрофеніл-3-О-метил-6-О-трифенілметил-4-О-маннопіранозид:
Вказану вище сполуку (2,72г, 5 ммоль) перетворюють метилиодидом (2мл, 30 ммоль) як описано в прикладі 1.26.а. Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 2:1| та осадження із суміші етанол/п-гексан одержують безбарвні кристали (1,83г, 6695); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21:
В-0,68; (94129---106,42 (с-1,0 / СНЗОН); т. пл.-1042С. 1.40) р-амінофеніл-3-О-метил-у-ЮО-маннопіранозид:
Сполуку 1.40.р (1,4г, 2,5 ммоль) розчиняють в метанолі (5Омл) і після додавання паладію на активованому вугіллі (1095 Ра, З0Омг) протягом 24 год гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском. с ов Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (10Омл). Після згущення фільтрату у вакуумі залишок розчиняють водою (50мл), відфільтровують і фільтрат ліофілізують. о
Одержують коричнювату аморфну речовину (709мг, 9990); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21:
В0,33; (912О--ж92,92 (с-1,1 / СНЗОН).
Приклад 1.41 чЕ р-амінофеніл-2,3-ди-О-метил-о-О-маннопіранозид ою он «в) о. мо - (Се) хо но ? щН,. о не ч не - с 1.41.а) р-нітрофеніл-4,6-О-бензиліден-о-ЮО-маннопіранозид: :з» Розчин р-нітрофеніл-7у-О-маннопіранозиду (6б,0г, 20 ммоль) в диметилформаміді (120мл) змішують з бензальдегід-ди-метилацеталом (3,2мл, 21,4 ммоль) та 54-95 розчином тетрафторборної кислоти в діетиловому ефірі (2,7мл, 20 ммоль). Протягом 5 год перемішують при кімнатній температурі, потім припиняють реакцію
ФО шляхом додавання триетиламіну (2,8мл, 20 ммоль) та згущують у вакуумі. Після тонкошарової хроматографії (толуол- утолуол/етанол 20:1| одержують безбарвні кристали (6,48г, 8395); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) - 15:3:0,21: Б0,82, (с12б---170,72 (с-1,0 / СНоСІ»); т. пл.-1162С. ав! 1.41.5). р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-4,6-О-бензиліден-о-О-маннопіранозид: сл 50 Вказану вище сполуку (3,9г, 10 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Після тонкошарової хроматографії |(петролейний ефір/етилацетат 20:1.57:1| та осадження із суміші етилацетат/п-гексан одержують їз» безбарвну піну (3,2г, 7796); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11: Бу-0,67; |(9120---167,32 (с-1,05 / СНЗОН). 1.41) р-амінофеніл-2,3-ди-О-метил-5-Ю-маннопіранозид:
Сполуку 1.41.р (1,25г, З ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.26. Після тонкошарової хроматографії 22 |етилацетат/петролейний ефір 2:1-»етилацетат, при необхідності з 0,595 триетиламіном| одержують
Ф! червонувато-коричневу піну (480мг, 5395), ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: КеО,31; (де нВ83,6" юю (с-0,76 / СНЗОН).
Приклад 1.42 60 б5 он о о ,. не з, но он Мн,
Ві оо сн, 15 1.42.а) р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-д-О-галактопіранозид
Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (7,53г, 25 ммоль) в абсолютному діоксані (18О0мл) змішують з дибутилоксидом олова (9,3г, 37,5 ммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником. Через 4 год одержаний розчин змішують з метиловим ефіром бромоцтової кислоти (8,3мл, 90 ммоль) та йодидом тетрабутиламонію (9,25г, 25 ммоль) і перемішують пробу протягом наступних З год зі зворотним холодильником. Потім розчинник 20 відганяють у вакуумі і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 50:1.520:1|. Одержують поряд з деякими побічними продуктами сполуку 1.42.а у вигляді безбарвних кристалів (4,05г, 43965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Ру0,54; (9129--62,02 (с-1,0/СНЗОН);т. пл.-1762С. 1.42) р-амінофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид: сч 25 Сполуку 1.42.а (3,73г, 10 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після осадження із суміші етанол/п-гексан одержують безбарвні кристали (2,98г, 8795), ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21; і)
В-0,39; (4120--36,32 (с-1,07 / СНЗОН); т. пл.-1552С.
Приклад 1.43 он Що в 30 " ів) (9) (в) «в) «- "; зб НО он МН, Те) о / 40 Х о" Ма о) с ч» 1.43.а) р-нітрофеніл-3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозид, натрієва сіль: " Розчин сполуки 1.42.а (3,73г, 10 ммоль) в метанолі (10Омл) змішують з розчином гідроксиду натрію (40Омг, ммоль) у воді (бмл) і протягом 2 год перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год сушать у вакуумі, а потім змішують з етанолом (10Омл). Кип'ятять Бхв зі зворотним ме) холодильником, фільтрують після охолодження у льодяній бані і одержують безбарвні кристали (3,66бг, 9695); ОС - Іметанолі: К-0,62; (9429--50,02 (с-1,0 / СНЗОН); т. пл.-180-1852С. 1.43) р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозид, натрієва сіль: о Вказану вище сполуку (3,05г, 8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після виварювання з етанолом 1 50 (Бомл) одержують безбарвні кристали (2,03г, 7295); ОС |метанолі|: Р0,70, (с).О--22,47 (с-1,0 / СНЗОН), т. пл.-180-18276. с»
Приклад 1.44 р-амінофеніл-3-О-карбамоїлметил- р-О-галактопіранозид
Ф) іме) 60 б5 он (е) о
Фе б но "он МН, о...
Х ол ск, т 1,44.а) р-нітрофеніл-3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозид:
Розчин сполуки 1.42.а (37Змг, 1 ммоль) в метанолі (ЗОмл) змішують з 25-96 водним розчином аміаку (1Омл) і протягом 15хв. Перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год осушують у вакуумі, а потім змішують з етанолом (ЗОмл). Кип'ятять 5хв зі зворотним холодильником, фільтрують після охолодження у льодяній бані і одержують безбарвні кристали (ЗОбмг, 85965); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: Ке0О,14; Іод79--41,72 (с-1,0/ СНЗОН); т. пл.-2297С (розклад.). 1.44) р-амінофеніл-3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (287мг, 0,8 ммоль) як описано в прикладі 1.24 гідрують. Після осадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні кристали (207мг, 7990); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) с 15:3:0,21: Ке 0,10; т. пл.-2057С (розклад.). о
Приклад 1.45 р-амінофеніл-3-0-(М-метил-карбамоїлметил)- Д-ЮО-галактопіранозид
Он о. ,0 З ю з | «в) г но он Мн, - о, (Се)
Х сн и Кк! (в) М ч | ші с н й 1.45.а). р-нітрофеніл-3-0-(М-метил-карбамоїлметил)-дД-О-галактопіранозид "» Розчин сполуки 1.42.а (37Змг, 1 ммоль) в метанолі (ЗОмл) змішують з 30-96 водним розчином метиламіну (1Омл) і 2 год перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год сушать у вакуумі, а потім перекристалізують із етанолу. Одержують безбарвні кристали (372мг, 10090); ОС (22) Ідихлорметан/ метанол/аміак (2596) 15:3:0,21: Б.0,33; (0120--36,72 (с-1,0 / СНЗОН); т. пл.-2052С. - 1.45) р-амінофеніл-3-0-(М-метил-карбамоїлметил)-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.45.а (298мг, 0,8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після осадження із суміші («в метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні кристали (18О0мг, 6690); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) с 20 15:3:0,2); КеО,16; т. пл.-23976.
Приклад 1.46 ї» р-амінофеніл-3-0-(М-пропіл-карбамоїлметил)- дД-О-галактопіранозид
Ф) іме) 60 б5 он (о) (о; й б но он Мн, (в)
І Х с о се Н,
І н 1.46.а). р-нітрофеніл-3-0О-(М-пропіл-карбамоїлметил)-Д-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.42.а (37Змг, 1 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.45.а п-пропіламіном (82Змкл, 10 ммоль). Після згущення у вакуумі залишок осаджують із суміші етанол/п-гексан. Одержують безбарвні кристали (34Омг, 85965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Ру0,49; (9429--32,42 (с-1,0/ СНЗОН); т. пл.-1552С. 1.46) р-амінофеніл-3-0О-(М-пропіл-карбамоїлметил)-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.46.а (32О0мг, 0,8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після осадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні кристали (188мг, 6390); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: КЕО,31; т. пл.-154760.
Приклад 1.47 с р-амінофеніл-3-0-(М-бутил-карбамоїлметил)- Д-ЮО-галактопіранозид Ге) он о (6) « 30 . й ю о ' н он МН, о г8) -
АХ (Се) о мли « й - 1.47.а) р-нітрофеніл-3-0-(М-бутил-карбамоїлметил)-рД-О-галактопіранозид: с Сполуку 1.42.а (37Змг, 1 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.45.4 п-бутиламіном (90Омкл, 10 "з ммоль). Після згущення у вакуумі залишок осаджують Із суміші етанол/п-гексан. Одержують безбарвні кристали (41Змг, 10095); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2596) 15:3:0,21: Бе0,51; (012О--26,82 (с-1,0 / СНЗОН); т. пл.-922С. 15 1.47) р-амінофеніл-3-0-(М-бутил-карбамоїлметил)-р-О-галактопіранозид: б Сполуку 1.47.а (332мг, 0,8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1.24. Після осадження із суміші етанол/п-гексан одержують безбарвні кристали (105мг, 3495); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: -й Рее0,32; т. пл.-1352С. о Приклад 1.48 50 р-амінофеніл-3-О-метоксикарбонілметил- 5-О-маннопіранозид о он с» о ІК о 55 . я но хе й її (Ф) он Мн, дк о
Й Х сн о оз 1.48.а). р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-6-О-трифенілметил-о-О-маннопіранозид:
Сполуку 1.40л.а (13,6г, 25 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.42.43. Після тонкошарової бо хроматографії |(петролейний ефір/етилацетат 10:1) поряд з деякими побічними продуктами одержують безбарвні кристали (2,79г, 18965); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11: К0,50; т. пл.-95-9776. 1.48). р-амінофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-у-Ю-маннопіранозид:
Сполуку 1.48.а (1,23г, 2 ммоль) гідрують та оброблюють як описано в прикладі 1.40. Одержують коричнювату аморфну речовину (250мг, 3675), ОС |дихлорметан/ метанол/аміак (25905) 15:3:0,2). К-0,45.
Приклад 1.49 р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил- 5-ЮО-маннопіранозид он то щи ко
У но он Мн. о...
А - Ма (в) 6) 1.49.а). р-нітрофеніл-3-О-бензоксикарбонілметил-6- О-трифенілметил-у-О-маннопіранозид:
Сполуку 1.40.а (13,6г, 25 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.42.а бензиловим ефіром бромоцтової кислоти (144мл, 90 ммоль). Після тонкошарової хроматографії (петролейний ефір/етилацетат 20:1 -510:11 сч ре поряд з деякими побічними продуктами одержують жовтувату піну (5,0г, 2990); ОС (етилацетат/петролейний ефір 2:11; Т0,66; (937О-74,82 (с-1,0 / СНоСІ). о) 1.49) р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил-у-О-маннопіранозид:
Вказану вище сполуку (2,08г, З ммоль) протягом З6 год гідрують як описано в прикладі 1.40. Після згущення фільтрату осаджують залишок із суміші етанол/п-гексан. Шляхом промивання етилацетатом та повторного «г зо осадження із суміші етанол/диетиловий ефір одержують безбарвні кристали (495мг, 5095), ОС Іметанолі:
Ве0,53; т. пл.-205-2072С. о
Приклад 1.50 о р-амінофеніл-3-О-карбамоїлметил- 5-О-маннопіранозид он -- (Се) о. о і че Й « но (в) ю н МН, - с о " Х о МН,
Фо 1.50.а). р-нітрофеніл-3-О-карбамоїлметил-6-О-трифенілметил-у-ЮО-маннопіранозид: - Сполуку 1.49.а (1,04г, 1,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.44.а. Після сушіння у вакуумі о залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 2:3). Одержують безбарвні кристали (561мг, 62965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Бе0,67; |(с42О--91,32 (с-1,0 / 1 СНьоСІ»; т.пл.-125-12776.
ГТ» 1.50) р-амінофеніл-3-О-карбамоїлметил-о-Ю-маннопіранозид:
Вказану вище сполуку (541г, 0,9 ммоль) протягом 48 год гідрують як описано в прикладі 1.40. Після згущення фільтрату залишок ретельно промивають метанолом і одержують безбарвні кристали (134мг, 45965); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,2): Ке0,21; т. пл.-126-12876.
Приклад 1.51
ГФ) -амінофеніл-3-дезокси- дв -Ю-галактопіранозид р р р юю он о (в)
І в фії 17; но "он Мн, 1.51.а) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-4-О-ацетил-д-О-галактопіранозид: бо Розчин сполуки 1.31.65 (2,7г, 5,6 ммоль) в дихлорметані (20мл) змішують з триетилортоацетатом (Змл, 16,3 ммоль) та толуолсульфоновою кислотою (20мг). Через ЗОхв при кімнатній температурі пробу розводять дихлорметаном (200мл), промивають насиченим розчином гідрокарбонату натрію (5Омл), осушують органічну фазу сульфатом магнію і після фільтрування згущують у вакуумі. Одержану безбарвну піну розчиняють в 80-90 оцтовій кислоті (15мл). Ще через ЗОхв при кімнатній температурі пробу виливають в насичений розчин гідрокарбонату натрію (200мл), екстрагують хлороформом (З3х75мл), об'єднані органічні фази промивають водою (100мл), сушать сульфатом магнію і після фільтрування згущують у вакуумі. Шляхом осадження із суміші етанол/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (2,43г, 8390), ОС |етилацетат/петролейний ефір 2:11:
В0,64; (4120--62,12 (с- 1,0 / СНоСІ»); т. пл.-832С. 70 1.51.5). р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3-О-трифторметансульфоніл-4-О-ацетил-рД-О-галактопіранозид:
Розчин сполуки 1.51.а (2,3г, 4,4 ммоль) в суміші дихлорметану (ЗОмл) та піридину (Змл) в атмосфері аргону при температурі -207"С краплями змішують з розчином ангідриду трифторметансульфонової кислоти (2мл, 11,8 ммоль) в дихлорметані (ЗОмл). Через 1 год при -20"С пробу виливають в насичений розчин гідрокарбонату натрію (200мл), відокремлюють органічну фазу, сушать сульфатом магнію і після фільтрації згущують у вакуумі. 75 Після тонкошарової хроматографії |толуол -хтолуол/етилацетат 20:1| одержують безбарвні кристали (2.39Г, 8396); ОС |толуол/етилацетат 5:11):
В0,55; |4120--61,42 (с-1,0 / СНоСІ»); т. пл.-1052С. 1.51.с) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-З-дезокси-р-О-галактопіранозид:
Вказану вище сполуку (1,31г, 2 ммоль) розчиняють в толуолі (25мл) і змішують з тетраборогідратом тетрабутиламонію (1,54г, 6 ммоль). Через 2 год при 807С пробу розводять дихлорметаном (200мл), один раз промивають водою (50мл), осушують органічну фазу сульфатом магнію і після фільтрування згущують у вакуумі.
Після тонкошарової хроматографії (голуол/оетилацетат 7:1| одержують безбарвні кристали (59бмг, 6495); ОС
І(толуол/етилацетат 5:11: Бе 0,10; І9120--81,32 (с-1,0 / СНоСІ»); т. пл.-1142С. 1.51) р-амінофеніл-З-дезокси-8-О-галактопіранозид: с 29 Сполуку 1.51.с (465мг, 1 ммоль) гідрують протягом б год як описано в прикладі 1.40. Після згущення Ге) фільтрату переосаджують залишок із суміші етанол/петролейний ефір і одержують безбарвні кристали (206мг, 8196); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590)15:3:0,21: КО,22.
Приклад 1.52 р-амінофеніл-3,4-ди-дезокси- ВД-Ю-галактопіранозид З зо он ю о о) о «- у (Се) он МН, 1.52.а). р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-ди-О-трифторметансульфоніл-р-О-галактопіранозид:
Сполуку 11.31.56 (2,12г, 4,4 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 11.51.56 ангідридом « 20 трифторметансульфонової кислоти (мл, 23,6 ммоль). Після тонкошарової хроматографії -в с (толуол- »хтолуол/етилацетат 50:1| одержують жовтувату маслянисту рідину (2,75г, 84965); ОС |толуол/етилацетат й 5:11: В.0,67; (с120--22,52 (с-1,0/СН»СІ»). и"? 1.52.5). р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-ди-дезокси-д-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.52.а (1,9, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.51.с тетраборогідратом тетрабутиламонію (2,31г, 9 ммоль). Після тонкошарової хроматографії (толуол -»толуол/етилацетат 50:11 (22) одержують безбарвні кристали (629мг, 7095); ОС |голуол/етилацетат 5:1|: К0,53; Іощ79--79,12 (с- 1,0 / СНоСІ»); - т. пл.-89"70. 1.52) р-амінофеніл-3,4-ди-дезокси-8-О-галактопіранозид: о Сполуку 1.52.р (450мг, 1 ммоль) протягом 5 год гідрують як описано в прикладі 1.40. Після згущення с 20 фільтрату залишок переосаджують із суміші етанол/петролейний ефір і одержують безбарвні кристали (183Змг, 7696); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Б.0,47; (9129--115,12 (с- 1,0 /СНЗОН); т. пл.-1872С. ї» Приклад 1.53 р'ємінофеніл В-О'ацетил: В-О-галактопіранозид
Х о о "сн, іме) о о) з, но он Мн, он бо 1.53.а) р-нітрофеніл-6-О-ацетил-р-О-галактопіранозид:
Розчин р-нітрофеніл-Д-О-галактопіранозиду (7,53г, 25 ммоль) в абсолютному ацетонітрилі (ВОмл) при 07 краплями змішують із свіжоприготовленим розчином піридину (2мл, 25 ммоль) та ацетилхлориду (1,85мл, 26 ммоль) в ацетонітрилі (2Омл). Протягом ЗОхв перемішують при 0"С і потім згущують у вакуумі. Після тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 50:1--520:1| одержують безбарвні кристали (4,02г, 47965); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: Ке0,50. 1.53) р-амінофеніл-6-О-ацетил-рД-О-галактопіранозид:
Сполуку 1.53.а (1,72г, 5 ммоль) протягом 2 год гідрують як описано в прикладі 1.40. Після згущення фільтрату осаджують залишок із суміші метанол/диетиловий ефір і одержують безбарвні кристали (1,34г, 8696); 70. Ос |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,21: Бх0,34; (с120--41,02 (с-0,56 / СНЗОН); т. пл.-180"С(розклад.).
Приклад 1.54 р-амінофеніл-3,4-ди-О-метоксикарбонілметил- Д-О-галактопіранозид он о е;
У ні в) он МН, що я 6) б й тен, 07 ов сч 29 1.54.а) адилювання сполуки 1.24.а: Ге)
Сполуку 1.24.а (1,36бг, З ммоль) розчиняють в диметилформаміді (25мл) і змішують з метиловим ефіром бромоцтової кислоти (1мл, 10,6 ммоль) та порціями з 30-96 суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі (З0Омг, 10 ммоль). Через 3,5 год при кімнатній температурі знову додають метиловий ефір бромоцтової кислоти (25Омкл, 2,65 ммоль) та гідрид натрію в мінеральному маслі (75мг, 2,5 ммоль). Після наступних 2 год реакцію т припиняють додаванням краплями метанол (бмл) та згущують у вакуумі. Залишок розчиняють дихлорметані ю (250О0мл), розчин інтенсивно розмішують з водою (10Омл). Органічну фазу осушують сульфатом магнію (10Гг), згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат о 10:1-57:1. 55:1. 53:11). Одержують три фракції: -- з Фракція 1: р-нітрофеніл-2,3,4-три-О-метоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид; с безбарвна піна (401мг, 2190); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:11);
ВеО,47; (оЩ7О--51,92 (с-0,26 / СНЗОН).
Фракція 2: не ідентифікована: безбарвна піна (88мг), ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:11;
В-0,39, (9129--61,52 (с-0,26 / СНЗОН). «
Фракція 3: р-нітрофеніл-3,4-ди-О-метоксикарбонілметил- Д-О-галактопіранозид; - с безбарвна піна (275мг, 1690), ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:11); ц Ве: 0,30; (0129--38,67 (с-0,28 / СНЗОН). я 1.54) р-амінофеніл-3,4-ди-О-метоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид:
Фракцію З із прикладу 1.54.а (206бмг, 0,3 ммоль) протягом 16 год гідрують як описано в прикладі 1.4Огод.
Після згущення фільтрату залишок виварюють із діетиловим ефіром (20мл) і одержують сірі кристали (45,бмг, ме) 3790); ОС (петролейний ефір/етилацетат 1:1): Ке0,22, т. пл.-1557С (розклад.). - Приклад 1.55 р-амінофеніл-2,3,4-три-О-метоксикарбонілметил- р-О-галактопіранозид о он й о. 0 їз» "
Мк Фе о о МН,
Ф) о в) о іме) ро не. Ге бо не то: Ге! "ен,
Фракцію 1 із прикладу 1.54.а (З8Омг, 0,5 ммоль) протягом 16 год гідрують як описано в прикладі 1,40.
Після згущення фільтрату залишок виварюють з діетиловим ефіром (2О0мл) і одержують жовто-коричневу маслянисту рідину (46,8мг, 1990); ОС |(петролейний ефір/етилацетат 1:1): К.: 0,29; т. пл.-1067С (розклад.). 65 Приклад 1.56 р-амінофеніл-4-О-(В-О-галактопіранозил)- В-Ю-глюкопіранозид он о о
ОН я м Я 7 о о "он мн, он 4 но "он он р-нітрофеніл-4-О-(р-О-галактопіранозил)-В-О-галактопіранозид (4,63г, 10 ммоль) гідрують як описано в 75 прикладі 1.23. Одержують безбарвні кристали (3,04г, 7095); ОС |метанолі)|: КО,55; т. пл.-235-237"С (розклад.).
Приклад 1.57 р-амінофеніл-4-О-(3--сульфат- Д-Ю-галактопіранозил)- Д-О-глюкопіранозид, натрієва сіль он ів) о 20 оно. Фі г щу ! о ів; он мн, сч 25 й он о но "он о ре) г «І ду - Ма зо о Га! ою 1.57.а). р-нітрофеніл-4-О-(3,4-О-ізопропіліден-д-О-галактопіранозил)- ВД-О-глюкопіранозид: р-нітрофеніл-4-О-(Д-О-галактопіранозил)- Д-ЮО-глюкопіранозид (23,2г, 50 ммоль) змішують з г диметоксипропаном (40Омл) та каталітичною кількістю (ї)-камфоро-(О-сульфонової кислоти (400мг, 1,7 ммоль). -" пе
Через З дні при кімнатній температурі реакцію припиняють шляхом додавання триетиламіну (24Омкл, 1,7 ммоль), 35 згущують у вакуумі і осушують протягом 2 год у вакуумі. Одержані кристали розчиняють в суміші метанол/вода ікс, 10:1 (500мл) і протягом 6 год кип'ятять зі зворотним холодильником. Після згущення у вакуумі та хроматографії
Ідихлорметан/метанол 25:1-510:1, при необхідності з 0,590 триетиламіном| одержують безбарвні кристали (15,2г, 60905); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К.0,49; т. пл.-253-2557С (розклад.). « 1.57.Б) - 70 р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоїл-4-0-(2',6'-ди-О-бензоїл-3,4-О-ізопропіліден- Д-О-галактопіранозил)- В8-Ю-глюкопір с анозид: :з» До розчину сполуки 1.57.а (15,1г, ЗО ммоль) в піридині (ЗООмл) при 07"С протягом ЗОхв повільно краплями додають бензоїлхлорид (5Омл, 430 ммоль). Потім перемішують ще 2 год при кімнатній температурі, а потім пробу з помішуванням виливають у льодяну воду (2000мл). Через 15хв осаджені кристали відфільтровують і
ФУ розчиняють у дихлорметані (1500мл). Розчин промивають водою (2х500мл) та 1М-розчином гідрокарбонату натрію (2х500мл), органічну фазу осушують сульфатом магнію (50г), згущують у вакуумі і очищають шляхом - перекристалізації із метанолу. Одержують безбарвні кристали (26,7г, 8790); ОС |дихлорметан/метанол 50:11: о В-0,49; |(дЩ12О-ж23,62 (с-1,08 / СНЗСІ»); т. пл.-272-2742С. 1.57.с) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоїл-4-0-(2',6'-ди-О-бензоїл-р-О-галактопіранозил)- р-ЮО-глюкопіранозид: о Розчин сполуки 1.57.6 (20,5г, 20 ммоль) в дихлорметані (40Омл) змішують з 99-95 трифтороцтовою кислотою ї» (2О0мл) і протягом 20хв перемішують при кімнатній температурі. Потім розчин промивають 1М-розчином гідрокарбонату натрію (2х200Омл), органічну фазу осушують сульфатом магнію (10г), згущують у вакуумі і залишок очищують шляхом переосадження із суміші дихлорметан/діетиловий ефір. Одержують безбарвні дв Кристали (18,0г, 9195); ОС |дихлорметан/метанол 20:1|: КО,18; т. пл.-23476. 1.57.а)
Ф) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоїл-4-0-(2',6'-ди-О-бензоїл-4-О-ацетил- рД-О-галактопіранозил)- ВД-ЮО-глюкопіранозид: ко Сполуку 1.57.с (5,5г, 5,6 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.51.4. Після тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 3:1-51.1) одержують безбарвні кристали (4,03г, 7090); ОС 60 |дихлорметан/метанол 20:11: К.0,67; т. пл.- 11870. 1.57.е) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоїл-4-0-(2',6'-ди-О-бензоїл-3'-сульфат-4-О-ацетил- Д-О-галактопіранозил)- В -О-глюкопіранозид, натрієва сіль:
Розчин сполуки 11.57.44 (3,59г, 3,5 ммоль) в піридині (200мл) змішують з комплексом "триоксид 65 сірки-піридин" (4,5г, 28 ммоль) і перемішують спочатку 2 год при 60"С, а потім 16 год при кімнатній температурі. Потім реакцію припиняють додаванням краплями метанолу (5Омл) та згущують у вакуумі. Залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1). Одержують твердий продукт, який розчиняють в суміші дихлорметан/метанол 1:1 (200мл) і змішують з Атрбегійе ІК120 (форма Ма", 10г). Цю суміш протягом 1 год перемішують при кімнатній температурі, фільтрують і фільтрат згущують у вакуумі. Осідають безбарвні кристали (3,64г, 9290) ап; ОС |дихлорметан/метанол 2:1): К0,87; т. пл.-16870. 1.57 Ж) р-нітрофеніл-4-О-(3--сульфат-Д-О-галактопіранозил)- Д-ЮО-глюкопіранозид. натрієва сіль:
Сполуку 1.57.е (3,4г, 3 ммоль) розчиняють в абсолютному метанолі (150мл), змішують з метилатом натрію (200мг) і 7 год перемішують при 60"С. Після охолодження до кімнатної температури нейтралізують леватитом
ЗС108 (форма Н") і потім фільтрують. Підвищують значення рН фільтрату додаванням краплями 1М-розчину 70 їдкого натру до 7-8, випарюють у вакуумі і шляхом переосадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують коричнюваті кристали (1,30г, 7790); ОС |дихлорметан/метанол 2:1): К.0,55; т. пл.-2307С (розклад.). 1.57) р-амінофеніл-4-О-(3--сульфат-р-О-галактопіранозил)- Д-ЮО-глюкопіранозид. натрієва сіль:
Вказану вище сполуку (1,13г, 2 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Після виварювання з діетиловим ефіром (5Омл) одержують безбарвні кристали (983Змг, 9295); ОС |дихлорметан/метанол 2:1): К.0,22, 15. т. пл.-176"С (розклад.).
Приклад 1.58 р-амінофеніл-4-0О-(3-0'-метил-Д-О-галактопіранозил)- В-ЮО-глюкопіранозидон (в) (о; 20 он
М" 5; в) (в) он МН, - он с 25 1, но "он о (Ф) - те « зо 1.58.а) Селективне метилування р-нітрофеніл-4-О-(8р-О-галактопіранозил)- ВД-ЮО-глюкопіранозиду: р-нітрофеніл-4-О-(р-ЮО-галактопіранозил)- Д-О-глюкопіранозид (2,3, 5 ммоль) метилюють як описано в о прикладі 1.25.а. Шляхом хроматографії |дихлорметан/метанол 20:1--510:1--55:1)| одержують два продукти: ав!
Фракція 1: р-нітрофеніл-2-О-метил-4-0-(3'-О-метил-р-О-галактопіранозил)- Д-Ю-глюкопіранозид; безбарвні кристали (264мг, 1190), ОС |дихлорметан/метанол 5:11: -- 35 В0,46; (4120--73,92 (с-1,0 / СНЗОН); т. пл.- 2282 (розклад.). Ге)
Фракція 2: р-нітрофеніл-4-0-(3-О-метил-р-ЮО-галактопіранозил)- ВД-ЮО-глюкопіранозид; безбарвні кристали (1,0Ог, 4290); ОС |дихлорметан/метанол 5:11;
В0,29; (4120--65,32 (с-1,1 / СНЗОН); т. пл.-22026. « 1.58) р-амінофеніл-4-0О-(3'-О-метил-р-О-галактопіранозил)- В-ЮО-глюкопіранозид: 40 ов: і . . -
Фракцію 2 із прикладу 1.58.а (955мг, 2 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Після промивання с діетиловим ефіром (5Омл) одержують безбарвні кристали (894мг, 100950); ОС (|дихлорметан/метанол 5:11): "з Ече0,08; т. пл.-1297С (розклад.).
Приклад 1.59 р-амінофеніл-2-О-метил-4-0-(3-О-метил- Д-О-галактопіранозил)- ВД-О-глюкопіранозид он (22) - (в; в) о он
У що 1 ж 7, (в) (в) о Мн,
Т» он не й но бон 9) щ- о не де Фракцію 1 із прикладу 1.58.а (246бмг, 0,5 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1.24. Після промивання діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (18бмг, 8195); ОС |дихлорметан/метанол 5:11: 60 ВіОл13; (120-362 (с-1,0/ СНЗОН); т. пл.-1052С.
Приклад 1.60 р-амінофеніл-4-О-(34'-ди-О-метил- 8-Ю-галактопіранозил)- В-ЮО-глюкопіранозид б5 он о; о
І ІЙ | Фе
М т о, о он МН, не що он
З зо їй он о ла не 1.60.а) то р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-0-(2',6'-ди-О-бензил-3-4-О-ізопропіліден- Д-ЮО-галактопіранозил)- Д-Ю-глюкопір анозид:
Сполуку 1.57.а (5,0г, 10 ммоль) протягом 16 год перетворюють як описано в прикладі 1.26.с бензилбромідом (ЗОмл, 250 ммоль). Після згущення у вакуумі залишок розчиняють в етилацетаті (З0Омл) і розчин промивають оо Водою (200мл). Органічну фазу осушують сульфатом магнію (10г), згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/петролейний ефір 5:1 »дихлорметан)!ї. Одержують коричнювату маслянисту рідину (5,3г, 5695); ОС |дихлорметан/метанол 50:11; Бе0,70; (3429--23,22 (с-1,08 / СНЬСІ»). 1.60.5) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-О-(2',6'-ди-О-бензил-р-О-галактопіранозил)- В-Ю-глюкопіранозид:
Вказану вище сполуку (4,77г, 5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1.57.с. Після згущення у вакуумі с 1 осадження із суміші діетиловий ефір/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (3,94г, 8690); ОС
Ідихлорметан/метанол 50:1|): К,20,36; т. пл.-11670. і) 1.60. с) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-0-(2',6'-ди-О-бензил-3'4'-ди-О-метил- Д-О-галактопіранозил)- 8-Ю-глюкопіраноз ид: «І
Сполуку 1.60.р5 (1,8г, 2 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1.24.с. Осадженням із суміші ю дихлорметан/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (1,55г, 8290); ОС |дихлорметан/метанол 50:11:
ЕО,74; т. пл.-161-16276. | «в) 1.60) р-амінофеніл-4-О-(34-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)- рД-ЮО-глюкопіранозид: «-
Сполуку 1.60.с (1,41г, 1,5 ммоль) в метанолі (5Омл) розчиняють і після додавання гідроксиду паладію на вугіллі (вогкий, 2095 Ра, 500Омг) протягом 6 дні гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском. |се)
Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (1ООмл).
Згущення фільтрату у вакуумі і промивання залишку дихлорметаном дає коричнюваті кристали (425мг, 6196); т. пл.-1247С (розклад.). «
Приклад 2.1 М-аланіл-батрацилін сн, нн т с | сю й М о - б М - 2.1.а). М-(М-(трет-бутоксикарбоніл)-аланіл|-батрацилін: о М-(трет-бутоксикарбоніл)-аланін (3,Зг, 17,5 ммоль) і сл 20 2-ізобутокси-1-ізобутокси-карбоніл-1,2-дигідро-хінолін (б,бмл. 23 ммоль) розчиняють в 100мл дихлорметану.
Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин батрациліну (4,1г, 16,5 ммоль) в їз» абсолютному диметилформаміді (35Омл) і перемішують пробу ще 48 год при кімнатній температурі. Потім згущують у вакуумі до 50мл, доливають етилацетатом до ЗООмл і зразу ж за 10хв нагрівають до кипіння. Потім дають охолонути до кімнатної температури, відфільтровують і знову виварюють фільтрувальний матеріал з 5о етилацетатом (200мл). Охолодженням з перемішуванням до 0"С і фільтруванням одержують жовті кристали
ГФ! (6,18г, 8495), ОС (етилацетат)|: 20,57. т. пл.-246-2477С (розклад.). 2.1) М-аланіл-батрацилін: ю Розчин сполуки 2.1.а (10,5г, 25 ммоль) безводній трифтороцтовій кислоті (150мл) протягом 15хв перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі до ЗОмл пробу з інтенсивним перемішуванням виливають в 60 насичений розчин гідрокарбонату натрію (1000мл). Перемішують ще 10хв, відфільтровують і промивають водою, ізопропанолом і діетиловим ефіром. Продукт осідає жовтими кристалами (7,15г, 8990) ап; ОС (етилацетаті:
Ече0,06; т. пл.-261-2627С (розклад.).
Приклад 2.2
М-(лізил-аланіл|-батрацилін, ди-трифторацетат б5 о сн, н З сЕ,сооН ня. ЖД лу т М М
Е | ! - М свусоонН нм 2.2.а) М-ІМо, Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-аланіл|-батрацилін:
М,М-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізин (21, 6 ммоль) і 2-ізобутокси-1-ізобутокси-карбоніл-1,2-дигідро-хінолін (2,4мл, 8 ммоль) розчиняють в 20 мл дихлорметану.
Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин сполуки 2.1 (1,6г, 5 ммоль) в диметилформаміді (40мл) і перемішують пробу ще 16 год при кімнатній температурі. Потім згущують у вакуумі і 19 залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 2:1-»1:1- »етилацетаті.
Одержують жовті кристали (2,89г, 8995); ОС (етилацетаті|: Ке0,52; т. пл.-203-20476. 2.2) М-(лізил-аланіл|-батрацилін, ди-трифторацетат:
Суспензію вказаної вище сполуки (2,б6г, 4 ммоль) в дихлорметані (25мл) змішують з безводною трифтороцтовою кислотою (1Омл) і одержаний розчин протягом ЗОхв перемішують при кімнатній температурі.
Дісля згущення у вакуумі залишок кристалізують шляхом додавання діетилового ефіру (10Омл). Осад відфільтровують і інтенсивно промивають діетиловим ефіром. Одержують жовті кристали (2,68г, 99965); ОС (Іетилацетаті|: К/0,05; т. пл.-144-1467С (розклад.).
Приклад 2.3 М-(ІО-аланіл|-батрацилін сн н о сч
Ії : М (8) о т «г зо М ою 2.3.а). М-І(М-бензилоксикарбоніл-О-аланіл)-батрацилін: о
М-бензилоксикарбоніл-О-аланін (3,9г, 17,5 ммоль) перетворюють і обробляють як описано в прикладі 2.1.а. «-
Одержані жовті кристали (6б,4г, 8095) відокремлюють фільтруванням і об'єднані фільтрати після згущення у вакуумі очищують шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 3:2. 51:11). Одержують ще Ф 1,35г (1796); ОС (етилацетаті: К-0,45; т. пл.-2562С; (у12О--н75,12 (с-1,0 / СНЬСІ» я 0,596 СНЗОН) 2.3) М-(ІЮ-аланіл|-батрацилін:
Сполуку 2.3.а (11,4г, 25 ммоль) розчиняють в 33-95 розчині бромистого водню в льодяній оцтовій кислоті « (100мл). Через ЗОхв при кімнатній температурі пробу згущують у вакуумі до ЗОмл, а потім з інтенсивним З 50 перемішуванням виливають в насичений розчин гідрокарбонату натрію (1000мл). Перемішують ще 10хв, с відфільтровують і промивають водою, ізопропанолом і діетиловим ефіром. Продукт осідає жовтими кристалами
Із» (7,87г, 9895); ОС (етилацетаті|: К-0,06; т. пл.-2677С (розклад.).
Приклад 2.4
М-(Ме-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін но сн, н ;
Ф ! Е | ' о а зе "ев : М «Маки : о не 4 : І сн, о н в) р. ! т М т 2.4.а) М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін:
Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М е-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізин (5,Зг, 11,3ммоль) і о 2-ізобутокси-1-ізобутоксикарбоніл-1,2-дигідрохінолін (4мл, 14 ммоль) розчиняють в 40мл дихлорметану. Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин сполуки 2.3 (3,2г, 10 ммоль) в диметилформаміді ко (8Омл) і перемішують пробу ще 16 год при кімнатній температурі. Потім згущують у вакуумі і залишок суспендують в дихлорметані (10О0мл). Одержану суспензію заливають діетиловим ефіром (ЗООмл). Після б6Оо відфільтровування і промивання фільтрувального матеріалу діетиловим ефіром одержують жовті кристали (5,65г, 6595); ОС (етилацетат)|: К-0,45; т. пл.-18670. 2.4) М-ІМо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін:
Вказану вище сполуку (5,6г, 7,3 ммоль) розчиняють в диметилформаміді (5Омл).
Після додавання піперидину (5Омл) перемішують протягом З год при кімнатній температурі, потім згущують у бо вакуумі і очищують залишок шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (25905)
15:3:0,1--15:5:0,1). Одержують жовті кристали (2,5г, 62905); т. пл.-217"7С (розклад.).
Приклад 2.5
М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат і
Но сн, н і : І о 70 о М ; М , ет : о но р
М
15 сЕ,соонН НМ 2.5.а) М-ІМо-(фтореніл-З-метоксикарбоніл)-М є-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін: ма-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-М є-(трет-бутоксикарбоніл)-лізин (5,3г, 11,3 ммоль) перетворюють ((і4 20 бчищують як описано в прикладі 2.4.4. Одержують жовті кристали (7,0г, 8095); ОС (етилацетат|: К0,51;. т. пл.-22376. 2.5) М-ІМо-(фтореніл-9-метоксикарбонт)-лізил-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат:
Сполуку 2.5.а (6,17г, 8 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2. Після згущення у вакуумі залишок переосаджують із суміші дихлорметан/діетиловий ефір і одержують жовті кристали (6,08г, 97905); ОС с ов |етилацетаті: К-0,05; т. пл.-2247С (розклад.).
Приклад 2.6 (8)
М-ІМе-фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат
СЕзсооН о сн, н о « 3о нд ; М ю й ї М М . є | о х Н о р с ї " й 35 (Се) бут о « 40 Сполуку 2.4.а (6,17г, 8 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2. Після згущення залишок шщ с переосаджують у вакуумі із суміші дихлорметан/діетиловий ефір і одержують жовті кристали (5,97г, 9595); ОС й (етилацетат|: К0,04; т. пл.-1887С (розклад.). и? Приклад 2.7
М-(Ілізил-О-аспарагіл|-батрацилін, ди-трифторацетат 45 Го) он
Ф ж - . о сн, Н о т І. о; сію свсооН НА М
Е й М ї» ЕІ н о -
М сЕСООнН НА
Ф) г) 2.1.а). М-(М-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-аспарагіл-(дД-трет-бутиловий ефір))|-батрацилін:
М-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-аспарагіл-( Д-трет-бутиловий ефір) (7,2г, 17,5 ммоль) перетворюють як в 60 прикладі 2.1.а. Після згущення у вакуумі залишок розчиняють в дихлорметані (1000мл) і промивають 1М соляною кислотою (2х200мл) і 1М рознимом гідрокарбонату натрію (1х200Омл). Після сушіння сульфатом магнію (20ОГг), фільтрування, згущення до 100Омл і додавання петролейного ефіру в осад випадає сполука 2.7.а в формі жовтих кристалів (9,7г, 8695); ОС (етилацетат)|: КО,71; т. пл.-195760. 2.7.8) М-(ІО-аспарагіл-(рд-трет-бутиловий ефір))|-батрацилін: 65 Вказану вище сполуку (6б,4г, 10 ммоль) розчиняють в дихлорметані (10Омл). Після додавання морфоліну (5Омл) перемішують протягом 5 год при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі і очищують залишок шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 4:1- »етилацетат-»етилацетат/етанол 10:11.
Одержують жовті кристали (3,44г, 82905); ОС (етилацетаті|: Ке0,21; т. пл.-2097С (розклад.). 2.1.с) М-ІМо,,Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аспарагіл-( Д-трет-бутиловий ефір))|-батрацилін:
Сполуку 2.7.5 (2.1г, 5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2.а. Одержують жовті кристали (1,7 1г, 4690); ОС (етилацетаті: К0,61; т. пл. 14276. 2.7) М-(лізил-О-аспарагіл|-батрацилін, ди-трифторацетат:
Сполуку 2.7.с (1,65г, 2,2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2 і очищують. Одержують жовті кристали (1,5г, 9595); ОС |метанол/оцтова кислота 10:11); К.0,29; т. пл.-154-15572 (розклад.).
Приклад 2.8
М-Ілізил-О-глютаміл|-батрацилін, дигідробромід и 5 оон н 27 | Го)
НВг ня. Ж А М лит ТО У лк но -
М
НВг що 2.8.а). М-ІМ-(трет-бутоксикарбоніл)-О-глютаміл-(р-бензиловий ефір))|-батрацилін: Га
М-(трет-бутоксикарбоніл)-О-глютаміл-(Д-бензиловий ефір) (5,9г, 17,5 ммоль) перетворюють як в прикладі о 2.1.4. Після згущення у вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії |петролейний ефір/етилацетат 1:1| до одержання жовтих кристалів (9,45г, 9595); ОС (|етилацетат|: К 20,61; Ід О-53,12 (с-1,0/СН»оСІ»); т. пл.-15970. 2.8.5) М-ІЮО-глютаміл-(дД-бензиловий ефір))|-батрацилін: «
Сполуку 2.8.а (9,1г, 10 ммоль) розчиняють в амеїзеновій кислоті (1ООмл) і розчин протягом б год ю перемішують при кімнатній температурі. Після згущення у вакуумі залишок розчиняють в метанолі (10Омл) і підвищують значення рН розчину до 8 обережним додаванням 25-95 водного розчину аміаку. Після повторного о згущення у вакуумі і остаточної хроматографії (етилацетат/етанол 10:1)|) одержують жовту маслянисту рідину «- (4 2г, 5690); ОС (етилацетаті|: Ке0,06.
Зо 2.8.с) М-|Мо.,Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-глютаміл-( рд-бензиловий ефір)|-батрацилін: ісе)
Вказану вище сполуку (3,75г, 8 ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.2.4. Одержують жовту аморфну тверду речовину (2,26г, 35965); ОС |(етилацетаті: К.0,40; (912О--32,12 (с-1,2 / СНоСІ»). 2.8) М-(лізил-О-глютаміл|-батрацилін, дигідробромід: «
Сполуку 2.8.с (2,0г, 2,5 ммоль) розчиняють в 33-96 розчині бромистого водню в льодяній оцтовій кислоті -о 70 (БОмл). Через 1 год при кімнатній температурі пробу згущують у вакуумі і залишок ретельно промивають с діетиловим ефіром. Продукт випадає в осад у вигляді жовто-червоних кристалів (1,63г, 9895); т. пл.-207-20970 з (розклад.).
Приклад 2.9
М-(лізил-гліцил|-батрацилін, ди-трифторацетат
Ге) н (о) І о а сЕ,соонН НМ М ї М шия М о ЕІ
М т» сЕжсооНн. НА 2.9.а). М-(М-(трет-бутоксикарбоніл)-гліцил|-батрацилін:
М-(трет-бутоксикарбоніл)-гліцин (3,07г, 17,5ммоль) перетворюють як в прикладі 2.1.4. Через З дні при кімнатній температурі згущують у вакуумі і залишок розчиняють в етанолі (200мл). Після ЗОхв перемішування зі
ІФ) зворотним холодильником і фільтрування після охолодження випадає в осад цільовий продукт в формі жовтих іме) кристалів (4,73г, 6695); ОС (етилацетаті: К,.0,44; т. пл.-279"С (розклад.). 2.9.5) М-гліцил-батрацилін, гідрохлорид 60 Вказану вище сполуку (4,1г, 10 ммоль) розчиняють в дихлорметані (1200Омл) з нагріванням в ультразвуковій ванні. Після додавання хлористого водню в діетиловому ефірі (100мл) перемішують ЗОхв при кімнатній температурі, згущують у вакуумі і змішують залишок етанолом (200мл). Після 10хв перемішування зі зворотним холодильником і фільтрування після охолодження випадає в осад продукт в формі жовтих кристалів (3,21г, 9496); т. пл.-297-2997С (розклад.). 65 2.9.с) М-(Мо,,Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-гліцил|-батрацилін:
М,М-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізин (21, 6 ммоль) і
2-ізобутокси-1-ізобутоксикарбоніл-1,2-дигідро-хінолін (2,4мл, 8 ммоль) розчиняють в 20мл дихлорметану. Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин сполуки 2.9.5 (1,71г, 5 ммоль), етилдіїзопропіламін (0,8бмл, 5 ммоль) і диметилформамід (40мл) і перемішують пробу ще 16 год при кімнатній температурі Потім згущують у вакуумі і очищують шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 1:1 »етилацетат)| Одержують жовті кристали (1,69г, 5395); ОС (етилацетаті:
Ече0,31; т. пл.-2117С (розклад.). 2.9) М-І(лізил-гліцил|-батрацилін, ди-трифторацетат:
Сполуку 2.9.с (1,4г, 2,2 ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.2. Одержують жовті 70 Кристали (1,33г, 91905); т. пл.-1537С (розклад.).
Приклад 2.10
М-І(лізил-серил|-батрацилін, ди-трифторацетат он о сн, НН , І о ск,УсооНн нн. Ж Хо о. М 20 . М сЕ,ЙоонН нм 2.10.а). М-ІМ-(трет-бутоксикарбоніл)-серил)|-батрацилін:
М-(трет-бутоксикарбоніл)-серин (3,6бг, 17,5 ммоль) перетворюють як в прикладі 2.1.3. Через 48 год згущують С 25 у вакуумі до 100мл і змішують з 2л дихлорметану. Одержаний розчин промивають водою (1х5О0Омл), 0,5М о соляною кислотою (2х25Омл) і насиченим розчином гідрокарбонату натрію (1хХ250О0мл). Сушіння сульфатом магнію (50г), відгонка розчинника у вакуумі і хроматографія (петролейний ефір/етилацетат 1:1)| залишку дає сполуку 2.10.а (4,6бг, 6495) в формі жовтих кристалів ОС |етилацетат/оцтова кислота 100:1)Ї; Ке0,38, т. пл.-21976 (розклад.); с129--61,02 (с-0,5 / СНоСІ» я 0,595 СНЗОН). « 30 2.10.5) М-серил-батрацилін, гідрохлорид: ю
Суспензію вказаної вище сполуки (4,бг, 10,4 ммоль) в діоксані (/Омл) з помішуванням змішують з концентрованою соляною кислотою (1Омл), а потім протягом 1 год інтенсивно перемішують при кімнатній о температурі. Потім згущують у вакуумі і осушують залишок протягом 2 год у вакуумі. Після додавання етанолу «- (10Омл) кип'ятять протягом 15хв зі зворотним холодильником. Охолодження і відсмоктування дає оранжеві 35 кристали (1,97г, 9695); ОС (етилацетаті: К0,05; (Це 51,82 (с-1,0 / Н2О); т. пл. 22707С (розклад.). ре) 2.10.с) М-ІМо,Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-серил)|-батрацилін:
Сполуку 2.10.56 (1,86бг, 5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.9.сє. Після тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний ефір 2:1 »етилацетат| одержують жовті кристали (1,18г, 3690); ОС «
Іетилацетат/оцтова кислота 100:1): Б-0,24; т. пл.-1882С (розклад.); (9129--13,12 (с-0,5 / СНоСІ» я 0,596 СНЗОН). -в 2.10) М-І(лізил-серил|-батрацилін, ди-трифторацетат: с Сполуку 2.10.с (1,0г, 1,5 ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.2. Одержують жовті :з» кристали (1,Ог, 9695); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: 0,10; т. пл.-188-19072 (розклад.).
Приклад 2.11
М-(Ілізил-ЮО-серил)|-батрацилін, дигідробромід он б - іо; сн. нн 27 (в) о НВ ня. ЖД : М п Тире : «з» т н (о) ро
І
НвВг Нм.
Ф! 2.11.а). М-І(М-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-(трет-бутил)-О-серилі|-батрацилін:
М-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-(трет-бутил)-О-серин (6,7г, 17,5 ммоль) перетворюють як описано в о прикладі 2.1.3. Згущення у вакуумі і хроматографія (петролейний ефір/етилацетат 1:1| дають сполуку 2.11.а (5,64г, 5295) в формі жовтих кристалів; ОС (|дихлорметан/метанол/аміак (2595) 15:3:0,2| Ке0,87; т. 60 пл.-225-2282С (розклад.) 2.11.53. Ч-(О-(трет-бутил)-О-серил|-батрацилін:
Вказану вище сполуку (2,89г, 4,7 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.7.5. Шляхом хроматографії
Іпетролейний ефір/етилацетат 3:2-»етилацетат| одержують продукт у вигляді жовтих кристалів (1,15г, 6296); ОС (етилацетат|: 0,11; т. пл. 19776. бо 2.11.с) М-ІМо, Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-(трет-бутил)-О-серилі|-батрацилін:
Вказану вище сполуку (1,1г, 2,8 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2.3. Одержують жовті кристали (1,94г, 9690); ОС (етилацетат)|: К.0,59, т. пл.-20870. 2.11.а) М-(лізил-О-(трет-бутил)-О-серил|-батрацилін, ди-трифторацетат:
Сполуку 2.11.с (1,08г, 1,5 ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.2. Одержують жовті кристали (1,1г, 9895). ОС |метанол/оцтова кислота 10:1): К0,30, т. пл.-12870. 2.11) М-І(лізил-О-серилі|-батрацилін, дигідробромід:
Сполуку 2.11.4 (1,05г, 14 ммоль) як описано в прикладі 2.8 перетворюють і очищують. Одержують жовто-червоні кристали (84бмг, 9696); т. пл.-247-24876. 70 Приклад 2.12
М рівил-О-треонілі Євтрацилін, дигідробромід о? ин
НВг ня. ЖД А м Я
Н о р
М
НВ на 2.12.а). М-ІМ-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-(трет-бутил)-О-треоніл|-батрацилін:
М-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-О-(трет-бутил)-О-треонін (6,96г, 17,5 ммоль) перетворюють як в прикладі 2.1.а. Згущення у вакуумі і хроматографія |(петролейний ефір/етилацетат 1:1) дають сполуку 2.12.а (7 ,45г, 68965) в формі жовтих кристалів; ОС (етилацетаті|: 20,63; т. пл.-225-22670. с 2.12.53. М-(О-(трет-бутил)-О-треоніл|-батрацилін: о
Сполуку 2.12.а (3,8г, 6 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.7.5. Після згущення у вакуумі одержують продукт у вигляді жовтих кристалів (1,9г, 7895); ОС (етилацетаті|: Ке0О,21; т. пл.-110-11176. 2.12.с) М-(«Мо, Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-(трет-бутил)-О-треоніл|-батрацилін
Сполуку 2.12.р (1,8г, 4,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 2.2.4. Одержують жовті кристали в (2,6г, 79965); ОС (етилацетаті: Бе0,59; т. пл.-21226. ю 2.12.а) М-(лізил-О-(трет-бутил)-О-треоніл|-батрацилін, ди-трифторацетат:
Вказану вище сполуку (2,5г, 3,4 ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.2. Одержують - жовті кристали (2,5г, 9690); ОС |метанол/оцтова кислота 10:1|: К,20,30; т. пл.-1427С (розклад.). «-- 2.12) М-І(лізил-О-треоніл|-батрацилін, дигідробромід:
Сполуку 2.12.а4 (2,29г, З ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 2.8. Одержують жовто-червні о кристали (1,86г, 97965); т. пл.-2327С (розклад.).
Приклад 2.13
М-Ілізил-О-аланіл|-батрацилін, ди-трифторацетат « 20 сгусоон МН, - с ;»
М о ЗХ ; о
Ми - сЕЗСООН Нм на й й 50 ше о 1 2.13.а) М-ІМо, Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрацилін: їз» бг (17,3ммоль) Мо, Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізину розчиняють в 75мл ОМЕ і при 0"С змішують з Зг (26 ммоль) М-гідроксисукциніміду і 4,29г (20,8 ммоль) М.М'-дициклогексилкарбодіїміду. Через З год відфільтровують одержану сечовину, до фільтрату додають 5г (15,6 ммоль) М-(О-аланіл|-батрациліну (приклад 2.3) і перемішують 25 16 год при 20". Залишкову сечовину відфільтровують і видаляють. Фільтрат згущують і залишок перемішують з
Ф! метанолом і фільтрують. Фільтрат знову згущують і ще раз оброблюють метанолом. Знову фільтрують і об'єднують залишки на фільтрі, їх розчиняють в суміші дихлорметані/метанол 10:11 і осаджують ефіром. де Одержують 8,22г (81965) кристалічного цільового продукту. 2.13) М-І(лізил-О-аланіл|-батрацилін, ди-трифторацетат: 60 Одержання із 8,2г сполуки 2.13.а аналогічно прикладу 2.2. Вихід: 7,58г (89965).
Приклад 2.14
М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-батрацилін, трифторацетат б5
М в) ех сезСООН ня Ж м ї чн : (є; й с | | , сі о Мн 18 й (в) ,. 2.14.а) М-| Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-батрацилін:
Одержання аналогічне прикладу 2.4.а із М о-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізину 20 і батрациліну. Вихід: 78905. 2.14) М-(Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-батрацилін, трифторацетат:
Одержання аналогічне прикладу 2.5 із сполуки 2.14.а. Вихід: 9090
Приклад 2.15
М-Ілізил-Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-батрацилін, ди-трифторацетат с 25 Е нн
Сгзсоо мн, о й З ч 30 І М (о: вх юю «в)
МН о М стЗсоонН ни : ід! -- 35 о Е о (се; і й « 40 що ші с о. МН . з й
Ге) 2.15.а) М-( Мо, Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил- Ме-(фтореніл-9-метокси-карбоніл)-лізил|-батрацилін: б 324Омг (4,54 ммоль) сполуки 2.14 розчиняють в 5Хо0мл диметилформаміду і змішують з 2550мг (5,45 ммоль) Мо, Ме-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізин-р-нітрофенілового ефіру та О9З8вмкл етилдіїзопропіламіну. - Перемішують протягом 16 год при 20"С, згущують і змішують залишок спочатку з ефіром. Фільтрують і залишок о на фільтрі ще раз змішують із сумішшю метанол/простий ефір 1:11. Після відсмоктування і сушіння одержують і з881мг (9290) цільового продукту. 1 2.15) М-(лізил-Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-батрацилін, дитрифторацетат:
Т» Деблокування сполуки 2.15.4 сумішшю зневодженої трифтороцтової кислоти і дихлорметану 1:1 аналогічно прикладу 2.2. Вихід: 9595 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:6:0,6 К,0,081
Приклад 2.16
М-(лізил- Мр-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)- о, З-діамінопропіоніл)-батрацилін, дитрифторацетат
Ф) іме) 60 б5
СЕЗСООН мн,
М о хх 70 Й МН
СЕ.сСОоОоНн Ж М . к! нм - МН о; р. е;
НМ
75 А ,. а
Цей пептидний кон'югат одержують аналогічно прикладам 2.14 і 2.15 за 4 стадії із батрациліну та
Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М р-(фтореніл-9-метокси-карбоніл)-діамінопропіонової кислоти. сч
ІОС:ідихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К.0,15).
Приклад 2.17 о
М-(лізил|-батрацилін
М « (8) Ше ю но Ж М о т Мн
І - 4 (8) (Се) «
Мн, - . Відщеплення фтореніл-9-метоксикарбонільної групи аналогічне прикладу 2.4 із а М-(Ме-(фтореніл-9-метокси-карбоніл)-лізил|-батрациліну, трифторацетат (приклад 2.14). Вихід: 65965
Приклад 2.18
М-Ісерил-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат
Ме он М о Ех й во свусоон «М н м (ав) о о 1 20 2.18.3). М-ІМ-(трет-бутоксикарбоніл)-серил-О-аланіл|-батрацилін:
ГТ» Одержання аналогічне прикладу 2.13.а із М-(трет-бутоксикарбоніл)-серину та М-(О-аланіл|-батрациліну (приклад 2.3). Вихід: 7790 2.18) М-І(серил-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат:
Одержання аналогічне прикладу 2.2 із сполуки 2.18.а. Вихід: 9890
Приклад 2.19
ГФ) -(О-аланіл-О-аланіл|-батрацилін, трифторацетат до Стзсоон роя М о о
Одержання в дві стадії аналогічно прикладу 2.18.
Приклад 2.20
М-І(глютаміл-О-аланіл|-батрацилін б5 соон нд ша М ів) (в)
Одержання в дві стадії аналогічно прикладам 2.18, виходячи із
М-трет-бутоксикарбоніл-глютаміл- 5-трет-бутилового ефіру і М-(ІО-аланіл|-батрациліну (приклад 2.3). Після 170 відщеплення бутилоксикарбонільної групи згущують, розчиняють у воді, 0,1 М розчином їдкого натру встановлюють рН 7 і відсмоктують бетаїн.
Приклади 3.1 - 3.34
Загальна формула в є
ІФ
Зх кб
М в) уо )
НА «М о в)
Приклад 3.1 сч
М-(Ме-(О-(р-І-фукозил)-4-пдрокси-феніламінотіокарбоніл|-лізил-О-алант)-батрацилін о
З.а)
М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М в-(рД-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: оомг (0,22ммоль) р-амінофеніл-р-І-фукозид змішують в 1Омл суміші діоксан/вода 1:11 з тіофосгеном (З4мМкл, «Ж О0,44ммоль). Через 10хв згущують у вакуумі і залишок осушують протягом 1год в глибокому вакуумі. Одержане гірчичне масло зв'язують в абсолютному диметилформаміді з 109мг (0,21ммоль) о
М-ІМо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-батрациліном (приклад 2.4) в присутності 115мкл. Ф етилдіїзопропіламіну. Після дворазового осадження сирого продукту із суміші метанол/ізопропанол одержують «- 132мг (7596) цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол 9:1 К, - 0,151. 3.1) М-А«Ме-ТО-(р-І-фукозил)-4-пдрокси-фентаміно-тіокарбонт|)|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: (Се) 127мг (0,15ммоль) сполуки із прикладу 3.1.4 в 1Омл дихлорметані перемішують з бмл безводної трифтороцтової кислоти 2год при 0"С. Згущують, тричі дистилюють з 5мл дихлорметану і хроматографують сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (1795) 15:2:0,2. Після виморожування одержують 8Омг (71905) цільового « продукту. (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:4:0,4 К, - 0,31.
Аналогічно прикладу 3.1 із частково захищеного пептидного кон'югату прикладу 2.4 або із аналогічно З с одержуваного ізомерного М-|М"-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-аланіл|-батрациліну одержують такі глікокон'югати: "» Приклад 3.2 " М-(Ме-(О-(2-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.1
Хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол 95:5 і цільової стадії сумішшю
Ф дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2. Вихід: 5595 (ОС: дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота - 5:1:0.2 Кк - 0,41
Приклад 3.3 о Мм-(Ме-(О-(2-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-батрацилін: с 50 Едукт: Вуглевод із прикладу 1.1
Т» Очищення проміжної стадії шляхом осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:11 простим ефіром і хроматографічне очищення цільової стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2. Вихід: 6595 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2 К,- 0,211.
Приклад 3.4 59 М-(Ме-(О-(3-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін,
ГФ) трифторацетат:
ГФ Едукт: Вуглевод із прикладу 1.2
Тонкошарове хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол 97,5:2,5 і осадження цільової стадії із метанолу простим ефіром; Вихід: 59956 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 60 15:2:0,2 Вк - 0,19).
Приклад 3.5
М-(Ме-(О-(3-О-метил-р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.2 ве Очищення проміжної стадії шляхом осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:1 ефіром і хроматографічне очищення кінцевої стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17-96) 15:2:0.2. Вихід: 3695 (ОС:
дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5 К, - 0,571.
Приклад 3.6
М-їМе-(О-(3-О-метил-о-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.3
Очищення проміжної стадії шляхом осадження із метанолу ефіром і тонкошарове хроматографічне очищення цільової стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2. Вихід: 4495 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2 К- 0,15).
Приклад 3.7 70 М-(Ме-(О-(3-Оезокси-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.6
Тонкошарове хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол 95:5 і осадження цільової стадії із метанолу ефіром. Вихід: 3595 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,42).
Приклад 3.8
М-(МЕ-(О-(3,4-Ерокси-В-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.8
Тонкошарове хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол 95:5.
Багаторазове осадження цільової стадії із метанолу ефіром і заключне змішування з ефіром оцтової кислоти.
ІОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,49).
Приклад 3.9
МАМ е-(О-(3-О-карбоксиметил-В-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль: с
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.10 о
Очищення проміжної стадії шляхом перемішування з метанолом і доповнення осаду простим ефіром.
Тонкошарове хроматографічне очищення цільової стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:3:0,3; пізніше в тій же системі з пропорціями 15:6:0,6. Відповідні фракції згущують, розчиняють у воді і 0.1М розчином їдкого натру встановлюють рН 7. Відсмоктують, залишок на фільтрі розчиняють в суміші - диметилформамід/вода 1:3 і додають еквівалент 0,1 М розчину їдкого натру. Згущують, натрієву сіль розчиняють ю у воді і ліофілізують. Вихід: 43905. (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:4:0,5 К, - 0,15).
Приклад 3.10 (ав)
М-(Ме-(О-(3-О-карбамоїлметил-В-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, - натрієва сіль: 3о Едукт: Вуглевод із прикладу 1.18 ісе)
Очищення проміжної стадії шляхом перемішування з метанолом і доповнення осаду простим ефіром.
Тонкошарове хроматографічне очищення цільової стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:2:0,2.
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:3:0,3 К, - 0,381; т. пл.: 1907 (розклад.). «
Приклад 3.11
Мм-(Ме-(О-(4-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, ацетат: З с Едукт: Вуглевод із прикладу 1.4
Із» Тонкошарове хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол 95:5 і цільової стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15.2.0,2. Після згущення залишок змішують з еквівалентом льодяної оцтової кислоти та 1Омл води і ліофілізують. Вихід: 5295 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 75 51:02 В,- 0,43). ЕАВ-М8: т/» - 760 - Ма.
Ме Приклад 3.12 - М-(Ме-(0-(0-О-Одержання аналогічне)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: о Едукт: р-амінофеніл-4-О-глюкозид 1 20 Очищення проміжної стадії і цільової стадії шляхом перемішування з метанолом і доповнення осаду простим
ГТ» ефіром. Вихід: 8395. (ОС:, дихлорметан/метанол/аміак (1790)15:8:0,8 Ех - 0,481.
Приклад 3.13
М-їМе-(О-(с0-О-глюкозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: 5 Едукт: р-амінофеніл-4-О-глюкозид
Одержання аналогічне одержанню ізомера в прикладі 3.12 (Ф; Приклад 3.14
ГІ М-(Ме-(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат во 3.14.а)
М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М «-(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил- р-аланіл)-батрацилін:
Розчин сполуки 1,25 (62,8мг, 0,22ммоль) в суміші діоксан/вода 1:11 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (33,5мл, 0,44ммоль). Через 10хв, згущують у вакуумі і залишок протягом Тгод осушують у вакуумі. Одержаний 65 ізотіоціанат розчиняють в абсолютному диметилформаміді (1Омл) і змішують зі сполукою 2.4 (109.7мг, О0,2ммоль) та етилдіїззопропіламіном (О,5мл). Протягом 1бгод перемішують при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі і залишок очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:1). Одержують жовті кристали (108,Змг, 62905), ОС |дихлорметан/метанол 5;1): К,- 0,42; т. пл. - 194-19572 (розклад.). 3.14) 85 МА(Ме-(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Із сполуки 3.14.3 (105,1мг, О0,12ммоль) як описано в прикладі 2.2 віддеплюють трет-бутоксикарбонілльну групу. Після згущення у вакуумі і осадження із суміші метанол/діегиловий ефір одержують жовті кристали (57 ,4мг, 5495); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,16; т. пл. - 188-189" (розклад.).
Аналогічно прикладам 3.14.а та 3.14 із пептидного кон'югату 2.4 (по 109,7мг, О0,2ммоль) одержують такі глікокон'югати:
Приклад 3.15 м-(Ме-ЇО-(р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.23 (59,7мг, 0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1| дає жовті кристали (79,5мг, 4695), ОС |метанолі: К, - 0,74.7. пл. - 18276.
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (77,1мг, 4496); ОС
Іметанолі: К, - 0,27; т. пл. - 191-1927С (розклад.).
Приклад 3.16
М-(Ме-(0-(3,4-ди-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.31 (7Омг, О0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:11 5» 2071| с одержують жовті кристали (150,7мг, 85965). ОС |дихлорметан/метанол 10:1| К, - 0,35, т. пл. - 197-19972 (розклад.) о
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (137мг, 7690); ОС
Ідихлорметан/метанол 10:1): К, - 0,13, т. пл.- 184 - 1867С (розклад.).
Приклад 3.17
М-(Ме-(О-(3-О-метоксикарбонтметил- р «І -О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: ю
Едукт: Вуглевод 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:11 -» 25711 о одержують жовті кристали (124,1мг, 6690); ОС |дихлорметан/-метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: К;- 0,50; т. пл. сю 16576. 3о Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (107,8мг, 5796); ОС ікс,
Ідихлорметан/метанол 4:1|: К, - 0,53; т. пл. - 1837С (розклад.).
Приклад 3.18
М-(Ме-(О-(3-О-карбоксиметил-р « -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонт|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: З
Едукт: Сполука 1.43 (77,Змг, 0,22мМмоль) с Очищення проміжної стадії шляхом переосадження із суміші етанол/діетиловий ефір дає натрієву сіль у
Із» вигляді жовтих кристалів (172мг, 9195); ОС |метанолі: К.20,71; Т. пл. 5 225-22876.
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (136,5мг, 7396); ОС
Іметанолі: К, - 0,12; т. пл. - 217-220" (розклад.).
Приклад 3.19 б М-(Ме-(О-(3-О-карбамоїлметил-р - -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 144 (72,2мг, 0,22ммоль) о Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1| одержують с 90 жовті кристали (137,7мг, 75905), ОС |дихлорметан/метанол 4:1): К,; - 0,41; т. пл. - 198-2017С (розклад.).
І» Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (140,2мг, 7596); ОС
Ідихлорметан/метанол 4:1): К, - 0,16, т. пл. - 188-19072 (розклад.).
Приклад 3.20
М-(Ме-(О-(3-0-(М-метил-карбамоїлметил)-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
ГФ) Едукт: Вуглевод 1.45 (75,Змг, О0,22ммоль) 7 Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 7:1:0,11 одержують жовті кристали (158,4мг, 85965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,2): КК, - 0,25; т. пл. - 161-1637С (розклад.). 60 Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (132,5мг, 7096); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: КК, - 0,10;Т. пл. - 191-1937С (розклад.).
Приклад 3.21
М-(Ме-(О-(3-0-(М-пропіл-карбамоїлметил)- р в5 -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.46 (81,5мг, О0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 8:1:0,11 одержують жовті кристали (153,1мг, 80965); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,2): К, - 0,33: т. пл. - 1877С (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (154,9мг, 79905), ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (25905) 1530.21| К, - 0,21; т. пл. - 17976.
Приклад 3.22
М-(Ме --9-(3-0(М-бутил-карбамоїлметил)-В-ЮО-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-бат 70 Вацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.47 (84, бмг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 12:1| одержують жовті кристали (132,7мг, 6890); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21. К,; - 0,54; т. пл. - 180-18276.
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (115,2мг, 5896); ОС 75 |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,2|: Кк - 0,30; т. пл. - 17676.
Приклад 3.23
М-(Ме-І(О-(3,4-ди-дезокси-Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.52 (52,бмг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 25:1| одержують жовті кристали (127,4мг, 7790); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21. К,; - 0,60; т. пл. - 166-16770.
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (103,мг, 61965); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,2| К,- 0,44; т. пл. 5 173-1757С (розклад.).
Приклад 3.24 Га
М-(Ме-(О-(6-О-ацетил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: о
Едукт: Вуглевод 1.53 (78,2мг, О0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 25:1| одержують жовті кристали (88.Змг, 4995), ОС |дихлорметан/метанол 4:1). К, - 0,61; т. пл. - 196-19972 (розклад.). «І
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (89,бмг, 49965); ОС
Ідихлорметан/метанол 4:1|: К, - 0,31; т. пл. - 1867С (розклад.). о
Приклад 3.25 І ав
М-їМе-(О-(0-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: -
Едукт: Вуглевод 1.39 (59,7мг, О0,22ммоль) (се)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1| одержують жовті кристали (101,7мг, 5995); ОС |метанолі: К, - 0,79, т. пл.-1807С (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (103,1мг, 59965); ОС « метанол): К, - 0,34; т. пл. - 177-178" (розклад.).
Приклад 3.26 - с М-їМе-(О-(3-О-метил-2-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, в трифторацетат: -» Едукт: Вуглевод 1.40 (62,8мг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:1| одержують жовті кристали (56,бмг, 3295); ОС |дихлорметан/метанол 5:1)|: К; - 0,38; т. пл. - 191-1927С (розклад.). (2) Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (46,бмг, 2696); ОС - Ідихлорметан/метанол 5:1)|: К, - 0,13; т. пл. - 190- 19172 (розклад.).
Приклад 3.27 («в М-Ме-ІО-(2,3-ди-О-метил-о, с 20 -Ю-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.41 (ббмг, О0,22ммоль) ї» Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 25:1| одержують жовті кристали (77,8мг, 4495), ОС |дихлорметан/метанол 4:1); К, - 0,65; т. пл. -182-1837С (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (66б,1мг, 3790); ОС 22 |дихлорметан/метанол 4:1): К,- 0,40; т. пл. - 18126.
ГФ! Приклад 3.28
М-їМе-(О-(3-О-метоксикарбонтметил-о, ді -ЮВ-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.48 (75,5мг, О0,22ммоль) 60 Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 18:1| одержують жовті кристали (62,1мг, 3395); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25 9) 15:3:0,21: К, - 0,66; т. пл. - 16576.
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (57,бмг, ЗОУв); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 15:3:0,21: КК, - 0,43; Т. пл. - 183-18476.
Приклад 3.29 б5 М-(Ме-(О-(3-О-карбоксиметил-(о,
-ЮВ-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат;
Едукт: Вуглевод 1.49 (77 ,Змг, О0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом переосадження із суміші етанол/діетиловий ефір дає натрієву сіль у вигляді жовтих кристалів (173,4мг, 9296); ОС |метанолі: К, - 0,57; т. пл. - 201-2057С (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (171,7мг, 9296); ОС
Іметанолі: К, - 0,29; т, пл. - 196-1987С (розклад.).
Приклад 3.30
М-їМе-(О-(3-О-карбамоїлметил-о, 70. "«В-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод 1.50 (72,2мг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1| одержують жовті кристали (106,бмг, 5895), ОС |дихлорметан/метанол 4:1): К, - 0,34, т. пл. - 192-19472 (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.14 одержують жовті кристали (107.7мг, 5896); ОС 75 |дихлорметан/метанол 4:1): Кк; - 0,13, т. пл. - 186-1877С (розклад.).
Приклад 3.31
М-МЕ --9-(3,4-ди-О-метил-В-ЮО-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін 3.31.а) 20. М-(Мо-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-М є-(О-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарб оніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Розчин сполуки 1.31 (7Омг, 0,22ммоль) в суміші діоксан/вода 1:1 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (33,5мл,
О,44ммоль). Через 10хв. згущують у вакуумі і осушують залишок протягом год у вакуумі. Одержаний ізотіоціанат розчиняють в абсолютному диметилформаміді (1Омл) і змішують зі сполукою 2.5 (157мг, 0,2ммоль) та Ге етиплдізопропіламіном (О0,5мл). Протягом 1бгод перемішують при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі о і розчиняють у суміші дихлорметан/метанол 1:11. Продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру і промивають невеликою кількістю охолодженого льодом метанолу. Одержують жовті кристали (191мг, 9490), ОС
Ідихлорметан/метанол 10:1): К,- 0,35; т. пл. - 2037 (розклад.). 3.31) «І
М-АМе-(О-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: ю
Із сполуки 3.31а (182.2мг, О,18ммоль) як описано в прикладі 2.4 відщеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу. Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:11 продукт осаджують шляхом (ав) додавання діетилового ефіру. Одержують жовті кристали (127,1мг. 8990) ОС |метанолі К, - 0,46, т. пл. - 15870. «-
Аналогічно прикладам 3.31.а і 3.31 із пептидного кон'югату 2.5 (по 157мг, 0,02 ммоль) одержують такі глікокон'югати: (Се)
Приклад 3.32
М-(Ме-(О-(3-О-(піперидил-М)-карбонілметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «
Едукт: Вуглевод 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 3.31.а; одержують жовті кристали (191,2мг, 9196); ОС в) с Ідихлорметан/метанол 10:1): К, - 0,28;Т. пл. - 2087 (розклад.). ч Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.31 одержують жовті кристали (155,8мг, 8896); ОС и? метанол): К,; - 0,47; т. пл. - 1207С (розклад.).
Приклад 3.33
М-(Ме-(О-(3-О-карбоксиметил- р іа -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль: - Едукт: Вуглевод 1.43 (77, Змг, О0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 3.31.а; одержують жовті кристали (192мг, 9095); ОС о (Іетанол/метанол 1:1): К, - 0,05; т. пл. 5 211-2137С (розклад.). «сл 50 Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.31 одержують жовті кристали (110,бмг, 6бУв); ОС
Іметанолі: К, - 0,33; т. пл. - 233-235" (розклад.).
Т» Приклад 3.34
М-(Ме-(О-(3-О-карбамоїлметил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: 52 Едукт: Вуглевод 1.44 (72.2мг, 0,22ммоль)
ГФ) Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 3.31.а, одержують жовті кристали (159,2мг. 7696). ОС юю Ідихлорметан/метанол 10:1) К, - 0,04. т. пл. - 1777 (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 3.31 одержують жовті кристали (125,1мг, 7696); ОС
Іметанолі: К, - 0,48, т. пл. - 1067 (розклад.). бо Приклади 4.1-4.12
Загальна формула б5 -БО0-
Мн, в о М
Мносмн ря м о в)
Приклад 4.1 4.1.8)
М-(Мо-(О-(р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батр ацилін: 140мг (0,55ммоль) р-амінофеніл-р-І-фукозид згідно з інструкцією прикладу 3.1.4 спочатку перетворюють в гірчичне масло, а потім зв'язують з 430мг (0,55ммоль) трифторацетату 75 М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|- батрациліну (приклад 2.5) в присутності З75мкл етилдіїзопропіламіну. Після осадження сирого продукту із суміші метанол/дихлорметан очищають шляхом тонкошарової хроматографії (ацетонітрил/вода 10:1). Після змішування залишку з простим ефіром одержують
З58мг (67905) цільового продукту (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,481. 4.1) М-(Мо-(О-(8-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
З5бмг (0,37ммоль) сполуки із прикладу 4,1,ла розчиняють в 1їО0мл диметилформаміду і 5мл піперидину і протягом год перемішують при 20"С. Згущують і залишок хроматографують сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:6:0,6. Одержують цільовий продукт з 46-96 виходом (ОС дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15: 4:0,5 Ех - 0,11)
Аналогічно прикладам 4.1 із частково захищеного пептидного кон'югата 2.5 одержують такі глікокон'югати: с
Приклад 4.2
М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, (8) натрієва сіль:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.10
Хроматографічне очищення проміжної стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:3:0,3; потім в « зо такій же системі з пропорцією 15:4:0,5. Очищення кінцевого продукту на стадії бетаїну шляхом перемішування з водою; заключне переведення в натрієву сіль 0,1 М розчином їдкого натру і виморожування із суміші юю діоксан/вода. о
Вихід: 6590; т. пл.: 22076.
Приклад 4.3 -
М-(Мо-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «я
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.2
Очищення проміжної стадії шляхом осадження із дихлорметану простим ефіром;
Очищення кінцевого продукту шляхом багаторазового осадження із диметилформаміду простим ефіром.
Вихід: 8895 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К.О,281. «
Приклад 4.4 - с М-(Мо-(О-(4-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: ц Едукт: Вуглевод із прикладу 1.4 "» Очищення проміжної стадії шляхом багаторазового осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:1 простим ефіром, очищення кінцевого продукту на хроматографічній колонці |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:8:0.81, осадження із суміші дихлорметан/метанол 1.1 простим ефіром. Вихід:7495 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак
Ге) (1790) 10:01 КК, - 0,19) з Приклад 4.5
М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-р (ав) -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін сл 50 4.5.а)
М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл-М вє-(фтореніл-9-метоксикарбо їз» ніл)|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Розчин сполуки 1.31 (7Омг, 0,22ммоль) в суміші діоксан/вода 1:1 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (33,5мл,
О,44ммоль). Через 10хв. згущують у вакуумі і осушують залишок протягом год у вакуумі. Одержаний ізотіоціанат 2о розчиняють в абсолютному диметилформаміді (1Омл) і змішують зі сполукою 2.6 (157мг, 0,2ммоль) і о етилдіїзопропіламіном (О0,5мл). Протягом 1бгод перемішують при кімнатній температурі, а потім згущують у вакуумі. Шляхом багаторазового осадження залишку із суміші дихлорметан/метанол 1:1 діетиловим ефіром і о заключного промивання невеликою кількістю охолодженого льодом метанолу одержують жовті кристали (198мг, 9896); ОС |дихлорметан/метанол 10:1|: К;- 0,23; т. пл. - 17576. 60 4.5)
М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-рД-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
ІЗ сполуки 4.5.а (172.1мг, О,17ммоль) як описано в прикладі 24 відщеплюють фтореніл-9-метоксикарбонілльлну групу. Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:11 продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Одержують жовті кристали (114,5мг, 8596); ОС бо |дихлорметан/метанол 1:1): Б, - 0,16; т. пл, - 2062С (розклад.).
Аналогічно прикладам 4.5.а і 4.5 із пептидного кон'югату 2.6 (по 157мг, О0,2ммоль) одержують такі глікокон'югати:
Приклад 4.6 м-(Меа-(О-(8-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод 1.23 (59,7мг, 0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (185,8мг, 9496); ОС
Ідихлорметан/метанол 10:1): К, - 0,09; т. пл. - 1827 (розклад.).
Очищенням цільового продукту як описано в прикладі 4.5 одержують жовті кристали (134,Змг, 88965); ОС 70 Ідихлорметан/метанол 1:1): К;- 0,04; т. пл. - 22172 (розклад.).
Приклад 4.7
М-(Мо-(О-(3-О-метил-Д-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (193,5мг, 9796): ОС 75 |дихлорметан/метанол 10:1|: К;- 0,27, т. пл. - 1787С (розклад.).
Очищенням кінцевого продукту шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 2:11 -» 1:71) одержують жовті кристали (130,5мг, 8495); ОС |дихлорметан/метанол 1:1|: К, - 0,09; т. пл. - 2067 (розклад.).
Приклад 4.8
М-(Ма-ТО-(3-О-метоксикарбонтметил-р -О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт; Вуглевод 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль)
Очищенням проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.в одержують жовті кристали (209,8мг 99965), ОС
Ідихлорметан/метанол 10:1) К, - 0,32, т. пл. - 2357С (розклад.).
Очищенням кінцевого продукту як описано в прикладі 4.5 одержують жовті кристали (164,Змг, 9995); ОС Ге |дихлорметан/метанол 1:1|: К, - 0,05, т. пл. - 2177С (розклад.). (5)
Приклад 4.9
М-(Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Едукт: Вуглевод 1.43 (77, Змг, О0,22ммоль) «І
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (210.Змг, 99965); ОС ю
Ідихлорметан/метанол 10:1): К,;- 0,02; т. пл. - 18570.
Після очищення продукту як описано в прикладі 4.5 залишок суспендують у воді (1Омл) і суспензію краплями (ав) змішують з 0,05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН «х 10). Шляхом ліофілізації «- профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (150,8мг, 9095); ОС |дихлорметан/метанол 1:1): К; - 0,04. (Се)
Приклад 4.10
М-(Мо-(О-(3-О-карбамотметил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «
Едукт: Вуглевод 1.44 (72 2мг, 0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (152,7мг, 7396); ОС в) с Ідихлорметан/метанол 10:1): К, - 0,11; т. пл. 5 2297 (розклад.). "» Після очищення продукту як описано в прикладі 4.5 залишок суспендують у суміші вода/діоксан 1:1 (20мл). " Шляхом ліофілізації профільтрованого розчину одержуютьжовту аморфну тверду речовину (98,4мг, 61905), ОС
Ідихлорметан/метанол 1:1): Бк - 0,10, ІА" - -44,92 (с - 0,2 / Но).
Приклад 4.11
Фо М-їМе-(О-(2-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацил ін: - Едукт: Вуглевод 1.39 (59,7мг, О0,22ммоль)
Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (179,бмг, 91965); ОС о Ідихлорметан/метанол 10:1): К,- 0,07; т. пл. - 1767 (розклад.). с 20 Очищенням кінцевого продукту як описано в прикладі 4,5 одержують жовті кристали (137,5мг, 9095); ОС
Ідихлорметан/метанол 1:1): К,- 0,09; т. пл 5 2137С (розклад.). с»
Приклад 4.12
М-їМо-(О-(3-О-метил-5-ЮО-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Вуглевод 1.40 (62,8мг, 0,22ммоль) 59 Очищення проміжної стадії як описано в прикладі 4.5.а; одержують жовті кристали (94,2мг, 48965); ОС
ГФ) Ідихлорметан/метанол 10:1): К, - 0,13; т. пл. - 1737С (розклад.). Очищенням кінцевого продукту як описано в 7 прикладі 4.5 одержують жовті кристали (66б,бмг, 4395); ОС |дихлорметан/метанол 1:1|: К; - 0,07; т. пл. - 21570 (розклад.).
Приклади 5.1-5.23 бо Загальна формула б5 к..
Мн
А.Й ! - о М
Сх з з п х й во м м й - о
Приклад 5.1 70 М-(Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-(О-(3-О-метил-р -І-фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: 5Омг (0,1бммоль) р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил-р-І-фукозиду (приклад 1.10) в 1Омл суміші діоксан/вода 1:11 змішують з ЗОмкл (0,18ммоль) тіофосгену. Через 10хв згущують і осушують протягом год в глибокому вакуумі. Потім одержане гірчичне масло зв'язують в абсолютному диметилформаміді з 109мг (0,144ммоль) 75 КкоНн'югату із прикладу 3.4 в присутності 82мкл етилдізопропіламіну. Згущують і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:4:0,5). Речовину, одержану після згущення, ліофілізують із води. Вихід: 89мг (5695). (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:6:0,6 КК, - 0,221
Аналогічно прикладу 5.1 одержують такі змішано заміщені кон'югати:
Приклад 5.2
М-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-(О-(3-О-карбоксиметил-р -І-фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Вуглевод із прикладу 1.2.
Кон'югат із прикладу 3.10
Очищення шляхом осадження сирого продукту із метанолу простим ефіром. Вихід: 7895 |ОС: с ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,451). о
Приклад 5.3 м-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є -(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Кон'югат із прикладу 4.3, 4-гідрокси-анілін «І
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,21; Вихід: 6095 (ОС: ою дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2 МК, 0,311.
Приклад 5.4 (ав)
М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є - -(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Кон'югат із прикладу 4.2, 4-гідрокси-анілін (се)
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:4:0,5). Потім залишок змішують із сумішшю метанол/простий ефір. Вихід: 5595 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:6:0,6 К, - 0,3).
Приклад 5.5 « м-(Ма-ТО-(4-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є -(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: о) с Едукти: Кон'югат із прикладу 4.4, 4-гідрокси-анілін ч Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2). Потім залишок "» : ще : : осаджують із суміші метанол/дихлорметан простим ефіром. Вихід: 4995, т. пл. 12870 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2 К,- 0,261.
Приклад 5.6 ме) М-(Ма-(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М «-(О-(4-0-метил-рд - -І-фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Кон'югат із прикладу 3.11, 4-гідрокси-анілін о Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2| Потім залишок «сл 20 ліофілізують із суміші вода/діоксан. Вихід: 50956 (ОС дихлорметан/метанол/аміак (1796) 15:2:0.2 Б. - 0,29)
Приклад 5.7 ї» М-(Ма-(4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-(О-(3-О-метил-р -І-фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Кон'югат із прикладу 3.4, 4-гідрокси-анілін 29 Залишок осаджують із метанолу простим ефіром. Вихід: 7695 (ОС; дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2
ГФ) К,- 0,26).
Приклад 5.8 о м-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є -(-гідроксиетиламіно-2-(О-(3-О-метил- р 60 -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|)гриазин-6-ілІ|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: Кон'югат із прикладу 8.10,
Вуглевод із прикладу 1.2
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0.2). Вихід: 990
ЕАВ-М5: т/2 - 1165 - М.-1 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:3:0,3 К,- 0,27). бо Приклад 5.9
М-(Моа-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбонт|-М є --ацетил|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: М-(Ме-(ацетил)-лізил-О-аланіл)|-батрацилін,
Вуглевод із прикладу 1.10
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:4:0,5). Потім залишок виморожують із води. Вихід: 4695 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0.2 К, - 0,31)
Приклад 5.10
М-(Мо-(О-(4-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-ацетил|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: 51мг (0,067ммоль) кон'югату із прикладу 4.4 в 5мл диметилформаміді змішують з 1Омкл ацетангідриду і ЗОхв перемішують при кімнатній температурі. Згущують і осаджують із метанолу простим ефіром. Вихід: 4бмг (8695)
ІОС-ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5; 1:0,2 К, - 0,61.
Приклад 5.11
М-(Ма-(О-(ф-І--фукозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-(сукциніл-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль: 20мг (0,027ммоль) кон'югату із прикладу 4.1 в 2мл диметилформамід змішують з Змг ангідриду бурштинової кислоти і бгод перемішують при кімнатній температурі. Згущують і осаджують із метанолу простим ефіром.
Залишок розчиняють у воді і додають 27мкл 0,1 М розчину їдкого натру. Вихід: 20мг (8695); (ОС: дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:2 К, - 0,21.
Приклад 5.12
М-(МА-(О-(3-О-метоксикарбонілметил-В-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є --0-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Вуглевод 1.42 (37,7мг, О0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.31 с (79мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі і хроматографії |дихлорметан/метанол 20:11 -» 101) одержують жовті (39 кристали (52,9мг, 4590), ОС |дихлорметан/метанол 10:1); К,- 0,14: т. пл. - 1787С (розклад.)
Приклад 5.13
М-(Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-М є --0-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, З натрієва сіль: ІФ)
Вуглевод 1.43 (38,бмг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.31 о (79мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/діхлорметан 1:11 продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (1Омл) і суспензію краплями змішують з - 0,05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН «х 10). Ліофілізацією профільтрованого со розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (87,9мг, 7496); ОС (етанолі: Бк - 0,17; ІА? - 56,02 (с - 0,1/н50).
Приклад 5.14
М-(Мо-(О-(3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбонілі|-М є « -(0-(3,4-ди-О-метил-дД-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: з с Вуглевод 1.44 (36,1мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.31 й (79мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:1 продукт осаджують «» шляхом додавання діетилового ефіру. Одержують жовті кристали (45.9мг. 3995); ОС (етанол): КК, - 0,38; т. пл. т 2197С (розклад.).
Приклад 5.15
Ге»! М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-рД-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є -3з --0-(3-О-(піперидил-М)-карбонілметил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: (ав) Вуглевод 1.31 (39,5мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.3134 пептидним конгюгатом 3.32 сл 50 (88,7мг. О0,1ммоль) Після згущення у вакуумі і хроматографії (дихлорметан/метанол 20:11 -» 10:1) одержують жовті кристали (38,8мг, 3295); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К;- 0,79; т. пл. - 20570 (розклад.). їз» Приклад 5.16
М-(Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл)-М є --0-(3-О-(піперидил-М)-карбонілметил- В го -ЮД-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
ГФ! Вуглевод 1.43 (38,бмг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.32 (88,7мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:1 продукт осаджують о шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (1Омл) і суспензію краплями змішують з 0,05М розчину їдкого натрудо одержання прозорого розчину (рН « 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину бо одержують жовту аморфну тверду речовину (90,Змг, 7195), ОС (етанолі: Ех - 0,05; (А)29 - 39,02 (с - 0,1 / НО).
Приклад 5.17
М-(Мо-(О-(3-О-карбамотметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбонілі|-М є --0-(3-О-(піперидил-М)-карбонілметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: бо Вуглевод 1.44 (36,1мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.32 -Б4-
(88,7мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:1 продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Одержують жовті кристали (44 8мг, 3695), ОС (етанол). КК, - 0,06; т. пл. т 22370 (розклад.)
Приклад 5.18
М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-рД-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є --0-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Вуглевод 1.31 (39,5мг, 0,11ммоль) перетворюють як(описано в прикладі 3.31. пептидним кон'югатом 3.33 70 (84,2мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі змішують із сумішшю метанол/дихлорметан 1:1 (20мл) і продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (ІОмл) і суспензію краплями змішують з 0,05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН о « 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (80,7мг, 6890); ОС (етанолі: К,; - 0,09;
ІА120 - 35,02 (с - 0,1/Н20).
Приклад 5.19
М-(Ма-ТО-(3-О-метоксикарбонілметил- р-ЮО-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є --0-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Вуглевод 1.42 (37,7мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31. пептидним кон'югатом 3.33 (84,2мг, 0,1ммоль). Після згущення у вакуумі змішують із сумішшю метанол/дихлорметан 1:1 (20мл) і продукт осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (ІОмл) і суспензію краплями змішують з 0,05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН о « 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (87,5мг, 71965); ОС (етанолі: К,; - 0,10;
ІА120 - 24,62 (с - 0,11/Н20). с 29 Приклад 5.20 Ге) м-(Ма-ТО-(3-О-карбамотметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є --9-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль: «
Вуглевод 1.44 (36,1мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31. пептидним кон'югатом 3.33 (84,2мг, О,ммоль). Після згущення у вакуумі змішують із сумішшю метанол/дихлорметан 1:1 (20мл) і продукт І в) осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (ІОмл) і суспензію краплями о змішують з 0.05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН о « 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (78,бмг, 65906); ОС (етанолі) К; - 0,11; ж з ІА120 - -44,02 (с - 0,13/Н20). с
Приклад 5.21
М-(Моа-(О-(3,4-ди-О-метил-рД-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-М є --0-(3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Вуглевод 1.31 (39,5мг, О0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі З 31.4 пептидним кон'югатом 3.34 « (81,9мг, О,їммоль). Після згущення у вакуумі і хроматографії (етанол -» етанол/метанол 2:11) одержують жовті й с кристали (17 4мг, 1595); ОС (етанол): К, - 0,20, т. пл. 22907 (розклад.). ц Приклад 5.22 ,» М-(Мо-(О-(3-О-метоксикарбонілметил- рД-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-М є --0-(3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Вуглевод 1.42 (37,7мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4 пептидним кон'югатом 334 б» (81.9мг, О,Тммоль) Після згущення у вакуумі і розчинення в суміші метанол/дихлорметан 1:1 продукт осаджують - шляхом додавання діетилового ефіру. Одержують жовті кристали (72мг, 6090), ОС (етанолі| К, - 0,21, т. пл. - 2227 (розклад.). («в) Приклад 5.23 сл 50 М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-М є --0-(3-О-карбамоїлметил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін,
Т» натрієва сіль:
Вуглевод 1.43 (38,бмг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 3.31.4а пептидним кон'югатом 3.34 (81,9мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі змішують із сумішшю метанол/дихлорметан 1:1 (20мл) і продукт 22 осаджують шляхом додавання діетилового ефіру. Залишок суспендують у воді (1Омл) і суспензію краплями
ГФ) змішують з 0,05М розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН о « 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (78,2мг, 65905), ОС (етанолі: К,; - 0,07; т ІА120 - «33,02 (с - 0,1/Н50).
Приклади 6.1 - 6.89 60 Загальна формула б5
А о о
Сі
АХ, нн
Кк, 2 А. (о) о з о М
В, о к о п (а:1,0) то Приклад 6.1
М-(Мо Ме-біс-(О-(2-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Розчин сполуки 1.1 (5Омг, 0,19ммоль) в суміші діоксан/вода 1:11 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (ЗОмкл,
О,4ммоль). Через 10хв. згущують у вакуумі і осушують залишок протягом 1год у вакуумі. Одержаний ізотіоціанат розчиняють в абсолютному диметилформаміді (1Омл) і змішують зі сполукою 2.13 (б1мг, 0,09ммоль) і з етилдіїзопропіламіном (0,5мл). Перемішують протягом 16бгод при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі ії очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2Ї. Залишок осаджують із метанолу простим ефіром. Одержують 48мг (5095) цільового продукту у формі жовтих кристалів.
Аналогічно прикладу 6.1 із пептидного кон'югату прикладу 2.13 і І -аланіл-ізомера (приклад 2.2) одержують такі глікокон'югати:
Приклад 6.2
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: 100мг (0,3в8ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:0,5:0,05; потім в такій сч ов Же системі з пропорціями 15:1:0,1; потім осадження із суміші дихлорметан/метанол/простий ефір. Вихід: 59905. т. пл. 5 1787С (розкладення) (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,511. о
Приклад 6.3
М-(Мо Ме-біс-(О-(4-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: 115мг (0,44ммоль) вуглеводу із прикладу 1.4 «Е зо Очищення шляхом хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2, потім осадження із суміші дихлорметан/метанол (1:1) / простий ефір Вихід: 58905. т. пл.: 1767С (розкладення) (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 Кк, о - 0,521. о
Приклад 6.4
М-«(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-батрацилін: -
Едукт: 115мг (0,44ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2 Ге)
Очищення шляхом осадження із суміші дихлорметан/метанол (1:1)/простий ефір.
Вихід: 9395. т. пл.: 1927 (розкладення) (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,46).
Приклад 6.5
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «
Едукт: 100мг (0,3в8ммоль) вуглеводу із прикладу 1.3 - с Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:1:0,1; осадження із ц суміші дихлорметан/метанол (1:1) / простий ефір. т. пл.: 1787С (розкладення); ЕАВ-М8: т/2 - 1071 - М-А1. и"? Приклад 6.6
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-п-пропіл- Д-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: Звмг (0,127ммоль) вуглеводу із прикладу 1.5 (є) Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:1:0,1; осадження із - суміші дихлорметан/метанол (1:11) / простий ефір. Вихід: 42905, т. пл. 167-1707С (розкладення), (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) К,- 0,341. о Приклад 6.7 сл 50 М-(Мо Ме-біс-(О-(3-Оевокси- р-І -фукозил)-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: 40мг (0,167ммоль) вуглеводу із прикладу 1.6 чз» Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2; осадження із суміші метанол/простий ефір. Вихід:81905, (ОС: ацетонітрил/вода/вода 10:1 К, - 0,46).
Приклад 6.8
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-дезокси- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: о Едукт: 41мг (0,183ммоль) вуглеводу із прикладу 1.7
Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 95:5)|; виморожування із суміші ко вода/діоксан. Вихід: 6090; (ОС: дихлорметан/метанол 9:1 К, - 0,221.
Приклад 6.9 60 М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3З-гідроксиетил- р-І -рукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: 75мг (0,25ммоль) вуглеводу із прикладу 1.12
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:2:0,2; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:4:0,5; осадження із суміші метанол/простий ефір. Вихід: 6ббою; (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,281. б5 Приклад 6.10
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2-гідроксиетил- р-І -рукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: -58в-
Едукт: 50мг(0,167ммоль) вуглеводу із прикладу 1.19
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:3:0,3; осадження із суміші метанол/простий ефір; сушіння виморожуванням із суміші вода/діоксан. Вихід: 7290; (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0.2 К, - 0,391.
Приклад 6.11
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2-О-карбоксиметил- В -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, динатрієва сіль:
Едукт: 5Омг (0,1бммоль) вуглеводу із прикладу 1.13 70 Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:8:0,8; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:10:11. Залишок дигерують простим ефіром, потім виморожують із суміші вода/діоксан. Перетворення в динатріеву сіль двома еквівалентами 0,1 М розчину їдкого натру, потім виморожування із води. Вихід: 4995 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,5 КК, - 0,38). М5-ЕАВ:
ЕАВ: т/2 - 1157 - М-2Ма" ж Н".
Приклад 6.12
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, динатрієва сіль:
Едукт: 200мг (0,64ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:4:0,5; потім в такій же системі з пропорціями 15:8:0,8; і на закінчення з пропорціями 15:10:11. Залишок дигерують простим ефіром, потім сушать виморожуванням із суміші вода/діоксан 1:11. Перетворюють в динатрієву сіль двома еквівалентами
О,1М розчину їдкого натру, остаточне виморожування із води. Вихід: 5995; (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (1790)
ЕК, -0,11.
Приклад 6.13 см
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- р о -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: бОмг (О0,19ммоль) вуглевод із прикладу 1 18
Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:3:0,3). Залишок осаджують із суміші дихлорметан/метанол (1:11) простим ефіром, відсмоктують і виморожують із суміші Ж вода/діоксан 1:1. Вихід: 3695 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 КК, - 0,46), т. пл.: 19076 ю (розклад.).
Приклад 6.14 (ав)
М-(Мо,, Мера-біс-(О-(р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «-
Едукт: 100мг (0,39ммоль) р-амінофеніл- р-І -фукозиду
Зо Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2; потім в такій же ісе) системі з пропорціями 15:4:0,5). Залишок осаджують із диметилформаміду простим ефіром, відсмоктують. Вихід: 4890; т. пл.: 1957-1986.
Приклад 6.15 «
М-їМо;, Ме-біс-(О-(о-ЇІ -рамнозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукт: 158мг (0,61ммоль) вуглеводу із прикладу 1.21 не) с Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 15:3:0,3; пізніше в такій "» же системі з пропорціями 15:4:0,5). Залишок ліофілізують із суміші вода/діоксан. Вихід: 87905. |ОС: " дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:4:0,5 К, - 0,251.
Приклад 6.16
М-їМо;,Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-о,
Ф -І-рамнозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, динатрієва сіль: - Едукт: 200мг (0,64ммоль) вуглеводу із прикладу 1.22
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:4:0,5, потім в такій же о системі з пропорціями 15:8:0,8, і, нарешті 15:10 1). Залишок дигерують простим ефіром, потім виморожують із (9! 20 суміші вода/діоксан.
Їх Аналогічно прикладу 6.1 із різних пептидних кон'югатів батрациліну, що на змінному кінці містять повністю деблоковані лізинові модулі, одержують такі глікокон'югати:
Приклад 6.17
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В 59 -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін, динатрієва сіль:
ГФ) Едукти: З2мг (0,Тммоль) вуглеводу із прикладу 1.10 7 З2мг (0,045ммоль) М-Ілізил-гліцил|-батрацилін, ди-трифторацетат (приклад 2.9)
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:8:0,8; потім в такій же системі з пропорціями 15:15:1,5). Осадження із суміші диметилформамід/метанол (1:1) простим ефіром, потім бо виморожування із суміші вода/діоксан. Перетворення в динатрієву сіль двома еквівалентами 0,1 М розчину їдкого натру, потім виморожування із води. Вихід: 2595, (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:8:0,8 К; - 0,19).
ЕАВ-М5: т/2 - 1189 - Мт.
Приклад 6.18
М-(МоМе-біс-(О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін: 65 Едукти: бОмг (0,22ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2 ббмг (0,1ммоль) М-|лізил-гліцил|-батрацилін, ди-трифторацетат (приклад 2.9)
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:11; осадження із метанолу простим ефіром, потім виморожування із суміші вода/діоксан. Вихід: б8Ую (ОС: дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:2 К,- 0,621.
Приклад 6.19
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-лізил)-батрацилін: 6.19.а)
М-«(Мо Ме-біс-(О-(р-І--фукозил)-4-гідрокси-фенілаїпіпо-тіокарбоніл)|-лізил-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил)-б 70 атрацилін:
Едукти: 297мг (Іммоль) р-амінофеніл-р-І -фукозиду ббмг (0,їммоль) М-Ілізил-Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-бсатрациліну, ди-трифторацетат (приклад 2.15) 206бмкл етилдіїзопропіламіну.
Очищення шляхом подвійного осадження із суміші метанол/дихлорметан (1:1) простим ефіром. Промивання фільрувального залишку простим ефіром. Вихід: 8995 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:4:0,5 КК - 0,911. 6.19) М-«Мо,Ме-біс-(О-(р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-лізил)-батрацилін: 515мг (0,39ммоль) сполуки із прикладу 6.19л.а розчиняють в мл диметилформаміду і мл піперидину і протягом ЗОхв перемішують при 20"С. Пробу згущують і залишок дигерують ефіром. Відсмоктують і фільтрувальний залишок розчиняють в диметилформаміді. Після осадження простим ефіром і промивання фільтрувального залишку залишаються ЗЗ5мг (7895) кристалічного цільового продукту.
ЕАВ-М5: т/2 - 1100 - МАТ.
Приклад 6.20
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонт|-лізил-діамінопропіоніл)-батрацилін: с 6.20.а) о
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-фенілатто-тіокарбоніл|-лізил-М р-(фтореніл-9-метоксикарбо ніл)-діамінопропіоніл)-батрацилін:
Синтез аналогічний прикладу 619
Едукти: бОмг (0.22ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2 т 100мг (0,11ммоль) М-(лізил-Мр-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-діаміно-пропіоніл|-батрациліну, юю ди-трифторацетат (приклад 2.16) 7бмкл етилдіїзопропіламіну.
Очищення шляхом подвійного осадження із метанолу простим ефіром. Промивання фільтрувального о залишку простим ефіром. Вихід: 105мг (7390). -- 6.20) со
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл-лізил-діамінопропіоніл)-батрацилін: 10Змг (0,079ммоль) сполуки із прикладу 6.20.а деблокують піперидином аналогічно прикладу 6.19. Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:3:0,3; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:6:0,6). Виморожування із суміші вода/діоксан. Вихід: 2190; (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова « 20 кислота 5:1:0,2 К, - 0,321). з с Приклад 6.21
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д :з» -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-діамінопропіоніл)-батрацилін, динатрієва сіль:
Цю сполуку одержують аналогічно прикладу 6.20 в дві стадії, виходячи із вуглеводу із прикладу 1.10 і пептидного кон'югату із прикладу 2.16. Хроматографічне очищення можна пропустити, оскільки побічні продукти б можуть бути видалені дигеруванням з метанолом та простим ефіром. Потім здійснюють переведення в динатрієву сіль двома еквівалентами 0,1 М розчину їдкого натру. Вихід: ббУю в дві стадії. (ОС: - ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота -10:3:1,5 К, - 0,3). о Приклад 6.22
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-серил)-батрацилін: і-й Едукт: бОмг (0,22ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2
Та» 7бмг (0,11ммоль) М-|Ілізил-серил|-батрациліну, ди-трифторацетат (приклад 2.10)
Едукт: бОмг (0,19ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10 24мг (0,06З3ммоль) М-|лізил|-батрацилін (приклад 217)
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1795) 15:2:0,21; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:4:0,5; виморожування із води. Вихід: 2695. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова
Ф) кислота 5:1:0,2 К, - 0,25). ко Приклад 6.26
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-батрацилін: во Розчин сполуки 1.31 (79мг, 0,22ммоль) в суміші діоксан/«вода 1:11 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (33,5мкл, О,44ммоль). Через 10 хв. згущують у вакуумі і залишок осушують у вакуумі протягом год. Одержаний ізотіоціанат в абсолютному диметилформаміді (1Омл) розчиняють і змішують зі сполукою 2.17 (37,7мг, О0,1ммоль) і етилдіїіззопропіламіном (О0,5мл). Перемішують протягом 1бгод при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:1 5 20:15 101). Одержують 65 жовті кристали (56,7мг, 5390); ОС (етилацетат/етанол 2:1); К, - 0,72; т. пл. - 12572 (розклад.).
Приклад 6.27
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метоксикарбонтметил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-батрацилін:
Сполуку 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.17 (З7,7мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:11 -» 201 -5 10:11 одержують жовті кристали (51,1мг, 4496); ОС (етанолі: К, - 0,80; т. пл. - 176"С (розклад.).
Приклад 6.28
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д -Ю-галактопіранозил/-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-батрацилін, динатрієва сіль:
Сполуку 1.43 (77,З3мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.17 (37,7мг, О,1ммоль). Очищення осадженням із суміші метанол/дихлорметан 1:11 діетиловим ефіром дає жовті кристали (53мг, 4796); ОС Іметанолі: К;- 0,75: т. пл. - 22607 (розклад.).
Приклад 6.29
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамотметил-р 75 -Ю-галактопіранрзил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (72,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.17 (37,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (55,6 мг, 48 9в); ОС (етанолі: К, - 0,09; т. пл. - 2067 (розклад.).
Приклад 6.30
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін:
Сполуку 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,3мг, О,Т1ммоль). Після згущення у вакуумі розсиняють у суміші дихлорметан/метанол 1:1 (1Омл), осаджують продукт шляхом додавання діетилового ефіру (15мл) і промивають невеликою кількістю охолодженого льодом с метанолу. Одержують жовті кристали (4бмг, 4195), ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К,;- 0,12: Т. пл. - 190-19170 о
Приклад 6.31
М-(Мо Ме-біс-(О-(р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-серил)-батрацилін: р-амінофеніл- р-І -фукопіранозид (56,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,З3мг. О0,1ммоль) Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етанол) і - осадженням із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (73,8мг. 7090), ОС о (етанол) К;- 0,15: т. пл. - 12376
Приклад 6.32 о
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-рд «-- -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін:
Зо Сполуку 1.31 (7Умг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,3мг, іш
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етилацетат/етанол 7:1| одержують жовті кристали (43,8мг, 3896); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К;- 0,31; т, пл. - 17670.
Приклад 6.33 «
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метоксикарбонілметил- Д -о то -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін: с Сполуку 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 :з» (69,3мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етилацетат/етанол 3:11 одержують жовті кристали (46,2мг, 37905); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К;- 0,12; т. пл. - 16170.
Приклад 6.34 б М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін, динатрієва сіль: - Сполуку 1.43 (77,Змг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом о 2.10 (69,Змг, О,1ммоль). Одержують жовті кристали (39,2мг, 31965); ОС |метанолі| К,; - 0,77; т. пл. - 213-21570 (розклад.). о Приклад 6.35
Т» М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін:
Сполуку 144 (72.2мг, 0,2З3ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,3мг, 0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/етанол 2:11) одержують жовті кристали (66,1 мг. 5395); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К, - 0,14, т. пл. - 1927С (розклад.).
Ф) Приклад 6.36 ка М-їМо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-о, -Ю-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін: во Сполуку 1.40 (62, 8мг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,Змг, О,Т1ммоль). Одержують жовті кристали (48,Умг, 44965). ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К, - 0,10; т. пл. - 2042756.
Приклад 6.37
М-їМо;, Ме-біс-(О-(2,3-ди-О-метил-о, 65 -ЮО-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін:
Сполуку 1.41 (ббмг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,3мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етилацетат/етанол 7:1| одержують жовті кристали (52мг, 4595); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: КК; - 0,28: т. пл. - 164-165".
Приклад 6.38
М-(Мо Ме-біс-(О-(4-0-(р-О-галактопіранозил)- д -ЮВ-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-серил)-батрацилін:
Сполуку 1.56 (954мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.10 (69,3мг, О,Тммоль). Після згущення у вакуумі продукт ретельно промивають гарячим метанолом (5Омл).
Одержують жовті кристали (61,бмг. 44965) ОС |метанолі К, - 0,32, т. пл. - 270 (розклад.).
Приклад 6.39
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-серил)-батрацилін: р-амінофеніл- р-І-фукопіранозид (56,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.11 (62,б6мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етанол) і осадженням залишку із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (50,Умг, 4890); ОС (етанолі: К, - 0,14: т. пл. - 13370.
Приклад 6.40
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-рд -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-серил)-батрацилін:
Сполуку 1.31 (7Умг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.11 (62,бмг,
О/М1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |етилацетат -» етилацетат/етанол 5:1)| одержують жовті кристали (53,8мг, 4790); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К,- 0,38; т. пл. - 145-14670.
Приклад 6.41
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метоксикарбонілметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-серил)-батрацилін: с
Сполуку 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.11 Ге) (62,б6мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етилацетат/етанол 3:11 одержують жовті кристали (52,4мг, 42905); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К;- 0,12; т. пл. - 16870.
Приклад 6.42
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В т 3о -Ю-галактопіранозил/-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-серил)-батрацилін, динатрієва сіль: ІС о)
Сполуку 1.43 (77,Змг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.11 (62,бмг, О,1ммоль). Одержують жовті кристали (69,2мг, 55965); ОС |метанолі| К, - 0,71; т. пл. - 214-21670 о (розклад.). --
Приклад 6.43
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- Д ї-о -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-серил)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (72,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.11 (62,бмг, О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/етанол 2:1| одержують жовті « 20 кристали (46,4мг, 3890); ОС (етилацетат/етанол 2:1): К, - 0,10; т. пл. - 17376. -в
Приклад 6.44 с М-(Мо;, Ме-біс-(О-(р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін: :з» р-амінофеніл- р-І-фукопіранозид (56,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.7 (72,1мг, О0,Тммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (69,4мг, 6490); ОС (етанолі: КК, - 0,14; т. пл. - 185-187760. б Приклад 6.45
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-рд - -Ю-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін: о Сполуку 1.31 (7Умг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.7 (72, 1мг, сл 5р б/1ммоль) Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/оцтова кислота 2001 -х етилацетат/етанол 3:1| одержують жовті кристали (99,5мг, 8595); ОС (етанолі: К, - 0,59; т. пл. - 14972 (розклад.).
Чл» Приклад 6.46
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін, динатрієва сіль:
Сполуку 1.43 (77,3мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.7 (72,1мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром о одержують жовті кристали (93,4мг, 73905); т. пл. - 22070 (розклад.). ко Приклад 6.47
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- р бо -О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (72,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.7 (72,1мг, О,Тїммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |етилацетат/(етанол/оцтова кислота 400:100:2) одержують жовті кристали (69,7мг, 5790); ОС (етанолі: К, - 0,11. т. пл. - 11176.
Приклад 6.48 бБ М-«(Мо Ме-біс-(О-(р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Сполуку 6.44 (21,7мг, 20ммоль) суспендують у воді (1Омл) і суспензію з перемішуванням краплями змішують з 0,05М-розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН «10). Ліофілізаціею профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (20,бмг, 93965).
Приклад 6.49
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Сполуку 6.45 (23,5мг, 20мкмоль) перетворюють і обробляють як описано в прикладі 6.48. Одержують жовту аморфну тверду речовину (23,9мг, 10096). 70 Приклад 6.50
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін, три-натрієва сіль:
Сполуку 6.46 (25,бмг, 20ммоль) розчиняють у воді (1Омл) і розчин з перемішуванням краплями змішують з 0,о5М-розчином їдкого натру, до досягнення значення рН 8. Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують 75 жовту аморфну тверду речовину (24мг, 9296).
Приклад 6.51
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аспарагіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Сполуку 6.47 (24,7мг, 20мкмоль) перетворюють і обробляють як описано в прикладі 6.48.Одержують жовту аморфну речовину (23.Омг, 9290)
Приклад 6.52
М-«(Мо Ме-біс-(О-(р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-О-глютаміл)-батрацилін: р-амінофеніл- р-І-фукопіранозид (56,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.8 (66,вмг, О,Т1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/оцтова кислота с 200:1 -» етилацетат/етанол/оцтова кислота 10:1:0,1| одержують жовті кристали (39,5мг, 3690); ОС (етанолі: К; - о 0,09; т. пл. - 138-1397С (розклад.).
Приклад 6.53
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-глютаміл)-батрацилін, динатрієва сіль: -
Сполуку 1.43 (77,3мг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом му 2.8 (66,8мг, О,Тммоль). Одержують жовті кристали (97,4мг, 7590); т. пл. - 1807 (розклад.).
Приклад 6.54 о
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В «- -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-глютаміл)-батрацилін, три-натрієва сіль: 3о Сполуку 6.53 (25,б6мг, 20мкмоль) перетворюють і обробляють як описано в прикладі 6.50. Одержують жовту ее, аморфну тверду речовину (24,Змг, 9296); (4129 - 20,02 (с - 0,26 / Н20).
Приклад 6.55
М-(Мо Ме-біс-(О-(р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-гліцил)-батрацилін: « 20 р-амінофеніл- р-І -фукопіранозид (56,2мг. 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним з с кон'югатом 2.9 (66.2мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етанол одержують жовті кристали (62.2мг, 609), ОС (етанол): К, - 0,12, т. пл. - 17676. :з» Приклад 6.56
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р 7"О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|)-лізил-гліцил)-батрацилін:
Ф Сполуку 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |(етилацетат/етанол 10:1 -» 2:1| одержують - жовті кристали (56,2мг, 5296); ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К;- 0,22; т. пл. - 19776. ав! Приклад 6.57
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-р
Мн -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін:
ЧТ» Сполуку 1.31 (7Умг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/етанол 10:11 -» 3:1)| одержують жовті кристали (26,2мг, 2390); ОС (етилацетат/етанол 2:1): К, - 0,39, т. пл. - 20976.
Приклад 6.58 о М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метоксикарбонілметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін: ко Сполуку 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/"етанол о -» 10:1| одержують 60 жовті кристали (22мг, 1890); ОС (етилацетат/етанол 2:1): К, - 0,06, т. пл. - 194-1957С (розклад.)
Приклад 6.59
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін, динатрієва сіль:
Сполуку 1.43 (77,3мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 бо (66,2мг, 0,1ммоль). Після згущення у вакуумі продукт ретельно промивають метанолом, дихлорметаном і діетиловим ефіром. Одержують жовті кристали (86,8мг, 7190), т. пл. - 230-2327С (розклад.).
Приклад 6.60
М-(Мо Ме-біс-(О-43-О-карбамоїлметил- р -Ю-галактопіраирзил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-гліцил)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (72,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг, О0,1ммоль). Після згущення у вакуумі і промивання метанолом, дихлорметаном і діетиловим ефіром одержують жовті кристали (40,9мг, 3595). ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К, - 0,05; т. пл. - 214-2167С (розклад.).
Приклад 6.61
М-їМо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-2-ЮО-маннопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін:
Сполуку 1.40 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |(етилацетат/етанол 10:11 -» 2:1| одержують жовті кристали (72,2мг, 669Ув): ОС (етилацетат/етанол 2:1|: К;- 0,18, т. пл. - 17576.
Приклад 6.62
М-їМо;, Ме-біс-(О-(2,3-ди-О-метил-о, 75 -Ю-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-гліцил)-батрацилін:
Сполуку 1.41 (ббмг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.9 (66,2мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/етанол 10:11 .» 3:1)| одержують жовті кристали (66,бмг, 6090); ОС (етилацетат/етанол 2:1); К, - 0,41; т. пл. - 17376.
Приклад 6.63
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-треоніл)-батрацилін: р-амінофеніл- р-І -фукопіранозид (56,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.12 (б4мг, О.1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат -» етанол) і осадженням продукту із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (30,5мг, 2890); ОС (етанолі: К, - 0,10; т. пл. 5 17276. с 29 Приклад 6.64 Ге)
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(8рД-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.23 (59,7мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:11 -» 1:11 одержують жовті кристали (68,Змг, 6490); ОС |дихлорметан/метанол 1:1)|: К, - 0,49; т. пл. хх 222-2247С (розклад.). ч
Приклад 6.65 ІС о)
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2-О-метил-р о -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.24 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 - з (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром с одержують жовті кристали (69,бмг, 63905); ОС (етанол): К, - 0,24: т. пл. - 20870 (розклад.).
Приклад 6.66
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: « 20 Сполуку 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 з с (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 15:11 -» 10:15 5:11 одержують жовті кристали (94,Змг, 8595); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,16; т. пл. 5 2127С (розклад.). :з» Приклад 6.67
М-(Мо Ме-біс-(О-(4-О-метил-р "О-гталактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Ге») Сполуку 1.26 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 15:11 -» 10:1-»5 5:11 - одержують жовті кристали (52,бмг, 4890); ОС |дихлорметан/метанолі: К, - 0,88, т. пл. - 19272 (розклад.). ав! Приклад 6.68
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(6-О-метил-р і-й -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «з» Сполуку 1.27 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали . (96,7мг, 8895); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К, - 0,04; Т. пл. 5 21072 (розклад.).
Приклад 6.69
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2,3-ди-О-метил-р о -Ю-галактопгранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: іме) Сполуку 1.28 (65,9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:1)|) одержують 60 жовті кристали (57,4мг, 5190); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: КК, - 0,40; Т. пл. - 148"7С (розклад.).
Приклад 6.70
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2,4-ди-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.29 (65,9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 65 (67,7мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:1 -» 15:-» 10:11 одержують жовті кристали (74,2мг, 6590); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,40: Т. пл. - 1407С (розклад.)
Приклад 6.71
М-(Мо;, Ме, -біс-(О-(2,6-ди-О-метил-О-ЮО-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.30 (65,9мг, О0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:11 -5 15:1| одержують жовті кристали (43,9мг, 4095); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К,- 0,43; т. пл. - 22970 (розклад.).
Приклад 6.72
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-рд 70 -О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.31 (7Умг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1)|) одержують жовті кристали (66,2мг, 5990); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: К, - 0,39; т. пл. - 18476.
Приклад 6.73
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,6-ди-О-метил-рд -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.32 (65,9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг. О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 15:11 -» 10:11 одержують жовті кристали (57,1мг, 5090); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,42; т. пл. - 19072 (розклад.)
Приклад 6.74
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(4,6-ди-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.33 (79мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг,
О,їммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:11 5 10:11 5 511. ДЦ Є 29 одержують жовті кристали (47,Омг, 4295); ОС |дихлорметан/метанол 5:11. Б, - 0,39, т. пл. - 16926. ге)
Приклад 6.75
М-(Мо Ме-біс-(О-(2,3,4-три-О-метил-д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.34 (бО9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, З
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:1| одержують жовті ю кристали (83,8мг, 7290), ОС |дихлорметан/метанол 10:1): К,- 0,36; т. пл. - 1657С (розклад.)
Приклад 6.76 о
М-(Мо Ме-біс-(О-(2,3,6-три-О-метил-рд «-- -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Зо Сполуку 1.35 (б9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, іш
О,Тммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:11 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (105мг, 9195); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К, - 0,48; т. пл. - 19472 (розклад.)
Приклад 6.77 «
М-(Мо Ме-біс-(О-(2,4,6-три-О-метил-д З 70 -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: с Сполуку 1.36 (б9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, :з» О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:11 -»5 10:1)| одержують жовті кристали (б7мг, 5895); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,54; Т. пл. - 228"С (розклад.). 15 Приклад 6.78
Фу М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3,4,6-три-О-метил-Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: - Сполуку 1.37 (б9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, о О,Тммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:11 діетиловим ефіром 5о Одержують жовті кристали (109,Змг, 9496); ОС |дихлорметан/метанол 5:1|: К, - 0,52; Т. пл. - 1807С (розклад.). о Приклад 6.79
Їх» М-(Мо;, Ме-біс-(О-(2,3,4,6-тетра-О-метил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.38 (б9мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7 мг, 5Б О,Тммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:11 диетиловим ефіром одержують жовті кристали (99,2мг, 8490); ОС |дихлорметан/метанол 10:1); К, - 0,73; т. пл. - 1887С (розклад.) (Ф; Приклад 6.80 ко М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метоксикарбонілметил- Д -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: во Сполуку 1.42 (75,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (22мг, 1895); ОС |дихлорметан/метанол 5:1): К.: 0,33; Т. пл. - 194-1957С (розклад.).
Приклад 6.81
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В 65 -О-гапактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, динатрієва сіль:
Сполуку 1.43 (77,Змг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом
2.13 (67,7мг, О,Тммоль). Одержують жовті кристали (99,7мг, 8195), ОС І|метанол|: К, - 0,80; Т. пл. - 23076 (розклад.).
Приклад 6.82
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбамоїлметил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (72,2мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,ТїТммоль). ОСчищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 7:1| одержують жовті кристали (29,4мг, 2595); ОС |дихлорметан/метанол 3:1|: К;- 0,23; Т. пл. - 201-20276. 70 Приклад 6.83
М-(Мо Ме-біс-(О-(3,4-ди-дезокси-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.52 (52,б6мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 17:1)| одержують 75 Жовті кристали (38,8мг, 3795); ОС |дихлорметан/метанол/аміак, (2590) 15:3:0,2|: К, - 0,40; Т. пл. - 17576.
Приклад 6.84
М-їМо;, Ме-біс-(О-(0-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.39 (59,7мг, 0,22ммоль) як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,Тммоль) перетворюють. Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1 .» 1:1)|) одержують жовті кристали (52мг, 4895), ОС |дихлорметан/метанол 1:1): К, - 0,19; Т. пл. - 19670.
Приклад 6.85
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3,4-ди-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.31 (79мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.2 (67,7мг, «М б0/1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:1| одержують жовті о кристали (77,бмг. 6990); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 15:3:0,21: К, - 0,33 Т. пл. - 18670.
Приклад 6.86
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(4-0О-(р-О-галактопіранозил)- Д -ЮВ-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін: «
Сполуку 1.56 (954мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 ю (67,7мг, О,Т1ммоль). Після згущення у вакуумі залишок ретельно промивають гарячим метанолом (5Омл).
Одержують жовті кристали (102,8мг, 7390); ОС |метанолі: К, - 0,27; Т. пл. 5 225-226" (розклад.). о
Приклад 6.87 «-
М-(Мо Ме-біс-(О-(4-0-(3'-сульфат-р-О-галактопіранозил)- В
Зо -Д-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, динатрієва сіль: ісе)
Сполуку 1.57 (117, вмг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (152,8мг, 9596); Т. пл. - 23270 (розклад.). «
Приклад 6.88
М-(Мо,Ме-біс-(О-(4-0-(3'-О-метил-д-О-галактопіранозил)- В З с -ЮВ-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Із» Сполуку 1.58 (98,4мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.13 (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (118,2мг, 83905). ОС |дихлорметан/метанол 1:1|: К, - 0,58, Т. пл. - 2217С (розклад.)
Приклад 6.89 б М-(Мо Ме-біс-(О-(2-О-метил-4-0-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)- В - -ЮВ-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.59 (101,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 213 о (67,7мг, О,1ммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 15:11 -» 10:1-»5 5:11 1 20 одержують жовті кристали (101,Змг, 7090); |дихлорметан/метанол 2:1): К, - 0,58; Т. пл. - 233"С (розклад.).
Приклади 7.1 -7.13 с»
Загальна формула
А о о не ві в о
Ф) зва мно Тк кн, м т і о ІФФ 5
М п (по) 60 Виходячи із інших амінокислотних або пептидних кон'югатів батрациліну або батрациліну, аналогічно прикладу 4.1.а) одержують такі глікокон'югати:
Приклад 7.1
Мм-(М-(О-(3-О-метил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонт|-О-алант)-батрацилін: в5 Едукти: Вуглевод із прикладу 1.2, амінокислотний кон'югат із прикладу 2.3
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:1:0,1).
Виморожування із суміші діоксан/вода. Вихід: 4295 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2 К,- 0,911.
Приклад 7.2
М-А(ч-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Едукти; Вуглевод із прикладу 1.10, амінокислотний кон'югат із прикладу 2.3
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:3:0,3). 70 Виморожування із суміші діоксан/вода і заключне переведення в натрієву сіль 0,1 М розчином їдкого натру.
Вихід: 4395 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак(1 7-90) 15:4:0,5 МК, - 0,141.
Приклад 7.3
М-А(М-ЇО-(р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-серил-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: р-амінофеніл-р-І -фукозид, амінокислотний кон'югат із прикладу 2.18
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:3:0,3).
Виморожування із суміші діоксан/вода. Вихід: 9395 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:3:0,3 КК; - 0,28)
ЕАВ-М5: т/2 - 705 - М-Н1.
Приклад 7.4
М-А(М-ЇО-(р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: р-амінофеніл-р-І -фукозид, амінокислотний кон'югат із прикладу 2.19
Очищення шляхом дигерування метанолом і осадження із суміші метанол/дихлорметан простим ефіром.
Вихід: 6595 (ОС ацетонітрил/вода/лводяна оцтова кислота; 5:1:0,3; К, - 0,781 с
Приклад 7.5 о
М-(М-(О-(р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-глютаміл-О-аланіл)-батрацилін:
Едукти: р-амінофеніл-р-І -фукозид, амінокислотний кон'югат із прикладу 2.20
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5; пізніше в такій в же системі з пропорціями 15:6:0,6). Виморожування із суміші діоксан/вода. Вихід: 9295 (ОС: ю дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:8:0,8; М, - 0,551.
Приклад 7.6 о
М-(О-ІЗ3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-батрацилін: - 250мг (Іммоль) батрациліну розчиняють в 5Омл діоксану і після додавання 184мкл тіофосгену перемішують 3о протягом 2год при 207С. Згущують, дигерують ефіром і фільтрують. Фільтрувальний залишок 1бгод в глибокому ее, вакуумі осушують і потім розчиняють в ЗОмл диметилформаміду. Додають З312мг (Іммоль) вуглеводу із прикладу 1.10 ї 5Б0Омкл етил-діззопропіламіну і обробляють ультразвуком протягом 4год. Потім згущують і очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-96) 15:2:0,2; пізніше в такій же системі з « пропорціями 15:6:0,6). Суттєві фракції згущують і ліофілізують із суміші діоксан/вода. Вихід: ЗбЗмг (60905) -
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:6:0,6 К, - 0,381. с Приклад 7.7 "з М-(О-(3-О-метил-р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-батрацилін: " Одержання аналогічне прикладу 7.6, виходячи із батрациліну і вуглеводу із прикладу 1.2.
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:1:0,1; Вихід: (58965) 15 ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-96) 15:2:0,2 К,- 0,391.
Ф ЕАВ-М5: т/2 - 561 - Мт. - Приклад 7.8
М-(М-(О-(3,4-ди-О-метил- р-ЮО-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін: о ; '
Сполуку 1.31 (37,5мг, О,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг, 1 50 О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 30:1| одержують жовті
ГТ» кристали (49.Змг, 7590); ОС (етилацетат/етанол 2:1): К; - 0,81; Т. пл. - 18572 (розклад.).
Приклад 7.9
М-А(ч-(О-(2,3,4-три-О-метил-д-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін: 5 Сполуку 1.34 (34,5мг, О,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 40:11 -5 15:1)| одержують (Ф) жовті кристали (54,Умг, 8195); ОС |дихлорметан/метанол 20:1|: К, - 0,15; Т. пл. - 19072 (розклад.).
ГІ Приклад 7.10
М-«М-(О-(3-О-метоксикарбонілметил-В-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батр во ацилін:
Сполуку 1.42 (37 мг, О0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:11 5 101) одержують жовті кристали (44,Змг, 6390), ОС (етанол): К, - 0,85, т. пл. - 19572 (розклад.)
Приклад 7.11 65 М-А(ч-(О-(3-О-карбоксиметил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін, натрієва сіль:
Сполуку 1.43 (38,бмг, О,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:11 діетиловим ефіром одержують жовті кристали (63,8мг, 89905); ОС (етанолі: К, - 0,15; Т. пл. - 2177С (розклад.).
Приклад 7.12
М-«М-(О-(3-О-карбамоїлметил- р -Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін:
Сполуку 1.44 (37 мг, О0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг,
О,Тммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 20:11 -» 10:11 -5» 511 70 одержують жовті кристали (2Омг, 2996); ОС (етанолі: К, - 0,15; Т. пл. - 1847С (розклад.).
Приклад 7.13
Мм-(М-(О-(р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-батрацилін: р-амінофеніл- р-І-фукопіранозид (28,1мг, 0,11ммоль) перетворюють як описано в прикладі 6.26 пептидним кон'югатом 2.3 (32мг, О,їммоль). Очищенням шляхом тонкошарової хроматографії (етилацетат/петролейний 75 ефір 2:11 -» 5:11) одержують жовті кристали (49,8мг, 8195); ОС (етанолі: К, - 0,50; Т. пл. - 17376.
Приклади 8.1-8.12
Загальна формула
А о (9) пе
КА в збе т. (9) ! З ех нм «МА с (в) о
Приклад 8.1 о
М-(Ме-2-хлор-4-(0-(3-О-метил- Д-І -фукозил)-4-гідрокси г феніламіно|-триазин-6-іл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат 8.1.а) ЧІ
М-АМо-(трет-бутоксикарбонил|)|-М є-12-хлор-4-(О-(3-0-метил- р-І фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-б-іл)-лізи ю л-Ю-аланіл)-батрацилін: 265мг (0,98ммоль) р-амінофеніл-3-О-метил-р-І-фукозиду (приклад 1.2) і 181мг (0,98ммоль) хлорангідриду (2 ціанурової кислоти розчиняють в 5Омл суміші діоксан/«вода 1:11, охолоджують до температури -572 і після «-- додавання 8Змг гідрокарбонату натрію протягом 15хв перемішують при цій температурі. Потім додають 538мМг (0,98ммоль) М-(Ме-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланілІ-батрациліну (приклад 2.4), розчиненого в ї4мл диметилформаміду і ще 8Змг гідрокарбонату натрію і дають нагрітися до кімнатної температури. Після 16бгод перемішування при 207С згущують і оброблюють залишок водою. Відсмоктують, сушать залишок в глибокому вакуумі і одержують 890Омг (9695) цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол 10:1 К, - 0,261 « 5.1)
М-(Ме-12-хлор-4--0-(3-О-метил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-б-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, не) с трифторацетат: "з 10Омг (0,11ммоль) сполуки із прикладу 8.1.а в протягом ЗОхв при 0"С перемішують в суміші 5мл безводної трифтороцтової кислоти і мл дихлорметану. Згущують і очищають шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак 17-90) 15:1,5:0,15. Осадження із суміші метанол/простий ефір дає, 41мг (9595) 35 цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:2:0,2 К- 0,26) ЕАВ-М5: т/2 - 829 - М.-Н1. б Приклад 8.2 - М-(Ме-І(4-гідроксиетиламіно-2--0-(3-О-метил- В о -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат 8.2.а) 1 50 М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл|)-М є-(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(3-О-метил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно)-триаз
Т» ин-6-іл)-лізил-О-аланіл)-батрацилін: 10Омг (0,11ммоль) сполуки із прикладу 8.1.4 розчиняють в Змл діоксану. Додають бОмг карбонату калію і б,5мл 0,1 М розчину етаноламіну в діоксані і перемішують 18год при 80"7С. Потім згущують і залишок розмішують вв З ВОДОЮ. Фільтрують і очищають фільтрувальний залишок шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:1:0,1). Після згущення суттєвих фракцій і сушіння в глибокому вакуумі (Ф) одержують 8Змг (8095) цільової сполуки. (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:2:0,2 К,- 0,231).
ГІ 8.2)
М-(Ме-(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(3-О-метил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-б бо атрацилін, трифторацетат: б7мг (0,07ммоль) сполуки із прикладу 8.2.3 деблокують аналогічно прикладу 8.1. Очищення здійснюють шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:2:0.2). Остаточне осадження із суміші метанол/простий ефір дає цільовий продукт з виходом 90-95. РАВ-М5 т/: - 854 - Мат
Аналогічно прикладу 8.1 одержують такі глікокон'югати: 65 Приклад 8.3
М-(Ме-(2-хлор-4--0-(2-0-метил- В
-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.1; Вихід: 7695; ЕАВ-М5: т/2 - 829 - МН1.
Приклад 8.4
М-(Ме-(2-хлор-4-(О-(р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: р-амінофеніл-р-І -фукозид;
Вихід: 3695; ЕАВ-М5: т/2 - 815 - М-1
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-96) 15:4:0, К, - 0,44).
Приклад 8.5
М-(Ме-(2-хлор-4-(О-(3-дезокси- р -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: углевод із прикладу 1.6;
Вихід: 5695; ЕАВ-М5: т/2 - 799 - М-1
ІОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,54).
Аналогічно прикладам 8.1.4, 3.2.а та 8.2 із пептидного кон'югату із прикладу 2.4 або із одержаних відповідним чином І! -аланіл-ізомерів одержують такі глікокон'югати:
Приклад 8.6
М-(Ме -Ід-гідроксиетиламіно-2-(О-(2-О-метил-В-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6б-іл|-лізил-О-аланіл)-батрац илін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.1;
Вихід:7895, ЕАВ-М5:т/2-854-М 1;
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:4:0,5 К, - 0,331. Ге
Приклад 8.7 (5)
М-А(Ме-І(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(4-О-метил- р -І-фукозил)-4-гідроксифеніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.4;
Вихід: 3890; (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5 КК, - 0,4). «
Приклад 8.8 ю
М-їМЕ -Ід-гідроксиетиламіно-2-(О-(3-дезокси-В-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6б-іл)-лізил-О-аланіл)-батрац (ав) илін, трифторацетат: «-
Едукт: Вуглевод із прикладу 1.6;
Вихід: 7790; ЕАВ-М5: т/7 - 824 - МА-1; (Се)
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5 К, - 0,371
Приклад 8.9
М-(Ме|(4-гідроксиетиламіно-2-(О-( р « -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-О-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Едукти: р-амінофеніл-р-І-фукозид, о) с Вихід: 5395. РАВ-М5 т/: - 840 - М'-1. "з ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:4:0,5 К, - 0,301. " Приклад 8.10
М-(Ме-(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(3-О-метил- В -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
Ме Едукт: Вуглевод із прикладу 1.2; - Вихід: 8890; (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:3:0,3 К,- 0,3)
Приклад 8.11 о М-(Ме-(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(2-О-метил- В с 50 -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно|-триазин-6-іл|-лізил-аланіл)-батрацилін, трифторацетат:
І» Едукт: Вуглевод із прикладу 1.1;
Вихід: 5895;
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:4:0,5 К, - 0,401.
Приклад 8.12 99 М-(Ме-(4-гідроксиетиламіно-2-(О-(4-О-метил- В
ГФ) -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно)-триазин-6-іл|-лізил-аланіл)-батрацилін, трифторацетат: 7 Едукт: Вуглевод із прикладу 1.4;
Вихід: 6696; ЕАВ-М5:т/2-854-М 1;
ІОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0.5 К, - 0,371 бо Приклад 9.1
І-(О-аланіл|-хінолон-а, трифторацетат б5 о
СЕ сон ка
Мн
Е й ІФ й (в) 95 М соон сі ї Й то 9.1.а). М-ІМ-(трет-бутоксикарбоніл)-О-алант|-хінолон-а:
М-(трет-бутоксикарбоніл)-О-аланін (3,6бг, 19,2ммоль) і 2-ізобутокси-1-ізобутокси-карбоніл-1,2-дигідро-хінолін (5,8г, 19,2ммоль) розчиняють в 200мл диметилформаміду.
Після год перемішування при кімнатній температурі додають хінолон-а (4г, 9бммоль) і З,Змл етилдіїзопропіламіну і протягом 1Огод оброблюють пробу ультразвуком. Згущують, залишок розчиняють в т дихлорметані і осаджують простим ефіром. Після фільтрування, промивання простим ефіром і сушіння в глибокому вакуумі одержують 4,58г (81905) цільового продукту, який перетворюють без подальшого очищення. 9.1) Ч-(О-аланіл|-хінолон-а, трифторацетат: 4,56бг (7,75ммоль) сполуки із прикладу 9.1.4 розчиняють в БОмл дихлорметану і БОмл безводної трифтороцтової кислоти при 07С і протягом год перемішують при цій температурі. Згущують, дистилюють з дихлорметаном і осаджують із метанолу простим ефіром. Одержують 4.07г (8795) кристалічного цільового продукту. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,34)
Приклад 9.2
М-(аланіл|-хінолон-а, трифторацетат: о й с севжооНн но Ж о
Ї МН Е й (в) м « соон сі М / юю 4 щі
Синтез ідентичний синтезу в прикладі 9.1. -
Приклад 9.3 (се)
М-І(лізил-О-аланіл|-хінолон-а, ди-трифторацетат сгзсоон Мн, о - с сгзсоон ни шк. Е з о о
М соон ох (22) чі - 9.3.а) М-ІМо,,Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолон-а: о 341мг (0,984ммоль). Мо, Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізину розчиняють в ТОмл ЮОМЕ і при 0"С змішують з с 20 200мг (1.4в8ммоль) М-гідроксибензотриазолу і 227мг (1,18ммоль) гідрохлориду
Їх М'-(З-диметиламінопропіл)-М-етилкарбодіїміду. Після перемішування протягом Згод при 107"С додають 432мг (0,82ммоль) сполуки із прикладу 9.1 і перемішують ще 2год при 207С. Згущують і залишок тричі перемішують з 5Омл води. Потім залишок розчиняють в дихлорметані і сушать над сульфатом натрію. Осадження простим ефіром дає 516бмг (7895) цільового продукту. (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,551. 25 9.3). М-(лізил-О-аланіл|-хінолон-а, ди-трифторацетат:
ГФ) Деблокування 512мг (0,63ммоль) сполуки із прикладу 9.3.3 аналогічно прикладу 9.1. Осадження ефіру т оцтової кислоти простим ефіром. Вихід: 47О9мг (9090); (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:3:1,5 К; - 0,3.
Приклад 9.4 60 М-|(лізил-аланіл|-хінолон-а, ди-трифторацетат:
Синтез аналогічний синтезу ізомерів у прикладі 9.3.
Приклад 9.5
М-ІМо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолон-а б5
Мн, ? о пед
Е о со
М у соон с! 4 9.5.а) М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолон-а: 1,57г (3,3бммоль) Мо-(трет-бутокси-карбоніл)-М є-(фтореніл-9У-метоксикарбоніл)-лізину розчиняють в 25мл диметилформаміду і при 0"С змішують з бООмг (5,04ммоль) М-гідроксисукциніміду і 820мг (4,0Зммоль)
М,М'-дициклогексилкарбодіїміду. Через Згод відфільтровують утворену сечовину, до фільтрату додають 1,5г (2,8бммоль) сполуки із прикладу 9.1 і перемішують протягом 1бгод при кімнатній температурі. Залишкову сечовину відфільтровують і фільтрат очищують шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 97,5:2,5; пізніше в такій же системі з пропорціями 90:10). Потім осаджують із суміші дихлорметан/метанол 1:1 простим ефіром. Вихід: 1,5г (5690) (ОС: дихлорметан/ метанол 9:1 К, - 0,47). 9.5) М-ІМо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолон-а:
Відщеплення фтореніл-9-метоксикарбонільної групи із прикладу 9.5.3) піперидином в диметилформаміді.
Осадження сирого продукту із диметилформаміду простим ефіром. Вихід: 7295 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна сч оцтова кислота 5:1:0,2 Кк, - 0,43)
Приклад 9.6 о)
М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолон-а, трифторацетат о ша ч " В о
І | «в)
Сгзсоон нм шк. Е «- о 9)
Со є (Се) / соон сі М сі « 20 Відщеплення бутоксикарбонільної групи із прикладу 9.5.4) аналогічно прикладу 9.1. Осадження сирого з продукту із суміші метанол/простий ефір. Вихід: 8095 (ОС: дихлорметан/метанол/ аміак (17-90) 15:4:0,5 К, - 0,36). с Приклад 9.7 ; з» М-ІМо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-аланіл|-хінолон-а:
Синтез аналогічний синтезу ізомерів у прикладі 9.5.
Приклад 9.8 б М-І(лізил|-хінолон-а, ди-трифторацетат о -ь сгсоон ня. Ж о В нн Е с 70 со й «г» / соон
СезСОоН мн, сі М с 9.8.а) М-ІМо,,Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил|-хінолон-а:
ІФ) 1317мг (3,вммоль) Мо,Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл|-лізину з'єднують з хінолоном-а згідно з інструкціями іме) прикладу 9.1.4. Очищення здійснюють шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:1:0,1). Одержують 1010мг (7195) цільового продукту. 60 9.8) М-І(Ілізил|-хінолон-а, ди-трифторацетат: 1005мг (1,347ммоль) сполуки із прикладу 9.8.3 деблокують аналогічно прикладу 9.1. Після осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:1 простим ефіром одержують 96бмг (9395) кристалічного цільового продукту (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:5:3 К, - 0,33)
Приклад 9.9 бБ ІМ-(О-лізил|-хінолон-п, ди-трифторацетат:
Синтез аналогічний синтезу ізомерів у прикладі 9.8.
Приклад 9.10
М-(Ме-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил|-хінолон-а
Ге о мн Ж зр, о ЕІ о
Со / соон 70 мн, сі ї 9.10.а) М-(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М е-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил/|-хінолон-а: 1350мг (2,88ммоль) /Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9У-метоксикарбоніл)-лізину з'єднують з хінолоном-а згідно з інструкціями прикладу 9.8.4. Очищення здійснюють шляхом тонкошарової хроматографії
Ідихлорметан/метанол/аміак (17-95) 15:1:0,1; пізніше в такій же системі з пропорціями 15:2:0,2). Одержують 1025мг (8296) цільового продукту. 9.10) М-ІМе-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил/|-хінолон-а:
Відщеплення фтореніл-9-метоксикарбонільної групи із прикладу 9.10.а аналогічне прикладу 9.5. Дворазове осадження сирого продукту із метанолу простим ефіром. Вихід: 8695 (ОС; ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 Кк, - 0,48)
Приклад 9.11
М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-хінолон-а, трифторацетат: с о сгзсОоН 3 сан , Го) о лову м (| ЛГ у соон -
Оу 4 ій й о
Відщеплення бутоксикарбонільної групи із прикладу 9.10.а аналогічно прикладу 9.1. Дворазове осадження сирого продукту із суміші метанол/простий ефір. Виморожування із суміші діоксан/вода. Вихід: 9295 |ОС: - дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5 Ех - 0,44). (Те)
Приклади 10.1-10.3
Загальна формула
Ав уо
Од ї
В, я. 20 Ц Я Мн чн -о с о 5 А
Обоє м о вади з пхо1 ї- ї (ав) Приклад 10.1 с 20 М-(Ме-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламінотіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-хінолон-а: 10.1.а) ї» М-(Мо-(трет-бутоксикарбонт)-М є-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тюкарбоніл|-лізил-О- аланіл)-хінолон-а: 78мг (0,25ммоль) р-амінофеніл-3-О-карбоксиметил-р-І-фукозиду (приклад 1.10) в 15мл суміші діоксан/вода 29 11 перемішують з 47мкл (0,28ммоль) тіофосгену. Через 10хв перемішування при 207"С згущують і осушують
ГФ) протягом год в глибокому вакуумі. Потім утворене гірчичне масло в абсолютному диметилформаміді зв'язують т з 180мг (025ммоль) М-І(Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл|-хінолону-а (приклад 9.5) в присутності 8бмкл етилдіїзопропіламіну. Після дворазового осадження сирого продукту із суміші дихлорметан/простий ефір, перемішування з водою і виморожування із суміші діоксан/вода одержують 210мг (7890) цільового продукту. (ОС: бо ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,621. 10.13 М-(Ме-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-хінолон-а: 208мг (0,193ммоль) сполуки із прикладу 10.1.а в ТОмл дихлорметану протягом год при температурі 07"С перемішують з 1Омл безводної трифтороцтової кислоти. Згущують, дистилюють з 1ібмл метанолу і ве хроматографують сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 10:10:0,8. Після осадження із диметилформаміду простим ефіром одержують 52мг (2895) цільового продукту. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота
5:1:0,2 Кк, - 0,53).
Аналогічно прикладу 10.1 із частково захищених пептидних кон'югатів із прикладів 9.5, 9.7 та 9.10 одержують такі глікокон'югати:
Приклад 10.2
М-(Ме-(О-(3-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-аланіл)-хінолон-а:
Едукти: Вуглевод із прикладу 1.2; пептидний кон'югат із прикладу 9.7
Очищення проміжної стадії багаторазовим осадженням із метанолу простим ефіром. Тонкошарове 7/0 хроматографічне очищення цільової стадії сумішшю дихлорметан/ метанол/аміак (17-90) 15:4:0,5; пізніше в такій же системі з пропорціями тії 15:8:0,8. Вихід: 2095 (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:8:0,8 К, - 0,151.
Приклад 10.3
М-(Ме-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а:
Едукти: Вуглевод із прикладу 1.2; амінокислотний кон'югат із прикладу 9.10
Очищення проміжної стадії шляхом осадження із метанолу простим ефіром. Тонкошарове хроматографічне очищення кінцевої стадії сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17-90) 15:8:0,8. Вихід: 3995; (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,33).
Приклади 11.1 -11.18
Загальна формула І
А. (2, (в) і
А «Кн в,
А. в) о и у сч (9)
ХА Од, Е о т, о 7 о
М со. й пеф1 а м 4 ю
Приклад 11.1 о
М-«(Мо Ме-біс-(О-(3-0-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-хінолон-а:
ЗОмг (0,19ммоль) р-амінофеніл-3-О-метил-р-І-фукозиду (приклад 1.2) спочатку згідно з інструкціями - прикладу 10.1.а перетворюють в гірчичне масло, а потім в 5Хмл диметилформаміду з'єднують з бвмг (0,08 ммоль) «0
М-І(лізил-О-аланіл|-хінолону-а, ди-трифторацетат (приклад 9.3), в присутності 55мкл етилдіїзопропіламіну.
Перемішують протягом 1бгод при кімнатній температурі, згущують і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 85:15:1,5)|. Потім шляхом осадження із метанолу « простим ефіром одержують 6б2мг (63905) цільового продукту. (ОС: дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:22 К;- 0,5) М5-МА0О1І: т/: - 1242 5 Мт. - с Аналогічно прикладу 11.1 із пептидних кон'югатів із прикладів 9.3, 9.4, 9.8 та 9.9 одержують такі и глікокон'югати: "» Приклад 11.2
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-аланіл)-хінолон-а:
Едукти: 5Омг (0,19ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2; (о) О,Овммоль пептидного кон'югату із прикладу 9.4 - Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:1) і осадження із метанолу простим ефіром. Вихід: 79905. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К; - («в 0,421. сл 50 Приклад 11.3
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- рД-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-хінолон-а: ї» Едукти: 52мг (0,16бммоль) вуглеводу із прикладу 1.10; 0О,07ммоль пептидного кон'югату із прикладу 9.4
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:2) і 22 перемішування залишку з метанолом. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:3:1,5 К, - 0,621.
ГФ! Приклад 11.4
М-(Мо;, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- В ді -І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-хінолон-а:
Едукти: 44мг (0,14ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10 60 0О,О0бммоль пептидного кон'югату 9.3
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:2) і перемішування залишку з метанолом Вихід: 5795. (ОС ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:3:1.5 К,; - 0,62)
Приклад 11.5 б5 М-їМо;, Ме-біс-(О-(о-Ї -рамнозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-хінолон-а:
Едукти: 44мг (0,16бммоль) вуглеводу із прикладу 1.21; 0О,07ммоль пептидного кон'югату із прикладу 9.4
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 80:20:1) і перемішування залишку із сумішшю метанол/простий ефір. Вихід: ЗОмг (89905); (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,51| М5-ЕЗІ:т/2 - 1212 - МАТ.
Приклад 11.6
М-(Мо Ме-біс-(0-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонт|-лізил)-хінолон-а:
Едукти: 7Омг (0,258ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2; 70 0О,11ммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 9.8
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:1) і осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:11 простим ефіром. Змішування залишку з водою. Вихід: 4195. | ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0.2 К, - 0,651.
Приклад 11.7
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І-фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а:
Едукти: 5Омг (0,19 ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2,
О,Овммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 9.9
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:1) і осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:11 простим ефіром. Змішування залишку з водою. Вихід: 6795. |ОС: 2о ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,65) М5-ЕАВ: т/2 - 1169 - М.А1.
Приклад 11.8
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-фентаміно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, динатрієва сіль:
Едукти: 5Омг (0,1бммоль) вуглеводу із прикладу 1.10, Ге 0,07ммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 9.8 о
Після згущення реакційної проби, розчинення в ї0мл диметилформаміду і додавання мл 0,1 М розчину їдкого натру перемішують протягом 2год при 207С. Після повторного згущення розчиняють у воді і встановлюють значення рН 5. Ліофілізують і дигерують з метанолом, а потім із сумішшю метанол/простий ефір. Таким чином одержують б8мг (6595) цільової сполуки. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,261. «І
Приклад 11.9
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а, о динатрієва сіль: (ав)
Едукти: 100мг (0,32ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10; -
О,1Зммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 12.9
Після згущення реакційної проби, розчинення в 1ї0мл диметилформаміду і додавання 1бмл 0,1 М розчину (Се) їдкого натру перемішують протягом 2год при 207С. Після повторного згущення розчиняють у воді і встановлюють значення рН 5. Ліофілізують і дигерують з метанолом, а потім із сумішшю метанол/простий ефір. Таким чином одержують 1бОмг (7795) цільової сполуки, т. пл.: 218-2207С (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота « 10:3:1,5 Кк, - 0,69).
Приклад 11.10 - с М-їМо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-о-і -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а: ч Едукти: 5Омг (0,19ммоль) вуглеводу із прикладу 1.3, » О,Овммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 9 9
Одержання аналогічне прикладу 11.7. Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (1790) 10:10:1) і заключного осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:1 простим (22) ефіром. Вихід: 6690. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2: К, - 0,621. - Приклад 11.11
М-їМо;, Ме-біс-(О-(о-Ї -рамнозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а: о Едукти: 5Омг (0,19ммоль) вуглеводу із прикладу 1.21; с 20 О,Овммоль амінокислотного кон'югату із прикладу 9.9
Одержання аналогічне прикладу 11.7. Вихід: 57905. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2: КК; ї» - 0,63).
Приклад 11.12
М-А(МА,М"-біс-(0-(3-О-метил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль: 58мг (0,05ммоль) сполуки із прикладу 11.7 суспендують у воді і еквівалентом 0,1 М розчину їдкого натру
ГФ) перетворюють в натрієву сіль. Після виморожування одержують бОмг цільової сполуки.
Приклад 11.13 ді М-їМо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-б-Ю-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль: 60 Розчин сполуки 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль) в суміші діоксан/вода 1:11 (1Омл) перемішують з тіофосгеном (33,5мл, 0,44ммоль). Через 10хв згущують у вакуумі і осушують залишок протягом год у вакуумі. Одержаний ізотіоціанат розчиняють в абсолютному диметилформаміді (1Омл) і змішують зі сполукою 98 (77 4мг, 0, Тммоль) і етилдіїзопропіламіном (0.Бмл). Перемішують протягом 16бгод при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (2595) 10:10:11 -» метанол/аміак бо (2590) 20:1|. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (1ІОмл). Суспензію з помішуванням краплями змішують з 0,05М-розчином їдкого натру до одержання прозорого розчину (рН ох 10). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (39,7мг, 3296); Іво т 25,87 (с - 026 /
НО). 2
Приклад 11.14
М-(Мо, Ме -біс-(О-І4-0-(3-О-метил-р-д-галактопіранозил)-6-ЮО-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-х інолон-а, натрієва сіль: 70 Сполуку 1.58 (98,4мг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі з, пептидним кон'югатом 9.8 (77 ,4мг, О,Тїммоль). Одержують жовту аморфну тверду речовину (62,5мг, 40905); (а|ї0 - 12,97 (с - 0,26 / Н2О).
Приклад 11.15
М-(Мо Ме-біс-(О-(2-О-метил-4-0-(3-О-метил-б-О-галактопіранозил)- В 715. -Ю-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль:
Сполуку 1.59 (101,5мг, 0,22ммоль) перетворюють як описано в прикладі 11.13 пептидним кон'югатом 9.8 (77, 4мг, О0,1ммоль). Очищенням шляхом переосадження із суміші метанол/дихлорметан 1:1 діетиловим ефіром і виварюванням з етанолом одержують жовті кристали, які описаним чином перетворюють в натрієву сіль.
Одержують жовту аморфну тверду речовину (51,1 мг, 3296); (во. ж 27,97 (с - 0,24 / НЬО).
Приклад 11.16
М-(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль:
Сполуку 1.25 (62,8мг. 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 11.13 пептидним сч кон'югатом 9.9 (77,4мг, О,1ммоль). Одержують жовту аморфну тверду речовину (77,Змг, 6396); (іо. т -23.87 (с о - 0,63 /Н2О).
Приклад 11.17
М-їМо;, Ме-біс-(О-(3-О-метил-2-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-О-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль: «
Сполуку 1.40 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 11.13 пептидним ю кон'югатом 9.9 (77 ,4мг, О0,Т1ммоль). Одержують жовту аморфну тверду речовину (33,бмг, 27965); (іо. т 0,7 (с о 0,28 /НьО).
Приклад 11.18 -
М-(Мо Ме-біс-(О-(4-0-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)- В с -Ю-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-а, натрієва сіль:
Сполуку 1.58 (98,4мг, 0,22ммоль) перетворюють і очищують як описано в прикладі 11.13 пептидним кон'югатом 9.9 (77,4мг, О,Тїммоль). Одержують жовту аморфну тверду речовину (63,Омг, 4190); (іо. т -21,87 (с « - 0,22 /НьО).
Приклади 12.1-12.15 ші с Загальна формула ч А о ше оц (о) В, -
А соо- - паб ам о 4
Приклад 12.1 о М-(М'-(О0-(3-О-метил- р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонті|-О-аланіл)-хінолон-а:
Їх» 447мг (1,6бммоль) р-амінофеніл-3-О-метил-р-І-фукозиду (приклад 1.2) згідно з інструкціями прикладу 10.1.а спочатку перетворюють в гірчичне масло, а потім в 40мл диметилформаміду з'єднують з 1г (1,6бммоль) -(О-аланіл|-хінолону-а, трифторацетат (приклад 9.1) в присутності 5б8мкл етилдіїзопропіламіну. Протягом 2год ов перемішують при кімнатній температурі, згущують і очищають шляхом багаторазового осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:1 простим ефіром. Потім залишок ще двічі розмішують з водою. Одержують 87бмг (6690)
Ф) цільового продукту. т. пл.: 19872; (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,63). ка Аналогічно прикладу 12.1 із амінокислотних кон'югатів із прикладів 9.1 та 9.2 одержують такі глікокон'югати:
Приклад 12.2 во М-(М'-(О0-(3-О-метил- р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-аланіл)-хінолон-а:
Едукг: 25мг (0,092ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:11), осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:11 простим ефіром і перемішування фільтрувального залишку з водою. Вихід: 5Змг (52905). (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,651. 65 Приклад 12.3
М-А(М'-(0-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-хінолон-а,
Мопо-натрієва сіль:
Едукт: 523Змг (1,67ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10,
Едукт: 84Омг (1,39ммоль) сполуки із прикладу 12.1
Після часу реакції 6 год згущують і розмішують з водою. Хроматографія |дихлорметан/ метанол/аміак (17905) 15:8:0,8; пізніше в такій же системі з пропорціями 10:1:1) закінчується виморожуванням із суміші діоксан/вода. Розчиняють у воді, додають еквівалент 0,1 М розчину їдкого натру і знову ліофілізують. Вихід: 525мг (4590). (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К, - 0,39).
Приклад 12.4 70 М-1М-(О-(а-Ї -рамнозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-хінолон-а:
Едукт: 20мг (0,07бммоль) вуглеводу із прикладу 1.21
Очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота 90:10:1) і осадження із метанолу простим ефіром. Вихід: 20мг (3495). (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 Кк, - 0,42).
Із частково захищених М-(лізил)-хінолон-а-кон'югатів та М-(лізил-О-аланіл)-хінолон-а-кон'югатів одержують такі глікокон'югати:
Приклад 12.5
Мм-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а: 12.5.а) 20. М-(Мо-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл|-лізилу-хі нолон-а: 92мг (0,34ммоль) р-амінофеніл-3-О-метил-р-І -фукозиду (приклад 1.2) згідно з інструкцією прикладу 10.1.а спочатку перетворюють в гірчичне масло, а потім в 2о0мл диметилформаміду з'єднують з ЗООмг (0,34 ммоль)
М-ІМе-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-хінолону-а, трифторацетат (приклад 9.11) в присутності 11бмкл С етилдізопропіламіну. Протягом 1бгод перемішують при кімнатній температурі, згущують і очищають шляхом Ге) осадження із дихлорметану простим ефіром. Потім фільрувальний залишок розмішують з водою і ліофілізують із суміші діоксан/вода. Одержують 29Омг (7995) цільового продукту (ОС ацетонітрил/вода 101 К, - 0,6) 12.5) М-«Ма-А1О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а: 288мг (0,267ммоль) сполуки із прикладу 12.5.а розчиняють в 20мл дихлорметану і змішують з 8 мл - піперидину. Після ЗОхв перемішування при 207С згущують і осаджують із дихлорметану простим ефіром. ю
Очищають шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (17-96) 10:10:22). Залишок розмішують з простим ефіром і ліофілізують із води. Одержують У9Омг (3995) цільового продукту. (ОС: о дихлорметан/метанол/аміак (17905) 10:10:5 К,- 0,41. «-
Аналогічно прикладам 12.5 із кон'югатів прикладів 9.11 та 9.6 одержують такі глікокон'югати:
Зо Приклад 12.6 со
М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил)-хінолон-а, динатрієва сіль:
Едукти: бЗмг (0,2ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10; « 158мг (0,18ммоль) сполуки із прикладу 9.11 З 50 Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/ метанол/аміак (1790) 15:4:0,5; с пізніше в такій же системі з пропорціями 10:10:11) і багаторазового перемішування кінцевої стадії шляхом з
Із» метанолом і промивання фільтрувального залишку простим ефіром. Вихід: 4495. Потім суспендують у воді і двома еквівалентами 0,1 М розчину їдкого натру одержують динатрієву сіль, а розчин ліофілізують. (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:3:1,5 К, - 0,341).
Приклад 12.7 б М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-О-аланіл)-хінолон-а: - Едукти: 147мг (0.47ммоль) вуглеводу із прикладу 1:10. 448мг (0,47ммоль) сполуки із прикладу 9.6 о Очищення проміжної стадії шляхом подвійного осадження із суміші дихлорметан/ метанол 1:1 простим с 50 ефіром; розмішування фільтрувального залишку з водою (Вихід: 9295). Очищення кінцевої стадії шляхом
Т» тонкошарової хроматографії |дихлорметан/ метанол/аміак (1790) 10:10:22), осадження із диметилформаміду простим ефіром. Вихід: 5995 (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 10:3:1,5 К, - 0,4).
Приклад 12.8
М-(Мо-(О-(3-О-метил-Д-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-лізил)-хінолон-а, гідрохлорид: 59 Едукти: Сполука 1.25 (62,8мг, О0,22ммоль);
ГФ) пептидний кон'югат 9.11 (180,Омг, О0,2ммоль) 7 Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:11 -5 71 -» 271.
Одержують жовті кристали (145,7мг, 6795); ОС |дихлорметан/ метанол 5:1)|; К; - 0,48. Потім як описано в во прикладі 4.5 віддеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу їі очищують. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (ЛОмл). Суспензію з помішуванням краплями змішують з 0,1 М соляною кислотою до одержання прозорого розчину (рН » 3). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (119,4мг, 6690); (во. т 33,87 (с - 0,28 / НьО).
Приклад 12.9 65 Мм-(Ма-ТО-(3,6-ди-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, гідрохлорид:
Едукти: Сполука 1.32 (65,9мг, О0,22ммоль),
Пептидний кон'югат 9.11 (180,Омг, О0,2ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:11 -5 7:11 -»5 171).
Одержують жовті кристали (115,0мг, 5275), ОС |дихлорметан/ метанол 5:1); К,; - 0,44. Потім, як описано в прикладі 4.5, віддеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу і очищують. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (МОмл). Суспензію з перемішуванням краплями змішують з 0,1 М-соляною кислотою, до одержання прозорого розчину (рН » 3). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (94,Змг, 5190), (а т над,2" (с - 0,34 /НьЬО).
Приклад 12.10
М-(Меа-(О-(3-О-метил-9-О-маннопіранрозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, гідрохлорид:
Едукт: Сполука 1.40 (62,8мг, 0,22ммоль)
Пептидний кон'югат 9.11 (180,Омг, О0,2ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол 10:11 -» 5:11 -» 171).
Одержують жовті кристали (96,7мг, 4490); ЮОС |дихлорметан/метанол 5:1|. К, - 0,47. Потім, як описано в прикладі 4.5, віддеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу і очищують. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (ЛОмл). Суспензію з помішуванням краплями змішують з 0,1 М соляною кислотою до одержання прозорого розчину (рН » 3). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (78,2мг, 4390); Іво т -157,27 (с - 0,30 / НЬО).
Приклад 12.11
М-«Моа-(О-(4-0-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)- р -Ю-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, гідрохлорид:
Едукт: Сполука 1.58. (98,4мг, 0,22ммоль) Га
Пептидний кон'югат 9.11 (180,Омг, О0,2ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/ метанол/аміак (2590) о 20:10:15 10:10:11 -» метанол/аміак (2595) 20:11 Одержують бежеві кристали (132,1мг, 5395); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2595) 10:10:3). КК, - 0,60. Потім, як описано в прикладі 45, відщдеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу і очищують. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (1Омл). «І Суспензію з перемішуванням краплями змішують з 0,1 М соляною кислотою до одержання прозорого розчину ою (рН » 3). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (90,Омг, 42960) (во - 192.27 (с - 0,27 / Н2д). о
Виходячи із незаміщеного хінолону-а, згідно з інструкціями прикладу 12.1 одержують такі глікокон'югати: --
Приклад 12.12
М-(О-(3-М-карбоксиметил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-хінолон-а, динатрієва сіль: і-й
Едукти: 78,5мг, (0,25ммоль) вуглеводу із прикладу 1.10; 7Омг (0,167ммоль) хінолону-а
Після часу реакції 6 год реакційну суміш згущують, розчиняють в диметилформаміді і перемішують з 4мл « 01 розчину їдкого натру год. Очищення шляхом тонкошарової хроматографії -о 70 Ідихлорметан/метанол/аміак.(1790) 15:4:0,5. Додаванням 0,1М розчину їдкого натру встановлюють рН - 7 і с ліофілізують. Вихід: бОмг (44 90). (ОС: ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К; - 0,42) ЕАВ-М5: т/:2 :з» - 773 5 М-2Ма"ЗН".
Приклад 12.13 415 М-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-хінолон-а:
Ф Едукти: З2мг (0,12ммоль) вуглеводу із прикладу 1.2, 5Омг (0,12ммоль) хінолону-а - Час реакції 2год; очищення шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/ метанол/льодяна оцтова о кислота 90:10:1|; осадження із суміші дихлорметан/метанол 1:11 простим ефіром. Вихід: 59мг (5195). (ОС: 20 ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,43). 1 Приклад 12.14
Їх» М-(Моа-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-а, гідрохлорид: 8Збмг (0.1ммоль) сполуки із прикладу 12.5 розчиняють у воді і еквівалентом 0,1М соляної кислоти перетворюють у сіль. Після сушіння виморожуванням одержують 88мг цільової сполуки.
Приклад 12.15
М-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-діаміно-ргоріопоу!)-хінолон-а, (Ф, гідрохлорид: ко Виходячи із М о-(трет-бутоксикарбоніл)-М р-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-І -ди-аміно-пропіонової кислоти та хінолону-а аналогічно прикладу 12.14 за кілька стадій одержують глікокон'югат 12.15. ОС: бо ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К.О,3).
Приклади 13:
Загальна формула б5 си й в, мноЇМмн »оОв; 57 в з ; а ше Сон пн012 Щі у
Приклад 13.1
М-(М'-(О0-(3-О-метил- р-І--фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-хінолон-р: 13.1.8) Хінолон р: 4-Аміно-7-КЗакз,4кК5,7авзк)-4-аміно-1,3,3а,4,7,7а-гексагідро-ізоіндол-2-іл|-1-цдциклопропіл-б-фтор-1,4-дигідро-8- метокси-4-оксо-3-хінолінкарбонова кислота
З1Омг (Іммоль) 5-Аміно-1-циклопропіл-б.7-дифтор-1,4-дигідро-8-метокси-4-оксо-3-хінолінкарбонової кислоти 19 в суміші, що складається із 4мл ацетонітрилу і 2мл диметилформаміду змішують з 17Омг (1,5ммоль) 1,4-діазабіцикло(222|октаном і 152мг (1,їммоль) (Зак5,4к5,7азк)-4-Аміно-1.3,За,4,7,7а-гексагідро-ізоіїндолу і протягом 1 години кип'ятять зі зворотним холодильником. Суміш згущують у вакуумі, залишок розмішують з 20мл води, осаджений залишок відсмоктують і при 1007" сушать у вакуумі. Вихід: ЗО1їмг (7095 від теоретичного), т. пл.: 237-239" (розкладення). 13.1.63 М-(О-аланіл|-хінолон-р, трифторацетат:
Виходячи із сполуки 13.1.3 та М-(трет-бутоксикарбоніл)-О-аланіну, аналогічно прикладу 9.1 одержують цільовий продукт. 13.1) М-АЯМ'-(О-(3-О-метил-р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл)-хінолон-р:
Виходячи із сполуки 13.1.6 та р-амінофеніл-3-О-метил- Д-І -фукозиду (приклад 1.2), аналогічно прикладу 12.1 сч 29 одержують цільовий продукт. Го)
Приклади 14:
Загальна формула
А в. МК Ї « | У п зе к в: о 5 в о ІФ)
М
! Со 5 сн, М не-кув --
Зо Хінолон с: ісе) 8-(2-Аміно-5-метил-8-азабіцикло|4.3.О|нон-3-ен-8-іл)-1-метил-7-фторо-5-оксо-5Н-тіазолої|3,2-а)хінолін-4-карбоно ва кислота
Приклад 14.1 «
М-(Моа-(О-(3-О-метил-Д-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбонілі|-лізил)-хінолон-с, гідрохлорид: 14.1.33 М-(Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-хінолон-с, трифторацетат: но) с Едукти: Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізин (1,4г, З,Оммоль); з Хінолон-с (82Омг, 1,9ммоль)
Одержання проміжного продукту здійснюють аналогічно прикладу 9.1.3. Осадженням із суміші етанол/діетиловий ефір одержують світложовті кристали (1,37г, 8290), із яких аналогічно прикладу 9.1.6 79 вивільняють сполуку 14.1.а. Одержують оранжеві кристали (1,25г, 7495); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905)
Ф 30:10:11; К,- 0,7; т. пл. - 18076. - 14.1) м-«Ме-А(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-с, о гідрохлорид:
Аналогічно прикладу 12.5 сполуку 1.25 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють пептидним кон'югатом 14.1.а 1 20 (178,4мг, О,2ммоль). Очищення проміжної стадії здійснюють шляхом тонкошарової хроматографії
І» Ідихлорметан/метанол/аміак (25 90) 30:6:1 -» 30:10:11), Одержують світложовті кристали (97,Омг, 4496); ОС
Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 30:10:11. ЖК, - 0,23. Потім описаним вище чином відщеплюють фтореніл-9-метоксикарбонільну групу і очищують. Одержують жовті кристали, які суспендують у воді (1Омл).
Суспензію з перемішуванням краплями змішують з 0,1М соляною кислотою до одержання прозорого розчину (РН о » З). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (75,8мг, 4195); Та|О - 12,57 (с - 0,27 / НьО). іме) Аналогічно прикладу 14.1 із пептидного кон'югату 14.1.а одержують такі глікокон'югати:
Приклад 14.2 60 М-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил)-хінолон-с, гідрохлорид:
Едукти: Сполука 1.2 (59,5мг, 0,22ммоль),
Пептидний кон'югат 14.1.а (178,4мг, О,2ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/ метанол/аміак (2590) 30:61 -» 30:10:11). Одержують світложовті кристали (146,бмг, 6790); ОС |дихлорметан/метанол/аміак (25905) 30:6:1)|; КК бо 0,48. Потім описаним вище чином відщеплюють фтореніл-9У-метоксикарбонільну групу і перетворюють в гідрохлорид. Одержують жовту аморфну тверду речовину (107,7мг, 6095); (во. хон51,6"(с - 0,36/Нь0).
Приклад 14.3
М-(Ма-ТО-(3-О-карбоксиметил- р-І -фукозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|)-лізил)-хінолон-с, динатрієва 9 сіль:
Виходячи із сполуки 14.1. аналогічно прикладу 12.6 за кілька стадій одержують глікокон'югат 14.4
ІРАВ-М5: т/2 - 911 - М-2Макзні.
Приклад 14.4
Мм-(Ма-ТО-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил)-хінолон-с, гідрохлорид:
Кон'югат одержують аналогічно ізомеру в прикладі 14.2 (ГАВ-М5: т/2 - 867 - МАНІ.
Приклади 15:
Загальна формула й о я ф ві ХУ й ва Е
В Геї З Кк о т, - 8
К В; И соон 720 Хінолон а: 4-(2-Аміно-8-азабіцикло|4.3.Ф|нон-4-ен-8-іл)-1-циклопропіл-б6,8-дифторо-1,4-дигідро-4-оксо-хінолін-3-карбонова кислота
Приклад 15.1 сч ре М-(Мо-(О-(3-О-метил-Д-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-й, гідрохлорид: 15.1.а) М-«Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил|-хінолон-й, трифторацетат: о
Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізин (1,4г, 3.Оммоль) перетворюють як описано в прикладі 9.1.а хінолоном-а, гідрохлорид (1,28мг, 2,8ммоль). Осадженням із суміші дихлорметан/метанол 1:1 діетиловим ефіром одержують бежеві кристали (1,97г, 8390), із яких аналогічно прикладу 9.1.5 вивільняють «І зо сполуку 15.1.4. Одержують бежеві кристали (1,7г, 7096); ОС |дихлорметан/ метанол/аміак (2590) 28:14:11); Кр - 0,60; т. пл. - 21526. о 15.1) м-«(Мае-А(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-сі, о гідрохлорид:
Аналогічно прикладу 12.5 сполуку 125 (62,8мг, 0,22ммоль) перетворюють пептидним кон'югатом 15.1.а -- (173.2мг. О,2ммоль). Очищення проміжної стадії здійснюють шляхом тонкошарової хроматографії Ге)
Ідихлорметан/метанол/аміак (25965) 28:14:11 -» метанол/ аміак (2595) 20:1|. Одержують бежеві кристали (140,8мг, 6596); ОС. |дихлорметан/метанол/аміак (25965) 28:14:11); КК, - 0,06. Потім описаним вище чином віддеплюють фтореніл-9-метокси-карбонільну групу і очищують. Одержують бежеві кристали, які суспендують у воді (1Омл). «
Суспензію з перемішуванням краплями змішують з 0,1М соляною кислотою до одержання прозорого розчину (рн » 3). Ліофілізацією профільтрованого розчину одержують жовту аморфну тверду речовину (102,бмг, 5795); -й с Іво - -49,07 (с - 0,26 / Н»О). з» Аналогічно прикладу 15.1 із пептидного кон'югату 15.1.а одержують такі глікокон'югати:
Приклад 15.2
М-(Мо-(О-(4-0-(3'-О-метил-р-О-галактопіранозил)- д 75 -Ю-глюкопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил)-хінолон-й, гідрохлорид:
Ф Едукти: Сполука 1.58 (98,4мг, О0,22ммоль); - Пептидний кон'югат 15.1.а (173,2мг, О,2ммоль)
Очищення проміжної стадії шляхом тонкошарової хроматографії |дихлорметан/метанол/аміак (2590) о 20:10:15 10:10:11 -» метанол/аміак (2595) 20:1Ї). Одержують бежеві кристали (106б,5мг, 4395); ОС 1 50 Ідихлорметан/метанол/аміак (2590) 10:10:3). Ж; - 0,51. Потім описаним вище чином відщеплюють
ГТ» фтореніл-9-метоксикарбонільну групу і перетворюють в гідрохлорид. Одержують жовту аморфну тверду речовину (82,Омг, 39905); (а|О - 22,87 (с - 0,29 / Н»О).
Приклади 16: Глікокон'югати з мелфаланом
Загальна формула сі о г й бите,
А
60 вві Кк що о фе 1 М "соон в о З К п
Кк, пех1,2 б5
Приклад 16.1
М-«М'-ІО-(3-О-метил-В-Ї -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-аланіл/-мелфалан: 16.1.а). М-трет-бутоксикарбоніл-О-аланіл-мелфалан: 114мг (0,бммоль) М-трет-бутоксикарбоніл-О-аланін розчиняють в їОмл ОМЕ і при 0"С змішують з 138мг
М'-(З-ди-метиламінопропіл)-М-етил-карбодіїміду, гідрохлоридом і І-гідрокси-бензотриазолом. Через 10хв додають 153мг мелфалану і перемішують протягом 1бгод при кімнатній температурі. Згущують і розподіляють між дихлорметаном і водою. Органічну фазу промивають, осушують над сульфатом натрію, згущують і потім хроматографують сумішшю дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:2:0,2 -» 15:4:0,5. Одержують 134мг (56905) цільової сполуки (ОС: дихлорметан/метанол/аміак (17905) 15:4:0,5 К, - 0,45). 70 16.1) МА«М'-(О-(3-О-метил-р-І--фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-О-аланіл)у-мелфалан:
Відщеплення захисної групи і зв'язування з вуглеводом здійснюють як описано прикладах 9.1 та 12.1. (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,26. ЕАВ-М5: т/2 - 685 - МНІ.
Приклад 16.2
М-«М'-ІО-(3-О-метил-В-ІЇ -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламінотіокарбоніл)|-аланіл-аланіл)-мелфалан:
Ця сполука може бути одержана за кілька стадій аналогічно прикладу 16.1 (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К, - 0,2; РЕАВ-М5: т/2 - 756 - М-НІ.
Приклади 17: Глікокон'югати з доксорубіцином (адріаміцин)
Загальна формула
Ммео У о ве но їй он с о о о й о о он това : зо о дон
ІС)
В, пн12 о
Приклад 17.1
М-(М'-(О0-(3-О-метил- р-І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламінотіокарбоніл|-аланіл-аланіл)-доксорубіцин: - 17.1.а) М-(О-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-аланіл-аланін: (Се) 160мг (Іммоль) аланіл-аланіну розчиняють в 20мл суміші діоксан/вода 1:1 і змішують з їмл основи Хюніга (Нипід). 1,2ммоль р-амінофеніл-3-О-метил-р-І-фукозиду (приклад 1.2) згідно з інструкціями прикладу 10.1.а спочатку перетворюють в гірчичне масло, а потім змішують його з розчином дипептиду. Перемішують протягом « 16год при кімнатній температурі, потім згущують і очищують залишок шляхом тонкошарової хроматографії (ацетонітрил/вода 15:1). Після згущення відповідних фракцій продукт осаджують із суміші метанол/простий ефір. т с Вихід: 267мг (5795). ч» 17.1у МАЯМ'-(О0-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-аланіл-аланіл)-доксорубіцин: " 48мг (0,ммоль) сполуки із прикладу 17.1.4 розчиняють в їОмл ЮОМЕ і змішують з 231мг
М'-(З-ди-метиламінопропіл)-М-етил-карбодіїміду, гідрохлорид, а також з 21мг 1-гідрокси-бензотриазол. Через
Бхв додають ЗОмг доксорубіцину і Зб5мкл основи Хюніга і перемішують протягом ЗОхв при кімнатній температурі. ме) Згущують і очищають шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 88:12). Відповідні фракції - згущують і ліофілізують із суміші діоксан/«вода. Одержують 20мг (4090) цільової сполуки. (ОС: дихлорметан/метанол 10:1 К,- 0,17; ЕБІ: т/2 - 997 - МАНІ. о Приклад 17.2 с 20 М-(Мо;, Ме, -біс-(О-(3-О-метил-В-ІЇ -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламінотіокарбоніл|-О-лізил-аланіл)-доксорубіцин: ї» 17.2.а) Мо, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-О-лізил-аланін: 58Омг (1,31ммоль) біс-трифторацетату О-лізил-аланіну описаним в прикладі 17.1.а чином в присутності 1,3мл основи Хюніга зв'язують з 2,2 еквівалентами вуглеводу із прикладу 1.2. Хроматографічне очищення здійснюють 29 сумішшю ацетонітрил/вода 10:11. Одержують 44бмг (41965) цільової сполуки.
ГФ) 17.2) т М-«(Мо Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-О-лізил-аланіл)-доксорубіцин:
Зв'язування 59мг сполуки із прикладу 17.2.а з 20мг доксорубіцину здійснюють як описано в прикладі 17.1.
Одержують 15мг кон'югату. (ОС: дихлорметан/метанол 85:15 К, - 0,43; ЕАВ-М: т/:2 - 1365 - МАНІ. 60 Приклади 18: Глікокон'югати з камптотецином
Загальна формула б5
(в; - ! М з Ми о о т о ко. «Я
МН з 70 5
Ге) т.
Су
А в,
Приклад 18.1 20-0-4Мо, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин: 18.1.а) 20-О-(аланіл)-камптотецин, трифторацетат: 5О0Омг (1,44ммоль) камптотецину розчиняють в 20мл ОМЕ, а потім змішують з 5Омг 4-диметиламінопіридину та М-трет-бутоксикарбоніл-аланін-М-карбокси-ангідриду. Через Згод додають ще 775Мг
М-трет-бутоксикарбоніл-аланін-М-карбоксиангідриду і суспензію 1бгод оброблюють ультразвуком. Згущують, с сирий матеріал розчиняють в 5О0мл дихлорметану і при 0"С додають бмл трифтороцтової кислоти. Після Го) перемішування протягом ЗОхв знову згущують і продукт очищують шляхом тонкошарової хроматографії (ацетонітрил/івода 20:1). Відповідні фракції збирають, згущують і ліофілізують із суміші діоксан/вода.
Одержують 712мг (9395) цільової сполуки (ГАВ-М5: т/2 - 420 - МАНІ. 18.1.5) 20-О-(лізил-аланіл)-камптотецин, біс-трифторацетат: в
Кон'югат із прикладу 18.1.а за стандартною інструкцією зв'язують з ю
Ма, Ме-біс-(трет-бутоксикарбоніл)-лізином і деблокують. Одержують цільову сполуку з виходом 65905. 18.1) | «в) 20-0-Мо; Ме-біс-(О-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-аланіл)-камптотецин: - р-амінофеніл-3-О-метил- Д-І-фукозид (приклад 1.2) зв'язують з кон'югатом із прикладу 18.1.5 аналогічно «со прикладу 11.1. Вихід: 4095 (ОС: ацетонітрил/вода 10:1 К,- 0,44)
Приклад 18.2 20-0-Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-рД -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин: « 18.2.а) 20-О-|Ме-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-аланіл|-камптотецин, трифторацетат: шщ с Кон'югат із прикладу 18.1.а за стандартною інструкцією зв'язують з ц Мо-(трет-бутоксикарбоніл)-М є-(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізином і потім деблокують в осо-амінофункції. ,» Одержують цільову сполуку з виходом 245905. (ОС: ацетонітрил/вода 20:1 К, - 0,15) 18.2.5) 45. 20-0-Ма-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукопіранозил)-4-гідроксифеніламіно-тіокарбоніл|-М є-(фтореніл-9-метоксик (22) арбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин: - Сполуку із прикладу 18.1.а аналогічно прикладам 12.6 та 12.5 модифікують похідною вуглеводу із прикладу 1.10. Сирий продукт очищають шляхом дигерування водою, потім ліофілізують із суміші діоксан/вода і без («в подальшої обробки подають на наступну стадію. с 50 18.2) ге 20-0-Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)-лізил-аланіл)-камптотец ин:
Кон'югат 18.2.6 деблокують піперидином в ОМЕ. Через ЗОхв згущують і залишок двічі дигерують дихлорметаном. Потім розчиняють в ОМЕ і осаджують із суміші метанол/простий ефір. Продукт відсмоктують, 22 промивають простим ефіром, а потім ліофілізують із суміші діоксан/вода. Вихід: 8695 (ОС:
Ф! ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К,- 0,17)
Приклад 18.3 о 20-0-Мо-(О-(3-О-карбоксиметил-рД -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин, натрієва сіль: 60 б2мг (0,074ммоль) кон'югату із прикладу 18.2 розчиняють в суміші діоксан/вода і еквівалентом 0,1М-розчину їдкого натру перетворюють в натрієву сіль. Вихід: (ОС; ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5:1:0,2 К; - 0,171.
Аналогічно прикладам 18.1 і 18.2 одержують такі глікокон'югати камптотецину:
Приклад 18.4 бо 20-О-(Мо, Ме-біс-(О-(3-О-метил-В
-І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-О-аланіл)-камптотецин
Приклад 18.5 20-0-4Мо, Ме-біс-(О-(3-О-метил-р 00 7І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-валініл)у-камптотецин
Приклад 18.6 20-0-Ма-(О-(3-О-карбоксиметил-р -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-валініл)-камптотецин
Приклад 18.7 20-0-ІМо-(О-(3-О-метил-р -Ю-галактопіранозил)-4-гіпдрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-валініл)у-камптотецин
Приклад 18.8 20-0-Моа-(О-(3-О-метил-р-О-галактопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин
Приклад 18.9 20-0-1Ма(О-(3-О-карбоксиметил-рд -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-валініл)-камптотецин, гідрохлорид
Сполуку 18.6 еквівалентом 0,01 М соляної кислоти перетворють в гідрохлорид.
Приклад 18.10 20-0-1Ма(О-(3-О-карбоксиметил-рд -ії -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин, гідрохлорид
Сполуку 18.2 еквівалентом 0,01 М соляної кислоти перетворюють в гідрохлорид.
Приклад 18.11 20-0-4М(О-(3-О-карбоксиметил-д -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-фенілаланіл)-камптотецин, гідрохлорид сч 29 Приклад 18.12 Ге) 20-0-4Мо, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-р -І-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-аланіл)-камптотецин, натрієва сіль
Приклад 18.13 20-0-4Мо, Ме-біс-(О-(3-О-карбоксиметил-р З й й й й й й й с. й ; -ІЇ-фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл|-лізил-валініл)-камптотецин, натрієва сіль ІФ)
Приклад 18.14 о 20-0-Моа10О-(3-О-метил-р-І -фукопіранозил)-4-гідрокси-феніламіно-тіокарбоніл)|-лізил-аланіл)-камптотецин, гідрохлорид - (Се)

Claims (8)

Формула винаходу
1. Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (1): « дю К-вр-С-ААТ- АХ? С) з в якій с К - незаміщений або регіоселективно модифікований вуглеводний залишок, :з» Зр - арилен формули -90 ' «7 - М-- н («в) с 50 З Я» І - що ч н або в , о А о МОМ АК ря 60 - М н де К - хлор або гідроксіалкіламіно, АА1 - залишок амінокислоти в О- або І -конфігурації, що при необхідності може мати захисні групи або другу в групу К-5р-Ї, в якій К, Зр, Ї незалежно від іншої групи К-5р-Ї може мати вказані вище значення, або прямий зв'язок,
АА2? - залишок амінокислоти в О- або І-конфігурації, що при необхідності може мати захисні групи, або прямий зв'язок, С - цитотоксичний залишок, залишок цитостатичного засобу або похідне цитостатичного засобу, та їх ізомери і солі.
2. Модифіковані вуглеводами сполуки формули (І) згідно з п. 1, в яких К - вуглеводний радикал загальної формули (ІІ): А 00-77 ді в2 в де А - метил, гідроксиметил, алкоксиметил, карбоксіалкілоксиметил, 2, в3 ві окремо або разом означають водень, гідрокси, алкілокси, гідроксіалкокси, карбоксіалкілкарбонілокси, сульфат, галоген, або два з залишків К2, БЕЗ, 27 разом означають епоксигрупу, і Зр, І, ААТ, АА?2 та С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі.
3. Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п. 1, в якій Зр - арилен формули -- о , с М- Н К, , ААТ, АА?2 та С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі. З 3о
4. Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п. 1, в якій С - хінолонкарбонова ІС о) кислота, батрацилін, камптотецин, доксорубіцин, мельфалан, К, Зр, І, АА1, АА2 мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі. о
5. Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п. 1, в якій -- ААїТ - залишок амінокислоти, похідний від гліцину, аланіну, валіну, лізину, аспарагінової кислоти, глутамінової кислоти, орнітину, тирозину або серину, в О- або І-конфігурації, який може бути зв'язаний з ї-о іншою додатковою групою К-5р-ЇІ -, або прямий зв'язок, К, зр, І, АА?2 і С мають наведені в п. 1 значення, та їх ізомери і солі. « дю б.
Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п. 1, в якій АА2 - залишок з амінокислоти, похідний від гліцину, аланіну, лізину, орнітину, діамінопропіонової кислоти або серину, в ЮО- с або І -конфігурації, або прямий зв'язок, К, 5р, І, АА? і С мають наведені в п. 1 значення :з» та їх ізомери і солі.
7. Модифіковані вуглеводами сполуки формули (1) згідно з п. 1, в якій С означає залишок формули (11): 35 тен) (22) но в якій -й о - залишок формули о х, (в) ' т" х, с соон те р У М і А Ф) іме) де У - означає с-в5, де З означає водень, галоген або метокси, Ху - водень, галоген, 60 Х» - водень, аміногрупа, або о - залишок формули б5
Ге) , Хз хх сооН й р; Сл 70 не де Хз - галоген, Т - залишок формули НМ со- в ра , НМ се М- (о) в? зо де В - водень, алкіл з 1-3 атомами вуглецю, і т К, зр, І, ААТ, АА2 мають наведені в п. 1 значення, ІС о) та їх ізомери і солі. їй й й й (ав)
8. Цитостатичний засіб, що містить одну сполуку згідно з будь яким з пп. 1-7. «- (Се) « - с з (е)) - (ав) с 50 ГТ» (Ф) ко бо б5
UA97115364A 1995-04-04 1996-03-22 Cytoctatics modified by carbohydrates UA61054C2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19512484A DE19512484A1 (de) 1995-04-04 1995-04-04 Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika
PCT/EP1996/001279 WO1996031532A1 (de) 1995-04-04 1996-03-22 Kohlenhydratmodifizierte cytostatika

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA61054C2 true UA61054C2 (en) 2003-11-17

Family

ID=7758679

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA97115364A UA61054C2 (en) 1995-04-04 1996-03-22 Cytoctatics modified by carbohydrates

Country Status (27)

Country Link
US (1) US6271342B1 (uk)
EP (1) EP0819135B1 (uk)
JP (1) JPH11502860A (uk)
KR (1) KR19980703591A (uk)
CN (1) CN1185786A (uk)
AT (1) ATE186738T1 (uk)
AU (1) AU713466B2 (uk)
BG (1) BG63048B1 (uk)
BR (1) BR9604825A (uk)
CA (1) CA2217164A1 (uk)
CZ (1) CZ291098B6 (uk)
DE (2) DE19512484A1 (uk)
DK (1) DK0819135T3 (uk)
EE (1) EE03619B1 (uk)
ES (1) ES2140078T3 (uk)
GR (1) GR3032605T3 (uk)
HU (1) HUP9800513A3 (uk)
IS (1) IS1822B (uk)
MX (1) MX9707613A (uk)
NO (1) NO974564L (uk)
NZ (1) NZ305855A (uk)
PL (1) PL183574B1 (uk)
RU (1) RU2170234C2 (uk)
SK (1) SK281785B6 (uk)
TW (1) TW384290B (uk)
UA (1) UA61054C2 (uk)
WO (1) WO1996031532A1 (uk)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6492335B1 (en) * 1996-09-30 2002-12-10 Bayer Aktiengesellschaft Glycoconjugates from modified camptothecin derivatives (20-O-linkage)
DE19640970A1 (de) * 1996-10-04 1998-04-16 Bayer Ag Modifizierte Cytostatika
JP3101710B2 (ja) 1997-02-28 2000-10-23 工業技術院長 硫酸化オリゴ糖化合物
ID23424A (id) * 1997-05-14 2000-04-20 Bayer Ag Glikokonjugat dari 20(s)-kamptotesin
RU2193558C2 (ru) 1997-09-15 2002-11-27 Дзе Проктер Энд Гэмбл Компани Производные хинолона и фармацевтическая композиция на их основе
US6387928B1 (en) 1997-09-15 2002-05-14 The Procter & Gamble Co. Antimicrobial quinolones, their compositions and uses
US6613879B1 (en) * 1999-05-14 2003-09-02 Boehringer Ingelheim Pharma Kg FAP-activated anti-tumour compounds
DE10005275A1 (de) * 2000-02-07 2001-08-09 Bayer Ag Neuartige Glycokonjugate
US7220824B1 (en) * 2000-08-28 2007-05-22 Bayer Aktiengesellschaft Integrin-mediated drug targeting
EP1219634A1 (en) * 2000-12-27 2002-07-03 Bayer Aktiengesellschaft Cytostatic-glycoconjugates having specifically cleavable peptidic linking units
EP1238678A1 (en) * 2001-03-08 2002-09-11 Bayer Aktiengesellschaft Enzyme-activated cytostatic conjugates with integrin ligands
AU2002350650A1 (en) * 2001-11-09 2003-05-19 Bayer Aktiengesellschaft Isotopically coded affinity marker 2
US7199149B2 (en) * 2003-10-01 2007-04-03 Bristol Myers Squibb Company Monocyclic and bicyclic lactams as factor Xa inhibitors
CN1922210A (zh) 2003-12-19 2007-02-28 健泰科生物技术公司 可用作治疗剂的单价抗体片段
BRPI0709209A2 (pt) 2006-03-28 2011-06-28 Procter & Gamble processo de redução de hidreto para preparo de intermediários de quinolona
US7456279B2 (en) 2006-03-28 2008-11-25 The Procter & Gamble Company Coupling process for preparing quinolone intermediates
DK2001862T3 (da) 2006-03-28 2011-08-08 Warner Chilcott Co Llc Malatsalte og polymorfe af (3S,5S)-7-[3-amino-5-methyl-piperidinyl]-1-cyklopropyl-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolincarboxylsyre
CA2972635A1 (en) 2015-01-06 2016-07-14 Immunovaccine Technologies Inc. Lipid a mimics, methods of preparation, and uses thereof
SI3380124T1 (sl) 2015-11-25 2024-10-30 Legochem Biosciences, Inc. Konjugati, ki obsegajo samožrtvujoče skupine in z njimi povezani postopki
US11173214B2 (en) 2015-11-25 2021-11-16 Legochem Biosciences, Inc. Antibody-drug conjugates comprising branched linkers and methods related thereto
AU2018246806B2 (en) 2017-03-29 2022-05-12 Ligachem Biosciences Inc. Pyrrolobenzodiazepine dimer precursor and ligand-linker conjugate compound thereof
EP3790591A4 (en) 2018-05-09 2022-05-11 LegoChem Biosciences, Inc. Compositions and methods related to anti-cd19 antibody drug conjugates
KR20210028544A (ko) 2019-09-04 2021-03-12 주식회사 레고켐 바이오사이언스 인간 ror1에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도
JP2024537169A (ja) * 2021-10-06 2024-10-10 サムヤン コーポレイション 飽和フロジオキシン誘導体化合物及びその二次電池用添加剤としての使用

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5977356A (ja) * 1982-06-30 1984-05-02 Fuji Photo Film Co Ltd 螢光アツセイ用多層分析要素およびそれを用いる螢光アツセイ法
DE3611194A1 (de) 1986-04-04 1987-10-08 Bayer Ag Cancerostatisches mittel
EP0284071B1 (en) * 1987-03-26 1994-06-08 Neorx Corporation Metal-radionuclide-labeled proteins and glycoproteins for diagnosis and therapy
US4975278A (en) 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
US4980343A (en) * 1988-10-27 1990-12-25 Bayer Aktiengesellschaft Aminooxodihydroisoindoloquinazoline carcinostatic agents
DE3837825A1 (de) 1988-11-08 1990-05-10 Hoechst Ag Neue insulinderivate, ihre verwendung und eine sie enthaltende pharmazeutische zubereitung
CA2031803C (en) * 1989-12-13 2001-05-29 Ramakrishnan Nagarajan Improvements in or relating to glycopeptide deriveratives
US5160727A (en) * 1990-02-13 1992-11-03 Warner-Lambert Company Tumor cell sensitization method using quinazolinedione derivatives
US6075121A (en) 1990-05-15 2000-06-13 Chiron Corporation Modified peptide and peptide libraries with protease resistance, derivatives thereof and methods of producing and screening such
US5420297A (en) 1990-10-24 1995-05-30 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Peptides having substance P antagonistic activity
US5399363A (en) * 1991-01-25 1995-03-21 Eastman Kodak Company Surface modified anticancer nanoparticles
DE4106101A1 (de) * 1991-02-27 1992-09-03 Bayer Ag Fucose-markierte cytostatika
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
FR2676058B1 (fr) 1991-04-30 1994-02-25 Hoechst Lab Prodrogues glycosylees, leur procede de preparation et leur utilisation dans le traitement des cancers.
DE4120646A1 (de) * 1991-06-22 1992-12-24 Bayer Ag 7-isoindolinyl-chinolon- und naphthyridoncarbonsaeure-derivate
DK0545198T3 (da) 1991-11-29 2000-03-20 Hoechst Ag Peptider med insulinagtig virkning
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
ZA935697B (en) 1992-08-07 1994-03-10 Sankyo Co Peptides capable of inhibiting the activity of hiv protease their preparation and their therapeutic use
US5872207A (en) 1992-09-04 1999-02-16 Sanofi Pharmaceuticals, Inc. N-terminal-marked peptides immobilized on glass beads and method of preparation and method of use thereof
IL106998A0 (en) 1992-09-17 1993-12-28 Univ Florida Brain-enhanced delivery of neuroactive peptides by sequential metabolism
DE4236237A1 (de) * 1992-10-27 1994-04-28 Behringwerke Ag Prodrugs, ihre Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
US5576298A (en) 1992-11-30 1996-11-19 Research And Development Institute, Inc. At Montana State University Peptides from pseudomonas syringae possessing broad-spectrum antibiotic activity
SE9300012D0 (sv) 1993-01-05 1993-01-05 Astra Ab New peptides
US5750648A (en) 1993-08-20 1998-05-12 G.D. Searle & Co. Retroviral protease inhibitors and combinations thereof
EP0647450A1 (en) 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
GB9320781D0 (en) 1993-10-08 1993-12-01 Erba Carlo Spa Polymer-bound camptothecin derivatives
CA2173990A1 (en) * 1993-10-12 1995-04-20 Narasinga Rao A library of glyco-peptides useful for identification of cell adhesion inhibitors
US5610145A (en) 1994-04-15 1997-03-11 Warner-Lambert Company Tachykinin antagonists
US5780589A (en) 1994-11-30 1998-07-14 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Ultraselective opioidmimetic peptides and pharmacological and therapeutic uses thereof
FR2729668A1 (fr) 1995-01-23 1996-07-26 Adir Nouveaux derives de mercaptoalcanoyldipeptides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US5677286A (en) * 1995-04-27 1997-10-14 The University Of Michigan Glycosylated analogs of camptothecin
US6143931A (en) 1997-04-16 2000-11-07 Arqule, Inc. Synthesis and use of α-ketoamide derivatives and arrays

Also Published As

Publication number Publication date
BR9604825A (pt) 1999-01-05
AU5397696A (en) 1996-10-23
AU713466B2 (en) 1999-12-02
PL322681A1 (en) 1998-02-16
DK0819135T3 (da) 2000-05-08
NO974564L (no) 1997-11-25
CN1185786A (zh) 1998-06-24
IS1822B (is) 2002-10-01
CA2217164A1 (en) 1996-10-10
IS4562A (is) 1997-09-18
HUP9800513A2 (hu) 1998-06-29
WO1996031532A1 (de) 1996-10-10
DE19512484A1 (de) 1996-10-17
EE03619B1 (et) 2002-02-15
BG101892A (en) 1998-05-29
NZ305855A (en) 1999-11-29
EP0819135B1 (de) 1999-11-17
GR3032605T3 (en) 2000-05-31
TW384290B (en) 2000-03-11
PL183574B1 (pl) 2002-06-28
MX9707613A (es) 1997-12-31
EE9700258A (et) 1998-04-15
CZ291098B6 (cs) 2002-12-11
BG63048B1 (bg) 2001-02-28
US6271342B1 (en) 2001-08-07
KR19980703591A (ko) 1998-11-05
SK134597A3 (en) 1998-05-06
SK281785B6 (sk) 2001-07-10
ATE186738T1 (de) 1999-12-15
HUP9800513A3 (en) 1998-09-28
CZ314397A3 (cs) 1998-01-14
JPH11502860A (ja) 1999-03-09
NO974564D0 (no) 1997-10-02
EP0819135A1 (de) 1998-01-21
DE59603678D1 (de) 1999-12-23
ES2140078T3 (es) 2000-02-16
RU2170234C2 (ru) 2001-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA61054C2 (en) Cytoctatics modified by carbohydrates
EP0727216B1 (en) Medicinal composition containing sialic acid derivative
KR102230325B1 (ko) 면역 부활 활성을 갖는 핵산 유도체
US7361644B2 (en) Specific antagonist for both E- and P-selectins
JPH09511233A (ja) 細胞接着インヒビターとしての置換ラクトース誘導体
JP2002537264A (ja) ベンズアルデヒド誘導体
JP4959098B2 (ja) 関節炎の処置及びそれ用の組成物
KR100363692B1 (ko) 치료제용도의피리딜비스인산염
佐々木琢磨 et al. Antitumor activity and immunomodulatory effect of glycoprotein fraction from scallop Patinopecten yessoensis.
WO2005112967A2 (en) Anticancer activity of chios mastic gum
JPH08500820A (ja) 細胞接着インヒビターとしての置換されたラクトース誘導体
AU595987B2 (en) Disaccharide derivatives
RU2205010C2 (ru) Природные противоопухолевые или противовирусные вещества и их применение
US5864024A (en) Synthetic glycoamines and methods for their use that affect cell adhesion, inhibit cancer cell metastasis, and induce apoptosis
JPWO1998055493A1 (ja) 天然型抗腫瘍性又は抗ウイルス性物質およびその用途
WO1998023625A9 (en) Synthetic glycoamines, methods for their use that affect cell
KR102246180B1 (ko) 핵 유전자 손상을 최소화한 암 치료를 위한 변형 항생제 화합물 및 이를 포함하는 항암 약학 조성물
CZ277683A3 (en) 1,5-bis(3-beta-d-glucosyloxy-4-hydroxyphenyl)element 1-pent-4-ine, process of its isolation and a preparation based thereon
KR20010111569A (ko) 전선화(야생 메꽃)의 고분자량 추출물
CN116284180B (zh) 一种金丝皇菊黄酮苷及在制备治疗高血脂症和脂肪肝药物方面的应用
JP3660230B2 (ja) 天然型抗腫瘍性又は抗ウイルス性物質およびその用途
RU2575925C1 (ru) Тетравалентные неогликоконъюгаты с углеводным разветвляющим ядром и способ их получения
HRP960440A2 (en) Sugar-modified cytostatics
IL119334A (en) Carbohydrate modified cytostatics and medicaments containing them
CS235979B2 (en) Method of new anti-tumor analogues-daunorubicine and doxorubicine production