TWI681959B

TWI681959B - 作為變異型異檸檬酸脫氫酶1阻礙劑之異噁唑衍生物

Info

Publication number: TWI681959B
Application number: TW104136174A
Authority: TW
Inventors: 齋藤昭一; 伊藤雅夫; 藤沢哲則; 斉藤博直; 清洋平; 渡邉秀昭; 松永大典; 神子島佳子; 鈴木徹也; 小川原陽子; 北林一生
Original assignee: 日商第一三共股份有限公司; 國立研究開發法人國立癌症研究中心
Priority date: 2015-06-09
Filing date: 2015-11-03
Publication date: 2020-01-11
Also published as: TW201643158A

Abstract

本發明發現具有異噁唑骨架之特定化合物具有對變異型IDH1蛋白質之優良阻礙活性，且藉由該蛋白質阻礙2-HG之產生之同時，亦有效果地阻礙表現該蛋白質之種種腫瘤的增殖。

Description

作為變異型異檸檬酸脫氫酶1阻礙劑之異噁唑衍生物

本發明係關於對於變異型異檸檬酸脫氫酶1(以下有時稱為「IDH1」)具有優良阻礙活性之化合物及其製醫藥上可被許可的鹽。

異檸檬酸脫氫酶(IDHs：isocitrate dehydrogenases)為將異檸檬酸轉換為2-氧代戊二酸(α-酮戊二酸)之酵素群。該酵素群可進一步分為NAD+依賴性異檸檬酸脫氫酶(EC 1.1.1.41)與NADP+依賴性異檸檬酸脫氫酶(EC 1.1.1.42)。

IDH1(isocitrate dehydrogenase 1(NADP+),soluble)蛋白質、IDH2(isocitrate dehydrogenase 2(NADP+),mitochondrial)蛋白質為為分類為NADP+依賴性異檸檬酸脫氫酶(EC 1.1.1.42)之酵素。於種種癌中發現IDH1基因變異或IDH2基因變異。作為具體例子，可舉出神經膠質瘤及神經膠質母細胞瘤、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性依賴性、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、甲狀腺癌等(非專利文獻1~16)。

又，已有報告指出對於大部份稱為奧利埃氏病、馬二氏症候群之多發性軟骨肉瘤之患者，已有天生的IDH1基因變異或IDH2基因變異以鑲嵌狀存在(非專利文獻8,9)。

作為種種文獻報告之共通特徵，IDH1及IDH2的基因變異無點突然變異，變異處集中於對酵素反應重要的胺基酸或其附近的胺基酸。若為IDH1，特別為IDH1蛋白質之第132號的精胺酸(以下以R132表示)由其他胺基酸所取代的變異佔大多數。作為例子，已知第132號的精胺酸變換為組胺酸之變異(如R132H所表示)或變換為胞嘧啶(R132C)、亮胺酸(R132L)、絲胺酸(R132S)、甘胺酸(R132G)、纈胺酸(R132V)等變異為多。除此以外，已知有於G97、R100,H133,A134等產生變異的例子。IDH2基因變異為R140、或R172變換為其他胺基酸之變異為大部分。例如已知有R140Q變異或R172K、R172S變異等。又，於變異例之大部分中，亦顯示片烯丙基直接以野生型方式存在。已揭示如此變異之特徵為變異IDH1基因及變異IDH2基因作為活性型變異之功能。

由IDH1R132H蛋白質之功能解析來看，得知IDH1R132H蛋白質為具有與野性型之IDH1完全相異的酵素活性，即具有將2-氧代戊二酸與NADPH轉換為D-2-羥基戊二酸(D-2-hydroxyglutarate：以下記載為2-HG)與 NADP+之活性者(非專利文獻17)。對於具有稱為IDH1R132H、R132S、R132C、R132G、G97D、或IDH2R140Q或R172K之變異的神經膠質瘤或急性髓細胞白血病細胞、培養細胞，可高濃度下產生2-HG者已被確認。同樣報告對於其他IDH1變異亦為如此(非專利文獻18-20)。由這些報告得知，考慮到表現於腫瘤之變異型IDH1蛋白質為，介著與野性型IDH相異的酵素活性所產生的2-HG，可能對腫瘤性質產生影響。

已揭示將IDH1R132H表現在急性髓細胞白血病細胞株之TF-1細胞時，即使在沒有GM-CSF(Granulocyte Macrophage Colony-Stimulating Factor)的培養基中亦可增殖。又，已揭示表現IDH1R132H之TF-1細胞中，藉由促紅細胞生成素之對紅血球的分化受到抑制(非專利文獻21)。由如此報告得知，對於腫瘤，已揭示藉由變異型IDH1蛋白質之功能，可誘導增殖促進、分化抑制等性質。

已揭示對於上述奧利埃氏病、馬二氏症候群之患者，檢測出高濃度2-HG。又已揭示IDH1基因變異被一部分D-2-羥基戊二酸尿症患者檢測出(非專利文獻22)。因此，可考慮對於這些疾病，可考慮到藉由IDH變異蛋白質所產生的2-HG對於病態有所貢獻。

由如此背景，阻礙變異型IDH1蛋白質之活性的藥劑，期待作為對於癌等與IDH1變異關連的疾病具有特異作用之治療藥的有用性。

至今，作為阻礙變異型IDH1蛋白質的活性之化合物，已有揭示醯胺衍生物(專利文獻6、7、8)、二環性化合物(專利文獻9)、胺基吡啶衍生物(專利文獻10、11)、胺基嘧啶衍生物(專利文獻12)等。

然而，現今期待對於變異型IDH1蛋白質具有優良阻礙活性之新穎結構的化合物之開發。

[先行技術文獻]

[專利文獻]

[專利文獻1] US3336307

[專利文獻2] WO1994/010145

[專利文獻3] WO1994/024095

[專利文獻4] GB2284600

[專利文獻5] WO2004/072051

[專利文獻6] WO2012/009678

[專利文獻7] WO2013/107291

[專利文獻8] WO2013/107405

[專利文獻9] WO2012/173682

[專利文獻10] WO2012/171506

[專利文獻11] WO2012/171337

[專利文獻12] WO2013/046136

[非專利文獻]

[非專利文獻1] H. Yang et al., Clin Cancer Res 18 (2012) 5562-5571.

[非專利文獻2] D. W. Parsons et al., Science 321 (2008) 1807-1812.

[非專利文獻3] H. Yan et al., N Engl J Med 360 (2009) 765-773.

[非專利文獻4] E. R. Mardis et al., N Engl J Med 361 (2009) 1058-1066.

[非專利文獻5] P. Paschka et al., J Clin Oncol 28 (2010) 3636-3643.

[非專利文獻6] O. Kosmider et al., Leukemia 24 (2010) 1094-1096.

[非專利文獻7] A. Tefferi et al., Leukemia 24 (2010) 1302-1309.

[非專利文獻8] T. C. Pansuriya et al., Nat Genet 43 (2011) 1256-1261.

[非專利文獻9] M. F. Amary et al., Nat Genet 43 (2011) 1262-1265.

[非專利文獻10] D. R. Borger et al., Oncologist 17 (2012) 72-79.

[非專利文獻11] T. Shibata et al., Am J Pathol 178 (2011) 1395-1402.

[非專利文獻12] M. R. Kang et al., Int J Cancer 125 (2009) 353-355.

[非專利文獻13] T. Sjoblom et al., Science 314 (2006) 268-274.

[非專利文獻14] J. P. Hemerly et al., Eur J Endocrinol 163 (2010) 747-755.

[非專利文獻15] R. A. Cairns et al., Blood 119 (2012) 1901-1903.

[非專利文獻16] X. Liu et al., Cancer Med 2 (2013) 803-814.

[非專利文獻17] L. Dang et al., Nature 462 (2009) 739-744.

[非專利文獻18] P. S. Ward et al., Cancer Cell 17 (2010) 225-234.

[非專利文獻19] S. Gross et al., J Exp Med 207 (2010) 339-344.

[非專利文獻20] P. S. Ward et al., Oncogene 31 (2012) 2491-2498.

[非專利文獻21] J. A. Losman et al., Science 339 (2013) 1621-1625.

[非專利文獻22] L. E. Vissers et al., Am J Med Genet A 155A (2011) 2609-2616.

本發明係為有鑑於如此狀況者，其目的為提供一種對於變異型IDH1蛋白質具有優良阻礙活性之新穎結構的化合物。

本發明者們欲解決上述課題，合成具有種種結構之化合物，對於該變異型IDH1蛋白質之阻礙活性進行檢證。其結果發現具有異噁唑骨架之特定化合物對於變異型IDH1蛋白質具有優良阻礙活性，藉由該蛋白質可阻礙2-HG之產生的同時，亦可有效地阻礙表現該蛋白質之種種腫瘤之增殖，而完成本發明。

因此，本發明為提供具有異噁唑骨架，對於變異型IDH1蛋白質具有阻礙活性之化合物、其製醫藥上可被許可的鹽、及與這些用途有關者，更詳細為提供以下者。

[1]一般式(I)

[式中，Z-Y表示N-O或O-N， R¹表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的苯基、或表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的吡啶基；R²表示-NR²¹R²²、可具有1至3個獨立選自下述B群的取代基之C₁~C₆烷基、可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基之C₃~C₆環烷基、或於環內具有1或者2個的獨立選自由氮原子及氧原子所成群之雜原子的4員至6員的雜環基、該4員至6員的雜環基亦可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基、且於該雜環內可將交聯結構、或於該雜環上可將1個C₃~C₆環烷基環進行螺結合，R²¹及R²²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基、或-C(=O)R²³，R²³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基，R³表示下述式(II)至下述式(IV)中任一者

(式中， R³¹表示可由氫原子、鹵素原子、1至3個鹵素原子所取代之C₁~C₆烷基、C₃~C₆環烷基、或C₁~C₆烷基羰基，R³²表示氫原子、或C₁~C₆烷基，或R³¹及R³²為R³¹與R³²共同可形成環己烷環，R³³表示氫原子、或C₁~C₆烷基，或R³²及R³³為R³²與R³³共同可形成環丙烷環、R³⁴表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R³⁵表示C₁~C₆烷基，R³⁶表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R³⁷表示氫原子、或C₁~C₆烷基，或R³⁶及R³⁷為R³⁶與R³⁷共同可形成苯環、R³⁸表示氫原子、或鹵素原子，X表示氮原子或CH，W表示氮原子或CH，虛線表示單鍵或雙鍵。)]

所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

A群：鹵素原子、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基

B群：鹵素原子、羥基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆烷基胺基、二C₁~C₆烷基胺基

C群：C₂~C₆烯基、鹵素原子、羥基、氰基、可具有1至3個獨立選自下述D群的取代基之C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、-NR²¹¹R²¹²、-C(=O)R²¹³、- SO₂R²¹³

R²¹¹及R²¹²各獨立表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R²¹³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基。

D群：胺基、C₁~C₆烷氧基、二C₁~C₆烷基胺基、氧代基、C₃~C₆環烷基

[2]對於前述式(I)，R¹表示可具有1至3個獨立地選自上述A群的取代基之苯基的[1]所記載的化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

[3]對於前述式(I)，R²表示可具有1至3個獨立選自上述B群的取代基之C₁~C₆烷基、或環內具有1或2個獨立選自由氮原子及氧原子所成群的雜原子之4至6員的脂肪族雜環基，(該4至6員的脂肪族雜環基可具有1至3個獨立選自上述C群的取代基)

[1]或者[2]所記載的化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

[4]對於前述式(I)，R²表示下述中任一者

[1]至[3]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[5]對於前述式(I)，R³表示下述式(IV)或下述式(V)

(式(IV)及式(V)中，R^3a表示氫原子、或可由1至3個鹵素原子所取代的C₁~C₆烷基，R^3b表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3c表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3d表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3e表示氫原子、或鹵素原子，虛線表示單鍵或雙鍵。)

[1]至[4]中任一項所記載的化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

[6]對於前述式(I)，R³表示下述中任一者

[1]至[5]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[7]一般式VI

[式中，R⁴、R⁵、及R⁶各獨立表示氫原子或鹵素原子，R⁷表示下述中任一者，

R⁸及R⁹各獨立表示氫原子或C₁~C₆烷基]

所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

[8]一般式VII

[式中，R¹⁰、R¹¹、及R¹²各獨立表示氫原子或鹵素原子，R¹³表示下述中任一者，

R¹⁴表示氫原子或C₁~C₆烷基]

所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

[9]選自下述群中任1之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

(2E)-3-(1-{[5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-3-(1-{[3-(2,4-二氯-6-氟苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-3-(1-{[3-(2,4-二氯苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

(2E)-3-(1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯-6-氟苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯-5-氟苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)- 亞基]乙烷酸

(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

[10](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[11](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸tert-丁基胺鹽。

[12](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[13](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸tert-丁基胺鹽。

[14]將[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之變異型異檸檬酸脫氫酶1阻礙劑。

[15]將[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之D-2-羥基戊二酸產生阻礙劑。

[16]將[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之醫藥組成物。

[17]將[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之對於具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的抗腫瘤劑。

[18]腫瘤為腦腫瘤(含有神經膠質瘤)、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌之[17]所記載的抗腫瘤劑。

[19]使用於具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的治療方法之[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[20]腫瘤為腦腫瘤(含有神經膠質瘤)、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌之[19]所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽。

[21]欲製造具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的治療用醫藥組成物之製造的[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽的使用。

[22]腫瘤為腦腫瘤(含有神經膠質瘤)、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌之[21]所記載的使用。

[23]以投與[1]至[13]中任一項所記載的化合物或者其製藥學上可被許可的鹽者為特徵之具有變異型異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的治療方法。

[24]腫瘤為腦腫瘤(含有神經膠質瘤)、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌之[23]所記載的治療方法。

且，對於具有異噁唑骨架的化合物，至今已有揭示抗炎症劑(專利文獻1)、多巴胺受體亞型配位體(專利文獻2)、免疫抑制劑(專利文獻3)、除草劑(專利文獻4)、熱衝擊蛋白質阻礙劑(專利文獻5)之報告，但並無對於阻礙變異型IDH蛋白質之活性的報告。

本發明之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽對於變異型IDH1蛋白質具有強力活性阻礙作用，藉此對於表現該蛋白質的細胞，阻礙2-HG之產生，且可抑制其增殖。IDH1蛋白質的變異以發現有種種腫瘤，故本發明之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽為特別作為抗腫瘤劑為有用。

[圖1] 表示導入含有IDH1R132H之4基因的急性髓細胞白血病(AML)老鼠模型中，測定本發明之化合物的2-HG產生阻礙活性之結果圖表。A表示血漿中2-HG濃度，B表示骨髓細胞中之2-HG量。

[圖2] 表示導入含有IDH1R132H之4基因的急性髓細胞白血病(AML)老鼠模型中，測定本發明之化合物的抗腫瘤活性之結果圖表。A表示骨髓細胞中之EGFP陽性AML細胞的比例，B表示末梢血細胞中之EGFP陽性AML細胞的比例。各平均±分散合併表示。

[圖3] 表示IDH1/R132H變異型神經膠質母細胞瘤A1074老鼠移植模型中之測定本發明之化合物的抗腫瘤活性之結果圖表。其中表示本試驗時之各群腫瘤體積的平均值、標準誤差。

[圖4] 表示IDH1/R132H變異型神經膠質母細胞瘤A1074老鼠移植模型中之測定本發明之化合物的抗腫瘤活性之結果圖表。其比少4週間的混餌投與後之腫瘤重量。

本發明為提供下述一般式(I)所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽。

式中，Z-Y表示N-O或O-N。

式中，R¹表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的苯基、或可具有1至3個獨立選自下述A群的取代基之吡啶基。較佳為表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的苯基。

A群：鹵素原子、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基

本發明中，「鹵素原子」為氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。

本發明中，「C₁~C₆烷基」為碳數1至6個直鏈或支鏈烷基。例如可舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、s-丁基、t-丁基、戊基、異戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、己基、異己基、或4-甲基戊基等。

本發明中，「C₁~C₆烷氧基」表示於上述C₁-C₆烷基以氧基鍵結的基，例如可舉出甲氧基、乙氧基、n-丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、s-丁氧基、t-丁氧基、戊氧基、異戊氧基、2-甲基丁氧基、己氧基、或異己基氧基等。

式中，R²表示-NR²¹R²²、可具有1至3個獨立選自下述B群的取代基之C₁~C₆烷基、可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基之C₃~C₆環烷基、或環內具有1或者2的獨立選自由氮原子及氧原子所成群的雜原子之4員至6員的雜環基。

其中，「-NR²¹R²²」中之R²¹及R²²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基、或-C(=O)R²³，R²³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基。又，「4員至6員的雜環基」可為具有1至3個獨立選自下述C群的取代基，且亦可於該雜環內使交聯結構、或於該雜環上使1個C₃~C₆環烷基環進行螺結合。

C群：C₂~C₆烯基、鹵素原子、羥基、氰基、可具有1至3個獨立選自下述D群的取代基之C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、-NR²¹¹R²¹²、-C(=O)R²¹³、-SO₂R²¹³

其中，「-NR²¹¹R²¹²」中之R²¹¹及R²¹²各獨立表示氫原子、或C₁~C₆烷基。「-C(=O)R²¹³」「-SO₂R²¹³」中之R²¹³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基。

本發明中，所謂「C₃~C₆環烷基」為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。

本發明中，所謂「C₁~C₆烷基胺基」為1個上述C₁~C₆烷基由胺基取代的基。例如可舉出甲基胺基、乙基胺基、丙基胺基、異丙基胺基、丁基胺基、異丁基胺基、s-丁基胺基、t-丁基胺基、戊基胺基、異戊基胺基、2-甲基丁基胺基、新戊基胺基、1-乙基丙基胺基、己基胺基、或異己基胺基等。

對於本發明，「二C₁~C₆烷基胺基」表示相同或相異的2個上述C₁~C₆烷基由胺基所取代的基。例如可舉出二甲基胺基、二乙基胺基、二丙基胺基、二異丙基胺基、二丁基胺基、二異丁基胺基、二戊基胺基、二新戊基胺基、二己基胺基、N-乙基-N-甲基胺基、N-甲基-N-丙基胺基、N-異丙基-N-甲基胺基、N-丁基-N-甲基胺基、N-異丁基-N-甲基胺基、N-乙基-N-丙基胺基、N-乙基-N-異丙基胺基、N-丁基-N-乙基胺基、或N-乙基-N-異戊基胺基等。

本發明中，所謂「C₂~C₆烯基」表示於分子內具有1個雙鍵之碳數2至6個的直鏈或支鏈烯基，例如可舉出乙烯基、烯丙基、或異丙烯基等。

本發明中，所謂「C₂~C₆炔基」為於分子內具有1個參鍵之碳數2至6個的直鏈或支鏈C₂-C₆炔基，例如可舉出乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、或丁-3-炔基等。

對於本發明，所謂「雜環基」表示於環之構成原子，由碳以外含有1或2個各獨立選自由氮原子及氧原子所成群之原子的單環之芳香族或脂肪族化合物所導出的基。例如可舉出呋喃基、吡咯基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、環氧乙烷基、氮丙啶基、氧雜環丁烷基、氮雜環丁基、四氫呋喃基、吡咯烷基、四氫吡喃基、哌嗪基、四氫噻喃基、嗎啉代基、嗎啉基、或哌嗪基等。

R²較佳為可具有1至3個獨立選自B群的取代基之C₁~C₆烷基、或環內具有1或者2個選自由氮原子及氧原子所成群之雜原子的4員至6員之雜環基。

R²較佳為如下述中任一者所示。

式中，R³表示下述式(II)至下述式(IV)中任一者。

(式中，R³¹表示可由氫原子、鹵素原子、1至3個鹵素原子所取代之C₁~C₆烷基、C₃~C₆環烷基、或C₁~C₆烷基羰基，R³²表示氫原子、或C₁~C₆烷基、或R³¹及R³²為R³¹與R³²共同可形成環己烷環，R³³表示氫原子、或C₁~C₆烷基、或R³²及R³³為R³²與R³³共同可形成環丙烷環，R³⁴表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R³⁵表示C₁~C₆烷基，R³⁶表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R³⁷表示氫原子、或C₁~C6烷基、或R³⁶及R³⁷為R³⁶與R³⁷共同可形成苯環、R³⁸表示氫原子、或鹵素原子，X表示氮原子或CH，W表示氮原子或CH，虛線表示單鍵或雙鍵。)

本發明中，「C₁~C₆烷基羰基」表示於上述C₁-C₆烷基鍵結羰基的基，例如可舉出甲基羰基、乙基羰基、n-丙基羰基、或異丙基羰基等。

R³較佳表示下述式(IV’)或下述式(V)。

(式(IV)及式(V)中，R^3a表示氫原子、或可由1至3個鹵素原子所取代之C₁~C₆烷基，R^3b表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3c表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3d表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3e表示氫原子、或鹵素原子，虛線表示單鍵或雙鍵。)

R³更佳為表示下述中任一者。

一般式I所示化合物較佳為下述一般式(VI)或下述一般式(VII)所示化合物。

R⁸及R⁹各獨立表示氫原子或C₁~C₆烷基]

R¹⁴表示氫原子或C₁~C₆烷基]

一般式(I)所示化合物特佳為選自下述群中任一種化合物。

(2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑 -4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯-5-氟苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

本發明之化合物中最佳為(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸或者其製醫藥上可被許可的鹽、或(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸或者其製醫藥上可被許可的鹽。此等化合物之製醫藥上可被許可的鹽的較佳態樣為tert-丁基胺鹽(t-丁基胺鹽)。

本發明中所謂的「製醫藥上可被許可的鹽」為不具有顯著毒性而可作為醫藥組成物使用的鹽。本發明之化合物若具有鹼性基時可藉由與酸之反應、或具有酸性基時可藉由與鹼的反應而成為鹽。作為依據鹼性基的鹽，例如可舉出如氟化氫酸鹽、鹽酸鹽、溴化氫酸鹽、碘化氫酸鹽之鹵素化氫酸鹽、如硝酸鹽、過氯酸鹽、硫酸鹽、燐酸鹽之無機酸鹽、如甲磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽、乙磺酸鹽之C₁-C₆烷基磺酸鹽、如苯磺酸鹽、p-甲苯磺酸鹽之芳基磺酸鹽、如乙酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽之羧酸鹽，但並未限定於此等。

另一方面，作為依據酸性基的鹽，例如可舉出如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽的鹼金屬鹽、如鈣鹽、鎂鹽之鹼土類金屬鹽、如鋁鹽、鐵鹽等金屬鹽；如銨鹽之無機鹽、如t-丁基胺鹽、t-辛基胺鹽、二苯甲基胺鹽、嗎啉鹽、葡萄糖胺鹽、苯基甘胺酸烷基酯鹽、乙二胺鹽、N-甲基葡糖胺鹽、胍鹽、二乙基胺鹽、三乙基胺鹽、二環己基胺鹽、N,N’-二苯甲基乙二胺鹽、氯普魯卡因鹽、普魯卡因鹽、二乙醇胺鹽、N-苯甲基苯乙基胺鹽、哌嗪鹽、四甲基銨鹽、參(羥基甲基)胺基甲烷鹽之有機鹽等胺鹽；及如甘胺酸鹽、賴胺酸鹽、精胺酸鹽、鳥胺酸鹽、谷胺酸鹽、天冬胺酸鹽的胺基酸鹽，但並未限定於此等。

本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽有時因放置在大氣中，或藉由再結晶後吸取水分子成為水合物，如此水合物亦包含於本發明之鹽中。

本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽有時因放置在溶劑中，或藉由再結晶後吸收某種溶劑而成為溶媒合劑，如此溶媒合劑亦包含於本發明之鹽中。

於本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽中，包含所有的異構物(非對映異構物、光學異構物、幾何異構物、轉動異構物等)。

對於本發明之化合物，這些異構物及這些異構物之混合物皆以單一方式表示。因此，本發明中這些異構物及這些異構物之任意比例的混合物皆包含。

本發明為提供一種將上述本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之變異型IDH1阻礙劑。作為本發明中之「變異型IDH1」中之變異，例如可舉出IDH1之第132號的精胺酸(以下以R132表示)之變異、G97之變異、R100之變異、H133之變異、A134之變異，但並未限定於此等。又，作為R132之變異，例如可舉出對組胺酸之變異(R132H)、對胞嘧啶之變異(R132C)、對亮胺酸之變異(R132L)、對絲胺酸之變異(R132S)、對甘胺酸之變異(R132G)、對纈胺酸之變異(R132V)，但並未限定於此等。本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽，特別以作為IDH1之R132變異體的阻礙劑為佳。

且，典型的來自人類的野生型IDH1之胺基酸序列已記載於Genebank之NP_005887.2或UniprotKB之O75874。

對於特定變異型IDH1，並未存在於野性型之IDH1，已確認將2-氧代戊二酸與NADPH變換為2-HG與NADP+之酵素活性，又對於具有特定IDH1變異之細胞，已確認2-HG以高濃度產生(非專利文獻17-20)。對於本試驗例(試驗例1、2、3、及5)，發現藉由本發明之化合物阻礙該酵素活性，可阻礙2-HG之產生。因此，本發明為提供一種將上述本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之2-HG產生阻礙劑。

本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽可作為醫藥組成物而調製出，又可作為研究目的之試藥而調製出。

本發明之化合物為，構成如此化合物的原子之1以上，亦含有原子同位體之非天然比例。作為原子同位體，例如可舉出重氫(²H)、氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)等。又，前述化合物例如藉由氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)等放射性同位體進行放射性標識而得。經放射性標識之化合物可作為治療或預防劑、研究試藥(例如分析試藥)、及診斷劑(例如活體內圖像診斷劑)使用。本發明之化合物的所有同位體變異種不管是否為放射性，皆包含於本發明之範圍中。

對於腦腫瘤(含有神經膠質瘤)、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T 細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、甲狀腺癌等癌，會奧利埃氏病、馬二氏症候群之患者，發現IDH1基因變異或IDH2基因變異(非專利文獻1-16)。又，本試驗例(試驗例4及7)中，發現本發明之化合物可抑制種種腫瘤細胞之增殖。因此，將本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分之醫藥組成物，例如可將這些疾病作為治療對象，特別適用於抗腫瘤劑。

對於IDH1基因變異是否存在，可將患者之披檢組織(例如藉由採血、生檢等進行取)使用免疫印跡法、ELISA、DNA芯片、FISH分析、組織免疫染色、其他公知基因解析法{例如，桑格序列(Sanger sequence)解析、次世代DNA排序解析(NGS),PCR,LCR(Ligase chain reaction)、SDA(Strand displacement an plification)、NASBA(Nucleic acid sequence-based amplification)、ICAN(Isothermal and chineric primer-initiated amplification)、LAMP法(Loop-mediated isothernal amplification)等}等解析、病理學方法等公知方法進行確認。

且，對於本發明，所謂「腫瘤」為不限定為惡性腫瘤可含有所有種類之腫瘤，例如含有癌細胞、肉瘤、良性腫瘤等。特別對於惡性腫瘤有時以「癌」做表現。

本發明之抗腫瘤劑可併用其他抗腫瘤劑或其他治療法(例如放射線療法、免疫療法)。

作為其他抗腫瘤劑，例如可舉出烷基化劑、各種代謝拮抗劑、抗腫瘤抗生物質、抗腫瘤性植物成分、BRM(生物學的應答性控制物質)、荷爾蒙、維他命、抗腫瘤性抗體、分子標的藥、其他抗腫瘤劑等。

作為更具體的烷基化劑，例如可舉出氮芥類、氮芥類N-氧化物或者苯丁酸氮芥等烷基化劑、Carboquone或者噻替哌等氮雜環丙烷系烷基化劑、二溴甘露醇或者二溴衛矛醇等環氧化物系烷基化劑、卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、尼莫司汀鹽酸鹽、鏈脲佐菌素、氯脲霉素或者雷莫司汀等亞硝脲系烷基化劑、二甲磺酸丁酯、甲苯磺酸甲磺丙胺或達卡巴嗪等。

作為各種代謝拮抗劑，例如可舉出6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤或者硫磺菊素等嘌呤代謝拮抗劑、氟尿嘧啶、替加氟、替加氟．尿嘧啶、卡莫氟、去氧氟尿苷、溴尿核苷、阿糖胞苷或者依諾他濱等嘧啶代謝拮抗劑、甲氨蝶呤或者三甲氨蝶呤等葉酸代謝拮抗劑等。

作為抗腫瘤性抗生物質，例如可舉出絲裂黴素C、博萊黴素、培普利歐霉素、柔紅黴素、阿柔比星、多柔比星、吡柔比星、THP-阿黴素、4’-表多柔比星或者表多柔比等蒽環類藥物系抗生物質抗腫瘤劑、色黴素A3或放線菌素D等。

作為抗腫瘤性植物成分，例如可舉出長春酰胺、長春新鹼或者長春花鹼等長春花生物鹼類、紫杉醇、多西紫杉醇等紫杉類、或依托泊苷或者替尼泊苷等表鬼臼毒素類。

作為BRM，例如可舉出腫瘤壞死因子或吲哚美辛等。

作為荷爾蒙，例如可舉出氫化可的松、地塞米松、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、普拉睾酮、倍他米松、曲安奈德、羥甲烯龍、諾龍、美替諾龍、磷雌酚、乙炔基雌甾二醇、氯地孕酮或醋酸甲羥孕酮等。

作為維他命，例如可舉出維他命C或維他命A等。

作為抗腫瘤性抗體、分子標的藥，可舉出赫塞汀、利妥昔單抗、西妥昔單抗、尼妥珠單抗、狄諾塞麥、貝伐單抗、英夫利昔單抗、伊馬替尼、吉非替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、拉帕替尼、索拉非尼等。

作為其他抗腫瘤劑，例如可舉出順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、他莫昔芬、喜樹鹼、異環磷醯胺、環磷醯胺、美法崙、L-門冬醯胺酶，、醋葡醛內酯、西索菲蘭、溶鏈菌、甲基芐肼、哌泊溴烷、新制癌菌素發、羥基脲、烏苯美司或雲芝等。

本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽僅為可與增進治療上有用特性之補助部分進行結合即可。作為代表性有用特性，例如促進對於標的區域(例如腫瘤)之化合物的送達、持續對於標的區域中之化合物的治療濃度、改變化合物的藥物動態特性或藥力學特性、或改善化合物之治療指數或安全性特徵可舉出。又，作為較佳補助部分，例如可利用對於將標的區域以特異性辨識的抗體或表現於標的區域之受體的配位體。

作為將本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為醫藥組成物進行調製時，作為使用的製醫藥上可被許可的載體，例如可舉出滅菌水或生理食鹽水、植物油、溶劑、基劑、乳化劑、懸浮劑、界面活性劑、安定劑、香味劑、芳香劑、賦形劑、媒介物、防腐劑、結合劑、稀釋劑、等張化劑、無痛化劑、增量劑、崩壞劑、緩衝劑、塗佈劑、滑澤劑、著色劑、甜味劑、黏稠劑、矯味矯臭劑、溶解補助劑或者其他添加劑等，但並未限定於此等。本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽可配合治療目的等，作為錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、液劑等各種形態。又，例如亦可以脂質體送達系之形態進行投與。該脂質體中可附加可增進治療上有用特性之上述補助部分(例如抗體或配位體等)。

對患者之投與可為經口投與亦可為非經口投與。作為非經口投與，例如可舉出對靜脈投與、動脈投與、筋肉內投與、胸腔內投與、腹腔內投與、標的部位(例如，腫瘤)之直接投與等。

投與量僅為治療目的疾病之有效量即可並無特別限制，可配合患者之年齡、體重、症狀、健康狀態、疾病進行狀況等，做適宜選擇即可。作為投與頻度，並無特別限制，可配合目的做適宜選擇，例如將每日之投與量可1天1次投與，或分為複數次進行投與。將本發明之藥劑投與給人類時，有效成分之投與量的範圍為每1天，通常約0.01mg/kg體重~約500mg/kg體重，較佳為約0.1mg/kg體重~約100mg/kg體重。對人類進行投與時，較佳為每1日1次，或者分為2~4次進行投與，以適當間隔重複進行為佳。

且，將本發明之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為試藥進行調製時，視必要，可含有滅菌水或生理食鹽水、緩衝劑、保存劑等作為試藥可被許可的其他成分。該試藥配合目的對於對象(例如細胞或該分級物、組織、實驗動物等)配合目的以投與量進行投與，例如可阻礙變異型IDH1，阻礙2-HG之產生，又可抑制腫瘤之增殖

其次，對於一般式(I)所示化合物之代表性製造法做說明。本發明之化合物可由種種製造法所製造，以下所示製造法為一例，但本發明並非受限於這些解釋。一般式(I)所示化合物及其製造中間體可利用以下所示種種公知反應而製造。此時，有時在原料或中間體之段階將官能基以適當保護基進行保護。作為如此官能基，例如可舉出羥基、羧基、胺基等，保護基之種類、以及這些保護基的導入與除去之條件，例如可參考Protective Groups in Organic Synthesis(T.W.Green and P.G.M.Wuts,John Wiley & Sons,Inc.,New York,2006)所記載者。

[製造法1]

式(I)所示化合物中，以下所示化合物1a，例如可藉由下述反應式製造。

[式中，R¹、R³¹、R³²、R³³、R³⁸、W、X、Y及Z與前述同意思。式中，虛線表示單鍵或雙鍵。R³⁹表示羧基之保護基。

R²⁴表示可具有1至3個獨立選自下述B群的取代基之C₁~C₆烷基、可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基之C₃~C₆環烷基、或環內具有1個氧原子之4員至6員的脂肪族雜環基。該4員至6員的脂肪族雜環基可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基]

B群：鹵素原子、羥基、C₁~C₆烷氧基。

C群：鹵素原子、羥基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、二C₁~C₆烷基胺基。

(1)自化合物2a至化合物4a的變換

自化合物2a至化合物4a的變換為在對反應不產生壞影響之適當溶劑(例如苯、甲苯、二乙基醚、二氯甲烷、四氫呋喃、或N,N-二甲基甲醯胺等、或這些混合溶劑)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點，較佳為0℃至100℃中，適當鹼(例如氫化鈉、三乙基胺、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺、N-甲基嗎啉、4-二甲基胺基吡啶等或此等混合物)之存在下，藉由使字羧酸化合物2a所導向的羧酸鹵素化物或羧酸活性酯進行反應而可實施。作為鹼的量可使用觸媒量或者過剩量。反應時間為10分鐘至72小時為佳，自30分鐘至24小時為較佳。

(2)自化合物4a至化合物1a的變換

自化合物4a至化合物1a的變換為依R³⁹的種類同，而脫保護之反應條件亦不同。R³⁹為甲基、乙基、苯甲基等時，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如可舉出甲醇、乙醇、水、四氫呋喃、二噁烷等或這些混合溶劑，但以與水以任意比率可混合的有機溶劑為佳)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為室溫至100℃中可藉由適當鹼(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、或鉀tert-丁氧化物等)進行處理而實施。反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

R³⁹為tert-丁基等時，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如二氯甲烷、氯仿、甲醇、四氫呋喃、1,4-二噁烷等、或彼等的混合溶劑)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為-20℃至室溫中，藉由以三氟乙酸、鹽酸或甲酸等進行處理而實施。反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

製造原料之化合物2a及3a可依據參考例記載的方法進行合成。

[製造法2]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1b，例如可藉由下述反應式而製造。

R²⁵表示環內具有1個氮原子之4員至6員的脂肪族雜環基。

該4員至6員的脂肪族雜環為介在環上之氮原子而與R²⁶鍵結，又可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基，且易於雜環內將交聯結構、或於雜環上將1個C₃~C₆環烷基環進行螺結合，R²⁶表示胺基的保護基，可舉出2-硝基苯基磺醯基等

R²⁷表示-C(=O)R²³、-SO₂R²³，R²³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基]

C群：鹵素原子、羥基、氰基、可具有1至3個獨立選自下述D群的取代基之C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、-NR²¹R²²。

其中，R²¹及R²²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基、或-C(=O)R²³，R²³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基。

D群：胺基、C₁~C₆烷氧基、二C₁~C₆烷基胺基、氧代基、C₃~C₆環烷基。

(1)自化合物2b至化合物4b之變換

自化合物2b至化合物4b的變換可藉由與上述[製造法1]之(1)所記載的相同方法，進行一般偶合反應。

(2)自化合物4b至化合物5b之變換

自化合物4b至化合物5b的變換為當R²⁶為2-硝基苯基磺醯基等時，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如乙腈、N,N-二甲基甲醯胺等、或彼等的混合溶劑)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為-20℃至室溫中，可藉由適當鹼(例如碳酸鉀、碳酸銫等)與硫醇衍生物(例如苯硫醇等)進行處理而實施。反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

(3)自化合物5b至化合物6b的變換

自化合物5b至化合物6b的變換為，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲苯等、或彼等的混合溶劑)中，將化合物5b與羧酸鹵素化物或磺酸鹵素化物在適當鹼(例如三乙基胺、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺、4-二甲基胺基吡啶、N-甲基嗎啉、吡啶、2,6-盧剔啶、二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯之有機鹼、或如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉等無機鹼)存在下，可藉由使其反應而實施。反應溫度，通常為-78℃至100℃或者至溶劑的沸點之範圍，但以自-10℃至室溫附近者為佳。又，作為另外方法，本化合物6b為在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如二氯甲烷、N,N-二甲基甲醯胺、四氫呋喃、乙酸乙酯等、或彼等的混合溶劑)中，可將化合物5b與羧酸或磺酸在適當縮合劑(例如N,N’-二環己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺等)存在下進行反應而得。反應溫度通常為-78℃至100℃或者至溶劑的沸點之範圍，0℃至50℃為止為佳。又視必要可添加三乙基胺、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺、N-甲基嗎啉或4-二甲基胺基吡啶等鹼。且亦可將1-羥基苯並三唑、N-羥基琥珀酸醯亞胺等作為反應促進劑添加。

(4)自化合物6b至化合物1b的變換

自化合物6b至化合物1b的變換可藉由與上述[製造法1]之(2)所記載的相同方法，進行一般脫保護反應。

[製造法3]

又，化合物1b對於上述[製造法2]，R²⁶為tert-丁氧基羰基，R³⁹為tert-丁基時，可藉由下述製法合成。

(1)自化合物4b至化合物7b的變換

自化合物4b至化合物7b的變換為，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如二氯甲烷、氯仿、甲醇、四氫呋喃、1,4-二噁烷等、或彼等的混合溶劑)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為0℃至室溫中，可藉由與三氟乙酸、鹽酸或甲酸等進行處理而實施。反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

(2)自化合物7b至化合物1b的變換

自化合物7b至化合物1b的變換可藉由Schotten-Baumann反應而實施。即，使用對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如二氯甲烷、氯仿等)與碳酸氫鈉、氫氧化鈉等鹼水溶液的二層系條件下，可藉由反應羧酸鹵素化物或磺酸鹵素化物而實施。反應溫度為在0℃至室溫下進行為佳，反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

[製造法4]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1c例如可藉由下述反應式而製造。

[式中，R¹、R³¹、R³²、R³³、R³⁸、W、X、Y 及Z與前述同意思。式中，虛線表示單鍵或雙鍵。R³⁹表示羧基之保護基。

R⁴¹、R⁴²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基，或R⁴¹與R⁴²共同形成環烷基環、或環內具有氧原子之脂肪族雜環。]

(1)自化合物2c至化合物4c的變換

自化合物2c至化合物4c的變換為在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、丙酮等、或彼等之混合溶劑中)，自室溫至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為50℃至100℃中之適當鹼(例如碳酸鉀、碳酸銫等或彼等之混合物)存在下，可藉由反應鹵素化烷基而實施。作為鹼之量可使用過剩量。反應時間為1小時至72小時為佳，自8小時至24小時為較佳。

(2)自化合物4c至化合物5c的變換

自化合物4c至化合物5c的變換可藉由與上述[製造法1]之(2)所記載的相同方法，進行一般脫保護反應。

(3)自化合物5c至化合物6c的變換

自化合物5c至化合物6c的變換可藉由上述[製造法1]之(1)所記載的相同方法之一般醯胺化反應進行。

(4)自化合物6c至化合物1c的變換

自化合物6c至化合物1c的變換可藉由與上述[製造法1]之(2)所記載的相同方法，進行一般脫保護反應。

製造原料之化合物2c可依據參考例記載之方法合成。

[製造法5]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1c，例如可藉由下述反應式製造。

R⁴¹、R⁴²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基，或R⁴¹ 與R⁴²共同可形成環烷基環、或可形成環內具有氧原子之脂肪族雜環。]

(1)自化合物2d至化合物7c的變換

自化合物2d至化合物7c的變換可藉由上述[製造法1]之(1)所記載的相同方法之一般醯胺化反應進行。

(2)自化合物7c至化合物6c的變換

自化合物7c至化合物6c的變換在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、丙酮等、或彼等之混合溶劑)中，自-30℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為0℃至100℃中，可藉由反應所對應的胺而實施。此時，可使用過剩量的適當鹼(例如三乙基胺、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺、N-甲基嗎啉、碳酸鉀等或彼等之混合物)。反應時間以10分鐘至72小時為佳，以30分鐘至24小時為較佳。

(3)自化合物6c至化合物1c的變換

製造原料之化合物2d可依據參考例記載之方法合成。

[製造法6]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1d例如可藉由下述反應式製造。

[式中，R¹、R³¹、R³²、R³³、R³⁸、W、X、Y及Z與前述同意思。式中，虛線表示單鍵或雙鍵。R³⁹表示羧基的保護基，可舉出tert-丁基等。

R⁵¹、R⁵²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基，或R⁵¹與R⁵²共同可形成環烷基環。

R²⁶表示胺基的保護基，可舉出tert-丁氧基羰基等。

R²⁷表示-C(=O)R²³、-SO₂R²³]

(1)自化合物7c至化合物6d的變換

自化合物7c至化合物6d的變換可藉由與上述[製造法5]之(2)所記載的相同方法的一般取代反應進行。

(2)自化合物6d至化合物8d的變換

自化合物6d至化合物8d的變換可藉由與上述[製造法3]之(1)所記載的相同方法之一般脫保護反應進行。

(3)自化合物8d至化合物1d的變換

自化合物8d至化合物1d的變換可藉由與上述[製造法3]之(2)所記載的相同方法之醯化反應進行。

[製造法7]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1e例如考藉由下述反應式製造。

[式中，R¹、R³¹、R³²、R³³、R³⁵、R³⁶、Y及Z與前述同意思。R³⁹表示羧基之保護基。

R²⁸表示可具有1至3個獨立選自下述B群的取代基之C₁~C₆烷基、可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基之C₃~C₆環烷基、或環內具有1個氧原子之4員~6員的脂肪族雜環基，該4員~6員脂肪族雜環基為可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基。]

B群：鹵素原子、羥基、C₁~C₆烷氧基。

(1)自化合物2a至化合物4e的變換

自化合物2a至化合物4e的變換可藉由Friedel-Crafts反應實施。即，在對反應無影響的適當溶劑(例如二氯甲烷等)中，可藉由使用自化合物2a所調整的羧酸氯化物與化合物3b及金屬鹽化物(例如無水氯化鋁、無水鋅鹽化物等)而進行。反應溫度為自-20℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為在0℃至室溫下實施。所使用的金屬鹽化物為1至過剩莫耳當量為佳。

(2)自化合物4e至化合物5e的變換

自化合物4e至化合物5e的變換可藉由Heck反應而實施。即，在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、四氫呋喃、甲苯、1,4-二噁烷、或水等、或彼等之混合溶劑)中，在對應之丙烯酸酯及適當過渡金屬觸媒(例如鈀化合物等)存在下，加入有機鹼或無機鹼(例如碳酸鈉、碳酸鉀、磷酸三鉀、N,N-二(丙烷-2-基) 乙基胺、等)、配位體(例如三苯基次膦等)進行。丙烯酸酯可藉由市售或公知方法製造。對於上述偶合反應，反應溫度以0℃至300℃為止為佳，室溫至200℃(至適溫度為80℃至100℃)為較佳。上述反應可藉由在封管中或微波照射下進行處理而進行。對於化合物4e之丙烯酸酯及鹼各使用1至過剩莫耳當量為佳，丙烯酸酯的使用量以1至1.5莫耳當量，鹼的使用量以1至5莫耳當量較佳。反應時間以1分鐘至60小時為佳，5分鐘至24小時為較佳。

(3)自化合物5e至化合物6e的變換

自化合物5e至化合物6e的變換為在對反應不會產生壞影響的適當溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、四氫呋喃等)或彼等之混合溶劑中，在自-20℃至使用於反應的溶劑之沸點為止，較佳為0℃至室溫中適當鹼(例如氫化鈉等)之存在下，可藉由反應鹵素化烷基而實施。作為鹼的量可使用過剩量。反應時間以1小時至72小時為佳，以8小時至24小時為較佳。

(4)自化合物6e至化合物1e的變換

自化合物6e至化合物1e的變換可藉由與上述[製造法1]之(2)所記載的相同方法，進行一般脫保護反應。

[製造法8]

式(I)所示化合物之中，以下所示化合物1f，例如可藉由下述反應式而製造。

R²⁵表示環內具有1個氮原子之4員~6員的脂肪族雜環基，該4員至6員的脂肪族雜環介在環上的氮原子與R²⁶結合，又可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基，且於雜環內將交聯結構、或於雜環上將1個C₃~C₆環烷基環進行螺結合， R²⁶表示胺基之保護基，可舉出2-硝基苯基磺醯基等。

(1)自化合物2b至化合物4f的變換

自化合物2b至化合物4f的變換可藉由與上述[製造法7]之(1)所記載的相同方法之一般偶合反應進行。

(2)自化合物4f至化合物5f的變換

自化合物4f至化合物5f的變換可藉由進行與上述[製造法7]之(2)所記載之相同方法的一般烷基化反應。

(3)自化合物5f至化合物6f的變換

自化合物5f至化合物6f的變換為可藉由與上述[製造法7]之(3)所記載的相同方法之一般烷基化反應進行。

(4)自化合物6f至化合物7f的變換

自化合物6f至化合物7f的變換為可藉由與上述[製造法2]之(2)所記載之相同方法的一般脫保護反應進行。

(5)自化合物7f至化合物8f的變換

自化合物7f至化合物8f的變換可藉由與上述[製造法2]之(3)所記載之相同方法的一般醯化反應進行。

(6)自化合物8f至化合物1f的變換

自化合物8f至化合物1f的變換可藉由與上述[製造法1]之(2)所記載的相同方法，進行一般脫保護反應。

[實施例]

以下舉出參考例、實施例及試驗例，對本發明做更詳細說明，但本發明之範圍並未受到這些限定。

參考例及實施例之管柱層析法中之溶離係藉由TLC(Thin Layer Chromatography，薄層層析法)觀察下進行。對於TLC觀察，作為TLC板使用Merck公司製的矽膠60F₂₅₄或矽膠60NH₂F₂₅₄S，作為展開溶劑，使用在管柱層析法中作為溶離溶劑使用的溶劑，作為檢測法，採用UV檢測器。管柱用矽膠同樣使用默克公司製的矽膠SK-85(230~400目)、或者富士矽化學Chromatorex NH(200-350目)。通常管柱層析法以外，可適用山善公司的自動純化裝置(YFLC-5404-FC)或者Biotage公司的自動純化裝置(HORIZON、SP1或者Isolera)。溶離溶劑使用在各參考例及實施例所指定之溶劑。且，在參考例及實施例所使用的簡稱，具有如以下的意義。

mg：毫克，g：克，μl：微升，ml：毫升，L：公升，MHz：兆赫。

對於以下實施例，核磁共振(以下、¹H NMR：400MHz)光譜為將四甲基矽烷作為標準物質，將化學位移值以δ值(ppm)記載。分裂圖型為，一重線以s表示，二重線以d表示，三重線以t表示，四重線以q表示，多重線以m表示，寬以br表示。

[參考例K-1]乙基3-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-氧代丙酸酯

[步驟1]

於3-甲基氧雜環丁烷-3-羧酸(4.78g)的四氫呋喃(80ml)溶液中加入1,1’-羰基二咪唑(7.35g)，將混合物在室溫下進行1小時攪拌。於反應液加入丙二酸單乙基鉀(7.01g)及氯化鎂(3.92g)，將混合物在60℃下進行1小時攪拌。冷卻後，將反應液以乙酸乙酯稀釋並過濾。於濾液中加入1N鹽酸使其成為酸性後，分離二層，將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下將溶劑餾去後得到標記化合物(5.98g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.29(3H,t,J=7.3Hz),1.60(3H,s), 3.62(2H,s),4.21(2H,q,J=7.3Hz),4.45(2H,d,J=6.7Hz),4.91(2H,d,J=6.7Hz)。

藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到下述化合物。

[參考例K-15]乙基4-氟-4-甲基-3-氧代戊酸酯

[步驟1]

於氫化鈉(55%油性、6.10g)的四氫呋喃(40ml)懸浮液中將乙基2-氟-2-甲基丙酸酯(12.5g)與乙酸乙酯(12.3g)之混合物經20分鐘滴入，將混合物在室溫下進行3小時攪拌。於反應液中加入1N鹽酸並中和，以n-己烷進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑並使其乾燥。藉由除去澄清的油，得到粗標記化合物(16.60g)，直接使用於下個反應。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.29(3H,t,J=7.3Hz),1.50(6H,d,J=21.2Hz),3.66(2H,d,J=3.6Hz),4.21(2H,q,J=7.3Hz)。

[參考例K-16]tert-丁基4,4-二氟-3-氧代戊酸酯

[步驟1]

於鋰二(丙烷-2-基)醯胺(1.12莫耳-四氫呋喃溶液、36ml)的四氫呋喃(50ml)溶液，在-78℃加入乙酸tert-丁酯(4.83ml)，將混合物在同溫下進行30分鐘攪拌。於反應液中加入乙基2,2-二氟丙酸酯(3g)，將混合物在同溫下進行2小時攪拌。於反應液中加入1N鹽酸，以n-己烷進行萃取。將萃取液以1N鹽酸、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑後，得到粗標記化合物(5.10g)，直接使用於下個反應。

¹H-NMR(CDCl3)δ：1.47(9H,s),1.74(3H,t,J=19.3Hz),3.62(2H,s)。

藉由進行參考例K-16的步驟1之同樣操作，得到下述化合物。

[參考例K-18]乙基3-[1-(甲氧基甲氧基甲基)環丁基]-3-氧代丙酸酯

[步驟1]乙基1-(甲氧基甲氧基甲基)環丁烷羧酸酯

於乙基1-(羥基甲基)環丁烷羧酸酯(2.50g)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(4.06ml)、氯甲基甲基醚(1.43ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液中追加氯甲基甲基醚(0.595ml)、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(1.62ml)，將混合物再進行1小時攪拌。於反應液中加入水、二氯甲烷，分離為二層。將有機層以0.25N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。在減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(2.98 g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(3H,t,J=7.3Hz),1.89-2.05(4H,m),2.39-2.48(2H,m),3.35(3H,s),3.79(2H,s),4.18(2H,q,J=7.3Hz),4.63(2H,s)。

[步驟2]1-(甲氧基甲氧基甲基)環丁烷羧酸

於在上述步驟1所得之化合物(2.98g)的甲醇(20ml)-四氫呋喃(20ml)混合溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(20ml)，將混合物在45℃下攪拌1小時半。冷卻後於反應液加入1N鹽酸使其成為弱酸性，以乙酸乙酯萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(2.05g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.93-2.07(4H,m),2.42-2.53(2H,m),3.37(3H,s),3.82(2H,s),4.66(2H,s)。

[步驟3]乙基3-[1-(甲氧基甲氧基甲基)環丁基]-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(2.05g)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(2.49g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(3H,t,J=7.3Hz),1.81-2.03(4H,m),2.40-2.48(2H,m),3.36(3H,s),3.54(2H,s),3.81(2H,s),4.19(2H,q,J=7.3Hz),4.61(2H,s)。

[參考例K-19]乙基3-[1-(甲氧基甲基)環丁基]-3-氧代丙酸酯

[步驟1]乙基1-(甲氧基甲基)環丁烷羧酸酯

於乙基1-(羥基甲基)環丁烷羧酸酯(0.690g)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入42%四氟硼酸水溶液(0.793ml)，繼續徐徐加入(三甲基矽基)二偶氮甲烷(2.0莫耳-n-己烷溶液、4.36ml)，將混合物在室溫進行15分鐘攪拌。於反應液加入水、二氯甲烷，分離為二層，將有機層以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(0.720g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(3H,t,J=7.3Hz),1.88-2.05(4H,m),2.36-2.45(2H,m),3.36(3H,s),3.63(2H,s),4.18(2H,q,J=7.3Hz)。

[步驟2]1-(甲氧基甲基)環丁烷羧酸

使用上述步驟1所得之化合物(720mg)，藉由進行與參考例K-18之步驟2的同樣操作，得到標記化合物(300mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.92-2.06(4H,m),2.40-2.51(2H,m),3.41(3H,s),3.66(2H,s)。

[步驟3]乙基3-[1-(甲氧基甲基)環丁基]-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(285mg)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(308mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(3H,t,J=7.3Hz),1.81-2.00(4H,m),2.38-2.44(2H,m),3.34(3H,s),3.51(2H,s),3.64(2H,s),4.19(2H,q,J=7.3Hz)。

[參考例K-20]乙基3-(1-甲氧基環丙基)-3-氧代丙酸酯

[步驟1]甲基1-甲氧基環丙烷羧酸酯

於甲基1-羥基環丙烷羧酸酯(3.2g)的四氫呋喃(40ml)溶液，冰冷下加入氫化鈉(55%油性、1.3g)，將混合物在同溫下進行15分鐘攪拌。於反應液加入碘化甲基(2.3 ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液中加入1N鹽酸，以n-己烷-乙酸乙酯混合溶液進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(4.0g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.13-1.32(4H,m),3,42(3H,s),3.75(3H,s)。

[步驟2]1-甲氧基環丙烷羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(4.0g)，藉由進行與參考例K-18之步驟2的同樣操作，得到標記化合物(2.0g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.22-1.26(2H,m),1.36-1.40(2H,m),3.45(3H,s)。

[步驟3]乙基3-(1-甲氧基環丙基)-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(2.0g)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(3.1g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.22-1.39(7H,m),3.38(3H,s),3.72(2H,s),4.21(2H,q,J=7.3Hz)。

藉由進行與參考例K-20之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例K-22]乙基3-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

[步驟1]1-(2-硝基苯基)磺醯基哌啶-4-羧酸

哌啶-4-羧酸(30g)的水溶液(1000ml)在冰冷下，少量徐徐地加入碳酸鈉(73.9g)及氯化2-硝基苯磺醯基(61.8g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液中加入乙酸乙酯，分離二層。於水層冰冷下，加入濃鹽酸使其酸性後，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分中加入n-己烷，藉由濾取後得到標記化合物(69g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.78-1.90(2H,m),1.99-2.07(2H,m), 2.45-2.52(1H,m),2.93-3.02(2H,m),3.76(2H,dt,J=12.7,3.6Hz),7.61-7.74(3H,m),8.00(1H,dd,J=7.3,1.8Hz)。

[步驟2]乙基3-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(10g)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(14g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.26(3H,t,J=7.3Hz),1.68-1.79(2H,m),1.84-2.01(2H,m),2.57-2.66(1H,m),2.88-2.97(2H,m),3.48(2H,s),3.79-3.86(2H,m),4.19(2H,q,J=7.3Hz),7.60-7.74(3H,m),7.98-8.02(1H,m)。

藉由進行與參考例K-22之同樣操作，得到下述化合物。

[參考例K-25]tert-丁基4-(3-乙氧基-3-氧代丙醯基)-4-(甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸酯

[步驟1]1-tert-丁基4-乙基4-(甲氧基甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯

氮環境下，於1-tert-丁基4-乙基哌啶-1,4-二羧酸酯 (1.00g)的四氫呋喃(20ml)溶液中在-78℃下加入鋰二(丙烷-2-基)醯胺(1.09莫耳-四氫呋喃溶液、5.35ml)，將混合物在同溫下進行1小時攪拌。於反應液中追加氯甲基甲基醚(0.73ml)，將混合物徐徐升溫至室溫，在室溫進行一晚攪拌。於反應液中加入氯化銨水溶液(20ml)後，分離二層。將水層以乙酸乙酯進行萃取，合併有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(917mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(3H,t,J=7.0Hz),1.38-1.48(11H,m),2.04-2.12(2H,m),2.85-3.06(2H,brm),3.30(3H,s),3.38(2H,brs),3.75-3.95(2H,brm),4.20(2H,q,J=7.1Hz)。

[步驟2]1-tert-丁氧基羰基-4-(甲氧基甲基)哌啶-4-羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(910mg)，藉由進行與參考例K-18的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(852mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.39-1.50(11H,m),2.03-2.12(2H,m),2.99-3.14(2H,brm),3.36(3H,s),3.44(2H,brs),3.75-3.91(2H,brm)。

MS(m/z)：272(M-H)^-。

[步驟3]tert-丁基4-(3-乙氧基-3-氧代丙醯基)-4-(甲氧基甲基)哌啶-1-羧酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(825mg)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(835mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(3H,t,J=7.3Hz),1.44(9H,s),1.46-1.57(2H,brm),2.03(2H,ddd,J=13.9,4.1,2.0Hz),3.08-3.24(2H,m),3.30(3H,s),3.40(2H,s),3.57(2H,s),3.58-3.72(2H,brm),4.19(2H,q,J=7.3Hz)。

[參考例K-26]tert-丁基4-(3-乙氧基-3-氧代丙醯基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸酯

[步驟1]1-tert-丁基4-乙基4-羥基哌啶-1,4-二羧酸酯

於乙基4-羥基哌啶-4-羧酸酯鹽酸鹽(1.02g)的二氯甲烷(10ml)懸浮液中加入三乙基胺(1.69ml)及二-tert-丁基二碳酸酯(1.23ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n- 己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.35g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.30(3H,t,J=7.3Hz),1.47(9H,s),1.53-1.62(2H,brm),1.95(2H,td,J=12.7,4.8Hz),3.05(1H,s),3.07-3.25(2H,brm),3.86-4.08(2H,brm),4.25(2H,q,J=7.3Hz)。

[步驟2]1-tert-丁基4-乙基4-甲氧基哌啶-1,4-二羧酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(685mg)，藉由進行與參考例K-20的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(483mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.30(3H,t,J=7.0Hz),1.46(9H,s),1.82-1.96(4H,brm),3.10-3.23(2H,brm),3.27(3H,s),3.69-3.85(2H,brm),4.23(2H,q,J=7.3Hz)。

[步驟3]1-(tert-丁氧基羰基)-4-甲氧基哌啶-4-羧酸

使用在上述步驟2所得之化合物(483mg)，藉由進行與參考例K-18的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(430mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.46(9H,s),1.85-1.99(4H,m),3.08-3.23(2H,brm),3.33(3H,s),3.75-3.92(2H,brm)。

[步驟4]tert-丁基4-(3-乙氧基-3-氧代丙醯基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸酯

使用在上述步驟3所得之化合物(430mg)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(488mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(3H,t,J=7.3Hz),1.45(9H,s),1.71-1.95(4H,m),3.08-3.22(2H,m),3.23(3H,s),3.63(2H,s),3.82-3.84(2H,brm),4.20(2H,q,J=7.3Hz)。

[參考例K-27]乙基3-{4-(甲氧基甲氧基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

[步驟1]乙基4-羥基哌啶-4-羧酸酯鹽酸鹽

於由參考例K-26的步驟1所得之化合物(2.78g)的乙醇溶液(30ml)在冰冷下，加入4N鹽酸-1,4-二噁烷溶液(10 ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液在減壓下進濃縮後得到標記化合物(2.12g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.22(3H,t,J=7.3Hz),1.77-1.80(2H,m),2.02(2H,ddd,J=13.1,4.0,2.0Hz),3.02-3.05(2H,m),3.14-3.17(2H,m),4.14(2H,q,J=7.1Hz),5.86(1H,brs),8.51(1H,brs),8.67(1H,brs)。

[步驟2]乙基4-羥基-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-羧酸酯

在上述步驟1所得之化合物(2.12g)與三乙基胺(4.24ml)的二氯甲烷溶液(35ml)於冰冷下，加入氯化2-硝基苯磺醯基(2.47g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋後加入水。分離二層，將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(3.38g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.31(3H,t,J=7.3Hz),1.68-1.71(2H,m),2.15(2H,ddd,J=13.1,4.6,2.3Hz),3.11(1H,s),3.16(2H,ddd,J=12.7,2.4,1.2Hz),3.78-3.81(2H,m),4.26(2H,q,J=7.1Hz),7.59-7.65(1H,m),7.67-7.73(2H,m),7.98(1H,dd,J=7.3,1.8Hz)。

MS(m/z)：359(M+H)⁺。

[步驟3]乙基4-(甲氧基甲氧基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-羧酸酯

於在上述步驟2所得之化合物(1.51g)與氯甲基甲基醚(0.64ml)之N,N-二甲基甲醯胺溶液(16.9ml)在冰冷下，加入氫化鈉(55%油性、369mg)，將混合物在室溫下進行30分鐘攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋後，加入冰並分離為二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.12g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(3H,t,J=7.0Hz),2.01-2.13(4H,m),3.21-3.27(2H,m),3.34(3H,s),3.60(2H,ddd,J=8.6,4.2,2.1Hz),4.19(2H,q,J=7.1Hz),4.70(2H,s),7.61-7.74(3H,m),7.99-8.02(1H,m)。

[步驟4]4-(甲氧基甲氧基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-羧酸

使用在上述步驟3所得之化合物(1.12g)，藉由進行與參考例K-18的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(1.07g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.07-2.17(4H,m),3.21-3.28(2H,m),3.38(3H,s),3.64(2H,ddd,J=8.5,4.0,2.0Hz),4.75(2H,s),7.62-7.64(1H,m),7.67-7.74(2H,m),8.00-8.02(1H,m)。

[步驟5]乙基3-{4-(甲氧基甲氧基)-1-[(2-硝基苯基) 磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟4所得之化合物(1.07g)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(958mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.26(3H,t,J=7.3Hz),1.91-2.02(4H,m),3.23-3.30(2H,m),3.35(3H,s),3.61-3.64(4H,m),4.18(2H,q,J=7.3Hz),4.61(2H,s),7.62-7.64(1H,m),7.69-7.72(2H,m),7.99-8.02(1H,m)。

MS(m/z)：443(M-H)^-。

[參考例K-28]乙基3-{4-(tert-丁氧基羰基胺基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

[步驟1]甲基4-(tert-丁氧基羰基胺基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-羧酸酯

於甲基4-(tert-丁氧基羰基胺基)哌啶-4-羧酸酯(1.06 g)的四氫呋喃(11ml)及水(11ml)混合溶液，在冰冷下加入碳酸鈉(1.30g)及氯化2-硝基苯磺醯基(1.09g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮所得之殘分以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.66g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.42(9H,s),2.01-2.09(2H,m),2.17-2.25(2H,m),3.17-3.26(2H,m),3.62(2H,td,J=8.9,4.2Hz),3.73(3H,s),4.64(1H,brs),7.63(1H,dd,J=7.3,1.8Hz),7.67-7.75(2H,m),8.00(1H,dd,J=7.0,2.7Hz)。

[步驟2]4-(tert-丁氧基羰基胺基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(1.66g)，藉由進行與參考例K-18的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(1.46g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(9H,s),2.01-2.12(2H,m),2.19-2.29(2H,m),3.25(2H,t,J=11.2Hz),3.57-3.67(2H,m),4.80(1H,brs),7.62-7.77(3H,m),7.97-8.04(1H,m)。

[步驟3]乙基3-{4-(tert-丁氧基羰基胺基)-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-氧代丙酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(1.46g)，藉由進行與參考例K-1之步驟1的同樣操作，得到標記化合物(1.23g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.26(3H,t,J=7.3Hz),1.43(9H,s),1.85-1.97(2H,brm),2.16-2.32(2H,m),3.27-3.38(2H,m),3.51-3.61(2H,m),3.59(2H,s),4.17(2H,q,J=7.3Hz),4.83(1H,brs),7.62-7.76(3H,m),7.99(1H,dd,J=7.9,1.8Hz)。

[參考例X-1]3-(2,6-二氯苯基)-5-(丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1](1E)-2,6-二氯苯甲醛肟

將2,6-二氯苯甲醛(1.24g)懸浮於水(20ml)，加入羥基胺鹽酸鹽(652mg)、碳酸鈉(488mg)，將混合物進行2小時加熱迴流。冷卻後，將反應液以二氯甲烷萃取，將萃取液以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(1.31g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.24(1H,dd,J=8.6,7.4Hz),7.37 (2H,d,J=8.0Hz),7.88(1H,brs),8.38(1H,s)。

[步驟2](1Z)-2,6-二氯-N-羥基苯脒基氯化物

於在上述步驟1所得之化合物(1.00g)的N,N-二甲基甲醯胺(13ml)溶液中，在水浴下一邊冷卻一邊加入N-氯琥珀酸醯亞胺(737mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液中加入水，以二乙基醚進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(1.28g)，無須進行純化下使用於下個反應。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.27-7.41(3H,m),9.64-9.94(1H,m)。

[步驟3]甲基3-(2,6-二氯苯基)-5-(丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於甲基4-甲基-3-氧代戊酸酯(0.79ml)的四氫呋喃(6ml)溶液中在冰冷下，滴入鈉甲氧化物(28%甲醇溶液、1.07ml)的甲醇(10ml)溶液，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液並冰冷下，滴入上述步驟2所得之化合物(1.28g)的四氫呋喃(3ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入水，以二乙基醚進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(1.34g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.44(6H,d,J=7.3Hz),3.67(3H,s),3.83-3.90(1H,m),7.29-7.44(3H,m)。

[步驟4]3-(2,6-二氯苯基)-5-(丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於上述步驟3所得之化合物(1.34g)的甲醇(10ml)溶液中1N氫氧化鈉水溶液(10ml)，將混合物在55℃進行9小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入乙酸乙酯，分離二層。冰冷下將水層使用1N鹽酸進使其成為酸性，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以無水硫酸鈉乾燥後，藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(1.11g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(6H,d,J=6.7Hz),3.85-3.92(1H,m),7.30-7.43(3H,m)。

使用市售的酯或者參考例記載之酯，藉由進行與參考例X-1之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例X-52]5-(1,1-二氟乙基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]tert-丁基5-(1,1-二氟乙基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於(1E)-2,4,6-三氯苯甲醛肟(1.90g)的N,N-二甲基甲醯胺(30ml)溶液加入N-氯琥珀酸醯亞胺(1.19g)，將混合物在室溫下進行45分鐘攪拌。於反應液加入參考例K-16的步驟1所得之化合物(3.52g)及三乙基胺(1.88g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(3.00g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.33(9H,s),2.20(3H,t,J=18.7Hz),7.47(2H,s)。

[步驟2]5-(1,1-二氟乙基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

將上述步驟1所得之化合物(3.00g)、三氟乙酸(5ml)、二氯甲烷(15ml)的混合物在室溫下進行3小時攪拌。將反應液以氯仿稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，藉由將所得之殘分以n-己烷洗淨後，得到標記化合物(2.07g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.21(3H,t,J=18.4Hz),7.46(2H,s)。

使用參考例記載的酯，藉由進行與參考例X-52之同樣操作，得到下述化合物。

[參考例X-54]5-(6-氯吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-(6-氯吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於(1E)-2,4,6-三氯-苯甲醛肟(1.00g)的N,N-二甲基甲醯胺(18ml)溶液加入N-氯琥珀酸醯亞胺(625mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液注入於水中，以二乙基醚進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分溶解於N,N-二甲基甲醯胺(18ml)。於該溶液的依序加入參考例K-13所得之化合物(1.52g)與三乙基胺(1.55ml)，將混合物在室溫進行6小時攪拌。將反應液注入於乙酸乙酯、n-己烷、水之混合溶液中，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.08g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.03(3H,t,J=7.0Hz),4.15(2H,q,J=7.0Hz),7.48(2H,s),7.53(1H,d,J=8.5Hz),8.48(1H,dd,J=8.5,2.4Hz),9.13(1H,d,J=2.4Hz)。

MS(m/z)：431(M+H)⁺。

[步驟2]5-(6-氯吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於上述步驟1所得之化合物(570mg)的四氫呋喃(5ml)-甲醇(5ml)混合溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(5ml)，將混合物進行1小時加熱迴流。冷卻後，將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中冰冷下加入1N鹽酸(7ml)。將析出的固體經濾取，以水、n-己烷的依序洗淨後，減壓下加熱乾燥後得到粗標記化合物(497mg)，直接使用於下個反應。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.48(2H,s),7.54(1H,d,J=8.5Hz),8.40(1H,dd,J=7.9,2.4Hz),9.14(1H,s)。

MS(m/z)：403(M+H)⁺。

[參考例X-55]5-{3-甲基-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]氮雜環丁烷-3-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-[1-(tert-丁氧基羰基)-3-甲基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於(1E)-2,4,6-三氯-苯甲醛肟(536mg)的N,N-二甲基甲醯胺(6ml)溶液中加入N-氯琥珀酸醯亞胺(319mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液並冰冷下，加入鈉甲氧化物(28%甲醇溶液、0.48ml)後，滴入將參考例K-10所得之化合物(681mg)的四氫呋喃(7ml)溶液與鈉甲氧化物(28%甲醇溶液、0.48ml)的甲醇(5ml)溶液進行混合所調製之烯醇溶液。將混合物在室溫下進行一晚攪拌後，減壓下濃縮。將所得之殘分以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.80g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.46(9H,s),1.80(3H,s),4.03(2H,d,J=9.1Hz),4.14(2H,q,J=7.1Hz),4.46(2H,d,J=9.1Hz),7.45(2H,s)。

[步驟2]乙基5-(3-甲基氮雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯鹽酸鹽

於上述步驟1所得之化合物(0.80g)中加入4N鹽酸-1,4-二噁烷(8ml)，將混合物在室溫下進行1.5小時攪拌。將反應液在減壓下進濃縮後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

[步驟3]乙基5-{3-甲基-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]氮雜環丁烷-3-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物的二氯甲烷(8ml)懸浮液，冰冷下加入三乙基胺(0.91ml)及氯化2-硝基苯磺醯基(470mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(454mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.08(3H,t,J=7.0Hz),1.81(3H,s),4.08-4.21(4H,m),4.67(2H,d,J=8.5Hz),7.44(2H,s),7.69-7.75(3H,m),8.08(1H,dd,J=7.3,2.4Hz)。

[步驟4]5-{3-甲基-1-[(2-硝基苯基)磺醯基]氮雜環丁烷-3-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟3所得之化合物(334mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(312mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.83(3H,s),4.16(2H,d,J=8.5Hz),4.69(2H,d,J=8.5Hz),7.44(2H,s),7.70-7.76(3H,m),8.06-8.11(1H,m)。

使用參考例記載的酯，藉由進行與參考例X-55之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例X-60]5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-[1-(tert-丁氧基羰基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用(1E)-2,4,6-三氯苯甲醛肟(79mg)、參考例K-8所得之化合物(100mg)，藉由進行與參考例X-55的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(21mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.01(3H,t,J=7.3Hz),1.34(9H,s),1.93-2.04(1H,m),2.13-2.24(1H,m),2.48-2.55(2H,m),2.84-2.91(2H,m),4.10(2H,q,J=7.3Hz),5.79(1H,brs),7.44(1H,s)。

MS(m/z)：489(M+H)⁺。

[步驟2]5-[1-(tert-丁氧基羰基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(2.50g)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(2.45g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.28(9H,brs),1.80-1.88(1H,m),2.00-2.11(1H,m),2.41-2.48(2H,m),2.70-2.77(2H,m),7.87(2H,s),13.01(1H,brs)。

[步驟3]5-(1-胺基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸鹽酸鹽

於上述步驟2所得之化合物(2.45g)的甲醇(20ml)懸浮液中加入4N鹽酸-1,4-二噁烷溶液(15ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液中追加4N鹽酸-1,4-二噁烷溶液(5ml)，進一步在室溫進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入少量二乙基醚、n-己烷，將所生成的固體藉由濾取後得到標記化合物(1.55g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.88-1.99(1H,m),2.21-2.32 (1H,m),2.67-2.75(2H,m),2.81-2.90(2H,m),7.93(2H,s),9.20(3H,brs)。

[步驟4]5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於上述步驟3所得之化合物(1.55g)的1,2-二氯乙烷(20ml)懸浮液中加入甲醛(37%水溶液、1.45ml)、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.666ml)、乙醯氧基氫化硼鈉(4.13g)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。於反應液加入水、二氯甲烷並分離二層，將水層以二氯甲烷進行萃取。合併有機層，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分中加入n-己烷，將所生成的固體藉由濾取後得到標記化合物(1.25g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.91-1.99(2H,m),2.42-2.52(2H,m),2.43(6H,s),2.71-2.80(2H,m),7.87(2H,s)。

MS(m/z)：389(M+H)⁺。

使用參考例記載的酯，藉由進行與參考例X-60之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例X-62]5-(1-{甲基-[(2-硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-(1-胺基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯鹽酸鹽

於在參考例X-60的步驟1所得之化合物(1.00g)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入4N鹽酸-1,4-二噁烷(10ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液在減壓下進濃縮後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

[步驟2]乙基5-(1-{[(2-硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟1所得之化合物之二氯甲烷(20ml)懸浮液中加入三乙基胺(0.848ml)、氯化2-硝基苯磺醯基(0.452g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液中追加三乙基胺(0.283ml)、氯化2-硝基苯磺醯基(0.206g)，進一步在室溫進行30分鐘攪拌。於反應液加入水、二氯甲烷，分離二層，將有機層以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.66g)，直接使用於下個反應。

[步驟3]乙基5-[(1-{甲基-[(2-硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(53mg)的N,N-二甲基甲醯胺(3ml)溶液加入碘化甲基(0.017ml)及氫化鈉(55%油性、6mg)，將混合物在室溫進行15分攪拌。於反應液加入水、乙酸乙酯，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(31mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.95(3H,t,J=7.3Hz),1.71-1.83(1H,m),1.88-1.97(1H,m),2.83-2.93(2H,m),2.98-3.04(2H,m),3.11(3H,s),4.05(2H,q,J=7.3Hz),7.44(2H,s),7.57-7.71(3H,m),7.92-7.95(1H,m)。

[步驟4]5-(1-{甲基-[(2-硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用在上述步驟3所得之化合物，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

使用參考例記載的酯，藉由進行與參考例X-60及X-62之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例X-65]5-{1-[(tert-丁氧基羰基)(丙-2-烯-1-基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-{1-[(tert-丁氧基羰基)(丙-2-烯-1-基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於氫化鈉(55%油性、0.260g)的N,N-二甲基甲醯胺(5ml)懸浮液中加入參考例X-60的步驟1所得之化合物(1.46g)，將混合物在室溫進行5分攪拌。於反應液並冰冷下，加入溴化烯丙基(1.80g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。冰冷下於反應液加入水及乙酸乙酯，分離二層。將水層以乙酸乙酯進行萃取，合併有機層，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.871g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.96(3H,t,J=7.3Hz),1.35(9H,s),1.86-1.96(2H,m),2.66-2.74(2H,m),2.90-2.96(2H,m),4.05(2H,q,J=7.3Hz),4.16-4.23(2H,m),5.19-5.30(2H,m),5.94-6.05(1H,m),7.44(2H,s)。

MS(m/z)：529(M+H)⁺。

[步驟2]5-{1-[(tert-丁氧基羰基)(丙-2-烯-1-基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(0.871g)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.40(9H,s),1.80-1.88(1H,m),1.90- 2.00(1H,m),2.66-2.76(2H,m),2.89-2.99(2H,m),4.04-4.08(2H,m),5.21-5.27(2H,m),5.89-5.98(1H,m),7.43(2H,s)。

[參考例X-66]5-[1-(二甲基胺基)環丙基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基5-[1-(tert-丁氧基羰基胺基)環丙基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用(1E)-2,4,6-三氯苯甲醛肟(2.42g)、參考例K-7所得之化合物(2.93g)，藉由進行與參考例X-55的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(3.32g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.03(3H,t,J=7.3Hz),1.39(9H,s),1.40-1.44(2H,m),1.61-1.66(2H,m),4.14(2H,q,J=7.3Hz),6.03(1H,brs),7.43(2H,s)。

MS(m/z)：475(M+H)⁺。

[步驟2]乙基5-(1-胺基環丙基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯鹽酸鹽

使用在上述步驟1所得之化合物(3.32g)，藉由進行與參考例X-62的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(2.40g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.02(3H,t,J=7.3Hz),1.68-1.72(4H,m),4.13(2H,q,J=7.3Hz),7.96(2H,s),9.14(3H,brs)。

[步驟3]乙基5-[1-(二甲基胺基)環丙基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(1.00g)，藉由進行與參考例X-60的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(584mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.10(3H,t,J=7.3Hz),1.20-1.21(4H,m),2.38(6H,s),4.14(2H,q,J=7.3Hz),7.44(2H,s)。

[步驟4]5-[1-(二甲基胺基)環丙基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟3所得之化合物(584mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

[參考例X-67]3-(2,6-二氯苯基)-5-(3-甲氧基氧雜環丁烷-3-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]甲基3-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)丙-2-酸酯

於鋰雙(三甲基矽基)醯胺(1.09莫耳-四氫呋喃溶液、9.2ml)溶液，在-78℃下滴入甲基丙油酸酯(0.83ml)的四氫呋喃(10ml)溶液，將混合物在同溫下進行30分鐘攪拌。於反應液中加入氧雜環丁烷-3-酮(360mg)，將混合物進行1.5小時攪拌後，注入於激烈攪拌之乙酸乙酯、飽和氯化銨水溶液。分離二層，將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(152mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.76(1H,s),3.82(3H,s),4.73(2H,d,J=6.7Hz),4.88(2H,d,J=6.7Hz)。

[步驟2]甲基3-(2,6-二氯苯基)-5-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於參考例X-1的步驟1所得之化合物(190mg)的N,N-二甲基甲醯胺(2ml)溶液加入N-氯琥珀酸醯亞胺(134mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液並冰冷下，加入三乙基胺(0.34ml)及上述步驟1所得之化合物(152mg)的N,N-二甲基甲醯胺(2ml)溶液，將混合物在室溫進行二天攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(281mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.66(3H,s),4.97(2H,d,J=7.7Hz),5.15(2H,d,J=7.7Hz),5.87(1H,s),7.36-7.46(3H,m)。

[步驟3]甲基3-(2,6-二氯苯基)-5-(3-甲氧基氧雜環丁烷-3-基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(124mg)的N,N-二甲基甲醯胺(2ml)溶液，冰冷下加入碘化甲基(0.050ml)及氫化鈉(55%油性、22mg)，將混合物在室溫進行20分鐘攪拌。冰冷下，將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(93.3mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.23(3H,s),3.67(3H,s),4.98(2H,d,J=6.8Hz),5.18(2H,d,J=6.8Hz),7.34-7.50(3H,m)。

[步驟4]3-(2,6-二氯苯基)-5-(3-甲氧基氧雜環丁烷-3-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟3所得之化合物(73mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(67mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.26(3H,s),4.97(2H,d,J=7.7Hz),5.18(2H,d,J=7.7Hz),7.36-7.46(3H,m)。

藉由進行與參考例X-67之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例X-70]5-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]tert-丁基3-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)丙-2-酸酯

使用氧雜環丁烷-3-酮(3.0g)，藉由進行與參考例X-67的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(8.25g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.51(9H,s),3.16(1H,s),4.72(2H,d,J=6.7Hz),4.89(2H,d,J=6.7Hz)。

[步驟2]tert-丁基5-(3-羥基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(861mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(1.27g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.25(9H,s),4.96(2H,d,J=7.3Hz),5.13(2H,d,J=7.3Hz),6.33(1H,s),7.47(2H,s)。

[步驟3]tert-丁基5-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(87mg)的二氯甲烷(1ml)溶液，在-78℃加入(二乙基胺基)硫三氟化物(0.030ml)，將混合物在同溫下進行30分鐘攪拌後，在0℃進行1小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(66mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.31(9H,s),5.18(2H,dd,J=20.9,8.8Hz),5.26(2H,dd,J=22.4,8.5Hz),7.47(2H,s)。

[步驟4]5-(3-氟氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟3所得之化合物(66mg)，藉由進行與參考例X-52的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(57mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：5.18(2H,dd,J=22.1,9.4Hz),5.28(2H,dd,J=22.4,9.1Hz),7.47(2H,s)。

[參考例X-71]3-(2,6-二氯苯基)-5-[1-(甲氧基甲氧基)-1-甲基乙基]-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基4-羥基-4-甲基戊-2-酸酯

使用乙基丙油酸酯(1.02ml)，藉由進行與參考例X-67的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(1.64g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.32(3H,t,J=7.3Hz),1.57(6H,s),2.05(1H,s),4.24(2H,q,J=7.1Hz)。

[步驟2]乙基3-(2,6-二氯苯基)-5-(1-羥基-1-甲基乙基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(781mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(627mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.89(3H,t,J=7.3Hz),1.73(6H,s),4.10(2H,q,J=7.1Hz),5.96(1H,s),7.33-7.43(3H,m)。

[步驟3]乙基3-(2,6-二氯苯基)-5-[1-(甲氧基甲氧基)-1-甲基乙基]-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(304mg)的N,N-二甲基甲醯胺(3ml)溶液，在冰冷下加入氯甲基甲基醚(0.13ml)及氫化鈉(55%油性、77mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(317mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.93(3H,t,J=7.0Hz),1.86(6H,s),3.36(3H,s),4.07(2H,q,J=7.3Hz),4.78(2H,s),7.31-7.45(3H,m)。

[步驟4]3-(2,6-二氯苯基)-5-[1-(甲氧基甲氧基)-1-甲基乙基]-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟3所得之化合物(317mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(296mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.89(6H,s),3.44(3H,s),4.96(2H,s),7.33-7.43(3H,m)。

[參考例X-72]3-(2,6-二氯苯基)-5-(2-甲基氧雜環丁烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]4-[tert-丁基(二甲基)矽基]

丁烷-2-酮

於4-羥基丁烷-2-酮(881mg)的二氯甲烷(26ml)溶液，冰冷下將三乙基胺(4.2ml)、4-二甲基胺基吡啶(244mg)及tert-丁基二甲基氯矽烷(1.81g)的依序加入，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.63g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.05(6H,s),0.88(9H,s),2.18(3H,s),2.62(2H,t,J=6.0Hz),3.89(2H,t,J=6.3Hz)。

[步驟2]乙基6-[tert-丁基(二甲基)矽基]

-4-羥基-4-甲基己-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(809mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(1.09g)。

[步驟3]乙基5-[3-[tert-丁基(二甲基)矽基]氧基-1-羥基-1-甲基丙基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(1.09g)，藉由進行與參考例X-67的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(850mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.04(3H,s),0.05(3H,s),0.88(3H,t,J=7.3Hz),0.89(9H,s),1.74(3H,s),2.22(1H,td,J=14.5,7.5Hz),2.32-2.40(1H,m),3.74(2H,t,J=7.0Hz),4.07(2H,q,J=7.1Hz),5.90(1H,s),7.32-7.46(3H,m)。

[步驟4]乙基3-(2,6-二氯苯基)-5-(1,3-二羥基-1-甲基丙基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟3所得之化合物(434mg)的甲醇(5ml)-四氫呋喃(5ml)混合溶液，加入吡啶鎓p-甲苯磺酸鹽(223mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(293mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.89(3H,t,J=7.3Hz),1.74(3H,s),2.17-2.25(1H,m),2.43-2.51(1H,m),2.70(1H,t,J=5.4Hz),3.76- 3.85(1H,m),3.88-3.96(1H,m),4.10(2H,q,J=7.3Hz),6.47(1H,s),7.34-7.44(3H,m)。

[步驟5]乙基3-(2,6-二氯苯基)-5-(2-甲基氧雜環丁烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟4所得之化合物(355mg)的二氯甲烷(5ml)溶液在冰冷下，加入三乙基胺(0.18ml)及氯化甲烷磺醯基(0.090ml)，將混合物在同溫下進行15分鐘攪拌。於反應液加入四氫呋喃(20ml)及鉀tert-丁氧化物(426mg)，將混合物在室溫進行20分鐘攪拌。在冰冷下將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(55.2mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.99(3H,t,J=7.3Hz),1.96(3H,s),2.97(1H,dt,J=14.5,5.9Hz),3.22(1H,dt,J=14.5,5.7Hz),4.09(2H,q,J=7.3Hz),4.66-4.73(2H,m),7.32-7.43(3H,m)。

[步驟6]3-(2,6-二氯苯基)-5-(2-甲基氧雜環丁烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟5所得之化合物(95mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(68mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.03(3H,s),3.05-3.14(1H,m),3.20 (1H,ddd,J=13.8,7.1,4.7Hz),4.88(1H,dt,J=11.3,4.5Hz),4.92-5.00(1H,m),7.33-7.44(3H,m)。

[參考例X-73]5-[3-甲氧基-1-(2-硝基苯基)磺醯基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]tert-丁基3-(3-乙氧基-3-氧代-1-丙炔基)-3-羥基氮雜環丁烷-1-羧酸酯

使用tert-丁基3-氧代氮雜環丁烷-1-羧酸酯(856mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(758mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.33(3H,t,J=7.0Hz),1.44(9H,s),2.87(1H,brs),4.05(2H,d,J=9.1Hz),4.23-4.30(4H,m)。

[步驟2]乙基5-[1-(tert-丁氧基羰基)-3-羥基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(758mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(876mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.01(3H,t,J=7.3Hz),1.48(9H,s),4.16(2H,q,J=7.5Hz),4.22-4.28(2H,m),4.43-4.56(2H,m),6.09(1H,s),7.47(2H,s)。

[步驟3]乙基5-[1-(tert-丁氧基羰基)-3-甲氧基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(876mg)，藉由進行與參考例X-67的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(732mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.10(3H,t,J=7.0Hz),1.47(9H,s),3.20(3H,s),4.16(2H,q,J=7.3Hz),4.31(2H,d,J=10.3Hz),4.52(2H,d,J=10.3Hz),7.46(2H,s)。

[步驟4]乙基5-(3-甲氧基氮雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯鹽酸鹽

使用上述步驟3所得之化合物(732mg)，藉由進行與參考例X-62的步驟1之同樣操作後得到標記化合物，直接使用於下個反應。

[步驟5]乙基5-[3-甲氧基-1-(2-硝基苯基)磺醯基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用上述步驟4所得之化合物，藉由進行與參考例X-62的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(831mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.11(3H,t,J=7.3Hz),3.17(3H,s),4.17(2H,q,J=7.3Hz),4.54(2H,d,J=9.7Hz),4.76(2H,d,J=9.7Hz),7.46(2H,s),7.71-7.76(3H,m),8.07-8.12(1H,m)。

[步驟6]5-[3-甲氧基-1-(2-硝基苯基)磺醯基氮雜環丁烷-3-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟5所得之化合物(831mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(674mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.20(3H,s),4.53(2H,d,J=9.7Hz),4.75(2H,d,J=9.7Hz),7.47(2H,s),7.72-7.78(3H,m),8.07-8.12(1H,m)。

[參考例X-74]3-(2,6-二氯-4-環丙基苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]乙基3-(2,6-二氯-4-環丙基苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於參考例X-49所得之化合物(1.69g)與三環己基次膦(200mg)、環丙基硼酸(368mg)、磷酸三鉀(2.27g)的甲苯(17.8ml)-水(3.6ml)懸浮液中加入乙酸鈀(80mg)，將混合物在100℃進行3小時攪拌。冷卻後，於反應液加入乙酸乙酯、水，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.09g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.74-0.78(2H,m),1.01(3H,t,J=7.3Hz),1.05-1.10(2H,m),1.86-1.99(7H,m),4.11(2H,q,J=7.3Hz),7.09(2H,s)。

MS(m/z)：386(M+H)⁺。

[步驟2]3-(2,6-二氯-4-環丙基苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用在上述步驟1所得之化合物(1.09g)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(655 mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.78(2H,ddd,J=5.7,4.2,2.1Hz),1.05-1.11(2H,m),1.87-1.99(7H,m),7.09(2H,s)。

[參考例X-75]3-(tert-丁基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

[步驟1]1,3,5-三氯-2-乙炔基苯

於2,4,6-三氯苯甲醛(1.68g)的甲醇(80ml)溶液加入碳酸鉀(2.22g)及(1-二偶氮-2-氧代丙基)膦酸二甲基(1.44ml)，將混合物在室溫進行二天攪拌。在冰冷下，於反應液加入飽和碳酸氫鈉水溶液，將混合物減壓下濃縮。於所得之殘分中加入乙酸乙酯，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.35g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.71(1H,s),7.37(2H,s)。

[步驟2]乙基3-(2,4,6-三氯苯基)丙-2-酸酯

於上述步驟1所得之化合物(1.35g)的四氫呋喃(14ml)溶液在-78℃下加入n-丁基鋰(1.58莫耳-n-己烷溶液、4.6ml)，將混合物在同溫下進行30分鐘攪拌。於反應液加入氯甲酸乙酯(0.82ml)，將混合物在同溫下進行1.5小時攪拌後，注入於激烈攪拌之乙酸乙酯與飽和氯化銨水溶液。分離二層，將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(732mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37(3H,t,J=7.3Hz),4.33(2H,q,J=7.1Hz),7.39(2H,s)。

[步驟3](1E)-2,2-二甲基丙醛肟

於2,2-二甲基丙醛(2.0ml)的乙醇(11ml)溶液，在冰冷下加入羥基胺鹽酸鹽(1.4g)及1N氫氧化鈉水溶液(45ml)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。冰冷下，於反應液加入濃鹽酸使其成為酸性後，以二乙基醚進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥，藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(790mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.11(9H,s),7.35(1H,s),7.77(1H, brs)。

[步驟4](1Z)-N-羥基-2,2-二甲基丙烯亞胺氯化物

於上述步驟3所得之化合物(303mg)的N,N-二甲基甲醯胺(6ml)溶液中加入N-氯琥珀酸醯亞胺(401mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以二乙基醚稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(473mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.26(9H,s),7.52(1H,s)。

[步驟5]乙基3-(tert-丁基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(278mg)與上述步驟4所得之化合物(407mg)的N,N-二甲基甲醯胺(5ml)溶液中慢慢加入三乙基胺(0.83ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌後，在50℃進行6小時攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(406mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.00(3H,t,J=7.0Hz),1.52(9H,s),4.12(3H,q,J=7.1Hz),7.45(2H,s)。

[步驟6]3-(tert-丁基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

使用上述步驟5所得之化合物(406mg)，藉由進行與參考例X-1的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(211mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.52(9H,s),7.45(2H,s)。

參考例X-75之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例E-1]tert-丁基(E)-3-(1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]

於1H-吲哚-4-甲醛(30g)的N,N-二甲基甲醯胺(300ml)溶液中加入tert-丁基二乙基膦醯乙酸酯(53.4ml)及碳酸鉀(60g)，將混合物在80度下進行9小時半攪拌。冷卻後，於反應液加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化。將溶離部份在減壓下濃縮後，將所得之殘分中加入n-己烷，將混合物在室溫下進行攪拌後，將懸浮液藉由濾取後得到標記化合物(41.3g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),6.55(1H,d,J=16.3Hz),6.84(1H,brs),7.20(1H,t,J=7.9Hz),7.32(1H,t,J=3.0Hz),7.37(1H,d,J=7.3Hz),7.43(1H,d,J=7.9Hz),8.01(1H,d,J=15.7Hz),8.32(1H,brs)。

參考例E-1之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例E-3]tert-丁基(E)-3-(3-氟-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]

於參考例E-1的步驟1所得之化合物(1.60g)的丙酮(13ml)-乙腈(20ml)混合溶液中加入1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮鎓聯環[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽)(2.70g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以乙酸乙酯稀釋，以飽和碳酸氫鈉水、水(50ml)、飽和食鹽水(50ml)的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(74mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),6.51(1H,dd,J=15.7,1.8Hz),7.07(1H,dd,J=2.7,1.4Hz),7.21(1H,dd,J=7.9,3.9Hz),7.32(1H,dd,J=8.2,2.7Hz),7.44(1H,d,J=7.3Hz),7.70(1H,brs),8.26(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：260(M-H)^-。

[參考例E-4]tert-丁基(E)-3-(3-氯-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]

於參考例E-1的步驟1所得之化合物(1.20g)的N,N-二甲基甲醯胺(20ml)溶液，加入N-氯琥珀酸醯亞胺(659mg)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後、以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.25g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),6.41(1H,d,J=15.7Hz),7.20-7.25(3H,m),7.38(1H,d,J=7.9Hz),8.21(1H,brs),8.90(1H,d,J=15.7Hz)。

參考例E-4之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例E-6]tert-丁基(E)-3-(3-甲醯基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]

氮環境下，於N,N-二甲基甲醯胺(0.883g)的1,2-二氯乙烷(65ml)溶液，於冰冷下加入草醯氯(1.3ml)的1,2-二氯乙烷(7ml)溶液，將混合物在同溫下進行20分鐘攪拌。於反應液加入參考例E-1的步驟1所得之化合物(2.45g)，將混合物在室溫下進行3.5小時攪拌。於反應液並冰冷下，加入10%碳酸鈉水溶液(50ml)，將混合物在同溫下進行2小時攪拌。分離二層，將水層以二氯甲烷進行萃取。合併有機層，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.99g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.59(9H,s),6.41(1H,d,J=15.1Hz),7.32(1H,dd,J=7.9,3.9Hz),7.47(1H,d,J=8.5Hz),7.61(1H,d,J=7.9Hz),8.01(1H,d,J=3.0Hz),9.21(2H,d,J=16.3Hz),10.03(1H,s)。

MS(m/z)：270(M-H)^-。

[參考例E-7]tert-丁基2-(1H-吲哚-4-基)環丙烷羧酸酯

[步驟1]

將碘化三甲基氧化鎏溶解於二甲基亞碸(2ml)，加入鉀tert-丁氧化物(138mg)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應溶液加入參考例E-1的步驟1所得之化合物(150mg)，將混合物在室溫進行17小時攪拌。於反應液加入飽和食鹽水後，以乙酸乙酯萃取，將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(66.9mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37-1.43(1H,m),1.50(9H,s),1.56-1.62(1H,m),1.93-1.99(1H,m),2.75-2.81(1H,m),6.67-6.70(1H,m),6.73-6.77(1H,m),7.09-7.14(1H,m),7.22-7.25(1H,m),7.25-7.29(1H,m),8.23(1H,br)。

MS(ESI)：258(M+H)⁺。

[參考例E-8]tert-丁基(E)-3-(3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]

於4-溴-3-甲基-1H-吲哚(15g)的N,N-二甲基甲醯胺(500ml)溶液，加入N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(18.7ml)、參(2-甲基苯基)次膦(2.2g)、乙酸鈀(0.8g)及tert-丁基丙烯酸酯(15.7ml)，將混合物在氮環境下，在140度進行8小時攪拌。冷卻後，於反應液加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化。將溶離部份在減壓下進行濃縮，將所得之殘分中加入n-己烷，將混合物在室溫進行攪拌後，將懸浮液藉由濾取後得到標記化合物(15.6g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),2.56(3H,s),6.39(1H,d,J=15.7Hz),7.03(1H,s),7.15(1H,t,J=7.3Hz),7.35(1H,d,J=8.5Hz),7.41(1H,d,J=7.3Hz),7.99(1H,brs),8.49(1H,d,J=15.7Hz)。

參考例E-8之同樣操作後得到下述化合物。

[參考例E-13]tert-丁基3-(3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙酸酯

[步驟1]

於參考例E-8的步驟1所得之化合物(364mg)的乙酸乙酯(10ml)溶液在氮環境下，加入10%鈀碳觸媒(wet、152mg)，將混合物在氫環境下，在室溫下進行2.5小時攪拌。將反應液以矽藻土過濾，將濾液在減壓下濃縮。將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(306mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.45(9H,s),2.51(3H,d,J=1.2Hz),2.58-2.64(2H,m),3.31-3.37(2H,m),6.87(1H,d,J=7.3Hz),6.94(1H,q,J=1.2Hz),7.07(1H,t,J=7.6Hz),7.20(1H,d,J=7.9Hz),7.88(1H,brs)。

[參考例E-14]tert-丁基(E)-3-(7-氟-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]4-溴-7-氟-1H-吲哚-3-甲醛

使用4-溴-7-氟-1H-吲哚(1.10g)，藉由進行與參考例 E-6的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(502mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：6.91(1H,dd,J=10.0,8.2Hz),7.40(1H,dd,J=8.5,4.2Hz),8.11(1H,d,J=3.0Hz),9.10(1H,brs),10.92(1H,s)。

MS(m/z)：242(M+H)⁺。

[步驟2]4-溴-7-氟-3-甲基-1H-吲哚

在氮環境下，於上述步驟1所得之化合物(500mg)的甲苯(10ml)-四氫呋喃(2ml)混合溶液在冰冷下，加入氫化雙(2-甲氧基乙氧基)鋁鈉(65%甲苯溶液、1.89ml)，將混合物進行1小時加熱迴流。於反應液並冰冷下，加入飽和氯化銨水溶液，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(357mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.54(3H,s),6.73(1H,dd,J=10.3,8.5Hz),7.00-7.03(1H,brm),7.12(1H,dd,J=8.5,4.2Hz),8.12(1H,brs)。

MS(m/z)：228(M+H)⁺。

[步驟3]tert-丁基(E)-3-(7-氟-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(354mg)，藉由進行與參考例E-8的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(366 mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),2.54(3H,s),6.33(1H,d,J=15.7Hz),6.87(1H,dd,J=10.6,8.2Hz),7.05-7.05(1H,brm),7.33(1H,dd,J=8.5,4.8Hz),8.14(1H,brs),8.40(1H,d,J=15.7Hz)。

[參考例E-15]tert-丁基(E)-3-(3-乙醯-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]1-(4-溴-1H-吲哚-3-基)乙酮

於4-溴-1H-吲哚(1.96g)的二氯甲烷(20ml)溶液，冰冷下加入氯化乙醯(1.18g)及四氯化錫(1.0莫耳-二氯甲烷溶液、15ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液加入飽和碳酸氫鈉水、矽藻土，在室溫進行30分鐘攪拌後過濾。分離二層，將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之固體以二氯甲烷/n-己烷洗淨後得到標記化合物(2.02g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.62(3H,s),7.11-7.14(1H,m),7.36-7.38(1H,m),7.48-7.51(1H,m),7.79-7.81(1H,m),8.63(1H,brs)。

[步驟2]tert-丁基(E)-3-(3-乙醯-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(2.02g)，藉由進行與參考例E-8的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(2.02g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.57(9H,s),2.58(3H,s),6.31(1H,d,J=15.7Hz),7.29(1H,d,J=7.9Hz),7.42(1H,d,J=8.5Hz),7.55(1H,d,J=7.9Hz),7.98-7.99(1H,m),8.83(1H,s),9.24(1H,d,J=15.7Hz)。

[參考例E-16]tert-丁基(E)-3-(3-乙基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

[步驟1]4-溴-1-[(4-甲基苯基)磺醯基]-1H-吲哚

於4-溴-1H-吲哚(6.18g)的甲苯(50ml)溶液，在冰冷下，加入50%氫氧化鈉水溶液(24.6g)、氯化p-甲苯磺醯基(6.4g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液加入水，分離二層，將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之固體以二氯甲烷/n-己烷進行洗淨後得到標記化合物(9.33g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.35(3H,s),6.72(1H,d,J=3.6Hz),7.16-7.18(1H,m),7.24(2H,d,J=7.9Hz),7.39(1H,d,J=7.9Hz),7.62(1H,d,J=3.6Hz),7.76(2H,d,J=7.9Hz),7.94(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟2]1-[4-溴-1-[(4-甲基苯基)磺醯基]-1H-吲哚-3-基]乙酮

在冰冷下於二氯甲烷(60ml)加入氯化鋁(10.7g)、乙酸酐(5.44g)。確認氯化鋁已被溶解，加入上述步驟1所得之化合物(9.33g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水的依序洗淨後、以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之固體以二氯甲烷/n-己烷進行洗淨後得到標記化合物(9.15g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.38(3H,s),2.64(3H,s),7.20-7.22(1H,m),7.28(2H,d,J=8.5Hz),7.52(1H,d,J=7.9Hz),7.79(2H,d,J=8.5Hz),7.95(1H,d,J=8.5Hz),8.04(1H,s)。

[步驟3]4-溴-3-乙基-1-[(4-甲基苯基)磺醯基]-1H-吲哚

在冰冷下於三氟乙酸(20ml)與二氯甲烷(15ml)的混合溶液加入上述步驟2所得之化合物(8.01g)與氫化硼鈉(7.72g)，將混合物在室溫進行4小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯/二氯甲烷)進行純化後得到標記化合物(6.61g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.31(3H,t,J=7.3Hz),2.35(3H,s),2.98(2H,q,J=7.3Hz),7.09-7.11(1H,m),7.22(2H,d,J=7.9Hz),7.36-7.37(2H,m),7.73(2H,d,J=7.9Hz),7.94(1H,d,J=9.1Hz)。

[步驟4]4-溴-3-乙基-1H-吲哚

將上述步驟3所得之化合物(1.10g)、鎂(0.29g)、氯化銨(83.8mg)、甲醇(20ml)的混合物在室溫進行2小時攪拌。於反應液加入飽和氯化銨水溶液，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.51g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.33(3H,t,J=7.5Hz),3.07(2H,q,J=7.5Hz),6.97-7.02(2H,m),7.26-7.29(2H,m),8.01(1H,brs)。

[步驟5]tert-丁基(E)-3-(3-乙基-1H-吲哚-4-基)丙-2- 酸酯

使用上述步驟4所得之化合物(1.23g)，藉由進行與參考例E-8的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(1.21g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37(3H,t,J=7.5Hz),1.56(9H,s),3.00(2H,q,J=7.5Hz),6.38(1H,d,J=15.7Hz),7.05-7.06(1H,m),7.15-7.17(1H,m),7.35-7.40(2H,m),8.02(1H,brs),8.44(1H,d,J=15.7Hz)。

[參考例E-17]tert-丁基(2E)-(3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

[步驟1]tert-丁基(2E)-[1-(2,2-二甲基丙醯基)-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

於tert-丁基二乙基膦醯乙酸酯(1.12ml)的四氫呋喃(5ml)溶液，在冰冷下，加入氫化鈉(55%油性、190mg)，將混合物進行30分鐘攪拌。於反應液加入1-(2,2-二甲基丙醯基)-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-酮[Tetrahedron Lett.,39,8729-8732(1998)](1.01g)的四氫呋喃(10ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(490mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.52(9H,s),1.55(9H,s),2.95(2H,t,J=6.7Hz),3.43(2H,t,J=6.7Hz),6.44(1H,s),7.33(1H,t,J=7.9Hz),7.43-7.48(2H,m),8.33(1H,d,J=7.9Hz)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-(3,4-二氫-苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

於上述步驟1所得之化合物(490mg)的四氫呋喃(1ml)-甲醇(3ml)混合溶液，在室溫加入1N氫氧化鈉水溶液(3ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以1N鹽酸、水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(298mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),2.98-3.03(2H,m),3.43-3.49(2H,m),6.45(1H,t,J=1.5Hz),6.94-6.95(1H,m),7.18(1H,t,J=7.9Hz),7.28-7.33(2H,m),7.93(1H,brs)。

[參考例E-18]tert-丁基1,3,4,5-四氫苯並[cd]吲哚-5-基乙酸酯

[步驟1]

使用參考例E-17的步驟2所得之化合物(149mg)，藉由進行與參考例E-13的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(90mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.49(9H,s),1.86-1.96(1H,m),2.08-2.21(1H,m),2.44(1H,dd,J=14.8,8.8Hz),2.79(1H,dd,J=14.5,6.0Hz),2.82-2.97(2H,m),3.47-3.58(1H,m),6.85-6.91(2H,m),7.12(1H,t,J=7.6Hz),7.18(1H,d,J=7.9Hz),7.86(1H,brs)。

[參考例E-19]tert-丁基(2E)-(6-氟-3,4-二氫-1H-苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

[步驟1]3-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙烷酸

將5-氟-1H-吲哚(2.03g)、乙酸(15ml)及丙烯酸(2.27ml)的混合物在90℃進行3天攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入3N氫氧化鈉水溶液並攪拌後，過濾不溶物並除去。將濾液以二乙基醚洗淨，於所得之水層，在冰冷下加入濃鹽酸使其酸性後，以二氯甲烷進行萃取。將萃取液以無水硫酸鎂進行乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(2.37g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.76(2H,t,J=7.6Hz),3.07(2H,t,J=7.6Hz),6.90-6.99(1H,m),7.07(1H,d,J=2.4Hz),7.22-7.28(2H,m),7.98(1H,brs)。

[步驟2]3-[1-(2,2-二甲基丙醯基)-5-氟-1H-吲哚-3-基]丙烷酸

在氮氣流下，於上述步驟1所得之化合物(2.37g)的四氫呋喃(57ml)溶液在-78℃下，加入n-丁基鋰(1.6莫耳-n-己烷溶液、14.6ml)，將混合物在同溫下進行5分鐘攪拌。於反應液加入氯化新戊醯基(1.51ml)，將混合物在室溫下進行3小時攪拌。於反應液並冰冷下，加入飽和氯化銨水溶液，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑後，得到粗標記化合物(3.21g)，無須純化下使用於下個反應。

[步驟3]1-(2,2-二甲基丙醯基)-6-氟-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-酮

在氮氣流下，於上述步驟2所得之化合物(2.85g)的二氯甲烷(24.5ml)溶液，在冰冷下加入亞硫醯氯(2.86ml)，將混合物在室溫進行20分攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分溶解於二氯甲烷(24.5ml)，調製出酸氯化物之溶液。

在氮氣流下，於氯化鋁(2.87g)的二氯甲烷(24.5ml)溶液，在冰冷下滴入氯化氯乙醯(2.57ml)。繼續加入所調製之酸氯化物溶液，將混合物在室溫進行20分攪拌後，進行2.5小時加熱迴流。將反應液加入於冰中，以二氯甲烷萃取，將萃取液以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(662mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.53(9H,s),2.89(2H,t,J=7.3Hz),3.20(2H,q,J=4.8Hz),7.10(1H,dd,J=10.9,9.1Hz),7.63(1H,s),8 .50(1H,dd,J=8.8,3.9Hz)。

[步驟4]tert-丁基(2E)-[1-(2,2-二甲基丙醯基)-6-氟-3,4-二氫-1H-苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

使用上述步驟3所得之化合物(662mg)，藉由進行與參考例E-17的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(192mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.51(9H,s),1.54(9H,s),2.91(2H,t,J=6.3Hz),3.39(2H,t,J=6.7Hz),6.69(1H,s),7.06(1H,dd,J=11.8,8.8Hz),7.48(1H,s),8.25(1H,dd,J=9.1,3.6Hz)。

[步驟5]tert-丁基(2E)-(6-氟-3,4-二氫-1H-苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基乙酸酯

使用上述步驟4所得之化合物(192mg)，藉由進行與參考例E-17的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(146mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),2.95(2H,t,J=6.7Hz),3.42(2H,t,J=6.3Hz),6.70(1H,s),6.89-6.99(2H,m),7.19(1H,dd,J=8.5,3.0Hz),7.91(1H,brs)。

[參考例E-20]tert-丁基6,7,8,9-四氫-3H-苯並[e]吲哚-8-羧酸酯

[步驟1]甲基5-[(1E)-4-甲氧基-4-氧代丁-1-烯-1-基]-1H-吲哚-4-羧酸酯

於甲基5-溴-1H-吲哚-4-羧酸酯(WO2004/063198)(1.21g)的N,N-二甲基甲醯胺(9.5ml)溶液中，加入N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(2.49ml)、參(2-甲基苯基)次膦(580mg)、乙酸鈀(214mg)及甲基丁-3-酸酯(1.07ml)，使用微波裝置，將混合物在氮環境下以140度進行1小時攪拌。將混合物以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(990mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.32(2H,dd,J=7.3,1.8Hz),3.73(3H,s),4.00(3H,s),6.20(1H,dt,J=15.7,7.3Hz),6.83(1H,t,J=2.7Hz),7.02-7.53(4H,m),8.29(1H,brs)。

[步驟2]甲基5-(4-甲氧基-4-氧代丁基)-1H-吲哚-4-羧酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(990mg)，藉由進行與參考例E-13的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(850mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.99(2H,tt,J=7.9,7.9Hz),2.38(2H,t,J=7.6Hz),3.01(2H,t,J=7.6Hz),3.66(3H,s),3.99(3H,s),6.81-6.84(1H,m),7.08(1H,d,J=8.5Hz),7.28(1H,t,J=2.4Hz),7.44(1H,d,J=8.5Hz),8.23(1H,brs)。

[步驟3]1-tert-丁基4-甲基5-(4-甲氧基-4-氧代丁基)吲哚-1,4-二羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(850mg)的二氯甲烷(15ml)溶液中，冰冷下加入三乙基胺(0.86ml)、4-二甲基胺基吡啶(38mg)及二-tert-丁基二碳酸酯(809mg)，將混合物在室溫下進行3天攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(1.00g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.67(9H,s),1.93-2.02(2H,m),2.37(2H,t,J=7.6Hz),2.98(2H,t,J=7.6Hz),3.67(3H,s),3.98(3H,s),6.84(1H,d,J=3.6Hz),7.19(1H,d,J=9.1Hz),7.62(1H,d,J=3.6Hz),8.20(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟4]3-tert-丁基8-甲基9-氧代-6,7,8,9-四氫-3H- 苯並[e]吲哚-3,8-二羧酸酯

於鋰二(丙烷-2-基)醯胺(1.09莫耳-四氫呋喃溶液、7.33ml)溶液，在-78℃滴入上述步驟3所得之化合物(1.00g)的四氫呋喃(5ml)溶液，將混合物進行2小時攪拌。將反應液注入於激烈攪拌的乙酸乙酯與1N鹽酸之混合溶液，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(809mg)。

[步驟5]甲基9-氧代-6,7,8,9-四氫-3H-苯並[e]吲哚-8-羧酸酯

於上述步驟4所得之化合物(809mg)的二氯甲烷(7.9ml)溶液，在冰冷下加入三氟乙酸(7.9ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液在減壓下進濃縮後得到標記化合物(695mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.38-2.48(1H,m),2.52-2.64(1H,m),3.06-3.24(2H,m),3.74(1H,dd,J=10.3,4.8Hz),3.82(3H,s),7.23-7.28(1H,m),7.65(1H,d,J=3.6Hz),7.75(1H,d,J=3.6Hz),8.36(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟6]甲基6,7,8,9-四氫-3H-苯並[e]吲哚-8-羧酸酯

於上述步驟5所得之化合物(547mg)中加入乙酸乙酯 (5ml)、甲醇(10ml)、二氯甲烷(3ml)及乙酸(0.13ml)並使其溶解後，在氮環境下，加入5%鈀碳觸媒(wet、547mg)。將混合物在氫環境下，以50℃進行7小時攪拌後，以氮取代後，以矽藻土過濾。將濾液在減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(111mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.86-1.98(1H,m),2.24-2.33(1H,m),2.85(1H,tdd,J=11.2,5.5,2.9Hz),2.92-2.99(2H,m),3.15(1H,dd,J=16.6,11.2Hz),3.31(1H,dd,J=16.9,5.4Hz),3.76(3H,s),6.53(1H,t,J=2.4Hz),6.94(1H,d,J=8.5Hz),7.17-7.22(2H,m),8.13(1H,brs)。

[步驟7]6,7,8,9-四氫-3H-苯並[e]吲哚-8-羧酸

於上述步驟6所得之化合物(111mg)的四氫呋喃(1ml)-甲醇(1ml)混合溶液，在室溫加入1N氫氧化鈉水溶液(1ml)，將混合物在50℃進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入乙酸乙酯、1N鹽酸，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(104mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.90-2.02(1H,m),2.29-2.38(1H,m),2.91(1H,tdd,J=10.9,5.5,2.9Hz),2.95-3.02(2H,m),3.18(1H,dd,J=16.9,10.3Hz),3.34(1H,dd,J=16.9,5.4Hz),6.53(1H,t,J=2.4Hz),6.95(1H,d,J=8.5Hz),7.18-7.23(2H,m),8.14(1H,brs)。

[步驟8]tert-丁基6,7,8,9-四氫-3H-苯並[e]吲哚-8-羧酸酯

於上述步驟7所得之化合物(104mg)的甲苯(5ml)懸浮液中在70℃中加入N,N-二甲基甲醯胺二-tert-丁基縮醛(1.2ml)，將混合物在90℃進行45分鐘攪拌。冷卻後，將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後、以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(82mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.50(9H,s),1.80-1.93(1H,m),2.20-2.28(1H,m),2.72(1H,tdd,J=11.2,5.4,2.8Hz),2.90-2.97(2H,m),3.10(1H,dd,J=16.6,10.6Hz),3.24(1H,dd,J=16.9,5.4Hz),6.53(1H,t,J=2.4Hz),6.93(1H,d,J=8.5Hz),7.16-7.21(2H,m),8.12(1H,brs)。

[實施例1](2E)-3-(1-{[5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於參考例X-11所得之化合物(10.2g)的二氯甲烷溶液(100ml)，在冰冷下，將N,N-二(丙烷-2-基)胺(7.6ml)、三氟乙酸五氟苯基(7.3ml)依序滴入，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/二氯甲烷)進行純化後得到標記化合物(11.4g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.92(3H,s),4.70(2H,d,J=6.7Hz),5.21(2H,d,J=6.7Hz),7.46(2H,s)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於參考例E-1所得之化合物(4.98g)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(60ml)，在冰冷下慢慢加入氫化鈉(55%油性、 936mg)，將混合物在室溫下進行45分鐘攪拌。於反應液並冰冷下，加入上述步驟1所得之化合物(10.3g)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(50ml)，將混合物在室溫下進行30分鐘攪拌。冰冷下，於反應液加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(11.9g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),1.92(3H,s),4.60(2H,d,J=6.7Hz),5.12(2H,d,J=6.7Hz),6.45(1H,d,J=16.3Hz),6.71(1H,d,J=3.6Hz),7.13(1H,d,J=4.2Hz),7.31(2H,s),7.36(1H,t,J=7.9Hz),7.53(1H,d,J=7.3Hz),7.85(1H,d,J=16.3Hz),8.29(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟3](2E)-3-(1-{[5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟2所得之化合物(11.9g)的四氫呋喃溶液(20ml)，加入甲酸(120ml)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後、以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化。將溶離部份在減壓下濃縮，於所得之殘分中加入n-己烷/二氯甲烷混合溶液，經濾取、乾燥後得到標記化合物(7.61 g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.93(3H,s),4.62(2H,d,J=6.7Hz),5.13(2H,d,J=6.7Hz),6.55(1H,d,J=15.7Hz),6.74(1H,d,J=4.2Hz),7.17(1H,d,J=4.2Hz),7.32(2H,s),7.40(1H,t,J=7.3Hz),7.59(1H,d,J=7.3Hz),8.05(1H,d,J=15.7Hz),8.34(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：531(M+H)⁺。

使用在參考例所得之化合物，藉由進行與實施例1之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例10](2E)-3-(3-甲基-1-{[5-(1-甲基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-(1-甲基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用參考例X-14所得之化合物(0.109g)，藉由進行與實施例1的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(0.123g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.72(3H,s),1.92-2.01(1H,m),2.14-2.30(3H,m),2.72-2.82(2H,m),7.44(2H,s)。

MS(m/z)：526(M+H)⁺。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(3-甲基-1-{[5-(1-甲基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用上述步驟1所得之化合物(0.123g)與參考例E-8所得之化合物(0.054g)，藉由進行與實施例1的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(0.103g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.67(3H,s),1.88-2.22 (4H,m),2.38(3H,s),2.56-2.63(2H,m),6.36(1H,d,J=15.7Hz),6.95(1H,s),7.29-7.33(3H,m),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.28(1H,d,J=15.7Hz),8.37(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：599(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-(3-甲基-1-{[5-(1-甲基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟2所得之化合物(0.100g)的二氯甲烷(5ml)溶液，在冰冷下加入三氟乙酸(1ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入乙酸乙酯、水，分離二層。將有機層以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(0.072g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.68(3H,s),1.88-2.17(4H,m),2.39(3H,s),2.56-2.64(2H,m),6.46(1H,d,J=15.7Hz),6.98(1H,s),7.32(2H,s),7.35(1H,t,J=7.9Hz),7.58(1H,d,J=7.9Hz),8.41(1H,d,J=7.9Hz),8.48(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：543(M+H)+。

使用參考例所得之化合物，藉由進行與實施例1之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例21](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於參考例X-20所得之化合物(200mg)與N,N-二甲基甲醯胺(10μl)的二氯甲烷(6ml)溶液中加入草醯氯(216mg)，將混合物在室溫下進行30分鐘攪拌。將反應液減壓下濃縮得到酸氯化物。

於參考例E-8所得之化合物(218mg)與N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.19ml)、4-二甲基胺基吡啶(7.0mg)的二氯甲烷(3ml)溶液中，冰冷下滴入上述酸氯化物之二氯甲烷(3ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液注入於n-己烷、乙酸乙酯及水之混合液，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(171mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.88(6H,d,J=21.8Hz),2.41(3H,s),6.36(1H,d,J=15.7Hz),6.98(1H,s),7.31(1H,dd,J=8.2,4.1Hz),7.35(2H,s),7.53(1H,d,J=7.9Hz),8.30(1H,d,J=15.7Hz),8.41(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：591(M+H)⁺。

[步驟2](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用在上述步驟1所得之化合物(170mg)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(110mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.88(6H,d,J=21.8Hz),2.42(3H,d,J=1.2Hz),6.45(1H,d,J=15.7Hz),7.02(1H,s),7.35(3H,t,J=7.9Hz),7.58(1H,d,J=7.3Hz),8.48(2H,dd,J=13.0,6.5Hz)。

MS(m/z)：535(M+H)⁺。

使用參考例所得之化合物，藉由進行與實施例21之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例71](2E)-3-(3-環丙基-1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(3-溴-1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用參考例X-20所得之化合物(2.08g)與參考例E-5 所得之化合物(1.90g)，藉由進行與實施例21的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(3.27g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),1.89(6H,d,J=21.8Hz),6.36(1H,d,J=15.7Hz),7.29-7.41(4H,m),7.57(1H,d,J=7.3Hz),8.43(1H,d,J=8.5Hz),8.88(1H,d,J=15.7Hz)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(3-環丙基-1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

將上述步驟1所得之化合物(1.50g)、環丙基硼酸(0.216g)、磷酸三鉀(1.45g)、三環己基次膦(0.128g)、乙酸鈀(51.3mg)懸浮於甲苯(30ml)、水(0.1ml)，將混合物在氮環境下，在90℃進行2小時攪拌。冷卻後，將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(863.9mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.54-0.59(2H,m),1.01(2H,dd,J=8.2,1.5Hz),1.54(9H,s),1.87(6H,d,J=21.2Hz),1.88-1.99(0H,m),6.38(1H,d,J=15.7Hz),6.87(1H,s),7.29-7.36(3H,m),7.56(1H,d,J=7.9Hz),8.40(1H,d,J=8.5Hz),8.74(1H,d,J=15.7Hz)。

[步驟3](2E)-3-(3-環丙基-1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2- 烯酸

使用在上述步驟2所得之化合物(863.9mg)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(547.0mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.55-0.60(2H,m),1.01-1.05(2H,m),1.87(6H,d,J=21.8Hz),1.88-1.97(7H,m),6.46(1H,d,J=15.7Hz),6.91(1H,s),7.33-7.38(3H,m),7.61(1H,d,J=7.9Hz),8.44(1H,d,J=8.5Hz),8.97(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：559(M-H)^-。

[實施例72](2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-(二氟甲基)-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲醯基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用參考例X-5所得之化合物(1.20g)與參考例E-6所得之化合物(0.93g)，藉由進行與實施例21的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(1.95g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.50(9H,s),1.58(9H,s),6.37(1H,d,J=16.3Hz),7.27-7.28(2H,m),7.46(1H,dd,J=8.2,4.1Hz),7.68(1H,d,J=7.3Hz),7.90(1H,s),8.41(1H,d,J=8.5Hz),8.88(1H,d,J=16.3Hz),9.96(1H,s)。

MS(m/z)：545(M+H)⁺。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-(二氟甲基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-酸酯

在氮環境下，於上述步驟1所得之化合物(300mg)的二氯甲烷(5ml)溶液，在冰冷下加入三氟化二乙基胺基硫(0.36ml)，將混合物在同溫下進行4小時攪拌後，在室溫進行一晚攪拌。將反應液注入於乙酸乙酯、飽和碳酸氫鈉水之混合溶液中，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(282mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.47(9H,s),1.55(9H,s),6.37(1H,d,J=15.1Hz),6.89(1H,t,J=55.0Hz),7.28-7.31(2H,m),7.43(1H,dd,J=7.9,3.9Hz),7.49(1H,dd,J=1.8,0.9Hz),7.58(1H,d,J=7.3Hz),8.06(1H,d,J=15.7Hz),8.43(1H,d,J=7.3Hz)。

MS(m/z)：623(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-(二氟甲基)-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用在上述步驟2所得之化合物(280mg)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(93mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.48(9H,s),6.47(1H,d,J=15.7Hz),6.89(1H,t,J=55.0Hz),7.30(2H,s),7.47(1H,dd,J=7.9,3.9Hz),7.51(1H,dd,J=2.1,1.1Hz),7.64(1H,d,J=7.9Hz),8.27(1H,d,J=15.7Hz),8.48(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：567(M+H)⁺。

[實施例73](2E)-3-(1-{[5-(6-乙烯基吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(6-氯吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用參考例X-54所得之化合物(464mg)與參考例E-1所得之化合物(0.31g)，藉由進行與實施例21的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(518mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),6.46(1H,d,J=15.7Hz),6.71-6.76(1H,m),7.14(1H,d,J=4.2Hz),7.38-7.40(4H,m),7.56(1H,d,J=7.9Hz),7.85(1H,d,J=15.7Hz),8.00(1H,dd,J=8.5,1.8Hz),8.39(1H,d,J=7.9Hz),8.77(1H,d,J=2.4Hz)。

MS(m/z)：628(M+H)⁺。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(6-乙烯基吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於上述步驟1所得之化合物(250mg)、鉀乙烯基三氟硼酸鹽(84mg)、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.14ml)的(丙烷-2-基)醇(3ml)、水(0.6ml)懸浮液中，加入[1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]鈀(II)二氯化物-二氯甲烷加成物，將混合物使用微波裝置，在120℃進行1小時攪拌。冷卻後將反應液注入於乙酸乙酯、水之混合溶液，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(50mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),5.61(1H,d,J=10.9Hz),6.30(1H,d,J=17.5Hz),6.46(1H,d,J=16.3Hz),6.72(1H,d,J=4.2Hz),6.79(1H,dd,J=17.2,10.6Hz),7.17(1H,d,J=3.6Hz),7.37(2H,dd,J=15.1,7.9Hz),7.41(2H,s),7.56(1H,d,J=7.9Hz),7.85(1H,d,J=15.7Hz),7.94(1H,dd,J=8.5,2.4Hz),8.42(1H,d,J=8.5Hz),8.92(1H,d,J=2.4Hz)。

MS(m/z)：620(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-(1-{[5-(6-乙烯基吡啶-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用在上述步驟2所得之化合物(49mg)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(5.5mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：5.62(1H,d,J=10.9Hz),6.30(1H,d,J=17.5Hz),6.51(1H,d,J=15.7Hz),6.75-6.82(2H,m),7.20(1H,d,J=3.6Hz),7.39-7.42(4H,m),7.60(1H,d,J=7.3Hz),7.99-8.02(2H,m),8.47(1H,d,J=7.9Hz),8.90(1H,s)。

MS(m/z)：564(M+H)⁺。

[實施例74](2E)-3-(1-{[5-(1-甲氧基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-(1-甲氧基環丁基)-3-(2,4,6-三氯.苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用參考例X-15所得之化合物(0.316g)與參考例E-1所得之化合物(0.204g)，藉由進行與實施例21的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(316mg)，直接使用於下個反應。

[步驟2](2E)-3-(1-{[5-(1-甲氧基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用在上述步驟1所得之化合物(316mg)，藉由進行與實施例1的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(0.147g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.97-2.10(2H,m),2.42-2.50(2H,m),2.65-2.72(2H,m),3.13(3H,s),6.57(1H,d,J=15.7Hz),6.86(1H,d,J=4.2Hz),7.28(1H,d,J=4.2Hz),7.35-7.39(3H,m),7.58(1H,d, J=7.3Hz),8.11(1H,d,J=15.7Hz),8.44(1H,d,J=8.5Hz)。

使用參考例所得之化合物，藉由進行與實施例74之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例81](2E)-3-(1-{[5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用參考例X-60所得之化合物(0.050g)，藉由進行與實施例1的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(0.061g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.85-1.94(1H,m),2.04-2.18(1H,m),2.21(6H,s),2.45-2.53(2H,m),2.74-2.82(2H,m),7.45(2H,s)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用上述步驟1所得之化合物(416mg)與參考例E-8所得之化合物(0.174g)，藉由進行與實施例1的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(0.283g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.83-1.95(2H,m),2.20(6H,s),2.38(3H,s),2.40-2.47(2H,m),2.51-2.61(2H,m),6.36(1H,d,J=15.7Hz),7.00(1H,s),7.27-7.33(3H,m),7.52(1H,d,J=7.3Hz),8.28(1H,d,J=15.7Hz),8.39(1H,d,J=7.9Hz)。

[步驟3](2E)-3-(1-{[5-[1-(二甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟2所得之化合物(0.283g)的二氯甲烷(3ml)溶液中加入4N鹽酸-1,4-二噁烷溶液(1ml)，將混合物在室溫進行攪拌1小時半。於反應液追加4N鹽酸-1,4-二噁烷溶液(3ml)，進一步進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入水、二氯甲烷，分離二層後，將有機層以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化。將溶離部份在減壓下濃縮，於所得之殘分中加入n-己烷/二乙基醚混合溶液，經濾取、乾燥後得到標記化合物(0.161g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.84-1.97(2H,m),2.21(6H,s),2.38(3H,s),2.40-2.48(2H,m),2.52-2.61(2H,m),6.45(1H,d,J=15.7Hz),7.02(1H,s),7.31-7.36(3H,m),7.56(1H,d,J=7.9Hz),8.42-8.47(2H,m)。

MS(m/z)：572(M+H)⁺。

使用參考例所得之化合物，藉由進行與實施例81之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例83](2E)-3-(3-甲基-1-{[5-[1-(甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-(1-{甲基[(2-硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用參考例X-62所得之化合物，藉由進行與實施例1的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(0.454g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.79-1.91(1H,m),1.94-2.03(1H,m),2.86-3.01(4H,m),3.09(3H,s),7.46(2H,s),7.59-7.72(3H,m),7.90(1H,dd,J=7.9,1.2Hz)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(3-甲基-1-{[5-(1-{甲基[(2- 硝基苯基)磺醯基]胺基}環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用上述步驟1所得之化合物(0.447g)與參考例E-8所得之化合物(0.158g)，藉由進行與實施例1的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(0.386g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.83-2.01(2H,m),2.34(3H,d,J=1.2Hz),2.63-2.72(2H,m),2.80-2.87(2H,m),3.05(3H,s),6.35(1H,d,J=15.7Hz),7.04(1H,d,J=1.2Hz),7.26-7.32(3H,m),7.51(1H,d,J=7.3Hz),7.60-7.71(3H,m),7.96-7.99(1H,m),8.26(1H,d,J=15.7Hz),8.37(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：799(M+H)⁺。

[步驟3]tert-丁基(2E)-3-[3-甲基-1-({5-[1-(甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-酸酯

於上述步驟2所得之化合物(0.376g)的乙腈(10ml)溶液，在冰冷下，加入4-溴苯硫醇(0.192g)及碳酸鉀(0.281g)，將混合物在同溫下進行1小時，在室溫下進行3小時攪拌。冰冷下，於反應液加入乙酸乙酯、水，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.244g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.97-2.28(4H,m),2.25(3H,s),2.34(3H,d,J=1.2Hz),2.60-2.67(2H,m),6.36(1H,d, J=15.7Hz),6.93(1H,d,J=1.2Hz),7.29-7.33(3H,m),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.26(1H,d,J=15.7Hz),8.35(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：614(M+H)⁺。

[步驟4](2E)-3-[3-甲基-1-({5-[1-(甲基胺基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

使用上述步驟3所得之化合物(0.100g)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(0.085g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.99-2.39(4H,m),2.30(3H,s),2.33(3H,s),2.62-2.70(2H,m),6.43(1H,d,J=15.7Hz),6.94(1H,s),7.31(2H,s),7.35(1H,t,J=7.9Hz),7.55(1H,d,J=7.9Hz),8.37-8.43(2H,m)。

MS(ESI)：558(M+H)⁺。

使用在參考例所得之化合物，藉由進行與實施例83之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例87](2E)-3-(1-{[5-{1-[丙烯醯基(甲基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-{1-[丙烯醯基(甲基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於實施例83的步驟3所得之化合物(0.133g)的二氯甲烷(3ml)溶液，加入三乙基胺(0.090ml)、氯化丙烯醯基(0.035ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液加入二氯甲烷、水，分離二層後，將有機層以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物，將此直接使用於下個反應。

MS(m/z)：668(M+H)⁺。

[步驟2](2E)-3-(1-{[5-{1-[丙烯醯基(甲基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用上述步驟1所得之化合物，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(0.112g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.94-2.02(1H,m),2.32-2.42(1H,m),2.34(3H,s),2.53-3.09(4H,m),3.04(3H,s),5.32(1H,d,J=10.3Hz),5.83(1H,d,J=16.9Hz),6.16(1H,dd,J=16.9,10.3Hz),6.41(1H,d,J=15.7Hz),6.95(1H,s),7.26-7.32(3H,m),7.53(1H,d,J=7.9Hz),8.40(1H,d,J=7.9Hz),8.44(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：612(M+H)⁺。

[實施例88](2E)-3-(1-{[5-{1-[(二甲基胺基)甲基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-{1-[(甲氧基甲氧基)甲基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用參考例X-33所得之化合物(2.04g)，藉由進行與實施例1的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(2.34g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.98-2.11(1H,m),2.14-2.22(1H,m),2.41-2.48(2H,m),2.73-2.83(2H,m),3.24(3H,s),4.03(2H,s),4.59(2H,s),7.44(2H,s)。

MS(m/z)：586(M+H)⁺。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-{1-[(甲氧基甲氧基)甲基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(2.34g)與參考例E-8所得之化合物(1.03g)，藉由進行與實施例1的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(2.00g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.95-2.24(4H,m),2.36(3H,s),2.59-2.66(2H,m),3.23(3H,s),4.01(2H,s),4.50(2H,s),6.36(1H,d,J=15.7Hz),7.09(1H,d,J=1.2Hz),7.28-7.32(1H,m),7.31(2H,s),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.28(1H,d,J=15.7Hz),8.38(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：659(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-[1-({5-[1-(羥基甲基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-3-甲基-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

於上述步驟2所得之化合物(1.47g)的二氯甲烷(10ml)溶液加入三氟乙酸(2ml)，將混合物在室溫進行攪拌1小時半。於反應液追加三氟乙酸(1ml)並進行30分鐘攪拌後，再追加三氟乙酸(2ml)並進行30分鐘攪拌。於反應液加入二氯甲烷、水，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分中加入n-己烷，藉由濾取後得到標記化合物(1.32g)。

MS(m/z)：559(M+H)⁺。

[步驟4](2E)-3-(1-{[5-(1-甲醯基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟3所得之化合物(0.60g)的二氯甲烷(5ml)溶液加入Dess-Martin過碘酸(0.909g)，將混合物在室溫下進行2小時攪拌。於反應液中加入水、二氯甲烷，分離為二層。將有機層以水、硫代硫酸鈉水溶液、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，於所得之殘分加入二乙基醚、n-己烷，藉由濾取後得到標記化合物(0.460g)。

MS(m/z)：557(M+H)⁺。

[步驟5](2E)-3-(1-{[5-{1-[(二甲基胺基)甲基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟4所得之化合物(0.160g)的1,2-二氯乙烷(3ml)懸浮液中加入二甲基胺(2.0莫耳-四氫呋喃溶液、0.57ml)、乙醯氧基氫化硼鈉(0.304g)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。於反應液加入二氯甲烷、水，分離二層。將水層以二氯甲烷進行萃取，合併有機層，以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後，以分級用薄層層析法(乙酸乙酯)進行純化。將所得之殘分中加入n-己烷，藉由濾取後得到標記化合物(0.028g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.01(6H,s),2.05-2.30(4H,m),2.35 (3H,d,J=1.2Hz),2.69-2.76(2H,m),2.89(2H,s),6.40(1H,d,J=15.7Hz),7.04(1H,d,J=1.2Hz),7.27(2H,s),7.31(1H,t,J=7.9Hz),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.39-8.45(2H,m)。

MS(m/z)：586(M+H)⁺。

[實施例89](2E)-3-(1-{[5-[1-(二甲基胺基甲醯基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]2,2,2-三氯乙基(2E)-3-[1-({5-[1-(羥基甲基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於實施例88的步驟3所得之化合物(0.398g)的2,2,2-三氯乙醇(3.5ml)溶液加入1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)- 碳二亞胺鹽酸鹽(0.204g)、1-羥基苯並三唑1水合物(0.035g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌後，在70℃進行攪拌1小時半。於反應液加入乙酸乙酯、水，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.262g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.97-2.06(1H,m),2.11-2.23(1H,m),2.27-2.34(2H,m),2.32(3H,d,J=1.2Hz),2.51-2.59(2H,m),4.11(2H,d,J=5.4Hz),4.88(2H,s),6.52(1H,d,J=15.7Hz),7.01(1H,d,J=1.2Hz),7.29(2H,s),7.36(1H,t,J=7.9Hz),7.59(1H,d,J=7.9Hz),8.40(1H,d,J=7.9Hz),8.51(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：689(M+H)⁺。

[步驟2]2,2,2-三氯乙基(2E)-3-(1-{[5-(1-甲醯基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(0.262g)，藉由進行與實施例88的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(0.261g)。

MS(m/z)：687(M+H)⁺。

[步驟3]1-[4-({3-甲基-4-[(1E)-3-氧代-3-(2,2,2-三氯乙氧基)丙-1-烯-1-基]吲哚-1-羰基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑5-基)環丁烷羧酸

於上述步驟2所得之化合物(0.261g)加入tert-丁醇(3ml)、乙腈(5ml)、水(1ml)磷酸二氫鈉．二水合物(0.065g)、2-甲基-2-丁烯(0.18ml)、亞氯酸鈉(0.077g)，將混合物在室溫進行攪拌1小時半。於反應液加入1N鹽酸使其成為弱酸性，以二氯甲烷進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(0.198g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.99-2.38(2H,m),2.33(3H,s),2.73-2.79(4H,m),4.87(2H,s),6.51(1H,d,J=15.7Hz),7.00(1H,s),7.29-7.33(3H,m),7.57(1H,d,J=7.9Hz),8.35(1H,d,J=7.9Hz),8.52(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：703(M+H)⁺。

[步驟4]2,2,2-三氯乙基(1-{[5-[1-(二甲基胺基甲醯基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於上述步驟3所得之化合物(0.064g)、O-(7-氧雜苯並三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽(0.045g)的N,N-二甲基甲醯胺(1ml)溶液中加入二甲基胺(2.0莫耳-四氫呋喃溶液、0.091ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液加入乙酸乙酯、飽和食鹽水，分離二層。將水層以乙酸乙酯進行萃取，合併有機層，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.068g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.03-2.24(2H,m),2.43(3H,s),2.61(3H,s),2.65(3H,s),2.82-2.92(4H,m),4.88(2H,s),6.51(1H,d,J=15.7Hz),6.79(1H,d,J=1.2Hz),7.30(1H,t,J=7.9Hz),7.37(2H,s),7.58(1H,d,J=7.9Hz),8.36(1H,d,J=7.9Hz),8.58(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：730(M+H)⁺。

[步驟5](2E)-3-(1-{[5-[1-(二甲基胺基甲醯基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟4所得之化合物(0.054g)的四氫呋喃(2ml)溶液中加入水(0.2ml)、銦(0.127g)、甲酸(0.08ml)，將混合物使用微波裝置，在100℃進行1小時攪拌。於反應液中追加銦(0.085g)，將混合物使用微波裝置，在100℃進行30分鐘攪拌。將無機物濾去，於濾液加入水、乙酸乙酯，分離二層。將有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後，以分級用薄層層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(0.009g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.03-2.14(1H,m),2.17-2.28(1H,m),2.43(3H,s),2.62(3H,s),2.67(3H,s),2.83-2.96(4H,m),6.36(1H,d,J=15.7Hz),6.78(1H,s),7.29(1H,t,J=8.0Hz),7.38(2H,s),7.54(1H,d,J=8.0Hz),8.34(1H,d,J=8.0Hz),8.44(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：600(M+H)⁺。

[實施例90](2E)-3-(1-{[5-(1-胺基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]五氟苯基5-{1-[(tert-丁氧基羰基)(丙-2-烯-1-基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

使用參考例X-65所得之化合物，藉由進行與實施例1的步驟1之同樣操作後得到標記化合物(1.01g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.36(9H,s),1.91-2.06(2H,m),2.69-2.78(2H,m),2.88-2.96(2H,m),4.07-4.13(2H,m),5.19-5.28 (2H,m),5.92-6.02(1H,m),7.45(2H,s)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(1-{[5-{1-[(tert-丁氧基羰基)(丙-2-烯-1-基)胺基]環丁基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(1.01g)與參考例E-8所得之化合物(0.389g)，藉由進行與實施例1的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(0.899g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(9H,brs),1.54(9H,s),1.89-1.99(1H,m),2.12-2.27(1H,m),2.31(3H,d,J=1.2Hz),2.60-2.79(2H,m),2.81-2.99(2H,m),3.60-3.74(2H,m),5.11-5.18(2H,m),5.79-5.89(1H,m),6.35(1H,d,J=15.7Hz),6.91(1H,brs),7.26-7.32(3H,m),7.51(1H,d,J=7.9Hz),8.25(1H,d,J=15.7Hz),8.39(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：740(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-[3-甲基-1-({5-[1-(丙-2-烯-1-基)環丁基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟2所得之化合物(0.40g)的二氯甲烷(2ml)溶液加入4N鹽酸-1,4-二噁烷(4ml)，將混合物在室溫進行攪拌2小時半。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入三氟乙酸(3ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入二氯甲烷、水，分離二層。將有機層以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，於所得之殘分中加入二乙基醚與n-己烷，藉由濾取後得到標記化合物(0.281g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.99-2.10(1H,m),2.12-2.22(1H,m),2.27-2.36(2H,m),2.35(3H,s),2.63-2.70(2H,m),3.11(2H,d,J=6.0Hz),4.93-4.97(1H,m),5.00-5.06(1H,m),5.69-5.79(1H,m),6.45(1H,d,J=15.7Hz),6.95(1H,d,J=1.2Hz),7.32-7.37(3H,m),7.57(1H,d,J=7.9Hz),8.40(1H,d,J=7.9Hz),8.46(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：584(M+H)⁺。

[步驟4](2E)-3-(1-{[5-(1-胺基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟3所得之化合物(0.237g)、3-二苯基膦基丙基(二苯基)膦(0.084g)、雙[(2,2,2-三氟乙醯)氧基]鈀(0.067g)，加入乙腈(2ml)、水(0.2ml)，在氮環境下，將混合物使用微波裝置，在110℃進行1小時攪拌。將不溶物濾去後，將濾液在減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後，以分級用薄層層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化。於所得之殘分中加入二氯甲烷，藉由濾取後得到標記化合物(0.020g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.84-1.92(1H,m),2.01-2.10(3H,m),2.35(3H,s),2.65-2.70(2H,m),6.50(1H,d,J=15.7Hz),7.29 (1H,s),7.33(1H,t,J=7.9Hz),7.68(1H,d,J=7.9Hz),7.83(2H,s),8.23-8.28(2H,m)。

MS(m/z)：544(M+H)⁺。

[實施例91](2E)-3-[1-({5-[2-(二甲基胺基)丙烷-2-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-3-甲基-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-[1-({5-[2-(二甲基胺基)丙烷-2-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-3-甲基-1H-吲哚-4-基]丙-2-酸酯

於實施例84的步驟3所得之化合物(0.220g)的1,2-二氯乙烷(3ml)溶液加入甲醛(37%水溶液、0.136ml)、乙醯氧基氫化硼鈉(0.387g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液加入水、二氯甲烷，分離二層後，將有機層以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(0.199g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.49(6H,brs),1.54(9H,s),2.14(6H,s),2.41(3H,d,J=1.2Hz),6.36(1H,d,J=15.7Hz),7.01(1H,s),7.30(1H,t,J=7.9Hz),7.34(2H,s),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.31(1H,d,J=15.7Hz),8.43(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：616(M+H)⁺。

[步驟2](2E)-3-[1-({5-[2-(二甲基胺基)丙烷-2-基]-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-3-甲基-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

使用在上述步驟1所得之化合物(0.199g)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(0.127g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.51(6H,brs),2.15(6H,s),2.41(3H,s),6.42(1H,d,J=15.7Hz),7.03(1H,s),7.31-7.35(3H,m),7.56(1H,d,J=7.9Hz),8.46-8.50(2H,m)。

MS(m/z)：516(M+H)⁺。

使用實施例86的步驟3所得之化合物，藉由進行與實施例91之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例93](2E)-3-(1-{[5-(1-氰基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]2,2,2-三氯乙基(2E)-3-(1-{[5-

(1-胺基甲醯基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於實施例89的步驟3所得之化合物(0.067g)、O-(7- 氧雜苯並三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽(0.047g)的N,N-二甲基甲醯胺(1ml)溶液中加入N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.049ml)，將混合物在室溫進行5分鐘攪拌後，加入氯化銨(0.008g)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。於反應液加入水、乙酸乙酯，分離二層。將水層以乙酸乙酯進行萃取，合併有機層，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.034g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.90-2.00(1H,m),2.17-2.25(1H,m),2.33(3H,d,J=1.2Hz),2.55-2.63(2H,m),2.90-3.00(2H,m),4.88(2H,s),5.73(1H,brs),6.53(1H,d,J=15.7Hz),6.98(1H,d,J=1.2Hz),7.30(2H,s),7.38(1H,t,J=7.9Hz),7.59-7.64(2H,m),8.39(1H,d,J=7.9Hz),8.50(1H,d,J=15.7Hz)。

[步驟2]2,2,2-三氯乙基(2E)-3-(1-{[5-(1-氰基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於在上述步驟1所得之化合物(0.290g)的吡啶(1ml)溶液加入三氟乙酸酐(0.172ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液在減壓下濃縮後，將所得之殘分以乙酸乙酯稀釋，以1N鹽酸水溶液-飽和食鹽水(1：1)、飽和碳酸氫鈉水溶液-飽和食鹽水(1：1)的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物 (0.308g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.15-2.25(1H,m),2.41(3H,s),2.44-2.53(1H,m),2.75-2.82(2H,m),2.92-2.99(2H,m),4.88(2H,s),6.53(1H,d,J=15.7Hz),6.95(1H,s),7.35-7.39(3H,m),7.61(1H,d,J=7.9Hz),8.41(1H,d,J=7.9Hz),8.55(1H,d,J=15.7Hz)。

MS(m/z)：684(M+H)⁺。

[步驟3](2E)-3-(1-{[5-(1-氰基環丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

使用在上述步驟2所得之化合物(0.289g)，藉由進行與實施例89的步驟5之同樣操作後得到標記化合物(0.131g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.15-2.25(1H,m),2.41(3H,d,J=1.2Hz),2.43-2.53(1H,m),2.76-2.83(2H,m),2.92-2.99(2H,m),6.46(1H,d,J=15.7Hz),6.95(1H,d,J=1.2Hz),7.35-7.39(3H,m),7.59(1H,d,J=8.0Hz),8.41(1H,d,J=8.0Hz),8.48(1H,d,J=15.7Hz)。

[實施例94](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

[步驟1]五氟苯基5-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於參考例X-38所得之化合物(20.0g)的二氯甲烷(200ml)溶液，在冰冷下，加入N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(9.1ml)及三氟乙酸五氟苯基(8.0ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(24.7g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.07-2.24(4H,m),2.93-3.08(2H,m),3.61-3.73(1H,m),4.00-4.08(2H,m),7.44(2H,s),7.68-7.63(1H,m),7.69-7.76(2H,m),8.02-8.06(1H,m)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-[1-{[5-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙酸酯

於參考例E-17所得之化合物(5.22g)的N,N-二甲基甲醯胺(97ml)溶液，在冰冷下將氫化鈉(55%油性、846mg)慢慢加入，將混合物在室溫下進行30分鐘攪拌。於反應液並冰冷下，加入上述步驟1所得之化合物(14.1g)，將混合物在室溫下進行10分鐘攪拌。冰冷下，將反應液以乙酸乙酯稀釋，加入冰水。分離二層，將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(11.5g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.53(9H,s),2.75(2H,t,J=6.7Hz),2.86-2.97(4H,m),2.88-2.95(2H,m),3.20-3.35(3H,m),3.94-4.02(2H,m),6.41(1H,s),6.78(1H,s),7.30-7.36(3H,m),7.46(1H,d,J=7.9Hz),7.60-7.65(1H,m),7.66-7.76(2H,m),8.00(1H,dd,J=7.6,2.1Hz),8.06(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟3]tert-丁基(2E)-[1-{[5-(哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙酸酯

於上述步驟2所得之化合物(14.2g)的乙腈(175ml)溶液，冰冷下加入4-溴苯硫醇(6.61g)及碳酸鉀(9.67g)，將混合物在室溫進行7小時攪拌。冰冷下，將反應液以乙酸乙酯稀釋，加入冰水。分離二層，將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(8.66g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.91-2.17(4H,m),2.71(2H,td,J=11.8,3.2Hz),2.78(2H,t,J=6.7Hz),3.18-3.31(3H,m),3.34(2H,t,J=6.7Hz),6.42(1H,s),6.84(1H,s),7.31-7.37(3H,m),7.47(1H,d,J=7.3Hz),8.10(1H,d,J=7.9Hz)。

[步驟4]tert-丁基(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙酸酯

於上述步驟3所得之化合物(6.13g)的二氯甲烷(98ml)溶液，冰冷下加入三乙基胺(2.7ml)及氯化丙烯醯基(0.95ml)，將混合物在0℃進行20分鐘攪拌。於反應液加入冰水，以氯仿萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(5.93g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),2.00(2H,ddd,J=24.6,11.9,3.8Hz),2.08-2.16(2H,m),2.72-2.84(3H,m),3.12-3.25(1H,m),3.34(2H,t,J=6.7Hz),3.42(1H,tt,J=11.5,4.2Hz),4.07-4.18(1H,m),4.70-4.81(1H,m),5.71(1H,dd,J=10.9,1.8Hz),6.30(1H,dd,J=16.3,1.8Hz),6.42(1H,s),6.59(1H,dd,J=16.9,10.3Hz),6.81(1H,s),7.32(2H,s),7.35(1H,t,J=7.9Hz),7.47(1H, d,J=7.3Hz),8.10(1H,d,J=7.9Hz)。

[步驟5](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸

使用上述步驟4所得之化合物(6.36g)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(5.28g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.02(2H,ddd,J=25.1,11.8,3.9Hz),2.09-2.20(2H,m),2.75-2.89(3H,m),3.16-3.28(1H,brm),3.38(2H,t,J=6.3Hz),3.44(1H,tt,J=12.1,3.6Hz),4.07-4.19(1H,m),4.71-4.81(1H,m),5.75(1H,dd,J=10.9,1.8Hz),6.30(1H,dd,J=16.9,1.8Hz),6.54(1H,s),6.59(1H,dd,J=16.6,10.6Hz),6.84(1H,s),7.32(2H,s),7.39(1H,t,J=7.9Hz),7.52(1H,d,J=7.9Hz),8.14(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：624(M+H)⁺。

使用在參考例所得之化合物，藉由進行與實施例94之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例132](2E)-3-(1-{[3-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基4-[4-({4-[(1E)-3-tert-丁氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1H-吲哚-1-基}羰基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-3-基]哌啶-1-羧酸酯

於參考例X-76所得之化合物(160mg)的二氯甲烷(2ml)溶液，在冰冷下滴入1-氯-N,N,2-三甲基-1-丙烯基胺(0.054ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。冰冷下於反應液追加1-氯-N,N,2-三甲基-1-丙烯基胺(0.054ml)，將混合物在室溫下進行45分鐘攪拌。將反應液加入於參考例E-1所得之化合物(0.082mg)、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.16ml)及4-二甲基胺基吡啶(4mg)的二氯甲烷(1ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(93mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.46(9H,s),1.55(9H,s),1.80-1.93 (2H,m),2.01-2.10(2H,m),2.77-2.91(2H,m),3.15-3.25(1H,m),4.07-4.24(2H,m),6.46(1H,d,J=15.7Hz),6.71(1H,d,J=4.2Hz),7.14(1H,d,J=4.2Hz),7.31-7.45(3H,m),7.54(1H,d,J=7.9Hz),7.85(1H,d,J=15.7Hz),8.37(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟2](2E)-3-(1-{[3-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-5-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟1所得之化合物(93mg)的二氯甲烷(1ml)溶液，在室溫加入三氟乙酸(2ml)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分在冰冷下加入二氯甲烷(2ml)及飽和碳酸氫鈉水溶液(1ml)，一邊激烈攪拌一邊加入氯化丙烯醯基(0.01ml)。將混合物在室溫進行10分鐘攪拌後，再加入氯化丙烯醯基(0.01ml)，將混合物進行10分鐘攪拌。將反應液冰冷後，以1N鹽酸成為酸性後，以二氯甲烷進行萃取。將萃取液以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)及分級用薄層層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(26mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.82-2.06(2H,m),2.09-2.26(2H,m),2.80-2.93(1H,m),3.16-3.30(1H,m),3.29-3.40(1H,m),4.03-4.17(1H,m),4.62-4.74(1H,m),5.70(1H,dd,J=10.3,1.8Hz),6.28(1H,dd,J=16.9,1.8Hz),6.55(1H,d,J=15.7Hz),6.59(1H,dd, J=16.9,10.3Hz),6.73(1H,d,J=3.6Hz),7.17(1H,d,J=3.6Hz),7.34(2H,s),7.42(1H,t,J=7.9Hz),7.59(1H,d,J=7.3Hz),8.04(1H,d,J=16.3Hz),8.41(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：598(M+H)⁺。

[實施例133](2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(二甲基胺基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1](1Z)-2,6-二氯-N-羥基苯脒基氯化物

將2,6-二氯苯甲醯胺肟(5.0g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(75ml)

溶解，在氮環境下，在室溫加入N-氯琥珀酸醯亞胺(3.69g)。將混合物進行5小時攪拌後加入水，以二乙基醚進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下將溶劑餾去後得到標記化合物(6.13g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.30-7.41(3H,m),9.03(1H,brs)。

[步驟2]甲基5-胺基-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

在氮環境下，於氰基乙酸乙酯(0.25ml)的四氫呋喃(3ml)溶液，在冰冷下滴入鈉甲氧化物(28%甲醇溶液、0.46ml)的甲醇(6ml)溶液，將混合物在室溫進行1小時攪拌。於反應液並冰冷下，滴入上述步驟1所得之化合物(0.50g)的四氫呋喃(1ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液在減壓下濃縮所得之殘分以二乙基醚稀釋，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.40g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.62(3H,s),6.08(2H,brs),7.30-7.41(3H,m)。

[步驟3]甲基3-(2,6-二氯苯基)-5-(二甲基胺基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

於上述步驟2所得之化合物(0.10g)的N,N-二甲基甲醯胺(2ml)溶液，冰冷下加入碳酸鉀(0.24g)及碘化甲基(0.49g)，將混合物在50℃進行3小時半攪拌。冷卻後，於反應液加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.085g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.30(6H,s),3.47(3H,s),7.27-7.39(3H,m)。

[步驟4]3-(2,6-二氯苯基)-5-(二甲基胺基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於上述步驟3所得之化合物(0.51g)的甲醇(10ml)溶液中，在室溫下加入1N氫氧化鈉水溶液(10ml)，將混合物在50℃進行8小時攪拌。冷卻後，將反應液減壓下濃縮，於所得之殘分中加入乙酸乙酯，分離二層。冰冷下，於水層加入1N鹽酸並中和後，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。藉由減壓下餾去溶劑後得到標記化合物(0.36g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.29(6H,s),7.26-7.37(3H,m)。

[步驟5]tert-丁基(2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(二甲基胺基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

在氮環境下，於上述步驟4所得之化合物(0.10g)的苯(3ml)溶液中加入亞硫醯氯(0.12ml)、N,N-二甲基甲醯胺(0.01ml)，將混合物進行3小時加熱迴流。冷卻後，將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分溶解於N,N-二甲基甲醯胺(3ml)。

在氮環境下，於參考例E-1所得之化合物 (0.08g)的N,N-二甲基甲醯胺(3ml)溶液，冰冷下加入氫化鈉(55%油性、0.014g)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。於反應液並冰冷下，加入上述酸氯化物溶液，將混合物在室溫下進行16小時攪拌。於反應液加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(0.165g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.55(9H,s),3.16(6H,s),6.42(1H,d,J=15.7Hz),6.56(1H,d,J=4.2Hz),7.08-7.21(3H,m),7.30(1H,d,J=7.9Hz),7.34(1H,d,J=3.6Hz),7.45(1H,d=7.3Hz),7.84(1H,d,J=16.3Hz),8.21(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟6](2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(二甲基胺基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟5所得之化合物(0.16g)的二氯甲烷(7ml)溶液，在冰冷下加入三氟乙酸(1ml)，將混合物在室溫進行18小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(0.083g)。

¹H-NMR(DMSO-d6)δ：3.04(6H,s),6.58(1H,d,J=15.7Hz),6.81(1H,d,J=3.6Hz),7.30-7.44(4H,m),7.54(1H,d,J=3.6Hz),7.64(1H,d,J=7.9Hz),7.83(1H,d,J=15.7Hz),8.09(1H,d,J= 8.5Hz),12.46(1H,brs)。

將實施例133的步驟2所得之化合物作為原料，藉由進行與實施例133之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例137](2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(cis-2,6- 二甲基哌啶-1-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基3-溴丙-2-酸酯

於tert-丁基2-丙酸酯(50.0g)的丙酮(500ml)溶液加入硝酸銀(6.73g)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液在水浴中一邊冷卻一邊加入N-溴琥珀酸醯亞胺(79.2g)，將混合物在室溫進行18小時攪拌。將反應液以矽藻土過濾，將濾液在減壓下濃縮。於所得之殘分加入二乙基醚/n-戊烷(1：4)的混合溶劑，將析出之不溶物以矽藻土過濾。將濾液在減壓下進行濃縮後，得到標記化合物(81.3g)，無須純化下使用於下個反應。

[步驟2]tert-丁基5-溴-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸酯

將上述步驟1所得之化合物(81.3g)、實施例4的步驟1所得之化合物(44.5g)溶解於乙酸乙酯(480ml)，加入水(60ml)並攪拌。冰冷下加入碳酸氫鈉(50.0g)，將混合物在室溫進行17小時攪拌。將反應液以矽藻土過濾，將濾液在減壓下濃縮。將所得之殘分溶解於乙酸乙酯，以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，於所得之殘分中加入乙酸乙酯/n-己烷，將所生成的固體藉由濾取後得到標記化合物(34.7g)。又將濾液在減壓下濃縮後，將所得之殘分中加入n-己烷，藉由濾取所生成的固體，進一步得到標記化合物(15.7g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(9H,s),7.34-7.44(3H,m)。

[步驟3]5-溴-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-羧酸

於上述步驟2所得之化合物(15.7g)的二氯甲烷(50ml)溶液，冰冷下加入三氟乙酸(10ml)，將混合物在室溫下進行24小時攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分中加入n-己烷，將生成的固體藉由濾取後得到標記化合物(9.95g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.36-7.45(3H,m)。

[步驟4]tert-丁基(2E)-3-[1-[5-溴-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於上述步驟3所得之化合物(9.0g)的二氯甲烷(180 ml)懸浮液，加入N,N-二甲基甲醯胺(0.1ml)並進行攪拌。冰冷下加入草醯氯(2.5ml)，將混合物在30℃進行3小時攪拌。

於參考例E-1所得之化合物(6.5g)的N,N-二甲基甲醯胺(180ml)懸浮液，冰冷下加入氫化鈉(55%油性、1.3g)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。將反應液冰冷後，使用套管於上述酸氯化物溶液冰冷下經30分鐘滴入。將混合物一邊升溫至室溫，一邊進行17小時攪拌後，加入水，以乙酸乙酯進行萃取。將萃取液以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(6.14g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.57(9H,s),6.48(1H,d,J=16.3Hz),6.87-6.88(1H,m),7.33-7.39(5H,m),7.55(1H,d,J=7.3Hz),7.91(1H,d,J=16.3Hz),8.33(1H,d,J=8.5Hz)。

[步驟5]tert-丁基(2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(cis-2,6-二甲基哌啶-1-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-酸酯

於上述步驟4所得之化合物(50mg)的N,N-二甲基甲醯胺(1ml)之溶液中加入cis-2,6-二甲基哌啶(0.024ml)，將混合物在80℃進行7小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(16.1mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.36(6H,d,J=7.3Hz),1.56-1.60(12H,m),1.75-1.90(3H,m),4.27-4.31(2H,m),6.42(1H,d,J=16.3Hz),6.57(1H,d,J=3.6Hz),7.04-7.14(3H,m),7.29(1H,d,J=7.9Hz),7.37(1H,d,J=3.6Hz),7.44(1H,d,J=7.9Hz),7.84(1H,d,J=16.3Hz),8.19(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：594(M+H)⁺。

[步驟6](2E)-3-(1-{[3-(2,6-二氯苯基)-5-(cis-2,6-二甲基哌啶-1-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸

於上述步驟5所得之化合物(16.1mg)的二氯甲烷(2ml)溶液於冰冷下加入三氟乙酸(0.3ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液以二氯甲烷稀釋，以水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分物以分取薄層層析法(氯仿/甲醇)進行純化後得到標記化合物(12.2mg)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.27(6H,d,J=6.7Hz),1.42-1.86(6H,m),4.05-4.13(2H,m),6.58(1H,d,J=16.3Hz),6.88(1H,d,J=3.6Hz),7.30-7.44(4H,m),7.57(1H,d,J=4.2Hz),7.64(1H,d,J=7.3Hz),7.83(1H,d,J=16.3Hz),8.08(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：538(M+H)⁺。

實施例137之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例139](2E)-3-[1-({5-[(3R)-3-(胺基甲基)吡咯烷-1-基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(2E)-3-[1-({5-[(3R)-3-{[(tert-丁氧基羰基)胺基]甲基}吡咯烷-1-基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-酸酯

於實施例137的步驟4所得之化合物(50mg)、(S)-3- N-丁氧基羰基胺基甲基吡咯烷鹽酸鹽(35.6mg)的N,N-二甲基甲醯胺(1ml)溶液中加入三乙基胺(0.037ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(氯仿/甲醇)進行純化後得到標記化合物(60.5mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.42(9H,s),1.55(9H,s),1.74-1.87(1H,m),2.10-2.21(1H,m),2.51-2.64(1H,m),3.12-3.32(2H,m),3.34-3.81(3H,m),4.62-4.72(1H,m),6.42(1H,d,J=15.7Hz),6.51(1H,d,J=3.6Hz),7.06-7.21(3H,m),7.28-7.33(2H,m),7.44(1H,d,J=7.3Hz),7.83(1H,d,J=15.7Hz),8.20(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：681(M+H)⁺。

[步驟2](2E)-3-[1-({5-[(3R)-3-(胺基甲基)吡咯烷-1-基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

在上述步驟1所得之化合物(60.5mg)的二氯甲烷(3ml)溶液於冰冷下加入三氟乙酸(0.5ml)，將混合物在室溫進行8小時攪拌。將反應液減壓下濃縮後，以二氯甲烷稀釋，在冰冷下加入三乙基胺，使其成為弱鹼性。減壓下濃縮所額之殘分以分級用薄層管柱層析法(氯仿/甲醇/水)進行純化後得到標記化合物(15.5mg)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.20-1.31(2H,m),1.73-1.85(1H,m),2.04-2.16(1H,m),2.63-2.72(3H,m),2.83-2.91(2H,m), 3.39-3.76(3H,m),6.56(1H,d,J=15.7z),6.73(1H,d,J=3.6z),7.30-7.35(3H,m),7.45(2H,d,J=3.6z),7.62(1H,d,J=7.3z),7.79(1H,d,J=16.3z),8.09(1H,d,J=8.5z)。

MS(m/z525(M+H)⁺。

實施例139之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例141](2E)-3-[1-({5-[(2R)-4-丙烯醯基-2-甲基哌嗪-1-基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

[步驟1]tert-丁基(3R)-4-[4-({4-[(1E)-3-tert-丁氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1H-吲哚-1-基}羰基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-5-基]-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯

於實施例137的步驟4所得之化合物(150mg)的N,N-二甲基甲醯胺(3ml)溶液加入(3R)-1-tert-丁氧基羰基-3-甲基哌嗪(107mg)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(137mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.32-1.37(3H,m),1.45-1.48(9H,m),1.54-1.57(9H,m),2.95-3.31(2H,m),3.37-3.66(2H,m),3.85-4.35(3H,m),6.42-6.46(1H,m),6.59(1H,s),7.10-7.22(3H,m),7.28-7.35(2H,m),7.45-7.49(1H,m),7.84(1H,d,J=18.7Hz),8.20(1H,d,J=8.5Hz)。

MS(m/z)：681(M+H)⁺。

[步驟2](2E)-3-[1-({3-(2,6-二氯苯基)-5-[(2R)-2-甲基哌嗪-1-基]-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

於上述步驟1所得之化合物(137mg)的二氯甲烷(5ml)溶液在冰冷下加入三氟乙酸(1ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液減壓下濃縮後，以二氯甲烷稀釋，冰冷下加入三乙基胺使其成為弱鹼性。藉由減壓下濃縮，得到標記化合物，無需純化下可使用於下個反應。

[步驟3](2E)-3-[1-({5-[(2R)-4-丙烯醯基-2-甲基哌嗪-1-基]-3-(2,6-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基}羰基)-1H-吲哚-4-基]丙-2-烯酸

將上述步驟2所得之化合物懸浮於二氯甲烷(16ml)，冰冷下加入飽和碳酸氫鈉水(8ml)、氯化丙烯醯基(0.034ml)，將混合物在室溫進行5小時攪拌。於反應液並冰冷下，追加氯化丙烯醯基(0.034ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。冰冷下於反應液加入1N鹽酸使其成為酸性，以二氯甲烷萃取。將萃取液以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(86.4mg)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.19(3H,d,J=6.7Hz),2.87-3.11(1H,m),3.46-3.61(2H,m),3.94-4.30(4H,m),5.70(1H,d,J=10.9Hz),6.11-6.21(1H,m),6.59(1H,d,J=16.3Hz),6.71-6.83(1H,m),6.86(1H,s),7.31-7.47(4H,m),7.59(1H,s),7.66(1H,d,J=7.9Hz),7.84(1H,d,J=16.3Hz),8.10(1H,d,J=8.5Hz),12.48(1H,s)。

MS(m/z)：579(M+H)⁺。

實施例141之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例164](2E)-3-(3-[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-烯酸

[步驟1](7-溴-1H-吲哚-3-基)[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]甲酮

參考例X-5所得之化合物(1.00g)與N,N-二甲基甲醯胺(10μl)的於二氯甲烷(20ml)溶液加入草醯氯(743mg)，將混合物在室溫進行1小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，得到酸氯化物。

在氮環境下，於上述酸氯化物的二氯甲烷(15ml)溶液在冰冷下加入氯化鋁(781mg)，將混合物在室溫進行10分鐘攪拌。

在氮環境下，於7-溴吲哚(1.16g)的二氯甲烷(15ml)溶液加入上述反應液，將混合物在室溫進行40分鐘攪拌。將反應液注入於冰中，分離二層。將水層以二氯甲烷進行萃取，合併有機層，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(514mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(9H,s),7.18(1H,t,J=7.9Hz),7.29(2H,s),7.45(1H,d,J=7.9Hz),7.66(1H,d,J=3.0Hz),8.29(1H,d,J=7.9Hz),8.67(1H,brs)。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(3-{[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

於上述步驟1所得之化合物(510mg)、tert-丁基丙烯酸酯(186mg)、N,N-二(丙烷-2-基)乙基胺(0.33ml)、參(2-甲基苯基)次膦(88mg)的N,N-二甲基甲醯胺(3.5ml)溶液加入乙酸鈀(33mg)，將混合物使用微波裝置，在140℃ 進行1小時攪拌。冷卻至室溫後，於反應液加入乙酸乙酯與飽和食鹽水，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(430mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.44(9H,s),1.55(9H,s),6.42(1H,d,J=16.9Hz),7.28(2H,s),7.31(1H,dd,J=8.2,4.1Hz),7.49(1H,d,J=7.3Hz),7.66(1H,d,J=2.4Hz),7.83(1H,d,J=15.7Hz),8.39(1H,d,J=7.9Hz),8.93(1H,brs)。

MS(m/z)：573(M+H)⁺。

[步驟3]tert-丁基(2E)-3-(3-[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

在氮環境下，於上述步驟2所得之化合物(426mg)的N,N-二甲基甲醯胺(3ml)溶液，冰冷下加入氫化鈉(55%油性、36mg)，將混合物進行5分鐘攪拌。於反應液加入碘化甲基(0.14ml)，將混合物進行1小時攪拌。於反應液加入冰、水、乙酸乙酯，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(354mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.45(9H,s),1.54(9H,s),3.99(3H,s),6.32(1H,d,J=15.7Hz),7.25-7.30(3H,m),7.44(2H,d,J=6.7Hz), 8.32(1H,d,J=15.7Hz),8.40(1H,d,J=7.9Hz)。

MS(m/z)：587(M+H)⁺。

[步驟4](2E)-3-(3-[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-烯酸

於上述步驟3所得之化合物(350mg)的二氯甲烷(5ml)溶液加入三氟乙酸(1ml)，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。將反應液注入於水、二氯甲烷之混合溶液，分離二層。將有機層以水、飽和食鹽水的依序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(260mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.46(9H,s),4.00(3H,s),6.42(1H,d,J=15.1Hz),7.29(2H,s),7.32(1H,t,J=7.9,3.9Hz),7.45(1H,s),7.49(1H,d,J=7.3Hz),8.45(1H,d,J=7.9Hz),8.52(1H,d,J=15.1Hz)。

MS(m/z)：531(M+H)⁺。

實施例164之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例166](2E)-3-(3-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-烯酸

[步驟1](7-溴-1H-吲哚-3-基)[5-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]甲酮

在氮氣流下，於參考例X-38所得之化合物(500mg)的二氯甲烷(5.35ml)懸浮液在冰冷下加入N,N-二甲基甲醯胺(28μl)及草醯氯(0.153ml)，將混合物在室溫進行2小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分溶解於二氯甲烷(5.35ml)。在氮氣流下，於該溶液在冰冷下，加入氯化鋁(238mg)，將混合物在室溫進行15分攪拌。於反應液並冰冷下加入7-溴吲哚(262mg)，將混合物在室溫進行 40分攪拌。將反應液加於冰中，以二氯甲烷進行萃取，將萃取液以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(145mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.08-2.18(3H,m),2.86-2.93(2H,m),3.25-3.33(1H,m),3.59(1H,dd,J=15.7,9.1Hz),3.97(2H,d,J=12.7Hz),6.90-7.07(1H,m),7.20(1H,q,J=7.9Hz),7.35(2H,dd,J=15.1,8.5Hz),7.45(1H,t,J=6.3Hz),7.53(1H,t,J=3.9Hz),7.59-7.77(2H,m),7.99-8.03(1H,m),8.22(1H,d,J=7.9Hz),8.64(1H,s)。

MS(m/z)：739(M+H)⁺。

[步驟2]tert-丁基(2E)-3-(3-{[5-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟1所得之化合物(145mg)，藉由進行與實施例164的步驟2之同樣操作後得到標記化合物(76.7mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.59(9H,s),2.08-2.16(4H,m),2.85-2.92(2H,m),3.26-3.35(1H,m),3.97(2H,d,J=13.4Hz),6.41(1H,d,J=15.8Hz),7.30-7.32(2H,m),7.48-7.53(2H,m),7.61-7.63(1H,m),7.69-7.75(2H,m),7.81(1H,d,J=16.4Hz),7.98-8.01(1H,m),8.31(1H,d,J=7.3Hz),8.90(1H,s)。

MS(m/z)：787(M+H)⁺。

[步驟3]tert-丁基(2E)-3-(1-甲基-3-{[5-{1-[(2-硝基苯基)磺醯基]哌啶-4-基}-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

使用在上述步驟2所得之化合物(76.7mg)，藉由進行與實施例164的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(44.7mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),2.05-2.12(4H,m),2.87-2.94(2H,m),3.29-3.39(1H,m),3.88-4.04(5H,m),6.32(1H,d,J=15.8Hz),7.29-7.33(3H,m),7.42-7.46(1H,m),7.61-7.72(4H,m),8.00(1H,dd,J=7.3,1.8Hz),8.25-8.35(2H,m)。

MS(m/z)：801(M+H)⁺。

[步驟4]tert-丁基(2E)-3-(1-甲基-3-{[5-(哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

使用上述步驟3所得之化合物(44.7mg)，藉由進行與實施例94的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(26.9mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),2.20-2.30(4H,m),2.88-2.97(2H,m),3.11(1H,q,J=7.3Hz),3.42-3.51(3H,m),3.94(3H,s),6.32(1H,d,J=15.2Hz),7.28-7.35(4H,m),7.45(1H,d,J=6.1Hz),8.26-8.36(2H,m)。

MS(m/z)：614(M+H)⁺。

[步驟5]tert-丁基(2E)-3-(3-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-酸酯

使用上述步驟4所得之化合物(26.9mg)，藉由進行與實施例94的步驟4之同樣操作後得到標記化合物(16.6mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.54(9H,s),1.93-2.10(4H,m),2.70-2.90(1H,m),3.11-3.22(1H,m),3.47-3.52(1H,m),3.93(3H,s),4.01-4.17(1H,m),4.74(1H,d,J=10.9Hz),5.71(1H,dd,J=10.6,1.5Hz),6.27-6.35(2H,m),6.59(1H,dd,J=16.6,10.6Hz),7.27-7.35(4H,m),7.42-7.48(1H,m),8.26-8.38(2H,m)。

MS(m/z)：670(M+H)⁺。

[步驟6](2E)-3-(3-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-吲哚-7-基)丙-2-烯酸

使用上述步驟5所得之化合物(16.6mg)，藉由進行與實施例10的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(10.1mg)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.61-1.77(2H,m),2.00(2H,d,J=12.1Hz),2.60-2.74(1H,m),3.01-3.14(1H,m),3.33-3.39(1H,m),3.98-4.11(4H,m),4.33-4.45(1H,m),5.63(1H,dd,J=10.9,2.4 Hz),6.06(1H,dd,J=16.6,2.1Hz),6.37(1H,d,J=15.7Hz),6.77(1H,dd,J=16.6,10.6Hz),7.23(1H,t,J=7.6Hz),7.51(1H,d,J=7.9Hz),7.76-7.80(2H,m),8.01(1H,s),8.12(1H,d,J=7.9Hz),8.33(1H,t,J=16.0Hz),13.5(1H,brs)。

MS(m/z)：614(M+H)⁺。

[實施例167]3-{[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-苯並[g]吲哚-8-羧酸

[步驟1]乙基8-硝基萘-2-羧酸酯

將萘-2-羧酸(10g)的乙酸酐(105ml)溶液冷卻至-10℃，將發煙硝酸(2.71ml)的乙酸酐(13ml)溶液經10分鐘滴入。將反應液在室溫進行5小時攪拌後，注入於冰中。過濾取出不溶物，經減壓乾燥後得到5-及8-硝基萘-2-羧酸之混合物(12.6g)。於所得之固體中加入乙醇(110ml)、濃硫酸(1.2ml)，將混合物進行18小時加熱迴流。將反應液減壓下濃縮，加入乙醇後過濾取出。將所得之粗生成物以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(2.96g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.46(3H,t,J=7.3Hz),4.47(2H,q,J=7.3Hz),7.66(1H,t,J=7.9Hz),8.02(1H,d,J=9.1Hz),8.16(1H,d,J=8.5Hz),8.22(1H,dd,J=8.8,1.5Hz),8.27(1H,t,J=3.9Hz),9.27(1H,s)。

[步驟2]乙基1H-苯並[g]吲哚-8-羧酸酯

於上述步驟1所得之化合物(1.0g)的四氫呋喃(20ml)溶液在-45℃滴入氯化乙烯基鎂(14%四氫呋喃溶液、13.7ml)，將混合物在同溫下進行2小時攪拌。於反應液加入飽和氯化銨水溶液、飽和食鹽水及乙酸乙酯，分離二層。將有機層在減壓下濃縮，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(342mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.44-1.50(3H,m),4.48(2H,q,J=7.3Hz),6.73(1H,t,J=2.7Hz),7.33(1H,t,J=2.7Hz),7.55(1H,d,J=8.5Hz),7.84(1H,d,J=8.5Hz),7.96(1H,d,J=8.5Hz),8.04(1H,dd,J=8.5,1.2Hz),8.86(1H,s),9.22(1H,brs)。

[步驟3]乙基3-{[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-苯並[g]吲哚-8-羧酸酯

於參考例X-5所得之化合物(382mg)的甲苯(3.84ml)溶液中加入N,N-二甲基甲醯胺(14μl)、亞硫醯氯(0.4ml)，將混合物在100℃下進行2小時攪拌。將反應液減壓下濃縮，將所得之殘分溶解於二氯甲烷(6.58ml)，加入氯化鋁(219mg)，將混合物在室溫進行20分鐘攪拌。

於上述步驟2所得之化合物(262mg)的二氯甲烷(6.56ml)溶液加入上述反應液，將混合物在室溫進行攪拌1小時半。將反應液注入於冰中，以二氯甲烷萃取，將萃取液以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(n-己烷/乙酸乙酯)進行純化後得到標記化合物(61.1mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.41-1.52(12H,m),4.46(2H,q,J=7.1Hz),7.69(1H,d,J=3.0Hz),7.73(1H,d,J=9.1Hz),7.99(1H,d,J=8.5Hz),8.10(1H,d,J=8.5Hz),8.50(1H,d,J=8.5Hz),8.79(1H,s),9.48(1H,brs)。

[步驟4]乙基3-{[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-苯並[g]吲哚-8-羧酸酯

使用上述步驟3所得之化合物(61.1mg)，藉由進行與實施例164的步驟3之同樣操作後得到標記化合物(46mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.39-1.52(0H,m),4.31(3H,s),4.46(2H,q,J=7.1Hz),7.51(1H,s),7.73(1H,d,J=8.5Hz),8.01(1H,d,J=8.5Hz),8.09(1H,t,J=4.2Hz),8.55(1H,d,J=9.1Hz),9.17(1H,s)。

[步驟5]3-{[5-tert-丁基-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1-甲基-1H-苯並[g]吲哚-8-羧酸

於上述步驟4所得之化合物(46mg)的四氫呋喃(0.48ml)-甲醇(0.48ml)混合溶液在冰冷下，加入氫氧化鋰(13.4mg)的水溶液(0.48ml)，將混合物在60度下進行3小時攪拌。冰冷下於反應液中加入1N鹽酸，作為酸性後，將混合物減壓下濃縮。將所得之殘分以乙酸乙酯萃取，將萃取液以無水硫酸鎂進行乾燥。減壓下餾去溶劑，將所得之殘分以矽膠管柱層析法(二氯甲烷/甲醇)進行純化後得到標記化合物(37mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：4.33(3H,s),7.27(1H,s),7.53(1H,s),7.75(1H,d,J=8.5Hz),8.06(1H,d,J=8.5Hz),8.15(1H,d,J=8.5Hz),8.59(1H,d,J=8.5Hz),9.26(1H,s)。

[實施例168](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸tert-丁基胺鹽

[步驟1](2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸tert-丁基胺鹽

於實施例21的步驟2所得之化合物(15g)的2-丙醇(150ml)懸浮液中，冰冷下加入tert-丁基胺(2.94ml)的四氫呋喃(15ml)溶液，將混合物在室溫下進行一晚攪拌。過濾懸浮液，將所得之固體在減壓下於50℃進行一晚乾燥後得到標記化合物(15.4g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.20(9H,s),1.83(6H,d,J=22.4Hz),2.35(3H,s),6.39(1H,d,J=15.7Hz),7.30(1H,t,J=7.9Hz),7.34(1H,s),7.54(1H,d,J=7.9Hz),7.85(2H,s),7.93(1H,d,J=15.7Hz),8.17(1H,d,J=8.5Hz)。

Anal.Calcd for C₂₅H₁₇Cl₃FN₂O₄．C₄H₁₂N：C,57.20；H,4.80；Cl,17.46；F,3.12；N,6.90。

Found：C,57.01；H,4.93；Cl,17.65；F,3.09；N,6.89。

實施例168之同樣操作後得到下述化合物。

[實施例174](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸鈉鹽

[步驟1](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸鈉鹽

於在實施例94的步驟5所得之化合物(1.28g)的四氫呋喃(10ml)懸浮液加入1N乙醇性氫氧化鈉溶液(1.8ml)並攪拌。確認溶解後，在減壓下使溶劑餾去、乾固。於此加入乙醇(10ml)後，再次減壓下，使溶劑餾去、乾固。於此加入乙醇(10ml)，在40℃進行一晚攪拌。加入乙酸乙酯(20ml)，在室溫進行1小時攪拌後，過濾取出固體，以乙酸乙酯洗淨。將所得之固體經一晚風乾後得到標記化合物(1.02g)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.63-1.80(2H,m),2.03-2.11(2H,m),2.60-2.64(2H,m),2.71-2.80(1H,m),3.11-3.19(3H,m),3.42-3.52(1H,m),4.09-4.16(1H,m),4.44-4.51(1H,m),5.67(1H,dd,J=10.3,2.4Hz),6.10(1H,dd,J=16.4,2.4Hz),6.38(1H,s),6.82(1H,dd,J=16.4,10.3Hz),7.00(1H,s),7.28(1H,t,J=7.9Hz),7.36(1H,d,J=7.9Hz),7.82(1H,s),7.84(1H,d,J=7.9Hz).

Anal.Calcd for C₃₁H₂₃Cl₃N₃O₅．Na：C,57.56；H,3.58；Cl,16.44；N,6.50；Na,3.55.

Found：C,56.69；H,3.79；Cl,16.13；N,6.28；Na,3.53.

[實施例175](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸tert-丁基胺鹽

[步驟1](2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸tert-丁基胺鹽

於在實施例94的步驟5所得之化合物(0.64g)中加入tert-丁基胺的1mol/L四氫呋喃(1.05ml)溶液，加溫使其溶解。加入乙酸乙酯(10ml)，經遮光後在室溫放置3天。減壓下，將溶劑濃縮乾固後，加入乙酸乙酯並使其懸浮。過濾取出固體，以乙酸乙酯洗淨。將所得之固體經風乾後，得到標記化合物。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.21(9H,s),1.68-1.77(2H,m),2.03-2.10(2H,m),2.67(2H,t,J=6.7Hz),2.71-2.79(1H,m),3.11-3.22(3H,m),3.42-3.51(1H,m),4.13(1H,d,J=13.4Hz),4.47(1H,d,J=13.4Hz),5.67(1H,dd,J=10.6,2.1Hz),6.10(1H,d,J=16.4,2.4Hz),6.44(1H,s),6.81(1H,dd,J=17.0,10.3Hz),7.05(1H,s),7.30(1H,t,J=7.9Hz),7.45(1H,d,J=7.3Hz),7.81(2H,s),7.89(1H,d,J=7.9Hz).

Anal.Calcd for C₃₁H₂₃Cl₃N₃O₅．C₄H₁₁N：C,60.22； H,5.05；Cl,15.24；N,8.03.

Found：C,59.61；H,5.05；Cl,15.29；N,7.89.

[試驗例1]IDH1R132H、IDH1R132C酵素阻礙活性評估

IDH1R132H蛋白質、IDH1R132C蛋白質如以下製作。於pET24b(+)載體(Novagen)插入IDH1R132H或IDH1R132C基因，製作出於C末端融合6×組胺酸標籤之構築。導入於Rosetta2(DE3)大腸菌後，以IPTG誘導蛋白質之表現。回收大腸菌，並破碎後，藉由HisTrap HP管柱(GE醫療保健)進行6×組胺酸融合蛋白質之親和力純化、及使用Superdex200管柱(GE醫療保健)進行凝膠過濾純化，取得目的IDH1R132H或IDH1R132C蛋白質。

IDH1R132H及IDH1R132C為將2-氧代戊二酸與NADPH變換成D-2-羥基戊二酸(2-HG)與NADP+。因此，藉由檢測NADPH量，可測定IDH1R132H及IDH1R132C酵素之活性。

酵素阻礙活性評估如以下實施。將含有相異濃度化合物之40μL的反應液(100mM Tris-HCl(pH 7.5),150mM NaCl,20mM MgCl₂,0.5mg/mL bovine serum albumin,1mM還原型穀胱甘肽，40μM NADPH,0.5mM2-氧代戊二酸，0.5% dimethyl sulfoxide,50000-0.128nM化合物、作為酵素之12nM IDH1R132H或10nM IDH1R132C)加入於384孔板(Greiner bio-one,#781096)的各孔中，在室溫使其反應。來自NADPH的螢光藉由隨時監控器，於NADPH被消費前，添加5μL之0.5M EDTA，使反應終了。再添加5μL的WST-8試藥(DOJINDO、#CK04)，並混合，15分鐘後，將450nm的吸光度使用平板讀數儀(珀金埃爾默、EnVision)進行測定。所得之吸光度的值反映殘存NADPH量。由吸光度之數據計算出各化合物之各濃度中之酵素阻礙活性，並以醫療統計解析軟體GraphPad Prism進行解析算出IC50值。

其結果如表90~93所示。

[試驗例2]使用IDH1R132H表現TF-1細胞之2-HG(2-hydroxyglutarate)產生阻礙活性評估

人類紅白血病細胞株TF-1(American Type Culture Collection)在含有最終濃度10%牛胚胎血清(Hyclone、#SH30070.03)、2ng/mL人類重組體GM-CSF(Granulocyte Macrophage colony-stimulating Factor)(R&D Systems、#215-GM-050)之RPMI培養基(Life Technologies、#11875-093)(以下稱為增殖培養基A)進行培養。藉由以下方法製作出於TF-1導入IDH1R132H之細胞株。將編碼人類IDH1的變異體IDH1R132H之DNA於逆轉錄病毒載體pMSCVpuro(Clontech #634-401)選殖。將構築之載體pMSCVpuro-IDH1R132H使用脂質體轉染法(Invitrogen#15338-100)，導入於PT67細胞(Clontech #634-401)，於澄清液產生病毒。將含有病毒之培養澄清液以2000rpm進行20分鐘離心所得之離心澄清液作為病毒溶液。於6mL的增殖培養基A中懸浮1200000個TF-1細胞，添加於10cm盤(IWAKI #3020-100)，欲使最終濃度成為4μg/mL，添加混合凝聚胺(SIGMA ALDRICH)之4mL病毒溶液。病毒感染後，以含有最終濃度2μg/mL的puromycin(Invivogen #ant-pr)之增殖培養基A，進行藉由IDH1R132H表現細胞之選擇，接著極限稀釋法的選殖，構築表現IDH1R132H之TF-1細胞株TF-1/IDH1R132H。

將TF-1/IDH1R132H細胞在增殖培養基A，調製成40000個/190μL之細胞濃度，對96孔板(IWAKI、#3860-096)的各孔各播種190μL。其後，添加以增殖培養基A稀釋成所定濃度的化合物溶液10μL，在37℃、5%CO₂下進行2天培養。培養後，自各孔各以培養澄清液100μL移至96孔圓底板(Corning、#3799)。將板以2000rpm進行3分鐘離心後，自各孔將澄清液50μL分注於1.5mL試管(SARSTEDT、#72.690.001S)。於每試管中添加200μL之乙醇(WAKO、#057-00456)，以旋渦混合器(Pasolina、#NS-8)進行30秒攪拌後，在-80度下進行1小時恆溫培養。其後，再添加150μL的超純水並以旋渦混合器進行30秒攪拌且在-20度下保存。將經保存的溶液在室溫融解後，以內部標準(3-hydroxyglutarate(3-HG))溶液進行稀釋，藉由固相萃取(Oasis MAX μElution(Waters))調製出濃度測定用試料。將試料10μL注入於UPLC(Waters)，將含有0.5%甲酸之50%甲醇作為移動相 (流速每分0.6mL)，以保持40℃的分析管柱(Hypercarb(2.0x150mm、粒子徑5μm、Thermo Fisher))進行分離後，導入於質量分析裝置(Xevo TQ MS(Waters)。對於以電子噴霧離子化法進行離子化的來自2-HG之負離子(質量電荷比147)所生成的質量電荷比129之產品離子(保持時間1.0分)進行觀測，由2-HG標準液所作成的標準曲線算出溶液中之2-HG濃度。使各化合物的2-HG產生進行50%阻礙之濃度(IC50值)為，將各濃度中之2-HG濃度的相對值(對於在未添加化合物之細胞的2-HG濃度之%)與化合物濃度作為單側對數坐標圖而算出。

將該結果表示於上述表90~93。

[試驗例3]使用HT1080細胞的2-HG產生阻礙活性評估

表現IDH1的變異體IDH1R132C之人類線維肉瘤細胞株HT-1080(American Type Culture Collection)為，以含有最終濃度10%牛胚胎血清(Hyclone #SH30070.03)之RPMI培養基(Life Technologies #11875-093)(以下稱為增殖培養基B)進行培養。將HT1080細胞在增殖培養基B中，調製至2000個/100μL的細胞濃度，於96孔板(IWAKI、#3860-096)的各孔各播種100μL。1天培養後，自各孔除去培養澄清液，添加增殖培養基B之100μL，將添加之增殖培養基B再度除去。其後於各孔添加增殖培養基B之100μL，再添加以增殖培養基B稀釋至所定濃度的化合物溶液25μL，在37℃，5%CO₂下進行2天培養。培養後，自各孔將各培養澄清液90μL移至96孔圓底板(Corning、#3363)。將板在室溫以2000rpm進行3分鐘離心後，自各孔將澄清液50μL分注於96 Deep well plate(Porvair #219009)，藉由200μL之甲醇(WAKO #131-01826)與移液進行攪拌後，在-80度進行20-60分鐘之恆溫培養。其後，再添加150μL之超純水並藉由移液攪拌後在-20度下保存。

將保存之溶液在室溫進行融解後，進行與[試驗例2]之相同方法，算出溶液中之2-HG濃度。將各化合物之2-HG產生進行50%阻礙之濃度(IC50值)為，將各濃度中之2-HG濃度的相對值(對於在未添加化合物之細胞中之2-HG濃度的%)與化合物濃度作為單側對數坐標圖而算出。

該結果表示於上述表90~93。

[試驗例4]對於TF-1/IDH1R132H細胞之增殖阻礙活性評估

將培養於增殖培養基A之TF-1/IDH1R132H細胞的細胞懸浮液30mL分注於50mL試管(IWAKI、#2345-050)。在室溫以1200rpm進行5分鐘離心並除去澄清液。以增殖培養基B 30mL使細胞懸浮，在室溫以1200rpm進行5分鐘離心，除去澄清液。該操作再進行2次重複。將所得之TF-1/IDH1R132H細胞以增殖培養基B調製至2000個/100μL的細胞濃度。

調製出含有最終濃度10%牛胚胎血清、4.44pg/mL人類重組體GM-CSF之RPMI培養基(以下稱為增殖培養基C)。對96孔板(COSTAR、#3904)的各孔各分注增殖培養基C之90μL。繼續添加以增殖培養基B稀釋至所定濃度的化合物溶液10μL。且添加所調製之TF-1/IDH1R132H細胞的懸浮液100μL，在37℃，5%CO₂下進行2星期培養。培養後，使用ATPlite lstep Luminescence Assay System(珀金埃爾默、#6016739)依據附加的手冊進行反應後，在平板讀數儀(珀金埃爾默、EnVision)測定各孔發光量。藉由化合物添加群(T)、化合物非添加群(C)、細胞非添加群(B)的發光量依據以下式子算出細胞生存率。

細胞生存率%=(T-B)/(C-B)×100

將各化合物之TF-1/IDH1R132H細胞的增殖進行50%阻礙之濃度(GI50值)係由將各濃度中之細胞生存率與化合物濃度作為單側對數坐標圖而算出。

其結果表示於上述表90~93。

[試驗例5]使用HT1080罹癌老鼠之2-HG產生阻礙活性評估

表現IDH1之變異體IDH1R132C的人類線維肉瘤細胞株HT-1080(American Type Culture Collection)以含有最終濃度10%牛胚胎血清(Hyclone #SH30070.03)及青黴素-鏈黴素(Life Technologies #15070-063)之RPMI培養基(Life Technologies #11875-093)進行培養。

將HT1080細胞在PBS(Life Technologies #14190-250)，調製至4×10⁷個/mL之細胞濃度，以100μL/老鼠移植至Balb/c裸鼠(日本查爾斯河)的右腋窩部皮下。對於有腫瘤生著的HT1080罹癌老鼠進行化合物75mg/kg之1天2次，合計3次的強制經口投與。化合物的7.5mg/mL中添加溶劑後，使用均質機調製出懸浮液後，在-20℃下保存，於投與前經融解後使用於投與。於試驗之陰性對照群將溶劑進行強制經口投與。將老鼠之體重使用小動物用自動天秤進行測定，投與用液係以10mL/kg體重之比例進行投與。

於最終投與6小時後將老鼠藉由碳酸氣進行安樂死，並採出腫瘤一部分，以電子天秤測定重量後，在乾冰上使其冷凍。對於冷凍腫瘤，添加腫瘤重量之14倍量的甲醇，藉由Beads Shocker(安井器械)進行均質後，在-20℃之冷凍庫進行15分鐘恆溫培養。以微量高速冷卻離心機在15000rpm、4℃下進行15分鐘離心所得之澄清液150μL中添加250μL之甲醇與400μL之超純水後所調製之試樣提供於2-HG測定。進行與[試驗例2]之相同方法，算出溶液中之2-HG濃度後，藉由化合物投與群(T)、陰性對照群(C)的2-HG濃度，於以下式子算出2-HG產生抑制率。

2-HG產生抑制率%=T/C×100

將該結果表示於上述表90~93。

[試驗例6]導入含有IDH1R132H之4基因的AML細胞之建構與2-HG之測定

將欲進行基因導入之病毒製作如以下進行。首先欲進行逆轉錄病毒製作，製作出以下載體。作為基因使用皆為急性髓細胞白血病(AML)且可見到高頻度變異之變異型基因。pMy-NPMc-ires-EGFP為於pMy-ires-EGFP載體(Cell Biolabs,San Diego,CA,USA)將變異型NPM1基因(細胞質核磷敏1(cytoplasmic nucleophosmin)；記載為NPMc)導入於多克隆側而製作。pGCDN-IDH1/R132H-ires-NGFR為於pGCDN-ires-NGFR載體(由京都大學坂口志文氏提供)將IDH1/R132H變異基因導入於多克隆側而製作。pMSCV-DNMT3A(DNA甲基化酵素3A)/R882H為於pMSCVpuro載體(Takara)導入DNMT3A/R882H變異體基因而製作。pMSCV-FLT3/ITD為於pMSCVneo載體(Takara)導入FLT3/ITD變異基因(FMS樣酪胺酸激酶3/內部串聯重複(FMS-like tyrosine kinase 3/Internal Tandem Duplication)而製作。

於PLAT-E細胞(由東京大學醫科學研究所北村俊雄氏提供)將4種類的逆轉錄病毒載體(pMy-NPMc-ires-EGFP,pGCDN-IDH1/R132H-ires-NGFR,pMSCV-DNMT3A/R882H,pMSCV-FLT3/ITD)使用各GeneJuice(Merck)進行轉染。將含有逆轉錄病毒之培養澄清液10ml於48小時後回收，添加3.3ml之PEG濃縮液(30% PEG-8000,0.4M NaCl,and 40mM HEPES[pH 7.4])，在4℃進行一晚靜置。將試樣經離心(1500rpm x 45minutes,4℃)後作為顆粒。於Stempro-34溶液(Invitrogen)添加至50ng/ml SCF,10ng/ml IL-3,10ng/ml OSM(以下記載為Stempro培養基)。將病毒顆粒於Stempro培養基200μl中懸浮後各分注100μl，以液體氮急速冷凍後在-80℃冰箱中保存。

基因導入及一次骨髓移植如以下進行。

自8週齡之NPM^+/-老鼠(TaconicArtemis GmbH)的下胺回收骨髓細胞，於溶血處理後，使用CD117 MACS beads(Miltenyi Biotec)，回收c-Kit⁺細胞。於以RetroNectin(Takara)編碼的24孔盤(well plate)中加入pMy-NPMc-ires-EGFP之濃縮病毒100μl，於此添加懸浮於400μl的Stempro培養基之c-Kit⁺細胞4 x 10⁵個，在恆溫培養器進行培養。經半天後使用PBS回收細胞，將細胞懸浮於400μl之Stempro培養基。於以Retronectin(Takara)編碼的24孔盤(well plate)中加入pGCDN-IDH1/R132H-ires-NGFR的濃縮病毒100μl，於此添加細胞400μl，在恆溫培養器進行培養。半天後，以同樣方法進行pMSCV-DNMT3A/R882H之病毒感染。半天後以同樣方法進行pMSCV-FLT3/ITD之病毒感染，至做出導入4種類基因之基因導入細胞。

將基因導入細胞懸浮於600μl之Stempro-34溶液，對於經放射線照射(950Gy)之2隻老鼠各進行300μl之尾靜脈注射。每4週採取末梢血，對於EGFP與NGFR之表現進行FACS解析。EGFP陽性細胞考慮為AML細胞風險。於該AML細胞之生著確認後，回收骨髓細胞，懸浮於Bambanker(NIPPON Genetics)至5x10⁶cells/ml並庫存一次移植老鼠之細胞。

2次骨髓移植、化合物投與如以下進行。對於經放射線照射(600Gy)之老鼠將一次移植老鼠之骨髓細胞各以1x10⁵細胞進行尾靜脈注射。2次移植後經4週之時間點，由全老鼠採血後進行末梢血細胞之FACS解析，欲使EGFP陽性的AML細胞之比例不要偏差下進行分群。對於移植後經過6週後，於0.5%甲基纖維素將實施例168及實施例94的化合物作為自由型態懸浮成7.5、15、30mg/mL，而將該懸浮液以10mL/kg之比例進行投與。每1天以2次的間隔進行共計3次之化合物投與，於最終投與之6,16,24小時後，回收血漿及骨髓細胞。對於血漿20μL添加水80μL作成100μL溶液。對於1x10⁶之骨髓細胞，懸浮於100μL之PBS。對於血漿、骨髓之100μL溶液，添加400μL之乙醇，混合後在-20℃進行1小時恆溫培養。其後，再添加300μL之水，在4℃以15000rpm進行20分鐘離心後，回收澄清液並在-20℃保存。

將保存之溶液與試驗例2同樣地進行處理後測定2-HG-。

如圖1所示，實施例168及實施例94的化合物之投與結果，血漿中2-HG濃度以及骨髓細胞中2-HG量為顯著降低。

[試驗例7]對於導入含有IDH1R132H之4基因的AML老鼠模型的抗腫瘤活性之測定

添加實施例94之化合物的飼料係將CRF-1(Oriental酵母工業股份有限公司)作為基礎以0.3%(自由體重量比)的比例添加化合物所調製(Oriental酵母工業股份有限公司)。

對於試驗例6所建構的一次移植老鼠之骨髓細胞各1x10⁵細胞，對於經放射線照射(600Gy)之老鼠進行尾靜脈注射。移植6週後，一部分的老鼠之骨髓細胞經回收並確認EGFP陽性之AML細胞的比例。作為平均以骨髓細胞的80%為EGFP陽性，確認移植細胞在骨髓中充分地增加。

於移植8週後由全老鼠採血並進行末梢血細胞之FACS解析。欲使EGFP陽性的AML細胞之比例不會偏差下進行分群(對照組餌用4隻，實施例94的化合物配合飼料投與用4隻)。使用添加實施例94之化合物的飼料，開始進行混餌投與。

經4週混餌投與後，由各老鼠回收末梢血與骨髓細胞並進行FACS解析。檢測EGFP信號陽性之AML細胞的比例。

如圖2所示，得知將實施例94的化合物配合之混餌經4週投與結果，對於4隻中3隻老鼠，在骨髓中及末梢血中，EGFP陽性之AML的細胞所占比例有大幅度的減少。

[試驗例8]於IDH1/R132H變異型神經膠質母細胞瘤A1074老鼠移植模型中之抗腫瘤活性的測定

將由劍橋大學病理學部之Peter Collins教授所分讓的IDH1/R132H變異型人類神經膠質母細胞瘤的老鼠皮下移植傳代檢體(A1074)依據文獻(Goike HM：Cryopreservation of viable human glioblastoma xenografts.Neuropathol.Appl.Neurobiol.26：172-176,2000)所記載之方法，在37℃水浴下急速解凍，以手術分出含有腫瘤邊緣及中心部的5mm大之片段後，移植至NOD/SCID老鼠的腹部皮下。腫瘤成為1cm尺寸時，將老鼠藉由頸椎脫臼進行安樂死並摘出腫瘤，之後於NOG老鼠(公益財團法人實驗動物中央研究所)進行移植傳代，建構A1074老鼠移植模型。

對於NOG老鼠15隻，將分為5mm尺寸片的A1074腫瘤移植至單側皮下。使用適宜之游標卡尺進行腫瘤之計測，將腫瘤體積(mm³)以(長徑)×(短徑)²/2之計算式計算，使用腫瘤之增殖及藥效的確認。

自移植經過4週後，各分為5隻老鼠3群，對於各群，使用實施例168化合物配合飼料、實施例94化合物配合飼料、及對照組之飼料進行4星期的混餌投與。添加化合物之飼料係由將CRF-1(Oriental酵母工業股份有限公司)為基礎添加0.3%(自由體重量比)的比例之化合物而調製(Oriental酵母工業股份有限公司)。進行4星期的混餌投與後，將老鼠藉由頸椎脫臼使其安樂死，並摘出腫瘤測定重量。

本試驗時之各群腫瘤體積的平均值、標準誤差如圖3所示。又4週之混餌投與後的腫瘤重量如圖4所示。對於本實驗，藉由實施例168化合物及實施例94化合物之腫瘤增殖的抑制被確認。

[產業上可利用性]

本發明之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽因可抑制表現變異型IDH1蛋白質之腫瘤的增殖，特別可作為抗腫瘤劑可利用於醫療領域中。又，作為欲阻礙變異型IDH1蛋白質之活性的試藥，亦可利用於研究目的上。

Claims

一種下述一般式(I)所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其為一般式(I)
[式中，Z-Y表示N-O或O-N；R¹表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的苯基、或表示可具有1至3個獨立選自下述A群之取代基的吡啶基；R²表示-NR²¹R²²、可具有1至3個獨立選自下述B群的取代基之C₁~C₆烷基、可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基之C₃~C₆環烷基、或於環內具有1或者2個的獨立選自由氮原子及氧原子所成群之雜原子的4員至6員的雜環基；該4員至6員的雜環基亦可具有1至3個獨立選自下述C群的取代基，且於該雜環內以交聯結構、或於該雜環上可由1個C₃~C₆環烷基環進行螺結合；上述交聯結構為，構成雜環的碳原子之間的直接單鍵結者；R²¹及R²²為各獨立表示氫原子、C₁~C₆烷基、或- C(=O)R²³；R²³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基；R³表示下述式(II)至下述式(IV)中任一者
(式中，R³¹表示可由氫原子、鹵素原子、1至3個鹵素原子所取代之C₁~C₆烷基、C₃~C₆環烷基、或C₁~C₆烷基羰基；R³²表示氫原子、或C₁~C₆烷基、或R³¹及R³²為R³¹與R³²共同可形成環己烷環；R³³表示氫原子、或C₁~C₆烷基、或R³²及R³³為R³²與R³³共同可形成環丙烷環；R³⁴表示氫原子、或C₁~C₆烷基；R³⁵表示C₁~C₆烷基；R³⁶表示氫原子、或C₁~C₆烷基；R³⁷表示氫原子、或C₁~C₆烷基、或R³⁶及R³⁷為R³⁶與R³⁷共同可形成苯環；R³⁸表示氫原子、或鹵素原子；X表示氮原子或CH； W表示氮原子或CH；虛線表示單鍵或雙鍵)](但，除去R²為具有獨立選自下述C群的取代基之情況時，C群為具有獨立選自下述D群的C₁~C₆烷氧基、-NR²¹¹R²¹²、-C(=O)R²¹³或-SO₂R²¹³，且D群為胺基或C₃~C₆環烷基之情況)；A群：鹵素原子、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基；B群：鹵素原子、羥基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆烷基胺基、二C₁~C₆烷基胺基；C群：C₂~C₆烯基、鹵素原子、羥基、氰基、可具有1至3個獨立選自下述D群的取代基之C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、-NR²¹¹R²¹²、-C(=O)R²¹³、-SO₂R²¹³；R²¹¹及R²¹²各獨立表示氫原子、或C₁~C₆烷基；R²¹³表示C₂~C₆烯基、或C₂~C₆炔基；D群：胺基、C₁~C₆烷氧基、二C₁~C₆烷基胺基、氧代基、C₃~C₆環烷基。
如請求項1之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其中對於前述式(I)，R¹表示可具有1至3個獨立選自上述A群的取代基之苯基。
如請求項1或2之化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其中對於前述式(I)，R²表示可具有1至3個獨立選自上述B群的取代基之C₁~C₆烷基、或環內具有1或2個獨立選自由氮原子及氧原子所成群的雜原子之4至6員的脂肪族雜環基， (該4至6員的脂肪族雜環基可具有1至3個獨立選自上述C群的取代基)。
如請求項1或2之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽，其中對於前述式(I)，R²表示下述中任一者，
如請求項1或2的化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其中對於前述式(I)，R³表示下述式(IV’)或下述式(V)，
(式(IV)及式(V)中，R^3a表示氫原子、或可由1至3個鹵素原子所取代的C₁~C₆烷基，R^3b表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3c表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3d表示氫原子、或C₁~C₆烷基，R^3e表示氫原子、或鹵素原子，虛線表示單鍵或雙鍵)。
如請求項1或2之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽，其中對於前述式(I)，R³表示下述中任一者，
一種如下述一般式VI所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其為一般式VI
[式中，R⁴、R⁵、及R⁶各獨立表示氫原子或鹵素原子，R⁷表示下述中任一者，
R⁸及R⁹各獨立表示氫原子或C₁~C₆烷基]。
一種如下述一般式VII所示化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其為一般式VII
[式中，R¹⁰、R¹¹、及R¹²各獨立表示氫原子或鹵素原子，R¹³表示下述中任一者，
R¹⁴表示氫原子或C₁~C₆烷基]。
一種選自下述群中任一的化合物或其製醫藥上可被許可的鹽，其為(2E)-3-(1-{[5-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-3-(1-{[5-(tert-丁基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑 -4-基]羰基}-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-3-(1-{[3-(2,4-二氯-6-氟苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-3-(1-{[3-(2,4-二氯苯基)-5-(2-氟丙烷-2-基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸(2E)-3-(1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯-6-氟苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯-5-氟苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4-二氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸。
一種(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸或者其製醫藥上可被許可的鹽。
一種(2E)-3-(1-{[5-(2-氟丙烷-2-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3-甲基-1H-吲哚-4-基)丙-2-烯酸tert-丁基胺鹽。
一種(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸或者其製醫藥上可被許可的鹽。
一種(2E)-[1-{[5-(1-丙烯醯基哌啶-4-基)-3-(2,4,6-三氯苯基)-1,2-噁唑-4-基]羰基}-3,4-二氫苯並[cd]吲哚-5(1H)-亞基]乙烷酸tert-丁基胺鹽。
一種變異型異檸檬酸脫氫酶1阻礙劑，其特徵為將如請求項1至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分者。
一種D-2-羥基戊二酸產生阻礙劑，其特徵為將如請求項1至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分者。
一種醫藥組成物，其特徵為將如請求項1至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分。
一種對於具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異的腫瘤之抗腫瘤劑，其特徵為將如請求項1至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽作為有效成分者。
如請求項17之抗腫瘤劑，其中腫瘤為腦腫瘤、神經膠質瘤、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌。
如請求項1、2、7至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽，其中使用於具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的治療方法者。
如請求項19之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽，其中腫瘤為腦腫瘤、神經膠質瘤、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌。
一種使用如請求項1至13中任一項之化合物或者其製醫藥上可被許可的鹽於製造具有異檸檬酸脫氫酶1基因變異之腫瘤的治療用醫藥組成物之用途。
如請求項21之用途，其中腫瘤為腦腫瘤、神經膠質瘤、急性髓細胞白血病、骨髓增生異常綜合徵、骨髓增殖性腫瘤、末梢性T細胞性淋巴瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤、膽管癌、原始神經外胚葉腫瘤、B淋巴母細胞性淋巴瘤、惡性黑色腫、前列腺癌、大腸癌、或甲狀腺癌。