TWI438205B - 蛋白質酪胺酸激酶活性抑制劑 - Google Patents

Description

蛋白質酪胺酸激酶活性抑制劑

本發明係關於會抑制蛋白質酪胺酸激酶活性之化合物。特定言之，本發明係關於化合物，其會抑制生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性，而造成受體發出訊息之抑制，例如，VEGF受體發出訊息與HGF受體發出訊息之抑制。更特定言之，本發明係關於抑制VEGF受體發出訊息與HGF受體發出訊息之化合物、組合物及方法。

本申請案係主張2008年3月5日提出申請之美國臨時申請案序號61/034,005之權益。上文所引用申請案之全部陳述內容係併於本文供參考。

酪胺酸激酶可被分類為生長因子受體(例如EGFR、PDGFR、FGFR及erbB2)或非受體(例如c-src與bcr-abl)激酶。受體類型酪胺酸激酶係構成約20個不同亞族群。非受體類型酪胺酸激酶係構成許多亞族群。此等酪胺酸激酶具有各種不同生物學活性。受體酪胺酸激酶為大的酵素，其係跨越細胞膜，且具有關於生長因子之胞外結合功能部位，跨膜功能部位，及胞內部份，其係充作激酶，以使蛋白質中之特定酪胺酸殘基磷醯基化，且因此影響細胞增生。迷行或不適當蛋白質激酶活性可助長與此種迷行激酶活性有關聯疾病狀態之上升。

血管生成係為某些正常生理過程，譬如胚胎發生與傷口癒合之重要成份，但迷行血管生成會助長一些病理學病症，且特別是腫瘤生長。VEGF-A(血管內皮生長因子A)為促進腫瘤之新血管生成作用(血管生成)之重要因子。VEGF係藉由發出訊息經過兩種高親和力受體，似fms酪胺酸激酶受體Flt-1，與含激酶插入功能部位之受體KDR，引致內皮細胞增生與潛移。此等發出訊息回應係關鍵性地視固有受體酪胺酸激酶(RTK)活性之受體二聚合作用與活化作用而定。VEGF之結合為二硫化物連結均二聚體會刺激RTK功能部位之受體二聚合作用與活化作用。該激酶活性係使細胞質受體酪胺酸殘基自磷醯基化，其接著係充作關於涉及傳播發出訊息級聯反應之分子之結合位置。雖然多種途徑可能欲被解釋為針對兩種受體，但KDR發出訊息係最被廣泛地研究，其中有絲分裂原回應係被指出涉及ERK-1與ERK-2有絲分裂原活化之蛋白質激酶。

VEGF受體發出訊息之瓦解在癌症中為高度吸引人之治療標的，因血管生成係為關於所有固態腫瘤生長之先決條件，且成熟內皮仍然相對較靜止(惟女性生殖系統與傷口癒合除外)。抑制VEGF發出訊息之許多實驗途徑已被檢視，包括使用中和抗體、受體拮抗劑、可溶性受體、反有意義構造物及顯性-陰性策略。

儘管單獨藉由VEGF抑制之抗血管生成療法具吸引力，但數項爭論可能會限制此研究途徑。VEGF表現程度本身可藉由許多各種不同之刺激而被提高，且可能最重要的是，由於VEGFr抑制所造成腫瘤之氧不足狀態可導致誘發本身會促進腫瘤侵入與轉移之因子，因此潛在地逐漸損害VEGF抑制劑作為癌症治療劑之衝擊。

HGF(肝細胞生長因子)與HGF受體c-met係牽涉腫瘤細胞逐漸損害VEGF抑制活性之能力。衍生自無論是圍繞腫瘤細胞之基質成纖維細胞或表現自該腫瘤本身之HGF，已被指出係在腫瘤血管生成、侵入及轉移上扮演一項關鍵角色。例如，某些癌細胞之侵入生長係激烈地藉由涉及HGF/c-Met(HGF受體)途徑之腫瘤-基質交互作用而被增強。HGF，其最初係被確認為關於肝細胞之有效有絲分裂原，主要係自基質細胞分泌，且所分泌之HGF可促進以副分泌物方式表現c-Met之各種癌細胞之能動性與侵入。HGF之結合至c-Met會導致Ras/有絲分裂原活化蛋白質激酶(MAPK)發出訊息途徑之受體磷醯化作用與活化作用，於是增強癌細胞之惡性行為。再者，HGF/c-met途徑本身之刺激可導致VEGF表現之誘發，本身直接有助於血管生成活性。

因此，以VEGF/VEGFr發出訊息或HGF/c-met發出訊息為標的之抗腫瘤抗血管生成策略或途徑可代表經改良之癌症療法。

酪胺酸激酶亦會助長眼科學疾病、病症及症狀之病理學疾病，譬如與老化有關聯之斑點變性(AMD)及糖尿病患者之視網膜病(DR)。得自此種疾病之失明已被連結至視網膜新血管生成作用中之異常。新血管之形成係藉由生長因子譬如VEGF與HGF調節，該生長因子係活化受體酪胺酸激酶，而造成發出訊息途徑之引發，導致血漿滲漏至斑點中，造成視覺喪失。此等激酶係因此為關於治療涉及新血管生成作用之眼部疾病之吸引人標的。

因此，有需要發展關於控制眼睛之新血管生成作用之策略，及發展關於治療眼部疾病之策略。

此處吾人係描述小分子，其係為蛋白質酪胺酸激酶活性之有效抑制劑。

本發明係提供關於治療對激酶活性之抑制具回應性之疾病之新穎化合物與方法，例如對蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病，例如對生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病，例如對受體類型酪胺酸激酶發出訊息之抑制具回應性之疾病，或例如對VEGF受體發出訊息之抑制具回應性之疾病。於一項具體實施例中，疾病為細胞增生疾病。於另一項具體實施例中，疾病為眼科學疾病。本發明化合物為激酶活性之抑制劑，譬如蛋白質酪胺酸激酶活性，例如生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性或例如受體類型酪胺酸激酶發出訊息之抑制劑。

於第一方面，本發明係提供可作為激酶抑制劑使用之式(I)化合物：

及其N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、前體藥物及複合物，以及其外消旋與呈比例混合物、非對映異構物及對掌異構物，其中D、M、Z、Ar及G均如本文定義。由於本發明之化合物可作為激酶抑制劑使用，故其因此係為有用之研究工具，供研究激酶在正常與疾病狀態兩者中之角色。於一項具體實施例中，本發明係提供化合物，其可作為VEGF受體發出訊息之抑制劑使用，且因此係為有用之研究工具，供研究VEGF在正常與疾病狀態兩者中之角色。

本文指稱"式(I)化合物"(或相當地為"根據第一方面之化合物"或"本發明化合物"等)，應明瞭係包括指稱其N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、前體藥物及複合物，以及其外消旋與呈比例混合物、非對映異構物、對掌異構物及互變異構物，除非另有指出。

於第二方面，本發明係提供組合物，其包含根據本發明之化合物或其N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、前體藥物或複合物，或其外消旋或呈比例混合物、非對映異構物或對掌異構物，及藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。例如，本發明係提供組合物，其包含一種化合物，其係為VEGF受體發出訊息之抑制劑，或其藥學上可接受之鹽，及藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。

於第三方面，本發明係提供一種抑制激酶活性，例如蛋白質酪胺酸激酶，例如生長因子受體之酪胺酸激酶活性之方法，此方法包括使該激酶，與根據本發明之化合物，或與根據本發明之組合物接觸。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供一種抑制受體類型酪胺酸激酶發出訊息，例如抑制VEGF受體發出訊息之方法。抑制可在細胞或多細胞生物體中。若在細胞中，則根據本發明此方面之方法係包括使該細胞，與根據本發明之化合物，或與根據本發明之組合物接觸。若在多細胞生物體中，則根據本發明此方面之方法係包括對該生物體投予根據本發明之化合物或根據本發明之組合物。於一些具體實施例中，該生物體為哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。

於第四方面，本發明係提供一種抑制血管生成之方法，此方法包括對有需要之病患投予治療上有效量之根據本發明化合物，或治療上有效量之根據本發明組合物。在此方面之一些具體實施例中，欲被抑制之血管生成係涉及腫瘤生長。於一些其他具體實施例中，欲被抑制之血管生成為視網膜血管生成。在此方面之一些具體實施例中，病患為哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。

於第五方面，本發明係提供一種治療對激酶活性之抑制具回應性之疾病之方法，例如對蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病，例如對生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供一種治療對受體類型酪胺酸激酶發出訊息之抑制具回應性之疾病，例如對VEGF受體發出訊息之抑制具回應性之疾病之方法，此方法包括對有需要之生物體投予治療上有效量之根據本發明化合物或根據本發明組合物。在此方面之一些具體實施例中，該生物體為哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。

於第六方面，本發明係提供一種治療細胞增生疾病之方法，此方法包括對有需要之病患投予治療上有效量之根據本發明化合物或治療上有效量之根據本發明組合物。在此方面之一些具體實施例中，細胞增生疾病為癌症。在一些具體實施例中，病患為哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。

於第七方面，本發明係提供一種治療眼部疾病、病症或症狀之方法，此方法包括對有需要之病患投予治療上有效量之根據本發明化合物，或治療上有效量之根據本發明組合物。在此方面之一些具體實施例中，疾病係因脈絡膜之血管生成所造成。在此方面之一些具體實施例中，病患為哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。

於第八方面，本發明係提供根據本發明之化合物用於或在於製造藥劑以抑制激酶活性上之用途，例如抑制蛋白質酪胺酸激酶活性，例如抑制生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供根據本發明之化合物用於或在於製造藥劑以抑制受體類型酪胺酸激酶發出訊息上之用途，例如抑制VEGF受體發出訊息。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供根據本發明之化合物用於或在於製造藥劑上之用途，以治療對激酶活性之抑制具回應性之疾病。在此方面之一些具體實施例中，該疾病係對蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制，例如生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性。在此方面之一些具體實施例中，該疾病係對受體類型酪胺酸激酶發出訊息，例如VEGF受體發出訊息之抑制具回應性。於一些具體實施例中，疾病為細胞增生疾病，例如癌症。在此方面之一些具體實施例中，疾病為眼部疾病、病症或症狀。在此方面之一些具體實施例中，眼部疾病、病症或症狀係因脈絡膜之血管生成所造成。在此方面之一些具體實施例中，疾病為與老化有關聯之斑點變性、糖尿病患者之視網膜病或視網膜水腫。

於第九方面，本發明係提供利用根據本發明之化合物或其組合物，以抑制激酶活性，例如抑制受體類型酪胺酸激酶活性，例如抑制生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供利用根據本發明之化合物或其組合物，以抑制受體類型酪胺酸激酶發出訊息，例如抑制VEGF受體發出訊息。

於第十方面，本發明係提供利用根據本發明之化合物或其組合物，以治療對激酶活性之抑制具回應性之疾病，例如對蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病，例如對生長因子受體之蛋白質酪胺酸激酶活性之抑制具回應性之疾病。在此方面之一些具體實施例中，本發明係提供利用根據本發明之化合物或其組合物，以治療對受體類型酪胺酸激酶發出訊息之抑制具回應性之疾病，例如對VEGF受體發出訊息之抑制具回應性之疾病。在此方面之一些具體實施例中，疾病為細胞增生疾病，例如癌症。在此方面之一些具體實施例中，疾病為眼部疾病、病症或症狀。在此方面之一些具體實施例中，眼部疾病、病症或症狀係因脈絡膜之血管生成所造成。

前文僅只是摘述本發明之某些方面，而在本性上並非意欲成為限制。此等方面與其他方面及具體實施例，係更完整地描述於下文。

詳細說明

本發明係提供關於抑制激酶活性之化合物、組合物及方法，例如蛋白質酪胺酸激酶活性，例如受體蛋白激酶活性，例如VEGF受體KDR。本發明亦提供關於抑制血管生成，治療對激酶活性之抑制具回應性之疾病，治療細胞增生疾病與症狀，及治療眼部疾病、病症及症狀之化合物、組合物及方法。於本文中所引用之專利與科學文獻，係反映出熟諳此藝者可取得之知識。於本文中引用之經頒予專利、已公告專利申請案及參考資料，均據此併於本文供參考，達猶如每一件係明確地且個別地顯示欲被併於本文供參考一般之相同程度。在不一致之情況中，本發明揭示內容將佔優勢。

對本發明之目的而言，將使用下述定義(除非另有明確地陳述)：為簡化起見，化學部份基團係在整個本文中主要被定義與指稱為單價化學部份基團(例如烷基、芳基等)。雖然如此，在熟諳此藝者所明瞭之適當結構情況下，此種術語亦用以傳達相應多價部份基團。例如，雖然"烷基"部份基團一般係指單價基團(例如CH3-CH2-)，但在某些狀況下，二價連結部份基團可為"烷基"，於此種情況中，熟諳此藝者將明瞭烷基係為二價基團(例如，-CH2-CH2-)，其係相當於"伸烷基"一詞。同樣地，在其中需要二價部份基團，且被敘述為"芳基"之情況中，熟諳此藝者將明瞭"芳基"一詞係指其相應之二價部份基團伸芳基。應明瞭所有原子均具有其供鍵結形成之正常價數(意即，對碳為4，對N為3，對O為2，及對S為2、4或6，依S之氧化狀態而定)。有時，部份基團可被定義為例如(A)a-B-，其中a為0或1。在此種情況中，當a為0時，該部份基團為B-，而當a為1時，該部份基團為A-B-。

為簡化起見，對"Cn-Cm"雜環基或"Cn-Cm"雜芳基之指稱，係意謂雜環基或雜芳基，具有"n"至"m"個環形原子，其中"n"與"m"為整數。因此，例如C5-C6-雜環基為5-或6-員環，具有至少一個雜原子，且包括四氫吡咯基(C5)與六氫吡基及六氫吡啶基(C6)；C6-雜芳基包括例如吡啶基與嘧啶基。

"烴基"一詞係指直鏈、分枝狀，或環狀烷基、烯基或炔基，各如本文定義。"C0"烴基係用以指共價鍵。因此，"C0-C3烴基"包括共價鍵、甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、丙基、丙烯基、丙炔基及環丙基。

"烷基"一詞係意指直鏈或分枝狀脂族基團，具有1至12個碳原子，或者，1-8個碳原子，及或者，1-6個碳原子。在一些具體實施例中，烷基具有2至12個碳原子，或者，2-8個碳原子，及或者，2-6個碳原子。烷基之實例包括但不限於甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第二-丁基、第三-丁基、戊基、己基等。"C0"烷基(譬如在"C0-C3烷基"中)係為共價鍵。

"烯基"一詞係意指不飽和直鏈或分枝狀脂族基團，具有一或多個碳-碳雙鍵，具有2至12個碳原子，或者，2-8個碳原子，及或者，2-6個碳原子。烯基之實例包括但不限於乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基及己烯基。

"炔基"一詞係意指不飽和直鏈或分枝狀脂族基團，具有一或多個碳-碳參鍵，具有2至12個碳原子，或者，2-8個碳原子，及或者，2-6個碳原子。炔基之實例包括但不限於乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基及己炔基。

於本文中使用之"伸烷基"、"伸烯基"或"伸炔基"術語，係意指個別如前文定義之烷基、烯基或炔基，其係位在兩個其他化學基團之間，且係用以連接之。伸烷基之實例包括但不限於亞甲基、伸乙基、伸丙基及伸丁基。伸烯基之實例包括但不限於伸乙烯基、伸丙烯基及伸丁烯基。伸炔基之實例包括但不限於伸乙炔基、伸丙炔基及伸丁炔基。

當於本文中採用時，"碳環"一詞係意指環烷基或芳基部份基團。

"環烷基"一詞係意指飽和、部份不飽和或不飽和單-,雙-,三-或多環狀烴基，具有約3至15個碳，或者，具有3至12個碳，或者，3至8個碳，或者，3至6個碳，及或者，5或6個碳。在一些具體實施例中，環烷基係經稠合至芳基、雜芳基或雜環族基團。環烷基之實例包括但不限於環戊烯-2-烯酮、環戊烯-2-烯醇、環己-2-烯酮、環己-2-烯醇、環丙基、環丁基、環丁烯基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基、環辛基等。

"雜烷基"一詞係意指飽和、部份不飽和或不飽和、直鏈或分枝狀脂族基團，其中在此基團中之一或多個碳原子係獨立被選自O、S及N所組成之組群之雜原子置換。

"芳基"一詞係意指單-,雙-,三-或多環狀芳族部份基團，包含一至三個芳族環。在一些具體實施例中，芳基為C6-C14芳族部份基團，或者，芳基為C6-C10芳基，或者為C6芳基。芳基之實例包括但不限於苯基、萘基、蒽基及茀基。

"芳烷基"或"芳基烷基"術語係意指包含芳基而以共價方式連結至烷基之基團。若芳烷基係被描述為"視情況經取代"，則所意欲的是，芳基與烷基部份基團之任一個或兩者可獨立地視情況經取代或未經取代。在一些具體實施例中，芳烷基為(C1-C6)烷(C6-C10)芳基，包括但不限於苄基、苯乙基及萘基甲基。為簡化起見，當書寫成"芳烷基"時，此術語及其相關之術語係意欲指示基團在化合物中之順序為"芳基-烷基"。同樣地，"烷基-芳基"係意欲指示基團在化合物中之順序為"烷基-芳基"。

"雜環基"、"雜環族"或"雜環"術語係意指一種基團，其係為單-,雙-或多環狀結構，具有約3至約14個原子，或者，3至8個原子，或者，4至7個原子，或者，5或6個原子，其中一或多個原子，例如1或2個原子係獨立選自N、O及S所組成之組群，其餘環構成原子為碳原子。環結構可為飽和、不飽和或部份不飽和。在一些具體實施例中，雜環族基團為非芳族，於此種情況中，此基團亦被稱為雜環烷基。在雙環狀或多環狀結構中，一或多個環可為芳族；例如雙環狀雜環之一個環，或三環狀雜環之一或兩個環，可為芳族，譬如在氫茚與9,10-二氫蒽中。雜環基之實例包括但不限於環氧基、氮丙啶基、四氫呋喃基、四氫吡咯基、六氫吡啶基、六氫吡基、噻唑啶基、四氫唑基、四氫唑酮基、嗎福啉基、噻吩基、吡啶基、1,2,3-三唑基、咪唑基、異唑基、吡唑基、六氫吡基、六氫吡啶基、六氫吡啶基、嗎福啉基、高六氫吡基、高六氫吡基、硫代嗎福啉基、硫代嗎福啉基、四氫吡咯基及一氮七圜烷基。在一些具體實施例中，雜環族基團係經稠合至芳基、雜芳基或環烷基。此種稠合雜環之實例包括但不限於四氫喹啉與二氫苯并呋喃。明確地自此術語之範圍排除在外者為其中環形O或S原子係鄰近另一個O或S原子之化合物。

在一些具體實施例中，雜環族基團為雜芳基。於本文中使用之"雜芳基"一詞係意指單-,雙-,三-或多環基團，具有5至14個環原子，或者，5、6、9或10個環原子；具有例如6、10或14個π電子，在環狀陣列中被共用；且除了碳原子以外，具有一或多個間之雜原子，獨立選自N、O及S所組成之組群。例如，雜芳基係包括但不限於嘧啶基、吡啶基、苯并咪唑基、噻吩基、苯并噻唑基、苯并呋喃基及二氫吲哚基。雜芳基之其他實例包括但不限於噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡基、嘧啶基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹喏啉基、四唑基、唑基、噻唑基及異唑基。

"伸芳基"、"伸雜芳基"或"伸雜環基"術語係意指個別如前文定義之芳基、雜芳基或雜環基，其係位在兩個其他化學基團之間，且係用以連接之。

雜環基與雜芳基之實例包括但不限於一氮七圜烯基、一氮四圜基、吖啶基、一氮八圜烯基、苯并吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋呫基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并硫苯基、苯并唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并異唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑啉基、苯并唑基、苯并二唑基、苯并哌喃基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、基、烯基、啈啉基、香豆基、十氫喹啉基、1,3-二氧伍圜、2H,6H-1,5,2-二噻基、二氫呋喃并[2,3-b]四氫呋喃、二氫異吲哚基、二氫喹唑啉基(譬如3,4-二氫-4-酮基-喹唑啉基)、呋喃基、呋喃并吡啶基(譬如呋喃并[2,3-c]吡啶基、呋喃并[3,2-b]吡啶基或呋喃并[2,3-b]吡啶基)、呋喃基、呋呫基、六氫二氮七圜烯基、四氫咪唑基、二氫咪唑基、咪唑基、吲唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氫吲哚基、吲基、吲哚基、3H-吲哚基、異苯并呋喃基、異基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑啶基、異噻唑基、異二氫唑基、異唑基、亞甲二氧基苯基、嗎福啉基、啶基、八氫異喹啉基、二唑基、1,2,3-二唑基、1,2,4-二唑基、1,2,5-二唑基、1,3,4-二唑基、四氫唑基、唑基、四氫唑基、環氧丙烷基、2-氧一氮七圜烯基、2-酮基六氫吡基、2-酮基六氫吡啶基、2-酮基四氫吡咯基、嘧啶基、啡啶基、啡啉基、啡基、啡噻基、苯氧硫陸圜烯基、啡基、呔基、六氫吡基、六氫吡啶基、六氫吡啶酮基、4-六氫吡啶酮基、向日葵基、喋啶基、嘌呤基、哌喃基、吡基、四氫吡唑基、二氫吡唑基、吡唑基、嗒基、吡啶唑、吡啶并咪唑、吡啶噻唑、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、四氫吡咯基、二氫吡咯基、吡咯并吡啶基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹基、喹喏啉基、啶基、四氫-1,1-二酮基噻吩基、四氫呋喃基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四氫哌喃基、四唑基、噻唑啶基、6H-1,2,5-噻二基、噻二唑基(例如1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基)、硫基嗎福啉基、硫基嗎福啉基亞碸、硫基嗎福啉基碸、噻嗯基、噻唑基、噻吩基、噻吩噻唑基、噻吩唑基、噻吩咪唑基、硫苯基、三基、三基一氮七圜烯基、三唑基(例如1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基)及基。

"唑基"一詞，當於本文中採用時，係意謂五-員飽和或不飽和雜環族基團，含有兩個或多個選自氮、硫及氧所組成之組群之雜原子為環原子，其中至少一個雜原子為氮原子。唑基之實例包括但不限於視情況經取代之咪唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,4-二唑基及1,3,4-二唑基。

在本文中採用時，且除非另有述及，否則當部份基團(例如烷基、雜烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環基等)係被描述為"視情況經取代"時，係意謂該基團視情況具有一至四個，或者，一至三個，或者，一或兩個獨立經選擇之非氫取代基。適當取代基包括但不限於鹵基、羥基、酮基(例如被酮基取代之環形-CH為-C(O)-)、硝基、鹵基烴基、烴基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷氧基、芳氧基、胺基、醯基胺基、烷基胺甲醯基、芳基胺甲醯基、胺基烷基、醯基、羧基、羥烷基、烷磺醯基、芳環磺醯基、烷磺醯胺基、芳環磺醯胺基、芳烷基磺醯胺基、烷羰基、醯氧基、氰基及脲基。

取代基，其本身未進一步被取代(除非另有明確地陳述)，其實例為：

(a)鹵基、氰基、酮基、羧基、甲醯基、硝基、胺基、甲脒基、胍基，

(b)C₁ -C₅ 烷基或烯基或芳烷基亞胺基、胺甲醯基、疊氮基、羧醯胺基、巰基、羥基、羥烷基、烷基芳基、芳烷基、C₁ -C₈ 烷基、C₁ -C₈ 烯基、C₁ -C₈ 烷氧基、C₁ -C₈ 烷胺基、C₁ -C₈ 烷氧羰基、芳氧基羰基、C₂ -C₈ 醯基、C₂ -C₈ 醯基胺基、C₁ -C₈ 烷硫基、芳烷基硫基、芳基硫基、C₁ -C₈ 烷基亞磺醯基、芳烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基、C₁ -C₈ 烷基磺醯基、芳烷基磺醯基、芳基磺醯基、C₀ -C₆ N-烷基胺甲醯基、C₂ -C₁₅ N,N-二烷基胺甲醯基、C₃ -C₇ 環烷基、芳醯基、芳氧基、芳烷基醚、芳基，經稠合至環烷基或雜環或另一個芳基環之芳基，C₃ -C₇ 雜環、C₅ -C₁₅ 雜芳基或任何此等環經稠合或螺稠合至環烷基、雜環基或芳基，其中各前述係進一步視情況被一或多個列示於上文(a)中之部份基團取代；及(c)-(CR³² R³³ )_s -NR³⁰ R³¹ ，其中s為0(於此種情況中，氮係直接結合至經取代之部份基團)至6，R³² 與R³³ 各獨立為氫、鹵基、羥基或C₁ -C₄ 烷基，且R³⁰ 與R³¹ 各獨立為氫、氰基、酮基、羥基、C₁ -C₈ 烷基、C₁ -C₈ 雜烷基、C₁ -C₈ 烯基、羧醯胺基、C₁ -C₃ 烷基羧醯胺基、羧醯胺基-C₁ -C₃ 烷基、甲脒基、C₂ -C₈ 羥烷基、C₁ -C₃ 烷基芳基、芳基-C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷基雜芳基、雜芳基-C₁ -C₃ 烷基、C₁ -C₃ 烷基雜環基、雜環基-C₁ -C₃ 烷基C₁ -C₃ 烷基環烷基、環烷基-C₁ -C₃ 烷基、C₂ -C₈ 烷氧基、C₂ -C₈ 烷氧基-C₁ -C₄ 烷基、C₁ -C₈ 烷氧羰基、芳氧基羰基、芳基-C₁ -C₃ 烷氧羰基、雜芳基氧基羰基、雜芳基-C₁ -C₃ 烷氧羰基、C₁ -C₈ 醯基、C₀ -C₈ 烷基-羰基、芳基-C₀ -C₈ 烷基-羰基、雜芳基-C₀ -C₈ 烷基-羰基、環烷基-C₀ -C₈ 烷基-羰基、C₀ -C₈ 烷基-NH-羰基、芳基-C₀ -C₈ 烷基NH-羰基、雜芳基-C₀ -C₈ 烷基-NH-羰基、環烷基-C₀ -C₈ 烷基NH-羰基、C₀ -C₈ 烷基-O-羰基、芳基-C₀ -C₈ 烷基-O-羰基、雜芳基-C₀ -C₈ 烷基-O-羰基、環烷基-C₀ -C₈ 烷基-O-羰基、C₁ -C₈ 烷基磺醯基、芳烷基磺醯基、芳基磺醯基、雜芳烷基磺醯基、雜芳基磺醯基、C₁ -C₈ 烷基-NH-磺醯基、芳烷基-NH-磺醯基、芳基-NH-磺醯基、雜芳烷基-NH-磺醯基、雜芳基-NH-磺醯基芳醯基、芳基、環烷基、雜環基、雜芳基、芳基-C₁ -C₃ 烷基-、環烷基-C₁ -C₃ 烷基-、雜環基-C₁ -C₃ 烷基-、雜芳基-C₁ -C₃ 烷基-或保護基，其中各前述係進一步視情況被一或多個列示於上文(a)中之部份基團取代；或R³⁰ 與R³¹ 和彼等所連接之N一起採用，形成雜環基或雜芳基，其每一個係視情況被1至3個取代基取代，取代基選自上文(a)、保護基及(X³⁰ -Y³¹ -)所組成之組群，其中該雜環基亦可經橋接(形成具有亞甲基、伸乙基或伸丙基橋基之雙環狀部份基團)；其中X³⁰ 係選自下列組成之組群；C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基-、C₂ -C₈ 炔基-、-C₀ -C₃ 烷基-C₂ -C₈ 烯基-C₀ -C₃ 烷基、C₀ -C₃ 烷基-C₂ -C₈ 炔基-C₀ -C₃ 烷基、C₀ -C₃ 烷基-O-C₀ -C₃ 烷基-、HO-C₀ -C₃ 烷基-、C₀ -C₄ 烷基-N(R³⁰ )C₀ -C₃ 烷基-、N(R³⁰ )(R³¹ )-C₀ -C₃ 烷基-、N(R³⁰ )(R³¹ )-C₀ -C₃ 烯基-、N(R³⁰ )(R³¹ )-C₀ -C₃ 炔基-、(N(R³⁰ )(R³¹ ))₂ -C=N-、C₀ -C₃ 烷基-S(O)₀ -₂ -C₀ -C₃ 烷基-、CF₃ -C₀ -C₃ 烷基-、C₁ -C₈ 雜烷基、芳基、環烷基、雜環基、雜芳基、芳基-C₁ -C₃ 烷基-、環烷基-C₁ -C₃ 烷基-、雜環基-C₁ -C₃ 烷基-、雜芳基-C₁ -C₃ 烷基-、N(R³⁰ )(R³¹ )-雜環基-C₁ -C₃ 烷基-，其中芳基、環烷基、雜芳基及雜環基係視情況被1至3個得自(a)之取代基取代；且Y³¹ 係選自下列組成之組群：直接鍵結、-O-、-N(R³⁰ )-、-C(O)-、-O-C(O)-、-C(O)-O-、-N(R³⁰ )-C(O)-、-C(O)-N(R³⁰ )-、-N(R³⁰ )-C(S)-、-C(S)-N(R³⁰ )-、-N(R³⁰ )-C(O)-N(R³¹ )-、-N(R³⁰ )-C(NR³⁰ )-N(R³¹ )-、-N(R³⁰ )-C(NR³¹ )-、-C(NR³¹ )-N(R³⁰ )-、-N(R³⁰ )-C(S)-N(R³¹ )-、-N(R³⁰ )-C(O)-O-、-O-C(O)-N(R³¹ )-、-N(R³⁰ )-C(S)-O-、-O-C(S)-N(R³¹ )-、-S(O)_0-2 -、-SO₂ N(R³¹ )-、-N(R³¹ )-SO₂ -及-N(R³⁰ )-SO₂ N(R³¹ )-。

經取代之部份基團係為其中一或多個(例如，一至四個，或者，一至三個，及或者，一或兩個)氫已獨立被另一個化學取代基置換者。作為非限制性實例，經取代之苯基係包括2-氟苯基、3,4-二氯苯基、3-氯基-4-氟苯基、2-氟基-3-丙基苯基。作為另一個非限制性實例，經取代之正-辛基係包括2,4-二甲基-5-乙基-辛基與3-環戊基-辛基。被包含在此定義內者為亞甲基(-CH₂ -)，被氧取代，以形成羰基-CO-。

當有兩個選用取代基結合至環結構之相鄰原子時，例如苯基、硫苯基或吡啶基，此等取代基和彼等所結合之原子一起視情況形成5-或6-員環烷基或雜環，具有1、2或3個環形雜原子。

在一些具體實施例中，烴基、雜烷基、雜環族及/或芳基係為未經取代。

在一些具體實施例中，烴基、雜烷基、雜環族及/或芳基係被1至3個獨立經選擇之取代基取代。

在烷基上取代基之實例包括但不限於羥基、鹵素(例如單一鹵素取代基或多重鹵基取代基；於後述情況中為基團譬如CF₃ 或帶有Cl₃ 之烷基)、酮基、氰基、硝基、烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、雜環、芳基、-OR^a 、-SR^a 、-S(=O)R^e 、-S(=O)₂ R^e 、-P(=O)₂ R^e 、-S(=O)₂ OR^e 、-P(=O)₂ OR^e 、-NR^b R^c 、-NR^b S(=O)₂ R^e 、-NR^b P(=O)₂ R^e 、-S(=O)₂ NR^b R^c 、-P(=O)₂ NR^b R^c 、-C(=O)OR^e 、-C(=O)R^a 、-C(=O)NR^b R^c 、-OC(=O)R^a 、-OC(=O)NR^b R^c 、-NR^b C(=O)OR^e 、-NR^d C(=O)NR^b R^c 、-NR^d S(=O)₂ NR^b R^c 、-NR^d P(=O)₂ NR^b R^c 、-NR^b C(=O)R^a 或-NR^b P(=O)₂ R^e ，其中R^a 為氫、烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、雜環或芳基；R^b 、R^c 及R^d 係獨立為氫、烷基、環烷基、雜環或芳基，或該R^b 與R^c 和彼等所結合之N一起視情況形成雜環；且R^e 為烷基、環烷基、烯基、環烯基、炔基、雜環或芳基。在前述舉例之取代基中，基團譬如烷基、環烷基、烯基、炔基、環烯基、雜環及芳基可本身視情況經取代。

在烯基與炔基上之取代基實例包括但不限於烷基或經取代之烷基，以及被敘述為烷基取代基之實例之基團。

在環烷基上之取代基實例包括但不限於硝基、氰基、烷基或經取代之烷基，以及上文被敘述為烷基取代基之實例之基團。取代基之其他實例包括但不限於經螺連接或經稠合之環狀取代基，例如螺連接之環烷基、螺連接之環烯基、螺連接之雜環(排除雜芳基)、稠合之環烷基、稠合之環烯基、稠合之雜環或稠合之芳基，其中前文所提及之環烷基、環烯基、雜環及芳基取代基可本身視情況經取代。

在環烯基上之取代基實例包括但不限於硝基、氰基、烷基或經取代之烷基，以及被敘述為烷基取代基之實例之基團。取代基之其他實例包括但不限於經螺連接或經稠合之環狀取代基，例如螺連接之環烷基、螺連接之環烯基、螺連接之雜環(排除雜芳基)、稠合之環烷基、稠合之環烯基、稠合之雜環或稠合之芳基，其中前文所提及之環烷基、環烯基、雜環及芳基取代基可本身視情況經取代。

在芳基上之取代基實例包括但不限於硝基、環烷基或經取代之環烷基、環烯基或經取代之環烯基、氰基、烷基或經取代之烷基，以及上文被敘述為烷基取代基之實例之基團。取代基之其他實例包括但不限於稠合之環狀基團，譬如稠合之環烷基、稠合之環烯基、稠合之雜環或稠合之芳基，其中前文所提及之環烷基、環烯基、雜環及芳基取代基可本身視情況經取代。在芳基(苯基，作為非限制性實例)上之取代基之又其他實例包括但不限於鹵烷基及被敘述為烷基取代基之實例之基團。

在雜環族基團上之取代基實例包括但不限於環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、硝基、酮基(意即=O)、氰基、烷基、經取代之烷基，以及被敘述為烷基取代基之實例之基團。在雜環族基團上之其他取代基實例包括但不限於經螺連接或經稠合之環狀取代基，在任何可取用之點或連接點上，例如螺連接之環烷基、螺連接之環烯基、螺連接之雜環(排除雜芳基)、稠合之環烷基、稠合之環烯基、稠合之雜環及稠合之芳基，其中前文所提及之環烷基、環烯基、雜環及芳基取代基可本身視情況經取代。

在一些具體實施例中，雜環族基團係在一或多個位置處之碳、氮及/或硫上經取代。在氮上之取代基實例包括但不限於烷基、芳基、芳烷基、烷羰基、烷基磺醯基、芳基羰基、芳基磺醯基、烷氧羰基或芳烷氧基羰基。在硫上之取代基實例包括但不限於酮基與C_1-6 烷基。在一些具體實施例中，氮與硫雜原子可獨立地視情況經氧化，且氮雜原子可獨立地視情況經四級化。

在一些具體實施例中，於環基團譬如芳基、雜芳基、環烷基及雜環基上之取代基，係包括鹵素、烷氧基及/或烷基。

在一些具體實施例中，於烷基上之取代基包括鹵素及/或羥基。

"鹵基烴基"，當於本文中採用時，係為烴基部份基團，其中從一個至全部氫已被一或多個鹵基置換。

"鹵素"或"鹵基"術語，當於本文中採用時，係指氯、溴、氟或碘。當於本文中採用時，"醯基"一詞係指烷羰基或芳基羰基取代基。"醯基胺基"一詞係指醯胺基，經連接於氮原子上(意即R-CO-NH-)。"胺甲醯基"一詞係指醯胺基，經連接於羰基碳原子上(意即NH₂ -CO-)。醯基胺基或胺甲醯基取代基之氮原子，係另外視情況經取代。"磺醯胺基"一詞係指磺醯胺取代基，藉由無論是硫或氮原子連接。"胺基"一詞係意謂包括NH₂ 、烷胺基、二烷胺基(其中各烷基可為相同或不同)、芳胺基及環狀胺基。"脲基"一詞當於本文中採用時係指經取代或未經取代之脲部份基團。

於本文中使用之"自由基"一詞係意謂包含一或多個未成對電子之化學部份基團。

在選用取代基係選自"一或多個"基團之情況中，應明瞭的是此定義係包括所有取代基均選自所指定基團之一內，或選自全部所指定基團之組合內。

此外，於環狀部份基團(意即環烷基、雜環基、芳基、雜芳基)上之取代基，係包括5-至6-員單-與9-至14-員雙環狀部份基團，經稠合至母體環狀部份基團，以形成雙或三-環狀稠合環系統。於環狀部份基團上之取代基亦包括5-至6-員單-與9-至14-員雙環狀部份基團，藉由共價鍵連接至母體環狀部份基團，以形成雙或三-環狀雙環系統。例如，視情況經取代之苯基包括但不限於下列：

"未經取代"部份基團(例如，未經取代之環烷基、未經取代之雜芳基等)係意謂如上文定義之部份基團，未具有任何選用取代基。

飽和、部份不飽和或不飽和三-至八-員碳環為例如四-至七-員，或者五-或六-員飽和或不飽和碳環。飽和或不飽和三-至八-員碳環族環之實例包括苯基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基及環庚基。

飽和或不飽和羧與雜環族基團可與另一個飽和或雜環族基團縮合，以形成雙環狀基團，例如飽和或不飽和九-至十二-員雙環狀碳環族或雜環族基團。雙環狀基團包括萘基、喹啉基、1,2,3,4-四氫喹啉基、1,4-苯并氧陸圜基、氫茚基、吲哚基及1,2,3,4-四氫萘基。

當碳環族或雜環族基團係被兩個C₁ -₆ 烷基取代時，該兩個烷基可結合在一起而形成伸烷基鏈，例如C_1-3 伸烷基鏈。具有此交聯結構之碳環族或雜環族基團包括雙環并[2.2.2]辛烷基與正烷基。

"激酶抑制劑"與"激酶活性之抑制劑"等術語係用以確認能夠與激酶交互作用且抑制其酵素活性之化合物。

"抑制激酶酵素活性"一詞係用以意謂降低激酶使來自供體分子(譬如ATP)之磷酸根基團轉移至特定標的分子(受質)之能力。例如，激酶活性之抑制可為至少約10%。在本發明之一些具體實施例中，激酶活性之此種降低係為至少約25%，或者至少約50%，或者至少約75%，及或者至少約90%。在其他具體實施例中，激酶活性係被降低達至少95%，及或者達至少99%。IC₅₀ 值為會降低激酶之活性至未被抑制酵素之50%之激酶抑制劑濃度。

"VEGF受體發出訊息之抑制劑"一詞係用以確認具有如本文所定義結構之化合物，其係能夠與VEGF受體交互作用，且抑制VEGF受體之活性。在一些具體實施例中，活性之此種降低係為至少約50%，或者至少約75%，及或者至少約90%。在一些具體實施例中，活性係被降低達至少95%，及或者達至少99%。

"抑制有效量"一詞係意欲表示足以造成抑制激酶活性之劑量。構成"抑制有效量"之本發明化合物量將依化合物、激酶等而改變。抑制有效量可例行性地由一般熟諳此藝者測定。激酶可在細胞中，其依次可在多細胞生物體中。多細胞生物體可為例如植物、真菌或動物，例如哺乳動物，及例如人類。真菌可感染植物或哺乳動物，例如人類，且因此可位於植物或哺乳動物中及/或於其上。

在舉例之具體實施例中，此種抑制為專一，意即激酶抑制劑會在低於為產生另一種不相關生物學作用所需要抑制劑濃度之濃度下，降低激酶使來自供體分子(譬如ATP)之磷酸根基團轉移至特定標的分子(受質)之能力，例如，對於激酶抑制活性所需要之抑制劑濃度為至少2-倍低於，或者至少5-倍低於，或者至少10倍低於，及或者至少20倍低於為產生不相關生物學作用所需要之濃度。

因此，本發明係提供一種抑制激酶酵素活性之方法，其包括使該激酶與抑制有效量之根據本發明化合物或組合物接觸。在一些具體實施例中，激酶係在生物體中。因此，本發明係提供一種在生物體中抑制激酶酵素活性之方法，其包括對該生物體投予抑制有效量之根據本發明化合物或組合物。在一些具體實施例中，生物體為哺乳動物，例如馴養哺乳動物。在一些具體實施例中，生物體為人類。

"治療上有效量"一詞，當於本文中採用時，係為本發明化合物，當投予病患時，會誘出所要治療效果之量。治療效果係依被治療之疾病及所要之結果而定。因此，治療效果可為疾病狀態之治療。再者，治療效果可為激酶活性之抑制。構成"治療上有效量"之本發明化合物量將依化合物、疾病狀態及其嚴重性、待治療病患之年齡等而改變。治療上有效量可例行性地由一般熟諳此藝者測定。

於一些具體實施例中，治療作用為血管生成之抑制。"血管生成之抑制"措辭係用以表示根據本發明之化合物阻滯血管，譬如與抑制劑接觸之血管生長之能力，當與未經接觸之血管比較時。於一些具體實施例中，血管生成為腫瘤血管生成。"腫瘤血管生成"措辭係意謂會穿透至或者接觸癌性生長(譬如腫瘤)之血管之增生。於一些具體實施例中，血管生成為在眼睛中之異常血管形成。

在舉例之具體實施例中，血管生成係被阻滯達至少25%，當與未經接觸血管之血管生成比較時，或者至少50%，或者至少75%，或者至少90%，或者至少95%，及或者至少99%。或者，血管生成係被抑制達100%(意即血管不會在大小或數目上增加)。在某些具體實施例中，"血管生成之抑制"措辭包括在血管之數目或大小上之退化，當與未經接觸之血管比較時。因此，會抑制血管生成之根據本發明化合物可引致血管生長阻滯、血管生長遏制，或引致血管生長之退化。

因此，本發明係提供一種在動物中抑制血管生成之方法，其包括對需要此種治療之動物投予治療上有效量之本發明化合物或組合物。在一些具體實施例中，動物為哺乳動物，例如馴養哺乳動物。在一些具體實施例中，動物為人類。

於一些具體實施例中，治療作用為眼部疾病、病症或症狀之治療。"眼部疾病、病症或症狀之治療"措辭係意謂根據本發明之化合物治療滲出及/或炎性眼部疾病、病症或症狀、與減弱之視網膜血管滲透性及/或完整性有關聯之病症、與視網膜微血管斷裂而導致局灶出血有關聯之病症、眼睛背後之疾病、視網膜疾病或眼睛前方之疾病或其他眼部疾病、病症或症狀之能力。

於一些具體實施例中，眼部疾病、病症或症狀係包括但不限於與老化有關聯之斑點變性(ARMD)、滲出斑點變性(亦稱為"潮濕"或新血管之與老化有關聯之斑點變性(潮濕-AMD)、水腫斑、老化盤狀斑點變性、囊狀水腫斑、眼瞼水腫、視網膜水腫、糖尿病患者之視網膜病、急性斑點視神經網膜病、中央漿脈絡膜視網膜病、脈絡膜視網膜病、脈絡膜新血管生成作用、新血管斑病、新血管青光眼、阻塞動脈與靜脈視網膜病(例如視網膜靜脈閉塞或視網膜動脈閉塞)、中央視網膜靜脈閉塞、散播性血管內凝固病、分枝視網膜靜脈閉塞、高血壓底部變化、眼部絕血性徵候簇、視網膜動脈微動脈瘤、Coat氏疾病、小凹旁毛細管擴張、半視網膜靜脈閉塞、乳頭狀靜脈炎、中樞視網膜動脈閉塞、分枝視網膜動脈閉塞、頸動脈疾病(CAD)、霜白分枝淋巴管炎、鐮狀細胞視網膜病及其他血色素疾病、血管狀條紋，由於病原學譬如疾病所造成之水腫斑發生(例如糖尿病患者之水腫斑)，眼部損傷或眼部手術，因例如損傷、創傷或腫瘤所產生之視網膜絕血或退化，葡萄膜炎、虹膜炎、視網膜脈管炎、眼內炎、全眼炎、轉移性眼炎、脈絡膜炎、視網膜色素上皮炎、結合膜炎、睫狀體炎、鞏膜炎、上鞏膜炎、視神經炎、眼球後視神經炎、角膜炎、瞼炎、滲出視網膜脫落、角膜潰瘍、結合膜潰瘍、慢性錢幣狀角膜炎、Thygeson角膜炎、進行性Mooren氏潰瘍，因細菌或病毒感染或因眼部手術所造成之眼部炎性疾病，因對眼睛之物理損傷所造成之眼部炎性疾病，及因眼部炎性疾病所造成之病徵，包括搔癢、閃光、水腫與潰瘍、紅斑、多形滲出性紅斑、結節性紅斑、環形紅斑、硬腫病、皮膚炎、血管神經性水腫、喉水腫、聲門水腫、聲門下喉炎、枝氣管炎、鼻炎、咽炎、竇炎、喉炎或中耳炎。

於一些具體實施例中，眼部疾病、病症或症狀包括但不限於與老化有關聯之斑點變性、糖尿病患者之視網膜病、視網膜水腫、視網膜靜脈閉塞、新血管青光眼、早產之視網膜病、色素視網膜變性、葡萄膜炎、角膜新血管生成作用或增生性玻璃體視網膜病。

於一些具體實施例中，眼部疾病、病症或症狀為與老化有關聯之斑點變性、糖尿病患者之視網膜病或視網膜水腫。

因此，本發明係提供一種在動物中治療眼部疾病、病症或症狀之方法，其包括對需要此種治療之動物投予治療上有效量之本發明化合物或組合物。在一些具體實施例中，動物為哺乳動物，例如馴養哺乳動物。在一些具體實施例中，動物為人類。

於一些具體實施例中，治療作用為視網膜新血管生成作用之抑制。"視網膜新血管生成作用之抑制"措辭係意謂根據本發明之化合物在眼睛中阻滯血管生長之能力，例如來自視網膜靜脈之新血管，例如阻滯來自視網膜靜脈，且沿著視網膜之內部(玻璃狀體)表面延伸之新血管之生長。

在舉例之具體實施例中，視網膜新血管生成作用係被阻滯達至少25%，當與未經接觸血管之視網膜新血管生成作用比較時，或者至少50%，或者至少75%，或者至少90%，或者至少95%，及或者至少99%。或者，視網膜新血管生成作用係被抑制達100%(意即血管不會在大小或數目上增加)。在一些具體實施例中，"視網膜新血管生成作用之抑制"措辭包括在血管之數目或大小上之退化，當與未經接觸之血管比較時。因此，會抑制視網膜新血管生成作用之根據本發明化合物可引致血管生長阻滯、血管生長遏制或引致血管生長之退化。

因此，本發明係提供一種在動物中抑制視網膜新血管生成作用之方法，其包括對需要此種治療之動物投予治療上有效量之本發明化合物或組合物。在一些具體實施例中，動物為哺乳動物，例如馴養哺乳動物。在一些具體實施例中，動物為人類。

於一些具體實施例中，治療作用為細胞增生之抑制。"細胞增生之抑制"措辭係用以表示根據本發明之化合物阻滯與抑制劑接觸之細胞生長之能力，當與未經接觸之細胞比較時。細胞增生之評估可藉由使用Coulter細胞計數器(Coulter,Miami,Fla.)或血球計，計數經接觸與未經接觸之細胞而施行。於細胞係在固體生長(例如固態腫瘤或器官)中之情況下，細胞增生之此種評估可經由以測徑器度量生長，或將經接觸細胞之生長大小與未經接觸之細胞作比較而施行。

在舉例之具體實施例中，與抑制劑接觸細胞之生長係被阻滯達至少25%，當與未經接觸細胞之生長比較時，或者至少50%，或者至少75%，或者至少90%，或者至少95%，及或者至少99%。或者，細胞增生係被抑制達100%(意即經接觸之細胞不會在數目上增加)。在某些具體實施例中，"抑制細胞增生"措辭包括經接觸細胞之數目或大小上之減少，當與未經接觸之細胞比較時。因此，會在經接觸之細胞中抑制細胞增生之根據本發明化合物可引致經接觸之細胞遭受生長阻滯，遭受生長遏制，遭受程式化之細胞死亡(意即細胞凋零)或遭受壞死細胞死亡。

在一些具體實施例中，經接觸之細胞為贅瘤細胞。"贅瘤細胞"一詞係用以表示會顯示迷行細胞生長之細胞。在一些具體實施例中，贅瘤細胞之迷行細胞生長為經增加之細胞生長。贅瘤細胞可為增生細胞，會於活體外顯示缺乏生長之接觸抑制之細胞，不能夠於活體內轉移之良性腫瘤細胞，或能夠於活體內轉移且在嘗試移除之後可復發之癌細胞。"腫瘤發生"一詞係用以表示細胞增生之誘發，其會導致贅瘤生長之發展。

在一些具體實施例中，經接觸之細胞係在動物中。因此，本發明係提供一種在動物中治療細胞增生疾病或症狀之方法，其包括對需要此種治療之動物投予治療上有效量之本發明化合物或組合物。在一些具體實施例中，動物為哺乳動物，例如馴養哺乳動物。在一些具體實施例中，動物為人類。

"細胞增生疾病或症狀"一詞係意欲指稱其特徵為迷行細胞生長，較佳為異常增加細胞增生之任何症狀。易於接受抑制與治療之此種細胞增生疾病或症狀之實例包括但不限於癌症。特定癌症型式之實例包括但不限於乳癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病及腎癌。在一些具體實施例中，本發明係提供一種在動物中抑制贅瘤細胞增生之方法，其包括對具有至少一種贅瘤細胞存在於其身體中之動物投予治療上有效量之本發明化合物或其組合物。

對本發明之目的而言，"病患"一詞，當於本文中採用時，係包括人類及其他動物，例如哺乳動物，及其他生物體。因此，本發明之化合物、組合物及方法係可應用於人類療法與獸醫應用兩者。在一些具體實施例中，病患為哺乳動物，例如人類。

於本文中使用之"進行治療"、"治療作業"等術語係涵蓋在動物中疾病狀態之治療，且包括以下之至少一個：(i)預防疾病狀態發生，特別是當此種動物易罹患該疾病狀態但尚未被診斷具有該疾病之徵候時；(ii)抑制該疾病狀態，意即部份或完全遏制其發展；(iii)減輕該疾病狀態，意即造成該疾病狀態之徵候之退化，或改善該疾病之徵候；及(iv)該疾病狀態之逆轉或退化，較佳為該疾病之消除或治癒。於本發明之一些具體實施例中，生物體為動物，例如哺乳動物，例如靈長類動物，例如人類。正如此項技藝中所已知者，對於全身對局部之傳輸、年齡、體重、一般健康狀態、性別、飲食、投藥時間、藥物交互作用、症狀之嚴重性之調整可為必須，且可以例行實驗術，由一般熟諳此藝者確定。在一些具體實施例中，於本文中使用之"進行治療"、"治療作業"等術語，係涵蓋在生物體中疾病狀態之治療，且包括上文(ii)、(iii)及(iv)之至少一個。

關於非眼部疾病、病症或症狀之投藥可藉任何途徑，包括但不限於非經腸、口腔、舌下、經皮、局部、鼻內、氣管內或直腸內。在一些具體實施例中，本發明化合物係以靜脈內方式在醫院環境中投藥。在一些具體實施例中，投藥可藉由口腔途徑。

關於眼部疾病、病症及症狀之投藥途徑之實例包括但不限於系統、眼周圍、眼球後、小管內、玻璃狀體內注射、局部(例如眼藥水)、結合膜下注射、眼球筋膜下、經鞏膜、眼房內、視網膜下、電擊穿孔及持續釋出植入物。關於眼部狀況之其他投藥途徑、其他注射位置或其他投藥形式係為熟諳此藝者已知或預期，且係意欲在本發明之範圍內。

在本發明之一些具體實施例中，關於眼部疾病、病症及症狀之投藥途徑包括局部、結合膜下注射、玻璃狀體內注射或其他眼部途徑，系統地，或熟諳此藝者已知對眼睛手術後病患之其他方法。

在本發明之一些其他具體實施例中，關於眼部疾病、病症及症狀之投藥途徑包括局部、玻璃狀體內、經鞏膜、眼周圍、結合膜、眼球筋膜下、眼房內、視網膜下、結合膜下、眼球後或小管內。

在本發明之一些具體實施例中，關於眼部疾病、病症及症狀之投藥途徑包括局部投藥(例如眼藥水)、系統投藥(例如口腔或靜脈內)、結合膜下注射、眼周圍注射、玻璃狀體內注射及手術植入物。

在本發明之一些具體實施例中，關於眼部疾病、病症及症狀之投藥途徑包括玻璃狀體內注射、眼周圍注射及持續釋出植入物。

在本發明之一些具體實施例中，眼球內注射可至玻璃狀體中(玻璃狀體內)，於結合膜下方(結合膜下)，在眼睛背後(眼球後)，至鞏膜中，在眼球之筋膜下(眼球筋膜下)，或可呈積貯形式。

本發明化合物會形成鹽，其亦在本發明之範圍內。本文指稱本發明之化合物，例如式(I)化合物，應明瞭係包括指稱其鹽，除非另有指出。

當於本文中採用時，"鹽"一詞係表示以無機及/或有機酸與鹼所形成之酸性及/或鹼性鹽。此外，當本發明化合物含有鹼性部份基團譬如但不限於吡啶或咪唑，與酸性部份基團譬如但不限於羧酸兩者時，可形成兩性離子("內鹽")，且係被包含在如本文中使用之"鹽"一詞內。藥學上可接受(意即無毒性(顯示最少或沒有不期望之毒物學作用)、生理學上可接受)之鹽為較佳，惟其他鹽亦可例如使用於單離或純化步驟中，其可於製備期間採用。本發明化合物之鹽可例如經由使本發明化合物與一數量之酸或鹼，譬如等量，在媒質中，譬如鹽會沉澱於其中者，或在水性媒質中反應，接著冷凍乾燥而形成。

本發明化合物，其含有鹼性部份基團，譬如但不限於胺或吡啶或咪唑環，可與多種有機與無機酸類形成鹽。舉例之酸加成鹽包括醋酸鹽(譬如與醋酸或三鹵基醋酸(例如三氟醋酸)所形成者)、己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、酸性硫酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡萄糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、羥基乙烷磺酸鹽(例如2-羥基乙烷磺酸鹽)、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸鹽(例如2-萘磺酸鹽)、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酯酸鹽、過硫酸鹽、苯基丙酸鹽(例如3-苯基丙酸鹽)、磷酸鹽、苦味酸鹽、三甲基醋酸鹽、丙酸鹽、柳酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽(譬如與硫酸所形成者)、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(譬如甲苯基磺酸鹽)、十一烷酸鹽等。

本發明化合物，其含有酸性部份基團，譬如但不限於羧酸，可與多種有機與無機鹼形成鹽。舉例之鹼性鹽包括銨鹽，鹼金屬鹽，譬如鈉、鋰及鉀鹽，鹼土金屬鹽，譬如鈣與鎂鹽，與有機鹼(例如有機胺類)之鹽，該鹼類譬如苄星(benzathine)、二環己基胺類、海巴胺(與N,N-雙(脫氫松香基)乙二胺所形成)、N-甲基-D-葡萄糖胺、N-甲基-D-葡萄糖醯胺、第三-丁基胺類，及與胺基酸之鹽，該胺基酸譬如精胺酸、離胺酸等。鹼性含氮基團可以作用劑四級化，譬如低碳烷基鹵化物(例如甲基、乙基、丙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物)、二烷基硫酸鹽(例如二甲基、二乙基、二丁基及二戊基硫酸鹽)、長鏈鹵化物(例如癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂基之氯化物、溴化物及碘化物)、芳烷基鹵化物(例如苄基與苯乙基溴化物)及其他。

於本文中使用之"藥學上可接受鹽"一詞，係意指會保持上文所確認化合物之所要生物學活性，且顯示最少或無不期望毒物學作用之鹽。此種鹽之實例包括但不限於與無機酸類(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等)所形成之鹽，及與有機酸類所形成之鹽，該有機酸類譬如醋酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、鞣酸、棕櫚酸、海藻酸、聚麩胺酸、萘磺酸、萘二磺酸、甲烷磺酸、對-甲苯磺酸及聚半乳糖醛酸。其他鹽包括熟諳此藝者已知之藥學上可接受之四級鹽，明確言之，其包括式--NR+Z--之四級銨鹽，其中R為氫、烷基或苄基，且Z為抗衡離子，包括氯根、溴根、碘根、--O-烷基、甲苯磺酸根、甲基磺酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根(譬如苯甲酸根、琥珀酸根、醋酸根、乙醇酸根、順丁烯二酸根、蘋果酸根、檸檬酸根、酒石酸根、抗壞血酸根、苯甲酸根、桂皮酸根、苯乙醇酸根、苄酸根及二苯基醋酸根)。

本發明之另一方面係提供組合物，其包含根據本發明之化合物。例如，在本發明之一些具體實施例中，組合物係包含根據本發明之化合物，化合物之N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、複合物或前體藥物，以至少約30%對掌異構物或非對映異構物過量存在。在本發明之一些具體實施例中，化合物、N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、複合物或前體藥物係以至少約50%，至少約80%，或甚至為至少約90%對掌異構物或非對映異構物過量存在。在本發明之一些具體實施例中，化合物、N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、複合物或前體藥物係以至少約95%，更佳為至少約98%，且又更佳為至少約99%對掌異構物或非對映異構物過量存在。在本發明之其他具體實施例中，化合物、N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、複合物或前體藥物係以實質上外消旋混合物存在。

本發明之一些化合物可具有對掌中心及/或幾何異構中心(E-與Z-異構物)，且應明瞭的是，本發明係涵蓋所有此種光學、對掌異構物、非對映異構物及幾何異構物。本發明亦包含本文中所揭示化合物之所有互變異構形式。在本發明化合物包含對掌中心之情況中，本發明係涵蓋此種化合物之對掌異構上及/或非對映異構上純異構物，此種化合物之對掌異構上及/或非對映異構物上富含之混合物，及此種化合物之外消旋與呈比例混合物。例如，組合物可包含本發明化合物之對掌異構物或非對映異構物之混合物，以至少約30%非對映異構或對掌異構物過量。在本發明之某些具體實施例中，化合物係以至少約50%對掌異構物或非對映異構物過量，以至少約80%對掌異構物或非對映異構物過量，或甚至是以至少約90%對掌異構物或非對映異構物過量存在。在本發明之某些更佳具體實施例中，化合物係以至少約95%，又更佳係以至少約98%對掌異構物或非對映異構物過量，而最佳係以至少約99%對掌異構物或非對映異構物過量存在。

本發明之對掌中心可具有S或R組態。外消旋形式可藉由物理方法解析，例如非對映異構衍生物之分級結晶、分離或結晶化作用，或藉對掌性管柱層析之分離。個別光學異構物可無論是自對掌性先質/中間物，或自外消旋物開始，藉任何適當方法而獲得，包括但不限於習用方法，例如與光學活性酸之鹽形成，接著為結晶化作用。

本發明亦包括本發明化合物之前體藥物。"前體藥物"一詞係意欲表示共價結合至載劑之化合物，當該前體藥物被投予哺乳動物病患時，其係能夠釋出活性成份。活性成份之釋出係發生在活體內。前體藥物可藉由熟諳此藝者已知之技術製備。此等技術通常係修改特定化合物中之適當官能基。但是，此等經修改之官能基係藉由例行操控或於活體內再生原先官能基。本發明化合物之前體藥物包括其中羥基、胺基、羧基或類似基團經修改之化合物。前體藥物之實例包括但不限於本發明化合物中之羥基或胺基官能基之酯類(例如醋酸酯、甲酸酯及苯甲酸酯衍生物)、胺基甲酸酯類(例如N,N-二甲胺基羰基)，醯胺類(例如三氟乙醯胺基、乙醯胺基等)等。

本發明化合物可例如以本身或以前體藥物投予，例如呈活體內可水解酯或活體內可水解醯胺之形式。含有羧基或羥基之本發明化合物之活體內可水解酯，係為例如藥學上可接受之酯，其係在人類或動物身體中水解，以產生母體酸或醇。關於羧基之適當藥學上可接受酯類，包括C₁ -₆ -烷氧基甲基酯類(例如甲氧基甲基)、C₁ -₆ -烷醯氧基甲基酯類(例如例如三甲基乙醯基氧基甲基)、酞基酯類、C₃ -₈ -環烷氧基羰基氧基C₁ -₆ -烷基酯類(例如1-環己羰基氧基乙基)；1,3-二氧伍圜烯-2-酮基甲基酯類(例如5-甲基-1,3-二氧伍圜烯-2-酮基甲基)；及C₁ -₆ -烷氧羰基氧基乙基酯類(例如1-甲氧羰基氧基乙基)，且可在本發明化合物中之任何羧基上形成。

含有羥基之本發明化合物之活體內可水解酯，包括無機酯類，譬如磷酸酯類與α-醯氧基烷基醚類，及相關化合物，其係由於酯分解之活體內水解作用而得母體羥基。α-醯氧基烷基醚類之實例包括乙醯氧基甲氧基與2,2-二甲基丙醯氧基-甲氧基。羥基之活體內可水解酯形成基團之選擇係包括烷醯基、苯甲醯基、苯乙醯基及經取代之苯甲醯基與苯乙醯基、烷氧羰基(而得烷基碳酸酯類)、二烷基胺甲醯基與N-(N,N-二烷胺基乙基)-N-烷基胺甲醯基(而得胺基甲酸酯類)、N,N-二烷胺基乙醯基及羧基乙醯基。於苯甲醯基上之取代基實例包括嗎福啉基與哌基，從環氮原子經由亞甲基連結至苯甲醯基環之3-或4-位置。含有羧基之本發明化合物之活體內可水解醯胺之適當意義，係為例如N-C₁ -₆ -烷基或N,N-二-C₁ -₆ -烷基醯胺，譬如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N,N-二甲基、N-乙基-N-甲基或N,N-二乙基醯胺。

在投予病患時，前體藥物係藉由代謝或化學過程進行化學轉化，而產生本發明化合物或例如其鹽及/或溶劑合物。本發明化合物之溶劑合物包括例如水合物。

在整個本專利說明書中，一或多種化學取代基之具體實施例係經確認。亦涵蓋者為各種具體實施例之組合。例如，本發明係描述D在化合物中之一些具體實施例，且係描述基團G之一些具體實施例。因此，以下述作為實例，亦意欲被涵蓋在本發明之範圍內者為其中D之實例係如上述且其中基團G之實例係如上述之化合物。

化合物

根據一項具體實施例，本發明係提供式(I)化合物：

包括其N-氧化物、水合物、溶劑合物、藥學上可接受之鹽、前體藥物及複合物，以及其外消旋與呈比例混合物、非對映異構物及對掌異構物，其中D係選自下列組成之組群：芳族、雜芳族、環烷基或雜環系統，其每一個係視情況被1至5個獨立經選擇之R³⁸ 取代；M為視情況經取代之稠合雜環族部份基團；Z為-O-；Ar為5至7員芳族環系統，其係視情況被0至4個R² 基團取代；且G為基團B-L-T，其中B為-N(R¹³ )-或-C(=S)-；L係選自下列組成之組群：-C(=O)N(R¹³ )-、-C(=O)C_0- C₁ 烷基-C(=O)N(R¹³ )-及-C(=O)-，其中前述L基團之烷基係視情況經取代；且T係選自下列組成之組群：-C_0- C₅ 烷基、-C_0- C₅ 烷基-Q、-O-C_0- C₅ 烷基-Q、-O-C_0- C₅ 烷基、-C(=S)-N(R¹³ )-C_0- C₅ 烷基-Q、-C_0- C₅ 烷基-S(O)₂ -Q及-C(=S)-N(R¹³ )-C_0- C₅ 烷基，其中各C_0- C₅ 烷基係視情況經取代；其中各R³⁸ 係獨立選自下列組成之組群：鹵基、視情況經取代之C₁ -C₆ 烷基、-C₀ -C₆ 烷基-(視情況經取代之雜環)、視情況經取代之-C₂ -C₆ 烯基=N-雜環-C₁ -C₆ 烷基、視情況經取代之-CH=N-雜環、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 、-C(O)(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ C(O)-(CH₂ )_j O(CH₂ )_j OR³ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)、-(CH₂ )_j NR³⁹ CH(CH₃ )(CH₂ )_j R⁹⁹ 及-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j COOH；其中各j係獨立為範圍從0至4或者1-2之整數，n為範圍從0至6之整數，x為範圍從0-6或者2-3之整數，各i係獨立為2或3，且前述R³⁸ 基團之-(CH₂ )_n -部份基團係視情況被C₁ -C₆ 烷基取代；R³⁶ 為H或-(CH₂ )_n3 OR³⁷ ；其中n3為範圍從0至6之整數；其附帶條件是，當R³⁶ 與R³⁹ 均連接至相同氮時，則R³⁶ 與R³⁹ 並非皆直接經過氧結合至該氮；各R³⁷ 係獨立選自H、C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_n O(CH₂ )_a O-C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_n CH(NH)(CH₂ )_n O-C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_n CH(NH)(CH₂ )_n -C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_n O(CH₂ )_a O-C₃ -C₁₀ 環烷基、-(CH₂ )_n CH(NH)-(CH₂ )_n O-C₃ -C₁₀ 環烷基及-(CH₂ )_n CH(NH)(CH₂ )_n C₃ -C₁₀ 環烷基，其中各n係獨立為範圍從0至6之整數，且a為範圍從2至6之整數，其中前述R³⁷ 基團之烷基與環烷基部份基團係視情況被一或多個獨立經選擇之取代基取代；R³⁹ 係選自下列組成之組群：H、C₁ -C₆ 烷基、-SO₂ -C₁ -C₆ 烷基、-C(O)-C₁ -C₆ 烷基、-C(O)O-C₁ -C₆ 烷基、-C(O)-C₁ -C₆ 烷基-NR³ R³ 、-C₁ -C₆ 烷基-O-C₁ -C₆ 烷基、-C(O)(CH₂ )_0-4 O(CH₂ )_1-4 OC₁ -C₆ 烷基、-C(O)-C₁ -C₆ 烷基-OH、-C(O)CH[CH(C₁ -C₆ 烷基)₂ ]NR³ R³ 及-C(O)-CF₃ ，及用以保護二級胺基之保護基，其附帶條件是，當R³⁶ 與R³⁹ 均連接至相同氮時，則R³⁶ 與R³⁹ 並非皆直接經過氧結合至該氮；R⁹⁹ 於每一存在處係獨立為-H、-NH₂ 或-OR³ ；R² 於每一存在處係獨立選自-H與鹵素；各R³ 係獨立選自-H與R⁴ 所組成之組群；R⁴ 為(C₁ -C₆ )烷基；各R¹³ 係獨立選自-H、-C(O)NR³ R³ 及C₁ -C₆ 烷基所組成之組群；Q為三-至十-員環系統，視情況被零與四個間之R²⁰ 取代；且各R²⁰ 係獨立選自下列組成之組群：-H、鹵素、三鹵甲基、-OR³ 、-S(O)_0-2 R³ 、-S(O)₂ NR³ R³ 、-C(O)OR³ 、-C(O)NR³ R³ 、-(CH₂ )_0-5 (雜芳基)、C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_n P(=O)(C₁ -C₆ 烷基)₂ ，其中n為範圍從0至6之整數，且雜芳基與C₁ -C₆ 烷基係視情況經取代。

於根據本發明化合物之一些具體實施例中，D為芳族或雜芳族環系統，其每一個係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為5-或6-員雜芳族環系統，其每一個係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為6-員芳族或6-員雜芳族環系統，其每一個係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為6-員芳族環系統，被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為6-員雜芳族環系統，被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為5-員雜芳族環系統，被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於本發明之一些具體實施例中，D係選自下列組成之組群

其中該組群之成員係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於本發明之一些具體實施例中，D係選自下列組成之組群

其中該組群之成員係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，D係被一個R³⁸ 基團取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為苯基、吡啶基、咪唑基或四氫吡啶基，其每一個係被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代。

於根據本發明之一些具體實施例中，R³⁸ 為或

於根據本發明之一些具體實施例中，D為被1個R³⁸ 基團取代之苯基。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為被1或2個獨立經選擇之R³⁸ 基團取代之吡啶基。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為被一個R³⁸ 取代之吡啶基。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為被一或兩個R³⁸ 取代之咪唑基。

於根據本發明之一些具體實施例中，D為被兩個R³⁸ 取代之咪唑基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被1個R³⁸ 基團取代之四氫吡啶基。

於本發明之一些具體實施例中，各R³⁸ 係獨立選自下列組成之組群：C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j COOH、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 及-C₀ -C₆ 烷基-(視情況經取代之雜環)。

於本發明之一些具體實施例中，各R³⁸ 係獨立選自下列組成之組群：C₁ -C₆ 烷基、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 及-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 。

於本發明之一些具體實施例中，各R³⁸ 係獨立為-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 或-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁸ 為-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ ，其中j為1，且n為2。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁸ 為-(CH₂ )NR³⁹ -(CH₂ )₂ OCH₃ 。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁸ 為-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i -[O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁸ 為-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i -[O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ ，其中j為1，i為2，且x為2或3。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 或者一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代，其中j為1，且n為2。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 或者一個-(CH₂ )_j NR³⁹ -(CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j OMe取代，其中j為1，i為2，且x為2或3。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ -(CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)取代之吡啶基。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被一個-C₀ -C₆ 烷基-(視情況經取代之雜環)例如-C₀ -C₆ 烷基-(被一個酮基取代之雜環)取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ -(CH₂ )_j COOH取代之吡啶基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ -C(O)(CH₂ )_j O(CH₂ )_j OR³ 取代之吡啶基。

於本發明之一些具體實施例中，D為四氫吡啶基，被一個視情況經取代之-CH=N-雜環取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個-C(O)(CH₂ )_j -NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代之四氫吡啶基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個C₁ -C₆ 烷基與一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代之咪唑基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個-(CH₂ )_j NR³⁹ -(CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 取代之苯基。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁹ 係選自下列組成之組群：H、-C(O)-C₁ -C₆ 烷基(例如-C(O)-Me)、-C(O)-O-C₁ -C₆ 烷基、-C(O)-C₁ -C₆ 烷基-NH₂ 、-SO₂ -Me、-C(O)(CH₂ )₀ -₄ O(CH₂ )_1-4 OC₁ -C₆ 烷基及-C(O)CH[CH(C₁ -C₆ 烷基)₂ ]NR³ R³ 。

於本發明之另一項具體實施例中，R³⁹ 係選自下列組成之組群：H、-C(O)-Me、-C(O)(CH₂ )O(CH₂ )₂ OC₁ 烷基及-C(O)CH-(CHMe₂ )NH₂ 。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁹ 為H或-C(O)-Me。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁹ 為H。

於本發明之一些具體實施例中，R³⁶ 為-OMe。

於本發明之一些具體實施例中，R⁹⁹ 為-OMe。

於本發明之一些具體實施例中，M為

其中*表示對D之連接點；且表示對Z之連接點。

於本發明之一些具體實施例中，Ar係選自下列組成之組群：苯基、吡、嗒、嘧啶及吡啶，其中各該苯基、吡、嗒、嘧啶及吡啶係視情況被0至4個R² 基團取代。

於本發明之一些具體實施例中，Ar為苯基，視情況被0至4個R² 基團，或者被1或2個R² 基團，或者被0,1或2個鹵基取代。

於本發明之一些具體實施例中，Ar為苯基，被一個鹵基例如一個F取代。

於本發明之一些具體實施例中，G係選自下列組成之組群

於本發明之一些具體實施例中，G係選自下列組成之組群

於本發明之一些具體實施例中，G係選自下列組成之組群

於本發明之一些具體實施例中，Q係選自下列組成之組群：苯基、環丙基、異唑基、環己基、噻唑基、四氫呋喃、吡唑基、環丁基及環戊基，視情況被零與二個間之R20取代。

於本發明之一些具體實施例中，Q為視情況被一或兩個R20取代之苯基。

於本發明之一些具體實施例中，Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，Q為四氫呋喃。

於本發明之一些具體實施例中，Q為視情況被一個R20取代之吡唑基。

於本發明之一些具體實施例中，各R20係獨立選自下列組成之組群：-P(=O)(Me)2、甲基、鹵基(例如F)、三鹵甲基、甲氧基、-C(O)NH2、雜芳基、-COOH、-SO2NH2、-C(O)NH2、-COOMe、-C(O)N(H)(Me)、-C(O)N(Me)2及-SO2Me。

於本發明之一些具體實施例中，Q係被一個選自-P(=O)(Me)2、甲基及甲氧基之R20取代。

於本發明之一些具體實施例中，Q為被一個-P(=O)(Me)2取代之苯基。

於本發明之一些具體實施例中，Q為吡唑基、異唑基或噻唑基，被一個甲基取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為苯基、吡啶基、咪唑基或四氫吡啶基，其每一個係被1或2個獨立經選擇之R38基團取代；M為Z為-O-；Ar為苯基，視情況被0至4個R2基團，例如被零與四個間之鹵基取代；且G係選自下列組成之組群

其中Q係視情況被0至4個獨立經選擇之R²⁰ 取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i -[O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )jR⁹⁹ 、-C₀ -C₆ 烷基-(視情況被一或兩個酮基取代之雜環)、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j COOH、-(CH₂ )_j NR³⁹ CH(CH₃ )-(CH₂ )_j R⁹⁹ 或-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)取代；M為Z為-O-；Ar為苯基，視情況被0至4個R² 基團(例如一個F)取代；且G為

其中Q係視情況被0至4個獨立經選擇之R²⁰ 取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i -[O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 、-C₀ -C₆ 烷基-(被一個酮基取代之雜環)、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j COOH或-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)取代；R⁹⁹ 為OMe；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為苯基，視情況被1或2個獨立經選擇之R²⁰ 取代，其中各R²⁰ 係獨立選自下列組成之組群：-P(=O)(Me)₂ 、甲基、鹵基(例如F)、三鹵甲基、甲氧基、-C(O)NH₂ 、雜芳基、-COOH、-SO₂ HN₂ 、-C(O)NH₂ 、-COOMe、-C(O)N(H)(Me)、-C(O)N(Me)₂ 及-SO₂ Me，或Q為視情況被甲基取代之吡唑基，或Q為環丙基、環丁基或四氫呋喃，或Q為被甲基取代之異唑基。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i -[O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 、-C₀ -C₆ 烷基-(被一個酮基取代之雜環)、-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j COOH或-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_j (CH)(NH₂ )(COOH)取代；R⁹⁹ 為OMe；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被-C₀ -C₆ 烷基-(視情況經取代之雜環)取代之吡啶基；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，D為吡啶基，被-C₀ -C₆ 烷基-(視情況被一或兩個酮基取代之雜環)例如-CH₂ -(被0,1或2個酮基取代之5-或6-員雜環基)取代；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被或取代之吡啶基；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_i [O(CH₂ )_i ]_x (CH₂ )_j R⁹⁹ 取代之吡啶基；R⁹⁹ 為OMe；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為環丙基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個C₁ -C₆ 烷基與一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代之咪唑基；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團例如一個F取代之苯基；且G為

其中Q係視情況被0至4個獨立經選擇之R²⁰ 取代。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個C₁ -C₆ 烷基與一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代之咪唑基；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為視情況被0至4個獨立經選擇之R²⁰ 取代之苯基。

於本發明之一些具體實施例中，D為被一個C₁ -C₆ 烷基與一個-(CH₂ )_j NR³⁹ (CH₂ )_n R³⁶ 取代之咪唑基；M為Z為-O-；Ar為視情況被0至4個R² 基團取代之苯基，例如被一個F取代之苯基；且G為

其中R¹³ 為H；且Q為苯基，視情況被一或兩個基團取代，取代基獨立選自下列組成之組群：-P(O)Me₂ 、甲基、鹵基(例如F)、三鹵甲基(例如三氟甲基)、甲氧基、-C(O)NH₂ 及雜芳基(例如唑基)，或Q為環丙基。

上文化學式之化合物可一般性地根據下文圖式製備。上文化學式之化合物之互變異構物與溶劑合物(例如水合物)亦在本發明之範圍內。溶劑化合作用之方法於此項技藝中係為一般已知。因此，本發明化合物可呈自由態、水合物或鹽形式，且可藉由以下文圖式為例之方法獲得。

下述實例與製備係描述施行與使用本發明之方式與方法，且係為說明性而非限制性。應明瞭的是，可以有其他具體實施例落在如被隨文所附之請求項所定義之本發明精神與範圍內。

根據本發明之化合物係包括但不限於下文實例中所述者。化合物係使用Chemdraw Ultra 10.0版或8.0.3版命名，其可經過Cambridgesoft.com,100 Cambridge Park Drive,Cambridge,MA 02140取得或係自其衍生。

本文中所提出之數據係証實本發明激酶抑制劑之抑制作用。此等數據導致吾人合理地預期本發明化合物不僅可用以抑制激酶活性、蛋白質酪胺酸激酶活性或其具體實施例，譬如VEGF受體發出訊息，而且可作為治療劑，以治療增生疾病，包括癌症與腫瘤生長，及眼科學疾病、病症及症狀。

合成圖式與實驗程序

本發明化合物可根據下文所示之反應圖式或實例，利用一般熟諳此藝者所已知之方法製成。此等圖式係用以舉例說明一些可用以製造本發明化合物之程序。熟諳此藝者將明瞭的是，可使用其他一般合成程序。本發明化合物可製自市購可得之起始成份。可根據熟諳此藝者所習知之程序，對起始成份施行任何種類之取代，以獲得本發明化合物。

特定實例 圖式1

(2-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(46 )

步驟1. 5-(1,3-二氧陸圜-2-基)-1-甲基-1H-咪唑(38) [Shafiee A.,Rastkary N.,Jorjani M.,Shafaghi B.,Arch .Pharm .Pharm .Med .Chem . 2002,2,69-76]

於1-甲基-1H-咪唑-5-羧甲醛(2.9克，26.3毫莫耳)在甲苯(20毫升)中之溶液內，添加丙烷-1,3-二醇(4.01克，52.7毫莫耳)與CSA(0.306克，1.317毫莫耳)，並將反應混合物加熱至回流，歷經24小時，伴隨著所釋出水之共沸移除。使反應混合物冷卻至室溫，以DCM稀釋，且以NaHCO₃ 溶液洗滌。然後，使其以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。藉管柱層析純化(己烷中之80% EtOAc至 EtOAc)，獲得38 (2.53克，57%產率)，為黃色油，其係在靜置時固化成黃色固體。MS(m/z)：169.2(M+H).

步驟2. 5-(1,3-二氧陸圜-2-基)-2-碘基-1-甲基-1H-咪唑(39)

於38 (295克，1.754毫莫耳)在無水THF(10毫升)中之溶液內，在-78℃下，添加n-BuLi(0.772毫升，1.929毫莫耳，在己烷中之2.5M溶液)，並將反應混合物攪拌20分鐘。慢慢逐滴添加THF(2毫升)中之碘(445毫克，1.754毫莫耳)，同時保持溫度在-78℃下，且將反應混合物再攪拌30分鐘，並藉由添加水使反應淬滅，接著以EtOAc萃取。將有機相以硫代硫酸鈉溶液洗滌，分離，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。藉管柱層析純化(20% EtOAc/己烷)，獲得39 (305毫克，59%產率)，為白色固體。MS(m/z)：294.1(M+H).

步驟3. 2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶(40)

於7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶(1 )[Klemm,L. H.；Louris,J. N.；Boisvert,W.；Higgins,C.；Muchiri,,. R.；J. Heterocyclic Chem.,22 ,1985 ,1249-1252](11.7克，69.0毫莫耳)在THF(300毫升)中之溶液內，在-78℃下，添加n-BuLi溶液(30.46毫升，76毫莫耳，2.5M，在己烷中)，並將反應混合物攪拌10分鐘。添加ZnCl₂ 溶液(76.15毫升，76毫莫耳，1.0M，在Et₂ O中)，且將混合物在室溫下攪拌10分鐘。添加Pd(PPh₃ )₄ (2.287毫克，0.104毫莫耳)，伴隨著39 (5.82克，19.79毫莫耳)在THF(20毫升)中之溶液，並將反應混合物於N₂ 氣體大氣下加熱至回流，歷經4小時。然後，使反應物冷卻至室溫，且以氫氧化銨與EtOAc稀釋。收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將所形成之物質以Et₂ O研製，而得標題化合物40 (5.79克，87%產率)，為白色固體。MS(m/z)：336.1(M+H).

步驟4. 2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶(41)

將40 (5.9克，17.57毫莫耳)、2-氟基-4-硝基酚(5.52克，35.1毫莫耳)及NaHCO₃ (1.346克，16.02毫莫耳)在Ph₂ O(7毫升)中之混合物加熱至180℃，歷經4小時。使反應混合物冷卻至室溫，並以DCM稀釋，過濾，及濃縮。殘留物藉管柱層析之純化(溶離劑EtOAc)，獲得41 (2.5克，31%產率)，為黃色固體。MS(m/z)：457.1(M+H).

步驟5. 2-(5-(二甲氧基甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶(42)

於41 (2.5克，5.48毫莫耳)在MeOH(200毫升)中之溶液內，添加CSA(127毫克，0.548毫莫耳)，並將反應混合物加熱至回流，歷經5小時。然後，使其冷卻至室溫，且添加固體NaHCO₃ 。過濾混合物，並使濾液濃縮至乾涸。使殘留固體溶於DCM中，以水洗滌，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將所形成之固體以Et₂ O研製，而得42 (1.8克，74%產率)，使用之而無需任何進一步純化。MS(m/z)：445.1(M+H).

步驟6. 2-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-羧甲醛(43)

於42 (1.8克，4.05毫莫耳)在丙酮(100毫升)與水(100毫升)中之溶液內，添加稀HCl(20毫升，2M，40.0毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。然後，使其濃縮至乾涸。使殘留固體溶於DCM中，以水洗滌，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將所形成之固體以Et₂ O研製，而得43 (1.3克，81%產率)，使用之而無需另外純化。MS(m/z)：399.2(M+H).

步驟7. N-((2-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-2-甲氧基乙胺(44)

於43 (1.3克，3.26毫莫耳)在無水DCM(50毫升)中之懸浮液內，在室溫下，添加2-甲氧基乙胺(1.226克，16.32毫莫耳)、醋酸(0.98克，16.32毫莫耳)及三乙醯氧基硼氫化鈉(3.46克，16.32毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌24小時。然後，將其以另外之DCM稀釋，且以飽和NaHCO₃ 溶液洗滌，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮至乾涸，而得44 (1.5克，100%產率)，為黃色油，將其以粗製使用於下一步驟，無需另外純化。MS(m/z)：458.2(M+H).

步驟8. (2-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2- 基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(45)

於44 (1.5克，3.28毫莫耳)在DCM(50毫升)中之溶液內，在室溫下，添加Boc₂ O(1.073毫克，4.92毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。使混合物濃縮至乾涸，且將殘留物藉管柱層析純化(溶離劑EtOAc)，而得45 (1.3克，71%產率)，為黃色固體。MS(m/z)：558.2(M+H).

步驟9. 　(2-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3，2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(46)

於45 (1.1克，0.717毫莫耳)在MeOH(30毫升)與水(10毫升)中之溶液內，添加氯化銨(211毫克，3.95毫莫耳)與鋅(1.61克，17.76毫莫耳)，並將反應混合物加熱至回流，歷經24小時。使反應混合物冷卻至室溫，然後濃縮至乾涸。使殘留物於DCM與水之間作分液處理，且收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮，而得標題化合物46 (1.04克，100%產率)，將其以粗製使用於下一步驟，無需另外純化。MS(m/z)：528.1(M+H).

圖式9

(6-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(126)

步驟1.　N-((6-溴基吡啶-3-基)甲基)-2-甲氧基乙胺(143)

於6-溴基吡啶-3-羧甲醛(5克，26.9毫莫耳)在DCM(40毫升)中之溶液內，添加2-甲氧基乙胺(2.80毫升，32.3毫莫耳)。10分鐘後，將三乙醯氧基硼氫化鈉(7.98克，37.6毫莫耳)添加至混合物中，並將其在室溫下攪拌17小時。將DCM(100毫升)、水(50毫升)及NH₄ Cl(50毫升)添加至反應混合物中。收集有機相，且以DCM(3 x 100毫升)萃取水層。將合併之有機溶液以鹽水洗滌，及在減壓下濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，溶離劑為98/2至95/5DCM/MeOH，而得標題143 (2.958克，45%產率)，為褐色油。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.31(dd,J=2.6,0.6 Hz,1H),7.70(dd,J=8.2,2.6 Hz,1H),7.58(d,J=8.4 Hz,1H),3.69(s,2H),3.37(t,J=5.8 Hz,2H),3.22(s,3H),2.60(t,J=5.8 Hz,2H). MS(m/z)：245.1(M+H).

步驟2. (6-溴基吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(144)

於143 (13.072克，53.3毫莫耳)在THF(40毫升)中之溶液內，添加二碳酸二-第三-丁酯(14.86毫升，64.0毫莫耳)。將混合物於室溫下攪拌16小時，及在減壓下濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，溶離劑為己烷/EtOAc：7/3,6/4,5/5，而得標題化合物144 (16.196克，88%產率)，為黃色油。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.26(dd,J=2.4,0.8 Hz,1H),7.64-7.58(m,2H),4.39(s,2H),3.40-3.33(m,4H),3.20(s,3H),1.41-1.31(m,9H). MS(m/z)：345.2(M+H).

步驟3. (6-(7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(145)

於7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶(1 )(8.84克，52.1毫莫耳)在THF(100毫升)中之溶液內，在-78℃下，添加正-丁基鋰(20.86毫升，52.1毫莫耳)。30分鐘後，於-78℃下添加氯化鋅(52.1毫升，52.1毫莫耳)(1M，在醚中)，並使反應混合物溫熱至室溫。1小時後，添加THF(25毫升)中之肆三苯膦鈀(1.004克，0.869毫莫耳)與144 (6克，17.38毫莫耳)，且將混合物加熱至回流，歷經1小時。然後，使其在飽和NaHCO₃ 水溶液與EtOAc之間作分液處理。收集有機層，並以EtOAc(3 x 100毫升)萃取水層。將合併之有機層以鹽水洗滌，及在減壓下蒸發。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，溶離劑為己烷/EtOAc：5/5,3/7,0/10，而得化合物145 (5.41克，72%產率)。¹ H NMR(400 MHzmDMSO-d₆ )δ(ppm)：8.65(d,J=5.1 Hz,1H),8.52(d,J=1.6 Hz,1H),8.39(s,1H),8.27(d,J=8.0 Hz,1H),7.80(dd,J=8.1,2.1 Hz,1H),7.58(d,J=5.1 Hz,1H),4.48(s,2H),3.43-3.35(m,4H),3.22(s,3H),1.43-1.33(m,9H). MS(m/z)：434.2(M+H).

步驟4. (6-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(126)

於4-胺基-2-氟基酚(1.933克，15.21毫莫耳)在DMSO(30毫升)中之溶液內，添加第三-丁醇鉀(2.017克，17.97毫莫耳)。30分鐘後，添加氯化物145 (6克，13.83毫莫耳)，並將反應混合物於100℃下加熱45分鐘。使混合物冷卻下來，然後在40-45℃下傾倒於水(250毫升)中，且攪拌30分鐘。藉過濾收集沉澱物，以水(2 x 30毫升)洗滌，及乾燥過夜。將粗製固體以Et₂ O(50毫升)研製1小時，而得標題化合物126 (4.18克，58%產率)，為褐色固體。MS(m/z)：525.2(M+H).

實例179

1-(3-(二甲基磷醯基)苯基)-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(289 )

步驟1. 1-(二甲基磷醯基)-3-硝基苯(286 )

在壓力瓶中，於1-碘基-3-硝基苯(2.4克，9.6毫莫耳)在無水1,4-二氧陸圜(24毫升)中之溶液內，在氮氣及室溫下，添加氧化二甲基膦[WO 2005/009348](1.5克，19.2毫莫耳)、Pd₂ (dba)₃ (0.44克，0.48毫莫耳)、黃磷(xantphos)(0.56克，0.96毫莫耳)及碳酸銫(4.38克，13.5毫莫耳)。混合物係藉由使氮起泡進入溶液中10分鐘而被脫氣。將壓力瓶密閉，並在90℃下加熱3小時。於減壓下移除溶劑，且使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/醋酸乙酯；25M管柱)，而得標題化合物286 ，為褐色固體(1.52克，7.63毫莫耳，79%)。MS(m/z)：200.1(M+H).

步驟2. 3-(二甲基磷醯基)苯胺(287 )

於化合物286 (1.5克，7.5毫莫耳)在甲醇(62毫升)與水(12毫升)中之溶液內，在氮氣及室溫下，添加氯化銨(0.604克，11.3毫莫耳)與鐵(1.68克，30.1毫莫耳)。將所形成之混合物加熱至回流，歷經30分鐘，然後經過矽藻土過濾。以甲醇沖洗矽藻土墊。合併濾液及洗液，並濃縮，且使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；25M管柱)，而得化合物287 ，為黃色固體(1.27克，7.51毫莫耳，定量)。MS(m/z)：170.1(M+H).

步驟3. (6-(7-(4-(3-(3-(二甲基磷醯基)苯基)脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(288 )

於化合物126 (圖式6或9)(200毫克，0.381毫莫耳)在無水四氫呋喃(8毫升)中之溶液內，在氮氣及-20℃下，添加氯甲酸4-硝基苯酯(115毫克，0.572毫莫耳)。將反應混合物於-20℃下攪拌2小時。在-20℃下，添加3-(二甲基磷醯基)苯胺287 (97毫克，0.57毫莫耳)與N,N'-二異丙基乙胺(0.200毫升，1.14毫莫耳)在無水四氫呋喃(2毫升)與無水N,N'-二甲基甲醯胺(2毫升)之混合物中之溶液，使反應混合物慢慢溫熱至室溫，並再持續攪拌16小時。於減壓下移除溶劑；將殘留物以醋酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨水溶液洗滌，以無水硫酸鈉脫水乾燥，及濃縮。經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；25M管柱)，獲得化合物288 (230毫克，0.32毫莫耳，84%)。MS(m/z)：720.4(M+H).

步驟4.　1-(3-(二甲基磷醯基)苯基)-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(289 )

於化合物288 (230毫克，0.32毫莫耳)在二氯甲烷(7毫升)中之溶液內，在氮氣及室溫下，添加三氟醋酸(2.5毫升，32毫莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌16小時。在減壓下移除溶劑，並添加飽和碳酸氫鈉水溶液。將水相以醋酸乙酯萃取(3x)，濃縮合併之有機層。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；25M管柱)，而得化合物289 ，為灰白色固體(75.3毫克，0.122毫莫耳，38.0%)。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：9.15(s,1H),9.06(s,1H),8.57(d,J=1.6 Hz,1H),8.53(d,J=5.6 Hz,1H),8.31(s,1H),8.23(d,J=8.0 Hz,1H),7.92-7.83(m,2H),7.76(dd,J=13.2,2.4 Hz,1H),7.67-7.62(m,1H),7.49-7.42(m,2H),7.41-7.33(m,1H),7.32-7.26(m,1H),6.67(d,J=5.6 Hz,1H),3.78(s,2H),3.54-3.34(2H,隱藏在水信號下方),3.24(s,3H),2.65(t,J=5.6 Hz,2H),1.65(d,J=13.2 Hz,6H). MS(m/z)：620.4(M+H).

實例180

1-(4-(二甲基磷醯基)苯基)-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(290 )

化合物290 係藉由按照上文關於化合物289 (實例179 )所述之程序獲得。化合物290 及化合物295-300之特徵鑒定係提供於表1中。

圖式16

實例202

步驟1.(2-(7-(2-氟基-4-(3-異丙基脲基)苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(314 )

於微波反應器中，將苯胺46 (200毫克，0.379毫莫耳)與2-異氰酸基丙烷(64.5毫克，0.758毫莫耳)之反應混合物加熱至100℃，歷經15分鐘。將反應混合物直接裝填至Biotage(Silicycle，HR，12克管柱，50-100% EA/己烷，然後為MeOH/EA，0-20%)上。經收集之溶離份係獲得所要之產物314 (150毫克，0.245毫莫耳，64.6%產率)，為白色固體。MS：613(MH)⁺ ，極弱信號。

步驟2.1-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-3-異丙基脲(315 )

將脲314 (150毫克，0.245毫莫耳)與TFA(1毫升，12.98毫莫耳)在DCM(20毫升)中之溶液於室溫下攪拌4小時，並濃縮。使殘留物在EtOAc/NaHCO₃ 飽和溶液之間作分液處理。藉過濾收集固體，且與有機層合併。濃縮混合物，並使殘留物經由Biotage純化(EA/MeOH 0-40%，12克Silicycle HR管柱)。收集溶離份，獲得所要之產物315 (70毫克，0.137毫莫耳，55.8%產率)，為白色固體。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)1H：8.67(s,1H),8.48(d,1H,J=5.5 Hz),7.91(s,1H),7.65(dd,1H,J1=13.7 Hz,J2=2.6 Hz),7.32(t,1H,J=9.0 Hz),7.07(m,2H),6.63(d,1H,J=5.5 Hz),6.13(d,1H,J=7.6 Hz),4.04(s,bi,2H),3.08(s,3H),3.72(m,1H),3.47(t,2H,J=5.2 Hz),3.24(s,3H),2.94(m,2H),1.07(s,3H),1.05(s,3H)(假定為單-TFA鹽).MS：513.4(MH)⁺

步 驟4. 4-(2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2- b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯胺(319)

步驟1. 2-溴基-5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶(316)

於6-溴基吡啶-3-羧甲醛(25克，134毫莫耳)在甲苯(130毫升)中之溶液內，添加1,3-丙二醇(20.45克，269毫莫耳)與10-樟腦磺酸(3.12克，13.44毫莫耳)。將反應混合物加熱至回流，歷經50分鐘，伴隨著所釋出水之共沸移除，冷卻至室溫，及濃縮。使殘留物於EtOAc(150毫升)與飽和NaHCO₃ 水溶液(100毫升)之間作分液處理。收集有機相，並以EtOAc(2 x 150毫升)萃取水相。將合併之有機離份以鹽水(100毫升)洗滌，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮，產生褐色固體，將其以Et₂ O與己烷(10/200毫升)研製，而得中間物316 (27.7克，84%產率)，為米黃色固體。MS(m/z)：244.1,246.1(M+H).¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.40(d,J=2.4 Hz,1H),7.35(dd,J=8.0,2.4 Hz,1H),7.66(dd,J=8.0,0.4 Hz,1H),5.61(s,1H),4.15(ddd,J=11.8,5.0,1.2 Hz,2H),3.98-3.91(m,2H),2.028-1.95(m,1H),1.46(d,五重峰,J=13.2,1.2 Hz,1H).

步驟2. 2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶-2-基)-7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶(317)

於7-氯基噻吩并[3,2-b]吡啶(1 )(13.33克，79毫莫耳)在THF(204毫升)中之溶液內，在-5℃/-10℃下，添加n-BuLi(2.5M，在己烷中，31.6毫升，79毫莫耳)，歷經50分鐘。30分鐘後，於-5℃/-10℃下，添加氯化鋅在醚中之溶液(1M，79毫升，79毫莫耳)，歷經50分鐘，並使反應混合物溫熱至室溫。45分鐘後，添加THF(28毫升)中之2-溴基-5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶(316 )(15.98克，65.5毫莫耳)與肆三苯膦鈀(2.27克，1.964毫莫耳)，且將混合物加熱至回流，歷經2小時，冷卻至室溫，及濃縮。將殘留物以DCM(600毫升)、H₂ O(500毫升)及NH₄ OH(100毫升)稀釋，於室溫下攪拌1小時，並分離液相。以DCM(2 x 100毫升)萃取水相；使合併之有機相以無水Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將殘留物以MTBE(150毫升)研製，而得中間物317(12.796克，59%產率)，為米黃色固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.66-8.65(m,2H),8.43(d,J=0.8 Hz,1H),8.30(d,J=8.4 Hz,1H),7.94(d,J=8.4 Hz,1H),7.59(dd,J=5.0,0.6 Hz,1H),5.68(s,1H),4.19(dd,J=11.6,4.8 Hz,2H),3.99(t,J=11.4 Hz,2H),2.07-2.01(m,1H),1.49(d,J=13.2 Hz,1H).MS(m/z)：333.1(M+H).

步驟3.　2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶-2-基)-7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶(318)

於317 (22.48克，67.5毫莫耳)在苯基醚(65毫升)中之懸浮液內，添加碳酸鈉(14.32克，135毫莫耳)與2-氟基-4-硝基酚(15.92克，101毫莫耳)。將反應混合物在180℃下加熱2小時，冷卻至40℃，以DCM(300毫升)稀釋，於室溫下攪拌15分鐘，及過濾。收集濾液，並濃縮至最小體積；添加Et₂ O(200毫升)，且將所形成之懸浮液攪拌30分鐘。藉過濾收集固體物質，而得中間物318 (25.20克，55.6毫莫耳，82%產率)，為米黃色固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.63-8.62(m,2H),8.48(dd,J=10.6,2.6 Hz,1H),8.43(s,1H),8.31(d,J=8.0 Hz,1H),8.21(dt,J=8.8,1.2 Hz,1H),7.94(dd,J=8.4,2.0 Hz,1H),7.71(t,J=8.6 Hz,1H),6.98(d,J=5.2 Hz,1H),5.67(s,1H),4.19(dd,J=10.8,5.2 Hz,2H),3.98(td,J=12.0,2.0 Hz,2H),2.08-1.99(m,1H),1.46(d,J=13.6 Hz,1H). MS(m/z)：454.2(M+H).

步驟4. 4-(2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯胺(319)

方法A

於318 (10克，22.05毫莫耳)在EtOH(216毫升)與水(108毫升)中之懸浮液內，添加鐵粉(10.47克，187毫莫耳)與氯化銨(1.015克，18.97毫莫耳)。將混合物加熱至回流，歷經30分鐘，趁熱過濾，並以醚(200毫升)洗滌固體。合併濾液與洗液，及濃縮，而得標題化合物319 (9.62克，99%產率)，為米黃色固體。將此物質使用於下一步驟(圖式18)中，無需另外純化。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.64(d,J=2.0 Hz,1H),8.51(dd,J=5.6,2.0 Hz,1H),8.34(s,1H),8.28(dd,J=8.0,0.8 Hz,1H),7.93(dd,J=8.4,2.0 Hz,1H),7.13(t,J=9.0 Hz,1H),6.61(dd,J=5.4,0.6 Hz,1H),6.54(dd,J=13.2,2.4 Hz,1H),6.46(ddd,J=8.8,2.8,0.6 Hz,1H),5.67(s,1H),5.56(s,2H),4.19(dd,J=10.6,5.0 Hz,2H),3.98(td,J=12.0,2.5 Hz,2H)，2.09-1.99(m,1H),1.49(dt,J=13.2,1.3Hz,1H).MS(m/z)：424.1(M+H).

方法B

於4-胺基-2-氟基酚(7.42克，58.4毫莫耳)在DMSO(65毫升)中之溶液內，添加第三-丁醇鉀(7.75克，69.0毫莫耳)。30分鐘後，添加中間物317 (17.67克，53.1毫莫耳)，並將反應混合物在100℃下加熱1.5小時，冷卻至室溫，於40-45℃下傾倒在水(300毫升)中，且攪拌30分鐘。藉過濾收集固體，以水(2 x 30毫升)洗滌，及乾燥2小時。將此物質以醚(60毫升)研製，而得標題化合物319 (19.80克，88%產率)，為褐色固體。MS(m/z)：424.1(M+H).

實例203

1-(4-(2-(5-5,8,11,14-四氧-2-氮十五基吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-環丙基脲(323)

步驟1：1-(4-(2-(5-(1,3-二氧陸圜-2-基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-環丙基脲(320)

於100毫升圓底燒瓶中，添加無水四氫呋喃(55毫升)中之319 (0.55克，1.3毫莫耳)與DIPEA(0.91毫升，5.2毫莫耳)，獲得無色溶液。使反應混合物冷卻至0℃，然後添加三光氣(0.154克，0.520毫莫耳)。將反應混合物在0℃下攪拌1小時，接著添加環丙基胺(1.8毫升，26毫莫耳)。最後，將反應混合物於室溫下攪拌3小時，然後濃縮。使殘留物在水與醋酸乙酯之間作分液處理，而造成濃厚白色固體形成。將其藉抽氣過濾單離，以水與醋酸乙酯沖洗，及在真空中乾燥，獲得粗製320 (0.65克，1.2毫莫耳，99%產率)，使用之而無需進一步純化。MS：507.2(M+H).

步驟2：1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-甲醯基吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(321)

將320 (0.65克，1.3毫莫耳)在5:2:1丙酮/水/TFA(100毫升)中之懸浮液加熱至回流，歷經6小時。然後，使混合物冷卻，並濃縮。使所形成之固體殘留物懸浮於水中，藉抽氣過濾單離，以醋酸乙酯洗滌，及在真空中乾燥，產生321 (0.49克，1.1毫莫耳，85%產率)，將其使用於下一步驟中，無需進一步純化。MS：449.0(M+H).

步驟3. 2,5,8,11-四氧十三烷-13-胺(322)

使四乙二醇單甲基醚(10.0毫升，47.5毫莫耳)、鄰苯二甲醯亞胺(7.20克，48.9毫莫耳)及三苯膦(12.8克，48.8毫莫耳)懸浮於無水四氫呋喃(200毫升)中，獲得無色懸浮液。藉注射器逐滴添加偶氮二羧酸二乙酯(8.0毫升，50.5毫莫耳)，並將混合物在室溫下攪拌18小時。然後添加乙醇(50毫升)，將混合物再攪拌30分鐘，接著在減壓下濃縮。使殘留物溶於1:1醋酸乙酯/己烷(100毫升)中，在0℃下攪拌2小時，並將所形成之白色沉澱物藉抽氣過濾移除。使濾液濃縮(13.5克，40.0毫莫耳，84%產率)，且使用於下一步驟中，無需進一步純化。

使上述粗產物溶於乙醇(100毫升)中，獲得無色溶液。添加肼水合物(2.3毫升，40毫莫耳)，並將混合物加熱至回流，歷經4小時。然後，使其冷卻，添加濃HCl(10.0毫升)，且使混合物再回流1小時。接著，使其冷卻至室溫，藉抽氣過濾移除白色沉澱物，及濃縮濾液。使殘留物於水與乙醚之間作分液處理。以醚萃取水相(拋棄有機相，其含有大部份PPh₃ O，藉MS)，然後以3M NaOH(50毫升)鹼化至pH=13。以氯化鈉使水相飽和，並以二氯甲烷(~10 x 50毫升)重複萃取。使有機萃液脫水乾燥(MgSO₄ )，及濃縮，而產生322 (7.0克，33.8毫莫耳，84%產率，71%，歷經2個步驟)。將其使用於後續步驟中，無需進一步純化。MS(m+1)=208.1.

步驟4：1-(4-(2-(5-5,8,11,14-四氧-2-氮十五基吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-環丙基脲(323).

於羧醛321 (0.45克，1.0毫莫耳)與胺322 (1.4克，6.75毫莫耳)在二氯甲烷(75毫升)中之懸浮液內，添加醋酸(0.12毫升，2.0毫莫耳)。將反應混合物攪拌1小時，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(0.64克，3.0毫莫耳)，並將所形成之混合物攪拌18小時。接著，使混合物於水與二氯甲烷之間作分液處理，以1M NaOH與鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及在減壓下濃縮。將殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-75% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾。使經純化之產物(含有一部份甲酸，得自HPLC)於溫熱二氯甲烷與1M NaOH之間作分液處理。使有機相脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而得標題化合物323 (0.264克，0.413毫莫耳，41.1%產率)。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：8.80(s,1H)；8.57(s,1H)；8.51(d,J=5.5,1H)；8.31(s,1H)；8.23(d,J=8.0,1H)；7.89(dd,J=8.0,1.5,1H)；7.73(dd,J=13.5,2.2,1H)；7.38(t,J=9.0,1H)；7.20(d,J=8.2,1H)；6.67(d,J=2.7,1H)；6.64(d,J=5.5,1H)；3.78(s,2H)；3.56-45(m,12H)；3.41(t,J=5.7,2H)；3.21(s,3H)；2.66(d,J=5.7,2H)；2.58-2.51(m,1H)；0.66-0.62(m,2H)；0.44-0.41(m,2H). LRMS：640.5(M+H).

圖式19

實例204

(S)-2-胺基-6-((6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-bJ吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲胺基)己酸(324)

於321 (0.26克，0.58毫莫耳)與N-Boc-離胺酸(1.1克，4.6毫莫耳)在二氯甲烷(75毫升)中之懸浮液內，添加醋酸(0.066毫升，1.2毫莫耳)。將反應混合物攪拌1小時，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(0.37克，1.7毫莫耳)，並將所形成之混合物攪拌18小時。接著，使混合物於水與二氯甲烷之間作分液處理，且藉由經過矽藻土抽氣過濾移除固體沉澱物。產物係大部份在固體濾餅中，故藉由以1:1二氯甲烷/甲醇洗滌使其溶解。濃縮此溶液，並使殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-75% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾，而產生Boc-保護之產物。使其溶於二氯甲烷(75毫升)與三氟醋酸(3毫升)中，並在室溫下攪拌3小時。濃縮混合物，且將殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-75% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾，而產生標題化合物324 (44毫克，69%產率)。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：9.02(s,1H)；8.66(s,1H)；8.53(d,J=5.3,1H)；8.35(s,1H)；8.28(d,J=8.4,1H)；7.98(d,J=6.3,1H)；7.72(dd,J=13.5,2.3,1H)；7.37(t,J=9.0,1H)；7.21(d,J=10.0,1H)；6.89(s,1H)；6.68(d,J=5.3,1H)；4.00(s,2H)；2.75-2.70(m,2H)；2.55-2.52(m,1H)；2.45(m,1H)；1.70-1.30(m,6H)；0.67-0.62(m,2H)；0.44-0.40(m,2H). LRMS：579.5(M+H).

實例205

1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲

步驟1：6-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)菸鹼醛(325) .

將318 (2.64克，5.82毫莫耳)在80%醋酸水溶液(42毫升)中之懸浮液於90℃下加熱18小時。使反應混合物冷卻至室溫，並以水稀釋。藉抽氣過濾收集所形成之沉澱物。將固體轉移至圓底燒瓶，藉由與甲苯共沸蒸餾(4次)移除殘留水，且使固體在真空中乾燥，產生325 (1.76克，76%)。LRMS(M+H)：396.3

步驟2：2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺(326)

使二乙二醇單甲基醚(9.8毫升，83毫莫耳)、鄰苯二甲醯亞胺(14.7克，100毫莫耳)及三苯膦(26.2克，100毫莫耳)懸浮於無水四氫呋喃(200毫升)中，獲得無色懸浮液(參閱圖式18，步驟3)。藉注射器逐滴添加偶氮二羧酸二乙酯(15.8毫升，100毫莫耳)，並將混合物於室溫下攪拌18小時。然後添加乙醇(50毫升)，將混合物再攪拌30分鐘，接著在減壓下濃縮。使殘留物溶於1:1醋酸乙酯/己烷(100毫升)中，在0℃下攪拌2小時，並藉抽氣過濾移除所形成之白色沉澱物。使濾液濃縮，且使用於下一步驟中，無需進一步純化。

使上述粗產物溶於乙醇(200毫升)中，獲得無色溶液。添加肼水合物(5.1毫升，104毫莫耳)，並將混合物加熱至回流，歷經4小時。然後，使其冷卻，添加濃HCl(16毫升)，且使混合物再回流1小時。接著，使其冷卻至室溫，藉抽氣過濾移除白色沉澱物，及濃縮濾液。使殘留物於水與醋酸乙酯之間作分液處理。將水相以醋酸乙酯萃取(拋棄有機相，其含有大部份PPh₃ O，藉MS)，然後以3M NaOH(50毫升)鹼化至pH=13。以氯化鈉使水相飽和，並以二氯甲烷(~10 x 50毫升)重複萃取。使有機萃液脫水乾燥(MgSO₄ )，及濃縮，而產生326 (6.6克，56毫莫耳，67%產率，歷經2個步驟)。將其使用於後續反應中，無需進一步純化。MS(m+1)=120.2.

步驟3：N-((6-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺(327).

將羧甲醛325 (0.50克，1.3毫莫耳)、胺326 (0.30克，2.5毫莫耳)及醋酸(0.14毫升，2.5毫莫耳)在二氯甲烷(20毫升)中之懸浮液於室溫下攪拌1小時。然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(0.80克，3.8毫莫耳)，並在室溫下攪拌16小時。接著添加另外之三乙醯氧基硼氫化鈉(1.0克)，且持續攪拌2小時。使反應混合物於二氯甲烷與1N NaOH之間作分液處理。藉過濾移除黃色懸浮液，並以二氯甲烷與1N NaOH沖洗。將有機萃液以無水硫酸鈉脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；Snap 100克管柱)，而產生327 (280毫克，0.562毫莫耳，44%)，為黃色固體。LRMS(M+H)：499.4

步驟4：(6-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(328).

於二氯甲烷(100毫升)中之化合物327 (0.28克，0.56毫莫耳)內，在室溫下，添加三乙胺(0.25毫升，1.7毫莫耳)、DMAP(0.017克，0.14毫莫耳)及Boc₂ O(0.26克，1.1毫莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時，然後，將混合物相繼以水、飽和氯化銨及鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉矽膠層析純化(醋酸乙酯)，而得化合物328 (0.20克，60%產率)。LRMS(M+H)：599.5

步驟5：(6-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(329)

於MeOH(75毫升)中之硝基化合物328 (0.20克，0.33毫莫耳)內，添加水(5毫升)中之鐵粉(0.37克，6.7毫莫耳)與氯化銨(0.089克，1.7毫莫耳)。將所形成之混合物加熱至回流，歷經4小時，然後冷卻，經過矽藻土過濾，及濃縮。使殘留物在醋酸乙酯與水之間作分液處理，以鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。將產物329 (0.18克，95%)以粗製使用於下一步驟中。LRMS(M+H)：569.5

步 驟6：(6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(330)

於四氫呋喃(25毫升)中之胺330 (0.17克，0.30毫莫耳)與DIPEA(0.16毫升，0.12克，0.90毫莫耳)內，在0℃下，添加三光氣(0.035克，0.12毫莫耳)，並將所形成之溶液於0℃下攪拌1小時。添加環丙基胺(0.26克，4.6毫莫耳)，且使混合物溫熱至室溫，並攪拌18小時，然後在減壓下濃縮。使殘留物於二氯甲烷與水之間作分液處理，將有機相以飽和NH₄ Cl_(水溶液) 與鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮，產生粗製330 (0.15克，77%產率)。LRMS(M+H)：652.6

步驟7：1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-(2-甲氧基乙氧基) 乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(331).

使化合物330 (0.15克，0.23毫莫耳)溶於二氯甲烷(20毫升)與三氟醋酸(0.9毫升)中，並將反應混合物在室溫下攪拌12小時。濃縮混合物，且使殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(40-80% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾。將經純化之產物(含有一部份甲酸，得自HPLC)於溫熱二氯甲烷與1M NaOH之間作分液處理。使有機相脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而得標題化合物331 (0.110克，72%產率)(單-TFA鹽，儘管以NaOH處理)。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：8.84(s,1H)；8.65(d,J=1.3,1H)；8.53(d,J=5.5,1H)；8.37(s,1H)；8.30(d,J=8.2,1H)；7.99(dd,J=8.2,2.0,1H)；7.73(dd,J=13.7,2.5,1H)；7.38(t,J=9.0,1H)；7.22-7.18(m,1H)；6.68-6.64(m,2H)；4.03(s,2H)；3.60-3.52(m,4H)；3.48-3.44(m,2H)；3.25(s,3H)；2.92-2.88(m,2H)；2.55(七重峰,J=3.1,1H)；0.69-0.62(m,2H)；0.44-0.40(m,2H).LRMS：(M+H)：552.5.

圖式21

實例206與207

4-((6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲胺基)丁酸(332)與1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-酮基四氫吡咯-1-基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(333)

於羧甲醛321 (0.20克，0.45毫莫耳)與4-胺基丁酸(1.0克，9.7毫莫耳)在二氯甲烷(75毫升)中之懸浮液內，添加醋酸(0.051毫升，0.89毫莫耳)。將反應混合物攪拌1小時，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(0.38克，1.8毫莫耳)，並將所形成之混合物攪拌18小時。接著，使混合物在水與二氯甲烷之間作分液處理，且藉由經過矽藻土抽氣過濾移除固體沉澱物。MS分析顯示經環化之產物333 係在濾液中，同時酸產物332 係大部份在固體濾餅中。使得自濾液之有機相濃縮，並將殘留物藉矽膠層析純化(10% MeOH/醋酸乙酯)，以提供經純化之333 (35毫克，15%產率)。藉由以1:1二氯甲烷/甲醇洗滌使矽藻土濾餅中之產物溶解。濃縮此溶液，且使殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-75%M_e OH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾，而得酸332 (44毫克，69%產率)。化合物332 與333 之特徵鑒定係提供於下文。

化合物332 (實例206)：¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：9.23(s,1H)；8.58(s,1H)；8.51(d,J=5.4,1H)；8.36(s,1H)；8.32(s,1H)；8.24(d,J=8.2,1H)；7.91(dd,J=8.4,2.0,1H)；7.74(dd,J=13.7,2.3,1H)；7.37(t,J=9.0,1H)；7.22(d,J=9.0,1H)；6.63(d,J=5.3,1H)；3.79(s,2H)；2.56(t,J=5.1,2H)；2.47-2.43(m,1H)；2.27(t,J=7.2,2H)；1.65(五重峰,J=6.7,2H)；0.66-0.61(m,2H)；0.44-0.40(m,2H).LRMS：(M+H) 536.4.

化合物333 (實例207)：¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：8.76(s,1H)；8.52(s,1H)；8.52(d,J=5.5,1H)；8.35(s,1H)；8.26(d,J=8.2,1H)；7.79(dd,J=8.2,2.1,1H)；7.73(dd,J=13.5,2.5,1H)；7.38(t,J=9.2,1H)；7.20(d,J=8.4,1H)；6.65(d,J=5.3,1H)；6.62(s,1H)；4.46(s,2H)；3.30-3.20(t,2H,被水吸收峰遮蔽？)；2.55(五重峰,J=3.3,1H)；2.31(t,J=7.8,2H)；1.95(五重峰,J=7.6,2H)；0.67-0.62(m,2H)；0.45-0.40(m,2H). LRMS：(M+H) 518.4

圖式22

實例208與209

步驟1.(S)-1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((1-甲氧基丙-2-基胺基)甲基)-吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(334 )

於羧甲醛321 (336毫克，0.749毫莫耳)、(S)-1-甲氧基-2-胺基丙烷(200毫克，2.248毫莫耳)及醋酸(68毫克，1.124毫莫耳)在DCM(20毫升)中之經攪拌懸浮液內，在室溫及氮氣下，添加NaBH(OAc)₃ (418毫克，1.873毫莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌過夜，並以10% HCl溶液使反應淬滅。分離液層；收集水層，以DCM洗滌兩次，且以4N NaOH(pH 12)鹼化，以形成懸浮液，將其攪拌30分鐘。藉過濾收集固體，以水沖洗，及風乾，並於矽膠上藉急驟式管柱層析純化(溶離劑2%氫氧化銨在MeOH/DCM：10/90中)，而得標題化合物334 (182毫克，0.35毫莫耳，46%產率)，為黃色絨毛狀固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.71(s,1H),8.58(d,J=1.6 Hz,1H),8.51(d,J=5.5 Hz,1H),8.31(s,1H),8.23(d,J=8.2 Hz,1H),7.91(dd,J=8.2,2.2 Hz,1H),7.73(dd,J=13.6,2.4 Hz,1H),7.38(t,J=9.0 Hz,1H),7.23-7.17(m,1H),6.64(d,J=5.5 Hz,1H),6.57(bd,J=2.7 Hz,1H),3.84(d,J=14.5 Hz,1H),3.78(d,J=14.5 Hz,1H),3.27(dd,J=9.4,6.3 Hz,1H),3.24(s,3H),3.19(dd,J=9.2,5.5 Hz,1H),2.81-2.71(m,1H),2.59-2.51(m,1H),2.36-2.10(m,1H),0.98(d,J=6.3 Hz,3H),0.69-0.62(m,2H),0.46-0.40(m,2H).MS(m/z)：522.4(M+H).

步驟2.　(S)-N-((6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(1-甲氧基丙-2-基)乙醯胺(335 )

將脲334 (66毫克，0.127毫莫耳)在醋酸酐(2毫升)中之懸浮液於室溫下攪拌2天。藉由添加甲醇與水使反應混合物淬滅，並以AcOEt分配。在分離後，收集有機層，以水、1N NaOH(x4)、水及鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製固體於矽膠上藉急驟式管柱層析純化(溶離劑2%氫氧化銨在MeOH/DCM：05/90至10/90中)，而得標題化合物335 (46毫克，0.08毫莫耳，64%產率)，為灰白色絨毛狀固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：旋轉異構物之混合物,8.70(s,1H),8.58-8.48(m,2H),8.34與8.30(2s,1H),8.27與8.19(2d,J=8.3 Hz,1H),7.85-7.69(m,2H),7.38(t,J=9.0 Hz,1H),7.20(bd,J=9.0 Hz,1H),6.67-6.54(m,2H),4.74-4.16(m,3H),3.41-3.22(m,2H),3.15與3.13(2s,3H),2.59-2.52(m,1H),2.16與1.96(2s,3H),1.09與1.04(2d,J=6.9 Hz,3H),0.72-0.58(m,2H),0.50-0.36(m,2H). MS(m/z)：564.4(M+H).

實例210

N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)環丙烷羧醯胺(337 )

步驟1.　(6-(7-(4-(環丙烷羧醯胺基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(336 )

於苯胺126 (200毫克，0.36毫莫耳)在DCM(10毫升)中之溶液內，在氮氣及0℃下，添加DIPEA(127微升，0.72毫莫耳)與環丙基氯化碳醯(50微升，0.54毫莫耳)。使反應混合物慢慢溫熱至室溫，並於室溫下攪拌過夜。將反應混合物在AcOEt中稀釋，且以飽和氯化銨水溶液(x4)、1N NaOH(x2)、水及鹽水連續洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製殘留物在最少的於己烷中AcOEt內共沉澱。藉過濾收集固體，以己烷沖洗，風乾，及在高真空下乾燥，而得標題化合物A (定量產率)，為淡褐色固體。MS(m/z)：593.4(M+H).

步驟2. N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)環丙烷羧醯胺(337 )

於醯胺336 (215毫克，粗製混合物)在DCM(10毫升)中之溶液內，添加TFA(2毫升)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，濃縮，於水與AcOEt之間作分液處理，並以1N NaOH溶液鹼化。在分離液層後，收集有機層，以1N NaOH(x2)、水及鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上藉急驟式管柱層析純化(溶離劑2%氫氧化銨在MeOH/DCM：05/95至15/95中)，而得標題化合物336 (87毫克，0.177毫莫耳，48%產率)，為淺橙色黏性固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：10.57(s,1H),8.57(d,J=1.6 Hz,1H),8.52(d,J=5.5 Hz,1H),8.32(s,1H),8.23(d,J=8.0 Hz,1H),7.93-7.83(m,2H),7.47(t,J=8.9 Hz,1H),7.41(dd,J=8.9,2.0,1H),6.66(d,J=5.3 Hz,1H),3.78(s,2H),3.41(t,J=5.6 Hz,2H),3.24(s,3H),2.66(t,J=5.7 Hz,2H),1.79(五重峰,J=6.2 Hz,1H),0.90-0.80(m,4H),一個NH係消失. MS(m/z)：493.4(M+H).

實例340與341

(6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸甲酯(340)與(R)-2-胺基-N-((6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁醯胺(341)

步驟1：(6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(338)

於四氫呋喃(60毫升)中之胺126 (0.24克，0.46毫莫耳)內，在0℃下，添加三光氣(0.054克，0.18毫莫耳)，並將所形成之溶液於0℃下攪拌1小時。相繼添加DIPEA(0.40毫升，0.30克，2.3毫莫耳)與環丙基胺(0.26克，4.6毫莫耳)，且使混合物溫熱至室溫，並攪拌3小時，然後在減壓下濃縮。使殘留物於二氯甲烷與水之間作分液處理，收集有機相，以飽和NH₄ Cl_(水溶液) 與鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物在矽膠上藉急驟式層析純化(醋酸乙酯至5%甲醇/醋酸乙酯)，產生338 (0.19克，67%產率)。MS(m/z)：608.4(M+H).

步驟2：1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(339)

於二氯甲烷(40毫升)中之338 (0.19克，0.31毫莫耳)內，添加TFA(3毫升)。將溶液攪拌6小時，然後濃縮。使殘留物在98:2二氯甲烷/甲醇混合物與1M NaOH(水溶液)之間作分液處理，以鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將所形成之油狀物以乙醚與醋酸乙酯研製，提供339 (0.13克，82%產率)。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：¹ H：8.80(s,1H)；8.57(s,1H)；8.51(d,J=5.5,1H)；8.31(s,1H)；8.23(d,J=8.0,1H)；7.89(dd,J=8.0,1.5,1H)；7.73(dd,J=13.5,2.2,1H)；7.38(t,J=9.0,1H)；7.20(d,J=8.2,1H)；6.66-6.62(m,2H)；3.78(s,2H)；3.41(t,J=5.7,2H)；3.24(s,3H)；2.65(d,J=5.7,2H)；2.57-2.51(m,1H)；0.66-0.62(m,2H)；0.44-0.41(m,2H). MS(m/z)：508.3(M+H).

步驟3.(6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸甲酯(340)

於化合物339 (220毫克，0.433毫莫耳)與氯甲酸甲酯(50.2微升，0.65毫莫耳)在THF(4毫升)中之溶液內，添加DIPEA(227微升，1.30毫莫耳)，並將混合物在室溫下攪拌18小時。於減壓下移除溶劑，以MeOH研製殘留物，並藉過濾收集固體懸浮液，且經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；Snap 25克管柱)，而得化合物340 (123.1毫克，0.218毫莫耳，50.2%產率)，為米黃色固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：8.70(s,1H),8.56-8.50(m,2H),8.33(s,1H),8.25(d,J=8.0 Hz,1H),7.84-7.77(m,1H),7.73(dd,J=13.6,2.4 Hz,1H),7.38(t,J=9.2 Hz,1H),7.20(dd,J=8.8,1.2 Hz,1H),6.65(d,J=5.6 Hz,1H),6.56(d,J=2.8 Hz,1H),4.54(s,2H),3.64(s,2H),3.44(s,3H),3.22(s,2H),2.59-2.51(m,1H),0.69-0.62(m,2H),0.46-0.40(m,2H). MS(m/z)：566.4(M+H).

步驟4：(R)-2-胺基-N-((6-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁醯胺(341)

於339 (48毫克，0.095毫莫耳)、N-Boc-纈胺酸(41毫克，0.19毫莫耳)及DIPEA(0.083毫升，0.47毫莫耳)在DMF(20毫升)中之溶液內，添加HATU(90毫克，0.236毫莫耳)。將所形成之溶液在室溫下攪拌3小時。使反應混合物於醋酸乙酯與水之間作分液處理，以1M HCl與鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而產生粗製Boc-保護之產物。使此物質溶於二氯甲烷(75毫升)與三氟醋酸(3毫升)中，並在室溫下攪拌3小時。然後濃縮混合物，且將殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-95% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，及凍乾。使殘留物(含有一部份甲酸，得自HPLC)於二氯甲烷與1M NaOH之間作分液處理。使有機相脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而得341 (18毫克，50%產率)，為旋轉異構物之7:3混合物，藉¹ H NMR。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：8.73(s,1H)；8.57-8.51(m,2H)；8.36(s,0.3H)；8.32(s,0.7H)；8，29-8.24(m,1H)；7.84-7.71(m,2H)；7.38(t,J=8.8,1H)；7.21(d,J=8.3,1H)；6.66-6.64(m,1H)；6.59(s,1H)；4.90(d,J=17.6,0.3H)；4.73(d,J=15.6,0.7H)；4.64(d,J=17.1,0.3H)；4.53(d,J=15.6,0.7H)；3.73-3.39(m,5H)；3.25(s,2.2H)；3.22(s,1.1H)；2.58-2.52(m,1H)；1.80-1.70(m,1H)；0.89-0.84(m,6H)；0.68-0.64(m,2H)；0.45-0.41(m,2H).LRMS：(M+H)607.5.

圖式25

實例213與214

N¹ -(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N³ -(3-(甲磺醯基)苯基)丙二醯胺(345 )與N ¹ -(3-氟基-4-(2-(5-((N-(2-甲氧基乙基)乙醯胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-(甲磺醯基)苯基)丙二醯胺(346)

步驟1：3-(4-(2-(5-((第三-丁氧羰基(2-甲氧基乙基)胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基胺基)-3-酮基丙酸甲酯(342)

於化合物126 (480毫克，0.915毫莫耳)與DIPEA(479微升，2.74毫莫耳)在DCM(9毫升)中之溶液內，在室溫下，添加氯化甲基丙二醯(196微升，1.83毫莫耳)。將混合物攪拌18小時。添加飽和氯化銨水溶液，並以DCM萃取水相兩次。將合併之有機層以無水硫酸鈉脫水乾燥，及濃縮。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；Snap 50克管柱)，而得化合物342 (540毫克，0.86毫莫耳，94%產率)，為黃色油。MS(m/z)：625.5(M+H).

步驟2.　3-(4-(2-(5-((第三-丁氧羰基(2-甲氧基乙基)胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基胺基)-3-氧基丙酸(343)

於化合物342 (540毫克，0.864毫莫耳)在THF(12毫升)與水(6毫升)中之溶液內，添加LiOH單水合物(363毫克，8.64毫莫耳)。將混合物在室溫下攪拌48小時，並於減壓下移除THF。將水溶液以水(10毫升)稀釋，且使用1N HCl酸化至pH 4。過濾此懸浮液，並使沉澱物在高真空下乾燥，而得化合物343 (485毫克，0.79毫莫耳，92%產率)，為米黃色固體。MS(m/z)：611.5(M+H).

步驟3與4.　N ¹ -(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-(甲磺醯基)苯基)丙二醯胺(345)

於化合物343 (120毫克，0.197毫莫耳)、3-甲磺醯基苯胺鹽酸鹽(82毫克，0.393毫莫耳)及DIPEA(172微升，0.983毫莫耳)在DMF(4毫升)中之溶液內，添加BOP試劑(261毫克，0.59毫莫耳)，並將混合物在室溫下攪拌18小時。添加飽和氯化銨水溶液，且以醋酸乙酯萃取水相兩次。將合併之有機萃液以鹽水洗滌，以無水硫酸鈉脫水乾燥，及在減壓下移除溶劑。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，甲醇/二氯甲烷；Snap 25克管柱)，而得化合物344 ，為黃色固體(並未作特徵鑒定)，使其溶於DCM(10毫升)中，且以TFA(4.5毫升，59毫莫耳)處理。將混合物在室溫下攪拌18小時。於減壓下移除溶劑，以醋酸乙酯稀釋殘留物，並以1N NaOH萃取有機層。將水相以醋酸乙酯萃取3次，及濃縮合併之有機層。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-30%，甲醇/二氯甲烷；Snap 50克管柱)，而得化合物345 (39毫克，0.059毫莫耳，29.9%產率)，為米黃色固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：10.65(s,1H),10.61(s,1H),8.57(d,J=1.6 Hz,1H),8.52(d,J=5.2 Hz,1H),8.33(s,1H),8.28(s,1H),8.24(d,J=8.0 Hz,1H),7.92-7.85(m,3H),7.66-7.60(m,2H),7.51(t,J=8.8 Hz,1H),7.45(dd,J=9.2,1.6 Hz,1H),6.68(dd,J=5.2,0.8 Hz,1H),3.79(s,2H),3.57(s,2H),3.41(t,J=5.6 Hz,2H),3.24(s,3H),3.21(s,3H),2.66(t,J=5.6 Hz,2H).MS(m/z)：664.5(M+H).

步驟5.N ¹ -(3-氟基-4-(2-(5-((N-(2-甲氧基乙基)乙醯胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N ³ -(3-(甲磺醯基)苯基)丙二醯胺(346)

將化合物345 (18.5毫克，0.028毫莫耳)在醋酸酐(1.31毫升，13.9毫莫耳)中之溶液於室溫下攪拌60小時。在減壓下移除溶劑，並將殘留物以水研製3小時。過濾固體懸浮液，將沉澱物以水沖洗，及在高真空下乾燥，而得化合物346 (6.4毫克，9.07微莫耳，32.5%)，為米黃色固體。¹ H NMR(400 MHz,DMSO-d₆ )δ(ppm)：旋轉異構物之混合物,10.64(s,1H),10.60(s,1H),8.55-8.49(m,2H),8.38-8.21(m,3H),7.91-7.86(m,2H),7.78(td,J=8.8,2.0 Hz,1H),7.66-7.60(m,2H),7.51(t,J=8.8 Hz,1H),7.44(dd,J=9.2,1.6 Hz,1H),6.71-6.67(m,1H),4.71與4.59(2s,2H),3.58-3.23(m,14H),3.21(s,3H),2.13與2.05(2s,3H). MS(m/z)：706.5(M+H).

實例215

N-((2-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)甲烷磺醯胺(349 )

步驟1：(2-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(347 ).

於苯胺46 (400毫克，0.758毫莫耳)之溶液中，添加三光氣(1125毫克，5當量，3.79毫莫耳)與iPr₂ NEt(490毫克，5當量，3.79毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌一小時。添加環丙基胺(6103毫克，141當量，107毫莫耳)，且將反應混合物於室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，然後以DCM稀釋，並以水洗滌。收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及蒸發。使殘留物藉管柱層析純化(溶離劑20% MeOH在EtOAc中)，而得所要之化合物347 ，為黃色油(426毫克，92%產率)。MS(m/z)=611.4(M+H).

步驟2：1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(348 )

於347 (426毫克，0.698毫莫耳)在DCM(10毫升)中之溶液內，添加二氧陸圜中之HCl(0.7毫升，4.01當量，2.80毫莫耳，4M，在二氧陸圜中)，並將反應混合物在室溫下攪拌3小時。以水稀釋混合物，且添加固體NaHCO₃ 。將反應混合物以EtOAc充分萃取，然後，收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉管柱層析純化(溶離劑EtOAc中之25% MeOH至EtOAc中之50% MeOH)，而得所要之化合物348 ，為黃色粉末(211毫克，59%產率)。MS(m/z)=511.4(M+H).

步驟3：N-((2-(7-(4-(3-環丙基脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)甲烷磺醯胺(349 )

於胺348 (61毫克，0.119毫莫耳)在DCM(5毫升)中之懸浮液內，添加氯化甲烷磺醯(20.53毫克，1.5當量，0.179毫莫耳)與iPr₂ NEt(46.3毫克，3當量，0.358毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物以EtOAc稀釋，然後以飽和NH₄ Cl溶液、飽和NaHCO₃ 溶液及鹽水洗滌。收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉管柱層析純化(溶離劑25% MeOH在EtOAc中)，而得所要之化合物349 ，為淡黃色固體(34毫克，48%)。¹ H NMR(d₆ -DMSO)8.27(s,1H),8.10(d,J=5.48 Hz,1H),7.53(s,1H),7.25(m,1H),6.95(t,J=9.0 Hz,1H),6.76(m,1H),6.71(s,1H),6.24(d,J=5.48 Hz,1H),6.14(s,1H),4.06(s,2H),3.49(s,3H),2.72(s,3H),2.63(s,3H),2.12(m,3H),0.23(m,2H),0.00(s,2H).

實例216

步驟1：(2-(7-(4-(3-(2,4-二氟苯基)脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(350 )

於苯胺46 (500毫克，0.948毫莫耳)在DCM(10毫升)中之溶液內，添加2,4-二氟-1-異氰酸基苯(441毫克，3當量，2.84毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌24小時。使混合物濃縮，且經由管柱層析純化(溶離劑10% MeOH在EtOAc中)，而得350 (600毫克，93%)，為白色固體。MS(m/z)=683.7(M+H)

步驟2：1-(2,4-二氟苯基)-3-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(351 )

於350 (600毫克，0.879毫莫耳)在DCM(15毫升)中之溶液內，添加二氧陸圜中之HCl(2毫升，7.17當量，8毫莫耳，4M，在二氧陸圜中)，並將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物以水稀釋，且添加固體NaHCO₃ 。以EtOAc萃取反應混合物，然後，收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。殘留物以EtOAc之研製，獲得所要之化合物351 ，為灰白色固體(314毫克，61%產率)。¹ H NMR(d₆ -DMSO)：10.90(s,1H),8.89(s,1H),8.50(d,J=5.48 Hz,1H),7.98(m,1H),7.95(s,1H),7.72(m,1H),7.41(m,1H),7.28-7.20(m,3H),7.04(m,1H),6.68(d,J=5.28 Hz,1H),4.28(s,2H),3.92(s,3H),3.61(m,2H),3.27(s,3H),3.13(m,2H).

步驟3：(S)-1-(((2-(7-(4-(3-(2,4-二氟苯基)脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)(2-甲氧基乙基)胺基)-3-甲基-1-酮基丁-2-基胺基甲酸第三-丁酯(352 )

於化合物351 (280毫克，0.481毫莫耳)在DMF(10毫升)中之溶液內，添加(S)-2-(第三-丁氧羰基胺基)-3-甲基丁酸(209毫克，2當量，0.961毫莫耳)、iPr₂ NEt(0.252毫升，3當量，0.1.442毫莫耳)及HATU(365毫克，2當量，0.961毫莫耳)，並將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物以EtOAc稀釋，並以水、飽和NaHCO₃ 溶液，然後以鹽水洗滌。收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，接著濃縮。殘留物藉管柱層析之純化(溶離劑20% MeOH在EtOAc中)，獲得所要之化合物352 ，為灰白色固體(200毫克，53%產率)。MS(m/z)=782.7(M+H).

步驟4：(S)-2-胺基-N-((2-(7-(4-(3-(2,4-二氟苯基)脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-3-甲基丁醯胺(353 )

於化合物352 (200毫克，0.256毫莫耳)在DCM(10毫升)中之懸浮液內，添加二氧陸圜中之HCl(0.7毫升，10.95當量，2.80毫莫耳，4M，在二氧陸圜中)，並將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物以水稀釋，且添加固體NaHCO₃ 。以EtOAc萃取反應混合物，然後，收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。殘留物藉管柱層析之純化(溶離劑30% MeOH在EtOAc中)，獲得所要之化合物353 ，為淡黃色粉末(155毫克，89%產率)。¹ H NMR(d₆ -DMSO)9.36(s,1H),8.60(s,1H),8.49(m,1H),8.01(m,1H),7.87(s,1H),7.71(m,1H),7.41(t,J=8.99 Hz,1H),7.31(m,1H),7.20(m,1H),7.02(m,1H),6.98(s,1H),6.65(d,J=5.09 Hz,1H),4.83(d,J=15.65 Hz,1H),4.48(d,J=15.65 Hz,1H),3.81(s,1H),3.80(s,2H),3.40(m,1H),3.39-3.295(m,6H),1.71(m,2H),0.81(m,6H).

實例217

N1-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N3-(2-氟苯基)丙二醯胺(355 )

步驟1.(2-(7-(2-氟基-4-(3-(2-氟苯基胺基)-3-酮基丙醯胺基)苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(354 )

於苯胺46 (300毫克，0.569毫莫耳)、酸2 (224毫克，1.137毫莫耳)及DIPEA(0.397毫升，2.274毫莫耳)在DMF(15毫升)中之溶液內，添加HATU(540毫克，1.422毫莫耳)。將反應混合物在室溫下攪拌16小時，然後於醋酸乙酯與水之間作分液處理；收集有機層，以水、1M NaOH及鹽水洗滌，脫水乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾，及濃縮。使殘留物藉Biotage純化(溶離劑1-30% MeOH/EA，Silicycle 12克管柱)，獲得354 (230毫克，0.325毫莫耳，57.2%產率)，為米黃色固體。TLC：R_f =0.35(溶離劑10% MeOH/EtOAc)

步驟2.　N1-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)-N3-(2-氟苯基)丙二醯胺(355 )

於354 (230毫克，0.325毫莫耳)在DCM(3毫升)中之溶液內，添加TFA(0.5毫升)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜，然後濃縮。使殘留物於EtOAc與NaHCO₃ 飽和溶液之間作分液處理。收集有機層，脫水乾燥，及濃縮。使殘留物經由Biotage純化(0-50% MeOH/EA；10克SNAP管柱)，而得帶紅色固體，使其藉急驟式管柱層析再一次純化(溶離劑MeOH/EA，20-25%)，獲得帶黃色固體，將其以醚研製，而得標題化合物355 (80毫克，0.132毫莫耳，40.5%產率)，為灰白色固體。HNMR(dmso)d(ppm)1H：10.53(s,1H),10.01(s,1H),8.47(d,1H,J=5.5 Hz),7.95(m,1H),7.85-7.81(m,2H),7.46(t,1H,J=8.8 Hz),7.39(d,1H,J=10.9 Hz),7.15-7.09(m,2H),6.91(s,1H),6.65(d,1H,J=5.5 Hz),3.81(s,3H),3.72(s,2H),3.58(s,2H),3.35(t,2H,J=5.6 Hz),3.20(s,3H),2.64(t,2H,J=5.6 Hz).MS：607.2(MH)⁺ .

實例218

2-氟-N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)苯甲醯胺(357 )

步驟1. (2-(7-(2-氟基-4-(2-氟基苯甲醯胺基)苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(356 )

於苯胺46 (300毫克，0.569毫莫耳)在DCM(10毫升)中之溶液內，在0℃下，添加DIPEA(0.199毫升，1.137毫莫耳)與氯化2-氟苯甲醯(135毫克，0.853毫莫耳)，並將此懸浮液於室溫下攪拌過夜。濃縮反應混合物，且使殘留物在EtOAc與水之間作分液處理。收集有機層，脫水乾燥，及濃縮。將殘留物使用Biotage純化(溶離劑EtOAc，25克Silicycle HR管柱)，以提供標題化合物356 (400毫克，0.616毫莫耳，定量產率)，為白色固體。MS：650(MH)+.步驟2. 2-氟-N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)苯甲醯胺(357 )

將356 (400毫克，0.616毫莫耳)與TFA(0.047毫升，0.616毫莫耳)在DCM(15毫升)中之溶液於室溫下攪拌過夜，然後濃縮。使殘留物在EtOAc與NaHCO₃ 飽和溶液之間作分液處理。在兩層中發現產物。合併液層，及濃縮。以MeOH萃取殘留物，並濾出無機固體。濃縮濾液，且將殘留物使用Biotage純化(溶離劑MeOH/EtOAc，10-50%，25克Silicycle管柱)，以提供固體，將其以EtOAc/醚混合物研製，而得358 (40毫克，0.073毫莫耳，11.82%產率)，為白色固體。HNMR：(dmso) d(ppm) 1H：10.77(s,1H),8.51(d,1H,J=5.5 Hz),7.94-7.91(m,2H),7.68-7.63(m,1H),7.60-7.56(m,2H),7.49(t,1H),J=8.8 Hz),7.36-7.30(m,2H),7.15(s,1H),6.70(d,1H,J=5.5 Hz),4.13(s,2H),3.89(s,3H),3.51(t,2H,J=5.3 Hz),3.26(s,3H),3.01(m,2H).MS：550(MH)⁺

實例219

1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-(嗎福啉基甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(360 )

步驟1.　4-((6-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基)嗎福啉(358 )

於羧甲醛321 (0.5克，1.265毫莫耳)在DCM(12.65毫升)中之懸浮液內，添加嗎福啉(0.220毫升，2.53毫莫耳)與醋酸(0.145毫升，2.53毫莫耳)，並將混合物在室溫下攪拌1小時，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(0.804克，3.79毫莫耳)。持續攪拌過夜。接著，使混合物於DCM與1N NaOH之間作分液處理。分離液相；收集有機層，以硫酸鈉脫水乾燥，及濃縮。使殘留物經由Biotage純化(線性梯度0-20%，MeOH/EtOAc；10克SNAP管柱)，而得標題化合物358 (341毫克，0.731毫莫耳，57.8%產率)，為米黃色固體。MS：467(MH)+.

步驟2. 3-氟基-4-(2-(5-(嗎福啉基甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯胺(359 )

將硝基化合物358 (432毫克，0.926毫莫耳)、鐵粉(440毫克，7.87毫莫耳)及氯化銨(42.6毫克，0.796毫莫耳)在水(3.00毫升)與乙醇(6毫升)混合物中之混合物加熱至80℃，歷經30分鐘。然後，使反應混合物趁熱經過矽藻土墊過濾。濃縮濾液，並將殘留物使用Biotage純化(溶離劑0-20%EtOAc/MeOH，10克SNAP管柱)，而得胺359 (136毫克，0.312毫莫耳，33.6%產率)，為白色固體。MS：437(MH)+.

步驟3. 1-環丙基-3-(3-氟基-4-(2-(5-(嗎福啉基甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基)脲(360 )

使苯胺359 (136毫克，0.312毫莫耳)與DIPEA(0.218毫升，1.246毫莫耳)在THF(6毫升)中之溶液冷卻至0℃，然後添加三光氣(46.2毫克，0.156毫莫耳)，並將反應混合物在0℃下攪拌1小時，接著添加環丙基胺(89毫克，1.558毫莫耳)。將反應混合物於室溫下再攪拌3小時，然後濃縮，在水與醋酸乙酯之間作分液處理。形成濃厚固體，將其藉抽氣過濾單離，以水與醋酸乙酯沖洗，及在真空中乾燥。接著，將此物質使用Gilson純化(溶離劑20-95% MeOH/H₂ O，1小時)，而得標題化合物360 (30毫克，0.058毫莫耳，18.53%產率)，為白色固體。¹ H NMR(DMSO-d₆ )d(ppm)¹ H：HNMR 9.16(s,br,1H),8.16(d,1H,J=1.6 Hz),8.11(d,1H,J=5.4 Hz),7.91(s,1H),7.83(d,1H,J=8.2 Hz),7.46(dd,1H,J1=2.1 Hz,J2=8.2 Hz),7.34(dd,1H,J1=2.6 Hz,J2=13.9 Hz),6.97-7.45(m,2H),6.84-6.81(m,1H),6.23(d,1H,J=4.7 Hz),3.18(t,4H),3.14(s,2H),2.15-2.12(m,1H),1.98(m,4H),0.23-0.19(m,2H),0.02-0.005(m,2H). MS：520.4(MH)+.

實例220

1-(4-(2-(4-5,8,11-三氧-2-氮十二基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-(5-甲基異 唑-3-基)脲(368)

步驟1：4-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苯甲醛(362)

使碘基噻吩并吡啶361 (US 2006/0287343)(2.10克，5.05毫莫耳)、4-甲醯基苯基二羥基硼烷(1.51克，10.1毫莫耳)及肆(三苯膦)鈀(0.29克，0.25毫莫耳)溶於無水二氧陸圜(80毫升)中。使氟化銫(0.92克，6.1毫莫耳)與碳酸氫鈉(2.12克，25.2毫莫耳)溶於水(各5毫升)中，並添加至反應混合物中，使其以N₂ 氣流脫氣，然後加熱至回流，歷經3小時，冷卻，及濃縮。使殘留物在醋酸乙酯與水之間作分液處理，而造成濃厚沉澱物。將其藉抽氣過濾單離，並以水與醋酸乙酯沖洗，而得362 (1.92克，96%)。LRMS(M+H)：395.2

步驟2：N,N-(4-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基)-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙胺(364)

將362 (0.90克，2.3毫莫耳)、胺363 (0.93克，5.7毫莫耳)[胺363 已根據關於胺類322 (圖式18)與326 (圖式20)合成所使用之程序合成]及醋酸(0.26毫升，4.6毫莫耳)在二氯甲烷(50毫升)中之懸浮液於室溫下攪拌1小時。然後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(1.45克，6.85毫莫耳)，並將混合物在室溫下攪拌16小時。接著添加另外之三乙醯氧基硼氫化鈉(1.5克)，且持續攪拌2小時。使反應混合物於二氯甲烷與1N HCl之間作分液處理。拋棄有機相。以3M NaOH使水相鹼化(pH=13)，並以二氯甲烷萃取。使有機萃液以無水硫酸鈉脫水乾燥，過濾，及濃縮，而產生364 (0.72克，58%)，為黃色固體。LRMS(M+H)：542.4

步驟3：4-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(365)

於364 (0.72克，1.3毫莫耳)在二氯甲烷(100毫升)中之溶液內，在室溫下，添加DMAP(0.041克，0.33毫莫耳)與Boc₂ O(0.58克，2.7毫莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時，然後，將混合物相繼以水、鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉矽膠層析純化(溶離劑EtOAc，然後為EtOAc中之1% MeOH)，而得化合物365 (0.51克，60%產率)。LRMS(M+H)：642.5

步驟4：4-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(366).

於365 (0.49克，0.76毫莫耳)在MeOH(100毫升)中之溶液內，添加水(5毫升)中之鐵粉(0.43克，7.6毫莫耳)與氯化銨(0.12克，2.3毫莫耳)。將所形成之混合物加熱至回流，歷經4小時，然後，冷卻，經過矽藻土墊過濾，及濃縮。使殘留物在二氯甲烷與水之間作分液處理；收集有機相，以鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉矽膠層析純化(溶離劑2% MeOH在EtOAc中)，獲得366 (0.41克，88%產率)。LRMS(M+H)：612.6

步驟5：4-(7-(2-氟基-4-(3-(5-甲基異 唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3,2-bJ吡啶-2-基)苄基(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)胺基甲酸第三-丁酯(367)

於366 (0.15克，0.25毫莫耳)與DIPEA(0.11毫升，0.080克，0.61毫莫耳)在四氫呋喃(50毫升)中之溶液內，在0℃下，添加三光氣(0.029克，0.098毫莫耳)，並將所形成之溶液於0℃下攪拌1小時。添加3-胺基-5-甲基異唑(0.025克，0.25毫莫耳)，且使混合物溫熱至室溫，並攪拌3小時，然後，以1毫升水使反應淬滅，及在減壓下濃縮。使殘留物於醋酸乙酯與水之間作分液處理；收集有機相，以鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使產物藉矽膠層析純化(溶離劑2% MeOH在EtOAc中)，獲得367 (0.074克，4%產率)。

步 驟7：1-(4-(2-(4-5,8,11-三氧-2-氮十二基苯基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基)-3-(5-甲基異 唑-3-基)脲(368)

於367 (0.074克，0.10毫莫耳)在二氯甲烷(50毫升)中之溶液內，添加三氟醋酸(1.0毫升)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時，然後濃縮，並使殘留物於二氯甲烷與飽和NaHCO₃ 之間作分液處理。收集有機相，以鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。將殘留物藉Gilson逆相HPLC純化(35-75% MeOH/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)，並凍乾。使經純化之產物(含有一部份甲酸，得自HPLC)在二氯甲烷與1M NaOH之間作分液處理。收集有機相，脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而得化合物368 (0.033克，0.052毫莫耳，52%產率)。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：9.71(s,1H)；9.31(s,1H)；8.48(d,J=5.5,1H)；8.01(s,1H)；7.82-7.79(m,2H)；7.73(dd,J=13.1,2.5,1H)；7.46-7.41(m,3H)；7.28-7.26(m,1H)；6.60(d,J=5.5,1H)；6.54(d,J=0.8,1H)；3.75(s,2H)；3.51-3.45(m,8H)；3.41-3.35(m,2H)；3.20(s,3H)；2.63(t,J=5.7,2H)；2.35(d,J=0.6,3H). LRMS(M+H)：636.5

實例221

N-(4-(7-(2-氟基-4-(3-(5-甲基異 唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙醯胺(371)

步驟1：N-(4-(7-(2-氟基-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶- 2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙醯胺(369)

於364 (0.50克，0.92毫莫耳)在無水四氫呋喃(50毫升)中之溶液內，添加醋酸酐(1.0毫升，11毫莫耳)。將反應混合物在室溫下攪拌24小時，然後濃縮。使殘留物於醋酸乙酯與水之間作分液處理；收集有機相，以飽和NaHCO₃ 鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮。將殘留物藉矽膠層析純化(溶離劑EtOAc)，獲得369 (0.36克，67%產率)。LRMS(M+H)：584.4

步驟2：N-(4-(7-(4-胺基-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙醯胺(370).

於369 (0.36克，0.62毫莫耳)在MeOH(100毫升)中之溶液內，添加水(5毫升)中之鐵粉(0.68克，12毫莫耳)與氯化銨(0.13克，2.5毫莫耳)。將所形成之混合物加熱至回流，歷經4小時，然後冷卻，經過矽藻土過濾，及濃縮。使殘留物在二氯甲烷與水之間作分液處理；收集有機相，以鹽水洗滌，以無水硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使產物藉矽膠層析純化(溶離劑2% MeOH在EtOAc中)，而得370 (0.35克，100%產率)。LRMS(M+H)：554.4

步驟3：N-(4-(7-(2-氟基-4-(3-(5-甲基異 唑-3-基)脲基)苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)苄基)-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙醯胺(371)

於370 (0.14克，0.25毫莫耳)與DIPEA(0.11毫升，0.080克，0.61毫莫耳)在四氫呋喃(50毫升)中之溶液內，在0℃下，添加三光氣(0.030克，0.10毫莫耳)，並將所形成之溶液於0℃下攪拌0.5小時。添加3-胺基-5-甲基異唑(0.074克，0.76毫莫耳)，且使混合物溫熱至室溫，並攪拌3小時，然後，以1毫升水使反應淬滅，及在減壓下濃縮。使殘留物於醋酸乙酯與水之間作分液處理；收集有機相，以鹽水洗滌，以MgSO₄ 脫水乾燥，過濾，並濃縮。將產物藉矽膠層析(10% MeOH在EtOAc中)，接著為Gilson逆相HPLC(35-65%乙腈/H₂ O，Aquasil C₁₈ ，30分鐘)純化，及凍乾。使殘留物(含有一部份甲酸，得自HPLC)於二氯甲烷與1M NaOH之間作分液處理。使有機相脫水乾燥(MgSO₄ )，過濾，及濃縮，而得371 (65毫克，38%產率)，為旋轉異構物之2:1混合物，藉¹ H NMR。¹ H NMR(DMSO-d₆ )δ(ppm)¹ H：9.64(s,1H)；9.19(s,1H)；8.50-8.48(m,1H)；8.04(s,0.4H)；8.01(s,0.6H)；7.89(d,J=8.2,0.4H)；7.82(d,J=8.2,0.6H)；7.72(dd,J=12.9,2.5,1H)；7.45(t,J=9.2,1H)；7.33(d,J=8.4,2H)；7.27-7.24(m,1H)；6.61-6.59(m,1H)；6.54(d,J=0.8,1H)；4.68(s,0.4H)；4.59(s,0.6H)；3.52-3.38(m,12H)；3.21(s,1.8H)；3.20(s,1.2H)；2.35(d,J=0.4,3H)；2.12(s,1.8H)；2.00(1.2H). LRMS(M+H)：678.8

圖式32

實例222

3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基胺基甲酸2,2,2-三氟乙酯(373 )

步驟1. 4-(2-(5-((第三-丁氧羰基(2-甲氧基乙基)胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)-3-氟苯基2,2,2-三氟乙基甲基胺基甲酸酯(372 )

將雙光氣(0.017毫升，0.143毫莫耳)添加至苯胺126 (0.15克，0.286毫莫耳)在THF(2.86毫升)中之溶液內，並將反應混合物激烈攪拌2小時。於反應混合物中，添加2,2,2-三氟乙醇(0.042毫升，0.572毫莫耳)與DIPEA(0.100毫升，0.572毫莫耳)在THF(2.86毫升)中之溶液。將反應混合物激烈攪拌過夜，以DCM稀釋，以飽和氯化銨溶液洗滌，以無水硫酸鈉脫水乾燥，及濃縮至乾涸。使殘留物藉急驟式層析純化(Biotage，Snap 10管柱，梯度液：3% 10 CV、3%至5% 2 CV及5% 10 CV MeOH在DCM中)，獲得372 (0.1097克，0.169毫莫耳，59.0%產率)，為淡褐色固體。m/z：651.4(M+H)⁺ .

步驟2. 3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯基胺基甲酸2,2,2-三氟乙酯(373 )

於372 (0.1097克，0.169毫莫耳)在DCM(1.0毫升)中之懸浮液內，添加TFA(1.0毫升，12.98毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌2小時。在減壓下濃縮反應混合物，使殘留物溶於DCM中，以1N NaOH溶液、水洗滌，以無水硫酸鈉脫水乾燥，及在減壓下濃縮,獲得373 (0.0543克，0.097毫莫耳，57.3%產率)，為白色固體。¹ H-NMR(DMSO-D₆ ，400 MHz)10.55(s,1H),8.57(s,1H),8.52(d,J=5.62 Hz,1H),8.32(s,1H),8.23(d,J=8.1 Hz,1H),7.90(d,J=8.10 Hz,1H),7.63(d,J=9 Hz,1H),7.52(d,J=13.5 Hz,1H),7.39(t,J=9.0 Hz,1H),6.66(d,J=6.7 Hz,1H),4.85(q,J=9.0 Hz,2H),3.79(s,2H),3.41(t,J=5.5 Hz,2H),3.24(s,3H),2.66(t,J=5.5 Hz,2H). m/z：(M+H)⁺ 551.4.

實例223

N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯胺甲醯基)環丙烷磺醯胺(376 )

步驟1：環丙基磺醯基胺基甲酸乙酯(374 )

於環丙烷磺醯胺(Li,J.等人；Synlett 2006,5,725-728)(800毫克，6.60毫莫耳)在丙酮(25毫升)中之溶液內，添加碳酸鉀(2.738克，3當量，19.81毫莫耳)與氯甲酸乙酯(1.075克，1.5當量，9.90毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水中，且以濃HCl使其呈酸性(pH 1)，然後以EtOAc萃取。收集萃液，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。殘留物藉管柱層析之純化(溶離劑30% EtOAc在己烷中)，獲得374 ，為無色油(800毫克，63%)。¹ H NMR(DMSO,d₆ ) 11.47(s,1H),4.10(q,J=10.27 Hz,2H),2.90(m,1H),1.19(t,J=7.24 Hz,3H),1.039(m,4H).

步驟2：(6-(7-(4-(3-(環丙基磺醯基)脲基)-2-氟基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基)甲基(2-甲氧基乙基)胺基甲酸第三-丁酯(375 )

於胺126 (500毫克，0.953毫莫耳)在DME(4毫升)中之溶液內，添加胺基甲酸酯374 (460毫克，2.5當量，2.383毫莫耳)，並將反應混合物加熱至120℃，歷經1天。使混合物冷卻至室溫，以EtOAc與水稀釋，且收集有機相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮。殘留物藉管柱層析之純化(溶離劑EtOAc至EtOAc中之50%丙酮)，獲得375 ，為褐色油(130毫克，55%)。MS(m/z)=672.5(M+H)

步驟3：N-(3-氟基-4-(2-(5-((2-甲氧基乙胺基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基氧基)苯胺甲醯基)環丙烷磺醯胺(376 )

於375 (140毫克，0.208毫莫耳)在DCM(5毫升)中之溶液內，添加二氧陸圜中之HCl(0.5毫升，2毫莫耳，9.6當量，4M，在二氧陸圜中)，並將反應混合物攪拌4小時。將混合物以EtOAc稀釋，以NaHCO₃ 溶液使呈鹼性，且以EtOAc/丙酮萃取。收集並拋棄有機相。濃縮水相，且使殘留物懸浮於DCM與丙酮之混合物中。收集溶液相，以Na₂ SO₄ 脫水乾燥，過濾，及濃縮，在以Et₂ O進一步研製後，獲得376 ，為米黃色固體(產量8毫克，7%)。¹ H NMR(DMSO-d6)：8.67(s,1H),8.56(s,1H),8.47(d,J=5.28,1H),8.27(s,1H),8.19(d,J=8.02 Hz,1H),7.85(m,2H),7.80(s,1H),7.22(m,2H),6.59(d,J=5.28 Hz,1H),3.76(s,2H),3.40(m,2H),3.20(s,3H),2.76(m,1H),2.60(m,2H),0.75(m,2H),0.65(m,2H). LRMS(ESI)：(計算值)571.64(實測值)572.58(MH)⁺ .

根據本發明之其他化合物係包括表2中者。

根據本發明之其他化合物係包括表3中者。

根據本發明之其他化合物係包括表4中者。

根據本發明之其他化合物係包括表5中者。

根據本發明之其他化合物係包括表5a中者。

醫藥組合物

於一些具體實施例中，本發明係提供醫藥組合物，其包含根據本發明之化合物，及藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。本發明之組合物可藉任何此項技藝中所習知之方法調配，且可經製備，以藉任何途徑投藥，包括但不限於非經腸、口腔、舌下、經皮、局部、鼻內、氣管內或直腸內。在某些具體實施例中，本發明之組合物係以靜脈內方式在醫院環境中投藥。在一些具體實施例中，投藥可為藉由口腔途徑。

載劑、賦形劑或稀釋劑之特徵係依投藥途徑而定。於本文中使用之"藥學上可接受"一詞係意謂無毒性物質，其係可與生物系統相容，譬如細胞、細胞培養物、組織或生物體，且不會干擾活性成份之生物學活性之有效性。因此，根據本發明之組合物，除了抑制劑以外，可含有稀釋劑、填料、鹽、緩衝劑、安定劑、增溶劑，及此項技藝中所習知之其他物質。藥學上可接受配方之製備係描述於例如Remington氏醫藥科學，第18版,A. Gennaro編著,Mack出版公司,Easton,Pa,1990。

活性化合物係被包含在藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑中，其量足以對病患傳輸治療上有效量，而不會在經治療之病患中造成嚴重毒性作用。藥學上可接受衍生物之有效劑量範圍，可以欲被傳輸母體化合物之重量為基準計算而得。若衍生物本身顯示活性，則有效劑量可如上述使用衍生物之重量，或藉由熟諳此藝者已知之其他方式估計。

VEGF受體發出訊息之抑制

於一些具體實施例中，本發明係提供一種在細胞中抑制VEGF受體發出訊息之方法，其包括使其中VEGF受體發出訊息之抑制係為所要之細胞，與根據本發明VEGF受體發出訊息之抑制劑接觸。由於本發明化合物會抑制VEGF受體發出訊息，故其係為有用研究工具，供活體外研究VEGF受體發出訊息在生物學過程上之角色。

於一些具體實施例中，抑制VEGF受體發出訊息會造成經接觸細胞之細胞增生之抑制。

檢測實例 VEGF活性之抑制

使用下列擬案以檢測本發明化合物。

檢測實例1 活體外受體酪胺酸激酶檢測(VEGF受體KDR)

此試驗係度量化合物抑制重組人類VEGF受體酵素活性之酵素活性之能力。

將相應於VEGFR2(KDR)(基因銀行收受號碼AF035121胺基酸806至1356)之催化功能部位之1.6-kb cDNA無性繁殖至pDEST20 Gateway載體(Invitrogen)之Pst I位置中，供產生該酵素之GST-標記之變型。此構造物係使用Bac-對-BacTM系統，根據製造者之說明書(Invitrogen)，用以產生重組桿狀病毒。

在被重組桿狀病毒構造物感染時，GST-VEGFR2806-1356蛋白質係被表現於Sf9細胞(草地黏蟲(Spodoptera frugiperda))中。簡言之，使已生長於懸浮液中，且於細胞密度約2 X 10⁶ 個細胞/毫升下，被保持在不含血清之培養基(經補充健大霉素之Sf900 II)中之Sf9細胞，在感染多重度(MOI)為0.1下，於72小時期間，在27℃下，被上文所提及之病毒感染，並於迴轉式振盪器上，在120 rpm下攪拌。受感染之細胞係藉由在398克下離心15分鐘而被採集。將細胞丸粒於-80℃下冷凍，直到進行純化為止。

在細胞萃取與純化中所述之所有步驟係於4℃下進行。使已被GST-VEGFR2806-1356重組桿狀病毒感染之經冷凍Sf9細胞丸粒解凍，並溫和地再懸浮於緩衝劑A(PBS pH 7.3經補充1微克/毫升胃蛋白酶抑制素,2微克/毫升抑肽酶與亮肽素,50微克/毫升PMSF,50微克/毫升TLCK與10μM E64及0.5mM DTT)中，每克細胞使用3毫升緩衝劑。懸浮液係經Dounce均化，並將1% Triton X-100添加至勻漿中，然後使其在22500克下，於4℃下離心30分鐘。上層清液(細胞萃取物)係作為起始物質使用於GST-VEGFR2806-1356之純化。

將上層清液裝填至以PBS pH 7.3達成平衡之GST-瓊脂糖管柱(Sigma)上。在以PBS pH 7.3+1% Triton X-100之四個管柱體積(CV)洗滌，及以緩衝劑B(50mM Tris pH 8.0,20%甘油及100mM NaCl)之4 CV洗滌之後，將所結合之蛋白質以經補充5mM DTT與15mM榖胱甘肽之5 CV緩衝劑B逐步溶離。將得自此層析步驟之GST-VEGFR2806-1356富含之溶離份以U.V.軌跡為基礎進行匯集，意即具有高O.D.280之溶離份。最後GST-VEGFR2806-1356蛋白質製劑濃度為約0.7毫克/毫升，具有純度大約70%。將經純化之GST-VEGFR28061356蛋白質儲備液分成數液份，並在使用於酵素檢測中之前，冷凍於-80℃下。

VEGFR/KDR之抑制係在DELFIATM檢測(Perkin Elmer)中度量。受質聚(Glu4,Tyr)係被固定於黑色高結合聚苯乙烯96-井板上。將經塗覆之板洗滌，並儲存於4℃下。在此檢測期間，將酵素以抑制劑與Mg-ATP，在冰上，於聚丙烯96-井板中預培養4分鐘，然後轉移至經塗覆之板上。後續激酶反應係在30℃下進行10-30分鐘。在此檢測中之ATP濃度為0.6μM，對於VEGFR/KDR(2X Km)。酵素濃度為5 nM。在培養之後，使激酶反應以EDTA淬滅，並將板洗滌。經磷醯基化之產物係經由與銪標識之抗磷酸酪胺酸MoAb一起培養而被檢出。在將板洗滌之後，所結合之MoAb係藉由時間解析螢光，在Gemini SpectraMax讀取器(分子裝置公司)中偵測。化合物係於一範圍之濃度上經評估，並測定IC50(給予酵素活性之50%抑制作用之化合物濃度)。其結果係示於表6中。在此表中，"a"表示在濃度低於250毫微莫耳濃度下之抑制活性；"b"表示在濃度≧250但<500毫微莫耳濃度下之抑制活性，"c"表示在≧500但<1000毫微莫耳濃度下之抑制活性；及"d"表示抑制活性≧1000毫微莫耳濃度。

檢測實例2 VEGF依賴性Erk磷醯化作用

細胞與生長因子 ：HUVEC細胞係購自Cambrex生物科技Walkersville公司，且根據賣方之指示培養。VEGF₁₆₅ 之全長編碼順序係使用關於桿狀病毒表現Sf9細胞之Gateway無性繁殖技術(Invitrogen)進行無性繁殖。VEGF₁₆₅ 係純化自經調理之培養基，自HiTrap肝素管柱(GE保健生命科學)使用NaCl梯度溶離，接著為自HiTrap螯合管柱(GE保健生命科學)之咪唑梯度溶離，然後，將緩衝劑儲存於經補充0.1% BSA之PBS中，且經濾器殺菌。

細胞檢測 ：將細胞在96井板之8000個細胞/井下接種，及生長48小時。然後，使細胞在不含血清與生長因子之培養基中生長過夜，且對化合物稀釋液曝露1.5小時。在培養基中15分鐘培養之後，使VEGF₁₆₅ (150毫微克/毫升)細胞溶解於含有1 mM氟化4-(2-胺基乙基)苯磺醯鹽酸鹽、200μM原釩酸鈉、1 mM氟化鈉、10微克/毫升亮肽素、10微克/毫升抑肽酶、1微克/毫升胃蛋白酶抑制素及50微克/毫升Na-對-甲苯磺醯基-L-離胺酸氯基甲基酮鹽酸鹽之冰冷溶胞緩衝劑(50 mM HEPES,pH 7.4,150 mM NaCl,1.5 mM MgCl₂ ,1% Triton X-100,10%甘油)中，且以Western氏沾吸處理，以偵測抗-磷醯基ERK1/2(T202/Y204)(細胞發出訊息技術)。

Western氏沾吸分析 ：將得自單一處理井之溶胞產物試樣在5-20% SDS-PAGE凝膠上分離，且免疫沾吸係使用Immobilon聚二氟亞乙烯薄膜(Amersham)，根據製造者之說明書進行。將沾吸在具有0.1% Tween 20清潔劑之Tris-緩衝鹽水(TBST)中洗滌，及探測關於抵抗磷醯基-Thr202/Tyr204-ERK之抗體(細胞發出訊息技術)。化學發光偵測(Amersham,ECL plus)係根據製造者之說明書，使用Storm光密度計(GE保健；800 PMT,100 nM解析度)進行，供成像與光密度度量法分析。涵蓋稀釋範圍之數值係用以製備IC₅₀ 曲線，使用4-參數吻合模式。此等曲線係使用GraFit 5.0軟體計算。其結果係示於表6中。在此表中，"a"表示在濃度低於250毫微莫耳濃度下之抑制活性；"b"表示在濃度≧250但<500毫微莫耳濃度下之抑制活性，"c"表示在≧500但<1000毫微莫耳濃度下之抑制活性；及"d"表示抑制活性≧1000毫微莫耳濃度。

檢測實例3 活體內固態腫瘤疾病模式

此試驗係度量化合物抑制固態腫瘤生長之能力。

腫瘤異種移植物係在雌性無胸腺CD1老鼠(查理士河(Charles River)公司)之腰窩中，藉由皮下注射1X106 U87、A431或SKLMS細胞/老鼠而建立。一旦經建立，即使腫瘤接著在無毛老鼠宿主中連續性地以皮下產生繼代。得自此等宿主動物之腫瘤碎片係被使用於後續化合物評估實驗中。關於化合物評估實驗，體重大約20克之雌性無毛老鼠係藉由手術植入得自供體腫瘤之~30毫克腫瘤碎片，而被皮下植入。當腫瘤於大小上為大約100立方毫米(在植入之後~7-10天)時，將動物隨機且分隔成治療與對照組。各組群含有6-8隻帶有腫瘤之老鼠，其每一隻係經耳朵標記，且在整個實驗中個別地追蹤。

將老鼠稱重，且藉由測徑器每週取得腫瘤度量值三次，於第1天開始。此等腫瘤度量值係藉由習知公式(L+W/4)34/3π被轉化成腫瘤體積。當對照腫瘤達到大小為大約1500立方毫米時，終止此實驗。在此模式中，關於化合物治療組之平均腫瘤體積上之變化/對照組(未經治療或經媒劑治療)之平均腫瘤體積上之變化x 100(△T/△C)係被減去100，而得關於各試驗化合物之百分比腫瘤生長抑制(%TGI)。除了腫瘤體積以外，每週兩次監測動物之體重，歷經高達3週。

檢測實例4 活體內膠態新血管生成作用(CNV)模式

此試驗係度量化合物抑制CNV進展之能力。CNV為在患有與老化有關聯之斑點變性(AMD)之病患中，嚴重視覺損失之主要原因。

雄性褐色-Norway大白鼠(Japan Clea公司)係被使用於此等研究中。

藉由腹膜腔內注射戊巴比妥使大白鼠麻醉，且以0.5%磋皮卡醯胺(tropicamide)與0.5%鹽酸苯腎上腺素，使右邊瞳孔擴張。右眼係在視網膜血管之間接受6次雷射燒傷，使用綠色雷射光凝固機之裂隙燈傳輸系統(Nidex公司,Japan)，及顯微鏡載玻片玻璃，具有Healon^TM (AMO公司)作為接觸透鏡使用。雷射功率為100或200 mW，歷經0.1秒，且斑點直徑為100微米。在雷射燒傷時，發現氣泡產生，其係為對於CNV產生為重要之Bruch氏膜破裂之指標。

在雷射照射(第0天)之後，使用SAS軟體(日本SAS學會,R8.1)將大白鼠以其體重為基礎區分成數組群。在使動物麻醉及右邊瞳孔擴張(如上文所述)之後，於第3天，動物之右眼係藉由注射(10微升/眼睛)，在30毫微莫耳/眼睛之劑量下，接受化合物或媒劑。於注射前，使化合物溶解或懸浮於CBS、PBS或其他適當媒劑中。

於第10天，以醚使動物麻醉，且經由尾靜脈(20毫克/大白鼠)注射高分子量螢光素異硫氰酸酯(FITC)-葡聚醣(SIGMA，2 x 10⁶ MW)。於FITC-葡聚醣注射之後約30分鐘，藉由醚或二氧化碳使動物安樂死，並移除眼睛，及以10%福馬林中性緩衝溶液固定。在固定超過1小時之後，RPE-脈絡膜-鞏膜平坦裝載物係藉由從眼球移除角膜、晶狀體及視網膜而獲得。平坦裝載物係在50%甘油中被裝載於顯微鏡載玻片上，且將被雷射燃燒之部份使用螢光顯微鏡(Nikon公司，激發濾光鏡：465-495毫微米，吸收濾光鏡：515-555毫微米)照相。CNV面積係藉由使用Scion影像度量照片上所發現之高螢光面積而獲得。

6次燒傷之平均CNV面積係作為CNV面積之個別值使用，且將化合物治療組之平均CNV面積與媒劑處理組之平均CNV面積作比較。使用一些本發明化合物之結果係示於表7中，且係以CNV進展之%抑制顯示("A"表示大於或等於60%抑制，而"B"表示≧40%至<60%抑制)。

Claims (11)

1. 一種化合物，係選自由下列組成之群： 、及 及其藥學上可接受之鹽。
2. 如請求項1之化合物，其中該化合物係為
3. 如請求項1之化合物，其中該化合物係為
4. 如請求項1之化合物，其中該化合物係為
5. 如請求項1之化合物，其中該化合物係為
6. 一種組合物，其包含如請求項1至5中任一項之化合物及醫藥上可接受之載體。
7. 一種如請求項1至5中任一項之化合物或其組合物之用途，其係用於製備用以治療眼部疾病、症狀或病症之藥劑。
8. 如請求項7之用途，其中該化合物係為
9. 如請求項7之用途，其中該化合物係為
10. 如請求項7之用途，其中該化合物係為
11. 如請求項7之用途，其中該化合物係為