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TW202434299A - 製造水凝膠微球之方法 - Google Patents

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TW202434299A
TW202434299A TW112150102A TW112150102A TW202434299A TW 202434299 A TW202434299 A TW 202434299A TW 112150102 A TW112150102 A TW 112150102A TW 112150102 A TW112150102 A TW 112150102A TW 202434299 A TW202434299 A TW 202434299A
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hydrogel
microspheres
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TW112150102A
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賽巴斯欽 史塔克
班傑明 布瑞坦貝奇
卡爾斯坦 羅素
丹尼斯 紹爾
湯馬士 納普
托拜斯 佛吉特
提爾 普瑞斯
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丹麥商阿仙帝斯製藥公司
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Abstract

本發明係關於經由懸浮聚合作用製備之水凝膠透明質酸(hyaluronic acid；HA)微球或其醫藥學上可接受之鹽。根據本發明方法製備之該等水凝膠HA微球可用作各種藥劑之載劑，諸如各種藥物部分之載劑。本發明亦提供使用該等水凝膠HA微球作為載劑之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽、製造該等藥物結合物之方法、包含該等藥物結合物之醫藥組合物及其等用途。

Description

製造水凝膠微球之方法
本發明係關於經由懸浮聚合作用製備之水凝膠透明質酸(hyaluronic acid；HA)微球或其醫藥學上可接受之鹽。根據本發明方法製備之該等水凝膠HA微球可用作各種藥劑之載劑，諸如各種藥物部分之載劑。本發明亦提供使用該等水凝膠HA微球作為載劑之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽、製造該等藥物結合物之方法、包含該等藥物結合物之醫藥組合物及其等用途。
為改善物理化學或藥物動力學特性，諸如藥物之活體內循環半衰期，此類藥物可與載劑(諸如水凝膠)結合。通常，藥物遞送中之水凝膠用於藥物與水凝膠之間的非共價錯合，藥物可包埋於水凝膠中，或經由藥物與水凝膠之結合以共價方式包埋。
非共價方法需要高效藥物封裝，以防止藥物-水凝膠錯合物在投與後因崩解而導致藥物之不可控、爆發式釋放。限制未結合水溶性藥物分子之擴散需要較強的凡得瓦爾力相互作用，其常常經由疏水性及帶電部分介導以用於靜電結合。許多構形敏感性藥物(諸如蛋白質或肽)在錯合過程期間及/或在非共價結合藥物之後續儲存期間出現功能異常。
替代地，藥物可經由連接子部分共價結合於水凝膠，由此藥物與連接子之間的鍵聯係穩定的；或經由連接子部分共價結合於水凝膠，由此藥物與連接子部分之間的鍵聯係可逆的。
習知的水凝膠係能夠吸收大量水之三維親水性或兩親媒性聚合物網。此等網可包含各種聚合物，且由於存在共價及/或物理交聯(諸如離子、疏水相互作用或纏結)而為不可溶的。
已開發出包含共價連接至水凝膠之藥物的各種藥物遞送系統。舉例而言，WO 2018/175788 A1教示水凝膠前藥組合物，其包含與藥物-連接子部分結合之交聯透明質酸(HA)。HA係由D-葡糖醛酸及 N-乙醯基-D-葡糖胺組成之生物相容性親水多醣。該等前藥可用於治療尤其在新生血管性眼部疾病之領域中的眼部病狀，該等病狀需要重複玻璃體內注射抗血管內皮生長因子。特定言之，對於水凝膠注射應用，重要的係改善水凝膠載劑之生物穩定性以及其易於通過針之可注射性。WO 2018/193408 A1描述一種由透明質酸水凝膠組成之藥物遞送系統，該等透明質酸水凝膠經由可逆連接子連接至藥物部分。在此情況下，可經由機械研磨使塊狀水凝膠可注射。
仍需要適合於藥物持續釋放的新穎藥物遞送系統。
此目標藉由一種用於製備包含交聯透明質酸(HA)之水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽的方法達成，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中各-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑；及 (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球。
本文中描述用於製造可容易注射之HA水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽的方法。由於水凝膠微球之相對均勻大小及形狀，可注射性得到了增強。該等HA水凝膠微球可用作與藥物部分共價結合之載劑，且可提供用於局部藥物遞送之寶貴工具。
在本發明之含義中，該等術語係如下使用。
如本文所使用，與數值組合之術語「約」用於指示介於該數值加減不超過20%之該數值，在某些實施例中不超過加減15%之該數值，在某些實施例中不超過加減10%之該數值且在某些實施例中不超過加減5%之該數值之範圍內且包括該數值的範圍。舉例而言，片語「約200」用於意謂範圍介於200+/-20%且包括該數值，亦即範圍介於160至240且包括該數值；在某些實施例中，200+/-15%，亦即範圍介於170至230且包括該數值；在某些實施例中，範圍介於200+/-10%且包括該數值，亦即範圍介於180至220且包括該數值；且在某些實施例中，200+/-5%，亦即範圍介於190至210且包括該數值。
如本文所用，術語「多醣」亦稱為「聚醣」，係指由糖苷連接之單醣部分組成的化合物。典型地，此術語用於由大量糖基連接之單醣部分(例如超過十個單醣部分)組成之化合物。
如本文所用，術語「醣胺聚醣」或「黏多醣」係指由雙醣單元組成之線性多醣，其中重複雙糖單元由糖醛酸糖及胺基糖組成，但在硫酸化醣胺聚醣角質素之情況下除外，在此情況下，代替糖醛酸糖的係半乳糖單元。醣胺聚醣分子之實例可包括透明質酸、肝素、硫酸乙醯肝素、肝素前體、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素或硫酸角質素分子。
如本文所用，術語「官能化透明質酸」係指可藉由對原生透明質酸進行化學或酶官能化或修飾而產生的任何透明質酸衍生物。特定言之，該術語係指任何可由羧酸基團處之化學修飾或官能化產生的透明質酸衍生物。
如本文所用，術語「微球」係指典型地由固體或半固體材料構成且實質上為球形之微米級粒子。典型地，經諸如流式顯微法或雷射繞射或任何其他適合之方法測定，本發明之微球之平均直徑在約1 µm至約1000 µm範圍內，諸如約10 µm至約500 µm或諸如約50 µm至約500 µm。
如本文所用，術語「分散相」係指包含分佈於或分散於連續相中的任何大小及任何性質之粒子或液滴的相。分散相內液滴之直徑可介於約1 µm至約5000 µm範圍內，諸如約10 µm至約1000 µm，或諸如約50 µm至約500 µm。在本發明之乳液中所發現的分散相中，分散相中液滴之平均直徑通常在1 µm至約1000 µm範圍內，諸如10 µm至約500 µm範圍內，或諸如約50 µm至約500 µm範圍內。
如本文所用，術語「連續相」或「連續相溶液」係指其中分佈有固體或流體粒子或液滴之流體相。
如本文中所使用，術語「乳液」係指一種液體的液滴分散於另一種液體中的流體系統，而該種液體不可溶於另一種液體或不可與另一種液體混溶。若分散相為有機材料且連續相為水或水溶液，則將乳液稱為油/水(o/w)乳液，且若分散相為水或水溶液且連續相為有機液體，則將乳液稱為水/油(w/o)乳液。
如本文所用，術語「懸浮聚合」係指一種聚合過程，其中聚合物(諸如水凝膠)以單體或單體-溶劑液滴形式形成於連續相中，該連續相對於單體及所形成聚合物兩者均為非溶劑。隨著單體轉化為聚合物，液滴轉化為黏稠的黏性單體及/或聚合物粒子，且逐漸變成球形固體聚合物粒子或微球。
應理解，在本發明之上下文中，先前提及之單體對應於第一及第二官能化HA，且所形成之聚合物對應於HA水凝膠。
如本文中所使用，術語「藥物」係指用於治療、治癒、預防或診斷疾病或以其他方式用於增強患者之身體或精神健康之物質。若藥物與另一部分結合，則所得產物中之來源於藥物之部分稱為「藥物部分」。
如本文所用，術語「包含一級或二級胺之藥物D-H的部分」係指包含至少一個一級或二級胺官能基之藥物部分，該藥物可視情況具有一或多個其他官能基，該一或多個其他官能基包括一或多個額外一級及/或二級胺官能基。
如本文所用，術語「部分(moiety)」意謂相比於對應的試劑缺少一或多個原子的分子之部分。舉例而言，若式「H-X-H」之試劑與另一試劑反應且變成反應產物的一部分，則反應產物之對應部分具有結構「H-X-」或「-X-」，而各「-」表示與另一部分之連接。因此，藥物部分自可逆鍵釋放作為藥物。
應理解，若提供一組原子之序列或化學結構，該組原子與兩個部分連接或間雜一部分，則除非另外明確陳述，否則該序列或化學結構可以任一定向連接至該等兩個部分。舉例而言，部分「-C(O)N(R x)-」可以「-C(O)N(R x)-」或「-N(R x)C(O)-」之形式與兩個部分連接或間雜一部分。
如本文所用，術語「保護基部分」係指可逆地連接至官能基以使其不能與例如另一官能基反應的部分。適合之醇(-OH)保護基為例如乙醯基、苯甲醯基、苯甲基、β-甲氧基乙氧基甲基醚、二甲氧基三苯甲基、甲氧基甲基醚、甲氧基三苯甲基、對甲氧基苯甲基醚、甲硫基甲基醚、特戊醯基、四氫哌喃基、三苯甲基、三甲基矽烷基、三級丁基二甲基矽烷基、三異丙基矽烷氧基甲基、三異丙基矽烷基醚、甲基醚及乙氧基乙基醚。適合羰基保護基係例如縮醛及縮酮、縮羰酯及二硫雜環己烷。適合之羧酸保護基係例如甲基酯、苯甲基酯、三級丁基酯、2,6-二甲基苯酚、2,6-二異丙基苯酚、2,6-二-三級丁基苯酚、矽烷基酯、原酸酯及㗁唑啉。適合之磷酸酯保護基係例如2-氰基乙基及甲基。
如本文所用，術語「胺保護基部分」係指用於在化學反應過程期間可逆保護胺官能基以使得該胺不能與例如另一官能基反應的部分。
如本文所用，術語「還原劑」係指在氧化還原化學反應中丟失或給予電子給電子受體(諸如氧化劑)的化合物或元素。
如本文中所使用，術語「氧化劑」係指能夠氧化其他化合物的化學化合物。
如本文中所使用，術語「試劑」意謂包含至少一個用於與另一種化合物或藥物之官能基進行反應之官能基的化合物。應理解，包含官能基之藥物亦為試劑。
一般熟習此項技術者認識到，本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽為前藥。如本文所用，術語「前藥」係指藥物部分，其經由-L 1-L 2-部分可逆且共價地結合於透明質酸。前藥釋放呈其對應的藥物D-H或D形式的可逆且共價鍵結的藥物部分-D或D +。換言之，前藥為包含藥物部分之結合物，該藥物部分經由至少一個-L 1-L 2-部分共價且可逆地結合至聚合部分。此類前藥或結合物釋放呈游離或未經修飾之藥物形式的先前結合之藥物部分。
如本文所用，術語「可逆鍵聯」或「可生物降解之鍵聯」係在生理條件下(在pH 7.4及37℃的水性緩衝劑中)在不存在酶的情況下的可裂解鍵聯，其半衰期在一小時至六個月範圍內，諸如十小時至四個月，諸如一天至三個月、兩天至兩個月或三天至一個月。然而，應理解，可逆鍵聯亦可在其他條件下(諸如在不同pH下或在不同溫度下)可裂解，但用於測定可逆性之測試係在上述生理條件(水性緩衝劑，pH 7.4，37℃)中進行。因此，「穩定鍵聯」係在生理條件下半衰期超過六個月的鍵聯。
如本文中所使用，單獨或呈組合形式之術語「C 1 - 4烷基」意謂具有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈烷基部分。若存在於分子之末端，則直鏈或分支鏈C 1 - 4烷基之實例為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。當分子之兩個部分由C 1 - 4烷基連接時，則此類C 1 - 4烷基之實例為-CH 2-、-CH 2-CH 2-、-CH(CH 3)-、-CH 2-CH 2-CH 2-、-CH(C 2H 5)-、-C(CH 3) 2-。C 1 - 4烷基碳之各氫可視情況經如下所定義之取代基置換。視情況，C 1 - 4烷基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
如本文中所使用，單獨或呈組合形式之術語「C 1 - 6烷基」意謂具有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烷基部分。若存在於分子之末端，則直鏈及分支鏈C 1 - 6烷基之實例為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基。當分子之兩個部分由C 1 - 6烷基連接時，則此等C 1 - 6烷基之實例為-CH 2-、-CH 2-CH 2-、-CH(CH 3)-、-CH 2-CH 2-CH 2-、-CH(C 2H 5)-及-C(CH 3) 2-。C 1 - 6碳之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況，C 1 - 6烷基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
因此，「C 1 - 10烷基」、「C 1 - 20烷基」、「C 8 - 24烷基」或「C 1 - 50烷基」分別意謂具有1至10個、1至20個、8至24個或1至50個碳原子的烷基鏈，其中C 1 - 10、C 1 - 20、C 8 - 24或C 1 - 50碳之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況，C 1 - 10烷基、C 1 - 20烷基、C 8 - 24烷基或C 1 - 50烷基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
如本文所使用，單獨或呈組合形式之術語「C 2 - 6烯基」意謂具有2至6個碳原子之包含至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈烴部分。若存在於分子之末端，則實例為-CH=CH 2、-CH=CH-CH 3、-CH 2-CH=CH 2、-CH=CHCH 2-CH 3及-CH=CH-CH=CH 2。當分子之兩個部分由C 2 - 6烯基連接時，則該C 2 - 6烯基之實例為-CH=CH-。C 2 - 6烯基部分之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況，C 2 - 6烯基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
相應地，單獨或呈組合形式之術語「C 2 - 10烯基」、「C 2 - 20烯基」或「C 2 - 50烯基」分別意謂具有2至10個、2至20個或2至50個碳原子之包含至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈烴部分。C 2 - 10烯基、C 2 - 20烯基或C 2 - 50烯基之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況，C 2 - 10烯基、C 2 - 20烯基或C 2 - 50烯基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
如本文所使用，單獨或呈組合形式之術語「C 2 - 6炔基」意謂具有2至6個碳原子之包含至少一個碳-碳參鍵之直鏈或分支鏈烴部分。若存在於分子之末端，則實例為-C≡CH、-CH 2-C≡CH、CH 2-CH 2-C≡CH及CH 2-C≡C-CH 3。當分子之兩個部分由炔基連接時，則實例為-C≡C-。C 2 - 6炔基部分之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況地，可存在一或多個雙鍵。視情況，C 2 - 6炔基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
因此，如本文中所使用，單獨或呈組合形式之術語「C 2 - 10炔基」、「C 2 - 20炔基」及「C 2 - 50炔基」分別意謂具有2至10個、2至20個或2至50個碳原子之包含至少一個碳-碳參鍵之直鏈或分支鏈烴部分。C 2 - 10炔基、C 2 - 20炔基或C 2 - 50炔基之各氫原子可視情況由如下所定義之取代基置換。視情況地，可存在一或多個雙鍵。視情況，C 2 - 10炔基、C 2 - 20炔基或C 2 - 50炔基可間雜有一或多個如下文所定義之部分。
如上文所提及，C 1 - 4烷基、C 1 - 6烷基、C 1 - 10烷基、C 1 - 20烷基、C 1 - 50烷基、C 8 - 24烷基、C 2 - 6烯基、C 2 - 10烯基、C 2 - 20烯基、C 2 - 50烯基、C 2 - 6炔基、C 2 - 10炔基、C 2 - 20烯基或C 2 - 50炔基可視情況間雜有一或多個部分，其在某些實施例中係選自由以下組成之群 ， 其中 虛線指示與部分或試劑之其餘部分之連接； -R及-R a係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基；且該等部分及鍵聯視情況進一步經取代。
如本文所用，術語「C 3 - 10環烷基」意謂具有3至10個碳原子之環狀烷基鏈，其可為飽和或不飽和的，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯基、環庚基、環辛基、環壬基或環癸基。C 3 - 10環烷基之各氫原子可由如下所定義之取代基置換。術語「C 3 - 10環烷基」亦包括橋接雙環，例如降冰片烷或降冰片烯。
如本文所用，術語「8員至30員羰基多環基」或「8員至30員羰基多環」意謂具有8至30個環原子之兩個或更多個環之環狀部分，其中兩個相鄰環共有至少一個環原子且可含有至多最大數目之雙鍵(完全飽和、部分飽和或不飽和之芳族或非芳族環)。在某些實施例中，8員至30員羰基多環基意謂兩個、三個、四個或五個環之環狀部分。在某些實施例中，8員至30員羰基多環基意謂兩個、三個或四個環之環狀部分。
如本文所用，術語「3員至10員雜環基」或「3員至10員雜環」意謂具有3、4、5、6、7、8、9或10個環原子之環，其可含有至多最大數目之雙鍵(完全飽和、部分飽和或不飽和之芳族或非芳族環)，其中至少一個環原子至4個環原子由選自由以下組成之群之雜原子置換：硫(包括-S(O)-、-S(O) 2-)、氧及氮(包括=N(O)-)，且其中環經由碳或氮原子連接至分子之其餘部分。3員至10員雜環之實例包括但不限於氮丙啶、環氧乙烷、環硫乙烷、氮雜環丙烯、環氧乙烯、硫雜丙烯環、氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、硫雜環丁烷、呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、㗁唑、㗁唑啉、異㗁唑、異㗁唑啉、噻唑、噻唑啉、異噻唑、異噻唑啉、噻二唑、噻二唑啉、四氫呋喃、四氫噻吩、吡咯啶、咪唑啶、吡唑啶、㗁唑啶、異㗁唑啶、噻唑啶、異噻唑啶、噻二唑啶、環丁碸、哌喃、二氫哌喃、四氫哌喃、咪唑啶、吡啶、嗒𠯤、吡𠯤、嘧啶、哌𠯤、哌啶、𠰌啉、四唑、三唑、三唑啶、四唑啶、二氮雜環庚烷、氮呯及高哌𠯤。3員至10員雜環基或3員至10員雜環基團之各氫原子可由如下文所定義之取代基置換。
如本文所用，術語「8員至11員雜雙環基」或「8員至11員雜雙環」意謂具有8至11個環原子之兩個環之雜環部分，其中至少一個環原子由兩個環共有且可含有至多最大數目之雙鍵(完全飽和、部分飽和或不飽和之芳族或非芳族環)，其中至少一個環原子至6個環原子由選自由以下組成之群之雜原子置換：硫(包括-S(O)-、-S(O) 2-)、氧及氮(包括=N(O)-)，且其中環經由碳或氮原子連接至分子之其餘部分。8員至11員雜雙環之實例為吲哚、吲哚啉、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并㗁唑、苯并異㗁唑、苯并噻唑、苯并異噻唑、苯并咪唑、苯并咪唑啉、喹啉、喹唑啉、二氫喹唑啉、喹啉、二氫喹啉、四氫喹啉、十氫喹琳、異喹啉、十氫異喹啉、四氫異喹啉、二氫異喹啉、苯并氮呯、嘌呤及喋啶。術語8員至11員雜雙環亦包括兩個環之螺環結構，例如1,4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷或橋接雜環，如8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷。8員至11員雜雙環基或8員至11員雜雙環碳之各氫原子可由如下文所定義之取代基置換。
類似地，術語「8員至30員雜多環基」或「8員至30員雜多環」意謂具有8至30個環原子之超過兩個環(在某些實施例中為三個、四個或五個環)之雜環部分，其中兩個相鄰環共有至少一個環原子且可含有至多最大數目之雙鍵(完全飽和、部分飽和或不飽和之芳族或非芳族環)，其中至少一個環原子至10個環原子由選自由以下組成之群之雜原子置換：硫(包括-S(O)-、-S(O) 2-)、氧及氮(包括=N(O)-)，且其中環經由碳或氮原子連接至分子之其餘部分。
應理解，關於具有以下結構之部分的片語「-R x/-R y對與其所連接之原子結合在一起以形成C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基」 意謂-R x及-R y形成以下結構： ， 其中R為C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基。
亦應理解，關於具有以下結構之部分的片語「-R x/-R y對與其所連接之原子接合在一起以形成環A」 意謂-R x及-R y形成以下結構： 。
如本文中所使用，術語「供應π電子對之雜芳族含N部分」係指滿足以下條件之部分：在-D與-L 1-之間的鍵裂解之後產生藥物D-H且其中藥物部分-D及類似地，相應的D-H包含至少一個(諸如一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)向芳族π系統供應π電子對的雜芳族氮原子。包含向芳族π系統供應π電子對的此類雜芳族氮原子的化學結構之實例包括(但不限於)吡咯、吡唑、咪唑、異吲唑、吲哚、吲唑、嘌呤、四唑、三唑及咔唑。舉例而言，在以下咪唑環中，向芳族π系統供應π電子對之雜芳族氮用「#」標記：
供應π電子對的雜芳族氮原子不包含僅向芳族π系統供應一個電子(亦即，並非一對π電子)之雜芳族氮原子，諸如在上述咪唑環結構中用「§」標記之氮。藥物D-H可以一或多種互變異構形式存在，諸如其中一個氫原子在至少兩個雜芳族氮原子之間移動。在所有此類情況下，連接子部分以共價及可逆方式連接在向芳族π系統供應π電子對之雜芳族氮處。
如本文所用，術語「賦形劑」係指與治療劑(諸如藥物結合物或醫藥組合物)一起投與之稀釋劑、佐劑或媒劑。
如本文所用，術語藥物之「游離形式」係指例如在自結合物釋放之後，呈其未經修飾之藥理學活性形式的藥物。
如本文中所使用，術語「官能基」意謂一組可與其他組原子反應之原子。例示性官能基為羧酸、一級胺、二級胺、三級胺、順丁烯二醯亞胺、硫醇、磺酸、碳酸酯、胺基甲酸酯、羥基、醛、酮、肼、異氰酸酯、異硫氰酸酯、磷酸、膦酸、鹵乙醯基、烷基鹵化物、丙烯醯基、芳基氟化物、羥胺、二硫化物、磺醯胺、硫酸、乙烯基碸、乙烯基酮、重氮烷烴、環氧乙烷及氮丙啶。
如本文所使用，術語「鹵素」意謂氟、氯、溴或碘。在某些實施例中，鹵素為氟或氯。
如本文所使用，術語「中斷」意謂在兩個碳原子之間或(若插入物位於部分之一個末端處)在碳或雜原子與氫原子之間，在某些實施例中在碳與氫原子之間插入一個部分。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受」意謂在向患者投與時不會造成損害的物質，且較佳意謂經監管機構(諸如EMA (歐洲)及/或FDA (US)及/或任何其他國家監管機構)批准用於動物，較佳用於人類。
如本文所使用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留化合物之生物學效用及特性且通常在生物學上或其他方面所需要的鹽。在某些實施例中，化合物能夠藉助於胺基及/或羧基官能基或其類似基團之存在而形成酸鹽及/或鹼鹽。醫藥學上可接受之酸加成鹽可由無機酸及有機酸形成，例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、馬尿酸鹽(hippurate)、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、次水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。可衍生鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物。可衍生鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似者。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可用無機鹼及有機鹼形成。可衍生出鹽之無機鹼包括例如銨鹽及元素週期表之第I行至第XII行之金屬。在某些實施例中，鹽衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；特別適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。可衍生鹽之有機鹼包括例如一級胺、二級胺及三級胺；包括天然存在之經取代胺的經取代胺；環胺；鹼離子交換樹脂及類似者。某些有機胺包括異丙胺、苄星(benzathine)、膽酸鹽、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌𠯤或緩血酸胺。醫藥學上可接受之鹽可藉由習知化學方法自母化合物鹼性或酸性部分合成。
如本文所使用，術語「肽」係指至少2個至多達(且包括) 50個藉由肽(醯胺)鍵聯而鍵聯之胺基酸單體部分(亦可被稱為「胺基酸殘基」)之鏈。胺基酸單體可選自由蛋白型胺基酸及非蛋白型胺基酸組成之群，且可為D-胺基酸或L-胺基酸。術語「肽」亦包括肽模擬物，諸如類肽、β肽、環肽及縮肽，且涵蓋具有多達(且包括) 50個單體部分之此類肽模擬物鏈。
如本文所用，術語「蛋白質」係指超過50個由肽鍵聯連接之胺基酸單體部分(亦可稱為「胺基酸殘基」)之鏈，其中較佳不超過12000個胺基酸單體由肽鍵聯連接，諸如不超過10000個胺基酸單體部分、不超過8000個胺基酸單體部分、不超過5000個胺基酸單體部分或不超過2000個胺基酸單體部分。
如本文所用，術語「小分子藥物」係指分子量小於1000 Da，諸如小於900 Da或小於800 Da之有機化合物的藥物。應理解，基於核鹼基之藥物部分(諸如腺嘌呤或鳥嘌呤類似物)亦可為一種類型之小分子藥物。
如本文所用，術語「中等分子藥物」係指為有機化合物的藥物，其不為肽且不為蛋白質，且分子量在1 kDa至7.5 kDa範圍內且包括該數值。
如本文所用，術語「聚合物」意謂包含藉由化學鍵以直鏈、環狀、分支鏈、交聯或樹突狀方式或其組合連接之重複結構單元(亦即，單體)的分子，其可為合成或生物學來源或兩者之組合。單體在聚合物為均聚物的情況下可相同，或在聚合物為雜聚物的情況下可不同。雜聚物亦可被稱為「共聚物」，且例如包括交替共聚物，其中不同類型之單體交替；週期共聚物，其中不同類型之單體的單體以重複序列排列；統計共聚物，其中不同類型之單體隨機排列；嵌段共聚物，其中僅由一種單體組成之不同均聚物之嵌段藉由共價鍵鍵聯；及梯度共聚物，其中不同單體之組合物沿聚合物鏈逐漸改變。應理解，聚合物亦可包含一或多個其他部分，諸如一或多個官能基。同樣，應理解，肽或蛋白質亦為聚合物，即使個別胺基酸殘基之側鏈可能不同。應理解，對於共價交聯之聚合物，諸如水凝膠，無法提供有意義的分子量範圍。
如本文所使用，術語「水凝膠」意謂由均聚物或共聚物構成之親水性或兩親媒性聚合物網，其由於存在疏水相互作用、氫鍵、離子相互作用及/或共價化學交聯而不可溶。交聯提供網狀結構及物理完整性。
如本文所用，術語「間隔子」或「間隔子部分」係指適用於連接兩個部分之部分。
如本文中所使用，術語「經取代」意謂分子或部分之一或多個-H原子由稱為「取代基」之不同的原子或一組原子置換。
如本文中所使用，在某些實施例中，術語「取代基」係指選自由以下組成之群之部分：鹵素、-CN、-C(O)OR x1、-OR x1、-C(O)R x1、-C(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2N(R x1)(R x1a)、-S(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2R x1、-S(O)R x1、-N(R x1)S(O) 2N(R x1a)(R x1b)、-SR x1、-N(R x1)(R x1a)、-NO 2、-OC(O)R x1、-N(R x1)C(O)R x1a、-N(R x1)S(O) 2R x1a、-N(R x1)S(O)R x1a、-N(R x1)C(O)OR x1a、-N(R x1)C(O)N(R x1a)(R x1b)、-OC(O)N(R x1)(R x1a)、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R x3)-、-S(O) 2N(R x3)-、-S(O)N(R x3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R x3)S(O) 2N(R x3a)-、-S-、-N(R x3)-、-OC(OR x3)(R x3a)-、-N(R x3)C(O)N(R x3a)-及-OC(O)N(R x3)-； -R x1、-R x1a、-R x1b彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R x3)-、-S(O) 2N(R x3)-、-S(O)N(R x3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R x3)S(O) 2N(R x3a)-、-S-、-N(R x3)-、-OC(OR x3)(R x3a)-、-N(R x3)C(O)N(R x3a)-及-OC(O)N(R x3)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代； 各-R x2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR x4、-OR x4、-C(O)R x4、-C(O)N(R x4)(R x4a)、-S(O) 2N(R x4)(R x4a)、-S(O)N(R x4)(R x4a)、-S(O) 2R x4、-S(O)R x4、-N(R x4)S(O) 2N(R x4a)(R x4b)、-SR x4、-N(R x4)(R x4a)、-NO 2、-OC(O)R x4、-N(R x4)C(O)R x4a、-N(R x4)S(O) 2R x4a、-N(R x4)S(O)R x4a、-N(R x4)C(O)OR x4a、-N(R x4)C(O)N(R x4a)(R x4b)、-OC(O)N(R x4)(R x4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-R x3、-R x3a、-R x4、-R x4a、-R x4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，術語「取代基」係指選自由以下組成之群之部分：鹵素、-CN、-C(O)OR x1、-OR x1、-C(O)R x1、-C(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2N(R x1)(R x1a)、-S(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2R x1、-S(O)R x1、-N(R x1)S(O) 2N(R x1)(R x1a)、-SR x1、-N(R x1)(R x1a)、-NO 2、-OC(O)R x1、-N(R x1)C(O)R x1a、-N(R x1)S(O) 2R x1a、-N(R x1)S(O)R x1a、-N(R x1)C(O)OR x1a、-N(R x1)C(O)N(R x1)(R x1a)、-OC(O)N(R x1)(R x1a)、-T 0、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基；其中-T 0、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代，且其中C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R x3)-、-S(O) 2N(R x3)-、-S(O)N(R x3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R x3)S(O) 2N(R x3a)-、-S-、-N(R x3)-、-OC(OR x3)(R x3a)-、-N(R x3)C(O)N(R x3a)-及-OC(O)N(R x3)-； 各-R x1、-R x1a、-R x1b、-R x3、-R x3a係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代； 各-R x2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR x4、-OR x4、-C(O)R x4、-C(O)N(R x4)(R x4a)、-S(O) 2N(R x4)(R x4a)、-S(O)N(R x4)(R x4a)、-S(O) 2R x4、-S(O)R x4、-N(R x4)S(O) 2N(R x4a)(R x4b)、-SR x4、-N(R x4)(R x4a)、-NO 2、-OC(O)R x4、-N(R x4)C(O)R x4a、-N(R x4)S(O) 2R x4a、-N(R x4)S(O)R x4a、-N(R x4)C(O)OR x4a、-N(R x4)C(O)N(R x4a)(R x4b)、-OC(O)N(R x4)(R x4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-R x4、-R x4a、-R x4b係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，術語「取代基」係指選自由以下組成之群之部分：鹵素、-CN、-C(O)OR x1、-OR x1、-C(O)R x1、-C(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2N(R x1)(R x1a)、-S(O)N(R x1)(R x1a)、-S(O) 2R x1、-S(O)R x1、-N(R x1)S(O) 2N(R x1a)(R x1b)、-SR x1、-N(R x1)(R x1a)、-NO 2、-OC(O)R x1、-N(R x1)C(O)R x1a、-N(R x1)S(O) 2R x1a、-N(R x1)S(O)R x1a、-N(R x1)C(O)OR x1a、-N(R x1)C(O)N(R x1a)(R x1b)、-OC(O)N(R x1)(R x1a)、-T 0、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中-T 0、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代，且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R x3)-、-S(O) 2N(R x3)-、-S(O)N(R x3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R x3)S(O) 2N(R x3a)-、-S-、-N(R x3)-、-OC(OR x3)(R x3a)-、-N(R x3)C(O)N(R x3a)-及-OC(O)N(R x3)-； 各-R x1、-R x1a、-R x1b、-R x2、-R x3、-R x3a係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R x2取代。
在某些實施例中，視情況經取代之分子中最多6個-H原子獨立地經取代基置換，例如5個-H原子獨立地經取代基置換、4個-H原子獨立地經取代基置換、3個-H原子獨立地經取代基置換、2個-H原子獨立地經取代基置換或1個-H原子經取代基置換。
如本文所使用，術語「治療有效量」意謂足以治癒、緩解或部分遏止給定疾病及其併發症之臨床表現的量。用於各目的之有效量將取決於疾病之嚴重程度以及個體之重量及一般狀態。
如本文所使用，術語「經由注射投與」或「可注射性」係指因素之組合，該等因素諸如施加至注射器之推桿的力，該注射器包含以某一濃度(w/v)且在某一溫度下膨脹於液體中之本文所描述藥物結合物；連接至該注射器之出口的具有給定內徑的針頭；及自該注射器擠壓某一體積之藥物結合物通過針頭所需的時間。
如本文所用，術語「個體」係指動物。通常，動物為哺乳動物。術語「個體」亦指例如靈長類(例如，人類)、奶牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔子、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似物。在某些實施例中，個體為靈長類。在某些實施例中，個體係人類。在某些實施例中，目標為非人類靈長類動物。
如本文所使用，若個體將由於治療而在生物學上、醫學上或在生活品質中受益，則該個體「需要(in need of)」或「需要(in need thereof)」該治療。
如本文所使用，術語「不溶於水」係指少於1 g化合物可在20℃下溶解於一公升水中以形成均勻溶液。因此，術語「水可溶」係指1 g或更多可在20℃下溶解於一公升水中以形成均勻溶液的化合物。
如本文所用，術語「緩衝液」或「緩衝劑」係指將溶液之pH值保持在所需範圍內的化合物。
如本文所用，術語「乳化劑(emulsifying agent)」或「乳化劑(emulsifier)」係指一種化學化合物，諸如表面活性成分，其在乳液形成期間吸附在分散相與連續相溶液之間的新形成界面處，允許混合該等溶液且保護新形成的液滴不會立即重新聚結。
如本文所用，術語「pH調節劑」係指一種化學化合物，用於改變乳液中(諸如步驟(a)的乳液中)液滴的pH，且引發及/或促進第一及第二官能化HA之間的交聯反應。
如本文所用，術語「封端試劑」係指用於封端未反應之官能基(諸如-FG 1或-FG 2)之化學化合物。
如本文所用，術語「流動系統」或「連續流動系統」係指一種系統，其中在連續流動流而非分批生產中運行諸如聚合物沉澱的過程。
如本文所用，術語「用於沉澱及分離聚合物的裝置」係指包含連接至收集總成之流動系統的配置或設備。
如本文所用，術語「反溶劑」係指聚合物(諸如官能化HA)不溶於其中的溶劑。參考聚合物之術語「不溶性」意謂在室溫下(室溫可在17℃至30℃範圍內，諸如17℃至25℃)，小於一公克之該聚合物可溶解於一公升之該溶劑中以形成均質溶液。
如本文所用，「篩網渦旋離心機」係指將固體及液體與固-液混合物分離之過濾離心機。在典型的篩網渦旋離心機中，基本原理係將進入的饋料分離成液體及固體兩種產物形式。
一般而言，術語「包含(comprise)」或「包含(comprising)」亦涵蓋「由…組成(consist of)」或「由…組成(consisting of)」。
本發明係關於一種用於製備包含交聯透明質酸(HA)之水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑；及 (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球。
熟習此項技術者應認識到，用於製備包含交聯HA或其醫藥學上可接受之鹽之水凝膠微球的本發明方法可適用於製備包含任何交聯醣胺聚醣之任何水凝膠微球。換言之，本發明方法可同樣適用於製備包含交聯肝素、硫酸乙醯肝素、肝素前體、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素或硫酸角質素之水凝膠微球。特定言之，該方法可應用於製備包含交聯肝素前體之水凝膠微球。
本發明方法內之聚合經由懸浮聚合進行。在步驟(a)中，溶液A及B形成乳液，且在進行充分混合時間之後，溶液A變為分散相，而溶液B變為連續相。分散相不應與連續相混溶。此外，在步驟(a)中，官能化HA均係主要或完全直鏈HA股。
在步驟(a)中，形成乳液之溶液A及B之混合可能需要劇烈攪拌、壓力或其他力，其可藉由攪拌來達成，諸如藉由用斜葉式攪拌器與擋扳組合進行攪拌；振盪，諸如藉由在容器中，諸如在法爾康管(封閉管)中振盪；藉由使用轉子或定子；藉由使用超音波裝置；藉由使用靜態混合器，諸如藉由使用填充珠粒管柱或流動盤；藉由使用具有限定孔隙的膜，諸如藉由使用錯流式膜(cross-flow membrane)乳化技術，在該技術中待形成為微粒之材料之液體形式經由包含微米級孔隙的膜被推入分散相的流動溶液或經攪拌之細胞膜乳化；藉由使用具有由疏水性塑膠製成之表面的管狀膜，諸如WO 2022/198052 A2中所揭示之管狀膜，該文獻特此以全文引用之方式併入；藉由使用微流液滴產生器；或藉由在空氣中諸如藉由使用超音波霧化器進行噴霧聚合。
適合地，步驟(a)中之混合藉由攪拌(諸如藉由用斜葉式攪拌器與擋扳組合進行攪拌)或藉由使用微流體液滴產生器來達成。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑；及 (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球。
在某些實施例中，所有-FG 1均相同且所有-FG 2均相同。
適合地，本發明之方法之第一及第二官能化HA不是可選擇性地經其他官能基修飾。
本發明之方法視情況進一步包含對步驟(c)所得之水凝膠微球進行尺寸分級的步驟，以獲得具有特定粒度分佈之微球。
此外，熟習此項技術者應認識到，在整個說明書中，在本發明方法之任何步驟之間具有可選擇之洗滌或純化步驟。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球； (d) 視情況，對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微球進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之微球； (f) 視情況，在pH約7至約14範圍內，諸如約8至約12或諸如約8.5至約10之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g) 視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
應理解，步驟(d)亦可在步驟(e)、(f)、(g)或(h)之後進行。
在某些實施例中，第一及第二官能化HA之分子量獨立地在約80 kDa至約250 kDa範圍內，諸如約90 kDa至約200 kDa或諸如約100 kDa至約150 kDa範圍內。適當地，第一及第二官能化HA之分子量在100 kDa至150 kDa之範圍內。應理解，該HA可為多分散的且包含長度不等的聚合物鏈，且因此分子量不為單一值，亦即該HA以鏈長及分子量之分佈的形式存在。舉例而言，若第一或第二官能化HA之分子量為125 kDa，則該HA將包含約30 kDa至約400 kDa範圍內之聚合HA股。
在某些實施例中，經流式顯微法或此項技術中已知之其他類似方法所測定，在步驟(d)中，所得微球具有介於以下範圍內之直徑：約1 µm至約1000 µm，諸如約50 µm至約900 µm，諸如約100 µm至約700 µm，諸如約200 µm至約500 µm或諸如約50 µm至約500 µm。在某些實施例中，經流式顯微法所測定，在步驟(d)中，所得微球具有介於以下範圍內之直徑：約1 µm至約1000 µm，諸如約50 µm至約900 µm，諸如約100 µm至約700 µm，諸如約200 µm至約500 µm或諸如約50 µm至約500 µm。在某些實施例中，經流式顯微法所測定，在步驟(d)中，所得微球具有介於50 µm至500 µm範圍內之直徑。在某些實施例中，經流式顯微法所測定，在步驟(d)中，所得微球具有介於100 µm至200 µm範圍內之直徑。
適合地，經流式顯微法所測定，在步驟(d)中，所得微球具有≥50 µm之d 10值及≤900 µm之d 90值，諸如≥100 µm之d 10值及≤700 µm之d 90值或≥200 µm之d 10值及≤500 µm之d 90值。在某些實施例中，在步驟(d)中，所得微球具有≥100 µm之d 10值及≤200 µm之d 90值。較佳地，對於此等量測，該等微球於丁二酸鹽緩衝液中。
如本文所使用，參數d 10值表示尺寸分佈的一個點，低於該點時，樣品中含有材料總體積的10%。類似地，d 90值係含有低於材料體積的90%的尺寸。應理解，HA微球之膨脹可能受到在量測期間儲存微球之緩衝劑及/或pH值、重量莫耳滲透濃度及離子強度影響，且因此，此可對d 10及d 90值產生影響。
在某些實施例中，在步驟(f)中，緩衝劑之pH在8至12範圍內。在某些實施例中，在步驟(f)中，緩衝劑之pH在8.5至10範圍內。在某些實施例中，在步驟(f)中，緩衝劑之pH為約9。在某些實施例中，在步驟(f)中，緩衝劑之pH值為9。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微球進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(c)或(d)中所獲之微球； (f) 在pH約7至約14，諸如約8至約12，諸如約8.5至10範圍內之緩衝劑中培育步驟(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g) 將步驟(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
本發明亦關於可藉由本發明之方法中之任一者獲得或得到之水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽。
出人意料地發現，本發明之方法允許在合成有效交聯之水凝膠HA微球中使用具有較低取代度之直鏈官能化HA股。亦觀測到，由於微球之尺寸，HA微球及包含水凝膠HA微球之藥物結合物的可注射性比相干凝膠(諸如WO 2018/175788 A1中揭示的相干凝膠)的可注射性顯著提高。使用HA水凝膠微球作為藥物結合物載劑之另一優點為，在投與之前，微球可經洗滌且因此可輕易地移除可溶性副產物。另一方面，揭示於WO 2018/175788 A1中之相干凝膠無法進行洗滌步驟，因為該凝膠經由注射器中之聚合獲得，且其後直接注射至眼睛中。此外，揭示於WO 2018/175788 A1中之相干凝膠在填充於注射器中時易於硬化，使填充注射器之過程更具挑戰性。相比之下，本發明之HA水凝膠微球可在合成之後儲存，且隨後在稍後時間點輕易填充或進一步在最終容器中與藥物部分結合。
適合地，步驟(a)之溶液A包含第一及第二官能化HA以及可溶解該官能化HA的溶劑。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液A包含第一及第二官能化HA以及二甲亞碸、DMF、DMA或其混合物。在某些實施例中，步驟(a)之溶液A包含第一及第二官能化HA以及二甲亞碸。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液A包含第一及第二官能化HA、二甲亞碸以及水。在某些實施例中，步驟(a)之溶液A包含第一及第二官能化HA、二甲亞碸以及緩衝劑。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液A係水溶液且包含第一及第二官能化HA以及緩衝劑。
熟習此項技術者清楚，一般而言，片語「緩衝劑」可指一種緩衝劑或兩種或更多種緩衝劑之混合物。
例示性緩衝劑可係選自由以下組成之群：N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙磺酸(ACES)、乙酸鹽、2,2',2''-氮基三乙酸(ADA)、己二酸鹽、丙胺酸、銨、2-胺基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、2-胺基-2-甲基-1,3-丙二醇(AMPD)、N-(1,1-二甲基-2-羥基乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(AMPSO)、精胺酸、抗壞血酸鹽、天冬胺酸、苯甲酸鹽、N,N-雙(2-羥基乙基)-2-胺基乙磺酸(BES)、碳酸氫鹽、N,N-雙(2-羥基乙基)甘胺酸、雙-(2-羥基-乙基)-胺基-參(羥基甲基)-甲烷、1,3-雙(參(羥基甲基)甲胺基)丙烷、硼酸鹽、4-(環己胺基)丁烷-1-磺酸(CABS)、N-環己基-3-胺基丙磺酸(CAPS)、3-(環己胺基)-2-羥基-1-丙磺酸(CAPSO)、碳酸酯、N-環己基-2-胺基乙磺酸(CHES)、檸檬酸鹽、二乙醇胺、3-(N,N-雙[2-羥基乙基]胺基)-2-羥基丙磺酸(DIPSO)、依地酸鹽、乙醇胺、乙二胺、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、麩胺酸、甘胺酸、甘胺醯甘胺酸、胍、N-(2-羥基乙基)哌𠯤-N'-(4-丁磺酸) (HEPBS)、4-(2-羥基乙基)-1-哌𠯤乙磺酸(HEPES)、3-[4-(2-羥基乙基)哌𠯤-1-基]丙烷-1-磺酸(HEPPS)、N-(2-羥基乙基)哌𠯤-N'-(丙磺酸) (HEPPSO)、組胺酸、肼、咪唑、乳酸鹽、離胺酸、蘋果酸鹽、順丁烯二酸酯、2-(N-N-𠰌啉基)乙磺酸(MES)、偏磷酸鹽、甲胺、4-(4-𠰌啉基)丁磺酸(MOBS)、3-(N-N-𠰌啉基)丙磺酸(MOPS)、2-羥基-3-N-𠰌啉基丙磺酸(MOPSO)、噴替酸鹽、磷酸鹽、哌𠯤-N,N'-雙(2-乙磺酸) (PIPES)、哌𠯤、哌啶、哌𠯤-N,N'-雙(2-羥基丙磺酸) (POPSO)、丙酸鹽、吡啶、焦磷酸鹽、丙酮酸鹽、山梨酸鹽、丁二酸鹽、N-參(羥基甲基)甲基-4-胺基丁磺酸(TABS)、([參(羥基甲基)甲基胺基]丙磺酸(TAPS)、2-羥基-3-[參(羥基甲基)甲基胺基]-1-丙磺酸(TAPSO)、酒石酸鹽、牛磺酸、2-{[1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙-2-基]胺基}乙烷-1-磺酸(TES)、三(羥甲基)甲基甘胺酸(tricine)、三乙醇胺、三羥甲基胺基甲烷(tromethamine)及α-酮戊二酸酯。
熟習此項技術者清楚，亦包括緩衝劑之相應結合酸、鹼或鹽及其混合物。
在某些實施例中，水溶液包含第一及第二官能化HA以及緩衝劑，諸如選自由檸檬酸鹽及組胺酸或其混合物組成之群的緩衝劑。在某些實施例中，緩衝劑包含檸檬酸鹽與組胺酸之混合物。在某些實施例中，緩衝劑由檸檬酸鹽與組胺酸之混合物組成。
如本文所定義，術語「組胺酸」意欲涵蓋D-組胺酸及L-組胺酸兩者及其混合物。在某些實施例中，術語「組胺酸」係指L-組胺酸。在某些實施例中，術語「組胺酸」係指D-組胺酸。在某些實施例中，術語「組胺酸」係指L-組胺酸及D-組胺酸之混合物。
在某些實施例中，緩衝劑為L-組胺酸。
在某些實施例中，緩衝劑由檸檬酸鹽、L-組胺酸及氯化鈉之混合物組成。
在某些實施例中，水溶液包含第一及第二官能化HA、檸檬酸鹽及氯化鈉。
在某些實施例中，水溶液由第一及第二官能化HA、檸檬酸鹽及氯化鈉組成。在某些實施例中，水溶液包含第一及第二官能化HA、組胺酸及氯化鈉。
在某些實施例中，水溶液包含第一及第二官能化HA以及乳化劑，而溶液B包含溶劑。
通常可以約0.01 mM至約500 mM之量添加緩衝劑。在某些實施例中，緩衝劑之濃度在約0.5 mM至約350 mM範圍內。在某些實施例中，緩衝劑之濃度在約1 mM至約250 mM範圍內。在某些實施例中，緩衝劑之濃度在約5 mM至100 mM範圍內。在某些實施例中，緩衝劑之濃度為約100 mM。在某些實施例中，緩衝劑之濃度為100 mM。在某些實施例中，緩衝劑之濃度為約5 mM。在某些實施例中，緩衝劑之濃度為5 mM。
適當地，步驟(a)之溶液B包含乳化劑及溶劑。
熟習此項技術者清楚，一般而言，片語「溶劑」可指一種溶劑或兩種或更多種溶劑之混合物，且片語「乳化劑」可指一種乳化劑或兩種或更多種乳化劑之混合物。
例示性乳化劑可係選自由以下組成之群：脫水山梨糖醇酯，諸如脫水山梨糖醇單月桂酸酯(Span ®20)、脫水山梨糖醇單油酸酯(Span ®80)、脫水山梨糖醇單軟脂酸酯(Span ®40)、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯(Span ®60)、脫水山梨糖醇倍半油酸酯(Span ®83)、脫水山梨糖醇三油酸酯(Span ®85)或脫水山梨糖醇三硬脂酸酯(Span ®65)；PEG-30二聚羥基硬脂酸酯(Cithrol TMDPHS)；聚甘油基-3二異硬脂酸酯；脫水山梨糖醇油酸酯與羥基硬脂酸及乙二醇之共聚酯的混合物(Hypermer TM1083)；聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯(聚山梨醇酯80、Tween ®80及Tween ®80R)；醇，諸如丙醇、丁醇、戊醇、己醇、庚醇或辛醇；烷基及芳基胺鹽，諸如一級胺鹽、四級胺鹽、二級胺鹽或三級胺鹽；烷基二甲基甜菜鹼；烷基乙氧化物硫酸鹽；烷基苯基聚氧乙烯醚，諸如辛基酚聚醚9、Triton X-100、Igepal TM或Nonidet P40；烷基磷酸鹽，諸如單烷基磷酸鹽或二烷基磷酸鹽；烷基聚氧乙烯醚，諸如月桂醇聚醚-4、月桂醇聚醚-9、月桂醇聚醚-23、鯨蠟醇聚醚-2、鯨蠟醇聚醚-10、鯨蠟醇聚醚-20、鯨蠟硬脂醇聚醚-6、鯨蠟硬脂醇聚醚-20、鯨蠟硬脂醇聚醚-25、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-10、硬脂醇聚醚-20、油醇聚醚-2、油醇聚醚-10、油醇聚醚-20、癸醇聚醚-10或十三烷醇聚醚-10；烷基硫酸鹽，諸如十二烷基硫酸鈉(SDS)；烷基黃原酸鹽；膽酸鹽，諸如膽酸鈉鹽或去氧膽酸鈉鹽；陽離子脂質，諸如十六烷基三甲基銨溴化物、十六烷基三甲基銨氯化物、二(十八基)二甲基銨溴化物、二(十八基)二甲基銨氯化物、1,2-二醯基-3-三甲基銨丙烷、1,2-二醯基-3-二甲基銨丙烷、[2,3-雙(油醯基)丙基]三甲基銨氯化物或[N-(N-二甲基胺基乙烷)-胺甲醯基]膽固醇、二油醯基)；二烷基磺基丁二酸鹽，諸如Aerosol OT；乙二胺肆(乙氧基化物-嵌段-丙氧基化物)四醇，諸如Tetronic 304、Tetronic 904、Tetronic 90R4或Tetronic 1304；脂肪酸，諸如棕櫚酸、油酸、月桂酸、肉豆蔻酸、硬脂酸、二十烷酸、二十二烷酸、二十四烷酸、棕櫚油酸、亞麻油酸、次亞麻油酸或二十碳四烯酸及其鹽，諸如鈉鹽或鉀鹽；糖苷，諸如辛基葡糖苷或十二烷基麥芽糖苷；直鏈及分支鏈烷基苯磺酸鹽；聚(乙二醇)-嵌段-聚(丙二醇)-嵌段-聚(乙二醇)，諸如泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188 (Pluronic ®F68)、泊洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙姆231、泊洛沙姆234、泊洛沙姆235、泊洛沙姆237、泊洛沙姆238、泊洛沙姆282、泊洛沙姆284、泊洛沙姆288、泊洛沙姆331、泊洛沙姆333、泊洛沙姆334、泊洛沙姆335、泊洛沙姆338、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402、泊洛沙姆403、泊洛沙姆407、泊洛沙姆105苯甲酸鹽或泊洛沙姆182二苯甲酸鹽；聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯，諸如聚伸乙基氧基(40)-山梨醇六油酸酯、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯(聚山梨醇酯20、Tween ®20及Tween ®21)、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單軟脂酸酯(聚山梨醇酯40、Tween ®40)、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單硬脂酸酯(聚山梨醇酯60、Tween ®60及Tween ®61)、聚氧乙烯脫水山梨糖醇三油酸酯(聚山梨醇酯85、Tween ®85)或聚氧乙烯脫水山梨糖醇三硬脂酸酯(聚山梨醇酯65、Tween ®65)；聚乙烯醇；聚乙烯吡咯啶酮；澱粉及其衍生物及其混合物。
在某些實施例中，乳化劑係選自由以下組成之群：脫水山梨糖醇單月桂酸酯(Span ®20)、脫水山梨糖醇單油酸酯(Span ®80)、脫水山梨糖醇單軟脂酸酯(Span ®40)、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯(Span ®60)、脫水山梨糖醇倍半油酸(Span ®83)、脫水山梨糖醇三油酸酯(Span ®85)及脫水山梨糖醇酯三硬脂酸酯(Span ®65)。
在某些實施例中，乳化劑係選自由以下組成之群：脫水山梨糖醇單油酸酯(Span ®80)、PEG-30二聚羥基硬脂酸酯(Cithrol TMDPHS)、聚甘油基-3二異硬脂酸酯、及脫水山梨糖醇油酸酯與羥基硬脂酸及乙二醇之共聚酯的混合物(Hypermer TM1083)。
在某些實施例中，乳化劑係選自由以下組成之群：脫水山梨糖醇單油酸酯、PEG-30二聚羥基硬脂酸酯、聚甘油基-3二異硬脂酸酯、及脫水山梨糖醇油酸酯與羥基硬脂酸及乙二醇之共聚酯的混合物。
在某些實施例中，乳化劑為PEG-30二聚羥基硬脂酸酯。在某些實施例中，乳化劑為聚甘油基-3二異硬脂酸酯。在某些實施例中，乳化劑為脫水山梨糖醇油酸酯與羥基硬脂酸及乙二醇之共聚酯的混合物。
有利地，乳化劑為脫水山梨糖醇單油酸酯。
可以約0.01% (w/w)至約15% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約0.01% (w/w)至約10% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約0.1% (w/w)至約7% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約1% (w/w)至約5% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約1.5% (w/w)至約3.0% (w/w)之量添加乳化劑。
在某些實施例中，以約1.5% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以1.5% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約0.5% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以0.5% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以約0.25% (w/w)之量添加乳化劑。在某些實施例中，以0.25% (w/w)之量添加乳化劑。
在某些實施例中，溶劑可為任何不可與分散相混溶之溶劑。
在某些實施例中，溶劑係選自由極性溶劑、非極性溶劑、氟碳化物及離子液體組成之群。
在某些實施例中，溶劑係選自由以下組成之群：烴，諸如3-蒈烯、苯、異丙苯、環庚烷、環己烷、癸烷、十二烷、乙基苯、連三甲苯(hemellitene)、庚烷、己烷、異杜烯、檸檬烯、均三甲苯、間二甲苯、正丁基苯、正丙基苯、壬烷、辛烷、鄰二甲苯、對異丙基甲苯、十五烷、戊烷、蒎烷、蒎烯、對薄荷烷、連四甲苯、偏三甲苯、對二甲苯、苯乙烯、十四烷、甲苯、十三烷或十一烷；矽氧烷，諸如環甲聚矽氧烷、十甲基環五矽氧烷、六甲基二矽氧烷、八甲基三矽氧烷或液態聚矽氧烷(矽油)，以及酯，諸如乙醯三丁基檸檬酸酯、蓖麻油、月桂酸乙酯、三油酸甘油酯、液態甘油三酯、三醋精、甘油三丁酸酯及檸檬酸三乙酯。
在某些實施例中，溶劑係選自由以下組成之群：3-蒈烯、苯、異丙苯、環庚烷、環己烷、癸烷、十二烷、乙基苯、連三甲苯、庚烷、己烷、異杜烯、檸檬烯、均三甲苯、間二甲苯、正丁基苯、正丙基苯、壬烷、辛烷、鄰二甲苯、對異丙基甲苯、十五烷、戊烷、蒎烷、蒎烯、對薄荷烷、連四甲苯、偏三甲苯、對二甲苯、苯乙烯、十四烷、甲苯、十三烷及十一烷。
在某些實施例中，溶劑係選自由以下組成之群：乙醯三丁基檸檬酸酯、蓖麻油、月桂酸乙酯、三油酸甘油酯、液態甘油三酯、三醋精、甘油三丁酸酯及檸檬酸三乙酯。
在某些實施例中，溶劑為庚烷或十四烷。在某些實施例中，溶劑為庚烷。在某些實施例中，溶劑為十四烷。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含脫水山梨糖醇單油酸酯及庚烷。在某些實施例中，步驟(a)之溶液B由脫水山梨糖醇單油酸酯及庚烷組成。在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含PEG-30二聚羥基硬脂酸酯及庚烷。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含脫水山梨糖醇單油酸酯及十四烷。在某些實施例中，步驟(a)之溶液B由脫水山梨糖醇單油酸酯及十四烷組成。在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含PEG-30二聚羥基硬脂酸酯及十四烷。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含Hypermer TM1083及庚烷。在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含脫水山梨糖醇油酸酯與羥基硬脂酸及乙二醇之共聚酯的混合物以及庚烷。
在某些實施例中，步驟(a)之溶液B包含聚甘油基-3二異硬脂酸酯及庚烷。
步驟(a)可在約0℃至約150℃範圍內(諸如約4℃至約80℃)之溫度下進行充足的時間，諸如至少約10秒至至少約12小時，諸如至少30分鐘至至少約12小時以使官能化HA發生反應。
在某些實施例中，將步驟(a)之乳液置放於室溫下約5分鐘。
在某些實施例中，將步驟(a)之乳液置放於室溫下約12小時。應理解，室溫可在17℃至30℃，諸如17℃至25℃範圍內。
適合地，pH調節劑引發及/或加速第一與第二官能化HA之間的交聯反應。
pH調節劑可溶於步驟(a)之溶液A與溶液B兩者。此為本發明之水凝膠HA微球的合成提供了受控反應條件的優勢。
pH調節劑可為酸或鹼。
在某些實施例中，鹼係一種可溶於分散相及連續相中的非質子非親核胺。
例示性鹼可係選自由以下組成之群：N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)、1,4-二甲基哌𠯤、4-甲基𠰌啉、4-乙基𠰌啉、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷、1,1,4,7,10,10-六甲基三伸乙基四胺、1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷、參[2-(二甲胺基)乙基]胺、三乙胺、二異丙基乙胺(DIPEA)、三甲胺、N,N-二甲基乙胺、N,N,N',N'-四甲基-1,6-己二胺、N,N,N',N',N''-五甲基二伸乙基三胺、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯及六亞甲基四胺。
在某些實施例中，鹼係選自由以下組成之群：N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)、1,4-二甲基哌𠯤、4-甲基𠰌啉、4-乙基𠰌啉、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷、1,1,4,7,10,10-六甲基三伸乙基四胺、1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷、參[2-(二甲胺基)乙基]胺、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯及六亞甲基四胺。
在某些實施例中，鹼為N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)。
在某些實施例中，在步驟(c)之前，用包含緩衝劑之溶液稀釋步驟(b)之懸浮液，諸如pH小於或等於4之緩衝劑。在某些實施例中，該溶液包含丁二酸、硫酸鈉及乙二胺四乙酸(EDTA)。在某些實施例中，該溶液包含丁二酸、乙二胺四乙酸(EDTA)及異丙醇。在某些實施例中，該溶液包含氯化鈉。
在某些實施例中，在步驟(b)中，將pH調節劑添加至步驟(a)之乳液中，且接著在4至50℃範圍內之溫度下，諸如10至40℃，諸如20至30℃範圍內之溫度下培育。在某些實施例中，在步驟(b)中，該培育在約25℃下，諸如在25℃下發生。
在某些實施例中，在步驟(b)中，pH調節劑將乳液之pH值提高至約4。在某些實施例中，在步驟(a)中，亦即在添加pH調節劑之前，乳液之pH為至少1，諸如約2。應理解，在步驟(a)中，在水相中量測乳液之pH。
適當地，在步驟(d)中，尺寸分級可經由篩分進行，諸如經由濕式篩分，諸如藉由使用振動篩分機；攪拌池過濾；錯流式過濾；沉降；或離心。
有利地，尺寸分級經由濕式篩分進行。
在某些實施例中，在步驟(d)中，將所獲水凝膠HA微球在其中分散相之粒子可膨脹的溶劑中進行濕式篩分。
在某些實施例中，在步驟(d)中，將所獲水凝膠HA微球在溶劑(諸如包含緩衝劑及可選擇之可與水混溶之有機溶劑(諸如極性溶劑)的溶劑)中進行濕式篩分。例示性溶劑可係選自由以下組成之群：乙醇、甲醇、異丙醇、乙腈、二㗁烷、二甲基甲醯胺、二甲亞碸、三級丁醇、二甲基乙醯胺及N-甲基吡咯啶酮。
在某些實施例中，在步驟(e)及(h)中，微球用包含緩衝劑(諸如丁二酸)之溶液洗滌。在某些實施例中，該溶液包含丁二酸、氯化鈉、乙二胺四乙酸及聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯。在某些實施例中，在步驟(e)中，用包含丁二酸、氯化鈉、組胺酸及泊洛沙姆泊洛沙姆(Pluronic TMF-68)之溶液洗滌微球。
適合地，在步驟(f)中，水凝膠HA微球在pH高於8之緩衝劑(諸如硼酸鹽)中培育。在某些實施例中，該緩衝劑之pH為約9。在某些實施例中，該緩衝劑之pH為9。在某些實施例中，在步驟(f)中，水凝膠HA微球在硼酸鹽及泊洛沙姆(Pluronic TMF-68)中培育。
該培育可在4至50℃，諸如10至40℃，諸如20至30℃範圍內之溫度下進行。在某些實施例中，在步驟(f)中，該培育在25℃下進行。
在某些實施例中，用還原劑處理步驟(f)之水凝膠HA微球。
例示性還原劑可係選自由以下組成之群：1,3-丙二硫醇、2-巰基乙醇、3-巰基丙酸、抗壞血酸、二氫硫辛酸、二硫赤藻糖醇、二硫蘇糖醇、硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、參(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)及硫代乙醇酸。
在某些實施例中，還原劑係選自由二硫蘇糖醇及參(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)組成之群。
適合地，還原劑為二硫蘇糖醇。
用官能基對HA進行化學修飾可賦予HA官能性。熟習此項技術者應認識到一個官能化HA可具有超過一個反應性官能基，諸如-FG 1或-FG 2。
在某些實施例中，-FG 1、-FG 2及-FG 3係獨立地選自由以下組成之群： (y-1)、 (y-2)、 (y-3)、 (y-4)、 (y-5)、 (y-6)、 (y-7)、 (y-8)、 (y-9)、 (y-10)、 (y-11)、 (y-12)、 (y-13)、 (y-14)、 (y-15)、 (y-16)、 (y-17)、 (y-18)、 (y-19)、 (y-20)、 (y-21)、 (y-22)、 (y-22a)、 (y-23)、 (y-24)、 (y-25)、 (y-26)、 (y-27)、 (y-28)、 (y-29)、 (y-30)、 (y-31) (y-32)、 (y-33)、 (y-34)、 (y-35)、 (y-36)、 (y-37)、 (y-38)、 (y-39)、 (y-40)、 (y-41)、 (y-42)、 (y-43)、 (y-44)、 (y-45)、 (y-46)、 (y-47)、 (y-48)、 (y-49)、 (y-50)、 (y-51)、 (y-52)、 (y-53)、 (y-54)、 (y-55)、 (y-56)、 (y-57)、 (y-58)、 (y-59)、 (y-60)、 (y-61)、 (y-62)、 (y-63)、 (y-64)、 (y-65)、 (y-66)、 (y-67)、 (y-68)、 (y-69)、 (y-70)、 (y-71)、 (y-72)、 (y-73)、 (y-74)、 (y-75)、 (y-76)、 (y-77)、 (y-78)、 (y-79)、 (y-80)、 (y-81)、 (y-82)、 (y-83)、 (y-84)、 (y-85)、 (y-86)及 (y-87)； 其中虛線指示與第一或第二官能化HA之連接，諸如與變數-X'-或-Y'-之連接； 各-R 08、-R 08a及-R 08b係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代； 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各n獨立地為1、2、3或4； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 各-Y 03及-Y 03a係獨立地選自由以下組成之群：-F、-Cl、-Br、-I、-OR、-NR 011R 011a及-SR 011； 各-Y 04-係獨立地選自-O-、-S-、-NR 011-、-CR 011R 011a-；且 各-R 011及-R 011a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 013)-、-S(O) 2N(R 013)-、-S(O)N(R 013)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 013)S(O) 2N(R 013a)-、-S-、-N(R 013)-、-OC(OR 013)(R 013a)-、-N(R 013)C(O)N(R 013a)-及-OC(O)N(R 013)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代；且 各-R 12、-R 013及-R 013a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-FG 1、-FG 2及-FG 3係獨立地選自由以下組成之群： (y-1)、 (y-2)、 (y-6)、 (y-7)、 (y-8)、 (y-9)、 (y-16)、 (y-17)、 (y-18)、 (y-19)、 (y-21)、 (y-22)、 (y-22a)、 (y-23)、 (y-26)、 (y-29)、 (y-30)、 (y-31)、 (y-35)、 (y-37)、 (y-39)、 (y-44)、 (y-45)、 (y-46)、 (y-47)、 (y-49)、 (y-56)、 (y-57)、 (y-58)、 (y-60)、 (y-61)、 (y-63)、 (y-69)、 (y-70)、 (y-71)、 (y-72)、 (y-73)、 (y-74)、 (y-75)、 (y-76)、 (y-77)、 (y-79)、 (y-80)、 (y-81)、 (y-82)、 (y-85)及 (y-86)； 其中虛線指示與第一或第二官能化HA之連接，諸如與變數-X'-或-Y'-之連接； 各-R 08、-R 08a及-R 08b係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代； 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各n獨立地為1、2、3或4； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 各-Y 03及-Y 03a係獨立地選自由以下組成之群：-F、-Cl、-Br、-I、-OR、-NR 011R 011a及-SR 011； 各-Y 04-係獨立地選自-O-、-S-、-NR 011-、-CR 011R 011a-； 各-R 011及-R 011a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 013)-、-S(O) 2N(R 013)-、-S(O)N(R 013)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 013)S(O) 2N(R 013a)-、-S-、-N(R 013)-、-OC(OR 013)(R 013a)-、-N(R 013)C(O)N(R 013a)-及-OC(O)N(R 013)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代；且 各-R 12、-R 013及-R 013a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，pH調節劑增加步驟(a)之乳液的pH，且-FG 1及-FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-1)、 (y-7)、 (y-16)、 (y-17)、 (y-18)、 (y-19)、 (y-21)、 (y-22)、 (y-22a)、 (y-26)、 (y-29)、 (y-30)、 (y-31)、 (y-35)、 (y-37)、 (y-39)、 (y-44)、 (y-45)、 (y-49) (y-56)、 (y-57)、 (y-58)、 (y-60)、 (y-69)、 (y-75)、 (y-76)、 (y-81)、 (y-85)及 (y-86)； 其中虛線指示與第一或第二官能化HA之連接，諸如與變數-X'-或-Y'-之連接； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代； 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各n獨立地為1、2、3或4； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 各-Y 03及-Y 03a係獨立地選自由以下組成之群：-F、-Cl、-Br、-I、-OR、-NR 011R 011a及-SR 011； 各-R 011及-R 011a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 013)-、-S(O) 2N(R 013)-、-S(O)N(R 013)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 013)S(O) 2N(R 013a)-、-S-、-N(R 013)-、-OC(OR 013)(R 013a)-、-N(R 013)C(O)N(R 013a)-及-OC(O)N(R 013)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 012取代； 各-R 012、-R 013及-R 013a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，pH調節劑降低步驟(a)之乳液的pH，且-FG 1及-FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-1)、 (y-6)、 (y-9)、 (y-22)、 (y-22a)、 (y-23)、 (y-44)、 (y-45)、 (y-46)及 (y-47)， 其中虛線指示與第一或第二官能化HA之連接，諸如與變數-X'-或-Y'-之連接； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-6)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-9)、 (y-47)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-6)，則-FG 2具有式(y-9)；若-FG 1具有式(y-49)，則-FG 2具有式(y-85)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-47)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。
在某些實施例中，pH調節劑增加步驟(a)之乳液的pH，且-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。
在某些實施例中，pH調節劑降低步驟(a)之乳液的pH，且-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-6)及 (y-44)， 其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接； 各-R 08、-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-9)及 (y-47)， 其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-6)，則-FG 2具有式(y-9)且若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-47)。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線表示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自約1增加至約9，諸如自約1增加至約5.5，或諸如自約2增加至約4，且各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自約1增加至約9，諸如自約1增加至約5.5，或諸如自約2增加至約4，且-Y 02及-Y 02a均為-H。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自1增加至5.5，且各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自1增加至5.5，且-Y 02及-Y 02a均為-H。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自2增加至4，且各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。
在某些實施例中，-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與第一官能化HA之連接，諸如與變數-X'-之連接；-FG 2為 (y-57)，其中虛線指示與第二官能化HA之連接，諸如與變數-Y'-之連接，pH調節劑使步驟(a)之乳液的pH自2增加至4，且-Y 02及-Y 02a均為-H。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-FG 1、-FG 2如本文別處所定義； 各-X-、-Y-獨立地為羰基或不存在； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3單元： ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X-、-Y-、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； 各-L 3-獨立地為鍵聯部分或不存在； (d) 視情況，對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g) 視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
本發明亦關於上述方法，其中步驟(b)、(d)及(e)不是可選擇的，而步驟(f)、(g)及(h)不存在。
本發明亦關於上述方法，其中步驟(b)、(d)及(e)不是可選擇的，而步驟(f)、(g)及(h)不存在，且步驟(a)之溶液A進一步包含緩衝劑，步驟(a)之溶液B包含乳化劑及溶劑，其中該緩衝劑、乳化劑及溶劑如本文中其他地方所定義使用。
應理解，在整個說明書中-L 3-係由-FG 1與-FG 2反應而產生的鍵聯。
-X'-及-Y'-之特定實施例經本文中其他地方所描述。
熟習此項技術者應認識到，獲自上文步驟中之任一者的水凝膠HA微球亦可包含分別具有一或多個未反應之-FG 1或-FG 2的Z 5及/或Z 6單元，亦即其中一或多個-FG 1不與一或多個-FG 2反應之步驟(a)的Z 5及/或Z 6單元。亦應理解，該水凝膠亦可包含Z 5及/或Z 6單元，其中一或多個-FG 1及/或-FG 2經歷水解或變得無活性。
在某些實施例中，大部分-FG 1或-FG 2部分不自反應。如本文所用，術語「自反應」就-FG 1或-FG 2而言意謂部分一個-FG 1不與另一個部分-FG 1反應，且一個部分-FG 2不與另一個部分-FG 2反應。
根據下圖所示Z 3單元之一部分的部分化學結構，水凝膠HA微球可為不可降解的或可生物降解的： ， 其中無標記之虛線指示與-X-之連接，而標有星號之虛線指示與-Y-之連接。
適當地，本發明之水凝膠HA微球在生理學條件下可生物降解。
在某些實施例中，-X-及-Y-均為羰基部分。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 視情況，對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球，以提供包含複數個Z 3-i'單元之水凝膠HA微球： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (g) 視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
本發明亦關於上述方法，其中步驟(b)、(d)及(e)不是可選擇的，而步驟(f)、(g)及(h)不存在。
本發明亦關於上述方法，其中步驟(b)、(d)及(e)不是可選擇的，而步驟(f)、(g)及(h)不存在，且步驟(a)之溶液A進一步包含緩衝劑，步驟(a)之溶液B包含乳化劑及溶劑，且其中該緩衝劑、乳化劑及溶劑如本文中其他地方所定義使用。
本發明亦關於上述方法，其中步驟(b)、(d)及(e)不是可選擇的，而步驟(f)、(g)及(h)為可選擇的。
-X'-及-Y'-之特定實施例經本文中其他地方所描述。
熟習此項技術者應認識到，在以上步驟(f)中，所得水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽可包含複數個Z 3-i'單元及/或複數個Z 3-i''單元，其視硫代丁二醯亞胺環之兩個羰基中哪一個發生開環水解而定。Z 3-i''單元的結構展示如下： ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各R a1、-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基；且 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或化學鍵。
在某些實施例中，步驟(f)之水凝膠HA微球包含複數個Z 3-i'及Z 3-i''單元。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中溶液A進一步包含緩衝劑，諸如檸檬酸鹽及/或組胺酸，且溶液B包含溶劑，諸如庚烷或十四烷以及乳化劑，諸如脫水山梨糖醇單油酸酯；其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-具有式(x0)； 各-Y'-具有式(y0)； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 洗滌步驟(d)中所獲之水凝膠HA微球；及 (f) 收集步驟(e)之該等水凝膠HA微球。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中溶液A進一步包含檸檬酸鹽及/或組胺酸，且溶液B包含庚烷及脫水山梨糖醇單油酸酯或十四烷及脫水山梨糖醇單油酸酯；其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； 各-Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加TMEDA； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 洗滌步驟(d)中所獲之水凝膠HA微球；及 (f) 收集步驟(e)之該等水凝膠HA微球。
本發明亦關於上文所描述之方法，其中溶液A進一步包含適合的鹽，諸如NaCl。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中溶液A進一步包含緩衝劑，諸如組胺酸，且溶液B包含溶劑，諸如庚烷或十四烷以及乳化劑，諸如PEG-30二聚羥基硬脂酸酯；其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-及-Y'-具有式(y0)； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 洗滌步驟(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 在硼酸鹽中培育步驟(e)之該等水凝膠HA微球，以提供包含複數個Z 3-i'單元之水凝膠HA微球： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (g) 將步驟(f)之該等水凝膠HA微球與DTT一起培育； (h) 洗滌步驟(g)中所獲之微球；及 (i) 收集步驟(h)之該等水凝膠HA微球。
在某些實施例中，本發明之方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中溶液A進一步包含組胺酸，且溶液B包含庚烷或十四烷及PEG-30二聚羥基硬脂酸酯；其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-及-Y'-具有式(y4)： ， 其中對於-X'-，無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與硫原子之連接； 其中對於-Y'-，無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加TMEDA； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 洗滌步驟(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 在硼酸鹽中培育步驟(e)之該等水凝膠HA微球，以提供包含複數個Z 3-i'單元之水凝膠HA微球： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (g) 將步驟(f)之該等水凝膠HA微球與DTT一起培育； (h) 洗滌步驟(g)中所獲之微球；及 (i) 收集步驟(h)之該等水凝膠HA微球。
本發明亦關於上文所描述之方法，其中溶液A進一步包含鹽，諸如NaCl。
熟習此項技術者應理解，在關於單元Z 3的整個說明中，連接至包含-X'-之單元之一部分的對應相鄰單元可為如對應Z 3單元中之任一者中所定義的交聯單元，或連接至未反應之Z 5單元或Z 1單元或第一官能化HA中亦存在或可在聚合期間產生之任何其他單元。類似地，應理解，連接至包含-Y'-之單元之一部分的對應相鄰單元可為如對應Z 3單元中之任一者中所定義的交聯單元，或連接至未反應之Z 6單元或Z 1單元或第二官能化HA中亦存在或可在聚合期間產生之任何其他單元。相同基本原理適用於Z 3-i、Z 3-i'及Z 3-ii''單元及其相對應的Z 5-i及Z 6-i單元。
第一官能化HA之-FG 1官能化程度可在約0.001%至100%範圍內，諸如約0.01%至約90%，諸如約0.1%至約80%，諸如約1%至約70%，諸如約1%至約60%，諸如約1%至約50%，諸如約1%至約40%，諸如約1%至約30%，諸如約1%至約20%，諸如約1%至約15%，諸如約1%至約10%，諸如約1%至7%，諸如約2%至約6%或諸如約3%至約5%範圍內。在某些實施例中，第一官能化HA之-FG 1官能化程度為約5%。
第二官能化HA之-FG 2官能化程度可在約0.001%至100%範圍內，諸如約0.01%至約90%，諸如約0.1%至約80%，諸如約1%至約70%，諸如約1%至約60%，諸如約1%至約50%，諸如約1%至約40%，諸如約1%至約30%，諸如約1%至約20%，諸如約1%至約15%，諸如約1%至約10%，諸如約5%至約15%，諸如約6%至約14%，諸如約7%至約13%，諸如約8%至約12%，諸如約10%至約12%或諸如約9%至約11%範圍內。在某些實施例中，第二官能化HA之-FG 2官能化程度為約10%。
在某些實施例中，第一官能化HA之-FG 1官能化程度為約5%且第二官能化HA之-FG 2官能化程度為約10%。
更特定言之，引入硫醇官能基以提供HA官能化程度，範圍為：約0.001%至100%，諸如約0.01%至約90%，諸如約0.1%至約80%，諸如約1%至約70%，諸如約1%至約60%，諸如約1%至約50%，諸如約1%至約40%，諸如約1%至約30%，諸如約1%至約20%，諸如約1%至約15%，諸如約1%至約10%，諸如約1%至7%，諸如約2%至約6%或諸如約3%至約5%。
適當地，引入硫醇官能基以提供約5%之HA官能化程度。
更特定言之，引入順丁烯二醯亞胺官能基以提供HA官能化程度，範圍可為：約0.001%至100%，諸如約0.01%至約90%，諸如約0.1%至約80%，諸如約1%至約70%，諸如約1%至約60%，諸如約1%至約50%，諸如約1%至約40%，諸如約1%至約30%，諸如約1%至約20%，諸如約1%至約15%，諸如約1%至約10%，諸如約5%至約15%，諸如約6%至約14%，諸如約7%至約13%，諸如約8%至約12%，諸如約10%至約12%或諸如約9%至約11%。
適當地，引入順丁烯二醯亞胺官能基以提供約10%之HA官能化程度。
適當地，引入硫醇官能基以提供約5%之HA官能化程度，且引入順丁烯二醯亞胺官能基以提供約10%之HA官能化程度。
如本文中所使用，術語「(HA)官能化程度」係指官能化HA雙醣單元之數目與特定HA內所包含之所有雙醣單元之總數之間的相對比率。
在某些實施例中，各-L 3-具有式(x-101)： (x-101)， 其中標有星號之虛線指示與-Y'-之連接，且無標記之虛線指示與-X'-之連接。
在某些實施例中，各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各-T'-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各-T'-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 25烷基、C 2 - 25烯基及C 2 - 25炔基；其中C 1 - 25烷基、C 2 - 25烯基及C 2 - 25炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 25烷基、C 2 - 25烯基及C 2 - 25炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各-T'-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各-T'-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 18烷基、C 2 - 18烯基及C 2 - 18炔基；其中C 1 - 18烷基、C 2 - 18烯基及C 2 - 18炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 18烷基、C 2 - 18烯基及C 2 - 18炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各-T'-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各-T'-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基；其中C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各-T'-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各-T'-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 5烷基、C 2 - 5烯基及C 2 - 5炔基；其中C 1 - 5烷基、C 2 - 5烯基及C 2 - 5炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 5烷基、C 2 - 5烯基及C 2 - 5炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各-T'-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各-T'-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 4烷基；其中C 1 - 4烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群；其中C 1 - 4烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-X'-具有式(x0)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； v 0係選自由0及1組成之群； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-N(R y1)-及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； 其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -X 2-係選自由-N(R 1)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =X 3係選自由=O、=N(R 1)及=S組成之群； -X 5-係C 1 - 20烷基，該C 1 - 20烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-C(O)O-、-T-、-N(R y1)-及-N(R y1)C(O)-之基團；且該C 1 - 20烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-N(R y1)-及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； -R 1係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 2係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 3、-OR 3、-C(O)R 3、-C(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2N(R 3)(R 3a)、-S(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2R 3、-S(O)R 3、-N(R 3)S(O) 2N(R 3a)(R 3b)、-SR 3、-N(R 3)(R 3a)、-NO 2、-OC(O)R 3、-N(R 3)C(O)R 3a、-N(R 3)S(O) 2R 3a、-N(R 3)S(O)R 3a、-N(R 3)C(O)OR 3a、-N(R 3)C(O)N(R 3a)(R 3b)、-OC(O)N(R 3)(R 3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 3、-R 3a及-R 3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，式(x0)之v 0為0。在某些實施例中，式(x0)之v 0為1。
在某些實施例中，-X'-具有式(x1)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -X 2-係選自由-N(R 1)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =X 3係選自由=O、=N(R 1)及=S組成之群； -X 6-係C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-C(O)O-、-T-、-N(R y1)-及-N(R y1)C(O)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； -R 1係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 2係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 3、-OR 3、-C(O)R 3、-C(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2N(R 3)(R 3a)、-S(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2R 3、-S(O)R 3、-N(R 3)S(O) 2N(R 3a)(R 3b)、-SR 3、-N(R 3)(R 3a)、-NO 2、-OC(O)R 3、-N(R 3)C(O)R 3a、-N(R 3)S(O) 2R 3a、-N(R 3)S(O)R 3a、-N(R 3)C(O)OR 3a、-N(R 3)C(O)N(R 3a)(R 3b)、-OC(O)N(R 3)(R 3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 3、-R 3a及-R 3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-X'-具有式(x2)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-、-X 7-、-X 8-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -R 1、-R 5、-R 10係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 6取代； -R 6係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 7、-OR 7、-C(O)R 7、-C(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2N(R 7)(R 7a)、-S(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2R 7、-S(O)R 7、-N(R 7)S(O) 2N(R 7a)(R 7b)、-SR 7、-N(R 7)(R 7a)、-NO 2、-OC(O)R 7、-N(R 7)C(O)R 7a、-N(R 7)S(O) 2R 7a、-N(R 7)S(O)R 7a、-N(R 7)C(O)OR 7a、-N(R 7)C(O)N(R 7a)(R 7b)、-OC(O)N(R 7)(R 7a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 7、-R 7a及-R 7b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-X'-具有式(x3)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -R 1、-R 5、-R 10係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 6取代； -R 6係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 7、-OR 7、-C(O)R 7、-C(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2N(R 7)(R 7a)、-S(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2R 7、-S(O)R 7、-N(R 7)S(O) 2N(R 7a)(R 7b)、-SR 7、-N(R 7)(R 7a)、-NO 2、-OC(O)R 7、-N(R 7)C(O)R 7a、-N(R 7)S(O) 2R 7a、-N(R 7)S(O)R 7a、-N(R 7)C(O)OR 7a、-N(R 7)C(O)N(R 7a)(R 7b)、-OC(O)N(R 7)(R 7a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 7、-R 7a及-R 7b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為1。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為2。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為3。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為4。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為5。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為6。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為7。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為8。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為9。在某些實施例中，式(x1)、(x2)或(x3)之b 0為10。
在某些實施例中，-X'-具有式(x4)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接；且 c 0係選自由以下組成之群：1、2、3、4、5、6、7、8、9及10。
在某些實施例中，式(x4)之c 0為1。在某些實施例中，式(x4)之c 0為2。在某些實施例中，式(x4)之c 0為3。在某些實施例中，式(x4)之c 0為4。在某些實施例中，式(x4)之c 0為5。在某些實施例中，式(x4)之c 0為6。在某些實施例中，式(x4)之c 0為7。在某些實施例中，式(x4)之c 0為8。在某些實施例中，式(x4)之c 0為9。在某些實施例中，式(x4)之c 0為10。
在某些實施例中，-Y'-具有式(y0)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-、-L 4-或-L 5-之連接； -Y 1-、-Y 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -Y 2-係選自由-N(R 2)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =Y 3係選自由=O、=N(R 2)及=S組成之群； -R 1、-R 2係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； -R 3係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 4、-OR 4、-C(O)R 4、-C(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2N(R 4)(R 4a)、-S(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2R 4、-S(O)R 4、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)(R 4b)、-SR 4、-N(R 4)(R 4a)、-NO 2、-OC(O)R 4、-N(R 4)C(O)R 4a、-N(R 4)S(O) 2R 4a、-N(R 4)S(O)R 4a、-N(R 4)C(O)OR 4a、-N(R 4)C(O)N(R 4a)(R 4b)、-OC(O)N(R 4)(R 4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 4、-R 4a及-R 4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-X'-具有式(y0)，其中無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1之連接。
在某些實施例中，式(y0)之-Y 2-為-N(R 2)-。在某些實施例中，式(y0)之-Y 2-為-O-。在某些實施例中，式(y0)之-Y 2-為-S-。在某些實施例中，式(y0)之-Y 2-為-Se-。
在某些實施例中，式(y0)之=Y 3為=O。在某些實施例中，式(y0)之=Y 3為=N(R 2)。在某些實施例中，式(y0)之=Y 3為=S。
在某些實施例中，-Y'-具有式(y1)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-、-L 4-或-L 5-之連接； -Y 1-、-Y 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -Y 2-係選自由-N(R 2)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； -R 1、-R 2係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； -R 3係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 4、-OR 4、-C(O)R 4、-C(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2N(R 4)(R 4a)、-S(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2R 4、-S(O)R 4、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)(R 4b)、-SR 4、-N(R 4)(R 4a)、-NO 2、-OC(O)R 4、-N(R 4)C(O)R 4a、-N(R 4)S(O) 2R 4a、-N(R 4)S(O)R 4a、-N(R 4)C(O)OR 4a、-N(R 4)C(O)N(R 4a)(R 4b)、-OC(O)N(R 4)(R 4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 4、-R 4a及-R 4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-X'-具有式(y1)，其中無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1之連接。
在某些實施例中，-Y'-具有式(y2)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-、-L 4-或-L 5-之連接； -R 1、-R 5係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、丙基及異丙基；且 a 1、a 2係獨立地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5、6、7、8、9及10，較佳地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5、6、7及8，更佳地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5及6，或甚至更佳地選自由以下組成之群：1、2及3。
在某些實施例中，-X'-具有式(y2)，其中無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1之連接。
在某些實施例中，-Y'-具有式(y3)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-、-L 4-或-L 5-之連接；且 -R 1、-R 5係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、丙基及異丙基。
在某些實施例中，-X'-具有式(y3)，其中無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接。
在某些實施例中，-Y'-具有式(y4)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-、-L 4-或-L 5-之連接。
在某些實施例中，-X'-具有式(y4)，其中無標記之虛線指示與-X-之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接。
本發明之水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽可有利地用作藥物載劑，因為其延長藥物之半衰期且展現生理學耐受性。
本發明亦關於一種製備藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 提供藉由本發明之方法中之任一者獲得之水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽，其中該水凝膠包含複數個具有一或多個未反應之-FG 1或-FG 2之Z 5及/或Z 6單元； (b) 提供單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3、雙結合物試劑FG 3-L 2-L 1-D-L 1-L 2-FG 3或式(t)之三結合物試劑： (t)， 其中-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或化學鍵； 各-FG 3獨立地為與Z 5上之-FG 1或與Z 6上之-FG 2反應之官能基； (c) 將步驟(a)之該等水凝膠HA微球與步驟(b)之該單結合物、雙結合物或三結合物試劑混合； (d) 視情況，將步驟(c)之該藥物結合物或其醫藥學上之鹽與封端試劑混合；及 (e) 收集步驟(c)或(d)之該藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。
製備藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽之方法亦可包含對步驟(c)或(d)中所獲之藥物結合物進行視情況之洗滌或純化步驟。
本發明亦關於可藉由本發明之方法獲得之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。
熟習此項技術者應認識到，本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽亦可包含一或多個未反應之-FG 1或-FG 2。為了避免該等基團與藥物部分或化合物上之其他官能基(可能在投與藥物結合物之位置處發現)之間發生非所要反應，需要使用封端試劑。
例示性封端試劑可係選自由以下組成之群： 、 、 、 及 。
更特定言之，為避免HA水凝膠微球上之未反應的順丁烯二醯亞胺與諸如硫醇(特定言之，麩胱甘肽)之親核化合物或諸如胺之藥物部分上的官能基之間發生不當反應，該未反應的順丁烯二醯亞胺與封端試劑反應。有利地，式(r01)之封端試劑在其他含硫醇化合物存在下在生理pH值及溫度下抑制所形成的硫代丁二醯亞胺的逆向邁克爾反應(retro-Michael reaction)及交換反應。此對於將藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽投與至天然存在有麩胱甘肽的組織或器官(諸如眼睛)中尤其有益。
在某些實施例中，步驟(b)之試劑係單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3。在某些實施例中，步驟(b)之試劑為雙結合物試劑FG 3-L 2-L 1-D-L 1-L 2-FG 3。在某些實施例中，步驟(b)之試劑為式(t)之三結合物試劑。
在某些實施例中，-FG 3具有式(y-56)或(y-57)： (y-56)或 (y-57)， 其中虛線指示與-L 2-之連接；且 -Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。
在某些實施例中，步驟(b)之試劑為式(m1)或(m2)之單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3： (m1)或 (m2)。
如本文所使用，在整個說明書中，出於方便，大部分結構不描繪立體化學且由此表示所有可能的立體異構物。
在某些實施例中，步驟(b)之試劑為式(m'1)或(m'2)之單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3： (m'1)或 (m'2)。
本發明亦關於本發明之水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽作為藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽中之載劑的用途。
本發明之另一態樣係關於一種可藉由本發明之方法獲得之包含水凝膠HA微球的藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明亦關於一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其包含HA水凝膠微球，該HA水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，該藥物結合物包含複數個以下單元： 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 4-獨立地為鍵聯部分；且 各R a1、-R a2、-X-、-Y-、-X'-、-Y'-、-L 1-、-L 2-及-L 3-如本文別處所定義使用。
熟習此項技術者應瞭解，本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽可包含少量其他HA單元，其可由各種分子內反應產生，諸如-D在兩個官能化HA股之間充當交聯劑的HA單元。另外，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽可包含其中發生降解或其他修飾的少量HA單元。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含HA水凝膠微球，該HA水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點；且 各R a1、-R a2、-X'-、-Y'-、-D、-L 1-及-L 2-如本文別處所定義使用。
在某些實施例中，各-L 3-、-L 4-或-L 5-係獨立地選自由以下組成之群： (x-17)、 (x-18)、 (x-19)、 (x-20)、 (x-21)、 (x-22)、 (x-23)、 (x-24)、 (x-25)、 (x-26)、 (x-27)、 (x-28)、 (x-29)、 (x-30)、 (x-31)、 (x-32)、 (x-33)、 (x-34)、 (x-35)、 (x-36)、 (x-37)、 (x-38)、 (x-39)、 (x-40)、 (x-41)、 (x-42)、 (x-43)、 (x-44)、 (x-45)、 (x-46)、 (x-47)、 (x-48)、 (x-49)、 (x-50)、 (x-51)、 (x-52)、 (x-53)、 (x-54)、 (x-55)、 (x-56)、 (x-57)、 (x-58)、 (x-59)、 (x-60)、 (x-61)、 (x-62)、 (x-63)、 (x-64)、 (x-65)、 (x-66)、 (x-67)、 (x-68)、 (x-69)、 (x-70)、 (x-71)、 (x-72)、 (x-73)、 (x-74)、 (x-75)、 (x-76)、 (x-77)、 (x-78)、 (x-79)、 (x-80)、 (x-81)、 (x-82)、 (x-83)、 (x-84)、 (x-85)、 (x-86)、 (x-87)、 (x-88)、 (x-89)、 (x-90)、 (x-91)、 (x-92)、 (x-93)、 (x-94)、 (x-95)、 (x-96)、 (x-97)、 (x-98)、 (x-99)、 (x-100)、 (x-101)、 (x-102)、 (x-103)、 (x-104)、 (x-105)、 (x-106)、 (x-107)、 (x-108)、 (x-109)、 (x-110)、 (x-111)、 (x-112)、 (x-113)、 (x-114)、 (x-115)、 (x-116)、 (x-117)、 (x-118)、 (x-119)、 (x-120)、 (x-121)、 (x-122)、 (x-123)、 (x-124)、 (x-125)、 (x-126)、 (x-127)、 (x-128)、 (x-129)、 (x-130)、 (x-131)、 (x-132)、 (x-133)、 (x-134)、 (x-134a)、 (x-135)、 (x-136)、 (x-137)、 (x-138)、 (x-139)、 (x-140)、 (x-141)、 (x-142)、 (x-143)、 (x-144)、 (x-145)、 (x-146)、 (x-147)、 (x-148)、 (x-149)、 (x-150)、 (x-151)、 (x-152)、 (x-153)、 (x-154)、 (x-155)、 (x-156)、 (x-157)、 (x-158)、 (x-159)、 (x-160)、 (x-161)、 (x-162)、 (x-163)、 (x-164)、 (x-165)、 (x-166)、 (x-167)、 (x-168)、 (x-169)、 (x-170)、 (x-171)、 (x-172)、 (x-173)、 (x-174)、 (x-175)及 (x-176)； 其中對於-L 3-，一條虛線指示與-X'-之連接，而另一條虛線指示與-Y'-之連接；對於-L 4-，一條虛線指示與-L 2-之連接，而另一條虛線指示與-Y'-之連接；且對於-L 5-，一條虛線指示與-Y'-之連接，而另一條虛線指示與-BA之連接； -Y-係選自由-O-、-S-、-NR 05-、-CR 05R 05a-組成之群； 各-R 04、-R 04a、-R 04b、-R 04c、-R 05及-R 05a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 06取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R0 7)-、-S(O) 2N(R 07)-、-S(O)N(R 07)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 07)S(O) 2N(R 07a)-、-S-、-N(R 07)-、-OC(OR 07)(R 07a)-、-N(R 07)C(O)N(R 07a)-及-OC(O)N(R 07)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 06取代；且 各-R 06、-R 07及-R 07a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，所有部分-L 3-具有相同結構。在某些實施例中，所有部分-L 4-具有相同結構。在某些實施例中，所有部分-L 5-具有相同結構。在某些實施例中，所有部分-L 3-具有相同結構，所有部分-L 4-具有相同結構且所有部分-L 5-具有相同結構，不同部分之間的結構可相同或不同。在某些實施例中，所有部分-L 3-、所有部分-L 4-及所有部分-L 5-具有相同化學結構。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含HA水凝膠微球，該HA水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X-、-Y-、-X'-、-Y'-、-D、-L 1-、-L 2-、-L 3-及-L 4-如本文別處所定義使用； 各-L 5-獨立地為鍵聯部分；且 各-BA為封端劑。
本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽可包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2、約0.1%至約20%範圍內之Z 3及約0.1%至約10%範圍內之Z 4。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含約75%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約10%範圍內之Z 2、約0.1%至約10%範圍內之Z 3及約0.1%至約5%範圍內之Z 4。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含約78%至約96%範圍內之Z 1、約2%至約10%範圍內之Z 2、約1%至約7%範圍內之Z 3及約0.5%至約5%範圍內之Z 4。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含約90.5%至約94.8%範圍內之Z 1、約2.7%至約6.4%範圍內之Z 2、約1.1%至約2.1%範圍內之Z 3及約0.8%至約1.9%範圍內之Z 4。
適當地，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含約92.9% Z 1、約4.3% Z 2、約1.5% Z 3及約1.3% Z 4。
應理解，上文提供之百分比係基於藥物結合物中存在之單元之總數目計算。
例示性封端劑可係選自由以下組成之群： 、 、 、 及 ， 其中虛線指示與-L 5-之連接。
在某些實施例中，封端劑具有式(b01)、(b02)或(b04)。在某些實施例中，封端劑具有式(b01)。在某些實施例中，封端劑具有式(b02)。在某些實施例中，封端劑具有式(b03)。在某些實施例中，封端劑具有式(b04)。在某些實施例中，封端劑具有式(b05)。
適當地，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含HA水凝膠微球，該HA水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在；且 其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2-i、約0.1%至約20%範圍內之Z 3-i及約0.1%至約10%範圍內之Z 4-i。
有利地，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含HA水凝膠微球，該HA水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點；且 各R a1為-H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-具有(x0)： ， 其中 無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與硫原子之連接； v 0係選自由0及1組成之群； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； 其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -X 2-係選自由-N(R 1)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =X 3係選自由=O、=N(R 1)及=S組成之群； -X 5-係C 1 - 20烷基，該C 1 - 20烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-C(O)O-、-T-、-N(R y1)-及-N(R y1)C(O)-之基團；且該C 1 - 20烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； -R 1係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 2係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 3、-OR 3、-C(O)R 3、-C(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2N(R 3)(R 3a)、-S(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2R 3、-S(O)R 3、-N(R 3)S(O) 2N(R 3a)(R 3b)、-SR 3、-N(R 3)(R 3a)、-NO 2、-OC(O)R 3、-N(R 3)C(O)R 3a、-N(R 3)S(O) 2R 3a、-N(R 3)S(O)R 3a、-N(R 3)C(O)OR 3a、-N(R 3)C(O)N(R 3a)(R 3b)、-OC(O)N(R 3)(R 3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 3、-R 3a及-R 3b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-Y'-具有式(y0)： ， 其中 無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與硫代丁二醯亞胺環之氮原子的連接； -Y 1-、-Y 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -Y 2-係選自由-N(R 2)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =Y 3係選自由=O、=N(R 2)及=S組成之群； -R 1、-R 2係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； -R 3係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 4、-OR 4、-C(O)R 4、-C(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2N(R 4)(R 4a)、-S(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2R 4、-S(O)R 4、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)(R 4b)、-SR 4、-N(R 4)(R 4a)、-NO 2、-OC(O)R 4、-N(R 4)C(O)R 4a、-N(R 4)S(O) 2R 4a、-N(R 4)S(O)R 4a、-N(R 4)C(O)OR 4a、-N(R 4)C(O)N(R 4a)(R 4b)、-OC(O)N(R 4)(R 4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 4、-R 4a及-R 4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1之藥物部分； 各-L 1-為式(I)之連接子部分： (I)， 其中 虛線指示藉由形成醯胺鍵來連接至-D之氮； -X-為-C(R 4R 4a)-；-N(R 4)-；-O-；-C(R 4R 4a)-C(R 5R 5a)-；-C(R 5R 5a)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-N(R 6)-；-N(R 6)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-O-；-O-C(R 4R 4a)-；或-C(R 7R 7a)-； X 1為C；或S(O)； -X 2-為-C(R 8R 8a)-；或-C(R 8R 8a)-C(R 9R 9a)-； =X 3為=O；=S；或=N-CN； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 6、-R 8、-R 8a、-R 9、-R 9a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群； -R 3、-R 3a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群，其限制條件為在-R 3、-R 3a中之一者或兩者不為-H之情況下，其連接至其經由sp 3雜化碳原子所連接的N； -R 7為-N(R 10R 10a)；或-NR 10-(C=O)-R 11； -R 7a、-R 10、-R 10a、-R 11彼此獨立地為-H；或C 1 - 10烷基； 視情況，-R 1a/-R 4a、-R 1a/-R 5a、-R 1a/-R 7a、-R 4a/-R 5a、-R 8a/-R 9a對中之一或多者形成化學鍵； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a、-R 8/-R 8a、-R 9/-R 9a對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基；或3員至10員雜環基； 視情況，-R 1/-R 4、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 7a、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 8/-R 9、-R 2/-R 3對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成環A； 視情況，-R 3/-R 3a與其所連接的氮原子接合在一起以形成3員至10員雜環； 環A係選自由以下組成之群：苯基；萘基；茚基；二氫茚基；四氫萘基；C 3 - 10環烷基；3員至10員雜環基；及8員至11員雜雙環基；且 各-L 1-經-L 2-取代，其限制條件為式(I)中標有星號之氫不經取代基置換；或 各-L 1-為式(XI)之連接子部分： (XI)， 其中 虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接； v係選自由0或1組成之群； -X 1-係選自由-C(R 8)(R 8a)-、-N(R 9)-及-O-組成之群； =X 2係選自由=O及=N(R 10)組成之群； -X 3係選自由-O、-S及-Se組成之群； 各p係獨立地選自由以下組成之群：0或1，其限制條件為至多一個p為0； -R 6、-R 6a、-R 10係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T； -R 9係選自由-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T組成之群； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 3、-R 3a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 7、-R 8-R 8a、-R 11、-R 11a及-R 11b係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； -R 12、-R 12a、-R 12b係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代； -R 13係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 15、-OR 15、-C(O)R 15、-C(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2N(R 15)(R 15a)、-S(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2R 15、-S(O)R 15、-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)(R 15b)、-SR 15、-N(R 15)(R 15a)、-NO 2、-OC(O)R 15、-N(R 15)C(O)R 15a、-N(R 15)S(O) 2R 15a、-N(R 15)S(O)R 15a、-N(R 15)C(O)OR 15a、-N(R 15)C(O)N(R 15a)(R 15b)、-OC(O)N(R 15)(R 15a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 其中-R 14、-R 14a、-R 15、-R 15a及-R 15b係獨立地選自由以下組成之群：-H及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 3/-R 3a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a或-R 8/-R 8a對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 1/-R 2、-R 1/-R 8、-R 1/-R 9、-R 2/-R 9或-R 2/-R 10對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成環-A-； 其中-A-係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 3/-R 6、-R 4/-R 6、-R 5/-R 6、-R 6/-R 6a或-R 6/-R 7對中之一或多者與其所連接之原子一起形成環-A'-； 其中-A'-係選自由3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基組成之群；且 -L 1-經-L 2-取代，其限制條件為式(XI)中標有星號之氫不經取代基置換； 各-L 2-為間隔子部分，且 其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2-i、約0.1%至約20%範圍內之Z 3-i及約0.1%至約10%範圍內之Z 4-i。
本發明亦關於可藉由本發明之方法獲得或得到之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種醫藥組合物，其包含本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
本發明亦關於用作藥劑之本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。
本發明亦關於本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物，其用於治療可用D-H或D或其醫藥學上可接受之鹽治療之疾病(諸如眼部疾病)的方法中。
本發明亦關於一種本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物，其用於製造藥劑，諸如用於治療眼部疾病之藥劑。
眼部病症可係選自由以下組成之群：老年性黃斑變性(AMD)、黃斑變性、黃斑水腫、糖尿病黃斑水腫(DME)、視網膜病變、糖尿病視網膜病變(DR)、其他與缺血相關的視網膜病變、早產兒視網膜病變(ROP)、視網膜靜脈阻塞(RVO)、CNV、角膜新血管生成、與角膜新血管生成相關的疾病、視網膜新血管生成、與視網膜/脈絡膜新血管生成相關的疾病、病理性近視、逢希伯-林道病(von Hippel-Lindau disease)、眼組織胞漿菌病、家族性滲出性玻璃體視網膜病變(FEVR)、科茨病(Coats'disease)、諾里病(Norrie disease)、骨質疏鬆症-假性神經膠質瘤症候群(OPPG)、結膜下出血、虹膜紅變、眼部新生血管性疾病、新生血管性青光眼、色素性視網膜炎(RP)、高血壓視網膜病變、視網膜血管瘤增生、黃斑毛細血管擴張、虹膜新血管生成、眼內新血管生成、視網膜變性、囊樣黃斑水腫(CME)、血管炎、視神經乳頭水腫、視網膜炎、結膜炎、萊伯氏先天性黑蒙症(Leber congenital amaurosis)、葡萄膜炎、脈絡膜炎、眼部組織胞漿菌病、瞼緣炎、乾眼症、創傷性眼損傷及休格連氏病(Sjögren's disease)。
適當地，眼部疾病係選自由AMD、DME、DR或RVO組成之群。
較佳地，眼部疾病為AMD。
本發明之另一態樣為一種預防或治療可用D-H或D預防或治療之疾病(諸如眼部疾病)的方法，該方法包含以下步驟：向有需要之個體投與治療有效量之本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或醫藥組合物。
在某些實施例中，藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽之所有部分-D相同，亦即具有相同化學結構。在此情況下，藥物結合物之所有部分-D均衍生自相同類型之藥物分子。
在某些實施例中，本發明之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽包含不同部分-D，亦即包含具有不同化學結構之部分-D。此等不同結構來源於不同類型之藥物分子。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含兩種不同類型之部分-D。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含三種不同類型之部分-D。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含四種不同類型之部分-D。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含五種不同類型之部分-D。
若本發明藥物結合物包含超過一種類型之-D，則所有部分-D可與同一類型之-L 1-結合或可與不同類型之-L 1-結合，亦即第一類型之-D可與第一類型之-L 1-結合，第二類型之-D可與第二類型之-L 1-結合，等等。在某些實施例中，使用不同類型之-L 1-可允許不同類型之-D之不同釋放動力學，諸如第一類型之-D之較快釋放，第二類型之-D之中等釋放及第三類型之-D之緩慢釋放。因此，在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含一種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含兩種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含三種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含四種類型之-L 1-。
在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含一種類型之-D及一種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含兩種類型之-D及兩種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含三種類型之-D及三種類型之-L 1-。在某些實施例中，本發明之藥物結合物包含四種類型之-D及四種類型之-L 1-。
在某些實施例中，藥物結合物之所有部分-L 1-具有相同結構。在某些實施例中，藥物結合物包含兩種或更多種不同類型之部分-L 1-，諸如兩種、三種、四種或五種不同類型之部分-L 1-。此兩種或更多種不同類型之部分-L 1-可與相同或不同類型之-D結合。使用不同類型之-L 1-允許自本發明結合物釋放出具有不同釋放半衰期的相同或不同類型之藥物D-H，諸如將具有短釋放半衰期的第一組部分-L 1-與具有長半衰期的第二組部分-L 1-組合在一起。
在某些實施例中，-D係選自由以下組成之群：小分子藥物部分、中等大小之藥物部分、肽藥物部分及蛋白質藥物部分。
在某些實施例中，-D為小分子藥物部分。
在某些實施例中，-D為肽藥物部分。在某些實施例中，-D為蛋白質藥物部分。在某些實施例中，此類蛋白質部分為單株或多株抗體或其片段或融合物。
在某些實施例中，-L 1-連接至-D之半胱胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之組胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之離胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之色胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之絲胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之蘇胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之酪胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之天冬胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之麩胺酸殘基。在某些實施例中，-L 1-連接至-D之精胺酸殘基。
在某些實施例中，至少一個部分-L 1-連接至-D之胺基酸殘基且一或多個額外部分-L 1-連接至-D中存在之修飾部分。
部分-L 1-可經由任何類型之鍵聯連接至-D，其限制條件為該鍵聯係可逆的。
在某些實施例中，-L 1-經由選自由以下組成之群的鍵聯連接至-D：醯胺、酯、胺基甲酸酯、縮醛、縮醛胺、亞胺、肟、腙、二硫化物及醯基胍。在某些實施例中，-L 1-經由選自由以下組成之群的鍵聯連接至-D：醯胺、酯、胺基甲酸酯及醯基胍。應瞭解，此等鍵聯本身可能不可逆，而可逆性可為-L 1-中存在之某些原子或部分基團的作用。
在某些實施例中，-L 1-經由酯鍵聯連接至-D。在某些實施例中，-L 1-經由胺基甲酸酯鍵聯連接至-D。在某些實施例中，-L 1-經由醯基胍鍵聯連接至-D。在某些實施例中，-L 1-經由醯胺鍵聯連接至-D。
在某些實施例中，-L 1-經由-D之離胺酸殘基之側鏈之胺官能基的氮連接至-D。適當地，-L 1-經由胺官能基(諸如來自-D之離胺酸殘基之側鏈的胺官能基)的氮連接至-D，且在-D與-L 1-之間形成的鍵聯為醯胺。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2009/095479 A2中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(I)： (I)， 其中 虛線指示藉由形成醯胺鍵來連接至-D之氮； -X-為-C(R 4R 4a)-；-N(R 4)-；-O-；-C(R 4R 4a)-C(R 5R 5a)-；-C(R 5R 5a)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-N(R 6)-；-N(R 6)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-O-；-O-C(R 4R 4a)-；或-C(R 7R 7a)-； X 1為C；或S(O)； -X 2-為-C(R 8R 8a)-；或-C(R 8R 8a)-C(R 9R 9a)-； =X 3為=O；=S；或=N-CN； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 6、-R 8、-R 8a、-R 9、-R 9a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群； -R 3、-R 3a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群，其限制條件為在-R 3、-R 3a中之一者或兩者不為-H之情況下，其連接至其經由sp 3雜化碳原子所連接的N； -R 7為-N(R 10R 10a)；或-NR 10-(C=O)-R 11； -R 7a、-R 10、-R 10a、-R 11彼此獨立地為-H；或C 1 - 10烷基； 視情況，-R 1a/-R 4a、-R 1a/-R 5a、-R 1a/-R 7a、-R 4a/-R 5a、-R 8a/-R 9a對中之一或多者形成化學鍵； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a、-R 8/-R 8a、-R 9/-R 9a對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基；或3員至10員雜環基； 視情況，-R 1/-R 4、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 7a、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 8/-R 9、-R 2/-R 3對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成環A； 視情況，-R 3/-R 3a與其所連接的氮原子接合在一起以形成3員至10員雜環； 環A係選自由以下組成之群：苯基；萘基；茚基；二氫茚基；四氫萘基；C 3 - 10環烷基；3員至10員雜環基；及8員至11員雜雙環基；且 各-L 1-經-L 2-取代，且視情況進一步經取代，其限制條件為式(I)中標有星號之氫不經取代基置換。
在某些實施例中，-L 1-具有式(I)，其中虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。在某些實施例中，-L 1-具有式(I)，其中虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(I)之-L 1-不進一步經取代。
應理解，若式(I)之-R 3/-R 3a與其所連接之氮原子接合在一起以形成3員至10員雜環，則僅可形成其中與氮直接連接之原子為sp 3雜化碳原子的該等3員至10員雜環。換言之，由-R 3/-R 3a與其所連接之氮原子一起形成之該等3員至10員雜環具有以下結構： ， 其中 虛線指示與-L 1-之其餘部分的連接； 環包含3至10個原子，該等原子包含至少一個氮；且 R #及R ##表示sp 3雜化碳原子。
亦應理解，3員至10員雜環可進一步經取代。
由式(I)之-R 3/-R 3a與其所連接之氮原子一起形成之適合的3員至10員雜環之例示性實施例如下： ， 其中 虛線指示與分子之其餘部分之連接；且 -R係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。
式(I)之-L 1-可視情況進一步經取代。一般而言，只要裂解原理不受影響，就可使用任何取代基，亦即式(I)中標有星號之氫未經置換，且式(I)之部分 之氮仍為一級、二級或三級胺之部分，亦即-R 3及-R 3a彼此獨立地為-H或經由sp 3雜化碳原子連接至-N＜。
在某些實施例中，式(I)之-R 1或-R 1a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 2或-R 2a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 3或-R 3a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 4經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 5或-R 5a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 6經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 7或-R 7a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 8或-R 8a經-L 2-取代。在某些實施例中，式(I)之-R 9或-R 9a經-L 2-取代。
適當地，式(I)之-R 11經-L 2-取代。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2018/193408 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(II)： (II)， 其中 虛線指示與-D之連接，其為一級胺、二級胺或氮雜芳環之環氮原子；-R 1為-H或C 1-C 4烷基； -R 1a為-H或C 1-C 4烷基，或-CR 1R 1a，以組合方式形成C 3-C 6環烷-1,1-二基； -R 2在每次出現時獨立地選自C 1-C 4烷基或側氧基，或兩個-R 2基團以組合方式形成稠合C 3-C 6環烷基或螺C 3-C 6環烷-1,1-二基； a為0、1、2、3或4； -R 3為-H或C 1-C 4烷基； -R 3a為-H或C 1-C 4烷基，或-CR 3R 3a，以組合方式形成C 3-C 6環烷-1,1-二基； -Y為-C(O)R 4、-C(O)OR 4、-C(O)NHR 4、-C(O)NR 5R 6、-SiR 5R 6R 7或-CR 12R 12aOR 13； -R 12為-H或C 1-C 4烷基； -R 12a為-H或C 1-C 4烷基，或-CR 12R 12a，以組合方式形成C 3-C 6環烷-1,1-二基； -R 13為C 1-C 4烷基；或-CHR 12OR 13，以組合方式形成5員、6員或7員環醚； -R 4為C 1-C 8烷基或C 3-C 7環烷基，其中環烷基視情況經0、1或2個獨立選擇之C 1-C 4烷基取代，且其中烷基視情況經C 1-C 4烷氧基取代； -R 5及-R 6各自獨立地選自C 1-C 4烷基及C 3-C 6環烷基； -R 7為C 1-C 8烷基、C 3-C 7環烷基、C 1-C 8烷氧基、C 3-C 7環烷氧基、雜環烷氧基或-(OCHR 3CH 2) bO-C 1-C 4烷基，其中雜環烷氧基為具有一個選自N、O及S之環雜原子且視情況經0、1或2個獨立選擇之C 1-C 4烷基取代之4員至7員飽和雜環； b為1至10範圍內之整數； -Z為-CH-L 2-或-N-L 2-；且 其中各-L 1-視情況進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IIa)： (IIa)， 其中 標有星號之虛線指示形成醯胺鍵時與-D之氮原子之連接； 無標記之虛線指示與-L 2-之連接；且 -R 4為-CH 3、-CH 2-O-CH 3、-CH 2CH 3或-CH(CH 3) 2。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IIa)且-L 2-具有式(IIa')： (IIa')， 其中 無標記之虛線指示與-L 1-之連接；且 標有星號之虛線指示與-L 4-之連接。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO2016/020373A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(III)： (III)， 其中 虛線指示分別藉由形成醯胺或酯鍵聯而形成的與-D之一級或二級胺或羥基之連接； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 3及-R 3a彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(R 8R 8aR 8b)、-C(=O)R 8、-C≡N、-C(=NR 8)R 8a、-CR 8(=CR 8aR 8b)、-C≡CR 8及-T； -R 4、-R 5及-R 5a彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(R 9R 9aR 9b)及-T； a1及a2彼此獨立地為0或1； 各-R 6、-R 6a、-R 7、-R 7a、-R 8、-R 8a、-R 8b、-R 9、-R 9a、-R 9b彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-COOR 10、-OR 10、-C(O)R 10、-C(O)N(R 10R 10a)、-S(O) 2N(R 10R 10a)、-S(O)N(R 10R 10a)、-S(O) 2R 10、-S(O)R 10、-N(R 10)S(O) 2N(R 10aR 10b)、-SR 10、-N(R 10R 10a)、-NO 2、-OC(O)R 10、-N(R 10)C(O)R 10a、-N(R 10)S(O) 2R 10a、-N(R 10)S(O)R 10a、-N(R 10)C(O)OR 10a、-N(R 10)C(O)N(R 10aR 10b)、-OC(O)N(R 10R 10a)、-T、C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基；其中-T、C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 11取代，且其中C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群的基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 12)-、-S(O) 2N(R 12)-、-S(O)N(R 12)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)-、-S-、-N(R 12)-、-OC(OR 12)(R 12a)-、-N(R 12)C(O)N(R 12a)-及-OC(O)N(R 12)-； 各-R 10、-R 10a、-R 10b係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基；其中-T、C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 11取代，且其中C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群的基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 12)-、-S(O) 2N(R 12)-、-S(O)N(R 12)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)-、-S-、-N(R 12)-、-OC(OR 12)(R 12a)-、-N(R 12)C(O)N(R 12a)-及-OC(O)N(R 12)-； 各T彼此獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 11取代； 各-R 11彼此獨立地選自鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR 13、-OR 13、-C(O)R 13、-C(O)N(R 13R 13a)、-S(O) 2N(R 13R 13a)、-S(O)N(R 13R 13a)、-S(O) 2R 13、-S(O)R 13、-N(R 13)S(O) 2N(R 13aR 13b)、-SR 13、-N(R 13R 13a)、-NO 2、-OC(O)R 13、-N(R 13)C(O)R 13a、-N(R 13)S(O) 2R 13a、-N(R 13)S(O)R 13a、-N(R 13)C(O)OR 13a、-N(R 13)C(O)N(R 13aR 13b)、-OC(O)N(R 13R 13a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 各-R 12、-R 12a、-R 13、-R 13a、-R 13b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 3/-R 3a、-R 6/-R 6a、-R 7/-R 7a對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基或3員至10員雜環基； 視情況，-R 1/-R 2、-R 1/-R 3、-R 1/-R 4、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 7、-R 2/-R 3、-R 2/-R 4、-R 2/-R 5、-R 2/-R 6、-R 2/-R 7、-R 3/-R 4、-R 3/-R 5、-R 3/-R 6、-R 3/-R 7、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 4/-R 7、-R 5/-R 6、-R 5/-R 7、-R 6/-R 7對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成環A； A係選自由以下組成之群：苯基；萘基；茚基；二氫茚基；四氫萘基；C 3 - 10環烷基；3員至10員雜環基；及8員至11員雜雙環基； 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
式(III)之-L 1-的可選擇之其他取代基較佳如上文所描述。
在某些實施例中，式(III)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有如EP1536334B1、WO2009/009712A1、WO2008/034122A1、WO2009/143412A2、WO2011/082368A2及US8618124B2中所揭示之結構，該等文獻特此以引用之方式併入。
在某些實施例中，-L 1-具有如US8946405B2及US8754190B2中所揭示之結構，該等文獻特此以全文引用之方式併入。因此，在某些實施例中，-L 1-具有式(IV)： (IV)， 其中 虛線指示經由-D之官能基與-D之連接，該官能基選自由-OH、-SH及-NH 2組成之群； m為0或1； -R 1及-R 2中之至少一者或兩者彼此獨立地選自由以下組成之群：-CN、-NO 2、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之烯基、視情況經取代之炔基、-C(O)R 3、-S(O)R 3、-S(O) 2R 3及-SR 4， -R 1及-R 2中有且只有一者係選自由以下組成之群：-H、視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基烷基及視情況經取代之雜芳基烷基； -R 3係選自由以下組成之群：-H、視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜芳基烷基、-OR 9及-N(R 9) 2； -R 4係選自由以下組成之群：視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基及視情況經取代之雜芳基烷基； 各-R 5係獨立地選自由以下組成之群：-H、視情況經取代之烷基、視情況經取代之烯基烷基、視情況經取代之炔基烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基及視情況經取代之雜芳基烷基； -R 9係選自由以下組成之群：-H及視情況經取代之烷基； -Y-不存在，且-X-為-O-或-S-；或 -Y-為-N(Q)CH 2-，且-X-為-O-； Q係選自由以下組成之群：視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基及視情況經取代之雜芳基烷基； 視情況，-R 1及-R 2可接合以形成3員至8員環；且 視情況，兩個-R 9與其所連接之氮一起形成雜環； 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
僅在式(IV)之上下文中，所用術語具有以下含義：
如本文所使用，術語「烷基」包括具有1至8個碳原子，或在一些實施例中具有1至6個或1至4個碳原子之直鏈、分支鏈或環狀飽和烴基。
術語「烷氧基」包括與氧鍵結之烷基，包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、環丙氧基、環丁氧基及類似基團。
術語「烯基」包括具有碳-碳雙鍵之非芳族不飽和烴。
術語「炔基」包括具有碳-碳參鍵之非芳族不飽和烴。
術語「芳基」包括具有6至18個碳，較佳6至10個碳之芳族烴基，包括諸如苯基、萘基及蒽基之基團。術語「雜芳基」包括芳族環，該等芳族環包含含有至少一個N、O或S原子之3至15個碳，較佳含有至少一個N、O或S原子之3至7個碳，包括諸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、異噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基及類似基團之基團。
在一些實例中，烯基、炔基、芳基或雜芳基部分可經由伸烷基鍵聯與分子之其餘部分偶合。在此等情形下，取代基將稱為烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或雜芳基烷基，表明伸烷基部分在烯基、炔基、芳基或雜芳基部分與烯基、炔基、芳基或雜芳基所偶合之分子之間。
術語「鹵素」包括溴、氟、氯及碘。
術語「雜環」係指包含3至7個碳原子及至少一個N、O或S原子之4至8員芳族環或非芳族環。實例為哌啶基、哌𠯤基、四氫哌喃基、吡咯啶及四氫呋喃基以及上文關於術語「雜芳基」所提供之例示性基團。
當環系統視情況經取代時，適合之取代基選自由烷基、烯基、炔基或另一環組成之群，其各自視情況進一步經取代。任何基團(包括上述基團)上可選擇之取代基包括鹵基、硝基、氰基、-OR、-SR、-NR 2、-OCOR、-NRCOR、-COOR、-CONR 2、-SOR、-SO 2R、-SONR 2、-SO 2NR 2，其中各R獨立地為烷基、烯基、炔基、芳基或雜芳基，或兩個R基團與其所連接之原子一起形成環。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO2013/036857A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，-L 1-具有式(V)： (V)， 其中 虛線指示經由-D之胺官能基與-D的連接； -R 1係選自由以下組成之群：視情況經取代之C 1-C 6直鏈、分支鏈或環狀烷基；視情況經取代之芳基；視情況經取代之雜芳基；烷氧基；及-NR 5 2； -R 2係選自由以下組成之群：-H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；視情況經取代之芳基；及視情況經取代之雜芳基； -R 3係選自由以下組成之群：-H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；視情況經取代之芳基；及視情況經取代之雜芳基； -R 4係選自由以下組成之群：-H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；視情況經取代之芳基；及視情況經取代之雜芳基； 各-R 5彼此獨立地選自由以下組成之群：-H；視情況經取代之C 1-C 6烷基；視情況經取代之芳基；及視情況經取代之雜芳基；或當兩個-R 5連在一起時可為環烷基或環雜烷基； 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
僅在式(V)之上下文中，所用術語具有以下含義：
「烷基」、「烯基」及「炔基」包括具有1至8個碳或1至6個碳或1至4個碳之直鏈、分支鏈或環狀烴基，其中烷基為飽和烴，烯基包括一或多個碳-碳雙鍵且炔基包括一或多個碳-碳參鍵。除非另外指定，否則此等基團含有1-6個C原子。
「芳基」包括具有6-18個碳、較佳6-10個碳之芳族烴基，包括諸如苯基、萘基及蒽之基團。「雜芳基」包括芳族環，該等芳族環包含含有至少一個N、O或S原子之3至15個碳，較佳含有至少一個N、O或S原子之3至7個碳，包括諸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、異噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基及類似基團之基團。
術語「經取代」意謂烷基、烯基、炔基、芳基或雜芳基包含代替一或多個氫原子的一或多個取代基。取代基通常可選自：鹵素，包括F、Cl、Br及I；低碳數烷基，包括直鏈、分支鏈及環狀低碳數烷基；低碳數鹵烷基，包括氟烷基、氯烷基、溴烷基及碘烷基；OH；低碳數烷氧基，包括直鏈、分支鏈及環狀低碳數烷氧基；SH；低碳數烷基硫基，包括直鏈、分支鏈及環狀低碳數烷基硫基；胺基，烷基胺基，二烷基胺基；矽烷基，包括烷基矽烷基、烷氧基矽烷基及芳基矽烷基；硝基；氰基；羰基；羧酸，羧酸酯，羧酸醯胺，胺基羰基；胺基醯基；胺基甲酸酯；脲；硫胺基甲酸酯；硫脲；酮；碸；磺醯胺；芳基，包括苯基、萘基及蒽基；雜芳基，包括5員雜芳基，包括吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、㗁唑、噻唑、異㗁唑、異噻唑、噻二唑、三唑、㗁二唑及四唑，6員雜芳基，包括吡啶、嘧啶、吡𠯤，及稠合雜芳基，包括苯并呋喃、苯并噻吩、苯并㗁唑、苯并咪唑、吲哚、苯并噻唑、苯并異吡𠯤及苯并異噻唑。
在某些實施例中，-L 1-具有如US7585837B2中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，-L 1-具有式(VI)： (VI)， 其中 虛線指示經由-D之胺官能基與-D的連接； R 1及R 2係獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、鹵素、硝基、-SO 3H、-SO 2NHR 5、胺基、銨、羧基、PO 3H 2及OPO 3H 2； R 3、R 4及R 5獨係獨立地選自由以下組成之群：氫、烷基及芳基； 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
式(VI)之適合取代基為烷基(諸如，C 1 - 6烷基)、烯基(諸如，C 2 - 6烯基)、炔基(諸如，C 2 - 6炔基)、芳基(諸如，苯基)、雜烷基、雜烯基、雜炔基、雜芳基(諸如，芳族4員至7員雜環)或鹵素部分。
僅在式(VI)之上下文中，所用術語具有以下含義：
術語「烷基」、「烷氧基」、「烷氧基烷基」、「芳基」、「烷芳基」及「芳烷基」意謂具有1-8、較佳1-4個碳原子之烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基及丁基，及具有6-10個碳原子之芳基，例如苯基及萘基。術語「鹵素」包括溴、氟、氯及碘。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO2002/089789A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，-L 1-具有式(VII)： (VII)， 其中 虛線指示經由-D之胺官能基與-D的連接； Y 1及Y 2獨立地為O、S或NR 7； R 2、R 3、R 4、R 5、R 6及R 7係獨立地選自由以下組成之群：氫、C 1 - 6烷基、C 3 - 12分支鏈烷基、C 3 - 8環烷基、C 1 - 6經取代之烷基、C 3 - 8經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、芳烷基、C 1 - 6雜烷基、經取代之C 1 - 6雜烷基、C 1 - 6烷氧基、苯氧基及C 1 - 6雜烷氧基； Ar為當包括於式(VII)中時形成經多取代之芳族烴或經多取代之雜環基之部分； X為化學鍵或主動轉運至目標細胞中之部分、疏水性部分或其組合， y為0或1； 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
僅在式(VII)之上下文中，所用術語具有以下含義：
術語「烷基」應理解為包括例如直鏈、分支鏈、經取代之C 1 - 12烷基，包括烷氧基、C 3 - 8環烷基或經取代之環烷基等，
術語「經取代」應理解為包括添加一或多個不同原子或用一或多個不同原子置換官能基或化合物內所含之一或多個原子。
經取代之烷基包括羧基烷基、胺基烷基、二烷基胺基、羥烷基及巰基烷基；經取代之環烷基包括諸如4-氯環己基之部分；芳基包括諸如萘基之部分；經取代之芳基包括諸如3-溴-苯基之部分；芳烷基包括諸如甲苯甲醯基之部分；雜烷基包括諸如乙基噻吩之部分；經取代之雜烷基包括諸如3-甲氧基噻吩之部分；烷氧基包括諸如甲氧基之部分；且苯氧基包括諸如3-硝基苯氧基之部分。鹵基-應理解為包括氟、氯、碘及溴。
在某些實施例中，-L 1-包含式(VIII)之子結構： (VIII)， 其中 標有星號之虛線指示形成醯胺鍵時與-D之氮之連接； 無標記之虛線指示與-L 1-之其餘部分之連接；且 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(VIII)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。在某些實施例中，-L 1-具有式(VIII)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(VIII)之-L 1-經一個部分-L 2-取代。在某些實施例中，式(VIII)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-包含式(IX)之子結構： (IX)， 其中 標有星號之虛線指示形成胺基甲酸酯鍵時與-D之氮之連接； 無標記之虛線指示與-L 1-之其餘部分之連接；且 其中-L 1-經-L 2-取代，且其中-L 1-視情況進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(IX)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-a)： (IX-a)， 其中 標有星號之虛線指示與-D之氮之連接，且無標記之虛線指示與-L 2-之連接； n為0、1、2、3或4； =Y 1係選自由=O及=S組成之群； -Y 2-係選自由-O-及-S-組成之群； -Y 3-係選自由-O-及-S-組成之群； -Y 4-係選自由-O-、-NR 5-及-C(R 6R 6a)-組成之群； =Y 5係選自由=O及=S組成之群； -R 3、-R 5、-R 6、-R 6a彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基； -R 4係選自由以下組成之群：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基； -W-係選自由以下組成之群：C 1 - 20烷基，其視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：C 3 - 10環烷基、8員至30員羰基多環基、3員至10員雜環基、-C(O)-、-C(O)N(R 7)-、-O-、-S-及-N(R 7)-； -Nu為選自由以下組成之群之親核試劑：-N(R 7R 7a)、-N(R 7OH)、-N(R 7)-N(R 7aR 7b)、-S(R 7)、-COOH、 ； -Ar-係選自由以下組成之群： ； 其中 虛線指示與-L 1-之其餘部分之連接； -Z 1-係選自由以下組成之群：-O-、-S-及-N(R 7)-，且 -Z 2-為-N(R 7)-；且 -R 7、-R 7a、-R 7b彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基； 其中-L 1-視情況進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-a)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-a)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(IX-a)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-b)： (IX-b)， 其中 標有星號之虛線指示與-D之氮之連接，且無標記之虛線指示與-L 2-之連接； n為0、1、2、3或4； =Y 1係選自由=O及=S組成之群； -Y 2-係選自由-O-及-S-組成之群； -Y 3-係選自由-O-及-S-組成之群； -Y 4-係選自由-O-、-NR 5-及-C(R 6R 6a)-組成之群； =Y 5係選自由=O及=S組成之群； -R 2、-R 3、-R 5、-R 6、-R 6a彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基； -R 4係選自由以下組成之群：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基； -W-係選自由以下組成之群：C 1 - 20烷基，其視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：C 3 - 10環烷基、8員至30員羰基多環基、3員至10員雜環基、-C(O)-、-C(O)N(R 7)-、-O-、-S-及-N(R 7)-； -Nu為選自由以下組成之群之親核試劑：-N(R 7R 7a)、-N(R 7OH)、-N(R 7)-N(R 7aR 7b)、-S(R 7)、-COOH、 ； -Ar-係選自由以下組成之群： ； 其中 虛線指示與-L 1-之其餘部分之連接； -Z 1-係選自由以下組成之群：-O-、-S-及-N(R 7)-，且 -Z 2-為-N(R 7)-；且 -R 7、-R 7a、-R 7b彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基； 其中-L 1-視情況進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-b)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-b)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(IX-b)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之=Y 1為=O。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-Y 2-為-O-。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-Y 3-為-O-。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-Y 4-為-NR 5-。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之=Y 5為=O。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之n為0或1。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之n為0。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之n為1。
在某些實施例中，式(IX-b)之-R 2係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-b)之-R 2係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-b)之-R 2係選自-H、甲基、乙基。在某些實施例中，式(IX-b)之-R 2為-H。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 3係選自-H、甲基、乙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 3為-H。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之各-R 4係獨立地選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 4係選自由以下組成之群：甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 4係選自甲基及乙基。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 5係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 5係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 5係選自甲基及乙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 5為甲基。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 6及-R 6a係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 6及-R 6a係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 6及-R 6a係獨立地選自-H、甲基及乙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 6及-R 6a兩者均為-H。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之Ar為苯基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之Ar為 ， 其中虛線指示與式(IX-a)及(IX-b)部分之其餘部分的連接。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之W為C 1-20烷基，視情況間雜有C 3-10環烷基、-C(O)-、-C(O)N(R 7)-、-O-、-S-及-N(R 7)-。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之W為C 1-10烷基，視情況間雜有C 3-10環烷基、-C(O)-、-C(O)N(R 7)-、-O-、-S-及-N(R 7)-。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之W為C 1-6烷基，視情況間雜有C 3-10環烷基、-C(O)-、-C(O)N(R 7)-、-O-、-S-及-N(R 7)-。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之W為 ， 其中 虛線分別指示與式(IX-a)或(IX-b)部分之其餘部分的連接。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-Nu為-N(R 7R 7a)。
在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 7、-R 7a及-R 7b彼此獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基及三級丁基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 7、-R 7a及-R 7b彼此獨立地選自-H、甲基、乙基、正丙基及異丙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 7、-R 7a及-R 7b彼此獨立地選自甲基及乙基。在某些實施例中，式(IX-a)及(IX-b)之-R 7、-R 7a及-R 7b均為甲基。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-c)： (IX-c)， 其中 標有星號之虛線指示與-D之氮的連接； 無標記之虛線指示與-L 2-之連接；且 s1為選自由以下組成之群的整數：1、2、3、4、5、6、7、8、9及10。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-c)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-c)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(IX-c)之s1為選自由1、2、3、4及5組成之群的整數。在某些實施例中，式(IX-c)之s1為1。在某些實施例中，式(IX-c)之s1為2。在某些實施例中，式(IX-c)之s1為3。在某些實施例中，式(IX-c)之s1為4。在某些實施例中，式(IX-c)之s1為5。 在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-d)： (IX-d)， 其中 標有星號之虛線指示與-D之氮的連接；且 無標記之虛線指示與-L 2-之連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-d)，其中標有星號之虛線指示與-D之離胺酸側鏈之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有式(IX-d)，其中標有星號之虛線指示與-D之N端之胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO2020/206358 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(X)： (X)， 其中 無標記之虛線指示與-D之連接； 標有星號之虛線指示與-L 2-之連接； n為選自由0、1、2、3、4、5及6組成之群的整數； -R 1及-R 2獨立地為拉電子基團、烷基或-H，且其中-R 1或-R 2中之至少一者為拉電子基團； 各-R 4獨立地為C 1-C 3烷基，或兩個-R 4與其所連接之碳原子一起形成3員至6員環；且 當-D為經由胺連接之藥物部分時，-Y-不存在，或當-D為經由苯酚、醇、硫醇、硫酚、咪唑或非鹼性胺連接之藥物部分時，-Y-為-N(R 6)CH 2-；其中-R 6為視情況經取代之C 1-C 6烷基、視情況經取代之芳基或視情況經取代之雜芳基。
在某些實施例中，式(X)之n為選自1、2、3、4、5及6之整數。在某些實施例中，式(X)之n為選自1、2及3之整數。在某些實施例中，式(X)之n為0、1、2及3之整數。在某些實施例中，式(X)之n為1。在某些實施例中，式(X)之n為2。在某些實施例中，式(X)之n為3。
在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團係選自由以下組成之群：-CN；-NO 2；視情況經取代之芳基；視情況經取代之雜芳基；視情況經取代之烯基；視情況經取代之炔基；-COR 3、-SOR 3或-SO 2R 3，其中-R 3為-H、視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜芳基烷基、-OR 8或-NR 8 2，其中各-R 8獨立地為-H或視情況經取代之烷基，或兩個-R 8基團與其所連接之氮一起形成雜環；或-SR 9，其中-R 9為視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基或視情況經取代之雜芳基烷基。
在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2之拉電子基團為-CN。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2之拉電子基團為-NO 2。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為包含6至10個碳之視情況經取代之芳基。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為視情況經取代之苯基、萘基或蒽基。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為視情況經取代之雜芳基，其包含3至7個碳且包含至少一個N、O或S原子。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為視情況經取代之吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、異噻唑基、喹啉基、吲哚基或茚基。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為含有2至20個碳原子之視情況經取代之烯基。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為包含2至20個碳原子之視情況經取代之炔基。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為-COR 3、-SOR 3或-SO 2R 3，其中-R 3為-H、包含1至20個碳原子之視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基、視情況經取代之雜芳基烷基、-OR 8或-NR 8 2，其中各-R 8獨立地為-H或包含1至20個碳原子之視情況經取代之烷基，或兩個-R 8基團與其所連接之氮一起形成雜環。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2的拉電子基團為-SR 9，其中-R 9為包含1至20個碳原子之視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之芳基烷基、視情況經取代之雜芳基或視情況經取代之雜芳基烷基。
在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2中之至少一者為-CN、-SOR 3或-SO 2R 3。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2中之至少一者為-CN或-SO 2R 3。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2中之至少一者為-CN或-SO 2R 3，其中-R 3為視情況經取代之烷基、視情況經取代之芳基或-NR 8 2。在某些實施例中，式(X)之-R 1及-R 2中之至少一者為-CN、-SO 2N(CH 3) 2、-SO 2CH 3、經-SO 2取代之苯基、經-SO 2及-Cl取代之苯基、-SO 2N(CH 2CH 2) 2O、-SO 2CH(CH 3) 2、-SO 2N(CH 3)(CH 2CH 3)或-SO 2N(CH 2CH 2OCH 3) 2。
在某些實施例中，式(X)之各-R 4獨立地為C 1-C 3烷基。在某些實施例中，兩個-R 4均為甲基。
在某些實施例中，式(X)之-Y-不存在。在某些實施例中，式(X)之-Y-為-N(R 6)CH 2-。
在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-CN，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2N(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為SO 2CH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2CHCH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為經-SO 2取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為經-SO 2及-Cl取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2O，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2CH(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2N(CH 3)(CH 2CH 3)，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2OCH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為1，-R 1為經-SO 2及-CH 3取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。
在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-CN，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2N(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為SO 2CH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2CHCH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為經-SO 2取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為經-SO 2及-Cl取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2O，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2CH(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2N(CH 3)(CH 2CH 3)，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2OCH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為2，-R 1為經-SO 2及-CH 3取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。
在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-CN，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2N(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為SO 2CH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2CHCH 3，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為經-SO 2取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為經-SO 2及-Cl取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2) 2O，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2CH(CH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2N(CH 3)(CH 2CH 3)，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為-SO 2N(CH 2CH 2OCH 3) 2，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。在某些實施例中，-L 1-具有式(X)，其中n為3，-R 1為經-SO 2及-CH 3取代之苯基，-R 2為-H，且-R 4為-CH 3。
僅在式(X)之上下文中，所用術語具有以下含義：
術語「烷基」係指具有1至20個、1至12個、1至8個、1至6個或1至4個碳原子之直鏈、分支鏈或環狀飽和烴基。在某些實施例中，烷基為直鏈或分支鏈。直鏈或分支鏈烷基之實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、三級丁基、異丁基、二級丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基及正癸基。在某些實施例中，烷基為環狀。環烷基之實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊二烯基及環己基。
術語「烷氧基」係指鍵結至氧之烷基，包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、環丙氧基及環丁氧基。
術語「烯基」係指具有碳-碳雙鍵及2至20、2至12、2至8、2至6或2至4個碳原子之非芳族不飽和烴。
術語「炔基」係指具有碳-碳參鍵及2至20、2至12、2至8、2至6或2至4個碳原子之非芳族不飽和烴。
術語「芳基」係指具有6至18個碳，較佳6至10個碳之芳族烴基，包括諸如苯基、萘基及蒽基之基團。術語「雜芳基」係指芳族環，該等芳族環包含含有至少一個N、O或S原子之3至15個碳，較佳含有至少一個N、O或S原子之3至7個碳，包括諸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、㗁唑基、異㗁唑基、噻唑基、異噻唑基、喹啉基、吲哚基及茚基之基團。
在某些實施例中，烯基、炔基、芳基或雜芳基部分可經由烷基鍵聯與分子之其餘部分偶合。在此等情形下，取代基將稱為烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或雜芳基烷基，表明伸烷基部分在烯基、炔基、芳基或雜芳基部分與烯基、炔基、芳基或雜芳基所偶合之分子之間。
術語「鹵素」或「鹵基」係指溴、氟、氯及碘。
術語「雜環」或「雜環基」係指包含至少一個N、O或S原子之3員至15員芳族或非芳族環。實例包括哌啶基、哌𠯤基、四氫哌喃基、吡咯啶及四氫呋喃基以及上文關於術語「雜芳基」所提供之例示性基團。在某些實施例中，雜環或雜環基為非芳族的。在某些實施例中，雜環或雜環基為芳族的。
術語「視情況經取代」係指基團可未經取代或經一或多個(例如，1、2、3、4或5個)可相同或不同的取代基取代。取代基之實例包括烷基、烯基、炔基、鹵素、-CN、-OR aa、-SR aa、-NR aaR bb、-NO 2、-C=NH(OR aa)、-C(O)R aa、-OC(O)R aa、-C(O)OR aa、-C(O)NR aaR bb、-OC(O)NR aaR bb、-NR aaC(O)R bb、-NR aaC(O)OR bb、-S(O)R aa、-S(O) 2R aa、-NR aaS(O)R bb、-C(O)NR aaS(O)R bb、-NR aaS(O) 2R bb、-C(O)NR aaS(O) 2R bb、-S(O)NR aaR bb、-S(O) 2NR aaR bb、-P(O)(OR aa)(OR bb)、雜環基、雜芳基或芳基，其中烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、雜芳基及芳基各自獨立地視情況經-R cc取代，其中-R aa及-R bb各自獨立地為-H、烷基、烯基、炔基、雜環基、雜芳基或芳基，或-R aa及-R bb與其所連接之氮原子一起形成雜環基，該雜環基視情況經烷基、烯基、炔基、鹵素、羥基、烷氧基或-CN取代，且其中：各-R cc獨立地為烷基、烯基、炔基、鹵素、雜環基、雜芳基、芳基、-CN或-NO 2。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2021/136808 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(XI)： (XI)， 其中 虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接； v係選自由0或1組成之群； -X 1-係選自由-C(R 8)(R 8a)-、-N(R 9)-及-O-組成之群； =X 2係選自由=O及=N(R 10)組成之群； -X 3係選自由-O、-S及-Se組成之群； 各p係獨立地選自由以下組成之群：0或1，其限制條件為至多一個p為0； -R 6、-R 6a、-R 10係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T； -R 9係選自由-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T組成之群； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 3、-R 3a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 7、-R 8-R 8a、-R 11、-R 11a及-R 11b係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； -R 12、-R 12a、-R 12b係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代； -R 13係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 15、-OR 15、-C(O)R 15、-C(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2N(R 15)(R 15a)、-S(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2R 15、-S(O)R 15、-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)(R 15b)、-SR 15、-N(R 15)(R 15a)、-NO 2、-OC(O)R 15、-N(R 15)C(O)R 15a、-N(R 15)S(O) 2R 15a、-N(R 15)S(O)R 15a、-N(R 15)C(O)OR 15a、-N(R 15)C(O)N(R 15a)(R 15b)、-OC(O)N(R 15)(R 15a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 其中-R 14、-R 14a、-R 15、-R 15a及-R 15b係獨立地選自由以下組成之群：-H及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 3/-R 3a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a或-R 8/-R 8a對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 1/-R 2、-R 1/-R 8、-R 1/-R 9、-R 2/-R 9或-R 2/-R 10對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成環-A-； 其中-A-係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 3/-R 6、-R 4/-R 6、-R 5/-R 6、-R 6/-R 6a或-R 6/-R 7對中之一或多者與其所連接之原子一起形成環-A'-； 其中-A'-係選自由3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基組成之群；且 -L 1-經-L 2-取代，且視情況進一步經取代，其限制條件為式(XI)中標有星號之氫不經取代基置換。
在某些實施例中，式(XI)中之虛線指示與-D之一級胺之氮的連接。在某些實施例中，式(XI)中之虛線指示與-D之二級胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(XI)之-X 3為-O。在某些實施例中，式(XI)之-X 3為-S。在某些實施例中，式(XI)之-X 3為-Se。
在某些實施例中，式(XI)之-R 6為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 6為-C(R 11)(R 11a)(R 11b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 6為-T。
在某些實施例中，式(XI)之-R 6a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 6a為-C(R 11)(R 11a)(R 11b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 6a為-T。
在某些實施例中，式(XI)之-R 6與-R 6a均為-H。
在某些實施例中，式(XI)之v為0。在某些實施例中，式(XI)之v為1。
在某些實施例中，式(XI)之-X 1-為-C(R 8)(R 8a)-。在某些實施例中，式(XI)之-X 1-為-N(R 9)-。在某些實施例中，式(XI)之-X 1-為-O-。
在某些實施例中，式(XI)之=X 2為=O。在某些實施例中，式(XI)之=X 2為=N(R 10)。
在某些實施例中，式(XI)之-R 9為-C(R 11)(R 11a)(R 11b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 9為-T。
在某些實施例中，式(XI)之-R 10為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 10為-C(R 11)(R 11a)(R 11b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 10為-T。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 2係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 2a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 3a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 4係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 4a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 5係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 5a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 7係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 7為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 7係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 8係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 8a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 11係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 11a係選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 11a係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、3-甲基丁基、1-甲基丁基及1-乙基丙基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 12係為選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 12為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 12為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 12a係選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 a為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 a為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 a為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 a為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 12b係選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 b為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 b為-T。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 b為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 b為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XI)之-R 12 b為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XI)之T係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基。在某些實施例中，式(XI)之T為苯基。在某些實施例中，式(XI)之T為萘基。在某些實施例中，式(XI)之T為茚基。在某些實施例中，式(XI)之T為二氫茚基。在某些實施例中，式(XI)之T為四氫萘基。在某些實施例中，式(XI)之T為四氫萘基。在某些實施例中，式(XI)之T為C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之T為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之T為8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之T經一或多個相同或不同的式(XI)之-R 13取代。
在某些實施例中，式(XI)之T經一個式(XI)之-R 13取代。
在某些實施例中，式(XI)之T不經-R 13取代。
在某些實施例中，式(XI)之-R 13係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 15、-OR 15、-C(O)R 15、-C(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2N(R 15)(R 15a)、-S(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2R 15、-S(O)R 15、-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)(R 15b)、-SR 15、-N(R 15)(R 15a)、-NO 2、-OC(O)R 15、-N(R 15)C(O)R 15a、-N(R 15)S(O) 2R 15a、-N(R 15)S(O)R 15a、-N(R 15)C(O)OR 15a、-N(R 15)C(O)N(R 15a)(R 15b)、-OC(O)N(R 15)(R 15a)及C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為鹵素。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-CN。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為側氧基。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-C(O)OR 15 。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-OR 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-C(O)R 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-C(O)N(R 15)(R 15a)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-S(O) 2N(R 15)(R 15a)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-S(O)N(R 15)(R 15a)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-S(O) 2R 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-S(O)R 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)(R 15b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-SR 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)(R 15a)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-NO 2。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-OC(O)R 15。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)C(O)R 15a。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)S(O) 2R 15a。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)S(O)R 15a。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)C(O)OR 15a。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-N(R 15)C(O)N(R 15a)(R 15b)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為-OC(O)N(R 15)(R 15a)。在某些實施例中，式(XI)之-R 13為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 14係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XI)之-R 14為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 14為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 14 a係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XI)之-R 14 a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 14 a為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 15係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XI)之-R 15為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 15為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 15a係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XI)之-R 15a為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 15a為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 15b係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XI)之-R 15b為-H。在某些實施例中，式(XI)之-R 15b為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 1a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 1a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 1a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 2及-R 2a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2及-R 2a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 2及-R 2a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 3及-R 3a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3及-R 3a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 3及-R 3a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 4及-R 4a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4及-R 4a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 4及-R 4a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 5及-R 5a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5及-R 5a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 5及-R 5a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 8及-R 8a與其所連接之原子接合在一起形成C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8及-R 8a與其所連接之原子接合在一起形成3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-R 8及-R 8a與其所連接之原子接合在一起形成8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 2與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 8與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 1及-R 9與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 2及-R 9與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 2及-R 10與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A-。
在某些實施例中，式(XI)之-A-為苯基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為萘基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為茚基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為二氫茚基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為四氫萘基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-A-為8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XI)之-R 3及-R 6與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A'-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 4及-R 6與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A'-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 5及-R 6與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A'-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 6及-R 6a與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A'-。
在某些實施例中，式(XI)之-R 6及-R 7與其所連接之原子接合在一起形成式(XI)之環-A'-。
在某些實施例中，式(XI)之-A'-為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XI)之-A'-為8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，-L 1-具有式(XIa)： (XIa)， 其中 虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 3、-R 3a、-R 5、-R 5a、-R 6及-R 6a係如式(XI)中所定義來使用；且 -L 1-經-L 2-取代，且視情況進一步經取代，其限制條件為式(XIa)中標有星號之氫不經取代基置換。
在某些實施例中，式(XIa)中之虛線指示與-D之一級胺之氮的連接。在某些實施例中，式(XIa)中之虛線指示與-D之二級胺之氮的連接。
在某些實施例中，-R 1為-H。在某些實施例中，-R 1a為-H。在某些實施例中，-R 2為-H。在某些實施例中，-R 2a為-H。在某些實施例中，-R 3為-H。在某些實施例中，-R 3a為-H。在某些實施例中，-R 5為-H。在某些實施例中，-R 5a為-H。在某些實施例中，-R 6為-H。在某些實施例中，-R 6a為-H。
在某些實施例中，式(XIa)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-R 1為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 1a為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 2為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 2a為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 3為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 3a為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 5為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 5a為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 6為-H，該-H經-L 2-取代。在某些實施例中，-R 6a為-H，該-H經-L 2-取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(XIb)： (XIb)， 其中 虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接；且 -L 1-經-L 2-取代，且視情況進一步經取代，其限制條件為式(XIb)中標有星號之氫不經取代基置換。
在某些實施例中，式(XIb)中之虛線指示與-D之一級胺之氮的連接。在某些實施例中，式(XIb)中之虛線指示與-D之二級胺之氮的連接。
在某些實施例中，式(XIb)之-L 1-不進一步經取代。
在某些實施例中，-L 1-具有式(XIc)： (XIc)， 其中 無標記之虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接，且 標有#之虛線指示與-L 2-之連接。
在某些實施例中，式(XIc)中之無標記之虛線指示與-D之一級胺之氮的連接。在某些實施例中，式(XIc)中之無標記之虛線指示與-D之二級胺之氮的連接。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2020/254603 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(XII)： (XII)， 其中 虛線指示與-D之供應π電子對之雜芳族N之連接； n為選自由0、1、2、3及4組成之群之整數； =X 1係選自由=O、=S及=N(R 4)組成之群； -X 2-係選自由以下組成之群：-O-、-S-、-N(R 5)-及-C(R 6)(R 6a)-； -X 3-係選自由以下組成之群： 、 、 、 -C(R 10)(R 10a)-、-C(R 11)(R 11a)-C(R 12)(R 12a)-、-O-及-C(O)-； -R 1、-R 1a、-R 6、-R 6a、-R 10、-R 10a、-R 11、-R 11a、-R 12、-R 12a以及-R 2及-R 2a中之各者係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、鹵素、-CN、-OH、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群的基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； -R 3、-R 4、-R 5、-R 7、-R 8及-R 9係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、-CN、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； 各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代； 其中-R 13選自由以下組成之群：-H、-NO 2、-OCH 3、-CN、-N(R 14)(R 14a)、-OH、-C(O)OH及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 其中-R 14及-R 14a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、兩個相鄰-R 2、-R 6/-R 6a、-R 10/-R 10a、-R 11/-R 11a及-R 12/-R 12a對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 1/-R 2、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 9、-R 1/-R 10、-R 3/-R 6a、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 5/-R 10及-R 6/-R 10對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成環-A-； 其中-A-係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 1及相鄰-R 2形成碳-碳雙鍵，其限制條件為n係選自由1、2、3及4組成之群； 視情況，兩個相鄰-R 2形成碳-碳雙鍵，其限制條件為n係選自由2、3及4組成之群； 其限制條件為若-X 2-為-N(R 5)-，則-X 3-係選自由以下組成之群： 、 及 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為5、6或7個原子，且形成於-R 1與-R 2之間或兩個相鄰-R 2之間的碳-碳雙鍵(若存在)呈順式組態；且 各-L 1-經-L 2-取代且視情況進一步經取代。
應理解，片語「供應π電子對之雜芳族N」中之「N」係指氮。
應理解，僅在n為至少2時，式(XII)中才可存在兩個相鄰-R 2。
應理解，表述「標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離」係指標有星號之氮原子與碳原子之間的最短距離中之原子總數，且亦包括標有星號之氮原子及碳原子。舉例而言，在以下結構中，n為1，且標有星號之氮與標有星號之碳之間的距離為5： 且在以下結構中，n為2，-R 1及-R 1a形成環己基，且標有星號之氮與標有星號之碳之間的距離為6： 。
在某些實施例中，式(XII)之=X 1為=O。在某些實施例中，式(XII)之=X 1為=S。在某些實施例中，式(XII)之=X 1為=N(R 4)。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-O-。在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-S-。在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-。在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-C(R 6)(R 6a)-。
在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為 。
在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為 。
在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為 。
在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為-C(R 10)(R 10a)-。在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為-C(R 11)(R 11a)-C(R 12)(R 12a)-。在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為-O-。在某些實施例中，式(XII)之-X 3-為-C(O)-。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為5個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為6個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為7個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為5個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為6個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為7個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為5個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為6個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為7個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為5個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為6個原子。
在某些實施例中，式(XII)之-X 2-為-N(R 5)-，式(XII)之-X 3-為 ，且式(XII)中標有星號之氮原子與標有星號之碳原子之間的距離為7個原子。
在某些實施例中，式(XII)之=X 1為=O，式(XII)之-X 2-為-C(R 6)(R 6a)-，式(XII)之-X 3-為 ，且-R 3不包含胺。
在某些實施例中，式(XII)之-R 1、-R 1a、-R 6、-R 6a、-R 10、-R 10a、-R 11、-R 11a、-R 12、-R 12a以及式(XII)-R 2及-R 2a中之各者係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、鹵素、-CN、-OH、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2020/254602 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。該-L 1-適合於藥物D，該等藥物在結合至-L 1-時包含供應電子之雜芳族N +部分或四級銨陽離子且在鍵聯後變成部分-D +因此，在某些實施例中，-L 1-具有式(XII)： (XIII)， 其中 虛線指示與-D +之N +之連接； t係選自由0、1、2、3、4、5及6組成之群； -A-為選自由單環或雙環芳基及雜芳基組成之群之環，其限制條件為-A-經由碳原子連接至-Y及-C(R 1)(R 1a)-；其中該單環或雙環芳基及雜芳基視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 1、-R 1a及各-R 2係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、-鹵素、-NO 2、-CN、-OH、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群的基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 4)-、-S(O) 2N(R 4)-、-S(O)N(R 4)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)-、-S-、-N(R 4)-、-OC(OR 4)(R 4a)-、-N(R 4)C(O)N(R 4a)-及-OC(O)N(R 4)-； 各-T-係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基，其中各-T-獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； 其中-R 3係選自由以下組成之群：-H、-NO 2、-OCH 3、-CN、-N(R 4)(R 4a)、-OH、-C(O)OH及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 其中-R 4及-R 4a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； -Y係選自由以下組成之群： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 及肽基部分； 其中 標有星號之虛線指示與-A-之連接。 -Nu為親核試劑； -Y 1-係選自由以下組成之群：-O-、-C(R 10)(R 10a)-、-N(R 11)-及-S-； =Y 2係選自由以下組成之群：=O、=S及=N(R 12)； -Y 3-係選自由以下組成之群：-O-、-S-及-N(R 13)-； -E-係選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基、C 2 - 6炔基及-Q-；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基、C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 14取代； -R 5、-R 6、各-R 7、-R 8、-R 9、-R 10、-R 10a、-R 11、-R 12及-R 13係獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基、C 2 - 20炔基及-Q；其中C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 14取代；且其中C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基及C 2 - 20炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-Q-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 15)-、-S(O) 2N(R 15)-、-S(O)N(R 15)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)-、-S-、-N(R 15)-、-OC(OR 15)R 15a-、-N(R 15)C(O)N(R 15a)-及-OC(O)N(R 15)-； 各Q係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基，其中各Q獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 14取代； 其中-R 14、-R 15及-R 15a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-L 1-經-L 2-取代且視情況進一步經取代。
應理解，在某些實施例中，-D +可包含供應電子之雜芳族N +及四級銨陽離子兩者，且類似地，對應的D可包含供應電子之雜芳族N及三級胺兩者。亦應理解，若D與-L 1-結合，則-D +及-L 1-形成四級銨陽離子，其中可存在相對陰離子。相對陰離子之實例包括但不限於氯離子、溴離子、乙酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫酸氫根、硝酸根、碳酸根、烷基磺酸根、芳基磺酸根及磷酸根。
式(XIII)之-L 1-之可選擇的其他取代基如本文中其他處所描述。
在某些實施例中，式(XIII)之-L 1-不進一步經取代。
此類藥物部分-D +包含至少一個(諸如一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)供應電子之雜芳族N +或四級銨陽離子，且類似地，對應的所釋放藥物D包含至少一個(諸如一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)供應電子之雜芳族N或三級胺。包括向芳族π系統供應電子之雜芳族氮原子(亦即N +或N)的化學結構之實例包括(但不限於)吡啶、嗒𠯤、嘧啶、喹啉、喹唑啉、喹㗁啉、吡唑、咪唑、異吲唑、吲唑、嘌呤、四唑、三唑及三𠯤。舉例而言，在以下咪唑環中，向芳族π系統供應一個電子的雜芳族氮用「§」標記： 。
此類供應電子的雜芳族氮原子不包含向芳族π系統供應一個電子對(亦即，並非一個電子)的雜芳族氮原子，諸如在上述咪唑環結構中用「#」標記的氮。藥物D可以一或多種互變異構形式存在，諸如其中一個氫原子在至少兩個雜芳族氮原子之間移動。在所有此類情況下，連接子部分共價且可逆地連接在向芳族π系統供應電子之雜芳族氮處。
如本文所使用，術語「單環或雙環芳基」意謂可為單環或雙環之芳族烴環系統，其中單環芳環由至少5個環碳原子組成且可包含至多10個環碳原子，且其中雙環芳環由至少8個環碳原子組成且可包含至多12個環碳原子。單環或雙環芳基之各氫原子可由如下文所定義之取代基置換。
如本文所用，術語「單環或雙環雜芳基」意謂可包含2至6個環碳原子及1至3個環雜原子之單環芳族環系統或可包含3至9個環碳原子及1至5個環雜原子之雙環芳族環系統，該等環雜原子諸如氮、氧及硫。單環或雙環雜芳基之實例包括(但不限於)苯并呋喃基、苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲哚基、氮雜吲哚基、氮雜苯并咪唑基、苯并㗁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、四𠯤基、四唑基、異噻唑基、㗁唑基、異㗁唑基、吡𠯤基、吡唑基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、喹唑啉基、喹㗁啉基、三唑基、噻唑基及噻吩基。單環或雙環雜芳基之各氫原子可由如下所定義之取代基置換。
如本文所使用，術語「親核試劑」係指藉由供應兩個鍵結電子而與其反應搭配物(亦即親電試劑)形成鍵的試劑或官能基。
在某些實施例中，式(XIII)之t為0。在某些實施例中，式(XIII)之t為1。在某些實施例中，式(XIII)之t為2。在某些實施例中，式(XIII)之t為3。在某些實施例中，式(XIII)之t為4。在某些實施例中，式(XIII)之t為5。在某些實施例中，式(XIII)之t為6。
在某些實施例中，式(XIII)之-A-為選自由單環或雙環芳基及雜芳基組成之群的環，其限制條件為-A-經由碳原子與-Y及-C(R 1)(R 1a)-連接。在某些實施例中，式(XIII)之-A-經一或多個相同或不同的式(XIII)之-R 2取代。在某些實施例中，式(XIII)之-A-不經式(XIII)之-R 2取代。在某些實施例中，式(XIII)之-A-係選自由以下組成之群： ； 其中各V係獨立地選自由O、S及N組成之群。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 1、-R 1a及各-R 2係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、-鹵素、-CN、-NO 2、-OH、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1、-R 1a及各-R 2係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、-CN、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-C(O)OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-鹵素。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-F。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-CN。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-NO 2。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為-OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1為C 2-6炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-C(O)OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-鹵素。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-F。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-CN。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-NO 2。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為-OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 1a為C 2-6炔基。
在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(O)OH、-鹵素、-CN、-NO 2、-OH、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-H。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-C(O)OH。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-鹵素。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-F。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-CN。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-NO 2。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為-OH。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為C 2-6烯基。在某些實施例中，式(XIII)之各-R 2為C 2-6炔基。
在某些實施例中，式(XIII)之T係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基。在某些實施例中，式(XIII)之T為苯基。在某些實施例中，式(XIII)之T為萘基。在某些實施例中，式(XIII)之T為茚基。在某些實施例中，式(XIII)之T為二氫茚基。在某些實施例中，式(XIII)之T為四氫萘基。在某些實施例中，式(XIII)之T為C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XIII)之T為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XIII)之T為8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XIII)之T經一或多個相同或不同的式(XIII)之-R 3取代。在某些實施例中，式(XIII)之T經一個式(XIII)之-R 3取代。在某些實施例中，式(XIII)之T不經式(XIII)之-R 3取代。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、-NO 2、-OCH 3、-CN、-N(R 4)(R 4a)、-OH、-C(O)OH及C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-NO 2。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-OCH 3。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-CN。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-N(R 4)(R 4a)。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為-C(O)OH。在某些實施例中，式(XIII)之-R 3為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 4及-R 4a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XIII)之-R 4為-H。在某些實施例中，-R 4為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 4a為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 4a為C 1 - 6烷基。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y係選自由以下組成之群： 、 、 、 、 、 及 ， 其中-Nu、-E-、-Y 1-、=Y 2、-Y 3-、-R 5、-R 7、-R 8及-R 9如上文所定義。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y為 ， 其中-Nu、-E、-Y 1-、=Y 2及-Y 3-如本文中其他處所定義，且標有星號之虛線指示與式(XII)之-A-的連接。應理解，在此情況下，藥物D之釋放並非由酶觸發，且藥物在不存在酶的情況下以其未經修飾之藥理學上完全活性形式釋放。
在某些實施例中，式(XIII)之-Nu為選自由以下組成之群的親核試劑：一級胺、二級胺、三級胺及醯胺。在某些實施例中，式(XIII)之-Nu為一級胺。在某些實施例中，式(XIII)之-Nu為二級胺。在某些實施例中，式(XIII)之-Nu為三級胺。在某些實施例中，式(XIII)之-Nu為醯胺。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-係選自由以下組成之群：-O-、-C(R 10)(R 10a)-、-N(R 11)-及-S-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-O-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-C(R 10)(R 10a)-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-N(R 11)-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-S-。
在某些實施例中，式(XIII)之=Y 2係選自由=O、=S及=N(R 12)組成之群。在某些實施例中，式(XIII)之=Y 2為=O。在某些實施例中，式(XIII)之=Y 2為=S。在某些實施例中，式(XIII)之=Y 2為=N(R 12)。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y 3-係選自由-O-、-S-及-N(R 13)組成之群。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 3-為-O-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 3-為-S-。在某些實施例中，式(XIII)之-Y 3-為-N(R 13)-。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-N(R 11)-，式(XIII)之=Y 2為=O且-Y 3-為-O-。
在某些實施例中，式(XIII)之-Y 1-為-N(R 11)-，式(XIII)之=Y 2為=O，式(XIII)之-Y 3-為-O-且式(XIII)之-Nu為-N(CH 3) 2。
在某些實施例中，式(XIII)之-E-係選自由C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基、C 2 - 6炔基及-Q-組成之群。在某些實施例中，式(XIII)之-E-為C 1-6烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-E-為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-E-為C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-E-為-Q-。
在某些實施例中，式(XIII)之Q係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為苯基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為萘基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為茚基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為二氫茚基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為四氫萘基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XIII)之Q為8員至11員雜雙環基。在某些實施例中，式(XIII)之Q經一或多個-R 14取代。在某些實施例中，式(XIII)之Q不經-R 14取代。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 5、-R 6、各-R 7、-R 8、-R 9、-R 10、-R 10a、-R 11、-R 12及-R 13係獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基、C 2 - 20炔基及-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 5為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 5為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 5為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 5為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 6為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 6為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 6為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，-R 6為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 7中之各者係獨立地選自由C 1 - 20烷基、C 2 - 20烯基、C 2 - 20炔基及-Q組成之群。在某些實施例中，式(XIII)之-R 7中之各者為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 7中之各者為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 7中之各者為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 7中之各者為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 8為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 8為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 8為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 8為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 9為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 9為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 9為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 9為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 10為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 10a為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10a為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10a為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 10a為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 11為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 11為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 11為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 11為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 12為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 12為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 12為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 12為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 13為C 1 - 20烷基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 13為C 2 - 20烯基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 13為C 2 - 20炔基。在某些實施例中，式(XIII)之-R 13為-Q。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 14、-R 15及-R 15a係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 14為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 14為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 15為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 15為C 1-6烷基。
在某些實施例中，式(XIII)之-R 15a為-H。在某些實施例中，式(XIII)之-R 15a為C 1-6烷基。
在某些實施例中，-L 1-具有如WO 2020/254606 A1中所揭示之結構，其以全文引用之方式併入本文中。因此，在某些實施例中，部分-L 1-具有式(XIV)： (XIV)， 其中 標有星號之虛線指示與-L 2-之連接； 無標記之虛線指示與-D之供應π電子對之雜芳族N之連接； -Y-係選自由-N(R 3)-、-O-及-S-組成之群； -R 1、-R 2及-R 3係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 4取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 5)-、-S(O) 2N(R 5)-、-S(O)N(R 5)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 5)S(O) 2N(R 5a)-、-S-、-N(R 5)-、-OC(OR 5)(R 5a)-、-N(R 5)C(O)N(R 5a)-及-OC(O)N(R 5)-； 各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基，其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 4取代； 其中-R 4、-R 5及-R 5a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-L 1-經-L 2-取代且視情況進一步經取代。
在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-N(R 3)-。在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-。在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-S-。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 1、-R 2及-R 3係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 1係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 1為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 1為-T。在某些實施例中，式(XIV)之-R 1為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 1為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 1為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 2係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 2為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 2為-T。在某些實施例中，式(XIV)之-R 2為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 2為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 2為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 3係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 3為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 3為-T。在某些實施例中，式(XIV)之-R 3為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 3為C 2 - 6烯基。在某些實施例中，式(XIV)之-R 3為C 2 - 6炔基。
在某些實施例中，式(XIV)之T係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基。在某些實施例中，式(XIV)之T為苯基。在某些實施例中，式(XIV)之T為萘基。在某些實施例中，式(XIV)之T為茚基。在某些實施例中，式(XIV)之T為二氫茚基。在某些實施例中，式(XIV)之T為四氫萘基。在某些實施例中，式(XIV)之T為C 3 - 10環烷基。在某些實施例中，式(XIV)之T為3員至10員雜環基。在某些實施例中，式(XIV)之T為8員至11員雜雙環基。
在某些實施例中，式(XIV)之T經一或多個-R 4取代。在某些實施例中，式(XIV)之T經一個-R 4取代。在某些實施例中，式(XIV)之T不經-R 4取代。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 4、-R 5及-R 5a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 4係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XIV)之-R 4為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 4為C 1 - 6烷基。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 5係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XIV)之-R 5為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 5為C 1 - 6烷基。
在某些實施例中，式(XIV)之-R 5a係選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群。在某些實施例中，式(XIV)之-R 5a為-H。在某些實施例中，式(XIV)之-R 5a為C 1 - 6烷基。
在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-且式(XIV)之-R 2為C 1 - 6烷基。在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-且式(XIV)之-R 2係選自由以下組成之群：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基。在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-且式(XIV)之-R 2為甲基。在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-且式(XIV)之-R 2為乙基。
在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-O-且式(XIV)之-R 2為C 1-6烷基，其中C 1-6烷基間雜有-C(O)-。
在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-N(R 3)-且式(XIV)之-R 2為C 1-6烷基，其中C 1-6烷基間雜有-C(O)O-且式(XIV)之-R 3如式(XIV)中所定義。
在某些實施例中，式(XIV)之-Y-為-N(R 3)-且式(XIV)之-R 2為C 1-6烷基，其中C 1-6烷基間雜有-C(O)O-且式(XIV)之-R 3係選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基及丙基。
在某些實施例中，-L 2-不存在。
在某些實施例中，-L 2-為間隔子部分。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2 '-或-L 2 ''-係選自由以下組成之群：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y1)-、-S(O) 2N(R y1)-、-S(O)N(R y1)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y1)S(O) 2N(R y1a)-、-S-、-N(R y1)-、-OC(OR y1)(R y1a)-、-N(R y1)C(O)N(R y1a)-、-OC(O)N(R y1)-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y3)-、-S(O) 2N(R y3)-、-S(O)N(R y3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y3)S(O) 2N(R y3a)-、-S-、-N(R y3)-、-OC(OR y3)(R y3a)-、-N(R y3)C(O)N(R y3a)-及-OC(O)N(R y3)-； -R y1及-R y1a係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y4)-、-S(O) 2N(R y4)-、-S(O)N(R y4)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y4)S(O) 2N(R y4a)-、-S-、-N(R y4)-、-OC(OR y4)(R y4a)-、-N(R y4)C(O)N(R y4a)-及-OC(O)N(R y4)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代； 各-R y2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR y5、-OR y5、-C(O)R y5、-C(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-S(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2R y5、-S(O)R y5、-N(R y5)S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-SR y5、-N(R y5)(R y5a)、-NO 2、-OC(O)R y5、-N(R y5)C(O)R y5a、-N(R y5)S(O) 2R y5a、-N(R y5)S(O)R y5a、-N(R y5)C(O)OR y5a、-N(R y5)C(O)N(R y5)(R y5a)、-OC(O)N(R y5)(R y5a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y3、-R y3a、-R y4、-R y4a、-R y5、-R y5a及-R y5b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2 '-或-L 2 ''-係選自由以下組成之群：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y1)-、-S(O) 2N(R y1)-、-S(O)N(R y1)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y1)S(O) 2N(R y1a)-、-S-、-N(R y1)-、-OC(OR y1)(R y1a)-、-N(R y1)C(O)N(R y1a)-、-OC(O)N(R y1)-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y3)-、-S(O) 2N(R y3)-、-S(O)N(R y3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y3)S(O) 2N(R y3a)-、-S-、-N(R y3)-、-OC(OR y3)(R y3a)-、-N(R y3)C(O)N(R y3a)-及-OC(O)N(R y3)-； -R y1及-R y1a係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T'、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基；其中-T'、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y4)-、-S(O) 2N(R y4)-、-S(O)N(R y4)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y4)S(O) 2N(R y4a)-、-S-、-N(R y4)-、-OC(OR y4)(R y4a)-、-N(R y4)C(O)N(R y4a)-及-OC(O)N(R y4)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代； -R y2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR y5、-OR y5、-C(O)R y5、-C(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-S(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2R y5、-S(O)R y5、-N(R y5)S(O) 2N(R y5a)(R y5b)、-SR y5、-N(R y5)(R y5a)、-NO 2、-OC(O)R y5、-N(R y5)C(O)R y5a、-N(R y5)S(O) 2R y5a、-N(R y5)S(O)R y5a、-N(R y5)C(O)OR y5a、-N(R y5)C(O)N(R y5a)(R y5b)、-OC(O)N(R y5)(R y5a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y3、-R y3a、-R y4、-R y4a、-R y5、-R y5a及-R y5b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2 '-或-L 2 ''-係選自由以下組成之群：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y1)-、-S(O) 2N(R y1)-、-S(O)N(R y1)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y1)S(O) 2N(R y1a)-、-S-、-N(R y1)-、-OC(OR y1)(R y1a)-、-N(R y1)C(O)N(R y1a)-、-OC(O)N(R y1)-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y3)-、-S(O) 2N(R y3)-、-S(O)N(R y3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y3)S(O) 2N(R y3a)-、-S-、-N(R y3)-、-OC(OR y3)(R y3a)-、-N(R y3)C(O)N(R y3a)-及-OC(O)N(R y3)-； -R y1及-R y1a係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T'、C 1 - 10烷基、C 2 - 10烯基及C 2 - 10炔基； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基； 各-R y2係獨立地選自由鹵素及C 1 - 6烷基組成之群；且各-R y3、-R y3a、-R y4、-R y4a、-R y5、-R y5a及-R y5b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2 '-或-L 2''-為C 1 - 20烷基鏈，其視情況間雜有一或多個獨立地選自由以下組成之群之基團：-O-、-T'-及-C(O)N(R y1)-；且該C 1 - 20烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自由以下組成之群之基團取代：-OH、-T'及-C(O)N(R y6R y6a)；其中-R y1、-R y6、-R y6a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群，且其中T'係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2'-或-L 2 ''-之分子量介於14 g/mol至750 g/mol之範圍內。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2'-或-L 2''-包含選自由以下組成之群之部分： ， 其中對於-L 2-，虛線指示與-L 1-及-L 4-之連接；且-R及-R a係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基及3,3-二甲基丙基。
在某些實施例中，-L 2-包含以下部分 。
在某些實施例中，-L 2-、-L 2'-或-L 2''-之鏈長為1至20個原子。
適當地，-L 2-具有式(l1)： ，其中無標記之虛線指示與-L 4-之連接，而標有星號之虛線指示與-L 1-之連接。
本發明之另一態樣為一種用於製備官能化HA之方法，其包含以下步驟： (i)藉由將HA之至少一或多個羧基轉化為具有間隔子部分(諸如-L 2'-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含胺基)之N取代之醯胺來引入胺基； (ii)藉由將末端胺基進一步轉化為具有間隔子部分(諸如-L 2''-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含硫醇或順丁烯二醯亞胺基)之N取代之醯胺來將順丁烯二醯亞胺或硫醇基引入步驟(i)所得之HA中。
本發明之另一態樣為一種用於製備官能化HA之方法，其包含以下步驟： (i)藉由將HA之至少一或多個醯胺基去乙醯化(較佳經由酶催化)成胺基，從而引入胺基； (ii)藉由將胺基進一步轉化為具有間隔子部分(諸如-L 2''-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含硫醇或順丁烯二醯亞胺基)之N取代之醯胺來將順丁烯二醯亞胺或硫醇基引入步驟(i)所得之HA中。
藉由以下非限制性項目進一步描述本發明。 1. 一種用於製備包含交聯透明質酸(HA)之水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中各-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑；及 (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球。 2. 如項目1之方法，其中步驟(a)之溶液A進一步包含緩衝劑。 3. 如項目1或2之方法，其中步驟(a)之溶液B包含乳化劑及溶劑。 4. 如項目1至3中任一項之方法，其中經由懸浮聚合進行聚合。 5. 如項目1至4中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b) 視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球； (d) 視情況對步驟(c)所得之水凝膠HA微球進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(c)或(d)中所獲之微球； (f) 視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g) 視情況，將步驟(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。 6. 如項目1至5中任一項之方法，其中-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-6)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與該第一官能化HA之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-9)、 (y-47)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與該第二官能化HA之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-6)，則-FG 2具有式(y-9)；若-FG 1具有式(y-49)，則-FG 2具有式(y-85)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-47)；若-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-86)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。 7. 如項目1至6中任一項之方法，其中該pH調節劑增加步驟(a)之該乳液的pH且-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與該第一官能化HA之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與該第二官能化HA之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。 8. 如項目1至7中任一項之方法，其中-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與該第一官能化HA之連接，-FG 2為 (y-57)，其中虛線表示與該第二官能化HA之連接，該pH調節劑使步驟(a)之該乳液的pH自約1增加至約9，較佳自約1增加至約5.5，更佳自約2增加至約4，且其中各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。 9. 如項目8之方法，其中-Y 02及-Y 02a兩者均為-H。 10. 如項目1至9中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-FG 1、-FG 2獨立地為官能基部分； 各-X-、-Y-獨立地為羰基或不存在； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3單元： ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X-、-Y-、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； 各-L 3-獨立地為鍵聯部分或不存在； (d) 視情況對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g) 視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。 11. 如項目1至10中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 視情況對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 視情況，洗滌在步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之水凝膠HA微球； (f) 視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球，以提供包含複數個Z 3-i'單元之水凝膠HA微球： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (g) 視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h) 視情況，洗滌在步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i) 視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。 12. 如項目10或11之方法，其中步驟(d)及(e)不是可選擇的且步驟(f)至(h)不存在。 13. 如項目1至12中任一項之方法，其中該pH調節劑係選自由以下組成之群：N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)、1,4-二甲基哌𠯤、4-甲基𠰌啉、4-乙基𠰌啉、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷、1,1,4,7,10,10-六甲基三伸乙基四胺、1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷、參[2-(二甲胺基)乙基]胺、三乙胺、二異丙基乙胺(DIPEA)、三甲胺、N,N-二甲基乙胺、N,N,N',N'-四甲基-1,6-己二胺、N,N,N',N'',N''-五甲基二伸乙基三胺、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯及六亞甲基四胺。 14. 如項目1至13中任一項之方法，其中該pH調節劑為N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)。 15. 如項目1至14中任一項之方法，其中各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'- -C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 16. 如項目1至15中任一項之方法，其中各-X'-具有式(x0)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； v 0係選自由0及1組成之群； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； 其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -X 2-係選自由-N(R 1)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =X 3係選自由=O、=N(R 1)及=S組成之群； -X 5-係C 1 - 20烷基，該C 1 - 20烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-C(O)O-、-T-、-N(R y1)-及-N(R y1)C(O)-之基團；且該C 1 - 20烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； -R 1係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 2係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 3、-OR 3、-C(O)R 3、-C(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2N(R 3)(R 3a)、-S(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2R 3、-S(O)R 3、-N(R 3)S(O) 2N(R 3a)(R 3b)、-SR 3、-N(R 3)(R 3a)、-NO 2、-OC(O)R 3、-N(R 3)C(O)R 3a、-N(R 3)S(O) 2R 3a、-N(R 3)S(O)R 3a、-N(R 3)C(O)OR 3a、-N(R 3)C(O)N(R 3a)(R 3b)、-OC(O)N(R 3)(R 3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 3、-R 3a及-R 3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 17. 如項目1至16中任一項之方法，其中各-X'-具有式(x1)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -X 2-係選自由-N(R 1)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =X 3係選自由=O、=N(R 1)及=S組成之群； -X 6-係C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-C(O)O-、-T-、-N(R y1)-及-N(R y1)C(O)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代； -R 1係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 2取代； -R 2係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 3、-OR 3、-C(O)R 3、-C(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2N(R 3)(R 3a)、-S(O)N(R 3)(R 3a)、-S(O) 2R 3、-S(O)R 3、-N(R 3)S(O) 2N(R 3a)(R 3b)、-SR 3、-N(R 3)(R 3a)、-NO 2、-OC(O)R 3、-N(R 3)C(O)R 3a、-N(R 3)S(O) 2R 3a、-N(R 3)S(O)R 3a、-N(R 3)C(O)OR 3a、-N(R 3)C(O)N(R 3a)(R 3b)、-OC(O)N(R 3)(R 3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 3、-R 3a及-R 3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 18. 如項目1至17中任一項之方法，其中各-X'-具有式(x2)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-、-X 7-、-X 8-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -R 1、-R 5、-R 10係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 6取代； -R 6係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 7、-OR 7、-C(O)R 7、-C(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2N(R 7)(R 7a)、-S(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2R 7、-S(O)R 7、-N(R 7)S(O) 2N(R 7a)(R 7b)、-SR 7、-N(R 7)(R 7a)、-NO 2、-OC(O)R 7、-N(R 7)C(O)R 7a、-N(R 7)S(O) 2R 7a、-N(R 7)S(O)R 7a、-N(R 7)C(O)OR 7a、-N(R 7)C(O)N(R 7a)(R 7b)、-OC(O)N(R 7)(R 7a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 7、-R 7a及-R 7b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 19. 如項目1至18中任一項之方法，其中各-X'-具有式(x3)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接； b 0係選自由以下組成之群：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9及10； -X 1-、-X 4-獨立地為C 1 - 5烷基，該C 1 - 5烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 5烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由-H及C 1 - 4烷基組成之群； -R 1、-R 5、-R 10係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 6取代； -R 6係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 7、-OR 7、-C(O)R 7、-C(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2N(R 7)(R 7a)、-S(O)N(R 7)(R 7a)、-S(O) 2R 7、-S(O)R 7、-N(R 7)S(O) 2N(R 7a)(R 7b)、-SR 7、-N(R 7)(R 7a)、-NO 2、-OC(O)R 7、-N(R 7)C(O)R 7a、-N(R 7)S(O) 2R 7a、-N(R 7)S(O)R 7a、-N(R 7)C(O)OR 7a、-N(R 7)C(O)N(R 7a)(R 7b)、-OC(O)N(R 7)(R 7a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 7、-R 7a及-R 7b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 20. 如項目1至19中任一項之方法，其中各-X'-具有式(x4)： ， 其中 無標記之虛線指示與-X-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 1或-L 3-之連接；且 c 0係選自由1、2、3、4、5、6、7、8、9及10組成之群，較佳地c 0為7。 21. 如項目1至20中任一項之方法，其中各-Y'-具有式(y0)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-之連接； -Y 1-、-Y 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -Y 2-係選自由-N(R 2)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； =Y 3係選自由=O、=N(R 2)及=S組成之群； -R 1、-R 2係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； -R 3係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 4、-OR 4、-C(O)R 4、-C(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2N(R 4)(R 4a)、-S(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2R 4、-S(O)R 4、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)(R 4b)、-SR 4、-N(R 4)(R 4a)、-NO 2、-OC(O)R 4、-N(R 4)C(O)R 4a、-N(R 4)S(O) 2R 4a、-N(R 4)S(O)R 4a、-N(R 4)C(O)OR 4a、-N(R 4)C(O)N(R 4a)(R 4b)、-OC(O)N(R 4)(R 4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 4、-R 4a及-R 4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 22. 如項目1至21中任一項之方法，其中各-Y'-具有式(y1)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-之連接； -Y 1-、-Y 4-獨立地為C 1 - 10烷基，該C 1 - 10烷基視情況間雜有一或多個獨立地選自-O-、-T-、-N(R y1)-、-C(O)O-及-C(O)N(R y1)-之基團；且該C 1 - 10烷基鏈視情況經一或多個獨立地選自-OH、-T、-NH(R y1)及-C(O)N(R y2R y2a)之基團取代；其中-R y1、-R y2、-R y2a係獨立地選自由H及C 1 - 4烷基組成之群； -Y 2-係選自由-N(R 2)-、-O-、-S-及-Se-組成之群； -R 1、-R 2係獨立地選自由-H、C 1 - 5烷基及-T組成之群； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 3取代； -R 3係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 4、-OR 4、-C(O)R 4、-C(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2N(R 4)(R 4a)、-S(O)N(R 4)(R 4a)、-S(O) 2R 4、-S(O)R 4、-N(R 4)S(O) 2N(R 4a)(R 4b)、-SR 4、-N(R 4)(R 4a)、-NO 2、-OC(O)R 4、-N(R 4)C(O)R 4a、-N(R 4)S(O) 2R 4a、-N(R 4)S(O)R 4a、-N(R 4)C(O)OR 4a、-N(R 4)C(O)N(R 4a)(R 4b)、-OC(O)N(R 4)(R 4a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 其中-R 4、-R 4a及-R 4b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 23. 如項目1至22中任一項之方法，其中各-Y'-具有式(y2)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-之連接； -R 1、-R 5係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、丙基及異丙基；且 a 1、a 2係獨立地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5、6、7、8、9及10，較佳地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5、6、7及8，更佳地選自由以下組成之群：1、2、3、4、5及6，或甚至更佳地選自由以下組成之群：1、2及3。 24. 如項目1至23中任一項之方法，其中各-Y'-具有式(y3)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-之連接；且 -R 1、-R 5係獨立地選自由以下組成之群：-H、甲基、乙基、丙基及異丙基。 25. 如項目1至24中任一項之方法，其中各-Y'-具有式(y4)： ， 其中 無標記之虛線指示與-Y-或與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與-FG 2或-L 3-之連接。 26. 如項目1至25中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H； 各-X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； 各-Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； (b) 向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c) 收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d) 對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e) 洗滌步驟(d)中所獲之水凝膠HA微球。 27. 如項目1至26中任一項之方法，其中該第一及第二官能化HA之分子量獨立地在約80 kDa至約250 kDa範圍內，諸如約90 kDa至約200 kDa或諸如約100 kDa至約150 kDa範圍內。 28. 如項目1至27中任一項之方法，其中該第一及第二官能化HA之分子量在約100 kDa至約150 kDa範圍內。 29. 如項目26至28中任一項之方法，其中Z 5-i中之硫醇官能化程度為約5%且Z 6-i中之順丁烯二醯亞胺官能化程度為約10%。 30. 如項目1至29中任一項之方法，其中在步驟(a)中，溶液A進一步包含檸檬酸鹽及/或組胺酸，較佳在約2之pH下。 31. 如項目1至30中任一項之方法，其中在步驟(a)中，溶液B包含庚烷或十四烷及脫水山梨糖醇單油酸酯。 32. 如項目1至31中任一項之方法，其中在步驟(b)中，該pH調節劑為N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)且使步驟(a)之該乳液的pH值增加，較佳增加至約4之pH值。 33. 如項目1至32中任一項之方法，其中在步驟(d)中，經由濕式篩分進行尺寸分級。 34. 一種水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽，其可藉由如項目1至33中任一項之方法獲得。 35. 一種如項目34之水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽作為藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽中之載劑的用途。 36. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其包含如項目34之水凝膠HA微球。 37. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其包含透明質酸(HA)水凝膠微球，該透明質酸水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X-、-Y-獨立地為羰基或不存在； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在； 各-L 3-、-L 4-、-L 5-獨立地為鍵聯部分或不存在；且 各-BA獨立地為封端劑。 38. 如項目37之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2、約0.1%至約20%範圍內之Z 3及約0.1%至約10%範圍內之Z 4。 39. 如項目37或38之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含約75%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約10%範圍內之Z 2、約0.1%至約10%範圍內之Z 3及約0.1%至約5%範圍內之Z 4。 40. 如項目37至39中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含約78%至約96%範圍內之Z 1、約2%至約10%範圍內之Z 2、約1%至約7%範圍內之Z 3及約0.5%至約5%範圍內之Z 4。 41. 如項目37至40中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-BA係選自由以下組成之群： 、 、 、 及 ， 其中虛線指示與-L 5-之連接。 42. 如項目37至41之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-BA具有式(b01)。 43. 如項目37至42中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在；且 其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2-i、約0.1%至約20%範圍內之Z 3-i及約0.1%至約10%範圍內之Z 4-i。 44. 如項目37至43中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D係選自由以下組成之群：小分子藥物部分、中等大小藥物部分、肽藥物部分及蛋白質藥物部分。 45. 如項目37至44中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D為蛋白質藥物部分。 46. 如項目37至45中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D為單株或多株抗體或其片段或融合物。 47. 如項目37至46中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a1為鹼金屬離子或H且-R a2為-H。 48. 如項目37至47中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-X-及-Y-中之各者為羰基。 49. 如項目37至48中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各-L 2-係選自由以下組成之群：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y1)-、-S(O) 2N(R y1)-、-S(O)N(R y1)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y1)S(O) 2N(R y1a)-、-S-、-N(R y1)-、-OC(OR y1)(R y1a)-、-N(R y1)C(O)N(R y1a)-、-OC(O)N(R y1)-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y3)-、-S(O) 2N(R y3)-、-S(O)N(R y3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y3)S(O) 2N(R y3a)-、-S-、-N(R y3)-、-OC(OR y3)(R y3a)-、-N(R y3)C(O)N(R y3a)-及-OC(O)N(R y3)-； -R y1及-R y1a係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y4)-、-S(O) 2N(R y4)-、-S(O)N(R y4)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y4)S(O) 2N(R y4a)-、-S-、-N(R y4)-、-OC(OR y4)(R y4a)-、-N(R y4)C(O)N(R y4a)-及-OC(O)N(R y4)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代； 各-R y2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR y5、-OR y5、-C(O)R y5、-C(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-S(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2R y5、-S(O)R y5、-N(R y5)S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-SR y5、-N(R y5)(R y5a)、-NO 2、-OC(O)R y5、-N(R y5)C(O)R y5a、-N(R y5)S(O) 2R y5a、-N(R y5)S(O)R y5a、-N(R y5)C(O)OR y5a、-N(R y5)C(O)N(R y5)(R y5a)、-OC(O)N(R y5)(R y5a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y3、-R y3a、-R y4、-R y4a、-R y5、-R y5a及-R y5b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。 50. 如項目37至49中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各-L 1-具有式(I)： (I)， 其中 虛線指示藉由形成醯胺鍵來連接至-D之氮； -X-為-C(R 4R 4a)-；-N(R 4)-；-O-；-C(R 4R 4a)-C(R 5R 5a)-；-C(R 5R 5a)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-N(R 6)-；-N(R 6)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-O-；-O-C(R 4R 4a)-；或-C(R 7R 7a)-； X 1為C；或S(O)； -X 2-為-C(R 8R 8a)-；或-C(R 8R 8a)-C(R 9R 9a)-； =X 3為=O；=S；或=N-CN； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 6、-R 8、-R 8a、-R 9、-R 9a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群； -R 3、-R 3a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群，其限制條件為在-R 3、-R 3a中之一者或兩者不為-H之情況下，其連接至其經由sp 3雜化碳原子所連接的N； -R 7為-N(R 10R 10a)；或-NR 10-(C=O)-R 11； -R 7a、-R 10、-R 10a、-R 11彼此獨立地為-H；或C 1 - 10烷基； 視情況，-R 1a/-R 4a、-R 1a/-R 5a、-R 1a/-R 7a、-R 4a/-R 5a、-R 8a/-R 9a對中之一或多者形成化學鍵； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a、-R 8/-R 8a、-R 9/-R 9a對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基；或3員至10員雜環基； 視情況，-R 1/-R 4、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 7a、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 8/-R 9、-R 2/-R 3對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成環A； 視情況，-R 3/-R 3a與其所連接的氮原子接合在一起以形成3員至10員雜環； 環A係選自由以下組成之群：苯基；萘基；茚基；二氫茚基；四氫萘基；C 3 - 10環烷基；3員至10員雜環基；及8員至11員雜雙環基；且 各-L 1-經一個-L 2-取代，且視情況進一步經取代，其限制條件為式(I)中標有星號之氫不經取代基置換。 51. 如項目50之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-X-為-C(R 7R 7a)-，-R 7為-NR 10-(C=O)-R 11且-R 7a為-H。 52. 如項目37至49中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各-L 1-具有式(XI)： (XI)， 其中 虛線指示與-D之一級胺或二級胺之氮之連接； v係選自由0或1組成之群； -X 1-係選自由-C(R 8)(R 8a)-、-N(R 9)-及-O-組成之群； =X 2係選自由=O及=N(R 10)組成之群； -X 3係選自由-O、-S及-Se組成之群； 各p係獨立地選自由以下組成之群：0或1，其限制條件為至多一個p為0； -R 6、-R 6a、-R 10係獨立地選自由以下組成之群：-H、-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T； -R 9係選自由-C(R 11)(R 11a)(R 11b)及-T組成之群； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 3、-R 3a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 7、-R 8-R 8a、-R 11、-R 11a及-R 11b係獨立地選自由以下組成之群：-H、鹵素、-CN、-C(O)OR 12、-OR 12、-C(O)R 12、-C(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2N(R 12)(R 12a)、-S(O)N(R 12)(R 12a)、-S(O) 2R 12、-S(O)R 12、-N(R 12)S(O) 2N(R 12a)(R 12b)、-SR 12、-NO 2、-N(R 12)C(O)OR 12a、-N(R 12)C(O)N(R 12a)(R 12b)、-OC(O)N(R 12)(R 12a)、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； -R 12、-R 12a、-R 12b係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基；其中-T、C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代；且其中C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基及C 2 - 6炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 14)-、-S(O) 2N(R 14)-、-S(O)N(R 14)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 14)S(O) 2N(R 14a)-、-S-、-N(R 14)-、-OC(OR 14)(R 14a)-、-N(R 14)C(O)N(R 14a)-及-OC(O)N(R 14)-； 其中各T係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 13取代； -R 13係選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基、-C(O)OR 15、-OR 15、-C(O)R 15、-C(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2N(R 15)(R 15a)、-S(O)N(R 15)(R 15a)、-S(O) 2R 15、-S(O)R 15、-N(R 15)S(O) 2N(R 15a)(R 15b)、-SR 15、-N(R 15)(R 15a)、-NO 2、-OC(O)R 15、-N(R 15)C(O)R 15a、-N(R 15)S(O) 2R 15a、-N(R 15)S(O)R 15a、-N(R 15)C(O)OR 15a、-N(R 15)C(O)N(R 15a)(R 15b)、-OC(O)N(R 15)(R 15a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 其中-R 14、-R 14a、-R 15、-R 15a及-R 15b係獨立地選自由以下組成之群：-H及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 3/-R 3a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a或-R 8/-R 8a對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基或8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 1/-R 2、-R 1/-R 8、-R 1/-R 9、-R 2/-R 9或-R 2/-R 10對中之一或多者與其所連接之原子接合在一起以形成環-A-； 其中-A-係選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基； 視情況，-R 3/-R 6、-R 4/-R 6、-R 5/-R 6、-R 6/-R 6a或-R 6/-R 7對中之一或多者與其所連接之原子一起形成環-A'-； 其中-A'-係選自由3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基組成之群；且 -L 1-經-L 2-取代，其限制條件為式(XI)中標有星號之氫不經取代基置換。 53. 一種醫藥組合物，其包含如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。 54. 如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物，其適用作藥劑。 55. 如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物，其用於治療可經D-H或其醫藥學上可接受之鹽治療之疾病的方法中。 56. 如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物，其用於治療眼部疾病。 57. 如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物，其用於製造用以治療性治療疾病之藥劑。 58. 如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物，其用於製造用以治療性治療眼部疾病之藥劑。 59. 一種預防或治療可用D-H預防或治療之疾病之方法，該方法包含以下步驟：向有需要之個體投與治療有效量之如項目36至52中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如項目53之醫藥組合物。 60. 如項目59之方法，其中該疾病為眼部疾病。 61. 一種製備藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a) 提供藉由如項目1至33中任一項之方法獲得之該等水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽，其中該水凝膠包含一或多個未反應之-FG 1或-FG 2； (b) 提供單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3、雙結合物試劑FG 3-L 2-L 1-D-L 1-L 2-FG 3或式(t)之三結合物試劑： (t)， 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在； 各-FG 3獨立地為與一個-FG 1或-FG 2反應之官能基； (c) 將步驟(a)之該等水凝膠HA微球與步驟(b)之該單結合物、雙結合物或三結合物試劑混合； (d) 將步驟(c)之該藥物結合物或其醫藥學上之鹽與封端試劑混合；及 (e) 收集步驟(c)或(d)之該藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。 62. 如項目61之方法，其中該方法包含對步驟(c)或(d)中所獲之藥物結合物進行可選擇之純化步驟。 63. 如項目61或62之方法，其中在步驟(c)中，將該等水凝膠HA微球與單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3混合。 64. 如項目61至63中任一項之方法，其中該單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3具有式(m1)或(m2)： (m1)或 (m2)。 65. 如項目61至64中任一項之方法，其中該單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3具有式(m'1)或(m'2)： (m'1)或 (m'2)。 66. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其可藉由如項目61至65中任一項之方法獲得。
本發明之另一態樣係關於一種用於在流動系統中沉澱聚合物之方法。
本發明亦提供一種用於在用於沉澱及分離聚合物之裝置中分離聚合物之方法。
本發明亦關於可藉由本發明之方法獲得之聚合物。
本發明之另一態樣係關於用於沉澱聚合物之流動系統。
本發明亦提供一種用於沉澱及分離聚合物的裝置，其包含流動系統及收集總成。
用於在流動系統中沉澱聚合物之方法可包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液組合； (c')使步驟(b')之組合混合物流入至少一個沉澱單元中；及 (d')沉澱該聚合物； 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。
用於在用於沉澱及分離聚合物之裝置中分離聚合物之方法可包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液組合； (c')使步驟(b')之組合混合物流入至少一個沉澱單元中； (d')沉澱該聚合物；及 (e')分離步驟(d')之沉澱物， 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。
用於沉澱本發明之聚合物的流動系統可包含： - 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； - 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； - 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液組合或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合； - 用於沉澱該聚合物之至少一個沉澱單元； 其中該容器、該至少一個儲存容器、該至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 - 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； - 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； - 該組合混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。
用於沉澱及分離本發明之聚合物的裝置可包含： I) 用於沉澱聚合物之流動系統，其包含： - 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； - 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； - 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液組合或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合； - 用於沉澱該聚合物之至少一個沉澱單元； 其中該容器、該至少一個儲存容器、該至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 - 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； - 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； - 該組合混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合；以及 II) 用於分離該沉澱聚合物之收集總成。
例示性聚合物係選自由以下組成之群：多醣，諸如透明質酸、透明質酸及衍生物或官能化透明質酸、肝素、硫酸乙醯肝素、肝素前體(heparosan)、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素、纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、幾丁質、幾丁聚醣、聚葡萄糖或糊精；聚醚，諸如聚(乙二醇)或聚(丙二醇)；聚酯，諸如聚羥基丁酸酯、聚(乙醇酸)、聚對苯二甲酸丁二酯、聚(己內酯)、聚(乳酸)或聚(乳酸-共-乙醇酸)；蛋白質，諸如明膠或膠原蛋白；聚烯烴，諸如聚(2-甲基丙烯醯基-氧基乙基磷醯膽鹼)、聚(丙烯酸)、聚(丙烯酸酯)、聚(丙烯醯胺)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(二甲基丙烯醯胺)、聚乙烯、聚(羥乙基丙烯酸酯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(N-(2-羥丙基)甲基丙烯醯胺)、聚(羥丙基甲基丙烯酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯基胺)、聚(乙烯基甲基醚)或聚(乙烯基吡咯啶酮)；聚(㗁唑啉)，諸如聚(甲基㗁唑啉)或聚(乙基㗁唑啉)；聚醯胺；聚(醯胺基胺)；聚(胺基酸)；聚酸酐；聚(天冬醯胺)；聚碳酸酯；聚(伸烷基磷酸酯)，諸如聚(伸乙基磷酸酯)；聚(亞胺基碳酸酯)；聚(甲基丙烯醯胺)；聚(有機磷氮烯)；聚(原酸酯)；聚(矽氧烷)及聚(胺基甲酸酯)。
在某些實施例中，聚合物為官能化透明質酸。在某些實施例中，聚合物為透明質酸(亦即原生透明質酸)。在某些實施例中，聚合物為聚(乙二醇)。在某些實施例中，聚合物為膠原蛋白。
官能化HA可包含複數個經線性連接之Z 1及Z 5單元、Z 1及Z 6單元或Z 1及Z 7單元，其中Z 1、Z 5及Z 6單元如本文中其他處所描述。
在某些實施例中，官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 7單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-FG 1、-FG 2如本文別處所定義； 各-X-、-Y-、-R*-獨立地為羰基或不存在；且 各-X'-、-Y'-、-R*'-獨立地為如本文中其他地方所定義之間隔子部分或不存在。
在某些實施例中，官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 7-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； -X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； -Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H；且 該第二溶液為乙醇。
本發明亦提供一種用於沉澱官能化HA之方法，其中該方法包含連續流動沉澱且其中官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1單元及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 7-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； -X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； -Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H。
使用用於沉澱或分離上文所描述之聚合物之流動系統、裝置或方法的一個優點係與相應的批量製程相比，可以較高產率及較短處理時間獲得該聚合物(諸如本文中其他地方所描述之官能化HA)。另一個優點在於能夠控制及改良分離聚合物之形態，諸如本文中其他地方所描述之官能化HA之形態，與藉由批量製程獲得的可能具有黏性濾餅之外觀及特性之聚合物相比，該經分離之聚合物具有串狀、顆粒狀或非黏性多孔形狀。呈顆粒形狀形式之聚合物(諸如官能化HA)提供較大的表面積，防止形成較大的聚集體且具有改良之溶解特性。特定言之，為了獲得具有適合形態之聚合物(諸如官能化HA)，存在至少兩個沉澱單元將係有利的，且自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之混合物在流入另一沉澱單元之前與包含反溶劑之第二溶液組合或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。
與相應的批量製程相比，用於沉澱或分離上文所描述之聚合物之流動系統、裝置或方法的額外優點係其允許控制滯留時間、溫度，需要減少之製程體積(例如一次在儲存容器中需要較低的峰值反溶劑製程體積)，允許更好地控制沉澱及分離製程且改良可擴展性。與其相應的批量製程相比，該系統亦較不易於受到污染。
一般而言，在本發明之流動系統內，溶液及混合物可藉由氣體超壓或泵流動。該泵可係選自由以下組成之群：齒輪泵；隔膜泵(亦稱為膜泵)；柱塞泵(諸如高效液相層析泵)；注射泵；蠕動泵及活塞泵。典型地，在壓力及所要流動範圍內校準泵，以確保其在特定流動速率下流動或引入溶液。
在整個本發明中，可對諸如流動速率、濃度、溫度、壓力及其類似者之參數進行量測且最佳化，以便獲得高沉澱產率及純度。此外，用於沉澱及分離本發明之聚合物的流動系統或裝置之尺寸可經設定且經組態以允許在廣泛範圍及規模下純化及分離聚合物。因此，諸如官能化HA之聚合物可以以下之量進行純化及分離：大於約10 g，諸如大於約15 g，諸如大於約30 g，諸如大於約50 g，諸如大於約100 g，諸如大於約150 g，諸如大於約175 g，諸如大於約200 g，諸如大於約250 g，諸如大於約400 g，諸如大於約600 g，諸如大於約800 g，諸如大於約1 kg，諸如大於約10 kg，諸如大於約100 kg，諸如大於約200 kg，諸如大於約300 kg或諸如大於約500 kg。
一般而言，併入於上述流動系統或裝置中之通道的尺寸亦可經選擇，例如以允許通道中之流體具有某一體積或線性流動速率。通道之數目及通道之形狀可藉由熟習此項技術者已知之任何方法改變。在一些情況下，可使用超過一個通道或毛細管。舉例而言，可使用兩個或更多個通道，其中該等通道定位於彼此內部、定位成彼此相鄰或定位成彼此相交。
流動速率影響滯留時間(假定容器體積相同)。混合效果可視流動速率而定，亦即低流動速率具有低混合效率，高流動速率具有高混合效率。混合效力亦可受流動濁度影響，流動濁度自身視幾何結構及流速而定。
通常，各溶液之流動速率將在流動製程過程中保持恆定。此外，通常在步驟(a')中，第一溶液與第二溶液同時流經第一通道。
在以上方法內，各溶液可以約1 ml/min至約100 l/min，諸如約10 ml/min至約90 l/min，諸如約15 ml/min至約60 l/min，諸如約20 ml/min至約40 l/min，諸如約30 ml/min至約30 l/min或諸如約10 ml/min至約10 ml/min範圍內之流動速率獨立地流動。
在某些實施例中，第一溶液以約10 ml/min至約10 l/min，諸如約10 ml/min至約5 l/min，諸如約10 ml/min至約200 ml/min，諸如約15 ml/min至約115 ml/min，諸如約25至約105 ml/min，諸如約35至約95 ml/min，諸如約45至約85 ml/min或諸如約55至約75 ml/min範圍內之流動速率流動。有利地，第一溶液以約64 ml/min之流動速率流動。
在某些實施例中，第二溶液以約10 ml/min至約10 l/min，諸如約10 ml/min至約5 l/min，諸如約10 ml/min至約200 ml/min，諸如約55 ml/min至約135 ml/min，諸如約65 ml/min至約125 ml/min，諸如約75 ml/min至約115 ml/min或諸如約85 ml/min至約105 ml/min範圍內之流動速率流動。有利地，第二溶液以約96 ml/min之流動速率流動。
在步驟(b')中，第一溶液與包含反溶劑之第二溶液在組合單元，諸如混合器中組合。另外，自沉澱單元流出之包含沉澱聚合物(諸如沉澱官能化HA)之混合物與包含反溶劑之第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液在組合單元(諸如混合器)中組合。該混合器可為Y型、T型、X型、箭頭型混合器或靜態混合器。應理解，在組合單元中將第一溶液與第二溶液組合後，亦即在聚合物與反溶劑之間首先接觸時，聚合物可能已經發生一些沉澱。
在某些實施例中，混合器為Y型混合器(Y型或Y形混合器以120°混合溶液)。在某些實施例中，混合器為T型混合器(T型或T形混合器以迎面方式或以90°混合兩種溶液)。在某些實施例中，混合器為X型混合器。在某些實施例中，混合器為箭頭型混合器。有利地，在步驟(b')中，第一溶液與包含反溶劑之第二溶液在Y型混合器中組合，且包含自沉澱單元流出之沉澱聚合物的混合物與包含反溶劑之第二溶液在T型混合器(較佳在Y型混合器)中組合。
在步驟(c')中，將經組合之溶液流入至少一個沉澱單元中，該沉澱單元可為連續流動反應器，諸如盤管反應器或管式反應器。該管式反應器可由惰性塑膠、惰性金屬、合金或玻璃製成。
盤管或管式反應器之長度決定或影響滯留時間，諸如沉澱或熟化時間。該盤管或管式反應器之長度範圍為約1 m至約1000 m，諸如約1 m至約900 m，諸如約1 m至約800 m，諸如約1 m至約700 m，諸如約1 m至約600 m，諸如約1 m至約500 m，諸如約1 m至約400 m，諸如約1 m至約300 m，諸如約1 m至約200 m，諸如約1 m至約100 m，諸如約1 m至約80 m，諸如約1 m至約60 m，諸如約1 m至約40 m，諸如約1 m至約20 m，諸如約1 m至約10 m，諸如約2 m至約8 m，諸如約3 m至7 m或諸如約4 m至6 m。特定言之，盤管反應器之長度為約5 m。該盤管反應器之內徑可在約1 mm至約100 mm範圍內，諸如約1 mm至約80 mm，諸如約1 mm至約60 mm，諸如約1 mm至約30 mm，諸如約1 mm至約15 mm，諸如約1 mm至約8 mm，諸如約2 mm至約6 mm或諸如約3 mm至5 mm範圍內。特定言之，該盤管反應器之直徑為約4 mm。
在步驟(e')中，可藉由此項技術中已知之任何適合手段(包括標準純化或分離方法)分離沉澱物。該純化或分離方法包括例如沉降、過濾或離心。可藉由抽吸過濾器或攪拌過濾器乾燥器達成過濾。離心可藉由使用離心機，諸如藉由手動排出之立式離心機、去皮離心機、篩網渦旋離心機、篩網渦旋離心機或推進離心機來達成。對於低於或等於1 kg之批量，宜使用具有手動排放之離心機，而對於高於1 kg之批量，宜使用去皮離心機。
如熟習此項技術者將瞭解，收集單元(諸如離心機)可裝備有提供氣體供應之惰化控制系統。此係尤其有益的，因為本發明之分離及純化方法使用反溶劑(諸如有機溶劑)來沉澱及洗滌聚合物(諸如官能化HA)。為了能夠控制引起爆炸風險之所得蒸氣混合物，且為了使所得聚合物保持惰性，在開始之前用諸如氮氣或氬氣之氣體吹掃離心機。在此完成之後，離心機保持於氣體氛圍(氮氣或氬氣氛圍)中。將經分離之聚合物(諸如官能化HA)保持在惰性狀態下，對於穩定性較差的化合物(例如容易氧化的硫醇官能化HA)尤其有用。
第二溶液或可選擇之溶液可包含反溶劑混合物或由反溶劑混合物組成，其可包含水及反溶劑之混合物或其可由反溶劑組成。反溶劑可為任何使聚合物(諸如官能化HA)沉澱的此項技術中已知的溶劑，或該聚合物不可溶於其中的溶劑。
可用於第二溶液中之反溶劑的實例包括乙醇、甲醇、異丙醇、乙腈、三級丁醇、正丙醇、四氫呋喃、丙酮、1,4-二㗁烷、乙二醇、二甘醇、三甘醇、丙三醇、二甲基甲醯胺(DMF)、N-甲基-2-吡咯啶酮(NMP)或其混合物。
在某些實施例中，第二溶液為乙醇。在某些實施例中，第二溶液為甲醇。在某些實施例中，第二溶液為異丙醇。在某些實施例中，第二溶液為乙腈。在某些實施例中，第二溶液為三級丁醇。在某些實施例中，第二溶液為正丙醇。在某些實施例中，第二溶液為四氫呋喃。在某些實施例中，第二溶液為丙酮。在某些實施例中，第二溶液為1,4-二㗁烷。在某些實施例中，第二溶液為乙二醇。在某些實施例中，第二溶液為二甘醇。在某些實施例中，第二溶液為三甘醇。
在某些實施例中，第二溶液為丙三醇。在某些實施例中，第二溶液為二甲基甲醯胺(DMF)。在某些實施例中，第二溶液為N-甲基-2-吡咯啶酮(NMP)。
在某些實施例中，第二溶液為水與乙醇之混合物。
包含官能化HA之第一溶液可為產生用於製備官能化HA之方法的混合物。舉例而言，其可為在合成(或製備方法)胺官能化HA時產生之混合物，亦即藉由將HA之至少一或多個羧基轉化為具有間隔子部分(諸如本文中其他處所描述之-L 2'-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含胺基)之N取代之醯胺來引入胺基。亦可為合成順丁烯二醯亞胺基官能化HA時產生之混合物，亦即藉由將末端胺基轉化為具有間隔子部分(諸如本文中其他處所描述之-L 2'-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含順丁烯二醯亞胺基)之N取代之醯胺來將順丁烯二醯亞胺基引入至胺官能化HA中。此外，其可為在合成硫醇官能化HA時產生之混合物，亦即藉由將末端胺基轉化為具有間隔子部分(諸如本文中其他處所描述之-L 2'-間隔子部分，該間隔子部分在其末端包含硫醇基)之N取代之醯胺來將硫醇基引入至胺官能化HA中。因此，應理解，除官能化HA(亦即產物)以外，第一溶液亦可包含未反應之起始試劑或任何副產物。
一般而言，必要時，第一溶液可在與包含反溶劑之第二溶液組合之前在流動系統中進行調節。調節條件包括淬滅，諸如用包含有機鹽(例如乙酸鈉)之淬滅溶液進行淬滅。
特定言之，第一溶液包含胺官能化HA，諸如包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 7-i單元中之各者的胺官能化HA： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H； 亦可包含水、乙酸根離子、氯離子、鹼金屬離子(諸如Na +或K +)、2-(N-N-𠰌啉基)乙磺酸(MES)、未反應之1,3-二胺基丙烷、EDC脲(N-[3-(二甲胺基)丙基]-N'-乙基脲)及/或羥基苯并三唑(HOBt)。
此外，第一溶液包含硫醇官能化HA，諸如包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者的硫醇官能化HA： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H； -X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； 亦可包含N-2-羥基乙基哌𠯤-N-2-乙磺酸(HEPES)、乙酸根離子、氯離子、鹼金屬離子(諸如Na +或K +)、乙腈、參(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)及/或以下化合物： 、 或 。
第一溶液包含順丁烯二醯亞胺官能化HA，諸如包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者的順丁烯二醯亞胺官能化HA： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H； -Y'-具有式(y4)： ， 亦可包含N-2-羥基乙基哌𠯤-N-2-乙磺酸(HEPES)、乙酸根離子、氯離子、鹼金屬離子(諸如Na +或K +)、乙腈及/或以下化合物： 、 或 。
圖式之具體實施方式圖1示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置1的一個實施例。裝置1包含流動系統2及收集總成6a'。收集總成6a'包含收集單元6、產物容器7及廢料容器8。在此實施例中，包含聚合物之第一溶液1a在容器1'內流經第一通道2a。包含反溶劑之第二溶液1b在儲存容器4內流經第二通道2b。第一溶液1a及第二溶液1b在組合單元3中混合。組合之混合物1c流經第三通道2c自組合單元3流向沉澱單元5。包含沉澱聚合物之混合物1c流經通道2c自沉澱單元5流出進入收集單元6。所有前述溶液及混合物藉助於泵2'流動。將沉澱物7a收集至產物容器7中，同時將廢料8a收集至廢料容器8中。
圖2示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置1的另一實施例，該裝置包含流動系統2及收集總成6a'。收集總成6a'包含收集單元6、產物容器7、廢料容器8、惰化控制系統12及儲存容器4。在此實施例中，儲存於儲存容器10中之緩衝劑10a流經系統1以平衡泵2'。包含聚合物之第一溶液1a在容器1'內流經第一通道2a。第一通道2a亦經由三通閥9連接至儲存容器10。包含反溶劑之第二溶液1b在儲存容器4內流經第二通道2b。第一溶液1a及第二溶液1b在組合單元3中混合。組合之混合物1c流經第三通道2c自組合單元3流向沉澱單元5。包含沉澱聚合物之混合物1c流經通道2c自沉澱單元5流出進入組合單元3，在組合單元中混合物與通過第四通道2d自儲存容器4流出的包含反溶劑的溶液1b混合。所得混合物1c'流經第五通道2e自組合單元3流向沉澱單元5。包含沉澱聚合物之混合物1c'流經通道2e自第二沉澱單元5流出進入收集單元6。通過第六通道2f自儲存容器4流出(且該第六通道經由雙通閥11連接至收集單元6)之包含反溶劑的溶液1b用於洗滌收集單元6中之沉澱聚合物。惰化控制系統12經由雙通閥11連接至收集單元6。將沉澱物7a收集至產物容器7中，同時將廢料收集至廢料容器8a中。所有前述溶液、緩衝劑及混合物藉助於泵2'流動。
圖3示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置1的另一實施例，該裝置包含流動系統2及收集總成6a'。收集總成6a'包含收集單元6、產物容器7、廢料容器8、惰化控制系統12及儲存容器4。在此實施例中，儲存於儲存容器10中之緩衝劑10a流經系統以平衡泵2'。包含聚合物之第一溶液1a在容器1'內流經第一通道2a。第一通道2a亦經由三通閥9連接至儲存容器10。儲存在用於儲存淬滅溶液之容器13內之淬滅溶液13a流經通道2b'。第一溶液1a及淬滅溶液13a在組合單元3中混合。儲存在儲存容器4內的包含反溶劑之第二溶液1b流經第二通道2b。
第二溶液1b及包含經淬滅之聚合物的混合物13a' (圖中未示)在組合單元3中混合。組合之混合物1c流經第三通道2c自組合單元3流向沉澱單元5。包含沉澱聚合物之混合物1c流經通道2c自沉澱單元5流出進入組合單元3，在組合單元中混合物與通過第四通道2d自儲存容器4流出的包含反溶劑的溶液1b混合。所得混合物1c'流經第五通道2e自組合單元3流向沉澱單元5。包含沉澱聚合物之混合物1c'流經通道2e自第二沉澱單元5流出進入收集單元6。通過第六通道2f自儲存容器4流出(且該第六通道經由雙通閥11連接至收集單元)之包含反溶劑的溶液1b用於洗滌收集單元6中之沉澱聚合物。惰化控制系統12經由雙通閥11連接至收集單元6。將沉澱物7a收集至產物容器7中，同時將廢料8a收集至廢料容器8中。所有前述溶液及混合物藉助於泵2'流動。
前述實施例中之任一者，包括描述於圖1、圖2及圖3中的彼等實施例可以各種方式修改。舉例而言，容器1'、儲存容器4、沉澱單元5、組合單元3及收集單元6可各自獨立地為溫度控制的。此外，舉例而言，在圖2或圖3所繪示之實施例中，可僅使用一個儲存容器4，而連接至收集單元6之通道2f可連接至同一個儲存容器4。此外，在圖2或圖3所繪示之實施例中，包含反溶劑的另一溶液(不同於第二溶液)可包含於另一個儲存容器(圖中未示)中。此外，視待沉澱之聚合物或包含該聚合物之第一溶液而定，可採用各種流動速率、壓力、溫度及濃度。特定言之，在將包含反溶劑之第二溶液與第一溶液混合之前，或混合至自沉澱單元5流出之混合物之前，需要使第二溶液冷卻，諸如冷卻至0℃或以下。
亦藉由以下非限制性項目進一步描述本發明。 1. 一種用於在流動系統中沉澱聚合物之方法，其中該方法包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液組合； (c')使步驟(b')之組合混合物流入至少一個沉澱單元中；及 (d')沉澱該聚合物； 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。 2. 一種用於在用於沉澱及分離聚合物之裝置中分離聚合物之方法，其中該方法包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液組合； (c')使步驟(b')之組合混合物流入至少一個沉澱單元中； (d')沉澱該聚合物；及 (e')分離步驟(d')之沉澱物， 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。 3. 如項目1或2之方法，其中存在一個沉澱單元。 4. 如項目1或2之方法，其中存在兩個沉澱單元，且自第一沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入第二沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液組合。 5. 如項目1至4中任一項之方法，其中該聚合物係選自由以下組成之群：多醣，諸如透明質酸、透明質酸及衍生物或官能化透明質酸、肝素、硫酸乙醯肝素、肝素前體、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素、纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、幾丁質、幾丁聚醣、聚葡萄糖或糊精；聚醚，諸如聚(乙二醇)或聚(丙二醇)；聚酯，諸如聚羥基丁酸酯、聚(乙醇酸)、聚對苯二甲酸丁二酯、聚(己內酯)、聚(乳酸)或聚(乳酸-共-乙醇酸)；蛋白質，諸如明膠或膠原蛋白；聚烯烴，諸如聚(2-甲基丙烯醯基-氧基乙基磷醯膽鹼)、聚(丙烯酸)、聚(丙烯酸酯)、聚(丙烯醯胺)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(二甲基丙烯醯胺)、聚乙烯、聚(羥乙基丙烯酸酯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(N-(2-羥丙基)甲基丙烯醯胺)、聚(羥丙基甲基丙烯酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯基胺)、聚(乙烯基甲基醚)或聚(乙烯基吡咯啶酮)；聚(㗁唑啉)，諸如聚(甲基㗁唑啉)或聚(乙基㗁唑啉)；聚醯胺；聚(醯胺基胺)；聚(胺基酸)；聚酸酐；聚(天冬醯胺)；聚碳酸酯；聚(伸烷基磷酸酯)，諸如聚(伸乙基磷酸酯)；聚(亞胺基碳酸酯)；聚(甲基丙烯醯胺)；聚(有機磷氮烯)；聚(原酸酯)；聚(矽氧烷)及聚(胺基甲酸酯)。 6. 如項目1至5中任一項之方法，其中該聚合物係選自由以下組成之群：多醣，諸如透明質酸、透明質酸及衍生物或官能化透明質酸、肝素、硫酸乙醯肝素、肝素前體、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素、纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、幾丁質、幾丁聚醣、聚葡萄糖或糊精；聚醚，諸如聚(乙二醇)；及蛋白質，諸如明膠或膠原蛋白。 7. 如項目1至6中任一項之方法，其中該聚合物為官能化HA。 8. 如項目1至7中任一項之方法，其中該第一溶液包含官能化HA，其中該官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 或複數個以下經線性連接之Z 1及Z 7-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； -X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； -Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； 各R a1為H或鹼金屬； 各-R a2為-H；且 該第二溶液為乙醇。 9. 一種用於沉澱聚合物之流動系統，其包含： - 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； - 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； - 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液組合或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合； - 用於沉澱該聚合物之至少一個沉澱單元； 其中該容器、至少一個儲存容器、至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 - 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； - 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； - 該組合混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合。 10. 如項目9之流動系統，其中該容器及該至少一個儲存容器進一步連接至閥及/或泵以控制包含該聚合物及該反溶劑的該混合物的流動速率。 11. 如項目9或10之流動系統，其進一步包含用於儲存緩衝劑之儲存容器，其中該儲存容器經由通道及閥連接至該容器的流出口。 12. 一種用於沉澱及分離聚合物之裝置，其中該裝置包含： I) 用於沉澱聚合物之流動系統，其包含： - 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； - 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； - 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液組合或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合； - 用於沉澱該聚合物之至少一個沉澱單元； 其中該容器、至少一個儲存容器、至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 - 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； - 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； - 該組合混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則自一個沉澱單元流出之包含沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液組合；以及 II) 用於分離該沉澱聚合物之收集總成。 13. 如項目9至11中任一項之流動系統或如項目12之裝置，其中該組合單元為Y型、T型、X型、箭頭型混合器或靜態混合器。 14. 如項目9至11中任一項之流動系統或如項目12之裝置，其中該組合單元為Y型或T型混合器。 15. 如項目9至11中任一項之流動系統或如項目12之裝置，其中該沉澱單元為盤管反應器或管式反應器。 16. 如項目12之裝置，其中該收集總成包含離心機。
材料及方法除非另外說明，否則所有材料均為市售的。
胺 - HA 之胺含量測定 ：藉由使游離胺基與鄰苯二甲醛(OPA)及N-乙醯基半胱胺酸在鹼性條件下反應且對所形成之發色團進行光度定量來測定胺-HA之胺含量，如由Molnár-Perl (編) (2015), Journal of Chromatography Library 70: 405-444系統地描述。
硫醇化化合物之硫醇含量測定：藉由Ellman檢定藉由在中性pH值下使游離化合物硫醇基與DTNB試劑反應且後續對所釋放之5-硫基-2-硝基苯甲酸(TNB)進行光度測定，來測定化合物之硫醇含量，該化合物可溶於或不溶於水溶液體系中，如由G.L. Ellman (1959), Archives of Biochemistry and Biophysics 82: 70-77系統地描述。
順丁烯二醯亞胺化合物之順丁烯二醯亞胺含量測定 ：藉由在中性pH值下使游離化合物順丁烯二醯亞胺基與已知過量之2-巰基乙醇反應且藉由Ellman檢定對殘餘的硫醇進行測定，來測定化合物之順丁烯二醯亞胺含量，該化合物可溶於或不溶於水溶液體系中。
水凝膠懸浮液之聚合物含量測定 ：藉由以下方法來測定水凝膠懸浮液之聚合物含量：在具有PE篩板(PE frit)之注射器反應器中，用水及無水乙醇連續洗滌代表性懸浮液之等分試樣，且接著在真空下乾燥固體水凝膠部分。由每個注射器之水凝膠殘餘物之質量及水凝膠懸浮液之各別等分試樣體積來計算水凝膠含量。
實例 1 ： 合成 NHS 活化之二硫化物處理試劑 1e根據以下流程合成NHS活化之壬二酸二硫化物建構嵌段 1e：
將9-(三級丁氧基)-9-側氧基壬酸(18.4 g；75.4 mmol；1.00當量)、 1a(15.5 g；75.4 mmol；1.00當量)、EDC*HCl (15.9 g；83.0 mmol；1.10當量)及DMAP (2.29 g；18.7 mmol；0.25當量)於二氯甲烷(300 mL)中之混合物在室溫下攪拌2.5小時。在真空下移除所有揮發物。使殘餘物溶於EtOAc (500 mL)中且有機相依次用5% NaHSO 4溶液(3×500 mL)、飽和NaHCO 3溶液及水(1:1 v/v；3×500 mL)之混合物及鹽水(500 mL)洗滌。有機相經NaSO 4乾燥，過濾且在減壓下移除所有揮發物。在高真空下乾燥後，獲得呈淡黃色油狀物之化合物 1b。 產量：29.84 g (69 mmol, 91 %) MS： m/z454.27 = [M+Na] +, (單同位素質量計算值：[M] = 431.56)
製備 1b(29.8 g；69 mmol，1.00當量)於TFA (50.0 mL；0.65 mol，9.39當量)中之溶液且在室溫下攪拌160分鐘的同時使氬氣流通過反應溶液。添加甲苯(100 mL)，且將溶液在減壓下濃縮至乾燥。該程序重複四次。將產物在高真空下乾燥隔夜。在45℃下在減壓下進一步乾燥三小時之後，獲得呈TFA鹽形式之呈黃色油狀物的化合物 1c。 產量：28.11 g (max. 69 mmol) MS： m/z276.18 = [M+H] +, (單同位素質量計算值：[M] = 275.17)
將3,3'-二硫代二丙酸二( N-羥基丁二醯亞胺酯) (9.13 g；22.6 mmol；1.00當量)及 1c(26.4 g；67.7 mmol；3.00當量)溶解於無水乙腈(106 mL)中且在室溫下攪拌五分鐘，隨後添加DIPEA (98.3 mL；564 mmol；25.00當量)且在室溫下再攪拌1.5小時。使溶液在冰浴中冷卻至0℃且添加TFA (43.2 mL，564 mmol，25當量)。使溶液緩慢升溫至室溫，同時再攪拌一小時。用二氯甲烷(600 mL)稀釋反應溶液且用10% NaHSO 4(3×600 mL)洗滌。用二氯甲烷(2×100 mL)再萃取經合併之水相。合併所有有機相且經Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。將殘餘物在高真空下乾燥隔夜。粗物質由乙腈再結晶，產生呈黃色固體狀之化合物 1d。 產量：14.95 g (20.6 mmol，兩步之產量為91%) MS： m/z725.34 = [M+H] +, (單同位素質量計算值：[M] = 724.32.)
將 1d(14.9 g；20.5 mmol；1.00當量)及 N-羥基丁二醯亞胺(11.8 g；102 mmol；5.00當量)溶解於DMF (200 mL)中。添加DIPEA (35.7 mL；204 mmol；10.0當量)且在60℃下攪拌混合物15分鐘。向澄清溶液中添加EDC*HCl (19.6 g；102 mmol；5.00當量)及額外DMF (100 mL)，且將其在60℃下攪拌1.5小時。在冰浴中冷卻混合物至0℃之後，添加TFA (17.2 mL，225 mmol，11當量)。在減壓下濃縮溶液且所得黃色油狀物用乙酸乙酯(700 mL)稀釋且依次用0.1 M HCl (5×200 mL)、飽和NaHCO 3溶液及水(1: 1 v/v，5×200 mL)之混合物及鹽水(100 mL)洗滌。有機相經MgSO 4乾燥，過濾，且在減壓下移除所有揮發物，隨後在高真空下乾燥殘餘物12小時。藉由急驟管柱層析純化粗物質，得到呈黃色固體狀之產物 1e。 產量：11.4 g (12.4 mmol, 60.4 %) MS： m/z919.37 = [M+H] +, (單同位素質量計算值：[M] = 918.36.)
實例 1a ： 原生 HA 2 之流動沉澱藉由在室溫下使透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，60.0 g，150 mmol COOH官能基，1.00當量)於2.5 L 100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 6.5)中溶解16小時來製備原生HA 2之溶液。溶解之後，添加乙酸鈉(339 g；2.49 mol，16.6當量)且攪拌混合物15分鐘且接著保持在室溫下。
流動沉澱系統調節如下。在環境溫度下，100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 6.5)以64 mL/min之流動速率泵送，且乙醇流1以96 mL/min之流動速率泵送。兩個料流於Y型件中合併且流動至管反應器(長5 m，內徑4 mm，體積63 mL，滯留時間24秒)中。隨後，來自管反應器之流及乙醇流2以160 mL/min之流動速率經由另一Y型件添加。合併之流動進入PTFE管反應器(長30 m，內徑4 mm，體積377 mL，滯留時間71秒)。隨後，將料流導引至配備有孔徑為20 µm的過濾袋之800 rpm旋轉的篩網離心機中。當流到達離心機時完成調節，且隨後停止所有泵。
如下沉澱HA 2。來自調節之緩衝液饋料由原生HA饋料替換，以64 mL/min之流動速率泵送原生HA溶液，且所有其他參數設定與調節過程中之彼等參數相同。可自第一Y型件開始觀測沉澱。在HA溶液耗盡之後，將饋料換回緩衝液儲集器以沖洗管線。所有泵之流動保持恆定，直至在進入離心機時無法再目測偵測到沉澱，且接著停止所有泵。為了在離心機中洗滌濾餅，經由離心機之噴嘴以500 mL/min之流動速率泵送2.5 L 80%乙醇水溶液且隨後泵送2.5 L純乙醇。以800 rpm繼續旋轉1分鐘，隨後停止離心機。收集產物且在高真空下乾燥隔夜，得到呈白色固體狀之流動沉澱HA 2。 回收率：54.71 g (91.2%)
實例 2 ： 合成胺 - HA 建構嵌段 3 、 3a 、 3b 、 3c 、 3d 、 3e 、 3f 、 3g 及 3h用於合成胺官能化HA衍生物之例示性反應流程：
將 2(平均分子量：100-150 kDa，5 g，12.5 mmol COOH官能基、1.00當量)溶解於100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 6.5)中，形成8 mg/mL溶液。依次添加HOBt*H 2O (5.72 g，37.4 mmol，3.00當量)及EDC*HCl (2.68 g，0.46 mmol，1.12當量)且在37℃下攪拌溶液24小時。向反應混合物中添加乙酸鈉(84.8 g；24.9 mmol，50.0當量)。完全溶解之後，藉由添加無水乙醇使中間物沉澱，用乙醇洗滌且在高真空下乾燥隔夜。將粗物質溶解於水(400 mL)中，添加NaOH (4 M，133 mL)，且在環境溫度下攪拌溶液兩小時，隨後添加冰乙酸(30.5 mL)。衍生HA藉由添加無水乙醇沉澱，用乙醇洗滌且在高真空下乾燥，得到呈白色固體狀之胺-HA 3。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：4.78 g (胺含量：0.266 mmol/g, 11.0% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，5 g，12.5 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (5.73 g，37.4 mmol，3.00當量)、EDC*HCl (1.24 g，6.47 mmol，0.52當量)及100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 5.5)且在22℃下反應18.5小時來製備另一胺官能化HA 3a。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：4.53 g (胺含量：0.126 mmol/g, 5.1% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，5 g，12.5 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (5.73 g，37.4 mmol，3.00當量)、EDC*HCl (1.55 g，8.11 mmol，0.65當量)及100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 5.5)且在22℃下反應18.5小時來製備另一胺官能化HA 3b。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：4.39 g (胺含量：0.162 mmol/g, 6.6% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，10 g，24.9 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (11.5 g，74.8 mmol，3.00當量)、EDC*HCl (3.11 g，16.2 mmol，0.65當量)及100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 5.5)且在22℃下反應18.5小時來製備另一胺官能化HA 3c。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：9.15 g (胺含量：0.151 mmol/g, 6.2% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，7 g，17.4 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (8.01 g，52.3 mmol，3.00當量)及EDC*HCl (583 g，3.04 mmol，0.17當量)來製備另一胺官能化HA 3d。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：6.16 g (胺含量：0.127 mmol/g, 5.2% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，2.50 g，6.24 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (2.86 g，18.7 mmol，3.00當量)及EDC*HCl (473 g，2.47 mmol，0.40當量)來製備另一胺官能化HA 3e。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：2.13 g (胺含量：0.269 mmol/g, 11.1% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，5.01 g，12.5 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (5.73 g，37.4 mmol，2.99當量)、EDC*HCl (2.54 g，13.3 mmol，1.06當量)及100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 5.5)且在22℃下反應18.5小時來製備另一胺官能化HA 3f。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：4.67 g (胺含量：0.232 mmol/g, 9.5% DS)
類似於上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(150-300 kDa，90.0 g，224 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (34.3 g，224 mmol，1.00當量)、EDC*HCl (3.96 g，20.7 mmol，0.092當量)及3.75 L 100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 6.5)且使此等組分在37℃下反應24小時來製備另一胺官能化HA 3g。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：83.0 g (胺含量：0.137 mmol/g, 4.2% DS)
根據上文所描述之程序，使用透明質酸鈉鹽(100-150 kDa，120.0 g，299 mmol COOH官能基，1.00當量)、HOBt*H 2O (45.7 g，299 mmol，1.00當量)、EDC*HCl (14.9 g，77.5 mmol，0.26當量)及5.0 L 100 mM MES，0.4 M 1,3-二胺基丙烷緩衝液(pH 6.5)且使此等組分在37℃下反應24小時來製備胺-HA 3h。向反應混合物中添加乙酸鈉(678.2 g；4.98 mol，16.7當量)且在20℃下攪拌混合物4小時。藉由沉澱收集粗製胺-HA且針對實例1a中之HA 2所描述進行洗滌，不同之處在於將產物流直接泵送出反應器。將粗物質溶解於水(3.2 L)中，接著添加NaOH (4 M，1.08 L)，且在20℃下攪拌該溶液2小時。添加冰乙酸(248 mL)。根據如實例1a中所描述之程序，將此混合物用於第二沉澱。自離心機過濾器分離出胺-HA 3h，在高真空中乾燥5天且獲得白色固體。使用OPA檢定測定胺含量。 產量：109.23 g (胺含量：0.307 mmol/g, 12.2% DS)
實例 3 ： 合成順丁烯二醯亞胺 - HA 建構嵌段 5 、 5a 、 5b 、 5c 、 5d - i 、 5d - ii 及 5e用於合成順丁烯二醯亞胺官能化HA衍生物之例示性反應流程：
將 3(4.28 g，胺官能基：0.266 mmol/g，1.14 mmol，1.00當量)溶解於100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)中，形成10 mg/mL溶液。添加 4(3.03 g，11.4 mmol；10.0當量)於MeCN (75.6 mL)中之溶液且在室溫下攪拌反應混合物60分鐘。在攪拌下將1 M pH 5.5之乙酸鈉溶液(504 mL)添加至溶液中，隨後添加無水乙醇以使聚合物沉澱。沉澱物用乙醇洗滌且在高真空下乾燥。將粗物質溶解於1%乙酸(428 mL)中。向溶液中添加1 M pH 5.5之乙酸鈉溶液(504 mL)。聚合物藉由添加無水乙醇沉澱，用乙醇洗滌且在高真空下乾燥，得到呈白色固體狀之順丁烯二醯亞胺-HA 5。使用逆Ellman檢定測定順丁烯二醯亞胺含量。 產量：3.75 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.258 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3b(2.00 g，0.162 mmol/g胺，0.32 mmol，1.00當量)及 4(0.86 g，3.24 mmol；10.0當量)於乙腈(35 mL)中之溶液來製備另一順丁烯二醯亞胺官能化HA 5a。使用逆Ellman檢定測定順丁烯二醯亞胺含量。 產量：1.67 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.153 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3e(2.04 g，0.269 mmol/g胺，0.55 mmol，1.00當量)及 4(1.53 g，5.75 mmol；10.5當量)於乙腈(110 mL)中之溶液來製備另一順丁烯二醯亞胺官能化HA 5b。使用逆Ellman檢定測定順丁烯二醯亞胺含量。 產量：1.59 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.231 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3f(2.00 g，0.232 mmol/g胺，0.46 mmol，1.00當量)及 4(1.24 g，4.64 mmol；10.0當量)於乙腈(35 mL)中之溶液來製備另一順丁烯二醯亞胺官能化HA 5c。使用逆Ellman檢定測定順丁烯二醯亞胺含量。 產量：1.78 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.212 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3h(50.15 g，0.307 mmol/g胺，15.4 mmol，1.00當量)於2.00 L 100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)中以形成25 g/L溶液及 4(8.17 g，30.7 mmol；2.0當量)於乙腈(500 mL)中之溶液來製備另外兩批順丁烯二醯亞胺-HA 5d- i及 5d- ii。在1小時之後，添加2 M pH 4.0之乙酸鈉溶液(833 mL)以形成溶液A。
使用具有6 mm內徑及8 mm外徑之管沉澱第一半溶液A。為調節流動沉澱系統，以144 mL/min之流動速率泵送80 vol% 100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)及20 vol%乙腈之混合物，且以216 mL/min之流動速率泵送乙醇流1。兩個料流於Y型件中合併且流動至管反應器(長5 m，內徑6 mm，體積141 mL，滯留時間23秒)中。隨後，將乙醇流2經由Y型件以360 mL/min之流動速率添加。合併之流動進入PTFE管反應器(長30 m，內徑6 mm，體積848 mL，滯留時間70秒)。隨後，將料流導引至配備有孔徑為20 µm的過濾袋之800 rpm旋轉的篩網離心機中。當流到達離心機時完成調節，且隨後停止所有泵。
將來自調節之緩衝液饋料更換為反應器饋料且以144 mL/min之流動速率泵送溶液A。所有其他參數設定為與調節過程中之彼等參數相同。洗滌、分離及乾燥以與實例1a中所描述相同之方式進行，得到呈白色固體狀之化合物 5d- i。
使用具有4 mm內徑及6 mm外徑之管沉澱第二半溶液A。以與針對原生HA 2之實例1a中所描述相同的方式進行調節、沉澱及洗滌步驟，不同之處在於緩衝液，其為80體積% 100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)及20體積%乙腈之混合物。在高真空中乾燥後，分離呈白色固體狀之物質 5d - ii。
使用逆Ellman檢定測定順丁烯二醯亞胺含量。 產量(化合物 5d-i):    26.26 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.290 mmol/g) 產量(化合物 5d-ii):  23.71 g (順丁烯二醯亞胺含量：0.290 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3h(50.15 g，0.307 mmol/g胺，121 mmol，1.00當量)於2.00 L，100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)中以形成25 g/L溶液及 4(32.3 g，121 mmol；1.0當量)於乙腈(500 mL)中之溶液來製備另一順丁烯二醯亞胺-HA 5e。反應之淬滅以及產物之沉澱均在流動中進行。
為調節系統，以108 mL/min之流動速率泵送80 vol% 100 mM HEPES緩衝液(pH 7.4)及20 vol%乙腈之混合物，且以36 mL/min之流動速率泵送2 M乙酸鈉(pH 4.0)。兩個料流於附接有靜態混合器之Y型件中合併，進入管反應器(長5 m，內徑6 mm，體積141 mL，滯留時間59秒)中。隨後，將乙醇流經由Y型件以576 mL/min之流動速率添加。合併之流動進入PTFE管反應器(長30 m，內徑6 mm，體積848 mL，滯留時間71秒)。隨後將料流導引至配備有孔徑為20 µm的過濾袋之800 rpm旋轉的篩網離心機中。當流到達離心機時完成調節，且隨後停止所有泵。
將來自調節步驟之緩衝液饋料更換為反應器饋料且以108 mL/min之流動速率泵送順丁烯二醯亞胺-HA溶液。所有其他參數設定為與調節過程中相同。以與實例1中所描述相同之方式進行洗滌。分離物質 5e且在高真空中乾燥，得到特性與化合物 5d - i及化合物 5d - ii相當之化合物。
實例 4 ： 合成可降解硫醇 - HA 建構嵌段 6 、 6a 、 6b 及 6c用於合成可降解硫醇官能化HA之例示性反應流程：
將 3a(1.50 g，胺官能基：0.126 mmol/g，0.19 mmol，1.00當量)溶解於100 mM HEPES緩衝液(pH 8.4)中，形成20 mg/mL溶液。添加 1e(0.52 g，0.57 mmol；3.00當量)於MeCN (40 mL)中之新鮮製備的溶液且在室溫下攪拌混合物三小時。向反應混合物中添加新鮮製備之TCEP*HCl (0.33 g，1.14 mmol；6.00當量)於水(11.5 mL)中之溶液且在室溫下攪拌一小時。在攪拌下將1 M pH 5.5之乙酸鈉溶液(127 mL)添加至溶液中，隨後添加無水乙醇以使聚合物沉澱。沉澱物用乙醇洗滌且在高真空下乾燥。在氬氣氛圍下，藉由劇烈攪拌使粗物質溶解於1%乙酸(150 mL)中。將1 M pH 5.5之乙酸鈉溶液(150 mL)添加至溶液中。聚合物藉由添加無水乙醇沉澱，用乙醇洗滌且在高真空下乾燥，得到呈白色固體狀之可降解硫醇-HA 6。使用Ellman檢定測定硫醇含量。 產量：1.07 g (硫醇含量：0.103 mmol/g)
類似於上文所描述之程序，使用 3d(5 g，0.127 mmol/g胺，0.63 mmol，1.00當量)、雙-NHS酯 1e(1.75 g，1.9 mmol；3.0當量)及TCEP*HCl (1.10 g，3.83 mmol；6.03當量)來製備另一可降解硫醇HA 6a。分離之後，藉由將物質(2.5 g)溶解於TCEP*HCl (302 mg，1.06 mmol)於1%乙酸(250 mL)中之溶液中來進行第三次再沉澱。用1 M乙酸鹽、1 mM pH 5.5之組胺酸溶液(250 ml)稀釋之後，藉由添加無水EtOH沉澱物質，用無水EtOH洗滌且在高真空下乾燥。使用Ellman檢定測定硫醇含量。 產量：2.23 g (硫醇含量：0.102 mmol/g)
類似於針對 6所描述之程序，使用 3g(40.0 g，0.137mmol/g胺，5.48 mmol，1.00當量)、雙-NHS酯 1e(15.1 g，16.5 mmol；3.0當量)，但在40℃下攪拌2小時來製備另一可降解硫醇HA 6c。添加288 mL TCEP*HCl (9.43 g，32.9 mmol；6.00當量)且攪拌混合物1小時，隨後添加3 M乙酸鹽、1 mM pH 5.5之組胺酸緩衝液(524 mL)。
除了以下偏差以外，以與實例1a中所描述相同之方式進行硫醇-HA之調節及沉澱。緩衝液為80 vol% 100 mM HEPES (pH 8.0)及20 vol%乙腈之混合物。使用T型件替代Y型件來作為連接器。使用5 L各80%乙醇及無水乙醇進行濾餅洗滌。在高真空中乾燥物質5天，得到呈白色物質狀之粗硫醇-HA。
將粗化合物溶解於0.25 M乙酸鹽、1 mM pH 4.0之組胺酸緩衝液(4.0 L)中且以與第一次沉澱相同之方式進行第二次沉澱。在高真空中乾燥物質2天，得到呈白色物質之化合物 6c。 產量：35.0 g (硫醇含量：0.099 mmol/g)
用於替代合成可降解硫醇官能化HA之例示性反應流程：
類似於上文所描述之程序，使用 3f(1.50 g，0.126 mmol/g胺，0.189 mmol，1.00當量)、 7(描述於專利WO2018175788A1中，作為化合物 d9；562 mg，0.95 mmol；5.0當量)及TCEP*HCl (543 mg，1.90 mmol；10.0當量)來製備另一可降解硫醇HA 6b。使用Ellman檢定測定硫醇含量。 產量：1.19 g (硫醇含量：0.088 mmol/g)
實例 5 ： 合成永久硫醇 - HA 建構嵌段 9用於合成不可降解硫醇官能化HA之例示性反應流程：
類似於實例4中所描述之程序，使用 3c(7 g，0.151 mmol/g胺，1.06 mmol，1.00當量)、3-(2-吡啶基二硫基)-丙酸 N-丁二醯亞胺基酯(3.32 g，10.6 mmol；10.0當量)及TCEP*HCl (6.08 g，21.2 mmol；20.0當量)來製備不可降解硫醇HA 9。使用Ellman檢定測定硫醇含量。 產量：5.6 g (硫醇含量：0.120 mmol/g)
實例 6 ： 合成具有游離順丁烯二醯亞胺官能基之可降解交聯 HA 微球 10 、 10a 、 10b 、 10c 、 10d 及 10e用於合成具有游離順丁烯二醯亞胺之可降解交聯HA微球之例示性反應流程：
在250 mL反應器中，在室溫下攪拌Span® 80於庚烷(0.5%，75 mL)中之溶液。製備 6(0.103 mmol/g硫醇)於100 mM檸檬酸鹽、150 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液A。製備 5(0.258 mmol/g順丁烯二醯亞胺)於100 mM檸檬酸鹽、150 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液B。將4.82 mL溶液A之等分試樣與9.33 mL溶液B及0.75 mL 100 mM檸檬酸鹽、150 mM NaCl緩衝液(pH 2)混合且將所得混合物添加至反應器中，且攪拌其乳化。將TMEDA (10.6 µL)於Span® 80庚烷溶液(0.5%，5 mL)中之溶液中添加至反應器中且在室溫下攪拌混合物隔夜，之後在攪拌下添加10 mM丁二酸鹽、200 mM硫酸鈉、1 mM pH 4之EDTA緩衝液(50 mL)。在相分離之後收穫含有微粒之水相。對於尺寸分級，將水-水凝膠懸浮液與異丙醇以4:1 v/v混合，且使用315、200、160、100及50 µm的篩用10 mM丁二酸鹽、1 mM EDTA、200 mM硫酸鈉緩衝液(pH 4)及異丙醇之4:1 v/v混合物作為篩分緩衝液進行濕式篩分。分別收集保留在200、160及100 µm篩上之粒子級份，且用20 mM丁二酸鹽、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.1% Tween® 20緩衝液(pH 4)洗滌，且隨後在同一緩衝液中調配以得到水凝膠懸浮液 10。藉由在用水及乙醇洗滌粒子之後在高真空下乾燥代表性樣品來測定懸浮液之水凝膠含量。對100 µm篩級份進行逆Ellman檢定，且所得順丁烯二醯亞胺含量用作所有篩級份之代表值。 產量：    篩級份100 µm: 22.5 mL，具有4.3 mg/mL粒子含量 篩級份160 µm: 25.0 mL，具有4.7 mg/mL粒子含量 篩級份200 µm: 7.5 mL，具有5.9 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：  129 µmol/g (針對乾燥物質計算)
針對化合物 10所描述之程序，使用 5(0.258 mmol/g順丁烯二醯亞胺，6.96 mL於100 mM檸檬酸鹽、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液)、 6b(0.088 mmol/g硫醇，4.08 mL於100 mM檸檬酸鹽、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液)、100 mM檸檬酸鹽、100 mM pH 2之NaCl緩衝液(153 µL)及TMEDA (119 µL)來製備另一具有游離順丁烯二醯亞胺之可降解交聯HA。使用300、212、150、100及50 µm篩來進行濕式篩分以得到呈微粒懸浮液形式之可降解交聯HA 10a。藉由在用水及乙醇洗滌粒子之後在高真空下乾燥代表性樣品來測定不同篩級份之水凝膠含量。對150 µm篩級份進行逆Ellman檢定，且所得順丁烯二醯亞胺含量用作所有篩級份之代表值。 產量：    篩級份100 µm: 25.0 mL，具有2.3 mg/mL粒子含量 篩級份150 µm: 25.0 mL，具有4.2 mg/mL粒子含量 篩級份212 µm: 25.0 mL，具有2.2 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：  117 µmol/g (針對乾燥物質計算)
使用 6a及 5b製備具有游離順丁烯二醯亞胺官能基之另一可降解交聯HA 10b。在250 mL反應器中，在室溫下攪拌Span® 80於庚烷(0.5%，75 mL)中之溶液。製備 6a(0.102 mmol/g硫醇)於100 mM檸檬酸鹽、5 mM組胺酸、150 mM NaCl緩衝液(pH 4)中之32.5 mg/mL溶液作為溶液A。製備 5b(0.231 mmol/g順丁烯二醯亞胺)於100 mM檸檬酸鹽、5 mM組胺酸、150 mM NaCl緩衝液(pH 4)中之32.5 mg/mL溶液作為溶液B。將13.1 mL溶液B之等分試樣與水(7.1 µL)及6 M HCl (620 µL)混合，隨後添加6.32 mL溶液A之等分試樣且將其再次混合。將黏稠溶液添加至反應器中，且攪拌其乳化。將TMEDA (271 µL)於Span® 80庚烷溶液(0.5%，5 mL)中之溶液中添加至反應器中且在室溫下攪拌混合物隔夜，之後在攪拌下添加10 mM丁二酸鹽、200 mM硫酸鈉、1 mM pH 4之EDTA緩衝液(80 mL)。在相分離之後收穫含有微粒之水相。對於尺寸分級，將水-水凝膠懸浮液與異丙醇以4:1 v/v混合，且使用315、200、160、100及50 µm的篩用10 mM丁二酸鹽、1 mM EDTA、200 mM硫酸鈉緩衝液(pH 4)及異丙醇之4:1 v/v混合物作為篩分緩衝液進行濕式篩分。分別收集保留在200、160及100 µm篩上之粒子級份，且用20 mM丁二酸鹽、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.1% Tween® 20緩衝液(pH 4)洗滌，且隨後在同一緩衝液中調配以得到水凝膠懸浮液 10b。藉由在用水及乙醇洗滌粒子之後在高真空下乾燥代表性樣品來測定懸浮液之水凝膠含量。對100 µm、160 µm及200 µm篩級份進行逆Ellman檢定，且將三個級份之平均順丁烯二醯亞胺含量用作所有篩級份之代表值。 產量：    篩級份100 µm: 10.0 mL，具有4.6 mg/mL粒子含量 篩級份160 µm: 20.0 mL，具有5.2 mg/mL粒子含量 篩級份200 µm: 55.0 mL，具有5.3 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：  119 µmol/g (針對乾燥物質計算)
使用 6b、 5c及作為乳化劑之Cithrol™ DPHS來製備具有游離順丁烯二醯亞胺之另一可降解交聯HA 10c。向50 mL法爾康管中饋入Cithrol™ DPHS於庚烷(0.25%，6 mL)中之溶液，且翻滾培育混合物。製備 6b(0.088 mmol/g硫醇)於100 mM組胺酸、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液A。製備 5c(0.212 mmol/g順丁烯二醯亞胺)於100 mM組胺酸、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液B。372 µL之溶液A之等分試樣與618 µL之溶液B及91 µL之100 mM組胺酸、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)混合，且將所得混合物添加至法爾康管中。翻滾攪動乳液，添加TMEDA (31.8 µL)，且在室溫下進一步攪動混合物。在添加10 mM丁二酸鹽、1 mM EDTA緩衝液(pH 4)及iPrOH (6 mL)之4:1 v/v混合物之後，將管短暫攪動且在離心之後收集呈水性懸浮液形式之微粒。依次用10 mM丁二酸鹽、1 mM EDTA緩衝液(pH 4)及iPrOH之4:1 v/v混合物、iPrOH及20 mM丁二酸鹽、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.1% Tween® 20緩衝液(pH 4)洗滌物質，且於20 mM丁二酸鹽、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.1% Tween® 20緩衝液(pH 4)中調節至10 mL體積，得到呈微粒懸浮液形式之可降解交聯HA 10c。 產量：10.0 mL，具有2.4 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：60 µmol/g (針對乾燥物質計算)
針對化合物 10c所描述，使用Hypermer 1083作為乳化劑製備具有游離順丁烯二醯亞胺之另一可降解交聯HA，得到呈微粒懸浮液形式之可降解交聯HA 10d。 產量：10.0 mL，具有2.3 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：67 µmol/g (針對乾燥物質計算)
針對化合物 10c所描述，使用Lameform® TGI作為乳化劑製備具有游離順丁烯二醯亞胺之另一可降解交聯HA，得到呈微粒懸浮液形式之可降解交聯HA 10e。 產量：10.0 mL，具有2.5 mg/mL粒子含量 順丁烯二醯亞胺含量：64 µmol/g (針對乾燥物質計算)
實例 7 ： 合成具有游離硫醇官能基之永久交聯 HA 微球 11a用於合成具有游離硫醇之永久交聯HA微球之例示性反應流程：
在1000 mL反應器中，在室溫下攪拌Cithrol™ DPHS於庚烷(15%，3.36 mL)及庚烷(240 mL)中之混合物。製備 9(0.120 mmol/g硫醇)於100 mM組胺酸、150 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液A。製備 5a(0.153 mmol/g順丁烯二醯亞胺)於100 mM組胺酸、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)中之30 mg/mL溶液作為溶液B。將24.6 mL溶液A之等分試樣與8.69 mL溶液B及0.27 mL 100 mM組胺酸、100 mM NaCl緩衝液(pH 2)混合且一次性將所得混合物添加至反應器中，且在室溫下攪拌。向混合物中添加TMEDA (186 µL)於庚烷(5 mL)中之溶液且在室溫下攪拌隔夜，之後在攪拌下添加15% NaCl-溶液(150 mL)。在相分離之後收穫含有微粒之水相。對於尺寸分級，將水-水凝膠懸浮液與乙醇以4:1 v/v混合，且使用300、212、150、100及50 µm的篩用10 mM丁二酸鹽、1 mM EDTA (pH 4)及乙醇之4:1 v/v混合物作為篩分緩衝液進行濕式篩分。在150 µm及100 µm篩網上保留的粒子級份用20 mM丁二酸鹽、200 mM NaCl、5 mM組胺酸、0.1% Pluronic緩衝液(pH 5.5)洗滌且於同一緩衝液中調配以得到 11。藉由在用水及乙醇洗滌粒子之後在高真空下乾燥代表性樣品來測定懸浮液之水凝膠含量。化合物 11a僅顯示在硫代丁二醯亞胺環中之一個羰基處發生開環水解，但應瞭解該反應亦可在硫代丁二醯亞胺環之另一個羰基處發生。 產量：    篩級份100 µm: 45.0 mL，具有7.5 mg/mL粒子含量 篩級份150 µm: 45.0 mL，具有6.1 mg/mL粒子含量
混合 11之等分試樣(級份100 µm為44 mL，級份150 µm為25 mL)且用500 mM硼酸鹽、0.01% Pluronic F-68緩衝液(pH 9.0)洗滌微粒且隨後在同一緩衝液中在室溫下培育24小時。水凝膠用0.5 M磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)洗滌，且接著將於0.5 M磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中之50 mM DTT溶液在室溫下中培育40分鐘。使DTT培育重複一次，隨後用20 mM丁二酸鹽、200 mM NaCl、5 mM組胺酸、0.1% Pluronic緩衝液(pH 5.5)洗滌微粒且在同一緩衝液中調配，得到呈微粒懸浮液形式之 11a。藉由在用水及乙醇洗滌粒子之後在高真空下乾燥代表性樣品來測定懸浮液的水凝膠含量。對產物懸浮液進行Ellman檢定，且使用粒子懸浮液之所得硫醇含量來計算乾燥物質之硫醇含量。 產量：75.0 mL，具有6.6 mg/mL粒子含量 硫醇含量：59.8 µmol/g (針對乾燥物質計算)
實例 8 ： 合成受保護之蘭尼單抗連接子單結合物 14
將蘭尼單抗(Rbz)於10 mM組胺酸、10 wt% α,α-D-海藻糖、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5) (62 mL，2.48 g蛋白)中之溶液的緩衝液更換為30 mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)。濃縮溶液，無菌過濾且藉由添加30 mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)稀釋至約40 mg/mL，得到溶液 12。 產量：53.2 g溶液，具有2.12 g Rbz (85%) Rbz含量：39.8 mg/mL
向冰冷 12(50 mL，39.8 mg/mL，1.99 g蛋白質，41.1 µmol，1.00當量)中添加 13於DMSO (如WO2018175788A1中所描述，作為化合物 b8，100 mM，8.00 mL，0.62 mmol，15.0當量活性NHS酯)中之溶液，且在0至4℃下小心攪拌混合物5分鐘。藉由添加0.5 M丁二酸鹽緩衝液(pH 3.0) (6.0 mL)使溶液之pH降至約pH 4.0且小心地振盪。在緩衝液更換成5 mM丁二酸鹽緩衝液(pH 4.0)之後，獲得結合物混合物 14。經由MS及光譜之解卷積表徵混合物之不同組分。 產量：134 mL溶液，具有1.94 g Rbz (以原生蛋白質計算，97%) Rbz含量：14.5 mg/mL (以原生Rbz計算) MS：48382 (原生Rbz，平均質量計算值：48380) 49066 (Rbz連接子單結合物，平均質量計算值：49066) 49754 (Rbz連接子雙結合物，平均質量計算值：49752) 50437 (Rbz連接子三結合物，平均質量計算值：50438)
實例 9 ： 合成 標籤化 脫除保護之蘭尼單抗連接子單結合物 16 n = 0、1、2、3等等 1) pH 7.4, r.t., 35分鐘 2) 30 mM TriMED, pH 7.4, 25℃, 16 h, 3) CIEX
向 14(14.5 mg/mL，125 mL，1.82 g蛋白質，1.00當量)添加 15水溶液(如WO2018175788A1中所描述，作為化合物 e8，50 mM，1.89 mL，2.50當量)且攪拌混合物35分鐘。藉由添加0.5 M磷酸鹽、200 mM TriMED緩衝液(pH 7.8) (21.4 mL，就 14而言為0.17體積當量)使pH值偏移至pH 7.4，且將其在25℃下培育隔夜。藉由添加0.5 M丁二酸鹽緩衝液(pH 3.0) (52.7 mL，就 14而言為0.42體積當量)對148 mL經培育混合物之等分試樣進行進一步處理，以使pH值偏移至約pH 4.0。將標籤化蘭尼單抗連接子單結合物 16純化，且藉由CIEX使用丁二酸鹽緩衝液(pH 4)與NaCl梯度自混合物分離。經由MS及光譜之解卷積表徵物質。 產量：450 mL溶液，具有383 mg Rbz (以原生蛋白質計算，21%) Rbz含量：0.85 mg/mL (以原生Rbz計算) MS：49573 (標籤化Rbz單結合物，平均質量計算值：49572)
實例 10 ： 合成蘭尼單抗連接子單結合物 17
使用TFF系統將 16(0.85 mg/mL，450 mL，383 mg蛋白質，1.0當量)濃縮至約4.8 mg/mL。向濃縮溶液(68 mL)中添加DTT於20 mM丁二酸鹽緩衝液(pH 4.0) (25 mM，2.84 mL，9.2當量)中之溶液，小心地振盪且在2至8℃下培育隔夜。混合物藉由CIEX使用10 mM組胺酸緩衝液(pH 5.5)及NaCl梯度純化。在藉由添加10 mM組胺酸、500 mM NaCl緩衝液(pH 5.5)將溶液中之NaCl濃度調節至150 mM之後，藉由超過濾將溶液濃縮以得到 17。經由MS及光譜之解卷積表徵物質。 產量：4.54 g溶液，具有293 mg Rbz (以原生蛋白質計算，77%) Rbz含量：64.6 mg/mL (以原生Rbz計算) MS：48710 (Rbz單結合物，平均質量計算值：48709)
實例 11 ： 合成具有短暫結合之蘭尼單抗之可降解微球 18a用於合成具有短暫結合之蘭尼單抗之可降解微球的例示性反應流程：
將篩級份為150 µm之 10a的等分試樣(737 µL，363 nmol順丁烯二醯亞胺，4.2 mg/mL，117 µmol /g順丁烯二醯亞胺，1.26當量)用10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01%Tween® 20緩衝液(pH 5.5)洗滌，且移除上清液。向 17(721 µL，302 nmol，20.4 mg/mL蛋白質)中添加10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.2% Tween® 20緩衝液(pH 5.5) (38 µL)及10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5) (223 µL)。將此溶液之等分試樣(936 µL，288 nmol，15.3 mg/mL蛋白質，1.00當量)添加至水凝膠中且在室溫下攪動混合物隔夜，得到負載蛋白質之微球 18之懸浮液。移除上清液，且水凝膠用1 mM 2-巰基乙醇於10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5)中之溶液洗滌且在室溫下保持於相同溶液中持續兩小時。微粒用10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5)洗滌且在同一緩衝液中調配以得到產物 18a。 產量：375 µL懸浮液，具有9.7 mg水凝膠結合之蘭尼單抗(68%) Rbz含量：26.0 mg/mL (以原生Rbz計算)
實例 12 ： 合成具有短暫結合之蘭尼單抗之可降解微球 20a用於合成具有短暫結合之蘭尼單抗之可降解微球的例示性反應流程：
針對化合物 10a所描述製備之順丁烯二醯亞胺官能化微球 19的等分試樣(22.783 mL，13.5 µmol順丁烯二醯亞胺，4.7 mg/mL，126 µmol/g順丁烯二醯亞胺)用10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5)洗滌且移除上清液。向 17(94.3 g，10 µmol，5.1 mg/mL蛋白質)中添加10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.2% Tween® 20緩衝液(pH 5.5) (4.909 mL)。將所獲得之溶液添加至水凝膠中且在室溫下攪動混合物隔夜，得到負載蛋白質之微球 20之懸浮液。移除上清液，且水凝膠用1 mM 3-巰基丙酸於10 mM組胺酸、150 mM NaCl、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5)中之溶液洗滌且在室溫下於相同溶液中攪拌兩小時。洗滌微粒且在pH 4的乙酸鹽緩衝液中調配以得到產物 20a。 產量：7.58 g懸浮液，具有463 mg水凝膠結合之蘭尼單抗(96.3%) Rbz含量：61.1 mg/mL (以原生Rbz計算)
實例 13 ： 合成受保護之 CTLA - 4 mAB 連接子結合物 23
將CTLA-4 mAB於20 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、1%甘露醇、0.1 mM噴替酸、0.01% Tween® 80緩衝液(pH 7.0) (307 mL，1.71 g蛋白質)中之溶液的緩衝液更換成30 mM磷酸鈉緩衝液(pH 7.4)，且使用TFF系統濃縮，且之後使用另外的30 mM磷酸鈉緩衝液(pH 7.4)將蛋白質濃度調節至10 mg/mL，得到溶液 21，將其儲存在4℃。 產量：156 g溶液，具有1.56 g CTLA-4 mAB (91%) CTLA-4 mAB含量：10.0 mg/mL
向 21(100.5 mL，9.88 mg/mL，993 mg蛋白質，6.68 µmol，1.00當量)中添加 22於DMSO (如WO2021136808A1中所描述，作為化合物 9g，95 mM，212 µL，20.1 µmol，3.0當量活性NHS酯)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物5分鐘。添加500 mM丁二酸鹽緩衝液(pH 3.0) (12.1 mL)之後，藉由CIEX使用丁二酸鹽緩衝液(pH 5.5)與NaCl梯度分離出混合物的蛋白質含量。藉由使樣品等分試樣與過量PEG-20kDa-SH反應，且隨後進行SE-HPLC分析，從而對結合物混合物之等分試樣進行表徵，確定不同結合物類型之組成。添加20 mM丁二酸鹽、100 mM EDTA、0.2%Tween® 20緩衝液(pH 5.5) (6 mL)且無菌過濾混合物，得到 23。 產量：                            118 mL溶液，具有991 mg CTLA-4 mAB (以原生蛋白質計算，定量) CTLA-4 mAB含量：      8.4 mg/mL, 56.8 µM (M CTLA-4 mAB= 148000 kDa) (以原生蛋白質計算) CTLA-4 mAB結合物：  54%原生CTLA-4 mAB 34% CTLA-4 mAB單結合物 10% CTLA-4 mAB雙結合物 2% CTLA-4 mAB三結合物 Mal含量：                          1x 34% + 2x 10% + 3x 2% = 60%的莫耳蛋白質濃度
實例 14 ： 合成具有短暫結合之 CTLA - 4 mAB 之微球 24a用20 mM丁二酸、200 mM NaCl、5 mM EDTA、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 5.5)洗滌 11a之等分試樣(30.5 mL，12.0 µmol硫醇，6.6 mg/mL，59.8 µmol/g硫醇，4.0當量)且移除上清液。添加 23之等分試樣(88.2 mL，8.4 mg/mL，741 mg，5 µmol CTLA-4 mAB (以原生蛋白質計算)，3 µmol順丁烯二醯亞胺，1.0當量)且在室溫下攪拌混合物隔夜，得到負載蛋白質之微球 24。用30 mM磷酸鈉、10 mM碘乙醯胺、50 mM TriMED、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 7.4)洗滌物質，且在室溫下在同一緩衝液中攪拌一小時。微球用30 mM磷酸鈉、200 mM TriMED、0.01% Tween® 20緩衝液(pH 7.4)洗滌，且在同一緩衝液中在25℃下培育24小時。微球用pH 4之緩衝液洗滌且調配於該緩衝液中以得到 24a。藉由QAAA測定蛋白質含量。 產量：35.0 mL，具有304 mg聚合物結合之CTLA-4 mAB (以原生蛋白質計算，41%) CTLA-4 mAB含量：8.7 mg/mL (以原生蛋白質計算)
縮寫CIEX               陽離子交換層析法 CTLA-4           細胞毒性T淋巴球相關蛋白質4 DCM               二氯甲烷 DIPEA N , N-二異丙基乙胺 DMAP             4-(二甲胺基)吡啶 DMF N , N-二甲基甲醯胺 DMSO             二甲亞碸 DPHS              二聚羥基硬脂酸酯 DS                  取代度 DTNB             5,5'-二硫基雙(2-硝基苯甲酸) DTT                二硫蘇糖醇 EDC N-(3-二甲基胺基丙基)- N '-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 EDTA              乙二胺四乙酸 eq.                  當量 EtOAc             乙酸乙酯 EtOH               乙醇 HA                  透明質酸 HEPES            (4-(2-羥乙基)-1-哌𠯤乙磺酸) HOBt              1-羥基苯并三唑 HOSu N-羥基丁二醯亞胺 iPrOH             異丙醇 mAB               單株抗體 MeCN             乙腈 MES                2-( N-N-𠰌啉基)乙磺酸 MS                  質譜分析 NHS N-羥基丁二醯亞胺 OPA                鄰苯二甲醛 PE                   聚乙烯 PEG                聚(乙二醇) PES                 聚醚碸 QAAA             定量胺基酸分析 r.t.                  室溫 Rbz                 蘭尼單抗 SE-HPLC        尺寸排阻高效液相層析 TCEP              參(2-羧乙基)膦 TFA                三氟乙酸 TFF                 切向流過濾 TGI                 三甘油基二異硬脂酸酯 TMEDA N , N , N ', N '-四甲基乙二胺 TNB                5-硫基-2-硝基苯甲酸 TriMED N , N , N '-三甲基乙二胺
1:裝置 1':容器 1a:第一溶液 1b:第二溶液 1c:組合之混合物 1c':所得混合物 2:流動系統 2':泵 2a:第一通道 2b:第二通道 2b':通道 2c:第三通道 2d:第四通道 2e:第五通道 2f:第六通道 3:組合單元 4:儲存容器 5:沉澱單元 6:收集單元 6a':收集總成 7:產物容器 7a:沉澱物 8:廢料容器 8a:廢料 9:三通閥 10:儲存容器 10a:緩衝劑 11:雙通閥 12:惰化控制系統 13:容器 13a:淬滅溶液
下文參考圖式描述各種實施例。類似元件符號貫穿全文指類似元件。因此，將不會關於各圖之描述來詳細地描述類似元件。亦應注意，圖式僅旨在便於描述實施例。圖式不欲作為對所主張發明之詳盡描述或作為對所主張發明之範疇的限制。此外，所說明之實施例無需具有所展示之所有態樣或優點。結合特定實施例而描述之態樣或優點不必限於彼實施例且可在任何其他實施例中實踐，即使未如此說明或未如此明確地描述亦如此。 圖1示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置的一個實施例。 圖2示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置的另一實施例。 圖3示意性地繪示用於沉澱及分離聚合物之裝置的又一實施例。
1:裝置
1':容器
1a:第一溶液
1b:第二溶液
1c:組合之混合物
2:流動系統
2':泵
2a:第一通道
2b:第二通道
2c:第三通道
3:組合單元
4:儲存容器
5:沉澱單元
6:收集單元
6a':收集總成
7a:沉澱物
8a:廢料

Claims (40)

  1. 一種用於製備包含交聯透明質酸(hyaluronic acid；HA)之水凝膠微球或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1及可選擇之其他官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2及可選擇之其他官能基修飾之第二官能化HA，其中各-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b)  視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑；及 (c)   收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球。
  2. 如請求項1之方法，其中步驟(a)之溶液A進一步包含緩衝劑。
  3. 如請求項1或2之方法，其中步驟(a)之溶液B包含乳化劑及溶劑。
  4. 如請求項1至3中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球； (b)  視情況，向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c)   收集步驟(b)所得之水凝膠HA微球； (d)  視情況，對步驟(c)所得之水凝膠HA微球進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e)   視情況，洗滌步驟(c)或(d)中所獲之該等微球； (f)   視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g)   視情況，將步驟(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h)  視情況，洗滌步驟(f)或(g)中所獲之微球；及 (i)   視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
  5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-6)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與該第一官能化HA之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-9)、 (y-47)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與該第二官能化HA之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)或(y-47)；若-FG 1具有式(y-6)，則-FG 2具有式(y-9)；若-FG 1具有式(y-49)，則-FG 2具有式(y-85)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-47)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。
  6. 如請求項1至5中任一項之方法，其中該pH調節劑增加步驟(a)之該乳液的pH，且-FG 1係獨立地選自由以下組成之群： (y-56)、 (y-1)、 (y-39)、 (y-44)及 (y-49)； 其中虛線指示與該第一官能化HA之連接； -Y 01係獨立地選自由-F、-Cl、-Br及-I組成之群； 各-R 08及-R 08a係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-H、-CN、-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T 0、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T 0-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R 010)-、-S(O) 2N(R 010)-、-S(O)N(R 010)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R 010)S(O) 2N(R 010a)-、-S-、-N(R 010)-、-OC(OR 010)(R 010a)-、-N(R 010)C(O)N(R 010a)-及-OC(O)N(R 010)-； 各T 0係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基及8員至11員雜雙環基；其中各T 0獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R 09取代；且 各-R 09、-R 010及-R 010a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 -FG 2係獨立地選自由以下組成之群： (y-57)、 (y-16)、 (y-85)、 (y-56)及 (y-86)； 其中虛線指示與該第二官能化HA之連接； 各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群； 其限制條件為：-FG 1具有式(y-56)，則-FG 2具有式(y-57)或(y-86)；若-FG 1具有式(y-1)，則-FG 2具有式(y-16)；若-FG 1具有式(y-44)，則-FG 2具有式(y-16)；或若-FG 1具有式(y-39)，則-FG 2具有式(y-56)。
  7. 如請求項1至6中任一項之方法，其中-FG 1為 (y-56)，其中虛線指示與該第一官能化HA之連接，-FG 2為 (y-57)，其中虛線表示與該第二官能化HA之連接，該pH調節劑使步驟(a)之該乳液的pH自約1增加至約9，較佳自約1增加至約5.5，更佳自約2增加至約4，且其中各-Y 02及-Y 02a係獨立地選自由-H及-Br組成之群。
  8. 如請求項1至7中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個-FG 1修飾之第一官能化HA，及經一或多個-FG 2修飾之第二官能化HA，其中-FG 1及-FG 2為彼此不同的官能基部分，且其中該第一官能化HA上之-FG 1與該第二官能化HA上之-FG 2反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-FG 1、-FG 2獨立地為官能基部分； 各-X-、-Y-獨立地為羰基或不存在； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b)  向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c)   收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3單元： ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X-、-Y-、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； 各-L 3-獨立地為鍵聯部分或不存在； (d)  視情況，對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e)   視情況，洗滌步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之該等水凝膠HA微球； (f)   視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球； (g)   視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h)  視情況，洗滌步驟(f)或(g)中所獲之該等微球；及 (i)   視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
  9. 如請求項1至8中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； (b)  向步驟(a)之該乳液中添加pH調節劑； (c)   收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d)  視情況，對步驟(a)、(b)或(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e)   視情況，洗滌步驟(a)、(b)、(c)或(d)中所獲之該等水凝膠HA微球； (f)   視情況，在pH約8至約12範圍內之緩衝劑中培育步驟(a)、(b)、(c)、(d)或(e)之該等水凝膠HA微球，以提供包含複數個Z 3-i'單元之水凝膠HA微球： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1、-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (g)   視情況，將步驟(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之該等水凝膠HA微球與還原劑一起培育； (h)  視情況，洗滌步驟(f)或(g)中所獲之該等微球；及 (i)   視情況，收集步驟(d)、(e)、(f)、(g)或(h)之該等水凝膠HA微球。
  10. 如請求項8或9之方法，其中步驟(d)及(e)不是可選擇的且步驟(f)至(h)不存在。
  11. 如請求項1至10中任一項之方法，其中該pH調節劑係選自由以下組成之群：N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(TMEDA)、1,4-二甲基哌𠯤、4-甲基𠰌啉、4-乙基𠰌啉、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷、1,1,4,7,10,10-六甲基三伸乙基四胺、1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷、參[2-(二甲胺基)乙基]胺、三乙胺、二異丙基乙胺(DIPEA)、三甲胺、N,N-二甲基乙胺、N,N,N',N'-四甲基-1,6-己二胺、N,N,N',N'',N''-五甲基二伸乙基三胺、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯及六亞甲基四胺。
  12. 如請求項1至11中任一項之方法，其中各-X'-及-Y'-獨立地為選自由以下組成之群的間隔子部分：-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y2)-、-S(O) 2N(R y2)-、-S(O)N(R y2)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y2)S(O) 2N(R y2a)-、-S-、-N(R y2)-、-OC(OR y2)(R y2a)-、-N(R y2)C(O)N(R y2a)-及-OC(O)N(R y2)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y1取代； 各-R y1係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-COOR y3、-OR y3、-C(O)R y3、-C(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2N(R y3R y3a)、-S(O)N(R y3R y3a)、-S(O) 2R y3、-S(O)R y3、-N(R y3)S(O) 2N(R y3aR y3b)、-SR y3、-N(R y3R y3a)、-NO 2、-OC(O)R y3、-N(R y3)C(O)R y3a、-N(R y3)S(O) 2R y3a、-N(R y3)S(O)R y3a、-N(R y3)C(O)OR y3a、-N(R y3)C(O)N(R y3aR y3b)、-OC(O)N(R y3R y3a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y2、-R y2a、-R y3、-R y3a、-R y3b係獨立地選自由-H及C 1-6烷基組成之群；其中C 1-6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
  13. 如請求項1至12中任一項之方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   將溶液A與溶液B混合以形成乳液，其中溶液A包含經一或多個硫醇官能基修飾之第一官能化HA，及經一或多個順丁烯二醯亞胺官能基修飾之第二官能化HA，其中該第一官能化HA上之該等硫醇官能基與該第二官能化HA上之該等順丁烯二醯亞胺官能基反應以形成複數個交聯，從而形成水凝膠HA微球，其中， 該第一官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 5-i單元中之各者： 及 ， 該第二官能化HA包含複數個以下經線性連接之Z 1及Z 6-i單元中之各者： 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1為H或鹼金屬離子； 各-R a2為-H； 各-X'-具有式(x4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，標有星號之虛線指示與硫原子之連接，且c 0為7； 各-Y'-具有式(y4)： ， 其中無標記之虛線指示與羰基之連接，且標有星號之虛線指示與順丁烯二醯亞胺環之氮原子的連接； (b)  向步驟(a)之該乳液中添加TMEDA； (c)   收集步驟(a)或(b)所得之水凝膠HA微球，其中該水凝膠包含複數個Z 3-i單元： 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各-R a2、-X'-及-Y'-如步驟(a)中所定義； (d)  對步驟(c)所得之水凝膠HA微粒進行尺寸分級，以獲得具有特定粒度分佈之微球； (e)   洗滌步驟(d)中所獲之該等水凝膠HA微球；及 (f)   收集步驟(e)之該等水凝膠HA微球。
  14. 如請求項1至13中任一項之方法，其中該第一及第二官能化HA之分子量獨立地在約80 kDa至約250 kDa範圍內，諸如約90 kDa至約200 kDa或諸如約100 kDa至約150 kDa範圍內。
  15. 如請求項9至14中任一項之方法，其中Z 5-i中之硫醇官能化程度為約5%且Z 6-i中之順丁烯二醯亞胺官能化程度為約10%。
  16. 如請求項1至15中任一項之方法，其中在步驟(a)中，溶液A進一步包含檸檬酸鹽及/或組胺酸，較佳在約2之pH下。
  17. 如請求項1至16中任一項之方法，其中在步驟(a)中，溶液B包含庚烷及脫水山梨糖醇單油酸酯，或十四烷及脫水山梨糖醇單油酸酯。
  18. 如請求項1至17中任一項之方法，其中在步驟(b)中，該pH調節劑為TMEDA且使步驟(a)之該乳液的pH增加，較佳增加至約4之pH。
  19. 如請求項1至18中任一項之方法，其中在步驟(d)中，經由濕式篩分進行尺寸分級。
  20. 一種水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽，其可藉由如請求項1至19中任一項之方法獲得。
  21. 一種如請求項20之水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽作為載劑用於藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽中的用途。
  22. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其包含如請求項20之水凝膠HA微球。
  23. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其包含透明質酸(HA)水凝膠微球，該透明質酸水凝膠微球包含與複數個藥物部分共價且可逆地結合的交聯HA鏈或其醫藥學上可接受之鹽，該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 其中 無標記之虛線指示與標有#之虛線處的相鄰單元或與氫原子之連接點； 標有#之虛線指示與無標記之虛線處的相鄰單元或與羥基之連接點； 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X-、-Y-獨立地為羰基或不存在； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在； 各-L 3-、-L 4-、-L 5-獨立地為鍵聯部分或不存在；且 各-BA獨立地為封端劑。
  24. 如請求項23之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2、約0.1%至約20%範圍內之Z 3及約0.1%至約10%範圍內之Z 4。
  25. 如請求項23或24之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-BA係選自由以下組成之群： 、 、 、 及 ， 其中虛線指示與-L 5-之連接。
  26. 如請求項23至25中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該藥物結合物包含複數個以下單元中之各者： 、 、 及 ， 各R a1係獨立地選自以下組成之群：-H、C 1 - 10烷基、銨離子、四丁基銨離子、十六烷基三甲基銨離子、鹼金屬離子及鹼土金屬離子； 各-R a2獨立地為-H或C 1 - 10烷基； 各-X'-、-Y'-獨立地為間隔子部分或不存在； 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在；且 其中該藥物結合物包含約50%至約98%範圍內之Z 1、約0.1%至約20%範圍內之Z 2-i、約0.1%至約20%範圍內之Z 3-i及約0.1%至約10%範圍內之Z 4-i。
  27. 如請求項23至26中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D係選自由以下組成之群：小分子藥物部分、中等大小之藥物部分、肽藥物部分及蛋白質藥物部分。
  28. 如請求項23至27中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D為蛋白質藥物部分。
  29. 如請求項23至28中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中-D為單株或多株抗體或其片段或融合物。
  30. 如請求項23至29中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a1為H或鹼金屬離子且-R a2為-H。
  31. 如請求項23至30中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各-L 2-係選自由以下組成之群：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y1)-、-S(O) 2N(R y1)-、-S(O)N(R y1)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y1)S(O) 2N(R y1a)-、-S-、-N(R y1)-、-OC(OR y1)(R y1a)-、-N(R y1)C(O)N(R y1a)-、-OC(O)N(R y1)-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'-、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y3)-、-S(O) 2N(R y3)-、-S(O)N(R y3)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y3)S(O) 2N(R y3a)-、-S-、-N(R y3)-、-OC(OR y3)(R y3a)-、-N(R y3)C(O)N(R y3a)-及-OC(O)N(R y3)-； -R y1及-R y1a係獨立地選自由以下組成之群：-H、-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基；其中-T'、C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代，且其中C 1 - 50烷基、C 2 - 50烯基及C 2 - 50炔基視情況間雜有一或多個選自由以下組成之群之基團：-T'-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R y4)-、-S(O) 2N(R y4)-、-S(O)N(R y4)-、-S(O) 2-、-S(O)-、-N(R y4)S(O) 2N(R y4a)-、-S-、-N(R y4)-、-OC(OR y4)(R y4a)-、-N(R y4)C(O)N(R y4a)-及-OC(O)N(R y4)-； 各T'係獨立地選自由以下組成之群：苯基、萘基、茚基、二氫茚基、四氫萘基、C 3 - 10環烷基、3員至10員雜環基、8員至11員雜雙環基、8員至30員羰基多環基及8員至30員雜多環基；其中各T'獨立地視情況經一或多個相同或不同的-R y2取代； 各-R y2係獨立地選自由以下組成之群：鹵素、-CN、側氧基(=O)、-C(O)OR y5、-OR y5、-C(O)R y5、-C(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-S(O)N(R y5)(R y5a)、-S(O) 2R y5、-S(O)R y5、-N(R y5)S(O) 2N(R y5)(R y5a)、-SR y5、-N(R y5)(R y5a)、-NO 2、-OC(O)R y5、-N(R y5)C(O)R y5a、-N(R y5)S(O) 2R y5a、-N(R y5)S(O)R y5a、-N(R y5)C(O)OR y5a、-N(R y5)C(O)N(R y5)(R y5a)、-OC(O)N(R y5)(R y5a)及C 1 - 6烷基；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代；且 各-R y3、-R y3a、-R y4、-R y4a、-R y5、-R y5a及-R y5b係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群；其中C 1 - 6烷基視情況經一或多個相同或不同的鹵素取代。
  32. 如請求項23至31中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各-L 1-具有式(I)： (I)， 其中 虛線指示藉由形成醯胺鍵來連接至-D之氮； -X-為-C(R 4R 4a)-；-N(R 4)-；-O-；-C(R 4R 4a)-C(R 5R 5a)-；-C(R 5R 5a)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-N(R 6)-；-N(R 6)-C(R 4R 4a)-；-C(R 4R 4a)-O-；-O-C(R 4R 4a)-；或-C(R 7R 7a)-； X 1為C；或S(O)； -X 2-為-C(R 8R 8a)-；或-C(R 8R 8a)-C(R 9R 9a)-； =X 3為=O；=S；或=N-CN； -R 1、-R 1a、-R 2、-R 2a、-R 4、-R 4a、-R 5、-R 5a、-R 6、-R 8、-R 8a、-R 9、-R 9a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群； -R 3、-R 3a係獨立地選自由-H及C 1 - 6烷基組成之群，其限制條件為在-R 3、-R 3a中之一者或兩者不為-H之情況下，其連接至N，其經由sp 3雜化碳原子連接至該N； -R 7為-N(R 10R 10a)；或-NR 10-(C=O)-R 11； -R 7a、-R 10、-R 10a、-R 11彼此獨立地為-H；或C 1 - 10烷基； 視情況，-R 1a/-R 4a、-R 1a/-R 5a、-R 1a/-R 7a、-R 4a/-R 5a、-R 8a/-R 9a對中之一或多者形成化學鍵； 視情況，-R 1/-R 1a、-R 2/-R 2a、-R 4/-R 4a、-R 5/-R 5a、-R 8/-R 8a、-R 9/-R 9a對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成C 3 - 10環烷基；或3員至10員雜環基； 視情況，-R 1/-R 4、-R 1/-R 5、-R 1/-R 6、-R 1/-R 7a、-R 4/-R 5、-R 4/-R 6、-R 8/-R 9、-R 2/-R 3對中之一或多者與其所連接的原子接合在一起以形成環A； 視情況，-R 3/-R 3a與其所連接的氮原子接合在一起以形成3員至10員雜環； 環A係選自由以下組成之群：苯基；萘基；茚基；二氫茚基；四氫萘基；C 3 - 10環烷基；3員至10員雜環基；及8員至11員雜雙環基；且 各-L 1-經-L 2-取代，其限制條件為式(I)中標有星號之氫不經取代基置換。
  33. 一種醫藥組合物，其包含如請求項23至32中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
  34. 一種如請求項23至32中任一項之藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項33之醫藥組合物的用途，其用於製造用以治療可經D-H或其醫藥學上可接受之鹽治療之疾病的藥劑。
  35. 一種製備藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法，其中該方法包含以下步驟： (a)   提供藉由如請求項1至22中任一項之方法獲得之該等水凝膠HA微球或其醫藥學上可接受之鹽，其中該水凝膠包含一或多個未反應之-FG 1或-FG 2； (b)  提供單結合物試劑D-L 1-L 2-FG 3、雙結合物試劑FG 3-L 2-L 1-D-L 1-L 2-FG 3或式(t)之三結合物試劑： (t)， 其中各-D獨立地為共價且可逆地結合至-L 1-之藥物部分； 各-L 1-獨立地為可逆連接子部分； 各-L 2-獨立地為間隔子部分或不存在； 各-FG 3獨立地為與一個-FG 1或-FG 2反應之官能基； (c)   將步驟(a)之該等水凝膠HA微球與步驟(b)之該單結合物、雙結合物或三結合物試劑混合； (d)  將步驟(c)之該藥物結合物或其醫藥學上之鹽與封端試劑混合；及 (e)   收集步驟(c)或(d)之該藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  36. 一種藥物結合物或其醫藥學上可接受之鹽，其可藉由如請求項35之方法獲得。
  37. 一種用於在流動系統中沉澱聚合物之方法，其中該方法包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液合併； (c')使步驟(b')之合併混合物流入至少一個沉澱單元中；及 (d')沉澱該聚合物； 其中若存在超過一個沉澱單元，則將自一個沉澱單元流出之包含該沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併。
  38. 一種用於在聚合物沉澱及分離裝置中分離聚合物之方法，其中該方法包含以下步驟： (a')視情況同時使包含該聚合物之第一溶液流經第一通道且使包含反溶劑之第二溶液流經第二通道； (b')將步驟(a')之該第一及第二溶液合併； (c')使步驟(b')之合併混合物流入至少一個沉澱單元中； (d')沉澱該聚合物；及 (e')分離步驟(d')之沉澱物， 其中若存在超過一個沉澱單元，則將自一個沉澱單元流出之包含該沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併。
  39. 一種用於沉澱聚合物之流動系統，其包含： 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液合併或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併； 至少一個用於沉澱該聚合物之沉澱單元； 其中該容器、至少一個儲存容器、至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； 該合併混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則將自一個沉澱單元流出之包含該沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併。
  40. 一種用於沉澱及分離聚合物之裝置，其中該裝置包含： II)   用於沉澱聚合物之流動系統，其包含： 容器，其包含含有該聚合物之第一溶液； 至少一個儲存容器，其包含含有反溶劑之第二溶液； 至少一個組合單元，其用於將該第一及第二溶液合併或用於將自沉澱單元流出之該混合物與包含反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併； 至少一個用於沉澱該聚合物之沉澱單元； 其中該容器、至少一個儲存容器、至少一個組合單元及該至少一個沉澱單元經由連接通道連接以提供連續流動路徑，其中 該第一溶液流經第一通道自該容器流向該組合單元； 該第二溶液流經第二通道自該至少一個儲存單元流向該組合單元； 該合併混合物流經該等沉澱單元中之至少一者，且 其中若存在超過一個沉澱單元，則將自一個沉澱單元流出之包含該沉澱聚合物之該混合物在其流入另一沉澱單元之前與包含該反溶劑之該第二溶液或視情況與包含反溶劑之另一溶液合併；以及 III)  用於分離該沉澱聚合物之收集總成。
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