TW201241005A - Methods for synthesizing molybdopterin precursor Z derivatives - Google Patents

Description

201241005 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本文提供製備鉬蝶呤衍生物前驅物z之合成方法及適用 於該等方法中之新穎合成中間物。本文亦提供前驅物乙之 適用中間物、衍生物' 前藥及醫藥學上可接受之鹽、溶劑 合物及水合物》此等化合物尤其適用於治療與鉬輔因子缺 乏相關之疾病。 相關申請案之交叉參考 本申請案主張以下申請案之優先權：2〇11年2月18曰申 請之美國臨時申請案第61/444 399號；2〇11年6月2〇日申請 之美國臨時申請案第61/498 8〇1號；2〇11年2月18曰申請之 美國臨時申請案第61/444,2 80號；2011年6月20曰申請之美 國臨時申請案第61/498 8〇8號；及2〇11年2月18曰申請之美 國臨時申請案第61/444,389號；及2〇12年2月15曰申請之美 國臨時申請案第61/599,314號；其均以全文引用的方式併 入本文中。 【先前技術】 飽輔因子（M〇co)缺乏為一種多效性遺傳病症。m〇co由 共價結合於一或兩個二硫醇鹽之鉬連接於獨特三環蝶呤部 分組成，通常稱為鉬蝶呤（MPT) ^ M〇c〇藉由生物合成路徑 合成，該路控根據生物合成中間前驅物z(環狀單磷酸哌喃 并蝶呤；cPMP) ' MPT及腺苷酸化MPT可分成四個步驟。 Moco生物合成酶基因之突變導致鉬依賴性酶亞硫酸鹽氧 化酶、黃嘌呤氧化還原酶及醛氧化酶之產量損失。然而， 162380.doc 201241005

〜句干兄但嚴董的病症，其伴 的神經學症狀，包括腦生長削弱、無法治療之癲 眼睛晶狀體脫位及智力遲鈍。 因辅因子缺乏而受 至亞硫酸鹽氧化酶活性之損 1董的病症，其伴隨有嚴重 無法治療之瘤癎發作、 用且罹患Moco缺乏之受折磨患者死於嬰兒早期。 。直至最近，仍無有效療法可 已發現投與鉬蝶呤衍生物前驅物Z(M0 co生物合成路徑

改變有關之相關疾病的有效治療方法（參見美國專利第 7,504,095號）。$而，如同用於疾病之大部分替代療法一 般，該治療受治療性活性劑之可用性的限制。 【發明内容】 前驅物Z(式（I)及（XIII)之化合物）先前已使用醱酵方法製 備。然而，此等方法具有穩定性問題，產率低，且對於大 規模生產而言成本過高。提出以下合成方法作為此等醱酵 方法之替代方法。 本文提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽 的方法：

該方法包含：使式（II)化合物： 162380.doc 201241005

與式（III)化合物反應：

產生式（IV)化合物：

ΗΝ ΝΗ PR1-

V1JX· /IV 其中各1^獨立地為Η或保護基；選擇性保護該式（IV)化合 物以製備式（V)化合物：

使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物： I62380.doc -6- (VI) 201241005 Ο Ο R!

OR.

Ρ=0 使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 在一些實施例中，該醫藥學上可接受之鹽為鹽酸鹽。 在一些實施例中，該式（II)化合物為： h2n

NH2

HN

nh2 在一些實施例中，式（III)化合物為經保護或未經保護之 半乳糠、甘露糖、葡萄糖或古洛糖（gulose)。舉例而言， 式（III)化合物可為：

ORi 162380.doc 201241005 在一些實施例中，兩個相鄰R!基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛或苯亞曱基縮醛部分。 在一些實施例中，步驟（a)包含使式（II)化合物與式（III) 化合物在肼存在下反應。舉例而言，該肼可選自由苯肼及 烷基肼組成之群。在一些實施例中，肼為苯肼。 在一些實施例中，步驟（c)之磷酸化包含使式（V)化合物 與P(V)磷酸化劑反應。舉例而言，P(V)磷酸化劑可選自由 以下組成之群：P0C13 ; H3P〇4 ; PO(OBn)xCl3.x ; C13CCH20P(0)C12;及（Βη0)2Ρ(0)0Ρ(0)(0Βη)2。在一些實 施例中，該P(v)磷酸化劑為P〇Cl3。在一些實施例中，步 驟（c)之磷酸化包含使式（V)化合物與P(III)亞磷酸化劑反 應。舉例而言，該P(III)亞磷酸化劑可選自由以下組成之 群：P(0CH2CH2CN)2C1 ; P(OCH2CH2CN)(NPr2-i)Cl ;及氰 基乙基-0-P[N(i-Pr)2)]2。在一些實施例中，步驟（c)進一步 包含使所得亞磷酸酯氧化以製備化合物（VI)之磷酸酯。 在一些實施例中，步驟（d)包含使式（VI)化合物與選自由 以下組成之群的氧化劑反應：Ru04 ;戴斯-馬丁試劑（Dess-Martin) ; DMSO/三 氟甲磺 酸酐； 及 PDC 。 在一些實施例中，脫除式（VII)化合物之保護基係在缺氧 條件下進行。 在一些實施例中，式（IV)化合物為：

162380.doc 201241005 在一些實施例中，式（V)化合物為：

〇 R1.

在一些實施例中，式（VI)化合物為：

ΓΙ //ρ——ο 在一些實施例中，式（VII)化合物為：

ο ο Γιι /.ρ——ο 在一些實施例中，該方法進一步包含將式（I)化合物調配 為醫藥組合物。 本文亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之 鹽的方法，該方法包含：使式（Π-A)化合物： 0 (U-A) H2N N NH2 162380.doc 201241005 與式（III-A)化合物在肼存在下反應：

OH HO

HO

產生式（IV-A)化合物： h2n

HN

OH Η

OH

OH (IV-A) 選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-A)化合物：

0 R! OH

其中R!為保護基；使該式（V-A)化合物磷酸化以製備式（VI-A) 化合物：

使該式（VI-A)化合物氧化以製備式（VII-A)化合物： 162380.doc -10- 201241005

脫除該式（VII-A)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本文進一步提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽的方法，該方法包含：使式（Π-A)化合物與式（III-A) 化合物在肼存在下反應，產生式（IV-A)化合物；選擇性保 護該式（IV-A)化合物以製備式（V-B)化合物：

(V-B)

其中各R!獨立地為保護基；使該式（V-B)化合物磷酸化以 製備式（VI-B)化合物：

使該式（VI-B)化合物氧化以製備式（VII-B)化合物：

162380.doc -11 - 201241005 脫除該式（VII-B)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本文亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之 鹽的方法，其包含：使式（II)化合物與式（VIII)化合物反 應.

其中R2為Η或保護基；產生式（IX)化合物：

//D _i 選擇性保護該式（IX)化合物以製備式（X)化合物： R1

其中R3為保護基；使該式（X)化合物氧化以製備式（XI)化合 物：

及 I62380.doc • 12· 201241005 脫除該式（XI)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本文進一步提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽的方法，該方法包含使式（II)化合物與式（III)化合 物反應，產生式（IV)化合物；選擇性保護該式（IV)化合物 以製備式（V)化合物；使該式（V)化合物氧化以製備式（XII) 化合物：

(XII) 使該式（XII)化合物磷酸化以製備式（VII)化合物；及 脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本文提供一種式（IV)化合物： R1\

OR,

(IV) R1

或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中各心獨立地為Η或保 護基。舉例而言，式（IV)化合物可為：

162380.doc -13- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽形式。 本文亦提供一種式（V)化合物：

OR1 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中各1^獨立地為Η或保 護基。舉例而言，式（V)化合物可選自由以下組成之群：

或其醫藥學上可接受之鹽形式。在一些實施例中，式（V) ί匕合物係選自由以下組成之群： OBoc OBoc Boc

Boc Boc I62380.doc .14· 201241005

或其醫藥學上可接受之鹽。 162380.doc -15- 201241005 本文進一步提供一種式（VI)化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中各心獨立地為Η或保 護基。舉例而言，式（VI)化合物可選自由以下組成之群：

Ο/ΓΟ

及 οR1 =OR- 或其醫藥學上可接受之鹽形式。在一些實施例中，式（VI) 化合物係選自由以下組成之群：

ο I62380.doc -16- 201241005

Boc

Boc

Boc 或其醫藥學上可接受之鹽。 本文提供一種式（VII)化合物：

R1 Ri (VII) 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中各心獨立地為Η或保 護基。舉例而言，式（VII)化合物係選自由以下組成之群：

Ri 162380.doc -17- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽形式。在一些實施例中，式（VII) 化合物係選自由以下組成之群：

Boc Boc 或其醫藥學上可接受之鹽形式。 本發明亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受 之鹽的方法，該方法包含：使式（II)化合物與式（XXII)化 合物反應：

HO OR!

HO (XXII)

PhHNN

OR!

OR! 產生式（IV)化合物；選擇性保護該式（IV)化合物以製備式 162380.doc -18- 201241005 (V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合 物；使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物；及脫除 該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 在一些實施例中，式（II)化合物為： 0

nh2 ΝΗ2 ο 在一些實施例中，式（XXII)化合物為：

在一些實施例中，步驟（C)之磷酸化包含使式（V)化合物 與P(V)磷酸化劑反應。舉例而言，P(V)磷酸化劑可選自由 以下組成之群：POCl3 ; H3P04 ; PO(OBn)xCl3-x ; C13CCH20P(0)C12 ;及（Βη0)2Ρ(0)0Ρ(0)(0Βη)2。在一些實 施例中，該P(V)磷酸化劑為Cl2PO(OCH3)。 在一些實施例中，步驟（d)包含使式（VI)化合物與選自由 以下組成之群的氧化劑反應：Ru04 ;戴斯-馬丁試劑； DMSO/三氟曱磺酸酐；及PDC。 在一些實施例中，脫除式（VII)化合物之保護基係在缺氧 條件下進行。 在一些實施例中，式（IV)化合物為： 162380.doc -19- 201241005

在一些實施例中，式（V)化合物為：

'Ν'

I

Ri 在一些實施例中，式（vi)化合物為：

在一些實施例中，式（VII)化合物為：

'N

、ΝΓ Ν

I

Ri 在一些實施例中，該方法進一步包含將式（I)化合物調配 為醫藥組合物。 162380.doc -20- 201241005 本文進一步提供一種製備式（i)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽的方法：

Ο HO OH

該方法包含：使式（Π-A)化合物： h2n

NH2

HN

nh2 與式（XXII-A)化合物在肼存在下反應：

OH HO

PhHNN 產生式（IV-A)化合物：

選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-C)化合物： 162380.doc •21 · 201241005

ν· OR1 使該式（V-C)化合物磷酸化以製備式（VI-C)化合物：

使該式（VI-C)化合物氧化以製備式（VII-C)化合物：

脫除該式（VII-C)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本發明亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受 之鹽的方法，該方法包含： 使式（XXIII)化合物反應： 0R4 R1R1 ,ORi 0，、0, I62380.doc ·22· (XXIII) 201241005 其中各1獨立地為Η或保護基且R4為Η或離去基；產生式 (XXIV)化合物：

使式（XXIV)化合物與式（II)化合物反應，產生式（XXV)化 合物：

催化該式（XXV)化合物之環形成，產生式（IV)化合物；選 擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物；使該式（V) 化合物磷酸化以製備式（VI)化合物；使該式（VI)化合物氧 化以製備式（VII)化合物；及脫除該式（VII)化合物之保護 基以製備該式（I)化合物。 在一些實施例中，式（XXIII)化合物係選自由以下組成之 群： ΟΗ

ΟΗ 及 162380.doc -23- £ 201241005

舉例而言，式（XXIV)化合物可為：

在一些實施例中，式（II)化合物為：

在一些實施例中，式（XXV)化合物為：

在一些實施例中，步驟（C)之磷酸化包含使式（V)化合物 與P(V)磷酸化劑反應。舉例而言，P(V)磷酸化劑可選自由 162380.doc • 24- 201241005 以下組成之群：P0C13 ; H3P〇4 ; PO(OBn)xCl3.x ; C13CCH20P(0)C12;及（Βη0)2Ρ(0)0Ρ(0)(0Βη)2。在一些實 施例中，P(V)磷酸化劑為Cl2PO(OCH3)。 在一些實施例中，步驟（d)包含使式（VI)化合物與選自由 以下組成之群的氧化劑反應：Ru04 ;戴斯-馬丁試劑； DMSO/三氟甲磺酸酐；及PDC。 在一些實施例中，脫除式（VII)化合物之保護基係在缺氧 條件下進行。 在一些實施例中，式（XXIII)化合物為：

在一些實施例中，式（XXIV)化合物為：

在一些實施例中，式（XXV)化合物為：

162380.doc -25- 201241005 在一些實施例中，該方法進一步包含將式（i)化合物調配 為醫藥組合物。 在一些實施例中，離去基係選自由以下組成之群：曱苯 磺酸酯基、溴苯磺酸酯基、硝基苯磺酸酯基、曱磺酸酯 基、氧鏽基、三氟曱磺酸酯基、九氟丁磺酸酯基及三氟乙 續酸S旨基。 本文亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之 鹽的方法，該方法包含：使式（XXIII-A)化合物反應：

(XXIII-A) 其中：各心獨立地為Η或保護基，且R4為Η或離去基，產 生式（XXIV)化合物： Ο

OR， (XXIV)

使式（XXIV)化合物與式（II_A)化合物反應：

NH2 (H-A) HN h2n

162380.doc _26· 201241005 產生式（XXV-A)化合物：

(XXV-A) 催化該式（XXV-A)化合物之環形成，產生式（IV-D)化合 物：

OH

N

(IV-D) 選擇性保護該式（IV-D)化合物以製備式（V-D)化合物：

Ri Ri 使該式（V-D)化合物磷酸化以製備式（VI-D)化合物：

(VI-D) 162380.doc -27- 201241005 使該式（VI-D)化合物氧化以製備式（VII-D)化合物：

脫除該式（VII-D)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本發明亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可 接受之鹽形式的方法：

〇 〇 | Η H II H OH

(XIII) 該方法包含：使式（II)化合物 0

N (Π) R1>

N N

I

Ri 與式（III)化合物反應： ΟΗλ ,〇Ri ,〇Ri HO 0 162380.doc -28- (III) 201241005 產生式（IV)化合物：

,v OR1 其中： 各尺丨獨立地為Η或保護基； 選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

(v OR1 使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物： ο

Ν——R1

及 I62380.doc -29- 201241005 (e)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化合 物。 本文亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽的方法，該方法包含： 使式（II)化合物與式（VIII)化合物反應：

R2 ο (VII 其中： R2為Η或保護基， 產生式（IX)化合物：

Γ2! /P——ο 選擇性保護該式（IX)化合物以製備式（X)化合物：

其中R3為保護基；使該式（X)化合物氧化以製備式（XV)化 162380.doc -30· 201241005 合物：

脫除該式（XV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化合物。 本文進一步提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上 可接受之鹽的方法，該方法包含：使式（II)化合物與式 (III) 化合物反應，產生式（IV)化合物；選擇性保護該式 (IV) 化合物以製備式（V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化 以製備式（VI)化合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式 (XIV)化合物：

ο ,p:— 0 及 脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化合物。 本發明亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受 之鹽的方法，該方法包含：使式（VI)化合物氧化以製備式 (VII)化合物；及脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該 式（I)化合物。 在一些實施例中，式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽 162380.doc •31 - 201241005 可藉由以下步驟製備：使式（V)化合物磷酸化以製備式（VI) 化合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物；及 脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本文亦提供一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之 鹽的方法，該方法包含：選擇性保護式（IV)化合物以製備 式（V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合 物；使該式（VI)化合物氧化以掣備式（VII)化合物；及脫除 該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 本發明亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可 接受之鹽形式的方法，該方法包含：使式（VI)化合物氧化 以製備式（XIV)化合物；及（b)脫除該式（XIV)化合物之保護 基以製備該式（XIII)化合物。 在一些實施例中，式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受 之鹽可藉由以下步.驟製備：使式（V)化合物磷酸化以製備 式（VI)化合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合 物；及脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 本文亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽形式的方法，該方法包含：選擇性保護式（IV)化合 物以製備式（V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化以製備式 (VI)化合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合 物；及（d)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII) 化合物。 本發明亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可 162380.doc •32· 201241005 接受之鹽的方法，該方法包含：使式（II)化合物與式 (XXII)化合物反應，產生式（IV)化合物；選擇性保護該式 (IV)化合物以製備式（V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化 以製備式（VI)化合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式 (XIV)化合物；及脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該 式（XIII)化合物。 本文亦提供一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽的方法，該方法包含：使式（XXIII)化合物反應，產 生式（XXIV)化合物；使式（XXIV)化合物與式（II)化合物反 應，產生式（XXV)化合物；催化該式（XXV)化合物之環形 成，產生式（IV)化合物；選擇性保護該式（IV)化合物以製 備式（V)化合物；使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化 合物；使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物；及脫 除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化合物。 本文進一步提供一種式（I)化合物或其醫藥學上可接受之 鹽，其藉由上述任一方法製備。在一些實施例中，提供一 種醫藥組合物，其包含藉由上述任一方法製備之式（I)化合 物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之賦形 劑。本文亦提供一種藉由上述任一方法製備之式（XIII)化 合物。在一些實施例中，提供一種醫藥組合物，其包含藉 由上述任一方法製備之式（XIII)化合物或其醫藥學上可接 受之鹽，及醫藥學上可接受之賦形劑。 本發明亦提供一種製備式（XXIV)化合物或其醫藥學上可 接受之鹽的方法： 162380.doc •33- 201241005

其中 各1^為11或保護基，該方法包含使式（ΧΧΠΙ)化合物：

其中： R4為Η或離去基， 與鹼反應以製備式（XXIV)化合物。 【實施方式】 應瞭解，為清楚起見在各別實施例之情形下描述的本發 明之某些特點亦可以組合形式提供於單一實施例中。相 反’為簡便起見在單一實施例之情形下描述的本發明之各 種特點亦可各別地提供或以任何適合之子組合形式提供。 除非另有定義’否則本文中所使用之所有技術及科學術 語均具有如一般熟習本發明所屬技術者通常所瞭解的相同 含義。本文所引用之所有專利、申請案、公開申請案及其 他公開案均以全文引用的方式併入本文中。除非另有規 定，否則在本文所列舉之術語存在複數個定義的情況下， 162380.doc •34- 201241005 以本章節中之定義為準。 對於術語「 「但不限於」 用，術語「約 外明確規定， §吾「約」修飾 例如」及「諸如」及其語法相等物，片語 應理解為除非另外明確規定。如本文中所使 」意欲說明由實驗誤差引起之變化。除非另 否則本文所報導之所有量測均應理解為由術 ，無論是否明確使用該術語^除非本文另外 明確指示，否則如本文中所使用，單數形式「一（a/an) 及「該（the)」包括複數個指示物。 術語「鹽」包括化合物之任何離子形式及一或多種相對 離子（陽離子及/或陰離子）。鹽亦包括兩性離子化合物（亦 即含有一或多個陽離子及陰離子之分子，例如兩性離子胺 基酸）。鹽十存在之相對離子可包括任何陽離子、陰離子 或兩性離子。例示性陰離子包括（但不限於）：氣離子、溴 離子、碘離子、硝酸根、硫酸根、硫酸氫根、亞硫酸根、 亞硫酸氫根、磷酸根、酸式磷酸根、高氣酸根、氣酸根、 亞氯酸根、次氯酸根、過埃酸根、蛾酸根、亞埃酸根、次 碘酸根、碳酸根、碳酸氫根、異菸鹼酸根、乙酸根、三氣 乙酸根、三氟乙酸根、乳酸根、水揚酸根、檸檬酸根、酒 石酸根、泛酸根、酒石酸氫根、抗壞血酸根、丁二酸根、 順丁烯二酸根、龍膽酸根、反丁烯二酸根、葡糖酸根、葡 糖醛酸根、醣酸根、甲酸根、苯曱酸根、麩胺酸根、曱烷 磺酸根、三氟曱磺酸根、乙烷磺酸根、苯磺酸根、對曱苯 磺酸根、對三氟甲基苯磺酸根、氫氧根、鋁酸根及硼酸 根。例示性陽離子包括（但不限於）：單價鹼金屬陽離子， 162380.doc •35· 201241005 諸如鋰、鈉、鉀及鉋；及二價鹼土金屬，諸如鈹、鎂、 鈣、鳃及鋇。亦包括過渡金屬陽離子，諸如金、銀、銅及 鋅；以及非金屬陽離子，諸如錢鹽。 如本文中所使用，術語「前藥」係指在投與個體後藉由 代謝或化學過程發生化學轉化以得到例如本文所述之化合 物及/或其鹽及/或溶劑合物的化合物。術語「前藥」可包 括例如藉由使用熟習此項技術者已知之程序使本文所述之 化合物的一或多個羥基與經烷基、烷氧基或芳基取代之醯 化劑反應以產生例如相應乙酸酯、特戊酸酯、曱基碳酸酯 及苯曱酸酯所形成之酯及碳酸酯。舉例而言，含有缓基之 化合物可形成生理學上可水解之酯，其充當前藥，藉由在 體内水解得到本文所提供之化合物。該等前藥可經口投 與，因為在許多情況下水解在消化酶之影響下發生。亦可 使用非經腸投藥，例如在水解在血液中發生之情形下。 術語「溶劑合物」在本文中用於描述包含本文所提供之 化合物及化學計算量之一或多種醫藥學上可接受之溶劑分 子（例如乙醇）的分子複合物。當溶劑為水時，使用術語 「水合物」。用於製備及鑑別水合物及溶劑合物之典型程 序描述於 K.J. Guillory，「Generation of p〇lymorphs，

Hydrates，Solvates，and Amorphous Solids，」尸 ζ·« PAarTwacewiz.ca/ «So/z.i/j，Harry G. Brittan編，第 95 卷， Marcel Dekker，Inc·，New York, 1999之第 202-209頁，該文 獻以全文引用的方式併入本文中。 如本文中所使用’含有一或多個以虛線及粗體鍵（亦即 162380.doc -36 - 201241005 i I)描緣之立體異構中心的化學結構意欲指示該化學結構 中存在之立體異構中心的絕對立體化學。如本文中所使 用’由簡單線表示之鍵並不指示立體偏向性。除非另外指 示與之相反’否則本文中所說明但未指示絕對或相對立體 化學之包括一或多個立體異構中心的化學結構涵蓋化合物 所有可能的立體異構形式（例如非對映異構體、對映異構 體）及其混合物。具有單一粗線或虛線及至少一個其他簡 單線之結構涵蓋所有可能非對映異構體之單一對映異構系 列。 化合物之外消旋混合物的解析可藉由此項技術中已知之 許多方法中之任一者來進行。例示性方法包括使用對掌性 解析酸之分步再結晶’該酸為光學活性成鹽有機 酸。適合 於分步再結晶方法之解析劑為例如光學活性酸，諸如D及 L形式之酒石酸、二乙醯基酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、 杏仁酸、蘋果酸、乳酸或各種光學活性樟腦磺酸（諸如樟 腦項酸）。適合於分步結晶方法之其他解析劑包括立體異 構純形式之曱基苯曱胺（例如5及Λ形式，或非對映異構純 形式）、2-苯基甘胺醇、降麻黃素、麻黃素、…甲基麻黃 素、環己基乙胺、1，2-二胺基環己烷及其類似物。 外消旋混合物之解析亦可藉由在填充有光學活性解析劑 (例如二硝基苯甲醯基苯基甘胺酸）之管柱上溶離來進行。 適合之溶離溶劑組合物可由熟習此項技術者確定。 本文所提供之化合物亦可包括中間物或最終化合物中存 在之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序數但 162380.doc -37- 201241005 不同質量數之彼等原子。舉例而言，氫之同位素包括氚及 氘。 刀1 如本文中所❹，術語「化合物」意欲包括所述結構之 所有立體異構體、幾何異構體、互變異構體及同位素。除 非另外規定，否則本文中由名稱或結構鑑別為—種特定互 變異構形式之化合物意欲包括其他互變異構形式。 所有化合物及其醫藥學上可接受之鹽可與其他物質㈣ 如水及溶劑）一起存在（例如水合物及溶劑合物）。 在-些實施例中，本文所提供之化合物或其鹽經實質上 刀離。經實質上分離」意謂化合物至少部分或實質上自 $成其或偵測到其所處之環境分離。部分分離可包括例如 富含本文所提供之化合物的組合物。實質上分離可包括含 有至少約50重量％、至少約6〇重量％、至少約川重量％、 至少約80重量％、至少約9〇重量％、至少約％重量％、至 少約97重量％或至少約99重量％本文所提供之化合物或其 鹽的組合物^分離化合物及其鹽之方法在此項技術中為常 規方法。 片語「醫藥學上可接受」在本文中用於指如下化合物、 物質、組合物及/或劑型：其在正確醫學判斷之範疇内， 適合於與人類及動物之組織接觸使用而無過度毒性、刺 激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理的益處/風險 比相稱。 如本文中所使用，表述「周圍溫度」及「室溫」在此項 技術中應王里解為且大體上係指A約為進行反應之房間之溫 162380.doc •38- 201241005 度的溫度（例如反應温度），例如約20°c至約3(rc之溫度。 本文亦提供本文所述之化合物的醫藥學上可接受之鹽。 如本文中所使用，「醫藥學上可接受之鹽」係指所揭示化 合物之衍生物，其中母化合物藉由將現有的酸或鹼部分轉 化為其鹽形式而改變。醫藥學上可接受之鹽的實例包括 (但不限於）驗性殘基（諸如胺）之無機酸鹽或有機酸鹽；酸 性殘基（諸如羧酸）之鹼金屬鹽或有機鹽；及其類似物。本 文所提供之化合物的醫藥學上可接受之鹽包括例如由無毒 無機或有機酸形成之母化合物的習知無毒鹽。本文所提 供之化合物的醫藥學上可接受之鹽可藉由習知化學方法由 含有鹼性或酸性部分之母化合物合成。一般，該等鹽可藉 由使游離酸或鹼形式之此等化合物與化學計算量之適當鹼 或酸在水中或在有機溶劑中或在兩者之混合物中反應來製 備；在一些實施例中，可使用如乙鍵、乙酸乙酯、酵（例 如甲醇、乙醇、異丙醇或丁醇）或乙腈（ACN)之非水性介 質。適合鹽之清單見於及⑽〜以㈣’友 •SWewces，第 17版 ’ Mack Publishing Company，Easton，Pa., 1985 ’ 第 1418頁及Jbwrna/ o/P/iarmacewiica/ Science，66, 2 (1977)中’該等文獻各以全文引用的方式併入本文中e 製備鹽形式之習知方法例如描述於«办οολ: 0/ Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH，2002 中。 合成 本文所提供之化合物（包括其鹽）可使用已知有機合成技 162380.doc -39- 201241005 術製備且可根據諸多可行合成路徑中之任一者來合成。 用於製備本文所提供之化合物的反應可在適合之溶劑中 進行，該等溶劑可容易地由熟習有機合成技術者選擇。適 合之溶劑在進行反應之溫度（例如可在溶劑冰點溫度至溶 劑沸點溫度之範圍内的溫度）下可實質上不與起始物質（反 應物）、中間物或產物反應。特定反應可在一種溶劑或一 種以上溶劑之混合物中進行。視特定反應步驟而定，適合 於特定反應步驟之溶劑可由熟習此項技術者選擇。 本文所提供之化合物的製備可涉及各種化學基團之保護 及脫除保護基"對保護及脫除保護基之需要以及適當保護 基之選擇可容易地由熟習此項技術者確定。保護基之化學 性質可例如見於 Proieciz’wg Growp C/zewbiry，第 1 版， Oxford University Press, 2000 ； March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure > 第 5版， Wiley-Interscience Publication，2001 ;及 Peturssion，S.等 人，r Protecting Groups in Carbohydrate Chemistry, j J. 五74(11)，1297 (1997)(該等文獻各以全文弓I用 的方式併入本文中）中。 反應可根據此項技術中已知之任何適合方法來監測。舉 例而言，產物形成可藉由光譜方法監測，諸如核磁共振譜 法（例如巾或13C)、紅外光譜法、分光光度測定法（例如UV-可見）、質譜法或藉由層析法，諸如高效液相層析 (HPLC)、液相層析-質譜法（LCMS)或薄層層析（TLC)。化 合物可由熟習此項技術者藉由各種方法來純化，包括高效 162380.doc -40- 201241005 液相層析（HPLC)(「iVepara/z’ve ZC-M5* 尸 Improved Compound Specific Method Optimization j K.F. Blom等人，J. Cow6z·. C/zew. 6(6)，874 (2004)，該文獻以全 文引用的方式併入本文中）及正相二氧化矽層析。 式（I)化合物及其他適用化合物及中間物可如流程1中所 示形成。舉例而言，式（II)之二胺基嘧啶酮化合物可與經 保護或未經保護之式（III)之己醣反應，得到式（IV)化合 物。接著可使用標準條件選擇性保護式（IV)之哌嗪環的環 氮原子，得到式（V)之衍生物。使式（V)化合物磷酸化可得 到式（VI)之磷酸酯中間物。式（VI)之磷酸酯可在適當氧化 條件下轉化為式（VII)之二醇。最後，可脫除式（VII)化合 物之保護基，得到式（I)化合物。 流程1

式(11)化合物： 162380.doc -41 - 201241005 在一些實施例中，涵蓋式（II)化合物之製備： £

Π) 2 2 NHNH 其中各Ri獨立地為Η或保護基。 式（II)可包括例如化合物2,5,6-三胺基嘧啶-4(3Η)-酮

η2νγ 、νγ νη2 2,5,6-三胺基嘧啶-4(3印-酮， 及其鹽及衍生物。在一些實施例中，式（II)化合物可呈鹽 酸鹽形式：

如所指示，式（II)結構之某些官能基（例如胺基、嘧啶環 之2位及3位之環氮原子）可經R!保護基保護。出於此目 的，R!可包括任何適合之胺基保護基，包括（但不限於）胺 基甲酸酯、醯胺、烷基或芳基衍生之保護基。h保護 基可相同或不同。 詳言之，胺基曱酸酯保護基可包括例如胺基甲酸9-苐基 162380.doc -42- 201241005 甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)、胺基甲酸羧基苯 甲酯（cbz)、胺基甲酸甲酯、胺基曱酸乙酯、胺基甲酸9-(2-磺基）苐基曱酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）苐基曱酯、胺基甲 酸17-四苯并[a,c，g，i]第基曱酯（Tbfmoc)、胺基甲酸2-氣-3-茚基甲酯（Climoc)、胺基曱酸2,7·二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，10-四氫噻咄基）]曱酯（DBD-Tmoc)、胺基曱酸 1,1-二侧氧基苯并[b]噻吩-2-基曱酯（Bsmoc)、胺基曱酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基曱酸2-三甲基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基甲酸2-笨乙酯（hZ)、胺基甲酸1，1-二甲基-2-鹵乙酯、胺基曱酸1,1·二曱基-2,2-二溴乙酯（DB-i-boc)、胺 基曱酸1，1-二甲基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基甲酸1-甲 基-1-(4-聯笨基）乙酯（Bpoc)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-曱基乙酯（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1，1-二甲基乙酯、胺基甲酸2-[(2·硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基曱酸2-(Ν，Ν·二環己基曱醯胺基） 乙酯、胺基曱酸1-金剛烷酯（Ι-Adoc)、胺基曱酸乙烯酯 (Voc)、胺基甲酸1-異丙基烯丙酯（Ipaoc)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基甲酸3-(3,吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基曱酸8-喹啉酯、胺基曱酸烷基二硫基酯、胺基甲酸對曱 氧基苯曱酯（Moz)、胺基曱酸對硝基苯甲酯（Pnz)、胺基曱 酸對溴苯曱酯、胺基曱酸對氣苯甲酯、胺基甲酸2,4_二氣 苯曱酯、胺基曱酸4-曱基亞磺醯基苯曱酯（Msz) '胺基曱 酸二苯基曱酯、胺基曱酸2-曱硫基乙酯、胺基曱酸2_甲基 續醯基乙醋、胺基曱酸2-(對曱苯磺醯基）乙酯、胺基曱酸 162380.doc • 43· 201241005 [2-(1,3-二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基甲酸4-曱硫基苯酯 (Mtpc)、胺基曱酸2,4-二曱硫基苯酯（Bmpc)、胺基曱酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸1，1_二甲基-2-氰基乙酯、胺基 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣-對醯氧基苯曱酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基係選自胺基甲酸9-苐基曱酯 (Fmoc)、胺基曱酸第三丁酯（B〇c)及胺基曱酸羧基苯甲酯 (cbz)。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡啶基甲醯胺、苯曱醯 胺、對苯基苯甲醯胺、2-甲基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 (W-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 式（II)化合物可使用已知方法製備，諸如由Sharma等 人，Indian Journal of Chemistry, Section B: Organic Chemistry Including Medicinal Chemistry, 43B, 385 (2004) 所述之方法。舉例而言，2,5,6-三胺基嘧啶-4(3i/)-酮如流 程2中所示製備。 流程2

式（Π)化合物亦可包括互變異構結構： 162380.doc • 44· 201241005

OR 、nT 'NT 、nh2

I

Ri 或其醫藥學上可接受之鹽。 式（111)化合物： 本發明之另一實施例提供式（III)化合物之製備 OR, (in) HO Ο 其中各1^獨立地為Η或保護基。 式（III)可包括例如經保護或未經保護之己醣。詳言之， 葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿洛糖（allose)、阿卓糖 (altrose)、古洛糖、艾杜糖（idose)、塔羅糖（talose)及其衍 生物。己糖可呈D或L形式。舉例而言，以下己糖全部包 括在式（III)之範疇内：

—so

阿洛糖

162380.doc •45 201241005 在一些實施例中，己醣為經保護或未經保護之葡萄糖或 半乳糖。舉例而言，式(111)化合物可為經保護或未經保護 之半乳糖（例如D-半乳糖卜在一些實施例中，己醣為經保 δ蒦或未經保護之古洛糖或半乳糖。 如所指示，式（III)化合物可呈游離糖（亦即未經保護之單 醣）形式。或者，式（III)結構之某些羥基（例如己醣之3、4 及5位的羥基）可經Rl保護基保護。出於此目的，&可包括 任何適合之羥基官能基，包括（但不限於）醚、酯、碳酸酯 或磺酸酯保護基。R!保護基可相同或不同。 詳言之，醚保護基可包括曱基、曱氧基甲基（Μ〇Μ)、苯 甲氧基甲基（ΒΟΜ)、曱氧基乙氧基甲基（MEM)、2-(三曱基 矽烷基）乙氧基曱基（SEM)、甲硫基甲基（MTM)、苯基硫基 甲基（PTM)、疊氮基曱基、氰基甲基、2,2-二氣-1,1-二氟 乙基、2-氣乙基、2·溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1·乙氧基 乙基（EE)、苯甲醯甲基、4-溴笨曱醯曱基、環丙基曱基、 烯丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二曱基苯甲基、4-甲氧基苯甲基（MPM-OAr)、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氯苯甲基、3，4_二氣苯甲基、心（二曱基胺 基）羰基苯甲基、4-曱基亞磺醯基苯曱基（Msib)、9-蒽基曱 基、4-吡啶甲基、七氟-對甲苯基、四氟-4-吡啶基、三甲 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙醯氧基（OAc)、甲酸芳酯、乙酸芳 162380.doc -46 - 201241005 醋、乙酿丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_苐曱酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸醋保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸1 -金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（B〇c_〇Ar)、胺基甲酸第三丁 醋（B〇C)、碳酸4_曱基亞磺醯基笨曱酯（Msz-OAr)、碳酸 2,4-一甲基戊-3_基酯（D〇c-〇Ar)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 西曰碳酸芳知乙烯酯、碳酸芳酯苯曱酯及芳基胺基甲酸酯。 續I自曰保護基可包括甲烧確酸芳酯、曱苯績酸芳酯及 曱醞基苯續酸芳醋。 在二實施例中，兩個相鄰Ri基團結合在一起形成亞異 丙基縮路、苯亞 基縮路）、6,10-基-2-甲基-

苯亞曱基縮醛、1，5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己

162380.doc •47 201241005

式（III)化合物可根據碳水化合物合成之已知方法來製 備。保護碳水化合物之方法亦為已知的，如Orgam’c 〇/ iSwgars，Taylor及 Francis，2006，第 181 頁及 Peturssion，S.等人，《/. C/zew.五c?wc·，74(1 1), 1297 (1997)中 所述，該等文獻各以全文引用的方式併入本文中。 如一般熟習此項技術者應認識到，且如下文所論述，式 (III)結構之立體化學可控制式（I)合成中之後續中間物的立 體化學。此外，保護某些羥基可改良式（III)化合物之溶解 度並調節連續反應步驟之立體特異性。 式（IV)化合物： 本文所提供之另一實施例係關於式（IV)化合物之製備：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各1獨立地為Η 或保護基。 如所指示，式（IV)化合物中之胺基及羥基可呈經保護或 未經保護之形式。舉例而言，呈未經保護之形式時，式 (IV)化合物可包括化合物2-胺基-6,7-二羥基-8-(羥基曱基）- 162380.doc • 48 · 201241005 5&，6,7,8,9&，10-六氫_311-哌喃并[3,2-8]蝶啶-4(511)-酮：

六氫-3H-略喃幷[3,2-g]蝶啶·4(5Η)-醐 ， 或其醫藥學上可接受之鹽。 式（IV)結構之某些胺基及/或羥基可經心保護基保護。出 於此目的，心可包括由熟習化學技術者選擇的任何適合之 胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之範疇内的胺基 保護基包括（但不限於）胺基甲酸酯、醯胺、ΛΓ-烷基或iV-芳 基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實例可包括醚、 酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。1^保護基可相同或不同。 詳言之，胺基甲酸酯保護基可包括例如胺基甲酸9-苐基 甲酯（Fmoc)、胺基曱酸第三丁酯（Boc)、胺基甲酸羧基苯 甲酯（cbz)、胺基甲酸甲酯、胺基曱酸乙酯、胺基甲酸9-(2-磺基）薙基甲酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）第基曱酯、胺基曱 酸17-四苯并[a，c，g，i]苐基甲酯（Tbfmoc)、胺基曱酸2-氣-3-茚基曱酯（Climoc)、胺基曱酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氩-10，10，10，10-四氫噻咕基）]甲酯（〇60-丁111〇(：)、胺基甲酸 1,1-二側氧基苯并[b]噻吩-2-基甲酯（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基甲酸2-三曱基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基甲酸2-苯乙酯（hZ)、胺基曱酸1，1-二曱基-2-鹵乙酯、胺基甲酸1，1-二曱基-2,2-二溴乙酯（DB-i-boc)、胺 162380.doc • 49· 201241005 基甲酸1,1-二曱基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基曱酸1-甲 基-1-(4-聯苯基）乙酯（Bpoc)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-曱基乙酯（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1，1-二曱基乙酯、胺基曱酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基甲酸2-(N，N-二環己基曱醯胺基） 乙酯、胺基甲酸1-金剛烷酯（Ι-Adoc)、胺基甲酸乙烯酯 (Voc)、胺基甲酸1-異丙基烯丙酯（Ipaoc)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基甲酸3-(3’"比啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基甲酸8-喹啉酯、胺基甲酸烷基二硫基酯、胺基甲酸對曱 氧基苯曱酯（Moz)、胺基甲酸對硝基苯曱酯（Pnz)、胺基甲 酸對溴苯甲酯、胺基甲酸對氯苯甲酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯曱酯、胺基甲酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基甲 酸二苯基甲酯、胺基曱酸2-甲硫基乙酯、胺基甲酸2-曱基 磺醯基乙酯、胺基甲酸2-(對曱苯磺醢基）乙酯、胺基曱酸 [2-(1，3-二噻烷基）]曱酯（Dmoc)、胺基甲酸4-曱硫基苯酯 (]^?(〇、胺基曱酸2,4-二甲硫基苯酯（611^(〇、胺基甲酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸1,1-二甲基-2-氰基乙酯、胺基 曱酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基曱酸4·苯基乙醯氧基苯曱 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣-對醯氧基苯甲酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基係選自胺基甲酸9-苐基甲酯 (Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)及胺基曱酸羧基苯曱酯 (cbz)保護基》 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡啶基甲醯胺、苯甲醯 162380.doc • 50· 201241005 胺、對苯基苯甲醯胺、2-曱基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 (#’-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括甲基、甲氧基曱基（MOM)、苯曱氧基甲 基（BOM)、甲氧基乙氧基甲基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 乙氧基甲基（SEM)、甲硫基甲基（MTM)、苯基硫基甲基 (PTM)、疊氮基曱基、氰基甲基、2,2-二氣-1,1-二氟乙 基、2-氯乙基、2·溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯曱基、4-溴苯曱醯曱基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯曱基、 2,6-二曱基苯曱基、4-曱氧基苯曱基（]^?]^-0八〇、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氯苯曱基、3,4-二氯苯曱基、4-(二曱基胺 基）幾基苯甲基、4-曱基亞續醯基苯甲基（Ms ib)、9-蒽基甲 基、4- °比啶曱基、七氟-對甲苯基、四氟_4_ n比啶基、三曱 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（tbDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙醯氧基（〇Ac)、甲酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_第甲酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸醋保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸丨_金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（B〇c_〇Ar)、胺基曱酸第三丁 醋（Boc)、碳酸4-曱基亞磺醯基苯曱酯（Msz_〇Ar)、碳酸 2,4-二曱基戊-3-基酯（Doc_OAr)、碳酸芳酯2,2,2_三氯乙 162380.doc •51- 201241005 酯、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯。 磺酸酯保護基可包括曱烷磺酸芳酯、曱苯磺酸芳酯及2· 曱醢基苯項酸芳醋。 在一些實施例中，兩個相鄰Ri基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、苯亞甲基縮醛、1，5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己 基縮醛）、6,10-二氧螺μ. 5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2-異丁 基-2-甲基-1，3-二噁烷部分。舉例而言，式（IV)之己醣環組 分之4及5位的心基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞甲基 縮路、I，5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己基縮醛）、6，10_二氧 螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2_異丁基_2_曱基_1，3_二噁烷 部分。 保護某些胺基及羥基可改良式（IV)化合物之溶解度。舉 例而s，式（IV)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度並增 加產物分離產量。 θ 式（iv)化合物可藉由如下製備：使式（11)化合物 Ο

與式（III)化合物反應：

201241005 產生式（ιν)化合物：

其中： 各1^獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 詳言之，式（IV)化合物可在式（II)化合物與式（III)化合物 在將達成所需環化之任何試劑存在下反應後製備。該試劑 可容易地由熟習此項技術者確定且可包括例如經取代或未 經取代之肼。適合之肼試劑的非限制性實例包括苯肼及烷 基肼，例如苯肼及對硝基苯肼。 應瞭解，式（IV)結構之異構形式可控制式（I)合成中之連 續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此步 驟中分離，或者式（IV)之異構混合物可進入合成之稍後階 段且在合成之稍後階段分離。 在一些實施例中，式（IV)化合物包括異構體： Ο ORi H y ! y

Ri 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 162380.doc •53· 201241005 在合成期間，式（ιν)產物之立體化學可視情況藉由操縱 式（III)己醣之C-3及C-4位的立體化學來控制。舉例而言， 衍生自葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿洛糖、阿卓糖、古洛 糖、艾杜糖及塔羅糖之式（III)反應物及關於糖之C-3及C-4 位的立體化學不同之衍生物將產生式（IV)產物之不同異構 體混合物。 式（IV)合成之立體選擇性亦可藉由在式（III)化合物之某 些位置併入龐大保護基來控制。舉例而言，在式（III)糖之 C-3、C-4或C-5位之任一處引入亞異丙基縮醛可調節反應 之立體選擇性。 式〇〇化合物： 本文所提供之另一實施例係關於式（V)化合物之製備：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各1^獨立地為Η 或保護基。舉例而言，式（V)化合物包括化合物（V-A):

Ο Ri OH

或其醫藥學上可接受之鹽，其中1^為Η或保護基。式（V)化 162380.doc -54· 201241005 合物亦包括例如化合物2-胺基-6,7-二羥基-8-(羥基甲基）-4-側氧基-5a，6,7,8,9a,10-六氫-3H-哌喃并[3,2-g]蝶啶-5(4H)-甲酸（9H-苐-9-基）甲酯：

0 Fmoc OH

之-胺基名^-二羥基-以羥基甲基”-側氧基^#,?^;^^-六氫-3H-哌喃幷[3,2-g]蝶啶-5(4H)-曱酸(9H-筅-9-基)曱酯， 或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，式（V)化合 物可包括例如以下一或多種化合物： OBoc OBoc

Boc Boc O OBoc

O OBoc Boc

OBoc OBoc

162380.doc -55- 201241005 O OBoc

BoC\

O OH

在一些實施例中，一或多種上述化合物可由熟習此項技術 者藉由各種方法分離，包括高效液相層析（HPLC) (「Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization」K.F. Blom等人，乂 Com6z'_ 6(6)(2004)，該文獻以全文引用的方式併入本文中） 及正相二氧化矽層析。 如所指示，式（V)結構之某些胺基及/或羥基可經R,保護 基保護。出於此目的，R!可包括由熟習化學技術者選擇的 任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之範 疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基曱酸酯、醯胺、Μ- ΐ 62380.doc -56- 201241005 烷基或iv-芳基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實例 可包括醚、酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。Ri保護基可相同 或不同。 詳言之’胺基甲酸酯保護基可包括例如胺基曱酸9-苐基 甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)、胺基甲酸羧基苯 甲酯（cbz)、胺基甲酸曱酯、胺基甲酸乙酯、胺基甲酸9_(2_ 磺基）第基甲酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）第基曱酯、胺基曱 酸17-四苯并[a，c，g，i]苐基甲酯（Tbfmoc)、胺基甲酸2-氣-3-茚基曱酯（Climoc)、胺基甲酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，10-四氫噻咕基）]甲酯（DBD-Tmoc)、胺基甲酸 1，1-二側氧基苯并[b]噻吩-2-基甲酯（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基甲酸2-三曱基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基曱酸2-苯乙酯（hZ)、胺基曱酸1,1-二曱基-2-鹵乙酯、胺基甲酸1,1-二甲基-2,2-二溴乙酯（0丑+1)〇(：)、胺 基甲酸1，1-二曱基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基曱酸1-甲 基-1-(4-聯苯基）乙酯（BpOC)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-甲基乙酯（i-Bumeoc)、胺基甲酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1,1-二曱基乙酯、胺基甲酸2-[(2·硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基曱酸2-(N，N-二環己基曱醯胺基） 乙S旨、胺基曱酸1-金剛院g旨（l-Adoc)、胺基曱酸乙稀8旨 (Voc)、胺基甲酸1-異丙基烯丙酯（ipaoc)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基曱酸3-(3'吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基曱酸8-喹啉酯、胺基曱酸烷基二硫基酯、胺基曱酸對曱 氧基苯甲酯（Moz)、胺基曱酸對硝基苯甲酯（Pnz)、胺基曱 162380.doc •57· 201241005 酸對溴苯曱酯、胺基甲酸對氣苯甲酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯甲酯、胺基甲酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基甲 酸二苯基甲酯、胺基甲酸2-曱硫基乙酯、胺基甲酸2-甲基 磺醯基乙酯、胺基甲酸2-(對曱苯磺醯基）乙酯、胺基甲酸 [2-(1，3·二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基甲酸4-甲硫基苯酯 (Mtpc)、胺基甲酸2,4-二曱硫基苯酯（Bmpc)、胺基甲酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸1，1-二甲基-2-氰基乙酯、胺基 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣-對醯氧基苯甲酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基係選自胺基甲酸9-第基曱酯 (Fmoc)、胺基曱酸第三丁酯（Boc)及胺基曱酸羧基苯曱酯 (cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醢胺、吡啶醯胺、3-吡啶基甲醯胺、苯甲醯 胺、對苯基苯甲醯胺、2-甲基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 (//'-二硫基苯曱氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括甲基、甲氧基曱基（MOM)、苯曱氧基曱 基（BOM)、甲氧基乙氧基甲基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 乙氧基甲基（SEM)、曱硫基曱基（MTM)、苯基硫基甲基 (PTM)、疊氮基甲基、氰基甲基、2,2-二氣-1,1-二氟乙 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯甲基、4·溴苯曱醯曱基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 162380.doc -58 ·* 201241005 2,6-二甲基苯甲基' 4-甲氧基苯曱基（MPM-OAr)、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氯笨甲基、3,4-二氯苯曱基、4-(二曱基胺 基）羰基苯曱基、4-甲基亞磺醯基笨曱基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-吡啶曱基、七氟-對甲苯基、四氟-4-吡啶基、三甲 基矽烷基（TMS)、第三丁基二曱基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二笨基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 酯保護基可包括乙醯氧基（OAc)、甲酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9·苐甲酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸酯保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸丨_金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（B〇C-〇Ar)、胺基甲酸第三丁 醋（Boc)、碳酸4-甲基亞磺醯基苯曱酯（Msz_〇Ar)、碳酸 2,4_二曱基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 醋、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯。 磺酸酯保護基可包括甲烷磺酸芳酯、甲苯磺酸芳酯及2_ 甲酿基本續酸芳醋。 在一些實施例中，兩個相鄰Rl基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、苯亞甲基縮醛、丨，5_二氧螺[5 5]十一烷（亞環己 基縮醛）、6,10·二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2異丁 基-2-甲基-i，3-二噁烷部分。舉例而言式（v)之己醣環組 分之4及5位的心基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞甲基 縮醛、1’5-二氧螺[5·5]十一烷（亞環己基縮醛）、6，1〇二氧 螺[(5]癸烧（亞環戊基縮路）或2_異丁基_2_甲基-^-二嚼烧 162380.doc -59- 201241005 部分。 保護某些胺基及羥基可改良式（v)化合物之溶解度。舉 例而言，式（v)之乙醢基衍生物的製備可改良溶解度並增 加產物分離產量。 式（V)化合物可藉由如下製備：選擇性保護式（IV)化合物

(IV)

Ri

以製備式（V)化合物：

其中： 各1^獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 詳言之，式（V)化合物可藉由使用可達成心保護基選擇 性安置於N-5之任何試劑及條件使式（IV)化合物反應來製 備。適合於安置I保護基之試劑及條件可容易地由一般技 術者確定。舉例而言，胺基曱酸9-第基曱酯（Fmoc)可使用 活化氣化物衍生物來安置，如E. Atherton等人，「The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group，」The 162380.doc -60- 201241005

Peptides, S. Udenfriend 及 J. Meienhofer 編，Academic Press，New York，1987，第9卷，第1頁所報導。使用胺基 甲酸第三丁酯（Boc)保護可藉由使式（IV)化合物與例如 (Boc)20在NaOH水溶液中反應來實現，如D. Tarbell等人， Proc. TVa"· jcad· 5W., CAS/i, 69, 730 (1972)所述。可容易地 引入胺基曱酸甲酯及胺基曱酸乙酯，如E.J. Corey等人， 19(12)，1051 (1978)所述。 應瞭解，式（V)結構之異構形式可控制式（I)合成中之連 續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此步 驟中分離，或者式（V)之異構混合物可進入合成之稍後階 段且在合成之稍後階段分離。 在一些實施例中，式（V)化合物包括異構體：

另外，如上文所示，式（V)化合物亦包括互變異構結構：

ORi Ri ORi I

Ri Ri 162380.doc -61 - 201241005 式（vi)化合物： 在另一實施例中，製備式（VI)化合物：

R1 Ri 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各1獨立地為Η 或保護基。舉例而言，式（VI)化合物包括化合物（VI-A):

或其醫藥學上可接受之鹽，其中1為Η或保護基。式（VI) 化合物亦包括例如化合物：

0 Fmoc OH

8-胺基-2，12-二羥基-10-側氧基4,4a，5a,6,9,10，12，12a· 八氩-[l，3,2]二氧磷雜環己烷幷[4’，5’:5,6]哌喃幷[3,2-g]蝶啶 -ll(llaH)-甲酸(9H-葬-9·基)甲酯2-氧化物 或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，式（VI)化合 物包括例如化合物（VI-B): 162380.doc -62- 201241005

B) l· (v 或其醫藥學上可接受之鹽。舉例而言，式（VI)化合物可包 括以下一或多者：

或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，一或多種上 述化合物可由熟習此項技術者藉由各種方法分離，包括高 效液相層析（HPLC)(「Preparai/ve LC-M*S Improved Compound Specific Method Optimization j H Blom等人，J. C/zem. 6(6) (2004)，該文獻以全文引 162380.doc •63- 201241005 用的方式併入本文中）及正相二氧化矽層析。 如所指示，式(VI)結構之某些胺基及/或羥基可經r丨保護 基保護。出於此目#’R丨可包括由熟習化學技術者選擇的 任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之範 疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基甲酸酯、醢胺、… 烷基或芳基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實例 可包括趟、S旨、碳酸酯或磺酸酯保護基。Ri保護基可相同 或不同。 詳言之’胺基甲酸酯保護基可包括例如胺基曱酸9_第基 甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)、胺基曱酸叛基苯 甲醋（cbz)、胺基曱酸曱酯、胺基曱酸乙酯、胺基甲酸9_(2_ 續基）薙基甲酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）第基甲酯、胺基曱 酸1 7-四苯并[a，c，g，i]苐基甲酯（Tbfmoc)、胺基甲酸2-氣-3-茚基曱酯（Climoc)、胺基甲酸2,7_二第三丁基[9-(l〇，i〇_二 氫-10，10，10，10-四氫噻咄基）]曱酯（DBD-Tmoc)、胺基甲酸 1，1_二侧氧基苯并[b]嗔吩-2-基甲醋（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基甲酸2-三甲基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基甲酸2-苯乙酯（hZ)、胺基甲酸l，l-二甲基·2-鹵乙酯、胺基曱酸1，1-二曱基-2,2-二溴乙酯（DB4-boc)、胺 基甲酸1，1-二曱基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基甲酸1-甲 基-1-(4-聯苯基）乙酯（Bpoc)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-甲基乙酯（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1,1-二曱基乙酯、胺基甲酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基甲酸2-(N，N-二環己基曱醯胺基） 162380.doc • 64- 201241005 乙酯、胺基曱酸1-金剛烷酯（l-Adoc)、胺基曱酸乙烯酯 (Voc)、胺基曱酸1-異丙基烯丙酯（ipaoc)、胺基曱酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基曱酸3-(3’吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基曱酸8-喹啉酯、胺基甲酸烷基二硫基酯、胺基甲酸對曱 氧基苯甲酯（Moz)、胺基曱酸對硝基苯甲酯（pnz)、胺基甲 酸對溴苯曱酯、胺基曱酸對氣苯甲酯、胺基甲酸2,4-二氯 笨曱酯、胺基曱酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基曱 酸二苯基曱酯、胺基甲酸2-甲硫基乙酯、胺基曱酸2-甲基 磺醯基乙酯、胺基甲酸2-(對曱苯磺醢基）乙酯、胺基甲酸 [2-(1,3-二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基曱酸4-甲硫基苯酯 (Mtpc)、胺基甲酸2,4-二甲硫基苯酯（Bmpc)、胺基曱酸2-膦酿乙酯（Peoc)、胺基甲酸1，1-二曱基-2-氰基乙酯、胺基 曱酸2-(4·硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基笨甲 酯（PhAcOZ)及胺基曱酸間氣-對醯氧基苯曱酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基可選自胺基甲酸9-苐基甲酯 (Fmoc) '胺基曱酸第三丁酯（Boc)及胺基曱酸羧基苯曱酯 (cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡啶基曱醯胺、苯曱醯 胺、對苯基苯甲醯胺、2-甲基-2·(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 (ΛΓ-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括甲基、甲氧基曱基（MOM)、苯甲氧基曱 基（BOM)、曱氧基乙氧基曱基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 162380.doc •65· 201241005 乙氧基甲基（SEM)、甲硫基曱基（ΜΤΜ)、苯基硫基曱基 (PTM)、叠氮基甲基、氰基甲基、2,2-二氣-1，1-二氟乙 基、2_氣乙基、溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲酿甲基、4_溴苯曱醯甲基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯曱基、 2,6-二甲基苯甲基、4_曱氧基苯甲基（μρμ-ΟΑγ)、鄰硝基 苯曱基、2,6-二氣笨曱基、3,4_二氣苯曱基、4_(二曱基胺 基）叛基苯甲基、4-甲基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-»比咬甲基、七氟-對曱苯基、四氟_4_吡啶基、三曱 基石夕烧基（TMS)、第三丁基二曱基矽烷基（TbdmS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDps)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 醋保護基可包括乙醯氧基（〇Ac)、甲酸芳酯、乙酸芳 醋、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_苐甲酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸醋保護基可包括碳酸芳酯甲酯、碳酸丨_金剛烷酯 (Adoc_OAr)、碳酸第三丁醋（BOC-OAr)、胺基甲酸第三丁 酯（Boc)、碳酸4-曱基亞磺醯基苯曱酯（Msz-OAr)、碳酸 2,4-二甲基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酯、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯。 磺酸酯保護基可包括甲烷磺酸芳酯、曱笨磺酸芳酯及2_ 曱醯基苯磺酸芳酯》 保護某些胺基及羥基可改良式（VI)化合物之溶解度。舉 例而言’式（VI)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度並增 162380.doc •66· 201241005 加產物分離產量。 式（VI)化合物可藉由如下製備：使式（V)化合物磷酸化

I R1 (V)

R、八N

Ri 以製備式（VI)化合物： T T T 厂 (VI) 0 R, OR, I ,0R1

或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中各尺丨獨立地為Η或如 上文所定義之保護基。 詳言之，式（VI)化合物可藉由使式（V)化合物與任何適當 磷酸化劑反應以形成式（VI)化合物來製備。適合之磷酸化 試劑及條件可容易地由一般技術者確定。舉例而言，式 (VI)化合物可藉由用P(V)磷酸化劑處理式（V)化合物來達 成。適合之P(V)磷酸化劑包括（但不限於）P0C13、h3po4、 PO(OBn)xCl3-x、C13CCH20P(0)C12、PO(OCH3)xC13-x、 PO(OCH3)Cl2 、 PO(OCH3)xC13-x 、 PO(OCH3)Cl2 及 (Bn0)2P(0)0P(0)(0Bn)2。在一些實施例中，P(V)磷酸化 162380.doc -67- 201241005 劑為P0C13。 在一個實施例中，磷酸化反應係藉由在周圍溫度下用 POCl3處理式（V)化合物以得到式（VI)化合物來進行。在另 一實施例中，式（VI)化合物係藉由在60°c下用P0C13處理 式（V)化合物來形成。 磷酸化反應亦可涉及用P(III)亞磷酸化劑處理式（V)化合 物以形成亞磷酸酯中間物。適合之Ρ(πΐ)亞磷酸化劑包括 例如 P(0CH2CH2CN)2C1 ; P(OCH2CH2CN)(NPr2-i)Cl ;及氰 基乙基-0-P[N(i-Pr)2)]2。當對於磷酸化使用P(III)亞磷酸化 劑時，可使用後續氧化得到相應磷酸酯。當對於合成式 (VI)化合物使用P(III)試劑時，由於用於磷酸化之鹼性環 境，故可使用Boc或Cbz基團保護式（IV)化合物之N-5的

Ri 0 應瞭解，式（VI)結構之異構形式可調節式（I)合成中之連 續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此步 驟中分離，或者式（VI)化合物之異構混合物可進入合成之 稍後階段且在合成之稍後階段分離。 在一些實施例中，式（VI)化合物包括異構體：

如上文所示，式（VI)化合物亦可包括互變異構結構。 162380.doc • 68 - 201241005 ORi

式（VII)化合物： 在另一實施例中，製備式（VII)化合物：

I (vn) 、n rr

I

Ri 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各心獨立地為H或 保護基。舉例而言，式（VII)化合物包括化合物（VII-A): Ο h2n"

OH / P=0 I ,0 (VII-A) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中1^為11或保護基。式（VII) 化合物亦包括例如化合物： 162380.doc

OH 'p=o 8-胺基-2,12,12-三羥基-10-側氧基 4,403,6,9,10,12,12a-八氫-[1，3,2]二氧蛾雜環己烷幷[4·，5Ά6]哌喃幷[3,2-g]蝶咬-ll(llaH)-曱酸(9H-葬-9-基)甲酯2-氧化物 -69- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，式（VII)化合 物包括化合物（VII-B):

或其醫藥學上可接受之鹽。舉例而言，式（VII)化合物可包 括以下一或多者：

Boc Boc

Boc Boc 或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，一或多種上 述化合物可由熟習此項技術者藉由各種方法分離，包括高 162380.doc • 70- 201241005 效液相層析（HPLCK「•姐啼灿机

Improved Compound Specific Method 〇ptimization Δ Κ.Έ

Blom等人，/. Cow6z.· C/zew. ό(6) (2004)，該文獻以全文引 用的方式併入本文中）及正相二氧化矽層析。 如所指示，式（VII)結構之某些胺基及/或羥基可經心保 護基保護。出於此目的，1^可包括由熟習化學技術者選擇 的任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之 範疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基甲酸酯、醯胺、 烷基或#·芳基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實 例可包括醚、酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。R1保護基可相 同或不同。 詳言之’胺基曱酸酯保護基可包括例如胺基甲酸9-苐基 甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（B〇c)、胺基曱酸羧基苯 甲酯（cbz)、胺基曱酸甲酯、胺基甲酸乙酯、胺基甲酸9_(2-磺基）第基甲酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）苐基曱酯、胺基甲 酸17-四苯并[a，c，g，i]第基曱酯（Tbfmoc)、胺基曱酸2-氣-3-茚基曱酯（Climoc)、胺基甲酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，1〇-四氳噻咄基）]曱酯（〇80-1'111〇(〇、胺基甲酸 1，1-二側氧基苯并[b]噻吩-2-基甲酯（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基曱酸2-三甲基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基甲酸2-苯乙酯（hZ)、胺基曱酸1，1-二曱基-2-鹵乙酯、胺基曱酸1，1-二甲基-2,2-二溴乙酯（DB-i-boc)、胺 基甲酸1，1-二甲基-2,2,2-三氯乙酯（1^8〇〇、胺基曱酸1-甲 基-1-(4-聯苯基）乙酯（Bpoc)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 162380.doc -71 - 201241005 苯基）·1-曱基乙酯（ί-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1，1-二甲基乙酯、胺基甲酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基曱酸2-(N，N-二環己基曱酿胺基） 乙酯、胺基甲酸1-金剛烷酯（Ι-Adoc)、胺基曱酸乙烯酯 (Voc)、胺基甲酸1-異丙基烯丙酯（Ipaoc)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基甲酸3-(3'吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基曱酸8-喹啉酯、胺基曱酸烷基二硫基酯、胺基曱酸對曱 氧基苯甲酯（Moz)、胺基甲酸對硝基苯甲酯（Pnz)、胺基曱 酸對溴苯甲酯、胺基曱酸對氣苯曱酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯甲酯、胺基甲酸4-曱基亞磺醯基苯曱酯（Msz)、胺基甲 酸二苯基曱酯、胺基曱酸2-曱硫基乙酯、胺基曱酸2-甲基 磺醯基乙酯、胺基曱酸2-(對甲苯磺醯基）乙酯、胺基曱酸 [2-(1，3-二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基曱酸4-甲硫基苯酯 (Mtpc)、胺基甲酸2,4·二曱硫基苯酯（Bmpc)、胺基曱酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸.1,1-二甲基-2-氰基乙酯、胺基 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基曱酸間氣-對醯氧基苯曱酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基係選自胺基甲酸9-苐基甲酯 (Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)及胺基甲酸叛基苯甲酯 (cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3 -苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡啶基甲醢胺、苯甲醯 胺、對苯基苯曱醯胺、2-甲基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 162380.doc • 72· 201241005 (w-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括甲基、曱氧基曱基（MOM)、苯甲氧基甲 基（BOM) '曱氧基乙氧基甲基（MEM)、2-(三甲基矽烷基） 乙氧基甲基（SEM)、曱硫基甲基（MTM)、苯基硫基甲基 (PTM)、疊氮基曱基、氰基甲基、2,2-二氣-1，1-二氟乙 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯曱醯曱基、4-溴苯甲醯甲基、環丙基曱基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二曱基苯甲基、4-甲氧基苯曱基（MPM-OAr)、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氣苯甲基、3,4-二氣苯曱基、4-(二甲基胺 基）羰基苯曱基、4-曱基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-吡啶甲基、七氟-對甲苯基、四氟-4-吡啶基、三曱 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙醯氧基、甲酸芳酯、乙酸芳酯、乙醯 丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9-苐甲酸芳酯。 碳酸酯保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸1 -金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（BOC-OAr)、胺基曱酸第三丁 酯（Boc)、碳酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz-OAr)、碳酸 2,4-二曱基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酯、碳酸.芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯曱酯及碳酸芳酯。 磺酸酯保護基可包括甲烷磺酸芳酯、曱苯磺酸芳酯及2-甲醯基苯磺酸芳酯。 162380.doc •73- 201241005 保護某些胺基及羥基可改良式（VII)化合物之溶解度。舉 例而言，式（VII)化合物之乙醯基衍生物的製備可改良溶解 度並增加產物分離產量。 式（VII)化合物可藉由如下製備：使式（VI)化合物氧化

0

R1\ J

N

、人N

I I

Ri Ri 以製備式（VII)化合物：

(VII) Ri R1 其中： 各心獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 在此合成中，式（VII)化合物可藉由使式（VI)化合物與任 何適當氧化劑反應以選擇性形成式（VII)之二醇來製備。適 合之氧化劑及條件可容易地由一般技術者確定。舉例而 言，式（VII)化合物可在用釕化合物（諸如Ru04-/NM0)處理 式（VI)化合物後形成。亦可使用其他氧化劑，諸如戴斯-馬 丁試劑、DMSO/三氟甲磺酸酐、TFAA/DMSO、PDC、過 氧化氫、無機過氧化物、确酸、硕酸鹽、亞氣酸鹽、氣酸 162380.doc -74- 201241005 鹽、高氣酸鹽、次氣酸鹽、過氧化物、碘、臭氧、氧化亞 氮、氧化銀、高錳酸鹽、六價鉻化合物、鉻酸、二鉻酸、 三氧化鉻、氯鉻酸吡錠、過硫酸、亞砜、硫酸、托倫斯試 劑（Tollens' reagent)、2,2’-二 °比咬基二硫化物（DPS)及四氧 化锇。在一個實施例中，應用使得化合物（VI)之吡嗪環不 經氧化之氧化條件。在一些實施例中，氧化劑係選自 Ru04_/NMO、戴斯-馬丁試劑、DMSO/三氟甲磺酸酐及 PDC。 舉例而言，氧化反應可藉由在周圍溫度下用Ru047NMO 處理式（VI)化合物以得到式（VII)化合物來進行。在另一實 施例中，式（VII)化合物係藉由在20-60°C之溫度下或在 20、25、30、35、40、45、50 或 55°C 下用 Ru047NMO處理 式（VI)化合物來形成。 應瞭解，式（VII)結構之異構形式可調節式（I)合成中之 連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此 步驟中分離，或者式（VII)化合物之異構混合物可進入合成 之稍後階段且在合成之稍後階段分離。 在一些實施例中，式（VII)化合物包括異構體：

或其醫藥學上可接受之鹽。如上文所示，式（VII)化合物亦 162380.doc -75- 201241005 可包括互變異構結構：

ο ,ρ-ο 或其醫藥學上可接受之鹽。 式⑴化合物： 在一些實施例中，提供式（I)化合物之製備：

0 HO OH

及其醫藥學上可接受之鹽及水合物。式（I)化合物亦包括互 變異構結構：

OH HO OH

或其醫藥學上可接受之鹽。 式（I)化合物之合成較佳進行以達成所需立體化學且避免 在化學合成期間由哌喃開環所引起之氧化。 式（I)化合物可例如藉由如下製備：脫除式（VII)化合物 之保護基 162380.doc •76· 201241005

其中各尺丨獨立地為Η或如上文所定義之保護基，以製備式 (I)化合物。 在此合成中，該脫除保護基可涉及例如式（VII)化合物上 某些胺基及羥基保護基的連續脫除或一鋼法脫除以得到式 (I)化合物。適合於脫除式（VII)化合物之保護基的試劑及條 件可容易地由一般技術者確定。舉例而言，化合物⑴可在 使得羥基保護基（諸如乙酸酯、亞異丙基及苯亞曱基保護 基）自式（VII)結構移除之條件下處理式（VII)化合物後形 成。乙Ϊλ S曰基可例如在曾普倫條件（Zempidn condition) 下，使用催化性NaOMe作為驗，在甲醇中裂解。苯亞甲基 及亞異丙基可藉由氫化或使用如r.M. Hann等人，《/· C/zew· 5W.，72，561 (1950)所報導之酸性水解來裂解。在 另一實例中’可脫除保護基以使得諸如胺基甲酸9-苐基甲 酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（B〇c)及胺基甲酸羧基苯曱 酯（cbz)保護基之胺基保護基自式（VII)化合物裂解。胺基 甲酸9-苐基曱酯（Fmoc)可在溫和條件下使用胺鹼（例如哌 咬）移除以得到游離胺及二苯并芙，如E. Atherton等人， 「 The Fluor enylmethoxy carbonyl Amino Protecting

Grow;?，」The Peptides，S. Udenfriend 及 J. Meienhofer， Academic Press，New York, 1987，第 1頁所述。胺基曱酸 162380.doc -77- 201241005 第三丁醋（Boc)可如 G.L. Stahl 等人，J. C/zew·, 43, 2285 (1978)所報導在酸性條件（例如3 M HC1之EtOAc溶液） 下移除。可使用氫化裂解胺基甲酸羧基苯曱酯（cbz)保護 基，如 J. Meienhofer 等人，reira/zec/ron Le"·，29，2983 (1988)所述。 為防止在反應期間式（I)氧化，脫除保護基可在缺氧條件 下進行。脫除保護基亦可在周圍溫度下或在約20-60°C (例 如25、30、35、40、45、50或55°C )之溫度下進行。 式（I)化合物可以醫藥學上可接受之鹽形式分離。舉例而 言，式（I)化合物可在HC1存在下結晶以形成該化合物之鹽 酸鹽形式。式（I)化合物亦可例如藉由用NaOH處理從而以 鈉鹽形式沈澱來分離。式（I)化合物在某些反應及儲存條件 下不穩定。在一些實施例中，包含式（I)化合物之最終溶液 可藉由此項技術中已知之方法酸化。舉例而言，若式⑴化 合物儲存於溶液中，則其可儲存於酸性溶液中。 或者，式（I)化合物可例如藉由如下製備： 使式（II-A)化合物：

H2N N NH2 (Π-Α) 與式（III-A)化合物在肼存在下反應：

162380.doc -78 - 201241005 產生式（IV-A)化合物： h2n

HN

OH

OH (IV-A) 選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-A)化合物：

其中： R!為如上文所定義之保護基； 使該式（V-A)化合物磷酸化以製備式（VI-A)化合物：

使該式（VI-A)化合物氧化以製備式（VII-A)化合物：

脫除該式（VII-A)化合物之保護基以製備該式⑴化合物。 162380.doc -79· 201241005 舉例而言，式（I)化合物可如流程3中所示製備。 流程3.

在另一實施例中，式（I)化合物係藉由如下製備： 使式（Π-A)化合物：

與式（III-A)化合物在肼存在下反應：

產生式（IV-A)化合物： 162380.doc -80 - 201241005

(IV-A) 選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-B)化合物：

O R, OH

Ri 其中： 各1^獨立地為如上文所定義之保護基； 使該式（V-B)化合物磷酸化以製備式（VI-B)化合物：

Ο R! OH

Ri 其中各R!為如上文所定義之保護基； 使該式（VI-B)化合物氧化以製備式（VII-B)化合物：

162380.doc -81 - 201241005 脫除該式（VII-B)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。舉 例而言，式（I)化合物可如流程4中所示製備。 流程4.

或者，式（I)化合物可如流程5中所示形成。式（II)之二胺 基嘧啶酮化合物可與式（VIII)之磷酸化己醣偶合，得到式 (IX)化合物。可保護哌嗪環氮原子，得到式（X)化合物，可 使其氧化，得到式（XI)之二醇。接著可使用適當條件脫除 式（XI)之二醇的保護基並使其轉化為式（I)化合物。 流程5

I62380.doc • 82. 201241005

在此實施例中，可在合成開始時引入磷酸酯以避免在合 成之後續步驟期間哌喃并異構體與呋喃并異構體之間的不 良平衡。舉例而言，式（I)化合物可如流程6中所示製備。 流程6.

式I化合物亦可如流程7中所示形成。式（II)之二胺基嘧 啶酮化合物可與式（III)化合物偶合，得到式（IV)之哌嗪衍 生物。可在標準條件下保護式（IV)化合物之哌嗪環氮原 子，得到式（V)之衍生物。可使式（V)結構氧化，得到式 (XII)化合物。使式（XII)化合物磷酸化，得到式（VII)化合 162380.doc • 83 - 201241005 物。全面脫除式（VII)化合物之保護基可得到式（I)化合物 流程7

(例如使用肼） V R，、人

保護哌嗪環

磷酸化

脫除保護基 ΗιΝ

CD 舉例而言，式（I)化合物可如流程8中所示製備

HO OH i iyj 〇 ^ ㈣州： HSSI Τί' I 〇 HCI，Et〇H*H20

ο

在一替代性實施例中，式（I)化合物可如流程9中所示形 162380.doc 84- 201241005 成。式（II)之二胺基嘧啶酮化合物可與式（XVIII)之2-羰基 己醣構建嵌段縮合，產生具有良好區域選擇性的式（XX)之 亞胺。由路易斯酸（Lewis acid，LA)(例如TMSOTf)進一步 活化變旋異構位置上之官能基將得到式（XXI)之環化化合 物。新產生之醣苷鍵可處於赤道位置。使式（XXI)化合物 氫化可產生式（IV)化合物。選擇性保護式（IV)化合物，得 到式（V)化合物，使其氧化，得到式（XII)化合物。接著可 如本文所述處理式（XII)化合物，得到式（I)化合物。 流程9

舉例而言，式（I)化合物可如流程10中所示製備。 流程10.

162380.doc -85 - 201241005

中，用己醣構建嵌段使式（II)之二胺基嘧啶酮環化可在鹼 存在下進行。用路易斯酸（LA)活化得到環狀產物，可脫除 其保護基，形成未經保護之酮。可如本文所述使該酮磷酸 化及/或全面脫除保護基，產生式（I)化合物或式（XIII)化合 物。 流程11

舉例而言，式（I)化合物可如流程12中所示製備。 流程12.

162380.doc • 86 · 201241005 在一替代性實施例中，式（I)化合物可如流程13中所示由 化合物Z之環化反應製備。 流程13

或者，式（I)化合物可如流程14中所示製備。式（II)之二 胺基嘧啶酮化合物可與式（XXII)化合物偶合，得到式（IV) 之哌嗪衍生物。可在標準條件下保護式（IV)化合物之哌嗪 環氮原子，得到式（V)之衍生物。在一些實施例中，式（V) 化合物可經歷選擇性脫除保護基，隨後磷酸化。舉例而 言，可脫除一或多個羥基部分之保護基，隨後進行磷酸 化。使式（V)化合物磷酸化，得到式（VI)化合物。可使式 (VI)結構氧化，得到式（VII)化合物。全面脫除式（VII)化合 物之保護基可得到式（I)化合物。 流程14

162380.doc 87 - 201241005

舉例而言，式（i)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可藉由 如下製備：使式（Π-A)化合物 h2n

nh2

(U-A) 與式（XXII-A)化合物在肼存在下反應：

OH HO

產生式（IV-A)化合物： h2n

(IV-A) 可選擇性保護式（IV-A)化合物以製備式（V-C)化合物：

(v-c) 162380.doc -88 - 201241005 其中各1^為11或如本文所述之保護基。接著可使（ν-c)化合 物磷酸化，得到式（VI-C)化合物：

接著可使式（VI-C)化合物氧化以製備式（VII-C)化合物：

最後，脫除式（VII-C)化合物之保護基以製備式（I)化合物。 或者，式（I)化合物可如流程15中所示製備。式（XXIII) 化合物可經歷環氧化，得到式（XXIV)化合物。式（XXIV) 化合物可與式（II)化合物偶合以製備式（XXV)化合物。式 (XXV)化合物可經歷閉環反應，得到式（IV)之哌嗪衍生 物。可在標準條件下保護式（IV)化合物之哌嗪環氮原子， 得到式（V)之衍生物。使式（V)化合物磷酸化，得到式（VI) 化合物。可使式（VI)結構氧化，得到式（VII)化合物。全面 脫除式（VII)化合物之保護基可得到式（I)化合物。 162380.doc -89- 201241005

.ORi 流程15

或保熳基 或離去基

舉例而言，式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可藉由 如下製備：使式（XXIII-A)化合物反應 OR^ HO、入 /OR! (ΧΧΠΙ-Α) Ο 0〆 其中各心獨立地為Η或保護基且R4為Η或離去基，產生式 (XXIV)化合物： 0、

CT '0 OR! ORi (XXIV) 使式（XXIV)化合物與式（II-A)化合物反應： 162380.doc -90- 201241005 ο

(ΙΙ-Α) ΗΝ ΝΗ2

產生式（XXV-A)化合物：

催化該式（XXV-Α)化合物之環形成，產生式（IV-D)化合 物： 0R1

OH

(IV-D)

N H2N

選擇性保護該式（IV-D)化合物以製備式（V-D)化合物：

其中各1^為11或保護基。 使該式（V-D)化合物磷酸化以製備式（VI-D)化合物： 162380.doc -91- 201241005

Ν-R1 ΗΝ

使該式（VI-D)化合物氧化以製備式（VII-D)化合物：

ί ο ,ρ-ο

H (VI 最後，脫除該式（VII-D)化合物之保護基以製備式（I)化合 物。 式ραι)化合物： 在另一實施例中，製備式（XII)化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各Ri獨立地為Η 或保護基。 如所指示，式（XII)結構之某些胺基及/或羥基可經心保 護基保護。出於此目的，Ri可包括由熟習化學技術者選擇 的任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之 I62380.doc -92- 201241005 範疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基曱酸酯、醯胺、 烷基或ΛΓ-芳基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實 例可包括醚、酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。t保護基可相 同或不同。 詳言之，胺基甲酸酯保護基可包括例如胺基甲酸9-苐基 甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)、胺基曱酸羧基苯 甲酯（cbz)、胺基甲酸曱酯、胺基曱酸乙酯、胺基曱酸9-(2-磺基）薙基甲酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）苐基甲酯、胺基曱 酸17-四苯并[a，c，g，i]苐基曱酯（Tbfmoc)、胺基甲酸2-氯-3-茚基曱酯（Climoc)、胺基甲酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，10-四氫噻咄基）]曱酯（DBD-Tmoc)、胺基甲酸 1，1-二側氧基苯并[b]噻吩-2-基甲酯（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基曱酸2·三曱基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基曱酸2-苯乙酯（hZ)、胺基甲酸1,1-二曱基-2-鹵乙酯、胺基甲酸1,1-二甲基-2,2-二溴乙酯（DB-i-boc)、胺 基甲酸1，1-二曱基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基甲酸1-曱 基-1-(4-聯笨基）乙酯（Bpoc)、胺基甲酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-甲基乙酯（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊醯基胺 基）-1，1-二曱基乙酯、胺基曱酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基曱酸2-(N，N-二環己基曱醯胺基） 乙酯、胺基甲酸1-金剛烷酯（Ι-Adoc)、胺基曱酸乙烯酯 (Voc)、胺基曱酸1-異丙基烯丙酯（Ipaoc)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基曱酸3-(3’吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基甲酸8-喹啉酯、胺基曱酸烷基二硫基酯、胺基曱酸對曱 氧基苯曱酯（Moz)、胺基甲酸對硝基苯甲酯（pnz)、胺基甲 162380.doc -93- 201241005 酸對溴苯甲酯、胺基甲酸對氣苯甲酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯甲酯、胺基曱酸4-甲基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基曱 酸二苯基甲酯、胺基曱酸2-甲硫基乙酯、胺基甲酸2-曱基 磺醯基乙酯、胺基甲酸2-(對曱苯磺醯基）乙酯、胺基甲酸 [2-(1,3-二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基甲酸4-甲硫基苯酯 (]^卩£〇、胺基曱酸2,4-二曱硫基苯酯（811^(〇、胺基甲酸2- : 膦醯乙酯（Peoc)、胺基曱酸1,1-二曱基-2-氰基乙酯、胺基 . 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣-對醯氧基苯甲酯。在一些實 施例中’胺基甲酸酯保護基係選自胺基甲酸9-第基曱酯 (Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（B〇c)及胺基甲酸羧基苯甲酯 (cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡咬基甲醯胺、苯曱醯 胺、對苯基苯甲醯胺、2-甲基_2_(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醢胺、乙醯乙醯胺、3·(對羥基苯基）丙醯胺及 (V-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括曱基、甲氧基曱基（MOM)、苯甲氧基曱 基（BOM)、甲氧基乙氧基曱基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 乙氧基甲基（SEM)、曱硫基曱基（MTM)、苯基硫基甲基 ·. (PTM)、疊氮基甲基、氰基甲基、22_二氯_u_二氟乙 . 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（ΊΉρ)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯甲基、4-溴苯甲醯甲基、環丙基曱基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二甲基苯甲基、4-甲氧基苯甲基（μρμ-ΟΑγ)、鄰硝基 162380.doc •94· 201241005 苯曱基、2,6-二氯苯曱基、3,4-二氯苯曱基、4-(二曱基胺 基）羰基苯曱基、4-曱基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基曱 基、4-吡啶甲基、七氟-對曱苯基、四氟-4-"比咬基、三甲 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙醯氧基（OAc)、甲酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9-苐曱酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸酯保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸1·金剛烷龍 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（BOC-OAr)、胺基曱酸第三丁 酯（Boc)、碳酸4-甲基亞磺醯基苯甲酯（Msz_〇Ar)、碳酸 2,4-二曱基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酯、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯曱酯及碳酸芳酯。 磺酸酯保護基可包括甲烷磺酸芳酯、曱苯磺酸芳酯及2_ 曱醢基苯績酸芳醋。 保護某些胺基及羥基可改良式（χΠ)化合物之溶解度。舉 例而言，式（XII)化合物之乙醯基衍生物的製備可改良溶解 度並增加產物分離產量。 式（XII)化合物可藉由如下製備：使式（v)化合物氧化

162380.doc •95- (XII) (XII)201241005 以製備式（XII)化合物：

其中： 各1獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 在此合成中，式（XII)化合物可藉由使式（V)化合物與任 何適當氧化劑反應以選擇性形成式（ΧΠ)之二醇來製備。適 合之氧化劑及條件可容易地由一般技術者確定。舉例而 言，式（XII)化合物可在用釕化合物（諸如Ru047NM0)處理 式（V)化合物後形成。亦可使用其他氧化劑，諸如戴斯-馬 丁試劑、DMSO/三氟曱磺酸酐、TFAA/DMSO、PDC、過 氧化氫、無機過氧化物、琐酸、确酸鹽、亞氣酸鹽、氯酸 鹽、高氯酸鹽、次氯酸鹽、過氧化物、碘、臭氧、氧化亞 氛、氧化銀、高锰酸鹽、六價絡化合物、鉻酸、二絡酸、 三氧化絡、氣鉻酸°比鍵、過硫酸、亞颯、硫酸、托倫斯試 劑、2,2'-二吡啶基二硫化物（DPS)及四氧化锇。在一個實 施例中，應用使得化合物（XII)之吡嗪環不經氧化之氧化條 件。在一些實施例中，氧化劑係選自ru〇47NMO、戴斯-馬丁試劑、DMSO/三氟甲磺酸酐、TFAA/DMSO及PDC。 舉例而言，氧化反應可藉由在周圍溫度下用Ru04_/NMO 處理式（V)化合物以得到式（XII)化合物來進行。在另一實 162380.doc •96· 201241005 施例中，式（XII)化合物係藉由在約20-60°C之溫度下（例如 在約 20、25、30、35、40、45、50 或 55°C 下）用 Ru04·/ NMO處理式（V)化合物來形成。 應瞭解，式（XII)結構之異構形式可調節式（I)合成中之 連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此 步驟中分離，或者式（XII)化合物之異構混合物可進入合成 之稍後階段且在合成之稍後階段分離。 式(XIII)化合物： 在另一實施例中，製備式（XIII)化合物： Ο Ο

I H Η 丨 H OH HN p=〇 丄、 n (xni) ‘· II — — Η Η Η ' 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。式（XIII)化合物亦包 括互變異構結構：

ο Ή II 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 式（I)化合物為式（XIII)化合物與水之反應產物。鑒於此 兩種產物之間產生的平衡，在某些pH值及條件下水性溶液 中很可能存在兩種物質。熟習此項技術者能夠控制合成條 件（例如在水不存在下操作）以分離呈純化形式之式（XIII)之 162380.doc •97· 201241005 酮物質。 式（XIII)化合物可藉由脫除式（XIV)化合物之保護基來製 備：

其中： 各尺丨獨立地為Η或如上文所定義之保護基，以製備式（XIII) 化合物。 在此合成中’該脫除保護基可涉及例如式（XIV)化合物 上之某些胺基及羥基保護基的連續脫除或一鍋法脫除以得 到式（XIII)化合物*適合於脫除式（XIV)化合物之保護基的 試劑及條件可容易地由一般技術者確定。舉例而言，化合 物（XIII)可在使得羥基保護基（諸如乙酸酯、亞異丙基及苯 亞曱基保護基）自式（XIV)移除之條件下處理式（XIV)化合 物後形成。乙酸酯基可例如在曾普倫條件下，使用催化性 NaOMe作為鹼’在甲醇中裂解》苯亞甲基及亞異丙基可藉 由氫化或使用如 R.M. Hann等人，·/. Jm. C/zem. iSoc.，72, 561 (1950)所報導之酸性水解來裂解。在另一實例中，可 脫除保護基以使得諸如胺基甲酸9-第基甲酯（Fmoc)、胺 基曱酸第三丁酯（Boc)及胺基曱酸羧基苯曱酯（cbz)保護 基之胺基保護基自式（XIV)化合物裂解。胺基甲酸9_第基 甲酷（Fmoc)可在溫和條件下使用胺鹼（例如哌啶）移除以 162380.doc • 98 · 201241005 得到游離胺及二苯并芙’如E. Atherton等人’ The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Gr〇uP^ J The

Peptides, S. Udenfriend及 J. Meienhofer，Academic Press’

New York, 1987，第1頁所述。胺基甲酸第三丁酯（B〇C)可 如 G.L. Stahl等人，乂 0发.C/zem·, 43, 2285 (1978)所報導在 酸性條件（例如3 M HC1之EtOAc溶液）下移除。可使用氣化 來裂解胺基甲酸羧基苯甲酯（cbz)保護基，如J. Meienh()fe 等人，Zeii.，29，2983 (1988)所述。 #也*·氧 為防止在反應期間式（XIII)氧化，脫除保護基可在 〇/-» 條件下進行。脫除保護基亦可在周圍溫度下或在2(^6 或25、30、35、40、45、50或55°C之溫度下進行。 或者，式（XIII)化合物可如流程16中所示形成。式（11)^ ，# 二胺基嘧啶酮化合物可與式（VIII)之磷酸化己醣偶合’ 到式（IX)化合物。可保護哌嗪環氮原子，得到式13 物，可使其氧化，得到式（XV)之二醇。接著可使用適當條# 脫除式（XV)之二醇的保護基並使其轉化為式（XIII)化合物° 流程16

•99· 162380.doc 201241005

在另一實施例中，式（XIII)化合物可如流程17中所示形 成。舉例而言，式（II)之二胺基嘧啶酮化合物可與經保護 或未經保護之式（III)之己醣反應，得到式（IV)化合物。接 著可使用標準條件選擇性保護式（IV)之哌嗪環的環氮原 子，得到式（V)之衍生物。使式（V)化合物磷酸化可得到式 (VI)之磷酸酯中間物。式（VI)之磷酸酯可在適當氧化條件 下轉化為式（XIV)之酮。最後，可脫除式（XIV)化合物之保 護基，得到式（XIII)化合物。 流程17.

或者，式（XIII)化合物可如流程18中所示製備。式（II)之 二胺基嘧啶酮化合物可與式（XXII)化合物偶合，得到式 162380.doc -100- 201241005 (IV)之哌嗪衍生物。可在標準條件下保護式（IV)化合物之 派°秦環氮原子，得到式（V)之衍生物。在一些實施例中， 式（V)化合物可經歷選擇性脫除保護基，隨後磷酸化。舉 例而言，可脫除一或多個羥基部分之保護基，隨後進行磷 酸化。使式（V)化合物磷酸化，得到式（VI)化合物。可使式 (VI)結構氧化，得到式（XIV)化合物。全面脫除式（XIV)化 合物之保護基可得到式（XIII)化合物。 流程18

或者，式（I)化合物可如流程19中所示製備。式（XXIII) 化合物可經歷環氧化，得到式（XXIV)化合物。式（XXIV) 化合物可與式（II)化合物偶合以製備式（XXV)化合物。式 (XXV)化合物可經歷閉環反應，得到式（IV)之哌嗪衍生 物。可在標準條件下保護式（IV)化合物之哌嗪環氮原子， 得到式（V)之衍生物。使式（V)化合物磷酸化，得到式（VI) 化合物。可使式（VI)結構氧化，得到式（XIV)化合物。全面 162380.doc -101 - 201241005 脫除式（XIV)化合物之保護基可得到式（I)化合物。 流程19

式（XIII)化合物可以醫藥學上可接受之鹽形式分離。舉例 而言，式（XIII)化合物可在HC1存在下結晶以形成該化合物 之鹽酸鹽形式。式（XIII)化合物亦可例如藉由用NaOH處理 從而以鈉鹽形式沈澱來分離。式（XIII)化合物在某些反應 及儲存條件下不穩定。在一些實施例中，包含式（XIII)化 合物之最終溶液可藉由此項技術中已知之方法酸化。舉例 而言，若式（XIII)化合物儲存於溶液中，則其可儲存於酸 性溶液中。 式pav)化合物 在另一實施例中，製備式（XIV)化合物：

162380.doc -102- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各心獨立地為Η 或保護基。. 如所指示，式（XIV)結構之某些胺基及/或羥基可經心保 護基保護。出於此目的，R!可包括由熟習化學技術者選擇 的任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之 範疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基甲酸酯、醯胺、 烷基或芳基衍生之保護基。羥基保護基之非限制性實 例可包括醚、酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。Rl保護基可相 同或不同。 詳言之，胺基曱酸酯保護基可包括例如胺基曱酸9_苐基 曱酯（Fmoc)、胺基曱酸第三丁酯（B〇c)、胺基甲酸羧基苯 曱酯（cbz)、胺基甲酸曱酯、胺基甲酸乙酯、胺基甲酸9_(2-磺基）薙基曱酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）苐基曱酯、胺基曱 酸17-四苯并[a，c，g，i]荞基曱酯（Tbfmoc)、胺基甲酸2_氣_3_ 茚基甲酯（Climoc)、胺基甲酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，10-四氫噻山基）]曱酯（DBD-Tmoc)、胺基甲酸 1，1-二側氧基苯并[b]噻吩-2-基甲酯（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基甲酸2-三曱基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基曱酸2-苯乙酯（hZ)、胺基曱酸1,1-二曱基-2-鹵乙酯、胺基甲酸1，1-二甲基-2,2-二溴乙酯（08-卜1>〇(；)、胺 基甲酸1，1-二甲基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基甲酸1-甲 基-1-(4-聯苯基）乙醋（Bpoc)、胺基曱酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-曱基乙醋（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊酿基胺 基）-1,1-二甲基乙酯、胺基甲酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]_卜 162380.doc •103- 201241005 苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基曱酸2-(n，N-二環己基甲醯胺基） 乙酯、胺基甲酸1-金剛烷酯（i—Adoc)、胺基甲酸乙烯酯 (Voc)、胺基曱酸1-異丙基烯丙酯（Ipa〇c)、胺基甲酸4-硝基 桂皮酯（Noc)、胺基甲酸3-(3,吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基甲酸8-喹啉酯、胺基甲酸烷基二硫基酯、胺基曱酸對曱 氧基苯曱酯（Moz)、胺基曱酸對硝基苯甲酯（Pnz)、胺基曱 酸對溴苯甲酯、胺基甲酸對氣苯甲酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯甲酯、胺基甲酸4-甲基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基甲 酸二苯基甲酯、胺基甲酸2-曱硫基乙酯、胺基甲酸2-曱基 磺醯基乙酯、胺基甲酸2-(對甲苯磺醯基）乙酯、胺基曱酸 [2-(1，3-二噻烷基）]甲酯（Dmoc)、胺基甲酸4-甲硫基苯酯 (Mtpc)、胺基曱酸2,4-二曱硫基苯酯（Bmpc)、胺基甲酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸l，l-二甲基-2·氰基乙酯、胺基 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣-對醢氧基苯甲酯。詳言之， 可使用胺基甲酸9-苐基甲酯（Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯 (Boc)及胺基曱酸羧基苯甲酯（cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4-烯醯胺、°比啶醢胺、3-0比啶基甲醯胺、苯甲醯 胺、對苯基苯甲醯胺、2-甲基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3-(對羥基苯基）丙醯胺及 (V-二硫基苯甲氧基羰基胺基）乙醯胺。 醚保護基可包括甲基、甲氧基甲基（MOM)、苯曱氧基甲 基（BOM)、甲氧基乙氧基曱基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 162380.doc -104- 201241005 乙氧基甲基（SEM)、甲硫基曱基（ΜΤΜ)、苯基硫基曱基 (PTM)、疊氮基甲基、氰基甲基、2,2-二氣-1,1-二氟乙 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯甲基、4-溴苯曱醯甲基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6·二甲基苯甲基、4-甲氧基苯甲基（MPM-OAr)、鄰硝基 苯曱基、2，6-二氯笨曱基、3，4-二氣苯甲基、4-(二甲基胺 基）羰基苯曱基、4-曱基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-葱基曱 基、4-。比咬甲基、七氟-對甲笨基、四氟-4-。比咬基、三甲 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基》 酯保護基可包括乙醯氧基（OAc)、甲酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯曱酸芳酯及9-苐甲酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸酯保護基可包括碳酸芳酯甲酯、碳酸1-金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（BOC-OAr)、胺基曱酸第三丁 酯（Boc)、碳酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz-OAr)、碳酸 2,4-二曱基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酯、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯》 磺酸酯保護基可包括甲烷磺酸芳酯、甲苯磺酸芳酯及2-曱酿基笨確酸芳醋。 保護某些胺基及羥基可改良式（XIV)化合物之溶解度。 舉例而言，式（XIV)化合物之乙醯基衍生物的製備可改良 162380.doc -105- 201241005 溶解度並增加產物分離產量。 式（XIV)化合物可藉由如下製備：使式（VI)化合物氧化

Ri Ri 以製備式（XIV)化合物：

其中： 各1^獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 在此合成中，式（XIV)化合物可藉由使式（VI)化合物與 任何適當氧化劑反應以選擇性形成式（XIV)之酮來製備。 適合之氧化劑及條件可容易地由一般技術者確定。舉例而 言，化合物（XIV)可在用釕化合物（諸如Ru047NM0)處理式 (VI)化合物後形成。亦可使用其他氧化劑，諸如戴斯-馬丁 試劑、DMSO/三氟曱磺酸酐、TFAA/DMSO、PDC、過氧 化氫、無機過氧化物、破酸、硝酸鹽、亞氯酸鹽、氣酸 鹽、高氯酸鹽、次氯酸鹽、過氧化物、碘、臭氧、氧化亞 氮、氧化銀、高錳酸鹽、六價鉻化合物、鉻酸、二鉻酸、 三氧化鉻、氣鉻酸吡錠、過硫酸、亞砜、硫酸、托倫斯試 162380.doc -106· 201241005 劑、2,2'-二吡啶基二硫化物（DPS)及四氧化锇。在一個實 施例中，應用使得化合物（XIV)之吡嗪環不經氧化之氧化 條件。詳言之，可使用氧化劑Ru04_/NM0、戴斯-馬丁試 劑、DMSO/三氟曱磺酸酐及PDC。 舉例而言，氧化反應可藉由在周圍溫度下用Ru047NM0 處理式（VI)化合物以得到式（XIV)化合物來進行。在另一實 施例中，式（XIV)化合物係藉由在20-60°C之溫度下或在 20、25、30、35、40、45、50 或 55°C 下用 Ru047NM0處理 式（VI)化合物來形成。 應瞭解，式（XIV)結構之異構形式可調節式（XIII)合成中 之連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之 此步驟中分離，或者式（XIV)化合物之異構混合物可進入 合成之稍後階段且在合成之稍後階段分離。 在一個實施例中，式（XIV)化合物包括異構體：

式（XIV)化合物亦包括互變異構結構：

ORi 0 〇Ri P=0 (Xiv) N Ri

Ri Ri 162380.doc -107· 201241005 式（XXII)化合物 另一實施例係關於一種式（XXII)化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各R丨獨立地為Η 或保護基。 如所指示，式（XXII)化合物中之羥基可呈經保護或未經 保護之形式。舉例而言，呈未經保護之形式時，式（XXII) 化合物可包括化合物（ΧΧΙΙ-Α):

PhHNN, HO 6-(2-笨基亞肼基)己-1，2,3,4,5-五醇， 或其醫藥學上可接受之鹽。 式（XXII)結構之某些羥基可經R!保護基保護。出於此目 的，R!可包括由熟習化學技術者選擇的任何適合之羥基官 能基。舉例而言，羥基保護基之非限制性實例可包括醚、 酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。1^保護基可相同或不同。 醚保護基可包括甲基、曱氧基曱基（MOM)、苯曱氧基甲 基（BOM)、曱氧基乙氧基曱基（MEM)、2-(三曱基矽烷基） 乙氧基曱基（SEM)、甲硫基曱基（MTM)、苯基硫基曱基 162380.doc • 108 · 201241005 (PTM)、疊氮基甲基、氣基曱基、2,2-二氣-1，1-二說乙 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THP)、卜乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯甲基、4-溴苯甲醯甲基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯曱基、 2,6-二曱基苯甲基、4-甲氧基苯曱基（MPM_OAr)、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氯苯甲基、3,4-二氣苯甲基、4-(二曱基胺 基）羰基苯曱基、4-曱基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基曱 基、4-吡啶曱基、七氟-對甲苯基、四氟-4-吡啶基、三曱 基矽烷基（TMS)、第三丁基二曱基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙醯氧基（OAc)、曱酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醢丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯曱酸芳酯及9_第曱酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸酿保護基可包括.碳酸芳酿甲醋、碳酸1 _金剛燒g旨 (Adoc_OAr)、碳酸第三丁酯（B〇C-〇Ar)、胺基甲酸第三丁 S旨（Boc)、碳酸4-甲基亞磺醯基笨曱酯（Msz_〇Ar)、碳酸 2,4_二曱基戊-3-基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酯、碳酸芳酯乙稀酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯。 續酸S曰保護基可包括曱烧續酸芳醋、甲苯續酸芳醋及2_ 曱醯基苯項酸芳g旨。 在一些實施例中，兩個相鄰R〗基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、笨亞甲基縮醛、1>5_二氧螺[5 5]十一烷（亞環己 基縮醛）、6，10-二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2_異丁 162380.doc -109· 201241005 基-2-曱基-1，3-二噁烷部分。舉例而言，式（XXII)之己醣環 組分的4及5位之心基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞曱 基縮醛、1，5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己基縮醛）、6，10-二 氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2-異丁基-2-甲基-1，3-二噁 烷部分。 保護某些胺基及羥基可改良式（XXII)化合物之溶解度。 舉例而言，式（XXII)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度 並增加產物分離產量。 式（XXII)化合物可藉由已知方法（參見例如Goswami，S.; Adak，Α·Κ· Ze". (2005)，221-224)來製備或 商業購得。 應瞭解，式（XXII)結構之異構形式可控制式（I)合成中之 連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此 步驟中分離，或者式（XXII)之異構混合物可進入合成之稍 後階段且在合成之稍後階段分離。 在一些實施例中，式（XXII)化合物包括異構體：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 式(XXU1)化合物 另一實施例係關於一種式（XXIII)化合物： 162380.doc -110- 201241005

或保護基且尺4為Η或離去基。 式（XXIII)化合物中之羥基可呈經保護或未經 如所指示， 保護之形式。舉例而言，呈未經保護之形式時式（ΧΧΙ⑴ 化合物可包括化合物2-(烯丙基氧基）-6_(羥基甲基）四氫_ 2H-n底喃-3,4,5-三醇：

或其醫藥學上可接受之鹽。 式（XXIII)結構之某些羥基可經Rl保護基保護β出於此目 的，心可包括由熟習化學技術者選擇的任何適合之羥基官 能基。舉例而言，羥基保護基之非限制性實例可包括醚、 酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。1^保護基可相同或不同。 醚保護基可包括甲基、曱氧基甲基（mom)、苯曱氧基甲 基（BOM)、甲氧基乙氧基甲基（MEM)、2_(三甲基矽烷基） 乙氧基甲基（SEM)、甲硫基甲基（MTM)、苯基硫基甲基 162380.doc 201241005 (ΡΤΜ)、疊氮基甲基、氰基甲基、2,2-二氣-1，1-二氟乙 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THP)、1-乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯曱基、4-溴苯曱醯甲基、環丙基曱基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二甲基苯曱基、4-曱氧基苯甲基（]\^]^-0八1〇、鄰硝基 苯甲基、2,6-二氯苯曱基、3,4-二氣苯曱基、4-(二曱基胺 基）羰基苯甲基、4-曱基亞磺醢基苯甲基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-。比啶甲基、七氟-對甲苯基、四氟-4-吡啶基、三曱 基矽烷基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBDMS)、第三 丁基二笨基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 酯保護基可包括乙酿氧基（〇Ac)、曱酸芳酯、乙酸芳 酯、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_苐曱酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 破酸酯保護基可包括碳酸芳酯甲酯、碳酸金剛烷酯 (Adoc-OAr)、碳酸第三丁酯（B〇C_〇Ar)、胺基甲酸第三丁 醋（Boc)、碳酸4-甲基亞磺醢基苯甲酯（Msz_〇Ar) '碳酸 2,4-二曱基戊-3·基酯（Doc-OAr)、碳酸芳酯2,2,2-三氯乙 醋、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯甲酯及碳酸芳酯。 項酸醋保護基可包括甲烷磺酸芳酯、甲苯磺酸芳酯及2_ 甲醯基苯磺酸芳酯。 在一些實施例中’兩個相鄰Rl基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、笨亞甲基縮醛、丨，5_二氧螺[5 5]十一烷（亞環己 基縮醛）、6，1〇-二氧螺[45]癸烷（亞環戊基縮醛）或2異丁 Π2 162380.doc 201241005 基-2-甲基-1，3-二噁烷部分。舉例而言，式（XXIII)之己醣 環組分的4及5位之1基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞 甲基縮醛、1,5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己基縮醛）、6,10-二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2-異丁基-2-甲基-1,3-二 噁烷部分。舉例而言，式（XXIII)化合物可為式（XXIII-A) 化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽。舉例而言，（XXIII)化合物可包 括化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽。 保護某些胺基及羥基可改良式（XXIII)化合物之溶解度。 162380.doc -113- 201241005 舉例而。’式（XXIII)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度 並增加產物分離產量。 如上文所拓示，R4可為離去基。出於此目的，R4可包括 由熟S化學技術者選擇的任何適合之羥基離去基。舉例而 言，羥基保護基之非限制性實例可包括甲苯磺酸酯基、溴 苯磺酸酯基、硝基苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、氧鏽基、三 氟曱磺酸酯基、九氟丁磺酸酯基及三氟乙磺酸酯基。 式（XXIII)化合物可藉由已知方法製備或商業購得。 應瞭解，式（XXIII)結構之異構形式可控制式⑴合成中 之連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之 此步驟中分離，或者式（XXIII)之異構混合物可進入合成之 猶後階段且在合成之稍後階段分離。 在一個實施例中，式（χΧΙΙ)化合物包括異構體：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 式（XXIV)化合物 另一實施例係關於一種式（χχΐν)化合物：

162380.doc -114- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，纟中各&獨立地抑 或保護基。 如所指不，式（XXIV)化合物中之羥基可呈經保護或未經 保護之形式。舉例而言，呈未經保護之形式時，式（XXIV) 化合物可包括化合物2-(烯丙基氧基）_4_(羥基曱基）_3 7_二 氧雙環[4.1.0]庚-5-醇：

或其醫藥學上可接受之鹽。 式（XXIV)結構之某些羥基可經Ri保護基保護。出於此目 的，R!可包括由熟習化學技術者選擇的任何適合之羥基官 能基。舉例而言，羥基保護基之非限制性實例可包括醚、 酯、碳酸酯或磺酸酯保護基。K保護基可相同或不同。 醚保護基可包括甲基、甲氧基曱基（MOM)、苯曱氧基甲 基（BOM)、曱氧基乙氧基曱基（mem)、2·(三曱基矽烷基） 乙氧基曱基（SEM)、曱硫基曱基（MTM) '苯基硫基甲基 (PTM)、疊氮基甲基、氰基曱基、2,2_二氣-二氟乙 基、2-氯乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（τηρ)、i_乙氧基乙 基（EE)、苯曱醯甲基、4-溴苯曱醯甲基、環丙基曱基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二曱基苯甲基、4-甲氧基苯曱基（MPM-OAr)、鄰硝基 162380.doc •115- 201241005 苯曱基、2,6-二氣苯甲基、34_二氣苯甲基、4_(二曱基胺 基）羰基苯曱基、4-曱基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-。比啶甲基、七氟-對曱苯基、四氟_4_吡啶基、三甲 基矽烧基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TbdmS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 醋保護基可包括乙酿氧基（〇Ac)、曱酸芳酯、乙酸芳 醋、乙醯丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_苐甲酸 芳酯。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 碳酸醋保護基可包括碳酸芳酯甲酯、碳酸丨_金剛烷酯 (Adoc-OAr) '碳酸第三丁酯（B〇c_〇Ar)、胺基甲酸第三丁 醋（Boc)、碳酸4-甲基亞磺醯基苯甲酯（Msz_〇Ar)、碳酸 2,4-二曱基戊-3-基酯（D〇c-〇Ar)、碳酸芳酯2,2,2-三氣乙 酿、碳酸芳酯乙烯酯、碳酸芳酯苯曱酯及碳酸芳酯。 磺酸醋保護基可包括曱烷磺酸芳酯、曱苯磺酸芳酯及2_ 曱醯基苯續酸芳醋。 在一些實施例中’兩個相鄰Rl基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、苯亞甲基縮醛、L5 —二氧螺[5 5]十一烷（亞環己 基縮醛）、6,10-二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2·異丁 基-2-曱基-1，3-二噁烷部分。舉例而言，式（χχιν)之己醣 環組分的4及5位之心基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞 曱基縮醛、1,5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己基縮醛）、61〇_ 二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2·異丁基_2_甲基-13-二 噁烷部分。舉例而言，式（XXIV)化合物可包括化合物： 162380.doc -116- 201241005

或其醫藥學上可接受之鹽。 保護某些胺基及羥基可改良式（XXIV)化合物之溶解度。 舉例而言，式（XXIV)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度 並增加產物分離產量。 式（XXIV)化合物可藉由如下製備：使式（XXIII)化合物

與鹼反應以製備式（XXIV)化合物。 1>N^0R1

其中心獨立地為Η或保護基，且R4為Η或如上文所定義之 離去基。 在此合成中，式（XXIV)化合物可藉由使式（XXIII)化合 物與任何適當鹼反應以選擇性形成式（XXIV)之環氧化物來 製備。適合之鹼及條件可容易地由一般技術者確定。舉例 162380.doc •117· 201241005 而言，式（XXIV)化合物可在用強鹼（諸如氫氧化鈉）處理式 (XXIII) 化合物後形成。亦可使用其他鹼，諸如氫氧化卸、 氫氧化鋇、氫氧化鉋、氫氧化锶、氩氧化鈣、氩氧化鎂、 氫氧化鋰、氫氧化铷、丁基鋰、二異丙基胺基鋰、二乙基 胺基裡、胺基納、氮化納及雙（三甲基<5夕烧基）胺基裡。 舉例而言，反應可藉由在約o°c下在有機溶劑中用氫氧 化鈉處理式（XXIII)化合物，升溫至室溫隔夜，得到式 (XXIV) 化合物來進行。 應瞭解，式（XXIV)結構之異構形式可控制式（I)合成中 之連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之 此步驟中分離，或者式（XXIV)之異構混合物可進入合成之 稍後階段且在合成之稍後階段分離。 在一個實施例中，式（XXIV)化合物包括異構體：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 式（XXV)化合物 另一實施例係關於一種式（XXV)化合物：

162380.doc •118· 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽或水合物，其中各1獨立地為Η 或保護基。 如所指示，式（XXV)化合物中之羥基可呈經保護或未經 保護之形式。舉例而言，呈未經保護之形式時，式（XXV) 化合物可包括化合物6-(烯丙基氧基）-5-((2,4-二胺基-6-羥 基嘧啶-5-基）胺基）-2-(羥基甲基）四氫-2H-哌喃-3，4-二醇：

6·(缔丙基氧基)-5-((2,4·二胺基~6_經基嘴咬-5-基) 胺基)-2-(羥基曱基)四氫-2H-哌喃-3,4-二醇 或其醫藥學上可接受之鹽。或者，一或多個羥基可經保 護。舉例而言，式（XXV)化合物可包括化合物6-(烯丙基氧 基）-7-((2,4-二胺基-6-(苯甲氧基）嘧啶-5-基）胺基）-2-苯基六 氫哌喃并[3,2-d][l,3]二氧雜環己烯-8-醇：

6-(烯丙基氧基)·7-((2,4-二胺基各(苯曱氧基)嘧啶-5-基） 胺基)-2·苯基六氫哌喃幷[3,2峋[1，3]二氧雜環己烯-8-醇， 或其醫藥學上可接受之鹽。 如所指示，式（XXV)結構之某些胺基及/或羥基可經心保 162380.doc •119· 201241005 護基保護。出於此目的，心可包括由熟習化學技術者選擇 的任何適合之胺基或羥基官能基。舉例而言，在本發明之 範疇内的胺基保護基包括（但不限於）胺基甲酸酯、醯胺、 烧基或方基衍生之保護基。經基保護基之非限制性實 例可包括醚、酯、碳酸酯或磺酸酯保護基^ &保護基可相 同或不同。 詳言之’胺基甲酸酯保護基可包括例如胺基曱酸9·第基 甲酯（Fmoc)、胺基曱酸第三丁酯（Boc)、胺基曱酸羧基苯 曱酯（cbz)、胺基曱酸曱酯、胺基曱酸乙酯、胺基甲酸9-(2_ 磺基）第基曱酯、胺基甲酸9-(2,7-二溴）苐基曱酯、胺基甲 酸17-四苯并卜^^第基甲酯口匕加❶^〜胺基甲酸之-氣」-茚基曱酯（Climoc)、胺基甲酸2,7-二第三丁基[9-(10,10-二 氫-10，10，10，10-四氫噻p山基）]曱酯（DBD-Tmoc)、胺基甲酸 1，1 -二側氧基苯并[b] °塞吩-2-基曱S旨（Bsmoc)、胺基甲酸 2,2,2-三氣乙酯（Troc)、胺基甲酸2-三甲基矽烷基乙酯 (Teoc)、胺基甲酸2-苯乙酯（hZ)、胺基曱酸1，1-二甲基-2-鹵乙酯、胺基曱酸1,1-二甲基-2,2-二溴乙酯（DB-i-boc)、胺 基曱酸1,1-二甲基-2,2,2-三氣乙酯（TCBoc)、胺基甲酸1-曱 基-1-(4-聯苯基）乙酯（Bpoc)、胺基甲酸1-(3,5-二第三丁基 苯基）-1-甲基乙酯（i-Bumeoc)、胺基曱酸N-(2-特戊酿基胺 基）-1,1-二甲基乙酯、胺基甲酸2-[(2-硝基苯基）二硫基]-1-苯乙酯（NpSSPeoc)、胺基甲酸2-(N，N-二環己基甲醯胺基） 乙酯、胺基甲酸1-金剛烷酯（Ι-Adoc)、胺基甲酸乙烯酯 (Voc)、胺基甲酸1_異丙基烯丙酯（lpaoc)、胺基甲酸4-硝基 162380.doc -120- 201241005 桂皮酯（Noc)、胺基甲酸3-(3,吡啶基）丙-2-烯酯（Paloc)、胺 基甲酸8-喹啉酯、胺基曱酸烷基二硫基酯、胺基曱酸對曱 氧基苯曱酯（Moz)、胺基曱酸對硝基苯甲酯（pnz)、胺基甲 酸對溴苯甲酯、胺基曱酸對氣苯曱酯、胺基甲酸2,4-二氣 苯曱酯、胺基甲酸4-曱基亞磺醯基苯甲酯（Msz)、胺基曱 酸二苯基曱酯、胺基曱酸2-甲硫基乙酯、胺基曱酸2-甲基 磺醯基乙酯、胺基曱酸2-(對曱苯磺醯基）乙酯、胺基甲酸 [2-(1，3-二售烧基）]曱酯（Dmoc)、胺基甲酸4-曱硫基苯酯 (Mtpc)、胺基甲酸2,4·二曱硫基苯酯（Bmpc)、胺基曱酸2-膦醯乙酯（Peoc)、胺基甲酸ι,ι_二甲基_2_氰基乙酯、胺基 甲酸2-(4-硝基苯基）乙酯、胺基甲酸4-苯基乙醯氧基苯甲 酯（PhAcOZ)及胺基甲酸間氣對醯氧基苯曱酯。在一些實 施例中，胺基甲酸酯保護基係選自胺基曱酸9-苐基甲酯 (Fmoc)、胺基甲酸第三丁酯（Boc)及胺基曱酸羧基苯甲酯 (cbz)保護基。 醯胺保護基可包括例如乙醯胺、苯基乙醯胺、3-苯基丙 醯胺、戊-4·烯醯胺、吡啶醯胺、3-吡啶基甲酿胺、苯曱醯 胺、對苯基苯曱醯胺、2-曱基-2-(鄰苯基偶氮苯氧基）丙醯 胺、4-氣丁醯胺、乙醯乙醯胺、3_(對羥基苯基）丙醯胺及 (iV'-二硫基苯甲氧基幾基胺基）乙酿胺。 醚保護基可包括甲基、曱氧基甲基（mom)、苯曱氧基甲 基（BOM)、曱氧基乙氧基甲基（MEM)、2·(三曱基矽烷基） 乙氧基曱基（SEM)、曱硫基曱基（MTM)、苯基硫基曱基 (PTM)、疊氮基甲基、氰基甲基、2,2_二氣二氟乙 162380.doc -121 - 201241005 基、2-氣乙基、2-溴乙基、四氫哌喃基（THp)、丨·乙氧基乙 基（EE)、苯甲醯甲基、4-溴苯甲醯甲基、環丙基甲基、烯 丙基、炔丙基、異丙基、環己基、第三丁基、苯甲基、 2,6-二甲基苯曱基、4-曱氧基苯甲基（MPM-OAr) '鄰硝基 苯甲基、2,6-二氣苯甲基、3,4-二氣苯曱基、4-(二曱基胺 基）羰基苯甲基、4-甲基亞磺醯基苯甲基（Msib)、9-蒽基甲 基、4-吡啶甲基、七氟-對曱苯基、四氟_4_吡啶基、三甲 基矽烧基（TMS)、第三丁基二甲基矽烷基（TBdmS)、第三 丁基二苯基矽烷基（TBDPS)及三異丙基矽烷基（TIPS)保護 基。 醋保護基可包括乙醯氧基（〇Ac)、甲酸芳酯、乙酸芳 S旨、乙酿丙酸芳酯、特戊酸芳酯、苯甲酸芳酯及9_苐甲酸 芳醋。在一個實施例中，酯保護基為乙醯氧基。 破酸醋保護基可包括碳酸芳酯曱酯、碳酸1-金剛烷酯 (Adoc_OAr)、碳酸第三丁酯（BOC-OAr)、胺基甲酸第三丁 醋（B〇c)、碳酸4·甲基亞磺醯基苯甲酯（Msz-OAr)、碳酸 2,4-二甲基戊-3_基酯（D〇c_〇Ar)、碳酸芳酯2 2 2_三氣乙 酉旨、碳酸芳醋乙烯酯、碳酸芳酯苯曱酯及碳酸芳酯。 績酸醋保護基可包括曱烷磺酸芳酯、甲苯磺酸芳酯及2-甲醯基苯磺酸芳酯。 在一些實施例中，兩個相鄰R〗基團結合在一起形成亞異 丙基縮醛、笨亞曱基縮醛、1，5-二氧螺[5,5]十一烷（亞環己 基縮越）、6，10-二氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2-異丁 基-2-曱基-l，3-二噁烷部分。舉例而言，式（χχν)之己醣環 162380.doc •122· 201241005 組分的4及5位之1^基團可組合形成亞異丙基縮醛、苯亞甲 基縮醛、1,5-二氧螺[5.5]十一烷（亞環己基縮醛）、6,10-二 氧螺[4.5]癸烷（亞環戊基縮醛）或2-異丁基-2-甲基-1,3-二噁 烷部分。舉例而言，式（XXV)化合物可包括化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽。 保護某些胺基及羥基可改良式（XXV)化合物之溶解度。 舉例而言，式（XXV)之乙醯基衍生物的製備可改良溶解度 並增加產物分離產量。 式（XXV)化合物可藉由如下製備：使式（XXIV)化合物

與式（II)化合物反應： ORi NH2 162380.doc •123· 201241005 得到式（XXV)化合物：

其中心獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 在此合成中，式（XXV)化合物可藉由使式（XXIV)化合物 與式（II)化合物偶合以形成式（XXV)化合物來製備。適合之 反應條件可容易地由一般技術者確定。舉例而言，式 (XXV)化合物可在諸如高氣酸鋰之氧化劑存在下處理式 (XXIV)及（II)之化合物後形成。亦可使用其他氧化劑，諸 如Ru047NM0、戴斯-馬丁試劑、DMSO/三氟曱磺酸酐、 TFAA/DMSO、PDC 、過氧化氮、無機過氧化物、石肖酸、 硝酸鹽、亞氣酸鹽、氯酸鹽、高氣酸鹽、次氣酸鹽、過氧 化物、碘、臭氧、氧化亞氮、氧化銀、高錳酸鹽、六價鉻 化合物、絡酸、二鉻酸、三氧化絡、氣鉻酸°比錠、過硫 酸、亞颯、硫酸、托倫斯試劑、2,2'-二吡啶基二硫化物 (DPS)及四氧化锇。 舉例而言，氧化反應可藉由在有機溶劑中處理式（XXIV) 及（II)之化合物與高氣酸鋰之混合物，同時加熱（例如在約 90°C下），得到式（XXV)化合物來進行。 應瞭解，式（XXV)結構之異構形式可控制式（I)合成中之 162380.doc -124- 201241005 連續步驟的立體特異性。因此，特定異構體可在合成之此 步驟中分離，或者式（XXV)之異構混合物可進入合成之稍 後階段且在合成之稍後階段分離。 在一個實施例中，式（XXV)化合物包括異構體：

或其醫藥學上可接受之鹽或水合物。 接著可使用式（XXV)化合物產生式（IV)化合物。式（IV) 化合物可藉由如下製備：使式（XXV)化合物

與1，3-二曱基巴比妥酸反應，得到式（IV)化合物，其中R! 獨立地為Η或如上文所定義之保護基。 在此合成中，式（IV)化合物可藉由在催化劑存在下使式 (XXV)化合物與1，3-二甲基巴比妥酸反應以形成式（IV)化合 物來製備。適合之催化劑及反應條件可容易地由一般技術 者確定。舉例而言，式（XXV)化合物可在諸如肆（三苯基 162380.doc -125 - 201241005 膦）把（〇)之催化劑存在下處理式（XXIV)及（II)之化合物後形 成。亦可使用其他催化劑。 醫藥調配物及劑型 當用作藥物時，本文所提供之化合物可以醫藥組合物形 式投與。此等組合物可以醫藥技術中熟知之方式製備，且 可藉由各種途徑投與，此視需要局部或全身治療及待治療 區域而定。投藥可為表面投藥（包括經皮、經表皮、經眼 及至黏膜，包括鼻内、經陰道及經直腸傳遞）、經肺投藥 (例如藉由吸入或吹入散劑或氣溶膠，包括由霧化器；氣 管内或鼻内）、經口投藥或非經腸投藥。非經腸投藥包括 靜脈内、動脈内、皮下、腹膜内、肌肉内或注射或輸注； 或顱内（例如鞘内或腦室内）投藥。非經腸投藥可為單一單 次劑量之形式，或可例如藉由連續灌注泵進行。用於表面 投藥之醫藥組合物及調配物可包括經皮貼片、軟膏、洗 劑、乳膏、凝膠、滴劑、栓劑、喷霧、液體及散劑。習知 4藥載劑’水性、粉末狀或油性基齊，增稠劑及其類似物 可為必需或所需的β 本發明亦提供含有本文所提供之化合物或其醫藥學上可 接乂之鹽作為活性成分與一或多種醫藥學上可接受之載劑 (賦形劑)的組合之醫藥組合物。在一些實施例中該組合 物適合於表面投藥。在製備本文所提供之組合物時，通常 ❹賦形_合’由賦形劑稀釋或密封於呈例如 膠囊、藥囊、紙或其他容器形式之該載劑中。當賦形劑充 162380.doc •126- 201241005 當稀釋劑時’其可為固體、半固體或液體材料，其充（舌 性成分之媒劑、載劑或介質。因此，組合物可呈以；形 式：錠劑、丸劑、散劑、口含旋、藥囊、扁囊劑、_、 懸浮液、乳液、溶液、糖毁、氣溶膠(呈固體形式或於液 體介質中）、含有例如至多1G重量％活性化合物之軟膏、軟 明膠膠囊及硬明谬膠囊、栓劑、無菌可注射溶液及I菌包 裝散劑。 在製備調配物時’可研磨活性化合物以提供適當粒徑， 隨後與其他成分組合。若活性化合物實質上不可溶，則可 將其研磨至小於200目之粒徑.若活性化合物實質上可溶 於水，則可藉由研磨來調整粒徑以便在調配物中實質上均 勻分佈，例如約40目。 可使用已知研磨程序（諸如濕式研磨）研磨本文所提供之 化合物以獲得適合於錠劑形成及其他調配物類型之粒徑。 本文所提供之化合物的細粉狀（奈米粒子）製劑可藉由此項 技術中已知之方法製備’例如參見國際申請案第W〇 2002/000196號。 適合之賦形劑的一些實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山 梨糖醇、甘露糖醇、澱粉 '阿拉伯膠、磷酸鈣、海藻酸 鹽、黃箸膠 '明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶 酮、纖維素、水、糖漿及曱基纖維素。調配物可另外包 括：满滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鎂及礦物油；濕潤劑； 乳化劑及懸浮劑；防腐劑，諸如苯曱酸曱酯-及丙基羥基- 162380.doc • 127· 201241005 本甲酸酯；甜味劑；及調味劑。本文所提供之組合物可經 調配以使得在藉由使用此項技術中已知之程序投與患者後 活性成分快速、持續或延緩釋放。 組合物可調配為單位劑型，各劑量含有約5 mg至約1 〇〇〇 mg(l g) ’更通常為約100 mg至約500 mg活性成分。術語 「單位劑型」係指適合用作用於人類個體及其他哺乳動物 之單一劑量的物理個別單元，各單元含有經計算以產生所 需治療作用之預定量的活性物質以及適合之醫藥賦形劑。 在一些實施例中，本文所提供之組合物含有約5 mg至約 5 0 mg活性成分。一般技術者應瞭解，此表示組合物含有 約5 mg至約10 mg、約10 mg至約15 mg、約15 mg至約20 mg、約 20 mg至約 25 mg、約 25 mg至約 30 mg、約 30 mg至 約35 mg、約35 mg至約40 mg、約40 mg至約45 mg或約45 mg至約50 mg活性成分。 在一些實施例中，本文所提供之組合物含有約5 mg至約 500 mg活性成分◊一般技術者應瞭解，此表示組合物含有 約 50 mg至約 100 mg、約 100 mg至約 150 mg、約 150 mg至 約 200 mg、約 200 mg至約 250 mg、約 250 mg至約 300 mg、 約3 50 mg至約400 mg或約450 mg至约500 mg活性成分。 在一些實施例中，本文所提供之組合物含有約500 mg至 約1000 mg活性成分。一般技術者應瞭解，此表示組合物 含有約500 mg至約550 mg、約550 mg至約600 mg、約600 mg至約 650 mg、約 650 mg至約 700 mg、約 700 mg至約 750 162380.doc • 128· 201241005 mg、約 750 mg至約 800 mg、約 800 mg至約 850 mg、約 850 mg至約900 mg、約900 mg至約950 mg或約950 mg至約 1000 mg活性成分。 在本文所提供之方法及用途中，可使用類似劑量之本文 所述之化合物。 活性化合物可在寬劑量範圍内有效且一般以醫藥有效量 投與。然而’應瞭解，實際上投與之化合物的量將通常由 醫師根據相關情況來確定，包括待治療之病狀，所選投藥 途徑’所投與之實際化合物，個別患者之年齡、體重及反 應’患者症狀之嚴重程度及其類似因素。 為製備諸如錠劑之固體組合物，將主要活性成分與醫藥 賦形劑混合以形成含有本文所提供之化合物的均勻混合物 之固體預調配組合物。當提及此等預調配組合物為均質 時’活性成分通常均勻地分散於整個組合物中以使得組合 物可容易地再分為諸如錠劑、丸劑及膠囊之同等有效的單 位劑型。接著將此固體預調配物再分為上述類型之單位劑 型，其含有例如約Oj mg至約1〇〇〇 mg本文所提供之活性 成分。 本文所提供之錠劑或丸劑彳包覆包衣或另外經混配以提 供給予長時間作用優點之劑型。舉例而言，錠劑或丸劑可 包含内部劑量及外部劑量組分，後者呈包覆前者之包膜形 式。兩種組分可由用以阻止在胃中崩解且允許内部組分完 整進入十二指腸或延緩釋放之腸衣層隔開。該等腸衣層或 162380.doc 201241005 包衣可使用各種物質，該等物質包括多種聚合酸及聚合酸 與諸如蟲膠、十六醇及乙酸纖維素之物質的混合物。 可併有本文所^供之化合物及組合物以用於經口或藉由 注射投藥之液體形式包括水性溶液，經適當調味之糖聚， 水性或油性懸浮液’及經食用油（諸如棉籽油、芝麻油' 椰子油或花生油）調味之乳液，以及酏劑及類似醫藥媒 劑。 在一些實施例中，本文所提供之化合物經調配用於靜脈 内投藥。適合於可注射使用之醫藥組合物可包括無菌水性 溶液（當可溶於水時）或分散液及用於即時製備無菌可注射 溶液或分散液之無菌散劑。對於靜脈内投藥，適合之載劑 包括生理食鹽水、抑制細菌水、Cremophor ELTM(BASF Parsippany，NJ)或磷酸鹽緩衝食鹽水（PBS)。在所有情況 下，組合物必須為無菌的且應為流體，達到容易注射之程 度。其在製造及儲存條件下應穩定且必須在防止微生物 (諸如細菌及真菌）之污染作用下保存。載劑可為含有例如 水、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇及 其類似物）及其適合之混合物的溶劑或分散介質。可例如 藉由使用諸如卵碗脂之包衣，藉由在分散液情況下維持所 需粒徑且藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。可由例 如對羥基苯甲酸酯、氣丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞及 其類似物之各種抗細菌劑及抗真菌劑達成防止微生物作 用。在許多情況下，較佳在組合物中包括等張劑，例如 162380.doc -130· 201241005 糖、多元醇（諸如甘露糖醇、山梨糖醇）、氣化鈉。可注射 組合物之長時間吸收可藉由在組合物中包括延緩吸收之試 劑（例如單硬脂酸鋁及明膠）來實現。 無菌可注射溶液可藉由視需要將所需量之活性化合物與 上述-種成分或成分之組合一起併入適當溶劑中，隨後過 $滅菌來製備…般藉由將活性化合物併入含有鹼性分散 介質及以上所列舉之所需其他成分的無菌媒劑中來製備分 散液。在用於製備無菌可注射溶液之無菌散劑的情況下， 較佳製備方法為真空乾燥及冷;東乾燥，此自預先經無菌過 濾之溶液得到活性成分加上任何其他所需成分之散劑。 用於吸入或吹人之組合物包括於醫藥學上可接受之水性 或有機溶劑中的溶液及懸浮液，或其混合物，及散劑。液 體或固體組合物可含有如上文所述之適合的醫藥學上可接 受之賦形劑。在一些實施例中’組合物係藉由經口或經鼻 呼吸途徑投與從而達成局部或全身作用。組合物可藉由使 用惰性氣體來霧化。霧化溶液可直接自霧化裝置吸取或該 霧化裝置可連接於面罩、帷罩或間歇性正壓呼吸機。可自 以適當方式傳遞調配物之裝置經口或經鼻投與溶液、懸浮 液或散劑組合物。 表面調配物可含有一或多種習知載劑。在一些實施例 申’軟膏可含有水及一或多種選自例如液體石壤、聚氧乙 烯炫基驗6—醇、白凡士林（white VaseHne)及其類似物 之疏水性載劑。乳膏之載劑组合物可基於水與甘油及一或 162380.doc -131- 201241005 多種其他組分（例如單硬脂酸甘油酯、PEG-單硬脂酸甘油 酯及十六烧基硬脂醇）之組合。可使用適當地與例如甘 油、經乙基纖維素及其類似物之其他組分組合的異丙醇及 水調配凝膠。在一些實施例中，表面調配物含有至少約 0.1 wt%、至少約〇·25 wt%、至少約〇.5 wt%、至少約1 wt%、至少約2 wt%或至少約5 wt%本文所提供之化合物。 表面調配物可適當地包裝於例如1〇〇 g管中，其視情況附 有關於治療選擇適應症之說明書。 在一個實施例中’本文所提供之化合物與載劑一起製 備’該等載劑將保護化合物以防自體内快速消除，諸如控 制釋放調配物’包括植入物及微囊封傳遞系統。可使用生 物可降解、生物相容性聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚 酸針、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯及聚乳酸^該等調 配物可使用標準技術製備’或商業獲得，例如獲自A][za

Corporation 及 Nova Pharmaceuticals, Inc。脂質體懸浮液 (包括靶向所選細胞之脂質體及針對細胞抗原之單株抗體） 亦可用作醫藥學上可接受孓載劑。此等物質可根據熟習此 項技術者已知之方法製備’例如如美國專利第4,522,811號 中所述。 投與患者之化合物或組合物的量將視待投與物、投藥目 的（諸如預防或治療）、患者狀況、投藥方式及其類似因素 而變化。在治療性應用中，可向已罹患疾病之患者投與足 以治癒或至少部分遏止該疾病之症狀及其併發症之量的組 162380.doc -132· 201241005 合物。有效劑量將視所治療之疾病病狀，以及主治臨床醫 師依據諸如疾病嚴重程度、患者之年齡、體舌 餿董及一般狀況 及其類似因素之因素所作之判斷而定。 投與患者之組合物可呈上述醫藥組合物形式。此等組合 物可藉由習知滅菌技術滅菌，或可經無菌過濾。水性溶液 可經包裝以按原樣使用，或經凍乾，在投藥之前將凍2製 劑與無菌水性載劑組合。化合物製劑之pH值通常將介於3 與11之間、更佳為5至9且最佳為7至8。應瞭解，使用某些 上述賦形劑、載劑或穩定劑將導致形成醫藥鹽。 本文所提供之化合物的治療性劑量可根據例如進行治療 之特定用途、化合物投藥方式、患者之健康狀況及病狀， 及開藥醫師之判斷而變化。醫藥組合物中本文所提供之化 合物的比例或濃度可視多種因素而變化，包括劑量、化學 特徵（例如疏水性）及投藥途徑。舉例而言，本文所提供之 化合物可提供於含有約〇.1% w/v至約1〇% w/v化合物之水 性生理學緩衝溶液中以用於非經腸投藥。一些典型劑量範 圍為每天每公斤體重約i mg至約i g。在一些實施例中， 劑量範圍為每天每公斤體重約〇 〇1 mg至約丨〇〇 mg。劑量 可能視諸如疾病或病症之類型及進展程摩、特定患者之總 體健康狀況、所選化合物之相對生物功效、賦形劑之調配 及其投藥途徑的變數而定，有效劑量可自源於活體外或動 物模型測試系統之劑量-反應曲線推斷。 實例 162380.doc •133· 201241005 實例1.前驅物Z(cPMP)之製備 流程20.

162380.doc -134- 201241005 C!2PO(OMe) 4a,b 或e -- CH2C丨2·吡啶

1) DMSO,TFAA, DCM 2) DIPEA

實驗。 在氬氣下進行空氣敏感性反應。經無水MgS04乾燥有機 溶液且在減壓下蒸發溶劑。無水及層析溶劑係商業獲得 (無水級溶劑來自Sigma-Aldrich Fine Chemicals)且在不作 任何進一步純化即可使用。在塗有60卩…矽膠之玻璃或鋁 片上進行薄層層析（t.l.c.)。在UV光下或使用含鉬酸銨（5 wt%)及硫酸鈽（IV)4H2O(0.2 wt%)iH2S04水溶液（2 M)、 含12(0.2%)及KI(70/〇)中之一者的h2S04(1 Μ)或含0.1%茚三 酮之EtOH浸潰來觀察有機化合物。在矽膠（4〇_63 μηι)上或 162380.doc -135· 201241005 在具有連續梯度設施之自動系統上進行層析（急驟管柱）。 在1 dm之路徑長度下記錄旋光度且以10·1 deg cm2 g_1為單 位；濃度以g/l〇〇 mL為單位。1H NMR光譜係於CDC13、 CD3OD(内部 Me4Si ’ δ 0 ppm)或 D20(H0D ’ δ 4.79 ppm)中 量測，且13C NMR光譜係於CDC13(中心線，δ 77.0 ppm)、 CD3OD(中心線，δ 49.0 ppm)或 DMSO c/6(中心線 ’ δ 39.7 ppm)、D20(無内部參照物或内部CH3CN ’ δ 1.47 ppm(若有 規定））中量測。1Η及13C共振之指定係基於2口（111-1110(^-COSY，HSQC，HMBC)及 DEPT實驗。31P NMR係 在202.3 MHz下運作且在無參照物之情況下報導。高解析 度電喷霧質譜（ESI-HRMS)係在Q-TOF串聯質譜儀上記錄。 微量分析係由奥塔哥大學（University of Otag〇(Dunedin， New Zealand)之 Campbell Microanalytical Department 進 行。 A. (5aS，6R，7R,8R，9aR)-2-胺基-6,7-二羥基-8-(羥基甲 S)-SH,4H,5H,5aH,6H,7H>8H,9aH,10H-^. # ^[3,2-gJ 蝶啶-4·酮單水合物（1)之製備。 攪拌2,5,6-三胺基-3,4-二羥基嘧啶-4-酮二鹽酸鹽 (Pfleiderer, W.; Chem. Ber. 1957, 90, 2272 ； Org. Synth. 1952，32，45 ; Org 办》A. 1963，第 4累積卷，245，10.0 g，46.7 mmol)、D-半乳糖苯腙（Goswami，S·; Adak，Α.Κ·

Tetrahedron Lett. 2005, 46, 221-224 > 15.78 g，58.4 mmol) 及2-巯基乙醇（1 mL)且在MeOH-H20之1:1混合物（400 mL) 中加熱至回流（浴溫110°C )2小時。冷卻至周圍溫度後’添 162380.doc •136· 201241005 加乙醚（500 mL)，震盪燒瓶且傾析出乙醚層並丟棄。用另 外兩份乙醚（500 mL)重複該過程，接著蒸發殘餘揮發性物 質。依次添加曱醇（40 mL)、H2O(40 mL)及三乙胺（39 4 mL，280 mmol)且用數毫克1對混合物種晶。5分鐘後，濾 出黃色固體，用少量MeOH洗滌並乾燥，得到呈單水合物 形式之1(5.05 g ’ 36%) ’其具有適合純度以供進一步使 用。使分析部分自DMSO-EtOH或沸騰的h20中再結晶。 MPt 226(分解）。[a]D +135.6 (cl.13，DMSO)。NMR (DMSO Α): δ 10.19 (bs ’ 交換 D20, 1H)，7.29 (d, 7=5.0 Hz， 緩慢交換〇20, 1H)，5.90 (s，交換D2〇, 2H)，5.33 (d，*7=5.4 Hz，父換 D2O，1H)，4.66 (ddd，*/〜5.0，~1.3, ~1.3 Hz，1H)， 4.59 (t，《7=5.6 Hz，交換D2O，1H)，4.39 (d，《7=10.3 Hz，交 換D20，1H)，3.80 (bt，~1.8 Hz，交換D20，1H), 3.70 (m， 1H)，3.58 (dd，《7=10.3，3.0 Hz，1H)，3.53 (dt，《7=10.7’ 6.4

Hz, 1H), 3.43 (ddd, /=11.2, 5.9, 5.9 Hz, 1H), 3.35 (t, 7=6.4 Hz，1H)，3.04 (br m, 1H)。13C NMR (DMSO 中心線 δ 39.7): δ 156.3 (C), 150.4 (C), 148.4 (〇, 99.0 (〇, 79.4 (CH), 76.5 (CH), 68.9 (CH), 68.6 (CH), 60.6 (CH2), 53.9 (CH)。CiqH!5N5〇5'H2〇 之分析計算值 39.60 C, 5.65 H， 23.09 N，實驗值 39.64 C，5.71 H，22.83 N。 B.化合物2(a或h)反3(a、b或c)之製備。 在50°C下在Ar下將二碳酸二第三丁酯（10.33 g，47.3 mmol)及 DMAP(0.321 g，2.63 mmol)添加至 1(1.5 g，5.26 mmol)於無水THF(90 mL)中的經攪拌懸浮液中。20小時 162380.doc -137- 201241005 後，得到澄清溶液》蒸發溶劑且對殘餘物進行矽膠層析 (梯度為〇至40% Et〇Ac之己烧溶液），得到兩種產物溶離 第浴離產物為黃色泡沫狀物（1.46 g)。藉由丨η NMR 觀察到該產物為兩種化合物之混合物，其主要含有具有七 個Boc基團之產物（23或21>)。使樣品自以〇心_己烷中結 日曰件到呈精細結晶固體狀之2a或2b。MPt 189-191 0 [αβ。-43.6 (c 0.99, MeOH)。丨H NMR (500 MHz，CDC13): δ 5.71 (t，*7=1.7 Hz，1H)，5.15 (dt，J=3.5,〜1.0，1H)，4.97 (t， ^=3.8, 1H), 4.35 (br t, 7=-1.7, 1H), 4.09-3.97 (m, 3H), 3.91 (m，1H)，1.55，1.52，1.51，1.50，1.45 (5s，45H)，1.40 (s， 18H)。13C NMR (125.7 MHz，CDC13): δ 152.84 (C)，152.78 (C), 151.5 (C), 150.9 (C), 150.7 (2xC), 150.3 (C), 149.1 (C), 144.8 (C), 144.7 (C), 118.0 (C), 84.6 (C), 83.6 (C), 83.5 (C), 82.7 (3xC), 82.6 (C), 76.3 (CH), 73.0 (CH), 71.4 (CH), 67.2 (CH), 64.0 (CH2), 51.4 (CH), 28.1 (CH3), 27.8 (2 x CH3)，27.7 (CH3)，27.6 (3xCH3)。C45H72N5019+， (M+H)+之 MS-ESI+，計算值 986.4817，實驗值 986.4818。 C45H7丨N50丨9 H20之分析計算值 54.39 C，7.39 H，6·34 N ;實 驗值54.66 C，7.17 H，7·05 N。獲得呈黃色泡沫狀之第二溶 離份（2.68 g)，根據1H NMR，其為存在六個Boc基團之產 物（3a、3b或3c)。使少量自EtOAc-己烷中結晶，得到無色 晶體。[aU。-47.6 (c，1.17，CHC13)» 4 NMR (500 MHz， CDC13): δ 11.10 (br s，交換D20，1H)，5.58 (t，/=1.8 Hz， 1H), 5.17 (d, J=3.4 Hz, 1H), 4.97 (t, 7=3.9 Hz, 1H), 4.62 162380.doc -138- 201241005 (s ’ 交換D20，1H)，4.16 (dd，/=11.3, 5.9 Hz，1H)，4.12 (dd， /=11.3, 6.4 Hz, 1H), 3.95 (dt, 7=6.1, 1.1 Hz, 1H), 3.76 (m, 1H), 1.51, 1.50, 1.49, 1.48, 1.46 (5s, 54H) ° 13C NMR (125.7 MHz, CDC13)： δ 156.6 (C), 153.0 (C), 152.9 (〇, 151.9 (C), 150.6 (C), 149.4 (2xC)5 136.2 (C), 131.8 (〇, 116.9 (C), 85.0 (2xC), 83.3 (C), 82.8 (C), 82.49 (C), 82.46 (C), 73.3 (CH), 71.5 (CH), 67.2 (CH), 64.5 (CH2), 51.3 (CH)，28.0，27.72，27.68，27.6 (4xCH3) » C40H64N5O17+， (M+H)+之 MS-ESI+ 計算值 886,4287，實驗值 886.4289。 C. 化合物4a、4b或4c之製備。 步爾1-將來自上述B之主要含有化合物2a或2b的第一溶 離份（1.46 g，1.481 mmol)溶解於MeOH(29 mL)中且添加甲 醇納之MeOH溶液（1 Μ’ 8.14 mL，8.14 mmol)。留置於周 圍溫度下20小時後’用Dowex 50WX8(H+)樹脂中和溶液， 接著濾出固體且蒸發溶劑。 步驟2-將來自上述5之主要含有3a、3b或3c的第二溶離 份（2.68 g，3.02 mmol)溶解於MeOH(54 mL)中且添加甲醇 納之 MeOH 溶液（1 Μ，12.10 mL，12.10 mmol)。留置於門 圍溫度下20小時後，用Dowex 50WX8(H+)樹脂中和溶液， 接著濾出固體且蒸發溶劑。 合併來自上述步驟1及步驟2之產物且進行矽膠層析（梯 度為0至15% MeOH之CHCI3溶液），得到呈米色固體狀之 4a、4b 或 4c(1.97 g)。4 NMR (500 MHz，DMSO ί/6)·δ 12.67 (br s，交換 D20，1Η)，5.48 (d，《7=5.2 Hz，交換 〇2〇 162380.doc -139- 201241005 1H)，5.43 (t，*/=〜1.9 Hz，D20交換後變為 a d，J=1.9 Hz，1H)， 5.00 (br s，交換 D2O，1H)，4.62 (d，*7=5.7 Hz，交換 D20, 1H)，4.27 (d，*7=6.0 Hz，交換D20, 1H)，3.89 (dt，《7=5.2, 3.8 Hz，D20後變為 a t，/=3.9 Hz，1H)，3.62 (dd，《7=6.0, 3·7 Hz， D20 交換後變為 a d，J=3.7 Hz，1H)，3.52-3.39 (m，4H)，1.42 (s，9H)，1.41 (s，18H)。13C NMR (125.7 MHz, DMSO d6): δ 157.9 (C)，151.1，（C)，149.8 (2xC)，134.6 (C)，131.4 (C)， 118.8 (C), 83.5 (2xC), 81.3 (C), 78.2 (CH), 76.5 (CH), 68.1 (CH), 66.8 (CH), 60.6 (CH2), 54.4 (CH)S 27.9 (CH3), 27.6 (2xCH3)。CuHwNsOh' (M+H)+ 之 MS-ESI+ 計算值 586.2719，實驗值 586.2717。 D.化合物5a、5b或5c之製備 將化合物4a、4b或4c(992 mg，1.69 mmol)溶解於無水0比 啶中並濃縮。在氮氣氛圍下將殘餘物溶解於無水 CH2C12(10 mL)及吡啶（5 mL)中且在乙腈/乾冰浴中將溶液 冷卻至-42°C。逐滴添加二氣磷酸甲酯（187 pL，1.86 mmol)且揽拌混合物2小時20分鐘。將水（10 mL)添加至冷 溶液中，接著自冷水浴移出且用乙酸乙酯（50 mL)及飽和 NaCl溶液（30 mL)稀釋。分離有機部分且用飽和NaCl溶液 洗滌。再用乙酸乙酯萃取合併之水性部分兩次且經MgS04 乾燥合併之有機部分並濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析（用2-20%甲醇之乙酸乙酯溶液溶離）純化，得到環狀磷酸曱酯 5a、5b或 5c(731 mg，65〇/〇)。NMR (500 MHz，CDC13): δ 11.75 (1H), 5.59 (t, 7=1.8 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.89 (d, 162380.doc -140- 201241005 «7=3.8 Hz，1H)，4.68 (dt，《7=12.6, 2.0 Hz, 1H), 4.44 (m，1H), 4.11 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.78 (s, 1H) 3.70 (s, 1H), 3.60

(d，J-11.6 Hz, 3H)，1.58 (s, 9H)，1.49 (s，18H)。丨3C NMR (500 MHz, CDC13): δ 157.7 (C), 151.4 (C), 149.7 (2 C), 134.3 (C), 132.1 (C), 117.8 (C), 84.5 (2 C), 82.8 (C), 75.1 (CH), 69.8 (CH2), 68.8 (CH), 68.4 (CH), 56.0 (CH), 55.9 (CH3)，28.2 (3 CH3)，27.8 (6 CH3)。31P NMR (500 MHz, CDC13): δ _5.7 ppm。C26H40N5NaO13P+ (M+Na)+之 MS-ESI+，計算值 684.2252，實驗值 684.2251。 E. 化合物6a、6l>或6c之製備 在氮氣氛圍下將化合物Sa、5b或5c(223 mg，0.34 mmol) 溶解於無水CH2C12(7 1111〇中。添加無水DMSO(1〇4 μι， 1.46 mmol)且將溶液冷卻至-78°C。逐滴添加三氣乙酸肝 (104 μΐ ’ 0.74 mmol)且攪拌混合物40分鐘。添加二異 丙基乙胺（513 pL，2.94 mmol)且在-78°C下持續授拌50分 鐘。添加飽和NaCl溶液（20 mL)且自冷水浴移出混合物並 用 CH2C12(30 mL)稀釋。添加冰乙酸（17〇 pL，8.75 mmol) 且攪拌混合物10分鐘。分離各層且用CH2Cl2(l〇 mL)洗滌 水相。依次用5% HC1水溶液、3 :1飽和NaCl溶液：10〇/〇 NaHC〇3溶液及飽和NaCl溶液洗滌合併之有機相，經 MgS〇4乾燥並濃縮，得到化合物6a、6b或6c(228 mg，定 量）’其具有適合純度以供進一步使用。1H NMR (500 MHz, CDC13): δ 5.86 (m，1 H)，5.07 (m，1 H)，4.70-4.64 (m， 2 H)，4.49-4.40 (m，1 H)，4.27 (m, 1 H)，3.56, m，4 H)，1.49 162380.doc -141. 201241005 (s，9 Η), 1.46 (s，18 H) ppm。13c NMR (500 MHz, CDC13): δ 157.5 (C), 151.1 (〇, 150.6 (2 C), 134.6 (C), 132.7 (C), 116.6 (C), 92.0 (〇, 84.6 (2 C), 83.6 (C), 78.0 (CH), 76.0 (CH)，70.4 (CH2)，67.9 (CH)，56.2 (CH3) 56.0 (CH)，28.2 (3 CH3), 26.8 (6 CH3) ppm 〇 31P NMR (500 MHz, CDC13): δ-6.3 ppm。 R 化合物7 之製備：（4(111，5(1反,11(1狄>12(13)-1,3,2-二氧填 雜環己炫并[4’，5’：5,6]哌喃并[3,2-g]蝶啶-l〇(4H)-顯l 8-胺基-4a，5a，6,9,11,11a，12,12a-八氫-2,12,12-三窥 基-2-氣化物 將化合物6a、6b或6c(10 mg，14.8 μπιοί)溶解於無水乙 腈（0.2 mL)中且冷卻至〇 C。逐滴添加漠三曱基石夕烧（19.2 μΐ，148 μιηοΐ)且使混合物升溫至周圍溫度並攪拌5小時， 在此期間形成沈澱物。添加HC1(* * * )(1 〇 μΐ，37%)且再授 拌混合物1 5分鐘。離心混合物1 5分鐘（3〇〇〇 g)且收集所得 沈澱物。添加乙腈（0.5 mL)且再離心混合物1 5分鐘。再重 複乙腈洗務及離心兩次且在高真空下乾燥所得固體，得到 化合物 7(4 mg ’ 75%)。4 NMR (500 MHz，D2〇): δ 5.22 (d， /=1.6 Hz, 1H), 4.34 (dt, J=13, 1.6 Hz, 1H), 4.29-4.27 (m, 1H), 4.24-4.18 (m, 1H), 3.94 (br m, 1H), 3.44 (t, 7=1.4 Hz, 1H)。31P NMR (500 MHz, D20): δ -4.8。C10H15N5O8P+， (1^+11)+之]\^-£81+計算值364.0653，實驗值364.0652。 實例2·合成製備之前驅物Z(cPMP)與由大腸桿菌製備者在 Mo co之活想外合成中的比較 162380.doc •142· 201241005 使用合成前驅物Z(cPMP)及自大腸桿菌純化之cPMP的樣 名纪# Moco之活禮分合成。Moco合成亦涉及使用經純化 之組分大腸桿菌MPT合成酶、橋尾蛋白（gephyrin)、鉬酸 鹽、ATP及變亞硫酸鹽氧化酶。參見美國專利第7,504,095 號；及「Biosynthesis and molecular biology of the molybdenum cofactor (Moco)」Metal Ions in Biological Systems, Mendel, Ralf R.及 Schwarz，Gunter, Informa Pic, 2002，第39卷，第317-68頁。該分析係基於cPMP轉化為 MPT，隨後使用重組橋尾蛋白及ATP插入鉬酸鹽，最後復 原人類變亞硫酸鹽氧化酶。 如圖1中所示，證實由合成cPMP合成Moco，且與大腸桿 菌純化之cPMP相比未發現Moco轉化有差異。 實例3.合成製備之前驅物Z(cPMP)與由大腸桿菌製備者在 MPT之活體外合成中的比較 使用合成前驅物Z(cPMP)及自大腸桿菌純化之cPMP的樣 品比較MPT之活體外合成。MPT合成亦涉及使用來自大腸 桿菌之活體外組裝之MPT合成酶。參見美國專利第 7,504,095號；及「Biosynthesis and molecular biology of the molybdenum cofactor (Moco)」Metal Ions in Biological Systems, Mendel, Ralf R.及 Schwarz, Gunter, Informa Pic, 2002，第39卷，第317-68頁。每一實驗重複三次且展示於 圖2及3中。 . 如圖2及3中所示，證實自合成cPMP合成MPT，且與大 腸桿菌純化之cPMP相比未發現MPT轉化有明顯差異。在 所有樣品中均可見cPMP線性轉化為MPT，此證實合成 162380.doc -143 - 201241005 cPMP之一致性（參見圖2)。咸信重複實驗之間的微小差異 係歸因於鑒於存在干擾性發色團合成cPMP之不精確濃度 測定。 實例4·前驅物Z(cPMP)之製備 A·起始物質之製備 流程21.

LiCIO^ MeCN, 90°C

162380.doc • 144· 201241005 B.經保護之磷酸酯的引入 流程22.

BoCaO.DMAP. DCM 經2步為45·490/〇

H2, Pd/C MeOH, 50°C 81%

Pyr., DCM 〇y~C\ 69% 一。 .卜 boc [11] 使用中間物[10】（630 mg)形成環狀磷酸酯，得到呈非對映 異構體之1:1混合物形式的所需產物[11](494 mg，69%)。 162380.doc 145 - 201241005 流程23.

C.分子之氧化及全面脫除保護基 二級醇氧化為孿二醇在中間物丨12】上證明為成功的，但 氧化產物[13】顯示顯著不穩定性且無法純化。為此，在氧 化前嘗試脫除磷酸酯之保護基。然而，中間物【11]與 TMSBr反應導致完全脫除分子之保護基，得到中間物 [14]。試圖使用戴斯-馬丁高碘烷使醇氧化為孿二醇，得到 162380.doc •146· 201241005 芳化蝶啶[15】。 用戴斯-馬丁高碘烷使中間物[11】氧化，得到起始物質、 氧化產物及若干副產物之混合物。最後，使用實例1所述 之方法使中間物[11]氧化。處理後，僅觀察到部分氧化， 得到[11]/[16】之2:1混合物。對粗混合物進行最後脫除保護 基。獲得灰白色固體且藉由1H-NMR及HPLC-MS進行分 ： 析。此等分析表明cPMP與脫除保護基之前驅物[11】一起產 生。 因為分析型HPLC條件使得cPMP與主要雜質良好分離， 所以此方法將使用製備型HPLC重複以分離最終物質。 【圖式簡單說明】 圖1展示說明使用合成前驅物Z(cPMP)及經純化前驅物 Z(cPMP)活體外合成Moco之柱狀圖。 圖2提供由合成前驅物Z(cPMP)活體外合成MPT之三次重 複實驗的數據。 圖3提供由使用大腸桿菌製備之經純化前驅物Z(cPMP)活 、體外合成MPT之三次重複實驗的數據。 162380.doc -147-

Claims (1)

1. 201241005 七、申請專利範圍： 1. 一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法

   ο Ή II 該方法包含： (a)使式（II)化合物： 〇 (Π) 'N N NH, 與式（III)化合物反應： OR, .OR, (ΠΙ) ,〇Ri HO O 產生式（IV)化合物： 中 其 R1

   \J- ,v OR1 I62380.doc 201241005 各1^獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   (c)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   Ri Ri (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (e)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 2. 如請求項1之方法，其中該醫藥學上可接受之鹽為鹽酸 鹽。 3. 如請求項1至2中任一項之方法，其中該式（II)化合物 162380.doc -2- 201241005 為· ο

   νη2 νη2 4. 如請求項！至2中任-項之方法，其中該式⑽化合物為 經保護或未經保護之半乳糖、甘露糖、葡萄糖或古洛糖 (gulose) 〇 5. 如請求項1至2中壬一夕古、土 L , Τ 項之方法，其中該式（III)化合物

   HOV HO

   6. 如β求項1至2中任一項之方法其中兩個相鄰&基團結 合在一起形成亞異丙基縮醛或苯亞曱基縮醛部分。 7. 如·月求項1至2中任一項之方法其中步驟⑷包含使該式 (Π)化合物與該式（1„)化合物在肼存在下反應。 青求項7之方法’其中該肼係選自由苯肼及烧基拼組 成之群。 9.如請求項8之方法，其中該耕為苯耕。 如b求項1至2中任一項之方法其中步驟⑷之該鱗酸化 包含使該式（V)化合物與P(v)碟酸化劑反應。 162380.doc 201241005 11. 如請求項10之方法，其中該P(V)磷酸化劑係選自由以下 組成之群：P0C13 ； H3PO4 ； PO(OBn)xCl3-x ； Cl3CCH2OP(0)Cl2 ;及（Βη0)2Ρ(0)0Ρ(0)(0Βη)2。 12. 如請求項10之方法，其中該P(V)磷酸化劑為P0C13。 13. 如請求項1至2中任一項之方法，其中步驟（c)之該磷酸化 包含使該式（V)化合物與Ρ(ΠΙ)亞磷酸化劑反應。 14. 如請求項13之方法，其中該Ρ(ΙΙΙ)亞磷酸化劑係選自由以下 組成之群：P(〇CH2CH2CN)2Cl ; P(OCH2CH2CN)(NPr2-i)Cl ; 及氰基乙基-〇-P[N(i-Pr)2)]2。 15. 如請求項13之方法，其中步驟（c)進一步包含使所得亞磷 酸酯氧化以製備該化合物（VI)之磷酸酯。 16. 如請求項1至2中任一項之方法，其中步驟（d)包含使該式 (VI)化合物與選自由以下組成之群的氧化劑反應： Ru04 ;戴斯-馬丁試劑（Dess-Martin) ; DMSO/三氟曱磺酸 酐；及PDC。 17. 如請求項1至2中任一項之方法，其中該脫除該式（VII)化 合物之保護基係在缺氧條件下進行。 18. 如請求項1至2中任一項之方法，其中該式（IV)化合物

   162380.doc 201241005 19.如請求項1至2中任一項之方法，其中該式（V)化合物為： R1

   ο OR1 20.如請求項1至2中任一項之方法，其中該式（VI)化合物

   ο ,ρ-ο 21.如請求項1至2中任一項之方法，其中該式（VII)化合物

   ο ,ρ-ο 1 22. 如請求項1至2中任一項之方法，其中該方法進一步包含 將該式（I)化合物調配為醫藥組合物。 23. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， I62380.doc 201241005

   該方法包含： (a)使式（II-A)化合物： h2n

   NH2 HN

   nh2 與式（III-A)化合物在肼存在下反應： OH

   (III-A) 產生式（IV-A)化合物：

   (IV-A) (b)選擇性保護式（IV-A)化合物以製備式（V-A)化合物： h2n

   Ri OH

   (V-A)

   OH

   OH 162380.doc •6· 201241005 其中I為保護基； (c)使該式（V-A)化合物磷酸化以製備式（VI-A)化合物：

   (d)使該式（VI-A)化合物氧化以製備式（VII-A)化合物：

   (e)脫除該式（VII-A)化合物之保護基以製備該式（I)化 合物。 24. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法，

   該方法包含： (a)使式（Π-A)化合物：

   NH2 (Π-Α) h2n HN

   nh2 1623 肌 doc 201241005 與式（III-A)化合物在肼存在下反應： OH

   HO

   OH

   OH 產生式（IV-A)化合物：

   (b)選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-B)化合 物： 0 Ri OH

   Ri , 其中： 各R丨獨立地為保護基； 162380.doc (c)使該式（V-B)化合物磷酸化以製備式（VI-B)化合物：

   Ri 201241005 (d)使該式（VI-B)化合物氧化以製備式（VII-Β)化合物：

   ο /P-ο -B) I (VI 及 (e)脫除該式（VII-Β)化合物之保護基以製備該式（I)化 合物。 25. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， HO OH

   h2n n Η H hjxl〇. r P=0 其包含： (a)使式（II)化合物： ο (Π) Ν， 'Ν' 'ΝΗ2 Ri 其中各1^獨立地為Η或保護基； 與式（VIII)化合物反應： 162380.doc (VIII)201241 005

   /〇r2 ^P=0 .0 其中心為Η或保護基； 產生式（IX)化合物：

   R2 ο/ ο ,ρ-ο (b)選擇性保護該式（IX)化合物以製備式（X)化合物：

   R2 ο/ ο ,ρ——ο 其中R3為保護基； (c)使該式（X)化合物氧化以製備式（XI)化合物：

   Ν——R1

   及 (d)脫除該式（XI)化合物之保護基以製備該式⑴化合 物0 I62380.doc -ΙΟ- 201241005 26. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO ΟΗ

   該方法包含： (a)使式（II)化合物：

   與式（III)化合物反應：

   產生式（IV)化合物：

   -Λ)/ Iv OR1 其中各Ri獨立地為Η或保護基； I62380.doc II - 201241005 (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   (c)使該式（V)化合物氧化以製備式（XII)化合物：

   (XII OR1 (d)使該式（XII)化合物磷酸化以製備式（VII)化合物： R1

   (VI ο Γιι //ρ—ο 及 脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合物。 27. —種式（IV)化合物，

   OR1 162380.doc 12- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中： 各R,獨立地為Η或保護基。 28.如請求項27之化合物，其中該式（IV)化合物為：

   或其醫藥學上可接受之鹽形式。 29. —種式（V)化合物， Ri

   (V)

   或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中： 各Rdg立地為Η或保護基。 30.如請求項29之化合物，其中該式（V)化合物係選自由以下 組成之群·

   162380.doc •13· 201241005

   或其醫藥學上可接受之鹽形式。 3 1.如請求項29之化合物，其中該式（V)化合物係選自由以下 組成之群：

   O OBoc

   Ο OBoc

   OBoc OBoc

   O OBoc

   162380.doc 14· 201241005

   或其醫藥學上可接受之鹽。 32. —種式（VI)化合物， R1

   Ri Ri

   ί/ιι //Ρ—ο 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中： 各1^獨立地為Η或保護基。 33.如請求項32之化合物，其中該式（VI)化合物係選自由以 下組成之群：

   及 ο ΓΓΟ 162380.doc -15. 201241005 Η2Ν Ο

   ΗΝ

   OH

   或其醫藥學上可接受之鹽形式。 34.如請求項32之化合物，其中該式（VI)化合物係選自由以 下組成之群：

   Boc Boc 或其醫藥學上可接受之鹽。 35· —種式（VII)化合物， 162380.doc -16- 201241005

   或其醫藥學上可接受之鹽形式，其中： 各1^獨立地為Η或保護基。 3 6.如請求項35之化合物，其中該式（VII)化合物係選自由以 下組成之群：

   或其醫藥學上可接受之鹽形式。 3 7.如請求項35之化合物，其中該式（VII)化合物係選自由以 下組成之群： 162380.doc -17- 201241005

   Boc Boc

   Boc Boc 或其醫藥學上可接受之鹽形式。 3 8. —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽形式 的方法， 〇 〇

   該方法包含： (a)使式（II)化合物： 162380.doc 18- 201241005 Ο

   ΝΗ 2 (Π) Ri 與式（III)化合物反應： HO OR!

   (ΠΙ) HO

   OR，

   OR! 產生式（IV)化合物： O OR!

   其中： 各心獨立地為H或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   Ri Ri (c)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物： 162380.doc -19· 201241005

   (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物： R1

   1 m \ 1 R丨N NIR

   v)| 及 (e)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 39. —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方 法，

   該方法包含： (a)使式（II)化合物： R1

   Π) I62380.doc -20- 201241005 其中： 各1^獨立地為Η或保護基， 與式（VIII)化合物反應：

   其中： R2為Η或保護基， 產生式（IX)化合物：

   (b)選擇性保護該式（IX)化合物以製備式（X)化合物：

   Γ2ι. (X) 其中： R3為保護基； (c)使該式（X)化合物氧化以製備式（XV)化合物： 162380.doc -21 * 201241005

   (d)脫除該式（XV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 40. —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方 法，

   該方法包含： (a)使式（II)化合物：

   (Π) Ri

   Ri NH

   與式（III)化合物反應： HO OR!

   (ΠΙ) OR! HO

   162380.doc -22· 201241005 產生式（IV)化合物：

   Λ/ Ιν OR1 其中各尺丨獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物： £

   0R1 (c)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   ΓΙ ^/p-ο (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物：

   I62380.doc -23- 201241005 (e)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 41. 一種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO OH

   該方法包含： (a)使式（VI)化合物氧化：

   其中： 各心獨立地為Η或保護基； 以製備式（VII)化合物：

   (b)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物0 162380.doc •24- 201241005 42. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO OH

   該方法包含： (a)使式（V)化合物磷酸化：

   OR! 其中： 各1^獨立地為Η或保護基； 以製備式（VI)化合物： Ο Ri

   (b)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   P=0 I (VII) ο ORt ;及 162380.doc -25- 201241005 (c)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物0 43. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO OH

   該方法包含： (a)選擇性保護式（IV)化合物：

   八N

   I R1 其中： 各心獨立地為Η或保護基； 以製備式（V)化合物：

   (b)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   162380.doc -26- 201241005 (C)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (d)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 44. 一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽形式 的方法，

   該方法包含： (a)使式（VI)化合物氧化：

   Ri Ri 其中： 各心獨立地為Η或保護基； 以製備式（XIV)化合物： 162380.doc -27- 201241005 R1

   及 V) (XI (b)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 45. —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽形式 的方法， 〇 〇 I Η H I H OH

   該方法包含： (a)使式（V)化合物磷酸化： O R! 0^ 〆〇& (V) Ri R! 其中： 各1獨立地為H或保護基； 以製備式（VI)化合物：

   I62380.doc •28· 201241005 (b)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物：

   I R! ο 及 (c)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 46. —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽形式 的方法， OH 、P=0

   Η2Ν Ν 〇 (ΧΙΠ) Η 該方法包含： (a)選擇性保護式（IV)化合物：

   lv OR1 其中： 各立地為Η或保護基； 以製備式（V)化合物： I62380.doc -29· (V) 201241005

   (b)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物 0 R! OR

   P=0 (VI) (C)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物

   N——R1 2 、 RIN

   及 (d)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 47. —種式（I)化合物， 0 HO 0H

   0H / P=0 I 0 或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 I62380.doc -30· 201241005 備： (a)使式（II)化合物：

   與式（III)化合物反應： HO OR,

   (ΠΙ) HO

   OR,

   OR， 產生式（IV)化合物： Ri

   (IV) Ri

   其中： 各1獨立地為H或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   162380.doc -31 - 201241005 (C)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   Ri R, (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (e)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 48. —種式（I)化合物， h2n

   OH / P=0 HN

   ο 或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)使式（VI)化合物氧化：

   其中： 162380.doc -32- 201241005 各心獨立地為Η或保護基； 以製備式（VII)化合物：

   (b)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 49. 一種式（I)化合物， 0 HO OH

   或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)使式（V)化合物磷酸化：

   其中： 各心獨立地為Η或保護基， 162380.doc -33- 201241005 以製備式（νι)化合物：

   (b)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   OR! / P^O I ,0 R1 R1 :及 (VII) (c)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 50. —種式（I)化合物， 〇

   OH / 、P=0 I ,0 或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)選擇性保護式（IV)化合物： 0 OR, a. 其中： 162380.doc •34- (IV) ,0% 201241005 各1獨立地為Η或保護基； 以製備式（V)化合物： Ο R! OR,

   (V) 、入An 人o^^^〇Rl I I Ri Ri (b)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   Ri R, (c)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (d)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式⑴化合 物。 51· —種式（XIII)化合物， 162380.doc -35- 201241005

   或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)使式（II)化合物：

   與式（VIII)化合物反應：

   (VI R2 ο 其中： R2為Η或保護基， 產生式（IX)化合物：

   162380.doc -36- 201241005 其中： 各1獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IX)化合物以製備式（X)化合物： s

   Γ2!. TO 其中R3為保護基； (c)使該式（X)化合物氧化以製備式（XV)化合物：

   R2 ο/ ο ,ρ——ο 及 (d)脫除該式（XV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 52. —種式（XIII)化合物，

   OH, ο ίρ-ο XII 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其藉由包含以下之方法 製備： (a)使式（VI)化合物氧化： 162380.doc ·37· 201241005

   Ri Ri 其中： 各R丨獨立地為H或保護基， 以製備式（XIV)化合物：

   R1 (b)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 53. —種式（XIII)化合物， Η2Ν

   ο Ή II 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其藉由包含以下之方法 製備： (a)使式（V)化合物磷酸化： 0 Ri OR,

   I62380.doc • 38 - 201241005 其中： 各1^獨立地為Η或保護基； 以製備式（VI)化合物：

   Ri Ri (b)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物： R1

   1 N 〆 1 R-N N-R'

   I 及 (c)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 54. —種式（XIII)化合物，

   ο IH一一 或其醫藥學上可接受之鹽形式，其藉由包含以下之方法 製備： (a)選擇性保護式（IV)化合物： I62380.doc •39- 201241005

   πν‘ OR1 其中： 各1獨立地為Η或保護基； 以製備式（V)化合物：

   (b)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   (C)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物：

   及

   Ν——R1 I62380.doc -40- 201241005 (d)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 5 5. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， Η2

   ?H ,p;—ο 該方法包含： (a)使式（II)化合物：

   與式（XXII)化合物反應 0R1 (XXII) ,〇Ri PhHNN’ HO" 產生式（IV)化合物：

   ΗΝ ΝΗ ί丨 ο OR1 I62380.doc -41 · 201241005 其中： 各Ri獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   (c)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (e)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 56.如請求項55之方法，其中該式（II)化合物為： 162380.doc • 42· 201241005

   5 7.如請求項55至56中任一項之方法，其中該式（XXII)化合 物為：

   58. 如請求項55至56中任一項之方法，其中步驟（c)之該磷酸 化包含使該式（V)化合物與P(V)磷酸化劑反應。 59. 如請求項58之方法，其中該P(V)磷酸化劑係選自由以下組成 之群：P0C13 ; PO(OCH3)xC13_x ; H3P〇4 ; PO(OBn)xCl3_x ; C13CCH20P(0)C12 ;及（Bn0)2P(0)0P(0)(0Bn)2。 60. 如請求項58之方法，其中該P(V)磷酸化劑為 Cl2PO(OCH3)。 61. 如請求項55至56中任一項之方法，其中步驟（d)包含使該 式（VI)化合物與選自由以下組成之群的氧化劑反應： TFAA/DMSO ; Ru04 ;戴斯-馬丁試劑；DMSO/三氟甲磺 酸酐；及PDC。 62. 如請求項55至56中任一項之方法，其中該脫除該式（VII) 化合物之保護基係在缺氧條件下進行。 63. 如請求項55至56中任一項之方法，其中該式（IV)化合物 162380.doc -43- 201241005 為 OM R1 N-R1 N1 .N

   任 中 6 5 至 5 5 項 求 請： 如為 4 6 一項之方法，其中該式（V)化合物 ΊΛ1 R1、N——R

   5 6 任 中 6 5 至 5 5 項 求 請： 如為 一項之方法，其中該式（V)化合物 ο R1

   6 6 任 中 6 5 至 5 5 項 求 請： 如為 項之方法，其中該式（VII)化合物 JLR /. R1-N

   I62380.doc • 44 - 201241005 67·如請求項55至56中任一項之方法，其中該方法進一步包 含將該式（I)化合物調配為醫藥組合物。 68. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO ΟΗ

   該方法包含： (a)使式（ΙΙ-Α)化合物：

   nh2 (Π-Α)

   與式（XXII-A)化合物在肼存在下反應： PhHNN OH HO

   HO

   OH 產生式（IV-A)化合物： h2n

   HN

   OH

   (IV-A)

   OH (b)選擇性保護該式（IV-A)化合物以製備式（V-C)化合 162380.doc -45- 201241005 物

   (V- OR1 (C)使該式（V-C)化合物磷酸化以製備式（VI-C)化合物： R1

   ρ-ο VIί/Ι (d)使該式（VI-C)化合物氧化以製備式（VII-C)化合物：

   N-R1 N-R1 ο 及 (e)脫除該式（VII-C)化合物之保護基以製備該式（I)化 合物。 69. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法，

   OH SP=0 162380.doc •46· .0 (XXIII) 201241005 該方法包含： (a)使式（XXIII)化合物反應 OR4 /〇Ri ,ORi 〇，、cr 其中= 各心獨立地為H或保護基且 R4為Η或離去基； 產生式（XXIV)化合物： 0 or '〇

   OR， OR, (XXIV) (b)使式（XXIV)化合物與式（II)化合物反應

   產生式（XXV)化合物： -47- I62380.doc (XXV) 201241005

   (c)催化該式（XXV)化合物之環形成，產生式（IV)化合 物：

   I Ri (d)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物： 0 R! OR,

   Ri Ri (e)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   162380.doc • 48 · (VI) 201241005 ⑴使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物··

   (g)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 70.如請求項69之方法，其中該式（XXIII)化合物係選自由以 下組成之群： OH

   71.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（XXIV)化合 物為

   162380.doc -49- 201241005 72.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（II)化合物

   73.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（XXV)化合 物為：

   74. 如請求項69至70中任一項之方法，其中步驟（e)之該磷酸 化包含使該式（V)化合物與P(V)磷酸化劑反應。 75. 如請求項74之方法，其中該P(V)磷酸化劑係選自由以下組成 之群：P0C13 ; PO(OCH3)xC13.x ; H3P〇4 ; PO(OBn)xCl3_x ; C13CCH20P(0)C12 ;及（Βη0)2Ρ(0)0Ρ(0)(0Βη)2 〇 76. 如請求項74之方法，其中該P(V)磷酸化劑為 Cl2PO(OCH3)。 77. 如請求項69至70中任一項之方法，其中步驟（f)包含使該 式（VI)化合物與選自由以下組成之群的氧化劑反應： TFAA/DMSO ; Ru04 ;戴斯-馬丁試劑；DMSO/三氟曱磺 162380.doc -50- 201241005 酸酐；及PDC。 78. 79. 80. 81. 如請求項69至70中任一項之方法，其中該脫除該式（VII) 化合物之保護基係在缺氧條件下進行。 如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（XXIII)化合 物為：

   如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（XXIV)化合 物為：

   如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（XXV)化合 物為：

   162380.doc -51 · 201241005 82.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（IV)化合物

   ...... ^ Ν Ν Ν Ξ 0 = | Η = = OR, Ri 83.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（V)化合物 為：

   〇 Ν N" I Ri 84.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（VI)化合物 為：

   Ν N I Ri R! 85.如請求項69至70中任一項之方法，其中該式（VII)化合物 為： 162380.doc -52- 201241005

   86. 如請求項69至70中任一項之方法，其中該方法進一步包 含將該式（I)化合物調配為醫藥組合物。 87. 如請求項69至70中任一項之方法，其中離去基係選自由 以下組成之群：甲苯磺酸酯基、溴苯磺酸酯基、硝基苯 石黃酸自旨基、曱績酸醋基、氧鏽基、三氟甲確酸自旨基、九 氟丁磺酸酯基及三氟乙磺酸酯基。 88. —種製備式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方法， 0 HO OH

   該方法包含： (a)使式（XXIII-A)化合物反應：

   (XXI1I-A) 其中： 各Rdg立地為Η或保護基，且 162380.doc -53- (XXIV) 201241005 R4為Η或離去基， 產生式（XXIV)化合物：

   (b)使式（XXIV)化合物與式（II-A)化合物反應： 〇 (U-A) h2n ΗΝ

   產生式（XXV-A)化合物：

   (XXV-A) (c)催化該式（XXV-AH匕合物之環形成，產生式（IV 化合物： OR!

   (IV-D) h2n

   162380.doc • 54· 201241005 (d)選擇性保護該式（IV-D)化合物以製備式（V-D)化合 物：

   (e)使該式（V-D)化合物磷酸化以製備式（VI-D)化合物： ORi Η ORn ,〇、 、P=0 (VI-D) 、N N N 0, I I Ri Ri (f)使該式（VI-D)化合物氧化以製備式（VII-D)化合物：

   (g)脫除該式（VII-D)化合物之保護基以製備該式（I)化 合物。 89. —種式（I)化合物，

   162380.doc -55- 201241005 或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)使式（II)化合物：

   nh2 (II)

   Ri 與式（XXII)化合物反應：

   (XXII) 產生式（IV)化合物： Ri

   (IV) R!

   其中： 各1獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物： 0 R, OR,

   、入An 人。^^〇Rl I I Ri Ri 162380.doc -56- (V) 201241005 (C)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   ο ,ρ-ο (VI (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物： NT

   0R1 / P=0 I ,〇 (VII) R1 R1 :及 (e)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 90. —種式（I)化合物 〇

   或其醫藥學上可接受之鹽，其藉由包含以下之方法製 備： (a)使式（XXIII)化合物反應：

   162380.doc -57- (XXIII) 201241005 其中： 各1^獨立地為Η或保護基且 R4為Η或離去基； 產生式（XXIV)化合物： L>Y〇Ri (xxiv)

   (b)使式（XXIV)化合物與式（II)化合物反應：

   (c)催化式（XXV)化合物之環形成，產生式（IV)化合 物： 162380.doc • 58 - 201241005 O OR，

   Ri (d)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   R1 R1 (e)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   Ri Ri ⑴使該式（VI)化合物氧化以製備式（VII)化合物：

   (g)脫除該式（VII)化合物之保護基以製備該式（I)化合 物。 162380.doc -59- 201241005 91. 一種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方 法，

   該方法包含： (a)使式（II)化合物：

   nh2 (U) Ri Ri N

   Ri

   nh2 HO OR，

   (XXII) OR,

   產生式（IV)化合物： O OR!

   Ri 162380.doc 60- 201241005 其中： 各1獨立地為Η或保護基； (b)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物： Ο Ri OR，

   Ri Ri (C)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   Ri Ri (d)使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物： OR! ,〇、 、PU I (xiv) ,ο ο :及 (e)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 92· —種製備式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方 法， 162380.doc •61 · 201241005

   該方法包含： (a)使式（XXIII)化合物反應： 〇R4 ο ο

   OR， (XXIII)

   其中： 各立地為Η或保護基且 R4為Η或離去基； 產生式（XXIV)化合物：

   〇

   OR, (XXIV) (b)使式（XXIV)化合物與式（II)化合物反應： Ri

   Ri

   (Π)

   Ri NH

   162380.doc •62- (XXV) (XXV)201241005 產生式（XXV)化合物：

   (c)催化該式（XXV)化合物之環形成，產生式（IV)化 合物：

   (d)選擇性保護該式（IV)化合物以製備式（V)化合物：

   (e)使該式（V)化合物磷酸化以製備式（VI)化合物：

   162380.doc -63· 201241005 ⑴使該式（VI)化合物氧化以製備式（XIV)化合物：

   | (XIV) R、入NAN 入 I I R1 R1 ;及 (g)脫除該式（XIV)化合物之保護基以製備該式（XIII)化 合物。 93. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項1之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 94. 一種醫藥組合物，其包含藉由如請求項23之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 95. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項24之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 96. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項25之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 97. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項26之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 98. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項55之方法製備的 162380.doc -64- 201241005 式（i)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 99. 一種醫藥組合物，其包含藉由如請求項68之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 100. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項69之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 101. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項88之方法製備的 式（I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接 受之賦形劑。 102. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項39之方法製備的 式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上 可接受之賦形劑。 103. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項40之方法製備的 式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上 可接受之賦形劑。 104. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項91之方法製備的 式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上 可接受之賦形劑。 105. —種醫藥組合物，其包含藉由如請求項92之方法製備的 式（XIII)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上 可接受之賦形劑。 106. —種製備式（XXIV)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的方 162380.doc -65- 201241005 法， 〇、 L>^/0Ri

   其中： 各1^為11或保護基，該方法包含使式（XXIII)化合物： OR4 Ο Ο

   OR! (XXIII)

   其中： R4為Η或離去基， 與鹼反應以製備式（XXIV)化合物。 162380.doc 66-