TW201118105A - Steroidal compounds as melanogenesis modifiers and uses thereof - Google Patents

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201118105 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於對於調節黑色素合成（黑色素生成）之化合 物之鑑別、及該等化合物及其組合物在調節（例如，抑制） 黑色素產生中之用途。本發明亦係關於使用本發明化合物 來預防及/或治療與異常黑色素生成活性（例如包括（但不限 於）色素沉著異常及色素沉著過度）因果有關之病狀的方 法。應理解，該等化合物可單獨使用或與具有本文所述活 性之其他化合物組合使用。 本申請案係2009年4月30日提出申請且標題為「Ster〇idal compounds as melanogenesis modifiers and uses thereofj 之美國專利申請案第12/433,322號之部分接續申請案，其 主張2008年4月30日提出申請之美两臨時專利申請案第 61/049,114號之權利。該等申請案之揭示内容的全部内容 皆以引用方式併入本文中。 【先前技術】 本申明案中提及若干公開案及專利文件以更全面地闡述 本揭示内容所屬之技術狀態。該等公開案及文件中每一者 之揭示内容皆以引用方式明確併入本文中。 在稱作黑色素小體之專屬細胞器内部，黑色素細胞會合 成黑色素（參見 Orlow，1998，The Pigmentary System: Physiology and Pathophysiology 97, Oxford University Press, New York，Nordlund等人編輯）。黑色素小體係藉由 融合兩類泡囊而形成。黑色素係在許多動物之皮膚、毛 151482.doc 201118105 髮、羽毛、鱗屑、眼睛、及一些内部膜中發現之可防護紫 外輻射的暗色生物色素（dark biological pigment)(生物色素 (biochrome)) ° 參見 http://www.britannica.com/eb/topic?idxStructId=460219&typeId=13 ； http://www.britannica.com/eb/topic?idxStructId=126546&typeId=13 ； http://www.britannica.com/eb/article-9109619。黑變病係 指黑色素在活動物組織中發生沈積，其化學性質取決於胺 基酸酪胺酸之代謝。更特定而言，黑色素在胺基酸酪胺酸 之代謝期間以最終產物形式形成。參見 http://www.britannica.com/eb/topic?idxStructId=611971&typeld=13。 黑色素產生缺陷及黑色素沈積（亦即，黑變病）可導致色素 沉著缺陷，例如白化病。 可使用控制黑色素合成繼而改變皮膚色素沉著之能力來 有利地解決各種健康相關性病狀、以及化妝目標。降低色 素沉著係諸如黑斑病、黃褐斑、炎症後色素沉著過度、曬 斑、及諸如此類等病症治療中之期望結果。 調節膚色之能力在許多國家已產生相當大的興趣。人們 認為，黑色素之不恰當產生或過度產生係許多個體之化妝 問題。特定而言，期望膚色均勻之個體較為關注去除色素 沉著過度（例如通常發現於老人斑、雀斑或老化皮膚中者） 之能力。另外，因在過度曝露於日光後出現之黃褐斑、雀 斑、及色素沈積物往往在中年及老年個體中發生戒發生頻 率增大，故該等問題在老齡個體中有所增加。實際上’隨 著年齡增長，該等色素沈積物通常需要較長時間方才消失 151482.doc 201118105 且更可能持續下去。在世界上某些地區，亦期望整個身體 變白。 業内已研發出許多產品來降低皮膚色素沉著。一種此類 產品含有氫醌，其係用於皮膚色素脫失之熟知之活性物 質’如美國專利第6，139,854號中所述。然而，若長時間施 用’則氫醌可具有嚴重副作用。將氫醌施加至皮膚可（例 如）引起永久性色素脫失’此使得皮膚在曝露於紫外光時 之光敏性有所增加。可組合投與氫酿與可的松 (cortisone)(其在面部投與後可使皮膚變薄並引起其他問 題）、視黃酸（刺激物）、或羥乙酸（刺激物）以增加氫醌功 效。 業内已提出各種其他物質來用作皮膚色素沉著之調節 齊J °幾乎所有該等物質皆係藉由抑制黑色素產生中之酪胺 酸酶（主要速率限制酶）活性以漂白現有顏料或預防合成新 顏料來發揮作用。美國專利第6,123,959號（例如）闡述包括 脂質體及至少一種參與黑色素合成之酶競爭抑制劑之水性 組合物的用途。美國專利第5，132,74〇號闡述某些間苯二酚 衍生物作為皮膚增亮劑之用途。w〇 99/64〇25闡述用於皮 膚增亮之組合物’其含有來自加拿大本土之雙子葉植物類 之路胺酸酶抑制提取物。美國專利第5,58〇,549號闡述用於 皮膚增免之外部製劑’其包括2_羥基苯曱酸衍生物及其鹽 作為酪胺酸酶之抑制劑。w〇 99/〇9〇11闡述用於抑制皮膚 紅斑及/或皮膚色素沉著之藥劑，其含有至少一種喹諾酮 何生物及其鹽。美國專利第5,214,〇28號及第5,389,611號闡 151482.doc 201118105 述用作酪胺酸酶抑制劑之乳鐵蛋白水解物。 在WO 02 98347中，Manga闡述鑑別可改變黑色素原細 胞t之黑色素生成之化合物、更特定而言抑制或增強p蛋 白功能之化合物的方法《此方法係部分地基於如下觀察： 酪胺酸酶及其他黑色素小體蛋白之適當細胞定位需要p蛋 白功能，且黑色素原細胞類型中之全酪胺酸酶活性及黑色 素生成亦需要P蛋白功能。

Orlow等人闡述用於鑑別抑制或增加黑色素原細胞中之 黑色素生成之化合物的篩選方法。參見w〇 〇 i丨丨3丨。該等 研究係基於如下發現：一些化合物藉由引起黑色素合成中 之主要酶-酪胺酸酶發生錯位來抑制黑色素生成。 其他研究係關於用於增加黑色素生成之方法及組合物。 美國專利第5,352,440號（例如）係，關於藉由投與某些二酿甘 :化合物來增加黑色素細胞中之黑色素合成並增加色素沉 著。美國專斧,J第5,532,001號係關於經由投與某些DNA片段 來增加哺乳動物皮膚中之色素沉著。美國專利第 號係？於藉由投與向溶酶體劑來增加黑色素細胞中之黑色 素含量。美國專利第6,75q，229號及第M95，綱號係關於分 別對於蛋白酶-活化受體_2(鲁2)路徑及一氧化氮合成調 節劑之鑑別及其在調節色素沉著程度中之用途。 ^上所述，t内已提出許多方法來達成期望之皮膚色素 /儿者程度。該等方法包含麴酸、氫騎、類視色素及用於色 :脫失目的之其他化合物。然而，許多該等化合物及其組 °物之價值值得商榷1要精輕加所有該等化合物以達 151482.doc 201118105 成期望結果’此乃因皮膚之經處理區域與未經處理區域間 之明晰分界線通常顯而易見。另外，許多該等化合物會引 起皮膚刺激，且因此該等化合物之使用具有不期望之副作 用，尤其在長期使用時。 【發明内容】 本發明係關於可藉由細胞基分析鑑別之化合物，該等化 合物可控制黑色素生成。簡言之，在細胞基分析中筛選化 合物以鑑別能夠控制、且尤其抑制黑色素生成之化合物。 關於筛選分析之詳細内容闡述於下文實例中。筛選分析之 結果能鑑別複數種可調節（亦即抑制）黑色素生成之化合 物，-些化合物先前並未知曉可呈現該活性而其他化合物 已知可影響黑色素生成。應注意，對於本發明筛選方法中 已知黑色素生成調節劑之活性進行確認可證實該等技術及 實驗方式之有效性。 因此’本文揭示如下實施例：其係關於對於先前未經鑑 別之類固醇黑色素生成抑制劑之鑑別、及該等抑制劑在活 體外及活體内應用中控制(例如減少)色素沉著之用途。本 揭示内容進一步提供以提取物、或經純化化合物形式投與 類固醇黑色素生成抑制劑之方法。該方法視需要包含自夹 竹桃科（AP〇cynaceae)家族植物獲得一定量之植物物質，視 需要粉碎該植物物質，使該植物物質與提取介質接觸，及 分離該植物物質與該提取介質。 新穎黑色素生成調節劑包含由式；[代表之化合物： 151482.doc 201118105

R、R2、R4、R7、Rn獨立地選自由以下組成之群： 氫、羥基、胺基、硝基、鹵素 '經取代或未經取代之 (C1-C6)燒基、經取代或未經取代之（Ci_C0)烧氧基、經 取代或未經取代之（C3_C·；)環烧基、及經取代或未經取 代之苯基； R1G係氫或經取代或未經取代之烷基； R12係氫、羥基或經取代或未經取代之醯氧基； R13係氫或（C丨-C6)經取代或未經取代之烧基； R17係氫、（q-cd經取代或未經取代之烷基、或COR22 ; R18係經取代或未經取代之烷基； R20及R21獨立地選自Η、（Ci-C6)烷基，或視需要R20與R21 一起形成側氧基； 151482.doc 201118105

Ra、“獨立地選自氫、（Ci-C6)經取代或未經取代之烷 基、（eve：6)經取代或未經取代之雜烷基、 取代或未經取代之芳基、（C5_Ciq)經取代或未經取代 之雜芳基、COR22、C〇2R22、c〇n(r23)2、8〇爪22 或 S02N(R23)2 ; 5 每一 R22皆獨立地係（Cl_C6)經取代或未經取代之烷基、 (Cl-c0)經取代或未經取代之雜烷基、（c^cw經取代 或未經取代之芳基、或（C5_c〗q)經取代或未經取代之 雜芳基； 每一R23皆獨立地係氫、（Cl_C6)經取代或未經取代之烷 基、（Q-C6)經取代或未經取代之雜烷基、（C6_Cy經 取代或未經取代之芳基、或取代或未經取 代之雜芳基；且

Rc係氫或（C1 -C0)經取代或未經取代之院基； 或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體、代謝物、類似物、同位素變體或前藥。 在一特定實施針’對於幻而言，化合物係式π(錐絲 驗）.

Me

Me 151482.doc •10-

II 201118105 或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體、代謝物、類似物、同位素變體或前藥。錐絲鹼及錐絲 驗衍生物揭示於美國專利第3,466,279號、第3,485,825號、 及第3,539,449號中，每一者之全部内容皆以引用方式併入 本文中。 對於活體外應用而言’可使用試管基及額外細胞基分析 來測試經修飾形式及/或類固醇化合物改變黑色素生成之 能力。活體内應用係關於出於預防、治療及/或化妝目 的，向渴望或有需要之受試者投與新穎類固醇黑色素生成 調節劑化合物中之至少一者以控制及/或減少色素沉著程 度。 根據所揭示之實施例，提出改變哺乳動物皮膚色素沉著 方法其包括向哺乳動物皮膚局部施加至少一種類固醇 化合物或其組合物。本文所揭示之組合物可含有已經鑑別 可作為黑色素生成調節劑之類固醇化合物中之一或多者。 更特定而言且對於彼等能夠減少或抑制黑色素生成之化 合物而言’所揭示之實施例涵蓋降低哺乳動物皮膚、毛髮 或絨毛t之色素沉著、及/或增強其亮白度之方法，其包 括向哺㈣物局部投與有效量之—或多種本文所述作為黑 色素生成調節劑的化合物。 :-特定實施例中，可.將本文所揭示之黑色素生成調節 ::其組合物施加至色素沉著過度位點]亥色素沉著過度 不限於）老人斑、雀斑、藥物誘導性色素沉著過度、 “瘡中所見之炎症後色素沉著過度、脂溢性角化病、黑斑 J51482.doc 201118105 病及黃褐斑。對於一些個體而言，期望身體的較大皮膚區 域變白，且可藉由更普遍性地施加本文所揭示之黑色素生 成抑制劑或其組合物來達成。 在另一態樣中，所揭示之實施例提供組合物（包含化妝 品調配物）’彡包括本文所揭示之一或多種化合物、及適 且生物相容或生物惰性載劑、賦形劑或稀釋劑。在此態樣 中，化妝品或醫藥組合物可包括本文所述化合物中之一或 多者。另外，本文所揭示之化合物可用於本文所揭示之化 妝品及/或醫藥組合物及治療方法中，其在製備及使用時 皆係醫藥上及/或化妝上可接受。 在另-態樣中，本文揭示包括本文所述化合物與各種額 外化合物或藥劑之組合之組合物，該等額外化合物或藥劑 包含可對黑色素生成具有類似效應之化合物或藥劑，例 如’其他皮膚增亮劑、皮膚亮白劑或皮膚漂白齊卜在一些 實施例中’額外化合物或藥劑可為皮膚護理活性劑（❹ 磨钱劑、吸收劑、收斂劑）、美觀組份（例如香味劑、顏 料、色素/著色劑、料油、皮膚感覺劑、收斂劑及其他 :觀組份)、抗氧化劑、還原劑、聲合劑、皮膚漂白或增 亮劑、皮膚調節劑（例如保濕劑及潤膚劑）、皮膚安撫劑、 皮膚癒合劑（例如泛醇及衍生物、真屢薈、泛酸、尿囊 素、沒藥帛'甘草酸二鉀)、皮膚處理劑、維他命及衍生 物(例如類視色素)、或其混合物。在一些實施例中，類視 色素係視黃醇、視黃酸、視黃醇@旨、丙酸視黃自旨、 I棕《視黃'或其混合物。在此態樣中，醫藥及/ 151482.doc 201118105 或化妝品組合物可句紅士 匕括本文所述化合物卡之一或多者。另 外，s玄等化合物可用於+ — 、本文所揭示之醫藥及/或化妝品組 合物及治療方法φ，甘^_办丨 '、在製備及使用時皆係醫藥上及/或 化妝上可接受。 本發明亦提供藉由黑色素細胞來抑制黑色素生成之方 法其包括向黑色素細胞或皮膚組織投與有效量之含有黑 色素生成抑制劑之植物提取物。在一些實施例中，黑色素 生成抑制劑係如式1中之類固醇黑色素生成抑制劑。在一 些實施.例中’黑色素生成抑制劑係錐絲鹼或錐絲鹼衍生 物。在一些實施例中’黑色素細胞係哺乳動物黑色素細 胞。在一些實施例中，皮膚組織係人類皮膚，包含但不限 於非洲裔美國人、亞洲人及高加索人皮膚同等物。在一些 實施例中，植物提取物源自夾竹桃科家族之植物。在一些 實施例令’植物提取物源自南亞止瀉木（H〇larrhena antidysenterica)(亦稱作Kutaj)。其他實例包含源自以下之 植物提取物.短柔毛止渴木（Holarrhena pubescens)(抗痢木 皮（Kurchibark))、非洲止〉寫木（Holarrhena Africana)、剛果 河止瀉木（Holarrhena congolensis)、退熱止瀉木（Holarrhena febrifuge)、繁花止瀉木（Holarrhena floribunda)、沃氏止瀉 木（Holarrhena wattsbergii)及野橡膠木（Funtumia elastica) 〇 在一些實施例中’亦提供含有預防、治療及/或化妝有 效量之黑色素生成抑制劑的植物提取物用作黑色素生成抑 制劑。植物提取物可用作醫藥、藥劑或化妝劑。在一些實 施例中，將植物提取物實質上純化或部分純化以濃縮黑色 151482.doc 13 201118105 素生成抑制劑。在其他實施例中，可將植物提取物實質上 液化或部分液化以投與有需要之患者。亦可在投與前處理 植物提取物以去除顆粒物質。在一些實施例中，黑色素生 成抑制劑係錐絲鹼或錐絲鹼衍生物。 亦提供本文所揭示植物提取物在製備用於治療指定黑色 素生成抑制劑之疾病、病狀或效應之藥劑或化妝劑中的用 途。可藉由標題組合物及方法預防、治療、改善及/或處 理之疾病、病狀或效應包含但不限於色素沉著過度或不均 :色素沉著病症’例如老人斑、雀斑、藥物誘導性色素沉 者過度'痤瘡中所見之炎症後色素沉著過度、脂溢性角化 病、黑斑病及黃褐斑。在其他實施例中，提供包括組合物 之局部調配物以用於化妝及/或皮膚病學/醫藥用途，該組 °物L括3有預防、化妝或治療有效量之錐絲鹼之植物提 取物。在-些實施例中，植物提取物源自夹竹桃科家族之 植物。在-些實施例中，植物提取物源自南亞止渴木。盆 =例包含源自以下之植物提取物：短柔毛止瀉木(抗病 木皮）、非洲止渴木、剛果河止填木、退熱止渴木、繁花 止渴木、沃氏止萬木及野橡夥木。在-些實施例中’將植 :提取物貫質上純化或部分純化以濃縮黑色素生成抑制 1在其他實施例中，可將植物提取物實質上液化或部分 =以投財f要之患者。亦可在投與前處理植物提 以去除顆粒物質。在一些實施例 里 錐絲驗或錐絲料生物。 ‘，、、色素生成抑制劑係 亦提供㈣、㈣、改善或處㈣及不㈣或異常黑色 15l482.doc 201118105 素生成之疾病或病狀之方法，其包括向需要或渴望該預 防、治療、改善或處理之患者投與預防或治療有效黑色素 生成抑制量之含有黑色素生成抑制劑的植物提取物。在一 些實施例中’黑色素生成抑制劑係式I之類固醇黑色素生 成抑制劑。在一實施例中，黑色素生成抑制劑係錐絲鹼或 錐絲鹼衍生物。在又一態樣中，提供改變或恢復哺乳動物 皮膚、毛髮、絨毛或毛皮中之色素沉著之方法，其包括向 哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮投與可有效改變或恢復 哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮中之色素沉著之量之含 有錐絲鹼的植物提取物。在再一態樣中，亦提供治療哺乳 動物（包含人類）以治療指定黑色素生成抑制劑之疾病之方 法，其包含使用有效量之含有錐絲鹼之植物提取物來治療 該哺乳動物。在-些實施例中，植物提取物源自爽竹桃科 家族之植物。在一些實施例中，植物提取物源自南亞止瀉 木。其他實例包含源自以下之植物提取物：短柔毛止瀉木 („木皮)、非洲止萬木 '剛果河止填木、退熱止填木' 繁花止瀉木、沃氏止瀉木及野橡膠木。在一些實施例中， 將植物提取物實質上純化或部分純化以濃縮黑色素生成抑 制劑。在其他實施例中，可將植物提取物實質上液化或部 刀液化以投與有需要之患者。亦可在投與前處理植物提取 物以去除顆粒物質。在-些實施例中，黑色素生成抑制劑 係錐絲驗或錐絲驗衍生物。 151482.doc •15- 201118105 投與含有黑色素生成抑制劑之植物提取物以減輕或減少皮 膚上色素沉著過度位點處之色素沉著程度。在一些實施例 中’黑色素生成抑制劑係錐絲驗或錐絲驗衍生物。在一 4b 實施例中，植物提取物源自夾竹桃科家族之植物。在一些 實施例中，植物提取物源自南亞止瀉木。其他實例包含源 自以下之植物提取物：短柔毛止瀉木（抗痢木皮）、非洲止 渴木、剛果河止瀉木、退熱止瀉木、繁花止瀉木、沃氏止 瀉木及野橡膠木。在一些實施例中，將植物提取物實質上 純化或部分純化以濃縮黑色素生成抑制劑。在其他實施例 中’可將植物提取物實質上液化或部分液化以投與有需要 之患者。亦可在投與前處理植物提取物以去除顆粒物質。 在一些實施例中，黑色素生成抑制劑係錐絲鹼或錐絲鹼衍 生物。在一些實施例中，黑色素生成抑制劑係錐絲鹼或錐 絲鹼衍生物。 在另實施例中，提供本文所揭示之植物提取物與相似 作用之藥劑（like-acting agent)之組合。相似作用之藥劑可 選自化妝成份及/或藥理學活性劑。舉例而言，化妝成份 可為皮膚増免劑或防曬劑或增加皮膚細胞更新之藥劑。藥 理學活性劑可選自另—黑色素生成抑㈣卜 、 另-態樣涵蓋藉由黑色素細胞抑制黑色素生成之方法 其包括向黑色素細胞投與有效量之含有黑色素生成抑制: 之植物提取物與相似作用之藥劑的組合。在—些實施彳 中’將植物提取物實質上純化或部分純化以濃縮黑色素: 成抑制劑。在其他實施例中，可將植物提取物實質上液> 151482.doc .16 · 201118105 或部分液化以投盘右营a * w /、 心者。亦可在投與前處理植物 =:去除顆粒物質。在-些實施例中，黑色素生成抑 制翁錐絲驗或錐絲驗衍生物。在一些實施例中，黑色素 生成抑制劑係錐絲鹼或錐絲鹼衍生物。本文亦提供預防、 治療、改善或處理涉及殘望或異常黑色素生成之疾病或 病狀之方法，#包括向需要或渴望該預防、治療、改善或 處理之患者投與預防或治療有效黑色素生成抑制量之植物 提取物與相似作用之藥劑的組合。在另-態樣中，提供改 變或恢復哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮中之色素沉著 之方法’纟包括向哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或 可有效改變或恢復哺乳動物皮膚、毛髮' 絨毛或毛皮中^ 色素沉著之量含有黑色素生成抑制劑之植物提取物與相似 作用之藥的組合。在另—態樣中，亦提供治療喷乳動物 (包含人類）以治療指定黑色素生成抑制劑之疾病之方法， 其包含使用有效量之含有黑色素生成抑制劑之植物提取物 與相似作用之藥劑之組合來治療該哺乳動物。在一些實施 例中，植物提取物源自夾竹桃科家族之植物。在一些實施 例中，植物提取物源自南亞止瀉木。其他實例包含源自以 下之植物提取物：短柔毛止瀉木（抗痢木皮）、非洲止瀉 木、剛果河止瀉木、退熱止瀉木、繁花止瀉木、沃氏止瀉 木及野橡膠木。 在任一上述標題方法中，相似作用之藥劑可選自化妝成 份及藥理學活性劑。化妝成份之一實例係皮膚增亮劑。藥 理學活性劑可選自另一黑色素生成抑制劑。 151482.doc 17 201118105 彼等熟習此項技術者藉由考慮隨後之詳細說明可明瞭其 他目標及優點，此可自參照下列閣釋性圖式開始進 【實施方式】 專利或中請案文件含有至少—個帶彩圖之圖式。可㈣ 要求並在支付必要費用之後由專利事務局提供帶彩圖之本 專利或專利申請公開案副本。 本揭示内容之新顆特徵心地閣述於隨附申請專利範圍 中。參照下列闡述闞釋性實施例及附圖之詳細說明， 好地理解諸多特徵及優點。 定義 在鬧述化合物、含有該等化合物之醫藥及/或化妝品組 合物及使用該等化合物及組合物之方法時，除非另有說 明’否則下列術語具有下列含義。亦應理解，任何下文所 定義之部分皆可經各種取代基取代，且各個定義皆意欲將 該等經取代部分包含於其範圍内。 ·、' 「醯基」係指基團_C(0)R2〇,其中yo係氫、如本文所定 義之經取代或未經取代之炫基、經取代或未經取代之環烧 基、經取代或未經取代之環雜烧基、經取代或未經取代之 芳基、經取代或未經取代之芳烧基、經取代或未經取代之 雜縣、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代 之雜芳院基。代表性實例包含但不限於甲酿基、乙醯A、 環己基幾基、環己基甲基幾基、苯甲醯基'节基幾基^諸 如此類。 「醯基胺基」係指基團ϋ⑼r22，其中r2i係氨、經 151482.doc -18 · 201118105 取代或未經取代之院基、經取代或未經取代之環院基、經 取代或未經取代之環雜烷基、經取代或未經取代之芳基、 、&取代或未經取代之芳烷基、經取代或未經取代之雜烷 基經取代或未經取代之雜芳基經取代或未經取代之雜 芳烷基且R22係氫、經取代或未經取代之烷基、經取代或 未經取代之絲基、經取代或未經取代之環烧基、經取代 或未、，、里取代之裱雜烷基、經取代或未經取代之芳基、經取 代或未經取代之芳院基、經取代或未經取代之雜烷基、經 取代或未經取代之雜芳基或經取代或未經取代之雜芳烷 基如本文所定義。代表性實例包含但不限於甲醯基胺 基、乙醯基胺基、環己基羰基胺基 '環己基甲基羰基胺 基、苯曱醯基胺基、苄基羰基胺基及諸如此類。 「醯氧基」係指基團_〇C(〇)R23，其中R23係氫、經取代 或未’座取代之烧基、經取代或未經取代之芳基或經取代或 未經取代之環烷基。 經取代之烯基」包含彼等在本文「經取代」之定義中 斤列舉的基團，且尤其係指具有1或多個取代基（例如1至5 個取代基，且尤其丨至3個取代基）之烯基，該等取代基選 自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基、烧氧基、 經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基、胺基、 經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺基、胺基羰基氧 基、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、氰基、環烷基、經取 代之環烷基、齒素、羥基、酮基、硝基 '硫代烷氧基、經 取代之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、硫醇、烷 I51482.doc •19· 201118105 基-s(o)-、芳基-s(0)_、烷基_s(0)2_及芳基_s(〇)2·。 「燒氧基」係指基團-0R“，其中r24係烧基。特定烧氧 基包含（例如）經取代或未經取代之甲氧基、經取代或未經 取代之乙氧基、經取代或未經取代之正丙氧基、經取代或 未經取代之異丙氧基、經取代或未經取代之正丁氧基、經 取代或未，巫取代之第二_ 丁氧基、經取代或未經取代之第 二-丁氧基、經取代或未經取代之正戊氧基、經取代或未 經取代之正己氧基、經取代或未經取代之丨，2-二甲基丁氧 基、及諸如此類。 「經取代之烷氧基」包含彼等在本文「經取代」之定義

中所列舉的基團’且尤其係指具有J或多個取代基(例如I 至5個取代基’且尤其⑴個取代基）之院氧基，該等取代 基選自由以下組成之群：酿基'縣絲、醯氣基、烧氧 基、經取代之院氧基、燒氧基幾基、烧氧基幾基胺基、胺 基、經取代之胺基、胺基縣、胺基㈣胺基、胺基幾基 氧基、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、氰基、環烧基、經 取代之環烧基、_素、雜芳基、經基、_基、硕基、硫代 烷氧基、經取代之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、 硫醇、烷基-s(0)-、芳基_s(0)_ '烷基_s(〇)2·及芳 基-s(o)2— 「烷氧基羰基胺基」係指基團_N R25C(0)R26，其中R25 係氫、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代之芳 基或經取代或未經取代之環烷基，且係經取代或未經 取代之烷基或經取代或未經取代之環烷基。 151482.doc 201118105 &基」係指單價飽和烷烴基團，其尤其具有多達約11 個碳原子’更特定而言係具有1至8個碳原子且更特定而言 具有1至6個碳原子之低碳烷基。烴鏈可為直鏈或具支鏈。 此術語可藉由諸如以下基團加以例示：甲基、乙基、正丙 基、異丙基、正丁基、異丁基、第三-丁基、正己基、正 辛基、第三-辛基及諸如此類，且可經取代或未經取代。 術語「低碳烧基」係指具有1至6個碳原子之烷基。術語 「烷基」亦包含如下文所定義之「環烷基」。 經取代之烷基」包含彼等在本文「經取代」之定義中 所列舉的基團’且尤其係指具有1或多個取代基（例如1至5 個取代基，且尤其丨至3個取代基）之烷基，該等取代基選 自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基 '烷氧基、 經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基、胺基、 經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺基、胺基羰基氧 基、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、氰基、環烷基、經取 代之環烷基、齒素、羥基、雜芳基、酮基、硝基、硫代烷 氧基、經取代之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、硫 醇、烷基-s(0)-、芳基_s(0)_、烷基_s(〇)2_、及芳 基-S(〇)2-。 「伸烷基」係指具有1至丨丨個碳原子且更特定而言丨至6 個碳原子之二價飽和烯烴基團，其可為直鏈或具支鏈。此 術語可藉由諸如以下基團加以例示：經取代或未經取代之 亞甲基（-CH2·)、經取代或未經取代之伸乙基（_CH2CH2_)、 經取代或未經取代之伸丙基異構體（例如，_CH2CH2ch 151482.doc -21 · 201118105 及-CH(CH3)CH2·)及諸如此類。 「經取代之伸院基」包含彼等在本文「經取代」之定義 中所列舉的基團’且尤其係指具有1或多個取代基（例如i 至5個取代基’且尤其1至3個取代基）之伸烷基，該等取代 基選自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基、烷氧 基、經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基、胺 基'經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺基、胺基羰基 氧基、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、氰基、齒素、羥 基、_基、硝基、硫代烷氧基、經取代之硫代烷氧基、硫 代芳氧基、硫代酮基、硫醇、烷基_s(0卜、芳基、 燒基-S(0)2-及芳基-S(〇)2-。 「烯基」係指單價烯系不飽和烴基，其較佳具有2至ii 個岐原子、特定而言2至8個碳原子、且更特定而言2至6個 碳原子’其可為直鏈或具支鏈且具有至少1個且尤其1至2 個烯系不飽和位點。特定烯基包含經取代或未經取代之乙 稀基（-CH=CH2)、經取代或未經取代之正丙烯基 (-CH2CH=CH2)、經取代或未經取代之異丙烯基 (-C(CH3)=CH2)、經取代或未經取代之乙烯基及經取代之 乙稀基、及諸如此類。 「伸烯基」係指尤其具有多達約丨丨個碳原子且更特定而 言2至6個碳原子之二價烯系不飽和烴基，其可為直鏈或具 支鏈且具有至少1個且尤其丨至2個烯系不飽和位點。此術 語可藉由諸如以下基團加以例示：經取代或未經取代之伸 乙烯基（-CH=CH-)、經取代或未經取代之伸丙烯基異構體 151482.doc •22· 201118105 (例如 ’ -CH=CHCH2-及-C(CH3)=CH-及-CH=C(CH3)-)及諸 如此類。 「炔基」係指尤其具有2至11個碳原子且更特定而言2至 6個碳原子之乙炔系（acetyienicaily)或炔系（aikynica丨丨丫）不 飽和煙基’其可為直鏈或具支鏈且具有至少1個且尤其1至 2個炔基不飽和位點。炔基之特定非限制性實例包含經取 代或未經取代之炔、經取代或未經取代之乙炔基 (-C^ch)、經取代或未經取代之炔丙基（_CH2CsCh)、及諸 如此類。 「經取代之炔基」包含彼等在本文「經取代」之定義中 所列舉的基團，且尤其係指具有i或多個取代基（例如丨至5 個取代基，且尤其丨至3個取代基）之炔基，該等取代基選 自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、 · 經取代之絲基、絲基隸、以㈣ 經取代之胺基、胺基㈣、胺基㈣胺基、胺基ϋ基氧 基、芳基、芳氧基、疊氮基、繞基、氮基、環烧基、經取 代之環烧基、_素、經基、酮基、石肖基、硫代烧氧基、經 取代之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、硫醇、烷 基-S(〇).、芳基__、烧基·S(G)2_及芳基_s(〇)2·。 如本文所用之「烧醯基」或「酿基」係指基團R”-C(0)_ ，其中R27係氫或如上文所定義之經取代或未經取代之烧 基。 統之單一碳原子去除 典型芳基包含但不限 「芳基」係指藉由自母體芳族環系 一個氫原子衍生之單價芳族烴基團。 151482.doc -23· 201118105 於衍生自以下之基團：醋蒽烯、二氫苊、醋代亞菲基、 蒽、甘菊環、苯、荔、蔻、螢蒽、第、并六苯、己芬、伸 己基、不對稱引達省（as-indacene)、對稱引達省 (s-indacene)、二氫茚、茚、萘、并辛苯、辛芬、艾氏劑 (octalene)、卵苯（ovalene)、戊-2,4-二烯、并五苯、并環戊 二稀、戊芬、茈、非那稀（phenalene)、菲、起、七曜稀、 芘、皮蒽、玉紅省（rubicene)、苯并菲、聯三萘及諸如此 類’且可經取代或未經取代。特定而言，芳基包括6至μ 個碳^原子。 「經取代之芳基」包含彼等在本文「經取代」之定義中 所列舉的基團，且尤其係指可視需要經丨或多個取代基（例 如1至5個取代基，尤其丨至3個取代基）取代之芳基，該等 取代基選自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基、 烯基、經取代之烯基、烷氧基、經取代之烷氧基烷氧基 羰基、烷基、經取代之烷基、炔基、經取代之炔基胺 基、經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺基、胺基羰基 氧基、芳基、芳氧基、4氮基、羧基、氰基、環烷基、經 取代之環&基、齒素、經基、硝^、硫代燒氧基、經取代 之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫醇、烷基-S(0)_、芳 基-S(O)-、烷基 _S(0)2•及芳基 s(〇)2_。 「稠合芳基」係指其兩個環碳與第二經取代或未經取代 之芳基環或經取代或未經取代之脂族環共用的芳基。 「烷芳基」係指經-或多個如上文所定義之經取代或未 經取代之烷基取代之如上文所定義的芳基。 151482.doc -24· 201118105 芳燒基」或 義之經取代或未 基。 -芳基院基」係指經一或多個如上文所定 τ<取代之芳基取代之如i文所定義的烷 芳氧基」係指經 其中 「— A 取代或未經取代之-ο-芳基 方基」如上文所定義。 「烧基胺基」係指基團烷基備、29，其中π及π中 二者皆獨立地選自氫及經取代或未經取代之烧基。 —方基胺基」係指基團芳基_nr30r3i，其中r3〇及&31中 之母一者皆獨立地選自纟、經取代或未經取代之芳基及經 取代或未經取代之雜芳基。 烷氧基胺基」係指基團_n(h)〇r32，其中r32代表如本 文所^義之經取代或未經取代之烧基或經取代《未經取代 之環烷基。 烧氧基Ik基」係指經取代或未經取代之基團_c(〇)_烧 氧基’其中烧氧基如本文所定義。 烧^基胺基」係指經取代或未經取代之基 團-NR33r34，其中R33代表烷基或環烷基且R34係芳基，如 本文所定義。 「烧基罐醯基」係指經取代或未經取代之基 團-S(0)2R35，其中R35係如本文所定義之烷基或環烷基。 代表性實例包含但不限於甲基磺醯基、乙基磺醯基、丙基 磺醯基、丁基磺醯基及諸如此類。 「烷基亞磺醯基」係指經取代或未經取代之基 團-S(0)R35，其中R35係如本文所定義之烷基或環烷基。代 151482.doc -25- 201118105 表性實例包含但不限於甲基亞續酿基、乙基亞績酿基、丙 基亞磺酿基、丁基亞磺醯基及諸如此類。 「烷硫基」係指經取代或未經取代之基團_sr35，其中 R35係如本文所定義之烷基或環烷基且可視需要如本文所 定義經取代。代表性實例包含但不限於甲硫基、乙硫基、 丙硫基、丁硫基、及諸如此類。 「胺基」係指基團_nh2。 「經取代之胺基」包含彼等在本文「經取代」之定義中 所列舉的基團，且尤其係指基團_N(R36)2，其中每一 R36皆 獨立地選自由以下組成之群：氫、烧基、經取代之烧基、 烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、芳基、環烷 基、經取代之環烷基，且其中兩個R基團連接形成伸烷 基。在兩個R基團係氫時，_叫尺36)2係胺基。 「胺基羰基」係指基團_C(〇)nr37r37，其中每一 R37皆獨 立地係氫、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代 之芳基及經取代或未經取代之環烷基，或其中R37基團連 接形成伸烷基。 「胺基羰基胺基」係指基團_NR38c(〇)NR38R38，其中每 一 R38皆獨立地係氫、經取代或未經取代之烷基、經取代 或未經取代之芳基或經取代或未經取代之環烷基，或其中 兩個R基團連接形成伸烷基。 「胺基羰基氧基」係指基團_〇c(〇)NR39R39，其令每一 白獨立地係氮、經取代或未經取代之烧基、經取代或 未、，呈取代之芳基或經取代或未經取代之環烷基，或其中尺 151482.doc -26 - 201118105 基團連接形成伸烷基。 「芳烷基氧基」係指經取代或未經取代之_〇_芳烷基， 其中芳烷基如本文所定義。 「芳基胺基」意指經取代或未經取代之基團_NHR4()，其 中R40代表如本文所定義之芳基。 「芳氧基羰基」係指經取代或未經取代之基團<(〇)_〇_ 芳基，其中芳基如本文所定義。 「芳基磺醯基」係指經取代或未經取代之基 團-S(0)2R41，其中R4!係如本文所定義之芳基或雜芳基。 疊氣基」係指基團-N 3。 「雙環芳基」係指藉由自母體雙環芳族環系統之單一碳 原子去除一個氫原子衍生的單價芳族烴基團。典型雙環芳 基包3但不限於源自二氫茚、茚、萘、四氫萘、及諸如此 類之基團，且可經取代或未經取代。特定而言，芳基包括 8至11個碳原子。 「雙環雜芳基」係指藉由自母體雙環雜芳族環系統之單 一原子去除一個氫原子衍生的單價雙環雜芳族基團。典型 雙環雜芳基包含但不限於源自以下之基團：笨并呋喃、苯 并咪唑、笨并吲唑、笨并H、咬締、苯并二氮吼喃、 . °辛啉、呔嗪、吲哚、二氫吲哚、吲嗪、異苯并呋喃、異吭 烯、異吲哚、異二氫吲哚、異喹啉、苯并噻唑、苯并噁 0坐、萘。定、苯并嚼二。坐、蝶咬、續吟、笨并。比喃、苯并吼 嗪、吡啶并嘧啶、喹唑啉、喹啉、喹嗪、喹喔啉'苯并嗎 非炫四氫異喧琳、四氫喧淋、及諸如此類，且可經取代 151482.doc •27· 201118105 或未經取代。較佳地，雙環雜芳基係9_u員雙環雜芳基， 其中5-1G員雜芳基尤佳。特定雙環雜芳基係彼等源自以下 者：苯并嘆吩、苯并咬喃、苯并嗟嗤、0弓卜朵、喧淋、異啥 咐、苯并咪唾、苯并噁唑及苯并二噁烷。 「胺曱醯基」係指基團_C(〇)N(R42)2，其中每一 r42基團 皆獨立地係氫、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經 取代之環烷基或經取代或未經取代之芳基（如本文所定 義）’其可視需要如本文所定義經取代。 「羧基」係指基團-C(0)〇H。 「羧基胺基」係指基團。 「環烷基」係指具有3至約1〇個碳原子且具有單環或多 個縮合環（包含稠合及橋接環系統）之環狀烴基，其視需要 可經1至3個烷基取代。該等環烷基包含（例如）單環結構（例 如環丙基、環丁基、環戊基、環辛基、丨_甲基環丙基、2_ 曱基％戊基、2 -甲基環辛基、及諸如此類）及多環結構（例 如金鋼烷基、及諸如此類），且可經取代或未經取代。 「經取代之環烧基」包含彼等在本文「經取代」之定義 中所列舉的基團’且尤其係指具有i或多個取代基（例如1 至5個取代基，且尤其丨至3個取代基）之環烷基，該等取代 基選自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基、炫氧 基、經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基、胺 基、經取代之胺基、胺基幾基、胺基幾基胺基、胺基叛基 氧基、芳基、芳氧基'疊氮基、羧基'氰基、環烷基、經 取代之環烧基、ii素、經基、酮基、確基、硫代烧氧基、 151482.doc -28 - 201118105 IL取代之硫代炫氣基、硫代芳氧基、硫代鲷基、硫醇、烧 基-S(O)-、芳基-S(0)-、烷基 _s(〇)2-及芳基 _S(0)2_。 「環烷氧基」係指基團_〇R43，其中R43係經取代或未經 取代之環烷基。該等環烷氧基包含（例如）經取代或未經取 代之環戊氧基、經取代或未經取代之環己氧基及諸如此 類。 「環烯基」係指如下環狀烴基：其具有3至1〇個碳原子 且具有單環或多個縮合環（包含稠合及橋接環系統）且具有 至少一個且尤其1至2個烯系不飽和位點。該等環烯基包含 (例如）單環結構，例如經取代或未經取代之環己烯基經 取代或未經取代之環戊烯基、經取代或未經取代之環丙烯 基、及諸如此類。 「經取代之環烯基」包含彼等在本文「經取代」之定義 中所列舉的基團，且尤其係指具有丨或多個取代基（例如】 至5個取代基，且尤其丨至3個取代基）之環烯基，該等取代 基選自由以下組成之群：醯基、醯基胺基、醯氧基、烷氧 基、經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基 '胺 基、經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺 氧基、芳基、芳氧基、錢基、《、氰基、環料1 取代之環燒基、㈣、録、酮基“肖基、硫代炫氧基、 經取代之硫代烧氧基 '硫代芳氧基、硫代酮基、硫醇、烷 基,〇)-、芳基_s(0)_、烷基_s(〇)2及芳基_s⑼2。 「稠合核稀基」係指環碳原子中之兩者與第二脂族或芳 族％共用且其具有位於其中之稀系不飽和以賦予環烯基環 I51482.doc •29· 201118105 方香性之經取代或未經取代之環稀基。 「氰氧基」係指基團_0CN。 「氰基」係指基團_CN。 γ二院基胺基」意指基inr44r45，其中r44及r45獨立 也代表如本文所義之烧基、經取代之烧基、芳基、經取 代之芳基、環料、經取代之環烧基、環祕基、經取代 之環雜烧基、雜芳基、或經取代之雜芳基。 乙烯基」係指經取代或未經取代之_(c=c)_。 伸乙基」係指經取代或未經取代之_(C-C)_。 「乙炔基」係指_(CsC)· 〇 鹵基」或「鹵素」係指氟、氣、溴及碘。較佳之鹵基 係氟或氣。 「羥基」係指基團-OH。 「硝基」係指基團-N02。 「經取代」係指一或多個氫原子各自獨立地經一或多個 相同或不同取代基代替之基團。典型取代基包含但不限 於·Χ、-R46、-〇-、=〇、_〇r46、SR46、s-、=s、_nr46r47、 =NR46、-cx3、-CF3、-CN、-〇CN、-SCN、-NO、-N02、 =N2、-N3、-S(0)20_、-S(0)2〇H、-S(0)2R46、-os(o2)〇-、 -〇S(〇)2R46、-P(〇)(〇 )2、-P(〇)(〇R46)(〇 )、_〇p(〇)(〇R46)(〇R47)、

-C(0)R46、-C(S)R46、-C(0)0R46、-C(0)NR46R47、-C(0)CT 、-c(s)or46、-nr48c(o)nr46r47、-nr48c(s)nr46r47、 -nr49c(nr48)nr46r47及·<:(νκ48)νκ46ιι47，其中每一 X 皆獨 立地係鹵素；每一 R46、R47、R48及R49皆獨立地係氫、烷 151482.doc -30- 201118105 基、經取代之烷基、芳基、經取代之烷基、芳烷基經取 代之烷基、環烷基、經取代之烷基、環雜烷基、經取代之 環雜烷基、雜烷基、經取代之雜烷基、雜芳基、經取代之 雜芳基、雜芳烧基、經取代之雜芳烷基' —NrSOr”、 -C(0)R5<)或-S(0)2R50，或視需要R5〇&R5i與其所連接之原 子一起形成環雜烷基或經取代之環雜烷基環；且r5〇及rS1 獨立地係氫、烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之烷 基、芳院基、經取代之烷基、環烷基、經取代之烷基、環 雜烷基、經取代之環雜烷基、雜烷基、經取代之雜烷基、 雜芳基、經取代之雜芳基、雜芳院基或經取代之雜芳烧 基。 代表性經取代之芳基的實例包含下列基團：

在該等式中，R52及R53中之一者可為氫且R52及R53中之 至少一者各自獨立地選自烷基、烯基、炔基、環雜烷基、 烧醯基、烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、烷基胺基、芳基胺 基、雜芳基胺基、NR54COR55、NR54SOR55 - nr54so2r57、 coo 烷基、coo 芳基、CONR54R55 > CONR54OR55、 NR54R55、S〇2nR54r55、s_烧基、S_烧基、s〇烧基、s〇2烧 基、s芳基、SO芳基、S〇2芳基；或R52與R53可連接形成具 有5至8個原子之環狀環（飽和或不飽和），其視需要含有一 或多個選自基團N、Ο或S之雜原子。R54、R55、及R56獨立 I51482.doc -31 · 201118105 地係氫、炫基、烯基、快基、全氟院基、環烧基、環雜烧 基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之烧基或雜烧 基或諸如此類。 「雜」在用於闡述化合物或化合物上所存在之基團時意 指該化合物或基團中之-或多個碳原子經氮、氧或硫㈣ 子代替。「雜」可適用於上述任一烴基，例如院基（例如， 雜烷基、環烷基（例如環雜烷基））、芳基（例如雜芳基環 烯基、環雜烯基及具有丨至5個且尤其丨至3個雜原子之諸如 此類。 「雜芳基」係指藉由自母體雜芳族環系統之單一原子去 除一個氫原子衍生的單價雜芳族基團。典型雜芳基包含但 不限於衍生自以下之基團：吖咬、砷雜茚、咔唑卜嗔 啉、苯并二氫吡喃、咣烯、啐啉、呋喃、咪唑、吲唑、吲 哚、二氫吲哚、吲嗪、異苯并呋喃、異咣烯、異吲哚、異 二氫吲哚、異喹啉、異噻唑、異噁唑、萘啶、噁二唑、噁 坐、奈彼間一氣雜本、菲咬、菲η各琳、吩嗪、醜嗅、蝶 啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、吡唑、噠嗪、吡啶、嘧啶、吡 咯、吡咯嗪、喹唑你、喹啉、喹嗪、喹喔淋、四唑、噻二 唑、噻唑、噻吩、三唑、咕噸、及諸如此類。較佳地，雜 芳基係5-15員雜芳基，其中5-10員雜芳基尤佳。特定雜芳 基係彼等衍生自。塞喻、°比ρ各、苯并。塞吩、苯并吱喃、η引 D朵、°比咬 '啥琳、味峻、。惡唾及。比嗓者。 代表性雜芳基之實例包含以下基團： 151482.doc •32- 201118105

〇、及S ;且R58獨立地 芳基、雜芳基、雜烷基 其中每一y皆選自羰基、N、nr58 係氫、烷基、環烷基、環雜烷基、 或諸如此類。 本文所用之術語「環雜院基」係指 選自N、〇及S之雜原子的穩定雜 ，：獨立地 合雜環系統可包含碳環且僅需要包含—個=稠：：。稠 例包含但不限於六氫吡唪基 '、η之實 甘丞· 问氫D比味其、与， 及嗎啉基’且示於下列闡釋性實例中： ' ’、里啶基

其中每一X皆選自cr58、cr582、nr58、;且每—Υ皆 選自NR58、〇及S ;且尺58獨立地係氫、烷基、環烷基、埽 雜烧基、芳基、雜芳基、雜烷基或諸如此類。該等環雜燒 151482.doc •33· 201118105 基環可視需要經一或多個選自由以下組成之群之基團取 代··醯基、醯基胺基、醯氧基、烷氧基、經取代之烷氧 基、烷氧基羰基、烷氧基羰基胺基、胺基、經取代之胺 基、胺基羰基、胺基羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、芳 氧基、疊氮基、羧基、氰基、環烷基、經取代之環烷基、 鹵素、羥基、酮基、硝基、硫代烷氧基、經取代之硫代烷 氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、硫醇、烷基_s(〇)_、芳 基-s(0)-、烷基-s(o)2_及芳基_s(0)2^取代基團包含羰基 或硫代幾基，其提供（例如）内醯胺及脲衍生物。 代表性環雜烯基之實例包含以下基團： 〇 0 0 0 Q Ο 其中每一X皆選自CR58、cr582、nr58、〇及8 ,且每一 γ皆 選自碳基、N、NR58、〇及S ,且R58獨立地係氫、烷基、 %烧基、環雜烷基、芳基、雜芳基、雜烷基或諸如此類。 具有含有雜原子之取代基的代表性芳基之實例包含以下 基團：

其中每—X皆選自CR582、NR58、0及S ;且每一 Y皆選自羰 151482.doc •34- 201118105 基、NR 、〇及S ;且R58獨立地係氫、烷基、環烷基、環 雜烷基、芳基、雜芳基、雜烷基或諸如此類。 「雜取代基」係指含有鹵基、〇、s或N原子之官能團， 其可作為R4存在於作為取代基直接存在於本文所揭示化合 物之一或多個環上之R4C基團中，或可作為取代基存在於 該等化合物中所存在之任一「經取代」芳基及脂族基團 中〇 雜取代基之實例包含： _鹵基， -N02、-NH2、-NHR59、-N(R59) 2， -NRCOR、_NR59s〇r59、nr59s〇2r59 〇h -co2h， -R59-〇H ' -〇-R59 > -COOR59 , _CON(R59) 2、-CONROR59， -S03H、-R59_S、_s〇2N(R59) 2， -S(0)R59 . -S(〇)2r59 〃中每R皆獨立地係芳基或脂族基團，其視需要具有 取代基。在含有r59基團之雜取代基中，較佳者係彼等具 有如本文所定義之芳基及烷基以9基團之材料。較佳雜取 代基係彼等列示於上文中者。 一羥基磷醯基」係指經取代或未經取代之美 團-Ρ0(0Η)2。 土 >!取代之二羥基磷醯基」包含彼等在本文「經取代」 之定義中所列舉的基園，且#盆 m且尤/、係私一或兩個羥基經取代 151482.doc -35- 201118105 之一經基碳酿基。適宜取代基詳細闡述於下文中。 「胺基經基璃酿基」係指經取代或未經取代之義 團-PO(OH)NH2。 「經取代之胺基羥基磷醯基」包含彼等在本文「經取 代」之定義中所列舉的基團，且尤其係指胺基經一或兩個 取代基取代之胺基羥基磷酿基。適宜取代基詳細聞述於下 文中。在某些實施例中，羥基亦可經取代。 「硫代烷氧基」係指經取代或未經取代之基團-SR6〇， 其中R0()係烷基。 「經取代之硫代烷氧基」包含彼等在本文「經取代」之 定義中所列舉的基團，且尤其係指具有i或多個取代基（例 如1至5個取代基，且尤其丨至3個取代基）之硫代烷氧基， 該等取代基選自由以下組成之群：醯基、醢基胺基、醯氧 基、烷氧基、經取代之烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基 胺基、胺基、經取代之胺基、胺基羰基、胺基羰基胺基、 胺基幾基氧基 '芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、氰基、環 烷基、經取代之環烷基、_素、羥基、酮基 '硝基、硫代 烧氧基、經取代之硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代酮基、 硫醇、烧基-s(0)-、芳基-S(O)-、烷基-s(o)2-及芳 基-s(o)2-。 「硫基」係指經取代或未經取代之基團HS_。「經取代之 硫基」係指基團（例如）RS_，其中r係本文所述之任一取代 基。 「續酿基」係指經取代或未經取代之二價基團-s(o2)·。 151482.doc -36- 201118105 「經取代之伽基」係指基團（例如）r6 二本文所述之任—取代基。「胺基梅」：中：i 係指基眺N(o2)H「經取代之胺基俩基」、「2 代之磺醯胺」係指基團（例如）R622N(〇2)S-，其中每—t比 獨立地係本文所述之任一取代基。 R皆 「砜」係指經取代或未經取代之基團4021163。 貫，:中：R63選自H、低碳烧基、炫基、芳基及雜芳基， 「硫代芳氧基」係指經取代或未經取代之基二 其中R64係芳基。 R 5 硫代酮基」係指基團=s。 「硫醇」係指基團。 熟習有機合成技術者應瞭解，化學上可行之穩定雜環 (不論其係芳族或非芳族)中雜原子之最大數量係由環大 小、不飽和程度及雜原子之化合價決定。㈣，雜環；具 有1至4個雜原子’只要雜芳環在化學上可行並穩定即可Γ 如本說明書及隨附申請專利範圍中所用，除非上下文另 夕「卜明確指*，否則單數形式「一」（「a」、「an」）、及 「該」（「the」）包含複數個指示物。因此，舉例而言在 ^ ^方去」時，其包含本文所述類型及/或彼等熟習 此項技術者在閱讀本揭示内容後將明瞭之一或多個方法、 及/或步驟。 本文所用之「哺乳動物」係指任一高級脊椎動物成員 (包括哺乳動物綱類），其包含但不限於人類。 本文所用之術語「黑色素生成抑制劑」用於闡述本文所 151482.doc -37- 201118105 鑑別之能夠抑制黑色素細胞中之黑色素生成的化合物。 本文所用之「有效量」意指足以覆蓋期望改變色素沉著 之皮f一毛髮、毛皮、或絨毛表面區域的量。 #藥上可接觉之」意指由聯邦或州政府之管理機構認 可’或列示於美國藥典或其他用於動物、且更特定而言人 類中之公認藥典中。 藥物化妝品上可接受」意指適用於化妝應用，包含在 把加本文所揭不之組合物或化合物時不存在明顯不利副作 用之it形下局部施加本文所揭示之組合物。其他應用包含 皮膚護理應用’包含但不限於洗劑、乳f、清潔乳膏或洗 劑、肥皂及其他清潔劑、止汗藥及/或除臭劑、化妝產品 (例如搽臉粉、粉底霜、口紅、眼影膏、睫毛膏、眼線膏 或唇膏）、防曬產品（例如防曬劑或其他UVa護性化妝品、 洗劑或乳膏）、美髮產品（例如洗髮劑、染發液、或處理定 型劑（treatment setting agent))。片語「醫藥上可接受」及 藥物化妝品上可接受」在所有應用中皆不表示相互排 斥°在一些實施例中’端視本文所揭示組合物之需要及作 用過程，組合物可為「醫藥上可接受」及「藥物化妝品上 可接受」。 醫藥上可接受之鹽」係指醫藥上可接受且具有母體化 合物之期望藥理學活性之本文所揭示化合物的鹽。該等鹽 包含：（1)酸加成鹽，由無機酸形成，該等無機酸係（例 如）鹽酸、氩溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、及諸如此類；或 由有機酸形成，該等有機酸係（例如）乙酸、丙酸、己酸、 151482.doc -38- 201118105 環戍院丙酸、乙醇酸、丙_酸、乳酸'丙二酸、號泊酸、 蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸'擰檬酸、笨甲酸、 3-(4-羥基苯曱醯基）笨曱酸、肉桂酸、苯乙醇酸、曱燒石黃 酸、乙磺烷酸、1，2-乙烷·二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、笨磺 酸、4-氣苯磺酸、2-萘磺酸、4-曱苯磺酸、樟腦磺酸、4_ 甲基雙環[2.2_2]-辛-2-烯Μ—甲酸，葡庚糖酸、3_苯基丙 酸、三曱基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖 酸、麩胺酸、經基萘曱酸、水楊酸、硬脂酸、黏康酸 (muconic acid)及諸如此類；或（2)在存在於母體化合物中 之酸性質子經金屬離子（例如鹼金屬離子、鹼土金屬離 子、或鋁離子）代替時、或與有機鹼（例如乙醇胺、二乙醇 胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺、及諸如此類)配位時形成 之鹽。鹽進-步包含（僅作為實例）納鹽、卸鹽、辦鹽、錢 二錢鹽、四烧基錄鹽及諸如此類；且在化合物含有驗性 S月匕團時’為無毒性有機或無機酸之鹽，例如，鹽酸鹽、 虱漠酸鹽、酒石酸鹽、甲續酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、草 酸鹽及諸如此類。在-些實施例t，「醫藥上可接受之 鹽,」_亦可連同藥物化妝品上可接受之組合物—起使用。 術-f藥上可接受之陽離子」係指可接受之酸性官能 團之無毒陽離子抗衡離子。 及寺陽離子例不為鈉、卸、 約、鎮、錄、四烷基銨陽離 中，「 料及$如此類ϋ實施例 接為之έ Α 之陽離子」亦可連㈣物化妝品上可 接又之組合物一起使用。 醫枭上可接受之媒劑」係指與所揭示化合物一起投與 151482.doc -39. 201118105 之稀釋劑、佐劑、賦形劑或載劑。在一些實施例中，「醫 藥上可接受之媒劑」亦可連同藥物化妝品上可接受之組合 物一起使用。 「預防」（「preventing」或「prevention」）係指減少患 上疾病或病症之危險（亦即，使暴露於致病因素或易感染 。亥疾病但尚未經受或顯示該疾病症狀之受試者不出現該疾 病之至少一種臨床症狀）。 「前藥」係指具有可裂解基團且可藉由溶劑分解或在生 理學條件下變成在活體内具有醫藥活性之化合物的化合 物，包含所揭示化合物之衍生物。該等實例包含但不限於 膽鹼酯衍生物及諸如此類、N_烷基嗎啉酯及諸如此類。 「溶劑合物」係指通常藉由溶劑分解反應與溶劑締合之 化合物形式。習用溶劑包含水、乙醇、乙酸及諸如此類。 本文所揭不之化合物可以(；例如）結晶形式製備且可經溶合 或水合。適宜溶劑合物包含醫藥上可接受之溶劑合物（例 如水合物）’且進一步包含化學計量之溶劑合物及非化學 計量之溶劑合物二者。 「受試者」包含人類。術語「人類」、「患者」及「受試 者」在本文中可互換使用。

「治療有效量」意指在投與受秸去、A 又式者以治療疾病時足以實 現此疾病治療之化合物量。「治.底古μ县 °療有效量」可端視化合 物、疾病及其嚴重程度以及擬治療受試者之年齡、體重等 情況而有所變化。 治療 在一實施例中，任一疾病或病症之「 151482.doc •40· 201118105 reatlng」或「treatment」）係指改善該疾病或病症（亦 即，阻止該疾病或減緩其至少一種臨床症狀之進展p在 另一實施例中’「治療」係指改善受試者不能感受到之至 ;一個物理參數。在另一實施例中，「治療」係指在物理 方面調節疾病或病症（例如’穩定可感受到之症狀）或在生 理學方面調節該疾病或病症（例如，穩定物理參數）或二 者在另一貫施例中，「治療」係指延遲疾病或病症之發 作或甚至預防該疾病或病症。在另一實施例中，「治 療」係指出於化妝目的投與本文所揭示之化合物或組合 物。 所揭示化合物之其他衍生物在呈其酸及酸衍生物形式時 皆具有活性，但酸敏形式在哺乳動物有機體中經常提供溶 解性、組織相容性、或緩釋優點（參見Bundgard, h , Design of Prodrugs ’ 第 7-9、21_24 頁，Amsterdam 1985)。包含冑衍生⑯’例如藉由使母酸與適宜醇反 應製備之酯、或藉由使母體酸化合物與經取代或未經取代 之胺反應製備之醯胺、或酸酐、或混合酐。衍生自所揭示 化合物酸性側基之簡單脂族或芳族酯、醯胺及酐係較佳前 藥。在-些情形下’期望製備雙醋型前藥，例如(醯氧基) 烷基酯或（（烷氧基羰基）氧基）烷基酯。較佳者係本文所揭 示化合物之CVC：8烷基' (VC8烯基、芳基、C7_Ci2經取代 之芳基、及C7-Ci2芳烧基g旨。 本文所用之術語「同位素變體」係、指在構成化合物之一 或多個原子處含有非天然比例的同位素的化合物。舉例而 151482.doc •4卜 201118105 °化。物之「同位素變體」可含有一或多個非放射性同 位素，例如，氘（2i^d)、碳]3^)、氮叫、）、或諸 如此類。應理解，在具有該同位素取代之化合物中，下列 原子（若存在）可有所變化，因此（例如）任一氫可為2H/D , 任一妷可為13C，或任一氮可為15N，且熟習此項技術者可 確定是否存在及佈置有該等原子。同樣，在（例如）所得化 合物可用於藥物及/或受質組織分佈研究之情形下，所揭 示化合物可包含具有放射性同位素之同位素變體之製劑。 放射性同位素氚（亦即3H)及碳-14(亦即14c)因易於納入且容 易檢測而尤其可用於此目的。另外，可製備經正電子發射 同位素（例如％、4、丨5〇及nN)取代之化合物，且該等化 合物可在正電子發射斷層掃描（PET)研究中用於檢驗受質 受體佔據情況。 本文所提供化合物之所有同位素變體不論是否具有放射 性皆意欲涵蓋於所涵蓋化合物之範圍内。 亦應理解，具有相同分子式但原子之鍵結性質或順序不 同或原子空間排列不同之化合物稱為「異構體」。原子空 間排列不同之異構體稱為「立體異構體」。 彼此非鏡像之立體異構體稱為「非對映異構體」且彼等 彼此為不可疊合鏡像者稱為「對映異構體」。在化合物具 有不對稱中心（例如其與4個不同基團鍵結）時，可能存在一 對對映異構體《對映異構體之特徵可在於其不對稱中心之 絕對構型且可由Cahn及Prelog之R-及s-排序規則或由其中 分子旋轉偏振光平面之方式來描述並稱為右旋或左旋（亦 151482.doc -42- 201118105 即’分別稱為（+)或（-)·異構體）。對掌性化合物可以單獨對 映異構體或以其混合物之形式存在。含有相同比例對映異 構體之混合物稱作「外消旋混合物」。 「互變異構體」係指具有特定化合物結構之相互轉換形 式且在氫原子及電子替換方面有所不同之化合物。因此， 兩個結構可經由移動π電子及原子（經常為H)來保持平衡。 舉例而言，烯醇及酮係互變異構體，此乃因其可藉由使用 酸或鹼進行處理快速地發生互變。互變異構現象之另一實 例係苯基硝基甲烷之酸_及硝基_形式，其同樣係藉由使用 酸或驗進行處理形成。 互變異構形式可能與達成目標化合物之最佳化學反應性 及生物活性有關。 所揭示之化合物可具有一或多個不對稱中心；因此，該 等化合物可作為單獨（R)·或（s)_立體異構體或作為其混合 物製得。除非另有說明，否則在本說明#及中請專利範圍 中闡述或指明特定化合物時意欲包含單獨對映異構體及其 混合物（外消旋或相反）二者m體化學之方法及立體 異構體之分離方法已為此項技術所熟知。 如本文所述，本發明揭示關於鑑別控制黑色素合成（黑 色素生成)之化合物、及該等化合物及其組合物在戰： 如’抑制)黑色素產生中之用途的實施例。本發明亦係關 於使用本文所揭示化合物及組合物來預防及/或治療與異 常黑色素生成活性(包括(但不限於)異常色素沉著，包含所 151482.doc -43· 201118105 有病因學之色素沉著過度、不均句色素沉著、及諸如此 類）因果有關之病狀的方法。 因此，已鑑別出複數種能夠控制、且尤其抑制黑色素生 成之化合物。該等先前並未鑑別出具有此一能力之化合物 列示於本文中且稱作新穎黑色素生成調節劑。因此，本文 所揭示之化合物及組合物係用於在活體外及活體内應用中 調節色素沉著。對於活體外應用而言，可使用試管基及額 外細胞基分析來測試本文所列示化合物之經修飾形式及/ 或衍生物改變黑色素生成的能力。活體内應用係關於出於 預防、治療及/或化妝目的，向有需要之受試者投與本文 所列示新顆黑色素生成抑制化合物中之至少一者以減少色 素沉著程度。 因此，在一態樣中，已鑑別出能夠有效及有力抑制哺乳 動物細胞中之黑色素生成之化合物（在本文中稱作黑色素 生成抑制劑）。該等化合物降低或抑制黑色素生成之能力 來可用於有利地降低黑色素細胞之黑色素含量，此繼而使 皮膚 '毛髮、絨毛、或毛皮顏色之色素沉著降低或使其亮 白。鑒於以上所述’可將本文所揭示之新穎黑色素生成抑 制劑局部施加至皮膚、毛髮、絨毛、或毛皮以增亮其顏 色。 在一實施例中，所揭示之類固醇化合物係黑色素生成調 節劑（例如抑制劑）’其具有式（I): 151482.doc •44· 201118105 其中

R12

式（I)

Ri、R2、R4、r7、Rn獨立地選自由以下組成之群： 氫、羥基、胺基、硝基、鹵素、經取代或未經取代之 (G-C：6)烷基、經取代或未經取代之烷氧基、經 取代或未經取代之（C3_C7)環烧基、及經取代或未經取 代之笨基； R1G係氫或（Ci-Cd經取代或未經取代之烷基； R12係氫、羥基或經取代或未經取代之醯氧基； R係氫或（C^Ce)經取代或未經取代之烷基； R係氫、（<：丨-(：6)經取代或未經取代之烷基、或c〇r22 ; R18係經取代或未經取代之烷基； R20及R2i獨立地選自Η、（c^-cd烷基，或視需要R20與r2i 一起形成側氧基； 151482.doc •45· 201118105

Rs IT獨立地逍目虱 基、（G-C6)經取代或未經取代之雜烷基、（c6_c】d經 取代或未經取代之芳基' (Cs-C丨〇)經取代或未經取代 之雜芳基、COR22、C02R22、CON(R23)2、s〇2R22 或 so2N(R23)2 ; 每一 R皆獨立地係（C!-C6)經取代或未經取代之烷基、 (Cl-C6)經取代或未經取代之雜烷基、（c^c一經取代 或未經取代之芳基、或（C5_CiG)經取代或未經取代之 雜芳基； 每一R23皆獨立地係氫、（CA)經取代或未經取代之烧 基、（CVC6)經取代或未經取代之雜院基、（C6_Ci〇)經 取代或未經取代之关A 斗、/广。 代之雜芳基;且 …W,。)經取代或未經取 R係氫或（(VC6)經取代或未經取代之烧基； 或其醫藥上可接受之鹽 體、代謝物、_物、共構體互變異構 问位素變體或前藥。 在—特定實施例中，對认4 τ _ 〇 :式1而s，化合物係式11(錐絲 Μ

I I 151482.doc 46. 201118105 或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體代謝物、類似物、同位素變體或前藥。雜絲驗及錐絲 驗衍生物揭示於美國專利第3,偏，279號、第M85,825號、 t ’每—者之全部内容皆以引用方式併入 本文中。 在另一實施例中，所揭示之類固醇化合物係黑色素生成 調節劑（例如抑制劑），其具有式（π

e Μ Η

III 或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體、代謝物、類似物、同位素變體或前藥。 在另一實施例中’所揭示之類固醇化合物係黑色素生成 調節劑（例如抑制劑）’其具有式（Iv): h3c

或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體、代謝物、類似物、同位素變體或前藥。 151482.doc ·47· 201118105 在一特定實施例中 驗。 在一特定實施例中 鹽。 在一特定實施例中 鹽° 在一特定實施例中 鹽。 對於式wv而言，化合物係游離 對於式MV而言，化合物係單HC1 對於式!_IV而f ’化合物係二HC1 對於式I·言’化合物係水合 另一態樣進一步係關於包 化妝藥劑之組合的調配物= 與額外醫⑸ -物在一實施例中，額外醫藥或/丨 妝藥劑係相似作用之筚#丨 诸樂成1 “ 劑°在—特定實施例中，相似作月 之藥劑選自化妝成份及藥理學活性劑。 在剛闡述組合之一實施例中，製備用於治療指定愛色^ 生成抑制劑之疾病的醫藥组合物，其包括治療有效量之句 合’其中相似作用之藥_藥理學活性劑。更特定而言， 相似作用之藥劑係皮膚增亮或皮膚漂白化合物。在一些， e例中纟膚增亮或皮膚漂白化合物係氫酿、趟酸、抗壞 血酸、抗壞血酸基磷酸鎂或抗壞企酸基葡糖胺、或其混合 物。 在上述組合之另一實施例中，製備包括用於化妝或皮膚 病學用途之組合物的局部調配物，該組合物包括化妝及/ 或皮膚病學有效量之上述組合，其中相似作用之藥劑係化 妝活性劑。更特定而言’相似作用之藥劑係皮膚增亮或皮 膚漂白化合物。在一些實施例中，皮膚增亮或皮膚漂白化 151482.doc • 48 - 201118105 合物係氫醌、麴酸、抗壞血酸、抗壞血酸基磷酸鎂或抗壞 血酸基葡糖胺、或其混合物。 在上述組合之另一實施例中，額外醫藥或化妝藥劑係皮 膚護理活性劑。在一些實施例中’皮膚護理活性劑係磨姓 劑、吸收劑、收斂劑、美觀組份（例如香味劑、顏料、色 素/著色劑、芳香油、皮膚感覺劑、收斂劑及其他美觀组 份）、抗氧化劑、還原劑、螯合劑、皮膚漂白或增亮劑、 皮膚調節劑（例如保濕劑及潤膚劑）、皮膚安撫劑、皮膚療 合劑（例如泛醇及衍生物、真蘆薈、泛酸、尿囊素、沒藥 醇、甘草酸二鉀）、皮膚處理劑、維他命及衍生物（例如類 視色素）、或其混合物。在一些實施例中，類視色素係視 黃醇、視黃醛、視黃醇酯、丙酸視黃酯、視黃酸、棕搁酸 視黃酯、或其混合物。 在另—態樣中，亦提供預防、治療、改善或處理涉及不 期望或異常黑色素生成之疾病或病狀之方法，其包括向需 要或渴望該預防、治療、改善或處理之患者投與醫藥組合 物，該醫藥組合物包括預防或治療有效黑色素生成抑制量 之如上文所指出及闡述之組合’其中相似作用之藥劑係醫 藥活性劑。更特定而言，相似作用之藥劑係皮膚增亮或皮 膚漂白化合物。在一些實施例中，皮膚增亮或皮膚漂白化 合物係氫醌、麴酸、抗壞血酸、抗壞血酸基磷酸鎂或抗壞 血酸基葡糖胺、或其混合物。 一種改變或恢復哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮中之 色素沉著之方法包括向哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮 151482.doc • 49- 201118105 才又與定量之組合物，該組合物包括恢復或改變色素有效 量之如上文所指出及闡述之組合，其中該類似作用劑係化 妝活性劑。更特定而言，類似作用劑係皮膚增亮或皮膚漂 白化合物。在-些實施例中，皮膚增亮或皮膚漂白化合物 係氫醌、麴酸、抗壞血酸、抗壞血酸基磷酸鎂或抗壞血酸 基葡糖胺、或其混合物。 本文所揭示之方法及組合物涵蓋使用一或多種本文所列 不化合物作為用於各種用途之活性成份。在一特定實施例 中，將活性成份與可接受之載劑組合以形成應用至皮膚 (例如，用於化妝及/或治療皮膚病學用途）之局部調配物。 局部調配物可包含軟膏、洗劑、膏糊、乳膏、凝膠、滴 劑、栓劑、喷霧、液體、洗髮劑、粉劑、止汗藥、除臭 劑、染發液、肥皂、局部化妝產品（包含但不限於搽臉 粉、粉底霜、口紅、眼影膏、睫毛膏、眼線膏或唇膏）、 uv保護性產品（可包含防曬劑、洗劑或乳膏）、及經皮貼 片。可根據需要使用增稠劑、稀釋劑、乳化劑、分散助劑 或黏合劑。較佳地，載劑之一個功能係增強活性成份之皮 膚滲透性’且應能夠在活體内條件下將活性成份遞送至黑 色素細胞。適宜載劑已為熟習此項技術者所熟知，且包含 脂質體、乙醇、二甲基亞砜（DMSO)、凡士林（礦脂）、礦物 油（液體礦脂）、水、二甲基曱醯胺、十氧乙烯-油基醚、油 酸、2-吡咯啶酮及Azone®牌滲透促進劑（Upjohn)。可調配 包含表I中所述活性成份之特定組合物，其中添加2-吡咯啶 酮、油酸及/或Azone®中之一者以增強滲透性且使其溶於 151482.doc -50- 201118105 水、乙醇、丙醇及/或丙二醇之基質中。 如上所述，可使用包括脂質體之媒劑來局部遞送—些本 文所揭示之組合物。端視組成且經熟習此項技術者考慮， 該等脂質體可為非離子型且含有a) n月桂酸顆（較佳 地，其量介於約5重量％與約7〇重量％之間）；b)具有膽固 醇中所發現之_醇主鏈之化合物（較佳地，其量介於L 重量％與約45重量％之間）；及0 -或多種具有約12至約 18個碳原子之脂肪酸醚（較佳地，其總量介於約5重量％與 約70重篁％之間）’其中脂質體中各組份化合 佳包括甘油二月桂酸酯/膽固醇/聚氧乙烯_1〇-硬脂基醚/聚 氧乙烯-9-月桂基醚（GDL脂質體）。基於組合物之總體積， 脂質體之存在量可為約1〇 mg/mL至約_ mg/mL、且更佳 約 2〇 mg/mL 至約 50 mg/mL。可使用約 37.5:12.5:33.3:16.7 之比率以獲得特定優點。可根據業内常用之標準方 備適宜脂質體。 上述組合物可藉由以下方式製得：在適宜容器中合併期 望組份’ 在環境條件下於業内f知用於非離子型脂質體 製備之任H高剪切混合部件巾將其混合，舉例而言， 乂门剪切混a部件係彼等揭示於Niemiec等人（pharm Res 12.1184-88 (1995))中者，其全部内容以引用方式併入本文 中。該等脂質體之存在會增強—些組合物之脫色素能力。 其他調配物可含有⑼如）以或其他直接源自豆英科或 其他適宜植物之液體調配物。此-調配物可(例如)含有較 151482.doc 201118105 大比例之且漿、乳化劑（維持豆漿之物理穩定性）、及視需 要螯合劑、防腐劑、潤膚劑、保濕劑及/或增稠劑或膠凝 劑。 亦可利用彼等熟習此項技術者已知之水包油型乳液、油 包水型乳液、溶劑基調配物及水性凝膠作為媒劑來遞送所 揭示之組合物。 端視具體應用，本文所揭示之組合物亦可包含其他活性 成伤、以及惰性或非活性成份。在該等替代性實施例中， 局部活性醫藥或化妝品組合物可視需要與其他成份進行組 合，例如增濕劑、化妝佐劑、表面活性劑、發泡劑、調節 劑、保濕劑、香味劑、稠化劑、緩衝劑、防腐劑、防嘴劑 及諸如此類。 特定調配物可包含至少一種活性成份（例如，本文所述 之新穎黑色素生成調節劑）或先前確認之且尤其相似作用 之藥劑（例如皮膚增亮劑或皮膚漂白劑，其可為彼等熟習 此項技術者所熟知P已知具有相似活性及/或性質之藥劑 包含但不限於：漂白劑；㈣酸酶抑制劑；α_經基酸、鹽 及其衍生物；α·酮基酸、鹽及其衍生物；β_經基酸、鹽及 其衍生物；類視色素、鹽及其衍生物；維他命Α及相關化 口物’酉夂’酚，甲氧基丙基-葡糖醯胺；皮質類固醇；阻 斷，.’、色素J體向角蛋白細胞轉移之藥劑（例如可發現於大 豆提取物中者）；麴酸；甘草提取物；及諸如此類。在一 些實施例中’類視色素包含視黃醇、視黃酸、視黃醇醋、 丙酸視黃酯、視黃酸、棕櫚酸視黃酯或其混合物。 151482.doc -52· 201118105

端視應用而定，劍旦士由1 L 劑里方案取決於可易於確定之諸多因素 (例如擬治療病狀之嚴重栽碎a 6^、 ’、 嚴重程度及反應性），但通常為每日施 加或^個劑里，且治療過程持續數天至數月，或直至實 現治癒或減輕疾病狀況為止，或直至達成化妝期望程度之 黑色素生成調節(例如，減少色素沉著)為止。熟習此項技 術者可易於破定最佳劑量、投藥方法及重複速率。通常， 預計本文所揭示組合物中之黑色素生成抑制劑濃度為約 0.01%至約50% '較佳約〇 〇3%至約1〇%。在—些實施例 中，本文所揭示組合物中之黑色素生成抑制劑濃度為約 0.1%至約25%、或約1%至約1〇%。在其他實施例中，本文 所揭示組合物具有以下黑色素生成抑制劑濃度：約〇.1%至 約75%、約0.5%至約6〇%、約〇 5%至約5〇%、約〇 5%至約 40%、約0.5%至約30°/。、約〇_5%至約2〇%、約〇 5%至約 10%、約1%至約75%、約1%至約60%、約1%至約5〇%、約 1%至約40%、約1%至約3〇%、約1%至約2〇%、約1%至約 10%、約5%至約75%、約5。/。至約60%、約5。/。至約50%、約 5%至約40%、約5%至約30。/❶、約5%至約20%、約5%至約 10%、約10%至約75%、約10%至約60。/。、約10%至約 50%、約10%至約40%、約10%至約30%、約1〇〇/0至約 200/。、及約10%至約15%。在一些實施例中，本文所揭示 組合物具有以下黑色素生成抑制劑濃度：〇 1%、〇 5%、 0.75% ' 1.0% ' 1.5% ' 2.0% ' 2.5% ' 3.0% > 3.5% ' 4.0% - 4.5%、5.0%、5.5%、6.0%、6.5%、7.0%、7.5〇/〇、8.0%、 8.5% ' 9.0% ' 9.5% ' 10% ' 10.5% ' 11% ' 11.5% ' 12% ' 151482.doc -53· 201118105 12.5%、13%、13.5%、14¾、14.5%、150/〇、160/〇、17%、 180/。、19%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或 5〇〇/0。 亦預計本文所揭示組合物可含有約〇 〇1 mg至約1〇〇 mg 黑色素生成抑制劑、較佳約〇. 1 mg至約丨〇 mg黑色素生成 抑制劑。在一些實施例中，本文所揭示組合物可含有約 0.05至約5 mg黑色素生成抑制劑、或約〇1至約3 黑色素 生成抑制劑。在一些實施例中，本文所揭示組合物可含有 約0.1至約50 mg、約0」至約45 mg、約〇」至約4〇 mg、約 0.1至約35 mg、約（M至約3〇 mg、約〇」至約25 mg、約〇」 至約20 mg、約（U至約15 mg、約〇」至約1〇 mg、約〇」至 約5 mg、約0.5至約50 mg、約〇.5至約45 mg、約0.5至約40 mg、約0.5至約35 mg、約〇 5至約3〇 mg、約〇」至約25 mg、約0.5至約20 mg、約〇_5至約15 mg、約〇 5至約1〇 mg、約0.5至約5mg、約1〇至約5〇mg、約〗〇至約45邮、 約1·〇至約40 mg、約^至約35 mg、約丨〇至約3〇吨、約 1.0至約25 mg、約^至約2〇 mg、約i 〇至約15 約1 〇 至約1〇 mg、約丨.0至約5 mg、約25至約5〇 ^、約25至約 45 mg、約2.5至約40 mg、約25至約35叫、約25至約3〇 mg、約2.5至約25 mg、約25至約2〇呵、約以至約15 mg、約2.5至約10 mg、及約2 5至約5 mg。在一些實施例 中，本文所揭示組合物含有約〇1 mg、〇 2 mg、〇 3 mg、 〇·4 mg、G.5 mg、〇.6 mg、〇 7 mg、G 8 叫、q 9 、工 〇 mg、2.0 mg、3.G mg、4.G mg、5.G mg、7 〇 mg、1〇 〇 mg ^ 15.0 mg ^ 20 mg ^ 25 mg > 30 mg > 35 mg ^ 40 mg ^ 45 151482.doc -54- 201118105 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、9〇 爪§或 1〇〇 mg黑色 素生成抑制劑。在一些實施例中’本文所揭示組合物含有 約0.3 mg至約0.75 mg黑色素生成抑制劑。 進一步預計，本文所揭示組合物中之黑色素生成抑制劑 濃度為約0.01 mg/ml至約50 mg/ml、較佳約〇」mg/ml至約 10 mg/ml。在一些實施例中，本文所揭示組合物中之黑色 素生成抑制劑濃度為約〇· 1 mg/ml至約5 mg/mi、或約〇 3 mg/ml至約3 mg/ml。在一些實施例中，組合物中之黑色素 生成抑制劑濃度為約0.1至約50 mg/ml、約0.1至約45 mg/ml、約 0.1 至約 40 mg/ml、約 0.1 至約 35 mg/ml、約 〇」 至約30 mg/ml、約0.1至約25 mg/ml、約〇」至約2〇 mg/ml、約 0_1 至約 15 mg/ml、約 0.1 至約 10 mg/ml、約 〇 j 至約 5 mg/ml、0.5 至約 50 mg/ml、約 〇.5 至約 45 mg/ml、約 0.5 至約 40 mg/ml、約 〇,5 至約 35 mg/ml、約 〇 5 至約 3〇 mg/ml、約 0.5 至約 25 mg/ml、約 0.5 至約 20 mg/ml、約 〇_5 至約 15 mg/ml、約 0.5至約 1〇 mg/mi、約 〇 5至約 5 mg/ml、 1.0 至約 50 mg/ml、約 l〇 至約 45 mg/mi、約！ 〇 至約 4〇 mg/ml、約 1.0至約 35 mg/ml、約 1.0至約 3〇 mg/ml、約 i 〇 至約25 mg/ml、約！·〇至約20 mg/ml、約i 〇至約15 mg/ml、約 1.0至約 1〇 mg/mi、約 1 〇至約 5 、約 2 5至 約 50 mg/ml、約 2_5 至約 45 mg/ml、約 2.5 至約 40 mg/ml、 約2.5至約35 mg/ml、約2.5至約30 mg/mi、約2.5至約25 mg/ml、約 2.5 至約 20 mg/ml、約 2.5 至約 15 mg/ml、約 2.5 至約10 mg/ml、約2.5至約5 mg/ml。在一些實施例中，本 151482.doc -55- 201118105 文所揭示組合物中之黑色素生成抑制劑濃度為〇卜〇 2、 0 3、〇·4、0.5、〇_6、0.7、0.8、〇.9、1.〇、15、2 〇、 2·5、3·〇、3.5、4.〇、4 5、5 〇、5 5、6 〇、6 5、7 〇、 7·5 、 8.0 、 8.5 、 9.〇 、 9.5 、 1〇 、 1〇 5 、 ^ 、 u $ 、 12 、 12.5、13、13.5、14、14.5、15、16、17、18、19、20、 25 30、35、40、45 或 50 mg /ml。 通常，降低或阻抑哺乳動物皮膚、毛髮/毛皮或絨毛中 之黑色素產生及色素沉著的黑色素生成抑制劑或化合物可 用於(例如)出於化妝目的使皮膚、毛髮、絨毛或毛皮增亮 及/或發亮，或用於治療色素沉著過度或不均勻色素沉著 病症，例如白癜風、雀斑、斑痣、表皮黑色素細胞增多 症、咖啡牛奶色素斑（cafe_au lait sp〇t)、炎症後色素沉著 過度等。對於該等色素脫失應用而言，如上所述進行調配 及投藥。 在某些態樣中，提供所揭示化合物之前藥及衍生物。前 樂係化合物之衍生物，其具有代謝可裂解基團且藉由溶劑 分解或在生理條件下變成在活體内具有醫藥活性之化合 物。該等實例包含但不限於膽鹼酯衍生物及諸如此類、N_ 烷基嗎啉酯及諸如此類。 化合物之其他衍生物在呈其酸及酸衍生物形式時皆具有 活性，但酸敏形式在哺乳動物有機體中經常提供溶解性、 組織相容性、或緩釋優點（參見Bundgard，H.，Design 〇f

Pr〇drugS ’ 第7·9、21-24 頁，Elsevier，Amsterdam 1985)。 刖藥包含業内從業者熟知之酸衍生物，例如藉由使母酸與 151482.doc •56- 201118105 酸化合物與經取代或 適且醇反應製備之g旨、或藉由使母體 未經取代之胺反應製備之醯胺、或酸酐、或混合針。衍生

合物之經取代或未經取代之Cl_c8烷基、 自所揭示化合物酸性側基之簡單脂族或芳族 係較佳前藥。在一些情形下，期望劁 醋。較佳者係化 經取代或未經取 代之C2_C8烯基、芳基、經取代或未經取代之C7_c〗2芳基、 及經取代或未經取代之C7_C12芳烷基酯。 亦包含任一上述式MV化合物之醫藥上可接受之酸加成 鹽及鹼式鹽。用於製備上述鹼式化合物之醫藥上可接受之 酸加成鹽的酸係彼等形成無毒酸加成鹽者，該等無毒酸加 成鹽亦即含有藥理學可接受之陰離子之鹽，例如鹽酸鹽、 虱溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽 '硫酸氫鹽、磷酸 鹽、酸式磷酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬 酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、富 馬酸鹽、葡糖酸鹽、蔗糖酸鹽、苯曱酸鹽、曱磺酸鹽、乙 確酸鹽、笨續酸鹽、對曱苯磺酸鹽及雙羥萘酸鹽（亦即， 1，1-亞曱基-雙-(2-羥基_3_萘甲酸鹽。 本質上為驗性之有用化合物能夠與不同無機及有機酸形 成各種不同鹽。儘管該等鹽必須在醫藥上可接受以投與動 物’但通常期望在實踐中首先將式化合物I以醫藥上不可 接受之鹽形式自反應混合物中分離，且然後藉由使用鹼性 試劑進行處理將該醫藥上不可接受之鹽簡單地轉化回游離 驗化合物’且隨後將該游離鹼轉化成醫藥上可接受之酸加 151482.doc •57- 201118105 成鹽。本文所揭示活性驗化合物之酸加成鹽易於藉由以下 方式製得：使用實質上等效量之所選無機酸或有機酸在水 !·生冷劑介質或適宜有機溶劑（例如甲醇或乙醇）巾處理驗化 。物。仔細蒸發溶劑後’可容易地獲得期望固體鹽。 /彼等本質上A酸性之有用化合難夠與各種冑藥上可接 受之陽離子形成驗鹽。該等鹽之實例包含驗金屬及驗土金 屬鹽’且尤其為鈉及卸鹽。該等鹽可藉由習用技術製得。 作為試劑用於製備本文所揭示化合物之醫藥上可接受之驗 鹽的化學驗係彼等與式W之酸性化合物形成無毒驗鹽 者。該等無毒驗鹽包含彼等源自該等醫藥上可接受之陽離 子(例如鈉、鉀、鈣及鎂等)者。該等鹽可容易地藉由以下 方式製得·使用含有醫藥上可接受之期望陽離子之水溶液 處理相應&性化合物’且㈣較佳在減壓下將所得溶液蒸 乾燥$選擇為，該等鹽亦可藉由以下方式製得： :酸性化合物之低碳醇溶液與期望之驗金屬醇鹽—起混 〇且然後如上所述將所得溶液蒸發至乾燥。在任-情形 下’較佳知用化學計量量之試劑以確保反應完成且期望最 終產物之產率最大。 化合物及其醫藥上可接受之鹽可用於治療人類色素沉著 :症’包含日光及普通斑疲、（包含年齡/肝色斑）、黑斑病/ Η褐斑及炎症後色素沉著過度。該等化合物藉由抑制黑色 素之產生來減》皮膚黑色素含量，不論黑色素係組成上產 生抑或因應UV輻照（例如日光曝露）而產生。因此，—些所 用活性化合物中的-些可用於減少非病理學狀態中之皮膚 151482.doc -58· 201118105 黑色素含量以誘導較亮的皮膚色澤（如使用者所期望），或 用以防止已曝露於uv輻照之皮膚中之黑色素積累。該等 化合物亦可與皮膚脫除劑（包含羥乙酸或三氯乙酸面部脫 除劑）組合使用以使皮膚色澤變亮並預防色素重新沉著。 適當劑量方案、每一投與劑量之量、及活性化合物劑量 間之具體間隔取決於所用之特定活性化合物、所治療患者 之病狀、及所治療病症或病狀之性質及嚴重程度。較佳 地，黑色素生成抑制劑之投與量及間隔應使得可對所治療 之病症或病狀產生期望治療或改進。 對於皮膚增亮而言，本文所揭示之黑色素生成抑制劑亦 可與防曬劑（UVA或UVB阻斷劑）組合使用以預防色素恢 復、防止曰光或UV誘導性皮膚發黑或增強其減少皮膚黑 色素及其皮膚漂白作用之能力。對於皮膚增亮而言，黑色 素生成抑制劑亦可與視黃酸或其衍生物或任一如下化合物 組合使用：其與視黃酸受體相互作用並加速或增強減少皮 膚黑色素及皮膚漂白作用之能力、或增強預防皮膚黑色素 積累之能力。對於皮膚增亮而言，黑色素生成抑制劑亦可 與4-經基苯甲醚組合使用。對於皮膚增亮而言，黑色素生 成抑制劑亦可與以下物質組合使用：抗壞血酸、其衍生物 及基於抗壞血_酸之產物（例如抗壞血酸鎂）或可加速或增強 其減少皮膚黑色素及其皮膚漂白作用之能力且具有抗氧化 劑機制之其他產物（例如白藜蘆醇或維他命A或視黃酸）。 亦提供用於降低黑色素產生或減少皮膚色素沉著之化合 物’其對應於式I-IV之化合物、及其前藥及類似物、及含 151482.doc •59· 201118105 有其之醫藥組合物’且包含其任一醫藥上可接受之鹽或溶 劑合物。 儘管與本文所述彼等方法及材料相似或等效之方法及材 料白可用於貫踐 < 測試本文所揭示之組合物及化合物，但 較佳方法及材料闡述如下。該等材料、方法、及實例僅具 有闡釋性且並不意欲加以限制。自詳細說明、實例、及申 請專利範圍可明瞭其他特徵及優點。 含有錐絲驗之植物提取物 一些實施例係抑制黑色素生成之方法，其包括向黑色素 細胞杈與有效量之含有黑色素生成抑制劑之植物提取物。 在些實施例中，黑色素生成抑制劑係如式I中之類固醇 黑色素生成抑制劑。在一些實施例中.，黑色素生成抑制劑 係錐絲鹼或錐絲鹼衍生物。在一些實施例中，植物提取物 源自夾竹桃科家族之植物。在一些實施例中，植物提取物 係源自南亞止瀉木提取物之提取物。其他實例包含源自以 下之植物提取物：短柔毛止瀉木（抗痢木皮）、非洲止瀉 木、剛果河止瀉木、退熱止瀉木、繁花止瀉木、沃氏止瀉 木及野橡膠木。所列示之植物物種並不意欲限於黑色素生 成抑制劑之來源。可經由其製備植物提取物且包括黑色素 生成抑制劑（包含錐絲鹼或錐絲鹼衍生物）之其他植物物種 亦可連同本文之揭示内容一起使用。 在一些實施例中，將植物提取物實質上純化或部分純化 以灌·縮黑色素生成抑制劑。在其他實施例中，可將植物提 取物實質上液化或部分液化以投與有需要之患者。亦可在 151482.doc •60· 201118105 投與前處理植物提取物以去除顆粒物質。在一些實施例 中’植物提取物含有約〇. 1至約90%、約〇 5%至約80%、約 1%至約75%、約5°/。至約60%、約1〇%至約5〇。/。、約25°/〇至 約40 /〇之黑色素生成抑制劑。在其他實施例中，植物提取 物含有約1°/。至約80%、約1%至約70% '約1%至約60%、約 1%至約50%、約1%至約4〇〇/。、約1。/。至約3〇〇/0、約p/0至約 20%、約1%至約1〇。/。、約5%至約8〇。/。、約。至約7〇。/。、約 5%至約60%、約5。/。至約50%、約5°/。至約40〇/。、約5¼至約 3 0〇/〇、約 5°/〇 至約 20%、約 5% 至約 10%、約 1〇% 至約 8〇〇/〇、 約10%至約70%、約1〇%至約60%、約1〇%至約5〇%、約 10%至約40%、約1〇%至約30%或約1〇%至約2〇。/。之黑色素 生成抑制劑。在一些實施例中’植物提取物含有約〇 5 %、 1% > 5% ' 10% ' 15% ' 20% ' 25% ' 30% ' 35% ' 40% > 45〇/〇、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85〇/〇、 90%、或95%之黑色素生成抑制劑。 在一些實施例中，提供含有用作黑色素生成抑制劑之錐 絲驗或錐絲驗衍生物的植物提取物。在一些實施例中，提 供含有用於抑制黑色素生成之錐絲鹼或錐絲鹼衍生物之植 物提取物的調配物《亦提供預防、治療、改善或處理涉及 不期望或異常黑色素生成之疾病或病狀之方法，其包括向 需要或渴望該預防、治療、改善、或處理之患者投與預 防、治療或化妝有效黑色素生成抑制量之含有錐絲鹼或錐 絲鹼衍生物的植物提取物。在一些實施例中，提供改變或 恢復哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛、或毛皮中之色素沉著之 151482.doc -61 · 201118105 方法，其包括向哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮投與有 效量之含有錐絲鹼或錐絲鹼衍生物的植物提取物。該植物 提取物之一實例係源自南亞止瀉木之提取物。其他實例包 含源自以下之植物提取物：短柔毛止瀉木（抗痢木皮）、非 洲止瀉木、剛果河止瀉木、退熱止瀉木、繁花止瀉木及沃 氏止濕木（Apocynaceae) ° 錐絲驗係源自某些植物（包含但不限於南亞止渴木）提取 物之生物驗。使用南亞止瀉木之植物種子作為用於痢疾、 腹瀉、細蟲、及不規則發熱之口服治療劑。其他植物實例 包含來自夾竹桃科家族之植物，包含源自以下之植物提取 物：短柔毛止瀉木（抗痢木皮）、非洲止瀉木、剛果河止瀉 木、退熱止;舄木、繁花止萬木、沃氏止瀉木及野橡膠木。 在一些實施例中，將植物提取物實質上純化或部分純化以 濃縮黑色素生成抑制劑。在其他實施例中，可將植物提取 物實質上液化或部分液化以投與有需要之患者。亦可在投 與前處理植物提取物以去除顆粒物質。 已使用植物皮作為用於痢疾、血友病、及食欲缺乏之口 服治療劑（Gjerstad G. Pharmaceutical Biology, Swets & Zeitlinger Lisse，Netherlands，1968，8(1): 1141-51)。據 信，其可有效治療消化不良、腸胃氣脹、及絞痛。在本文 所揭不之某些實施例中，使用源自南亞止瀉木之提取物來 抑制黑色素生成及/或調節皮膚色素沉著。 南亞止瀉木粉末（呈野生Kutaj粉末形式）市面有售且可購 自（例如）Vadik Herbs(Bazaar 0f India Inc )。可自南亞止瀉 151482.doc -62- 201118105 取物， 。舉例而言，為製備植物提

物之上清液。 木粉末製備南亞止瀉木提取物。舉 取物，將ίο克南亞止瀉木粉末與5〇 日將混合物渦旋若干次並在室溫 源自南亞止瀉木之提取物係所培養黑色素細胞中黑色素 口成之有效抑制劑及人類皮膚組織中之有效脫色劑(圖】 20)。在一些實施例中，將源自南亞止瀉木之提取物抑制 黑色素生成之有效性與甘草提取物及純形式錐絲鹼進行比 較在商業上使用甘草提取物作為化妝產品中之皮膚增白 劑。業内已提出，甘草提取物經由其對於酪胺酸酶酶促活 11之抑制效應來降低黑色素生成等人2〇〇3)。局部施 加0.5%光甘草定（甘草提取物中之主要異黃烷）可抑制uv誘 導性色素沉著（Yokota等人1998)。甘草提取物ρτ_4〇(4〇%光 甘草定）可自（例如）Barnet Products公司購得《可將甘草提 取物粉末浴於70%乙醇中。在一些實施例中，源自南亞止 λ寫木之提取物較甘草提取物ρτ·4〇在同等濃度下可更有效 地抑制黑色素_a細胞中之黑色素合成（圖16)。作為脫色 劑’源自南亞止瀉木之提取物亦比甘草提取物更有效（圖 17-20)。 通常’預計本文所揭示之植物提取物組合物包括約10/〇 至約75°/〇、較佳約5%至約5〇%、更佳約1〇%至約3〇%、且 更佳約20%之植物提取物。在一些實施例中，本文所揭示 組合物中之植物提取物量為約5%至約35%、或約15%至約 151482.doc •63- 201118105 25%。在一些實施例中，本文所揭示組合物中之植物提取 物量為約5°/。至約75%、約5%至約70°/。、約5%至約65%、約 5%至約60%、約5%至約55%、約5%至約50%、約5%至約 45°/。、約5°/。至約40%、約5%至約35%、約5%至約30%、約 50/〇至約25%、約5°/。至約20❹/。、約5%至約15%、約5%至約 10〇/〇、約10%至約75%、約10%至約70%、約10%至約 650/。、約10%至約60%、約10%至約55%、約10%至約 50%、約10%至約45%、约1〇〇/❶至約40%、約10%至約 350/。、約10%至約30%、約10%至約25%、約10%至約 20%、及約10%至約15%。在一些實施例中，本文所揭示 組合物中之植物提取物量為1%、2%、3%、4%、5%、 60/〇、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、 15% ' 16% ' 17% ' 18% ' 19% ' 20% ' 21% > 22% ' 23% ' 24〇/〇、25%、26%、27%、28%、29%、30%、32%、34%、 350/〇、36%、38%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、 70%或75°/〇。所揭示組合物中所包含之植物提取物量取決 於諸多因素，包含植物提取物製劑中所含黑色素生成抑制 劑（包含錐絲鹼或錐絲鹼衍生物）之量。本文所述實施例範 圍涵蓋測試植物提取物製劑以測定每一製劑中所包含黑色 素生成抑制劑之量。 亦預計，本文所揭示之組合物可含有約1 〇 mg至約100 g 植物提取物/100 ml組合物、較佳約1 g至約50 g植物提取 物/100 ml組合物。在一些實施例中，本文所揭示之組合物 可含有約100 mg至約50 g植物提取物/100 ml組合物、或約 151482.doc -64- 201118105 1 g至約20 g植物提取物/100 ml組合物。在一些實施例 中’本文所揭示之組合物可含有約100 mg至約50 g、約 100 mg至約 45 g、約 100 mg至約 40 g、約 100 mg至約 35 g '約100 mg至約30 g、約1〇〇 mg至約25 g、約1〇〇 mg至約 20 g、約 100 mg至約 15 g、約 100 mg至約 10 g、約 1〇〇 mg 至約5 g、約100 mg至約1 g、1 g至約50 g '約1 g至約45 g、約1 g至約40 g、約1 g至約35 g、約1 g至約30 g、約1 g 至約25 g、約1 g至約20 g、約1 g至約15 g、約1 g至約10 g、約1 g至約5 g、約2.5 g至約5 0 g、約2.5 g至約4 5 g、約 2.5 g至約40 g、約2.5 g至約35 g、約2.5 g至約30 g、約2.5 g至約25 g、約2·5 g至約20 g、約2.5 g至約15 g、約2.5 g至 約10 g、及約2.5 g至約5 g植物提取物/loo mi組合物。在 些實施例中’本文所揭不之組合物含有約〇. 5 g、1 g、2 g、3g、4g、5g、6g、7g、8g、9g、10g、ll g、12 g、13g、14g、15g、16g、l7g、18g、19g、20g、21 g 22 g、23 g、24 g、25 g、26 g、27 g ' 28 g ' 29 g、30 g 32 g、35 g、37 g、40 g、45 g、5〇 g、55 g、6〇 g、65 g、7〇 g或75 g植物提取物/1〇〇 mi組合物。 在其他實施例中，提供含有錐絲鹼或錐絲鹼衍生物之植 物提取物與相似作用之藥劑之組合。該植物提取物之-實 例係源自南亞止渴木之提取物。相似作用之藥劑可為本文 =π之* >fb妝成份或藥理學活性劑。亦提供用於治療 .曰，黑色素生成抑制劑之疾病之醫藥組合物，纟包括治療 有效量之含有錐絲驗或錐絲驗射物之植物提取物與相似 15I482.doc -65- 201118105 作用之藥劑之組合。在_些實施例中，包括含有錐㈣或 錐絲驗衍生物之植物提取物與相μ作用之藥劑之组合之醫 藥組合物係用於化妝或皮膚病學用途的局部調配物。在其 貫施例中，提供預防、治療、改善或處理涉及不期望或 異常黑色素生成之疾病或病狀之方法’其包括向需要或渴 望該預防、治療、改善或處理之患者投與醫藥或化妝品組 合物，該組合物包括預防、治療或化妝有效黑色素生成抑 制量之含有錐絲鹼或錐絲鹼衍生物之植物提取物與相似作 用之藥劑的組合。在其他實施例中，亦提供改變或恢復哺 乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮_之色素沉著之方法，其 包括向哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮投與一定量之組 合物，該組合物包括顏料_恢復或改變有效量之含有錐絲 鹼或錐絲鹼衍生物之植物提取物與相似作用之藥劑的組 合。在一些實施例中，相似作用之藥劑係皮膚增亮化合 物0 合理藥物設計 藉由本文所揭示方法鑑別之化合物或本文所揭示化合物 可用作設計更有效化學類似物之分子建模技術的根據。舉 例而言，可使用該等或其他建模技術來產生本文所列示任 一化合物之化學類似物。分子建模系統之實例係 CHARM(Polygen 公司 ’ Waltham，Mass·)及 QUANTA (Molecular Simulations公司，San Diego, Calif.)程式。 CHARM實施能量最低化及分子動力學功能。qUAnTA實 施分子結構之構建、圖形建模及分析^ quanta對分子間 151482.doc -66- 201118105 彼此之行為進行相互作用構建、改良、可視化、及分析。 舉例而言’化合物可進一步用於使用諸如Ludi、insight II、0：2-1^1111114^及八汀^^丫(河〇1“11131_ Simulati〇ns& 司，

San Diego，Calif.)等建模包裝來設計更有效類似物。尤佳 建模包裝係MacroModel (Columbia University，New York， N.Y.) 〇 化合物可進一步用作研發合理組合文庫之根據。亦可篩 選此一文庫以鑑別更有效之化合物。儘管組合文庫之性質 取決於諸如以下各種因素：自本文所揭示較佳化合物選擇 用於形成文庫根據之特定化合物、以及使用樹脂合成文庫 之要求，但應認識到，本文所揭示之化合物提供適用於組 〇 a又 a十矛王式（例如 c2-QSAR(Molecular Simulations 公司， San Diego, Calif.))的所需數據。 抑制黑色素生成之方法 如上所述，本文所揭示之化合物可用於治療患有由黑色 素之產生或過度產生？丨起之疾病、病狀、或病症的動物或 (較佳）人類。該等疾病 '病狀、或病症包括彼等特徵在於 皮膚或毛髮脫色者，例如，自炎症或諸如黑斑病等疾病引 起之色素沉著過度、或褐斑病（例如「咖啡牛奶」斑疹）。 另一選擇為，受試者可能渴望增亮其毛髮或皮膚之顏色。 術語「治療」、「治療用途」、「化妝用途」及「醫學用 途」應指所揭示組合物之任一及所有如下用途：治療疾病 狀態、一或多種症狀或一或多種效應，或另外以任何方式 預防阻止、延遲、或逆轉疾病或一或多種其他不期望症 151482.doc -67. 201118105 狀或效應之進展。 本發明進一步提供抑制皮膚色素沉著之方法及醫藥及/ 或化妝品組合物，其包括單獨或與其他類似作用之藥劑組 合使用本發明化合物。舉例而言，該等額外藥劑可包括據 信藉由模擬或增加ρ蛋白功能、及/或藉由調節晚期胞内體/ 溶酶體運輸來發揮作用的藥劑。料t藥組合物及其相應 方法用於降低及/或抑制黑色素產生且由此用於減少皮膚 色素沉著。該等藥劑可單獨、彼此組合、或與其他抑制色 素沉著之藥物組合使用。根據非限制性實例，其他抑制色 素沉著之藥物包括諸如酪胺酸酶抑制劑等藥劑。較佳地， 本文所揭示之方法及組合物係制於脊椎動物、更特定而 言哺乳動物，且以人類最佳。 本文所用之術語「約」意指大約（approximately)、概略 地（roughly)、左右（ar〇und)、或在的附近（h 讣e regi〇r of)。在術:吾「約」連同數值範圍一起使用時，其藉由將邊 界延伸至高於及低於所述數值來修飾該範圍。 片「降低黑色素產生」或「抑制黑色素生成」意指與 未處理之對照黑色素細胞新合成之黑色素量相比，可顯著 降低該已暴露於本文所揭示化合物之黑色素細胞之新合成 黑色素量。本文制之術語「降低」係指在第—例中係將 新合成之黑色素量降低至少約丨G %，在另_例中係降低至 少約25%，且在又-例中係降低至少約50%。 本文所用之術語「晚期胞内體/溶酶體運輸」係指在不 同細胞區室之間蛋白質、脂質、或其他化合物之移動。該 151482.doc -68 - 201118105 等定位包含該等化合物自晚期胞内體移動至溶酶體、自容 酶體移動至晚期胞内體、自晚期胞内體或溶酶體移動至古 爾基體外側網絡（trans Golgi network)、及自高爾基體外側 網絡移動至晚期胞内體或溶酶體。 可藉由使黑色素細胞與諸如以下化合物接觸來改變晚期 胞内體/溶酶體運輸：孕酮、疏水胺、鞘胺醇、晚期胞内 體/溶酶體運輸之拮抗劑、或本文所述式（I)_(IV)之任—化 合物。 熟習此項技術者根據本揭示内容應明瞭，本文所揭示方 法中所用之化合物可單獨使用或彼此組合使用。另外，該 等方法亦包含另外使用業内已知之其他化合物來影響黑色 素合成，例如酪胺酸酶抑制劑。該等抑制劑為彼等熟習此 項技術者所熟知且尤其包含間笨二酚之各種衍生物、氫 醌麴駄、二聚氰胺、及不同類型植物提取物。 一 *因此，本揭示内容係關於調節、且尤其抑制皮膚之色素 ^之方法’其中將所用活性化合物、或其醫藥上可接受 会人 或夕種上文提及之其他活性成份作為同一醫藥 計:物=部分"'起投與’且係關於將該等物質作為經設 又侍、’且合療法益處之適當劑量方案之一部分單獨投與 的方法。適當齋丨番古安 〆 劑量間之且體門 母一投與劑量之量、及各活性劑 者之-m、 隔取決於所用4寺定活性劑，组合、所治療患 額外活性、、“療病症或病狀之性質及嚴重程度。該等 部治療劑^通:以小於或等於彼等其有效_作單一局 里的畺投與。该等活性劑之經認可以投與 151482.doc •69· 201118105 人類之FDA認可劑量可公開獲得。 舉例而5 ’本文所揭示皮膚增亮方法所用之任一化合物 可與赂胺酸酶抑制劑或其他當前業内已知或將來欲研發之 皮膚增白劑組合使用，尤其包含下列專利公開案中所述一 或多種彼等藥劑中之任一者·· Nagai等人之1981年7月14曰 頒佈之美國專利第4,278,656號；Nagai等人之1983年1月18 曰頒佈之美國專利第4,369,174號；Torihara等人之1990年9 月25日頒佈之美國專利第4,959,393號；Fukuda等人之1996 年12月3曰頒佈之美國專利第5,580,549號；Jones等人之 2000年9月26日頒佈之美國專利第6,123,959號；Hu之2000 年10月17曰頒佈之美國專利第6 132 74〇號；Tul〇up等人之 2000年12月12日頒佈之美國專利第6,159,482號；LOreal之 1999年 7 月 1 日公開之 w〇 99/32077 ; Fytokem Prod.公司之 1999年12月16日公開之WO 99/64025 ; Pfizer公司之2000年 9月28日公開之WO 00/56702 ; Shiseido有限公司之20〇〇年 12 月 12 日公開之 WO 00/76473 ; LOreal SA之 2000 年 5 月 3 日公開之 EP 997140 ; Kunimasa Tomoji之 1993 年 8 月 31 日公 開之JP 5221846 ; Shiseido有限公司之1995年9月19日公開 之 JP 7242687 ; Itogawa Η 之 1995 年 12 月 12 日公開之 jp 7324023 ; Shiseido有限公司之1996年1月16日公開之jp 8012552 ; Shiseido有限公司之1996年1月16日公開之jp 8012554 ; Shiseido有限公司之1996年1月16日公開之jp 8012557 ; Shiseido有限公司之1996年1月16日公開之jp 8012560 ; Shiseido有限公司之1996年1月16日公開之jp 151482.doc -70- 201118105

8012561 ; Fujisawa之 1996年 5 月 28 日公開之 JP 8134090 ; Kirinjo KK 之 1996 年 7 月 2 日公開之 JP 8168378 ; Kansai Koso KK 之 1996 年 10 月 22 日公開之 JP 8277225 ; Sanki Shoji KK之 1997 年 1 月 7 日公開之 JP 9002967 ; Yagi Akira之 1997 年 11 月 18 日公開之 JP 9295927 ; Kansai Kouso之 1998 年 3月 17日公開之JP 10072330 ; Kamiyama KK 之1998年 3 月 31 日公開之 JP 10081626 ; Kansai Kouso KK之 1998年4月 21 日公開之 JP 10101543 ; Maruzen Pharm 之 1999年 3 月 16 日公 開之 JP 11071231 ; Kyodo Nyugyo之 1999 年 3 月 23 日公開之 JP 11079934 ; Shiseido有限公司之1999年9月14日公開之JP 1 1246347 ; Shiseido有限公司之1999年9月14日公開之JP

1 12463 44 ; Kanebo有限公司之2000年3月21日公開之JP 2 000-08 0023 ; Kose KK 之 2000 年 4 月 4 日公開之】？ 2000-095663 ; Hai Tai Confectionary有限公司之 2000年 6月 13 日 公開之JP 2000-159681 ; Kanebo有限公司之2000年9月12日 公開之 JP 2000-247907 ; Sanki Shoji KK之 1997年 1 月 7 日公 開之 JP-9002967 ; Nikken Food KK之 1995 年 8 月 8 日公開之 JP-7206753 ; Kunimasa T 之 1993 年 12 月 3 日公開之 JP-5320025 ;及 Yakurigaku Chuou KE 之 1984年 9月 6 日公開之 JP-59157009 ;該等專利公開案皆以引用方式併入本文 中。 引起晚期胞内體/溶酶體運輸改變之化合物的非限制性 實例包含本文式I-IV之化合物（單獨或組合）。特定衍生物 已闡述於本文中。 151482.doc 201118105 在另一態樣中’提供減少皮膚多夸、_ 汉渭巴素〉儿者之方法。在此方 法中’使皮膚與醫藥上有效量之可冲 1之可改變晚期胞内體/溶酶 體運輸的化合物接觸’其中改變眵 1晛期胞内體/溶酶體運輸 可使得皮膚色素沉著有所減少。 片語「減少皮膚色素沉著」意指皮膚中黑色素量之可檢 測降低，較佳因降低新合成之黑色素量而使皮膚增亮。本 文所用之術語「降低」係指在第—情形下將新合成之黑色 素量降低至少約1G%，在另-情形下降低至少約洲，且 在又-情形下降低至少約50%。新合成黑色素之此降低較 佳在視覺上可由肉眼辨識出，亦即，&需借助顯微鏡或其 他此類部件來檢測其發生。 亦提供藉由使皮膚在局部與有效量之改變皮膚中晚期胞 内體/溶酶體運輸之化合物接觸來減少皮膚色素沉著的方 法》用於該等方法之有用化合物包含彼等揭示於上文中 者。 醫藥應用 對於醫藥用途，本文所揭示之化合物較佳係醫藥組合物 之-部分。可將醫藥組合物（包括有效量之存於醫藥上可 接受之載劑中之此一化合物）投與患有產生、或過度產生 黑色素之類型疾病、病症、或病狀的患者、個人、戋動 物。 有效治療特定疾病、病症、或病狀之化合物量取決於該 疾病、病症、或病狀之性質，且可藉由標準臨床技術來確 定。若可能，期望在人類中進行測試及使用之前，在活體 151482.doc •72· 201118105 外、且然後在有用動物模型系統中測定化合物對於擬治療 組織類型之細胞毒性。 μ 可精由使活性劑與哺乳動物身體中其作用位點接觸之任 -方式來投與化合物以減少或增加黑色素合成。可藉由可 4同醫樂-起使用之任—f用方式以個別治療劑或治療劑 、，且口之形^來投與化合物。每_治療劑皆可單獨投與但 較佳與根據所選投與途徑及標準醫藥實踐選擇之醫藥載劑 -起投與。醫藥組合物可適用於經口、非經腸、經直腸且 f佳局部投與，且可以彼等熟習醫藥技術者熟知之方式呈 早位劑型。非經腸投與包含但不限於皮下注射、靜脈内注 射'腹膜腔内注射或肌内注射。然而，局部施加較佳。 化妝應用 除醫藥用途外，本文所揭示之方法可用於化妝目的。關 於本文所揭示方法之化妝應用包含局部施加含有一或多種 化合物之組合物以增強或以其他方式改變皮膚或毛髮之視 覺外觀。可使用本文所揭示方法來治療因黑色素產生過 度產生或產生不足所引起之在皮膚或毛髮中出現之顯著但 不期望的色素沉著。因此且如上文所述，可使用化合物及 組合物來改進皮膚或毛髮外觀，如藉由使皮膚或毛髮發 亮、增加或增強光澤、及諸如此類來達成。適用於該等目 的之調配物可由彼等熟習此項技術者製得，且認為該等製 備細節屬於本發明範圍。 片語「醫藥應用」及「化妝應用」並不意欲表示相互排 斥。在-些實施例中，端視所需作用之要求及過程，可將 15l482.doc -73- 201118105 組合物應用於「醫藥應用」及「化妝應用」。 端點及劑量 可藉由習用方式來確定有效劑量及治療方案，其中在實 驗室動物中以低劑量開始且然後增加劑量同時監測效應， 且亦系統地改變劑量方案。通常使用動物研究（較佳哺乳 動物研究）來測定關於生物活性劑/公斤重量之最大耐受劑 量（或MTD)。彼等熟習此項技術者可將有效且避免毒性之 劑量外推至其他物種（包含人類）。 在實施人類功效研究之前，正常受試者中之階段1臨床 研究可幫助確立安全劑量。在確定給定受試者之最佳劑量 時’臨床醫師可考慮多個因H主㈣素係影響或模擬 P蛋白功能或抑制晚期胞内體/溶酶體運輸之所選化合物的 毒性及半衰期。額外因素包含患者之個頭大小、患者年 齡、患者之-般病況、所治療之特定疾病、病狀、或病 症、所治療疾病、病狀、或病症之嚴重程度、患者中其他 藥物之存在、期望效應及諸如此類。在考慮動物研究結果 及臨床文獻之後選擇試驗劑量。 熟習此項技術者應瞭解，特定情形中之所選端點將根 以下而有所變化：所治療之疾病、病狀、或病症；患者 受試者之㈣結果；或治療醫師；及其他因素。在將组 物應用化壯目的以（例如）增亮皮膚顏色（例如，用以逆轉 (例如）炎症或諸如黑斑病等疾病引起之色素沉著過度）或 節毛髮顏色時’可選擇諸多端點中之任—者。 在該情形下，舉例而言，在受試者只是「滿意」治療」 151482.doc •74· 201118105 療定端點。對於藥理學應用而言，可由滿 為，可客觀：二治療醫師來確定端點。另一選擇 界疋柒點。舉例而言，可比較 之治療區域中夕“ * 比餃患者或丈试者 膚或θ或毛髮與比色圖表。在治療區域中皮 另L.⑼之顏色與圖標上之顏色外觀相似時，終止治療。 所'、二^ ’可量測所治療皮膚或毛髮之反射率，且可在 了 Ί膚或毛髮達到指枝射率時終止治療。另一選擇 量測所治療毛髮或皮膚之黑色素含量。可在所治療 s皮膚之黑色素含量達到指定值時終止治療。可以業 内已知之扭_ 士 4λ '' 方式（包含組織學方法）在使用或不使用黑色 素木色進行增強之情況下測定黑色素含量。 投與方法 〇局卩^與所揭示之化合物，例如，以貼片、軟膏、乳 :、凝膠 '洗劑、溶液、發泡體、面膜（mask)或經皮形式 投與^亦可以固體或半固體劑型（例如硬質或軟質明膠膠 j或私劑）或液體劑型（例如馳劑、糖漿、或懸浮 液)經口投與化合物。此外，亦可以無菌液體劑型或栓劑 形式非經腸投與化合物。 因涵蓋活體内使用，故組合物較佳具有高純度且實質上 不3 ’曰在有害之污染物，例如，至少係國家食品（NF)等 級通常至少分析等級、且較佳至少醫藥等級。寥於給定 5物必/員在使用刖合成，故該合成或隨後純化應較佳產 生實質上不含可在合成或純化程序期間使用之任何潛在污 染毒性劑的產物。 151482.doc •75- 201118105 用於投與本發明化合物之有用醫藥劑型闌述於下文令。 醫藥組合物可直接施加至皮膚。另一選擇為，可藉由各 種經皮藥物遞送系統（例如業内已知之經皮貼片）來遞送。 舉例而言，對於局部投與而言，可藉由業内熟知之方法以 醫藥或化妝上可接受之形式將活性成份調配成溶液、凝 膠、洗劑、軟膏、乳膏、懸浮液、發泡體、面膜、膏糊、 搽劑、粉劑、酊劑、氣溶膠、貼片、或諸如此類。组合物 可為用於局部施加至動物或人類之醫藥或化妝技術中常用 各種形式中之任一者，包含溶液、洗劑、喷霧、乳膏、軟 膏、油膏、凝膠等，如下文所述◊較佳藥劑係彼等具有足 夠黏度以保留於治療區域上者、彼等不易於蒸發者、及/ 或彼等易於藉由使用水沖洗、視需要借助肥皂、清潔劑及/ 或洗髮劑去除者。製備局部調配物之現行方法已為彼等熟 習此項技術者所習知或明瞭，且詳細闡述於Remingt〇n，s Pharmaceutical Seiences，199〇(參見上文

Dosage F〇rms and Drug Delivery Systems，第 6 版， Williams & Wilkins (1995)中。 為增強活性成份之經皮吸收，可在局部調配物中添加諸 多試劑中之一或多種，包含但不限於二甲基亞砜、二甲基 乙醯胺、一甲基甲醯胺、表面活性劑、氮酮、醇、丙酮、 丙二醇及聚乙二醇。此外，亦可使用物理方法來增強經皮 滲透’例如藉由離子電滲或超音促滲。另一選擇為或此 外，可採用脂質體。 局部施加之組合物含有醫藥有效量之至少一種本文所述 151482.doc -76- 201118105 及揭示之化合物及彼等用作載劑所需之成份，例如乳液、 乳膏、軟膏、眼用軟膏、水溶液、洗劑或氣溶膠。該等載 劑之非限制性實例更詳細地闡述於下文中且可參見以下案 件：2000年10月26日公開之國際專利公開案w〇 00/62742、Mason等人之1997年11月25日頒佈之美國專利 第5,691，3 80號、及Deckner等人之1999年10月19日頒佈之 美國專利第5,968,528號、Chidsey，III之1979年2月13日頒 佈之美國專利第4，139,619號、及Orentreich等人之1987年8 月4曰頒佈之美國專利第4,684,635號，其皆以引用方式併 入本文中。適宜醫藥載劑進一步闡述於此領域中之標準參 考文件-Remington 丨 s Pharmaceutical Sciences，第 17 版， Mack Publishing公司，Easton，Pa. (1990)中。 醫藥組合物亦可包含可選組份。該等可選組份應適於施 加至角質組織中’亦即，在納入至組合物中時，其適用於 與人類角質組織接觸且在合理醫學判斷範圍内不具有不恰 當之毒性、不相容性、不穩定性、過敏反應、及諸如此 類。此外’該等可選組份只要並不不可接受地改變本文所 揭示活性化合物之益處即可有用。The CTFA Cosmetic Ingredient Handbook，第二版（1992)闡述常用於皮膚護理 工業中之各種非限制性化妝及醫藥成份，其適用於本文所 揭示之組合物中。該等成份種類之實例包含：磨触劑、吸 收劑、美觀組份（例如香味劑、顏料、色素/著色劑、芳香 油、皮膚感覺劑、收斂劑等（例如，丁香油、薄荷醇、樟 腦、桉葉油、丁香酚、乳酸薄荷酯、金縷梅餾出物））、抗 151482.doc -77· 201118105 痤瘡劑、抗結劑、消泡劑、抗微生物劑（例如，丁基胺基 曱酸碘丙基酯）、抗氧化劑、黏合劑、生物調節劑、緩衝 劑、填充劑、螯合劑、化學添加劑、著色劑、化妝收斂 劑、化妝殺蟲劑、變性劑、藥物收斂劑、外部鎮痛劑、膜 形成劑或材料（例如，有助於組合物之成膜性質及直接性 之聚合物（例如’二十稀與乙稀基㈣㈣之共聚物））、遮 光劑、pH調節劑、推進劑、還原劑、多價螯合劑、皮膚調 即劑（例如，保濕劑’包含混合型及封閉型）、皮膚安撫劑 及/或癒合劑（例如，泛醇及衍生物（例如，乙基泛醇）、真 蘆薈、泛酸及其衍生物、尿囊素、沒藥醇、及甘草酸二 鉀）、皮膚處S齊卜增_、及維他命與其衍生物。 除醫藥有效量之本文所揭示藥劑外，局部組合物亦包括 皮膚病子上可接受之載劑。本文所用之片語「皮膚病學上 可接受之載劑」意指該载劑適適於局部施加至皮膚(亦 即’角質组織），且右_ M ij. 〃、有良好美觀性質’與本文所揭示之活 性劑及任一其他缸粉相六 β — 、，相今，且不會引起任何安全或毒性問 題安王及有效量之載劑佔組合物之約⑺％至約99 99〇/。、 較佳約3 0 %至約9 9 Q %、® /a • 更佳約50%至約98%、且最佳約 60%至約 95%。

所揭示組合物中所用夕#女I 中所用之載劑可呈各種形式。該等形式包 3礼液载劑’包含但不pp 一 p於水包油型、油包水型、油包 ^-7包油型、及水包油·聚石夕氧包水型乳液、乳膏、軟 /眼用軟膏、水溶液、洗劑或氣溶膠。熟習此項技術者 應理解’端視給定組份在組合物中之水溶性/分散性^ 151482.doc •78- 201118105 組份主要分佈於水或油/聚矽氧相中。 乳液通常含有醫藥有效量之本文所揭示之藥劑及脂質或 油。脂質及油可源自動物、植物、或石油且可為天然或合 成（亦即，人工）脂質及油。較佳乳液亦含有保濕劑，例如 甘油。基於載劑之重量，乳液較佳進一步含有約1%至約 10%、更佳約2%至約5%之乳化劑。乳化劑可為非離子 型、陰離子型或陽離子型。適宜乳化劑闡述於（例如）頒予 Dickert等人之1973年8月28日之美國專利第3,755 56〇號、 頒予Dixon等人之1983年u月2〇日之美國專利第4,421，769 號、及 McCutcheon's Detergents and Emulsifiers，North

American Edition，第 3 17-324 頁（1986)中。 乳液亦可含有消泡劑以在施加至角質組織時將發泡降至 最低。消泡劑包含高分子量聚矽氧及業内用於該用途之其 他熟知材料。 端視期望產物形式，適宜乳液可具有寬範圍之黏度。較 佳之實例性低黏度乳液的黏度為約5〇厘斯托克斯 (Centistokes)或更小、更佳約1〇厘斯托克斯或更小、最佳 約5厘斯托克斯或更小.乳液亦可含有消泡劑以在施加至角 質組織時將發泡降至最低。消泡劑包含高分子f聚石夕氧及 業内用於該用途之其他熟知材料。 -類乳液係聚秒氧包水型乳液。聚石夕氧包水型乳液含有 連續聚矽氧相及分散水相。本文所揭示之較佳聚矽氧包水 型乳液包括約1重量％至約6〇重量％、較佳約5重量。/。至約 4〇重量。/。、更佳約10重量％至約2〇重量％之連續聚矽氧 151482.doc •79· 201118105 相。連續聚矽氧相以含有或包圍下文所述不連續水相的外 部相形式存在。 勺連續聚矽氧相可含有聚有機矽氡烷油。調配較佳聚矽氧 匕乂里礼液系、统以提供氧化穩定之媒劑來遞送醫藥有效量 之本文所揭示藥劑。該等較佳乳液之連續聚石夕氧相包括約 5〇重量。/。至約99.9重量％之有機聚矽氧烷油及小於約5〇重 量％之非聚秒氧油。在-尤佳實施例中，連續聚梦氧相包 勺5〇/〇、較佳約60〇/〇至約99.9%、更佳約70%至約 99.9%、且甚至更佳約8〇%至約99 9%之聚有機矽氧烷油 連續聚石夕氧相之重量計）及至多約50%、較佳小於約 更佳J於約30%、甚至更佳小於約10%、且最佳小 於約2%之非聚石夕氧油（以連續聚石夕氧相之重量計）。與含有 較低濃度聚有機矽氧烷油之可比油包水型乳液相比，該等 有用乳液系統可在延長時間段内提供更強之氧化穩定性。 將連續聚矽氧相中非聚矽氧油之濃度降至最低或完全消除 :可進-步增強組合物中本文所揭示活性化合物的氧化穩 定性。此類聚碎氧包水型乳液闡述於心繼等人之年 11月25日頒佈之美國專利第5,691，⑽號令。 用於、·且&物巾之有機㈣氧❹可為揮發性㈣氧 揮發性聚梦氧、或揮發性㈣氧與非揮發性㈣氧之混人 物。此上下文中所用之術語「非揮發性」係指彼等在環: 條件下呈液體狀態且閉赴,—. 閃點（在一個大氣壓下）為約loot或大 於約威之㈣氧。此上下文中利之術語「揮發性 係指所有其他聚錢油。可自涵蓋寬範@揮發性及黏度二 151482.doc 201118105 3 =選擇適宜有機聚魏院。適宜有機聚嫩 芳基石夕彳3聚烧基石夕氧烧、環狀聚院基石夕氧院、及聚烧 售。κ疋，其為彼f熟習此項技術者所習知且市面有 連續聚石夕氧相可含有— 氧油。較佳地，將 氧相中非聚碎氧油之濃度降至最低或完全消除以 v增強組合物令醫藥有效藥劑之氧化穩定性。適宜非 聚矽氧油在約一個大氣壓下之熔點為約25。。或更低。適用 料續^氧相巾之非㈣氧油之實㈣彼等在局部個人 -蔓理產品中為化學技術所熟知者，其呈油包水型乳液形 弋例如礦物油、植物油、合成油、半合成油等。 。有用局部組合物包括約鄕至約9G%、更佳約5〇%至約 85%、且最佳約7()%至約嶋之分散水相。在乳液技術 中，術語「分散相」係熟習此項技術者所熟知之術語其 意指該相以懸浮於連續相中且由該連續相包圍之小顆粒或 微滴的形式存在。分散相亦稱作内部相或不連續相。分散 水相係懸浮於上述連續聚矽氧相中且由該連續聚矽氧相包 圍之小水性顆粒或微滴的分散液。水相可為水、或水與一 或多種水溶性或分散性成份之組合。該等可選成份之非限 制性實例包含增稠劑 '酸、鹼、鹽、螯合劑、膠、水溶性 或分散性醇及多元醇、緩衝劑、防腐劑、防曬劑、色素、 及諸如此類。 以局部組合物之重量計，該組合物通常在分散水相中包 括約25%至約90%、較佳約40%至約80%、更佳約6〇%至約 151482.doc -81 - 201118105 8 0%之水。 聚石夕氧包水型乳液較佳包括乳化劑。在一較佳實施例 中’以組合物之重量計，組合物含有約0.1 %至約1 〇%之乳 化劑、更佳約0.5%至約7.5%、最佳約1%至約5%之乳化 劑。乳化劑可幫助分散及懸浮連續聚矽氧相内之水相。 本文可採用各種乳化劑以形成較佳之聚矽氧包水型乳 液。已知或習用乳化劑可用於組合物中，前提係所選乳化 劑在化學及物理上與組合物之基本組份相容且提供期望分 散特性。適宜乳化劑包含彼等熟習此噚技術者已知用於局 郤個人護理產品中之聚矽氧乳化劑（例如，經有機修飾之 有機聚矽氧烷，彼等熟習此項技術者亦將其稱作聚矽氧表 面活性劑）、不含矽之乳化劑、及其混合物。 有用乳化劑包含各種聚矽氧乳化劑。該等聚矽氧乳化劑 通常係經有機修飾之有機聚石夕氧烷，彼等熟習此項技術者 亦將其稱作聚矽氧表面活性劑。適宜乳化劑闡述於(例 如）MCCmcheon，s Detergents and Emulsifiers, N〇rth American ion (1986)(由Allured 公司公開）、等人 之1991年4月30日頒佈之美國專利第5,〇ii，68i號、讓等 人之1983年12月2〇日頒佈之美國專利第4,421，769號、及 .ken等人之1973年8月28日頒佈之美國專利第3,755,56〇 號中。 其他較佳局部載劑包含水包油型乳液，其具有連續水相 及分散於其中之疏水性水不溶性相（「油相」）。包括水包 油型乳液之適宜載劑的實例闡述於D· 了等人之 151482.doc •82· 201118105 1991年12月17日頒佈之美國專利第5,奶’371號、及Τ則er， D_ J·4人之1991年12月17日頒佈之美國專利第5,073,372號 卜含有結構化劑、親水性表面活性劑及水之尤佳水包油 型乳液詳細闡述於下文中。 較佳水包油型乳液包括結構化劑以有助於形成液體結晶 凝膠網絡結構。不受限於理論，據信，結構化财助於向 組合物提供可促進組合物穩定性之流變性。結構化劑亦可 用作乳化劑或表面活性劑。較佳組合物包括約請至約 2〇〇/〇、更佳約1%至約1()%、最佳約1%至約5%之結構化劑 (以組合物重量計）。較佳結構化劑選自由以下組成之群： 硬脂酸、棕櫚酸、硬脂醇、鯨蠟醇、山茶醇、硬脂酸、棕 櫊酸、平均具有約i個至約21個環氧乙烧單元之硬脂醇的 聚乙二醇ϋ、平均具有約！個至約5個帛氧乙烧單元之錄峨 醇的聚乙二醇醚、及其混合物。 較佳水包油型乳液包括約〇.〇5%至約1〇%、較佳約1%至 約6/。、且更佳約1 %至約3%之至少一種可將疏水性材料分 散於水相中的親水性表面活性劑（局部載劑之重量百分 比）。表面活性劑（最小量）必須具有足夠親水性以分散於水 中。適宜表面活性劑包含各種已知陽離子型、陰離子型、 兩性離子、及兩性表面活性劑中之任一者。參見 McCutcheon's. Detergents and Emulsifiers, North American

Edition (1986)(由 Allured Publishing公司公開）、Ciotti等人 之1991年4月3〇曰頒佈之美國專利第5,〇11，681號、Dix⑽等 人之1983年12月20曰頒佈之美國專利第4,421，769號、及美 151482.doc •83- 201118105 國專利第3,755,560號》所選確切表面活性劑取決於組合物 之pH及存在之其他組份。較佳者係陽離子型表面活性劑、 尤其二烷基四級銨化合物，其實例闡述於以下文件中： McCall等人之1992年9月29日頒佈之美國專利第515 12〇9 號、Steuri等人之1992年9月29日頒佈之美國專利第 5，151，210號、美國專利第5，12〇,532號、美國專利第 4,387,090號、美國專利第3,155,591號、美國專利第 3,929,678 號、美國專利第 3,959,461 號、McCutcheon's，

Detergents & Emulsifiers (North American edition 1979) M.C. Publishing 公司、及Schwartz等人，Surface Active

Agents, Their chemistry and Technology, New York: Interscience Publishers, 1949 〇 另一選擇為’其他有用陽離子型乳化劑包含胺基-醯 胺。該等陽離子型乳化劑之非限制性實例包含硬脂醯胺丙 基PG-—甲基亂化敍鱗酸鹽、山檢醯胺丙基ρ〇_二曱基氯化 敍、硬脂醯胺丙基乙基二甲銨乙基硫酸鹽、硬脂醯胺丙基 二甲基（乙酸肉豆蔻基酯）氯化銨、硬脂醯胺丙基二甲基録 蝶基曱苯續酸錄、硬脂醯胺丙基二甲基氯化銨、硬脂醯胺 丙基二曱基乳酸銨、及其混合物。 各種陰離子型表面活性劑亦用於本文中。例如，參見 Laughlin等人之1975年12月30日頒佈之美國專利第 3,929,678號。此外，兩性及兩性離子表面活性劑亦用於本 文中.。 較佳水包油型乳液包括約25%至約98%、較佳約65%至 151482.doc •84- 201118105 約95%、更佳約70%至約9〇%之水（以局部載劑之重量計）。 疏水相刀散於連續水相中。疏水相可含有水不溶性或部 分可溶性材料（例如業内已知者），包含但不限於本文提及 水包聚矽氧型乳液時所闡述之聚矽氧、及（例如）上文提及 乳液時所闡述之其他油及脂質。 本文所揭示之局部組合物（包含但不限於洗劑及乳膏）可 包括皮膚病學上可接受之潤膚劑。該等組合物較佳含有約 2%至約50%之潤膚劑。本文所用之「潤膚劑」係指用於防 止或減輕乾燥以及用於保護皮膚之材料。各種適宜潤膚劑 已眾所周知且可用於本文卜例如’參見δ—Γίη，

Cosmetics, Science and Technology，第 2版，第 1卷，第 3243頁（1972)，其含有§午多適於用作潤膚劑之材料實例。 較佳潤膚劑係甘油。甘油之較佳使用量為〇 〇〇1%或約 0.001%至20%或約20%、更佳〇 〇1%或約〇㈣至ι〇%或約 10%、最佳0.1。/。或約0.1%至5%或約5%，例如3%。 本文所揭示實施例之洗劑及1膏通冑包括溶液載劑系統 及一或多種潤膚劑。洗劑通常包括約1%至約2〇%、較佳約 5%至約10%之潤膚劑；約5〇%至約9〇%、較佳約帆至約 80%之水；及醫藥有效量之本文所述藥劑。乳膏通常包括 約5%至約50% '較佳約1〇%至約2〇%之潤膚劑；約至 約85%、較佳約5〇%至約75%之水；及醫藥有效量之本文 所述藥劑。 軟膏可包括動物或植物油或半固體烴（油性）之簡單載劑 基質、吸收水以形成乳液之吸收用軟膏基質、或水溶性载 151482.doc -85 - 201118105 劑（例如’水溶性溶液載劑）。軟膏可進一步包括增稠劑（例 如闡述於 Sagarin, Cosmetics, Science and Technology，第 2 版，第1卷，第72-73頁（1972)中者，該文獻以引用方式併 入本文中）、及/或潤膚劑。舉例而言，軟膏可包括約至 約10%之潤膚劑、約0.1%至約2%之增稠劑、及醫藥有效量 之本文所述藥劑。 根據非限制性實例，自下列類型及量之成份製 局邛乳膏.醤藥有效篁之本文所揭示之藥劑、改良硬醋 (150 g)(購自 Goldschmidt ChemicaW 司，New γ〇1% Ν γ 之自乳化單硬脂酸甘油酯）、聚山梨醇酯8〇 (5〇 鯨蝶 (100 g)、丙二醇（50 g)、對羥基苯甲酸甲酯（1 g)、及其量 足以補足至達到屬gm之去離子水。將改良硬醋及録堪 在70-80 c之溫度下熔化至一起。將對羥基苯甲酸甲酯溶 於約5〇〇 g水中且依次添加丙二醇、聚山梨醇賴、及&胺 基-1，2-二氫+經基I亞胺基_4-六氫吼咬基㈣游離驗， :時將溫度維持於75_80t。在值定授拌下將對經基苯甲 ^甲醋混合物緩慢添加至改良硬醋及錄躐熔體 =下繼續添加至少30分鐘直至溫度降至·价為止。 維:寺均使最終重量達到1000找㈣製劑以 子勺3眭直至冷卻並凝結為止。 根據非限制性實例 局部軟膏.盤—士 』類生及里之成份製備1000 g 樂有效量之本文所揭示之藥 g)、爐甘石⑼g)、液體礦脂(重質)(250 “氧化鋅(50 g)、及 ί ,、，土 1里買）（250 g)、絨毛脂（200 達到画代白礦脂。簡言之，將白礦脂及織 15I482.doc -86 - 201118105 毛脂熔化並向其中添加100 §液體礦脂。將醫藥有效量之 t文所揭示之藥劑、氧化鋅、及爐甘石添加至剩餘液^鑛 脂中，且研磨混合物直至粉末變精細且分散均勻為止。將 混合物授拌至白礦脂中，炼化並在授掉下冷卻直 結為止。 秋@级 根據非限制性實例’自下列類型及量之成份製備麵呂 含有醫藥有效量之本文所揭示藥劑之軟膏（例如，眼用軟 膏）：醫藥有效量之本文所揭示之藥劑、輕f液體礦脂⑽ g)、域毛脂(200 g)、及足以達到测§之白礦脂。簡古 二:醫藥有效量之本文所揭示之藥劑製成精細物並添加 至輕資液體礦脂中。將絨毛脂及㈣㈣化至—起，擠 溫度調節至45销。添加液體❾旨聚液，並授 拌軟膏直至凝結為止。 限制性實例’自下列類型及量之成份製卿 有效量之本文所揭示藥劑之水溶液：醫藥有效

Li?所揭示之藥劑、聚乙二醇_〜、肉豆謹个 皮考琳乳化物(〇_2 g)、聚乙稀基料咬酮 足至達到1000毫升去 ^ g)及足以補 中且藉之’一於水 含有根=:實例，自下列類型及量之成份製― 本文所揭示之藥劑劑之洗劑:醫藥有效量之 至達到〜:二::一㈣ 根據非限制性實例’自下列類型及量之材料製備含有醫 I51482.doc •87· 201118105 藥有效量之本文所揭示藥劑之氣溶膠：醫藥有效量之本文 所揭示之藥劑、無水醇（4.37 g)、二氯二敦乙院（1 43 §)及 二氣四氟乙烷(5.70 g)。簡言之，將醫藥有效量之本文所 揭示之藥舰於無水醇巾並過朗得溶液以去除顆粒及毛 絨。將此溶液冷束至至約_3n：n，向其中添加二氯 一氟甲烧及二氣四氟乙院之冷凍混合物。 對於經口投與而言，明膠膠囊或填充液體之軟質明膠膠 囊可含有活性成份及粉末化或液體載劑，例如乳糖、卵磷 脂澱粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸、及諸如此 類。可使用相似稀釋劑來製備經壓製錠劑。可將錠劑及膠 囊製成持續釋放產物以經數小時時段連續釋放藥劑。經壓 製錠劑可經糖包覆或膜包覆以掩蔽任何不良氣味並保護錠 劑免受大氣影響，或經腸包覆以在胃腸道中選擇性地定向 崩解。用於經口投與之液體劑型可含有色素及/或矯味劑 以增加患者接受性。 通常’無菌水、油、鹽水、水性右旋糖（葡萄糖聚山 梨醇醋及相關糖溶液及多元醇（例如丙二醇或聚乙二醇）係 適用於非經腸溶液之載劑。用於非經腸投與之溶液或乳液 較佳含有約5-1 5%之聚山梨醇酯80或卵磷脂、適宜穩定劑 及（若需要）緩衝物質。抗氧化劑（例如但不限於亞硫酸氫 鈉、亞硫酸鈉、或抗壞血酸，以單獨或組合形式）係適宜 穩定劑。亦有用者係檸檬酸及其鹽、及EDTA鈉。此外， 非經腸溶液可含有防腐劑，包含但不限於苯紮氯銨、對羥 基笨甲酸甲酯或對羥基苯曱酸丙酯、及氣丁醇。 151482.doc • 88 - 201118105 彼等熟習此項技術者應理解，组合物及醫藥組合物可以 套組形式提供。套組包括—或多種本文所揭示之具體^ 物及/或醫藥組合物M見需要，套組進一步含有作為^ 或包裝㈣之印製說明♦，其指導使用該等試劑來調節皮 膚色素丨儿者，亦即，補雲Α a. a a 优的要在特定包含之組合物的作用下 使皮膚變亮。將該等化合物提供於經設計以防止污染、將 組合物之蒸發或乾燥降至最低等之容器中。該等化合物可 以預定單位劑量或使用量提供或可並非如此。 下列調配物實例閣釋可根據本文所揭示實施例製得之代 表性醫藥組合物’但並不意欲限於下列醫藥組合物。 調配物1-旋劑 將有效量之式I_IV化合物以乾燥粉末形式與乾燥明膠黏 合劑以約1:2之重量比混合。添加少量硬脂酸鎂作為潤滑 劑。混合物在壓旋機中形成24〇_27〇mg鍵劑（8〇_9〇叫活性 化合物/鍵劑）。 調配物2-膠囊 將有效量之式I -1V化合物以&燥粉末形式與⑲粉稀㈣ 以約1:1之重量比混合。將混合物填充成250 mg膠囊（125 mg活性化合物/膠囊）。 調配物3-液體 可將有效量之式I-IV化合物（125 mg)與蔗糖（1 75 g)及黃 原膠（4 mg)此合，且可摻和所得混合物，使其經過丨〇號網 目U.S.篩，且然後與先前製得之微晶纖維素及羧曱基纖維 素鈉（11 89，50 mg)之水溶液混合。使用水稀釋苯甲酸鈉 151482.doc -89- 201118105 (10 mg)、矯味劑及著色劑且邊授拌邊添加。然後可添加 足量水以產生5 mL之總體積。 調配物4·键劑 可將有效量之式I-IV化合物以乾燥粉末形式與乾燥明膠 黏合劑以約1:2之重量比混合。添加少量硬脂酸鎂作為潤 滑劑。混合物在壓錠機中形成450-900 mg錠劑（150-3 00 mg 活性化合物）。 調配物5-注射劑 將有效量之式I-IV化合物溶解或懸浮於緩衝無菌鹽水可 注射水性介質中直至濃度為約5 mg/mL。 調配物6 -局部調配物 在約75°c下熔化硬脂醇（250 g)及白礦脂（250 g)且然後添 加溶解於水（約370 g)中之式I-IV化合物（10-50 g活性化合 物）、對羥基苯曱酸甲酯（0.25 g)、對羥基笨甲酸丙酯（〇 Η g)、月桂基硫酸鈉（10 g)、及丙二醇（12〇 g)之混合物且攪 拌所得混合物直至其凝結為止。 可自商業來源購得包括各種已知藥物或藥物樣分子之式 I-IV之類固醇化合物並測試其活性。非市售類固醇化合物 可自易於獲得之起始材料使用t内已知之各種_ 程序製得。 /汉 可能需要習用保 。用於特定官能 之適宜條件的選 此外，如彼等熟習此項技術者所瞭解， HI®來防止某些官能團發生不期望反應 團之適且保護基團以及用於保護及去保護 151482.doc 201118105 擇已為此項技術習知。例如，T. W. Greene及P. G. Μ.

Wuts 之 Protecting Groups in Organic Synthesis(第二版，

Wiley，New York，1991)及本文所列舉之參考文獻闡述若干 保護基團及其引入及去除。 實例 實例1 在經培養鼠類黑色素細胞中篩選化合物 對由2000種藥物化合物或天然產物組成之Spectrum Collection文庫進行篩選以在經培養鼠類黑色素細胞（黑色 素-a)中鑑別新穎色素沉著抑制劑或刺激劑。將化合物溶於 二甲基亞砜（DMSO)中直至最終濃度為1〇 mM。使用經培 養之黑色素細胞在24-孔板中實施篩選隨後實施黑色素分 析（參見下文）。將黑色素形成中最小5〇%改變確立為色素 沉著抑制劑或刺激劑有效。在每一板上，使用DMS〇作為 陰性對照且使用廣泛使用之脫色劑氫醌作為陽性對照。叫 在1 μΜ之最終濃度下實施初級篩選’且在丨μΜ及$ 之 最終濃度下一式兩份再次證實來自初級薛選之潛在候選 者。 將黑色素-a細胞以5χ1〇4個細胞/孔平鋪於24_孔板中之】 ml培養基中，第二天，添加文庫化合物。以指定最終濃度 添加所有化合物。培育72小時後，收穫細胞，且實施黑色 素分析。 對於進—步測試及作用機制研究，自叫㈣或 MiCr〇S〇UrCe購得化合物。將該等化合物溶於二甲基亞砜 151482.doc •91 · 201118105 (DMSO)中直至最終濃度為1〇 mM，且測試該等化合物在 指定最終濃度下對於黑色素合成之效應。 實例2 黑色素分析 對於初級及次級篩選而言，在7〇〇c下收穫細胞並溶於 200 μΐ存於 20。/。DMSO 中之2 N NaOH*。在490 nm下量測 所得溶液之180-μ1等份試樣的吸光度。 在含有完全蛋白酶抑制劑混合劑（R〇che)之提取緩衝液 (1% Triton X-100, 50 mM Tris, 2 mM EDTA, 150 mM NaCl, pH 7_5)中收穫細胞。將溶解產物在14,〇〇〇 rpm及下離 ’ό· 10刀鐘。使用BCA蛋白分析套組（pjerce)量測上清液之 蛋白濃度，且使用牛血清白蛋白作為標準。將剩餘顆粒與 1〇〇 μΐ乙醇-乙醚（1:1)在室溫下一起培育1〇分鐘。去除乙 醇-乙醚後，將該等顆粒在70。(：下溶於2〇〇 μ1存於2〇% DMSO中之2 N NaOH*。在490 nm下量測所得溶液之18〇_ μΐ等份試樣的吸光度。將黑色素含量標準化成總蛋白量。 化合物、其結構、抑制數據（以剩餘對照％形式表示）、 及可用IC50數據示於下表1中。 151482.doc •92· 201118105 表1 :用作黑色素生成調節劑之化合物的活性數據 編號 名稱 .結構.. ,‘ .· . · * . . 1 μΜ下 之剩餘 對照％ 5 μΜ 下. 之剩餘 對照％ 1 錐絲鹼 Me[ ^Nxxr Me 1 /Me 73.3 32.2 2 地麻素-5(Con-5-enine), 3β-(二甲基胺基)-，（土)-(8CI) (登記號：14546-12-4) -a (Ό '靡 1 Me Me 1 广、 ε X/ Η 广 ---Η 78.4 38.5 3 Ν，Ν~二曱基-3-胺-地麻 素-5(N，N-Dimethylcon_ 5-enin-3-amine) h3c 59.2 28.4 實例3

Me丨anoDermTM色素沉著分析 在MelanoDermTM色素沉著分析中測試本發明化合物以證 實及顯示其作為抑制劑在複製活體内條件之環境中之活 性。由MatTek公司製得之MelanoDerm™係含有源自非洲裔 美國人（MEL-B)、亞洲人（MEL-A)或高加索人（MEL-C)供體 之正常黑色素細胞及角蛋白細胞的活重構三維人類皮膚同 等物。在當前研究中使用MEL-A及MEL-B組織，且如製造 商所建議將其保持於NMM-113培養基中。 將錐絲鹼（來自Sigma)溶於30°/。乙醇：70°/。丙二醇中直至 最終濃度為1.0 mM(等於356.6 pg/ml)，且將此濃度維持恆 151482.doc -93- 201118105 定並用於所有測試試樣中。在第〇、1、3、6、8及10天， 將25 μΐ其等份試樣局部施加至MeianoDermTM組織（Mel-B) 上。母隔一天向MelanoDerm™組織供給5 ml新鮮 NMM-113。在每次施加之前，使用！ ml pBS洗滌組織以去 除任何殘餘測試化合物。在第丨〇及丨3天將組織固定以用於 顯微分析及組織學評估。此外，在第丨〇及丨3天冷凍雙份組 織以用於黑色素分析。 對亞洲人皮膚同等物（MEL-A)實施相似實驗，只是：在 第〇、1、3、6、8、1〇及13天進行處理。在第13及16天取 出組織以用於各種分析。使用3〇%乙醇：7〇%丙二醇作為 陰性對照且使用熟知之色素沉著抑制劑熊果苷（濃度為3 mg/ml)作為陽性對照。 對來自不同批次之MEL_A及MEL_B組織重複兩次實驗以 確保結果具有重現性（研究丨或2)。對於每一實驗，使用錐 絲驗處理6份組織，且使用媒劑（3〇0/。乙醇：pEG)或熊 果苷處理6份組織（若可行）。對於MEL_B，在第丨〇天，取出 每一處理條件下之3份組織，且將一份用於組織學研究且 另兩份用於黑色素分析。對於MEL_B試樣，在處理13天後 實施相同方案，且對kMEL_a，在處理13天或16天後實施 相同方案。 對於組織學研究： 程序1 .藉由光顯微術（自組織頂面觀察）評估錐絲鹼對 MEL-A或B中之黑色素合成之效應。 程序2 :藉由圓像分析使用F〇mana_Mass〇n染色組織切片 I51482.doc -94· 201118105 (自組織侧面觀察）來評價經處理-MEL-A或B中累色素之八 佈。 對於黑色素組織’測定每一個別組織之黑色素含量，且 最終數據顯示2份在相同條件下處理之組織之平均黑色素 含量。 兩份皮膚同等物之分析結果闡述於圖1Α_1〇Β中，且其、，主 晰地顯示本發明化合物在所有測試試樣中皆達成皮膚增 亮。 若需要，可使用彼等發現可減少色素沉著之化合物（累 色素生成6周郎劑或抑制劑，參見表1 )及其組合物作為局部 蕖劑使毛髮、毛皮、及/或羽毛增亮。可將本發明黑色素 生成抑制劑或其組合物施加至色素沉著過度位點，包含 (不限於）老人斑、雀斑、及黃褐斑。對於一些個體，化妝 目標係使身體之較大皮膚區域變亮或變白，此可藉由更普 遍性地施加本發明黑色素生成抑制劑或其組合物來達成。 實例4 作為氣類黑色素細胞中之有&色素沉著抑·之雜絲驗的 鑑別 藉由在經培養鼠類黑色素細胞（黑色素_a細胞）中篩選 2000種市售藥物及天然產物之SpecUum c〇UecU〇n文庫來 鑑別作為有效色素沉著抑制劑之錐絲鹼（圖Ua)。自 INDOFINE Chemical 公司（Hillsborough，NJ 08844)購得錐 絲鹼。此研究中所用之文庫係The Spectrum c〇Uecti〇n (MicroSource Discovery公司，Gayl〇rdsviUe，CT 〇6755)。 151482.doc -95- 201118105 此文庫中之2000種化合物包含許多市售藥物及天然產物， 且以存於二甲基亞颯（DMSO)中之10 mM溶液形式供應。 在1 μΜ(0·1 μΐ原料）之最終化合物濃度下於24-孔板中實施 篩選’隨後如前文所報告實施黑色素分析（Ni-Komatsu, L. 及 Orlow， S. J. J. Invest. Dermatol. 128， 1236-1247 (2008))。在每一板上，使用0.1 μΐ DMSO作為陰性對照且 使用3 00 μΜ之酪胺酸酶抑制劑苯基硫脲（PTU)作為陽性對 ,日，?、（Ha 11，A..及 Orlow，S.J. Degradation of tyrosinase induced by phenylthiourea occurs following Golgi maturation. Pigment Cell Res. 18(2)，122-129 (2005))。 藉由將黑色素-a細胞與各種濃度之錐絲驗一起培育72小 時來測定關於錐絲鹼之細胞黑色素合成抑制的IC5()值》簡 言之’將黑色素-a細胞以5 X 1 04個細胞/孔平鋪於24·孔板中 之1 ml培養基中’第二天，添加錐絲鹼。以指定最終濃度 添加錐絲鹼。使用DMSO作為陰性對照。在培育72小時後 收穫細胞’且對細胞顆粒實施分光光度黑色素分析。將黑 色素含量標準化成總蛋白量。使用CellTiter 96水性非放射 性細胞增殖分析來測定細胞存活率。錐絲驗以劑量依賴性 方式降低黑色素-a細胞中之黑色素合成（圖lib)，且IC50值 為約2.5 μΜ。錐絲驗在低於20 μΜ之濃度下並不呈現細胞 毒性。 在商業上使用甘草提取物作為化妝產品中之皮膚增白 劑。業内已提出甘草提取物經由其對酪胺酸酶酶促活性之 抑制效應來降低黑色素生成（Nerya，0.，等人，Glabrene and 151482.doc -96- 201118105 isoliquirtigenin as tyrosinase inhibitors from Licorice roots. J· Agric. Food Chem. 51，1201-1207 (2003))。局部施 加0.5%光甘草定（甘草提取物中之主要異黃烷）可抑制uv誘 導性色素》儿著（Yokota，T.等人，The inhibitory effect of glabridin from licorice extracts on melanogenesis and inflammation. Pigment Cell Res· 11，355-361 (1998))。自 Barnet Products公司（Englewood Cliffs, NJ 07632)獲得甘草 提取物PT-40。在與錐絲鹼相似之條件下測試甘草提取物 降低黑色素-a細胞中黑色素合成之能力（圖丨丨c)。將黑色 素-a細胞以5χ 1〇4個細胞/孔平鋪於24_孔板中之丨mi培養基 中，第二天，添加甘草提取物。使用7〇%乙醇作為對照且 在細胞培養基中以指定濃度稀釋甘草提取物。在培育72小 時後收穫細胞，隨後如前文所報告實施黑色素分析（Ni_

Komatsu, L·及 Orlow, S. J. J. Invest. Dermatol. 128, 1236. 1247 (2008))。兩種藥劑皆以劑量依賴性方式顯著抑制黑 色素生成’其中錐絲驗係更有效之脫色劑。 在人類醫學中，使用氫醌作為皮膚增白中之局部塗藥以 減少皮膚顏色。錐絲鹼及氫醌對於經培養黑色素細胞（黑 色素-a細胞）中黑色素合成之效應示於圖1 Id中。兩種藥劑 皆以劑量依賴性方式顯著抑制黑色素生成，其中錐絲驗係 更有效之脫色劑。 實例5 錐絲鹼抑制黑色素生成但導致酪胺酸酶及溶酶體相關膜蛋 白1 (Lamp-Ι)發生積累 15H82.doc •97· 201118105 因酪胺酸酶在黑色素生成中發揮重要作用，故許多脫色 化合物經由影響此酶之表現、加工、成熟、降解及酶促活 性來發揮作用（parvez，S.等人 Phytother. Res. 20，921-934 (2006)及 Solano，F.等人 Pigment Cell Res. 19，550-571 (2006))。實施若干分析來確定錐絲鹼是否影響酪胺酸酶之 表現、加工、成熟 '降解及酶促活性。 在活體外使用黑色素-a細胞溶解產物研究錐絲驗對於赂 胺酸轉活性之影響。錐絲驗並不直接抑制赂胺酸酶活性。 據觀察’在收獲前將細胞與雜絲驗一起預培育72 hr時，專 色素-a細胞 >谷解產物之路胺酸酶活性並無明顯差異。該等 數據表明，與甘草提取物及許多其他增白劑相比，錐絲鹼 可令人吃驚地經由除抑制酪胺酸酶酶促活性外之機制來降 低色素沉著。 在一貫例中’在室溫下將黑色素-a細胞溶解產物（丨〇 與稀釋劑、錐絲鹼（10 μΜ)或苯基硫脲（ρτυ，300 μΜ，已 知絡胺酸酶抑制劑）一起預培育30分鐘。如前文所述，在 黑色素-a細胞溶解產物中一式三份實施酪胺酸酶活性分析 (Odow等人1990)。如圖12a中所示，錐絲鹼在活體外酪胺 酸分析中並不直接抑制酪胺酸酶酶促活性。 將黑色素- a細胞與各種濃度之錐絲驗一起培育72小時。 製備細胞溶解產物且藉由7.5 %十二烷基硫酸鈉_聚丙烯醯 胺凝膠進行分離，並轉移至Immobilon-P膜上。使用各蛋 白質之抗體來檢測酪胺酸酶基因家族蛋白。圖12b顯示， 儘管錐絲鹼係有效色素沉著抑制劑，但錐絲鹼出人意料地 151482.doc • 98 - 201118105 以劑量依賴性方式增加酪胺酸酶家族蛋白之細胞含量。 小眼球轉錄因子（MITF)係調節酪胺酸酶基因家族之表現 之轉錄因子。如圖12c中所示，錐絲鹼對黑色素_a細胞中 之MITF含量並無明顯影響。因此，使用錐絲鹼處理時酪 胺酸酶基因家族蛋白之含量增加並非因黑色素_3細胞中之 MITF表現增加所致。 檢驗錐絲驗對黑色素-a細胞中之Lamp-1含量的影響。黑 色素小體及溶酶體中之共用譜系已被充分接受。Lampd (溶酶體相關膜蛋白1)係溶酶體標記物。錐絲鹼亦增加 Lamp-Ι之細胞含量。因此，錐絲鹼處理很可能使得 及酪胺酸酶基因家族蛋白之降解有所降低（圖12d)，由此可 出人意料地用作黑色素生成抑制劑。 實例6 錐絲鹼抑制三維亞洲人類皮膚同等物模型中之色素沉著積累 在MelanoDermTM色素沉著分析中測試化合物以證實及顯 示其作為抑制劑在複製活體内條件之環境中之活性。由 MatTek公司製得之MelanoDerm™係含有源自非洲裔美國人 (MEL-B)、亞洲人（MEL_A)或高加索人（MELC)供體之正常 黑色素細胞及角蛋白細胞的活重構三維人類皮膚同等物。 其具有人類皮膚樣結構且在2-3週過程期間會發生進行性 組織發黑。MelanoDermTM提供了用於評估調節色素沉著之 藥劑的有用活體外方式。人類皮膚同等物模型（例如 MelanoDermTM)提供了用於評估假定生物活性化合物對哺 乳動物色素沉著之效應之臨床及動物測試的替代方式人 151482.doc -99· 201118105 們認為MelanoDerm™係與僅黑色素細胞或黑色素細胞角 蛋白細胞共培養物相比更具生理學相關性之模型。在當前 研究中使用MEL-A及MEL-B組織，且如製造商所建議將其 保持於NMM-113培養基中。在此模型中，新合成黑色素在 二至三週時段過程中發生實質性積累。 將錐絲驗及甘草k取物溶於30%乙醇：70%丙二醇（peg) 中直至最終濃度為0.036% (0.36 mg/ml)。在第〇、ι、3、 6、8、10及13天，將每一化合物之25 μΐ等份試樣局部施加 至亞洲人MelanoDerm™組織（MEL-A)上。每隔一天向 MelanoDerm™組織供給5 ml新鮮nmM-113。在每次施加之 前，使用1 ml PBS洗滌組織以去除任何殘餘測試化合物。 在第13及16天將組織固定以用於顯微分析及組織學評估。 此外’在第13及1 6天冷凍雙份組織以用於黑色素分析。使 用3 0%乙醇.7〇% PEG作為陰性對照。根據製造商說明書 使用]^丁丁分析套組（]\^丁61<:公司，八8111311(1，1^八01721)量測 細胞存活率。在第2及7天收穫來自每一條件下之一份 MEL-A組織，且實施MTT分析。對MEL-B實施相似實驗。 藉由光顯微術評估在嚴格相同條件下使用錐絲鹼、媒劑 或甘草提取物處理的MEL-A組織。與經媒劑處理之對照或 使用甘草提取物處理之MEL-A相比，在錐絲驗處理後13 天’觀察到色素沉著顯著不同（圖13a)。與對照及甘草提取 物相比’在使用錐絲鹼處理之MEL-A中，在第16天色素沉 著程度顯著降低（圖13a)。顯微圖像顯示，亞洲人皮膚同等 物之顏色在使用錐絲鹼處理時變得更亮。 151482.doc •100- 201118105 對經處理之MEL-A組織實施定量黑色素分析。如前文所 報告測定經處理人類皮膚同等物（MEL-A及MEL-B)中之黑 色素含量（Takeyama，R.等人 J. Molecular Histology 35, 157-165 (2004); Ni-Komatsu，L.等人 Mol. Pharmacol. 74, 1576_1586 (2008) ; Rosenthal，M.H.等人 Anal. Biochem. 56, 91-99 (1973))。在使用0.036%錐絲鹼局部處理後，亞洲人 類皮膚同等物（MEL-A)中之相對黑色素積累顯著降低（圖 13 b)。據觀察’與經媒劑處理之MEL-A相比，使用0.036% 錐絲驗處理1 3及1 6天之MEL-A中之黑色素含量會降低3〇_ 40%。與之相比，甘草提取物（常用增白劑）在相同濃度下 在處理13或16天後並不顯示對MEL-A之黑色素含量具有明 顯影響（圖13b)。經錐絲鹼處理之MEL-A中之黑色素含量 降低不可能由細胞毒性所致。藉由根據製造商說明書實施 之細胞毒性測試來檢驗經0·036%錐絲驗-或〇_〇36%甘草提 取物處理之MEL-A的細胞存活率，且在任一處理中皆未觀 察到可檢測之細胞毒性。在指定濃度下之化合物皆顯示不 會改變細胞增殖或形態。此與光顯微圖像一致，從而表明 錐絲鹼係比甘草提取物更有效之增白劑。 黑色素自黑色素細胞至角蛋白細胞之轉移及其在角蛋白 細胞中之分佈係在皮膚顏色調節中發揮重要作用的過程 (Van Den Bossche, K.，Naeyaert, J.M·，及 Lambert，J. Traffic 7，769-778 (2006) ; Goding，C.R. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology 39, 275-279 (2007); Yoshida，Y_ 等人 FASEB J. 21，2829-2839 (2007))。藉由組 -101 - 151482.doc 201118105 織切片（使用使黑色素突出顯示之Fontana-Masson方法進行 染色）之圖像分析來評價經處理MEL-A中黑色素之分佈 (Bancroft, J.D.及 Stevens, A. Theory and practices of histological techniques. Churchill Livingstone, New York. (1982) ; Yoon, T.J.等人 Analytic Biochemistry 318，260-269 (2003))(圖13c)。簡言之，使用10%福爾馬林（f0rmalin) (Sigma-Aldrich，St. Louis, MO 63103)在 4°C 下將經處理之 非洲裔美國及亞洲人類皮膚同等物（MEL-B及MEL-A)試樣 固定過夜。在相差顯微鏡下觀察試樣。為觀測黑色素在整 個組織内之分佈’如前文所述在石蠟包埋組織上實施 Fontana-Masson銀染色 〇 在第13及16天，錐絲鹼處理使得MEL-A之相對黑色素含 量顯著降低，而觀察到使用甘草提取物處理之MEL-A中之 黑色素含量無明顯差異。在經媒劑處理或經化合物處理之 MelanoDermTN^ 8 F〇ntana_Mass〇n染色組織切片上實施定 量分析。結果顯示，與經媒劑處理之組織相比，經錐絲鹼 處理之MelanoDermTM中之黑色素含量為49 9〇% (Ρ<0·001，第 13 天）及42·31%(ρ<0·0005，第 16天）且使用甘 草提取物處理之黑色素含量為95 65%(ρ為約〇 67，第13天） 及98.89°/〇(P為約0.93，第16天）〇錐絲鹼處理使得亞洲人皮 膚同等物（MEL-A)之黑色素含量有所降低。各處理皆未顯 不可促進MEL-A中之黑色素顏料發生顯著重新分佈（圖 13c)。 熊果苷係醚及糖苷；其係自熊果屬（Arct〇staphyl〇s)之熊 I5l482.doc •102· 201118105 果植物提取之糖基化氫醌。其抑制酪胺酸酶且由此防止黑 色素形成。熊果苷係熟知色素沉著抑制劑且由此可用作皮 膚增壳劑。使用濃度為3 mg/ml之熊果苷水溶液作為陽性 對照。使用水作為熊果苷之未經處理對照。亦使用熊果苷 处里MEL A亞洲人皮膚同等物。結果表明，錐絲驗較甘草 提取物或熊果苷可更有效地用作脫色劑（圖13d及Ue)。 實例7 錐絲驗抑制二維非洲裔美國人類皮膚同等物模型中之色素 沉著積累 在非洲裔美國人皮膚同等物（MEL_B)中實施相似實驗， 、疋在第0 1、3、ό、8及1〇天將每一化合物之25 y等份 試樣局部施加至MEL_B，且持續處理1〇或13天，此乃因此 系統中之黑色素積累程度極高。光顯微圖像顯示，雜絲驗 係發現對腿-Β具有活性之有效黑色素原抑制劑（圖叫。 在使用0.036%錐絲鹼局部處理後，僅觀察到mel_b之顏色 顯著降低（圖14a)。^量黑色素分析結果證實，在使用 0.036%錐絲鹼局部處理後，僅觀察到mel_b之相對黑色素 含量有所降低。使用錐絲鹼處理後，非洲裔美國人皮膚同 等物（MEL-B)之黑色素含量降低約3Q%(圖⑽）。甘草提取 物對騰·Β並不具有f質性增亮效應（圖⑽）。㈤讓·

Masson染色組織結果表明，與光顯微圖像及黑色素分析數 據一致，錐絲鹼係發現對MEL_B具有活性之有效黑 抑制劑’ Λ乃因F〇ntana_Mass〇n染色表明非洲裔美國^皮 膚同等物之黑色素含量在使用錐絲驗處理後顯著降低（圖 15J482.doc •103- 201118105 14c)。對經媒劑處理或經化合物處理之MEL_b之8 Fontana-Masson染色組織切片實施相似定量分析。結果表 明，與經媒劑處理之組織相比，經錐絲鹼處理之MEL-B中 之黑色素含量為73.61 %(P為約0.012，第1〇天）及62.43% (P<0.001 ’第13天）且經甘草提取物處理之黑色素含量為 98.19%(P 為約 〇·83，第 10 天）及 ι〇2.60%(Ρ 為約 0.67，第 13 天）。定量分析結果與黑色素分析結果一致。 熊果苷係醚及糖苷；其係自熊果屬之熊果植物提取之糖 基化氫醌。其抑制酪胺酸酶且由此防止黑色素形成。使用 漢度為3 mg/ml之熊果苷水溶液作為陽性對照。使用水作 為熊果苷之未經處理對照。亦使用3 mg/ml熊果苷處理 MEL-B MelanoDerm™。結果表明’錐絲鹼較甘草提取物 或熊果苷可更有效地用作脫色劑（圖14(1及14e)。 貝例3及4顯示，與已知色素沉著抑制劑熊果苷及當前用 於化妝產品中之增白劑甘草提取物相比，發現錐絲鹼係人 類皮膚同等物模型中之更有效黑色素原抑制劑。 實例8 源自南亞止瀉木之提取物係經培養黑色素細胞中黑色素合 成之有效抑制劑 將黑色素-a細胞以5χΐ〇4個細胞/孔平鋪於以·孔板中之！ ml培養基中，第二天，添加源自由南亞止瀉木製得之粉末 的提取物。使帛6醇（70% )作為對照且在細胞培養基中以 指定濃度稀釋源自南亞止填木之提取物（圖15)。在培育72 小時後收穫細胞’且對細胞顆粒實施分光光度黑色素分 151482.doc .104· 201118105 析。將黑色素含量標準化成總蛋白量。使用細胞Ther % 水性非放射性細胞增殖分析來測定細胞存活率。圖15顯 示，源自南亞止瀉木之提取物係經培養黑色素々細胞中黑 色素合成之有效抑制劑。 將錐絲鹼、源自南亞止瀉木之提取物及甘草提取物pT_ 4〇對於黑色素-a細胞中黑色素合成之效應進行比較。如圖 16中所示，源自南亞止瀉木之提取物較甘草提取物可更有 效地抑制黑色素合成，但其功效低於指定濃度下之純淨形 式的錐絲驗。 實例9 源自南亞止瀉木之提取物係人類皮膚同等物模型中之有效 色素沉著抑制劑 在此貫例中’使用如上所述之MelanoDerm™來評估源自 南亞止瀉木之提取物對人類皮膚色素沉著及黑色素生成之 效應’並與甘草提取物及錐絲鹼之效應進行比較。 將錐絲鹼及甘草提取物溶於3〇%乙醇：70%丙二醇（媒 劑）中直至最終濃度為〇·36 mg/ml。以1:50將源自南亞止渴 木之提取物稀釋於30%乙醇：70%丙二醇中。在一實驗 中’在第0、1、3、及6天將10 μΐ及25 μΐ錐絲鹼、源自南 亞止瀉木之提取物、甘草提取物或媒劑局部施加至非洲裔 美國人皮膚同等物（MEL-B)上。在第2及7天取出每一條件 下之一份組織用於細胞毒性分析。根據細胞毒性分析結 果’選擇25 μΐ各測試藥劑用於後續實驗。 在一實例中，在第〇、1、3、6、8及10天，將25 μΐ錐絲 151482.doc 105· 201118105 驗、源自南亞止瀉木之提取物、甘草提取物或媒劑局部施 加至MEL-B上。每隔一天向MelanoDermTIV^&織供給5 ml新 鮮NMM-113。在每一施加之前，使用1 mi PBS洗滌組織以 去除任何殘餘測試化合物。在第丨〇及丨3天將組織固定以用 於顯微分析及組織學評估，此外，在第10及13天冷凍雙份 組織以用於黑色素分析。 對亞洲人皮膚同等物（MEL-A)實施相似實驗，只是：在 第〇、1、3、6、8' 1〇及13天進行處理。在第13及丨6天取 出組織以用於各種分析。使用3〇%乙醇：7〇0/〇丙二醇作為 陰性對照。 圖1 7顯示源自南亞止瀉木之提取物對於非洲裔美國人皮 膚同等物（MEL-B)之效應。作為脫色劑，源自南亞止瀉木 之提取物之有效性遠大於甘草提取物。F〇ntana_Masson染 色表明，在第10及13天’使用源自南亞止瀉木之提取物或 錐絲驗處理可顯著降低非洲裔美國人皮膚同等物的黑色素 含量（圖1 8)。源自南亞止瀉木之提取物係比甘草提取物更 有效之脫色劑。 圖19顯示源自南亞止瀉木之提取物對於亞洲人皮膚同等 物（MEL-A)之效應。顯微圖像表明，使用源自南亞止瀉木 之提取物或錐絲鹼處理時亞洲人皮膚同等物之顏色變得更 免。作為脫色劑，源自南亞止瀉木之提取物之有效性遠大 於甘草提取物。Fontana-Masson染色表明，使用源自南亞 止瀉木之提取物進行處理使得亞洲人皮膚同等物（mel_a) 之黑色素含量有所降低（圖20) ^源自南亞止瀉木之提取物 151482.doc •106· 201118105 係比甘草提取物更有效之脫色劑。 儘管上文已闡述並具體例示了某些較佳實施例，但本發 明並不意欲限於該等實施例。如下列申請專利範圍中所 述’可對本發明作出各種修改，此並不背離本發明之範圍 及精神。 根據前述說明，彼等熟習此項技術者可對本發明組合物 及方法作出各種修改及改變。在隨附申請專利範圍之範圍 内進行之所有該等修改皆意欲包含於本文内。 本說明書所引用之所有出版物（包含但不限於專利及專 利申凊案）皆以引用方式併入本文中，就如同充分陳述之 已特定地及個別地指明將各個出版物以引用方式併入一 般。 本申晴案中所給出化合物之化學名稱係使用各種市售化 學命名軟體工具（包含撾01^ ISIS Draw Aut〇n〇m s〇ftware 工具）產生，且並未加以證實。特定而言，在不一致之情 形下，以所繪示結構為準。 【圖式簡單說明】 圖A,.„員示系列取自重構皮膚同等物MelanoDerm™(自 非洲裔美國人供體製得（MEL-B))試樣經本發明化合物處理 後之顯微照片。所有照片皆在相同條件下獲得。 頁示圖1A中所不圖像之定量分析結果的條形圖。 使用Ad〇bePhot〇sh〇pCS2分析。選擇黑色素顆粒之區域， 且黑色素含量計算如下·· 黑色素含量=黑色/灰色像素x平均密度 總圖像像素 151482.doc -107- 201118105 最終結果以相對於對照組之百分比表示。 圖2A及2B出示所得試樣在組織病理學切片F〇ntana_ Masson染色後之顯微照片。如針對圖1 a及1B所指定，使 用Adobe Photoshop CS2實施定量分析。該等試樣之染色結 果顯示’在使用本發明化合物後’與經對照處理之皮膚同 專物相比，非洲裔美國人皮膚同等物之黑色素含量降低約 50-60〇/〇。此結果以圖解形式示於圊2C中，其中c=對照； L201=錐絲鹼；Arb=熊果苷。在此圖中，在每一條件下，j 個圖像展示第10天之處理結果且2個圖像展示第丨3天之處 理結果（第13天之定量數據係兩個圖像之平均值）。 圖3出示使用非洲裔美國人皮膚同等物之黑色素分析中 本發明化合物之總測試結果的圖形。結果顯示，與經對照 處理之皮膚同等物相比，使用本發明化合物之非洲裔美國 人皮膚同等物的黑色素含量降低約30_40%。該數據係在每 一條件下處理之2份組織之平均值，且每一組織之黑色素 含量皆單獨測定。 圖4包括非洲裔美國人皮膚同等物（不同批次之mel_b細 胞）在經對照及本發明化合物處理後第1〇及13天獲取的兩 組顯微照片（俯視圖）。本發明組合物之濃度為〗〇 mM(等於 356.6 pg/ml)。 圓5包括一系列出示雙份經對照及本發明化合物處理之 非洲裔美國人皮膚同等物組織病理學試樣（與圖4係相同批 次）在第10及13天之Fontana-Masson染色結果的顯微照片。 經染色試樣繪示由使用本發明化合物處理引起之黑色素含 151482.doc •108· 201118105 量的明顯減少。 圖6係顯示圖4及5中所示研究結果之圖形，且顯示與經 對照處理之皮膚同等物相比，使用本發明化合物處理之非 洲裔美國人皮膚同等物之黑色素含量降低約30-40%。 圖7係一系列在第13及16天自'MelanoDerm™(多層人類表 皮皮膚培養物）皮膚同等物（自亞洲供體製得，經對照及本 發明化合物處理）(MEL-A)獲取之顯微照片（俯視圖）。試樣 外觀顯示使用本發明化合物進行處理可使皮膚增亮。

圖8係一系列繪示來自亞洲人皮膚同等物第一研究之雙 伤組織病理學S式樣（經對照及本發明化合物處理）在第1 3及 16天之Fontana-Masson染色結果的顯微照片。如同MELB 試樣，本研究之經染色MEL-A試樣可繪示黑色素含量之明 顯減少。 圖9係一系列繪示來自亞洲人皮膚同等物第二研究之雙 份組織病理學試樣（經對照及本發明化合物處理）在第。及 16天之Fontana_Masson染色結果的顯微照片。如同圖9中所 示第-研究之試樣，本研究之經染色Mel_a試樣亦可緣示 黑色素含量之明顯減少。 圖及10B係顯示圖8及9中所示研究結果之圖形且 顯示在與經對照處理之皮膚同等物相比時，藉由本發明化 合物處理之亞洲人皮膚同等物的黑色素含量降低約4〇%。 圖11顯示對作為經培養永生鼠 从 紙頰黑色素細胞中之有效色 素沉著抑制劑之錐絲鹼的鑑別β ( U)錐絲鹼之化學結構。 (b)錐絲鹼對黑色素_3細胞中黑色入 I 0成之效應。數據係以 151482.doc •109· 201118105 對照百分比形式呈現，且每一柱代表多個實驗之平均值 ±SD ° (c)錐絲鹼及甘草提取物以劑量依賴性方式抑制黑色 素-a細胞中之黑色素合成，其中錐絲鹼係更有效之色素沉 著抑制劑。數據係以對照百分比形式呈現，且每一柱代表 多個實驗之平均值±SD。（d)錐絲鹼及氫醌皆以劑量依賴性 方式抑制黑色素生成，其中錐絲鹼係更有力且更有效之增 亮劑。 圖12顯示錐絲鹼在改變黑色素^細胞中之黑色素合成中 之效應。V :經媒劑處理之黑色素_a細胞；c :經錐絲驗處 理之黑色素-a細胞。（a)錐絲驗並不直接抑制酪胺酸酶酶促 /舌性’（b)錐絲鹼對黑色素_a細胞中Tyr基因家族蛋白之細 胞含量的影響；（c)錐絲鹼對黑色素-a細胞中之小眼球轉錄 因子含量並無影響；及（d)錐絲鹼對黑色素_3細胞中之 Lamp-Ι含量的影響。 圖13顯示錐絲鹼可降低亞洲人類皮膚同等物（Mel_a)之 黑色素積累。使用〇.036%錐絲鹼、甘草提取物或對照（3〇% 水：70% PEG)將MEL-A處理Π或16天。顯示來自多個實 驗之代表性數據。（a) MEL_A之相差顯微圖像。（b) mel_a 之黑色素含量變化。數據係以對照百分比形式呈現，且每 柱代表多個貫驗之平均值士SD。（c) Fontana-Masson染色 後的MEL-A組織病理學切片以突出黑色素含量。（d)及 使用熊果苷作為脫色劑之陽性對照。 圖14顯示錐絲鹼可降低非洲裔美國人類皮膚同等物 (MEL-B)之黑色素積累。使用〇 〇36%錐絲鹼、甘草提取物 151482.doc •110· 201118105 或對"、、（存於由30%水：70% PEG組成之媒劑中）將mEL-B 處理13或16天。顯示來自多個實驗之代表性數據。（a) MEL-B之相差顯微圖像。（b) MEL_B之黑色素含量變化。 數據係以對照百分比形式呈現，且每一柱代表多個實驗之 平均值土SD。（c) Fontana_Mass〇n染色後的織病理 學切片以突出黑色素含量。（d)及（e)使用熊果苷作為脫色 劑之陽性對照。 圖15顯示源自南亞止瀉木之提取物係經培養黑色素細胞 (黑色素-a細胞）中之黑色素合成的有效抑制劑。 圖16顯示錐絲鹼、源自南亞止瀉木之提取物及甘草提取 物PT-40對於黑色素_a細胞中之黑色素合成之效應。 圖17顯示錐絲鹼、源自南亞止瀉木之提取物及甘草提取 物對於非洲裔美國人皮膚同等物（MEL-b)之效應。 圖18展示非洲裔美國人皮膚同等物（MEL_B)之

Masson染色，其顯示源自南亞止瀉木之提取物係比甘草提 取物更有效之脫色劑。 圖19顯示錐絲鹼、源自南亞止瀉木之提取物及甘草提取 物對於亞洲人皮膚同等物（MEL-A)之效應。 圖20展示亞洲人皮膚同等物（MEL_A)之F〇nUna_Mass⑽ 染色，其顯示源自南亞止瀉木之提取物係比甘草提取物更 有效之脫色劑。 151482.doc •111-

Claims (1)

1. 201118105 七、申請專利範圍： 1. 一 裡殂兮物在製備 ;抑制黑色素生成之藥劑中 途，該組合物包括有效量之式τ化合物:

   R R R、R、R"獨立地選自由以下組成之群： 氣經基、胺基、硝基、齒素、經取代或未經取代 之（Ci-C6)烷基、經取代或未經取代之烷氧 基、經取代或未經取代之（C3-C7)環烷基、 及經取代 或未經取代之苯基； R係氫或（c 1-C6)經取代或未經取代之烧基； R係氫、羥基或經取代或未經取代之醯氧基； rU係氫或（Ci-Ce)經取代或未經取代之烷基； 151482.doc 201118105 R係氫、（(：丨-(：6)經取代或未經取代之烷基、或 COR22 ； R18係經取代或未經取代之烷基； r20及R2丨獨立地選自H、（Ci_C6)烷基，或視需要r20與 r21一起形成側氧基； R、R獨立地選自氫、（Ci_C6)經取代或未經取代之烷 基、（c]-C6)經取代或未經取代之雜烷基、 經取代或未經取代之芳基、（C5_Cig)經取代或未經 取代之雜芳基、C〇R22、c〇2r22、c〇N(R23)2、 SO2R22或 so2n(r23)2 ; 每一 R22皆獨立地係（C1-C6)經取代或未經取代之烷 基、（Ci-C6)經取代或未經取代之雜烷基、 經取代或未經取代之芳基、或（C5_C1G)經取代或未 經取代之雜芳基； 母一 R23皆獨立地係氫、（Ci_C6)經取代或未經取代之 烷基、（Ci-C6)經取代或未經取代之雜烷基、w 經取代或未經取代之芳基、或（C5_CiQ)經取代或未 經取代之雜芳基；且 係氫或（C丨-C6)經取代或未經取代之烷基； 或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、異構體、互變異構 體、代謝物、類似物、同位素變體或前藥。 2.—種組合物在製備藥劑中之用途，該藥劑係用於預防、 〜療、改善或處理涉及不期望或異常黑色素生成之疾病 或病狀，該組合物包括預防上或治療上有效抑制黑色2 151482,doc 201118105 生成之量之如請求項1中所定義之化合物。 3. -種組合物在製備藥劑中之用途，該藥劑係用於改變或 恢復哺乳動物皮膚、毛髮、絨毛或毛皮中之色素沉著， 曰物包括一疋s之一或多種如請求項丨中所定義之 化合物，該等化合物有效地改變或恢復哺乳動物皮膚、 毛髮、絨毛或毛皮中之色素沉著；及適宜載劑。 4. 如請求項1至3中任一項之用途，其中該組合物包括含有 如請求項1中所定義之化合物之植物提取物。 如θ长項4之用途，其中該植物提取物源自南亞止瀉木 (Holarrhena antidysenterica)。 6. 如明求項1至3中任—項之用途其中該組合物進一步包 括額外活性劑、藥理學藥劑、額外黑色素生成抑制劑、 皮膚亮白劑及/或皮膚增亮劑。 7. 如晴求項丨至3中任一項之用途，其中該組合物包括約 〇.01 mg至約100 mg、或約0.1 mg至約10 mg之如請求項丄 中所定義之化合物。 8. 如凊求項丨至3中任—項之用途，其中該如請求項1中所 定義之化合物使黑色素生成受到約10%、或約25%、或 約50%的抑制。 9. 如吻求項1至3中任—項之用途，其中該如請求項1中所 定義之化合物減輕或減少該皮膚、毛髮、絨毛或毛皮之 色素沉著程度。 10· -種用於皮膚或毛髮增亮之組合物，其包括可接受之栽 劑及有效量之如請求们中所定義之化合物。 151482.doc 201118105 π. 一種用於皮膚或毛奪播_»* . . . 雙増免之組合物，其包括含有預防或 治療有效量之如請求項丨中所定義之化合物的植物提取 物及可接受之載劑。 12 ·如請求項1 0或11之組合物，其進一步包括額外活性劑、 藥理學藥劑、額外黑色素生成抑制劑、化妝藥劑、皮膚 亮白劑及/或皮膚增亮劑。 13· —種施加至皮膚或毛髮之局部調配物，其包括如請求項 1中所定義之化合物及可接受之載劑。 14. 一種施加至皮膚或毛髮之局部調配物，其包括含有預防 或治療有效量之如請求項1中所定義之化合物的植物提 取物及可接受之載劑。 15. 如請求項13或14之局部調配物，其進一步包括额外活性 劑、藥理學藥劑、額外黑色素生成抑制劑、化妝藥劑、 皮膚亮白劑及/或皮膚增亮劑。 151482.doc