TW201006788A - Purification strategy for direct nucleophilic procedures - Google Patents

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201006788 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明大體而言係關於藥物之製備。詳言之，本發明係 關於用於對包含經由離去基L與靶向基質連接之純化部分 Μ的前驅物靶向基質S進行與親核試劑X之高效「液相」親 核取代反應的方法及套組。本發明之方法及套組提供所期 望樂物S - X自未反應前驅物及仍含有該純化部分μ之副產 物的簡單純化。 【先前技術】 在許多包括放射性鹵化藥物之藥物的製備中，適用且通 常採用流程1中所描繪的親核取代反應。 流程1 :

X + S-L -► S-X + L 其中S為靶向基質， X為親核試劑》且 L為離去基。 舉例而δ ’ US 5，5 65,1 85揭示一種藉由鹵代去錫化來放 射性標記間碘苄胍（meta-iodobenzylguanidine，MIBG)之無 運載體方法（non-carrier process)。然而，該方法因許多雜 質餘留在具有經放射性標記之河1]3(}之溶液中而不利。詳 言之，毒性錫副產物餘留在溶液中且在經放射性標記之 MIBG隨時可用之前必須分離。 不得不建立移除諸如過量前驅物之副產物之方法以用於 臨床所關注之化合物的成功（放射性）合成及後續安全投 139706.doc 201006788 藥。該等反應通常採用相對於所使用之經放射性標記之藥 劑的量大大過量之量的非放射性有機前驅物。隨後在可將 經放射性標記之化合物施用於患者進行診斷及/或治療應 用之前必須自反應混合物中移除過量前驅物。 在放射性鹵素藥物之狀況下，通常可例如利用氧化鋁固 相萃取容易地將X與反應混合物中之其他物質分離。此 外’熟習此項技術者通常知道利用標準純化方案移除諸如 nc化合物或一般親核化合物之其他經放射性標記之親核 物質的方法。 然而，通常較難分離S-Χ與S-L。在許多狀況下，分離s_x 與未經標έ己之乾向基質S-L尤其重要，因為可與S-Χ競 爭且因此干擾S-Χ與其標把之結合。若發生該競爭，則該 作用可產生放射性藥物的次最佳效能特徵。受體結合（亦 即’特異性乾向）放射性藥物之狀況尤其如此。 通常藉由採用例如HPLC之層析純化程序來實現自s-L 之純化。然而’該技術需要專用設備且此外會單調乏味且 耗時。考慮大部分臨床上適用之放射性同位素的半衰期， 希望在投與至患者之前儘可能快速地完成放射性合成及純 化。舉例而言’ 18F之半衰期為110分鐘且因此在臨床使用 之1小時内合成且純化經18F標記之靶向基質。 蓉於上述情況，易於瞭解到，此項技術中需要提供非所 需物質與最終藥物S-Χ之快速且高效分離的純化技術。 自從引入用於肽合成之麥里菲爾德方法（Merrifield method)後，已在許多合成方法中併入不溶性聚合物支撐 139706.doc 201006788 物以促進產物純化。在固相肽合成方法中，如流程2中所 示，取代反應之親核體係與固相樹脂共價鍵聯。取代反應 後，藉由過濾使過量基質S-L及所置換之離去基L容易地與 樹脂結合產物X-S-樹脂分離。 流程2 :

S-L + 樹脂-X ——樹脂-X>S + L

純化： 過濾-樹脂-X-S

\

S-L + L WO 2003/0012730揭示一種替代性放射性鹵化方法，其 中如流程3中所示，取代反應之基質係經由離去基與固相 樹脂共價鍵聯。 流程3 : X + 樹磨-L^S -► S-X + 樹脂·Ι_ 純化：

過濾-S-X + X

樹脂-US + 樹脂·!_ 用該方法使經放射性標記之試劑X與固相支撐基質反應 以形成S-X ’藉由洗滌及濾除樹脂可方便地將該s_x與未反 應樹脂-L-S及樹脂結合離去基樹脂_L分離。 產生適合用作正電子發射斷層攝影法放射性示蹤劑之經 1 8 ， F放射性標記之示蹤劑的固相方法例如揭示於w〇 2003/002157中。 雖然固相支撐親核取代技術可大體上簡化純化步驟，但 139706.doc 201006788 其具有以下固有缺點：非均相反應條件通常效率不太古， 從而得到較低放射性化學物質產率且與溶液中（亦即，無 固體支樓物）進行之反應相比反應時間較長。 利用均相取代反應條件之替代性放射性標記方法例如揭 示於WO 2005/107819及Donavan等人之科技出版物（j八瓜 Chem. Soc·，2006，128，3536-3537)中。 WO 2005/1078 19係關於利用固體支擇物結合清除基團 (scavenger group)(清除樹脂）純化由r*取代基質載體_χ_γ 上之Υ的取代反應產生之經放射性標記之示蹤劑載體-χ_ R*。清除樹脂Ζ-樹脂經歷未反應基質載體_χ_γ上置換γ且 產生載體-Χ-Ζ-樹脂之類似取代反應，載體_乂_2_樹脂可自 產物載體-X-R*(餘留在溶液中）中濾除。因此，該純化程 序分離產物與未反應前驅物。此外，清除樹脂僅經設計以 置換反應性基團之部分Υ。換言之’該方法偈限於移除未 反應前驅物’但不允許自產物中同時移除γ離去基。此 外，WO 2005/107819中描述之清除樹脂之反應性部分ζ僅 限於作為Υ之良好取代劑的基團。

Donavan等人（同上述引文）描述利用離去基與全氟部分 鍵聯之富氟可溶性支撐物之親電子放射性碘取代的「均 相」可溶性支撐程序。基於全氟部分對其他全氟物質之強 親和力分離放射性峨化產物與未反應基質及離去基。 雖然已證明此具有基於氟之純化之均相取代程序有效用 於放射性碘化’但通常不可能適用於（例如）uF放射性標記 或親核反應，因為Sn基質對親電子取代具有特異性。通常 139706.doc 201006788 不進行親電子18f取代，因為放射性氟氣[18F] F2*容易獲 付’且因為其具有低比活性（由添加之[19F] F2載氣產生）。 此外’由於全氟部分中之18!7交換成冷（〗9F)氟，因此預期利 用與[18f]氟化物之更佳（較高比活性）親核取代反應的基於 . 說之純化存在問題。該等氟交換反應為吾人所熟知且會導 致放射性化學物質產率較低且放射性藥物之比活性較差。 由上可知’顯然需要易於使用且與上述先前技術相比提 φ 供更廣泛適用性的用於尤其放射性鹵素藥物之其他可溶性 支律純化方法。因此，開發純化（例如）含放射性齒素藥物 之替代方法將為有用的，該方法不需HPLC純化且此外可 靠地確保s-x與未反應前驅化合物S_L以及離去基副產物L 的有效分離。 【發明内容】 本發明大體而言係關於製備及純化藥物之新穎方法及套 組。詳^之，本發明係關於進行製備包括放射性藥物之藥 • 物之高效液相親核取代反應的方法及套組，且係關於利用 與前驅物基質之離去基連接之純化部分1^的獨特性質而進 行之產物的後續純化。本發明之純化方法將取代產物與未 .反應前驅物分子及親核取代反應之所置換之離去基分離。 該等方法及其所產生的產物在若干方面為有利的。該等 方法提供利用標準實驗室操作且無需先進純化設備之未反 應前驅物及副產物與所期望主要產物之簡單且有效的分 離。另外’根據本發明之方法如本文中所述的分離程序通 常更方便、更靈活且最重要的是耗時更少，此在例如處理 139706.doc 201006788 諸如經18f標記之藥物之臨床上採用的短壽期放射性藥物 中具重要優勢。 因此’在第一態樣中’本發明係關於一種製備藥物s_x 之方法，其中前驅物質S_L_M之部分L-M經由液相親核取 代經反應物X置換形成該藥物S_X及物質L_M，其中S為乾 向基質；L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外 與S共價連接之離去基；為與l共價結合且具有允許含 有該純化部分Μ之物質與不含該純化部分μ之其他物質分 離之特徵的純化部分。S-X視情況進一步反應以得到最終 產物S-X'。 在第二態樣中’本發明係關於一種製備及純化藥物s_x 之方法，其中前驅物質S-L-M之部分L-M經由液相親核取 代經反應物X置換形成該藥物S-X及物質L-M，其中視情況 S-X進一步反應以得到最終產物s_x，；且其中任何仍含有 該純化部分Μ之物質（含Μ物質）藉由例如如本文中在下文 更詳細陳述之純化程序選擇性地與不含該純化部分Μ之物 質（較佳S-X)分離。 在某些實施例中，S-L-M與S-X之親核取代反應為可溶 性支撐反應。 在第三態樣中，本發明係關於一種自包含S-X、S-L-M 及視情況L-M之液相反應混合物中純化藥物S-Χ的方法， 其係藉由利用純化程序將任何含有該純化部分Μ之物質與 該藥物S-Χ選擇性分離。根據本發明之合適純化程序將在.. 下文中更詳細地描述。 139706.doc 201006788 在較佳實施例中，液相親核取代反應為均相親核取代反 應’亦即，反應在單一液相令進行。 本發明之純化方法示意性描繪於圖〗中。在較佳實施例 中，例如藉由液-液或固-液相萃取、藉由調節反應混合物 . 至使得含^^物質沈澱之條件、藉由基於尺寸大小排除來分 • 離含Μ物質及/或藉由使純化部分Μ上之反應性基團與例如 連接於樹脂之互補反應性基團共價結合（圖1Β)而直接對含 φ Μ物貝實現純化（亦即分離含Μ物質與非含Μ物質參見圖 1Α-1Β)。或者，純化程序亦可包含兩步法，其中使互補反 應性基團與第二純化部分Ρ共價連接以產生物質Μ_ρ，且 根據如上所提及之純化方法進行Μ_ρ產物之後續純化（參見 圖 1C-1D) 〇 此外，本發明之另一態樣係關於進行根據本發明之親核 取代及/或純化之套組。在一實施例中，本發明之套組包 含至少一個分別待與S-L或S連接之純化部分撾或部分L_M。 • 在另一實施例中，套組包含至少S-L及純化部分M。在又 一實施例中，本發明之套組包含至少一個部分s_l_m。本 發明之套組視情況包含產品手冊、一或多種進行純化步驟 及/或合適反應之化合物或樹脂或純化介質及其類似物。 【實施方式】 本發明係關於在液相、較佳均相反應條件下進行之親核 取代反應，亦即取代發生在液體反應介質中。本發明之新 穎的液相親核取代及後續純化方法以一般化方式展示於以 下流程4中。 139706.doc 201006788 流程4 : 親核取代: 純化: X· + S-L-M —— 一 S-X + M-L- 分離類型A、B、C — —► S-X + X- 或D K S-L-M + M-L· 雖然本發明之較佳實施例係指用諸如18F之放射性鹵素 同位素進行之親核取代，但任何該等對放射性商素之提及 均僅以舉例之方式使用且不意欲以任何方式限制本發明。 舉例而言’亦可實施該等方法來產生其他放射性藥物、含 齒素非放射性藥物或甚至任何含親核殘基藥物。 本發明之所有方法之特徵在於涉及特定純化部分M。根 據本發明，該部分Μ與前驅化合物S-L-Μ之離去基L共價鍵 聯，該前驅化合物S_L_M係經受親核取代反應以連接親核 部分X，該親核部分X例如可在取代反應之前或期間衍生 自前驅物X*(X*為向反應提供親核體χ之合適前驅物：X* 之非限制性實例為例如X之鹽）或衍生自前驅物X* *(其中 X為在親核反應期間自X**轉移至S之親核部分）。在本發 明之親核取代反應（及套組）中，在該親核取代反應期間， S為靶向基質且L為離去基。 純化部分Μ具有允許任何含M物質容易地與不含μ之其 他甚至另外類似之物質分離的特徵。該等特徵具體體現： Μ内所包含之純化元件Ν中。下文中更詳細描述藉由採用 純化部分1^實現之多種分離程序。純化部允許未反應 前驅物S-L.M及副產物M_L與所期望產物s_x高效且方便地 139706.doc -10- 201006788 分離。應瞭解’含Μ物質與彼等不含μ之物質的分離視^1 之實際物理及/或化學性質而定且通常可由熟習此項技術 者已知之方法進行。雖然不限於該等實施例，但本發明係 藉由更詳細地描述多種分離類型來加以說明。 分離類型Α係基於利用對Μ具有親和力之溶液相（液相） 或樹脂（固相）之液-液或固-液萃取。在該等分離中，將含 Μ物質移入液體萃取相中或固體樹脂中通常依賴於離子純 化兀件Ν對液體萃取相或固體樹脂之離子性質之親和力。 一般而言，任何不含該純化部之物質（諸如所期望之反 應產物S-X)基本上餘留在反應混合物中且不轉移至液體萃 Τ相或固體樹脂中’進而達成含Μ物質與不含河之物質的 刀離。或者，在液_液萃取之實施例中，含河物質可對反應 混合物具有親和力且基本上餘留在該混合物中，亦即，其 不轉移至液體萃取相中。 適於進行液-液萃取之本發明純化部分“内所包含之純化 • 幻牛N的非限制性實例為離子液體部分，其可例如為啦咬 鏽基或咪唑鏘基。 在本發明之上下文中’術語「離子液體反應相」應理解 I。含離子液體之反應相。該等離子液體在此項技術中為 ，，、、的（例如參見 Thomas Welton Chem. Rev. 1999, 2〇71_2〇83)。 =液體為在約室溫下或甚至低於室溫下溶融形成液相之 鈐疋類型之鹽化合物。該等離子液體通常包含諸如吡啶 _離°米嗟鏽、四烧基錄或鱗基之陽離子有機部分以及合適 丢子。因此，如本文中所使用之「離子液體部分」係指 139706.doc 201006788 與（例如）L共價結合且為「離子液體」之離子或包含「離 子液體」之離子的部分。 在本發明之某些實施例中，將本發明之含Μ物質萃取於 離子液體相中。 作為非限制性實例，本發明之親核取代反應係在液體反 應相中且與含Μ物質（其中Μ為Ν或包含Ν，Ν為（例如比啶 鑌或咪唑鏽基）進行，隨後將該等含Μ物質萃取於「離子液 體」液體萃取相中。諸如S-X之不含純化部分Μ之物質留 在反應相中。 因此’液-液萃取之一些實施例係關於含Μ物質與不含純 化部分Μ之物質的分離，其中該分離依賴於該μ對液體萃 取相之親和力。 在特定實施例中’帶電之部分Μ或含有該帶電部分M2 物質經萃取於「離子液體」相中。 在固-液萃取之特定實施例中，含Μ物質之萃取依賴於該 包含帶電部分Μ之含Μ物質對與樹脂連接之「離子液體」 部分的親和力。 在一些實施例中，含Μ物質之萃取依賴於該包含「離子 液體j部分Μ之含Μ物質對與樹脂連接之適當帶電之不同 「離子液體」部分的親和力。 在上述液-液萃取之其他實施例中，含厘物質與不含純化 部分Μ之物質的分離係基於含Μ物質（其中Μ包含Ν，且^^為 (例如）吡啶鑌或咪唑鑌基）對液體反應相之親和力而不含 純化部分Μ之物質經萃取於液體萃取相中，亦即，在液-液 139706.doc -12- 201006788 萃取分離方法之一特定實施例中，M對反應溶液液相而非 萃取液相具有親和力’且因此反應產物S_X可自反應溶液 中萃取出來以實現純化。 換s之’在關於含Μ物質與不含純化部分Μ之物質之分 . 離的本發明之某些實施例中，該分離依賴於該Μ對反應相 之親和力。 ν 作為非限制性實例’本發明之親核取代反應可在「離子 φ 液體」液體介質中進行’且進行後續液-液萃取以分離出 S-X。含Μ物質（其中]^為（例如比啶鏽或咪唑鏽基）留在離 子液體反應相中。 在固-液萃取之實施例中，含M物質之萃取依賴於該物質 對固體樹脂（或與樹脂連接之基團）之親和力。 在固-液萃取之特定實施例中，含有帶電部分Μ之物質可 由離子交換樹脂滯留。舉例而言，陽離子（或兩性離子）部 分Μ可由陽離子交換樹脂滯留，且類似地，陰離子（或兩性 Φ 離子）部分Μ可由陰離子交換樹脂滯留。在該等特定實施例 中，希望產物S-X不帶電或帶與Μ相反的電荷。 . 此外亦可藉由沈澱及後續過濾或離心來分離含μ物質 一產物S-X，亦即，可自反應混合物中移除含μ物質，因 為Μ使其在特定條件下易於沈澱（分離類型…。舉例而言， Ν可為g添加至有機溶劑中時易於沈澱之pEG鏈。隨後可 藉由過濾或離心容易地移除該等化合物。 亦可藉由尺寸大小排除來分離含M物質與產物s_x(分離 類3L C)。可例如使用超濾（亦稱為分子量截止過濾）或 139706.doc 201006788 尺寸大小排除層析（有時亦稱為凝膠層析）自包含s-x之混 合物移除可溶性之非所需物質S-L-Μ或M-L(亦即含Μ物 質），因為Μ使非所需物質顯著大於S-X。舉例而言，亦可 用分子量截止（旋轉）過濾（通常稱為超濾）或凝膠過濾（例如 用Sephadex®濾筒）分離上述聚乙二酵化物質。 在其他實施例中，可藉由使Μ上之反應性基團與互補樹 脂結合反應性基團發生化學反應以使Μ與樹脂共價連接且 隨後過濾或離心樹脂來分離含Μ物質與產物S-X(分離類型 D)。舉例而言，Μ上之反應性元件N可為疊氮基且與樹脂 結合之互補反應性基團可為炔基（或反之亦然），且該等基 團可經由熟知的Cu⑴催化休斯根1,3-偶極環加成（Huisgen l，3-dipolar cycloaddition)(「點擊」）反應形成共價連接。 類似地’ Μ上之反應性基團亦可與另一純化部分p之互補 反應性基團共價鍵聯，此將留下順應不同分離類型之含Μ_ρ 物質。 如上文簡單解釋’本發明之製備藥物8_乂之方法包含親 核劑X與前驅物S-L-Μ之「液相」親核取代反應。在較佳 實施例中，該親核取代反應為r均相」親核取代反應。所 得產物S-X隨後可視情況進一步反應以得到最終產物s_x，。 定義 在本發明之情形下，以下定義將適用： 如本文中所使用之術語「一」意謂「一」、「至少一」或 「一或多」。 本發明之親核取代反應係在「液相」中進行。如本文中 139706.doc 201006788

所定義之液相親核取代反應係指視情況在相轉移催化劑存 在下例如兩種不可混溶溶劑之兩相液-液反應，或其係指 「均相反應」。如本文中用於描述取代反應之術語「均 相」意謂反應條件均一（亦即，與例如關於涉及固體支標 物之先前技術純化所述之非均相反應相反）。換言之，均 相親核取代反應發生在單一液相中且在反應期間反應物溶 解於該相中。熟習此項技術者應瞭解，一些化合物在取代 反應元成後可自液體反應混合物中沈殿出來，但不應將該 反應與非均相親核反應混淆。 如本文中所使用之術語「s」或「靶向基質」描述較佳 具有給予有利於顯像病理、疾病或病狀之生物分布之固有 性質的化合物。在親核取代反應之前，使s與本身共價結 合純化部分Μ之離去基L共價鍵聯，亦即，使物質8_卜厘經 受液相親核取代反應^ S可為任何經選擇用於預期目的之合適靶向基質且其通 常具有小於約50000 Da、約30000 Da、約15〇〇〇以、約 1_ Da、較佳小於約5000 Da、更佳小於約25〇〇 且最 佳小於約1500 Da之分子量。 出於實用原因已容易地認識到，小乾6 j杷向基質較佳，不僅 僅因為化學性質更明確且因為通常存 々遇*仔在較少可與本發明之 液相親核取代反應中之親核體X相互

工作用/干擾該親核體X 的官能基。S通常選自由以下各物 卿、，且成之群：合成小分 子、醫藥活性化合物（亦即，藥物分早、 _ )、代謝物、信號轉 導为子、激素、肽、蛋白質、受體梓 守0抗劑、受體促效劑、 139706.doc 15· 201006788 受體反向促效劑、維生素、必需營養辛、 ” 胺基酸、脂肪 酸、脂質、核酸、單醣、二醣、三醣或多酶 7嗯、類固醇及其 類似物。應瞭解，一些前述選擇將在其含 6我—卜._ 叠，亦 即’肽亦可例如為醫藥活性化合物，或激杳 尺歲素可為信號轉導 分子或肽激素。此外，應瞭解，亦涵蓋前述物質種類之衍 生物。舉例而t，保護基可與S之不與除化合物S_L_M1L: 以外之部分鍵聯的反應性基團連接。 S(或視情況S或s-χ之相應任何代謝物）較佳為與哺乳動 物身體之目標位點特異性結合之部分。特異性結合在本文 中意謂化合物S或s-χ就此而言與周圍組織 程度地在該目標位點處累積。舉例… 物身體内之病料位點處㈣表現之受體或整合素或酶特 異性結合，或S可由在哺乳動物身體内之病理學位點處優 先表現之轉運體特異性轉運。在一些實施例中，受體、整 合素、酶或轉運體僅表現於哺乳動物身體内之病理學位點 (亦即，與健康個體中不同或健康個體中不存在的位點） 處，或反之亦然。在本文中，應瞭解8較佳與僅表現或出 現於哺乳動物身體内之病理學位點處且不表現或出現於非 病理學位點處之受體/或整合素/或酶/或轉運體特異性結 合，雖然毫無疑問極需要後者，但很少能在實踐中達成。 特異性結合之實例包括（但不限於）特異性結合感染、炎 症、癌症、轉移、血小板凝集、血管生成、壞死、局部缺 血、組織缺氧、血管生成性血管、阿茲海默氏病 (Alzheimer’s disease)斑、動脈粥樣硬化斑、胰島細胞、血 139706.doc •16- 201006788 栓、生長抑素受體、血管活性腸肽受體、D受體、σ受體、 GRP受體、周邊苯并二氮呼受體、雌激素受體、孕酮受 體、GLP-1受體、G蛋白偶合受體、血清素轉運體、神經 腎上腺素（neuroepinephrin)轉運體、多巴胺（dopamine)轉運 體、LAT 1轉運體、胺基酸轉運體、糖轉運體、凋亡細 胞、巨噬細胞、嗜中性白血球、EDB纖維結合蛋白、受體 酪胺酸激酶、解離酶、合成酶、磷脂醯絲胺酸、PSMA、 心臟交感神經元及其類似物之位點。 在較佳實施例中，S可選自由以下各物組成之群：合成 小分子、醫藥活性化合物（藥物）、肽、代謝物、信號轉導 分子、激素、蛋白質、轉運體或酶基質、受體拮抗劑、受 體促效劑、受體反向促效劑、維生素、必需營養素、胺基 酸、脂肪酸、脂質、核酸、單醣、二醣、三醣或多醣、類 固醇、激素及其類似物。更特定言之，S可選自由以下各 物組成之群：葡萄糖、半乳糖、果糖、甘露糖醇、蔗糖或 水蘇糖及其衍生物（例如連接N-Ac基團或保護除-L-M以外 的官能基）、麩醢胺酸、麩胺酸、酪胺酸、白胺酸、曱硫 胺酸、色胺酸、乙酸鹽、膽鹼、胸苷、葉酸鹽、曱胺喋 呤、Arg-Gly-Asp(RGD)肽、趨化性肽、α促黑素肽、生長 抑素、鈐檐素（bombesin)、人類騰島素原連接肽及其類似 物、GPIIb/IIIa結合化合物、PF4結合化合物、ανβ3、ανβ6 或α4β 1整合素結合化合物、生長抑素受體結合化合物、 GLP-1受體結合化合物、σ2受體結合化合物、σΐ受體結合 化合物、周邊苯并二氮呼受體結合化合物、PSMA結合化 139706.doc -17- 201006788 合物、雌激素受體結合化合物、雄激素受體結合化合物、 血清素轉運n結合化合物、神經腎上腺素轉運體結合化合 物、多巴胺轉運體結合化合物、lati轉運體結合化合物 及諸如肽激素之激素及其類似物。 在本發明之實施例中，通常將較佳地，SOC展示與s基本 上相同之生物學相關特徵，例如為與似動物身體内之目 標位點特異性結合之㈣部分。換言之，X基本上不改變 部分S之把向特性。 此外，在另一較佳實施例中，s x可以允許估算器官中 之局部組織罐注之方式累積於主要器官中。舉例而言，s 可根據局部灌注量累積於潛在心臟病發作患者之心臟中， 且允許圈定心臟具有阻塞性冠狀動脈之區域。類似地，反 映腦中灌注之S化合物可幫助鑑別中風區域。 如本文中所使用之術語「蛋白質」意謂任何不限於具有 至少約20個或20個以上之胺基酸（其D形式及/或[形式）之 蛋白質，包括（但不限於）肽、酶、醣蛋白、激素、受體、 抗原、抗體、生長因子等。蛋白質之含義中包括具有約2〇 個以上胺基酸、約5 0個以上胺基酸殘基且有時甚至約！ 〇 〇 或200個以上胺基酸殘基之蛋白質。 如本文中所使用之術語「狀」係指任何包含至少一個肽 鍵之實體且可包含D胺基酸及/或L胺基酸。術語肽之含義 有時會與上文所定義之術語蛋白質重疊。因此，本發明之 肽具有至少2個至約1〇〇個胺基酸、較佳2個至約5〇個胺基 酸。然而，肽最佳具有2個至約20個胺基酸，且在一些實 139706.doc -18- 201006788 施例中，肽具有介於2個與約15個之間的胺基酸。 術語「小分子」意欲包括所有小於約1 〇〇〇個原子單位之 分子。在本發明之某些實施例中，小分子為可來自天然來 源之肽或經合成產生之肽。在其他實施例中，小分子為有 機的非肽/蛋白質分子且較佳經合成產生。在特定實施例 中，小分子為醫藥活性化合物（亦即，藥物）或其前藥、藥 物代謝物或與例如回應刺激之酶促功能或器官功能之天然 生物過程相關的反應之產物。 肽激素之非限制性實例為：血管緊張素、瘦素、泌乳 素、催產素、升壓素、緩激肽、去胺加壓素（desmopressin)、 促性腺素釋放素（gonadoliberin)、胰島素、升糖素、胃泌 素、生長抑素、抑約素、副甲狀腺素（parathormon)、 ANF、胃内激素、肥胖抑制素、HCG、促甲狀腺素 (thyreotropin)、促曱狀腺素釋放素（thyreoliberin)、促濾、泡 素（follitropin)、促黃體素（luteotropin)、促腎上腺皮質激 素（adrenocortikotropin)、MSH、EPO、生長素（somatotropin)、 IGF、LH/FSH、TSH、ACTH及GH。 因為S通常包含在S-L-M物質内，所以應瞭解S係指適於 參與選擇性親核取代反應以使離去基L(與S連接且另外與 Μ連接）與親核劑X或包含X之部分/分子/前驅物交換之任何 形式的S。換言之，S可視情況具有除L-M以外之其他反應 性基團。在一些實施例中，在進行親核取代之前必須保護 該等其他反應性基團中之至少一個。另外，S可為所期望 藥物之前驅物，亦即，S在親核取代後必須進一步經修飾 139706.doc -19- 201006788 以獲得所期望之產物。 如本文中所使用之術語「L」或「離去基」係指獨立地 與靶向基質S與純化部分Μ兩者結合之部分。L在親核反應 期間自S移除，但其仍與M連接。此項技術中通常已知親 核反應之該等離去基。 在本發明之所有實施例中，部分M係與L連接。值得注 意的是，應理解如本文中所使用之L意謂獨立地為離去 基，亦即Μ之存在不使L成為離去基。換言之，未與Μ連接 之離去基L(熟習此項技術之讀者當然應瞭解，在不存在％ 之情況下，諸如Η之另一取代基將替代μ作為共價結合部 分）單獨在親核取代反應中必為合適的離去基。作為非限 制性實例，-0-S〇2-CH2_M為根據本發明之_L_m部分。馗存 在於部分-o-s〇2-cH2_m中之事實不使_〇_s〇2_Ch2_成為離 去基’因為-0-S〇2_CH3早已為親核取代反應之合適離去 基。 類似地，諸如-L-Μ之含Μ物質的分離視M而定且不取決 於L(或S)’亦即’L(及/或S)不表示允許含l物質與不含部 分L之物質分離的純化部分。作為非限制性實例，含％物 質-0-S02-M與-O-SOHCVCb)烷基-Μ(其中Μ為（例如）聚乙 二醇（PEG))之分離視M(PEG)之存在而定且不取決於[可能 含有或可能不含與Μ連接之（C丨-C15)烷基之事實。 離去基L較佳選自由以下各基團組成之群：_〇s〇2_R_、 -N(R)3+-、-N(烷基）2R+-、 139706.doc -20- 201006788

其中R獨立地選自C^-Cm烷基、q-Cw烷基芳基、芳基、芳 基烧基、Ci-Cl5烯基、C1-C15炔基，所有該等基團可視情 況經取代，或R為與Μ鍵結之直接鍵。 在本文中所使用之情形下，R為與Μ鍵結之化學鍵或為 能夠與Μ形成鍵之部分。該鍵例如可形成於作為R之一部 分之官能基之間，亦即，R可經至少一個諸如羥基-、醛 基-、嗣基-、叛基-、胺基-、耕基-、硫醇基-及其類似基團 之能夠與Μ形成共價鍵之官能基取代，或R包含可使R經受 Μ之加成反應之C-C雙鍵或參鍵。應瞭解，L與Μ之間的任 何鍵在使S-L-M轉化為S-X之親核取代反應之反應條件下 應對X之親核取代呈惰性。 另外’若離去基L含有一個以上R，則至少一個R具有與 Μ鍵結之直接共價鍵，或μ藉由直接鍵結L之碳原子或經由 反應性基團與至少一個R共價結合。 在某些實施例中，離去基L含有一個以上R且各R連接至 少一個純化部分Μ。 如本文中所使用之術語「Μ」或「純化部分」係指與親 核取代反應相關之離去基「L」共價結合之部分，亦即， 物質S-L-M之部分L_M(且不僅物質s_LiL)經該親核反應 物X取代如本文中所定義之Μ具有允許含有該純化部分 Μ之物質與不含該純化部分乂之其他物質分離之特徵。 139706.doc -21 - 201006788 本發明之純化部分Μ包含可將M與離去基匕共價連接之官 能基且進一步包含純化元件N(參見圖lA)。N例如選自㈠曰 不限於）由以下各元件組成之群：陽離子部分、陰離子部 分、兩性離子部分、離子部分；適於與金屬離子形成整合 物之元件N ;或比S大至少3倍、較佳5倍或甚至⑺倍或_ 之元件N;或可使得含自調節至使含M物質沈漱而s_x 留在溶液中之條件之反應混合物中沈澱的元件n;或包含 能夠與互補樹脂結合之反應性基團形成共價鍵之反應性基 團的元件N(圖1B)。在本發明之某些實施例中，N可包含諸 如視情況經取代之Cl_c]5烷基、Ci_Ci5烷基芳基芳基、 芳基（CVC!5)烷基、Cl_Cl5烯基或Ci_Ci5炔基之碳部分。在 其他實施例中，純化部分Μ可包含使Μ與離去基l共價連接 之官能基及連接至少兩個部分Ν或在一些實施例中連接三 個或三個以上部分碳骨架（例如Cl_c4烷基）。 在一特定實施例中，純化元件N包备能夠與另一純化部 刀P之互補反應性基團形成共價鍵從而產生順應根據本文 中所述方法之純化之物質Μ-P的反應性基團（參見圖1 c)。 在本文中指示為「兩步純化」之該實施例中，純化元件在 親核取代反應後有效加成至Μ物質上。該方法可適用於使 可以其他方式干擾親核取代反應之高效純化方法可行。 用於本發明之兩步純化之純化部分Ρ包含能夠使Μ與ρ共 價連接之Μ之反應性基團的一個或一個以上互補反應性基 團及至少一個較佳選自（但不限於）由以下各元件組成之群 的純化元件Q :陽離子部分、陰離子部分、兩性離子部 139706.doc •22- 201006788 分、離子液體部分；適於與金屬離子形成螯合物之部分； 或比S大至少3倍、較佳5倍或甚至1〇倍或15倍之部分；或 可使得含Μ-P物質自調節至使含Μ-P物質沈澱而s_x留在溶 液中之條件之反應混合物中沈澱出的部分；或包含能夠與 互補樹脂結合之反應性基團形成共價鍵之反應性基團的部 分/元件Q。應瞭解，P通常僅與"結合且相應地不與L*s 結合。 在兩步純化之一較佳實施例中，使包含反應性基團之純 化部分Μ經由部分P之互補反應性基團與純化部分p連接， 且該部分Ρ包含一個以上純化部分q(圖1D)e在某些實施例 中，純化部分P可包含使？與!^之反應性基團共價連接之官 能基及連接至少兩個部分q或在一些實施例中連接三個、 四個、五個、六個或甚至六個以上部分Q之碳骨架（例如 Cl-C4 烧基）。 在某些實施例中，Q可包含諸如視情況經取代之 烷基、（^-(:15烷基芳基、芳基、芳基（C1_C15)烷基、 烯基、Ci-Cu炔基之碳部分。在一些實施例中，Q包含至 少一個經鹵素取代之碳部分，其中該等經取代碳部分中之 至少一者經一或多個、較佳兩個或兩個以上、更佳三個或 一個以上齒素原子取代，且最佳地，其中該等碳部分中之 至少一者經全鹵化。在一特定較佳實施例中，Q中所包含 之所有經取代之碳部分均經全齒化。如本文中所使用之經 鹵素取代之碳部分較佳為心至匸^烷基或(^至(:15烯基。在 上述實施例中，較佳地，取代_素為氟。在Q為氟取代部 139706.doc -23- 201006788 分之該等狀況下’純化方法將需要液-液萃取於氟相中或 固-液萃取於氟樹脂上。 如本文中所使用之術語「S—L-M」係指親核取代反應之 反應物。通常’本發明之S-L-M物質在所選擇之親核取代 反應條件下可溶於液體反應相中。在某些實施例中，雖然 較佳採用已呈隨時可用形式之S-L_M，但S-L-M可視情況 ’ 在親核取代反應之前利用熟習此項技術者已知之方法由S_L - 及Μ或由S及L-M起始合成。前驅物質之該準備性合成可在 獨立的反應混合物中進行或亦可在適於親核取代反應之反 _ 應混合物中進行，亦即在單蚤反應（one_p〇t reacti〇n)中進 行。 如本文中所使用之術語「X」或「反應物χ」係指適於 進行S-L-M刖驅物之L-M部分之親核取代以產生s_x物質的 任何親核劑。舉例而言，X整體為親核劑或χ為包含與^^河 反應之親核基團（例如胺基）之部分/分子。或者，X可衍生 自前驅物Χ*(例如’鹽）或衍生自前驅物X**，其中X為在 親核反應期間自X"轉移至s之親核部分且其中又藉此取代❿ S-L-M之部分L-M。反應物X之反應性區較佳帶負電。根據 前述易於瞭解到，如本文中所使用之術語Γχ」或「反應 物X」意欲描述在本發明之親核反應之前、期間及之後可 (例如）存在於進行該親核反應之反應混合物中之所有可能 形式的X。作為說明適用於本發明之上下文中不同可能形 式之X的實例’ χ在該親核反應之前可為陰離子形式，或 在親核反應期間可包含於中間狀態中，且在形成產物s_x 139706.doc -24- 201006788

之親核反應後在任何狀況下均將為8之共價連接基團。應 瞭解，相同原則亦擴展至例如s、L、M、L_M、p、 等本文中所使用之物質的其他類似物。 在本發明之特定實施例中，X為鹵素或鹵離子，例如氟 或氟離子。在其他較佳實施例中，親核劑χ為放射性同位 1241、 153Sm 1251 、 13 .186η 67

Cu 64

Cu 19

At 225 素或包含放射性同位素，該放射性同位素選自（但不限於） \、165 _ · 99m Tc、niIn ’ .18p 、201 丁 i 、123i 、 1、nc 、32P、72As、 76Br、 89Sr、 、212Bi 、2】3Bi、 89Zr 、86γ 、90Y、 ;Dy、1 77Lu、117m Sn、 2 1 3 tj · Bi、 212Bi、 69Yb、 68Ga及 67Ga。 應瞭解，一些以上所列之放射性同位素不適於單獨進行 親核取代反應。然而，熟習此項技術者應已知所列放射性 同位素中之何者可適於表示親核反應中之親核體（諸如 18

F) ’以及何種放射性同位素必須與適於藉由親核取代反 應取代L-M之另一親核部分結合。 在X為放射性同位素之實施例中，若放射性同位素為諸 如uF、⑴卜m】、125卜131卜34〇1及211^之放射性南素， 則較佳。在本發明之上下文中最佳放射性同位素為氟之 UF放射性同位素。應瞭解，以上所列之放射性齒素可以 韻i核劑形式（亦即’陰離子物質形式）存在於反應混合物中 或其可包含在親核劑内，其中放射性同位素不主動參與親 核反應但為取代部分χ之一部分。 通常且若不另作明確說明，則如本文中所使用之術語 139706.doc -25- 201006788 「前驅物」係指親核取代反應之至少一種、一種以上或所 有反應物’亦即，X、X*、X**及S-L-M。 如本文中所使用之術語rS_X」涉及前驅物/反應物S_L_M 與親核劑X之液相親核反應的產物。術語「s_x」可涵蓋 中性、帶負電或帶正電物質。產物「S-X」可包含經保護 反應性基團及/或可經受不與S_X鍵相互作用（諸如去保護） 或修飾不同反應性基團以製備最終產物S_x，的其他修飾。 在一較佳實施例中，S-X為鹵化產物。在又一較佳實施 例中，S -X為經放射性標記之產物，較佳為經放射性齒素 標記之產物且最佳為經18F標記之產物。 通常，諸如S-L-M及L-M(與Μ結合之置換離去基L)之含 Μ物質含有一個與L結合之純化部分Μ。然而，不排除該含 Μ物質亦可含有兩個或甚至三個或三個以上與同_ L結合 之純化部分Μ。此外’亦涵蓋純化部分μ可含有兩個或甚 至三個或三個以上純化元件Ν。 如本文中所使用之術語「反應介質」通常包含進行本發 明之親核反應之所有化合物，諸如緩衝液、鹽、溶劑及可 溶性支撐物。應瞭解，另外，前驅物S-L-M及X可視情況 在親核取代之前存在於反應介質中。 如本文中所使用之術語「反應混合物」通常係指經受本 發明之液相親核取代反應的液體組合物且其包含或疑似包 含主要產物及視情況副產物及未反應之反應物。反應混合 物可包含在該取代反應之後且在後續純化步驟之前添加以 產生更適於進行該純化步驟之條件的添加劑，例如藉由添 139706.doc •26· 201006788 加酸或鹼輕微改變pH值以獲得對（例如）螯合固-液萃取而 言最佳之pH值。 在本申請案之上下文中，術語「純化」與「分離」可互 換使用且意欲意謂任何基於純化部分Μ之存在或不存在性 對兩種或兩種以上物質之混合物的分離，其中至少一種不 含純化部分Μ之物質餘留在或萃取於液體部分中且含Μ物 質收集於另一液體或固體部分中。分離因此包括（但不限 於）含Μ物質之特定且選擇性富集或耗盡、濃縮及/或分 離，或反之，不含純化部分Μ之物質之特定且選擇性富集 或耗盡、濃縮及/或分離。然而，應瞭解純化通常理解為 意謂耗盡亦含有不含純化部分Μ之物質之液相内的含Μ物 質（無論該不含部分Μ之非Μ物質是否進一步經修飾或與其 他化合物分離）。顯而易見，純化後可能有含Μ物質雜質留 在液相中。 因此，應瞭解，如本文中所使用之「純化」涉及在純化 步驟後耗盡含有至少一種不含純化部分Μ之物質之液相中 至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80°/。或至 少90%的含Μ物質，但該術語較佳意謂甚至更完全耗盡含 Μ物質。因此，當本申請案提及術語「純化」或「分離」 時，其意欲涉及在純化步驟後自含有不含純化部分Μ之物 質之液相中耗盡50%、60%、70%、80%、90%、較佳 95%、更佳99%且最佳100%的含Μ物質。在純化程度未達 到至少95%、較佳97%、更佳99%且最佳100%耗盡含Μ物 質之狀況下，可對反應混合物實施連續（重複）純化程序以 139706.doc -21 · 201006788 使總純化增加至期望程度。 如本文中所使用之術語「可溶性支撐」或「可溶性支撐 物」係指用諸如聚乙二醇之可溶性聚合物進行的合成方 法。與涉及不採用聚合物支撐物之均相反應流程之「經 典」或「溶液」合成相比，如本文中所使用之術語「可溶 性支撐」反應用於指併入可溶性大分子運載體以促進㈠列 如）產物分離之方法。 _ 本發明之可溶性支樓物」為可溶性大分子運載體。通 常，適於本發明方法之可溶性支撐物顯示良好的化學穩定❿ 性且提供易於連接有機部分之冑當官能基且展5見以低溶解 度溶解分子實體之增溶能力且允許與目標化合物之物理化 學性質無關之-般合成方法。應瞭解，可溶性支撐物通常 可能不展現單個離散的分子量而是可由具有不定大小"分 子量之大分子組成。合適固體支撑物可選自（但不限於）由 聚苯乙烯'聚乙烯醇、《乙烯亞胺、聚丙烯酸、聚曱醛 (P〇lymethylene oxide)、聚乙二醇、聚氧化丙烯、纖維 素、聚丙烯醯胺及其類似物組成之群。 ® 如本文中所使用之術語「樹脂」係指固相，亦即，其不 可溶於用於進行親核取代反應之液體中或在後續純化㈣ 不可溶。樹脂通常為聚合物，其可視情況包含與樹脂表自 連接或藉由連接子與樹脂表面連接之反應性基團。 如下文中在本發明說明書及巾請專利範圍中所使用，術 居烧基」單獨或作為另一基團之部分時係指具有】至Η 個碳原子之直鏈或分支鏈烷基，諸如曱基、乙基、丙基、 139706.doc -28 - 201006788 異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、異戊基、新戍 基、庚基、己基、癸基。烷基亦可經諸如齒素原子、羥 基、C^C：4烷氧基或C^-Cu芳基（其亦可又經諸如i至3個鹵 素原子取代）取代。烷基更佳為（Ci_CiQ)烷基、（Ci_c6)烷 . 基、（Cl_C5)燒基、（C2-C5)烧基或（Ci-D垸基。 如下文中在本發明說明書及申請專利範圍中所使用，術 語「稀基」及「块基」係與烧基類似地定義，但相應地含 有至少一個碳-碳雙鍵或參鍵。 如本文所使用之術語「芳基」單獨或作為另一基團之部 分係指在環部分中含有6至12個碳、較佳在環部分中含有 6-10個碳之單環或雙環芳族基團，諸如苯基、萘基或四氫 萘基，芳基本身可經一個、兩個或三個獨立且個別地選自 包含以下各基團之群之取代基取代：自基、硝基、（Ci_c6) 羰基、氰基、腈、羥基、全氟_(C1_C16)烷基，尤其三氟曱 基、（Ci-CJ烷基磺醯基、（Ci_c6)烷基、（Ci_c6)烷氧基、 • (二曱基胺甲醯基）（甲基）胺基及（q-c：6)烷基硫基。如上文 所概述，該「芳基」可另外經一個或若干個取代基取代。 熟習此項技術者易於瞭解到，以上所提及之取代基亦可合 併於同一個取代基（例如，鹵烷基、全氟烷基-烷氧基等） 中。芳基較佳為苯基、萘基。 如本文所使用之術語「雜芳基」係指以下基團··其具有 5至14個環原子；環狀陣列中共用6、1〇或丨斗個^^)電子； 且含有碳原子（其可經鹵基、硝基、（(Ci_C6)烷基）羰基、氰 基、羥基、二氟甲基、（Ci_C6)磺醯基、（Ci-c6)烷基' d· 139706.doc •29- 201006788 Q)烯基、（CVC：6)炔基、（CVC6)燒氧基或（(Ci_c6)烧基）硫 基取代）及i、2、3或4個氧、氮或硫雜原子（其中雜芳基之 實例為、塞吩基、苯并[b]喧吩基、蔡幷[2,3仲塞吩基、售 嗯基、咬喃基、哌喃基、異笨并呋喃基、苯并噁唑基、咣 烯基、咄基、啡噁噻基、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、 吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲嗪基、異 吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4h喹嗪 基、異喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、啐 琳基、喋啶基、4aH-咔唑基、咔唑基、咔啉基、啡咬基、 吖啶基、呸啶基、啡啉基、啡嗪基、異噻唑基、啡噻嗪 基、異鳴咏基、咬η丫基及徘鳴嗪基）。雜芳基較佳為吼啶 基或咪唑基。 如上文所概述，該「雜芳基」可另外經一個或若干個取 代基取代。 如本文所使用之術s吾「芳烧基」係指用芳基取代统基Η 原子之基團。源於芳基化炫•基。 顯然’當本說明書中使用術語「芳基」、「雜芳基」或任何 涉及方族系統之其他術s吾時’其亦包括該芳族系統經一咬多 個適當取代基取代之可能性，該或該等取代基為諸如〇Η、齒 基、烷基、CF3、CN、（CVC6)烯基、（CVC6)炔基、（Cl_ C6)烷氧基、（二甲基胺甲醯基)（甲基)胺基、NH2、no2、so3h、 -S02NH2、-NCHKODXCkCs)烷基、烷基。 當使用術語「經取代」時，其意欲指示與使用「經取 代」之表述中所指示之原子連接的一或多個氫經來自指示 139706.doc •30· 201006788 之群之選擇置換’其限制條 > ·*、牛為不超過所指示之原子之正 常價數且取代產生化學上穩~ 像之 〜'又的化合物，亦即足夠穩定以 能經受住自反應混合物中分 " 離達有用的純度及調配成醫藥 組合物的化合物。取代基可選自i素原子（氟、氣、/、、 蛾）、經基、-聊、硝基、（c丨Μ烧基録、氛基、猜、 三說甲基、（c丨；）燒基續基、（Ci_C6)烧基、A')稀 基、(CVC6)炔基、(Cl_C6)烷氧基及(Ci_c。烷基硫基。

術語「南基」或「由素」係指氟（F)、_)、漠㈣及 碘（I)。 若本發明化合物中存在對掌性“或另—形式之異構中 心，則本文中意欲涵蓋包括對映異構體及非對映異構體之 該立體異構體之所有形式。含有對掌性中心、之化合物可以 外消旋混合物或對映異構富集混合物形式使用，或可利用 熟知技術分離外消旋混合物且可單獨使用個別對映異構 體。在化合物具有不飽和碳碳鍵雙鍵之狀況下，（z)_異構 體與（E)-異構體均在本發明之範疇内。在化合物可以諸如 酮-烯醇互變異構體之互變異構形式存在之狀況下，涵蓋 以平衡狀態存在或一種形式占主導之各互變異構形式均包 括於本發明内。 聚（乙二醇）(PEG)(亦稱為聚（氧化乙烯κρΕΟ)或聚氧乙烯 (ΡΟΕ))為商業上最重要類型的聚醚。pEG、ρεο或ροε係 指環氧乙烷之募聚體或聚合物。 PEG具有如下結構：

HO-CH2-(CH2-0-CH2-)n-CH2-OH 139706.doc •31 - 201006788 其中 n=l〇-l〇〇。 根擄述應瞭解，本發明尤其係針對包含液相親核取代 反應之製備藥物之方法及自未反應反應物純化所期望產物 之可能的後續方法。 方法 一實施例為一種製備藥物S_X之方法，其中前驅物質S_L_M 之部分L-M經由液相親核取代經反應物X置換以形成該藥 物S-X及物質L-M，其中： S為乾向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與s共價 連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部分μ之物質與 不含該純化部分Μ之其他物質分離之特徵的純化部 分；且 其中s-x視情況進一步反應以得到該最終產物s_x,。 本發明之另一態樣係關於一種製備及純化藥物s_x之方 法，其中前驅物質S-L-M之部分L-M經由液相親核取代經 反應物X置換以形成該藥物S_X及物質L_M，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與s共價 連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部分M2物質與 不含該純化部分Μ之其他物質分離之特徵的純化部 分；且 139706.doc •32- 201006788 其中s-χ視情況進一步反應以得到冑終產物n，且 其中任何仍含有該純化部分M之物質（含M物質）藉由利用 純化程序選擇性地與不含該純化部分Μ之物質、較佳s_x 分離。 本發明之又—態樣係關於一種自包含S-X、S-L-M及視 情況L-M之液相反應混合物純化藥物8_χ的方法，其中·· ' S為靶向基質； '、 φ L為與Μ共價連接且在藉由液相親核取代反應使又與§連 接之前另外與S共價連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部物質與 不含該純化部分Μ之其他物質分離之特徵的純化部 分； 藉由利用純化程序選擇性分離任何含有該純化部分 物質與S_X。 在本發明之特定實施例中，S-L_M與s_x之親核取代反 φ 應係以可溶性支撐反應進行。 在本發明之較佳實施例中，S-L-M與S-X之親核反應係 以均相親核取代反應進行。 可利用熟習此項技術者通常已知之方法進行缺乏純化部 分Μ之物質（諸如所期望之產物8_幻與一種或若干種含]^物 質的分離。將在以下早卽中更詳細地描述合適的實例。 純化方法 液-液純化 在較佳實施例中，可藉由液-液相萃取來分離不含純化 139706.doc 33- 201006788 部分Μ之物質與含Μ物質。因此，含Μ物質可例如自反應 混合物中移除。或者，非含Μ物質（例如S-X)可自反應混合 物中移除且含Μ物質基本上留在反應混合物中。 熟習此項技術者通常已知液-液萃取之原理。本發明之 液-液萃取較佳依賴於純化部分Μ上之離子元件Ν對相應離 子液體萃取相或反應相之親和力。 ’ 本發明之純化方法例如可包含含Μ物質之液-液相萃取， 而不含純化部分Μ之物質基本上餘留在反應混合物中。必 須瞭解，如本文中所使用之術語「基本上餘留在反應混合 鲁 物中」意謂至少約60%、較佳至少約8〇%、更佳至少約 90%之各缺乏部分Μ之物質餘留在反應混合物中。最佳 地，至少約99〇/。或甚至1〇0%之各不含部分Μ之物質餘留在 反應混合物中。 因此，特定實施例係關於液_液萃取，其中包含帶電部 分Μ之含Μ物質經萃取於「離子液體」相申。 其他較佳實施例係關於液-液萃取，其中包含作為「離 子液體部分」之部分Μ的含卿質經萃取於「離子液體」® 相中。 在親核劑X為放射性同位素、較佳諸如！8F之放射性齒素 的本發明實施例中’希望萃取介質及/或純化部分m不含可 經歷與放射性同位素之交換反應之X的非放射性同源物。 根據該原理’亦應瞭解’在乂包含放射性同位素之狀況 下希望萃取介質及/或純化部分以不含該放射性同位素之 非放射性同源物。在液液萃取中不存在不含X之非放射性 139706.doc -34· 201006788 同源物之萃取介質及/或純化部分M避免產生作為副產物的 物質s-χ之非放射性類似物（例如，「冷」s_x)。 作為非限制性實例，若X為，則希望不含一 或多個可經歷與放射性同位素18F之交換反應之原子。 該等氟交換反應為熟習此項技術者所熟知且尤其會導致放 射性化學物質產率較低及放射性藥物比活性較差的問題。 在本發明之另一較佳實施例中，液-液相萃取方法依賴 於含Μ物質對萃取相（諸如離子液體萃取相）之親和力而 不3純化部分Μ之物質基本上不可萃取於該液體萃取相 中亦即’該等實施例係關於一種液-液萃取方法，其中 不含純化部分Μ之物質經萃取且含Μ物質基本上餘留在反 應/tC* σ物中。熟習此項技術者應已知一般如何進行液-液 萃取。液-液萃取可進行一次、兩次，且在某些狀況下， 甚至可進行三次、四次、五次或五次以上。 在又較佳實施例中’液-液萃取方法依賴於含μ物質對 呈反應混合物形式之液體萃取相之親和力，而不含純化部 刀Μ之物質基本上不可萃取於該液相中。 如本文中所述之液-液相萃取方法中所使用之「液體萃 取相」應理解為含Μ物質自反應混合物中萃取（亦即，轉 移）所至之〉谷液，而不含純化部分Μ之物質基本上餘留在反 應/昆合物中’亦即基本上不可萃取於該液體萃取相中。在 本文中’基本上不可萃取意謂至少約6〇%、較佳至少約 85/£>、更佳至少約90%之各不含部分Μ之物質餘留在反應 屈·合物中。在—些情況下，甚至可能可達成幾乎定量分 1397Q6.doc -35- 201006788 離’其中至少約㈣或甚幻帆之各不含部分批 留在反應混合物中。 爾 固-液萃取 在本發明之另—較佳實施例中，純化程序包含含⑽質 之固-液相萃取，而不含純化部分M之物質餘留在反應混合 物中。熟習此項技術者通常應已知如何進行固·液萃取Y _ 該萃取例如可包含使用可藉由離心或過㈣除之珠粒，冑 該萃取例如可包含使用管柱及其類似物，其中固相為固定 相且反應混合物為移動相或存在於移動相中。樹脂可為根 _ 據本發明之固相。樹脂例如可未經修飾或可包含一或多個 與其連接之活性及/或互補基團。本發明之固_液萃取較佳 依賴於離子Μ對離子固體萃取相之親和力。或者，本發明 之固-液萃取依賴於Μ與固體萃取相之間的非共價親和力， 其中萃取方法中涉及凡得瓦爾力（van der Waals)、離子相 互作用之組合。 此外，本發明之較佳實施例係關於X為放射性同位素之 方法。在該等狀況下，固體樹脂或其上連接之部分不含可 經歷與如上解釋之放射性同位素之交換反應的X之非放射 性同源物。 - 根據該原理，亦應瞭解，當X包含放射性同位素時，希 ' 望萃取介質及/或純化部分Μ及/或離去基L不含該放射性同 位素之非放射性同源物。 在另一較佳實施例中，固-液萃取方法依賴於含Μ物質對 陰離子交換劑、陽離子交換劑或「離子液體」之離子所連 139706.doc -36 - 201006788 接之樹脂的親和力，而不含純化部分M之物質基本上展示 對該樹脂無親和力》在本文中術語「基本上無親和力」意 謂少於10%、較佳少於5%、更佳少於1%且最佳少於〇 〇5% 之不含純化部分Μ之物質滯留在固體樹脂上。 在又一實施例中’萃取方法依賴於含Μ物質對與樹脂結 合之金屬離子的螯合作用。在該較佳實施例中，Μ為例如 可藉由將反應混合物負載於Ni管柱（其中Ni2+與管柱之樹脂 結合）上而移除之與L連接的His標記。 在又一實施例中，萃取方法依賴於Μ與結合於樹脂之互 補化合物之間的非共價親和力，其中包括凡得瓦爾力、離 子相互作用之組合。在該較佳實施例中，Μ例如為生物素 且與樹脂結合之互補化合物為抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈 菌素。 在本發明之另一較佳實施例中，液-液相萃取與固·液萃 取均係基於陽離子-陰離子吸引力且純化部分Μ包含陽離子 或陰離子部分Ν。 藉由沈澱之純化 根據本發明之教示，可藉助於使含Μ物質沈澱來分離含 Μ物質與不含純化部分Μ之物質，亦即，該純化程序包含 調節反應混合物至使得含Μ物質沈澱而不含純化部分Mi 物質仍可溶之條件。 可例如藉由調節反應混合物之pH值、溫度及/或離子強 度及/或藉由例如向反應混合物中添加特定離子以使含Μ物 質沈澱而不含純化部分Μ之物質仍可溶來達成含Μ物質之 139706.doc -37· 201006788 沈澱。舉例而言，Μ可包含PEG鏈（代表元件N)，當其添加 至非極性有機溶劑中時易於沈澱。或者，Μ與L結合且包 含與L結合之螯合部分或複合部分Ν，在添加特定離子以 當與該螯合部分或複合部分結合時降低含Μ物質之溶解度 後含Μ物質沈澱。可容易地藉由過濾或離心移除該沈澱物 質。 藉由尺寸大小排除之純化 在本發明之又一實施例中，純化程序包含藉由尺寸大小 排除來分離含Μ物質與不含純化部分Μ之物質。在該較佳 實施例中，純化部分Μ之元件Ν之分子量比S大約2倍、4 倍、6倍、10倍、20倍，更佳50倍且最佳100倍。因此可由 此項技術中可利用之合適方法（諸如超濾或尺寸大小排除 層析）分離不含純化部分Μ之物質。適於進行該純化程序之 純化部分Μ之實例為包含聚乙二醇（PEG)部分（元件Ν)之純 化部分Μ。 藉由使Μ與樹脂共價結合之純化 若含Μ物質包括作為其純化部分Μ上之反應性基團之元 件Ν且純化程序包含使含Μ物質經由該反應性基團與包含 互補反應性基團之樹脂反應以使含Μ物質與樹脂共價連 接，則不含純化部分Μ之物質可進一步與含Μ物質分離。 根據本發明，樹脂為固體。隨後可藉由此項技術中熟知之 方法（例如藉由過濾或離心）將含Μ物質-樹脂產物自包含至 少一種不含純化部分Μ之物質之混合物中移除。 該等互補反應性基團（其中一個基團與樹脂連接）之實例 139706.doc • 38 - 201006788 係選自（但不限於）由以下各基團組成之群：酸/胲胺氧基、 疊氮化物/块、疊氮化物/膦、活化酯/胺、α酮酸/胲、生物 素/抗生蛋白鏈菌素、His標記/Ni2+、（第一胺或第二胺）/異 氰酸酯、胺/硫氰酸酯、磺酸酯/硫醇、磺酸酯/羥基或（醛或 酮）/(fe、醯拼、肼、本肼、胺基脲（semicarbazjde)、胺氧 基或二胺基硫脲（thiocarbazide)) 〇 藉由形成物質-Μ-P之兩步純化 在本發明之又一實施例中，純化程序可以兩個步驟進行 (圖1C-1D)。在該實施例中，M包含使河與離去基[共價連 接之S旎基，及作為能夠與另一純化部分p之互補反應性 基團形成共價鍵之反應性基團的元件N。另一純化部分？包 含互補反應性基團及一或多個除不為反應性基團外可與N 相同之純化元件Q。純化程序包含使含M物質與p反應以形 成具有-Μ-P部分之物質，及接著藉由如以上所定義之純化 程序分離任何含-M_P之物質與不含_M_P之物質（諸如I X)。一般而言，在本發明之所有實施例中，較佳對於X為 放射性同位素或包含放射性同位素之狀況而言，純化部分 Μ不含可例如在親核取代反應期間經歷與放射性同位素之 父換反應之X的非玫射性同源物。 熟習此項技術者已知親核取代氟化反應通常在遠高於 loo C下進仃。在該等溫度下，通常觀察到包含X之非放射 性同源物之部分與放射性同位素X之間的錢反應增強， 且因此導致放射性標記產物之比活性降低且可限制標記反 應之放射性產率。 139706.doc 39- 201006788 因此纟發明之-較佳實施例係、關於—種若x為放射性 同位素或包含放射性同位素，則基_及基團π含可例 如在親核取代反應期間經歷與放射性同位素之交換之X的 非放射性同源物的方法。 因此，在某些狀況下’ Μ(其視情況包含使Μ與離去紅 共價連接之官能基且包含Ν)為㈣錢核取代反應後與部 分Ρ之互補反應性基團形成共價鍵之反應性基團Ν的兩步純 化實施例較佳。在後者狀況下，可進行包含放射性χ(或例 如18f·或包含放射性同位素之化合物）之親核取代反應且接 著在溫和條件下使含Μ物質與P(其隨後可包含χ之非放射 性同源物）反應。 套组 本發明之另一態樣係關於進行如本文中所述之親核取代 反應及/或純化程序之套組。 熟習此項技術者將易於瞭解到，可提供隨時可用之如本 發明方法中所使用之前驅物S-L-M ’或套組或者可含有諸 如Μ(視情況以及S-L)或L-M(視情況以及S)及在一些狀況下 僅S之一些反應物或元件。另外應瞭解，S_L_M(相應地 Μ、S-L、L-M及S)之前驅物有時將以經修飾形式傳遞，例 如與其抗衡離子或相應地在S-L之狀況下將由μ置換或在S 之狀況下將由Μ或L-M置換之離去基或在Μ或L-M之狀況下 經S-L或S取代之離去基組合。該等離去基之非限制性實例 為鹵離子部分。 根據本發明之一些實施例，套組可含有呈任何合適組合 139706.doc • 40· 201006788 之化合物Μ、S-L及L-M及/或S-L-M，且另外可視情況包含 物質X或諸如X*或X**之X之前驅物。詳言之，若放射性物 質X具有適於容納、製造、釋放、運送及接收套組之較長 半衰期’則其可與套組一起供應，但若放射性X必須在使 用現場產生（例如由迴旋加速器產生），則亦可不含放射性 X。

在本發明之一些實施例中，套組可更進一步含有適於進 行如本文中所揭示之兩步純化之純化部分P。 套組有時可更進一步包含提及合成S_L_M之一或多個相 應地合適S-L或S部分或對應物及進行該合成之反應條件的 產品手冊。該產品手冊視情況可描述一或多種如何進行 S-L-Μ之合成之實驗性方案及/或一或多種如何進行本發明 之親核取代反應之實驗性方案（亦即，一或多種如何進行 相應S-X或S-X，之合成之實驗性方案）及/或一或多種進行 s-χ之純化之實驗性方案。此外，在某些實施例中，產品 手冊可進一步描述一或多種如何進行含M物質與P之偶合 反應及/或含Μ-P物質之兩步純化的實驗性方案。此外 〇 品手冊可視情況指定組份之儲存條件。 另外，進行根據本發明之實施例之方法的套組可進—步 包含如本文中所述之親核劑X或X之前驅物。 , 應瞭解，套組中所包括之一或多種化合物係以單— 混合物之-部分傳遞或單獨封裝於—個或複數個 中。在-些情形下，當套組將進—步包含_可溶4 物及/或合適反應介質時為有利的。 牙 139706.doc -41 · 201006788 本發明之套組可進一步包含由如本文中所述之純化程序 分離含Μ物質與不含純化部分M之物質的液體萃取相或製 備該液體萃取相之化合物。 視情況，套組可進一步包含至少一種如本文中所述分離 含Μ物質與不含純化部分M之物質的萃取樹脂及/或套組可 包含在反應混合物内達成使含M物質沈澱而不含純化部分

Μ之物質仍可溶之條件的化合物。該等化合物可為調節pH 值之酸或鹼、調節之有機溶劑、調節反應混合物之離子強 度之鹽。 在另一實施例中，套組將亦包括包含適於與含河物質之 純化部分Μ上之反應性基團共價結合以分離含M物質與不 含純化部分之物質之互補反應性基團的樹脂。 本發明之套組可包含多種呈一或多種隨時可用形式之溶 液（亦即，所有組份均以進行本發明方法之所期望濃度存 在）的化合物或介質，或套組可含有一種或若干種呈在使 用前需用預定量之溶劑稀釋之濃溶液形式的化合物或介 質。忒儲備溶液之濃度可在（但不限於）隨時可用溶液之濃 度的1.5倍、2倍、2.5倍、5倍、10倍、50倍、1〇〇倍或1〇〇〇 倍範圍内。或者，套組可包含一種或若干種呈需用合適溶 劑溶解至供本發明方法使用之適當濃度之乾燥形式或凍乾 形式的化合物或介質。 應瞭解，本文中所述之所有較佳化合物以及純化缺乏純 化部分Μ之物質之較佳介質及實施例均可包括在本發明之 套組内。 139706.doc -42- 201006788 雖然通常較佳地各組份、各乾燥組份、各儲備溶液或隨 ° ,冷液（諸如反應介質或液體萃取相）應單獨置放於 密封谷t ’但熟習此項技術者將易於瞭解到其他組合及 封裝選擇亦有可能 A且適用於某些情形。舉例而言，前驅物 S-L-M可早已與反應混合物組合。

L-M ❿ L-M為本發明之基本部分。實際上，l_m允許移除任何 3職質。在如以上所定義之更廣泛實施例中，L與至少 一個純化部分Μ連接，亦即，l_m亦可為⑽，其中χ為〇 至6。 離去基L較佳選自由以下各基團組成之群：_〇s〇2如 _N(R)2+-、-N(烷基）2R+-、R_Ri_I+_

、 或 其中Rl為芳基、雜芳基、經取代芳基或經取代雜芳基， 其中X為CH或N， :中R獨立地選自Cl-Cl5烷基、Ci_Ci5烯基、。丨^炔基、 方烷基、芳基、芳基·胺甲醯基、芳基_胺甲醯基_Ci_Ci〇烷 基、雜芳基、雜芳基烷基、Cl_Ci()烷基_雜芳基、雜 芳基-胺曱醯基、雜芳基-胺曱醯基_Ci_Ci〇烷基，所有該等 基團均可視情況經取代，或R為與M鍵結之直接鍵^ L例如 139706.doc •43- 201006788

R

M為純化部分。M較佳包含至少_肺，其中n為陽離子 部分、陰離子部分、兩性離子部分或離子液體部分。 N較佳為PEG鍵、芳基、雜芳基、芳烧基、#氮基、块 基、銨、鱗、鋏衍生物，所有該等基團均可視情況經 代。 其他非限制性實例為膦、活化酯、胺、α酮酸、胲、生 物素、抗生蛋白鏈菌素、His標記、異氰酸酯、異硫氰酸 酯、硫氰酸酯、氰酸酯、磺酸酯、硫醇、羥基 '醛、酮、 醯肼、肼、腙、苯肼、胺基脲、胺氧基、二胺基硫脲、順 丁烯二醯亞胺、氧化腈。 Μ較佳包含1至3個N。Μ更佳包含單個N部分。 X較佳為1至3。X更佳為1或2。X甚至更佳為1。 本發明進一步由以下經編號之實施例說明： 1 · 一種製備藥物S-X之方法，其中前驅物質S-L-M之部分 L-M經由液相親核取代經反應物X置換以形成該藥物s-X及物質L-M，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與S共 價連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部分Μ之物質 139706.doc -44- 201006788 與不含該純化部分Μ之其他物質分離之特徵的純化部 分；且 其中S-X視情況進一步反應以得到最終產物s_x,。 2. 一種製備及純化藥物S-X之方法’其中前驅物質s_l_m 之部分L-M經由液相親核取代經反應物X置換以形成談 藥物S-X及物質L-M，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與§共 價連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部分μ之物質 與不含該純化部分Μ之其他物質分離之特徵的純化部 分；且 其中S-X視情況進一步反應以得到最終產物s-X，；且 其中任何仍含該純化部分Μ之物質（含Μ物質）係藉由利 用純化程序選擇性地與不含該純化部分Μ之物質、較 佳S-X分離。 3·根據實施例1或實施例2之方法，其中該液相親核取代 反應為可溶性支撐反應。 4. 一種自包含S-X、S-L-M及視情況L-M之液相反應混合 物純化藥物S-X之方法，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在由液相親核取代反應使X與S連 接之前另外與S共價連接的離去基；且 Μ為與L共價結合且具有允許含有該純化部分Μ之物質 139706.doc -45- 201006788 與不 分； 含該純化部分M之其 他物質分離之特徵的純化部 «亥方法係藉由利用姑/ 用純化程序選擇性分離任何含有該純 化部分河之物質與S-X。 5. 根據實施例1至4中 _ . y , ,, 中任一實施例之方法，其中該親核反 應係在均相中進行。 6. 根據實施例1至5中任一實施例之方法，其中該純化部 分Μ包含可㈣與離去基L共價連接之官能基且進一步 馨 包含選自由以下各物組成之群的純化元件Ν: 陽離子部分 '陰離子部分、兩性離子部分、離子液體 部分Ν ; 適於與金屬離子形成螯合物之元件Ν; 或比S大至乂3倍、較佳5倍或甚至1〇倍或丨^倍之元件 Ν ;或 可使得3 Μ物質自調節至使含Μ物質沈厥而s_x留在溶 液中之條件的反應混合物沈澱出之元件N;或 包含能夠與互補樹脂結合反應性基團形成共價鍵之反 應性基團的元件N ;或 包含能夠與另一純化部分p之互補反應性基團形成共價 鍵之反應性基團的元件N。 根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該純化程 序包含液-液相萃取，其中含質經萃取且不含純化 部分Μ之物質基本上餘留在反應混合物中，或其中不 3純化部分Μ之物質經萃取且含Μ物質餘留在反應混 139706.doc -46· 201006788 合物中。 8·根據實施例7之方法，其中若X為放射性同位素或包含 放射性同位素’則萃取介質不含可經歷與放射性同位 素交換之X之非放射性同源物。 9_根據實施例2至8中任一實施例之方法，其中該萃取方 法依賴於含Μ物質對液體萃取相之親和力，而不含純 化部分Μ之物質基本上不可萃取於該液體萃取相中。 0 1〇·根據實施例7或實施例8之方法，其中該萃取方法依賴 於含Μ物質對「離子液體」液體萃取相之親和力，而 不含純化部分Μ之物質基本上不萃取於該r離子液 體」液相中。 11·根據實施例10之方法’其中包含帶電部分Μ之含Μ物 質經萃取於「離子液體」相中。 12.根據實施例1 〇或實施例丨i之方法，其中包含「離子液 體部分」之含Μ物質經萃取於「離子液體」相中。 鲁 13 ·根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該純化程 序包含含Μ物質之固-液相萃取，而不含純化部分μ之 物質餘留在反應混合物中。 14_根據實施例13之方法’其中若X為放射性同位素或包 含放射性同位素，則固體樹脂或其上所連接的部分不 含可經歷與放射性同位素之交換反應之χ的非放射性 同源物。 15.根據實施例13或14之方法，其中該萃取方法依賴於含 Μ物質對陽離子交換劑或陰離子交換劑之親和力，而 139706.doc -47- 201006788 不含純化部分M之物質基本上展示對該樹脂無親和 力。 16·根據實施例7至15中任一實施例之方法，其中該萃取方 法係基於陽離子-陰離子吸引力且該純化部分M包含陽 離子部分N。 17·根據實施例7至15中任一實施例之方法，其中該萃取方 法係基於陽離子-陰離子吸引力且該純化部分M包含陰 離子部分N。 18.根據實施例13至14中任一實施例之方法，其中該萃取 方法依賴於含Μ物質對與樹脂結合之金屬離子的螯合 作用。 19 ·根據實施例18之方法，其中μ包含His標記且該與樹脂 連接之金屬離子為Ni。 20. 根據實施例13至14之任一實施例之方法，其中該萃取 方法依賴於Μ與結合於樹脂之互補化合物之間的非共 價親和力，其中包括凡得瓦爾力、離子相互作用。 21. 根據實施例20之方法，其中含生物素且該與樹脂 結合之互補化合物為抗生物素蛋白或抗生蛋白鏈菌 素。 22. 根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該純化程 序包含調節該反應混合物至使得含Μ物質沈澱而不含 純化部分Μ之物質仍可溶之條件。 23. 根據實施例22之方法’其申該反應混合物之ρΗ值、溫 度及/或離子強度經調節至使得含M物質沈澱而不含純 139706.doc -48· 201006788 化部分Μ之物質仍可溶之條件及/或添加特定離子以使 含Μ物質沈殿而不含純化部分μ之物質仍可溶。 24·根據實施例22或實施例η之方法，其中該沈澱之含Μ 物質係藉由過濾或離心移除。 25. 根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該純化程 序包含藉由尺寸大小排除來分離含]^物質與不含部分 Μ之物質。 26. 根據實施例25之方法，其中不含部分Μ之物質係藉由 超濾或尺寸大小排除層析與Μ物質分離。 27. 根據實施例25或實施例26之方法，其中Μ包含聚乙二 醇部分。 28. 根據實施例25至27中任一實施例之方法，其中該純化 部分Μ之分子量比s之分子量大約至少2倍、4倍、6 倍、10倍、20倍、50倍或1〇〇倍。 29·根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該含 質在該純化部分Μ上包含反應性基團，且該純化程序 包含使該含Μ物質經由該反應性基團與包含互補反應 性基團之樹脂反應以使該含質與該樹脂共價連接 且隨後自不含純化部分Μ之物質中移除含Μ物質-樹脂 產物。 30.根據實施例29之方法，其中該含Μ物質-樹脂產物之移 除係藉由過濾或離心進行。 3 1 ·根據實施例29或實施例30之方法，其中該等互補反應 性基團係選自由以下各基團組成之群：醛/胺氧基、疊 139706.doc -49· 201006788 氮化物/炔、疊氮化物/膦、活化酯/胺、α酮酸/胲、生 物素/抗生蛋白鏈菌素、His標記/Ni2+、（第一胺或第二 胺v異氰酸酯、胺/硫氰酸酯、續酸酯/硫醇、續酸酯/ 羥基、（醛或酮基）/(胺、醯肼、肼、苯肼、胺基脲、胺 氧基或二胺基硫脲）。 32. 根據實施例2至6中任一實施例之方法，其中該純化以 兩個步驟進行’第一步為使部分Μ經由反應性基團與 第一純化部分Ρ共價連接，其中該部分ρ包含互補反應 性基團及至少一個純化元件Q。 33. 根據實施例32之方法，其中卩包含至少一個經鹵素取 代之碳部分。 34. 根據實施例33之方法，其中該鹵素為氟。 35. 根據實施例33或實施例34之方法，其中該碳部分係經 至少一個、較佳至少兩個且更佳至少三個氟原子取 代。 36_根據實施例33至35中任一實施例之方法，其中該碳部 分係經全氟化。 37.根據實施例1至36中任一實施例之方法，其中該離去基 L係選自由以下各基團組成之群：-〇s〇2R…_N(R^+、 -N(烷基）2R+-、

139706.doc •50· 201006788 其中R獨立地選自視情況經取代之Ci_Ci5烷基、Ci_Ci〇 烷基芳基、芳基、芳基烷基、Cl_Ci5烯基、Ci_Ci5炔基 或與]V[鍵結之直接鍵。 38. 根據實施例！至37中任一實施例之方法，其中若χ為放 射性同位素或包含放射性同位素，則萃取介質不含該 放射性同位素之非放射性同源物。 39. 根據實施例！至38中任一實施例之方法，其中若X為放 φ 射性同位素或包含放射性同位素，則基團Μ或基團L不 含可經歷與該放射性同位素交換之X之非放射性同源 物。 40. 根據實施例1至39中任一實施例之方法，其中s具有小 於約10,000 Da、較佳小於約5,〇〇〇 Da、更佳小於約 2,500 Da且最佳小於約1，5〇〇 Da之分子量。 41. 根據實施例1至40中任一實施例之方法，其中s係選自 由以下各物組成之群：合成小分子、醫藥活性化合物 0 (藥物）、代謝物、信號轉導分子、激素、肽、蛋白 質、轉運體或酶基質、受體拮抗劑、受體促效劑、受體 反向促效劑、維生素、必需營養素、胺基酸、脂肪酸、 脂質、核酸、單醣、二醣、三醣或多醣及類固醇。 42. 根據實施例1至41中任一實施例之方法，其中s為特異 性結合哺乳動物身體内之目標位點之靶向部分。 43. 根據實施例42之方法，其中S特異性結合優先表現於哺 乳動物身體内之病理學位點處之受體或酶或整合素或 由優先表現於哺乳動物身體内之病理學位點處之轉運 139706.doc -51 · 201006788 體特異性轉運，較佳其中該受體或酶或整合素或轉運 體僅表現於該哺乳動物身體内之病理學位點處。 44. 45. 根據實施例1至43中任一實施例之方法，其中s特異性 結合感染、炎症、癌症、轉移、血小板凝集、血管生 成、壞死、局部缺血、組織缺氧、血管生成性血管、 阿茲海默氏病斑、動脈粥樣硬化斑、胰島細胞、血 栓、生長抑素受體、血管活性腸肽受體、D受體、口受 體、GRP受體、周邊苯并二氮呼受體、雌激素受體、 孕酮爻體、GLP-1受體、g蛋白偶合受體、血清素轉運 體、神經腎上腺素轉運體、多巴胺轉運體、LAT1轉運 體、胺基酸轉運體、糖轉運體、凋亡細胞、巨噬細 胞、嗜中性白血球、EDB纖維結合蛋白、受體酪胺酸 激酶、解離酶、合成酶、磷脂醯絲胺酸、psMA或心臟 交感神經元之位點。 根據實施例40至44中任一實施例之方法，其中s係選自 由以下各物組成之群：合成小分子、醫藥活性化合物 (藥物）、肽、代謝物、信號轉導分子、蛋白質、受體 拮抗劑、受體促效劑、受體反向促效劑、維生素、必 需營養素、胺基酸、脂肪酸、脂質、核酸、類固醇、 激素、葡萄糖、半乳糖、果糖、甘露糖醇、蔗糖、水 蘇糖、山梨糖及其衍生物、麩醯胺酸、糙胺酸、酪胺 酸、白胺酸、曱硫胺酸、色胺酸、乙酸鹽、膽鹼、胸 普、葉酸鹽、曱胺嗓呤、Arg_Gly-Asp肽、趨化性肽、 a促黑素狀、生長抑素、鈴蟾素、人類胰島素原連接肽 139706.doc •52· 201006788

及其類似物、GPIIb/IIIa結合化入仏 。物、PF4結合化合 物、ανβ3、ανβ6或α4β1整合素結人 一 e化合物、生長抑素 受體結合化合物、GLP-1受體結合 σ物、σ2受體结 合化合物、σΐ受體結合化合物、周 、 η透本并二氮呼受體 結合化合物、表皮生長因子受體結合化合物、讀^士 合化合物、雌激素受體結合化合物、雄激素受體Μ 化合物、血清素轉運體結合化合物、神經腎上腺素轉 運體結合化合物、多巴胺轉運體結合化合物、⑽轉 運體結合化合物及其任何組合。 46.根據實施例〗至42中任一實施例之方法’其中s_x以允 許估算器官中之局部組織灌注之方式累積於主要器官 中。 47·根據實施例U46中任—實施例之方法，其中該親核試 劑X為放射性同位素或包含放射性同位素。 48.根據實施例47之方法，其中該放射性同位素係選自由 以下各元素組成之群：99mTc、Μ、、丨、2()1τι、 125π 123j、 89Sr、 90γ、 213Bi 67Ga 124j ^ izdj 131 153Sm ' 186Re 67^.. 64, 'Cu、 212Bi .Cu :1 34C1 > uc ' 32 _P、72As、76Br 188Re、212Bi、213Bi、89Zr、86Y 192Ir、165Dy、177Lu、117mSn 、225Ac、223Ra、169γΐ)、68(3a 及 49. 根據實施例47之方法’其中該放射性同位素為放射性 鹵素。 50. 根據實施例49之方法，其中該放射性鹵素係選自由 139706.doc •53- 201006788 UF、76ΒΓ、丨、、％、125l、丨 31l、34C1、211At 組成之 群。 51. 根據實施例5〇之方法，其中該放射性同位素為！8f。 52. 根據實施例1至46中任一實施例之方法，其中該親核試 劑X為lS素，較佳地其中該親核試劑X為氟或氟離子。 53· —種進行根據實施例！至W中任一實施例之方法的套 組’其包含純化部分Μ或部分L-M。 54. —種進行根據實施例1至52中任一實施例之方法的套 組，其包含S-L及純化部分μ。 55. —種進行根據實施例1至52中任一實施例之方法的套 組，其包含S-L-M。 56. 根據實施例53至55中任一實施例之套組，其進一步包 含X或X之前驅物。 57. 根據實施例53至56中任一實施例之套組，其進一步包 含適於進行兩步純化之純化部分ρ。 58. 根據實施例53至57中任一實施例之套組，其進—步包 含描述一或多種如何進行S_X合成之實驗性方案及視情 況套組組份之儲存條件的產品手冊。 59. 根據實施例53至58中任一實施例之套組，其進一步包 含液體可溶性支撐物。 60. 根據實施例53至59中任一實施例之套組，其進—步包 含藉由如實施例7至10、16或17中任一實施例中所定^ 之純化程序分離含Μ物質與不含純化部分河之物質的 液體萃取相。 139706.doc •54- 201006788 61.根據實施例53至59中任一實施例之套組，其進一步包 含至少一種藉由如實施例13至21中任一實施例中所定 義之純化程序分離含M物質與不含純化部分M之物質 的萃取樹脂。 • 62.根據實施例53至59中任一實施例之套組，其進一步包 含一或多種達成如實施例22至24中任一實施例所定義 之反應混合物内之條件的化合物。 ❿ 63.根據實施例53至59中任一實施例之套組，其進一步包 含至少一種包含適於與如實施例29至31中任一實施例 中所定義之含Μ物質之純化部分M上的反應性基團共 價結合之互補反應性基團之樹脂。 64·根據實施例53至63中任一實施例之套組，其進一步包 含反應介質。 65. 根據實施例53至64中任一實施例之套組，其進一步包 含描述-或多種進行根據實施例【至52中任一實施例之 • 冑核取代及/或純化程序之實驗性方案及視情況組份之 儲存條件的產品手冊。 66. 根據實施例53至65t任—實施例之套組，其中該套組 之-或多個組份以隨時可用於根據實施例㈣中任一 實施例之方法中之溶液形式存在。 67. 根據實施例53至65中任-實施例之套組，其中該套組 之-或多個組份以待稀釋至供根據實施例GW中任一 實施例之方法使用之適當濃度的濃儲備溶液形式存 在0 139706.doc -55- 201006788 $谷液彼此獨立地具 、10倍、50倍、 68.根據實施例67之套組，其中各儲傷 有選自由1.5倍、2倍、2.5倍、5倍 倍及1000倍組成之群之濃度。 69.根據實施例53至68中任一實施例之套組，纟中該套租 之一或多個組份以待用溶劑溶解至供根據實施例⑴] 中任-實施例之方法使用之適當濃度的乾燥或滚乾形 式存在。 7〇·根據實關53⑽中任—實施狀套組，其中該套組

之各組份、各乾燥組份及/或各儲備溶液均單獨置放於 密封容器中。 71. 一種如實施例6中所定義之純化部分M的用途，其係用 於根據實施例1至52中任一實施例之方法中。 熟習此項技術者將易於瞭解，在不悖離本發明之精神及 範疇之情況下，本文中所述之實施例可能存在許多修改及 變化。在下文非限制性實例中進一步說明本發明及其優 勢。

實例 實例1 :合成炔型化合物放射性標記前驅物4-(甲基（丙-2-炔基）胺甲醢基）苯磺酸2-(萘-2-基）乙酯（S-L-M) 以下流程5中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 4-(甲基 (丙-2-炔基）胺曱醯基）笨磺酸2-(萘-2-基）乙酯（4)作為放射 性標記前驅物之示意性概述。 139706.doc -56- 201006788

流程5 : 〇c»o PCI5 甲基炔丙基胺 曱笨,95SC 定量 DCM,-78°C至室溫 cAei分離產率61。/〇

萘乙醇i 吡啶或 DCM/TEA/DMAP 分離產率32%

合成4-(甲基（丙-2-炔基）胺甲醯基）苯-1-磺醯氣（3)

將4-氯磺醯基苯甲酸（1)(11.94 g，54.1 mmol)及五氣化 磷（36.06 g，173.1 mmol)懸浮於甲苯中且加熱至95°C之外 部溫度歷時1 h。冷卻至周圍溫度後，將反應混合物傾入 冰水（250 mL)中，用甲苯（3x150 mL)萃取，乾燥（硫酸鈉） 且在真空中蒸發經合併有機層，得到中間物2。NMR分析 展示反應完成。將該物質溶解於DCM(150 ml)與三乙胺 (7.53. mL，5.48 g，54.11 mmol)之混合物中。在-78°C 下逐 滴添加甲基诀丙基胺（4,73 mL，3.74 g，54.11 mmol)且經1 h 使反應混合物溫至室温。傾入冰水（200 mL)中，用 DCM(3 XI 50 mL)萃取，乾燥（硫酸鈉）且在真空中蒸發有機 溶劑，得到粗物質3(14.6 g，53.7 mmol，99%)。藉由自動 管柱層析（Si02，於DCM中之0-2%甲醇）純化後，分離出呈 無色固體狀之3(8.98 g，33.0 mmol，61%)，根據NMR及 DSC純度> 95%，而HPLC-MS指示純度僅> 80%。 139706.doc •57· 201006788 合成4-(甲基（丙-2-炔基）胺甲醸基）苯磺酸2_(萘_2_基）乙酯（4) 將 3(2.5 g ’ 9.2 mmol)及萘乙醇（L9 g，11.0 mmol)溶解於 DCM(5 mL)中。在〇°c下’添加1塊DMAP晶體（約1 mg)且隨 後逐滴添加三乙胺（2.58 mL，1.85 g，18.4 mmol)。在周圍溫度 下攪拌24 h後，在真空中在<30°c下蒸發溶劑，得到粗物質 4(5.85§，最大9.2 111111〇1，定量）。藉由自動管柱層析（以〇2， 於0〇河中之〇-1〇〇/0曱醇）分離出純4(1.18§，2.9 111111〇1，32%)。 合成4-(甲基（丙-2-炔基）胺甲醯基）苯磺酸2_(萘_2_基）乙酯 將萘乙醇（0.7 g，4.0 mmol)溶解於吡啶（15 mL)中。在 0C下，整批添加3(1 g’ 3.7 mmol)且將混合物攪拌1 h。隨 後將反應燒瓶置放於5°C之冰箱中歷時120 h。將反應混合 物傾入冰水中’攪拌10分鐘且用乙醚（3x100 mL)萃取。將 經合併有機層用10% HC1水溶液（100 mL)、水（1〇〇 mL)洗 滌且用硫酸鈉乾燥。在真空中在周圍溫度下蒸發溶劑，得 到粗物質 4(0.44 g，1.1 mmol，29%)。 實例2 :製備疊氮化物-樹脂 三氟甲磺醢基疊氮化物（triflyl azide) 將疊氮化鈉（20.0 g，318.1 mmol)溶解於水（50 ml)中， 添加DCM(80 ml)且在冰浴中冷卻混合物。經丨〇分鐘緩慢向 反應混合物中添加三氟甲基磺酸酐（10 m卜59.0 mmol)。 自冰浴中移出反應且在周圍溫度下攪拌25 分離水相與 有機相’且用DCM(3x30 ml)洗滌水相。將含三氟甲磺醯 基疊氮化物之DCM有機相合併，用飽和Na2C03洗滌且不 經進一步純化即使用（160 ml)。 139706.doc • 58 - 201006788 (a) 4氣化物-NovaSynTG◎樹脂 向 H2〇(5 ml)及 MeOH(l〇 ml)中添加 脂 (500 mg，0.44 mmol/g)、K2C〇3(311 mg，2.25 mmol)及 Cu(OAc)2(3.0 mg，0.01 5 mmol)。添加三氟曱續驢基疊氮 化物之DCM溶液（8 ml)且將混合物密封且儲存隔夜。渡出 溶液，用DMF(6x)及DCM(6x)洗滌樹脂，且隨後將樹脂在 真空中乾燥隔夜。對樹脂進行之游離胺基之凱撒測試 (Kaiser test)為陰性（將少許樹脂珠粒轉移至試管中，於 H20/吡啶中之KCN溶液、於乙醇中之80%苯酚溶液及於乙 醇中之6%茚滿三酮（ninhydrin)溶液各添加3滴。隨後在 120°C下加熱混合物5 min。未能觀察到藍色）。 (b) 疊氮化物-NovaPEG®樹脂 向 H20(55 ml)及MeOH(110 ml)中添加NovaPEG◎樹脂(4.0 g， 0.6 mmol/g)、K2C〇3(3.4 g，24.6 mmol)及 Cu(OAc)2(33.0 mg，0.015 mmol)。添加於DCM(90 ml)中之三氟甲橫醯基 疊氮化物且將混合物攪拌隔夜。濾出溶液，用DMF(6x)及 DCM(6x)洗滌樹脂，且隨後將樹脂在真空中乾燥隔夜。對 樹脂進行之游離胺基之凱撒測試（如上所述）為陰性。 實例3 :放射性氟化；製備2-(2-[18F]氟乙基）萘（S-X) 在放射性氟化反應1中，用含有5 mg Kryptofix®(K222) 及111^1(：2(：03之2.〇1111^1/3 1120/乙腈將[18?]氟化物（496.2 MBq)自QMA濾筒（經0.5 M K2C03平衡，用10 ml H20洗滌） 溶離於反應小瓶中。蒸發溶劑且在120°C下在稀薄N2氣流 下乾燥殘餘物，再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小 139706.doc •59- 201006788 瓶中添加於500 μί DMSO中之前驅物（4)(1 mg，2.5 μιηοΐ)，在60°C下將反應物攪拌5分鐘，且最後將溶液冷卻 至周圍溫度。產物混合物之逆相放射性HPLC指示64% [18F]氟化物轉化為2-(2-[18F]氟乙基）萘。HPLC條件：C-18 逆相管柱（ACE 5 C18 ; 50x4.6 mm);梯度：30%-95% B， 10 min ; 100% B，2 min ;流速=1 ml/min ;溶劑：A=於 H20 中之 0.1% TFA ; B =於 MeCN 中之 0.1%TFA。 HPLC研究中之紫外光偵測指示前驅物降解為萘乙醇 及2-乙烯基萘，該2-萘乙醇及2-乙烯基萘係經由與市售參 考化合物進行比較來鑑別（圖2)。放射性氟化後反應1溶液 中之前驅物之HPLC純度（以220 nm下量測之總HPLC峰面 積之百分比計）為25%。 在第二放射性氟化反應（反應2)中，用於H20/MeCN 1:1(2 ml)中之 7.5 mM TBAHC03 替代 KryptoHx/K2C03 溶離 QMA遽筒，且將前驅物（4)(1 mg，2.5 μιηοΐ)添加於500 pL tBuOH/MeCN 4/1中而非DMSO中。類似量加熱（60°C下5分 鐘）後，該反應具有較低放射性化學轉化率（10%)，但具有 較高量之完整前驅物（純度35%)。 在第三放射性氟化反應（反應3)中，用於H20/MeCN 1/10(1.1 ml)中之10.8 mM TBAOH溶離QMA濾筒且將前驅 物（4)(1 mg ’ 2.5 μιηοΐ)添加於 500 pL tBuOH/MeCN 9/1 中。 類似量加熱（60°C下5分鐘）後，仍觀察到較低放射性化學轉 化率（5%) ’但大體上餘留更多完整前驅物（純度72%)。三 個放射性氟化反應之結果彙集於表1中。 139706.doc -60- 201006788 表1 :基於HPLC之放射性氟化結果 反應 放射性氟化條件 轉化率％3 (產率） 放射性氟化後之前驅物°/〇 (HPLC純度） 1 K2C03/Kryptofix@，DMSO， 60〇C，5 min 64% 25% 2 TBAHCO3 * tBuOH/MeCN · 60°C，5 min 10% 35% 3 TBAOH，tBuOH/MeCN， 60〇C，5 min 5% 72% HPLC條件如實例3中所述。 化率％ =對應於[18F]產物峰之總HPLC峰面積的百分比；放射性量測偵測 前驅物％=對應於前驅物之總HPLC峰面積之百分比；在220nm下紫外光偵測 實例4:經由點擊反應（疊氮化物樹脂）純化移除前驅物 在該純化步驟中，含Μ物質經由互補反應性基團與如實 例2中所製備之樹脂鍵聯。

向放射性氟化反應1(參見實例3)中添加54.5 mg於400 μΐ DMSO中預溶脹1 〇 min之疊氤化物_N〇vaSynTG©樹脂⑷（參 見實例 2)、50 pL抗壞血酸鈉（〇·6 μ)及5〇 pL CuSO4(0.4 M)。 在周圍溫度下攪拌反應混合物，且在5 min及3〇 min時抽取 混合物樣品用於逆相HPLC分析。將各樣品用DMS〇以〗：2〇 稀釋且穿過0.2 μιη針筒過濾器（pTFE膜），之後注射於 HPLC 上。 對放射性氟化反應2進行類似純化程序，其中例外為疊 氮化物-NovaSynTG◎樹脂（a)(55 2 mg)係在 4〇〇 μ tBuOH/MeCN 8/2中而非在DMS〇中預溶脹，且在〇、15 min 及30 min時取樣品用於逆相HP L C分析。 對放射性氣化反應3進行類似純化程序，其中例外為 49.5 mg疊氮化物-NovaPEGV)樹脂（參見實例2)係用於 139706.doc -61 - 201006788 400 μΐ tBuOH中，且在0、15 min及30 min時取樣品用於逆 相HPLC分析。 HPLC結果展示早在添加樹脂後5分鐘時，反應1溶液中 所存在之285%之前驅物已耗盡。類似地，所有其他樣品 之HPLC分析指示>91%之前驅物自反應溶液中移除（表2)。 相同HPLC注射之放射性量測監測指示點擊純化方法不會 大體上耗盡完全量之經放射性標記之產物（表2)。用紫外光 偵測及放射性量測偵測之純化研究之代表性HPLC層析圖 分別展示於圖3及圖4中。利用非疊氮化物取代樹脂（亦 即，具有胺基官能基之樹脂）但利用等效條件之對與反應3 等效之另一放射性標記反應的對照純化實驗展示30分鐘後 餘留78%前驅物（圖4)。 表2:放射性氟化反應純化結果。前駆物=4-(甲基（丙-2-炔 基）胺甲醯基）苯磺酸2-(萘-2-基）乙酯（4)。[18F】F產物=2-(2-[18F]氟乙基）萘 樣品(純化時間） 餘留前驅物％8 餘留[18f]f產物％b 反應1(5分鐘） 14.2 101 反應1(30分鐘） 8.3 103 反應2(15分鐘） 1.6 126 反應2(30分鐘） 0.5 149 反應3(15分鐘） 5.7 91.5 反應3(30分鐘） 7 109 a餘留前驅物％=純化之前原始前驅物HPLC峰面積之百分比；在220nm下紫外光偵測 b餘留[18F]F產物％ =純化之前原始[18F]F產物HPLC峰面積之百分比；放射性量測偵 測；衰減修正。 實例5:前驅物與疊氮化物樹脂之反應（點擊反應） 將50 mg疊氮化物-NovaPEG®樹脂在500 μί第三戊醇中 預溶脹10 min且添加1.41 mg於400 μί第三戊醇中之前驅 139706.doc -62- 201006788 物、50 pL抗壞血酸鈉（0.6 Μ)及50 pL CuSO4(0.4 Μ)。在周 圍溫度下授拌反應混合物，且在1 5 min及3 0 min時抽取樣 品用於逆相HPLC分析。將各樣品用DMSO以1:20稀釋且穿 過0.2 μιη針筒過濾器（PTFE膜），之後注射於HPLC上。 HPLC層析圖展示1 5分鐘後僅餘留 < 原始量之4%之前驅 物。在30分鐘時偵測到前驅物量未進一步減少。 實例6 :合成炔型化合物放射性標記前駆物4-(甲基-丙-2-炔基-胺甲醯基）-苯磺酸2-苯氧基·乙酯（S-L-M) 以下流程6中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 4-(甲基-丙-2-炔基-胺甲醯基）-苯磺酸2-苯氧基-乙酯（5)作為放射性 標記前驅物之示意性概述。 流程6 :

合成4-(甲基（丙-2-炔基)胺甲醢基）苯磺酸2-(萘-2-基）乙酯（4) 將萘乙醇（85 mg，0.61 mmol)溶解於D比咬（2.4 mL)中且 冷卻至0°C。向該溶液中逐份添加3(200 mg，0.74 mmol)。 在〇°C下將反應物攪拌3 h。藉由添加5 ml冰水使反應中止 且用乙醚（3x4 ml)萃取，經Na2S04乾燥，過濾且在真空中 濃縮。藉由半製備型HPLC(管柱：ACE 5 μ C18-HL 250x10 mm ; 溶劑A :水+0.1% TFA ;溶劑B : ACN/水 9/1 +0.1% TFA，流 139706.doc -63 - 201006788 速：3 ml/min，梯度：於A中之30% B，2 min ;隨後於A中之 30%至70% B，20 min)純化殘餘物，得到呈無色油狀之所期 望產物（16 mg，6%)。可見產物為旋轉異構體之混合物。 實例7 :合成疊氮化物型化合物放射性標記前騍物4-[(3-疊 氮基-丙基）-甲基-胺甲醢基】-苯磺酸2-萘-2-基-乙酯（S-L-M) 以下流程7中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 4-[(3-疊 氮基-丙基）-曱基-胺曱醯基]-苯磺酸2-萘-2-基-乙酯（7)作為 放射性標記前驅物之示意性概述。 流程7 :

合成4-丨(3-疊氮基-丙基）·甲基-胺甲趄基]-苯磺醯氣（8) 將4 -氯續酿基苯甲酿氣（2 )(780 mg，3.3 mmol)溶解於 DCM(10 ml)中，在-78°C下向其中添加（3-疊氮基丙基）曱胺 (J. Med. Chem., 1999, 42, 4749-4763 ； 390 mg » 3.4 mmol) 於DCM(5 ml)中之溶液。經1 h使反應混合物溫至室溫。傾 入冰水（100 mL)中，用DCM(3x50 mL)萃取，乾燥（硫酸鈉） 且在真空中蒸發有機溶劑，得到粗物質8。藉由管柱層析 (Si02，4:1己烷：EtOAc至100% EtOAc)純化後，分離出呈 無色油狀之8(370 mg，36%)。 139706.doc -64- 201006788 合成4-【(3-疊氮基-丙基）-甲基-胺甲醢基]-苯磺酸2-萘-2-基-乙酯（7) 將 7(50 mg，_0_16 mmol)及萘乙醇（38·1 mg，0.22 mmol) 溶解於DCM(5 mL)中。在0°C下逐滴添加三乙胺（44 eL， 0.32 mmol)。在周圍溫度下攪拌24 h後，在真空中在< 30°C 下蒸發溶劑，得到粗物質7。管柱層析（Si02，4:1己烷： 丑丈0八(：至1:1己烷土1〇入(〇後分離出純7(48.811^，68%)。 實例8 :製備炔-樹脂 (a) 炔-NovaSynTG®樹脂 將 NovaSynTG◎樹脂（1017 mg，0.53 mmol/g)在 DCM(5 ml)中溶脹30分鐘。用DMF(x5)洗滌樹脂。向樹脂中添加丙 炔酸（151 mg，2.16 mmol)及 DIC(265 mg，2.1 mmol)於 DMF(2 ml)中之溶液。在室溫下將反應混合物震盪2 h。濾 出溶液，用DMF(6x)及DCM(6x)洗滌樹脂，且隨後將樹脂 在真空中乾燥隔夜。對樹脂進行之游離胺基之凱撒測試為 陰性（將少許樹脂珠粒轉移至試管中，於h2o/吡啶中之 KCN溶液、於乙醇中之80%苯酚溶液及於乙醇中之6%茚滿 三酮溶液各添加3滴。隨後在120°C下將混合物加熱5 min。未能觀察到藍色）。 (b) 炔-NovaPEG®樹脂 將胺基 PEGA®樹脂（1.0 g，0.4 mmol/g)在 DCM(5 ml)中溶 脹30分鐘。用DMF(x5)洗滌樹脂。向樹脂中添加丙炔酸 (112 mg，1,6 mmol)及DIC(197 mg，1.56 mmol)於DMF(2 ml) 中之溶液。在室溫下將反應混合物震盪2 h。濾出溶液， 139706.doc -65- 201006788 用DMF(6x)及DCM(6x)洗滌樹脂，且隨後在真空中乾燥隔 夜。對樹脂進行之游離胺基之凱撒測試為陰性（將少許樹 脂珠粒轉移至試管中，於H20/吡啶中之KCN溶液、於乙醇 中之80%苯酚溶液及於乙醇中之6°/。茚滿三酮溶液各添加3 滴。隨後在120°C下將混合物加熱5 min。未能觀察到藍色）。 實例9 :放射性氟化；由疊氮化物前驅物（7)製備2-(2-[18F] 氟乙基）萘（S-X) 在放射性氟化反應1中，用含有5 mg Kryptofix®(K222) 及 1 mg K2C03 之 2·0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（134 MBq)自QMA濾筒（經0.5 M K2C03平衡，用10 ml H20洗滌） 溶離於反應小瓶中。蒸發溶劑且在120°C下在稀薄N2氣流 下乾燥殘餘物，再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小 瓶中添加於300 gL DMSO中之前驅物（7)(2 mg)，將反應物 在60°C下攪拌5分鐘，且最後將溶液冷卻至周圍溫度。產 物混合物之逆相放射性HPLC指示37% [UF]氟化物轉化為 2-(2-[18F]氟乙基）萘，完整前驅物為24%。HPLC條件：C-18 逆相管柱（ACE 5 C18 ; 50x4.6 mm);梯度：30%-95% B， 10 min ; 100% B，2 min ;流速=1 ml/min ;溶劑：A=於 H20 中之 0.1% TFA ; B =於 MeCN 中之 0.1% TFA。 在第二放射性氟化反應（反應2)中，用於H20/MeCN 1:1(2 ml)中之 2.3 mg Cs2C〇3 及 5 mg Kryptofix 替代 〖7?化£^/〖2(：03溶離(5]^入濾筒，且將前驅物（7)(2 111§)添加 於300 μι DMSO中。類似量加熱（60°C下5分鐘）後，該反應 具有較低放射性化學轉化率（19%)，但具有較高量之完整 139706.doc -66- 201006788 前驅物（純度80%)。 在第三放射性氟化反應（反應3)中，用8 μΐ於H20/MeCN 1/3(2 ml)中之40% TBAHC03溶離QMA濾筒且將前驅物 (7)(2 mg)添加於300 pL戊醇/MeCN 4/1中。類似量加熱 (60°C下5分鐘）後，仍觀察到較低放射性化學轉化率（5%)， 但大體上餘留更多完整前驅物（純度94%)。四個放射性氟 化反應之結果彙集於表3中。 在第四放射性氟化反應（反應4)中，用8 μΐ於H20/MeCN 1/3(2 ml)中之40% TBAOH溶離QMA濾筒且將前驅物（7) (2 mg)添加於300 μί戊醇/MeCN 4/1中。類似量加熱（60°C 下5分鐘）後，仍觀察到較低放射性化學轉化率（5%)，但大 體上餘留更多完整前驅物（純度73%)。四個放射性氟化反 應之結果彙集於表3中。 表3:基於HPLC之放射性氟化結果 反應 放射性氟化條件 轉化率％3 (產率） 放射性氟化後之前驅物％ (HPLC純度） 1 K2C〇3/Kryptofix@，DMSO， 60〇C，5 min 37% 24% 2 Cs2C03/Kryptofix®，DMSO， 60〇C，5 min 19% 80% 2 TBAHC03 ’ 戊醇/MeCN， 60°C，5 min 5% 94% 3 TBAOH，戊醇/MeCN， 60〇C，5 min 5% 73% HPLC條件如實例9中所述。 &化率％ =對應於[]8F]產物峰之總Hplc峰面積的百分比；放射性量測偵測 前驅物對應於前驅物之總HPLC峰面積之百分比；在254rnn下紫外光偵測 實例10:合成炔型化合物放射性標記前驅物4-(二甲基-丙· 2-炔基銨）苯甲酸乙酯三氟乙酸鹽（S_L_m) 139706.doc • 67- 201006788 以下流程8中給出合成放射性標記前驅物s_l_m 4 (一甲 基-丙-2-炔基銨）苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽（9)作為放射性標記 前驅物之示意性概述。 流程8 :

合成（4-乙氧基羰基-苯基）·二甲基丙-2-炔基-鞍（9) 將甲烷磺酸丙-2-炔基酯（l〇)(J. 〇rg. Chem.，1978, 43(4^ 555-560 ; 4.1 g，41 mmol)及4-二甲基胺基笨甲酸乙醋（8g， 34 mmol)溶解於曱苯（50 ml)中。在回流條件下將所得溶液 加熱80 h。將反應物用EtOAc(100 ml)稀釋且用水（3x50 ml) 洗滌。使水相經受製備型HPLC純化（管柱：xBridgerl C18 5 μιη，100x30 mm ;溶劑 A :水+0.1% TFA ;溶劑B : ACN/ 水 9/1 +0.1% TFA，流速：50 ml/min，梯度：於A中之〇% B，1 min ;隨後於A中之0%至50% B，7.5 min)，得到呈紅 棕色油狀之所期望產物9(4.1 g，37%)。 實例11 :放射性氟化；製備4-[18F]氟苯甲酸乙酯（S-X) 在放射性氟化中，用含有5 mg Kryptofix®(K222)及1 mg K2C03 之 2_0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（201 MBq)自 QMA濾筒（經〇·5 M K2C03平衡，用1〇 ml H20洗滌）溶離於 反應小瓶中。蒸發溶劑且在12(TC下在稀薄N2氣流下乾燥 殘餘物’再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小瓶中添 139706.doc -68· 201006788 加於500 pL DMSO中之前驅物（9)(5 mg)，在120°C下將反應物 攪拌10分鐘。藉由HPLC分析反應混合物，展示F18氟化物之 併入量極低（約1%)。HPLC條件：C-18逆相管柱（ACE 5 C18 ; 5〇x4.6 mm);梯度：5%-95% B，7 min ;流速=2 ml/min ;溶 劑：A=於 H20 中之 0.1% TFA ; B=於MeCN 中之 0.1% TFA。 實例12:合成離子液體型化合物放射性標記前驅物三氟乙 酸3-甲基-l-[4-(2-萘-2-基-乙氧基磺醯基）-丁基】-3H-咪唑-1-鑌鹽（S-L-M) 以下流程9中給出合成放射性標記前驅物S-L-M三氟乙酸 3 -曱基- l- [4-(2 -奈-2-基-乙氧基續酿基）-丁基] 鑌鹽（14)作為放射性標記前驅物之示意性概述。 流程9 :

合成1-(4-磺醯基丁基）-3-甲基咪唑鑌兩性離子（11) 向經攪拌之1，4-丁基砜（12 ml，118 mmol)中添加1-甲基 139706.doc •69- 201006788 味峻。在室溫下將反應物攪拌96 h。反應混合物變成固 體。向固體中添加乙喊且進行超音波處理。向所得懸浮液 中添加甲苯且劇烈攪拌1 h。藉由過濾收集固體且用甲笨 及隨後用乙醚重複洗滌。在真空中乾燥固體，以定量產率 得到所期望產物11。 合成二氟甲烷磺酸1_(4_磺醢基丁基）_3_甲基咪唑鑌鹽（12) 向經攪拌之K4-磺醯基丁基）_3_甲基咪唑鏽兩性離子 (11)(2.412 g，11 mmol)中添加三氟甲烷磺酸（〇96加，u mmol)。將所得懸浮液在4〇〇c下攪拌16 h。將反應混合物 用甲笨稀釋且經由玻璃絨（glass w〇〇1)過濾。用甲苯重複洗 滌所得離子液體且傾析出甲苯層。用乙醚重複洗滌及傾 析。在真空中乾燥離子液體，得到所期望產物1 14 77%)。 8 合成二氟甲烧續酸1-( 丁基-4-確酸氣）_3·甲基味唾鎮鹽（13) 向離子液體（12)(350 mg，0.95 mmo丨）中添加亞硫醯氣 (5 ml)。在回流條件下將所得溶液加熱6 h。將反應混合物 在真空中濃縮且隨後用曱苯重複洗滌，且傾析出甲苯層。 用乙趟重複洗滌及傾析。在真空中乾燥離子液體，得到所 期望產物 13(367 mg，100%)。 合成二氟乙酸3-甲基-1-[4-(2-萘-2-基-乙氧基確醯基）丁 基】-3Η-咪咬-1·鑌鹽（14) 在〇°C下向於DCM(2 ml)中之離子液體（14)(198 mg，〇 51 mmol)中添加2_萘乙醇（80 mg，0.46 mmol)，接著添加三乙 胺（1 60 μΐ ’ 1.15 mmol)。將反應物攪拌16 h。將反應混合 139706.doc • 70· 201006788 物用EtOAc稀釋，用1 M HC1洗滌，經Na2S04乾燥，過濾 且在真空中濃縮。藉由半製備型HPLC(管柱：Chromolith® 半製備型 RP-18e 100x10 mm ;溶劑 A :水+0.1% TFA ;溶 劑B : ACN/水9/1 +0.1% TFA，流速：3 ml/min，同溶劑： 於A中之39% B)純化粗殘餘物，得到呈無色油狀之所期望 產物（46 mg，19%)。 實例13 :放射性氟化；製備2-(2-[18F]氟乙基）萘（S-X) 在放射性氟化中，用含有5 mg Kryptofix@(K222)及1 mg K2C03 之 2.0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（599 MBq)自 QMA濾筒（經0·5 M K2C03平衡，用10 ml H20洗滌）溶離於 反應小瓶中。蒸發溶劑且在120°C下在稀薄N2氣流下乾燥 殘餘物，再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小瓶中添 加於300 μί MeCN中之前驅物（14)(4 mg)，在90°C下將反 應物攪拌20分鐘。藉由HPLC分析反應混合物，展示F1 8氟 化物之極佳併入（100%)。HPLC條件：C-18逆相管柱（ACE 5 C18 ; 50x4.6 mm);梯度：5°/。-95% B，7 min ;流速=2 ml/min ;溶劑：A=於 H20中之 0.1% TFA ; B=於 MeCN 中之 0.1% TFA。 實例14 :利用固相萃取（SPE)移除前驅物 在該純化步驟中，含Μ物質經由互補反應性基團與固相 萃取樹脂鍵聯。 製備冷標準物於乙腈中之儲備溶液（1 mg/ml)及前驅物14 於乙腈中之儲備溶液（0.6 mg/ml)。將1 ml之各溶液充分混合 且穿過WCX、MCX或SCX濾筒。藉由HPLC分析溶離溶液。 139706.doc •71 - 201006788 表4:純化結果。前驅物=三氟乙酸3-甲基-l-[4-(2-萘-2-基-乙氧基磺醢基）-丁基]-3H-咪唑-1-鎮鹽（14)。[19F]F產物=2-(2-[19F]氟乙基）萘 SPE 餘留前驅物％a 餘留[^町罗產物％11 WCX 37 134 MCX 0 91 SCX 0 74 a餘留前驅物％=純化之前原始前驅物HPLC峰面積之百分比；在254nm下紫外光偵測 b餘留[19F]F產物％=純化之前原始[19F]F產物HPLC峰面積之百分比；在254 nm下紫外 光偵測。 實例15:合成離子液體型化合物放射性標記前驅物三氟乙 酸3-甲基-l-[4-(3-苯氧基-丙氧基磺醢基）-丁基]-3H-咪唑-1-鑌鹽（S-L-M) 以下流程10中給出合成放射性標記前驅物S-L-M三氟乙 酸3-甲基-l-[4-(3-苯氧基-丙氧基磺醯基）-丁基]-3H-咪唑-1-鑌鹽（15)作為放射性標記前驅物之示意性概述。 流程10 :

0 3-苯氧基丙-l-g| CH2CI2, NEt3 ii)HPLC 純化

15

合成三氣乙酸3-甲基- l- [4-(3 -苯氧基-丙氧基續酿基）-丁 基]-3H-咪唑-1-鑌鹽（15) 在〇°C下向所添加之3-苯氧基丙醇（200 mg，1.3 mmol)及 三乙胺（160 μΐ，1.15 mmol)於DCM(5 ml)中之溶液中添加 離子液體（13)(5 59 mg，1.44 mmol)。將反應物攪拌16 h。 139706.doc -72- 201006788 在真空中濃縮反應混合物。藉由半製備型HPLC(管柱： XBridge C18 15〇xl9 mm ;溶劑 A :水+0.1% TFA ;溶劑 B : ACN/水 9/1 +0.1% TFA，流速：21 ml/min，梯度：於A 中之1%-100% B，12.5 min)純化粗殘餘物，得到呈無色油 狀之所期望產物（295 mg，40%)。 實例16:放射性氟化；製備2-(3·丨18F]氟-丙氧基）-萘（S-X) 在放射性氟化中，用含有5 mg Kryptofix®(K222)及1 mg K2C03 之 2.0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（124-350 MBq) 自QMA濾筒（經0.5 M K2C03平衡，用10 ml H20洗滌）溶離 於反應小瓶中。蒸發溶劑且在120°C下在稀薄N2氣流下乾 燥殘餘物，再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小瓶中 添加於300 pL DMSO中之前驅物（15)(4 mg)，在120°C下將 反應物攪拌5-10分鐘。藉由HPLC分析反應混合物，展示 F18氟化物之併入（5%-20°/〇)。HPLC條件：C-18逆相管柱 (ACE 5 C18 ; 50x4.6 mm);梯度：5%-95% B，7 min ;流 速=2 ml/min ;溶劑：A=於 H20 中之 0.1% TFA ; B=於 MeCN 中之 0.1% TFA。 在第二放射性氟化反應（反應2)中，用8 μΐ於H20/MeCN 1/3(2 ml)中之40% TBAHC03溶離QMA濾筒，且將前驅物 (15)(4 mg)添加於300 pL戊醇/MeCN 4/1中。類似量加熱 (60°C下5分鐘）後，仍觀察到較低放射性化學轉化率 (39%)，但大體上餘留更多完整前驅物（純度59%)。三個放 射性氟化反應之結果彙集於表5中。隨後使反應混合物穿 過二氧化矽SPE且藉由HPLC分析溶離液。 139706.doc -73- 201006788 在第三放射性氟化反應（反應3)中，用8 μΐ於H20/MeCN 1/3(2 ml)中之40% TBAOH溶離QMA濾筒且將前驅物（15) (4 mg)添加於300 pL戊醇/MeCN 4/1中。類似量加熱（l〇〇°C 下10分鐘）後，仍觀察到較低放射性化學轉化率（21%)，但 大體上餘留更多完整前驅物（純度71%)。三個放射性氟化 反應之結果彙集於表5中。隨後使反應混合物穿過MCX SPE且藉由HPLC分析溶離液。 表5:基於HPLC之放射性氟化結果 反應 放射性氟化條件 轉化率°/〇a (產率） 放射性氟化後之前驅物％ (HPLC純度） 1 K2C〇3/Kryptofix@ > DMSO，100〇C，5 min 20% 40% 2 TBAHC03，戊醇/MeCN， 60°C ' 5 min 39% 59% 3 TBAOH，戊醇/MeCN， 60°C，5 min 21% 71% HPLC條件如實例16中所述。 8轉化率％=對應於[巧]產物峰之總紐>1^峰面積之百分比；放射性量測偵測 b前驅物％=對應於前驅物之總HPLC峰面積之百分比；在254 nm下紫外光偵測 實例17 :利用固相萃取（SPE)移除前驅物 在該純化步驟中，含Μ物質經由互補反應性基團與固相 萃取樹脂鍵聯。 製備前驅物15於乙腈中之儲備溶液（1 mg/ml)。將1 ml之 各溶液充分混合且穿過WCX、MCX、SCX或二氧化矽濾 筒。藉由HPLC分析溶離溶液。 139706.doc -74- 201006788 表6:純化結果。前驅物=三氟乙酸3-f基-l-【4-(2-萘-2-基-乙氧基磺醢基）-丁基】-3H-咪唑-1-銪鹽（15)。 固相萃取濾筒(SPE) 餘留前驅物％8 WCX 17.4 MCX 0 SCX 6.3 二氧化矽 0 a餘留前驅物％ =純化之前原始前驅物HPLC峰面積之百分比；在254nm下紫外光偵测 表7:基於HPLC之放射性氟化結果 放射性氟化條件 SPE 放射性氟化後之前驅物°/〇 (HPLC純度） SPE純化後之 前驅物％ TBAHC03T^ /MeCN，60〇C，5 min 二氧化矽 59% 0% TBA(JH，戊醇/MeCN， 60°C 5 5 min WCX 71% 0% J1PLC條件如實例16中所述。

^化率％=：對應於[18F]產物峰之總HPLC峰面積之百分比；放射性量測偵測 前驅物％==對應於前驅物之總HPLC峰面積之百分比；在254 nm下紫外光偵測 實例18 :合成酮型化合物放射性標記前驅物（7,7-二甲基-2-側 氧基-雙環[2.2.1】庚-1·基）-甲烷磺酸3-苯氧基-丙酯（S-L-M) 以下流程11中給出合成放射性標記前驅物S-L-M(7,7-二 曱基-2-側氧基-雙環[22 庚-卜基卜曱烷磺酸3_苯氧基-丙 醋（16)作為放射性標記前驅物之示意性概述。

合成（7,7-二甲基_2_側氧基_雙環丨2.2.1】庚-1-基）-甲烷磺酸 3_苯氧基-丙酯（16) 139706.doc •75- 201006788 在〇C下向3 -苯氧基丙-1-醇（403 mg，2·6 mmol)、三乙 胺（923 μΐ，6.6 mmol)及 DMAP(1塊晶體）於DCM(5 ml)中之 溶液中緩慢地逐份添加10-樟腦磺醯氣（730 mg，2.9 mmol)。在0°C下將反應物授拌3 h。將反應物用DCM稀釋 且用0· 1 M HC1、水洗務，經MgS〇4乾燥且過濾、。使膠狀殘 餘物經受二氧化矽層析（Hex:EtOAc 3:1)。分離出呈無色膠 狀之所期望化合物。 實例I9 :放射性氟化；製備（3-[18F]氟-丙氧基）-苯（S-X) 在放射性氟化中，用含有5 111§1^丫？1〇^\@(^222)及2.3 111§ Cs2C03 之 2.0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（1099 MBq)自 QMA濾筒（經〇·5 M K2C03平衡，用10 ml H20洗滌）溶離於 反應小瓶中。蒸發溶劑且在12CTC下在稀薄N2氣流下乾燥 殘餘物’再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小瓶中添 加於300 pL MeCN中之前驅物（16)(2 mg)，在l〇〇°C下將反 應物攪拌1 〇分鐘。藉由HPLC分析反應混合物，展示併入 59%之F18氟化物。HplC條件：C-18逆相管柱（ACE 5 C18 ; 5〇χ4·6 mm);梯度·· 5%-95°/。B，7 min ;流速=2 ml/min ;溶 劑：A=於 h2〇 中之 〇·1〇/0 TFa ; B=於 MeCN 中之 0.1% TFA。 實例2〇 :利用固相萃取（SPE)移除前驅物 在該純化步驟中，含]VI物質經由互補反應性基團與固相 萃取樹脂鍵聯。 向二種放射性標記之反應混合物（關於方法，參見實例 19) : 1)2 mg前驅物；2)2 mg前驅物；3)4 mg前驅物中之每 一者中添加MeOH(300 μΐ)及水（pH 9)(500 μΐ)之溶液。移出 139706.doc •76- 201006788 各溶液之20 μΐ樣品，用MeCN(60 μΐ)稀釋且藉由HPLC分 析，且將該值設定為各反應之標準，亦即，前驅物面積等 於100%。隨後向各反應混合物中添加1)50 mg、2)100 mg、 3)100 mg之膝-王氏樹脂（Wang resin)(Novabiochem)且在室 溫下攪拌10分鐘。隨後藉由自各反應中移出20 μΐ樣品且用 MeCN(60 μΐ)稀釋以藉由HPLC分析反應。HPLC條件：C-18 逆相管柱(ACE 5 C18 ; 50x4.6 mm);梯度：5°/。-95% Β，7 min ; 流速=2 ml/min ;溶劑：A=於H20中之0.1% TFA ; B=於MeCN 中之 0.1% TFA。 表8:基於HPLC之前驅物之放射性氟化結果 反應 放射性氟化條件 轉化率％3 (產率） 樹脂反應後之前驅物％ (HPLC純度） 1 2 mg前驅物， Cs2C〇3/Kryptofix > MeCN * 100°C > 10 min 50 mg樹脂，室溫10 min 59% 10% 2 2 mg前驅物， Cs2C〇3/Kryptofix，MeCN， 10(TC，10 min 100 mg樹脂，室溫l〇 min 41% 5.2% 3 4 mg前驅物， Cs2C03/Kryptofix，MeCN， lOOt，10 min 100 mg樹脂，室溫l〇 min 47% 3.9% :^化率％=對應於[】8F]產物峰之總HPLC峰面積之百分比；放射性量測偵測 前驅物％=對應於前驅物之總HPLC峰面積之百分比；在254nm下紫外光偵測

實例21:合成醛型化合物放射性標記前驅物4_甲醢基_苯 確睃2 -苯氧基-乙醋（S-L-M) 以下流程12中給出合成放射性標記前驅物S_L_M 4-甲醯 基-苯磺酸2 -苯氧基-乙酯（17)作為放射性標記前驅物之示 意性概述。 139706.doc •77- 201006788 流程12 :

17 合成4-甲醢基-苯磺酸2-苯氧基酯（17) 向2 -苯氧基乙醇（2 07 mg，1.5 mmol)於0比0定（6 ml)中之冰 冷卻溶液中緩慢添加4-甲醯基-苯磺醯氣（367 mg，1.79 mmol)。在〇°C下將反應物攪拌3 h。將反應混合物用水稀 釋，用Et20萃取，經MgS04乾燥，過濾且在真空中濃縮。 藉由半製備型HPLC(管柱：ACE 5 μπι C18-HL 25〇xl〇 mm ; 溶劑 A :水+0.1% TFA ;溶劑B : ACN/水 9/1 +0.1% TFA， 流速：3 ml/min，同溶劑：於A中之30% B)純化粗殘餘 物，得到呈固體狀之所期望產物（76 mg，14%)。 實例22 :放射性氟化；製備（2_[i8F】氟-乙氧基）_苯（s_x) 在放射性氟化中，用含有5 mg Kryptofix®(K222)及1 mg K2C03 之 2.0 mL 1/3 H20/乙腈將[18F]氟化物（185 MBq)自 QMA濾筒（經〇·5 M K2C〇3平衡，用i〇 h2〇洗滌）溶離於 反應小瓶中。蒸發溶劑且在120°c下在稀薄n2氣流下乾燥 殘餘物’再添加乙腈，且重複乾燥過程。向反應小瓶中添 加於500 μί DMSO中之前驅物（9)(5 mg)，在120。(：下將反 應物搜拌10分鐘。藉由TCL(二氧化矽襯底鋁板： CUzClyMeOH 99:1)分析反應混合物，展示併入57%2F18。 實例23:合成疊氮化物型化合物放射性標記前驅物3疊氮 基-丙炫^1-確酸3_(萘-2-基氧基）-丙_(S-L-M) 139706.doc 201006788 以下流程13中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 3-疊氮 基-丙烧-1 -績酸3 -(秦-2 -基氧基）-丙S旨（1 8 )作為放射性標記 前驅物之示意性概述。 流程13 :

V

' ,S、0 NaN3

' ' MeCN 2-萘乙醇 Et3N, CH2CI2 w 合成3-疊氮基丙烧項酸納 在室溫下向疊氮化納（1.06 g，16.2 mmol)於乙腈（60 mL) 中之懸浮液中添加1，3 -丙烧績内S旨（2.00 g，16.2 mmol)。 將反應混合物在60°C下懸浮3天，且隨後冷卻至室溫。將 所得白色固體收集於布氏漏斗（Buchner funnel)中且用 EtOAc洗滌若干次。在高真空下移除揮發性溶劑，得到呈 ❿ 白色固體狀之3-疊氮基丙烷磺酸鈉（2.90 g，97%)。 合成3-疊氮基丙烷磺醯氣（18) 向含有3-疊氮基丙烧確酸鈉（3.00 g，16.0 mmol)之圓底 •燒瓶中添加亞硫醯氯（50 mL)。將懸浮液在60°C下充分攪 拌2天，且冷卻至室溫。將反應混合物過濾且用二氯曱烷 洗滌。蒸發過量亞硫醯氯及溶劑且在減壓下濃縮，得到呈 無色油狀之3-疊氮基丙烷磺醯氣（2·80 g，97%)。 合成3-疊氮基-丙烷-1-磺酸3-(萘-2-基氧基）-丙酯（19) 139706.doc -79- 201006788 在0 °C下向3 -疊氮基丙烧績醯氣（327 mg，1.78 mmol)及 2-(3-經基丙氧基）萘（3 00 mg，1.48 mmol)於二氯曱烧（5 mL)中之溶液中添加三乙胺（0.3 1 mL，2.22 mmol)。在室溫 下攪拌30分鐘後，向反應燒瓶中添加水。將有機化合物用 二氯甲烷（20 mL><3)萃取，且隨後經Na2S04乾燥。藉由管 柱層析純化有機殘餘物*得到3 -疊氣基-丙烧-1 -續酸3 -(奈· 2-基氧基）-丙酯（507 mg，98%)。 實例24 :放射性氟化；製備2-(3-[18F】氟-丙氧基）-萘（S-X) 流程14 :

化合物21 二氧>iis矽濾筒

[ieHTBAF, KOMs 第三戊醇""

18F

OuSO^, 抗壞血酸鈉 MeOH,室溫 藉由溶離kryptofix 2.2.2(20 mg，於0.9 mL 甲醇中）、0.2 Μ KOMs水溶液（0.1 mL)及TBAHC03(8 μΙ〇之混合溶液將[18F] 氟化物（147 MBq)自chromafix® j慮筒釋放於反應小瓶中。 在平緩N2氣流下在加熱下蒸發曱醇溶劑。藉由與乙腈（0.5 mLx3)共沸蒸發而移除餘留水。向反應小瓶中添加前驅物 19(3.0 mg)及第三戊醇（0.4 mL)。將反應混合物在120°C下 攪拌1 5分鐘，且隨後冷卻至室溫。向反應混合物中添加化 合物23(甲烷磺酸N-炔丙基三乙銨，6.0 mg)、0.2 M CuS04 水溶液（50 μί)、0.2 Μ抗壞血酸鈉（75 μι)及曱醇（0.2 mL)。 139706.doc -80- 201006788 在室溫下將反應混合物再攪拌1 5分鐘，且隨後用二氧化矽 濾筒過濾且用EtOAc(0.5 mLx4)洗滌。在平緩N2氣流下在 加熱下濃縮經合併濾液（在反應開始後39分鐘時，濾液溶 液含有107 MBq，且反應小瓶及二氧化矽管柱含有4 MBq。 對溶液之放射性TLC分析展示100%之[18F]氟化）（參見圖5a-5d) °

實例25:合成疊氮化物型化合物放射性標記前驅物3-疊氮 基-丙烷-1-磺酸2-{2-[2-(4-{(E)-2-[4-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基）-苯基】•乙稀基}-苯氧基）-乙氧基】-乙氧基}-乙醋（S-L-M) 以下流程15中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 3-疊氮 基-丙烷-1-磺酸2-{2-[2-(4-{(E)-2-[4-(第三丁氧基羰基-甲 基-胺基）-苯基]-乙烯基卜苯氧基）-乙氧基]-乙氧基}-乙酯 (21)作為放射性標記前驅物之示意性概述。 流程15 :

boc

21 合成3-疊氮基-丙烷-1-磺酸2-{2-[2-(4-{(E)-2-[4-(第三丁氧 基羰基-甲基-胺基）_苯基】•乙烯基}-苯氧基）-乙氧基]-乙氧 基}-乙酯（21) 139706.doc -81 · 201006788 在0C下向化合物20(800 mg，1.75 mmol)及3 -疊氮基丙 烧績醯氣18(353 mg’ 1.92 mmol)於二氯曱炫（15 mL)中之 ✓谷液中添加二乙胺（0.366 mL，2.62 mmol)。在室溫下撲拌 30分鐘後，向反應溶液中添加水。將有機化合物用 EtOAc(50 mLx3)萃取，且隨後經NaaSCU乾燥。將粗混合物 經用2% EtOAc/CH^Cl2之管柱層析純化，得到化合物 21(825 mg，78%)。 實例26:合成疊氮化物型化合物放射性標記前联物3疊氮 基丙烧-1-項酸3-(2-确基-1H-味峻-1-基）-2-(四氩_2H-旅味-2-基氧基）丙酯（S-L-M) 以下流程16中給出合成放射性標記前驅物S-L-M 3-疊氮 基丙烧-1-續酸3-(2-硝基_lH-°米嗤-1-基）-2-(四氫-2H-0辰喃-2-基氧基）丙酯（22)作為放射性標記前驅物之示意性概述。 流程16 :

合成3-疊氮基丙烷-1-磺酸3-(2-硝基-1H-咪唑-1-基）_2-(四 氩-2H-哌喃-2-基氧基）丙酯（22) 在〇C下向3 -叠鼠基丙烧續酿氣（18，372 mg，2.02 mmol)及3-(2-硝基-1H-咪唑-1-基）-2-(四氫-2H-哌喃-2-基氧 基）丙-1-醇（500 mg ’ 1.84 mmol)於二氣曱燒（15 mL)中之溶 液中添加三乙胺（0.31 mL，2.22 mmol)。在室溫下攪;拌3〇 139706.doc -82- 201006788 刀鐘後，向反應燒瓶中添加水。將有機化合物用二氣曱烷 (20 mLx3)萃取，且隨後經Na2S〇4乾燥。藉由管柱層析純化 有機殘餘物’得到3_疊氮基丙m酸3-(2_石肖基_1H-咪唾_ 1-基）-2-(四氫-2H-哌喃-2-基氧基）丙酯（22，639 mg，83%)。 實例27 ··合成疊氮化物型化合物放射性標記前驅物 ((2K，4R，SR)_4-(3-疊氮基丙基磺醢基氧基）_5 (三苯甲基氧

基甲基）四氫呋喃-2-基）_S-甲基_2,6_二側氧基_2 3_二氫嘧 咬-1(6H)-甲酸第三丁酯（s_l_m) 以下机程17中給出合成放射性標記前驅物S_L_M % ((2R’4R’5R)-4-(3-叠氮基丙基績酿基氧基）_5_(三苯曱基氧 基曱基）四氫呋喃-2-基）-5-曱基-2,6-二側氧基_2,3_二氫嘧 啶-1 (6H)-甲酸第三丁酯（23)作為放射性標記前驅物之示意 性概述。 流程17 :

23 合成（2R，4R，5R)-5-(甲基-2,4-二側氧基 _3,4-二氫,咬- 1(2H)-基）-2-(三笨甲基氧基甲基）四氩咳喃_3基）_3疊氮基 丙烷磺酸酯 139706.doc -83· 201006788 在〇°C下將l-((2R，4R，5R)-4-羥基-5-(三苯曱基氧基曱基） 四氮0夫D南·2 -基）-5-曱基鳴咬-2,4(1H，3H) -二嗣（405 mg， 0.836 mmol)、3-疊氮基丙烧續酿氣（18，184 mg , 1.00 mmol) 及三氟甲烧石簧酸銀（215 mg，0.836 mmol)溶解於。比咬（5 mL) 中。在室溫下攪拌12 h後，由旋轉蒸發器濃縮反應溶液， 且添加水。將有機化合物用乙酸乙酯萃取且經Na2S04乾 燥。用40% EtOAc/n-Hx進行管柱層析，得到呈油狀之3-疊 氮基丙烷-1-磺酸（2R,3R，5R)-5-(5-曱基-2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基）-2_(三苯曱基氧基曱基）四氫呋喃-3-基 醋（450 mg，85%)。 合成3-((2R，4R，5R)-4-(3-疊氮基丙基磺醢基氧基）-5-(三苯 甲基氧基甲基）四氫呋喃-2-基）-5-甲基-2,6-二側氧基-2,3-二氩嘧啶-1(6H)-甲酸第三丁酯（23) 在0°C下向3-疊氮基丙烷-1-磺酸（2R，3R，5R)-5-(5-曱基-2,4-二側氧基-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基）-2-(三苯甲基氧基曱 基）四氫0夫0南-3-基醋（358 mg，0.567 mmol)及DMAP(69 mg， 0.567 mmol)於THF(5 mL)中之溶液中添加第三丁氧基羰基 酸酐（0.156 mL，0.680 mmol)。移除冰浴後，將反應在室 溫下維持1 h，且隨後藉由添加水中止。將有機化合物用 乙酸乙酯萃取且經Na2S04乾燥。用30%EtOAc/n-Hx進行管 柱層析，得到呈油狀之3-((2R，4R,5R)-4-(3-疊氮基丙基磺 醯基氧基）-5-(三苯曱基氧基甲基）四氫呋喃-2-基）-5·甲 基-2,6-二側氧基-2,3-二氫嘧啶-1(6H)-曱酸第三丁酯（23， 3 77 mg，91%)。 139706.doc -84- 201006788 實例28:合成銨鹽支撐型化合物放射性標記前驅物：甲烷 績酸二乙基-(1-{3-[3-(茶-2-基氧基）-丙氧基續酿基]-丙基}_ 1H-[1，2,3]三唑-4-基甲基）-銨鹽（S-L-M) 以下流程1 8中給出合成放射性標記前驅物S-L-M曱烷磺 酸二乙基_(1-{3-[3-(秦-2 -基氣基）-丙乳基續酿基]-丙基}_ 1Η-[ 1,2,3]三唑-4-基甲基）-銨鹽（25)作為放射性標記前驅物 之示意性概述。 流程18 :

OMs

Et3N, THF 回流I

-OMs

合成甲烷磺酸N-炔丙基三乙銨（24) 參 將甲烧石黃酸炔丙S旨（2.0 g，14.9 mmol)及三乙胺（3.13 mL， 22.36 mmol)於THF(5 0 mL)中之溶液回流隔夜，且隨後冷 • 卻至室溫。將所得沈澱物過濾且用THF洗滌，且在減壓下 濃縮，得到呈白色固體狀之化合物24(4.24 g，99%)。 合成甲烷磺酸三乙基-(1-{3-[3-(萘-2-基氧基）-丙氧基磺醢 基】-丙基}-1Η-[1，2,3]三唑-4-基甲基）_銨鹽（25) 在室溫下向化合物18(150 mg，0.429 mmol)及化合物 2 1 (101 mg，0.429 mmol)於乙腈（5 mL)中之溶液中添加 139706.doc -85- 201006788

Cul(8 mg，0.043 mmol)及二異丙基乙基胺（5 pL，0.043 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，且用EtOAc( 10 mL)稀釋，且經二氧化石夕管柱（1 5 mmX40 mm)過濾、且用 EtOAc(30 mL)洗滌。用其他 10% MeOH/CH2Cl2(50 mL)溶 離二氧化矽管柱。在高真空下濃縮經合併之MeOH/CH2Cl2 溶液，得到呈淺黃色油狀之化合物25( 170 mg，68%)。 實例29:放射性氟化；製備2-(3-[18F】氟-丙氧基）-萘（S-X) 藉由溶離kryptofix 2.2.2(20 mg，於0.9 mL曱醇中）、0.2 Μ KOMs水溶液（0.1 mL)及TBAHC03(8 μΐ^)之混合溶液將[18F] 氟化物（123 MBq)自chromaHx®濾筒釋放於反應小瓶中。 在平緩乂氣流下在加熱下蒸發甲醇溶劑。藉由與乙腈（0.5 mLx3)共沸蒸發而移除餘留水。向反應小瓶中添加前驅物 25(5.0 mg)及第三戊醇（0.5 mL)。將反應混合物在120°C下 攪拌15分鐘，且隨後冷卻至室溫（如圖6a-6c中所示，藉由 放射性TLC在5 min、10 min及15 min時監測反應），且隨後 用EtOAc(1.0 mL)稀釋且經二氧化矽濾筒過濾且用 EtOAc(0.5 mLx4)洗滌。在平緩N2氣流下在加熱下濃縮經 合併之濾液（在反應開始後25分鐘時，濾液溶液含有89 MBq，且反應小瓶及二氧化矽管柱含有4 MBq。對溶液之 放射性TLC分析展示100%之[18F]氟化，圖6d)。將粗混合 物與作為内標之2-曱氧基萘（1.0 mg)—起溶解於乙腈中以 定量塊狀化合物之量。將溶液注射至HPLC中（圖7)。 實例30:合成銨盥支撐型化合物放射性標記FMISO、 BAY949172及 FLT前驅物（S-L-M) 139706.doc -86- 201006788 以下流程19中給出合成FMISO(26)、FLT(27)及 BAY949172(28)之放射性標記前驅物的示意性概述。 流程19 :

合成甲烷磺酸N，N-二乙基-N-((l_(4-(3-(2-硝基-1H·咪唑-1-基）-2-(四氮-2H -旅喃-2 -基氧基）丙氧基確酿基）丁基）·1Η_ 1，2,3_三唑-4-基）甲基）乙銨鹽（26) 利用與關於化合物24所述相同的方法且自3-疊氮基丙 烷-1-磺酸3-(2-硝基-1Η-咪唑-1-基）-2-(四氫-2Η-哌喃-2-基 氧基）丙酯（26)起始，得到呈液體狀之所期望產物（63°/〇)。 139706.doc -87 - 201006788 合成甲烷磺酸 N，N-二乙基-N-((l-(3-((2R，3R，5R)-5-(5-甲 基-2,4-二侧氧基_3,4_二氫嘧啶-1(2H)-基）-2-(三苯甲基氧基 甲基）四氩呋喃-3·基氧基磺醢基）丙基）-lH-l，2,3-三唑-4-基）甲基）乙銨鹽（27) 利用與關於化合物24所述相同的方法且自3-((2R，4R，5R)-4-(3-疊氮基丙基磺醯基氧基三苯甲基氧基曱基）四氫呋 喃-2-基）-5-甲基-2,6-二氧基-2,3-二氫嘧啶-1(6H)-曱酸第三 丁酯（27)起始’得到呈液體狀之所期望產物（77。/〇)。 合成（E)-甲烷磺酸2-(2-(2-(4-(4-(第三丁氧基羰基（甲基）胺 基）苯乙烯基）苯氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）丙氧基磺醮 基）丁基）-1Η_1,2,3-三唑-4-基）甲基）乙銨鹽（28) 利用與關於化合物24所述相同的方法且自（E)-3-疊氮基 丙烧-1-磺酸2-(2-(2-(4-(4-(第三丁氧基羰基（曱基）胺基）苯 乙烯基）苯氧基）乙氧基）乙氧基）乙酯（28)起始，得到呈液體 狀之所期望產物（82%)。 【圖式簡單說明】 圖1 :本發明之純化方法之示意圖。（A)包含純化元件N 之含Μ前驅物的直接純化；（B)M上包含反應性基團之含M 前驅物的直接純化，其中利用與互補反應性基團共價鍵聯 之樹脂係經由該互補反應性基團與Μ上之反應性基團連 接；（C)包含純化元件Q之含μ-p前驅物之兩步純化；（D)包 含多個元件Q之含Μ-P前驅物之兩步純化； 圖2 : 2-(2-[18F]氟乙基）萘（[!8F]F產物）放射性氟化反應溶 液及副產物標準物之HPLC層析圖（在254 nm下紫外光偵 139706.doc -88- 201006788 測）。A)反應2(參見實例3)反應溶液；B)反應1反應溶液； C)萘乙醇；D)2-乙烯基萘； 圖3 : 15分鐘及30分鐘後利用點擊化學（click chemistry) 純化放射性氟化反應3之HPLC層析圖（在220 nm下紫外光 偵測）； 圖4: 15分鐘及30分鐘後利用點擊化學純化放射性氟化 ' 反應3之HPLC層析圖（放射性量測偵測）。[18F]F產物=2-(2- [18f]氟乙基）萘； W 圖5 :前驅物19之[18F]氟化的放射性TLC(50%EtOAc/n-

Hx) ° a)5 min(92,2%) ; b)10 min(96.9%) ; c)15 min(98.9%) ; d) 溶液（100%); 圖6:前驅物25之[18F]氟化的放射性1^(：(50°/〇丑1〇入〇/11-Hx)。a)5 min(94.3%) ; b)10 min(98.2%) ; c)15 min(98.9%) ; d) 溶液（100%);及 圖7 :銨鹽前驅物25之[18F]氟化之HPLC曲線。條件：C-l 8 管柱（250 mmx 10 mm) ’ 乙腈/水（65/35)，4 mL/min，254 nm。 139706.doc -89-

Claims (1)

1. 201006788 七、申請專利範圍： 1. 一種製備藥物S-Χ之方法，其中使前驅物質S-L-Μ之L-M 基團經由液相親核取代由反應物X置換，以形成該藥物 S-Χ及物質L-M，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與8共 價連接之離去基；且 Μ為一純化基團，其與l共價結合，且具有允許含有該 純化部分Μ基團之物質與不含該純化μ基團之其他物質 分離之特徵；且 其中s-x視情況經進一步反應而得到終產物s_x，。 2. —種製備及純化藥物S-Χ之方法，其中前驅物質s_L_Mi L-Μ基團經由液相親核取代由反應物X置換，以形成該 藥物S-Χ及物質L-M，其中： S為靶向基質； L為與Μ共價連接且在該親核取代反應之前另外與s共 價連接之離去基；且 Μ為一純化基團，其與l共價結合且具有允許含有該純 化Μ基團之物質與不含該純化Μ基團之其他物質分離之 特徵；且 其中s-x視情況經進一步反應而得到最終產物s_x,;且 其中任何仍含有該純化M基團之物質（即，含M之物質） 藉由純化程序選擇性地與不含該純化Μ基團之物質（較佳 為8·Χ)分離。 139706.doc 201006788 3. 如。青求項1或2之方法，其中該液相親核取代反應為可溶 性支撐反應。 4. 一種自包含S-X、S-L-M及視情況存在之L_M之液相反應 混合物中純化藥物s-χ之方法，其中： S為乾向基質； L為一離去基，其與Μ共價連接，且在經液相親核取代 反應使X與S連接之前另外與S共價連接；且 Μ為一純化基團，其與L共價結合且具有允許含有該純 化Μ基團之物質與不含該純化厘基團之其他物質分離之鬱 特徵； 藉由純化程序選擇性地分離任何含有該純化Μ基團之 物質與S-Χ。 5·如請求項⑴中任—項之方法’其中該親核反應係在均 相中進行。 如”月求項1至5中任一項之方法，其中該純化Μ基團含有 使Μ與該離去基L共價連接之官能基，且進一步含有選自 由以下各物組成之群的純化元件N : ❹ 陽離子基團、陰離子基團、兩性離子基團、離子液體 N基團； - 適於與金屬離子形成螯合物之元件N; 或比S大至少3倍、較佳5倍或甚至1〇倍或i5倍之元 N ;或 可使含Μ之物質從反應混合物中沈厥而出之元件n， 其中該反應混合物與經調整至可使含Μ之物質沈澱而 139706.doc -2- 201006788 留在溶液中之狀況；或 含有可與樹脂上互補反應性基團形成共價鍵之反應性 基團的元件N ;或 含有可與另一純化p基團之互補反應性基團形成共價 鍵之反應性基團的元件N。 7.如請求項2至6中任一項之方法， 其中該純化程序包含液_液相萃取； 其中該純化程序係利用含M之物質與液體萃取相之親 和力，而不含純化Μ基團之物質基本上無法萃取至該液 體萃取相中； 其中該純化程序係利用含厘之物質與「離子液體」液 體萃取相之親和力，而不含純化Μ基團之物質基本上無 法萃取至該「離子液體」液相中； 其中該純化程序包含含Μ之物質之固_液相萃取，而不 含純化Μ基團之物質餘留在該反應混合物中； 其包含調整該反應混合物至含Μ之物質可沈澱而不含 純化Μ基團之物質保持可溶之狀況； 其中該純化程序包含藉由尺寸大小排除來分離含厘之 物質與不含Μ基團之物質； 其中該含Μ之物質包含於該純化Μ基團上之反應性基 團，且該純化程序包含使該含物質經由該反應性基 團與包含互補反應性基團之樹脂反應，以使該含Μ之物 質與該樹脂共價連接，且隨後使含Μ之物質_樹脂產物與 不含純化Μ基團之物質分離；或 139706.doc 201006788 其中該純化含兩個步驟’第一步為使該M基團經由反 應性基團與第二純化P基團共價連接，其中該？基團包含 互補反應性基團及至少—個純化元件Q。 8.如請求項!至7中任一項之方法，其中該離去基L係選自 由以下各基團組成之群：_〇s〇2R_、n(r)3+、N(烷 基）2R+-、 R

   〇、或 其中R獨立地選自視情況經取代之貌基、c】_c“ 烷基芳基 '芳基、芳基垸基、c】_c】5稀基、c】_c】5快基或 鍵結至Μ之直接鍵。 9. 如請求項1至8中任-項之方法，其中S係選自由以下各 物組成之群：合成小公主 _、 子、醤樂活性化合物（藥物）、代 謝物、信號轉導分子、激杳 Β, ^ ^ 激素、肽、蛋白質'轉運體或酶 基質&體拮抗劑、受體促效劑、受體反向促效劑、維 生素、必需營養素、胺基酸、脂肪酸、脂質、核酸、單 醣、二醣、三醣或多醣及類固醇。 10. 如請求項1至9中任一項之t Θ i — 項之方法，其中S-X累積於重要器 目中’該器官之局部組織灌注可經估算。 η.如請求項1至10中任一 ι万法，其中該親核試劑X為放 射性同位素或包含放射性间 ώ丄 门位素，該放射性同位素係選 以下各元素組成之群：9，C、"】Ιη、丨卞、，卜 139706.doc 201006788 123 89 124ι 125ι 131 34 Cl Sr 153 nc、32p、 90 Sm、、丨8SRe、2丨2出、2 :、、、 Y、67Cu、64 $9Zr > 86 212 Bi Cu、、、丨、、'、ll7m 211At、225ac、223Ra、169yb、〜Sn ' 213Bi , Ga， Yb、6、及”, Y ❿ 該親核試劍為18F。 12· 一種用以進行如請求項中任 其包含純化M基團或L-M基團。 13. —種用以進行如請求項1至11中任 其包含S-L及純化Μ基團。 14. 一種用以進行如請求項中任一項 其包含S-L-M。 <方法的套組， 15. 如請求項12至14中任一項之套組其 行兩步純化之純化p基團。 ，包含適於 16·如請求項12至15中任一項之套組其 册，盆P、+、 步包含產品手 冊其為述-或多種進行如請求項中任一項之親 核取代及/或純化程序之實驗方法、目昧 耳樹方法’視情況亦可描述組份 之儲存條件。 種請求項6所疋義之純化μ基圏的用途，其係用於如 «月求項1至11中任一項之方法中。 18· —種式I化合物， L-Mx 其中X為0至6， L為離去基’較佳選自由以下各基團組成之群·· _oso2R-、_N(R)2+…_N(烷基）2R+、 較佳地 項之 方法 的套組， 方法的套組， 進 139706.doc 201006788 R

   其中R獨立地選自C1-C15炫《基、C1-C15婦基、C1-C15快 基、芳烷基、芳基、芳基-胺甲醯基、芳基-胺甲醯基-C!-C10烷基、雜芳基、雜芳基-CrCw烷基、q-CM烷基-雜芳 基、雜芳基-胺甲醯基、雜芳基-胺曱醯基-CrCio烷基， 所有該等基團可視情況經取代，或R為鍵結至Μ之直接 鍵， Μ為純化基團，Μ較佳包含至少一個Ν，其中Ν為陽離 子基團、陰離子基團、兩性離子基團或離子液體基團。 139706.doc