SU977466A1 - Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени - Google Patents
Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени Download PDFInfo
- Publication number
- SU977466A1 SU977466A1 SU792831351A SU2831351A SU977466A1 SU 977466 A1 SU977466 A1 SU 977466A1 SU 792831351 A SU792831351 A SU 792831351A SU 2831351 A SU2831351 A SU 2831351A SU 977466 A1 SU977466 A1 SU 977466A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- gel
- polyacrylamide gel
- polyacrylamide
- microorganisms
- solution
- Prior art date
Links
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 title claims description 69
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 117
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 59
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 46
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 33
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 19
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 16
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 7
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 6
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 4
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 claims description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 4
- 239000003999 initiator Substances 0.000 claims description 4
- 238000010526 radical polymerization reaction Methods 0.000 claims description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 4
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 claims description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 claims 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 1
- 241000208202 Linaceae Species 0.000 claims 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 claims 1
- -1 N, N-methylene Chemical group 0.000 claims 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 claims 1
- 230000001523 saccharolytic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000000695 crystalline len Anatomy 0.000 description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 7
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000011837 N,N-methylenebisacrylamide Substances 0.000 description 5
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 5
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 235000006180 nutrition needs Nutrition 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 208000014733 refractive error Diseases 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 206010001557 Albinism Diseases 0.000 description 1
- 101100177348 Caenorhabditis elegans heh-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 208000006550 Mydriasis Diseases 0.000 description 1
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229920006397 acrylic thermoplastic Polymers 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000008303 aniridia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 210000001840 diploid cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002911 mydriatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl prop-2-enoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C=C ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000003144 traumatizing effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Eyeglasses (AREA)
Description
Изобретение относитс к химии полимеров, в частности к полиакриламидному гелю, предназначенному дл использовани в педицинских и биологических цел х.
Полиакриламидный гель известен сравнительно давно и используетс в насто щее врем в медицине и биологии исключительно дл сепарации различных веществ.
Однако возможности применени полиакриламидного гел дл других .целей в медицине и биологии ограничиваютс наличием в негч токсичных исходных мономеров,
Известен полиакриламидный гель, содержащий в качестве oqHOBH сополимер акриламида и N,N -метилен-бис -акриламида , использующийс дл выращивани различных микроорганизмов.
Указанный гель получают радикальной сополимеризацией акриламида с N,N -метилен-бис-акриламидом в при-, сутствии анициатора и активатора радикальной полимери-зации в водных растворах при содержании 3-20 вес.ч. воды на 1 ч ,сомономеров, смесь сомономеров содержит 0,01 0 ,25 ч N,N -метилен-бис-акриламида на 1 ч акриламида.
При этом в исходную среду при синтезе гел могут быть введены неорганические соли в относительно высокой конце 1трации, а также различные другие добавки дл обеспечени питательных потребностей отдельных видов микроорганизмов fl.
Недостатком указанных гелей вл етс то, что они содержат опреде10 ленное количество токсичных исходных мономеров. Кроме того, так как гели имеют кислую реакцию (рН 3,5-4), не любые питательные субстраты могут быть введены в них. Это обсто 15 тельство ограничивает возможность их использовани .
Наиболее .близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату вл етс полиакрила20 мидный гель дл медико-биологических целей, включающий сетчатый сополимер акриламида и N, N-петилен-бис-акриламида и воду в качестве среды набухани . Этот гель использу25 етс в качестве плотной основы дл приготовлени питательной среды, примен емой дл выращивани различных микроорганизмов.
Гель получают радикальной сополи30 меризацией акрилагшда с N, N-метилен-бис акриламидом и вещном раство ре в присутствии инициатора и активатора радикальной полимеразции с последующей отмывкой гел водой от 1иэкомолекул рных примесей. Известный способ позвол ет получить нетоксичный гель, который может быть использован при виращивании большинства видов микроорганизмов 2. Однако отг/1ывка целевого продукта хот и позвол ет удалить токсичные вещества, но не обеспечивает возгюж кости безвредного контакта полученного гел с клетками, ткан ми и органами животных и человека, так как не обеспечивает услови изоосмо тичности, что сужает область его ис пользовани в медицине и биологии. Кроме того, качество полиакриламидного гел ,который используют как ос нову дл выращивани микроорганизмо остаетс недостаточно высоким. Цель изобретени - расширение фу циональных возможностей гел и улуч шени его эксплуатационных характеристик . Указанна цель достигаетс тем, что полиакриламидный гель дл медико-билогических целей, включающий сетчатый сополимер акриламида с -метилен-бис-акриламидом и среду на бухани , в качестве среды набухани содержит физиологический раствор пр следующем соотношении компонентов, мае.%: Сетчатый сополимер 3,0-28,0 Физиологический раствор72,0-97,0 Предлагаег1ый гель получают путем радикальной сополимеризации акрилам да с N,N-метилен-бис-акриламидом в присутствии инициатора и активато ра радикальной полимеризации с последующей отмывкой гел от низкомоле кул рных примесей, при этом осуществ л ют и отмывку гел в физиологическо растворе при следующей исходной концентрации мономеров, мае.%: Акриламида 0,5-40 N,N-метилен-бис-акриламида 2,5-12 Получаемый полиакриламидный гель не токсичен и обладает высокой пористостью , гидрофильностью, эластичностью , прозрачностью, термостабильностью . Кроме того, он обладает изоосмотичностью-с биологическими систе мами (микроорганизмами, клетками, ткан ми, органами), что позвол ет стабилизировать его размеры в биологических системах, а также повысить насыщение его растворами различных веществ. Все это дает возможность осуществить безвредный контакт полиaкpилa rи u oгo гел с биологичр.скими системами и тем самьтм значительнс расширить возможность использовани его в медицине и биологии. Целесообразно дл расширени возможности использовани полиакриламидного гел в медицине и биологии в качестве физиологического раствора использовать 0,5%-ный водный раствор хлористого натри или 0,9%-ный водный раствор хлористого натри , раствор Рингера-Лока, раствор Эрла, раствор ХэН1$са, среду 199, среду Игла, 5%-ный водный раствор глюкозы. Рекомендуетс чтобы полиакриламидный гель в качестве физиологического раствора содержал 0,5%-ный водный раствор хлористого натри , при следукщем содержании компоне 1тов, мас.%: Полиакриламид 6,0-15,0 0,5%-ный водный раствор хлористого натри 84-94 Указанна модификаци полиакриламидного гел позвол ет получить наиболее оптимальную изоосмот1гчность с микроорганизмами, что позвол ет использовать ее в качестве плотной основы питательных сред дл культивировани микроорганизмов. Возможно, чтобы полиакриламидный гель в качест .ве физиологического раствора содержал 0,9%-ный водный раствор хлористого , натри при следующем содержании компонентов , мас.%: Полиакриламид 5,0-13,0 0,9%-ный водный раствор хлористого натри 82,0-95,0 Указанна модификаци полиакриламидного гел позвол ет получить наиболее оптимальную изоосмотичность с клетками животных и человека, что позвол ет использовать ее в качестве носител питательных субстратов при культивировании культур клеток. Предлагаетс , чтобы полиакриламидный гель в качестве физиологического раствора содержал 5%-ный водный раствор глюкозы при следующем содержании компонентов, мас.%: Полиакрилшлид 4,0-20,0 5%-ный водный раствор глюкозы 80,0-96,0 Указанна модификаци полиакриламидного гел обеспечивает оптимальную изоОсмотичность с биологическими свойствами и примен етс в тех случа х, когда присутствие хлористого натри не;хелательно. Целесообразно примен ть полиакриламидный гель в качестве питательной среды. Питательные среды, где в качестве плотной основы применен полиакриламидный гель, содержащий физиологический раствор, не содержат посторонних примесей, обладают микробиологической воспроизводимостьп, стабильностью . Они хорошо держатс в чашках Петри, устойчивы к высыханию, поддаютс длительному хранению и имеют р д существенных преимуществ перед известшлпи средами.
С целью уменьшени ; травматизации тканей глаза при имплантации посредством выполнени минимальных разрезов ,обеспечени : полной ареактивности оболочек глаза, реког1ендуетс примен ть указанный выше полакриламидный гель в качестве искусственного хрусталика.
С целью обеспечени длительного непрерывного ношени при коррекции аномалии рефракции в широких пределах , предлагаетс примен ть полиакриламидный гель в качестве контактной линзы.
Полиакриламидный гель получают путем полимеризации акрнламида и -метилен-бис-акрилаглида. Реакционна мономерна смесь обычно содержит 80-99,5 мас.% акриламида, 0,520 мас.% N N-метилен-бис-акриламида . Исходные мономеры раствор ют в физиологическом растворе, В качестве физиологического раствора используют 0,5%-ный водный раствор хлористого Натри или 0,9%-ный водный раствор хлористого натри , 5%ный водный раствор глюкозы, или растворы Рингера-Лока, Хенкса, Эрла, или среды 199, Игла и другие.
Варьиру количество исходных мономеров в реакционной смеси можно получать Полиакриламидный гель различной плотности и эластичности.
Полимеризаци исходных мономеров может протекать без нагрева или при нагревании реакционной смеси, добавлении известных инициаторов, катализаторов . Скорость реакции полимеризации пр мо пропорциональна температуре , количеству катализатора. O6tJ4Ho катализаторы добавл ют в количестве 0,05-0,1 мас.% от количества исходных мономеров.
Реакционна смесь может быть приготовлена путем смешивани сухих порошкообразных мономеров с последующим растворением в физиологическим растворе. Дл ускорени растворени физиологический раствор нагреваетс . Полимеризаци реакционной смеси может осуществл тьс в объеме заданной формы - в стекл нных, металлических , керамических емкост х, а также емкост х из синтетических материалов. Получаемый в процессе полимеризации гель повтор ет форму и размеры используемой емкости.
Процесс полимеризации можно осуществл ть в объемах, моделирующих форгду известных контактных линз, либо форму известных монолитных искусственных хрусталиков, что позвол ет использовать Полиакриламидный гель в качестве гкoй контактной линзы, либо в качестве искусственного хрусталика. Услови проведени процесса полимеризации аналогичны
приведенным выше.
Отмывка гел от токсичных продуктов может осуществл тьс в обычных услови х и при повьоиенной температуре . При этом исходные (токсичные)
компоненты раствор ютс и переход т из гел в физиологический раствор. Замен физиологический раствор, удаетс полностью удалить из гел токсичные продукты. Обычно дл этогр достаточно троекратной смены раствора . Нагревание ускор ет процесс oTtiHBKH гел . Процесс отмывки гел осуществл етс аналогично описанному выше и при получении м гкой кон-
тактной линзы или хруста/тика. Полученный гель поддаетс штамповке, разрезанию.
Стерилизаци гел может быть осуществлена тегтературныи, радиационныг и химическим путем. Выбор метода стериализации и его режим определ ютс услови ми конкретной задачи.Таким образом, гель становитс пригодным дл использовани в качестве плотной основы дл получени питательных сред, с целью культивировани микроорганизмов, либо искусственного хрусталика, либо м гкой контактной линзы и может хранитьс до момента его и спользовани .
Насыщение гел субстратами дл питани микроорганизмов и культур клеток может быть осуществлено до или после стерилизации. Выбор метода
насыщени определ етс конкретным составом питательного субстрата. При наличии в питательном субстрате термолабильных компонентов насыщение осуществл етс после стерилизации.
Состав питательных субстратов определ етс пищевыми потребност ми конкретных групп или видов микроорганизмов и клеток. Дл насыдени полученного в соответствии с изобретением полиакриламидного гел могут быть использованы питательные субстраты, обеспечивающие пищевые потребности практически всех известных видов микроорганизмов и клеток, включа
натуральные, полусинтетические и синтетические составы субстратов или их смеси.
Дл определени качества питательных сред, где в качестве плотной основы использован полиакриламидныП гель, содержащий физиологический раствор, а также изучени биологических свойств микроорганизмов, клеток животных и человека используютс известные г-5етоды исследовани . Известными методами определ ютс также оптические свойства м гких контактных линз и искусственных хру таликов из полиакриламидного гел , содержаидего физиологический раствор Полиакриламидный гель использоватьс ц качестве носител (плотной основы) питательных субстр тов, необходимых дл роста, размножени и развити микроорганизмов. Пластины полиакрилаг 1{дного гел могут выполн тьс круглыми по диаметру чашек , квадратнЕлг- и или пр моугольныг и по размерам покровных и предметных стекол, а также в виде блоков различных размеров и фо мы и использоватьс после насыщени питательными субстратами дл макрои микрокультивировани различных групп, видов и штзалмоз микроорганиз мов, клеток животных и человека. Использование полакриламидного гел в качестве плотной основы пита тельных сред обеспечивает последним микробиологическую инертность, что повышает выход биомассы микроорганизмов . Получение пластин полиакриламидного гел может быть автоматизировано ,. Пластины гел не требуют специаль ных методов стерилизации.. Стерилизацию их можно осуцеств; л ть oбщeпpин ты 1и методами и в обыч ньох услови х. Наприг.тер в автоклаве при давлении 1-1,5 атм или текучим паром. Возможно хранение готовых к употреблению пластин полиакриламидного гел длительное врем . Полиакриламидный гель имеет известный и посто нный состав, что обеспечивает воспроизводимость плотной основы питательных сред и св занную с этим стандартизацию микробиологических исследований, позвол ющую сопоставл ть результаты различ ных исследований. Использование полиакриламидного гел в качестве гд гкой контактной линзы может обеспечить коррекцию зре ни от-20 ОД до+20 ОД.. Кроме этого, м гкие контактные линзы могут быть использованы одновременно с лечебной целью дл пролонгированного действи лекарственных веществ (антибиотиков сульфаниламидов, мидриатиков, миоти ков и др. препаратов). Представл етс возможным примене ние м гких контактных линз в качест ве дополнительного звена при герметизации раны при ургенных и плановы операци х на глазу или в виде самосто тельного способа в тех же ситуа ци х. Линза из предлагаемого полиакрил мидного гел может быть использована так) с косметической целью и как средство уменьшени светорассе ний при аниридии, иридодилазе, стойком мидриазе, альбинизме. Полиакриламидный гель может быть применен в качестве искусственного хрусталика и использован дл коррекции аномалий рефракции после экстракапсул рной экстракции катаракты одномоментно или в качестве второго этапа. Хрусталик может Иметь заданные формы, размеры и оптическую силу . Пример 1. Дл получени полиакриламидного гел согласно изобретению готов т три раствора (А, В и с) по следующей методике (указаны количества исходных компонентов из расчета на 1000 мл основного раствора ) . Приготовление раствора А: 5 мл тетраметилэтилендиамина раствор ют в 995 мл 0,5% водного раствора хлористого натри и хран т в темной посуде при 4°С в услови х холодильника до употреблени (срок хранени 6-8 мес цев). Приготовление раствора В: 7,35 г метилен-бис-акриламида раствор ют в 350 МП 0,5%-ного водного раствора хлористого натри , подогретого до , а затем добавл ют 280 г акриламида , который размешивают до полного растворени . Полученный раствор фильтруют через ватно-марлевый фильтр , добавл ют до 1000 мл 0,5%-ного водного раствора хлористого натри и хран т в темной посуде при в услови х холодильника до употреблени (срок хранени 6-8 мес цев). Приготовление раствора Ct 1,4 г персульфата аммони раствор ют в 1000 мл 0,5%-ного водного раствора хлористого натри и хран т в темной посуде до употреблени (срок хранени 4-6 недель). Из приготовленных растворов 1А, В и с) готов т реакционную смесь. Дл этого к 1 объему раствора А добавл ют 2 объема раствора В и 4 объема раствора С. (Объемные соотношени основных растворов могут быть изненены в зависимости от необходимой эластичности или плотности гел ). Реакционную смесь заливают в щель, образованную двум плоскопараллельными стекл нными пластинами толщиной 3 мм. Процесс полимеризации протекает в течение 15 мин. Стекл нные пластины разъедин ют и освобохсдают образовавшую пластину полиакриламидного гел . Из пластины гел штампуют круглые диски диаметром 70 мм. Полученные диски помещают в емкость и заливают 0,5%-ным водным раствором хлорис: того натри из расчета 20 мл раствора на 1 диск.- Диски Далее вьщернивают в 0,5%г-ном водном растворе хлористого натри в течение 12 ч, замен раствор через каждые 4 ч. По истечении 12 ч раствор сливают.
Полученные диски полиакриламидного гел содержат мае.%
Полиакриламид 11,0 0,5%-ный водный раствор хлористого натри 89,0 Полученный полиакриламидный гель не токсичен, обладает высокой пористостью , гидрофильностью, эластичностью , прозрачностью, термостабильностью .
Клетки различных видов микроорганизмов , нанесенные на гель длительное (3 мес ца и более) врем , сохран ли форму, размеры и жизнеспособность , что свидетельствует об изоосмотичности данного гел с клетками микроорганизмов.
Гель хорошо насыщалс субстратами дл питани микроорганизмов, например м со-пептонным бульоном, и поэтому он был использован в качестве плотной основы дл получени питательных сред с целью культивировани различных групп микроорганизмов (эшерихии, сальмонеллы, шигеллы, протей, стафилококки и др.).
Дл насыщени отмытые диски заливают бульоном Хоттингера с аминньом
азотом 300 мг % из расчета 10 мл бульона на 1 диск и стерилизуют паром под давлением при 30 мин За это врем происходило (асыиение дисков бульоном и стерилизаци . Насыщенные бульонои стерильные диски , соблюда стерильность, помещают в стерильные чаыки Петри, подсуиивают и засевают кишечной палочкой. Микроорганизг.1ы подвергают инкубации при 37°С в течение суток. За это врем на поверхности дисков вырастала культура кишечной палочки в виде колоний.
При росте на геле микроорганизмы сохран ли биологические свойства: характер роста и размножени , форму клеток и колоний, морфологические, тинкторисшьные, культуральные, биохимические , серологические свойства , антигенную структуру, фаголи-зобильность . При этом биомасса выросших микроорганизмов при одинаковой посевной дозе превышала биомассу тех же шкpoopгaнизмoв, выросших на м со-пептонном агаре.
5
Определ лась выживаемость исследованных видов микроорганизмов на полиакриламидноп геле в соответствии с изобретением и на известном геле (2)1
0 Результаты сведены в таблицу.
Staphy1OCOCCUS Пример 2. Полиакриламидный гель, содержащий, мас.%: полиакриламид 8,0, физиологический раствор , получают способом, описанным в.примере 1. В качестве физиоло- 65 гического раствора используют 0,9%ный водный раствор хлористого натри . Полученный полиакриламидный гель не был токсичен, обладал высокой по
ристостью, гидрофильностью, эластичностью , прозрачностью, термостабильностыо .
Гель хорошо насыщалс субстратами дл питани микроорганизмов, клеток животных и человека. . .
Нанесенна на поверхность гел 2%-на суспензи эритроцитов барана (0,2 мл) не подвергалась гемолизу, а нанесенные фибробласты, клетки HEI и KB, сохран ли форму, размеры и жизнеспособность в течение до 2 сут при . Внутрйбркшинна и mлaнтaци белым пластин полученного гел размерами 1 смх1 смхо,3 см в течение 5 сут не измен ла первоначальны2 ; размеров пластин. Пластины оставались прозрачными, не вызывали реактивных изменений со стороны окружающих органов и тканей, хорошо переносились животными даже при одномомептной имплантации одному животному 2-3 пластин,
Пример 3. Полиакриламидный гель в соответствии с изобретением содержащий , мае . % : полиакриламид 0,3физиологический раствор 97,0, получают способом, описанным в примере 1. В качестве физиологического раствора используют раствор РингераЛока ,
Свойства полученного полиакриламидного гел аналогичны свойствам, описанным в 2.
Кроме того, на данном геле форма, размеры и жизнеспособность фибробластов , клеток ИЕI а и КБ сохран лись до 4 сут при .
Пример 4. Полиакриламидный гель, в соответствии с изобретением, содержащий, мае.%: полиакриламид 1,0 физиологический раствор 89,0, получают способом, описанныгл в примере 1 В качестве физиологического раствора используют раствор Хэнкса,
Свойства полученного полиакрилами ного гел были сходны свойствам, опи санным в примере 3.
Кроме этого, пластины гел были окрашены в розовой цвет, а форма, размеры и жизнеспособность фиброблас тов, клеток Не а и КБ сохран л1 сь до 6 сут при .
Полученные пластины гел насыщают средой роста дл культур клеток,, содержащей 60% среды 199, 20% гидролизата лактальбумина, 20% сыворотки крупного рогатого скота и :используют дл выращивани клеток Hela, При этом клетки Hela вырастали на поверхности гел в виде типичного моносло в обычные сроки,
Пример 5. Полиакриламидный гель, содержащий мас.%: полиакриламид 20,0, физиологический раствор 80,0, получают способом, списанным в примере 1. В качестве физиологического раствора используют раствор Эрла.
Свойства полученного полиакриламидного гел были аналогичны свойствам , описанным в примерах 2 и 4.
Пример 6. Полиакрилаглидный гель, содержащий мас.%: полиакриламид 5,0, физиологический раствор 95, получали способом, описанным в примере 1.
В качестве физиологического раствора используют среду 199.
Свойства полученного полиакриламидного гел были сходны со свойствами , описанными в примерах 2 и 4.
Кроме того, форма, размеры и жизнеспособность фибробластов, клеток Hela и КБ сохран лись до 3-10 су при 4° С.
Выросшие на пластинах гел клетки были хорошо прикреплены к гелю, что позволило переносить вырезанные из пластин блоки гел с клетками и исследовать под микроскопом, а также заключать блоки с клетками в микрокамеры ..
Пример 7. Полиакриламидный гель, содержащий, мае.%: полиакриламид 15,0, физиологический раствор 85,0, -получают способом, описанным в примере 1.
Б качестве физиологического раствора используют среду 199.
Свойства полученного полиакриламидного гел были сходны со свойствами , описанными в примерах 2 и 4, Кроме того, выросший на пластинах гел монослой клеток легко смывалс , что позволило легко накапливать биомассу клеток.
Пример 8. Полиакриламидный гель, содержащий, мае.%: полиакриламид 7,0, физиологический раствор 93,0, получают способом, описанным с примере 1.
В качестве физиологического раствора используют среду Игла.
Свойства полученного полиакриламидного гел были сходны со свойствами , описанными в примерах 2 и 7.
Кроме того, пластины гел , насыщенные средой роста, были использованы дл выращивани клеточных штаммов При этом наблюдали хороший рост диплоидных клеток.
Пример 9. Полиакриламидный гель, содержащий Mac.%t полиакриламид 10,0, физиологический раствор 90,0, Получали способом, описанным в примере 1. В качестве физиологического раствора используют 5%-ный раствор глюкозы.
Свойства полученного полиакриламидного гел были сходны со свойствами , описанными в примере 2.
Claims (2)
- Кроме того, на данном геле форма, размеры и жизнеспособность фибробластой , клеток Но la и КП сохран лись до 3 сут при 4С. Нар ду с этим но данном геле было отмечено ускорение роста и увеличение биомассы микроорганизмов, содержащих сахаролитические ферменты. Отсутствие в составе гел хлористого натри значительно упростило определение количества хлористого натри в клетках микроорганизмов. Пример 10 (сравнительный). Готов т полиакриламидный гель, содержащий , мае.%: полиакриламид 2,0, физиологический раствор 98,0. В качестве физиологического раствора используют 0,5%-ный водный раствор хлористого натри . При этом полученный полиакриламид ый гель имел полужидкую консистенцию, не позвол ющую получать пластины гел , осуществл ть их отмывку и насыщение субстратами дл питани микроорганизмов, клеток хсивотных и человека, посевы микроорганизмов и клеток. После добавлени жидких питательных субстратов гель раствор лс в них и тер л гелевую структуру. Пример 11 (сравнительный). Готов т полиакриламидный гель, содер жащий, мае.%: полиакриламид 29,0, физиологический раствор 71,0. В качестве физиологического раствора используют О ,9%-ный водный раствор хлористого натри .При этом получен ный полиакриламидный гель имел очень плотную консистенцию и был ломок при изгибах. Отмывка пластин гел от исходных компонентов была малоэф фективной, требовала длительного вр мени - 15 и более суток. Гель плохо насыщалс субстратами дл питани микроорганизмов и культу клеток, быстро высыхал с по влением трещин при и плохо фиксировалс в чашках Петри. Таким образом, использование изо ретени позволит получать полиакрил идные гели .с улучшенными эксплуатаионньлпи характеристиками и расгииить область их применени в медицие и биологии. Формула изобретени 1. Полиакриламидный гель дл меико-биологических целей, включающий етчатый сополимер акриламида.с N,N-метилен-бис-акрилс1мидом и среду набухани , отличающийс тем, что, с целью расширени функциональных возможностей гел и улучшени его эксплуатационных характеристик , в качестве среды набухани он содержит физиологический раствор, при следующем соотношении компонентов , мас.%: Сетчатый сополимер 3,0-28,0 Физиологический раствор72,0-97,0 2. Способ получени полиакриламидного гел дл медико-биологических целей путем радикальной сополимеризации акриламида с N,N-метилеи-бис-акриламидоп в присутствии инициатора и активатора радикальной полимеризации с последующей отнывкой гел от низкомолекул рных примесей , отличающийс тем, что сополинеризацию и отмывку гел осуществл ют в физиологическом растворе при следующей исходной концентрации мономеров, мас.%: АкриЛамида 0,5-40 N.N-метилен-бис2 ,5-12 -акриламида Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1.Патент СШЛ № 3046201, кл. 195-100, 19G2.
- 2.Авторское свидетельство СССР № 659619, кл. С 12 к 1/06, 1972 (прототип).
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU792831351A SU977466A1 (ru) | 1979-11-06 | 1979-11-06 | Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени |
| DE803050012T DE3050012A1 (de) | 1979-11-06 | 1980-06-19 | Polyacrylamide gel for medical and biological application and method of its preparation |
| JP80501574A JPS6240997B2 (ru) | 1979-11-06 | 1980-06-19 | |
| GB08120002A GB2114578B (en) | 1979-11-06 | 1980-06-19 | Polyacrylamide gel for medical and biological application and method of its preparation |
| PCT/SU1980/000104 WO1981001290A1 (fr) | 1979-11-06 | 1980-06-19 | Gel de polyacrylamide pour application medicale et biologique et son procede de preparation |
| JP31588386A JPS62260850A (ja) | 1979-11-06 | 1986-12-25 | 医学用ポリアクリルアミドゲル及びその製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU792831351A SU977466A1 (ru) | 1979-11-06 | 1979-11-06 | Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU977466A1 true SU977466A1 (ru) | 1982-11-30 |
Family
ID=20855616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU792831351A SU977466A1 (ru) | 1979-11-06 | 1979-11-06 | Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (2) | JPS6240997B2 (ru) |
| SU (1) | SU977466A1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3430316A1 (de) * | 1984-08-17 | 1986-02-27 | Ki Medicinskij I Im Akademika | Verfahren zur herstellung eines fluessigen naehrbodens zur zuechtung von mikroorganismen und zellenkulturen von makroorganismen |
| WO1988005794A1 (fr) * | 1987-01-30 | 1988-08-11 | Kievsky Meditsinsky Institut Imeni Akademika A.A.B | Procede d'obtention d'un milieu nutritif solide pour la culture de micro-organismes |
| WO1988009349A1 (fr) * | 1987-05-26 | 1988-12-01 | Kievsky Meditsinsky Institut Imeni Akademika A.A.B | Procede d'obtention d'un milieu solide pour la culture de micro-organismes |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE60033633T2 (de) * | 1999-12-08 | 2007-11-15 | Vercell Biotechnology Bv | Kit aus polyacrylamidgel zur herstellung einer kapsel im gewebe eines säugetierorganismus und tierischen allogenen oder xenogenen zellen , zur behandlung von onkologischen krankheiten und diabetes mellitus |
| US9827250B2 (en) * | 2012-07-31 | 2017-11-28 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Lens incorporating myopia control optics and muscarinic agents |
-
1979
- 1979-11-06 SU SU792831351A patent/SU977466A1/ru active
-
1980
- 1980-06-19 JP JP80501574A patent/JPS6240997B2/ja not_active Expired
-
1986
- 1986-12-25 JP JP31588386A patent/JPS62260850A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3430316A1 (de) * | 1984-08-17 | 1986-02-27 | Ki Medicinskij I Im Akademika | Verfahren zur herstellung eines fluessigen naehrbodens zur zuechtung von mikroorganismen und zellenkulturen von makroorganismen |
| WO1988005794A1 (fr) * | 1987-01-30 | 1988-08-11 | Kievsky Meditsinsky Institut Imeni Akademika A.A.B | Procede d'obtention d'un milieu nutritif solide pour la culture de micro-organismes |
| US4939150A (en) * | 1987-01-30 | 1990-07-03 | Gashinsky Vladimir V | Method for preparing dense nutrient medium for culturing microorganisms |
| WO1988009349A1 (fr) * | 1987-05-26 | 1988-12-01 | Kievsky Meditsinsky Institut Imeni Akademika A.A.B | Procede d'obtention d'un milieu solide pour la culture de micro-organismes |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62260850A (ja) | 1987-11-13 |
| JPS6240997B2 (ru) | 1987-09-01 |
| JPS57501110A (ru) | 1982-07-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| GB2114578A (en) | Polyacrylamide gel for medical and biological application and method of its preparation | |
| Xin-Yuan et al. | New contact lens based on chitosan/gelatin composites | |
| JP2014187901A (ja) | バクテリアセルロースを含有する温度感受性複合体及びその製造方法 | |
| Mitchison | The growth of single cells: III. Streptococcus faecalis | |
| SU977466A1 (ru) | Полиакриламидный гель дл медико-биологических целей и способ его получени | |
| AU2020218941B2 (en) | Protein hydrogel, preparation method and use thereof | |
| JP3414444B2 (ja) | 固定化用器具、これを用いた生物組織の固定化法および培養法 | |
| RU2121000C1 (ru) | Питательная среда для выращивания микобактерий | |
| FR2569419A1 (fr) | Procede de preparation d'un milieu nutritif pour la culture de microorganismes et de cultures de cellules d'un macroorganisme | |
| CA1164818A (en) | Tissue culture substrate | |
| Blake | The microbiology of acute ulcerative gingivitis with reference to the culture of oral trichomonads and spirochaetes | |
| RU2036233C1 (ru) | Питательная среда для выращивания первичных и перевиваемых клеток | |
| JPH01273599A (ja) | 微生物セルロースの製造方法 | |
| RU2412991C2 (ru) | Питательная двухфазная среда для культивирования микроорганизмов | |
| SU659619A1 (ru) | Способ приготовлени питательной среды дл культивировани микроорганизмов | |
| RU2053294C1 (ru) | Способ культивирования бифидобактерий | |
| RU2111245C1 (ru) | Питательная среда для культивирования дрожжевидных грибов рода candida | |
| RU2142505C1 (ru) | Состав для культивирования эшерихий | |
| SU636262A1 (ru) | Штамм продуцент -кетоглутаровой и пировиноградной кислот | |
| RU2161649C2 (ru) | Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата | |
| SU764390A1 (ru) | Способ культивировани вирусов | |
| SU872547A1 (ru) | Способ культивировани клеток | |
| WO1988005794A1 (fr) | Procede d'obtention d'un milieu nutritif solide pour la culture de micro-organismes | |
| SU539070A1 (ru) | Способ консервации микроорганизмов | |
| An et al. | Reversible gelling culture media for in-vitro cell culture in three-dimensional matrices |