SU1678838A1 - Способ вы влени нуклеотидных последовательностей - Google Patents
Способ вы влени нуклеотидных последовательностей Download PDFInfo
- Publication number
- SU1678838A1 SU1678838A1 SU894686597A SU4686597A SU1678838A1 SU 1678838 A1 SU1678838 A1 SU 1678838A1 SU 894686597 A SU894686597 A SU 894686597A SU 4686597 A SU4686597 A SU 4686597A SU 1678838 A1 SU1678838 A1 SU 1678838A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- nucleotide sequences
- test material
- carrier
- minutes
- results
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 title description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 title description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 26
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 6
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 5
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 3
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N benzidine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C=C1 HFACYLZERDEVSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- CPQCSJYYDADLCZ-UHFFFAOYSA-N n-methylhydroxylamine Chemical compound CNO CPQCSJYYDADLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- -1 sodium disubstituted phosphate Chemical class 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к молекул рной биологии и может быть использовано дл диагностики возбудителей инфекционных болезней, идентификации микроорганизмов , а также в научных исследовани х. Цель изобретени - ускорение способа и повышение достоверности его результатов за счет снижени веро тности неспецифических реакций. Предварительно на поверхность носител нанос т один или несколько эталонных образцов, а специфическую метку ввод т непосредственно в исследуемый материал без очистки его нуклеотидных последовательностей .
Description
Изобретение относитс к молекул рной биологии и может быть использовано дл диагностики возбудителей инфекционных болезней, идентификации микроорганизмов , а также в научных исследовани х.
Цель изобретени - ускорение способа и повышение достоверности его результатов за счет снижени веро тности неспецифических реакций.
При вы влении нуклеотидных последовательностей , комплементарных нуклеотид- ным последовательност м эталонного образца, предварительно на поверхность носител нанос т один или несколько эталонных образцов, а специфическую метку ввод т непосредственно в исследуемый материал без очистки его нуклеотидных последовательностей .
Способ осуществл ют следующим образом .
Эталонные образцы предварительно нанос т на поверхность носител , фиксируют их тепловой обработкой и предгибридизуют . Маркированию, например сульфированию , подвергают исследуемый материал без очистки его нуклеотидных последовательностей непосредственно в процессе лизиса бактериальных клеток или тканей, инфицированных вирусами, Общее врем обработки и маркировки исследуемого материала до его взаимодействи с фиксированными на носителе эталонными образцами занимает 3 ч. Носитель с эталонными образцами подвергают взаимодействию с маркированным исследуемым материалом и отмывают избыток материала . Факт комплементарного взаимодействи нуклеотидных последовательностей эталонного образца и исследуемого материала устанавливают иммуноферментным методом .
Пример 1. Бактериальную культуру штамма E.coli TG I с плазмидой pTZ 18R выращивают с аэрацией при 37°С в L-буль- оне, содержащем 30 мкг/мл ампициллина, до концентрации 2х108 кл /мл. Бактериальсл С
о xj
00 00
oj
00
ную культуру лизогеиного по фагу /1 штамма E.coli CSH 45 ( Я С 1857S7) выращивают аналогичным образом в L-бульоне без антибиотика . Бактериальную культуру штамма B.subtills 168 выращивают в L-бульоне до насыщени (до концентрации 2x10 кл/мл). Клетки из 1 мл каждой бактериальной культуры осаждают центрифугированием при 20QOg в течение 5 мин и суспендируют в 0,2 мл ТЭН-буфера, содержащего 0,05 М трис- HCI, 0.001 М ЭДТА, 0.025М натри хлористого , рН 8,0. Такие суспензии клеток используют в качестве исследуемого материала . Все дальнейшие операции, кроме специально указанных, провод т при комнатной температуре.
Дл обработки и маркировки исследуемого материала предлагаемым способом к суспензии клеток прибавл ют 0,05 мл раствора лизоцима в ТЭН-буфере с концентрацией 4 мг/мл. Через 10 мин добавл ют 1,35 мл лизирующего раствора, содержащего 6,0 М гуанидинхлорида, 0,1 М ЭДТА, 0,05 М трис-HCI, рН 8,0, и перемешивают в течение 5 мин до полного лизиса клеток. Прогревают лизат при G5°C в течение 10 мин, затем п ть раз пропускают лизат через иглу с помощью шприца на 5 мл. К лизату добавл ют 2 мл раствора 1,0 М метилгидроксиламина, рН 6,0 и 8 мл раствора 2,0 М метабисульфита натри , рН 6,0. Через 1,5 ч прибавл ют 11,6 мл изопропилового спирта и выдерживают в течение 15 мин. Затем осаждают сульфированные нуклеотидные последовательности центрифугированием при SOOOg в течение 15 мин, Осадок дважды промывают 70%-ным этиловым спиртом, высушивают на воздухе в течение 15 мин и раствор ют сульфированные нуклеотидные последовательности в 0,05 мл ТЭН-буфера. Общее врем подготовки исследуемого материала к реакции комплементарного взаимодействи с эталонными образцами составл ет 3 ч,
Дл сравнени исследуемый материал обрабатывают на носителе - нитроцеллю- лозном фильтре в соответствии с известным способом. Суспензию клеток нанос т на поверхность нитроцеллюлозного фильтра, ли- зируют раствором 0,5 М гидроокиси натри в течение 10 мин, нейтрализуют раствором 1,5 М натри хлористого, 1,0 М трис-HCI, рН 7,0 в течение 13 мин, затем фиксируют тепловой обработкой при 65°С в течение 2-12 ч,
Предгибридизацию провод т путем инкубации фильтра при 37°С в течение 3 ч в 10 мл гмбридизационного раствора, содержащего 50% формамида, 5хССР (1хССР соответствуе раствору 0,15 М натри хлористого , 0,015 М натри лимоннокислого), 0,02% фиколла, 0,02% поливинилпирролидона, 0,02% овальбумина, 0,1% додецилсульфата
натри , 75 мкг/мл денатурированной прогреванием при 100°С и фрагментированной ультразвуком ДНК тимуса теленка. Общее врем подготовки исследуемого материала на носителе составл ет 5,5-15,5 ч. .
0 По 0,2 мл растворов овальбумина с концентрацией 1 мг/мл в ТЭН-буфере и ДНК тимуса теленка с концентрацией 1 мг/мл в ТЭН-буфере подвергают такой же физико- химической обработке предлагаемым спо5 собом, как и бактериальные клетки. Полученные препараты используют в качестве контрольных.
На нитроцаллюлозный фильтр нанос т в виде отдельных точек по 0,01 мл растворов
0 сульфированных нуклеотидных последовательностей из бактериальных клеток и контрольных препаратов ДНК тимуса теленка и овальбумина. Фильтр высушивают на воздухе в течение 30 мин.
5Дл вы влени маркированного исследуемого материала и контрольных препаратов используют иммуноферментный метод. Фильтр помещают а 10 мл раствора дл блокировки, содержащего буфер ФСБ сле0 дующего.состава: 0,007 М натри фосфорнокислого двузамещенного, 0,003 М натри фосфорнокислого однозамещенного, 0,12 М натри хлористого. 0,02% глицина, 0,3% Твин-20, рН 7,4, с добавлением овальбуми5 на до конечной концентрации 0,2 мг/мл. Через 30 мин фильтр перенос т в 10 мл буферу ФСБ, содержащего конъюгат имму- ноглубул(лнов кролика против сульфированной ДНК с перексидазой хрена в
0 разведении 1:200 и выдерживают в течение 1 ч. Фильтр отмывают три раза по 10 мин, каждую поомывку провод т в 20 мл буфера ФСБ. Затем фильтр погружают в 5 мл раствора хромогенного субстрата, содержаще5 го 0,2% бензидина, 0,4 М аммони хлористого, 3% перекиси водорода, 0,02 М ЭДТА, рН 6,0, Выдерживают 20 с, затем фильтр промывают водой и высушивают на воздухе в течение 15 мин. Оценку результа0 тов провод т визуально, счита за положительный по вление сине-голубой окраски.
Из результатов следует, что иммунофер- ментным методом вы вл ютс нуклеотидные последовательности исследуемого
5 материала и контрольной ДНК, но не вы вл етс препарат контрольного белка.
Представленные данные свидетельствуют , что предлагаемый способ позвол ет вводить специфическую метку в исследуемый материал без очистки его нуклеотидных
последовательностей. При этом маркирование белка, составл ющего основную часть примесей, не происходит. Общее врем подготовки исследуемого материала к реакции комплементарного взаимодействи с эталонными образцами предлагаемым способом по сравнению с известным сокращаетс по меньшей мере на 2,5 ч.
Пример 2. В качестве эталонных образцов (зондов) используют ДНК плазми- ды pTZ 18R и фага Я. Дл денатурации ДНК растворы зондов с концентрацией 0,2 мг/мл в ТЭН-буфере прогревают при 100°С в течение 10 мин. На три нитроцеллюлозных фильтра нанос т в виде отдельных точек по 0,01 мл растворов зондов. Фиксацию зондов на фильтрах и предгибридизацию провод т в соответствии с известным способом. В качестве исследуемого материала используют суспензии бактериальных клеток штаммов E.coli TG I (pTZ 18R), E.coli CSH 45 ( A Cl 857S7) и Bac.subtilis 168, обработанные и маркированные по методике, описанной в примере 1. Фильтры с фиксированными эталонными образцами помещают в полиэтиленовые пакеты и внос т в каждый по 1 мл гибридизационной смеси, содержащей 0,95 мл гибридизационного раствора и 0,05 мл одного из препаратов маркированного исследуемого материала. Пакеты запаивают и инкубируют при 37°С в течение 24 ч. Удал ют из пакетов гибриди- зационные смеси. Фильтры отмывают в течение 45 мин, инкубиру их при 65°С в 200 мл раствора 5хССР, 0,1% додецилсульфата натри , затем 5 мин в растворе 2хССР при комнатной температуре. Фильтры высушивают на воздухе в течение 30 мин.
Инкубацию фильтров в растворе дл блокировки и в растворе коньюгата иммуноглобулинов кролика против сульфированной ДНК с пероксидазой хрена, отмывку фильтров и окрашивание комплементарных нуклеотидных последовательностей в растворе хромогенного субстрата провод т, как описано в примере 1.
Как следует из полученных данных, окраска по вл етс лишь в точках фиксации эталонных образцов, комплементарных нуклеотидных последовательност м маркированного исследуемого материала. Некомплементарные нуклеотидные последовательности предлагаемым способом не вы вл ютс .
Таким образом, предлагаемый способ действительно позвол ет вы вл ть в иссле- 5 дуемом материале нуклеотидные последовательности , комплементарные эталонным образцам, и применим дл идентификации как бактерий, так и вирусов. По сравнению с известным способом, предлагаемый спо- 0 соб за счет снижени веро тности неспецифических реакций не дает ложно положительных результатов и они имеют однозначную интерпретацию.
Преимущества предлагаемого способа 5 перед известным - ускорение анализа и повышение достоверности его результатов путем снижени веро тности неспецифических реакций - достигаютс за счет других отличительных признаков - маркировки ис0 следуемого материала (сульфирование) без очистки его нуклеотидных последовательностей и гибридизации маркированного материала с предварительно фиксированными на носителе эталонными образцами.
5Использованный метод детркции результатов гибридизации вл етс качественным и не позвол ет определ ть количество гибридных нуклеотидных последовательностей . Однако этот метод ис0 пользован лишь дл иллюстрации принципиальной осуществимости предлагаемого способа и не вл етс единственно возможным .
Claims (1)
- Формула изобретени5Способ вы влени нуклеотидных последовательностей , включающий подготовку носител , исследуемого материала, эталонного образца, введение метки, проведение реакции комплементарного взаимодейст0 ви на поверхности носител нуклеотидных последовательностей исследуемого материала и эталонного образца с последующей регистрацией результатов по наличию метки в продукте взаимодействи , отличаю5 щ и и с тем, что, с целью ускорени способа и повышени достоверности его результатов за счет снижени веро тности неспецифических реакций, в качестве исследуемого материала используют лизат кле0 ток, метку ввод т непосредственно в полученный лизат, а дл проведени реакции на носитель нанос т эталонный образец , а затем меченый исследуемый материал.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894686597A SU1678838A1 (ru) | 1989-05-03 | 1989-05-03 | Способ вы влени нуклеотидных последовательностей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894686597A SU1678838A1 (ru) | 1989-05-03 | 1989-05-03 | Способ вы влени нуклеотидных последовательностей |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1678838A1 true SU1678838A1 (ru) | 1991-09-23 |
Family
ID=21445373
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU894686597A SU1678838A1 (ru) | 1989-05-03 | 1989-05-03 | Способ вы влени нуклеотидных последовательностей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1678838A1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997038131A1 (en) * | 1996-04-11 | 1997-10-16 | Valentina Filippovna Kulikova | Method for detecting a nucleic acid chain to be analysed |
| RU2158765C2 (ru) * | 1994-05-23 | 2000-11-10 | Биотроникс Корпорейшн | Способ обнаружения целевой нуклеиновой кислоты, набор (варианты), днк дуплекс и композиция для осуществления способа |
-
1989
- 1989-05-03 SU SU894686597A patent/SU1678838A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| TalkowS., MoseleyS. Specific DNa proter In diagnostic microbiology. - USA Patent, 1982, №4358535. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2158765C2 (ru) * | 1994-05-23 | 2000-11-10 | Биотроникс Корпорейшн | Способ обнаружения целевой нуклеиновой кислоты, набор (варианты), днк дуплекс и композиция для осуществления способа |
| WO1997038131A1 (en) * | 1996-04-11 | 1997-10-16 | Valentina Filippovna Kulikova | Method for detecting a nucleic acid chain to be analysed |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1231303A (en) | Detection of bacteria by nucleic acid hybridization | |
| US4446237A (en) | Method for detection of a suspect viral deoxyribonucleic acid in an acellular biological fluid | |
| KR0159071B1 (ko) | 감염증 진단용 프로브 | |
| CA1272443A (en) | Solution-phase dual hybridization assay for detecting polynucleotide sequences | |
| EP0163220B1 (en) | Nucleic acid hybridization assay employing detectable anti-hybrid antibodies | |
| US5011770A (en) | DNA detection method | |
| EP0310251B1 (en) | DNA detection system | |
| NO841725L (no) | Fremgangsmaate og stoffer til bruk ved analyse og paavisning av genetisk materiale | |
| CN117051078B (zh) | 甲醛重交联在CUT&Tag技术建库中的应用 | |
| EP0128018B1 (en) | Molecular genetic probe, and method of forming same, assay technique and kit using said molecular genetic probe | |
| Shad et al. | Bluetongue virus detection: a safer reverse-transcriptase polymerase chain reaction for prediction of viremia in sheep | |
| Barry et al. | Relationship of colominic acid (poly N-acetylneuraminic acid) to bacteria which contain neuraminic acid | |
| Yehle et al. | A solution hybridization assay for ribosomal RNA from bacteria using biotinylated DNA probes and enzyme-labeled antibody to DNA: RNA | |
| JP3476821B2 (ja) | カンピロバクタージュジュニ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ）のゲノムの核酸の塩基配列と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列 | |
| CA2147618C (en) | Probe for diagnosing of infectious diseases | |
| SU1678838A1 (ru) | Способ вы влени нуклеотидных последовательностей | |
| JPS61502889A (ja) | 化学的にラベルした刻酸、その利用法およびその実行用キット | |
| CA2284555C (en) | Probes for the diagnosis of infections caused by streptococcus pyogenes | |
| Smith et al. | Non‐isotopic DNA probes for the identification of subgingival microorganisms | |
| CA2028012A1 (en) | Hybridization assay for campylobacter rrna | |
| GB1565908A (en) | Process for the extraction of microorganisms and reagents comprising them | |
| Flandrois et al. | Study of the staphylococcal affinity to fibrinogen by passive hemagglutination: a tool for the Staphylococcus aureus identification | |
| CN118460678A (zh) | 一种属水平乳杆菌活菌快速精准定量方法 | |
| Zeph et al. | Comparison of three nonradioactive and a radioactive DNA probe for the detection of target DNA by DNA hybridization | |
| KR900700623A (ko) | 감염증 진단방법 및 미생물의 검출과 미생물의 동정방법 |