SK7362003A3 - 4-(Biphenylcarbonylamino)piperidine derivatives as MTP inhibitors - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka derivátov 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu ako inhibítorov MTP, farmaceutických prostriedkov, ktoré tieto deriváty obsahujú a ich použitia v medicíne.

Doterajší stav techniky

Mikrozomálny triglyceridový transferový proteín (MTP) je transferový proteín umiestnený v retikule hepatocytov a enterocytov, ktorý katalyzuje zostavu biomolekúl, ktoré transportujú triglyceridy, apo B lipoproteíny.

Označenie apo B znamená apoproteín 48 vnútorností a apoproteín 100 pečene.

Mutácie v MTP alebo v B apoproteíne sa prejavujú u Íudí velmi nízkou hladinou alebo dokonca neprítomnosťou apo B lipoproteínov. Lipoproteíny, obsahujúce apo B (chylomikróny, lipoproteíny s veími nízkou hustotou - Very Low Density Lipoproteins) a ich metabolické rezídua (chylomikrónové zvyšky, Low Density Lipoproteins) sa považujú za hlavný rizikový faktor vo vývoji aterosklerózy, hlavnej príčiny úmrtí v priemyselných krajinách. U ludí, ktorí sú heterozygótny sa pozorujú pre tieto mutácie hladiny znížené v priemere na polovinu spojené s nízkym kardiovaskulárnym rizikom (C.J. Glueck, P.S. Gartside, M.J., Mellies P.M., Steiner, Trans. Assoc. Am. Physicians 90, str. 184, 1977). To naznačuje, že modulácia sekrécií triglyceridom bohatých lipoproteínov pomocou antagonistov MTP a/ alebo sekrécií apo B, by mohla byť užitočná pri liečení ate« rosklerózy a širšie patológií vyznačujúcich sa nárastom apo B lipoproteínov.

Molekuly, ktoré inhibujú MTP a/alebo sekréciu apo B, by preto mohli byt užitočné pri liečení hypertriglyceridémií, hypercholesterolémií a dyslipidémií spojených s diabetes a tiež pri prevencii a liečení obezity.

Inhibítory MTP už boli v odbore opísané. Z nich zaslúžia zmienku deriváty piperidínu opísané v kanadskom patentovom spise číslo 2 091102 a tiež zlúčeniny·opísané v európskom patentovom spise číslo EP 643 057 (BRISTOL-MEYERS SQUIBB), ktoré zodpovedajú jednej z nasledujúcich štruktúr:

Opisujú sa zlúčeniny všeobecného vzorca B, kde osobitne znamená

R¹ skupinu alkylovú, alkenylovú, alkinylovú, arylovú, heteroaryíovú, arylalkylovú (kde alkylový podiel obsahuje aspoň dva atómy uhlíka), diarylalkylovú, arylalkenylovú, diarylalkenylovú, arylalkinylovú, diarylalkinylovú, diarylalkylarylovú, heteroarylalkylovú (kde alkylový podiel obsahuje aspoň dva atómy uhlíka), cykloalkylovú alebo cykloalkylalkylovú (kde alkylový podiel obsahuje aspoň dva atómy uhlíka), pričom je každá z týchto skupín prípadne substituovaná, alebo R¹ znamená skupinu všeobecného vzorca alebo ' 1->1 znamena R

skupinu všeobecného vzorca

Ί 7 Ί β kde znamená p 1 až 8, R a R vždy od seba nezávisle atóm vodíka, skupinu alkylovú, alkenylovú, arylovú, arylalkylovú, heteroarylovú, heteroarylalkylovú, cykloalkylovou alebo cykloalkylalkylovú, pričom aspoň jeden R¹⁷ a R¹⁸ má iný význam ako atóm vodíka, alebo R¹ znamená skupinu všeobecného vzorca —R19

kde znamená

R¹⁹ skupinu arylovú alebo heteroarylovú,

R²⁰ skupinu arylovú alebo heteroarylovú a

R²¹ atóm vodíka, skupinu alkylovú, arylovú, alkylarylovú, arylalkylovú, aryloxyskupinu, arylalkoxyskupinu, skupinu heteroarylovú, heteroarylalkylovú, heteroarylalkoxyskupinu, cykloalkylovú, cykloalkylalkylovú alebo cykloalkylalkoxyskupinu,

R⁵ skupinu alkylovú obsahujúcu aspoň dva atómy uhlíka, alkenylovú, alkinylovú, arylovú, heteroarylovú, arylalkylovú, heteroarylalkylovú, cykloalkylovú, cykloalkyl alkylovú, polycykloalkylovú, polycykloalkylalkylovú, cykloalkenylovú, cykloalkenylalkylovú, polycykloalkenylovú, polycykloalkenylalkylovú alebo heteroarylkarbonylovú, pričom všetky substituenty R⁵ a R⁶ sú prípadne substituované a pokiaľ znamená R⁵ skupinu metylovú, neznamená R⁶ atóm vodíka a pokiaľ znamená R⁵ skupinu fenylovú, obsahuje fenylový cyklus s výhodou hydrofóbny substituent, ako je skupina alkylová, helogénalkylová, arylová, aryloxyskupina alebo skupina arylalkylová a R⁶ znamená atóm vodíka alebo skupinu alkylovú s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkenylovú s 1 až 4 atómami uhlíka.

Definícia vymedzená v európskom patentovom spise číslo EP 643057 zahŕňa množinu zlúčenín, ktorých aktivita nie je doložená a zostáva sporná.

V skutočnosti podľa väčšiny príkladov znamená R¹ jeden alebo dva karbocyklické arylové cykly a znamená napríklad prípadne substituovanú fenylovú skupinu; prípadne substituovanú fenylalkylovú skupinu; alkylovú skupinu; 3,3-bis(fenyl)propylovú skupinu; 5,5-bis(fenyl)-2-pentenylovú skupinu; alebo 5,5-bis(fenyl)pentylovú skupinu. Iba niekoľko príkladov objasňuje substituenty R¹ vo význame heterocyklickej skupiny. Avšak žiadne príklady nedokladajú zlúčeniny ako podľa vynálezu.

Hore uvedený všeobecný vzorec B nezahŕňa zlúčeniny, v ktorých R¹ znamená skupinu arylmetylovú alebo heteroarylmetylovú. Pri výskumoch týkajúcich sa inhibície MTP sa však zistila neúčinnosť zlúčeniny všeobecného vzorca

kde znamená R¹ skupinu 4-imidazolylmetylovú, 2-indolylmetylovú, 3-imdolylmetylovú, 2-benzofurylmetylovú, 2-benzotienylmetylovú alebo vzorca

Naproti tomu sa podlá vynálezu s prekvapením zistilo, že rodina zlúčenín, ktoré sú velmi podobné týmto neaktívnym zlúčeninám, vykazuje osobitne účinnú inhibíciu MTP a tiež vynikajúcu inhibíciu sekrécie B apoproteínov (apo B).

V porovnaní so zlúčeninami, ktoré vyvinula spoločnosť BRISTOL-MEYERS SQUIBB, sú zlúčeniny podlá vynálezu tiež charakterizované trvalosťou pôsobenia, čo podporuje ich potenciálnu výhodu s ohladom na mechanizmus toxickosti (hepatická steatóza).

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu sú predovšetkým zlúčeniny všeobecného vzorca I

Z—CO—NH (I) kde znamená

Z skupinu bifenylovú prípadne substituovanú v polohe 2', 3', 4', 5’ a 6' jedným alebo niekolkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho skupinu trihalogénmetylovú a trihalogénmetoxyskupinu,

Het skupinu chinolylovú, chinoxalylovú alebo pyridylovou príprípadne substituovanú jedným alebo niekolkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho atóm halogénu, kyanoskupinu, nitroskupinu, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, arylovú s 6 až 12 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu hydroxylovú, tioalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylovú a alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, a ich farmaceutický prijateľné soli, hydráty, solváty a stereoizoméry.

Hore uvedených zlúčenín sa vynález osobitne týka.

Farmaceutický prijateľnými sólami sa rozumejú soli s kyselinami minerálnymi alebo organickými, ako sú hydrochlorid, hydrobromid, sulfát, hydrogensulfát, dihydrogenfosfát, citrát, maleát, fumarát, 2-naftalénsulfonát a para-toluénsulfonát.

Soli, ktoré vhodne uľahčujú separáciu alebo kryštalizáciu zlúčenín všeobecného vzorca I, ako soli kyseliny pikrovej, šEaveľovej alebo opticky aktívnych kyselín, napríklad kyseliny vínnej, dibenzoylvínnej, mandľovej alebo gáforsulfónovej, sú rovnako nové a spadajú do rozsahu vynálezu ako medziprodukty zlúčenín podľa vynálezu.

Hydrátmi sa rozumejú napríklad hemihydráty, monohydráty alebo dihydráty, solvátmi sa rozumejú napríklad adičné zlúčení ny s alkoholom napríklad s metanolom alebo s etanolom.

Výrazom alkyl sa tu vždy rozumie lineárna alebo rozvetvená uhľovodíková skupina obsahujúca s výhodou 1 až 6 atómov uhlíka a výhodnejšie 1 až 4 atómy uhlíka. Príkladne sa uvádzajú najmä skupina metylová, etylová, propylová, izopropylová, butylová, terc-butylová, izobutylová, pentylová a hexylová skupina.

Výrazom alkoxy sa tu vždy rozumie alkylová skupina, hore definovaná, viazaná prostredníctvom atómu kyslíka. Pri kladne sa uvádzajú najmä metoxyskupina, etoxyskupina, izopropyloxyskupina, butoxyskupina a hexyloxyskupina.

Výrazom halogén sa tu vždy rozumie atóm brómu, chlóru, jódu alebo fluóru, pričom je výhodný atóm fluóru.

Výrazom aryl sa tu vždy rozumie monocyklická alebo polycyklická aromatická uhlovodíková skupina obsahujúca 6 až 18, s výhodou 6 až 10 atómov uhlíka. Podlá príkladov je to predovšetkým skupina fenylová.

S výhodou znamená Z skupinu 4'-trifluórmety1-2-bifenylovú alebo 4'-trifluórmetoxy-2-bifenylovú.

Ako výhodné významy skupiny Het sa uvádzajú skupina 2-pyridylová, 3-pyridylová, 2-chinolylová, 2-chinoxalylová a 4-chinolylová skupina, pričom je pyridylový, chinolylový a chinoxalylový cyklus prípadne substituovaný.

S výhodou pokial znamená Z skupinu 2-bifenylovú, znamená Het skupinu 2-chinolylovú alebo 6-fluór-2-chinolylovú, pričom práve tieto dva významy sú výrazne výhodné.

Podobne pokial Z znamená skupinu 4’-trifluórmetoxy-2-bifenylovú, znamená Het s výhodou prípadne substituovanú skupinu 3-pyridylovú, prípadne substituovanú skupinu 2-chinolylovú, prípadne substituovanú skupinu 4-chinolylovú alebo skupinu 2-pyridylovú substituovanú alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, najmä skupinou metylovou.

Okrem toho keď znamená Het skupinu pyridylovú, je táto pyridylová skupina s výhodou prípadne substituovaná jedným alebo niekolkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho skupinu metylovú, atóm halogénu a metoxyskupinu.

Nasledujúce zlúčeniny všeobecného vzorca I sú osobitne výhodné:

1-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidín (zlúčenina A-l), l-(3-pyridylmetyl)—4—[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidínfumarát (zlúčenina A-2),

1-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenylJkarbonylamino]piperidínmaleát (zlúčenina A-3),

1-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidínhydrochlorid (zlúčenina A-4),

1-[(6-metyl-2-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidín (zlúčenina A-5),

1-(2-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidín (zlúčenina A-6), l-[(2-metyl-3-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-7), l-(2-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-8),

1-(4-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-9), l-[(6-metoxy-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-10),

1—[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-ll), l-[3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-l), l-[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-2), l-[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4’-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínfumarát (zlúčenina A-12), l-[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínmaleát (zlúčenina A-13), l-[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínhydrochlorid (zlúčenina A-14),

1-( 2-chinolylmetyl)-4-[ (4 ' -trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidínhydrochlorid (zlúčenina A-15), l-[ (4-chinolyl)metyl]-4-[ (4 '-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínhydrochlorid (zlúčenina A-16),

1—[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl) karbonylamino] piperidín (zlúčenina B-3),

1—[ (6-metoxy-2-chinolyl)metyl]-4-[ (4 '-trifluórmetoy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-4), l-[(4-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-blfenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-5), l-[(2-chinoxalyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidín (zlúčenina A-17), l-[(2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-6),

1—[ (6-metyl-2-pyridyl)metyl]-4-[ ( 2-bifenyl )karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-7), l-[(2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino] piperidín (zlúčenina B-8),

1-[(2-metyl-3-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-9),

1-[(6-mety1-2-pyridýl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina B-10), alebo ich farmaceutický prijatelné soli, hydráty, solváty alebo stereoizoméry.

Zlúčeniny podlá vynálezu sa môžu lahko pripravoval: jedným z nasledujúcich spôsobov:

Spôsob A

Prvý spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I spočíva podlá vynálezu v tom, že sa necháva reagovať amín všeobecného vzorca II (II)

kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, s karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca III

Z - CO - OH (III) kde Z má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I alebo s aktivovaným derivátom karboxylovej kyseliny všeobecného vzorca III, takže dôjde ku kopulácii aminu všeobecného vzorca II s karboxylovou kyselinou všeobecného vzorca III alebo s jej derivátom.

Výrazom kopulácia sa tu rozumie vytváranie zodpovedajúcej amidovej väzby.

Kopulácia sa vykonáva za obdobných podmienok, ako je to opísané v literatúre na syntézu peptidov.

Aktivovaným derivátom karboxylovej kyseliny všeobecného vzorca III je zlúčenina, ktorá má miesto karboxylovej skupiny -COOH reaktívnejšiu skupinu napríklad -CO-T, kde znamená T atóm halogénu (a najmä atóm chlóru), skupinu azidovú, imidazolidovú, p-nitrofenoxyskupinu, skupinu 1-benzotriazolovú, N-O-sukcínimidovú, acyloxyskupinu (napríklad pivaloyloxyskupinu), alkoxykarbonyloxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxypodiele, dialkyl-O-ureidoskupinu alebo dicykloalkyl-O-ureidoskupinu.

Pokial sa používajú zlúčeniny všeobecného vzorca III vo forme svojej volnej karboxylovej kyseliny, uskutočňuje sa reakcia v prítomnosti kopulačného činidla, napríklad karbodiimidu, prípadne v prítomnosti aktivačného činidla napríklad hydroxybenzotriazolu alebo hydroxysukcínimidu.

Ako príkladné kopulačné činidlá sa uvádzajú dicykloalkylkarbodiimidy, dialkylkarbodiimidy a karbodiimidy, ktoré sú rozpustné vo vodnom prostredí a najmä dicyklohexylkarbodiimid, diizopropylkarbodiimid a (3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid.

Výhodné sú reakčné podmienky, ktoré zahŕňajú použitie ekvimolárnych množstiev zlúčenín, ktoré reagujú v inertných rozpúšťadlách.

Ako príklady inertných rozpúšťadiel sa uvádzajú najmä prípadne halogénované alifatické alebo aromatické uhľovodíky, napríklad hexán, heptán, toluén, benzén, xylén, dichlórmetán, chloroform, tetrachlórmetán, dichlóretán, chlórbenzén alebo dichlórbenzén.

S výhodou sa reakčná teplota udržuje v rozmedzí teploty okolia (15 až 35’C) až teploty spätného toku rozpúšťadla, najmä reakčná teplota v rozmedzí 15 až 60’C a ešte lepšie v rozmedzí 20 až 40’C.

Pri realizácii spôsobu v prítomnosti karbodiimidu sa toto reakčné činidlo môže zavádzať vo forme soli do reakčnej zmesi a napríklad vo forme hydrochloridu. V takom prípade sa odporúča zavádzať súčasne zásadu do reakčného prostredia. Vhodnými zásadami, ktoré je možné použiť, sú napríklad pyridín, 4-dimetylaminopyridín (4-DMAP), 2,6-di-terc-butylpyridín, 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU), 1,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-en (DBN) a l,4-diazabicyklo[2.2.2]oktán (DABCO) alebo trietyléndiamín.

Podía osobitne výhodného spôsobu realizácie vynálezu sa amín všeobecného vzorca II necháva reagovať s kyselinou všeobecného vzorca III v prítomnosti (3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu v dichlórmetáne za teploty okolia (15 až 35’C).

Pracovníci v odbore sú schopní ľahko pripraviť amíny všeobecného vzorca II známymi spôsobmi.

Amíny všeobecného vzorca II sa môžu napríklad získať vykonaním reakcií podľa schémy 1

Schéma 1

Het—COH

IV

CF₃—CO—N H

V

.redukčné činidlo

NH_Z

CH₂—Het

- H

V prvom stupni sa necháva reagovať 2,2,2-trifluór-N-[4-piperidyl]acetamid s aldehydom všeobecného vzorca IV

Het - COH (IV) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, v inertnom rozpúšťadle s výhodou v halogénovanom alifatickom alebo aromatickom uhľovodíku, ako je hore uvedené (s výhodou v halogénovanom alifatickom uhľovodíku napríklad v dichlóretáne), v prítomnosti redukčného činidla, ktoré sa môže používať na redukčnú amináciu. Vhodné sú redukčné činidlá, ktoré selektívne redukujú iminoskupiny v prítomnosti alkehydovej

I a amidovej skupiny. ^!

Takými redukčnými činidlami sú s výhodou triacyloxybórhydrid alkalického kovu, najmä triacyloxyborhydrid alkalického kovu napríklad triacyloxyborhydrid sodný.

Inými redukčnými činidlami, ktoré je možné použiť sú kyanobórhydrid sodný alebo vodík.

S výhodou sa reakcia vykonáva pri teplote v rozmedzí 0 až 60 °C, výhodnejšie pri teplote v rozmedzí 10 až 40’C napríklad pri teplote okolia (15 až 35°C).

Zlúčeniny všeobecného vzorca VI sa môžu získať reakciou zlúčenín všeobecného vzorca V i

cf₃— co-nh--^ \ih (V) so zlúčeninou všeobecného vzorca VIII

Het - CH₂ - Hal (VIII) kde Het má hore uvedený význam a Hal znamená atóm halogénu, napríklad chlóru, brómu alebo jódu, v prítomnosti minerálnej zásady alebo organickej zásady.

Povaha zásady a reakčné podmienky sa môžu íahko stanoviť pracovníkmi v odbore a zodpovedajú čŕalej uvedeným podmienkam v prípade spôsobu C pre reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca ’ VIII so zlúčeninou všeobecného vzorca VII.

Pokial je atóm halogénu v zlúčenine všeobecného vzorca VIII iný ako atóm jódu, môže byť výhodné pridávať do reakčného prostredia jodid alkalického kovu (napríklad jodid draselný) na urýchlenie reakcie.

V druhom stupni sa amidová skupina zlúčeniny všeobecného vzorca VI mení na zodpovedajúcu aminoskupinu. Na tento účel môžu pracovníci v odbore použiť akýkolvek známy spôsob. Môžu predovšetkým použit redukčnú alebo hydrolyzačnú reakciu.

Amidová skupina zlúčeniny všeobecného vzorca VI sa zbavuje elektrónov osobitne elektrón sťahujúcou trifluórmetylovou skupinou. Tak sa môže znižovať pôsobenie pomerne slabého re- ^: dukčného činidla, napríklad bórhydridu alkalického kovu (napríklad nátriumbórhydridu) alebo lítiumalumíniumhdridu alebo systému BH₃/BF₃Et₂O.

Reakcia sa všeobecne vykonáva v prítomnosti inertného rozpúšťadla éterového typu, napríklad alkyléterov (a najmä dietyléteru alebo diizopropyléteru), cyklických éterov (napríklad tetrahydrofuránu alebo dioxánu), dimetoxyetánu alebo dietylénglykoldimetyléteru.

Pokial sa použije bórhydrid alkalického kovu, môže reakčné prostredie obsahovať tiež protické rozpúšťadlo, ako je alkanol a predovšetkým alkanol s 1 až 6 atómami uhlíka (napríklad metanol, etanol, propanol, izopropanol, butanol, izobutanol, alebo terc-butanol), etylénglykol, cyklický alkohol! (napríklad cyklohexanol) alebo metylcellosolve.

Podía výhodného rozpracovania vynálezu je žiadúce pridávať alkohol do reakčného prostredia, ako je metanol, etanol, propanol, izopropanol, butanol, izobutanol, terc-butanol, dietylénglykol alebo cyklohexanol.

Reakčná teplota je spravidla v rozmedzí 15°C až teplota spätného toku použitého rozpúšťadla, s výhodou v rozmedzí 15 až 120°C napríklad v rozmedzí 20 až 115°C.

Pracovníci v odbore môžu však tiež použiť hydrolýzu amidoskupiny v zásaditom prostredí pôsobením zásady. Ako vhodné zásady sa osobitne uvádzajú hydroxid sodný a draselný, najmä ' hydroxid sodný.

V takom prípade sa hydrolýza s výhodou vykonáva v polárnom protickom prostredí, napríklad v alkoholovom prostredí. Výhodnými rozpúšťadlami sú alkanoly s 1 až 4 atómami uhlíka, najmä metanol a predovšetkým etanol.

Rozpúšťadlom môže však byť tiež éter hore uvedený a predovšetkým dimetoxyetán.

Hydrolýza sa s výhodou vykonáva pri teplote v rozmedzí 10 až 100“C a volba teploty závisí od sily použitej zásady.

V prípade hydroxidu sodného alebo draselného je teplota pri hydrolýze v rozmedzí 15 až 60’C všeobecne dostatočná, výhodnejšia je však teplota v rozmedzí 30 až 45°C.

Spôsob B

Druhý spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca I spočíva podlá vynálezu v tom, že sa necháva reagovať aldehyd všeobecného vzorca IV

Het - COH (IV) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, s piperidínom substituovaným v polohe 4 všeobecného vzorca VII

IH (VII) kde Z má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, v prítomnosti redukčného činidla, ktoré je vhodné na redukciu iminoskupiny.

Podmienky tejto reakcie sú rovnaké, ako sú opísané v prípade reakcie aldehydu všeobecného vzorca IV s piperidínom všeobecného vzorca V.

Výhodným redukčným činidlom je triacyloxybórhydrid alkalického kovu, pričom osobitne výhodným triacyloxybórhydridom alkalického kovu je nátriumtriacyloxybórhydrid (NaBH(OAc)₃).

Táto reakcia sa s výhodou vykonáva v polárnom aprotickom rozpúšťadle. S výhodou sú takým rozpúšťadlom halogénované aromatické alebo alifatické uhlovodíky. Príkladne sa pri tomto spôsobe môžu použiť rozpúšťadlá zo súboru zahŕňajúceho halogénbenzén, halogéntoluén, halogénxylén, dichlórmetán, tetrachlórmetán, dichlóretán, alebo dichlórmetán. Halogénované alifatické uhlovodíky sú pre tento účel osobitne vhodné. To platí predovšetkým pre dichlóretán.

S výhodou sa reakčná teplota udržuje v rozmedzí teploty 0 až 40°C, predovšetkým v rozmedzí 15 až 35°c.

Pracovníci v odbore lahko pripravia zlúčeniny všeobecného vzorca VII z obchodne dostupných zlúčenín známymi spôsobmi.

Najmä v prípade zlúčenín všeobecného vzorca VII, kde znamená Z skupinu 2-bifenylovú alebo 2-bifenylovú substituovanú trifluórmetylovou skupinou, môžu pracovníci v odbore využívať podmienky opísané v svetovom patentovom spise číslo WO 96/26205.

V prípade zlúčenín všeobecného vzorca VII, kde znamená Z skupinu 2-bifenylovú substituovanú trifluórmetoxyskúpinou môžu pracovníci v odbore využívať podnety vyplývajúce z nasledujúcej schémy 2:

Schéma 2

kde znamená Bn skupinu benzylovú a hal atóm halogénu.

Skupina 2-bifenylová substituovaná trifluórmetoxyskupinou, je pripravená v stupni (i) reakciou derivátu boru všeobecného vzorca XI

(XI) so zlúčeninou všeobecného vzorca IX v prítomnosti vhodného katalyzátoru ako paládia(O) napríklad Pd(PPh₃)₄ a v prítomnosti zásady, ako je minerálna zásada, napríklad uhličitan alkalického kovu, ako uhličitan sodný.

Vhodným rozpúšťadlom, ktoré sa používa, je napríklad zmes éteru a protického rozpúšťadla.

Vhodnými étermi sú hore definované étery (s výhodou dioxán) a dimetoxyetán a ich zmesi.

Ako výhodné alkoholy sa uvádzajú alkanoly s 1 až 6 atómami uhlíka, hore uvedené, napríklad etanol.

Výhodnými používanými rozpúšťadlami sú napríklad zmes dimetoxyetánu, dioxánu a etanolu.

S výhodou sa reakčná teplota udržuje v rozmedzí teploty 40 až 150°C, predovšetkým v rozmedzí 70 až 100°C, napríklad v rozmedzí 80 až 90 °C.

V stupni (ii) sa vykonáva debenzylácia endocyklického atómu dusíka piperidínu. Táto reakcia sa uskutočňuje pre pracovníkov v odbore známym spôsobom (napríklad katalytickou hydrogenáciou) a predovšetkým za podmienok opísaných v svetovom patentovom spise číslo WO 96/26205.

Zlúčeniny všeobecného vzorca IV sú obchodné produkty alebo sa môžu lahko pripraviť pracovníkmi v odbore z obchodne dostupných zlúčenín.

Variant spôsobu je založený predovšetkým na príprave aldehydu všeobecného vzorca IV so zodpovedajúcim esterom všeobecného vzorca XII

Het - CO -0 - Y (XII) kde znamená Y prípadne substituovanú uhlovodíkovú skupinu, s výhodou alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka a Het má hore uvedený význam, pôsobením vhodného redukčného činidla. Ester všeobecného vzorca XII sa redukuje v prvom stupni na zodpovedajúci alkohol všeobecného vzorca XIII

Het - CH₂ - OH (XIII) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorca I, pridaním vhodného redukčného činidla. V druhom stupni sa získaný alkohol všeobecného vzorca XIII oxiduje pôsobením pomerne slabého oxidačného činidla, napríklad oxidu manganičitého.

Iným riešením je priama oxidácia zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca XIV

Het - CH₃ (XIV) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, za získania aldehydu všeobecného vzorca IV napríklad pôsobením oxidu seleničitého.

Spôsob C

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu pripravovať reakciou halogenidu všeobecného vzorca VIII

Het - CH₂ - Hal (VIII) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, a Hal znamená atóm halogénu, s piperidínom všeobecného vzorca VII (VII) kde Z má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, v prítomnosti zásady.

Reakcia sa s výhodou vykonáva v silne polárnom aprotickom rozpúšťadle, ako je nitril (napríklad acetonitril alebo izobutyronitril) alebo amid (napríklad formamid, dimetylformamid, dimetylacetamid, N-metyl-2-pyrolidinón alebo hexametylfosforylamid), pričom dimetylformamid je osobitne výhodné rozpúšťadlo .

Pri tejto reakcii sa uvažuje o použití organickej zásady, ako je napríklad pyridín, 4-dimetylaminopyridín, 2,6-di-terc-butylpyridín, l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU), 1,5-di-azabicyklo[4.3.0]non-5-en (DBN) alebo 1,4-diazabicyklo[2.2.2]oktán (DABCO) alebo trietyléndiamín.

Podía výhodného rozpracovania sa používa minerálna zásada, ako je napríklad hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydrogenuhličitan sodný, uhličitan sodný, hydrogénuhličitan draselný, alebo uhličitan draselný, pričom uhličitan draselný je osobitne výhodný.

Pokial Hal neznamená atóm jódu, je žiadúóe pridávať: do reakčného prostredia jodid alkalického kovu, napríklad jodid draselný, za účelom katalýzy reakcie piperidínu všeobecného vzorca VII s halogenidom všeobecného vzorca VIII.

S výhodou sa reakčná teplota udržuje v rozmedzí teploty až 120°C, predovšetkým v rozmedzí 60 až 100C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca VIII sú bud obchodne dostupné alebo ich pracovníci v odbore lahko pripravia.

V zlúčenine všeobecného vzorca VIII znamená Hal s výhodou atóm brómu alebo chlóru a predovšetkým atóm brómu.

Pokiaí je zlúčeninou všeobecného vzorca VIII brómovaný derivát, môže sa tento derivát pripravovať, voínou radikálovou bromáciou pôsobením bromačného činidla za podmienok volných radikálov.

Tieto podmienky zahŕňajú najmä pridanie do reakčného prostredia iniciátorov volných radikálov, ktoré sa môžu aktivovať tepelne alebo fotochemický ožiarením ultrafialovými lúčmi.

Ako príklady iniciátorov sa uvádzajú najmä azozlúčeniny, peroxidy a peroxyestery. Ako azozlúčeniny sa uvádzajú príkladne l,l'-azobis(izobutyronitril) alebo AIBN, l,l'-azobis(sek-pentylnitril) a 1,1'-azobis(cyklohexánkarbonitril).

Ako príklady peroxidov sa uvádzajú benzoylperoxid, acetylperoxid, laurylperoxid, kumylperoxid a terc-butylperoxid.

Ako príklady peroxyesterov sa uvádzajú najmä terc-butylperoxyacetát a terc-butylperoxybenzoát.

Ako príklady volných radikálových bromačných činidiel sa uvádzajú bróm a N-brómsukcínimid (NBS). Pokial sa použije ako bromačné činidlo NBS, používa sa s výhodou polárne aprotické rozpúšťadlo a ešte výhodnejšie tetrachlórmetán.

Spôsob D

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu takisto pripravovať reakciou halogenidu všeobecného vzorca XV

(XV) kde Hal znamená atóm halogénu, s výhodou atóm brómu a Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, s derivátom boru všeobecného vzorca XI ^CF3°Q^ (OH)z (XI) v prítomnosti vhodného katalyzátoru, ako je paládium(O) napríklad Pd(PPh₃)₄ a v prítomnosti minerálnej zásady, ako je uhličitan alkalického kovu.

Reakcia sa vykonáva za podmienok, ktoré sú opísané hore pre reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca IX s derivátom bóru všeobecného vzorca XI podlá spôsobu B.

Zlúčeniny všeobecného vzorca XV sa môžu pripraviť jednoducho kopuláciou amínu všeobecného vzorca II

(II) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, s kyselinou všeobecného vzorca XVI

(XVI) kde Hal znamená atóm halogénu, alebo s jej aktivovaným derivátom.

Tento spôsob sa môže realizovať za obdobných podmienok ako hore opísaná kopulácia amínu všeobecného vzorca II s kyselinou všeobecného vzorca III (spôsob A).

Aktivovanými derivátmi kyseliny všeobecného vzorca XVI sú zlúčeniny majúce namiesto karboxylovej skupiny -COOH reaktívnej šiu skupinu, napríklad -CO-T, kde T má význam definovaný hore pri spôsobe A.

Vynález sa tiež týka medziproduktov všeobecného vzorca II a VI

(II) (VI)

kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I.

Zásada všeobecného vzorca I sa môže meniť s kyselinou na adičnú soľ s kyselinou, napríklad reakciou ekvivalentného množstva zásady a kyseliny v inertnom rozpúšťadle, ako je etanol a následným odparením rozpúšťadla. Vhodné na túto reakciu sú kyseliny, ktoré poskytujú fyziologicky prijateľné soli. Ako anorganické kyseliny sa môže použiť napríklad kyselina sírová, dusičná, halogenovodíkové, napríklad chlorovodíková alebo bromovodíková, kyselina fosforečná ako kyselina ortofosforečná, kyselina sulfamínová, ďalej organické kyseliny najmä alifatické, alicyklické, aralifatické, aromatické alebo heterocyklické jednosýtne alebo viacsýtne karboxylové, sulfónové a sírové kyseliny, ako sú napríklad kyselina mravčia, octová, propiónová, pivalová, dietyloctová, malónová, jantárová, pimelová, fumarová, maleínová, mliečna, vínna, jablčná, citrónová, glukónová, askorbová, nikotínová, izonikotínová, metánsulfónová alebo etánsulfónová, etándisulfónová, 2-hydroxyetánsulfónová, benzénsulfónová, p-toluénsulfónová, naftalénmonosulfónová a naftaléndisulfónová a laurylsírová kyselina. Soli s fyziologicky neprijateľnými kyselinami, napríklad pikráty, sa môžu používať na izoláciu a/alebo čistenie zlúčenín všeobecného vzorca I.

Na druhej strane môžu byť zlúčeniny menené na zodpovedajúce kovové soli, najmä soli alkalických kovov alebo soli kovov alkalických zemín, alebo na zodpovedajúce amóniové soli použitím zásad (napríklad hydroxidu alebo uhličitanu sodného alebo draselného). Použiť je možné prijateľné organické zásady, ako je napríklad etanolamín.

Vynález sa ďalej týka farmaceutických prostriedkov obsahujúcich jednu alebo niekolko zlúčenín všeobecného vzorca I podlá vynálezu v kombinácii s jedným alebo s niekolkými excipientmi.

Tieto zlúčeniny sa môžu podávať orálne vo forme tabliet okamžite vstrebávateIných alebo s riadeným vstrebávaním, gólových kapsúl alebo granúl, intravenózne vo forme vstrekovateľných roztokov, transdermálne vo forme adhéznych transdermálnych prostriedkov alebo lokálne vo forme roztokov, krémov alebo gélov.

Pevné prostriedky na orálne podanie sa pripravujú pridaním účinnej látky a plnidla a prípadne spojiva, rozptylovacieho činidla, mazadla, farbiva, alebo činidla zlepšujúceho chuť, tvarovaním zmesi na získanie tabliet, potiahnutých tabliet, granúl, práškov alebo kapsúl.

Ako príklady plnidiel sa uvádzajú laktóza, kukuričný škrob, sacharóza, glukóza, sorbitol, kryštalická celulóza a oxid kremičitý, ako príklady spojív sa uvádzajú poly(vinylalkohol), poly(vinyléter), etylcelulóza, metylcelulóza, akácia, tragakant, želatína, šelak, hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmetylcelulóza, citrát vápenatý, dextrín a pektín. Ako príklady mazadiel sa uvádzajú stearát horečnatý, mastenec, polyetylénglykol, oxid kremičitý a stužené rastlinné oleje. Ako príklady farbív sa uvádzajú farbivá schválené pre medicinálne produkty. Ako príklady činidiel zlepšujúcich chuť sa uvádzajú kakaový prášok, mäta v rastlinnej forme, aromatický prášok, mäta vo forme oleja, borneol a prášková škorica. Tablety alebo granuly sa môžu samozrejme vhodne poťahovať napríklad cukrom alebo želatínou.

Vstrekovatelná forma, obsahujúca ako účinnú látku zlúčeninu podlá vynálezu, sa pripravuje prípadne miešaním zlúčeniny s regulátorom hodnoty pH, s tlmivým roztokom, s činidlom suspenzačným, solubilizačným, stabilizačným, upravujúcim tonickosť a/alebo konzervačným a premenou zmesi na formu pre intravenózne, subkutánne alebo intramuskulárne vstrekovanie známymi spôsobmi. Vstrekovatelná forma sa prípadne môže lyofilizovať známym spôsobom.

Ako príklady suspenzačných činidiel sa uvádzajú metylcelulóza, polysorbát 80, hydroxyetylcelulóza, akácia, práškový tragakant, nátriumkarboxymetylcelulóza a poyetoxylovaný4D sorbitanmonolaurát.

Ako príklady solubilizačných činidiel sa uvádzajú ricínový olej stužený polyoxyetylénom, polysorbát 80, nikotínamid, polyetoxylovaný sorbitanmonolaurát a etylester mastných kyselín ricínového oleja.

Ako príklady stabilizátorov sa uvádzajú siričitan sodný, metasiričitan sodný a éter a ako príklady činidiel konzervačných metyl-p-hydroxybenzoát, etyl-p-hydroxybenzoát, kyselina sorbová, fenol, krezol a chlórkrezol.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I a farmaceutické prostriedky pódia vynálezu sú užitočné ako inhibítory mikrozomálneho triglyceridového transferového proteínu (MTP). Môžu sa používať na ošetrovanie hypercholesterolémie, hypertriglyceridémie, hyperlipidémie, pankreatitídy, hyperglykémie, obezity, aterosklerózy a dyslipidémie spojených s diabetes.

Vynález sa preto tiež týka použitia zlúčenín alebo farmaceutických prostriedkov podlá vynálezu na prípravu medicinálneho produktu, ktorý inhibuje mikrozomálny triglyceridový transfer ový proteín.

Zlúčeniny podlá vynálezu tiež umožňujú inhibíciu sekrécie B apoproteínov (apo B).

Zlúčeniny podlá vynálezu tiež umožňujú inhibíciu sekrécie lipoproteínov s velmi nízkou hustotou (VLDL). Demonštrácia inhibicie sekrécie VLDL umožňuje doložiť aktivitu in vivo zlúčenín podlá vynálezu.

Aktivita in vivo zlúčenín podlá vynálezu sa môže doložiť jednoducho na potkanoch Wistar podlá nasledujúceho protokolu. Hepatické VLDL sekrécie sa merajú blokovaním odbúravania VLDL s IV injekciou Tritonu (Tyloxapol) v dávke 400 mg/kg po dvoch dňoch postenia. Hodnotenie sekrécie VLDL sa vykonáva stanovením akumulácie triglyceridov a cholesterolu v krvnom obehu počas piatich hodín. Zlúčeniny podlá vynálezu znižujú túto hepatickú sekréciu VLDL.

Dva protokoly na demonštráciu inhibicie MTP a inhibicie sekrécie apo B sú uvedené v príkladoch uskutočnenia vynálezu.

Vynález objasňujú, nijak však neobmedzujú nasledujúce príklady praktického uskutočnenia.

Nukleárnymi magnetickými rezonančnými spektrami sú protónové spektrá získané pri 300 MHz a za teploty okolia. Chemické posuny sa vyjadrujú v ppm a v každom prípade sa týkajú signálu deutérovaného rozpúšťadla (chloroform pri 7,25 ppm alebo dimetylsulfoxid pri 2,5 ppm).

Signály sa opisujú týmito skratkami: s = singlet, d = dublet, t = triplet, dd = dublet dubletov, dt = dublet tripletov, td = triplet dubletov, m = multiplet.

Hmotové spektrá sa získajú pri použití zariadenia LC/MS Platform-LC (spoločnosti Waters/Micromass) v pozitívnom elektrosprejovom spôsobe s napätím 20 voltov. MS udáva hodnoty hmotovej spektrometrie. NMR udáva hodnoty nukleárnej magnetickej rezonancie.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príprava 1 l-Benzyl-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín

Roztok 7,86 g (38,2 mmol) 4-trifluórmetoxyfenylboritej kyseliny v zmesi 15 ml dimetoxyetánu a 40 ml dioxánu sa pridá do zmesi, ktorú tvorí 13,0 g (34,9 mmol) N-(l-benzyl-4-piperidyl)-2-brómbenzamidu, 15 ml dimetoxyetánu, 120 ml dioxánu, 5 ml absolútneho etanolu, 30 ml vodného 2M roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 1,04 g Pd(PPh₃)₄. Výsledná zmes sa udržuje 6,5 hodiny na teplote 85°C v prostredí dusíka, nechá sa stáť pri teplote miestnosti (15 hodín) a potom sa ohrieva ďalších päť hodín. Po vychladnutí a pridaní 100 ml etylacetátu a 50 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného sa pridá 100 ml vody a 100 ml etylacetátu. Po oddelení fáz usadením sa vodná fáza reextrahuje 100 ml etylacetátu. Spojené organické fázy sa premyjú 100 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Prvá vodná fáza sa reextrahuje 100 ml dichlórmetánu. Spojené organické fázy sa vysušia síranom sodným, sfiltrujú sa a skoncentrujú sa, čím sa získa svetle béžová pevná látka, ktorá sa disperguje v diizopropylétere. Získa sa 12,8 g (87 % teórie) špinavo bielej pevnej látky.

NMR: (DMSO-d₆) 8(ppm):l,23 (2H,m), 1,51 (2H,m),1,91 (2H,m),

2,62 (2H,m), 3,38 (2H,s), 3,56 (lH,m), 7,10 až 7,65 (13H,m), 7,98 (lH,m).

Príprava 2

4-[(4'-Trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylaminoJpiperidín

Zmes 6,2 g (13,4 mmol) zlúčeniny, získanej v príprave 1, v 30 ml metanolu, 30 ml absolútneho etanolu, 16 ml cyklohexénu a 2,1 g 20% hydroxidu paladnatého v prostredí dusíka sa udržuje na teplote spätného toku. Pokiaľ nie je reakcia ukončená po štyroch hodinách, pridá sa ďalších 16 ml cyklohexénu a 2,1 g 20% hydroxidu paladnatého a zmes sa zahrieva ďalších šesť hodín. Po sfiltrovaní cez celit a skoncentrovaní sa získa pevná látka, ktorá sa vyberie do izopropyléteru a získa sa 3,6 g (72 % teórie) šedo-bielej pevnej látky, ktorá zodpovedá titulnej zlúčenine.

NMR: (DMSO-dg) 6(ppm): 1,08 (2H,m), 1,48 (2H,m),2,41 (2H,m), 2,82 (2H,m), 3,30 (1H, široké s, zamenené trifluóroctovou kyselinou), 3,60 (lH,m), 7,33 až 7,60 (8H,m), 8,01 (lH,m).

Príklad 1

Príprava l-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín (zlúčenina A-l)

Stupeň a

2,2,2-Trifluór-N-[1-(3-pyridlmetyl)-4-piperidyl]acetamid

Pridá sa 31,4 g (0,144 mol) triacetoxybórhydridu sodného v prúde dusíka do roztoku 19,6 (0,1 mol) 2,2,2-trifluór-N-[4-piperidylJacetamidu a 10,9 g (0,1 mol) 3-formylpyridínu v 470 ml dichlórmetánu a zmes sa mieša 3 dni pri teplote miestnosti. Výsledná zmes sa spracuje nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a fázy sa oddelia usadením. Organická fáza sa premyje 2x nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa. Získa sa pevná látka, ktorá sa disperguje v diizopropylétere, čím sa získa 19,1 g (67 % teórie) bielej pevnej látky zodpovedajúcej titulnej zlúčenine s teplotou topenia 1287°C.

NMR: (CDC1₃) 8(ppm):l,55 (2H,m), 1,96 (2H,m),2,15 (2H,m), 2,82 (2H,m), 3,50 (2H,s), 3,85 (lH,m), 6,39 (1H,široké s), 7,24 (lH,m), 7,62 (lH,m), 8,38 až 8,63 (2H,m).

Stupeň b

1-(3-Pyridylmetyl)-4-aminopiperidín

20,8 g (0,53 mol) bórhydridu sodného sa pridá do roztoku 19 g (0,066 mol) 2,2,2-trifluór-N-[l-(3-pyridylmetyl)-4-piperidyl]acetamidu v 640 ml dioxánu a 64 ml absolútneho etanolu a výsledná zmes sa udržuje v prostredí dusíka 10,5 hodiny na teplote spätného toku. Po skoncentrovaní a vybraní zvyšku do vody, sa zmes extrahuje dichlórmetánom. Organická fáza sa vysuší síranom sodným a skoncentruje sa, čím sa získa 11,2 g (88 % teórie) oleja, ktorý sa použije bez čistenia v ďalšom stupni.

NMR: (CDC1₃) S(ppm):l,29 (2H,m), 1,70 (2H,m), 1,96 (2H,m), 2,00 až 2,45 (2H,široké s), 2,58 (lH,m), 2,71 (2H,m), 3,40 (2H,s), 7,19 (lH,m), 7,57 (lH,m), 8,30 až 8,60 (2H,m).

Stupeň c

1- (3-pyridylmetyl) -4- [ (4 ' -trif luórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín

Roztok 2,7 g (0,01 mol) 2-karboxy-4'-trifluórmetylbifenylovej kyseliny v 30 ml dichlórmetánu sa pridá do roztoku 2 g (0,00108 mol) zlúčeniny získanej v stupni b), 1,23 g (0,01 mol) 4-DMAP a 1,99 g (0,00102 mol) (3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochloridu v 50 ml dichlórmetánu. Táto zmes sa mieša 120 hodín v prostredí dusíka pri teplote,okolia. Po zriedení dichlórmetánom a premytí vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a vodou sa organická fáza vysuší síranom sodným a skoncentruje sa, čím sa získa olej, ktorý sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 4,5:4,5:1 etylacetát/dichlórmetán/metanol. Získa sa 2,85 (65 % teórie) bielej pevnej látky.

Príklad 2

Príprava l-(2-chinolylmetyl)-4-[(4’-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina A-8)

V prúde dusíka sa pridá 0,78 g (0,0036 mol) triacetoxybórhydridu sodného do roztoku 0,87 g (0,0025 mol) 4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu a 0,405 g (0,0025 mol) 2-formylchinolínu v 15 ml 1,2-dichlóretánu a zmes sa mieša 18 hodín pri teplote okolia. Výsledná zmes sa zriedi dichlórmetánom a pridá sa 40 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanú sodného. Organická fáza sa vysuší síranom sodným, odparí sa k suchu a zvyšok sa vyberie do diizopropyléteru, čím sa získa izolovaním zrazeniny 1 g titulnej zlúčeniny (v podobe bielej pevnej látky) vo výťažku 83%. Teplota topenia je 210°C.

Príklad 3

Príprava l-(6-fluór-2-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl2”bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina A-ll)

Zmes 0,5 g (0,00143 mol) 4-[(4'-trifluór-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu, 0,39 g (0,00286 mol) uhličitanu draselného a 0,1 g jodidu draselného v 25 ml DMF sa udržuje 30 minút na teplote 80“C.

Po vychladnutí na teplotu okolia sa pridá 0,00214 mol 2-brómmetyl-6-fluórchinolínu. Zmes sa udržuje 8 hodín na teplote 80 ’C. Po skoncentrovaní, premytí vodou a extrakcii dichlórmetánom sa organická fáza vysuší síranom sodným. Po prefiltrovaní a koncentrácii sa získa titulná zlúčenina v surovej forme a vyberie sa do diizopropyléteru na vyčistenie. Získa sa 0,16 g titulnej zlúčeniny.

Zlúčeniny v tabulkách I a II sa pripravia vykonaním niektorého spôsobu opísaného v predchádzajúcich príkladoch z vhodných východiskový reakčných činidiel.

V tabulke I v stĺpci I je číslo zlúčeniny, v stĺpci II význam symbolu Het, v stĺpci III teplota topenia a/alebo MS a v stĺpci IV hodnoty NMR S (ppm). V tabulke II je v stĺpci I číslo zlúčeniny, v stĺpci II význam symbolu Het, v stĺpci III význam symbolu T¹, v stĺpci IV teplota topenia a v stĺpci V hodnoty NMR δ (ppm).

Tabulka I

I	II	III	IV
A-1 ĽR 19370	3-pyridyl	160*0 MS: M + 1 = 440	(DMSO-de) 1,32 (2H, m); 1,58 (2H, m); 1.99 (2H, m); 2,61 (2H, m); 3,43 (2H, s); 3,58 (1H, m); 7 27 (2H, m); 7,437,60 (6H, m); 7,75 (2H, d. J = 8,19 Hz); 8..15 (1H, m); 8,49 (2H, m)
A-2 ĽR 20825 (fumaŕát)	3-pyridyl		(DMSO-de) 1,28 (2H, m); 1.58 (2H, m); 2,07 (2H, m); 2,65 (2H, m); 3.48 (2H, s); 3.60 (1H, m); 6,62 (2H, s); 7,307,60 (7H. m); 7,60-7,80 (3H, m); 8,058,30 (1H, m); 8,30-8,60 (2H, m)
A-3 ĽR 20825	3-pyridyl		(DMSO-d6) 1,49 (2H, m); 1,81 (2H, m); 2,70-3,75 (4H, m); 3,83 (1H, m); 4,18

(maleát- )			(2H, s); 6,05 (2H, s); 7,35-7,65 (7H, m); 7,65-7,95 (3H, m); 8,25-8 50 (1H, m); 8,50-8.80 (2H, m)
A_4 LR 20831 (hydrochloridt )	3-pyridyl		(DMSO-de) 1.60-1.95 (4H, m); 2,823,25 (2H, m); 3.25-3.50 (2H, m); 3.81 (1H, m); 4,42 (2H, s); 7,35-7,65 (&H, m); 7,65-8,00 (3H, m); 8,40-8,70 (2H, m); 8,80-9,15 (2H, m); 11,38 (1 H, 2s, brc .)
A-5 LR 20294	6-ielyl-2pyridyl	170’C	(DMSO-dä) 1,30 (2H, m); 1,58 (2H, m); ^.00 (2H, m); 2,42 (3H, s); 2,66 (2H. m) ; 3,46 (2H, s) ; 3,60 (1H, m); 7,16 (2H, m) ; 7,42-7,64 (7H, m) ; 7.75 (2H, d, J= 7,91 Hz); 8,14 (1H, d, J= 7.86 Hz)
A-6 LR 19278	2-pyridyl	156°C MS : M + 1 = 440	(DMSO-de) 1.30 (2H, m); i.58 (2H, m); 2,02 (2H, m); 2,66 (2H, m'); 3,40-3,80 (1H, m + 2H, s); 7,24 (1H, m); 7 257 60 (7H, m); 7,70-7,80 (3H, m); 8,14 (iH, d, J = 7.84 Hz); 8,46 <1 H. m)
A-7 LR 20547	2-Bety]-3pyridyl		(DMSO-d6) 1.27 (2H, m); 1.57 (2H, m) ; 2,00 (2H, m); 2,46 (3H, s); 2.S-2.6 (2H, m) ; 3,32 (2H, s) ; 3.57 (1H, m) ; 7,15 (1H, m) ; 7,35-7.65 (7H, m) ; 7,76 (2H, d, J = 8.2 Hz); 8,12 (1H, d, J = 7,88 Hz) ; 8 31 (1H, m)
A-8 LR 19621	2-<chinolyl	210°C	(DMSO-de) 1,35 (2H, m) ;1,59 (2H, m) ; 2 06 (2H, m) ; 2,69 (2H, m) ; 3,59.(1 H, m); 3.70 (2H, s) ; 7.40-7.80 (11H, m) ; 7,95 (2H, m) ; 8.16 (1H, m) ; 8,30 (1H, . m}

A-9 LR 19622	4-chinoly]	216°C	(DMSO-de) 131 (2H, m); 1.60 (2H, m); 2,10 (2H, m) ; 2,73 (2H, m) ; 3,62 (1H, m) ; 3.87 (2H, s) ; 7,35-7,65 (8H, m) ; 7.74 (3H, m); 8.02 (1H, d, J = 8,18 Hz); 8.14 (1H, d, J= 7.67 Hz) ; 8.25 (1H, d, J= 8,05 Hz); 8,82 (1 H, d, J = 6,34 Hz)
A-10 LR 20304	6-ieloxy2-chinolyl		(CDCI3) 1,16 (2Η, m) ; 1 65 (2H. m) ; 2,19 (2H, m); 2,59 (2H, m); 3,70 (2H, s) ; 3,84 (1H, m) ; 3,91 (3H, s); 5,09 (2H, d, J= 2.72 Hz); 7,04 (1 H, d, J= 2,72 Hz) ; 7 25-7.55 (7H, m); 7.65 (3H, m); 7.95 (2H, m)
A-11 LR 20368	6-fluoro-2chinolyl		(CDCI3) 1,15 (2H. m) ; 1,65 (2H, m) ; 2,20 (2H, m); 2,75 (2H, m); 3,71 (2H, s) ; 3,85 (1H, m); 5,09 (1H, m); 7,30-7,60 (8H. m); 7r65 (3H, m); 8,04 (2H, m)
A-12 LR 20919 (fumarát ·.)	6-fluoro-2chinolyl		(DMSO-de) 1 38 (2H, m); 1£4 (2H, m); 2,32 (2H, m); 2,81 (2H, m); 3,65 (1H, ΠΊ); 3,85 (2H, s); 6,62 (2H, s); 7,357,85 (11 H, m); 8,00-8,10 (1H, m); 8,108,30 (1H, m); 8,30-8,45 (1H, m)
A-13	6-fluoro-2-	-	(DMSO-d6) 1,65 (2H, m); 1,9 (2H, m);

LR 20918 (maleát )	chinoly1		2,95-3,55 (4H, m); 3Λ88 (1H, m); 4,55 (2H, m); 6,09 (2H, s); 7,40-8.00 (11 H, m); 8.05-8,20 (1H, m); 8,35-8.70 (2H, m)
A-14 LR 20917 (hydrochlorid·.)	6-fluoro-2chinolyl		(DMSO-d6) 1.p0-2.10 (4H, m); 3,003.55 (4H, m); 3,89 (1H, m); 4.58 (2H, s) ; 7,25-8,00 (11H, m); 8,00-8,20 (1H, m); 8,35-8,65 (2H, m)
A-15 LR 20420 (hydrochloridi.)	2-chinoly1		(DMSO-de) .1 51-1 89 (4H, m) ; 3,143,56 (4H, m); 3,91 (1H, m); 4 60 (2H, s) ; 7,.45-7,69 (6H, m); 7,69-7,85 (5H, m); 8,06 (2H, m); 8,5 (2H, m); 10,50 (1H, br.‘. s)
A-16 LR 20421 (hydrochlorid j)	4-chinolyl	MS: M+1 + 490.4	(DMSO-dg) 1.60-1 90 (4H, m) ; 3.003.42 (4H, m); 3^.81 (1H, m); 4.92 (2H, s) ; 7 42-7.58 (6H, m); 7f72 (2H, m); 7,88 (1H, m) ; 8,02 (1H, m) ; 8,31 (2H. m) ; 8,57 (2H, m) ; 9.21 (1H, m) ; 10.9011,35(1 H, brr Js)
A-17 LR 21017	2-chinolyl	204’C	(CDCIa) 1,18 (2H, m) ; 1,68 (2H, m) ; 2,23 (2H, m); 2,62(2H·, m); 378(2H, s) ; 3,84 (1H, m) ; 5,11 (1H, broad d, J = 8.05 Hz) ; 7,31-7,.40 (1H, m) ; 7.40-7,60 (4H, m) ; 7,60-7,80 (5H, m) ; 7,98-8,18 (2H, m) :8,92(1 H, s)

Tabuíka II

‘ I	ΙΪ	III	IV	V
B-1 LR 20795	3-pyridyl	-4l-OCF3		(DMSO-de) 1,05-1,35 (2H, m); 1,40- 1 (65 (2H, m); 1,90-3.15 (2H, m); 2,552.85 (2H, m); 3,57 (1H, m + 2H, broad s); 7,25-7,75 (11 H, m); ^.40-8,55 (2H, m)
B-2 LR 20879	6-fluon>-2chinolyl	H		(CDCI3) 1,10 (2H, m); 1,51 (2H, m); 2,18 (2H, m); 2,57 (2H, m); 3,70 (2H, s); 3,80 (1H, m); 7,30-7 60 (12H, m); 7.71 (1H, d, J = 1,-52 Hz); 7 95-8 15 (2H, m)
B-3	6-fluoro-2-	-4*-OCF3	-	(DMSO-de) 1,25 (2H, m); 1,54 (2H, m);

LR21000	chinolyl			2,06 (2H, m); 2,67 (2H, m ); 3,59 (1H. m); 3,68 (2H, s); 7.32-7,55 (8H, m); 7,55-7,70 (2H, m) ; 7,70-7,85 (1H, m); 7,95-8,10 (2H, m); 8,31 (1H, m)
B-4 LR21045	6-ieloxy- 2-cbinolyl	-4'-OCF3		(CDCIa) 1 11 (2H, m); 1.65 (2H. m); 2,18 (2H, m); 2,62 (2H, m); 3,70 (2H, s); 3,83 (1H, m); 3,91 (3H, s); 5.04 (1H, br,L : d, J = 8.30 Hz); 7.04 (ÍH. m); 7.20-7,55 (9H, m) 7,64 (iH, m); 7,88-8.,07 (2H, m)
B-5 LR21032	4-chinolyl	-4’-OCF3		(CDCIa) 1,90 (2H, m); 1,65 (2H, m); 2.17 (2H, m) ; 2,63 (2H, m); 3,83 (1H. m + 2H, s); 7,20-7,60 (10H, m); 7,60-7,80 (2H, m): 8,11 (2H, m); 8,83 (1H, m)
B-6 LR 21118	2-chinolyl	H		(DMSO-de) 1,33 (2H, m); 1,.58 (2H, m); 2,08 (2H, m) ; 2,71 (2H, m) ; 3,59 (1H, m) ; 3.70 (2H, s) ; 7,20-7,66 (11 H, m) ; 7,66-7,75 (1H, m) ; 7,75-8,12 (3H, m) ; 8,20-8,40 (1H, m)
B-7 LF 21089	6-»elyl-2pyridyl	H		(CDCl3) 1,06 (2H. m) ; 1,62 (2H, m) ; 2,11.(2ÍL m); 2,42-2,77. (2H, m + 3H, s) ; 3,51 (2H, s) ; 3,79 (1H, m) ; 5,04 (i H, brc_ . d, J = 7.84 Hz); 6,96-7,20 (2H, m) ; 7,32-7.65 (9H, m) ;7,65-7,85 (1 H, m)
: B-8 ; LR 21085 I	2-chinolyl	-4’-OCF3	165°C	(DMSO-da) 1 32 (2H, m); 1,53 (2H, m); 2,07 (2H, m) ; 2,68 (2H, m) ; 3,55 (1H, m) ; 3,69 (2H, s) ; 7,33-7,65 (10H, m) ; 7,65-7,83 (1H. m) ; 7,83-8.,10 (3H, m) ; 8.31 (1 H, d, J = 8.46 Hz)

B-9 LR 21115	2-»elyl-3pyridyl	-4-OCF3		(DMSO-de) 1 25 (2H, m) ; 1,52 (2H, m); 1,99 (2H, m); 2,45 (3H, s); 2,60 (2H. m) ; 3,37 (2H, s) ; 3,56 (1 Hr m) ; 7,00-7,25 (1H, m); 7,25-7,65 (9H, m) ; 7,85-8/5 (1H,m); 8,15-8,40 (1H,m)
B-10 LR 21119	i 6-»elyl-2pyridyl	-4-OCFa		(CDCIa) 1.10 (2H, m) ; 1,59 (2H, m) ; 2,13 (2H, m); 2,51 (3H, s); 2,60 (2H, m) ; 3,53 (2H, s) ; 3,80 (1H, m); 5 03 (1H, brr . d, J = 8,03 Hz); 6,95-7,05 (1 H, m) ; 7,05-7,20 (1 H, m) ; 7,20-7,30 (2H, m) ; 7,30-7,40 (1H, m) ; 7,40-7,60 (5H, m) ; 7,60-7..70 (1H. m)

Príklad 4

Príprava l-(2-chinolylmetyl)-4-((4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl) karbonylaminojpiperidínu (zlúčenina B-8)

V prúde dusíka sa pridá 0,31 g (1,4 mmol) triacetoxybórhydridu sodného do roztoku 0,36 g (1,0 mmol) 4-[(4’-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylaminojpiperidínu (zlúčeniny získanej v príprave 2) a 0,16 g (1,0 mmol) 2-chinolínkarboxaldehydu v ml 1,2-dichlóretánu a zmes sa mieša šes£ dní pri teplote okolí. Výsledná zmes sa zriedi dichlórmetánom a premyje sa nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Po vysušení organickej fázy síranom sodným a odparení sa získa pevná látka, ktorá sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 9,5:9,5:1 etylacetát/dichlórmetán/metanol). Hlavná frakcia sa disperguje v diizopropylétere, čím sa získa 0,2 g (40 % teórie) titulnej zlúčeniny v podobe bielej pevnej látky.

Príklad 5

Príprava l-[(6-metoxy-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina B-4)

Zmes 0,41 g (1,1 mmol) zlúčeniny získanej v príprave 2, 0,24 g (1,7 mmol) uhličitanu draselného a 0,1 g jodidu draselného v 20 ml dimetylformamidu sa mieša jednu hodinu pri teplote okolia. Pridá sa 0,29 g (1,1 mmol) 2-brómmetyl-6-metoxychinolínu. Zmes sa udržuje sedem hodín na teplote 80°C a nechá stáť cez víkend. Po skoncentrovaní, premytí vodou a extrakcii etyléterom sa organická fáza vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa 0,5 g surového produktu, ktorý sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 98:2 dichlórmetán/metanol). Hlavná frakcia sa disperguje v diizopropylétere, čím sa získa 0,31 g (53 % teórie) bielej pevnej látky zodpovedajúcej titulnej zlúčenine.

Príklad 6

Príprava l-[3-pyridylmetyl]-4-[(4’-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina B-l)

Zmes 0,30 g (0,79 mmol) 1-[3-pyridylmetyl]-4-[(2-brómfenylkarbonylamino]piperidínu, 0,75 ml dimetoxyetánu, 3,7 ml dioxánu, 0,12 ml etanolu, 0,75 ml vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 0,026 g Pd(PPhg)^ a 0,18 g (0,87 mmol) 4-trifluórmetoxyfenylboritej kyseliny sa udržuje 13,5 hodiny na teplote 80°C v prostredí dusíka. Po vychladnutí a pridaní etyl36 acetátu sa pridá nasýtený roztok chloridu sodného a zmes sa nechá stáť cez noc. Po filtrácii a oddelení fázy ustátím sa organická fáza suší síranom sodným, sfiltruje sa a skoncentruje na olej, ktorý sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 4,5:4,5:1 etylacetát/dichlórmetán/metanol). Získa sa 0,15 g (41 % teórie) pevnej látky, ktorá zodpovedá titulnej zlúčenine.

Príklad 7

Príprava l-[(6-fluór-2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenylJkarbonyl amino]piperidínu (zlúčenina B-2)

Stupeň a

Príprava 1-[(6-fluór-2-chinolyl)metyl]-4-[trifluórmetylkarbonylamino]piperidínu

Zmes 12,1 g (61 mmol) 4-trifluóracetamidopiperidínu, 17 g (122 mmol) uhličitanu draselného a 1,2 g jodidu draselného v 300 ml dimetylformamidu sa udržuje 0,5 hodiny na teplote 80°C. Po vychladnutí na teplotu okolia sa pridá roztok 18,1 g (75 mmol) 2-brómmetyl-6-fluórochinolínu v 75 ml dimetylformamidu. Zmes sa udržuje dve hodiny na teplote 80°C a potom sa mieša cez noc pri teplote okolia, opäť sa zahrieva počas šiestich hodín a mieša sa pri teplote okolia cez víkend. Reakčná zmes sa vleje do 500 ml ladovo studenej vody a 500 ml dichlórmetánu. Po oddelení fáz usadením a extrakcii dichlórmetánom sa organické fázy premyjú vodou a vysušia sa síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa surový produkt, ktorý sa čistí filtráciou cez oxid kremičitý (elučné činidlo: 10:1 trichlórmetán/metanol). Ako hlavná frakcia sa získa 15,3 g (71 % teórie) béžovo zafarbenej pevnej látky zodpovedajúcej titulnej zlúčenine.

NMR: (CDC1₃) 6(ppm): 1,49 až 1,72 (2H,m), 1,97 (2H,m), 2,31 (2H,m), 2,88 (2H,m), 3,81 (2H,s), 3,88 (lH,m), 6,12 (lH,m zameniteľné), 7,31 až 7,53 (2H,m), 7,58 (lH,d, J=8,44 Hz), 7,96 až 8,15 (2H,m).

Stupeň b

Príprava l-[(6-fluór-2-chinolyl)metyl]-4-aminopiperidínu

Prikvapká sa 100 ml IN hydroxidu sodného počas 0,5 hodiny do 24,8 g (69 mmol) zlúčeniny získanej v stupni a) v 140 ml monoglyme. Po miernej exotermickej reakcii sa zmes mieša dve hodiny pri teplote okolia, koncentruje sa a vyberie sa do 100 1 vody a 100 ml etyléteru. Vodná fáza sa vyberie do 3x100 ml etyléteru. Éterové organické fázy sa vysušia síranom sodným, sfiltrujú sa a skoncentrujú na tmavo hnedú kvapalinu Ll. Vodná fáza sa reextrahuje 3x100 ml dichlórmetánu. Spojené organické fázy sa vysušia síranom sodným, prefiltrujú a skoncentrujú sa na tmavo hnedú kvapalinu L2. Alkalické tekutiny sa spracujú 100 ml 30% roztoku hydroxidu sodného. Po extrakcii dichlórmetánom, vysušení organickej fázy síranom, filtrácii a odparení sa získa tmavo hnedá kvapalina L3. Všetky tri frakcie, Ll, L2 a L3 sa spoja rozpustením v dichlórmetáne, vysušia sa síranom sodným, sfiltrujú sa a skoncentrujú na produkt, ktorý sa čistí filtráciou cez oxid kremičitý (elučné činidlo: 2:1 trichlórmetán/ metanol). Ako hlavná frakcia sa získa 15,5 g (86 % teórie) červenooranžového oleja zodpovedajúceho titulnej zlúčenine.

NMR: (CDC1₃) 8(ppm): 1,30 až 1,60 (4H,m), 1,79 (2H,m), 2,17 (2H,m), 2,68 (lH,m) 2,85 (2H,m zameniteľné), 3,74 (2H,s), 7,32 až 7,53 (2H,m), 7,61 (lH,d, J=9,71 Hz), 7,97 až 8,14 (2H,m).

Stupeň c

Príprava l-[(6-fluór-2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina B-2)

Rovnakým spôsobom ako podľa príkladu 1 stupeň c) a s východiskovou zlúčeninou získanou v stupni b) a s 2-karboxybifenylom sa získa titulná zlúčenina.

Príklad 8

Príprava l-[(2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu (zlúčenina B-6)

V prúde dusíka sa pridá 0,39 g (1,7 mmol) triacetoxybórhydridu sodného do roztoku 0,36 g (1,3 mmol) 4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidínu a 0,22 g (1,4 mmol) 2-formylchinolínu v 15 ml 1,2-dichlóretánu a zmes sa mieša štyri dni pri teplote okolia. Výsledná zmes sa premyje nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje sa dichlórmetánom. Po vysušení organickej fázy síranom sodným a odparení sa získa pevná látka, ktorá sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom (eluovanie zmesou 4,5:4,5:1 etylacetát/dichlórmetán/metanol). Hlavná frakcia sa disperguje v diizopropylétere, čím sa získa 0,2 g (27 % teórie) titulnej zlúčeniny.

Príklad 8a

Hore opísanými spôsobmi sa pripravujú zlúčeniny uvedené v nasledujúcej tabuľke.

V tabuľke je v stĺpci I uvedená štruktúra zlúčeniny, v stĺpci II teplota topenia a/alebo hodnota MS, v stĺpci III NMR δ (ppm) a v stĺpci IV číslo príkladu, podľa ktorého je zlúčenina pripravená.

I	II ’	111	IV
Br		(DMSO-d6) 1.35 (2Η, m); (2Η, m); 2.1 (2Η, m); 2.65 m); 3.50 (2H, s); 3.60 (1H, 7.45-7.65 (m, 6H), 7.8 (2H, 8.0 (1H, m); 8.20 (1H, m); Í1H. m): 8.65 (1H.	2
		(CDCI3)1.20 (2H, m); 1.75 m); 2.20 (2H, m); 2.65 (2H, 3.50 (2H. s); 3.95 (1H, m); 7.35 (1H, m); 7.45 m); 7.50-7.70 (m, 5H); 7.7073H. πϋ:Β.Ή5ΓτΗ.	)2
	MS: Μ+1 = 459.2		i . 2
f<A Χι,ΌΧΛ'		(DMSO-Ó6) 1 ,50 (2H, m); (2H, m); 2,20-3-40 (2H. m); (2H, m); 3.70-3.90 (3H, m); (3H.s): 7/50-8.40 (12H..	- · , 4
^1,.0^/0		(CDCI3) 1.15 (2H, m); 1.65 m); 2,15 (ŽH, m); Z50-2.65 m); 3.65 (2H, s); 3.80(1 H, . 5.05 (1H, m); 7.30-7.65 11HY. 7.85 (In.io): 7.95 Í1h	L- : -2

/λόχο,. O‘	4	CDCI3) 1,15 (2H, m); 1,60 n); 2,20 (2H, m); 2,60 (2H, 3.60-3,85 (3H, m); $.05 (1H, /,30—7,75 (9H. m); 8,10(1 H, 3,20 (1H,m); 8.35 (1H, m); Í1H. m)	2
=O Q Ľ_		(CDCI3)1,10(2H,m);1,60 L m); 2,15 (2H, m); 2.55 (2H, 3,65 (2H, s); 3.75(1 H, m); (1 H, m); 7,30 (1H. m); 7,35(9H, m); 7,75 (1H,m); 7.85(2H. m)	...3
	173’C	(CDCI3) 1.30 (2H, m); 1.80 m); 2,30 (2H. m); 2,70 (ŽH, 3,80 (2H, s); 3,90 (1H, m); (1H,m);7,30 (1H, m); 7,35(10H,m);8,0 (1H,m);8,15 ml	. 2
diBetánsiilfnniSi.	135- 13ň%	(DMSO-d6) 1.60-2,15 (4H, 2,45 (6H, s); á,20-3,80 (4H, 4,15(1 H, m);4,80(2H, m); 7,75 (6H, m); 7,85 (2H, m); (2H, m); 8,30 (2H, m); 8,55 Inú: 9,15 (1H. sY. 11 (1H.
maleáis---------------------------------	116-	—w

> a zlúčenina l-[6-karboxy-3-pyridylmetyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín.

Príklad 9

Analýza inhibicie aktivity MTP

Podía nasledujúceho protokolu sa analyzuje inhibícia pôsobenia mikrozomálneho triglyceridového transferového proteínu (MTP).

Inhibícia aktivity MTP zlúčeninou sa môže kvantifikovať pozorovaním inhibicie transferu značeného triglyceridu z donorovej častice k akceptorovej častici v prítomnosti MTP. Spôsob prípravy MTP je založený na spôsobe, ktorý opísal Wetterau a Zilversmit (Biochem. Biophys. Acta 875, str. 610, 1986). Odoberie sa niekoíko gramov pečene zlatého chrčka a niekoíkokrát sa pokropí 250 mM cukrovým roztokom pri teplote o°C. Všetky nasledujúce kroky sa vykonávajú pri teplote 4°C. 50% homogenát 250 mM sacharózy sa pripraví v teflónovom mlyne a odstreďuje sa 10 minút pri 10 000 g pri teplote 4°C. Supernatant sa odstreďuje pri 105 000 g 75 minút pri teplote 4°C. Supernatant sa odstráni a odoberie sa mikrozomálna peleta v 3 ml (na gram východiskovej pečene) 150 mM hodnota pH 8,0 Tris/HCl. Uloží sa 1 ml alikvotného podielu pri teplote -80°C až do použitia.

Po roztopení sa pridá frakcia mikrozómomov (1 ml), 12 ml zmrazených tlmivých roztokov 50 mM Tris/HCl, 50 mM KC1, 5 mM MgCl₂, pH 7,4 a 1,2 ml deoxycholátu (0,54% vo vode). Po 30minútovej inkubácii pri teplote 4°C za mierneho miešania sa suspenzia odstreďuje 75 minút pri 105 000 x g. Supernatant, obsahujúci rozpustný MTP, sa dialyzuje proti tlmivému roztoku 150 mM Tris/HCl, 40 mM NaCl, 1 mM EDTA, 0,02 % azidu sodného, pH 7,4 (5x 1 liter počas dvoch až troch dní). MTP sa uloží pri teplote 4°C, je stály počas najmenej 30 dní a použije sa ako v teste.

Donorové častice (lipozómy) sa pripravia z 208 μΐ L-fosfatidylcholínu pri 10 mg/ml v chloroforme a 480 μΐ [3H]trioleínu pri 0,5 mCl/ml v toluéne. Po miešaní sa roztok odparí v prostredí dusíka, vnesie sa do tlmivého roztoku 6 ml 50 mM Tris/HCl, 50 mM KC1, 5 mM MgCl_2/ pH 7,4 a inkubuje sa v ultrazvukovom kúpeli 30 minút pri teplote okolia. Lipozómy sa uložia pri teplote 4°C a pred každým použitím sa opäť ultrazvukujú.

Akceptorové častice sa biotinylujú lipoproteínmi s nízkou hustotou (biot-LDL). Tieto častice sú obchodným produktom spoločnosti Amersham.

Reakčná zmes sa pripraví ako nespracované 1jamkové biele doštičky (Corning Costar) pridaním v tomto poradí: 5 μΐ 50 mM HEPES, 150 mM NaCl, 0,1% (hmotnosť/objem) BSA, 0,05 % (hmotnosť/objem) azid sodný, tlmivý roztok pH 7,4, 5 μΐ lipozómov, 5 μΐ biot-LDL, 5 μΐ DMSO testovaných produktov, 5 μΐ MTP. Po 18- až 24-hodinovej inkubácii pri teplote 37“C sa reakcia ukončí pridaním 100 μΐ Amershamových guíôčok SPA (Scintillation Proximity Assay) kopulovaných na steptavidín a rádioaktivita sa načíta počítačom Top Count (Packard) aspoň za jednu hodinu. Inhibícia transferu triglyceridov zlúčeninou sa prejaví znížením prenesenej rádioaktivity. Percento inhibicie pre danú zlúčeninu sa stanoví voči kontrolám, ktoré neobsahujú žiadne zlúčeniny v reakčnej zmesi.

Výsledky sú vyjadrené v IC₅₀, čo je koncentrácia, ktorá vykazuje 50% inhibíciu MTP. Tieto výsledky sú zhrnuté v tabuíke III pre niekoíko reprezentačných zlúčenín podía vynálezu

Tabulka III
Zlúčenina	IC50 (ΠΜ)
A-5	65
A-7	84
A-8	26

Príklad 10

Analýza sekrécie apo B v ludskej bunkovej línii Hep G2

Aktivita zlúčenín podlá vynálezu sa môže vyhodnocovať meraním inhibície vylučovania apo B v bunkách Hep G2.

Bunky Hep G2 (ECACC-číslo 85011430) sa použijú ako model v štúdii hepatickej sekrécie lipoproteínov in vitro (Dixon J. a Ginsberg H., J. Lipid. Res. 34, str. 167 až 179, 1993).

Bunky Hep G2 sa kultivujú 24 hodín v Dulbecco modifikovanom prostredí Eagle obsahujúcom 10 % zárodočného telacieho séra (DMEM a FCS-Gibco) v 96-jamkových doštičkách v prostredí 5% oxidu uhličitého (približne 70% spekaní).

Testované zlúčeniny sa rozpustia pri 2 alebo 10 mM v dimetylsulfoxide (DMSO). Pripravia sa odstupňované zriedenia (1:3:16) v DMSO a pridajú sa (1:200 Robot Multimek Beckman) do kultivačného prostredia (200 μΐ) a inkubujú sa 24 hodín v rôznych jamkách obsahujúcich bunky Hep G2.

Supernatant z 24 hodinovej kultúry zriedený 1:5 (fosfátom tlmená solanka: PBS obsahujúcom 1 % albumínu hovädzieho séra) sa testuje sendvičovým spôsobom ELISA, ktorý je špecifický pre ludské apo B.

Výsledky sú vyjadrené v IC^q, čo je koncentrácia, ktorá dovolí 50% inhibíciu sekrécie apo B v bunkách Hep G2. Tieto výsledky sú zhrnuté do tabulky IV pre tri reprezentatívne zlúčeniny podlá vynálezu.

Tabulka IV

Zlúčenina	IC50 (nM)
A-5	3
A-7	74
A-8	2
Priemyselná	využiteínosť

Deriváty 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu ako inhibítory mikrozomálneho triglyceridového transferového proteínu a ako inhibítory sekrécie apoproteínu B na výrobu farmaceutických prostriedkov na ošetrovanie napríklad hypercholesterolémie, hypertriglyceridémie, hyperlipidémie, pankreatitídy, hyperglykémie, obezity, aterosklerózy a dyslipidémie spojených s diabetes.

7F ¥3é-2eo3

Claims (19)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu všeobecného vzorca I

   Z—CO—NH—CH₂~Het <¹) kde znamená

   Z skupinu bifenylovú prípadne substituovanú v polohe 2', 3', 4', 5' a 6' jedným alebo niekoľkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho skupinu trihalogénmetylovú a trihalogénmetoxyskupinu,

   Het skupinu chinolylovú, chinoxalylovú alebo pyridylovú príprípadne substituovanú jedným alebo niekoľkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho atóm halogénu, kyanoskupinu, nitroskupinu, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, arylovú s 6 až 12 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu hydroxylovú, tioalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylovú a alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, a ich farmaceutický prijateľné soli, hydráty, solváty a stereoizoméry.
2. 2. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I, kde znamená Z prípadne substituovanú 2-bifenylovú skupinu a ostatné symboly majú v nároku 1 uvedený význam.
3. 3. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podľa nároku 1 alebo 2 všeobecného vzorca I, kde znamená Z skupinu
4. 4'-trifluórmetyl-2-bifenylovú alebo 4’-trifluórmetoxy-2-bifenylovú a ostatné symboly majú v nároku 1 uvedený význam.

   4. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podlá nároku 1 až 3 všeobecného vzorca I, kde znamená Het skupinu

   3-pyridylovú, 2-pyridylovú, 2-chinolylovú, 2-chinoxalylovú alebo 4-chinolylovú, pričom je pyridylový, chinolylový a chinoxalylový cyklus prípadne substituovaný a ostatné symboly majú v nároku 1 až 3 uvedený význam.
5. 5. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podlá nároku 4 všeobecného vzorca I, kde pyridylový cyklus je prípadne substituovaný jednou alebo niekolkými substituentmi zo súboru zahŕňajúceho metylovú skupinu, atóm halogénu a metoxyskupinu a ostatné symboly majú v nároku 4 uvedený význam.
6. 6. Derivát 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podlá nároku 1 až 5 všeobecného vzorca I zô súboru zahŕňajúceho l-(3-pyridylmetyl)-4-[(4¹-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín, l-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínfumarát,

   1-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínmaleát, l-(3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínhydrochlorid, l-[(6-metyl-2-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifeny1)karbonylamino]piperidín, l-(2-pyridylmetyl)-4-[(4’-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ] piperidín , l-[(2-metyl-3-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifeny1)karbonylamino]piperidín,

   1-(2-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín,

   1-(4-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín, l-[(6-metoxy-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín, l-[ (6-fluóro-2—chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín,

   1-[3-pyridylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín,

   1- [ (6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidín, l-[ ( 6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínfumarát, l-[ (6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifeny1)karbonylamino]piperidínmaleát, l-[ (6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino]piperidínhydrochlorid, l-( 2-chinolylmetyl)-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidínhydrochlorid, l-[(4-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidínhydrochlorid, l-[(6-fluóro-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín,

   1—[(6-metoxy-2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidín,

   1—[(4-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín, l-[(2-chinoxalyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetyl-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín,

   1-[(2-chinolyl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidín,

   1- [ (6-metyl-2-pyridýl)metyl]-4-[(2-bifenyl)karbonylamino]piperidín,

   1-[(2-chinolyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino ]piperidín,

   1—[(2-metyl-3-pyridyl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifenyl)karbonylamino]piperidín, l-[(6-metyl-2-pyridýl)metyl]-4-[(4'-trifluórmetoxy-2-bifeny1)karbonylamino]piperidín, a ich farmaceutický prijatelné soli, hydráty, solváty alebo stereoizoméry.
7. 7. Spôsob prípravy derivátu 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podlá nároku 1 všeobecného vzorca I, vyznačujúci sa tým, že sa necháva reagovať amín všeobecného vzorca II (II) kde Het má význam uvedený všeobecného vzorca III v nároku 1, s karboxylovou kyselinou

   CO - OH (III) kde Z má význam uvedený v tom karboxylovej kyseliny nároku 1 alebo s aktivovaným derivávšeobecného vzorca III.
8. 8. Spôsob prípravy derivátu 4-(bifenylkarbonylamino)vyznáaldehyd všepiperidínu podlá nároku 1 všeobecného vzorca I, čujúci sa tým, že sa necháva reagovať obecného vzorca IV

   Het - COH (IV) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorca všeobecného vzorca VII

   I, s amínom

   Z—CO—N H (VII) kde Z má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I redukčného činidla.

   v prítomnosti
9. 9. Spôsob podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že sa ako redukčné činidlo používa triacyloxybórhydrid alkalického kovu.
10. 10. Spôsob prípravy derivátu 4-(bifenylkarbonylamino)piperidínu podlá nároku 1 všeobecného vzorca I, vyznačujúci sa tým, že sa necháva reagovať halogenid všeobecného vzorca VII

    Het - CH₂ - Hal (VIII) kde Het má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I, s amínom všeobecného vzorca VII

    H (VII) kde Z má význam uvedený pri všeobecnom vzorci I.
11. 11. Zlúčenina všeobecného vzorca II (II) kde Het má v nároku 1 pri všeobecnom vzorci I uvedený význam.
12. 12. Zlúčenina všeobecného vzorca VI (VI) kde Het má v nároku 1 pri všeobecnom vzorci I uvedený význam.
13. 13. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa tým, že obsahuje aspoň jednu zlúčeninu podlá ktoréhokoľvek nároku 1 až 6 prípadne v kombinácii s jedným alebo s niekolkými excipientmi.
14. 14. Farmaceutický prostriedok podía nároku 13 na použitie ako inhibítor mikrozomálneho triglyceridového transferového proteínu MTP.
15. 15. Farmaceutický prostriedok podía nároku 13 na použitie ako inhibítor sekrécie apoproteínu B.
16. 16. Farmaceutický prostriedok podía nároku 13 až 15 na použitie na ošetrovanie hypercholesterolémie, hypertriglyceridémie, hyperlipidémie, pankreatitídy, hyperglykémie, obezity, aterosklerózy a dyslipidémie spojených s diabetes.
17. 17. Zlúčenina podía nároku 1 až 6 alebo farmaceutický prostriedok podía nároku 13 až 16 na prípravu medicinálneho prostriedku, ktorý inhibuje mikrozomálny triglyceridový transferový proteín.
18. 18. Zlúčenina podía nároku 1 až 6 alebo farmaceutický prostriedok podía nároku 13 až 16 na prípravu medicinálneho prostriedku, ktorý inhibuje sekréciu apoproteínu B.
19. 19. Zlúčenina podía nároku 1 až 6 alebo farmaceutický prostriedok podía nároku 13 až 16 na prípravu medicinálneho prostriedku na ošetrovanie hypercholesterolémie, hypertriglyceridémie, hyperlipidémie, pankreatitídy, hyperglykémie, obezity, aterosklerózy a dyslipidémie spojených s diabetes.