SK35597A3 - Iodinated x-ray-contrast media - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka zlepšenia kontrastných látok a súvisí s kontrastnými látkami, a konkrétne s jódovanými kontrastnými látkami pre rôntgenové žiarenie.

Doterajší stav techniky

Kontrastné látky sa môžu podávať pri zobrazovacích postupoch v medicíne, napríklad pre zobrazenie rôntgenom, magnetickou rezonanciou a ultrazvukom, na zvýšenie kontrastu obrazu pri zobrazení predmetov, všeobecne ľudského alebo nie-ľudského živočíšneho tela. Výsledný zvýšený kontrast umožňuje, že sa rôzne orgány, typy tkaniva alebo časti tela, môžu jasnejšie pozorovať alebo identifikovať. Pri rôntgenovom zobrazení kontrastná látka pôsobí zmenou absorpčných charakteristík rôntgenového žiarenia na miestach tela, do ktorých je distribuovaná.

Použiteľnosť materiálu ako kontrastnej látky je však jasne veľmi riadená jeho toxicitou, jeho diagnostickou účinnosťou, inými nepriaznivými účinkami, ktoré môže mať na subjekt, ktorému je podaný, a jeho ľahkosťou skladovania a ľahkosťou podávania.

Pretože takéto látky sa konvenčné používajú na účely diagnostiky, skôr ako na dosiahnutie priameho terapeutického účinku, pri vývoji novej kontrastnej, látky je všeobecná požiadavka vyvinúť látku, ktorá má najmenší možný účinok na rôzne biologické mechanizmy buniek alebo tela, čo bude všeobecne viesť k menšej toxicite pre živočíchov a nižším nepriaznivým klinickým účinkom.

K toxicite a nepriaznivým biologickým účinkom kontrastnej látky prispievajú zložky látky, napríklad rozpúšťadlo alebo nosič, ako aj kontrastné činidlo a jeho zložky (napríklad ióny, ak je iónová) a metabolity.

- 2 Zistili sa nasledujúce hlavné faktory prispievajúce k toxicite a nepriaznivým účinkom kontrastnej látky:

chemotoxicita kontrastného činidla, osmolalita kontrastnej látky, a iónové zloženie (alebo jeho nedostatok) kontrastnej látky,

Napríklad pri koronárnej angiografii sa injekcia kontrastnej látky do cirkulačného systému spája s viacerými vážnymi účinkami na funkciu srdca. Tieto účinky sú dosť silné, čím kladú obmedzenia použitiu určitých kontrastných látok pri angiografii.

V tomto postupe v krátkom časovom úseku bolus kontrastnej látky preteká namiesto krvi cirkulačným systémom a rozdiely v chemickej a fyzikálnochemickej povahe kontrastnej látky a krvi, ktorú dočasne nahrádza, môže spôsobiť vznik nežiadúcich efektov, napríklad arytmiu, QT-predĺženie a zvlášť zníženie sily srdcových kontrakcií a jav ventrikulárnej fibrilácie. Prebehlo mnoho výskumov týchto negatívnych účinkov na funkciu srdca spôsobených zavedením kontrastnej látky do cirkulačného systému, napríklad počas angiografie, a veľmi sa hladali prostriedky na zníženie alebo odstránenie týchto účinkov.

Prvé injektovateľné iónové kontrastné činidlá pre róntgenové žiarenie založené na trijódfenylkarboxylových soliach sa zvlášť spájali s osmotickými účinkami spôsobenými hypertonicitou injektovanej kontrastnej látky.

Táto hypertonicita spôsobuje osmotické efekty, ako napríklad odvádzanie vody z červených krviniek, endotelových buniek a buniek srdcovo-cievneho svalstva. Strata vody spôsobuje nepohyblivosť červených krviniek, a hypertonicita, chemotoxicita a neoptimálne iónové zloženie, zvlášť alebo spolu, znižujú silu kontrakcie svalových buniek a spôsobujú dilatáciu malých krvných ciev a následne pokles krvného tlaku.

Problém osmotoxicity sa riešil vývojom neiónových trijódfenylových monomérov, ako je napríklad iohexol, ktoré dovoľujú dosiahnutie rovnakých kontrastne účinných koncentrá- 3 cií jódu pri silne znížených sprievodných osmoxoxických účinkoch.

Snaha k zníženiu osmotoxicity viedla v pravý čas k vývoju neiónových bis(trijódfenylových) dimérov, ako je napríklad iodixanol, ktoré znižujú problémy spojené s osmotoxicitou, pričom ďalej ponechávajú možnosť dosiahnutia kontrastne účinných koncentrácií jódu s hypotonickými roztokmi.

Príklady bis(trijódfenylových) dimérov zviazaných cez aminokarbonylalkylénkarbonylaminové reťazce sú uvedené v VO 9109007 od Mallinckrodta.

Schopnosť dosiahnuť kontrastne účinné koncentrácie jódu bez zvýšenia osmolality roztoku do izotonických úrovní (asi 300 mOsm/kg F^O) ďalej umožnila príspevok k tomu, že toxicita spôsobená iónovou nerovnováhou sa rieši včlenením rôznych katiónov plazmy, ako je diskutované napríklad v VO-90/13636 od Nycomed Imaging AS.

Avšak kontrastná látka pre róntgenové žiarenie s komerčne vysokými koncentráciami jódu asi 300 mgl/ml má relatívne vysoké viskozity, ktoré sú pri laboratórnej teplote v rozsahu od asi 15 do asi 60 mPa.s, pričom dimérna látka je všeobecne viskóznejšia než monomérna látka. Takéto viskozity spôsobujú problémy pre toho, kto podáva kontrastnú látku, pretože sa vyžadujú ihly s relatívne širokým otvorom alebo vysoký aplikačný tlak, a zvlášť sa prejavujú v pediatrických rádiografických technikách, ktoré vyžadujú rýchle podanie bolusu, napríklad pri angiografii.

Zistilo sa, že tento problém viskozity spôsobuje vážnu prekážku pri vývoji vysoko-nepriepustných kontrastných činidiel pre róntgenové žiarenie, zvlášť v prípade látok s vysokou hodnotou jódu a jeho riešenie poskytuje možnosť buď vytvoriť roztoky kontrastného činidla s vyššími než konvenčnými koncentráciami jódu alebo roztoky s konvenčnými koncentráciami jódu ale s nižšími viskozitami, ktoré sa môžu ľahšie injektovať, a ktoré sú použiteľné vo väčšom rozsahu diagnostických sledovaní.

- 4 Podstata vynálezu

Tento vynález rieši problém viskozity zahrnutý u doteraz známych materiálov, a teda vynález z jedného aspektu poskytuje jódované bis-fenylóvé látky užitočné ako kontrastné činidlá pre rontgenové žiarenie so vzorcom I

(I) (kde skupiny môžu byť rovnaké alebo rôzne; R označujú vodíkový alebo jódový atóm alebo skupinu M, dve alebo tri nie-susedné R skupiny na každej CgR^ skupine označujú atómy jódu, a jedna, dve alebo tri R skupiny na každej skupine CgR^ označujú M skupinu, každá CgR^ skupina je trijódfenylovou skupinou alebo skupinou, v ktorej každý R je iný než vodík; X označuje skupinu, ktorá poskytuje 1-, 2- alebo 3-atómový reťazec spájajúci dve CgR^ skupiny; a každý M je nezávisle ne-iónovou hydrofilnou skupinou, M je výhodne ne-iónová hydrofilná skupina, ktorá zahrnuje mono-hydroxyalebo poly-hydroxyalkylovú skupinu) a ich izoméry, zvlášť stereoizoméry a rotaméry.

Zistilo sa, že krátkoreťazcové dimérne látky podľa tohto vynálezu majú vo vodnom roztoku požadovane nízke viskozity.

Látky so vzorcom I sú výhodne asymetrické. To sa môže dosiahnuť použitím asymetrickej 2- alebo 3-atómovej skupiny tvoriacej reťazec X a/alebo výberom neidentických CgR^ skupín, t.j. neidentickou substitúciou jódfenylových koncových skupín. Asymetrické molekuly sú výhodné, pretože sa zistilo, že majú lepšiu rozpustnosť vo vode.

Takáto neidentická substitúcia fenylových koncových skupín, skupiny CgR^, sa môže dosiahnuť rôznymi počtami alebo polohami jódových substituentov a/alebo rôznymi počtami, polohami alebo identitami M substituentov. Aby sa maximalizoval obsah jódu, sú výhodné trijódfenylové koncové skupiny, t.j. skupiny so vzorcom

a v nich dve R skupiny môžu byť rovnaké alebo rôzne, hoci výhodne obe predstavujú skupiny M.

Ak fenylová koncová skupina je disubstituovaná jódom, je to výhodne skupina so vzorcom

(kde M znova môže byť rovnaké alebo rôzne).

Všeobecne budú dijódfenyl-dijódfenylové diméry menej výhodné než dijódfenyl-trijódfenylové diméry alebo trijódfenylové-trijódfenylové diméry, primárne v dôsledku zníženého obsahu jódu, t.j. 4 namiesto 5 alebo 6 jódov na molekulu diméru. Trijódfenyl-trijódfenylové diméry sú skutočne všeobecne výhodnejšie pre ich vyšší obsah jódu.

Solubilizačnými skupinami M môžu byť akékoľvek neionizujúce skupiny konvenčné používané na zvýšenie rozpustnosti vo vode. Vhodné skupiny zahrnujú napríklad -^θ-alkylové skupiny s priamym alebo rozvetveným reťazcom, výhodne skupiny, voliteľne s jednou alebo viacerými CH2 alebo CH skupinami nahradenými kyslíkovými alebo dusíkovými atómami a voliteľne substituované jednou alebo viacerými skupinami vybratými z oxoskupiny, hydroxylu, aminoskupiny, karboxylových derivátov, a oxoskupiny substituovanej atómami síry a fosforu. Konkrétne príklady zahrnujú polyhydroxyalkyl, hydroxyalkoxyalkyl a hydroxypolyalkoxyalkyl a takéto skupiny naviazané na fenylovú skupinu prostredníctvom amidovej väzby, ako je napríklad hydroxyalkylaminokarbonylová, N-alkylhydroxyalkylaminokarbonylová a bis-hydroxyalkylaminokarbonylová skupina. Výhodné spomedzi takýchto skupín sú tie, ktoré obsahujú 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, zvlášť 1, 2 alebo 3 hydroxyskupiny, napríklad

-conh-ch₂ch₂oh

-CONH-CH ₂CH0HCH ₂0H

-conh-ch(ch₂oh)₂

-CON(CH₂CH₂OH)₂ ako aj iné skupiny, napríklad

-CONH₂

-conhch₃

-ococh₃

-n(coch₃)h

-N(COCH₃)C₁_₃-alkyl

-N(COCH₃)-mono, bis alebo tris-hydroxyC-^_4-alkyl,

-N(C0CH₂0H)-mono, bis alebo tris-hydroxyC^^-alkyl

-C(COCH₃)-(mono, bis alebo tris-hydroxyC₃_4-alkyl)₂

-N-(COCH₂OH)₂

-C0N(CH₂CH0HCH₂0H)(CH₂CH₂0H)

-CONH-C(CH₂OH)₃ a

-C0NH-CH(CH₂0H)(CH0HCH₂0H).

Vo všeobecnosti každá z M skupín zahrnuje polyhydroxyC^_4alkylovú skupinu, ako je napríklad 1,3-dihydroxyprop-2yl alebo 2,3-dihydroxyprop-l-yl.

Môžu sa tiež použiť iné takéto M skupiny, ktoré sa konvenčné používajú v oblasti trijódfenylových kontrastných činidiel pre rôntgenové žiarenie, a zavedenie M skupín na jódfenylové štruktúry sa môže dosiahnuť konvenčnými technikami.

Spojovacou skupinou X je v látkach podľa tohto vynálezu vhodne 1, 2 alebo 3 členný reťazec obsahujúci atómy uhlíka, dusíka, kyslíka alebo síry, napríklad

0, S, N alebo C jednoatómový reťazec,

NN, NC, NS, CC alebo CO dvojatómový reťazec, alebo NCN, OCN, CNC, OCO, NSN, CSN, COC, OCC alebo CCC trojatómový reťazec, napríklad :

jeden kyslíkový atóm alebo skupina NR¹, CO, SO2 alebo CR¹^ skupina COCO, CONR¹, C0CR¹2, S0CR¹2, SO^R¹, CR¹2CR¹2,

CR^NR¹, CR¹20;

skupina NR¹CONR¹, OCONR¹, CONR¹CO, CONR¹CR¹2, OCOO, cr¹2ocr¹2, ocr¹2co, cr¹2conr¹, cr¹2cr¹2cr¹2, COCR¹R¹CO, CR¹2NR¹CR¹2, CR¹2SO₂NR¹, CR^OCO alebo NR^O^R¹;

kde R¹ je vodík alebo C^_galkylová alebo alkoxylová skupina, voliteľne substituovaná hydroxylom, alkoxylom, oxa- alebo oxo- skupinou (napríklad polyhydroxyalkylová, formylová, acetylová, hydroxylová, alkoxylová alebo hydroxyalkoxylová skupina), alebo ak je pripojená na uhlík R¹, môže to tiež byť hydroxylová skupina.

Výhodne je X skupina nesymetrická. To sa môže dosiahnuť napríklad asymetrickou substitúciou symetrického reťazca (napríklad N-C-N substituovaný ako NHCONR¹) alebo výberom asymetrického reťazca (napríklad OCN substituovaný ako OCONR¹). Zvlášť by bolo výhodné, keby spojovacia skupina X bola polárna a tiež keby bola hydrofilná.

Príklady výhodných štruktúr podľa tohto vynálezu teda zahrnuj ú:

I I Μ

HCRl₂-Ň-CRl₂-^OV kde Μ a Rl sú podľa vyššie uvedenej definície. Zvlášť výhodnými sú látky so vzorcom

OH OH

NH HN

Λ

OH OH OH OH

Látky podľa tohto vynálezu sa všeobecne môžu pripraviť v troch stupňoch: (a) tvorba diméru, (b) jodácia fenylových skupín a (c) substitúcia fenylových skupín a/a’lebo voliteľne spojovacích skupín solubilizačnými skupinami.

Hoci teoreticky sa stupne (a), (b) a (c) môžu uskutočňovať v akomkoľvek poradí, všeobecne bude výhodné uskutočňovať krok tvorby diméru pred krokom jodácie a z ekonomických dôvodov bude výhodné uskutočňovať krok jodácie ako posledný stupeň syntézy, ak sa to dá uskutočniť, aby sa znížil odpad jódu. Stupeň tvorby diméru môže samotný byť viackrokovým postupom s vhodne aktivovanou spojovacou skupinou, ktorá sa najprv pripojí na jeden monomér, pred reakciou vzniknutého spojenia spojovacia skupina - monomér s druhým monomérom. Alternatívne môže prebiehať tvorba diméru pomocou reakcie podobne alebo kooperatívne substituovaných monomérov, s konjugáciou monomérov vedúcou k tvorbe diméru.

Ak sa to požaduje, spojovacia skupina X sa môže tvoriť modifikovaním, napríklad substitúciou, oxidáciou alebo redukciou prekurzora spojovacej skupiny, napríklad v prekurzorovom monoméri.

Vo všetkých prípadoch sa môžu použiť konvenčné syntetické metódy dobre známe z literatúry (napríklad metódy analogické k metódam použitým a opísaným n výrobu dimérov, ktoré sú uvedené v VO-94/14478).

Dimérne zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu použiť ako kontrastné činidlá pre rôntgenové žiarenie a pre tento účel sa môžu pripraviť s konvenčnými nosičmi a vehikulami, čím sa vytvorí diagnostická kontrastná látka.

Vynález teda z ďalšieho aspektu poskytuje diagnostickú zmes, ktorá obsahuje látku so Vzorcom I (ako je definovaná vyššie) spolu s najmenej jedným fyziologicky tolerovateľným nosičom alebo vehikulom, napríklad vo vodnom roztoku vo vode pre injekcie voliteľne spolu s pridanými iónmi plazmy alebo rozpusteným kyslíkom.

Zmesi kontrastného činidla podľa tohto vynálezu môžu byť pripravené ako hotové zmesi s koncentráciou pre priame použitie alebo sa môžu pripraviť vo forme koncentrátu na zriedenie pred podávaním. Všeobecne majú zmesi v hotovej forme koncentrácie jódu najmenej 100 mgl/ml, výhodne najmenej 150 mgl/ml, s koncentráciami najmenej 300 mgl/ml, napríklad 320 až 400 mgl/ml, ktoré sú všeobecne výhodné. Čím je koncentrácia jódu vyššia, tým je vyššia diagnostická hodnota, ale zároveň je vyššia viskozita a osmolalita roztoku. Normálne bude pre danú látku maximálna koncentrácia jódu určená jej rozpustnosťou a hornými hranicami tólerovateľnosti pre viskozitu a osmolalitu.

Pre kontrastné látky, ktoré sa podávajú injekciou, je požadovaná horná hranica viskozity roztoku pri laboratórnej teplote (20 ’C) 30 mPa.s; avšak viskozity do 50 alebo až do 60 mPa.s sa môžu tolerovať, hoci potom bude všeobecne kontraindikované ich použitie pre pediatrickú rádiografiu. Pre kontrastné látky, ktoré sa majú podávať bolusovou injekciou, napríklad pri angiografických postupoch, sa musia uvažovať osmotoxické účinky a osmolalita by výhodne mala byť pod 1 Osm/kg I^O, zvlášť pod 850 mOsm/kg H2O, konkrétne v dosahu 50 alebo menej, výhodne 10 mOsm od izotonicity (asi 300 mOsm/kg F^O).

S dimérmi podľa tohto vynálezu sa takéto cieľové viskozity, osmolality a koncentrácie jódu môžu ľahko splniť. Účinné koncentrácie jódu sa naozaj dajú dosiahnuť s hypotonickými roztokmi. Môže byť teda žiadúce, upraviť tonicitu roztoku pridaním katiónov plazmy, čím sa znižuje toxický príspevok, ktorý vyplýva z účinkov iónovej nerovnováhy, ktorá nasleduje po bolusovej injekcii. Bude sa požadovať včlenenie takýchto katiónov v rozsahoch navrhnutých vo VO-90/01194 a VO-91/13636.

Výhodné obsahy plazmových katiónov pre kontrastné látky podlá tohto vynálezu, zvlášť pre kontrastné látky pre angiografiu sú nasledujúce:

sodík 2 až 100, najmä 15 až 75, zvlášť 20 až 70, konkrétnejšie 25 až 35 mmol/1 vápnik do 3,0, výhodne 0,05 až 1,6, zvlášť 0,1 až 1,2, rétne 0,15 až 0,7 mmol/1 konkdraslík do 2, výhodne 0,2 až 1,5, zvlášť rétne 0,4 až 0,9 mmol/1

0,3 až 1,2, konkhorčík do 0,8, výhodne 0,05 až 0,6, zvlášť 0,1 až rétne 0,1 až 0,25 mmol/1

0,5, konkPlazmové katióny môžu celkom alebo čiastočne predstavovať protióny v iónovom kontrastnom činidle. Inak sa budú všeobecne dodávať vo forme solí s fyziologicky tolerovateľnými protiónmi, napríklad sa zvlášť výhodne budú s plazmovými katiónmi používať chloridy, sírany, fosforečnany, hydrogénuhličitany, atď.

Okrem plazmových katiónov môže kontrastná látka obsahovať iné protióny, ak dimér je iónový, a takýmito protiónmi budú samozrejme výhodne fyziologicky tolerovatelné protióny. Príklady takýchto iónov zahrnujú ióny alkalických kovov a kovov alkalických zemín, amónium, N-metyl-p-glukamín, etanolamín, dietanolamín, chlorid, fosforečnan a hydrogénuhličitan. Môžu sa použiť tiež iné protióny konvenčné vo farmaceutických prípravkoch. Zmesi naviac môžu obsahovať ďalšie zložky konvenčné v kontrastných látkach pre róntgenové žiarenie, napríklad pufre, atď.

Vynález bude teraz ďalej opísaný pomocou nasledujúcich Príkladov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-biš(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) fenyl ] močovina

a. 5-amino-2,4,6-trijód-N,N’-bis(2,3-diacetoxypropyl)-izoftalamid

5-amino-2,4,6-trij ód-N,N’-bis(2,3-diacetoxypropyl)-izoftalamid (14,08 g, 0,02 mol), ktorý sa pripravil podľa GB-A-1548594, sa suspendoval v pyridíne (200 ml) a po kvapkách sa s miešaním a chladením pridal anhydrid kyseliny octovej (57,1 g, 0,56 mol). Po premiešavaní počas noci sa zmes vyliala do etyacetátu (300 ml) a vodného roztoku 20 % hmotnostných HC1 (200 ml). Po extrakcii sa organická fáza premyla s 2 mol/1 vodným roztokom HC1 (20 ml), soľankou (70 ml), sušila sa (^28()4) a odparila sa. Výťažok bol 17,4' g (100 %). Surový materiál sa použil bez ďalšieho čistenia, pretože analýza pomocou HPLC a NMR poukázala, že produkt bol >97 % čistoty.

NMR (acetón-dg): 8,76 - 8,83 (m, 2H, NH), 5,50 (široký s, 2H, NH₂), 5,20 - 5,32 (m, 2H), 4,43 (dd, = 11,8 Hz, J_? = 3,4 Hz, 2H), 4,29 (dd, J₁ = 11,8 Hz, J_? = 6,0 Hz), 3,69 - 3,86 (m, 2H), 3,49 - 3,63 (m, 2H), 1,95 - 2,07 (m, 12H).

MS (ESP): 706 (M+l).

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

5-amino-2,4,6-trijód-N,N’-bis(2,3-diacetoxypropyl)-izoftalamid (10,4 g, 0,012 mmol) sa rozpustil v suchom dioxáne (20 ml) a pridal sa roztok 20 % hmotnostných fosgénu v toluéne (3,1 ml). Zmes sa premiešavala počas 1 týždňa v uzavretom hrubostenom kontajneri pri laboratórnej teplote. Po odparení sa zvyšok čistil pomocou preparátívnej HPLC. Výťažok bol 10,0 g (94 %).

*Η NMR: 8,24 - 8,98 (m, 6H, NH), 5,07 (široký s, 4H), 4,12

- 4,35 (m, 8H), 3,31 - 3,60 (m, 8H), 2,00 (s, 24H, CH₃C0).

MS (ESP): 1771 (M⁺).

c. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-dihydroxypropyÍaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (4,0 g, 2,26 mmol) sa rozpustila v zmesi 1:1 vody a metanolu 25 ml, ktorá obsahovala NaOH (1,44 g, 36 mmol). Po premiešavaní počas 6 hodín pri 40 °C sa roztok opracoval so silne kyslým vymieňačom iónov (Amberlyst 15), rozpúšťadlo sa oddelilo a odparenie poskytlo čistý produkt. Výťažok: 3,24 g (100 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 7,98 - 8,60 (m, 6H, NH), 4,65 - 4,80 (m,

4H), 4,44 - 4,57 (m, 4H), 3,62 - 3,75 (m, 4H), 3,02 - 3,55 (m, 16H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,4, 170,30, 151,7, 150,1,

143,5, 100,8, 100,7, 100,5, 100,3, 89,8, 89,6, 70,1, 70,0,

64,1, 42,7, 42,6.

MS (ESP): 1458 (M⁺ + Na⁺).

Príklad 2

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3 -dihydroxypropylaminokarbonyl) .fenyl ] -N-metyl-močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-dihydroxyp.ropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (7,32 g, 5,1 mmol) sa rozpustila vo vodnom roztoku 2 mol/1 NaOH (10 ml) a pridal sa metyljodid (0,95 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 60 hodín, opracovala sa so silne kyslým vymieňačom iónov (Amberlyst 15), odparila sa a čistila sa preparatívnou HPLC. Výťažok produktu bol 4,7 g (63 %) ako biela tuhá látka.

NMR (DMSO-dg): 8,80 (široký d, 1H, NH), 8,42 (široký d,

3H), 8,05 (široký d, 1H, NH), 4,42 - 4,85 (m, 8H), 3,01

- 3,78 (m, 23H).

¹³C NMR (DMSO-d₆): 170,2, 170,1, 170,0, 152,6, 152,5,

150,7, 150,3, 150,2, 149,5, 144,2, 101,3, 101,2, 100,0,

99,5, 90,5, 90,1, 70,5, 70,3, 64,4, 64,3, 43,1, 42,9, 36,0. MS (ESP): 1470 (M⁺ + Na⁺).

Príklad 3

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbony 1)fenyl]-N-hydroxyetyl-močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (2,0 vode (13 ml) obsahujúcej 2 2-brómetanol (1 g, 8,4 mmol) g, 1,4 mmol) sa rozpustila vô' mol/1 NaOH (7 ml). Pridal sa a zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 60 hodín, opracovala sa so silne kyslým vymieňačom iónov (Amberlyst 15), odparila sa a čistila sa preparatívnou HPLC. Výťažok: 1,45 g (70 %) produktu ako biela tuhá látka.

²Η NMR (DMSO-dg): 9,10 - 9,38 (m, 1H, NH), 7,90 - 8,65 (m,

4H, NH), 3,02 - 3,91 (m, 24H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,2, 153,2, 150,9, 150,3, 149,1,

144.1, 101,3, 100,9, 100,7, 100,3, 90,6, 89,8, 70,5, 70,4,

70.1, 64,4, 63,2, 60,6, 53,2, 43,1,

MS (ESP): 1502 (M⁺ + Na⁺).

Príklad 4

N, N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5-(1,3dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-močovina

a. Dichlorid kyseliny l-amino-2,4,6-trijód-3,5-izoftalovej

Kyselina 1-amino-2,4,6-trij ód-3,5-izoftalová (200 g,

O, 358 mol) sa pridala k tionylchloridu (150 ml). Zmes sa premiešavala pri teplote refluxu počas 6 hodín a potom sa nechala ochladnúť na teplotu okolia. Po odparení sa tuhý zvyšok rozpustil v etylacetáte (300 ml), ktorý sa znova odparil do sucha. Zvyšok sa rozpustil v etylacetáte (2000 ml) a výsledný roztok sa premyl roztokom NaCl (250 g) a NaHCO^ (120 g) vo vode (2000 ml), ktorý bol ochladený na 0 °C.

Organická fáza sa oddelila, premyla sa soľankou a vysušila sa (Na2S04) . Odparenie poskytlo 202 g (94 %) produktu ako bielu tuhú látku.

NMR (DMSO-dg): .10,179 (široký s, 2H) .

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,1, 149,7, 149,4, 78,94, 78,90 MS (ESP): 595, 593 (M⁺).

b . 1-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylaminokarbonyl)- 5(1,3-diacetoxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

Dichlorid kyseliny 1-amino-2,4,6-trijód-3,5-izoftalovej (10,0 g, 16,8 mmol) sa rozpustil v suchom N,N-dimetylacetamide (DMAC, 80 ml) a pridal sa trietylamín (14 ml). Po pridaní 2-amino-l,3-propándiolu (2,14 g, 23,55 mmol) sa zmes premiešavala počas 60 hodín. Pridal sa etanolamín (5,0 ml) a zmes sa premiešavala ďalších 24 hodín. Po odparení rozpúšťadiel sa tuhý zvyšok rozpustil v pyridíne (250 ml) a pridal sa anhydrid kyseliny octovej (200 ml). Po premiešavaní počas 20 hodín sa rozpúšťadlá odparili a zvyšok sa rozpustil v etylacetáte. Roztok sa premyl vodou, zriedeným vodným HC1, vodným roztokom NaHCO^, vysušil sa (MgSO^) a odparil sa. Chromatografia na silikagéli za pomoci zmesi etylacetát/heptán (6:1) nasledovaná preparatívnou HPLC (RP-18, acetonitril:voda 35:65) poskytla 4,74 g (35 %) produktu.

¹H NMR (CDC1₃): 6,01-6,17 (2 široké s, 2H, NH), 5,11 (široký s, 2H, NH2), 4,59 - 4,67 (m,lH, CH), 4,22 - 4,40 (m,6H, CH₂0), 3,69 - 3,78 (m, 2H, NCH₂), 2,12 (s, 3H), 2,08 (s,6H). MS (ESP, m/e): 823 ([M⁺+Na]⁺), 801 ([M+l]⁺).

c. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)- 5(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-močovina

1-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylaminokarbonyl)- 5 (1,3-diacetoxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén (0,967 g, 1,20 mmol) sa miešal s fosgénom (8,86 ml roztoku 20 % hmotnostných v toluéne) a dioxáne (3 ml) v hrubostenej, uzavretej banke, ktorá sa potom udržiavala pri 60 °C počas 18 hodín.

Zmes sa nechal ochladnúť na teplotu okolia a rozpúšťadlá sa odparili. Pridal sa dioxán (5 ml) a oddestiloval sa za atmosféerického tlaku. Tento postup sa opakoval dvakrát. Pridali sa dioxán (10 ml), l-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylaminokarbonyl)-5- (1,3-diacetoxy-prop-2-ylaminokarbony1)benzén (0,926 g, 1,16 mmol) a trifluóracetát ortutnatý (26 mg, 0,23 mmol) a rozpúšťadlo sa znova oddestilovalo za atmosférického tlaku počas 1 hodiny. Pridal sa dioxán (10 ml) a zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 16 hodín. Rozpúšťadlo sa ešte raz oddestilovalo a po odparení sa zvyšok rozpustil v zmesi metanolu (35 ml) a 0,4 mol/1 vodného roztoku NaOH (50 ml). Po premiešavaní počas 2 hodín sa roztok neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača katiónov, prefiltroval sa a lyofilizoval. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,43 g (27 %) .

^ΧΗ NMR (DMSO-d₆): 8,03 - 8,59 (m, 6H), 4,42 - 4,77 (m, 6H),

3,10 - 3,83 (m, 18H).

Príklad 5

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5-(1,3dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-N-hydroxyetylmočovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)- 5 (1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-močovina (0,27 g, 0,2 mmol) z Príkladu 4 sa rozpustila vo vode (7 ml) obsahujúcej vodný roztok 2 mmol/1 NaOH (2,0 ml) a 2-brómetanol (0,084 ml) 1,2 mmol). Po premiešavaní počas 20 hodín sa roztok neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača katiónov a odparil sa do sucha. Zvyšok sa čistil preparátívnou HPLC. Výťažok bol 138 mg (50 %).

¹H NMR (DMSO-dg): 9,06 - 9,22 (m, 1H), 8,03 - 8,46 (m, 4H),

4,22 - 4,69 (m, 7H) , 3,43 - 3,87 (m, 22H).

Príklad 6

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5-(1,3dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl) fenyl ] -N- (2,3 - dihydroxyp.ropyl)močovina

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)f enyl]-močovina (0,25g, 0,18 mmol) sa rozpustila vo vode (5 ml), nasledoval vodný roztok 2 mmol/1 . NaOH (2,1 ml) a po 5 minútach,sa pridal brómp.ropán-2,3-diol (0,196 ml). Roztok sa premiešaval počas 4 dní, neutralizoval sa pomocou silne kyslého vymieňača katiónov a odparil sa do sucha. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 38 mg (14 %) produktu ako bielu tuhú látku.

MS (ESP, m/e): 1450 (M⁺).

Príklad 7

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5-(2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)-fenyl]močovina

a. l-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylaminokarbonyl)- 5(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)benzén

Dichlorid kyseliny 1-amino-2,4,6-trij ód-3,5-izoftalovej (3,03 g, 5,1 mmol) pripravený podľa Príkladu 4a sa pridal do roztoku trietylamínu (4,26 ml) v DMAC (20 ml). Pridal sa roztok l-amino-2,3-propándiolu (0,51 g, 5,6 mmol) v DMAC (3 ml) a po premiešavaní počas 16 hodín pri laboratórnej teplote sa pridal etanolamín (1,55 g, 25,5 mmol). Po premiešavaní počas ďalších 16 hodín sa rozpúšťadlá odparili, zvyšok sa rozpustil v pyridíne (75 ml), pridal sa anhydrid kyseliny octovej (60 ml) a roztok sa premiešaval počas 17 hodín. Rozpúšťadlá sa odparili, zvyšok sa rozpustil v. etyacetáte a roztok sa premyl vodou, 0,2 mmol/1 vodným roztokom HCI, vodným roztokom NaHCO^, vysušil sa (MgSO^) a odparil sa. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 1,28 g (31 %) produktu ako bielu tuhú látku.

¹H NMR (CDC1₃): 8,60-8,71 (m, 2H), 5,42 - 5,51 (m, 1H), 5,02 - 5,13 (m, 1H), 4,24 - 4,33 (m, 1H), 4,08 - 4,21 (m, 3H), 3,32 - 3,49 (m, 5H), 2,00 (s, 9H) .

MS (ESP, m/e): 823 ([M⁺+Na]⁺), 801 ([M+l]⁺).

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-fenylJmočovina l-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylami.nókarbonyl)-5(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)benzén (1,99 g, 2,48 mmol) sa rozpustil v dioxáne spolu s roztokom fosgénu v toluéne (20 % hmotnostných, 18 ml) v hrubostennej banke. Zmes sa zahrievala na 60 °C počas 16 hodín a po ochladení na teplotu okolia a rozpúšťadlá odparili. Pridal sa dioxán (10 ml) a oddestiloval sa za atmosférického tlaku. Tento postup sa opakoval 3 krát. Zvyšok sa rozpustil v dioxáne (10 ml), ktorý obsahoval trifluóracetát ortutnatý (35 mg) a 1-amino-2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyetylaminokarbonyl)- 5 -(2,3 -diacetoxypropylaminokarbonyl)benzén (2,0 g, 2,50 mmol). Banka sa zahrievala a rozpúšťadlo sa pomaly oddestilovalo. Pridal sa ďalší podiel dioxánu (10 ml) a potom sa znova oddestiloval. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (60 ml) a vodného roztoku 0,22 mol/1 NaOH (90 ml) a po premiešavaní počas 6 hodín sa roztok neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača katiónov. Po odparení rozpúšťadiel sa zvyšok čistil preparatívnou HPLC, čím poskytol 1,26 g (37 %) produktu ako bielu tuhú látku.

l-H NMR (DMSO-dg) : 8,02 - 8,67 (m, 6H) , 4,60 - 4,84 (m, 4H) ,

4,43 - 4,57 (m, 2H), 3,02 - 3,75 (m, 18H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 169,7, 169,5, 151,4, 150,0, 142,9, 99,9,

89,6, 70,1, 70,0, 69,9, 64,0, 59,2, 42,6, 41,7.

Príklad 8

N, N’-bis[2,4,6-trijód-3 - (2-hydroxyetylaminokarbony'l) - 5-(2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]-N-hydroxyetylmočovina

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-fenyl]močovina (0,216 g,

O, 157 mmol) sa rozpustila v zmesi vody (6 ml) a vodného roztoku 2 mmol/1 NaOH (0,9 ml) spolu s 2-brómetanolom (0,067 ml). Zmes sa premiešavala počas 20 hodín, neutralizovala sa pomocou silne kyslého vymieňača katiónov a odparila sa do . .T 7 -/-ÍTTí/aÍ/í/ /:////Τ' ...//.///./

- 20 sucha. Čistenie pomocou preparativnej HPLC poskytlo 105 mg (47 %) produktu ako bielu tuhú látku.

¹H NMR (DMSO-dg): 9,11 - 9,22 (m, 1H), 7,84 - 8,61 (m, 4H),

4,41 - 4,80 (m, 7H), 3,02 - 3,87 (m, 22H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,2, 169,9, 153,2, 150,9, 150,4,

144,2, .144,1, 100,2, 70,5, 64,4, 60,6, 59,6, 43,1, 42,1.

MS (ESP, m/e): 1420 (M⁺).

Príklad 9

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)- 5 -(2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]-N-(2,3-dihydroxypropyl) močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyetylaminokarbonyl)-5(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-fenyl]močovina (0,353 g, 0,257 mmol) sa rozpustila v zmesi vody (8 ml) a vodného roztoku 2 mmol/1 NaOH (0,9 ml) spolu s l-bróm-2,3-dihydroxypropánom (0,136 ml, 1,55 mmol). Po premiešavni pri laboratórnej teplote počas 160 hodín sa roztok neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača katiónov. Po odparení sa zvyšok čistil pomocou preparativnej HPLC. Výťažok: 100 mg (27 %) produktu ako biela tuhá látka.

^TH NMR (DMSO-dg) : 9,45 - 9,63 (m, 1H) , 7,94 - 8,68 (m, 4H) , 5,82 - 6,07 (m, 1H), 5,12 (široký s, 1H), 4,43 - 4,80 (m, 6H), 4,13 (m, 1H), 3,04 - 3,97 (m, 14H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 169,8, 169,5, 153,5, 150,8, 150,5,

150,0, 149,9, 143,7, 99,8, 90,3, 70,0, 64,0, 59,2, 42,7,

41,7.

Príklad 10

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-acetamido-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) fenyl]močovina

a. N,N’-bis(3-nitro-5-karboxyfenyl)močovina

Kyselina l-nitro-3-aminobenzoová (9,11 g, 50 mmol) sa zmiešala s fosgénom (13 ml roztoku 20 % hmotnostných v to21 luéne) a Na₂CO₃ (7,4 g, 70 mmol) v toluéne (20 ml). Zmes sa premiešavala pri 60 °C počas 16 hodín. Po pridaní ďalšieho toluénu (4 ml) premiešavanie pokračovalo pri 100 °C počas 9 hodín. Pridal sa toluén (4 ml) a premiešavanie pokračovalo počas 20 hodín pri 40 ’C. Po ochladení na teplotu okolia sa roztok vylial do 1 mol/1 vodného roztoku HCI (200 ml). Špinavobiela zrazenina sa odfiltrovala, premyla a so zmesou etanolu a 2 mol/1 vodného roztoku HCI (4 ml), odfiltrovala a vysušila sa. Výťažok: 8,2 g (84 %) .

¹H NMR (DMSO-dg): 9,63 (s, NH, 2H), 8,65 (dd, 1_χ = J_? = 22 Hz, 2H), 8,34 (dd, 1_χ = 1,6 Hz, J₂ = 1,5 Hz, 2H), 8,18 (dd, = 1,5 Hz, J₂ = 1,3 Hz, 2H), 3,3 - 3,8 (široký s, 2H, OH). ¹³C NMR (DMSO-dg): 165,8, 152,7, 148,5, 141,4, 133,1,

125,3, 117,3, 116,6.

MS (ESP): 389 (M⁺, 100 %), 411 ([M+Na]⁺, 55 %)

b. N,N’-bis(3-nitro-5-metoxykarbonylfenyl)močovina

N,N’-bis(3-nitro-5-karboxyfenyl)močovina (0,5 g, 1,3 mmol) sa rozpustila v metanole (15 ml), ktorý obsahoval koncentrovanú kyselinu sírovú (0,5 ml) a roztok sa premiešaval pri 60 “C počas 20 hodín. Po ochladení na teplotu okolia sa roztok vylial do vody (40 ml). Žltkastá zrazenina sa odfiltrovala, premyla sa nasýteným vodným roztokom NaHCO^, vodou a vysušila sa. Výťažok bol 0,53 g (98 %) .

³H NMR (DMSO-dg): 9,78 (široký s, NH, 1H), 8,68 (dd, J_r = 2,1 Hz, J₂ = 2,0 Hz, 2H), 8,46 (dd, J_T = 2,2 Hz, J_? = 2,0 Hz, 2H), 8,23 (dd, 1_χ = 2,2 Hz, J₂ = 2,0 Hz, 2H), 3,92 (s, 0CH₃, 6H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 164,9, 153,1, 148,5, 142,0, 131,6,

124,9, 117,0, 116,9.

c. N,N’-bis[3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis(3-nitro-5-metoxykarbonylfenyl)močovina (0,209 g, 0,5 mmol) sa zahrievala s l-amino-2,3-propándiolom (0,114 g, 1,2 mmol) na 95 °C. Po 30 minútach sa tlak znížil na 26,6 kPa a zahrievanie pokračovalo počas 3 hodín. Surová reakčná zmes sa čistila preparatívnou HPLC, čím poskytla 164 mg (61 %) produktu ako bielu tuhú látku.

¹H NMR (DMSO-dg); 9,61 (s, 2H), 8,79 (t, J = 6,4 Hz, 2H),

8,67 (d.d, J₁ = 2,1 Hz, J₂ = 2,0 Hz, 2H) , 8,36 (dd, J₂ = 2,1

Hz, J₂ = 2,0 Hz, 2H), 8,25 (dd, 1_χ = J₂'= 2,0 Hz, 2H), 4,84 (d, J = 4,5 Hz, OH, 2H), 4,58 (t, J = 5,6 Hz, OH, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,30 - 3,50 (m, 6H), 3,21 (m, 2H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 164,8, 152,6, 148,5, 141,1, 136,8,

124,2, 115,9, 115,4.

MS (ESP): 537 (M⁺, 100 %), 519 ([M-H₂0]⁺, 56 %).

d. N,N’-bis[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl jmočovina

N,N’-bis[3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (0,102 g, 0,19 mmol) sa rozpustila v zmesi metanolu (14 ml) a vody (6 ml) obsahujúcej 2 mol/1 vodný roztok HCI (0,2 ml) a Pd/C katalyzátor (10 %, 0,1 g). Hydrogenácia sa uskutočňovala pri 414 kPa. Katalyzátor sa odfiltroval a rozpúšťadlá sa odparili. Zvyšok sa znova .rozpustil vo vode a lyofilizoval, čím poskytol 0,102 g (97 %) produktu .

NMR (D₂0): 7,60 (s, 4H), 7,29 (s, 2H), 3,74 - 3,82 (m,

2H), 3,38 - 3,54 (m, 4H), 3,22 - 3,37 (m, 4H).

¹³C NMR (D₂0): 168,6, 154,0, 139,9, 136,1, 131,1, 118,6,

118,5, 117,0, 116,9, 116,2, 70,1, 63,2, 42,4.

MS (ESP): 477 (M⁺, 100 %).

e . N , N ’ - bis [ 3 -amino- 2,4,6-t.rijód-5 - (2,3 - dihydroxypropylaminokarbonyl) fenyl]močovina

N,N’-bis[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (0,50 g, 0,91 mmol) sa rozpustila v zmesi metanolu (4 ml) a vody 46 ml a pridal sa vodný roztok KIC1₂ (6 mmol). Po nastavení pH na hodnotu 2 pomocou vodného roz23 toku HC1, sa roztok premiešaval počas 20 hodín pri 40 °C. Po pridaní vodného roztoku NaHSO^ sa rozpúšťadlá odparili a zvyšok sa tri krát rozotrel so zmesou metanol-voda (3:7), čím poskytol 1,02 g (89 %) produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 8,41 (široký s, 1H), 8,20 - 8,33 (m, 2H), 8,11 - .8,17 (d, J = 7,0 Hz, 1H) , 5,40 (široký s, NH₂, 4H) ,

3,62 - 3,74 (m, 2H), 3,44 - 3,52 (m, 2H), 3,34 - 3,43 (m, 2H) , 3,21 - 3,32 (m, 2H) , 3,07 - 3,21 (m, 2H) .

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,6, 151,9, 149,3, 148,9,

143,1, 143,0, 142,8, 70,6, 70,4, 64,4, 43,1, 43,0.

MS (ESP): 1232 (M⁺, 20 %), 1254 ([M+Na]⁺, 100 %), 1270 ([M+K]⁺, 50 %).

f. N,N’-bis[3-acetamido-2,4,6-trij ód-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’ -bis[3-amino-2,4,6-trijód-5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (0,155 g, 0,126 mmol) sa zmiešala s anhydridom kyseliny octovej (2 ml) a pridala sa koncentrovaná kyselina sírová (3 kvapky). Zmes sa premiešavala pri 70 °C počas 5 hodín a potom pri laboratórnej teplote počas 17 hodín. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok rozpustil v zmesi metanolu (2,5 ml) a vody (0,4 ml), pH sa nastavilo na hodnotu 10 pomocou 10 mol/1 vodného roztoku NaOH a zmes sa premiešavala pri 50 °C počas 5 hodín. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok rozotrel s vodou a tuhá látka sa odfiltrovala a vysušila. Výťažok bol 0,15 g (90 %).

XH NMR	(DMSO-dg): 9,80 -	10,10 (2 široké s, 2H)	, 8,20
- 8,75 (m	, 4H), 4,70 (s, OH, 2H), 4,48 (s, OH, 2H),	3,64
- 3,98 (m	, 2H), 3,41 - 3,56	(m, 4H), 3,03 - 3,26 (m	, 4H),
2,04 (s,	6H) .
13C NMR	(DMSO-d6): 170,3,	170,2, 168,3, 168,2,	168,1,
151,9, 151,7, 150,3, 144,4,	144,3, 108,1, 99,5, 99,4,	99,3,

99,2, 98,1, 98,0, 97,9, 70,6, 70,4, 64,4, 43,1, 23,5. MS (ESP): 1339 ([M+Na]⁺, 100 %).

·..·<·,.'2Λ'?··.^·· íí'?.ú:í· :·α: Β'λ·/.: '

Príklad 11

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyaceramido)-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

a. N , N’-bis[3-amino-2,4,6-trij ód-5-(2,3-diacetoxypropylaminoka.rbonyl) fenyl ] močovina

N,N’ -bis[3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylJmočovina (1,23 g, 1,0 mmol) sa rozpustila v zmesi anhydridu kyseliny octovej (5 ml), pyridínu (5,5 ml) a DMF (5 ml). Roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 65 hodín, a rozpúšťadlá sa odparili. Zvyšok sa rozpustil v CH2CI2 (250 ml) a roztok sa premyl vodou (2 x 50 ml), 0,1 mol/1 vodným roztokom HCI (50 ml), vodou (100 ml) a nasýteným vodným roztokom NaHCO^. Po vysušení (Na2SC>4) a odparení NMR a HPLC analýza zvyšku ukázali v podstate čistý produkt. Výťažok: 1,0 g, (71 %) .

^ΤΗ NMR (DMSO-d₆): 8,73 (široký s, 1H), 8,44 - 8,63 (m, 2H), 8,32 - 8,45 (m, 1H), 5,30 - 5,45 (s, NH₂, 4H), 5,02 - 5,16 (m, 2H), 4,10 - 4,37 (m, 4H), 1,80 - 2,05 (m, 12H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,8, 170,6, 149,1, 148,9, 148,3,

147,8, 143,3, 143,2, 136,6, 124,4, 92,6, 92,0, 70,1, 70,0,

63,5, 21,5, 21,0.

MS (ESP, m/e): 1400 (M⁺, 100 %) .

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyacetamido)-5 - (2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’ - bis[3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (1,0 g, 0,71 mmol) sa rozpustila v acetoxyacetylchloride (5 ml) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 24 hodín. Po zahriatí na 60 °C počas 2,5 hodiny sa roztok odparil do sucha a zvyšok sa rozotrel s vodou (40 ml). Hnedo zafarbená zrazenina sa odfiltrovala, znova sa premyla vodou (20 ml) a vysušila sa. Výťažok: 0,92 g (81 %) .

^XH NMR (DMSO-dg): 10,05 - 10,30 (m, 2H), 8,62 - 9,06 (m,

2Η) , 8,22 - 8,58 (m, 2H) , 5,02 - 5,15 (m, 2H), 4,66 (široký s, 4H), 4,23 - 4,39 (m, 2H), 4,12 - 4,23 (m, 2H), 3,25

- 3,62 (m, 4H), 2,11 (s, 6H), 2,00 (s, 12H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,4, 170,1, 165,7, 150,1,

150,0, 144,5, 144,4, 144,3, 143,3, 143,2, 108,5, 108,3,

108,1, 97,6, 97,3, 70,0, 63,5, 62,6, 61,0, 21,5, 21,0.

MS (ESP, m/e): 1599 (M⁺, 100 %), 1621 ([M+Na]⁺, 23 %).

c. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-hydroxyacetamido)-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-acetoxyacetamido)-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (0,88 g, 0,55 mmol) sa rozpustila v zmesi metanolu (10 ml) a vodného roztoku 2 mol/1. NaOH (2,5 ml). Po premiešavaní počas 15 minút pri laboratórnej teplote sa pH nastavilo na hodnotu 4 pomo3,36 13~ cou silne kyslého vymieňača iónov a po filtrácii sa zmes odparila do sucha. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,58 g (78 %).

^XH NMR (DMSO-dg) : 9,68 - 9,93 (m, 2H) , 8,42 - 8,64 (m, 2H) , 8,24 - 8,48 (m, 2H), 4,00 (s, OH, 6H), 3,60 - 3,73 (m, 6H) , 3,54 (m, 6H), 3,04 - 3,38 (m, 4H), .

ÍR (DMSO-dg): 171,0, 170,8, 170,6, 170,3, 170,2,

151,8, 151,7, 150,3, 150,2, 144,3, 144,1, 143,9, 143,8,

108,1, 108,0, 107,9, 99,5, 99,3, 97,9, 97,8, 97,7, 70,4,

64,4, 62,3, 43,1.

MS (ESP, m/e): 1349 (M⁺, 36 %) , 1379 ([M+Na]⁺, 100 %) .

Príklad 12

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2-hydroxypropiónamido)-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

a. N,N’-bis(2,4,6-trij ód-3-(2-acetoxypropiónamido)-5-(2,3diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (1,0 g, 0,71 mmol) pripravená ako je opísané vyššie a chlorid kyseliny 2-acetoxypropiónovej (4 ml) sa zmiešali a premiešavali sa pri 60 °C počas 2 hodín a počas 14 hodín pri 85 °C. Rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa rozotrel s. vodou (50 ml) . Zelenkavá tuhá látka sa odfiltrovala a použila sa bez čistenia v nasledujúcom kroku. Výťažok: 0,92 g (79 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 10,08 - 10,25 (m, 2H), 8,70 -9,30 (m, 2H), 8,08 - 8,75 (m, 2H), 5,15 - 5,27 (m, 2H), 5,03 - 5,16 (m, 2H), 4,23 - 4,36 (m, 2H), 4,11 - 4,25 (m, 2H), 3,23 - 3,54 (m, 4H), 2,10 (s, 3H), 2,06 (2s, 15H), 1,47 - 1,55 (m, 6H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,4, 170,0, 151,8, 150,1, 149,0, 144,5, 144,3, 143,2, 108,3, 107,9, 106,4, 97,7,

97,6, 70,5, 70,0, 69,9, 63,6, 63,5, 63,4, 21,5, 21,3, 21,0, 18,0.

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3 - (2-hyd.roxypropiónamido) -5 - (2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2-acetoxypropiónamido)-5-(2,3diacetoxypropylaminokarbonyl)fenyl]močovina (0,85 g, 0,52 mmol) sa rozpustila v zmesi metanolu (10 ml) a vodného roztoku 2 mol/1 NaOH (2,5 ml) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Potom sa pH nastavilo na hodnotu 4 pomocou silne kyslého vymieňača iónov, a po filtrácii sa zmes odparila do sucha. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 370 mg (51 %) .· ¹H NMR (DMSO-d₆): 9,58 -9,84 (m, 2H), 8,22 - 8,64 (m, 4H), 5,50 - 5,70 (m, 2H), 4,67 (široký s, OH, 2H), 4,48 (široký s, OH, 2H), 4,13 - 4,17 (m, 2H), 3,64 - 3,75 (m, 2H), 3,40 - 3,61 (m, 2H) , 3,26 - 3,35 (m, 2H), 3,07 - 3,25 (m, 4H) , 1,35 - 1,42 (m, 4H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 173,0, 172,8, 170,3, 170,2, 151,8,

150,2, 144,2, 143,9, 108,0, 99,5, 99,2, 97,8, 97,6, 97,5,

70,4, 70,3, 68,0, 64,4, 43,1, 21,5, 21,0.

MS (ESP, m/e): 1374 (M⁺, 20 %), 1397 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 13

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2,3-dihydroxypropiónamido)-5-(2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylJmočovina

a. N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2,3-diacetoxypropiónamido)- 5(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenylJmočovina

Draselná soľ kyseliny 2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karboxylovej (1,50 g, 8,1 mmol) sa suspendovala v suchom éteri (35 ml) a ochladila sa na 0 °C. Pridal sa oxalylchlorid (1,03 g, 8,1 mmol) a roztok sa premiešaval počas 2 hodín pri 0 °C a potom 24 hodín pri laboratórnej teplote. Zmes sa prefiltrovala a filtrát sa odparil. Potom sa pridal roztok N,N’-bis-[3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-diacetoxypropyl-aminokarbonyl)fenylJmočoviny (1,9 g, 1,36 mmol) pripravenej ako je opísané vyššie v dimetylacetamide (10 ml) a výsledný roztok sa premiešaval počas 60 hodín pri laboratórnej teplote. Prídavok éteru (60 ml) spôsobil tvorbu zrazeniny, ktorá sa ďalej rozotrela s éterom (50 ml), čím poskytla 1,88 g (84 %) produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 9,57 - 10,10 (m, 2H), 8,26 - 8,55 (m,

4H), 3,08 - 4,37 (m, 16H), 1,87 - 2,04 (m, 12H).

¹³C NMR (DMSO-d₆): 172,4, 170,9, 170,1, 150,1, 147,0,

144,4, 143,8, 141,9, 127,9, 100,1, 99,8, 99,6, 99,1, 97,7,

97,6, 97,4, 74,2, 70,4, 66,9, 66,8, 64,8, 64,4, 64,1, 43,1,

43,0, 37,9, 35,0, 21,8, 21,5.

MS (ESP, m/e): 1656 (M⁺, 100%), 1679. ([M+Na]⁺, 80 %).

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-(2,3-dihydroxypropiónamido)-5(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylJmočovina

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karboxamido)- 5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)fenylJ močovina (0,60 g, 0,36 mmol) sa zmiešala s K2CO3 (0,40 g, 2,8 mmol) v metanole (40 ml). Roztok sa premiešaval počas 88 hodín, roztok sa prefiltroval a filtrát sa odparil do sucha. Zvyšok sa rozpustil vo vode (20 ml) a pH sa upravilo na hodnotu 2 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 HCI. Po premiešavaní počas 3 hodín sa roztok odparil do sucha a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Oddelili a zachytil sa dve frakcie izomérov. Výťažok; 240 mg (frakcia 1) + 45 mg (frakcia 2); 56 %. Fyzikálne údaje, frakcia 1:

¹H NMR (DMSO-d₆): 9,67 - 9,90 (m, 2H), 8,23 - 8,60 (m, 4H),

3,06 - 3,84 (m, 16H), 4,02 - 4,20 (m, 8H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 171,0, 170,8, 170,3, 170,2, 151,8,

151.7, 150,2, 144,3, 144,1, 143,9, 143,8, 108,1, 108,0,

107.8, 99,5, 99,3, 99,2, 97,8, 97,6, 74,2, 70,4, 64,7,

64,4, 43,2, 43,1.

MS (ESP, m/e): 1408 (M⁺, 100 %), 1431 ([M+Na]⁺, 10 %). Frakcia 2: 9,62 - 10,05 (m, 2H), 8,25 - 8,60 (m, 4H), 5,65 5,90 (m, 2H), 4,62 - 4,90 (m, 4H), 4,42 - 4,53 (m, 2H), 4,02 - 4,10 (m, 2H), 3,40 - 3,82 (m, 10H), 3,05 - 3,32 (m, 4H).

Príklad 14

N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-amino-5-(1,3-diacetoxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]močovina

a. N,N’-bis[3-nitro-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-močovina

Reakcia sa uskutočnila analogicky ako syntéza opísaná vyššie pre Príklad 10c, pričom sa vychádzalo z N,N’-bis(3nitro-5-metoxykarbonylfenyl)močoviny (12,0 g, 28,7 mmol) a 2-amino-l,3-propándiolu (6,83 g, 75 mmol). Surový reakčný produkt sa čistil rozotretím s acetonitrilom (2 x 50 ml, vodou (200 ml) a s acetonitrilom (3 x 50 ml, čím poskytol produkt 95 % čistoty. Výťažok; 12,0 g (78 %).

¹H NMR (DMSO-dg): 10,06, 9,72 (2s, ArNH, 2H), 8,68 - 8,73 (m, 2H), 8,44 - 8,51 (m, 2H), 8,38 - 8,43 (m, 2H), 8,23 - 8,27 (m, 2H), 4,66 - 4,73 (m, 4H), 3,92 - 4,13 (m, 2H), 3,44 - 3,60 (m, 8H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 164,9, 164,6, 152,9, 148,6, 148,4,

141,9, 141,1, 137,0, 131,8, 124,9, 124,4, 117,1, 115,7,

115,3, 60,7, 54,8, 53,3.

b. N,N’-bis[2,4,6-trijód-3-amino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[3-nitro-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenyl]-močovina (5,6 g, 10,4 mmol) sa rozpustila v zmesi metanolu (100 ml) a vody (14 ml) obsahujúcej vodný roztok 2 mol/1 HC1 (10,4 ml) a katalyzátor Pd/C (10 % hmotnostných, 0,5 g). Hydrogenácia sa uskutočnila pri 414 kPa. Katalyzátor sa odfiltroval, metanol sa odparil a vodný roztok sa lyofilizoval. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (36 ml) a vody (775 ml) a potom sa pridal KIC1₂ (32,9 g, 97 mmol). Po premiešavaní počas 72 hodín sa pridal vodný roztok 2 mol/1 NaHSO^ a tuhá látka sa odfiltrovala. Po premytí zrazeniny metanolom (3 x 50 ml) sa zvyšok vysušil. Výťažok: 13,9 g (76 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 7,90 - 8,36 (m, 4H), 5,32 - 5,40 (m, 4H),

3,30 - 4,25 (m, 14H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,1 151,9, 149,1, 148,9, 148,8, 146,6,

143,1, 143,0, 88,8, 88,6, 83,0, 82,8, 81,5, 78,7, 78,6,

78,5, 76,9, 59,8, 53,6, 53,5.

MS (ESP, m/e): 1254 ([M+Na]⁺, 100 %) .

c. N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-amino-5-(1,3-diacetoxyprop-2-y1aminokarbonyl)fenyl]močovina

N,N’-bis[2,4,6-trij ód-3-amino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenylJmočovina (4,0 g, 3,26 mmol) sa suspendovala v zmesi anhydridu kyseliny octovej (10 ml) a pyridínu (10,5 ml) a zmes sa premiešavala počas 16 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa suspendoval vo vode (150 ml). Tuhá látka sa odfiltrovala, premyla sa vodným roztokom 0,1 mol/1 HC1 (2 x 50 ml), vodou (2 x 50 ml) a vysušila sa. Výťažok: 3,8 g, (84 %) .

¹H NMR (DMSO-dg): 8,55 - 8,95 (m, 2H), 8,10 - 8,35 (m, 2H) , 5,36 - 5,68 (m, 4H), 4,10 - 4,20 (m, 8H), 3,83 - 3,95 (m, 2H), 1,99 - 2,07 (m, 12H),.

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,2, 149,0, 148,9, 148,7,

143,3, 143,2, 143,1, 89,2, 82,8, 78,5, 78,3, 78,2, 62,6,

47,4, 21,3.

MS (ESP, m/e): 1422 ([M+Na]⁺, 70 %), 1478 ([M+C₅H₅N]⁺,

100 %).

Príklad 15

N-[3-hydroxymetyl-5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trij ódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trij ódfenyl]močovina

a. Metylester kyseliny l-hydroxymetyl-3-nitro-5-benzoovej

Monometylester kyseliny 1-nitroizoftalovej (22,5 g, 100 mmol) sa rozpustil v suchom THF (675 ml) a pridal sa BF₃.Et₂O (25,2 ml, 200 mmol). Potom sa v priebehu 1 hodiny po častiach pridal NaBH^ (5,1 g, 135 mmol). Po premiešavaní počas 2 ďalších hodín, sa pridal etanol (20 ml), pomaly nasledovaný vodou (200 ml) a dietyléterom (400 ml). Fázy sa oddelili a vodná fáza sa extrahovala ešte raz s dietyléterom (100 ml). Spojené organické fázy sa premyli s nasýteným vodným roztokom NaHC0₃, vysušili sa (Na₂S0₄) a odparili sa. Výťažok: 20 g, (96 %). HPLC analýza ukázala >95 % čistotu produktu .

^XH NMR (CDC1₃): 8,72 (s, IH), 8,42 (s, IH) , 8,32 (s, IH) ,

4,86 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 2,37 (široký s, IH).

b. l-hydroxymetyl-3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) benzén

Metylester z Príkladu 3a (20,5 g, 97 mmol) sa zmiešal s 2,3-dihydroxypropylamínom (9,6 g, 106 mmol) a zmes sa zahrievala na 90 °C. Po 45 minútach sa tlak znížil na 26,6 kPa a zahrievanie pokračovalo počas 2 hodín. Surový produkt, ktorý bol podľa HPLC analýzy >95 % čistoty, sa použil bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom kroku. Výťažok: 22,8 g (87 %) .

¹H NMR (CD₃OD): 8,57 (s, IH), 8,38 (s, IH), 8,19 (s, IH),

4,77 (s, 2H), 3,81 - 3,88 (m, 1H), 3,39 - 3,63 (m, 4H).

3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)anilín l-hydroxymetyl-3-nitro-5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén (12,0 g, 44,4 mmol) sa hydrogenoval v metanole (150 ml) pri 414 kPa za použitia Pd/C (10 % hmotnostných, 100 mg) ako katalyzátora. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a zvyšok sa odparil. Prídavok metanolu (10 ml) vyzrážal produkt ako bielu tuhú látku, ktorá sa odfiltrovala a vysušila. Výťažok: 6,6 g (62 %).

²Η NMR (CD₃OD): 7,05 - 7,09

6,83 - 6,87 (m, 1H), 4,53 (s, (m, 1H), 6,98 - 7,03 (m, 1H),

2H), 3,77 - 3,85 (m, 1H), 3,8

- 3,59 (m, 4H), 3,32 - 3,42 (m, 1H).

MS (ESP, m/e): 241 ([M+l]⁺, 100 %).

d. 3-hydroxymetyl-5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trij ódanilín

3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)anilín (500 mg, 2,1 mmol) sa rozpustil vo vode (175 ml) a po častiach 0,1 ml sa v priebehu 8 hodín pridal vodný roztok KICI2 (70 % hmotnostných). Celkovo sa pridal 1,0 ml KIC1_? roztoku. Po celkovom reakčnom čase 6 hodín sa roztok extrahoval etylacetátom (1000 ml), ktorý sa oddelil a premyl vodným roztokom ^282()3 (0,2 mol/1, 100 ml). Odparenie nasledované čistením preparatívnou HPLC poskytlo 432 mg (33 %) čistého produktu.

-’-H NMR (CD₃OD) : 5,10 (s, 2H) , 3,90 - 3,98 (m, 1H) , 3,72 (ddd, J₂ = 0,7 Hz, J₂ = 4,2 Hz, J₃ = 11,4 Hz, 1H), 3,60 (dd, J_x = 6,0 Hz, J₂ = 11,4 Hz, 1H), 3,49 (ddd, = 1,2 Hz, J₂ = 6,0 Hz, J₃ = 13,5 Hz, 1H), 3,37 (ddd, J_x = 1,2 Hz, J₂ = 6,1 Hz, J₃ = 13,2 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,28 a 2,34 (2s, 2H) .

MS (ESP, m/e): 618 (M⁺, 100 %) , 640 ([M+Na]⁺, 55 %).

e. 3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trij ódanilín

3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropyl-amino-karbonyl)2.4.6- trijódanilín (1,32 g, 2,1 mmol) sa rozpustil v pyridíne (10 ml), ktorý obsahoval anhydrid kyseliny octovej (10 ml) . Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 2 hodín a pridal sa CH2CI2 (100 ml) a roztok sa premyl vodou (3 x 25 ml). Organická fáza sa premyla vodou (3 x 50 ml) a nasýteným vodným roztokom NaHCO^ (2 x 50 ml). Po vysušení (Na₂S04) a odparení sa zvyšok čistil bleskovou chromatografiou na kolóne silikagélu za použitia zmesi CH2CI2 a metanolu (95:5) ako eluenta. Výťažok: 1,30 g (82 %).

¹H NMR (CDC1₃): 5,99 (široký s, 1H), 5,52 (s, 2H), 5,25 (široký s, 1H), 5,11 (s, 2H) 4,23 - 4,45 (m, 2H), 3,56 - 3,87 (m, 3H), 2,08 (s, 9H).

f. N-[3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)2.4.6- trij ódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl) -2,4,6-trijódfenyl]močovina

3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilín (260 mg, 0,30 mmol) sa rozpustil v dioxáne (1,0 ml) a pridal sa roztok fosgénu v toluéne (1,93 mol/1, 1,8 ml). Banka sa tesne uzavrela a potom sa zahrievala na 60 °C počas 17 hodín. Po ochladení na teplotu okolia a rozpúšťadlo oddestilovalo za zníženého tlaku. Pridal sa dioxán (3 ml) a znova sa oddestiloval. Tento postup sa opakoval dva krát. Pridal sa dioxán (1 ml) nasledovaný 3-acetoxymetyl-5-(2,3diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilínom (0,245 g, 0,31 mmol) a Hg(OCOCF₃)2 (20 mg). Zmes sa premiešavala počas 16 hodín pri laboratórnej teplote, rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,192 g (39 %) .

MS (ESP, m/e): 1643 (M⁺, 100 %), 1665 ([M+Na]⁺, 34 %).

g. N-[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trij ódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódfenyl]močovina

Produkt z Príkladu I5f sa rozpustil v zmesi metanolu (5 ml) a vody (5 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 2 hodín sa pH nastavilo na hodnotu 6,5 pomocou vodného roztoku HC1 a rozpúšťadlo sa odparilo. Produkt sa čistil pomocou preparatívnej HPLC. Výťažok: 68 mg (44 %) .

MS (ESP, m/e): 1349 (M⁺, 15 %), 1372 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 16

2,4,6-trijód-3-acetylamino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokar bonyl) fénylaminokarbonyl-2’,4’ ,6’-trij ód-3’-acetylamino5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

a. Hydrochlorid metylesteru kyseliny l-nitro-3-amino-5-benzoovej

Kyselina l-nitro-3-aminobenzoová (15,0 g, 82,4 mmol) sa rozpustila v metanole (100 ml) a cez roztok sa počas 30 minút prebublával plynný HC1. po premiešavaní počas 17 hodín pri laboratórnej teplote sa rozpúšťadlo odparilo a zvyšok sa premyl éterom (2 x 50 ml), čím poskytol produkt ako bielu tuhú látku, výťažok: 15,8 g (82 %).

¹H NMR (DMSO-dg) : 7,78-7,81 (m, 1H) , 7,68 - 7,71 (m, 1H), 7,65 - 7,67 (m, 1H), 5,00 (s, NH₃, 3H), 3,83 (s, OCH₃, 3H).

b. 3-nitro-5-metoxykarbonylfenylaminokarbonyl-(3’-nitro-5’metoxykarbonylbenzén

Hydrochlorid metylesteru kyseliny 1-nitro-3-amino-5benzoovej (0,92 g, 4,72 mmol) a monometylester kyseliny 5-nitroizoftalovej (1,06 g, 4,27 mmol) sa suspendovali v zmesi POCl^ (4 ml) a toluénu (15 ml). Zmes sa zahrievala, až kým roztok nebol homogénny a potom sa roztok premiešaval počas 16 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlá sa odparili a olej ovitý zvyšok sa rozpustil v CH2CI2· Roztok sa premyl vodným roztokom 0,1 mol/1 HCI (3 x 50 ml) a nasýteným vodným roztokom NaHCO^ (50 ml), opracoval sa aktívnym uhlím, vysušil (MgSO^) a odparil sa. Produkt bol podľa HPLC analýzy v podstate čistý. Výťažok: 1,25 g (66 %).

^XH NMR (DMSO-dg): 11,28 (s, 1H), 9,09 (t, J = 1,8 Hz, 1H),

9,03 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 8,95 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,81 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 8,78 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,38 (2t, =

1,6 Hz, J₂ = 1,5 Hz, 1H), 3,96 (s, OCHj, 3H), 3,93 (s, OCH₃, 3H).

MS (ESP, m/e): 426 ([M+Na] ⁺ , 100 %) , 442 ([M+K] ⁺ , 14 %) .

c. 3-nitro-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-[3’-nitro-5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén]

3-nitro-5-metoxykarbonylfenylaminokarbonyl-(3’-niťro-5’metoxykarbonylbenzén) (0,40 g, 1,0 mmol) a 2-amino-l,3-propándiol (0,23 g, 2,5 mmol) sa zmiešali a zahrievali sa na 95 °C. Po 30 minútach sa tlak znížil na 26,6 kPa a zahrievanie pokračovalo počas 3 hodín. Reakčná zmes sa čistila preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,27 g (52 %).

^XH NMR (DMSO-d₆): 11,2 (široký s, 1H), 8,94 - 8,98 (m, 2H), 8,89 - 8,92 (m, 2H), 8,61 - 8,65 (m, 1H), 8,61 (d, J = 7,2

Hz, 1H), 8,52 - 8,55 (m, 1H), 8,46 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,60 - 4,81 (m, 4H), 3,96 - 4,08 (m, 2H), 3,51 - 3,59 (m, 8H).

MS (ESP, m/e): 522 (M⁺, 100 %), 504 ([M-H₂O]⁺, 65 %).

d. 3-amino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl- [ 3 ’ -amino-5 ’ - (1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokar-: bonyl)benzén] dihydrochlorid

3-nitro-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)-fenylamino-karbonyl-[3’-nitro-5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén] (1,03 g, 1,98 mmol) sa hydrogenoval v roztoku, ktorý obsahoval metanol (40 ml), koncentrovanú HCI (2 ml), vodu (2 ml) a Pd/C katalyzátor (10 % hmotnostných, 0,2 g) pri 414 kPa. Katalyzátor sa odfiltroval a rozpúšťadlo sa odparilo. Potom sa pridala voda (150 ml) a roztok sa lyofilizoval. Výťažok: 0,98 g (93 %).

1H NMR (DMSÔ-dg,	ktorý obsahoval	1 % hmotnostné TFA):	10,83
(s, 1Η), 8,25 (d	, J = 8,0 Hz,	1H), 8,23 (d,	J =	2,0	Hz,
1H), 8,12 (d, J	= 8,0 Hz, 1H),	8,07 (t, J	= 2,0	Hz,	1H) ,
7,73 (t, J = 2,0	Hz, 1H), 7,70 (t	, J = 2,0 Hz,	1H),	7,46 (t,
J = 2,0 Hz, 1H),	4,30 (široký s,	6H), 3,95 -	4,01	(m,	2H) ,

3,54 (t, J = 5,5 Hz, 8H).

MS (ESP, m/e): 461 (M⁺, 100 %).

e. 3-amino-2,4,6-trijód-5-(l,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-[3’-amino-2’ ,4’,6’-trij ód5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

3-amino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-yl-aminokarbonyl)-fenylaminokarbonyl-[3’-amino-5’-(1,3-dihydroxy-prop-2-ylaminokarbonyl)benzén] dihydrochlorid (0,50 g, 0,94 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (225 ml) a vody (675 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 2,0 pomocou vodného roztoku HCI. Pridal sa KIC1₂ (1,91 g, 5,64 mmol) a roztok sa premiešaval pri 40 °C. Po 24 hodinách sa pridal jeden podiel KIC1₂ (0,1 g) naviac a po 48 hodinách sa reakcia ukončila pridaním vodného roztoku NaHSO^. Po odparení rozpúšťadiel sa zvyšok čistil preparátívnou HPLC. Výťažok: 0,05 g (8,3 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 9,85 - 10,05 (m, 1H), 8,87 - 9,00 (m,

1H), 7,80 - 8,15 (m, 1H), 5,52 (s, NH₂, 2H), 5,47 (s, NH₂, 2H), 4,40 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,15 - 4,24 (m, 2H), 4,06 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 3,78 - 3,85 (m,

3H), 3,57 - 3,64 (m, 3H), 3,40 - 3,56 (m, 2H).

¹³C NMR (DMSO-d₆): 170,3, 170,2, 165,7, 150,0, 149,9,

149,6, 148,9, 148,1, 148,0, 147,5, 141,7, 64,2, 59,7, 53,4. MS (ESP, m/e): 1215 (M⁺, 100 %).

f. 3-acetylamino-2,4,6-trijód-5-(l,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-[3’-acetylamino-2’,4’,6’36 trij ód-5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

3-amino-2,4,6-trijód-5-(1,3-dihydroxy-prop-2-yl-amino-karbony1)-fenylaminokarbonyl-[3’-amino-2’,4’,6’-trijód-5’(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén (75 mg, 0,062 mmol) sa rozpustil v anhydride kyseliny octovej (0,6 ml) obsahujúcom koncentrovanú kyselinu sírovú (0,04 ml). Zmes sa zahrievala na 60 °C počas 75 minút a po ochladení sa rozpúšťadlo odparilo. Tmavý zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (0,35 ml) a vody (0,15 ml), pH sa nastavilo na hodnotu 10 až 11 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 NaOH a roztok sa premiešaval pri 50 °C počas 5 hodín. Po ochladení na teplotu okolia sa pH nastavilo na hodnotu 7 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 HC1 a rozpúšťadlo sa odparilo. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,076 g, (94 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 10,27 - 10,48 (m, 1H), 9,97 (široký s,1H), 9,94 (široký s,lH), 8,21 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 7,0 Hz, 1H) , 4,43 - 4,56 (m, 4H), 3,72 - 3,88 (m, 2H), 3,60

- 3,70 (m, 4H), 3,40 - 3,60 (m, 4H), 2,07 - 2,08 (m, 6H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 169,9, 169,7, 169,2, 165,2, 151,0, 148,4, 144,7, 144,6, 144,3, 142,8, 142,7, 59,6, 59,5, 53,6, 31,1.

MS (ESP, m/e): 1300 (M⁺, 100 %).

Príklad 17

2,4,6-trijód-3-hydroxyacetylamino-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl) fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-hydroxyacetylamino-5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

a. 2,4,6-trijód-3-amino-5-(1,3-diacetoxyprop-2-yl-aminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’,4’, 6 ’-trijód-3’-amino-5’(1,3-diacetoxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén

3-amino-2,4,6-trijód-5-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)-fenylaminokarbonyl-[3’-amino-2’ ,4’ ,6’-trijód-5 ’ -(1,3dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén (0,10 g, 0,082 mmol), pripravený ako je opísané vyššie v Príklade 16e, sa rozpustil v zmesi anhydridu kyseliny octovej (5 ml) a pyridínu (5,5 ml). Zmes sa premiešavala pri 40 až 45 °C počas 16 hodín, rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa rozpustil v etylacetáte (25 ml). Po premytí vodou (25 ml), vodným roztokom 0,5 mol/1 HC1, vodou a nasýteným vodným roztokom NaHCO^ sa roztok sušil (MgŠ0₄) a rozpúšťadlo sa odparilo. Výťažok: 0,11 g (100 %).

¹H NMR (DMSO-dg): 9,94 - 10,04 (m, 1H), 8,67 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 8,65 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,54 (s, NH₂, 2H), 5,50 (s,

NH₂, 2H), 4,27-4,40 (m, 2H), 4,11 - 4,16 (m, 8H), 2,01

- 2,03 (m, 12H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 170,4, 165,7, 149,6, 149,5,

149,0, 148,2, 147,6, 141,8, 139,8, 62,6, 47,4, 21,3.

MS (ESP, m/e): 1385 (M⁺, 100 %).

b . 2,4,6-trij ód-3-hydroxyacetylamino-5-(1,3-dihydroxyprop2-ylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’hydroxyacetylamino-5’-(1,3-dihydroxyprop-2-ylaminokarbonyl) benzén

2,4,6-trij ód-3-amino-5 -(1,3-diacetoxyprop-2-yl-aminokar-bonyl)-fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-amino-5’-(1,3diacetoxyprop-2-ylaminokarbonyl)benzén (94 mg, 0,068 mmol) sa suspendoval v acetoxyacetylchloride (3 ml) a zmes sa premiešavala pri 65 °C počas 4 hodín, ponechala sa ochladnúť a potom sa odparila. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (3 ml), vody (3 ml) a vodného roztoku 1 mol/1 NaOH (0,50 ml) a roztok sa premiešaval počas 3 hodín. Roztok sa neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača katiónov a rozpúšťadlá sa odparili. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok bol 90 mg (100 %).

MS (ESP, m/e): 1582 (M⁺, 100 %) .

Príklad 18

2,4,6-trijód-3-acetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’ , 4 ’ , 6’-trijód-3’-acetylamino-5’(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén

a. 3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-[3’-nitro-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén]

3-nitro-5-metoxykarbonylf enylaminokarbonyl- (3 ’-nitro-5 ’ metoxykarbonylbenzén) (1,21 g, 3,0 mmol) sa suspendoval v aminopropán-2,3-diole (0,55 g, 6,0 mmol) a zmes sa zahrievala na 90 °C. Po 30 minútach sa tlak znížil na 26,6 kPa a zahrievanie pokračovalo počas 90 minút. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,73 g (47 %) .

¹H NMR (DMSO-dg): 11,32 (s, 1H), 9,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H),

8,93 - 8,97 (m, 3H), 8,88 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,86 (t,

J = 6,0 Hz, 1H), 8,68 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,51 (t, J = 1,8

Hz, 1H), 3,62 - 3,72 (m, 2H), 3,36 - 3,48 (m, 2H) , 3,33

- 3,36 (m, 4H), 3,18 - 3,29 (m, 2H), 3,09 (s, 4H).

MS (ESP, m/e): 545 ([M+Na]⁺, 65 %), 522 (M⁺, 100 %), 504 ([M-18]⁺, 19 %).

b . 3-amino-2,4,6-trij ód-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) fenylaminokarbonyl-[3’-amino-2,4,6,-trijód-5’-(2,3dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén]

3-nítro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-fenylami-nokarbonyl-[3’-nitro-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén] (2,0 g, 2,0 mmol) sa hydrogenoval v roztoku, ktorý obsahoval metanol (70 ml), koncentrovanú HC1 (4 ml), vodu (4 ml) a Pd/C katalyzátor (10 % hmotnostných, 0,6 g) pri 414 kPa. Katalyzátor sa odfiltroval a rozpúšťadlo sa odparilo. Potom sa pridala voda (150 ml) a roztok sa lyofilizoval. Výťažok: 0,98 g (93 %) . Surový produkt a použil ihneď bez čistenia v nasledujúcom kroku: Produkt sa rozpustil v zmesi metanolu a vody (1:3, 1200 ml) a pridal sa vodný roztok KIC1₂ (5,34 g, 22,6 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala pri 40 °C počas 30 hodín a potom sa pridal vodný roztok 0,5 mol/1 NaHSOj (1 ml). Po odparení rozpúšťadiel sa zvyšok čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,63 g (13 %) .

^XH NMR (DMSO-dg): 9,86 - 10,00 (m, 1H), 8,18 - 8,45 (m,

2Η) , 5,44 - 5,47 (m, 4Η), 4,66 - 4,78 (m, 2Η), 4,45 - 4,55 (m, 2Η), 3,59 - 3,78 (m, 2Η), 3,30 - 3,43 (m, 2Η), 3,10 - 3,36 (m, 2Η).

¹³C NMR (DMSO-dg): 170,7, 165,6, 149,9, 148,5, 147,8,

147,1, 140,8, 108,0, 85,2, 84,4, 80,9, 79,2, .78,3, 70,0,

64,0, 42,6.

MS (ESP, m/e); 1216 (M⁺, 100 %), 1238 ([M+Na]⁺, 20 %) .

c. 2,4,6-trijód-3-acetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-acetylamino-5’ - (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén

3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) fenylaminokarbonyl-[3’-amino-2’,4’,6’-trijód-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén (100 mg, 0,082 mmol) sa rozpustil v anhydride kyseliny octovej (7 ml), Pridala sa jedna kvapka koncentrovanej kyseliny sírovej a zmes sa zahrievala na 60 °C počas 1,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu a vody (3:1), 10 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 13 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 NaOH. Zmes sa premiešavala počas 16 hodín pri 50 ’C, zriedila sa vodou (20 ml) a pH sa nastavilo na neutrálnu hodnotu pomocou silne kyslého vymieňača iónov. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 75 mg, (71 %).

MS (ESP, m/e); 1301 (M⁺, 81 %) , 1324 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 19

2,4,6-trijód-3-hydroxyacetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-hydroxyacetylamino-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén

a. 2,4,6-trijód-3-amino-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbony 1) fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trij ód-3’-amino-5’-(2,3diacetoxypropylaminokarbony1)benzén

3-amino-2,4,6-trijód-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbo40 nyl)fenylaminokarbony1-[3’-amino-2’,4’,6’-trij ód-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén (100 mg, 0,082 mmol) pripravený podľa Príkladu 18b, sa rozpustil v zmesi anhydridu kyseliny octovej (2 ml) a pyridínu (2 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 17 hodín, rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa rozpustil v etylacetáte (50 ml). Po premytí vodným roztokom HC1 (0,1 mol/1, 25 ml), nasýteným vodným roztokom NaHCO^, vysušení (Na2SO^) a odparení sa zvyšok čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 100 mg, 88 %).

2H NMR (DMSO-d6):	9,89 -	10,27	(m, 1H), 8,56	8,70	i (m,
2H), 5,54 (s, 2H),	5,51 (s,	2H) ,	5,06 - 5,13 (m,	2H) ,	4,25
- 4,36 (m, 2H), 4,16 - 4,22	(m,	2H), 3,30 - 3,58	(m,	4H) ,
2,02 (s, 12H).
MS (ESP, m/e): 1385	(M+, 100	%) ,	1464 ([M+pyridín]+	, 19	%) .

b. 2,4,6-trijód-3-hydroxyacetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-hydroxyacetylamino-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén

2,4,6-trijód-3-amino-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbony 1) -fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’-amino-5’-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)benzén (35 mg), 0,025 mmol) sa rozpustil v acetoxyacetylchloride (1 ml) a zmes sa zahrievala na 70 °C počas 1,5 hodiny. Po ochladení na teplotu okolia sa rozpúšťadlo odparilo a zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu a vody (3:1), 1 ml). Pridal sa vodný roztok 1 mol/1 NaOH (0,23 ml) a po premiešavaní počas 15 minút sa pridala voda (20 ml) a roztok sa neutralizoval pomocou silne kyslého vymieňača iónov. Rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 14 mg (61 %) .

MS (ESP, m/e): 1332 (M⁺, 100 %).

Príklad 20

2,4,6-trij ód-3-(2-hydroxypropionylamino)-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenylaminokarbonyl-2’,4’,6’-trijód-3’(2-hydroxypropionylamino)-5’-(2,3-dihydroxypropylaminokar41 bonyl)benzén

2,4,6-trijód-3-amino-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-fenylaminokarbonyl-2 ’,4’,6’-trijód-3’-amino-5’-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)benzén (100 mg, 0,072 mmol) sa rozpustil v α-acetoxypropionylchloride (1 ml) a zmes sa premiešavala pri 40 °C počas 17 hodín. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa suspendoval v zmesi metanolu a vody (1:1, 4 ml). Pridal sa vodný roztok NaOH (1 mol/1, 0,5 ml) a roztok sa premiešaval počas 5 hodín. Pridala sa voda (20 ml) a pH sa nastavilo na neutrálnu hodnotu pomocou silne kyslého vymieňača katiónov. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 33 mg (43 %).

¹H NMR (DMSO-dg): 10,16 - 10,55 (m, 1H), 9,54 - 9,86 (m,

2H), 8,40 - 8,65 (m, 2H), 5,60 (široký s, 2H), 4,70 (široký s, 2H), 4,46 (široký s, 2H), 4,08 - 4,22 (m, 2H), 3,60 - 3,71 (m, 2H), 3,32 - 3,58 (m, 2H), 3,15 - 3,32 (m, 2H), 3,04 - 3,22 (m, 4H), 1,39 (d, J = 7,0 Hz, 6H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 172,4, 170,0, 169,8, 169,7, 150,7,

148,0, 143,8, 143,2, 142,3, 104,6, 100,8, 100,2, 100,0,

99,8, 97,2, 96,9, 95,0, 90,7, 90,5, 69,8, 67,6, 64,0, 42,7,

21,0.

MS (ESP, m/e): 1361 (M⁺, 100 %), 1383 ([M+Na]⁺, 25 %).

Príklad 21

Di[2,4,6-trijód-N,N’-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5-acetylaminofenyljéter

a. 3,5-dinitroanizol

Sodík (575 mg, 25 mmol) sa rozpustil v absolútnom metanole (100 ml). Potom sa pridal 1,3,5-trinitrobenzén (4,26 g, 20 mmol) a roztok sa premiešaval počas noci. Po odparení rozpúšťadla sa pridala voda a zrazenina sa odfiltrovala, premyla sa vodou a vysušila sa. Tento materiál sa použil bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom kroku. Výťažok: 3,4 g (86 %) .

^ΧΗ NMR (CDC1₃): 8,65 (t, J = 2,O Hz, IH), 8,06 (d, J = 2,0

Hz, 2H), 4,01 (s, IH).

b. 3,5-dinitrofenol

3,5 dinitroanizol (1,36 g, 6,9 mmol) a koncentrovaný vodný roztok HBr (50 ml) sa zahrievali na teplotu refluxu počas 16 hodín. Po ochladení na teplotu okolia sa tuhá zrazenina odfiltrovala, premyla sa vodou a vysušila sa. Výťažok: 325 mg (26 %).

¹H NMR (CDC1₃): 8,64 (t, J = 2,0 Hz, IH), 8,04 (d, J = 2,0

Hz, 2H), 2,0 (široký s, IH).

c. 3,5-diacetylaminofenol

3.5- dinitrofenol (325 mg, 1,77 mmol) sa rozpustil v ľadovej kyseline octovej (20 ml) a hydrogenoval sa pri 414 kPa za použitia Pd-C katalyzátora (10 % hmotnostných, 50 mg).

Reakčná zmes sa prefiltrovala a pridal sa anhydrid kyseliny octovej (2 ml).Roztok sa zahrial na 100 “C a potom sa nechal znova ochladiť. Rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil pomocou chromatografie na silikagéli za použitia zmesi metanolu a etylacetátu (10:90) ako eluenta. Výťažok: 90 mg (24 %).

¹H NMR (CD₃OD): 7,24 (t, J = 2,0 Hz, IH), 6,92 (d, J = 2,0

Hz, 2H), 2,12 (s, 6H).

d. 3,5-dinitrofenyl-3’,5’-diacetylaminofenyléter

3.5- diacetylaminofenol (90 mg, 0,43 mmol) a trinitrobenzén (0,111 g, 0,52 mmol sa rozpustili v suchom DMF (10 ml) a pridal sa K₂CO₃ (0,124 g, 0,90 mmol). Po premiešavaní počas 17 hodín sa pridala voda (20 ml) a roztok sa extrahoval etylacetátom. Po premytí vodou (2 x 10 ml), sušení (Na₂S0₄) a odparení rozpúšťadla sa zvyšok čistil chromatografiou na silikagéli za použitia etylacetátu ako eluenta. Výťažok: 0,121 g, (75 %).

MS (ESP, m/e): 375 ([M+l]⁺, 100 %), 397 ([M+Na]⁺, 39 %),

413 ([M+K]⁺, 35 %).

e. Di(3,5-diacetylaminofenyl)éter

3,5-dinitrofenyl-3’,5’-diacetylaminofenyléter (0,12 g, 0,32 mmol) sa rozpustil v ľadovej kyseline octovej (5 ml) a zahrieval sa na teplotu refluxu. Po častiach sa počas 5 minút pridal železný prášok (0,3 g). Po refluxovaní počas hodín sa roztok ponechal ochladnúť na teplotu okolia, pridal sa anhydrid kyseliny octovej (1,5 ml) a zahrievanie pokračovalo ďalšie 2 hodiny. Rozpúšťadlá sa potom odstránili odparením, zvyšok sa opracoval etylacetátom, prefiltroval a odparil. Zvyšok sa rozpustil v acetóne a roztok sa prefiltroval cez vrstvu silikagélu. Odparenie rozpúšťadla poskytlo 84 mg (66 %) produktu.

¹H NMR (CD₃OD): 7,62 (s, 2H), 7,08 (s, 4H), 2,12 (s, 12H).

MS (ESP, m/e): 399 ([M+l]⁺, 62 %) , 421 ([M+Na]⁺, 41 %) , 437 ([M+K]⁺, 100 %).

f. Di(3,5-diacetylamino-2,4,6-trijódfenyl)éter

Jodácia di(3,5-diacetylaminofenyl)éteru sa uskutočnila za použitia štandardných postupov pre jodáciu aktivovaných aromatických látok, napríklad za použitia KICI2 vo vodnom roztoku, alebo v zmesi vody a alkoholu, ako je opísané v literatúre (pozri napríklad EP-A-501875 a DE-A-2629228). Čistenie produktu sa uskutočnilo chromatografiou a rekryštalizáciou.

g. Di [ 2,4,6-trijód-N,N’-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5-acetylaminofenyl]éter

Alkylácia di(3,5-diacetylamino-2,4,6-trijódfenyl)éteru sa uskutočnila analogicky k podobným reakciám opísaným v literatúre, napríklad za použitia metoxidu sodného ako zásady vo vhodnom rozpúšťadle, ako je napríklad propylénglykol a 3-chlórpropán-l,2-diol (pozri napríklad US 4250113). Produkt sa čistil preparatívnou HPLC.

Príklad 22

Di [ 3 -hydroxyacetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódfenyl]metanol

a. Di(3-acetylfenyl)ketón

Acetofenón (57,6 g, 0,48 mmol) a AICI3 (160 g, 1,2 mol) sa zmiešali a zahrievali na 100 °C pod argónovou atmosférou počas 30 minút. Po ochladení na teplotu okolia sa pridal CCI4 (300 ml) a zmes sa zahrievala na teplotu refluxu počas 4 hodín. Po ochladení na teplotu okolia sa pridala zmes vody a koncentrovanej HC1 (300 ml , 1:1). Vodná fáza sa extrahovala s CHCI3 (3 x 200 ml) a spojené organické fázy sa odpariliZvyšok sa rozpustil v 70 % etanole (400 ml) a roztok sa krátko zahrial na teplotu refluxu. Odparenie rozpúšťadiel nasledované rekryštaliáciou z vodného acetónu poskytlo čistý produkt. Výťažok: 49,9 g (77 %).

¹H NMR (CDC1₃): 8,36 (t, J = 1,5 Hz, 2H), 8,20 (dt, J_d = 7,8 Hz, J_t = 1,5 Hz, 2H), 7,98 (dt, J_d = 7,7 Hz, J_t = 1,5 Hz, 2H) , 7,62 (t, J = 7,7 Hz, , 2H), 2,65 (s, 6H) .

MS (ESP, m/e): 268 (M⁺, 100 %).

b. Di(3-nitro-5-karboxyfenyl)ketón

Di(3-acetylfenyl)ketón (60,0 g, 0,224 mol) sa rozpustil v koncentrovanej kyseline sírovej (400 ml) a roztok sa ochladil na 0 °C. Po kvapkách sa potom pridala zmes koncentrovanej kyseliny sírovej (120 ml) a koncentrovanej kyseliny dusičnej (120 ml) a roztok sa potom premiešaval pri laboratórnej teplote počas 17 hodín Po premiešavaní počas ďalších 24 hodín pri 40 C a počas 6 hodín pri 60 °C sa reakčná zmes naliala na ľad a zrazenina sa oddelila, premyla vodou a vysušila sa. Výťažok: 77,6 g (96 %).

^ΧΗ NMR (DMSO-dg): 8,83 (t, J = 1,8 Hz, 2H), 8,67 (t, J =

1,8 Hz, 2H), 8,57 (t, J = 1,8 Hz, 2H), 3,9 (široký s, 2H) .

MS (ESP, m/e): 359 ([M-l]⁺, 100%).

c. Di(3-nitro-5-karboxyfenyl)ketón dimetylester dimetylketal

Di(3-nitro-5-karboxyfenyl)ketón (10,0 g, 28 mmol) sa rozpustil v metanole (250 ml), ktorý obsahoval koncentrovanú kyselinu sírovú (20 ml), a roztok sa zahrieval na teplotu refluxu počas 17 hodín. Rozpúšťadlo sa odparilo, pridala sa voda (70 ml) a etylacetát (300 ml) a organická fáza sa oddelila a vysušila sa. Po odparení rozpúšťadla sa zvyšok rozpustil v THF, ktorý obsahoval (3,87 g, 28 mmol) a CH₃I (5,0 ml) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 70 hodín. Reakčná zmes sa prefiltrovala a odparila do sucha a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok : 2,6 g (25 %) .

¹H NMR (CDC1₃): 8,76 - 8,78 (m, 2H), 8,58 (t, J = 1,7 Hz,

2H) , 8,41 (t, J = 1,6 Hz, 2H), 3,98 (s, 6H), 3,19 (s, 6H).

MS (EI, m/e): 403 ([M-OCH₃J⁺, 100 %) .

d. Di[3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]ketón

Di(3-nitro-5-karboxyfenyl)ketón dimetylester dimetylketál (1,0 g, 2,3 mmol) sa rozpustil v metanole (3,0 ml), ktorý obsahoval aminopropán-2,3-diol (0,84 g, 9,2 mmol) a zmes sa zahrievala na 95 °C počas 2,5 hodiny pri 26,6 kPa. Po ochladení na teplotu okolia sa rozpúšťadlo odstránilo odparením a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,78 g (67 %).

¹H NMR (DMSO-d₆): 9,03 - 9,15 (m, 2H), 8,90 - 9,03 (m, 2H), 8,58 - 8,73 (m, 4H) , 4,38 (široký s, 2H), 4,12 (široký s, 2H), 3,61 - 3,70 (m, 2H) , 3,39 - 3,48 (m, 2H), 3,35 (široký s, 2H), 3,15 - 3,26 (m, 2H).

¹³C NMR (DMSO-dg): 163,9, 148,3, 138,1, 137,9, 136,9, 134,4, 126,9, 126,4, 70,5, 64,3, 43,8.

MS (ESP, m/e): 504 (M, 100 %).

e. Di[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]metanol

Di[3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)fenyl]ketón (0,70 g, 1,4 mmol) sa rozpustil v.metanole (40 ml) a hydrogenoval sa pri 414 kPa za pomoci Pd/C katalyzátora (10 % hmotnostných, 0,20 g). Katalyzátor sa odfiltroval a rozpúšťadlo sa odparilo. Analýza pomocou NMR ukázala úplnú konverziu na produkt. Výťažok: 0,62 g (100 %).

^ΧΗ NMR (DMSO-d₆): 8,36 - 8,57 (m, 1H), 7,77 - 8,35 (m, 3H), 7,04 - 7,72 (m, 4H), 5,62 - 5,75 (m, 1H), 5,10 (široký s, 1H), 4,23 (široký s, 1H), 4,06 (široký s, 2H), 3,60 - 3,85 (m, 4H), 2,91 - 3,40 (m, 10H).

MS (ESP, m/e): 449 (M⁺, 100 %) .

f. Di[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6trij ódfenyl]metanol

Jodácia di[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbo„ nyl)fenyl]metanolu sa uskutočnila za použitia štandardných postupov pre jodáciu aktivovaných aromatických látok, napí ríklad za použitia KICI2 vo vodnom roztoku, alebo v zmesi vody a alkoholu, ako je opísané v literatúre (pozri napríklad EP-A-501875 a DE-A-2629228). Čistenie produktu sa uskutočnilo chromatografiou a rekryštalizáciou.

g. Di[3-hydroxyacetylamino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) - 2 , 4 , 6-tr i j ódf enyl jmetanol

Acylácia di[3-amino-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) -2,4,6-trijódfenyl]metanolu pomocou acetoxyacetylchloridu sa uskutočnila analogicky k Príkladu 19b. Surový produkt sa potom hydrolyzoval vodným roztokom NaOH. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC.

ŤU Sžtt-rz V

Claims (14)

1. PATENTOVÉ

   NÁROKY

   1. Látka so vzorcom I (kde CgRg skupiny môžu byť rovnaké alebo rôzne; R označuje vodíkový alebo jódový atóm alebo skupinu M, dve alebo tri nie-susedné R skupiny na každej CgRg skupine označujú atómy jódu, a jedna, dve alebo tri R skupiny na každej skupine CgRg označujú M skupiny, každá CgRg skupina je trijódfenylovou skupinou alebo skupinou, v ktorej každý R je iný než vodík; X označuje skupinu, ktorá poskytuje 1-, 2- alebo 3-atómový reťazec spájajúci dve CgRg skupiny; a každý M je nezávisle ne-iónovou hydrofilnou skupinou) a jej izoméry.
2. 2. Látka podľa nároku 1, kde X je karbonyloxyskupina alebo ju mostíkový reťazec obsahuje.
3. 3. Látka podľa nároku 1, kde M je monohydroxy- alebo polyhydroxyalkylová skupina.
4. 4. Látka podľa nároku 1, kde X je asymetrická skupina poskytujúca 2 alebo 3 atómový reťazec spájajúci dve CgR^ skupiny.
5. 5. Látka podľa nároku 1, kde dve CgRg skupiny sú neidenticky substituované.
6. 6. Látka podľa nároku 1, kde najmenej jedna CgR^ skupina je skupina so vzorcom kde dve R skupiny sú rovnaké alebo rôzne.
7. 7. Látka podľa nároku 1, kde najmenej jedna C^Rg skupina je skupina so vzorcom kde M skupiny sú rovnaké alebo rôzne.
8. 8. Látka podľa nároku 1, kde M skupiny sú ^θ-alkylové skupiny s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktoré majú jednu alebo viaceré CH₂ alebo CH skupiny nahradené kyslíkovými alebo dusíkovými atómami alebo ktoré sú substituované jednou alebo viacerými skupinami vybranými z oxoskupiny, hydroxylu, aminoskupiny, karboxylových derivátov, a oxoskupiny substituovanej atómami síry a fosforu.
9. 9. Látka podľa nároku 1, kde M skupinami sú polyhydroxyalkylové, hydroxyalkoxyalkylové alebo hydroxypolyalkoxyalkylové skupiny voliteľne naviazané na fenylovú skupinu prostredníctvom amidovej väzby.
10. 10. Látka podľa nároku 1, kde M skupiny sú vybrané z

    -conh-ch₂ch₂oh

    -conh-ch₂chohch₂oh

    -conh-ch(ch₂oh)₂

    -con(ch₂ch₂oh)₂

    -conh₂

    -conhch₃

    -ococh₃

    -N(COCH₃)H

    -N(COCH₃)C₁_₃-alkyl

    -N(COCH₃)-mono, bis alebo tris-hydroxyC₁_₄-alkyl,

    -N(C0CH₂0H)-mono, bis alebo tris-hydroxyC-_L_4-alkyl

    -C(COCH₃)-(mono, bis alebo tris-hydroxyCi^-alkyl)₂

    -N-(C0CH₂0H)₂

    -C0N(CH₂CH0HCH₂0H)(ch₂ch₂oh)

    -CONH-C(CH₂OH)₃ a

    -C0NH-CH(CH₂0H)(CH0HCH₂0H).
11. 11. Látka podlá nároku 1, kde M skupiny sú polyhydroxyC-^ _ ^alkylové skupiny.
12. 12. Látka podlá nároku 1, kde X jeden kyslíkový atóm alebo skupina NR¹, CO, S02 alebo CR¹2; skupina COCO, CONR¹, C0CR¹2, S0CR¹2, SC^NR¹, CR¹2CR¹2, CR^NR¹, CR¹20; skupina

    NR¹CONR¹, OCONR¹, CONR¹CO, C0NR¹CR¹2, OCOO, CR¹20CR¹2, ocr¹2co, cr¹2conr¹, cr¹2cr¹2cr¹2, cocr¹r¹co, cr¹2nr¹cr¹2, CR¹2SO₂NR¹, CR¹2OCO alebo NR¹SO₂NR¹; kde R¹ je vodík alebo C^^alkylová alebo alkoxylová skupina, voliteľne substituovaná hydroxylom, alkoxylom, oxa- alebo oxo- skupinou (napríklad polyhydroxyalkylová, formylová, acetylová, hydroxylová, alkoxylová alebo hydroxyalkoxylová skupina), alebo ak je pripojená na uhlík R¹, môže to tiež byť hydroxylová skupina.
13. 13. Látka podlá nároku 1, ktorá má jeden zo vzorcov

    I í

    (kde M je podlá definície v nároku 1 a je podľa definície v nároku 12).
14. 14. Diagnostická zmes, vyznačuj úca sa tým, že obsahuje látku so vzorcom I podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov spolu najmenej s jedným fyziologicky tolerovateľným nosičom alebo vehikulom.