SK282352B6

SK282352B6 - Prostriedok v tuhej forme na liečenie androgénnej alopécie

Info

Publication number: SK282352B6
Application number: SK448-96A
Authority: SK
Inventors: Glenn J. Gormley; Keith D. Kaufman; Elizabeth Stoner; Joanne Waldstreicher
Original assignee: Merck & Co., Inc.
Priority date: 1993-10-15
Filing date: 1994-10-11
Publication date: 2002-01-07
Also published as: EP0724444B1; GR3024375T3; DZ1817A1; BR9407824A; AU688395B2; BG62756B1; US5981543A; CY2071B1; ATE156358T1; US5760046A; WO1995010284A1; EP0724444A1; NO961497L; DK0724444T3; CN1137237A; FI961632A0; NZ275678A; IL111293A; US5824686A; NO961497D0

Abstract

Použitie 17beta-(N-terc.-butylkarbamoyl)-4-aza-5alfa- androst-1-en-3-ónu na výrobu lieku na orálne podanie na liečenie androgénnej alopécie u ľudí, kde jednotková dávka je do 0,05 do 1,0 mg.ŕ

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka použitia zlúčeniny 17β-(N-terc.-butylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-1 -en-3 -ónu na liečenie alopécie.

Doterajší stav techniky

Určité nežiaduce fyziologické prejavy, ako je acne vulgaris, mazotok, ženské nadmerné ochlpenie, plešatosť mužského typu a benígne zväčšenie prostaty sú výsledkom hyperandrogénnej stimulácie spôsobenej nadmernou akumuláciou testosterónu („T“) alebo podobných androgénnych hormónov v systéme metabolizmu. Počiatočné pokusy o chemoterapautický prostriedok proti nežiaducim dôsledkom hyperandrogenicity dospeli k objaveniu niekoľkých steroidných antiandrogénov, ktoré samy osebe majú nežiaduce hormonálne účinky. Napríklad estrogény pôsobia nielen proti účinku androgénov, ale majú aj feminizačný účinok. Boli tiež vyvinuté nesteroidné antiandrogény, napríklad 4'-nitro-3'-trifluórmetylizobutyranilid (pozri Neri a ďalší, Endocrinol., 1972, 91 (2)). Ale tieto produkty, hoci chýbajú hormonálne účinky, súťažia so všetkými prirodzenými androgénmi o receptorové miesta a preto majú snahu o feminizáciu mužského hostiteľa alebo plodu mužského pohlavia ženského hostiteľa a/alebo iniciáciu spätnoväzbových účinkov spôsobujúcich hyperstimuláciu samčích pohlavných žliaz.

Hlavným mediátorom androgénnej aktivity v niektorých cieľových orgánoch, napríklad v prostate, je 5a-dihydrotestosterón („DHT“) tvorený miestne v cieľovom orgáne pôsobením testosterón-5a-reduktázy. Inhibítory testosterón-5a-reduktázy slúžia na prevenciu alebo na zníženie symptómov hyperandrogénnej stimulácie týchto orgánov, pozri najmä U.S. patentový spis 4,377,584 firmy Merck & Co., Inc., publikovaný 22. marca 1983. Teraz je známe, že existuje druhý izoenzým 5a-reduktázy, ktorý vzájomne reaguje s kožným tkanivom, zvlášť s kožným tkanivom na temene hlavy, pozri napríklad G. Harris a ďalší, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, zv. 89, strany 10787 až 10791 (november 1992). Izoenzým, ktorý vzájomne reaguje hlavne v kožnom tkanive, je bežne označovaný ako 5a-reduktáza 1 (alebo 5a-reduktáza typu 1), zatiaľ čo izoenzým, ktorý vzájomne reaguje hlavne v prostatickom tkanive, je označovaný ako 5a-reduktáza 2 (alebo 5a-reduktáza typu 2).

Finasterid (17p-(N-terc.-butylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-ón), ktorý uvádza na trh firma Merck & Co., Inc. pod obchodným názvom PROSCAR^r, je inhibítorom 5a-reduktázy 2 a je známy ako použiteľný na liečenie hyperandrogénneho stavu, pozri napríklad US patentový spis 4,760,071. Finasterid je v súčasnosti uvádzaný na trh v USA a vo svete na liečenie benígneho zväčšenia prostaty. Užitočnosť finasteridu pri liečbe androgénnej holohlavosti a karcinómu prostaty je diskutovaná taktiež v nasledujúcich dokumentoch: EP 0 285 382, publikovaný 5. októbra 1988; EP 0 285 383, publikovaný 5. októbra 1988; kanadský patent č. 1,302,277 a kanadský patent č. 1,302,276. Špecifické dávky, uvádzané ako príklady v uvedených spisoch, sa pohybujú od 5 do 2000 mg na pacienta a deň.

Pri liečbe androgénnej holohlavosti, ktorá zahrnuje plešatosť tak ženského, ako aj mužského typu a iných hyperandrogénnych stavov, by bolo žiaduce podávať pacientovi čo najnižšie možné dávky farmaceutického prípravku a pritom stále zachovať terapeutický účinok. Bolo prekvapivo a neočakávane zistené, že nízka denná dávka finasteridu je pri liečbe holohlavosti zvlášť účinná.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález poskytuje použitie 17p-(N-terc.-butylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-ónu na výrobu lieku na orálne podanie na liečenie androgénnej alopécie u ľudí, kde jednotková dávka je do 0,05 do 1,0 mg. Liečenie androgénnej holohlavosti podporuje rast vlasov. Liek môže byť podávaný v dávkach od 0,05 do 0,2 mg/deň. Napríklad v dávkach približne 0,05,0,1,0,15 a 0,2 mg/deň.

Zlúčenina finasterid je v súčasnosti k dispozícii ako liečebný prípravok od firmy Merck & Co., Inc. Syntéza finasteridu je opísaná v US patentovom spise 4,760,071. Ďalšia syntéza finasteridu je opísaná v Synthetic Communications, 30 (17), str. 2683 až 2690 (1990).

Predkladaný vynález má za cieľ poskytnúť prostriedok na liečenie androgénnej holohlavosti vrátane plešatosti mužského typu a plešatosti ženského typu, podávaním finasteridu v dávke od 0,05 do 1 mg/deň. Vynález je ďalej ilustrovaný dávkami približne 0,05 až 0,2 mg/deň a špecificky dávkami približne 0,05; 0,1; 0,15 a 0,2 mg/deň. V príkladoch vynálezu sú dávky 0,05 a 0,2 mg/deň. Termín „liečenie androgénnej holohlavosti“ má zahrnovať zastavenie a/alebo reverziu androgénnej holohlavosti a podporu rastu vlasov. Finasterid môže byť tiež použitý v kombinácii s otváračom draslikového kanála, ako je monixidil alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, na liečbu androgénnej holohlavosti vrátane plešatosti mužského typu. Finasterid a otvárač draslikového kanálu môžu byť oba podávané miestne alebo môže byť každý prostriedok podávaný inou cestou, napríklad finasterid môže byť podávaný ústami, zatiaľ čo otvárač draslikového kanálu môže byť podávaný miestne.

Prostriedky obsahujúce finasterid ako aktívnu zložku na použitie pri liečbe uvedených hyperandrogénnych podmienok, môžu byť podávané širokou škálou liečebných dávkovacích foriem s bežnými nosičmi, ako sú tablety, kapsuly (obe formy vrátane prostriedkov s oneskoreným a trvalým uvoľňovaním), pilulky, prášky, granuly, elixíry, tinktúry, roztoky, suspenzie, sirupy a emulzie. Napríklad na podávanie ústami môže byť vyrobený prostriedok vo forme tabliet s drážkou alebo bez, obsahujúci 0,01,0,05,0,1,0,2,1,0,2,0 a 3,0 mg aktívnej látky na symptomatické nastavenie dávky pre liečeného pacienta.

Výhodne sa môžu zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu podávať v jednotlivej dávke alebo môže byť celková denná dávka podaná v rozdelených dávkach dvakrát, trikrát alebo štyrikrát denne.

Dávkovacia schéma využívajúca zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu sa volí v zhode s rôznymi faktormi vrátane typu, druhu, veku, váhy, pohlavia a zdravotného stavu pacienta, vážnosti liečeného stavu, cesty podávania, obličkovej a pečeňovej funkcie pacienta a zvlášť použitej zlúčeniny. Normálne skúsený lekár alebo veterinárny lekár môže ľahko určiť a predpísať účinné množstvo lieku nutné na predchádzanie, čelenie, zastavenie alebo zvrátenie priebehu stavu. Optimálna presnosť v dosiahnutí koncentrácie lieku v rozmedzí, pri ktorom sa získa účinok bez toxicity, vyžaduje režim postavený na kinetike dostupnosti lieku pre cieľové miesta. Ten berie do úvahy distribúciu, rovnovážny stav a odbúravanie lieku.

Kompozície obsahujúce finasterid sa typicky sa podávajú v zmesi s vhodnými farmaceutickými dihientmi, excipientmi alebo nosičmi (tu súhrne označovanými ako „nosné“ materiály), vhodne zvolenými s ohľadom na zamýšľanú formu podávania, t. j. orálne tablety, kapsuly, elixíry, sirupy a podobne, ktoré sú v zhode s bežnými farmaceutickými postupmi.

Napríklad na orálne podávanie vo forme tabliet alebo kapsúl môže byť aktívna liečivá zložka kombinovaná s orálnym, netoxickým farmaceutický prijateľným inertným nosičom, ako je etanol, glycerol, voda a podobne. Kapsuly s obsahom prostriedku podľa vynálezu môžu byť pripravené miešaním aktívnej zlúčeniny podľa vynálezu s laktózou a stearanom vápenatým, škrobom, mastencom alebo inými nosičmi a umiestnením zmesi v želatínovej kapsule. Tablety môžu byť pripravené miešaním aktívnej zložky s bežnými tabletovacími zložkami, ako je fosforečnan vápenatý, laktóza, kukuričný škrob alebo stearan horečnatý. Navyše, pokiaľ je to žiaduce alebo nutné, môžu byť do zmesi pridané vhodné spojivá, klzné látky, dezintegračné látky a farbivá. Vhodnými spojivami sú škrob, želatína, prírodné cukry, ako glukóza alebo β-laktóza, kukuričné sladidlá, prírodné a syntetické gumy, ako akácia, tragakant alebo alginát sodný, karboxymefylcelulóza, polyetylénglykol, vosky a podobne. Mastivá, ktoré sa používajú v týchto dávkovacích formách, sú olean sodný, stearan sodný, stearan horečnatý, benzoan sodný, octan sodný, chlorid sodný a podobne. Dezintegračné látky zahrnujú bez obmedzenia škrob, metylcelulózu, agar, bentonit, xantánovú gumu a podobne.

Kvapalné formy sú možné vo vhodných suspenzačných alebo dispergačných prostriedkoch, ako sú syntetické alebo prírodné gumy, napríklad tragakant, akácie, metylcelulóza, glycerín a podobne. Na parenterálne podávanie sú požadované sterilné suspenzie a roztoky. Pokiaľ je požadované intravenózne podávanie, používajú sa izotonické prípravky, ktoré všeobecne obsahujú vhodné ochranné látky.

Nasledujúce príklady ilustrujú predkladaný vynález a samotné ich nie je možné považovať za obmedzujúci celok vynálezu podľa pripojených nárokov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Je známe, že finasterid sa vyskytuje v dvoch rozdielnych polymorfhých kryštalických formách označovaných ako „forma I“ a „forma II“. Forma I je formou fmasteridu, ktorá je dodávaná na trh ako 5 mg tableta (PROSCAR^r).

Formu fmasteridu je možné pripraviť rozpustením fmasteridu v ľadovej kyseline octovej (približne 100 mg/1) a pridávaním vody za miešania, pokiaľ hmotnostné % vody nedosiahne alebo nepresiahne 84 %. Výsledná tuhá fáza sa oddelí filtráciou a suší sa pod vákuom pri teplote približne 50 °C. Výsledná forma I je charakterizovaná diferenciálnou skenovacou kalorimetriou (DSC), pri rýchlosti zohrievania 20 °C/min. a v uzavretej nádobe, pričom má menší endoterm s teplotu piku približne 232 °C, s extrapolovanou teplotou nasadenia pri približne 223 °C a skupenským teplom približne 11 J/g a hlavný endoterm tavenia s teplotou piku približne 261 °C, s extrapolovanou teplotou nasadenia pri približne 258 °C a skupenským teplom približne 89 J/g. Obraz rôntgenovej difrakcie prášku je charakterizovaný vzdialenosťami d 6,44, 5,69, 5,36, 4,89, 4,55, 4,31, 3,85, 3,59 a 3,14. FT-IR spektrum vykazuje pásy pri 3431, 3237, 1692, 1666, 1602 a 688 cm¹. Rozpustnosti vo vode a cyklohexáne pri 25 °C sú 0,05 + 0,02, respektíve 0,27 + + 0,05 mg/g. Navyše, forma I fmasteridu môže byť pripravená rekryštalizáciou zo suchého etylacetátu (H₂O < < 1 mg/ml) a izopropylacetátu. Izolované tuhé látky sa sušia vo vákuu pri približne 50 °C a sú charakterizované rovnakými fyzikálnymi údajmi, ako je uvedené.

Príklad 2

Formu II fmasteridu je možné pripraviť rozpustením fínasteridu v ľadovej kyseline octovej (približne 100 mg/1) a pridávaním vody za miešania, pokiaľ hmotnostné % vody nedosiahne 75 %, ale nepresiahne 80 %. Výsledná tuhá fáza sa oddelí filtráciou a suší sa pod vákuom pri teplote približne 100 °C. Výsledná forma II je charakterizovaná diferenciálnou skenovacou kalorimetriou (DSC), pri rýchlosti zohrievania 20 °C/min. a v uzavretej nádobe, pričom má jediný endoterm tavenia s teplotou piku približne 261 °C, s extrapolovanou teplotou nasadenia pri približne 258 °C a skupenským teplom približne 89 J/g. Obraz rôntgenovej difrakcie prášku je charakterizovaný vzdialenosťami d 14,09,10,36,7,92,7,18,6,40, 5,93,5,66,5,31,4,68, 3,90, 3,60 a 3,25. FT-IR spektrum vykazuje pásy pri 3441, 3215, 1678,1654,1597,1476 a 752 cm¹. Rozpustnosti vo vode a cyklohexáne pri 25 °C sú 0,16 + 0,02, respektíve 0,42 + + 0,05 mg/g. Forma II fmasteridu môže byť pripravená rekryštalizáciou z etylacetátu s obsahom vody medzi 2 a 30 mg/ml a izopropylacetátu s obsahom vody medzi 2 a 15 mg/ml. Izolované tuhé látky sa sušia vo vákuu pri približne 80 °C a sú charakterizované rovnakými fyzikálnymi údajmi, ako je uvedené. Forma II môže byť tiež pripravená zohrievaním formy I až na približne 150 °C, zotrvaním približne 1 hodinu pri tejto teplote a spätným ochladením na izbovú teplotu. Forma II, pripravená týmto spôsobom, je charakterizovaná rovnakými fyzikálnymi údajmi ako uvedené.

Príklad 3

Príprava ľudskej prostatickej 5a-reduktázy

Vzorky ľudského tkaniva boli práškované rozdrvením za mrazu a homogenizované v 40 mM fosforečnane draselnom pH 6,5, 5 mM sírane horečnatom, 25 mM chloride draselnom, 1 mM fenylmetylsulfonylfluoride, 1 mM ditiotrietole (DTT) s obsahom 0,25 M sacharózy v Potter-Elvehjemovom homogenizátore. Odstredením homogenizátu pri 1500 g 15 minút bol získaný surový centrifúgát jadier. Centrifúgát bol dvakrát premytý a resuspendovaný v dvoch objemoch pufra. Bol pridaný glycerol do konečnej koncentrácie 20 %. Enzýmová suspenzia bola zamrazená v alikvótach pri -80 °C. Za týchto podmienok skladovania boli prostatické reduktázy stabilné aspoň 4 mesiace.

Stanovenie 5a-reduktázy

Reakčná zmes pre 5a-reduktázu typu 2 obsahovala 40 mM citran sodný pH 5,5, 0,3 μΜ [7-³H]-testosterón, 1 mM ditiotreitol a 500 μΜ NADPH v konečnom objeme 100 μΐ. Typicky bolo stanovenie začaté prídavkom 50 až 100 pg prostatického homogenizátora a inkubované pri 3 °C. Po 10 až 50 minútach bola reakcia zastavená extrakciou 250 μΐ zmesi 70 % cyklohexánu : 30 % etylacetátu s obsahom 10 pg DHT a 10 pg T. Vodná a organická vrstva boli oddelené odstredením pri 14000 min.¹ v mikroskúmavke Eppendorf Organická fáza bola podrobená HPLC s normálnou fázou (kolóna 10 cm Whatman partisil 5 silica, ekvilibrovaná 1 ml/min. 70 % cyklohexán : 30 % etylacetát; retenčné časy; DHT 6,8 až 7,2 min., androstandiol 7,6 až 8,0 min., T 9,1 až 9,7 min.). Zostava HPLC sa skladala z chromatografii Waters Model 680 Gradient Systém, autosampleru Hitachi 655A, UV detektora s premennou vlnovou dĺžkou Applied Biosystems Model 757 a analyzátora rádioaktivity Radiomatic Model A120. Konverzia T na

SK 282352 Β6

DHT bola monitorovaná použitím prietokového detektora rádioaktivity miešaním eluenta z HPLC s jedným objemom scintilátora Flo Scint 1 (radiomatic). Za opísaných podmienok bola produkcia DHT lineárna aspoň počas 25 minút. Jediné steroidy, pozorované s ľudským prostatickým preparátom, boli T, DHT a androstandiol.

Inhibičné štúdie

Zlúčeniny boli rozpustené v 100 % etanole. Hodnoty IC₅₀ predstavujú koncentrácie inhibítora nutné na zníženie aktivity na 50 % kontroly. Hodnoty IC50 boli stanovené použitím šesťbodovej titrácie, kde koncentrácia inhibítora bola menená v rozsahu od 0,1 do 1000 nM.

Príklad 4

Makrofotografie a celkový fotografický postup na detekciu rastu vlasov

A. Postup makrofotografie

Umiestnenie: identifikačný preukaz oblasť počítania vlasov

Vybavenie: Film: Kodak-T-Max 24 obrázkov, všetok materiál rovnakého emulzného čísla

Prístroj: NikonN-6000

Objektív: Nikkor 60 mm f: 2,8

Blesky: Nikon SB-21B Macroflash

Zariadenie: registračné zariadenie

Fotografický postup

Pri týchto klinických fotografiách je jedinou povolenou premennou počet vlasov. Filmová emulzia, osvetlenie, 0rámovanie, expozícia a reprodukčné pomery sú udržované konštantné.

L Oblasť počítania vlasov pacienta je pripravená nasledujúcim spôsobom: Na začiatku štúdie sa vykoná malé (1 mm) bodkované tetovanie na začiatku holej oblasti priamo pred stredom holohlavej oblasti s použitím komerčného tetovacieho prístroja alebo manuálne (ihlou a atramentom). Oblasť s veľkosťou približne 6,5 cm² so stredom nad tetovaním je krátko ostrihaná (2 mm). Ostrihané vlasy sú z fotografovanej oblasti odstránené pomocou lepiacej pásky. Na uľahčenie odstránenia vlasov je možné použiť aj stlačený vzduch a/alebo otieranie etanolom.

2. Zväčšenie: každý objektív má pevný reprodukčný pomer 1 : 1,2.

Clona: všetky fotografie pri 1722.

Film: T-Max 100 (24 obrázkov).

3. Oblasť počítania vlasov pacienta. Tri expozície -2/3, 0 a +2/3 f-stop).

Vyškolený technik položí na fotografiu priehľadnú fóliu a fixom urobí čiernu bodku nad každým viditeľným vlasom. Fólia s bodkami je potom počítaná počítačovou obrazovou analýzou.

Fotografie sú kódované náhodným číslom, ktorému je priradené miesto štúdie, číslo návštevy a číslo pacienta. V 6. mesiaci sa počítajú vlasy na fotografiách a analyzujú sa dáta pre východiskový stav a 6. mesiac. V 12. mesiaci sa počítajú vlasy na fotografiách a analyzujú sa dáta pre východiskový stav, 6. mesiac a 12. mesiac pre prvý konečný výsledok.

Metodológia na detekciu rastu vlasov je tiež opísaná v: Olsen, E. A. a DeLong, E., J. Američan Academy of Dermatology, zv. 23, str. 470 (1990).

B. Postup celkovej fotografie

Umiestnenie: farebný preukaz/identifikačné číslo pacienta celková fotografia

Vybavenie: Film: Kodachrome KR-64 24 obrázkov, všetok materiál rovnakého emulzného čísla

Prístroj: NikonN-6000

Objektív: Nikkor 60 mm f: 2,8

Blesky: Nikon SB-23

Fotografický postup

Pri týchto klinických fotografiách je jedinou povolenou premennou celkový vzhľad oblastí. Všetko, čo leží vonku z oblasti (oblečenie, nábytok, steny a podobne) je z fotografovaného poľa odstránené.

L Celková fotografia pacienta sa urobí pred ostrihaním vlasov s hlavou vo fixovanej polohe (určené stereotaktickým zariadením). Vlasy na pacientovej hlave sú umiestnené tak, aby nezakrývali holú oblasť.

2. Zväčšenie: každý objektív má pevný reprodukčný pomer 1 : 6.

Clona: Všetky fotografie pri f/11.

Film: Kodachrome (24 obrázkov).

3. Celkové fotografie pacienta. Tri fotografie s nulovou kompenzáciou.

Použitím opísanej metodológie je možné ukázať, že podávanie inhibítorov 5a-reduktázy 2 vrátane finasteridu, v dávkach pod 5 mg/deň na pacienta, napríklad 1 mg/deň alebo 0,2 mg/deň, je výhodné pri liečení androgénnej holohlavosti a podporuje rast vlasov u pacientov v tomto stave.

Príklad 5

V ďalšom teste bol finasterid podávaný ústami 6 týždňov mužom s mužským typom plešatosti v dávkach 0,2 mg/deň, 1,0 mg/deň a 5,0 mg/deň. Výsledky tohto testu ukázali u testovaných osôb významné zníženie obsahu DHT v tkanive na temene hlavy.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie 173-(N-terc.-butylkarbamoyl)-4-aza-5a-androst-l-en-3-ónu na výrobu lieku na orálne podanie na liečenie androgénnej alopécie u ľudí, kde jednotková dávka je do 0,05 do 1,0 mg.
2. Použitie podľa nároku 1, kde dávková jednotka je 1,0 mg.
3. Použitie podľa nároku 1 alebo 2, kde sa lieči plešatosť mužského typu.