RU7872U1 - Препарат "беталейкин" - Google Patents

Abstract

1. Препарат иммуномодулирующего действия, состоящий из растворителя и порошкообразного активного начала на основе цитокинов, отличающийся тем, что активное начало состоит из смеси человеческого сывороточного альбумина и интерлейкина-1-бета.2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что активное начало содержит альбумина и интерлейкина-1-бета в соотношении 20 - 60 : 1.3. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве интерлейкин-1-бета представляет собой генно-инженерный продукт, полученный культивированием бактерии Escherichiacoli штамм C600 и выделенный из культуральной жидкости с использованием методов ион-гидрофобной хроматографии.

Description

l/co /l

ПРЕПАРАТ «БЕТАЛЕПКПП

Полезная модель относится к области медицины, а именно к формам лекарственных препаратов для внутривенного введения.

Известно использование в качестве иммуномодуляторов, как правило, иммуностимуляторов, препаратов женьшеня, элеутерококка, облепихи, котовника, мумие, прополиса и т.п. (В.И.Машанов, А.А.Покровский Пряно-ароматические растения, М., Агропромиздат, 1991., И.С.Соколова и др. Дикорастущие и культурные растения, М., Медицина, 1990).Указанные препараты применяются, как правило, перорально в виде растворов или таблеток.

Недостатком указанных препаратов является ограниченность природных ресурсов, нестандартность сырья, наличие побочных эффектов, невозможность использования внутривенно, что наиболее эффективно при ряде патологий, в частности, при онкологических заболеваниях.

Известны ряд биохимических иммуномоду.пяторов, в частности, тималин, нуклеинат натрия, продигиозан и т.п. Препараты выпускают в виде порошка, который либо принимается перорально, либо разводится, например физиологическим раствором, и используется внутримышечно.

(Земсков Ф.М. и др. Иммунология, 1981,№1, с.52-55, Морозов В.Г. и др. ДАН СССР, 1977, Т.233, №3, с.491-494, Машковский М.Д. Лекарственные средства, М., Медицина, 1993, т.2, с. 169-177 ).

Недостатком препаратов является невозможность использования их внутривенно, побочные эффекты, относительно невысокая эффективность.

Прототипом заявляемого решения являются препараты одного из цитокинов альфа-интерферона, широко реализуемые в клинической практике в виде иммуномодуляторов, выпускаемые в виде набора ампул с порошком- активным началом емкости и дистиллированной водой или другим растворителем (Малиновская В.В., Мурзабаева Р.Т., Манахова Л.С. и др. Функционирование системы интерферона при различных способах и дозах введения альфа-2интерферона. // Вопросы вирусологии.- 1989.- Т.34.-№2.-С. 180-183). Однако

МКл. A 61 К 9/08

препараты интерферона нспользуются также либо в виде аэрозоля или внутримышечно.

Задачей, стоявшей перед авторами являлось создание внутривенной лекарственной формы иммуномодулятора на основе цитокинов

Было установлено, что решение задачи возможно за счет того, что в препарате, состоящем из порошка, содержащего активное начало и растворитель, активное начало выполнено из смеси человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) и интерлейкина- 1 -бета (ИЛ-16).

В результате выполнения активного начала из указанной смеси удается получить комплекс указанных соединений, обладающий с одной стороны большей устойчивостью при хранении по сравнению с индивидуальным интерлейкином , а с другой стороны при введении в кровь наличие комплекса на основе ЧСА, обладающего высоким сродством к плазме крови, обеспечивает постепенное и высокоэффективное распределение ИЛ в крови, минимизируя возможные побочные эффекты.

Лучшие результаты достигаются при соотношении ЧСА: ИЛ-16 от 60 до 20 : 1. При большем содержании ЧСА доля ИЛ в препарате недостаточна для эффективного воздействия на организм. При меньшем соотношении комплекс становится неустойчивым и при внутривенном введении возможны негативные побочные эффекты.

Общий вид новой лекарственной формы препарата представлен на фиг.1, где обозначены емкость 1 с порошком 2-активным началом, выполненным из смеси ЧСА и ИЛ-16, а также емкость 3 с разбавителем 4.

В качестве последнего может использоваться изотонический раствор хлорида натрия, дистиллированная вода, растворы глюкозы и другие фармацевтически приемлемые жидкости.

В качестве интерлейкин-1-бета- содержащего компонента использовали человеческий ИЛ-1 или, в основном, генно-инженерный препарат рекомбинантного ИЛ-1-бета «Беталейкин, созданный в Государственном НИИ особо чистых биопрепаратов (Санкт-Петербург).

И Л-16 был получен культивированием бактерии Escherichia.coli штамм С600, в частности, по технологии описанной в пат. РФ №2045575,1992 и выделен из культуральной жидкости с помощью методов ион-гидрофобной хроматографии, в частности описанной в пат. РФ Г22051922, 1992

Полученный рекомбинантный интерлейкин-1 -бета представлял собой белок с молекулярной массой 18 кДа и по физико-химическим и биологическим свойствам полностью идентичный природному интерлейкину-1- бета человека. Препарат применяют следующим образом. Емкость 1 (ампулу), одержащую, как правило , 0.001 мг ИЛ-16 и 0.02-0.06 мг ЧСА растворяют непосредственно перед введением вначале в 1 мл растворителя 4- стерильного изотонического 0,9% раствора натрия хлорида либо воды для инъекций и доводят общий объем раствора до 100 мл изотоническим 0,9% раствором натрия хлорида или 5% раствору глюкозы.

Лечение препаратом проводят в виде курса из 5 ежедневных капельных внутривенных инфузий в дозе 15-20 нг/кг массы тела пациента на 500 мл изотонического 0,9% раствора натрия хлорида или 5% раствора глюкозы. Продолжительность инфузий может варьироваться от 30 до 90 минут. Наряду с внутривенным путем введения также применяется подкожный способ введения в тех же дозах.

После введения препарата в кровь комплекс постепенно разрушается, освобождая ИЛ-1, в результате чего реализуются возможности последнего. Одно из главных свойств ИЛ-1, заключается в способности стимулировать функции многих типов лейкоцитов в ходе осуществления защитных реакций. Кроме иммуностимулирующего действия ИЛ-1 изменяет продукцию белков острой фазы воспаления и содержание ионов металлов в плазме крови, стимулирует костномозговое кроветворение, повышает иммунологическую реактивность, воздействует на функции фибробластов и эндотелиальных клеток, влияет непосредственно на мозг.

Одно из важнейших свойств ИЛ-1 - стимуляция пролиферации клетокпредшественников костного мозга.. Действие ИЛ-1 на пролиферацию клеток костного мозга связано с индукцией синтеза и усилением биологического действия колониестимулирующих факторов. Данное свойство ИЛ-1 находит свое применение в восстановлении костномозгового кроветворения после воздействия токсических веществ, химиотерапевтических препаратов и облучения . ИЛ-1 стимулирует как неспецифические механизмы резистентности, связанные главным образом с активацией функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов, так и специфический иммунный ответ. Механизм иммуностимулирующего действия ИЛ-1 связан с увеличением дифференцировки лимфоцитов и повышением их функциональной активности, а именно, усилением синтеза лимфоцитами ИЛ-2, повышением ИЛ-2-зависимой пролиферации и увеличением антителообразования

Как показали проведенные эксперименты заявляемый препарат - «Беталейкин обладает способностью стимулировать лейкопоэз в условиях его глубокого угнетения при токсической лейкопении, в том числе при так называемой фебрильной нейтропении, обусловленной применением отдельных цитостатиков или их комбинаций при терапии злокачественных опухолей. Препарат оказывает аналогичное действие при лейкопении, вызванной воздействием ионизирующего излучения, и обладает радиозащитными свойствами.

Кроме того, препарат оказывает иммуностимулирующее действие путем увеличения функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов направленное против сопутствующей или самостоятельно существующей инфекции.

Клинические испытания продемонстрировали высокую эффективность применения препарата «Беталейкин в качестве иммуностимулятора для коррекции вторичных иммунодефицитных состояний у больных с гнойносептическими процессами. Оценка иммунного статуса пациентов, получавших терапию «Беталейкином, проведенная после окончания курса лечения, показала, что препарат вызывал возрастание относительного содержания Т-лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих поверхностные маркеры CD3, Влимфоцитов (CD20), а также увеличивал число клеток, нес) мембранные рецепторы к интерлейкину-2 (СВ25).Наиболее существенные изменения под влиянием терапии «Беталейкином наблюдались при анализе бластной трансформации лимфоцитов в культуре под влиянием ФГА. Препарат в несколько раз усиливал пролиферативный ответ лимфоцитов. По-видимому эти результаты могут быть связаны с усилением под влиянием «Беталейкина продукции цитокинов, особенно интерлейкина-2, синтез которого был существенно снижен до начала лечения по сравнению с нормальными показателями. «Беталейкин вызывал также увеличение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, а именно, миграции, бактерицидности и фагоцитоза клеток.

Лечение «Беталейкином основывается на методах иммунозаместительной терапии, когда в организм больного вводится естественный защитный медиатор, обеспечивающий активацию противоинфекционного иммунитета. Иммунозаместительная терапия цитокинами, в частности, интерлейкинами является новым шагом на пути развития иммунофармакологии, так как применение готового медиатора, синтезируемого клетками организма, отличается от использования различных щироко распространенных препаратов индукторов цитокинов. Эффективность последних часто невысока как за счет того, что механизм действия подобных препаратов связан с необходимостью индукции синтеза эндогенных медиаторов иммунитета,так и с превращениями, происходящими с препаратом до поступления его в целевые зоны организма а при иммунодефицитных состояниях клетки, ответственные за синтез, уже не способны адекватно ответить на внешнюю стимуляцию.

Иммунозаместительная терапия «Беталейкином, напротив, особенно эффективна при иммунодефицитных состояниях, которые сопровождают многие инфекционные заболевания и травмы, или когда локальная инфекция развивается на фоне уже имеющегося иммунодефицита. В этих случаях введенный внутривенно препарат восполняет дефицит эндогенных медиаторов иммунитета, в первую очередь, самого эндогенного ИЛ-1, и оказывает эффективное лечебное действие.

Основным показанием к применению «Беталейкина в качестве стимулятора лейкопоэза является токсическая лейкопения П-IV степени, осложняющая химио и радиотерапию злокачественных опухолей. «Беталейкин может быть также использован в качестве протектора лейкопоэза при необходимости проведения химиотерапии в условиях лейкопенического фона (число лейкоцитов периферической крови не менее 3 х 10/л).

Применение препарата позволяет в короткие сроки добиться нормализации числа лейкоцитов периферической крови и проводить химио- и радиотерапию с планируемыми интервалами.

Ниже приведены некоторые результаты, иллюстрирующие применения «Беталейкина в подобных случаях.

Влияние «БЕТАЛЕЙКИНА на содержание лейкоцитов в периферической крови у больных с миелодепрессией, вызванной цитостатиками (п 35)

Влияние «БЕТАЛЕИКИНА на содержание гранулоцитов и лимфоцитов в периферической крови у больных с миелодепрессией, вызванной цитостатиками (п 29)

Показатели

Абсолютное количество в 1 - до начала химиотерапии -перед применением Бегалейкина на фоне глубокой лейкопении -на фоне применения Бегалейкина -после окончания введения Бегалейкина

Динамика абсолютного количества клеток в мм в результате применения Бегалейкина (в %):

-по отношению к исходному фону

до химиотерапии

-по отношению к уровню лейкопении на фоне применения Беталейкина -по отношению к уровню лейкопении после введения Беталейкина

Как следует из вышеприведенных данных, пятидневный цикл применения «Беталейкина в разовых дозах 10-17 нг/кг массы тела вызывает быстрый (в среднем через 3 дня) и выраженный подъем числа лейкоцитов в периферической крови у больных с индуцированной цитостатиками лейкопенией П-Ш степени. Этот подъем (в среднем на 173%) колеблется в пределах 123-357% от лейкопенического фона, причем, содержание лейкоцитов в периферической крови составляет в среднем 4,, т.е. 273% от наблюдавшегося перед применением «Беталейкина и доходит до 90% от исходного (нормального), зарегистрированного перед началом химиотерапии.

В настоящее время иммуномодулятор нового типа Ъеталейкин получил разрешение МЗ РФ на клиническое использование в качестве средства восстановления нарушений костномозгового кроветворения после курсов радио и химиотерапии и для иммуностимуляции при иммунодефицитных состояниях, вызванных травмами, и на фоне хронических инфекционных заболеваний (регистрационный номер 97/51/6). Кроме того препарат прошел 2 фазу клинических испьгганий

Лимфоци-ты

Гранулоциты (М±т) (М±т)

728 + 66

371+33 524 ± 59

847 ± 77

86,4 ± 9,5

116±24

141 + 11

311+50

228 + 50

317 + 184

Claims (3)

1. Препарат иммуномодулирующего действия, состоящий из растворителя и порошкообразного активного начала на основе цитокинов, отличающийся тем, что активное начало состоит из смеси человеческого сывороточного альбумина и интерлейкина-1-бета.

2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что активное начало содержит альбумина и интерлейкина-1-бета в соотношении 20 - 60 : 1.

3. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве интерлейкин-1-бета представляет собой генно-инженерный продукт, полученный культивированием бактерии Escherichiacoli штамм C600 и выделенный из культуральной жидкости с использованием методов ион-гидрофобной хроматографии.