RU2835503C1 - Method for differential diagnosis of chronic lymphocytic leukemia and b-cell non-hodgkin lymphoma - Google Patents
Method for differential diagnosis of chronic lymphocytic leukemia and b-cell non-hodgkin lymphoma Download PDFInfo
- Publication number
- RU2835503C1 RU2835503C1 RU2023135910A RU2023135910A RU2835503C1 RU 2835503 C1 RU2835503 C1 RU 2835503C1 RU 2023135910 A RU2023135910 A RU 2023135910A RU 2023135910 A RU2023135910 A RU 2023135910A RU 2835503 C1 RU2835503 C1 RU 2835503C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lymphocytes
- proportion
- less
- peripheral blood
- leukocytes
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 67
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 title claims description 68
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 title claims description 33
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 162
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 119
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 104
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 104
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 81
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 claims abstract description 76
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 claims abstract description 76
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 69
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims abstract description 45
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 30
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 claims description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 12
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 9
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 6
- 208000030289 Lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 238000013528 artificial neural network Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000008846 dynamic interplay Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 208000019420 lymphoid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000491 multivariate analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000025366 tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к области медицины, биохимии, иммунологии, онкологии.The present invention relates to the field of medicine, biochemistry, immunology, oncology.
В наши дни методами молекулярной диагностики устанавливается гистогенез, стадия дифференцировки и иммунофенотип опухолевых клеток, свойственный злокачественной зрелоклеточной лимфопролиферации - хроническому лимфоцитарному лейкозу (ХЛЛ) и неходжкинским В-клеточным лимфомам (НХЛ). Своевременная дифференциальная диагностика ХЛЛ и НХЛ в рамках диагностики лимфопролиферативных заболеваний является важной клинической задачей т.к. при схожих симптомах заболеваний подходы к их терапии разнятся.Nowadays, molecular diagnostic methods are used to establish the histogenesis, differentiation stage and immunophenotype of tumor cells, which is characteristic of malignant mature cell lymphoproliferation - chronic lymphocytic leukemia (CLL) and non-Hodgkin's B-cell lymphomas (NHL). Timely differential diagnostics of CLL and NHL in the context of diagnostics of lymphoproliferative diseases is an important clinical task, since approaches to their therapy differ with similar symptoms of the diseases.
ХЛЛ - злокачественное клональное лимфопролиферативное заболевание, характеризующееся накоплением атипичных зрелых CD5/CD19/CD23-положительных В-лимфоцитов преимущественно в крови, костном мозге, реже в лимфатических узлах, печени и селезенке [Chiorazzi N., Rai K.R., Ferrarini М. Chronic lymphocytic leukemia // N Engl J Med. - 2005. - T. 352, вып.8. - С.804-815]. Выявлены сотни маркеров, отражающих особенности этого заболевания [Hallek М. Chronic lymphocytic leukemia: 2020 update on diagnosis, risk stratification and treatment. Am J Hematol. 2019; 94:1266-1287. https://doi.org/10.1002/ajh.25595].CLL is a malignant clonal lymphoproliferative disease characterized by the accumulation of atypical mature CD5/CD19/CD23-positive B-lymphocytes mainly in the blood, bone marrow, and less often in the lymph nodes, liver, and spleen [Chiorazzi N., Rai K.R., Ferrarini M. Chronic lymphocytic leukemia // N Engl J Med. - 2005. - V. 352, issue 8. - P.804-815]. Hundreds of markers reflecting the characteristics of this disease have been identified [Hallek M. Chronic lymphocytic leukemia: 2020 update on diagnosis, risk stratification and treatment. Am J Hematol. 2019; 94:1266-1287. https://doi.org/10.1002/ajh.25595].
При В-клеточных НХЛ (далее - НХЛ) первичное поражение, злокачественная пролиферация зрелых В-лимфоцитов, локализуется в лимфатических узлах, селезенке, печени и вне лимфатических узлов в тканях (не нодальные формы), реже наблюдается лейкемизация костного мозга и выход клеток в кровеносную систему. Это группа онкологических заболеваний, отличающихся между собой по степени злокачественности, скорости развития опухолевого процесса и симптоматике.In B-cell NHL (hereinafter referred to as NHL), the primary lesion, malignant proliferation of mature B-lymphocytes, is localized in the lymph nodes, spleen, liver and tissues outside the lymph nodes (non-nodal forms); less frequently, bone marrow leukemization and cell release into the bloodstream are observed. This is a group of oncological diseases that differ in the degree of malignancy, the rate of tumor development and symptoms.
В охране генетического гомеостаза организма иммунная система использует механизмы, в которых участвует многокомпонентный состав ее клеток и их продуценты. Описаны дисфункции иммунитета, генетические особенности и иммунофенотипы опухолевых В-клеток при зрелоклеточной лимфопролиферации [Д.Б. Казанский. Т-лимфоциты в развитии хронического лимфоцитарного лейкоза. Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. Ж-л Клиническая онкогематология, 2012, Т.5, №2, С. 84-95], [А.И. Свирновский. Хронический лимфоцитарный лейкоз: парадигмы и парадоксы. Медицинские новости. - 2008. - №13. - С. 7-19], [С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. Гематологический атлас, М., 2016, 296], [Кузьмина Е.Г., Мушкарина Т.Ю., Константинова Т.В., Зацаренко С.В. и др., Субпопуляционный состав иммунокомпетентных клеток периферической крови при В-клеточном хроническом лимфоцитарном лейкозе/лимфоме из малых лимфоцитов. Клиническая Онкогематология, 2020, Т. 13, №4 С. 395-405], [Beekman R, Chapaprieta V, Russinol N, et al. The reference epigenome and regulatory chromatin landscape of chronic lymphocytic leukemia. Nat Med. 2018; 24:868-880], [Hacken E, Burger JA. Microenvironment interactions and В cell receptor signaling in chronic lymphocytic leukemia: implications for disease pathogenesis and treatment. In: Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Cell Research, Amsterdam: Elsevier B.V.; 2016, v. 1863.401-13]. Степень нарушения иммунокомпетентности в сочетании с присутствием в крови опухолевых клеток представляют собой комплексный образ (многомерный паттерн), отражающий динамическое взаимодействие в системе «иммунитет-опухоль». Этот многомерный образ, как правило, отражает определенные изменения состава и численности клеток периферической крови. Таким образом, разные патологии крови формируют уникальные паттерны признаков.In maintaining genetic homeostasis of the body, the immune system uses mechanisms that involve the multicomponent composition of its cells and their producers. Dysfunctions of the immune system, genetic features and immunophenotypes of tumor B cells in mature cell lymphoproliferation are described [D.B. Kazansky. T-lymphocytes in the development of chronic lymphocytic leukemia. Clinical oncohematology. Fundamental research and clinical practice. J. Clinical oncohematology, 2012, Vol. 5, No. 2, P. 84-95], [A.I. Chronic lymphocytic leukemia: paradigms and paradoxes. Medical news. - 2008. - No. 13. - P. 7-19], [S.A. Lugovskaya, M.E. Pochtar. Hematological Atlas, Moscow, 2016, 296], [Kuzmina E.G., Mushkarina T.Yu., Konstantinova T.V., Zatsarenko S.V. et al., Subpopulation composition of immunocompetent cells of peripheral blood in B-cell chronic lymphocytic leukemia/small lymphocyte lymphoma. Clinical Oncohematology, 2020, Vol. 13, No. 4, pp. 395-405], [Beekman R, Chapaprieta V, Russinol N, et al. The reference epigenome and regulatory chromatin landscape of chronic lymphocytic leukemia. Nat Med. 2018; 24:868-880], [Hacken E, Burger JA. Microenvironment interactions and B cell receptor signaling in chronic lymphocytic leukemia: implications for disease pathogenesis and treatment. In: Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Cell Research, Amsterdam: Elsevier B.V.; 2016, v. 1863.401-13]. The degree of immunocompetence impairment in combination with the presence of tumor cells in the blood represent a complex image (multidimensional pattern) reflecting the dynamic interaction in the "immunity-tumor" system. This multidimensional image, as a rule, reflects certain changes in the composition and number of peripheral blood cells. Thus, different blood pathologies form unique patterns of signs.
На современном этапе развития науки, для дифференциальной диагностики ХЛЛ и НХЛ необходима не только характеристика их морфогенетических и других молекулярных признаков, но и сопоставление их размерности с качеством противоопухолевого иммунитета.At the current stage of scientific development, for differential diagnostics of CLL and NHL, it is necessary not only to characterize their morphogenetic and other molecular features, but also to compare their dimensions with the quality of antitumor immunity.
Ближайшим аналогом заявленного способа является иммунофенотипирование образцов периферической крови и костного мозга [Луговская С.А., Почтарь М.Е. Гематологический атлас. 4-е издание, дополненное. М.: Триада, 2016. 434 с.], [Российские клинические рекомендации по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний. Под ред. И.В. Поддубной, В.Г. Савченко. М, 2018. 356 с.].The closest analogue of the claimed method is immunophenotyping of peripheral blood and bone marrow samples [Lugovskaya S.A., Pochtar M.E. Hematological Atlas. 4th edition, supplemented. Moscow: Triada, 2016. 434 p.], [Russian clinical guidelines for the diagnosis and treatment of lymphoproliferative diseases. Ed. by I.V. Poddubnaya, V.G. Savchenko. Moscow, 2018. 356 p.].
Для осуществления процедуры иммунофенотипирования клетки в составе исследуемого образца обрабатывают флуоресцентно мечеными моноклональными антителами к различным поверхностным антигенам. Для анализа состава клеточных суспензий используются проточный цитофлуориметр. Исследование производится следующим образом. Лазерный луч направляется на кварцевую кювету, через которую поочередно поступают клетки, вызывая прямое и боковое светорассеяние лазера. На первом этапе производится оценка параметров рассеяния, которые отражают размер и гранулярность клеток в составе исследуемого образца. Данный подход позволяет выделить как минимум три типа клеток: лимфоциты (клетки мелкого размера без зернистости, моноциты (клетки с промежуточными характеристиками), и гранулоциты (клетки более крупного размера с зернистостью). Затем каждый тип клеток может быть проанализирован более детально. Так, при лимфопролиферативных заболеваниях анализируется состав т.н. лимфоцитарного гейта. При облучении клеток лазером происходит испускание монохроматического излучения определенной длины волны за счет антител, специфично связанных с антигенами на поверхности клеток и меченых различными флуорохромами. Оценивая интенсивность эмиссии, лимфоцит относят к определенному типу антигенположительных клеток (Т-, В-, NK-клетки). Сочетание различных флуорохромов и антител позволяет обнаруживать одновременно несколько антигенных детерминант на клетке интересующего типа. Основную проблему при проточной цитофлуориметрии представляет формирование панели моноклональных антител. При диагностике злокачественных лимфом и хронического лимфоцитарного лейкоза основное внимание при иммунофенотипировании уделяется учету бокового светорассеяния для выделения лимфоцитарного гейта, составу набора антител для определения основных характеристик пролиферирующих клеток и их клональности. Указанный метод является трудозатратным в связи с необходимостью забора материала лимфоузлов и костного мозга, а также в связи с необходимостью оценки большого количества различных антигенных детерминант, и, следовательно, использования панелей, включающих большое количество различных антител. Также указанный метод ограничен по точности.To perform the immunophenotyping procedure, the cells in the sample under study are treated with fluorescently labeled monoclonal antibodies to various surface antigens. A flow cytometer is used to analyze the composition of cell suspensions. The study is performed as follows. A laser beam is directed at a quartz cuvette through which cells enter one after another, causing direct and lateral scattering of the laser light. At the first stage, the scattering parameters are assessed, which reflect the size and granularity of the cells in the sample under study. This approach allows us to identify at least three types of cells: lymphocytes (small cells without granularity), monocytes (cells with intermediate characteristics), and granulocytes (larger cells with granularity). Each cell type can then be analyzed in more detail. Thus, in lymphoproliferative diseases, the composition of the so-called lymphocyte gate is analyzed. When cells are irradiated with a laser, monochromatic radiation of a certain wavelength is emitted due to antibodies that are specifically bound to antigens on the cell surface and labeled with various fluorochromes. By assessing the emission intensity, the lymphocyte is assigned to a certain type of antigen-positive cells (T, B, NK cells). The combination of various fluorochromes and antibodies allows us to simultaneously detect several antigenic determinants on a cell of interest. The main problem with flow cytometry is the formation of a panel of monoclonal antibodies. In the diagnosis of malignant lymphomas and chronic lymphocytic leukemia, the main In immunophenotyping, attention is paid to taking into account the side light scattering to isolate the lymphocyte gate, the composition of the antibody set to determine the main characteristics of proliferating cells and their clonality. This method is labor-intensive due to the need to collect material from lymph nodes and bone marrow, as well as due to the need to evaluate a large number of different antigen determinants, and, therefore, the use of panels that include a large number of different antibodies. This method is also limited in accuracy.
Таким образом, техническим результатом заявленного изобретения является снижение трудоемкости процедуры дифференциальной диагностики ХЛЛ и НХЛ, повышение ее точности, а также повышение вероятности выявления заболевания на ранних стадиях заболевания за счет возможности организации исследования, например, в рамках периодического осмотра пациентов, входящих в группу риска развития заболевания.Thus, the technical result of the claimed invention is a reduction in the labor intensity of the procedure for differential diagnostics of CLL and NHL, an increase in its accuracy, as well as an increase in the likelihood of detecting the disease in the early stages of the disease due to the possibility of organizing a study, for example, as part of a periodic examination of patients at risk of developing the disease.
Указанный технический результат достигается за счет способа дифференциальной диагностики хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ) и В-клеточной неходжкинской лимфомы (НХЛ), включающего забор у пациента образца периферической крови, подсчет количества лейкоцитов и лимфоцитов в образце периферической крови, оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+ и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+, в образце периферической крови, при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22%, и доля лимфоцитов HLADR+ составляет не менее 61,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),The specified technical result is achieved by a method for differential diagnosis of chronic lymphocytic leukemia (CLL) and B-cell non-Hodgkin's lymphoma (NHL), including taking a patient's peripheral blood sample, counting the number of leukocytes and lymphocytes in the peripheral blood sample, assessing the proportion of the HLADR+ lymphocyte population, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells, assessing the proportion and identifying B-lymphocytes by CD20+, CD23+ markers and assessing the CD4+/CD8+ immunoregulatory index in a peripheral blood sample, wherein if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers is at least 22%, and the proportion of HLADR+ lymphocytes is at least 61.5% of total lymphocyte count, determine chronic lymphocytic leukemia (CLL),
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22%, доля лимфоцитов HLADR+ составляет менее 61,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ менее 0,3% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is at least 22%, the proportion of HLADR+ lymphocytes is less than 61.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is less than 0.3% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22%, доля лимфоцитов HLADR+ составляет менее 61,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 0,3% от общего количества лимфоцитов определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is at least 22%, the proportion of HLADR+ lymphocytes is less than 61.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 0.3% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85* 109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 79,05% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85* 10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is at least 79.05% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет менее 18,15% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is not less than 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is less than 18.15% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 18,15% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 18.15% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, и доля В-лимфоцитов CD22+ составляет менее 21,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 21.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD22+ is less than 21.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, доля В-лимфоцитов CD22+ составляет не менее 21,5%, и доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 17% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 21.5%, the proportion of B-lymphocytes CD22+ is at least 21.5%, and the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 17% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, доля В-лимфоцитов CD22+ составляет не менее 21,5%, и доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 17% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 21.5%, the proportion of B-lymphocytes CD22+ is at least 21.5%, and the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is at least 17% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 27,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет менее 34,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is at least 27.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is less than 34.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 27,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 34,5% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of CD23+ B-lymphocytes is at least 27.5%, and the proportion of CD20+ B-lymphocytes is at least 34.5% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, и доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 55,5% и менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, and the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 55.5% and less than 56.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет менее 39,4444% и не менее 29,7059% от общего количества лейкоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is less than 39.4444% and at least 29.7059% of the total number of leukocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет не менее 39,4444% от общего количества лейкоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is at least 39.4444% of the total number of leukocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 1 1,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет менее 29,7059% от общего количества лейкоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 1 1.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is less than 29.7059% of the total number of leukocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 44,85%, и доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 28,1% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is at least 44.85%, and the proportion of T-helpers CD4+ is at least 28.1% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 44,85%, и доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 28,1% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is at least 44.85%, and the proportion of T-helpers CD4+ is less than 28.1% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, и иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен менее 0,179131, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, and the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is less than 0.179131, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен не менее 0,179131, и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 24% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, the immunoregulatory index CD4+/ CD8+ is not less than 0.179131, and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is not less than 24% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined,
при этом в случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен не менее 0,179131, и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 24% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).in this case, if the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is not less than 0.179131, and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 24% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
Как вариант, при реализации указанного способа оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+, и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+ в образце периферической крови может проводится методом иммунофенотипирования. При этом, процедура иммунофенотипирования может, например, проводиться с использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным антигенам на клетках иммунной системы методом проточной цитофлуорометрии.Alternatively, when implementing the said method, the assessment of the proportion of the population of HLADR+ lymphocytes, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells, the assessment of the proportion and identification of B-lymphocytes by CD20+, CD23+ markers, and the assessment of the CD4+/CD8+ immunoregulatory index in a peripheral blood sample can be carried out by the immunophenotyping method. In this case, the immunophenotyping procedure can, for example, be carried out using monoclonal antibodies to surface differentiation antigens on cells of the immune system by the flow cytofluorometry method.
Авторами изобретения разработан алгоритм и выполнена серия системных исследований по сопоставлению состояния иммунитета и признаков опухолевого роста по данным периферической крови при ХЛЛ и НХЛ. На первом этапе был проведен многомерный сравнительный анализ данных пациентов с ХЛЛ и НХЛ, а также практически здоровых людей. Проведено клинико-иммунологическое обследование 315 пациентов с ХЛЛ и 352 пациентов с НХЛ. Группу контроля составили данные 184 практически здоровых человека, преимущественно доноров крови; на момент взятия крови у которых не было отклонений в состоянии здоровья. Средний возраст пациентов с ХЛЛ составил 62 года, пациентов с НХЛ - 60 лет, практически здоровых людей - 58 лет. Для определения ХЛЛ и НХЛ использованы критерии классификации ВОЗ опухолей лимфоидной и кроветворной системы: объективный анализ ультразвукового, магнитно-резонансного обследования пациентов, иммуногистохимического исследования материала лимфатических узлов, тканей и костного мозга, иммунофенотипирование опухолевых клеток крови и костного мозга [С.А. Луговская, М. Е. Почтарь. Гематологический атлас, М., 2016, 296].The authors of the invention developed an algorithm and performed a series of systemic studies to compare the state of immunity and signs of tumor growth based on peripheral blood data in CLL and NHL. At the first stage, a multivariate comparative analysis of data from patients with CLL and NHL, as well as practically healthy people, was carried out. A clinical and immunological examination of 315 patients with CLL and 352 patients with NHL was carried out. The control group consisted of data from 184 practically healthy people, mainly blood donors; at the time of blood sampling, they had no deviations in their health. The average age of patients with CLL was 62 years, patients with NHL - 60 years, practically healthy people - 58 years. To determine CLL and NHL, the WHO classification criteria for tumors of the lymphoid and hematopoietic system were used: objective analysis of ultrasound and magnetic resonance examination of patients, immunohistochemical examination of lymph node material, tissues and bone marrow, immunophenotyping of tumor cells in the blood and bone marrow [S.A. Lugovskaya, M.E. Pochtar. Hematological Atlas, Moscow, 2016, 296].
По гемограмме подсчитывали количество лейкоцитов, относительное и абсолютное число лимфоцитов. Состав ядросодержащих клеток оценивали в цельной крови после предварительного лизиса эритроцитов лизирующим раствором фирмы BD Biosciences. Далее в лимфоцитарном гейте определяли фенотипы субпопуляций иммунокомпетентных клеток и опухолевых В-лимфоцитов методами 2-6-цветной проточной цитометрии на приборе FACSCan или FACSCanto II (BD Biosciences) по известной методике [Swerdlow S.H., Campo Е., Pileri S.A. et al. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Blood 2016; 19;127(20):2375-90. DOI: 10.1182/blood-2016-01-643569].The hemogram was used to calculate the number of leukocytes, relative and absolute numbers of lymphocytes. The composition of nucleated cells was assessed in whole blood after preliminary lysis of erythrocytes with a lysis solution from BD Biosciences. Then, in the lymphocyte gate, the phenotypes of subpopulations of immunocompetent cells and tumor B-lymphocytes were determined by 2-6-color flow cytometry on a FACSCan or FACSCanto II device (BD Biosciences) according to the well-known technique [Swerdlow S.H., Campo E., Pileri S.A. et al. The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Blood 2016; 19;127(20):2375-90. DOI: 10.1182/blood-2016-01-643569].
Для многомерного анализа состояния иммунитета и признаков В-клеточной пролиферации для каждого пациента использовано по 13 показателей. Это: количество лейкоцитов, WBC абс, х109 кл/л, доля лимфоцитов (LYM), общих Т-клеток, CD3+CD16-; Т-хелперы, CD3+CD4+; Т-киллеры, CD3+CD8+; иммунорегуляторный индекс, CD4/CD8; процент NK-клеток, (CD16+CD3-); активированных Т-клеток, CD3+HLADR+; HLADR+ лимфоцитов (включает активированные Т-клетки и В-лимфоциты в лимфоцитарном гейте). Идентификация В-лимфоцитов проведена по маркерам CD19+, CD20+, CD23+.For multivariate analysis of the immune status and signs of B-cell proliferation, 13 parameters were used for each patient. These are: the number of leukocytes, WBC abs, x10 9 cells/l, the proportion of lymphocytes (LYM), total T-cells, CD3+CD16-; T-helpers, CD3+CD4+; T-killers, CD3+CD8+; immunoregulatory index, CD4/CD8; the percentage of NK cells, (CD16+CD3-); activated T-cells, CD3+HLADR+; HLADR + lymphocytes (includes activated T-cells and B-lymphocytes in the lymphocyte gate). B-lymphocytes were identified by the markers CD19+, CD20+, CD23+.
Визуализация многомерных данных, характеризующих состояние иммунитета и В-клеточной пролиферации, проведена, используя самоорганизующиеся карты (СОКК, Self Organizing Maps, SOM), разработанные Т. Кохоненом [Kohonen, Essentials of the self-organizing map, Neural Networks 37 (2013) 52-65]. Этим методом многомерные данные проецируются в пространство пониженной размерности и визуализируются в виде двух(трех)мерной карты. На основе карты возможно осуществление кластеризации за счет выделения в ней векторов (показателей анализируемых признаков) пациентов и здоровых людей с близкими (похожими) характеристиками. Авторами изобретения определены показатели в многомерных структурах, контрастирующие данные в исследуемых группах «ХЛЛ», «НХЛ», и «Норма», которые затем использованы для разработки заявленного способа дифференциальной диагностики ХЛЛ и НХЛ.Visualization of multidimensional data characterizing the state of immunity and B-cell proliferation was performed using self-organizing maps (SOCM, Self Organizing Maps, SOM) developed by T. Kohonen [Kohonen, Essentials of the self-organizing map, Neural Networks 37 (2013) 52-65]. This method projects multidimensional data into a low-dimensional space and visualizes them as a two- (three-)dimensional map. Based on the map, clustering can be performed by identifying vectors (indicators of the analyzed features) of patients and healthy people with close (similar) characteristics. The authors of the invention determined the indicators in multidimensional structures, contrasting data in the studied groups "CLL", "NHL", and "Norm", which were then used to develop the claimed method for differential diagnostics of CLL and NHL.
Образы ХЛЛ и НХЛ, полученные с использованием СОКК, позволяют упростить способ дифференциальной диагностики данных заболеваний. Этот подход более прост, менее трудозатратен для дифференциальной диагностики ХЛЛ и НХЛ, и может быть использован для проведения скринингового определения указанных заболеваний.The images of CLL and NHL obtained using the SRCC allow to simplify the method of differential diagnosis of these diseases. This approach is simpler, less labor-intensive for differential diagnosis of CLL and NHL, and can be used for screening determination of these diseases.
Как вариант, заявленный способ может быть реализован следующим образом. У пациента проводится забор образца периферической крови. В полученном образце по гемограмме осуществляется подсчет количества лейкоцитов и лимфоцитов. Затем на проточном цитофлуориметре (FACSCanto II (BD Biosciences), используя метод 2-4-цветной проточной цитофлуориметрии, в образце периферической крови осуществляется оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+ и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+.Alternatively, the claimed method can be implemented as follows. A sample of peripheral blood is taken from the patient. The number of leukocytes and lymphocytes is counted in the obtained sample using a hemogram. Then, using a flow cytometer (FACSCanto II (BD Biosciences) and the 2-4-color flow cytometry method, the peripheral blood sample is assessed for the proportion of the HLADR+ lymphocyte population, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells, the proportion is assessed and B-lymphocytes are identified using CD20+, CD23+ markers, and the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is assessed.
На следующем этапе осуществляется интерпретация полученных данных.The next stage involves interpretation of the obtained data.
1. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22% и доля лимфоцитов HLADR+ составляет не менее 61,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).1. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers is at least 22% and the proportion of HLADR+ lymphocytes is at least 61.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
2. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22% и доля лимфоцитов HLADR+ составляет менее 61,5% и доля В-лимфоцитов CD20+ менее 0,3% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).2. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is at least 22% and the proportion of HLADR+ lymphocytes is less than 61.5% and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is less than 0.3% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
3. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 22%, доля лимфоцитов HLADR+ составляет менее 61,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 0,3% от общего количества лимфоцитов определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).3. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is at least 22%, the proportion of HLADR+ lymphocytes is less than 61.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 0.3% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
4. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22% и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 79,05% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).4. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22% and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is at least 79.05% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
5. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет менее 18,15% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).5. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, and the proportion of B-lymphocytes CD20+ is less than 18.15% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
6. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 18,15% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).6. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers is less than 22%, the proportion of CD23+ B-lymphocytes is less than 79.05%, and the proportion of CD20+ B-lymphocytes is at least 18.15% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
7. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, и доля В-лимфоцитов CD22+ составляет менее 21,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).7. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 21.5%, and the proportion of B-lymphocytes CD22+ is less than 21.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
8. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+составляет менее 22%о, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, доля В-лимфоцитов CD22+ составляет не менее 21,5%, и доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 17% от общего количества лимфоцитов определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).8. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of T-helpers CD4+ is less than 22%, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 79.05%, the proportion of B-lymphocytes CD20+ is at least 21.5%, the proportion of B-lymphocytes CD22+ is at least 21.5%, and the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 17% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
9. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет не менее 11,85*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 22%, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 79,05%, доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 21,5%, доля В-лимфоцитов CD22+ составляет не менее 21,5%, и доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 17% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).9. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is at least 11.85*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers is less than 22%, the proportion of CD23+ B-lymphocytes is less than 79.05%, the proportion of CD20+ B-lymphocytes is at least 21.5%, the proportion of CD22+ B-lymphocytes is at least 21.5%, and the proportion of activated CD3+HLADR+ T-cells is at least 17% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
10. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 27,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет менее 34,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).10. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of CD23+ B-lymphocytes is at least 27.5%, and the proportion of CD20+ B-lymphocytes is less than 34.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
11. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 27,5%, и доля В-лимфоцитов CD20+ составляет не менее 34,5% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).11. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of CD23+ B-lymphocytes is at least 27.5%, and the proportion of CD20+ B-lymphocytes is at least 34.5% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
12. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, и доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 55,5% и менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).12. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, and the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 55.5% and less than 56.5% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
13. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет менее 39,4444% и не менее 29,7059% от общего количества лейкоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).13. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is less than 39.4444% and at least 29.7059% of the total number of leukocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
14. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5% от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет не менее 39,4444% от общего количества лейкоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).14. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is at least 39.4444% of the total number of leukocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
15. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет не менее 56,5%о от общего количества лимфоцитов, и доля лимфоцитов составляет менее 29,7059% от общего количества лейкоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).15. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is at least 56.5% of the total number of lymphocytes, and the proportion of lymphocytes is less than 29.7059% of the total number of leukocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
16. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 44,85%, и доля Т-хелперов CD4+ составляет не менее 28,1% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).16. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is at least 44.85%, and the proportion of T-helpers CD4+ is at least 28.1% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
17. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет не менее 44,85%, и доля Т-хелперов CD4+ составляет менее 28,1% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).17. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is at least 44.85%, and the proportion of T-helpers CD4+ is less than 28.1% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
18. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, и иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен менее 0,179131, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).18. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, and the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is less than 0.179131, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
19. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен не менее 0,179131, и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет не менее 24% от общего количества лимфоцитов, определяют хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).19. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is not less than 0.179131, and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is not less than 24% of the total number of lymphocytes, chronic lymphocytic leukemia (CLL) is determined.
20. В случае, если абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составляет менее 11,85*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 27,5%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составляет менее 55,5%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составляет менее 44,85% от общего количества лимфоцитов, иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен не менее 0,179131, и доля В-лимфоцитов CD23+ составляет менее 24% от общего количества лимфоцитов, определяют неходжкинскую лимфому (НХЛ).20. If the absolute number of leukocytes in the peripheral blood is less than 11.85*10 9 /l, the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 27.5%, the proportion of T-cytotoxic lymphocytes CD8+ is less than 55.5%, the proportion of activated T-cells CD3+HLADR+ is less than 44.85% of the total number of lymphocytes, the immunoregulatory index CD4+/CD8+ is at least 0.179131, and the proportion of B-lymphocytes CD23+ is less than 24% of the total number of lymphocytes, non-Hodgkin's lymphoma (NHL) is determined.
На фиг.1 представлена схема реализации указанного способа.Fig. 1 shows a diagram of the implementation of the specified method.
На фиг.2 представлена ROC-кривая, характеризующая точность (качество) предложенного способа.Fig. 2 shows the ROC curve characterizing the accuracy (quality) of the proposed method.
Полученное значение AUC (площади, ограниченной ROC-кривой и осью абсцисс) свидетельствует о высокой точности заявленного способа. Чем значение AUC ближе к 1, тем выше качество предложенной модели.The obtained AUC value (area bounded by ROC curve and abscissa axis) indicates high accuracy of the claimed method. The closer the AUC value is to 1, the higher the quality of the proposed model.
Заявленное изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами.The claimed invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Реализация заявленного способаExample 1. Implementation of the claimed method
У пациента М. проводился забор образца периферической крови. В полученном образце по гемограмме определялась доля и количество лимфоцитов. Затем на проточном цитофлуориметре (FACSCanto II (BD Biosciences), используя метод 2-4-цветной проточной цитофлуориметрии осуществлялась оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+ и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+. Абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составила 12,91*109/л, доля Т-хелперов CD4+ составила 23%, доля лимфоцитов HLADR+ составила 56,5%, доля В-лимфоцитов CD20+ составила 0,2% от общего количества лимфоцитов. У пациента определен хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ).A peripheral blood sample was taken from patient M. The proportion and number of lymphocytes in the obtained sample were determined using a hemogram. Then, on a flow cytometer (FACSCanto II (BD Biosciences) using the 2-4-color flow cytometry method, the proportion of the HLADR+ lymphocyte population, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells, the proportion and identification of B-lymphocytes by CD20+, CD23+ markers and the immunoregulatory index CD4+/CD8+ were assessed. The absolute number of leukocytes in the peripheral blood was 12.91*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers was 23%, the proportion of HLADR+ lymphocytes was 56.5%, the proportion of CD20+ B-lymphocytes was 0.2% of the total number of lymphocytes. The patient was diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL).
Пример 2. Реализация заявленного способаExample 2. Implementation of the claimed method
У пациента Е. проводился забор образца периферической крови. В полученном образце по гемограмме определялась доля и количество лимфоцитов. Затем на проточном цитофлуориметре (FACSCanto II (BD Biosciences), используя метод 2-4-цветной проточной цитофлуориметрии осуществлялась оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+ и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+. Абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составило 13,43*109/л, доля Т-хелперов CD4+составило 19%о, доля В-лимфоцитов CD23+ составило 69,12%, доля В-лимфоцитов CD20+ составила 23,1%, доля В-лимфоцитов CD22+ составила 22,0%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составила 19% от общего количества лимфоцитов. У пациента определена неходжкинская лимфома (НХЛ),A peripheral blood sample was taken from patient E. The proportion and number of lymphocytes in the obtained sample were determined using a hemogram. Then, on a flow cytometer (FACSCanto II (BD Biosciences), using the method of 2-4-color flow cytofluorimetry, the proportion of the population of HLADR+ lymphocytes, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells was assessed, the proportion and identification of B-lymphocytes by CD20+, CD23+ markers and the immunoregulatory index CD4+/ CD8+ were assessed. The absolute number of leukocytes in the peripheral blood was 13.43*10 9 /l, the proportion of CD4+ T-helpers was 19%, the proportion of CD23+ B-lymphocytes was 69.12%, the proportion of CD20+ B-lymphocytes was 23.1%, the proportion of CD22+ B-lymphocytes was 22.0%, the proportion of activated CD3+HLADR+ T cells accounted for 19% of the total lymphocyte count. The patient was diagnosed with non-Hodgkin's lymphoma (NHL),
Пример 3. Реализация заявленного способа.Example 3. Implementation of the claimed method.
У пациента В. проводился забор образца периферической крови. В полученном образце по гемограмме определялась доля и количество лимфоцитов. Затем на проточном цитофлуориметре (FACSCanto II (BD Biosciences), используя метод 2-4-цветной проточной цитофлуориметрии осуществлялась оценка доли популяции лимфоцитов HLADR+, Т-хелперов CD4+, Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+, активированных Т-клеток CD3+HLADR+, оценка доли и идентификация В-лимфоцитов по маркерам CD20+, CD23+ и оценка иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+. Абсолютное количество лейкоцитов в периферической крови составило 10,56*109/л, доля В-лимфоцитов CD23+ составило 25,0%, доля Т-цитотоксических лимфоцитов CD8+ составило 53,8%, доля активированных Т-клеток CD3+HLADR+ составило 44,67% от общего количества лимфоцитов, иммунорегуляторный индекс CD4+/ CD8+ равен 0,186543, доля В-лимфоцитов CD23+ составило 25% от общего количества лимфоцитов. У пациента определен хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ),A peripheral blood sample was taken from patient V. The proportion and number of lymphocytes in the obtained sample were determined using a hemogram. Then, on a flow cytometer (FACSCanto II (BD Biosciences), using the method of 2-4-color flow cytofluorimetry, the proportion of the population of HLADR+ lymphocytes, CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic lymphocytes, CD3+HLADR+ activated T-cells, the proportion and identification of B-lymphocytes by CD20+, CD23+ markers and the assessment of the CD4+/CD8+ immunoregulatory index were assessed. The absolute number of leukocytes in the peripheral blood was 10.56*10 9 /l, the proportion of CD23+ B-lymphocytes was 25.0%, the proportion of CD8+ T-cytotoxic lymphocytes was 53.8%, the proportion of CD3+HLADR+ activated T-cells was 44.67% of the total number of lymphocytes, the immunoregulatory index CD4+/ CD8+ is 0.186543, the proportion of B-lymphocytes CD23+ was 25% of the total number of lymphocytes. The patient was diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL),
Пример 4. Сравнительная оценка точности заявленного способа. В рамках оценки точности анализа в дифференциальном определении ХЛЛ и НХЛ с использованием заявленного способа было проведено рандомизированное сравнительное исследование 10 пациентов с диагнозом ХЛЛ, 10 пациентов с диагнозом НХЛ заявленным способом, а также контрольным способом, включающим определение иммунофенотипа лимфоцитов периферической крови (в соответствии с ближайшим аналогом заявленного изобретения). Для подтверждения диагноза (эталонный способ определения ХЛЛ) выполнено ультразвуковое, магнитно-резонансное исследование, иммуногистохимическое исследование материала лимфатических узлов и иммунофенотипирование образцов периферической крови и костного мозга [Луговская С.А., Почтарь М.Е. Гематологический атлас. 4-е издание, дополненное. М.: Триада, 2016. 434 с.], [Российские клинические рекомендации по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний. Под ред. И.В. Поддубной, В.Г. Савченко. М., 2018. 356 с.].Example 4. Comparative evaluation of the accuracy of the claimed method. As part of the evaluation of the accuracy of the analysis in the differential determination of CLL and NHL using the claimed method, a randomized comparative study of 10 patients diagnosed with CLL, 10 patients diagnosed with NHL was conducted using the claimed method, as well as a control method, including determination of the immunophenotype of peripheral blood lymphocytes (in accordance with the closest analogue of the claimed invention). To confirm the diagnosis (the reference method for determining CLL), an ultrasound, magnetic resonance examination, immunohistochemical examination of lymph node material and immunophenotyping of peripheral blood and bone marrow samples were performed [Lugovskaya S.A., Pochtar M.E. Hematological Atlas. 4th edition, supplemented. Moscow: Triada, 2016. 434 p.], [Russian Clinical Guidelines for the Diagnosis and Treatment of Lymphoproliferative Diseases. Ed. by I.V. Poddubnoy, V.G. Savchenko. M., 2018. 356 p.].
Результаты исследования приведены в таблице 1.The results of the study are presented in Table 1.
По результатам сравнительной оценки точности анализа с использованием заявленного способа было установлено, что данный способ позволяет производить дифференциальную диагностику ХЛЛ и НХЛ с большей точностью, чем контрольный способ. При этом использование заявленного способа позволяет снизить трудоемкость процедуры определения при повышении ее точности.Based on the results of a comparative assessment of the accuracy of the analysis using the claimed method, it was found that this method allows for differential diagnostics of CLL and NHL with greater accuracy than the control method. At the same time, the use of the claimed method allows for a reduction in the labor intensity of the determination procedure while increasing its accuracy.
Claims (36)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2835503C1 true RU2835503C1 (en) | 2025-02-25 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2052199C1 (en) * | 1992-06-15 | 1996-01-10 | Елена Тарасовна Дудко | Method for differential diagnosis of chronic lymphoid leukoses and leukemization of non-hodgkin's diseases |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2052199C1 (en) * | 1992-06-15 | 1996-01-10 | Елена Тарасовна Дудко | Method for differential diagnosis of chronic lymphoid leukoses and leukemization of non-hodgkin's diseases |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ВОЙЦЕХОВСКИЙ В.В. и др. Хронический лимфолейкоз. Благовещенск, 2015, 178 c. PALMA M. et al. T cells in chronic lymphocytic leukemia display dysregulated expression of immune checkpoints and activation markers. Haematologica. 2017 Mar; 102(3): 562-572. Epub 2016 Dec 7. CRAIG F.E. et al. Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms. Blood. 2008 Apr 15; 111(8): 3941-67. Epub 2008 Jan 15. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Stetler-Stevenson et al. | Diagnostic utility of flow cytometric immunophenotyping in myelodysplastic syndrome | |
| KR102268963B1 (en) | A method and kit for cancer diagnostics or predict response to treatment by evaluating cancer immunity in peripheral blood by machine learning technique | |
| Hamdy et al. | Circulating prostate specific antigen‐positive cells correlate with metastatic prostate cancer | |
| Fleisher et al. | Flow cytometry | |
| JP2018185316A (en) | Method for detecting circulating tumor cells and method for diagnosing cancer in a mammalian subject | |
| US20130078667A1 (en) | Methods for detecting and collecting circulating tumor cells | |
| JPH02500297A (en) | Method and apparatus for automatic assessment of the immunoregulatory status of the mononuclear leukocyte immune system | |
| Choi et al. | Diagnostic value of peripheral blood immune profiling in colorectal cancer | |
| WO2000042431A1 (en) | Methods and assay kits for detecting mononuclear cell phenotype | |
| de Tute | Flow cytometry and its use in the diagnosis and management of mature lymphoid malignancies | |
| KR20200052356A (en) | How to predict response to immunotherapy | |
| Liu et al. | The potential diagnostic power of CD138+ microparticles from the plasma analysis for multiple myeloma clinical monitoring | |
| Fisher et al. | Immunophenotyping lymphomas in dogs: a comparison of results from fine needle aspirate and needle biopsy samples | |
| JP5800149B2 (en) | Target cell detection method | |
| RU2835503C1 (en) | Method for differential diagnosis of chronic lymphocytic leukemia and b-cell non-hodgkin lymphoma | |
| JP5791095B2 (en) | Method for detecting PNH type leukocytes | |
| RU2831405C1 (en) | Method for detecting b-cell non-hodgkin lymphoma | |
| RU2835466C1 (en) | Method for determining chronic lymphocytic leukaemia | |
| Rout et al. | Clinical outcome and Ki67 evaluation in dogs with nodal small cell B‐cell lymphoma diagnosed by flow cytometry | |
| US10557849B2 (en) | Diagnostic of chronic myelomonocytic leukemia (CMML) by flow cytometry | |
| CN117222880A (en) | Threshold gating for flow cytometry methods | |
| Ahmad et al. | Flow cytometric analysis: four-year experience in a Tertiary Care Centre of Pakistan | |
| Biggerstaff et al. | Enumeration of leukocyte infiltration in solid tumors by confocal laser scanning microscopy | |
| Pastoret et al. | Integration of Immature granulocytes quantification with the version 2.0 UniCel DxH 800 in the hematoFlow strategy | |
| JP4768706B2 (en) | A multidimensional detection method for abnormal phenotypes in neoplastic cells used to monitor minimal disease levels using fluid cytometry |