RU2809022C2 - Агонисты стимулятора генов интерферона sting - Google Patents
Агонисты стимулятора генов интерферона sting Download PDFInfo
- Publication number
- RU2809022C2 RU2809022C2 RU2020130864A RU2020130864A RU2809022C2 RU 2809022 C2 RU2809022 C2 RU 2809022C2 RU 2020130864 A RU2020130864 A RU 2020130864A RU 2020130864 A RU2020130864 A RU 2020130864A RU 2809022 C2 RU2809022 C2 RU 2809022C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sting
- ring
- compound
- groups
- mmol
- Prior art date
Links
- 239000000556 agonist Substances 0.000 title abstract description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 47
- 101000643024 Homo sapiens Stimulator of interferon genes protein Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 102100035533 Stimulator of interferon genes protein Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 14
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 22
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 21
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- -1 methylenedioxy, difluoromethylenedioxy, ethylenedioxy Chemical group 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 15
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 13
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 9
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 8
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 8
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- XRILCFTWUCUKJR-INFSMZHSSA-N 2'-3'-cGAMP Chemical compound C([C@H]([C@H]1O)O2)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](N4C5=NC=NC(N)=C5N=C4)O[C@@H]3COP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H]2N1C=NC2=C1NC(N)=NC2=O XRILCFTWUCUKJR-INFSMZHSSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100031256 Cyclic GMP-AMP synthase Human genes 0.000 description 6
- 108030002637 Cyclic GMP-AMP synthases Proteins 0.000 description 6
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000002849 thermal shift Methods 0.000 description 5
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 4
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 4
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 4
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 4
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 229940044665 STING agonist Drugs 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical compound BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 3
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical group C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- 125000006714 (C3-C10) heterocyclyl group Chemical group 0.000 description 2
- QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O[Si](C)(C)C(C)(C)C)C1 QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JBZVWABPSHNPIK-UHFFFAOYSA-N Ethyl-2-amino-1-cyclohexene-1-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1=C(N)CCCC1 JBZVWABPSHNPIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 2
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 2
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 2
- SJZAPSHKTOTRBQ-UHFFFAOYSA-N [dimethylamino(triazolo[4,5-b]pyridin-1-yl)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2[N+](=C(N(C)C)N(C)C)N=NC2=N1 SJZAPSHKTOTRBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 125000004855 decalinyl group Chemical group C1(CCCC2CCCCC12)* 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 125000005879 dioxolanyl group Chemical group 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 2
- XIURVKGLLDXVNH-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-5-fluoro-4-methoxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(F)=C(OC)C=C1N XIURVKGLLDXVNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGDFKKGHOXGSGL-UHFFFAOYSA-N methyl 5-fluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]-4-methoxybenzoate Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(C(=O)OC)C=C(C(=C1)OC)F WGDFKKGHOXGSGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N methyl anthranilate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1N VAMXMNNIEUEQDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000006574 non-aromatic ring group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002868 norbornyl group Chemical group C12(CCC(CC1)C2)* 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000475 sulfinyl group Chemical group [*:2]S([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 2
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 2
- 125000006272 (C3-C7) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- SEPPVOUBHWNCAW-FNORWQNLSA-N (E)-4-oxonon-2-enal Chemical compound CCCCCC(=O)\C=C\C=O SEPPVOUBHWNCAW-FNORWQNLSA-N 0.000 description 1
- XTJUPKRRBZQDSL-UHFFFAOYSA-N 2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]-4,5-dimethylbenzoic acid Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(C(=O)O)C=C(C(=C1)C)C XTJUPKRRBZQDSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJTNUTLIAQZGHU-UHFFFAOYSA-N 3-(1h-imidazol-2-yl)pyridazine Chemical compound C1=CNC(C=2N=NC=CC=2)=N1 RJTNUTLIAQZGHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLBZPESJRQGYMB-UHFFFAOYSA-N 4-one Natural products O1C(C(=O)CC)CC(C)C11C2(C)CCC(C3(C)C(C(C)(CO)C(OC4C(C(O)C(O)C(COC5C(C(O)C(O)CO5)OC5C(C(OC6C(C(O)C(O)C(CO)O6)O)C(O)C(CO)O5)OC5C(C(O)C(O)C(C)O5)O)O4)O)CC3)CC3)=C3C2(C)CC1 LLBZPESJRQGYMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEDHNJSBVURTND-UHFFFAOYSA-N 6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carboxylic acid Chemical compound N1=NC(C(=O)O)=CC=C1N1C=NC=C1 QEDHNJSBVURTND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037435 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Human genes 0.000 description 1
- 101710127675 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Proteins 0.000 description 1
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 101001011382 Homo sapiens Interferon regulatory factor 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001082060 Homo sapiens Interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 3 Proteins 0.000 description 1
- 101150007193 IFNB1 gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100029843 Interferon regulatory factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101100043703 Mus musculus Sting1 gene Proteins 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CIUQDSCDWFSTQR-UHFFFAOYSA-N [C]1=CC=CC=C1 Chemical compound [C]1=CC=CC=C1 CIUQDSCDWFSTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N [[(z)-(1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidene)amino]oxy-morpholin-4-ylmethylidene]-dimethylazanium;hexafluorophosphate Chemical compound F[P-](F)(F)(F)(F)F.CCOC(=O)C(\C#N)=N/OC(=[N+](C)C)N1CCOCC1 GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- TUCNEACPLKLKNU-UHFFFAOYSA-N acetyl Chemical compound C[C]=O TUCNEACPLKLKNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 108091005764 adaptor proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035181 adaptor proteins Human genes 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002490 anilino group Chemical group [H]N(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000002178 anthracenyl group Chemical group C1(=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C12)* 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 1
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000003828 azulenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 125000002529 biphenylenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3C12)* 0.000 description 1
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N c-di-GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](N4C5=C(C(NC(N)=N5)=O)N=C4)O[C@@H]3COP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 125000002676 chrysenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=C4C=CC=CC4=C3C=CC12)* 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003678 cyclohexadienyl group Chemical group C1(=CC=CCC1)* 0.000 description 1
- 125000000596 cyclohexenyl group Chemical group C1(=CCCCC1)* 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000640 cyclooctyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002433 cyclopentenyl group Chemical group C1(=CCCC1)* 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- QUPDWYMUPZLYJZ-UHFFFAOYSA-N ethyl Chemical compound C[CH2] QUPDWYMUPZLYJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHPMUQSWDSFUOE-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]cyclohexene-1-carboxylate Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(CCCC1)C(=O)OCC NHPMUQSWDSFUOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 125000003983 fluorenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3CC12)* 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 125000002192 heptalenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000050022 human STING1 Human genes 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005746 immune checkpoint blockade Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 125000003427 indacenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- FDTBFAYFEHKJLV-UHFFFAOYSA-M lithium 2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]-5-methoxybenzoate Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(C(=O)[O-])C=C(C=C1)OC.[Li+] FDTBFAYFEHKJLV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ODSAJRWPLSVEHJ-UHFFFAOYSA-M lithium 4,5-difluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]benzoate Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(C(=O)[O-])C=C(C(=C1)F)F.[Li+] ODSAJRWPLSVEHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WVYKTAVGSZKIQG-UHFFFAOYSA-M lithium 4-fluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]-5-methylbenzoate Chemical compound N1(C=NC=C1)C1=CC=C(N=N1)C(=O)NC1=C(C(=O)[O-])C=C(C(=C1)F)C.[Li+] WVYKTAVGSZKIQG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N methyl Chemical compound [CH3] WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006682 monohaloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 125000005003 perfluorobutyl group Chemical group FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)* 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001792 phenanthrenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3C=CC12)* 0.000 description 1
- 125000006684 polyhaloalkyl group Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002810 primary assay Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000001725 pyrenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- DHHKPEUQJIEKOA-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-[6-(nitromethyl)-6-bicyclo[3.2.0]hept-3-enyl]acetate Chemical compound C1C=CC2C(CC(=O)OC(C)(C)C)(C[N+]([O-])=O)CC21 DHHKPEUQJIEKOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001935 tetracenyl group Chemical group C1(=CC=CC2=CC3=CC4=CC=CC=C4C=C3C=C12)* 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000003960 triphenylenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3C3=CC=CC=C3C12)* 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к группе соединений, представленных структурными формулами в п. 1 формулы изобретения, которые обладают агонистической биологической активностью стимулятора генов интерферона (STING) и которые могут найти свое применение в медицине при лечении опухолей у страдающих ими пациентов. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 2 пр.
Description
Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на выдачу патента США №62/633409, поданной 21 февраля 2018 года, раскрытие которой во всей своей полноте включено в настоящий документ посредством ссылки.
Заявление о государственной поддержке
Настоящее изобретение было разработано при государственной поддержке в рамках гранта №СА200970-02, выданного Национальными институтами здравоохранения. Правительство имеет определенные права на настоящее изобретение.
Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Сигнальный путь cGAS-STING играет решающую роль во врожденном иммунном ответе, который клетки организма млекопитающих вырабатывают для уничтожения различных ДНК- и РНК-вирусов. STING (стимулятор генов интерферона) представляет собой резидентный сигнальный белок эндоплазматического ретикулума (ER), частично локализованный на митохондриальных мембранах, который широко экспрессируется как у иммуноцитов, так и отличных от иммуноцитов клеток. В ответ на циклические динуклеотиды (CDN), в том числе 2'-3' cGAMP, вырабатываемый в ответ на цитозольную ДНК с участием циклической GMP-AMP-синтазы (cGAS), STING перемещается в перинуклеарный участок, где быстро индуцирует ТВК1-/IRF3-зависимую выработку интерферона I типа (IFN) и провоспалительных цитокинов. Также было обнаружено, что STING напрямую связывает цитозольную ДНК, хотя физиологическое значение прямой ДНК-распознающей активности еще предстоит полностью охарактеризовать.
В ходе недавних исследований было продемонстрировано, что STING играет важную роль в иммунных ответах на опухолевые клетки. Эффективное инициируемое опухолью примирование Т-клеток в опухолевом микроокружении нуждается в выработке интерферона-бета (IFN-b) резидентными дендритными клетками, и было продемонстрировано, что экспрессия IFN-b зависит от активации пути STING (1). Действительно, было продемонстрировано, что внутриопухолевая доставка нуклеотидных агонистов STING вызывает глубокую регрессию развившихся опухолей у изогенных модельных мышей (1). Кроме того, было продемонстрировано, что активация пути STING в значительной степени способствует развитию противоопухолевого эффекта от облучения посредством развития опосредованного IFN-b иммунного ответа в облученном опухолевом микроокружении.
Краткое раскрытие настоящего изобретения
В соответствии с различными вариантами осуществления, настоящее изобретение относится к агонисту стимулятора генов интерферона (STING), который можно применять при лечении опухолей.
Например, настоящее изобретение может относиться к способу стимуляции экспрессии генов интерферона, предусматривающему введение пациенту эффективной дозы агониста стимулятора генов интерферона (STING), представляющего собой соединение с формулой (I) (ниже), и к способу лечения опухоли у пациента, предусматривающему введение пациенту эффективной дозы агониста стимулятора генов интерферона (STING), представляющего собой соединение с формулой (I):
где каждый R1 независимо представляет собой (С1-С4)алкил или CN, nr1 равно 0, 1, 2 или 3, при условии, что каждый R1 связан с атомом углерода; и
AR представляет собой группу с формулой -C(=O)N(R)Ar1;
где Аг1 выбран из группы, состоящей из:
и где волнистой линией указано положение связи; где любой Ar1 замещен nr2 раза независимо выбранными группами R2, которые выбраны из группы, состоящей из:
-(С1-С4)-алкила, -(С1-С4)-алкил-O, -(С1-С4)-алкил-ОС(O), -CN, -галогена, -(С3-С7)-циклоалкила, -(С1-С4)-алк-ОС(O), -СООН, (С3-С7)-циклоалкил-ОС(O), -CN, -F, -CI, -SF5, -метилендиокси, -дифторметилендиокси, -этилендиокси, -CF3, -OCF3, -C(O)NH2, -C(O)NH(CH2)2OH, -СН2ОН, -NR2, -С(/)ONH-аргинина, -C(O)O(CH2)2NR2,
; где волнистой линией указано положение связи; и пг2 равно 0, 1, 2 или 3; или
AR представляет собой группу с формулой:
где R3 выбран из группы, состоящей из
(С1-С4)-алкила, (С1-С4)-алкил-0, (С1-С4)-алкил-ОС(O), CN, галогена, (С3-С7)-циклоалкила, (С1-С4)-алк-ОС(O), СООН, (С3-С7)-циклоалкил-ОС(O), CN, F, CI, -SF5, метилендиокси, дифторметилендиокси, этилендиокси, CF3, -OCF3, CONH2, CONH(CH2)2OH, СН2ОН, NR2, CONH-аргинина и C(O)O(CH2)2NR2; и nr3 равно 0, 1, 2 или 3;
или его фармацевтически приемлемую соль.
Более конкретно, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I), где n1 равно 0; или n1 равно 1 или 2, и R1 представляет собой метил.
Более конкретно, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I),
где X представляет собой метиловый, этиловый или изопропиловый эфир карбоновой кислоты. Кроме того, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I), где X представляет собой 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-ол-2-ильную группу. Кроме того, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I), где Ar представляет собой фенил. Кроме того, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I). Кроме того, способ можно осуществить с применением соединения с формулой (I), где R2 независимо выбран из фтора, хлора, (С1-С4)-алкила, трифторметила или циано, и n2 равно 1 или 2; или два R2 вместе образуют метилендиоксигруппу.
Дополнительно, способ по настоящему изобретению можно осуществить с применением эффективной дозы любого из конкретных раскрываемых в настоящей заявке соединений; см., например, таблицы 1, 2 и 5.
В соответствии с различными вариантами осуществления, способ лечения опухоли может дополнительно предусматривать введение эффективной дозы соединения с формулой (I) или любого из конкретных раскрываемых в настоящем документе соединений путем перорального или внутриопухолевого введения или как первого, так и второго.
В соответствии с различными вариантами осуществления, способ лечения опухоли может дополнительно предусматривать введение эффективной дозы соединения с формулой (I) или любого из конкретных раскрываемых в настоящем документе соединений, причем введение предусматривает введение пациенту соединения в виде конъюгата антитело-лекарственное средство или в составе липосомы.
В соответствии с различными вариантами осуществления, способ лечения опухоли может дополнительно предусматривать введение эффективной дозы соединения с формулой (I) или любого из конкретных раскрываемых в настоящем документе соединений, дополнительно предусматривающий введение эффективной дозы лекарственного средства, целенаправленно воздействующего на контрольные точки иммунного ответа. Например, лекарственное средство, целенаправленно воздействующее на контрольные точки иммунного ответа, может представлять собой антитело к PD-L1, антитело к PD-1, антитело к CTLA-4 или антитело к 4-1 ВВ.
В соответствии с различными вариантами осуществления, способ лечения опухоли может дополнительно предусматривать введение эффективной дозы соединения с формулой (I) или любого из конкретных раскрываемых в настоящем документе соединений, дополнительно предусматривая применение ионизирующего излучения или противораковых лекарственных средств.
Настоящее изобретение также может относиться к новому соединению с формулой (I), которое раскрыто и заявлено в настоящем документе.
Краткое описание чертежей
Фигура 1: клетки дикого типа и клетки STING КО ТНР-1 с ISRE-содержащим люциферазным репортером обрабатывали возрастающими дозами 2'3'-cGAMP и через 48 часов после обработки оценивали репортерную активность (люминесценцию) (А). Отсутствие экспрессии белка STING в клетках STING КО ТНР-1 подтверждали с помощью вестерн-блоттинга с применением гамма-тубулина в качестве контрольного белка загрузки (В). Клетки дикого типа и клетки STING КО ТНР-1 с репортером обрабатывали возрастающими дозами соединения 164 (соед. 164) и через 24 часа после обработки оценивали репортерную активность и жизнеспособность клеток (C-D).
Фигура 2: клетки дикого типа и клетки STING КО ТНР-1 стимулировали поли(dA:dT), известным активатором как RIG-I, так и cGAS-зависимых сигнальных каскадов, и спустя 48 часов с помощью qPCR (А) оценивали экспрессию последующего в каскаде целевого гена. Клетки дикого типа и клетки STING КО ТНР-1 стимулировали 2'3'-cGAMP или соед. 164 в указанных дозах и с помощью анализа экспрессии гена IFNB1 (В) и стимулируемых интерфероном генов IFIT3 (С) и CXCL10 (D) оценивали активацию передачи сигналов с участием интерферона I типа.
Фигура 3: С-концевой домен человеческого белка STING (аминокислоты 138-379) инкубировали с 2'3'-cGAMP [100 мкМ] (А) или соед. 181 [100 мкМ] (В) и с 1× флуоресцентным красителем с последующим воздействием повышающейся температуры. Температуру плавления (Tm) рассчитывали с помощью способа производных и путем нормализации к соответствующему контрольному наполнителю (С) получали индуцированное связыванием с лигандом изменение температуры плавления (ΔTm).
Подробное раскрытие настоящего изобретения
Существует значительный интерес к разработке агонистов пути STING для различных иммуноонкологических задач. Что особенно важно, агонисты пути STING имеют важное потенциальное применение в качестве части комбинированной терапии с применением лекарственных средств, целенаправленно воздействующих на контрольные точки иммунного ответа, на пациентах, которые не отвечают на одну лишь блокаду контрольных точек.
Нами была создана надежная платформа для выявления ненуклеотидных низкомолекулярных агонистов STING. Это было установлено с помощью первичного анализа с задействованием линии человеческих клеток ТНР-1, несущих IRF-индуцируемый репортер с 5 копиями элемента, отвечающего на передачу сигнала с участием IFN. При скрининговых анализах для изучения избирательности и селективности лекарственных средств с задействованием альтернативных репортерных конструкций используют анализы на клетках грызунов, а также нокаутные по cGAS и STING линии клеток для устранения артефактов с люциферазой и обеспечения межвидовой реактивности между видами человека и грызуна, а также селективности к определенному сигнальному пути. Для выявления конкретной мишени указанных соответствий используют биохимические анализы с задействованием ферментативной активности cGAS и анализы связывания с белком STING. На сегодняшний день по результатам первоначального скрининга ~100000 соединений нами было выявлено по меньшей мере одно новое, хорошо отличимое, стоящее соединение 164 с остовом агониста STING, таблица 1 (ЕС50 ~1 мкМ, таблица 1), которое индуцирует стимулируемую интерфероном экспрессию генного паттерна у клеток соответствующего типа и экспрессию белка IFNI типа у РВМС человека с эффективностью, сравнимой с наблюдаемой для 2'-3' cGAMP. Наблюдаемая активность соединения 164, таблица 1, у клеток дикого типа и у нокаутных по cGAS клеток, а также наблюдаемое отсутствие активности у нокаутных по STING клеток свидетельствует о том, что этот ряд соединений реализует свою функцию путем прямого действия в качестве агонистов STING Дополнительные доказательства представлены данными теплового сдвига у белка STING Предварительная работа в области медицинской химии, предусматривающая разработку, синтез и тестирование ~100 аналогов в серии, позволила выявить ключевые элементы молекулы, которые необходимы для активности, и привела к выявлению производных с ~10-кратным улучшением клеточной эффективности (например, путем изменения схемы замещения в анилиновом кольце) и ~50-кратным повышением стабильности в плазме крови (путем изменения размера заместителя сложноэфирной группы).
«Проведение лечения» или «лечение» в контексте настоящего документа означает облегчение симптомов, связанных с нарушением или заболеванием, или подавление дальнейшего прогрессирования или ухудшения данных симптомов, или предупреждение или профилактику заболевания или нарушения, или излечение заболевания или нарушения. Аналогичным образом, в контексте настоящего документа «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» соединения по настоящему изобретению означает количество соединения, которое облегчает, полностью или частично, симптомы, связанные с нарушением или патологическим состоянием, или останавливает или замедляет дальнейшее прогрессирование или ухудшение этих симптомов, или предупреждает развитие или обеспечивает профилактику нарушения или патологического состояния. В частности, «терапевтически эффективное количество» обозначает количество, которое является эффективным в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество также является таким количеством, при котором любые токсические или пагубные эффекты соединений по настоящему изобретению перевешиваются терапевтически благоприятными эффектами.
Выражение «эффективное количество», при его использовании для описания терапевтического лечения страдающего нарушением индивидуума, обозначает количество или концентрацию соединения по настоящему изобретению, которые эффективны для ингибирования или иного действия на STING в тканях индивидуума, при этом STING вовлечен в развитие нарушения, причем такое ингибирование или иное действие представлено в степени, достаточной для достижения благоприятного терапевтического эффекта.
Термин «фармацевтически приемлемые соли» обозначает нетоксичные соли присоединения неорганических или органических кислот и/или оснований, см., например, публикацию Lit et al., Salt Selection for Basic Drugs (1986), Int J. Pharm., 33, 201-217, включенную в настоящий документ посредством ссылки.
Для химических групп использованы стандартные сокращения, такие как хорошо известные в данной области, например: Me=метил, Et=этил, i-Pr=изопропил, Bu=бутил, t-Bu=трет-бутил, Ph=фенил, Bn=бензил, Ас=ацетил, Bz=бензоил и т.д.
Термины «галоген», или «галогенид», или «галоид» сами по себе или как часть другого заместителя означают, если не указано иное, атом фтора, хлора, брома или йода, предпочтительно фтора, хлора или брома.
К «галогеналкильной» группе относятся моногалогеналкильные группы, полигалогеналкильные группы, в которых все атомы галогена могут быть одинаковыми или различаться, и пергалогеналкильные группы, в которых все атомы водорода заменены одинаковыми или различными атомами галогена, такими как атомы фтора и/или хлора. Примеры галогеналкила включают трифторметил, 1,1-дихлорэтил, 1,2-дихлорэтил, 1,3-дибром-3,3-дифторпропил, перфторбутил и др.
Арильные группы представляют собой циклические ароматические углеводороды, которые не содержат гетероатомов в кольце. Ароматическое соединение, как хорошо известно из уровня техники, представляет собой циклическую систему с несколькими ненасыщенными связями, которая содержит 4n+2 π-электронов, где n представляет собой целое число. Таким образом, к арильным группам относятся без ограничения фенильная, азуленильная, гепталенильная, бифенильная, индаценильная, флуоренильная, фенантренильная, трифениленильная, пиренильная, нафтаценильная, хризенильная, бифениленильная, антраценильная и нафтильная группы. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления, арильные группы содержат от приблизительно 6 до приблизительно 14 атомов углерода в кольцевых частях групп. Арильные группы могут быть незамещенными или замещенными, как определено выше. Типичные замещенные арильные группы могут быть монозамещенными или замещенными более одного раза, такими как без ограничения 2-, 3-, 4-, 5- или 6-замещенные фенильные или 2-8-замещенные нафтильные группы, которые могут быть замещены углеродными или неуглеродными группами, такими как перечисленные выше группы.
Гетероциклильные группы или термин «гетероциклил» включает ароматические и неароматические кольцевые соединения, содержащие 3 или более кольцевых членов, из которых один или несколько кольцевых атомов являются гетероатомами, такими как без ограничения N, О и S. Таким образом, гетероциклил может представлять собой циклогетероалкил, или гетероарил, или, если гетероциклил является полициклическим, любую их комбинацию. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления, гетероциклильные группы включают от 3 до приблизительно 20 кольцевых членов, тогда как другие такие группы содержат от 3 до приблизительно 15 кольцевых членов. Гетероциклильная группа, обозначаемая С2-гетероциклилом, может представлять собой 5-членное кольцо с двумя атомами углерода и тремя гетероатомами, 6-членное кольцо с двумя атомами углерода и четырьмя гетероатомами и так далее. Аналогично, С4-гетероциклил может представлять собой 5-членное кольцо с одним гетероатомом, 6-членное кольцо с двумя гетероатомами и так далее. Количество атомов углерода плюс количество гетероатомов в сумме равняется общему количеству кольцевых атомов. Размеры кольца также можно выразить общим количеством атомов в кольце, например, 3-10-членная гетероциклильная группа, в которой учтены как углеродные, так и неуглеродные кольцевые атомы. Гетероциклильное кольцо также может включать одну или несколько двойных связей. Гетероарильное кольцо представляет собой вариант осуществления гетероциклильной группы. Термин «гетероциклильная группа» включает конденсированные кольцевые системы, в том числе системы, которые содержат конденсированные ароматические и неароматические группы. Например, как диоксоланильное кольцо, так и бенздиоксоланильная кольцевая система (метилендиоксифенильная кольцевая система) в контексте настоящего документа являются гетероциклильными группами. Термин также включает полициклические, например, бициклические и трициклические кольцевые системы, содержащие один или несколько гетероатомов, такие как без ограничения хинуклидил. Гетероциклильные группы могут быть незамещенными или могут быть замещенными.
Гетероарильные группы представляют собой гетероциклические ароматические кольцевые соединения, содержащие 5 или более кольцевых членов, из которых один или несколько представляют собой гетероатом, такой как без ограничения N, О и S; например, гетероарильные кольца могут иметь от 5 до приблизительно 8-12 кольцевых членов. Гетероарильная группа представляет собой разновидность гетероциклильной группы, которая обладает ароматической электронной структурой, представляющей собой циклическую систему с несколькими ненасыщенными связями, которая содержит 4n+2 π-электронов, где n представляет собой целое число. Гетероарильная группа, обозначаемая С2-гетероарилом, может представлять собой 5-членное кольцо (т.е. кольцо с 5 кольцевыми членами) с двумя атомами углерода и тремя гетероатомами, 6-членное кольцо (т.е. кольцо с 6 кольцевыми членами) с двумя атомами углерода и четырьмя гетероатомами и так далее. Аналогично, С4-гетероарил может представлять собой 5-членное кольцо с одним гетероатомом, 6-членное кольцо с двумя гетероатомами и так далее. Количество атомов углерода плюс количество гетероатомов в сумме равняется общему количеству кольцевых атомов.
Примеры описываемых в настоящем документе гетероарильных кольцевых систем включают структурную единицу с формулой , имидазолил-пиридазин, который, как известно, также можно изобразить в следующем виде: . Другая описываемая в настоящем документе гетероарильная кольцевая система имеет формулу , которую, как известно, также можно изобразить в следующем виде: . Аналогичным образом и другие описываемые в настоящем документе арильные (например, фенильные) и гетероарильные (например, пиридильные) кольцевые системы могут быть записаны либо с помощью явных двойных связей, либо с помощью номенклатуры арильного «круга», но они имеют одно и то же значение.
Циклоалкильные группы представляют собой группы, содержащие одно или несколько карбоциклических колец, в том числе без ограничения циклопропильные, циклобутильные, циклопентильные, циклогексильные, циклогептильные и циклооктильные группы. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления, циклоалкильная группа может иметь от 3 до приблизительно 8-12 кольцевых членов, тогда как в соответствии с другими вариантами осуществления, количество атомов углерода в кольце варьирует в диапазоне от 3 до 4, 5, 6 или 7. К циклоалкильным группам дополнительно относятся полициклические циклоалкильные группы, такие как без ограничения норборнильные, адамантильные, борнильные, камфенильные, изокамфенильные и каренильные группы, и конденсированные кольца, такие как без ограничения декалинил и др. К циклоалкильным группам также относятся кольца, которые замещены алкильными группами с прямой или разветвленной цепью, определение которым дано выше.
К циклоалкенильным группам относятся циклоалкильные группы, имеющие по меньшей мере одну двойную связь между 2 атомами углерода. Так, например, к циклоалкенильным группам относятся без ограничения циклогексенильные, циклопентенильные и циклогексадиенильные группы. Циклоалкенильные группы могут иметь от 3 до приблизительно 8-12 кольцевых членов, тогда как в соответствии с другими вариантами осуществления, количество атомов углерода в кольце варьирует в диапазоне от 3 до 5, 6 или 7. К циклоалкильным группам дополнительно относятся полициклические циклоалкильные группы, такие как без ограничения норборнильные, адамантильные, борнильные, камфенильные, изокамфенильные и каренильные группы, и конденсированные кольца, такие как без ограничения декалинил и др., при условии, что они содержат по меньшей мере одну двойную связь в кольце. К циклоалкенильным группам также относятся кольца, которые замещены алкильными группами с прямой или разветвленной цепью, определение которым дано выше.
Гетероциклильные группы или термин «гетероциклил» включает ароматические и неароматические кольцевые соединения, содержащие 3 или более кольцевых членов, из которых один или несколько кольцевых атомов являются гетероатомами, такими как без ограничения N, О и S. Таким образом, гетероциклил может представлять собой циклогетероалкил, или гетероарил, или, если гетероциклил является полициклическим, любую их комбинацию. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления, гетероциклильные группы включают от 3 до приблизительно 20 кольцевых членов, тогда как другие такие группы содержат от 3 до приблизительно 15 кольцевых членов. Гетероциклильная группа, обозначаемая С2-гетероциклилом, может представлять собой 5-членное кольцо с двумя атомами углерода и тремя гетероатомами, 6-членное кольцо с двумя атомами углерода и четырьмя гетероатомами и так далее. Аналогично, С4-гетероциклил может представлять собой 5-членное кольцо с одним гетероатомом, 6-членное кольцо с двумя гетероатомами и так далее. Количество атомов углерода плюс количество гетероатомов в сумме равняется общему количеству кольцевых атомов. Размеры кольца также можно выразить общим количеством атомов в кольце, например, 3-10-членная гетероциклильная группа, в которой учтены как углеродные, так и неуглеродные кольцевые атомы. Гетероциклильное кольцо также может включать одну или несколько двойных связей. Гетероарильное кольцо представляет собой вариант осуществления гетероциклильной группы. Термин «гетероциклильная группа» включает конденсированные кольцевые системы, в том числе системы, которые содержат конденсированные ароматические и неароматические группы. Например, как диоксоланильное кольцо, так и бенздиоксоланильная кольцевая система (метилендиоксифенильная кольцевая система) в контексте настоящего документа являются гетероциклильными группами. Термин также включает полициклические, например, бициклические и трициклические кольцевые системы, содержащие один или несколько гетероатомов, такие как без ограничения хинуклидил.
Связанные документы
[1] Corrales L, Glickman LH, McWhirter SM, Kanne DB, Sivick KE, Katibah GE, Woo SR, Lemmens E, Banda T, Leong Д Metchette K, Dubensky TW Jr, Gajewski TF. (2015) Direct Activation of STING in the Tumor Microenvironment Leads to Potent and Systemic Tumor Regression and Immunity. CellRep.11: 1018-30.
[2] Deng, L. et al. (2014) STING-Dependent Cytosolic DNA Sensing Promotes Radiation-Induced Type I Interferon-Dependent Antitumor Immunity in Immunogenic Tumors, Immunity. 41: 843.
[3] Corrales L, Matson V, Flood B, Spranger S, Gajewski TF. (2017) Innate immune signaling and regulation in cancer immunotherapy. Cell Res. 27: 96-108.
[4] Corrales L, McWhirter SM, Dubensky TW Jr, Gajewski TF. (2016) The host STING pathway at the interface of cancer and immunity. J Clin Invest. 126: 2404-11.
Что касается комбинированной терапии, предусматривающей введение соединения по настоящему изобретению и лекарственного средства, целенаправленно воздействующего на контрольные точки иммунного ответа, или что касается комбинированной терапии для усиления воздействия ионизирующего излучения и существующих химиотерапевтических подходов, таких как химиотерапевтические подходы, основанные на повреждении ДНК, полагаем что агонисты STING по настоящему изобретению могут дополнять и усиливать эффекты этих известных терапевтических подходов. Данный вывод основан на недавних статьях, указывающих на критически важную роль STING-зависимого устранения опухоли с участием микронуклеусов при использовании данных подходов, см., например:
[5] Mackenzie, K.F., et all, (2017), cGAS surveillance of micronuclei links genome instability to innate immunity, Nature, 548, 461.
[6] Wang, W. et al., (2016), Effector T Cells Abrogate Stroma-Mediated Chemoresistance in Ovarian Cancer, Cell, 165, 1092 1105.
[7] Charlotte E. Ariyan, et al., January 16, 2018; DOI: 10.1158/2326-6066, Robust antitumor responses result from local chemotherapy and CTLA-4 blockade, cancerimmunolres.aacrjournals.org on January 31, 2018.
[8] Chung Kil Song, et al., www.moleculartherapy.org vol. 15 no. 8 aug. 2007, Chemotherapy Enhances CD8+T Cell-mediated Antitumor Immunity Induced by Vaccination With Vaccinia Virus.
Соединения по настоящему изобретению можно применять в терапевтических комбинациях с введением эффективной дозы лекарственного средства, целенаправленно воздействующего на контрольные точки иммунного ответа. Например, лекарственное средство, целенаправленно воздействующее на контрольные точки иммунного ответа, может представлять собой антитело к PD-L1, антитело к PD-1, антитело к CTLA-4 или антитело к 4-1 ВВ. См., например:
[9] Ager, CR, et al., (2017) Cancer Immunol Res; 5(8), 676.
[10] Fu, J. et al. (2015) Sci Transl Med. 2015 April 15; 7(283): 283ra52. doi: 10.1126/scitranslmed.aaa4306.
[11] Wang, H., et al. (2017) PNAS | February 14, 2017 | vol. 114 | no. 7 | 1637-1642.
Примеры
Тканевая культура
Клетки THP-l-Lucia ISG дикого типа (кат. №thpl-isg) и STING КО (кат. №thpd-kostg) приобретали у Invivogen и поддерживали в питательной среде, состоящей из RPMI 1640, 2 мМ L-глутамина, 25 мМ HEPES, 10% термоинактивированной фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1000 единиц/мл пенициллина, 1000 мкг/мл стрептомицина 0,25 мкг/мл амфотерицина В и 100 мкг/мл зеоцина, если не указано иное.
Стимулирование интерфероном 1-го типа
Поли(с1А:с1Т) и 2'3'-cGAMP приобретали у Invivogen и ресуспендировали в соответствии с инструкциями производителя.
ISRE-люциферазньш анализ
Клетки ТНР-1 Lucia ISG ресуспендировали в ростовой среде с низким содержанием сыворотки (2% FBS) плотностью 5×105 клеток/мл и обрабатывали тестируемым продуктом или наполнителем (DMSO). 50 мкл клеток высевали в каждую лунку 384-луночных белых планшетов Greiner и инкубировали в течение 24 часов. Для оценки экспрессии люциферазного репортера в каждую лунку добавляли 30 мкл детектирующего реагента Quanti-luc (Invivogen) и считывали люминесценцию с помощью планшетного ридера Envision (Perkin Elmer) со временем для аккумулирования заряда светодиодом, установленным на 0,1 секунды.
Анализ жизнеспособности
Клетки ресуспендировали в ростовой среде с низким содержанием сыворотки плотностью 5×105 клеток/мл и обрабатывали тестируемым продуктом или наполнителем (DMSO). 50 мкл клеток высевали в каждую лунку 384-луночных белых планшетов Greiner и инкубировали в течение 24 часов. Для оценки экспрессии люциферазного репортера в каждую лунку добавляли 30 мкл детектирующего реагента CellTiter-Glo (Promega) и детектировали люминесценцию с помощью планшетного ридера Envision со временем для аккумулирования заряда светодиодом, установленным на 0,1 секунды.
В естерн-блоттинг
Клетки солюбилизировали в 1× буфере для лизиса белка (25 мМ HEPES, рН 7,4, 300 мМ NaCl, 1,5 мМ MgCl2, 1 мМ EGTA, 1% Р-40, 1% дезоксихолата натрия, 2,5 мМ пирофосфата натрия, 1 мМ глицерофосфата) с недавно добавленными ингибиторами протеаз и фосфатаз (Cell Signaling). Вестерн-блоттинг проводили с применением 4-12% Bis-Tris гелей Bolt™ и мини-системы переноса Bolt™ в соответствии с инструкциями производителя (ThermoFisher Scientific). Антитела к STING и γ-тубулину приобретали у Cell Signaling, разводили в 5% BSA, 1× буфере TBS-T (таблица 3). Антитело с HRP к антителам кролика разводили в 5% обезжиренном сухом молоке, 1× буфере TBS-T, а люминесцентный сигнал регистрировали с помощью визуализатора ChemiDoc Imager (BioRad).
Полуколичественная ПЦР в режиме реального времени (qPCR)
Клетки ТНР-1 ресуспендировали в ростовой среде с низким содержанием сыворотки плотностью 5×105 клеток/мл и обрабатывали тестируемым продуктом или наполнителем (DMSO). 2,5 мл клеток высевали в каждую лунку 6-луночного планшета и инкубировали в течение 24 часов. РНК выделяли с помощью набора RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen) и 1 мкг очищенной РНК подвергали обратной транскрипции в кДНК (VILO, кат. №11755050, ThermoFisher Scientific). Экспрессию генов оценивали с применением праймеров и зондов Taqman, перечисленных в таблице 4, со смесью Taqman Universal Mix II (кат. №4440038, ThermoFisher) в соответствии с инструкциями производителя. Экспрессию генов нормализовали с помощью способа двойного дельта Ct и регистрировали как кратное изменение экспрессии.
Анализ теплового сдвига STING (TSA)
С-концевые домены (CTD) человеческого и мышиного STING экспрессировали и очищали так, как подробно описано ранее в (Ouyang et al., 2012). Тестируемый продукт или контрольные наполнители добавляли к разведенному белку STING (0,22 мг/мл) в 1х буфере для измерения теплового сдвига у белка, входящем в набор с красителем для измерения теплового сдвига у белка (кат. №4461146, ThermoFisher Scientific). Добавляли краситель для измерения теплового сдвига и перемешивали перед построением кривой плавления в соответствии с параметрами, указанными для набора красителя. Значения температуры плавления (Tm) рассчитывали с помощью способа с использованием производных с применением программного обеспечения Protein Thermal Shift Software v1.3 (кат.№4466038, ThermoFisher Scientific).
Ouyang, S., Song, X., Wang, Y., Ru, H., Shaw, N., Jiang, Y., Niu, F., Zhu, Y., Qiu, W., Parvatiyar, K., et al. (2012). Structural analysis of the STING adaptor protein reveals a hydrophobic dimer interface and mode of cyclic di-GMP binding. Immunity 36, 1073-1086.
Соединения, пригодные для осуществления способа по настоящему изобретению, можно получить в соответствии с приведенными далее процедурами в сочетании с обычными знаниями и навыками в области органического синтеза путем замены на соответствующие реагенты, как будет очевидно для специалиста-практика.
Экспериментальные процедуры
Сокращения
Использованы следующие сокращения: тетрагидрофуран (THF), дихлорметан (DCM), N,N-диметилформамид (DMF), диметилацетамид (DMA), диметилсульфоксид (DMSO), трифторуксусная кислота (TFA), триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIPEA), (1-циано-2-этокси-2-оксоэтилиденаминоокси)диметиламиноморфолинокарбения гексафторфосфат (COMU), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло [4,5-b]пиридиния 3-оксидгексафторфосфат, N-[(диметиламино)-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридин-1-илметилен]-N-метилметанаминия гексафторфосфат-N-оксид (HATU).
Общие примеры получения соединений по настоящему изобретению
Исходные материалы и промежуточные продукты для соединений по настоящему изобретению можно получить путем применения или адаптации описанных ниже способов, их очевидных химических эквивалентов или, например, описанных в такой литературе, как The Science of Synthesis, Volumes 1-8. Editors E. M. Carreira et al. Thieme publishers (2001-2008). Подробная информация о реагентах и вариантах реакций также доступна при поиске по структуре и реакциям с использованием коммерческих компьютерных поисковых систем, таких как Scifinder (www.cas.org) или Reaxys (www.reaxys.com).
ЧАСТЬ I: ПОЛУЧЕНИЕ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ПРОДУКТОВ
Схема 1: синтез промежуточного продукта А
6-(1H-нмндазол-1-шт) пирндазнн-3-карбоновая кислота, А: к суспензии метил-6-хлорггиридазин-3-карбоксилата (1 г, 5,2 ммопя) и имядазопа (400 мг, 5,2 ммоля) в сухом DMF (10 мл) добавляли К2СО2 (950 мг, 6,2 ммопя) и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 3 часов. Реакцию отслеживали с помощью LCM3. После полного превращения в метип-6-(1 Н-имидазш-1-ил)1 гиридазт-3-карбоксилат в реакционную смесь добавляли 2,5 М водного раствора LiOH (2,2 mi, 6,96 ммоль) и перемешивали при 60°С в течение 1 часа. Реакцию отслеживали с помощью LCMS. После завершения реакции реакционную смесь подкисляли водным раствором 1 М HCl и полученный осадок отфильтровьтапи и промывали водой с получением кислоты А (720 мг) в виде беловатого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-M3 (ESI+): m/z 191,0 [М+Н]+.
ЧАСТЬ II: ПОЛУЧЕНИЕ ПРИМЕРОВ СОЕДИНЕНИЙ
Все соединения получали с испопьзованием приведенных ниже процедур.
Пример 1
Схема 2: синтез соединения 1
Метнл-2-(6-(1Н-имидазол-1-мл)пиридазин-3-карбоксамидо)бензоат, 1: промежуточный продукт А (190 мг, 1 ммоль), метил-2-аминобензоат (166 мг, 1,1 ммоля), HATU (456 мг, 1,2 ммоля) и DIPEA (0,52 мл, 3 ммоля) растворяли в DMF (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции растворитель выпаривали при пониженном давлении и полученный неочищенный материал очищали хроматографией на колонке с силикагелем с применением 2-5% МеОН в DCM с получением соединения 1 в виде беловатого твердого вещества (226 мг). LC-MS (ESI+): m/z 32А,21 [М+Н]+.
Схема 3
аРеагенты и условия: а) тионилхлорид, кипячение в колбе с обратным холодильником, 3 часа; этил-2-аминоциклогекс-1-ен-1-карбоксилат, DIPEA, ацетонитрил, комнатная температура, 30 минут
Этил-2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)циклогекс-1-ен-1-карбоксилат: 6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоновую кислоту (19 мг, 0,1 ммоля) растворяли в 0,3 мл тионилхлорида и смесь нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем избыток тионила удаляли под вакуумом. Твердое вещество растворяли в 0,5 мл безводного ацетонитрила и при комнатной температуре добавляли раствор этил-2-аминоциклогекс-1-ен-1-карбоксилата (16,9 мг, 0,1 ммоля) и DIPEA (26,1 мкл, 0,15 ммоля) в 0,5 мл безводного ацетонитрила. После перемешивания в течение 30 минут неочищенную смесь фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением продукта (6,8 мг, 20% выход).
Схема 4: синтез соединения 8
Метил-2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-5-фтор-4-метоксибензоат, 8: промежуточный продукт А (190 мг, 1 ммоль) перемешивали в присутствии SOCl2 (5 мл) при 80°С в течение 2 часов. Затем удаляли летучие вещества с последующим добавлением раствсра метил-2-амино-5-фтор-4-метоксибензоата (219 мг, 1,1 ммоля) и DIPEA (0,52 мл, 3 ммоля) в ацетонитриле (5 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакцию отслеживали с помощью LCMS. После завершения реакции растворитель удаляли и полученный неочищенный материал очищали хроматографией на колонке с силикагелем с применением 2-5% МеОН в DCM с получением соединения 8 в виде беловатого твердого вещества (223 мг). LC-MS (ESI+): m/z 372,1 [М+Н]+.
Пример 2-Li
Схема 5: синтез соединения 2-Li
2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-5-метоксибензоат лития, 2-Li: метил- 2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-кар6оксамидо)-5-метокси6ензоат получали с помощью процедуры, описанной для соединения 1 (схема С). Полученный сложный эфир (20 мг, 0,057 ммоля) растворяли в DMSO (0,8 мл), а затем добавляли водный 0,1 М раствор LiOH (0,68 мл, 1,2 ммоля) с последующим перемешиванием при комнатной температуре до завершения реакции (~3 часа). Реакцию отслеживали с помощью LCMS. Затем реакционную смесь подкисляли путем добавления по каплям 1 М HCl с получением искомой кислоты. Полученный осадок выделяли и промывали водой с получением кислоты 2 в виде беловатого твердого вещества. LC-MS (ESI+): m/z 340,4 [М+Н]+. Кислоту 2 (10,2 мг, 0,03 ммоля) дополнительно суспендировали в 2,5 мл воды (0,25 мл/мг) и обрабатывали ультразвуком в течение 20 минут до получения однородной суспензии. Затем добавляли 1 М LiOH (30 мкл, 0,03 ммоля) с получением прозрачного раствора литиевой соли, который затем фильтровали для удаления каких-либо нерастворимых частиц. Полученный раствор лиофилизировали с получением соответствующей литиевой соли 2-Li. LC-MS (ESI+): m/z 340,4 [М+Н]+.
Метил-2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)1пиридазин-3-карбоксамидо)-4,5-дифторбензоат, 5: соединение 5 получали с помощью процедуры, аналогичной для соединения 1 (схема С). LC-MS (ESI+): m/z 360,21 [М+Н]+.
Пример 6-Li
2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-4,5-дифторбензоат лития, 6-Li: соединение 6-Li получали с помощью процедуры, аналогичной для соединения 2-Li (схема D). LC-MS (ESI+): m/z 346,1 [М+Н]+.
Пример 7-Li
2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-4-фтор-5-метилбензоат лития, 7-Li: соединение 7-Li получали с помощью процедуры, аналогичной для соединения 2-Li (схема D). LC-MS (ESI+): m/z 342,11 [М+Н]+.
Пример 8
Схема F: синтез соединения 8
Метил-2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-5-фтор-4-метоксибензоат, 8: промежуточный продукт А (190 мг, 1 ммоль) перемешивали в присутствии SOCl2 (5 мл) при 80°С в течение 2 часов. Затем удаляли летучие вещества с последующим добавлением раствора метил-2-амино-5-фтор-4-метоксибензоат а (219 мг, 1,1 ммоля) и DIPEA (0,52 мл, 3 ммоля) в ацетонитриле (5 мл). Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакцию отслеживали с помощью LCMS. После завершения реакции растворитель удаляли и полученный неочищенный материал очищали хроматографией на колонке с силикагелем с применением 2-5% МеОН в DCM с получением соединения 8 в виде беловатого твердого вещества (223 мг). LC-MS (ESI+): m/z 372,1 [М+Н]+.
Схема G: синтез диметилоксазинонового соединения
аРеагенты и условия: а) тионилхлорид, кипячение в колбе с обратным холодильником, 3 часа; DIPEA, ацетонитрил, комнатная температура, 30 минут 2 -(6-(1Н-имидазол-1 -и л)пиридазин-3-ил)-6,7 - диметил-4Н-бензо [d] [1,3] оксазин-4-он: 2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-карбоксамидо)-4,5-диметилбензойную кислоту (33,7 мг, 0,1 ммоля) растворяли в 0,3 мл тионилхлорида и смесь нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем избыток тионила удаляли под вакуумом. Твердое вещество растворяли в 0,5 мл безводного ацетонитрила и при комнатной температуре добавляли раствор DIPEA (26,1 мкл, 0,15 ммоля) в 0,5 мл безводного ацетонитрила. После перемешивания в течение 30 минут полученный осадок выделяли и промывали ацетонитрилом с получением продукта (26,2 мг, 82% выход).
Схема Н: синтез дифтороксазинонового соединения
а Реагенты и условия: а) формамид, микроволновая печь, 200°С
2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-ил)-6,7-дифторхиназолин-4(3Н)-он: раствор 2-(6-(1Н-имидазол-1-ил)пиридазин-3-ил)-6,7-дифтор-4Н-бензо[d][1,3]оксазин-4-она (32,7 мг, 0,1 ммоля) в 2 мл формамида помещали в 10-мл емкость для микроволновой печи, которую герметично закрывали и облучали на уровне температуры 200°С в течение 15 минут. Реакцию отслеживали с помощью LCMS. После завершения реакции добавляли 4 мл метанола и неочищенную смесь фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением продукта (13,0 мг, 40% выход).
Несмотря на то, что настоящее изобретение было достаточно подробно описано и проиллюстрировано для того, чтобы специалисты в настоящей области техники смогли его реализовать и применять, для специалистов в настоящей области техники будут очевидны различные альтернативы, модификации и усовершенствования без отклонения от сути и объема формулы изобретения.
Все упомянутые в настоящем документе патенты и публикации включены в настоящий документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация была специально и индивидуально указана как включенная во всей своей полноте посредством ссылки.
Claims (23)
1. Соединение с любой из следующих формул:
2. Применение соединения по п. 1 для изготовления лекарственного средства для лечения опухоли, связанной со стимулятором генов интерферона (STING).
3. Применение соединения по п. 1 для стимуляции экспрессии генов интерферона.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201862633409P | 2018-02-21 | 2018-02-21 | |
| US62/633,409 | 2018-02-21 | ||
| PCT/US2019/018899 WO2019165032A1 (en) | 2018-02-21 | 2019-02-21 | Agonists of stimulator of interferon genes sting |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020130864A RU2020130864A (ru) | 2022-03-23 |
| RU2809022C2 true RU2809022C2 (ru) | 2023-12-06 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011048525A1 (en) * | 2009-10-20 | 2011-04-28 | Pfizer Inc. | Novel heteroaryl imidazoles and heteroaryl triazoles as gamma-secretase modulators |
| WO2017027646A1 (en) * | 2015-08-13 | 2017-02-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists |
| US20170158724A1 (en) * | 2015-12-03 | 2017-06-08 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Novel Compounds |
| EA201692119A1 (ru) * | 2014-06-04 | 2017-06-30 | Глаксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед | Циклические динуклеотиды в качестве модуляторов стимулятора генов интерферона (sting) |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011048525A1 (en) * | 2009-10-20 | 2011-04-28 | Pfizer Inc. | Novel heteroaryl imidazoles and heteroaryl triazoles as gamma-secretase modulators |
| EA201692119A1 (ru) * | 2014-06-04 | 2017-06-30 | Глаксосмитклайн Интеллекчуал Проперти Дивелопмент Лимитед | Циклические динуклеотиды в качестве модуляторов стимулятора генов интерферона (sting) |
| WO2017027646A1 (en) * | 2015-08-13 | 2017-02-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists |
| US20170158724A1 (en) * | 2015-12-03 | 2017-06-08 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Novel Compounds |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7366456B2 (ja) | インターフェロン遺伝子刺激因子ｓｔｉｎｇのアゴニスト | |
| KR102569881B1 (ko) | 질병 치료용 화합물, 조성물 및 방법 | |
| Xi et al. | Design, synthesis, and biological evaluation of amidobenzimidazole derivatives as stimulator of interferon genes (STING) receptor agonists | |
| JP5414277B2 (ja) | Ａ３アデノシンレセプタ・アロステリックモジュレータ | |
| TW202134216A (zh) | HIF-2α抑制劑 | |
| KR20220133258A (ko) | 화합물 및 이의 용도 | |
| EP3980010A1 (en) | 2,3,5-trisubstituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidine compounds | |
| Kokatla et al. | Exquisite selectivity for human toll-like receptor 8 in substituted furo [2, 3-c] quinolines | |
| BRPI0609650A2 (pt) | inibidores heterobicìlicos de hvc | |
| JP2020532532A (ja) | 化合物、組成物、及び疾患の治療方法 | |
| CN108341813B (zh) | 取代的1-(异恶唑-3-基)-3-(3-氟-4-苯基)脲衍生物及其制备方法和用途 | |
| WO2012122534A2 (en) | N-quinolin-benzensulfonamides and related compounds for the treatment of cancer, autoimmune disorders and inflammation | |
| CN112442033A (zh) | Sting通路调节剂及其用途 | |
| RU2809022C2 (ru) | Агонисты стимулятора генов интерферона sting | |
| KR102821711B1 (ko) | 인터페론 유전자의 자극인자 sting의 비시클릭 효능제 | |
| Ma et al. | Discovery of Potent and Balanced Dual RIPK2 and 3 Inhibitors as a New Strategy for the Treatment of Inflammatory Bowel Diseases |