RU2846274C2 - Новые соединения, производные изоиндолинона, в качестве ингибиторов каспазы - Google Patents

Abstract

Группа изобретений относится к области органической химии и включает соединение формулы I, его фармацевтически приемлемые соли, его применение, фармацевтическую композицию на его основе и способ получения. В формуле I R¹ представляет собой галоген или С_6-12 арилокси, замещенный 1-5 галогенами, R² представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, R³ представляет собой галоген или Q, Q замещен или незамещен 1-3 независимыми R^a, Q представляет собой фенил, пиридинил, тетрагидропиридинил, пиразолил, пиримидинил, тиофенил, пирролидинил, нафталенил, хинолинил, изохинолинил, бензофуранил, бензотиазолил, дигидробензодиоксинил, оксо-дигидробензимидазолил, бензотиофенил, пиразолопиридинил или дигидроимидазопиразинил, R^a представляет собой C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, C_1-6 алкокси, галоген, C_1-6 галогеналкил, CO₂R^b, COR^b, NHR^b, S(О)₂R^b или 5-членный гетероарил, конденсированный с С6 арилом, R^b представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью. Технический результат: соединение формулы I, обладающее ингибирующей активностью в отношении каспазы. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 табл., 67 пр.

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к ингибиторам каспазы, и более конкретно, к новым соединениям, производным изоиндолинона, в качестве ингибиторов каспазы.

Уровень техники

Каспаза представляет собой тип фермента, цистеиновую протеазу, которая существует в виде тетрамера в форме α2β2, а ингибитор каспазы представляет собой соединение, которое может модулировать воспаление или апоптоз, вызванные действием каспаз, путем вмешательства в их активность. Заболевания, которые можно лечить с помощью этих соединений для устранения или уменьшения симптомов, включают остеоартрит, ревматоидный артрит, дегенеративный артрит, деструктивные заболевания костей, заболевания печени, вызванные вирусами гепатита, острый гепатит, цирроз печени, повреждение головного мозга, вызванное вирусами гепатита, фульминантную печеночную недостаточность у человека, сепсис, отторжение трансплантата органа, ишемическую болезнь сердца, деменцию, инсульт, черепно-мозговую травму, вызванную СПИДом, диабет и язву желудка.

Среди различных структурных соединений, известных как ингибиторы каспаз, производные изоксазолина были описаны в корейских патентных заявках No. 10-2004-0066726, No. 10-2006-0013107 и No. 10-2008-0025123. Кроме того, в WO 2007/015931 раскрыто пролекарство ингибитора каспазы на основе производного изоксазолина (заявитель: Vertex Pharmaceuticals Incorporated, США).

Цель изобретения

Задача, которую решает настоящее изобретение, заключается в обеспечении новых структурированных соединений, ингибирующих каспазы, которые проявляют превосходную ингибирующую активность в отношении каспаз.

Кроме того, задача, которую решает настоящее изобретение, заключается в обеспечении фармацевтической композиции для профилактики или лечения заболеваний, связанных с каспазой, включающей новые структурированные соединения, ингибирующие каспазу.

Кроме того, задача, которую решает настоящее изобретение, заключается в обеспечении способа профилактики или лечения заболеваний, связанных с ингибированием каспазы, с использованием соединения, ингибирующего каспазу, имеющего новую структуру.

Кроме того, задача, которую решает настоящее изобретение, заключается в обеспечении применения соединения, ингибирующего каспазу, имеющего новую структуру, для профилактики или лечения заболеваний, связанных с каспазой.

Кроме того, задача, которую решает настоящее изобретение, заключается в обеспечении способа получения соединения, ингибирующего каспазу, имеющего новую структуру.

Задача, которую решает настоящее изобретение, не ограничивается адачами, упомянутыми выше, и другие технические задачи, не упомянутые выше, могут быть ясно понятны специалистам в данной области из описания, приведенного ниже.

Сущность изобретения

Для решения вышеуказанной задачи в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предложено соединение, производное изоиндолинона, представленное следующей формулой I, его гидрат, его сольват или его фармацевтически приемлемая соль, где:

<Формула I>

R¹ представляет собой галоген или арилокси, замещенный 1-5 галогенами,

R² представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью,

R³ представляет собой галоген или Q, Q замещен или незамещен 1-3 независимыми R^a,

Q представляет собой представляет собой арил, аминоарил, гетероарил или неароматический гетероцикл, и Q необязательно конденсирован с насыщенным или ненасыщенным 5-7-членным кольцом, имеющим от 0 до 3 гетероатомов,

R^a представляет собой C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, C_1-6 алкокси, галоген, C_1-6 галогеналкил, CO₂R^b, COR^b, CONHR^b, CON(R^b)₂, NHR^b, N(R^b)₂, NHCOR^b, S(O)₂R^b или гетероарил, конденсированный с насыщенным или ненасыщенным 5-7-членным кольцом, имеющим от 0 до 3 гетероатомов,

R^b представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для профилактики или лечения заболеваний, связанных с каспазой, включающая соединение, производное изоиндолинона, представленное вышеприведенной формулой I, его гидрат, его сольват или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ профилактики или лечения заболевания, связанного с каспазой, включающий: введение соединения, производного изоиндолинона, представленного вышеприведенной формулой I, его гидрата, его сольвата или его фармацевтически приемлемой соли, субъекту, нуждающемуся в этом.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения, производного изоиндолинона, представленного вышеприведенной формулой I, его гидрата, его сольвата или его фармацевтически приемлемой соли, в получении лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания, связанного с каспазой.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение, производное изоиндолинона, представленное вышеприведенной формулой I, его гидрат, его сольват или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемую добавку.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ получения соединения, производного изоиндолинона, представленного приведенной выше формулой I.

Было подтверждено, что новое соединение, производное изоиндолинона, по настоящему изобретению демонстрирует превосходный эффект снижения интерлейкина-1β(IL-1β) и превосходный эффект снижения апоптоза, таким образом проявляя превосходную активность в качестве ингибитора каспазы, и, таким образом, было обнаружено, что новое соединение, производное изоиндолинона, можно использовать для профилактики или лечения заболеваний, связанных с каспазой.

Таким образом, новое соединение, производное изоиндолинона, по настоящему изобретению может быть эффективно использовано для профилактики или лечения заболеваний, связанных с каспазой, в медицинской и фармацевтической областях.

Эффекты настоящего изобретения не ограничиваются вышеуказанными эффектами, но следует понимать, что они включают все эффекты, которые можно вывести из описания изобретения или композиции изобретения, изложенных в формуле изобретения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к соединению, производному изоиндолинона, представленному следующей формулой I, его гидрату, его сольвату или его фармацевтически приемлемой соли, где:

<Формула I>

R¹ представляет собой галоген или арилокси, замещенный 1-5 галогенами,

R² представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью,

R³ представляет собой галоген или Q, Q замещен или незамещен 1-3 независимыми R^a,

Q представляет собой арил, аминоарил, гетероарил или неароматический гетероцикл, и Q необязательно конденсирован с насыщенным или ненасыщенным 5-7-членным кольцом, имеющим от 0 до 3 гетероатомов,

R^a представляет собой C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, C_1-6 алкокси, галоген, C_1-6 галогеналкил, CO₂R^b, COR^b, CONHR^b, CON(R^b)₂, NHR^b, N(R^b)₂, NHCOR^b, S(O)₂R^b, или гетероарил, конденсированный с насыщенным или ненасыщенным 5-7-членным кольцом, имеющим от 0 до 3 гетероатомов,

R^b представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью.

В одном варианте осуществления R¹ может представлять собой F или фенокси, замещенный 1-5 F.

В одном варианте осуществления R² может представлять собой водород, метил, этил или пропил с прямой или разветвленной цепью.

В одном варианте осуществления R³ может представлять собой Br или Q, где Q может представлять собой фенил, пиридинил, тетрагидропиридинил, пиразолил, пиримидинил, дигидропиранил, тиофенил, пирролидинил, пиперазинил, аминонафталенил, нафталенил, хинолинил, изохинолинил, бензофуранил, бензотиазолил, дигидробензодиоксинил, оксо-дигидробензимидазолил, бензотиофенил, пиразолопиридинил или дигидроимидазопиразинил.

В одном варианте осуществления R^a может представлять собой метил, метокси, F, трифторметил, карбокси, ацетил, амино, метилсульфонил или бензоизотиазолил.

Репрезентативные примеры соединений, производных изоиндолинона, согласно настоящему изобретению представляют собой следующие:

[1] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-фенилизоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[2] 5-фтор-3-(2-(6-(нафталин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[3] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[4] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[5] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(1H-пиразол-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[6] 5-фтор-3-(2-(6-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[7] 5-фтор-3-(2-(6-(1-(метилсульфонил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-4-оксопентановая кислота,

[8] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[9] 3-(2-(6-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[10] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(трифторметил)-5,6-дигидроимидазо[1,2-a]пиразин-7(8H)-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[11] 5-фтор-3-(2-(6-(нафталин-1-иламино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[12] 5-фтор-3-(2-(6-(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[13] 5-фтор-3-(2-(6-(6-метоксипиридин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[14] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(4-(трифторметил)фенил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[15] 3-(2-(6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-пентановая кислота,

[16] 3-(2-(6-бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[17] 4-(2-(1-((1-карбокси-4-фтор-3-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксобутан-2-ил)-3-оксоизоиндолин-5-ил)пентановая кислота,

[18] 3-(2-(6-(4-ацетилфенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[19] 3-(2-(6-(4-(бензо[d]изотиазол-3-ил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[20] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(6-(трифторметил)пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[21] (3-(2-(6-(2-аминопиримидин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[22] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[23] 3-(2-(6-(2-аминопиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[24] 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[25] 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[26] 3-(2-(6-бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[27] 3-(2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[28] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(тиофен-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[29] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[30] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-6-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[31] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[32] 3-(2-(6-(бензо[d]тиазол-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[33] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиразоло[1,5-a]пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[34] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[35] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-8-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[36] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[37] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[38] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)ацетамидо)пентановая кислота,

[39] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[40] 3-(2-(6-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[41] 3-(2-(6-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[42] 3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[43] 5-фтор-3-((S)-3-метил-2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)4-оксопентановая кислота,

[44] 3-((S)-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[45] 5-фтор-3-((S)-3-метил-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[46] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)пропанамидо)пентановая кислота,

[47] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)пропанамидо)пентановая кислота,

[48] 3-(2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пропанамидо-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[49] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пропанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[50] (S)-3-((S)-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота,

[51] (S)-3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота,

[52] (S)-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота,

[53] (S)-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота,

[54] (R)-3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота,

[55] 3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[56] 5-фтор-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[57] 3-((S)-2-(5-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[58] 3-((S)-2-(5-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[59] 3-((S)-2-(5-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[60] 3-((S)-2-(5-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[61] 5-фтор-3-((S)-2-(5-(нафталин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота,

[62] 5-фтор-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-5-(2-(трифторметил)-5,6-дигидроимидазо[1,2-a]пиразин-7(8H)-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота,

[63] 3-((S)-2-(5-(4-(бензо[d]изотиазол-3-ил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота,

[64] 5-фтор-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-5-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота.

В настоящем описании используются следующие определения при определении соединения формулы I, если не указано иное.

Термин «алкил» относится к гидрокарбонильной группе с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно C₁-C₁₂ алкил. Примеры алкила включают, но не ограничиваются этим, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, н-гексил, 3-метилгексил, 2,2-диметилпентил, 2,3-диметилпентил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил, н-ундецил и н-додецил и тому подобное.

Термин «галоген» или «гало» относится к фтору (F), хлору (Cl), брому (Br) или йоду (I).

Термин «алкокси» означает алкилокси с 1-10 атомами углерода, если не указано иное.

Термин «галогеналкил» и «галогеналкокси» означает алкил или алкокси, замещенный одним или несколькими атомами галогена.

Термин «гетероатом» означает N, O или S.

Термин «арил» означает ароматический углеводород, предпочтительно C₅-C₁₂ арил, более предпочтительно C₅-C₁₀ арил. Например, арил включает, но не ограничивается этим, фенил, нафтил, тетрагидронафтил и тому подобное.

Термин «гетероарил» или «ароматический гетероцикл» означает 3-12-членный, более предпочтительно 5-10-членный ароматический углеводород, образующий одно или конденсированное циклическое кольцо, которое имеет один или несколько гетероатомов, выбранных из N, O и S, в качестве атомов кольца, которые могут быть конденсированы с бензо- или C₃-C₈ циклоалкилом. Например, гетероарил включает, но не ограничивается этим, пиридинил, пиримидинил, пиридазинил, пиразинил, оксадиазолил, изоксадиазолил, тетразолил, триазолил, индолил, индазолил, изоксазолил, оксазолил, тиазолил, изотиазолил, фуранил, бензофуранил, имидазолил, тиофенил, бензтиазол, бензимидазол, хинолинил, индолинил, тетрагидропиридинил, пиразолил, дигидропиранил, и тому подобное.

Неароматическое гетероциклическое кольцо представляет собой неароматическое карбоциклическое кольцо, имеющее один или несколько гетероатомов, таких как N, O или S, внутри кольца. Кольцо может быть 5, 6, 7 или 8-членным и/или конденсировано с другим кольцом, например циклоалкильным или ароматическим кольцом. Примеры таких соединений включают 3-1H-бензимидазол-2-он, 3-1-алкилбензимидазол-2-он, 2-тетрагидрофуранил, 3-тетрагидрофуранил, 2-тетрагидротиофенил, 3-тетрагидротиофенил, 2-морфолино, 3-морфолино, 4-морфолино, 2-тиоморфолино, 3-тиоморфолино, 4-тиоморфолино, 1-пирролидинил, 2-пирролидинил, 3-пирролидинил, 1-пиперазинил, 2-пиперазинил, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 4-пиперидинил, 4-тиазолидинил, диазолонил, N-замещенный диазолонил, 1-фталимидинил, бензойная кислота, бензотриазол-1-ил, бензопирролидин, бензопиперидин, бензоксолан, бензотиолан и бензотиан, и тому подобное.

Арилалкил, алкиларил и гетероарилалкил относятся к группе, образованной путем объединения арила и алкила или гетероарила и алкила, как определено выше, и включают, например, бензил, тиофен метил, пиримидин метил и тому подобное, но не ограничиваются ими.

Арильные группы включают полициклические ароматические кольцевые системы, в которых карбоциклическое ароматическое кольцо или гетероарильное кольцо конденсировано с одним или несколькими другими кольцами. Примеры таких соединений включают нафтил (нафталенил), тетрагидронафтил, бензимидазолил, бензотиенил, бензофуранил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензотиазолил, бензооксазолил, бензимидазолил, изохинолинил, изоиндолил, акридинил, бензоизоксазолил, дигидробензодиоксинил, оксо-дигидробензоимидазолил, бензотиофенил, пиразолопиридинил или дигидроимидазопиразинил. Также в объем термина «арил», используемого в настоящем документе, входят соединения, имеющие одно или несколько карбоциклических ароматических и/или гетероарильных колец, конденсированных с циклоалкильным или неароматическим гетероциклическим кольцом, например, инданил или тетрагидробензопиранил.

Соединение, представленное формулой I, согласно настоящему изобретению может быть получено и использовано в форме пролекарств, гидратов, сольватов и фармацевтически приемлемых солей для усиления in vivo абсорбции или повышения растворимости, так что пролекарства, гидраты, сольваты и фармацевтически приемлемые соли находятся также в рамках настоящего изобретения. Кроме того, соединения, представленные формулой I, имеют хиральные атомы углерода, так что существуют их стереоизомеры, и эти стереоизомеры также входят в объем настоящего изобретения.

Термин «пролекарство» относится к веществу, которое трансформируется in vivo в исходное лекарственное вещество. Пролекарства часто используются, потому что в некоторых случаях их легче вводить, чем исходное лекарственное вещество. Например, они могут быть биодоступными при пероральном введении, тогда как исходное лекарственное вещество может не быть биодоступным. Пролекарства также могут иметь лучшую растворимость в фармацевтических композициях, чем исходное лекарственное вещество. Например, пролекарство может представлять собой гидролизуемый in vivo сложный эфир соединения по настоящему изобретению и его фармацевтически приемлемую соль. Другим примером пролекарства может быть короткий пептид (полиаминокислота), в котором пептид связан с кислотной группой, которая метаболически преобразуется для раскрытия активного сайта.

Термин «гидрат» относится к соединению по настоящему изобретению или его соли, имеющему стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной нековалентными межмолекулярными силами.

Термин «сольват» относится к соединению по настоящеу изобретению или его соли, имеющему стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя, связанного нековалентными межмолекулярными силами. Предпочтительные растворители, следовательно, включают растворители, которые являются летучими, нетоксичными и/или пригодными для введения человеку.

Термин «изомер» относится к соединению по настоящему изобретению или его соли, которые имеют ту же химическую формулу или молекулярную формулу, но отличается структурно или стерически. Такие изомеры включают как структурные изомеры, такие как таутомер, так и стереоизомеры, такие как R- или S-изомеры с асимметрическим углеродным центром, и геометрические изомеры (транс-, цис-). Все изомеры и их смеси также входят в рамки настоящего изобретения.

Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к солевой форме соединения, которая не вызывает серьезного раздражения организма, которому вводят соединение, и не ухудшает биологическую активность и физические свойства соединения. Фармацевтические соли включают кислотно-аддитивную соль, образованную кислотой, имеющей фармацевтически приемлемый анион и образующей нетоксичную кислотно-аддитивную соль, например, неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная и тому подобное, органическими углеродными кислотами, такими как винная кислота, муравьиная кислота, лимонная кислота, уксусная кислота, трихлоруксусная кислота, трифторуксусная кислота, глюконовая кислота, бензойная кислота, молочная кислота, фумаровая кислота, яблочная кислота, салициловая кислота и тому подобное, сульфоновыми кислотами, такими как метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и тому подобное. Например, фармацевтически приемлемые соли карбоновых кислот включают соли металлов или соли щелочноземельных металлов, образованные литием, натрием, калием, кальцием, магнием и тому подобное, соли аминокислот, такие как лизин, аргинин, гуанидин и тому подобное, органические соли, такие как дициклогексиламин, N-метил-D-глюкамин, трис(гидроксиметил)метиламин, диэтаноламин, холин и триэтиламин и тому подобное. Соединение формулы I по настоящему изобретению также можно превратить в его соль обычными способами.

Настоящее изобретение также предлагает способ получения соединения формулы I, включающий следующие стадии.

(1) Получение соединения формулы I-2 путем осуществления взаимодействия соединения формулы I-1 ниже с одним из соединений R³-B(OH)₂, R³-H и формулы I-c ниже.

Эта стадия может представлять собой реакцию сочетания Сузуки, в которой 1) арилбромидное соединение формулы I-1 ниже подвергают взаимодействию с R³-B(OH)₂ или соединением пинаколбора формулы I-c ниже с получением арил-арильного соединения. Катализатор, используемый при этом, может представлять собой катализатор, обычно используемый в реакциях сочетания Сузуки, например, может быть использован палладиевый катализатор, но не ограничивается этим. Кроме того, реакцию можно проводить при температуре реакции, обычно используемой в реакциях сочетания Сузуки, с использованием растворителя, обычно используемого в реакциях сочетания Сузуки, например, но не ограничиваясь этим, толуолового или 1,4-диоксанового растворителя при повышенной температуре (80-110°C) в течение соответствующего времени реакции (например, 10 часов или где-то около). Кроме того, эта стадия может представлять собой 2) реакцию Birkwald, в которой соединение формулы I-1 подвергают взаимодействию с соединением амина с получением соединения ариламинового типа. Катализатор, используемый при этом, может представлять собой катализатор, обычно используемый в реакции Birkwald, например, может быть использован палладиевый катализатор, но не ограничивается этим. Кроме того, реакцию можно осуществлять при температуре реакции, обычно используемой в реакции Burkhardt, с использованием растворителя, обычно используемого в реакции Burkhardt, например, но не ограничиваясь этим, толуолового растворителя при повышенной температуре (например, 80°C) в течение соответствующего времени реакции (например, 10 часов или где-то около).

(2) Гидролиз соединения формулы I-2, приведенной ниже, с получением соединения формулы I-3, приведенной ниже.

Эта стадия представляет собой реакцию гидролиза, в которой соединение формулы I-2, приведенное ниже, подвергают взаимодействию с гидроксидом лития. Растворитель, используемый в при этом, может представлять собой растворитель, обычно используемый в реакциях гидролиза, например, смешанный растворитель тетрагидрофуран-водный раствор и т.д., и соединение формулы I-3 может быть получено путем реакции при подходящей температуре (например, комнатной температуре) в течение соответствующего времени реакции (например, примерно 24 часа) с получением соединения формулы I-3.

(3) Получение соединения формулы I-5, приведенной ниже, путем осуществления взаимодействия соединения формулы I-3, приведенной ниже, с соединением формулы I-4, приведенной ниже.

Эта стадия представляет собой реакцию, в которой соединение формулы I-3, имеющее группу карбоновой кислоты, взаимодействует с соединением формулы I-4, имеющим аминогруппу, с образованием амидной связи. Растворитель, используемый на этой стадии, может представлять собой растворитель, обычно используемый в реакциях образования амидной связи, например растворитель DMF и т.п., и реакцию можно проводить при подходящей температуре (например, комнатной температуре).

(4) Гидролиз соединения формулы I-5, приведенной ниже, с получением соединения формулы I-6, приведенной ниже.

Эта стадия представляет собой реакцию гидролиза, в которой соединение формулы I-5, приведенной ниже, взаимодействует с гидроксидом лития. Растворитель, используемый на этой стадии, может представлять собой растворитель, обычно используемый в реакциях гидролиза, такой как смешанный растворитель тетрагидрофуран-водный раствор и т.п., а соединение формулы I-6 может быть получено путем реакции при подходящей температуре (например, комнатной температуре) в течение соответствующего времени реакции (например, примерно 24 часа) с получением соединения формулы I-6.

(5) Окисление соединения формулы I-6, приведенной ниже.

Эта стадия представляет собой реакцию снятия защитной группировки, в которой соединение формулы I-6, приведенное ниже, в форме диметилхитала обрабатывается кислотой с получением кетонового соединения. Растворитель, используемый на этой стадии, может представлять собой любой растворитель, обычно используемый в реакциях снятия защитной группировки, такой как, но не ограничиваясь этим, водный раствор хлористоводородной кислоты.

<Формула I-1>

<Формула I-c>

<Формула I-2>

<Формула I-3>

<Формула I-4>

<Формула I-5>

<Формула I-6>

В приведенной выше формуле, R¹, R² и R³ имеют значения, как определено в формуле I, приведенной выше.

В одном варианте осуществления соединение формулы I-1 может быть получено путем взаимодействия соединения формулы I-a, приведенной ниже, с соединением формулы I-b, приведенной ниже.

<Формула I-a>

<Формула I-b>

В приведенной выше формуле определение R² такое же, как и в формуле I, приведенной выше.

Схемы 1-64 примеров проиллюстрированы как способ получения соединения формулы I по настоящему изобретению, и описанный выше процесс получения не ограничивает способ получения соединения формулы I по настоящему изобретению. Очевидно, что способы получения на схемах 1-64 являются лишь иллюстративными и могут быть легко модифицированы специалистами в данной области в зависимости от конкретного заместителя.

Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения заболевания, связанного с каспазой, включающую соединение, производное изоиндолинона, представленное формулой I, его гидрат, его сольват или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ профилактики или лечения заболевания, связанного с каспазой, включающий: введение соединения, производного изоиндолинона, представленного вышеприведенной формулой I, его гидрата, его сольвата или его фармацевтически приемлемой соли, субъекту, нуждающемуся в этом.

Настоящее изобретение также обеспечивает применение соединения, производного изоиндолинона, представленного приведенной выше формулой I, его гидрата, его сольвата или его фармацевтически приемлемой соли, в получении лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания, связанного с каспазой.

В одном варианте осуществления заболевание, связанное с каспазой, может представлять собой остеоартрит или боль.

Ингибирующую каспазу активность измеряли для соединений, производных изоиндолинона, по настоящему изобретению, и было обнаружено, что они проявляли ингибирующую каспазу активность либо за счет снижения интерлейкина-1β (IL-1β), либо за счет снижения апоптоза.

Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую соединение, производное изоиндолинона, представленное вышеприведенной формулой I, его гидрат, его сольват или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемую добавку.

Добавка может включать фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель, каждый из которых может быть составлен в соответствии с обычными методами в форме лекарственных средств для перорального применения, таких как порошки, гранулы, таблетки, капсулы, суспензии, эмульсии, сиропы, аэрозоли; для местного применения; суппозиторией; и стерильных растворов для инъекций.

Фармацевтически приемлемые носители включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритритол, мальтит, крахмал, аравийскую камедь, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло, и тому подобное. Они также включают разбавители или эксципиенты, такие как наполнители, объемообразующие агенты, связующие, смачивающие агенты, разрыхлители и поверхностно-активные вещества. Твердые лекарственные формы для перорального применения включают таблетки, пилюли, порошки, гранулы, капсулы и тому подобное, которые могут включать по меньшей мере один эксципиент, такой как крахмал, карбонат кальция, сахароза, лактоза, желатин и тому подобное, и могут включать скользящие вещества, такие как стеарат магния и тальк. Жидкие препараты для перорального применения могут включать суспензии, растворы для перорального применения, эмульсии, сиропы и тому подобное, и могут включать разбавители, такие как вода и жидкий парафин, смачивающие вещества, подсластители, ароматизаторы, консерванты и тому подобное. Парентеральные препараты включают стерилизованные водные растворы, неводные растворители, суспензии, эмульсии, кремы, лиофилизированные препараты и суппозитории; неводные растворители и суспензии включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и сложные эфиры для инъекций, такие как этилолат. Субстратами для суппозиториев могут быть витепсол, макрогол, твин 61, камедь какао, лауриновая камедь, глицерожелатин и тому подобное.

Дозировка активного ингредиента в фармацевтической композиции по настоящему изобретению зависит от состояния и веса пациента, степени заболевания, состава активного ингредиента, пути и продолжительности введения и может быть соответствующим образом скорректирована в зависимости от пациента. Например, активный ингредиент можно вводить в дозе 0,0001-1000 мг/кг в день, предпочтительно 0,01-100 мг/кг, и эту дозу можно вводить один раз или несколькими разделенными дозами в день. Кроме того, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может включать 0,001-90% активного ингредиента по массе в расчете на общую массу композиции.

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить млекопитающим, таким как крысы, мыши, домашний скот и человек, различными путями, например, перорально, дермально, интраперитонально, ректально или внутривенной, внутримышечной, подкожной, внутриматочной инъекции в твердую мозговую оболочку или внутрицеребровентрикулярной инъекцие.

Далее настоящее изобретение описано более подробно с помощью примеров и экспериментальных примеров. Однако следующие примеры и экспериментальные примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения, и объем настоящего изобретения ими не ограничивается.

Пример 1. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-фенилизоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 1>

Стадия 1-1 (Способ A): 6-Броминдолин-1-он (500 мг, 2,36 ммоль) растворяли в N, N-диметилформамиде (10 мл), затем добавляли натрий гидроген гидрид (99,4 мг, 2,59 ммоль) и метил (R)-2-бромбутаноат (426,86 мг, 2,36 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции, добавляли воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 1-1 (324 мг, 44%).

Стадия 1-2 (Способ B): Соединение 1-1 (150 мг, 0,48 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (10 мл), затем добавляли фенилбороновую кислоту (70,3 мг, 0,58 ммоль), 2 М водный раствор карбоната калия (0,6 мл, 1,2 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (27,76 мг, 0,024 ммоль) и перемешивали при 110°C в течение 10 часов. После завершения реакции, добавляли насыщенный солевой раствор (50 мл), и экстрагировали этилацетатом (50 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 1-2 (108 мг, 72%).

Стадия 1-3 (Способ C): Соединение 1-2 (108 мг, 0,349 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране/воде (3/1, 150 мл), затем добавляли гидроксид лития (33,44 мг, 1,39 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции, тетрагидрофурановый растворитель концентрировали и удаляли, подкисляли добавлением 1 н. водного раствора хлористоводородной кислоты (pH 1), и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 1-3 (99 мг, 96%).

Стадия 1-4 (Способ D): Соединение 1-3 (75 мг, 0,254 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл), затем добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (48,68 мг, 0,254 ммоль), соединения 1-4, синтезированные известными способами (WO2006/090997) (59. 53 мг, 0,267 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (34,32 мг, 0,254 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламин (DIPEA, 39,48 мг, 0,305 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции, добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (30 мл) и экстрагировали дихлорметаном (20 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, а затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевых соединений 1-5 (93 мг, 73%).

Стадия 1-5 (Способ E): Соединение 1-5 (93 мг, 0,186 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране/воде (3/1, 50 мл), затем добавляли гидроксид лития (17,8 мг, 0,743 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции, тетрагидрофурановый растворитель удаляли концентрированием, затем подкисляли добавлением 1 н. водного раствора хлористоводородной кислоты (pH 1), и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевых соединений 1-6 (69 мг, 78%).

Стадия 1-6 (Способ F): Соединение 1-6 (69 мг, 0,146 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (2 мл), затем добавляли 6 н водный раствор хлористоводородной кислоты (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, а затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 1 (17 мг, 27%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,96 (c, 1H), 8,01-7,82 (м, 2H), 7,80-7,61 (м, 3H), 7,61-7,20 (м, 4H), 4,86-4,31 (м, 6H), 2,79-2,22 (м, 2H), 2,23-1,64 (м, 2H), 0,94-0,67(м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₄FN₂O₅ (MH⁺): 427,2, найдено: 427,2.

Пример 2. 5-фтор-3-(2-(6-(нафталин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 2>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и нафталин-1-бороновую кислоту, целевое соединение 2 (21 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,88-8,76 (м, 1H), 8,01 (дд, J=13,73, 8,24 Гц, 2H), 7,81-7,65 (м, 4H), 7,64-7,43 (м, 4H), 5,28-4,39 (м, 6H), 2,74-2,42 (м, 2H), 2,21-1,70 (м, 2H), 0,95-0,70 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₇H₂₆FN₂O₅ (MH⁺): 477,2, найдено: 477,2.

Пример 3. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 3>

Стадия 3-1 (Способ B'): Соединение 1-1 (150 мг, 0,481 ммоль) растворяли в толуоле (10 мл) в герметичной пробирке, затем добавляли карбонат цезия (172,22 мг, 0,529 ммоль), ацетат палладия (1,08 мг, 0,005 ммоль), рацемический-2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил (59,84 мг, 0,096 ммоль), пирролидин (47,84 мг, 0,673 ммоль), герметично закрывали и перемешивали при 80°C в течение 10 часов. После завершения реакции, разбавляли насыщенным солевым раствором (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, а затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 3-1 (109 мг, 75%).

Стадия 3-2: Используя соединение 3-1 (109 мг, 0,36 ммоль), целевое соединение 3-2 (91 мг, 86%) получали с использованием способа C.

Стадия 3-3 (Способ D'): После растворения соединения 3-2 (91 мг, 0,316 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл), добавляли HATU (144 мг, 0,379 ммоль) и DIPEA (61,33 мг, 0,473 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционному раствору добавляли соединение 1-4 (73,97 мг, 0,331 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции, добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, а затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 3-3 (111 мг, 71%). [HATU(1-[Бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат, Гексафторфосфат Азабензотриазол Тетраметилуроний), DIPEA (N, N-диизопропилэтиламин)]

Стадия 3-4/3-5: Используя соединение 3-3 в качестве исходного вещества, целевое соединение 3 (31 мг) получали с использованием способа E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, MeOD) d 12,46 (c, 1H), 8,81-8,44 (м, 1H), 7,40-7,20 (м, 1H), 6,84-6,60 (м, 2H), 5,35-3,87 (м, 6H), 3,40-3,09 (м, 4H), 2,78-2,34 (м, 2H), 2,05-1,57 (м, 6H), 0,90-0,65 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₇FN₃O₅ (MH⁺): 420,2, найдено: 420,2.

Пример 4. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 4>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и пиридин-3-бороновую кислоту, целевое соединение 4 (31 мг) получали с использованием способа B/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,84 (c, 1H), 8,59-8,47 (м, 1H), 8,19-7,81 (м, 4H), 7,72 (т, J=7,02 Гц, 1H), 7,55 (т, J= 7,63 Гц, 1H), 5,26-4,03 (м, 6H), 2,96-2,54 (м, 2H), 2,20-1,81 (м, 2H), 1,07-0,79 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₂₃FN₃O₅ (MH⁺): 428,2, найдено: 428,1.

Пример 5. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(1H-пиразол-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 5>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол, целевое соединение 5 (21 мг) получали с использованием способа B/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,86 (c, 2H), 8,89-8,61 (м, 1H), 8,18 (c, 2H), 7,98-7,73 (м, 2H), 7,58 (д, J=7,63 Гц, 1H), 5,32-4,28 (м, 6H), 2,84-2,37 (м, 2H), 2,10-1,68 (м, 2H), 0,93-0,70 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₀H₂₂FN₄O₅ (MH⁺) 417,1, найдено: 417,1.

Пример 6. 5-фтор-3-(2-(6-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 6>

Стадия 6-1 (Способ B''): После растворения соединения 1-1 (150 мг, 0,481 ммоль) в толуоле (15 мл), карбонат цезия (172,22 мг, 0,529 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (27,76 мг, 0,024 ммоль) и рацемический-2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил (59,84 мг, 0,096 ммоль), трет-бутил-1-пиперазинкарбоксилат (47,84 мг, 0,673 ммоль) добавляли, герметично закрывали и перемешивали при 80°C в течение 10 часов. После завершения реакции, разбавляли насыщенным солевым раствором (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 6-1 (120 мг, 60%).

Стадия 6-2: После растворения соединения 6-1 (120 мг, 0,287 ммоль) в этилацетате (5 мл), добавляли раствор хлористого водорода (4,0 M раствор 1,4-диоксана, 2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции, реакционную смесь концентрировали с получением целевого соединения 6-2 (95 мг, 93%) в виде белого твердого вещества.

Стадия 6-3: Соединение 6-2 (95 мг, 0,268 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл), затем добавляли метансульфонилхлорид (33,83 мг, 0,295 ммоль) и триметиламин (54,33 мг, 0,537 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции, смесь разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 6-3 (88 мг, 82%).

Стадия 6-4/6-5/6-6/6-7: Используя соединение 6-3 (88 мг, 0,223 ммоль), целевое соединение 6 (21 мг) получали с использованием способа C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,72-8,58 (м, 1H), 7,46 (дд, J=8,39, 4,20 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,39 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=5,72, 2,29 Гц, 1H), 5,36-4,29 (м, 6H), 3,55-3,11 (м, 8H), 2,93 (c, 3H), 2,59-2,34 (м, 2H), 2,03-1,62 (м, 2H), 0,90-0,64 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₃₀FN₄O₇S (MH⁺): 513,2, найдено: 513,2.

Пример 7. 5-фтор-3-(2-(6-(1-(метилсульфонил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 7>

Стадия 7-1: Используя соединение 1-1 и (150 мг, 0,48 ммоль), трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-3,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (178,3 мг, 0,58 ммоль), целевое соединение 7-1 (124 мг, 62%) получали с использованием способа B.

Стадия 7-2: Соединение 7-1 (124 мг, 0,297 ммоль) растворяли в этилацетате (5 мл), затем добавляли раствор хлористого водорода (4,0 M раствор 1,4-диоксана, 2 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции, целевое соединение 7-2 (99 мг, 95%) получали концентрированием.

Стадия 7-3: Соединение 7-2 (99 мг, 0,282 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл), затем добавляли метансульфонилхлорид (35,56 мг, 0,31 ммоль) и триэтиламин (57,11 мг, 0,564 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции, разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 7-3 (89 мг, 80%).

Стадия 7-4/7-5/7-6/7-7: Используя соединение 7-3 (89 мг, 0,227 ммоль), целевое соединение 7 (19 мг) получали с использованием способа C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,49 (c, 1H), 8,87-8,69 (м, 1H), 7,79-7,50 (м, 3H), 6,31 (c, 1H), 5,34-4,23 (м, 6H), 3,88 (c, 2H), 3,40 (т, J=5,72 Гц, 2H), 2,95 (c, 3H), 2,87-2,35 (м, 4H), 2,10-1,64 (м, 2H), 0,93-0,66 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₉FN₃O₇S (MH⁺): 510,2, найдено: 510,1.

Пример 8. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 8>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он, целевое соединение 8 (19 мг) получали с использованием способа B/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 10,80-10,64 (м, 2H), 8,80-8,64 (м, 1H), 7,90-7,74 (м, 2H), 7,70-7,58 (м, 1H), 7,28 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,20 (c, 1H), 7,01 (д, J= 7,93 Гц, 1H), 5,25-4,32 (м, 6H), 2,70-2,39 (м, 2H), 2,14-1,64 (м, 2H), 0,95-0,68 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₃FN₄O₆ (MH⁺): 483,2, найдено: 483,0.

Пример 9. 3-(2-(6-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 9>

Используя в качестве исходного вещества соединение 1-1, целевое соединение 9 (23 мг) получали с использованием способа C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,51 (c, 1H), 8,89-8,67 (м, 1H), 7,94-7,73 (м, 2H), 7,65-7,50 (м, 1H), 5,36-4,23 (м, 6H), 2,90-2,34 (м, 2H), 2,10-1,67 (м, 2H), 0,94-0,71 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₁₇H₁₉BrFN₂O₅ (MH⁺): 429,0, найдено: 429,0.

Пример 10. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-(трифторметил)-5,6-дигидроимидазо[1,2-a]пиразин-7(8H)-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 10>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 2-(трифторметил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2-а]пиразин, целевое соединение 10 (31 мг) получали с использованием способа B'/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,58 (c, 1H), 8,92-8,66 (м, 1H), 7,79 (c, 1H), 7,64-7,14 (м, 3H), 5,39-3,67 (м, 12H), 2,97-2,24 (м, 2H), 2,14-1,62 (м, 2H), 1,05-0,60 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₆F₄N₅O₅ (MH⁺): 540,2, найдено: 540,1.

Пример 11. 5-фтор-3-(2-(6-(нафталин-1-иламино)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 11>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 1-нафтиламин, целевое соединение 11 (18 мг) получали с использованием способа B'/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,18 (c, 1H), 8,55-8,41 (м, 1H), 8,19 (д, J=8,77 Гц, 1H), 8,12 (д, J=8,39 Гц, 1H), 7,92 (д, J=8,01 Гц, 1H), 7,61 (д, J=8,01 Гц, 1H), 7,56-7,39 (м, 4H), 7,35 (д, J=7,25 Гц, 1H), 7,28 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,14 (c, 1H), 4,77-4,17 (м, 6H), 2,70-2,25 (м, 2H), 1,95-1,58 (м, 2H), 0,79 (т, J=7,25 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₇H₂₇FN₃O₅ (MH⁺): 492,2, найдено: 492,1.

Пример 12. 5-фтор-3-(2-(6-(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота]

<Схема 12>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил)бороновую кислоту, целевое соединение 12 (32 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 7,99-7,72 (м, 4H), 7,67-7,48 (м, 3H), 5,34-4,23 (м, 6H), 3,34 (c, 3H), 2,91-2,40 (м, 2H), 2,15-1,68 (м, 2H), 0,96-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₅F₂N₂O₇S (MH⁺): 523,1, найдено: 523,1.

Пример 13. 5-фтор-3-(2-(6-(6-метоксипиридин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 13>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (6-метоксипиридин-3-ил)бороновую кислоту, целевое соединение 13 (31 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,53 (c, 1H), 8,54 (c, 1H), 8,10 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,95-7,80 (м, 2H), 7,74-7,50 (м, 2H), 6,93 (д, J=8,54 Гц, 1H), 5,35-4,22 (м, 6H), 3,90 (c, 3H), 2,91-2,37 (м, 2H), 2,14-1,67 (м, 2H), 0,94--0,73 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₅FN₃O₆ (MH⁺): 458,2, найдено: 458,1.

Пример 14. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(4-(трифторметил)фенил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 14>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (4-(трифторметил)фенил)бороновую кислоту, целевое соединение 14 (28 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,93 (c, 1H), 8,18-7,37 (м, 8H), 5,33-4,30 (м, 6H), 2,78-2,23 (м, 2H), 2,25-1,62 (м, 2H), 1,00-0,66 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₃F₄N₂O₅ (MH⁺): 495,1, найдено: 495,1.

Пример 15. 3-(2-(6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 15>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан, целевое соединение 15 (18 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 7,79-7,69 (м, 1H), 7,67-7,50 (м, 3H), 6,86 (c, 1H), 4,87-3,78 (м, 6H), 3,75-3,54 (м, 2H), 3,49-3,27 (м, 2H), 1,85-1,61 (м, 2H), 1,62-1,44 (м, 2H), 1,41-1,28 (м, 2H), 0,97-0,73 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₂₆FN₂O₆ (MH⁺): 433,2, найдено: 433,1.

Пример 16. 3-(2-(6-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 16>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и бензо[b]тиофен-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 16 (23 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,55 (c, 1H), 8,17-8,07 (м, 1H), 8,01-7,73 (м, 6H), 7,53-7,41 (м, 2H), 5,37-4,41 (м, 6H), 2,94-2,36 (м, 2H), 2,16-1,61 (м, 2H), 1,00-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₄FN₂O₅S (MH⁺): 483,1, найдено: 483,1.

Пример 17. 4-(2-(1-((1-карбокси-4-фтор-3-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксобутан-2-ил)-3-оксоизоиндолин-5-ил)бензойная кислота

<Схема 17>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (4-(трет-бутоксикарбонил)фенил)бороновую кислоту, целевое соединение 17 (18 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,97 (c, 2H), 8,24-7,58 (м, 8H), 5,03-4,26 (м, 6H), 2,91-2,34 (м, 2H), 2,19-1,63 (м, 2H), 1,08-0,69 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₄FN₂O₇ (MH⁺): 471,1, найдено: 471,1.

Пример 18. 3-(2-(6-(4-ацетилфенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 18>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (4-ацетилфенил)бороновую кислоту, целевое соединение 18 (29 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,19-7,31 (м, 8H), 5,33-4,13 (м, 6H), 2,62 (c, 3H), 2,84-2,18 (м, 2H), 2,12-1,33 (м, 2H), 0,95-0,68 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₆FN₂O₆ (MH⁺): 469,2, найдено: 469,1.

Пример 19. 3-(2-(6-(4-(бензо[d]изотиазол-3-ил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 19>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 3-(пиперазин-1-ил)бензо[d]изотиазол, целевое соединение 19 (22 мг) получали с использованием способа B''/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,20-8,03 (м, 2H), 7,66-7,42 (м, 4H), 7,41-7,30 (м, 1H), 7,28-7,20 (м, 1H), 5,31-4,10 (м, 6H), 3,62 (c, 4H), 3,44 (c, 4H), 2,87-2,34 (м, 2H), 2,14-1,67 (м, 2H), 0,96-0,73(м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₈H₃₁FN₅O₅S (MH⁺): 568,2, найдено: 568,2.

Пример 20. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(6-(трифторметил)пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 20>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (6-(трифторметил)пиридин-3-ил)бороновую кислоту, целевое соединение 20 (31 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,89 (c, 1H), 9,18 (c, 1H), 8,83 (c, 1H), 8,47 (д, J=6,10 Гц, 1H), 8,18-8,06 (м, 2H), 8,01 (д, J=8,01 Гц, 1H), 7,80 (д, J=7,63 Гц, 1H), 5,40-4,40 (м, 6H), 2,85-2,39 (м, 2H), 2,16-1,72 (м, 2H), 0,98-0,77(м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₂F₄N₃O₅ (MH⁺): 496,1, найдено: 496,1.

Пример 21. (3-(2-(6-(2-аминопиримидин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 21>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин, целевое соединение 21 (17 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,57 (c, 1H), 8,87-8,69 (м, 1H), 8,64 (c, 2H), 7,98-7,76 (м, 2H), 7,67 (д, J=7,93 Гц, 1H), 6,82 (c, 2H), 5,35-4,20 (м, 6H), 2,95-2,37 (м, 2H), 2,14-1,68 (м, 2H), 0,98-0,71 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₃FN₅O₅ (MH⁺): 444,2, найдено: 444,1.

Пример 22. 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 22>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и бензофуран-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 22 (24 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,50 (c, 1H), 8,87-8,73 (м, 1H), 8,50 (c, 1H), 8,06-7,79 (м, 2H), 7,93 (д, J=6,71 Гц, 1H), 7,80-7,73 (м, 1H), 7,69 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,46-7,35 (м, 2H), 5,33-4,25 (м, 6H), 2,92-2,36 (м, 2H), 2,11-1,70 (м, 2H), 0,96-0,74 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₄FN₂O₆ (MH⁺): 467,2, найдено: 467,1.

Пример 23. 3-(2-(6-(2-аминопиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 23>

Используя в качестве исходных веществ соединение 1-1 и (2-аминопиридин-4-ил)бороновую кислоту, целевое соединение 23 (4 мг) получали с использованием способа B/C/D/E/F последовательно.

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₂₄FN₄O₅ (MH⁺): 443,2, найдено: 443,0.

Пример 24. 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 24>

Используя в качестве исходных веществ 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 24 (28 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,76 (c, 1H), 8,27 (д, J=4,58 Гц, 1H), 7,96 (д, J=4,58 Гц, 1H), 7,91-7,72 (м, 2H), 7,68-7,47 (м, 2H), 5,39-4,22 (м, 6H), 3,87 (c, 3H), 2,91-2,39 (м, 2H), 2,15-1,69 (м, 2H), 1,02-0,74 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₄FN₄O₅ (MH⁺): 431,2, найдено: 431,2.

Пример 25. 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1H-пиразол-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 25>

Используя в качестве исходных веществ 1-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 25 (21 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,87-8,68 (м, 1H), 8,03 (т, J=8,01 Гц, 2H), 7,75 (д, J=2,29 Гц, 1H), 7,65-7,47 (м, 1H), 6,87-6,68 (м, 1H), 5,28-4,27 (м, 6H), 3,89 (c, 3H), 2,77-2,25 (м, 2H), 2,17-1,62 (м, 2H), 1,00-0,58 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₄FN₄O₅ (MH⁺): 431,2, найдено: 431,2.

Пример 26. 3-(2-(6-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 26>

Используя в качестве исходных веществ бензофуран-5-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 26 (19 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,82-8,63 (м, 1H), 8,11-7,85 (м, 4H), 7,77-7,54 (м, 3H), 7,01 (c, 1H), 5,28-4,23 (м, 6H), 2,76-2,25 (м, 2H), 2,13-1,63 (м, 2H), 0,95-0,62 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₂FN₂O₆ (MH⁺): 467,2, найдено: 467,1.

Пример 27. 3-(2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 27>

Используя в качестве исходных веществ (2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)бороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 27 (21 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,79-8,63 (м, 1H), 7,82 (т, J=9,16 Гц, 2H), 7,68-7,55 (м, 1H), 7,22-7,12 (м, 2H), 6,95 (д, J=8,01 Гц, 1H), 5,27-4,32 (м, 6H), 4,28 (c, 4H), 2,77-2,29 (м, 2H), 2,16-1,62 (м, 2H), 0,93-0,62 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₆FN₂O₇ (MH⁺): 485,2, найдено: 485,2.

Пример 28. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(тиофен-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 28>

Используя в качестве исходных веществ тиофен-3-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 28 (27 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, MeOD) d 8,20-7,34 (м, 7H), 5,26-4,22 (м, 6H), 2,95-2,35 (м, 2H), 2,31-1,75 (м, 2H), 1,11-0,73 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₂FN₂O₅S (MH⁺): 433,1, найдено: 433,1.

Пример 29. 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 29>

Используя в качестве исходных веществ 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изохинолин и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 29 (31 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,90 (c, 1H), 9,35 (c, 1H), 8,45 (c, 1H), 8,21 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,86-7,68 (м, 5H), 7,63-7,47 (м, 2H), 5,32-4,21 (м, 6H), 2,90-2,36 (м, 2H), 2,14-1,71 (м, 2H), 0,99-0,73 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,2.

Пример 30. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-6-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 30>

Используя в качестве исходных веществ соединение хинолин-6-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 30 (29 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,92 (c, 1H), 8,99-8,89 (м, 1H), 8,55-8,39 (м, 2H), 8,26-8,08 (м, 4H), 7,89-7,74 (м, 1H), 7,72-7,51 (м, 2H), 5,39-4,36 (м, 6H), 2,95-2,39 (м, 2H), 2,20-1,68 (м, 2H), 1,00-0,76 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,1.

Пример 31. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 31>

Используя в качестве исходных веществ 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)хинолин и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 31 (27 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,99 (c, 1H), 8,98 (c, 1H), 8,13 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,93-7,75 (м, 4H), 7,68-7,48 (м, 4H), 5,36-4,51 (м, 6H), 2,89-2,38 (м, 2H), 2,18-1,78 (м, 2H), 1,03-0,76 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 477,5.

Пример 32. 3-(2-(6-(бензо[d]тиазол-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 32>

Используя в качестве исходных веществ 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан2-ил)бензо[d]тиазол и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 32 (24 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 9,46 (c, 1H), 8,61-8,38 (м, 2H), 8,28 (д, J=8,24 Гц, 1H), 8,09-8,00 (м, 2H), 7,87 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,75 (д, J=7,93 Гц, 1H), 5,54-4,24 (м, 6H), 2,18-1,66 (м, 2H), 0,97-0,76 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₃FN₃O₅S (MH⁺): 484,1, найдено: 483,4

Пример 33. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиразоло[1,5-a]пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 33>

Используя в качестве исходных веществ 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиридин и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 33 (20 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,94 (c, 1H), 8,76 (д, J=7,02 Гц, 1H), 8,47 (c, 1H), 8,05-7,89 (м, 3H), 7,70 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,37 (т, J=7,02 Гц, 1H), 6,98 (т, J=6,41 Гц, 1H), 5,35-4,28 (м, 6H), 2,93-2,41 (м, 2H), 2,16-1,66 (м, 2H), 1,00-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₄FN₄O₅ (MH⁺): 467,2, найдено: 467,1.

Пример 34. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 34>

Используя в качестве исходных веществ хинолин-5-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 34 (31 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,98 (c, 1H), 8,95 (д, J=3,66 Гц, 1H), 8,18 (д, J=8,24 Гц, 1H), 8,10 (д, J=8,54 Гц, 1H), 7,91-7,71 (м, 4H), 7,62 (д, J=7,02 Гц, 1H), 7,53 (дд, J=8,39, 3,66 Гц, 1H), 5,32-4,52 (м, 6H), 2,91-2,41 (м, 2H), 2,18-1,72 (м, 2H), 1,00-0,78 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,2.

Пример 35. 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-8-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 35>

Используя в качестве исходных веществ изохинолин-8-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 35 (19 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 9,14 (c, 1H), 8,59-8,46 (м, 1H), 8,05 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,96-7,72 (м, 6H), 7,66 (д, J=7,63 Гц, 1H), 5,35-4,47 (м, 6H), 2,85-2,38 (м, 2H), 2,16-1,75 (м, 2H), 0,98-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,2.

Пример 36. 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 36>

Используя в качестве исходных веществ изохинолин-5-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 36 (23 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 9,42 (c, 1H), 8,50 (д, J=5,80 Гц, 1H), 8,24-8,18 (м, 1H), 7,84-7,73 (м, 6H), 7,65 (д, J=4,88 Гц, 1H), 5,34-4,50 (м, 6H), 2,84-2,30 (м, 2H), 2,17-1,78 (м, 2H), 0,96-0,80 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,1.

Пример 37. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 37>

Используя в качестве исходных веществ хинолин-3-илбороновую кислоту и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 37 (25 мг) получали с использованием способа B/A/C/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,60 (c, 1H), 9,32 (c, 1H), 8,78 (c, 1H), 8,35-7,97 (м, 4H), 7,95-7,49 (м, 4H), 5,40-4,28 (м, 6H), 2,94-2,31 (м, 2H), 2,19-1,69 (м, 2H), 1,00-0,61 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 478,2, найдено: 478,2.

Пример 38. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)ацетамидо)пентановая кислота

<Схема 38>

Используя в качестве исходных веществ метил 2-бромацетат и 6-бромизоиндолин-1-он, целевое соединение 38 (23 мг) получали с использованием способа A/B/C/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,23 (c, 1H), 10,72 (c, 2H), 8,41 (c, 1H), 7,98-7,77 (м, 2H), 7,66 (c, 1H), 7,37-7,14 (м, 2H), 7,11-6,94 (м, 1H), 5,48-3,94 (м, 7H), 3,59-2,69 (м, 2H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₂₀FN₄O₆ (MH⁺): 455,1, найдено: 455,1.

Пример 39. 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 39>

Используя в качестве исходных веществ соединение 38-1 и бензофуран-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 39 (33 мг) получали с использованием способа B/C'/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,93 (c, 1H), 8,52 (c, 1H), 8,12-7,85 (м, 3H), 7,83-7,50 (м, 4H), 7,49-7,31 (м, 2H), 5,45-3,93 (м, 3H), 4,59 (c, 2H), 4,32 (c, 2H), 2,95-2,25 (м, 2H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₀FN₂O₆ (MH⁺): 439,1, найдено: 439,1.

Пример 40. 3-(2-(6-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 40>

Используя в качестве исходных веществ 6-бромизоиндолин-1-он и бензотиофен-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 40 (30 мг) получали с использованием способа B/A/C'/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,52 (c, 1H), 8,15-8,02 (м, 1H), 8,00-7,70 (м, 3H), 7,68-7,38 (м, 5H), 5,41-5,06 (м, 1H), 4,80-4,16 (м, 6H), 2,97-2,38 (м, 2H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₀FN₂O₅S (MH⁺): 455,1, найдено: 455,1.

Пример 41. 3-(2-(6-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 41>

Используя в качестве исходных веществ соединение 6-бромизоиндолин-1-он и бензофуран-5-илбороновую кислоту, целевое соединение 41 (29 мг) получали с использованием способа B/A/C'/D/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,91 (c, 1H), 8,05 (д, J=2,14 Гц, 1H), 8,01 (c, 1H), 7,98-7,93 (м, 2H), 7,77-7,51 (м, 4H), 7,06-7,00 (м, 1H), 5,41-3,96 (м, 7H), 2,98-2,41 (м, 2H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H₂₀FN₂O₆ (MH⁺): 439,1, найдено: 439,1.

Пример 42. 3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 42>

Стадия 42-1: Используя в качестве исходных веществ метил 5-бром-2-метилбензоат и (400 мг, 1,75 ммоль) (2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)бороновую кислоту (330 мг, 1,83 ммоль), целевое соединение 42-1 (444 мг, 89%) получали с использованием способа B.

Стадия 42-2 (Способ G): После растворения соединения 42-1 (450 мг, 1,58 ммоль) в хлороформе (60 мл), добавляли N-бромсукцинимид и (NBS, 333,55 мг, 1,87 ммоль) AIBN (25 мг, 0,16 ммоль) и перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 24 часов. После завершения реакции, реакционный раствор промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), органический слой сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией с получением целевого соединения 42-2 (345 мг, 60%).

Стадия 42-3 (Способ H): Соединение 42-2 (345 мг, 0,95 ммоль) растворяли в ацетонитриле (40 мл), затем добавляли трет-бутил L-валинат (172,8 мг, 0,997 ммоль) и DIPEA (147,3 мг, 1,14 ммоль) и перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 12 часов. После завершения реакции, растворитель концентрировали перегонкой при пониженном давлении и экстрагировали насыщенным солевым раствором (50 мл) и этилацетатом (40 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Концентрат растворяли в дихлорметане (10 мл), добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции, смесь концентрировали, разбавляли насыщенным солевым раствором (30 мл), и экстрагировали этилацетатом (40 мл x 2). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением целевого соединения 42-3 (199 мг, 57%).

Стадия 42-4/42-5: Используя соединение 42-3 (150 мг, 0,408 ммоль), целевое соединение 42 (44 мг) получали с использованием способа D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,45 (c, 1H), 9,05-8,91 (м, 1H), 7,90-7,76 (м, 2H), 7,70-7,59 (м, 1H), 7,25-7,12 (м, 2H), 6,95 (дд, J=8,09, 2,14 Гц, 1H), 5,34-4,34 (м, 6H), 4,28 (c, 4H), 2,90-2,46 (м, 2H), 2,35-2,17 (м, 1H), 1,00-0,69 (м, 6H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₈FN₂O₇ (MH⁺): 499,2, найдено: 499,1.

Пример 43. 5-фтор-3-((S)-3-метил-2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 43>

Используя в качестве исходных веществ метил 5-бром-2-метилбензоат и пирролидин, целевое соединение 43 (66 мг) получали с использованием способа B'/G/H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,96 (c, 1H), 7,92-7,29 (м, 1H), 7,23-6,69 (м, 2H), 5,57-4,24 (м, 6H), 4,10-3,11 (м, 4H), 3,05-2,45 (м, 3H), 2,42-1,85 (м, 4H), 1,54-0,64 (м, 6H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₂H₂₉FN₃O₅ (MH⁺): 434,2, найдено: 434,1.

Пример 44. 3-((S)-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 44>

Используя в качестве исходных веществ метил 5-бром-2-метилбензоат и бензофуран-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 44 (71 мг) получали с использованием способа B/G/H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 9,06-8,84 (м, 1H), 8,50 (c, 1H), 8,12-7,89 (м, 3H), 7,84-7,65 (м, 2H), 7,52-7,34 (м, 2H), 5,37-4,44 (м, 6H), 2,86-2,46 (м, 2H), 2,39-2,16 (м, 1H), 1,13-0,67 (м, 6H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₆H₂₆FN₂O₆ (MH⁺): 481,2, найдено: 481,1.

Пример 45. 5-фтор-3-((S)-3-метил-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 45>

Используя в качестве исходных веществ метил 5-бром-2-метилбензоат и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3-дигидро-2H-бензо[d]имидазол-2-он, целевое соединение 45 (54 мг) получали с использованием способа B/G/H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,43 (c, 1H), 10,72 (д, J=9,46 Гц, 2H), 9,05-8,91 (м, 1H), 7,79-7,76 (м, 2H), 7,70-7,61 (м, 1H), 7,28 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,20 (c, 1H), 7,01 (д, J=7,93 Гц, 1H), 5,32-4,21 (м, 6H), 2,92-2,44 (м, 2H), 2,35-2,16 (м, 1H), 1,06-0,70 (м, 6H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₆FN₄O₆ (MH⁺): 497,2, найдено: 497,1.

Пример 46. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)пропанамидо)пентановая кислота

<Схема 46>

Используя в качестве исходных веществ соединение 43-2 и трет-бутил L-аланин 1 гидрохлорид, целевое соединение 46 (24 мг) получали с использованием способа H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,81 (c, 1H), 7,36 (д, J=8,01 Гц, 1H), 6,80 (дд, J=8,39, 2,29 Гц, 1H), 6,75-6,67 (м, 1H), 5,41-4,12 (м, 6H), 3,57-2,94 (м, 4H), 2,81-2,27 (м, 2H), 1,98 (c, 4H), 1,47 (д, J=7,63 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₀H₂₅FN₃O₅ (MH⁺): 406,2, найдено: 406,1.

Пример 47. 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)пропанамидо)пентановая кислота

<Схема 47>

Используя в качестве исходных веществ соединение 45-2 и трет-бутил L-аланин 1 гидрохлорид, целевое соединение 47 (31 мг) получали с использованием способа H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 12,91 (c, 1H), 10,72 (c, 2H), 7,90-7,76 (м, 3H), 7,66 (дд, J=7,63, 3,81 Гц, 1H), 7,29 (д, J=8,39 Гц, 1H), 7,20 (c, 1H), 7,01 (дд, J=8,01, 4,20 Гц, 1H), 5,39-4,18 (м, 6H), 2,85-2,27 (м, 2H), 1,57-1,47 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₃H_22FN₄O₆ (MH⁺): 469,1, найдено: 469,1.

Пример 48. 3-(2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пропанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 48>

Используя в качестве исходных веществ соединение 42-2 и трет-бутил L-аланин 1 гидрохлорид, целевое соединение 48 (19 мг) получали с использованием способа H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 7,91-7,74 (м, 2H), 7,64 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,25-7,12 (м, 2H), 6,95 (д, J=8,01 Гц, 1H), 4,99-3,94 (м, 6H), 4,28 (c, 4H), 2,63-2,22 (м, 2H), 1,51 (д, J=7,63 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₄FN₂O₇ (MH⁺): 471,1, найдено: 471,1.

Пример 49. 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пропанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 49>

Используя в качестве исходных веществ соединение 44-2 и трет-бутил L-аланин 1 гидрохлорид, целевое соединение 49 (29 мг) получали с использованием способа H/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) d 8,52 (c, 1H), 8,07-7,50 (м, 6H), 7,47-7,29 (м, 2H), 5,41-4,23 (м, 6H), 2,96-2,17 (м, 2H), 1,54 (д, J=7,25 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₂FN₂O₆ (MH⁺): 453,1, найдено: 453,1.

Пример 50. ( S )-3-(( S )-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота

<Схема 50>

Стадия 50-1: 5-Бром-2-метилбензоат (25 г, 109,14 ммоль) растворяли в хлороформе (100 мл), затем добавляли NBS и (19,424 г, 109,14 ммоль) дибензоилпероксид (1,322 г, 5,46 ммоль) и перемешивали при 75°C в течение 1 ч. Реакционный раствор промывали водой (100 мл), органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 50-1. Этот концентрат использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.

Стадия 50-2: Соединение 50-1 растворяли в ацетонитриле (300 мл), затем добавляли [(1S)-1-трет-бутоксикарбонилпропил]аммоний хлорид (21,287 г, 108,78 ммоль) и DIPEA (56,84 мл, 326,33 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 5 часов. После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли этилацетатом (500 мл), затем последовательно промывали водой (300 мл), насыщенным водным раствором хлорида аммония (300 мл) и насыщенным солевым раствором (300 мл), органический слой сушили над ангидридом магния, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией с получением целевого соединения 50-2 (25,1 г, 65% за 2 стадии).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₁₆H₂₀BrNO₃Na (MNa⁺): 376,1, найдено: 376,1.

Стадия 50-3: Используя в качестве исходных веществ соединение 50-2 и бензофуран-2-илбороновую кислоту, целевое соединение 50-3 получали с использованием способа B.

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₅NO₄Na (MNa⁺): 414,2, найдено: 414,2.

Стадия 50-4 (Способ I): Соединение 50-3 (0,456 г, 1,17 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (20 мл), затем добавляли раствор хлористого водорода (4 N HCl в диоксане, 20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов. После завершения реакции, растворитель концентрировали, добавляли диэтиловый эфир (20 мл) и этилацетат (20 мл), и полученное твердое вещество фильтровали и сушили с получением целевого соединения 50-4 (0,365 г, 84%).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₀H₁₇NO₄Na (MNa⁺): 358,1, найдено: 358,1.

Стадия 50-5: Соединение 50-5 синтезировали известным способом (WO2008/068615 A1).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₁₈H₁₆F₄NO₄ (MH⁺): 386,1, найдено: 386,1.

Стадия 50-6 (Способ D'): Используя соединение 50-4 и соединение 50-5, целевое соединение 50-6 получали с использованием способа D'.

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₈H₃₁F₄N₂O₇ (MH⁺): 703,2, найдено: 703,2.

Стадия 50-7 (Способ J): Соединение 50-6 (0,499 г, 0,71 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (7 мл), добавляли уксусную кислоту (0,7 мл) и 10% палладий на углероде (0,053 г, 0,05 ммоль), и смесь перемешивали в присутствии водорода в течение 12 часов. После завершения реакции, палладий фильтровали через фильтр Целит, фильтрат концентрировали и разделяли с помощью ВЭЖХ с получением целевого соединения 50 (0,328 мг, 75,5%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ12,50 (c, 1H), 8,88 (дд, J=11,7, 7,5 Гц, 1H), 8,54 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,08-8,01 (м, 2H), 8,00-7,93 (м, 1H), 7,79 (дд, J=8,5, 1,8 Гц, 1H), 7,77-7,71 (м, 1H), 7,65-7,51 (м, 1H), 7,45 (дтд, J=15,9, 7,3, 1,4 Гц, 2H), 5,36-5,16 (м, 2H), 4,88-4,81 (м, 1H), 4,81-4,65 (м, 2H), 4,59 (дд, J=17,9, 3,0 Гц, 1H), 4,07 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 2,82 (ддд, J=16,9, 5,9, 1,7 Гц, 1H), 2,69-2,59 (м, 1H), 2,03 (c, 2H), 1,93-1,80 (м, 1H), 1,22 (т, J=7,1 Гц, 1H), 0,91 (т, J=7,3 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₁H₂₅F₄N₂O₇ (MH⁺): 613,2, найдено: 613,2.

Пример 51. ( S )-3-(( S )-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота

<Схема 51>

Используя в качестве исходных веществ соединение 50-2, целевое соединение 51 получали с использованием способа B/I/D'/J последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,51 (c, 1H), 8,85 (дд, J=11,2, 7,5 Гц, 1H), 7,91-7,82 (м, 2H), 7,68 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,66-7,52 (м, 1H), 7,23 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,00 (д, J=8,2 Гц, 1H), 5,27 (д, J=4,1 Гц, 2H), 4,81 (дд, J=9,7, 5,7 Гц, 1H), 4,74-4,62 (м, 2H), 4,53 (д, J=17,7 Гц, 1H), 4,33 (c, 4H), 4,07 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 2,80 (дд, J=16,9, 6,0 Гц, 1H), 2,62 (дд, J=16,9, 7,0 Гц, 1H), 2,03 (c, 2H), 1,84 (дкв, J=9,5, 7,2 Гц, 1H), 1,21 (т, J=7,1 Гц, 1H), 0,88 (т, J=7,3 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₁H₂₇H₄N₂O₈ (MH⁺): 631,17, найдено: 631,2.

Пример 52. ( S )-4-оксо-3-(( S )-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота

<Схема 52>

Используя в качестве исходных веществ соединение 50-2 и (2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)бороновую кислоту, целевое соединение 52 получали с использованием способа B/I/D'/J последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,48 (c, 1H), 10,73 (д, J=7,7 Гц, 2H), 8,84 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,89-7,80 (м, 2H), 7,66 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,55 (ддд, J=11,0, 7,3, 3,6 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=8,1, 1,8 Гц, 1H), 7,21 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,03 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,25 (д, J=4,2 Гц, 2H), 4,79 (дд, J=9,6, 5,7 Гц, 1H), 4,73-4,60 (м, 2H), 4,51 (д, J=17,6 Гц, 1H), 4,03 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 2,78 (дд, J=16,9, 5,9 Гц, 1H), 2,60 (дд, J=16,9, 7,0 Гц, 1H), 2,00-1,92 (м, 2H), 1,87-1,77 (м, 1H), 1,18 (т, J=7,1 Гц, 1H), 0,86 (т, J=7,3 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₀H₂₅F₄N₄O₇ (MH⁺): 629,2, найдено: 629,2.

Пример 53. ( S )-4-оксо-3-(( S )-2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота

<Схема 53>

Используя в качестве исходных веществ соединение 50-2 и пирролидин, целевое соединение 53 получали с использованием способа B'/I/D'/J последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,11 (c, 1H), 7,47 (c, 1H), 7,33 (дд, J=15,5, 8,3 Гц, 1H), 7,15-7,04 (м, 1H), 7,04-6,91 (м, 1H), 6,72 (c, 1H), 4,95 (c, 1H), 4,68 (д, J=17,7 Гц, 2H), 4,41 (дд, J=17,3, 11,7 Гц, 1H), 4,12 (кв, J=7,2 Гц, 1H), 3,39 (кв, J=5,5 Гц, 4H), 2,84-2,69 (м, 1H), 2,09 (h, J=4,5 Гц, 6H), 1,96-1,83 (м, 1H), 1,26 (т, J=7,1 Гц, 1H), 0,96 (тд, J=7,4, 3,7 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₇H₂₈F₄N₃O₆ (MH⁺): 566,2, найдено: 566,2.

Пример 54. ( R )-3-(( S )-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановая кислота

<Схема 54>

Стадия 54-1: Соединение 54-1 синтезировали известным способом (WO2008/068615 A1).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₁₈H₁₆F₄NO₄ (MH⁺): 386,1, найдено: 386,1.

Стадия 54-2: Используя в качестве исходных веществ соединение 51-2 и соединение 54-1, целевое соединение 54 получали с использованием способа D'/J последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12,51 (c, 1H), 8,85 (дд, J=11,2, 7,5 Гц, 1H), 7,92-7,82 (м, 2H), 7,68 (дд, J=7,8, 1,8 Гц, 1H), 7,58 (дддд, J=18,1, 10,8, 8,9, 5,3 Гц, 1H), 7,23 (дд, J=8,1, 1,4 Гц, 2H), 7,00 (д, J=8,1 Гц, 1H), 5,35-5,14 (м, 2H), 4,80 (ддд, J=12,4, 9,6, 5,9 Гц, 1H), 4,76-4,63 (м, 2H), 4,54 (дд, J=17,8, 3,1 Гц, 1H), 4,33 (c, 4H), 4,07 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 2,81 (ддд, J=16,9, 5,9, 2,2 Гц, 1H), 2,63 (дт, J=16,8, 7,1 Гц, 1H), 2,03 (c, 2H), 1,84 (c, 1H), 1,22 (т, J=7,1 Гц, 1H), 0,89 (т, J=7,3 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₁H₂₇H₄N₂O₈ (MH⁺): 631,2, найдено 631,2.

Пример 55. 3-(( S )-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 55>

Используя соединение 51-2 и 1-4, целевое соединение 55 получали с использованием способа D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=12,51 (c, 1H), 8,78 (дд, J=10,8, 7,3 Гц, 1H), 7,92-7,76 (м, 2H), 7,69-7,60 (м, 1H), 7,20 (дд, J=8,1, 2,0 Гц, 2H), 7,02-6,90 (м, 1H), 5,32-5,05 (м, 1H), 4,88-4,56 (м, 3H), 4,55-4,49 (м, 1H), 4,49-4,34 (м, 1H), 4,29 (c, 4H), 2,91-2,67 (м, 1H), 2,58 (ддд, J=16,9, 7,3, 5,9 Гц, 1H), 1,96 (д, J=17,8 Гц, 1H), 1,81 (дп, J=15,0, 7,1 Гц, 1H), 0,94-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₀H₂₅F₄N₄O₇ (MH⁺): 485,2, найдено 485,2.

Пример 56. 5-фтор-4-оксо-3-(( S )-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 56>

Используя соединение 52-2 и 1-4, целевое соединение 56 получали с использованием способа D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=12,51 (c, 1H), 10,72 (д, J=7,3 Гц, 2H), 8,96-8,31 (м, 1H), 7,85 (д, J=11,4 Гц, 2H), 7,67 (дд, J=8,3, 3,9 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,21 (c, 1H), 7,03 (д, J=8,1 Гц, 1H), 5,36-5,06 (м, 1H), 4,91-4,57 (м, 3H), 4,51 (д, J=17,8 Гц, 2H), 2,78 (д, J=17,1 Гц, 1H), 2,65-2,55 (м, 1H), 1,89 (д, J=62,7 Гц, 2H), 0,87 (квт, J=9,1, 6,4 Гц, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₃₀H₂₅F₄N₄O₇ (MH⁺): 483,2, найдено 483,2.

Пример 57. 3-(( S )-2-(5-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 57>

Стадия 57-1: 4-Бром-2-метилбензоат (10 г, 43,65 ммоль) растворяли в хлороформе (50 мл), затем добавляли NBS (7,77 г, 43,65 ммоль) и дибензоилпероксид (0,528 г, 2,18 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 75°C в течение 1 ч. Реакционный раствор промывали водой (100 мл), органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением целевого соединения 50-1. Этот концентрат использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.

Стадия 57-2: Соединение 57-1 растворяли в ацетонитриле (150 мл) и добавляли [(1S)-1-трет-бутоксикарбоилпропил]аммония хлорид (8,541 г, 43,65 ммоль) и DIPEA (22,81 мл, 130,95 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 5 часов. После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли этилацетатом (300 мл), затем последовательно промывали водой (100 мл), насыщенным водным раствором хлорида аммония (300 мл) и насыщенным солевым раствором (300 мл), органический слой сушили над ангидридом магния, фильтровали, концентрировали и разделяли колоночной хроматографией с получением целевого соединения 50-2 (10,4 г, 67% за 2 стадии).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm)=7,74-7,73(м, 1H), 7,64-7,61 (м, 2H), 4,99 (м, 1H), 4,61-4,36 (м, 2H), 2,16-1,84 (м, 2H), 1,49 (c, 9H), 0,97-0,94 (м, 3H).

Стадия 57-3: Используя в качестве исходных веществ соединение 57-2 и бензофуран-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 57-3 получали с использованием способа B.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm)=7,99-9,94 (м, 1H), 7,89-7,84 (м, 2H), 7,77-7,75 (м, 2H), 7,60-7,58 (м, 1H), 7,49-7,35 (м, 2H), 5,05-5,00 (м, 1H), 4,74-4,43 (м, 2H), 2,23-1,87 (м, 2H), 1,48 (c, 9H), 1,01-0,97 (м, 3H)

Стадия 57-4 (Способ I): Путем реакции соединения 57-3 способом I, получали целевое соединение 57-4.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,08-8,07 (м, 1H), 8,01-7,99 (м, 1H), 7,92-7,90 (м, 1H), 7,81-7,66 (м, 5H), 4,78-4,68 (м, 1H), 4,62-4,48 (м, 2H), 2,13-1,82 (м, 2H), 0,92-0,85 (м, 3H).

Стадия 57-5 (Способ D'): Используя соединение 57-4 и соединение 1-4, целевое соединение 57-5 получали с использованием способа D'.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm)=7,95-7,51 (м, 7H), 6,8 (c, 1H), 6,66-6,60 (м, 1H), 4,87-4,05 (м, 9H), 3,36-3,08 (м, 6H), 2,75-2,65 (м, 1H), 2,52-2,45 (м, 1H), 2,23-2,08 (м, 1H), 1,27-0,93 (м, 6H).

Стадия 57-6 (Способ E): Реакцией соединения 57-5 способом E, получали целевое соединение 57-6.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,41-7,51 (м, 7H), 7,05 (c, 1H), 4,86-4,25 (м, 6H), 3,34-3,23 (м, 6H), 2,63-2,45 (м, 2H), 2,03-1,71 (м, 2H), 0,84-0,82 (м, 3H).

Стадия 57-7 (Способ F): Реакцией соединения 57-6 способом F, получали целевое соединение 57.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,87-8,73 (м, 1H), 8,50 (c, 1H), 8,06-7,93 (м, 2H), 7,83-7,75 (м, 1H), 7,80-7,73 (м, 1H), 7,46-7,35 (м, 2H), 5,33-4,25 (м, 6H), 2,92-2,36 (м, 2H), 2,11-1,70 (м, 2H), 0,96-0,74 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₄FN₂O₆ (MH⁺): 467,2, найдено: 467,1.

Пример 58. 3-(( S )-2-(5-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 58>

Используя соединение 57-2 и (2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)бороновую кислоту, целевое соединение 58 получали с использованием способа B/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,85-8,66 (м, 1H), 7,83-7,82 (м, 1H), 7,71 (c, 2H), 7,23-7,20 (м, 2H), 6,99-6,97 (м, 1H), 5,27-4,32 (м, 6H), 4,28 (c, 4H), 2,77-2,29 (м, 2H), 2,16-1,62 (м, 2H), 0,93-0,62 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₆FN₂O₇ (MH⁺): 485,4 найдено: 485

Пример 59. 3-(( S )-2-(5-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 59>

Используя соединение 57-2 и бензотиофен-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 59 получали с использованием способа B/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,79-8,72 (м, 1H), 8,13-8,10 (м, 1H), 7,97-7,96 (м, 2H), 7,86-7,75 (м, 2H), 7,71-7,68 (м, 1H), 7,48-7,46 (м, 2H), 5,37-4,41 (м, 6H), 2,54-2,46 (м, 2H), 2,16-1,61 (м, 2H), 1,00-0,75 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₄FN₂O₅S (MH⁺): 483,1, найдено: 483,1

Пример 60. 3-(( S )-2-(5-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 60>

Используя соединение 57-2 и бензофуран-3-илбороновую кислоту, целевое соединение 60 получали с использованием способа B/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,80-8,72 (м, 1H), 8,11-7,85 (м, 3H), 7,77-7,54 (м, 4H), 7,04 (c, 1H), 5,28-4,23 (м, 6H), 2,66-2,59 (м, 2H), 2,03-1,71 (м, 2H), 0,87-0,82 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₅H₂₃FN₂O₆ (MH⁺): 467,2, найдено: 467,1.

Пример 61. 5-фтор-3-(( S )-2-(5-(нафталин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановая кислота

<Схема 61>

Используя соединение 57-2 и нафталин-1-бороновую кислоту, целевое соединение 61 получали с использованием способа B/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,75-8,69 (м, 1H), 8,09 (м, 2H), 7,91-7,77 (м, 2H), 7,64-7,43 (м, 6H), 5,28-4,39 (м, 6H), 2,74-2,42 (м, 2H), 2,21-1,70 (м, 2H), 0,85-0,70 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₇H₂₆FN₂O₅ (MH⁺): 477,2, найдено: 477,2.

Пример 62. 5-фтор-4-оксо-3-(( S )-2-(1-оксо-5-(2-(трифторметил)-5,6-дигидроимидазо[1,2-a]пиразин-7(8H)-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 62>

Используя соединение 57-2 и 2-(трифторметил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2-а]пиразин, целевое соединение 62 получали с использованием способа B'/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,67-8,59 (м, 1H), 7,80 (c, 1H), 7,57-7,45 (м, 1H), 7,23-7,18 (м, 2H), 5,39-3,67 (м, 12H), 2,14-1,62 (м, 2H), 1,05-0,60 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₄H₂₆F₄N₅O₅ (MH⁺): 540,2, найдено: 540,1.

Пример 63. 3-(( S )-2-(5-(4-(бензо[d]изотиазол-3-ил)пиперазин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановая кислота

<Схема 63>

Используя соединение 57-2 и 3-(пиперазин-1-ил)бензо[d]изотиазол, целевое соединение 63 получали с использованием способа B'/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=8,72-8,64 (м, 1H), 8,20-8,03 (м, 2H), 7,66-7,42 (м, 3H), 7,20-7,15 (м, 2H), 5,31-4,10 (м, 6H), 3,62 (c, 4H), 3,44 (c, 4H), 2,57-2,44 (м, 2H), 1,94-1,67 (м, 2H), 0,83-0,73(м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₈H₃₁FN₅O₅S (MH⁺): 568,2, найдено: 568,2.

Пример 64. 5-фтор-4-оксо-3-(( S )-2-(1-оксо-5-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановая кислота

<Схема 64>

Используя соединение 57-2 и пирролидин, целевое соединение 64 получали с использованием способа B'/I/D'/E/F последовательно.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm)=7,47-7,41 (м, 1H), 6,64-6,59 (м, 2H), 5,13-4,18 (м, 6H), 3,29 (c, 4H), 2,56-2,50 (м, 2H), 2,05-1,65 (м, 6H), 0,821-0,74 (м, 3H).

MS (ESI, LR) Рассчитано для C₂₁H₂₇FN₃O₅ (MH⁺): 420,2, найдено: 420,2.

Экспериментальный пример 1. Оценка активности ингибирования каспазы-1

Для определения активности ингибирования каспазы-1 соединений по настоящему изобретению, полученных в Примере, активность каспазы-1 измеряли с использованием субстрата с прикрепленным к нему флуоресцентным красителем. Флуоресцентный краситель, прикрепленный к субстрату, высвобождается из субстрата каспазой и проявляет флуоресценцию.

Соединение растворяли в DMSO и хранили при -20°С. Ферментативные реакции проводили в буфере, содержащем 50 мМ HEPES (pH 8,0), 50 мМ KCl, 200 мМ NaCl, 10 мМ DTT, 0,1% CHAPS (масс./об.). Инактивацию фермента измеряли в присутствии различных концентраций соединения с использованием флуоресцентного субстрата N-ацетил-Tyr-Val-Ala-Asp-7-амидо-4-трифторметилкумарина (Ac-YVAD-AFC) (Sigma) в концентрации 50 мкМ и 1 единица рекомбинантной человеческой каспазы-1 (Enzo life science). Спектрометр CLARIOstar Plus (BMG Labtech) использовали для измерения скорости реакции в зависимости от времени в диапазоне длин волн 400/505 нм (Ex/Em). Константу скорости ингибирования соединения, k_observance (k_obs), получали из приведенного ниже уравнения 1 и выражали как k_obs/[I] с помощью линейного регрессионного анализа концентрации в зависимости от k_obs. Если значение k_obs/[I] составляет 20 и более, оно обозначается как A, если оно равно 10 и более, но меньше 20, оно обозначается как B, если оно равно 1 и более, но меньше 10, оно обозначается как C, а если оно меньше 1, оно обозначается как D.

<Уравнение 1>

k_obs=-ln(1-A_t/A_max)/t

В приведенном выше уравнении A_t означает скорость ферментативной реакции в момент времени t (мин), а A_max означает максимальную скорость реакции.

В результате, как показано в Таблице 1, было подтверждено, что каждое соединение ингибирует активность каспазы-1, тем самым подтверждая, что соединения по настоящему изобретению являются прямыми ингибиторами каспазы-1.

Экспериментальный пример 2. Измерение провоспалительной активности ингибирования интерлейкина-1β в моноцитарных клетках человека THP-1

Каспаза-1 известна как IL-1β-превращающий фермент (ICE). Активированная каспаза-1 участвует в расщеплении проформы IL-1β с образованием зрелой формы, которая затем секретируется, вызывая воспаление. Поэтому соединения, идентифицированные в экспериментальном примере 1, были протестированы для определения того, влияет ли их активности ингибирования каспазы-1 на выработку IL-1β.

Клетки THP-1 (ATCC) культивировали в питательной среде RPMI 1640 (Hyclone), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS, Gibco) и антибиотики (100 ед/мл пенициллина, 0,1 мг/мл стрептомицина, Cytiva) при температуре 37°C, в условиях 5% CO₂. Культивированные клетки THP-1 высевали в питательную среду до концентрации 3×10⁵ клеток/лунку в 24-луночные планшеты (Celvest), а затем обрабатывали 1 мкМ форбол 12-миристат-13-ацетата (PMA) (Sigma) в течение 24 часов для индуцирования дифференциации. Дифференцированные THP-1 предварительно обрабатывали 10 мкг/мл липополисахарида (LPS из E.coli 0111:B4 (InvivoGen)) в бессывороточной среде RPMI 1640 в течение 24 часов, чтобы вызвать воспалительную реакцию. После удаления LPS, соединения предварительно обрабатывали в течение 1 ч в концентрации 100 нМ в той же среде, затем добавляли 5 мМ ATP (InvivoGen) и инкубировали в течение 24 ч в инкубаторе. Обработанную среду собирали и центрифугировали, количественно определяли IL-1β с использованием набора для иммуноферментного анализа (набор ELISA, R&D system), и поглощение измеряли при 450 нм с использованием спектрометра CLARIOstar Plus. Активность ингибирования обозначали как а, если она составляла 50% и более, b, если она составляла 30% и более, но менее 50%, с, если она составляла 10% и более, но менее 30%, и d, если она была менее 10%.

Как показано в таблице 1, лечение соединениями по настоящему изобретению приводило к снижению уровня IL-1β. Таким образом, авторы изобретения подтвердили способность соединений по настоящему изобретению ингибировать воспаление за счет снижения уровня IL-1β. В частности, поскольку внутриклеточная каспаза-1 участвует в созревании IL-1β, авторы изобретения подтвердили связь с активностью ингибирования каспазы-1, идентифицированной в экспериментальном примере 1 выше.

Экспериментальный пример 3. Измерение активности ингибирования апоптоза в клетках Т-лимфоцитов человека Jurkat

Апоптоз, тип запрограммированной гибели клеток, представляет собой генетически регулируемый путь, который играет важную роль в поддержании клеточного гомеостаза. Обычно он индуцируется либо экзогенным путем через рецепторы апоптоза, либо эндогенным путем через митохондрии. Каспаза-8 и 9, известные как инициаторы, активируются экзогенными и эндогенными факторами, соответственно, и опосредуют гибель клеток путем активации нижестоящей исполнительной каспазы-3. Морфологически апоптоз характеризуется сжатием клеток, фрагментацией ДНК и снижением внутриклеточного ATP.

Для оценки эффекта соединения по настоящему изобретению на апоптоз клетки Jurkat (ATCC) обрабатывали анти-FAS антителом CH-11 (Merck) для индукции апоптоза через рецептор Fas (CD95), который оценивали по количеству внутриклеточного ATP.

Клетки Jurkat культивировали в питательной среде RPMI 1640, содержащей 10% FBS и антибиотики (100 ед/мл пенициллина, 0,1 мг/мл стрептомицина) в условиях 37°C и 5% CO₂. Культивированные клетки высевали в питательную среду до концентрации 8×10⁴ клеток/лунку в 96-луночные планшеты (SPL), предварительно обрабатывали соединением в концентрации 50 нМ в течение 1 часа, а затем обрабатывали 1 мкг/мл анти-FAS антителом в течение 24 часов в инкубаторе. Через 24 ч для измерения ATP использовали набор для анализа люминесценции ATP lite (PerkinElmer) и люминесценцию измеряли при 580 нм с использованием спектрометра CLARIOstar Plus. Если активность ингибирования составляет 30% и более, ее обозначают как а', если она составляет 20% и более, но менее 30%, ее обозначают как b', если она составляет 10% и более, но менее 20%, ее обозначают как c', а если она составляет меньше 10%, ее обозначают как d'.

Как показано в Таблице 1, лечение соединениями уменьшало апоптоз, тем самым подтверждая, что соединения настоящего изобретения эффективны против апоптоза.

[Таблица 1]

	kobs/[I] (мин-1M-1)	% ингибирования
Соединение	Каспаза-1	Секретируемый IL-1β	Апоптоз
1	C	c	b'
2	C	b	c'
3	C	b	b'
4	C	b	c'
5	C	b	c'
6	D	c	c'
7	C	d	NA
8	C	a	c'
9	C	b	a'
10	C	b	c'
11	D	b	NA
12	C	c	NA
13	C	a	b'
14	C	d	NA
15	D	d	NA
16	A	a	b'
17	C	c	NA
18	C	a	c'
19	D	d	NA
20	C	c	NA
21	C	b	NA
22	A	b	c'
23	C	d	NA
24	C	c	NA
25	C	c	NA
26	C	b	a'
27	C	c	a'
28	C	c	NA
29	C	d	d'
30	B	d	d'
31	C	d	NA
32	C	d	NA
33	C	d	NA
34	C	d	NA
35	C	d	NA
36	C	d	NA
37	C	c	d'
38	D	d	d'
39	C	d	d'
40	C	d	d'
41	C	d	d'
42	C	b	a'
43	D	c	NA
44	B	a	b'
45	C	b	c'
46	D	NA	NA
47	C	NA	NA
48	D	NA	NA
49	B	NA	NA
50	B	a	a'
51	B	b	b'
52	A	c	c'
53	C	d	NA
54	C	b	d'
55	C	b	a'
56	B	a	d'
57	C	c	b'
58	C	c	c'
59	D	d	NA
60	D	d	NA
61	D	d	NA
62	D	NA	NA
63	D	NA	NA
64	D	NA	NA

Вышеприведенное описание изобретения приведено только для примера, и специалистам в области, к которой относится настоящее изобретение, будет очевидно, что в раскрытое в настоящем документе изобретение могут быть внесены различные замены и модификации без отступления от сущности изобретения или существенных признаков изобретения. Таким образом, следует понимать, что описанные выше варианты осуществления предназначены только для иллюстрации изобретения и никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения. Например, каждый из компонентов, описанных в отдельной форме, также может быть реализован распределенным образом, и аналогичным образом компоненты, описанные как распределенные, также могут быть реализованы в комбинированной форме.

Объем изобретения обозначен следующими пунктами формулы изобретения. Считается, что значение и объем формулы изобретения, а также все модификации или вариации, производные от их эквивалентов, входят в объем изобретения.

Claims (86)

1. Соединение, производное изоиндолинона, представленное следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемая соль

,

где R¹ представляет собой галоген или С_6-12 арилокси, замещенный 1-5 галогенами;

R² представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью;

R³ представляет собой галоген или Q, Q замещен или незамещен 1-3 независимыми R^a;

Q представляет собой фенил, пиридинил, тетрагидропиридинил, пиразолил, пиримидинил, тиофенил, пирролидинил, нафталенил, хинолинил, изохинолинил, бензофуранил, бензотиазолил, дигидробензодиоксинил, оксо-дигидробензимидазолил, бензотиофенил, пиразолопиридинил или дигидроимидазопиразинил;

R^a представляет собой C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, C_1-6 алкокси, галоген, C_1-6 галогеналкил, CO₂R^b, COR^b, NHR^b, S(О)₂R^b или 5-членный гетероарил, конденсированный с С6 арилом;

R^b представляет собой водород или C_1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью.

2. Соединение, производное изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где R¹ представляет собой F или фенокси, замещенный 1-5 F.

3. Соединение, производное изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где R² представляет собой водород, метил, этил или пропил с прямой или разветвленной цепью.

4. Соединение, производное изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где R³ представляет собой Br или Q, Q представляет собой фенил, пиридинил, тетрагидропиридинил, пиразолил, пиримидинил, тиофенил, пирролидинил, нафталенил, хинолинил, изохинолинил, бензофуранил, бензотиазолил, дигидробензодиоксинил, оксо-дигидробензимидазолил, бензотиофенил, пиразолопиридинил или дигидроимидазопиразинил.

5. Соединение, производное изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где R^a представляет собой метил, метокси, F, трифторметил, карбокси, ацетил, амино или метилсульфонил.

6. Соединение, производное изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где соединение, производное изоиндолинона, представленное формулой I, выбрано из группы, состоящей из:

[1] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-фенилизоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[2] 5-фтор-3-(2-(6-(нафталин-1-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[3] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[4] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[5] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(1Н-пиразол-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[7] 5-фтор-3-(2-(6-(1-(метилсульфонил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-4-оксопентановой кислоты,

[8] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[9] 3-(2-(6-бром-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[10] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(трифторметил)-5,6-дигидроимидазо[1,2-а]пиразин-7(8Н)-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[12] 5-фтор-3-(2-(6-(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[13] 5-фтор-3-(2-(6-(6-метоксипиридин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[14] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(4-(трифторметил)фенил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[16] 3-(2-(6-бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[17] 4-(2-(1-((1-карбокси-4-фтор-3-оксобутан-2-ил)амино)-1-оксобутан-2-ил)-3-оксоизоиндолин-5-ил)пентановой кислоты,

[18] 3-(2-(6-(4-ацетилфенил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[20] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(6-(трифторметил)пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[21] (3-(2-(6-(2-аминопиримидин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[22] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[23] 3-(2-(6-(2-аминопиридин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[24] 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[25] 5-фтор-3-(2-(6-(1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[26] 3-(2-(6-бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[27] 3-(2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[28] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(тиофен-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[29] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-4-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[30] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-6-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[31] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-4-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[32] 3-(2-(6-(бензо[d]тиазол-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[33] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(пиразоло[1,5-а]пиридин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[34] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[35] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-8-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[36] 5-фтор-3-(2-(6-(изохинолин-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[37] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(хинолин-3-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[39] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[40] 3-(2-(6-(бензо[b]тиофен-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[41] 3-(2-(6-(бензофуран-5-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)ацетамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[42] 3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[44] 3-((S)-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-3-метилбутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[45] 5-фтор-3-((S)-3-метил-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксопентановой кислоты,

[47] 5-фтор-4-оксо-3-(2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)пропанамидо)пентановой кислоты,

[49] 3-(2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пропанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[50] (S)-3-((S)-2-(6-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановой кислоты,

[51] (S)-3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановой кислоты,

[52] (S)-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановой кислоты,

[53] (S)-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(пирролидин-1-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-(2, 3,5,6-тетрафторфенокси)пентановой кислоты,

[54] (R)-3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-4-оксо-5-(2,3,5,6-тетрафторфенокси)пентановой кислоты,

[55] 3-((S)-2-(6-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты,

[56] 5-фтор-4-оксо-3-((S)-2-(1-оксо-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)изоиндолин-2-ил)бутанамидо)пентановой кислоты,

[57] 3-((S)-2-(5-(бензофуран-3-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты и

[58] 3-((S)-2-(5-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1-оксоизоиндолин-2-ил)бутанамидо)-5-фтор-4-оксопентановой кислоты.

7. Применение производного соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-6 в получении лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с каспазой.

8. Применение производного соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п. 7, где заболевание, связанное с каспазой, представляет собой остеоартрит или боль.

9. Применение производного соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п. 7, где лечение заболевания, связанного с каспазой, осуществляют посредством снижения уровня IL-1β или уменьшения апоптоза.

10. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, связанного с каспазой, включающая терапевтически эффективное количество соединения, производного изоиндолинона, или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-6 и фармацевтически приемлемую добавку.

11. Способ получения соединения, производного изоиндолинона, представленного формулой I, включающий:

получение соединения формулы I-2 путем осуществления взаимодействия соединения формулы I-1, приведенной ниже, с одним из соединений R³-B(OH)₂, R³-H и формулы I-c, приведенной ниже;

гидролиз соединения формулы I-2, приведенной ниже, с получением соединения формулы I-3, приведенной ниже;

получение соединения формулы I-5, приведенной ниже, путем взаимодействия соединения формулы I-3, приведенной ниже, с соединением формулы I-4, приведенной ниже;

гидролиз соединения формулы I-5, приведенной ниже, с получением соединения формулы I-6, приведенной ниже; и

окисление соединения формулы I-6, приведенной ниже,

,

,

,

,

,

,

,

в приведенных выше формулах R¹, R² и R³ имеют значения, как определено в формуле I в п. 1.

12. Способ по п. 11, где соединение формулы I-1 получают путем взаимодействия соединения формулы I-а, приведенной ниже, с соединением формулы I-b, приведенной ниже,

,

,

,

в приведенных выше формулах R² имеет значение, как определено в формуле I в п. 1.