RU2789670C2

RU2789670C2 - Азотсодержащий гетероциклический амид и его применение для медицинских целей

Info

Publication number: RU2789670C2
Application number: RU2020128593A
Authority: RU
Inventors: Такаки МАЕБА; Коити СУДЗАВА; Масаюки КОТОКУ; Рицуки МАСУО; Даи МОТОДА; Нобутака ЯМАОКА
Original assignee: Джапан Тобакко Инк.
Priority date: 2018-02-01
Filing date: 2019-01-30
Publication date: 2023-02-07

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы [I-a] или формулы [II] или его фармацевтически приемлемой соли, где связь в виде пунктирной линии означает ординарную связь или двойную связь, X¹ означает атом углерода, атом азота или атом кислорода, X² означает атом углерода или атом азота, R^1a означает C_1-4 алкил или C_1-4 алкилкарбонил, R² означает галоген, цианогруппу или C_1-4 алкил, m равно 0 или 1, n равно 0, 1 или 2, если n равно 2, все R² являются одинаковыми или разными, A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶ и A⁷ все независимо выбраны из группы, включающей атом углерода, атом азота и атом кислорода, A⁸ выбран из группы, включающей атом углерода и атом азота, и полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента (а), равно 0, 1, 2 или 3, t равно 0 или 1, r равно 0, 1 или 2 и сумма t и r равна 1 или 2, w равно 0 или 1, R³ и R⁴ все независимо означают водород или C_1-4 алкил; Cy¹ означает (1) (i) C_4-6 циклоалкил или (ii) 4-6-членный насыщенный или частично насыщенный гетероциклил, содержащий один атом азота, C_4-6 циклоалкил и насыщенный или частично насыщенный гетероциклил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбранным из группы, включающей C_1-4 алкил и оксогруппу, или (2) (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, карбоксигруппу, C_1-4 алкил, галоген-C_1-4 алкил и C_3-6 циклоалкил; Cy² означает (1) (i) C_3-6 циклоалкил или (ii) 4-6-членный насыщенный гетероциклил, содержащий 1 или 2 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, и C_3-6 циклоалкил и насыщенный гетероциклил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, гидроксигруппу и C_1-4 алкил, или (2) (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота, и фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксигруппу и C_1-4 алкилсульфонил, и v равно 0 или 1. Также изобретение относится к фармацевтической композиции, обладающей ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, содержащей эффективное количество соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель. Соединения по изобретению предназначены для применения в лечения заболеваний, связанных с ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2. Технический результат - азотсодержащий гетероциклический амид, оказывающий ингибирующее воздействие на пируватдегидрогеназакиназу (PDHK 1 и 2). 23 н. и 23 з.п. ф-лы, 26 табл., 140 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

[0001]

Настоящее изобретение относится к азотсодержащему гетероциклическому амиду и его применению в фармацевтике. Точнее, настоящее изобретение относится к азотсодержащему гетероциклическому амиду или его фармацевтически приемлемой соли, оказывающему ингибирующее воздействие на пируватдегидрогеназакиназу (ниже в настоящем изобретении сокращенно обозначенную, как PDHK), к содержащей его фармацевтической композиции, содержащему его терапевтическому или профилактическому средству для лечения диабета (диабет типа 1, диабет типа 2 и т.п.), синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта и т.п.), сердечной недостаточности (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака или легочной гипертензии или болезни Альцгеймера и т.п.

Уровень техники

[0002]

В ткани для реакций с использованием энергии, таких как биосинтез, активный транспорт, сокращение мышцы и т.п., энергия подается путем гидролиза аденозинтрифосфата (ATP). ATP образуется путем окисления метаболического топлива, которое дает много энергии, такого как глюкоза и свободные жирные кислоты. В окислительных тканях, таких как мышцы, ATP в основном образуется из ацетил-CoA, который входит в цикл лимонной кислоты. Ацетил-CoA образуется путем окисления глюкозы гликолитическим путем или путем (окисления свободной жирной кислоты. Ферментом, который играет главную роль в регулировании продуцирования ацетил-CoA из глюкозы, является пируватдегидрогеназа (ниже в настоящем изобретении сокращенно обозначенная, как PDH). PDH катализирует восстановление никотинамидадениндиноулеотида (NAD) в NADH, одновременно с окислением пировиноградной кислоты в ацетил-CoA и диоксид углерода (например, непатентные документы 1, 2).

[0003]

PDH является полиферментным комплексом, состоящим из трех ферментных компонентов (E1, E2 и E3) и ряда субъединиц, локализованных в митохондриальной матрице. E1, E2 и E3 ответственны за декарбоксилирование пировиноградной кислоты, получение ацетил-CoA и восстановление NAD в NADH соответственно.

Два класса ферментов, обладающих регуляторной функцией, связываются с PDH. Одним является PDHK, который представляет собой протеинкиназу, обладающую специфичностью к PDH. Ее ролью является инактивация субъединицы E1(комплекса PDH фосфорилированием. Другим является PDH фосфатаза, которая является специфической протеинфосфатазой, которая активирует PDH путем дефосфорилирования субъединицы E1α. Доля PDH в его активном (дефосфорилированном) состоянии определяется балансом активности киназы и активности фосфатазы. Активность киназы регулируется с помощью относительной концентрации метаболических субстратов. Например, активность киназы активируется путем увеличения в отношениях NADH/NAD, ацетил-CoA/CoA и ATP/аденозиндифосфат (ADP) и ингибируется пировиноградной кислотой (например, непатентный документ 3).

[0004]

В тканях млекопитающих выявлены 4 типа изозимов PDHK. В частности, PDHK2 экспрессируется в широком диапазоне тканей, включая печень, скелетные мышцы и адипозные ткани, участвующие в метаболизме глюкозы. Кроме того, поскольку PDHK2 проявляет сравнительно высокую чувствительность к активации путем увеличения содержания NADH/NAD или ацетил-CoA/CoA и ингибированию пировиноградной кислотой, предполагается участие в кратковременной регуляции метаболизма глюкозы (например, непатентный документ 4).

[0005]

Кроме того, PDHK1 в больших количествах экспрессируется в сердечной мышце, скелетной мышце, β-клетках поджелудочной железы и т.п.Кроме того, поскольку экспрессия PDHK1 индуцируется путем активации индуцируемого гипоксией фактора (HIF) 1 в ишемическом состоянии, предполагается его участие в ишемических заболеваниях и раковых заболеваниях (например, непатентный документ 5).

[0006]

При заболеваниях, таких как инсулинозависимый (типа 1) диабет, инсулиннезависимый (типа 2) диабет и т.п., окисление липидов промотируется одновременным восстановлением при использовании глюкозы. Это восстановление при использовании глюкозы является одним из факторов, вызывающих гипергликемию. Когда окислительный метаболизм глюкозы уменьшается при диабете типа 1 и диабете типа 2 и ожирении, активность PDH также уменьшается. Это предполагает участие уменьшенной активности PDH в уменьшенном использовании глюкозы при диабете типа 1 и диабете типа 2 (например, непатентные документы 6, 7).

Напротив, печеночный глюконеогенез усиливается при диабете типа 1 и диабете типа 2, что становится одним фактором, вызывающим гипергликемию. Уменьшенная активность PDH приводит к уменьшению концентрации пировиноградной кислоты, что, в свою очередь, повышает доступность молочной кислоты, как субстрата для печеночного глюконеогенеза. Это предполагает возможное участие уменьшенной активности PDH в усиленном глюконеогенезе при диабете типа 1 и диабете типа 2 (например, непатентные документы 8, 9).

Если PDH активируется путем ингибирования PDHK, считается, что скорость окисления глюкозы возрастает.В результате промотируется использованием глюкозы в организме и подавляется печеночный глюконеогенез, в результате чего ожидается, что улучшается протекание гипергликемии при диабете типа 1 и диабете типа 2 (например, непатентные документы 10, 11, 12).

Другим фактором, вносящим вклад в диабет, является нарушенная секреция инсулина,, что, как известно, связано с уменьшенной активностью PDH в β-клетках поджелудочной железы и индукцией PDHK1, 2 и 4 (например, непатентные документы 13, 14).

Кроме того, известно, что продолжительная гипергликемия вследствие диабета вызывает осложнения, такие как диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия и т.п.Тиамин и α-липоевая кислота способствуют активации PDH в качестве коферментов. Показано, что тиамин и α-липоевая кислота или производные тиамина и производные α-липоевой кислоты оказывают многообещающее влияние на лечение осложнения при диабете. Таким образом, предполагается, что активация PDH улучшает протекание осложнения при диабете (например, непатентные документы 15, 16).

[0007]

При ишемических патологических состояниях ограниченное поступление кислорода уменьшает окисление и глюкозы, и жирной кислоты и уменьшает количество ATP, продуцируемого посредством окислительного фосфорилирования в тканях. При отсутствии достаточного количества кислорода содержание ATP поддерживается промотированным анаэробным гликолизом. В результате увеличивается содержание молочной кислоты и снижается внутриклеточный pH. Даже если клетки пытаются поддержать гомеостаз ионов путем потребления энергии, аномально низкое содержание ATP и нарушенная клеточная осмоляльность приводят к гибели клеток. Кроме того, активирующая аденозинмонофосфаткиназа, активированная в ишемическом состоянии, инактивирует ацетил-CoA карбоксилазу путем фосфорилирования. Полное содержание малонил-CoA в ткани уменьшается, поэтому активность карнитинпальмитоилтрансферазы-I увеличивается и окисление жирной кислоты становится более благоприятным, чем окисление глюкозы вследствие появления возможности переноса ацил-CoA в митохондрии. Допускается окисление глюкозы и требуется больше ATP в пересчете на молекулу кислорода, чем при окислении жирных кислот.Поэтому при ишемических патологических состояниях, если метаболизмом энергии становится окисление глюкозы, преобладающее вследствие активации PDH, способность поддерживать содержание ATP считается увеличенной (например, непатентный документ 17).

Кроме того, поскольку активация PDH вызывает окисление пировиноградной кислоты, образовавшейся путем гликолиза, и уменьшает выработку молочной кислоты, суммарное количество протонов в ишемических тканях считается уменьшенным. Соответственно, предполагается, что активация PDH путем ингибирования PDHK действует защищающим образом при ишемических заболеваниях, таких как ишемия сердечной мышцы (например, непатентные документы 18, 19).

[0008]

Считается, что лекарственное средство, которое активирует PDH путем ингибирования PDHK, уменьшает выработку лактата, поскольку оно промотирует метаболизм пирувата. Следовательно, такое лекарственное средство предположительно применимо для лечения гиперлактацидемии, такой как митохондриальное заболевание, митохондриальная энцефалопатия и сепсис (например, непатентный документ 20).

[0009]

В раковых клетках увеличивается экспрессия PDHK1 или 2. В раковых клетках, кроме того уменьшается выработка ATP путем окислительного фосфорилирования в митохондриях и увеличивается выработка ATP путем анаэробного гликолиза в цитоплазме. Активация PDH путем ингибирования PDHK предположительно промотирует окислительное фосфорилирование в митохондриях и увеличивает поступление активного кислорода, что индуцирует апоптоз раковых клеток. Поэтому активация PDH путем ингибирования PDHK применима для лечения раковых заболеваний (например, непатентный документ 21).

[0010]

Легочная гипертензия характеризуется высоким артериальным давлением, вызванным частичным сужением легочной артерии вследствие проходящей в ней промотированной пролиферации клеток. Поэтому при легочной гипертензии предполагается, что активация PDH в клетках легочной артерии промотирует окислительное фосфорилирование в митохондриях, увеличивает поступление активного кислорода и индуцирует апоптоз клеток легочной артерии. Поэтому активация PDH путем ингибирования PDHK считается применимой для лечения легочной гипертензии, например, легочной артериальной гипертензии (например, непатентный документ 22).

[0011]

Выработка энергии и метаболизм глюкозы в головном мозге уменьшаются при болезни Альцгеймера и также уменьшается активность PDH. Если активность PDH уменьшается, то уменьшается образование ацетил CoA. Ацетил CoA используется для выработки ATP в системе транспорта электронов с помощью цикла лимонной кислоты. Ацетил CoA также является исходным веществом для синтеза ацетилхолина, который является одним из нейротрансмиттеров. Поэтому считается, что уменьшенная активность PDH в головном мозге при болезни Альцгеймера приводит к гибели нейронных клеток вследствие уменьшенной выработки ATP. Кроме того, считается, что синтез ацетилхолина, который является траснсмиттером для холинергического нерва, ингибируется и индуцирует нарушение памяти и т.п. Предполагается, что активация PDH в головном мозге увеличивает выработку энергии и синтез ацетилхолина при болезни Альцгеймера. Поэтому активация PDH путем ингибирования PDHK считается применимой для лечения болезни Альцгеймера (например, непатентные документы 23, 24).

[0012]

Показано, что дихлоруксусная кислота, которая является лекарственным средством, активирующим PDH, обеспечивает перспективные воздействия для лечения диабета, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, сердечной недостаточности, гиперлактацидемии, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, заболевания периферической артерии, хронического обструктивного заболевания легких, ракового заболевания и легочной гипертензии (например, непатентные документы 10, 18, 20, 22, 25, 26, 27).

[0013]

Из приведенных выше данных следует, что ингибитор PDHK считается применимым для лечения или профилактики заболеваний, связанных с нарушением использования глюкозы, например, диабета (диабет типа 1, диабет типа 2 и т.п.), синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта и т.п.). Кроме того, ингибитор PDHK считается применимым для лечения или профилактики заболеваний, вызванным ограниченным поступлением энергетических субстратов в ткани, например, при сердечной недостаточности (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга и апоплексии головного мозга. Кроме того, ингибитор PDHK считается применимым для лечения или профилактики митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака, легочной гипертензии и т.п.

[0014]

Поэтому ингибитор PDHK считается применимым для лечения или профилактики диабета (диабет типа 1, диабет типа 2 и т.п.), синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта и т.п.), сердечной недостаточности (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака, легочной гипертензии или болезни Альцгеймера.

Перечень документов

Непатентные документы

[0015]

непатентный документ1: Reed LJ, Hackert ML. Structure-function relationships in dihydrolipoamide acyltransferases. J Biol Chem. 1990 Jun 5; 265(16):8971-4.

непатентный документ2: Patel MS, Roche TE. Molecular biology and biochemistry of pyruvate dehydrogenase complexes. FASEB J. 1990 Nov; 4(14):3224-33.

непатентный документ3: Sugden MC, Holness MJ. Recent advances in mechanisms regulating glucose oxidation at the level of the pyruvate dehydrogenase complex by PDKs. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2003 May; 284(5):E855-62.

непатентный документ4: Bowker-Kinley MM, Davis WI, Wu P, Harris RA, Popov KM. Evidence for existence of tissue-specific regulation of the mammalian pyruvate dehydrogenase complex. Biochem J. 1998 Jan 1; 329 (Pt 1):191-6.

непатентный документ5: Kim JW, Tchernyshyov I, Semenza GL, Dang CV. HIF-1-mediated expression of pyruvate dehydrogenase kinase: a metabolic switch required for cellular adaptation to hypoxia. Cell Metab. 2006 Mar; 3(3):177-85.

непатентный документ6: Morino K, Petersen KF, Dufour S, Befroy D, Frattini J, Shatzkes N, et al. Reduced mitochondrial density and increased IRS-1 serine phosphorylation in muscle of insulin-resistant offspring of type 2 diabetic parents. J Clin Invest. 2005 Dec; 115(12):3587-93.

непатентный документ7: Caterson ID, Fuller SJ, Randle PJ. Effect of the fatty acid oxidation inhibitor 2-tetradecylglycidic acid on pyruvate dehydrogenase complex activity in starved and alloxan-diabetic rats. Biochem J. 1982 Oct 15; 208(1):53-60.

непатентный документ8: Boden G, Chen X, Stein TP. Gluconeogenesis in moderately and severely hyperglycemic patients with type 2 diabetes mellitus. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2001 Jan; 280(1):E23-30.

непатентный документ9: Shangraw RE, Fisher DM. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of dichloroacetate in patients with cirrhosis. Clin Pharmacol Ther. 1999 Oct; 66(4):380-90.

непатентный документ10: Stacpoole PW, Moore GW, Kornhauser DM. Metabolic effects of dichloroacetate in patients with diabetes mellitus and hyperlipoproteinemia. NEngl J Med. 1978 Mar 9; 298(10):526-30.

непатентный документ11: Mayers RM, Leighton B, Kilgour E. PDH kinase inhibitors: anovel therapy for Type II diabetes? Biochem Soc Trans. 2005 Apr; 33(Pt 2):367-70.

непатентный документ12: Jeoung NH, Rahimi Y, Wu P, Lee WN, Harris RA. Fasting induces ketoacidosis and hypothermia in PDHK2/PDHK4-double-knockout mice. Biochem J.2012 May 1; 443(3):829-39.

непатентный документ13: Zhou YP, Berggren PO, Grill V. A fatty acid-induced decrease in pyruvate dehydrogenase activity is an important determinant of beta-cell dysfunction in the obese diabetic db/db mouse. Diabetes. 1996 May; 45(5):580-6.

непатентный документ14: Xu J, Han J, Epstein PN, Liu YQ. Regulation of PDK mRNA by high fatty acid and glucose in pancreatic islets. Biochem Biophys Res Commun. 2006 Jun 9; 344(3):827-33.

непатентный документ15: Benfotiamine. Monograph. Altern Med Rev. 2006 Sep; 11(3):238-42.

непатентный документ16: Vallianou N, Evangelopoulos A, Koutalas P. Alpha-lipoic Acid and diabetic neuropathy. Rev Diabet Stud. 2009 Winter; 6(4):230-6.

непатентный документ17: Ussher JR, Lopaschuk GD. The malonyl CoA axis as a potential target for treating ischaemic heart disease. Cardiovasc Res. 2008 Jul 15; 79(2):259-68.

непатентный документ18: Wargovich TJ, MacDonald RG, Hill JA, Feldman RL, StacpoolePW, Pepine CJ. Myocardial metabolic and hemodynamic effects of dichloroacetate in coronary artery disease. Am J Cardiol. 1988 Jan 1; 61(1):65-70.

непатентный документ19: Taniguchi M, Wilson C, Hunter CA, Pehowich DJ, Clanachan AS, Lopaschuk GD. Dichloroacetate improves cardiac efficiency after ischemia independent of changes in mitochondrial proton leak. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2001 Apr; 280(4):H1762-9.

непатентный документ20: Stacpoole PW, Nagaraja NV, Hutson AD. Efficacy of dichloroacetate as a lactate-lowering drug. J Clin Pharmacol. 2003 Jul; 43(7):683-91.

непатентный документ21: Bonnet S, Archer SL, Allalunis-Turner J, Haromy A, Beaulieu C, Thompson R, et al. A mitochondria-K+channel axis is suppressed in cancer and its normalization promotes apoptosis and inhibits cancer growth. Cancer Cell.2007 Jan; 11(1):37-51.

непатентный документ22: McMurtry MS, Bonnet S, Wu X, Dyck JR, Haromy A, Hashimoto K, et al. Dichloroacetate prevents and reverses pulmonary hypertension by inducing pulmonary artery smooth muscle cell apoptosis. Circ Res. 2004 Oct 15; 95(8):830-40.

непатентный документ23: Saxena U. Bioenergetics breakdown in Alzheimer’s disease: targets for new therapies. Int J Physiol Pathophysiol Pharmacol. 2011; 3(2):133-9.

непатентный документ24: Stacpoole PW. The pyruvate dehydrogenase complex as a therapeutic target for age-related diseases. Aging Cell. 2012 Jun; 11(3):371-7.

непатентный документ25: Marangos PJ, Turkel CC, Dziewanowska ZE, Fox AW. Dichloroacetate and cerebral ischaemia therapeutics. Expert Opin Investig Drugs. 1999 Apr; 8(4):373-82.

непатентный документ26: Calvert LD, Shelley R, Singh SJ, Greenhaff PL, Bankart J, Morgan MD, et al. Dichloroacetate enhances performance and reduces blood lactate during maximal cycle exercise in chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 2008 May 15; 177(10):1090-4.

непатентный документ27: Flavin DF. Non-Hodgkin’s Lymphoma Reversal with Dichloroacetate. J Oncol. Hindawi Publishing Corporation Journal of Oncology Volume 2010, Article ID 414726, 4 pages doi:10.1155/2010/414726.

Сущность изобретения

[0016]

Настоящее изобретение включает следующее.

[0017]

[1] Соединение формулы [I-a] или формулы [11], или его фармацевтически приемлемая соль:

[0018]

[0019]

[0020]

где

связь в виде пунктирной линии означает ординарную связь или двойную связь,

X¹ означает атом углерода, атом азота или атом кислорода,

X² означает атом углерода или атом азота,

R^1a означает C_1-4 алкил или C_1-4 алкилкарбонил,

R² означает галоген, цианогруппу или C_1-4 алкил,

m равно 0 или 1,

n равно 0, 1 или 2, если n равно 2, все R² являются одинаковыми или разными,

A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶ и A⁷ все независимо выбраны из группы, включающей атом углерода, атом азота и атом кислорода, A⁸ выбран из группы, включающей атом углерода и атом азота, и полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента:

[0021]

[0022]

равно 0, 1, 2 или 3,

t равно 0 или 1,

r равно 0, 1 или 2 и сумма t и r равна 1 или 2,

w равно 0 или 1,

R³ и R⁴ все независимо означают водород или C_1-4 алкил,

Cy¹ означает

(1) (i) C_4-6 циклоалкил или (ii) 4- - 6-членный насыщенный или частично насыщенный гетероциклил, содержащий один атом азота, C_4-6 циклоалкил и насыщенный или частично насыщенный гетероциклил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбранным из группы, включающей C_1-4 алкил и оксогруппу, или

(2) (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, карбоксигруппу, C_1-4 алкил, галоген-C_1-4 алкил и C_3-6 циклоалкил,

Cy² означает

(1) (i) C_3-6 циклоалкил или (ii) 4- - 6-членный насыщенный гетероциклил, содержащий 1 или 2 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, и C_3-6 циклоалкил и насыщенный гетероциклил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, гидроксигруппу и C_1-4 алкил, или

(2) (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота, и фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксигруппу и C_1-4 алкилсульфонил, и

v равно 0 или 1.

[0023]

[2] Соединение по параграфу [1], где X¹ означает атом углерода и X² означает атом азота, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0024]

[3] Соединение по параграфу [1] или [2], где в формуле [I-a] полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента:

[0025]

[0026]

где каждый символ является таким, как определено в параграфе [1], равно 2, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0027]

[4] Соединение по любому из параграфов [1] - [3], которое представляет собой соединение формулы [I-b]:

[0028]

[0029]

где каждый символ является таким, как определено в параграфе [1], или его фармацевтически приемлемая соль.

[0030]

[5] Соединение по параграфу [1], где v равно 0, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0031]

[6] Соединение по параграфу [1] или [5], где Cy¹ означает 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, и гетероарил необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, галоген-C_1-4 алкил и C_3-6 циклоалкил, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0032]

[7] Соединение по любому из параграфов [1], [5] и [6], где Cy² означает

(1) C_3-6 циклоалкил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, гидроксигруппу и C_1-4 алкил, или

(2) фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксигруппу и C_1-4 алкилсульфонил, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0033]

[8] Соединение, выбранное из числа следующих формул:

[0034]

[0035]

или его фармацевтически приемлемая соль.

[0036]

[9] Соединение, выбранное из числа следующих формул:

[0037]

.

[0038]

[10] Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

[0039]

[11] Ингибитор PDHK, включающий соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0040]

[12] Ингибитор PDHK1, включающий соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0041]

[13] Ингибитор PDHK2, включающий соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0042]

[14] Средство для лечения или профилактики диабета, синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете, сердечной недостаточности, кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака или легочной гипертензии, средство включает соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0043]

[15] Средство по параграфу [14], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0044]

[16] Средство по параграфу [14], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0045]

[17] Средство по параграфу [14], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0046]

[18] Средство по параграфу [14], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0047]

[19] Способ ингибирования PDHK, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемой соли.

[0048]

[20] Способ лечения или предупреждения заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию, способ включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемой соли.

[0049]

[21] Способ по параграфу [20], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0050]

[22] Способ по параграфу [20], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0051]

[23] Способ по параграфу [20], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0052]

[24] Способ по параграфу [20], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0053]

[25] Применение соединения по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемой соли для продуцирования ингибитора PDHK.

[0054]

[26] Применение соединения по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0055]

[27] Применение по параграфу [26], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0056]

[28] Применение по параграфу [26], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0057]

[29] Применение по параграфу [26], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0058]

[30] Применение по параграфу [26], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0059]

[31] Соединение по любому из параграфов [1] - [9] или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0060]

[32] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [31], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0061]

[33] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [31], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0062]

[34] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [31], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0063]

[35] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [31], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0064]

[36] Продающаяся упаковка, включающая фармацевтическую композицию по параграфу [10] и связанный с ней печатный материал, в печатном материале указано, что фармацевтическую композицию можно использовать для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0065]

[37] Набор, включающий фармацевтическую композицию по параграфу [10] и связанный с ней печатный материал, в печатном материале указано, что фармацевтическую композицию можно использовать для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0066]

[38] Соединение формулы [1] или его фармацевтически приемлемая соль:

[0067]

[0068]

где

R¹ означает C_1-4 алкил,

m равно 0 или 1,

[0069]

[0070]

равно 0, 1 или 2,

t равно 0 или 1,

u равно 0 или 1и сумма t и u равна 1 или 2, и

w равно 0 или 1.

[0071]

[39] Соединение по параграфу [38], где полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента:

[0072]

[0073]

где каждый символ является таким, как определено в параграфе [38], равно 2, или его фармацевтически приемлемая соль.

[0074]

[40] Соединение по параграфу [38], в котором структурная формула фрагмента:

[0075]

[0076]

где каждый символ является таким, как определено в параграфе [38], представляет собой формулу:

[0077]

[0078]

где каждый символ является таким, как определено в параграфе [38], или его фармацевтически приемлемая соль.

[0079]

[41] Соединение, выбранное из числа следующих формул:

[0080]

[0081]

или его фармацевтически приемлемая соль.

[0082]

[42] Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0083]

[43] Ингибитор PDHK, включающий соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0084]

[44] Ингибитор PDHK1, включающий соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0085]

[45] Ингибитор PDHK2, включающий соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0086]

[46] Средство, уменьшающее содержание молочной кислоты, включающее соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0087]

[47] Средство для лечения или профилактики диабета, синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете, сердечной недостаточности, кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака или легочной гипертензии, средство включает соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0088]

[48] Средство по параграфу [47], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0089]

[49] Средство по параграфу [47], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0090]

[50] Средство по параграфу [47], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0091]

[51] Средство по параграфу [47], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0092]

[52] Способ ингибирования PDHK, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемой соли.

[0093]

[53] Способ лечения или предупреждения заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию, способ включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемой соли.

[0094]

[54] Применение соединения по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемой соли для продуцирования ингибитора PDHK.

[0095]

[55] Применение соединения по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0096]

[56] Соединение по любому из параграфов [38] - [41] или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0097]

[57] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [56], где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

[0098]

[58] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [56], где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

[0099]

[59] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [56], где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

[0100]

[60] Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по параграфу [56], где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

[0101]

[61] Продающаяся упаковка, включающая фармацевтическую композицию по параграфу [42] и связанный с ней печатный материал, в печатном материале указано, что фармацевтическую композицию можно использовать для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

[0102]

[62] Набор, включающий фармацевтическую композицию по параграфу [42] и связанный с ней печатный материал, в печатном материале указано, что фармацевтическую композицию можно использовать для лечения или профилактики заболевания, выбранного из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

Описание вариантов осуществления

[0103]

Определения терминов, использующихся в настоящем изобретении, являются следующими.

[0104]

В следующей формуле [I-a]:

[0105]

[0106]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [I-a],

это означает, что R^1a связывается с A¹, A² или A³, и R² связывается с A⁴, A⁵, A⁶ или A⁷. Если n равно 2, два R² могут быть связаны с одним и тем же атомом, выбранным из группы, включающей A⁴, A⁵, A⁶ и A⁷ или могут быть связаны с разными атомами.

[0107]

Приведенная ниже волнистая линия:

[0108]

[0109]

в структуре фрагмента обозначает положение присоединения.

[0110]

В структурной формуле фрагмента:

[0111]

[0112]

"связь в виде пунктирной линии означает ординарную связь или двойную связь" означает, что два кольца, сконденсированные в указанной выше формуле, все являются насыщенным кольцом, частично насыщенным кольцом или ароматическим кольцом.

[0113]

Примеры группы, описывающейся структурной формулой фрагмента:

[0114]

[0115]

в формуле [I-a], включают следующие группы.

[0116]

[0117]

[0118]

В следующей формуле [1]:

[0119]

[0120]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [1],

это означает, что R¹ связывается с A¹, A² или A³, и R² связывается с A⁴, A⁵, A⁶ или A⁷. Если n равно 2, два R² могут быть связаны с одним и тем же атомом, выбранным из группы, включающей A⁴, A⁵, A⁶ и A⁷, или могут быть связаны с разными атомами.

[0121]

В структурной формуле фрагмента:

[0122]

[0123]

[0124]

[0125]

[0126]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [1], включают следующие группы.

[0127]

[0128]

В формуле [11] структурная формула фрагмента:

[0129]

[0130]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [11], указывает группу, в которой Cy¹ и Cy² связаны друг с другом ординарной связью. Примеры группы, описывающейся структурной формулой фрагмента, включают следующие группы.

[0131]

[0132]

"Галоген" означает фтор, хлор, бром или йод. В качестве "галогена" фтор или хлор является предпочтительным.

[0133]

"C_1-4 алкил" означает обладающий линейной цепью или разветвленной цепью алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода. Его примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил. В качестве "C_1-4 алкила" метил является предпочтительным.

[0134]

"Галоген-C_1-4 алкил" означает обладающий линейной цепью или разветвленной цепью алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода и замещенный 1- 5 "галогенами", определенными выше. Если алкил замещен несколькими галогенами, галогены могут быть одинаковыми или разными. Примеры "галоген-C_1-4 алкила" включают фторметил, трифторметил и т.п.В качестве "галоген-C_1-4 алкила" C_1-4 алкил, замещенный 1-3 атомами фтора, является предпочтительным.

[0135]

"C_1-4 алкоксигруппа" означает алкилоксигруппу, в которой алкильным фрагментом является "C_1-4 алкил", определенный выше, и включает, например, метоксигруппу, этоксигруппу, пропоксигруппу, изопропоксигруппу, бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу и трет-бутоксигруппу. В качестве "C_1-4 алкоксигруппы" метоксигруппу является предпочтительным.

[0136]

"C_1-4 алкилкарбонил" означает алкилкарбонил, в котором алкильным фрагментом является "C_1-4 алкил", определенный выше, и включает, например, ацетил, пропаноил, бутаноил, 2-метилпропаноил, пентаноил, 3-метилбутаноил, 2-метилбутаноил и 2,2-диметилпропаноил. В качестве "C_1-4 алкилкарбонила" ацетил является предпочтительным.

[0137]

"C_1-4 алкилсульфонил" означает алкилсульфонил, в котором алкильным фрагментом является "C_1-4 алкил", определенный выше, и включает, например, метансульфонил, этилсульфонил, пропилсульфонил, изопропилсульфонил, бутилсульфонил, изобутилсульфонил, втор-бутилсульфонил и трет-бутилсульфонил. В качестве "C_1-4 алкилсульфонила" метансульфонил является предпочтительным.

[0138]

"C_3-6 циклоалкил" означает 3- - 6-членную моноциклическую углеводородную кольцевую группу и включает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. В качестве "C_3-6 циклоалкила" циклопропил является предпочтительным.

[0139]

"C_4-6 циклоалкил" означает 4- - 6-членную моноциклическую углеводородную кольцевую группу и включает, например, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

[0140]

"4- - 6-Членный насыщенный или частично насыщенный гетероциклил, содержащий один атом азота" означает моноциклическую гетероциклическую группу, содержащую одну вторичную или третичную аминогруппу в кольце, где гетероциклическая группа является насыщенной или частично насыщенной. Примеры гетероциклила включают азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, 1,2-дигидропиридил и т.п.Предпочтительным является азетидинил, пирролидинил или 1,2-дигидропиридил.

[0141]

"5- или 6-Членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода" означает 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, содержащий, кроме атома углерода, 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода. В качестве гетероарила можно отметить фуранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, триазинил и т.п.Гетероарилом предпочтительно является пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пиридил или пиримидинил, более предпочтительно пиразолил или пиридил.

[0142]

"4- - 6-Членный насыщенный гетероциклил, содержащий 1 или 2 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода" означает 4- - 6-членную моноциклическую насыщенную гетероциклическую группу, содержащую, кроме атома углерода, 1 или 2 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода. В качестве гетероциклила можно отметить оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил и т.п.Предпочтительным является тетрагидропиранил, пиперидинил или пиперазинил.

[0143]

"5- или 6-Членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота" означает 5- или 6-членный моноциклический гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота кроме атома углерода. В качестве гетероарила можно отметить пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, триазинил и т.п.Предпочтительным является пиразолил, тетразолил или пиридил.

[0144]

Предпочтительный вариант осуществления соединения формулы [I-a] или формулы [11] описан ниже.

Предпочтительным вариантом осуществления R^1a является метил.

Предпочтительным вариантом осуществления R² является галоген или цианогруппа.

Предпочтительным вариантом осуществления m является 0.

Предпочтительным вариантом осуществления n является 1.

Предпочтительным вариантом осуществления t является 0.

Предпочтительным вариантом осуществления r является 1.

Предпочтительным вариантом осуществления w является 1.

[0145]

Предпочтительным вариантом осуществления комбинации X¹ и X² (X¹, X²) является (атом углерода, атом азота), (атом кислорода, атом углерода) или (атом азота, атом азота).

[0146]

Предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [I-a] является соединение, описывающееся структурной формулой [I-c]:

[0147]

[0148]

где символы в формуле являются такими, как определено в определении указанной выше формулы [I-a].

[0149]

Другим предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [I-a] является соединение, описывающееся структурной формулой [I-d]:

[0150]

[0151]

[0152]

Еще одним предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [I-a] является соединение, описывающееся структурной формулой [1]:

[0153]

[0154]

где символы в формуле являются такими, как определено в определении указанной выше формулы [1].

В формуле [1] R¹ предпочтительно означает C_1-4 алкил, полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента:

[0155]

[0156]

предпочтительно равно 0, 1 или 2, более предпочтительно 2, и u предпочтительно равно 0 или 1.

В формуле [1] предпочтительным вариантом осуществления структурной формулы фрагмента:

[0157]

[0158]

является формула:

[0159]

[0160]

где A¹, A² и A³ все независимо выбраны из группы, включающей атом углерода, атом азота и атом кислорода, полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в указанной выше формуле, равно 0, 1 или 2,

t равно 0 или 1, и

u равно 0 или 1и сумма t и u равна 1 или 2.

[0161]

Предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [11] является соединение, описывающееся структурной формулой [II-a]:

[0162]

[0163]

где R⁵ означает галоген или C_1-4 алкил;

x равно 0 или 1,

кольцо Cy^2-a представляет собой (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота, и фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксигруппу и C_1-4 алкилсульфонил; и

другие символы являются такими, как определено в определении указанной выше формулы [11].

[0164]

Другим предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [11] является соединение, описывающееся структурной формулой [II-b]:

[0165]

[0166]

где R⁶ означает галоген, C_1-4 алкил или циклопропил;

y равно 0, 1 или 2, если y равно 2, каждый R⁶ выбран независимо; и

[0167]

Другим предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [11] является соединение, описывающееся структурной формулой [II-g]:

[0168]

[0169]

где символы в формуле являются такими, как определено в определении указанной выше формулы [11].

[0170]

Другим предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [11] является соединение, описывающееся структурной формулой [II-h]:

[0171]

[0172]

[0173]

Другим предпочтительным вариантом осуществления соединения формулы [11] является соединение, описывающееся структурной формулой [II-i]:

[0174]

[0175]

В формуле [II-g], формуле [II-h] и формуле [II-i] предпочтительным вариантом осуществления v является 0.

[0176]

"Фармацевтически приемлемая соль" может представлять собой любую соль без избыточной токсичности, известную в данной области техники. В частности, можно отметить соли с неорганическими кислотами, соли с органическими кислотами, соли с неорганическими основаниями, соли с органическими основаниями и т.п. Разные формы фармацевтически приемлемых солей хорошо известны в данной области техники и, например, они описаны в следующих публикациях:

(a) Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, p1-19(1977),

(b) Stahl et al., "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002),

(c) Paulekuhn et al., J. Med. Chem., 50, p6665-6672 (2007).

Фармацевтически приемлемую соль соединения формулы [I-a] или формулы [11] можно получить по реакции соединения с неорганической кислотой, органической кислотой, неорганическим основанием или органическим основанием по общеизвестной методике. Фармацевтически приемлемую соль соединения формулы [I-a] или формулы [11] можно получить с половиной молекулы, одной молекулой или двумя или большим количеством молекул кислоты или основания в пересчете на молекулу соединения формулы [I-a] или формулы [11].

[0177]

Примеры соли с неорганической кислотой включают соли с фтористоводородной кислотой, хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, йодистоводородной кислотой, азотной кислотой, фосфорной кислотой и серной кислотой.

Примеры соли с органической кислотой включают соли с уксусной кислотой, адипиновой кислотой, альгиновой кислотой, 4-аминосалициловой кислотой, ангидрометиленлимонной кислотой, бензойной кислотой, бензолсульфоновой кислотой, этилендиаминтетраацетат кальция, камфорной кислотой, камфор-10-сульфоновой кислотой, угольной кислотой, лимонной кислотой, этилендиаминтетрауксусной кислотой, этан-1,2-дисульфоновой кислотой, додецилсерной кислотой, этансульфоновой кислотой, фумаровой кислотой, глюкогептоновой кислотой, глюконовой кислотой, глюкуроновой кислотой, гликолиларсаниловой кислотой, гексилрезорциловой кислотой, гидроксинафтойной кислотой, 2-гидрокси-1-этансульфоновой кислотой, молочной кислотой, лактобионовой кислотой, яблочной кислотой, малеиновой кислотой, миндальной кислотой, метансульфоновой кислотой, метилсерной кислотой, метилазотной кислотой, метиленбис(салициловой кислотой), галактаровой кислотой, нафталин-2-сульфоновой кислотой, 2-нафтойной кислотой, 1,5-нафталиндисульфоновой кислотой, олеиновой кислотой, щавелевой кислотой, памоевой кислотой, пантотеновой кислотой, пектиновой кислотой, пикриновой кислотой, пропионовой кислотой, полигалактуроновой кислотой, салициловой кислотой, стеариновой кислотой, янтарной кислотой, дубильной кислотой, винной кислотой, теоклиновой кислотой, тиоциановой кислотой, трифторуксусной кислотой, п-толуолсульфоновой кислотой, ундекановой кислотой, аспарагиновой кислотой и глутаминовой кислотой.

[0178]

Примеры соли с неорганическим основанием включают соль с литием, натрием, калием, магнием, кальцием, барием, алюминием, цинком, висмутом или аммонием.

Примеры соли с органическим основанием включают соль с ареколином, бетаином, холином, клемизолом, этилендиамином, N-метилглюкамином, N-бензилфенетиламином, трис(гидроксиметил)метиламином, аргинином или лизином.

[0179]

Предпочтительным вариантом осуществления "фармацевтически приемлемой соли" является описанный ниже.

Примеры соли с неорганической кислотой включают соли с хлористоводородной кислотой, азотной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой и бромистоводородной кислотой.

Примеры соли с органической кислотой включают соли со щавелевой кислотой, малеиновой кислотой, лимонной кислотой, фумаровой кислотой, молочной кислотой, яблочной кислотой, янтарной кислотой, винной кислотой, уксусной кислотой, трифторуксусной кислотой, бензойной кислотой, глюкуроновой кислотой, олеиновой кислотой, памоевой кислотой, метансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, п-толуолсульфоновой кислотой и 2-гидрокси-1-этансульфоновой кислотой.

Примеры соли с неорганическим основанием включают соли с натрием, калием, кальцием, магнием и цинком.

Примеры соли с органическим основанием включают соли с трис(гидроксиметил)метиламином, N-метилглюкамином и лизином.

[0180]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемая соль может существовать в виде сольвата. Термин "сольват" относится к соединению формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли, с которыми связана молекула растворителя, и также включает гидраты. Такие сольваты предпочтительно представляют собой фармацевтически приемлемые сольваты и включают, например, гидрат, сольват с этанолом, сольват с диметилсульфоксидом и т.п.соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли.

Конкретные примеры включают полугидрат, моногидрат, дигидрат или моно(этанол)сольват соединения формулы [I-a] или формулы [11] или моногидрат гидрохлорида соединения формулы [I-a] или формулы [11], дигидрат его гидрохлорида и т.п.Такие сольваты можно получить по обычным методикам.

[0181]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде стереоизомера, который следует считать цис/транс-изомером. В этом случае соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде цис-изомера, транс-изомера или смеси цис-изомера и транс-изомера.

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде таутомера. В этом случае соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде отдельного таутомера или смеси таутомеров.

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] может содержать один или большее количество асимметрических атомов углерода. В этом случае соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде одного энантиомера, одного диастереоизомера, смеси энантиомеров или смеси диастереоизомеров.

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде атропоизомера. В этом случае соединение формулы [I-a] или формулы [11] может существовать в виде отдельного атропоизомера или смеси атропоизомеров.

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] может одновременно обладать множеством структурных характеристик, которые приводят к образованию указанных выше изомеров. Кроме того, соединение формулы [I-a] или формулы [11] может содержать указанные выше изомеры в любом отношении.

При отсутствии другой ссылки, такой как примечание и т.п., формулы, химические структуры и названия соединений, приведенные в настоящем описании без указания стереохимической конфигурации, включают все указанные выше изомеры, которые могут существовать.

[0182]

Смесь диастереоизомеров можно разделить на отдельные диастереоизомеры по обычным методикам, таким как хроматография, кристаллизация и т.п. Кроме того, каждый диастереоизомер также можно получить путем использования стереохимически однозначного исходного вещества или по методике синтеза с использованием стереоселективной реакции.

[0183]

Смесь энантиомеров можно разделить на отдельные энантиомеры по методике, хорошо известной в данной области техники.

Например, смесь энантиомеров можно ввести в реакцию с в основном чистым энантиомером, для которого известно, что он является хиральным вспомогательным веществом для получения смеси диастереоизомеров, из которой затем можно выделить диастереоизомер при увеличенном изомерном отношении или в основном чистый отдельный диастереоизомер по обычной методике, такой как фракционированная кристаллизация или хроматография. Добавленное хиральное вспомогательное вещество можно удалить из выделенного диастереоизомера по реакции расщепления и получить желаемый энантиомер.

Кроме того, смесь энантиомеров соединения также можно прямо разделить по хроматографической методике с использованием хиральной твердой фазы, хорошо известной в данной области техники. Альтернативно, один из энантиомеров также можно получить путем использования в основном оптически чистого исходного вещества или стереоселективного синтеза (асимметрическая индукция) прохирального промежуточного продукта с использованием хирального вспомогательного вещества или асимметрического катализатора.

[0184]

Абсолютную стереохимическую конфигурацию можно определить по данным рентгеноструктурного анализа кристалла полученного кристаллического продукта или промежуточного продукта. В этом случае при необходимости можно использовать полученный кристаллический продукт или промежуточный продукт, для которого образовано производное с помощью реагента, содержащего асимметрический центр с известной стереохимической конфигурацией.

[0185]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] можно снабдить изотопной меткой (²H, ³H, ¹⁴C, ³⁵S и т.п.).

[0186]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемая соль предпочтительно представляет собой в основном очищенное соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемую соль. Также предпочтительно, если оно представляет собой соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемую соль, которая очищена до чистоты, составляющей не менее 80%.

[0187]

Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно получить путем надлежащего смешивания подходящего количества соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли по меньшей мере с одним типом фармацевтически приемлемого носителя по методике, известной в области фармацевтических препаратов. Содержание соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтической композиции меняется в зависимости от дозированной формы, дозы и т.п.Оно равно, например, от 0,1 до 100 мас.% от всей композиции.

[0188]

Дозированная форма соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли включает пероральный препарат, такой как таблетка, капсула, гранула, порошок, пастилка, сироп, эмульсия и суспензия или парентеральный препарат, такой как наружный препарат, суппозиторий, препарат для инъекции, глазные капли, назальный препарат и легочный препарат.

[0189]

Примеры "фармацевтически приемлемого носителя" включают разные органические или неорганические вещества-носители, обычно использующиеся в качестве материалов для приготовления препарата, и включают инертный наполнитель, разрыхлитель, связующее, флюидизатор, смазывающее вещество и т.п. для твердых препаратов и растворитель, солюбилизирующий агент, суспендирующий агент, изотонический агент, буферный реагент, успокаивающий агент и т.п.для жидких препаратов и основа, эмульгатор, смачивающий агент, стабилизатор, стабилизирующий агент, диспергирующий агент, пластификатор, регулятор pH, стимулятор абсорбции, желирующий агент, консервант, наполнитель, расторяющий агент, солюбилизирующие агенты, суспендирующий агент и т.п.для полужидких дозированных форм. При необходимости кроме того, также можно использовать добавки, такие как консервант, антиоксидант, окрашивающее вещество, подсластитель и т.п.

[0190]

Примеры "инертного наполнителя" включают лактозу, сахарозу, D-маннит, D-сорбит, кукурузный крахмал, декстрин, микрокристаллическую целлюлозу, кристаллическую целлюлозу, кармеллозу, кальциевую соль кармеллозы, натриевую соль карбоксиметилкрахмала, гидроксипропилцеллюлозу низкой степени замещения, гуммиарабик и т.п.

Примеры "разрыхлителя" включают кармеллозу, кальциевую соль кармеллозы, натриевую соль кармеллозы, натриевую соль карбоксиметилкрахмала, натриевая соль кроскармеллозы, кросповидон, гидроксипропилцеллюлозу низкой степени замещения, гидроксипропилметилцеллюлозу, кристаллическую целлюлозу и т.п.

Примеры "связующего" включают гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, повидон, кристаллическую целлюлозу, сахароза, декстрин, крахмал, желатин, натриевую соль кармеллозы, гуммиарабик и т.п.

Примеры "флюидизатора" включают легкую безводную кремниевую кислоту, стеарат магния и т.п.

Примеры "смазывающего вещества" включают стеарат магния, стеарат кальция, тальк и т.п.

Примеры "растворителя" включают очищенную воду, этанол, пропиленгликоль, макрогол, кунжутное масло, кукурузное масло, оливковое масло и т.п.

Примеры "солюбилизирующих агентов" включают пропиленгликоль, D-маннит, бензилбензоат, этанол, триэтаноламин, карбонат натрия, цитрат натрия и т.п.

Примеры "суспендирующего агента" включают бензалконийхлорид, кармеллозу, гидроксипропилцеллюлозу, пропиленгликоль, повидон, метилцеллюлозу, глицеринмоностеарат и т.п.

Примеры "изотонического агента" включают глюкозу, D-сорбит, хлорид натрия, D-маннит и т.п.

Примеры "буферного реагента" включают гидрофосфат натрия, ацетат натрия, карбонат натрия, цитрат натрия и т.п.

Примеры "успокаивающего агента" включают бензиловый спирт и т.п.

Примеры "основы" включают воду, животные и растительные масла (оливковое масло, кукурузное масло, арахисовое масло, кунжутное масло, касторовое масло и т.п.), низшие спирты (этанол, пропанол, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, фенол и т.п.), высшую жирную кислоту и ее эффир, воска, высший спирт, многоатомный спирт, углеводороды (белое вазелиновое масло, жидкий парафин, парафин и т.п.), гидрофильное вазелиновое масло, очищенный ланолин, абсорбирующую воду мазь, содержащий воду ланолин, гидрофильную мазь, крахмал, пуллулан, гуммиарабик, трагакантовая камедь, желатин, декстран, производное целлюлозы (метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза и т.п.), синтетический полимер (карбоксивиниловый полимер, полиакрилат натрия, поли(виниловый спирт), поливинилпирролидон и т.п.), пропиленгликоль, макрогол (макрогол 200-600 и т.п.) и комбинацию двух или большего количества их типов.

Примеры "консерванта" включают этил-парагидроксибензоат, хлорбутанол, бензиловый спирт, дегидроацетат натрия, сорбиновую кислоту и т.п.

Примеры "антиоксиданта" включают сульфит натрия, аскорбиновую кислоту и т.п.

Примеры "окрашивающего вещества" включают пищенвый красители colors (например, Food Color Red No. 2 или 3, Food Color yellow No. 4 или 5 и т.п.), β-каротин и т.п.

Примеры "подсластителя" включают сахаринат натрия, дикалийглициризинат, аспартам и т.п.

[0191]

Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно вводить перорально или парентерально (местное, ректальное, внутривенное, внутримышечное, подкожное введение и т.п.) млекопитающим, не являющимся людьми (например, мышам, крысам, хомякам, морским свинкам, кроликам, кошкам, собакам, свиньям, жвачным животным, лошадям, овцам, обезьянам и т.п.) и людям. Доза меняется в зависимости от субъекта введения, заболевания, симптома, дозированной формы, пути введения и т.п. Например, суточная доза для перорального введения взрослому пациенту обычно находится в диапазоне примерно от 0,01 мг до 1 г в пересчете на соединение формулы [I-a] или формулы [11] в качестве активного ингредиента. Это количество можно вводить одной или несколькими порциями.

[0192]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемая соль оказывает ингибирующее воздействие на PDHK и применимо для лечения и/или профилактики различных заболеваний или патологических состояний, протекание которых предположительно улучшается путем регулирования активности PDHK. Примеры различных заболеваний или патологических состояний, протекание которых предположительно улучшается путем регулирования активности PDHK, включают такие заболевания, как диабет (диабет типа 1, диабет типа 2), синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемия, гиперлактацидемия, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта), сердечная недостаточность (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатия, ишемия миокарда, инфаркт миокарда, стенокардия, дислипидемия, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающаяся хромота, хронические обструктивные заболевания легких, ишемия головного мозга, апоплексия головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальная энцефалопатия, рак, легочная гипертензия (легочная артериальная гипертензия), болезнь Альцгеймера и т.п.

[0193]

"Ингибирование PDHK" означает устранение или уменьшение активности PDHK путем ингибирования ее функции. Например, это означает ингибирование ее функции, как PDHK на основе условий, указанных в приведенном ниже экспериментальном примере 1. При "ингибировании PDHK" предпочтительно ингибируется PDHK человека. При "ингибировании PDHK" предпочтительно ингибируются "PDHK1 и PDHK2".

"Ингибитор PDHK" означает вещество, которое связывается с PDHK и ингибирует функцию PDHK. В качестве "ингибитора PDHK" предпочтительным является "ингибитор PDHK человека". В качестве "ингибитора PDHK" предпочтительным является "ингибитор PDHK1 и 2".

[0194]

В настоящем описании "лечение" также включает ослабление симптомов, уменьшение тяжести, поддержание ремиссии, предупреждение обострения и, кроме того, предупреждение рецидива.

В настоящем описании "предупреждение" или "профилактика" означает подавление проявления симптомов.

[0195]

Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно использовать в комбинации с одним или множеством других лекарственных средств (ниже в настоящем изобретении также называющимся сопутствующим лекарственным средством) по методике, обычно использующейся в медицине (ниже в настоящем изобретении называющейся совместным использованием).

[0196]

Период введения лекарственного средства, содержащего соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемую соль и сопутствующее лекарственное средство, не ограничивается и их можно вводить эксципиенту в виде комбинированного препарата или оба препарата можно вводить одновременно или с заданными интервалами. Кроме того, фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, и сопутствующее лекарственное средство можно использовать в качестве лекарственного средства в форме набора. Доза сопутствующего лекарственного средства сходна с клинически использующейся дозой и ее можно подходящим образом выбрать в соответствии с субъектом введения, заболеванием, симптомом, дозированной формой, путем введения, временем введения, комбинацией и т.п.На вводимую форму сопутствующего лекарственного средства не налагаются особые ограничения и только его необходимо объединить с лекарственным средством, содержащим соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемую соль.

[0197]

Примеры сопутствующего лекарственного средства включают терапевтические средства и/или профилактические средства для диабета (диабет типа 1, диабет типа 2 и т.п.), синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта и т.п.), сердечной недостаточности (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака, легочной гипертензии или болезни Альцгеймера и т.п., и одно или большее количество этих средств и соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемую соль можно использовать в комбинации.

[0198]

В настоящем описании представление предпочтительных вариантов осуществления и вариантов соединения, методики, применения и композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, также включает комбинации предпочтительных вариантов осуществления и вариантов, если их можно объединять и они не являются несовместимыми.

[0199]

Методики получения соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли описаны ниже. Однако методика получения соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли не ограничивается такими методиками получения.

Соединение, полученное на каждой стадии, при необходимости можно выделить или очистить по обычным методикам, таким как дистилляция, перекристаллизация, колоночная хроматография и т.п. В некоторых случаях следующую стадию можно провести без выделения или очистки. Если проводимая реакция на каждой стадии проводится в безводной среде, ее предпочтительно проводить в атмосфере инертного газа, аргона, азота и т.п.

[0200]

[Методика получения 1]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид можно получить по методике получения 1, приведенной на следующей схеме.

[0201]

[0202]

Стадия 1-1

трет-Бутил-(S)-(1-(бензиламино)пропан-2-ил)карбамат (соединение A2) можно получить бензилированием аминогруппы трет-бутил-(S)-(1-аминопропан-2-ил)карбамата (соединение A1). Например, соединение A2 можно получить по реакции соединения A1 с бензальдегидом в растворителе при температуре от комнатной до 80°C с последующей реакцией с восстановительным реагентом при охлаждении льдом. Кроме того, соединение A2 также можно получить по реакции соединения A1 с бензальдегидом с последующим проведением каталитического восстановления в присутствии платинового катализатора при комнатной температуре в атмосфере водорода.

Примеры восстановительного реагента включают борогидрид натрия.

Примеры платинового катализатора включают платину на угле.

Примеры растворителя включают этанол, тетрагидрофуран и толуол.

[0203]

Стадия 1-2

трет-Бутил-(S)-(1-(N-бензил-2-хлорацетамидо)пропан-2-ил)карбамат (соединение A3) можно получить по реакции соединения A2 с 2-хлорацетилхлоридом. Например, соединение A3 можно получить по реакции соединения A2 с 2-хлорацетилхлоридом в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают гидрокарбонат натрия и триэтиламин.

Примеры растворителя включают этилацетат, тетрагидрофуран и толуол.

[0204]

Стадия 1-3

трет-Бутил-(S)-4-бензил-2-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат (соединение A4) можно получить по реакции внутримолекулярной циклизации соединения A3. Например, соединение A4 можно получить путем обработки соединения A3 основанием в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают гидрид натрия и трет-бутоксид калия.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран, диметилформамид и циклопентилметиловый эфир.

[0205]

Стадия 1-4

трет-Бутил-(2S,6S)-4-бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метил-3-оксопиперазин-1-карбоксилат (соединение A5) можно получить алкилированием соединения A4 и бензилхлорметилового эфира. Например, соединение A5 можно получить по реакции соединения A4 с бензилхлорметиловым эфиром в растворителе в присутствии основания при температуре от -78°C до -40°C.

Примеры основания включают бис(триметилсилил)амид лития, бис(триметилсилил)амид натрия и бис(триметилсилил)амид калия.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран и диэтиловый эфир.

Метильная группа в положении 2 соединения A4 становится стерически заторможенной и реакция протекает диастереоселективно. На основании этого механизма реакции можно предложить стереохимическую конфигурацию соединения A5.

[0206]

Стадия 1-5

(3S,5S)-1-Бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин-2-он (соединение A6) можно получить путем удаления трет-бутоксикарбонильной группы соединения A5. Например, соединение A6 можно получить по реакции соединения A5 с кислотой в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры кислоты включают хлористоводородную кислоту и трифторуксусную кислоту.

Примеры растворителя включают этилацетат, хлороформ, метанол и 1,4-диоксан.

[0207]

Стадия 1-6

(3R,5S)-1-Бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин (соединение A7) можно получить путем удаления оксогруппы соединения A6 восстановлением. Например, соединение A7 можно получить по реакции соединения A6 с восстановительным реагентом в растворителе при температуре от 40°C до 70°C.

Примеры восстановительного реагента включают алюмогидрид лития, изобутилгидрид алюминия, боран и алан.

[0208]

Стадия 1-7

2-((2R,6S)-4-Бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтилацетат (соединение A8) можно получить ацилированием соединения A7 ацетоксиацетилхлоридом. Например, соединение A8 можно получить по реакции соединения A7 с ацетоксиацетилхлоридом в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают триэтиламин и гидрокарбонат натрия.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран, этилацетат и толуол.

[0209]

Стадия 1-8

трет-Бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-(гидроксиметил)-5-метилпиперазин-1-карбоксилат (соединение A9) можно получить путем удаления двух бензильных групп соединения A8 с последующей защитой атома азота пиперазинового кольца. Например, соединение A9 можно получить с помощью каталитического восстановления соединения A8 в растворителе в атмосфере водорода в присутствии палладиевого катализатора и ди-трет-бутилдикарбоната при комнатной температуре.

Примеры палладиевого катализатора включают гидроксид палладия на угле.

Примеры растворителя включают этанол, метанол и этилацетат.

[0210]

Стадия 1-9

трет-Бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-формил-5-метилпиперазин-1-карбоксилат (соединение A10) можно получить путем окисления гидроксигруппы соединения A9. Например, соединение A10 можно получить по реакции соединения A9 окислительным реагентом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры окислительного реагента включают комбинацию 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксильного радикала (TEMPO) и диацетоксийодбензола, комплекс триоксида серы с пиридином и перйодинан Десса-Мартина.

Примеры растворителя включают хлороформ, дихлорметан, ацетонитрил и диметилсульфоксид.

[0211]

Стадия 1-10

трет-Бутил-(S)-3-(1-ацетоксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A11) можно получить по реакции циклизации с использованием соединения A10 и аммониевого реагента. Например, соединение A11 можно получить путем нагревания соединения A10 и аммониевого реагента в растворителе при температуре от 70°C до 110°C.

Примеры аммониевого реагента включают ацетат аммония.

Примеры растворителя включают уксусную кислоту, толуол и циклопентилметиловый эфир.

[0212]

Стадия 1-11

трет-Бутил-(S)-3-(1-гидроксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A12) можно получить путем удаления ацетильной группы соединения A11. Например, соединение A12 можно получить путем обработки соединения A11 основанием в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают карбонат калия и гидроксид натрия.

Примеры растворителя включают метанол и тетрагидрофуран и смесь этих растворителей и воды.

[0213]

Стадия 1-12

трет-Бутил-(S)-3-формил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A13) можно получить путем окисления гидроксигруппы соединения A12. Например, соединение A13 можно получить по реакции соединения A12 с окислительным реагентом в растворителе при температуре от комнатной до 80°C.

Примеры окислительного реагента включают диоксид марганца и перйодинан Десса-Мартина.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран и хлороформ.

[0214]

Стадия 1-13

трет-Бутил-(5S)-3-(1-гидроксиэтил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A14) можно получить по реакции соединения A13 с метилмагнийгалогенидом. Например, соединение A14 можно получить по реакции соединения A13 с метилмагнийгалогенидом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры метилмагнийгалогенида включают метилмагнийбромид.

[0215]

Стадия 1-14

трет-Бутил-(S)-3-ацетил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A15) можно получить путем окисления гидроксигруппы соединения A14. Например, соединение A15 можно получить по реакции соединения A14 с окислительным реагентом в растворителе при температуре от комнатной до 90°C.

[0216]

Стадия 1-15

трет-Бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение A16) можно получить по реакции соединения A15 с (трифторметил)триметилсиланом. Например, соединение A16 можно получить по реакции соединения A15 с (трифторметил)триметилсиланом в растворителе в присутствии добавки при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры добавки включают тетра-н-бутилфторид аммония, ацетат лития, карбонат калия и фторид цезия.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран, диметилформамид и метанол.

Метильная группа в положении 5 соединения A15 становится стерически заторможенной и реакция протекает диастереоселективно. На основании этого механизма реакции можно предложить стереохимическую конфигурацию соединения A16.

[0217]

Стадия 1-16

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-ол можно получить путем удаления трет-бутоксикарбонильной группы соединения A16 кислотой. Например, (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (соединение A17) можно получить путем обработки соединения A16 хлористоводородной кислотой в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры растворителя включают хлороформ, 1,4-диоксан, метанол и этилацетат.

Форму свободного основания также можно получить путем обработки соединения A17 щелочью.

[0218]

[Методика получения 2]

Соединение формулы [1] можно получить по методике получения 2, приведенной на следующей схеме.

[0219]

[0220]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [1].

[0221]

Стадия 2-1

Соединение [1] можно получить по реакции амидирования соединения A17 соединением [31]. Например, соединение [1] можно получить по реакции соединения A17 с соединением [31] в растворителе в присутствии основания и конденсирующего реагента при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают диизопропилэтиламин и триэтиламин.

Примеры конденсирующего реагента включают комбинацию 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорида (WSC.HCl) и 1-гидроксибензотриазола (HOBt), и O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N’,N’-тетраметилуронийгексафторфосфат (HATU).

Примеры растворителя включают диметилформамид, ацетонитрил и хлороформ.

Соединение [31] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

[0222]

Стадия 2-2

Соединение [32] можно получить хлорированием карбоксигруппы соединения [31]. Например, соединение [32] можно получить путем обработки соединения [31] с хлорирующим реагентом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 60°C. Каталитическое количество диметилформамида также можно добавить к реакционной смеси в качестве добавки.

Примеры хлорирующего реагента включают оксалилхлорид и тионилхлорид.

Примеры растворителя включают хлороформ и тетрагидрофуран.

[0223]

Стадия 2-3

Соединение [1] можно получить по реакции амидирования соединения A17 соединением [32]. Например, соединение [1] можно получить по реакции соединения A17 с соединением [32] в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают триэтиламин.

Примеры растворителя включают хлороформ.

[0224]

[Методика получения 3]

Соединение формулы [I-a] или формулы [11] можно получить по методике получения 3, приведенной на следующей схеме.

[0225]

[0226]

[0227]

где каждый символ является таким, как определено для указанной выше формулы [I-a] или формулы [11].

[0228]

Стадия 3-A

Соединение [I-a] можно получить по реакции амидирования соединения [17] соединением [2]. Например, соединение [I-a] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [2] в растворителе в присутствии основания и конденсирующего реагента при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Соединение [17] может представлять собой соль, такую как гидрохлорид, дигидрохлорид и т.п. Соединение [17] можно получить в соответствии с примером получения 1, 12 или 13, описанным ниже, или по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

Соединение [2] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

[0229]

Стадия 3-B

Соединение [3] можно получить хлорированием карбоксигруппы соединения [2]. Например, соединение [3] можно получить путем обработки соединения [2] с хлорирующим реагентом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 60°C. Каталитическое количество диметилформамида также можно добавить к реакционной смеси в качестве добавки.

[0230]

Стадия 3-C

Соединение [I-a] можно получить по реакции амидирования соединения [17] соединением [3]. Например, соединение [I-a] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [3] в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры растворителя включают дихлорметан и хлороформ.

[0231]

Стадия 3-D

Соединение [11] можно получить по реакции амидирования соединения [17] соединением [4]. Например, соединение [11] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [4] в соответствии со стадией 3-A.

Соединение [4] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

[0232]

Стадия 3-E

Соединение [5] можно получить хлорированием карбоксигруппы соединения [4]. Например, соединение [5] можно получить по реакции соединения [4] с хлорирующим реагентом в соответствии со стадией 3-B.

[0233]

Стадия 3-F

Соединение [11] можно получить по реакции амидирования соединения [17] соединением [5]. Например, соединение [11] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [5] в соответствии со стадией 3-C.

[0234]

В методике получения 3, если соединение [17] представляет собой соединение A17, описывающееся формулой:

[0235]

,

[0236]

соединение A17 можно получить по указанной выше методике получения 1.

[Методика получения 4]

В методике получения 3, если соединение [17] представляет собой соединение B17, описывающееся формулой:

[0237]

[0238]

соединение B17 можно получить по методике получения 4, приведенной на следующей схеме.

[0239]

[0240]

Стадия 4-A

(3R,7aS)-3-Фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он (соединение B2) можно получить по реакции циклизации (S)-5-(гидроксиметил)пирролидин-2-она (соединение B1) и бензальдегида. Например, соединение B2 можно получить по реакции соединения B1 с бензальдегидом в растворителе в присутствии кислоты при температуре от 80°C до 150°C.

Примеры кислоты включают п-толуолсульфоновую кислоту.

Примеры растворителя включают толуол и бензол.

[0241]

Стадия 4-B

(3R,6S,7aS)-6-Метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он (соединение B3) можно получить метилированием соединения B2. Например, соединение B3 можно получить по реакции соединения B2 метилирующим реагентом в растворителе в присутствии основания при температуре от -78°C до -50°C.

Примеры основания включают диизопропиламид лития и бис(триметилсилил)амид лития.

Примеры метилирующего реагента включают метилйодид.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран.

[0242]

Стадия 4-C

(3R,6R,7aS)-6-Метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он (соединение B4) можно получить путем изомеризации соединения B3. Например, соединение B4 можно получить по реакции соединения B3 с основанием в растворителе при температуре от -78°C до -50°C с последующей реакцией с водой при температуре от -20°C до 10°C.

[0243]

Стадия 4-D

((2S,4R)-1-Бензил-4-метилпирролидин-2-ил)метанол (соединение B5) можно получить восстановлением соединения B4. Например, соединение B5 можно получить по реакции соединения B4 с восстановительным реагентом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 80°C.

Примеры восстановительного реагента включают алюмогидрид лития и комплекс боран-тетрагидрофуран.

[0244]

Стадия 4-E

(3R,5R)-1-Бензил-5-метилпиперидин-3-ол (соединение B6) можно получить путем превращения гидроксигруппы соединения B5 в отщепляющуюся группу с последующей реакцией внутримолекулярной циклизации и последующей реакцией раскрытия цикла.

Превращение в отщепляющуюся группу можно провести, например, по реакции соединения B5 с трифторуксусным ангидридом при температуре от -78°C до комнатной температуры. Внутримолекулярную циклизацию можно провести, например, путем нагревания продукта указанной выше реакции в растворителе в присутствии основания при температуре от 50°C до 90°C. Реакцию раскрытия цикла можно провести путем, например, реакции продукта, полученного по указанной выше реакции циклизации, со щелочью в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают триэтиламин.

Примеры щелочи включают гидроксид натрия.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран и смешанный растворитель из тетрагидрофурана и воды.

[0245]

Стадия 4-F

(R)-1-Бензил-5-метилпиперидин-3-он (соединение B7) можно получить путем окисления гидроксигруппы соединения B6. Например, соединение B7 можно получить по реакции соединения B6 с окислительным реагентом в растворителе в присутствии основания при температуре от -78°C до комнатной температуры.

Примеры окислительного реагента включают комбинацию оксалилхлорида и диметилсульфоксида, и комбинацию комплекс триоксида серы с пиридином и диметилсульфоксидом.

Примеры основания включают триэтиламин.

[0246]

Стадия 4-G

Этиловый эфир (4R)-6-бензил-7a-гидрокси-4-метил-3a,4,5,6,7,7a-гексагидроизоксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты (соединение B8) можно получить по реакции циклизации соединения B7 и этилхлор(гидроксимино)ацетат.Например, соединение B8 можно получить по реакции обработанного основанием соединения B7 с обработанным основанием этилхлор(гидроксимино)ацетатом в растворителе при температуре от -78°C до комнатной температуры.

[0247]

Стадия 4-H

Этиловый эфир (R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты (соединение B9) можно получить путем превращения гидроксигруппы соединения B8 в отщепляющуюся группу с последующей реакцией элиминирования. Если отщепляющейся группой является мезилоксигруппа, соединение B9 можно получить по реакции соединения B8 с метансульфонилхлоридом в растворителе в присутствии основания при охлаждении льдом.

Примеры основания включают триэтиламин.

Примеры растворителя включают тетрагидрофуран и толуол.

[0248]

Стадия 4-I

(R)-6-Бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновую кислоту (соединение B10) можно получить путем гидролиза сложного эфира соединения B9. Например, соединение B10 можно получить по реакции соединения B9 со щелочью в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры щелочи включают гидроксид натрия, карбонат калия и гидроксид лития.

[0249]

Стадия 4-J

(R)-6-Бензил-N-метокси-N,4-диметил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоксамид (соединение B11) можно получить по реакции амидирования соединения B10 N, O-диметилгидроксиламином. Например, соединение B11 можно получить по реакции соединения B10 с N, O-диметилгидроксиламином в растворителе в присутствии основания и конденсирующего реагента при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры конденсирующего реагента включают HATU.

Примеры растворителя включают диметилформамид.

[0250]

Стадия 4-K

(R)-1-(6-Бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)этан-1-он (соединение B12) можно получить по реакции соединения B11 с метилмагнийгалогенидом. Например, соединение B12 можно получить по реакции соединения B11 с метилмагнийгалогенидом в растворителе при температуре от 0°C до комнатной температуры.

[0251]

Стадия 4-L

(R)-2-((R)-6-Бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (соединение B13) можно получить по реакции соединения B12 с (трифторметил)триметилсиланом. Например, соединение B13 можно получить по реакции соединения B12 с (трифторметил)триметилсиланом в растворителе в присутствии добавки при температуре от -78°C до комнатной температуры.

Метильная группа в положении 4 соединения B12 становится стерически заторможенной и реакция протекает диастереоселективно. На основании этого механизма реакции можно предложить стереохимическую конфигурацию соединения B13.

[0252]

Стадия 4-M

(9H-Флуорен-9-ил)метил (R)-4-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-4,7-дигидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-6(5H)-карбоксилат (соединение B14) можно получить по реакции соединения B13 с 9-флуоренилметилхлорформиатом. Например, соединение B14 можно получить по реакции соединения B13 с 9-флуоренилметилхлорформиатом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры растворителя включают хлороформ и толуол.

[0253]

Стадия 4-N

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((R)-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)пропан-2-ол (соединение B17) можно получить путем удаления защитной группы соединения B14. Например, соединение B17 можно получить по реакции соединения B14 со вторичным амином в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры вторичного амина включают диэтиламин и пиперидин.

Примеры растворителя включают ацетонитрил и диметилформамид.

[0254]

[Методика получения 5]

В методике получения 3, если соединение [17] представляет собой соединение C17, описывающееся формулой:

[0255]

,

[0256]

соединение C17 можно получить по методике получения 5, приведенной на следующей схеме.

[0257]

[0258]

Стадия 5-A

трет-Бутил-(R)-2-(3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропаноил)гидразин-1-карбоксилат (соединение C2) можно получить по реакции (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (соединение C1) с трет-бутилкарбазатом. Например, соединение C2 можно получить по реакции соединения C1 с трет-бутилкарбазатом в растворителе в присутствии конденсирующего реагента при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры конденсирующего реагента включают комбинацию WSC.HCl и HOBt, и HATU.

[0259]

Стадия 5-B

(R)-3,3,3-Трифтор-2-гидрокси-2-метилпропангидразид (соединение C3) можно получить путем удаления трет-бутоксикарбонильной группы соединения C2 кислотой. Например, соединение C3 можно получить путем обработки соединения C2 кислотой в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

[0260]

Стадия 5-C

Метиловый эфир (S)-(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропил)глицина (соединение C5) можно получить по реакции восстановительного аминирования трет-бутил-(S)-(1-оксопропан-2-ил)карбамата (соединение C4) с метиловым эфиром глицина. Например, соединение C5 можно получить по реакции соединения C4 с метиловым эфиром глицина в растворителе в присутствии основания и восстановительного реагента при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают диизопропилэтиламин и ацетат натрия.

Примеры восстановительного реагента включают триацетоксиборогидрид натрия.

Примеры растворителя включают хлороформ и дихлорметан.

[0261]

Стадия 5-D

трет-Бутил-(S)-3-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат (соединение C6) можно получить путем удаления трет-бутоксикарбонильной группы соединения C5, внутримолекулярной циклизации и защиты аминогруппы.

Трет-бутоксикарбонильную группу можно удалить, например, по реакции соединения C5 с кислотой в растворителе при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры. Примеры кислоты включают хлористоводородную кислоту и трифторуксусную кислоту. Примеры растворителя включают хлороформ, 1,4-диоксан, метанол и этилацетат.

Внутримолекулярную циклизацию можно провести путем, например, нагревания указанного выше полученного продукта без защитной группы в растворителе в присутствии основания при температуре от комнатной до 80°C. Примеры основания включают ацетат натрия. Примеры растворителя включают метанол.

Защиту аминогруппы, если, например, защитной группой является трет-бутоксикарбонильная группа, можно провести по реакции продукта, полученного по указанной выше реакции циклизации с ди-трет-бутилдикарбонатом в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры. Примеры основания включают триэтиламин. Примеры растворителя включают хлороформ.

[0262]

Стадия 5-E

трет-Бутил-(S)-3-метил-5-тиооксопиперазин-1-карбоксилат (соединение C7) можно получить путем превращения оксогруппы соединения C6 в тиооксогруппу. Например, соединение C7 можно получить по реакции соединения C6 с сульфурирующим реагентом в растворителе при температуре от 50°C до 80°C.

Примеры сульфурирующего реагента включают реагент Лавессона.

[0263]

Стадия 5-F

трет-Бутил-(S)-3-метил-5-(метилтио)-3,6-дигидропиразин-1(2H)-карбоксилат (соединение C8) можно получить метилированием соединения C7. Например, соединение C8 можно получить по реакции соединения C7 с метилирующим реагентом в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 50°C.

Примеры растворителя включают ацетон и ацетонитрил.

Соединение C8 можно получить в виде соли. Например, гидройодид соединения C8 можно получить по реакции соединения C7 с метилйодидом.

[0264]

Стадия 5-G

трет-Бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (соединение C9) можно получить по реакции циклизации соединения C3 соединением C8. Например, соединение C9 можно получить по реакции соединения C3 с соединением C8 в растворителе в присутствии кислоты.

Примеры кислоты включают уксусную кислоту.

Примеры растворителя включают воду и изопропанол, и образованный из них смешанный растворитель.

[0265]

Стадия 5-H

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (соединение C17) можно получить путем удаления трет-бутоксикарбонильной группы соединения C9 кислотой. Например, соединение C17 можно получить путем обработки соединения C9 кислотой в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 70°C.

Форму свободного основания также можно получить путем обработки соединения C17 щелочью.

[0266]

[Методика получения 6-1]

Если соединение формулы [11] представляет собой соединение [II-d], описывающееся формулой:

[0267]

[0268]

где R¹¹ означает C_1-4 алкил;

R¹² означает водород или C_1-4 алкил; и

другие символы являются такими, как определено для указанной выше формулы [11],

соединение [II-d] можно получить по методике получения 6-1, приведенной на следующей схеме.

[0269]

[0270]

где R¹³ означает C_1-4 алкил; и

другие символы являются такими, как определено для указанной выше формулы [II-d].

[0271]

Стадия 6-1-A

Соединение [7] можно получить по реакции циклизации пиразола с использованием соединения [6]. Например, соединение [7] можно получить по реакции соединения [6] с диалкилоксалатом R¹³O₂CCO₂R¹³ в растворителе в присутствии основания и спирта при условиях от охлаждения льдом до 50°C и его реакции с гидразином в присутствии кислоты при условиях от охлаждения льдом до 50°C. Промежуточный продукт реакции с диалкилоксалатом также можно выделить и ввести в реакцию с гидразином.

Примеры диалкилоксалата включают диэтилоксалат.

Примеры основания включают этоксид натрия, гидрид натрия и бис(триметилсилил)амид лития.

Примеры кислоты включают уксусную кислоту.

Соединение [6] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

[0272]

Стадия 6-1-B

Смесь соединений [8-d] и [8-e] можно получить алкилированием пиразольного кольца соединения [7]. Например, соединения [8-d] и [8-e] можно получить по реакции соединения [7] с C_1-4 алкилгалогенидом в растворителе в присутствии основания при условиях от охлаждения льдом до комнатной температуры.

Примеры основания включают гидрид натрия и карбонат калия.

Примеры C_1-4 алкилгалогенида включают метилйодид.

Положение алкильной группы в пиразольном кольце можно предположительно определить по данным NMR для соединения, раскрытого, например, в следующей публикации. Schmidt, Andreas, et al. "New pyrazolium-carboxylates as structural analogues of the pseudo-cross-conjugated betainic alkaloid Nigellicine". The Journal of Organic Chemistry 68.15 (2003): 5977-5982.

[0273]

Стадия 6-1-C

Соединение [9] можно получить путем гидролиза сложноэфирной группы соединения [8-d]. Например, соединение [9] можно получить путем обработки соединения [8-d] со щелочью в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 60°C.

[0274]

Стадия 6-1-D

Соединение [II-d] можно получить по реакции амидирования соединения [17] в методике получения 3 и соединения [9]. Например, соединение [II-d] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [9] по методике получения 3, стадия 3-A.

[0275]

[Методика получения 6-2]

Соединение [II-e], в котором соединение формулы [11] обладает структурой, описывающейся формулой:

[0276]

[0277]

где каждый символ является таким, как определено выше,

можно получить путем введения соединения [8-e], полученного по методике получения 6-1, стадия 6-1-B, в реакции стадии 6-1-C и стадии 6-1-D.

[0278]

[Методика получения 7]

Если соединение формулы [11] представляет собой соединение [II-f], описывающееся формулой:

[0279]

[0280]

где кольцо Cy^2-a означает (i) фенил или (ii) 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 атома азота, фенил и гетероарил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, C_1-4 алкоксигруппу и C_1-4 алкилсульфонил; и

все остальные символы являются такими, как определено для указанной выше формулы [11],

соединение [II-f] можно получить по методике получения 7, приведенной на следующей схеме.

[0281]

[0282]

где Hal означает хлор, бром или йод;

R¹⁴ означает C_1-4 алкил;

R¹⁵ независимо означает водород или C_1-4 алкил, один из R¹⁵ может быть связан с другим R¹⁵ с образованием кольца; и

другие символы являются такими, как определено для указанной выше формулы [11] или [II-f].

[0283]

Стадия 7-A

Соединение [12] можно получить сочетанием по Судзуки соединения [10] с соединением [11]. Например, соединение [12] можно получить по реакции соединения [10] с соединением [11] в растворителе в присутствии основания и палладиевого катализатора при температуре от комнатной до 70°C.

Примеры основания включают карбонат калия и трикалийфосфата.

Примеры палладиевого катализатора включают бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(II).

Примеры растворителя включают диметилацетамид, толуол и метанол.

Соединение [10] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

Соединение [11] может быть имеющимся в продаже продуктом или его можно получить путем соответствующего превращения имеющегося в продаже продукта по методике, хорошо известной специалистам с общей подготовкой в данной области техники.

[0284]

Стадия 7-B

Соединение [13] можно получить путем гидролиза сложноэфирной группы соединения [12]. Например, соединение [13] можно получить путем обработки соединения [12] с щелочью в растворителе при условиях от охлаждения льдом до 60°C.

[0285]

Стадия 7-C

Соединение [II-f] можно получить по реакции амидирования соединения [17] в методике получения 3 и соединения [13]. Например, соединение [II-f] можно получить по реакции соединения [17] с соединением [13] по методике получения 3, стадия 3-A.

Примеры

[0286]

Методика получения соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли, предлагаемого в настоящем изобретении, специально разъяснена с помощью приведенных ниже примеров получения. Однако методика получения соединения формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемой соли не ограничивается примерами получения.

Если не указано иное, % означает мас.%. Если не указано иное, отношение компонентов в смешанном растворителе является объемным.

В примерах аббревиатуры обладают следующими значениями.

DMSO: диметилсульфоксид

M: моль/л

HATU: O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N’,N’-тетраметилуронийгексафторфосфат

Результаты измерений с помощью ¹H-NMR описаны с помощью следующих аббревиатур:

s: синглет, d: дублет, dd: двойной дублет, dt: двойной триплет, t: триплет, q: квартет, dq: двойной квартет, m: мультиплет, brs: широкий синглет, brm: широкий мультиплет, J: константа спин-спинового взаимодействия, Hz: Гц

Спектр ¹H-NMR измеряли в CDCl₃ или DMSO-D₆ с использованием тетраметилсилана в качестве внутреннего стандарта и все значения (приведены в част./млн.

[0287]

Пример получения 1 Синтез (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорида

[0288]

Стадия 1

трет-бутил-(S)-(1-(бензиламино)пропан-2-ил)карбамат

[0289]

[0290]

трет-Бутил-(S)-(1-аминопропан-2-ил)карбамат (3,60 г) и бензальдегид (2,64 мл) смешивали с этанолом (50 мл). Эту смесь перемешивали при 60°C в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли борогидрид натрия (1,51 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. При охлаждении льдом насыщенный водный раствор хлорида аммония и 1 н. хлористоводородную кислоту последовательно добавляли к реакционной смеси до pH=9. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=2:1 до хлороформ:метанол=25:1) и получали искомое соединение (4,47 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,01 (d, J=6,45Hz, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,99 (brs, 1H), 2,36-2,48 (m, 2H), 3,54-3,57 (brm, 1H), 3,66 (s, 2H), 6,57 (brs, 1H), 7,19-7,30 (m, 5H)

[0291]

Стадия 2

трет-бутил-(S)-(1-(N-бензил-2-хлорацетамидо)пропан-2-ил)карбамат

[0292]

[0293]

трет-Бутил-(S)-(1-(бензиламино)пропан-2-ил)карбамат (6,75 г) смешивали с насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (60 мл) и этилацетат (60 мл). При охлаждении льдом 2-хлорацетилхлорид (4,06 мл) добавляли к смеси и смесь перемешивали в течение 50 мин. Органический слой подвергали распределению и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (9,41 г) в виде неочищенного продукта.

[0294]

Стадия 3

трет-бутил-(S)-4-бензил-2-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат

[0295]

[0296]

Неочищенный продукт (9,4 г) трет-бутил-(S)-(1-(N-бензил-2-хлорацетамидо)пропан-2-ил)карбамат, полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (45 мл) и диметилформамидом (45 мл). При охлаждении льдом добавляли 60 мас./мас.% гидрид натрия (2,6 г). Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 3:1 до 3:2) и получали искомое соединение (7,07 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,06 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,44 (s, 9H), 2,92 (dd, J=12,25, 1,85Hz, 1H), 3,50 (dd, J=12,25, 4,39Hz, 1H), 3,84 (d, J=18,50Hz, 1H), 4,34-4,38 (m, 3H), 4,83 (d, J=14,57Hz, 1H), 7,15-7,34 (m, 5H)

[0297]

Стадия 4

трет-бутил-(2S,6S)-4-бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метил-3-оксопиперазин-1-карбоксилат

[0298]

[0299]

трет-Бутил-(S)-4-бензил-2-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат (6,46 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (85 мл). В атмосфере аргона 1,1 M раствор бис(триметилсилил)амид лития/тетрагидрофуран (21,2 мл) по каплям добавляли к этой смеси при температуре -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и по каплям добавляли бензилхлорметиловый эфир (7,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (20 мл) при температуре -20°C и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 4:1 до 3:1) и получали искомое соединение (6,80 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,01 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,61 (t, J=5,90Hz, 1H), 2,77 (d, J=12,48Hz, 1H), 3,86-3,91 (m, 2H), 4,40 (brs, 1H), 4,50-4,53 (m, 2H), 4,69 (d, J=5,78Hz, 2H), 4,78-4,81 (m, 1H), 7,19-7,36 (m, 10H)

[0300]

Стадия 5

(3S,5S)-1-бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин-2-он

[0301]

[0302]

трет-Бутил-(2S,6S)-4-бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метил-3-оксопиперазин-1-карбоксилат (6,80 г), полученный на предыдущей стадии, перемешивали с этилацетатом (70 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 4 н. раствор хлористоводородная кислота/этилацетат (35 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от этилацетата до этилацетат:метанол=10:1) и получали искомое соединение (4,99 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,05 (d, J=6,47Hz, 3H), 2,95 (dd, J=11,56, 8,79Hz, 1H), 3,07 (dd, J=11,68, 3,81Hz, 1H), 3,27-3,29 (m, 1H), 3,78-3,95 (m, 3H), 4,40 (d, J=14,80Hz, 1H), 4,57 (q, J=11,71Hz, 2H), 4,74 (d, J=14,57Hz, 1H), 7,15-7,36 (m, 10H)

[0303]

Стадия 6

(3R,5S)-1-бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин

[0304]

[0305]

Алюмогидрид лития (1,75 г) смешивали с тетрагидрофураном (100 мл). При охлаждении льдом к этой смеси по каплям добавляли раствор (3S,5S)-1-бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин-2-она (4,99 г), полученный на предыдущей стадии, в тетрагидрофуране (60 мл). Реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение 1,5 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси последовательно по каплям добавляли воду (1,75 мл), 4 н. водный раствор гидроксида натрия (1,75 мл) и воду (5,25 мл). К реакционной смеси добавляли сульфат натрия и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит.Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (6,31 г) в виде неочищенного продукта.

[0306]

Стадия 7

2-((2R,6S)-4-бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтилацетат

[0307]

[0308]

Смешивали неочищенный продукт (6,3 г) (3R,5S)-1-бензил-3-((бензилокси)метил)-5-метилпиперазин, полученный на предыдущей стадии, тетрагидрофуран (50 мл) и триэтиламин (4,3 мл). При охлаждении льдом к этой смеси по каплям добавляли ацетоксиацетилхлорид (1,82 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 50 мин. При охлаждении льдом к реакционной смеси по каплям добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 3:1 до 3:2) и получали искомое соединение (5,71 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,43 (d, J=6,36Hz, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,19 (brs, 1H), 2,61-2,63 (m, 3H), 3,40 (d, J=13,20Hz, 1H), 3,56 (d, J=13,20Hz, 1H), 3,70-3,78 (m, 4H), 4,50 (dd, J=21,64, 11,86Hz, 2H), 4,71 (d, J=14,18Hz, 1H), 4,80 (d, J=14,43Hz, 1H), 7,24-7,35 (m, 10H)

[0309]

Стадия 8

трет-бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-(гидроксиметил)-5-метилпиперазин-1-карбоксилат

[0310]

[0311]

Смешивали 2-((2R,6S)-4-Бензил-2-((бензилокси)метил)-6-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтилацетат (5,71 г), полученный на предыдущей стадии, этанол (60 мл) и ди-трет-бутилдикарбонат (3,35 г). К этой смеси добавляли 20 мас./мас.% гидроксид палладия на угле (2,9 г) и смесь перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=1:1 до гексан:ацетон=1:1) и получали искомое соединение (4,40 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,35 (d, J=10,64Hz, 3H), 1,48 (s, 9H), 2,18 (s, 3H), 2,83 (brs, 1H), 3,35-3,41 (m, 1H), 3,55 (dd, J=13,69, 3,91Hz, 1H), 3,74-3,79 (m, 4H), 4,11-4,13 (m, 2H), 4,72-4,75 (m, 2H)

[0312]

Стадия 9

трет-бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-формил-5-метилпиперазин-1-карбоксилат

[0313]

[0314]

трет-Бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-(гидроксиметил)-5-метилпиперазин-1-карбоксилат (4,40 г), полученный на предыдущей стадии, перемешивали с хлороформом (44 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли перйодинан Десса-Мартина (7,4 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. При охлаждении льдом добавляли насыщенный водный раствор тиосульфата натрия к реакционной смеси. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (4,97 г) в виде неочищенного продукта.

[0315]

Стадия 10

трет-бутил-(S)-3-(1-ацетоксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0316]

[0317]

Смешивали неочищенный продукт (4,97 г) трет-бутил-(3R,5S)-4-(2-ацетоксиацетил)-3-формил-5-метилпиперазин-1-карбоксилат, полученный на предыдущей стадии, уксусную кислоту (53 мл) и ацетат аммония (4,11 г). Реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом. К полученному остатку при охлаждении льдом добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=2:1 до гексан:ацетон=1:1) и получали искомое соединение (2,98 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,38 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,49 (s, 9H), 2,08 (s, 3H), 3,26, (brs, 1H), 4,26-4,45 (m, 3H), 5,09-5,17 (m, 3H), 6,83 (s, 1H)

[0318]

Стадия 11

трет-бутил-(S)-3-(1-гидроксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0319]

[0320]

трет-Бутил-(S)-3-(1-ацетоксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (2,98 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с метанолом (30 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли карбонат калия (0,133 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:ацетон=1:2 до хлороформ:метанол=15:1) и получали искомое соединение (2,60 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,43 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,48 (s, 9H), 3,15-3,39 (m, 1H), 4,13-4,20 (m, 2H), 4,53 (brs, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,81-5,13 (m, 1H), 6,67 (s, 1H)

[0321]

Стадия 12

трет-бутил-(S)-3-формил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0322]

[0323]

трет-Бутил-(S)-3-(1-гидроксиметил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (2,40 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (40 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли диоксид марганца (3,0 г) и смесь перемешивали при 70°C в течение 2,5 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (2,34 г) в виде неочищенного продукта.

[0324]

Стадия 13

трет-бутил-(5S)-3-(1-гидроксиэтил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0325]

[0326]

Неочищенный продукт (2,34 г) трет-бутил-(S)-3-формил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат, полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (30 мл). В атмосфере аргона к этой смеси при 0°C по каплям добавляли 3,0M раствор метилмагнийбромид/диэтиловый эфир (4,1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 50 мин. К реакционной смеси при охлаждении льдом добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и насыщенный водный раствор хлорида натрия. Реакционную смесь экстрагировали смесью хлороформ:метанол=20:1. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=1:1 до хлороформ:метанол=15:1) и получали искомое соединение (2,40 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,44 (d, J=6,24Hz, 3H), 1,49 (s, 9H), 1,63 (d, J=4,62Hz, 3H), 3,12-3,36 (m, 1H), 4,02-4,73 (m, 3H), 4,77-5,07 (m, 2H), 6,74 (s, 1H)

[0327]

Стадия 14

трет-бутил-(S)-3-ацетил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0328]

[0329]

трет-Бутил-(5S)-3-(1-гидроксиэтил)-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (2,40 г), полученный на предыдущей стадии, и диоксид марганца (2,4 г) смешивали с тетрагидрофураном (35 мл). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 3,5 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 1:1 до 2:3) и получали искомое соединение (1,84 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,40 (d, J=6,36Hz, 3H), 1,53 (s, 9H), 2,65 (s, 3H), 3,25-3,27 (m, 1H), 4,10-4,30 (m, 2H), 5,05-5,21 (m, 2H), 6,99 (s, 1H)

[0330]

Стадия 15

трет-бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0331]

[0332]

трет-Бутил-(S)-3-ацетил-5-метил-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (1,84 г), полученный на предыдущей стадии, и фторид цезия (0,15 г) смешивали с тетрагидрофураном (25 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли (трифторметил)триметилсилан (1,95 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли метанол (8 мл) и 1,5 M водный раствор карбоната калия (13 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 1 ч. Реакционную смесь подвергали распределению путем добавления этилацетата и воды. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли этилацетат:гексан=1:2 и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (1,65 г). Полученное соединение анализировали с использованием хиральной колонки и устанавливали, что время удерживания полученного искомого соединения равнялось 13,4 мин и оптическая чистота составляла>99,9%. Условия анализа с использованием хиральной колонки описаны ниже.

измерительное устройство; HPLC system Shimadzu Corporation высокоэффективный жидкостный хроматограф

колонка; Daicel CHIRALPAK IC 4,6 ммφ×250 мм

температура колонки; 40°C

подвижная фаза; гексан:этанол=19:1

скорость потока; 0,5 мл/мин

детектирование; UV (220 нм)

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,41 (d, J=6,60Hz, 3H), 1,53 (s, 9H), 1,94 (s, 3H), 3,23 (dd, J=37,78, 13,08Hz, 1H), 3,47 (d, J=22,99Hz, 1H), 4,10 (dd, J=43,53, 17,06Hz, 1H), 4,51 (d, J=16,14Hz, 1H), 4,75 (t, J=17,85Hz, 1H), 4,98 (brs, 1H), 6,85 (s, 1H)

[0333]

Стадия 16

(R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид

[0334]

[0335]

трет-Бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (1,60 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с метанолом (6 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 4 н. раствор хлористоводородная кислота/этилацетат (11,8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли этилацетат и диэтиловый эфир и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (1,49 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,56 (d, J=7,63Hz, 3H), 1,86 (s, 3H), 3,28 (brs, 1H), 3,56 (d, J=13,18Hz, 1H), 4,38-4,44 (m, 2H), 5,19 (brs, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,77 (brs, 1H), 9,86 (brs, 1H), 10,49 (brs, 1H)

[0336]

Пример получения 2Синтез (2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон (соединение примера 3)

[0337]

Стадия 1

2,3-дигидро-1H-инден-2-карбонилхлорид

[0338]

[0339]

2,3-Дигидро-1H-инден-2-карбоновую кислоту (6,4 мг) перемешивали с хлороформом (0,5 мл). При охлаждении льдом добавляли оксалилхлорид (15,2 мкл) и каталитическое количество диметилформамида. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение в виде неочищенного продукта.

[0340]

Стадия 2

(2,3-дигидро-1H-инден-2-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон

[0341]

[0342]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (13,3 мг) и неочищенный продукт 2,3-дигидро-1H-инден-2-карбонилхлорид, полученный на предыдущей стадии, смешивали с хлороформом (0,5 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли триэтиламин (15,2 мкл) и смесь перемешивали в течение 1,5 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли небольшое количество метанола для остановки реакции. Реакционную смесь очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и получали искомое соединение (13,9 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,41-1,50 (m, 3H), 1,96-1,97 (m, 3H), 3,12-3,65 (m, 7H), 3,99-5,08 (m, 4H), 6,91 (s, 1H), 7,16-7,21 (m, 4H)

[0343]

Пример получения 3Синтез 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила (соединение примера 4) его солей и его гидрата, и 1-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-индазол-6-карбонитрила (соединение примера 5)

[0344]

Стадия 1

Метиловый эфир 6-циано-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты и метиловый эфир 6-циано-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты

[0345]

[0346]

6-Циано-2H-индазол-3-карбоновую кислоту (100 мг) и карбонат калия (220 мг) смешивали с диметилформамидом (3 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли метилйодид (82,5 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 2:1 до 1:1) и получали метиловый эфир 6-циано-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты (42,9 мг) в качестве менее полярного соединения.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (4,05 (s, 3H), 4,55 (s, 3H), 7,41 (dd, J=8,79, 0,92Hz, 1H), 8,11 (d, J=8,79Hz, 1H), 8,18 (s, 1H)

Кроме того, метиловый эфир 6-циано-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты (46,1 мг) получали в качестве более полярного соединения.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (4,05 (s, 3H), 4,22 (s, 3H), 7,53 (d, J=8,55Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,34 (d, J=8,32Hz, 1H)

Структуру каждого изомера определяли путем сопоставления спектра ¹H-NMR каждого изомера и аналогов с известной структурой.

[0347]

Стадия 2-1

6-циано-2-метил-2H-индазол-3-карбоновая кислота

[0348]

[0349]

Метиловый эфир 6-циано-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты (42,9 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (2 мл) и метанолом (1 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (150 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (50 мкл) и смесь дополнительно перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (800 мкл) и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (37,8 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (4,47 (s, 3H), 7,52 (dd, J=8,67, 1,27Hz, 1H), 8,12 (dd, J=8,79, 0,92Hz, 1H), 8,48 (s, 1H), 13,96 (brs, 1H)

[0350]

Стадия 3-1

2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрил

[0351]

[0352]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (35,4 мг) и 6-циано-2-метил-2H-индазол-3-карбоновую кислоту (21,7 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (1 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (54,9 мкл) и HATU (41,1 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и получали искомое соединение (29,5 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,25-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,26-3,37 (m, 1H), 3,67 (brs, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,76-5,16 (m, 3H), 6,62-6,89 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,91 (brs, 1H), 8,43 (s, 1H)

[0353]

Стадия 4-1Синтез дигидрата гидрохлорида, гидрохлорида, сульфата, 0,5 сульфата, п-толуолсульфоната, метансульфоната, фосфата и тартрата 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

[0354]

2-Метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрил (50,0 мг) смешивали с трет-бутиловым спиртом (0,5 мл) и водой (0,05 мл). К этой смеси добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту (0,023 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали дигидрат гидрохлорида 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила (36,9 мг). По данным измерения содержания хлорид-иона с помощью ионной хроматографии полученное соединение предположительно было сочтено моногидрохлоридом. Кроме того, по данным измерения уменьшения массы, составляющего 2 экв. воды, по сравнению со свободной формой, когда в TG-DTA (термогравиметрия-дифференциальный термический анализ) повышали температуру, и по данным анализа структуры с помощью порошковой рентгенографии оно предположительно было сочтено дигидратом.

[0355]

Таким же образом 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрил, полученный на предыдущей стадии, обрабатывали по обычной методике и получали гидрохлорид, сульфат, 0,5 сульфат, п-толуолсульфонат, метансульфонат, фосфат и тартрат соответственно.

[0356]

дигидрат гидрохлорида 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,34-1,55 (m, 3H), 1,91 (s, 3H), 3,51-3,79 (m, 1H), 4,24 (s, 3H), 4,68-5,29 (m, 4H), 7,30-7,45 (m, 2H), 7,89-7,91 (m, 2H), 8,45 (s, 1H)

[0357]

гидрохлорид 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,34-1,55 (m, 3H), 1,92 (s, 3H), 3,48-3,78 (m, 1H), 4,24 (s, 3H), 4,70-4,89 (m, 2H), 5,09-5,19 (m, 2H), 7,22-7,45 (m, 2H), 7,89-7,91 (m, 2H), 8,45 (s, 1H)

[0358]

сульфат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,33-1,55 (m, 3H), 1,89 (s, 3H), 3,50-3,79 (m, 2H), 4,24 (s, 3H), 4,85-4,89 (m, 1H), 5,10-5,20 (m, 2H), 7,26-7,68 (m, 2H), 7,88-7,91 (m, 2H), 8,46 (s, 1H)

[0359]

0,5 сульфат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

(400 MHz, DMSO-d₆) 1,29-1,51 (m, 3H), 1,84 (s, 3H), 3,47-3,75 (m, 1H), 4,23 (s, 3H), 4,88-5,15 (m, 4H), 7,04-7,34 (m, 1H), 7,43-7,46 (m, 1H), 7,60 (brs, 1H), 7,87-7,89 (m, 1H), 8,45 (s, 1H)

[0360]

п-толуолсульфонат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

(400 MHz, DMSO-d₆) 1,33-1,54 (m, 3H), 1,88 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 3,50-3,80 (m, 1H), 4,24 (s, 3H), 4,90-5,18 (m, 4H), 7,10 (dd, J=8,44, 0,58Hz, 2H), 7,45-7,47 (m, 4H), 8,03-8,31 (m, 3H)

[0361]

метансульфонат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,33-1,54 (m, 3H), 1,88 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 3,50-3,78 (m, 1H), 4,24 (s, 3H), 4,70-4,88 (m, 2H), 5,05-5,26 (m, 2H), 7,20-7,54 (m, 2H), 7,83-7,91 (m, 2H), 8,45 (s, 1H)

[0362]

фосфат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,26-1,48 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,36-3,65 (m, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,63-4,77 (m, 2H), 4,88-5,16 (m, 2H), 6,62-6,89 (m, 1H), 7,06 (brs, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 8,43 (s, 1H)

[0363]

тартрат 2-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-2H-индазол-6-карбонитрила

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) 1,26-1,48 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,40-3,69 (m, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,29 (s, 2H), 4,76-5,16 (m, 5H), 6,62-6,89 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 12,64 (brs, 2H)

[0364]

Стадия 2-2

6-циано-1-метил-1H-индазол-3-карбоновая кислота

[0365]

[0366]

6-Циано-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты Метиловый эфир (46,1 мг), полученный на стадии 1, смешивали с тетрагидрофураном (5 мл) и метанолом (2 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (160 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (160 мкл) и смесь дополнительно перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (1,3 мл) и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (41,8 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (4,21 (s, 3H), 7,63 (dd, J=8,44, 1,27Hz, 1H), 8,21 (d, J=8,55Hz, 1H), 8,52 (s, 1H), 13,29 (s, 1H)

[0367]

Стадия 3-2

1-метил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-индазол-6-карбонитрил

[0368]

[0369]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (35,4 мг) и 6-циано-1-метил-1H-индазол-3-карбоновую кислоту (21,7 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (1 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (54,9 мкл) и HATU (41,1 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и получали искомое соединение (32,3 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,37-1,42 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,26-3,63 (m, 1H), 4,21-4,24 (m, 3H), 4,84-5,39 (m, 4H), 6,77-6,87 (m, 1H), 7,08-7,09 (m, 1H), 7,60 (d, J=8,52Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,37Hz, 1H), 8,52-8,54 (m, 1H)

[0370]

Пример получения 4Синтез (5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанона и (5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанона (соединения примеров 9 и 10)

[0371]

Стадия 1

Метиловый эфир 5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты и метиловый эфир 5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты

[0372]

[0373]

5,6-Дифтор-2H-индазол-3-карбоновую кислоту (500 мг) и карбонат калия (1046 мг) смешивали с диметилформамидом (5 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли метилйодид (394 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 20:1 до 3:2) и получали метиловый эфир 5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты (202 мг) в качестве менее полярного соединения.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (4,04 (s, 3H), 4,48 (s, 3H), 7,48 (dd, J=10,02, 7,03Hz, 1H), 7,73 (dd, J=10,16, 7,77Hz, 1H)

Кроме того, метиловый эфир 5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты (259 мг) получали в качестве более полярного соединения.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (4,03 (s, 3H), 4,14 (s, 3H), 7,24 (dd, J=9,42, 6,13Hz, 1H), 7,98 (dd, J=9,72, 7,62Hz, 1H)

[0374]

Стадия 2-1

5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-карбоновая кислота

[0375]

[0376]

Метиловый эфир 5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-карбоновой кислоты (202 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (2 мл) и метанолом (2 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (671 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (1,8 мл) и воду. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (171 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (4,39 (s, 3H), 7,79-7,84 (m, 2H), 13,88 (brs, 1H)

[0377]

(5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон

[0378]

[0379]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (70,0 мг) и 5,6-дифтор-2-метил-2H-индазол-3-карбоновую кислоту (53,3 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (675 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (146 мкл) и HATU (96 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой очищали с помощью SCX колоночной хроматографии (от метанола до 1 н. раствора аммиак/метанол). Полученный неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон=от 5:1 до 1:4) и получали искомое соединение (69,0 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,24-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,29-3,35 (m, 1H), 3,70 (brs, 1H), 4,13 (s, 3H), 4,72-5,16 (m, 3H), 6,64-6,88 (m, 1H), 7,03-7,08 (m, 1H), 7,75-7,78 (m, 2H)

[0380]

Стадия 2-2

5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновая кислота

[0381]

[0382]

Метиловый эфир 5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновой кислоты (259 мг), полученный на стадии 1, смешивали с тетрагидрофураном (4 мл) и метанолом (4 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (857 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (2,3 мл) и воду. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (238 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (4,12 (d, J=6,47Hz, 3H), 7,89 (dd, J=10,06, 7,74Hz, 1H), 8,00 (dd, J=10,63, 6,70Hz, 1H), 13,18 (s, 1H)

[0383]

Стадия 3-2

(5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон

[0384]

[0385]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (70,0 мг) и 5,6-дифтор-1-метил-1H-индазол-3-карбоновую кислоту (53,3 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (675 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (146 мкл) и HATU (96 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой очищали с помощью SCX колоночной хроматографии (от метанола до 1 н. раствора аммиак/метанол). Полученный неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон=от 5:1 до 1:4) и получали искомое соединение (78,2 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,35-1,39 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,25-3,57 (m, 1H), 4,11-4,14 (m, 3H), 4,90-5,35 (m, 4H), 6,77-6,84 (m, 1H), 7,06-7,07 (m, 1H), 7,95-7,99 (m, 2H)

[0386]

Пример получения 5Синтез (2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанона (соединение примера 11)

[0387]

[0388]

2,2-Дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-карбоновую кислоту (55,0 мг), диизопропилэтиламин (146 мкл) и HATU (96,0 мг) смешивали с диметилформамидом (1 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (70,0 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон=от 9:1 до 1:4) и получали искомое соединение (80,7 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,26-1,40 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,15-5,04 (m, 5H), 6,65-6,84 (m, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,33-7,35 (m, 1H), 7,50 (d, J=8,09Hz, 1H), 7,57 (brs, 1H)

[0389]

Пример получения 6Синтез 6-(1-метил-5-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-3-ил)никотинонитрила (соединение примера 73)

[0390]

Стадия 1

6-ацетилникотинонитрил

[0391]

[0392]

2-Хлор-5-цианопиридин (1,5 г) и дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (760 мг) смешивали с толуолом (15 мл). В атмосфере аргона к этой смеси при комнатной температуре добавляли трибутил(1-этоксивинил)олово (4,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 130°C в течение 2 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 6 н. хлористоводородную кислоту (4 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси последовательно добавляли 4 н. водный раствор гидроксида натрия (4 мл) и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия для установления pH=9. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли водный раствор фторида калия и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водным раствором фторида калия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 20:1 до 3:2) и получали искомое соединение (1,3 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (2,73 (s, 3H), 8,09-8,14 (m, 2H), 8,94 (s, 1H)

[0393]

Стадия 2

этил-3-(5-цианопиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-карбоксилат

[0394]

[0395]

6-Ацетилникотинонитрил (731 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (7 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диэтилоксалат (812 мкл), этанол (29,2 мкл) и 60 мас./мас.% гидрид натрия (220 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли гидразинмоногидрат (267 мкл) и уксусную кислоту (630 мкл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и получали искомое соединение (182 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,43 (t, J=7,17Hz, 3H), 4,44 (q, J=7,08Hz, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,98-8,03 (m, 2H), 8,88 (d, J=1,49Hz, 1H)

[0396]

Стадия 3

Этиловый эфир 3-(5-цианопиридин-2-ил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты

[0397]

[0398]

Этил-3-(5-цианопиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-карбоксилат (182 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (2 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 60 мас./мас.% гидрид натрия (36 мг) и метилйодид (140 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли уксусную кислоту (51,5 мкл). Реакционную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 4:1 до 3:2) и получали искомое соединение (86,2 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,39 (t, J=7,17Hz, 3H), 4,26 (s, 3H), 4,37 (q, J=7,17Hz, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,95-8,07 (m, 2H), 8,86 (d, J=2,08Hz, 1H)

[0399]

Стадия 4

3-(5-цианопиридин-2-ил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновая кислота

[0400]

[0401]

Этиловый эфир 3-(5-цианопиридин-2-ил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (86,2 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (1,6 мл) и водой (0,4 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли моногидрат гидроксида лития (16,9 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту (403 мкл) и воду (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (70,5 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (4,19 (d, J=0,60Hz, 3H), 7,39 (s, 1H), 8,09 (d, J=8,37Hz, 1H), 8,34 (dd, J=8,37, 2,09Hz, 1H), 9,04-9,54 (m, 1H), 13,64 (brs, 1H)

[0402]

Стадия 5

6-(1-метил-5-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-3-ил)никотинонитрил

[0403]

[0404]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (60,0 мг) и 3-(5-цианопиридин-2-ил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (41,1 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (0,5 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (91,4 мкл) и HATU (68,4 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли этилацетат:гексан=1:1 и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (70,9 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,32, 1,42 (d, J=6,47, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,21-3,68 (m, 1H), 3,97-5,09 (m, 7H), 6,72-7,36 (m, 3H), 8,09 (d, J=8,20Hz, 1H), 8,33 (dd, J=8,20, 1,85Hz, 1H), 9,02 (s, 1H)

[0405]

Пример получения 7Синтез (3-(4-фторфенил)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанона (соединение примера 16) и его гидрохлорида

[0406]

[0407]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (60 мг) и 3-(4-фторфенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (46,5 мг) смешивали с диметилформамидом (0,4 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (107 мкл) и HATU (80,2 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси при комнатной температуре добавляли этилацетат.Реакционную смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (этилацетат) и получали искомое соединение (76,2 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,31-1,47 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,19-3,69 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,56 (m, 1H), 4,68-5,16 (m, 3H), 6,74, 6,87 (s, 1H), 7,01-7,31 (m, 4H), 7,82-7,91 (m, 2H)

[0408]

(3-(4-фторфенил)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанонгидрохлорид

[0409]

[0410]

(3-(4-Фторфенил)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон, полученный на предыдущей стадии, обрабатывали по обычной методике и получали гидрохлорид.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,43-1,50 (m, 3H), 1,93 (s, 3H), 3,37-3,74 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 4,13-5,30 (m, 4H), 7,00-7,54 (m, 4H), 7,84-8,00 (m, 3H)

[0411]

Пример получения 8Синтез 4-(1-циклопропил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-5-ил)бензонитрила (соединение примера 53)

[0412]

Стадия 1

Этиловый эфир (Z)-4-(4-цианофенил)-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновой кислоты

[0413]

[0414]

4-Ацетилбензонитрил (1,00 г) и диэтилоксалат (1,21 мл) смешивали с ацетонитрилом (8 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли трет-бутоксид натрия (1,32 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли воду и смесь дважды промывали диэтиловым эфиром. При охлаждении льдом 1 н. хлористоводородную кислоту добавляли к водному слою до установления pH равным примерно 4. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (1,02 г) в виде неочищенного продукта.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,41 (t, J=7,17Hz, 4H), 4,40 (q, J=7,17Hz, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,78-7,80 (m, 2H), 8,06-8,08 (m, 2H)

[0415]

Стадия 2

5-(4-цианофенил)-1-циклопропил-1H-пиразол-3-карбоновой кислоты Этиловый эфир

[0416]

[0417]

Этиловый эфир (Z)-4-(4-цианофенил)-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновой кислоты (400 мг), полученный на предыдущей стадии, и циклопропилгидразингидрохлорид (177 мг) смешивали с этанолом (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и при температуре 60°C в течение 6 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли циклопропилгидразингидрохлорид (177 мг) и смесь перемешивали при 60°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и добавляли этилацетат к полученному остатку. Реакционную смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=20:1) и получали искомое соединение (213 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,04-1,05 (m, 2H), 1,20-1,20 (m, 2H), 1,38 (t, J=7,05Hz, 3H), 3,60-3,64 (m, 1H), 4,40 (q, J=7,17Hz, 3H), 6,91 (s, 1H), 7,70-7,71 (m, 2H), 7,76-7,77 (m, 2H)

[0418]

Стадия 3

5-(4-цианофенил)-1-циклопропил-1H-пиразол-3-карбоновая кислота

[0419]

[0420]

Этиловый эфир 5-(4-цианофенил)-1-циклопропил-1H-пиразол-3-карбоновой кислоты (38,5 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (400 мкл) и метанолом (400 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (137 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 6 н. хлористоводородную кислоту (46 мкл). Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение (43,9 мг) в виде неочищенного продукта.

[0421]

Стадия 4

4-(1-циклопропил-3-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-5-ил)бензонитрил

[0422]

[0423]

5-(4-Цианофенил)-1-циклопропил-1H-пиразол-3-карбоновую кислоту (43,9 мг), полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (0,4 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (88,4 мкл), HATU (51,9 мг) и (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (48,8 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=10:1) и получали искомое соединение (55,9 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (0,98-1,24 (m, 4H), 1,46-1,47 (m, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,26-3,66 (m, 2H), 3,98-5,61 (m, 5H), 6,81-6,90 (m, 1H), 7,67-7,80 (m, 4H)

[0424]

Пример получения 9Синтез 4-(4-хлор-1-метил-5-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-3-ил)бензонитрил (соединение примера 40)

[0425]

Стадия 1

Этиловый эфир 3-(4-цианофенил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты

[0426]

[0427]

Этиловый эфир (Z)-4-(4-цианофенил)-2-гидрокси-4-оксобут-2-еновой кислоты (600 мг) и гидразинмоногидрат (119 мкл) смешивали с этанолом (9 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли уксусную кислоту (140 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и при температуре 50°C в течение 4,5 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли этанол и гексан и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (462 мг).

[0428]

Стадия 2

Этиловый эфир 3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты

[0429]

[0430]

Этиловый эфир 3-(4-цианофенил)-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (241 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (2,5 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 60 мас./мас.% гидрид натрия (44 мг) и метилйодид (187 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=3:7) и получали искомое соединение (201 мг).

[0431]

Стадия 3

Этиловый эфир 4-хлор-3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты

[0432]

[0433]

Этиловый эфир 3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (50,0 мг), полученный на предыдущей стадии, перемешивали с ацетонитрилом (750 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли N-хлорсукцинимид (52,3 мг) и трифторуксусную кислоту (33,0 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси при комнатной температуре добавляли хлороформ (750 мкл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и при температуре 70°C в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к полученному остатку добавляли этилацетат. Реакционную смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором сульфита натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (61,8 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,45 (t, J=7,03Hz, 3H), 4,21 (s, 3H), 4,45 (q, J=7,17Hz, 2H), 7,72 (d, J=8,67Hz, 2H), 8,05 (d, J=8,97Hz, 2H)

[0434]

Стадия 4

4-хлор-3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновая кислота

[0435]

[0436]

Этиловый эфир 4-хлор-3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (38,5 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (400 мкл) и метанолом (400 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (137 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 6 н. хлористоводородную кислоту (46 мкл). Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение (49,3 мг) в виде неочищенного продукта.

[0437]

Стадия 5

4-(4-хлор-1-метил-5-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)-1H-пиразол-3-ил)бензонитрил

[0438]

[0439]

Неочищенный продукт (42,1 мг) 4-хлор-3-(4-цианофенил)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту, полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (400 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (86,5 мкл), HATU (51,9 мг) и (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (48,8 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=12:1) и получали искомое соединение (46,4 мг).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,33-1,57 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 3,38-3,96 (m, 6H), 4,61-5,29 (m, 3H), 6,80, 6,94 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,55Hz, 2H), 8,03 (d, J=8,32Hz, 2H)

[0440]

Пример получения 10Синтез (2-(4-фторфенил)пиридин-4-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанона (соединение примера 48) и его гидрохлорида

[0441]

Стадия 1

2-(4-фторфенил)изоникотиноилхлорид

[0442]

[0443]

2-(4-Фторфенил)изоникотиновую кислоту (34 мг) перемешивали с хлороформом (1,2 мл). При охлаждении льдом добавляли оксалилхлорид (26 мкл) и каталитическое количество диметилформамида. К реакционной смеси добавляли тетрагидрофуран (1 мл) и смесь перемешивали при 50°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение в виде неочищенного продукта.

[0444]

Стадия 2

(2-(4-фторфенил)пиридин-4-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон

[0445]

[0446]

Неочищенный продукт 2-(4-фторфенил)изоникотиноилхлорид, полученный на предыдущей стадии, перемешивали с хлороформом (1,0 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли (R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (39 мг) и триэтиламин (67 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли этилацетат и смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=10:1) и получали искомое соединение (14,3 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,28-1,46 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,19-5,11 (m, 5H), 6,65-6,87 (m, 1H), 7,03-7,09 (m, 1H), 7,29-7,35 (m, 2H), 7,37-7,43 (m,1H), 8,01-8,02 (m, 1H), 8,18-8,21 (m, 2H), 8,75-8,76 (m, 1H)

[0447]

Стадия 3

(2-(4-фторфенил)пиридин-4-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанонгидрохлорид

[0448]

[0449]

(2-(4-Фторфенил)пиридин-4-ил)((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидроимидазо[1,5-a]пиразин-7(8H)-ил)метанон, полученный на предыдущей стадии, обрабатывали по обычной методике и получали гидрохлорид.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,41, 1,55 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,97 (s, 3H), 3,34-5,28 (m, 5H), 7,31-7,66 (m, 4H), 8,03, 8,10 (s, 1H), 8,18-8,26 (m, 3H), 8,79-8,80 (m, 1H)

[0450]

Пример получения 11Синтез 4-(5-фтор-4-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)пиридин-2-ил)бензонитрила (соединение примера 68)

[0451]

Стадия 1

Метиловый эфир 2-бром-5-фторизоникотиновой кислоты

[0452]

[0453]

2-Бром-5-фторизоникотиновую кислоту (1,1 г) смешивали с толуолом (15 мл) и метанолом (5 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли 2M раствор триметилсилилдиазометан/гексан. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (1,17 г) в виде неочищенного продукта.

[0454]

Стадия 2

Метиловый эфир 2-(4-цианофенил)-5-фторизоникотиновой кислоты

[0455]

[0456]

Неочищенный продукт метиловый эфир 2-бром-5-фторизоникотиновой кислоты (234 мг), полученный на предыдущей стадии, 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил (229 мг), бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(II) (14 мг) и карбонат калия (415 мг) смешивали с толуолом (3 мл) и метанолом (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение 2 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 1 н. хлористоводородную кислоту для установления pH=7. К реакционной смеси добавляли этилацетат и смесь последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 10:1 до 5:1). Элюат концентрировали и к полученному остатку добавляли гексан. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (152 мг).

[0457]

Стадия 3

2-(4-цианофенил)-5-фторизоникотиновая кислота

[0458]

[0459]

Метиловый эфир 2-(4-цианофенил)-5-фторизоникотиновой кислоты (43 мг), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (1 мл) и метанолом (0,3 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (140 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли 6 н. хлористоводородную кислоту (47 мкл). Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение в виде неочищенного продукта.

[0460]

Стадия 4

4-(5-фтор-4-((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-7-карбонил)пиридин-2-ил)бензонитрил

[0461]

[0462]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,5-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (45 мг) и неочищенный продукт 2-(4-цианофенил)-5-фторизоникотиновую кислоту, полученную на предыдущей стадии, смешивали с диметилформамидом (1 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (96 мкл) и HATU (64 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси при комнатной температуре добавляли этилацетат. Реакционную смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=9:1) и получали искомое соединение (59,4 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,29-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,23-5,12 (m, 5H), 6,64-6,88 (m, 1H), 7,06-7,11 (m, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H), 8,25-8,32 (m, 3H), 8,85-8,86 (m, 1H)

[0463]

Пример получения 12Синтез (3-циклопропил-1H-пиразол-5-ил)((R)-4-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-4,7-дигидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-6(5H)-ил)метанона (соединение примера 111)

[0464]

Стадия 1

(3R,7aS)-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он

[0465]

[0466]

(S)-5-(Гидроксиметил)пирролидин-2-он (50 г), бензальдегид (69,1 г) и гидрат п-толуолсульфоновой кислоты смешивали с толуолом (300 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 130°C при удалении воды с помощью аппарата Дина-Штарка. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 10:1 до 1:1) и получали искомое соединение (45,8 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,92-1,95 (m, 1H), 2,33-2,41 (m, 1H), 2,52-2,57 (m, 1H), 2,80 (dt, J=18,34, 8,67Hz, 1H), 3,48 (t, J=7,98Hz, 1H), 4,10-4,17 (m, 1H), 4,22 (dd, J=7,86, 6,24Hz, 1H), 6,32 (s, 1H), 7,30-7,35 (m, 3H), 7,42-7,44 (m, 2H)

[0467]

Стадия 2

(3R,6S,7aS)-6-метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он

[0468]

[0469]

Диизопропиламин (13,2 мл) смешивали с тетрагидрофураном (50 мл). К этому раствору при охлаждении льдом по каплям добавляли 1,6 M раствор н-бутиллитий/гексан (57,8 мл). Реакционную смесь охлаждали до -78°C и по каплям добавляли раствор (3R,7aS)-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-она (17,4 г), полученный на предыдущей стадии, в тетрагидрофуране (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и при -78°C по каплям добавляли метилйодид (5,86 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и по каплям добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и воду. Реакционную смесь дважды экстрагировали этилацетатом и объединенный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1) и получали искомое соединение (11,3 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) 1,23 (d, J=6,01Hz, 3H), 1,50-1,53 (m, 1H), 2,58-2,62 (m, 1H), 2,90-2,97 (m, 1H), 3,51 (d, J=7,74Hz, 1H), 4,08 (s, 1H), 4,22 (dd, J=8,21, 6,36Hz, 1H), 6,32 (s, 1H), 7,31-7,35 (m, 3H), 7,42-7,44 (m, 2H)

[0470]

Стадия 3

(3R,6R,7aS)-6-метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-он

[0471]

[0472]

2,0M Раствор диизопропиламид лития/тетрагидрофуран/гептан/этилбензол (97,9 мл) смешивали с тетрагидрофураном (180 мл). К этой смеси при температуре -78°C по каплям добавляли раствор (3R,6S,7aS)-6-метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-она (30,4 г) в тетрагидрофуране (120 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и добавляли тетрагидрофуран/вода (60 мл/30 мл). К реакционной смеси при 0°C добавляли воду (200 мл) и смесь дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (34,8 г) в виде неочищенного продукта.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,34 (d, J=7,40Hz, 3H), 1,94-2,01 (m, 1H), 2,15-2,22 (m, 1H), 2,70-2,74 (m, 1H), 3,41 (t, J=8,32Hz, 1H), 4,08 (s, 1H), 4,21 (t, J=7,17Hz, 1H), 6,30 (s, 1H), 7,30-7,37 (m, 3H), 7,43-7,44 (m, 2H)

[0473]

Стадия 4

((2S,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-2-ил)метанол

[0474]

[0475]

К 2,5M раствору алюмогидрид лития/тетрагидрофуран (73,6 мл) при охлаждении льдом по каплям добавляли раствор неочищенного продукта (30,8 г) (3R,6R,7aS)-6-метил-3-фенилтетрагидро-3H,5H-пирроло[1,2-c]оксазол-5-она, полученный на предыдущей стадии, в тетрагидрофуране (110 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 ч. К реакционной смеси медленно при охлаждении льдом по каплям добавляли воду (7 мл), 4 н. водный раствор гидроксида натрия (7 мл) и воду (21 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляли сульфат натрия и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Эту смесь фильтровали через целит и твердое вещество последовательно промывали этилацетатом (100 мл) и тетрагидрофураном (400 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом и получали искомое соединение (32,5 г) в виде неочищенного продукта.

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) 0,94 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,50-1,55 (m, 1H), 1,94-1,98 (m, 2H), 2,10-2,12 (m, 1H), 2,80 (s, 1H), 3,01 (dd, J=7,51, 3,76Hz, 1H), 3,34-3,37 (m, 2H), 3,61 (dd, J=10,75, 3,35Hz, 1H), 3,92 (d, J=12,95Hz, 1H), 7,15-7,32 (m, 5H)

[0476]

Стадия 5

(3R,5R)-1-бензил-5-метилпиперидин-3-ол

[0477]

[0478]

Неочищенный продукт (32,5 г) ((2S,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-2-ил)метанол, полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (200 мл). К этой смеси при температуре -78°C добавляли трифторуксусный ангидрид (23,6 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси при температуре -78°C добавляли триэтиламин (78,9 мл). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 6 ч. К реакционной смеси при комнатной температуре добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (234 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли воду и смесь трижды экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1) и получали искомое соединение (25,4 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (0,82 (d, J=6,70Hz, 3H), 0,99-1,06 (m, 1H), 1,81-1,84 (m, 1H), 1,96-2,00 (m, 1H), 2,09 (dd, J=11,21, 1,50Hz, 1H), 2,77 (dt, J=11,02, 2,02Hz, 1H), 2,83-2,85 (m, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,85 (brs, 1H), 7,22-7,32 (m, 5H)

[0479]

Стадия 6

(R)-1-бензил-5-метилпиперидин-3-он

[0480]

[0481]

(3R,5R)-1-Бензил-5-метилпиперидин-3-ол (25,2 г), полученный на предыдущей стадии, триэтиламин (49,8 г) и диметилсульфоксид (48,0 г) смешивали с хлороформом (180 мл). К реакционной смеси при охлаждении льдом добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (43,1 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли воду (150 мл) и смесь экстрагировали хлороформом. К водному слою добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь 4 раза экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным рассолом. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=6:1) и получали искомое соединение (20,6 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (0,97 (d, J=6,24Hz, 3H), 1,95 (dd, J=15,14, 9,83Hz, 1H), 2,08-2,16 (m, 2H), 2,44-2,49 (m, 1H), 2,76 (d, J=14,33Hz, 1H), 2,85-2,86 (m, 1H), 3,15 (dt, J=14,33, 1,50Hz, 1H), 3,57 (d, J=5,45Hz, 2H), 7,23-7,33 (m, 5H)

[0482]

Стадия 7

Этиловый эфир (4R)-6-бензил-7a-гидрокси-4-метил-3a,4,5,6,7,7a-гексагидроизоксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты

[0483]

[0484]

Этил-2-хлор-2-(гидроксимино)ацетат (16,4 г) смешивали с тетрагидрофураном (150 мл). К этому раствору при температуре -78°C по каплям добавляли 1,1M раствор бис(триметилсилил)амид лития/тетрагидрофуран (108 мл) для получения раствора нитрилоксида. В другой реакционный сосуд добавляли 1,1 M раствор бис(триметилсилил)амид лития/тетрагидрофурана (90,0 мл). К этому раствору при -78°C добавляли раствор (R)-1-бензил-5-метилпиперидин-3-она (18,3 г), полученный на предыдущей стадии, в тетрагидрофуране (140 мл). Эту реакционную смесь через канюлю по каплям добавляли к указанному выше раствору нитрилоксида, охлажденному до -78°C. Эту реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и ей давали нагреваться до 10°C в течение 1,5 ч. К реакционной смеси при температуре -20°C по каплям добавляли 2 н. хлористоводородную кислоту (150 мл). При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду для установления pH, равного примерно 8. Эту смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=3:1) и получали искомое соединение (22,4 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,09 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,37 (t, J=7,17Hz, 3H), 1,59-1,66 (m, 1H), 1,79 (t, J=11,44Hz, 1H), 2,37-2,40 (brm, 1H), 2,71-2,76 (m, 3H), 3,33 (dd, J=12,60, 1,50Hz, 1H), 3,58-3,63 (m, 2H), 4,36 (ddd, J=14,28, 7,11, 1,10Hz, 2H), 7,23-7,31 (m, 5H)

[0485]

Стадия 8

Этиловый эфир (R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты

[0486]

[0487]

Этиловый эфир (4R)-6-бензил-7a-гидрокси-4-метил-3a,4,5,6,7,7a-гексагидроизоксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты (22,4 г), полученный на предыдущей стадии, и триэтиламин (39,2 мл) смешивали с тетрагидрофураном (200 мл). При охлаждении льдом к этой смеси по каплям добавляли метансульфонилхлорид (10,9 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=2:1) и получали искомое соединение (19,0 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,26 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,40 (t, J=7,17Hz, 3H), 2,61 (m, 2H), 3,03 (brs, 1H), 3,40 (d, J=15,72Hz, 1H), 3,71-3,77 (m, 3H), 4,42 (q, J=7,09Hz, 2H), 7,27-7,34 (m, 5H)

[0488]

Стадия 9

(R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновая кислота

[0489]

[0490]

Этиловый эфир (R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновой кислоты (19,0 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (95 мл) и метанолом (95 мл). При охлаждении льдом к этой смеси по каплям добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия (44,9 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси по каплям добавляли 6 н. хлористоводородную кислоту (15,0 мл). Эту реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде неочищенного продукта.

[0491]

Стадия 10

(R)-6-бензил-N-метокси-N,4-диметил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоксамид

[0492]

[0493]

Неочищенный продукт (R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоновую кислоту, полученную на предыдущей стадии, и N, O-диметилгидроксиламингидрохлорид (9,39 г) смешивали с диметилформамидом (190 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (33,5 мл) и HATU (29,3 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=2:1) и получали искомое соединение (19,3 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,14 (d, J=6,70Hz, 3H), 2,39 (dd, J=11,56, 6,01Hz, 1H), 2,78 (dd, J=11,79, 4,62Hz, 1H), 2,99 (brs, 1H), 3,37 (brs, 3H), 3,55-3,63 (m, 2H), 3,70-3,73 (m, 5H), 7,29-7,32 (m, 5H)

[0494]

Стадия 11

(R)-1-(6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)этан-1-он

[0495]

[0496]

(R)-6-Бензил-N-метокси-N,4-диметил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-карбоксамид (19,3 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (100 мл). При охлаждении льдом 3,0M к этой смеси по каплям добавляли раствор метилмагнийбромид/диэтиловый эфир (30,6 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси медленно добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). К реакционной смеси добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=4:1) и получали искомое соединение (15,7 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,23 (d, J=5,66Hz, 3H), 2,54-2,65 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 3,03 (d, J=6,47Hz, 1H), 3,39 (d, J=15,26Hz, 1H), 3,68-3,77 (m, 3H), 7,26-7,39 (m, 5H)

[0497]

Стадия 12

(R)-2-((R)-6-бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)-1,1,1-трифторпропан-2-ол

[0498]

[0499]

(R)-1-(6-Бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)этан-1-он (15,5 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с тетрагидрофураном (150 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли фторид цезия (1,71 г) и по каплям добавляли (трифторметил)триметилсилан (12,5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при охлаждении льдом в течение 1 ч. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли метанол (150 мл) и карбонат калия (11,7 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Эту реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=6:1) и получали искомое соединение (10,3 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,30 (d, J=6,94Hz, 3H), 1,83 (s, 3H), 2,52 (dd, J=11,56, 3,70Hz, 1H), 2,67 (dd, J=11,68, 2,66Hz, 1H), 2,84 (s, 1H), 2,89 (brs, 1H), 3,28 (d, J=15,72Hz, 1H), 3,72 (dd, J=15,95, 13,18Hz, 2H), 3,83 (d, J=15,49Hz, 1H), 7,25-7,37 (m, 5H)

[0500]

Стадия 13

(9H-флуорен-9-ил)метил (R)-4-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-4,7-дигидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-6(5H)-карбоксилат

[0501]

[0502]

(R)-2-((R)-6-Бензил-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (10,3 г), полученный на предыдущей стадии, перемешивали с хлороформом (150 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 9-флуоренилметилхлорформиат (9,3 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Эту реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=4:1) и получали искомое соединение (9,9 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (0,96, 1,12 (m, 3H), 1,84 (s, 3H), 2,80-2,98 (m, 3H), 3,84-4,15 (m, 3H), 4,55-4,58 (m, 2H), 4,81-5,05 (m, 1H), 7,33-7,37 (m, 4H), 7,56 (d, J=7,40Hz, 2H), 7,76 (d, J=7,40Hz, 2H)

[0503]

Стадия 14

(R)-1,1,1-трифтор-2-((R)-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)пропан-2-ол

[0504]

[0505]

(9H-Флуорен-9-ил)метил (R)-4-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-4,7-дигидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-6(5H)-карбоксилат (9,9 г), полученный на предыдущей стадии, перемешивали с ацетонитрилом (200 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диэтиламин (32,3 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с метанолом. Полученный остаток очищали с помощью SCX колоночной хроматографии (от метанола до 1 н. раствора аммиак/метанол) и дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=1:2). К полученному твердому веществу добавляли этилацетат (10 мл) и гексан (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (3,91 г).

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) (1,27 (d, J=6,88Hz, 3H), 1,86 (s, 3H), 2,91-2,93 (m, 3H), 3,93-4,01 (m, 2H)

[0506]

Стадия 15

(3-циклопропил-1H-пиразол-5-ил)((R)-4-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-4,7-дигидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-6(5H)-ил)метанон

[0507]

[0508]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((R)-4-метил-4,5,6,7-тетрагидроизооксазоло[5,4-c]пиридин-3-ил)пропан-2-ол (90 мг), полученный на предыдущей стадии, и 3-циклопропил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (61 мг) смешивали с диметилформамидом (675 мкл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (87 мкл) и HATU (151 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли хлороформ и диэтиловый эфир и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (119 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (0,68-0,72 (m, 2H), 0,90-0,97 (m, 2H), 1,11-1,17 (m, 3H), 1,71 (s, 3H), 1,88-1,95 (m, 1H), 2,95-3,10 (m, 1,5H), 3,34-3,46 (m, 0,5H), 4,24-4,54 (m, 1H), 4,61-4,97 (m, 1H), 5,18-5,30 (m, 0,5H), 5,76-5,91 (m, 0,5H), 6,22-6,35 (m, 1H), 7,09 (s, 1H), 13,01 (s, 1H)

[0509]

Пример получения 13Синтез ((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил)(1-метил-3-фенил-1H-пиразол-5-ил)метанона (соединение примера 122)

[0510]

Стадия 1

трет-бутил-(R)-2-(3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропаноил)гидразин-1-карбоксилат

[0511]

[0512]

(R)-3,3,3-Трифтор-2-гидрокси-2-метилпропановую кислоту (4,74 г), трет-бутилкарбазат (5,55 г) и моногидрат 1-гидроксибензотриазола смешивали с ацетонитрилом (50 мл). При охлаждении льдом добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорид (2,75 г) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Эту смесь концентрировали при пониженном давлении. Добавляли этилацетат и 0,5 н. хлористоводородную кислоту и слои разделяли. Органический слой последовательно промывали водой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение (9,18 г) в виде неочищенного продукта.

[0513]

Стадия 2

(R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропангидразид

[0514]

[0515]

Неочищенный продукт (4,74 г) трет-бутил-(R)-2-(3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропаноил)гидразин-1-карбоксилат, полученный на предыдущей стадии, перемешивали с этилацетатом (40 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 4 н. раствор хлористоводородная кислота/этилацетат (40 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Эту смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол=от 20:1 до 9:1) и получали искомое соединение (4,10 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,45 (s, 3H), 4,34 (brs, 2H), 6,85 (brs, 1H), 9,30 (brs, 1H)

[0516]

Стадия 3

(S)-(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропил)глицин Метиловый эфир

[0517]

[0518]

трет-Бутил-(S)-(1-оксопропан-2-ил)карбамат (5,2 г) и метиловый эфир гидрохлорида глицина (7,53 г) смешивали с хлороформом (100 мл). При охлаждении льдом добавляли диизопропилэтиламин (7,75 мл) и триацетоксиборогидрид натрия (9,93 г). Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и слои разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=1:1 до хлороформ:метанол=20:1) и получали искомое соединение (8,44 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (0,99 (d, J=6,60Hz, 3H), 1,37 (s, 9H), 1,95 (brs, 1H), 2,39-2,48 (m, 2H), 3,48 (brs, 1H), 3,61-3,62 (m, 4H), 6,56 (brs, 1H)

[0519]

Стадия 4

трет-бутил-(S)-3-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат

[0520]

[0521]

Метиловый эфир (S)-(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропил)глицина (8,4 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с метанолом (80 мл). К этой смеси при комнатной температуре добавляли 4 н. раствор хлористоводородная кислота/1,4-диоксан (23 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли метанол (90 мл) и ацетат натрия (7,4 г) и смесь перемешивали при 70°C в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали при комнатной температуре и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и подвергали азеотропной перегонке с толуолом. К полученному остатку добавляли хлороформ (100 мл), триэтиламин (5,0 мл) и ди-трет-бутилдикарбонат и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали при комнатной температуре и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=1:1 до этилацетат:метанол=20:1). К полученному твердому веществу добавляли этилацетат (8 мл) и гексан (35 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Эту смесь собирали фильтрованием и получали искомое соединение (3,13 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,04 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,39 (s, 9H), 3,00 (brs, 1H), 3,43 (brs, 1H), 3,61 (brs, 1H), 3,75-3,83 (m, 2H), 8,03 (brs, 1H)

[0522]

Стадия 5

трет-бутил-(S)-3-метил-5-тиооксопиперазин-1-карбоксилат

[0523]

[0524]

трет-Бутил-(S)-3-метил-5-оксопиперазин-1-карбоксилат (3,1 г), полученный на предыдущей стадии, и реагент Лавессона (4,14 г) смешивали с тетрагидрофураном (50 мл). Эту смесь перемешивали при 75°C в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат=от 3:1 до 3:2) и получали искомое соединение (2,69 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,26 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 2,98 (brs, 1H), 3,65 (brs, 1H), 3,99 (brs, 1H), 4,34 (d, J=19,88Hz, 1H), 4,67 (d, J=20,11Hz, 1H), 8,25 (brs, 1H)

[0525]

Стадия 6

Гидройодид трет-бутил-(S)-3-метил-5-(метилтио)-3,6-дигидропиразин-1(2H)-карбоксилата

[0526]

[0527]

трет-Бутил-(S)-3-метил-5-тиооксопиперазин-1-карбоксилат (2,68 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с ацетоном (50 мл). К этой смеси добавляли йодметан (3,63 мл) и смесь перемешивали при 45°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и получали искомое соединение в виде неочищенного продукта.

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,23 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,42 (s, 9H), 2,62 (s, 3H), 3,26 (brs, 1H), 3,67 (dd, J=13,41, 4,16Hz, 1H), 3,87-3,89 (m, 1H), 4,52 (brs, 2H)

[0528]

Стадия 7

трет-бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат

[0529]

[0530]

Неочищенный продукт гидройодид трет-бутил-(S)-3-метил-5-(метилтио)-3,6-дигидропиразин-1(2H)-карбоксилата, полученный на предыдущей стадии, и (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропангидразид (2,01 г), полученный на стадии 2, смешивали с 2-пропанолом (80 мл) и водой (15 мл). К этой смеси добавляли уксусную кислоту (1,33 мл) и смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали хлороформом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=1:9 до этилацетата). К полученному твердому веществу добавляли диэтиловый эфир и гексан и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (1,30 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,32 (d, J=5,78Hz, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,82 (s, 3H), 3,12-3,30 (m, 1H), 4,05 (d, J=38,15Hz, 1H), 4,44 (dd, J=43,70, 17,11Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,96 (d, J=16,88Hz, 1H), 7,42 (s, 1H)

[0531]

Стадия 8

(R)-1,1,1-трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид

[0532]

[0533]

трет-Бутил-(S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-карбоксилат (1,3 г), полученный на предыдущей стадии, смешивали с метанолом (2 мл) и этилацетатом (2 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли 4 н. раствор хлористоводородная кислота/этилацетат (5,0 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и дополнительно при температуре 60°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли метанол, этилацетат и диэтиловый эфир. Осадившееся твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (1,08 г).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,60 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,84 (s, 3H), 3,42 (dd, J=14,10, 6,94Hz, 1H), 3,57 (d, J=12,48Hz, 1H), 4,45 (d, J=16,18Hz, 1H), 4,58 (d, J=15,95Hz, 1H), 4,97-4,98 (m, 1H), 7,64 (brs, 2H), 9,93 (brs, 1H), 10,81 (brs, 1H)

[0534]

Стадия 9

((S)-5-метил-3-((R)-1,1,1-трифтор-2-гидроксипропан-2-ил)-5,6-дигидро-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил)(1-метил-3-фенил-1H-пиразол-5-ил)метанон

[0535]

[0536]

(R)-1,1,1-Трифтор-2-((S)-5-метил-5,6,7,8-тетрагидро[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-3-ил)пропан-2-олдигидрохлорид (39 мг), полученный на предыдущей стадии, и 1-метил-3-фенил-1H-пиразол-5-карбоновую кислоту (29,1 мг) смешивали с диметилформамидом (0,6 мл). При охлаждении льдом к этой смеси добавляли диизопропилэтиламин (83 мкл) и HATU (55 мг) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. При охлаждении льдом к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (от гексан:этилацетат=2:1 до хлороформ:метанол=20:1). К полученному твердому веществу добавляли этилацетат и гексан и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердое вещество собирали фильтрованием и получали искомое соединение (41,7 мг).

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (1,34-1,46 (m, 3H), 1,83 (s, 3H), 3,26-3,38 (m, 0,5H), 3,64-3,77 (m, 0,5H), 3,91 (s, 3H), 4,10-4,22 (m, 0,5H), 4,60-4,75 (m, 1H), 4,85-5,06 (m, 1,5H), 5,18-5,32 (m, 1H), 6,93-7,02 (m, 0,5H), 7,19-7,27 (m, 0,5H), 7,32 (tt, J=7,40, 1,46Hz, 1H), 7,42 (t, J=7,63Hz, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,80-7,86 (m, 2H)

[0537]

Соединения примеров 1-123 получали по методикам, сходным с указанными выше методиками получения 1-6 и примерами получения 1-13, или при необходимости по другим известным методикам. Структурные формулы и характеристики соединений примеров приведены в последующих таблицах.

[0538]

[Таблица 1-1]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
1		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,25-1,47 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,26-3,40 (m, 1 H), 3,74 (brs, 1 H), 4,17 (s, 3H), 4,77-4,91 (m, 2H), 5,14-5,17 (m, 1H), 6,67-6,89 (m, 1H), 7,05 (s, 1 H), 7,23-7,25 (m, 1 H), 7,48 (brs, 1 H), 7,80 (brs, 1H)	426	424
2		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,49-1,51 (m, 3H), 1,96 (s, 3H), 3,39-3,76 (m, 1 H), 3,63 (brs, 1 H), 4,76-4,84 (m, 1 H), 5,24-5,53 (m, 3H), 6,92-6,94 (m, 1H), 7,22-7,28 (m, 1 H), 7,48 -7,54 (m, 1H), 7,60-7,62 (m, 1 H)	413	411
3		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,41-1,50 (m, 3H), 1,96-1,97 (m, 3H), 3,12-3,65 (m, 7H), 3,99-5,08 (m, 4H), 6,91 (s, 1H), 7,16-7,21 (m, 4H)	394	392
4		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,25-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,26-3,37 (m, 1 H), 3,67 (brs, 1 H), 4,22 (s, 3H), 4,76-5,16 (m, 3H), 6,62-6,89 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,91 (brs, 1H), 8,43 (s, 1 H)	433	431
5		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,37-1,42 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,26-3,63 (m, 1 H), 4,21-4,24 (m, 3H), 4,84 -5,39 (m, 4H), 6,77-6,87 (m, 1 H), 7,08-7,09 (m, 1 H), 7,60 (d, J=8,52Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,37Hz, 1H), 8,52-8,54 (m, 1 H)	433	431
6		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,26-1,41 (m, 3H), 1,75-1,76 (m, 3H), 3,33 -5,15 (m, 5H), 4,08-4,11 (m, 3H), 6,69-6,81 (m, 1H), 7,01-7,09 (m, 1H), 7,33-7,36 (m, 1H)	444	442

[0539]

[Таблица 1-2]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
7		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,29-1,41 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,30-5,10 (m, 5H), 4,06-4,16 (m, 3H), 6,64 -6,84 (m, 1H), 7,05-7,10 (m, 1 H), 7,55-7,56 (m, 1 H)	444	488 (M-1+46)
8		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,38 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,55 (brs, 1 H), 4,42 (d, J=12,72Hz, 1 H), 4,97-5,07 (m, 3H), 6,82 (s, 1 H), 7,09 (s, 1H), 7,56-7,61 (m, 1 H), 7,82 (dd, J=9,94, 5,32Hz, 1 H), 8,26 (s, 1H), 9,11-9,12 (m, 1H)	412	410
9		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,29-3,35 (m, 1 H), 3,70 (brs, 1 H), 4,13 (s, 3H), 4,72-5,16 (m, 3H), 6,64-6,88 (m, 1 H), 7,03-7,08 (m, 1 H), 7,75-7,78 (m, 2H)	444	442
10		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,35-1,39 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,25-3,57 (m, 1H), 4,11-4,14 (m, 3H), 4,90 -5,35 (m, 4H), 6,77-6,84 (m, 1 H), 7,06-7,07 (m, 1 H), 7,95-7,99 (m, 2H)	444	442
11		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,26-1,40 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,15-5,04 (m, 5H), 6,65-6,84 (m, 1H), 7,05 (s, 1 H), 7,33-7,35 (m, 1 H), 7,50 (d, J=8,09Hz, 1 H), 7,57 (brs, 1 H)	434	432
12		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,31 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,44-3,69 (m, 2H), 4,20 (s, 3H), 4,71-4,87 (m, 3H), 6,79 (brs, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 7,30 (d, J=8,80Hz, 1H), 7,65 (d, J=8,80Hz, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 8,45 (s, 1 H)	408	406

[0540]

[Таблица 1-3]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
13		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,39 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,69 (brs, 1 H), 4,55-5,01 (m, 4H), 6,83 (brs, 1 H), 7,09 (s, 1 H), 7,34 (t, J=7,17Hz, 1H), 7,44-7,49 (m, 1 H), 7,51 (brs, 1H), 7,69 (d, J=8,32Hz, 1H), 7,77 (d, J=7,63Hz, 1 H)	394	392
14		(400 MHz, CDCl₃) δ: 0,68-0,78 (m, 2H), 0,90-0,97 (m, 2H), 1,35-1,49 (m, 3H), 1,86-1,98 (m, 1 H), 1,96 (s, 3H), 2,93-3,39 (m, 0,7H), 3,54 -3,65 (m, 0,4H), 3,91 (s, 3H), 4,02 -4,17 (m, 0,6H), 4,54-4,76 (m, 0,3H), 4,72 (d, J=17,73Hz, 1 H), 4,94-5,14 (m, 2H), 5,95-6,16 (m, 1H), 6,77-6,99 (m, 1 H)	398	396
15		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,35-1,39 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,21-3,25 (m, 1H), 3,62-5,09 (m, 5H), 3,92 (s, 3H), 6,72-6,86 (m, 1 H), 7,07 -7,15 (m, 2H), 7,31 (t, J=7,40Hz, 1H), 7,41 (t, J=7,40Hz, 2H), 7,81 (d, J=7,17Hz, 2H)	434	432
16		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,31-1,47 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,19-3,69 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 4,03-4,56 (m, 1H), 4,68-5,16 (m, 3H), 6,74, 6,87 (s, 1H), 7,01-7,31 (m, 4H), 7,82-7,91 (m, 2H)	452	450
17		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,29-1,41 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,16-3,93 (m, 2H), 4,55-5,13 (m, 3H), 6,71 -6,89 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,41 -7,52 (m, 2H), 7,59-7,72 (m, 2H), 8,05-8,18 (m, 1 H)	506	504
18		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,68-0,74 (m, 2H), 0,95-1,02 (m, 2H), 1,20 -1,43 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,92 -1,99 (m, 1H), 3,10-3,31 (m, 0,5H), 3,43-3,58 (m, 0,6H), 3,65-3,78 (m, 0,6H), 4,39-5,06 (m, 3,3H), 6,58-6,86 (m, 1H), 7,03 (s, 1 H), 7,14 (d, J=8,09Hz, 2H), 7,33 (d, J=7,40Hz, 2H)	394	392

[0541]

[Таблица 1-4]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
19		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,00-1,01 (m, 4H), 1,37, 1,50 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,93 (s, 3H), 1,97-1,98 (m, 1H), 3,42-3,77 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 4,03-5,20 (m, 4H), 6,81, 6,92 (s, 1H)	423	421
20		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,27-1,42 (m, 3H), 1,57-1,68 (m, 2H), 1,73 -1,83 (m, 2H), 1,76 (s, 3H), 2,75 -2,85 (m, 1H), 3,13-3,24 (m, 0,4H), 3,40 (t, J=10,87Hz, 2H), 3,51-3,61 (m, 0,6H), 3,79 (s, 3H), 3,84-3,92 (m, 2H), 3,93-4,01 (m, 0,6H), 4,39-4,52 (m, 0,4H), 4,60-4,94 (m, 2H), 4,96-5,10 (m, 1H), 6,36-6,58 (m, 1H), 6,70-6,85 (m, 1H), 7,07 (s, 1H)	442	440
21		(400 MHz, CDCl3) δ: 0,99-1,02 (m, 2H), 1,09-1,13 (m, 2H), 1,43-1,45 (m, 3H), 1,93 (s, 3H), 2,05-2,10 (m, 1H), 3,28-3,63 (m, 1H), 3,66 -5,33 (m, 5H), 6,28 (s, 1H), 6,83, 6,90 (s, 1H)	385	383
22		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,73-0,94 (m, 4H), 1,23-1,43 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,78-1,87 (m, 1H), 3,22 -3,33 (m, 0,6H), 3,49-3,80 (m, 4,1H), 4,44-4,78 (m, 1,8H), 4,88 -5,10 (m, 1,5H), 6,74 (s, 0,4H), 6,84 (s, 0,6H), 7,06-7,10 (m, 1H)	432	430
23		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,96-1,09 (m, 4H), 1,31 (d, J=6,85Hz, 1,8H), 1,39 (d, J=6,36Hz, 1,2H), 1,77 (s, 3H), 2,32-2,38 (m, 1 H), 3,20-3,25 (m, 0,4H), 3,38-3,44 (m, 0,6H), 3,98-4,03 (m, 0,6H), 4,51-4,55 (m, 0,4H), 4,62-4,68 (m, 1H), 4,82-4,99 (m, 1,6H), 5,03-5,09 (m, 0,4H), 6,68 (s, 0,4H), 6,84 (s, 0,6H), 7,06-7,09 (m, 1H), 7,47-7,53 (m, 1H), 7,73-7,80 (m, 1H)	413	411
24		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,87-1,01 (m, 4H), 1,32 (d, J=6,58Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), 2,45-2,60 (m, 1H), 3,27-3,39 (m, 3H), 4,56-5,07 (m, 3H), 6,41 (d, J=9,27Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,49-7,58 (m, 1H), 7,80 (s, 1H)	411	455 (M-1+46)

[0542]

[Таблица 1-5]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
25		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,46-1,48 (m, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,35-3,66 (m, 1H), 3,78 (brs, 1H), 3,86 (s, 3H), 4,67-5,42 (m, 4H), 6,78-6,92 (m, 2H), 6,97-7,01 (m, 2H), 7,72-7,74 (m, 2H)	451	495 (M-1+46)
26		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,47-1,49 (m, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,35-3,69 (m, 1H), 3,82 (brs, 1H), 4,68-5,42 (m, 4H), 6,87-6,91 (m, 2H), 7,18-7,20 (m, 2H), 7,77-7,82 (m, 2H)	439	437
27		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,59-1,02 (m, 4H), 1,26-1,32 (m, 2H), 1,36-1,46 (m, 1H), 1,70-1,99 (m, 1H), 1,76 (s, 3H), 3,15-3,26 (m, 0,4H), 3,39-3,49 (m, 1,2H), 4,31-5,10 (m, 3,4H), 6,67-6,87 (m, 2H), 6,98-7,11 (m, 2H), 7,19-7,32 (m, 1H)	412	410
28		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,83-0,94 (m, 2H), 1,12-1,17 (m, 2H), 1,26 (d, J=6,11Hz, 2H), 1,42 (d, J=7,09Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 2,17-2,26 (m, 1H), 3,15-3,22 (m, 0,4H), 3,46-3,56 (m, 1,3H), 4,48-4,65 (m, 1,7H), 4,86-4,95 (m, 1,3H), 5,03-5,10 (m, 0,3H), 6,66 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,04-7,16 (m, 2H), 7,36-7,43 (m, 1H), 7,86 (d, J=7,58Hz, 1H)	419	417
29		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,57-1,13 (m, 8H), 1,26-1,43 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,81-1,91 (m, 1H), 3,14-3,90 (m, 3H), 4,49-5,13 (m, 3H), 6,14-6,33 (m, 1H), 6,70-6,87 (m, 1H), 7,08 (s, 1H) (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,92-1,02 (m, 4H), 1,21-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 2,11-2,18 (m, 1 H), 3,12 -	424	422
30		3,25 (m, 0,4H), 3,52-3,76 (m, 1,2H), 4,43-5,09 (m, 3,4H), 6,63 -6,86 (m, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,38 (d, J=8,09Hz, 1H), 7,70-7,80 (m, 1H), 8,48 (brs, 1H)	395	393

[0543]

[Таблица 1-6]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
31		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,43 (brs, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,49-3,67 (m, 2H), 4,07 (s, 3H), 4,10-5,06 (m, 4H), 6,95 (s, 2H), 7,68 (d, J=8,55Hz, 2H), 7,88 (d, J=7,63Hz, 2H)	459	457
32		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,84-1,17 (m, 4H), 1,27-1,46 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,20-3,61 (m, 1H), 3,75 -5,12 (m, 5H), 6,48-6,89 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,44-7,51 (m, 1 H),	384	382
33		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,43-1,51 (m, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,24-4,37 (m, 5H), 4,66-5,67 (m, 4H), 6,83-6,95 (m, 2H), 7,56 (d, J=8,09Hz, 2H), 7,78 (d, J=8,09Hz, 2H)	459	457
34		(400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,34-1,41 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,14-3,24 (m, 1H), 3,56-4,11 (m, 1H), 4,55 -5,12 (m, 3H), 6,75-6,87 (m, 1 H), 7,05-7,23 (m, 2H), 7,27-7,35 (m, 2H), 7,64-7,65 (m, 2H), 13,72 (brs, 1H)	438	436
35		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,17-1,38 (m, 7H), 1,95 (s, 3H), 3,27-4,03 (m, 4H), 4,85-5,01 (m, 3H), 6,70-6,90 (m, 2H), 7,66 (d, J=8,32Hz, 2H), 7,86 (d, J=7,63Hz, 2H)	485	464
36		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,64-0,98 (m, 4H), 1,24-1,38 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,87-2,00 (m, 1 H), 3,18 -5,35 (m, 7H), 6,51-6,88 (m, 2H), 7,09 (s, 1H)	466	464

[0544]

[Таблица 1-7]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
37		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,70-0,76 (m, 2H), 0,98-1,05 (m, 2H), 1,34 (d, J=6,60Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,99-2,07 (m, 1H), 3,13-3,52 (m, 1H), 4,49-5,41 (m, 6H), 6,33-6,37 (m, 1H), 6,70-6,82 (m, 1H), 7,07 (s, 1H)	466	464
38		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,34 (d, J=6,01 Hz, 2H), 1,44 (d, J=6,01 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 3,24-3,32 (m, 0,3H), 3,50-3,55 (m, 0,6H), 4,08 -4,13 (m, 0,6H), 4,56-4,61 (m, 0,4H), 4,69 (d, J=17,80Hz, 0,6H), 4,78 (d, J=16,41Hz, 0,4H), 4,91-5,03 (m, 1,7H), 5,07-5,13 (m, 0,4H), 6,67 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,01-7,10 (m, 1H), 7,30-7,36 (m, 2H), 7,57-7,63 (m, 1H), 8,00-8,19 (m, 4H)	449	447
39		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,02 (d, J=6,01Hz, 1,5H), 1,10 (d, J=6,01Hz, 1,5H), 1,72 (s, 3H), 3,02-3,13 (m, 1H), 3,41-3,45 (m, 0,5H), 4,27-4,43 (m, 1,5H), 4,52 (d, J=17,34Hz, 0,5H), 4,70-4,76 (m, 0,5H), 4,81-4,87 (m, 0,5H), 4,92-4,99 (m, 0,5H), 6,61 (s, 0,5H), 6,79 (s, 0,5H), 7,00 (d, J=8,55Hz, 1H), 7,20-7,30 (m, 2H), 7,44-7,51 (m, 2H), 7,56 -7,62 (m, 1H), 7,92-7,96 (m, 1H), 8,60-8,66 (m, 1H)	449	447
40		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,33-1,57 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 3,38-3,96 (m, 6H), 4,61-5,29 (m, 3H), 6,80, 6,94 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,55Hz, 2H), 8,03 (d, J=8,32Hz, 2H)	493	491
41		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,45, 1,52 (d, J=6,47Hz, 3H), 1,94 (s, 3H), 3,31, 3,67 (d, J=10,40Hz, 1H), 3,82, 3,88 (s, 3H), 4,32-5,15 (m, 5H), 6,79, 6,92 (s, 1H), 7,58 (d, J=8,44Hz, 2H), 7,83 (d, J=8,44Hz, 2H)	493	537 (M-1+46)

[0545]

[Таблица 1-8]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
42		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33 (d, J=6,01 Hz, 1,8H), 1,42 (d, J=6,47Hz, 1,2H), 1,76 (s, 3H), 3,20-3,29 (m, 0,4H), 3,49-3,55 (m, 0,6H), 4,09-4,15 (m, 0,6H), 4,56-4,78 (m, 1,4H), 4,92-5,03 (m, 1,6H), 5,05 -5,11 (m, 0,4H), 6,67 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,02-7,09 (m, 1H), 7,33-7,40 (m, 2H), 7,75 (t, J=7,74Hz, 1H), 7,82-7,89 (m, 2H), 8,21-8,26 (m, 1H), 8,92-8,95 (m, 1H)	449	447
43		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,35 (d, J=6,36Hz, 1,8H), 1,46 (d, J=6,60Hz, 1,2H), 1,78 (s, 3H), 3,26-3,32 (m, 0,4H), 3,52-3,58 (m, 0,6H), 4,08 -4,13 (m, 0,6H), 4,58-4,83 (m, 1,4H), 4,93-5,05 (m, 1,6H), 5,08-5,15 (m, 0,4H), 6,68 (s, 0,4H), 6,87 (s, 0,6H), 7,05 (s, 0,6H), 7,10 (s, 0,4H), 7,68-7,74 (m, 1H), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,10-8,15 (m, 1H), 8,20-8,34 (m, 3H)	456	454
44		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33-1,47 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,24 (s, 3H), 3,25-3,69 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 4,05-4,55 (m, 1H), 4,70-5,16 (m, 3H), 6,72-6,90 (m, 1H), 7,08-7,42 (m, 2H), 7,94-8,00 (m, 2H), 8,07-8,13 (m, 2H)	512	510
45		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,35 (d, J=5,87Hz, 1,8H), 1,44 (d, J=6,60Hz, 1,2H), 1,78 (s, 3H), 3,24-3,30 (m, 0,4H), 3,51-3,56 (m, 0,6H), 4,07 -4,12 (m, 0,6H), 4,57-4,79 (m, 1,4H), 4,93-5,04 (m, 1,6H), 5,07-5,13 (m, 0,4H), 6,68 (s, 0,4H), 6,87 (s, 0,6H), 7,05-7,10 (m, 1H), 7,81 (t, J=8,19Hz, 1H), 7,99-8,06 (m, 4H), 8,34-8,38 (m, 1H), 9,02-9,06 (m, 1H)	456	454
46		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,41 (d, J=6,36 Hz, 3H), 1,79 (s, 3H), 2,40-2,43 (m, 3H), 3,61-4,70 (m, 3H), 4,91-5,33 (m, 2H), 6,85 (br s, 1H), 7,11 (s, 1H), 8,01-8,27 (m, 4H),	460	458

[0546]

[Таблица 1-9]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
47		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,30-1,48 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,21-3,68 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,99-4,56 (m, 1H), 4,66-5,16 (m, 3H), 6,71-7,11 (m, 3H), 7,15-7,22 (m, 1H), 7,31-7,41 (m, 1H), 7,93-8,01 (m, 1H)	470	468
48		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28-1,46 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,19-5,11 (m, 5H), 6,65-6,87 (m, 1 H), 7,03-7,09 (m, 1H), 7,29-7,35 (m, 2H), 7,37-7,43 (m, 1H), 8,01-8,02 (m, 1H), 8,18-8,21 (m, 2H), 8,75-8,76 (m, 1H)	449	447
49		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,26-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,19-3,29 (m, 0,4H), 3,52-3,62 (m, 0,6H), 3,71-3,79 (m, 0,6H), 4,52-4,72 (m, 1,7H), 4,91-5,10 (m, 1,7H), 6,65 (brs, 0,4H), 6,85 (brs, 0,6H), 7,00-7,08 (m, 1H), 7,38 (dd, J=7,28, 4,97Hz, 1H), 7,49-7,54 (m, 1H), 7,59 (t, J=7,51Hz, 1H), 7,89 (td, J=7,74, 1,77Hz, 1H), 8,02 (d, J=7,63Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,32Hz, 1H), 8,67 (d, J=4,86Hz, 1H)	431	429
50		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,30-1,51 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 3,25-3,78 (m, 1H), 4,08 (s, 3H), 4,48-5,29 (m, 5H), 6,73-7,00 (m, 2H), 7,36-7,54 (m, 2H), 8,18 (t, J=7,74Hz, 1H)	477	475
51		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,45 (m, 3H), 1,63-1,74 (m, 1H), 1,77 (s, 3H), 1,90-2,00 (m, 1 H), 2,24-2,44 (m, 4H), 3,15-3,78 (m, 2H), 4,55-5,08 (m, 3H), 5,59 (s, 1H), 6,64-6,87 (m, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,44 (d, J=7,63 Hz, 2H), 7,57 (d, J=8,09 Hz, 2H),	424	468 (M-1+46)

[0547]

[Таблица 1-10]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
52		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,23-1,47 (m, 3H), 1,71-1,93 (m, 11H), 3,49-3,80 (m, 1H), 4,46-5,08 (m, 4H), 6,63-6,89 (m, 1H), 7,05 (br s, 1H), 7,41 (d, J=7,58 Hz, 2H), 7,55 (d, J=8,07 Hz, 2H),	438	436
53		(400 MHz, CDCl₃) δ: 0,98-1,24 (m, 4H), 1,46-1,47 (m, 3H), 1,95 (s, 3H), 3,26-3,66 (m, 2H), 3,98-5,61 (m, 5H), 6,81-6,90 (m, 1H), 7,67 -7,80 (m, 4H)	485	529 (M-1+46)
54		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,30-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,19-5,11 (m, 5H), 6,65-6,87 (m, 1H), 7,04-7,09 (m, 1H), 7,54-7,59 (m, 1H), 7,70-7,75 (m, 1H), 7,91-8,04 (m, 3H), 8,83-8,86 (m, 1H)	474	472
55		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33 (d, J=6,47Hz, 1,8H), 1,43 (d, J=6,47Hz, 1,2H), 1,76 (s, 3H), 3,22-3,28 (m, 0,4H), 3,48-3,53 (m, 0,6H), 3,98-4,04 (m, 0,6H), 4,56-4,61 (m, 0,4H), 4,66-4,73 (m, 1H), 4,84 -5,01 (m, 1,6H), 5,05-5,11 (m, 0,4H), 6,66 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,02-7,08 (m, 1H), 7,33-7,39 (m, 2H), 7,82-7,86 (m, 1H), 7,90-7,96 (m, 3H), 8,65-8,69 (m, 1H)	449	447
56		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,31 (d, J=4,86Hz, 1,8H), 1,45 (d, J=6,01 Hz, 1,2H), 1,76 (s, 3H), 3,19-3,28 (m, 0,4H), 3,63-3,71 (m, 0,6H), 3,85-3,92 (m, 0,6H), 4,48-4,55 (m, 0,4H), 4,68-5,00 (m, 2,6H), 5,07-5,15 (m, 0,4H), 6,66 (s, 0,4H), 6,87 (s, 0,6H), 7,07 (s, 1H), 7,53-7,60 (m, 3H), 8,41-8,46 (m, 2H), 9,02 -9,08 (m, 2H)	432	430

[0548]

[Таблица 1-11]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
57		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33 (d, J=7,09Hz, 3H), 1,77 (s, 3H), 4,11 -4,28 (m, 1H), 4,57-4,76 (m, 1 H), 4,86-4,94 (m, 1H), 4,98-5,05 (m, 1H), 6,55 (d, J=9,29Hz, 1H), 6,78 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 7,34-7,40 (m, 2H), 7,51-7,57 (m, 2H), 7,66 (dd, J=9,66, 2,81Hz, 1H), 7,97 (s, 1H)	465	463
58		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,26-1,46 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,19-3,31 (m, 0,4H), 3,54-3,64 (m, 0,6H), 3,73-3,85 (m, 0,6H), 4,51-4,77 (m, 1,8H), 4,89-5,11 (m, 1,6H), 6,67 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,06 (s, 1H), 7,52 (dd, J=10,88, 8,44Hz, 1H), 7,66-7,75 (m, 1H), 8,06 (d, J=8,07Hz, 1H), 8,10 (dd, J=7,46, 2,08Hz, 1H), 8,46 (dd, J=8,31, 2,20Hz, 1H), 9,17-9,18 (m, 1H)	474	472
59		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,34 (d, J=6,36Hz, 2H), 1,46 (d, J=6,36Hz, 1H), 1,77 (s, 3H), 2,37 (d, J=5,38Hz, 3H), 3,23-3,30 (m, 0,4H), 3,53-3,56 (m, 1,2H), 4,50-4,79 (m, 1,8H), 4,92-5,03 (m, 1,2H), 5,08-5,14 (m, 0,4H), 6,70 (s, 0,4H), 6,88 (s, 0,6H), 7,05-7,13 (m, 1H), 7,72-7,78 (m, 1H), 7,87 (d, J=6,11Hz, 1H), 7,96-8,03 (m, 2H), 8,58 (s, 0,6H), 8,65 (s, 0,4H)	488	486
60		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,36, 1,43 (d, J=6,30Hz, 3H), 1,81-1,95 (m, 9H), 2,21-2,25 (m, 2H), 2,58-2,66 (m, 1H), 3,07 (d, J=10,63Hz, 0,5H), 3,58-3,89 (m, 1H), 4,17-4,19 (m, 1H), 4,64 (d, J=17,11Hz, 1H), 4,75 (t, J=15,72Hz, 1H), 4,90 (d, J=15,26Hz, 0,5H), 5,13-5,19 (m, 1H), 5,37-5,59 (m, 1H), 6,24 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,49 (s, 1H)	426	424
61		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,35-1,43 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,22-5,11 (m, 5H), 3,95 (s, 3H), 6,69-6,86 (m, 1H), 7,08-7,23 (m, 2H), 7,65-7,70 (m, 1H), 7,91-7,98 (m, 2H)	477	521 (M-1+46)

[0549]

[Таблица 1-12]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
62		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,29-1,43 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,20-5,10 (m, 5H), 6,64-6,86 (m, 1H), 7,04-7,08 (m, 1H), 7,53-7,60 (m, 1H), 7,83-7,92 (m, 2H), 8,03 (dd, J=11,10, 1,39Hz, 1H), 8,14 (t, J=7,98Hz, 1H), 8,86-8,89 (m, 1H)	474	472
63		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28-1,43 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 2,37-2,39 (m, 3H), 3,18-5,10 (m, 5H), 6,67-6,85 (m, 1H), 7,04-7,08 (m, 1H), 7,46-7,53 (m, 1H), 7,61-7,68 (m, 2H), 7,77 (d, J=7,86Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 8,80-8,82 (m, 1H)	470	468
64		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,22-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,15-3,27 (m, 0,3H), 3,50-3,61 (m, 0,6H), 3,72-3,82 (m, 0,6H), 3,76 (s, 3H), 4,43-5,09 (m, 3,5H), 6,45 (s, 1H), 6,63-6,87 (m, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,45-7,54 (m, 2H), 7,55-7,72 (m, 2H)	452	450
65		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33-1,46 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 2,16-2,24 (m, 3H), 3,19-5,13 (m, 5H), 6,69-6,89 (m, 1H), 7,06-7,12 (m, 1H), 7,31-7,42 (m, 1H), 7,78-7,82 (m, 2H), 7,95-7,98 (m, 2H), 8,59-8,64 (m, 1H)	470	514 (M-1+46)
66		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,35-1,51 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 3,32-3,72 (m, 2H), 4,08 (s, 3H), 4,17-5,16 (m, 4H), 6,95-6,97 (m, 2H), 7,69-7,95 (m, 2H), 8,54 (s, 1H)	469	464

[0550]

[Таблица 1-13]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
67		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,19-5,12 (m, 5H), 6,64-6,87 (m, 1H), 7,04-7,10 (m, 1H), 7,48-7,53 (m, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H), 8,16-8,17 (m, 1H), 8,31-8,36 (m, 2H), 8,82-8,84 (m, 1H)	456	454
68		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,29-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,23-5,12 (m, 5H), 6,64-6,88 (m, 1H), 7,06-7,11 (m, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H), 8,25-8,32 (m, 3H), 8,85-8,86 (m, 1H)	474	472
69		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,25-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,16-3,27 (m, 0,4H), 3,56-3,64 (m, 0,6H), 3,72-3,81 (m, 0,6H), 4,47-5,09 (m, 3,4H), 6,61-6,87 (m, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,54 (t, J=9,25Hz, 1H), 7,71-7,83 (m, 2H), 8,63 (dd, J=8,44, 2,89Hz, 1H), 9,05 (d, J=2,77Hz, 1H)	492	490
70		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,17-3,31 (m, 0,4H), 3,50-3,61 (m, 0,6H), 3,72-3,82 (m, 0,6H), 4,48-5,08 (m, 3,4H), 6,62-6,87 (m, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,45 (dd, J=11,21, 8,44Hz, 1H), 7,57-7,64 (m, 1H), 7,84-7,94 (m, 2H), 7,99 (dd, J=7,51, 2,20Hz, 1H), 8,72 (d, J=3,01Hz, 1H)	467	465
71		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28-1,48 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,19-3,29 (m, 0,4H), 3,59-3,67 (m, 0,6H), 3,73-3,80 (m, 0,6H), 4,52-4,58 (m, 0,4H), 4,67-4,79 (m, 1,4H), 4,90-5,01 (m, 1,2H), 5,06-5,13 (m, 0,4H), 6,68 (s, 0,4H), 6,87 (s, 0,6H), 7,06-7,11 (m, 1H), 7,85-7,95 (m, 2H), 8,07 (d, J=9,78Hz, 1H), 8,14-8,22 (m, 1H), 8,75-8,81 (m, 1H), 8,93 (s, 1H)	474	472

[0551]

[Таблица 1-14]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
72		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28-1,46 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,19-3,27 (m, 0,4H), 3,61-3,81 (m, 1,2H), 4,51-4,58 (m, 0,4H), 4,68-5,13 (m, 3H), 6,64 (s, 0,4H), 6,86 (s, 0,6H), 7,06 (s, 1H), 7,75 (td, J=8,55, 2,85Hz, 1H), 7,79-7,86 (m, 1H), 8,06 (dd, J=8,55, 2,54Hz, 1H), 8,15-8,24 (m, 1H), 8,77-8,82 (m, 1H), 8,87 (s, 1H)	474	472
73		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,32, 1,42 (d, J=6,47, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,21-3,68 (m, 1H), 3,97-5,09 (m, 7H), 6,72-7,36 (m, 3H), 8,09 (d, J=8,20Hz, 1H), 8,33 (dd, J=8,20, 1,85Hz, 1H), 9,02 (s, 1H)	460	458
74		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,46-1,50 (m, 3H), 1,96 (s, 3H), 3,36-3,77 (m, 2H), 4,65-5,20 (m, 4H), 6,57 (s, 1H), 6,82-7,02 (m, 1H), 7,47 (d, J=7,40Hz, 1H), 7,80 (d, J=1,39Hz, 1H), 7,86 (d, J=8,09Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,23 (d, J=2,31Hz, 1H)	445	443
75		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,32-1,48 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 2,52-2,59 (m, 3H), 3,20-3,69 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 4,03-4,56 (m, 1H), 4,66 -5,16 (m, 3H), 6,73, 6,87 (s, 1H), 6,95-7,19 (m, 2H), 7,69-7,87 (m, 3H)	473	471
76		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,23-1,47 (m, 3H), 1,72-1,81 (m, 3H), 2,12-2,26 (m, 3H), 3,15-3,89 (m, 5H), 4,56-5,17 (m, 3H), 6,73, 6,88 (s, 1H), 7,08, 7,12 (s, 1H), 7,85-7,94 (m, 4H)	473	471

[0552]

[Таблица 1-15]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
77		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,29 (d, J=6,01 Hz, 1,8H), 1,43 (d, J=6,01 Hz, 1,2H), 1,75 (s, 3H), 3,18-3,26 (m, 0,4H), 3,53-3,59 (m, 0,6H), 3,65-3,71 (m, 0,6H), 4,51-4,56 (m, 0,4H), 4,63-4,69 (m, 1,4H), 4,90 -4,97 (m, 1,2H), 5,04-5,10 (m, 0,4H), 6,65 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,02-7,09 (m, 1H), 7,71 (dd, J=15,49, 8,32Hz, 1H), 7,93-8,04 (m, 3H), 8,08 (d, J=7,63Hz, 1H), 8,76 (d, J=3,01Hz, 1H)	474	472
78		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,30-1,42 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,22-5,10 (m, 5H), 6,64-6,87 (m, 1H), 7,05-7,10 (m, 1H), 7,57-7,65 (m, 1H), 7,99-8,02 (m, 2H), 8,09-8,13 (m, 2H), 8,67-8,71 (m, 1H)	474	472
79		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,20-3,32 (m, 0,4H), 3,54-3,62 (m, 0,6H), 3,69-3,77 (m, 0,6H), 4,52-4,70 (m, 1,7H), 4,90-5,11 (m, 1,7H), 6,64 (s, 0,4H), 6,85 (s, 0,6H), 7,01-7,08 (m, 1H), 7,58-7,67 (m, 2H), 8,23-8,25 (m, 1H), 8,26-8,30 (m, 2H), 8,41 (dd, J=8,44, 2,20Hz, 1H), 9,11 (dd, J=2,20, 0,81Hz, 1H)	456	454
80		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,27-1,48 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 3,18-3,26 (m, 0,4H), 3,60-3,67 (m, 0,6H), 3,73-3,79 (m, 0,6H), 4,50-4,58 (m, 0,4H), 4,66-4,78 (m, 1,4H), 4,88-5,12 (m, 1,6H), 6,66 (s, 0,4H), 6,86 (s, 0,6H), 7,02-7,09 (m, 1H), 7,35 (t, J=8,79Hz, 2H), 7,82-7,88 (m, 2H), 8,15-8,20 (m, 1H), 8,63-8,68 (m, 1H), 8,98 (d, J=2,08Hz, 1H)	449	447
81		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,33, 1,44 (d, J=5,98, 3H), 1,78 (s, 3H), 3,22-3,68 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 4,02-5,03 (m, 4H), 6,74-7,22 (m, 3H), 7,80 (td, J=8,67, 2,09Hz, 1H), 7,98-8,01 (m, 1H), 8,59 (s, 1H)	453	451

[0553]

[Таблица 1-16]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
82		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,22-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,14-3,28 (m, 0,4H), 3,52-3,63 (m, 0,6H), 3,72-3,82 (m, 0,6H), 4,45-5,10 (m, 3,4H), 6,64-6,86 (m, 1 H), 7,05 (s, 1H), 7,51 (t, J=9,25Hz, 1 H), 7,60-7,73 (m, 3H), 8,56 (dd, J=4,74, 1,04Hz, 1 H), 8,72 (d, J=2,08Hz, 1 H)	467	465
83		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,47 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,15-3,25 (m, 0,4H), 3,56-3,65 (m, 0,6H), 3,74-3,81 (m, 0,6H), 4,46-5,10 (m, 3,4H), 6,65-6,87 (m, 1 H), 7,05 (s, 1H), 7,49 (dd, J=10,63, 8,55Hz, 1 H), 7,59-7,65 (m, 1 H), 7,75-7,80 (m, 1H), 7,99-8,06 (m, 1 H), 8,64 (d, J=3,01Hz, 1 H), 8,69 (brs, 1 H)	467	465
84		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,25-1,45 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,16-3,26 (m, 0,4H), 3,57-3,65 (m, 0,6H), 3,74-3,82 (m, 0,6H), 4,47-5,10 (m, 3,4H), 6,63-6,86 (m, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 7,58 (t, J=9,25Hz, 1 H), 7,71-7,82 (m, 3H), 8,96 (d, J=5,32Hz, 1H), 9,17 (d, J=0,69Hz, 1H)	474	472
85		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,22-1,26 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 2,94-3,66 (m, 2H), 4,61-5,11 (m, 4H), 6,77-6,96 (m, 1H), 7,48-7,50 (m, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 7,86-7,87 (m, 2H), 8,21 (s, 1H)	479	477
86		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,30-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,22-5,11 (m, 5H), 6,65-6,88 (m, 1 H), 7,05 -7,11 (m, 1H), 7,29-7,35 (m, 2H), 8,11-8,17 (m, 3H), 8,77-8,78 (m, 1H)	467	465
87		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,30-1,42 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,23-5,10 (m, 5H), 6,65-6,86 (m, 1 H), 7,05 -7,10 (m, 1H), 7,34-7,39 (m, 2H), 7,48-7,56 (m, 1 H), 7,95-8,02 (m, 2H), 8,61-8,64 (m, 1 H)	467	465

[0554]

[Таблица 1-17]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
88		(400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,31-1,45 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,20-5,11 (m, 5H), 6,66-6,87 (m, 1 H), 7,06 -7,11 (m, 1H), 7,24-7,29 (m, 1 H), 7,39-7,53 (m, 2H), 7,78-7,82 (m, 1 H), 8,01-8,07 (m, 1 H), 8,82-8,85 (m, 1 H)	467	465
89		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,37-1,44 (m, 3H), 1,68-1,79 (m, 7H), 1,94 (s, 3H), 2,22-2,25 (m, 2H), 2,60 (d, J=34,22Hz, 1H), 3,05-3,90 (m, 2H), 4,62-4,92 (m, 3H), 5,07-5,11 (m, 1H), 6,88 (s, 1H), 7,39 (s, 1 H), 7,41 (s, 1H)	460	458
90		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,26-1,36 (m, 3H), 1,62 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 3,03-5,08 (m, 9H), 6,47 (dd, J=9,02, 3,47Hz, 1H), 6,79 (s, 1 H), 7,05-7,10 (brm, 1 H), 7,50 (td, J=8,79, 3,01Hz, 1H), 8,05 (d, J=3,01Hz, 1H)	442	440
91		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,27-1,34 (m, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,77 (s, 3H), 2,29-2,32 (m, 2H), 2,58-2,59 (m, 2H), 2,99-5,04 (m, 10H), 6,75 -6,79 (brm, 1H), 7,05-7,10 (brm, 1H)	437	435
92		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,22-1,41 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 2,05-2,34 (m, 2H), 2,91-3,86 (m, 6H), 4,15 -5,12 (m, 4H), 6,54-6,60 (m, 1 H), 6,74-6,79 (m, 1H), 7,04-7,10 (m, 1 H), 7,80 (dt, J=8,86, 1,85Hz, 1 H), 8,45 (t, J=1,85Hz, 1H)	449	493 (M-1+46)
93		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,28 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,43 (t, J=4,97Hz, 4H), 3,21 (t, J=4,97Hz, 4H), 3,32-3,60 (m, 1 H), 3,80-4,20 (m, 1H), 4,50-4,68 (m, 1 H), 4,77 -4,90 (m, 1H), 4,91-5,02 (m, 1 H), 6,76 (s, 1H), 6,95 (d, J=8,79Hz, 2H), 7,03 (s, 1H), 7,34 (d, J=8,79Hz, 2H)	452	450

[0555]

[Таблица 1-18]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
94		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,13-1,23 (m, 4H), 1,39-1,44 (m, 3H), 1,94 (s, 3H), 2,27-2,33 (m, 1 H), 3,40-3,47 (m, 1H), 3,71 (d, J=18,26Hz, 1H), 4,71-5,06 (m, 3H), 6,79-6,95 (m, 1H), 8,66 (s, 2H)	396	394
95		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,24-1,44 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 1,88-2,06 (m, 4H), 3,11-3,78 (m, 6H), 4,45 -5,10 (m, 3H), 6,62-6,86 (m, 2H), 6,92-6,97 (m, 1 H), 7,01-7,09 (m, 1H), 8,17-8,23 (m, 1 H)	474	518 (M-1+46)
96		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,88-1,02 (m, 4H), 1,23-1,46 (m, 3H), 1,75 (s, 3H), 2,08-2,20 (m, 1 H), 3,14 -5,11 (m, 5H), 6,65-6,86 (m, 1 H), 7,01-7,09 (m, 1H), 7,11-7,20 (m, 1 H), 7,30-7,39 (m, 1 H), 8,45-8,52 (m, 1 H)	395	393
97		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,00-1,08 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 3,09-3,17 (m, 1 H), 3,50-4,97 (m, 4H), 6,60 -6,80 (m, 1H), 7,02 (d, J=4,39Hz, 1 H), 7,27-7,35 (m, 2H), 7,53-7,56 (m, 2H), 9,03 (d, J=9,25Hz, 1 H), 9,27 (d, J=13,41 Hz, 1H)	450	448
98		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,90-1,12 (m, 4H), 1,23-1,48 (m, 3H), 1,76 (s, 3H), 2,21-2,34 (m, 1 H), 3,15 -3,66 (m, 2H), 4,45-5,15 (m, 3H), 6,65-6,89 (m, 1H), 7,02-7,11 (m, 1H), 7,63-7,74 (m, 2H)	463	461
99		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,20-1,29 (m, 3H), 1,86 (s, 3H), 2,79 (s, 1 H), 3,02-3,15 (m, 1,6H), 3,35-3,43 (m, 0,4H), 4,22-4,38 (m, 2,6H), 4,60 -4,72 (m, 1 H), 5,02-5,11 (m, 0,6H), 5,08 (t, J=7,98Hz, 2H), 5,42-5,51 (m, 0,4H), 5,84-5,99 (m, 1,4H)	387	385

[0556]

[Таблица 1-19]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
100		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,18-1,30 (m, 3H), 1,85 (s, 3H), 2,59-2,66 (m, 2H), 2,88-2,97 (m, 3H), 3,03-3,15 (m, 1,5H), 3,34-3,44 (m, 0,5H), 4,11-4,20 (m, 2H), 4,21-4,31 (m, 0,5H), 4,59-4,75 (m, 1H), 5,08-5,17 (m, 0,5H), 5,43-5,53 (m, 0,5H), 5,92-6,03 (m, 0,5H), 6,45 -6,52 (m, 1H)	385	383
101		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,25-1,34 (m, 3H), 1,86 (s, 3H), 2,93 (s, 1 H), 3,08-3,51 (m, 2H), 4,32-5,17 (m, 2H), 5,62-5,97 (m, 1H), 7,26-7,30 (m, 1H), 7,42-7,46 (m, 1H), 7,52 (d, J=8,55Hz, 1H), 8,20 (brs, 1H), 10,33 (brs, 1H)	395	393
102		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,06-1,21 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 2,89-5,49 (m, 5H), 7,14-7,17 (m, 2H), 7,44 (dd, J=8,32, 6,94Hz, 1H), 7,66 (d, J=8,32Hz, 1H), 7,98 (brs, 1H), 13,33 (s, 1H)	395	393
103		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,96 (s, 6H), 1,11-1,18 (m, 3H), 1,45 (t, J=6,24Hz, 2H), 1,72 (s, 3H), 2,38 (s, 2H), 2,45-2,56 (m, 2H), 2,95 -3,44 (m, 2H), 4,29-4,55 (m, 1H), 4,64-4,86 (m, 1H), 5,27-5,86 (m, 1H), 7,10-7,12 (brm, 1H), 12,73 -12,77 (brm, 1H)	427	425
104		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,08-1,29 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 3,00-3,60 (m, 2H), 4,35-6,05 (m, 3H), 7,08 -7,14 (m, 1H), 7,33 (td, J=9,07, 2,47Hz, 1H), 7,63-7,74 (m, 2H), 13,78 (s, 1H)	413	411
105		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,02-1,22 (m, 3H), 1,85 (s, 3H), 2,71-2,87 (m, 2H), 2,97-3,02 (m, 3H), 3,20-3,35 (m, 1H), 3,42-3,77 (m, 1H), 4,17-5,12 (m, 3H), 5,31-5,61 (m, 1H), 6,97 (d, J=7,40Hz, 1H), 7,10-7,21 (m, 3H)	410	468 (M-1+60)

[0557]

[Таблица 1-20]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
106		(400 MHz, CDCl₃) δ: 0,35, 1,23 (d, J=6,70Hz, 3H), 1,78, 1,82 (s, 3H), 2,36, 2,44 (s, 3H), 2,46-3,05 (m, 5H), 3,15-3,30 (m, 2H), 4,19-4,66 (m, 2H), 5,10-5,95 (m, 1 H), 7,09 -7,17 (m, 4H)	424	482 (M-1+60)
107		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,16-1,26 (m, 3H), 1,85 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,83-3,75 (m, 5H), 4,01-4,91 (m, 3H), 5,14-5,42 (m, 1 H), 6,25-6,45 (m, 1H), 7,03-7,14 (m, 4H)	452	450
108		(400 MHz, CDCl3) δ: 0,69-0,75 (m, 2H), 0,88-0,94 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,88-1,94 (m, 1H), 3,10-3,34 (m, 3H), 3,87 (s, 3H), 4,02-5,47 (m, 2H), 6,05 (s, 1H)	399	457 (M-1+60)
109		(400 MHz, CDCl3) δ: 0,99 (brs, 2H), 1,23-1,27 (m, 5H), 1,88 (s, 3H), 3,10-3,89 (m, 5H), 4,36-5,53 (m, 2H), 6,35 (s, 1H), 7,44 (s, 1 H)	385	443 (M-1+60)
110		(400 MHz, CDCl3) δ: 1,12-1,22 (m, 7H), 1,86-1,88 (m, 3H), 3,09-4,27 (m, 4H), 4,68-4,76 (m, 1 H), 5,11 -6,01 (m, 2H), 6,71-6,74 (m, 1H), 7,47 (s, 1H)	385	443 (M-1+60)
111		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,68-0,72 (m, 2H), 0,90-0,97 (m, 2H), 1,11 -1,17 (m, 3H), 1,71 (s, 3H), 1,88 -1,95 (m, 1H), 2,95-3,10 (m, 1,5H), 3,34-3,46 (m, 0,5H), 4,24-4,54 (m, 1H), 4,61-4,97 (m, 1H), 5,18 -5,30 (m, 0,5H), 5,76-5,91 (m, 0,5H), 6,22-6,35 (m, 1 H), 7,09 (s, 1H), 13,01 (s, 1H)	385	383

[0558]

[Таблица 1-21]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
112		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,84-0,90 (m, 2H), 0,94-1,02 (m, 2H), 1,04-1,11 (m, 1,7H), 1,17-1,21 (m, 1,3H), 1,71 (s, 3H), 1,84-1,93 (m, 1H), 2,90-3,13 (m, 1,5H), 3,36 -3,46 (m, 0,6H), 3,89-4,05 (m, 0,5H), 4,34-4,52 (m, 1H), 4,57 -4,67 (m, 0,4H), 4,89-5,02 (m, 0,4H), 5,33 (d, J=16,41Hz, 0,6H), 7,07-7,13 (m, 1H), 13,13 (s, 1H)	419	417
113		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,64-0,69 (m, 2H), 0,84-0,89 (m, 2H), 1,06-1,26 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 1,84 -1,91 (m, 1H), 2,96-3,14 (m, 1,5H), 3,38-3,51 (m, 0,5H), 3,73 (s, 3H), 3,79-3,91 (m, 0,5H), 4,29-5,38 (m, 2,5H), 6,16-6,38 (m, 1H), 7,14 (s, 1H)	399	397
114		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,99-1,17 (m, 7H), 1,73 (s, 3H), 3,00-5,36 (m, 6H), 7,15 (s, 1H), 7,28 (m, 1H)	410	408
115		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,00-1,25 (m, 7H), 1,68-1,75 (m, 3H), 2,30 -2,36 (m, 1H), 3,03-3,55 (m, 2H), 4,42-5,63 (m, 3H), 7,15 (s, 1H)	387	445 (M-1+60) and 385
116		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,46-1,68 (m, 16H), 2,33-4,49 (m, 6H), 6,58-7,20 (m, 3H), 7,66-7,75 (m, 1H), 12,81 (brs, 1H)	481	479
117		(400 MHz, CDCl₃) δ: 1,04-1,06 (m, 4H), 1,10-1,31 (m, 3H), 1,88 (s, 3H), 1,98-2,02 (m, 1H), 2,86-2,91 (m, 1H), 3,12-3,23 (m, 1H), 3,70-3,73 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 4,37 -5,72 (m, 2H)	424	422

[0559]

[Таблица 1-22]
Пример	Структура	¹H-NMR	Масса M+1	Масса M-1
118		(400 MHz, CDCl₃) δ: 0,73-0,77 (m, 2H), 0,94-0,98 (m, 2H), 1,24-1,26 (m, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 3,13-3,49 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,15-5,47 (m, 3H), 6,13 (s, 1H)	413	471 (M-1+60)
119		(400 MHz, CDCl3) δ: 0,76-0,85 (m, 4H), 1,24-1,29 (m, 3H), 1,33 (s, 3H), 1,86-1,87 (m, 3H), 3,08-3,39 (m, 2H), 3,77-3,84 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 4,22-5,99 (m, 3H), 6,49-6,52 (m, 1H)	413	471 (M-1+60)
120		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,46-0,64 (m, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 2,77-2,92 (m, 2H), 3,87-4,86 (m, 3H), 7,04 (s, 1H), 7,35 (d, J=8,40Hz, 2H), 7,97 (d, J=8,40Hz, 2H)	465	463
121		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,76-0,79 (m, 4H), 1,16 (d, J=6,94Hz, 3H), 1,73 (s, 3H), 1,98 (ddd, J=14,28, 7,34, 4,33Hz, 1H), 3,01-5,12 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 7,10 (s, 1H), 7,85 (s, 1H)	399	795 (2M-1)
122		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 1,34-1,46 (m, 3H), 1,83 (s, 3H), 3,26-3,38 (m, 0,5H), 3,64-3,77 (m, 0,5H), 3,91 (s, 3H), 4,10-4,22 (m, 0,5H), 4,60-4,75 (m, 1H), 4,85-5,06 (m, 1,5H), 5,18-5,32 (m, 1H), 6,93-7,02 (m, 0,5H), 7,19-7,27 (m, 0,5H), 7,32 (tt, J=7,40, 1,46Hz, 1H), 7,42 (t, J=7,63Hz, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,80-7,86 (m, 2H)	435	433
123		(400 MHz, DMSO-d₆) δ: 0,65-0,71 (m, 2H), 0,84-0,90 (m, 2H), 1,29 -1,42 (m, 3H), 1,81-1,93 (m, 1 H), 1,84 (s, 3H), 3,24-3,34 (m, 0,6H), 3,57-3,70 (m, 0,5H), 3,76 (s, 3H), 4,00-4,12 (m, 0,4H), 4,55-4,70 (m, 0,9H), 4,83-4,95 (m, 1,6H), 5,05-5,30 (m, 1H), 6,18-6,50 (m, 1H), 7,48 (s, 1H)	399	397

[0560]

Экспериментальный пример 1: Ингибирующее воздействие на активность PDHK in vitro

Ингибирующее воздействие на активность PDHK оценивали косвенно путем определения остаточной активности PDH после реакции PDHK в присутствии исследуемого соединения.

[0561]

(Ингибирующее воздействие на активность PDHK1)

В случае PDHK1 человека (hPDHK1, NCBI Reference Database Accession number NM_002610.3) фрагмент размером 1,3 т.п.н. (тысяча пар нуклеотидов), кодирующий этот белок, выделяли из cDNA печени человека с помощью полимеразной цепной реакции (PCR). Модифицированную hPDHK1 cDNA, где последовательность FLAG-Tag добавлена к N-концу, получали с помощью PCR и лигировали к сайту NdeI/EcoRI вектора pET-17b (Merck MGaA, model number 69663-3). Рекомбинантную конструкцию превращали в Escherichia coli DH5((TOYOBO, model number DNA-903). Идентифицировали рекомбинантные клоны и выделяли плазмиду DNA и проводили анализ последовательности DNA. Один клон, который обладал ожидаемой последовательностью нуклеиновых кислот, выбирали для проведения экспрессии.

[0562]

Для экспрессии активности hPDHK1 клетки штамма Escherichia coli BL21(DE3) (Merck KGaA, model number 69450-4) трансформировали с вектором pET17b, содержащим модифицированную hPDHK1 cDNA. Escherichia coli выращивали до оптической плотности, равной 0,6 (600 нмоль/л), при температуре 30°C. Экспрессию белка индуцировали путем добавления 500 мкмоль/л изопропил-β-тиогалактопиранозида. Escherichia coli выращивали при температуре 20°C в течение 17-18 ч и собирали центрифугированием.

[0563]

Собранную Escherichia coli повторно суспендировали в буфере для суспендирования (20 ммоль/л N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N’-2-этансульфоновая кислота-гидроксид натрия (HEPES-NaOH), 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля и 0,1% блок-сополимера полиоксиэтилен-полиоксипропилен (Pluronic F-68), cOmplete без EDTA (pH 8,0)) и разрушали с помощью микрофлюидизатора M-110H (MIZUHO INDUSTRIAL CO., LTD.) или путем обработки ультразвуком. Осадок удаляли центрифугированием и надосадочную жидкость добавляли к гелю для очистки белков с меткой DDDDK (MBL, model number 3329). Гель для очистки белков с меткой DDDDK промывали промывочным буфером (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)) и связанный белок элюировали элюирующим буфером 1 (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 100 мкг/мл пептида (аминокислотная последовательность DYKDDDDK) (SEQ ID NO: 1), 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)).

[0564]

Элюированные фракции, содержащие белок с меткой FLAG, объединяли, концентрировали по методике ультрафильтрования, помещали в колонку для гель-фильтрования (HiLoad 26/60 Superdex 200 (GE Healthcare, model number 17-1070-01)) и элюировали элюирующим буфером 2 (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 150 ммоль/л хлорида натрия, 0,5 ммоль/л этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)). Элюированные фракции объединяли и хранили при температуре -80°C.

[0565]

0,025 Ед/мл PDH (PDH комплекс сердца свиньи, Sigma P7032) и 0,5 мкг/мл hPDHK1 смешивали в буфере для анализа (50 ммоль/л 3-морфолинопропансульфоновой кислоты (pH 7,0), 20 ммоль/л гидрофосфата калия, 60 ммоль/л хлорида калия, 2 ммоль/л хлорида магния, 0,4 ммоль/л EDTA, 0,2% полоксамера, 2 ммоль/л дитиотреитола) и смесь инкубировали при температуре 4°C в течение ночи и получали раствор комплекса PDH/hPDHK1. В буфере для анализа 0,025 Ед/мл PDH перемешивали и инкубировали при температуре 4°C в течение ночи для приготовления раствора PDH.

[0566]

Исследуемые соединения разводили диметилсульфоксидом (DMSO). Для определения ингибирующего воздействия исследуемого соединения на активность PDHK в растворе комплекса PDH/hPDHK1, раствор комплекса PDH/hPDHK1 (20 мкл), исследуемое соединение (1,5 мкл) и 0,353 мкмоль/л ATP (разведенного в буфере для анализа) (8,5 мкл) помещали в 384-луночный микропланшет (Greiner Bio-One 781801) и реакцию PDHK проводили при комнатной температуре в течение 45 мин (лунка с исследуемым соединением). DMSO (1,5 мкл) добавляли в контрольные лунки вместо исследуемого соединения. Кроме того, DMSO (1,5 мкл) добавляли в холостые лунки вместо исследуемого соединения и раствор PDH добавляли вместо раствора комплекса PDH/hPDHK1. Для определения ингибирующего воздействия исследуемого соединения на активность PDHK, содержащейся в растворе PDH, добавляли исследуемое соединение и раствор PDH вместо раствора комплекса PDH/hPDHK1 добавляли в холостую лунку+лунку с исследуемым соединением.

[0567]

Затем добавляли 10 мкл субстратов (5 ммоль/л пирувата натрия, 5 ммоль/л кофермента A, 12 ммоль/л NAD, 5 ммоль/л пирофосфата тиамина, разведенного в буфере для анализа). Смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 90 мин и определяли остаточную активность PDH.

[0568]

Поглощение для каждой лунки при 340 нм измеряли считывающим устройством для микропланшетов для детектирования NADH, образовавшегося по реакции PDH. Активность PDH в каждой лунке рассчитывали по изменениям поглощения до и после реакции PDH. Активность по отношению к PDH обработанного исследуемым соединением образца рассчитывали по формуле {активность по отношению к PDH для лунки с исследуемым соединением - (активность по отношению к PDH для холостой лунки+лунки с исследуемым соединением - активность по отношению к PDH для холостой лунки)}. Степень ингибирования hPDHK1 (%) исследуемым соединением рассчитывали по формуле [{(активность по отношению к PDH обработанного исследуемым соединением образца - активность по отношению к PDH для контрольной лунки)/активность по отношению к PDH для холостой лунки - активность по отношению к PDH для контрольной лунки)}×100]. Значение IC₅₀ рассчитывали по методике логистической регрессии на основе концентрации исследуемого соединения и степени ингибирования hPDHK1 (%).

[0569]

(Ингибирующее воздействие на активность PDHK2)

В случае PDHK2 человека (hPDHK2, NCBI Reference Database Accession number NM_002611.4) модифицированную hPDHK2 cDNA, где последовательность FLAG-Tag добавлена к N-концу клона hPDHK2 cDNA (pReceiver-M01/PDK2-GeneCopoeia) в качестве основы получали с помощью PCR и лигировали к сайту NdeI/EcoRI вектора pET-17b. Рекомбинантную конструкцию превращали в Escherichia coli DH5α. Идентифицировали рекомбинантные клоны и выделяли плазмиду DNA и проводили анализ последовательности DNA. Один клон, который обладал ожидаемой последовательностью нуклеиновых кислот, выбирали для проведения экспрессии.

[0570]

Для экспрессии активности hPDHK2 клетки штамма Escherichia coli BL21(DE3) трансформировали с вектором pET17b, содержащим модифицированную hPDHK2 cDNA. Escherichia coli выращивали до оптической плотности, равной 0,6 (600 нмоль/л) при температуре 30°C. Экспрессию белка индуцировали путем добавления 500 мкмоль/л изопропил-β-тиогалактопиранозида. Escherichia coli выращивали при температуре 20°C в течение 17-18 ч и собирали центрифугированием. Собранную Escherichia coli повторно суспендировали в буфере для суспендирования (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0), cOmplete, без EDTA (pH 8,0)) и разрушали с помощью микрофлюидизатора. Осадок удаляли центрифугированием и надосадочную жидкость добавляли к гелю для очистки белков с меткой DDDDK. Гель для очистки белков с меткой DDDDK промывали промывочным буфером (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)) и связанный белок элюировали элюирующим буфером 1 (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 100 мкг/мл пептида (аминокислотная последовательность DYKDDDDK) (SEQ ID NO: 1) 500 ммоль/л хлорида натрия, 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)). Элюированные фракции, содержащие белок с меткой FLAG, объединяли, концентрировали по методике ультрафильтрования, помещали в колонку для гель-фильтрования (HiLoad 26/60 Superdex 200), и элюировали элюирующим буфером 2 (20 ммоль/л HEPES-NaOH, 150 ммоль/л хлорида натрия, 0,5 ммоль/л этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), 1% этиленгликоля, 0,1% pluronic F-68 (pH 8,0)). Элюированные фракции объединяли и хранили при температуре -80°C.

[0571]

0,025 Ед/мл PDH и 0,5 мкг/мл hPDHK2 смешивали в буфере для анализа (50 ммоль/л 3-морфолинопропансульфоновой кислоты (pH 7,0), 20 ммоль/л гидрофосфата калия, 60 ммоль/л хлорида калия, 2 ммоль/л хлорида магния, 0,4 ммоль/л EDTA, 0,2% полоксамера, 2 ммоль/л дитиотреитола) и смесь инкубировали при температуре 4°C в течение ночи и получали раствор комплекса PDH/hPDHK2. В буфере для анализа 0,025 Ед/мл PDH перемешивали и инкубировали при температуре 4°C в течение ночи для приготовления раствора PDH.

Исследуемые соединения разводили с помощью DMSO. Для определения ингибирующего воздействия исследуемого соединения на активность PDHK в растворе комплекса PDH/hPDHK2, раствор комплекса PDH/hPDHK2 (20 мкл), исследуемое соединение (1,5 мкл) и 1,06 мкмоль/л ATP (разведенного в буфере для анализа) (8,5 мкл) помещали в 384-луночный микропланшет и реакцию PDHK проводили при комнатной температуре в течение 45 мин (лунка с исследуемым соединением). DMSO (1,5 мкл) добавляли добавляли в контрольные лунки вместо исследуемого соединения. Кроме того, DMSO (1,5 мкл) добавляли добавляли в холостые лунки вместо исследуемого соединения комплекса и раствор PDH добавляли вместо раствора PDH/hPDHK2. Для определения ингибирующего воздействия исследуемого соединения на активность PDHK, содержащейся в растворе PDH, добавляли исследуемое соединение и раствор PDH вместо раствора комплекса PDH/hPDHK2 добавляли в холостую лунку+лунку с исследуемым соединением.

[0572]

[0573]

Поглощение для каждой лунки при 340 нм измеряли считывающим устройством для микропланшетов для детектирования NADH, образовавшегося по реакции PDH. Активность PDH в каждой лунке рассчитывали по изменениям поглощения до и после реакции PDH. Активность по отношению к PDH обработанного исследуемым соединением образца рассчитывали по формуле {активность по отношению к PDH для лунки с исследуемым соединением - (активность по отношению к PDH для холостой лунки+лунки с исследуемым соединением - активность по отношению к PDH для холостой лунки)}. Степень ингибирования hPDHK2 (%) исследуемым соединением рассчитывали по формуле [{(активность по отношению к PDH обработанного исследуемым соединением образца - активность по отношению к PDH для контрольной лунки)/активность по отношению к PDH для холостой лунки - активность по отношению к PDH для контрольной лунки)}×100]. Значение IC₅₀ рассчитывали по методике логистической регрессии на основе концентрации исследуемого соединения и степени ингибирования hPDHK2 (%).

Результаты приведены в последующих таблицах. Если значение IC₅₀ нельзя было рассчитать, то приведена степень ингибирования при наименьшей концентрации исследуемого соединения, использованной для анализа. Например, соединение примера 5 обладало равной 55% степенью ингибирования hPDHK1 при концентрации 3 нмоль/л.

[0574]

[Таблица 2-1]
Пример №	hPDHK1 IC₅₀ (нмоль/л)	hPDHK2 IC₅₀ (нмоль/л)
1	6	5
2	12	15
3	16	14
4	4	5
5	<3 (55%)	5
6	11	11
7	8	10
8	49	34
9	7	11
10	9	13
11	14	15
12	8	10
13	29	36
14	<3 (68%)	<3 (57%)
15	3	5
16	6	7
17	8	7
18	7	7
19	5	<3 (67%)
20	8	12
21	13	12
22	6	8
23	6	12
24	42	36
25	7	14
26	9	14
27	9	8
28	12	10
29	7	7
30	20	13

[0575]

[Таблица 2-2]
Пример №	hPDHK1 IC₅₀ (нмоль/л)	hPDHK2 IC₅₀ (нмоль/л)
31	9	11
32	13	10
33	12	16
34	10	13
35	3	4
36	4	5
37	3	8
38	<3 (73%)	4
39	46	18
40	5	6
41	6	6
42	4	5
43	<3 (52%)	5
44	5	7
45	9	8
46	5	5
47	<3 (53%)	4
48	<3 (88%)	<3 (81%)
49	3	3
50	4	5
51	4	6
52	4	6
53	4	8
54	<3 (53%)	5
55	<3 (54%)	4
56	10	10
57	11	10
58	3	4
59	4	3
60	14	9

[0576]

[Таблица 2-3]
Пример №	hPDHK1 IC₅₀ (нмоль/л)	hPDHK2 IC₅₀ (нмоль/л)
61	3	5
62	3	4
63	5	7
64	5	7
65	4	5
66	4	6
67	5	7
68	4	6
69	5	8
70	3	6
71	4	7
72	7	9
73	6	7
74	6	11
75	6	11
76	6	9
77	6	9
78	4	7
79	5	8
80	3	6
81	5	7
82	5	7
83	5	11
84	5	11
85	<3 (49%)	6
86	<3 (52%)	4
87	<3 (66%)	<3 (53%)
88	3	4
89	20	19
90	66	45

[0577]

[Таблица 2-4]
Пример №	hPDHK1 IC₅₀ (нмоль/л)	hPDHK2 IC₅₀ (нмоль/л)
91	49	28
92	27	23
93	8	11
94	40	24
95	6	15
96	8	8
97	63	26
98	6	6
99	8	12
100	4	5
101	<3 (69%)	4
102	4	4
103	<3 (67%)	<3 (66%)
104	4	6
105	9	8
106	<3 (61%)	4
107	5	6
108	5	6
109	<3 (53%)	5
110	7	13
111	3	6
112	3	5
113	4	5
114	5	7
115	6	8
116	17	32
117	6	8
118	4	4
119	4	5
120	5	9
121	5	5
122	5	7
123	6	12

[0578]

В качестве примера препарата, предлагаемого в настоящем изобретении, можно отметить следующие препараты. Однако настоящее изобретение не ограничивается этими примерами препаратов.

[0579]

Пример препарата 1: Получение капсулы

1) соединение примера 1	30 мг
2) микрокристаллическую целлюлозу	10 мг
3) лактоза	19 мг
4) стеарат магния	1 мг

1), 2), 3) и 4) смешивают и помещают в желатиновую капсулу.

[0580]

Пример препарата 2: Получение таблетки

1) соединение примера 1	10 г
2) лактоза	50 г
3) кукурузный крахмал	15 г
4) кальциевая соль кармеллозы	44 г
5) стеарат магния	1 г

Полное количество 1), 2), 3) и 30 г 4) замешивают с водой, сушат в вакууме и просеивают.Просеянный порошок смешивают с 14 г 4) и 1 г 5) и смесь штампуют в таблетирующей машине. Таким образом получают 1000 таблеток, каждая из которых содержит 10 мг соединения примера 1 на таблетку.

[0581]

Пример препарата 3: Получение препарата для инъекции

1) соединение примера 1	5 мг
2) D-маннит	5 г
3) дистиллированная вода	100 мл

1) и 2) Растворяют в 3) и раствор помещают в контейнер для инъекции, герметизируют и стерилизуют.

Промышленное применение

[0582]

Поскольку соединение формулы [I-a] или формулы [11] или его фармацевтически приемлемая соль обладает ингибирующей активностью по отношению к PDHK, оно применимо в качестве активного ингредиента лекарственного средства для лечения или профилактики диабета (диабет типа 1, диабет типа 2 и т.п.), синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете (диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, катаракта и т.п.), сердечной недостаточности (острая сердечная недостаточность, хроническая сердечная недостаточность), кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака, легочной гипертензии или болезни Альцгеймера.

Claims

1. Соединение формулы [I-a] или формулы [II] или его фармацевтически приемлемая соль:

,

где связь в виде пунктирной линии означает ординарную связь или двойную связь,

X² означает атом углерода или атом азота,

R^1a означает C_1-4 алкил или C_1-4 алкилкарбонил,

m равно 0 или 1,

A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶ и A⁷ все независимо выбраны из группы, включающей атом углерода, атом азота и атом кислорода, A⁸ выбран из группы, включающей атом углерода и атом азота, и полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента

,

равно 0, 1, 2 или 3,

t равно 0 или 1,

r равно 0, 1 или 2 и сумма t и r равна 1 или 2,

w равно 0 или 1,

Cy¹ означает

(1) (i) C_4-6 циклоалкил или (ii) 4-6-членный насыщенный или частично насыщенный гетероциклил, содержащий один атом азота, C_4-6 циклоалкил и насыщенный или частично насыщенный гетероциклил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбранным из группы, включающей C_1-4 алкил и оксогруппу, или

Cy² означает

(1) (i) C_3-6 циклоалкил или (ii) 4-6-членный насыщенный гетероциклил, содержащий 1 или 2 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, и C_3-6 циклоалкил и насыщенный гетероциклил необязательно замещены 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, гидроксигруппу и C_1-4 алкил, или

v равно 0 или 1.

2. Соединение по п. 1, где X¹ означает атом углерода и X² означает атом азота, или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п. 1 или 2, где в формуле [I-a] полное количество атомов азота и атомов кислорода, содержащихся в структурной формуле фрагмента

,

где каждый символ является таким, как определено в п. 1, равно 2, или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, которое представляет собой соединение формулы [I-b]

,

где каждый символ является таким, как определено в п. 1, или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по п. 1, где v равно 0, или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п. 1 или 5, где Cy¹ означает 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетеротома, независимо выбранных из группы, включающей атом азота и атом кислорода, и гетероарил необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей галоген, цианогруппу, C_1-4 алкил, галоген-C_1-4 алкил и C_3-6 циклоалкил, или его фармацевтически приемлемая соль.

7. Соединение по любому из пп. 1, 5 и 6, где Cy² означает

8. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

9. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

10. Соединение, представленное формулой

.

11. Соединение, представленное формулой

.

12. Соединение, представленное формулой

.

13. Соединение, представленное формулой

.

14. Соединение, представленное формулой

.

15. Соединение, представленное формулой

.

16. Соединение, представленное формулой

.

17. Соединение, представленное формулой

.

18. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

19. Соединение, представленное формулой

.

20. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

21. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

22. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

23. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

24. Соединение, представленное формулой

.

25. Соединение, представленное формулой

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

26. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-25 или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

27. Средство для лечения заболеваний, связанных с ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, выбранных из диабета, синдрома резистентности к инсулину, метаболического синдрома, гипергликемии, гиперлактацидемии, осложнения при диабете, сердечной недостаточности, кардиомиопатии, ишемии миокарда, инфаркта миокарда, стенокардии, дислипидемии, атеросклероза, заболевания периферической артерии, перемежающейся хромоты, хронического обструктивного заболевания легких, ишемии головного мозга, апоплексии головного мозга, митохондриального заболевания, митохондриальной энцефалопатии, рака или легочной гипертензии, содержащее соединение по любому из пп. 1-25 или его фармацевтически приемлемую соль.

28. Средство по п. 27, где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

29. Средство по п. 27, где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

30. Средство по п. 27, где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

31. Средство по п. 27, где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

32. Способ лечения заболеваний, связанных с ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, выбранных из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию, способ включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-25 или его фармацевтически приемлемой соли.

33. Способ по п. 32, где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

34. Способ по п. 32, где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

35. Способ по п. 32, где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

36. Способ по п. 20, где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

37. Применение соединения по любому из пп. 1-25 или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства для лечения заболеваний, связанных с ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, выбранных из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

38. Применение по п. 37, где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

39. Применение по п. 37, где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

40. Применение по п. 37, где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

41. Применение по п. 37, где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.

42. Соединение по любому из пп. 1-25 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения или профилактики заболеваний, связанных с ингибирующим воздействием на активность PDHK1 и 2, выбранных из группы, включающей диабет, синдром резистентности к инсулину, метаболический синдром, гипергликемию, гиперлактацидемию, осложнение при диабете, сердечную недостаточность, кардиомиопатию, ишемию миокарда, инфаркт миокарда, стенокардию, дислипидемию, атеросклероз, заболевание периферической артерии, перемежающуюся хромоту, хронические обструктивные заболевания легких, ишемию головного мозга, апоплексию головного мозга, митохондриальное заболевание, митохондриальную энцефалопатию, рак и легочную гипертензию.

43. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 42, где диабетом является диабет типа 1 или диабет типа 2.

44. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 42, где осложнение при диабете выбрано из группы, включающей диабетическую невропатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую нефропатию и катаракту.

45. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 42, где сердечной недостаточностью является острая сердечная недостаточность или хроническая сердечная недостаточность.

46. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 42, где легочной гипертензией является легочная артериальная гипертензия.